CN114403064A - 一种适应于贝类活体的贝壳otc标记方法 - Google Patents
一种适应于贝类活体的贝壳otc标记方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN114403064A CN114403064A CN202210230823.8A CN202210230823A CN114403064A CN 114403064 A CN114403064 A CN 114403064A CN 202210230823 A CN202210230823 A CN 202210230823A CN 114403064 A CN114403064 A CN 114403064A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- shellfish
- shell
- marked
- otc
- marking
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 235000015170 shellfish Nutrition 0.000 title claims abstract description 45
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 19
- 229960004368 oxytetracycline hydrochloride Drugs 0.000 claims abstract description 19
- 239000013535 sea water Substances 0.000 claims abstract description 19
- MWKJTNBSKNUMFN-UHFFFAOYSA-N trifluoromethyltrimethylsilane Chemical compound C[Si](C)(C)C(F)(F)F MWKJTNBSKNUMFN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 19
- 241000620877 Ruditapes philippinarum Species 0.000 claims abstract description 14
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 9
- 238000004043 dyeing Methods 0.000 claims abstract description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 9
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 8
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 claims abstract description 4
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 claims abstract description 4
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 claims abstract description 3
- 238000002372 labelling Methods 0.000 claims description 4
- 241000237858 Gastropoda Species 0.000 claims description 2
- 239000013505 freshwater Substances 0.000 claims description 2
- 238000007598 dipping method Methods 0.000 claims 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 abstract description 6
- 230000002045 lasting effect Effects 0.000 abstract description 3
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 abstract description 2
- 238000002791 soaking Methods 0.000 abstract description 2
- 235000020639 clam Nutrition 0.000 description 16
- 241000543567 Rapana venosa Species 0.000 description 13
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 13
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 7
- 229920002101 Chitin Polymers 0.000 description 6
- 241000237519 Bivalvia Species 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 230000035611 feeding Effects 0.000 description 4
- 241000195493 Cryptophyta Species 0.000 description 3
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 3
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 239000008239 natural water Substances 0.000 description 2
- 206010067482 No adverse event Diseases 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 1
- 238000005470 impregnation Methods 0.000 description 1
- 239000003147 molecular marker Substances 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003973 paint Substances 0.000 description 1
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 1
- 238000009394 selective breeding Methods 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K61/00—Culture of aquatic animals
- A01K61/50—Culture of aquatic animals of shellfish
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K61/00—Culture of aquatic animals
- A01K61/90—Sorting, grading, counting or marking live aquatic animals, e.g. sex determination
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A40/00—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
- Y02A40/80—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in fisheries management
- Y02A40/81—Aquaculture, e.g. of fish
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Marine Sciences & Fisheries (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
- Farming Of Fish And Shellfish (AREA)
Abstract
本发明涉及一种适应于贝类活体的贝壳OTC标记方法，属于水产动物标记技术领域，所述方法为选取壳长2‑6mm贝类苗种，在待标记贝类养殖用水中溶解盐酸土霉素，用碳酸氢钠或氢氧化钠不段将海水pH调整到7‑8之间；将贝类苗种在盐酸土霉素溶液中浸染72h，期间正常投喂微藻；将标记的菲律宾蛤仔正常喂养，用荧光体视镜能够看到标记后的贝类贝壳具有光信号。本发明标记过程中贝类幼苗不会被触摸或者移动，对贝类的将物理效应降至最低，在不对贝类个体造成生理损伤的前提下标记保持持久，也不会对环境造成污染。
Description
技术领域
本发明涉及贝类的标记方法，特别涉及一种适应于贝类活体的贝壳OTC标记方法。
背景技术
水产动物标记技术，既可用于水产动物的标记放流并调查其资源及活动情况，又可应用于大规模的选择育种，如家系选育等。为便于不同家系、不同处理组之间的区分，就需要对不同家系及不同处理组的贝类进行标记。常见的对普通贝类进行标记的方法有挂牌标记、分子标记，挂牌标记容易对贝类造成损伤。分子标记不易对动物造成危害，但其检测复杂、成本高。对于标记技术一般要求是，对动物的伤害小，简单易行、成本低廉适宜于大量操作，标记显著、不易脱落或消失，易于识别和检测。
由于双壳类物种具有较高的商业价值，双壳类生长已经得到了更深入的研究，使用传统方法(表面修整、边缘刻痕、油漆标签)测试贝壳生长率可能导致贝类生长中断。
发明内容
为了解决上述技术问题，本发明要解决的技术问题是提供一种适应于双壳贝类活体的贝壳标记方法，所述方法对贝类无生理损伤的环境友好型的标记方法。
本发明是通过如下技术方案来实现的：
一种适应于贝类活体的贝壳OTC标记方法，所述方法具体步骤如下：
(1)选取需要标记的贝类苗种：根据需要获取贝类苗种，所选取贝类苗种壳长2-6mm；
(2)在纯净的海水中溶解盐酸土霉素(oxytetracycline hydrochloride，OTC)，用碳酸氢钠或氢氧化钠不段将海水pH调整到7-8之间；
(3)将贝类苗种在步骤(2)的海水中浸染72h，期间正常投喂微藻；
(4)将标记的菲律宾蛤仔正常喂养，用荧光体视镜能够看到标记后的贝类贝壳具有光信号。
作为本发明的一个优选方案，在所述步骤(3)中，所述贝类苗种浸染密度为1000-4000粒/平方米。
作为本发明的一个优选方案，所述贝类苗种是海水或淡水双壳类、腹足类在内的具有石灰质外壳的苗种。
本发明与现有技术相比的有益效果：
普通染料对贝类进行染色后，在养殖一段时间后会发生褪色。盐酸土霉素无毒且对生长和生存无不良影响。本发明标记过程中贝类幼苗不会被触摸或者移动，对贝类的将物理效应降至最低，在不对贝类个体造成生理损伤的前提下标记保持持久，也不会对环境造成污染。
具体实施方式
下面通过实施例来对本发明的技术方案做进一步解释，但本发明的保护范围不受实施例任何形式上的限制。
实施例1
以壳长4-5mm的菲律宾蛤仔标记为例，依次按如下步骤操作：
(1)选取4-5mm菲律宾蛤仔幼苗，将蛤仔壳质表面藻类清洗干净。
(2)在纯净的海水中溶解OTC,用海水配置OTC(250mg/L、500mg/L、750mg/L)的浸染海水，三个重复，同时设置对照组。随着OTC浓度的增加，海水pH逐渐降低，用碳酸氢钠将海水pH升高至7-8之间。
(3)将菲律宾蛤仔幼虫以2000粒/平方米的密度在3L透明小桶中浸染72h，每个小桶30粒，期间每天正常投喂2次并且正常充气以便模拟流动海水环境，浸染后用凝胶成像系统(EpiChemi3 Darkroom)的紫外光检测是否标记成功。菲律宾蛤仔壳质的边缘处在紫外灯光的照射下有强烈的光信号，并且随着OTC浓度的升高，光信号逐渐变强。
(4)将标记的菲律宾蛤仔正常喂养两个月，两天一次全部换水，期间记录存活率(以贝壳张开为判定死亡的标准)，用荧光体视镜(UV)逐个检测标记状况，浸染结果均显示清晰。浸染组和对照组在72h浸染试验中均无死亡。蛤仔恢复培养69天，750mg/L的OTC浸染的蛤仔壳质在明场下无法看出染色的蛤仔与对照的区别，但在紫外灯下可产生清晰、明亮的月牙状形黄色荧光标记，蛤仔恢复续养58天，试验组平均存活率为84.33％，考虑到自然死亡，蛤仔存活率几乎不受影响。蛤仔恢复续养69天，单因素方差分析结果表明，各实验组与对照组的壳长差异不显著(P>0.05)。因此，荧光物质对蛤仔的生长和存活没有影响。
实施例2
以壳长2mm的青蛤标记为例，依次按如下步骤操作：
1)选取1-2mm青蛤幼苗，将青蛤表面藻类清洗干净。
2)在纯净的海水中溶解OTC，水体选取贝类天然生活水域的自然水体，用海水配置OTC(750mg/L)的浸染海水，同时设置对照组，三个重复。
3)将青蛤幼虫以2000粒/平方米在3L透明小桶中浸染72h，每个小桶30粒，期间每天正常投喂2次并且正常充气以便模拟流动海水环境，浸染后用荧光体视镜(UV)检查是否标记成功。明场状态下，浸染的青蛤壳质无明显变化。
4)将标记的青蛤正常喂养69天，两天一次全部换水，之后用荧光体视镜(UV)检查标记。将浸染后的菲律宾蛤仔幼虫正常喂养69天，间隔两天全换水，期间记录存活率(以贝壳张开为判定死亡的标准)，用荧光体视镜(UV)逐个检测标记状况。青蛤恢复培养69天，750mg/L OTC浸染的青蛤壳质可产生清晰、明亮的荧光标记。浸染组和对照组在72h浸染试验中均无死亡。青蛤恢复培养58天，试验组平均存活率大于80％，考虑到自然死亡，青蛤的存活率几乎不受影响。青蛤恢复培养69天，单因素方差分析结果表明，各实验组与对照组的壳长差异不显著(P>0.05)。因此，荧光物质对青蛤的生长和存活没有影响。
实施例3
以壳长1-2mm的脉红螺标记为例，依次按如下步骤操作：
1)选取1-2mm脉红螺幼苗，将脉红螺表面藻类清洗干净。
2)在纯净的海水中溶解OTC，水体选取贝类天然生活水域的自然水体，用海水配置三种浓度OTC(750mg/L)的浸染海水，同时设置对照组，三个重复。
3)将脉红螺幼虫以2000粒/平方米在3L透明小桶中浸染72h，每个小桶30粒，期间每天正常投喂2次并且正常充气以便模拟流动海水环境，浸染后用荧光体视镜(UV)检查是否标记成功。脉红螺的壳质边缘处在紫外光的照射下有黄色的荧光信号，明场状态下，浸染的脉红螺无明显变化。
4)将标记的脉红螺正常喂养两个月，两天一次全部换水，之后用荧光体视镜(UV)检查标记。
将浸染后的脉红螺幼虫正常喂养69天，间隔两天全换水，期间记录存活率，用荧光体视镜(UV)逐个检测标记状况。蛤仔恢复续养69天，750mg/L OTC浸染的脉红螺可产生清晰、明亮的荧光标记。浸染组和对照组在72h浸染试验中均无死亡。脉红螺恢复续养58天，试验组平均存活率大于80％，考虑到自然死亡，脉红螺的存活率几乎不受影响。脉红螺恢复培养69天，单因素方差分析结果表明，各实验组与对照组的壳长差异不显著(P>0.05)。因此，荧光物质对脉红螺的生长和存活没有影响。
综上所述，采用本发明公开的标记方法，可以不损伤贝类幼苗生理的情况下，对贝类外壳提供了持久的荧光标记，标记清晰、成本低廉、操作简单。在实际应用中，本领域的技术人员完全可以在本发明的技术方案内合理选择其他的参数，但与本发明所保护的技术方案实质性相同，仍落入本发明的保护范围之内。
Claims (3)
1.一种适应于贝类活体的贝壳OTC标记方法，其特征在于所述方法具体步骤如下：
(1)选取需要标记的贝类苗种，所选取贝类苗种壳长2-6mm；
(2)在待标记贝类养殖用水中溶解盐酸土霉素，浓度为750mg/L，用碳酸氢钠或氢氧化钠不断将海水pH调整到7-8之间；
(3)将贝类苗种在步骤(2)的溶液中浸染72h，期间正常投喂微藻；
(4)将标记的菲律宾蛤仔正常喂养，用荧光体视镜能够看到标记后的贝类贝壳具有光信号。
2.根据权利要求1所述的一种适应于贝类活体的贝壳OTC标记方法，其特征在于在所述步骤(3)中，所述贝类苗种浸染密度为1000-4000粒/平方米。
3.根据权利要求1所述的一种适应于贝类活体的贝壳OTC标记方法，其特征在于所述贝类苗种是包括海水或淡水双壳类、腹足类在内的具有石灰质外壳的苗种。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210230823.8A CN114403064A (zh) | 2022-03-09 | 2022-03-09 | 一种适应于贝类活体的贝壳otc标记方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210230823.8A CN114403064A (zh) | 2022-03-09 | 2022-03-09 | 一种适应于贝类活体的贝壳otc标记方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN114403064A true CN114403064A (zh) | 2022-04-29 |
Family
ID=81263114
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202210230823.8A Pending CN114403064A (zh) | 2022-03-09 | 2022-03-09 | 一种适应于贝类活体的贝壳otc标记方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN114403064A (zh) |
Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4133294A (en) * | 1977-04-27 | 1979-01-09 | University Of Delaware | Process for marking molluscs |
| JPH0353829A (ja) * | 1989-07-19 | 1991-03-07 | Kajima Corp | 標識貝の標識形成方法 |
| USH2119H1 (en) * | 1997-11-17 | 2005-06-07 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Navy | Acoustic fusion of aquatic animal tissue cells with biological agents |
| JP2007209222A (ja) * | 2006-02-08 | 2007-08-23 | Fisheries Research Agency | 魚体用標識剤及びそれを用いた魚体の標識方法 |
| CN102165924A (zh) * | 2011-01-20 | 2011-08-31 | 中国科学院南海海洋研究所 | 一种海参幼体的荧光标记方法 |
| CN102265798A (zh) * | 2011-06-24 | 2011-12-07 | 浙江海洋学院 | 乌贼海螵蛸四环素标记方法及其专用试剂 |
| CN107076724A (zh) * | 2013-03-29 | 2017-08-18 | 国立大学法人三重大学 | 生物体染色剂 |
| CN108770755A (zh) * | 2018-04-08 | 2018-11-09 | 中国水产科学研究院南海水产研究所 | 一种适用于黑鲷幼鱼的标记方法 |
-
2022
- 2022-03-09 CN CN202210230823.8A patent/CN114403064A/zh active Pending
Patent Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4133294A (en) * | 1977-04-27 | 1979-01-09 | University Of Delaware | Process for marking molluscs |
| JPH0353829A (ja) * | 1989-07-19 | 1991-03-07 | Kajima Corp | 標識貝の標識形成方法 |
| USH2119H1 (en) * | 1997-11-17 | 2005-06-07 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Navy | Acoustic fusion of aquatic animal tissue cells with biological agents |
| JP2007209222A (ja) * | 2006-02-08 | 2007-08-23 | Fisheries Research Agency | 魚体用標識剤及びそれを用いた魚体の標識方法 |
| CN102165924A (zh) * | 2011-01-20 | 2011-08-31 | 中国科学院南海海洋研究所 | 一种海参幼体的荧光标记方法 |
| CN102265798A (zh) * | 2011-06-24 | 2011-12-07 | 浙江海洋学院 | 乌贼海螵蛸四环素标记方法及其专用试剂 |
| CN107076724A (zh) * | 2013-03-29 | 2017-08-18 | 国立大学法人三重大学 | 生物体染色剂 |
| CN108770755A (zh) * | 2018-04-08 | 2018-11-09 | 中国水产科学研究院南海水产研究所 | 一种适用于黑鲷幼鱼的标记方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| TIM LUCAS 等: "Marking the Shell of the Saucer Scallop Amusium balloti for Sea Ranching using Oxytetracycline, Calcein and Alizarin Red S" * |
| 段必成等: "盐酸四环素浸泡与投喂标记鲢的效果比较及其浸泡标记对肝脏生理指标的影响", 《海洋与湖沼》 * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Forbord et al. | Effect of seeding methods and hatchery periods on sea cultivation of Saccharina latissima (Phaeophyceae): a Norwegian case study | |
| ES2953699T3 (es) | Textil y método de fabricación de estructuras cementadas biológicamente para aplicaciones marítimas | |
| CN102742532A (zh) | 一种左壳纯紫色长牡蛎新品系的培育方法 | |
| CN102428886A (zh) | 一种贝类标志放流贝壳缺刻标记方法 | |
| KR101001370B1 (ko) | 방사무늬김의 신품종 육성방법 및 그로부터 생산된 신품종 방사무늬김 | |
| CN103947607B (zh) | 一种草鱼抗细菌性败血症品系的构建方法 | |
| Lü et al. | Use of tetracycline hydrochloride and alizarin complexone for immersion marking black rockfish Sebastes schlegelii | |
| CN114403064A (zh) | 一种适应于贝类活体的贝壳otc标记方法 | |
| Roberts et al. | Factors affecting settlement of abalone (Haliotis iris) larvae on benthic diatom films | |
| Medipally et al. | Sustainable aquaculture of Asian arowana-a review | |
| Wu et al. | Study on artificial induction and early development of gynogenetic fat greenling Hexagrammos otakii | |
| Wada et al. | Population genetics and stock improvement | |
| Maeda et al. | Microbial processes in aquaculture environment and their importance for increasing crustacean production | |
| CN114868682A (zh) | 一种应用于活体双壳贝类的贝壳Cal标记方法 | |
| Pandey et al. | Features of sperm motility and circadian rhythm in Japanese anchovy (Engraulis japonicus) | |
| Pandey et al. | Freshwater pearl culture: Scope and importance in North West States of India | |
| CN115211396A (zh) | 一种适应于贝类活体的贝壳ars标记方法 | |
| CN114617087A (zh) | 一种耐低盐四指马鲅的培育方法 | |
| CN100494356C (zh) | 用配子体克隆法繁育能源海藻—巨藻孢子体的方法 | |
| CN101855999A (zh) | 一种双壳贝类的选育方法 | |
| CN112640820A (zh) | 一种大眼圆吻鲴人工繁殖方法 | |
| Hartman et al. | Farming the artificial sea: growth of clams in a recirculating seawater system | |
| CN111165417A (zh) | 一种鲻鱼幼鱼染色剂、染色方法及茜素红在鲻鱼幼鱼染色标记中的应用 | |
| Zúñiga et al. | Short note: micropropagation of Antarctic Colobanthus quitensis | |
| CN111838026B (zh) | 一种利用金钱鱼防控东星斑水蛭寄生虫病的驯养及操作方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |