WO2006109888A1

WO2006109888A1 - 抗シワ剤

Info

Publication number: WO2006109888A1
Application number: PCT/JP2006/308163
Authority: WO
Inventors: Keiko Takada; Shinji Inomata; Yuki Ogura; Kenichi Umishio
Original assignee: Shiseido Company, Ltd.
Priority date: 2005-04-13
Filing date: 2006-04-12
Publication date: 2006-10-19
Also published as: US20090041875A1; CN101155576B; CN102302424B; CN101155576A; KR101323487B1; KR20070120142A; EP1870094A1; CN102302424A

Abstract

オランダガラシ、トショウ、ビャクジュツ及びフキタンポポの抽出物のうちのいずれか１つ以上を有効成分として含んで成る新規な抗シワ剤を提供する。

Description

抗シヮ剤

技術分野

本発明は新規な抗シヮ剤に関する。更に具体的には、本発明は、オランダガラシ、トシヨウ、ビヤクジュッ及び又はフキ夕ンポポ明

由来抽出物を有効成分とする抗シヮ剤に関する。また、本発明は、上記抽出物を有効成分とする基底膜安定化剤、細胞外マトリックス産生促進剤及び皮膚のたるみ、ハリ改書善剤並びに上記抽出物を用いた人工皮膚の製造方法、シヮの軽減方法、皮膚のたるみ、ハリ改善方法に関する。

背景技術

人類を始めとする様々な動物の身体全体を覆う皮膚は、日光、乾燥、酸化、環境によるストレス、精神的ストレスなどの外的因子及び加齢によるシヮの形成、硬化、しみ、くすみ、弾力性の低下等の変化に曝されている。ここで、皮膚は大きく分けて、表皮と真皮の二つの層から構成されている。表皮と真皮の間には基底膜と呼ばれる薄くて繊細な膜が存在する。表皮の代謝は、この基底膜を通して真皮の細胞が産生する因子や血液供給に依存している。皮膚における表皮の増殖と分化は、基底膜と真皮によって調節されている。従つて、基底膜を介しての表皮 · 真皮間のコミュニケーションは、皮膚表皮の機能調節にとって重要な役割を担っている。

皮膚基底膜にはアンカリング複合体と呼ばれる特殊な構造があり

、表皮と真皮という 2つの組織の接着やコミュニケーションを安定させる役割を果たしている。アンカリング複合体のタンパク質は、ケラチノサイ卜の細胞骨格であるケラチンと真皮乳頭層の結合組織タンパク質の双方にリンクしている。アンカリング複合体の重要な構成要素の一つがラミニン 5である（Rousselle et al. , J Cell B iol. 1991 Aug; 114 (3) :567-76) 。これまでの研究から、ラミニ.ン 5の 3本鎖をコードする遺伝子の遺伝学的変異は、 Herlitz接合部型表皮水疱症という重度の水疱を形成する先天性の遺伝疾患の原因であることが解明された（Aberdam et al. , Nat Genet. 1994 Mar; 6 (3) :299-304) 。このことは、ラミニン 5が表皮の接着に不可欠な物質であることを示している。また、ラミニン 5はアンカリング - フィラメントを形成し、さらに、ラミニン 5の受容体として知られているインテグリン α 6ι64 (へミデスモソームに存在する細胞膜貫通型のインテグリン）と結合することが解明されている（Niessen et al. , Exp Cell Res. 1994 Apr;211 (2) :360-7) 。

ラミニン 5は、真皮乳頭層に接続しているアンカリング線維を形成する V I I 型コラーゲンと直接結合するだけでなく、そして更に他のラミニン 6や 7 と複合体を形成し、この複合体がナイドジェンを介して基底膜の骨格である I V型コラーゲンと結合することが報告されている。

上記複合体を構成する I V型コラーゲンの発現レベルは、加齢と共に低下することが観察されており（Vazquez F et al. , Maturitas

1996, 25: 209-215)、ラミニン 5が結合する V I I 型コラーゲンに関しても、高齢者由来の皮膚線維芽細胞では若い人由来の皮膚線維芽細胞に比べて、蛋白質レベルおよび m R N Aレベルで産生能が低下するとの報告（Chen et al. , J. Invest. Dermatol. , 102: 20 5-209, 1994)がある。また、 V I I 型コラーゲンにより構成されるアンカリング線維は、正常皮膚において生理的老化および光老化に伴い減少するとの報告（辻卓夫'、日皮会誌 1 0 5 ： 9 6 3 - 9 7 5 , 1 9 9 5 , Tidman et al. , J. Invest Dermatol. , 83: 448- 453, 1984) もある。これらの個々の構成成分の特徴に加え、基底膜自体も皮膚老化に伴い多重化、断裂などの構造以上を示すことが知られており（Lavker et al. , J. Invest. Dermatol. 1979 73:· 5 9-66)、この構造変化の結果、シヮ、たるみなどの老徴の発現、老化に伴う皮膚機能低下が生じるものと思われる。従って、基底膜骨格を構成するラミニン 5、 I V型及び V I I 型コラーゲンの産.生を促進することは、基底膜の構造を良好な状態に保ち、皮膚老化を防ぐ上で極めて重要であると考えられる。事実、皮膚基底膜構造を詳細に観察した場合、 2 0代後半から 3 0代前半にかけて基底膜ダメージが高頻度に観察されることより、基底膜の構造変化が皮膚老化の誘導において重要な役割を示すことが報告されている（IFSCC Mag azine, 2000 4 (4)： 15-23)。

皮膚老化の防止の中でも抗シヮは主要な問題の 1つである。

で、シは大別すると溝の浅い「表皮ジヮ」（小シヮ）と溝の深い

「真皮ンヮ」（大ジ ) に分類されるが、特に真皮ジヮは基底膜の変化によるとともに、真皮層が変性 · 陥没して生じるため、この理由からも基底膜の維持は重要であると考られる

更に、上記の基底膜の構成成分に加え、真皮中に多く存在する I 型及び I I I 型コラーゲン（それぞれ約 8 0 %、約 1 5 % ) は、加齢に伴い真皮中の絶対量が減少するため、これらの変化が真皮の弾力性及びハリの減少、シヮ、あるいは真皮萎縮と関係している可能性が高いと考えられている。 I I I 型コラ ―ゲンに着目すると、胎児から幼児組織では成人組織に比べて I I I 型コラーゲンの割合が高いことや、シヮが目立つエーラスダン □ス症候群 I V型では組織中に I I I 型コラーゲンが存在しないことから、正常で柔らかい皮膚を構築する際に重要な成分で'ある可能性が高いと考えられているここで、真皮中の I 型及び I I I 型コラーゲンは線維芽細胞により合成される。この線維芽細胞をコラーゲンゲル内で培養すると、コラ一ゲンゲルは収縮する。収縮したコラーゲンゲルの線維密度は真皮での線維密度に近い値になる。これは、線維芽細胞がコラーゲン線維を引き寄せるために起こる現象である。実際の皮膚中においても、線維芽細胞が十分にコラ一ゲン線維を引き寄せることにより皮膚のハリが保たれていると考えられる。このように、抗シヮ、皮膚のたるみ、はりの改善など、皮膚の恒常性維持のためには基底膜に加え、真皮の維持も重要である。

これまでに、皮膚の恒常性維持の観点から、基底膜の主要成分であるラミニン 5の産生能を増強することを目的とした大豆由来の調製物ゃリゾフォスファチジルコリン、リゾフォスファチジン酸並びにボコニァ (Bacconia) 属、プソフォカレプス (Psop ocarpus) 属、カシア（Cassia) 属及びエリスレア（Erythraea) 属に属する植物の抽出物等が提案されている（特開平 1 1 一 3 4 3 2 2 6号、特開？ 0 0 0 — 2 2 6 3 0 8号、及び特開 2 0 0 3 — 3 1 3 1 3 5号公報）。同様に、 I I I 型、 I V型、 V I I 型コラーゲンの産生促進剤については、ダイズ、ブナの芽、カツコン、西洋キヅ夕、ブナ科ブナ属植物の抽出物等、様々な植物由来の抽出物が知られている (特開 2 0 0 1 — 3 9 8 4 9号、特開 2 0 0 4— 1 8 4 7 1号、特開 2 0 0 4— 7 5 6 6 1号等）。しかしながら、基底膜の重要な構成成分であるラミニン 5、 I V型、 V I I 型コラーゲン、そして真皮の重要な構成成分である I I I 型コラーゲンの産生を全て促進させる物質は、カツコン抽出物以外知られていない（特開 2 0 0 1 — 3 9 8 4 9号、特開 2 0 0 3 — 1 3 7 7 6 7号及び特開 2 0 0 4— 1 8 4 7 1号）。発明の開示

本発明は、新規な抗シヮ剤の提供に関する。

本願発明者は、特に真皮ジヮに対しての抗シヮ作用を得る目的で、種々の植物抽出物質について鋭意検討した結果、オランダガラシ、トシヨウ、ビヤクジュッ、フキ夕ンポポが、基底膜の重要な構成要素であるラミニン 5、 I V型コラーゲン、 V I I型コラーゲン、そして真皮の重要な構成成分である I Γ Ι型コラーゲンの産生を著しく促進させ、更に皮膚に適用した場合に、皮膚老化防止作用、特に抗シヮ作用及び皮膚のたるみ、ハリ改善作用を発揮することが明らかとなつた。同時に、上記抽出物のうち、トシヨウ、ビヤクジュッ、フキ夕ンポポが抗炎症作用、創傷治癒作用を有することについても見出した。これまで、上記植物抽出物に関しては、ラミニン 5 を始めとする細胞外マトリックスの産生促進作用を始めとして、皮膚老化の中でも抗シヮ作用については報告されていなかった。

オランダガラシ（学名 Nasturt ium officinal is R. Brown) ：ァブラナ科の一種であるオランダガラシの抽出物は、血行促進作用（特開 2 0 0 1— 1 8 1 1 2 0 ) 、血管内皮細胞増殖因子産生促進による育毛剤としての利用（特開 2 0 0 3— 3 1 3 1 1 3 ) が知られている。しかしながら、皮膚老化に関する作用は知られていない。

卜ショウ（学名 Juniperus oxycedrus Linne) ：ヒノキ科の一種であるトシヨウの抽出物は、肌荒れなどの皮膚バリア機能改善効果 (特開 2 0 0 1 — 2 8 8 0 6 6) が知られているが、皮膚老化、抗シヮ、皮膚のたるみ、ハリ改善に関する作用は知られていない。尚、ここでいう皮膚バリア機能改善効果とは、角質層に対するものあつて、角質層以下の真皮等に対しての効果はなんら言及されていない。

ビヤクジュッ（学名 Atractylodes macrocephale) ：キク科の一種であるビヤクジュッの抽出物は、抗肌荒れ作用（特開 2 0 0 3 — 1 9 4 8 0 9 ) 、抗白髪作用（特開 2 0 0 4— 1 6 1 6 3 9 ) が知られているカ^ 皮膚老化、抗シヮ、皮膚のたるみ、ハリ改善に関する作用は知られていない。

フキ夕ンポポ（学名 Tussilago farfara Linne) ：キク科の一種であるフキ夕ンポポの抽出物は、光毒性抑制効果、例えば大気汚染物質への UV A照射により生成した産物による老化を防止する作用 (特開 2 0 0 2— 1 2 5 4 8 ) が知られている力主に U V B照射により引き起こされるシヮに対する予防改善作用及び皮膚のたるみ、ハリ改善作用は知られていない。

従って、本発明は、オランダガラシ、トシヨウ、ビヤクジュッ及びフキ夕ンポポの抽出物のうちのいずれか 1つ以上を有効成分として含んで成る抗シヮ剤、基底膜安定化剤、細胞外マトリックス産生促進剤及び皮膚のたるみ、ハリ改善剤、並びに上記抽出物を使用する人工皮膚の製造方法、シヮの軽減及び皮膚のたるみ、ハリ改善のための美容方法、を提供する。発明の効果

本発明に係る抗シヮ剤は、オランダガラシ、トシヨウ、ビヤクジュッ、フキ夕ンポポの抽出物を含むことにより、基底膜の重要な構成成分であるラミニン 5、 I V型コラーゲン、 V I I 型コラーゲン、そして真皮の重要な構成成分である I I I 型コラーゲン等の細胞外マトリックスの産生を促進する。また、細胞外マトリックスの産生が促進されることにより、基底膜及び真皮が修復し、創傷治癒がもたらされ、経皮水分蒸散量の減少、皮膚粘弾性増加等、皮膚状態の正常化、またはシヮの数及び長さの減少といった抗シヮ作用が達成される。正確な機構は定かで'はないが、これらの作用はいずれも、ラミニン等の産生が促進された結果、基底膜及び真皮が修復され、そレて安定化されたことに起因するものと考えられる。従って上記抽出物はまた、基底膜細胞の融解、基底膜の表皮からの剥離、 V I I 型コラーゲンの異常等、. 基底膜の不安定化を原因とする表皮水泡症についても、その症状の改善に寄与しうる。尚、本願発明の効果に関して特に注目されるべきことは、上記抽出物いずれもが、ラミニン 5 、 I I I 型、 I V型コラーゲ及び V I I 型コラーゲンを単独でではなく、それら全てを産生促進させることである。発明を実施するための最良の形態

抗シヮ剤

本発明の抗シヮ剤は、オランダガラシ、トシヨウ、ビヤクジュッ及び/又はフキ夕ンポポの抽出物を有効成分とするものである。本明細書において使用する「抗シヮ」とは、後述する「皮膚老化防止作用」のうち、皮膚のシヮを防止及び Z又は改善する作用、特に皮膚のシヮの数及び長さの軽減を意味するが、「皮膚老化防止作用」と同義的に使用されることもある。また、本発明によって改善/防止される「シヮ」は、基底膜の変化によて真皮層が陥没して生じる溝の深い真皮ジヮを特に味する。これらの作用は、例えば視感判定による角質の改善、皮膚の水分量増加、皮膚弾力性増加等の要因を考慮して判断されるちのである。本発明において達成される上記作用は、オランダガラシ、トシヨウ、ビヤクジュッ及びフキタンポポ由来抽出物がラミニン 5 、 I I I 型、 I V型又は V I I 型コラ一ゲン等の細胞外マトリックスの産生量を増大させることで、基底膜及び真皮が安定化し、皮膚の恒常性が改善することによるものと考えられるが、正確な機構は定かではない。従て、本発明の抗シヮ剤によって得られる抗シヮ作用は、細胞外卜リックス産生量の増大に起因するものに限定されないことは明らかである。尚、フキ夕ンポポ抽出物については、 U V A照射によって生じる皮膚老化又はシヮの生成の予防 Z改善作用は知られているが（特開 2 0 0 2 — 1 2 5 4 8 ) 、主に U V Bにより引き起こされるシヮに対する予防ノ改善作用は知られていない。

本明細書において使用する「皮膚老化防止作用」とは、加齢や光老化による基底膜の構造変化の蓄積に伴う皮膚の機能低下、具体的には、皮膚のシヮ、たるみ、硬化等を防止、改善し、弾力のある若々しい健康な肌の状態を維持す,ることを意味する。

基底膜安定化剤

本発明は、オランダガラシ、トシヨウ、ビヤクジュッ及びフキ夕ンポボ由来抽出物のうちのいずれか 1 つ以上を有効成分とする基底膜安定化剤を提供する。ここで、本明細書において使用する「基底膜安定化」とは、表皮と真皮の間に存在する、皮膚の恒常性維持に '深く関与する基底膜において、その骨格が安定化し、そして更には修復されることを意味するものである。更に具体的には、基底膜を構成する重要な成分、特に細胞外マトリックスの産生が促進されることにより生じる基底膜への作用全般を意味することが意図される細胞外マトリックス産生促進剤

本発明は更に、上記抽出物のうちのいずれか 1 つ以上を有効成分とする細胞外マトリックス産生促進剤を提供する。ここで、本明細書において使用する「細胞外マトリックス」とは、当業界で一般的に認識されているものを意味し、特にラミニン 5 、 I V型又は V I I 型コラーゲンを始めとする、基底膜において重要な構成成分、そして I I I 型コラーゲン等の真皮の重要な構成成分を意味する。皮膚のたるみ、ハリ改善剤 ' 本発明は更に、上記抽出物のうちのいずれか 1 つ以上を有効成分とする皮膚のたるみ、ハリ改善剤を提供する。ここで、本明細書において使用する「皮膚のたるみ、ハリ改善」とは、乾燥、紫外線等の外界の刺激、老化によるたるみ、ハリを皮膚の弾力性の向上やひきしめにより改善することを意味し、例えば i n v i t roではコラーゲンゲルの収縮促進作用等により評価することができ、 i n v i voでは皮膚粘弾性等により評価することがでぎる。

また、上記抽出物は、抗シヮ作用、基底膜安定化作用、細胞外マトリックス産生促進作用、皮膚のたるみ、ハリ改善作用及びコラーゲンゲル収縮促進作用に加え、抗炎症作用及び創傷治癒促進作用も有する。しかしながら、上述の通りこれらの作用の正確な機構は明らかでない。本明細書において使用する「抗炎症作用」及び「創傷治癒促進作用」は、本発明の植物抽出物をそれぞれ炎症部位及び創傷部位に適用した場合に、非適用部位と比較して相対的に決定されるものである。本発明により得られる創傷治癒促進作用は、細胞外マトリックスの産生が促進された結果、基底膜が安定化し、そして修復されたことによるものであると考えられる。しかしながら、当該作用は、必ずしも細胞外マトリックス産生の増大に起因するものに限定されないことは明らかである。尚、本発明において使用する抽出物の中で、オランダガラシ抽出物については、既に創傷治癒効果が報告されている（特開 2 0 0 3— 3 1 3 1 3 4 ) 。

上記抗炎症作用及び創傷治癒促進作用の他、本発明で使用する植物抽出物は表皮水泡症改善作用も有する。ここで、本明細書において使用する「表皮水泡症改善作用」とは、単純型表皮水疱症、接合部型表皮水疱症及び栄養障害型表皮水疱症に分類される一般的な表皮水泡症の緩和、治癒だけでなく、当該症状の予防を意図する。当該作用は、基底膜の重要な構成'成分であるコラーゲン等の産生が促進され、基底膜の構造が安定化することによりもたらされる。

本発明において使用される植物抽出物は、オランダガラシ、トシヨウ、ビヤクジュッ及びフキタンポポに由来するものである。草本植物であるオランダガラシ、トシヨウ、ビヤクジュッ及びフキタンポポについては各植物の根、葉、茎、花等から、木本植物であるトショウについてはその根、芽、樹皮、果実、葉、花等から抽出される。

抽出方法は溶媒抽出で行つてもよ < 、溶媒抽出の場合には、植物材料を必要に応じて乾燥させ、更に必要に応じて細断又は粉砕した後、水性抽出剤、例えば冷水、温水、又は沸点若しくはそれより低温の熱水、あるいは有機溶媒、例えばメ夕ノール、ェ夕ノール、 1

， 3 —ブタンジオール、エーテル等を常温で又は加熱して用いるァとにより抽出される。しかしながら、抽出方法は溶媒抽出に限定されず、当業界で知られている常用の手法によってもよい。上記抽出物の形態には、抽出液自体だけでなく、常用の手法により適宜希釈又は濃縮、あるいは乾燥させたものも含まれうる。

本発明の抗シヮ剤、基底膜安定化剤、細胞外マトリックス産生促進剤又は皮膚のたるみ、ハリ改善剤は、各抽出物を単独で、あるいは複数の抽出物を組み合わせて含んでもよい。更に別の態様として、本発明の抗シヮ剤、基底膜安定化剤、細胞外マトリックス産生促進剤又は皮膚のたるみ、ハリ改善剤は、セリンプロテアーゼ阻害剤を更に含んで成ることもある。後述の実施例に記載の通り、本発明の抗シヮ剤、基底膜安定化剤、細胞外マトリックス産生促進剤又は皮膚のたるみ、ハリ改善剤はセリンプロテアーゼ阻害剤を含むことにより、コラーゲンの分解を阻害して基底膜及び真皮を更に良好な状態に保つ。この結果、本発明によって得られる抗シヮ作用、皮膚のたるみ、ハリ改善作用、創傷治癒促進作用、表皮水泡症改善作用等が更に良好なものとなることが予想される。当該セリンプロテアーゼ阻害剤としては、限定しないが、セィヨウハツ力、イチャクソゥ、オトギリソゥ、ジユウャク、アル二力、カリン、サンザシ、セィヨウナツユキソゥ、セィヨウバラ、ノバラ、ブドウ、ボタン、ホップ、ラズベリー、口一マ力ミツレの抽出物を挙げることができ、これらは上述のオランダガラシ等の抽出方法と同様に溶媒抽出等により抽出されうる。更に、上記セリンプロテア一ゼ阻害剤にはアブロチニン、トラネキサム酸、 ε -アミノカプロン酸等も含まれる。本発明で使用する上記抽出物,は、皮膚老化防止作用、特に抗シヮ作用及び皮膚のたるみ、ハリ改善作用を達成するのに必要な量、あるいは基底膜及び真皮の安定化又はラミニン 5 I I I 型、 I V型若しくは V I I 型ラーゲン等の細胞外マ卜リックスの産生量増加を達成するのに必要な量が配合される。更に、角層又は経皮の水分量増加（肌荒れ改 ) 、皮膚弾力性増加、皮膚のキメの改善等の目的に応じて必要な量が配合され、そして当該配合量は配合される剤形等の種々の要因によつても変動する。限定しないが、上記抽出物は、抗シヮ剤、基底膜安定化、細胞外マ卜リックス産生促進剤又は皮膚のたるみ、ハ改善剤の全体の質量に対して 0 0 0 0 1 1

0質量％の濃度で好ましくは 0 . 0 0 1 1 質量 %の濃度で配合されうる。

本発明の抗シヮ剤、基底膜安定化剤、細胞外マ卜 ϋ ックス産生促進剤又は皮膚のたるみ、ハリ改善剤には、上記抽出物の他、抗シヮ作用等を損なわない範囲内で、通常化粧品や医薬品に配合可能な成分、例えば、液体油脂、固体油脂、ロウ、炭化水素、高級脂肪酸、高級アルコール、エステル類、シリコーン類、ァニオン界面活性剤、カチオン界面活性剤、両性界面活性剤、非イオン性界面活性剤、保湿剤、水溶性高分子化合物、増粘剤、被膜剤、紫外線吸収剤、金属イオン封鎖剤、低級アルコール、多価アルコール、糖類、ァミノ酸類、有機アミン類、 P H調整剤、皮膚栄養剤、ビタミン類、酸化防止剤、香料、粉末、色材、水等を必要に応じて適宜配合することができる。また、 L —ァスコルビン酸及びその塩、 L —ァスコルビン酸リン酸エステル、 L —ァスコルビン酸硫酸エステル等の Lーァスコルビン酸のエステル誘導体及びその塩、 L —ァスコルビン酸グルコシド等の L—ァスコルビン酸の配糖体及びその塩、 4 _メトキシサリチル酸等のアルコキシサリチル酸及びその塩、ハイドロキノン）6 — D—グルコース、ハイドロキノン α _ D —グルコース等のハイドロキノンの配糖体及びその塩、トラネキサム酸、トラネキサム酸メチルァミド塩酸塩等の卜ラネキサム酸 m導体、 4 一 n 一ブチル

、、、

レゾルシン等のレゾルシン誘導体、コゥン酸、ェラグ酸、 U ノール酸、力ミツレエキス、レチノイン酸、レチノ —ル、レチノ一ル酢酸

、レチノールパルミチン酸、グリチルリチン酸及びその誘導体等、リゾフォスファチジルコリンゃリゾフォスファチジン酸、大豆調製物等のラミニン 5産生促進剤、グルコース、フレク卜一ス、マンノ

、

—ス、ショ糖、トレハロース等の糖類、二チン酸べノジルエステル、ニコチン酸；8 —ブトキシェチルエステル、カプサイシン、ジンゲロン、カンタリスチンキ、イク夕モール、カフェイン、タンニン酸、 α —ポルネオ一ル、ニコチン酸トコフエロール、イノシトールへキサニコチネート、シクランデレート、シンナリジン、トラゾリン、アセチルコリン、ベラパミル、セファランチン、ァ一オリザノール等の血行促進剤、硫黄、チアントール等の抗脂漏剤、多様な目的から、ヒノキチオール、アイリス抽出物、ァセンャク抽出物、ァラントイン、アロエ抽出物、イチャクソゥ抽出物、イブキジヤコゥ抽出物、ゥコン抽出物、ォゥパク抽出物、ォゥレン抽出物、オトギリソゥ抽出物、オノニス抽出物'、加水分解カゼイン、加水分解酵母抽出液、カツコン抽出物、キシリトール、クララ抽出物、米抽出物加水分解液、サイコ抽出物、サフラン抽出物、酸化亜鉛、シカクマメ抽出物、シコン抽出物、シャクャク抽出物、ショウキヨウ抽出物、シリカ被覆酸化亜鉛、セージ抽出物、ゼニァオイ抽出物、センキユウ抽出物、センプリ抽出物、チンゼ抽出物、トウガラシ抽出物、トウキ抽出物、トウニン抽出物、チォタウリン、ニンジン抽出物、ニンニク抽出物、ヒォウギ抽出物、ヒポ夕ゥリン、バーチ抽出物、ビヮ抽出物、ブドウ抽出物、ブナの芽抽出物、へチマ抽出物、マジョラム抽出物、ユリ抽出物、ョクィ一ン抽出物、口一ズマリ一抽出物、アルギニン及びその塩酸塩、セリン及びその塩酸塩等ァミノ酸及びその誘導体、パントテン酸力ルシゥム、 D —パン卜テニルアルコール、パントテニルェチルエーテル、ァセチルパン卜テニルェチルエーテル等のパントテン酸類、ェルゴカルシフエ口ール、コレカルシフエロール等のビタミン D類、一コチン酸、ニコチン酸アミド

、ニコチン酸べンジル等のニコチン酸類、ひ一トコフエロール、酢酸トコフエロール、ニコチン酸 D L α— 卜コフエ口ール、コハク酸 D L— - トコフエロール等のビ夕ミン Ε類、ビ夕ミン Κ、ビ夕ミン P、ピオチン等のビタミン類、ビキノン等の補ノこち迴宜配合することができる。

本発明の抗シヮ剤、基底膜安定化剤、細胞外マ卜リックス産生促進剤又は皮膚のたるみ、ハリ改善剤の剤型は特に限定されるものではなく、例えば、溶液系、可溶化系、乳化系、粉末分散系、水一油二層系、水一油—粉末三層系、軟膏、ゲル、エアゾール等の任意の剤型をとることができる。また、使用形態も特に限定されるものではなく、例えば、化粧水、乳液、クリーム、エッセンス、ゼリー、ジエル、軟膏、ノック、ファンデーション等の任意の形態をとることができる。皮膚外用剤

更に、本発明は上記抽出物を含んで成る皮膚外用剤を提供する。ここで、本発明の皮膚外用剤は、抗シヮ作用及び皮膚のたるみ、ハリ改善作用を除く皮膚老化防止作用、抗炎症作用、創傷治癒促進作用、表皮水泡症改善作用等を目的として使用される。しかしながら、本発明の皮膚外用剤はこれらの目的に限定されず、上記抽出物の細胞外マトリックス産生促進作用によりもたらされる皮膚の諸症状の改善を意図した使用が考えられる。

本発明の皮膚外用剤に配合される物質は、抗シヮ剤等について上述したものと同様であるが、これは当業者により所望の目的に応じて適切にその種類、量、濃度等が決定されうる。例えば、抗炎症作用、創傷治癒促進作用を目的とする場合、上記抽出物は、皮膚外用剤全体の質量に対して 0 . 0 0 0 1 〜 1 0質量％の濃度で、好ましくは 0 . 0 0 1 〜 1質量％の濃度で配合されうる。

抗シヮ剤、基底膜安定化剤、細胞外マトリックス産生促進剤又は皮膚のたるみ、八リ改善剤の製造方法

別の態様において、本発明はオランダガラシ、トシヨウ、ビヤクジュッ及びフキ夕ンポポ由来抽出物を水相又は油相に添加する工程を含んで成る、抗シヮ剤、基底膜安定化剤、細胞外マトリックス産生促進剤又は皮膚のたるみ、ハリ改善剤の製造方法を提供する。当該方法は、上記皮膚外用剤にも適用可能である。

人工皮膚の製造方法

更に、本発明は、オランダガラシ、トシヨウ、ビヤクジュッ及びフキ夕ンポポの抽出物のうちのいずれか 1 つ以上を人工皮膚形成培地中に添加することを特徴とする、人工皮膚の製造方法、を提供する。

本発明における人工皮膚の製造に用いる基礎培地としては、人工皮膚の製造に従来から使用されている任意の培地を用いることができ、これらの培地としては 1 0 %の牛胎児血清を含むダルベッコ改変イーグル培地（DME M) ; 1 0 %の牛胎児血清、トランスフエリン 5 g Zm l 、インシュリン 5 g Zm l 、 t r i ーョードチ口ニン 2 n M、コレラ卜キシン 0. 1 η Μ、ヒドロコーチゾン 0 . 4 gZm l を含む DM E M— H a m， s F 1 2 ( 3 : 1 ) ；ケラチノサイト増殖培地（K GM) と 1 0 %牛胎児血清を含む DM E Mとを 1 ： 1 に混合した培地、等が挙げられる。これらの基礎培地に添加される上記抽出物は、そ種類により異なるが、およそ 0. 0 0 1質量％〜 1質量％程度である。当該抽出物以外にも、抗シヮ剤の態様において用いられる種々の物質が一緒に添加されてもよく、特に上述したセリンプロテア一ゼ阻害剤は、コラーゲンの分解を阻害し基底膜を安定化させるために好ましいものと考えられる。本発明の人工皮膚の製造においてはまず、金網の上にヒト線維芽細胞を含む収縮 I 型コラーゲンゲルを静置する。ヒト線維芽細胞を含む収縮 I 型コラーゲンゲルは例えば次のようにして調製することができる。線維芽細胞懸濁コラーゲン溶液を氷上にて作製後、ぺトリ皿内にてコラーゲンをゲル化させて調製する。その後、ペトリ皿壁面からゲルを剥離し、コラーゲンゲルを C 0₂インキュベーター内にて収縮させる。

次に、上記コラーゲンゲルの上に、表皮細胞、例えばヒト正常表皮ケラチノサイトを培養し、表皮を形成する。皮膚細胞の培養による表皮層の形成は次のようにして行うことができる。収縮コラーゲンゲルを金網の上にのせ、さらにガラスリングをこのゲルの上にのせる。このガラスリング内に液漏れをさせないようにヒト包皮由来の表皮ケラチノサイト懸濁液を入れる。 c o₂インキュベーター内にてケラチノサイトを接着させ'、リングを外す。上記培地を表皮層の境界まで満たし、表皮層を空気に曝しながら、培養を継続し、角層を形成させる。

この方法によれば、線維芽細胞を含む収縮 I 型コラーゲンゲルから成る真皮層と、表皮層との間に十分に基底膜成分が沈着した天然皮膚に近い人工皮膚が得られる。本発明で使用する上記抽出物は、表皮細胞の播種後数日目の培地交換の際に新規な培地中に含有させるだけでなく、この段階に限定されず、必要に応じて適宜添加することができる。

シヮ軽減方法及び皮膚のたるみ、ハリ改善方法

別の態様において、本発明は、オランダガラシ、トシヨウ、ビヤクジュッ及びフキ夕ンポポの抽出物のうちのいずれか 1 つ以上を皮膚に適用することによりシヮを軽減し、皮膚のたるみ、ノヽリを改善することを特徴とする美容方法、を提供する。尚、当該方法は、シヮの軽減、皮膚のたるみ、ハリ改善だけでなく、上述のような細胞外マトリックスの産生促進、延いては基底膜及び真皮の安定化を必要とする皮膚の諸症状、例えば表皮水泡症を改善するための使用が意図される。当該方法において、上記抽出物が適用される対象者は概して哺乳類であり、特にヒ卜への適用が考えられる。実施例

次に、本願発明を以下の実施例により更に具体的に説明する。

(実験方法一 1 )

ラミニン 5産生促進効果に関する試験方法

( 1 ) 表皮角質細胞の培養

表皮角質細胞はヒト包皮より単離し、カルシウム濃度の低い表皮細胞増殖培地（K G M ) にて培養した。この培地には牛脳下垂体抽出液と E G Fを添加した。細胞は第 4代まで K G Mで培養後、トリプシン— E D T A処理によって接着細胞を浮遊させ、ろ過によって細胞のァグリゲートを除き、均一な細胞懸濁液を得た。遠心分離によって細胞を集め、 DM E M— F 1 2 ( 2 ： 1 ) - 0. 1 % B S A に 8 X 1 0⁴ /m 1 となるように再懸濁させた。この細胞懸濁液を 0. 5 m l 、 2倍濃度の薬剤を含む同培地 0. 5 m l に加えた。培養は 2 4穴プレートを用いて、 3 7 にて 2 4時間行った。培養終了時に、培養上清をエツペンドルフチューブに移し、 1 0 0 0 O r p mで 5分間遠心分離し、上清を新たなチューブに移し、ラミニン 5 の測定の日まで一 2 0でで保存レた。また細胞内と培養プラスチック上に結合したラミニン 5を可溶化するため、各種の界面活性剤を含むトリス塩酸緩衝液（ P H 7. 4 ) を各穴に添加し、一晩一 2 0 °Cで保存した。翌日、超音波処理を行い、再度凍結した。翌日、再度溶解後、 1 0 0 0 0 r p mで 5分間遠心分離し、上清をチューブに移し、ラミニン 5の測定の日まで— 2 0でにて保存した。

( 2 ) サンドイッチ E L I S A法によるラミニン 5の測定

培養上清、細胞層に存在するラミニン 5はサンドイッチ E L I S A法にて測定した。 9 6穴 E L I S Aプレートの固層にラミニン 5 のラミニン α 3鎖に対するモノクローナル抗体、 B M 1 6 5 を結合させた。ラミニン 5をサンドイッチして測定するため、もう一種の抗体としてラミニン） 6 3鎖に対するモノクローナル抗体である 6 F 1 2 を予めピオチン化（ b _ 6 F 1 2 ) して用いた。本法では、機能を発揮しうるへテロトリマー体（ひ 3 /8 3 ァ 2 ) のみを測定し、ヘテロダイマー（ /3 3 ァ 2 ) を検出しない。 b _ 6 F 1 2を含む 3 %ゼラチン · リン酸緩衝溶液を予め入れておいた各穴に試料を添加する。試料の穴内での最終希釈率は培養液が 1 / 4、細胞層が 1 Z 1 0 とした。抗原抗体反応は 3 7でで 2時間行い、プレートを洗浄した後アビヂン H R P (ホースラデイシュパーォキシダ一ゼ）溶液を添加し、更に 3 0分から 1 時間反応させた。洗浄後、 H R Pの基質である A B T S溶液を加え、 4 0 5 n mの吸光度を E L I S Aプレートリーダーにて測定した。検量線は 0〜 4 0 n g /m 1 の範囲で作成した。

ラミニン 5の産生量は、培地中に遊離された量と細胞層に残った量との総和を算出し、植物抽出物を添加していない試料（コント口 —ル）に対する相対的な値をもって示じた。以下の表 1 に、各抽出物毎のラミニン 5産生量の上昇率を要約する。

表 1

(結果一 1 )

試料濃度（％) 無添加対照に対する相対的なラミニン 5産生量（％) オランダガラシ（日本産） 0. 001 125

0. 01 135

トシヨウ 0. 001 117

0. 01 120

ビヤクジュッ 0. 001 115

0. 01 129

フキタンポポ（日本産） 0. 001 107

0. 01 110

(実験方法一 2 )

IV型コラーゲン、 VII型コラーゲン産生促進効果に関する試験方法

( 1 ) ヒト線維芽細胞の培養

1 0 % F B S含有 DM E M培地で培養したヒト線維芽細胞を 2 4 穴プレートに播種し、細胞が接着した後、 0. 2 5 % F B S及び 2 5 O Mァスコルビン酸ダルコシド含有 D M E M培地に置換し、薬剤を添加した。 1 日後、培地上清を回収、遠心分離し、得られた上清中の IV型、 VII型コラーゲン測定及び、細胞について D N A量を測定し、細胞数の指標とした。

( 2 ) D N A定量

D N A量の測定は Hoechst社め H33342を用いた蛍光測定法で実施した。

( 3 ) サンドイッチ E L I S A法による IV型、 VII型コラーゲンの測定

IV型、 VII型コラーゲンは、サンドイッチ E L I S A法によって測定した。本実施例において使用した抗体は以下の通りである。 • IV型コラーゲン特異的抗体；モノクロナール抗体 J K - 1 9 9およびポリクロナール抗体 MO— S— C L I V

. VII型コラーゲン特異的抗体；モノクロナール抗体 N P— 1 8 5およびモノクロナール抗体 N P _ 3 2

薬剤を添加していない試料（コントロール）の D N Aあたりの IV 型、 VII型コラーゲン量を 1 0 0 としたときの、薬剤添加試料の D

NAあたりの IV型、 VII型コラーゲン量を、 IV型、 VII型コラーゲン産生促進率とした。以下の表 2 に、当該コラーゲンの産生促進率を要約する。

表 2

(結果— 2 )

(実験方法一 3 )

I I I 型コラーゲン産生促進効果に関する試験方法

( 1 ) ヒト皮膚線維芽細胞の培養

1 0 % F B S含有 DM E M培也で培養したヒト皮膚線維芽細胞を 2 4穴プレートに播種し、細胞が接着した後、 0. 2 5 % F B S及び 2 5 0 ァスコルビン酸リン酸マグネシウム含有 DM E M培地に置換し、薬剤を添加した。 3 日後、培地上清を回収、遠心分離した。得られた上清中の I I I 型'コラーゲン及び細胞の D N A量を測定し、細胞数の指標とした。

( 2 ) D N A定量

D N A量の測定は Hoechst社の H33342 ¾用いた蛍光測定法で実施した。

( 3 ) I I I 型コラーゲンの測定

細胞の I I I 型コラーゲン生合成能は、培養上清中に分泌される I I I 型コラーゲンの末端ペプチド（Procollagen type ΙΙΙ-pept ide： P III P ) と略す。 ) 量を測定することにより評価した。具体的には、「リアグノスト ΡΙΠΡ ( P III P ) 測定キット（シーアイデスダイァグノスティック株式会社）」を用いて測定した。 I I I 型コラーゲンの産生量は、 D NA量で割り、植物抽出物を添加していない試料（コントロール）に対する相対的な値をもって示した（表 3 を参照のこと）。

表 3

(結果一 3 )

試料濃度（％) 無添加対照に対する相対的な DNAあたりの III型コラーゲン産生量（％) オランダガラシエキス 0.001 117

0.01 124 以上の結果より、オランダガラシエキスには有意な I I I 型コラ一ゲンの産生促進作用が見出された。

(実験方法一 4 )

ヒト皮膚線維芽細胞による I 型コラーゲンゲル収縮能に対する作用の評価方法

線維芽細胞（ 5 x 1 0 cell/ml) 懸濁コラーゲン溶液（高研株式会社製 I 型コラーゲンを使用）を氷上にて調製後、 3 7ででコラーゲンをゲル化した。その後、被験物質（コントロールとして D M S Oを使用）及び 0. 2 5 % F B S含有 DM E M培地を添加し、シャーレ壁面からゲルを剥離し、コラーゲ収縮を行った（各群 n = 3 ) 。 1， 2 日後、コラーゲンゲルめ直径を三方向から測定し、平均値を求めた。収縮前の直径を収縮率 0 %とし、被験物添加後の収縮率を求めた（表 4を参照の.こと）。

表 4 '

(結果— 4 )

コントロール（DMS0) 1 日後 12%

2 日後 21%

オランダガラシエキス (0.001%) 1 日後 18%

2 日後 27%

オランダガラシエキス (0.003 %) 1 日後 25%

2 日後 34%

以上の結果より、ォランダガラシエキスには有意なコ

ル収縮促進作用が見出された。

(実験方法一 5 )

人工皮膚の製造方法

コラーゲンゲルは、ヒト真皮由来の線維芽細胞（ 1 X 1 0⁵ c e 1 1 s /m 1 ) 懸濁コラーゲン溶液を氷上にて作製後、 6 0 mmのペトリディッシュ内にて 3 7 °Cでコラーゲンをゲル化した。その後シャーレ壁面からゲルを剥離し、コラーゲンゲルを金属の上にのせ、さらにガラスリング（内径 1 2 m m ) をゲルの上にのせた。このガラスリング内に液漏れさせな'いようにヒト包皮由来表皮ケラチノサイト懸濁液を含む KGM— DMEM ( 1 ： 1 ) 混合培地を添加した。一晩インキュベートして表皮細胞を接着させ、翌日リングをはずした。上記培地を表皮層の境界まで満たし、表皮層を空気に曝しながら、角層形成を示す重層化した表皮を持つ皮膚モデルを作製した。

表皮細胞を播種後 4日目より、（ 1 ) 薬剤無添加、（ 2 ) オランダガラシエキス 0. 3 %、（ 3 ) オランダガラシエキス 0. 3 % + セィヨウハツ力エキス 0. 5 %、（4) トシヨウ油 0. 3 %、（ 5

) トシヨウ油 0. 3 % +ィチヤクソゥエキス 0. 5 %、（6 ) ビヤクジュツエキス 0. 3 %、（ 7 ) ビヤクジュツエキス 0. 3 % +ォトギリソゥエキス 0. 5 %、（ 8 ) フキ夕ンポポエキス 0. 3 %、

( 9 ) フキ夕ンポポエキス 0. 3 % +ジユウャクエキス 0. 5 %を含む培地に換え、その後 2— 3 日おきに同種 · 同濃度の薬剤を含有する培地と交換してさらに 2週間培養した。

形成された人工皮膚は、へマトキシリン—ェォジン染色、並びに免疫染色（抗 IV型コラーゲン抗体及び抗 VII型コラーゲン抗体）により染色した。 IV型及び VII型コラーゲンの染色度を低い方から高い方へ順に 1 _ 5の 5段階でスコア化した。以下の表 5に、コラーゲンの染色度のスコアを要約する。

表 5

(結果一 5 )

IV型コラ一ゲンの染色度 VII型コラーゲンの染色度

( 1 ) 2 1

( 2 ) 5 4

( 3 ) 5 5

( 4 ) 3 3

( 5 ) 4 5

( 6 ) 4 3

( 7 ) 5 5

( 8 ) 3 3

( 9 ) 4 4 上記のように、対照（ 1 ) において、 IV型コラーゲンは弱く染色されたが、 VI I型コラーゲンはほとんど観察されなかった。これに対し、ラミニン 5 · IV型コラーゲン · VII型コラーゲン産生促進作用を有するオランダガラシ、卜ショウ、ビヤクジュッ、フキ夕ンポポはいずれも IV型 · VII型コラーゲンの染色性を共に高めることが人ェ皮膚において確認された。さらに、セリンプロテアーゼ阻害剤のセィヨウハツ力、イチャクソゥ、オトギリソゥ、ジユウャクの各ェキスはこれらの染色性をさらに高めることが明らかとなった。

(実験方法一 6)

3 0 - 4 5才の健常人男性 3名の皮膚にオランダガラシ、トショゥ、ビヤクジュッ、フキ夕ンポポの各エキスをそれぞれ塗布したときの角層水分量を測定し、対照部位と比較した。対照にはイオン交換水を用いた。それぞれの検体を前腕内側 2. 5 c m四方の正方形内に塗布し、塗布直前、 1時間後の角層水分量を C o r n e o m e t e r CM 8 2 5 C (Courage + Khazaka社製）を用いて測定し水分量増加率を求めた。以下の表 6に、各植物抽出物を塗布した場合の角層水分量の増加率を要約する。

表 6

(結果一 6 )

被験物質塗布 1時間後の角層水分量の増加率

対照部位薬剤塗布部位

オランダガラシトシヨウビヤクジュッフキタンポポ 1 % 40% 35% 38% 30% 上記より、被験物質塗布によって、角層中の水分量が上昇し、肌改善効果があることが示された。

(実験方法一 7 )

4 0 - 5 5才の健常人女性パネルにより下記処方のクリームの連用試験を行った。パネル 4 8名'を 4群に分け、各群の顔面の半分にクリーム（本発明品 1 — 4 ) を、もう半分には比較品 1 をそれぞれ 4週間、一日 2回ずつ毎日塗布した。角層水分量を C o r n e o m e t e r C M 8 2 5 C、経皮水分蒸散量を T e w a m e t e r T M 2 1 0、皮膚の粘弾性をキュートメ一夕一（いずれも Courage + Khazaka社製）にて測定し、それぞれ水分量の増加度、肌荒れ改善度、ハリの改善度の指標とした。キュー卜一夕一に関しては、常法により 2秒間の吸引と 1秒間の開放を 3回繰り返し、 1 回目と 3回目の皮膚の伸び（U f 値、 maximal amplitude) と粘性/弾性比率（ U v/Ue値）を連用前と比較レた。またシリコーンレプリカ（ S i 1 f 1 o, FLEXICO DEVELOPMENTS社製）で目尻のレプリカを採取し、シヮの数、長さを測定し連用前後の値を比較した。さらにテープにより採取した角層の取れ具合から、肌のキメの整い具合と、角層の均一な取れ具合を専門パネルが視感判定した。

結果（連用前との比較値）を以下の表 7〜 1 1 に示す。また括弧内の数値は Paired Student t- testによる検定値を示す。

表 7

(結果一 7 )

• レプリカによる解析結果

本発明品 1使用群本発明品 2使用群本発明品 3使用群本発明品 4使用群シヮの数 - 9% (p = 0.003) -6 % (p = 0.004) -7 % (p = 0.009) -6 % (p = 0.003) シヮの長さ - 12% (p = 0.010) -10% (p=0.009) - 11 % (p = 0.015) -9% (p = 0.008) 以上の結果より、本発明品の抗シヮ作用が統計学的に有意に認められた。

表 8

• 角質水分量

本発明品 1使用群本発明品 2使用群本発明品 3使用群本発明品 4使用群 + 22% (p = 0.0001) +24 % (p = 0.0001 ) +20 % (P = 0.0001) +15 % (p = 0.0008)

以上の結果より、本発明品の保湿効果が統計学的に有意に認められた。

侧瞓^籙灰^^¾¾^ 。

表 1 2

- 本発明品 - 比較品

1 2 3 4 1 試料

オランダガラシエキス 1.0 - - - - 卜ショウ油 - 1.0 - - ― ビヤクジュツエキス —― ― 1.0 - - フキ夕ンポポエキス - ― ― 1.0 ― グリセリン 10.0 10.0 10.0 10.0 10.0

1 ， 3 —ブチレングリコール 4.0 •4.0 4.0 4.0 4.0 エタノール 7.0 7.0 7.0 7.0 7.0 ポリオキシエチレン（20モル）

ォレイルアルコール 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 精製水残余残余残余残余残余

(実験方法一 8 )

抗炎症、創傷治癒促進試験

8週齢の HR— 1マウスに炎症または創傷を人工的に形成し、各群 (n = 5)に（ 1 ) 薬剤無添加、（ 2 ) トシヨウ油 5 %、（ 3 ) ビヤクジュツエキス 5 %、（ 4 ) フキ夕ンポポエキス 5 %を含有する 1， 3 —ブチレングリコールをそれぞれ 0. 5 gずつ 1 日 2回、 5 日間塗布し、 5 日目に炎症部位または創傷部位の状態を観察した。抗炎症作用、創傷治癒促進作用をそれぞれ低い方から高い方へ順に 1 一 5の 5段階でスコア化した。その結果を表 1 3に要約する。

表 1 3

(結果一 8 )

抗炎症作用創傷治癒促進作用

( 1 ) 1 2

( 2 ) 3 4

( 3 ) 4 4

( 4 ) 5 4

表 1 3に示すように、対照（ 1 ) において、炎症、創傷の改善度は低かった。これに対し、トシヨウ、ビヤクジュッ、フキ夕ンポポエキスはいずれも抗炎症作用、創傷治癒促進作用を有すること v i voにおいて確認された。

(実施例 1 一クリーム）

( 1 ) 処方

( A相）

ステアリン酸 i 0 . 0 1

ステアリルアルコール 4 . 0

ステアリン酸ブチル 8 . 0

ステアリン酸モノグリセリンエステル 2 . 0

ビタミン Eアセテート 0 . 5

ビタミン Aパルミテー卜 0 . 1

マカデミアナッツ油 1 . 0

防腐剤 ί 量

香料 J 量

( B相）

グリセリン 4 . 0

1 ， 2 _ペンタンジオール 3 . 0

水酸化カリウム 0 . 4

ァスコルビン酸リン酸マグネシウム 0 . 1

L 一アルギニン塩酸塩 0 . 0 1

ェデト酸三ナトリウム 0 . 0 5

オランダガラシ

1 , 3 —ブチレングリコール抽出物 0 . 5

イオン交換水残余

( 2 ) 製法

Aの油相部と Bの水相部をそれぞれ 7 0でに加熱し完全溶解する。 A相を B相に加えて、乳化機'で乳化する。乳化物を熱交換器を用いて冷却する。

(実施例 2 —クリ

( 1 ) 処方

ステアリン酸 5 . 0 重重％ステアリルアルコール 4 . 0

イソプロピルミリステー卜 1 8 . 0

グリセリンモノステアリン酸エステル 3 . 0

プロピレングリコール 1 0 . 0

トシヨウメタノール抽出物 0 . 0 1

苛性カリ 0 . 2

亜硫酸水素ナトリウム 0 . 0 1

防腐剤 M量

香料量

イオン交換水残余

( 2 ) 製法

イオン交換水にプロピレングリコールと卜シヨウメ夕ノ物と苛性カリを加え溶解し、加熱して 7 0 °Cに保つ（水相）。他の成分を混合し加熱溶解して 7 0 °Cに保つ（油相）。水相に油相を徐々に加え、全部加え終わってからしばらくその温度に保ち反応を起こさせる。その後、ホモミキサーで均一に乳化し、よくかきまぜながら 3 0 まで冷却する。

(実施例 3 —シヮ予防クリーム）

( 1 ) 処方

ステアリン酸 2 . 0 重量％ステアリルアルコール 7 . 0

水添ラノリン 2 . 0

スクヮラン 5 . 0 2 —ォクチルドデシルアルコール 6 . 0 ポリオキシエチレン（ 2 5モル）

セチルアルコールエーテル 3 . 0

グリセリンモノステアリン酸エステル 2 . 0

プロピレングリコール 5 . 0

ビヤクジュツエ夕ノール抽出物 0 . 0 O

ゥコンエタノール抽出物 0 . 0 5

亜硫酸水素ナトリウム 0 . 0 3

ェチルパラベン 0 . 3

香料適量

イオン交換水残余

( 2 ) 製法

イオン交換水にプロピレングリコールを加え、加熱して 7 0 に保つ（水相）。他の成分を混合し加熱溶解して 7 0 に保つ（油相 ) 。水相に油相を加え予備乳化を行い、ホモミキサーで均一に乳化した後、よくかきまぜながら 3 0 まで冷却する。

(実施例 4 ー抗老化用クリーム）

( 1 ) 処方

固形パラフィン 5 . 0

ミツロウ 1 0 . 0

ワセリン 1 5 . 0

流動パラフィン 4 1 . 0

グリセリンモノステアリン酸エステル 2 . 0

ポリオキシエチレン（ 2 0モル）

ソルビ夕ンモノラウリン酸エステル 2 . 0

石けん粉末 0 . 1

硼砂 0 . 2 フキ夕ンポポアセトン抽出物 0. 0 5 サイコエタノール抽出物 0. 0 5

亜硫酸水素ナトリウム 0. 0 3

ェチルパラベン 0. 3

杳料適量

イオン交換水残余

( 2 ) 製法

イオン交換水に石けん粉末と硼砂を加え、加熱溶解して 7 0 に保つ（水相）。他の成分を混合,し加熱融解して 7 0 °Cに保つ（油相 ) 。水相に油相をかきまぜながら徐々に加え反応を行う。反応終了後、ホモミキサーで均一に乳化し、乳化後よくかきまぜながら 3 0 でまで冷却する。

(実施例 5—乳液）

( 1 ) 処方

ステアリン酸 1. 0 重量％ワセリン 5. 0

流動パラフィン 1 0. 0

ポリオキシエチレン（ 1 0モル）

モノォレイン酸エステル 2. 0

ポリエチレングリコール 1 5 0 0 3. 0

トリエタノールァミン 1. 0

カルボキシビ二ルポリマー 0. 2

(商品名：カーボポール 941, B. F. Goodrich Chemical company) オランダガラシ酢酸ェチル抽出物 0. 0 1

亜硫酸水素ナトリウム 0. 0 1

ェチルパラベン 0. 3

香料イオン交換水残余

( 2 ) 製法

少量のイオン交換水にカルボキシビ二ルポリマーを溶解する（A 相）。残りのイオン交換水にポリエチレングリコール 1 5 0 0 とトリエ夕ノールアミンを加え、加熱溶解して 7 0でに保つ（水相）。他の成分を混合し加熱融解して 7 0 °Cに保つ（油相）。水相に油相を加え予備乳化を行い、 A相を加えホモミキサーで均一乳化し、乳化後よくかきまぜながら 3 0 °Cまで冷却する。

(実施例 6 —乳液）

( 1 ) 処方

マイクロクリス夕リンワックス 1 · 0

密ロウ 2 . 0

ラノリン 2 · 0

流動パラフィン 1 0 . 0

スクヮラン 5 . 0

ソルビタンセスキォレイン酸エステル 4 . 0

ポリオキシエチレン（ 2 0モル）

ソルビ夕ンモノォレイン酸エステル 1 . 0

プロピレングリコール 7 . 0

卜ショウ 1 , 3—ブチレングリコール抽出物 1 0 . 0

亜硫酸水素ナトリウム 0 . 0 1

ェチルパラベン 0 . 3

香料適 A

イオン交換水残余

( 2 ) 製法

イオン交換水にプロピレングリコールを加え、加熱して 7 0 °Cに保つ（水相）。他の成分を混合し、加熱融解して 7 0 °Cに保つ（油相）。油相をかきまぜながらこれに水相を徐々に加え、ホモミキサ一で均一に乳化する。乳化後よくかきまぜながら 3 0でまで冷却する。

(実施例 7 —乳液）

( 1 ) 処方

( A相）

スクヮラン 5 . 0

ォレイルォレ一卜 3 . 0

ワセリン 2 . 0

ソルビ夕ンセスキォレイン酸エステル 0 . 8

ポリオキシェチレンォレイルエーテル

( 2 O E O ) 1 . 2

月見草油 0 . 5

防腐剤遍量

香料適量

( B相）

1 , 3 —プチレングリコール 4 . o 「ビヤクジュッェ夕ノール抽出液 1 . 5

エタノール 3 . 0

力ルポキシビ一ルポリマ一 0 . 2

水酸化力リウム 0 . 1

L一アルギニノヽ L—ァスパラギン酸塩 0 . 0 1

カツコンェ夕ノール抽出液 1 . 5

エリスリトール 0 . 5

へキサメタリン酸ナトリウム 0 . 0 5

イオン交換水残余

( 2 ) 製法 Aの油相部と Bの水相部をそれぞれ 7 0 °Cに加熱し完全溶解する。 A相を B相に加えて、乳化機で乳化する。乳化物を熱交換器を用いて冷却する。

(実施例 8 —ゼリー）

( 1 ) 処方

9 5 %エチルアルコール 1 0. 0 重量％ジプロピレングリコール 1 5. 0

ポリオキシエチレン（ 5 0モル）

ォレイルアルコールエーテル 2. 0

カルボキシビ二ルポリマー 1. 0

(商品名：カーボポール 940, B. F. Goodrich Chemical company) 苛性ソーダ 0. 1 5

L—アルギニン 0. 1

フキ夕ンポポエタノール抽出物 7. 0

2—ヒドロキシ一 4—メトキシ

ベンゾフエノンスルホン酸ナトリウム 0. 0 5

エチレンジアミンテトラアセテート ·

3ナトリウム · 2水 0. 0 5

メチルパラベン 0. 2

香料適量

イオン交換水残余

( 2 ) 製法

イオン交換水にカーボポール 9 4 0 を均一に溶解し、一方、 9 5 %エタノールにフキ夕ンポポエタノール抽出物、ポリオキシェチレン（ 5 0モル）ォレイルアルコールエーテルを溶解し、水相に添加する。次いで、その他の成分を加えたのち苛性ソーダ、 L—アルギニンで中和させ増粘する。 (実施例 9 一美容液）

( 1 ) 処方

( A相）

エチルアルコール（ 9 5 %) 1 0. 0

ポリオキシエチレン（ 2 0モル）

ォクチルドデカノール 1. 0

パントテニールェチルエーテル 0. 1

オランダガラシメタノール抽出物 1. 5

メチルパラベン 0. 1

(B相）

水酸化力リウム 0. 1

(C相）

「

グリセリン o . 0

ジプロピレングリコール 1 0

亜硫酸水素ナトリウム 0. 0

カルボキシビ二ルポリマー 0. 2

(商品名：カーボポール 940， B. F. Goodrich Chemical company) イオン交換水 < 残余

( 2 ) 製法

A相、 C相をそれぞれ均一に溶解し、 C相に A相を加えて可溶化する。次いで B相を加えたのち充填を行う。

(実施例 1 0 —パック）

( 1 ) 処方

( A相）

ジプロピレングリコール 5. 0 重量％ポリオキシエチレン（60モル）

硬化ヒマシ油 5. 0 ( B相）

トシヨウ抽出物 0. 0 1

ォリーブ油 5. 0

酢酸トコフエロール 0. 2

ェチルパラベン 0. 2

香料 0 . 2

( C相）

亜硫酸水素ナトリウム 0. 0 3

ポリビニルアルコール

(ケン化度 9 0、重合度 2 , 0 0 0 ) 1 3. 0

エタノール 7 . 0

ィオン交換水残余

( 2 ) 製法

A相、 B相、 C相をそれぞれ均一に溶解し、 A相に B相を加えて可溶化する。次いでこれを C相に加えたのち充填を行う。

(実施例 1 1 一化粧水）

( 1 ) 処方

( A相）

エタノール 5. 0重量％

P O Eォレイルアルコールエーテル 2. 0

ォレイルアルコール 0. 1

2一ェチルへキシル一 P—ジメチル

ァミノべンゾエー卜 0. 1 8

香料適量

( B相）

1 ， 3—ブチレングリコール 9. 5

グリセリン 2. 0 ピロリドンカルボン酸ナトリウム 0. 5

ニコチン酸アミド 0. 3

ビヤクジュッ 1， 3 —ブチレングリコール抽出物

0. 1

)6 —シクロデキストリン 1. 0

エリスリトール 0. 0 5

イオン交換水残余

( 2 ) 製法

Aのアルコール相を Bの水相に添加し、可溶化して化粧水を得る

(実施例 1 2 —固形ファンデーション）

( 1 ) 処方

タルク 4 3. 1 盧里 ,

「

カオリン 1 o . 0

セリサイ卜 1 0. 0

亜鉛華 7. 0

二酸化チタン 3. 8

黄色酸化鉄 2. 9

黒色酸化鉄 0. 2

スクヮラン 8. 0

イソステアリン酸 4. 0

モノォレイン酸 P O Eソルビ夕ン 3. 0

オクタン酸イソセチル 2. 0

フキ夕ンポポ

ェ夕ノール抽出物 0. 5

防腐剤適量

香料 m量 ( 2 ) 製法

タルク〜黒色酸化鉄の粉末成分をプレンダ一で十分混合し、これにスクヮラン〜オクタン酸イソセチルの油性成分、フキタンポポェ夕ノール抽出物、防腐剤、香料を加え良く混練した後、容器に充填、成型する。

(実施例 1 3 —乳化型ファンデーション（クリームタイプ）） ( 1 ) 処方

(粉体部）

二酸化チタン 1 0. 3 重量％

セリサイト 5. 4

カオリン 3. 0

黄色酸化鉄 0. 8

ベンガラ 0. 3

黒色酸化鉄 0. 2

(油相）

デカメチルシクロペン夕シロキサン 1 1. 5 流動パラフィン 4. 5 ポリオキシエチレン変性ジメチルポリシロキサン 4. 0

(水相）

ィオン交換水 5 0 0

1， 3 _ブチレンダルコール 4 5

オランダガラシエタノール抽出物 1 5

ソルビ夕ンセスキォレイン酸エステル 3 0

防腐剤

香料

( 2 ) 製法

水相を加熱撹袢後、十分に混合粉枠した粉体部を添加してホモミキサー処理する。更に加熱混合した油相を加えてホモミキサー処理した後、撹拌しながら香料を添加して室温まで冷却する。

Claims

1 . オランダガラシ、トシヨウ、ビヤクジュッ及びフキ夕ンポポ由来抽出物のうちのいずれか 1 つ以上を有効成分として含んで成る抗シヮ剤。

2 . オランダガラシ、トシヨウ、ビヤクジュッ及びフキ夕ンポポ請

由来抽出物のうちのいずれか 1 つ以上を有効成分として含んで成る基底膜安定化剤。

3 . オランダガラシ、トシヨウの、ビヤク~ジュッ及びフキ夕ンポポ由来抽出物のうちのいずれか 1 つ以上を有効成分として含んで成る細胞外マトリックス産生促進剤。

4 . 産生促進される細胞外マトリックスの構成成分がラミニン 5 、 I I I 型コラーゲン、 I V型コラーゲン及び V I I 型コラーゲンから成る群から選択される一種又は二種以上である、請求項 3 に記載の細胞外マ卜リックス産生促進剤。

5 . ラミニン 5 、 I I I 型コラーゲン、 I V型コラーゲン及び V I I 型コラーゲンの全てを産生促進させることを特徴とする、請求項 3又は 4に記載の細胞外マトリックス産生促進剤。

6 . オランダガラシ、トシヨウ、ビヤクジュッ及びフキ夕ンポポ由来抽出物のうちのいずれか 1 つ以上を有効成分として含んで成る、皮膚のたるみ、ハリ改善剤。

7 . オランダガラシ、トシヨウ、ビヤクジュッ及びフキ夕ンポポ由来抽出物のうちのいずれか 1 つ以上を人工皮膚形成培地中に添加する工程を含んで成る、人工皮膚の製造方法。

8 . オランダガラシ、トシヨウ、ビヤクジュッ及びフキ夕ンポポ由来抽出物のうちのいずれか 1 つ以上を皮膚に適用することによりシヮを軽減し、皮膚のたるみ、ハリを改善することを特徴とする美容方法。