WO2005042555A1

WO2005042555A1 - チロシナーゼ活性阻害剤及び顔面血流改善剤

Info

Publication number: WO2005042555A1
Application number: PCT/JP2004/015470
Authority: WO
Inventors: Hitoshi Matsumoto; Yuko Nakamura; Megumi Yamagishi; Kyoko Ito
Original assignee: Meiji Seika Kaisha, Ltd.
Priority date: 2003-10-30
Filing date: 2004-10-20
Publication date: 2005-05-12
Also published as: CA2543676A1; CA2543676C; US20070082024A1; EP1681297A4; JPWO2005042555A1; US7863248B2; JP4593474B2; EP1681297A1

Abstract

　安全性に優れたチロシナーゼ活性阻害剤、顔面血流改善剤ならびにこれらを有効成分として含有する医薬品組成物、食品組成物又は化粧料。　植物原料などから濃縮あるいは抽出して得たアントシアンを含有してなるチロシナーゼ活性阻害剤、顔面血流改善剤ならびにチロシナーゼ活性阻害作用と顔面血流改善作用を併せ持つ医薬品組成物、食品組成物又は化粧料を提供する。

Description

明細書

チロシナーゼ活性阻害剤及び顔面血流改善剤

技術分野

[0001] 本発明は、アントシアンを含有するチロシナーゼ活性阻害剤又は顔面血流改善剤、及びアントシアンを有効成分として含有する医薬品組成物、食品用組成物又は化粧料に関するものである。本発明の組成物はチロシナーゼ活性阻害効果と顔面血流改善効果を併せ持ち、かつ安全性に優れたものである。

背景技術

[0002] 女性にとってしみ、そばかす、くまは、しわ、たるみなどと並んで、美容上の大きな悩みの一つである。ところで、皮膚の色は 4種類の色素 (メラニン、酸ィ匕ヘモグロビン、還元ヘモグロビン、カロチン）と光散乱現象によって決定されている。なかでもメラ二ンは、ホルモンの異常分泌、紫外線や炎症性の刺激などにより、表皮色素細胞内メラニン産生情報伝達経路が活性ィ匕し、メラニン産生主要酵素であるチロシナーゼの産生、活性発現が亢進した結果、メラニンが表皮に過剰に沈着し、しみ、そばかすが出現する。このようなしみ、そばかすを防ぐ手段として、従来からメラニン産生主要酵素であるチロシナーゼの活性を阻害する物質が用いられ、現在までに、ビタミン C誘導体、プラセンタエキス、アルブチン、コウジ酸、エラグ酸、タンニン酸、甘草エキス、プラセンタエキスなどの多数のメラニン生成抑制剤が開発されている [Maeda, K:

FRAGRANCE JOURNAL, 1997年 9月号: 10-18] (非特許文献 1)。また、特開平 5— 20 1846号公報 (特許文献 1)にあるようにクランベリー由来のカフェ一酸配糖体を配合した美白料なども報告されているが、十分な効果が得られていないのが現状である。

[0003] し力しながら、近年コウジ酸などは食品への使用が禁止されるなど食品では可食性の問題があり、ビタミン Cなどごく一部の物質が実用化されているに過ぎず、効果の面でも未だ満足できるものではな、。

[0004] 一方、くまは顔面の血流不全が一因となっており、還元ヘモグロビン量の増加により青色又は黒色のくまが発生することが知られている。また、この顔面の血流不全はしみ、そばかすの一因にもなつている。しかし、血流改善効果を作用機作とした、しみ、そばかすの改善作用を持つ物質は、未だ見いだされていない。

[0005] 同様にくすみも顔面の血流の不全を原因とした還元ヘモグロビン量の増加による顔面の黒色化とチロシナーゼ活性が関与する黒色メラニンの生成によるふたつの要因が知られている。

[0006] このような状況下、しみ、そばかす、くま及びくすみなどの重要な作用点であるチロシナーゼの活性阻害効果と顔面の血流改善効果を有し、且つ安全性や味や食感、コストの観点力も満足の、く組成物が求められて、る。

特許文献 1：特開平 5- 201846号公報

非特許文献 1 :Maeda, K: FRAGRANCE JOURNAL, 1997年 9月号: 10-18

発明の開示

発明が解決しょうとする課題

[0007] 上記のようにァスコルビン酸類、ハイドロキノン誘導体、コウジ酸類、プラセンタェキスなどはチロシナーゼ活性阻害効果が弱ぐ安全性も十分とはいえな力つたことから、近年、植物抽出液中に含有される各種の活性成分が注目されている。多くの植物に含有されるポリフエノールの抗酸ィ匕作用を始めとして、抗腫瘍作用など様々な作用が報告されている。しかし、チロシナーゼ活性阻害効果を有する植物抽出液はバラ科 (Rosaceae)バラ属（Rosa)に含まれる植物として、従来金桜子、営実などが知られているが、チロシナーゼ活性阻害効果は満足できるものではな力つた。もちろん、血流改善作用は見、だされて、なかった。

[0008] 一方、血流改善作用を持つ物質として、ビタミン E、キトサン、イチヨウ葉、サフラン抽出エキスなどがあげられるが、これらの物質はメラニン産生阻害を得ることは困難であつた。本発明者らは上記事情に鑑み鋭意研究を重ねた結果、アントシアンにチロシナーゼ活性阻害効果及び顔面の血流改善効果を併せ持つことを見出し、本発明を完成するに至った。し力も、アントシアンによる顔面の血流改善効果は経口摂取 15 分以内に効果を発揮し、即効性を有するものであることが判明した。

[0009] 本発明の目的は、アントシアンを含有するチロシナーゼ活性阻害剤又は顔面血流改善剤、及びアントシアンを有効成分として含有する医薬品組成物、食品用組成物又は化粧料を提供することにある。本発明の組成物はチロシナーゼ活性阻害効果と顔面血流改善効果を併せ持ち、かつ安全性に優れたものである。

課題を解決するための手段

[0010] 本発明者らは、上記課題を達成するために鋭意研究を重ねた結果、アントシアンがチロシナーゼ活性阻害効果と顔面血流改善効果の双方を有することを見、だし、これを医薬品、食品などに配合して摂取することにより相乗的に効果を発揮することを見いだし、本発明を完成させるに至った。

[0011] 本発明の化合物は好ましくはポリフエノールの一種であるアントシアンである。主に下記の構造式に示されるような骨格を含む化合物の総称をアントシアンと呼ぶ力ァグリコンのみのものを特にアントシァ-ジン、配糖体として糖が結合したものを特にァントシァニンと呼ぶ。アントシァ-ジンには、下記のように側鎖によりデルフィ-ジン、シァ-ジン、マルビジン、ペラルゴ-ジン、ぺォ-ジン、ぺッ-ジンがある。例えば、グルコースが配糖体として結合しているものはアントシァ-ジンダルコシドと呼ぶことも可能である。

[化 1]

R 1

R 2

o o o o h

Delphinidin

Cyanidin ¾ 3

Malvidin

Pelargonidin

Peonidin

Petunidin

o

^ H

H

[0012] [式中、 R¹及び R²は、同一又は異なって水素原子、水酸基又はメトキシ基を表し、 R³ は水素原子又は Glyを表し、 Glyは、グルコース、ルチノース、ァラビノース、ガラタトース、ソフォロースなどの糖類基を表す。 ]

アントシアンは自然界に幅広く存在し、主に天然系色素として食品、あるいはその機能性力も欧州では、医薬品、医薬部外品、化粧品などに幅広く使用されている。例えば特公昭 59-53883号公報に記載されるような瘢痕形成剤としての利用、あるいは、特開平 3-81220号公報に記載されるようなブルーベリー由来のアントシァニンを用いた末梢血管の疾病治療について価値ある薬理学的性質が見出されている。昨今日本国内でもアントシアンの色素以外の利用法としてアントシアンの機能性に注目が集まってきている。

[0013] 特に、このデルフィ-ジン- 3-ダルコシド（以下 D3Gと約す）、デルフィ-ジン- 3-ルチノシド (以下 D3Rと約す)及びシァ-ジン- 3-ダルコシド (以下 C3Gと約す）は、対照薬として比較されるコウジ酸、アルブチンなどと同等のチロシナーゼ阻害活性を有することを発明者らは見出し、美肌効果や関与する紅班'黒班などの治療及び予防に有効である。同時に、本発明のアントシアン化合物は経口摂取すると 15分以内に顔面の血流量を増大させる効果があることを同時に見出した。

[0014] 従って本発明は、アントシアンを含有するチロシナーゼ活性阻害剤又は顔面血流改善剤、及びアントシアンを有効成分として含有する医薬品組成物、食品用組成物又は化粧料を提供するものである。

[0015] 本明細書は本願の優先権の基礎である日本国特許出願 2003-371080号の明細書および/または図面に記載される内容を包含する。

発明の効果

[0016] 以上詳述したように、本発明によれば、優れたチロシナーゼ活性阻害効果及び顔面血流改善効果を併せ持ち、安全性の高い、医薬品組成物、食品組成物又は化粧料が提供される。

図面の簡単な説明

[0017] [図 1]本発明の組成物を投与した場合の血流量の変化を示す図である。

発明を実施するための最良の形態

[0018] 以下、本発明について詳述する。本発明のアントシアンを有効成分として含有する医薬品組成物、食品組成物又は化粧料は、チロシナーゼ阻害活性効果及び/又は顔面血流改善効果を併せ持つことから、これらの組成物を用いることにより、有用な美肌効果を発揮できる。

[0019] 本発明に用い得るアントシアンとしては、紫サツマィモ、赤キャベツ、エルダーベリ一、ブドウ果汁あるいは果皮、ブドウ果皮、紫トウモロコシ、赤ダイコン、シソ、赤米、力シス、カウべリー、グースベリー、クランベリー、サーモンベリー、スィムブノレ一べリー、ストロベリー、ダークスイートチェリー、チェリー、ノヽィビスカス、ハクノレべリー、ブラックベリー、ブノレーべリー、プラム、ホワートノレべリー、ボイセンべリー、マノレべリー、紫ィモ、紫ャマイモ、ラズベリー、レッドカーラント、ローガンベリーなどアントシアンを多く含む物から抽出されるアントシアンを挙げることができる。例えば、発明者らが以前に出願した（WO02/22847)デルフィ-ジン- 3-ダルコシド、デルフィ-ジン- 3-ルチノシド及びシァ-ジン- 3-ダルコシドのように結晶化したアントシァニンであってよ、。例えば本願発明者がすでに開示している (WO01/01798)ように植物体など力抽出したィ匕合物を用いることができる。アントシアンの原料が高いことから、この中でもべリー類から抽出されることが望ましい。また、例えば、本発明者らが開示している（

WO02/22847)デルフィ-ジン及びシァ-ジンの- 3-ダルコシド及びルチノシドのように結晶化したアントシァニンも望ましい。本発明で用いるアントシァニン及びその結晶は、 WO01/01798及び WO02/22847の記載に従って得ることができる。本発明のァントシアンの一般式は上記の通りであり、ァグリコン部分は、デルフィ-ジン、シァ-ジン、マルビジン、ペラルゴ-ジン、ぺォ-ジン、ぺッ-ジンのいずれのものも用い得る力デルフィ-ジン又はシァ-ジンが望ましい。また、糖部分はグルコース、ルチノース、ァラビノース、ガラクトース、ソフォロースなどいずれも用いることができ、又は糖が結合しないものを用いることもできる。また、本発明者らが以前に出願しているアントシアンを含む食品用組成物 (WO01/01798)を本発明の組成物として用いることもできる。

[0020] 以前の研究において、この化合物力非毒性であることが示され、経口摂取で血中及び皮膚中に存在することが示されるため、経口的に、非経口的に投与や摂取することができる。

[0021] 原料としては、上記に記載のような植物原料が望ましぐ生果実、乾燥果実、果実破砕物、ピューレ、生果汁、濃縮果汁などを使用することが好ましい。また、アントシアンの製造法としては、上記原料を、膜濃縮あるいは抽出することが好ましい。膜濃縮を行う際は、事前に圧搾濾過が必要であり、その前に濾過物の粘性を低下させるためべクチン不活性ィ匕処理することが好ましい。抽出する場合は、水、 1, 3—ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン、ジグリセリンなどの多価アルコール、エタノール、イソプロピルアルコール、プロピルアルコールなどの低級アルコール、ァセトンなどの溶媒、それらの混合溶媒、好ましくは水、多価アルコール、低級アルコール、それらの混合溶媒、さらに好ましくは、温水、熱水などで抽出して得られる。該抽出物の形態としては、溶媒を含む抽出液、溶媒除去物などが挙げられる。しかし本発明では、アントシアンとして果汁の膜濃縮物を用いることが原料の製造が容易であり経済的であるので好まし、。アントシアンの濃度が高、ほど力卩ェが容易になるため望ましい。生果実、圧搾した果汁状態、あるいは乾燥果実の状態でもアントシアンとして使用することができるが、使用性、製剤化などの点から乾燥粉末あるいは溶媒抽出物として用いることが好ま、。本発明で用いるアントシアン濃縮物又は抽出物の精製程度としては、精製物中のアントシアンの含有量が高いものが望ましい。少なくとも

1%以上、好ましくは 5%以上のアントシアンを含むものが望ましい。アントシアンは皮膚に対する安全性が高ぐかつ細胞毒性が低い特徴がある。このようにして得たアントシアン含有組成物は、安全性が高ぐ優れたチロシナーゼ活性阻害効果及び顔面血流改善効果を有する。

[0022] 本発明のアントシアンを有効成分として含有する医薬品組成物を用いる場合は、その剤型に応じて異なる力通常全組成物中アントシアンカ S0.1— 50重量％、好ましくはアントシアンが 0.1— 20重量％程度である。投与量は患者の年齢、体重、性別、疾患の相違、症状の程度などを考慮して、個々の場合に応じて適宜決定される力通常成人 1日当りアントシアンが 1一 1000mg、好ましくは 1一 200mgであり、これを 1日 1 回又は数回に分けて投与する。

[0023] 本発明の糸且成物は、メラニン産生主要酵素であるチロシナーゼ阻害活性を有するため、メラニンの産生を抑制し、皮膚にできるしみ、そばかすを予防又は軽減することができる。また、本発明の組成物は、血流を改善する作用を有するため、顔面の血流を改善し、血流不全により出現するくまやくすみを予防又は軽減することができる。

[0024] 本発明の組成物以外に、従来効果を有することが知られている美白剤を併用すると、単独で配合するよりも美肌効果が相乗的に高まるので好ましい。併用する美白剤としては、例えば、アルブチン、エラグ酸、プラセンタエキス、ビタミン C及びその誘導体、ルシノール、ダルタチオン、リノール酸、リノレン酸、乳酸、トラネキサム酸、ビフエ -ル化合物、パンテティン- S-スルホン酸カルシウム、ィォゥ、油溶性甘草エキス (グラブリジン）、ラズベリーケトンダルコシド、ゥワウルシェキス、甘草エキス、ァセロラエキス、ァノレモンドエキス、アロエエキス、イチヨウエキス、イブキトラノォエキス、ェイジツエキス、ォゥゴンエキス、ォゥレンエキス、オトギリソゥエキス、ォドリコソウエキス、海藻ェキス、力ミツレエキス、カツコン（クズ）エキス、キハダエキス、クチナシエキス、クララ（クジン）エキス、クロレラエキス、黒砂糖抽出物、クヮ（ソゥハクヒ）エキス、ゲンチアナェキス、紅茶エキス、ゴバイシエキス、コムギエキス、コメ胚芽油、小麦胚芽エキス、コメヌ力エキス、サイシンエキス、サンシンエキス、サンショウエキス、シソエキス、シャクャクエキス、スィカズラエキス、セージエキス、センキユウエキス、ダィズエキス、チヤエキス (葉又は実)、トウキエキス、トウキンセン力エキス、トウニンエキス、ドクダミエキス、ニン -クエキス、ハマメリス抽出液、ビヮエキス、ベ-バナエキス、ボタンエキス、マツホドエキス、マロニエエキス、メリッサエキス、ョクイ-ン（ノヽトムギ）エキス、ユキノシタエキス、ヮレモコゥ（ジュ）エキス、ョモギエキス、火棘エキス、ノ、イビスカスエキスなどが挙げられる。この中で、ァスコルビン酸、ァスコルビン酸ナトリウム、ァスコルビン酸リン酸エステルマグネシウム、ァスコルビン酸ステアリン酸エステル、ァスコルビン酸パルミチン酸エステル、ァスコルビン酸ジパルミチン酸エステル、ァスコルビン酸クルコシドなどのビタミン C及びその誘導体、乳酸、ブラセンタエキス、油溶性甘草エキス、アロエエキス、スィカズラエキス、ノ、ィビスカスエキス、ョクイニンエキス、チヤエキス、ユキノシタエキスが汎用性や安定性に富むことから好ましい。その中でも、特にビタミン C及びその誘導体、プラセンタエキスが好ましい。

[0025] 本発明の組成物は、抗炎症剤を併用することによって、紫外線によるシミ、ソバカス、クスミなどの色素沈着を一層改善し、防止する効果が得られるので、抗炎症剤を併用することが好ましい。抗炎症剤としては、グリルリチン酸、グリチルレチン酸及びそれらの塩又はそれらのエステル、甘草エキス、ゥコンエキス、ォゥゴンエキス、ォォムギエキス、シャクャクエキス、シラカバ榭液、モモの葉エキス、アラントイン、 ε—ァミノカプロン酸、インドメタシン、グアイァズレン、塩化リゾチーム、ヒドロコルチゾン、パンテノール及びその誘導体力も選ばれる 1種又は 2種以上である。

[0026] 上記薬効成分としては、従来、医薬品、医薬部外品、化粧品、衛生材料、雑貨などで使用されているものであれば特に限定されるものではなぐそれらの中でチロシナーゼ阻害効果ゃ抗炎症効果を有するものは、本発明の他のチロシナーゼ阻害剤や抗炎症剤として使用できる。薬効成分の例としては、ァシタバエキス、ァボガドエキス、アマチヤエキス、ァノレテアエキス、ァノレニ力エキス、アンズェキス、ウイキヨウエキス、ェチナシ葉エキス、ォゥバタエキス、オランダ力ラシエキス、オレンジエキス、海水乾燥物、加水分解エラスチン、加水分解シルク、力モミラエキス、力ロットエキス、力ワラョモギエキス、カルカデエキス、キウイエキス、キナエキス、キューカンバーエキス、グァノシン、クマザサエキス、クルミエキス、グレープフノレーツエキス、タレマティスエキス、酵母エキス、ゴボウエキス、コンフリーエキス、コラーゲン、サイコエキス、サイタイ抽出液、サルビアエキス、サボンソゥエキス、ササエキス、サンザシエキス、シィタケエキス、ジォゥエキス、シコンエキス、シナノキエキス、シモッケソゥエキス、ショウブ根エキス、シラカバエキス、スギナエキス、セィヨウキズタエキス、セィヨウサンザシエキス、セィヨウ-ヮトコエキス、セィヨウノコギリソゥェキス、セィヨウハツ力エキス、ゼ-ァオイェキス、センブリエキス、タイソゥエキス、タイムエキス、チヨウジエキス、チガヤエキス、チンピエキス、トウヒエキス、トマトエキス、納豆エキス、ニンジンエキス、ノバラエキス、バタモンドゥエキス、パセリエキス、蜂蜜、パリエタリアエキス、ヒキォコシエキス、ビサボ口ール、フキタンポポエキス、フキノトゥエキス、ブクリヨウエキス、ブッチャーブルームェキス、ブドゥエキス、プロポリス、へチマエキス、ぺノ一ミントエキス、ボダイジユエキス、ホップエキス、マツエキス、ミズバショウエキス、ムクロジェキス、ャグノレマギクエキス、ユーカリエキス、ュズエキス、ラベンダーエキス、リンゴエキス、レタスエキス、レモンエキス、レンゲソゥエキス、ローズエキス、ローズマリーエキス、ローマ力ミツレエキス、ローヤルゼリーエキスなどを挙げることができる。

また、ヒアルロン酸ナトリウム、コンドロイチン硫酸ナトリウムなどのムコ多糖類、デォキシリボ核酸、コラーゲン、エラスチン、キチン、キトサン、加水分解卵殻膜などの生体高分子;アミノ酸、尿素、ピロリドンカルボン酸ナトリウム、ベタイン、ホエイ、トリメチルグリシンなどの保湿成分;スフインゴ脂質、セラミド、コレステロール、コレステロール誘導体、リン脂質などの油性成分；ビタミン A, B2, B6, D, K,ピオチン、ニコチン酸アミドなどのビタミン類；ジイソプロピルアミンジクロ口アセテート、 4—アミノメチルシクロへキサンカルボン酸などの活性成分；レチノール、レチノール誘導体などの創傷治癒剤；セファランチン、トウガラシチンキ、ヒノキチオール、ヨウ化ニン-タエキス、塩酸ピリドキシン、ニコチン酸、ニコチン酸誘導体、イソプロピルメチルフエノール、エストラジオール、ェチュルエステラジオール、塩化力プロ-ゥム、塩化ベンザルコ-ゥム、塩酸ジフェンヒドラミン、タカナール、カンフル、サリチル酸、ノ-ル酸バニリルアミド、ノナン酸バニリルアミド、ピロタトンオラミン、ペンタデカン酸グリセリル、 1 メントール、メントールのピロリドンカルボン酸塩、モノ-トログアヤコール、レゾルシン、 γ—ァミノ酪酸、塩化べンゼトニゥム、塩酸メキシレチン、オーキシン、女性ホルモン、カンタリスチンキ、シクロスポリン、ヒドロコルチゾン、モノステアリン酸ポリオキシエチレンソルビタン、ノヽッカ油、鎮痛剤、抗菌性物質なども挙げられる。

[0028] 本発明のチロシナーゼ阻害剤及び顔面血流改善剤を含有する組成物の食品素材としての利用は発明者らが以前に出願 (WO02/22847)した物質であるデルフィ-ジン -3-ダルコシド、デルフィ-ジン- 3-ルチノシド及びシァ-ジン- 3-ダルコシド、又は、発明者らが以前に出願しているアントシアンを含む食品用組成物及び飲食品（ WO01/01798)を用いることによって、しみ、そばかす、くま及びくすみなどを予防又は改善する機能性食品を製造することが可能である。本発明の組成物は、しみ、そばかすの予防や改善に適した特定保健用食品の製造などに用いることができる。すなわち、本発明の組成物は、固体状食品、ゼリー状食品、液状食品、カプセル状食品など様々な形態の食品に添加することができる。ここで、固体状食品としては、パン生地;せんべい、ビスケット、クッキーなどの焼き菓子用生地;そば、うどんなどの麵類；かまぼこ、ちくわなどの魚肉製品；ハム、ソーセージなどの畜肉製品；粉ミルクなどが挙げられる。また、ゼリー状食品としては、フルーツゼリー；コーヒーゼリーなどが挙げられる。さらに、液状食品としては、茶;コーヒー;紅茶;発酵乳;乳酸菌飲料などが挙げられる。カプセル状食品としては、ハードカプセル、ソフトカプセルなどがあげられる。

[0029] 本発明の組成物を、上記食品に添加する場合、添加量としては、食品全体に対して本発明の化合物の含有量が 0. 01から 10重量％となるように配合することができる。効果が期待できる摂取量は年齢、体重、性別、症状の程度などを考慮して、個々の場合に応じて適宜決定されるが、通常成人 1日当りアントシアンカ S1— 1000mg、好ましくは 10— 200mgであり、これを 1日 1回又は数回に分けて摂取する。

[0030] また、本発明はチロシナーゼ阻害活性と顔面血流改善効果を併せ持つことから、本発明の組成物を用いることにより美肌効果の発揮も期待される。ここで、美肌とは、顔面のしみ、そばかす、くま、くすみを軽減又は予防することをいう。上記のアントシァンを含む医薬組成物、食品組成物又は化粧料を顔面にしみ、そばかす、くま及びくすみのいずれか 1つ以上が出現している被験体に適用することができる。

実施例

[0031] 次に、実施例を挙げて本発明をさらに詳細に説明するが、本発明の技術的範囲はこれらの実施例によってなんら限定されるものでない。

[0032] [実施例 1] アントシアンを含む組成物の調製

市販のカシス濃縮果汁 3Kg (固形分当たりのアントシアン純度 2.8%)を水で希釈し、 Bx.10 (固形分濃度 10%)の濃度に調製した。この希釈果汁を濾紙で濾過して異物を除去した後、マイナス荷電型逆浸透膜日東電工社製 NTR-7410をセットした装置で膜分離を実施した。濃縮液が循環しなくなるまで分離を実施し、再度水を添加して希釈した後、再度分離を継続した。濃縮液が循環しなくなった段階で分離を終了した。濃縮液をスプレードライして粉末状のアントシアン高含有組成物を得た。本組成物のアントシアン純度は固形分当たり 14.1 %であった。

[0033] [実施例 2] 結晶アントシァニンの調製

さらに本組成物から、アントシァニンを結晶として調製した。

[0034] 実施例 1に記載の方法に準じて得られた粉末 40g (アントシァニン各成分の内訳は D3G 12.5%D3R 47.9%C3G 4.1%, C3R 35.5%)を ODSシリカゲルカラムを用い 0.1 %TFAを含む 9%ァセトニトリル水溶液で分画した。

[0035] 得られた D3G画分は 1.51gと C3G画分 0.98g、 C3R画分 162mg、 D3R画分 231mgであつた。

[0036] この濃縮物を 5%塩ィ匕水素 Zメタノール溶液で溶解後、 5°Cで 24時間静置し結晶化を行い、結晶性 D3G塩酸塩 1.06gと結晶性 C3G塩酸塩 0.59g、結晶性 C3R塩酸塩 58mg、結晶性 D3R塩酸塩 88mgを調製した。

[試験例 1] チロシナーゼ活性阻害試験

被験物質は実施例 1で調製した組成物と実施例 2で調製した 4種の結晶アントシァニンを用いた。

[0037] 96ゥエルプレートにマッシュルーム由来のチロシナーゼ（125U/ml、 67mmol/Lリン酸緩衝液に溶解、シグマ社製) 40 1、基質である 3,4-ジノヽイドロキシフエ-ルァラニン（ L- dopa、 5mmol/L、 67mmol/Lリン酸緩衝液に溶解、シグマ社製） 120 1、阻害剤溶液 40 /z lを加え、 37°Cで 30分間放置した後、 dopachrome生成量を 490nmの吸光度で測定した。阻害活性は次の式力も求められる阻害率で表した。

[0038] 阻害率（％) = [(A-B)-(C-D)]/ (A-B) X 100

A:対照溶液の 490謹における吸光度

B：対照溶液 blankの 490nmにおける吸光度

C：アントシァニン溶液の 490nmにおける吸光度

D：アントシァニン溶液 blankの 490nmにおける吸光度

結果を表 1に示す。実施例 1の組成物は、アルブチンよりもチロシナーゼ阻害活性が高いことがわ力つた。

[0039] また実施例 2の結晶アントシァニンは、 L-システィン、コウジ酸、グノレタチオンよりもチロシナーゼ阻害活性が高、ことがわ力た。

[表 1]

[0040] [試験例 2] 顔面血流改善試験

被験物質は実施例 1で調製した組成物を用いた。

[0041] 顔面血流量はレーザードップラー血流計を用い、頰部にプローブを設置し測定した。被験者は 25— 38歳の男女 6名とし、室温 23± 1°C、湿度 45 ±5%の条件下で 30分馴化後、摂取前の測定を行った。実施例 1の組成物 465mg、又は対照群として等熱量に相当するショ糖を摂取し、 15、 30、 60分後の顔面皮膚血流量を測定した。

[0042] 結果を図 1に示す。実施例 1の組成物を摂取した場合、摂取 15分後から頰部の血流量が増加し、即効性を持って顔面の血流量を改善したことがわかる。よって、実施例 1の糸且成物を摂取することにより、しみ、そばかす、くま及びくすみなどが改善されることが期待できる。

本明細書で引用した全ての刊行物、特許および特許出願をそのまま参考として本明細書にとり入れるものとする。

Claims

請求の範囲

[I] アントシアンを含有してなるチロシナーゼ活性阻害剤。

[2] アントシアンがデルフィ-ジンの配糖体及び Z又はシァ-ジンの配糖体である請求項 1記載のチロシナーゼ活性阻害剤。

[3] アントシアンを含有してなる顔面血流改善剤。

[4] アントシアンがデルフィ-ジンの配糖体及び Z又はシァ-ジンの配糖体である請求項 3記載の顔面血流改善剤。

[5] アントシアンをチロシナーゼ活性阻害剤及び/又は顔面血流改善剤として含有することを特徴とする医薬組成物。

[6] アントシアンがデルフィ-ジンの配糖体及び Z又はシァ-ジンの配糖体である請求項 5記載の医薬組成物。

[7] アントシアンをチロシナーゼ活性阻害剤及び/又は顔面血流改善剤として含有することを特徴とする食品組成物。

[8] アントシアンがデルフィ-ジンの配糖体及び Z又はシァ-ジンの配糖体である請求項 7記載の食品組成物。

[9] アントシアンをチロシナーゼ活性阻害剤及び/又は顔面血流改善剤として含有することを特徴とする化粧料。

[10] アントシアンがデルフィ-ジンの配糖体及び Z又はシァ-ジンの配糖体である請求項 9記載の化粧料。

[II] 皮膚のしみ、そばかす、くま及びくすみを改善するための、請求項 5— 10のいずれ力 1項に記載の組成物又は化粧料。