UA72545C2 - Олігосахариди, спосіб їх одержання та фармацевтична композиція на їх основі - Google Patents
Олігосахариди, спосіб їх одержання та фармацевтична композиція на їх основі Download PDFInfo
- Publication number
- UA72545C2 UA72545C2 UA2002043067A UA200243067A UA72545C2 UA 72545 C2 UA72545 C2 UA 72545C2 UA 2002043067 A UA2002043067 A UA 2002043067A UA 200243067 A UA200243067 A UA 200243067A UA 72545 C2 UA72545 C2 UA 72545C2
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- oligosaccharides
- formula
- mixture
- radical
- hydrogen atom
- Prior art date
Links
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 title claims abstract description 76
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 title claims abstract description 76
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 27
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims abstract description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 64
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical group [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 51
- 239000011734 sodium Substances 0.000 claims description 29
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 claims description 27
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 claims description 27
- MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N Nitric oxide Chemical compound O=[N] MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 26
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims description 22
- WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M Lithium hydroxide Chemical compound [Li+].[OH-] WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 18
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 15
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 14
- VDZOOKBUILJEDG-UHFFFAOYSA-M tetrabutylammonium hydroxide Chemical compound [OH-].CCCC[N+](CCCC)(CCCC)CCCC VDZOOKBUILJEDG-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 10
- 125000001453 quaternary ammonium group Chemical group 0.000 claims description 9
- 239000000908 ammonium hydroxide Substances 0.000 claims description 8
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 claims description 7
- 239000012429 reaction media Substances 0.000 claims description 7
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 claims description 6
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 6
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 239000011591 potassium Substances 0.000 claims description 5
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 claims description 5
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 4
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 4
- 239000011575 calcium Substances 0.000 claims description 4
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 claims description 4
- 230000006378 damage Effects 0.000 claims description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 4
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 claims description 4
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 claims description 4
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 4
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 claims description 3
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 claims description 3
- 208000023105 Huntington disease Diseases 0.000 claims description 3
- 208000018737 Parkinson disease Diseases 0.000 claims description 3
- 206010002026 amyotrophic lateral sclerosis Diseases 0.000 claims description 3
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 claims description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 3
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 claims description 3
- 208000005264 motor neuron disease Diseases 0.000 claims description 3
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 claims description 3
- 208000004296 neuralgia Diseases 0.000 claims description 3
- 208000021722 neuropathic pain Diseases 0.000 claims description 3
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 claims description 3
- 208000027232 peripheral nervous system disease Diseases 0.000 claims description 3
- 208000033808 peripheral neuropathy Diseases 0.000 claims description 3
- 229910052792 caesium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- TVFDJXOCXUVLDH-UHFFFAOYSA-N caesium atom Chemical compound [Cs] TVFDJXOCXUVLDH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 230000002490 cerebral effect Effects 0.000 claims description 2
- 210000000278 spinal cord Anatomy 0.000 claims description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 claims 2
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 claims 1
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 claims 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 claims 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 claims 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 claims 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 claims 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 claims 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 41
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 20
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 14
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 14
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 14
- 239000000047 product Substances 0.000 description 13
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 11
- MHDVGSVTJDSBDK-UHFFFAOYSA-N dibenzyl ether Chemical compound C=1C=CC=CC=1COCC1=CC=CC=C1 MHDVGSVTJDSBDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 8
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 7
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 7
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 7
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 7
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 7
- MFGOFGRYDNHJTA-UHFFFAOYSA-N 2-amino-1-(2-fluorophenyl)ethanol Chemical compound NCC(O)C1=CC=CC=C1F MFGOFGRYDNHJTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 6
- HUCVOHYBFXVBRW-UHFFFAOYSA-M caesium hydroxide Inorganic materials [OH-].[Cs+] HUCVOHYBFXVBRW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 6
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 6
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 6
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 5
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 5
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 5
- 239000013067 intermediate product Substances 0.000 description 5
- 238000001616 ion spectroscopy Methods 0.000 description 5
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 5
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 5
- HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K trisodium citrate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 5
- 108010022901 Heparin Lyase Proteins 0.000 description 4
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 4
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 4
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 4
- 238000005227 gel permeation chromatography Methods 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 4
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 3
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 3
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M Nitrite anion Chemical compound [O-]N=O IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 206010034576 Peripheral ischaemia Diseases 0.000 description 3
- 150000008044 alkali metal hydroxides Chemical class 0.000 description 3
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 3
- 238000011141 high resolution liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 3
- 210000003097 mucus Anatomy 0.000 description 3
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 3
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 3
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- 238000000870 ultraviolet spectroscopy Methods 0.000 description 3
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- -1 Benzyl ester Chemical class 0.000 description 2
- 201000006474 Brain Ischemia Diseases 0.000 description 2
- 206010008120 Cerebral ischaemia Diseases 0.000 description 2
- 206010053172 Fatal outcomes Diseases 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010019196 Head injury Diseases 0.000 description 2
- 108090000913 Nitrate Reductases Proteins 0.000 description 2
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 2
- 244000309464 bull Species 0.000 description 2
- 206010008118 cerebral infarction Diseases 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 2
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 2
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000012691 depolymerization reaction Methods 0.000 description 2
- 230000001066 destructive effect Effects 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 210000003027 ear inner Anatomy 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 2
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 2
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- VWWQXMAJTJZDQX-UYBVJOGSSA-N flavin adenine dinucleotide Chemical compound C1=NC2=C(N)N=CN=C2N1[C@@H]([C@H](O)[C@@H]1O)O[C@@H]1CO[P@](O)(=O)O[P@@](O)(=O)OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)CN1C2=NC(=O)NC(=O)C2=NC2=C1C=C(C)C(C)=C2 VWWQXMAJTJZDQX-UYBVJOGSSA-N 0.000 description 2
- 235000019162 flavin adenine dinucleotide Nutrition 0.000 description 2
- 239000011714 flavin adenine dinucleotide Substances 0.000 description 2
- 229940093632 flavin-adenine dinucleotide Drugs 0.000 description 2
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- 239000003701 inert diluent Substances 0.000 description 2
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 2
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 description 2
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 description 2
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 2
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 description 2
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 2
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 2
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 238000009736 wetting Methods 0.000 description 2
- ZCUQOPGIJRGJDA-UHFFFAOYSA-N 1-naphthalen-1-ylethane-1,2-diamine Chemical compound C1=CC=C2C(C(N)CN)=CC=CC2=C1 ZCUQOPGIJRGJDA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 2-amino-2-deoxy-D-glucopyranose Chemical compound N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 0.000 description 1
- AGJBKFAPBKOEGA-UHFFFAOYSA-M 2-methoxyethylmercury(1+);acetate Chemical compound COCC[Hg]OC(C)=O AGJBKFAPBKOEGA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 206010003175 Arterial spasm Diseases 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000632511 Daviesia arborea Species 0.000 description 1
- 208000016952 Ear injury Diseases 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N Lithium Chemical compound [Li] WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- ACFIXJIJDZMPPO-NNYOXOHSSA-N NADPH Chemical compound C1=CCC(C(=O)N)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](O2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)O)O1 ACFIXJIJDZMPPO-NNYOXOHSSA-N 0.000 description 1
- 239000005662 Paraffin oil Substances 0.000 description 1
- YZCKVEUIGOORGS-IGMARMGPSA-N Protium Chemical compound [1H] YZCKVEUIGOORGS-IGMARMGPSA-N 0.000 description 1
- 208000020339 Spinal injury Diseases 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 description 1
- 244000299461 Theobroma cacao Species 0.000 description 1
- 235000009470 Theobroma cacao Nutrition 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 208000025698 brain inflammatory disease Diseases 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 230000000112 colonic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 238000004737 colorimetric analysis Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 239000008298 dragée Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 230000001804 emulsifying effect Effects 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 206010014599 encephalitis Diseases 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N ethanol;hydrate Chemical compound O.CCO IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003889 eye drop Substances 0.000 description 1
- 229940012356 eye drops Drugs 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 239000007903 gelatin capsule Substances 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 125000005456 glyceride group Chemical group 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 239000012456 homogeneous solution Substances 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 1
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 229910052744 lithium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 1
- 210000003141 lower extremity Anatomy 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 210000004165 myocardium Anatomy 0.000 description 1
- 235000000010 nanu Nutrition 0.000 description 1
- 244000082862 nanu Species 0.000 description 1
- 229940100662 nasal drops Drugs 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- TWNQGVIAIRXVLR-UHFFFAOYSA-N oxo(oxoalumanyloxy)alumane Chemical compound O=[Al]O[Al]=O TWNQGVIAIRXVLR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 239000004627 regenerated cellulose Substances 0.000 description 1
- 210000001525 retina Anatomy 0.000 description 1
- 230000002207 retinal effect Effects 0.000 description 1
- 238000005185 salting out Methods 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 1
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 1
- 210000003625 skull Anatomy 0.000 description 1
- 239000008247 solid mixture Substances 0.000 description 1
- 208000020431 spinal cord injury Diseases 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 239000003206 sterilizing agent Substances 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 229940124530 sulfonamide Drugs 0.000 description 1
- 150000003456 sulfonamides Chemical class 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- DZLFLBLQUQXARW-UHFFFAOYSA-N tetrabutylammonium Chemical compound CCCC[N+](CCCC)(CCCC)CCCC DZLFLBLQUQXARW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000004044 tetrasaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 230000008719 thickening Effects 0.000 description 1
- 150000004043 trisaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 239000002966 varnish Substances 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 235000012431 wafers Nutrition 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/006—Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence; Gellans; Succinoglycans; Arabinogalactans; Tragacanth or gum tragacanth or traganth from Astragalus; Gum Karaya from Sterculia urens; Gum Ghatti from Anogeissus latifolia; Derivatives thereof
- C08B37/0063—Glycosaminoglycans or mucopolysaccharides, e.g. keratan sulfate; Derivatives thereof, e.g. fucoidan
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
- A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/02—Drugs for disorders of the nervous system for peripheral neuropathies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
- A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
- A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/01—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing oxygen
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Neurology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Virology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Psychology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Psychiatry (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- AIDS & HIV (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Cardiology (AREA)
Abstract
Винахід стосується олігосахаридів формули: , їх сумішей, їх діастереоізомерів, способу одержання та олігосахаридвмісних композицій.
Description
Дійсний винахід відноситься до олігасахариди формули:
ОМ Ов, соом о о о
В, он г)
В, Мн, ОВ, й Мн (Фу, їхніх сумішей, їх діастереоіїзомерів, способу їх одержання й олігасахаридвмісних фармацевтичних композицій.
Дисахариди-сульфати, що мають на відновлюючому кінці структуру 1,6-ангідро, були описані Н.Р.М/еззеї, у.Сагропуагайе спетівігу, 1(8), 1039-1052 (1992). НІ про яку їхню фармакологічну активність не згадувалося.
У патенті ЕР 84999 і авторами У.Іспікажа із співроб., Сагропуйдг. Кев., 141, 273-282 (1985), були також описані трисахариди-сульфати з ланкою 1,6-ангідро як проміжні продукти для одержання вищих олігасахариди. Ці трисахариди мають слабку активність анти-хХа.
У формулі І є цілим числом від 0 до 25; Кі, Нз, Ва і К5, однакові чи різні, означають атом чи водню радикал
ЗОЗзМ; Ві і Ке, однакові чи різні, означають атом водню чи радикал 5Оз3М чи СОСН»; і М означає натрій, кальцій, магній чи калій. Ці олігасахариди містять, таким чином, парне число сахаридів.
Ах у формулі І є переважно атомом водню, а п переважно є цілим числом від 0 до 10, переважно відо до 6 і ще більш переважно від 1 до 6.
Олігасахариди формули І можуть бути отримані дією гідроксиду лужного металу чи четвертинного амонію на олігасахариди формули:
ОМ он, сооМ вОжма й он н он
А, МНВ, ов, а МН. , у якій п є цілим числом від 0 до 25; Кі, Нз, Ва і К5, однакові чи різні, означають атом водню чи радикал
ЗОзЗМ; Ві і Кє однакові чи різні, означають атом водню чи радикал 5ЗОзМ чи СОСН»;; і М означає натрій, кальцій, магній чи калій чи їхні суміші.
Названу реакцію проводять у водному середовищі при температурі від 40 до 80"С і рН від 10 до 3.
Як можливо використовуваний гідроксид лужного металу можна назвати гідроксид натрію, гідроксид калію, гідроксид літію і гідроксид цезію.
Як можливо використовуваний гідроксид четвертинного амонію можна назвати гідроксид тетрабутиламмонію.
Кількість гідроксиду лужного металу чи четвертинного амонію повинна бути достатньою для того, щоб значення рН реакційного середовища під час реакції зберігалося постійним. Для цієї мети гідроксид лужного металу чи четвертинного амонію необхідно додавати безупинно протягом усієї реакції.
Гідроксид лужного металу чи четвертинного амонію використовується переважно у вигляді 1-Б595-ного водного розчину.
Реакцію проводять переважно при температурі від 60 до 7070. рН реакційного середовища переважно дорівнює 11-12,5.
Реакцію зупиняють шляхом підкислення реакційного середовища, наприклад додаванням кислої смоли, такої як смола Атрегійе ІР120А (Ріка).
Олігасахариди формули | можуть бути, при необхідності, очищені за допомогою гель-проникаючої хроматографії на гелі типу поліакриламід-агароза, такому як гель, що поставляється під маркою ШПгодеї
АСА2гО2А (Віозерга), відповідно до пропису приведеного нижче для розділення проміжних олігасахариди формули ІІ. Олігасахариди формули І, у яких п дорівнює 0 чи 1, також можуть бути, у разі потреби, очищені на колонці з окисом алюмінію з використанням суміші вода-етанол як елюента.
Проміжні олігасахариди формули І! і їх суміші можуть бути отримані розділенням за допомогою гелевой хроматографії суміші олігасахаридів І, отриманої ферментативною деполімеризацією гепарину чи лужною деполімеризацією бензилового ефіру гепарину чи напівсинтетичного бензилового ефіру гепарину.
Названу вище хроматографію проводять на колонках, заповнених гелем типу поліакриламід-агароза, що поставляється маркою ШКгодеІ АСА 202" Віозерга) Переважно використовують батарею колонок з поліакриламід-агарозним гелем. Число використовуваних колонок залежить від обсягу, гелю і олігасахаридів, які дідлягають розділенню. Суміш елююють за допомогою розчину, що містить фосфатний буфер і хлорид натрію. Фосфатний буфер являє собою переважно 0,02моль/л розчин МангРОз/Манрох (рн 7), який містить
О,Тмоль/д хлориду натрію. Детекцию різних фракцій здійснюють за допомогою УФ спектрометрії (254нм) і іонної спектрометрії (ІВЕ). Одержувані при цьому фракції можуть бути потім при необхідності очищені, наприклад за допомогою хроматографії ЗАХ (5зігопд апіоп ехспапде) з використанням відомих фахівцям способів, зокрема способів описаних К.сС.Кісе і .).Іппагаї, Сагропудгаєе Кезеагсп, 219-233 (1989),
А.Гагпкіаег, 5.Н.Напзеп і Р.В.О5іегдаага, Сагропуагате Кезеагсіп, 266, 37-52 (1995) і в патенті УМО 90/01501 (приклад 2). Фракції після цього ліофілізують і потім збезсолюють на заповненій гелем колонці, такій як колонка з гелем Зерпадех СТОК (Рнагтасіа Віоспетіса!в5).
Якщо очищення здійснюють, не користуючись допомогою хроматографії 5АХ, ліофілізати можуть бути очищені простим осадженням чи піддані фракціонуванню за допомогою відомих фахівцям способів, зокрема за допомогою способу, описаного в патенті ЕК 2548672. У загальному випадку операції проводять у відповідності з наступним прописом: ліофілізовану фракцію, що очищається розчиняють при 25"С в приблизно десятьох об'ємах дистильованої води. За допомогою додавання метанолу чи етанолу осаджують бажаний олігасахарид, контролюючи його чистоту за допомогою хроматографії РХВР (рідинної хроматографії високої розділяючої здатності). Додавання метанолу чи етанолу визначають у залежності від бажаних чистоти чи виходу олігасахариду. Ця операція може бути проведена в кілька послідовних етапів, виходячи з початкового розчину ліофілізату. З цією метою агент для висолювання( метанол чи етанол) додають малими порціями, відокремлюючи після кожного додавання осад, що утвориться. Отримані в такий спосіб осади аналізують за допомогою хроматографії
РХВР. У залежності від бажаних чистоти та виходу збирають відповідні їм фракції осаду.
Для проміжних продуктів формули ІІ, у яких п-0,1 чи 2, доцільно виходити із суміші І, одержуваної за допомогою ферментативної деполімеризації.
Цю деполімеризацію проводять з використанням гепаринази І (ЕС 4.2.2.7) у розчині фосфатного буферу з рН 7 у присутності хлориду натрію і БСА (бичачого сироваткового альбуміну) при температурі в межах від 10 до 18"С, переважно при 15"С, протягом 8-10 діб, переважно 9 діб. Деполімеризація може бути зупинена, наприклад, нагріванням реакційного середовища до 1007"С протягом 2хв, а суміш може бути виділена ліофілізацією. На 25г гепарину переважно використовують 7меж.од. гепаринази І. Фосфатний буфер звичайно містить 0,05моль/л МангРОгМанНРОх (рн 7) у присутності О0,їмоль/л хлориду натрію. Концентрація БСА звичайно складає 2965.
Для проміжних продуктів формули ІЇ, у яких п-О, 1, 2, З чи 4, доцільно виходити із суміші Ії, одержуваної деполімеризацією бензилового ефіру гепарину.
Бензиловий ефір гепарину може бути отриманий за допомогою методів, описаних у патентах 5 5389618,
ЕР 40144, РК 2548672. Ступінь естерифікації в цьому випадку складає від 50 до 10095, переважно від 70 до 909.
Деполімеризацію проводять у водному середовищі за допомогою гідроксиду лужного металу (наприклад, гідроксиду літію, гідроксиду натрію, гідроксиду калію чи гідроксиду цезію) чи гідроксиду четвертинного амонію (наприклад, гідроксиду тетрабутиламонію) переважно в молярній концентрації від 0,1 до 0,2моль/л при температурі від 40 до 807С протягом від 5 до 120хв. У кращому варіанті реакцію проводять протягом 5-15х8в при температурі від 60 до 70"С з використанням 0,15моль/л розчину гідроксиду натрію. Реакцію деполімеризації зупиняють за допомогою нейтралізації додаючи кислоту, таку як оцтова кислота. Після додавання 1095 мас/об ацетату натрію суміш олігасахаридів осаджують, додаючи метанол переважно в кількості 2 об'ємів на 1 об'єм реакційного середовища, після чого суміш фільтрують.
Відповідно до переважного аспекту винаходу, суміш олігасахаридів, отриману після хімічної деполімеризації у вигляді водного розчину, збагачують за допомогою ультрафільтрації на мембранах з відповідною номінальною межею розділення (типу Реїйсоп з регенерованої целюлози, що поставляються фірмою Міїроге), причому тип мембрани підбирають відповідно до типу збагачених олігасахаридів, що виділяються. Для олігасахаридів Ії, у яких п-:0, використовують мембрану з номінальною межею розділення 1кДа, для олігасахаридів ІІ, у яких п-1, використовують мембрану 1кДа чи ЗкдДа, для олігасахаридів ІІ, у яких п-2, використовують мембрану ЗкДа, для олігасахаридів ІІ, у яких ь-З чи 4, використовують мембрану 5кДа. У процесі цієї операції збирають фільтрат, а затриманий матеріал відкидають. У результаті операції фракція збагаченого продукту може складати від 50 до 10095 вихідної суміші олігасахаридів, містячи при цьому не менш 8095 бажаного олігасахариду.
Для проміжних продуктів формули ІІ, у яких п-від 0 до 25, доцільно виходити із суміші Ії, одержуваної деполімеризацією напівсинтетичного бензилового ефіру полісахарид-сульфату. Напівсинтетичний бензиловий ефір полісахарид-сульфату одержують з напівсинтетичних полісахарид-сульфатів, одержуваних з полісахариду К5 за допомогою методів, описаних у патентах УМО 94/29352 і М/О 96/14425. Умови естерифікації, деполімеризації і виділення такі ж, як ті, котрі описані вище для бензилового ефіру гепарину.
У всіх описаних вище способах вихідний гепарин може бути отриманий від свині, вівці, кози чи бика і може бути взятий зі слизу, легень чи шкіри тварин. Переважно використовують гепарин зі слизу свині, вівці чи з легень бика, причому переважніше зі слизу свині.
Олігасахариди формули І мають протизапальні властивості і можуть, таким чином, бути використані для профілактики чи лікуванняхвороб, пов'язаних із запальним процесом, при якому відбувається продукція цитотоксичних речовин, таких як закис азоту (МО), і при якому вивільняється його форма, що піддається індукції, зокрема нейтрофілами чи макрофагами, коли останні мігрують і активуються в тканині. Активація, міграція, злипання й інфільтрація нейтрофілов відбуваються в порушених ішемією зонах тканини в результаті закупорки чи спазму артерії що живить цю тканину. Такі ішемії можуть виникати чи в головному мозку (порушення мозкового кровообігу), чи в серцевому м'язі (інфаркт міокарда), чи в нижніх кінцівках (так звані периферичні ішемії). Олігасахариди формули І! можуть бути, таким чином, використані для профілактики і/чи лікування нейродегенеративних захворювань, у випадку яких запалення мозку відіграє руйнуючу роль з можливим летальним результатом, з яких можна назвати церебральні ішемії, ішемії серця (інфаркт міокарда), периферичні ішемії, ушкодження центральної нервової системи і, зокрема черепні, спинномозкові і черепно- спинномозкові травми, розсіяний склероз, невропатичні болі і периферичні невропатії, захворювання рухових нейронів, у тому числі бічний аміотрофічний склероз, нейро-СНІД, хвороба Альцгеймера, хвороба Паркінсона і хорея Гентінгтона, і деякі форми остеоартритів, зокрема локалізованих у суглобах.
Протизапальна активність цих продуктів доведена іп мімо у тесті на продукцію МОХ (нітрит і нітрат), индуковану ліпополісахаридом (І РБ5), отриманим від Е.соїї способом, описаним М.Матавзнпїйа із сотр., Ешиг. 9.
РПпаптасої!., 338, 2,151-158 (1997) чи У.Е.зПеййо із сотр.. Ат. 9. Кезріг. СеїЇ Мої. Віо!., 13,1,45-53 (1995).
Мишам-самцям СОЇ! (Спапев5 Кімег, 25-35г) вводять внутрішньовенно в момент часу ТО 0,5мг/кг олігасахариду у вигляді кульок, у момент часу Т-15хв підшкірНо 1 чи 2мг/кг олігасахариду. У момент часу
ТяЗ3Охв уводять 100мг/кг ліпополісахариду (ГРБ), отриманого від Е.соїї (Зідта І 3129, серотип 0127:У8). У момент часу ТЗ години знову вводять підшкірно 1 чи 2мг/кг олігасахариду. У момент часу Тя5 годин ЗОхв за допомогою очної пункції відбирають пробу крові і "визначають концентрації МОх (нітрит і нітрат) у плазмі, використовуючи колориметрический метод Грісса після відновлення нітрату в нітрит за допомогою нітратредуктази в такий спосіб: 1Т2нл зразка плазми змішують з 8вдл деіонізованої води та інкубують у темряві протягом 1 години при кімнатній температурі з 40цл о фосфатного буферу (0.31М, рН 7,5), 20дл ДВ-НАДФН (відновлений нікотинамідаденіндинуклеотид-фосфат) (0,86мМ), 20нл ФДА (флавінаденіндинуклеотид) (011МмММ) і 20дл нітратредуктази (2од./мол) (Воепгіпдег Мапппеїт). Додають Тбил 2п5054 (1М) для осадження білків, і після змішування зразки центрифугують при 200004 протягом 5хв. На закінчення 50дл супернатанту інкубують протягом 10хв при кімнатній температурі з 100дл реактиву Грісса (195-ний розчин сульфаніламіду в 0,195-ному розчині суміші фосфорна кислота/нафтилетилендіамін у деіонізованій воді (06/06). Оптичну густину вимірюють при 540нм на мікропластинчастому спектрофотометрі, роблячи по два виміри на кожну точку. Як стандарт у колориметричному методі використовують КМОз і Мамо».
Олігасахариди винаходу в названому дослідженні інгібують утворення МОх більш ніж на 50905.
З кращих олігасахаридів формули І можна, зокрема назвати олігасахариди, у яких: п дорівнює 0, Кі і Кв означають радикал 5ОзМа і М означає натрій, і суміш його діастериоізомерів, п дорівнює 1, Кі, Р», Аз і К5 і Ке означають радикал 5ОзМа, Ва означає атом водню і М означає натрій, і суміш його діастериоізомерів, п дорівнює 2, Кі, Р», НВз і К5 і Ке означають радикал 5ОзМа, Ва означає атом водню і М означає натрій, і суміш його діастериоізомерів, п дорівнює 2, Кі, В», Аз і Кв означають радикал 5ОзМа, Н5 означає атом водню чи радикал ЗОзМа, Ва означає атом водню і М означає натрій, і суміш його діастериоізомерів (похідне 1,6-ангідро-ХМ 158-18-18).
Одержання олігасахаридів формули І і проміжних продуктів ілюструють наступні приклади.
У цих прикладах використовують наступні значення скорочень:
ХМІв: (4-дезокси-2-О-сульфо-со-І -трео-гексенпіранозилуронієва кислота)-(1-54)-2-дезокси-2-сульфаміно-6-
О-сульфо-О-о-О-глюкопіраноза, тринатрієва сіль, чи УОАр2г5-(1--24)-о0-О-сСісМр2а565,
Ів: (2-сульфо-со-І -ідопіранозилуронієва кислота)-(1-с54)-2-дезокси-2-сульфаміно-6-О-сульфо-о-0О- глюкопіраноза, тетранатрієва сіль, чи о-І -ІДйоАр25-(1-:4)-о-0-сІсМр2а5б5, в: 0 (о-І-ідопіранозилуронієва /кислота)-(1-и24)-2-дезокси-2-сульфаміно-6-0О-сульфо-о-ЮО-глюкопіраноза, тринатрієва сіль, чи о-І -ІЙоАр25-(1--с4)-о-О-сІсМраг565,
Ше: 2-сульфо-о-І -і допіранозилуронієва кислота)-(1-24)-2-дезокси-2-сульфаміно-с-Ю-глюкопіраноза, тринатрєва сіль чи с-І -ІдоАр25-(1--24)-о-0-сісМраг5,
ІдоАр ідопіранозилуронієва кислота, сісМр: 2-дезокси-2-аміноглюкопіраноза,
МЦШАр: 4-дезокси-о-І -трео-гексенпіранозилуронієва кислота, з: сульфат
Приклади одержання сумішей формули ЇЇ
ПРИКЛАД А - одержання олігасахаридів формули Ії, у яких п-:0,1 і 2, ферментативною деполімеризацією і розділенням
Розчиняють 25г гепарину в 250мл розчину фосфатного буферу, що містить 0,05моль/л КангРОг/МагНРО»Х (рне?7), 0,2моль/л хлориду натрію і 295 БСА (бичачого сироваткового альбуміну). У суміш вводять 7меж.од. гепаринази (ЕС 4.2.2.2.7) охолоджують отриманий розчин до 15 "С і витримують при цій температурі протягом усієї реакції деполімеризації. За протіканням реакції стежать шляхом ступінчатого відбору проб, аналізованих за допомогою гельпроникаючої хроматографії. Після закінчення 9 доби ферментативну реакцію зупиняють, нагріваючи реакційне середовище протягом двох хвилин при 100"С. Суміш після цього охолоджують і ліофілізують, одержуючи в такий спосіб суміш олігасахаридів І.
Отриману суміш олігасахаридів Ії хроматографують за наступною методикою: хроматографію проводять на колонках, заповнених поліакриламід-агарозним гелем, відомим за назвою ОКгоде! АСА 202, і елююють суміш розчином, що містить фосфатний буфер (0,02моль/л МангРОз/МагНРО»), рнае?7, і 0 Тмоль/л хлориду натрію. Детекцію здійснюють за допомогою УФ спектрометрії (254нм) і іонної спектрометрії (ІВЕ). Продукти можуть бути потім при необхідності очищені за допомогою хроматографії ЗАХ (5ігопд апіоп ехспапде) чи фракційним осадженням згідно Методу, описаному в патенті РК 2548672. Виділені фракції продукту ліофілізують і потім збезсолюють на колонці, заповненій гелем Зерпадех СТОК (Рнаптасіа Віоспетісаї!в5).
Використовуючи цю методику, одержують Зг дисахариду 5 і 1100мг суміші гексасахариду, що містить, як правило, похідного У185--і8-І5, 3590 МІв-1І8-І5 і 1095 МІв8-І5-Ш5. Ця суміш може бути очищена з використанням відомих фахівцям способів, що дозволяють виділити кожний з компонентів, чи використана як така для перетворення в 1,6-ангідро-похідні формули І. Слід зазначити, що в процесі цього перетворення гексасахарид
ХІ8-І8-ПІ5 не може дати сполук формули І.
ПРИКЛАД В - одержання олігасахаридів формули ЇЇ, у яких п-0, 1, 2, З чи 4, деполімеризацією бензилового ефіру гепарину і розділенням а. Одержання бензилового ефіру гепарину
Бензиловий ефіру гепарину одержують як описано в прикладі 2 патенти 05 5389618. р. Деполімеризація
Розчиняють 100г бензилового ефіру гепарину в 1,9л демінералізованої води. Суміш нагрівають до 607 при перемішуванні. Після утворення гомогенного розчину вводять в один прийом приблизно З5мл 2395-ного розчину гідроксиду натрію. Після проведення реакції протягом 10хв розчин охолоджують і нейтралізують ЗОмл приблизно 2н. розчину оцтової кислоти. До отриманого розчину додають 1095 мас/об ацетату натрію. Суміш олігасахаридів осаджують додаванням приблизно 2 об'ємів метанолу. Осад відокремлюють фільтрацією, двічі промивають метанолом і сушать при 50"С і зниженому тиску. Після висушування одержують 73,8г суміші олігасахаридів ЇЇ. с. Збагачення олігасахариду з п--1
Розчиняють З0г отриманої вище суміші олігасахаридів у приблизно 35 об'ємах води. Цей розчин піддають ультрафільтрації на мембрані ЗкДа (РеїПсоп). Після одержання бООмл фільтрату затриману частину розбавляють 500мл води. Продовжують операцію до одержання додаткових 450мл фільтрату. Обидві фракції фільтрату об'єднують і потім до суха випарюють при зниженому тиску. Одержують 6,1г жовтувато-білої твердої речовини. Аналіз цієї речовини за допомогою гельпроникаючої хроматографії вказує на зміст у ньому приблизно 3095 олігасахаридів формули ЇЇ, у яких п-1. а. Фракціонування підданих! ультрафільтрації сумішей олігасахаридів
Збагачену суміш фракціонють на колонках, заповнених поліакриламід-агарозним гелем, відомим за назвою ШОКгоде! АСА 202 (використовують 4 послідовно розташовані колоники з діаметром 10см і висотою 50см). 5г збагаченої ультрафільтрацією суміші розчиняють у 25мл води, після чого елююють 0,2моль/л розчином хлориду натрію зі швидкістю 5мл/хв. Відбирають з низу колонки фракції по 25мл. Детекцію "продуктів здійснюють за допомогою УФ спектрометрії (254нм) і іонної спектрометрії (ІВЕ). Фракції продукту з п-1 виділяють, ліофілізують і потім збезсолюють на колонці, заповненій гелем Зерпадех 10. Після ліофілізации одержують 1г тетрасахариду, що містить, як правило, 7095 похідного Міб5-І5 формули І! (Кі, АН», Аз і Кз і є означають радикал 5ОзМа, Ва-Н і МеМа). Похідне МіІ5-І5 може бути при необхідності очищене за допомогою хроматографії ЗАХ (5ігопд апіоп ехспапде) чи, що є кращим, фракційним осадженням згідно з методом, описаним в патенті ЕК 2548672.
ПРИКЛАД 1
У реактор при температурі 66"С завантажують 5мл 0,006Змоль/л розчину гідроксиду натрію. Вимірюють рН розчину і приймають його значення за необхідне (рН 11,35). Додають при перемішуванні в один прийом
ЗОмг олігасахариду формули Ії, у якого п дорівнює 0, Кі і Кв означають радикал 5ОзМа і М означає натрій.
Після цього коректують рН і підтримують його рівним 11,35 за допомогою безупинного додавання 0,5моль/л розчину гідроксиду натрію. Через 10 годин додавання гідроксиду натрію припиняють і реакційну суміш охолоджують до 257"С. Після цього доводять рН розчину до 6-7, додаючи смолу Атбрегійе ІК 120. Суміш фільтрують на мембрані УУпайтап СР/В і досуха випарюють при зниженому тиску (2,7кПа) при температурі, близькій до 257С. Продукт забирають 0,5мл дистильованої води і ліофілізують, одержуючи 29мг суміші діастериоізомерів олігасахариду формули І, у якого п дорівнює 0, Кі і Кє означають радикал 5ОзМа і М означає натрій ((4-дезокси-2-О-сульфо-о-І -трео-гекс-4-єнпіранозилуронієва кислота)-(1--с4)-1,6-ангідро-2- дезокси-2-сульфаміно-3-ЮО-маннопіраноза, тринатрієва сіль: спектр ПМР у 020, 400мгц, Т-298К, б у м.д.: 3,15 (ІН, с, Н2), 3,75(2Н, м, Нб і НЗ), 3,88(1Н, м, НЯ), 4,20(1Н, д, 9-8Гц, Нб), 4,22(1Н, т, У-5Гц, НЗ), 4,58(1Н, м, Н2г), 4,75(1Н, м, Н5), 5,53(1Н, с, НІ), 5,60(1Н, дд, 9-6 і 1Гц, НТ), 6,03(1Н, д, У-5Гц, НА"); (4-дезокси-2-О-сульфо-ос-І - трео-гексо-4-єнпіра-нозилуронієва кислота)-(1-х4)-1,6-ангідро-2-дезокси-2-сульфаміно-Д-О-глюкопіраноза, тринатрієва сіль): спектр ПМР у 020, 400мгц, Т-298ДО, 5 у м.д.: 3,3А(1Н, дд, уУ-7 і 2Гц, Н2), 3,72(1Н, т, У-8Гцу,
Нб), 3,90(1Н, м, НЗ), 4,03(1Н, з, Н4), 4,20(1Н, д, 9-8Гц, Нв), 4,23(1Н, т, У-5Гц, НУ), 4,58(1Н, м, Н2), 4,78(1Н, м,
Н5), 5,50(1Н, з, НІ), 5,60(1Н, дд, 9-6 і 1Гц, НТ), 6,03(1Н, д, 9У-5Гц, НУ).
ПРИКЛАД 2
У реактор при температурі 62"С завантажують 33,3 мол 0,00бЗмоль/л розчину гідроксиду натрію.
Вимірюють рН розчину і приймають його значення за необхідне (рН 11,15). Додають при перемішуванні в один прийом 200мг олігасахарида формули Ії, у якого п дорівнює 1, Кі, ЕН», Нз, Н5 і Кеє означають радикал ЗОзМа, Ва означає атом водню і М означає натрій. Після цього коректують рН і підтримують його рівним 11,15 за допомогою безупинного додавання 0,5моль/л розчину гідроксиду натрію. Через 12 годин додавання гідроксиду натрію припиняють і реакційну суміш охолоджують до 25"7С. Після цього доводять рН розчину до 6-7, додаючи смолу Атрбрегійе ІА 120. Суміш фільтрують на мембрані М/пайтап СР/В і до суха випарюють при зниженому тиску (2,1кПа) при температурі близькій до 25"С. Продукт забирають Змл дистильованої води і ліофілізують, одержуючи 230мг олігасахариду формули І, у якого п дорівнює 1, Ні, Р», Нз, Н5 і Кє означають радикал 5ОзіМа,
Ва означає атом водню і М означає натрій, у вигляді суміші діастереоізомерів (4-дезокси-2-О-сульфо-о-І - трео-гексо-4-єнпіранозилуронієва кислота)-(1-24)-2-дезокси-2-сульфаміно-6-0О-сульфо-с-О-глюкопіранозил- (1-4)-(2-О-сульфо-со-І -ідопіранозилуронієва кислота)-(1-5х4)-1,6-ангідро-2-дезокси-2-сільфаміно-8-О- маннопіраноза, гептанатрієва сіль): спектр ПМР у 020, 400мгц, Т-298К, 5 у м.д.: 3,15(1Н, с, Н2), 3,25(1Н, м,
Н2г), 3,60(1Н, м, НЗ"), 3,70-4,70(14Н, масив, НЗ/НА/Нв6в, Н2гУНЗ "НАНУ", НА"/Н5Б"/Нв", Н2г "НІ, 4,75(1Н, м, Н5Б), 5,20-5,40(2Н, м, НІ ї НІ"), 5,45 (1Н, м, НІ"), 5,56(1Н, м, НІ), 5,94(1Н, д, У9-5Гц, Н4); (4-дезокси-2-О-сульфо-о-
Ї -трео-гексо-4-єнпіранозилуронієва /кислота)-(1-24)-2-дезокси-2-сульфаміно-6-0О-сульфо-с-О-глюкопіранозил- (1-4)-(2-О-сульфо-со-І -ідопіранозилуронієва кислота)-(1-5х4)-1,6-ангідро-2-дезокси-2-сільфаміно-8-0О- глюкопіраноза, гептанатрієва сіль) : спектр ПМР у 020, 400мгц, Т-298К, б у м.д.: 3,25(1Н, м, Н2г"), 3,42(1Н, дд, 9-4 і 1гц, Н2г), 3,60(1Н, м, НЗ"), 3,70-4,70 (14Н, масив, НЗ/На/Нб, Н2г/НЗ/НІ/НУ нНА"Т/Н5"Нв", нНаг"НЗ, 4,75(1Н, м, Н5), 5,20-5,40 (2Н, м, НТ їі НІ"), 5,45 (1Н, м, НІ1"), 5,52(1Н, м, НІ), 5,94(1Н, д, У-5Гц, НУ).
ПРИКЛАД З
У реактор при температурі 62"С завантажують 16,7мл 0,006Змоль/л розчину гідроксиду натрію. Вимірюють рН розчину і приймають його значення за необхідне (рН 11,7). Додають при перемішуванні в один прийом 100мг олігасахариду формули ІІ, у якого п дорівнює 2, Кі, Н», Нз, Н5 і Ко означають радикал 5ОзМа, Ва означає атом водню і М означає натрій. Після чого коректують рН й підтримують його рівним 11,7 за допомогою непреривного додавання 0,5моль/л розчину гідроксиду натрію. Через 10 годин додавання гідроксиду натрію припиняють й реакційну суміш охолоджують до 2570. Після цього доводять рН розчину до 6-7, додаючи смолу
Атрепійе ІВ 120. Суміш фільтрують на мембрані УУпайта СН/В й до суха випарюють при зниженому тиску (2,7кПа) при температуі близькій до 25"С. Продукт забирають Змл дистильованої води й оіофілізують, одержуючи 108мг олігосахариду формули І, у якого п дорівнює 2, Кі, Н»2, Нз, Н5 і Кє означають радикал 5ОзіМа,
Ва означає атом водню і М означає натрій, у вигляді суміші діастереоізомерів. Означають символами від А до
Е цукри, котрі утворюють гексасахариди, де А являє собою залишок 1,6-анигідро й Е-залишок ненасиченої уронієвої кислоти. |((4-дезокси-2-О-сульфо-со-І -трео-геко-4-єнпіранозилуронієва кислота)-(1-54)-2-дезокси-2- сульфаміно-6-0О-сульфо-с-О-глюкопіранозил-(1--»54)-(2-О-сульфо-о-І -ідопіранозилуронієва /кислота)-(1-54)-2- дезокси-2-сульфаміно-6-О-сульфо-о-ЮО-глюкопіранозил-(1-54)-(2-О-сульфо-о-І -і допіранозилуронієва кислота)- (1-4)-1,6-ангідро-2-дезокси-2-сульфаміно-24-Ю-маннопіраноза, ундеканатрієва сіль); спектр ПМР у 020, бООмгц, Т-298К, б у м.д.: 3,15(1Н, с, Н2 (А)), 3,25(2Н, м, Н2(СяЕ)), 3,69(2Н, м, НЗ(СЕ)), 3,65-4,50(19Н, масив,
Нг(В0)/НЗ(Аз ВО )У/НА(Ах ВС ОТЕ)/Н5(СЯЕ)УНв АС Е)),4,6О(1Н, С, НОІ(Р)), 4,80(3Н, м, Н5(АнВ)), 5,18(1Н, С, НІ(0) 5,30(1Н, С, НІ(В)), 5,34(1Н, д, НІ(С)), 5,36(1Н, д, НІ (Е)), 5,46(1Н, 3, НІ(Е)), 5,57 (1Н, 3, НІ (А)), 5,95 (1Н, д, 925Гц, НА (Р)); 4-дезокси-2-О-сульфо-о-І -трео-гекс-4-єнпіранозилуронієа кислота)-(1-54)-2- дезокси-2-сульфаміно-6-О-сульфо-о-ЮО-глюкопіранозил-(1-54)-(2-О-сульфо-о-І -і допіранозилуронієва кислота)- (1-4)-2-дезокси-2-сульфаміно-6-0О-сульфо-о-Ю-глюкопіранозил-(1-»4)-(2-О-сульфо-с-іІ --допіранозилуронієва кислота)-(1-с4)-1,6-ангідро-2-дезокси-2-сульфаміно-З-ЮО-глюкопіраноза, ундеканатрієва сіль); спектр ПМР у
РгО, ббОбОмгц, Т-298К, 6 у м.д.: 3,25(2Н, м, Н2 (СяЕ)), 3,42 (1Н, м, Н2(А)), 3,69(2Н, м, НЗ(СяЕ)), 3,65-4,50(19Н, масив, Н2(В-0)/НЗ (АВ ОР )У/НА(АжВаіСОЕ)/Н5(СяЕ)/Нв(АСЕ)), 4,60(1Н, с, Н2(О)), 4,80(ЗН, м, Н5(АнВ)), 5,18(1Н, с, НІ(0)), 5,31(1Н, с, НІ(В)), 5,3А(1Н, д, НІ(С)), 5,36(1Н, д, НІ(Е)), 5,46(1Н, с, НІ(Р)), 5,52(1Н, с, НІ(А)), 5,95(1Н, д, 9-5Гц, НА(Р)).
ПРИКЛАД 4
У реактор при температурі 627"С завантажують 4мл 0,0316бмоль/л розчину гідроксиду натрію. Вимірюють рН розчину й приймають його значення за необхідне (рН 11,8). Додають при перемішуванні в один прийом 100,8мг суміші олігосахаридів формули ІІ, у котрих п дорівнює 2, що містить 5595 похідного ХМ1в8-15-І5 (Ві, В», Взі
Ав означають радикал 5ОзМа, Н5 означає атом водню і М означає натрій), 3595 МІв5-І5-ІІ5 (Ні, Н2, Нз, Нв і Ке означають радикал 5ОзМаа, Ва означає атом водню і М означає натрій) й 1095 ХМІв-І5-Пв5 (Ві, РН», Аз, Нв і Ке означають радикал 5ОзМа, На означає атом водню і М означає натрій, причому функція ЗОзЗМ у вуглецю Сб замінена воднем). Після цього коректують рН й підтримують його рівним 11,8 за допомогою непреривного додавання 0,5моль/л розчину гідроксиду натрію. Через 11 годин додавання гідроксиду натрію припиняють й реакційну суміш охолоджують до 2570. Після цього доводять рН розчину до 6-7, додаючи смолу Атбегійе ІВ 120. Суміш фільтрують на мембрані М/пайтап СР/В й до суха випарюють при зниженому тиску (2,7кПа) при температурі близькій до 257С. Продукт забирають 1,5мл дистильованої води й ліофілізують, одержуючи 110мг суміші олігасахаридів формули І, у котрих п дорівнює 2, що містить, зокрема, похідне 1,6-ангідро-ХМ1в8-15-І6 (Ві,
В», В», В5 і Кє означають радикал 5ОзМа, На означає атом водню і М означає натрій) й похідне 1,6-ангідро-М1Ів5-
І5-ІПв8 (Ві, Аг, Аз, і Кв означають радикал 5ОзМа, Н» означає атом водню і М означає натрій). Аналіз за допомогою РХВР (рідинної хроматографії високої розділяючої здатності) у режимі іонних пар дозволяє стежити за перетворенням похідних формули І.
Отримані дані РХВР вказують на те, що перетворення здійснюється з похідними УІ15-15-І5 і МУ1І5- 18-16.
ПРИКЛАД 5
У реактор при температурі 66"С завантажують 8,бмл 0,025моль/л розчину гідроксиду літію. Вимірюють рН розчину і приймають його значення за необхідне (рН 11,68). Додають при перемішуванні в один прийом 50мг олігасахариду формули ІЇ, у якого п дорівнює 0, Кі і Ке означають радикал 5ОзМа і М означає натрій. Після цього коректують рН і підтримують його рівним 11,68 за допомогою безупинного додавання 0,46бмоль/л розчину гідроксиду літію. Через 8 годин додавання гідроксиду літію припиняють і реакційну суміш охолоджують до 25"С. Аналіз за допомогою РХВР (рідинної хроматографії високої розділяючої здатності) у режимі іонних пар дозволяє стежити за перетворенням похідного формули І, у якого п дорівнює 0, Кі і Ке означають радикал 5ОзМа і М означає натрій чи літій. Отримані дані РХВР вказують на те, що перетворення здійснюється на 10095. Вихід кінцевого продукту на підставі порівняння з еталонними даними складає 81,2905.
ПРИКЛАД 6
У реактор при температурі 66"С завантажують 8,Змл 0,006Змоль/л розчину гідроксиду калію. Вимірюють рН розчину і приймають його значення за необхідне (рН 11,1). Додають при перемішуванні в один прийом 5О0мг олігасахариду формули Ії, у якого п дорівнює 0, Кі і Кв6 означають радикал 5ОзМа і М означає натрій.
Після цього коректують рН і підтримують його рівним 11,1 за допомогою безупинного додавання 0,515моль/л розчину гідроксиду калію. Через 24 години додавання гідроксиду калію припиняють і реакційну суміш охолоджують до 25"С. Аналіз за допомогою РХВР (рідинної хроматографії високої розділяючої здатності) у режимі іонних пар дозволяє стежити за перетворенням похідного формули І, у якого п дорівнює 0, Кі і Ке означають радикал 5ОЗзМ і М означає натрій чи калій. Отримані дані РХВР вказують на те, що перетворення здійснюється на 10095. Вихід на підставі порівняння з еталонними даними складає 75,6905.
ПРИКЛАД 7
У реактор при температурі 66"С завантажують 8,Змл 0,006Змоль/л розчину гідроксиду цезію. Вимірюють рН розчину і приймають його значення за необхідне (рН 10,75). Додають при перемішуванні в один прийом 5О0мг олігосахариду формули Ії, у якого п дорівнює 0, Кі і Кв означають радикал 5ОзМа і М означає натрій.
Після цього коректують рн і підтримують його рівним 10,75 за допомогою безупинного додавання 0,476моль/л розчину гідроксиду цезію. Через 20 годин додавання гідроксиду цезію припиняють і реакційну суміш охолоджують до 25"С. Аналіз за допомогою РХВР (рідинної хроматографії високої розділяючої здатності) у режимі іонних пар дозволяє стежити за перетворенням похідного формули І, у якого п дорівнює 0, Кі і Ке означають радикал 5ОзМа і М означає натрій чи цезій. Отримані дані РХВР вказують на те, що перетворення здійснюється на 90,395. Вихід на підставі порівняння з еталонними даними складає 73905.
ПРИКЛАД 8
У реактор при температурі 66"С завантажують 8,Змл 0,006бЗ3моль/л розчину гідроксиду тетрабутиламмонію. Вимірюють рН розчину і приймають його значення за необхідне (рН 10,95). Додають при перемішуванні в один прийом 5О0мг олігосахариду формули Ії, у якого п дорівнює 0, Кі і Кеє означають радикал
ЗОзМа і М означає натрій. Після цього коректують рН і підтримують його рівним 10,95 за допомогою безупинного додавання 0,521моль/л розчину гідроксиду тетрабутиламмонію. Через 16 годин додавання гідроксиду цезію припиняють і реакційну суміш охолоджують до 2570. Аналіз за допомогою РХВР (рідинної хроматографії високої розділяючої здатності) у режимі іонних пар дозволяє стежити за перетворенням похідного формули І, у якого п дорівнює 0, Кі і Кє означають радикал 5ОзМа і М означає натрій чи тетрабутиламмоній. Отримані дані РХВР вказують на те, що перетворення здійснюється на 96,795. Вихід на підставі порівняння з еталонними даними складає 6595.
Лікувальні засоби згідно з винаходом містять як активний початок щонайменше один олігасахарид формули І чи суміш олігасахаридів формули І! у вигляді композиції, у якій активний початок асоційований з будь-яким іншим фармацевтично сумісним продуктом, що може бути як інертним, так і фізіологічно активним.
Лікувальні засоби згідно з винаходом можуть застосовуватися внутрішньовенно, підшкірно, перорально, ректально, місцево і пульмонарно (інгаляцією).
Стерильні композиції для внутрішньовенного і підшкірного застосування звичайно є водними розчинами.
Ці композиції можуть також містити адьюванти, зокрема змочувальні, ізотонізуючі, емульгуючі, диспергуючі і стабілізуючі агенти. Стерилізація може бути здійснена різними способами, наприклад асептичною фільтрацією, введенням у композицію агентів, що стерилізують, опроміненням. Ці композиції можуть бути також виготовлені у вигляді твердих стерильних композицій, що безпосередньо перед застосуванням можуть бути розчинені в стерильній воді чи в будь-якому іншому придатному для ін'єкцій стерильному середовищі.
Як тверді композиції для перорального застосування можуть бути використані таблетки, пігулки, порошки (желатинові капсули, крохмальні облатки) чи гранули. Активний початок у композиціях змішують у струмі аргону з одним чи декількома інертними розріджувачами, такими як крохмаль, целюлоза, сахароза, лактоза чи ремнезем. Ці композиції можуть також містити інші, відмінні від розріджувачів, речовини, наприклад один чи кілька маслянистих матеріалів, таких як стеарат магнію чи тальк, агент, що сприяє всмоктуванню при пероральному застосуванні, барвник, оболонка (драже) чи лак.
Як рідкі композиції для перорального застосування можна використовувати фармацевтично прийнятні розчини, суспензії, емульсії, сиропи й еліксири, що містять інертні розріджувачі, такі як вода, етиловий спирт, гліцерин, рослинні олії чи парафінова олія. Ці композиції можуть містити інші, відмінні від розріджувачів, речовини, що наприклад змочують, підсолоджують, загущують, ароматизують або стабілізуючі продукти.
Композиціями для ректального застосування є суппозиторії чи ректальні капсули, що крім активного продукту містять ексципієнти, такі як олія какао, напівсинтетичні гліцериди чи поліетиленгліколі.
Композиції для місцевого застосування можуть, наприклад, являти собою креми, лосьйони, очні краплі, полоскання, краплі для носа чи аерозолі.
Дози залежать від бажаного ефекту, від тривалості лікування і від шляху введення. Звичайно вони складають від 0,5 до 10мг/кг на добу при підшкірному застосуванні, що відповідає добовій дозі від З до бОмг для дорослої людини вагою бокг.
У загальному випадку лікар повинний визначити придатну дозу в залежності від віку, ваги і всіх інших факторів, пов'язаних з процесом лікування конкретної особи.
Винахід відноситься також до способу попередження і лікування хвороб, зв'язаних із запальним процесом, при якому відбувається продукція цитотоксичних речовин, таких як закис азоту (МО). Олігасахариди формули можуть у такий спосіб бути використані для попередження і/чи лікування нейродегенеративних захворювань, у випадку яких запалення мозку відіграє руйнуючу роль з можливим летальним результатом, з яких можна назвати ішемії центральної нервової системи, церебральні ішемії, ішемії сітківки і внутрішнього вуха, ішемії серця (інфаркт міокарда), периферичні ішемії, ушкодження центральної нервової системи і, зокрема черепні, спинномозкові і черепно-спинномозкові травми, травми сітківки і внутрішнього вуха, розсіяний склероз, невропатичні болі і периферичні невропатії, захворювання рухових нейронів, у тім числі бічний аміотрофічний склероз, нейро-СНІД, хворобу Альцгеймера, хвороба Паркінсона і хорея Гентінггона, і деякі форми остеоартритів, зокрема, локалізованих у суглобах.
Claims (15)
1. Олігосахариди формули: ОМ ОВ; СОМ о (0) (9) (0) а 8; ОН о ОВ, о ОН у о, Он і ОК, МНЕ, ОВ. МН, п (), у якій п є цілим числом від 0 до 25; Ні, Нз, Ва і Н5, однакові чи різні, означають атом водню чи радикал 5ОзМ; Р?» і Ав, однакові чи різні, означають атом водню чи радикал 5ОзМ чи СОСН», і М означає натрій, кальцій, магній чи калій, суміш цих олігасахаридів і їх діастереоізомери.
2. Олігосахариди формули І за п. 1, у яких Ва означає атом водню, суміш цих олігасахаридів і їх діастереоізомери.
3. Олігосахариди формули І за одним з пп.1 чи 2, у яких п є цілим числом від 0 до 10, суміш цих олігасахаридів і їх діастереоізомери,
4. Олігосахариди формули | за одним з пп. 1 чи 2, у яких п є цілим числом від 0 до б, суміш цих олігасахаридів і їх діастереоізомери.
5. Олігосахариди формули І за одним з пп.1 чи 2, у яких п є цілим числом від 1 до 6, суміш цих олігасахаридів і їх діастереоізомери.
6. Спосіб одержання олігасахаридів формули І за п. 1, який відрізняється тим, що гідроксид лужного металу чи четвертинного амонію вводять у взаємодію з олігасахаридами формули: ом ОК; сом 50 Ма 8; (6; ОнУу З ю ОН о вд о, (Ф/ ві ОН ОК, МНЕ, ОВ, МНВ, й (9 у якій п є цілим числом від 0 до 25; Ві, Нз, Ва і Н5, однакові чи різні, означають атом водню чи радикал 5ОзМ; Р?» і Ає, однакові чи різні, означають атом водню чи радикал 5ОзМ чи СОСН», і М означає натрій, кальцій, магній чи калій, чи їх суміші, і виділяють олігасахариди чи їх суміші.
7. Спосіб за п. 6, який відрізняється тим, що реакцію проводять у водному середовищі при температурі від 40 до 80"С і рН від 10 до 13.
8. Спосіб за одним з пп. 6 чи 7, який відрізняється тим, що використовують 1-595-ий водний розчин гідроксиду лужного металу чи четвертинного амонію.
9. Спосіб за одним з пп. 6-8, який відрізняється тим, що реакцію проводять при температурі від 60 до 7020.
10. Спосіб за одним з пп. 6-9, який відрізняється тим, що рН реакційного середовища складає від 11 до 12,5.
11. Спосіб за пп. 6-10, який відрізняється тим, що гідроксидом лужного металу чи четвертинного амонію є гідроксид натрію, гідроксид калію, гідроксид літію, цезію чи гідроксид тетрабутиламонію.
12. Фармацевтична композиція, що складається з активного начала і фармацевтично прийнятних добавок, яка відрізняється тим, що як активне начало містить щонайменше один олігасахарид за п. 1.
13. Фармацевтична композиція, що складається з активного начала і фармацевтично прийнятних добавок, яка відрізняється тим, що як активне начало містить щонайменше один олігасахарид за одним з пп. 1-5.
14. Олігосахариди формули І за одним з пп.1-5 для одержання лікувального засобу, придатного для профілактики чи лікування захворювань, пов'язаних з запальним процесом, при якому відбувається продукування закису азоту (МО).
15. Олігосахариди формули І за п. 14 для одержання лікувального засобу, придатного для профілактики і лікування церебральних, серцевих чи периферійних судинних ішемій, остеоартритів, ушкоджень центральної нервової системи, черепних, спиномозкових і черепно-спиномозкових травм, розсіяного склерозу, невропатичних болів і периферичних невропатій, захворювань рухових нейронів, бічного аміотрофічного склерозу, нейро-СНІДУу, хвороби Альцгеймера, хвороби Паркінсона і хореї Гентінгтона.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FR9913182A FR2800074B1 (fr) | 1999-10-22 | 1999-10-22 | Nouveaux oligosaccharides, leur preparation et les compositions pharmaceutiques les contenant |
| PCT/FR2000/002897 WO2001029055A2 (fr) | 1999-10-22 | 2000-10-18 | Nouveaux oligosaccharides, leur preparation et les compositions pharmaceutiques les contenant |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| UA72545C2 true UA72545C2 (uk) | 2005-03-15 |
Family
ID=9551218
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| UA2002043067A UA72545C2 (uk) | 1999-10-22 | 2000-10-18 | Олігосахариди, спосіб їх одержання та фармацевтична композиція на їх основі |
Country Status (31)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP1226148B1 (uk) |
| JP (1) | JP4733329B2 (uk) |
| KR (2) | KR100778166B1 (uk) |
| CN (1) | CN1241932C (uk) |
| AT (1) | ATE534656T1 (uk) |
| AU (1) | AU781414B2 (uk) |
| BR (1) | BR0014939A (uk) |
| CA (1) | CA2388369C (uk) |
| CY (1) | CY1112274T1 (uk) |
| CZ (1) | CZ303255B6 (uk) |
| DK (1) | DK1226148T3 (uk) |
| EA (1) | EA004046B1 (uk) |
| EE (1) | EE05091B1 (uk) |
| ES (1) | ES2376409T3 (uk) |
| FR (1) | FR2800074B1 (uk) |
| HK (1) | HK1050535A1 (uk) |
| HR (1) | HRP20020330A2 (uk) |
| HU (1) | HU229385B1 (uk) |
| IL (2) | IL149154A0 (uk) |
| ME (1) | MEP9309A (uk) |
| MX (1) | MXPA02003945A (uk) |
| NO (1) | NO323409B1 (uk) |
| NZ (1) | NZ518539A (uk) |
| PL (1) | PL204623B1 (uk) |
| PT (1) | PT1226148E (uk) |
| RS (1) | RS50829B (uk) |
| SK (1) | SK287459B6 (uk) |
| TR (1) | TR200201102T2 (uk) |
| UA (1) | UA72545C2 (uk) |
| WO (1) | WO2001029055A2 (uk) |
| ZA (1) | ZA200203102B (uk) |
Families Citing this family (26)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP4676048B2 (ja) * | 2000-07-10 | 2011-04-27 | 生化学工業株式会社 | 脱髄性疾患処置剤 |
| DE50105650D1 (de) * | 2000-12-16 | 2005-04-21 | Aventis Pharma Gmbh | Verwendung von niedermolekularen heparin zur behandlung von osteoarthrose |
| DE10121003A1 (de) | 2001-04-28 | 2002-12-19 | Aventis Pharma Gmbh | Anthranilsäureamide, Verfahren zur Herstellung, ihrer Verwendung als Medikament sowie sie enthaltende pharmazeutische Zubereitungen |
| JP4828795B2 (ja) | 2002-03-11 | 2011-11-30 | モメンタ ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド | 硫酸化多糖類の分析 |
| FR2844808B1 (fr) * | 2002-09-23 | 2005-02-25 | Aventis Pharma Sa | Methode de determination de groupements specifiques constituant les heparines ou les heparines de bas poids moleculaire |
| US20040171819A1 (en) | 2002-10-10 | 2004-09-02 | Aventis Pharma S.A. | Mixtures of polysaccharides derived from heparin, their preparation and pharmaceutical compositions containing them |
| US7511026B2 (en) * | 2003-03-25 | 2009-03-31 | Seikagaku Corporation | Therapeutic agent for nerve damage |
| US7956046B2 (en) * | 2003-07-24 | 2011-06-07 | Aventis Pharma S.A. | Oligosaccharide mixtures derived from heparin, preparation thereof and pharmaceutical compositions containing them |
| FR2857971B1 (fr) * | 2003-07-24 | 2005-08-26 | Aventis Pharma Sa | Melanges d'oligosaccharides derives d'heparine, leur preparation et les compositions pharmaceutiques les contenant |
| US20050186679A1 (en) * | 2004-02-24 | 2005-08-25 | Christian Viskov | Method for determining specific groups constituting heparins or low molecular weight heparins |
| EP1580197A1 (en) * | 2004-03-24 | 2005-09-28 | Aventis Pharma S.A. | Method for quantitatively determining specific groups constituting heparins or low molecular wieght heparins using HPLC |
| EP1582531A1 (en) | 2004-03-24 | 2005-10-05 | Aventis Pharma S.A. | Process for oxidizing unfractionated heparins and detecting presence or absence of glycoserine in heparin and heparin products |
| DE102005017799A1 (de) * | 2005-04-18 | 2006-10-19 | Abbott Gmbh & Co. Kg | Verwendung von Heparin und Heparinderivaten zur Modulation des Neuritenwachstum-kontrollierenden Nogo-Rezeptors |
| US8101733B1 (en) | 2006-06-27 | 2012-01-24 | Momenta Pharmaceuticals, Inc. | Methods of evaluating mixtures of polysaccharides |
| US7790466B1 (en) | 2007-01-26 | 2010-09-07 | Momenta Pharmaceuticals, Inc. | Evaluating mixtures of low molecular weight heparins by chain profiles or chain mapping |
| US7968082B1 (en) | 2007-01-26 | 2011-06-28 | Momenta Pharmaceuticals, Inc. | Evaluating mixtures of low molecular weight heparins by NMR |
| US9139876B1 (en) | 2007-05-03 | 2015-09-22 | Momenta Pharmacueticals, Inc. | Method of analyzing a preparation of a low molecular weight heparin |
| EP2256138A1 (en) * | 2009-05-05 | 2010-12-01 | Sanofi-Aventis | Novel acylated 1,6-anhhydro decasaccharide and its use as antithrombotic agent |
| FR2949115B1 (fr) * | 2009-08-14 | 2012-11-02 | Sanofi Aventis | OLIGOSACCHARIDES N-SULFATES ACTIVATEURS DES RECEPTEURS DES FGFs, LEUR PREPARATION ET LEUR APPLICATION EN THERAPEUTIQUE |
| FR2949114B1 (fr) * | 2009-08-14 | 2011-08-26 | Sanofi Aventis | OCTASACCHARIDES N-ACYLES ACTIVATEURS DES RECEPTEURS DES FGFs, LEUR PREPARATION ET LEUR APPLICATION EN THERAPEUTIQUE |
| EP2526122B1 (en) | 2010-01-19 | 2020-06-10 | Momenta Pharmaceuticals, Inc. | Evaluating heparin preparations |
| WO2012115952A1 (en) | 2011-02-21 | 2012-08-30 | Momenta Pharmaceuticals, Inc. | Evaluating heparin preparations |
| CN102864191A (zh) * | 2011-12-16 | 2013-01-09 | 深圳市海普瑞药业股份有限公司 | 肝素双糖混合物及其制备方法和应用 |
| CN104910217B (zh) * | 2015-06-19 | 2018-04-17 | 天津红日药业股份有限公司 | 用于磺达肝癸钠质量控制的参比化合物 |
| CZ308106B6 (cs) * | 2016-06-27 | 2020-01-08 | Contipro A.S. | Nenasycené deriváty polysacharidů, způsob jejich přípravy a jejich použití |
| CN110092848A (zh) * | 2019-05-14 | 2019-08-06 | 山东辰龙药业有限公司 | 一种贝米肝素钠的制备方法 |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2519987A1 (fr) * | 1982-01-15 | 1983-07-22 | Choay Sa | Trisaccharides a structures d-glucosamine, acide d-glucuronique, d-glucosamine et leur preparation |
| AU563351C (en) * | 1982-01-15 | 2003-06-19 | Glaxo Group Limited | Synthesis of oligosaccharides |
| FR2764511B1 (fr) * | 1997-06-13 | 2000-09-08 | Sanofi Sa | Compositions pour le traitement et la prevention de la thrombose arterielle et utilisation d'un inhibiteur du facteur xa seul et/ou en combinaison avec un antiagregant plaquettaire |
| JP4166851B2 (ja) * | 1997-09-29 | 2008-10-15 | 生化学工業株式会社 | 新規虚血・再灌流障害抑制剤 |
-
1999
- 1999-10-22 FR FR9913182A patent/FR2800074B1/fr not_active Expired - Fee Related
-
2000
- 2000-10-18 JP JP2001531853A patent/JP4733329B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2000-10-18 ES ES00969634T patent/ES2376409T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2000-10-18 EP EP00969634A patent/EP1226148B1/fr not_active Expired - Lifetime
- 2000-10-18 IL IL14915400A patent/IL149154A0/xx active IP Right Grant
- 2000-10-18 HU HU0203821A patent/HU229385B1/hu unknown
- 2000-10-18 KR KR1020027005061A patent/KR100778166B1/ko not_active IP Right Cessation
- 2000-10-18 AU AU79302/00A patent/AU781414B2/en not_active Ceased
- 2000-10-18 EE EEP200200208A patent/EE05091B1/xx not_active IP Right Cessation
- 2000-10-18 TR TR2002/01102T patent/TR200201102T2/xx unknown
- 2000-10-18 PT PT00969634T patent/PT1226148E/pt unknown
- 2000-10-18 CN CNB008145318A patent/CN1241932C/zh not_active Expired - Fee Related
- 2000-10-18 NZ NZ518539A patent/NZ518539A/en not_active IP Right Cessation
- 2000-10-18 KR KR1020077018523A patent/KR100872215B1/ko not_active IP Right Cessation
- 2000-10-18 WO PCT/FR2000/002897 patent/WO2001029055A2/fr active IP Right Grant
- 2000-10-18 BR BR0014939-0A patent/BR0014939A/pt active Pending
- 2000-10-18 EA EA200200479A patent/EA004046B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2000-10-18 SK SK527-2002A patent/SK287459B6/sk not_active IP Right Cessation
- 2000-10-18 RS YUP-298/02A patent/RS50829B/sr unknown
- 2000-10-18 CA CA2388369A patent/CA2388369C/fr not_active Expired - Fee Related
- 2000-10-18 UA UA2002043067A patent/UA72545C2/uk unknown
- 2000-10-18 DK DK00969634.5T patent/DK1226148T3/da active
- 2000-10-18 CZ CZ20021385A patent/CZ303255B6/cs not_active IP Right Cessation
- 2000-10-18 MX MXPA02003945A patent/MXPA02003945A/es active IP Right Grant
- 2000-10-18 ME MEP-93/09A patent/MEP9309A/xx unknown
- 2000-10-18 AT AT00969634T patent/ATE534656T1/de active
- 2000-10-18 PL PL363052A patent/PL204623B1/pl not_active IP Right Cessation
-
2002
- 2002-04-15 IL IL149154A patent/IL149154A/en not_active IP Right Cessation
- 2002-04-15 HR HR20020330A patent/HRP20020330A2/xx not_active IP Right Cessation
- 2002-04-18 ZA ZA200203102A patent/ZA200203102B/xx unknown
- 2002-04-19 NO NO20021859A patent/NO323409B1/no not_active IP Right Cessation
-
2003
- 2003-04-16 HK HK03102754A patent/HK1050535A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2012
- 2012-02-01 CY CY20121100113T patent/CY1112274T1/el unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| UA72545C2 (uk) | Олігосахариди, спосіб їх одержання та фармацевтична композиція на їх основі | |
| US6617316B1 (en) | Oligosaccharides, their preparation and pharmaceutical compositions containing them | |
| JP2007530718A (ja) | アルギンオリゴ糖及びその誘導体、並びにそれらの調製と用途 | |
| EP0265865A2 (de) | Blutersatzmittel | |
| US5053398A (en) | Sulfated homopolysaccharides as anti-aids virus agents | |
| DE69334102T2 (de) | Zusammenstellung zur Regulierung der Zytokinaktivität | |
| DE60109279T2 (de) | Pharmazeutische zusammensetzungen mit oligosacchariden und deren herstellung | |
| US6608042B2 (en) | Pharmaceutical compositions containing oligosaccharides, the novel oligosaccharides and preparation thereof | |
| EP0368131B1 (de) | Neoglykoproteine, ihre Herstellung und Verwendung | |
| DE60106246T2 (de) | Malto-oligosaccharide und deren verwendung | |
| JPH01103601A (ja) | 新規な抗ウィルス剤 |