PL204623B1 - Oligosacharydy, sposób ich wytwarzania, kompozycje farmaceutyczne zawierające je oraz ich zastosowanie - Google Patents
Oligosacharydy, sposób ich wytwarzania, kompozycje farmaceutyczne zawierające je oraz ich zastosowanieInfo
- Publication number
- PL204623B1 PL204623B1 PL363052A PL36305200A PL204623B1 PL 204623 B1 PL204623 B1 PL 204623B1 PL 363052 A PL363052 A PL 363052A PL 36305200 A PL36305200 A PL 36305200A PL 204623 B1 PL204623 B1 PL 204623B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- oligosaccharides
- formula
- sodium
- mixture
- hydroxide
- Prior art date
Links
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 title claims abstract description 81
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 title claims abstract description 80
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims abstract description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title description 11
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 67
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 27
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 51
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 claims description 35
- 239000011734 sodium Substances 0.000 claims description 34
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical group C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 claims description 31
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 23
- WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M Lithium hydroxide Chemical compound [Li+].[OH-] WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 18
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 18
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 18
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims description 18
- MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N Nitric oxide Chemical compound O=[N] MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 14
- 239000000908 ammonium hydroxide Substances 0.000 claims description 10
- 125000001453 quaternary ammonium group Chemical group 0.000 claims description 10
- VDZOOKBUILJEDG-UHFFFAOYSA-M tetrabutylammonium hydroxide Chemical compound [OH-].CCCC[N+](CCCC)(CCCC)CCCC VDZOOKBUILJEDG-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 10
- 150000008044 alkali metal hydroxides Chemical class 0.000 claims description 9
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 8
- MFGOFGRYDNHJTA-UHFFFAOYSA-N 2-amino-1-(2-fluorophenyl)ethanol Chemical compound NCC(O)C1=CC=CC=C1F MFGOFGRYDNHJTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 claims description 7
- HUCVOHYBFXVBRW-UHFFFAOYSA-M caesium hydroxide Inorganic materials [OH-].[Cs+] HUCVOHYBFXVBRW-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 7
- 230000006378 damage Effects 0.000 claims description 7
- 208000005264 motor neuron disease Diseases 0.000 claims description 7
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 7
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 6
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 6
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 6
- 206010034576 Peripheral ischaemia Diseases 0.000 claims description 5
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical group [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 5
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 claims description 5
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 claims description 5
- 208000014674 injury Diseases 0.000 claims description 5
- 229910052700 potassium Chemical group 0.000 claims description 5
- 239000011591 potassium Chemical group 0.000 claims description 5
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 claims description 4
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 claims description 4
- 201000006474 Brain Ischemia Diseases 0.000 claims description 4
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical group [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 206010008120 Cerebral ischaemia Diseases 0.000 claims description 4
- 208000023105 Huntington disease Diseases 0.000 claims description 4
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical group [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 208000018737 Parkinson disease Diseases 0.000 claims description 4
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 239000011575 calcium Chemical group 0.000 claims description 4
- 206010008118 cerebral infarction Diseases 0.000 claims description 4
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 239000011777 magnesium Chemical group 0.000 claims description 4
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 claims description 4
- 201000000585 muscular atrophy Diseases 0.000 claims description 4
- 208000004296 neuralgia Diseases 0.000 claims description 4
- 208000021722 neuropathic pain Diseases 0.000 claims description 4
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 claims description 4
- 208000027232 peripheral nervous system disease Diseases 0.000 claims description 4
- 208000033808 peripheral neuropathy Diseases 0.000 claims description 4
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 claims description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 3
- 208000031225 myocardial ischemia Diseases 0.000 claims description 3
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 claims description 2
- 208000034189 Sclerosis Diseases 0.000 claims 1
- 206010069689 Spinal column injury Diseases 0.000 claims 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 claims 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 43
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 16
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 15
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 15
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 15
- -1 Disaccharide sulfates Chemical class 0.000 description 14
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 14
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000000047 product Substances 0.000 description 11
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 9
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 8
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 7
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 7
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 6
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 6
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 6
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 6
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 5
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 5
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 description 5
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 5
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 5
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 5
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 5
- 239000012429 reaction media Substances 0.000 description 5
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 5
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 5
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- 108010022901 Heparin Lyase Proteins 0.000 description 4
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 4
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 229910000397 disodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 4
- 235000019800 disodium phosphate Nutrition 0.000 description 4
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 4
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 description 4
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 4
- 235000019799 monosodium phosphate Nutrition 0.000 description 4
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 description 4
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 4
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 4
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 4
- 125000004436 sodium atom Chemical group 0.000 description 4
- AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M sodium dihydrogen phosphate Chemical compound [Na+].OP(O)([O-])=O AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 4
- HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K trisodium citrate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 4
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010028289 Muscle atrophy Diseases 0.000 description 3
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 3
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M Nitrite anion Chemical compound [O-]N=O IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000005349 anion exchange Methods 0.000 description 3
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 3
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 3
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 3
- 201000010901 lateral sclerosis Diseases 0.000 description 3
- 210000003097 mucus Anatomy 0.000 description 3
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 3
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 3
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 3
- WFIYPADYPQQLNN-UHFFFAOYSA-N 2-[2-(4-bromopyrazol-1-yl)ethyl]isoindole-1,3-dione Chemical compound C1=C(Br)C=NN1CCN1C(=O)C2=CC=CC=C2C1=O WFIYPADYPQQLNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 2
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 2
- ACFIXJIJDZMPPO-NNYOXOHSSA-N NADPH Chemical compound C1=CCC(C(=O)N)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](O2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)O)O1 ACFIXJIJDZMPPO-NNYOXOHSSA-N 0.000 description 2
- 108090000913 Nitrate Reductases Proteins 0.000 description 2
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 2
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 2
- 230000002490 cerebral effect Effects 0.000 description 2
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 2
- 238000012691 depolymerization reaction Methods 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 2
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- VWWQXMAJTJZDQX-UYBVJOGSSA-N flavin adenine dinucleotide Chemical compound C1=NC2=C(N)N=CN=C2N1[C@@H]([C@H](O)[C@@H]1O)O[C@@H]1CO[P@](O)(=O)O[P@@](O)(=O)OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)CN1C2=NC(=O)NC(=O)C2=NC2=C1C=C(C)C(C)=C2 VWWQXMAJTJZDQX-UYBVJOGSSA-N 0.000 description 2
- 235000019162 flavin adenine dinucleotide Nutrition 0.000 description 2
- 239000011714 flavin adenine dinucleotide Substances 0.000 description 2
- 229940093632 flavin-adenine dinucleotide Drugs 0.000 description 2
- 238000005227 gel permeation chromatography Methods 0.000 description 2
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 description 2
- 239000003701 inert diluent Substances 0.000 description 2
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 2
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 description 2
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 description 2
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 2
- FGIUAXJPYTZDNR-UHFFFAOYSA-N potassium nitrate Chemical compound [K+].[O-][N+]([O-])=O FGIUAXJPYTZDNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 2
- 230000002207 retinal effect Effects 0.000 description 2
- 210000003625 skull Anatomy 0.000 description 2
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 2
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 2
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- ZCUQOPGIJRGJDA-UHFFFAOYSA-N 1-naphthalen-1-ylethane-1,2-diamine Chemical compound C1=CC=C2C(C(N)CN)=CC=CC2=C1 ZCUQOPGIJRGJDA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 2-amino-2-deoxy-D-glucopyranose Chemical compound N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- CZNJCCVKDVCRKF-UHFFFAOYSA-N Benzyl sulfate Chemical compound OS(=O)(=O)OCC1=CC=CC=C1 CZNJCCVKDVCRKF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N Lithium Chemical group [Li] WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 208000026072 Motor neurone disease Diseases 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 208000001738 Nervous System Trauma Diseases 0.000 description 1
- 239000005662 Paraffin oil Substances 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 239000006096 absorbing agent Substances 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 1
- PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N aluminium oxide Inorganic materials [O-2].[O-2].[O-2].[Al+3].[Al+3] PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001858 anti-Xa Effects 0.000 description 1
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 1
- 239000002585 base Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 229910052792 caesium Chemical group 0.000 description 1
- TVFDJXOCXUVLDH-UHFFFAOYSA-N caesium atom Chemical group [Cs] TVFDJXOCXUVLDH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000013375 chromatographic separation Methods 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 229940110456 cocoa butter Drugs 0.000 description 1
- 235000019868 cocoa butter Nutrition 0.000 description 1
- 238000004737 colorimetric analysis Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000008602 contraction Effects 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 239000008298 dragée Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 230000001804 emulsifying effect Effects 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N ethanol;hydrate Chemical compound O.CCO IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 239000007903 gelatin capsule Substances 0.000 description 1
- 125000005456 glyceride group Chemical group 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 239000012456 homogeneous solution Substances 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 1
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 1
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000001616 ion spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 230000000302 ischemic effect Effects 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 229910052744 lithium Chemical group 0.000 description 1
- 210000003141 lower extremity Anatomy 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 239000002324 mouth wash Substances 0.000 description 1
- 230000020763 muscle atrophy Effects 0.000 description 1
- 210000004165 myocardium Anatomy 0.000 description 1
- 239000007923 nasal drop Substances 0.000 description 1
- 229940100662 nasal drops Drugs 0.000 description 1
- 239000007922 nasal spray Substances 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 230000020477 pH reduction Effects 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 230000036470 plasma concentration Effects 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 235000010333 potassium nitrate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 239000004627 regenerated cellulose Substances 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 238000011012 sanitization Methods 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 239000008247 solid mixture Substances 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 239000003206 sterilizing agent Substances 0.000 description 1
- 238000002305 strong-anion-exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- FDDDEECHVMSUSB-UHFFFAOYSA-N sulfanilamide Chemical compound NC1=CC=C(S(N)(=O)=O)C=C1 FDDDEECHVMSUSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940124530 sulfonamide Drugs 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- DZLFLBLQUQXARW-UHFFFAOYSA-N tetrabutylammonium Chemical group CCCC[N+](CCCC)(CCCC)CCCC DZLFLBLQUQXARW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000004044 tetrasaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 150000004043 trisaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 239000002966 varnish Substances 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 235000012431 wafers Nutrition 0.000 description 1
- 238000009736 wetting Methods 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/006—Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence; Gellans; Succinoglycans; Arabinogalactans; Tragacanth or gum tragacanth or traganth from Astragalus; Gum Karaya from Sterculia urens; Gum Ghatti from Anogeissus latifolia; Derivatives thereof
- C08B37/0063—Glycosaminoglycans or mucopolysaccharides, e.g. keratan sulfate; Derivatives thereof, e.g. fucoidan
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
- A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/02—Drugs for disorders of the nervous system for peripheral neuropathies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
- A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
- A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/01—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing oxygen
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Neurology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Virology (AREA)
- Psychology (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Psychiatry (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Immunology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
Description
Opis wynalazku
Niniejszy wynalazek dotyczy oligosacharydów o wzorze:
ich mieszanin, ich diastereoizomerów, sposobu ich wytwarzania, zawierających je kompozycji farmaceutycznych oraz ich zastosowania.
Siarczany disacharydów mające koniec redukujący o strukturze 1,6-anhydro zostały opisane przez H.P.Wessela, J. Carbohydrate Chemistry, 11(8), 1039-1052 (1992); nie przypisano im żadnej aktywności farmakologicznej.
Siarczany trisacharydów zawierające ugrupowanie 1,6-anhydro również zostały opisane w opisie patentowym EP 84999 i przez Y.Ichikawę i in., Carbohydr.Res.,141,273-282 (1985) jako związki pośrednie przy wytwarzaniu wyższych oligosacharydów. Te trisacharydy mają małą aktywność anty-Xa.
Przedmiotem wynalazku są oligosacharydy o wzorze:
w którym n oznacza liczbę całkowitą w zakresie od 0 do 6, R1, R2, R3 i R6 oznaczają grupę SO3M, R4 oznacza atom wodoru i R5 oznacza atom wodoru lub grupę SO3M i M oznacza atom sodu, wapnia, magnezu lub potasu, mieszanina tych oligosacharydów i ich diastereoizomerów.
Korzystnie, wynalazek obejmuje oligosacharydy o wzorze (I) w których n jest równe 0 i M oznacza atom sodu, i mieszaninę ich diastereoizomerów.
Korzystnie, wynalazek dotyczy oligosacharydów o wzorze (I) w których n oznacza 1, R5 oznacza grupę SO3M i M oznacza atom sodu, i mieszaninę ich diastereoizomerów.
Korzystnie, wynalazek obejmuje oligosacharydy o wzorze (I) w których w których n oznacza 2, R5 oznacza grupę SO3M i M oznacza atom sodu, i mieszanina ich diastereoizomerów.
Korzystnie, wynalazek obejmuje oligosacharydy o wzorze (I) w których n oznacza 2, i M oznacza atom sodu, i mieszaninę ich diastereoizomerów.
Przedmiotem wynalazku jest również sposób wytwarzania oligosacharydów o wzorze (I) w którym działa się wodorotlenkiem metalu alkalicznego lub czwartorzędowym wodorotlenkiem amoniowym na oligosacharydy o wzorze:
PL 204 623 B1
w którym n oznacza liczbę całkowitą 0-6, R1, R2, R3 i R6, oznaczają grupę SO3M, R4 oznacza atom wodoru i R5 oznacza atom wodoru lub grupę SO3M i M oznacza atom sodu, wapnia, magnezu lub potasu, lub ich mieszaninę i wyodrębnia się oligosacharydy albo ich mieszaniny.
Korzystnie, prowadzi się reakcję w środowisku wodnym w temperaturze 40-80°C przy pH 10-13.
Korzystnie, stosuje się 1-5% roztwór wodny wodorotlenku metalu alkalicznego lub czwartorzędowego wodorotlenku amoniowego.
Korzystnie, prowadzi się reakcję w temperaturze 60-70°C.
Korzystnie, stosuje się pH reakcji 11-12,5.
Korzystnie, stosuje się wodorotlenek metalu alkalicznego lub czwartorzędowy wodorotlenek amoniowy, będący wodorotlenkiem sodu, wodorotlenkiem potasu, wodorotlenkiem litu, wodorotlenkiem cezu lub wodorotlenkiem tetrabutyloamoniowym.
Wynalazek obejmuje także, kompozycję farmaceutyczną zawierającą jako substancję aktywną co najmniej jeden oligosacharyd o wzorze (I).
Ponadto przedmiotem wynalazku jest zastosowanie oligosacharydów o wzorze (I) do wytwarzania leku przydatnego do zapobiegania lub leczenia chorób związanych z procesem zapalnym, wynikającym z produkcji tlenku azotu (NO).
Korzystnie, oligosacharydy o wzorze (I) są stosowane do wytwarzania leków przydatnych do zapobiegania lub leczenia niedokrwienia mózgu, niedokrwienia serca lub naczyń obwodowych, zapalenia kości i stawów, urazów ośrodkowego układu nerwowego, urazów czaszki, kręgów, czaszkowokręgowych, stwardnienia rozsianego, bólów neuropatycznych i neuropatii obwodowych, chorób motoneuronowych, stwardnienia bocznego z zanikiem mięśni, neuro-AIDS, choroby Alzheimera, choroby Parkinsona i pląsawicy Huntingtona.
Te oligosacharydy obejmują więc parzystą liczbę sacharydów.
W procesie wytwarzania oligosacharydów o wzorze (I) ilość wodorotlenku metalu alkalicznego lub czwartorzędowego wodorotlenku amoniowego powinna być wystarczająca, aby pH środowiska reakcyjnego pozostawało stałe podczas całego czasu reakcji. Jest więc konieczne ciągłe dodawanie wodorotlenku metalu alkalicznego lub czwartorzędowego wodorotlenku amoniowego w ciągu całej reakcji.
Korzystnie wodorotlenek metalu alkalicznego lub czwartorzędowy wodorotlenek amoniowy jest w postaci 1-5% wodnego roztworu.
Reakcja zachodzi korzystnie w temperaturze 60-70°C.
Korzystnie pH reakcji wynosi 11-12,5.
Reakcję kończy zakwaszenie środowiska reakcyjnego np. przez dodanie kwaśnej żywicy, takiej jak żywica Amberlit IR120® (Fluka).
Oligosacharydy o wzorze (I) można ewentualnie oczyścić przez chromatografię permeacyjną na żelu typu poliakrylamid-agaroza, jak sprzedawany pod nazwą handlową Ultrogel ACA202® (Biosepra) według protokołu opisanego poniżej dla rozdzielania oligosacharydów pośrednich o wzorze (II). Oligosacharydy o wzorze (I), w którym n oznacza 0 lub 1, można też ewentualnie oczyścić na kolumnie z tlenkiem glinu, stosując jako eluent mieszaninę woda-etanol.
Oligosacharydy pośrednie o wzorze (II) i ich mieszaniny można otrzymać przez rozdzielanie przez chromatografię na żelu mieszaniny oligosacharydów (III), uzyskanej przez depolimeryzację enzymatyczną heparyny lub depolimeryzację zasadową estru benzylowego heparyny lub estru benzylowego heparyny półsyntetycznej.
PL 204 623 B1
Tę chromatografię prowadzi się na kolumnach wypełnionych żelem typu poliakrylamid-agaroza, jak sprzedawany pod nazwą handlową Ultrogel ACA202® (Biosepra). Korzystnie stosuje się baterię kolumn z żelem poliakrylamid-agaroza. Ilość użytych kolumn jest przystosowana do objętości żelu i rozdzielanych oligosacharydów. Mieszaninę eluuje się roztworem zawierającym bufor fosforanowy i chlorek sodu. Korzystnie roztwór buforu fosforanowego jest roztworem o 0,02 mola/litr NaH2PO4/Na2HPO4 (pH 7), zawierającym 0,1 mola/litr chlorku sodu. Detekcję różnych frakcji wykonuje się na drodze spektrometrii UV (254 nm) i jonowej (IBF). Tak otrzymane frakcje można następnie ewentualnie oczyścić np. przez chromatografię SAX (strong anion exchange) zgodnie z metodami znanymi fachowcom, a zwłaszcza według metod opisanych przez K.G.Rice i R.J.Linhardta, Carbohydrate Research, 190, 219-233(1989), A.Larnkjaera, S.H.Hansena i P.B.Ostergaarda, Carbohydrate Research, 266, 37-52(1995) i w opisie patentowym WO90/01501 (przykład 2). Frakcje następnie są liofilizowane, potem odsolone na kolumnie wypełnionej żelem, takiej jak kolumna z żelem Sephadex G10® (Pharmacia Biochemicals).
Gdy oczyszczania nie wykonuje się przez chromatografię SAX, liofilizaty można ewentualnie oczyścić przez wytrącenie zwykłe lub frakcjonowane według metody opisanej w opisie patentowym FR 2548672. Ogólnie biorąc działa się według następującego protokołu:
Liofilizowaną frakcję do oczyszczenia rozpuszcza się w temperaturze 25°C w około dziesięciu objętościach wody destylowanej. Przez dodanie metanolu lub etanolu wytrąca się żądany oligosacharyd, kontrolując jego wzbogacanie przez chromatografię CLHP (wysokosprawna chromatografia cieczowa). Dodatek metanolu lub etanolu określa się w zależności od czystości i żądanej wydajności wymienionego oligosacharydu. Również tę operację można wykonać w kilku kolejnych etapach, wychodząc z roztworu początkowego liofilizatu. W tym celu dodaje się środek powodujący nierozpuszczalność (metanol lub etanol) w małych porcjach i otrzymany osad oddziela się po każdym dodaniu. Tak wytworzone osady analizuje się przez chromatografię CLHP. Zależnie od czystości i żądanej wydajności zbiera się właściwe frakcje osadu.
Dla produktów pośrednich o wzorze (II), w których n = 0, 1 lub 2, korzystnie jest wychodzić z mieszaniny (III) otrzymanej przez depolimeryzację enzymatyczną .
Ta depolimeryzacja zachodzi przy użyciu heparynazy 1 (EC 4.2.2.7) w roztworze buforu fosforanowego o pH 7, w obecności chlorku sodu i BSA (albumina z serum bydlęcego), w temperaturze 10-18°C, korzystnie 15°C, w ciągu 8-10 dni, korzystnie 9 dni. Depolimeryzację kończy się np. przez ogrzewanie środowiska reakcyjnego w temperaturze 100°C w ciągu 2 minut i mieszaninę uzyskuje się przez liofilizację. Korzystne jest stosowanie 7UI heparynazy na 25 g heparyny. Roztwór buforu fosforanowego zawiera generalnie 0,05 mola/litr NaH2PO4/Na2HPO4 (pH 7) w obecności 0,1 mola/litr chlorku sodu. Stężenie BSA wynosi generalnie 2%.
Dla produktów pośrednich o wzorze (II), w których n = 0, 1, 2, 3 lub 4, korzystnie jest wychodzić z mieszaniny (III) uzyskanej przez depolimeryzację estru benzylowego heparyny.
Ester benzylowy heparyny można wytworzyć zgodnie z metodami opisanymi w opisach patentowych US 5389618, EP 40144, FR 2548672. Stopień estryfikacji wynosi korzystnie 50-100%. Korzystnie wynosi on 70-90%.
Depolimeryzacja zachodzi w środowisku wodnym, przy użyciu wodorotlenku metalu alkalicznego (np. wodorotlenku litu, wodorotlenku sodu, wodorotlenku potasu lub wodorotlenku cezu) lub czwartorzędowego wodorotlenku amoniowego (np. wodorotlenku tetrabutyloamoniowego), korzystnie o stężeniu molowym 0,1-0,2 mola/litr, w temperaturze 40-80°C w ciągu 5-120 minut. Korzystnie działa się 5-15 minut w temperaturze 60-70°C roztworem zawierającym 0,15 mola/litr wodorotlenku sodu. Reakcję depolimeryzacji zatrzymuje się przez zobojętnienie dodatkiem kwasu, takiego jak kwas octowy. Po dodaniu 10% (ciężar na objętość) octanu sodu mieszaninę oligosacharydów wytrąca się przez dodanie metanolu, korzystnie 2 objętości na 1 objętość środowiska reakcyjnego i odsącza się.
Mieszaninę oligosacharydów otrzymaną po chemicznej depolimeryzacji w postaci wodnego roztworu, wzbogaca się przez ultrafiltrację przez membrany z odpowiednim nominalnym progiem odcięcia (typu Pellicon z celulozy regenerowanej sprzedawane przez Millipore); typ membrany dostosowuje się zależnie od typu odzyskiwanych wzbogaconych oligosacharydów. Dla oligosacharydów o wzorze (II), w których n = 0, stosuje się membranę z nominalnym progiem odcięcia 1 kDa, dla oligosacharydów o wzorze (II), w których n = 1, stosuje się membranę 1 kDa lub 3 kDa, dla oligosacharydów o wzorze (II), w których n = 2, stosuje się membranę 3 kDa, dla oligosacharydów o wzorze (II), w których n = 3 lub 4, stosuje się membranę 5 kDa. W ciągu tej operacji odzyskuje się tę część roztworu, która przeszła przez membranę, a odrzuca pozostałość. Tak więc frakcja produktu wzbogaconego może stanowić
PL 204 623 B1
10-50% początkowej mieszaniny oligosacharydów, zatrzymując co najmniej 80% żądanego oligosacharydu.
Dla produktów pośrednich o wzorze (II), w których n = 0-6, korzystnie jest wychodzić z mieszaniny (III) uzyskanej przez depolimeryzację estru benzylowego siarczanu polisacharydu półsyntetycznego. Ester benzylowy siarczanu polisacharydu półsyntetycznego wytwarza się z siarczanów polisacharydów półsyntetycznych otrzymanych z polisacharydu K5 i według metod opisanych w opisach patentowych WO 94/29352 i WO 96/14425. Warunki estryfikacji, depolimeryzacji i odzyskiwania są takie same jak opisane poprzednio dla estru benzylowego heparyny.
We wszystkich poprzednich sposobach początkowa heparyna może pochodzić ze świni, owcy, kozy lub bydła i może pochodzić ze śluzu, płuc lub skóry zwierząt. Korzystnie stosuje się heparynę ze śluzu świni, owcy lub płuc wołu, a jeszcze korzystniej ze śluzu świni.
Oligosacharydy o wzorze (I) wykazują właściwości przeciwzapalne i można je więc stosować do zapobiegania lub leczenia chorób związanych z procesem zapalnym, wynikającym z produkcji substancji cytotoksycznych, takich jak monotlenek azotu (NO), którego postać indukująca jest uwalniana zwłaszcza przez neutrofile lub makrofagi, gdy one migrują i są aktywowane na poziomie tkanki. Aktywacja, migracja, adhezja i infiltracja neutrofilów zachodzi na poziomie stref tkankowych niedokrwionych podczas niedrożności lub skurczu tętnicy unaczyniającej tę tkankę. Te nie-dokrwienia mogą powstawać albo na poziomie mózgowym (przypadek naczyń mózgowych) albo na poziomie mięśnia sercowego (zawał mięśnia sercowego), lub na poziomie dolnych kończyn (niedokrwienia zwane obwodowymi). Oligosacharydów o wzorze (I) można więc używać do zapobiegania i/lub leczenia chorób neurodegeneratywnych, w których stany zapalne mózgu odgrywają niszczącą rolę, mogącą doprowadzić do śmierci, wśród których można wymienić niedokrwienie mózgu, niedokrwienie serca (zawał mięśnia sercowego), niedokrwienie obwodowe, urazy ośrodkowego układu nerwowego i zwłaszcza urazy czaszki, kręgów, czaszkowo-kręgowe, stwardnienie rozsiane, bóle neuropatyczne i neuropatie obwodowe, choroby motoneuronów, w nich stwardnienie boczne z zanikiem mięśni, neuro-AIDS, chorobę Alzheimera, chorobę Parkinsona i pląsawicę Huntingtona oraz niektóre postacie zapalenia kości i stawów szczególnie z umiejscowieniem w stawach.
Aktywność przeciwzapalną tych produktów ukazano in vivo w teście wytwarzania NOx (azotyn i azotan) wywoł anego przez lipopolisacharyd (LPS), pochodzą cy z E.coli wedł ug protokoł u opisanego przez M.Yamashitę i in., Eur.J. Pharmacol., 338, 2, 151-158(1997) lub J.E.Shellito i in., Am.J.Respir.Cell Mol.Biol.,13,1,45-53(1995). Samcom myszy CD1 (Charles River, 25-35g) wstrzyknięto w T0 dożylnie dawkę 0,5 mg/kg oligosacharydu, w T+15 minut podskórnie 1 lub 2 mg/kg oligosacharydu. W T+30 minut podano 100 mg/kg lipopolisacharydu (LPS) pochodzącego z E.coli (Sigma L3129, serotyp 0127:B8).W T+ 3 godziny wstrzyknięto znów podskórnie 1 lub 2 mg/kg oligosacharydu. W T+5 godzin 30 minut pobrano próbkę krwi przez punkcję oka i okreś lono stężenia NOx (azotyn i azotan) w plazmie metodą kolometryczną Griessa po zredukowaniu azotanu do azotynu przez reduktazę azotanową w sposób następujący: 12 μΐ próbki plazmy zmieszano z 88 μΐ wody zdejonizowanej i inkubowano w ciemności przez 1 godzinę w temperaturze otoczenia z 40 μl buforu fosforanowego (0,31 M, pH 7,5), 20 μl β-NADPH (zredukowany fosforan dinukleotydu nikotyno-amidoadeninowego) (0,86 mM), 20 μl FAD (dinukleotyd flawinoadeninowy) (0,11 mM) i 20 μl reduktazy azotanowej (2U/ml) (Boehringer Mannheim). Dodano 10 μ! ZnSO4 (1 M) w celu wtrącenia białek i po wymieszaniu próbki odwirowano przy 20 000 g w ciągu 5 minut. Na koniec 50 μl supernatantu inkubowano 10 minut w temperaturze otoczenia ze 100 μl reagenta Griessa (1% sulfanilamid w 1% mieszaninie kwas fosforowy/naftyloetylenodiamina w wodzie zdejonizowanej (objętościowo). Gęstości optyczne odczytano w 540 nm przy użyciu spektrofotometru z mikropłytkami; każdy punkt określano 2 razy. KNO3 i HaNO2 używano jako wzorzec dla metody kolorymetrycznej.
W tym teście oligosacharydy według wynalazku hamowały ponad 50% tworzenia NOx.
Spośród korzystnych oligosacharydów o wzorze (I) można zwłaszcza wymienić oligosacharydy, w których:
- n jest równe 0, R1 i R6 oznaczają grupę SO3Na i M oznacza atom sodu i mieszaninę jego diastereoizomerów
- n jest równe 1, R1, R2, R3, R5, R6 oznaczają grupę SO3Na, R4 oznacza atom wodoru i M oznacza atom sodu i mieszaninę jego diastereoizomerów
- n jest równe 2, R1, R2, R3, R5, R6 oznaczają grupę SO3Na, R4 oznacza atom wodoru i M oznacza atom sodu i mieszaninę jego diastereoizomerów
PL 204 623 B1
- n jest równe 2, R1, R2, R3, R6 oznaczają grupę SO3Na, R5 oznacza atom wodoru lub grupę
SO3Na, R4 oznacza atom wodoru i M oznacza atom sodu i mieszaninę jego diastereoizomerów (pochodna 1,6-anhydro Δ^-^-Ι^).
Następujące przykłady są reprezentatywne dla wytwarzania oligosacharydów o wzorze (I) i produktów pośrednich.
W tych przykładach oznaczenia skrótów są następujące:
AIs: (kwas 4-deoksy-2-O-sulfo-a-L-treo-heksenopiranozylouronowy)-(1 >4)-2-deoksy-2-sulfoamino-6-O-sulfo-a-D-glukopiranoza, sól tetrasodowa lub też AUAp2S-(1 >4)-a-D-GlcNp2S6S
Is: (kwas 2-sulfo-a-L-idopiranozylouronowy)-(1 >4)-2-deoksy-2-sulfoamino-6-O-sulfo-a-D-glukopiranoza, sól tetrasodowa lub też a-L-IdoAp2S-(1 >4)-a-D-GlcNp2S6S lIs: (kwas a-L-idopiranozylouronowy)-(1 >4)-2-deoksy-2-sulfoamino-6-O-sulfo-a-D-glukopiranoza, sól trisodowa lub też a-L-IdoAp-(1 >4)-a-D-GlcNp2S6S
IIIs: (kwas 2-sulfo-a-L-idopiranozylouronowy)-(1 >4)-2-deoksy-2-sulfoamino-a-D-glukopiranoza, sól trisodowa lub też a-L-IdoAp2S-(1 >4)-a-D-GlcNp2S
IdoAp: kwas idopiranozylouronowy
GlcNp: 2-deoksy-2-aminoglukopiranoza
ΔUAp: kwas 4-deoksy-a-L-treo-heksenopiranozylouronowy
S: siarczan
Przykłady wytwarzania mieszanin o wzorze (II)
P r z y k ł a d A. Wytwarzanie oligosacharydów o wzorze (II), w których n = 0, 1 i 2 przez depolimeryzację enzymatyczną i rozdzielanie
Rozpuszczono 25 g heparyny w 250 ml roztworu buforu fosforanowego, zawierającego 0,05 mola/litr NaH2PO4/Na2HPO4 (pH=7), 0,2 mola/litr chlorku sodu i 2% BSA (albumina z surowicy bydlęcej). Do mieszaniny wprowadzono 7UI heparynazy I (EC 4.2.2.2.7, otrzymany roztwór ochłodzono w temperaturze 15°C i potem utrzymywano w tej temperaturze w ciągu całego czasu reakcji depolimeryzacji. Postęp reakcji śledzono, pobierając jednakowe próbki rozłożone w czasie i analizowane przez chromatografię permeacyjną na żelu. Po upływie 9 dni reakcję enzymatyczną zakończono, ogrzewając środowisko reakcyjne w temperaturze 100°C w ciągu 2 minut. Ochłodzoną mieszaninę następnie liofilizowano. Otrzymano tak mieszaninę oligosacharydów (III).
Otrzymaną mieszaninę oligosacharydów (III) potem chromatografowano według następującej metody: chromatografię prowadzono na kolumnach wypełnionych żelem poliakrylamidagaroza znanym pod nazwą Ultrogel ACA 202 i eluowano mieszaninę roztworem zawierającym bufor fosforanowy (0,02 mola/litr NaH2PO4/Na2HPO4) pH = 7 i 0,1 mola/litr chlorku sodu. Detekcję prowadzono na drodze spektrofotometrii UV (254 nm) i jonowej (IBF). Produkty można ewentualnie oczyścić przez chromatografię SAX (strong anion exchange) lub przez frakcjonowane wytrącanie według metody opisanej w opisie patentowym FR 2548672. Frakcje uzyskanego produktu są liofilizowane, potem odsolone na kolumnie wypełnionej żelem Sephadex G10R (Pharmacia Biochemicals).
Tą metodą otrzymano 3 g disacharydu Is, 1100 mg mieszaniny heksasacharydu zawierającej typowo 55% pochodnej Δ^-Is-Is, 35% Δ^-^-^ i 10% Δ^-^-Η^. Tę ostatnią mieszaninę można oczyszczać metodami znanymi fachowcowi w celu rozdzielenia każdego ze składników lub użyć jako taką do przekształcenia w pochodne 1,6-anhydro o wzorze (I). Należy zaznaczyć, że podczas tego przekształcenia heksasacharyd Δ^-^-Ν^ nie może prowadzić do tworzenia związków o wzorze (I).
P r z y k ł a d B. Wytwarzanie oligosacharydów o wzorze (II), w których n = 0, 1, 2, 3 lub 4 przez depolimeryzację estru benzylowego heparyny i rozdzielanie a - Wytwarzanie estru benzylowego heparyny
Ester benzylowy heparyny wytworzono według przykładu 3 opisu patentowego US 5,389,618.
b - Depolimeryzacja
Rozpuszczono 100 g estru benzylowego heparyny w 1,9 litra wody zdemineralizowanej. Mieszaninę ogrzewano w temperaturze 60°C przy mieszaniu. Po uzyskaniu homogenicznego roztworu wprowadzono do niego jednorazowo około 35 ml 23% roztworu wodorotlenku sodu. Po 10 minutach reakcji roztwór ochłodzono i zobojętniono 80 ml około 2N roztworu kwasu octowego. Do tego roztworu dodano 10% (ciężar na objętość) octanu sodu. Mieszaninę oligosacharydów wytrącono, dodając około 2 objętości metanolu. Osad oddzielono przez filtrację, przemyto metanolem w dwóch porcjach, potem suszono pod zmniejszonym ciśnieniem w temperaturze 50°C. Po wysuszeniu otrzymano 73,8 g mieszaniny oligosacharydów (II).
PL 204 623 B1 c - Wzbogacanie w oligosacharyd, w którym n = 1
Rozpuszczono 30 g mieszaniny oligosacharydów otrzymanej uprzednio w około 35 objętościach wody. Roztwór ten poddano ultrafiltracji przez membranę 3 kDa (Pellicon). Po odebraniu 600 ml roztworu, który przeszedł przez membranę, rozcieńczono pozostałość 500 ml wody. Operację kontynuowano do przejścia dodatkowych 450 ml roztworu, który przeszedł przez membranę. Połączono obie frakcje roztworu, który przeszedł przez membranę, po czym zatężono do sucha pod zmniejszonym ciśnieniem. Otrzymano 6,1 g żółtawego stałego ciała białego. Analiza ciała stałego przez chromatografię permeacyjno-żelową wykazała, że zawiera ono około 30% oligosacharydu o wzorze (II), w którym n = 1.
d - Frakcjonowanie mieszanin oligosacharydów poddanych ultrafiltracji
Wzbogaconą mieszaninę frakcjonowano na kolumnach wypełnionych żelem poliakrylamid-agaroza znanym pod nazwą Ultrogel ACA 202 (stosowano 4 kolumny szeregowe o średnicy 10 cm i wysokoś ci 50 cm). 5 g mieszaniny wzbogaconej przez ultrafiltrację rozpuszczono w 25 ml wody, potem eluowano roztworem 0,2 mola/litr chlorku sodu z szybkością 5 ml/minutę. Odebrano na dole kolumny frakcje po 25 ml. Detekcję produktów prowadzono na drodze spektrofotometrii UV (254 nm) i jonowej (IBF). Frakcje produktu, w którym n = 1 odzyskano, liofilizowano, potem odsolono na kolumnie wypełnionej żelem Sephadex G10. Po liofizacji otrzymano 1 g tetrasacharydu zawierającego typowo 70% pochodnej Δ^-Is o wzorze (II) (R1, R2, R3, R5, R6 = SO3Na; R4 = H i M = Na). Pochodną Δ^-Is można ewentualnie oczyszczać przez chromatografię SAX (strong anion exchange) lub według korzystnego aspektu przez frakcjonowane wytrącanie zgodnie z metodą opisaną w opisie patentowym FR 2548672.
P r z y k ł a d 1
Do reaktora utrzymywanego w temperaturze 66°C wprowadzono 5 ml roztworu 0,0063 mola/litr wodorotlenku sodu. Wtedy zmierzono pH roztworu i przyjęto jako wartość docelową (pH = 11,35). Przy mieszaniu dodano do niego jednorazowo 30 mg oligosacharydu o wzorze (II), w którym n równa się 0, R1 i R6 oznacza grupę SO3Na i M oznacza atom sodu. Wtedy pH wyregulowano i utrzymywano pH 11,35, dodając w sposób ciągły roztwór 0,5 mola/litr wodorotlenku sodu. Po 10 godzinach przerwano dodawanie wodorotlenku sodu i mieszaninę reakcyjną ochłodzono do temperatury 25°C. Wtedy doprowadzono pH roztworu do 6-7, dodając żywicę Amberlit IR120. Mieszaninę przesączono przez membranę Whatman GF/B, potem zatężono do sucha pod zmniejszonym ciśnieniem (2,7 kPa), w temperaturze około 25°C. Do produktu dodano 0,5 ml wody destylowanej, po czym liofilizowano. Otrzymano tak 29 mg mieszaniny diastereoizomerów oligosacharydu o wzorze (I), w którym n równa się 0, R1 i R6 oznaczają grupę SO3Na i M oznacza atom sodu [(kwas 4-deoksy-2-O-sulfo-a-L-treo-heks-4-enopiranozylouronowy-(1 >4)-1,6-anhydro-2-deoksy-2-sulfo-amino-p-D-mannopiranoza, sól trisodowa): Widmo protonowe w D2O, 400 MHz, T=298 K, δ w ppm: 3,15 (1H, s, H2), 3,75(2H, m, H6 i H3), 3,88(1H, m, H4), 4,20(1H, d, J=8Hz, H6) , 4,22(1H, t, J=5Hz, H3'), 4,58(1H, m, H2'), 4,75(1H, m, H5), 5,53 (1H, s, H1), 5,60(1H,dd,J=6 i 1Hz,H1'), 6,03(1 H,d,J=5Hz, H4'); (kwas 4-deoksy-2-O-sulfo-a-Ltreo-heks-4-enopiranozylouronowy-(1 >4)-1,6-anhydro-2-deoksy-2-sulfoamino-p-D-glukopiranoza, sól trisodowa): Widmo protonowe w D2O, 400 MHz, T=298 K, δ w ppm: 3,34 (1H,dd,J=7 i 2Hz,H2), 3,72(1H,t,J=8Hz,H6), 3,90(1H,m,H3), 4,03(1H,s,H4), 4,20(1H,d,J=8Hz,H6), 4,23(1H,t,J=5Hz,H3'), 4,58(1H,m,H2'), 4,78(1H,m,H5), 5,50 (1H,s,H1), 5,60(1H,dd,J=6 i 1Hz, H1'), 6,03(1H,d,J=5Hz,H4')].
P r z y k ł a d 2
Do reaktora utrzymywanego w temperaturze 62°C, wprowadzono 33,3 ml roztworu 0,0063 mola/litr wodorotlenku sodu. Wtedy zmierzono pH roztworu i przyjęto jako wartość docelową (pH = 11,15). Dodano do niego przy mieszaniu jednorazowo 200 mg oligosacharydu o wzorze (II), w którym n równa się 1, R1, R2, R3, R5 i R6 oznaczają grupę SO3Na, R4 oznacza atom wodoru i M oznacza atom sodu. Wtedy pH wyregulowano i utrzymywano pH 11,15, dodając w sposób ciągły roztwór 0,5 mola/litr wodorotlenku sodu. Po 12 godzinach, przerwano dodawanie wodorotlenku sodu i mieszaninę reakcyjną ochłodzono do temperatury 25°C. Wtedy pH roztworu doprowadzono do 6-7, dodając żywicę Amberlit IR120. Mieszaninę przesączono przez membranę Whatman GF/B, potem zatężono do sucha pod zmniejszonym ciśnieniem (2,7 kPa), w temperaturze około 25°C. Do produktu dodano 3 ml wody destylowanej, po czym liofilizowano. Otrzymano tak 230 mg oligosacharydu o wzorze (I), w którym n równa się 1, R1, R2, R3, R5 i R6 oznaczają grupę SO3Na, R4 oznacza atom wodoru i M oznacza atom sodu, w postaci mieszaniny diastereoizomerów [(kwas 4-deoksy-2-O-sulfo-a-L-treo-heks-4-enopiranozylouronowy-(1 >4)-2-deoksy-2-sulfoamino-6-O-sulfo-a-D-glukopiranozylo-(1 >4)-kwas 2-O-sulfo-a-L-idopyranozylouronowy-(1^-4)-1,6-anhydro-2-deoksy-2-sulfoamino-e-D-mannopiranoza, sól
PL 204 623 B1 heptasodowa): Widmo protonowe w D2O, 400 MHz, T=298 K, δ w ppm: 3,15(1H,s,H2), 3,25(1H,m,H2), 3,60(1H,m,H3), między 3,70 i 4,70(14H, masyw, H3/H4/H6, H2'/H3'/H4'/H5',
H4/H5/H6, H2'/H3'), 4,75(1H, m,H5), między 5,20 i 5,40(2H,m,H1' i H1), 5,45(1H, m, H1'), 5,56 (1H,m,H1), 5,94(1H,d,J=5Hz,H4); (kwas 4-deoksy-2-O-sulfo -a-L-treo-heks-4-enopiranozylouronowy(1 >4)-2-deoksy-2-sulfo-amino-6-O-sulfo-a-D-glukopiranozylo-(1 >4), kwas-2-O-sulfo-a-L-idopyranozylouronowy-(1 >4)-1,6-anhydro-2-deoksy-2-sulfoamino-e-D-glukopiranoza sól heptasodowa): Widmo protonowe w D2O, 400 MHz, T-298 K, δ w ppm: 3,25(1H,m,H2), 3,42(1H,dd,J=4 i 1Hz, H2), 3,60(1H,m,H3), między 3,70 i 4,70(14H, masyw, H3/H4/H6, H2'/H3'/H4'/H5', H4/H5/H6, H2'/H3'), 4,75 (1H,m,H5), między 5,20 i 5,40(2H,m,H1' i H1), 5,45(1H,m,H1'), 5,52(1H,m,H1), 5,94(1H,d,J=5Hz, H4)].
P r z y k ł a d 3
Do reaktora utrzymywanego w temperaturze 62°C, wprowadzono 16,7 ml roztworu 0,0063 mola/litr wodorotlenku sodu. Zmierzono wtedy pH roztworu i przyjęto jako wartość docelową (pH = 11,7). Dodano do niego przy mieszaniu jednorazowo 100 mg oligosacharydu o wzorze (II), w którym n równa się 2, R1, R2, R3, R5 i R6 oznaczają grupę SO3Na, R4 oznacza atom wodoru i M oznacza atom sodu. Wtedy pH wyregulowano i utrzymywano pH 11,7, dodając w sposób ciągły roztwór 0,5 mola/litr wodorotlenku sodu. Po 10 godzinach przerwano dodawanie wodorotlenku sodu i mieszaninę reakcyjną ochłodzono do temperatury 25°C. Wtedy pH roztworu doprowadzono do 6-7, dodając żywicę Amberlit IR120. Mieszaninę przesączono przez membranę Whatman GF/B, potem zatężono do sucha pod zmniejszonym ciśnieniem (2,7 kPa) w temperaturze około 25°C. Do produktu dodano 3 ml wody destylowanej, po czym liofilizowano. Otrzymano tak 108 mg oligosacharydu o wzorze (I), w którym n równa się 2, R1, R2, R3, R5 i R6 oznaczają grupę SO3Na, R4 oznacza atom wodoru i M oznacza atom sodu, w postaci mieszaniny diastereoizomerów. Zauważono A - F cukry konstytutywne heksasacharydów, przy czym A oznacza resztę 1,6-anhydro i F resztę nienasyconego kwasu uronowego.
[(kwas 4-deoksy-2-O-sulfo-a-L-treo-heks-4-enopiranozylouronowy-(1 >4)-2-deoksy-2-sulfoamino-6-O-sulfo-a-D-glukopiranozylo-(1 >4)-kwas 2-O-sulfo-a-L-idopyranozylouronowy-(1 >4)-2-deoksy-2-sulfoamino-6-O-sulfo-a-D-glukopiranozylo-(1 >4)-kwas 2-(O-sulfo-a-L-idopyranozylouronowy-(1 >4)-1,6-anhydro-2-deoksy-2-sulfoamino-e-D-mannopiranoza, sól undekasodowa): Widmo protonowe w D2O, 600 MHz, T=298 K, δ w ppm: 3,15(1H,s,H2(A)), 3,25(2H,m,H2(C+E)); 3,60(2H,m,H3(C+E)), między 3,65 i 4,50 (19H, masyw, H2(B+D)/H3(A+B+D+F)/H4(A+B+C+D+E)/H5(C+E)/-H6(A+C+E)), 4,60(1H,s, H2(F)), 4,80(3H,m,H5(A+B+D), 5,18(1H, s,H1(D)), 5,30(1H,s, H1(B)), 5,34(1H,d,H1(C)), 5,36(1H,d, H1(E)), 5,46(1H,s, H1(F)), 5,57(1H,s,H1(A)), 5,95(1H,d,J=5Hz, H4(F));(kwas 4-deoksy-2-O-sulfo-a-L-treo-heks-4-enopiranozylouronowy-(1 >4)-2-deoksy-2-sulfoamino-6-O-sulfo-a-D-glukopiranozylo-(1 >4)-kwas 2-O-sulfo-a-L-idopyranozylouronowy-(1 >4)-2-deoksy-2-sulfoamino-6-O-sulfo-a-D-glukopiranozylo-(1 >4)-kwas 2-O-sulfo-a-L-idopyranozylouronowy-(1 >4)-1,6-anhydro-2-deoksy-2-sulfoamino-e-D-glukopiranoza, sól undekasodowa): Widmo protonowe w D2O, 600 MHz, T=298 K, δ w ppm: 3,25(2H,m, H2(C+E)) 3,42(1H,m,H2(A)), 3,60(2H,m,H3(C+E)), między 3,65 i 4,50 (19H, masyw, H2(B+D)/H3(A+B+D+F)/H4(A+B+C+D+E)/H5(C+E)/H6(A+C+E)), 4,60 (1H,s, H2(F)), 4,80(3H,m, H5(A+B+D), 5,18(1H,s,H1(D)), 5,31 (1H, s,H1(B)), 5,34 (1H, d, H1(C)), 5,36(1H,d, H1(E)), 5,46(1H,s,H1(F)), 5,52(1H,s,H1(A)), 5,95,d,J=5Hz, H4(F))].
P r z y k ł a d 4
Do reaktora utrzymywanego w temperaturze 62°C, wprowadzono 4 ml roztworu 0,0316 mola/litr wodorotlenku sodu. Zmierzono wtedy pH roztworu i przyjęto jako wartość docelową (pH = 11,8). Dodano do niego jednorazowo przy mieszaniu 100,8 mg mieszaniny oligosacharydu o wzorze (II), w którym n równa się 2, zawierającej 55% pochodnej Δ^-Is-Is (R1, R2, R3, R5 i R6 oznaczają grupę SO3Na, R4 oznacza atom wodoru i M oznacza atom sodu), 35% Δ^-^-^ (R1, R2, R3, i R6 oznaczają grupę SO3Na, R5 oznacza albo grupę SO3Na lub atom wodoru, R4 oznacza atom wodoru i M oznacza atom sodu) i 10% Δ^-^-Η^ (R1, R2, R3, R5 i Rg oznaczają grupę SO3Na, R4 oznacza atom wodoru i M oznacza atom sodu, przy czym grupa SO3M węgla C6 jest zastąpiona przez atom wodoru). Wtedy pH wyregulowano i utrzymywano pH 11,8, dodając w sposób ciągły roztwór wodorotlenku sodu o 0,5 mola/litr. Po 11 godzinach, przerwano dodawanie wodorotlenku sodu i mieszaninę reakcyjną ochłodzono do temperatury 25°C. Wtedy doprowadzono pH roztworu do 6-7, dodając żywicę Amberlit IR120. Mieszaninę przesączono przez membranę Whatman GF/B, potem zatężono do sucha pod zmniejszonym ciśnieniem (2,7 kPa) w temperaturze około 25°C. Do produktu dodano 1,5 ml wody destylowanej, po czym liofilizowano. Otrzymano tak 110 mg mieszaniny oligosacharydu o wzorze (I), w którym n równa się 2, zawierającej zwłaszcza pochodną 1,6-anhydro Δ^-Is-Is (R1, R2, R3, R5 i R6 oznaczają grupę
PL 204 623 B1
SO3Na, R4 oznacza atom wodoru i M oznacza atom sodu) i pochodną 1,6-anhydro Δ^-^-Ι^^-ι, R2, R3, R5 i R6 oznaczają grupę SO3Na, R5 oznacza albo grupę SO3Na lub atom wodoru, R4 oznacza atom wodoru i M oznacza atom sodu). Analiza CLHP (wysokosprawna chromatografia cieczowa) metodą pary jonowej pozwoliła na śledzenie przekształcenia na pochodne o wzorze (I). W tym wypadku oznaczenie CLHP ukazało, że przekształcenie wykonano dla pochodnych Δ^-Is-Is, Δ^-^-^.
P r z y k ł a d 5
Do reaktora utrzymywanego w temperaturze 66°C, wprowadzono 8,6 ml roztworu wodorotlenku litu o 0,025 mola/litr. Zmierzono wtedy pH roztworu i przyjęto jako wartość docelową (pH = 11,68). Dodano do niego jednorazowo przy mieszaniu 50 mg oligosacharydu o wzorze (II), w którym n równa się 0, R1 i R6 oznaczają grupę SO3Na i M oznacza atom sodu. Wtedy pH wyregulowano i utrzymywano pH 11,68, dodając w sposób ciągły roztwór wodorotlenku litu o 0,466 mola/litr. Po 8 godzinach przerwano dodawanie wodorotlenku litu i mieszaninę reakcyjną ochłodzono do temperatury 25°C. Analiza CLHP (wysokosprawna chromatografia cieczowa) metodą pary jonowej pozwoliła na śledzenie przekształcenia na pochodną o wzorze (I), w którym n równa się 0, R1 i R6 oznaczają grupę SO3Na i M oznacza atom sodu lub litu. W tym wypadku oznaczenie CLHP ukazało, że przekształcenie wykonano w 100%. Wydajność obliczona przez wzorcowanie zewnętrzne wyniosła 81,2%.
P r z y k ł a d 6
Do reaktora utrzymywanego w temperaturze 66°C, wprowadzono 8,3 ml roztworu wodorotlenku potasu o 0,0063 mola/litr. Zmierzono wtedy pH roztworu i przyjęto jako wartość docelową (pH = 11,1). Dodano do niego jednorazowo przy mieszaniu 50 mg oligosacharydu o wzorze (II), w którym n równa się 0, R1 i R6 oznaczają grupę SO3Na i M oznacza atom sodu. Wtedy pH wyregulowano i utrzymywano pH 11,1, dodając w sposób ciągły roztwór wodorotlenku potasu o 0,515 mola/litr. Po 24 godzinach przerwano dodawanie wodorotlenku potasu i mieszaninę reakcyjną ochłodzono do temperatury 25°C. Analiza CLHP (wysokosprawna chromatografia cieczowa) metodą pary jonowej pozwoliła na przeprowadzenie przekształcenia w pochodną o wzorze (I), w którym n równa się 0, R1 i R6 oznaczają grupę SO3Na i M oznacza atom sodu lub potasu. W tym wypadku oznaczenie CLHP pokazało, że przekształcenie wykonano w 100%. Wydajność obliczona przez wzorcowanie zewnętrzne wyniosła 75,6%.
P r z y k ł a d 7
Do reaktora utrzymywanego w temperaturze 66°C, wprowadzono 8,3 ml roztworu wodorotlenku cezu o 0,0063 mola/litr. Zmierzono wtedy pH roztworu i przyjęto jako wartość docelową (pH - 10,75). Przy mieszaniu dodano do niego jednorazowo 50 mg oligosacharydu o wzorze (II), w którym n równa się 0, R1 i R6 oznaczają grupę SO3Na i M oznacza atom sodu. Wtedy pH wyregulowano i utrzymywano pH 10,75, dodając w sposób ciągły roztwór wodorotlenku cezu o 0,476 mola/litr. Po 20 godzinach przerwano dodawanie wodorotlenku cezu i mieszaninę reakcyjną ochłodzono do temperatury 25°C. Analiza CLHP (wysokosprawna chromatografia cieczowa) metodą pary jonowej pozwoliła na śledzenie przekształcenia na pochodną o wzorze (I), w którym n równa się 0, R1 i R6 oznaczają grupę SO3Na i M oznacza atom sodu lub cezu. W tym wypadku oznaczenie CLHP pokazało, że przekształcenie wykonano w 90,3%. Wydajność obliczona przez wzorcowanie zewnętrzne wyniosła 73%.
P r z y k ł a d 8
Do reaktora utrzymywanego w temperaturze 66°C wprowadzono 8,3 ml roztworu wodorotlenku tetrabutyloamoniowego o 0,0063 mola/litr. Zmierzono wtedy pH roztworu i przyjęto jako wartość docelową (pH = 10,95). Przy mieszaniu dodano do niego jednorazowo 50 mg oligosacharydu o wzorze (II), w którym n równa się 0, R1 i R6 oznaczają grupę SO3Na i M oznacza atom sodu. Wtedy pH wyregulowano i utrzymywano pH 10,95, dodając w sposób ciągły roztwór wodorotlenku tetrabutylooamoniowego o 0,521 mola/litr. Po 16 godzinach przerwano dodawanie wodorotlenku cezu i mieszaninę reakcyjną ochłodzono do temperatury 25°C. Analiza CLHP (wysokosprawna chromatografia cieczowa) metodą pary jonowej pozwoliła na śledzenie przekształcenia na pochodną o wzorze (I), w którym n równa się 0, R1 i R6 oznaczają grupę SO3Na i M oznacza atom sodu lub grupę tetrabutylamoniową. W tym wypadku oznaczenie CLHP pokazało, że przekształcenie wykonano w 96,7%. Wydajność obliczona przez wzorcowanie zewnętrzne wyniosła 65%.
Leki według wynalazku zawierają jako substancję aktywną co najmniej jeden oligosacharyd o wzorze (I) lub mieszaninę oligosacharydów o wzorze (I) w postaci kompozycji, w której jest on połączony z każdym innym produktem zgodnym farmaceutycznie, który może być obojętny lub aktywny fizjologicznie. Leki według wynalazku można stosować dożylnie, podskórnie, doustnie, doodbytniczo, miejscowo lub przez wziewanie (inhalacja).
PL 204 623 B1
Kompozycje sterylne do podawania dożylnego lub podskórnego są generalnie roztworami wodnymi. Kompozycje te mogą też zawierać adiuwanty, w szczególności środki zwilżające, izotonizujące, emulgujące, rozpraszające i stabilizatory. Sterylizację można wykonać kilkoma sposobami np. przez filtrację odkażającą, włączając do kompozycji środki sterylizujące, przez napromieniowanie. Można je też wytworzyć w postaci stałych sterylnych kompozycji, które można rozpuścić w momencie użycia w sterylnej wodzie lub każdym innym sterylnym środowisku do wstrzyknięć.
Jako kompozycje stałe do podawania doustnego można stosować tabletki, pigułki, proszki (kapsułki żelatynowe, opłatki) lub granulki. W tych kompozycjach substancja aktywna zostaje zmieszana z jednym lub kilkoma obojętnymi rozcieńczalnikami, takimi jak skrobia, celuloza, sacharoza, laktoza lub krzemionka w strumieniu argonu. Kompozycje te mogą też zawierać substancje inne niż rozcieńczalniki np. jeden lub kilka środków poślizgowych, jak stearynian magnezu lub talk, środek sprzyjający doustnej absorpcji, barwnik, powłokę (drażetki) lub lakier.
Jako kompozycje ciekłe do podawania doustnego można stosować roztwory, zawiesiny, emulsje, syropy i eliksiry dopuszczalne farmaceutycznie, zawierające obojętne rozcieńczalniki, jak woda, etanol, glicerol, oleje roślinne lub olej parafinowy. Kompozycje te mogą zawierać substancje inne niż rozcieńczalniki np. produkty zwilżające, środki słodzące, zagęstniki, środki zapachowe lub stabilizatory.
Kompozycje do podawania doodbytniczego są czopkami lub kapsułkami doodbytniczymi, które zawierają poza substancją czynną zaróbki, jak masło kakaowe, glicerydy półsyntetyczne lub glikole polietylenowe.
Kompozycje do podawania miejscowego mogą być np. kremami, lotionami, płynami do oczu, płynami do ust, kroplami do nosa lub aerozolami.
Dawki zależą od poszukiwanego efektu, okresu leczenia i stosowanej drogi podawania; wynoszą one generalnie 0,5-10 mg na kg dziennie drogą podskórną czyli 3-60 mg dziennie dla dorosłego o ciężarze 60 kg.
Ogólnie biorąc lekarz ustali odpowiednie dawkowanie zależnie od wieku, ciężaru i wszystkich innych czynników właściwych dla leczonego pacjenta.
Wynalazek dotyczy również metody zapobiegania lub leczenia chorób związanych z procesem zapalnym, wynikającym z produkcji substancji cytotoksycznnych, takich jak monotlenek azotu (NO). Oligosacharydów o wzorze (I) można więc używać do zapobiegania i/lub leczenia chorób neurodegeneratywnych, w których stany zapalne mózgu odgrywają niszczącą rolę, mogącą doprowadzić do śmierci, wśród których można wymienić niedokrwienie ośrodkowego układu nerwowego, niedokrwienie mózgu, niedokrwienie siatkówki i ślimaka, niedokrwienie serca (zawał mięśnia sercowego), niedokrwienie obwodowe, urazy ośrodkowego układu nerwowego i zwłaszcza urazy czaszki, kręgów, czaszkowo-kręgowe, urazy siatkówki i ślimaka, stwardnienie rozsiane, bóle neuropatyczne i neuropatie obwodowe, choroby motoneuronowe, a w nich stwardnienie boczne z zanikiem mięśni, neuro-AIDS, chorobę Alzheimera, chorobę Parkinsona i pląsawicę Huntingtona oraz niektóre postacie zapalenia kości i stawów szczególnie z umiejscowieniem w stawach.
Claims (15)
1. Oligosacharydy o wzorze:
COOM
ÓR or3
NHR2
COOM
OR5
NHRg (i)
PL 204 623 B1 w którym n oznacza liczbę całkowitą w zakresie od 0 do 6, R1, R2, R3 i R6, oznaczają grupę SO3M, R4 oznacza atom wodoru i R5 oznacza atom wodoru lub grupę SO3M i M oznacza atom sodu, wapnia, magnezu lub potasu, mieszanina tych oligosacharydów i ich diastereoizomerów.
2. Oligosacharydy o wzorze (I) według zastrz. 1, w których n jest równe 0 i M oznacza atom sodu, i mieszanina ich diastereoizomerów.
3. Oligosacharydy o wzorze (I) według zastrz. 1, w których n oznacza 1, R5 oznacza grupę SO3M i M oznacza atom sodu, i mieszanina ich diastereoizomerów.
4. Oligosacharydy o wzorze (I) według zastrz. 1, w których n oznacza 2, R5 oznacza grupę SO3M i M oznacza atom sodu, i mieszanina ich diastereoizomerów.
5. Oligosacharydy o wzorze (I) według zastrz. 1, w których n oznacza 2, i M oznacza atom sodu, i mieszanina ich diastereoizomerów.
6. Sposób wytwarzania oligosacharydów o wzorze (I) według zastrz. 1, znamienny tym, że działa się wodorotlenkiem metalu alkalicznego lub czwartorzędowym wodorotlenkiem amoniowym na oligosacharydy o wzorze:
w którym n oznacza liczbę całkowitą 0-6, R1, R2, R3, R6 i oznaczają grupę SO3M, R4 oznacza atom wodoru i R5 oznacza atom wodoru lub grupę SO3M i M oznacza atom sodu, wapnia, magnezu lub potasu, lub ich mieszaninę i wyodrębnia się oligosacharydy albo ich mieszaniny.
7. Sposób według zastrz. 6, znamienny tym, że prowadzi się reakcję w środowisku wodnym w temperaturze 40-80°C przy pH 10-13.
8. Sposób według jednego z zastrz. 6 albo 7, znamienny tym, że stosuje się 1-5% roztwór wodny wodorotlenku metalu alkalicznego lub czwartorzędowego wodorotlenku amoniowego.
9. Sposób według jednego z zastrz. 6-8, znamienny tym, że prowadzi się reakcję w temperaturze 60-70°C.
10. Sposób według jednego z zastrz. 6-9, znamienny tym, że stosuje się pH reakcji 11-12,5.
11. Sposób według zastrz. 6-10, znamienny tym, że stosuje się wodorotlenek metalu alkalicznego lub czwartorzędowy wodorotlenek amoniowy, będący wodorotlenkiem sodu, wodorotlenkiem potasu, wodorotlenkiem litu, wodorotlenkiem cezu lub wodorotlenkiem tetrabutyloamoniowym.
12. Kompozycja farmaceutyczna, znamienna tym, że zawiera jako substancję aktywną co najmniej jeden oligosacharyd określony w zastrz. 1.
13. Kompozycja farmaceutyczna, znamienna tym, że zawiera jako substancję aktywną co najmniej jeden oligosacharyd określony w zastrz. 1-5.
14. Zastosowanie oligosacharydów o wzorze (I) określonym w zaostrz. 1-5 do wytwarzania leku przydatnego do zapobiegania lub leczenia chorób związanych z procesem zapalnym, wynikającym z produkcji tlenku azotu (NO).
15. Zastosowanie oligosacharydów o wzorze (I) według zastrz. 14 do wytwarzania leków przydatnych do zapobiegania lub leczenia niedokrwienia mózgu, niedokrwienia serca lub naczyń obwodowych, zapalenia kości i stawów, urazów ośrodkowego układu nerwowego, urazów czaszki, kręgów, czaszkowo-kręgowych, stwardnienia rozsianego, bólów neuropatycznych i neuropatii obwodowych, chorób motoneuronowych, stwardnienia bocznego z zanikiem mięśni, neuro-AIDS, choroby Alzheimera, choroby Parkinsona i pląsawicy Huntingtona.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FR9913182A FR2800074B1 (fr) | 1999-10-22 | 1999-10-22 | Nouveaux oligosaccharides, leur preparation et les compositions pharmaceutiques les contenant |
| PCT/FR2000/002897 WO2001029055A2 (fr) | 1999-10-22 | 2000-10-18 | Nouveaux oligosaccharides, leur preparation et les compositions pharmaceutiques les contenant |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL363052A1 PL363052A1 (pl) | 2004-11-15 |
| PL204623B1 true PL204623B1 (pl) | 2010-01-29 |
Family
ID=9551218
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL363052A PL204623B1 (pl) | 1999-10-22 | 2000-10-18 | Oligosacharydy, sposób ich wytwarzania, kompozycje farmaceutyczne zawierające je oraz ich zastosowanie |
Country Status (31)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP1226148B1 (pl) |
| JP (1) | JP4733329B2 (pl) |
| KR (2) | KR100872215B1 (pl) |
| CN (1) | CN1241932C (pl) |
| AT (1) | ATE534656T1 (pl) |
| AU (1) | AU781414B2 (pl) |
| BR (1) | BR0014939A (pl) |
| CA (1) | CA2388369C (pl) |
| CY (1) | CY1112274T1 (pl) |
| CZ (1) | CZ303255B6 (pl) |
| DK (1) | DK1226148T3 (pl) |
| EA (1) | EA004046B1 (pl) |
| EE (1) | EE05091B1 (pl) |
| ES (1) | ES2376409T3 (pl) |
| FR (1) | FR2800074B1 (pl) |
| HK (1) | HK1050535A1 (pl) |
| HR (1) | HRP20020330A2 (pl) |
| HU (1) | HU229385B1 (pl) |
| IL (2) | IL149154A0 (pl) |
| ME (1) | MEP9309A (pl) |
| MX (1) | MXPA02003945A (pl) |
| NO (1) | NO323409B1 (pl) |
| NZ (1) | NZ518539A (pl) |
| PL (1) | PL204623B1 (pl) |
| PT (1) | PT1226148E (pl) |
| RS (1) | RS50829B (pl) |
| SK (1) | SK287459B6 (pl) |
| TR (1) | TR200201102T2 (pl) |
| UA (1) | UA72545C2 (pl) |
| WO (1) | WO2001029055A2 (pl) |
| ZA (1) | ZA200203102B (pl) |
Families Citing this family (26)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP4676048B2 (ja) * | 2000-07-10 | 2011-04-27 | 生化学工業株式会社 | 脱髄性疾患処置剤 |
| ATE290874T1 (de) * | 2000-12-16 | 2005-04-15 | Aventis Pharma Gmbh | Verwendung von niedermolekularen heparin zur behandlung von osteoarthrose |
| DE10121003A1 (de) | 2001-04-28 | 2002-12-19 | Aventis Pharma Gmbh | Anthranilsäureamide, Verfahren zur Herstellung, ihrer Verwendung als Medikament sowie sie enthaltende pharmazeutische Zubereitungen |
| EP2284535A1 (en) | 2002-03-11 | 2011-02-16 | Momenta Pharmaceuticals, Inc. | Low molecular weight heparins |
| FR2844808B1 (fr) * | 2002-09-23 | 2005-02-25 | Aventis Pharma Sa | Methode de determination de groupements specifiques constituant les heparines ou les heparines de bas poids moleculaire |
| US20040171819A1 (en) | 2002-10-10 | 2004-09-02 | Aventis Pharma S.A. | Mixtures of polysaccharides derived from heparin, their preparation and pharmaceutical compositions containing them |
| US7511026B2 (en) * | 2003-03-25 | 2009-03-31 | Seikagaku Corporation | Therapeutic agent for nerve damage |
| FR2857971B1 (fr) * | 2003-07-24 | 2005-08-26 | Aventis Pharma Sa | Melanges d'oligosaccharides derives d'heparine, leur preparation et les compositions pharmaceutiques les contenant |
| US7956046B2 (en) * | 2003-07-24 | 2011-06-07 | Aventis Pharma S.A. | Oligosaccharide mixtures derived from heparin, preparation thereof and pharmaceutical compositions containing them |
| US20050186679A1 (en) * | 2004-02-24 | 2005-08-25 | Christian Viskov | Method for determining specific groups constituting heparins or low molecular weight heparins |
| EP1580197A1 (en) * | 2004-03-24 | 2005-09-28 | Aventis Pharma S.A. | Method for quantitatively determining specific groups constituting heparins or low molecular wieght heparins using HPLC |
| EP1582531A1 (en) | 2004-03-24 | 2005-10-05 | Aventis Pharma S.A. | Process for oxidizing unfractionated heparins and detecting presence or absence of glycoserine in heparin and heparin products |
| DE102005017799A1 (de) * | 2005-04-18 | 2006-10-19 | Abbott Gmbh & Co. Kg | Verwendung von Heparin und Heparinderivaten zur Modulation des Neuritenwachstum-kontrollierenden Nogo-Rezeptors |
| US8101733B1 (en) | 2006-06-27 | 2012-01-24 | Momenta Pharmaceuticals, Inc. | Methods of evaluating mixtures of polysaccharides |
| US7790466B1 (en) | 2007-01-26 | 2010-09-07 | Momenta Pharmaceuticals, Inc. | Evaluating mixtures of low molecular weight heparins by chain profiles or chain mapping |
| US7968082B1 (en) | 2007-01-26 | 2011-06-28 | Momenta Pharmaceuticals, Inc. | Evaluating mixtures of low molecular weight heparins by NMR |
| US9139876B1 (en) | 2007-05-03 | 2015-09-22 | Momenta Pharmacueticals, Inc. | Method of analyzing a preparation of a low molecular weight heparin |
| EP2256138A1 (en) * | 2009-05-05 | 2010-12-01 | Sanofi-Aventis | Novel acylated 1,6-anhhydro decasaccharide and its use as antithrombotic agent |
| FR2949114B1 (fr) * | 2009-08-14 | 2011-08-26 | Sanofi Aventis | OCTASACCHARIDES N-ACYLES ACTIVATEURS DES RECEPTEURS DES FGFs, LEUR PREPARATION ET LEUR APPLICATION EN THERAPEUTIQUE |
| FR2949115B1 (fr) * | 2009-08-14 | 2012-11-02 | Sanofi Aventis | OLIGOSACCHARIDES N-SULFATES ACTIVATEURS DES RECEPTEURS DES FGFs, LEUR PREPARATION ET LEUR APPLICATION EN THERAPEUTIQUE |
| CN102791742B (zh) | 2010-01-19 | 2014-12-24 | 动量制药公司 | 评价肝素制剂 |
| WO2012115952A1 (en) | 2011-02-21 | 2012-08-30 | Momenta Pharmaceuticals, Inc. | Evaluating heparin preparations |
| CN102864191A (zh) * | 2011-12-16 | 2013-01-09 | 深圳市海普瑞药业股份有限公司 | 肝素双糖混合物及其制备方法和应用 |
| CN104910217B (zh) * | 2015-06-19 | 2018-04-17 | 天津红日药业股份有限公司 | 用于磺达肝癸钠质量控制的参比化合物 |
| CZ308106B6 (cs) * | 2016-06-27 | 2020-01-08 | Contipro A.S. | Nenasycené deriváty polysacharidů, způsob jejich přípravy a jejich použití |
| CN110092848A (zh) * | 2019-05-14 | 2019-08-06 | 山东辰龙药业有限公司 | 一种贝米肝素钠的制备方法 |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2519987A1 (fr) * | 1982-01-15 | 1983-07-22 | Choay Sa | Trisaccharides a structures d-glucosamine, acide d-glucuronique, d-glucosamine et leur preparation |
| AU563351C (en) * | 1982-01-15 | 2003-06-19 | Glaxo Group Limited | Synthesis of oligosaccharides |
| FR2764511B1 (fr) * | 1997-06-13 | 2000-09-08 | Sanofi Sa | Compositions pour le traitement et la prevention de la thrombose arterielle et utilisation d'un inhibiteur du facteur xa seul et/ou en combinaison avec un antiagregant plaquettaire |
| JP4166851B2 (ja) * | 1997-09-29 | 2008-10-15 | 生化学工業株式会社 | 新規虚血・再灌流障害抑制剤 |
-
1999
- 1999-10-22 FR FR9913182A patent/FR2800074B1/fr not_active Expired - Fee Related
-
2000
- 2000-10-18 EA EA200200479A patent/EA004046B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2000-10-18 ME MEP-93/09A patent/MEP9309A/xx unknown
- 2000-10-18 TR TR2002/01102T patent/TR200201102T2/xx unknown
- 2000-10-18 CN CNB008145318A patent/CN1241932C/zh not_active Expired - Fee Related
- 2000-10-18 JP JP2001531853A patent/JP4733329B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2000-10-18 PL PL363052A patent/PL204623B1/pl not_active IP Right Cessation
- 2000-10-18 KR KR1020077018523A patent/KR100872215B1/ko not_active IP Right Cessation
- 2000-10-18 CZ CZ20021385A patent/CZ303255B6/cs not_active IP Right Cessation
- 2000-10-18 DK DK00969634.5T patent/DK1226148T3/da active
- 2000-10-18 AU AU79302/00A patent/AU781414B2/en not_active Ceased
- 2000-10-18 CA CA2388369A patent/CA2388369C/fr not_active Expired - Fee Related
- 2000-10-18 EP EP00969634A patent/EP1226148B1/fr not_active Expired - Lifetime
- 2000-10-18 IL IL14915400A patent/IL149154A0/xx active IP Right Grant
- 2000-10-18 KR KR1020027005061A patent/KR100778166B1/ko not_active IP Right Cessation
- 2000-10-18 PT PT00969634T patent/PT1226148E/pt unknown
- 2000-10-18 EE EEP200200208A patent/EE05091B1/xx not_active IP Right Cessation
- 2000-10-18 NZ NZ518539A patent/NZ518539A/en not_active IP Right Cessation
- 2000-10-18 AT AT00969634T patent/ATE534656T1/de active
- 2000-10-18 UA UA2002043067A patent/UA72545C2/uk unknown
- 2000-10-18 ES ES00969634T patent/ES2376409T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2000-10-18 MX MXPA02003945A patent/MXPA02003945A/es active IP Right Grant
- 2000-10-18 WO PCT/FR2000/002897 patent/WO2001029055A2/fr active IP Right Grant
- 2000-10-18 HU HU0203821A patent/HU229385B1/hu unknown
- 2000-10-18 SK SK527-2002A patent/SK287459B6/sk not_active IP Right Cessation
- 2000-10-18 RS YUP-298/02A patent/RS50829B/sr unknown
- 2000-10-18 BR BR0014939-0A patent/BR0014939A/pt active Pending
-
2002
- 2002-04-15 HR HR20020330A patent/HRP20020330A2/xx not_active IP Right Cessation
- 2002-04-15 IL IL149154A patent/IL149154A/en not_active IP Right Cessation
- 2002-04-18 ZA ZA200203102A patent/ZA200203102B/xx unknown
- 2002-04-19 NO NO20021859A patent/NO323409B1/no not_active IP Right Cessation
-
2003
- 2003-04-16 HK HK03102754A patent/HK1050535A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2012
- 2012-02-01 CY CY20121100113T patent/CY1112274T1/el unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| PL204623B1 (pl) | Oligosacharydy, sposób ich wytwarzania, kompozycje farmaceutyczne zawierające je oraz ich zastosowanie | |
| US6617316B1 (en) | Oligosaccharides, their preparation and pharmaceutical compositions containing them | |
| DE69814140T2 (de) | Kohlenhydrat-derivate | |
| US6608042B2 (en) | Pharmaceutical compositions containing oligosaccharides, the novel oligosaccharides and preparation thereof | |
| AU782713B2 (en) | Pharmaceutical compositions containing oligosaccharides and preparation thereof | |
| JPH1045805A (ja) | 炭水化物誘導体 | |
| EP0485748B1 (en) | Salts of glycosaminoglycans with esters of aminoacids, preparation thereof and pharmaceutical formulations containing them | |
| JPH08217785A (ja) | 硫酸化フルオロアルキルラミナリペンタオシド及びそれを有効成分とする抗ウイルス剤 | |
| KR20050024339A (ko) | 엔-아실-(에피)케이5-아민-오-황산염-유도체 생산방법 및그 생성물 | |
| KR20050024349A (ko) | 매우 높은 황산화도를 가진 케이5 폴리사카라이드의에피머화된 유도체 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| LAPS | Decisions on the lapse of the protection rights |
Effective date: 20141018 |