KR20020063881A

KR20020063881A - 신규 올리고사카라이드, 이의 제조방법 및 이를 함유하는약학 조성물

Info

Publication number: KR20020063881A
Application number: KR1020027005061A
Authority: KR
Inventors: 무리에피에르; 페렝엘리사벳; 비스코프크리스티앙; 슈투쯔만장-마리; 발플로랑스
Original assignee: 아방티 파르마 소시에테 아노님
Priority date: 1999-10-22
Filing date: 2000-10-18
Publication date: 2002-08-05
Also published as: IL149154A0; HRP20020330B1; FR2800074B1; TR200201102T2; NO323409B1; WO2001029055A3; WO2001029055A2; HK1050535A1; EA004046B1; EE05091B1; CN1241932C; NO20021859D0; CN1379781A; HUP0203821A2; MXPA02003945A; NO20021859L; YU29802A; JP4733329B2; AU781414B2; RS50829B

Abstract

본 발명은 화학식 (I)의 올리고사카라이드, 이들의 혼합물, 이들의 부분입체이성체, 이들의 제조방법 및 이들을 함유하는 약학 조성물에 관한 것이다.

화학식 I

Description

신규 올리고사카라이드, 이의 제조방법 및 이를 함유하는 약학 조성물{NOVEL OLIGOSACCHARIDES, PREPARATION METHOD AND PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS CONTAINING SAME}

환원 말단에 1,6-언하이드로 구조를 함유하는 디사카라이드 설페이트가 문헌[참조: H.P. Wessel, J. Carbohydrate Chemistry, 11(8), 1039-1052 (1992)]에 의해 기술되었으며; 이들 산물에 대해 어떠한 약리학적 활성도 언급되어 있지 않다.

1,6-언하이드로 단위를 포함하는 트리사카라이드 설페이트도 특허 EP 84999에 및 문헌[참조: Y. Ichikawa et al., Carbohyd. Res, 141, 273-282 (1985)]에 의해 고급 올리고사카라이드 제조를 위한 중간체로서 기술되었다. 이들 트리사카라이드는 낮은 항-Xa 활성을 지니고 있다.

본 발명은 화학식 (I)의 올리고사카라이드 또는 이의 혼합물, 이의 부분입체이성체, 이들의 제조방법 및 이들을 함유하는 약학 조성물에 관한 것이다.

화학식 (I)에서, n은 0 내지 25의 정수이고, R₁, R₃, R₄및 R₅는 동일하거나 상이할 수 있고, 수소원자 또는 라디칼 SO₃M을 나타내며, R₂및 R₆는 동일하거나 상이할 수 있고, 수소원자 또는 라디칼 SO₃M 또는 COCH₃를 나타내며 M은 나트륨, 칼슘, 마그네슘 또는 칼륨이다.

따라서, 이들 올리고사카라이드는 짝수 개의 사카라이드를 포함한다.

화학식 (I)에서, R₄는 바람직하게는 수소원자이다.

바람직하게는, n은 0 내지 10, 특히 0 내지 6, 좀더 구체적으로는 1 내지 6의 정수이다.

화학식 (I)의 올리고사카라이드는 알칼리 금속 또는 4급 암모늄 하이드록사이드를 화학식 (II)의 올리고사카라이드에 작용시켜 제조할 수 있다:

상기식에서, n은 0 내지 25의 정수이고, R₁, R₃, R₄및 R₅는 동일하거나 상이할 수 있고, 수소원자 또는 라디칼 SO₃M을 나타내며, R₂및 R₆는 동일하거나 상이할 수 있고 수소원자 또는 라디칼 SO₃M 또는 COCH₃를 나타내며, M은 나트륨, 칼슘, 마그네슘 또는 칼륨, 또는 이들의 혼합물이다.

이 반응은 수성 매질 중, 40 내지 80℃의 온도, 10 내지 13의 pH에서 수행된다.

사용될 수 있는 알칼리 금속 하이드록사이드로는 나트륨 하이드록사이드, 칼륨 하이드록사이드, 리튬 하이드록사이드 및 세슘 하이드록사이드를 들 수 있다.

사용될 수 있는 4급 암모늄 하이드록사이드로는 테트라부틸암모늄 하이드록사이드를 들 수 있다.

알칼리 금속 또는 4급 암모늄 하이드록사이드의 양은 반응매질의 pH가 반응 전반을 통해 안정한 채로 남도록 하기에 충분하여야 한다. 따라서, 반응 전반에 걸쳐서 알칼리 금속 또는 4급 암모늄 하이드록사이드를 연속적으로 첨가하는 것이 필요하다.

바람직하게는, 알칼리 금속 또는 4급 암모늄 하이드록사이드는 1 내지 5% 수용액 형태이다.

바람직하게는, 반응은 60 내지 70℃의 온도에서 수행된다.

유리하게는, 반응 pH는 11 내지 12.5이다.

반응은 예를 들면, Amberlite IR120^R수지(Fluka)와 같은 산성 수지의 첨가로 반응매질을 산성화시킴으로써 종결된다.

화학식 (I)의 올리고사카라이드는 화학식 (II)의 중간체 올리고사카라이드의 분리에 대해 후술되는 프로토콜에 따라 브랜드명 Ultrogel ACA202^R(Biosepra)로 판매되고 있는 것과 같은, 폴리아크릴아미드-아가로스 타입의 겔 투과 크로마토그래피로 임의로 정제될 수 있다. n이 0 또는 1인 화학식 (I)의 올리고사카라이드도 물-에탄올 혼합물을 용출제로 하여 알루미나 칼럼상에서 임의로 정제될 수 있다.

화학식 (II)의 중간체 올리고사카라이드 및 이의 혼합물은 헤파린의 효소 해중합 또는 헤파린의 벤질 에스테르 또는 반합성 헤파린의 벤질 에스테르의 염기성 해중합에 의해 수득된 올리고사카라이드 (III)의 혼합물의 겔상 크로마토그래피 분리에 의해 수득될 수 있다.

상기 크로마토그래피는 브랜드명 Ultrogel ACA202^R(Biosepra)로 판매되고 있는 겔과 같은 폴리아크릴아미드-아가로스 타입의 겔로 충진한 칼럼상에서 수행된다. 바람직하게는, 폴리아크릴아미드 아가로스 겔 칼럼의 어레이가 사용된다. 사용되는 칼럼의 수는 부피, 겔 및 분리할 올리고사카라이드의 함수로서 변용된다. 혼합물은 포스페이트 완충액 및 나트륨 클로라이드를 함유하는 용액으로 용출시킨다. 바람직하게는, 포스페이트 완충액은 나트륨 클로라이드 0.1 mol/1을 함유하는 NaH₂PO₄/Na₂HPO₄(pH 7) 0.02 mol/l을 함유하는 용액이다. 다양한 분획의 검출이 UV 분광법(254 nm) 및 이온 분광법(IBF)에 의해 수행된다. 이렇게 수득된 분획은 이어서 예를 들면, 당업자에 공지된 방법에 따라, 특히 문헌[참조: K.G. Rice and R.J. Lindhardt, Carbohydrate Research 190, 219-233 (1989), A. Larnkjaer, S.H.Hansen and P.B. Ostergaard, Carbohydrate Research, 266, 37-52 (1995)]에 의해 및 특허 WO 90/01501 (실시예 2)에 기술된 방법에 따라 SAX(강 음이온 교환) 크로마토그래피에 의해 임의로 정제될 수 있다. 이어서, 분획을 동결건조시킨 후, 이들을 세파덱스 G10^R겔(Pharmacia Biochemicals)의 칼럼과 같은 겔로 충진한 칼럼상에서 탈염화시킨다.

정제과정이 SAX 크로마토그래피에 의해 수행되지 않는 경우, 당업자에 공지된 방법에 따라, 특히 특허 FR 2 548 672에 기술된 방법에 따라 단순 또는 분별 침전에 의해 동결건조물을 임의로 정제할 수 있다. 일반적으로, 과정은 하기의 절차에 따라 수행된다:

정제될 동결건조 분획을 증류수 약 10 부피 중 25℃에서 용해시킨다. 메탄올 또는 에탄올 첨가시, 목적하는 올리고사카라이드가 침전되며, 동시에 HPLC 크로마토그래피(고성능 액체 크로마토그래피)로 농축을 함께 모니터한다. 메탄올 또는 에탄올의 첨가는 올리고사카라이드의 목적하는 수율과 순도의 함수로서 결정된다. 이와 마찬가지로, 이러한 작업은 동결건조물의 초기 용액을 출발물질로 하여 수개의 연속 단계로 수행된다. 이를 위해, 더 많은 불용화제(메탄올 또는 에탄올)가 나누어 첨가되며 각각의 첨가 후에 수득된 침전물이 분리된다. 이렇게 제조된 침전물을 HPLC 크로마토그래피로 분석한다. 목적하는 수율과 순도에 따라, 침전물의 적당한 분획이 병합된다.

n이 0, 1 또는 2인 화학식 (II)의 중간체의 경우에, 효소 해중합에 의해 수득된 혼합물 (III)을 출발물질로 하는 것이 바람직하다.

이러한 해중합 과정은 헤파리나제 I(EC 4.2.2.7)를 사용하여, pH 7 포스페이트 완충액 중에서, 나트륨 클로라이드와 BSA(소 혈청 알부민)의 존재하에, 10 내지 18℃의 온도, 바람직하게는 15℃에서, 8 내지 10일간, 바람직하게는 9일간 수행된다. 해중합은 예를 들면, 반응매질을 100℃에서 2분간 가열함으로써 중단되고, 혼합물은 동결건조에 의해 회수된다. 헤파린 25 g당 7 IU의 헤파리나제 I을 사용하는 것이 바람직하다. 포스페이트 완충액은 일반적으로 나트륨 클로라이드 0.1 mol/l의 존재하에 NaH₂PO₄/Na₂HPO₄(pH 7) 0.05 mol/l을 포함한다. BSA 농도는 일반적으로 2%이다.

n이 0, 1, 2, 3 또는 4인 화학식 (II)의 중간체의 경우에, 헤파린의 벤질 에스테르를 해중합시켜 수득한 혼합물 (III)을 출발물질로 하는 것이 바람직하다.

헤파린의 벤질 에스테르는 특허 US 5 389 618, EP 40 144 및 FR 2 548 672에 기재된 방법에 따라 제조될 수 있다. 에스테르화도는 바람직하게는 50 내지 100%가 될 것이다. 바람직하게는, 70 내지 90%가 될 것이다.

해중합은 수성 매질에서, 알칼리 금속 하이드록사이드(예를 들면, 리튬 하이드록사이드, 나트륨 하이드록사이드, 칼륨 하이드록사이드 또는 세슘 하이드록사이드) 또는 4급 암모늄 하이드록사이드(예를 들면, 테트라부틸암모늄 하이드록사이드)를 사용하여, 바람직하게는 0.1 내지 0.2 mol/l 몰농도에서, 40 내지 80℃의 온도에서, 5 내지 120분간 수행된다. 하나의 바람직한 양식으로서, 과정은 5 내지 15분간, 60 내지 70℃의 온도에서, 0.15 mol/l 나트륨 하이드록사이드 용액으로 수행된다. 해중합 반응은 아세트산과 같은 산의 첨가에 의한 중화로 중단된다. 나트륨 아세테이트 1 부피당 10 중량%를 첨가한 후, 메탄올을 바람직하게는 반응매질 1 부피당 2 부피로 첨가하여 올리고사카라이드 혼합물을 침전시킨 다음 여과시킨다.

본 발명의 일 바람직한 양태에 따라, 화학적 해중합 후 수득한 수용액 형태의 올리고사카라이드 혼합물을 적당한 공칭 컷오프 역치를 갖는 막(재생 셀룰로스로 만든 Pellicon 타입, Millipore 판매)을 통해 한외여과하여 농축시킨다; 막의 유형은 회수될 농축 올리고사카라이드 유형의 함수로서 변용된다. n이 0인 올리고사카라이드 (II)의 경우에는 공칭 컷오프 역치가 1 kDa인 막이 사용될 것이고, n이 1인 올리고사카라이드 (II)의 경우에는 1 kDa 또는 3 kDa 막이 사용될 것이며, n이 2인 올리고사카라이드 (II)의 경우에는 3 kDa 막이 사용될 것이며, n이 3 또는 4인 올리고사카라이드 (II)의 경우에는 5 kDa 막이 사용될 것이다. 이러한 작업 동안, 투과액을 회수하고 잔류물을 버린다. 따라서, 농축 산물의 분획은 초기 올리고사카라이드 혼합물의 50 내지 10%를 나타낼 수 있는 반면에 동시에 목적하는 올리고사카라이드의 적어도 80%를 보존한다.

n이 0 내지 25인 화학식 (II)의 중간체의 경우에, 벤질 에스테르 또는 반합성 폴리사카라이드 설페이트를 해중합시켜 수득한 혼합물 (III)을 출발물질로 하는 것이 바람직하다. 반합성 폴리사카라이드 설페이트의 벤질 에스테르는 폴리사카라이드 K5로부터 및 특허 WO 94/29352 및 WO 96/14425에 기술된 방법에 따라 수득한 반합성 폴리사카라이드 설페이트로부터 제조된다. 에스테르화, 해중합 및 회수 조건은 헤파린의 벤질 에스테르에 대해 전술한 바와 동일하다.

모든 선행 과정에서, 초기 헤파린은 돼지, 양, 염소 또는 소 기원일 수 있으며 동물의 점막, 폐 또는 피혁으로부터 수득될 수 있다. 바람직하게는, 돼지 또는 양의 점막 또는 소의 폐 헤파린이 사용되며, 한층 더 바람직하게는 돼지 점막의 헤파린이 사용된다.

화학식 (I)의 올리고사카라이드는 소염 특성이 있으며 따라서 호중구나 대식구가 이동하여 조직에서 활성화될 때 특히 이들에 의해 유도 가능한 형태가 방출되는 일산화질소(NO)와 같은 세포독성 물질의 생성을 수반하는 염증 과정과 연관된 질환의 예방이나 치료에 사용될 수 있다. 호중구의 이동, 활성화 및 부착은 이러한 조직에 혈관을 형성하는 동맥의 폐색 또는 경련 뒤에 허혈성 조직 영역에서 발생한다. 이러한 허혈증은 뇌(뇌혈관 우발증후) 또는 심근(심근경색) 또는 하지(소위 말하는 말초 허혈증)에서 발생할 수 있다. 따라서, 화학식 (I)의 올리고사카라이드는 뇌의 염증이 사망에 이르게 할 수 있는 유해한 역할을 하는 신경퇴행성 질환의 예방 및/또는 치료에 사용될 수 있으며, 이러한 질환으로는 뇌 허혈증, 심장 허혈증(심근경색), 말초 허혈증, 중추신경계의 외상 및 특히 두개골, 척추 및 두개척주에서의 외상, 다발성 경화증, 신경병 통증 및 말초 신경병, 운동 뉴런 질환(근위축성 측삭 경화증, 뉴로-AIDS, 알츠하이머병, 파킨슨병 및 헌팅턴 무도병 포함) 및 특정 형태의 골관절염, 특히 관절 국재를 들 수 있다.

이들 산물의 소염활성은 문헌[참조: M. Yamashita et al., Eur. J. Pharmacol, 338, 2, 151-158 (1997) 또는 J.E. Shellito et al., Am. J. Respir.Cell Mol. Biol., 13, 1, 45-53 (1995)]에 기재된 프로토콜에 따라 이.콜라이로부터 수득된 리포폴리사카라이드(LPS)에 의해 유도된 NOx(나이트라이트 및 나이트레이트)의 생체내 생성 시험에서 증명된다.

올리고사카라이드 0.5 mg/kg를 CD1 마우스 수컷(Charles River, 25-35 g)에 T0에서 정맥내 거환을 통해 주사하고, 올리고사카라이드 1 또는 2 mg/kg을 T+15분에서 피하 주사한다. T+30분에서, 이.콜라이(Sigma L3129, 혈청형 0127:B8)로부터 리포폴리사카라이드(LPS) 100 mg/kg을 수득한다. 추가로 올리고사카라이드 1 또는 2 mg/kg을 T+3 시간에서 피하 주사한다. T+5 시간 30분에서, 혈액 샘플을 안구 천공에 의해 수집하고, 하기의 방식으로 나이트레이트 리덕타제를 사용하여 나이트레이트를 나이트라이트로 환원시킨 후 Griess 측색법에 의해 혈장내 NOx(나이트라이트 및 나이트레이트)의 농도를 측정한다: 혈장 샘플 12 ㎕를 탈이온수 88 ㎕와 혼합하고 암실에서 1시간 동안 실온에서 포스페이트 완충액 40 ㎕(0.31 M, pH 7.5), β-NADPH(환원된 니코틴아미드 아데닌 디뉴클레오타이드 포스페이트) 20 ㎕(0.86 mM), FDA(플라빈 아데닌 디뉴클레오타이드) 20 ㎕(0.11 mM) 및 나이트레이트 리덕타제 20 ㎕(2 U/ml)(Boehringer Mannheim)와 배양한다. ZnSO₄10 ㎕(1M)을 가하여 단백질을 침전시키고, 혼합 후 샘플을 20,000 x g에서 5분간 원심분리시킨다. 최종적으로, 상등액 50 ㎕를 10분간 실온에서 Griess 시약(탈이온수내 인산/0.1% 나프틸에틸렌디아민 혼합물중의 1% 설파닐아미드(v/v))과 배양한다. 광학 밀도는 540 nm에서 마이크로플레이트 분광광도계로 판독한다; 각각의 포인트는 2회 측정한다.KNO₃및 NaNO₂를 측색법을 위한 표준으로 사용한다.

당해 시험에서, 본 발명에 따른 올리고사카라이드는 NOx의 형성을 50% 이상까지 억제한다.

바람직한 화학식 (I)의 올리고사카라이드로는, 특히

- n이 0이고, R₁및 R₆가 SO₃Na 라디칼을 나타내며 M이 나트륨인 올리고사카라이드, 및 이의 부분입체이성체의 혼합물,

- n이 1이고, R₁, R₂, R₃, R₅및 R₆가 SO₃Na 라디칼을 나타내며, R₄가 수소원자를 나타내며 M이 나트륨인 올리고사카라이드, 및 이의 부분입체이성체의 혼합물,

- n이 2이고, R₁, R₂, R₃, R₅및 R₆가 SO₃Na 라디칼을 나타내며, R₄가 수소원자를 나타내며 M이 나트륨인 올리고사카라이드, 및 이의 부분입체이성체의 혼합물,

- n이 2이고, R₁, R₂, R₃및 R₆가 SO₃Na 라디칼을 나타내며, R₅가 수소원자 또는 SO₃Na 라디칼을 나타내며, R₄가 수소원자를 나타내며 M이 나트륨인 올리고사카라이드 및 이의 부분입체이성체의 혼합물(1,6-언하이드로 ΔIs-Is-IIs 유도체)을 들 수 있다.

하기 실시예는 화학식 (I)의 올리고사카라이드 및 중간체의 대표적인 제조방법이다.

이들 실시예에서, 약어의 의미는 다음과 같다:

ΔIs: (4-데옥시-2-O-설포-α-L-트레오-헥스-에노피라노실우론산)-(1→4)-2-데옥시-2-설포아미노-6-O-설포-α-D-글루코피라노스, 4나트륨 염, 또는 ΔUAp2S-(1→4)-α-D-GlcNp2S6S

Is: (2-설포-α-L-아이오도피라노실우론산)-(1→4)-2-데옥시-2-설포아미노-6-O-설포-α-D-글루코피라노스, 4나트륨 염, 또는 α-L-IdoAp2S-(1→4)-α-D-GlcNp2S6S

IIs: (α-L-아이오도피라노실우론산)-(1→4)-2-데옥시-2-설포아미노-6-O-설포-α-D-글루코피라노스, 3나트륨 염, 또는 α-IdoAp-(1→4)-α-D-GlcNp2S6S

IIIs:(2-설포-α-L-아이오도피라노실우론산)-(1→4)-2-데옥시-2-설포아미노-α-D-글루코피라노스, 3나트륨 염, 또는 α-L-IdoAp2S-(1→4)-α-D-GlcNp2S

IdoAp: 아이오도피라노실우론산

GlcNp: 2-데옥시-2-아미노글루코피라노스

ΔUap: 4-데옥시-α-L-트레오-헥스-에노피라노실우론산

S: 설페이트

화학식 (II)의 혼합물의 제조 실시예

실시예 A- 효소 해중합 및 분리에 의한, n이 0, 1 및 2인 화학식 (II)의 올리고사카라이드의 제조

헤파린 25 g을 NaH₂PO₄/Na₂HPO₄(pH = 7) 0.05 mol/l, 나트륨 클로라이드 0.2 mol/l 및 BSA(소 혈청 알부민) 2%를 함유하는 포스페이트 완충액 250 ml에 용해시킨다. 7 IU의 헤파리나제 I(EC 4.2.2.2.7)을 혼합물에 도입하고 수득 용액을 15℃로 냉각시킨 다음 이 온도에서 해중합 반응 내내 유지시킨다. 반응과정은 일정간격으로 분취량 샘플을 취함으로써 모니터하고, 이들을 겔 투과 크로마토그래피로 분석한다. 9일 후, 효소반응은 100℃에서 2분간 반응매질을 가열함으로써 중단된다. 이어서, 냉각 혼합물을 동결건조시킨다. 올리고사카라이드 혼합물 3을 수득한다.

이어서, 수득된 올리고사카라이드 혼합물 (III)을 하기 방법에 따라 크로마토그래피한다: 크로마토그래피는 Ultrogel ACA 202라는 이름으로 알려져 있는 폴리아크릴아미드-아가로스 겔로 충진한 칼럼상에서 수행되며 혼합물은 포스페이트 완충액(0.02 ml/l NaH₂PO₄/Na₂HPO₄) pH = 7 및 나트륨 클로라이드 0.1 mol/l을 함유하는 용액으로 용출시킨다. UV 분광법(254 nm) 및 이온 분광법(IBF)으로 검출을 수행한다. 산물을 SAX(강 음이온 교환) 크로마토그래피에 의해 또는 특허 FR 2 548 672에 기술된 방법에 따른 분별 침전에 의해 임의로 정제할 수 있다. 회수된 산물 분획을 동결건조시킨 다음 세파덱스 G10^R겔(Pharmacia Biochemicals)로 충진한 칼럼상에서 탈염화시킨다.

상기 방법에 의해, 디사카라이드 Is 3 g 및 전형적으로 ΔIs-Is-Is 유도체 55%, ΔIs-Is-IIs 유도체 35% 및 ΔIs-Is-IIIs 유도체를 함유하는 헥사사카라이드 혼합물 1100 mg이 수득된다. 후자의 혼합물은 당업자에 공지된 방법에 따라 정제하여 그로부터 성분 각각을 분리해낼 수 있거나, 화학식 (I)의 1,6-언하이드로 유도체로 전환시키기 위해 현 상태로 사용될 수 있다. 이러한 전환과정 동안, 헥사사카라이드 ΔIs-Is-IIIs는 화학식 (I) 화합물의 형성을 유도하지 못함에 주의.

실시예 B- 헤파린의 벤질 에스테르의 해중합 및 분리에 의한, n이 0, 1, 2, 3 또는 4인 화학식 (II)의 올리고사카라이드의 제조

a - 헤파린의 벤질 에스테르 제조

헤파린의 벤질 에스테르는 US 특허 5 389 618의 실시예 3에 따라 제조된다.

b - 해중합

헤파린의 벤질 에스테르 100 g을 탈이온수 1.9 리터에 용해시킨다. 혼합물을 교반하에 60℃로 되게 한다. 균질 용액을 수득한 후, 23% 나트륨 하이드록사이드 용액 약 35 ml를 단일 분량으로 도입한다. 10분간 반응시킨 후, 용액을 냉각시킨 다음 대략 2 N 아세트산 용액 80 ml로 중화시킨다. 나트륨 아세테이트 10 중량%/부피를 상기 용액에 가한다. 메탄올 약 2 부피를 첨가하여 올리고사카라이드 혼합물을 침전시킨다. 침전물을 여과 분리하고, 메탄올로 2회 세척한 다음 50℃에서 감압하에 건조시킨다. 건조 후, 73.8 g의 올리고사카라이드 혼합물 (II)이 수득된다.

c - n이 1인 올리고사카라이드로의 농축

상기에서 수득한 올리고사카라이드 혼합물 30 g을 물 약 35 부피에 용해시킨다. 이 용액을 3 kDa 막(Pellicon)을 통해 한외여과시킨다. 투과액 600 ml를 뽑아내고, 잔류물을 물 500 ml로 희석시킨다. 추가로 450 ml의 투과액을 뽑아낼 때까지 작업을 계속한다. 투과액의 두 분획을 병합한 다음 감압하에 농축건고시킨다. 황백색 고체 6.1 g을 수득한다. 겔 투과 크로마토그래피에 의한 고체의 분석은 고체가 n이 1인 화학식 (II)의 올리고사카라이드 약 30%를 함유함을 시사한다.

d - 한외여과한 올리고사카라이드 혼합물의 분별

농축 혼합물을 Ultrogel ACA 202라는 이름으로 알려져 있는 폴리아크릴아미드-아가로스 겔로 충진한 칼럼 상에서 분별시킨다(직경 10 cm, 길이 50 cm의 시리즈로 있는 4개의 칼럼이 사용됨). 한외여과 농축한 혼합물 5 g을 물 25 ml에 용해시킨 다음 0.2 mol/l 나트륨 클로라이드 용액으로 5 ml/분의 속도로 용출시킨다. 25 ml 분획을 칼럼의 바닥에서 수집한다. 산물을 UV 분광법(254 nm) 및 이온 분광법(IBF)으로 검출한다. n이 1인 산물의 분획을 회수하고, 동결건조시킨 다음 세파덱스 G10 겔로 충진한 칼럼상에서 탈염화시킨다. 동결건조 후, 전형적으로 화학식 (II)의 ΔIs-Is 유도체(R₁, R₂, R₃, R₅및 R₆= SO₃Na; R₄= H 및 M = Na) 70%를 함유하는 테트라사카라이드 1 g을 수득한다. ΔIs-Is 유도체는 SAX(강 음이온 교환) 크로마토그래피에 의해, 또는 바람직한 양태에 따르면, 특허 FR 2 548 672에 기술된 방법에 따른 분별 침전에 의해 임의로 정제할 수 있다.

실시예 1

0.0063 mol/l 나트륨 하이드록사이드 용액 5 ml를 66℃에서 유지시킨 반응기 중으로 도입시킨다. 이어서, 용액의 pH를 측정하고 표적 값(pH = 11.35)으로 취하였다. n이 0이고, R₁및 R₆가 SO₃Na 라디칼을 나타내며 M이 나트륨인 화학식 (II)의 올리고사카라이드 30 mg을 단일 분량으로 교반하에 가한다. 이어서, pH를 조정한 다음 0.5 mol/l 나트륨 하이드록사이드 용액의 연속 첨가에 의해 pH 11.35로 유지시킨다. 10시간 후, 나트륨 하이드록사이드의 첨가를 멈추고 반응 혼합물을 25℃로냉각시킨다. 이어서, Amberlite IR120 수지를 첨가하여 용액의 pH가 6 내지 7이 되게 한다. 혼합물을 Whatman GF/B 막을 통해 여과시킨 다음 감압하에(2.7 kPa) 25℃ 부근의 온도에서 농축건고시킨다. 산물을 증류수 0.5 ml에 취한 다음 동결건조시킨다. n이 0이고, R₁및 R₆가 SO₃Na 라디칼이며 M이 나트륨인 화학식 (I)의 올리고사카라이드의 부분입체이성체의 혼합물 29 mg이 수득된다[ (4-데옥시-2-O-설포-α-L-트레오-헥스-4-에노피라노실우론산 (1→4)-1,6-언하이드로-2-데옥시-2-설포아미노-β-D-만노피라노스, 3나트륨 염): D₂O에서의 양성자 스펙트럼, 400 MHz, T = 298 K, δ(ppm)): 3.15 (1H, s, H2), 3.75 (2H, m, H6 및 H3), 3.88 (1H, m, H4), 4.20 (1H, d, J = 8 Hz, H6), 4.22 (1H, t, J = 5 Hz, H3′), 4.58 (1H, m, H2′), 4.75 (1H, m, H5), 5.53 (1H, s, H1), 5.60 (1H, dd, J = 6 및 1 Hz, H1′), 6.03 (1H, d, J = 5 Hz, H4′); (4-데옥시-2-O-설포-α-L-트레오-헥스-4-에노피라노실우론산- (1→4)-1,6-언하이드로-2-데옥시-2-설포아미노-β-D-글루코피라노스, 3나트륨 염): D₂O에서의 양성자 스펙트럼, 400 MHz, T = 298 K, δ(ppm)): 3.34 (1H, dd, J = 7 및 2 Hz, H2), 3.72 (1H, t, J = 8 Hz, H6), 3.90 (1H, m, H3), 4.03 (1H, s, H4), 4.20 (1H, d, J = 8 Hz, H6), 4.23 (1H, t, J = 5 Hz, H3′), 4.58 (1H, m, H2′), 4.78 (1H, m, H5), 5.50 (1H, s, H1), 5.60 (1H, dd, J = 6 및 1 Hz, H1′), 6.03 (1H, d, J = 5 Hz, H4′)].

실시예 2

0.0063 mol/l 나트륨 하이드록사이드 용액 33.3 ml를 62℃에서 유지시킨 반응기 중으로 도입시킨다. 이어서, 용액의 pH를 측정하고 표적 값(pH = 11.15)으로 취하였다. n이 1이고, R₁, R₂, R₃, R₅및 R₆가 SO₃Na 라디칼을 나타내며, R₄가 수소원자를 나타내며 M이 나트륨인 화학식 (II)의 올리고사카라이드 200 mg을 단일 분량으로 교반하에 가한다. 이어서, pH를 조정한 다음 0.5 mol/l 나트륨 하이드록사이드 용액의 연속 첨가에 의해 pH 11.15로 유지시킨다. 12시간 후, 나트륨 하이드록사이드의 첨가를 멈추고 반응 혼합물을 25℃로 냉각시킨다. 이어서, Amberlite IR120 수지를 첨가하여 용액의 pH가 6 내지 7이 되게 한다. 혼합물을 Whatman GF/B 막을 통해 여과시킨 다음 감압하에(2.7 kPa) 25℃ 부근의 온도에서 농축건고시킨다. 산물을 증류수 3 ml에 취한 다음 동결건조시킨다. 이에 따라, n이 1이고, R₁, R₂, R₃, R₅및 R₆가 SO₃Na 라디칼이며 R₄가 수소원자이며 M이 나트륨인 화학식 (I)의 올리고사카라이드 230 mg이 부분입체이성체의 혼합물 형태로 수득된다[ (4-데옥시-2-O-설포-α-L-트레오-헥스-4-에노피라노실우론산-(1→4)-2-데옥시-2-설포아미노-6-O-설포-α-D-글루코피라노실-(1→4) 2-O-설포-α-L-아이오도피라노실우론산-(1→4)-1,6-언하이드로-2-데옥시-2-설포아미노-β-D-만노피라노스, 7나트륨 염): D₂O에서의 양성자 스펙트럼, 400 MHz, T = 298 K, δ(ppm)): 3.15 (1H, s, H2), 3.25 (1H, m, H2″), 3.60 (1H, m, H3″), 3.70 내지 4.70 (14H, 광역 피크, H3/H4/H6, H2′/H3′/H4′/H5′, H4″/H5″/H6″, H2″′/H3″′), 4.75 (1H, m, H5), 5.20내지 5.40 (2H, m, H1′및 H1″), 5.45 (1H, m, H1″′), 5.56 (1H, m, H1), 5.94 (1H, d, J = 5 Hz, H4); (4-데옥시-2-O-설포-α-L-트레오-헥스-4-에노피라노실우론산 -(1→4)-2-데옥시-2-설포아미노-6-O-설포-α-D-글루코피라노실-(1→4)-2-O-설포-α-L-아이오도피라노실우론산-(1→4)-1,6-언하이드로-2-데옥시-2-설포아미노-β-D-글루코피라노스, 7나트륨 염): D₂O에서의 양성자 스펙트럼, 400 MHz, T = 298 K, δ(ppm)): 3.25 (1H, m, H2″), 3.42 (1H, dd, J = 4 및 1 Hz, H2), 3.60 (1H, m, H3″), 3.70 내지 4.70 (14H, 광역 피크, H3/H4/H6, H2′/H3′/H4′/H5′, H4″/H5″/H6″, H2″′/H3″′), 4.75 (1H, m, H5), 5.20 내지 5.40 (2H, m, H1′및 H1″), 5.45 (1H, m, H1″′), 5.52 (1H, m, H1), 5.94 (1H, d, J = 5 Hz, H4)].

실시예 3

0.0063 mol/l 나트륨 하이드록사이드 용액 16.7 ml를 62℃에서 유지시킨 반응기 중으로 도입시킨다. 이어서, 용액의 pH를 측정하고 표적 값(pH = 11.7)으로 취하였다. n이 2이고, R₁, R₂, R₃, R₅및 R₆가 SO₃Na 라디칼을 나타내며, R₄가 수소원자를 나타내며 M이 나트륨인 화학식 (II)의 올리고사카라이드 100 mg을 단일 분량으로 교반하에 가한다. 이어서, pH를 조정한 다음 0.5 mol/l 나트륨 하이드록사이드 용액의 연속 첨가에 의해 pH 11.7로 유지시킨다. 10시간 후, 나트륨 하이드록사이드의 첨가를 멈추고 반응 혼합물을 25℃로 냉각시킨다. 이어서, Amberlite IR120 수지를 첨가하여 용액의 pH가 6 내지 7이 되게 한다. 혼합물을 Whatman GF/B 막을 통해 여과시킨 다음 감압하에(2.7 kPa) 25℃ 부근의 온도에서 농축건고시킨다. 산물을 증류수 3 ml에 취한 다음 동결건조시킨다. 이에 따라, n이 2이고, R₁, R₂, R₃, R₅및 R₆가 SO₃Na 라디칼이며 R₄가 수소원자이며 M이 나트륨인 화학식 (I)의 올리고사카라이드 108 mg이 부분입체이성체의 혼합물 형태로 수득된다. 헥사사카라이드를 구성하는 당이 A 내지 F로 주시되는데, A는 1,6-언하이드로 잔기이고 F는 불포화 우론산 잔기이다. [(4-데옥시-2-O-설포-α-L-트레오-헥스-4-에노피라노실우론산-(1→4)-2-데옥시-2-설포아미노-6-O-설포-α-D-글루코피라노실-(1→4)-2-O-설포-α-L-아이오도피라노실우론산-(1→4)-2-데옥시-2-설포아미노-6-O-설포-α-D-글루코피라노실-(1→4)-2-O-설포-α-L-아이오도피라노실우론산-(1→4)-1,6-언하이드로-2-데옥시-2-설포아미노-β-D-만노피라노스, 11나트륨 염: D₂O에서의 양성자 스펙트럼, 600 MHz, T = 298 K, δ(ppm)): 3.15 (1H, s, H2(A)), 3.25 (2H, m, H2(C+E)), 3.60 (2H, m, H3(C+E)), 3.65 내지 4.50 (19H, 광역 피크, H2(B+D)/H3(A+B+D+F)/H4(A+B+C+D+E)/H5(C+E)/H6(A+C+E)), 4.60 (1H, s, H2(F)), 4.80 (3H, m, H5(A+B+D)), 5.18 (1H, s, H1(D)), 5.30 (1H, s, H1(B)), 5.34 (1H, d, H1(C)), 5.36 (1H, d, H1(E)), 5.46 (1H, s, H1(F)), 5.57 (1H, s, H1(A)), 5.95 (1H, d, J = 5 Hz, H4(F)); (4-데옥시-2-O-설포-α-L-트레오-헥스-4-에노피라노실우론산 -(1→4)-2-데옥시-2-설포아미노-6-O-설포-α-D-글루코피라노실-(1→4)-2-O-설포-α-L-아이오도피라노실우론산 -(1→4)-2-데옥시-2-설파미노-6-O-설포-α-D-글루코피라노실-(1→4)-2-O-설포-α-L-아이오도피라노실우론산-(1→4)-1,6-언하이드로-2-데옥시-2-설포아미노-β-D-글루코피라노스, 11나트륨 염): D₂O에서의 양성자 스펙트럼, 600 MHz, T = 298 K, δ(ppm)): 3.25 (2H, m, H2(C+E)), 3.42 (1H, m, H2(A)), 3.60 (2H, m, H3(C+E)), 3.65 내지 4.50 (19H, 광역 피크, H2(B+D)/H3(A+B+D+F)/H4(A+B+C+D+E)/H5(C+E)/H6(A+C+E)), 4.60 (1H, s, H2(F)), 4.80 (3H, m, H5(A+B+D), 5.18 (1H, s, H1(D)), 5.31 (1H, s, H1(B)), 5.34 (1H, d, H1(C)), 5.36 (1H, d, H1(E)), 5.46 (1H, s, H1(F)), 5.52 (1H, s, H1(A)), 5.95 (1H, d, J = Hz, H4(F))].

실시예 4

0.0316 mol/l 나트륨 하이드록사이드 용액 4 ml를 62℃에서 유지시킨 반응기 중으로 도입시킨다. 이어서, 용액의 pH를 측정하고 표적 값(pH = 11.8)으로 취하였다. n이 2이고, ΔIs-Is-Is 유도체(R₁, R₂, R₃, R₅및 R₆는 SO₃Na 라디칼을 나타내고, R₄는 수소원자를 나타내며 M은 나트륨이다) 55%, ΔIs-Is-IIs 유도체(R₁, R₂, R₃및 R₆는 SO₃Na 라디칼을 나타내고, R₅는 SO₃Na 라디칼 또는 수소원자를 나타내며, R₄는 수소원자를 나타내며 M은 나트륨이다) 35% 및 ΔIs-Is-IIIs 유도체(R₁, R₂, R₃, R₅및 R₆는 SO₃Na 라디칼을 나타내고, R₄는 수소원자를 나타내며 M은 나트륨이고, 탄소 C6의 작용기 SO₃M은 수소로 치환된다) 10%를 포함하는 화학식 (II)의 올리고사카라이드 혼합물 100.8 mg을 단일 분량으로 교반하에 가한다. 이어서, pH를 조정한 다음 0.5 mol/l 나트륨 하이드록사이드 용액의 연속 첨가에 의해 pH 11.8로 유지시킨다. 11시간 후, 나트륨 하이드록사이드의 첨가를 멈추고 반응 혼합물을 25℃로 냉각시킨다. 이어서, Amberlite IR120 수지를 첨가하여 용액의 pH가 6 내지 7이 되게 한다. 혼합물을 Whatman GF/B 막을 통해 여과시킨 다음 감압하에(2.7 kPa) 25℃ 부근의 온도에서 농축건고시킨다. 산물을 증류수 1.5 ml에 취한 다음 동결건조시킨다. 이에 따라, n이 2이고, 특히 1,6-언하이드로 ΔIs-Is-Is 유도체(R₁, R₂, R₃, R₅및 R₆는 SO₃Na 라디칼을 나타내고, R₄는 수소원자를 나타내며 M은 나트륨이다) 및 1,6-언하이드로 ΔIs-Is-IIs 유도체(R₁, R₂, R₃및 R₆는 SO₃Na 라디칼을 나타내고, R₅는 SO₃Na 라디칼 또는 수소원자를 나타내며, R₄는 수소원자를 나타내며 M은 나트륨이다)를 함유하는 화학식 (I)의 올리고사카라이드 혼합물 110 mg이 수득된다. 이온쌍 방식에 의한 HPLC(고성능 액체 크로마토그래피) 분석은 화학식 (I)의 유도체로의 전환을 모니터할 수 있게 한다. 이 경우에, HPLC 분석은 전환이 ΔIs-Is-Is 및 ΔIs-Is-IIs 유도체에 대해 달성됨을 보여준다.

실시예 5

0.025 mol/l 리튬 하이드록사이드 용액 8.6 ml를 66℃로 유지시킨 반응기에 넣는다. 이어서, 용액의 pH를 측정하고 표적 값(pH = 11.68)으로 취하였다. 이어서, n이 0이고, R₁및 R₆가 SO₃Na 라디칼을 나타내며 M이 나트륨인 화학식 (II)의 올리고사카라이드 50 mg을 교반하에 단일 분량으로 가한다. 이어서, pH를 조정하고 0.466 mol/l 리튬 하이드록사이드 용액을 연속 첨가하여 pH 11.68로 유지시킨다. 8시간 후에, 리튬 하이드록사이드의 첨가를 중단하고 반응 혼합물을 25℃로 냉각시킨다. 이온쌍 방식에 의한 HPLC(고성능 액체 크로마토그래피) 분석은 n이 0이고, R₁및 R₆가 SO₃Na 라디칼을 나타내며 M이 나트륨 또는 리튬인 화학식 (I)의 유도체로의 전환을 모니터할 수 있게 한다. 이 경우에, HPLC 분석은 달성된 전환율이 100%임을 보여준다. 외부 검정에 의한 수율은 81.2%이다.

실시예 6

0.0063 mol/l 칼륨 하이드록사이드 용액 8.3 ml를 66℃로 유지시킨 반응기에 넣는다. 이어서, 용액의 pH를 측정하고 표적 값(pH = 11.1)으로 취하였다. 이어서, n이 0이고, R₁및 R₆가 SO₃Na 라디칼을 나타내며 M이 나트륨인 화학식 (II)의 올리고사카라이드 50 mg을 교반하에 단일 분량으로 가한다. 이어서, pH를 조정하고 0.515 mol/l 칼륨 하이드록사이드 용액을 연속 첨가하여 pH 11.1로 유지시킨다. 24시간 후에, 칼륨 하이드록사이드의 첨가를 중단하고 반응 혼합물을 25℃로 냉각시킨다. 이온쌍 방식에 의한 HPLC(고성능 액체 크로마토그래피) 분석은 n이 0이고, R₁및 R₆가 SO₃Na 라디칼을 나타내며 M이 나트륨 또는 칼륨인 화학식 (I)의 유도체로의 전환을 모니터할 수 있게 한다. 이 경우에, HPLC 분석은 달성된 전환율이 100%임을 보여준다. 외부 검정에 의한 수율은 75.6%이다.

실시예 7

0.0063 mol/l 세슘 하이드록사이드 용액 8.3 ml를 66℃로 유지시킨 반응기에 넣는다. 이어서, 용액의 pH를 측정하고 표적 값(pH = 10.75)으로 취하였다. 이어서, n이 0이고, R₁및 R₆가 SO₃Na 라디칼을 나타내며 M이 나트륨인 화학식 (II)의 올리고사카라이드 50 mg을 교반하에 단일 분량으로 가한다. 이어서, pH를 조정하고 0.476 mol/l 세슘 하이드록사이드 용액을 연속 첨가하여 pH 10.75로 유지시킨다. 20시간 후에, 세슘 하이드록사이드의 첨가를 중단하고 반응 혼합물을 25℃로 냉각시킨다. 이온쌍 방식에 의한 HPLC(고성능 액체 크로마토그래피) 분석은 n이 0이고, R₁및 R₆가 SO₃Na 라디칼을 나타내며 M이 나트륨 또는 세슘인 화학식 (I)의 유도체로의 전환을 모니터할 수 있게 한다. 이 경우에, HPLC 분석은 달성된 전환율이 90.3%임을 보여준다. 외부 검정에 의한 수율은 73%이다.

실시예 8

0.0063 mol/l 테트라부틸암모늄 하이드록사이드 용액 8.3 ml를 66℃로 유지시킨 반응기에 넣는다. 이어서, 용액의 pH를 측정하고 표적 값(pH = 10.95)으로 취하였다. 이어서, n이 0이고, R₁및 R₆가 SO₃Na 라디칼을 나타내며 M이 나트륨인 화학식 (II)의 올리고사카라이드 50 mg을 교반하에 단일 분량으로 가한다. 이어서, pH를 조정하고 0.521 mol/l 테트라부틸암모늄 하이드록사이드 용액을 연속 첨가하여 pH 10.95로 유지시킨다. 16시간 후에, 세슘 하이드록사이드의 첨가를 중단하고 반응 혼합물을 25℃로 냉각시킨다. 이온쌍 방식에 의한 HPLC(고성능 액체 크로마토그래피) 분석은 n이 0이고, R₁및 R₆가 SO₃Na 라디칼을 나타내며 M이 나트륨 또는 테트라부틸암모늄인 화학식 (I)의 유도체로의 전환을 모니터할 수 있게 한다. 이 경우에, HPLC 분석은 달성된 전환율이 96.7%임을 보여준다. 외부 검정에 의한 수율은65%이다.

본 발명에 따른 의약품은 활성 성분으로서, 적어도 하나의 화학식 (I)의 올리고사카라이드 또는 화학식 (I)의 올리고사카라이드 혼합물을, 불활성이거나 생리 활성일 수 있는 여타 약학적으로 적합한 산물과 배합되는 조성물 형태로 포함한다. 본 발명에 따른 의약품은 정맥내, 피하, 경구, 직장, 국소 또는 폐(흡입) 경로를 통해 사용될 수 있다.

정맥내 또는 피하 투여용의 멸균 조성물은 일반적으로 수용액이다. 이들 조성물은 또한, 보조제, 특히 습윤제, 토닉제, 유화제, 분산제 및 안정제를 함유할 수 있다. 멸균과정은 여러 방식으로, 예를 들면 무균 여과로, 조성물 중으로 멸균제의 혼입에 의해 또는 조사에 의해 수행될 수 있다. 이들은 또한 사용시에 멸균수나 여타 주사 가능한 멸균 매질에 용해시킬 수 있는 멸균 고체 조성물 형태로 제조될 수 있다.

사용될 수 있는 경구 투여용 고체 조성물은 정제, 환제, 분말제(젤라틴 캡슐 또는 캐세이) 또는 입제이다. 이들 조성물에서, 활성 성분은 아르곤 스트림하에서 전분, 셀룰로스, 슈크로스, 락토스 또는 실리카와 같은 하나 이상의 불활성 희석제와 혼합된다. 이들 조성물은 또한 희석제 이외의 물질, 예를 들면 마그네슘 스테아레이트 또는 탈크와 같은 하나 이상의 윤활제, 경구 흡수 촉진제, 염료, 코팅(당의정) 또는 바니시도 포함할 수 있다.

사용될 수 있는 경구 투여용 액체 조성물은 물, 에탄올, 글리세롤, 식물성 오일 또는 액상 파라핀과 같은 불활성 희석제를 함유하는 약학적으로 허용되는 용액, 현탁액, 에멀션, 시럽 및 엘릭서이다. 이들 조성물은 희석제 이외의 물질, 예를 들면, 습윤제, 감미제, 증점제, 향미제 또는 안정제를 포함할 수 있다.

직장 투여용 조성물은 활성 산물 이외에도, 코코아 버터, 반합성 글리세라이드 또는 폴리에틸렌 글리콜과 같은 부형제를 함유하는 좌제 또는 직장용 캡슐이다.

국소 투여용 조성물은 예를 들면, 크림, 로션, 점안제, 인후 스프레이, 점비제 또는 에어로졸일 수 있다.

용량은 원하는 효과, 치료 지속기간 및 사용되는 투여 경로에 좌우되며; 일반적으로는 0.5 내지 10 mg/kg/일(피하), 즉 60 kg 성인의 경우 1일 3 내지 60 mg이다.

일반적으로, 의사는 치료하고자 하는 개체의 연령과 체중 및 모든 개인적인 요인의 함수로서 적정 용량을 결정하게 된다.

본 발명은 또한, 나이트라이트 옥사이드(NO)와 같은 세포독성 물질의 생성을 수반하는 염증 과정과 연관된 질환의 예방 또는 치료 방법에 관한 것이다. 따라서, 화학식 (I)의 올리고사카라이드는 뇌의 염증이 사망에 이르게 할 수 있는 유해한 역할을 하는 신경퇴행성 질환의 예방 및/또는 치료에 사용될 수 있으며, 이러한 질환으로는 중추신경계의 허혈증, 뇌 허혈증, 망막 및 달팽이관의 허혈증, 심장 허혈증(심근경색), 말초 허혈증, 중추신경계의 외상 및 특히 두개골, 척추 및 두개척주 외상, 망막과 달팽이관의 외상, 다발성 경화증, 신경병 통증 및 말초 신경병, 운동 뉴런 질환(근위축성 측삭 경화증, 뉴로-AIDS, 알츠하이머병, 파킨슨병 및 헌팅턴 무도병 포함) 및 특정 형태의 골관절염, 특히 관절 국재를 들 수 있다.

Claims

화학식 (1)의 올리고사카라이드, 이들 올리고사카라이드의 혼합물 및 이들의 부분입체이성체.

화학식 I

상기식에서,

n은 0 내지 25의 정수이고, R₁, R₃, R₄및 R₅는 동일하거나 상이할 수 있고, 수소원자 또는 라디칼 SO₃M을 나타내며, R₂및 R₆는 동일하거나 상이할 수 있고, 수소원자 또는 라디칼 SO₃M 또는 COCH₃를 나타내며 M은 나트륨, 칼슘, 마그네슘 또는 칼륨이다.
제 1 항에 있어서, R₄가 수소원자를 나타내는 화학식 (I)의 올리고사카라이드, 이들 올리고사카라이드의 혼합물 및 이들의 부분입체이성체.
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, n이 0 내지 10의 정수인 화학식 (I)의 올리고사카라이드, 이들 올리고사카라이드의 혼합물 및 이들의 부분입체이성체.
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, n이 0 내지 6의 정수인 화학식 (I)의 올리고사카라이드, 이들 올리고사카라이드의 혼합물 및 이들의 부분입체이성체.
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, n이 1 내지 6의 정수인 화학식 (I)의 올리고사카라이드, 이들 올리고사카라이드의 혼합물 및 이들의 부분입체이성체.
알칼리 금속 하이드록사이드 또는 4급 암모늄 하이드록사이드를 화학식 (II)의 올리고사카라이드와 반응시킨 다음, 올리고사카라이드 또는 이들의 혼합물을 분리시킴을 특징으로 하는, 제 1 항에 따른 화학식 (I)의 올리고사카라이드의 제조방법.

화학식 II

상기식에서, n은 0 내지 25의 정수이고, R₁, R₃, R₄및 R₅는 동일하거나 상이할 수 있고, 수소원자 또는 라디칼 SO₃M을 나타내며, R₂및 R₆는 동일하거나 상이할수 있고 수소원자 또는 라디칼 SO₃M 또는 COCH₃를 나타내며, M은 나트륨, 칼슘, 마그네슘 또는 칼륨, 또는 이들의 혼합물이다.
제 6 항에 있어서, 반응을 수성 매질 중, 40 내지 80℃의 온도 및 10 내지 13의 pH에서 수행함을 특징으로 하는 방법.
제 6 항 또는 제 7 항에 있어서, 1 내지 5% 알칼리 금속 하이드록사이드 또는 4급 암모늄 하이드록사이드의 수용액이 사용됨을 특징으로 하는 방법.
제 6 항 내지 제 8 항 중 어느 한 항에 있어서, 반응이 60 내지 70℃의 온도에서 수행됨을 특징으로 하는 방법.
제 6 항 내지 제 9 항 중 어느 한 항에 있어서, 반응 pH가 11 내지 12.5임을 특징으로 하는 방법.
제 6 항 내지 제 10 항 중 어느 한 항에 있어서, 알칼리 금속 하이드록사이드 또는 4급 암모늄 하이드록사이드가 나트륨 하이드록사이드, 칼륨 하이드록사이드, 리튬 하이드록사이드, 세슘 하이드록사이드 또는 테트라부틸암모늄 하이드록사이드임을 특징으로 하는 방법.
제 1 항에 따른 적어도 하나의 올리고사카라이드를 활성 성분으로 함유하는 약학 조성물.
제 1 항 내지 제 5 항 중 어느 한 항에 따른 적어도 하나의 올리고사카라이드를 활성 성분으로 함유하는 약학 조성물.
나이트라이트 옥사이드(NO)의 생성을 동반하는 염증 과정과 연관된 질환의 예방 또는 치료에 유용한 의약품의 제조를 위한, 제 1 항 내지 제 5 항 중 어느 한 항에 따른 화학식 (I)의 올리고사카라이드의 용도.
뇌, 심장 또는 말초 혈관 허혈증, 골관절염, 중추신경계의 외상, 두개골, 척추 또는 두개척주 외상, 다발성 경화증, 신경병 통증 및 말초 신경병, 운동 뉴런 질환, 근위축성 측삭 경화증, 뉴로-AIDS, 알츠하이머병, 파킨슨병 및 헌팅턴 무도병의 예방 및 치료에 유용한 의약품의 제조를 위한 제 14 항에 따른 화학식 (I)의 올리고사카라이드의 용도.