UA71994C2

UA71994C2 - Glucopyranosyloxypyrazole derivatives, a pharmaceutical composition containing these derivatives and intermediate compounds for the preparation thereof

Info

Publication number: UA71994C2
Application number: UA2002032522A
Authority: UA
Original assignee: Kissei Pharmaceutical
Priority date: 1999-08-31
Filing date: 2000-08-24
Publication date: 2005-01-17
Also published as: PL364800A1; ZA200201991B; PT1213296E; DE60009929T2; DK1213296T3; TR200201082T2; US20050137143A1; SK2872002A3; US7115575B2; NO20020968L; EP1213296B1; NZ517439A; US7056892B2; HU229581B1; CZ303372B6; IL148384A; HK1050369A1; CA2382480A1; BRPI0013667B1; NO322703B1

Description

в: ле

ЧА;

М в" де КЕ! являє собою атом водню або нижчу алкільну групу; один з 0! і Т! представляє 2,3,4,6-тетра-О- ацетил-д-ЮО-глюкопіранозилоксигрупу, тоді як інший являє собою нижчу алкільну групу або галоген(нижчу алкільну) групу; а 2 являє собою атом водню, нижчу алкільну групу, нижчу алкоксигрупу, нижчу алкілтіогрупу, галогенінижчу алкільну) групу або атом галогену, або до його солі, і до бензилпіразольного похідного, представленого загальною формулою: ве о де (У)

В М нн де БК? являє собою нижчу алкільну групу, нижчу алкоксигрупу, нижчу алкілтіогрупу, галоген(нижчу алкільну) групу або атом галогену; і З представляє нижчу алкільну групу, або до його солі.

Авторами даного винаходу проведене поглиблене дослідження для того, щоб знайти сполуки, що володіють придушуючою дією на людський НГЛС2. В результаті було виявлено, що глюкопіранозилоксипіразольні похідні, представлені вищенаведеною загальною формулою (І), виявляють чудову придушуючу дію на людський НГЛОС2, як зазначено нижче, створюючи тим самим основу даного винаходу.

Тобто, даний винахід відноситься до глюкопіранозилоксипіразольного похідного, представленого загальною формулою: о

Лк; ву м ()

М де В! представляє атом водню або нижчу алкільну групу; один з 0! і Т! представляє групу, представлену формулою: но 0. ,0 ноу оН он тоді як інший являє собою нижчу алкільну групу або галоген(нижчу алкільну) групу; а В? являє собою атом водню, нижчу алкільну групу, нижчу алкоксигрупу, нижчу алкілтіогрупу, галоген(інижчу адкильну) групу або атом галогену, або до його фармацевтично прийнятної солі, фармацевтичної композиції, що містить цю сполуку, і до його проміжної сполуки.

Для сполук, представлених вищенаведеною загальною формулою (І), термін "нижча алкільна група" означає алкільну групу з прямим або розгалуженим ланцюгом, що має від 1 до 6 атомів вуглецю, таку як метильна група, етильна група, пропільна група, ізопропільна група, бутильна група, ізобутильна група, втор- бутильна група, трет-бутильна група, пентильна група, ізопентильна група, неопентильна група, трет- пентильна група, гексильна група тощо; термін "нижча алкоксигрупа" означає алкоксигрупу з прямим або розгалуженим ланцюгом, що має від 1 до 6 атомів вуглецю, таку як метоксигрупа, етоксигрупа, пропоксигрупа, ізопропоксигрупа, бутоксигрупа, ізобутоксигрупа, втор-бутоксигрупа, трет-бутоксигрупа, пентилоксигрупа, ізопентилоксигрупа, неопентилоксигрупа, третпентилоксигрупа, гексилоксигрупа тощо; і, термін "нижча алкілтіогрупа" означає алкілтіогрупу з прямим або розгалуженим ланцюгом, що має від 1 до 6 атомів вуглецю, таку як метилтіогрупу, етилтіогрупу, пропілтіогрупу, ізопропілтіогрупу, бутилтіогрупу, ізобутилтіоірупу, втор- бутилтіогрупу, трет-бугилтіогрупу, пентилтіогрупу, ізопентилтіогрупу, неопентилтіогрупу, трет-пентилтіогрупу, гексилтіогрупу або тому подібне. Термін "атом галогену" означає атом фтору, атом хлору, атом брому або атом йоду; і термін "галоген(нижча алкільна)група" означає вищевказану нижчу алкільну групу, заміщену різними або однаковими атомами галогену, у кількості від 1 до 3, визначеними як зазначено вище.

Для замісника В! переважними є атом водню або алкільна група з прямим або розгалуженим ланцюгом, що має від 1 до З атомів вуглецю; атом водню, етильна група, пропільна група або ізопропільна група є більш переважними. Для замісника Р? переважними є алкільна група з прямим або розгалуженим ланцюгом, що має від 1 до 4 атомів вуглецю, алкоксигрупа з прямим або розгалуженим ланцюгом, що має від 1 до З атомів вуглецю, або алкілтіогрупа з прямим або розгалуженим ланцюгом, що має від 1 до З атомів вуглецю; етильна група, етоксигрупа, ізопропоксигрупа або метилтіогрупа є більш переважними. Для замісників СО! і т! переважно, щоб один з них був алкільною групою з прямим або розгалуженим ланцюгом, що має від 1 до З атомів вуглецю, і більш переважно, щоб один з них був метильною групою.

Наприклад, сполуки, представлені вище загальною формулою (І), даного винаходу можуть бути одержані за наступною методикою:

Процес. І Процес 2

Я допо й анна і я а» або пого ї (по моногідрат (у

Кене ром-ельф: т ки прлвой "У

О-глюкоза ци о кн" 2) Необов'язково В - (0 т

КОЦУУ о де Х і МУ представляють відхідну групу, таку як атом галогену, мезилоксигрупа або тозилоксигрупа; ВЗ представляє нижчу алкільну групу або галоген(нижчу алкільну)групу; В" представляє метильну або групу етильну групу; Е? представляє нижчу алкільну групу; один з 02 і Т? являє собою 2, 3, 4, б-тетра-О-ацетил-д-О- глюкопіранозилоксигрупу, тоді як інший представляє нижчу алкільну групу або галоген (нижчу алкільну) групу; а В, В2, СО і Т! мають ті ж значення, що зазначені вище.

Процес 1

Сполука, представлена вищенаведеною загальною формулою (ІМ), може бути одержана шляхом конденсації бензилового похідного, представленого загальною формулою (ІІ) з кетоацетатом, представленим загальною формулою (ІІ), в присутності основи, такої як гідрид натрію або трет-бутоксид калію, в інертному розчиннику. Як приклади інертного розчинника можна привести 1,2-диметоксіетан, тетрагідрофуран, М,М- диметилформамід, змішаний з них розчинник тощо. Температура реакції звичайно складає від кімнатної температури до температури дефлегмації, а час реакції звичайно складає від 1 години до однієї доби, змінюючись в залежності від вихідного матеріалу, що використовується, розчинника і температури реакції.

Процес2

Піразолонове похідне, представлене вищенаведеною загальною формулою (М), може бути одержане шляхом конденсації сполуки, представленої вищенаведеною загальною формулою (ІМ) з гідразином або моногідратом гідразину в інертному розчиннику. Як приклади інертного розчинника, що використовується в реакції, можна привести толуол, тетрагідрофуран, хлороформ, змішаний з них розчинник тощо. Температура реакції звичайно знаходиться в інтервалі від кімнатної температури до температури дефлегмації, а час реакції звичайно складає від 1 години до 1 доби, змінюючись в залежності від вихідного матеріалу, що використовується, розчинника і температури реакції. Одержане піразолонове похідне, представлене вищенаведеною загальною формулою (М), можна також використовувати в процесі З після перетворення його в сіль звичайним шляхом.

Процес З

У випадку піразолонових похідних, представлених вищенаведеною загальною формулою (М), де ВЗ є нижчою алкільною групою, відповідна сполука, представлена вищенаведеною загальною формулою (МІЇ), може бути одержана шляхом проведення з відповідним піразолоновим похідним, представленим вищенаведеною загальною формулою (М), глікозидування із застосуванням ацетобром-о-О-глюкози в присутності основи, такої як карбонат срібла, в інертному розчиннику, і проведення з одержаною сполукою М- алкілування з використанням алкілуючої речовини, представленої вищенаведеною загальною формулою (МІ) в присутності основи, такої як карбонат калію, в інертному розчиннику, як того вимагають обставини. Як приклади розчинника, що використовується при реакції глікозидування, можна привести тетрагідрофуран тощо. Температура реакції звичайно складає від кімнатної температури до температури дефлегмації, а час реакції звичайно складає від 1 години до 1 доби, змінюючись в залежності від вихідного матеріалу, що використовується, розчинника і температури реакції. Як приклади розчинника, що використовується при реакції М-алкілування, можна привести ацетонітрил, М,М-диметилформамід, тетрагідрофуран, змішаний з них розчинник тощо. Температура реакції звичайно складає від кімнатної температури до температури дефлегмації, а час реакції звичайно складає від 1 години до 1 доби, змінюючись в залежності від вихідного матеріалу, що використовується, розчинника і температури реакції. (2) У випадку піразолонових похідних, представлених вищенаведеною загальною формулою (М), де ВЗ є галоген(нижчою алкільною) групою, відповідна сполука, представлена вищенаведеною загальною формулою (МІ), може бути одержана шляхом проведення з відповідним піразолоновим похідним, представленим вищенаведеною загальною формулою (М), глікозидування з застосуванням ацетобром-о-ЮО-глюкози в присутності основи, такої як карбонат калію, в інертному розчиннику, і проведення з одержаною сполукою М- алкілування з використанням алкілуючої речовини, представленої вищенаведеною загальною формулою (МІ) в присутності основи, такої як карбонат калію, в інертному розчиннику, як того вимагають обставини. Як приклади розчинника, що використовується при реакції глікозидування, можна привести ацетонітрил, тетрагідрофуран тощо. Температура реакції звичайно складає від кімнатної температури до температури дефлегмації, а час реакції звичайно складає від 1 години до 1 доби, змінюючись в залежності від вихідного матеріалу, що використовується, розчинника і температури реакції. Як приклади розчинника, що використовується при реакції М-алкілування, можна привести ацетонітрил, М,М-диметилформамід, тетрагідрофуран, змішаний з них розчинник тощо. Температура реакції звичайно знаходиться в інтервалі від кімнатної температури до температури дефлегмації, а час реакції звичайно складає від 1 години до 1 доби, змінюючись в залежності від вихідного матеріалу, що використовується, розчинника і температури реакції.

Одержані сполуки, представлені вищенаведеною загальною формулою (Мі), також можна використовувати в процесі 4 після перетворення в їх солі звичайним шляхом.

Процес 4

Сполуки (І) даного винаходу можуть бути одержані шляхом проведення лужного гідролізу сполуки,

представленої вищенаведеною загальною формулою (МІ). Як приклад розчинника, що використовується в реакції можна привести метанол, етанол, тетрагідрофуран, воду, змішаний з них розчинник тощо, а як приклад основи, що використовується, можна привести гідроксид натрію, етоксид натрію тощо. Температура реакції звичайно складає від 0" до кімнатної температури, а час реакції звичайно складає від 30 хвилин до 6 годин, змінюючись в залежності від вихідного матеріалу, що використовується, розчинника і температури реакції.

Зі сполук, представлених вищенаведеною загальною формулою (І), сполуки, де замісник КЕ" є нижчою алкільною групою, можуть бути одержані відповідно до наступної методики: т Процес 5 ве т! ро то Ж

Ге) м попити ні Ге т н - (8) «Фо де 0", В2, ВУ, Т! і Х мають ті ж значення, що зазначені вище.

Процес 5

Сполука, представлена вищенаведеною загальною формулою (ІБ) за даним винаходом, може бути одержана шляхом проведення М-алкілування сполуки, представленої вищенаведеною загальною формулою (Іа) за даним винаходом, з використанням М-алкілуючої речовини, представленої вищенаведеною загальною формулою (МІ), в присутності такої основи, як карбонат калію або карбонат цезію, і іноді каталітичної кількості йодиду натрію в інертному розчиннику. Як приклад інертного розчинника, що використовується в даній реакції, можна привести М,М-диметилформамід, диметоксіетан, диметилсульфоксид, тетрагідрофуран, етанол, змішаний з них розчинник тощо. Температура реакції звичайно складає від кімнатної температури до температури дефлегмації, а час реакції звичайно складає від 10 хвилин до 1 доби, змінюючись в залежності від вихідного матеріалу, що використовується, розчинника і температури реакції.

Сполуки, представлені вищенаведеною загальною формулою (Мі) і їх солі, що використовуються у вищенаведеному процесі одержання, є сполуками, придатними як проміжні сполуки для сполук, представлених вищенаведеною загальною формулою (1) даного винаходу. Для сполук, представлених вищенаведеною загальною формулою (Мі!) а також сполук, представлених вищенаведеною загальною формулою (І) даного винаходу, переважно, щоб один із замісників 02 і Те був алкільною групою з прямим або розгалуженим ланцюгом, що має від 1 до З атомів вуглецю, і більш переважно, щоб один з них був метильною групою.

Для сполуки, представленої вищенаведеною загальною формулою (М) як вихідний матеріал, існують наступні три таутомери, що змінюються в залежності від зміни умов реакції: и де, УМ

Я. шли / х я / х / Х , х хх де «я «С я и ЩІ Пе нини звик НН де В2 і ЕЗ мають ті ж значення, що представлені вище. Сполуки, представлені вищенаведеною загальною формулою (М) і їх солі, що використовуються у вищенаведеному процесі одержання, є сполуками, придатними як проміжні сполуки для сполук, представлених вищенаведеною загальною формулою (І) даного винаходу.

Для сполук представлених вищенаведеною загальною формулою (М), а також сполук, представлених вищенаведеною загальною формулою (І) даного винаходу, переважно, щоб замісник ЕЗ був алкільною групою з прямим або розгалуженим ланцюгом, що має від 1 до З атомів вуглецю, і більш переважно, щоб ВЗ був метильною групою.

Сполуки, представлені вищенаведеною загальною формулою (І) даного винаходу., одержані за допомогою вищенаведених процесів одержання, можуть бути виділені і очищені за допомогою звичайних засобів виділення, таких як фракційна перекристалізація, очищення із застосуванням хроматографії та екстрагування розчинником.

Глюкопіранозилоксипіразольні похідні, представлені вищенаведеною загальною формулою (І) даного винаходу, можуть бути перетворені в їх фармацевтично прийнятні солі звичайним способом. Приклади таких солей включають кислотно-адитивні солі з мінеральними кислотами, такими як соляна кислота, бромистоводнева кислота, йодистоводнева кислота, сірчана кислота, азотна кислота, фосфорна кислота тощо, солі кислотно-адитивні з органічними кислотами, такими як мурашина кислота, оцтова кислота, метансульфонова кислота, бензолсульфонова кислота, п: толуолсульфонова кислота, пропіонова кислота, лимонна кислота, янтарна кислота, винна кислота, фумарова кислота, масляна кислота, щавлева кислота, малонова кислота, малеїнова кислота, молочна кислота, яблучна кислота, вугільна кислота, глютамінова кислота, аспарагінова кислота тощо, і солі з неорганічними основами, такими як натрієва сіль, калієва сіль тощо.

Сполуки, представлені вищенаведеною загальною формулою (І) даного винаходу, включають їх сольвати з фармацевтично прийнятними розчинниками, такими як етанол і вода.

Сполуки, представлені вищенаведеною загальною формулою (І) даного винаходу, володіють чудовою приглушуючою дією на людський НГЛС2З і надзвичайно корисні як засоби для профілактики і лікування діабету, ускладнень діабету, ожиріння і т.п. Наприклад, у наступному дослідженні приглушуючої дії на активність людського НГЛС2 сполуки даного винаходу виявляли сильну інгібуючу активність у відношенні людського

НГЛО2. З іншого боку, оскільки М/АМ-123783 має вкрай низьку інгібуючу активність у відношенні людського

НГЛО2, не можна очікувати, щоб він виявляв достатній вплив як інгібітор людського НГЛС2.

Коли фармацевтичні композиції за даним винаходом застосовуються при практичному лікуванні, використовуються різні лікарські форми, в залежності від їх застосування. Прикладами лікарських форм є порошки, гранули, дрібні гранули, сухі сиропи, таблетки, капсули, ін'єкції, розчини, мазі, супозиторії, припарки і т.п., що приймаються перорально або вводяться парентерально.

Зазначені фармацевтичні композиції можуть бути одержані змішуванням з відповідною фармацевтичною добавкою або розведенням і розчиненням такою добавкою, як, наприклад, наповнювачі (основи), дезінтегратори, зв'язувальні речовини, поліпшуючі ковзання речовини, розчинники, буфери, що створюють ізотоничність речовини, антисептики, зволожувачі, емульгатори, диспергатори, стабілізатори, що поліпшують розчинення добавки і т.п., і готуванням суміші у вигляді лікарської форми звичайним шляхом.

Коли фармацевтичні композиції даного винаходу застосовуються для практичного лікування, дозування сполуки, представленої вищенаведеною загальною формулою (І), або її фармацевтично прийнятної солі як активного інгредієнта визначається відповідно в залежності від віку, статі, ваги тіла і міри симптомів і лікування кожного пацієнта, що приблизно знаходиться в межах від 0,1 до 1000мг на добу для дорослої людини у випадку перорального прийому, і приблизно в інтервалі від 0,01 до З00мг на добу для дорослої людини у випадку парентерального введення, і добова доза може бути розподілена на разові дози в кількості від одного до декількох на добу і вводитися відповідним чином.

Приклади

Даний винахід далі більш детально ілюструється за допомогою наступних довідкових прикладів, прикладів і прикладів досліджень. Однак даний винахід не обмежується ними.

Приклад 1 1,2-дигідро-4-І(4-ізопропоксифеніл)метил|-5-метил-ЗН-піразол-3-он

До розчину 4-ізопропоксибензилового спирту (0,34г) у тетрагідрофурані (бмл) додають триетиламін (0,28мл) і метансульфонілхлорид (0,16бмл) і суміш перемішують при кімнатній температурі протягом 30 хвилин.

Одержану нерозчинну речовину видаляють фільтруванням. Одержаний розчин 4- ізопропоксибензилметансульфонату в тетрагідрофурані додають до суспензії гідриду натрію (6095, 81мгГ) і метилацетоацетату (0,20мл) у 1,2-диметоксіетані (ЯЛОмл) і суміш перемішують при 80"С протягом ночі.

Реакційну суміш виливали у насичений водний розчин гідрокарбонату натрію і одержану суміш екстрагують діетиловим ефіром. Органічний шар промивають насиченим розчином соли і сушать над безводним сульфатом магнію. Розчинник видаляють під зниженим тиском, залишок розчиняють у толуолі (5мл). До розчину додають безводний гідразин (0,19мл) і суміш перемішують при 80"С протягом ночі. Розчинник видаляють під зниженим тиском і залишок очищають колонковою хроматографією на силікагелі (елюент: дихлорметан/метанол--10/1) з одержанням 1,2-дигідро-4-((4-ізопропоксифеніл)метил|-5-метил-ЗН-піразол-3- ону (95мг).

ІЄН-ЯМР (500мгц, ОМ5О-йв) б м.д.: 1,22 (6Н, д, 9У-6,0Гц), 1,99 (ЗН, с), 3,45 (2Н, с), 4,40-4,60 (1Н, м), 6,65- 6,80 (2Н, м), 6,95-7,10 (2Н, м).

Приклад 2 1.2-дигідро-5-метил-4-((4-пропілфеніл)метил|-ЗН-піразол-3-он

Названа в заголовку сполука одержана способом, подібним описаному у прикладі 1, з використанням 4- пропілбензилового спирту замість 4-ізопропоксибензилового спирту. 1ТН-ЯМР (500мгц, ОМ5О-дйв) 5 м.д.: 0,75-0,95 (ЗН, м), 1,45-1,65 (2Н, м), 1,99 (ЗН, с), 2,40-2,55 (2Н, м), 3,32 (2Н, с), 6,95-7,10 (4Н, м).

Приклад З 1,2-дигідро-4-І((4-ізобутилфеніл)метил|-5-метил-ЗН-піразол-3-он

Названа в заголовку сполука одержана способом, подібним описаному у прикладі 1, з використанням 4- ізобутилбензилового спирту замість 4-ізопропоксибензилового спирту.

ІН-ЯМР (500мгц, ОМ5О-йв) 6 м.д.: 0,83 (6Н, д, 9У-6,6Гц), 1,70-1,85 (1Н, м), 1,99 (ЗН, с), 2,30-2,45 (2Н, м), 3,50 (2Н, с), 6,90-7,10 (4Н, м).

Приклад 4 1,2-дигідро-5-метил-4-((4-пропоксифеніл)метил|-ЗН-піразол-3-он

Названа в заголовку сполука одержана способом, подібним описаному у прикладі 1, з використанням 4- пропоксибензилового спирту замість 4-ізопропоксибензилового спирту.

ІН-ЯМР (500мгц, ОМ5О-ав) 5 м.д.: 0,95 (ЗН, т, 9-74 Гц), 1,60-1,75 (2Н, м), 1,98 (ЗН, с), 3,46 (2Н, с), 3,75-3,90 (2Н, м), 6,70-6,85 (2Н, м), 6,95-7,10 (2Н, м).

Приклад 5 4-(4-етоксифеніл)метил|-1,2-дигідро-5-метил-ЗН-піразол-3-он

Названа в заголовку сполука одержана способом, подібним описаному у прикладі 1, з використанням 4-

етоксибензилового спирту замість 4-ізопропоксибензилового спирту.

ТН-ЯМР (500мгц, ОМ5О-ав) 6 м.д.: 1,20-1,35 (ЗН, м), 1,98 (ЗН, с), 3,46 (2Н, с), 3,85-4,05 (2Н, м), 6,70-6,85 (2Н, м), 6,95-7,10 (2Н,м).

Приклад 6 1,2-дигідро-5-метил-4-((4-трифторметилфеніл)метил|-ЗН-піразол-3-он

Названа в заголовку сполука одержана способом, подібним описаному у прикладі 1, з використанням 4- трифторметилбензилового спирту замість 4-ізопропоксибешилового спирту.

ІН-ЯМР (500мгц, ОМ5О-йв) 5 м.д.: 2,02 (ЗН, с), 3,64 (2Н, с), 7,30-7,45 (2Н, м), 7,55-7,70 (2Н, м).

Приклад 7. 4-(4-трет-бутилфеніл)метилд|-1,2-дигідро-5--метил-ЗН-піразол-3-он

Названа в заголовку сполука одержана способом, подібним описаному у прикладі 1, з використанням 4- трет-бутилбензилового спирту замість 4-ізопропоксибензилового спирту. 1ТН-ЯМР (500мгц, ОМ5О-айв) 6 м.д.: 1,24 (9Н, с), 2,01 (ЗН, с), 3,49 (2Н, с), 7,00-7,15 (2Н, м), 7,15-7,30 (2Н, м).

Приклад 8 4-(4-бутоксифеніл)метил|)|-1,2-дигідро-5--метил-ЗН-піразол-3-он

Названа в заголовку сполука одержана способом, подібним описаному у прикладі 1, з використанням 4- бутоксибензилового спирту замість 4-ізопропоксибензилового спирту.

ІН-ЯМР (500мгц, ОМ5О-дв) 6 м.д.: 0,91 (ЗН, т, 9У-7,4Гц), 1,30-1,50 (2Н, м), 1,55-1,75 (2Н, м), 1,98 (ЗН, с), 3,46 (2Н, с), 3,80-3,95 (2Н, м), 6,70-6,85 (2Н, м), 6,95-7,10 (2Н, м).

Приклад 9 1,2-дигідро-5-метил-4-|(4-метилтіофеніл)метил|-ЗН-піразол-3-он

Названа в заголовку сполука одержана способом, подібним описаному у прикладі 1, з використанням 4- (метилтіо)бензилового спирту замість 4-ізопропоксибензилового спирту. 1ТН-ЯМР (500мгц, ОМ5О-ав) 5 м.д.: 1,99 (ЗН, с), 2,42 (ЗН, с), 3,50 (2Н, с), 7,05-7,20 (АН, м).

Приклад 10

Б-етил-1.2-дигідро-4-(4-метилтіофеніл)метил|-ЗН-піразол-3-он

Названа в заголовку сполука одержана способом, подібним описаному у прикладі 1, з використанням 4- (метилтіо)бензилового спирту замість 4-ізопропоксибензилового спирту і використанням 3-оксопентаноату замість метил ацетоацетату.

ІН-ЯМР (500мгц, ОМ5О-йв) 6 м.д.: 1,02 (ЗН, т, 9-7,6Гц), 2,39 (2Н, кв, 9-7,6Гу), 2,42 (ЗН, с), 3,51 (2Н, с), 7,05-7,20 (АН, м).

Приклад 11 1,2-дигідро-4-І(4-ізопропілфеніл)метил|-5-метил-ЗН-піразол-3-он

До суспензії гідриду натрію (6095, 40мг) у 1,2-диметоксиетані (1мл) додають метилацетоацетат (0,11мл), 4- ізопропілбензилхлорид (0,17г) і каталітичну кількість йодиду натрію, і суміш перемішують при 80"С протягом ночі. Реакційну суміш виливають у насичений водний розчин гідрокарбонату натрію, і суміш екстрагують діетиловим ефіром. Органічний шар промивають насиченим розчином соли і сушать над безводним сульфатом магнію. Розчинник видаляють під зниженим тиском і залишок розчиняють у толуолі (1мл). До розчину додають безводний гідразин (0,094мл) і суміш перемішують при 80"С протягом ночі. Розчинник видаляють під зниженим тиском, і залишок очищають колонковою хроматографією на силікагелі (елюент: дихлорметан/метанол--10/1) з одержанням 1,2-дигідро-4-І(4-ізопропілфенілуметил|-5-метил-ЗН-піразол-3-ону (0,120).

ІЄН-ЯМР (500мгц, ОМ5О-йв) б м.д.: 1,16 (6Н, д, 9У-6,9Гц), 2,01 (ЗН, с), 2,70-2,90 (1Н, м), 3,49 (2Н, с), 6,95- 7,20 (АН, м).

Приклад 12 4-(4-етилфеніл)метил!|-1,2-дигідро-5-метил-ЗН-піразол-3-он

Названа в заголовку сполука одержана способом, подібним описаному в прикладі 11, з використанням 4- етилбензилхлориду замість 4-ізопропілбензилхлориду.

ІЄН-ЯМР (500мгц, ОМ5О-айв) 6 м.д.: 1,13 (ЗН, т, 9-7,6Гц), 2,00 (ЗН, с), 2,45-2,60 (2Н, м), 3,49 (2Н, с), 7,00- 7,15 (АН, м).

Приклад 13 1,2-дигідро-5-метил-4-((4-метилфеніл)метил|-ЗН-піразол-3-он

Названа в заголовку сполука одержана способом, подібним описаному у прикладі 11, з використанням 4- метилбензилброміду замість 4-ізопропілбензилхлориду. 1ТН-ЯМР (500мгц, ОМ5О-ав) 5 м.д.: 1.98 (ЗН, с), 2,23 (ЗН, с), 3,48 (2Н, с), 6,95-7,10 (АН, м).

Довідковий приклад 1 4-бензил-1,2-дигідро-5-трифторметил-ЗН-піразол-3-он

Названа в заголовку сполука одержана способом, подібним описаному у прикладі 11, з використанням етилтрифторацетоацетату замість метилацетоацетату і з використанням бензилброміду замість 4- ізопропілбензилхлориду.

ІН-ЯМР (500мгц, ОМ50О-ав) 5 м.д.: 3,73 (2Н, с), 7,05-7,35 (5Н, м), 12,50-13,10 (1Н, шир.с).

Приклад 14 1,2-дигідро-4-((4-метилфеніл)метил|-5-метил-ЗН-піразол-3-он

Названа в заголовку сполука одержана способом, подібним описаному у прикладі 11, з використанням 4- метоксибензилброміду замість 4-ізопропілбензилхлориду.

ІН-ЯМР (500мгц, ОМ50О-ав) 5 м.д.: 1.99 (ЗН, с), 3,47 (2Н, с), 3,69 (ЗН, с), 6,75-6,85 (2Н, м), 7,00-7,10 (2Н, м), 8,70-11,70 (2Н, шир.)

Довідковий приклад 2

4-бензил-1,2-дигідро-5-метил-ЗН-піразол-3-он

Названа в заголовку сполука одержана способом, подібним описаному у прикладі 11, з використанням бензилброміду замість 4-ізопропілбензилхлориду. 1ТН-ЯМР (500мгц, ОМ5О-ав) 6 м.д.: 2,00 (ЗН, с), 3,54 (2Н, с), 7,05-7,30 (5Н, с).

Приклад 15 4-(4-ізопропоксифеніл)метилі|-5-метил-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-ЮО-глюкопіранозилокси)- 1Н-піразол

До суспензії 1,2-дигідро-4-((4-ізопропоксифеніл)метил|-5-метил-ЗН-піразол-З-ону (46мг), ацетобром-о-

Оглюкози (99мг) і молекулярного сита 4А в тетрагідрофурані (Змл) додають карбонат срібла (ббм/г) і суміш перемішують при затіненні світла при 65"С протягом ночі. Реакційну суміш очищають колонковою хроматографією на амінопропіловому силікагелі (елюент: тетрагідрофуран) Подальше очищення препаративною тонкошаровою хроматографією на силікагелі (розчинник, який проявляє: етилацетат/гексан-2/1) дає 4-(4-ізопропоксифеніл)метил|-5-метил-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-р-О- глюкопіранозилокси)-1 Н-піразол (42мГг).

ІН-ЯМР (500мгц, СОС 13) 6 м.д.: 1,25-1,35 (6Н, м), 1,88 (ЗН, с), 2,01 (ЗН, с), 2,03 (ЗН, с), 2,05 (ЗН, с), 210 (ЗН, с), 3,45-3,65 (2Н, м), 3,80-3,90 (1Н, м), 4,13 (1Н, дд, 92,3, 12,4Гц), 4,31 (1Н, дд, 9У-4,0, 12,4Гу), 4,40-4,55 (ІН, м), 5,15-5,35 (ЗН, м), 5,50-5,60 (1Н, м), 6,70-6,80 (2Н, м), 6,95-7,05 (2Н, м).

Приклад 16 5-метил-4-(4-пропілфеніл)метил!/д-3-(2,3,4,3-тетра-О-ацетил-Д-ЮО-глюкопіранозилокси)-1 Н-піразол

Названа в заголовку сполука одержана способом, подібним описаному у прикладі 15, з використанням 1,2- дигідро-5-метил-4-(4-пропілфеніл)метил|-ЗН-піразол-3-ону замість 1,2-дигідро-4-І(4-ізопропоксифеніл)метил|-

Б-метил-ЗН-піразол-3-ону. 1ІТН-ЯМР (500МГЦц, СОСІз) 5 м.д.: 0,91 (ЗН, т, 9-7,3ГЦ), 1,50-1,65 (2Н, м), 1,86 (ЗН, с), 2,01 (ЗН, с), 2,03 (ЗН, с), 2,05 (ЗН, с), 2,10 (ЗН, с), 2,45-2,55 (2Н, м), 3,55 (1Н, д, 9-15,8Гц), 3,63 (1Н, д, У-15,8Гц), 3,80-3,90 (1Н, м), 4,13 (1Н, дд, У-2,3, 12,4Гц), 4,30 (1Н, дд, 9-3,9, 12,4ГцЦ), 5,15-5,35 (ЗН, м), 5,50-5,60 (1Н, м), 7,00-7,20 (АН, м).

Приклад 17 4-(4-ізобутилфеніл)метил|-5-метил-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-Ю-глюкопіранозилокси)-1 Н-піразол

Названа в заголовку сполука одержана способом, подібним описаному у прикладі 15, з використанням 1,2- дигідро-4-І(4-ізобутилфеніл)метил|-5-метил-ЗН-піразол-З-ону замість /1,2-дигідро-4-І(4-ізопропоксифеніл)- метил|-5-метил-ЗН-піразол-З-ону. 1ТН-ЯМР (500мгц, СОСІз) 6 м.д.: 0,87 (ВН, д, 9У-6,6 ГЦ), 1,70-1,85 (1Н, м), 1,87 (ЗН, с), 2,01 (ЗН, с), 2,03 (ЗН, с), 2,06 (ЗН, с), 2,10 (ЗН, с), 2,40 (2Н, д, 9-7,2Гу), 3,56 (1Н, д, У-15,8Гц), 3,63 (1Н, д, У-15,8Гц), 3,80-3,90 (1Н, м), 4,14 (1Н, дд, 9У-2,3, 12,4Гц), 4,31 (1Н, дд, У-4,0, 12,4Гц), 5,15-5,35 (ЗН, м), 5,50-5,60 (1Н, м), 6,95-7,10 (АН, м).

Приклад 18

Б5-метил-4-(4-пропоксифеніл)метил)-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-ЮО-глюкопіранозилокси)-1Н-піразол

Названа в заголовку сполука одержана способом, подібним описаному у прикладі 15, з використанням 1,2- дигідро-5-метил-4-((4-пропоксифеніл)метил|-ЗН-піразол-3З-ону замість 1,2-дигідро-4-((4- ізопропоксифеніл)метил|-5-метил-ЗН-піразол-3-ону.

ІН-ЯМР (500мгц, СОСІз) 6 м.д.: 1,01 (ЗН, т, 9-74 Гу), 1,70-1,85 (2Н, м), 1,89 (ЗН, с), 2,01 (ЗН, с), 2,03 (ЗН, с), 2,06 (ЗН, с), 2,10 (ЗН, с), 3,53 (1Н, д, 9У-15,7 Гц), 3,59 (1Н, д, 9У-15,7Гу), 3,80-3,95 (ЗН, м), 4,14 (1Н, дд, 9-23, 12,4 Гц), 4,31 (1Н, дд, уУ-4,0,12,4ГцЦ), 5,15-5,35 (ЗН, м), 5,50-5,60 (1Н, м), 6,70-6,80 (2Н, м), 6,95-7,10 (2Н, м).

Приклад 19 4-(4-етоксифеніл)метил|-5-метил-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-р-ЮО-глюкопіранозилокси)-1Н-піразол

Названа в заголовку сполука одержана способом, подібним описаному у прикладі 15, з використанням 4- ((4-етоксифеніл)метил|-1,2-дигідро-5-метил-ЗН-піразол-3-ону замість 1,2-дигідро-4-((4- ізопропоксифеніл)метил|-5-метил-ЗН-піразол-3-ону. 1ТН-ЯМР (500мгц, СОСІз) 6 м.д.: 1,38 (ЗН, т, 9У-7,0ГЦ), 1,89 (ЗН, с), 2,01 (ЗН, с), 2,03 (ЗН, с), 2,06 (ЗН, с), 2,10 (ЗН, с), 3,53 (1Н, д, 9У-15,8Гу), 3,59 (1Н, д, 9У-15,8Гцу), 3,80-3,90 (1Н, м), 3,98 (2Н, кв, 9-7,0Гу), 4,13 (1Н, дд, у-2,3, 12,4Гц), 4,91 (ІН, дд, 9У- 4,0, 12,А4Гц), 5,15-5,30 (ЗН, м), 5,50-5,60 (1Н, м), 6,70-6,80 (2Н, м), 6,95-7,10 (2Н,

М).

Приклад 20

Б-метил-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-ЮО-глюкопіранозилокси)-4-І(4-трифторметилфеніл)метил|-1 Н-піразол

Названа в заголовку сполука одержана способом, подібним описаному у прикладі 15, з використанням 1,2- дигідро-5-метил-4-(4-трифторметилфеніл)метил|-ЗН-піразол-3-ону замість 1,2-дигідро-4-((4- ізопропоксифеніл)метил|-5-метил-ЗН-піразол-3-ону.

ІН-ЯМР (500мгц, СОСІз) б м.д.: 1,85 (ЗН, с), 2,01 (ЗН, с), 2,03 (ЗН, с), 2,06 (ЗН, с), 2,14 (ЗН, с), 3,65 (1Н, д, 9-15,9Гц), 3,71 (ІН, д, 9-15,9Гу), 3,80-3,90 (1Н, м), 4,14 (1Н, дд, 9У-2,4, 12,АГЦ), 4,31 (1Н, дд, У-4,0, 12.4Гу), 5,15-5,40 (ЗН, м), 5,55-5,65 (1Н, м), 7,20-7,30 (2Н, м), 7,45-7,55 (2Н, м).

Приклад 21 4-(4-трет-бутилфеніл)метил|-5-метил-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-ЮО-глюкопіранозилокси)-1Н-піразол

Названа в заголовку сполука одержана способом, подібним описаному у прикладі 15, з використанням 4- ((4-третбутилфеніл)метил|-1,2-дигідро-5-метил-ЗН-піразол-3-ону замість 1,2-дигідро-4-((4- ізопропоксифеніл)метил|-5-метил-ЗН-піразол-3-ону. 1ТН-ЯМР (5б0омгц, СОСІв) 5 м.д.: 1,27 (9Н, с), 1,84 (ЗН, с), 2,01 (ЗН, с), 2,03 (ЗН, с), 2,06 (ЗН, с), 2,14 (ЗН, с), 3,56 (1Н, д, 9У-15.8Гц), 3,64 (1Н, д, У-15,8Гц), 3,80-3,90 (1Н, м), 4,13 (1Н, дд, уУ-2,3, 12,4Гц), 4,31 (1Н, дд, 9-40, 12,4Гц), 5,15-5,30 (ЗН, м), 5,50-5,60 (1Н, м), 7,00-7,10 (2Н, м), 7,20-7,30 (2Н, м).

Приклад 22 4-(4-бутоксифеніл)метил|-5-метил-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-ЮО-глюкопіранозилокси)-1 Н-піразол

Названа в заголовку сполука одержана способом, подібним описаному у прикладі 15, з використанням 4- ((4-бутоксифеніл)метил|-1,2-дигідро-5-метил-ЗН-піразол-3-ону замість 1,2-дигідро-4-((4-

ізопропоксифеніл)метил|-5-метил-ЗН-піразол-3-ону. 1ТН-ЯМР (500мгц, СОСІз) б м.д.: 0,96 (ЗН, т, 9-74 Гц), 1,40-1,55 (2Н, м), 1,65-1,80 (2Н, м), 1,88 (ЗН, с), 2,01 (ЗН, с), 2,03 (ЗН, с), 2,06 (ЗН, с), 2,10 (ЗН, с), 3,52 (1Н, д, 9У-15,8Гц), 3,59 (1Н, д, 9.-15,8Гц), 3,80-3,90 (1Н, м), 3,91 (2Н, т, 9-6,5Гц), 4,13 (1Н, дд, 9-23, 12,4ГцЦ), 4,91 (1Н, дд, У-4,0, 12,4Гуц), 5 15-5,30 (ЗН,м), 5,50-5,60 (1Н, м), 6,70-6,80 (2Н, м), 6,95-7,10 (2Н м).

Приклад 23 5-метил-4-(4-метилтіофеніл)метилі/|-3-(2.3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-ЮО-глюкопіранозилокси)-1Н-піразол

Названа в заголовку сполука одержана способом, подібним описаному у прикладі 15, з використанням 1,2- дигідро-5-метил-4-((4-метилтіофеніл)метил|-ЗН-піразол-3-ону замість 1,2-дигідро-4-І((4- ізопропоксифеніл)метил|-5-метил-ЗН-піразол-3-ону.

ІТН-ЯМР (500МГЦ, СОС з) 6 м.д.: 1,88 (ЗН, с), 2,01 (ЗН, с), 2,03 (ЗН, с), 2,07 (ЗН, с), 2,12 (ЗН, с), 2,44 (ЗН, с),

З,50-3,65 (2Н, м), 3,80-3,90 (1Н, м), 4,13 (1Н, дд, 9-24, 12,4Гц), 4,31 (1Н, дд, У-4,1, 12,4Гц), 5,15-5,30 (ЗН, м), 5,55-95,65 (1Н, м), 7,00-7,10 (2Н, м), 7,10-7,20 (2Н, м), 8,65-8,85 (1Н, шир.с)

Приклад 24

Б5-етил-4-І(4-метилтіофеніл)метил)|-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-ЮО-глюкопіранозилокси)-1 Н-піразол

Названа в заголовку сполука одержана способом, подібним описаному у прикладі 15, з використанням 5- етил-1,2-дигідро-4-(4-метилтіофеніл)метил|-ЗН-піразол-3З-ону замість 1,2-дигідро-4-((4- ізопропоксифеніл)метил|-5-метил-ЗН-піразол-3-ону. 1ІТН-ЯМР (500МГЦц, СОСІз) 5 м.д.; 1,13 (ЗН, т, 9-7,6Гц), 1,88 (ЗН, с), 2,01 (ЗН, с), 2,03 (ЗН, с), 2,06 (ЗН, с), 2,44 (ЗН, с), 2,45-2,55 (2Н, м), 3,50-3,70 (2Н, м), 3,80-3,90 (1Н, м), 4,05-4,20 (1Н, м), 4,31 (1Н, дд, 9У-4,0, 12,4Гц), 5,15- 5,35 (ЗН, м), 5,55-5,65 (1Н, м), 7,00-7,10 (2Н, м), 7,10-7,20 (2Н, м), 8,80-9,20 (1Н, шир.с).

Приклад 25 4-(4-ізопропілфеніл)метилі|-5-метил-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-ЮО-глюкопіранозилокси)-1Н-піразол

Названа в заголовку сполука одержана способом, подібним описаному у прикладі 15, з використанням 1,2- дигідро-4-(4-ізопропілфеніл)метил|-5-метил-ЗН-піразол-3-ону замість 1,2-дигідро-4-((4- ізопропоксифеніл)метил|-5-метил-ЗН-піразол-3-ону. 1ТН-ЯМР (500мгц, СОСІз) 6 м.д.: 1,20 (6Н, Д, 9У-6,9ГЦ), 1,85 (ЗН, с), 2,01 (ЗН, с), 2,03 (ЗН, с), 2,06 (ЗН, с), 2713 (ЗН, с), 2,75-2,90 (1Н, м), 3,56 (1Н, д, 9У-15,8Гц), 3,63 (1Н, д, 9-15,8Гц), 3,80-3,90 (1Н, м), 4,05-4,20 (1Н, м), 4,31 (ІН, дд, 9- 4,0, 12,4ГЦ), 5,15-5,35 (ЗН, м), 5,50-5,60 (1Н, м), 7,00-7,15 (АН, м), 8,70-9,30 (1Н, шир.с).

Приклад 26 4-(4-метилтіофеніл)метил|-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-ЮО-глюкопіранозилокси)-5-трифторметил-1 Н- піразол

До розчину 1,2-дигідро-4-((4-метилтіофеніл)метил|-5-трифторметил-ЗН-піразол-3-ону (2,0г) в ацетонітрилі (100мл) додають ацетобром-о-О-глюкозу (3,1г) і карбонат калію (1,1г) і суміш перемішують при кімнатній температурі протягом ночі. До реакційної суміші додають воду і одержану суміш екстрагують етилацетатом.

Органічний шар промивають насиченим водним розчином гідрокарбонату натрію і насиченим розчином соли і сушать над безводним сульфатом магнію. Розчинник видаляють під зниженим тиском і залишок очищають колонковою хроматографією на силікагелі (елюент: гексан/етилацетат-1/1) з одержанням 4-|(4-метил- тіофеніл)метил|-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-ЮО-глюкопіранозил-окси)-5-трифторметил-1 Н-піразолу (2,0г).

ІН-ЯМР (500мгц, СОСІв) 6 м.д.: 1,91 (ЗН, с), 2,03 (ЗН, с), 2,04 (ЗН, с), 2,09 (ЗН, с), 2,45 (ЗН, с), 3,73 (2Н, с),

З,75-3,90 (1Н, м), 4,15-4,35 (2Н, м), 5,15-5,65 (4Н, м), 7,00-7,20 (АН, м).

Приклад 27 4-бензил-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-ЮО-глюкопіранозилокси)-5-трифторметил-1Н-піразол

Названа в заголовку сполука одержана в такий же спосіб, що описаний у прикладі 26, з використанням 4- бензил-1,2-дигідро-5-трифторметил-ЗН-піразол-3-ону замість 1,2-дигідро-4-((4-метилтіофеніл)метил|-5- трифторметил-ЗН-піразол-3-ону. 1ТН-ЯМР (500мгц, СОСІз) 5 м.д.: 1,89 (ЗН, с), 2,02 (ЗН, с), 2,04 (ЗН, с), 2,08 (ЗН, с), 3,70-3,90 (ЗН, м), 4,15- 4,30 (2Н, м), 5,10-5,50 (4Н, м), 7,10-7,30 (5Н, м).

Приклад 28 4-(4-метоксифетл)метил)|-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-р-ЮО-глюкопіранозилокси)-5-трифторметил-1 Н-піразол

Названа в заголовку сполука одержана в такий же спосіб, що описаний у прикладі 26, з використанням 1,2-дигідро-4-((4-метоксифеніл)метил|-5-трифторметил-ЗН-піразол-3З-ону замість 1,2-дигідро-4-((4- метилтіофеніл)метил|-5-трифторметил-ЗН-піразол-З-ону.

ІН-ЯМР (500мгц, СОСІз) б м.д.: 1,93 (ЗН, с), 2,03 (ЗН, с), 2,05 (ЗН, с), 2,09 (ЗН, с), 3,65-3,75 (2Н, м), 3,77 (ЗН, с), 3,75-3,90 (1Н, м), 4,15-4,35 (2Н, м), 5,10-5,45 (АН, м), 6,75-6,85 (2Н, м), 7,00-7,15 (2Н, м).

Приклад 29 4-(4-метоксифеніл)метил|-5-метил-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-ЮО-глюкопіранозилокси)-1 Н-піразол

Названа в заголовку сполука одержана в такий же спосіб, що описаний у прикладі 15, з використанням 1,2-дигідро-4-((4-метоксифеніл)метил|-5-метил-ЗН-піразол-3-ону замість 1,2-дигідро-4-((4- ізопропоксифеніл)метил|-5-метил-ЗН-піразол-3-ону. 1ТН-ЯМР (500мгц, СОСІз) 6 м.д.: 1,89 (ЗН, с), 2,02 (ЗН, с), 2,03 (ЗН, с), 2,05 (ЗН, с), 2,10 (ЗН, с), 3,45-3,65 (2Н, м), 3,76 (ЗН, с), 3,80-3,90 (1Н, м), 4,11 (1Н, дд, 9-22, 12,4Гцу), 4,30 (1Н, дд, уУ-4,0, 12,4ГЦц), 5,15-5,35 (ЗН, м), 5,50-5,60 (1Н, м), 6,70-6,85 (2Н, м), 7,00-7,10 (2Н, м).

Приклад 30 4-бензил-5-метил-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-ЮО-глюкопіранозилокси)-1 Н-піразол

Названа в заголовку сполука одержана в такий же спосіб, що описаний у прикладі 15, з використанням 4- бензил-1,2-дигідро-5-метил-ЗН-піразол-З-ону замість 1,2-дигідро-4-((4-ізопропоксифеніл)метил|-5-метил-ЗН- піразол-3З-ону. 1ТН-ЯМР (5бомгц, СОСІЗз) 6 м.д.: 1,86 (ЗН, с), 2,01 (ЗН, с), 2,03 (ЗН, с), 2,06 (ЗН, с), 2,11 (ЗН, с), 3,59 (ІН, д,

9-15,8Гу), 3,66 (1Н, д, 9У-15,8Гц), 3,80-3,90 (1Н, м), 4,11 (1Н, дд, 9У-2,3, 12,4Гц),-4,30 (1Н, дд, 9У-4,0, 12.4Гу), 5,15-5,30 (ЗН, м), 5,50-5,65 (1Н, м), 7,05-7,30 (5Н, м), 8,75-9,55 (1Н, шир.с).

Приклад 31 4-(4-метоксифеніл)метил|-1,5-диметил-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-О-глюкопіранозилокси)піразол

Суспензію 4-(4-метоксифеніл)метил|-5-метил-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-ЮО-глюкопіранозилокси)-1 Н- піразолу (18мг), карбонату калію (14мг) і йодметану (4,7мг) в ацетонітрилі (2мл) перемішують при 7570 протягом ночі. Реакційну суміш фільтрують через селітФ і розчинник з фільтрату видаляють під зниженим тиском. Залишок очищають препаративною тонкошаровою хроматографією (розчинник, який проявляє: бензол/ацетон-2/1) з одержанням 4-(4-метоксифеніл)метил|-1,5-диметил-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-р-О- глюкошранозил-окси)піразолу (4мгГг). 1ТН-ЯМР (500мгц, СОСІз) 6 м.д.: 1,90 (ЗН, с), 2,01 (ЗН, с), 2,03 (ЗН, с), 2,06 (ЗН, с), 2,07 (ЗН, с), 3,45-3,60 (2Н, м), 3,60 (ЗН, с), 3,76 (ЗН, с), 3,80-3,90 (1Н, м), 4,13 (1Н, дд, 9У-2,4, 12,4 Нзл), 4,29 (1Н, дд, 9-41, 12,4Гцу), 5,15- 5,30 (ЗН, м), 5,50-5,60 (1Н, м), 6,70-6,80 (2Н, м), 7,00-7,10 (2Н, м).

Приклад 32 1-метил-4-(4-метилтіофеніл)метил|-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-ЮО-глюкопіранозилокси)-5- трифторметилпіразол

Суспензію А-(4-метилтіофеніл)метил)-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-ЮО-глюкопіранозилокси)-5- трифторметил-1Н-піразолу (ЗОмг), карбонату калію (8,0мг) і йодметану (8,2мг) у тетрагідрофурані (мл) перемішують при 757"С протягом ночі. Реакційну суміш фільтрують через селітФ і розчинник з фільтрату видаляють під зниженим тиском. Залишок очищають препаративною тонкошаровою хроматографією (розчинник, який проявляє: дихлорметан/зтилацетат-:5/1) з одержанням 1-метил-4-(4-метилтіофеніл)метил|-3- (2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-ЮО-глюкопіранозилокси)-5-трифторметилпіразолу (1ЗмгГ). 1ТН-ЯМР (500мгц, СОСІз) 6 м.д.: 1,89 (ЗН, с), 2,02 (ЗН, с), 2,04 (ЗН, с), 2,07 (ЗН, с), 2,44 (ЗН, с), 3,65-3,95 (6Н,

М), 4,14 (1Н, дд, 9У-2,3, 12,4ГуЦ), 4,29 (1Н, дд, У-4,3, 12,4Гц), 5,15-5,35 (ЗН, м), 5,50-5,65 (1Н, м), 7,00-7,20 (АН, т).

Приклад 33 1-етил-4-І(4-метилтіофеніл)метил|-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-ЮО-глюкопіранозилокси)-5- трифторметилпіразол

Названа в заголовку сполука одержана тим же способом, що описаний у прикладі 32, з використанням йод етану замість йодметану.

ІН-ЯМР (500мгц, СОСІз) б м.д.: 1,40 (ЗН, т, 9У-7,2Гц), 1,90 (ЗН, с), 2,02 (ЗН, с), 2,04 (ЗН, с), 2,06 (ЗН, с), 2,44 (ЗН, с), 3,72 (2Н, с), 3,80-3,90 (1Н, м), 4,05-4,20 (ЗН, м), 4,27 (1Н, дд, 9У-4,5, 12,4Гц), 5,10-5,35 (ЗН, м), 5,55-5,65 (ІН, м), 7,00-7,10 (2Н, м), 7,10-7,20 (2Н, м).

Приклад 34 4-(4-метилтіофеніл)метил|-1-пропіл-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-ЮО-глюкопіранозилокси)-5- трифторметилпіразол

Названа в заголовку сполука одержана тим же способом, що описаний у прикладі 32, з використанням йодпропану замість йодметану. 1ТН-ЯМР (500мгц, СОСІз) 6 м.д.: 0,92 (ЗН, т, 9-7,4ГЦ), 1,75-1,90 (2Н, м), 1,89 (ЗН, с), 2,02 (ЗН, с), 2,04 (ЗН, с), 2,06 (ЗН, с), 2,44 (ЗН, с), 3,72 (2Н, с), 3,80-3,90 (1Н, м), 3,90-4,05 (2Н, м), 4,12 (1Н, дд, уУ-2,3, 12,4Гу), 4,27 (1Н, дд, уУ-4,5, 12,АГц), 5,10-5,35 (ЗН, м), 5,55-5,65 (1Н, м), 7,00-7,10 (2Н, м), 7,10-7,20 (2Н, м).

Приклад 35 3-(Д-Р-Глюкопіранозилокси)-4-|(4-ізопропоксифеніл)метил|-5-метил-1Н-піразол

До розчину 4-((4-ізопропоксифеніл)метил|-5-метил-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-ЮО-глюкопіранозилокси)-1Н- піразолу (б1мг) у етанолі (Змл) додають 1н водний розчин гідроксиду натрію (0,53мл) і суміш перемішують при кімнатній температурі протягом 2 годин. Розчинник видаляють під зниженим тиском і залишок очищають шляхом твердофазного екстрагування на ОДС (005; розчинник, що промиває: дистильована вода, елюент: метанолу з одержанням /3-(В-ЮО-глюкопіранозилокси)-4-|(4-ізопропоксифеніл)метил|-5-метил-1 Н-піразолу (39мг).

ІН-ЯМР (5б00мгц, СОзОБ) 6 м.д.: 1,26 (6Н, д, 9У-5,9Гц), 2,05 (ЗН, с), 3,25-3,45 (4Н, м), 3,55-3,75 (ЗН, м), 3,75- 3,90 (1Н, м), 4,45-4,60 (1Н, м), 5,00-5,10 (1Н, м), 6,70-6,80 (2Н, м), 7,00-7,15 (2Н, м).

Приклад 36 3-(8-О-Глюкопіранозилокси)-5-метил-4-(4-пропілфеніл)метил|-1 Н-піразол

Названа в заголовку сполука одержана тим же способом, що описаний у прикладі 35, з використанням 5- метил-4-((4-пропілфеніл)метил|-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-ЮО-глюкопіранозилокси)-1Н-піразолу замість 4-((4- ізопропокси-феніл)метилі|-5-метил-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-О-глюкопіранозилокси)-1 Н-піразолу. 1ТН-ЯМР (500мгц, СОзОО) 5 м.д.: 0,91 (ЗН, т, 9У-7,5Гц), 1,50-1,65 (2Н, м), 2,05 (ЗН, с), 2,45-2,60 (2Н, м), 3,25- 3,45 (4Н, м), 3,55-3,75 (ЗН, м), 3,83 (1Н, д, 9У-11,9Гц), 5,00-5,10 (1Н, м), 7,00-7,15 (АН, м).

Приклад 37 3-(8-Ю-глюкопіранозилокси)-4-|(4-ізобутилфеніл)метил|-5-метил-1Н-піразол

Названа в заголовку сполука одержана тим же способом, що описаний у прикладі 35, з використанням 4- ((4-їзобутилфеніл)метил|-5-метил-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-р-ЮО-глюкопіранозилокси)-1Н-піразолу замість 4- (4-ізопропокси-феніл)метил|-5-метил-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-ЮО-глюко-піранозилокси)-1 Н-ніразолу.

ІЄН-ЯМР (500мгц, СОзОб) 5 м.д.: 0,87 (6Н, д, У-6,6Гц), 1,70-1,90 (1Н, м), 2,04 (ЗН, с), 2,41 (2Н, д, 9-7 1ГЦ), 3,25-3,45 (4Н, м), 3,55-3,90 (4Н, м), 5,00-5,10 (1Н, м), 6,95-7,15 (АН, м).

Приклад 38 3-(8-О-глюкопіранозилокси)-5-метил-4-|(4-пропоксифеніл)-метилі|-1 Н-піразол

Названа в заголовку сполука одержана тим же способом, що описаний у прикладі 35, з використанням 5-

метил-4-((4-пропоксифеніл)метил|-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-ЮО-глюкопіранозилокси)-1Н-піразолу замість 4- ((4-ізопропоксифеніл)метил|-5-метил-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-ЮО-глюкопіранозилокси)-1 Н-піразолу.

ІН-ЯМР (500мгц, СОзОВ) 5 м.д.: 1,02 (ЗН, т, 927,А4ГЦ), 1,65-1,80 (2Н, м), 2,05 (ЗН, с), 3,25-3,45 (4Н, м), 3,60- 3,75 (ЗН, м), 3,80-3,90 (ЗН, м), 5,00-5,10 (1Н, м), 6,70-6,85 (2Н, м), 7,05-7,15 (2Н, м).

Приклад 39 4-(4-етоксифеніл)метил)|--3-(Д-О-глюкопіранозилокси)-5-метил-1 Н-піразол

Названа в заголовку сполука одержана тим же способом, що описаний у прикладі 35, з використанням 4- ((4-етоксифеніл)метил|-5-метил-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-ЮО-глюкопіранозилокси)-1Н-піразолу замість 4-(4- ізопропокси-феніл)метилі|-5-метил-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-О-глюкопіранозилокси)-1Н-піразолу.

ІН-ЯМР (500мгц, СОзОВ) 5 м.д.: 1,34 (ЗН, т, 927,0ГЦ), 2,05 (ЗН, с), 3,25-3,45 (АН, м), 3,60-3,75 (ЗН, м), 3,80- 3,90 (1Н, м), 3,97 (2Н, кв, У-7,0Гц), 5,00-5,10 (1Н, м), 6,70-6,85 (2Н, м), 7,05-7,15 (2Н, м).

Приклад 40 3-ІД-О-глюкопіранозилокси)-5-метил-4-(4-трифторметилфеніл)-метилі|-1 Н-піразол

Названа в заголовку сполука одержана тим же способом, що описаний у прикладі 35, з використанням 5- метил-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-р-ЮО-глюкопіранозилокси)-4-((4-трифторметилфеніл)метил|-1Н-піразолу замість 4-(4-ізо-пропоксифеніл)метил|-5-метил-3-(2,3,4,б-тетра-О-ацетил-Д-Ю-глюкопіранозилокси)-1Н- піразолу.

ІТН-ЯМР (500мгц, СОзОБ) 6 м.д.: 2,08 (ЗН, с), 3,20-3,40 (АН, м), 3,67 (1Н, дд, 9У-5,0, 11,9Гц), 3,75-3,90 (ЗН, м), 5,00-5,10 (1Н, м), 7,30-7,45 (2Н, м), 7,45-7,60 (2Н, м).

Приклад 41 4-(4-трет-бутилфеніл)метил|-3-(8-Ю-глюкопіранозилокси)-5-метил-1 Н-піразол

Названа в заголовку сполука одержана тим же способом, що описаний у прикладі 35, з використанням 4- ((4-трет-бутилфеніл)метил|-5-метил-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-ЮО-глюкопіранозилокси)-1Н-піразолу замість 4- ((4-ізопро-поксифеніл)метил|-5-метил-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-ЮО-глюкопіранозилокси)-1 Н-піразолу. 1ТН-ЯМР (500мгц, СОзОО) 5 м.д.: 1,28 (9Н, с), 2,06 (ЗН, с), 3,25-3,45 (АН, м), 3,60-3,90 (4Н, м), 5,00-5,10 (1Н, м), 7,05-7,15 (2Н, м), 7,20-7,30 (2Н, м).

Приклад 42 4-(4-бутоксифеніл)метил|-3-(8-ЮО-глюкопіранозилокси)-5-метил-1 Н-піразол

Названа в заголовку сполука одержана тим же способом, що описаний у прикладі 35, з використанням 4- ((4-бутоксифеніл)метил|-5-метил-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-ЮО-глюкопіранозилокси)-1 Н-піразолу замість 4-|(4- ізопропокси-феніл)метилі|-5-метил-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-О-глюкопіранозилокси)-1Н-піразолу. 1ТН-ЯМР (500мгц, СОзОБ) 5 м.д.: 0,97 (ЗНУ, т, 927,4 Гц), 1,40-1,55 (2Н, м), 1,65-1,80 (2Н, м), 2,05 (ЗН, с), 3,30- 3,45 (АН, м), 3,60-3,75 (ЗН, м), 3,83 (1Н, д, У9-12,0Гц), 3,91 (2Н, т, 9-6,4Гцу), 5,00-5,10 (1Н, м), 6,70-6,85 (2Н, м), 7,05-7,15 (2Н, м).

Приклад 43 3-(8-О-Глюкопіранозилокси)-5-метил-4-(4-метилтіофеніл)-метил|-1 Н-піразол

Названа в заголовку сполука одержана тим же способом, що описаний у прикладі 35, з використанням 5- метил-4-(4-метилтіофеніл)метил|-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-З-ЮО-глюкопіранозилокси)-1!Н-піразолу замість 4- ((4-ізопропокси-феніл)метил|-5-метил-3-(2,3,4, б-тетра-О-ацетил-Д-ЮО-глюкопіранозилокси)-1 Н-піразолу.

ІН-ЯМР (500мгц, СОзОО) 5 м.д.: 2,06 (ЗН, с), 2,42 (ЗН, с), 3,20-3,45 (АН, м), 3,55-3,75 (ЗН, м), 3,80-3,90 (1Н, м), 5,00-5,10 (1Н, м), 7,05-7,20 (АН, м).

Приклад 44

Б5-етил-3-(Д-ЮО-глюкопіранозилокси)-4-(4-метилтіофеніл)-метилі-1 Н-піразол

Названа в заголовку сполука одержана тим же способом, що описаний у прикладі 35, з використанням 5- етил-4-((4-метилтіофеніл)метил|-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-ЮО-глюкопіранозилокси)-1Н-піразолу замість 4-(4- ізопропокси-феніл)метил|-5-метил-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-ЮО-глюкопіранозилокси)-1Н-піразолу.

ІН-ЯМР (500мгц, СОзОБ) 5 м.д.: 1,06 (ЗН, т, 9-7,6Гцу), 2,42 (ЗН, с), 2,47 (2Н, кв, 9У-7,6Гц), 3,25-3,45 (4Н, м),

З,60-3,80 (ЗН, м), 3,80-3,90 (1Н, м), 5,00-5,10 (1Н, м), 7,10-7,20 (АН, м).

Приклад 45 3-(8-О-Глюкопіранозилокси)-4-((4-ізопропілфеніл)метил|-5-метил-1 Н-піразол

Названа в заголовку сполука одержана тим же способом, що описаний у прикладі 35, з використанням 4- (4-ізопропілфеніл)метил|-5-метил-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-ЮО-глюкопіранозилокси)-1Н-піразолу замість 4- ((4-ізопропокси-феніл)метил|-5-метил-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-ЮО-глюкопіранозилокси)-1 Н-піразолу.

ІН-ЯМР (5б00мгц, СОзОБ) 6 м.д.: 1,20 (6Н, д, уУ-6,9Гц), 2,05 (ЗН, с), 2,75-2,90 (1Н, м), 3,25-3,45 (4Н, м), 3,55- 3,90 (4Н, м), 5,00-5,10 (1Н, м), 7,00-7,15 (4Н, м).

Приклад 46 3-(8-О-глюкопіранозилокси)-4-(4-метилтіофеніл)уметил|-5-трифторметил-1 Н-піразол

Названа в заголовку сполука одержана тим же способом, що описаний у прикладі 35, з використанням 4- ((4-метилтіофеніл)метил|-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-р-Ю-глюкопіранозилокси)-5-трифторметил-1 Н-піразолу замість 4-(4-ізопропоксифеніл)метил|-5-метил-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-О-глюкопіранозилокси)-1 Н- піразолу.

ІН-ЯМР (500мгц, СОзОБ) 5 м.д.: 2,42 (ЗН, с), 3,25-3,50 (4Н, м), 3,69 (1Н, дд, уУ-4,9, 12,0Гц), 3,75-3,90 (ЗН, м), 4,90-5,10 (1Н, м), 7,10-7,20 (4Н, м).

Приклад 47 4-бензил-3-(8-ЮО-глюкопіранозилокси)-5-трифторметил-1Н-піразол

Названа в заголовку сполука одержана тим же способом, що описаний у прикладі 35, з використанням 4- бензил-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-ЮО-глюкопіранозилокси)-5-трифторметил-1Н-піразолу замість 4-(4-

ізопропоксифеніл)-метил|-5-метил-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-О-глюкопіранозилокси)-1Н-піразолу.

ІН-ЯМР (500мгц, СРЗОО) 5 м.д.: 3,25-3,45 (4Н, м), 3,67 (1Н, дд, 25,3, 12,0Гц), 3,80-3,95 (ЗН, м), 4,97 (1Н, д, 9-7 ,АГЦ), 7,05-7,25 (5Н, м).

Приклад 48 3-(8-О-Глюкопіранозилокси)-4-((4-метоксифеніл)метил|-5-трифторметил-1 Н-піразол

Названа в заголовку сполука одержана тим же способом, що описаний у прикладі 35, з використанням 4- (4-метоксифеніл)метил|-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-О-глюкопіранозилокси)-5-трифторметил-1 Н-піразолу замість 4-(4-ізопропоксифеніл)метил|-5-метил-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-О-глюкопіранозилокси)-1Н- піразолу. 1ТН-ЯМР (500мгц, СОзЗОО) 5 м.д.: 3,25-3,45 (АН, м), 3,67 (1Н, д, 925,4, 12,1ГЦ), 3,73 (ЗН, с), 3,75-3,90 (ЗН, м), 4,90-5,00 (1Н, м), 6,70-6,85 (2Н, м), 7,05-7,15 (2Н, м).

Приклад 49 3-(8-О-глюкопіранозилокси)-4-((4-метоксифеніл)метил|-5-метил-1 Н-піразол

Названа в заголовку сполука одержана тим же способом, що описаний у прикладі 35, з використанням 4- ((4-метоксифеніл)метил|-5-метил-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-ЮО-глюкопіранозилокси)-1 Н-піразолу замість 4-|(4- ізопропокси-феніл)метилі|-5-метил-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-О-глюкопіранозилокси)-1Н-піразолу. 1ТН-ЯМР (500мгц, СОзЗОО) 5 м.д.: 2.04 (ЗН, с), 3,25-3,45 (АН, м), 3,55-3,75 (ЗН, м), 3,73 (ЗН, с), 3,80-3,90 (1Н, м), 5,00-5,10 (1Н, м), 6,75-6,85 (2Н, м), 7,05-7,15 (2Н, м).

Приклад 50 4-бензил-3-(8-ЮО-глюкозопіранозилокси)-5-метил-1 Н-піразол

Названа в заголовку сполука одержана тим же способом, що описаний у прикладі 35, з використанням 4- бензил-5-метил-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-ЮО-глюкопіранозилокси)-1Н-піразолу замість 4-(4-ізопропокси- феніл)метил|-5-метил-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-ЮО-глюколіранозилокси)-1 Н-піразолу. 1ТН-ЯМР (500мгц, СОзОБ) 5 м.д.: 2.05 (ЗН, с), 3,25-3,А45 (4Н, м), 3,60-3,90 (АН, м), 5,00-5,10 (1Н, м), 7,05-7,25 (5Н, м).

Приклад 51 3-(8-О-Глюкопірайозилокси)-4-((4-метоксифеніл)метил|-1,5-диметилпіразол

Названа в заголовку сполука одержана тим же способом, що описаний у прикладі 35, з використанням 4- ((4-метоксифеніл)метил|)|-1,5-диметил-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-Ю-глюкопіранозилокси)піразолу замість 4- ((4-ізопропоксифеніл)метил|-5-метил-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-ЮО-глюкопіранозилокси)-1 Н-піразолу.

ІН-ЯМР (500мгц, СОзОО) 5 м.д.: 2,06 (ЗН, с), 3,25-3,45 (4Н, м), 3,55-3,70 (ВН, м), 3,73 (ЗН, с), 3,75-3,90 (1Н, м), 5,00-5,10 (1Н, м), 6,70-6,80 (2Н, м), 7,05-7,15 (2Н, м).

Приклад 52 3-(8-О-Глюкопіранозилокси)-1-метил-4-(4-метилтіофеніл)-метил|-5-трифторметилпіразол

Названа в заголовку сполука одержана тим же способом, що описаний у прикладі 35, з використанням 1- метил-4-((4-метилтіофеніл)метилі-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-З-ЮО-глюкопіранозилокси)-5- трифторметилпіразолу замість 4-(4-ізопропоксифеніл)метил|-5-метил-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-р-О- глюкопіранозилокси)-1 Н-піразолу.

ІН-ЯМР (500мгц, СОзОБ) 5 м.д.: 2,42 (ЗН, с), 3,30-3,50 (4Н, м), 3,69 (1Н, дд, уУ-4,7, 12,0Гц), 3,75-3,90 (6Н,

М), 5,25-5,35 (1Н, м), 7,05-7,20 (4Н, м).

Приклад 53 1-етил-3-(8-Ю-глюкопіранозилокси)-4-І(4-метилтіофеніл)-метил|-5-трифторметилпіразол

Названа в заголовку сполука одержана тим же способом, що описаний у прикладі 35, з використанням 1- етил-4-((4-метилтіофеніл)метил|-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-ЮО-глюкопіранозилокси)-5-трифторметилпіразолу замість 4-(4-ізопропоксифеніл)метил|-5-метил-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-ЮО-глюкопіранозилокси)-1Н- піразолу.

ІН-ЯМР (500мгц, СОзОВ) 5 м.д.: 1,38 (ЗН, т, 927,1 ГЦ), 2,42 (ЗН, с), 3,30-3,50 (АН, м), 3,60-3,75 (1Н, м), 3,75- 3,90 (1Н, м), 4,14 (2Н, кв, 9-7,1ГЦ), 5,25-5,35 (1Н, м), 7,05-7,20 (АН, м).

Приклад 54 3-(8-О-Глюкопіранозилокси)-4-(4-метилтіофеніл)метил|-1-пропіл-5-трифторметилпіразол

Названа в заголовку сполука одержана тим же способом, що описаний у прикладі 35, з використанням 4- ((4-метилтіофеніл)метил|-1-пропіл-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-ЮО-глюкопіранозилокси)-5- трифторметилпіразолу замість 4-(4-ізопропоксифеніл)метил|-5-метил-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-р-О- глюкопіранозилокси)-1 Н-піразолу. 1ТН-ЯМР (500мгц, СОзОБ) 5 м.д.: 0,90 (ЗН, т, 9У-7,4Гц), 1,75-1,90 (2Н, м), 2,42 (ЗН, с), 3,30-3,50 (4Н, м), 3,69 (ІН, дд, У-4,9, 12,0Гц), 3,75-3,90 (ЗН, м), 4,00-4,10 (2Н, м), 5,25-5,35 (1Н, м), 7,05-7,20 (АН, м).

Приклад 55 3-(8-О-глюкопіранозилокси)-5-метил-4-((4-метилфеніл)метил|-1 Н-піразол

Б5-метил-4-(4-метилфеніл)метил|-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-ЮО-глюкопіранозилокси)-1Н-піразол одержаний тим же способом, що описаний у прикладі 15, з використанням 1,2-дигідро-5-метил-4-|(4- метилфеніл)метил|-ЗН-піразол-3-ону замість 1,2-дигідро-4-ІЇ(4-ізопропоксифеніл)метил|-5-метил-ЗН-піразол-3- ону. Потім названу в заголовку сполука, одержували в такий же спосіб, як описано в прикладі 35, з використанням 5-метил-4-(4-метилфеніл)метил|-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-Ю-глюкопіранозилокси)-1 Н- піразолу замість 4-|((4-ізопропоксифеніл)метил|-5-метил-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-ЮО-глюкопіранозилокси)- 1Н-піразолу. 1ТН-ЯМР (500мгц, СОзЗОО) 5 м.д.: 2,04 (ЗН, с), 2,26 (ЗН, с), 3,25-3,45 (АН, м), 3,55-3,90 (АН, м), 5,00-5,10 (1Н, м), 6,95-7,15 (4Н, м).

Приклад 56

4-(4-етилфеніл)метил|-3-(8-О-глюкопіранозилокси)-5-метил-1 Н-піразол 4-(4-етилфеніл)метилі|-5-метил-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-ЮО-глюкопіранозилокси)-1Н-піразол одержаний тим же способом, що описаний у прикладі 15, з використанням 4-|(4-етилфеніл)метил)|-1,2-дигідро-5-метил-ЗН- піразол-З-ону замість 1,2-дигідро-4-((4-ізопропоксифеніл)метил|-5-метил-ЗН-піразол-З-ону. Потім названу в заголовку сполуку одержували таким же способом, що описаний у прикладі 35, з використанням 4-|(4- етилфеніл)метил|-5-метил-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-З-ЮО-глюкопіранозилокси)-1 Н-піразолу замість 4-(4- ізопропоксифеніл)метил|-5-метил-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-ЮО-глюкопіранозилокси)-1 Н-піразолу. 1ТН-ЯМР (5б0мгц, СОзОБ) 6 м.д.: 1,18 (ЗН, 6, 9У-7,6Гу), 2,04 (ЗН, с), 2,57 (2Н, кв, 9У-7,6Гу), 3,25-3,45 (АН, м),

З,55-3,90 (4Н, м), 5,00-5,10 (1Н, м), 6,95-7,20 (4Н, м).

Приклад 57 3-(8-О-глюкопіранозилокси)-4-(4-метилфеніл)метил|-5-трифторметил-1 Н-піразол 4-(4-метилфеніл)метил)|-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-ЮО-глюкопіранозилокси)-5-трифторметил-1 Н-піразол одержаний тим же способом, що описаний у прикладі 26, з використанням 1,2-дигідро-4-(4- метилфеніл)метил|-5-Трифторметил-ЗН-піразол-3-ону замість 1,2-дигідро-4-І(4-метилтіофеніл)метил|-5- трифтор-метил-ЗН-піразол-З-ону. Потім названу в заголовку сполуку одержували таким же способом, що описаний у прикладі 35, з використанням 4-(4-метилфеніл)метил|-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-рД-О- глюкопіранозилокси)-5-трифтор-метил-1Н-піразолу замість 4-(4-ізопропоксифеніл)метил|-5-метил-3-(2,3,4,6- тетра-О-ацетил-Д-ЮО-глюкопіранозилокси)-1Н-піразолу.

ІН-ЯМР (5б00мгц, СОзОБ) 6 м.д.: 2,25 (ЗН, с), 3,20-3,45 (4Н, м), 3,55-3,70 (1Н, м), 3,70-3,90 (ЗН, м), 4,80-4,95 (1Н,м), 6,90-7,15 (4Н м).

Приклад 58 4-(4-етилфеніл)метил|-3-(8-О-глюкопіранозилокси)-5-трифторметил-1Н-піразол 4-(4-етилфеніл)метил|-3-(2,3,4,6-тетгтгра-О-ацетил-Д-ЮО-глюкопіранозилокси)-5-трифторметил-1Н-піразол одержаний тим же способом, що описаний у прикладі 26, з використанням 4-((4-етилфеніл)метил|-1,2-дигідро-

Б-трифтор-метил-ЗН-піразол-3-ону замість 1,2-дигідро-4-(4-метилтіо-феніл)метил|-5-трифторметил-З3Н- піразол-3-ону. Потім названу в заголовку сполуку одержували таким же способом, що описаний у прикладі 35, з використанням 4-|((4-етилфеніл)метил|-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-ЮО-глюкопіранозилокси)-5-трифторметил- 1Н-піразолу замість 4-(4-ізопропоксифеніл)-метил|-5-метил-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-О-глюкопіранозил- окси)-1Н-піразолу.

ІН-ЯМР (500мгц, СОзОО) 5 м.д.: 1,18 (ЗН, т, 9У-7,6Гц), 2,50-2,60 (2Н, м), 3,15-3,40 (4Н, м), 3,55-3,65 (1Н, м),

З,70-3,90 (ЗН, м), 4,80-4,95 (1Н, м), 6,95-7,15 (4Н, м).

Приклад 59 3-(8-О-глюкопіранозилокси)-4-(4-ізопропілфеніл)метил|-5-трифторметил-1Н-піразол 4-(4-ізопропілфеніл)метил|-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-З-ЮО-глюкопіранозилокси)-5-трифторметил-1 Н- піразол одержаний тим же способом, що описаний у прикладі 26, з використанням 1,2-дигідро-4-((4- ізопропілфеніл)метил|-5-трифторметил-ЗН-піразол-З-ону замість 1,2-дигідро-4-((4-метилтіофеніл)мегил|-5-

Трифторметил-ЗН-піразол-3-ону. Потім названа в заголовку сполука була одержана таким же способом, що описаний у прикладі 35, з використанням 4-(4-ізопропілфеніл)метил|-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-р-О- глюкопіранозилокси)-5-трифтор-метил-1Н-піразолу замість 4-(4-ізопропоксифеніл)метил|-5-метил-3-(2,3,4,6- тетра-О-ацетил-Д-ЮО-глюкопіранозилокси)-1 Н-піразолу. 1ТН-ЯМР (500мгц, СОзЗОО) 5 м.д.: 1,20 (6Н, д, 9-6,9ГЦ), 2,75-2,85 (1Н, м), 3,15-3,40 (АН, м), 3,55-3,65 (1Н, м),

З,70-3,90 (ЗН, м), 4,80-4,95 (1Н, м), 7,00-7,15 (4Н, м).

Приклад 60 4-(4-хлорфеніл)метилі|-3-(8-О-глюкопіранозилокси)-5-трифторметил-1 Н-піразол 4-(4-хлорфеніл)метил|-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-З-ЮО-глюкопіранозилокси)-5-трифторметил-1 Н-піразол одержаний тим же способом, що описаний у прикладі 26, з використанням 4-|(4-хлорфеніл)метил|-1,2-дигідро-

Б-трифторметил-ЗН-піразол-3-ону замість 1,2-дигідро-4-((4-метилтіофеніл)метил|-5-трифторметил-ЗН-піразол-

З-ону. Потім названу в заголовку сполуку одержували таким же способом, що описаний у прикладі 35, з використанням 4-((4-хлорфеніл)метил|)-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-Д-ЮО-глюкопіранозилокси)-5-трифтор-метил- 1Н-піразолу замість 4-(4-ізопропоксифеніл)метил|-5-метил-3-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-р-О- глюкопіранозилокси)-1 Н-піразолу.

ІН-ЯМР (500мгц, СОзОБ) б м.д.: 3,20-3,40 (4Н, м), 3,55-3,70 (1Н, м), 3,75-3,90 (ЗН, м), 4,80-4,95 (1Н, м), 7,10-7,25 (АН, м).

Приклад 61 3-(8-О-глюкопіранозилокси)-4-(4-ізопропілфеніл)уметил|-5-метил-1 Н-пропілпіразол

До суспензії 3-(8-О-глюкопіранозилокси)-4-|(4-ізопропоксифеніл)метил|-5-метил-1Н-піразолу (50мг) і карбонату цезію (0,20г) у М,М-диметилформаміді (1мл) додають йодпропан (0,03бмл) при 50"С и суміш перемішують протягом ночі. До реакційної суміші додають воду й одержану суміш очищають твердофазним екстрагуванням на ОДС (розчинник, який промиває: дистильована вода, елюент: метанол). Одержану напівочищену речовину очищають колонковою хроматографією на силікагелі (елюент: дихлорметан/метанол т8/1) з одержанням 3-(Д-ЮО-глюкопіранозилокси)-4-(4-ізопропоксифеніл)метил|-5-метил-1 Н-пропілпіразолу (28мг).

ІН-ЯМР (500мгц, СОзОб) 6 м.д.: 0,87 (ЗН, т, 9-7,4Гу), 1,26 (6Н, д, 9У-6,0Гц), 1,65-1,80 (2Н, м), 2,07 (ЗН, с), 3,25-3,45 (4Н, м), 3,55-3,75 (ЗН, м), 3,75-3,95 (ЗН, м), 4,40-4,60 (1Н, м), 5,00-5,10 (1Н, м), 6,70-6,80 (2Н, м), 7,00- 7,10 (2Н, м).

Приклад 62 1-етил-3-(8-ЮО-глюкопіранозилокси)-4-((4-ізопропілфеніл)-метил|-5-метилпіразол

Названа в заголовку сполука, одержана таким же способом, що описаний у прикладі 61, з використанням йодетану замість йодпропану.

ІТН-ЯМР (5б0мгц, СОзОО) 5 м.д.: 1,26 (6Н, д, 9-6,0ГЦ), 1,29 (ЗН, т, 9У-7,2Гу), 2,08 (ЗН, с), 3,25-3,45 (АН, м),

З,55-3,75 (ЗН, м), 3,75-3,90 (1Н, м), 3,96 (2Н, кв, 9У-7,2Гц), 4,40-4,60 (1Н, м), 5,00-5,10 (1Н, м), 6,70-6,80 (2Н, м), 7,00-7,10 (2Н, м).

Приклад 63 1-етил-3-(8-Ю-глюкопіранозилокси)-4-((4-метоксифеніл)метил|-5-метилпіразол

Названа в заголовку сполука одержана таким же способом, що описаний у прикладі 61, з використанням 3-(8-О-глюкопіранозилокси)-4-((4-метоксифеніл)метил|-5-метил-1 Н-піразолу замість 3-(8-0- глюкопіранозилокси)-4-(4-ізопропоксифеніл)метил|-5-метил-1!Н-піразолу і використанням йодетану замість йодпропану.

ІН-ЯМР (500мгц, СОзОО) 5 м.д.: 1,29 (ЗН, т, 9У-7,1Гц), 2,07 (ЗН, с), 3,20-3,45 (4Н, м), 3,55-3,75 (6Н, м), 3,82 (ІН, дд, --2,0, 12,0Гу), 3,90-4,05 (2Н, м), 5,00-5,10 (1Н, м), 6,70-6,85 (2Н, м), 7,05-7,15 (2Н,м).

Приклад 64 3-(8-О-глюкопіранозилокси)-4-((4-метоксифеніл)метил|-5-метил-1-пропілпіразол

Названа в заголовку сполука одержана таким же способом, що описаний у прикладі 61, з використанням 3-(8-О-глюкопіранозилокси)-4-((4-метоксифеніл)метил|-5-метил-1 Н-піразолу замість 3-(р-0- глюкопіранозилокси)-4-(4-ізопропоксифеніл)метилі|-5-метил-1 Н-піразолу.

ІН-ЯМР (500мгц, СОзО0б) 5 м.д.: 0,87 (ЗН, т, 927,5ГЦ), 1,65-1,80 (2Н, м), 2,07 (ЗН, с), 3,35-3,45 (4Н, м), 3,60- 3,75 (ЗН, м), 3,73 (ЗН, с), 3,75-3,85 (1Н, м), 3,85-3,95 (2Н, м), 5,00-5,10 (1Н, м), 6,70-6,85 (2Н,м), 7,00-7,15 (2Н,м).

Приклад 65 1-етил-4-І(4-етоксифеніл)метил|-3-(0-О-глюкопіранозилокси)-5-метилпіразол

Названа в заголовку сполука одержана таким же способом, що описаний у прикладі 61, з використанням 4-(4-етоксифеніл)метил|-5-метил-3-(8-О-глюкопіранозилокси)-1 Н-піразолу замість 3-(8-ЮО-глюкопіранозилокси)- 4-(4-ізо-пропоксифеніл)метил|-5-метил-1 Н-піразолу і використанням йодетану замість йодпропану 1ІТН-ЯМР (500мгц, СОзОБ) 6 м.д.: 1,28 (ЗН, т, 9-7,4Гц), 1,34 (ЗН, т, 9-7,2Гц), 2,07 (ЗН, с), 3,25-3,45 (АН, м),

З,55-3,75 (ЗН, м), 3,75-3,85 (1Н, м), 3,90-4,00 (4Н, м), 5,00-5,10 (1Н, м), 6,70-6,85 (2Н м), 7,00-7,15 (2Н,м).

Приклад 66 4-(4-етоксифеніл)метил|-3-(Д-В-глюкопіранозилокси)-5-метил-1-пропілпіразол

Названа в заголовку сполука одержана таким же способом, що описаний у прикладі 61, з використанням 4-(4-етоксифеніл)метил|-5-метил-3-(8-О-глюкопіранозилокси)-1 Н-піразолу замість 3-(8-ЮО-глюкопіранозилокси)- 4-(4-ізо-пропоксифеніл)метил|-5-метил-1 Н-піразолу.

ІТН-ЯМР (500МГЦц, СОзОБ) 5 м.д.: 0,87 (ЗН, т, 9У-7,6Гц), 1,34 (ЗН, т, 9-7,1Гу), 1,65-1,80 (2Н, м), 2,07 (ЗН, с), 3,25-3,45 (4Н, м), 3,55-3,75 (ЗН, м), 3,81 (1Н, дд, 922,1, 12,1Гц), 3,85-4,05 (4Н, м), 5,00-5,10 (1Н, м), 6,70-6,85 (2Н, м), 7,00-7,15 (2Н, м).

Приклад 67 1-етил-4-І(4-етоксифеніл)метил|-3-(0-О-глюкопіранозилокси)-5-метилпіразол

Названа в заголовку сполука одержана таким же способом, що описаний у прикладі 61, з використанням 4-(4-етилфеніл)метил|-5-метил-3-(Д-ЮО-глюкопіранозилокси)-1Н-піразолу замість 3-(Д-О-глюкопіранозилокси)-4- ((4-ізопропокси-феніл)метил|-5-метил-1Н-піразолу і використанням йодметану замість йодпропану.

ІН-ЯМР (5б00мгц, СОзОб) 6 м.д.: 1,17 (ЗН, т, 9У-7,6Гц), 1,28 (ЗН, т, 9-7,2ГЦц), 2,06 (ЗН, с), 2,56 (2Н, кв, 97,6Гц), 3,25-3,45 (4Н, м), 3,55-3,75 (ЗН, м), 3,75-3,85 (1Н, м), 3,90-4,00 (2Н, м), 5,00-5,10 (1Н,м), 7,00-7,15 (4Н,м).

Приклад 68 4-(4-етилфеніл)метил|-3-(8-О-глюкопіранозилокси)-5-метил-1-пропілпіразол

Названа в заголовку сполука одержана таким же способом, що описаний у прикладі 61, з використанням 4-(4-етилфеніл)метил|-5-метил-3-(Д-ЮО-глюкопіранозилокси)-1Н-піразолу замість 3-(Д-О-глюкопіранозилокси)-4- (4-ізопропокси-феніл)метил|-5-метил-1Н-піразолу.

ІН-ЯМР (500мгц, СОзОБ) 5 м.д.: 0,87 (ЗН, т, 9-7,АГу), 1,17 (ЗН, т, 9-7,6Гу), 1,65-1,80 (2Н, м), 2,06 (ЗН, с), 2,56 (2Н, кв, 9У-7,6Гц), 3,25-3,45 (4Н, м), 3,60-3,95 (6Н, м), 5,00-5,10 (1Н, м), 7,00-7,15 (4Н,м).

Приклад 69 1-бутил-3-(8-Ю-глюкопіранозилокси)-4-|(4-ізопропоксифеніл)-метил|-5-метилпіразол

Названа в заголовку сполука одержана таким же способом, що описаний у прикладі 61, з використанням бромбутану замість йодпропану.

ІН-ЯМР (500мгц, СОзО0) 5 м.д.: 0,92 (ЗН, т, 927,А4ГЦ), 1,20-1,40 (ВН, м), 1,60-1,75 (2Н, м), 2,07 (ЗН, с), 3,25- 3,45 (4Н, м), 3,55-3,75 (ЗН, м), 3,81 (1Н, дд, 9-21, 12,0Гц), 3,91 (2Н, т, 3-7,2Гц), 4,45-4,55 (1Н, м), 5,00-5,10 (1Н, м), 6,70-6,80 (2Н, м), 7,00-7,10 (2Н, м).

Приклад 70 3-(8-О-глюкопіранозилокси)-4-(4-ізопропілфеніл)метил)|-1-ізопропіл-5-метилпіразол

Названа в заголовку сполука одержана таким же способом, що описаний у прикладі 61,3 використанням 2- бромпропану замість йодпропану.

ІН-ЯМР (5б00мгц, СОзОБ) 6 м.д.: 1,26 (6Н, д, уУ-6,0Гц), 1,30-1,40 (6Н, м), 2,08 (ЗН, с), 3,15-3,45 (4Н, м), 3,55- 3,75 (ЗН, м), 3,78 (1Н, дд, У-2,3, 12,0Гцу), 4,35-4,45 (1Н, м), 4,45-4,55 (1Н, м), 5,00-5,10 (1Н, м), 6,70-6,80 (2Н, м), 7,00-7,10 (2Н, м).

Приклад дослідження 1

Дослідження інгібуючої дії на активність людського НГЛС2 1) Конструювання плазмідного вектора, що експресує людський НГЛОС2

Одержання бібліотеки кКДНК для ампліфікації за допомогою ПЦР здійснювали шляхом зворотної транскрипції всієї РНК, взятої з людської нирки (Огі депе) з оліго а8Т як праймера, застосовуючи систему попередньої ампліфікації Бирег Зсгірі (сірсо-ВВІ: ГПІРЕ ТЕСНМОГОСІЕ5). Фрагмент ДНК, що кодує людський

НГЛО2, ампліфікували за допомогою реакції ПЦР, при якій використовували бібліотеку КДНК людської нирки, описану вище, як матрицю, а наступні олігонуклеотиди 0702Е і 0712К, представлені як послідовності 1 і 2, відповідно, використовували як праймери. Ампліфікований Фрагмент ДНК лігували у вектор рСкК (Іпмігодеп) для клонування, за стандартною методикою, прикладеною до набору. Е5спегіспіа соїї НВ101 трансформували звичайним способом і потім робили селекцію трансформантів на агаровому середовищі В, що містить 5омкг/мл канаміцину. Після того, як плазмідну ДНК екстрагували з одного з трансформантів і очищали, робили ампліфікацію фрагменту ДНК, що кодує людський НГЛОС2, шляхом реакції ПЦР, при якій наступні олігонуклеотиди 0714Е і 0715К, представлені у вигляді послідовності номер З і номер 4, відповідно, використовували як праймери. Ампліфікований фрагмент ДНК розщеплювали за допомогою рестрикційних ферментів Хпо І ії Ніпа ПІ ї потім очищали за допомогою системи очищення Міг2ага (Рготеда). Цей очищений фрагмент ДНК вставляли у відповідні сайти рестрикції сСОМАЗ.1 (-) Мус/Ніз-В (Іпігодеп) - вектора для експресії злитого білка. ЕвсПпегіспіа соїї НВІ01 трансформували звичайним способом і потім робили селекцію трансформантів на агаровому середовищі І В, що містить 50мкг/мл ампіциліну. Після того, як плазмідну ДНК екстрагували з цього трансформанту і очищали, аналізували послідовність основ фрагменту ДНК, вставленого в сайти поліклонування вектора рсоМАЗ.1 (-) Мус/Ніз-В. Цей клон мав єдину заміну основи (АТС, що кодує ізолейцин-433, був заміщений на СТ) у порівнянні з людським НГЛС2, про яку повідомляли УмеїЇ5 еї а. (Ат. 9.

РПувзіої., МоіІ.263, рр.459-465 (1992)). Потім одержували клон, у якому валін замінений на ізолейцин-433. Цей плазмідний вектор, що експресує людський НГЛС2, в якому пептид, представлений послідовністю номер 5, злитий з аланіновим залишком, на карбоксильному кінці позначений як КІ 29.

Послідовність номер 1 АтТОосАСсАССсАСАСАСАСОС

Послідовність номер 2 саСсАТАСААОССССАСАСОА

Послідовність номер З ДААССТоСАСАТОСАСОАОСАСАСАСАСаС

Послідовність номер 4 дАсСААДОСтТТОССАТАСААОССССАСАССА

Послідовність номер 5 Кк сРЕОКІИЗЕЕРІ МЗАМОНННННН 2) Одержання клітин, що тимчасово експресують людський НГЛС2. Плазміду КІ/29, що експресує людський НГЛОС2, трансфікували в клітини СО5-7 (КІКЕМ СЕ ВАМК КСВО539) шляхом електропорації.

Електропорацію виконували за допомогою СЕМЕ РОЇ ЗЕК ІІ (Віо-Кай І арогаюгіез) в умовах: 0,290кв, 975мкф, 2х106 клітин СО5-7 і 20мкг КІ29 у 500мкл середовища ОРТІ-МЕМ І! (Ссібсо-ВВІ: ГІРЕ ТЕСНМОГОСІЕ5) у кюветі типу 0,4 см. Після перенесення гена клітини збирали шляхом центрифугування і знову суспендували із середовищем ОРТІ-МЕМ І (Імл на кювету). У кожну комірку у 96-комірковому планшеті додавали 125мкл цієї суспензії клітин. Після культивування протягом ночі при 37"С в атмосфері 590 СО» у кожну комірку додавали 125мкл модифікованого за Дульбекко середовища Голка, що містило 1095 фетальної бичачої сироватки (Запко ЧЧуппуаки), 1Обод/мл натрієвої солі пеніциліну З (сбірсо-ВВІ: 1ІРЕ ТЕСНМОГОСІЕ5), 100мкг/мл стрептоміцин-сульфату (сірсо-ВКГ: РЕ ТЕСНМОГОСІЕ5). Ці клітини культивували до наступного дня, а потім їх використовували для виміру інгібуючої активності у відношенні поглинання метил-о-О- глюкопіранозиду. 3) Вимірювання інгібуючої активності у відношенні поглинання метил-с-ЮО-глюкопіранозиду

Після того, як випробувані сполуки розчиняли в диметилсульфоксиді і розбавляли буфером для визначення поглинання (буфер рН 7,4, що містить 140мМ хлориду натрію, 2мММ хлориду калію, 1мММ хлориду кальцію, ї7мМ хлориду магнію, 5мММ метил-а-О-глюкопіранозиду, 10мМ /2-(4-(2-гідроксіетил)-1- піперазиніл|дтансульфонової кислоти і 5мММ трис(гідроксиметил)амінометану), кожен розріджувач використовували як випробуваний зразок для визначення інгібуючої активності. Після видалення середовища від клітин СО5-7, що тимчасово експресують людський НГЛС2, у кожну комірку додавали 200мкл буфера для попередньої обробки (буфер рН 7,4, що містить 140мМ холінхлориду, 2иМ хлориду калію, їмМ хлориду кальцію, їмМ хлориду магнію, 10мМ 2-І4-(2-гідроксіетил)-1-піперазиніліетансульфонової кислоти і 5ММ трис(гідроксиметил)амінометану) і клітини інкубували при 37"С протягом 10 хвилин. Після того, як буфер для попередньої обробки видаляли, знову додавали 200мкл того ж буфера і клітини інкубували при 37"С протягом хвилин. Буфер для проведення вимірювань одержували шляхом додавання 7мкл метил-х-0-(О- 14С)глюкопіранозиду (Атегзпат РПагтасіа Віоїесп) до 525мкл одержаного образу для досліджень. Для контролю буфер для проведення вимірів готували без випробуваної речовини. Щоб оцінити вихідне поглинання під час відсутності випробуваної речовини і натрію, готували в такий же спосіб буфер для проведення вимірювання вихідного поглинання, що містить 140мМ холінхлориду замість хлориду натрію.

Після видалення буфера для попередньої обробки в кожну комірку додавали 75мкл кожного буфера для вимірювання, клітини інкубували при 37"С протягом 2 годин. Після того як видаляли буфер для проведення вимірювання в кожну комірку додавали 200мкл буфера, що промиває, (буфер із рН 7,4, що містить 140мММ холінхлориду, 2мММ хлориду калію, їмМ хлориду кальцію, їмМ хлориду магнію, 10мММ метил-а-О- глюкопіранозиду, 10МмМ 2-І4-(2-гідроксіетил)-1-піперазиніл|-етансульфонової кислоти і 5ММ трис(гідроксиметил)амінометану) і відразу ж видаляли. Після двох додаткових промивань клітини солюбілізували додаванням 75мкл 0,2н гідроксиду натрію в кожну комірку. Після того, як лізати клітин переносили в РісоРіаїе (РасКага) і в кожну комірку додавали 150мкл Місгозсіпі-40 (РасКага), проводили вимірювання радіоактивності за допомогою сцинтиляційного лічильника для мікропланшетів ТорсСоипі (РаскКага). Різницю в поглинанні одержували як 10095 значення шляхом вирахування значення радіоактивності при вихідному поглинанні зі значення радіоактивності в контрольному зразку, а потім концентрації, при яких поглинання інгібувалось на 5095 (ІСво), розраховували за кривою концентрація-інгібування за методом найменших квадратів. Результати показані в наступній таблиці 1.

Таблиця 1

Приклад дослідження 2

Дослідження за полегшуючим ефектом на виведення глюкози з сечею

Метод А)

Як експериментальну тварину використовували пацюків 50 лінії, що голодували протягом ночі, (стан при останньому обстеженні), самці, 5-тижневого віку, 120-150г). Випробувану сполуку (25,40мг) суспендували в 762мкл етанолу і розчиняли шляхом додавання 3,048мл поліетиленгліколю 400 і 3,8їмл фізіологічногоого розчину, і потім одержували розчин 3,Змг/мл. Частину цього, розчину розбавляли розчинником (фізіологічний розчин: поліетиленгліколь 400:етанол.--5:4:1) і потім одержували кожний розчин з концентрацією 3,3, 1 або 0,33 (мг/мл). Кожний з цих розчинів вводили під шкіру пацюкам у дозі Змл/кг (10, З і 1мг/кг). Для контролю підшкірно вводили тільки розчинник (фізіологічний розчин: поліетиленгліколь 400: етанол--5:4:1) у дозі Змл/кг. Відразу після цього підшкірного введення перорально вводили розчин глюкози 200 г/л у дозі 1О0мл/кг (2г/кг). Підшкірне введення робили за допомогою голки 2605 і їмл шприца. Пероральне введення робили за допомогою шлункового зонда для пацюків і 2,5мл шприца. Число особин в одній групі дорівнювало 3. Збирання сечі здійснювали в клітці для визначення загального метаболізму після того, як завершували ці введення. Час відбору зразків при збиранні сечі складав 4 години після введення глюкози. Після закінчення збирання сечі реєстрували обсяг сечі і визначали концентрацію глюкози в сечі. Концентрацію глюкози визначали за допомогою набору для лабораторних досліджень: Сійсозе В-Теві УМАКО (УМако Риге Спетісаї! Іпаисіпев, ЦО).

Кількість екскреції глюкози із сечею через 4 години на 1 організм розраховували за обсягом сечі і концентрацією глюкози.

Метод В)

Як експериментальну тварину використовували пацюків лінії ЗО, що голодували протягом ночі, (стан при останнбому обстеженні), самці, 7-тижневого віку, 180-200г). Випробувану сполуку (10мг) суспендували або розчиняли в Зб0Омкл етанолу і розчиняли шляхом додавання 1,2мл поліетиленгліколю 400 і 1,5мл фізіологічногоого розчину, а потім одержували розчин 3,Змг/мл. Частину цього розчину розбавляли розчинником (фізіологічний розчин: поліетиленгліколь 400:'етанол--5:4:1), а потім кожний розчин готували з концентрацією 3,3, 0,33 або 0,033 (мг/мл). Після того, як визначали вагу тіла пацюків, вводили розчин випробуваної сполуки шляхом внутрішньовенної ін'єкції в хвостову вену в дозі Змл/кг (10, 1 і 0,1мг/кг). Для контролю вводили тільки розчинник (фізіологічний розчин: поліетиленгліколь 400'еєтанол--5:4:1) шляхом внутрішньовенної ін'єкції в хвостову вену в дозі Змл/кг. Відразу ж після цього внутрішньовенного введення перорально вводили розчин глюкози 200г/л у дозі 1Омл/кг (2г/кг). Внутрішньовенне введення робили за допомогою голки 2605 і шприца на 1мл. Пероральне введення виконували за допомогою шлункового зонда для пацюків і шприца на 2,5мл. Кількість особин в одній групі дорівнювала 3. Збирання сечі здійснювали в клітці для визначення загального метаболізму після того, як завершували ці введення. Час відбору зразків при збиранні сечі складав 24 години після введення глюкози. Після закінчення збирання сечі, реєстрували обсяг сечі і визначали концентрацію глюкози в сечі. Концентрацію глюкози визначали за допомогою набору для лабораторних досліджень: сСіисозе В-Тезі МУАКО (М/ако Риге Спетіса! Іпдисігіев5, Ца). Кількість екскреції глюкози із сечею через 24 години на 200 г ваги тіла розраховували за обсягом сечі, концентрації глюкози і ваги тіла.

Результати представлені в наступній таблиці 2.

Таблиця 2 тот рен ВТ ер

Метод глюкози з сечею сполука (мг/кг) (мо

Приклад 35 ло | 533

Приклад дослідження З

Дослідження на гостру токсичність

Метод А)

Готували суспензію 100мг/мл шляхом додавання до випробуваної сполуки 0,595 розчину натрійкарбоксиметилцелюлози. Як експериментальну тварину використовували самців мишей ІС 6-7- тижневого віку, що голодували протягом 4 годин (Сіеа дарап, 28-33г, 5 тварин у кожній групі). Випробувану суспензію, описану вище, вводили експериментальним тваринам, описаним вище, перорально в дозі 10мл/кг (1000мг/кг) і потім встановлювали спостереження за ними на 24 години після введення.

Метод В)

Готували суспензію 200мг/мл шляхом додавання до випробуваної сполуки розчинника (фізіологічний розчин: поліетиленгліколь 400:'етанол--5:4:1). Як експериментальну тварину використовували самців мишей

ІСА Б-тижневого віку, що голодували протягом 4 годин (Сієа дарап, 26-33г, 5 тварин у кожній групі).

Випробувану суспензію, описану вище, вводили експериментальним тваринам, описаним вище, підшкірно в дозі Змл/кг (б0Омг/кг) і потім встановлювали спостереження за ними на 24 години після введення.

Результати показані в наступній таблиці 3.

Таблиця З смертей

Приклад35 -:/ | В | 05

Промислова застосовність

Глюкопіранозилоксибензилбензольні похідні, представлені вищенаведеною загальною формулою (Ії) за даним винаходом, і їх фармацевтично прийнятні солі володіють інгібуючою активністю у відношенні людського

НГЛОС2 і виявляють чудову гіпоглікемічну дію за допомогою виведення надлишку глюкози із сечею за рахунок запобігання зворотного всмоктування глюкози в нирках. Тому можуть бути одержані засоби профілактики або лікування діабету, ускладнень діабету, ожиріння тощо, що містять глюкопіранозилоксибензилбензольне похідне вищенаведеної загальної формули (І) за даним винаходом або його фармацевтично прийнятну сіль.

Крім того, сполуки, представлені вищенаведеними загальними формулами (М) і (МІЇ) і їх солі є важливими сполуками як проміжні продукти при виробництві сполук, представлених вищенаведеною загальною формулою (І), і їх фармацевтично прийнятних солей. Відповідно, сполуки даного винаходу, представлені вищенаведеною загальною формулою (І), і їх фармацевтично прийнятні солі можуть бути легко одержані через ці сполуки.