UA117732C2 - Парентеральна норовірусна вакцина - Google Patents
Парентеральна норовірусна вакцина Download PDFInfo
- Publication number
- UA117732C2 UA117732C2 UAA201401321A UAA201401321A UA117732C2 UA 117732 C2 UA117732 C2 UA 117732C2 UA A201401321 A UAA201401321 A UA A201401321A UA A201401321 A UAA201401321 A UA A201401321A UA 117732 C2 UA117732 C2 UA 117732C2
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- norovirus
- vaccine
- genogroup
- mcg
- dose
- Prior art date
Links
- 241001263478 Norovirus Species 0.000 title claims abstract description 338
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 title claims abstract description 218
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 155
- 238000009472 formulation Methods 0.000 title description 12
- 108090000565 Capsid Proteins Proteins 0.000 claims abstract description 56
- 102100023321 Ceruloplasmin Human genes 0.000 claims abstract description 55
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 44
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 claims abstract description 31
- 230000036039 immunity Effects 0.000 claims abstract description 17
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims abstract description 15
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 claims abstract description 14
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 81
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims description 43
- 229940035032 monophosphoryl lipid a Drugs 0.000 claims description 43
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 claims description 42
- 239000000902 placebo Substances 0.000 claims description 42
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 claims description 37
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 33
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 20
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical group [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 15
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 14
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 claims description 14
- 108091035707 Consensus sequence Proteins 0.000 claims description 13
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 11
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 claims description 9
- 241000445563 Rat norovirus Species 0.000 claims description 8
- 101000932768 Conus catus Alpha-conotoxin CIC Proteins 0.000 claims description 7
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 claims description 7
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 claims description 7
- 238000011160 research Methods 0.000 claims description 6
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 claims description 4
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N Succinic acid Natural products OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 claims description 3
- KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N butanedioic acid Chemical compound O[14C](=O)CC[14C](O)=O KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N 0.000 claims description 3
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 claims description 2
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 claims description 2
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- IJJWOSAXNHWBPR-HUBLWGQQSA-N 5-[(3as,4s,6ar)-2-oxo-1,3,3a,4,6,6a-hexahydrothieno[3,4-d]imidazol-4-yl]-n-(6-hydrazinyl-6-oxohexyl)pentanamide Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)NCCCCCC(=O)NN)SC[C@@H]21 IJJWOSAXNHWBPR-HUBLWGQQSA-N 0.000 claims 3
- 244000005894 Albizia lebbeck Species 0.000 claims 2
- 101100065885 Caenorhabditis elegans sec-15 gene Proteins 0.000 claims 1
- 108010038447 Chromogranin A Proteins 0.000 claims 1
- 102100031186 Chromogranin-A Human genes 0.000 claims 1
- 241001327708 Coriaria sarmentosa Species 0.000 claims 1
- 240000006927 Foeniculum vulgare Species 0.000 claims 1
- 235000004204 Foeniculum vulgare Nutrition 0.000 claims 1
- 241000283965 Ochotona princeps Species 0.000 claims 1
- 102000014105 Semaphorin Human genes 0.000 claims 1
- 108050003978 Semaphorin Proteins 0.000 claims 1
- 241000657469 Spermacoce capitata Species 0.000 claims 1
- 235000006732 Torreya nucifera Nutrition 0.000 claims 1
- 244000111306 Torreya nucifera Species 0.000 claims 1
- CCAZWUJBLXKBAY-ULZPOIKGSA-N Tutin Chemical compound C([C@]12[C@@H]3O[C@@H]3[C@@]3(O)[C@H]4C(=O)O[C@@H]([C@H]([C@]32C)O)[C@H]4C(=C)C)O1 CCAZWUJBLXKBAY-ULZPOIKGSA-N 0.000 claims 1
- 210000004268 dentin Anatomy 0.000 claims 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims 1
- 239000008141 laxative Substances 0.000 claims 1
- 230000002475 laxative effect Effects 0.000 claims 1
- CPTIBDHUFVHUJK-NZYDNVMFSA-N mitopodozide Chemical compound C1([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@H](O)[C@@H](CO)[C@@H]2C(=O)NNCC)=CC(OC)=C(OC)C(OC)=C1 CPTIBDHUFVHUJK-NZYDNVMFSA-N 0.000 claims 1
- YLHXSKZGPASTOD-ZMZOTGGVSA-N otophylloside B Chemical compound O1[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](OC)C[C@@H]1O[C@H]1[C@@H](OC)C[C@H](O[C@H]2[C@H](C[C@@H](O[C@@H]2C)O[C@@H]2CC3=CC[C@@]4(O)[C@@]5(O)CC[C@](O)([C@@]5(C)[C@H](OC(=O)\C=C(/C)C(C)C)C[C@@H]4[C@@]3(C)CC2)C(C)=O)OC)O[C@@H]1C YLHXSKZGPASTOD-ZMZOTGGVSA-N 0.000 claims 1
- 244000062645 predators Species 0.000 claims 1
- 230000000391 smoking effect Effects 0.000 claims 1
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 claims 1
- 235000014101 wine Nutrition 0.000 claims 1
- 102100031788 E3 ubiquitin-protein ligase MYLIP Human genes 0.000 description 92
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 76
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 64
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 64
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 61
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 40
- 230000004044 response Effects 0.000 description 40
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 38
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 29
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 29
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 28
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 25
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 25
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 23
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 21
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 21
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 20
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 20
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 18
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 18
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 17
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 17
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 16
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 16
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 description 16
- 208000006339 Caliciviridae Infections Diseases 0.000 description 15
- 230000035931 haemagglutination Effects 0.000 description 15
- 229940024545 aluminum hydroxide Drugs 0.000 description 13
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 13
- 210000000628 antibody-producing cell Anatomy 0.000 description 12
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 12
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 11
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 11
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 10
- 210000000776 antibody secreting cell Anatomy 0.000 description 9
- 229940031416 bivalent vaccine Drugs 0.000 description 9
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 9
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 9
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 9
- 210000001806 memory b lymphocyte Anatomy 0.000 description 9
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 9
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 9
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 8
- 241001617329 Norovirus isolates Species 0.000 description 8
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 8
- 210000000234 capsid Anatomy 0.000 description 8
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 8
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 8
- GZQKNULLWNGMCW-PWQABINMSA-N lipid A (E. coli) Chemical compound O1[C@H](CO)[C@@H](OP(O)(O)=O)[C@H](OC(=O)C[C@@H](CCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCCCC)[C@@H](NC(=O)C[C@@H](CCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCC)[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](OC(=O)C[C@H](O)CCCCCCCCCCC)[C@@H](NC(=O)C[C@H](O)CCCCCCCCCCC)[C@@H](OP(O)(O)=O)O1 GZQKNULLWNGMCW-PWQABINMSA-N 0.000 description 8
- 239000000047 product Substances 0.000 description 8
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 8
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 8
- 241000532183 Norovirus GI Species 0.000 description 7
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 7
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 7
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 7
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 7
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 6
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 5
- 101710199461 MP1 protein Proteins 0.000 description 5
- 101710140929 MP2 protein Proteins 0.000 description 5
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 5
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 5
- 238000010211 hemagglutination inhibition (HI) assay Methods 0.000 description 5
- 239000012678 infectious agent Substances 0.000 description 5
- 230000015788 innate immune response Effects 0.000 description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 5
- 238000012552 review Methods 0.000 description 5
- 231100000279 safety data Toxicity 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 5
- 206010019233 Headaches Diseases 0.000 description 4
- 208000000112 Myalgia Diseases 0.000 description 4
- 206010028813 Nausea Diseases 0.000 description 4
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 206010047700 Vomiting Diseases 0.000 description 4
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 4
- DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N creatinine Chemical compound CN1CC(=O)NC1=N DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 231100000869 headache Toxicity 0.000 description 4
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 4
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 4
- 239000012669 liquid formulation Substances 0.000 description 4
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 4
- 230000008693 nausea Effects 0.000 description 4
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 4
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 4
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 4
- 241000701447 unidentified baculovirus Species 0.000 description 4
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 4
- 230000008673 vomiting Effects 0.000 description 4
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 3
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 3
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 3
- 208000005577 Gastroenteritis Diseases 0.000 description 3
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 3
- 101000969327 Homo sapiens Methylthioribose-1-phosphate isomerase Proteins 0.000 description 3
- -1 I-histidine Substances 0.000 description 3
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 3
- 102100021415 Methylthioribose-1-phosphate isomerase Human genes 0.000 description 3
- 241000532184 Norovirus GII Species 0.000 description 3
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 3
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 102100038021 Steryl-sulfatase Human genes 0.000 description 3
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 3
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 3
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 description 3
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 3
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 3
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 3
- 229940037003 alum Drugs 0.000 description 3
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- 239000002095 exotoxin Substances 0.000 description 3
- 231100000776 exotoxin Toxicity 0.000 description 3
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 3
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 3
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 3
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 3
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 3
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 3
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 3
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 3
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 3
- 230000036407 pain Effects 0.000 description 3
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 3
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 3
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 3
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 3
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 3
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 3
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 3
- 241000894007 species Species 0.000 description 3
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 3
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 3
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 3
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 3
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 3
- 210000002845 virion Anatomy 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 2
- 208000004998 Abdominal Pain Diseases 0.000 description 2
- 208000006820 Arthralgia Diseases 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 2
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 108010040721 Flagellin Proteins 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VSOAQEOCSA-N L-altropyranose Chemical compound OC[C@@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VSOAQEOCSA-N 0.000 description 2
- 206010024769 Local reaction Diseases 0.000 description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 2
- 241000702670 Rotavirus Species 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003187 abdominal effect Effects 0.000 description 2
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 2
- 208000012873 acute gastroenteritis Diseases 0.000 description 2
- 230000004520 agglutination Effects 0.000 description 2
- AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N alumane Chemical class [AlH3] AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HPYIIXJJVYSMCV-MGDXKYBTSA-N astressin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCC)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]1C(N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=2N=CNC=2)C(=O)N[C@@H](CCCCNC(=O)CC1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(N)=O)=O)C(C)C)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CNC=N1 HPYIIXJJVYSMCV-MGDXKYBTSA-N 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 2
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 2
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 description 2
- 239000004067 bulking agent Substances 0.000 description 2
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 229940109239 creatinine Drugs 0.000 description 2
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 2
- 238000001493 electron microscopy Methods 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 2
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 2
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 2
- 230000006054 immunological memory Effects 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 2
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 2
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 2
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000021633 leukocyte mediated immunity Effects 0.000 description 2
- 210000003563 lymphoid tissue Anatomy 0.000 description 2
- 206010025482 malaise Diseases 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 2
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 2
- 229940031346 monovalent vaccine Drugs 0.000 description 2
- 230000016379 mucosal immune response Effects 0.000 description 2
- 210000003928 nasal cavity Anatomy 0.000 description 2
- 239000007923 nasal drop Substances 0.000 description 2
- 229940100662 nasal drops Drugs 0.000 description 2
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 2
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 229920002627 poly(phosphazenes) Polymers 0.000 description 2
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 2
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 2
- 238000009021 pre-vaccination Methods 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 description 2
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 2
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 2
- 238000001338 self-assembly Methods 0.000 description 2
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 2
- YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N (6E,10E,14E,18E)-2,6,10,15,19,23-hexamethyltetracosa-2,6,10,14,18,22-hexaene Chemical compound CC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)C YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RKDVKSZUMVYZHH-UHFFFAOYSA-N 1,4-dioxane-2,5-dione Chemical compound O=C1COC(=O)CO1 RKDVKSZUMVYZHH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OTLLEIBWKHEHGU-UHFFFAOYSA-N 2-[5-[[5-(6-aminopurin-9-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methoxy]-3,4-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-3,5-dihydroxy-4-phosphonooxyhexanedioic acid Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C(C(C1O)O)OC1COC1C(CO)OC(OC(C(O)C(OP(O)(O)=O)C(O)C(O)=O)C(O)=O)C(O)C1O OTLLEIBWKHEHGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HRGUSFBJBOKSML-UHFFFAOYSA-N 3',5'-di-O-methyltricetin Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC(C=2OC3=CC(O)=CC(O)=C3C(=O)C=2)=C1 HRGUSFBJBOKSML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YRNWIFYIFSBPAU-UHFFFAOYSA-N 4-[4-(dimethylamino)phenyl]-n,n-dimethylaniline Chemical compound C1=CC(N(C)C)=CC=C1C1=CC=C(N(C)C)C=C1 YRNWIFYIFSBPAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010000087 Abdominal pain upper Diseases 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 239000005995 Aluminium silicate Substances 0.000 description 1
- 230000003844 B-cell-activation Effects 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 102000009410 Chemokine receptor Human genes 0.000 description 1
- 108050000299 Chemokine receptor Proteins 0.000 description 1
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 1
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 1
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 description 1
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 description 1
- 206010061166 Gastroenteritis bacterial Diseases 0.000 description 1
- 101000868422 Homo sapiens Sushi, nidogen and EGF-like domain-containing protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000734214 Homo sapiens Unconventional prefoldin RPB5 interactor 1 Proteins 0.000 description 1
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- 102000016252 Huntingtin Human genes 0.000 description 1
- 108050004784 Huntingtin Proteins 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 1
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 1
- 206010022678 Intestinal infections Diseases 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 241000406668 Loxodonta cyclotis Species 0.000 description 1
- 108010006035 Metalloproteases Proteins 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 description 1
- 241001457034 Minireovirus Species 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 101100072790 Mus musculus Irf4 gene Proteins 0.000 description 1
- 208000010428 Muscle Weakness Diseases 0.000 description 1
- 206010028372 Muscular weakness Diseases 0.000 description 1
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 1
- IDDMFNIRSJVBHE-UHFFFAOYSA-N Piscigenin Natural products COC1=C(O)C(OC)=CC(C=2C(C3=C(O)C=C(O)C=C3OC=2)=O)=C1 IDDMFNIRSJVBHE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N Poloxamer Chemical compound C1CO1.CC1CO1 RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010076039 Polyproteins Proteins 0.000 description 1
- 229940124859 Rotavirus vaccine Drugs 0.000 description 1
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 101710172711 Structural protein Proteins 0.000 description 1
- 102100032853 Sushi, nidogen and EGF-like domain-containing protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 230000006044 T cell activation Effects 0.000 description 1
- 230000006052 T cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000005867 T cell response Effects 0.000 description 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N Tetramethylsqualene Natural products CC(=C)C(C)CCC(=C)C(C)CCC(C)=CCCC=C(C)CCC(C)C(=C)CCC(C)C(C)=C BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100033622 Unconventional prefoldin RPB5 interactor 1 Human genes 0.000 description 1
- 108020000999 Viral RNA Proteins 0.000 description 1
- 230000010530 Virus Neutralization Effects 0.000 description 1
- TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N Xylitol Natural products OCCC(O)C(O)C(O)CCO TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 230000004721 adaptive immunity Effects 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K aluminium phosphate Chemical compound O1[Al]2OP1(=O)O2 ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000012211 aluminium silicate Nutrition 0.000 description 1
- 229940024546 aluminum hydroxide gel Drugs 0.000 description 1
- SMYKVLBUSSNXMV-UHFFFAOYSA-K aluminum;trihydroxide;hydrate Chemical compound O.[OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] SMYKVLBUSSNXMV-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000007503 antigenic stimulation Effects 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000013011 aqueous formulation Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- OWMVSZAMULFTJU-UHFFFAOYSA-N bis-tris Chemical compound OCCN(CCO)C(CO)(CO)CO OWMVSZAMULFTJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004820 blood count Methods 0.000 description 1
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 1
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000007969 cellular immunity Effects 0.000 description 1
- 230000036755 cellular response Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 1
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 1
- 239000000287 crude extract Substances 0.000 description 1
- 238000005138 cryopreservation Methods 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 238000002716 delivery method Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- KCFYHBSOLOXZIF-UHFFFAOYSA-N dihydrochrysin Natural products COC1=C(O)C(OC)=CC(C2OC3=CC(O)=CC(O)=C3C(=O)C2)=C1 KCFYHBSOLOXZIF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N dodecahydrosqualene Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 241001493065 dsRNA viruses Species 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 1
- 230000002550 fecal effect Effects 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 239000012628 flowing agent Substances 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 238000002825 functional assay Methods 0.000 description 1
- 238000011990 functional testing Methods 0.000 description 1
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 1
- BEBCJVAWIBVWNZ-UHFFFAOYSA-N glycinamide Chemical compound NCC(N)=O BEBCJVAWIBVWNZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 230000005745 host immune response Effects 0.000 description 1
- 230000008348 humoral response Effects 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 1
- 210000004347 intestinal mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N kaolin Chemical compound O.O.O=[Al]O[Si](=O)O[Si](=O)O[Al]=O NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JJTUDXZGHPGLLC-UHFFFAOYSA-N lactide Chemical compound CC1OC(=O)C(C)OC1=O JJTUDXZGHPGLLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 239000006194 liquid suspension Substances 0.000 description 1
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 1
- 208000030208 low-grade fever Diseases 0.000 description 1
- 238000012792 lyophilization process Methods 0.000 description 1
- 239000008176 lyophilized powder Substances 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000015654 memory Effects 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N meso ribitol Natural products OCC(O)C(O)C(O)CO HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 description 1
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 description 1
- 238000000520 microinjection Methods 0.000 description 1
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 1
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 1
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 1
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000214 mouth Anatomy 0.000 description 1
- 230000003232 mucoadhesive effect Effects 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- BSOQXXWZTUDTEL-ZUYCGGNHSA-N muramyl dipeptide Chemical class OC(=O)CC[C@H](C(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](C)O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H](O)[C@@H]1NC(C)=O BSOQXXWZTUDTEL-ZUYCGGNHSA-N 0.000 description 1
- 230000010807 negative regulation of binding Effects 0.000 description 1
- 108010087904 neutravidin Proteins 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 244000045947 parasite Species 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 210000001986 peyer's patch Anatomy 0.000 description 1
- 238000013081 phylogenetic analysis Methods 0.000 description 1
- 229960000502 poloxamer Drugs 0.000 description 1
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 230000037452 priming Effects 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 1
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 1
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 1
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 1
- 235000017709 saponins Nutrition 0.000 description 1
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 235000011083 sodium citrates Nutrition 0.000 description 1
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 229940031439 squalene Drugs 0.000 description 1
- TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N squalene Natural products CC(=CCCC(=CCCC(=CCCC=C(/C)CCC=C(/C)CC=C(C)C)C)C)C TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 238000005728 strengthening Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 238000012876 topography Methods 0.000 description 1
- XUPZAARQDNSRJB-SJDTYFKWSA-N trans-dothiepin hydrochloride Chemical compound [Cl-].C1SC2=CC=CC=C2C(=C/CC[NH+](C)C)/C2=CC=CC=C21 XUPZAARQDNSRJB-SJDTYFKWSA-N 0.000 description 1
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004627 transmission electron microscopy Methods 0.000 description 1
- BMCJATLPEJCACU-UHFFFAOYSA-N tricin Natural products COc1cc(OC)c(O)c(c1)C2=CC(=O)c3c(O)cc(O)cc3O2 BMCJATLPEJCACU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001493 tyrosinyl group Chemical class [H]OC1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 239000012646 vaccine adjuvant Substances 0.000 description 1
- 229940124931 vaccine adjuvant Drugs 0.000 description 1
- 239000000277 virosome Substances 0.000 description 1
- 239000000811 xylitol Substances 0.000 description 1
- 235000010447 xylitol Nutrition 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N xylitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N 0.000 description 1
- 229960002675 xylitol Drugs 0.000 description 1
- 150000003751 zinc Chemical class 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
- A61K39/125—Picornaviridae, e.g. calicivirus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/525—Virus
- A61K2039/5258—Virus-like particles
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/545—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the dose, timing or administration schedule
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55505—Inorganic adjuvants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55572—Lipopolysaccharides; Lipid A; Monophosphoryl lipid A
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/70—Multivalent vaccine
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
- C12N2770/00011—Details
- C12N2770/16011—Caliciviridae
- C12N2770/16034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Virology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- Immunology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
Винахід стосується способу стимулювання формування захисного імунітету проти норовірусу в людини, що включає парентеральне введення людині не більше одноразової дози композиції вакцини, зазначена композиція містить вірусоподібні частинки (VLP) норовірусу геногрупи I та вірусоподібні частинки (VLP) норовірусу геногрупи IІ у різних кількостях, причому зазначена композиція містить від приблизно 15 мкг до приблизно 50 мкг VLP норовірусу геногрупи I та від приблизно 50 мкг до приблизно 150 мкг VLP норовірусу геногрупи II, де зазначені VLP норовірусу геногрупи I містять капсидний білок, отриманий з вірусного штаму геногрупи I, де зазначені VLP норовірусу геногрупи IІ містять капсидний білок, отриманий з вірусного штаму геногрупи IІ.
Description
Перехресне посилання на споріднені заявки 0001) Дана заявка заявляє пріоритет за попередньою заявкою на патент США 61/506447, поданою 11 липня 2011 р., повний зміст якої включено в даний документ за допомогою посилання.
Галузь винаходу 0002) Даний винахід відноситься до галузі, пов'язаної з вакцинами, зокрема, вакцинами від норовірусів. Крім того, даний винахід відноситься до способів одержання композицій вакцини та способам індукування та оцінювання захисних імунних відповідей проти норовірусу в людей.
Передумови винаходу 0003 Норовіруси являють собою некультивовані каліцивіруси людини, які, як з'ясувалося, є єдиною найбільш важливою причиною епідемічних спалахів різновидів небактеріального гастроентериту (Сіаб55 еї аї., 2000; Нагау еї аї., 1999). Клінічне значення норовірусів недооцінювали до того, як були розроблені чутливі аналізи молекулярної діагностики.
Клонування геному прототипного вірусу Могу/аІкК (ММ) геногрупи І і одержання вірусоподібних частинок (МІ Р) за допомогою системи експресії рекомбінантного бакуловірусу привело до розробки аналізів, які виявляють розповсюджену норовірусну інфекцію (діапод еї аї. 1990; 1992).
І0004| Норовіруси є вірусами, що мають одноланцюгову молекулу РНК позитивної полярності, які містять несегментований РНК-геном. Вірусний геном кодує три відкриті рамки зчитування, з яких останні дві визначають продукування головного капсидного білка та малого структурного білка, відповідно (Сіаб55 еї аІ. 2000). При експресії капсидного білка ММ і деяких інших норовірусів на високому рівні в еукаріотичних системах експресії, він самоорганізується в
МІР, які структурно імітують нативні віріони норовірусів. При дослідженні за допомогою трансмісійної електронної мікроскопії МІР морфологічно не відрізняються від інфекційних віріонів, виділених зі зразків фекалій людини. 0005) Імунні відповіді на норовіруси є комплексними, і кореляти захисту в цей час тільки з'ясовують. Дослідження на людях-добровольцях, що здійснювалися з нативним вірусом, показали, що імунологічна пам'ять слизуватих оболонок забезпечувала короткостроковий захист від інфекції, і дозволили припустити, що захист, опосередкований вакциною, є можливим (Гпаезтій еїа!ї. 2003; Рагтіпо єї а). 1977; Муаї! єї а!., 1974).
Зо ІЇ0006| Хоча норовірус неможливо культивувати іп мійго, завдяки доступності МІР та їх здатності вироблятися у великих кількостях був досягнутий значний прогрес у визначенні антигенної та структурної топографії норовірусного капсида. МІР зберігають вихідну конформацію вірусного капсидного білка, при цьому в них відсутній інфекційний генетичний матеріал. Отже, МІР імітують функціональні взаємодії вірусу із клітинними рецепторами, викликаючи, таким чином, відповідну імунну відповідь хазяїна, але при цьому вони не мають здатності до репродукції або здатності викликати інфекцію. Медичний коледж Бейлора (Вауїог
СоПеде ої Медісіпе) разом з МІН вивчали гуморальну, мукозну і клітинну імунні відповіді на МІ Р
ММ на людях-добровольцях в | фазі академічних клінічних випробувань, на які надавалися кошти дослідником. Перорально застосовувані МІР характеризувалися безпекою та імуногенністю в здорових дорослих (Ваї еї аІ. 1999; Таскеї єї аІ. 2003). Але для появи імунної відповіді були потрібні багаторазові дози з відносно високою кількістю МІ Р. В інших наукових центрах доклінічні експерименти на тваринних моделях продемонстрували посилення імунних відповідей на МІР при їхньому застосуванні інтраназально з ад'ювантами-бактеріальними екзотоксинами (Спегїтего еї аІ. 2001; МісоПШег-Чатої еї аІ. 2004; Репмаї єї а. 2003; 5оцга еї аї. (2007) Массіпе, Мої. 25(50):8448-59). Однак захисний імунітет проти норовірусу в людей залишається неясним у зв'язку з тим, що показники захисної імунної відповіді в людей все ще чітко не визначені (Негрзі-Ктаїомеї? вї а. (2010) Ехреп Рем. Массіпев 9(3), 299-307).
Короткий опис даного винаходу
І0007| Даний винахід частково заснований на відкритті, що одноразова доза норовірусної вакцини викликає швидку, сильну захисну імунну відповідь проти норовірусу в людей при парентеральному введенні. Відповідно, у даному винаході представлений спосіб стимулювання формування захисного імунітету проти норовірусу в людини, що включає парентеральне введення людині не більше одноразової дози композиції вакцини, при цьому зазначена композиція містить МІР норовірусу геногрупи | та/або геногрупи ІЇ, при цьому зазначена композиція індукує щонайменше триразове збільшення титру норовірус-специфічних сироваткових антитіл у порівнянні з титром у людини до введення композиції. У певних варіантах здійснення індукція збільшення титру норовірус-специфічних антитіл відбувається протягом семи днів після введення одноразової дози композиції. У деяких варіантах здійснення композицію вакцини вводять людині за допомогою внутрішньовенного, підшкірного, бо внутрішньошкірного або внутрішньом'язового шляху введення. В одному варіанті здійснення композицію вакцини вводять людині за допомогою внутрішньом'язового шляху введення. 0008) Композиції вакцини одноразової дози можуть містити МІ Р норовірусу геногрупи І, МІ Р норовірусу геногрупи ІЇ або і ті, та інші в дозі, що складає від приблизно 5 мкг до приблизно 150 мкг. У варіантах здійснення, у яких композиції вакцини одноразової дози містять МІР норовірусу як геногрупи І, так і геногрупи Ії, доза МІ Р кожної геногрупи може бути однаковою або різною. В одному варіанті здійснення композиція містить не більше 50 мкг МІ Р норовірусу геногрупи І. В іншому варіанті здійснення композиція містить не більше 25 мкг МІ Р норовірусу геногрупи Ії. У ще одному варіанті здійснення композиція містить не більше 150 мкг МІР норовірусу геногрупи ІІ. У ще іншому варіанті здійснення композиція містить не більше 50 мкг
МІР норовірусу геногрупи І. МІР норовірусу можуть бути моновалентними МІР або мультивалентними МІ Р.
І0009) У деяких аспектах даного винаходу МІ Р норовірусу геногрупи І у композиціях вакцини містять капсидний білок, отриманий з вірусного штаму геногрупи І. В одному варіанті здійснення
МІР норовірусу геногрупи | містять капсидний білок з норовірусу 1 генотипу геногрупи І. В іншому варіанті здійснення МІ Р норовірусу геногрупи І містять капсидний білок з вірусу МогулаїК.
В інших аспектах даного винаходу МІР норовірусу геногрупи ІІ у композиціях вакцини містять капсидний білок, отриманий з вірусного штаму геногрупи ЇЇ. У деяких варіантах здійснення МІ Р норовірусу геногрупи ІЇ містять капсидний білок з норовірусу 4 генотипу геногрупи ІІ. У певних варіантах здійснення МІР норовірусу геногрупи ІЇ являють собою МІР, що утворилися в результаті експресії консенсусної послідовності норовірусу геногрупи ІІ. В одному конкретному варіанті здійснення МІ Р норовірусу геногрупи ІІ містять капсидний білок з послідовністю ЗЕО ІЮ
МО: 1. 0010) У певних варіантах здійснення композиція вакцини додатково містить щонайменше один ад'ювант. Ад'ювант переважно не є ад'ювантом-бактеріальним екзотоксином. В одному варіанті здійснення ад'ювант являє собою агоніст 0ЇІ-подібних рецепторів, такий як монофосфорил-ліпід А (МР), флагелін або Сро. В іншому варіанті здійснення ад'ювант являє собою гідроксид алюмінію (наприклад, галуни). У певних варіантах здійснення композиція вакцини містить два ад'юванта, таких як МРІ та гідроксид алюмінію. У деяких варіантах здійснення композиція вакцини може додатково містити буфер, такий як І -гістидин, імідазол,
Зо бурштинова кислота, трис та лимонна кислота. Композиція вакцини може бути складена у вигляді сухого порошку або рідини. В одному варіанті здійснення композицію вакцини складають у вигляді рідини (наприклад, водний склад).
Короткий опис графічних матеріалів 0011) Фігура 1. Результати аналізів за методом ЕГІЗА для загального Ід по вимірюванню об'єднаних сироваткових рівнів Ід, ІдА та ДМ у людей-добровольців, імунізованих внутрішньом'язово плацебо (сольовим розчином) або складом вакцини, що містить 5, 15, 50 або 150 мкг кожного з МІР норовірусу геногрупи І-ї і М Р норовірусу геногрупи 1І.4. Середній геометричний титр антитіл до С1.1 (А) ї до С1І.4 (В) показаний для кожного з рівнів дозування на 7 і 21 день після першої імунізації та на 7 і 28 день після другої імунізації. Добровольців імунізували в 0 і на 28 день дослідження.
І0012) Фігура 2. Результати аналізів за методом ЕГІЗА для загального Ід по вимірюванню об'єднаних сироваткових рівнів ІдС, ІдА та ІМ у людей-добровольців, імунізованих внутрішньом'язово плацебо (сольовим розчином) або складом вакцини, що містить 5, 15, 50 або 150 мкг кожного з МІР норовірусу геногрупи І-ї ї МР норовірусу геногрупи 1.4. Фактор сероконверсії для антитіл до 01.1 (А) і до С1І.4 (В) показаний для кожного з рівнів дозування на 7 і 21 день після першої імунізації та на 7 і 28 день після другої імунізації. Добровольців імунізували в 0 і на 28 день дослідження.
І0О0О13) Фігура 3. Результати аналізів за методом ЕГІЗА для загального Ід по вимірюванню об'єднаних сироваткових рівнів ІдС, ІдА та ІД9М у людей-добровольців, імунізованих внутрішньом'язово плацебо (сольовим розчином) або складом вакцини, що містить 5, 15, 50 або 150 мкг кожного з МІР норовірусу геногрупи І.ї ії М Р норовірус геногрупи 1І.4. Процентні показники серологічної реакції (тобто чотириразове збільшення титру антитіл у порівнянні з титрами до імунізації) для антитіл до (31.1 (А) і до С1І.4 (В) показані для кожного з рівнів дозування на 7 і 21 день після першої імунізації та на 7 їі 28 день після другої імунізації.
Добровольців імунізували в 0 і на 28 день дослідження. 0014) Фігура 4. Результати аналізів за методом ЕГІЗА по вимірюванню сироваткового ІдДА у людей-добровольців, імунізованих внутрішньом'язово плацебо (сольовим розчином) або складом вакцини, що містить 5, 15 або 50 мкг кожного з МІ Р норовірусу геногрупи І.1 і МІ Р норовірусу геногрупи 1І.4. Середній геометричний титр антитіл до (3.1 (А) ії до С1І.4 (В) бо показаний для кожного з рівнів дозування на 7 і 21 день після першої імунізації та на 7 і 28 день після другої імунізації. Добровольців імунізували в 0 і на 28 день дослідження. 0015) Фігура 5. Результати аналізів за методом ЕГІЗА по вимірюванню сироваткового ІдДА у людей-добровольців, імунізованих внутрішньом'язово плацебо (сольовим розчином) або складом вакцини, що містить 5, 15 або 50 мкг кожного з МІ Р норовірусу геногрупи І.1 і МІ Р норовірус геногрупи 1І.4. Фактор сероконверсії для антитіл до 01.1 (А) і до С1І.4 (В) показаний для кожного з рівнів дозування на 7 і 21 день після першої імунізації та на 7 і 28 день після другої імунізації. Добровольців імунізували в 0 і на 28 день дослідження.
І0О0О16) Фігура 6. Результати аналізів за методом ЕГІЗА по вимірюванню сироваткового ІдДА у людей-добровольців, імунізованих внутрішньом'язово плацебо (сольовим розчином) або складом вакцини, що містить 5, 15 або 50 мкг кожного з МІ Р норовірусу геногрупи І.1 і МІ Р норовірусу геногрупи 1І.4. Процентні показники серологічної реакції (тобто чотириразове збільшення титру антитіл у порівнянні з титрами до імунізації) для антитіл до с1.1 (А) їі до С1І.4 (В) показані для кожного з рівнів дозування на 7 і 21 день після першої імунізації та на 7 і 28 день після другої імунізації. Добровольців імунізували в 0 і на 28 день дослідження.
І0017| Фігура 7. Результати аналізів за методом ЕГІЗА по вимірюванню сироваткового Ід у людей-добровольців, імунізованих внутрішньом'язово плацебо (сольовим розчином) або складом вакцини, що містить 5, 15 або 50 мкг кожного з МІ Р норовірусу геногрупи І.1 і М Р норовірусу геногрупи 1І.4. Середній геометричний титр антитіл до (3.1 (А) ії до С1І.4 (В) показаний для кожного з рівнів дозування на 7 і 21 день після першої імунізації та на 7 і 28 день після другої імунізації. Добровольців імунізували в 0 і на 28 день дослідження.
ІОО18) Фігура 8. Результати аналізів за методом ЕГІЗА по вимірюванню сироваткового до у людей-добровольців, імунізованих внутрішньом'язово плацебо (сольовим розчином) або складом вакцини, що містить 5, 15 або 50 мкг кожного з МІ Р норовірусу геногрупи І.1 і М Р норовірусу геногрупи 1І.4. Фактор сероконверсії для антитіл до (1.1 (А) ї до С1ІІ.4 (В) показаний для кожного з рівнів дозування на 7 і 21 день після першої імунізації та на 7 і 28 день після другої імунізації. Добровольців імунізували в 0 і на 28 день дослідження.
І0019) Фігура 9. Результати аналізів за методом ЕГІЗА по вимірюванню сироваткового до у людей-добровольців, імунізованих внутрішньом'язово плацебо (сольовим розчином) або складом вакцини, що містить 5, 15 або 50 мкг кожного з МІ Р. норовірусу геногрупи І.1 і МІ Р
Зо норовірусу геногрупи 1.4. Процентні показники серологічної реакції (тобто чотириразове збільшення титру антитіл у порівнянні з титрами до імунізації) для антитіл до 01.1 (А) і до С1І.4 (В) показані для кожного з рівнів дозування на 7 і 21 день після першої імунізації та на 7 і 28 день після другої імунізації. Добровольців імунізували в 0 і на 28 день дослідження.
І0020) Фігура 10. Результати аналізів за методом ЕГІЗА для загального Ід по вимірюванню об'єднаних сироваткових рівнів ДС, ІА та ДМ у людей-добровольців, імунізованих або норовірусною моновалентною вакциною для інтраназального введення, як описано в ЕЇ Катагу еї а). (2010) 9 Іпесї Оі5, Мої. 202(11): 1649-1658, (групи І МО01-103), або норовірусною бівалентною вакциною для внутрішньом'язового введення, як описано в прикладі 1 (групи І МО3- 104), у зазначені моменти часу. Люди-добровольці одержували або плацебо, або дві дози складу вакцини або для внутрішньом'язового введення, або для інтраназального введення.
Бівалентна норовірусна вакцина для внутрішньом'язового введення містила 5 мкг кожного з МІ Р норовірусу геногрупи Її і МІР норовірусу геногрупи 1.4. Моновалентна вакцина для інтраназального введення містила 100 мкг норовірусу геногрупи І.1. Добровольцям, що одержували вакцину для інтраназального введення або плацебо, вводили провокаційну пробу з живим норовірусом після другої імунізації.
І0021) Фігура 11. ГАС5з-аналіз мононуклеарних клітин периферичної крові, отриманої від людей-добровольців в 0 день перед імунізацією або 5 мкг дозою бівалентної норовірусної вакцини для внутрішньом'язового введення (А), або плацебо (В) і на 7 день після імунізації.
СОр19-4 РВМС є націленими на слизуваті, про що свідчить експресія хомінг-рецептора альфа 4/бета7 і хемокінового рецептора ССК10.
Детальний опис винаходу
І0022| Даний винахід відноситься до способів стимулювання формування захисного імунітету до норовірусних інфекцій у суб'єкта. Зокрема, у даному винаході представлені способи стимулювання формування захисного імунітету проти норовірусу в людини за допомогою парентерального введення людині не більше одноразової дози вакцини, що містить Мі Р норовірусу та необов'язково щонайменше один ад'ювант, де вакцина забезпечує захист від або полегшення щонайменше одного симптому норовірусної інфекції. Винахідники виявили, що внутрішньом'язове введення людям не більше одноразової дози композиції вакцини, що містить
МІР норовірусу, індукує швидку (тобто протягом 7 днів після імунізації) сероконверсію в бо сироватці крові (тобто щонайменше триразове збільшення титрів антиген-специфічних сироваткових антитіл у порівнянні з рівнями до вакцинації), що вказує на захисну імунну відповідь проти норовірусної інфекції та захворювання. Імунні відповіді, які індукуються даною композицією вакцини одноразової дози, досягають такого ж високого рівня титрів антитіл, що і рівень, спостережуваний при природній інфекції в результаті введення живого вірусу в дослідженнях із уведенням провокаційної проби людям. Примітно, що повторна доза вакцини не потрібна, оскільки імунна відповідь не підвищується при додатковому введенні ще однієї дози вакцини. 0023) У даному винаході представлена композиція вакцини, що містить один або декілька норовірусних антигенів. Під "норовірусом", "норовірусом (МОК)" і граматичними еквівалентами в даному документі розуміють члени роду Могоміги5 сімейства Саїїсімігідає. У деяких варіантах здійснення норовірус може включати групу споріднених вірусів, які містять одноланцюгову молекулу РНК позитивної полярності та не мають оболонки, котрі можуть бути інфекційними для людини або видів ссавців, що не є людиною. У деяких варіантах здійснення норовірус може викликати гострий гастроентерит у людей. Норовіруси також можуть згадуватися як невеликі сферичні структуровані віруси (ЗК5М), що мають певну поверхневу структуру або нерівний контур, як видно при розгляді за допомогою електронної мікроскопії.
І0024| Норовіруси включають щонайменше п'ять геногруп (С, СІ, С, СІМ ї ОМ).
Норовіруси СІ, (СІ ії ІМ є інфекційними для людей, тоді як норовіруси СП в основному інфікують велику рогату худобу. ЗМ нещодавно був виділений з мишей (2Пепод еї аї. (2006)
Мігоіоду, Мо! 346: 312-323). Типовими представниками СП є штами Уепа і Мем/бигу, тоді як типовими представниками СІМ є штами АІрПаїгоп, Еогі І ацаегааїйе і Заїпї Сіоца. Групи СІ ї СІ можна додатково розділити на генетичні кластери або генотипи на основі генетичної класифікації (Апдо еї аї. (2000) 9. Іп'есіои5 Різеазе5, Мої. 181(З,ирр2):5336-5348; І іпаеї! еї аї. (2005) 9. Сіїп. Місгобіо!Ї., Мої. 43(3): 1086-1092). Використовуваний в даному документі вираз "генетичні кластери" застосовується взаємозамінно з виразом "генотипи". У геногрупу І входить 8 кластерів СІ, відомих на сьогоднішній день (3 назвою прототипного вірусного штаму): 01.1 (МогмаїкК (ММ-О5А9ЗЗ)); СІ.2 (Бошійпатріоп (5ОУ-СВНОЗ3)); СІ.З (Оєзеп Зпівіа (05М-О5А9ЗЗ)); С1І.4 (Співе пір мігиз/Спіра (Спіра-УРМОО)); 21.5 (318/Миздгоме (Мивздгох-СВАОО0)); С1.6 (Незве (Неззе-ЮОБШОВ)); С1І.7 (М/пспеві-ОВКОО) і СІ.8 (Вохег-О5АО2). У геногрупу ІІ входить 19 кластерів
Зо СІЇ, відомих на сьогоднішній день (з назвою прототипного вірусного штаму): ОП. (Намаїї (Намаїй-О5БА9З4)); СІИ.2 (Зпожм Моипіаіп/Меік5пат (М5пат-СВАОБ5)); СИ.З (Тогопіо (Тогопіо-
САМОЗ)); С.А (ВгівітоЙЙ огазаає (ВгібіоІі-ЯВАЗЗ)); СИ.5 (290/Нійпіпдаоп (Ніїїпда-евАОО)); СИ.б (269/беастой (ЗеасгоЇї-ЯВНОО)); СИ.7 (273/Левдв5 (І єед5-2ВНО0)); С1І.8 (539/Атвівгдат (Атвзідат-МІ 099)); С1І.9 (378 (Мареасн-О5БАО1)), СІ.10 (Енип-ОБШОО1); СИ.11 (5М/91809ОРМО1);
СІИ.12 (ММопієу-аВАО0); СІ.13 (Раумі-ОБАОг); СІ.14 (М7-О5АОЗ) СП.15 (д23-О5А02); СП.16 (Тійп-ОБАОЗ); С1І.17 (С5БЕ1-О5АОЗ); С1І.18 (ОМ/101/2003/05) ї 11.19 (0ММ170/2003/05).
І0025| Під "норовірусом' також у даному документі розуміють вірусоподібні частинки рекомбінантного норовірусу (МІР ГМО). У деяких варіантах здійснення рекомбінантна експресія щонайменше норовірусного капсидного білка, який кодується ОКЕ2, у клітинах, наприклад, з бакуловірусного вектора в клітинах 59, може привести до самовільної самоорганізації капсидного білка в МІ Р. У деяких варіантах здійснення рекомбінантна експресія щонайменше норовірусних білків, які кодуються ОКЕ1 та ОКЕ2, у клітинах, наприклад, з бакуловірусного вектора в клітинах 519, може привести до самовільної самоорганізації капсидного білка в МІ Р. МІ Р структурно схожі з норовірусами, але в них відсутній вірусний РНК- геном і, отже, вони не є інфекційними. Відповідно, "норовірус" включає віріони, які можуть являти собою інфекційні або неінфекційні частки, які включають неповні частинки.
І0026| Необмежуючі приклади норовірусів включають норовірус геногрупи 1 штам
Ни/МомлЛЛ/езі Спевіег/2001/О5А, номер доступу в СепВапк АМ5О02016; Сіра мігпив (СНУ,
СепВапк АВО42808); норовірус геногрупи 2 штам Ни/МоМм/Вгадаоск Неїіднів/1999/О5А, номер доступу в СсепВапк АУ502015; норовірус геногрупи 2 штам Ни/МоУ/Рауене/1999/О5А, номер доступу в сСепВапк АУ502014; норовірус геногрупи 2 штам Ни/Мом/РаїПе9д/1999/05А, номер доступу в сСепВапк АХ502013; норовірус геногрупи 2 штам Ни/МоМм/ЗапдизКу/1999/05А, номер доступу в сСепВапк АУ502012; норовірус геногрупи 2 штам Ни/МомМ/Сапіоп/1999/05А, номер доступу в СепВапк АМУ502011; норовірус геногрупи 2 штам Ни/МоМ/Тініп/1999/0О5А, номер доступу в СепВапк АУ502010; норовірус геногрупи 2 штам Ни/Мом/С5-Е1/2002/О5А, номер доступу в сепВапк АУ50200; норовірус геногрупи 1 штам Ни/МомМЛЛ/ізсопзіп/2001/О5А, номер доступу в СепВапк АУ502008; норовірус геногрупи 1 штам Ни/МоМ/25-841/2001/О5А, номер доступу в СепВапк АМ502007; норовірус геногрупи 2 штам Ни/Мом/Нігат/2000/05А, номер доступу в сСепВапк АУ502006; норовірус геногрупи 2 штам Ни/МоМ/Гопіодапу/1999/О5А, номер бо доступу в СепВапк АУ502005; вірус МогмаїК, повний геном, номер доступу в СепВапк МеС.5иб.--
001959; норовірус Ни/сІ/ОіоїтиКе/1979/УР, геномна РНК, повний геном, номер доступу в сепВапк
АВ187514; норовірус Ни/НоККаїдо/1 33/2003/2Р, номер доступу в сСепВапк АВ212306; норовірус зудпеу 2212, номер доступу в сСепВапк АУ588132; вірус Моглмаік штам ЗМ2О009А, номер доступу в зепВапк АВ190457; вірус ГІ огазаае, повний геном, номер доступу в СепВапк х86557;
МогмаїіКк-подібний вірус, геномна РНК, Сійг9б, номер доступу в СепВапк АВО45603; вірус
Могуаік штам Міеїпат 026, повний геном, номер доступу в сСепВапк АЕ504671; норовірус
Ни/С1І.4/2004/М/, номер доступу в СепВапк АУ883096; норовірус Ни/ЗП/НоКизпіп/03/ОР, номер доступу в СепВапк АВ195227; норовірус Ни/зП/Като/03/)Р, номер доступу в СепВапк
АВІ195228; норовірус Ни/ЗП/5іпзіго/97/ОР, номер доступу в СепВапк АВІ195226; норовірус
НишсПпа/02/9Р, номер доступу в СепВапк АВ195225; норовірус
Ним М П/Меизігеїй27260/2000/0ОЕ, номер доступу в СепВапк АМЖМ772730; норовірус
Ни/МІ М/Отгезаеп174/рОиОБ-МогІ/1997/5Е, номер доступу в СепВапк АМм741811; норовірус
Ним М/Охіога/в2516/2002/ОК, номер доступу в СепВапк АМХ587989; норовірус
Ним М/Охіога/в457/2002/ОК, номер доступу в СепВапк АмУ587987; норовірус
Ним МЛЛїпеу/87 52/2003/ОК, номер доступу в СепВапк АУ588030; норовірус
Ни/МІ М/Вапригу/89523/2003/0ОК, номер доступу в СепВапк АУ588029; норовірус
Ним М/СпірріпаМогіоп/2003/0ОК, номер доступу в СепВапк АУ588028; норовірус
Ним М/Оідсоуве52/2003/ШК, номер доступу в СепВапк Ам 588027; норовірус
Ни/ М М/Охіога/вв55/2002/ОК, номер доступу в СепВапк Ам588026; норовірус
НишММ/Охгога/в654/2003/ОК, номер доступу в СепВапк АмУ588025; норовірус
Ни/ М М/Охіога/в6в55/2003/ОК, номер доступу в СепВапк Ам 588024; норовірус
Ним М/Охіога/в5523/2003/ОК, номер доступу в СепВапк АМХ588023; норовірус
Ним М/Охгога/в652/2003/0К, номер доступу в ОСепВапк АУ588022; норовірус
Ним М/Охгога/в656/2003/0К, номер доступу в СепВапк АХУ588021; ізолят МогмаїЇКк-подібного вірусу Во/ППігеК10/00/0К, номер доступу в сСепВапк АУ126468; ізолят Могу/аІк-подібного вірусу
Во/Репгйп55/00/0К, номер доступу в СепВапк АХУ126476; ізолят МогмаїЇК-подібного вірусу
Во/Абегузімуїп24/00/Ш0К, номер доступу в сСепВапк АУ126475; ізолят МогмаїІКк-подібного вірусу
Во/Оитігіе5/94/Ш0К, номер доступу в зЗепВапк АМ126474; норовірус МІ МЛЕ2036/2003/гад, номер доступу в СепВапк АУб75555; норовірус МІМЛЕ1998/2003/Лгад, номер доступу в СепВапк
Зо АУб75554; норовірус МІГ .М/8005/2002/О5А, номер доступу в СепВапк АУббО568; норовірус
МІ М/Рагі5 ІзІапа/2003/О5А, номер доступу в сСепВапк АУб52979; вірус Зпом/ Мошпіаїп, повний геном, номер доступу в СепВапк АМХ134748; МогмаіК-подібний вірус МІ М/Рогі
Ї ашаегааІіе/560/1998/05, номер доступу в СепВапк АР414426;
Ни/Могомігив/пігозпіта/1999/УР(9912-02Е), номер доступу в СепВапк АВО44366; Могмаїк- подібний вірус штам 11М5О-ММУ, номер доступу в СепВапк АУ274820; МогмаїЇК-подібний вірус штам В-154МО, номер доступу в СепВапк АМмУ274819; норовірус геногрупи 2 штам
Ни/Мом/БРагтіпдіоп НіЇїЇз/2002/О5А, номер доступу в сСепВапк АУ502023; норовірус геногрупи 2 штам Ни/МоМм/С5-(34/2002/О5А, номер доступу в СепВапк АУ502022; норовірус геногрупи 2 штам Ни/МоМм/С5-052/2002/О5А, номер доступу в СепВапк АМУ502021; норовірус геногрупи 2 штам Ни/Мом/С5-51/2002/О5А, номер доступу в СепВапк АУ502020; норовірус геногрупи 2 штам Ни/МомМ/Апспогаде/2002/О5А, номер доступу в сепВапк АХ502019; норовірус геногрупи 2 штам Ни/МоМм/С5-01/2002/САМ, номер доступу в СепВапк АМУ502018; норовірус геногрупи 2 штам Ни/МоМ/Зептапіоп/2002/0О5А, номер доступу в сепВапк АУ502017; каліцивірус людини
МІМ/ЗІИ апдеп1061/2002/ОЕ, повний геном, номер доступу в СепВапк АУ485642; норовірус мишей 1, поліпротеїн, номер доступу в СепВапк АхУ228235; вірус МогмаїкК, номер доступу в
СепВапк АВОб7536; каліцивірус людини Мі М/Мех7076/1999, номер доступу в СепВапк
АЕ542090; каліцивірус людини МІ М/Орегпацзеп 455/01/ОЕ, номер доступу в сепВапк АЕ539440; каліцивірус людини МІМ/Нег2регд 385/01/0Е, номер доступу в сСепВапк АЕ539439; каліцивірус людини МІ М/Вохег/2001/05, номер доступу в СепВапк АЕ538679; МогмаїІК-подібний вірус, геномна РНК, повний геном, номер доступу в СепВапк АВО81723; МогмаїК-подібний вірус, геномна РНК, повний геном, ізолят:Зайата 0201, номер доступу в СепВапк АВО39782; Могмаїк- подібний вірус, геномна РНК, повний геном, ізолят:Зайата ШО18, номер доступу в СепВапк
АВОЗ39781; МогмаїК-подібний вірус, геномна РНК, повний геном, ізолят:Зайата 025, номер доступу в СсСепВапк АВО39780; вірус МогмаІК штам:025СІІ, номер доступу в зепВапк АВОб67543; вірус МогмуаїкК штам:0201 СІ, номер доступу в СепВапк АВО67542; МогмаїК-подібні віруси штам 416/97003156/1996/Л. А, номер доступу в СепВапк АРО80559; МогмаїЇК-подібні віруси штам 408/97003012/1996/РЇ, номер доступу в СепВапк АРО80558; МогмаїЇК-подібний вірус
МІ М/Вигмазі І апаіпд/331/1995/05, номер доступу в сепВапк АР414425; МогмаІК-подібний вірус
МІМ/Міаті Веасп/326/1995/05, номер доступу в СепВапк АР414424; МогмаїЇК-подібний вірус бо МІМАЛ/пне Рімег/290/1994/05, номер доступу в СепВапк АР414423; МогмуаК-подібний вірус
МІМ/Мемж ОпПеап5/306/1994/05, номер доступу в СепВапк АЕ414422; МогмаїЇКк-подібний вірус
МІМ/Рогі Сапамега|/301/1994/05, номер доступу в СепВапк АЕБ414421; МогмаїЇК-подібний вірус
МІ .М/НопоїЇши/314/1994/О5, номер доступу в СепВапк АР414420; МогмаїКк-подібний вірус
МІ М/кКісптопа/283/1994/05, номер доступу в СепВапк АР414419; МогмаїЇК-подібний вірус
МІМАЛезіомег/302/1994/05, номер доступу в СепВапк АР414418; МогмаїЇК-подібний вірус
МІМ/ОКЗ-17/12700/1992/58, номер доступу в СепВапк АР414417; МогмуаіІК-подібний вірус
МІ М/Міаті/81/1986/05, номер доступу в СепВапк АБ414416; штам 5пом/ Мошпіаїп, номер доступу в СепВапк 70059; вірус Оезетп зЗпівій 05М395, номер доступу в зЗепВапк 004469; вірус
МогуаІкК, повний геном, номер доступу в сСепВапк АБО93797; каліцивірус Наулаї, номер доступу в СепВапк 007611; вірус зошвпатріоп, номер доступу в СепВапк І 07418; вірус Могмаїк (5К5М-
КУ-89/89/3)), номер доступу в сепВапк І 23828; вірус МогмаїкК (ЗКЗМ-ЗМА/76/05), номер доступу в СепВапк 123831; вірус СатбрегмеїЇ, номер доступу в сСепВапк 046500; каліцивірус людини штам МеїКк5пат, номер доступу в СепВапк Х81879; каліцивірус людини штам МХ, номер доступу в сСепВапк 022498; мініреовірус ТУ24, номер доступу в сСепВапк 002030; та Могу/аїк- подібний вірус МІ М/зумупеда/273/1994/05, номер доступу в сСепВапк АР414409; послідовності всіх з яких (як внесено на дату подачі даної заявки) включені в даний документ за допомогою посилання. Додаткові послідовності норовірусів розкриті в наступних патентних публікаціях: УМО 2005/030806, МО 2000/79280, УР2002020399, 0О52003129588, патент США Мо 6572862, УМО 1994/05700 та М/О 05/032457, усі з яких включені в даний документ у повному обсязі за допомогою посилання. Для порівняння послідовностей і для розгляду генетичної різноманітності та філогенетичного аналізу норовірусів див. також Сгееп еї аїЇ. (2000) 9. Іптесії. Оів5., Мої. 181(5иррі. 2):5322-330; Мапа еї а!. (1994) 9. Міко!., Мої. 68:5982-5990; СНеп евї аї. (2004) 9. Міго!.,
Мої. 78: 6469-6479; СпакКтгамапу еї аї. (2005) 9. Мігої!., МоІ. 79: 554-568; Напзтап еї аї. (2006) 9.
Скеп. Міго!., Мої. 87:909-919; Виї! єї а. (2006) 9. Сіїп. Місго., Мої. 44(2):327-333; біерепаа, 6ї аї. (2007) 9. Мігої., Мої. 81(18):9932-9941 та Рапкпаизег еї а!. (1998) у. Іптесі. Оів., Мої. 178:1571-1578.
Усі нуклеїнові кислоти та відповідні амінокислотні послідовності кожного з них включені в повному обсязі за допомогою посилання. У деяких варіантах здійснення для цілей ідентифікації може використовуватися шифр, і він має наступний порядок: вид хазяїна, з якого вірус був виділений/скорочене позначення роду/скорочене позначення виду/назва штаму/рік
Зо виявлення/країна походження (сгееп еї аї., Нитап Саїїсімігизев5, іп Рієїд5 Мігоїюду Мої. 1 841-874 (Кпіре апа Ном/еу, еайогв-іп-спієї, 44п єа., Пірріпсойй УМміШат»ь 8 УМІКіп5 2001)). Вірусні штами 4 генотипу геногрупи ІІ (211.4) (наприклад, штами Ноизіоп, Міпегма (також відомий як Оеп Наад) та
Ї ашгепо (також відомий як УегзеКе)) є переважними в деяких варіантах здійснення. У міру того, як ідентифікують нові штами та їх генетичні послідовності стають доступними, фахівець у даній галузі зможе застосовувати МІ Р з використанням цих сучасних штамів у композиціях і способах за даним винаходом за допомогою звичайних методик. Таким чином, у даному винаході передбачені МІР, отримані з таких штамів, у якості придатних антигенів для застосування в композиціях і способах, описаних у даному документі.
І0027| Норовірусні антигени можуть бути у формі пептидів, білків або вірусоподібних частинок (МІР). У переважному варіанті здійснення норовірусні антигени включають МІР.
Використовуваний в даному документі вираз "вірусоподібна частинка (вірусоподібні частинки) або МІР" відноситься до вірусоподібної частинки (вірусоподібних частинок), її фрагменту (фрагментам), комплексам або частині (частинам), отриманим з послідовності, що кодує капсидний білок норовірусу та що включають антигенну характеристику (характеристики), аналогічні таким інфекційних частинок норовірусу. Норовірусні антигени можуть також бути у формі капсидних мономерів, капсидних мультимерів, білкових або пептидних фрагментів МІ Р або їх комплексів або сумішей. Норовірусні антигенні білки або пептиди можуть також перебувати в денатурованій формі, їх можна одержати за допомогою способів, відомих у рівні техніки. 0028) МІ Р за даним винаходом можуть бути утворені або з норовірусного капсидного білка повної довжини, такого як білки МР та/"або МР2, або певних похідних МР1І або МР2 за допомогою стандартних способів з рівня техніки. Альтернативно, капсидний білок, застосовуваний для утворення МІР, є усіченим капсидним білком. У деяких варіантах здійснення, наприклад, щонайменше один з Мі Р містить усічений білок УР1. В інших варіантах здійснення всі МІ Р містять усічені білки МР1. Усікання може бути М- або С-кінцевим усіканням.
Усічені капсидні білки є придатними функціональними похідними капсидного білка.
Функціональні похідні капсидного білка здатні викликати імунну відповідь (за необхідності, за наявності придатного ад'юванта) у такий же спосіб, як викликають імунну відповідь МІ Р, що складаються з капсидного білка повної довжини. 60 І0029| МІ Р можуть містити головні білки МР1 та/або малі білки МР2. У деяких варіантах здійснення кожна МІР містить білок МРТ та/або МР2 з норовірусу тільки однієї геногрупи, утворюючи моновалентну МІ Р. Використовуваний в даному документі вираз "моновалентний" означає, що антигенні білки отримані з норовірусу однієї геногрупи. Наприклад, МІ Р містять МР1 та/або МР зі штаму вірусу геногрупи І (наприклад, МР і МР2 з вірусу МогмаїкК). Переважно М Р головним чином складаються з білків МР1. В одному варіанті здійснення даного винаходу антиген являє собою суміш моновалентних МІР, де композиція включає Мі Р, що складаються з
МРІ1 ї МР2 з норовірусу однієї геногрупи, змішані з МІ Р, що складаються з МРІ1 і МР2 норовірусу іншої геногрупи (наприклад, вірусу МогулаїК і вірусу Ноивіоп), отриманими з декількох вірусних штамів. Винятково в якості прикладу композиція може містити моновалентні МІ Р з одного або декількох штамів норовірусу геногрупи І разом з моновалентними Мі Р з одного або декількох штамів норовірусу геногрупи ІЇ. Штами можуть бути обрані на основі їх переважання в циркуляції на даний час. У певних варіантах здійснення суміш МІ Р норовірусу включає вірусні штами 01.1 і С1І.4. Більш переважно суміш МІ Р норовірусу містить послідовність штамів Могмаїк і консенсусну послідовність капсидного білка, отриману з норовірусів геногрупи ІІ. Консенсусні послідовності капсидного білка, отримані з послідовностей циркулюючих норовірусів, і МІ Р, створені з таких послідовностей, описані в УМО 2010/017542, який включений у даний документ у повному обсязі за допомогою посилання. Наприклад, в одному варіанті здійснення консенсусна послідовність капсидного білка, отримана з вірусних штамів 4 генотипу геногрупи ЇЇ (С1І.4), містить послідовність ЗЕО ІЮ МО: 1. Таким чином, у деяких варіантах здійснення композиція вакцини містить суміш моновалентних МІ Р, де одні моновалентні МІ Р містять капсидний білок з норовірусу геногрупи І (наприклад, МогмаїкК), а інші моновалентні МІ Р. містять капсидний білок з консенсусною послідовністю, що містить послідовність зЕО ІЮ МО: 1.
МКМАЗЗОПАМРЗООЗТАМІМРЕУМММЕУМА ЕРУМаААІААРУАИаОО
МУМІПРМІВММЕМОАРаСЕЕТУМ5З5РАМАРСЕЇЇ МУЗАРІСРОІГЇГМРМІЗНІ А
ВАВМУМаМАаагЕМОМІ АСМАЕЄЕТАИКІІГААУРРМЕРТЕСІЇ 5РІОМТМЕ
РНІІМОУВКОГ ГЕРМІІРІРОМАММЕУМНУМОЗМОРТІКІ ІАМГЕМТРІВКАММ
АСООУМЕТУ5ЗСАМІТАРЗРОБОБІГЇ МРРІМЕЗВАТКРЕТУРІЇ ТМЕЕМТ М
ЗВЕРІРГЕКГЕЕТаРБаАРУММОРОМаАСсСТТОаМІ ОТТО 56РММІСТЕВ
СОМТНІАСТОЕУТММ АЗОМУММУМОРТЕЕІРАРІ СТРОГєЕУСаКІОССМІ Т
Коо) оттвМпараЗвТвВанкАатУТавзуУНнНЕТРКІСОЗМОБГЗТОТЗ5МОБЕТСОМТК
ЕТРУаУмМУОразТТНОМЕРООМУМІРОУЗавОЗНнНМУНІАРАМАРТЕРОС
ЕО ГЕЕВЗТМРАСЗауУРМММІОСІ РОБУМОНЕУОЕєЕААРАОБЗОМАЇ І
ВЕММРОТаВМІГЕСКІНКЗауУуУТуАНТаОНнНО УМІРРМамМЕВЕОБММУМ
ОгГМТ АРМОаМИатТайВнйв А (5ЕО1ЮО МО: 1).
І0030| Однак в альтернативному варіанті здійснення даного винаходу МІР можуть бути мультивалентними МІР, які містять, наприклад, білки МР1 та/або МР2 з норовірусу однієї геногрупи, змішані з білками УРІ1 та/або МР2 з норовірусу другої геногрупи, де різні білки МР і
МР2 не є хімерними білками МР1 і МР2, але зв'язані разом в одній капсидній структурі з утворенням імуногенних МІР. Використовуваний в даному документі вираз "мультивалентний" означає, що антигенні білюи отримані з двох або більше геногрупп або штамів норовірусу.
Мультивалентні МІР можуть містити антигени МІ Р, узяті з двох або більше вірусних штамів.
Виключно в якості прикладу композиція може містити мультивалентні МІР, що складаються з капсидних мономерів або мультимерів з одного або декількох штамів норовірусу геногрупи І (наприклад, вірусу МогмаїК) разом з капсидними мономерами або мультимерами з одного або декількох штамів норовірусу огеногрупи |! (наприклад, вірусу Ноизіоп). Переважно мультивалентні МІ Р. містять капсидні білки зі штамів норовірусу Могмаїк ії Ноивіоп або інших переважних на даний час циркулюючих штамів. 00311) Комбінування моновалентних або мультивалентних МІ Р у композиції переважно не буде знижувати імуногенність МІ Р кожного типу. Зокрема, переважно, щоб між Мі Р норовірусу в комбінації за даним винаходом не було взаємного впливу так, щоб комбінована композиція МІ Р за даним винаходом була здатна стимулювати формування імунітету до інфекції за допомогою норовірусу кожного генотипу, представленого у вакцині. Відповідно, імунна відповідь проти даного типу МІ Р у комбінації складає щонайменше 5055 імунної відповіді проти того ж типу МІ Р при вимірюванні окремо, переважно 10095 або практично 10095. Імунну відповідь можна придатним чином визначати, наприклад, за допомогою гуморальних імунних відповідей, як ілюструється в прикладах даного документа.
І0032| Використовуваний в даному документі вираз "МІ Р норовірусу геногрупи І" відноситься або до моновалентних, або до мультивалентних Мі Р, які містять капсидний білок, отриманий з одного або декількох штамів норовірусу геногрупи І. У деяких варіантах здійснення МІР бо норовірусу геногрупи | містять капсидний білок повної довжини з норовірусу геногрупи
(наприклад, вірусу МогухаІкК). В інших варіантах здійснення МІ Р норовірусу геногрупи І! містять капсидний білок з консенсусною послідовністю, отриманий з різних штамів геногрупи І. Штами геногрупи І, з яких отримана консенсусна послідовність капсидного білка, можуть входити в той самий генотип або генетичний кластер або в різні генотипи або генетичні кластери. Аналогічно, використовуваний в даному документі вираз "Мі Р норовірусу геногрупи ІІ" відноситься або до моновалентних, або до мультивалентних Мі Р, які містять капсидний білок, отриманий з одного або декількох штамів норовірусу геногрупи Ії. У деяких варіантах здійснення МІР. норовірусу геногрупи ЇЇ містять капсидний білок повної довжини з норовірусу геногрупи ІІ (наприклад, вірусу
Їаигеп5 або Міпегма). В інших варіантах здійснення МІР норовірусу геногрупи ІЇ містять капсидний білок з консенсусною послідовністю, отриманий з різних штамів геногрупи ІЇ. Штами геногрупи ЇЇ, з яких отримана консенсусна послідовність капсидного білка, можуть входити в той самий генотип або генетичний кластер або в різні генотипи або генетичні кластери. В одному варіанті здійснення МІ Р норовірусу геногрупи ІЇ містять консенсусну послідовність капсидного білка із норовірусу 4 генотипу геногрупи ІЇ (11.4). Таким чином, у деяких варіантах здійснення
МІ Р норовірусу геногрупи ІІ містять послідовність капсидного білка БЕО ІЮ МО: 1.
Ї0033| Мультивалентні МР можна одержувати за допомогою роздільної експресії окремих капсидних білків з наступним комбінуванням для одержання МІР. Альтернативно, безліч капсидних білків може експресуватися в одній і тій же клітині з одного або декількох ДНК- конструктів. Наприклад, клітини-хазяї можна трансформувати або трансфікувати за допомогою безлічі ДНК-конструктів, причому кожний вектор кодує різний капсидний білок. Альтернативно, можна застосовувати один вектор з безліччю генів капсидних білків, регульованих загальним промотором або декількома окремими промоторами. ІКЕЗ-елементи також можна за необхідності включати у вектор. За допомогою таких стратегій експресії капсидні білки, які спільно експресуються, можна спільно очищати для подальшого утворення МІР, або вони можуть самовільно утворювати мультивалентні МІ Р, які можна потім очищати. (0034) Переважний спосіб одержання мультивалентних МІ Р включає одержання капсидних білків або похідних МІР, таких як білки МР, з норовірусів різних генотипів, змішування білків і складання білків з одержанням мультивалентних МІР. Білки МР1І можуть бути у формі неочищеного екстракту, можуть бути частково очищеними або очищеними перед змішуванням.
Зо Зібрані моновалентні МІ Р різних геногруп можна розбирати, змішувати разом і збирати заново в мультивалентні МІР. Переважно білки або МІР щонайменше частково очищені перед комбінуванням. Необов'язково додаткове очищення мультивалентних МІР можна проводити після складання. 0035) Якщо треба, МІ Р за даним винаходом одержують, розбираючи та заново збираючи
МІР для забезпечення гомогенних і чистих МІР. В одному варіанті здійснення мультивалентні
МІР можна одержувати, розбираючи дві або більше МІР, з наступним комбінуванням розібраних компонентів МР у будь-який придатний момент до нового складання. Цей підхід можна застосовувати, коли МІ Р утворюються самовільно з білка МР1, який експресується, що відбувається, наприклад, у деяких штамів дріжджів. У випадку, коли експресія білка МРІ1 не приводить до самовільного утворення МІР, препарати білків МРІ або капсомерів можна комбінувати до складання у МІ Р. 0036) У випадку, коли використовують мультивалентні МІР, компоненти МІ Р. переважно змішують у процентному співвідношенні, у якому вони повинні бути в кінцевих змішаних МІ Р.
Наприклад, суміш однакової кількості частково очищеного білка УР'1 з вірусів МогмаїкК і Нои5іоп (або інших штамів норовірусу) забезпечує мультивалентні МІР із приблизно рівними кількостями кожного білка.
І0037| Композиції, що містять мультивалентні МІР, можна стабілізувати за допомогою розчинів, відомих у рівні техніки, таких як розчини з М/О 98/44944, УМО 00/45841, включених у даний документ за допомогою посилання. 0038) Композиції за даним винаходом можуть містити інші білки або фрагменти білків на додаток до білків або похідних МР1 і МР2 норовірусу. Інші білюи або пептиди можна також уводити разом з композицією за даним винаходом. Необов'язково композицію можна також складати або вводити разом з антигенами, що не є норовірусними антигенами. Відповідно, ці антигени можуть забезпечувати захист від інших захворювань. 00391 Білок УР або функціональне похідне білка у відповідному випадку здатні утворювати
МІ Р, і утворення МІ Р можна оцінювати за допомогою стандартних технік, таких як, наприклад, ексклюзіонна хроматографія, електронна мікроскопія та динамічне розсіювання лазерного випромінювання.
І0040)| Молекули антигену за даним винаходом можна одержувати за допомогою виділення бо та очищення з організмів, у яких вони зустрічаються в природі, або їх можна одержувати за допомогою технік рекомбінації. Переважно антигени МІ Р норовірусу одержують із клітин комах, таких як клітини 519 або Н5, хоча можна застосовувати будь-які придатні клітини, такі як клітини
Е. соїї або дріжджів, наприклад, 5. сегемівіає, 5. ротре, Ріспіа рахіогі або інші системи експресії на основі Ріспіа, системи експресії на основі клітин ссавців, такі як системи експресії на основі
СНО або НЕК. При одержанні за допомогою рекомбінантного способу або за допомогою синтезу можна робити одну або кілька вставок, делецій, інверсій або заміщень амінокислот, що складають пептид. Кожний з вищевказаних антигенів переважно застосовують у по суті чистому стану. 00411) Процедури одержання МІ Р норовірусу в культурі клітин комах були раніше розкриті в патенті США Мо 6942865, який включений у даний документ у всій своїй повноті за допомогою посилання. Коротко, клонують кКДНК від 3'-кінця генома, що містить ген вірусного капсида (ОКЕ2) і малий структурний ген (ОКЕЗ). Рекомбінантні бакуловіруси, що несуть гени вірусного капсида, конструюють на основі клонованих кДНК. МІ Р норовірусу одержують у культурах клітин комах 519 або Н5.
І0042| У деяких варіантах здійснення композиція вакцини містить один або декілька ад'ювантів у комбінації з норовірусним антигеном. Більшість ад'ювантів містять речовину, призначену захищати антиген від швидкого катаболізму, таку як гідроксид алюмінію або мінеральне масло, і стимулятор імунних відповідей, такий як білки, отримані з Вогадаїейа репивбзіз або Мусобасіегішт їшрегсціо5із. Придатні ад'юванти комерційно доступні, як, наприклад, неповний ад'ювант Фрейнда та повний ад'ювант (Ріїсо Іарогаїйогіе5, Детройт,
Мічиган); ад'ювант МегокК Адіимапі 65 (МегоК апа Сотрапу, Іпс., Рахвей, Нью-Джерсі); солі алюмінію, такі як гель гідроксиду алюмінію (галуни) або фосфат алюмінію; солі кальцію, заліза або цинку; нерозчинна суспензія ацильованого тирозину, ацильованих цукрів; катіонно або аніонно отримані полісахариди; поліфосфазени; біорозкладні мікросфери та Оції А. 00431 Придатні ад'юванти також включають без обмежень агоністи (01ІІ- подібних рецепторів (ТІК), зокрема, агоністи 1І- подібних рецепторів 4 типу (ТІ К-4) (наприклад, монофосфорил- ліпід А (МР), синтетичний ліпід А, міметики або аналоги ліпіду А), солі алюмінію, цитокіни, сапоніни, похідні мурамілдипептиду (МОР), СрОо-олігонуклеотиди, ліпополісахарид (ІРБ) грамнегативних бактерій, поліфосфазени, емульсії, віросоми, кохлеати, мікрочастинки
Зо співполімерів(лактиду та гліколіду) (РІС), полоксамерні частинки, мікрочастинки, ліпосоми, емульсії "масло у воді, МЕ59 і сквален. У деяких варіантах здійснення ад'юванти не є екзотоксинами бактеріального походження. Переважні ад'юванти включають ад'юванти, які стимулюють відповідь по ТП 1-типу, такі як ЗОМРІ. або 0521. (0044| Монофосфорил-ліпід А (МР), нетоксичне похідне ліпіду А, отриманого із ЗаІтопепПа, є сильним агоністом ТІ К-4, який був розроблений у якості ад'юванта вакцини (Емап5 еї аї. 2003). У доклінічних дослідженнях на мишах було показано, що інтраназальне введення МРІ. підсилює секреторні, а також системні гуморальні відповіді (Ваїагідде еї а. 2000; Мапод еї аї. 2002). Також була доведена його безпека та ефективність у якості ад'юванта вакцини в клінічних дослідженнях на більш ніж 120000 пацієнтів (ВаїагіскК еї аї., 2002; Ваїадгіаде еї аї. 2004).
МРІ. стимулює індукцію вродженого імунітету за допомогою рецептора ТІ К-4 і, таким чином, здатний стимулювати формування неспецифічних імунних відповідей проти широкого спектра інфекційних патогенів, у тому числі грамнегативних і грампозитивних бактерій, вірусів і паразитів (Ваїагідде еї аІ. 2004; Регхіпуд еї а. 2002). Включення МРІ. у склади вакцин повинно забезпечувати швидку індукцію вроджених відповідей, стимулюючи формування неспецифічних імунних відповідей, після введення вірусної провокаційної проби та при цьому підсилювати специфічні відповіді, викликувані антигенними компонентами вакцини. 0045) В одному варіанті здійснення даний винахід представляє композицію, що містить монофосфорил-ліпід А (МРІ) або о-ацильований монофосфорил-ліпід А (3О-МРІ) у якості стимулятора адаптивного та уродженого імунітету. У хімічному відношенні ЗО-МРІ. являє собою суміш о-ацильованого монофосфорил-ліпіду А з 4, 5 або б ацильованими ланцюгами.
Переважна форма о-ацильованого монофосфорил-ліпіду А розкрито в Європейському патенті 0 689 454 В1 (бтійКіїпе Вееспат ВіоіодісаІ5 ЗА), який включений у даний документ за допомогою посилання. В іншому варіанті здійснення даний винахід представляє композицію, що містить синтетичний ліпід А, міметики або аналоги ліпіду А, такі як РЕТ ліпід А від Віотіга, або синтетичні похідні, розроблені таким чином, що функціонують як агоністи ТІ К-4. 0046) У певних варіантах здійснення композиція вакцини містить два ад'юванта. Комбінацію ад'ювантів можна вибрати з комбінацій, описаних вище. В одному конкретному варіанті здійснення два ад'юванта являють собою МРІ і гідроксид алюмінію (наприклад, галуни). В іншому конкретному варіанті здійснення два ад'юванта являють собою МРІ і масло. бо І0047| Вираз "ефективна кількість ад'юванта" буде добре зрозуміло фахівцеві в даній галузі та включає кількість одного або декількох ад'ювантів, яка здатна стимулювати імунну відповідь на введений антиген, тобто кількість, яка збільшує імунну відповідь на введену композицію антигену, який вимірюють на основі рівнів (ДА у змивах з носової порожнини, рівнів сироваткового Ідс або ІдМм або В- і Т-клітинної проліферації. Підходяще ефективне збільшення рівнів імуноглобулінів включає більш ніж на 595, переважно більш ніж на 2595 і, зокрема, більш ніж на 5095 у порівнянні з такою ж композицією антигену без будь-якого ад'юванта.
І0048| В одному варіанті здійснення даний винахід представляє композицію вакцини, складену для парентерального введення, де композиція включає щонайменше два типи МІ Р норовірусу в комбінації з гідроксидом алюмінію та буфером. Буфер може бути обраний із групи, що включає І -гістидин, імідазол, бурштинову кислоту, трис, лимонну кислоту, біс-трис, РІРЕ5,
МЕ5, НЕРЕХ, гліцинамід і трицин. В одному варіанті здійснення буфер являє собою І -гістидин або імідазол. Переважно буфер присутній у концентрації від приблизно 15 мМ до приблизно 50 мМ, більш переважно від приблизно 18 мМ до приблизно 40 мМ або найбільше переважно від приблизно 20 мМ до приблизно 25 мМ. У деяких варіантах здійснення рН композиції антигену або вакцини складає від приблизно 6,0 до приблизно 7,0, або від приблизно 6,2 до приблизно 6,8, або приблизно 6,5. Композиція вакцини може являти собою водний склад. У деяких варіантах здійснення композиція вакцини являє собою ліофілізований порошок та її ресуспендують з одержанням водного складу. 0049) У певних варіантах здійснення композиція вакцини додатково містить щонайменше один ад'ювант на додаток до МІ Р норовірусу двох або більше типів, гідроксиду алюмінію та буферу. Наприклад, ад'ювант може являти собою агоніст (0ЇІ-подібних рецепторів, такий як
МРІ'., флагелін, Сро-олигонуклеотиди, синтетичний ліпід А або міметики або аналоги ліпіду А. В одному конкретному варіанті здійснення ад'ювант являє собою МРІ.. 0050) МІ Р. норовірусу, які включають у композиції вакцини за даним винаходом, можуть являти собою будь-які МІ Р, описані в даному документі. В одному варіанті здійснення кожний із двох типів МІ Р норовірусу містить капсидний білок різних геногрупп (наприклад, геногрупи | і геногрупи ІЇ). Наприклад, МР норовірусу одного типу містять капсидний білок, отриманий з норовірусу геногрупи І, а М Р. норовірусу іншого типу містять капсидний білок, отриманий з норовірусу геногрупи ІІ. В одному варіанті здійснення МІР норовірусу одного типу містять
Зо капсидний білок з вірусу Могулаіїк, а МІ Р норовірусу іншого типу містять капсидний білок з консенсусною послідовністю, отриманий з норовірусів 4 генотипу геногрупи Ії (наприклад, капсидний білок, що містить послідовність ЗЕО ІЮ МО: 1). Композиція вакцини може містити від приблизно 5 мкг до приблизно 200 мкг МР норовірусу кожного типу, більш переважно від приблизно 15 мкг до приблизно 50 мкг МР норовірусу кожного типу. У деяких варіантах здійснення доза МІ Р норовірусу одного типу відрізняється від дози МІ Р норовірусу іншого типу.
Наприклад, у певних варіантах здійснення композиція вакцини містить від приблизно 5 мкг до приблизно 15 мкг МІ Р геногрупи І і від приблизно 15 мкг до приблизно 50 мкг МІ Р геногрупи ІІ. В інших варіантах здійснення композиція вакцини містить від приблизно 15 мкг до приблизно 50 мкг МІ Р геногрупи І і від приблизно 50 мкг до приблизно 150 мкг МІ Р геногрупи ІІ. 0051) У деяких варіантах здійснення композиції вакцини додатково містять фармацевтично прийнятну сіль, включаючи без обмежень хлорид натрію, хлорид калію, сульфат натрію, сульфат амонію та цитрат натрію. В одному варіанті здійснення фармацевтично прийнятна сіль являє собою хлорид натрію. Концентрація фармацевтично прийнятної солі може складати від приблизно 10 мМ до приблизно 200 мМ із переважними концентраціями в діапазоні від приблизно 100 мМ до приблизно 150 мМ. Переважно композиції вакцини за даним винаходом містять менше 2 мМ вільного фосфату. У деяких варіантах здійснення композиції вакцини містять менше 1 мМ вільного фосфату. Композиції вакцини можуть також додатково містити інші фармацевтично прийнятні допоміжні речовини, такі як цукри (наприклад, сахароза, трегалоза, маніт) і поверхнево-активні речовини. (0052) Як розглядалося в даному документі, композиції за даним винаходом можна складати для введення у вигляді складів вакцини. Використовуваний в даному документі вираз "вакцина" відноситься до складу, який містить МІ Р. норовірусу або інші норовірусні антигени за даним винаходом, описані вище, який представлений у формі, яку можна вводити хребетним, зокрема, людині, та який індукує захисну імунну відповідь, достатню для індукції імунітету для попередження та/(або полегшення плину норовірусної інфекції або хвороби, яка індукується норовірусом, та/або для зменшення щонайменше одного симптому норовірусної інфекції або хвороби.
І0053| Використовуваний в даному документі вираз "імунна відповідь" відноситься як до гуморальної імунної відповіді, так ії до клітинно-опосередкованої імунної відповіді. Гуморальна бо імунна відповідь включає стимуляцію продукції антитіл В-лімфоцитами, які, наприклад,
нейтралізують збудників інфекції, перешкоджають проникненню збудників інфекції в клітини, перешкоджають реплікації зазначених збудників інфекції та/або захищають клітини-хазяї від інфекції та руйнування. Клітинно-опосередкована імунна відповідь відноситься до імунної відповіді, опосередкованої Т-лімфоцитами та/або іншими клітинами, такими як макрофаги, спрямованої проти збудника інфекції, що проявляється в хребетних (наприклад, людини), який попереджає або полегшує плин інфекції або зменшує щонайменше один її симптом. Зокрема, «захисний імунітет" або "захисна імунна відповідь" відноситься до імунітету або стимулювання формування імунної відповіді проти збудника інфекції що проявляється в хребетних (наприклад, людини), яка попереджає або полегшує плин інфекції або зменшує щонайменше один її симптом. Зокрема, про індукцію захисної імунної відповіді при введенні вакцини свідчить усунення або зменшення прояву одного або декількох симптомів гострого гастроентериту або зменшення тривалості або тяжкості таких симптомів. Клінічні симптоми гастроентериту, викликаного норовірусом, включають нудоту, діарею, рідкі випорожнення, блювоту, лихоманку та загальне нездужання. Захисна імунна відповідь, яка зменшує або усуває симптоми захворювання буде зменшувати або зупиняти поширення епідемії норовірусу в популяції.
Одержання вакцини в цілому описане в Массіпе Оевзідп ("Пе зибипії апа адіимапі арргоасп" (еав5
РомеїІ М. РЕ. 5 Межмлтап М. 9.) (1995) Ріепит Ргез5 Мемж/ МогК). Композиції за даним винаходом можна складати, наприклад, для доставки в одну або декілька зі слизуватих ротової порожнини, шлунково-кишкового тракту та дихальних шляхів (наприклад, носової порожнини). Композиції за даним винаходом можна складати, наприклад, для доставки за допомогою ін'єкції, такої як парентеральна ін'єкція (наприклад, внутрішньовенна, підшкірна, внутрішньошкірна або внутрішньом'язова ін'єкція). 0054) У випадку, коли композиція призначена для доставки в слизувату дихальних шляхів (наприклад, носової порожнини), її зазвичай складають у вигляді водного розчину для введення у формі аерозолю, або назальних крапель, або, альтернативно, у формі сухого порошку, наприклад, для швидкого накопичення в носовому ході. Композиції для введення у формі назальних крапель можуть містити одну або кілька допоміжних речовин таких, які зазвичай включають у подібні композиції, наприклад, консерванти, засоби, що регулюють в'язкість, засоби, що регулюють тонічність, буферні засоби і т.п. Засобами для зміни в'язкості можуть
Зо бути мікрокристалічна целюлоза, хітозан, крохмалі, полісахариди і т.п. Композиції для введення у формі сухого порошку можуть також містити одну або кілька допоміжних речовин, які зазвичай включають у подібні композиції, наприклад, засоби, що регулюють мукоадгезивні властивості, наповнювачі та засоби для надання порошку відповідних характеристик плинності та об'єму.
Наповнювачі та засоби, що регулюють плинність та об'єм порошку, можуть включати маніт, сахарозу, трегалозу та ксиліт.
Ї0055| У випадку, коли композиція призначена для парентеральної ін'єкції, такої як внутрішньовенна (і.м.), підшкірна (5.с.), внутрішньошкірна або внутрішньом'язова (і.т.) ін'єкція, її зазвичай складають у формі рідкої суспензії (тобто водного складу), що містить щонайменше один тип МР норовірусу та необов'язково щонайменше один ад'ювант. В одному варіанті здійснення ад'ювант може являти собою МРІ. В іншому варіанті здійснення в рідкій вакцині, складеній для парентерального введення, може міститися більше одного ад'юванта. У переважному варіанті здійснення рідка вакцина, складена для парентерального введення (наприклад, складена для і.т., і.м. або 5.с. уведення), містить МІ Р норовірусу геногрупи І та/або геногрупи ЇЇ з гідроксидом алюмінію (наприклад, галунами) і монофосфорил-ліпідом А (МРІ) у якості ад'ювантів. В одному варіанті здійснення, рідкий склад для парентерального введення містить антиген (антигени) геногруп норовірусу, такий як один або кілька типів МІ Р норовірусу, описаних у даному документі, МР", гідроксид алюмінію та буфер. В іншому варіанті здійснення рідкий склад для парентерального введення містить антиген (антигени) геногруп норовірусу,
МРІ, масло та буфер. У певних варіантах здійснення буфер у складах вакцини для парентерального введення являє собою І-гістидин або імідазол. Парентеральне введення рідких вакцин можна здійснювати за допомогою голки та шприца, як добре відомо в рівні техніки.
Ї0056| У певних варіантах здійснення композиція вакцини за даним винаходом для стимулювання формування захисної імунної відповіді проти норовірусу в людей містить МІ Р норовірусу геногрупи | та/або геногрупи І у дозі не більше 150 мкг. Наприклад, у деяких варіантах здійснення композиція вакцини містить не більше 150 мкг, не більше 100 мкг, не більше 50 мкг, не більше 25 мкг, не більше 15 мкг або не більше 10 мкг М Р норовірусу геногрупи І. В інших варіантах здійснення композиція вакцини містить не більше 150 мкг, не більше 100 мкг, не більше 50 мкг, не більше 25 мкг, не більше 15 мкг або не більше 10 мкг МІ Р бо норовірусу геногрупи ІІ. У певних варіантах здійснення композиція вакцини містить не більше
150 мкг кожного з МІ Р норовірусу геногрупи І і геногрупи ЇЇ. У таких варіантах здійснення доза
МІР норовірусу геногрупи І і МІ Р. геногрупи ЇЇ може бути однаковою або різною. Наприклад, в одному варіанті здійснення композиція вакцини може містити не більше 50 мкг МІ Р норовірусу геногрупи І і не більше 150 мкг М Р норовірусу геногрупи ІІ. В іншому варіанті здійснення композиція вакцини може містити не більше 25 мкг МІ Р норовірусу геногрупи І і не більше 50 мкг
МІ Р норовірусу геногрупи ІІ. В інших варіантах здійснення композиція вакцини може містити не більше 15 мкг МІР норовірусу геногрупи І ії не більше 50 мкг МІ Р норовірусу геногрупи ІІ. У ще інших варіантах здійснення композиція вакцини може містити не більше 25 мкг МІ Р норовірусу геногрупи І і не більше 150 мкг МІ Р норовірусу геногрупи ІІ.
І0057| МІ Р. норовірусу геногрупи І! ії геногрупи ІЇ можуть бути отримані з будь-якого штаму норовірусу, описаного в даному документі. В одному варіанті здійснення МІР. норовірусу геногрупи І являють собою МІ Р 1 генотипу геногрупи І (01.1) (тобто містять капсидний білок з норовірусу 01.1). В іншому варіанті здійснення МІ Р. норовірусу геногрупи І являють собою МІ Р вірусу МогулаІК. В іншому варіанті здійснення МІ Р норовірусу геногрупи ІЇ являють собою МІ Р 4 генотипу геногрупи ІЇ (011.4). В іншому варіанті здійснення МІ Р норовірусу геногрупи ІЇ являють собою МІ Р, отримані в результаті експресії консенсусної послідовності норовірусу геногрупи ІІ.
У конкретному варіанті здійснення МІР норовірусу геногрупи І містять капсидний білок з послідовністю ЗЕО ІЮО МО: 1. 0058) Композиції вакцини, описані раніше в даному документі, можна ліофілізувати і зберігати в безводному стані до того, як вони будуть готові до використання, і тоді їх ресуспендують за допомогою розріджувача. Альтернативно, різні компоненти композиції можна зберігати окремо в наборі (будь-який або все компоненти можна ліофілізувати). Компоненти можна залишати в ліофілізованій формі для сухого складу або можна ресуспендувати для рідких складів та або змішувати перед застосуванням, або вводити пацієнтові окремо. У деяких варіантах здійснення композиції вакцини зберігаються в наборах у формі рідких складів, і до них можуть додаватися пристрої доставки, такі як шприци з голками. В інших варіантах здійснення рідкі композиції вакцини можна зберігати в пристроях доставки в наборі. Наприклад, набір може містити попередньо заповнені шприци, автоїнжектори або пристрої шприц-ручки, що містять рідкий склад композиції вакцини, описаний у даному документі.
Зо І0059| Ліофілізація вакцин добре відома в рівні техніки. Зазвичай рідкий антиген ліофілізують у присутності засобів для захисту антигену під час процесу ліофілізації та для одержання осаду з необхідними характеристиками порошку. Цукри, такі як сахароза, маніт, трегалоза або лактоза (присутні в початковій концентрації 10-200 мг/мл) зазвичай застосовують для кріозахисту білкових антигенів і для одержання ліофілізованого осаду з необхідними характеристиками порошку. Ліофілізація композицій теоретично дає в результаті більш стійку композицію. 0060) Кількість антигену в кожній композиції вакцини вибирають як кількість, яка індукує сильну імунну відповідь без значних несприятливих побічних ефектів. Така кількість буде варіювати залежно від того, який специфічний антиген (антигени) використовують, від шляху введення та використовуваних ад'ювантів. Загалом, доза, яку вводять пацієнтові, згідно із даним винаходом повинна бути достатньою для того, щоб викликати захисну імунну відповідь у пацієнта через якийсь час, або щоб індукувати вироблення антиген-специфічних антитіл. Таким чином, композицію вводять пацієнтові в кількості, достатній для стимулювання формування імунної відповіді на специфічні антигени та/або для попередження, полегшення, зменшення або лікування симптомів та/або ускладнень захворювання або інфекції і, таким чином, зменшення або зупинки поширення епідемії норовірусу в популяції. Кількість, достатню для виконання вищезгаданого, визначають як "терапевтично ефективну дозу".
ІЇ0061| Композиції вакцини за даним винаходом можна вводити за допомогою шляху введення через слизуваті або не через слизуваті. Ці шляхи введення можуть включати іп мімо уведення за допомогою парентеральної ін'єкції (наприклад, внутрішньовенної, підшкірної, внутрішньошкірної та внутрішньом'язової), або інші традиційні прямі шляхи, такі як букальний/сублінгвальний, ректальний, пероральний, назальний, місцевий (такий як трансдермальний та очний), вагінальний, легеневий, інтраартеріальний, внутрішньочеревинний, інтраокулярний або інтраназальний шляхи, або введення безпосередньо в конкретну тканину.
Інші придатні шляхи введення включають чрезшкірний, субдермальний і за допомогою супозиторія. В одному варіанті здійснення вакцину вводять за допомогою парентерального шляху введення, такого як внутрішньовенний, підшкірний, внутрішньошкірний або внутрішньом'язовий. У певних варіантах здійснення вакцину вводять за допомогою внутрішньом'язового шляху введення. Уведення можна здійснювати просто шляхом 60 безпосереднього введення за допомогою голки, катетера або подібного пристрою (наприклад,
попередньо заповнених шприців або автоїнжекторів) одномоментно або в різні моменти часу.
Інші склади для парентерального введення можуть бути доставлені підшкірно або внутрішньошкірно за допомогою мікроіїн'єкції або способів доставки з використанням трансдермального пластиру.
І0062| У даному винаході представлені способи стимулювання формування захисного імунітету проти норовірусу в суб'єкта, що включають парентеральне введення суб'єктові не більше одноразової дози композиції вакцини за даним винаходом, де зазначена вакцина містить МІР норовірусу геногрупи | та/або геногрупи ІІ, описані в даному документі, і необов'язково щонайменше один ад'ювант. У таких варіантах здійснення композиція вакцини одноразової дози індукує щонайменше триразове збільшення титру норовірус-специфічних сироваткових антитіл у порівнянні з титром у людини до введення композиції. У деяких варіантах здійснення композиція вакцини одноразової дози індукує щонайменше шестиразове збільшення титру норовірус-специфічних сироваткових антитіл у порівнянні з титром у людини до введення композиції. В інших варіантах здійснення композиція вакцини одноразової дози індукує титр норовірус-специфічних сироваткових антитіл, зіставний з титром антитіл, який індукується контактом з живим норовірусом при природній інфекції, тобто більш ніж десятиразове збільшення титру норовірус-специфічних сироваткових антитіл у порівнянні з титром у людини до введення композиції. У певних варіантах здійснення композиція вакцини одноразової дози індукує збільшення титру норовірус-специфічних сироваткових антитіл протягом семи днів після введення композиції. Переважно композицію вакцини одноразової дози вводять за допомогою внутрішньовенного, підшкірного або внутрішньом'язового шляху введення. У певному варіанті здійснення композицію вакцини одноразової дози вводять людині внутрішньом'язово. 0063) Як описано в даному документі, у деяких варіантах здійснення композиції вакцини одноразової дози, що підходять для застосування в способі, містять не більше 150 мкг кожного з М Р норовірусу геногрупи | та/або геногрупи ІІ. Наприклад, у деяких варіантах здійснення композиція вакцини містить не більше 150 мкг, не більше 100 мкг, не більше 50 мкг, не більше 25 мкг, не більше 15 мкг або не більше 10 мкг МІ Р норовірусу геногрупи І. В інших варіантах здійснення композиція вакцини містить не більше 150 мкг, не більше 100 мкг, не більше 50 мкг,
Зо не більше 25 мкг, не більше 15 мкг або не більше 10 мкг МІ Р норовірусу геногрупи ІІ. У певних варіантах здійснення композиція вакцини містить не більше 50 мкг кожного з МІ Р. норовірусу геногрупи І і геногрупи ІІ. У варіантах здійснення, у яких композиція вакцини одноразової дози містить МІ Р норовірусу як геногрупи І, так і геногрупи ІІ, доза МІ Р норовірусу геногрупи І та М Р геногрупи ПП може бути однаковою або різною. Наприклад, в одному варіанті здійснення композиція вакцини може містити не більше 50 мкг МІ Р норовірусу геногрупи І і не більше 150 мкг МР. норовірусу геногрупи ІІ. В іншому варіанті здійснення композиція вакцини може містити не більше 25 мкг МР норовірусу геногрупи І і не більше 50 мкг МІР. норовірусу геногрупи ІІ. В інших варіантах здійснення композиція вакцини може містити не більше 15 мкг
МІ Р норовірусу геногрупи І і не більше 50 мкг МІ Р норовірусу геногрупи ІІ. У ще інших варіантах здійснення композиція вакцини може містити не більше 25 мкг МІ Р норовірусу геногрупи І і не більше 150 мкг МІ Р норовірусу геногрупи ІІ. 0064) В одному варіанті здійснення способу суб'єкт є людиною, і вакцина забезпечує захист від одного або декількох симптомів норовірусної інфекції. Хоча в інших джерелах і повідомлялося про способи індукції імунної відповіді за допомогою норовірусних антигенів (див. публікацію заявки на патент США Мо 05 2007/0207526), показники захисної імунної відповіді проти норовірусу в людей усе ще чітко не визначені (Негрз5і-Кгаїомеї? єї аї. (2010) Ехреп Неу.
Массіпе5 9(3), 299-307). На відміну від деяких вакцин, ліцензованих у цей час у США, де ефективність вакцини корелює із сироватковими антитілами, дослідження показали, що маркери імунної відповіді, такі як збільшення титрів сироваткових антитіл до до вірусу МогмаїкК,
БО не пов'язані із захисним імунітетом у людей (допп5оп еї аї. (1990) У. Іптесібив Оівзеазез 161: 18- 21). Більше того, інше дослідження, у якому вивчали реакцію людей на введення провокаційної проби з вірусом Могулаїк, показало, що сприйнятливість до інфекції Могмак є мультифакторіальною і включає такі фактори, як секреторний статус та імунологічна пам'ять слизуватих (І іпадезтійй еї аї. (2003) Маїшиге Меаїсіпе 9: 548-553). 0065) Оскільки норовірус неможливо культивувати іп міїго, то аналізи нейтралізації вірусів у цей час не доступні. Функціональним аналізом, який служить заміною аналізу нейтралізації, є аналіз інгібування гемаглютинації (НАЇ) (див. приклад 1). НАЇ дозволяє вимірювати здатність антитіл, індукованих норовірусною вакциною, інгібувати аглютинацію еритроцитів, покритих антигенами, МІР норовірусу, тому що МІР норовірусу зв'язуються з антигенами еритроцитів бо (наприклад, антигенами групи крові). Даний аналіз також відомий як аналіз блокування вуглеводів, оскільки він показує функціональну здатність антитіла блокувати зв'язування вірусу або МІ Р з вуглеводами антигенів групи крові на поверхні еритроцитів. У даному аналізі певну кількість МІ Р. норовірусу змішують із певною кількістю еритроцитів і сироватки від імунізованих суб'єктів. Якщо зразок сироватки містить функціональні антитіла, антитіла будуть зв'язуватися з
МІ Р і, таким чином, інгібувати аглютинацію еритроцитів. Використовуваний в даному документі вираз "функціональні антитіла" відноситься до антитіл, здатних інгібувати взаємодію між частинками норовірусу та антигенами еритроцитів. Інакше кажучи, титр функціональних антитіл дорівнює титру антитіл, що блокують антигени групи крові (НВОА) або вуглеводи. Сироватковий титр норовірус-специфічних функціональних антитіл можна вимірювати за допомогою аналізу
НАЇ, описаного вище. Сироватковий титр норовірус-специфічних функціональних антитіл можна також вимірювати за допомогою аналізу на основі ЕГІЗБА, у якому вуглеводний Н-антиген пов'язаний з лунками мікротитрувального планшета та зв'язування МІР норовірусу з Н- антигеном виявляють у присутності сироватки (див. приклад 1 та Кееск еї аї. (2010) У Іптесії ів,
Мої. 202(8):1212-1218). Збільшення рівня норовірус-специфічних функціональних антитіл може служити показником захисної імунної відповіді. Таким чином, в одному варіанті здійснення введення вакцини стимулює формування захисного імунітету, що включає збільшення сироваткового титру норовірус-специфічних функціональних антитіл у порівнянні із сироватковим титром у людини, що не одержувала вакцину. Сироватковий титр норовірус- специфічних функціональних антитіл, який служить показником захисної імунної відповіді, переважно являє собою середній геометричний титр, що складає більше 40, 50, 75, 100, 125, 150, 175, 200 за результатами вимірювання за допомогою аналізу НАЇ, або середній геометричний титр блокувальних антитіл (ВТ)50 (5095 інгібування зв'язування Н-антигену з МІ Р норовірусом) складає більше 100, 150, 200, 250, 300, 350, 400, 450 або 500 за результатами вимірювання за допомогою аналізу зв'язування Н-антигену. В одному варіанті здійснення сироватковий титр норовірус-специфічних функціональних антитіл являє собою середній геометричний титр, що складає більше 40 за результатами вимірювання за допомогою аналізу
НА. В іншому варіанті здійснення сироватковий титр норовірус-специфічних функціональних антитіл являє собою середній геометричний титр, що складає більше 100 за результатами вимірювання за допомогою аналізу НАЇ. В іншому варіанті здійснення сироватковий титр
Зо норовірус-специфічних функціональних антитіл являє собою середній геометричний титр ВТ50, що складає більше 100 за результатами вимірювання за допомогою аналізу зв'язування Н- антигену. У ще іншому варіанті здійснення сироватковий титр норовірус-специфічних функціональних антитіл являє собою середній геометричний титр ВТ50О, що складає більше 200 за результатами вимірювання за допомогою аналізу зв'язування Н-антигену.
ІЇ0066б| У додатковому аспекті введенням вакцини стимулюють формування захисного імунітету, включаючи ІдА-опосередковану мукозну імунну відповідь і Ідс-опосередковану системну імунну відповідь, за допомогою парентерального введення (переважно внутрішньом'язового) суб'єктові не більше одноразової дози антигенної композиції або композиції вакцини, що містить один або кілька типів норовірусних антигенів і необов'язково щонайменше один ефективний ад'ювант. Винахідники виявили, що парентеральне введення композицій норовірусної вакцини, описаних у даному документі, індукує сильну ІдА- опосередковану відповідь на додаток до сильної Ідбс-опосередкованої відповіді. Як правило, сильні ІдА-опосередковані відповіді спостерігаються тільки коли вакцини вводять за допомогою шляху введення через слизуваті.
І0067| У певних варіантах здійснення введення вакцини стимулює формування захисного імунітету, що включає збільшення рівня клітин, які секретують норовірус-специфічні антитіла класу ІДА, у крові в порівнянні з рівнем у людини, що не одержувала вакцину. У деяких варіантах здійснення введення вакцини стимулює формування захисного імунітету, що включає збільшення рівня клітин, які секретують норовірус-специфічні антитіла класу ІдА, у крові в порівнянні з рівнем у людини до одержання вакцини. В одному варіанті здійснення клітинами, які секретують норовірус-специфічні антитіла класу (ДА, є ССКТ1О-, СО19-, С027-, СО621ч. і а4р7. Клітини, які секретують антитіла, з даним маркерним профілем здатні до хоумінгу як у периферичну лімфоїдну тканину, таку як пейєрові бляшки в кишечнику, так і в лімфоїдну тканину слизуватої, такої як слизувата кишечнику. В одному варіанті здійснення кількість сССк10-, Ср19ж, 6027, СОб62І я і а4ф7- клітин, які секретують антитіла класу ІдА, складає більше приблизно 500, приблизно 700, приблизно 1000, приблизно 1500 або більше приблизно 2000 клітин на 1 х 106 моноцитів периферичної крові. В іншому варіанті здійснення клітинами, які секретують норовірус-специфічні антитіла класу ІА, є ССКІО-, СО19ж, С027-, СО62І- і а4ф7. У клітин, які секретують антитіла, з даним маркерним профілем зазвичай бо спостерігається хоумінг тільки в ділянки слизуватої і вони можуть служити показниками вторинної В-клітинної відповіді. У деяких варіантах здійснення, у яких вакцину вводять внутрішньом'язово, кількість ССКТОж, СО19ж, СО027-, СО62І- і а4р7- клітин, які секретують антитіла класу ІДА, складає більше приблизно 5000, приблизно 6500, приблизно 7000, приблизно 10000, приблизно 13000, приблизно 15000 або більш приблизно 20000 клітин на 1 х 106 моноцитів периферичної крові.
І0068| Аналогічні результати одержували з вакцинами проти інших вірусів, таких як ротавірус. У відношенні ротавірусної вакцини існують розбіжності із приводу того, чи залучені сироваткові антитіла безпосередньо в захист або тільки відображають недавню інфекцію (діапод, 2002; Егапсо, 2006). Визначення таких взаємозв'язків із захистом особливо важко у відношенні гострих кишкових інфекцій, таких як ротавірусні або норовірусні, оскільки доклінічні дослідження, за результатами яких можна зробити висновок про захисний ефект, можуть бути багатофакторними з урахуванням захисних властивостей слизуватих (таких як опосередковані
ІА кишечнику), вироблення цитокінів та клітинного імунітету. Складність вимірювання таких імунних відповідей під час клінічних досліджень і слабкий взаємозв'язок з даними вимірювань сироваткових антитіл припускають, що ефективність вакцини проти цих типів вірусів можна виявити тільки за допомогою клінічних експериментів по введенню провокаційної проби людям. 0069) Як зазначено вище, введення композиції вакцини за даним винаходом попереджає та/або зменшує щонайменше один симптом норовірусної інфекції. Симптоми норовірусної інфекції добре відомі в рівні техніки та включають нудоту, блювоту, діарею та спастичні болі в шлунку. Крім того, у пацієнта з норовірусною інфекцією може спостерігатися субфебрильна лихоманка, головний біль, озноб, м'язові болі та слабкість. Даний винахід також охоплює спосіб індукції захисної імунної відповіді в суб'єкта з наявністю норовірусної інфекції за допомогою введення суб'єктові складу вакцини за даним винаходом таким чином, що полегшують та/або зменшують щонайменше один симптом, пов'язаний з норовірусною інфекцією. Зменшення симптому може бути визначено суб'єктивно або об'єктивно, наприклад, за допомогою самостійної оцінки свого стану суб'єктом, оцінки клініцистом або за допомогою проведення відповідного аналізу або вимірювання (наприклад, температури тіла), включаючи, наприклад, оцінку якості життя, уповільнення прогресування норовірусної інфекції або додаткових симптомів, зменшення тяжкості симптомів норовірусної інфекції, або придатних аналізів (наприклад, титр антитіл, виявлення антигенів методом ЗТ-ПЛР та/або аналіз активації В-клітин або Т-клітин). Ефективну відповідь також можна визначати за допомогою прямого вимірювання (наприклад, ЗТ-ПЛР) вірусного навантаження в зразках випорожнень, яке відбиває кількість вірусів, виділюваних з кишечнику). Об'єктивне оцінювання включає методи оцінки, застосовувані як для тварин, так і для людини.
І00709| У даному винаході також представлений спосіб стимулювання утворення антитіл до одного або декількох норовірусних антигенів, причому зазначений спосіб включає введення композиції вакцини за даним винаходом, описаної вище, суб'єктові. Ці антитіла можна виділяти та очищати за допомогою звичайних способів з рівня техніки. Виділені антитіла, специфічні у відношенні норовірусних антигенів, можна використовувати при розробці діагностичних імунологічних аналізів. Ці аналізи можна використовувати для виявлення норовірусу в клінічних зразках та ідентифікації конкретного вірусу, що викликає інфекцію (наприклад, МогмаїкК, Ноивіоп,
Зпом/ Моипіайп і т.д.) Альтернативно, виділені антитіла можна вводити суб'єктам, сприйнятливим до норовірусної інфекції, для забезпечення пасивного або короткострокового імунітету.
І0071| Даний винахід буде далі більш докладно ілюстрований, грунтуючись на конкретних варіантах здійснення, описаних у наступних прикладах. Приклади, як передбачається, служать винятково ілюстративним цілям даного винаходу та, як передбачається, не обмежують будь- яким чином його обсяг.
Приклади
Приклад 1. Дослідження з ескалацією дози по вивченню безпеки та імуногенності норовірусної бівалентної вакцини для внутрішньом'язового введення на основі вірусоподібних частинок (МІ Р) у людей (дослідження І МО03-104), когорта А 00721 У даному прикладі описана когорта А рандомізованого багатоцентрового дослідження з ескалацією дози по вивченню безпеки та імуногенності чотирьох рівнів дозування норовірусної бівалентної вакцини для внутрішньом'язового введення (ІМ) на основі МІР з ад'ювантом монофосфорил-ліпідом А (МРІ) і гідроксидом алюмінію (АІОН) у порівнянні із плацебо в дорослих суб'єктів. Приблизно 48 суб'єктів у віці від 18 до 49 років включили в когорту. Суб'єкти одержували дві дози вакцини або плацебо за допомогою внутрішньом'язової (ІМ) ін'єкції з використанням 1,5-дюймової (38 мм) голки з різницею в 28 днів. бо І0073| Норовірусна бівалентна вакцина на основі МІ Р. містила МІ Р 1 генотипу геногрупи
(СІ.1) ії ІМ генотипу геногрупи ЇЇ (11.4) у якості антигенів і монофосфорил-ліпід А (МРІ) і гідроксид алюмінію (АІОН) у якості ад'ювантів, хлорид натрію (Масі) і І -гістидин (І-Нів) у якості буфера (рн 6,3-6,7), етанол та воду для ін'єкцій. Композиція норовірусної бівалентної вакцини для внутрішньом'язового введення на основі МР викладена в таблиці 1. МІР. С1І.4 містили послідовність капсидного білка ЗЕО ІЮО МО: 1, отриману із трьох штамів С1І.4.
Таблиця 1
Кінцева композиція готової лікарської форми для чотирьох складів норовірусних бівалентних
ІМ вакцин на основі МІ Р у розрахунку на 0,5 мл (мкг) (мкг) (мкг) (мг) (мг) (мг) (мг) х у вигляді гідроксиду алюмінію
І0074| Плацебо являло собою стерильний нормальний сольовий розчин для ін'єкцій (0,990 масі, без консервантів). Ескалацію дози вакцини проводили в такий спосіб: після відповідного скринінгу на предмет задовільного стану здоров'я суб'єктів когорти А послідовно включали в кожну із чотирьох груп по дозуванню, по «12 суб'єктів кожна (групи по дозуванню Ат, Аг, АЗ і
А4). Групи по дозуванню Ат, А2, АЗ і А4 представляли дозування бівалентних антигенів, що складали 5/5 мкг, 15/15 мкг, 50/50 мкг і 150/150 мкг МІ Р норовірусу СО 1.1 і 1.4, відповідно.
Суб'єкти в кожній групі по дозуванню були рандомізовані у співвідношенні 5 : 1 для одержання вакцини або плацебо. Суб'єкти в групі по дозуванню А! одержували своє відповідно рандомізоване лікування (10 суб'єктів одержували 5/5 мкг вакцини та 2 суб'єкти одержували плацебо). Суб'єктів спостерігали з метою оцінки безпеки за допомогою розгляду симптомів, зареєстрованих у щоденнику самоспостереження (дні 0-7) та індивідуальних картах, починаючи з дня відвідування 7, 21, 28, 35 і 56. Дані по безпеці розглядалися головним спостерігачем, відповідальним за безпеку (СЗМ). Після того, як від суб'єктів групи по дозуванню А1 були отримані для розгляду дані по безпеці по закінченні 7 днів після приймання дози 2 (день дослідження 35) та їх вважали прийнятними, суб'єкти групи по дозуванню А2 допускалися до приймання своєї початкової дози. Те ж правило застосовували для дозування в наступних групах по дозуванню; тобто після того, як від групи по дозуванню були отримані для розгляду дані по безпеці по закінченні 7 днів після приймання дози 2 (день дослідження 35), наступна група по дозуванню допускалася до приймання своєї початкової дози.
ІЇ0075| По закінченні включення в когорту А приблизно 10 суб'єктів у кожній групі по дозуванню одержували вакцину (у сумі 40 вакцинованих), і 2 суб'єкти в кожній групі одержували сольовий розчин (у сумі приблизно 8 реципієнтів, що одержували сольовий розчин-контроль).
Зо І0076| Суб'єкти щодня вели записи в щоденнику самоспостереження про очікувані симптоми, включаючи чотири місцеві реакції в місці ін'єкції, такі як біль, хвороблива чутливість, почервоніння та припухлість, і 10 системних проявів або симптомів, включаючи щоденну температуру тіла, вимірювану в ротовій порожнині, головний біль, слабкість, м'язові болі, озноб, болі в суглобах і гастроінтестинальні симптоми, а саме нудоту, блювоту, діарею, абдомінальні спастичні болі/абдомінальний біль, від дня 0 до 7 після кожної дози норовірусної бівалентної ІМ вакцини на основі МІ Р або контролю. Почервоніння та припухлість у місці ін'єкції вимірювали та реєстрували щодня протягом 7 днів після кожної ін'єкції.
І0077| Індивідуальні карти заповнювали при кожному наступному відвідуванні в дні 7-3, 213, 283, 3553, 567, 180--14 і 3934-14 та під час наступного телефонного дзвінка в день 26514; суб'єктів розпитували про перенесені за даний період захворювання, відвідування лікаря, будь-які серйозні несприятливі явища (ЗАЕ) та виникнення будь-яких нових значимих медичних станів. У суб'єктів визначали кількість формених елементів крові з визначенням лейкоцитарної формули та визначенням кількості тромбоцитів та здійснювали оцінку сироваткової сечовини, креатиніну, глюкози, АСТ та АЛТ при скринінгу та у дні 21 ї 35 (-7 днів після кожної дози) для оцінки того, чи продовжують вони відповідати вимогам, та для оцінки безпеки, відповідно. 0078) У суб'єктів збирали зразки крові перед вакцинацією в день 0 і в дні 73, 213, 28.3,
353, 56-47, 180-4-14 ії 393 414 для вимірювання сироваткових антитіл (дО, ІдА і І9М окремо та у сукупності), вироблених у відповідь на норовірусну бівалентну ІМ вакцину на основі МІ Р, за допомогою імуноферментних аналізів (ЕГІЗА). Також вимірювали рівні антитіл, що обумовлюють активність блокування вуглеводів у сироватці крові та НАЇ у сироватці крові. У суб'єктів когорти А аналізували клітини, які секретують антитіла (АЗС), маркери хоумінгу, В- клітини пам'яті та клітинні імунні відповіді.
І0079| Наступні способи застосовували для аналізу зразків крові, зібраних від імунізованих осіб або осіб, що одержували плацебо.
Вимірювання рівнів сироваткових антитіл за допомогою ЕГІЗА
І0080| Вимірювання рівнів антитіл до норовірусу за допомогою ЕГІ5ЗА здійснювали у всіх суб'єктів з використанням очищених рекомбінантних МІ Р норовірусу (01.1 і С1І.4 окремо) у якості цільових антигенів для того, щоб здійснювати скринінг проб із наданим шифром. Коротко, МІ Р норовірусу в карбонатному покриваючому буфері з рН 9,6 використовували для нанесення на титраційні мікропланшети. Планшети промивали, блокували та інкубували із дворазовими серійними розведеннями досліджуваної сироватки з наступним промиванням та інкубуванням зі зв'язаними з ферментом вторинними антитілами-реагентами, специфічними у відношенні всіх
Іо, ІдС1, Ідс2, ІдСЗ3, Ідс4, ІА і ДМ людини. Додавали відповідні субстратні розчини, здійснювали проявлення фарбування, зчитування планшетів і визначали кінцеві титри Ідс, ІдА Її
ІДОМ у порівнянні з контрольною стандартною кривою для кожного класу антитіл. Визначали середні геометричні титри (СМТ), фактор сероконверсії (ЗМЕК) і показники серологічної реакції для кожної групи. Серологічну реакцію характеризували як 4-разове збільшення титру антитіл у порівнянні з титрами до імунізації.
Активність норовірусів по блокуванню вуглеводних антигенів групи крові (НВСА)
І0081| Аналізи блокування для визначення здатності сироваткових антитіл інгібувати зв'язування МІ Р ММ із синтетичними вуглеводними Н-антигенами 1 типу або Н-антигенами З типу здійснювали, як описано раніше (КеескК еї аї. (2010) У Іптесї Оі5, Мої. 202(8):1212-1218).
Коротко, МІР ММ для аналізів блокування інкубували з рівним об'ємом сироватки та здійснювали дворазове серійне розведення, починаючи від вихідного розведення 1 : 25. Покриті нейтравідином 96-лункові титраційні мікропланшети промивали та на них наносили 2,5 мкг/мл
Зо або синтетичного полівалентного комплексу Н-антиген 1 типу-РАА-біотин, або полівалентного комплексу Н-антиген З типу-РАА-біотин. Додавали розчини МІР у сироватці. Планшети промивали та додавали поліклональну сироватку кролика, специфічну у відношенні МР. ММ, промивали та потім інкубували з антитілами кози до до кролика, зв'язаними з пероксидазою хріну. Фарбування проявляли за допомогою рідкого субстрату для пероксидази тетраметилбензидину та зупиняли за допомогою 1М фосфорної кислоти. Оптичну щільність вимірювали при 450. Виконували позитивний та негативний контролі. Визначали п'ятидесятипроцентні титри блокувальних антитіл (ВТ50), їх характеризували як титри, при яких результати зчитування ОО (після видалення даних контролю) становили 5095 позитивного контролю. Значення 12,5 було надано зразкам з ВТ50 менше 25. Визначали середні геометричні титри (СМТ), фактор сероконверсії (ЗМЕК) і показники серологічної реакції для кожної групи. Серологічну реакцію характеризували як 4-разове збільшення титру антитіл у порівнянні з титрами до імунізації. Контрольні зразки блокувальної сироватки використовували у якості внутрішнього контролю. Аналіз для підтвердження специфічності блокування здійснювали з використанням того ж самого протоколу для аналізу блокування з наступними особливостями: після нанесення вуглеводів сироватки інкубували безпосередньо на планшеті без першого попереднього інкубування з МІ Р. Після промивання МІР інкубували на планшеті та виявляли так само, як в аналізі блокування.
Аналіз антитіло-опосередкованого інгібування гемаглютинації (НАЇ) норовірусом (0082) Індуковані вакциною антитіла досліджували на здатність інгібувати гемаглютинацію еритроцитів людини О-типу МІР норовірусу, як описано раніше (ЕЇ Каптагу еї аї. (2010) У Іптесі
Орів, Мої. 202(11): 1649-58). Титри НАЇ обчислювали як величину, зворотну найбільшому розведенню, при якому відбувалося інгібування гемаглютинації з утворенням компактного "негативного" патерну еритроцитів, і представляли у вигляді МТ, ЗМЕК і 2 4-разового збільшення. 0083) Проводили серійне розведення МІ Р норовірусу 01.1 ії С1І.4 окремо та інкубували їх з рівним об'ємом 0,595 суспензії еритроцитів людини в 9б-лунковому планшеті з М-образним дном. Визначали кількість антигенів, МІР норовірусу, що відповідає 4 ГА одиницям, і підтверджували за допомогою зворотного титрування. Досліджувані сироватки інактивували теплом при 562С протягом 30 хвилин і обробляли свіжоотриманою 2595 суспензією каоліну. Для 60 того, щоб виключити сироваткові інгібітори, досліджувані зразки були попередньо адсорбовані на еритроцитах. Аналіз НАЇ здійснювали в такий спосіб: попередньо оброблені сироватки (у дворазовому розведенні в РВ5, рН 5,5) додавали в 96-лункові планшети з М-образним дном та інкубували з рівним об'ємом антигену, МІ Р норовірусу 1.1 і С1І.4, відповідно, що складає 4 ГА одиниці. Додавали 0,595 суспензію еритроцитів у кожну лунку та планшети інкубували протягом додаткових 90 хвилин при 49С. Лунки, що містили тільки РВ5 або антиген без сироватки, служили в якості негативних та позитивних контролів, відповідно. Визначали середні геометричні титри (ЗМТ), фактор сероконверсії (ЗМЕК) і показники серологічної реакції для кожної групи. Серологічну реакцію характеризували як 4-разове збільшення титру антитіл у порівнянні з титрами до імунізації.
Аналізи клітин, які секретують антитіла
І0084)| РВМС виділяли із приблизно 60 мл крові з доданим антикоагулянтом в дні 0, 7-3, 2853 і 3543 після введення норовірусної бівалентної ІМ вакцини на основі МІ Р або плацебо.
Одержували приблизно 25 мл крові для аналізів РВМС безпосередньо після одержання та
З5 мл крові для кріоконсервації РВМС. Аналізи АБС дозволяють виявити клітини, які секретують антитіла до МІ Р норовірусу (ТаскКеї еї аІ. (2000) 9. Іптесі. Оі5., МоІ. 182:302-305; ТаскКеї єї аї. (2003) Сіїп. Іттипої., Мої. 108:241-247; ЕІ Катагу єї а!. (2010) У Іптесі Сів, МоІ. 202(11): 1649-58).
Свіжозабрані РВМС від групи суб'єктів оцінювали на частоту зустрічальності АБС і визначали маркери хоумінгу. Заморожені РВМС від суб'єктів, що входили в когорту А, оцінювали на частоту зустрічальності АЗС. Показники відповіді та середня кількість АБС на 106 РВМС описані в кожний момент часу для кожної групи. Позитивну відповідь визначали як число АБС після вакцинації на 106 РВМС, яке щонайменше на З стандартних відхилення (50) перевищує середнє число до вакцинації для всіх суб'єктів (у логарифмічному виді), і наявність щонайменше 8 плям АБС, що відповідало середньому значенню стимульованих середовищем лунок негативного контролю (2 плями) плюс З 50, як визначено в аналогічних аналізах.
Вимір кількості вірус-специфічних В-клітин пам'яті, специфічних у відношенні норовірусу
І0085| Зразки крові з доданим антикоагулянтом збирали тільки від суб'єктів когорти А (приблизно 25 мл у дні 0, 28, 56 і 180) для вимірювання кількості В-клітин пам'яті в дні 0, 28, 56 і 180 після вакцинації за допомогою аналізу ЕГІЗрої з попередньою антигенною стимуляцією іп міо (Стоцу еї аї. (2004) 9. Іттипої. Меїйпосдв5, Мої. 286:111-122.; 1 еї аї. (2006) 9. Іттипої.
Зо Меїпод5, Мої. 313:110-118). Мононуклеарні клітини периферичної крові (5 х 106 клітин/мл, 1 мл/лунка в 24-лункових планшетах) інкубували протягом 4 днів з антигенами, МІ Р норовірусу
СІ.1 і С1.4, окремо для того, щоб забезпечити можливість клональної експансії антиген- специфічних В-клітин пам'яті та диференціації в клітини, які секретують антитіла. Контролі включали клітини, які інкубували в тих же умовах у відсутності антигену, та/або клітини, які інкубували з неспорідненим антигеном. Після стимуляції клітини промивали, підраховували та переносили в планшети для ЕГІЗрої з нанесеними МІР Могмаїк. Для того, щоб визначити частоту зустрічальності вірус-специфічних В-клітин пам'яті у відношенні до загальної кількості
В-лімфоцитів, які секретують Ід, розмножені В-клітини також додавали в лунки з нанесеними антитілами до дО людини та до ІдДА людини. Антитіла, що зв'язалися, виявляли за допомогою
НАР-мічених антитіл до до людини або до ІдА людини, після яких застосовували відповідний субстрат. Кон'югати до підкласів ДА і ІдсС (ДА, ІдА2 ї Іде1-4) також застосовують для визначення антиген-специфічних відповідей, опосередкованих антитілами цих підкласів, які можуть бути пов'язані з певними ефекторними механізмами та локалізацією імунного праймування. Плями підраховували за допомогою ЕЇГ ІЗрої-ридера. Популяції розмножених клітин для кожного суб'єкта вивчали за допомогою проточної цитометрії для того, щоб, серед іншого, підтвердити фенотип В-клітин пам'яті, тобто СО19ж, СО27, Ід, ІМ, СОЗв', ідо (Стону єї аї. (2004) 9. Іттипої. Меїйодвз, Мої. 286:111-122.; 1 еї аї. (2006) 9. Іттипої. Меїнодв,
Мої. 313:110-118).
Клітинні імунні відповіді 0086) Зразки крові з доданим антикоагулянтом (приблизно 25 мл у дні 0, 28, 56 і 180) від суб'єктів когорти А збирали у вигляді проб із привласненим шифром і РВМС виділяли та заморожували в рідкому азоті для можливого оцінювання в майбутньому СМІ-відповідей на антигени, МІ Р норовірусу С1І.1 і 1.4. Аналізи, які проводять, включають, серед іншого, аналізи проліферації РВМС і цитокінових відповідей на антигени, МР норовірусу С1.1 ї С1І.4, за допомогою виміру рівнів інтерферону (ІЄМ)-у і інтерлейкіну (1-)-4 згідно із прийнятими техніками (ЗБатапаагі єї аї. (2000) 9. Іттипої., Мої. 164:2221-2232; ТаскКеї єї аї. (2003) Сіїп. Іттипо!., Мої. 108:241-247). Також оцінюють Т-клітинні відповіді.
Результати
І0087| Оцінка безпеки включала місцеві та системні очікувані симптоми протягом 7 днів та 60 неочікувані симптоми протягом 28 днів після кожної дози. Здійснювали спостереження на предмет серйозних небажаних явищ протягом 12 місяців. Імуногенність оцінювали на основі сироватки, отриманої до та після кожної вакцинації, по антитілах з ЕІ ІЗА для загального Ід (Ід,
ІДА і ІДМ у сукупності) і мононуклеарним клітинам периферичної крові (РВМС) відносно клітин, які секретують антитіла класу дос і ІА (АЗС), за допомогою ЕГІЗРрОЇ. (00881) Усі чотири групи по дозуванню були включені в когорту А з наявністю даних по безпеці після дози два для всіх чотирьох груп по дозуванню (40 вакцинованих у сумі). Серед 40 вакцинованих біль або хвороблива чутливість були найпоширенішими місцевими симптомами, зареєстрованими після кожної дози, тоді як припухлість або почервоніння були рідкими. Важких місцевих симптомів не було зареєстровано. Системні симптоми, а саме головний біль, міалгія або нездужання, після кожної дози були зареєстровані в менш ніж половині вакцинованих. У жодного вакцинованого не була зареєстрована лихоманка. Ніяких близьких 5АЕ зареєстровано не було.
І0089| Як показано на фігурах 1-3, за результатами ЕГІЗА для загального Ід сильні анамнестичні антитіло-опосередковані відповіді (дО, ДА і ІМ у сукупності) спостерігали. у відношенні обох типів антигенів МІ Р через 7 днів після першої дози з найменшим дозуванням (бмкг МІР ОСЇ.1 ж- 5 мкг М Р.ОС1І.4). Друга доза не підсилювала відповіді після дози один.
Аналогічні результати спостерігали для відповідей, опосередкованих антиген-специфічними сироватковими ІдсС і сироватковими ІА, вимірюваних окремо (фігури 4-9). Доза-залежні відповіді спостерігали для антитіло-опосередкованих відповідей на обидва антигени (фігури 1- 9). Однак максимальну відповідь на МІ Р. С1.1, як виявилося, одержували з меншою дозою, ніж для одержання максимальної відповіді на Мі Р. 11.4 (15 мкг у порівнянні з 50 мкг). Що примітно, одноразова доза норовірусної бівалентної вакцини, яка вводиться внутрішньом'язово, індукувала несподівано значно більший титр антиген-специфічних антитіл, ніж титр, індукований двома дозами моновалентних вакцин на основі МІ Р, які вводяться інтраназально та містять в 20 раз більшу дозу МІ Р (фігура 10; порівнюється група 5 мкг І МО03-104 із групою 100 мкг ГМО1- 103). Більш того, низька доза (5 мкг) бівалентної норовірусної ІМ вакцини забезпечувала такий же титр норовірус-специфічних антитіл, що і титр, індукований у людей, які контактували з нативним норовірусом (фігура 10).
І0090| Сильні ІдО- та ІдА-опосередковані відповіді за результатами ЕГІБрої також
Зо спостерігали через 7 днів після першої дози з найменшим дозуванням (5 мкг) у відношенні обох типів антигенів МІ Р (таблиця 2). Примітно, відповіді, опосередковані клітинами, які секретують антитіла (АБС), були зміщені у бік ЇЗДА у порівнянні з ДС, і в АБС спостерігався фенотип рецепторів хоумінгу в слизуваті (альфа 4/бета7) і фенотип хемокінових (ССК10) рецепторів, як оцінювалося за допомогою проточної цитометрії (фігура 11; таблиця 3). Як показано в таблиці 3, у більшої кількості АЗС спостерігалися маркери хоумінгу в слизуваті (бета 7, СОб621-) у порівнянні із подвійними маркерами хоумінгу в слизуваті/лериферичні тканини (бета 7к,
СОб62І Кк). У таблиці 4 показано процентне співвідношення В-клітин пам'яті на 106 моноцитів периферичної крові, що здійснюють відповідь на антигени, МР. Більший відсоток антиген- специфічних В-клітин пам'яті також експресують маркери хоумінгу в слизуваті в порівнянні із подвійними маркерами в слизуваті/плериферичні тканини або хоумінгу в периферичні тканини.
Аналогічні відповіді також спостерігали в реципієнтів, що одержували дози 15 мкг і 50 мкг (таблиці 2-4).
Таблиця 2
Характеристика відповіді, опосередкованої РВМС. Приблизна кількість клітин, котрі секретують антитіла, (АЗС)/мільйон СО19-- клітин - День 7 7 г | неннннаннння | в клітин - день 7 специфічні
Відсоток
МНоровірус" | дд | да | ІдА 0 дс | Специфічні Специфічні загальної специфічні В- сі сі са са відношенні сі відношенні сП4| сукупності клітини циркулюючих
РвВМСО
Середнє геометричне АТ 130947113807110947| 3945 4,4895 1,4995 5,9695 доза 5 мкг (п--5)
Стандартне відхилення А1 6674 | 9780 | 3651 | 2261 доза 5 мкг
Середнє геометричне А2 |252961170041І 7108 | 4336 42390 1,1495 5,379о доза 15 мкг (п--4)
Стандартне відхилення А2 10846118770| 6055 | 5697 доза 15 мкг
Середнє геометричне АЗ |36158120572114103| 2549 5,679о 1,6795 7,3490 доза 50 мкг (п--4)
Стандартне відхилення АЗ 11470) 418 | 7627 | 2230 доза 50 мкг
Середнє геометричне 4 134183) 9566 26213111310| 43795 3,759 81395 доза 150 мкг п-4
Стандартне відхилення А4 32938) 4466 89769115226 доза 150 мкг па 5 ре зах | вх 1
Таблиця З
Маркери АЗС у реципієнтів, що одержували вакцину та плацебо, визначені за допомогою проточної цитометрії - День 7
Загальна ор від 9; о від 95 Відсоток. кількість Відсоток 95 загальної| ВІД Ю | загальної / багальної ) вакцина" вакцина" кількості загальної кількості кількості специфічних специфічних кількості АБС на мільйон |від загальної
Сор19-- В- со27 бО27-, сО27 пд й ік клітин. які є -, соз84 -, клітин кількості срот я СОЗ8, ССВІ 0 СОзЗ8, СбО27-, циркулюючи сОоЗ84 ССК10-- бет бета 7 ССВ10-ю, СОЗ8, х РВМС з а 7, СО0621- Сов бета 7 ССВІ10-, | хоумінгом у
СО621(юі(-)| бета 7 слизуваті
СО621 (т)і(-
Середнє геометричне АТ. 251095, 6,8695 1,0695 2,789 1656 01796 доза 5 мкг п-о5
Стандартне відхилення А1 10,45 3,13 1,01 доза 5 мкг
Середнє геометричне? 329995 | 169895 2,43 4,639 1355 01496 доза 15 мкг п-4
Стандартне відхилення А2 913 1,56 023 мкг доза
Середнє рометричне 29. 317195 | 264396 3,639 12,0195 23915 2,399 мкг доза п-4
Стандартне відхилення АЗ 6,32 1,82 1,38 доза 50 мкг
Середнє геометричне Ай 33 4ве; | 30,0695 5,686 15,7495 31350 31495 доза 150 мкг п-4
Стандартне відхилення А4 9,86 2,97 1,70 доза 150 мкг » у випадку, коли більшість АЗС є норовірус-специфічними
Таблиця 4
Відповіді В-клітин пам'яті в реципієнтів, що одержували вакцину та плацебо - День 7 . Загальна
Відсоток шани в/о й кількість . ую від Уо о; від 9; загальної й Відсоток до загальної | загальної о ВІД кількості вакцина вакцина- - - й : загальної специфічних І кількості кількості кількості бр27, на мільйон специфічних
СОр19- в- бОр27, со27 СОЗ8в, бу Від загальної й і щ, клітин . ік клітин, які є СОзЗ8, СсОоЗва СО138, СО274 кількості
СбО27-, СО138, сор ССВ10-, СОЗ8а циркулюючи
СОЗ8в, ССВА10- : Бета 7 " х РВМС з
СС10- Бет : СО138, :
СО138- Бета 75, СО62І (т)(-) хоумінгом у
СОбаІ- а тк, СОб21-х клітин Совтоя, слизуваті пам'яті бета Ци сО621 (в)і(-
Середнє геометричне АТ н/в н/в н/в н/в н/в н/в доза 5 мкг
Середнє геометричне А2 о о о о о доза 15 мкг 1,5495 11,5895 1,9290 0,219 61 0,0195 п-4
Стандартне відхилення А2 1,54 3,94 0,94 доза 15 мкг
Середнє геометричнейЗ 3319; 161096 4,609 0,689 1364 01495 доза 50 мкг п-4
Стандартне відхилення АЗ 1,11 2,16 0,97 доза 50 мкг
Середнє геометричне А4 о о о о о 150 мкг доза 1,5695 16,9095 81096 0,399 778 0,0895 п-4
Стандартне відхилення А4 0,22 3,26 4,57 доза 150 мкг (Плацебо(п-1) | 0,196 | 125096 | 00096 | біз | 0 | 096 » у випадку, коли більшість АЗС є норовірус-специфічними
І0091) За відсутності доступного прямого аналізу нейтралізації вірусу у зв'язку з відсутністю можливості культивувати норовірус іп міго проводили функціональні аналізи, які служать заміною аналізам нейтралізації вірусу, для вимірювання кількості функціональних антитіл у вакцинованих.
І0092| За допомогою аналізу активності блокування вуглеводного Н-антигену, описаного вище, вимірювали інгібування зв'язування МІР СІ.ї 3 Н-антигеном, опосередковане сироватковими антитілами, індукованими вакциною. Дані представлені у вигляді фактора сероконверсії (ЗМЕК) та серологічної реакції (4-разове збільшення) у таблиці 5 і у вигляді середнього геометричного титру (МТ) у таблиці 6. Несподівано, після всього однієї внутрішньом'язової ін'єкції складу вакцини спостерігали значну активність блокування вуглеводів для всіх груп доз; фактично, уведення другої дози вакцини не підвищувало значно активність блокування в порівнянні з рівнями після дози 1. Активність інгібування зв'язування зберігалася протягом усього періоду випробувань аж до 56-го дня після дози 1.
Таблиця 5
Активність блокування вуглеводів (НВОА ВТ50). Фактор сероконверсії (ЗМЕР) і серологічна реакція (4-разове збільшення) для антитіл до норовірусу С1.1 11111111 Деньдослідження.д//://С/:(КФК5:/:К4н3))//|5НЗ/С(Л1//С( С. 2. й с. 7 днів після дози| 28 днів після 1 лози т ля 21 "кози М 1 (перед дозою 2) 2 (35 днів після | дози 2 (56 днів дози 1) після дози 1) 4- 4- 4- 4- 4-
ОМЕКВІРаЗОВеЇ ЗМ рд|разове ІСмред разове) Змрд| разове! |Ммрдуразове
Група М (95 95 збільш МІ (95 95 збільше М! (95 95 збільше МІ (95 95 збільше М (9595 збільш обробки ДІ) ення ДІ) ння ДІ) ння ДІ) ння ДІ) ення (95 95 (95 95 (95 95 (95 95 (95 95
ДІ) ДІ) ДІ) ДІ) ДІ)
Вакцина на 26,6 | 88,9 25,1 88,9 19,7 | 100,0 20 88,9 16,6 | 77,8 основі (8,9, | (51,8, (8,9, | (51,6, (8,2, | (66,4, (7,7, | (51,8, (5,7, | (40,0,
МІР 85,1) | 99,7) 70,3) | 99,7) 47,1) | 100,0) 51,7) | 99,7) 48,1) | 97,2) 5/5 МКГ
Вакцина
Основі 33,2 | 100,0 25,5 | 100,0 18,5 | 100,0 22,2 | 100,0 8,4 | 571
МР (195,6, | (631, (10,5, | (631, (8,4, | (631, | 7| (8,68, | (590, |) 7 | (2,4, | (18,4, 155 80,8) 1100,0) 61,8) | 100,0) 40,6) | 100,0) 56) | 100,0) 29,6) | 90,1)
МКГ
Вакцина
Основі 38,6 | 100,0 4 27,9 | 100,0 20,9 | 100,0 19 100,0 102 | 77,8
МР 101(18,3, | (69,2, 0 (13,4, (69,2, 101 (10, | (69,2, 10 (9,9, | (69.2, (4,6, | (40,0, 5О/БО 81,6) 1100,0) 58) | 100,0) 43,5) | 100,0) 36,4) | 100,0) 22,8) | 97,2)
МКГ
Вакцина
Основі 30,6 | 100,0 19,4 | 100,0 16,93 | 100,0 18,8 | 100,0 23,8 | 100,0
МР 7 1(16,3,| (59,0, (13,1, | (631, (11,7, | (631, (12,8, | (631, (17, І (631, 150/150 57,6) 1100,0) 28,5) | 100,0) 22,6) | 100,0) 27,5) | 100,0) 33,3) 1100,0)
МКГ
0,9 0,0 0,8 0,8 0,8 0,6 0,0
Плацебо 8 | (08, | (020, | 81 (077, зв (0,6, зв (077, зв (03, (00, 1 36,9 1,1 ' 1,1 ' 1,1 ' 1,2) | 36,9
Результати на основі даних по всіх суб'єктах, що одержували обидві дози досліджуваного продукту.
Виключено два окремих значення від двох суб'єктів у зв'язку з тим, що проби можливо були переплутані; одне із цих окремих значень являло собою дані базової проби, що привело в результаті до того, що для суб'єкта не були отримані дані по кратності збільшення для якого- небудь моменту часу.
Таблиця 6
Активність блокування вуглеводів (НВОА ВТ50). Середній геометричний титр (СМТ) антитіл до норовірусу О1.1 11111110 Деньдослідження./://:л///С:(«;/|Н/4СССССС(С 28 днів після 7 днів після |28 днів після
Перед 7 днів після |21 день після зи 1 (пере дози 2 (35 дози 2 (56 дозою 1 дози 1 дози 1 д озою о д днів після днів після д дози 1) дози 1)
Мт
Група М (95 9: М Мт М Мт М Мт М Мт М СМТ (95 95 обробки ДІ) й (95 Фо ДІ) (95 Фо ДІ) (95 Фо ДІ) (95 Фо ДІ) ДІ)
Вакцина на 28,9 768,5 723,7 568 (321,8 5771 478,3 основі МІ Р (12,7, (3441, (3981, 1003). ' (351,2, (293,3, 5/5 мкг 65,9 1716 1316 948,3 780,1
Вакцина на 24,93 826,1 634,3 459,8 610,3 230,9 основі МІ Р (12,7, (524,9, (285,9, (225,3, |7| (354,6, |7| (105,2, 15/15 мкг 48,7 1300 1407 938,6 1050 506,7
Вакцина на 669,2 483,7 362,4 328,9 основі МІ Р о Ак В о (329.1, о (258,7, |10| (192,9, о (191.9, УА 50/50 мкг ' 1361 904,2 680,7 563,8 І
Вакцина на 15,5 435 (262,5, 300,7 252,7 291,5 369,7 основі МІ Р (111, 17 720,8) (173,9, (146,7, (171,5, (233,8, 150/150 мкг 21,8 ' 520 435,2 495,4 584,6 29 (911, 24,6 (9,8, 22,5 (8,8, 22,2 (8,9, 24,6 (8,4, 18,3 (1041,
Плацебо в! 92,8 В во В 573 55,5 72,6 33,3
Результати на основі даних по всіх суб'єктах, що одержували обидві дози досліджуваного продукту.
Виключено два окремих значення від двох суб'єктів у зв'язку з тим, що проби можливо були переплутані. (0093) Аналогічно, вимірювали активність блокування вуглеводів сироваткових антитіл проти
МІР 1.4. Значну відповідь спостерігали у всіх групах дозування, як було виміряно за допомогою СМЕРК і серологічної реакції (таблиця 7), а також СМТ (таблиця 8). Аналогічне антитіло-опосередкованому блокуванню зв'язування СІ.1ї7, описаному вище, виявляли сильну активність блокування зв'язування вуглеводів МІ Р. 1.4 після всього однієї дози, причому друга доза, як виявилося, не підсилювала активність блокування.
Таблиця 7
Активність блокування вуглеводів (НВОА ВТ50). Фактор сероконверсії (ЗМЕК) і серологічна реакція (4-разове збільшення) для антитіл до норовірусу 11.4 11111111 Деньдослідження.//:/:/;:/3: 5 оИюС( 7 днів після 21 день після 28 днів після | 7 днів після дози | 28 днів після д д дози 1 (перед | 2 (35 днів після | дози 2 (56 днів дози 1 дози 1 й дозою 2 дози 1 після дози 1 4- 4- 4- 4- 4-
СМЕ разове разове разове разове разове
Група в збільш МеВ збільш МЕН збільш МЕН збільш МеВ збільш о МІ (95 о МІ (95 Фо МІ (95 Фо МІ (95 о обробки (95 95| ення ДІ) ення ДІ) ення ДІ) ення ДІ) ення
ДІ) (95 95 (95 95 (95 95 (95 95 (95 95
ДІ) ДІ) ДІ) ДІ) ДІ)
Вакцина на основі, 5 (1,6, 33,3 5,9 55,6 4,7 44 4 4,7 44 4 5(1,6, 55,6
МР 16,1) (7,5, (1,7, | (21,2, (14, | (13,7, (1,6, | (13,7, 15,9) (21,2, ' 70,1) 20,3) | 86,3) 15,7) | 78,8) 13,8) | 78,8) ' 86,3) 5/5 МКГ
Вакцина на основі 11 62,5 9,2 (3, 62,5 74 62,5 7 (24, 571 5,6 | 571
МР (2,7, | (24,5, 279) (24,5, (2,5, | (245, |7 23) (18,4, |7| (2,5, | (18,4, 1515 МКГ 45,3) | 91,5) ' 91,5) 21,8) | 91,5) 90,1) 14) | 901)
Вакцина п 186| 700.) 122| 700 |) 84 | 700 |,| 87 | 700 52 | 66,7
МР 0 (4,9, | (34,8, 0 (3,8, | (34,8, 0 (2,9, | (34,8, 0 (2,9, | (34,8, (2,2, | (29,9, 50/50 МКГ 70,8) | 93,3) 39,4) | 93,3) 24,1) | 93,3) 26,1) | 93,3) 12) 1 92,5)
Вакцина на основі | 101 | 571 5,5 50,0 4,4 50,0 4,3 37,5 З 25,0
МІ Р 7| (2, | (184, (1,9, | (15,7, (1,6, | (15,7, (1,7, | (8,5, (1,5, | (3,2, 150/150 51,8) | 9011) 16,5) | 843) 12,2) | 84,3) 10,7) | 75,5) 7,2) | 651)
МКГ
0,0 0,0 1,3 12,5 1,68 12,5 12,5
Плацебо |В/ ХУ (00, |8| 8457) (00, |8| (09, | (08, 8) (0,5, (03, 87 (03, ' 36,9 ' 36,9 21 52,7 6,7 52,7 " 52,7
Результати на основі даних по всіх суб'єктах, що одержували обидві дози досліджуваного продукту.
Виключено два окремих значення від двох суб'єктів у зв'язку з тим, що проби можливо були переплутані; одне із цих окремих значень являло собою дані базової проби, що привело в результаті до того, що для суб'єкта не були отримані дані по кратності збільшення для якого- небудь моменту часу.
Таблиця 8
Активність блокування вуглеводів (НВОА ВТ50). Середній геометричний титр (СМТ) антитіл до норовірусу С1І.4 11111111 Деньдослідження./:7/Г:///: 3): НС 28 днів після! 7 днів після | 28 днів після
Перед 7 днів після |21 день після дози 1 дози 2 (35 дози 2 (56 дозою 1 дози 1 дози 1 (перед дозою днів після днів після 2 дози 1) дози 1) гоупа обробки М (955; м смт м смт смт м Мт (955 | МТ (95 55 рупа сор еф (95965 ДІ). | "(95965 ДІ). | "(95 95 ДІ). | "| ДІ) ДІ)
Вакцина на| Ї203 (18 2021 236,9 189,7 188,7 201,6 основі МІ Р 90) " (106,3, (133,4, (108,6, (118,7, (116,4, 5/5 мкг 384,3 420,6 331,3 300,1 349,5
Вакцина нар 2957 | Івол(ови) | 218 1754. |. 823 (891,|., 146,3 (92,4, основі МІР 12,8, 711) пофе, |ВІ(в27,372)37| 83728) 71 2315) 15/15 мкг 43,8 ' 456,3 п ' '
Вакцина на) 4 28,4 4 5272 4 345,2 4 238,3 4 246,5 160,2 основі МІ Р 0 (131, 0 (27111, 0 (195,5, 0 (139,4, 0 (138,7, (107,4, 50/50 мкг 61,5 1025 609,6 407,3 438,2 238,8
Вакцина на 721,8 347,7 267,9 193,5 основі МІ Р во 7| (з446, (1861, Шен (158,7, (121,6, 150/150 мкг " 1512 649,5 452,2 308,2 241 22,8 (12,6, І 4 | 24,9 (12,7, 1 А1291 (1541, 44 (12,6, 48,2 (16,7,
Плацебо 8 12,9, 45 9 41,6 9 48,7 В 5 154,2 139,5
Результати на основі даних по всіх суб'єктах, що одержували обидві дози досліджуваного продукту.
Виключено два окремих значення від двох суб'єктів у зв'язку з тим, що проби можливо були переплутані. (0094) Аналізи інгібування гемаглютинації (НАЇ) також використовували для дослідження відповіді сироваткових антитіл від вакцинованих суб'єктів проти цільових антигенів, МІ Р норовірусу. Аналогічно дослідженням зв'язування вуглеводних Н-антигенів усього одна доза вакцини на основі МІР індукувала антитіла, які інгібували гемаглютинацію у всіх групах дозування, що вимірювали за допомогою СМЕРЕ (таблиця 9), 4-разового збільшення (таблиця 9) і СМТ (таблиця 10). Хоча рівень інгібування гемаглютинації зберігався до останнього дня випробувань (28 днів після дози 2, 56 днів після дози 1), друга доза вакцини на основі МІ Р, як виявилося, не підсилювала інгібування гемаглютинації, опосередковане антитілами, індукованими вакциною.
Таблиця 9
Аналіз інгібування гемаглютинації. Фактор сероконверсії (ЗМЕР) і серологічна реакція (4- разове збільшення) для антитіл до норовірусу 01.1 11111111 Деньдослідження.//:/://4НООСС:(://о////-://«/О/С(С 7 днів після дози! 21 день після 28 днів після |/7 днів після дози| 28 днів після д д д дози 1 (перед |) 2 (35 днів після | дози 2 (56 днів 1 дози 1 й дозою 2 дози 1 після дози 1 4- 4- 4- 4- 4- азове разове разов разове разов
Група СМЕВ вільно СМЕВ збільш СМЕВІ| е СМЕВ збільш СМЕВ| е
РУ М (95 95 М (95 95 МІ (95 95 | збіль | М | (95 95 М | (95 95 | збіль обробки ення ення ення
ДІ) ДІ) ДІ) шення) |ДІ) ДІ) шення (95 95 (95 95 о (95 95 о
ДІ) ДІ) (95 95 ді) (95 95
ДІ) ДІ)
Вакцина ! 77,8 88,9 би 88,9 717,8 6,3 | 88,9
МР у оо, аг (тв, в (4, (вве ут (00,9) (39, | (51,8, 5/5 МКГ ' 97,2) ' 99,7) 9,3) 199,7) ' 97,2) 10,3) | 99,7)
Вакцина. 89 100,0) авіа, 875 7 | 750 8,5 | 85,7 8 100,0
МР (4,4, | (631, 29 Б) (47,3, (31, 1(34,95171| (41, | (421,17 | (44, (59,0, 1515 МКГ 18) 100,0) ' 99,7) 16,1) | 96,8) 17,7) | 99,6) 15,2) 100,0)
Вакцина. 22,4 |100,0| 16,7 |л1000| 13,9 |ч000| | 14,5 | 100,0). | 11,8 | 100,0
МР 101 (11,6, | (69,2, 1101 (9,3, | (69,2, 10 (8,1, /(69,2,110| (9,5, | (69,2, (6,3, /(664, 50/50 МКГ 43) 1100,0) 29,68) 1100,0) 24) 100,0) 22,7) 100,0) 21,9) 100,0)
Вакцина на основі 12,6 | 85,7 11,1 /100,0 8,4 (5 100,0 8,4 (5 100,0 7,3 1100,0
МІ Р 7| (5,7, | (421, (6,4, | (63,1, 14) "| (631, 14) "| (631, (4,5, (631, 150/150 28) | 99,6) 19,3) 1100,0) 100,0) 100,0) 11,9) 100,0)
МКГ
0,0 0,0 0,0 0,9 0,0 0,0 пе в В В ЯМОК ее ' 36,9 ' 36,9 ' 36,9 1,1 36,9 ' 36,9
Результати на основі даних по всіх суб'єктах, що одержували обидві дози досліджуваного продукту.
Виключено два окремих значення від двох суб'єктів у зв'язку з тим, що проби можливо були переплутані; одне із цих окремих значень являло собою дані базової проби, що привело в результаті до того, що для суб'єкта не були отримані дані по кратності збільшення для якого- небудь моменту часу.
Таблиця 10
Аналіз інгібування гемаглютинації. Середній геометричний титр (СМТ) антитіл до норовірусу а 11111111 Деньдослідження.//:/С/С:(6///:///////-/ ЗИВФ/С("С 28 днів після! 7 днів після | 28 днів після
Перед 7 днів після |21 день після дози 1 дози 2 (35 дози 2 (56 дозою 1 дози 1 дози 1 (перед днів після днів після дозою 2) дози 1) дози 1)
Мт о Мт Мт Мт СМТ (9595, | СМТ (95 95
Група обробки ЩЕ ую | М (95 95 ДІ) М (95 95 ДІ) М (95 95 ДІ) М До) М ді)
Вакцина на 26,4 143,5 185,3 162,1 основі МІ Р (1441, (53,6, (88,6, (83,3, в вв 5/5 мкг 49,4 383,8 387,6 315,6 ' І
Вакцина на | 119 105,3 8 ваг (314, 1103,3 (43,3,Ї., 99,2 (46,9, основі МІ Р (6,1, (561, (42,5, 2278) 7 246,6) 7 209,7) 15/15 мкг 23,4 197,6 301,3 ' І І
Вакцина на фбо(вз) |160(794, 1192 | 697(51,8/, 103,8(584, | 811 (38,8, основі МІ Р 10 9,6) 10 322,6) 101 (604, Мо 191,8) 10 184,5) 169,5) 50/50 мкг " " 235,1 " " "
Вакцина на до(тв, ля 101,6 (62, | 5177,2(51,8, 5 77,2(51,8,| 5 67,3 (44,7, основі МІР 118) || (50, 166,4) 115) 115) 101,3) 150/150 мкг " 255,7 ' ' 16,8 " 16,6(11,7, 0 116,1 (10,7, 16,6 (11, 15,4 (10, 16,2 (10,8,
Плацебо В бе з 23,7) Й 241) з 25) 23,7) 244)
Результати на основі даних по всіх суб'єктах, що одержували обидві дози досліджуваного продукту.
Виключено два окремих значення від двох суб'єктів у зв'язку з тим, що проби можливо були переплутані. 0095) Інгібування гемаглютинації також досягали, коли цільові МІР відносилися до невідповідного вірусу. Сироваткові антитіла, індуковані вакциною, інгібували гемаглютинацію
МІР штаму вірусу Ноивіоп, що вимірювали за допомогою ОМЕБЕ і серологічної реакції (таблиця 11), а також СМТ (таблиця 12). У цьому випадку, більш високі дози вакцини на основі МІ Р забезпечували більш сильні відповіді, що, зокрема, вимірювали за допомогою 4-разового збільшення або СМТ. Також спостерігалося значне підвищення ЗМЕК і 4-разового збільшення, коли цільові МІ Р відносилися до штаму вірусу 2003 Сіпсіппаїї, що вимірювали всього 7 днів після дози 1 (таблиця 13).
Таблиця 11
Аналіз інгібування гемаглютинації (МІ Р вірусу штаму Ноизіоп). Фактор сероконверсії (ЗМЕБК) і серологічна реакція (4-разове збільшення) для антитіл до норовірусу С1І.4 11111111 Деньдослідження./-/:5:53:З76 7 днів після дози! 21 день після 28 днів після | 7 днів після дози | 28 днів після д д д дози 1 (перед | 2 (35 днів після | дози 2 (56 днів 1 дози 1 : дозою 2 дози 1 після дози 1 4- 4- 4- 4- 4- разове разов разов разове разове
Група СМЕВ збільш СМЕВІ| е СМЕНВІ е СМЕВ збільш СМЕВ збільш
РУ М | (95 95 МІ (95 9» | збіль | М | (95 95 | збіль | М | (95 95 М | (95 95 обробки ення ення ення
ДІ) ДІ) шення ДІ) шення ДІ) ДІ) (95 95 о о (95 95 (95 95
ДІ) (95 95 (95 95 ДІ) ДІ)
ДІ) ДІ)
Вакцин а на 0,0 1,3 0,0 1,3 0,0 0,0 0,0 основі (9| 775" (00, |9| (09, | (00, (9) (09, | (00, 49/77) (00, 19 76) | (00,
МІ Р " 33,6) 1,7) | 33,6) 1,7) 133,6) ' 33,6) ' 33,6) 5/5 МКГ
Вакцин ана 12,5 16 125 15 | 00 0,0 16 | 00
Ме 18о6 83) 8, 18 М, | (08,18) М, (00,17, 52) (00, |7| (М, | (00, 15/15 о 52,7) 2,4) 52,7) 2,2) 36,9) І А 0) 24) 41 ,0)
МКГ
Вакцин ана 10,0 16 | 100 17. | 10,0 15 | 100 11 основі 4 2 (0,9, ; " ; " ; " ; 1,3 ;
МР (0) 43) (0,9, ПОЇ (0,8, | (0,5, (10) (0,9, | (0,9, 1101 (0,9, | (0,5, (0,8, 2) (0,3, " 44,5) 3,1) 144,5) 31) 1445) 2,4) | 445) бо 48,2) 50/50
МКГ
Вакцин основі 1313) 57 2,6 | 500 19 | 12,5 19 | 1265 17 | 125
МР 7 (1,5, | (18,4, (1,2, 115,7, (11, | (03, (11, | (0,5, (11, | (0,3, 150/150 12,4) | 9011) 5,68) | 84,3) 3,3) | 52,7) 3,5) | 52,7) 2,6) | 52,7)
МКГ
0,0 1,1 0,0 0,0 12 12,5 11 12,5 и ер вія ве ' 36,9 1,3) | 36,9 ' 36,9 1,9 52,7 1,68 52,7
Результати на основі даних по всіх суб'єктах, що одержували обидві дози досліджуваного продукту.
Виключено два окремих значення від двох суб'єктів у зв'язку з тим, що проби можливо були переплутані; одне із цих окремих значень являло собою дані базової проби, що привело в результаті до того, що для суб'єкта не були отримані дані по кратності збільшення для якого- небудь моменту часу.
Таблиця 12
Аналіз інгібування гемаглютинації (МІ Р вірусу штаму Ноизіоп). Середній геометричний титр (СМТ) антитіл до норовірусу С.А 11111111 Деньдослдження.//:.7/7//://СС:(///:Х/ и (С 28 днів після 7 днів після |28 днів після
Перед 7 днів після | 21 день після зи 1 (пере дози 2(35 | дози 2 (56 дозою 1 дози 1 дози 1 д озою о д днів після днів після д дози 1) дози 1)
Група М Мт М СМТ (95 95 М МТ (9595 М СМТ (95 95 М Мт М Мт обробки 95 95 ДІ) ДІ) ДІ) ДІ) 95 9о ДІ) 95 905 ДІ)
Вакцина порі 143,5 177,4 180,8 180,8 189,1 180,8
МР (97,9, (122,7, (1144, (114.4, (1192, (122,7, 5/5 МКГ 210,3) 256,5) 285,6) 285,6) 299,9) 266,3)
Вакцина ві 129,8 218,3 207,5 200,2 169,5 187,2
МР (86,4, (129,2, (134,8, (132,8, 17| (1141, |7| (1191, 1515 МКГ 194.9) 368,8) 319,3) 301,7) 252) 294 2)
Вакцина ві 1161,9 323,8 252,5 273,9 242,5 195,2
МР 10) (119,7, 10) (156,5, |101 (130,4, 101 (150,95 101 (150,2, (125, 50/50 МКГ 218) 669,8) 489,2) 497 2) 391,5) 304,9)
Вакцина на основі 210,6 853,5 5Аб2 406,3 406,3 3541
МІР (108,8, 17| (297,4, (237,6, (201,5, (180,3, (184,6, 150/150 407,5) 2449) 1255) 819,1) 915,4) 679,5)
МКГ плацео в) 738 це (ВОМ Й 157 (77,9, Но (91 чів 183,6 (95, В (885, 300,3 281,1) 316,5) 306,4) 354,5) 297,9
Результати на основі даних по всіх суб'єктах, що одержували обидві дози досліджуваного продукту.
Виключено два окремих значення від двох суб'єктів у зв'язку з тим, що проби можливо були переплутані.
Таблиця 13
Інгібування гемаглютинації в групі плацебо у порівнянні з групою 50/50 мкг вакцин на основі
МІР
Аналіз інгібування гемаглютинації (МІ Р штаму вірусу 2003 Сіпсіппаїї). Фактор сероконверсії (СМЕРЕ) і геометрична серологічна реакція (4-разове збільшення) для антитіл до норовірусу СІ1І.4.
Результати по групі обробки, 7 днів після дози 1
Вакцина на основі МІ Р
І0096| Результати даного дослідження продемонстрували, що бівалентна норовірусна ІМ вакцина на основі МІР у цілому добре переносилася. Дані по імуногенності дозволяють вважати, що одноразової дози вакцини може бути досить для захисту серопозитивних дорослих людей. Результати аналізів активності блокування вуглеводів та інгібування гемаглютинації представили додаткові докази того, що одноразова доза вакцини індукувала сильну протиноровірусну активність сироваткових антитіл. Сила та швидкість спостережуваних імунних відповідей після введення одноразової парентеральної дози в людей були значно більшими в порівнянні з імунними відповідями після введення безлічі вакцин на основі МІ Р для назального введення з більш високими дозуваннями МІ Р, про які повідомлялося раніше (ЕЇ! Каптагу еї аї. (2010) У Іптесі ів, Мої. 202(11): 1649-1658). Ці відповіді також перевищували відповіді, індуковані
МІР норовірусу, що вводяться перорально (Таскеї еї аї. (2003) Сіїп Іттипої! 108:241-247; Ваї! єї аі. (1999, Савігоепієгоїоду 117:40-48), а також відповіді, індуковані МІР норовірусу, що продукуються трансгенними рослинами (Таскеї еї аї. (2000) 9 Іптесі біз 182:302-305). Зокрема, даний склад вакцини для внутрішньом'язового введення викликав анамнестичні відповіді протягом семи днів після імунізації, і спостерігалися максимальні відповіді, опосередковані сироватковими антитілами, після одноразової дози, включаючи значну ІдА-опосередковану відповідь, і функціональну активність блокування вуглеводів, і активність інгібування гемаглютинації. Таким чином, дана норовірусна бівалентна вакцина індукувала сильну захисну імунну відповідь у людей, яка перевищувала імунні відповіді, індуковані будь-якою доступною в даний час норовірусною вакциною.
Приклад 2. Ескалація дози. Дослідження безпеки та імуногенності норовірусної бівалентної вакцини для внутрішньом'язового введення на основі вірусоподібних частинок (МІ Р) у людей (дослідження І МО03-104)
І0097| У наступному прикладі представлена запланована частина, що залишилася, клінічного дослідження, описаного в прикладі 1, де проводили рандомізоване багатоцентрове дослідження з ескалацією дози серед дорослих у віці 2 18 років по вивченню безпеки та імуногенності чотирьох рівнів дозування норовірусної бівалентної вакцини для
Зо внутрішньом'язового введення (ІМ) на основі МІ Р з ад'ювантом монофосфорил-ліпідом А (МРІ) та гідроксидом алюмінію (АІОН) у порівнянні із плацебо. Суб'єкти одержували дві дози вакцини або плацебо за допомогою внутрішньом'язової (ІМ) ін'єкції з використанням 1,5-дюймової (38 мм) голки з різницею в 28 днів. Даний приклад призначений для додаткового ілюстрування основних ідей даного винаходу. 00981 Відбір у когорту А дослідження завершений і був описаний вище в прикладі 1. Когорта
В включає -- 20 суб'єктів у віці 50-64 років. Когорта С включає - 30 суб'єктів у віці 65-85 років.
Усього в дослідження включено приблизно 98 суб'єктів. 00991 У когорті В -«- 20 суб'єктів у віці 50-64 років відібрані та рандомізовані в співвідношенні 1: 1 для одержання вакцини (М-10) або плацебо (М-10). Після того, як отримані для розгляду дані по безпеці по закінченні 7 днів після дози 2 (день дослідження 35) від суб'єктів когорти В, суб'єкти когорти С допускаються до одержання своєї початкової дози. У когорті С - 30 суб'єктів у віці від 65 до 85 років відібрані та рандомізовані в співвідношенні 1: 1: 1 для одержання вакцини з ад'ювантом МРІ. та АІОН (М-10), або вакцини тільки з ад'ювантом АЇОН, тобто без
МРІ. (М-10), або плацебо (М-10). Концентрації антигену, МІ Р норовірусу, і АІОН у двох складах вакцини, які оцінюють, у когорті С однакові; відмінність тільки в наявності або відсутності МРІ.. 00100) Норовірусна бівалентна вакцина на основі МІ Р містить МІ Р 1 генотипу геногрупи І (СІ.1) ї ІМ генотипу геногрупи ЇЇ (1І.4) у якості антигенів та монофосфорил-ліпід А (МРІ) і гідроксид алюмінію (АІОН) у якості ад'ювантів, хлорид натрію (Масі) і І -гістидин (І-Нів) у якості буфера (рН 6,3-6,7), етанол і воду для ін'єкцій. МІ Р. 11.4 містять послідовність капсидного білка,
ЗЕО ІЮ МО: 1, яка була отримана із трьох штамів С11.4.
І00101| Одноразове дозування вакцини, обране для подальшого оцінювання в когортах В і
С, являє собою найменше дозування з когорти А, яке дає в результаті найбільш сильну та відтворювану імунну відповідь, яка також у цілому добре переноситься. Дані по безпеці та імуногенності на день 56 від суб'єктів когорти А розглядає С5М/5МС, і вибирають дозування бівалентної вакцини для оцінювання в когортах В і С. 00102) Суб'єкти ведуть записи в щоденнику самоспостереження про очікувані симптоми, включаючи чотири місцеві реакції в місці ін'єкції, такі як біль, хвороблива чутливість, почервоніння та припухлість, і 10 системних проявів або симптомів, включаючи щоденну температуру тіла, вимірювану в ротовій порожнині, головний біль, слабкість, м'язові болі, озноб, болі в суглобах і гастроінтестинальні симптоми, а саме нудоту, блювоту, діарею, абдомінальні спастичні болі/абдомінальний біль, від дня 0 до 7 після кожної дози норовірусної бівалентної ІМ вакцини на основі МІ Р або контролю. Почервоніння та припухлість у місці ін'єкції вимірюють і реєструють щодня протягом 7 днів після кожної ін'єкції.
І00103| Індивідуальні карти заповнюють при кожному наступному відвідуванні в дні 7-3, 21-53, 283, 3543, 567, 180-414 і 3934-14 і під час наступного телефонного дзвінка в день 265-414; суб'єктів розпитують про перенесені за даний період захворювання, відвідування лікаря, будь-які серйозні несприятливі явища (ЗАЕ) і виникнення будь-яких нових значимих медичних станів. У суб'єктів визначають кількість формених елементів крові з визначенням лейкоцитарної формули та визначенням кількості тромбоцитів і здійснюють оцінку сироваткової сечовини, креатиніну, глюкози, АСТ і АЛТ при скринінгу та у дні 21 ї 35 (4-7 днів після кожної дози) для оцінки того, чи продовжують вони відповідати вимогам та для оцінки безпеки, відповідно.
І00104| Зразки крові від суб'єктів збирають до вакцинації в день 0 і в дні 73, 213, 28:53, 35-3, 567, 1800-14 і 3934-14 для вимірювання кількості сироваткових антитіл (Ідс, ІдА і (ДМ разом і окремо), вироблених у відповідь на норовірусну бівалентну ІМ вакцину на основі МІ Р, за допомогою імуноферментних аналізів (ЕГІ5А). Також вимірюють рівні антитіл, що обумовлюють активність блокування вуглеводів у сироватці крові та НАЇ у сироватці крові.
Зо ІЇ00105| Способи, описані вище для когорти А, застосовують для аналізу зразків крові, зібраних від імунізованих осіб або осіб, що одержують плацебо. Результати дослідження будуть використовуватися в розробці клінічного протоколу введення складів вакцини за даним винаходом.
І00106| Даний винахід не слід обмежувати в обсязі конкретними описаними варіантами здійснення, які, як передбачається, є тільки ілюстраціями окремих аспектів даного винаходу, і функціональні еквіваленти способів і компонентів охоплені обсягом даного винаходу.
Безумовно, різні модифікації даного винаходу на додаток до таких, наведених і описаних у даному документі, стануть очевидними фахівцям у даній галузі з вищевикладеного опису та супутніх графічних матеріалів при використанні не більш ніж звичайного експериментування.
Такі модифікації та еквіваленти, як передбачається, охоплені обсягом прикладеної формули винаходу.
І00107| Усі публікації, патенти та заявки на патент, що згадуються в даному описі, у даному документі включені в даний опис за допомогою посилання в тому ж обсязі, як якби було зазначено, що кожна окрема публікація, патент або заявка на патент конкретно та індивідуально включені в даний документ за допомогою посилання. (00108) Цитування або розгляд літературних джерел у даному документі не слід тлумачити як визнання, що вони є рівнем техніки для даного винаходу.
Джерела інформації: 1. Сіав5, ВІ, У5 Моєї, Т Апао, ВІ. РапКнаийзег, Сх Вей, А Мошпів, ОО Рагазнетг, 95 Вгезеє апа
ЗО Мопгое. Те Ерідетіоіоду ої Епівтіс Саїїсімігиве5 їот Нитап: А Неаззеззтепі Овіпд Мем ріадпозіїсв. У Іптесі бів 2000; 181 (Бур 2): 5254-5261. 2. Нагау, МЕ. Могмаїк апа "Мопмаїк-йКе Мігпивев5" іп Ерідетіс Савігоепієгіїйв. Сіп ар Меа 1999:19(3): 675-900.
З. Лапа, Х, ОМ Станат, КМ УУапо, апа МК Евієз. МопмаїкК Міпиє Сбепоте Сіопіпа апа СПНагасієгігайоп. Зсіепсе 1990; 250: 1580-1583. 4. діапа, Х, М Мапі, ОМ Станат, апа МК Езієз. Ехргеззіоп, Зеї-Аззетрбіу, апа Апіідепісйу ої
Ше МогмаїК Мігив Сарзіа Ргоївіп. У Міго! 1992; 66: 6527-6532. 5. Спазв5, Р, ГУ М/нійе, УМ Ваї,, І Гераго-СоїМап, МЕ Нагау, апа МК Езіез. Могмаїк Міги5 Ореп
Веадіпд Егате З Епсодез а Міпог Зігисічгаї Ргоїеєїп. у Міо! 2000; 74: 6581-6591. 60 б. ІІпаєвзтій, І, С Моє, 5 Магіоппєаи, М Вимоєп, Х діапа, І І іпаріад, Р Біеманй, у І ерепди,
апа В Ваїіс. Нитап Зизсеріїйбіїйу апа Незівіапсе о Могмаїк Мігив Іптесіїоп. Маї Мей 2003; 9: 548- 7. Ратіпо, ТА, О5 5сНгвїрег, 95 Тег, А? Карікіап, апа МА ВіасКіом. Сіїпіса! Іттипйу іп Асціє
Савзігоепієтййв Сайзей Бу МогмаїкК Адепі. М Епаї ) Меа 1977; 297: 86-89. 8. Муаїй, Ва, А Ооїїп, МА ВіасКкіом, НІ Юиропі, ВЕ Вивспо, Т5 Поппнпії, А2 КаріКіап, апа ЕМ
Спапоск. Сотрагізоп ої Тигеє Адепів ої Асціе Іптесібиб5 Мопбрасіега! Савігоепівтіів Бу Стго55- спаІІепде іп МоІшпіеетгв. У Іптесі Оіб5 1974; 129: 709. 9. ВаїІї, "М, ОМ ССтанат, АВ ОреКит, МА аїїдег, ВА Сие!їтего, апа МК Евіе5. Весотрбіпапі
Могмаїк Мігив-ЇїКе Рапісієв Сімеп ОгаїІу то МоІшпіеегв: Ріпазе І 5іцау. Савігоепіегоіоду 1999; 117: 40-48. 10. Таскеї, СО, МВ 521віп, СА ГозопКу, 55 Уазвзептап, апа МК Евієвз. Нитогаї, Мисозаї, апа
Сеїїшаг Іттипе Незропзез Юю Ога! Могмаїк Мігив5-ЇїКе Рапісіе5 іп МоІшпіеегв. Сіїп Іттипої 2003; 108: 241. 11. Сцеїтего, ВА, УМ Ваї, 55 Кгаївегї, 5Е Распесо, 90 Сіетепів, апа МК Евівев. Несотбіпапі
Могмаїк Мігив-їКе Рапісієз Адтіпівіетейд ІпігапазайПу о Місе Іпдисе бувзіетіс апа Мисозаї (Еєсаї апа Мадіпа!) Іттипе Незропзезв. У Мігої 2001; 75: 9713. 12. МісоїПег-Чатої, В, А Одієг, І. Рігоїй, Р Роїпієг, апа Е Копії. Несотрбріпапі Мігив5-ЇКе Рапісіе5 ої а Могоміги5 (Сеподгоир Ії 5ігаіп) Адтіпівіегейд ІпігапазаПу апа Огаїу мйй Мисозаї! Адіимапіб ГТ апа І Т(81922) іп ВАЇВ/с Місе Іпдисе бресіїйс Нитога! апа Сеїйшаг Ти1/ТН2-ЇїКе Іттипе
Везропзевз. Массіпе 2004; 22:1079-1086. 13. Репма!ї, 5В, КА Кошіє, М Катаснапаагап, 5) ВіаКепеу, 5 Оебгиіп, О 7Ни, ТУ 7атр, 1.
Зтій, З Одет, УН ЕЇІадгідде, КЕ Зпгойї, апа РА НеййШу. А Моайей Споїега Ноіоїохіп СТ-Е2ОН
Еппапсевз Бузієтіс апа Мисоза! Іттипе Незропзевз о Несотбіпапі Могмаїк Мігив-ЇїКе Рапісіє
Массіпе. Массіпе 2003; 21: 376-385. 14. ІзаКа, М, У Мазида, 5 КогикКа, Т Тапідиспі, К Маїапо, У Мавуата, Т Котіуа, К ОпКита, М
Сою, апа К Тоспікибро. Іпдисійїоп ої зубзіетіс апа тисозаї апіїроду гезропзез іп тісе іттипігей іпігапазайПу м/п аїштіпит-поп-адзотеа аїрпіНетліа їюхоїа їодеїпег уп гесотбіпапі споїега хіп В зирипії аз ап адіимапі. Массіпе 1999; 18: 743-751. 15. Коліомузкі, РА, 5 Си-Оміп, МА Меціга, апа ТР Ріапідап. Сотрагізоп ої їйе огаї, гесіа), апа мадіпа! іттипігайоп гошез ог іпдисіоп ої апіїбодієв іп гесіа!Ї апа депіа! ігасі зестейопв5 ої мотеп.
Іптесі Іттип 1997; 65: 1387-1394. 16. МезіесКу, У, 5М Міснаіек, 7 МоІдоулеапи, апа МУУ ВиззеїІ. Вошевз ої іттипігайоп апа апіїдеп аеїїмегу зувієтв ог оріїта! тисозаї іттипе гезроп5ез іп питапв. Венпгіпа Іпві Мі 1997; 33-43. 17. Ми, НУ, апа МУ Аивбв5еї. Маза! Іутрпоїй іїйббзиє, іпігтапаза! іттипігайоп, апа сотраптепіаїї2айоп ої Ше соттоп тисозаї іттипе 5узієт. Іттипої! Нез 1997; 16: 187-201. 18. Емапв, УТ, СМУ Сішй, БА доппзоп, МУ ІГасу, ОН Регвіпд, апа УА Ваїдідде. Епнапсетепі ої апіїдеп-5ресіїс іттипйу міа Ше ТІ НА Іїдапа5 МРІ. адіимапі апа Вірі 529. Ехреп Нем Массіпе5 2003; 2: 219-229. 19. Ваїдгідде, УВ, М Могдеп5зеп, УА УМага, апа УТ Шиси. Мопорпозрпогу! Ірій А еппапсев тисовзаї апа зузієтіс іттипйу юю массіпе апіїдеп5 ТОоПом/пу іпігапаза! адітіпівігайоп (и Ргосев5
Спйайоп). Массіпе 2000; 18: 2416-2425. 20. Мапу, ОВ, М Мапйіп, 5М МіснаіеК, апа У Каї2. МесНнапібзтв ої топорпозрпогуї! рій А айдтепіайоп ої пові гезропзев5 о гесотбріпапі Надь їот Рогрпуготопаз діпаімаїїв5. Іптесї Іттип 2002; 70: 3557-3565. 21. Ваїадгіск, Р, О Віснагазоп, с ЕПіой, апа АМУ М/невіег. Заїеїу емаІсайоп ої топорпозрпогу)
Іріа А (МРІ): ап іттиповійтиіаюгу адіимапі. Неди! Тохісо! Рпаттасої 2002; 35: 398-413. 22. Ваїідгідде, УВ, Р Месдоуап, УТ Емапв, С Сішй, 5 Мо55тап, Ю доппзоп, апа О Регвіпд. Такіпа а юю оп питап аїбзеазе: ТоїІ-ІКе гесеріог 4 адопібі5 ах массіпе адуимапі5 апа топоїПегарешіс адепів. Ехреп Оріп Віо! Тег 2004; 4: 1129-1138. 23. Регзіпу, ОН, ВАМ Соїег, Му Іасу, СА доппзоп, УА Ваїагдде, ВМ Негзпбего, апа за Нева.
Такіпо 01: Ігріа А тітеїйсв аз адіимапів апа іттипотоациіаогв5. Ттепав Містобіо! 2002; 10: 5532-37.
ПЕРЕЛІК ПОСЛІДОВНОСТЕЙ
«1105 ЛігоЦит тТармацевтикаліа, ІЇнНЕ.
БРичаюрдссн, Чарльз
БаАргатче, Роберт ф,
Менлелман, Поло, «120» ПАРЕНТЕРАЛЬНІ СКЛАДИ НОРОВИРУСНОЇ ВАКЦИНИ «1305 БІСО-О2А/ОТМО «1505 по 61/506,447 «1515 2011-07-11 «16вох 1 «1705 Рабеюопсіп версія 3.5 «2105 1 «й115 540 «2125 Білок 213» Штучна посліловність «йхвОх «223» Складена амінокислотна поспідовність МРі норовірусу СІ1І.4 «400» 1
Мес ус Мес Аїа бек бек Ар Аа АБ о Рго бЗег Аквробіу бек Тіг АївВ 1 5 10 15
Авпобеп Уа1і Рго б5ій Маї АБ оАЗзп обі Уві Мег Аїв Гей біз Рго Уві
Зо
Уві бі1у Аї1а Аїда 112 АїЇз Аза Рко Узі Аза с1у біп с1іп АппоУді їі 4о 45
АвроБбко Ткр тіе Ак Авп о АвБап Рпе Уді сіп Аїд Рго біу сіу Бій Рпе зо 55 бо
ТЕ Ма! бер Ро Аку АвБп Аїд Рко біу бій Ті їейп Ткр бек Аа Ріо 70 75 во ївц біу Рко Азроївй Азп о Рго Туг ів Зег Ніз Гей Аїа Ак Меє Тукг 85 зо 95
АБпосіу Тук Аід Б1у сіу Рпе бі Уді біп Узі 1128 їеп Аїд сбіу АЗп 100 105 110
Аза Ріпа Тпг Аїа сіу бух їі Т1іе Рпе Аіз АіЇд Уді Рго Рко Авп о РНпе 115 1720 125
Его Тк обі сбіу ей бер Рго Зег о біп Уві ТВг о Месб Рпе Рго Нів 112 130 135 140 тів Узі АБр Уаі Ак біп Бей обіч Рго Уді Пецп Іїе Рко Гей Рго Авр 145 1580 155 16560 уа1і Акч Авп о Авп Рпє Тук Ні Туг Авпопіп бег Авп о Авр о Рго Тр ої1ег 165 170 175 їУу5 їей Ті Аїа Мег їеп Туг ТК о Рго їеп Агу АЇЗ8 АБп Авп о Ав біу 1во 155 195
АБр о оАвБроузі Епе Тік Уві бег Сув АгЯ Уді Бей Так Ага Рго бег Рго 155 200 205
Авр о Рпе Авр опе Іїе Рпе Бей Уді Рго Рго Тпйт Уді бій бек Ага Таг 218 215 22О
Був Рго Рпе Тк Уві Ркго Ті еп ТикК о Уві бі 51 Мес ТЬК о Абвпобер 225 230 235 240
Ак Ре Рго Ті Рко Тер осічз Гу Тей Рбе Тпг о сіу Рко бек сіу Аід 245 2за 255
Рпе Уаії Уаії б5іп Рко біп Аб5п о біуУу АкЧ о Сув Тпг о Так АвБросСіу Уві Бе 260 255 21О
Ііви о піу Тйг о ТпкосСіп Тел бек Ргро Уді Авп Ті Субв Так о Рпв Агу біу та 2во 255
Авр уаї ТіК Нія ІТ15 Аїа біу Тк обСіп бі Туг ТБк о Мес АБп їГец АїВ 235 БІ
Ззек піп Авп оТкКр о Авп о АБО Тук АвроРго Тпг осі с1й Т1е Рго Аїва Рго за5 310 315 32
Бей біу Так Рко Аб5рогпе Уа! біу Тув чТіе бів біу Маї їей Тк сів
325 330 335
Тис отТпг Ага Б1у Авр о біу бек Тк Ак с1Уу Ні уз Аіа Тк Узі бег зАо 345 зво
Тьк обіу дек о Маі Ні Ре Таг о Ркго Буш Реп о сіу бег Уві сбіп Ре бег 355 зво 365
ТВг о Авр Тк Бек Ап о Адр о Бпе бій Тк ос1Уу біп Абп Тк о Був Ре Так 370 375 380
Его Ма1! сб1у Мда1і Уві біп Авробіу бек Тбк Тпг Нів сій Авп о біц Рео 385 390 395 400 біп спіп ТЕромді Бей Рго АвроТукє бек с1у Ака Абвр обет Нів Авп Уві 405 410 415
Ні: їецп Аїа Рго Аа УаїЇ А1їа Рго Тйг Рпе Рго біу біз біп Гей їви 420 425 430
Рпе Рпе Аг бек Тпг Мес Рго 5іу Сув бек Б1Уу Тут РЕо Ачзп о Мег Ав 435 440 445 їеп о АвроСув Теп Тен Рго біп січ Тер Уві сів Нів Рпе Тук біп січ 455 455 бо
Аза Аїа Рго Аїа ціп бек Авр о Уаі Аїа Ге їБечп Акоа Рпе Уді Авп рРго 465 470 875 480
Авр отак обіу Ага Уа! Гей Рпе бічп Суз Пув Гей Нів Був бег Сіу ТУуг 485 495 495
Уві Так Уді Аїа Ні ТикКросіу сСіп Нів АвроГецй Уві Ті Ркго Рго Авп 50О0 5оО5 516 сбіУу Туюк Рпе Акп Рпе Адробек Тер оУМаіЇ Ав о сСіп Ре Туг Тк їГез дів 515 520 525
Ркго Ме сіу Азпобіу Тип о сіу АкЧ Аку Аг А1З Те
ЗО 235 240
Claims (13)
1. Спосіб стимулювання формування захисного імунітету проти норовірусу в людини, що включає парентеральне введення людині не більше одноразової дози композиції вакцини, зазначена композиція містить вірусоподібні частинки (МІР) норовірусу геногрупи | та вірусоподібні частинки (МІ Р) норовірусу геногрупи ІІ у різних кількостях, причому зазначена композиція містить від приблизно 15 мкг до приблизно 50 мкг МІ Р норовірусу геногрупи І та від приблизно 50 мкг до приблизно 150 мкг МІР норовірусу геногрупи ІІ, де зазначені МІ Р норовірусу геногрупи | містять капсидний білок, отриманий з вірусного штаму геногрупи Ї, де зазначені МІ Р. норовірусу геногрупи ІІ містять капсидний білок, отриманий з вірусного штаму геногрупи ІІ.
2. Спосіб за п. 1, де зазначені МІ Р норовірусу є моновалентними МІР або мультивалентними МІ Р.
3. Спосіб за п. 1, де зазначені МІ Р норовірусу геногрупи І являють собою МІ Р вірусу МогухакК, а зазначені МЕР норовірусу геногрупи ЇЇ являють собою МІР, утворені в результаті експресії консенсусної послідовності норовірусу геногрупи ІІ.
4. Спосіб за будь-яким з пп. 1-3, де композиція додатково містить щонайменше один ад'ювант.
5. Спосіб за п. 4, де зазначений щонайменше один ад'ювант являє собою гідроксид алюмінію.
6. Спосіб за будь-яким з пп. 1-3, де зазначена композиція додатково містить два ад'юванти.
7. Спосіб за п. 6, де зазначені два ад'юванти являють собою монофосфорил-ліпід А та гідроксид алюмінію.
8. Спосіб за будь-яким з пп. 1-7, де зазначена композиція додатково містить буфер.
9. Спосіб за п. 8, де зазначений буфер вибраний із групи, що включає І -гістидин, імідазол, бурштинову кислоту, трис та лимонну кислоту.
10. Спосіб за будь-яким з пп. 1-9, де композицію вакцини вводять людині за допомогою внутрішньовенного, підшкірного, внутрішньошкірного або внутрішньом'язового шляху введення.
11. Спосіб за п. 10, де композицію вакцини вводять людині за допомогою внутрішньом'язового шляху введення.
12. Спосіб за будь-яким з пп. 1-11, де композиція вакцини складена у вигляді рідини.
13. Спосіб за п. 1, де зазначені МІ Р норовірусу геногрупи ІЇ містять капсидний білок, отриманий з вірусних штамів 4 генотипу геногрупи ЇЇ.
д Дослідження норовірусної вакцини 103-104 "7, Середній геометричний титр всіх класів Ії до МОУ СТІ пе во аа Кк «ее Планебо для СЯ. (по- 5) Е о ПИ щи «ве 5 МКГ УаХ СТ.1 (п - 9) БО вое / куреня Ж се» 15 мкг Ух СТІ (1-8) ОВ Кі не ЗО) мкг ОУах СЯ. бі- 103 те 150 мкг Уах СТ.1 (п - 7 робоснюю Я г ви р БД Й Й ще Шен сс жа ПМ ТКУ БМК ща що Мк о сі й сі ра й ЕЕ 7 хх - В 480 що осо сво Г- - ї- оч "4 2-х В Дослідження норовірусної вакцини 103-104 Середній геометричний титр всіх класів Іс до МоУ С.А -- наоБє «ее Плацебо для СНІ. (по- 5) 2 п ц -ве 5 мкг ОМах СП.
Я (тр- 8) у КЗ Ше КИ ще - т що й Й . х | В) зо і5 мкг оуах СНІ Я (по- 8) х за шо Ф проносне Се 50) мкг бах СП.Я (п -- 10) Кеш КЗ ДО мам о одідююююювюм СК хорох о у -ч . - 5 Я і щК 150 мкг Уах СП. (по- 7) З м я З І х НЯ ча У Шен Б 0 Са жк ж З фон е є шо о - - - ет с 2 й ; Ше: 2 щ Су ж В х 2 5 ро - в Мо с щ -а мом ЕЕ ово 5 -З са Фігура І
Дослідження норовірусної вакцини ГО3-104 А Фактор сероконверсії дпя всіх класів Те до МОУ СТІ ОПО «ду - не я с ре Х 15 що ха ІІлацебо для Ст. 1 (а - 5)
г ї. ож й «де З МЕТО Уах СИП. (п - 9) ЩО зо І ше і ха 15 мкт ах СЯ. го - 8) ж ге за боку в дк й Й х Я ЕК ще Ж «де 30 мкг Оу ах сЯ.і1 (п - 10 що ЕВ «В я Ще чее150 мкг Уах СИ. (п -7 п а - Ку я я- - - й 3 4 щ й тк с й їй Ба В 8 585 8 ФЕ щ ж « а я ж ка - й Се г - нинш ш ши - н Ш мч ш щ я те - т- ве «і я В Дослідження нороврусної вакцини 1.403-104 Фактор сероконверсії для всіх класів Тс до Мом СПА ; «фе 1лАНеВО ДЛЯ СНІ Я (п - 8 ох -аже З МКГ Уах ОП (по- 9) - - т В -
я. ше 15 мкг У ах СП. (п - В 58 ї- Я «іже 50 мкг Уах СП. Я (п - 103 мВ й -е 150 мкг Уах СІЯ (п - 7) ка ке оо і ишя м Ж і п й щ З ин в щ ре УЗД чи НН МТ ТУ яд в ОО МН ННЯ У о я і і з в щі з - х - г дж о «г - щ ей С і щ- й я и в со ш ї що їх їх й а а й я 8 ї- - ге 2 - Є Фігура 2
І Дослідження норовфусної вакцини 103-104 д ВсікласнІсдо МОУ СТІ ор З Конан: вини: винних зви: НИЦІ й пі, ем г й «еетІлацебво для СЯ. (п - 5) от Х - й НИ Й 2 в те Е. ее 5 МКГ ОУЯХ СІ. (п - 9) що тп Об. В с. 1 ем ль Як У в М сек 15 мкг Уах СЯ.і (п - В) т мМ . й й тов Я дод мкг уах СТІ га - 10 ТБ «в -ще ЗО МКГ о Мах сЯ.і в - 103 ї- г. чо т. - ї тт пиКб -квее 130 мкг Оу ах (1 (по- 7) Я во 8 Й І ЖЖ б 5 ї КК шш я 55 ї ж з щ ш Х я це нен й їз Жодні З шосте Шк ж Кз г а х г а х х х 5 Ка їй З щ З о шо СВ ТЕ У Е: я ка - Не їк г г т Е Е їх КЗ КЗ к н щ т ге - ї- - - - кі Дослідження норовфусної вакцини І/О3-104 Всікласи іє до МоУ СПІ.А де 185 ееетілацейо для С.Я (п - 8) а А - он й сс ке Я МКГ У ах СТІ. 4 ( в- 93 5 Ук Й Не нн с с ЗСШ шк ; - РИ : в окСд б о дней жефее15 МКГ ах С.Я - 8) ох АХ Ж. т р І ре вив г вк пеня жйне50 МКГ ах СИ. Я (п - 103 п В І і Кн ВН хе зе й «тт я - -- Ж й В ; «аа 150 мкг Мах СП. (по- 7) жу кКаю КУ 5 Б Її 8 Ж г Є ке З м КУ НИ Й й г х щ ІЗ. Кк Ге ; й ме -з рен А и НИ НИ: Ж 5 Ка щш їй Не КІ щ о. ш ш х
2 -. се! Б т ж щ Ж ж Ко « ш Ф й-Я в в «й З їх Е Е х. Є щ й а ва ою тож х шо х я ей ч щ о г - - - - Фігура З
А Дослідження нороврусної вакцини 1703-1004 Середній геометричний титр ІРА до Мо М СТ... - я щх КЕ з от тро щ мое «вк БТ ілацебо для СЯ. 1 (п - 0 - й т 7 «ті і г Ер ее МКГ ОУах ОЇ. (п о- 9) х хе ве Вова с т не Ше я Ж ши в КИЙ сах 15 мкг о мах СЯ. (п- 8 рей КТК: | ду ой - й Й пд ді г Я сек мкг обах Сі. 1 (п - 10) ож З 7 8 о . зерня ЕК ПИ Уже Ко Е В
Є . Ні л- т- - -5З -щ8 - хх т т рез - х х Ф 5 КУ 2 2 ш гУ ож щі в миши ши ше ни ше «3 - в Дослідження норовфрусної вакцини 1А703-104 Середній геометричнни титр ІА до Мо У О114 2 вк зарве Плацебо для СПІ.Я (по - 6) х се З мКГОУах СПІ.Я (п - 9) В й же 15 МКГ ОУах СТА (а - 8) Е ча є Шин зро ЗО МКгОМах СПІ. Я (з - 101 щ- Ж Хо У СУ ЗУ У 7 з Жохххос 5 рення кн ра « ТЯ К ан своодофовкнююсе я Е за ї, її Б; Ні - - - са «з сез г з Ж о вх ХЕ З я ок й я їй що ок - й а т Ж ов дв ах в жа в сх г с миши ши ние с 5 в щ р рес а ев Фігура 4
Дослідження нороврусної вакцини 103-104 А Фактор сероконверсії для ІгА до МОУ С.І ШИ «ве Плацебо для сі.1 (по- 6) З щі г ; зт я ! Ж шов х зе з мМКкРОУах СП. (п - 9 кеВ г -ае 15 мкг Уах 1.1 (з - 8) чи і шк те 50 мкг Уах О.І (п - 10) «ОК Й в в р в хе ве З х еоснвоов з Коддроююнннннкк Ж дек ом ва -т р-д Б щ ш « ш х х ки Го Ко Ко. КУ а М и ни ни и в о в й а в і х Ж і щ ш щ кЕ щ т р- - ї- 2 Ге! т в Дослілження норовірусної вакцини 103-104 Фактор сероконверсії для ІА до МоУ СПА а 2 ее Плапебо для СП. Я (п - 6) 2 я к зе 5 мкг ах СЯЇТ.Я (п - 9) ВЕ її -е: 15 мкг ах СПІ.Я (п - 8) Що- ї Б сифідню су ; тод ач «ов Бр ЗО мкг бах сп. яп - 10) гу 5 Я Йо рос Шо сш в. 5 г: ї й Ще дх Во ох - Іі лав і мото -в ча 5 З х Ф ря З и в Бе "В в се Як Е5 Ге Б Е шовком зн г оо 3 4 Фігура 5
Дослідження норовірусної вакцини 103-104 А Іва до МОУ СТІ - са КК фев од не дос й - . й КЕ І ше мех С /Ілацебо для СТ. (п- 6) ВОЕ в їй "офраннкнфрнкнкнков Сея мкг уах СН. 1 0-9) же Е. -е15 мкг Уах С.І (п - 8) вч А Е шо стро ст ін їй й ще У «щекой мкг бах СЯ. (п - НЯ ге що ЕС 3з щЗ -еш Я о я Хв г) Фо Кс -оз та НЯ Х ТЕ з "Е ЕЗ Дюк Кк КК Кк мот Е ; ; ; дО? : с т - т т "і 24 З х Кк З х х її 5 Бо - о - ге М КУ М Гея В вв 5 НИ: В я В Ка Ек с- в Дослідження норовірусної вакпини 103-104 ІА до МоУ ОЦЯ х
-щ . М КЗЗ я як я: , Вк ее Плацебо для СП. (по 6) Ж ооочк й - -вех мкг Уах СПА (п - 5 що ж одне Я ки с Ко х ар ой е Ес бу 15 мкг Уах Н.Я (п - 8) г д зо удо нео С Ск с еде 51 МКГ тах СА (п - 10 - СоЯ КЗ І КІВ о, Її шо ж ; що ш Я ж шо кош 2 в - - - ся -3 - Я х - Ко їх «З ГА че С що ; я т с - -ш їх ге їх осв ат ав М- Ку ХУ - Ще 7 кН: Я Я - ре Бо с - Фігура 6
А Даслідження норовірусної вакцини 17203-104 ! Середній геометричний титр Сх до Мо У СТ. Ж «ах Плацебо для СІ. | (п - 6) ся ; жде З МЕР Уах СТ. | (п - 9)
5. оо Йон Я устя і М й "еф осоюноцюдютнюкня: ше 13 МКГ ОУаХх С.І (п - 8) ех я я подано жо Ме ! Й. пухом фреютююіфнянняЯй аж ЗО МК ОМаХ СЯ. (п- 10)
т к. Що Е Я Кк ПИКА а, и ново й ж ША у Е " Ж дня ю Е Ні ! ї- ; - - - і Ге с ак Ж З ВЕ: що в в я ш Е г їх Е9 є ін рен ми в «в 2 2 щ осв Во т- - ї- Фо «а с в Дослідження норовфусної вакцини 103-104 Середній геометричний титр б; до Мо У СТА Е- юроон «ве Плацебо для оп (в - 6) Кк ! се З МКГ ОУаХ ОПСЯ 0 - 9 Кк Е Ех к сх у х 5 зБоди з-ееі15 МКК Обах СНІ (п - 5 В ! зоре ЗО МКГ ОУ ах СНІ Я - 10)
в. ! І коня и о Зоре й нн и 5 - ! я п НН НН ГУ ! дек ; Кфкюксснаню ян М МО ГЕЙ Ж їв - т- т- - -2 с са 8 5 8 ІЕ я 5 5 Ф5 5 2 х ї-3 В 2 я ї- щ Ж Ж щ х - -а Го То 5 - кі те ЕК ОС в- як г г З м Фігура 7
Дослідження норовірусної вакцини 103-104 А Фактор сероконверсй для ТеЄї до МОМ СП ЕС - щ ; - 8 ! «ееТІлацебо для СТ.1 (п - 6) Ух Е г - ях с ІЗ - ККУ В шоснкі -ео МЕГОУах СИОЇ (по- 9 в В Те «ее МКГ обах СИ.1 п - 83 о Е - 7 щ ; ій шо Ж ее 30 мкг мах С1.1 (п - 103 ж Ж | ї ою т Е ї СЗЗ т Е «Ж. Масу це 8 55 ; / р Ох ет, І З - - - - ее "з Ж НЕ: 2 х 5 г в щ - щ : : що щ ни ни ИН ШЕ є. г Е в. Е ве ж в ке д а ї- не Ж ми ж хх т - їх - се в Дослідження норовірусної вакцини І/03-104 Фактор сероконверсії для Із до МоУ СЛІ.А - ва "еПнапейі спав ві еПлацебо для СП.Я (п - 6 я щк Вк ее мкг Уах СПА (п - 9) ом ШІ ее ще 715 мкг бах ОПО (п - 8) пу ДЕ й заоле0О мкг уах СП. Я (п - 10) КЗ в ВЗ а "фра к 5 в Б й - З и ЕТ ЩА Кк: й пе м Ж і ей х тан Ка схо г ща и кн й їх й й т Б ; - тек - м ті - т т ре х 5 с к Би щ ч ка в г ке г в осв сЕ СЕ щ г | кх. Кк її» тн - со «4 ек! Фігура 8
Дослідження норовірусної вакцини 103-104 А Івб до Моу СТ. ; зав | щ що - Е ж Е шен -2- Плацебо для Ст. 1 (пр - 6) - й Ж Щ - х й Й й В з / Шк -фе З МЕТ Ууах С.І (п - 9) до Дай зе 15 мкг Уах СЯ. п - 8 пеКЯ Я -- є у щ й 4, Б я Ї/ -йе 50 мкг Уах СИ. п - 101 с" ЯК й її 5 Й т що де х. -й - се - -3 - і т- і щЩ її ж Ж З щ - у - ш ш ч Кк Ж - 588 чх 5 о іх Е р х. ії Е й ов а ре щ ше шнши ше К- - - - г г в Дослідження нороврусної вакцини 1703-1044 ІвСдо МоМ 1.4 ШЩож «ае Плацебо для СП. (п - 6) ош Же з мкт ах СТ Я а - ВЕ от мм ее мкг Мах СИ. (по - 9) в фе че» 15 мкг Уах ОП.Я (п - 8) -- ш ок ж - - ви ся па єе ГА і оз 50 мкг Уах СПІ.Я (п - 10) в Я збу : Ка ни ж Е ще 3 У Мен ВИЙ ее 5 5 Ка з й т- З й а ш Ех ооо фо дово фо 2 сш сте -- ще лек п поя - - - ех -!4оосгз чі З - Ж г 5 Б щ-щ Ес ж щ щ щ - т - Не т ши шк и ШК Се х їх сх її ш р а ек ; 2 щш їт- - - 2 ті т Чигура 9
З товщ» вдо одоу 1 У03-104, 5 мк вакцини (п-9) ко «МК Я - . - их Янко Я: сема 1. Ж 01-105, НЮ мкг вакнини (п- 47) с ту я т -у о х 00 5 се» 1. У 001-103, плацебо (п - 39) ї Зх КЗ Я тер тт у. - я | Вк КЕ І У И3- 1, плацебо (п - 2) о з гу щ-- ду Е К ш а коні т ї в: нн х їх ке ж Же -їй т тож ща без сі шо Е з в Б 'шВ В Б В Б ке щ й що йо м МОМ що -- 5 5 в в 5 5 З й в ОКО Що кО ОМ Од -щ ЩОМ ОВО В'К й -к в т ть мЕ я Б я Б Б Ж й т-ооо- юною сероєя евро ко тож сг Фігура 10
Сг х КАК х ДК. що ПИЛИ ЕН Я нн ! ї й ПИ Ин вої здо пит ї ї ТЕН Б 1 : ЕН не КЕККККК КК С Я ї ї Е Х ПИ ї 3 7 Е От г З з З ник З 0 ЖЕ ее ї - ї ее Я - З ЩЕ пн ше З о я Ж дителннт ї х : 7 ї А й ре ПДК Я ї ЕКЗ ІНВ ОО то ї х м 3 ши ї хх х З ЩЕ ї пе ЗНЕООН ї ЕІ с ВО СО ї ї й ї шт т «ЕЕ : ХО КАЖЕ ООН ї їз Її -н- що я їх т. о о. пло г ОВ що ЕЕ З ЕН її . що х ше ж ші о 0 о щі їж хе ШУ І її С и хо
Е. Я и ши шк о. . Її її З дошк ОО ЕНШШЕЗ ХО ОО ЗЕ о. КЕ хо х Коко кююте ДУХ 55 шк о :- ях х 5 мя сво ЕНН: От Б. ХВ о. ЗО хо ння що же КУ ї І Х ІАЕ ПВ ХХ Те Е ї фено сх я джеми ї ї що ІЗ ко ЗОН ї ї ї поет схе ух тилнннкютной Її Еш о Ж хо Х зи ї пкт ВК З Я З Е Ку Ж СЕ де . ї 3 Жов я ПАПКИ а Я ЩЕ" ї «Ж хек ХК З т: їх ї ! ЕТ Ин їі ї сохкх ше ще. х : т х ЕП дтекиннннннку шо ий ОХ ЗОВ ї :
Ж. ї ї фени ХЕ з Кенктямкюкхнкиккукх Е 3 ва! дим її ї Е ШМК дише м ак ї Си шт БО 5 п ення і ж з : ЕК ї х я і ї х ЕЗ КК дтодтелненнннкК Зк їх ще ї Я ї г ї щу не Із ОЕПЕЕ ї з Я ї За Е ш ї ща ПЕ НН ї Я . : Її ей ей В м ї : Мечх ї ПОЖВя бо ї Я ЕЯ т З Б яя х З ЖЕ ХХ їх ШК п т Я ї З х винна й Е ї Ї ЕН той ннрнннииииииин й ї дк і х "дае шо поко о ва. Ба ї х Ж ди ПЕК 5 й їх Ох З ЗОН ще КОН ше їх ї ша З вКИ Е ев о Ох й ї : З о Ей ї В З о ЗЕ у я ї ІЗ х с КУ НЕБУ птн ї ЖЖ КУ ОО ОХ У т Ж х х ве р КО 5 ї ІЖЕ х РО КК я ї х І: ї Еш п хо й . 0. є : 4 х Крок ря сонна ї Ж ще х МАХ ОХ і вн ї ІЗ х ? НН ЩООКЛЕ ї ЕОЖ ОО З еВ о ще ї 5 х шили МИХ ї І Ох ОКХ ЖЖ їх ї хе їх ЛИ дегтек у їх ї ОС х МОХ ох Ко ї х фени ОК Ще ХУхкююд х ї ож С ЕОМ ОК ШО їх ї ІЗ есосвноох сви ЩЕ г комою Е Щі З п о Е ї х щої й спо ту М Е ЕН ОО ХК Е ї Ж щи СХ « ЕЕ: ОК З І -ї п щ ши х ї ж ї ше КЕ їй ї ен ее щі т х щ ПОМ ї що я о ї й З х ї Ще й ооо о зв шк ВщЕ й КК ехо Е ІЗ ск 0 ї І Кент нти ще ще Му мм ї ІЗ шу - я ЕНЕЗ ї туту КК ЕВ КВ ву ЗШ Мих . о іскннк ЕН вай помннн ВКЕЕКККоВ Ге щі 5 ек х щ : ти х І ТЕ ше ме 2 З ще ї ї й З ї деки Її Е Х. и ПОМ : о ОК ж ї ї хх. ї кт по У ие КОКОН пи т т. : ЕЗ К ї До п х ї із. НЕ ЕЕ мое т 5 рооже и ще од ШЕ Ж ХО АХ пи 5 й х їх В ТО ше Не пода шипи її х ща : Кз ОО х ОО ання З їй Б пил, З ї ї т БОНН, ПЕ ше ї лиш 5 Б її : НИ ше шо. п ОА. ; я : З ос то . 0 ії г х З Я о. о й: х ї ж ш о. й її ХЕ З КО Е ХХ х же М їх х
І. в ЕМ що о ; ії х орки ї Ж фо ж КЕЕООооо я й Е ІЗ х дод руду ух ЕН ни МО я х хо Же дощ ХІМ КЕ ї Е МОХ . З її . ї ІЗ я дощ и оон 5 щи ще . ще х З ІЗ пон ох. ТЕ воая хуя х Е КК ОХ Са х ІЗ х с ЩЕ св ї З о 54 Ж зд ї пек КЕН КВК х ОКО: їх Е Ол ПИЛНИШК НИ ПМЖ ї ї х СЕЗ ОО кН х Зуде Бик ПК х ІЗ ІЗ ї ДО денних шо ЗЕ о кв со х З : : ЕІ З он о Ж ЕК о Ще : ско Е спон од вки ув я ОН ож : ення вини ; Кая й су ї ОО КОЖ МНН и ще 5 Ме ї вн ї їх ї як Я дм пд ї ШИИПНИНИИНИИНниХ ї ї ї ї ї мк: ща я ї пилю їх Ж дрю ї Е ї пе їх Й ї Ж ї ПЕ ї ї й Хот ко дин ї ї ї Й ї ї ; п о В ЕЕ : щі Ж од ви з - ї їх ак ї дититетх х х жо Ес т Я ї М с ке Ин се пктотне КВК їх : х КОКО ПЕКАИТТНЕ Ве Пи р ї ОХ ДОКТ МК ОКХ ЖОЖУХ Е З я не ШОК дентин ї ща ПН З п ще ї їх : шк: що ВЕ ЕМ ее о: ши
І. З й ще В ї о КЕ о Я ї : он а Я ї ши ЕК Т ОО ПА й ї ІЗ кокон ЕД НЕ ОО о. : ї ї З с нн нини З І п З о: я х З Х їх ЖЕ ке ення Я Е ОЗ І пня Е Е У пи ши шк. шо . |і сш щі шо Б шафа кокрююденнни Е Х2 ПИ ОВУ Х З Е ІЗ КОСХЗНЕх ї (Я й ї З У ПЕВ ит СКК МОЄ з КЗ їх ва Се Кі ще ї в т о х ї х ї Ши рн ЕЕ а й х ІЗ ї вок У З її - що но з соохорккденкиХ ї - «Ве КЕ деко КО 5 В ен КУ хх Як В ще 5 День 0 п . їх : КУ Д й ень 7 ГУ 4 тура! ТА
ЕК Ж шк ША: ШЕ: Х ХО ї З жу ї Шш х ї щож Її З в ЕЕ Я й КУ ї ПЖОЕ ї 3 ї пиКИМОХ ї п х ї ї З 3 ї й КУ Ж сднюююююю ї Е Х дюкккєюююююких ї Шй Худ : о балії ї ШЕ: фе Ян оте о.
ЕЕ: Б оцю пк ОІВ хост оо ШЕ: ох ОО ее ї І ЕІ З Пт КВ 5: ї Ш З Що си ї ТК ї КЕ ЗО МЕ Ко ї ш гм сі дн ОО я ОЇ Сі і шо о. ее ЖЕК ПК те ї Кл НКУ ПЕЖО ик Ку ї Щц ЕФ Оу В.
ОК ШЕУ Ж З р - ЕК ї й іч ПЕК о - ї р ЕКЗ і я АБО Її ЩЕ ї Бон НЕ ж Її й х ї Щ ОО ї З 3 ЕК НЯ ОВ х п НН 4 ші ОВ ос ЗНМ о. е нин ши.
ОО х ї Що КО Я ї З З КО ї КЕ ї Хр юр ау МО фоложнююнккукнккдк кн ї ЗежеюкеВ х У КО кое декуювннн ї х г ко кет т пре З рхя що Кон с Се є г х й маю хи их ВВ кі же І Ше екв клин мк ММК ж ш х т Енн З ТМ А АКА Ш ї ДУ ї ф : В Х шк ї З щ ї Ш х їж" З ї З оо Бу : г х х КЕ Я З ї ОВ ї КЕ Х Б нн ї З 5 ле ї її с «ди ру т т їх МЕ т т т їх ре я ї ї ор ї Е я ї В й; Х Хо т. ї ї т Е «ПЕН ї ЩШ С: ШЕ ши ши ши шн ни и ШИШИШИ ї- ї ШИК Дототя ї ї ї ща Хе ХІН, ОО ї ї Шш ши Шен ї 1-й . З і ї її У НН ОП по ї ї ї Ох ТАК КК : ї Ш ЕІ ІЩЕ З оо Шен : ї с ЕК що Он ї г Вея КУ ПММ и ї щої 3 ОК ПЕН ї п ЖЕ ЕОМ их ї З У МАЕ Ки ї Шо НН ОВ : ше 00000. ОВ Х шої ЕХО ї З х 3 А ОХ КОНЯ ї ш Ок ОБО ож Р Ощх шо В У ї ша ООН шк ї Б о ШЕ: Х 0 ки Се ї З шо о х КЕ . Її її ЕЗ шк КИ у Е ов АК их ї р ОО вия ше 0000000 ОВ ї Зуєв М С ов м В я п С ПН М: х мо В а З М т жк вка й ї я ву Б ек я я МВ . х КИ оВет ПОКИ й З КК тк ди її Х ДЕК М ІЗ ДУХУКК КК КК КК т х - ях ІК -3 не ше х Її ще ї З КУ поодпююк ти я ї Ш х х Ки нан Її З іу ПОД КТИМКТЮ у дили, Її й х Ж я осн ШИЯ : 3 Дон ЗИ : гу о їх. бл ш ПОСУД ї -2 пу и ПЕ Ед я ШОПИОЖКИХ ї Щ сеї т Жде : ен я Ї її яке ОХ ев и т у щодо 5 ї р рок УК ї фок 0 ЗОМ ї й Б о о ШИ Ж КОКОС оо ОВ найм ОО шоу ї ї М х ЗОЗ» ї Шо в - МЕНЕ І знане ї ї З Я ЕК Он Її її сотки «МК й ї ї- их В Ж ї ї ОТ КУ ПОКИ ї Я ЗУ ї Шо а МОМ ШЕ ШЕ: Ки ФК ПИ ОІИИИИТК ї що ДЕННИМ ТИМИ ї Ш СУ ФЛ ї ЕЙ КН Ти" ї ш ї ак шщЕ о.
ОО Жов ях ї З ще ХаВу ї й НЕ - ї ФО 0 ЗО ї й З ши ОО КУ пло ї З Я ШЕННЯ вве ї Шй Х те Х ї З т а ПОЛК КИТ» Я Її її Х СИ ї 3 ї їй ї "Кдкожф у ук тя ех ех рек уте З ; Хижак же у думки І ороржею те й х шко сщк жо? : бе я: З шо ЖЕ ЕЕ? С о Її ї їх й х сн ниж ШЕ І. п еКЖ Ей КЕ Ш ДН ЗМК ММ їжу ШЕ ШЕ її жом Ж ї В жж я ї ш х НУ ї Е Ку ї Ш х шо 5 ШИ: х : з: З ше ОСТ ї ї ВЕН ї Щц Х джек В Я ї ї ідкжежекекекі щи Її й ї І Я ї ї 3 : ї ї ш їе З ї ; у Іо ї пой ї ї р Я их ВЕ ше с ши сш: ше СС. ши шк ОО БУ ї ї ОВ СХ ї ї ри х ща НН ПЕИКИикикикииииий ї 5 Ох х тини ї КЕ Х й КОКО ООН ї З а ВОК З ї ш Хода А ОО Я ї Ж дшеуй ДАНЕ хо Її її Пн о ж ШЕ ЗВ ОВ Х БУ АН К ПЕКИ ї З Є МИТ ї Шш Х ХЕ ї З й ОО ї й х ЕВ Її З ж в.
ВОК ї й ї у НИ ї З ЗМК : їй х ен и в БЕ З ОК КК Кк ск Кен й х ОСИ ше ш СЕ І. ш ЖЕ Я Се ш х «ЖЕК МУК Жнис ПЕЖО Ж з З ЖЖ МЖК: пмщт КИМ ех х я - День 0 День 7 Фігура ПІВ
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US201161506447P | 2011-07-11 | 2011-07-11 | |
| PCT/US2012/046222 WO2013009849A1 (en) | 2011-07-11 | 2012-07-11 | Parenteral norovirus vaccine formulations |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| UA117732C2 true UA117732C2 (uk) | 2018-09-25 |
Family
ID=47506489
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| UAA201401321A UA117732C2 (uk) | 2011-07-11 | 2012-11-07 | Парентеральна норовірусна вакцина |
Country Status (29)
| Country | Link |
|---|---|
| US (5) | US9801934B2 (uk) |
| EP (3) | EP3299030B1 (uk) |
| JP (2) | JP6208659B2 (uk) |
| KR (1) | KR102096937B1 (uk) |
| CN (3) | CN103874507A (uk) |
| AU (2) | AU2012282658B2 (uk) |
| BR (1) | BR112014000656A2 (uk) |
| CA (1) | CA2841356C (uk) |
| CL (1) | CL2014000082A1 (uk) |
| CR (2) | CR20190540A (uk) |
| DK (1) | DK3299030T3 (uk) |
| DO (2) | DOP2014000004A (uk) |
| EA (3) | EA035442B1 (uk) |
| EC (1) | ECSP14013201A (uk) |
| ES (2) | ES2926487T3 (uk) |
| GE (1) | GEP201706668B (uk) |
| HK (3) | HK1198136A1 (uk) |
| IL (1) | IL230356B (uk) |
| MA (1) | MA35414B1 (uk) |
| MX (1) | MX356586B (uk) |
| MY (1) | MY170746A (uk) |
| PE (1) | PE20140845A1 (uk) |
| PH (1) | PH12018501515B1 (uk) |
| PL (2) | PL3299030T3 (uk) |
| SG (1) | SG10201605644WA (uk) |
| TN (1) | TN2014000008A1 (uk) |
| UA (1) | UA117732C2 (uk) |
| WO (1) | WO2013009849A1 (uk) |
| ZA (2) | ZA201401012B (uk) |
Families Citing this family (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DK2066354T3 (da) | 2006-09-29 | 2013-05-27 | Ligocyte Pharmaceuticals Inc | Norovirus vaccine formuleringer |
| JP2010539192A (ja) | 2007-09-18 | 2010-12-16 | リゴサイト ファーマスーティカルズ，インコーポレイテッド | ノロウイルスに対して防御免疫応答を付与する方法 |
| US20100266636A1 (en) | 2007-09-18 | 2010-10-21 | Ligocyte Pharmaceuticals, Inc. | Method of conferring a protective immune response to norovirus |
| JP6208659B2 (ja) | 2011-07-11 | 2017-10-04 | タケダ ワクチン，インコーポレイテッド | 非経口ノロウイルスワクチン製剤 |
| EP3052631B1 (en) | 2013-10-03 | 2019-08-07 | Takeda Vaccines, Inc. | Methods of detection and removal of rhabdoviruses from cell lines |
| US20160310412A1 (en) | 2013-12-16 | 2016-10-27 | Takeda Pharmaceutical Company Limited | Microneedle |
| CN107184970A (zh) * | 2017-02-16 | 2017-09-22 | 北京生物制品研究所有限责任公司 | 口服诺如病毒亚单位疫苗及lt作为该疫苗佐剂的用途 |
| GB201703644D0 (en) | 2017-03-07 | 2017-04-19 | Elopak As | Improvements in or relating to toller mounting arrangements |
| WO2018210804A1 (en) * | 2017-05-15 | 2018-11-22 | Janssen Vaccines & Prevention B.V. | Stable virus-containing composition |
| JP2021514391A (ja) * | 2018-02-15 | 2021-06-10 | アイコン ジェネティクス ゲーエムベーハー | ノロウイルスに対する免疫応答を生成するための免疫原性組成物及びワクチン |
| US20210121511A1 (en) * | 2018-05-29 | 2021-04-29 | Unm Rainforest Innovations | Virus-like particle compositions and methods of using same |
| CN109265542B (zh) * | 2018-09-27 | 2021-06-15 | 国药中生生物技术研究院有限公司 | 特异性结合诺如病毒gii.4基因型vp1蛋白或vlp的抗体及其制备方法和应用 |
| AR117462A1 (es) * | 2018-12-20 | 2021-08-04 | Takeda Vaccines Inc | Vacuna contra norovirus, formulaciones y métodos |
| WO2021140524A1 (en) | 2020-01-08 | 2021-07-15 | Bharat Biotech International Limited | Viral vaccine compositions and methods of preparations thereof |
| JPWO2022210742A1 (uk) | 2021-03-29 | 2022-10-06 | ||
| EP4340874A1 (en) | 2021-05-21 | 2024-03-27 | Takeda Vaccines, Inc. | Solid composition, freeze-drying method and glass vial |
Family Cites Families (71)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6572862B1 (en) | 1989-11-08 | 2003-06-03 | Baylor College Of Medicine | Methods and reagents to detect and characterize Norwalk and related viruses |
| AU1893592A (en) | 1991-03-25 | 1992-10-21 | Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Norwalk virus human gastroenteritis agent and molecular cloning of corresponding cdnas |
| JPH07509122A (ja) | 1992-04-08 | 1995-10-12 | ザ ガバメント オブ ザ ユナイテッド ステイツ オブ アメリカ，アズ レプリゼンテッド バイ ザ セクレター，デパートメント オブ ヘルス アンド ヒューマン サービシーズ | 野生型麻疹ウイルス糖タンパク質：ワクチンおよびその検出方法 |
| AU4851493A (en) | 1992-09-07 | 1994-03-29 | Baylor College Of Medicine | Methods and reagents to detect and characterize norwalk and related viruses |
| EP0812593B8 (en) | 1993-03-23 | 2010-11-10 | SmithKline Beecham Biologicals S.A. | Vaccine compositions containing 3-0 deacylated monophosphoryl lipid a |
| US5788970A (en) | 1994-03-29 | 1998-08-04 | The University Of Maryland College Park | Chimeric infectious bursal disease virus CDNA clones, expression products and vaccines based thereon |
| PL183781B1 (pl) | 1994-05-16 | 2002-07-31 | Merck & Co Inc | Sposób wytwarzania szczepionki przeciwko ludzkiemu wirusowi brodawczaków |
| US5645051A (en) | 1995-04-21 | 1997-07-08 | Dura Pharmaceuticals, Inc. | Unit dose dry powder inhaler |
| US5861241A (en) | 1995-08-16 | 1999-01-19 | University Of Massachusetts | Monoclonal antibodies for detecting Norwalk virus |
| GB9525083D0 (en) | 1995-12-07 | 1996-02-07 | Danbiosyst Uk | Vaccine compositions |
| US5834015A (en) * | 1996-09-11 | 1998-11-10 | Albany Medical College | Protein-lipid vesicles and autogenous vaccine comprising the same |
| US5953727A (en) | 1996-10-10 | 1999-09-14 | Incyte Pharmaceuticals, Inc. | Project-based full-length biomolecular sequence database |
| US6491919B2 (en) | 1997-04-01 | 2002-12-10 | Corixa Corporation | Aqueous immunologic adjuvant compostions of monophosphoryl lipid A |
| KR20010006169A (ko) | 1997-04-08 | 2001-01-26 | 폴락 돈나 엘. | 안정화된 사람 파필로마바이러스 제형물 |
| EP0980257A1 (en) | 1997-05-01 | 2000-02-23 | Chiron Corporation | Use of virus-like particles as adjuvants |
| US20040265377A1 (en) | 1997-10-27 | 2004-12-30 | Harry Seager | Solid dispersing vaccine composition for oral delivery |
| ES2262333T3 (es) | 1998-08-14 | 2006-11-16 | MERCK & CO., INC. | Procedimiento para purificar particulas similares a virus de papilomavirus humano. |
| CA2354444A1 (en) | 1998-12-17 | 2000-06-22 | Merck & Co., Inc. | Synthetic virus-like particles with heterologous epitopes |
| DK1150712T3 (da) * | 1999-02-05 | 2009-02-02 | Merck & Co Inc | Vaccineformuleringer mod human papillomavirus |
| KR100762092B1 (ko) | 1999-06-22 | 2007-10-04 | 국립감염증연구소장이 대표하는 일본국 | Ｓｒｓｖ 검출 킷트 |
| JP2002020399A (ja) | 2000-07-10 | 2002-01-23 | Osaka Prefecture | ノルウォークウイルス（ｎｖ）を認識するモノクローナル抗体 |
| GB0118249D0 (en) | 2001-07-26 | 2001-09-19 | Chiron Spa | Histidine vaccines |
| AU2003219760A1 (en) | 2002-02-14 | 2003-09-04 | Novavax, Inc. | Optimization of gene sequences of virus-like particles for expression in insect cells |
| GB0206359D0 (en) | 2002-03-18 | 2002-05-01 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Viral antigens |
| GB0206360D0 (en) | 2002-03-18 | 2002-05-01 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Viral antigens |
| EP1494651A4 (en) | 2002-04-11 | 2010-10-13 | Medimmune Vaccines Inc | PRESERVATION OF BIO-ACTIVE MATERIALS WITH LYOPHILIZED FOAM |
| GB0302218D0 (en) | 2003-01-30 | 2003-03-05 | Chiron Sri | Vaccine formulation & Mucosal delivery |
| ATE521367T1 (de) | 2002-06-07 | 2011-09-15 | Kentucky Bioproc Llc | Flexlibler aufbau- und darreichungs-plattform von impfstoffen |
| US20040005338A1 (en) | 2002-06-20 | 2004-01-08 | Cytos Biotechnology Ag | Packaged virus-like particles for use as adjuvants: method of preparation and use |
| EP1594536B1 (en) | 2003-01-30 | 2009-03-25 | Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. | Adjuvanted influenza vaccine |
| US20040213745A1 (en) | 2003-02-20 | 2004-10-28 | Vincent Sullivan | Powder formulations of rSEB for improved vaccination |
| US8592197B2 (en) | 2003-07-11 | 2013-11-26 | Novavax, Inc. | Functional influenza virus-like particles (VLPs) |
| WO2005032457A2 (en) | 2003-07-21 | 2005-04-14 | Boyce Thompson Institute For Plant Research, Inc. | Vectors and methods for immunization against norwalk virus using transgenic plants |
| US20050152911A1 (en) | 2003-09-24 | 2005-07-14 | Montana State University | Norovirus monoclonal antibodies and peptides |
| US7795242B2 (en) | 2003-10-15 | 2010-09-14 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Methods and compositions for immunomodulation |
| US20050215501A1 (en) | 2003-10-24 | 2005-09-29 | Coley Pharmaceutical Group, Inc. | Methods and products for enhancing epitope spreading |
| FR2863890B1 (fr) | 2003-12-19 | 2006-03-24 | Aventis Pasteur | Composition immunostimulante |
| US7481997B1 (en) | 2004-02-12 | 2009-01-27 | Montana State University | Snow mountain virus genome sequence, virus-like particles and methods of use |
| US20050260225A1 (en) | 2004-05-18 | 2005-11-24 | Goldberg Joanna B | Intranasal recombinant Salmonella vaccine encoding heterologous polysaccharide antigens |
| CU23496A1 (es) | 2004-09-03 | 2010-02-23 | Ct Ingenieria Genetica Biotech | Composición vacunal contra el virus de la hepatitis c |
| AU2005295438B2 (en) | 2004-10-20 | 2012-07-05 | Sanofi Pasteur Biologics, Llc | Vaccines against Japanese encephalitis virus and West Nile virus |
| GB0428394D0 (en) | 2004-12-24 | 2005-02-02 | Chiron Srl | Saccharide conjugate vaccines |
| US20060177468A1 (en) | 2005-01-05 | 2006-08-10 | Philadelphia Health and Education Corporation (d/b/a Drexel University College of Medicine | Delivery vehicles, bioactive substances and viral vaccines |
| WO2006086188A2 (en) | 2005-01-31 | 2006-08-17 | The Johns Hopkins University | Use of consensus sequence as vaccine antigen to enhance recognition of virulent viral variants |
| NZ580974A (en) | 2005-02-18 | 2011-05-27 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Immunogens from uropathogenic escherichia coli |
| US7767212B2 (en) | 2005-03-18 | 2010-08-03 | Cytos Biotechnology Ag | CAT allergen conjugates and uses thereof |
| WO2007053188A2 (en) | 2005-06-01 | 2007-05-10 | Dow Global Technologies, Inc. | Production of multivalent virus like particles |
| EP1736538A1 (en) | 2005-06-21 | 2006-12-27 | Cytos Biotechnology AG | Process for the preparative purification of virus-like-particles (VLPs) |
| AU2006335256B2 (en) | 2005-11-22 | 2012-10-18 | Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. | Norovirus and sapovirus antigens |
| JP2007145775A (ja) | 2005-11-29 | 2007-06-14 | Falco Life Science:Kk | ノロウイルスｇｉの高感度検出方法 |
| US20080029915A1 (en) * | 2006-08-02 | 2008-02-07 | Courtoy Nv | Rotary tablet press |
| DK2066354T3 (da) * | 2006-09-29 | 2013-05-27 | Ligocyte Pharmaceuticals Inc | Norovirus vaccine formuleringer |
| NZ577405A (en) | 2006-12-06 | 2012-08-31 | Novartis Ag | Vaccines including antigen from four strains of influenza virus |
| SG179488A1 (en) * | 2007-03-14 | 2012-04-27 | Ligocyte Pharmaceuticals Inc | Virus like particle purification |
| WO2009033229A1 (en) | 2007-09-12 | 2009-03-19 | Australian Centre For Plant Functional Genomics Pty Ltd | Plant seed active transcriptional control sequences |
| JP2010539192A (ja) * | 2007-09-18 | 2010-12-16 | リゴサイト ファーマスーティカルズ，インコーポレイテッド | ノロウイルスに対して防御免疫応答を付与する方法 |
| US20100266636A1 (en) * | 2007-09-18 | 2010-10-21 | Ligocyte Pharmaceuticals, Inc. | Method of conferring a protective immune response to norovirus |
| CN104911154A (zh) | 2008-08-08 | 2015-09-16 | 武田疫苗股份有限公司 | 交叉反应性增强的包含复合衣壳氨基酸序列的病毒样颗粒 |
| AU2009338516A1 (en) * | 2009-01-22 | 2011-08-18 | Pharmathene, Inc. | Stable vaccine compositions and methods of use |
| EP2942062A1 (en) * | 2009-02-10 | 2015-11-11 | Novartis AG | Influenza vaccine regimens for pandemic-associated strains |
| US20110070260A1 (en) | 2009-09-09 | 2011-03-24 | Baric Ralph S | Multivalent Immunogenic Compositions Against Noroviruses and Methods of Use |
| WO2011091279A2 (en) * | 2010-01-21 | 2011-07-28 | Ligocyte Pharmaceuticals, Inc. | Targeted heterologous antigen presentation on calicivirus virus-like particles |
| US20110293700A1 (en) * | 2010-05-26 | 2011-12-01 | Selecta Biosciences, Inc. | Nanocarrier compositions with uncoupled adjuvant |
| JP6208659B2 (ja) | 2011-07-11 | 2017-10-04 | タケダ ワクチン，インコーポレイテッド | 非経口ノロウイルスワクチン製剤 |
| JOP20130186B1 (ar) | 2012-06-22 | 2021-08-17 | Takeda Vaccines Montana Inc | تنقية الجزيئات الشبيهة بالفيروسات |
| EP4253412A3 (en) | 2015-12-16 | 2023-11-22 | The Walter and Eliza Hall Institute of Medical Research | Inhibition of cytokine-induced sh2 protein in nk cells |
| EP4338799A3 (en) | 2016-10-18 | 2024-06-05 | Regents of the University of Minnesota | Tumor infiltrating lymphocytes and methods of therapy |
| SG11202010763VA (en) | 2018-05-03 | 2020-11-27 | Univ Texas | Natural killer cells engineered to express chimeric antigen receptors with immune checkpoint blockade |
| US20210308249A1 (en) | 2018-08-20 | 2021-10-07 | Takeda Vaccines, Inc. | Vlp formulations |
| AR117462A1 (es) | 2018-12-20 | 2021-08-04 | Takeda Vaccines Inc | Vacuna contra norovirus, formulaciones y métodos |
| KR20210129105A (ko) | 2019-02-15 | 2021-10-27 | 에디타스 메디신, 인코포레이티드 | 면역치료법을 위한 변형된 자연 살해(nk) 세포 |
-
2012
- 2012-07-11 JP JP2014520273A patent/JP6208659B2/ja active Active
- 2012-07-11 CR CR20190540A patent/CR20190540A/es unknown
- 2012-07-11 EP EP17199372.8A patent/EP3299030B1/en active Active
- 2012-07-11 PE PE2014000054A patent/PE20140845A1/es active IP Right Grant
- 2012-07-11 DK DK17199372.8T patent/DK3299030T3/da active
- 2012-07-11 EP EP12811916.1A patent/EP2731621B1/en active Active
- 2012-07-11 AU AU2012282658A patent/AU2012282658B2/en active Active
- 2012-07-11 CN CN201280043691.2A patent/CN103874507A/zh active Pending
- 2012-07-11 CN CN201810373895.1A patent/CN108567975A/zh active Pending
- 2012-07-11 PL PL17199372.8T patent/PL3299030T3/pl unknown
- 2012-07-11 MY MYPI2014000073A patent/MY170746A/en unknown
- 2012-07-11 BR BR112014000656A patent/BR112014000656A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2012-07-11 SG SG10201605644WA patent/SG10201605644WA/en unknown
- 2012-07-11 EA EA201792407A patent/EA035442B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2012-07-11 ES ES17199372T patent/ES2926487T3/es active Active
- 2012-07-11 EA EA201490258A patent/EA029470B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2012-07-11 EA EA202090699A patent/EA202090699A3/ru unknown
- 2012-07-11 WO PCT/US2012/046222 patent/WO2013009849A1/en active Application Filing
- 2012-07-11 EP EP22176978.9A patent/EP4112074A1/en active Pending
- 2012-07-11 GE GEAP201213384A patent/GEP201706668B/en unknown
- 2012-07-11 KR KR1020147003571A patent/KR102096937B1/ko active IP Right Grant
- 2012-07-11 CN CN201510262891.2A patent/CN105031637A/zh active Pending
- 2012-07-11 PL PL12811916T patent/PL2731621T3/pl unknown
- 2012-07-11 MX MX2014000411A patent/MX356586B/es active IP Right Grant
- 2012-07-11 CA CA2841356A patent/CA2841356C/en active Active
- 2012-07-11 ES ES12811916.1T patent/ES2656527T3/es active Active
- 2012-11-07 UA UAA201401321A patent/UA117732C2/uk unknown
-
2013
- 2013-03-15 US US13/840,403 patent/US9801934B2/en active Active
-
2014
- 2014-01-07 IL IL230356A patent/IL230356B/en active IP Right Grant
- 2014-01-07 TN TNP2014000008A patent/TN2014000008A1/en unknown
- 2014-01-10 CL CL2014000082A patent/CL2014000082A1/es unknown
- 2014-01-10 DO DO2014000004A patent/DOP2014000004A/es unknown
- 2014-02-06 MA MA36741A patent/MA35414B1/fr unknown
- 2014-02-10 ZA ZA2014/01012A patent/ZA201401012B/en unknown
- 2014-02-11 EC ECSP14013201 patent/ECSP14013201A/es unknown
- 2014-02-11 CR CR20140069A patent/CR20140069A/es unknown
- 2014-11-21 HK HK14111772.5A patent/HK1198136A1/xx unknown
- 2014-12-18 HK HK16102061.2A patent/HK1215154A1/zh unknown
- 2014-12-18 HK HK14112697.5A patent/HK1199202A1/xx unknown
-
2015
- 2015-02-09 ZA ZA2015/00915A patent/ZA201500915B/en unknown
- 2015-02-19 AU AU2015200836A patent/AU2015200836B2/en active Active
- 2015-07-10 US US14/796,614 patent/US9867876B2/en active Active
-
2017
- 2017-05-02 JP JP2017091755A patent/JP6613259B2/ja active Active
- 2017-12-08 US US15/836,030 patent/US10675341B2/en active Active
-
2018
- 2018-07-06 PH PH12018501515A patent/PH12018501515B1/en unknown
-
2020
- 2020-06-05 US US16/894,291 patent/US11701420B2/en active Active
-
2022
- 2022-02-04 DO DO2022000030A patent/DOP2022000030A/es unknown
-
2023
- 2023-05-24 US US18/322,679 patent/US20230338503A1/en active Pending
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| UA117732C2 (uk) | Парентеральна норовірусна вакцина | |
| TWI620574B (zh) | 口蹄疫合成胜肽緊急疫苗 | |
| TWI421091B (zh) | 包含以聚肌苷酸-聚胞苷酸為主之佐劑的黏膜免疫物質 | |
| JP2010500399A (ja) | 尿路病原性大腸菌由来の免疫原 | |
| BR112020008652A2 (pt) | vacinas e composições imunogênicas contra zika e métodos de uso das mesmas | |
| CN113666990A (zh) | 一种诱导广谱抗冠状病毒的t细胞疫苗免疫原及其应用 | |
| UA118551C2 (uk) | Парвовірус свиней 5b, спосіб застосування та вакцина | |
| JP5265545B2 (ja) | 免疫応答を誘発または誘導する方法 | |
| Aravind et al. | Protective effects of recombinant glycoprotein D based prime boost approach against duck enteritis virus in mice model | |
| Karuturi et al. | Preliminary evidence that the novel host-derived immunostimulant EP67 can act as a mucosal adjuvant | |
| Smith et al. | Group B meningococcal outer membrane protein vaccine promote potent anti-viral effect | |
| KR20230059897A (ko) | SARS-CoV-2의 스파이크 단백질 전부 또는 일부를 포함하는 바이러스 유사입자 및 이를 이용한 백신 | |
| KR20230153047A (ko) | 톡소포자충의 항원 rop4를 포함하는 재조합 백시니아 바이러스 백신 | |
| WO2023039108A1 (en) | Coronavirus vaccine | |
| AU2020260415A1 (en) | Vaccine against Bovine Viral Diarrhea Virus | |
| NZ750583B2 (en) | Vaccine against bovine viral diarrhea virus | |
| Karuturi | Development of EP67-based mucosal vaccines against cytomegalovirus infection | |
| WO2006138248A2 (en) | Vaccines for protection from bartonella infection and related methods | |
| EA042694B1 (ru) | Композиции, содержащие буфер, вакцины, которые содержат композиции, содержащие буфер, и пути их применения |