TWI761413B - 通過血腦障壁之新穎抗人類運鐵蛋白受體抗體 - Google Patents

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TWI761413B
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薗田啟之
高橋健一
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日商Ｊｃｒ製藥股份有限公司
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Abstract

本發明係提供一種抗人類運鐵蛋白受體抗體及其類似物，該抗體係於重鏈之可變區中，(a)CDR1為包含序列編號62或序列編號63之胺基酸序列而成，(b)CDR2為包含序列編號13或序列編號14之胺基酸序列而成，且(c)CDR3為包含序列編號15或序列編號16之胺基酸序列而成者。

Description

通過血腦障壁之新穎抗人類運鐵蛋白受體抗體
本發明係關於一種為了使投予至血中而應於中樞神經系統(CNS)中發揮功能之化合物(蛋白質、低分子化合物等)能夠通過血腦障壁，與該等化合物結合而使用之抗人類運鐵蛋白受體抗體，其製造法及其使用法。
除包含腦室周圍器官(松果體、腦下垂體、最後區等)在內之若干區域以外，向腦之大部分組織供給血液之微血管係與存在於肌肉等其他組織中之微血管不同，形成其內皮之內皮細胞彼此藉由牢固之細胞間接合而相密接。因此，妨礙物質自血液向腦之被動傳輸，儘管有例外，但除脂溶性較高之物質、或分子量較小(200～500道耳頓以下)且於生理pH值附近為電中性(electrical neutrality)之物質以外，均不易自微血管向腦轉移。此種對經由腦內之微血管內皮所進行之血液與腦組織液間之物質交換加以限制的機構係稱為血腦障壁(Blood-Brain Barrier，BBB)。又，血腦障壁不僅限制腦，亦限制包括腦及脊髓在內之中樞神經系統之組織液與血液間之物質交換。 由於存在血腦障壁，故而中樞神經系統之大部分細胞不會受到血中之激素、淋巴激活素等物質之濃度變化所影響，而保持其生物化學上之恆常性。 然而，血腦障壁之存在於藥劑開發方面引起問題。例如，對於因α-L-艾杜糖醛酸酶缺損引起之遺傳性代謝疾病即I型黏多糖症(Hurler症候群)，採用將重組α-L-艾杜糖醛酸酶進行靜脈內補充之酶補充療法作為其治療法，但對於在Hurler症候群中出現之明顯之中樞神經系統(CNS)之異常，由於酶無法通過血腦障壁故而無效。 開發出各種用以使應於中樞神經系統中發揮作用之此種蛋白質等高分子物質通過血腦障壁之方法。例如，於神經生長因子之情形時，嘗試了如下方法：使內包其之脂質體與腦內微血管之內皮細胞之細胞膜融合，藉此使之通過血腦障壁，但尚未達到實用化程度(非專利文獻1)。於α-L-艾杜糖醛酸酶之情形時，進行了如下嘗試，即增加每次投予之酶之量以提高其血中濃度，藉此提高血腦障壁中之酶之被動傳輸，且使用Hurler症候群之動物模型，而顯示出藉由該方法會緩解中樞神經系統(CNS)之異常(非專利文獻2)。 又，亦進行了如下嘗試，即避開血腦障壁，將高分子物質直接投予至脊椎內或腦內。例如報告有：將人類α-L-艾杜糖醛酸酶投予至Hurler症候群(I型黏多糖症)患者之脊椎內之方法(專利文獻1)；將人酸性神經磷脂酶投予至尼-皮二氏病患者之腦室內之方法(專利文獻2)；將艾杜糖醛酸2-硫酸酯酶(I2S)投予至Hunter症候群之模型動物之腦室內之方法(專利文獻3)。根據此類方法，認為可使藥劑確實地作用於中樞神經系統，但另一方面存在侵入性極高之問題。 作為使高分子物質通過血腦障壁而到達至腦內之方法，報告有各種以具有與存在於腦內微血管之內皮細胞上之膜蛋白質之親和性的方式對高分子物質進行修飾之方法。作為存在於腦內微血管之內皮細胞上之膜蛋白質，可列舉：針對胰島素、運鐵蛋白、類胰島素生長因子(IGF-I、IGF-II)、LDL(low density lipoproteins，低密度脂蛋白)、瘦體素等化合物之受體。 例如報告有如下技術：將神經生長因子(NGF)以與胰島素之融合蛋白質之形式合成，經由與胰島素受體之結合而使該融合蛋白質通過血腦障壁(專利文獻4～6)。又，報告有如下技術：將神經生長因子(NGF)以與抗胰島素受體抗體之融合蛋白質之形式合成，經由與胰島素受體之結合而使該融合蛋白質通過血腦障壁(專利文獻4及7)。又，報告有如下技術：將神經生長因子(NGF)以與運鐵蛋白之融合蛋白質之形態合成，經由與運鐵蛋白受體(TfR)之結合而使該融合蛋白質通過血腦障壁(專利文獻8)。又，報告有如下技術：將神經生長因子(NGF)以與抗運鐵蛋白受體抗體(抗TfR抗體)之融合蛋白質之形態合成，經由與TfR之結合而使該融合蛋白質通過血腦障壁(專利文獻4及9)。 進而就使用抗TfR抗體之技術而言，報告有於藉由與抗TfR抗體結合而使藥劑通過血腦障壁之技術中，可使用單鏈抗體(非專利文獻3)。又，報告有與hTfR之解離常數相對較大之抗hTfR抗體(低親和性抗hTfR抗體)於製成藥劑而使之通過血腦障壁之技術中可適宜地應用(專利文獻10及11、非專利文獻4)。進而，報告有與hTfR之親和性pH值依存性地發生變化之抗TfR抗體由於使藥劑通過血腦障壁，故而可用作載體(專利文獻12、非專利文獻5)。 [先前技術文獻] [專利文獻] [專利文獻1]日本專利特表2007-504166號公報 [專利文獻2]日本專利特表2009-525963號公報 [專利文獻3]日本專利特開2012-62312號公報 [專利文獻4]美國專利5154924號公報 [專利文獻5]日本專利特開2011-144178號公報 [專利文獻6]美國專利2004/0101904號公報 [專利文獻7]日本專利特表2006-511516號公報 [專利文獻8]日本專利特開H06-228199號公報 [專利文獻9]美國專利5977307號公報 [專利文獻10]WO2012/075037 [專利文獻11]WO2013/177062 [專利文獻12]WO2012/143379 [非專利文獻] [非專利文獻1]Xie Y. et al., J Control Release. 105. 106-19 (2005) [非專利文獻2]Ou L. et al., Mol Genet Metab. 111. 116-22 (2014) [非專利文獻3]Li JY. Protein Engineering. 12. 787-96 (1999) [非專利文獻4]Bien-Ly N. et al., J Exp Med. 211. 233-44 (2014) [非專利文獻5]Sada H. PLoS ONE. 9. E96340 (2014)
[發明所欲解決之問題] 於上述背景下，本發明之目的在於提供一種為了使投予至血中而應於中樞神經系統(CNS)中發揮功能之化合物(蛋白質、低分子化合物等)能夠通過血腦障壁，可與該等化合物結合而使用之抗TfR抗體、其製造法及其使用法。 [解決問題之技術手段] 於面向上述目的之研究中，本發明者等人反覆進行努力研究，結果發現，將藉由本說明書中詳述之抗體製作方法所獲得之識別hTfR之細胞外區域的抗人類運鐵蛋白受體抗體(抗hTfR抗體)投予至生物體內時會高效率地通過血腦障壁，從而完成本發明。即，本發明提供以下者。 1.一種抗體，其係抗人類運鐵蛋白受體抗體，且係於重鏈之可變區中， (a)CDR1為包含序列編號62或序列編號63之胺基酸序列而成， (b)CDR2為包含序列編號13或序列編號14之胺基酸序列而成，且 (c)CDR3為包含序列編號15或序列編號16之胺基酸序列而成者。 2.如上述1之抗體，其中重鏈之架構區3為包含序列編號64之胺基酸序列而成者。 3.如上述1或2之抗體，其係於該重鏈之可變區中， CDR2為代替序列編號13或序列編號14之胺基酸序列而包含相對於其具有80%以上之同源性的胺基酸序列而成，且 CDR3為代替序列編號15或序列編號16之胺基酸序列而包含相對於其具有80%以上之同源性的胺基酸序列而成。 4.如上述1或2之抗體，其係於該重鏈之可變區中， CDR2為代替序列編號13或序列編號14之胺基酸序列而包含相對於其具有90%以上之同源性的胺基酸序列而成，且 CDR3為代替序列編號15或序列編號16之胺基酸序列而包含相對於其具有90%以上之同源性的胺基酸序列而成者。 5.如上述1或2之抗體，其係於該重鏈之可變區中，代替 (a)關於CDR1之序列編號62或序列編號63， (b)關於CDR2之序列編號13或序列編號14， (c)關於CDR3之序列編號15或序列編號16，及 (d)關於架構區3之序列編號64 中之至少1個胺基酸序列而包含相對於其有1～5個胺基酸經置換、缺失或附加之修飾之胺基酸序列而成者， 此處，關於CDR1，位於序列編號62或序列編號63之胺基酸序列之自N末端側起第5位的甲硫胺酸即便於經修飾後之胺基酸序列中亦處於相同位置，且 關於架構區3，位於序列編號64之自N末端側起第17位的白胺酸即便於經修飾後之胺基酸序列中亦處於相同位置。 6.如上述1或2之抗體，其係於該重鏈之可變區中，代替 (a)關於CDR1之序列編號62或序列編號63， (b)關於CDR2之序列編號13或序列編號14， (c)關於CDR3之序列編號15或序列編號16，及 (d)關於架構區3之序列編號64 中之至少1個胺基酸序列而包含相對於其有1～3個胺基酸經置換、缺失或附加之修飾之胺基酸序列而成者， 此處，關於CDR1，位於序列編號62或序列編號63之胺基酸序列之自N末端側起第5位的甲硫胺酸即便於經修飾後之胺基酸序列中亦處於相同位置，且 關於架構區3，位於序列編號64之自N末端側起第17位的白胺酸即便於經修飾後之胺基酸序列中亦處於相同位置。 7.如上述2之抗體，其中該重鏈之可變區為包含序列編號65之胺基酸序列而成者。 8.如上述7之抗體，其係於該重鏈之可變區中CDR1之序列編號62或序列編號63及架構區3之序列編號64之各胺基酸序列以外之部分，代替該部分而包含與該部分具有80%以上之同源性的胺基酸序列而成者。 9.如上述7之抗體，其係於該重鏈之可變區中CDR1之序列編號62或序列編號63及架構區3之序列編號64之各胺基酸序列以外之部分，代替該部分而包含與該部分具有90%以上之同源性的胺基酸序列而成者。 10.如上述7之抗體，其係代替構成該重鏈之可變區之胺基酸序列而包含相對於其有1～5個胺基酸經置換、缺失或附加之修飾之胺基酸序列而成者， 此處，關於CDR1，位於序列編號63之胺基酸序列之自N末端起第5位的甲硫胺酸即便於經修飾後之胺基酸序列中亦處於相同位置，且關於架構區3，位於序列編號64之自N末端側起第17位的白胺酸即便於經修飾後之胺基酸序列中亦處於相同位置。 11.如上述7之抗體，其係代替構成該重鏈之可變區之胺基酸序列而包含相對於其有1～3個胺基酸經置換、缺失或附加之修飾之胺基酸序列而成者， 此處，關於CDR1，位於序列編號63之胺基酸序列之自N末端起第5位的甲硫胺酸即便於經修飾後之胺基酸序列中亦處於相同位置，且關於架構區3，位於序列編號64之自N末端側起第17位的白胺酸即便於經修飾後之胺基酸序列中亦處於相同位置。 12.如上述7之抗體，其中該重鏈為包含序列編號66或序列編號68之胺基酸序列而成者。 13.如上述12之抗體，其係代替該重鏈中CDR1之序列編號62或序列編號63及架構區3之序列編號64之各胺基酸序列以外之部分，而包含相對於該部分具有80%以上之同源性的胺基酸序列而成者。 14.如上述12之抗體，其係代替該重鏈中CDR1之序列編號62或序列編號63及架構區3之序列編號64之各胺基酸序列以外之部分，而包含相對於該部分具有90%以上之同源性的胺基酸序列而成者。 15.如上述12之抗體，其係代替構成該重鏈之胺基酸序列而包含相對於其有1～5個胺基酸經置換、缺失或附加之修飾之胺基酸序列而成者， 此處，關於CDR1，位於序列編號63之胺基酸序列之自N末端起第5位的甲硫胺酸即便於經修飾後之胺基酸序列中亦處於相同位置，且關於架構區3，位於序列編號64之自N末端側起第17位的白胺酸即便於經修飾後之胺基酸序列中亦處於相同位置。 16.如上述12之抗體，其係代替構成該重鏈之胺基酸序列而包含相對於其有1～3個胺基酸經置換、缺失或附加之修飾之胺基酸序列而成者， 此處，關於CDR1，位於序列編號63之胺基酸序列之自N末端起第5位的甲硫胺酸即便於經修飾後之胺基酸序列中亦處於相同位置，且關於架構區3，位於序列編號64之自N末端側起第17位的白胺酸即便於經修飾後之胺基酸序列中亦處於相同位置。 17.如上述1至16中任一項之抗體，其係於該抗體之輕鏈之可變區中， (a)CDR1為包含序列編號6或序列編號7之胺基酸序列而成， (b)CDR2為包含序列編號8或序列編號9之胺基酸序列、或者胺基酸序列Lys-Val-Ser而成，且 (c)CDR3為包含序列編號10之胺基酸序列而成者。 18.如上述17之抗體，其係於該輕鏈之可變區中， (a)CDR1為代替序列編號6或序列編號7之胺基酸序列而包含相對於其具有80%以上之同源性的胺基酸序列而成， (b)CDR2為代替序列編號8或序列編號9之胺基酸序列、或者胺基酸序列Lys-Val-Ser而包含相對於其具有80%以上之同源性的胺基酸序列而成， 且 (c)CDR3為代替序列編號10之胺基酸序列而包含相對於其具有80%以上之同源性的胺基酸序列而成者。 19.如上述17之抗體，其係於該輕鏈之可變區中， (a)CDR1為代替序列編號6或序列編號7之胺基酸序列而包含相對於其具有90%以上之同源性的胺基酸序列而成， (b)CDR2為代替序列編號8或序列編號9之胺基酸序列、或者胺基酸序列Lys-Val-Ser而包含相對於其具有90%以上之同源性的胺基酸序列而成， 且 (c)CDR3為代替序列編號10之胺基酸序列而包含相對於其具有90%以上之同源性的胺基酸序列而成者。 20.如上述17之抗體，其係於該輕鏈之可變區中，代替 (a)關於CDR1之序列編號6或序列編號7， (b)關於CDR2之序列編號8或序列編號9、或者胺基酸序列Lys-Val-Ser，及 (c)關於CDR3之序列編號10， 中之至少1個胺基酸序列而包含相對於其有1～5個胺基酸經置換、缺失或附加之修飾之胺基酸序列而成者。 21.如上述17之抗體，其係於該輕鏈之可變區中，代替 (a)關於CDR1之序列編號6或序列編號7， (b)關於CDR2之序列編號8或序列編號9、或者胺基酸序列Lys-Val-Ser，及 (c)關於CDR3之序列編號10， 中之至少1個胺基酸序列而包含相對於其有1～3個胺基酸經置換、缺失或附加之修飾之胺基酸序列而成者。 22.如上述1至16中任一項之抗體，其中 該抗體之輕鏈之可變區為包含序列編號17、序列編號18、序列編號19、序列編號20、序列編號21或序列編號22之胺基酸序列而成者。 23.如上述22之抗體，其係代替該輕鏈之可變區之胺基酸序列而包含相對於其具有80%以上之同源性的胺基酸序列而成者。 24.如上述22之抗體，其係代替該輕鏈之可變區之胺基酸序列而包含相對於其具有90%以上之同源性的胺基酸序列而成者。 25.如上述22之抗體，其係代替該輕鏈之可變區之胺基酸序列而包含相對於其有1～5個胺基酸經置換、缺失或附加之修飾之胺基酸序列而成者。 26.如上述22之抗體，其係代替該輕鏈之可變區之胺基酸序列而包含相對於其有1～3個胺基酸經置換、缺失或附加之修飾之胺基酸序列而成者。 27.如上述1至16中任一項之抗體，其中該抗體之輕鏈為包含序列編號23、序列編號25、序列編號27或序列編號29之胺基酸序列而成者。 28.如上述27之抗體，其係代替該輕鏈之胺基酸序列而包含相對於其具有80%以上之同源性之胺基酸序列而成者。 29.如上述27之抗體，其係代替該輕鏈之胺基酸序列而包含相對於其具有90%以上之同源性之胺基酸序列而成者。 30.如上述27之抗體，其係代替該輕鏈之胺基酸序列而包含相對於其有1～5個胺基酸經置換、缺失或附加之修飾之胺基酸序列而成者。 31.如上述27之抗體，其係代替該輕鏈之胺基酸序列而包含相對於其有1～3個胺基酸經置換、缺失或附加之修飾之胺基酸序列而成者。 32.如上述1至31中任一項之抗體，其係對於人類運鐵蛋白受體之細胞外區域及猴運鐵蛋白受體之細胞外區域兩者具有親和性者。 33.如上述32之抗體，其係與人類運鐵蛋白受體之細胞外區域之解離常數為1×10-10 M以下者，且係與猴運鐵蛋白受體之細胞外區域之解離常數為1×10-9 M以下者。 34.如上述1至33中任一項之抗體，其係Fab抗體、F(ab')2 抗體、或F(ab')抗體。 35.如上述1至33中任一項之抗體，其係選自由scFab、scF(ab')、scF(ab')2 及scFv所組成之群中之單鏈抗體。 36.如上述35之抗體，其係經由連接子序列將該抗體之輕鏈與重鏈結合者。 37.如上述36之抗體，其係於該輕鏈之C末端側經由連接子序列而結合有該重鏈者。 38.如上述35之抗體，其係於該重鏈之C末端側經由連接子序列而結合有該輕鏈者。 39.如上述36至38中任一項之抗體，其中該連接子序列為包含8～50個胺基酸殘基者。 40.如上述39之抗體，其中該連接子序列為包含選自由胺基酸序列Gly-Ser、胺基酸序列Gly-Gly-Ser、胺基酸序列Gly-Gly-Gly、序列編號3、序列編號4、序列編號5之各胺基酸序列、將3個序列編號3之胺基酸序列接連而成之胺基酸序列、及將1～10個該等胺基酸序列接連而成之胺基酸序列中者。 41.一種融合蛋白質，其係抗人類運鐵蛋白受體抗體與其他蛋白質(A)之融合蛋白質，且 該抗人類運鐵蛋白受體抗體為如上述1至40中任一項之抗體， 該蛋白質(A)為結合至該抗體之輕鏈之C末端側或N末端側者。 42.如上述41之融合蛋白質，其中該蛋白質(A)為直接或經由連接子而結合至該輕鏈之C末端側或N末端側者。 43.如上述41或42之融合蛋白質，其中該蛋白質(A)為經由連接子而結合至該輕鏈之C末端側或N末端側者。 44.如上述43之融合蛋白質，其中該連接子為包含1～50個胺基酸殘基之肽。 45.如上述44之融合蛋白質，其中該連接子為包含選自由1個甘胺酸、1個絲胺酸、胺基酸序列Gly-Ser、胺基酸序列Gly-Gly-Ser、序列編號3之胺基酸序列、序列編號4之胺基酸序列、序列編號5之胺基酸序列、及將1～10個該等胺基酸序列接連而成之胺基酸序列所組成之群中之胺基酸序列而成之肽。 46.一種融合蛋白質，其係抗人類運鐵蛋白受體抗體與其他蛋白質(A)之融合蛋白質，且 該抗人類運鐵蛋白受體抗體為如上述1至40中任一項之抗體， 該蛋白質(A)為結合至該抗體之重鏈之C末端側或N末端側者。 47.如上述46之融合蛋白質，其中該蛋白質(A)為直接或經由連接子而結合至該重鏈之C末端側或N末端側者。 48.如上述46或47之融合蛋白質，其中該蛋白質(A)為經由連接子而結合至該重鏈之C末端側或N末端側者。 49.如上述48之融合蛋白質，其中該連接子序列為包含1～50個胺基酸殘基之肽。 50.如上述49之融合蛋白質，其中該連接子為包含選自由1個甘胺酸、1個絲胺酸、胺基酸序列Gly-Ser、胺基酸序列Gly-Gly-Ser、序列編號3之胺基酸序列、序列編號4之胺基酸序列、序列編號5之胺基酸序列、及將1～10個該等胺基酸序列接連而成之胺基酸序列所組成之群中之胺基酸序列而成之肽。 51.如上述41至50中任一項之融合蛋白質，其中該蛋白質(A)為源自人類之蛋白質。 52.如上述39至49中任一項之融合蛋白質，其係如上述41至51中任一項之融合蛋白質，其中該蛋白質(A)為選自由神經生長因子(NGF)、溶酶體酶、睫狀神經滋養因子(CNTF)、神經膠細胞株神經滋養因子(GDNF)、神經滋養素3、神經滋養素4/5、神經滋養素6、神經調節蛋白1、紅血球生成素、達貝泊汀(Darbepoetin)、活化素、鹼性纖維芽細胞生長因子(bFGF)、纖維芽細胞生長因子2(FGF2)、上皮細胞生長因子(EGF)、血管內皮生長因子(VEGF)、干擾素α、干擾素β、干擾素γ、介白素6、顆粒球巨噬細胞菌落刺激因子(GM-CSF)、顆粒球菌落刺激因子(G-CSF)、巨噬細胞菌落刺激因子(M-CSF)、各種細胞激素、腫瘤壞死因子α受體(TNF-α受體)、PD-1配體、PD-L1、PD-L2、具有分解β澱粉樣蛋白之活性之酶、抗β澱粉樣蛋白抗體、抗BACE抗體、抗EGFR抗體、抗PD-1抗體、抗PD-L1抗體、抗PD-L2抗體、抗HER2抗體、抗TNF-α抗體、抗CTLA-4抗體、及其他抗體醫藥所組成之群中者。 53.一種融合蛋白質，該蛋白質(A)為溶酶體酶，且該溶酶體酶為選自由α-L-艾杜糖醛酸酶、艾杜糖醛酸-2-硫酸酯酶、人類酸性α-葡萄糖苷酶、葡萄糖腦苷脂酶、β-半乳糖苷酶、GM2活化蛋白質、β-己糖胺酶A、β-己糖胺酶B、N-乙醯葡萄糖胺-1-磷酸轉移酶、α-甘露糖苷酶、β-甘露糖苷酶、半乳糖神經醯胺酶、脂結合蛋白C、芳基硫酸酯酶A、α-L-岩藻糖苷酶、天冬胺醯胺基葡糖苷酶、α-N-乙醯基半乳糖苷酶、酸性神經磷脂酶、α-半乳糖苷酶A、β-葡萄糖醛酸苷酶、乙醯肝素N-硫酸酯酶、α-N-乙醯葡萄糖胺苷酶、乙醯輔酶Aα-胺基葡糖苷N-乙醯轉移酶、N-乙醯葡萄糖胺-6-硫酸酯酶、酸性神經醯胺酶、澱粉-1,6-葡萄糖苷酶、唾液酸酶、棕櫚醯蛋白硫酯酶-1、三肽基肽酶-1、玻尿酸酶-1、CLN1及CLN2所組成之群中者。 54.如上述41至51中任一項之融合蛋白質，其中該蛋白質(A)為人類艾杜糖醛酸-2-硫酸酯酶、人類酸性α-葡萄糖苷酶、或人類α-L-艾杜糖醛酸酶之任一者。 55.如上述51之融合蛋白質，其中該蛋白質(A)為人類酸性α-葡萄糖苷酶， (1)該抗體之輕鏈為包含序列編號23之胺基酸序列而成，且 (2)該抗體之重鏈於其C末端側經由胺基酸序列Gly-Ser而與人類酸性α-葡萄糖苷酶結合，藉此形成有序列編號57或序列編號58之胺基酸序列。 56.如上述51之融合蛋白質，其中該蛋白質(A)為人類酸性α-葡萄糖苷酶， (1)該抗體之輕鏈為包含序列編號23之胺基酸序列而成，且 (2)該抗體之重鏈為包含序列編號66或序列編號68之胺基酸序列而成，且該重鏈於其C末端側經由胺基酸序列Gly-Ser而與具有序列編號55或序列編號56之胺基酸序列之人類酸性α-葡萄糖苷酶結合。 57.如上述51之融合蛋白質，其中該蛋白質(A)為人類酸性α-葡萄糖苷酶，該抗體為Fab抗體， (1)該抗體之輕鏈為包含序列編號23之胺基酸序列而成，且 (2)該抗體之重鏈於其C末端側經由將3個序列編號3之胺基酸序列接連而成之胺基酸序列，而與人類酸性α-葡萄糖苷酶結合，藉此形成有序列編號89之胺基酸序列。 58.如上述51之融合蛋白質，其中該蛋白質(A)為人類酸性α-葡萄糖苷酶，該抗體為Fab抗體， (1)該抗體之輕鏈為包含序列編號23之胺基酸序列而成，且 (2)該抗體之重鏈為包含序列編號61之胺基酸序列而成，且該重鏈於其C末端側經由將3個序列編號3之胺基酸序列接連而成之胺基酸序列，而與具有序列編號55或序列編號56之胺基酸序列之人類酸性α-葡萄糖苷酶結合。 59.如上述51之融合蛋白質，其中該蛋白質(A)為人類α-L-艾杜糖醛酸酶，該抗體為Fab抗體， (1)該抗體之輕鏈為包含序列編號23之胺基酸序列而成，且 (2)該抗體之重鏈於其C末端側經由將3個序列編號3之胺基酸序列接連而成之胺基酸序列，而與人類α-L-艾杜糖醛酸酶結合，藉此形成有序列編號93之胺基酸序列。 60.如上述51之融合蛋白質，其中該蛋白質(A)為人類α-L-艾杜糖醛酸酶，該抗體為Fab抗體， (1)該抗體之輕鏈為包含序列編號23之胺基酸序列而成，且 (2)該抗體之重鏈為包含序列編號61之胺基酸序列而成，且該重鏈於其C末端側經由將3個序列編號3之胺基酸序列接連而成之胺基酸序列，而與具有序列編號75或序列編號76之胺基酸序列之人類α-L-艾杜糖醛酸酶結合。 61.如上述41之融合蛋白質，其係將人類IgG Fc區域或其一部分導入至該蛋白質(A)與該抗體之間而成者。 62.如上述61之融合蛋白質，其係於該蛋白質(A)之C末端側直接或經由連接子序列結合人類IgG Fc區域而成，且於該人類IgG Fc區域之C末端側直接或經由連接子序列而結合該抗體之重鏈或輕鏈而成者。 63.如上述61或62之融合蛋白質，其中人類IgG Fc區域為包含序列編號70之胺基酸序列而成者。 64.如上述63之融合蛋白質，其係包含序列編號71之胺基酸序列而成者，該胺基酸序列係藉由將人類IgG Fc區域經由連接子序列與包含序列編號61之胺基酸序列之Fab重鏈結合而形成。 65.一種DNA片段，其編碼如上述1至40中任一項之抗人類運鐵蛋白受體抗體之胺基酸序列。 66.一種DNA片段，其編碼如上述41至64中任一項之融合蛋白質之胺基酸序列。 67.一種表現載體，其係組入如上述65或66之DNA片段而成。 68.一種哺乳動物細胞，其係利用如上述67之表現載體進行轉形而獲得。 69.一種抗人類運鐵蛋白受體抗體-藥理活性物質複合體，其係使通過血腦障壁而應於腦內發揮功能之低分子量藥理活性物質與如上述1至40中任一項之抗人類運鐵蛋白受體抗體之輕鏈及/或重鏈之任一者結合而成者。 70.如上述69之抗人類運鐵蛋白受體抗體-藥理活性物質複合體，其中該藥理活性物質為選自由抗癌劑、阿茲海默氏症治療劑、帕金森氏症治療劑、杭丁頓舞蹈症治療劑、精神分裂症治療劑、抑鬱症治療劑、多發性硬化症治療劑、肌萎縮性側索硬化症治療劑、包含腦腫瘤之中樞神經系統之腫瘤之治療劑、伴隨著腦障礙之溶酶體儲積症之治療劑、糖原儲積病治療劑、肌肉失養症治療劑、腦缺血治療劑、朊毒體病治療劑、外傷性之中樞神經系統障礙之治療劑、對於病毒性及細菌性之中樞神經系統疾病之治療劑、用於腦外科手術後之恢復之藥劑、用於脊椎外科手術後之恢復之藥劑、siRNA、反義DNA、及肽所組成之群中之任一者。 71.一種如上述1至40中任一項之抗人類運鐵蛋白受體抗體之用途，其係用於使蛋白質(A)或低分子量之藥理活性物質通過血腦障壁而使之於腦內發揮功能。 72.一種如上述1至40中任一項之抗人類運鐵蛋白受體抗體之用途，其係用於製造用以治療中樞神經系統之疾病狀態之血中投予用藥劑，而與針對該疾病狀態之生理活性蛋白質或藥理活性低分子化合物之分子結合。 73.一種治療方法，其係中樞神經系統之疾病之治療方法，包括：將治療上有效量之針對該疾病之生理活性蛋白質或藥理活性低分子化合物以與如上述1至40中任一項之抗人類運鐵蛋白受體抗體分子的結合體之形態投予至具有該疾病之患者之血中。 74.一種如上述52至58中任一項之融合蛋白質之用途，其係用於使人類酸性α-葡萄糖苷酶通過血腦障壁而使之於腦內發揮功能。 75.一種如上述52至58中任一項之融合蛋白質之用途，其係用於製造用以治療龐貝氏症所伴隨之中樞神經系統之疾病狀態之血中投予用藥劑。 76.一種治療方法，其係龐貝氏症所伴隨之中樞神經系統之疾病之治療方法，包括：將治療上有效量之如上述52至58中任一項之融合蛋白質投予至具有該疾病之患者之血中。 77.一種如上述52至54、59、或60中任一項之融合蛋白質之用途，其係用於使人類酸性α-L-艾杜糖醛酸酶通過血腦障壁而使之於腦內發揮功能。 78.一種如上述52至54、59、或60中任一項之融合蛋白質之用途，其係用於製造用以治療Hurler症候群或Hurler-Scheie症候群所伴隨之中樞神經系統之疾病狀態的血中投予用藥劑。 79.一種治療方法，其係Hurler症候群或Hurler-Scheie症候群所伴隨之中樞神經系統之疾病之治療方法，包括：將治療上有效量之如上述52至54、59、或60中任一項之融合蛋白質投予至具有該疾病之患者之血中。 [發明之效果] 本發明係具有生理活性或藥理活性之蛋白質或低分子量之物質，但由於基本上或完全無法通過血腦障壁，故而對於先前在血中投予中無法應用之各種物質，可將該等製成能夠通過血腦障壁之形態，因此可製成用以治療中樞神經系統之疾病狀態之血中投予用的新穎藥劑。
本發明中，「抗體」一詞係主要指人類抗體、小鼠抗體、人源化抗體、人類抗體與其他哺乳動物之抗體之嵌合抗體、及小鼠抗體與其他哺乳動物之抗體之嵌合抗體，只要為具有特異性地結合至特定抗原之性質者，則並不限定於其等，又，抗體之動物物種亦無特別限制。其中較佳為人源化抗體。 本發明中，「人類抗體」一詞係指整個蛋白質由源自人類之基因所編碼之抗體。其中，為了提昇基因之表現效率等，而對於原本之人類之基因在不會使原本之胺基酸序列產生變化之情況下施加有突變之基因所編碼的抗體亦包括在「人類抗體」中。又，將編碼人類抗體之2個以上基因加以組合，並將某人類抗體之一部分置換為其他人類抗體之一部分所製作之抗體亦為「人類抗體」。人類抗體具有免疫球蛋白輕鏈之3個互補決定區域(CDR)與免疫球蛋白重鏈之3個互補決定區域(CDR)。免疫球蛋白輕鏈之3個CDR自處於N末端側者起依序稱為CDR1、CDR2及CDR3。免疫球蛋白重鏈之3個CDR亦自處於N末端側者起依序稱為CDR1、CDR2及CDR3。藉由將某人類抗體之CDR置換為其他人類抗體之CDR而改變了人類抗體之抗原特異性、親和性等之抗體亦包括在人類抗體中。 本發明中，藉由對原本之人類抗體之基因進行修飾，而對原本之抗體之胺基酸序列施加有置換、缺失、附加等突變所獲得之抗體亦包括在「人類抗體」中。於利用其他胺基酸置換原本之抗體之胺基酸序列中之胺基酸之情形時，所置換之胺基酸之個數較佳為1～20個，更佳為1～5個，進而較佳為1～3個。於使原本之抗體之胺基酸序列中之胺基酸缺失的情形時，所缺失之胺基酸之個數較佳為1～20個，更佳為1～5個，進而較佳為1～3個。又，施加有組合有該等胺基酸之置換與缺失之突變所獲得之抗體亦為人類抗體。於附加胺基酸之情形時，於原本之抗體之胺基酸序列中或者N末端或C末端附加較佳為1～20個、更佳為1～5個、進而較佳為1～3個胺基酸。施加有將該等胺基酸之附加、置換及缺失加以組合之突變所獲得之抗體亦為人類抗體。施加有突變之抗體之胺基酸序列相對於原本之抗體之胺基酸序列較佳為顯示出80%以上之同源性，更佳為顯示出90%以上之同源性，進而較佳為顯示出95%以上之同源性，進而更佳為顯示出98%以上之同源性。即，本發明中稱為「源自人類之基因」時，除源自人類之原本之基因以外，亦包括藉由對其加以修飾而獲得之基因。 原本之抗體之胺基酸序列與施加有突變之抗體之胺基酸序列的同源性可使用眾所周知之同源性計算演算法而容易地算出。例如，作為此種演算法，有BLAST(Altschul SF. J Mol .Biol. 215. 403-10, (1990))、Pearson及Lipman之類似性檢索法(Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 85. 2444 (1988))、Smith及Waterman之局部同源性演算法(Adv. Appl. Math. 2. 482-9(1981))等。 本發明中，稱為「小鼠抗體」時，係指包含其蛋白質整體由源自小鼠之基因所編碼之抗體與同源之胺基酸序列的抗體。因此，其中，為了提昇基因之表現效率等，而對於原本之小鼠之基因在不會使原本之胺基酸序列產生變化之情況下施加有突變之基因所編碼的抗體亦包括在「小鼠抗體」中。又，將編碼小鼠抗體之2個以上基因加以組合，並將某小鼠抗體之一部分置換為其他小鼠抗體之一部分所獲得之抗體亦包括在小鼠抗體中。小鼠抗體具有免疫球蛋白輕鏈之3個互補決定區域(CDR)與免疫球蛋白重鏈之3個互補決定區域(CDR)。免疫球蛋白輕鏈之3個CDR自處於N末端側者起依序稱為CDR1、CDR2及CDR3。免疫球蛋白重鏈之3個CDR自處於N末端側者起依序稱為CDR1、CDR2及CDR3。例如，藉由將某小鼠抗體之CDR置換為其他小鼠抗體之CDR而改變了小鼠抗體之抗原特異性、親和性等之抗體亦包括在小鼠抗體中。 本發明中，藉由對原本之小鼠抗體之基因進行修飾，而對原本之抗體之胺基酸序列施加有置換、缺失、附加等突變所獲得之抗體亦包括在「小鼠抗體」中。於將原本之抗體之胺基酸序列中之胺基酸置換為其他胺基酸之情形時，所置換之胺基酸之個數較佳為1～20個，更佳為1～5個，進而較佳為1～3個。於使原本之抗體之胺基酸序列中之胺基酸缺失之情形時，所缺失之胺基酸之個數較佳為1～20個，更佳為1～5個，進而較佳為1～3個。又，施加有組合有該等胺基酸之置換與缺失之突變所獲得之抗體亦包括在「小鼠抗體」中。於附加胺基酸之情形時，於原本之抗體之胺基酸序列中或者N末端側或C末端側附加較佳為1～20個、更佳為1～5個、進而較佳為1～3個胺基酸。施加有將該等胺基酸之附加、置換及缺失加以組合之突變所獲得之抗體亦包括在「小鼠抗體」中。施加有突變之抗體之胺基酸序列較佳為相對於原本之抗體之胺基酸序列顯示出80%以上之同源性，更佳為顯示出90%以上之同源性，進而較佳為顯示出95%以上之同源性，進而更佳為顯示出98%以上之同源性。即，本發明中稱為「源自小鼠之基因」時，除源自小鼠之原本之基因以外，亦包括藉由對其加以修飾而獲得之基因。 本發明中，「人源化抗體」一詞係指可變區之一部分(例如，尤其是CDR之全部或一部分)之胺基酸序列源自人類以外之哺乳動物，除此以外之區域源自人類之抗體。例如，作為人源化抗體，可列舉：藉由將構成人類抗體之免疫球蛋白輕鏈之3個互補決定區域(CDR)與免疫球蛋白重鏈之3個互補決定區域(CDR)置換為其他哺乳動物之CDR而製作之抗體。關於成為移植至人類抗體之適當位置之CDR之來源的其他哺乳動物之生物物種，只要為人類以外之哺乳動物，則無特別限定，較佳為小鼠、大鼠、兔、馬、或人類以外之靈長類，更佳為小鼠及大鼠，進而較佳為小鼠。 本發明中，「嵌合抗體」一詞係指由源自2個以上之不同物種之2個以上之不同抗體的片段連結而成之抗體。 所謂人類抗體與其他哺乳動物之抗體之嵌合抗體，係人類抗體之一部分被置換為人類以外之哺乳動物之抗體之一部分的抗體。抗體包含以下所說明之Fc區域、Fab區域及鉸鏈部。作為此種嵌合抗體之具體例，可列舉：Fc區域源自人類抗體，另一方面Fab區域源自其他哺乳動物之抗體之嵌合抗體。鉸鏈部係源自人類抗體或其他哺乳動物之抗體之任一者。可列舉相反地Fc區域源自其他哺乳動物，另一方面Fab區域源自人類抗體之嵌合抗體。鉸鏈部係源自人類抗體或其他哺乳動物之抗體之任一者。 又，抗體亦可謂由可變區與恆定區構成。作為嵌合抗體之其他具體例，亦可列舉：重鏈之恆定區(CH )與輕鏈之恆定區(CL )源自人類抗體，另一方面重鏈之可變區(VH )及輕鏈之可變區(VL )源自其他哺乳動物之抗體者；相反地重鏈之恆定區(CH )與輕鏈之恆定區(CL )源自其他哺乳動物之抗體，另一方面重鏈之可變區(VH )及輕鏈之可變區(VL )源自人類抗體者。此處，其他哺乳動物之生物物種只要為人類以外之哺乳動物，則無特別限定，較佳為小鼠、大鼠、兔、馬、或人類以外之靈長類，更佳為小鼠。 所謂小鼠抗體與其他哺乳動物之抗體之嵌合抗體，係小鼠抗體之一部分被置換為小鼠以外之哺乳動物之抗體之一部分的抗體。作為此種嵌合抗體之具體例，可列舉：Fc區域源自小鼠抗體，另一方面Fab區域源自其他哺乳動物之抗體之嵌合抗體；或相反地Fc區域源自其他哺乳動物，另一方面Fab區域源自小鼠抗體之嵌合抗體。此處，其他哺乳動物之生物物種只要為小鼠以外之哺乳動物，則無特別限定，較佳為大鼠、兔、馬、人類以外之靈長類，更佳為人類。 人類抗體與小鼠抗體之嵌合抗體尤其是指「人類/小鼠嵌合抗體」。關於人類/小鼠嵌合抗體，可列舉：Fc區域源自人類抗體，另一方面Fab區域源自小鼠抗體之嵌合抗體；或相反地Fc區域源自小鼠抗體，另一方面Fab區域源自人類抗體之嵌合抗體。鉸鏈部係源自人類抗體或小鼠抗體之任一者。作為人類/小鼠嵌合抗體之其他具體例，亦可列舉：重鏈之恆定區(CH )與輕鏈之恆定區(CL )源自人類抗體，另一方面重鏈之可變區(VH )及輕鏈之可變區(VL )源自小鼠抗體者；相反地重鏈之恆定區(CH )與輕鏈之恆定區(CL )源自小鼠抗體，另一方面重鏈之可變區(VH )及輕鏈之可變區(VL )源自人類抗體者。 抗體原本具有如下基本結構，該基本結構包含2條免疫球蛋白輕鏈與2條免疫球蛋白重鏈之共計4條多肽鏈。其中，本發明中，稱為「抗體」時，除具有該基本結構者以外，亦包含 (1)包含1條免疫球蛋白輕鏈與1條免疫球蛋白重鏈之共計2條多肽鏈者；或如以下所詳述般， (2)作為於免疫球蛋白輕鏈之C末端側結合連接子序列，並且進而於其C末端側結合免疫球蛋白重鏈而成者之單鏈抗體，及 (3)作為於免疫球蛋白重鏈之C末端側結合連接子序列，並且進而於其C末端側結合免疫球蛋白輕鏈而成者之單鏈抗體。又， (4)原本意義上之抗體之基本結構中缺失有Fc區域者即包含Fab區域者及包含Fab區域與鉸鏈部之全部或一部分者(包含Fab、F(ab')及F(ab')2 )亦包含於本發明中之「抗體」中。 此處，所謂Fab，係指包含可變區與CL 區域(輕鏈之恆定區)之1條輕鏈、與包含可變區與CH 1區域(重鏈之恆定區之部分1)之1條重鏈以存在於各自中之半胱胺酸殘基彼此藉由雙硫鍵結合而成之分子。於Fab中，重鏈除可變區與CH 1區域(重鏈之恆定區之部分1)以外，亦可進而含有鉸鏈部之一部分，但該情形時之鉸鏈部係欠缺存在於鉸鏈部中且將抗體之重鏈彼此結合之半胱胺酸殘基者。於Fab中，輕鏈與重鏈係藉由雙硫鍵而結合，該雙硫鍵係形成於存在於輕鏈之恆定區(CL 區域)之半胱胺酸殘基、與存在於重鏈之恆定區(CH 1區域)或鉸鏈部之半胱胺酸殘基之間。將形成Fab之重鏈稱為Fab重鏈。Fab係欠缺存在於鉸鏈部中且將抗體之重鏈彼此結合之半胱胺酸殘基，因此包含1條輕鏈與1條重鏈。構成Fab之輕鏈包含可變區與CL 區域。構成Fab之重鏈可為包含可變區與CH 1區域者，亦可為除可變區、CH 1區域外，亦包含鉸鏈部之一部分者。但是，於該情形時，為了於鉸鏈部中在2條重鏈之間不會形成雙硫鍵，而選擇使鉸鏈部不包含將重鏈間結合之半胱胺酸殘基。F(ab')中，其重鏈除可變區與CH 1區域以外，亦含有包含將重鏈彼此結合之半胱胺酸殘基之鉸鏈部之全部或一部分。F(ab')2 係指2個F(ab')以存在於各自鉸鏈部中之半胱胺酸殘基彼此藉由雙硫鍵結合而成之分子。將形成F(ab')或F(ab')2 之重鏈稱為Fab'重鏈。又，複數個抗體直接或經由連接子結合而成之二聚物、三聚物等聚合物亦為抗體。進而，並不限於該等，包含免疫球蛋白分子之一部，且具有特異性地結合至抗原之性質者均包含於本發明中所謂「抗體」中。即，於本發明中稱為免疫球蛋白輕鏈時，包含源自免疫球蛋白輕鏈，且具有其可變區之全部或一部分之胺基酸序列者。又，稱為免疫球蛋白重鏈時，包含源自免疫球蛋白重鏈，且具有其可變區之全部或一部分之胺基酸序列者。因此，只要具有可變區之全部或一部分之胺基酸序列，則例如缺失有Fc區域者亦為免疫球蛋白重鏈。 又，此處所謂Fc或Fc區域，係指抗體分子中之含有如下片段之區域，該片段包含CH 2區域(重鏈之恆定區之部分2)、及CH 3區域(重鏈之恆定區之部分3)。 進而，於本發明中稱為「抗體」時， (5)亦包含使構成上述(4)所示之Fab、F(ab')或F(ab')2 之輕鏈與重鏈經由連接子序列結合而分別製成單鏈抗體所獲得之scFab、scF(ab')、及scF(ab')2 。此處，於scFab、scF(ab')、及scF(ab')2 時，亦可為於輕鏈之C末端側結合連接子序列，並且進而於其C末端側結合重鏈而成者，又，亦可為於重鏈之C末端側結合連接子序列，並且進而於其C末端側結合輕鏈而成者。進而，使輕鏈之可變區與重鏈之可變區經由連接子序列結合而製成單鏈抗體所獲得之scFv亦包含於本發明之抗體中。scFv時，亦可為於輕鏈之可變區之C末端側結合連接子序列，並且進而於其C末端側結合重鏈之可變區而成者，又，亦可為於重鏈之可變區之C末端側結合連接子序列，並且進而於其C末端側結合輕鏈之可變區而成者。 進而，本說明書中所謂「抗體」，係包含作為除完全長抗體、上述(1)～(5)所示者以外，亦包括上述(4)及(5)之更廣泛概念的全長抗體之一部分缺損之抗原結合性片段(抗體片段)之任一形態。 「抗原結合性片段」一詞係指保持有與抗原之特異性結合活性之至少一部分的抗體之片段。作為結合性片段之例，例如除上述(4)及(5)所示者以外，亦包含：使Fab、Fab'、F(ab')2 、可變區(Fv)、重鏈可變區(VH )及輕鏈可變區(VL )經由適當連接子連結而成之單鏈抗體(scFv)；作為包含重鏈可變區(VH )與輕鏈可變區(VL )之多肽之二聚物之雙鏈抗體；作為於scFv之重鏈(H鏈)結合有恆定區之一部分(CH 3)者之二聚物之微型抗體；其他低分子化抗體等。但是，只要具有與抗原之結合能力，則並不限定於該等分子。又，關於該等結合性片段，不僅包含抗體蛋白質之全長分子經適當酶處理者，亦包含使用經基因工程修飾之抗體基因而於適當宿主細胞中產生之蛋白質。 本發明中稱為「單鏈抗體」時，係指於包含免疫球蛋白輕鏈之可變區之全部或一部分之胺基酸序列的C末端側結合連接子序列，進而於其C末端側結合包含免疫球蛋白重鏈之可變區之全部或一部分之胺基酸序列而成，且可特異性地結合至特定抗原之蛋白質。例如，單鏈抗體包括上述(2)、(3)及(5)所示者。又，於包含免疫球蛋白重鏈之可變區之全部或一部分之胺基酸序列的C末端側結合連接子序列，進而於其C末端側結合包含免疫球蛋白輕鏈之可變區之全部或一部分之胺基酸序列而成，且可特異性地結合至特定抗原之蛋白質亦為本發明中之「單鏈抗體」。於在免疫球蛋白重鏈之C末端側經由連接子序列結合有免疫球蛋白輕鏈之單鏈抗體時，通常免疫球蛋白重鏈缺失有Fc區域。免疫球蛋白輕鏈之可變區具有3個與抗體之抗原特異性相關之互補決定區域(CDR)。同樣地，免疫球蛋白重鏈之可變區亦具有3個CDR。該等CDR係決定抗體之抗原特異性之主要區域。因此，單鏈抗體較佳為包含免疫球蛋白重鏈之全部3個CDR、與免疫球蛋白輕鏈之全部3個CDR。但是，只要維持抗體之抗原特異性親和性，則亦可設為缺失有1個或複數個CDR之單鏈抗體。 單鏈抗體中，配置於免疫球蛋白之輕鏈與重鏈之間之連接子序列係由較佳為2～50個、更佳為8～50個、進而較佳為10～30個、進而更佳為12～18個或15～25個、例如15個或25個胺基酸殘基所構成之肽鏈。此種連接子序列只要藉由其兩鏈連結而成之抗hTfR抗體保持對於hTfR之親和性，則並不限定於其胺基酸序列，較佳為僅由甘胺酸構成者或由甘胺酸與絲胺酸構成者，例如可列舉包含如下序列者：胺基酸序列Gly-Ser、胺基酸序列Gly-Gly-Ser、胺基酸序列Gly-Gly-Gly、胺基酸序列Gly-Gly-Gly-Gly-Ser(序列編號3)、胺基酸序列Gly-Gly-Gly-Gly-Gly-Ser(序列編號4)、胺基酸序列Ser-Gly-Gly-Gly-Gly(序列編號5)、或者該等胺基酸序列反覆2～10次或2～5次而成之序列。例如，於在包含免疫球蛋白重鏈之可變區之全區域之胺基酸序列的C末端側經由連接子序列結合免疫球蛋白輕鏈之可變區的情形時，較佳為包含相當於3個胺基酸序列Gly-Gly-Gly-Gly-Ser(序列編號3)接連而成者之共計15個胺基酸之連接子序列。 本發明中，關於「人類運鐵蛋白受體」或「hTfR」一詞，係指具有序列編號1所示之胺基酸序列之膜蛋白質。本發明之抗hTfR抗體於其一實施態樣中，係特異性地結合至序列編號1所示之胺基酸序列中自從N末端側起第89位之半胱胺酸殘基直至C末端之苯丙胺酸的部分(hTfR之細胞外區域)者，但並不限定於此。又，本發明中關於「猴運鐵蛋白受體」或「猴TfR」一詞，係具有尤其是源自食蟹猴(Macaca fascicularis)之序列編號2所示之胺基酸序列之膜蛋白質。本發明之抗hTfR抗體於其一實施態樣中係亦結合至序列編號2所示之胺基酸序列中自從N末端側起第89位之半胱胺酸殘基直至C末端之苯丙胺酸的部分(猴TfR之細胞外區域)者，但並不限定於此。 作為對於hTfR之抗體之製作方法，通常為如下方法：使用導入有組入有hTfR基因之表現載體之細胞而製作重組人類運鐵蛋白受體(rhTfR)，使用該rhTfR免疫小鼠等動物而獲得抗體。自免疫後之動物提取對於hTfR之抗體產生細胞，使其與骨髓瘤細胞融合，藉此可製作具有抗hTfR抗體產生能力之融合瘤細胞。 又，藉由體外免疫法用rhTfR對自小鼠等動物獲得之免疫系細胞進行免疫，亦可取得產生對於hTfR之抗體之細胞。於使用體外免疫法之情形時，該免疫系細胞所源自之動物物種並無特別限定，較佳為小鼠、大鼠、兔、豚鼠、狗、貓、馬、及包括人類在內之靈長類，更佳為小鼠、大鼠及人類，進而較佳為小鼠及人類。作為小鼠之免疫系細胞，例如可使用自小鼠之脾臟製備之脾細胞。作為人類之免疫系細胞，可使用自人類之末梢血、骨髓、脾臟等製備之細胞。於藉由體外免疫法免疫了人類之免疫系細胞之情形時，可獲得對於hTfR之人類抗體。 於藉由體外免疫法免疫了免疫系細胞後，使細胞與骨髓瘤細胞融合，藉此可製作具有抗體產生能力之融合瘤細胞。又，亦可自免疫後之細胞提取mRNA而合成cDNA，以該cDNA作為模板，藉由PCR反應擴增包含編碼免疫球蛋白之輕鏈及重鏈之基因之DNA片段，使用該等而人工重組抗體基因。 關於藉由上述方法直接獲得之融合瘤細胞，亦包含產生將hTfR以外之蛋白質識別作抗原之抗體之細胞。又，產生抗hTfR抗體之融合瘤細胞未必全部產生對於hTfR顯示出高親和性之抗hTfR抗體。 同樣地，關於經人工重組之抗體基因，亦包含編碼將hTfR以外之蛋白質識別作抗原之抗體之基因。又，編碼抗hTfR抗體之基因未必全部具備編碼對於hTfR顯示出高親和性之抗hTfR抗體等所需之特性。 因此，需要如下步驟：自上述中直接獲得之融合瘤細胞中選擇產生具有所需特性(對於hTfR之高親和性等)之抗體之融合瘤細胞。又，於經人工重組之抗體基因時，需要如下步驟：自該抗體基因中選擇編碼具有所需特性(對於hTfR之高親和性等)之抗體之基因。作為選擇產生對於hTfR顯示出高親和性之抗體(高親和性抗體)之融合瘤細胞、或編碼高親和性抗體之基因之方法，有效的是以下所詳述之方法。再者，所謂對於hTfR顯示出高親和性之抗體，係藉由實施例7所記載之方法測定之與hTfR之解離常數(KD )較佳為1×10-8 M以下者，更佳為1×10-9 M以下者，進而較佳為1×10-10 M以下者，進而更佳為1×10-11 M以下者。例如作為較佳者，可列舉：解離常數為1×10-13 M～1×10-9 M者、解離常數為1×10-13 M～1×10-10 M者。 例如於選擇產生對於抗hTfR抗體顯示出高親和性之抗體之融合瘤細胞的情形時，可使用如下方法：將重組hTfR添加至培養盤中並將之保持在其中後，添加融合瘤細胞之培養上清液，繼而將未與重組hTfR結合之抗體自培養盤去除，對培養盤中所保持之抗體之量進行測定。根據該方法，添加至培養盤中之融合瘤細胞之培養上清液所包含之抗體對於hTfR的親和性越高，培養盤中所保持之抗體之量變得越多。因此，對培養盤中所保持之抗體之量進行測定，可選擇與保持有更多抗體之培養盤對應之融合瘤細胞作為產生對於hTfR具有相對較高之親和性之抗hTfR抗體的細胞株。自以上述方式選擇出之細胞株提取mRNA而合成cDNA，以該cDNA作為模板，使用PCR法擴增包含編碼抗hTfR抗體之基因之DNA片段，藉此亦可將編碼高親和性抗體之基因單離。 於自上述經人工重組之抗體基因中選擇編碼具有高親和性之抗hTfR抗體的基因之情形時，暫時將經人工重組之抗體基因組入至表現載體中，將該表現載體導入至宿主細胞。此時，作為用作宿主細胞之細胞，只要為可藉由導入組入有經人工重組之抗體基因之表現載體而使抗體基因表現之細胞，則不論原核細胞、真核細胞均無特別限定，較佳為源自人類、小鼠、中國倉鼠等哺乳動物之細胞，尤佳為源自中國倉鼠卵巢之CHO細胞、或源自小鼠骨髓瘤之NS/0細胞。又，關於用以組入編碼抗體基因之基因並使之表現之表現載體，只要為於導入至哺乳動物細胞內時使該基因表現者，則可無特別限定地使用。組入至表現載體中之該基因係配置於在哺乳動物細胞內可調節基因之轉錄之頻度的DNA序列(基因表現控制部位)之下游。作為本發明中可使用之基因表現控制部位，例如可列舉：源自巨細胞病毒之啟動子、SV40初期啟動子、人類延伸因子-1α(EF-1α)啟動子、泛激素C啟動子等。 導入有此種表現載體之哺乳動物細胞變得表現組入至表現載體中之上述經人工重組之抗體。於自以上述方式獲得之表現經人工重組之抗體之細胞中選擇產生對於抗hTfR抗體具有高親和性之抗體之細胞的情形時，可使用如下方法：將重組hTfR添加至培養盤中並將之保持在其中後，使重組hTfR與細胞之培養上清液接觸，繼而，將未與重組hTfR結合之抗體自培養盤去除，對培養盤中所保持之抗體之量進行測定。根據該方法，細胞之培養上清液中所包含之抗體之對於hTfR之親和性越高，培養盤中所保持之抗體之量變得越多。因此，可對培養盤中所保持之抗體之量進行測定，而選擇與保持有更多抗體之培養盤對應之細胞作為產生對於hTfR具有相對較高之親和性之抗hTfR抗體的細胞株，進而可選擇編碼對於hTfR具有高親和性之抗hTfR抗體之基因。藉由使用PCR法擴增包含編碼抗hTfR抗體之基因之DNA片段，可自以上述方式選擇出之細胞株單離編碼高親和性抗體之基因。 自上述經人工重組之抗體基因中選擇編碼具有高親和性之抗hTfR抗體之基因時，亦可藉由如下方式進行：將經人工重組之抗體基因組入至表現載體中，將該表現載體導入至大腸桿菌，使用培養該大腸桿菌而獲得之培養上清液或使大腸桿菌溶解而獲得之包含抗體之溶液，利用與選擇上述融合瘤細胞之情形相同之方法而選擇具有所需基因之大腸桿菌。所選擇出之大腸桿菌株係表現編碼對於hTfR具有相對較高之親和性之抗hTfR抗體的基因者。可自該細胞株中選擇編碼對於hTfR具有相對較高之親和性之抗hTfR抗體之基因。於使抗體分泌至大腸桿菌之培養上清液中之情形時，只要以於N末端側結合分泌訊號序列之方式將抗體基因組入至表現載體即可。 作為選擇編碼具有高親和性之抗hTfR抗體之基因之其他方法，有如下方法：使上述經人工重組之抗體基因所編碼之抗體保持在噬菌體粒子上並使之表現。此時，抗體基因係以編碼單鏈抗體之基因之形式重組。將抗體保持在噬菌體粒子上之方法係記載於國際公開公報(WO1997/09436、WO1995/11317)等中，且眾所周知。自保持經人工重組之抗體基因所編碼之抗體之噬菌體中選擇保持對於抗hTfR抗體具有高親和性之抗體之噬菌體的情形時，可使用如下方法：將重組hTfR添加至培養盤中並將其加以保持後，使之與噬菌體接觸，繼而自培養盤將未與重組hTfR結合之噬菌體去除，對培養盤中所保持之噬菌體之量進行測定。根據該方法，噬菌體粒子上所保持之抗體之對於hTfR之親和性越高，培養盤中所保持之噬菌體之量變得越多。因此，可對培養盤中所保持之噬菌體之量進行測定，而選擇與保持有更多噬菌體之培養盤對應之噬菌體粒子作為產生對於hTfR具有相對較高之親和性之抗hTfR抗體的噬菌體粒子，進而可選擇編碼對於hTfR具有高親和性之抗hTfR抗體之基因。藉由使用PCR法擴增包含編碼抗hTfR抗體之基因之DNA片段，可自以上述方式選擇出之噬菌體粒子單離編碼高親和性抗體之基因。 可自上述產生對於抗hTfR抗體具有高親和性之抗體之融合瘤細胞等細胞、或者具有對於抗hTfR抗體具有高親和性之抗體之噬菌體粒子製備cDNA或噬菌體DNA，以其作為模板，藉由PCR法等擴增包含編碼抗hTfR抗體之輕鏈、抗hTfR抗體之重鏈、或作為抗hTfR抗體之單鏈抗體之全部或其一部分之基因的DNA片段並進行單離。同樣地，亦可藉由PCR法等擴增包含編碼抗hTfR抗體之輕鏈之可變區之全部或其一部分之基因的DNA片段、包含編碼抗hTfR抗體之重鏈之可變區之全部或其一部分之基因的DNA片段並進行單離。 將該編碼具有高親和性之抗hTfR抗體之輕鏈及重鏈之基因之全部或其一部分組入至表現載體，使用該表現載體將哺乳動物細胞等宿主細胞進行轉形，對所獲得之轉形細胞進行培養，藉此可產生具有高親和性之抗hTfR抗體。亦可自編碼所單離之抗hTfR抗體之基因之鹼基序列轉譯抗hTfR抗體之胺基酸序列，而人工合成編碼該胺基酸序列之DNA片段。於人工合成DNA片段之情形時，可藉由選擇適當之密碼子而增加宿主細胞中之抗hTfR抗體之表現量。 為了對於原本之抗hTfR抗體對胺基酸序列施加置換、缺失、附加等突變，亦可於編碼單離出之DNA片段所包含之抗hTfR抗體之基因施加適當突變。編碼施加有突變之抗hTfR抗體之基因較佳為與原本之基因具有80%以上之同源性者，更佳為具有90%以上之同源性者，但同源性並無特別限制。藉由對胺基酸序列施加突變，亦可改變與抗hTfR抗體結合之糖鏈之數量、糖鏈之種類以增加生物體內之抗hTfR抗體之穩定性。 於對編碼抗hTfR抗體之輕鏈之可變區之全部或其一部分的基因施加突變之情形時，施加有突變之基因較佳為與原本之基因具有80%以上之同源性者，更佳為具有90%以上之同源性者，同源性並無特別限制。於將輕鏈之可變區之胺基酸序列之胺基酸置換為其他胺基酸之情形時，所置換之胺基酸之個數較佳為1～10個，更佳為1～5個，進而較佳為1～3個，進而更佳為1～2個。於使輕鏈之可變區之胺基酸序列中之胺基酸缺失的情形時，所缺失之胺基酸之個數較佳為1～10個，更佳為1～5個，進而較佳為1～3個，進而更佳為1～2個。又，亦可施加組合有該等胺基酸之置換與缺失之突變。於輕鏈之可變區附加胺基酸之情形時，於輕鏈之可變區之胺基酸序列中或者N末端側或C末端側附加較佳為1～10個、更佳為1～5個、進而較佳為1～3個、進而更佳為1～2個胺基酸。亦可施加將該等胺基酸之附加、置換及缺失加以組合之突變。施加有突變之輕鏈之可變區之胺基酸序列較佳為與原本之輕鏈之可變區之胺基酸序列具有80%以上之同源性，更佳為顯示出90%以上之同源性，進而較佳為顯示出95%以上之同源性。尤其是於將CDR之胺基酸序列之胺基酸置換為其他胺基酸之情形時，所置換之胺基酸之個數較佳為1～5個，更佳為1～3個，進而較佳為1～2個。於使CDR之胺基酸序列中之胺基酸缺失之情形時，所缺失之胺基酸之個數較佳為1～5個，更佳為1～3個，進而較佳為1～2個。又，亦可施加組合有該等胺基酸之置換與缺失之突變。於附加胺基酸之情形時，於該胺基酸序列中或者N末端側或C末端側附加較佳為1～5個、更佳為1～3個、進而較佳為1～2個胺基酸。亦可施加將該等胺基酸之附加、置換及缺失加以組合之突變。施加有突變之各CDR之各胺基酸序列較佳為與原本之各CDR之胺基酸序列具有80%以上之同源性，更佳為顯示出90%以上之同源性，進而較佳為顯示出95%以上之同源性。 於對編碼抗hTfR抗體之重鏈之可變區之全部或其一部分之基因施加突變之情形時，施加有突變之基因較佳為與原本之基因具有80%以上之同源性者，更佳為具有90%以上之同源性者，同源性並無特別限制。於將重鏈之可變區之胺基酸序列之胺基酸置換為其他胺基酸的情形時，所置換之胺基酸之個數較佳為1～10個，更佳為1～5個，進而較佳為1～3個，進而更佳為1～2個。於使重鏈之可變區之胺基酸序列中之胺基酸缺失的情形時，所缺失之胺基酸之個數較佳為1～10個，更佳為1～5個，進而較佳為1～3個，進而更佳為1～2個。又，亦可施加組合有該等胺基酸之置換與缺失之突變。於重鏈之可變區附加胺基酸之情形時，於重鏈之可變區之胺基酸序列中或者N末端側或C末端側附加較佳為1～10個、更佳為1～5個、進而較佳為1～3個、進而更佳為1～2個胺基酸。亦可施加將該等胺基酸之附加、置換及缺失加以組合之突變。施加有突變之重鏈之可變區之胺基酸序列較佳為與原本之重鏈之可變區之胺基酸序列具有80%以上之同源性，更佳為顯示出90%以上之同源性，進而較佳為顯示出95%以上之同源性。尤其是於將CDR之胺基酸序列之胺基酸置換為其他胺基酸之情形時，所置換之胺基酸之個數較佳為1～5個，更佳為1～3個，進而較佳為1～2個。於使CDR之胺基酸序列中之胺基酸缺失之情形時，所缺失之胺基酸之個數較佳為1～5個，更佳為1～3個，進而較佳為1～2個。又，亦可施加組合有該等胺基酸之置換與缺失之突變。於附加胺基酸之情形時，於該胺基酸序列中或者N末端側或C末端側附加較佳為1～5個、更佳為1～3個、進而較佳為1～2個胺基酸。亦可施加將該等胺基酸之附加、置換及缺失加以組合之突變。施加有突變之各CDR之各胺基酸序列較佳為與原本之各CDR之胺基酸序列具有80%以上之同源性，更佳為顯示出90%以上之同源性，進而較佳為顯示出95%以上之同源性。 亦可組合上述對於抗hTfR抗體之輕鏈之可變區之突變、與上述對於抗hTfR抗體之重鏈之可變區之突變，而對於抗hTfR抗體之輕鏈與重鏈之可變區兩者施加突變。 作為上述抗hTfR抗體之輕鏈及重鏈之胺基酸序列中之胺基酸的利用其他胺基酸之置換，例如可列舉：芳香族胺基酸(Phe、Trp、Tyr)、脂肪族胺基酸(Ala、Leu、Ile、Val)、極性胺基酸(Gln、Asn)、鹼性胺基酸(Lys、Arg、His)、酸性胺基酸(Glu、Asp)、具有羥基之胺基酸(Ser、Thr)等分類為相同群組之胺基酸。關於利用此種類似胺基酸之置換，預測不會給蛋白質之表型帶來變化(即，為保守性胺基酸置換)。但是，本發明者首先發現，確認到與本案發明具有同種效果之抗體編號3(於本案申請時點未公開)之hTfR之架構區3的胺基酸序列即序列編號83其第17位為Trp，相對於此，本案發明中之抗hTfR抗體編號3N之重鏈之架構區3係具有序列編號68之胺基酸序列，且其自N末端側起第17位被置換為Leu者。又，CDR1之胺基酸序列係序列編號12之第5位之Thr如序列編號66所示般被置換為Met者。Trp與Leu並非上述類似關係，並且Thr與Met亦並非上述類似關係。然而，如下述般，包含該置換之抗體編號3N即便出乎預料，效果亦與抗體編號3同種，而且表現出進一步優異之效果。 再者，於對抗hTfR抗體施加突變而於C末端或N末端附加有胺基酸之情形時，該所附加之胺基酸於使抗hTfR抗體與其他蛋白質(A)融合時位於抗hTfR抗體與蛋白質(A)之間，於該情形時，該所附加之胺基酸構成連接子之一部分。關於在抗hTfR抗體與蛋白質(A)之融合蛋白質中，配置於抗hTfR抗體與蛋白質(A)之間之連接子，於以下進行詳述。 對藉由上述方法等選擇出之產生對於hTfR具有相對較高之親和性之抗hTfR抗體的細胞進行培養而獲得之抗hTfR抗體、及使編碼具有高親和性之抗hTfR抗體之基因表現而獲得之抗hTfR抗體亦可藉由對其胺基酸序列導入置換、缺失、附加等突變，而修飾為具有所需特性之抗體。對於抗hTfR抗體之胺基酸序列之突變導入係藉由如下方式進行，即對與該胺基酸序列對應之基因施加突變。 抗hTfR抗體可藉由對其抗體之可變區之胺基酸序列施加置換、缺失、附加等突變，而適當調整抗體對於hTfR之親和性。例如，於抗體與抗原之親和性較高，且於水性液中之解離常數明顯較低之情形時，將抗體投予至生物體內時，抗體未與抗原解離，其結果為，有可能產生功能上之異常。於此種情形時，藉由對抗體之可變區導入突變，而將解離常數階段性地調整為原本之抗體之2～5倍、5～10倍、10～100倍等，而可獲得符合目標之最佳抗體。相反地，亦可藉由該突變之導入，而將解離常數階段性地調整為原本之抗體之1/2～1/5倍、1/5～1/10倍、1/10～1/100倍等。 對抗hTfR抗體之胺基酸序列導入置換、缺失、附加等突變時，例如藉由如下方式進行：以編碼抗hTfR抗體之基因為模板，藉由PCR等方法對基因之鹼基序列之特定部位導入突變，或隨機地導入突變。 以調整抗體與hTfR之親和性為目的之對抗hTfR抗體之胺基酸序列的突變之導入例如可藉由如下方式實現：將編碼作為單鏈抗體之抗hTfR抗體之基因組入至噬菌粒中，使用該噬菌粒而製作使單鏈抗體於衣殼表面上表現出之噬菌體，使突變原等進行作用，藉此於編碼單鏈抗體之基因上導入突變並且使噬菌體增生，藉由上述方法，自所增生之噬菌體中選擇表現具有所需解離常數之單鏈抗體之噬菌體，或者於一定條件下使用抗原管柱進行純化。 藉由上述選擇產生高親和性抗體之細胞之方法而獲得之對於hTfR具有相對較高之親和性的抗體較佳為藉由實施例7所記載之方法所測定之與hTfR的解離常數(KD )較佳為1×10-8 M以下者，更佳為1×10-9 M以下者，進而較佳為1×10-10 M以下者，進而更佳為1×10-11 M以下者。例如作為較佳者，可列舉：解離常數為1×10-13 M～1×10-9 M者、解離常數為1×10-13 M～1×10-10 M者。即便抗體為單鏈抗體亦相同。暫時獲得之抗體可以導入突變等而具有所需特性之方式適當進行修飾。 自以上述方式獲得之抗hTfR抗體中選擇具有對於猴TfR之親和性之抗體，藉此可獲得對於人類及猴之TfR均具有親和性之抗體。具有對於猴TfR之親和性之抗體例如可藉由使用利用基因重組技術所製作之重組猴TfR之ELISA(Enzyme-linked immunosorbent assay，酶聯免疫吸附測定)法等進行選擇。於該ELISA法中，將重組猴TfR添加至培養盤中並將之保持在其中後，使之與抗hTfR抗體接觸，繼而將未與重組猴TfR結合之抗體自培養盤去除，測定培養盤中所保持之抗體之量。對於重組猴TfR之親和性越高，培養盤中所保持之抗體之量變得越多，因此可選擇與保持有更多抗體之培養盤對應之抗體作為對猴TfR具有親和性之抗體。再者，此處所謂「猴」，較佳為除人類外之分類為類人猿類者，更佳為分類為猴科(Cercopithecidae)者，進而較佳為分類為獼猴屬(Macaca)者，例如為食蟹猴或恆河獼猴，尤其是食蟹猴適合用於評價。 對於人類及猴之hTfR均具有親和性之抗體具有如下有利之效果：可使用猴來觀察投予了該抗體時之於生物體內的動態。例如，於應用本發明之抗hTfR抗體而開發醫藥之情形時，可使用猴來實施該醫藥之藥物動力學試驗，因此可顯著地促進該醫藥之開發。 本發明中，關於對於hTfR具有相對較高之親和性且對於猴TfR亦具有親和性之抗體，尤其是藉由實施例7所記載之方法進行測定時，與人類及猴之TfR之解離常數為如下者： (a)與hTfR之解離常數：較佳為1×10-10 M以下，更佳為2.5×10-11 M以下，進而較佳為5×10-12 M以下，進而更佳為1×10-12 M以下， (b)與猴TfR之解離常數：較佳為1×10-9 M以下，更佳為5×10-10 M以下，進而較佳為1×10-10 M以下，例如為7.5×10-11 M以下。 例如，可列舉與hTfR及猴TfR之解離常數分別為1×10-10 M以下與1×10-9 M以下、1×10-11 M以下與5×10-10 M以下、5×10-12 M以下與1×10-10 M以下、5×10-12 M以下與7.5×10-11 M以下、1×10-12 M以下與1×10-10 M以下、1×10-12 M以下與7.5×10-11 M以下者。此處，與人類TfR之解離常數並無特別明確之下限，例如可設為5×10-13 M、1×10-13 M等。又，與猴TfR之解離常數亦無特別明確之下限，例如可設為1×10-11 M、1×10-12 M等。即便抗體為單鏈抗體亦相同。 關於藉由上述選擇產生高親和性抗體之細胞之方法而獲得之對於hTfR具有相對較高之親和性的抗體，於為人類以外之動物之抗體之情形，可設為人源化抗體。所謂人源化抗體，係指藉由一邊維持對於抗原之特異性，一邊使用人類以外之動物之抗體之可變區的一部分(例如，尤其是CDR之全部或一部分)之胺基酸序列，利用該序列置換人類抗體之適當區域(該序列向人類抗體之移植)而獲得之抗體。例如作為人源化抗體，可列舉：構成人類抗體之免疫球蛋白輕鏈之3個互補決定區域(CDR)與免疫球蛋白重鏈之3個互補決定區域(CDR)經其他哺乳動物之CDR置換之抗體。關於組入至人類抗體中之CDR所源自之生物物種，只要為人類以外之哺乳動物，則無特別限定，較佳為小鼠、大鼠、兔、馬、人類以外之靈長類，更佳為小鼠及大鼠，進而較佳為小鼠。但是，亦可設為人類抗體之一部分經其他人類抗體之一部分置換之抗體。 人源化抗體之製作方法於該技術領域中眾所周知，最常用的是基於Winter等人所發明之用非人類哺乳動物之抗體之CDR置換處於人類抗體之可變區之互補決定區域(CDR)的胺基酸序列之方法(Verhoeyen M. Science. 239. 1534-1536 (1988))者。此處，亦眾所周知有如下情形，即為了再現施體抗體所具有之原本活性，需要不僅藉由非人類哺乳動物之抗體之CDR，亦藉由與CDR之結構保持或同抗原之結合相關之CDR外之區域的胺基酸序列而置換成為受體之人類抗體之相應部位(Queen C. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 86. 10029-10033 (1989))。此處，CDR外之區域亦稱為架構區(FR)。 抗體之重鏈與輕鏈之可變區均包含4個架構區1～4(FR1～4)。FR1係於其N末端側與CDR1鄰接之區域，且於構成重鏈及輕鏈之各肽中，包含自其N末端直至與CDR1之N末端鄰接之胺基酸之胺基酸序列。FR2於構成重鏈及輕鏈之各肽中，包含CDR1與CDR2之間之胺基酸序列。FR3於構成重鏈及輕鏈之各肽中，包含CDR2與CDR3之間之胺基酸序列。FR4包含自與CDR3之C末端鄰接之胺基酸直至可變區之C末端之胺基酸序列。但是，並不限於此，於本發明中，於上述各FR區域中，亦可將除其N末端側之1～5個胺基酸及/或C末端側之1～5個胺基酸以外之區域設為架構區。 人源化抗體之製作包括如下作業：代替人類抗體之可變區CDR(及視情形之其周邊之FR)，移植非人類哺乳動物之抗體之CDR(及視情形之其周邊之FR)。於該作業中，原本之人類抗體之可變區之架構區可自包含生殖細胞系列抗體基因序列之公共DNA資料庫等獲得。例如，人類重鏈及輕鏈可變區基因之生殖細胞系列DNA序列及胺基酸序列可自「VBase」人類生殖細胞系序列資料庫(於網際網路中能夠於www.mrc-cpe.cam.ac.uk/vbase中獲取)中選擇。此外，亦可自公表之文獻、例如「Kabat EA. Sequences of Proteins of Immunological Interest，第5版，美國衛生與人群服務部，NIH Publication No. 91-3242 (1991)」、「Tomlinson IM. J. Mol. Biol. 227. 776-98 (1992)」、「Cox JPL. Eur. J Immunol. 24：827-836 (1994)」等所記載之DNA序列及胺基酸序列中進行選擇。 如上所述，於人源化抗體中，移植至原本之人類抗體之可變區之非人類哺乳動物的抗體之區域一般包含CDR其本身、或者CDR與其周邊之FR。但是，與CDR一併移植來之FR亦與CDR之結構保持或同抗原之結合相關，而認為實質上具有決定抗體之互補性之功能，因此於本發明中「CDR」一詞於製作人源化抗體之情形時，係指自非人類哺乳動物之抗體移植至人源化抗體之區域、或可移植之區域。即，於CDR中，即便為一般視為FR之區域，只要其為與CDR之結構保持或同抗原之結合相關，而認為實質上具有決定抗體之互補性之功能者，則於本發明中亦包含於CDR中。 本發明之抗hTfR抗體於將其藉由靜脈注射等投予至生物體內之情形時，可高效率地結合至存在於腦內之微血管之內皮細胞上之hTfR。已與hTfR結合之抗體係藉由內噬作用、胞吞轉送作用等機制通過血腦障壁而摻入至腦內。因此，可藉由使應於腦內發揮功能之蛋白質、低分子化合物等與本發明之抗hTfR抗體結合，而使該等物質高效率地通過血腦障壁而到達至腦內。又，本發明之抗hTfR抗體可在通過血腦障壁後，到達至大腦之腦實質、海馬區之神經細胞、小腦之浦金埃氏細胞等、或者至少該等中之任一者。並且，亦預計會到達至大腦紋狀體之神經細胞及中腦黑質之神經細胞。因此，可藉由使對於該等組織或細胞發揮作用之蛋白質、低分子化合物等與本發明之抗hTfR抗體結合，而到達至該等組織或細胞。 於使通常而言由於無法通過血腦障壁，故而於靜脈內投予時於腦內幾乎或完全無法發揮生理性、藥理性作用之物質(蛋白質、低分子化合物等)自血中到達至腦內而藉此發揮作用的方面上，本發明之抗hTfR抗體可成為有效之方法。尤其是本發明之抗hTfR抗體於通過血腦障壁後，到達至大腦之腦實質、海馬區之神經細胞、小腦之浦金埃氏細胞等、或者至少該等中之任一者。並且，亦預計會到達至大腦紋狀體之神經細胞及中腦黑質之神經細胞。因此，可藉由利用靜脈內投予將該等物質以與本發明之抗hTfR抗體分子結合的形態進行血中投予，而於該等腦組織或細胞中發揮或強化該等之作用。 作為使抗hTfR抗體與此種物質(蛋白質、低分子化合物等)結合之方法，有經由非肽連接子或肽連接子而結合之方法。作為非肽連接子，可使用聚乙二醇、聚丙二醇、乙二醇與丙二醇之共聚物、聚氧乙基化多元醇、聚乙烯醇、多糖類、葡聚糖、聚乙烯醚、生物降解性高分子、脂質聚合物、甲殼素類、及玻尿酸、或者該等之衍生物、或組合有該等者。肽連接子係由肽鍵結之1～50個胺基酸所構成之肽鏈或其衍生物，且係其N末端與C末端分別與抗hTfR抗體或蛋白質、低分子化合物等之任一者形成共價鍵，藉此使抗hTfR抗體與蛋白質、低分子化合物等結合者。 使用PEG作為非肽連接子而使本發明之抗hTfR抗體與所需之其他蛋白質(A)結合所得者尤其是指抗hTfR抗體-PEG-蛋白質。抗hTfR抗體-PEG-蛋白質可藉由使抗hTfR抗體與PEG結合而製作抗hTfR抗體-PEG，繼而使抗hTfR抗體-PEG與其他蛋白質(A)結合而製造。或者，抗hTfR抗體-PEG-蛋白質亦可藉由使其他蛋白質(A)與PEG結合而製作蛋白質-PEG，繼而使蛋白質-PEG與抗hTfR抗體結合而製造。於使PEG與抗hTfR抗體及其他蛋白質(A)結合時，可使用經碳酸酯、羰基咪唑、羧酸之活性酯、吖內酯、環狀醯亞胺硫酮、異氰酸酯、異硫氰酸酯、醯亞胺酯、或醛等官能基修飾之PEG。該等導入至PEG之官能基主要與抗hTfR抗體及其他蛋白質(A)分子內之胺基進行反應，藉此PEG與hTfR抗體及其他蛋白質(A)進行共價鍵結。此時所使用之PEG之分子量及形狀並無特別限定，其平均分子量(MW)較佳為MW＝500～60000，更佳為MW＝500～20000。例如，平均分子量為約300、約500、約1000、約2000、約4000、約10000、約20000等之PEG可適宜地用作非肽連接子。於使抗hTfR抗體與所需之低分子化合物結合之情形時亦相同。 例如，抗hTfR抗體-PEG可藉由將抗hTfR抗體與具有醛基作為官能基之聚乙二醇(ALD-PEG-ALD)以ALD-PEG-ALD相對於該抗體之莫耳比成為11、12.5、15、110、120等之方式進行混合，於其中添加NaCNBH3 等還原劑並進行反應而獲得。繼而，使抗hTfR抗體-PEG於NaCNBH3 等還原劑之存在下與其他蛋白質(A)進行反應，藉此可獲得抗hTfR抗體-PEG-蛋白質。可相反地首先使其他蛋白質(A)與ALD-PEG-ALD結合而製作蛋白質-PEG，繼而使蛋白質-PEG與抗hTfR抗體結合，藉此亦可獲得抗hTfR抗體-PEG-蛋白質。 抗hTfR抗體與其他蛋白質(A)亦可於抗hTfR抗體之重鏈或輕鏈之C末端側或N末端側，經由連接子序列或直接利用肽鍵而分別結合其他蛋白質(A)之N末端或C末端。如上述般使抗hTfR抗體與其他蛋白質(A)結合而成之融合蛋白質可藉由如下方式獲得：將於編碼抗hTfR抗體之重鏈或輕鏈之cDNA之3'末端側或5'末端側直接或隔著編碼連接子序列之DNA片段將編碼其他蛋白質(A)之cDNA配置於讀碼框內(in-frame)而成之DNA片段組入至哺乳動物細胞用表現載體，對導入有該表現載體之哺乳動物細胞進行培養。關於該哺乳動物細胞，於使編碼其他蛋白質(A)之DNA片段與重鏈結合之情形時，亦將組入有編碼抗hTfR抗體之輕鏈之cDNA片段之哺乳動物細胞用表現載體導入至同一宿主細胞中，又，於使編碼其他蛋白質(A)之DNA片段與輕鏈結合之情形時，亦將組入有編碼抗hTfR抗體之重鏈之cDNA片段之哺乳動物細胞用表現載體組入至同一宿主細胞中。於抗hTfR抗體為單鏈抗體之情形時，使抗hTfR抗體與其他蛋白質(A)結合而成之融合蛋白質可藉由如下方法獲得：將於編碼其他蛋白質(A)之cDNA之5'末端側或3'末端側直接或隔著編碼連接子序列之DNA片段連結有編碼單鏈抗hTfR抗體之cDNA的DNA片段組入至(哺乳動物細胞、酵母等真核細胞或大腸桿菌等原核細胞用)表現載體中，使之於導入有該表現載體之該等細胞中表現。 於抗hTfR抗體之輕鏈之C末端側結合有其他蛋白質(A)之類型的融合蛋白質係抗人類運鐵蛋白受體抗體含有包含輕鏈之可變區之全部或一部分之胺基酸序列、與包含重鏈之可變區之全部或一部分之胺基酸序列者，且係其他蛋白質(A)結合至該抗人類運鐵蛋白受體抗體之輕鏈之C末端側者。此處，抗hTfR抗體之輕鏈與其他蛋白質(A)可直接結合，亦可經由連接子結合。 於抗hTfR抗體之重鏈之C末端側結合有其他蛋白質(A)之類型的融合蛋白質係抗人類運鐵蛋白受體抗體含有包含輕鏈之可變區之全部或一部分之胺基酸序列、與包含重鏈之可變區之全部或一部分之胺基酸序列者，且係其他蛋白質(A)結合至該抗人類運鐵蛋白受體抗體之重鏈之C末端側者。此處，抗hTfR抗體之重鏈與其他蛋白質(A)可直接結合，亦可經由連接子結合。 於抗hTfR抗體之輕鏈之N末端側結合有其他蛋白質(A)之類型的融合蛋白質係抗人類運鐵蛋白受體抗體含有包含輕鏈之可變區之全部或一部分之胺基酸序列、與包含重鏈之可變區之全部或一部分之胺基酸序列者，且係其他蛋白質(A)結合至該抗人類運鐵蛋白受體抗體之輕鏈之N末端側者。此處，抗hTfR抗體之輕鏈與其他蛋白質(A)可直接結合，亦可經由連接子結合。 於抗hTfR抗體之重鏈之N末端側結合有其他蛋白質(A)之類型的融合蛋白質係抗人類運鐵蛋白受體抗體含有包含輕鏈之可變區之全部或一部分之胺基酸序列、與包含重鏈之可變區之全部或一部分之胺基酸序列者，且係其他蛋白質(A)結合至該抗人類運鐵蛋白受體抗體之重鏈之N末端側者。此處，抗hTfR抗體之重鏈與其他蛋白質(A)可直接結合，亦可經由連接子結合。 此時，配置於抗hTfR抗體與其他蛋白質(A)之間之連接子序列係由較佳為1～50個、更佳為1～17個、進而較佳為1～10個、進而更佳為1～5個胺基酸所構成之肽鏈，但可藉由應結合至抗hTfR抗體之其他蛋白質(A)，而將構成連接子序列之胺基酸之個數適當調整為1個、2個、3個、1～17個、1～10個、10～40個、20～34個、23～31個、25～29個、27個等。此種連接子序列只要藉由其連結之抗hTfR抗體保持與hTfR之親和性，且藉由該連接子序列所連結之其他蛋白質(A)於生理條件下可發揮該蛋白質之生理活性，則其胺基酸序列並無限定，較佳為由甘胺酸與絲胺酸所構成者。例如可列舉：包含甘胺酸或絲胺酸之任一個胺基酸者，包含胺基酸序列Gly-Ser、胺基酸序列Gly-Gly-Ser、胺基酸序列Gly-Gly-Gly-Gly-Ser(序列編號3)、胺基酸序列Gly-Gly-Gly-Gly-Gly-Ser(序列編號4)、胺基酸序列Ser-Gly-Gly-Gly-Gly(序列編號5)、或該等胺基酸序列1～10個或2～5個接連而成之序列者。上述連接子序列係具有包含1～50個胺基酸之序列、包含2～17個、2～10個、10～40個、20～34個、23～31個、25～29個、或27個胺基酸之序列等者。例如，包含胺基酸序列Gly-Ser者可適宜地用作連接子序列。又，包含繼胺基酸序列Gly-Ser之後連接5個胺基酸序列Gly-Gly-Gly-Gly-Ser(序列編號3)而成之共計27個胺基酸序列者可適宜地用作連接子序列。進而，包含由5個胺基酸序列Gly-Gly-Gly-Gly-Ser(序列編號3)接連而成之共計25個胺基酸序列者亦可適宜地用作連接子序列。 於抗hTfR抗體與其他蛋白質(A)之融合蛋白質中，抗hTfR抗體為單鏈抗體之情形時，包含免疫球蛋白輕鏈之可變區之全部或一部分之胺基酸序列、與包含免疫球蛋白重鏈之可變區之全部或一部分之胺基酸序列一般經由連接子序列而結合。此時，只要抗hTfR抗體對於hTfR之親和性得到保持，則亦可於源自輕鏈之胺基酸序列之C末端側結合連接子序列，進而於其C末端側結合源自重鏈之胺基酸序列，又，亦可與之相反，於源自重鏈之胺基酸序列之C末端側結合連接子序列，進而於其C末端側結合源自輕鏈之胺基酸序列。 配置於免疫球蛋白之輕鏈與重鏈之間之連接子序列係由較佳為2～50個、更佳為8～50個、進而較佳為10～30個、進而更佳為12～18個或15～25個、例如15個或25個胺基酸所構成之肽鏈。此種連接子序列只要藉由其兩鏈連結而成之抗hTfR抗體保持與hTfR之親和性且結合至該抗體之其他蛋白質(A)於生理條件下可發揮其生理活性，則其胺基酸序列並無限定，較佳為由甘胺酸所構成者或由甘胺酸與絲胺酸所構成者，例如為包含胺基酸序列Gly-Ser、胺基酸序列Gly-Gly-Ser、胺基酸序列Gly-Gly-Gly、胺基酸序列Gly-Gly-Gly-Gly-Ser(序列編號3)、胺基酸序列Gly-Gly-Gly-Gly-Gly-Ser(序列編號4)、胺基酸序列Ser-Gly-Gly-Gly-Gly(序列編號5)、或該等胺基酸序列2～10個或2～5個接連而成之序列者。作為連接子序列之較佳一態樣，可列舉：含有包含3個胺基酸序列Gly-Gly-Gly-Gly-Ser(序列編號3)接連而成之15個胺基酸之序列者。 作為於抗hTfR抗體為單鏈抗體之情形時本發明之人源化抗hTfR抗體與其他蛋白質(A)之融合蛋白質之具體態樣的一例，可例示：於其他蛋白質(A)之C末端側經由包含繼胺基酸序列Gly-Ser之後連接5個胺基酸序列Gly-Gly-Gly-Gly-Ser(序列編號3)而成之共計27個胺基酸之第1連接子序列，結合有單鏈抗體者。作為此處所使用之單鏈抗體之較佳一態樣，可列舉：於具有序列編號65所記載之胺基酸序列之人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈的可變區之C末端，經由包含3個胺基酸序列Gly-Gly-Gly-Gly-Ser(序列編號3)接連而成之共計15個胺基酸之第1連接子序列，而結合有具有序列編號18所記載之胺基酸序列之抗hTfR抗體輕鏈之可變區者即具有序列編號60所記載之胺基酸序列者；於具有序列編號61所記載之胺基酸序列之人源化抗hTfR抗體編號3N之Fab重鏈的C末端側，經由包含於序列編號3所示之胺基酸序列接連6次之胺基酸序列後接著胺基酸序列Gly-Gly的32個胺基酸之連接子，而結合有具有序列編號23所記載之胺基酸序列的抗hTfR抗體輕鏈者即具有序列編號98所記載之胺基酸序列者。 於抗hTfR抗體為單鏈抗體之情形時之此種融合蛋白質例如可藉由利用組入有具有編碼融合蛋白質之鹼基序列之DNA片段的表現載體使哺乳動物細胞等宿主細胞轉形，對該宿主細胞進行培養而製造。 再者，於本發明中在1個肽鏈中包含複數個連接子序列之情形時，為了方便起見，各連接子序列自N末端側開始依序命名為第1連接子序列、第2連接子序列。 作為於抗hTfR抗體為Fab之情形時本發明之人源化抗hTfR抗體與其他蛋白質(A)之融合蛋白質之具體態樣之一例，可列舉：於其他蛋白質(A)之C末端側經由包含接著Gly-Ser後5個胺基酸序列Gly-Gly-Gly-Gly-Ser(序列編號3)接連而成之共計27個胺基酸的連接子序列，而融合有包含抗hTfR抗體重鏈之可變區與CH 1區域之區域者。此時除CH 1區域外，亦可包含鉸鏈部之一部分，但該鉸鏈部不包含形成重鏈間之二硫鍵之半胱胺酸殘基。 作為抗hTfR抗體為Fab之情形時之較佳重鏈的一例，可列舉：具有序列編號61所記載之胺基酸序列者。序列編號61之胺基酸序列係具有序列編號66所示之胺基酸序列之人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈的Fab，相當於序列編號66之胺基酸序列之自N末端側至第1～226位之部分。再者，序列編號61之自N末端至第1～118位之部分相當於可變區(序列編號65)，第119～216位之部分相當於CH 1區域，第217～226位之部分相當於鉸鏈部。 於抗hTfR抗體為Fab之情形時，亦可進而將其他IgG之Fc區域導入至融合蛋白質。藉由將Fc區域導入至融合蛋白質，可提高融合蛋白質於血中等生物體內之穩定性。作為該導入有Fc區域之融合蛋白質，例如為於其他蛋白質(A)之C末端側直接或經由連接子序列而結合人類IgG Fc區域，且於該人類IgG Fc區域之C末端側直接或經由連接子序列而結合抗人類運鐵蛋白受體抗體之Fab重鏈而成者。 其他蛋白質(A)與人類IgG Fc區域之間之連接子序列較佳為由1～50個胺基酸所構成。此處，胺基酸之個數係適當調整為1～17個、1～10個、10～40個、20～34個、23～31個、25～29個、27個等。此種連接子序列並不限定於其胺基酸序列，較佳為由甘胺酸與絲胺酸所構成者。例如可列舉：包含甘胺酸或絲胺酸之任一個胺基酸者，包含胺基酸序列Gly-Ser、胺基酸序列Gly-Gly-Ser、胺基酸序列Gly-Gly-Gly-Gly-Ser(序列編號3)、胺基酸序列Gly-Gly-Gly-Gly-Gly-Ser(序列編號4)、胺基酸序列Ser-Gly-Gly-Gly-Gly(序列編號5)、或該等胺基酸序列1～10個或2～5個接連而成之包含50個以下胺基酸之序列、包含2～17個、2～10個、10～40個、20～34個、23～31個、25～29個、或25個胺基酸之序列等者。例如，包含由5個胺基酸序列Gly-Gly-Gly-Gly-Ser(序列編號3)接連而成之共計25個胺基酸序列者可適宜地用作連接子序列。關於人類IgG Fc區域與Fab重鏈之間之連接子序列亦相同。 再者，與導入人類IgG Fc區域之情形時，人類IgG Fc區域亦可結合至抗人類運鐵蛋白受體抗體之重鏈與輕鏈之任一者。又，抗體亦可為包含F(ab')2 、F(ab')、單鏈抗體之其他抗原結合性片段。 所導入之人類IgG Fc區域之IgG之類型並無特別限定，可為IgG1～IgG5之任一種。又，所導入之人類IgG Fc區域可為Fc區域之整體，亦可為其一部分。作為該人類IgG Fc區域之較佳一實施形態，可列舉作為人類IgG1之Fc之全區域之具有序列編號70所示之胺基酸序列者。又，作為導入有人類IgG Fc區域之Fab重鏈之胺基酸序列，可列舉：於人源化抗hTfR抗體3N之Fab重鏈之胺基酸序列(序列編號61)的N末端側，經由包含由5個胺基酸序列Gly-Gly-Gly-Gly-Ser(序列編號3)接連而成之共計25個胺基酸序列之連接子序列，而結合有具有序列編號70所示之胺基酸序列之人類IgG Fc區域的具有序列編號71所示之胺基酸序列者。 亦可對抗hTfR抗體與其他蛋白質(A)之融合蛋白質以具有對於白蛋白之親和性之方式進行修飾。對於白蛋白之親和性可藉由使對於白蛋白具有親和性之化合物、肽、蛋白質等結合至融合蛋白質而達成。導入有對於白蛋白之親和性之融合蛋白質係至少其一部分與白蛋白結合並於血中循環。白蛋白具有使與其結合之蛋白質穩定之功能。因此，藉由導入對於白蛋白之親和性，可使投予至生物體內之融合蛋白質於血中之半衰期長期化，因此可強化其藥效。對於白蛋白之親和性之導入係於如下情形時更具效果，即抗hTfR抗體為欠缺有助於抗體之穩定性之Fc區域者、例如為Fab之情形。 又，於抗hTfR抗體與其他蛋白質(A)之融合蛋白質投予至生物體內時，導入對於白蛋白之親和性即便於如顯示出免疫原性之情形時亦具效果。藉由使融合蛋白質與白蛋白結合，而阻礙顯示出融合蛋白質之免疫原性之部位於免疫細胞中呈現，因此降低免疫原性。 於抗hTfR抗體與其他蛋白質(A)之融合蛋白質中導入對於白蛋白之親和性的情形時，該供導入親和性之部分可為抗hTfR抗體之輕鏈、抗hTfR抗體之重鏈、其他蛋白質(A)、及連接子部分之任一者，亦可導入至該等2個以上之部分。 作為對於白蛋白具有親和性之肽或蛋白質，例如可使用具有序列編號74所示之胺基酸序列之對源自鏈球菌菌株(Streptococcus strain)G418之蛋白質的白蛋白結合區域(Alm T. Biotechnol J. 5. 605-17 (2010))以顯示出鹼耐性之修飾而成之肽，但並不限定於此。作為使對於白蛋白具有親和性之肽或蛋白質(白蛋白親和性肽)、與抗hTfR抗體和其他蛋白質(A)之融合蛋白質(抗hTfR抗體-蛋白質(A)融合蛋白質)結合之方法，有經由非肽連接子或肽連接子而結合之方法。作為非肽連接子，可使用聚乙二醇、聚丙二醇、乙二醇與丙二醇之共聚物、聚氧乙基化多元醇、聚乙烯醇、多糖類、葡聚糖、聚乙烯醚、生物降解性高分子、脂質聚合物、甲殼素類、及玻尿酸、或者該等之衍生物、或組合有該等者。肽連接子係由肽鍵結之1～50個胺基酸所構成之肽鏈或其衍生物，且係其N末端與C末端分別與白蛋白親和性肽或融合蛋白質之任一者形成共價鍵，藉此使白蛋白親和性肽與融合蛋白質結合者。 使用PEG作為非肽連接子而使白蛋白親和性肽與抗hTfR抗體和其他蛋白質(A)之融合蛋白質結合所得者尤其是指白蛋白親和性肽-PEG-蛋白質(A)融合蛋白質。白蛋白親和性肽-抗hTfR抗體-蛋白質(A)融合蛋白質可藉由使白蛋白親和性肽與PEG結合而製作白蛋白親和性肽-PEG，繼而使白蛋白親和性肽-PEG與抗hTfR抗體-蛋白質(A)融合蛋白質結合而製造。或者，白蛋白親和性肽-抗hTfR抗體-蛋白質(A)融合蛋白質亦可藉由使抗hTfR抗體-蛋白質(A)融合蛋白質與PEG結合而製作抗hTfR抗體-蛋白質(A)融合蛋白質，繼而使白蛋白親和性肽與抗hTfR抗體-蛋白質(A)融合蛋白質-PEG結合而製造。於使PEG與白蛋白親和性肽及抗hTfR抗體-蛋白質(A)融合蛋白質結合時，可使用經碳酸酯、羰基咪唑、羧酸之活性酯、吖內酯、環狀醯亞胺硫酮、異氰酸酯、異硫氰酸酯、醯亞胺酯、或醛等官能基修飾之PEG。該等導入至PEG之官能基主要與白蛋白親和性肽及抗hTfR抗體-蛋白質(A)融合蛋白質分子內之胺基進行反應，藉此PEG與白蛋白親和性肽及抗hTfR抗體-蛋白質(A)融合蛋白質進行共價鍵結。此時所使用之PEG之分子量及形狀並無特別限定，其平均分子量(MW)較佳為MW＝500～60000，更佳為MW＝500～20000。例如，平均分子量為約300、約500、約1000、約2000、約4000、約10000、約20000等之PEG可適宜地用作非肽連接子。 例如，白蛋白親和性肽-PEG可藉由將白蛋白親和性肽與醛基改性PEG(ALD-PEG-ALD)以該改性PEG相對於該白蛋白親和性肽之莫耳比成為11、12.5、15、110、120等之方式進行混合，於其中添加NaCNBH3 等還原劑並進行反應而獲得。繼而，使白蛋白親和性肽-PEG於NaCNBH3 等還原劑之存在下與抗hTfR抗體-蛋白質(A)融合蛋白質進行反應，藉此可獲得白蛋白親和性肽-PEG-抗hTfR抗體-蛋白質(A)融合蛋白質。亦可相反地首先使抗hTfR抗體-蛋白質(A)融合蛋白質與ALD-PEG-ALD結合而製作抗hTfR抗體-蛋白質(A)融合蛋白質-PEG，繼而使白蛋白親和性肽與融合蛋白質-PEG結合，藉此獲得白蛋白親和性肽-PEG-抗hTfR抗體-蛋白質(A)融合蛋白質。 亦可使抗hTfR抗體-蛋白質(A)融合蛋白質與白蛋白親和性肽融合。該融合蛋白質(抗hTfR抗體-蛋白質(A)融合蛋白質-白蛋白親和性肽)可藉由如下方式獲得：將於編碼抗hTfR抗體-蛋白質(A)融合蛋白質之重鏈(包含重鏈與蛋白質(A)之融合蛋白質)或輕鏈(包含輕鏈與蛋白質(A)之融合蛋白質)之cDNA之3'末端側或5'末端側直接或經由編碼連接子序列之DNA片段將編碼白蛋白親和性肽之cDNA配置於讀碼框內(in-frame)而成之DNA片段組入至哺乳動物細胞用表現載體，對導入有該表現載體之哺乳動物細胞進行培養。於使編碼白蛋白親和性肽之DNA片段與重鏈(或重鏈與蛋白質(A)之融合蛋白質)結合之情形時，將組入有編碼構成抗hTfR抗體之輕鏈與蛋白質(A)之融合蛋白質(或輕鏈)之cDNA片段的哺乳動物細胞用表現載體亦一併導入至同一宿主細胞中，又，於使編碼白蛋白親和性肽之DNA片段與輕鏈(或輕鏈與蛋白質(A)之融合蛋白質)結合之情形時，將組入有編碼抗hTfR抗體之重鏈與蛋白質(A)之融合蛋白質(或重鏈)之cDNA片段的哺乳動物細胞用表現載體亦一併導入至同一宿主細胞中。即，白蛋白親和性肽可結合至抗hTfR抗體-蛋白質(A)融合蛋白質之重鏈(包含重鏈與蛋白質(A)之融合蛋白質)或輕鏈(包含輕鏈與蛋白質(A)之融合蛋白質)之N末端側或C末端側之任一者，於使蛋白質(A)結合至抗hTfR抗體之重鏈之N末端側之情形時，較佳為結合至抗hTfR抗體之C末端側，尤佳為結合至重鏈之C末端側。 於使抗hTfR抗體-蛋白質(A)融合蛋白質與白蛋白親和性肽融合之情形時，可直接或經由連接子序列融合。此處，連接子序列較佳為由1～50個胺基酸所構成。此處，胺基酸之個數係適當調整為1～17個、1～10個、10～40個、20～34個、23～31個、25～29個、27個等。此種連接子序列並不限定於其胺基酸序列，較佳為由甘胺酸與絲胺酸所構成者。例如可列舉：包含甘胺酸或絲胺酸之任一個胺基酸者，包含胺基酸序列Gly-Ser、胺基酸序列Gly-Gly-Ser、胺基酸序列Gly-Gly-Gly-Gly-Ser(序列編號3)、胺基酸序列Gly-Gly-Gly-Gly-Gly-Ser(序列編號4)、胺基酸序列Ser-Gly-Gly-Gly-Gly(序列編號5)、或該等胺基酸序列1～10個或2～5個連結而成之包含50個以下胺基酸之序列、包含2～17個、2～10個、10～40個、20～34個、23～31個、25～29個、或25個胺基酸之序列等者。例如，包含3個胺基酸序列Gly-Gly-Gly-Gly-Ser(序列編號3)接連而成之共計15個胺基酸序列者可適宜地用作連接子序列。 導入有白蛋白親和性肽之抗hTfR抗體-蛋白質(A)融合蛋白質之與白蛋白之結合親和性於藉由實施例7所記載之生物膜層干涉法測定時，較佳為1×10-7 M以下，更佳為5×10-7 M以下，進而較佳為1×10-8 M以下，進而更佳為1×10-9 M以下。 Fab抗體亦可藉由導入Fc區域或白蛋白親和性肽以外之方法而於血中穩定。例如，Fab抗體可藉由對Fab抗體本身、或Fab抗體與其他蛋白質之融合體進行PEG修飾而穩定。該方法一般於蛋白質醫藥之領域中實施，而經PEG化之紅血球生成素、干擾素等作為醫藥品得到實用化。又，Fab抗體亦可藉由對其導入突變而穩定化。例如，可藉由將輕鏈之自N末端側起第4位之甲硫胺酸置換為白胺酸而使Fab抗體穩定。但是，突變之導入方法並不限定於此，亦可對重鏈導入突變。又，Fab抗體之穩定方法並不限定於該等者，可應用眾所周知之全部方法。 應與抗hTfR抗體結合之其他蛋白質(A)並無特別限定，儘管為於生物體內可發揮生理活性者、尤其是應到達至腦內而發揮其功能者，但若直接使用則無法通過血腦障壁，因此為於靜脈內投予時無法期待於腦內發揮功能之蛋白質。作為此種蛋白質，例如可列舉：神經生長因子(NGF)、或α-L-艾杜糖醛酸酶(IDUA)、艾杜糖醛酸-2-硫酸酯酶(IDS)、葡萄糖腦苷脂酶(GBA)、β-半乳糖苷酶、GM2活化蛋白質、β-己糖胺酶A、β-己糖胺酶B、N-乙醯葡萄糖胺-1-磷酸轉移酶、α-甘露糖苷酶(LAMAN)、β-甘露糖苷酶、半乳糖神經醯胺酶(GALC)、脂結合蛋白C、芳基硫酸酯酶A(ARSA)、α-L-岩藻糖苷酶(FUCA1)、天冬胺醯胺基葡糖苷酶、α-N-乙醯基半乳糖苷酶、酸性神經磷脂酶(ASM)、α-半乳糖苷酶A、β-葡萄糖醛酸苷酶(GUSB)、乙醯肝素N-硫酸酯酶(SGSH)、α-N-乙醯葡萄糖胺苷酶(NAGLU)、乙醯輔酶Aα-胺基葡糖苷N-乙醯轉移酶、N-乙醯葡萄糖胺-6-硫酸酯酶、酸性神經醯胺酶(AC)、澱粉-1,6-葡萄糖苷酶、唾液酸酶、天冬胺醯胺基葡糖苷酶、棕櫚醯蛋白硫酯酶-1(PPT-1)、三肽基肽酶-1(TPP-1)、玻尿酸酶-1、酸性α-葡萄糖苷酶(GAA)、CLN1、CLN2等溶酶體酶。 與抗hTfR抗體結合之神經生長因子(NGF)可用作阿茲海默氏症之癡呆症治療藥，與抗hTfR抗體融合之α-L-艾杜糖醛酸酶(IDUA)可用作Hurler症候群或Hurler-Scheie症候群中之中樞神經障礙治療劑，與抗hTfR抗體融合之艾杜糖醛酸-2-硫酸酯酶(IDS)可用作Hunter症候群中之中樞神經障礙治療劑，葡萄糖腦苷脂酶(GBA)可用作高歇病(Gaucher's disease)中之中樞神經障礙治療劑，β半乳糖苷酶可用作GM1-神經節苷脂沈積症(GM1-gangliosidoses)1～3型中之中樞神經障礙治療劑，GM2活化蛋白質可用作GM2-神經節苷脂沈積症AB異型中之中樞神經障礙治療劑，β-己糖胺酶A可用作山多夫氏病(Sandhoff's disease)及泰-薩二氏症(Tay-Sachs disease)中之中樞神經障礙治療劑，β-己糖胺酶B可用作山多夫氏病中之中樞神經障礙治療劑，N-乙醯葡萄糖胺-1-磷酸轉移酶可用作I-細胞病中之中樞神經障礙治療劑，α-甘露糖苷酶(LAMAN)可用作α-甘露糖苷儲積症中之中樞神經障礙治療劑，β-甘露糖苷酶可用作β-甘露糖苷儲積症中之中樞神經障礙治療劑，半乳糖神經醯胺酶(GALC)可用作克拉培氏病(Krabbe's disease)中之中樞神經障礙治療劑，脂結合蛋白C可用作高歇病樣儲積症中之中樞神經障礙治療劑，芳基硫酸酯酶A(ARSA)可用作異染性白質退化症(異染性白質失養症)中之中樞神經障礙治療劑，α-L-岩藻糖苷酶(FUCA1)可用作岩藻糖苷儲積症中之中樞神經障礙治療劑，天冬胺醯胺基葡糖苷酶可用作天冬胺醯葡糖胺尿症(aspartylglucosaminuria)中之中樞神經障礙治療劑，α-N-乙醯基半乳糖苷酶可用作辛德勒疾病及川崎病中之中樞神經障礙治療劑，酸性神經磷脂酶(ASM)可用作尼-皮二氏病中之中樞神經障礙治療劑，α-半乳糖苷酶A可用作法布瑞氏症中之中樞神經障礙治療劑，β-葡萄糖醛酸苷酶(GUSB)可用作Sly氏症候群中之中樞神經障礙治療劑，乙醯肝素N-硫酸酯酶(SGSH)、α-N-乙醯葡萄糖胺苷酶(NAGLU)、乙醯輔酶Aα-胺基葡糖苷N-乙醯轉移酶及N-乙醯葡萄糖胺-6-硫酸酯酶可用作Sanfilippo氏症候群中之中樞神經障礙治療劑，酸性神經醯胺酶(AC)可用作Farber病中之中樞神經障礙治療劑，澱粉-1,6-葡萄糖苷酶可用作Cori氏病(Forbes-Cori病)中之中樞神經障礙治療劑，唾液酸酶可用作唾液酸酶缺損症中之中樞神經障礙治療劑，棕櫚醯蛋白硫酯酶-1(PPT-1)可用作神經性類蠟脂褐質病(Neuronal Ceroid Lipofuscinos)或Santavuori-Haltia病中之中樞神經障礙治療劑，三肽基肽酶-1(TPP-1)可用作神經性類蠟脂褐質病或Jansky-Bielschowsky病中之中樞神經障礙治療劑，玻尿酸酶-1可用作玻尿酸酶缺損症中之中樞神經障礙治療劑，酸性α-葡萄糖苷酶(GAA)可用作龐貝氏症中之中樞神經障礙治療劑，CLN1及2可用作巴登氏病(Batten disease)中之中樞神經障礙治療劑。預測尤其是本發明之抗hTfR抗體於通過血腦障壁後，會到達至大腦之腦實質、海馬區之神經細胞、小腦之浦金埃氏細胞等，或者亦到達至大腦紋狀體之神經細胞及中腦黑質之神經細胞，因此藉由與應於該等組織或細胞中發揮藥效之蛋白質融合，可強化該蛋白質之藥效。但是，醫藥用途並不限於該等疾病。 再者，本發明中可用作治療劑者亦可用以預防疾病之發病。 此外，作為可與抗hTfR抗體結合而發揮藥效之蛋白質，可列舉：溶酶體酶、睫狀神經滋養因子(CNTF)、源自神經膠細胞株之神經滋養因子(GDNF)、神經滋養素3、神經滋養素4/5、神經滋養素6、神經調節蛋白1、紅血球生成素、達貝泊汀(Darbepoetin)、活化素、鹼性纖維芽細胞生長因子(bFGF)、纖維芽細胞生長因子2(FGF2)、上皮細胞生長因子(EGF)、血管內皮生長因子(VEGF)、干擾素α、干擾素β、干擾素γ、介白素6、顆粒球巨噬細胞菌落刺激因子(GM-CSF)、顆粒球菌落刺激因子(G-CSF)、巨噬細胞菌落刺激因子(M-CSF)、各種細胞激素、腫瘤壞死因子α受體(TNF-α受體)、PD-1配體、PD-L1、PD-L2、具有使β澱粉樣蛋白分解之活性之酶、抗β澱粉樣蛋白抗體、抗BACE抗體、抗EGFR抗體、抗PD-1抗體、抗PD-L1抗體、抗PD-L2抗體、抗HER2抗體、抗TNF-α抗體、抗CTLA-4抗體、及其他抗體醫藥等。 與抗hTfR抗體結合之溶酶體酶可用作溶酶體儲積症中之中樞神經障礙治療劑，CNTF可用作肌萎縮性側索硬化症之治療劑，GDNF、神經滋養素3及神經滋養素4/5可用作腦缺血之治療劑，GDNF可用作帕金森氏症之治療劑，神經調節蛋白1可用作精神分裂症之治療劑，紅血球生成素及達貝泊汀(Darbepoetin)可用作腦缺血之治療劑，bFGF及FGF2可用作外傷性之中樞神經系統障礙之治療劑，且對於腦外科手術、脊椎外科手術後之恢復，具有使β澱粉樣蛋白分解之活性之酶、抗β澱粉樣蛋白抗體及抗BACE抗體可用作阿茲海默氏症之治療劑，抗EGFR抗體、抗PD-1抗體、抗PD-L1抗體、抗PD-L2抗體、抗HER2抗體、及抗CTLA-4抗體可用作包括腦腫瘤在內之中樞神經系統之腫瘤之治療劑，TNFαR-抗hTfR抗體可用作腦缺血及腦炎症性疾病之治療劑。 對於阿茲海默氏症、帕金森氏症、杭丁頓舞蹈症等神經退化性疾病、精神分裂症、抑鬱症等精神障礙、多發性硬化症、肌萎縮性側索硬化症、包括腦腫瘤在內之中樞神經系統之腫瘤、伴隨著腦障礙之溶酶體儲積症、糖原儲積病、肌肉失養症、腦缺血、腦炎症性疾病、朊毒體病、外傷性之中樞神經系統障礙等疾病之治療劑大致可成為應與抗hTfR抗體融合之其他蛋白質(A)。又，對於病毒性及細菌性之中樞神經系統疾病之治療劑亦大致可成為應與抗hTfR抗體融合之其他蛋白質(A)。進而，亦可用於腦外科手術、脊椎外科手術後之恢復之藥劑亦大致可成為應與抗hTfR抗體融合之其他蛋白質(A)。 作為應與抗hTfR抗體結合之其他蛋白質(A)，除上述蛋白質之天然型(野生型)者以外，天然型(野生型)之該等蛋白質之1個或複數個胺基酸經其他胺基酸置換或缺失等所獲得之類似物只要完全地或局部地具有作為該等蛋白質之功能，則亦包含於該等蛋白質中。於將胺基酸置換為其他胺基酸之情形時，所置換之胺基酸之個數較佳為1～10個，更佳為1～5個，進而較佳為1～3個。於使胺基酸缺失之情形時，所缺失之胺基酸之個數較佳為1～10個，更佳為1～5個，進而較佳為1～3個。又，亦可組合該等胺基酸之置換與缺失而製成所需之類似物。進而，於天然型(野生型)之蛋白質或其類似物之胺基酸序列中或者N末端側或C末端側附加有1個或複數個胺基酸者只要完全地或局部地具有作為該等蛋白質之功能，則亦包含於該等蛋白質中。此時，所附加之胺基酸之個數較佳為1～10個，更佳為1～5個，進而較佳為1～3個。亦可組合該等胺基酸之附加、置換及缺失而製成所需之該等蛋白質之類似物。 再者，於對該等其他蛋白質(A)施加突變而於C末端或N末端附加有胺基酸之情形時，該所附加之胺基酸於使該等蛋白質與抗hTfR抗體融合時位於該等蛋白質與抗hTfR抗體之間的情形時，該所附加之胺基酸構成連接子之一部分。 天然型之人類酸性α-葡萄糖苷酶(hGAA)係由序列編號55所示之883個胺基酸序列所構成之溶酶體酶的一種。但是，由於序列編號55所示之胺基酸序列之N末端側進而附加有13個胺基酸之序列編號56所示之896個胺基酸所構成者亦包含於天然型之hGAA中。 作為本發明中之抗hTfR抗體與其他蛋白質(A)之融合蛋白質之具體態樣的一例，可列舉：於抗hTfR抗體重鏈之C末端經由作為連接子序列之胺基酸序列Gly-Ser融合有天然型之hGAA的類型者。作為此種融合蛋白質，可例示：輕鏈包含序列編號23所記載之胺基酸序列，且重鏈包含序列編號66或68所記載之胺基酸序列，並於其C末端側藉由肽鍵經由連接子序列Gly-Ser而結合hGAA而成者。具有序列編號66所示之胺基酸序列者係IgG1型之抗hTfR抗體，具有序列編號68所示之胺基酸序列者係IgG4型之抗hTfR抗體。作為編碼具有序列編號66之胺基酸序列者之鹼基序列，可例示序列編號67所示者，作為編碼具有序列編號68之胺基酸序列者之鹼基序列，可例示序列編號69所示者。 人類酸性α-葡萄糖苷酶(hGAA)亦稱為α-1,4-葡萄糖苷酶或酸性麥芽糖酶。hGAA藉由使溶酶體中肝糖之α-1,4-及α-1,6-糖苷鍵水解而具有使肝糖分解之活性。龐貝氏症亦稱為II型糖原儲積病(GSD II； glycogen storage disease type II)，係由伴隨著溶酶體內之酸性α-葡萄糖苷酶(酸性麥芽糖酶)活性之缺損的細胞內之肝糖儲積引起之疾病。龐貝氏症患者有時伴有中樞神經障礙。與抗hTfR抗體結合之hGAA可用作龐貝氏症所伴隨之中樞神經障礙之治療劑。 本發明中，「人類GAA」或「hGAA」一詞尤其是指與天然型之hGAA具有同源之胺基酸序列的hGAA，但並不限於此，只要為具有hGAA活性者，則對天然型之hGAA之胺基酸序列施加置換、缺失、附加等突變所得者亦包含於hGAA中。於將hGAA之胺基酸序列之胺基酸置換為其他胺基酸之情形時，所置換之胺基酸之個數較佳為1～10個，更佳為1～5個，進而較佳為1～3個，進而更佳為1～2個。於使hGAA之胺基酸序列中之胺基酸缺失之情形時，所缺失之胺基酸之個數較佳為1～10個，更佳為1～5個，進而較佳為1～3個，進而更佳為1～2個。又，亦可施加組合有該等胺基酸之置換與缺失之突變。於在hGAA中附加胺基酸之情形時，於hGAA之胺基酸序列中或者N末端側或C末端側附加較佳為1～10個、更佳為1～5個、進而較佳為1～3個、進而更佳為1～2個胺基酸。亦可施加將該等胺基酸之附加、置換及缺失加以組合之突變。施加有突變之hGAA之胺基酸序列較佳為與原本之hGAA之胺基酸序列具有80%以上之同源性，更佳為顯示出90%以上之同源性，進而較佳為顯示出95%以上之同源性。 再者，此處所謂hGAA具有hGAA活性，係指在與抗hTfR抗體融合時，相對於天然型之hGAA原本所具有之活性，具有3%以上之活性。其中，其活性相對於天然型之hGAA原本所具有之活性，較佳為10%以上，更佳為20%以上，進而較佳為50%以上，進而更佳為80%以上。在與抗hTfR抗體融合之hGAA為施加有突變者之情形時亦相同。 抗hTfR抗體與hGAA之融合蛋白質例如可藉由如下方式進行製造：藉由組入有編碼序列編號58所示之胺基酸序列之具有序列編號59所示之鹼基序列的DNA片段之表現載體、與組入有編碼具有序列編號23所示之胺基酸序列之抗hTfR抗體輕鏈的具有序列編號24所示之鹼基序列之DNA片段之表現載體，使哺乳動物細胞等宿主細胞轉形，對該宿主細胞進行培養。所製造之融合蛋白質可用作龐貝氏症之治療劑、尤其是龐貝氏症中之中樞神經障礙治療劑。以上述方式獲得之融合蛋白質係IgG4型之人源化抗hTfR抗體與hGAA之融合蛋白質。 再者，於對抗hTfR抗體或hGAA施加突變而於C末端或N末端附加有胺基酸之情形時，在將該所附加之胺基酸配置至抗hTfR抗體與hGAA之間之情形時，該所附加之胺基酸構成連接子之一部分。 天然型之人類I2S(hI2S)係由序列編號50所示之525個胺基酸序列所構成之溶酶體酶的一種。作為本發明中之抗hTfR抗體與其他蛋白質(A)之融合蛋白質之具體態樣的一例，可列舉：於抗hTfR抗體重鏈之C末端經由作為連接子序列之胺基酸序列Gly-Ser而融合有天然型人類I2S之類型者。作為此種融合蛋白質，可例示：輕鏈包含序列編號23所記載之胺基酸序列，且重鏈於其C末端側經由包含胺基酸序列Gly-Ser之連接子藉由肽鍵結合人類I2S而形成有序列編號53之胺基酸序列者。具有序列編號53之胺基酸序列者係IgG1型之抗hTfR抗體之重鏈與hI2S融合而成者，該重鏈之部分具有序列編號66之胺基酸序列。藉由將該重鏈部分置換為序列編號68之胺基酸序列，而製成IgG4型之抗hTfR抗體與hI2S融合而成者。 人類I2S(hI2S)具有使屬於葡糖胺聚糖之硫酸乙醯肝素及硫酸皮膚素之硫酸酯鍵水解之活性。對於本酶具有遺傳性異常之Hunter症候群之患者由於硫酸乙醯肝素及硫酸皮膚素之代謝異常，故而該等之部分分解物於肝臟或脾臟等組織內儲積，而帶來骨骼異常等症狀。又，Hunter症候群之患者有時伴有中樞神經障礙。與抗hTfR抗體結合之hI2S可用作Hunter症候群所伴隨之中樞神經障礙之治療劑。 本發明中，「人類I2S」或「hI2S」一詞尤其是指與天然型之hI2S具有同源之胺基酸序列之hI2S，但並不限於此，只要為具有I2S活性者，則對天然型之hI2S之胺基酸序列施加置換、缺失、附加等突變所得者亦包含於hI2S中。於將hI2S之胺基酸序列之胺基酸置換為其他胺基酸之情形時，所置換之胺基酸之個數較佳為1～10個，更佳為1～5個，進而較佳為1～3個，進而更佳為1～2個。於使hI2S之胺基酸序列中之胺基酸缺失之情形時，所缺失之胺基酸之個數較佳為1～10個，更佳為1～5個，進而較佳為1～3個，進而更佳為1～2個。又，亦可施加組合有該等胺基酸之置換與缺失之突變。於在hI2S中附加胺基酸之情形時，於hI2S之胺基酸序列中或者N末端側或C末端側附加較佳為1～10個、更佳為1～5個、進而較佳為1～3個、進而更佳為1～2個胺基酸。亦可施加將該等胺基酸之附加、置換及缺失加以組合之突變。施加有突變之hI2S之胺基酸序列較佳為與原本之hI2S之胺基酸序列具有80%以上之同源性，更佳為顯示出90%以上之同源性，進而較佳為顯示出95%以上之同源性。 再者，此處所謂hI2S具有I2S活性，係指與抗hTfR抗體融合時，相對於天然型之hI2S原本所具有之活性，具有3%以上之活性。其中，其活性相對於天然型之hI2S原本所具有之活性，較佳為10%以上，更佳為20%以上，進而較佳為50%以上，進而更佳為80%以上。在與抗hTfR抗體融合之hI2S為施加有突變者之情形時亦相同。 抗hTfR抗體與hGAA之融合蛋白質例如可藉由如下方式進行製造：利用組入有編碼序列編號53之胺基酸序列之具有序列編號54之鹼基序列的DNA片段之表現載體、與組入有編碼序列編號23之胺基酸序列(抗hTfR抗體輕鏈)之具有序列編號24之鹼基序列的DNA片段之表現載體，使哺乳動物細胞等宿主細胞轉形，對該宿主細胞進行培養。所製造之融合蛋白質可用作龐貝氏症之治療劑、尤其是龐貝氏症中之中樞神經障礙治療劑。以上述方式獲得之融合蛋白質係IgG1型之人源化抗hTfR抗體與hGAA之融合蛋白質。 再者，於對抗hTfR抗體或人類I2S施加突變而於C末端或N末端附加有胺基酸之情形時，在將該所附加之胺基酸配置至抗hTfR抗體與人類I2S之間之情形時，該所附加之胺基酸構成連接子之一部分。 天然型之人類α-L-艾杜糖醛酸酶(hIDUA)係由序列編號75或76所示之胺基酸序列所構成之溶酶體酶的一種。序列編號76所示之hIDUA係於序列編號75所示者之N末端側附加有Ala-Pro之類型者。 作為本發明中之抗hTfR抗體與其他蛋白質(A)之融合蛋白質之具體態樣的一例，可列舉：於抗hTfR抗體重鏈之C末端經由作為連接子序列之胺基酸序列Gly-Ser而融合有天然型之hIDUA之類型者。作為此種融合蛋白質，可例示：輕鏈包含序列編號23所記載之胺基酸序列，且重鏈包含序列編號66或68所記載之胺基酸序列，於其C末端側藉由肽鍵經由連接子序列Gly-Ser而結合hIDUA而成者。具有序列編號66所示之胺基酸序列者係IgG1型之抗hTfR抗體，具有序列編號68所示之胺基酸序列者係IgG4型之抗hTfR抗體。 人類α-L-艾杜糖醛酸酶(hIDUA)係使存在於硫酸皮膚素、硫酸乙醯肝素分子中之艾杜糖醛酸鍵水解之溶酶體酶。Hurler症候群亦稱為I型黏多糖症，係由伴隨著溶酶體內之α-L-艾杜糖醛酸酶活性之缺損之細胞內的硫酸皮膚素等之儲積引起之疾病。Hurler症候群患者有時伴有中樞神經障礙。與抗hTfR抗體結合之hIDUA可用作伴隨著Hurler症候群之中樞神經障礙之治療劑。 本發明中「人類IDUA」或「hIDUA」一詞尤其是指與天然型之hIDUA具有同源之胺基酸序列之hIDUA，但並不限於此，只要為具有hIDUA活性者，則對天然型之hIDUA之胺基酸序列施加置換、缺失、附加等突變所得者亦包含於hIDUA中。於將hIDUA之胺基酸序列之胺基酸置換為其他胺基酸之情形時，所置換之胺基酸之個數較佳為1～10個，更佳為1～5個，進而較佳為1～3個，進而更佳為1～2個。於使hIDUA之胺基酸序列中之胺基酸缺失之情形時，所缺失之胺基酸之個數較佳為1～10個，更佳為1～5個，進而較佳為1～3個，進而更佳為1～2個。又，亦可施加組合有該等胺基酸之置換與缺失之突變。於在hIDUA中附加胺基酸之情形時，於hIDUA之胺基酸序列中或者N末端側或C末端側附加較佳為1～10個、更佳為1～5個、進而較佳為1～3個、進而更佳為1～2個胺基酸。亦可施加將該等胺基酸之附加、置換及缺失加以組合之突變。施加有突變之hIDUA之胺基酸序列較佳為與原本之hIDUA之胺基酸序列具有80%以上之同源性，更佳為顯示出90%以上之同源性，進而較佳為顯示出95%以上之同源性。 再者，此處所謂hIDUA具有hIDUA活性，係指於與抗hTfR抗體融合時，相對於天然型之hIDUA原本所具有之活性，具有3%以上之活性。其中，其活性相對於天然型之hIDUA原本所具有之活性，較佳為10%以上，更佳為20%以上，進而較佳為50%以上，進而更佳為80%以上。在與抗hTfR抗體融合之hIDUA為施加有突變者之情形時亦相同。 抗hTfR抗體與hIDUA之融合蛋白質例如可藉由如下方式進行製造：藉由組入有編碼序列編號90所示之胺基酸序列之DNA片段之表現載體、與組入有編碼具有序列編號23所示之胺基酸序列之抗hTfR抗體輕鏈之DNA片段的表現載體使哺乳動物細胞等宿主細胞轉形，對該宿主細胞進行培養。所製造之融合蛋白質可用作Hurler症候群之治療劑、尤其是Hurler症候群中之中樞神經障礙治療劑。以上述方式獲得之融合蛋白質係IgG4型之人源化抗hTfR抗體與hIDUA之融合蛋白質。 再者，於對抗hTfR抗體或hIDUA施加突變而於C末端或N末端附加有胺基酸之情形時，在將該所附加之胺基酸配置至抗hTfR抗體與hIDUA之間之情形時，該所附加之胺基酸構成連接子之一部分。 天然型之人類棕櫚醯蛋白硫酯酶-1(hPPT-1)係由序列編號77所示之胺基酸序列所構成之溶酶體酶的一種。 作為本發明中之抗hTfR抗體與其他蛋白質(A)之融合蛋白質之具體態樣的一例，可列舉：於抗hTfR抗體重鏈之C末端經由作為連接子序列之胺基酸序列Gly-Ser而融合有天然型之hPPT-1之類型者。作為此種融合蛋白質，可例示：輕鏈包含序列編號23所記載之胺基酸序列，且重鏈包含序列編號66或68所記載之胺基酸序列，於其C末端側藉由肽鍵經由連接子序列Gly-Ser而結合hPPT-1而成者。具有序列編號66所示之胺基酸序列者係IgG1型之抗hTfR抗體，具有序列編號68所示之胺基酸序列者係IgG4型之抗hTfR抗體。 神經性類蠟脂褐質病(包括Santavuori-Haltia病)係由伴隨著溶酶體內之棕櫚醯蛋白硫酯酶-1活性之缺損之細胞內的類蠟脂褐質之儲積所引起之疾病。神經性類蠟脂褐質病患者有時伴有中樞神經障礙。與抗hTfR抗體結合之hPPT-1可用作伴隨著神經性類蠟脂褐質病之中樞神經障礙之治療劑。 本發明中「人類PPT-1」或「hPPT-1」一詞尤其是指與天然型之hPPT-1具有同源之胺基酸序列之hPPT-1，但並不限於此，只要為具有hPPT-1活性者，則對天然型之hPPT-1之胺基酸序列施加置換、缺失、附加等突變所得者亦包含於hPPT-1中。將hPPT-1之胺基酸序列之胺基酸置換為其他胺基酸之情形時，所置換之胺基酸之個數較佳為1～10個，更佳為1～5個，進而較佳為1～3個，進而更佳為1～2個。於使hPPT-1之胺基酸序列中之胺基酸缺失之情形時，所缺失之胺基酸之個數較佳為1～10個，更佳為1～5個，進而較佳為1～3個，進而更佳為1～2個。又，亦可施加組合有該等胺基酸之置換與缺失之突變。於在hPPT-1中附加胺基酸之情形時，於hPPT-1之胺基酸序列中或者N末端側或C末端側附加較佳為1～10個、更佳為1～5個、進而較佳為1～3個、進而更佳為1～2個胺基酸。亦可施加將該等胺基酸之附加、置換及缺失加以組合之突變。施加有突變之hPPT-1之胺基酸序列較佳為與原本之hPPT-1之胺基酸序列具有80%以上之同源性，更佳為顯示出90%以上之同源性，進而較佳為顯示出95%以上之同源性。 再者，此處所謂hPPT-1具有hPPT-1活性，係指與抗hTfR抗體融合時，相對於天然型之hPPT-1原本所具有之活性，具有3%以上之活性。其中，其活性相對於天然型之hPPT-1原本所具有之活性，較佳為10%以上，更佳為20%以上，進而較佳為50%以上，進而更佳為80%以上。在與抗hTfR抗體融合之hPPT-1為施加有突變者之情形時亦相同。 抗hTfR抗體與hPPT-1之融合蛋白質例如可藉由如下方式進行製造：藉由組入有編碼序列編號100所示之胺基酸序列之DNA片段之表現載體、與組入有編碼具有序列編號23所示之胺基酸序列之抗hTfR抗體輕鏈之DNA片段的表現載體使哺乳動物細胞等宿主細胞轉形，對該宿主細胞進行培養。所製造之融合蛋白質可用作神經性類蠟脂褐質病之治療劑、尤其是神經性類蠟脂褐質病中之中樞神經障礙治療劑。以上述方式獲得之融合蛋白質係IgG4型之人源化抗hTfR抗體與hPPT-1之融合蛋白質。 再者，於對抗hTfR抗體或hPPT-1施加突變而於C末端或N末端附加有胺基酸之情形時，在將該所附加之胺基酸配置至抗hTfR抗體與hPPT-1之間之情形時，該所附加之胺基酸構成連接子之一部分。 天然型之人類酸性神經磷脂酶(hASM)係由序列編號78所示之胺基酸序列所構成之溶酶體酶的一種。 作為本發明中之抗hTfR抗體與其他蛋白質(A)之融合蛋白質之具體態樣的一例，可列舉：於抗hTfR抗體重鏈之C末端經由作為連接子序列之胺基酸序列Gly-Ser而融合有天然型之hASM之類型者。作為此種融合蛋白質，可例示：輕鏈包含序列編號23所記載之胺基酸序列，且重鏈包含序列編號66或68所記載之胺基酸序列，於其C末端側藉由肽鍵經由連接子序列Gly-Ser而結合hASM而成者。具有序列編號66所示之胺基酸序列者係IgG1型之抗hTfR抗體，具有序列編號68所示之胺基酸序列者係IgG4型之抗hTfR抗體。 人類酸性神經磷脂酶(hASM)係使神經鞘磷脂水解於磷酸膽鹼與腦醯胺中之溶酶體酶。尼-皮二氏病係根據其病因及症狀之不同而分類為A至F型。其中，酸性神經磷脂酶(ASM)之遺傳性缺損成為A型與B型之病因。尼-皮二氏病係由伴隨著溶酶體內之酸性神經磷脂酶活性之缺損之細胞內的神經鞘磷脂之儲積所引起之疾病。尼-皮二氏病患者有時伴有中樞神經障礙。與抗hTfR抗體結合之hASM可用作伴有尼-皮二氏病之中樞神經障礙之治療劑。 本發明中「人類ASM」或「hASM」一詞尤其是指與天然型之hASM具有同源之胺基酸序列之hASM，但並不限於此，只要為具有hASM活性者，則對天然型之hASM之胺基酸序列施加置換、缺失、附加等突變所得者亦包含於hASM中。於將hASM之胺基酸序列之胺基酸置換為其他胺基酸之情形時，所置換之胺基酸之個數較佳為1～10個，更佳為1～5個，進而較佳為1～3個，進而更佳為1～2個。於使hASM之胺基酸序列中之胺基酸缺失之情形時，所缺失之胺基酸之個數較佳為1～10個，更佳為1～5個，進而較佳為1～3個，進而更佳為1～2個。又，亦可施加組合有該等胺基酸之置換與缺失之突變。於在hASM中附加胺基酸之情形時，於hASM之胺基酸序列中或者N末端側或C末端側附加較佳為1～10個、更佳為1～5個、進而較佳為1～3個、進而更佳為1～2個胺基酸。亦可施加將該等胺基酸之附加、置換及缺失加以組合之突變。施加有突變之hASM之胺基酸序列較佳為與原本之hASM之胺基酸序列具有80%以上之同源性，更佳為顯示出90%以上之同源性，進而較佳為顯示出95%以上之同源性。 再者，此處所謂hASM具有hASM活性，係指與抗hTfR抗體融合時，相對於天然型之hASM原本所具有之活性，具有3%以上之活性。其中，其活性相對於天然型之hASM原本所具有之活性，較佳為10%以上，更佳為20%以上，進而較佳為50%以上，進而更佳為80%以上。在與抗hTfR抗體融合之hASM為施加有突變者之情形時亦相同。 抗hTfR抗體與hASM之融合蛋白質例如可藉由如下方式進行製造：藉由組入有編碼序列編號106所示之胺基酸序列之DNA片段之表現載體、與組入有編碼具有序列編號23所示之胺基酸序列之抗hTfR抗體輕鏈之DNA片段的表現載體使哺乳動物細胞等宿主細胞轉形，對該宿主細胞進行培養。所製造之融合蛋白質可用作尼-皮二氏病之治療劑、尤其是尼-皮二氏病中之中樞神經障礙治療劑。以上述方式獲得之融合蛋白質係IgG4型之人源化抗hTfR抗體與hASM之融合蛋白質。 再者，於對抗hTfR抗體或hASM施加突變而於C末端或N末端附加有胺基酸之情形時，在將該所附加之胺基酸配置至抗hTfR抗體與hASM之間之情形時，該所附加之胺基酸構成連接子之一部分。 天然型之人類芳基硫酸酯酶A(hARSA)係由序列編號79所示之胺基酸序列所構成之溶酶體酶的一種。 作為本發明中之抗hTfR抗體與其他蛋白質(A)之融合蛋白質之具體態樣的一例，可列舉：於抗hTfR抗體重鏈之C末端經由作為連接子序列之胺基酸序列Gly-Ser而融合有天然型之hARSA之類型者。作為此種融合蛋白質，可例示：輕鏈包含序列編號23所記載之胺基酸序列，且重鏈包含序列編號66或68所記載之胺基酸序列，於其C末端側藉由肽鍵經由連接子序列Gly-Ser而結合hARSA而成者。具有序列編號66所示之胺基酸序列者係IgG1型之抗hTfR抗體，具有序列編號68所示之胺基酸序列者係IgG4型之抗hTfR抗體。 異染性白質退化症(異染性白質失養症)係由伴隨著溶酶體內之芳基硫酸酯酶A活性之缺損之細胞內的髓硫脂(sulfatide)等之儲積所引起之疾病。異染性白質退化症患者有時伴有中樞神經障礙。與抗hTfR抗體結合之hARSA可用作伴隨著異染性白質退化症之中樞神經障礙之治療劑。 本發明中「人類ARSA」或「hARSA」一詞尤其是指與天然型之hARSA具有同源之胺基酸序列之hARSA，但並不限於此，只要為具有hARSA活性者，則對天然型之hARSA之胺基酸序列施加置換、缺失、附加等突變所得者亦包含於hARSA中。於將hARSA之胺基酸序列之胺基酸置換為其他胺基酸之情形時，所置換之胺基酸之個數較佳為1～10個，更佳為1～5個，進而較佳為1～3個，進而更佳為1～2個。於使hARSA之胺基酸序列中之胺基酸缺失之情形時，所缺失之胺基酸之個數較佳為1～10個，更佳為1～5個，進而較佳為1～3個，進而更佳為1～2個。又，亦可施加組合有該等胺基酸之置換與缺失之突變。於在hARSA中附加胺基酸之情形時，於hARSA之胺基酸序列中或者N末端側或C末端側附加較佳為1～10個、更佳為1～5個、進而較佳為1～3個、進而更佳為1～2個胺基酸。亦可施加將該等胺基酸之附加、置換及缺失加以組合之突變。施加有突變之hARSA之胺基酸序列較佳為與原本之hARSA之胺基酸序列具有80%以上之同源性，更佳為顯示出90%以上之同源性，進而較佳為顯示出95%以上之同源性。 再者，此處所謂hARSA具有hARSA活性，係指與抗hTfR抗體融合時，相對於天然型之hARSA原本所具有之活性，具有3%以上之活性。其中，其活性相對於天然型之hARSA原本所具有之活性，較佳為10%以上，更佳為20%以上，進而較佳為50%以上，進而更佳為80%以上。在與抗hTfR抗體融合之hARSA為施加有突變者之情形時亦相同。 抗hTfR抗體與hARSA之融合蛋白質例如可藉由如下方式進行製造：藉由組入有編碼序列編號115所示之胺基酸序列之DNA片段之表現載體、與組入有編碼具有序列編號23所示之胺基酸序列之抗hTfR抗體輕鏈之DNA片段的表現載體使哺乳動物細胞等宿主細胞轉形，對該宿主細胞進行培養。所製造之融合蛋白質可用作異染性白質退化症之治療劑、尤其是異染性白質退化症中之中樞神經障礙治療劑。以上述方式獲得之融合蛋白質係IgG4型之人源化抗hTfR抗體與hARSA之融合蛋白質。 再者，於對抗hTfR抗體或hARSA施加突變而於C末端或N末端附加有胺基酸之情形時，在將該所附加之胺基酸配置至抗hTfR抗體與hARSA之間之情形時，該所附加之胺基酸構成連接子之一部分。 天然型之人類乙醯肝素N-硫酸酯酶(hSGSH)係由序列編號80所示之胺基酸序列所構成之溶酶體酶的一種。 作為本發明中之抗hTfR抗體與其他蛋白質(A)之融合蛋白質之具體態樣的一例，可列舉：於抗hTfR抗體重鏈之C末端經由作為連接子序列之胺基酸序列Gly-Ser而融合有天然型之hSGSH之類型者。作為此種融合蛋白質，可例示：輕鏈包含序列編號23所記載之胺基酸序列，且重鏈包含序列編號66或68所記載之胺基酸序列，於其C末端側藉由肽鍵經由連接子序列Gly-Ser而結合hSGSH而成者。具有序列編號66所示之胺基酸序列者係IgG1型之抗hTfR抗體，具有序列編號68所示之胺基酸序列者係IgG4型之抗hTfR抗體。 Sanfilippo氏症候群亦稱為黏多糖症II型(MPS III型)，係由伴隨著溶酶體內之乙醯肝素N-硫酸酯酶活性之缺損之細胞內的硫酸乙醯肝素之儲積所引起之疾病。但是，α-N-乙醯葡萄糖胺苷酶等其他酶之缺損亦有時成為病因。Sanfilippo氏症候群患者有時伴有中樞神經障礙。與抗hTfR抗體結合之hSGSH可用作伴隨著Sanfilippo氏症候群之中樞神經障礙之治療劑。 本發明中「人類SGSH」或「hSGSH」一詞尤其是指與天然型之hSGSH具有同源之胺基酸序列之hSGSH，但並不限於此，只要為具有hSGSH活性者，則對天然型之hSGSH之胺基酸序列施加置換、缺失、附加等突變所得者亦包含於hSGSH中。於將hSGSH之胺基酸序列之胺基酸置換為其他胺基酸之情形時，所置換之胺基酸之個數較佳為1～10個，更佳為1～5個，進而較佳為1～3個，進而更佳為1～2個。於使hSGSH之胺基酸序列中之胺基酸缺失之情形時，所缺失之胺基酸之個數較佳為1～10個，更佳為1～5個，進而較佳為1～3個，進而更佳為1～2個。又，亦可施加組合有該等胺基酸之置換與缺失之突變。於在hSGSH中附加胺基酸之情形時，於hSGSH之胺基酸序列中或者N末端側或C末端側附加較佳為1～10個、更佳為1～5個、進而較佳為1～3個、進而更佳為1～2個胺基酸。亦可施加將該等胺基酸之附加、置換及缺失加以組合之突變。施加有突變之hSGSH之胺基酸序列較佳為與原本之hSGSH之胺基酸序列具有80%以上之同源性，更佳為顯示出90%以上之同源性，進而較佳為顯示出95%以上之同源性。 再者，此處所謂hSGSH具有hSGSH活性，係指於與抗hTfR抗體融合時，相對於天然型之hSGSH原本所具有之活性，具有3%以上之活性。其中，其活性相對於天然型之hSGSH原本所具有之活性，較佳為10%以上，更佳為20%以上，進而較佳為50%以上，進而更佳為80%以上。與抗hTfR抗體融合之hSGSH為施加有突變者之情形時亦相同。 抗hTfR抗體與hSGSH之融合蛋白質例如可藉由如下方式進行製造：藉由組入有編碼序列編號124所示之胺基酸序列之DNA片段之表現載體、與組入有編碼具有序列編號23所示之胺基酸序列之抗hTfR抗體輕鏈之DNA片段的表現載體使哺乳動物細胞等宿主細胞轉形，對該宿主細胞進行培養。所製造之融合蛋白質可用作Sanfilippo氏症候群之治療劑、尤其是Sanfilippo氏症候群中之中樞神經障礙治療劑。以上述方式獲得之融合蛋白質係IgG4型之人源化抗hTfR抗體與hSGSH之融合蛋白質。 再者，於對抗hTfR抗體或hSGSH施加突變而於C末端或N末端附加有胺基酸之情形時，在將該所附加之胺基酸配置至抗hTfR抗體與hSGSH之間之情形時，該所附加之胺基酸構成連接子之一部分。 天然型之人類葡萄糖腦苷脂酶(hGBA)係由序列編號81所示之胺基酸序列所構成之溶酶體酶的一種。 作為本發明中之抗hTfR抗體與其他蛋白質(A)之融合蛋白質之具體態樣的一例，可列舉：於抗hTfR抗體重鏈之C末端經由作為連接子序列之胺基酸序列Gly-Ser而融合有天然型之hGBA之類型者。作為此種融合蛋白質，可例示：輕鏈包含序列編號23所記載之胺基酸序列，且重鏈包含序列編號66或68所記載之胺基酸序列，於其C末端側藉由肽鍵經由連接子序列Gly-Ser而結合hGBA而成者。具有序列編號66所示之胺基酸序列者係IgG1型之抗hTfR抗體，具有序列編號68所示之胺基酸序列者係IgG4型之抗hTfR抗體。 人類葡萄糖腦苷脂酶(hGBA)係使葡萄糖腦苷脂(或葡糖基腦醯胺)水解之溶酶體酶。高歇病係由伴隨著溶酶體內之葡萄糖腦苷脂酶活性之缺損之細胞內的葡萄糖腦苷脂之儲積所引起之疾病。高歇病患者有時伴有中樞神經障礙。與抗hTfR抗體結合之hGBA可用作伴隨著高歇病之中樞神經障礙之治療劑。 本發明中「人類GBA」或「hGBA」一詞尤其是指與天然型之hGBA具有同源之胺基酸序列之hGBA，但並不限於此，只要為具有hGBA活性者，則對天然型之hGBA之胺基酸序列施加置換、缺失、附加等突變所得者亦包含於hGBA中。於將hGBA之胺基酸序列之胺基酸置換為其他胺基酸之情形時，所置換之胺基酸之個數較佳為1～10個，更佳為1～5個，進而較佳為1～3個，進而更佳為1～2個。於使hGBA之胺基酸序列中之胺基酸缺失之情形時，所缺失之胺基酸之個數較佳為1～10個，更佳為1～5個，進而較佳為1～3個，進而更佳為1～2個。又，亦可施加組合有該等胺基酸之置換與缺失之突變。於在hGBA中附加胺基酸之情形時，於hGBA之胺基酸序列中或者N末端側或C末端側附加較佳為1～10個、更佳為1～5個、進而較佳為1～3個、進而更佳為1～2個胺基酸。亦可施加將該等胺基酸之附加、置換及缺失加以組合之突變。施加有突變之hGBA之胺基酸序列較佳為與原本之hGBA之胺基酸序列具有80%以上之同源性，更佳為顯示出90%以上之同源性，進而較佳為顯示出95%以上之同源性。 再者，此處所謂hGBA具有hGBA活性，係指於與抗hTfR抗體融合時，相對於天然型之hGBA原本所具有之活性，具有3%以上之活性。其中，其活性相對於天然型之hGBA原本所具有之活性，較佳為10%以上，更佳為20%以上，進而較佳為50%以上，進而更佳為80%以上。在與抗hTfR抗體融合之hGBA為施加有突變者之情形時亦相同。 抗hTfR抗體與hGBA之融合蛋白質例如可藉由如下方式進行製造：藉由組入有編碼序列編號130所示之胺基酸序列之DNA片段之表現載體、與組入有編碼具有序列編號23所示之胺基酸序列之抗hTfR抗體輕鏈之DNA片段的表現載體使哺乳動物細胞等宿主細胞轉形，對該宿主細胞進行培養。所製造之融合蛋白質可用作高歇病之治療劑、尤其是高歇病中之中樞神經障礙治療劑。以上述方式獲得之融合蛋白質係IgG4型之人源化抗hTfR抗體與hGBA之融合蛋白質。 再者，於對抗hTfR抗體或hGBA施加突變而於C末端或N末端附加有胺基酸之情形時，在將該所附加之胺基酸配置至抗hTfR抗體與hGBA之間之情形時，該所附加之胺基酸構成連接子之一部分。 天然型之人類三肽基肽酶-1(hTPP-1)係由序列編號82所示之胺基酸序列所構成之溶酶體酶的一種。 作為本發明中之抗hTfR抗體與其他蛋白質(A)之融合蛋白質之具體態樣的一例，可列舉：於抗hTfR抗體重鏈之C末端經由作為連接子序列之胺基酸序列Gly-Ser而融合有天然型之hTPP-1之類型者。作為此種融合蛋白質，可例示：輕鏈包含序列編號23所記載之胺基酸序列，且重鏈包含序列編號66或68所記載之胺基酸序列，於其C末端側藉由肽鍵經由連接子序列Gly-Ser而結合hTPP-1而成者。具有序列編號66所示之胺基酸序列者係IgG1型之抗hTfR抗體，具有序列編號68所示之胺基酸序列者係IgG4型之抗hTfR抗體。 神經性類蠟脂褐質病(包括Santavuori-Haltia病)係由伴隨著溶酶體內之三肽基肽酶-1活性之缺損之細胞內的類蠟脂褐質之儲積所引起之疾病。神經性類蠟脂褐質病者有時伴有中樞神經障礙。與抗hTfR抗體結合之hTPP-1可用作伴隨著神經性類蠟脂褐質病之中樞神經障礙之治療劑。 本發明中「人類TPP-1」或「hTPP-1」一詞尤其是指與天然型之hTPP-1具有同源之胺基酸序列之hTPP-1，但並不限於此，只要為具有hTPP-1活性者，則對天然型之hTPP-1之胺基酸序列施加置換、缺失、附加等突變所得者亦包含於hTPP-1中。於將hTPP-1之胺基酸序列之胺基酸置換為其他胺基酸之情形時，所置換之胺基酸之個數較佳為1～10個，更佳為1～5個，進而較佳為1～3個，進而更佳為1～2個。於使hTPP-1之胺基酸序列中之胺基酸缺失之情形時，所缺失之胺基酸之個數較佳為1～10個，更佳為1～5個，進而較佳為1～3個，進而更佳為1～2個。又，亦可施加組合有該等胺基酸之置換與缺失之突變。於在hTPP-1中附加胺基酸之情形時，於hTPP-1之胺基酸序列中或者N末端側或C末端側附加較佳為1～10個、更佳為1～5個、進而較佳為1～3個、進而更佳為1～2個胺基酸。亦可施加將該等胺基酸之附加、置換及缺失加以組合之突變。施加有突變之hTPP-1之胺基酸序列較佳為與原本之hTPP-1之胺基酸序列具有80%以上之同源性，更佳為顯示出90%以上之同源性，進而較佳為顯示出95%以上之同源性。 再者，此處所謂hTPP-1具有hTPP-1活性，係指於與抗hTfR抗體融合時，相對於天然型之hTPP-1原本所具有之活性，具有3%以上之活性。其中，其活性相對於天然型之hTPP-1原本所具有之活性，較佳為10%以上，更佳為20%以上，進而較佳為50%以上，進而更佳為80%以上。在與抗hTfR抗體融合之hTPP-1為施加有突變者之情形時亦相同。 抗hTfR抗體與hTPP-1之融合蛋白質例如可藉由如下方式進行製造：藉由組入有編碼序列編號136所示之胺基酸序列之DNA片段之表現載體、與組入有編碼具有序列編號23所示之胺基酸序列之抗hTfR抗體輕鏈之DNA片段的表現載體使哺乳動物細胞等宿主細胞轉形，對該宿主細胞進行培養。所製造之融合蛋白質可用作神經性類蠟脂褐質病治療劑、尤其是神經性類蠟脂褐質病中之中樞神經障礙治療劑。以上述方式獲得之融合蛋白質係IgG4型之人源化抗hTfR抗體與hTPP-1之融合蛋白質。 再者，於對抗hTfR抗體或hTPP-1施加突變而於C末端或N末端附加有胺基酸之情形時，在將該所附加之胺基酸配置至抗hTfR抗體與hTPP-1之間之情形時，該所附加之胺基酸構成連接子之一部分。 天然型之人類α-N-乙醯葡萄糖胺苷酶(hNAGLU)係由序列編號83所示之胺基酸序列所構成之溶酶體酶的一種。 作為本發明中之抗hTfR抗體與其他蛋白質(A)之融合蛋白質之具體態樣的一例，可列舉：於抗hTfR抗體重鏈之C末端經由作為連接子序列之胺基酸序列Gly-Ser而融合有天然型之hNAGLU之類型者。作為此種融合蛋白質，可例示：輕鏈包含序列編號23所記載之胺基酸序列，且重鏈包含序列編號66或68所記載之胺基酸序列，於其C末端側藉由肽鍵經由連接子序列Gly-Ser而結合hNAGLU而成者。具有序列編號66所示之胺基酸序列者係IgG1型之抗hTfR抗體，具有序列編號68所示之胺基酸序列者係IgG4型之抗hTfR抗體。 Sanfilippo氏症候群係由伴隨著溶酶體內之α-N-乙醯葡萄糖胺苷酶活性之缺損之細胞內的硫酸乙醯肝素之儲積所引起之疾病。Sanfilippo氏症候群患者有時伴有中樞神經障礙。與抗hTfR抗體結合之hNAGLU可用作伴隨著Sanfilippo氏症候群之中樞神經障礙之治療劑。 本發明中「人類NAGLU」或「hNAGLU」一詞尤其是指與天然型之hNAGLU具有同源之胺基酸序列之hNAGLU，但並不限於此，只要為具有hNAGLU活性者，則對天然型之hNAGLU之胺基酸序列施加置換、缺失、附加等突變所得者亦包含於hNAGLU中。於將hNAGLU之胺基酸序列之胺基酸置換為其他胺基酸之情形時，所置換之胺基酸之個數較佳為1～10個，更佳為1～5個，進而較佳為1～3個，進而更佳為1～2個。於使hNAGLU之胺基酸序列中之胺基酸缺失之情形時，所缺失之胺基酸之個數較佳為1～10個，更佳為1～5個，進而較佳為1～3個，進而更佳為1～2個。又，亦可施加組合有該等胺基酸之置換與缺失之突變。於在hNAGLU中附加胺基酸之情形時，於hNAGLU之胺基酸序列中或者N末端側或C末端側附加較佳為1～10個、更佳為1～5個、進而較佳為1～3個、進而更佳為1～2個胺基酸。亦可施加將該等胺基酸之附加、置換及缺失加以組合之突變。施加有突變之hNAGLU之胺基酸序列較佳為與原本之hNAGLU之胺基酸序列具有80%以上之同源性，更佳為顯示出90%以上之同源性，進而較佳為顯示出95%以上之同源性。 再者，此處所謂hNAGLU具有hNAGLU活性，係指於與抗hTfR抗體融合時，相對於天然型之hNAGLU原本所具有之活性，具有3%以上之活性。其中，其活性相對於天然型之hNAGLU原本所具有之活性，較佳為10%以上，更佳為20%以上，進而較佳為50%以上，進而更佳為80%以上。與抗hTfR抗體融合之hNAGLU為施加有突變者之情形時亦相同。 抗hTfR抗體與hNAGLU之融合蛋白質例如可藉由如下方式進行製造：藉由組入有編碼序列編號142所示之胺基酸序列之DNA片段之表現載體、與組入有編碼具有序列編號23所示之胺基酸序列之抗hTfR抗體輕鏈之DNA片段的表現載體使哺乳動物細胞等宿主細胞轉形，對該宿主細胞進行培養。所製造之融合蛋白質可用作Sanfilippo氏症候群之治療劑、尤其是Sanfilippo氏症候群中之中樞神經障礙治療劑。以上述方式獲得之融合蛋白質係IgG4型之人源化抗hTfR抗體與hNAGLU之融合蛋白質。 再者，於對抗hTfR抗體或hNAGLU施加突變而於C末端或N末端附加有胺基酸之情形時，在將該所附加之胺基酸配置至抗hTfR抗體與hNAGLU之間之情形時，該所附加之胺基酸構成連接子之一部分。 天然型之人類β-葡萄糖醛酸苷酶(hGUSB)係由序列編號84所示之胺基酸序列所構成之溶酶體酶的一種。 作為本發明中之抗hTfR抗體與其他蛋白質(A)之融合蛋白質之具體態樣的一例，可列舉：於抗hTfR抗體重鏈之C末端經由作為連接子序列之胺基酸序列Gly-Ser而融合有天然型之hGUSB之類型者。作為此種融合蛋白質，可例示：輕鏈包含序列編號23所記載之胺基酸序列，且重鏈包含序列編號66或68所記載之胺基酸序列，於其C末端側藉由肽鍵經由連接子序列Gly-Ser而結合hGUSB而成者。具有序列編號66所示之胺基酸序列者係IgG1型之抗hTfR抗體，具有序列編號68所示之胺基酸序列者係IgG4型之抗hTfR抗體。 Sly氏症候群亦稱為黏多糖症VII型(MPS VII型)，係由伴隨著溶酶體內之β-葡萄糖醛酸苷酶活性之缺損之細胞內的黏多糖之儲積所引起之疾病。Sly氏症候群患者有時伴有中樞神經障礙。與抗hTfR抗體結合之hGUSB可用作伴隨著Sly氏症候群之中樞神經障礙之治療劑。 本發明中「人類GUSB」或「hGUSB」一詞尤其是指與天然型之hGUSB具有同源之胺基酸序列之hGUSB，但並不限於此，只要為具有hGUSB活性者，則對天然型之hGUSB之胺基酸序列施加置換、缺失、附加等突變所得者亦包含於hGUSB中。於將hGUSB之胺基酸序列之胺基酸置換為其他胺基酸之情形時，所置換之胺基酸之個數較佳為1～10個，更佳為1～5個，進而較佳為1～3個，進而更佳為1～2個。於使hGUSB之胺基酸序列中之胺基酸缺失之情形時，所缺失之胺基酸之個數較佳為1～10個，更佳為1～5個，進而較佳為1～3個，進而更佳為1～2個。又，亦可施加組合有該等胺基酸之置換與缺失之突變。於在hGUSB中附加胺基酸之情形時，於hGUSB之胺基酸序列中或者N末端側或C末端側附加較佳為1～10個、更佳為1～5個、進而較佳為1～3個、進而更佳為1～2個胺基酸。亦可施加將該等胺基酸之附加、置換及缺失加以組合之突變。施加有突變之hGUSB之胺基酸序列較佳為與原本之hGUSB之胺基酸序列具有80%以上之同源性，更佳為顯示出90%以上之同源性，進而較佳為顯示出95%以上之同源性。 再者，此處所謂hGUSB具有hGUSB活性，係指於與抗hTfR抗體融合時，相對於天然型之hGUSB原本所具有之活性，具有3%以上之活性。其中，其活性相對於天然型之hGUSB原本所具有之活性，較佳為10%以上，更佳為20%以上，進而較佳為50%以上，進而更佳為80%以上。在與抗hTfR抗體融合之hGUSB為施加有突變者之情形時亦相同。 抗hTfR抗體與hGUSB之融合蛋白質例如可藉由如下方式進行製造：藉由組入有編碼序列編號150所示之胺基酸序列之DNA片段之表現載體、與組入有編碼具有序列編號23所示之胺基酸序列之抗hTfR抗體輕鏈之DNA片段的表現載體使哺乳動物細胞等宿主細胞轉形，對該宿主細胞進行培養。以上述方式獲得之融合蛋白質係IgG4型之人源化抗hTfR抗體與hGUSB之融合蛋白質。所製造之融合蛋白質可用作Sly氏症候群之治療劑、尤其是Sly氏症候群中之中樞神經障礙治療劑。 再者，於對抗hTfR抗體或hGUSB施加突變而於C末端或N末端附加有胺基酸之情形時，在將該所附加之胺基酸配置至抗hTfR抗體與hGUSB之間之情形時，該所附加之胺基酸構成連接子之一部分。 天然型之人類半乳糖神經醯胺酶(hGALC)係由序列編號85所示之胺基酸序列所構成之溶酶體酶的一種。 作為本發明中之抗hTfR抗體與其他蛋白質(A)之融合蛋白質之具體態樣的一例，可列舉：於抗hTfR抗體重鏈之C末端經由作為連接子序列之胺基酸序列Gly-Ser而融合有天然型之hGALC之類型者。作為此種融合蛋白質，可例示：輕鏈包含序列編號23所記載之胺基酸序列，且重鏈包含序列編號66或68所記載之胺基酸序列，於其C末端側藉由肽鍵經由連接子序列Gly-Ser而結合hGALC而成者。具有序列編號66所示之胺基酸序列者係IgG1型之抗hTfR抗體，具有序列編號68所示之胺基酸序列者係IgG4型之抗hTfR抗體。 克拉培氏病係由半乳糖神經醯胺酶活性之缺損所引起之疾病。克拉培氏病患者有時伴有中樞神經障礙。與抗hTfR抗體結合之hGALC可用作伴隨著克拉培氏病之中樞神經障礙之治療劑。 本發明中「人類GALC」或「hGALC」一詞尤其是指與天然型之hGALC具有同源之胺基酸序列之hGALC，但並不限於此，只要為具有hGALC活性者，則對天然型之hGALC之胺基酸序列施加置換、缺失、附加等突變所得者亦包含於hGALC中。於將hGALC之胺基酸序列之胺基酸置換為其他胺基酸之情形時，所置換之胺基酸之個數較佳為1～10個，更佳為1～5個，進而較佳為1～3個，進而更佳為1～2個。於使hGALC之胺基酸序列中之胺基酸缺失之情形時，所缺失之胺基酸之個數較佳為1～10個，更佳為1～5個，進而較佳為1～3個，進而更佳為1～2個。又，亦可施加組合有該等胺基酸之置換與缺失之突變。於在hGALC中附加胺基酸之情形時，於hGALC之胺基酸序列中或者N末端側或C末端側附加較佳為1～10個、更佳為1～5個、進而較佳為1～3個、進而更佳為1～2個胺基酸。亦可施加將該等胺基酸之附加、置換及缺失加以組合之突變。施加有突變之hGALC之胺基酸序列較佳為與原本之hGALC之胺基酸序列具有80%以上之同源性，更佳為顯示出90%以上之同源性，進而較佳為顯示出95%以上之同源性。 再者，此處所謂hGALC具有hGALC活性，係指於與抗hTfR抗體融合時，相對於天然型之hGALC原本所具有之活性，具有3%以上之活性。其中，其活性相對於天然型之hGALC原本所具有之活性，較佳為10%以上，更佳為20%以上，進而較佳為50%以上，進而更佳為80%以上。在與抗hTfR抗體融合之hGALC為施加有突變者之情形時亦相同。 抗hTfR抗體與hGALC之融合蛋白質例如可藉由如下方式進行製造：藉由組入有編碼序列編號158所示之胺基酸序列之DNA片段之表現載體、與組入有編碼具有序列編號23所示之胺基酸序列之抗hTfR抗體輕鏈之DNA片段的表現載體使哺乳動物細胞等宿主細胞轉形，對該宿主細胞進行培養。所製造之融合蛋白質可用作克拉培氏病之治療劑、尤其是克拉培氏病中之中樞神經障礙治療劑。以上述方式獲得之融合蛋白質係IgG4型之人源化抗hTfR抗體與hGALC之融合蛋白質。 再者，於對抗hTfR抗體或hGALC施加突變而於C末端或N末端附加有胺基酸之情形時，在將該所附加之胺基酸配置至抗hTfR抗體與hGALC之間之情形時，該所附加之胺基酸構成連接子之一部分。 天然型之人類酸性神經醯胺酶(hAC)係由序列編號86所示之胺基酸序列所構成之溶酶體酶的一種。 作為本發明中之抗hTfR抗體與其他蛋白質(A)之融合蛋白質之具體態樣的一例，可列舉：於抗hTfR抗體重鏈之C末端經由作為連接子序列之胺基酸序列Gly-Ser而融合有天然型之hAC之類型者。作為此種融合蛋白質，可例示：輕鏈包含序列編號23所記載之胺基酸序列，且重鏈包含序列編號66或68所記載之胺基酸序列，於其C末端側藉由肽鍵經由連接子序列Gly-Ser而結合hAC而成者。具有序列編號66所示之胺基酸序列者係IgG1型之抗hTfR抗體，具有序列編號68所示之胺基酸序列者係IgG4型之抗hTfR抗體。 Farber病係由伴隨著溶酶體內之酸性神經醯胺酶活性之缺損之細胞內的腦醯胺之儲積所引起之疾病。Farber病患者有時伴有中樞神經障礙。與抗hTfR抗體結合之hAC可用作伴隨著Farber病之中樞神經障礙之治療劑。 本發明中「人類AC」或「hAC」一詞尤其是指與天然型之hAC具有同源之胺基酸序列之hAC，但並不限於此，只要為具有hAC活性者，則對天然型之hAC之胺基酸序列施加置換、缺失、附加等突變所得者亦包含於hAC中。於將hAC之胺基酸序列之胺基酸置換為其他胺基酸之情形時，所置換之胺基酸之個數較佳為1～10個，更佳為1～5個，進而較佳為1～3個，進而更佳為1～2個。於使hAC之胺基酸序列中之胺基酸缺失之情形時，所缺失之胺基酸之個數較佳為1～10個，更佳為1～5個，進而較佳為1～3個，進而更佳為1～2個。又，亦可施加組合有該等胺基酸之置換與缺失之突變。於在hAC中附加胺基酸之情形時，於hAC之胺基酸序列中或者N末端側或C末端側附加較佳為1～10個、更佳為1～5個、進而較佳為1～3個、進而更佳為1～2個胺基酸。亦可施加將該等胺基酸之附加、置換及缺失加以組合之突變。施加有突變之hAC之胺基酸序列較佳為與原本之hAC之胺基酸序列具有80%以上之同源性，更佳為顯示出90%以上之同源性，進而較佳為顯示出95%以上之同源性。 再者，此處所謂hAC具有hAC活性，係指於與抗hTfR抗體融合時，相對於天然型之hAC原本所具有之活性，具有3%以上之活性。其中，其活性相對於天然型之hAC原本所具有之活性，較佳為10%以上，更佳為20%以上，進而較佳為50%以上，進而更佳為80%以上。在與抗hTfR抗體融合之hAC為施加有突變者之情形時亦相同。 抗hTfR抗體與hAC之融合蛋白質例如可藉由如下方式進行製造：藉由組入有編碼序列編號166所示之胺基酸序列之DNA片段之表現載體、與組入有編碼具有序列編號23所示之胺基酸序列之抗hTfR抗體輕鏈之DNA片段的表現載體使哺乳動物細胞等宿主細胞轉形，對該宿主細胞進行培養。所製造之融合蛋白質可用作Farber病之治療劑、尤其是Farber病中之中樞神經障礙治療劑。以上述方式獲得之融合蛋白質係IgG4型之人源化抗hTfR抗體與hAC之融合蛋白質。 再者，於對抗hTfR抗體或hAC施加突變而於C末端或N末端附加有胺基酸之情形時，在將該所附加之胺基酸配置至抗hTfR抗體與hAC之間之情形時，該所附加之胺基酸構成連接子之一部分。 天然型之人類α-L-岩藻糖苷酶(hFUCA1)係由序列編號87所示之胺基酸序列所構成之溶酶體酶的一種。 作為本發明中之抗hTfR抗體與其他蛋白質(A)之融合蛋白質之具體態樣的一例，可列舉：於抗hTfR抗體重鏈之C末端經由作為連接子序列之胺基酸序列Gly-Ser而融合有天然型之hFUCA1之類型者。作為此種融合蛋白質，可例示：輕鏈包含序列編號23所記載之胺基酸序列，且重鏈包含序列編號66或68所記載之胺基酸序列，於其C末端側藉由肽鍵經由連接子序列Gly-Ser而結合hFUCA1而成者。具有序列編號66所示之胺基酸序列者係IgG1型之抗hTfR抗體，具有序列編號68所示之胺基酸序列者係IgG4型之抗hTfR抗體。 岩藻糖苷儲積症係由伴隨著溶酶體內之α-L-岩藻糖苷酶活性之缺損之細胞內的含岩藻糖之寡糖之儲積所引起之疾病。岩藻糖苷儲積症患者有時伴有中樞神經障礙。與抗hTfR抗體結合之hFUCA1可用作伴隨著岩藻糖苷儲積症之中樞神經障礙之治療劑。 本發明中「人類FUCA1」或「hFUCA1」一詞尤其是指與天然型之hFUCA1具有同源之胺基酸序列之hFUCA1，但並不限於此，只要為具有hFUCA1活性者，則對天然型之hFUCA1之胺基酸序列施加置換、缺失、附加等突變所得者亦包含於hFUCA1中。於將hFUCA1之胺基酸序列之胺基酸置換為其他胺基酸之情形時，所置換之胺基酸之個數較佳為1～10個，更佳為1～5個，進而較佳為1～3個，進而更佳為1～2個。於使hFUCA1之胺基酸序列中之胺基酸缺失之情形時，所缺失之胺基酸之個數較佳為1～10個，更佳為1～5個，進而較佳為1～3個，進而更佳為1～2個。又，亦可施加組合有該等胺基酸之置換與缺失之突變。於在hFUCA1中附加胺基酸之情形時，於hFUCA1之胺基酸序列中或者N末端側或C末端側附加較佳為1～10個、更佳為1～5個、進而較佳為1～3個、進而更佳為1～2個胺基酸。亦可施加將該等胺基酸之附加、置換及缺失加以組合之突變。施加有突變之hFUCA1之胺基酸序列較佳為與原本之hFUCA1之胺基酸序列具有80%以上之同源性，更佳為顯示出90%以上之同源性，進而較佳為顯示出95%以上之同源性。 再者，此處所謂hFUCA1具有hFUCA1活性，係指於與抗hTfR抗體融合時，相對於天然型之hFUCA1原本所具有之活性，具有3%以上之活性。其中，其活性相對於天然型之hFUCA1原本所具有之活性，較佳為10%以上，更佳為20%以上，進而較佳為50%以上，進而更佳為80%以上。在與抗hTfR抗體融合之hFUCA1為施加有突變者之情形時亦相同。 抗hTfR抗體與hFUCA1之融合蛋白質例如可藉由如下方式進行製造：藉由組入有編碼序列編號174所示之胺基酸序列之DNA片段之表現載體、與組入有編碼具有序列編號23所示之胺基酸序列之抗hTfR抗體輕鏈之DNA片段的表現載體使哺乳動物細胞等宿主細胞轉形，對該宿主細胞進行培養。所製造之融合蛋白質可用作岩藻糖苷儲積症之治療劑、尤其是岩藻糖苷儲積症中之中樞神經障礙治療劑。以上述方式獲得之融合蛋白質係IgG4型之人源化抗hTfR抗體與hFUCA1之融合蛋白質。 再者，於對抗hTfR抗體或hFUCA1施加突變而於C末端或N末端附加有胺基酸之情形時，在將該所附加之胺基酸配置至抗hTfR抗體與hFUCA1之間之情形時，該所附加之胺基酸構成連接子之一部分。 天然型之人類α-甘露糖苷酶(hLAMAN)係由序列編號88所示之胺基酸序列所構成之溶酶體酶的一種。 作為本發明中之抗hTfR抗體與其他蛋白質(A)之融合蛋白質之具體態樣的一例，可列舉：於抗hTfR抗體重鏈之C末端經由作為連接子序列之胺基酸序列Gly-Ser而融合有天然型之hLAMAN之類型者。作為此種融合蛋白質，可例示：輕鏈包含序列編號23所記載之胺基酸序列，且重鏈包含序列編號66或68所記載之胺基酸序列，於其C末端側藉由肽鍵經由連接子序列Gly-Ser而結合hLAMAN而成者。具有序列編號66所示之胺基酸序列者係IgG1型之抗hTfR抗體，具有序列編號68所示之胺基酸序列者係IgG4型之抗hTfR抗體。 人類α-甘露糖苷酶(hLAMAN)係使α型之甘露糖水解之溶酶體酶。α-甘露糖苷儲積症係由伴隨著溶酶體內之α-甘露糖苷酶活性之缺損之細胞內的含甘露糖之寡糖之儲積所引起之疾病。α-甘露糖苷儲積症患者有時伴有中樞神經障礙。與抗hTfR抗體結合之hLAMAN可用作伴隨著α-甘露糖苷儲積症之中樞神經障礙之治療劑。 本發明中「人類LAMAN」或「hLAMAN」一詞尤其是指與天然型之hLAMAN具有同源之胺基酸序列之hLAMAN，但並不限於此，只要為具有hLAMAN活性者，則對天然型之hLAMAN之胺基酸序列施加置換、缺失、附加等突變所得者亦包含於hLAMAN中。於將hLAMAN之胺基酸序列之胺基酸置換為其他胺基酸之情形時，所置換之胺基酸之個數較佳為1～10個，更佳為1～5個，進而較佳為1～3個，進而更佳為1～2個。於使hLAMAN之胺基酸序列中之胺基酸缺失之情形時，所缺失之胺基酸之個數較佳為1～10個，更佳為1～5個，進而較佳為1～3個，進而更佳為1～2個。又，亦可施加組合有該等胺基酸之置換與缺失之突變。於在hLAMAN中附加胺基酸之情形時，於hLAMAN之胺基酸序列中或者N末端側或C末端側附加較佳為1～10個、更佳為1～5個、進而較佳為1～3個、進而更佳為1～2個胺基酸。亦可施加將該等胺基酸之附加、置換及缺失加以組合之突變。施加有突變之hLAMAN之胺基酸序列較佳為與原本之hLAMAN之胺基酸序列具有80%以上之同源性，更佳為顯示出90%以上之同源性，進而較佳為顯示出95%以上之同源性。 再者，此處所謂hLAMAN具有hLAMAN活性，係指於與抗hTfR抗體融合時，相對於天然型之hLAMAN原本所具有之活性，具有3%以上之活性。其中，其活性相對於天然型之hLAMAN原本所具有之活性，較佳為10%以上，更佳為20%以上，進而較佳為50%以上，進而更佳為80%以上。與抗hTfR抗體融合之hLAMAN為施加有突變者之情形時亦相同。 抗hTfR抗體與hLAMAN之融合蛋白質例如可藉由如下方式進行製造：藉由組入有編碼序列編號182所示之胺基酸序列之DNA片段之表現載體、與組入有編碼具有序列編號23所示之胺基酸序列之抗hTfR抗體輕鏈之DNA片段的表現載體使哺乳動物細胞等宿主細胞轉形，對該宿主細胞進行培養。所製造之融合蛋白質可用作α-甘露糖苷儲積症之治療劑、尤其是α-甘露糖苷儲積症中之中樞神經障礙治療劑。以上述方式獲得之融合蛋白質係IgG4型之人源化抗hTfR抗體與hLAMAN之融合蛋白質。 再者，於對抗hTfR抗體或hLAMAN施加突變而於C末端或N末端附加有胺基酸之情形時，在將該所附加之胺基酸配置至抗hTfR抗體與hLAMAN之間之情形時，該所附加之胺基酸構成連接子之一部分。 如上所述，關於抗hTfR抗體與其他蛋白質(A)之融合蛋白質，分別例示了其他蛋白質(A)為hGAA、hI2S、hIDUA、hPPT-1、hASM、hARSA、hSGSH、hGBA、hTTP-1、hNAGLU、hGUSB、hAC、hFUca1、及hLAMAN之融合蛋白質，但於抗hTfR抗體與包含該等之其他蛋白質(A)之融合蛋白質之較佳實施形態中，抗hTfR抗體之重鏈及輕鏈之CDR之胺基酸序列只要為抗體具有對於hTfR之特異性親和性者，則無特別限制。 但是，此處所使用之抗TfR抗體係尤其是於藉由實施例7所記載之方法進行測定時， 與人類TfR之解離常數較佳為1×10-10 M以下、更佳為1×10-11 M以下、進而較佳為5×10-12 M以下、進而更佳為1×10-12 M以下者， 與猴TfR之解離常數較佳為1×10-9 M以下、更佳為5×10-10 M以下、進而較佳為1×10-10 M以下、例如7.5×10-11 M以下者。 例如可列舉：與人類TfR及猴TfR之解離常數分別為1×10-10 M以下及1×10-9 M以下、1×10-11 M以下及5×10-10 M以下、5×10-12 M以下及1×10-10 M以下、5×10-12 M以下及7.5×10-11 M以下、1×10-12 M以下及1×10-10 M以下、1×10-12 M以下及7.5×10-11 M以下者。此處，與人類TfR之解離常數並無特別明確之下限，例如可設為5×10-13 M、1×10-13 M等。又，與猴TfR之解離常數並無特別明確之下限，例如可設為1×10-11 M、1×10-12 M等。即便抗體為單鏈抗體亦相同。 亦可藉由與使其他蛋白質(A)結合至抗hTfR抗體相同之方法，而使相對較短之肽鏈結合至於抗hTfR抗體。應結合至抗hTfR抗體之肽鏈只要為其肽鏈具有所需之生理活性者，則無限定，例如可列舉：具有發揮各種蛋白質之生理活性之區域之胺基酸序列之肽鏈。肽鏈之鏈長並無特別限定，較佳為由2～200個胺基酸所構成者，例如為由5～50個胺基酸所構成者。 於使低分子物質結合至抗hTfR抗體之情形時，成為候補之低分子物質並無特別限定，儘管為應到達至腦內而發揮其功能者，但若直接使用則無法通過血腦障壁，因此為於靜脈內投予時無法期待於腦內發揮功能之低分子物質。例如，作為該低分子物質，可列舉：環磷醯胺、異環磷醯胺、美法侖、白消安、噻替派(thiotepa)，尼莫司汀，雷莫司汀，氮烯唑胺(dacarbazine)，甲基苄肼(procarbazine)，替莫唑胺(temozolomide)，卡氯芥(carmustine)，鏈脲黴素(streptozotocin)，苯達莫司汀(bendamustine)，順鉑(cisplatin)，卡鉑(carboplatin)，奧沙利鉑(oxaliplatin)，奈達帕汀，5-氟尿嘧啶，磺胺嘧啶(sulfadiazine)，磺胺甲異噁唑(sulfamethoxazole)，甲胺喋呤(methotrexate)，三甲氧苄胺嘧啶，嘧啶甲胺(pyrimethamine)，氟尿嘧啶，氟胞嘧啶(Flucytosine)，硫唑嘌呤(azathioprine)，噴司他丁，羥基尿素，氟達拉濱，阿糖胞苷，吉西他濱，伊立替康，多柔比星，依託泊苷，左氧氟沙星，環丙沙星，長春花鹼，長春新鹼，紫杉醇，多烯紫杉醇(docetaxel)，絲裂黴素C，多柔比星，表柔比星等抗癌劑。此外，作為應與抗hTfR抗體結合之低分子物質，可列舉siRNA、反義DNA、較短之肽。 於使抗hTfR抗體與低分子物質結合之情形時，低分子物質可僅結合至輕鏈或重鏈之任一者，又，亦可分別結合至輕鏈與重鏈。又，抗hTfR抗體只要為具有對於hTfR之親和性者，則可為含有包含輕鏈之可變區之全部或一部分之胺基酸序列、及/或包含重鏈之可變區之全部或一部分之胺基酸序列者。 對於阿茲海默氏症、帕金森氏症、杭丁頓舞蹈症等神經退化性疾病、精神分裂症、抑鬱症等精神障礙、多發性硬化症、肌萎縮性側索硬化症、包含腦腫瘤之中樞神經系統之腫瘤、伴隨著腦障礙之溶酶體儲積症、糖原儲積病、肌肉失養症、腦缺血、腦炎症性疾病、朊毒體病、外傷性之中樞神經系統障礙等疾病之治療劑一般可成為應與抗hTfR抗體融合之低分子物質候補。又，對於病毒性及細菌性之中樞神經系統疾病之治療劑亦一般可成為應與抗hTfR抗體融合之低分子物質候補。進而，亦可用於腦外科手術、脊椎外科手術後之恢復之藥劑亦一般可成為應與抗hTfR抗體融合之低分子物質候補。 於抗hTfR抗體為人類以外之動物之抗體之情形時，將其投予至人類時，會引起對於該抗體之抗原抗體反應，而產生欠佳之副作用之可能性較高。人類以外之動物之抗體可藉由製成人源化抗體而減少此種抗原性，而可抑制投予至人類時因抗原抗體反應而產生副作用之情況。又，報告有根據使用猴之實驗，人源化抗體與小鼠抗體相比，於血中更為穩定，而認為可相應地長時間維持治療效果。其原因在於，因抗原抗體反應而產生副作用之情況亦可藉由使用人類抗體作為抗hTfR抗體得到抑制。 以下，對抗hTfR抗體為人源化抗體或人類抗體之情形進一步詳細地進行說明。人類抗體之輕鏈有λ鏈與κ鏈。構成抗hTfR抗體之輕鏈可為λ鏈與κ鏈之任一者。又，人類之重鏈有γ鏈、μ鏈、α鏈、σ鏈及ε鏈，分別與IgG、IgM、IgA、IgD及IgE對應。構成抗hTfR抗體之重鏈可為γ鏈、μ鏈、α鏈、σ鏈及ε鏈之任一者，較佳為γ鏈。進而，人類之重鏈之γ鏈有γ1鏈、γ2鏈、γ3鏈及γ4鏈，分別與IgG1、IgG2、IgG3及IgG4對應。於構成抗hTfR抗體之重鏈為γ鏈之情形時，該γ鏈可為γ1鏈、γ2鏈、γ3鏈及γ4鏈之任一者，較佳為γ1鏈或γ4鏈。於抗hTfR抗體為人源化抗體或人類抗體，且為IgG之情形時，人類抗體之輕鏈可為λ鏈與κ鏈之任一者，人類抗體之重鏈可為γ1鏈、γ2鏈、γ3鏈及γ4鏈之任一者，較佳為γ1鏈或γ4鏈。例如作為較佳之抗hTfR抗體之一態樣，可列舉：輕鏈為λ鏈且重鏈為γ1鏈之抗hTfR抗體。 於抗hTfR抗體為人源化抗體或人類抗體之情形時，抗hTfR抗體與其他蛋白質(A)可於抗hTfR抗體之重鏈或輕鏈之N末端(或C末端)經由連接子序列或直接利用肽鍵而分別結合其他蛋白質(A)之C末端(或N末端)。於使其他蛋白質(A)結合至抗hTfR抗體之重鏈之N末端側(或C末端側)之情形時，於抗hTfR抗體之γ鏈、μ鏈、α鏈、σ鏈或ε鏈之N末端(或C末端)經由連接子序列或直接利用肽鍵而分別結合其他蛋白質(A)之C末端(或N末端)。於使其他蛋白質(A)結合至抗hTfR抗體之輕鏈之N末端側(或C末端側)之情形時，於抗hTfR抗體之λ鏈或κ鏈之N末端(或C末端)經由連接子序列或直接利用肽鍵而分別結合其他蛋白質(A)之C末端(或N末端)。但是，於抗hTfR抗體為包含Fab區域者或者包含Fab區域與鉸鏈部之全部或一部分者(Fab、F(ab')及F(ab')2 )之情形時，其他蛋白質(A)可於構成Fab、F(ab')2 及F(ab')之重鏈或輕鏈之N末端(或C末端)經由連接子序列或直接利用肽鍵而分別結合其C末端(或N末端)。 於使其他蛋白質(A)結合至作為人源化抗體或人類抗體之抗hTfR抗體之輕鏈之C末端側或N末端側而成的融合蛋白質中，抗人類運鐵蛋白受體抗體係含有包含輕鏈之可變區之全部或一部分之胺基酸序列、與包含重鏈之可變區之全部或一部分之胺基酸序列者。此處，抗hTfR抗體之輕鏈與其他蛋白質(A)可直接結合，亦可經由連接子結合。 於使其他蛋白質(A)結合至作為人源化抗體或人類抗體之抗hTfR抗體之重鏈之C末端側或N末端側而成的融合蛋白質中，抗人類運鐵蛋白受體抗體係含有包含輕鏈之可變區之全部或一部分之胺基酸序列、與包含重鏈之可變區之全部或一部分之胺基酸序列者。此處，抗hTfR抗體之重鏈與其他蛋白質(A)可直接結合，亦可經由連接子結合。 於將連接子序列配置於抗hTfR抗體或人類抗體與其他蛋白質(A)之間之情形時，配置於抗hTfR抗體與其他蛋白質(A)之間之連接子序列係由較佳為1～50個胺基酸所構成之肽鏈，但根據應結合至抗hTfR抗體之其他蛋白質(A)，構成連接子序列之胺基酸之個數係適當調整為1～17個、1～10個、10～40個、20～34個、23～31個、25～29個等。此種連接子序列只要藉由該連接子序列所連結之抗hTfR抗體與其他蛋白質(A)保持各自之功能(對於hTfR之親和性、及生理條件下之活性或功能)，則其胺基酸序列並無限定，較佳為由甘胺酸與絲胺酸所構成者，例如為包含甘胺酸或絲胺酸之任一個胺基酸者，包含胺基酸序列Gly-Ser、胺基酸序列Gly-Gly-Ser、胺基酸序列Gly-Gly-Gly-Gly-Ser(序列編號3)、胺基酸序列Gly-Gly-Gly-Gly-Gly-Ser(序列編號4)、胺基酸序列Ser-Gly-Gly-Gly-Gly(序列編號5)、或該等胺基酸序列1～10個或2～5個接連而成之序列者。例如，包含繼胺基酸序列Gly-Ser之後連接5個胺基酸序列Gly-Gly-Gly-Gly-Ser(序列編號3)而成之共計27個胺基酸序列者可適宜地用作連接子序列。又，包含由5個胺基酸序列Gly-Gly-Gly-Gly-Ser(序列編號3)接連而成之共計25個胺基酸序列者亦可適宜地用作連接子序列。 再者，此處所謂與抗hTfR抗體或人類抗體融合之其他蛋白質(A)保持有該其他蛋白質(A)於生理條件下之活性或功能或者僅具有活性，係指相對於作為天然型之其他蛋白質(A)原本所具有之活性，保持有3%以上之活性或功能。其中，其活性或功能相對於天然型之其他蛋白質(A)原本所具有之活性，較佳為10%以上，更佳為20%以上，進而較佳為50%以上，進而更佳為80%以上。在與抗hTfR抗體融合之其他蛋白質(A)為施加有突變者之情形時亦相同。 作為本發明中之人源化抗hTfR抗體或人類抗體與其他蛋白質(A)之融合蛋白質之更具體態樣的一例，可列舉：於抗hTfR抗體重鏈之C末端側經由包含繼胺基酸序列Gly-Ser之後連接5個胺基酸序列Gly-Gly-Gly-Gly-Ser(序列編號3)而成之共計27個胺基酸之連接子序列，而融合有其他蛋白質(A)者。 作為抗hTfR抗體為Fab之情形時本發明之人源化抗hTfR抗體或人類抗體與其他蛋白質(A)之融合蛋白質之具體態樣的一例，可列舉：於其他蛋白質(A)之C末端側經由包含由5個胺基酸序列Gly-Gly-Gly-Gly-Ser(序列編號3)接連而成之共計25個胺基酸之連接子序列，而融合有包含抗hTfR抗體重鏈之可變區與CH 1區域之區域者。此處，除CH 1區域以外，亦可包含鉸鏈部之一部分，但該鉸鏈部不包含形成重鏈間之二硫鍵之半胱胺酸殘基。 抗hTfR抗體之對於hTfR之特異性親和性主要依存於抗hTfR抗體之重鏈及輕鏈之CDR之胺基酸序列。該等CDR之胺基酸序列只要抗hTfR抗體除具有對於hTfR之特異性親和性以外，亦具有對於猴hTfR之特異性親和性者，則無特別限制。 但是，本發明中，對於人類及猴TfR均具有親和性且對於hTfR具有相對較高之親和性之抗體即人源化抗hTfR抗體或人類抗體係尤其是藉由實施例7所記載之方法進行測定時， 與人類TfR之解離常數較佳為1×10-10 M以下、更佳為2.5×10-11 M以下、進而較佳為5×10-12 M以下、進而更佳為1×10-12 M以下者，且 與猴TfR之解離常數較佳為1×10-9 M以下、更佳為5×10-10 M以下、進而較佳為1×10-10 M以下、例如7.5×10-11 M以下者。 例如可列舉：與人類TfR及猴TfR之解離常數分別為1×10-10 M以下及1×10-9 M以下、1×10-11 M以下及5×10-10 M以下、5×10-12 M以下及1×10-10 M以下、5×10-12 M以下及7.5×10-11 M以下、1×10-12 M以下及1×10-10 M以下、1×10-12 M以下及7.5×10-11 M以下者。此處，與人類TfR之解離常數並無特別明確之下限，例如可設為5×10-13 M、1×10-13 M等。又，與猴TfR之解離常數並無特別明確之下限，例如可設為1×10-11 M、1×10-12 M等。即便抗體為單鏈抗體亦相同。 作為對於hTfR具有親和性之抗體之較佳實施形態，可例示如下抗體，其係於重鏈之可變區中： (a)CDR1為包含序列編號62或序列編號63之胺基酸序列而成， (b)CDR2為包含序列編號13或序列編號14之胺基酸序列而成，且 (c)CDR3為包含序列編號15或序列編號16之胺基酸序列而成者。 作為對於hTfR具有親和性之抗體之更具體之實施形態，可例示如下抗體，其係於重鏈之可變區中： (a)CDR1為包含序列編號62之胺基酸序列而成， (b)CDR2為包含序列編號13之胺基酸序列而成，且 (c)CDR3為包含序列編號15所記載之胺基酸序列而成者。 於上述對於hTfR具有親和性之抗體之較佳實施形態、及對於hTfR具有親和性之抗體之更具體之實施形態中，可列舉：於作為抗體之重鏈之架構區3之胺基酸序列較佳者中包含序列編號64之胺基酸序列而成者。 作為對於hTfR具有親和性之抗體之較佳之輕鏈與重鏈的組合，可例示：於可變區中具有以下所示之胺基酸序列者。即：如下輕鏈與如下重鏈之組合，該輕鏈係 (a)CDR1為包含序列編號6或序列編號7之胺基酸序列而成， (b)CDR2為包含序列編號8或序列編號9之胺基酸序列、或者胺基酸序列Lys-Val-Ser而成，且 (c)CDR3為包含序列編號10之胺基酸序列而成者， 該重鏈係 (d)CDR1為包含序列編號62或序列編號63之胺基酸序列而成， (e)CDR2為包含序列編號13或序列編號14之胺基酸序列而成，且 (f)CDR3為包含序列編號15或序列編號16之胺基酸序列而成者。 作為對於hTfR具有親和性之抗體之輕鏈與重鏈之組合的具體態樣，可例示於可變區中具有以下所示之胺基酸序列者。即： 如下輕鏈與如下重鏈之組合，該輕鏈係分別包含序列編號6之胺基酸序列作為CDR1、包含序列編號8之胺基酸序列作為CDR2、及包含序列編號10之胺基酸序列作為CDR3而成者，該重鏈係分別包含序列編號62之胺基酸序列作為CDR1、包含序列編號13之胺基酸序列作為CDR2、及包含序列編號15之胺基酸序列作為CDR3而成者。 於上述對於hTfR具有親和性之抗體之較佳之輕鏈與重鏈的組合、及對於hTfR具有親和性之抗體之輕鏈與重鏈之組合的具體態樣中，可列舉：於作為抗體之重鏈之架構區3之胺基酸序列較佳者具有序列編號64的胺基酸序列者。 作為對於hTfR具有親和性之人源化抗體之較佳實施形態，可例示具有以下所示之胺基酸序列者。即： 如下抗hTfR抗體，其係輕鏈之可變區為包含序列編號17、序列編號18、序列編號19、序列編號20、序列編號21、或序列編號22之胺基酸序列而成，重鏈之可變區為包含序列編號65之胺基酸序列而成。 序列編號17、序列編號18、序列編號19、序列編號20、序列編號21、及序列編號22所示之輕鏈之可變區的胺基酸序列係CDR1包含序列編號6或7，CDR2包含序列編號8或9，及CDR3包含序列編號10之胺基酸序列者。但是，於序列編號17～22所記載之輕鏈之可變區之胺基酸序列中，稱為CDR時，CDR之序列並不限定於該等，包含該等CDR之胺基酸序列之區域、包含該等CDR之胺基酸序列之任意接連之3個以上胺基酸的胺基酸序列亦可設為CDR。 序列編號65所示之重鏈之可變區之胺基酸序列係 (a)CDR1為包含序列編號62或63之胺基酸序列， (b)CDR2為包含序列編號13或14之胺基酸序列，且 (c)CDR3為包含序列編號15或16之胺基酸序列而成者，進而包含序列編號64之胺基酸序列作為架構區3者。但是，於序列編號65所示之重鏈之可變區之胺基酸序列中，稱為CDR時，CDR之序列並不限定於該等，包含該等CDR之胺基酸序列之區域、包含該等CDR之胺基酸序列之任意接連之3個以上胺基酸的胺基酸序列亦可設為CDR。關於架構區亦相同。 作為對於hTfR具有親和性之人源化抗體之更具體之實施形態，可列舉： 輕鏈之可變區包含序列編號18之胺基酸序列且重鏈之可變區包含序列編號65之胺基酸序列者、 輕鏈之可變區包含序列編號20之胺基酸序列且重鏈之可變區包含序列編號65之胺基酸序列者、 輕鏈之可變區包含序列編號21之胺基酸序列且重鏈之可變區包含序列編號65之胺基酸序列者、及 輕鏈之可變區包含序列編號22之胺基酸序列且重鏈之可變區包含序列編號65之胺基酸序列者。 作為對於hTfR具有親和性之人源化抗體之更具體實施形態，可列舉： 輕鏈包含序列編號23之胺基酸序列且重鏈包含序列編號66之胺基酸序列者、 輕鏈包含序列編號25之胺基酸序列且重鏈包含序列編號66之胺基酸序列者、 輕鏈包含序列編號27之胺基酸序列且重鏈包含序列編號66之胺基酸序列者、 輕鏈包含序列編號29之胺基酸序列且重鏈包含序列編號66之胺基酸序列者、 輕鏈包含序列編號23之胺基酸序列且重鏈包含序列編號68之胺基酸序列者、 輕鏈包含序列編號25之胺基酸序列且重鏈包含序列編號68之胺基酸序列者、 輕鏈包含序列編號27之胺基酸序列且重鏈包含序列編號68之胺基酸序列者、及 輕鏈包含序列編號29之胺基酸序列且重鏈包含序列編號68之胺基酸序列者。 再者，於上述之具體之實施形態中，人源化抗hTfR抗體之重鏈包含序列編號66之胺基酸序列者係IgG1型之抗體，包含序列編號68之胺基酸序列者係IgG4型之抗體。均包含序列編號65之胺基酸序列作為可變區。 又，作為對於hTfR具有親和性之Fab即人源化抗體之更具體之實施形態，可列舉： 輕鏈包含序列編號23之胺基酸序列且Fab重鏈包含序列編號61之胺基酸序列者、 輕鏈包含序列編號25之胺基酸序列且Fab重鏈包含序列編號61之胺基酸序列者、 輕鏈包含序列編號27之胺基酸序列且Fab重鏈包含序列編號61之胺基酸序列者、 輕鏈包含序列編號29之胺基酸序列且Fab重鏈包含序列編號61之胺基酸序列者。 於抗hTfR抗體為Fab之情形時，作為將其他Fc區域導入至Fab重鏈中所得者之具體實施例，可列舉： 輕鏈包含序列編號23之胺基酸序列且導入有Fc區域之Fab重鏈包含序列編號71之胺基酸序列者、 輕鏈包含序列編號25之胺基酸序列且導入有Fc區域之Fab重鏈包含序列編號71之胺基酸序列者、 輕鏈包含序列編號27之胺基酸序列且導入有Fc區域之Fab重鏈包含序列編號71之胺基酸序列者、 輕鏈包含序列編號29之胺基酸序列且導入有Fc區域之Fab重鏈包含序列編號71之胺基酸序列者。 於上述將其他Fc區域導入至Fab重鏈中之情形時，例如可於其他蛋白質(A)之C末端側直接或經由連接子序列而結合導入有Fc區域之Fab重鏈。再者，具有序列編號71所示之胺基酸序列者係於人源化抗hTfR抗體3N之Fab重鏈之胺基酸序列(胺基酸序列61)的N末端側，經由包含由5個胺基酸序列Gly-Gly-Gly-Gly-Ser(序列編號3)接連而成之共計25個胺基酸序列之連接子序列，而結合有具有序列編號70所示之胺基酸序列之人類IgG Fc區域者。 將對於hTfR具有親和性之抗體之較佳實施形態如上述般例示。關於該等抗hTfR抗體之輕鏈及重鏈，可以將抗hTfR抗體與hTfR之親和性調整為所需者等為目的，而對於其可變區之胺基酸序列適當施加置換、缺失、附加等突變。 於將輕鏈之可變區之胺基酸序列之胺基酸置換為其他胺基酸之情形時，所置換之胺基酸之個數較佳為1～10個，更佳為1～5個，進而較佳為1～3個，進而更佳為1～2個。於使輕鏈之可變區之胺基酸序列中之胺基酸缺失的情形時，所缺失之胺基酸之個數較佳為1～10個，更佳為1～5個，進而較佳為1～3個，進而更佳為1～2個。又，亦可施加組合有該等胺基酸之置換與缺失之突變。 於在輕鏈之可變區中附加胺基酸之情形時，於輕鏈之可變區之胺基酸序列中或者N末端側或C末端側附加較佳為1～10個、更佳為1～5個、進而較佳為1～3個、進而更佳為1～2個胺基酸。亦可施加將該等胺基酸之附加、置換及缺失加以組合之突變。施加有突變之輕鏈之可變區之胺基酸序列較佳為與原本之輕鏈之可變區之胺基酸序列具有80%以上之同源性，更佳為顯示出90%以上之同源性，進而較佳為顯示出95%以上之同源性。 尤其是於將輕鏈之各CDR或各架構區之各胺基酸序列中之胺基酸置換為其他胺基酸的情形時，所置換之胺基酸之個數較佳為1～5個，更佳為1～3個，進而較佳為1～2個，進而更佳為1個。於使各CDR或各架構區之各胺基酸序列中之胺基酸缺失之情形時，所缺失之胺基酸之個數較佳為1～5個，更佳為1～3個，進而較佳為1～2個，進而更佳為1個。又，亦可施加組合有該等胺基酸之置換與缺失之突變。 於在輕鏈之各CDR或各架構區之各胺基酸序列中附加胺基酸之情形時，於該胺基酸序列中或者N末端側或C末端側附加較佳為1～5個、更佳為1～3個、進而較佳為1～2個、進而更佳為1個胺基酸。亦可施加將該等胺基酸之附加、置換及缺失加以組合之突變。施加有突變之各CDR或各架構區之各胺基酸序列較佳為與原本之各CDR之胺基酸序列具有80%以上之同源性，更佳為顯示出90%以上之同源性，進而較佳為顯示出95%以上之同源性。 於將作為重鏈之可變區之序列編號65所示之胺基酸序列的胺基酸置換為其他胺基酸之情形時，所置換之胺基酸之個數較佳為1～10個，更佳為1～5個，進而較佳為1～3個，進而更佳為1～2個。於使重鏈之可變區之胺基酸序列中之胺基酸缺失的情形時，所缺失之胺基酸之個數較佳為1～10個，更佳為1～5個，進而較佳為1～3個，進而更佳為1～2個。又，亦可施加組合有該等胺基酸之置換與缺失之突變。 於在作為重鏈之可變區之序列編號65所示之胺基酸序列中附加胺基酸的情形時，於重鏈之可變區之胺基酸序列中或者N末端側或C末端側附加較佳為1～10個、更佳為1～5個、進而較佳為1～3個、進而更佳為1～2個胺基酸。亦可施加將該等胺基酸之附加、置換及缺失加以組合之突變。施加有突變之重鏈之可變區之胺基酸序列較佳為與原本之重鏈之可變區之胺基酸序列具有80%以上的同源性，更佳為顯示出90%以上之同源性，進而較佳為顯示出95%以上之同源性。 尤其是於將序列編號65所示之胺基酸序列中之各CDR或各架構區的各胺基酸序列中之胺基酸置換為其他胺基酸之情形時，所置換之胺基酸之個數較佳為1～5個，更佳為1～3個，進而較佳為1～2個，進而更佳為1個。於使各CDR之各胺基酸序列中之胺基酸缺失之情形時，所缺失之胺基酸之個數較佳為1～5個，更佳為1～3個，進而較佳為1～2個，進而更佳為1個。又，亦可施加組合有該等胺基酸之置換與缺失之突變。 於在序列編號65所示之胺基酸序列中之各CDR或各架構區之各胺基酸序列中附加胺基酸的情形時，於該胺基酸序列中或者N末端側或C末端側附加較佳為1～5個、更佳為1～3個、進而較佳為1～2個、進而更佳為1個胺基酸。亦可施加將該等胺基酸之附加、置換及缺失加以組合之突變。施加有突變之各CDR之各胺基酸序列較佳為與原本之各CDR之胺基酸序列具有80%以上之同源性，更佳為顯示出90%以上之同源性，進而較佳為顯示出95%以上之同源性。 再者，於如上述般對作為抗hTfR抗體之重鏈之可變區之序列編號65所示的胺基酸序列施加置換、缺失、附加等突變之情形時，原本之序列編號62或63所示之CDR1之自N末端側起第5位的胺基酸即甲硫胺酸、與序列編號64所示之架構區3之自N末端側起第17位之胺基酸即白胺酸較佳為被保存在與原本相同的位置上。又，重鏈之CDR1及架構區3之胺基酸序列亦較佳為被保存在與原本相同之位置上。 亦可將上述對於抗hTfR抗體之輕鏈之可變區之突變、與上述對於抗hTfR抗體之重鏈之可變區之突變組合，而對於抗hTfR抗體之輕鏈與重鏈之可變區兩者施加突變。 作為上述抗hTfR抗體之重鏈及輕鏈之可變區之胺基酸序列中的胺基酸向其他胺基酸之置換，例如可列舉：芳香族胺基酸(Phe、Trp、Tyr)、脂肪族胺基酸(Ala、Leu、Ile、Val)、極性胺基酸(Gln、Asn)、鹼性胺基酸(Lys、Arg、His)、酸性胺基酸(Glu、Asp)、具有羥基之胺基酸(Ser、Thr)等分類為相同群組之胺基酸。 再者，於對抗hTfR抗體施加突變而於C末端或N末端附加有胺基酸之情形時，該所附加之胺基酸於使抗hTfR抗體與其他蛋白質(A)融合時位於抗hTfR抗體與其他蛋白質(A)之間，於該情形時，該所附加之胺基酸構成連接子之一部分。 於上述所例示之包含對於hTfR具有親和性之人源化抗體的抗體之較佳實施形態中，抗hTfR抗體之重鏈及輕鏈之CDR之胺基酸序列只要抗體為對於hTfR及猴TfR具有特異性親和性者，則無特別限制。 但是，本發明中，對於人類及猴TfR均具有親和性且對於hTfR具有相對較高之親和性之抗體即人源化抗體係尤其是藉由實施例7所記載之方法進行測定時， 與人類TfR之解離常數較佳為1×10-10 M以下、更佳為2.5×10-11 M以下、進而較佳為5×10-12 M以下、進而更佳為1×10-12 M以下者，且 與猴TfR之解離常數較佳為1×10-9 M以下、更佳為5×10-10 M以下、進而較佳為1×10-10 M以下、例如7.5×10-11 M以下者。 例如可列舉：與人類TfR及猴TfR之解離常數分別為1×10-10 M以下及1×10-9 M以下、1×10-11 M以下及5×10-10 M以下、5×10-12 M以下及1×10-10 M以下、5×10-12 M以下及7.5×10-11 M以下、1×10-12 M以下及1×10-10 M以下、1×10-12 M以下及7.5×10-11 M以下者。此處，與人類TfR之解離常數並無特別明確之下限，例如可設為5×10-13 M、1×10-13 M等。又，與猴TfR之解離常數並無特別明確之下限，例如可設為5×10-11 M、1×10-11 M、1×10-12 M等。即便抗體為單鏈抗體亦相同。 關於作為上述之具體實施形態所示之對於hTfR具有親和性之人源化抗體、與其他蛋白質(A)之融合蛋白質的具體實施形態，可列舉：其他蛋白質(A)為人類酸性α-葡萄糖苷酶(hGAA)、人類艾杜糖醛酸-2-硫酸酯酶(hI2S)、人類α-L-艾杜糖醛酸酶(hIDUA)、人類棕櫚醯蛋白硫酯酶-1(hPPT-1)、人類酸性神經磷脂酶(hASM)、人類芳基硫酸酯酶A(hARSA)、人類乙醯肝素N-硫酸酯酶(hSGSH)、人類葡萄糖腦苷脂酶(hGBA)、人類三肽基肽酶-1(hTPP-1)、人類α-N-乙醯葡萄糖胺苷酶(hNAGLU)、人類β-葡萄糖醛酸苷酶(hGUSB)、人類酸性神經醯胺酶(hAC)、人類α-L-岩藻糖苷酶(hFUCA1)、及α-甘露糖苷酶(hLAMAN)者。 作為其他蛋白質(A)為人類酸性α-葡萄糖苷酶(hGAA)之融合蛋白質之具體實施例，可列舉： (1)包含hGAA經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，且輕鏈之胺基酸序列為序列編號23所示者； (2)包含hGAA經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，且輕鏈之胺基酸序列為序列編號25所示者； (3)包含hGAA經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，且輕鏈之胺基酸序列為序列編號27所示者； (4)包含hGAA經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，且輕鏈之胺基酸序列為序列編號29所示者。此處，連接子序列較佳為包含1個甘胺酸、1個絲胺酸、胺基酸序列Gly-Ser、胺基酸序列Gly-Gly-Ser、序列編號3之胺基酸序列、序列編號4之胺基酸序列、序列編號5之胺基酸序列、及將1～10個該等胺基酸序列接連而成之胺基酸序列者。 此處，重鏈為具有序列編號66者之情形時之抗體為IgG1型者，於為序列編號68之情形時，為IgG4型者。又，hGAA係具有序列編號55或56之胺基酸序列者、或者其突變體。 作為其他蛋白質(A)為人類酸性α-葡萄糖苷酶(hGAA)之融合蛋白質之更具體實施例，可例示： (1)包含hGAA經由胺基酸序列Gly-Ser結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號57所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (2)包含hGAA經由胺基酸序列Gly-Ser結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號58所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者。(1)係抗體為IgG1型者，(2)係抗體為IgG4型者。又，hGAA係具有序列編號55之胺基酸序列者。 此處，上述(1)中序列編號57所包含之hTfR之重鏈之胺基酸序列係序列編號66所示者。即，上述(1)之融合蛋白質係作為人源化抗體，為輕鏈包含序列編號23之胺基酸序列且重鏈包含序列編號66之胺基酸序列者。又，於上述(2)中序列編號58所包含之hTfR之重鏈之胺基酸序列係序列編號68所示者。即，上述(2)之融合蛋白質係作為人源化抗體，為輕鏈包含序列編號23之胺基酸序列且重鏈包含序列編號68之胺基酸序列者。 作為其他蛋白質(A)為人類酸性α-葡萄糖苷酶(hGAA)且人源化抗體為Fab抗體之融合蛋白質的具體實施例，可列舉： (1)包含hGAA經由連接子序列結合至hTfR之Fab重鏈之C末端側或N末端而成者、與hTfR之輕鏈，且Fab重鏈之胺基酸序列為序列編號61所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號23所示者； (2)包含hGAA經由連接子序列結合至hTfR之Fab重鏈之C末端側或N末端而成者、與hTfR之輕鏈，且Fab重鏈之胺基酸序列為序列編號61所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號25所示者； (3)包含hGAA經由連接子序列結合至hTfR之Fab重鏈之C末端側或N末端而成者、與hTfR之輕鏈，且Fab重鏈之胺基酸序列為序列編號61所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號27所示者； (4)包含hGAA經由連接子序列結合至hTfR之Fab重鏈之C末端側或N末端而成者、與hTfR之輕鏈，且Fab重鏈之胺基酸序列為序列編號61所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號29所示者。此處，連接子序列較佳為包含1個甘胺酸、1個絲胺酸、胺基酸序列Gly-Ser、胺基酸序列Gly-Gly-Ser、序列編號3之胺基酸序列、序列編號4之胺基酸序列、序列編號5之胺基酸序列、及該等胺基酸序列1～10個連接而成之胺基酸序列者。 作為其他蛋白質(A)為人類酸性α-葡萄糖苷酶(hGAA)且人源化抗體為Fab抗體之融合蛋白質的更具體實施例，可列舉：包含hGAA經由序列編號3所示之胺基酸序列接連3次而成之連接子結合至hTfR之重鏈(Fab)的C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號89所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者。 其他蛋白質(A)為人類酸性α-葡萄糖苷酶(hGAA)之融合蛋白質係對於人類及猴TfR均具有親和性者，且藉由實施例7所記載之方法進行測定時， 與猴TfR之解離常數較佳為1×10-10 M以下、更佳為5×10-11 M以下者， 與人類TfR之解離常數較佳為1×10-10 M以下、更佳為5×10-11 M以下、進而較佳為1×10-11 M以下、進而更佳為1×10-12 M以下者。 例如可列舉：與猴TfR及人類TfR之解離常數分別為1×10-10 M以下及1×10-10 M以下、1×10-10 M以下及1×10-11 M以下、1×10-10 M以下及1×10-12 M以下、5×10-11 M以下及1×10-11 M以下、5×10-11 M以下及1×10-11 M以下、5×10-11 M以下及1×10-12 M以下者。此處，與猴TfR之解離常數並無特別明確之下限，例如可設為1×10-11 M、1×10-12 M、1×10-13 M等。與人類TfR之解離常數並無特別明確之下限，例如可設為1×10-12 M、5×10-13 M、1×10-13 M等。即便抗體為單鏈抗體亦相同。 作為其他蛋白質(A)為人類艾杜糖醛酸-2-硫酸酯酶(hI2S)之融合蛋白質之具體實施例，可列舉： (1)包含hI2S經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號23所示者； (2)包含hI2S經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號25所示者； (3)包含hI2S經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號27所示者； (4)包含hI2S經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號29所示者。此處，連接子序列較佳為包含1個甘胺酸、1個絲胺酸、胺基酸序列Gly-Ser、胺基酸序列Gly-Gly-Ser、序列編號3之胺基酸序列、序列編號4之胺基酸序列、序列編號5之胺基酸序列、及將1～10個該等胺基酸序列接連而成之胺基酸序列者。 此處，重鏈為具有序列編號66者之情形時之抗體係IgG1型者，為序列編號68之情形時係IgG4型者。 作為其他蛋白質(A)為人類艾杜糖醛酸-2-硫酸酯酶(hI2S)之融合蛋白質之更具體實施例，可例示： 包含hI2S經由胺基酸序列Gly-Ser結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號53所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者。於該情形時，抗體為IgG1型。序列編號53所包含之hTfR之重鏈之胺基酸序列係序列編號66所示者。即，該融合蛋白質係作為人源化抗體，輕鏈包含序列編號23之胺基酸序列且重鏈包含序列編號66之胺基酸序列者。亦可將抗體設為IgG4型，於該情形時，只要將重鏈自包含序列編號66之胺基酸序列者置換為包含序列編號68之胺基酸序列者即可。 作為其他蛋白質(A)為人類艾杜糖醛酸-2-硫酸酯酶(hI2S)且人源化抗體為Fab抗體之融合蛋白質的具體實施例，可列舉： (1)包含hI2S經由連接子序列結合至hTfR之Fab重鏈之C末端側或N末端而成者、與hTfR之輕鏈，且Fab重鏈之胺基酸序列為序列編號61所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號23所示者； (2)包含hI2S經由連接子序列結合至hTfR之Fab重鏈之C末端側或N末端而成者、與hTfR之輕鏈，且Fab重鏈之胺基酸序列為序列編號61所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號25所示者； (3)包含hI2S經由連接子序列結合至hTfR之Fab重鏈之C末端側或N末端而成者、與hTfR之輕鏈，且Fab重鏈之胺基酸序列為序列編號61所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號27所示者； (4)包含hI2S經由連接子序列結合至hTfR之Fab重鏈之C末端側或N末端而成者、與hTfR之輕鏈，且Fab重鏈之胺基酸序列為序列編號61所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號29所示者。此處，連接子序列較佳為包含1個甘胺酸、1個絲胺酸、胺基酸序列Gly-Ser、胺基酸序列Gly-Gly-Ser、序列編號3之胺基酸序列、序列編號4之胺基酸序列、序列編號5之胺基酸序列、及將1～10個該等胺基酸序列接連而成之胺基酸序列者。 作為其他蛋白質(A)為(hIDUA)之融合蛋白質之具體實施例，可列舉： (1)包含hIDUA經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號23所示者； (2)包含hIDUA經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號25所示者； (3)包含hIDUA經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號27所示者； (4)包含hIDUA經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號29所示者。此處，連接子序列較佳為包含1個甘胺酸、1個絲胺酸、胺基酸序列Gly-Ser、胺基酸序列Gly-Gly-Ser、序列編號3之胺基酸序列、序列編號4之胺基酸序列、序列編號5之胺基酸序列、及該等胺基酸序列1～10個接連或1～20個接連而成之胺基酸序列者。 此處，重鏈為具有序列編號66者之情形時之抗體係IgG1型者，為序列編號68之情形時係IgG4型者。又，hIDUA係具有序列編號75或76之胺基酸序列者、或其突變體。 作為其他蛋白質(A)為(hIDUA)之融合蛋白質之更具體實施例，可列舉： (1)包含hIDUA經由胺基酸序列Gly-Ser結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號90所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (2)包含hIDUA經由包含接著胺基酸序列Gly-Ser後序列編號3所示之胺基酸序列8次接連之共計42個胺基酸的連接子結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號91所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (3)包含hIDUA經由序列編號3所示之胺基酸序列20次接連而成之連接子結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號92所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (4)包含hIDUA經由序列編號3所示之胺基酸序列接連3次而成之連接子結合至hTfR之重鏈(Fab)之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號93所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (5)包含hIDUA經由序列編號3所示之胺基酸序列5次接連而成之連接子結合至hTfR之重鏈(Fab)之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號94所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (6)包含hIDUA經由序列編號3所示之胺基酸序列10次接連而成之連接子結合至hTfR之重鏈(Fab)之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號95所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (7)包含hIDUA經由序列編號3所示之胺基酸序列20次接連而成之連接子結合至hTfR之重鏈(Fab)之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號96所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (8)包含於在C末端側具有序列編號3所示之胺基酸序列6次接連而成之連接子之hTfR的重鏈(Fab)2次連接而成之胺基酸序列的C末端側結合hIDUA而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號97所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (9)於序列編號98所示之單鏈人源化抗hTfR抗體編號3N(2)之C末端側經由包含在序列編號3所示之胺基酸序列後接著胺基酸序列Gly-Gly之7個胺基酸的連接子結合hIDUA者即序列編號99所示者。 (1)～(3)係抗體為IgG1型者，(4)～(9)係抗體為Fab型者。 此處，上述(1)～(3)中之hTfR之重鏈之胺基酸序列係序列編號68所示者。即，上述(1)～(3)之融合蛋白質係作為人源化抗體，輕鏈包含序列編號23之胺基酸序列且重鏈包含序列編號68之胺基酸序列者。又，上述(4)～(9)中之hTfR之重鏈之胺基酸序列係序列編號61所示者。即，上述(4)～(9)之融合蛋白質係作為人源化抗體，輕鏈包含序列編號23之胺基酸序列且重鏈(Fab)包含序列編號61之胺基酸序列者。 作為其他蛋白質(A)為(hPPT-1)之融合蛋白質之具體實施例，可列舉： (1)包含hPPT-1經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號23所示者； (2)包含hPPT-1經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號25所示者； (3)包含hPPT-1經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號27所示者， (4)包含hPPT-1經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號29所示者。此處，連接子序列較佳為包含1個甘胺酸、1個絲胺酸、胺基酸序列Gly-Ser、胺基酸序列Gly-Gly-Ser、序列編號3之胺基酸序列、序列編號4之胺基酸序列、序列編號5之胺基酸序列、及該等胺基酸序列1～10個接連或1～20個接連而成之胺基酸序列者。 此處，重鏈為具有序列編號66者之情形時之抗體係IgG1型者，為序列編號68之情形時係IgG4型者。又，hPPT-1係具有序列編號77之胺基酸序列者、或其突變體。 作為其他蛋白質(A)為(hPPT-1)之融合蛋白質之更具體實施例，係 (1)包含hPPT-1經由胺基酸序列Gly-Ser結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號100所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (2)包含hPPT-1經由序列編號3所示之胺基酸序列接連5次而成之連接子結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號101所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (3)包含hPPT-1經由序列編號3所示之胺基酸序列接連10次而成之連接子結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號102所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (4)包含hPPT-1經由序列編號3所示之胺基酸序列接連20次而成之連接子結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號103所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (5)包含hPPT-1經由序列編號3所示之胺基酸序列接連3次而成之連接子結合至hTfR之重鏈(Fab)之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號104所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (6)包含於在C末端側具有序列編號3所示之胺基酸序列接連6次而成之連接子之hTfR的重鏈(Fab)接連2次而成之胺基酸序列的C末端側結合hPPT-1而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號105所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者， (1)～(4)係抗體為IgG1型者，(5)～(6)係抗體為Fab型者。 此處，上述(1)～(4)中之hTfR之重鏈之胺基酸序列係序列編號68所示者。即，上述(1)～(4)之融合蛋白質係作為人源化抗體，輕鏈包含序列編號23之胺基酸序列且重鏈包含序列編號68之胺基酸序列者。又，上述(5)及(6)中之hTfR之重鏈之胺基酸序列係序列編號61所示者。即，上述(5)及(6)之融合蛋白質係作為人源化抗體，輕鏈包含序列編號23之胺基酸序列且重鏈(Fab)包含序列編號61之胺基酸序列者。 作為其他蛋白質(A)為(hASM)之融合蛋白質之具體實施例，可列舉： (1)包含hASM經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號23所示者； (2)包含hASM經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號25所示者； (3)包含hASM經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號27所示者； (4)包含hASM經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號29所示者。此處，連接子序列較佳為包含1個甘胺酸、1個絲胺酸、胺基酸序列Gly-Ser、胺基酸序列Gly-Gly-Ser、序列編號3之胺基酸序列、序列編號4之胺基酸序列、序列編號5之胺基酸序列、及該等胺基酸序列1～10個接連或1～20個接連而成之胺基酸序列者。 此處重鏈為具有序列編號66者之情形時之抗體係IgG1型者，為序列編號68之情形時係IgG4型者。又，hASM係具有序列編號78之胺基酸序列者、或其突變體。 作為其他蛋白質(A)為(hASM)之融合蛋白質之更具體實施例，係 (1)包含hASM經由胺基酸序列Gly-Ser結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號106所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (2)包含hASM經由序列編號3所示之胺基酸序列接連5次而成之連接子結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號107所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (3)包含hASM經由序列編號3所示之胺基酸序列接連10次而成之連接子結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號108所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (4)包含hASM經由序列編號3所示之胺基酸序列接連20次而成之連接子結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號109所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (5)包含hASM經由序列編號3所示之胺基酸序列接連3次而成之連接子結合至hTfR之重鏈(Fab)之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號110所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (6)包含hASM經由序列編號3所示之胺基酸序列接連5次而成之連接子結合至hTfR之重鏈(Fab)之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號111所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (7)包含hASM經由序列編號3所示之胺基酸序列接連10次而成之連接子結合至hTfR之重鏈(Fab)之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號112所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (8)包含hASM經由序列編號3所示之胺基酸序列接連20次而成之連接子結合至hTfR之重鏈(Fab)之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號113所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (9)包含於在C末端側具有序列編號3所示之胺基酸序列接連6次而成之連接子之hTfR的重鏈(Fab)接連2次而成之胺基酸序列的C末端側結合hASM而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號114所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者， (1)～(4)係抗體為IgG1型者，(5)～(9)係抗體為Fab型者。 此處，上述(1)～(4)中之hTfR之重鏈之胺基酸序列係序列編號68所示者。即，上述(1)～(4)之融合蛋白質係作為人源化抗體，輕鏈包含序列編號23之胺基酸序列且重鏈包含序列編號68之胺基酸序列者。又，上述(5)及(6)中之hTfR之重鏈之胺基酸序列係序列編號61所示者。即，上述(5)及(6)之融合蛋白質係作為人源化抗體，輕鏈包含序列編號23之胺基酸序列且重鏈(Fab)包含序列編號61之胺基酸序列者。 作為其他蛋白質(A)為(hARSA)之融合蛋白質之具體實施例，可列舉： (1)包含hARSA經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號23所示者； (2)包含hARSA經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號25所示者； (3)包含hARSA經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號27所示者； (4)包含hARSA經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號29所示者。此處，連接子序列較佳為包含1個甘胺酸、1個絲胺酸、胺基酸序列Gly-Ser、胺基酸序列Gly-Gly-Ser、序列編號3之胺基酸序列、序列編號4之胺基酸序列、序列編號5之胺基酸序列、及該等胺基酸序列1～10個接連或1～20個接連而成之胺基酸序列者。 此處重鏈為具有序列編號66者之情形時之抗體係IgG1型者，為序列編號68之情形時係IgG4型者。又，hARSA係具有序列編號79之胺基酸序列者、或其突變體。 作為其他蛋白質(A)為(hARSA)之融合蛋白質之更具體實施例，係 (1)包含hARSA經由胺基酸序列Gly-Ser結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號115所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (2)包含hARSA經由序列編號3所示之胺基酸序列接連5次而成之連接子結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號116所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (3)包含hARSA經由序列編號3所示之胺基酸序列接連10次而成之連接子結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號117所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (4)包含hARSA經由序列編號3所示之胺基酸序列接連20次而成之連接子結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號118所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (5)包含hARSA經由序列編號3所示之胺基酸序列接連3次而成之連接子結合至hTfR之重鏈(Fab)之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號119所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (6)包含hARSA經由序列編號3所示之胺基酸序列接連5次而成之連接子結合至hTfR之重鏈(Fab)之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號120所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (7)包含hARSA經由序列編號3所示之胺基酸序列接連10次而成之連接子結合至hTfR之重鏈(Fab)之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號121所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (8)包含hARSA經由序列編號3所示之胺基酸序列接連20次而成之連接子結合至hTfR之重鏈(Fab)之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號122所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (9)包含於在C末端側具有序列編號3所示之胺基酸序列接連6次而成之連接子之hTfR的重鏈(Fab)接連2次而成之胺基酸序列的C末端側結合hARSA而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號123所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者， (1)～(4)係抗體為IgG1型者，(5)～(9)係抗體為Fab型者。 此處，上述(1)～(4)中之hTfR之重鏈之胺基酸序列係序列編號68所示者。即，上述(1)～(4)之融合蛋白質係作為人源化抗體，輕鏈包含序列編號23之胺基酸序列且重鏈包含序列編號68之胺基酸序列者。又，上述(5)～(9)中之hTfR之重鏈之胺基酸序列係序列編號61所示者。即，上述(5)～(9)之融合蛋白質係作為人源化抗體，輕鏈包含序列編號23之胺基酸序列且重鏈(Fab)包含序列編號61之胺基酸序列者。 作為其他蛋白質(A)為(hSGSH)之融合蛋白質之具體實施例，可列舉： (1)包含hSGSH經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號23所示者； (2)包含hSGSH經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號25所示者； (3)包含hSGSH經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號27所示者； (4)包含hSGSH經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號29所示者。此處，連接子序列較佳為包含1個甘胺酸、1個絲胺酸、胺基酸序列Gly-Ser、胺基酸序列Gly-Gly-Ser、序列編號3之胺基酸序列、序列編號4之胺基酸序列、序列編號5之胺基酸序列、及該等胺基酸序列1～10個接連或1～20個接連而成之胺基酸序列者。 此處重鏈為具有序列編號66者之情形時之抗體係IgG1型者，為序列編號68之情形時係IgG4型者。又，hSGSH係具有序列編號80之胺基酸序列者、或其突變體。 作為其他蛋白質(A)為(hSGSH)之融合蛋白質之更具體實施例，係： (1)包含hSGSH經由胺基酸序列Gly-Ser結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號124所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (2)包含hSGSH經由序列編號3所示之胺基酸序列接連5次而成之連接子結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號125所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (3)包含hSGSH經由序列編號3所示之胺基酸序列接連10次而成之連接子結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號126所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (4)包含hSGSH經由序列編號3所示之胺基酸序列接連20次而成之連接子結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號127所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (5)包含hSGSH經由序列編號3所示之胺基酸序列接連3次而成之連接子結合至hTfR之重鏈(Fab)之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號128所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (6)包含於在C末端側具有序列編號3所示之胺基酸序列接連6次而成之連接子之hTfR的重鏈(Fab)接連2次而成之胺基酸序列的C末端側結合hSGSH而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號129所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者， (1)～(4)成為抗體為IgG1型者，(5)及(6)成為抗體為Fab型者。 此處，上述(1)～(4)中之hTfR之重鏈之胺基酸序列係序列編號68所示者。即，上述(1)～(4)之融合蛋白質係作為人源化抗體，輕鏈包含序列編號23之胺基酸序列且重鏈包含序列編號68之胺基酸序列者。又，上述(5)及(6)中之hTfR之重鏈之胺基酸序列係序列編號61所示者。即，上述(5)及(6)之融合蛋白質係作為人源化抗體，輕鏈包含序列編號23之胺基酸序列且重鏈(Fab)包含序列編號61之胺基酸序列者。 作為其他蛋白質(A)為(hGBA)之融合蛋白質之具體實施例，可列舉： (1)包含hGBA經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號23所示者； (2)包含hGBA經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號25所示者； (3)包含hGBA經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號27所示者； (4)包含hGBA經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號29所示者。此處，連接子序列較佳為包含1個甘胺酸、1個絲胺酸、胺基酸序列Gly-Ser、胺基酸序列Gly-Gly-Ser、序列編號3之胺基酸序列、序列編號4之胺基酸序列、序列編號5之胺基酸序列、及該等胺基酸序列1～10個接連或1～20個接連而成之胺基酸序列者。 此處重鏈為具有序列編號66者之情形時之抗體係IgG1型者，為序列編號68之情形時係IgG4型者。又，hGBA係具有序列編號81之胺基酸序列者、或其突變體。 作為其他蛋白質(A)為(hGBA)之融合蛋白質之更具體實施例，係： (1)包含hGBA經由胺基酸序列Gly-Ser結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號130所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (2)包含hGBA經由序列編號3所示之胺基酸序列接連5次而成之連接子結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號131所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (3)包含hGBA經由序列編號3所示之胺基酸序列接連10次而成之連接子結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號132所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (4)包含hGBA經由序列編號3所示之胺基酸序列接連20次而成之連接子結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號133所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (5)包含hGBA經由序列編號3所示之胺基酸序列接連3次而成之連接子結合至hTfR之重鏈(Fab)之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號134所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (6)包含於在C末端側具有序列編號3所示之胺基酸序列接連6次而成之連接子之hTfR的重鏈(Fab)接連2次而成之胺基酸序列的C末端側結合hGBA而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號135所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者， (1)～(4)成為抗體為IgG1型者，(5)及(6)成為抗體為Fab型者。 此處，上述(1)～(4)中之hTfR之重鏈之胺基酸序列係序列編號68所示者。即，上述(1)～(4)之融合蛋白質係作為人源化抗體，輕鏈包含序列編號23之胺基酸序列且重鏈包含序列編號68之胺基酸序列者。又，上述(5)及(6)中之hTfR之重鏈之胺基酸序列係序列編號61所示者。即，上述(5)及(6)之融合蛋白質係作為人源化抗體，輕鏈包含序列編號23之胺基酸序列且重鏈(Fab)包含序列編號61之胺基酸序列者。 作為其他蛋白質(A)為(hTPP-1)之融合蛋白質之具體實施例，可列舉： (1)包含hTPP-1經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號23所示者； (2)包含hTPP-1經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號25所示者； (3)包含hTPP-1經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號27所示者； (4)包含hTPP-1經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號29所示者。此處，連接子序列較佳為包含1個甘胺酸、1個絲胺酸、胺基酸序列Gly-Ser、胺基酸序列Gly-Gly-Ser、序列編號3之胺基酸序列、序列編號4之胺基酸序列、序列編號5之胺基酸序列、及該等胺基酸序列1～10個接連或1～20個接連而成之胺基酸序列者。 此處重鏈為具有序列編號66者之情形時之抗體係IgG1型者，為序列編號68之情形時係IgG4型者。又，hTPP-1係具有序列編號82之胺基酸序列者、或其突變體。 作為其他蛋白質(A)為(hTPP-1)之融合蛋白質之更具體實施例，係： (1)包含hTPP-1經由胺基酸序列Gly-Ser結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號136所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (2)包含hTPP-1經由序列編號3所示之胺基酸序列接連5次而成之連接子結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號137所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (3)包含hTPP-1經由序列編號3所示之胺基酸序列接連10次而成之連接子結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號138所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (4)包含hTPP-1經由序列編號3所示之胺基酸序列接連20次而成之連接子結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號139所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (5)包含hTPP-1經由序列編號3所示之胺基酸序列接連3次而成之連接子結合至hTfR之重鏈(Fab)之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號140所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (6)包含於在C末端側具有序列編號3所示之胺基酸序列接連6次而成之連接子之hTfR的重鏈(Fab)接連2次而成之胺基酸序列的C末端側結合hTPP-1而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號141所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者， (1)～(4)成為抗體為IgG1型者，(5)及(6)成為抗體為Fab型者。 此處，上述(1)～(4)中之hTfR之重鏈之胺基酸序列係序列編號68所示者。即，上述(1)～(4)之融合蛋白質係作為人源化抗體，輕鏈包含序列編號23之胺基酸序列且重鏈包含序列編號68之胺基酸序列者。又，上述(5)及(6)中之hTfR之重鏈之胺基酸序列係序列編號61所示者。即，上述(5)及(6)之融合蛋白質係作為人源化抗體，輕鏈包含序列編號23之胺基酸序列且重鏈(Fab)包含序列編號61之胺基酸序列者。 作為其他蛋白質(A)為(hNAGLU)之融合蛋白質之具體實施例，可列舉： (1)包含hNAGLU經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號23所示者； (2)包含hNAGLU經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號25所示者； (3)包含hNAGLU經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號27所示者； (4)包含hNAGLU經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號29所示者。此處，連接子序列較佳為包含1個甘胺酸、1個絲胺酸、胺基酸序列Gly-Ser、胺基酸序列Gly-Gly-Ser、序列編號3之胺基酸序列、序列編號4之胺基酸序列、序列編號5之胺基酸序列、及該等胺基酸序列1～10個接連或1～20個接連而成之胺基酸序列者。 此處重鏈為具有序列編號66者之情形時之抗體係IgG1型者，為序列編號68之情形時係IgG4型者。又，hNAGLU係具有序列編號83之胺基酸序列者、或其突變體。 作為其他蛋白質(A)為(hNAGLU)之融合蛋白質之更具體實施例，係： (1)包含hNAGLU經由胺基酸序列Gly-Ser結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號142所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (2)包含hNAGLU經由序列編號3所示之胺基酸序列接連5次而成之連接子結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號143所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (3)包含hNAGLU經由序列編號3所示之胺基酸序列接連10次而成之連接子結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號144所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (4)包含hNAGLU經由序列編號3所示之胺基酸序列接連20次而成之連接子結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號145所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (5)包含hNAGLU經由序列編號3所示之胺基酸序列接連3次而成之連接子結合至hTfR之重鏈(Fab)之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號146所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (6)包含hNAGLU經由序列編號3所示之胺基酸序列接連5次而成之連接子結合至hTfR之重鏈(Fab)之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號147所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (7)包含hNAGLU經由序列編號3所示之胺基酸序列接連10次而成之連接子結合至hTfR之重鏈(Fab)之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號148所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (8)包含hNAGLU經由序列編號3所示之胺基酸序列接連20次而成之連接子結合至hTfR之重鏈(Fab)之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號149所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者， (1)～(4)成為抗體為IgG1型者，(5)～(8)成為抗體為Fab型者。 此處，上述(1)～(4)中之hTfR之重鏈之胺基酸序列係序列編號68所示者。即，上述(1)～(4)之融合蛋白質係作為人源化抗體，輕鏈包含序列編號23之胺基酸序列且重鏈包含序列編號68之胺基酸序列者。又，上述(5)～(8)中之hTfR之重鏈之胺基酸序列係序列編號61所示者。即，上述(5)～(8)之融合蛋白質係作為人源化抗體，輕鏈包含序列編號23之胺基酸序列且重鏈(Fab)包含序列編號61之胺基酸序列者。 作為其他蛋白質(A)為(hGUSB)之融合蛋白質之具體實施例，可列舉： (1)包含hGUSB經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號23所示者； (2)包含hGUSB經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號25所示者； (3)包含hGUSB經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號27所示者； (4)包含hGUSB經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號29所示者。此處，連接子序列較佳為包含1個甘胺酸、1個絲胺酸、胺基酸序列Gly-Ser、胺基酸序列Gly-Gly-Ser、序列編號3之胺基酸序列、序列編號4之胺基酸序列、序列編號5之胺基酸序列、及該等胺基酸序列1～10個接連或1～20個接連而成之胺基酸序列者。 此處重鏈為具有序列編號66者之情形時之抗體係IgG1型者，為序列編號68之情形時係IgG4型者。又，hGUSB係具有序列編號84之胺基酸序列者、或者其突變體。 作為其他蛋白質(A)為(hGUSB)之融合蛋白質之更具體實施例，係： (1)包含hGUSB經由胺基酸序列Gly-Ser結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號150所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (2)包含hGUSB經由序列編號3所示之胺基酸序列接連5次而成之連接子結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號151所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (3)包含hGUSB經由序列編號3所示之胺基酸序列接連10次而成之連接子結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號152所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (4)包含hGUSB經由序列編號3所示之胺基酸序列接連20次而成之連接子結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號153所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (5)包含hGUSB經由序列編號3所示之胺基酸序列接連3次而成之連接子結合至hTfR之重鏈(Fab)之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號154所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (6)包含hGUSB經由序列編號3所示之胺基酸序列接連5次而成之連接子結合至hTfR之重鏈(Fab)之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號155所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (7)包含hGUSB經由序列編號3所示之胺基酸序列接連10次而成之連接子結合至hTfR之重鏈(Fab)之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號156所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (8)包含hGUSB經由序列編號3所示之胺基酸序列接連20次而成之連接子結合至hTfR之重鏈(Fab)之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號157所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者， (1)～(4)成為抗體為IgG1型者，(5)～(8)成為抗體為Fab型者。 此處，上述(1)～(4)中之hTfR之重鏈之胺基酸序列係序列編號68所示者。即，上述(1)～(4)之融合蛋白質係作為人源化抗體，輕鏈包含序列編號23之胺基酸序列且重鏈包含序列編號68之胺基酸序列者。又，上述(5)～(8)中之hTfR之重鏈之胺基酸序列係序列編號61所示者。即，上述(5)～(8)之融合蛋白質係作為人源化抗體，輕鏈包含序列編號23之胺基酸序列且重鏈(Fab)包含序列編號61之胺基酸序列者。 作為其他蛋白質(A)為(hGALC)之融合蛋白質之具體實施例，可列舉： (1)包含hGALC經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號23所示者； (2)包含hGALC經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號25所示者； (3)包含hGALC經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號27所示者； (4)包含hGALC經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號29所示者。此處，連接子序列較佳為包含1個甘胺酸、1個絲胺酸、胺基酸序列Gly-Ser、胺基酸序列Gly-Gly-Ser、序列編號3之胺基酸序列、序列編號4之胺基酸序列、序列編號5之胺基酸序列、及該等胺基酸序列1～10個接連或1～20個接連而成之胺基酸序列者。 此處重鏈為具有序列編號66者之情形時之抗體係IgG1型者，為序列編號68之情形時係IgG4型者。又，hGALC係具有序列編號85之胺基酸序列者、或其突變體。 作為其他蛋白質(A)為(hGALC)之融合蛋白質之更具體實施例，係： (1)包含hGALC經由胺基酸序列Gly-Ser結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號158所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者， (2)包含hGALC經由序列編號3所示之胺基酸序列接連5次而成之連接子結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號159所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (3)包含hGALC經由序列編號3所示之胺基酸序列接連10次而成之連接子結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號160所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (4)包含hGALC經由序列編號3所示之胺基酸序列接連20次而成之連接子結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號161所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (5)包含hGALC經由序列編號3所示之胺基酸序列接連3次而成之連接子結合至hTfR之重鏈(Fab)之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號162所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (6)包含hGALC經由序列編號3所示之胺基酸序列接連5次而成之連接子結合至hTfR之重鏈(Fab)之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號163所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (7)包含hGALC經由序列編號3所示之胺基酸序列接連10次而成之連接子結合至hTfR之重鏈(Fab)之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號164所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (8)包含hGALC經由序列編號3所示之胺基酸序列接連20次而成之連接子結合至hTfR之重鏈(Fab)之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號165所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者， (1)～(4)成為抗體為IgG1型者，(5)～(8)成為抗體為Fab型者。 此處，上述(1)～(4)中之hTfR之重鏈之胺基酸序列係序列編號68所示者。即，上述(1)～(4)之融合蛋白質係作為人源化抗體，輕鏈包含序列編號23之胺基酸序列且重鏈包含序列編號68之胺基酸序列者。又，上述(5)～(8)中之hTfR之重鏈之胺基酸序列係序列編號61所示者。即，上述(5)～(8)之融合蛋白質係作為人源化抗體，輕鏈包含序列編號23之胺基酸序列且重鏈(Fab)包含序列編號61之胺基酸序列者。 作為其他蛋白質(A)為(hAC)之融合蛋白質之具體實施例，可列舉： (1)包含hAC經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號23所示者； (2)包含hAC經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號25所示者； (3)包含hAC經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號27所示者； (4)包含hAC經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號29所示者。此處，連接子序列較佳為包含1個甘胺酸、1個絲胺酸、胺基酸序列Gly-Ser、胺基酸序列Gly-Gly-Ser、序列編號3之胺基酸序列、序列編號4之胺基酸序列、序列編號5之胺基酸序列、及該等胺基酸序列1～10個接連或1～20個接連而成之胺基酸序列者。 此處重鏈為具有序列編號66者之情形時之抗體係IgG1型者，為序列編號68之情形時係IgG4型者。又，hAC係具有序列編號86之胺基酸序列者、或其突變體。 作為其他蛋白質(A)為(hAC)之融合蛋白質之更具體實施例，係： (1)包含hAC經由胺基酸序列Gly-Ser結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號166所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (2)包含hAC經由序列編號3所示之胺基酸序列接連5次而成之連接子結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號167所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (3)包含hAC經由序列編號3所示之胺基酸序列接連10次而成之連接子結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號168所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (4)包含hAC經由序列編號3所示之胺基酸序列接連20次而成之連接子結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號169所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (5)包含hAC經由序列編號3所示之胺基酸序列接連3次而成之連接子結合至hTfR之重鏈(Fab)之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號170所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (6)包含hAC經由序列編號3所示之胺基酸序列接連5次而成之連接子結合至hTfR之重鏈(Fab)之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號171所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (7)包含hAC經由序列編號3所示之胺基酸序列接連10次而成之連接子結合至hTfR之重鏈(Fab)之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號172所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (8)包含hAC經由序列編號3所示之胺基酸序列接連20次而成之連接子結合至hTfR之重鏈(Fab)之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號173所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者， (1)～(4)成為抗體為IgG1型者，(5)～(8)成為抗體為Fab型者。 此處，上述(1)～(4)中之hTfR之重鏈之胺基酸序列係序列編號68所示者。即，上述(1)～(4)之融合蛋白質係作為人源化抗體，輕鏈包含序列編號23之胺基酸序列且重鏈包含序列編號68之胺基酸序列者。又，上述(5)～(8)中之hTfR之重鏈之胺基酸序列係序列編號61所示者。即，上述(5)～(8)之融合蛋白質係作為人源化抗體，輕鏈包含序列編號23之胺基酸序列且重鏈(Fab)包含序列編號61之胺基酸序列者。 作為其他蛋白質(A)為(hFUCA1)之融合蛋白質之具體實施例，可列舉： (1)包含hFUCA1經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號23所示者； (2)包含hFUCA1經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號25所示者； (3)包含hFUCA1經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號27所示者； (4)包含hFUCA1經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號29所示者。此處，連接子序列較佳為包含1個甘胺酸、1個絲胺酸、胺基酸序列Gly-Ser、胺基酸序列Gly-Gly-Ser、序列編號3之胺基酸序列、序列編號4之胺基酸序列、序列編號5之胺基酸序列、及該等胺基酸序列1～10個接連或1～20個接連而成之胺基酸序列者。 此處重鏈為具有序列編號66者之情形時之抗體係IgG1型者，為序列編號68之情形時係IgG4型者。又，hFUCA1係具有序列編號87之胺基酸序列者、或其突變體。 作為其他蛋白質(A)為(hFUCA1)之融合蛋白質之更具體實施例，係： (1)包含hFUCA1經由胺基酸序列Gly-Ser結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號174所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (2)包含hFUCA1經由序列編號3所示之胺基酸序列接連5次而成之連接子結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號175所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (3)包含hFUCA1經由序列編號3所示之胺基酸序列接連10次而成之連接子結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號176所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (4)包含hFUCA1經由序列編號3所示之胺基酸序列接連20次而成之連接子結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號177所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (5)包含hFUCA1經由序列編號3所示之胺基酸序列接連3次而成之連接子結合至hTfR之重鏈(Fab)之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號178所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (6)包含hFUCA1經由序列編號3所示之胺基酸序列接連5次而成之連接子結合至hTfR之重鏈(Fab)之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號179所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (7)包含hFUCA1經由序列編號3所示之胺基酸序列接連10次而成之連接子結合至hTfR之重鏈(Fab)之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號180所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (8)包含hFUCA1經由序列編號3所示之胺基酸序列接連20次而成之連接子結合至hTfR之重鏈(Fab)之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號181所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者， (1)～(4)成為抗體為IgG1型者，(5)～(8)成為抗體為Fab型者。 此處，上述(1)～(4)中之hTfR之重鏈之胺基酸序列係序列編號68所示者。即，上述(1)～(4)之融合蛋白質係作為人源化抗體，輕鏈包含序列編號23之胺基酸序列且重鏈包含序列編號68之胺基酸序列者。又，上述(5)～(8)中之hTfR之重鏈之胺基酸序列係序列編號61所示者。即，上述(5)～(8)之融合蛋白質係作為人源化抗體，輕鏈包含序列編號23之胺基酸序列且重鏈(Fab)包含序列編號61之胺基酸序列者。 作為其他蛋白質(A)為(hLAMAN)之融合蛋白質之具體實施例，可列舉： (1)包含hLAMAN經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號23所示者； (2)包含hLAMAN經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號25所示者； (3)包含hLAMAN經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號27所示者； (4)包含hLAMAN經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號29所示者。此處，連接子序列較佳為包含1個甘胺酸、1個絲胺酸、胺基酸序列Gly-Ser、胺基酸序列Gly-Gly-Ser、序列編號3之胺基酸序列、序列編號4之胺基酸序列、序列編號5之胺基酸序列、及該等胺基酸序列1～10個接連或1～20個接連而成之胺基酸序列者。 此處重鏈為具有序列編號66者之情形時之抗體係IgG1型者，為序列編號68之情形時係IgG4型者。又，hLAMAN係具有序列編號88之胺基酸序列者、或其突變體。 作為其他蛋白質(A)為(hLAMAN)之融合蛋白質之更具體實施例，係： (1)包含hLAMAN經由胺基酸序列Gly-Ser結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號182所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (2)包含hLAMAN經由序列編號3所示之胺基酸序列接連5次而成之連接子結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號183所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (3)包含hLAMAN經由序列編號3所示之胺基酸序列接連10次而成之連接子結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號184所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (4)包含hLAMAN經由序列編號3所示之胺基酸序列接連20次而成之連接子結合至hTfR之重鏈之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號185所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (5)包含hLAMAN經由序列編號3所示之胺基酸序列接連3次而成之連接子結合至hTfR之重鏈(Fab)之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號186所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (6)包含hLAMAN經由序列編號3所示之胺基酸序列接連5次而成之連接子結合至hTfR之重鏈(Fab)之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號187所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (7)包含hLAMAN經由序列編號3所示之胺基酸序列接連10次而成之連接子結合至hTfR之重鏈(Fab)之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號188所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者； (8)包含hLAMAN經由序列編號3所示之胺基酸序列接連20次而成之連接子結合至hTfR之重鏈(Fab)之C末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且前者之胺基酸序列為序列編號189所示者，後者之胺基酸序列為序列編號23所示者， (1)～(4)成為抗體為IgG1型者，(5)～(8)成為抗體為Fab型者。 此處，上述(1)～(4)中之hTfR之重鏈之胺基酸序列係序列編號68所示者。即，上述(1)～(4)之融合蛋白質係作為人源化抗體，輕鏈包含序列編號23之胺基酸序列且重鏈包含序列編號68之胺基酸序列者。又，上述(5)～(8)中之hTfR之重鏈之胺基酸序列係序列編號61所示者。即，上述(5)～(8)之融合蛋白質係作為人源化抗體，輕鏈包含序列編號23之胺基酸序列且重鏈(Fab)包含序列編號61之胺基酸序列者。 作為其他蛋白質(A)為人類溶酶體酶之融合蛋白質之具體實施例，可列舉： (1)包含將人類溶酶體酶經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號23所示者； (2)包含將人類溶酶體酶經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號25所示者； (3)包含將人類溶酶體酶經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號27所示者； (4)包含將人類溶酶體酶經由連接子序列結合至hTfR之重鏈之C末端側或N末端側而成者、與hTfR之輕鏈，且重鏈之胺基酸序列為序列編號66或68所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號29所示者。此處，連接子序列較佳為包含1個甘胺酸、1個絲胺酸、胺基酸序列Gly-Ser、胺基酸序列Gly-Gly-Ser、序列編號3之胺基酸序列、序列編號4之胺基酸序列、序列編號5之胺基酸序列、及將1～10個該等胺基酸序列接連而成之胺基酸序列者。 此處重鏈為具有序列編號66者之情形時之抗體係IgG1型者，為序列編號68之情形時係IgG4型者。 作為其他蛋白質(A)為人類溶酶體酶且人源化抗體為Fab抗體之融合蛋白質之具體實施例，可列舉： (1)包含將人類溶酶體酶經由連接子序列結合至hTfR之Fab重鏈之C末端側或N末端而成者、與hTfR之輕鏈，且Fab重鏈之胺基酸序列為序列編號61所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號23所示者； (2)包含將人類溶酶體酶經由連接子序列結合至hTfR之Fab重鏈之C末端側或N末端而成者、與hTfR之輕鏈，且Fab重鏈之胺基酸序列為序列編號61所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號25所示者； (3)包含將人類溶酶體酶經由連接子序列結合至hTfR之Fab重鏈之C末端側或N末端而成者、與hTfR之輕鏈，且Fab重鏈之胺基酸序列為序列編號61所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號27所示者； (4)包含將人類溶酶體酶經由連接子序列結合至hTfR之Fab重鏈之C末端側或N末端而成者、與hTfR之輕鏈，且Fab重鏈之胺基酸序列為序列編號61所示者，輕鏈之胺基酸序列為序列編號29所示者。此處，連接子序列較佳為包含1個甘胺酸、1個絲胺酸、胺基酸序列Gly-Ser、胺基酸序列Gly-Gly-Ser、序列編號3之胺基酸序列、序列編號4之胺基酸序列、序列編號5之胺基酸序列、及將1～10個該等胺基酸序列接連而成之胺基酸序列者。 亦可將上述以外之人類溶酶體酶以與hGAA及hI2S所示者同樣之態樣製成與hTfR抗體的融合蛋白質。作為人類溶酶體酶，可列舉：β-半乳糖苷酶、GM2活化蛋白質、β-己糖胺酶A、β-己糖胺酶B、N-乙醯葡萄糖胺-1-磷酸轉移酶、β-甘露糖苷酶、半乳糖神經醯胺酶、脂結合蛋白C、天冬胺醯胺基葡糖苷酶、α-半乳糖苷酶A、α-N-乙醯葡萄糖胺苷酶、乙醯輔酶Aα-胺基葡糖苷N-乙醯轉移酶、N-乙醯葡萄糖胺-6-硫酸酯酶、澱粉-1,6-葡萄糖苷酶、唾液酸酶、玻尿酸酶-1、CLN1及CLN2，但並不限定於該等。又，於融合有溶酶體以外之蛋白質之情形時亦可以相同方式構建融合蛋白質。 其他蛋白質(A)為上述人類溶酶體酶之融合蛋白質係對於人類及猴TfR均具有親和性者，且係於藉由實施例7所記載之方法進行測定時， 與猴TfR之解離常數較佳為1×10-10 M以下、更佳為5×10-11 M以下者，且 與人類TfR之解離常數較佳為1×10-10 M以下、更佳為5×10-11 M以下、進而較佳為1×10-11 M以下、進而更佳為1×10-12 M以下者。 例如可列舉：與猴TfR及人類TfR之解離常數分別為1×10-10 M以下及1×10-10 M以下、1×10-10 M以下及1×10-11 M以下、1×10-10 M以下及1×10-12 M以下、5×10-11 M以下及1×10-11 M以下、5×10-11 M以下及1×10-11 M以下、5×10-11 M以下及1×10-12 M以下者。此處，與猴TfR之解離常數並無特別明確之下限，例如可設為1×10-11 M、1×10-12 M、1×10-13 M等。與人類TfR之解離常數並無特別明確之下限，例如可設為1×10-12 M、5×10- 13 M、1×10-13 M等。即便抗體為單鏈抗體亦相同。 本發明之抗hTfR抗體可藉由與生理活性蛋白質或藥理活性低分子化合物之分子結合，而用以製造用於治療中樞神經系統之疾病狀態之血中投予用藥劑。又，與生理活性蛋白質或藥理活性低分子化合物之分子結合之抗hTfR抗體可於如下治療方法中使用，該治療方法包括：將治療上有效量之生理活性蛋白質或藥理活性低分子化合物投予(包括靜脈滴注等靜脈注射)至中樞神經系統之疾病之患者之血中。與所血中投予之生理活性蛋白質或藥理活性低分子化合物之分子結合之抗hTfR抗體除到達至腦內以外，亦可到達至表現hTfR之其他器官。又，該藥劑可用以預防疾病之發病。 尤其是本發明之抗hTfR抗體可藉由與人類酸性α-葡萄糖苷酶(hGAA)結合，而使hGAA通過血腦障壁從而於腦內發揮功能，因此可用以製造用於治療龐貝氏症所伴隨之中樞神經系統之疾病狀態之血中投予用藥劑。又，與hGAA結合之抗hTfR抗體可於如下治療方法中使用，該治療方法包括：將治療上有效量之龐貝氏症所伴隨之中樞神經系統之疾病狀態投予(包括靜脈滴注等靜脈注射)至龐貝氏症之患者之血中。與所血中投予之hGAA結合之抗hTfR抗體除到達至腦內以外，亦可到達至表現hTfR之其他器官。又，該藥劑亦可用以預防該疾病狀態之發病。 又，尤其是本發明之抗hTfR抗體可藉由與人類艾杜糖醛酸-2-硫酸酯酶(hI2S)結合，而使hI2S通過血腦障壁從而於腦內發揮功能，因此可用以製造用於治療Hunter症候群所伴隨之中樞神經系統之疾病狀態之血中投予用藥劑。又，與hI2S結合之抗hTfR抗體可於如下治療方法中使用，該治療方法包括：將治療上有效量之Hunter症候群所伴隨之中樞神經系統之疾病狀態投予(包括靜脈滴注等靜脈注射)至Hunter症候群之患者之血中。與所血中投予之hI2S結合之抗hTfR抗體除到達至腦內以外，亦可到達至表現hTfR之其他器官。又，該藥劑亦可用以預防該疾病狀態之發病。 又，尤其是本發明之抗hTfR抗體可藉由與人類α-L-艾杜糖醛酸酶(hIDUA)結合，而使hIDUA通過血腦障壁從而於腦內發揮功能，因此可用以製造用於治療伴隨著Hurler症候群之中樞神經系統之疾病狀態之血中投予用藥劑。又，與hIDUA結合之抗hTfR抗體可於如下治療方法中使用，該治療方法包括：將治療上有效量之伴隨著Hurler症候群之中樞神經系統之疾病狀態投予(包括靜脈滴注等靜脈注射)至Hurler症候群之患者之血中。與所血中投予之hIDUA結合之抗hTfR抗體除到達至腦內以外，亦可到達至表現hIDUA之其他器官。又，該藥劑亦可用以預防該疾病狀態之發病。 又，尤其是本發明之抗hTfR抗體可藉由與人類溶酶體酶結合，而使人類溶酶體酶通過血腦障壁從而於腦內發揮功能，因此可用以製造用於治療原因在於人類溶酶體酶之缺損之中樞神經系統之疾病狀態的血中投予用藥劑。又，與人類溶酶體酶結合之抗hTfR抗體可於如下治療方法中使用，該治療方法包括：將原因在於人類溶酶體酶之缺損之中樞神經系統之疾病狀態治療上有效量投予(包括靜脈滴注等靜脈注射)至相應患者之血中。與所血中投予之人類溶酶體酶結合之抗hTfR抗體除到達至腦內以外，亦可到達至表現人類溶酶體酶之其他器官。又，該藥劑亦可用以預防該疾病狀態之發病。 與本發明之抗hTfR抗體結合之蛋白質、低分子化合物等可用作投予至血中而應於中樞神經系統(CNS)中發揮藥效之藥劑。該藥劑一般藉由利用靜脈滴注等之靜脈注射、皮下注射、肌肉注射而投予至患者，但投予路徑並無特別限定。 與本發明之抗hTfR抗體結合之蛋白質、低分子化合物等可作為藥劑並以冷凍乾燥品、或水性液劑等形態供給於醫療機構。於水性液劑之情形時，可將預先使藥劑溶解於含有穩定劑、緩衝劑、等張劑之溶液中所得者以封入至小瓶或注射器中之製劑的形態進行供給。封入至注射器中之製劑一般稱為預裝藥品之注射器製劑。藉由製成預裝藥品之注射器製劑，可使由患者本身投予藥劑變得簡單。 於以水性液劑之形式供給之情形時，與水性液劑所含有之抗hTfR抗體結合之蛋白質、低分子化合物等之濃度係應根據用法用量而適當調整者，例如為1～4 mg/mL。又，水性液劑所含有之穩定劑只要為藥劑學上可容許者，則無特別限定，可較佳地使用非離子性界面活性劑。作為此種非離子性界面活性劑，可將聚山梨糖醇酯、泊洛沙姆等單獨或組合該等使用。作為聚山梨糖醇酯，尤佳為聚山梨糖醇酯20、聚山梨糖醇酯80，作為泊洛沙姆，尤佳為泊洛沙姆188(聚氧乙烯(160)聚氧丙烯(30)二醇)。又，水性液劑所含有之非離子性界面活性劑之濃度較佳為0.01～1 mg/mL，更佳為0.01～0.5 mg/mL，進而較佳為0.1～0.5 mg/mL。作為穩定劑，亦可使用組胺酸、精胺酸、甲硫胺酸、甘胺酸等胺基酸。用作穩定劑之情形時之水性液劑所含有之胺基酸之濃度較佳為0.1～40 mg/mL，更佳為0.2～5 mg/mL，進而較佳為0.5～4 mg/mL。水性液劑所含有之緩衝劑只要為藥劑學上可容許者，則無特別限定，較佳為磷酸鹽緩衝劑，尤佳為磷酸鈉緩衝劑。於使用磷酸鈉緩衝劑作為緩衝劑之情形時之磷酸鈉之濃度較佳為0.01～0.04 M。又，經緩衝劑調整之水性液劑之pH值較佳為5.5～7.2。水性液劑所含有之等張劑只要為藥劑學上可容許者，則無特別限定，可較佳地將氯化鈉、甘露醇單獨或組合而用作等張劑。 [實施例] 以下，參照實施例而進一步詳細地說明本發明，但本發明並非意圖限定於實施例。再者，實施例1～15係關於參考例(抗體編號3)者。 [實施例1]hTfR表現用載體之構建 以人類脾臟快速選殖(Quick Clone)cDNA(Clontech公司)作為模板，使用引子hTfR5'(序列編號41)及引子hTfR3'(序列編號42)，藉由PCR擴增編碼人類轉鐵蛋白受體(hTfR)之基因片段。利用MluI與NotI消化經擴增之編碼hTfR之基因片段，插入至pCI-neo載體(Promega公司)之MluI與NotI間。將所獲得之載體命名為pCI-neo(hTfR)。繼而，利用MluI與NotI消化該載體，切出編碼hTfR之基因片段，組入至國際公開公報(WO2012/063799)所記載之表現載體即pE-mIRES-GS-puro之MluI與NotI之間，藉此構建作為hTfR表現用載體之pE-mIRES-GS-puro(hTfR)。 [實施例2]重組hTfR之製作 藉由電穿孔法將pE-mIRES-GS-puro(hTfR)導入至CHO-K1細胞中之後，使用包含甲硫胺酸磺醯亞胺(MSX)及嘌呤黴素之CD OptiCHOTM 培養基(Invitrogen公司)進行細胞之選擇培養，而獲得重組hTfR表現細胞。對該重組hTfR表現細胞進行培養而製備重組hTfR。 [實施例3]使用重組hTfR之小鼠之免疫 使用實施例2中所製備之重組hTfR作為抗原而免疫小鼠。免疫係將抗原靜脈內投予或腹腔內投予至小鼠而進行。 [實施例4]融合瘤之製作 在最後投予細胞之日之約1週後摘取小鼠之脾臟並均質化，將脾細胞分離。使用聚乙二醇法使所獲得之脾細胞與小鼠骨髓瘤細胞株(P3. X63. Ag8. 653)進行細胞融合。細胞融合結束後，使細胞懸浮於包含(1X)HAT混合鹽(Life Technologies公司)及10%超低IgG胎牛血清(Life Technologies公司)之RPMI1640培養基中，將細胞懸浮液以200 μL/每孔之方式分注至20片96孔培養盤中。於二氧化碳培養器(37℃，5%CO2 )中將細胞培養10天後，於顯微鏡下觀察各孔，選擇存在單一菌落之孔。 於各孔之細胞已大致融合之時點回收培養上清液，將其作為融合瘤之培養上清液而供於以下之篩選。 [實施例5]高親和性抗體產生細胞株之篩選 利用50 mM碳酸鈉緩衝液(pH值9.5～9.6)稀釋重組hTfR溶液(Sino Biologics公司)而調整為5 μg/mL之濃度，將其作為固相溶液。於Nunc MaxiSorpTM 平底(flat-bottom)96孔培養盤(基材：聚苯乙烯，Nunc公司製造)之各孔中各添加50 μL之固相溶液後，將培養盤於室溫下靜置1小時，使重組hTfR吸附於培養盤而進行固定。去除固相溶液，利用250 μL之洗淨液(PBS(Phosphate buffer saline，磷酸鹽緩衝液)-T：含有0.05% Tween20之PBS)將各孔洗淨3次後，於各孔中各添加200 μL之阻斷液(含有1% BSA(bovine serum albumin，牛血清血蛋白)之PBS)，將培養盤於室溫下靜置1小時。 去除阻斷液，利用250 μL之PBS-T將各孔洗淨3次後，於各孔中各添加50 μL之融合瘤之培養上清液，將培養盤於室溫下靜置1小時，使培養上清液所含有之小鼠抗hTfR抗體結合至重組hTfR。此時，作為對照組，設置向孔中添加有50 μL之不會產生小鼠抗hTfR抗體之融合瘤之培養上清液者。又，設置於添加有各培養上清液之孔之旁邊之孔中添加有50 μL之融合瘤之培養用培養基者，將其作為空白對照孔。測定係於n＝2下實施。繼而，去除溶液，利用250 μL之PBS-T將各孔洗淨3次。 於上述之各孔中添加100 μL之HRP標記山羊抗小鼠免疫球蛋白抗體溶液(Promega公司)，將培養盤於室溫下靜置30分鐘。繼而，去除溶液，利用250 μL之PBS-T將各孔洗淨3次。繼而，於各孔中添加50 μL之顯色用受質液TMB辣根過氧化酶穩定底物(Stabilized Substrate for Horseradish Peroxidase)(Promega公司)，於室溫下靜置10～20分鐘。繼而，於各孔中添加100 μL之反應終止液(2 N硫酸)後，使用讀盤儀對各孔之450 nm下之吸光度進行測定。取各培養上清液及對照組之2個孔之平均值，將自該等平均值分別減去各培養上清液及對照組每個設置之2個空白對照孔之平均值所得者設為測定值。 選擇與添加至顯示出較高測定值之孔中之培養上清液對應之14種融合瘤細胞作為產生對於hTfR顯示出高親和性之抗體(高親和性抗hTfR抗體)之細胞株(高親和性抗體產生細胞株)。該等14種細胞株編號為純系1株～純系14株。自該等細胞株選擇純系3株，並用於以下之實驗。又，將純系3株所產生之抗hTfR抗體設為抗hTfR抗體編號3。 [實施例6]高親和性抗hTfR抗體之可變區之胺基酸序列之分析 由在實施例5中選擇出之純系3株製備cDNA，以該cDNA作為模板，擴增編碼抗體之輕鏈及重鏈之基因。將經擴增之基因之鹼基序列進行轉譯，而確定關於該細胞株所產生之抗hTfR抗體編號3之抗體的輕鏈及重鏈之可變區之胺基酸序列。 抗hTfR抗體編號3係於輕鏈之可變區包含序列編號48所記載之胺基酸序列，且於重鏈之可變區包含序列編號49所記載之胺基酸序列者。又，其輕鏈之可變區係CDR1包含序列編號6或7所記載之胺基酸序列，CDR2包含序列編號8或9所記載之胺基酸序列，及CDR3包含序列編號10所記載之胺基酸序列而成，其重鏈之可變區係CDR1包含序列編號11或12所記載之胺基酸序列，CDR2包含序列編號13或14所記載之胺基酸序列，及CDR3包含序列編號15或16所記載之胺基酸序列而成者。但是，CDR並不限於上述之胺基酸序列，認為亦可將包含該等胺基酸序列之區域、包含含有該等胺基酸序列之一部分的連續3個以上胺基酸的胺基酸序列作為CDR。 將抗hTfR抗體編號3之輕鏈之可變區之CDR1～3與重鏈的可變區之CDR1～3所包含之胺基酸序列之序列編號彙總示於表1中。但是，表1係例示各CDR之胺基酸序列者，各CDR之胺基酸序列並不限於表1所記載之胺基酸序列，認為亦可將包含該等胺基酸序列之區域、包含含有該等胺基酸序列之一部分的連續3個以上胺基酸的胺基酸序列作為CDR。 [表1]
Figure 106145827-A0304-0001
 [實施例7]抗hTfR抗體對於人類TfR及猴TfR之親和性之測定 抗hTfR抗體對於人類TfR及猴TfR之親和性之測定係使用應用生物膜層干涉法(BioLayer Interferometry：BLI)之生物體分子相互作用分析系統即OctetRED96(ForteBio公司，a division of Pall Corporation)實施。關於生物膜層干涉法之基本原理，簡單地進行說明。將特定波長之光投射至固定在感測器晶片表面之生物體分子之層(layer)，由生物體分子之層與成為內部之參照之層的兩個表面反射光，而產生光之干涉波。測定試樣中之分子結合至感測器晶片表面之生物體分子，藉此感測器前端之層之厚度增加，干涉波產生波長位移。對該波長位移之變化進行測定，藉此可即時進行結合至固定在感測器晶片表面之生物體分子之分子數之定量及動力學分析。測定係大致依據OctetRED96所隨附之操作指南實施。作為人類TfR，使用如下重組人類TfR(r人類TfR：Sino Biological公司)，其係在於N末端附加有組胺酸標籤之序列編號1所示之胺基酸序列中具有自從N末端側起第89位之半胱胺酸殘基直至C末端之苯丙胺酸的hTfR之細胞外區域之胺基酸序列。作為猴TfR，使用如下重組猴TfR(r猴TfR：Sino Biological公司)，其係在於N末端附加有組胺酸標籤之序列編號2所示之胺基酸序列中具有自從N末端側起第89位之半胱胺酸殘基直至C末端之苯丙胺酸的食蟹猴之TfR之細胞外區域之胺基酸序列。 將實施例5中選擇出之純系3株以細胞濃度成為約2×105 個/mL之方式利用包含(1X)HAT混合鹽(Life Technologies公司)及10%超低IgG胎牛血清(Life Technologies公司)之RPMI1640培養基進行稀釋，於1 L之三角燒瓶中加入200 mL之細胞懸浮液，於37℃下在包含5%CO2 與95%空氣之濕潤環境下以約70 rpm之攪拌速度培養6～7天。對培養液進行離心操作後，利用0.22 μm過濾器(Millipore公司)進行過濾，回收培養上清液。於預先經包含150 mM NaCl之管柱體積3倍體積之20 mM三羥甲基胺基甲烷緩衝液(pH值8.0)平衡化之蛋白G管柱(管柱體積：1 mL，GE healthcare公司)中注入所回收之培養上清液。繼而，藉由管柱體積5倍體積之上述緩衝液將管柱洗淨後，利用包含150 mM NaCl之管柱體積4倍體積之50 mM甘胺酸緩衝液(pH值2.8)使所吸附之抗體溶出，採取溶出份。對溶出份添加1 M三羥甲基胺基甲烷緩衝液(pH值8.0)而調整至pH值7.0。將其作為抗hTfR抗體編號3之純化品而用於以下之實驗。 利用HBS-P+(150 mM NaCl、50 μM EDTA(ethylenediamine tetraacetic acid，四乙酸乙二胺)及包含0.05% Surfactant P20之10 mM HEPES(hydroxyethyl piperazine ethanesulfonic acid，羥乙基哌嗪乙磺酸))將抗hTfR抗體編號3之純化品進行2階段稀釋，而製備0.78125～50 nM(0.117～7.5 μg/mL)之7階段濃度之抗體溶液。將該抗體溶液設為樣品溶液。利用HBS-P+分別稀釋r人類TfR與r猴TfR，而製備25 μg/mL之溶液，並分別設為r人類TfR-ECD(Histag)溶液及r猴TfR-ECD(Histag)溶液。 將進行上述2階段稀釋所製備之樣品溶液以200 μL/每孔之方式添加至96孔培養盤(黑色)(greiner bio-one公司)中。又，將上述所製備之r人類TfR-ECD(Histag)溶液及r猴TfR-ECD(Histag)溶液以200 μL/孔之形式分別添加至特定之孔中。將HBS-P+以200 μL/每孔之方式添加至基線、解離用及洗淨用之孔中。將10 mM甘胺酸鹽酸鹽(Glycine-HCl)(pH值1.7)以200 μL/每孔之方式添加至再生用之孔中。將0.5 mM NiCl2 溶液以200 μL/每孔之方式添加至活化用之孔中。將該培養盤與生物感測器(Biosensor/Ni-NTA：ForteBio公司，a division of Pall Corporation)設置在OctetRED96之特定位置上。 使OctetRED96於下述表2所示之條件下作動而取得資料後，使用OctetRED96自帶之分析軟體，將結合反應曲線擬合為1：1結合模型或2：1結合模型，而測定抗hTfR抗體對於r人類TfR及r猴TfR之締合速度常數(kon)及解離速度常數(koff)，算出解離常數(KD )。再者，測定係於25～30℃之溫度下實施。 [表2]
Figure 106145827-A0304-0002
 於表3中表示抗hTfR抗體編號3對於人類TfR及猴TfR之締合速度常數(kon)及解離速度常數(koff)之測定結果、及解離常數(KD )。 [表3]
Figure 106145827-A0304-0003
 抗hTfR抗體對於人類TfR之親和性之測定之結果為，抗hTfR抗體編號3之與人類TfR之解離常數為1×10-12 M以下，與猴TfR之解離常數亦為1×10-12 M以下。該等結果表示，抗hTfR抗體編號3為不僅對於人類TfR具有高親和性，對於猴TfR亦具有高親和性之抗體。 [實施例7-2]抗hTfR抗體之使用小鼠之腦轉移評價 繼而，關於抗hTfR抗體編號3，使用將編碼小鼠運鐵蛋白受體之細胞外區域之基因置換為編碼人類運鐵蛋白受體基因之細胞外區域的基因所獲得之hTfR基因敲入小鼠(hTfR-KI小鼠)，對抗體通過BBB而轉移至腦內之情況進行評價。hTfR-KI小鼠大致藉由下述方法製作。又，作為抗hTfR抗體編號3，使用實施例7中所製備之純化品。 化學合成於編碼細胞內區域為小鼠TfR之胺基酸序列且細胞外區域為人類TfR之胺基酸序列之嵌合hTfR的cDNA之3'側配置有由loxP序列夾住之新黴素耐性基因之具有序列編號45所示之鹼基序列的DNA片段。藉由常規方法，將該DNA片段組入至具有序列編號46所示之鹼基序列作為5'連接臂序列且具有序列編號47所示之鹼基序列作為3'連接臂序列的靶載體(targeting vector)中，藉由電穿孔法將其導入至小鼠ES細胞中。將基因導入後之小鼠ES細胞於新黴素存在下進行選擇培養，選擇出藉由同源重組將靶載體組入至染色體中而成之小鼠ES細胞。將所獲得之基因重組小鼠ES細胞注入至ICR小鼠之8細胞期胚胎(宿主胚胎)，移植至藉由與進行過輸精管結紮之小鼠交配而獲得之假妊娠小鼠(受體小鼠)中。對於所獲得之產子(嵌合小鼠)進行毛色判定，篩選出ES細胞以高效率有助於生物體之形成之個體，即白色毛占整體毛之比率較高之個體。使該嵌合小鼠個體與ICR小鼠交配而獲得F1小鼠。篩選白色之F1小鼠，對自尾巴之組織提取之DNA進行分析，將染色體上小鼠運鐵蛋白受體基因被置換為嵌合hTfR之小鼠設為hTfR-KI小鼠。 使用螢光標記套組(Fluorescein Labeling Kit)-NH2 (同仁化學研究所)，依據隨附之操作指南，藉由螢光素異硫氰酸酯(FITC)對抗hTfR抗體編號3之純化品進行螢光標記。製備包含該經FITC螢光標記之抗體之PBS溶液。將該抗體溶液以所投予之抗hTfR抗體之用量成為3 mg/kg之方式靜脈注射至1隻hTfR-KI小鼠(雄性，10～12週齡)中。又，作為對照組，將以相同方式製備之包含經FITC螢光標記之小鼠IgG1(西格瑪公司)之PBS溶液以3 mg/kg之用量靜脈注射至1隻hTfR-KI小鼠(雄性，10～12週齡)中。於靜脈注射約8小時後利用生理鹽水進行全身灌注，採取腦(包含大腦與小腦之部分)。測定所摘取之腦之重量(濕重量)後，添加包含蛋白酶抑制劑混合液(Protease Inhibitor Cocktail)(西格瑪公司)之T-PER(Thermo Fisher Scientific公司)而將腦組織勻漿化。將勻漿進行離心而回收上清液，利用以下之方法測定上清液中所包含之經FITC螢光標記之抗體之量。首先，於高結合力培養盤(High Bind Plate)(Meso Scale Diagnostics公司)之各孔中各添加10 μL之抗FITC抗體(Bethyl公司)，靜置1小時而使抗FITC抗體固定在培養盤中。繼而，於各孔中各添加150 μL之含有SuperBlock阻斷緩衝液之PBS(SuperBlock blocking buffer in PBS)(Thermo Fisher Scientific公司)，進行1小時振盪而將培養盤阻斷。繼而，於各孔中各添加25 μL之腦組織勻漿之上清液，進行1小時振盪。繼而，於各孔中各添加25 μL之SULFO-TAG抗小鼠抗體(Goat)(Meso Scale Diagnostics公司)，進行1小時振盪。繼而，於各孔中各添加150 μL之Read buffer T(Meso Scale Diagnostics公司)，使用SectorTM Imager 6000 reader測定來自各孔之發光量。根據濃度已知之經FITC螢光標記之抗hTfR抗體之標準試樣的測定值製作校準曲線，於其中插補各檢體之測定值，藉此算出腦之每克重(濕重量)所包含之抗hTfR抗體之量(腦組織中之抗hTfR抗體之濃度)。將其結果示於表4。 與對照組相比，抗hTfR抗體編號3於腦組織中之濃度為約27.8倍。該結果顯示，抗hTfR抗體編號3具有積極地通過BBB而轉移至腦內之性質。 [表4]
Figure 106145827-A0304-0004
 [實施例8]抗hTfR抗體之使用猴之藥物動力學分析 將抗hTfR抗體編號3以5.0 mg/kg之用量單次靜脈內投予至雄性食蟹猴，於投予8小時後利用生理鹽水實施全身灌注。又，作為陰性對照，將未投予抗hTfR抗體之1隻個體同樣地進行全身灌注。灌注後，摘取包含髓質之腦組織。使用該腦組織，進行以下之抗hTfR抗體之濃度測定及免疫組織化學染色。作為抗hTfR抗體編號3，使用實施例7所記載之抗體之純化品。 腦組織中之抗hTfR抗體之濃度測定大致藉由以下程序進行。對於所採取之組織，將腦組織分為大腦、小腦、海馬區及髓質後，分別利用包含蛋白酶抑制劑混合液(Protease Inhibitor Cocktail)(Sigma-Aldrich公司)之RIPA緩衝液(和光純藥工業股份有限公司)進行勻漿化並進行離心而回收上清液。於高結合力培養盤(High Bind Plate)(Meso Scale Diagnostics公司)之各孔中各添加10 μL之標記山羊抗小鼠(Affinipure Goat Anti mouse)IgG Fcγ pAb(Jackson ImmunoResearch公司)，靜置1小時而固定於培養盤中。繼而，於各孔中各添加150 μL之含有SuperBlock阻斷緩衝液之PBS(SuperBlock blocking buffer in PBS)(Thermo Fisher Scientific公司)，進行1小時振盪而將培養盤阻斷。繼而，於各孔中各添加25 μL之腦組織勻漿之上清液，進行1小時振盪。繼而，於各孔中各添加25 μL之標記山羊抗小鼠(Affinipure Goat Anti mouse)IgG Fab-Biotin(Jackson ImmunoResearch公司)，進行1小時振盪。繼而，於各孔中各添加25 μL之SULFO-Tag-抗生蛋白鏈菌素(Streptavidin)(Meso Scale Diagnostics公司)，進行30分鐘振盪。於各孔中各添加150 μL之Read buffer T(Meso Scale Diagnostics公司)，使用SectorTM Imager 6000 reader(Meso Scale Diagnostics公司)測定來自各孔之發光量。根據濃度已知之抗hTfR抗體之標準試樣的測定值製作校準曲線，於其中插補各檢體之測定值，藉此算出各腦組織之每克重(濕重量)所包含之抗hTfR抗體之量(腦組織中之抗hTfR抗體之濃度)。 將腦組織中之抗hTfR抗體之濃度測定之結果示於表5。於大腦、小腦、海馬區及髓質全部中，發現了抗hTfR抗體編號3之儲積。該等結果顯示，抗hTfR抗體編號3具有通過血腦障壁而於腦組織中儲積之性質，藉由使應於腦組織內發揮功能之藥劑與該等抗體結合，而可使該藥劑高效率地儲積於腦組織中。 [表5]
Figure 106145827-A0304-0005
 腦組織中之抗hTfR抗體之免疫組織化學染色大致藉由以下之程序進行。使用Tissue-Tek冷凍3DM(Sakura-finetek股份有限公司)，將所採取之組織急速冷凍至-80℃，而製作組織之冷凍片。將該冷凍片薄切至4 μm後，貼附至MAS COAT載玻片(松浪硝子股份有限公司)。使4%多聚甲醛(和光純藥工業股份有限公司)與組織薄片於4℃下反應5分鐘，將組織薄片固定在載玻片上。繼而，使包含0.3%過氧化氫水之甲醇溶液(和光純藥工業股份有限公司)與組織薄片反應30分鐘，而使內源性過氧化酶失去活性。繼而，使載玻片與含有SuperBlock阻斷緩衝液之PBS(SuperBlock blocking buffer in PBS)於室溫下反應30分鐘而進行阻斷。繼而，使小鼠IgG-重鏈及輕鏈抗體(Bethyl Laboratories公司)與組織薄片於室溫下反應1小時。利用DAB受質(3,3'-二胺基聯苯胺，Vector Laboratories公司)使組織薄片顯色，利用邁爾氏蘇木精(Mayer's Hematoxylin)(Merck公司)進行對比染色，於脫水、透明後封片，利用光學顯微鏡觀察。 圖1中表示大腦皮質之抗hTfR抗體之免疫組織化學染色之結果。於投予了抗hTfR抗體編號3之猴之大腦皮質中，確認到血管之特異性染色(圖1b)。進而，於腦血管外之腦實質區域亦廣泛地確認到特異性染色。另一方面顯示，於作為對照組設置之未投予抗hTfR抗體之猴之大腦皮質中未發現染色，且背景之染色幾乎不存在(圖1a)。 圖2中表示海馬區之抗hTfR抗體之免疫組織化學染色之結果。於投予了抗hTfR抗體編號3之猴之大腦皮質中，確認到血管之特異性染色(圖2b)。進而，於神經細胞中亦確認到特異性染色，又，於腦血管外之腦實質區域亦廣泛地確認到特異性染色。另一方面顯示，於作為對照組設置之未投予抗hTfR抗體之猴之海馬區中未發現染色，且背景之染色幾乎不存在(圖2a)。 圖3中表示小腦之抗hTfR抗體之免疫組織化學染色之結果。於投予了抗hTfR抗體編號3之猴之大腦皮質中，確認到血管之特異性染色(圖3b)。進而，於浦金埃氏細胞中亦確認到特異性染色。另一方面顯示，於作為對照組設置之未投予抗hTfR抗體之猴之小腦中未發現染色，且背景之染色幾乎不存在(圖3a)。 根據以上之大腦、海馬區及小腦之免疫組織化學染色之結果可知，抗hTfR抗體編號3可結合至存在於腦血管內皮表面之hTfR，且結合至hTfR後，通過血腦障壁而轉移至腦實質內，進而於海馬區中自腦實質內摻入至神經細胞中，於小腦中摻入至浦金埃氏細胞中。 [實施例9]人源化抗hTfR抗體之製作 嘗試抗hTfR抗體編號3之輕鏈及重鏈之可變區所包含之胺基酸序列的人源化。然後，獲得具有序列編號17～序列編號22所示之胺基酸序列之經人源化之輕鏈的可變區、與具有序列編號31～序列編號36所示之胺基酸序列之經人源化之重鏈的可變區。 [實施例10]編碼人源化抗hTfR抗體之基因之構建 關於上述之抗hTfR抗體編號3，人工地合成如下DNA片段，其包含分別編碼包含人源化抗hTfR抗體之輕鏈及重鏈之可變區之輕鏈及重鏈之全長的基因。此時，於編碼輕鏈之全長之基因之5'側自5'端依序導入MluI序列與編碼前導肽之序列，於3'側導入NotI序列。又，於編碼重鏈之全長之基因之5'側自5'端依序導入MluI序列與編碼前導肽之序列，於3'側導入NotI序列。再者，此處所導入之前導肽係以於使人源化抗體之輕鏈及重鏈於作為宿主細胞之哺乳動物細胞表現出時將輕鏈及重鏈分泌至細胞外的方式作為分泌訊號發揮功能者。 關於抗hTfR抗體編號3之輕鏈，合成DNA片段(序列編號24)，其編碼可變區具有序列編號18所示之胺基酸序列之序列編號23所示之胺基酸序列的輕鏈(以下，人源化抗hTfR抗體編號3之輕鏈)之全長。 關於抗hTfR抗體編號3之輕鏈，亦合成DNA片段(序列編號26)、DNA片段(序列編號28)、及DNA片段(序列編號30)，該DNA片段(序列編號26)係編碼可變區具有序列編號20所示之胺基酸序列之序列編號25所示之胺基酸序列的輕鏈(人源化抗hTfR抗體編號3-2之輕鏈)之全長，該DNA片段(序列編號28)係編碼可變區具有序列編號21所示之胺基酸序列之序列編號27所示之胺基酸序列的輕鏈(人源化抗hTfR抗體編號3-3之輕鏈)之全長，該DNA片段(序列編號30)係編碼可變區具有序列編號22所示之胺基酸序列之序列編號29所示之胺基酸序列的輕鏈(人源化抗hTfR抗體編號3-4之輕鏈)之全長。 關於抗hTfR抗體編號3之重鏈，合成DNA片段(序列編號38)，其編碼可變區具有序列編號32所示之胺基酸序列之序列編號37所示之胺基酸序列的重鏈(人源化抗hTfR抗體編號3之重鏈)之全長。序列編號38所示之DNA片段所編碼之人源化抗hTfR抗體之重鏈為IgG1。 進而，關於抗hTfR抗體編號3之重鏈，合成DNA片段(序列編號40)，其編碼可變區具有序列編號32所示之胺基酸序列之序列編號39所示之胺基酸序列的重鏈(以下，人源化抗hTfR抗體編號3之重鏈IgG4)之全長。該序列編號40所示之DNA片段所編碼之人源化抗hTfR抗體之重鏈為IgG4。 [實施例11]人源化抗hTfR抗體表現載體之構建 利用KpnI與NcoI消化pEF/myc/nuc載體(Invitrogen公司)，切出包含EF-1α啟動子及其第一內含子之區域，利用T4 DNA聚合酶對其進行平滑末端化處理。利用BglII及EcoRI消化pCI-neo(Invitrogen公司)，切除包含CMV之促進子/啟動子及內含子之區域後，利用T4 DNA聚合酶進行平滑末端化處理。於其中插入上述包含EF-1α啟動子及其第一內含子之區域，而構建pE-neo載體。利用SfiI及BstXI消化pE-neo載體，將包含新黴素耐性基因之約1 kbp之區域切除。以pcDNA3.1/Hygro(+)(Invitrogen公司)為模板，使用引子Hyg-Sfi5'(序列編號43)及引子Hyg-BstX3'(序列編號44)，藉由PCR反應擴增潮黴素基因。利用SfiI及BstXI消化經擴增之潮黴素基因，插入至上述切除了新黴素耐性基因之pE-neo載體中，而構建pE-hygr載體。 分別利用MluI與NotI消化pE-hygr載體及pE-neo載體，利用MluI與NotI消化實施例10中所合成之編碼人源化抗hTfR抗體編號3之輕鏈之DNA片段(序列編號24)與編碼人源化抗hTfR抗體編號3之重鏈之DNA片段(序列編號38)，分別插入至pE-hygr載體與pE-neo載體之MluI-NotI間。將所獲得之載體分別製成人源化抗hTfR抗體編號3之輕鏈表現用載體之pE-hygr(LC3)、人源化抗hTfR抗體編號3之重鏈表現用載體之pE-neo(HC3)而用於以下之實驗。 進而，關於抗hTfR抗體編號3之輕鏈，利用MluI與NotI消化實施例10中所合成之編碼人源化抗hTfR抗體編號3-2之輕鏈之DNA片段(序列編號26)、編碼人源化抗hTfR抗體編號3-3之輕鏈之DNA片段(序列編號28)、及編碼人源化抗hTfR抗體編號3-4之輕鏈之DNA片段(序列編號30)，插入至pE-hygr載體之MluI-NotI間，分別構建人源化抗hTfR抗體編號3-2之輕鏈表現用載體之pE-hygr(LC3-2)、人源化抗hTfR抗體編號3-3之輕鏈表現用載體之pE-hygr(LC3-3)、及人源化抗hTfR抗體編號3-4之輕鏈表現用載體之pE-hygr(LC3-4)。 進而同樣地，關於抗hTfR抗體編號3之重鏈，利用MluI與NotI消化實施例10中所合成之編碼人源化抗hTfR抗體編號3之重鏈IgG4之DNA片段(序列編號40)，插入至pE-neo載體之MluI-NotI間，而構建人源化抗hTfR抗體編號3之重鏈IgG4表現用載體之pE-neo(HC3-IgG4)。 [實施例12]人源化抗hTfR抗體表現用細胞之構建 藉由下述方法，並使用基因脈衝儀(GenePulser)(Bio-Rad公司)，利用實施例11中所構建之輕鏈表現用載體pE-hygr(LC3)及重鏈表現用載體pE-neo(HC3)將CHO細胞(CHO-K1：自美國菌種中心(American Type Culture Collection)獲取)轉形。細胞之轉形大致藉由以下之方法進行。將5×105 個CHO-K1細胞接種至添加有CD OptiCHOTM 培養基(Life Technologies公司)之3.5 cm培養皿中，於37℃、5%CO2 之條件下培養一夜。將培養基更換為Opti-MEMTM I培養基(Life Technologies公司)，使細胞以成為5×106 細胞/mL之密度之方式懸浮。採取細胞懸浮液100 μL，於其中各添加5 μL之經Opti-MEMTM I培養基稀釋為100 μg/mL之pE-hygr(LC3)及pE-neo(HC3)質體DNA溶液。使用基因脈衝儀(GenePulser)(Bio-Rad公司)而實施電穿孔法，將質體導入至細胞中。將細胞於37℃、5%CO2 之條件下培養一夜後，於添加有0.5 mg/mL之潮黴素及0.8 mg/mL之G418之CD OptiCHOTM 培養基中進行選擇培養。 繼而，藉由限制稀釋法，以每孔接種1個以下之細胞之方式，將於選擇培養中選擇出之細胞接種至96孔培養盤上，以各細胞形成單純系菌落之方式培養約10天。採取形成有單純系菌落之孔之培養上清液，利用ELISA法調查培養上清液中之人源化抗體含量，選擇出人源化抗體高表現細胞株。 此時之ELISA法大致藉由以下之方法實施。於96孔微量滴定盤(Nunc公司)之各孔中各添加100 μL之利用0.05 M碳酸氫鹽緩衝液(pH值9.6)將山羊抗人類IgG多株抗體溶液稀釋至4 μg/mL所得者，於室溫下至少靜置1小時而使抗體吸附於培養盤。繼而，利用PBS-T將各孔洗淨3次後，於各孔中各添加200 μL之Starting Block(PBS)阻斷緩衝液(Blocking Buffer)(Thermo Fisher Scientific公司)，將培養盤於室溫下靜置30分鐘。利用PBS-T將各孔洗淨3次後，於各孔中各添加100 μL之經於PBS中添加有0.5%BSA及0.05%Tween20者(PBS-BT)稀釋為適當濃度所獲得之培養上清液或人類IgG標準品，將培養盤於室溫下至少靜置1小時。利用PBS-T將培養盤洗淨3次後，於各孔中各添加100 μL之經PBS-BT稀釋之HRP標記抗人類IgG多株抗體溶液，將培養盤於室溫下至少靜置1小時。利用PBS-T將各孔洗淨3次後，於各孔中各添加100 μL之包含磷酸-檸檬酸緩衝液(pH值5.0)之0.4 mg/mL鄰苯二胺，於室溫下靜置8～20分鐘。繼而，於各孔中各添加100 μL之1 mol/L硫酸而使反應終止，使用96孔讀盤儀，測定各孔之490 nm下之吸光度。將與顯示出較高測定值之孔對應之細胞設為人源化抗hTfR抗體編號1之高表現細胞株。將其設為抗體編號3表現株。 進而同樣地，使用實施例11中所構建之輕鏈表現用載體pE-hygr(LC3-2)及重鏈表現用載體pE-neo(HC3)而使CHO細胞轉形，從而獲得人源化抗hTfR抗體編號3-2之高表現細胞株。將其設為抗體編號3-2表現株。 進而同樣地，使用實施例11中所構建之輕鏈表現用載體pE-hygr(LC3-3)及重鏈表現用載體pE-neo(HC3)而使CHO細胞轉形，從而獲得人源化抗hTfR抗體編號3-3之高表現細胞株。將其設為抗體編號3-3表現株。 進而同樣地，使用實施例11中所構建之輕鏈表現用載體pE-hygr(LC3-4)及重鏈表現用載體pE-neo(HC3)而使CHO細胞轉形，從而獲得人源化抗hTfR抗體編號3-4之高表現細胞株。將其設為抗體編號3-4表現株。 進而同樣地，使用實施例11中所構建之輕鏈表現用載體pE-hygr(LC3)及重鏈表現用載體pE-neo(HC3-IgG4)而使CHO細胞轉形，從而獲得人源化抗hTfR抗體編號3(IgG4)之高表現細胞株。將其設為抗體編號3(IgG4)表現株。 進而同樣地，使用實施例11中所構建之輕鏈表現用載體pE-hygr(LC3-2)及重鏈表現用載體pE-neo(HC3-IgG4)而使CHO細胞轉形，從而獲得人源化抗hTfR抗體編號3-2(IgG4)之高表現細胞株。將其設為抗體編號3-2(IgG4)表現株。 [實施例13]人源化抗hTfR抗體之純化 將實施例12中所獲得之抗體編號3表現株、抗體編號3-2表現株、抗體編號3-3表現株及抗體編號3-4表現株分別以細胞濃度成為約2×105 個/mL之方式利用CD OptiCHOTM 培養基進行稀釋，於1 L之三角燒瓶中添加200 mL之細胞懸浮液，於37℃下且於包含5%CO2 與95%空氣之濕潤環境以約70 rpm之攪拌速度培養6～7天。藉由離心操作回收培養上清液，利用0.22 μm過濾器(Millipore公司)進行過濾，而製成培養上清液。於所回收之培養上清液中添加包含150 mM NaCl之5倍體積之20 mM三羥甲基胺基甲烷緩衝液(pH值8.0)，注入預先經包含150 mM NaCl之管柱體積3倍體積之20 mM三羥甲基胺基甲烷緩衝液(pH值8.0)平衡化之蛋白A管柱(管柱體積：1 mL，Bio-Rad公司)中。繼而，藉由管柱體積5倍體積之上述緩衝液將管柱洗淨後，利用包含150 mM NaCl之管柱體積之4倍體積之50 mM甘胺酸緩衝液(pH值2.8)使所吸附之人源化抗體溶出，採取溶出份。於溶出份中添加1 M三羥甲基胺基甲烷緩衝液(pH值8.0)而進行中和，將其設為抗體之純化品。 此處，自抗體編號3表現株之培養上清液純化所獲得之抗體係設為人源化抗hTfR抗體編號3。自抗體編號3-2表現株之培養上清液純化所獲得之抗體係設為人源化抗hTfR抗體編號3-2。自抗體編號3-3表現株之培養上清液純化所獲得之抗體係設為人源化抗hTfR抗體編號3-3。又，自抗體編號3-4表現株之培養上清液純化所獲得之抗體係設為人源化抗hTfR抗體編號3-4。 又，關於實施例12中所獲得之抗體編號3(IgG4)表現株、及抗體編號3-2(IgG4)表現株，亦與上述同樣地進行培養，自其培養上清液分別獲得經純化之人源化抗hTfR抗體編號3(IgG4)及人源化抗hTfR抗體編號3-2(IgG4)。該等2種抗體係用於使用實施例15所記載之猴之藥物動力學分析。 [實施例14]人源化抗hTfR抗體之對於人類TfR及猴TfR之親和性之測定 利用實施例7所記載之方法測定實施例13中所獲得之人源化抗hTfR抗體對於人類TfR及猴TfR之親和性。於表6中表示人源化抗hTfR抗體編號3～3-4(表中，分別與No.3～3-4對應)之對於人類TfR之締合速度常數(kon)及解離速度常數(koff)之測定結果、及解離常數(KD )。 [表6]
Figure 106145827-A0304-0006
 於表7中表示人源化抗hTfR抗體編號3～3-4(表中，分別與抗體編號3～3-4對應)之對於猴TfR之締合速度常數(kon)及解離速度常數(koff)之測定結果、及解離常數(KD )。 [表7]
Figure 106145827-A0304-0007
 人源化抗hTfR抗體編號3～3-4之對於人類TfR之親和性之測定的結果為，若為人源化抗hTfR抗體編號3及3-4抗體，則與人類TfR之解離常數未達1×10-12 M(表6)。又，人源化抗hTfR抗體編號3-2及3-3之與人類TfR之解離常數分別為2.39×10-11 M與2.09×10-11 M。另一方面，與該等抗體對應之人源化前之抗hTfR抗體(抗體編號3)之與人類TfR的解離常數未達1×10-12 M(表3)。該等結果顯示，抗hTfR抗體之對於人類TfR之較高親和性在將抗體人源化之前後得以維持。 繼而，自人源化抗hTfR抗體之對於猴TfR之親和性之測定結果來看，關於人源化抗hTfR抗體編號3～3-4，觀察到人源化前之與該等抗體對應之抗hTfR抗體編號3之與猴TfR的解離常數未達1×10-12 M者於人源化後，對於猴TfR之親和性降低至2.60×10-10 M～1.91×10-9 M。若為人源化抗hTfR抗體編號3，則觀察到對於猴TfR之親和性之降低，但該等結果顯示，抗hTfR抗體之對於猴TfR之較高親和性於將抗體人源化之前後不會喪失而大致得以維持。 [實施例15]人源化抗hTfR抗體之使用猴之藥物動力學分析 使用人源化抗hTfR抗體編號3、人源化抗hTfR抗體編號3-2、人源化抗hTfR抗體編號3(IgG4)及人源化抗hTfR抗體編號3-2(IgG4)之4種抗體，進行使用猴之藥物動力學分析。再者，人源化抗hTfR抗體編號3係重鏈為IgG1，人源化抗hTfR抗體編號3(IgG4)係將人源化抗hTfR抗體編號3之重鏈直接作為可變區而設為IgG4者。又，人源化抗hTfR抗體編號3-2係重鏈為IgG1，且人源化抗hTfR抗體編號3-2(IgG4)係將人源化抗hTfR抗體編號3-2之重鏈直接作為可變區而設為IgG4者。將該等4種抗體分別以5.0 mg/kg之用量分別單次靜脈內投予至雄性食蟹猴中，於投予前及投予後2分鐘、30分鐘、2小時、4小時及8小時後採取末梢血，於採血後實施全身灌注。又，作為陰性對照，將關於HER2蛋白之人源化抗體即曲妥珠單抗(赫賽汀(Herceptin)TM ，中外製藥)以相同方式投予至一隻個體，於投予前及投予後2分鐘、30分鐘、2小時、4小時及8小時後採取末梢血，於採血後實施全身灌注。灌注後，摘取包含髓質之腦組織、脊髓組織及其他組織(包含肝臟、心臟、脾臟及骨髓)。使用該腦組織、脊髓組織及其他組織，進行以下之人源化抗hTfR抗體之濃度測定及免疫組織化學染色。 組織中及末梢血中之人源化抗hTfR抗體之濃度測定大致藉由以下之程序進行。再者，將關於腦所採取之組織分為大腦皮質、小腦、海馬區及髓質後，進行人源化抗hTfR抗體之濃度測定。分別利用包含蛋白酶抑制劑混合液(Protease Inhibitor Cocktail)(Sigma-Aldrich公司)之RIPA緩衝液(和光純藥工業股份有限公司)將所採取之組織勻漿化，並進行離心而回收上清液。將關於末梢血之血清進行分離。將抗人類Kappa輕鏈山羊IgG生物素(免疫生物研究所股份有限公司)、Sulfo-tag抗人類IgG(H＋L)抗體(Bethyl公司)及腦組織勻漿添加至利用含有SuperBlock阻斷緩衝液之PBS(SuperBlock blocking buffer in PBS)(Thermo Fisher Scientific公司)實施過阻斷之抗生蛋白鏈菌素培養盤(Meso Scale Diagnostics公司)中，進行1小時振盪而固定於培養盤中。繼而，於各孔中各添加150 μL之Read buffer T(Meso Scale Diagnostics公司)，使用SectorTM Imager 6000 reader測定來自各孔之發光量。根據濃度已知之抗hTfR抗體之標準試樣的測定值製作校準曲線，於其中插補各檢體之測定值，藉此算出各組織中及末梢血中所包含之抗體之量。濃度之測定各樣品每個反覆進行3次。 將腦組織及脊髓組織中之人源化抗hTfR抗體之濃度測定之結果示於表8中。 [表8]
Figure 106145827-A0304-0008
 發現人源化抗hTfR抗體編號3、人源化抗hTfR抗體編號3-2、人源化抗hTfR抗體編號3(IgG4)及人源化抗hTfR抗體編號3-2(IgG4)之抗體均於大腦皮質、小腦、海馬區、髓質及脊髓中儲積(表8)。關於上述抗體之量，若為人源化抗hTfR抗體編號3，則與陰性對照之曲妥珠單抗(赫賽汀(Herceptin)TM )相比，於大腦皮質中為約82倍，於小腦中為約68倍，於海馬區中為約92倍，於髓質中為約54倍，於脊髓中為約3.1倍，若為人源化抗hTfR抗體編號3-2，則與陰性對照之曲妥珠單抗相比，於大腦皮質中為約128倍，於小腦中為約80倍，於海馬區中為約136倍，於髓質中為約63倍，於脊髓中為約3.1倍，若為人源化抗hTfR抗體編號3(IgG4)，則與陰性對照之曲妥珠單抗相比，於大腦皮質中為約79倍，於小腦中為約66倍，於海馬區中為約106倍，於髓質中為約54倍，於脊髓中為約3.1倍，若為人源化抗hTfR抗體編號3-2(IgG4)，則與陰性對照之曲妥珠單抗相比，於大腦皮質中為約93倍，於小腦中為約63倍，於海馬區中為約117倍，於髓質中為約66倍，於脊髓中為約3.2倍(表9)。該等結果顯示，該等4種人源化抗hTfR抗體具有通過血腦障壁而於腦組織中儲積之性質，可藉由使應於腦組織內發揮功能之藥劑與該等抗體結合而使該藥劑高效率地於腦組織中儲積。 [表9]
Figure 106145827-A0304-0009
 繼而，將肝臟、心臟、脾臟及骨髓之各組織中之人源化抗hTfR抗體之濃度測定的結果示於圖4。於肝臓、及脾臟中，發現4種人源化抗hTfR抗體及陰性對照之曲妥珠單抗均儲積，關於上述人源化抗hTfR抗體及曲妥珠單抗之量，係人源化抗hTfR抗體與曲妥珠單抗同等。於心臟中，人源化抗hTfR抗體與陰性對照之曲妥珠單抗相比，有儲積量較多之傾向，但該人源化抗hTfR抗體之量止於陰性對照之1.5倍～2.8倍左右。於骨髓中，人源化抗hTfR抗體與陰性對照之曲妥珠單抗相比，有儲積量明顯較多之傾向，該人源化抗hTfR抗體之量為陰性對照之3.5～16倍。關於人源化抗hTfR抗體向骨髓之儲積，認為其原因在於：於作為造血器官之骨髓中TfR之表現量較多，藉由與TfR結合而更多之人源化抗hTfR抗體較陰性對照儲積。該等資料顯示，該等4種人源化抗hTfR抗體具有特異性地於作為中樞神經系統之大腦、小腦、海馬區及髓質中儲積之性質，可藉由使應於腦組織內發揮功能之藥劑與該等抗體結合而使該藥劑高效率地於腦組織中儲積。 繼而，將人源化抗hTfR抗體之血液動力學之測定結果示於表9-2。4種人源化抗hTfR抗體係與陰性對照之曲妥珠單抗同樣地，即便於投予後8小時，血中濃度亦顯示出60 μg/mL以上之高值，而表示於血中穩定(表9-2)。 [表9-2]
Figure 106145827-A0304-0010
 腦組織中之人源化抗hTfR抗體之免疫組織化學染色係藉由實施例8所記載之方法進行。但是，此時，使用人類IgG-重鏈及輕鏈抗體(Bethyl Laboratories公司)代替小鼠IgG-重鏈及輕鏈抗體(Bethyl Laboratories公司)。 圖5中表示大腦皮質之人源化抗hTfR抗體之免疫組織化學染色的結果。於投予了人源化抗hTfR抗體編號3、人源化抗hTfR抗體編號3-2、人源化抗hTfR抗體編號3(IgG4)及人源化抗hTfR抗體編號3-2(IgG4)之猴之大腦皮質中，確認到血管及神經細胞之特異性染色(分別為圖5b～e)。尤其是於投予了人源化抗hTfR抗體編號3-2之猴之大腦皮質(圖5c)中，於腦血管外之腦實質區域亦廣泛地確認到特異性染色。再者，於作為對照組設置之投予了赫賽汀(Herceptin)之猴之大腦皮質中未發現染色，顯示於圖5b～e中觀察到之組織染色為對於人源化抗hTfR抗體具有特異性者(圖5a)。 圖6中表示海馬區之人源化抗hTfR抗體之免疫組織化學染色之結果。於投予了人源化抗hTfR抗體編號3、人源化抗hTfR抗體編號3-2、人源化抗hTfR抗體編號3(IgG4)及人源化抗hTfR抗體編號3-2(IgG4)之猴之海馬區中確認到血管及神經細胞之特異性染色(分別為圖6b～e)。再者，於作為對照組設置之投予了赫賽汀(Herceptin)之猴之海馬區中未發現染色，顯示於圖6b～e中觀察到之組織染色為對於人源化抗hTfR抗體具有特異性者(圖6a)。 圖7中表示小腦之人源化抗hTfR抗體之免疫組織化學染色之結果。於投予了人源化抗hTfR抗體編號3、人源化抗hTfR抗體編號3-2、人源化抗hTfR抗體編號3(IgG4)及人源化抗hTfR抗體編號3-2(IgG4)之猴之小腦中確認到血管及浦金埃氏細胞之特異性染色(分別為圖7b～e)。再者，於作為對照組設置之投予了赫賽汀(Herceptin)之猴之小腦中未發現染色，顯示於圖7b～e中觀察到之組織染色為對於人源化抗hTfR抗體具有特異性者(圖7a)。 圖8中表示髓質之人源化抗hTfR抗體之免疫組織化學染色之結果。於投予了人源化抗hTfR抗體編號3、人源化抗hTfR抗體編號3-2、人源化抗hTfR抗體編號3(IgG4)及人源化抗hTfR抗體編號3-2(IgG4)之猴之髓質中確認到血管及神經細胞之特異性染色(分別為圖8b～e)。再者，於作為對照組設置之投予了赫賽汀(Herceptin)之猴之髓質中未發現染色，顯示於圖8b～e中觀察到之組織染色為對於人源化抗hTfR抗體具有特異性者(圖8a)。 根據上述實施例8之大腦及小腦之免疫組織化學染色之結果顯示，作為人源化前之小鼠抗體之抗hTfR抗體編號3可結合至存在於腦血管內皮表面之hTfR，且結合至hTfR後，通過血腦障壁而轉移至腦實質內，進而於海馬區自腦實質內摻入至神經細胞中，於小腦中摻入至浦金埃氏細胞中。 根據實施例15之大腦、海馬區、小腦及髓質之免疫組織化學染色之結果可知，將供於實驗之抗hTfR抗體編號3人源化所獲得之4種人源化抗hTfR抗體係結合至存在於腦血管內皮表面之hTfR，且結合至hTfR後，通過血腦障壁而轉移至腦實質內，進而於大腦皮質中摻入至神經細胞中，於海馬區中自腦實質內摻入至神經細胞中，於小腦中摻入至浦金埃氏細胞中，於髓質中摻入至神經細胞中。 [實施例16]對於人源化抗hTfR抗體編號3之重鏈之突變 製作於序列編號37所示之人源化抗hTfR抗體編號3之重鏈之可變區中將CDR1設為序列編號12所示者時置換該CDR1之1個胺基酸序列，並且置換架構區3之1個胺基酸序列之人源化抗體的重鏈。該新穎之抗體之重鏈係CDR1包含序列編號62或63之胺基酸序列，架構區3包含序列編號64之胺基酸序列者，而係置換了2個構成序列編號37所示之人源化抗hTfR抗體編號3之重鏈之胺基酸序列的胺基酸者。該新穎之抗體之重鏈(人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈)係包含序列編號66所示之胺基酸序列，其胺基酸序列之可變區包含序列編號65所示之胺基酸序列而成。 於表10中表示人源化抗hTfR抗體編號3之重鏈中之序列編號12之CDR1與人源化抗hTfR抗體編號3N的重鏈中之序列編號62之CDR1的比對。於該比對中，將自N末端側起第5位的胺基酸自蘇胺酸置換為甲硫胺酸。 於表11中表示人源化抗hTfR抗體編號3之重鏈中之架構區3(序列編號73)與人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈中的架構區3(序列編號64)之胺基酸序列之比對。於該比對中，將自N末端側起第17位之胺基酸自色胺酸置換為白胺酸。 [表10]
Figure 106145827-A0304-0011
 [表11]
Figure 106145827-A0304-0012
 [實施例17]人源化抗hTfR抗體編號3N表現用細胞之構建 人工合成包含編碼包含序列編號66所示之胺基酸序列之抗體之重鏈之基因的DNA片段(序列編號67)。於該DNA片段之5'側自5'端開始依序導入MluI序列與編碼前導肽之序列，於3'側導入NotI序列。利用實施例11所記載之方法將以上述方式合成之DNA組入至pE-neo載體中，將所獲得之載體設為人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈表現用載體之pE-neo(HC3)N。使用該pE-neo(HC3)N與實施例11中所構建之輕鏈表現用載體pE-hygr(LC3)，利用實施例12所記載之方法使CHO細胞轉形，而獲得人源化抗hTfR抗體編號3N表現株。 [實施例18]人源化抗hTfR抗體編號3N之純化 使用實施例17中所獲得之人源化抗hTfR抗體編號3N表現株，利用實施例13所記載之方法而獲得人源化抗hTfR抗體編號3N之純化品。再者，人源化抗hTfR抗體編號3N係於人源化抗hTfR抗體編號3之重鏈之胺基酸序列中置換了表10及表11所示之2個胺基酸而成者。另一方面，人源化抗hTfR抗體編號3N與人源化抗hTfR抗體編號3之輕鏈之胺基酸序列係同源。 [實施例19]人源化抗hTfR抗體編號3與人源化抗hTfR抗體編號3N之對於人類TfR及猴TfR之親和性的比較 利用實施例7所記載之方法，測定實施例13中所獲得之人源化抗hTfR抗體編號3與實施例17中所獲得之人源化抗hTfR抗體編號3N之對於人類TfR及人類TfR的親和性。於表12中表示各抗體之對於人類TfR之締合速度常數(kon)及解離速度常數(koff)之測定結果、及解離常數(KD )。再者，表示人源化抗hTfR抗體編號3之對於人類TfR之親和性之測定值係與表6所示者不同，但為實驗誤差。 [表12]
Figure 106145827-A0304-0013
 利用實施例7所記載之方法，測定實施例13中所獲得之人源化抗hTfR抗體編號3與實施例17中所獲得之人源化抗hTfR抗體編號3N之對於人類TfR及猴TfR之親和性。於表13中表示各抗體之對於猴TfR之締合速度常數(kon)及解離速度常數(koff)之測定結果、及解離常數(KD )。再者，表示人源化抗hTfR抗體編號3之對於猴TfR之親和性之測定值係與表7所示者不同，但為實驗誤差。 [表13]
Figure 106145827-A0304-0014
 若將人源化抗hTfR抗體編號3N及人源化抗hTfR抗體編號3之與猴TfR之KD 值進行比較，則前者為5.07×10-11 M，後者為1.32×10-9 M，人源化抗hTfR抗體編號3N之與猴TfR之KD 值與人源化抗hTfR抗體編號3之與猴TfR之KD 值進行比較，為約30分之1。另一方面，若將人源化抗hTfR抗體編號3N及人源化抗hTfR抗體編號3之與人類TfR之KD 值進行比較，則均未達1×10-12 M，所有抗體均對於人類TfR具有較高之親和性。又，所有抗體相較於對於猴TfR之親和性，對於人類TfR具有較高之親和性。 作為將人源化抗hTfR抗體作為藥劑進行開發時實施之非臨床試驗的一環，大多情況下實施使用猴之藥理試驗。此處，使用猴之藥理試驗之結果係用以判斷實施使用人類之臨床試驗之妥當性，因此於猴體內之行為較佳為與投予至人類時之行為更為近似者。如上述結果所示，人源化抗hTfR抗體編號3N由於對於猴TfR之親和性顯示出人源化抗hTfR抗體編號3之約30倍之高值，故而人源化抗hTfR抗體編號3N之於猴體內之行為可謂與投予至人類時之行為更為近似。因此，藉由使用人源化抗hTfR抗體編號3N，而於使用猴之試驗中可獲得更為反映出投予至人類時之行為之結果。因此，藉由使用猴之試驗，而作為實施使用人類之臨床試驗時之判斷材料可獲得更有益之結果。 [實施例20]人源化抗hTfR抗體編號3與人源化抗hTfR抗體編號3N向使用猴之腦組織之轉移性的比較 將實施例13中所獲得之人源化抗hTfR抗體編號3與實施例17中所獲得之人源化抗hTfR抗體編號3N分別以5.0 mg/kg之用量分別單次靜脈內投予至雄性食蟹猴，於投予8小時後實施全身灌注。灌注後，摘取包含髓質之腦組織及脊髓組織。關於腦組織，於摘取後分為大腦皮質、小腦、海馬區及髓質。 各組織所包含之人源化抗hTfR抗體之濃度測定係依據實施例15所記載之測定法進行。 將腦組織中之抗hTfR抗體之濃度測定之結果示於表14中。若將人源化抗hTfR抗體編號3N與人源化抗hTfR抗體編號3之於大腦、小腦、海馬區中之濃度進行比較，則人源化抗hTfR抗體編號3N之濃度顯示出較人源化抗hTfR抗體編號3高之值，即於大腦中為約1.42倍，於小腦中為約1.56倍，於海馬區中為約1.29倍。於髓質中兩者之濃度大致同等。於頸脊髓中人源化抗hTfR抗體編號3N之濃度亦顯示出較人源化抗hTfR抗體編號3高之值，即為約1.47倍。該等結果顯示，人源化抗hTfR抗體編號3N具有與人源化抗hTfR抗體編號3相比，更高效率地通過血腦障壁而於大腦、小腦、海馬區等腦組織中儲積之性質。即，顯示人源化抗hTfR抗體編號3N具有如下性質：可藉由使應於腦組織內發揮功能之藥劑與該等抗體結合而使該藥劑高效率地於腦組織中儲積。 [表14]
Figure 106145827-A0304-0015
 [實施例20-2]hFc-人源化抗hTfR抗體表現用細胞之製作 人工合成包含編碼導入有包含序列編號71所示之胺基酸序列之人類IgG Fc區域之人源化抗hTfR抗體3N的Fab重鏈之胺基酸序列之基因之DNA片段(序列編號72)。於該DNA片段之5'側自5'端依序導入MluI序列與編碼前導肽之序列，於3'側導入NotI序列。利用實施例11所記載之方法將以上述方式合成之DNA組入至pE-neo載體中，將所獲得之載體設為pE-neo(Fc-Fab HC(3N))。使用該pE-neo(Fc-Fab HC(3N))與實施例11中所構建之輕鏈表現用載體pE-hygr(LC3)，利用實施例12所記載之方法使CHO細胞轉形，而獲得Fc-Fab(3N)表現株。 [實施例20-3]hFc-人源化抗hTfR抗體之製作 使用Fc-Fab(3N)表現株，利用實施例13所記載之方法獲得Fc-Fab(3N)之純化品。 [實施例20-4]hFc-人源化抗hTfR抗體之對於人類TfR及猴TfR之親和性之比較 利用實施例7所記載之方法，測定實施例20-3中所獲得之Fc-Fab(3N)之純化品之對於人類TfR及猴TfR的親和性。將結果示於表14-2中。Fc-Fab(3N)係對於人類TfR顯示出較高之親和性(KD ＜1.0×10-12 )。該結果顯示，Fc-Fab(3N)具有如下性質，即可藉由使應於腦組織內發揮功能之藥劑與該等抗體結合而使該藥劑高效率地於腦組織中儲積。 [表14-2]
Figure 106145827-A0304-0016
 [實施例20-5]hFc-人源化抗hTfR抗體之向使用猴之腦組織之轉移性之測定 將實施例20-3中所獲得之Fc-Fab(3N)以5.0 mg/kg之用量單次靜脈內投予至雄性食蟹猴，於投予8小時後實施全身灌注。灌注後，摘取包含髓質之腦組織及脊髓組織。關於腦組織，於摘取後分為大腦皮質、小腦、海馬區及髓質。 各組織所包含之人源化抗hTfR抗體之濃度測定係依據實施例15所記載之測定法進行。 將腦組織中之抗hTfR抗體之濃度測定之結果示於表14-3。Fc-Fab(3N)之於大腦、小腦、海馬區中之濃度分別為0.80 μg/g濕重量、0.80 μg/g濕重量、及1.05 μg/g。又，於髓質及脊髓中之濃度分別為0.68 μg/g濕重量、0.67 μg/g濕重量。該等結果顯示，即便於作為Fab之人源化抗hTfR抗體之N末端側結合有Fc區域之情形時，抗hTfR抗體亦可通過BBB。於Fab結合所需物質(蛋白質、生理活性物質)而成之結合體於投予至生物體內時不穩定之情形時，藉由於Fab之N末端側結合Fc區域，可一邊維持通過BBB之特性，一邊使該結合體於生物體內穩定、例如增加該結合體之血中半衰期。 [表14-3]
Figure 106145827-A0304-0017
 [實施例21]hI2S-人源化抗hTfR抗體融合蛋白質表現用細胞之製作 人工合成包含編碼如下蛋白質之基因之具有序列編號52所示之鹼基序列的DNA片段，該蛋白質係於具有序列編號37所示之胺基酸序列之人源化抗hTfR抗體編號3之重鏈的C末端側經由連接子序列(Gly Ser)而結合具有序列編號50所示之胺基酸序列的hI2S所得。該DNA片段係編碼於具有序列編號51所示之胺基酸序列之人源化抗hTfR抗體的重鏈經由連接子序列(Gly Ser)而結合hI2S所獲得之蛋白質。又，該DNA片段係於5'側自5'端依序具有MluI序列、與編碼作為分泌訊號發揮功能之前導肽之序列，且於3'側具有NotI序列。利用MluI與NotI消化該DNA片段，組入至pE-neo載體之MluI與NotI之間，而構建pE-neo(HC-I2S-3)。 又，人工合成包含編碼如下蛋白質之基因之具有序列編號54所示之鹼基序列的DNA片段，該蛋白質係於具有序列編號66所示之胺基酸序列之人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈的C末端側，經由連接子序列(Gly Ser)而結合具有序列編號50所示之胺基酸序列之hI2S所得。該DNA片段係編碼於具有序列編號53所示之胺基酸序列之人源化抗hTfR抗體之重鏈經由連接子序列(Gly Ser)而結合hI2S所得的蛋白質。又，該DNA片段係於5'側自5'端依序具有MluI序列、與編碼作為分泌訊號發揮功能之前導肽之序列，且於3'側具有NotI序列。利用MluI與NotI消化該DNA片段，組入至pE-neo載體之MluI與NotI之間，而構建pE-neo(HC-I2S-3N)。 利用pE-neo(HC-I2S-3)與實施例11中所構建之pE-hygr(LC3)將CHO細胞(CHO-K1：自美國菌種中心(American Type Culture Collection)獲取)轉形，而獲得表現hI2S與人源化抗hTfR抗體之融合蛋白質之細胞株。將該細胞株設為hI2S-抗hTfR抗體表現株3。將該細胞株所表現之hI2S與人源化抗hTfR抗體之融合蛋白質設為I2S-抗hTfR抗體3。 又，利用pE-neo(HC-I2S-3N)與pE-hygr(LC3)將CHO細胞轉形，而獲得表現hI2S與人源化抗hTfR抗體之融合蛋白質之細胞株。將該細胞株設為hI2S-抗hTfR抗體表現株3N。將該細胞株所表現之hI2S與人源化抗hTfR抗體之融合蛋白質設為I2S-抗hTfR抗體3N。 [實施例22]I2S-抗hTfR抗體之製造 藉由以下之方法製造I2S-抗hTfR抗體。將實施例21中所獲得之hI2S-抗hTfR抗體表現株3及3N以各自細胞濃度成為約2×105 個/mL之方式利用CD OptiCHOTM 培養基進行稀釋，於1 L之三角燒瓶中添加200 mL之細胞懸浮液，於37℃下在包含5%CO2 與95%空氣之濕潤環境以約70 rpm之攪拌速度培養6～7天。藉由離心操作回收培養上清液，利用0.22 μm過濾器(Millipore公司)進行過濾，而製成培養上清液。於回收之培養上清液中添加管柱體積5倍體積之包含150 mL NaCl之20 mM三羥甲基胺基甲烷緩衝液(pH值8.0)，注入預先經管柱體積3倍體積之包含150 mM NaCl之20 mM三羥甲基胺基甲烷緩衝液(pH值8.0)平衡化之蛋白A管柱(管柱體積：1 mL，Bio-Rad公司)中。繼而，供給管柱體積5倍體積之上述緩衝液而將管柱洗淨後，利用包含150 mM NaCl之管柱體積4倍體積之50 mM甘胺酸緩衝液(pH值2.8)使所吸附的I2S-抗hTfR抗體溶出。添加1 M三羥甲基胺基甲烷緩衝液(pH值8.0)而將包含該I2S-抗hTfR抗體之溶出液的pH值調整至pH值7.0，繼而使用Amicon Ultra 30kDa膜(Millipore公司)對PBS進行緩衝液更換。將以上述方式獲得者設為I2S-抗hTfR抗體3及I2S-抗hTfR抗體3N之純化品。 [實施例23]I2S-抗hTfR抗體之對於人類TfR及猴TfR之親和性之測定 依據實施例7所記載之方法，對實施例22中所獲得之I2S-抗hTfR抗體之對於人類TfR及猴TfR的親和性進行測定。於表15中表示I2S-抗hTfR抗體3及I2S-抗hTfR抗體3N之對於人類TfR之締合速度常數(kon)及解離速度常數(koff)之測定結果、及解離常數(KD )。又，表16中表示I2S-抗hTfR抗體3及I2S-抗hTfR抗體3N之對於猴TfR之締合速度常數(kon)及解離速度常數(koff)之測定結果、及解離常數(KD )。 I2S-抗hTfR抗體3N較I2S-抗hTfR抗體，顯示出約5倍之對於人類TfR之親和性(表15)。又，I2S-抗hTfR抗體3N較I2S-抗hTfR抗體，顯示出非常高之對於猴TfR之親和性(表16)。I2S-抗hTfR抗體3N較I2S-抗hTfR抗體3，對於人類TfR及猴TfR顯示出較高之親和性。 [表15]
Figure 106145827-A0304-0018
 [表16]
Figure 106145827-A0304-0019
 [實施例24]I2S-抗hTfR抗體3與I2S-抗hTfR抗體3N之向使用猴之腦組織之轉移性的比較 將實施例22中所獲得之I2S-抗hTfR抗體3及I2S-抗hTfR抗體3N分別以5.0 mg/kg之用量分別單次靜脈內投予至雄性食蟹猴，於投予8小時後實施全身灌注。灌注後，摘取包含髓質之腦組織及脊髓組織。關於腦組織，於摘取後分為大腦皮質、小腦、海馬區及髓質。 各組織所包含之I2S-抗hTfR抗體之濃度測定係大致藉由實施例20所記載之程序進行。將腦組織中之I2S-抗hTfR抗體之濃度測定之結果示於表17。若將I2S-抗hTfR抗體3N與I2S-抗hTfR抗體3之大腦、小腦、海馬區、髓質、及頸椎中之濃度進行比較，則I2S-抗hTfR抗體3N之濃度相較於I2S-抗hTfR抗體3之濃度，顯示出較I2S-抗hTfR抗體3高之值，即於大腦中為約2.12倍，於小腦中為約1.97倍，於海馬區中為約2.41倍，於髓質中為1.94倍，及與頸椎中為1.63倍。該結果顯示，I2S-抗hTfR抗體3N相較於I2S-抗hTfR抗體3，可更高效率地通過血腦障壁。 [表17]
Figure 106145827-A0304-0020
 [實施例25]hGAA-人源化抗hTfR抗體融合蛋白質表現用細胞之製作 人工合成包含編碼如下蛋白質之基因之具有序列編號59所示之鹼基序列的DNA片段，該蛋白質係於具有序列編號68所示之胺基酸序列之人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)的C末端側，經由連接子序列(Gly Ser)而結合具有序列編號55所示之胺基酸序列之hGAA所得。該DNA片段係編碼於具有序列編號58所示之胺基酸序列之人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)經由連接子序列(Gly Ser)而結合hGAA所獲得之蛋白質。又，該DNA片段於5'側自5'端依序具有MluI序列、編碼作為分泌訊號發揮功能之前導肽之序列，且於3'側具有NotI序列。利用MluI與NotI消化該DNA片段，組入至pE-neo載體之MluI與NotI之間，而構建pE-neo(HC-GAA-3N(IgG4))。 利用pE-neo(HC-GAA-3N(IgG4))與實施例11中所構建之pE-hygr(LC3)將CHO細胞(CHO-K1：自美國菌種中心(American Type Culture Collection)獲取)進行轉形，而獲得表現hGAA與人源化抗hTfR抗體之融合蛋白質之細胞株。將該細胞株設為hGAA-抗hTfR抗體表現株3N(IgG4)。將該細胞株所表現之hGAA與人源化抗hTfR抗體之融合蛋白質設為GAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)。 [實施例26]GAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)之製造 GAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)係使用實施例25中所獲得之hGAA-抗hTfR抗體表現株3N(IgG4)，大致藉由實施例22所記載之方法進行製造。 [實施例27]hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)之對於人類TfR及猴TfR之親和性之測定 依據實施例23所記載之方法，對實施例26中所獲得之hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)之對於人類TfR及猴TfR之親和性進行測定。又，關於下述實施例31中所製作之Fab GS-GAA之對於人類TfR及猴TfR之親和性之測定結果，亦記載於此處。 hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)對於人類TfR及猴TfR均顯示出非常高之親和性。將結果示於表17-2。Fab GS-GAA亦對於人類TfR及猴TfR均顯示出較高之親和性，但其親和性較hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)低。 [表17-2]
Figure 106145827-A0304-0021
 [實施例28]hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)之向使用猴之腦組織之轉移性評價 實施例26中所獲得之hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)向腦組織之轉移性可依據實施例24所記載之方法進行評價。具體而言，將hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)以5.0 mg/kg及20 mg/kg之用量單次靜脈內投予至雄性食蟹猴。又，將作為對象藥之以龐貝氏症治療藥市售的hGAA以5.0 mg/kg及20 mg/kg之用量單次靜脈內投予至雄性食蟹猴。又，20 mg/kg用量之hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)係投予至3隻猴，其他者係投予至1隻猴。對於投予了20 mg/kg用量之hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)之猴，於投予4小時、8小時、及24小時後，分別每1隻使用生理鹽水(大塚製藥工場公司)實施全身灌注。對於其他猴，於投予8小時後實施全身灌注。 灌注後，摘取包含髓質之腦組織、脊髓組織、及骨骼肌組織。關於腦組織，於摘取後分為大腦皮質、小腦、海馬區、髓質、及腦橋。又，關於骨骼肌組織，摘取股直肌(rectus femoris muscle)、趾長伸肌(extensor digitorum longus muscle)、比目魚肌、肱三頭肌、腰大肌、橫膈膜、及舌肌。又，使用生理鹽水(大塚製藥工場公司)，對未投予藥劑之1隻雄性食蟹猴進行全身灌注，摘取大腦皮質及股直肌。利用包含蛋白酶抑制劑混合液(Protease Inhibitor Cocktail)(西格瑪公司)之T-PER(Thermo Fisher Scientific公司)將所摘取之各組織進行勻漿化，回收離心後之上清液。使用所製備之上清液，實施以下利用ECL法之hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)及hGAA之濃度測定及免疫組織化學染色。 利用ECL法之蛋白質之濃度測定： 使用MSD GOLD Sulfo-TAG NHS Ester(Meso Scale Discovery公司)對兔抗hGAA多株抗體進行SULFO標記，而製備SULFO標記抗hGAA抗體。又，使用EZ-Link NHS-PEG4 -Biotin(Thermo Scientific公司)對兔抗hGAA多株抗體進行Biotin標記，而製備Biotin標記抗hGAA抗體。製備等量混合有SULFO標記抗hGAA抗體與Biotin標記抗hGAA抗體之溶液，於其中添加上述中所獲得之上清液，於室溫下進行1小時培養，將其設為抗體反應試樣。於塗覆有抗生蛋白鏈菌素之培養盤即Streptavidin Gold Plate 96well(Meso Scale Diagnostics公司)之各孔中添加1%BSA/PBS溶液並靜置1小時，將培養盤阻斷。 利用200 μL之PBS-T(西格瑪公司)將阻斷後之培養盤之各孔洗淨後，於各孔中添加抗體反應試樣，於室溫下培養1小時。培養後，利用PBS-T將培養盤之各孔洗淨，繼而，添加4X Read buffer T(Meso scale Diagnostics公司)與注射用水(大塚製藥工廠公司)之等量混合液，使用SectorTM Imager 6000(Meso scale Diagnostics公司)測定來自各孔之發光量。根據濃度已知之hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)或hGAA之標準試樣之測定值製作校準曲線，於其中插補各試樣之測定值，藉此定量hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)及hGAA，算出腦之每克重(g濕重量)所包含之量。 將利用ECL法之濃度測定結果示於表18。首先看腦組織之結果。於投予了hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)之猴中，投予8小時後之大腦皮質中之hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)之濃度為以5 mg/kg與20 mg/kg之用量投予後所得者，且分別濃度依存性地增加為0.740 μg/g濕重量、1.42 μg/g濕重量。於小腦、海馬區、髓質、及腦橋中為同樣之結果。另一方面，於投予了hGAA之猴中，投予8小時後之大腦皮質中之hGAA之濃度為以5 mg/kg與20 mg/kg之用量投予後所得者，且分別為與0.414 μg/g濕重量、0.435 μg/g濕重量大致相同之值。於小腦、海馬區、髓質、及腦橋中亦為同樣之結果。根據定量了未投予藥劑之猴之hGAA之大腦皮質中的內源性GAA的值為0.425 μg/g濕重量之情況可知，所靜脈內投予之hGAA基本上未摻入至腦內。另一方面，可知所靜脈內投予之hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)通過BBB而摻入至腦內。 繼而看骨骼肌組織之結果。於以5 mg/kg之用量分別投予了hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)與hGAA之猴中，投予8小時後之股直肌中之hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)與hGAA之濃度係前者為0.311 μg/g濕重量，後者為0.251 μg/g濕重量，hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)較hGAA，顯示出約1.23倍之定量值。關於以20 mg/kg之用量投予者，亦為同樣之結果。又，關於趾長伸肌、比目魚肌、肱三頭肌、腰大肌、橫膈膜、及舌肌亦為同樣之結果。即，可知所靜脈內投予之hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)與所靜脈內投予之hGAA相比，摻入至骨骼肌組織中之量較多。 [表18]
Figure 106145827-A0304-0022
 免疫組織化學染色： 腦組織中之hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)及hGAA之免疫組織化學染色大致藉由以下之程序進行。使用Tissue-Tek冷凍3DM(Sakura-finetek股份有限公司)，將上述中所獲得之腦組織急速冷凍至-80℃，使用LEICA CM1860 UV冷凍切片機(Cryostatl)(Leica Biosystems Nussloch公司)將該冷凍片薄切至4 μm後，貼附至MAS COAT載玻片(松浪硝子股份有限公司)。使4%多聚甲醛(和光純藥工業股份有限公司)與組織薄片於4℃下反應5分鐘，將組織薄片固定在載玻片上。繼而，使包含0.3%過氧化氫水之甲醇溶液(和光純藥工業股份有限公司)與組織薄片反應30分鐘，而使內源性過氧化酶失去活性。繼而，使載玻片與含有SuperBlock阻斷緩衝液之PBS(SuperBlock blocking buffer in PBS)於室溫下反應30分鐘而進行阻斷。繼而，使作為初級抗體之兔抗hGAA多株抗體與組織薄片於4℃下反應16小時。繼而，利用CSAII Rabbit Link(Agilent公司)、及CSAII生物素-游離酪胺訊號放大系統套組(Biotin-free Tyramide Signal Amplification System Kit)(Agilent公司)對組織薄片進行處理。繼而，使組織薄片與Anti-Fluorescein HRP於室溫下反應15分鐘。繼而利用DAB受質(3,3'-diaminobenzidine，Vector Laboratories公司)進行顯色，利用邁爾氏蘇木精(Mayer's Hematoxylin)(Merck公司)進行對比染色，於脫水、透明後封片，利用光學顯微鏡觀察。再者，免疫組織化學染色係僅對以20 mg/kg之用量投予了hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)者、與以20 mg/kg之用量投予了hGAA之猴的小腦實施。因此，投予後經過時間均為8小時。 於圖9中表示小腦之hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)及hGAA之免疫組織化學染色結果。於投予了hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)之猴之小腦中，確認到血管及浦金埃氏細胞之特異性染色(圖9a)。另一方面，於投予了hGAA之猴之小腦中，未發現該染色(圖9b)。該等結果顯示，藉由使通常不會通過血腦障壁之hGGA與抗hTfR抗體3N(IgG4)融合，可通過血腦障壁而於小腦中摻入至浦金埃氏細胞中。 [實施例29]hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)之使用小鼠之藥效評價-肝糖濃度之定量(1) 基於作為龐貝氏症之病態模型之破壞了酸性α-葡萄糖苷酶(GAA)基因之基因剔除小鼠，利用實施例7-2所記載之方法，將編碼小鼠TfR之細胞外區域之基因置換為編碼人類TfR受體基因之細胞外區域之基因，而製作於同種接合子中缺損GAA基因且於異種接合子具有嵌合TfR基因之小鼠(GAA-KO/hTfR-KI小鼠)。將小鼠分為個7群，以表19所示之用法、用量將hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)或hGAA進行靜脈內投予。再者，將未投予藥劑之正常小鼠設為正常對照(第1群)，將未投予藥劑之GAA-KO/hTfR-KI小鼠設為病態對照(第2群)。各群均設為小鼠5隻。又，小鼠係使用雄性及雌性之9～14週齡(投予開始時)小鼠。 [表19]
Figure 106145827-A0304-0023
 於第2次與第3次之試驗物質投予時，於投予10～20分鐘前，將苯海拉明以10 mL/kg之用量投予至小鼠。其係用以防止由於試驗物質之投予而實驗動物產生過敏性休克等免疫反應的措施。於最後之投予後13天後，於異氟醚麻醉下將小鼠斷頭，迅速地摘取右腦及脊髓頸部後，快速地浸漬於液態氮中而急速冷凍。冷凍後，測定各組織之濕重量。關於心臟、橫膈膜、肝臟、脾臟、股四頭肌、比目魚肌、脛骨前肌、趾長伸肌、腓肚肌(所採取之骨骼肌：右腳)，藉由放血而充分地觀察血液後，採取組織，利用生理鹽水洗淨後，測定各組織之濕重量。測定後之器官係封入至1.5 mL管中，利用液態氮進行瞬間冷凍。 添加相對於各組織之濕重量為20倍量之注射用水，使用顆粒破碎機將組織勻漿化。將組織之勻漿移至離心管中，於100℃下進行5分鐘加熱處理，靜置至冰上。繼而，以13000 rpm、4℃進行5分鐘離心分離，回收上清液。上清液係於-70℃以下之溫度下冷凍保存。 藉由糖原分析套組(Glycogen Assay Kit)(viovision公司)測定上述上清液中所包含之肝糖的濃度。將測定結果示於圖10及圖11。圖10係表示右腦、脊髓頸部、心臟、橫膈膜、肝臟及脾臟中之肝糖之濃度(分別為圖10a～f)。又，圖11係表示股四頭肌、比目魚肌、脛骨前肌、趾長伸肌、腓肚肌中之肝糖之濃度(分別為圖11a～e)。但是，20 mg/kg之hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)投予群由於在最終投予5天後死亡，故而將其除外。 以下探討之圖10及圖11之結果。 腦： 正常對照群、病態對照群、20 mg/kg之hGAA投予群、以及hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)之2.5、5.0、10及20 mg/kg投予群於腦組織中之肝糖濃度係分別為0.0815、3.08、2.36、2.07、1.00、0.891及0.592 mg/g濕重量(圖10(a))。於hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)投予群之投予量為5.0 mg/kg以上之群中，與病態對照群及20 mg/kg之hGAA投予群相比，發現組織中之肝糖顯著減少。又，由hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)引起之肝糖之減少係顯示出用量依存性。 脊髓頸部： 正常對照群、病態對照群、20 mg/kg之hGAA投予群、hGAA-抗HTFR抗體3N(IgG4)之2.5、5.0、10及20 mg/kg投予群之於頸部脊髓組織中之肝糖濃度分別為0.0459、3.10、2.68、2.26、1.77、1.06及0.795 mg/g濕重量(圖10(b))。於hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)投予群之全部中，與病態對照群相比，發現顯著之組織中肝糖減少。又，於hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)投予群之投予量為5.0 mg/kg以上之群中，與20 mg/kg之hGAA投予群相比，發現顯著之組織中肝糖減少。又，由hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)引起之肝糖之減少係顯示出用量依存性。 心臟： 正常對照群、病態對照群、20 mg/kg之hGAA投予群、hGAA-抗HTFR抗體3N(IgG4)之2.5、5.0、10及20 mg/kg投予群之於心臟中之肝糖濃度分別為0.0816、32.4、4.54、12.3、3.45、1.10及0.205 mg/g濕重量(圖10(c))。於hGAA-抗HTFR抗體3N(IgG4)投予群之全部中，與病態對照群相比，發現顯著之組織中肝糖減少。與20 mg/kg之hGAA投予群相比，於20 mg/kg之hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)投予量時顯示出顯著之減少。 橫膈膜： 正常對照群、病態對照群、20 mg/kg之hGAA投予群、hGAA-抗HTFR抗體3N(IgG4)之2.5、5.0、10及20 mg/kg投予群之於橫膈膜組織中之肝糖濃度分別為0.0824、14.1、6.96、12.4、5.57、2.68及0.564 mg/g濕重量(圖10(d))。於hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)投予群之投予量為5.0 mg/kg以上之群中，與病態對照群相比，發現顯著之組織中肝糖減少。與20 mg/kg之hGAA投予群相比，於10 mg/kg之hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)投予量時顯示出明顯之減少。 肝臟： 正常對照群、病態對照群、20 mg/kg之hGAA投予群、hGAA-抗HTFR抗體3N(IgG4)之2.5、5.0、10及20 mg/kg投予群之於肝臟中之肝糖濃度分別為1.16、22.5、2.65、8.88、2.95、3.01及1.46 mg/g濕重量(圖10(e))。於hGAA-抗HTFR抗體3N(IgG4)投予群之全部中，與病態對照群相比，發現與20 mg/kg投予群之hGAA投予群同等之顯著之組織中肝糖減少。 脾臟： 正常對照群、病態對照群、20 mg/kg之hGAA投予群、hGAA-抗HTFR抗體3N(IgG4)之2.5、5.0、10及20 mg/kg投予群之於脾臟中之肝糖濃度分別為0.0295、3.15、0.182、0.368、0.165、0.122及0.0990 mg/g濕重量(圖10(f))。於hGAA-抗HTFR抗體3N(IgG4)投予群之全部中，與病態對照群相比，發現與20 mg/kg投予群之hGAA投予群同等之顯著之組織中肝糖減少。 股四頭肌： 正常對照群、病態對照群、20 mg/kg之hGAA投予群、hGAA-抗HTFR抗體3N(IgG4)之2.5、5.0、10及20 mg/kg投予群之於股四頭肌組織中之肝糖濃度分別為0.0529、8.66、7.41、6.40、2.68、1.71及0.282 mg/g濕重量(圖11(a))。於hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)投予群之投予量為5.0 mg/kg以上之群中，與病態對照群及20 mg/kg之hGAA投予群相比，發現顯著之組織中肝糖減少。再者，20 mg/kg之hGAA投予群與病態對照群相比，未顯示出顯著之組織中肝糖減少。 腓肚肌： 正常對照群、病態對照群、20 mg/kg之hGAA投予群、hGAA-抗HTFR抗體3N(IgG4)之2.5、5.0、10及20 mg/kg投予群之於腓肚肌組織中之肝糖濃度分別為0.173、7.68、5.09、5.23、2.40、1.58及0.221 mg/g濕重量(圖11(b))。於hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)投予群之投予量為5.0 mg/kg以上之群中，與病態對照群相比，發現顯著之組織中肝糖減少。再者，20 mg/kg之hGAA投予群與病態對照群相比，未顯示出顯著之組織中肝糖減少。 比目魚肌： 正常對照群、病態對照群、20 mg/kg之hGAA投予群、hGAA-抗HTFR抗體3N(IgG4)之2.5、5.0、10及20 mg/kg投予群之於比目魚肌組織中之肝糖濃度分別為0.116、12.08、2.233、7.20、2.74、1.07及0.378 mg/g濕重量(圖11(c))。於hGAA-抗HTFR抗體3N(IgG4)投予群之全部中，與病態對照群相比，顯示出明顯之組織中肝糖減少。又，於hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)投予群之投予量為5.0 mg/kg以上之群中，可見與20 mg/kg之hGAA投予群同等之顯著之組織中肝糖減少。 脛骨前肌： 正常對照群、病態對照群、20 mg/kg之hGAA投予群、hGAA-抗HTFR抗體3N(IgG4)之2.5、5.0、10及20 mg/kg投予群之於脛骨前肌組織中之肝糖濃度分別為0.0419、9.68、8.23、4.13、2.56、0.895及0.277 mg/g濕重量(圖11(d))。於hGAA-抗HTFR抗體3N(IgG4)投予群之全部中，與病態對照群及20 mg/kg之hGAA投予群相比，發現顯著之組織中肝糖減少。再者，20 mg/kg之hGAA投予群與病態對照群相比，未顯示出顯著之組織中肝糖減少。 趾長伸肌： 正常對照群、病態對照群、20 mg/kg之hGAA投予群、hGAA-抗HTFR抗體3N(IgG4)之2.5、5.0、10及20 mg/kg投予群之於趾長伸肌組織中之肝糖濃度分別為0.0950、10.4、9.11、4.79、2.59、1.34及0.188 mg/g濕重量(圖11(e))。於hGAA-抗HTFR抗體3N(IgG4)投予群之全部中，與病態對照群相比，發現顯著之組織中肝糖減少。又，於hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)投予群之投予量為5.0 mg/kg以上之群中，與20 mg/kg之hGAA投予群相比，發現顯著之組織中肝糖減少。再者，20 mg/kg之hGAA投予群與病態對照群相比，未顯示出顯著之組織中肝糖減少。 [實施例30]hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)之使用小鼠之藥效評價-病理組織學評價(2) 將實施例29中所採取之左腦、脊髓頸部、股四頭肌、比目魚肌、趾長伸肌浸漬於充分量之10%中性緩衝福馬林液中。於約24小時後更換為10%中性緩衝福馬林液。於組織採取日3天後，浸漬於80%乙醇中，設定48小時延遲時間(delaytime)，藉由自動固定包埋裝置(Sakura Rotary)，自乙醇置換為甲苯，最終浸漬於石蠟中後進行包埋。將其供於PAS染色及HE染色。 以下探討PAS染色之結果。 大腦皮質： 細胞內之PAS染色性於病態對照群及20 mg/kg之hGAA投予群中全例為中等度，但於hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)2.5～20 mg/kg投予群中可見染色性之降低。關於血管之PAS染色性，於20 mg/kg之hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)投予群中可見染色性之降低。 海馬區、齒狀回(dentate gyrus)及基底核： 與病態對照群相比，於hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)20 mg/kg投予群中，可見細胞內及血管之PAS染色性之降低。於基底核中，於hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)2.5 mg/kg投予群及hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)5.0 mg/kg投予群中亦發現PAS染色性之降低。 間腦(Diencephalon)(丘腦、下丘腦)： 與病態對照群相比，於hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)2.5～20 mg/kg投予群中可見PAS染色性之降低。 中腦～腦橋： 於hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)5.0～20 mg/kg投予群中可見PAS染色性之降低。 髓質： 與病態對照群相比，於20 mg/kg之hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)投予群中可見PAS染色性之降低。 小腦： 於浦金埃氏細胞層、顆粒層中，與病態對照群相比，於2.5～20 mg/kg之hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)投予群中可見浦金埃氏細胞周圍之細胞內之PAS染色性的降低傾向。於白質中，於2.5 mg/kg及20 mg/kg之hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)投予群中可見PAS染色性之降低傾向。 股四頭肌： 與病態對照群相比，於5.0 mg/kg及10 mg/kg之hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)投予群中，可見PAS染色性之降低傾向，於20 mg/kg之hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)中可見染色性之顯著減少。 比目魚肌： 與病態對照群相比，於20 mg/kg之hGAA投予群、及10 mg/kg之hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)投予群中可見PAS染色性降低，進而於20 mg/kg之hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)投予群中，可見染色性之顯著減少。 繼而，以下探討HE染色之結果。 大腦皮質： 大腦皮質：與病態對照群相比，於5.0～20 mg/kg之hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)投予群中可見細胞腫大之減輕傾向。大腦白質(胼胝體(corpus callosum)、海馬繖(fimbria hippocampi)、前連合(anterior commissure))及腦室：與病態對照群相比，於20 mg/kg之hGAA投予群、5.0～20 mg/kg之hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)投予群中可見白質之囊泡之減少。 與髓質病態對照群相比，僅於20 mg/kg之hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)投予群中可見細胞腫脹之減輕傾向。 小腦： 關於白質之細胞腫脹，於20 mg/kg之hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)投予群中可見減輕傾向。 股四頭肌： 與病態對照群相比，於10 mg/kg之hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)投予群中可見肌纖維之囊泡、間隙形成之減輕傾向，於20 mg/kg之hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)投予群中可見進一步減輕化。 比目魚肌： 與病態對照群相比，於20 mg/kg之hGAA投予群、5.0～10 mg/kg之hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)投予群中可見肌纖維之囊泡、間隙形成之減輕，進而於20 mg/kg之hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)投予群中基本上未發現相同傾向。 趾長伸肌： 與病態對照群相比，於5.0 mg/kg之hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)投予群中可見肌纖維之囊泡、間隙形成之減輕，於10～20 mg/kg之hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)投予群中進一步發現減輕化。 以上之hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)之使用小鼠之藥效評價的結果顯示，藉由將hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)以5 mg/kg以上之用量進行投予，與將市售之hGAA以20 mg/kg投予之用量進行投予之情形相比，即便於病理組織學上亦作為龐貝氏症之治療藥具有效果，而顯示其效果於中樞神經系統及骨骼肌組織中極為顯著。 [實施例31]Fab抗hTfR抗體3N與hGAA之融合蛋白質(Fab GS-GAA)之製作 人工合成包含編碼序列編號89所示之人源化抗hTfR抗體之Fab重鏈與hGAA的融合蛋白質之基因之具有鹼基序列之DNA片段，將其組入至pE-neo載體之MluI與NotI之間，而構建表現載體pE-neo(Fab HC-GS-GAA)。此時，於編碼融合蛋白質之基因之5'末端側導入編碼作為分泌訊號發揮功能之前導肽之鹼基序列。利用pE-neo(Fab HC-GS-GAA)與實施例11中所構建之pE-hygr(LC3)將CHO細胞(CHO-K1：自美國菌種中心(American Type Culture Collection)獲取)轉形，而獲得表現作為Fab之抗hTfR抗體3N與hGAA之融合蛋白質(Fab GS-GAA)之細胞株。依據實施例22所記載之方法培養該表現株，而獲得培養上清液。將培養上清液注入經管柱體積5倍體積之含有100 mM NaCl之20 mM HEPES-NaOH緩衝液(pH值7.0)平衡化的作為CH1親和層析柱之CaptureSelect IgG-CH1管柱(管柱體積：約1.0 mL，Thermo Fisher公司)中，使融合蛋白質吸附至CH1親和層析柱。繼而，供給管柱體積5倍體積之含有100 mM NaCl之20 mM HEPES-NaOH緩衝液(pH值7.0)而將管柱洗淨。繼而，利用管柱體積5倍體積之含有50 mM NaCl之100 mM 甘胺酸緩衝液(pH值3.0)使吸附至CH1親和層析柱之融合蛋白質溶出。溶出液係接收至預先添加有1 M HEPES-NaOH緩衝液(pH值7.5)之容器中，立即進行中和。將以上述方式獲得者作為Fab GS-GAA之純化品而用於以下之實驗。 [實施例32]Fab GS-GAA之使用小鼠之藥效評價 以表19-2所示之用法、用量將實施例31中所獲得之Fab GS-GAA、或hGAA靜脈內投予至實施例28所記載之小鼠(GAA-KO/hTfR-KI小鼠)中。再者，將未投予藥劑之正常小鼠設為正常對照(第1群)，將未投予藥劑之GAA-KO/hTfR-KI小鼠設為病態對照(第2群)。各群均設為小鼠3～4隻。又，小鼠係使用雄性及雌性之9～14週齡(投予開始時)小鼠。於投予1週後，利用實施例29所記載之方法採取右腦、心臟、橫膈膜、股四頭肌、比目魚肌、脛骨前肌，對該組織所包含之肝糖之濃度進行測定。將測定結果示於圖12。於Fab GS-GAA投予群中，於測定了肝糖之濃度之全部器官中，與hGAA相比，肝糖均顯著地減少。其減少傾向尤其於右腦及心臟中顯著。又，於5.0 mg/kg之用量之Fab GS-GAA投予群中，亦與20 mg/kg之用量之hGAA投予群相比，於右腦及心臟中可見顯著之肝糖減少。該等結果顯示，Fab GS-GAA可用作龐貝氏症之治療藥、尤其是伴隨著作為腦及/或心臟之功能障礙之龐貝氏症的治療藥。 [表19-2]
Figure 106145827-A0304-0024
 [實施例33]各種人類溶酶體酶與人源化抗hTfR抗體之融合蛋白質之製作 人工合成包含編碼如下融合蛋白質之基因之具有鹼基序列的DNA片段，該融合蛋白質係具有表20-A～表20-C所示之序列編號之胺基酸序列之表20-A～表20-C中顯示為「融合蛋白質名」名稱之人源化抗hTfR抗體之重鏈(其中，關於scFab-IDUA係單鏈人源化抗hTfR抗體)、與各種人類溶酶體酶的融合蛋白質，將所獲得之DNA片段組入至pE-neo載體之MluI與NotI之間，而構建表現載體。此時，於編碼融合蛋白質之基因之5'末端側導入編碼作為分泌訊號發揮功能之前導肽之鹼基序列。將各表現載體之名稱示於表20-A～表20-C。利用所獲得之各表現載體與實施例11中所構建之pE-hygr(LC3)將CHO細胞(CHO-K1：自美國菌種中心(American Type Culture Collection)獲取)轉形，而獲得表現各種溶酶體酶與人源化抗hTfR抗體之融合蛋白質之細胞株。依據實施例22所記載之方法培養該表現株，而獲得培養上清液。 對於抗體為Fab者，藉由下述純化法1而生成培養上清液所包含之溶酶體酶與人源化抗hTfR抗體之融合蛋白質，對於抗體為包含重鏈之全長者，藉由下述純化法2而生成培養上清液所包含之溶酶體酶與人源化抗hTfR抗體之融合蛋白質。 純化法1：將培養上清液注入經管柱體積5倍體積之含有100 mM NaCl之20 mM HEPES-NaOH緩衝液(pH值7.0)平衡化的作為CH1親和層析柱之CaptureSelect IgG-CH1管柱(管柱體積：約1.0 mL，Thermo Fisher公司)中，使融合蛋白質吸附至CH1親和層析柱。繼而，供給管柱體積5倍體積之含有100 mM NaCl之20 mM HEPES-NaOH緩衝液(pH值7.0)而將管柱洗淨。繼而，利用管柱體積5倍體積之含有50 mM NaCl之100 mM 甘胺酸緩衝液(pH值3.0)使吸附至CH1親和層析柱之融合蛋白質溶出。溶出液係接收至預先添加有1 M HEPES-NaOH緩衝液(pH值7.5)之容器中，立即進行中和。 純化法2： 將培養上清液注入預先經管柱體積5倍體積之含有100 mM NaCl之20 mM HEPES-NaOH緩衝液(pH值7.0)平衡化的作為蛋白A親和層析柱之MabSelect SuRe LX管柱(管柱體積：約1.0 mL，GE Healthcare公司)中，使融合蛋白質吸附至蛋白A。繼而，供給管柱體積5倍體積之含有100 mM NaCl之20 mM HEPES-NaOH緩衝液(pH值7.0)而將管柱洗淨。繼而，利用管柱體積5倍體積之含有50 mM NaCl之100 mM 甘胺酸緩衝液(pH值3.0)使吸附至蛋白A之融合蛋白質溶出。溶出液係接收至預先添加有1 M HEPES-NaOH緩衝液(pH值7.5)之容器中，立即進行中和。 使用以上述方式獲得之融合蛋白質之純化品，實施下述之實驗。又，將以上述方式獲得之溶酶體酶與人源化抗hTfR抗體之融合蛋白質如表20-A～表20-C之最右列所示般命名。 [表20-A]
Figure 106145827-A0304-0025
 [表20-B]
Figure 106145827-A0304-0026
 [表20-C]
Figure 106145827-A0304-0027
 [實施例34]各種人類溶酶體酶與人源化抗hTfR抗體之融合蛋白質之對於人類TfR及猴TfR的親和性及酶活性之測定 對於人類TfR及猴TfR之親和性係藉由實施例7所記載之方法進行測定。人類溶酶體酶之活性係藉由下述方法進行測定。但是，hAC及hLAMAN之酶活性未測定。 hIDUA之活性測定： 利用包含0.1%BSA之50 mM檸檬酸緩衝液(pH值3.5)將所純化之hIDUA之抗TfR抗體融合蛋白質稀釋為適當濃度，於FLUORO PLATE F96(Nunc公司)之各孔中各添加20 μL。標準(standard)係使用4-甲基傘形酮(4-Methylumbelliferone)(4MU)(SIGMA公司)。繼而，於各孔中各添加60 μL之將作為受質之4-甲基傘形酮基α-L-Iduronide(glycosynth公司)利用同緩衝液稀釋為1 mM所得者。利用盤式攪拌器攪拌後，於37℃下反應1小時。反應後，於各孔中各添加200 μL之0.05 M甘胺酸/NaOH緩衝液(pH值10.6)而使反應終止，利用讀盤儀測定激發波長365 nm、檢測波長460 nm。再者，酶活性係將1 Unit定義為4 MUμmol/分鐘、37℃，求出蛋白質每單位重量(mg)之比活性。針對以下之融合蛋白質，亦求出比活性。 hPPT-1之活性測定： 利用包含0.2%BSA及0.00625% Triton X-100之0.4M Na2 HPO4 /0.2M檸檬酸緩衝液(pH值4.0)將β-葡糖苷酶(Oriental Yeast公司)稀釋為0.25 mg/mL，於FLUORO PLATE F96(Nunc公司)之各孔各添加20 μL。繼而，將所純化之hPPT-1之抗TfR抗體融合蛋白質利用同緩衝液稀釋為適當濃度，於各孔中各添加20 μL。標準(standard)係使用4-甲基傘形酮(4MU)(SIGMA公司)。繼而，將作為受質之4-甲基傘形酮基6-硫代棕櫚酸酯-β-D-葡萄哌喃糖苷(4-Methylumbelliferyl 6-Thio-palmitate-β-D-glucopyranoside)(Santa Cruz Biotechnology公司)利用同緩衝液稀釋為0.25 mM，於各孔中各添加20 μL。利用盤式攪拌器攪拌後，於37℃下反應1小時。反應後，於各孔中各添加150 μL之0.05 M甘胺酸/NaOH緩衝液(pH值10.6)而使反應終止，利用讀盤儀測定激發波長365 nm，檢測波長460 nm。再者，酶活性係將1 Unit定義為4 MUμmol/分鐘、37℃。 hASM之活性測定： 利用包含0.1 mM乙酸鋅、0.25 mg/mL BSA、及0.15%Tween20之250 mM乙酸緩衝液(pH值5.0)將所純化之hASM之抗TfR抗體融合蛋白質稀釋為適當濃度，於FLUORO PLATE F96(Nunc公司)之各孔中各添加20 μL。標準係使用4-甲基傘形酮(4MU)(SIGMA公司)。繼而，將作為受質之6-十六醯胺基-4-甲基傘形酮基磷酸膽鹼(6-Hexadecanoylamino-4-methylumbelliferyl phosphorylcholine)(Carbosynth公司)利用同緩衝液稀釋為1 mM，於各孔中各添加20 μL。利用盤式攪拌器攪拌後，於37℃下反應1小時。反應後，於各孔中各添加200 μL之0.05 M甘胺酸/NaOH緩衝液(pH值10.6)而使反應終止，利用讀盤儀測定激發波長365 nm，檢測波長460 nm。再者，酶活性係將1 Unit定義為4 MUμmol/分鐘，37℃，求出蛋白質每單位重量(mg)之比活性。 hARSA之活性測定： 利用包含0.5%BSA及1.0%Triton-X 100之50 mM乙酸緩衝液(pH值5.0)將所純化之hARSA之抗TfR抗體融合蛋白質稀釋為適當濃度，於FLUORO PLATE F96(Nunc公司)之各孔中各添加20 μL。標準係使用4-甲基傘形酮(4MU)(SIGMA公司)。繼而，將作為受質之4-甲基傘形酮基硫酸酯鉀鹽(4-methylumbelliferyl sulfate potassium salt)(SIGMA公司)利用同緩衝液稀釋為5 mM，於各孔中各添加100 μL。利用盤式攪拌器攪拌後，於37℃下反應1小時。反應後，於各孔中各添加150 μL之0.05 M甘胺酸/NaOH緩衝液(pH值10.6)而使反應終止，利用讀盤儀測定激發波長365 nm，檢測波長460 nm。再者，酶活性係將1 Unit定義為4 MUμmol/分鐘、37℃。 hSGSH之活性測定： 利用包含0.2%BSA之50 mM乙酸緩衝液(pH值5.0)將所純化之hSGSH之抗TfR抗體融合蛋白質稀釋為適當濃度，於FLUORO PLATE F96(Nunc公司)之各孔中各添加20 μL。標準係使用4-甲基傘形酮(4MU)(SIGMA公司)。繼而，將作為受質之4-甲基傘形酮基-2-去氧基-2-磺胺-α-D-葡萄哌喃糖苷(4-methylumbelliferyl 2-deoxy-2-sulfamino-α-D-glucopyranoside)(Carbosynth公司)利用同緩衝液稀釋為5 mM，於各孔中各添加20 μL。利用盤式攪拌器攪拌後，於37℃下反應2小時。反應後，於各孔中各添加20 μL之經同緩衝液稀釋之0.5 mg/mL α-葡糖苷酶(α-Glucosidase)(Oriental Yeast公司)，使之於37℃下反應17小時。反應後，於各孔中各添加150 μL之0.05 M甘胺酸/NaOH緩衝液(pH值10.6)而使反應終止，利用讀盤儀測定激發波長365 nm，檢測波長460 nm。再者，酶活性係將1 Unit定義為4 MUμmol/分鐘、37℃。 hGBA之活性測定： 利用包含0.1%BSA、0.15%Triton-X 100、及0.125%牛磺膽酸鈉之100 mM磷酸緩衝液(pH值6.0)將所純化之hGBA之抗TfR抗體融合蛋白質稀釋為適當濃度，於FLUORO PLATE F96(Nunc公司)之各孔中各添加20 μL。標準係使用4-甲基傘形酮(4MU)(SIGMA公司)。繼而，將作為受質之4-甲基傘形酮基β-D-葡萄哌喃糖苷(4-methylumbelliferyl β-D-glucopyranoside)(SIGMA公司)利用同緩衝液稀釋為3.5 mM，於各孔中各添加70 μL。利用盤式攪拌器攪拌後，於37℃下反應1小時。反應後，於各孔中各添加150 μL之0.05 M甘胺酸/NaOH緩衝液(pH值10.6)而反應終止，利用讀盤儀測定激發波長365 nm，檢測波長460 nm。再者，酶活性係將1 Unit定義為4 MUμmol/分鐘、37℃。 hTPP-1之活性測定： 利用包含150 mM NaCl及0.1%Triton-X 100之50 mM甲酸鈉緩衝液(pH值3.5)將所純化之hTPP-1之抗TfR抗體融合蛋白質稀釋為適當濃度，於37℃下預培養1小時。標準係使用7-胺基-4-甲基香豆素(7-Amino-4-methylcoumarin)(AMC)(SIGMA公司)，以相同方式進行處理。1小時後，於FLUORO PLATE F96(Nunc公司)之各孔中各添加20 μL。繼而，將作為受質之Ala-Ala-Phe-7-醯胺基-4-甲基香豆素(Ala-Ala-Phe-7-amido-4-methylcoumarin)(SIGMA公司)利用包含150 mM NaCl及0.1% Triton-X 100之100 mM乙酸緩衝液(pH值4.0)稀釋為25 mM，於各孔中各添加40 μL。利用盤式攪拌器攪拌後，於37℃下反應1小時。反應後，於各孔中各添加150 μL之100 mM單氯乙酸/130 mM NaOH/100 mM乙酸緩衝液(pH值4.3)而使反應終止，利用讀盤儀測定激發波長365 nm，檢測波長460 nm。再者，酶活性係將1 Unit定義為AMCμmol/分鐘，37℃。 hGAA之活性測定： 利用包含0.5%BSA之PBS(-)(pH值7.2)將所純化之hGAA之抗TfR抗體融合蛋白質稀釋為適當濃度，於FLUORO PLATE F96(Nunc公司)之各孔中各添加20 μL。標準係使用4-甲基傘形酮(4MU)(SIGMA公司)。繼而，將作為受質之4-甲基傘形酮基-a-D-葡萄哌喃糖苷(4-methylumbelliferyl-a-D-glucopyranoside)(SIGMA公司)利用200 mM乙酸緩衝液(pH值4.3)稀釋為2.2 mM，於各孔中各添加20 μL。利用盤式攪拌器攪拌後，於37℃下反應1小時。反應後，於各孔中各添加0.05 M甘胺酸/NaOH緩衝液(pH值10.6)而使反應終止，利用讀盤儀測定激發波長365 nm，檢測波長460 nm。再者，酶活性係將1 Unit定義為4 MUμmol/min，37℃。 hNAGLU之活性測定： 利用包含0.1%BSA之50 mM乙酸緩衝液(pH值4.3)將所純化之hNAGLU之抗TfR抗體融合蛋白質稀釋為適當濃度，於FLUORO PLATE F96(Nunc公司)之各孔中各添加20 μL。標準係使用4-甲基傘形酮(4MU)(SIGMA公司)。繼而，將作為受質之4-甲基傘形酮基-N-乙醯基-α-D-葡萄胺糖(4-methylumbelliferyl-N-acetyl-α-D-glucosaminide)(Calbiochem公司)利用同緩衝液稀釋為1 mM，於各孔中各添加20 μL。利用盤式攪拌器攪拌後，於37℃下反應1小時。反應後，於各孔中各添加150 μL之0.05 M甘胺酸/NaOH緩衝液(pH值10.6)而使反應終止，利用讀盤儀測定激發波長365 nm，檢測波長460 nm。再者，酶活性係將1 Unit定義為4MUμmol/min，37℃。 hGUSB之活性測定： 利用包含50 mM NaCl之25 mM乙酸緩衝液(pH值4.5)將所純化之hGUSB之抗TfR抗體融合蛋白質稀釋為適當濃度，於FLUORO PLATE F96(Nunc公司)之各孔中各添加20 μL。標準係使用4-甲基傘形酮(4MU)(SIGMA公司)。繼而，將作為受質之4-甲基傘形酮基-β-D-葡萄糖苷酸水合物 (4-methylumbelliferyl-β-D-glucuronide hydrate)(SIGMA公司)利用同緩衝液稀釋為2 mM，於各孔中各添加20 μL。利用盤式攪拌器攪拌後，於37℃下反應1小時。反應後，於各孔中各添加150 μL之0.05 M甘胺酸/NaOH緩衝液(pH值10.6)而使反應終止，利用讀盤儀測定激發波長365 nm，檢測波長460 nm。再者，酶活性係將1 Unit定義為4MUμmol/min，37℃。 hGALC之活性測定： 利用包含125 mM NaCl及0.5%Triton X-100之50 mM乙酸緩衝液(pH值4.5)將所純化之GALC之抗TfR抗體融合蛋白質稀釋為適當濃度，於FLUORO PLATE F96(Nunc公司)之各孔中各添加20 μL。標準係使用4-甲基傘形酮(4MU)(SIGMA公司)。繼而，將作為受質之4-甲基傘形酮基-β-D-哌喃半乳糖苷(4-methylumbelliferyl-β-D-galactopyranoside)(SIGMA公司)利用同緩衝液稀釋為1 mM，於各孔中各添加20 μL。利用盤式攪拌器攪拌後，於37℃下反應1小時。反應後，於各孔中各添加150 μL之0.05 M甘胺酸/NaOH緩衝液(pH值10.6)而使反應終止，利用讀盤儀測定激發波長365 nm，檢測波長460 nm。再者，酶活性係將1 Unit定義為4MUμmol/min，37℃。 hFUCA1之活性測定： 利用包含0.2%BSAl之100 mM檸檬酸緩衝液(pH值5.5)將所純化之FUCA1之抗TfR抗體融合蛋白質稀釋為適當濃度，於FLUORO PLATE F96(Nunc公司)之各孔中各添加20 μL。標準係使用4-甲基傘形酮(4MU)(SIGMA公司)。繼而，將作為受質之4MU-α-L-fucopyranoside(SIGMA公司)利用同緩衝液稀釋為2 mM，於各孔中各添加20 μL。利用盤式攪拌器攪拌後，於37℃下反應1小時。反應後，於各孔中各添加150 μL之0.05 M甘胺酸/NaOH緩衝液(pH值10.6)而使反應終止，利用讀盤儀測定激發波長365 nm，檢測波長460 nm。再者，酶活性係將1 Unit定義為4MUμmol/min，37℃。 於表21中表示各種人類溶酶體酶與人源化抗hTfR抗體之融合蛋白質之對於人類TfR及猴TfR的親和性及酶活性之測定。再者，親和性及酶活性之測定係僅對實施例33中所獲得之溶酶體酶與人源化抗hTfR抗體之融合蛋白質的一部分實施。即，對於人類TfR及猴TfR之親和性測定係僅對24種融合蛋白質實施，酶活性測定係僅對20種融合蛋白質實施。 測定了酶活性之融合蛋白質均為具有作為溶酶體酶之酶活性者。又，測定了與人類TfR之親和性之融合蛋白質均為與人類TfR具有較高之親和性者，即便是親和性最低者，其KD 值亦為2.09×10-10 ，19種融合蛋白質之KD 值未達1.00×10-12 。又，測定了與猴TfR之親和性之融合蛋白質均為與猴TfR具有較高之親和性者，即便是親和性最低者，其KD 值亦為3.05×10-8 ，12種融合蛋白質之KD 值未達1.00×10-12 。 此處所使用之抗hTfR抗體係重鏈為具有序列編號65所示之胺基酸序列作為可變區之重鏈(IgG)或Fab重鏈，輕鏈為具有序列編號18所示之胺基酸序列作為可變區者。該等結果顯示，藉由將溶酶體酶製成與包含該等胺基酸序列作為可變區者之融合蛋白質，可經由人類TfR通過BBB，且可於腦內發揮酶活性。 [表21]
Figure 106145827-A0304-0028
 [產生上之可利用性] 本發明之抗hTfR抗體可藉由與其融合而使所需之生理活性蛋白質、低分子物資等通過血腦障壁，因此作為提供將應於中樞神經系統中發揮作用之生理活性蛋白質、低分子物質等傳遞至腦內之方法者有用性較高。
1‧‧‧血管2‧‧‧腦實質3‧‧‧神經細胞4‧‧‧浦金埃氏細胞[序列表非關鍵文字] 序列編號3：連接子例1之胺基酸序列 序列編號4：連接子例2之胺基酸序列 序列編號5：連接子例3之胺基酸序列 序列編號6：小鼠抗hTfR抗體編號3之輕鏈CDR1之胺基酸序列1 序列編號7：小鼠抗hTfR抗體編號3之輕鏈CDR1之胺基酸序列2 序列編號8：小鼠抗hTfR抗體編號3之輕鏈CDR2之胺基酸序列1 序列編號9：小鼠抗hTfR抗體編號3之輕鏈CDR2之胺基酸序列2 序列編號10：小鼠抗hTfR抗體編號3之輕鏈CDR3之胺基酸序列 序列編號11：小鼠抗hTfR抗體編號3之重鏈CDR1之胺基酸序列1 序列編號12：小鼠抗hTfR抗體編號3之重鏈CDR1之胺基酸序列2 序列編號13：小鼠抗hTfR抗體編號3之重鏈CDR2之胺基酸序列1 序列編號14：小鼠抗hTfR抗體編號3之重鏈CDR2之胺基酸序列2 序列編號15：小鼠抗hTfR抗體編號3之重鏈CDR3之胺基酸序列1 序列編號16：小鼠抗hTfR抗體編號3之重鏈CDR3之胺基酸序列2 序列編號17：人源化抗hTfR抗體編號3之輕鏈之可變區之胺基酸序列1 序列編號18：人源化抗hTfR抗體編號3之輕鏈之可變區之胺基酸序列2 序列編號19：人源化抗hTfR抗體編號3之輕鏈之可變區之胺基酸序列3 序列編號20：人源化抗hTfR抗體編號3之輕鏈之可變區之胺基酸序列4 序列編號21：人源化抗hTfR抗體編號3之輕鏈之可變區之胺基酸序列5 序列編號22：人源化抗hTfR抗體編號3之輕鏈之可變區之胺基酸序列6 序列編號23：人源化抗hTfR抗體編號3之包含可變區之胺基酸序列2之輕鏈之胺基酸序列 序列編號24：編碼人源化抗hTfR抗體編號3之包含胺基酸序列2作為可變區之輕鏈之胺基酸序列的鹼基序列、合成序列 序列編號25：人源化抗hTfR抗體編號3之包含胺基酸序列4作為可變區之輕鏈之胺基酸序列 序列編號26：編碼人源化抗hTfR抗體編號3之包含胺基酸序列4作為可變區之輕鏈之胺基酸序列的鹼基序列、合成序列 序列編號27：人源化抗hTfR抗體編號3之包含胺基酸序列5作為可變區之輕鏈之胺基酸序列 序列編號28：編碼人源化抗hTfR抗體編號3之包含胺基酸序列5作為可變區之輕鏈之胺基酸序列的鹼基序列、合成序列 序列編號29：人源化抗hTfR抗體編號3之包含胺基酸序列6作為可變區之輕鏈之胺基酸序列 序列編號30：編碼人源化抗hTfR抗體編號3之包含胺基酸序列6作為可變區之輕鏈之胺基酸序列的鹼基序列、合成序列 序列編號31：人源化抗hTfR抗體編號3之重鏈之可變區之胺基酸序列1 序列編號32：人源化抗hTfR抗體編號3之重鏈之可變區之胺基酸序列2 序列編號33：人源化抗hTfR抗體編號3之重鏈之可變區之胺基酸序列3 序列編號34：人源化抗hTfR抗體編號3之重鏈之可變區之胺基酸序列4 序列編號35：人源化抗hTfR抗體編號3之重鏈之可變區之胺基酸序列5 序列編號36：人源化抗hTfR抗體編號3之重鏈之可變區之胺基酸序列6 序列編號37：人源化抗hTfR抗體編號3之包含胺基酸序列2作為可變區之重鏈之胺基酸序列 序列編號38：編碼人源化抗hTfR抗體編號3之包含胺基酸序列2作為可變區之重鏈之胺基酸序列的鹼基序列、合成序列 序列編號39：人源化抗hTfR抗體編號3之包含胺基酸序列2作為可變區之重鏈(IgG4)之胺基酸序列 序列編號40：編碼人源化抗hTfR抗體編號3之包含胺基酸序列2作為可變區之重鏈(IgG4)之胺基酸序列的鹼基序列、合成序列 序列編號41：引子hTfR5'、合成序列 序列編號42：引子hTfR3'、合成序列 序列編號43：引子Hyg-Sfi5'、合成序列 序列編號44：引子Hyg-BstX3'、合成序列 序列編號45：於編碼嵌合hTfR之cDNA之3'側配置有由loxP序列夾住之新黴素耐性基因之DNA的鹼基序列、合成序列 序列編號46：靶載體之5'連接臂序列、合成序列 序列編號47：靶載體之3'連接臂序列、合成序列 序列編號48：小鼠抗hTfR抗體編號3之輕鏈之可變區之胺基酸序列 序列編號49：小鼠抗hTfR抗體編號3之重鏈之可變區之胺基酸序列 序列編號51：抗hTfR抗體編號3之重鏈(人源化2)與hI2S之融合蛋白質之胺基酸序列 序列編號52：編碼抗hTfR抗體編號3之重鏈(人源化2)與hI2S之融合蛋白質之胺基酸序列的鹼基序列、合成序列 序列編號53：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈與hI2S之融合蛋白質之胺基酸序列 序列編號54：編碼人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈與hI2S之融合蛋白質之胺基酸序列的鹼基序列、合成序列 序列編號57：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈與hGAA之融合蛋白質之胺基酸序列 序列編號58：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hGAA之融合蛋白質之胺基酸序列 序列編號59：編碼人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hGAA之融合蛋白質之胺基酸序列的鹼基序列、合成序列 序列編號60：單鏈人源化抗hTfR抗體編號3N之胺基酸序列 序列編號61：人源化抗hTfR抗體編號3N之Fab重鏈之胺基酸序列 序列編號62：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈CDR1之胺基酸序列1 序列編號63：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈CDR1之胺基酸序列2 序列編號64：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈架構區3之胺基酸序列 序列編號65：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈之可變區之胺基酸序列 序列編號66：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈之胺基酸序列 序列編號67：編碼人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈之胺基酸序列之鹼基序列、合成序列 序列編號68：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)之胺基酸序列 序列編號69：編碼人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)之胺基酸序列之鹼基序列、合成序列 序列編號70：人類IgG之Fc區域之胺基酸序列之一例 序列編號71：導入有人類IgG Fc區域之人源化抗hTfR抗體3N之Fab重鏈之胺基酸序列 序列編號72：編碼導入有人類IgG Fc區域之人源化抗hTfR抗體3N之Fab重鏈之胺基酸序列的鹼基序列、合成序列 序列編號73：人源化抗hTfR抗體編號3之重鏈架構區3之胺基酸序列 序列編號74：白蛋白結合區域之胺基酸序列 序列編號75：人類IDUA之胺基酸序列1 序列編號76：人類IDUA之胺基酸序列2 序列編號77：人類PPT-1之胺基酸序列 序列編號78：人類ASM之胺基酸序列 序列編號79：人類ARSA之胺基酸序列 序列編號80：人類SGSH之胺基酸序列 序列編號81：人類GBA之胺基酸序列 序列編號82：人類TPP-1之胺基酸序列 序列編號83：人類NAGLU之胺基酸序列 序列編號84：人類GUSB之胺基酸序列 序列編號85：人類GALC之胺基酸序列 序列編號86：人類AC之胺基酸序列 序列編號87：人類FUCA1之胺基酸序列 序列編號88：人類LAMAN之胺基酸序列 序列編號89：人源化抗hTfR抗體編號3N之Fab重鏈與hGAA之融合蛋白質之胺基酸序列、Fab HC-GS3-GAA 序列編號90：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hIDUA之融合蛋白質之胺基酸序列、IgG4 HC-IDUA 序列編號91：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hIDUA之融合蛋白質之胺基酸序列、IgG4 HC-GS8-IDUA 序列編號92：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hIDUA之融合蛋白質之胺基酸序列、IgG4 HC-GS20-IDUA 序列編號93：人源化抗hTfR抗體編號3N之Fab重鏈與hIDUA之融合蛋白質之胺基酸序列、Fab HC-GS3-IDUA 序列編號94：人源化抗hTfR抗體編號3N之Fab重鏈與hIDUA之融合蛋白質之胺基酸序列、Fab HC-GS5-IDUA 序列編號95：人源化抗hTfR抗體編號3N之Fab重鏈與hIDUA之融合蛋白質之胺基酸序列、Fab HC-GS10-IDUA 序列編號96：人源化抗hTfR抗體編號3N之Fab重鏈與hIDUA之融合蛋白質之胺基酸序列、Fab HC-GS20-IDUA 序列編號97：人源化抗hTfR抗體編號3N之Fab重鏈與hIDUA之融合蛋白質之胺基酸序列、Tandem Fab HC-IDUA 序列編號98：單鏈人源化抗hTfR抗體編號3N(2)之胺基酸序列 序列編號99：單鏈人源化抗hTfR抗體編號3N與IDUA之融合蛋白質之胺基酸序列、scFab-IDUA 序列編號100：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hPPT-1之融合蛋白質之胺基酸序列、IgG4 HC-PPT1 序列編號101：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hPPT-1之融合蛋白質之胺基酸序列、IgG4 HC-GS5-PPT1 序列編號102：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hPPT-1之融合蛋白質之胺基酸序列、IgG4 HC-GS10-PPT1 序列編號103：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hPPT-1之融合蛋白質之胺基酸序列、IgG4 HC-GS20-PPT1 序列編號104：人源化抗hTfR抗體編號3N之Fab重鏈與hPPT-1之融合蛋白質之胺基酸序列、Fab HC-GS3-PPT1 序列編號105：人源化抗hTfR抗體編號3N之Fab重鏈與hPPT-1之融合蛋白質之胺基酸序列、Tandem Fab HC-PPT1 序列編號106：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hASM之融合蛋白質之胺基酸序列、IgG4 HC-ASM 序列編號107：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hASM之融合蛋白質之胺基酸序列、IgG4 HC-GS5-ASM 序列編號108：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hASM之融合蛋白質之胺基酸序列、IgG4 HC-GS10-ASM 序列編號109：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hASM之融合蛋白質之胺基酸序列、IgG4 HC-GS20-ASM 序列編號110：人源化抗hTfR抗體編號3N之Fab重鏈與hASM之融合蛋白質之胺基酸序列、Fab HC-GS3-ASM 序列編號111：人源化抗hTfR抗體編號3N之Fab重鏈與hASM之融合蛋白質之胺基酸序列、Fab HC-GS5-ASM 序列編號112：人源化抗hTfR抗體編號3N之Fab重鏈與hASM之融合蛋白質之胺基酸序列、Fab HC-GS10-ASM 序列編號113：人源化抗hTfR抗體編號3N之Fab重鏈與hASM之融合蛋白質之胺基酸序列、Fab HC-GS20-ASM 序列編號114：人源化抗hTfR抗體編號3N之Fab重鏈與hASM之融合蛋白質之胺基酸序列、Tandem Fab HC-ASM 序列編號115：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hARSA之融合蛋白質之胺基酸序列、IgG4 HC-ARSA 序列編號116：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hARSA之融合蛋白質之胺基酸序列、IgG4 HC-GS5-ARSA 序列編號117：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hARSA之融合蛋白質之胺基酸序列、IgG4 HC-GS10-ARSA 序列編號118：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hARSA之融合蛋白質之胺基酸序列、IgG4 HC-GS20-ARSA 序列編號119：人源化抗hTfR抗體編號3N之Fab重鏈與hARSA之融合蛋白質之胺基酸序列、Fab HC-GS3-ARSA 序列編號120：人源化抗hTfR抗體編號3N之Fab重鏈與hARSA之融合蛋白質之胺基酸序列、Fab HC-GS5-ARSA 序列編號121：人源化抗hTfR抗體編號3N之Fab重鏈與hARSA之融合蛋白質之胺基酸序列、Fab HC-GS10-ARSA 序列編號122：人源化抗hTfR抗體編號3N之Fab重鏈與hARSA之融合蛋白質之胺基酸序列、Fab HC-GS20-ARSA 序列編號123：人源化抗hTfR抗體編號3N之Fab重鏈與hARSA之融合蛋白質之胺基酸序列、Tandem Fab HC-ARSA 序列編號124：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hSGSH之融合蛋白質之胺基酸序列、IgG4 HC-SGSH 序列編號125：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hSGSH之融合蛋白質之胺基酸序列、IgG4 HC-GS5-SGSH 序列編號126：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hSGSH之融合蛋白質之胺基酸序列、IgG4 HC-GS10-SGSH 序列編號127：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hSGSH之融合蛋白質之胺基酸序列、IgG4 HC-GS20-SGSH 序列編號128：人源化抗hTfR抗體編號3N之Fab重鏈與hSGSH之融合蛋白質之胺基酸序列、Fab HC-GS3-SGSH 序列編號129：人源化抗hTfR抗體編號3N之Fab重鏈與hSGSH之融合蛋白質之胺基酸序列、Tandem Fab HC-SGSH 序列編號130：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hGBA之融合蛋白質之胺基酸序列、IgG4 HC-GBA 序列編號131：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hGBA之融合蛋白質之胺基酸序列、IgG4 HC-GS5-GBA 序列編號132：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hGBA之融合蛋白質之胺基酸序列、IgG4 HC-GS10-GBA 序列編號133：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hGBA之融合蛋白質之胺基酸序列、IgG4 HC-GS20-GBA 序列編號134：人源化抗hTfR抗體編號3N之Fab重鏈與hGBA之融合蛋白質之胺基酸序列、Fab HC-GS3-GBA 序列編號135：人源化抗hTfR抗體編號3N之Fab重鏈與hGBA之融合蛋白質之胺基酸序列、Tandem Fab HC-GBA 序列編號136：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hTPP-1之融合蛋白質之胺基酸序列、IgG4 HC-TPP1 序列編號137：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hTPP-1之融合蛋白質之胺基酸序列、IgG4 HC-GS5-TPP1 序列編號138：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hTPP-1之融合蛋白質之胺基酸序列、IgG4 HC-GS10-TPP1 序列編號139：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hTPP-1之融合蛋白質之胺基酸序列、IgG4 HC-GS20-TPP1 序列編號140：人源化抗hTfR抗體編號3N之Fab重鏈與hTPP-1之融合蛋白質之胺基酸序列、Fab HC-GS3-TPP1 序列編號141：人源化抗hTfR抗體編號3N之Fab重鏈與hTPP-1之融合蛋白質之胺基酸序列、Tandem Fab HC-TPP1 序列編號142：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hNAGLU之融合蛋白質之胺基酸序列、IgG4 HC-NAGLU 序列編號143：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hNAGLU之融合蛋白質之胺基酸序列、IgG4 HC-GS5-NAGLU 序列編號144：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hNAGLU之融合蛋白質之胺基酸序列、IgG4 HC-GS10-NAGLU 序列編號145：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hNAGLU之融合蛋白質之胺基酸序列、IgG4 HC-GS20-NAGLU 序列編號146：人源化抗hTfR抗體編號3N之Fab重鏈與hNAGLU之融合蛋白質之胺基酸序列、Fab HC-GS3-NAGLU 序列編號147：人源化抗hTfR抗體編號3N之Fab重鏈與hNAGLU之融合蛋白質之胺基酸序列、Fab HC-GS5-NAGLU 序列編號148：人源化抗hTfR抗體編號3N之Fab重鏈與hNAGLU之融合蛋白質之胺基酸序列、Fab HC-GS10-NAGLU 序列編號149：人源化抗hTfR抗體編號3N之Fab重鏈與hNAGLU之融合蛋白質之胺基酸序列、Fab HC-GS20-NAGLU 序列編號150：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hGUSB之融合蛋白質之胺基酸序列、IgG4 HC-GUSB 序列編號151：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hGUSB之融合蛋白質之胺基酸序列、IgG4 HC-GS5-GUSB 序列編號152：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hGUSB之融合蛋白質之胺基酸序列、IgG4 HC-GS10-GUSB 序列編號153：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hGUSB之融合蛋白質之胺基酸序列、IgG4 HC-GS20-GUSB 序列編號154：人源化抗hTfR抗體編號3N之Fab重鏈與hGUSB之融合蛋白質之胺基酸序列、Fab HC-GS3-GUSB 序列編號155：人源化抗hTfR抗體編號3N之Fab重鏈與hGUSB之融合蛋白質之胺基酸序列、Fab HC-GS5-GUSB 序列編號156：人源化抗hTfR抗體編號3N之Fab重鏈與hGUSB之融合蛋白質之胺基酸序列、Fab HC-GS10-GUSB 序列編號157：人源化抗hTfR抗體編號3N之Fab重鏈與hGUSB之融合蛋白質之胺基酸序列、Fab HC-GS20-GUSB 序列編號158：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hGALC之融合蛋白質之胺基酸序列、IgG4 HC-GALC 序列編號159：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hGALC之融合蛋白質之胺基酸序列、IgG4 HC-GS5-GALC 序列編號160：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hGALC之融合蛋白質之胺基酸序列、IgG4 HC-GS10-GALC 序列編號161：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hGALC之融合蛋白質之胺基酸序列、IgG4 HC-GS20-GALC 序列編號162：人源化抗hTfR抗體編號3N之Fab重鏈與hGALC之融合蛋白質之胺基酸序列、Fab HC-GS3-GALC 序列編號163：人源化抗hTfR抗體編號3N之Fab重鏈與hGALC之融合蛋白質之胺基酸序列、Fab HC-GS5-GALC 序列編號164：人源化抗hTfR抗體編號3N之Fab重鏈與hGALC之融合蛋白質之胺基酸序列、Fab HC-GS10-GALC 序列編號165：人源化抗hTfR抗體編號3N之Fab重鏈與hGALC之融合蛋白質之胺基酸序列、Fab HC-GS20-GALC 序列編號166：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hAC之融合蛋白質之胺基酸序列、IgG4 HC-AC 序列編號167：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hAC之融合蛋白質之胺基酸序列、IgG4 HC-GS5-AC 序列編號168：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hAC之融合蛋白質之胺基酸序列、IgG4 HC-GS10-AC 序列編號169：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hAC之融合蛋白質之胺基酸序列、IgG4 HC-GS20-AC 序列編號170：人源化抗hTfR抗體編號3N之Fab重鏈與hAC之融合蛋白質之胺基酸序列、Fab HC-GS3-AC 序列編號171：人源化抗hTfR抗體編號3N之Fab重鏈與hAC之融合蛋白質之胺基酸序列、Fab HC-GS5-AC 序列編號172：人源化抗hTfR抗體編號3N之Fab重鏈與hAC之融合蛋白質之胺基酸序列、Fab HC-GS10-AC 序列編號173：人源化抗hTfR抗體編號3N之Fab重鏈與hAC之融合蛋白質之胺基酸序列、Fab HC-GS20-AC 序列編號174：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hFUCA1之融合蛋白質之胺基酸序列、IgG4 HC-FUCA1 序列編號175：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hFUCA1之融合蛋白質之胺基酸序列、IgG4 HC-GS5-FUCA1 序列編號176：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hFUCA1之融合蛋白質之胺基酸序列、IgG4 HC-GS10-FUCA1 序列編號177：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hFUCA1之融合蛋白質之胺基酸序列、IgG4 HC-GS20-FUCA1 序列編號178：人源化抗hTfR抗體編號3N之Fab重鏈與hFUCA1之融合蛋白質之胺基酸序列、Fab HC-GS3-FUCA1 序列編號179：人源化抗hTfR抗體編號3N之Fab重鏈與hFUCA1之融合蛋白質之胺基酸序列、Fab HC-GS5-FUCA1 序列編號180：人源化抗hTfR抗體編號3N之Fab重鏈與hFUCA1之融合蛋白質之胺基酸序列、Fab HC-GS10-FUCA1 序列編號181：人源化抗hTfR抗體編號3N之Fab重鏈與hFUCA1之融合蛋白質之胺基酸序列、Fab HC-GS20-FUCA1 序列編號182：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hLAMAN之融合蛋白質之胺基酸序列、IgG4 HC-LAMAN 序列編號183：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hLAMAN之融合蛋白質之胺基酸序列、IgG4 HC-GS5-LAMAN 序列編號184：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hLAMAN之融合蛋白質之胺基酸序列、IgG4 HC-GS10-LAMAN 序列編號185：人源化抗hTfR抗體編號3N之重鏈(IgG4)與hLAMAN之融合蛋白質之胺基酸序列、IgG4 HC-GS20-LAMAN 序列編號186：人源化抗hTfR抗體編號3N之Fab重鏈與hLAMAN之融合蛋白質之胺基酸序列、Fab HC-GS3-LAMAN 序列編號187：人源化抗hTfR抗體編號3N之Fab重鏈與hLAMAN之融合蛋白質之胺基酸序列、Fab HC-GS5-LAMAN 序列編號188：人源化抗hTfR抗體編號3N之Fab重鏈與hLAMAN之融合蛋白質之胺基酸序列、Fab HC-GS10-LAMAN 序列編號189：人源化抗hTfR抗體編號3N之Fab重鏈與hLAMAN之融合蛋白質之胺基酸序列、Fab HC-GS20-LAMAN
圖1係表示將抗hTfR抗體單次靜脈內投予後之食蟹猴之大腦皮質之關於抗hTfR抗體的免疫組織化學染色之結果之圖式代用照片。(a)係不投予抗hTfR抗體，(b)係投予抗hTfR抗體編號3。各照片之右下之欄係表示50 μm之標準尺寸(gauge)。 圖2係表示將抗hTfR抗體單次靜脈內投予後之食蟹猴之海馬區之關於抗hTfR抗體的免疫組織化學染色之結果之圖。(a)係不投予抗hTfR抗體，(b)係投予抗hTfR抗體編號3。各照片之右下之欄係表示50 μm之標準尺寸(gauge)。 圖3係表示將抗hTfR抗體單次靜脈內投予後之食蟹猴之小腦之關於抗hTfR抗體的免疫組織化學染色之結果之圖式代用照片。(a)係不投予抗hTfR抗體，(b)係投予抗hTfR抗體編號3。各照片之右下之欄係表示50 μm之標準尺寸(gauge)。 圖4係表示單次靜脈內投予後之人源化抗hTfR抗體對於食蟹猴之腦以外之各種器官的儲積量之圖。縱軸係表示各器官之每單位濕重量之人源化抗hTfR抗體之量(μg/g濕重量)。白欄係自左依序分別投予人源化抗hTfR抗體編號3、人源化抗hTfR抗體編號3-2、人源化抗hTfR抗體編號3(IgG4)、及人源化抗hTfR抗體編號3-2(IgG4)，黑欄係表示投予了曲妥珠單抗(赫賽汀(Herceptin)TM )之猴之各器官中之儲積量。ND意指未測定。 圖5係表示單次靜脈內投予後之食蟹猴之大腦皮質之關於人源化抗hTfR抗體的免疫組織化學染色之結果之圖式代用照片。(a)係投予赫賽汀(Herceptin)，(b)係投予人源化抗hTfR抗體編號3，(c)係投予人源化抗hTfR抗體編號3-2，(d)係投予人源化抗hTfR抗體編號3(IgG4)，(e)係投予人源化抗hTfR抗體編號3-2(IgG4)。各照片之右下之欄係表示20 μm之標準尺寸(gauge)。 圖6係表示單次靜脈內投予後之食蟹猴之海馬區之關於人源化抗hTfR抗體的免疫組織化學染色之結果之圖。(a)係投予赫賽汀(Herceptin)，(b)係投予人源化抗hTfR抗體編號3，(c)係投予人源化抗hTfR抗體編號3-2，(d)係投予人源化抗hTfR抗體編號3(IgG4)，(e)係投予人源化抗hTfR抗體編號3-2(IgG4)。各照片之右下之欄係表示20 μm之標準尺寸(gauge)。 圖7係表示單次靜脈內投予後之食蟹猴之小腦之關於人源化抗hTfR抗體的免疫組織化學染色之結果之圖。(a)係投予赫賽汀(Herceptin)，(b)係投予人源化抗hTfR抗體編號3，(c)係投予人源化抗hTfR抗體編號3-2，(d)係投予人源化抗hTfR抗體編號3(IgG4)，(e)係投予人源化抗hTfR抗體編號3-2(IgG4)。各照片之右下之欄係表示20 μm之標準尺寸(gauge)。 圖8係表示單次靜脈內投予後之食蟹猴之髓質之關於人源化抗hTfR抗體的免疫組織化學染色之結果之圖。(a)係投予赫賽汀(Herceptin)，(b)係投予人源化抗hTfR抗體編號3，(c)係投予人源化抗hTfR抗體編號3-2，(d)係投予人源化抗hTfR抗體編號3(IgG4)，(e)係投予人源化抗hTfR抗體編號3-2(IgG4)。各照片之右下之欄係表示20 μm之標準尺寸(gauge)。 圖9係表示單次靜脈內投予後之食蟹猴之小腦之關於hGAA的免疫組織化學染色之結果之圖。(a)係投予hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)，(b)係投予hGAA。各照片之右下之欄係表示20 μm之標準尺寸(gauge)。 圖10係表示hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)之使用小鼠之藥效評價之結果的圖。(a)係表示右腦中之肝糖濃度，(b)係表示脊髓頸部中之肝糖濃度，(c)係表示心臟中之肝糖濃度，(d)係表示橫膈膜中之肝糖濃度，(e)係表示肝臟中之肝糖濃度，(f)係表示脾臟中之肝糖濃度。各圖中，1係表示正常對照群，2係表示病態對照群，3係表示hGAA之20 mg/kg投予群，4～7係分別表示hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)之2.5 mg/kg、5.0 mg/kg、10 mg/kg、20 mg/kg投予群。縱軸係表示肝糖濃度(mg/g濕重量)。縱欄係表示SD，#係表示與病態對照群之比較且為p＜0.01，##係表示與病態對照群之比較且為p＜0.05，$係表示與hGAA投予群之比較且為p＜0.01，$$係表示與hGAA投予群之比較且為p＜0.05(均為Tukey HSD試驗)。 圖11係表示hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)之使用小鼠之藥效評價之結果的圖。(a)係表示股四頭肌中之肝糖濃度，(b)係表示腓肚肌中之肝糖濃度，(c)係表示比目魚肌中之肝糖濃度，(d)係表示脛骨前肌中之之肝糖濃度，(e)係表示伸趾長肌腓肚中之肝糖濃度。各圖中，1係表示正常對照群，2係表示病態對照群，3係表示hGAA投予群，4～7係分別表示hGAA-抗hTfR抗體3N(IgG4)之2.5 mg/kg、5.0 mg/kg、10 mg/kg、20 mg/kg投予群。縱軸係表示肝糖濃度(mg/g濕重量)。縱欄係表示SD，#係表示與病態對照群之比較且為p＜0.01，##係表示與病態對照群之比較且為p＜0.05，$係表示與hGAA投予群之比較且為p＜0.01，$$係表示與hGAA投予群之比較且為p＜0.05(均為Tukey HSD試驗)。 圖12係表示Fab GS-GAA之使用小鼠之藥效評價之結果之圖。(a)係表示右腦中之肝糖濃度，(b)係表示心臟中之肝糖濃度，(c)係表示橫膈膜中之肝糖濃度，(d)係表示股四頭肌中之肝糖濃度，(e)係表示比目魚肌中之肝糖濃度，(f)係表示脛骨前肌中之肝糖濃度。各圖中，1係表示正常對照群，2係表示病態對照群，3係表示hGAA投予群，4及5係分別表示Fab GS-GAA之5.0 mg/kg、20 mg/kg投予群。縱軸係表示肝糖濃度(mg/g濕重量)。縱欄係表示SD。
<110> 日商JCR製藥股份有限公司(JCR PHARMACEUTICALS CO.,LTD.)
<120> 通過血腦障壁之新穎抗人類運鐵蛋白受體抗體
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<170> PatentIn第3.5版
<210> 1
<211> 760
<212> PRT
<213> 智人
<400> 1
Figure 106145827-A0305-02-0229-1
Figure 106145827-A0305-02-0230-2
Figure 106145827-A0305-02-0231-3
Figure 106145827-A0305-02-0232-4
<210> 2
<211> 760
<212> PRT
<213> 食蟹獼猴
<400> 2
Figure 106145827-A0305-02-0232-5
Figure 106145827-A0305-02-0233-6
Figure 106145827-A0305-02-0234-7
Figure 106145827-A0305-02-0235-8
<210> 3
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 例示連接子1之胺基酸序列
<400> 3
Figure 106145827-A0305-02-0235-9
<210> 4
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 例示連接子2之胺基酸序列
<400> 4
Figure 106145827-A0305-02-0235-10
<210> 5
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 例示連接子3之胺基酸序列
<400> 5
Figure 106145827-A0305-02-0235-11
<210> 6
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 小鼠抗hTfR抗體3號之輕鏈中的CDR 1的胺基酸序列1
<400> 6
Figure 106145827-A0305-02-0235-12
<210> 7
<211> 16
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 小鼠抗hTfR抗體3號之輕鏈中的CDR 1的胺基酸序列2
<400> 7
Figure 106145827-A0305-02-0236-13
<210> 8
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 小鼠抗hTfR抗體3號之輕鏈中的CDR 2的胺基酸序列1
<400> 8
Figure 106145827-A0305-02-0236-14
<210> 9
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 小鼠抗hTfR抗體3號之輕鏈中的CDR 2的胺基酸序列2
<400> 9
Figure 106145827-A0305-02-0236-15
<210> 10
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 小鼠抗hTfR抗體3號之輕鏈中的CDR 3的胺基酸序列
<400> 10
Figure 106145827-A0305-02-0236-16
<210> 11
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 小鼠抗hTfR抗體3號之重鏈中的CDR 1的胺基酸序列1
<400> 11
Figure 106145827-A0305-02-0237-17
<210> 12
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 小鼠抗hTfR抗體3號之重鏈中的CDR 1的胺基酸序列2
<400> 12
Figure 106145827-A0305-02-0237-18
<210> 13
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 小鼠抗hTfR抗體3號之重鏈中的CDR 2的胺基酸序列1
<400> 13
Figure 106145827-A0305-02-0237-19
<210> 14
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 小鼠抗hTfR抗體3號之重鏈中的CDR 2的胺基酸序列2
<400> 14
Figure 106145827-A0305-02-0237-20
<210> 15
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 小鼠抗hTfR抗體3號之重鏈中的CDR 3的胺基酸序列1
<400> 15
Figure 106145827-A0305-02-0238-21
<210> 16
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 小鼠抗hTfR抗體3號之重鏈中的CDR 3的胺基酸序列2
<400> 16
Figure 106145827-A0305-02-0238-22
<210> 17
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3號之輕鏈的可變區的胺基酸序列1
<400> 17
Figure 106145827-A0305-02-0238-23
<210> 18
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3號之輕鏈的可變區的胺基酸序列2
<400> 18
Figure 106145827-A0305-02-0239-24
<210> 19
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3號之輕鏈的可變區的胺基酸序列3
<400> 19
Figure 106145827-A0305-02-0239-25
Figure 106145827-A0305-02-0240-26
<210> 20
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3號之輕鏈的可變區的胺基酸序列4
<400> 20
Figure 106145827-A0305-02-0240-27
<210> 21
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3號之輕鏈的可變區的胺基酸序列5
<400> 21
Figure 106145827-A0305-02-0240-28
Figure 106145827-A0305-02-0241-29
<210> 22
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3號之輕鏈的可變區的胺基酸序列6
<400> 22
Figure 106145827-A0305-02-0241-30
<210> 23
<211> 219
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 包含胺基酸序列2作為可變區之人類化抗hTfR抗體3號的輕鏈的胺基酸序列
<400> 23
Figure 106145827-A0305-02-0242-31
<210> 24
<211> 740
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 編碼包含胺基酸序列2作為可變區之人類化抗hTfR抗體3號之輕鏈之胺基酸序列的核苷酸序列，合成序列
<400> 24
Figure 106145827-A0305-02-0243-32
<210> 25
<211> 219
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 包含胺基酸序列4作為可變區之人類化抗hTfR抗體3號之輕鏈之胺基酸序列
<400> 25
Figure 106145827-A0305-02-0243-33
Figure 106145827-A0305-02-0244-34
<210> 26
<211> 740
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 編碼包含胺基酸序列4作為可變區之人類化抗hTfR抗體3號之輕鏈之胺基酸序列的核苷酸序列，合成序列
<400> 26
Figure 106145827-A0305-02-0244-35
<210> 27
<211> 219
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 包含胺基酸序列5作為可變區之人類化抗hTfR抗體3號之輕鏈之胺基酸序列
<400> 27
Figure 106145827-A0305-02-0245-36
<210> 28
<211> 740
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 編碼包含胺基酸序列5作為可變區之人類化抗hTfR抗體3號之輕鏈之胺基酸序列的核苷酸序列，合成序列
<400> 28
Figure 106145827-A0305-02-0246-37
<210> 29
<211> 219
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 包含胺基酸序列6作為可變區之人類化抗hTfR抗體3號之輕鏈之胺基酸序列
<400> 29
Figure 106145827-A0305-02-0246-38
Figure 106145827-A0305-02-0247-39
<210> 30
<211> 740
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 編碼包含胺基酸序列6作為可變區之人類化抗hTfR抗體3號之輕鏈之胺基酸序列的核苷酸序列，合成序列
<400> 30
Figure 106145827-A0305-02-0247-41
Figure 106145827-A0305-02-0248-42
<210> 31
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3號之重鏈的可變區的胺基酸序列1
<400> 31
Figure 106145827-A0305-02-0248-43
<210> 32
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3號之重鏈的可變區的胺基酸序列2
<400> 32
Figure 106145827-A0305-02-0248-44
Figure 106145827-A0305-02-0249-45
<210> 33
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3號之重鏈的可變區的胺基酸序列3
<400> 33
Figure 106145827-A0305-02-0249-46
Figure 106145827-A0305-02-0250-47
<210> 34
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3號之重鏈的可變區的胺基酸序列4
<400> 34
Figure 106145827-A0305-02-0250-48
<210> 35
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3號之重鏈的可變區的胺基酸序列5
<400> 35
Figure 106145827-A0305-02-0250-49
Figure 106145827-A0305-02-0251-50
<210> 36
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3號之重鏈的可變區的胺基酸序列6
<400> 36
Figure 106145827-A0305-02-0251-51
<210> 37
<211> 448
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 包含胺基酸序列2作為可變區之人類化抗hTfR抗體3號之重鏈之胺基酸序列
<400> 37
Figure 106145827-A0305-02-0252-52
Figure 106145827-A0305-02-0253-53
<210> 38
<211> 1427
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 編碼包含胺基酸序列2作為可變區之人類化抗hTfR抗體3號之重鏈的胺基酸序列的核苷酸序列，合成序列
<400> 38
Figure 106145827-A0305-02-0254-750
<210> 39
<211> 445
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 包含胺基酸序列2作為可變區之人類化抗hTfR抗體3號之重鏈(IgG4)之胺基酸序列
<400> 39
Figure 106145827-A0305-02-0254-55
Figure 106145827-A0305-02-0255-56
Figure 106145827-A0305-02-0256-57
<210> 40
<211> 1418
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 編碼包含胺基酸序列2作為可變區之人類化抗hTfR抗體3號之重鏈(IgG4)之胺基酸序列的核苷酸序列，合成序列
<400> 40
Figure 106145827-A0305-02-0256-58
Figure 106145827-A0305-02-0257-59
<210> 41
<211> 43
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引子hTfR5'，合成序列
<400> 41
Figure 106145827-A0305-02-0257-60
<210> 42
<211> 59
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引子hTfR3'，合成序列
<400> 42
Figure 106145827-A0305-02-0257-61
<210> 43
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引子Hyg-Sfi5'，合成序列
<400> 43
Figure 106145827-A0305-02-0257-751
<210> 44
<211> 29
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 引子Hyg-BstX3'，合成序列
<400> 44
Figure 106145827-A0305-02-0258-63
<210> 45
<211> 4460
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> "由編碼嵌合hTfR之cDNA形成之DNA之核苷酸序列與置於cDNA's 3'側之側接loxP之新黴素抗性基因，合成序列"
<400> 45
Figure 106145827-A0305-02-0258-64
Figure 106145827-A0305-02-0259-65
Figure 106145827-A0305-02-0260-66
<210> 46
<211> 5003
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 靶向載體之5'臂之核苷酸序列，合成序列
<400> 46
Figure 106145827-A0305-02-0260-67
Figure 106145827-A0305-02-0261-68
Figure 106145827-A0305-02-0262-69
Figure 106145827-A0305-02-0263-70
<210> 47
<211> 2604
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 靶向載體之3'臂之核苷酸序列，合成序列
<400> 47
Figure 106145827-A0305-02-0263-71
Figure 106145827-A0305-02-0264-72
<210> 48
<211> 113
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 小鼠抗hTfR抗體3號之輕鏈的可變區的胺基酸序列
<400> 48
Figure 106145827-A0305-02-0264-73
Figure 106145827-A0305-02-0265-74
<210> 49
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 小鼠抗hTfR抗體3號之重鏈的可變區的胺基酸序列
<400> 49
Figure 106145827-A0305-02-0265-75
Figure 106145827-A0305-02-0266-76
<210> 50
<211> 525
<212> PRT
<213> 智人
<400> 50
Figure 106145827-A0305-02-0266-77
Figure 106145827-A0305-02-0267-78
Figure 106145827-A0305-02-0268-79
<210> 51
<211> 975
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗hTfR抗體3號(人類化2)之重鏈與hI2S之融合蛋白質的胺基酸序列
<400> 51
Figure 106145827-A0305-02-0268-80
Figure 106145827-A0305-02-0269-81
Figure 106145827-A0305-02-0270-82
Figure 106145827-A0305-02-0271-83
<210> 52
<211> 3011
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 編碼抗hTfR抗體3號(人類化2)之重鏈與hI2S之融合蛋白質的胺基酸序列的核苷酸序列，合成序列
<400> 52
Figure 106145827-A0305-02-0272-85
Figure 106145827-A0305-02-0273-86
<210> 53
<211> 975
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈與hI2S之融合蛋白質的胺基酸序列
<400> 53
Figure 106145827-A0305-02-0273-87
Figure 106145827-A0305-02-0274-88
Figure 106145827-A0305-02-0275-89
Figure 106145827-A0305-02-0276-90
Figure 106145827-A0305-02-0277-91
<210> 54
<211> 3011
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 編碼人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈與hI2S之融合蛋白質的胺基酸序列的核苷酸序列，合成序列
<400> 54
Figure 106145827-A0305-02-0277-92
Figure 106145827-A0305-02-0278-93
Figure 106145827-A0305-02-0279-94
<210> 55
<211> 883
<212> PRT
<213> 智人
<400> 55
Figure 106145827-A0305-02-0279-95
Figure 106145827-A0305-02-0280-96
Figure 106145827-A0305-02-0281-97
Figure 106145827-A0305-02-0282-98
<210> 56
<211> 896
<212> PRT
<213> 智人
<400> 56
Figure 106145827-A0305-02-0282-100
Figure 106145827-A0305-02-0283-101
Figure 106145827-A0305-02-0284-102
Figure 106145827-A0305-02-0285-103
Figure 106145827-A0305-02-0286-104
<210> 57
<211> 1333
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈與hGAA之融合蛋白質的胺基酸序列
<400> 57
Figure 106145827-A0305-02-0286-105
Figure 106145827-A0305-02-0287-106
Figure 106145827-A0305-02-0288-107
Figure 106145827-A0305-02-0289-108
Figure 106145827-A0305-02-0290-109
Figure 106145827-A0305-02-0291-110
<210> 58
<211> 1330
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hGAA之融合蛋白質的胺基酸序列
<400> 58
Figure 106145827-A0305-02-0291-111
Figure 106145827-A0305-02-0292-112
Figure 106145827-A0305-02-0293-113
Figure 106145827-A0305-02-0294-114
Figure 106145827-A0305-02-0295-115
Figure 106145827-A0305-02-0296-116
<210> 59
<211> 4076
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 編碼人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hGAA之融合蛋白質的胺基酸序列的核苷酸序列，合成序列
<400> 59
Figure 106145827-A0305-02-0296-117
Figure 106145827-A0305-02-0297-118
Figure 106145827-A0305-02-0298-119
<210> 60
<211> 245
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 單鏈人類化抗hTfR抗體3N號之胺基酸序列
<400> 60
Figure 106145827-A0305-02-0298-120
Figure 106145827-A0305-02-0299-121
<210> 61
<211> 226
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之Fab重鏈的胺基酸序列
<400> 61
Figure 106145827-A0305-02-0300-122
<210> 62
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈中的CDR1的胺基酸序列1
<400> 62
Figure 106145827-A0305-02-0301-123
<210> 63
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈中的CDR1的胺基酸序列2
<400> 63
Figure 106145827-A0305-02-0301-124
<210> 64
<211> 30
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈中的構架區3的胺基酸序列
<400> 64
Figure 106145827-A0305-02-0301-125
<210> 65
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈的可變區的胺基酸序列
<400> 65
Figure 106145827-A0305-02-0301-126
Figure 106145827-A0305-02-0302-127
<210> 66
<211> 448
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈之胺基酸序列
<400> 66
Figure 106145827-A0305-02-0302-129
Figure 106145827-A0305-02-0303-130
Figure 106145827-A0305-02-0304-131
<210> 67
<211> 1427
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 編碼人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈的胺基酸序列的核苷酸序列，合成序列
<400> 67
Figure 106145827-A0305-02-0304-132
<210> 68
<211> 445
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號(IgG4)之重鏈之胺基酸序列
<400> 68
Figure 106145827-A0305-02-0305-134
Figure 106145827-A0305-02-0306-135
<210> 69
<211> 1418
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 編碼人類化抗hTfR抗體3N號(IgG4)之重鏈的胺基酸序列的核苷酸序列，合成序列
<400> 69
Figure 106145827-A0305-02-0307-136
<210> 70
<211> 218
<212> PRT
<213> 智人
<400> 70
Figure 106145827-A0305-02-0307-137
Figure 106145827-A0305-02-0308-139
<210> 71
<211> 469
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N之Fab重鏈的胺基酸序列，另外與人類IgG之Fc區一起引入
<400> 71
Figure 106145827-A0305-02-0308-140
Figure 106145827-A0305-02-0309-141
Figure 106145827-A0305-02-0310-142
<210> 72
<211> 1491
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 編碼人類化抗hTfR抗體3N之Fab重鏈的胺基酸序列的核苷酸序列，另外與人類IgG之Fc區一起引入
<400> 72
Figure 106145827-A0305-02-0310-143
Figure 106145827-A0305-02-0311-144
<210> 73
<211> 30
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3號之重鏈中的構架區3的胺基酸序列
<400> 73
Figure 106145827-A0305-02-0311-145
<210> 74
<211> 46
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 白蛋白結合域之胺基酸序列
<400> 74
Figure 106145827-A0305-02-0312-146
<210> 75
<211> 628
<212> PRT
<213> 智人
<400> 75
Figure 106145827-A0305-02-0312-147
Figure 106145827-A0305-02-0313-148
Figure 106145827-A0305-02-0314-149
<210> 76
<211> 626
<212> PRT
<213> 智人
<400> 76
Figure 106145827-A0305-02-0314-150
Figure 106145827-A0305-02-0315-151
Figure 106145827-A0305-02-0316-152
Figure 106145827-A0305-02-0317-153
<210> 77
<211> 279
<212> PRT
<213> 智人
<400> 77
Figure 106145827-A0305-02-0317-154
Figure 106145827-A0305-02-0318-155
<210> 78
<211> 583
<212> PRT
<213> 智人
<400> 78
Figure 106145827-A0305-02-0318-156
Figure 106145827-A0305-02-0319-157
Figure 106145827-A0305-02-0320-158
<210> 79
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<212> PRT
<213> 智人
<400> 79
Figure 106145827-A0305-02-0320-159
Figure 106145827-A0305-02-0321-160
Figure 106145827-A0305-02-0322-161
<210> 80
<211> 482
<212> PRT
<213> 智人
<400> 80
Figure 106145827-A0305-02-0322-162
Figure 106145827-A0305-02-0323-163
Figure 106145827-A0305-02-0324-164
<210> 81
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<212> PRT
<213> 智人
<400> 81
Figure 106145827-A0305-02-0324-165
Figure 106145827-A0305-02-0325-166
Figure 106145827-A0305-02-0326-167
<210> 82
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<212> PRT
<213> 智人
<400> 82
Figure 106145827-A0305-02-0326-168
Figure 106145827-A0305-02-0327-169
Figure 106145827-A0305-02-0328-170
<210> 83
<211> 720
<212> PRT
<213> 智人
<400> 83
Figure 106145827-A0305-02-0328-172
Figure 106145827-A0305-02-0329-173
Figure 106145827-A0305-02-0330-174
Figure 106145827-A0305-02-0331-175
<210> 84
<211> 629
<212> PRT
<213> 智人
<400> 84
Figure 106145827-A0305-02-0331-176
Figure 106145827-A0305-02-0332-177
Figure 106145827-A0305-02-0333-178
<210> 85
<211> 643
<212> PRT
<213> 智人
<400> 85
Figure 106145827-A0305-02-0334-180
Figure 106145827-A0305-02-0335-181
Figure 106145827-A0305-02-0336-182
<210> 86
<211> 374
<212> PRT
<213> 智人
<400> 86
Figure 106145827-A0305-02-0336-183
Figure 106145827-A0305-02-0337-184
Figure 106145827-A0305-02-0338-185
<210> 87
<211> 435
<212> PRT
<213> 智人
<400> 87
Figure 106145827-A0305-02-0338-186
Figure 106145827-A0305-02-0339-187
<210> 88
<211> 962
<212> PRT
<213> 智人
<400> 88
Figure 106145827-A0305-02-0339-188
Figure 106145827-A0305-02-0340-189
Figure 106145827-A0305-02-0341-190
Figure 106145827-A0305-02-0342-191
Figure 106145827-A0305-02-0343-192
<210> 89
<211> 1124
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之Fab重鏈與hGAA之融合蛋白質的胺基酸序列
<400> 89
Figure 106145827-A0305-02-0343-194
Figure 106145827-A0305-02-0344-195
Figure 106145827-A0305-02-0345-196
Figure 106145827-A0305-02-0346-197
Figure 106145827-A0305-02-0347-198
<210> 90
<211> 1075
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hIDUA之融合蛋白質IgG4 HC-IDUA的胺基酸序列
<400> 90
Figure 106145827-A0305-02-0348-201
Figure 106145827-A0305-02-0349-202
Figure 106145827-A0305-02-0350-203
Figure 106145827-A0305-02-0351-204
Figure 106145827-A0305-02-0352-205
<210> 91
<211> 1113
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hIDUA之融合蛋白質IgG4 HC-GS8-IDUA的胺基酸序列
<400> 91
Figure 106145827-A0305-02-0352-207
Figure 106145827-A0305-02-0353-208
Figure 106145827-A0305-02-0354-209
Figure 106145827-A0305-02-0355-210
Figure 106145827-A0305-02-0356-211
<210> 92
<211> 1173
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hIDUA之融合蛋白質IgG4 HC-GS20-IDUA的胺基酸序列
<400> 92
Figure 106145827-A0305-02-0356-212
Figure 106145827-A0305-02-0357-213
Figure 106145827-A0305-02-0358-214
Figure 106145827-A0305-02-0359-215
Figure 106145827-A0305-02-0360-216
Figure 106145827-A0305-02-0361-217
<210> 93
<211> 869
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之Fab重鏈與hIDUA之融合蛋白質Fab HC-GS3-IDUA的胺基酸序列
<400> 93
Figure 106145827-A0305-02-0361-219
Figure 106145827-A0305-02-0362-220
Figure 106145827-A0305-02-0363-221
Figure 106145827-A0305-02-0364-222
<210> 94
<211> 879
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之Fab重鏈與hIDUA之融合蛋白質Fab HC-GS5-IDUA的胺基酸序列
<400> 94
Figure 106145827-A0305-02-0364-224
Figure 106145827-A0305-02-0365-225
Figure 106145827-A0305-02-0366-226
Figure 106145827-A0305-02-0367-227
Figure 106145827-A0305-02-0368-228
<210> 95
<211> 904
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<333> 人類化抗hTfR抗體3N號之Fab重鏈與hIDUA之融合蛋白質Fab HC-GS10-IDUA的胺基酸序列
<400> 95
Figure 106145827-A0305-02-0368-230
Figure 106145827-A0305-02-0369-231
Figure 106145827-A0305-02-0370-232
Figure 106145827-A0305-02-0371-233
<210> 96
<211> 954
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之Fab重鏈與hIDUA之融合蛋白質Fab HC-GS20-IDUA的胺基酸序列
<400> 96
Figure 106145827-A0305-02-0371-235
Figure 106145827-A0305-02-0372-236
Figure 106145827-A0305-02-0373-237
Figure 106145827-A0305-02-0374-238
Figure 106145827-A0305-02-0375-239
<210> 97
<211> 1140
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之Fab重鏈與hIDUA之融合蛋白質Tandem Fab HC-IDUA的胺基酸序列
<400> 97
Figure 106145827-A0305-02-0375-241
Figure 106145827-A0305-02-0376-242
Figure 106145827-A0305-02-0377-243
Figure 106145827-A0305-02-0378-244
Figure 106145827-A0305-02-0379-245
<210> 98
<211> 477
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 單鏈人類化抗hTfR抗體3N(2)號之胺基酸序列
<400> 98
Figure 106145827-A0305-02-0380-248
Figure 106145827-A0305-02-0381-249
<210> 99
<211> 1112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 單鏈人類化抗hTfR抗體3N號與hIDUA之融合蛋白質的胺基酸序列
<400> 99
Figure 106145827-A0305-02-0382-251
Figure 106145827-A0305-02-0383-252
Figure 106145827-A0305-02-0384-253
Figure 106145827-A0305-02-0385-254
Figure 106145827-A0305-02-0386-255
<210> 100
<211> 726
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hPPT-1之融合蛋白質IgG4 HC-PPT1的胺基酸序列
<400> 100
Figure 106145827-A0305-02-0386-257
Figure 106145827-A0305-02-0387-258
Figure 106145827-A0305-02-0388-259
Figure 106145827-A0305-02-0389-260
<210> 101
<211> 749
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hPPT-1之融合蛋白質IgG4 HC-GS5-PPT1的胺基酸序列
<400> 101
Figure 106145827-A0305-02-0389-262
Figure 106145827-A0305-02-0390-263
Figure 106145827-A0305-02-0391-264
Figure 106145827-A0305-02-0392-265
<210> 102
<211> 774
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hPPT-1之融合蛋白質IgG4 HC-GS10-PPT1的胺基酸序列
<400> 102
Figure 106145827-A0305-02-0392-267
Figure 106145827-A0305-02-0393-268
Figure 106145827-A0305-02-0394-269
Figure 106145827-A0305-02-0395-270
<210> 103
<211> 824
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hPPT-1之融合蛋白質IgG4 HC-GS20-PPT1的胺基酸序列
<400> 103
Figure 106145827-A0305-02-0395-272
Figure 106145827-A0305-02-0396-273
Figure 106145827-A0305-02-0397-274
Figure 106145827-A0305-02-0398-275
<210> 104
<211> 520
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之Fab重鏈與hPPT-1之融合蛋白質Fab HC-GS3-PPT1的胺基酸序列
<400> 104
Figure 106145827-A0305-02-0398-277
Figure 106145827-A0305-02-0399-278
Figure 106145827-A0305-02-0400-279
<210> 105
<211> 791
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之Fab重鏈與hPPT-1之融合蛋白質Tandem Fab HC-PPT1的胺基酸序列
<400> 105
Figure 106145827-A0305-02-0400-281
Figure 106145827-A0305-02-0401-282
Figure 106145827-A0305-02-0402-283
Figure 106145827-A0305-02-0403-285
<210> 106
<211> 1030
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hASM之融合蛋白質IgG4 HC-ASM的胺基酸序列
<400> 106
Figure 106145827-A0305-02-0403-287
Figure 106145827-A0305-02-0404-288
Figure 106145827-A0305-02-0405-289
Figure 106145827-A0305-02-0406-290
Figure 106145827-A0305-02-0407-291
<210> 107
<211> 1053
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hASM之融合蛋白質IgG4 HC-GS5-ASM的胺基酸序列
<400> 107
Figure 106145827-A0305-02-0408-293
Figure 106145827-A0305-02-0409-294
Figure 106145827-A0305-02-0410-295
Figure 106145827-A0305-02-0411-296
<210> 108
<211> 1078
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hASM之融合蛋白質IgG4 HC-GS10-ASM的胺基酸序列
<400> 108
Figure 106145827-A0305-02-0412-300
Figure 106145827-A0305-02-0413-301
Figure 106145827-A0305-02-0414-302
Figure 106145827-A0305-02-0415-303
Figure 106145827-A0305-02-0416-304
<210> 109
<211> 1128
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hASM之融合蛋白質IgG4 HC-GS20-ASM的胺基酸序列
<400> 109
Figure 106145827-A0305-02-0416-306
Figure 106145827-A0305-02-0417-307
Figure 106145827-A0305-02-0418-308
Figure 106145827-A0305-02-0419-309
Figure 106145827-A0305-02-0420-310
<210> 110
<211> 824
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之Fab重鏈與hASM之融合蛋白質Fab HC-GS3-ASM的胺基酸序列
<400> 110
Figure 106145827-A0305-02-0420-312
Figure 106145827-A0305-02-0421-313
Figure 106145827-A0305-02-0422-314
Figure 106145827-A0305-02-0423-315
<210> 111
<211> 834
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之Fab重鏈與hASM之融合蛋白質Fab HC-GS5-ASM的胺基酸序列
<400> 111
Figure 106145827-A0305-02-0424-318
Figure 106145827-A0305-02-0425-319
Figure 106145827-A0305-02-0426-320
Figure 106145827-A0305-02-0427-321
<210> 112
<211> 859
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之Fab重鏈與hASM之融合蛋白質Fab HC-GS10-ASM的胺基酸序列
<400> 112
Figure 106145827-A0305-02-0427-323
Figure 106145827-A0305-02-0428-324
Figure 106145827-A0305-02-0429-325
Figure 106145827-A0305-02-0430-326
<210> 113
<211> 909
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之Fab重鏈與hASM之融合蛋白質Fab HC-GS20-ASM的胺基酸序列
<400> 113
Figure 106145827-A0305-02-0430-328
Figure 106145827-A0305-02-0431-329
Figure 106145827-A0305-02-0432-330
Figure 106145827-A0305-02-0433-331
Figure 106145827-A0305-02-0434-332
<210> 114
<211> 1095
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之Fab重鏈與hASM之融合蛋白質Tandem Fab HC-ASM的胺基酸序列
<400> 114
Figure 106145827-A0305-02-0434-334
Figure 106145827-A0305-02-0435-335
Figure 106145827-A0305-02-0436-336
Figure 106145827-A0305-02-0437-337
Figure 106145827-A0305-02-0438-338
<210> 115
<211> 936
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hARSA之融合蛋白質IgG4 IgG4 HC-ARSA的胺基酸序列
<400> 115
Figure 106145827-A0305-02-0438-341
Figure 106145827-A0305-02-0439-342
Figure 106145827-A0305-02-0440-343
Figure 106145827-A0305-02-0441-344
Figure 106145827-A0305-02-0442-345
<210> 116
<211> 959
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hARSA之融合蛋白質IgG4 HC-GS5-ARSA的胺基酸序列
<400> 116
Figure 106145827-A0305-02-0442-347
Figure 106145827-A0305-02-0443-348
Figure 106145827-A0305-02-0444-349
Figure 106145827-A0305-02-0445-350
<210> 117
<211> 984
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hARSA之融合蛋白質IgG4 HC-GS10-ARSA的胺基酸序列
<400> 117
Figure 106145827-A0305-02-0446-353
Figure 106145827-A0305-02-0447-354
Figure 106145827-A0305-02-0448-355
Figure 106145827-A0305-02-0449-356
<210> 118
<211> 1034
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hARSA之融合蛋白質IgG4 HC-GS20-ARSA的胺基酸序列
<400> 118
Figure 106145827-A0305-02-0449-358
Figure 106145827-A0305-02-0450-359
Figure 106145827-A0305-02-0451-360
Figure 106145827-A0305-02-0452-361
Figure 106145827-A0305-02-0453-362
<210> 119
<211> 730
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之Fab重鏈與hARSA之融合蛋白質Fab HC-GS3-ARSA的胺基酸序列
<400> 119
Figure 106145827-A0305-02-0454-364
Figure 106145827-A0305-02-0455-365
Figure 106145827-A0305-02-0456-366
<210> 120
<211> 740
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之Fab重鏈與hARSA之融合蛋白質Fab HC-GS5-ARSA的胺基酸序列
<400> 120
Figure 106145827-A0305-02-0456-368
Figure 106145827-A0305-02-0457-369
Figure 106145827-A0305-02-0458-370
Figure 106145827-A0305-02-0459-372
<210> 121
<211> 765
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之Fab重鏈與hARSA之融合蛋白質Fab HC-GS10-ARSA的胺基酸序列
<400> 121
Figure 106145827-A0305-02-0459-373
Figure 106145827-A0305-02-0460-374
Figure 106145827-A0305-02-0461-375
Figure 106145827-A0305-02-0462-376
<210> 122
<211> 815
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之Fab重鏈與hARSA之融合蛋白質Fab HC-GS20-ARSA的胺基酸序列
<400> 122
Figure 106145827-A0305-02-0462-377
Figure 106145827-A0305-02-0463-378
Figure 106145827-A0305-02-0464-379
Figure 106145827-A0305-02-0465-380
<210> 123
<211> 1001
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之Fab重鏈與hARSA之融合蛋白質Tandem Fab HC-ARSA的胺基酸序列
<400> 123
Figure 106145827-A0305-02-0466-382
Figure 106145827-A0305-02-0467-383
Figure 106145827-A0305-02-0468-384
Figure 106145827-A0305-02-0469-385
<210> 124
<211> 929
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hSGSH IgG4之融合蛋白質IgG4 HC-SGSH的胺基酸序列
<400> 124
Figure 106145827-A0305-02-0470-388
Figure 106145827-A0305-02-0471-389
Figure 106145827-A0305-02-0472-390
Figure 106145827-A0305-02-0473-391
<210> 125
<211> 952
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hSGSH IgG4之融合蛋白質IgG4 HC-GS5-SGSH的胺基酸序列
<400> 125
Figure 106145827-A0305-02-0473-393
Figure 106145827-A0305-02-0474-394
Figure 106145827-A0305-02-0475-395
Figure 106145827-A0305-02-0476-396
Figure 106145827-A0305-02-0477-397
<210> 126
<211> 977
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hSGSH之融合蛋白質IgG4 HC-GS10-SGSH的胺基酸序列
<400> 126
Figure 106145827-A0305-02-0477-399
Figure 106145827-A0305-02-0478-400
Figure 106145827-A0305-02-0479-401
Figure 106145827-A0305-02-0480-402
Figure 106145827-A0305-02-0481-403
<210> 127
<211> 1027
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hSGSH之融合蛋白質IgG4 HC-GS20-SGSH的胺基酸序列
<400> 127
Figure 106145827-A0305-02-0481-405
Figure 106145827-A0305-02-0482-406
Figure 106145827-A0305-02-0483-407
Figure 106145827-A0305-02-0484-408
Figure 106145827-A0305-02-0485-409
<210> 128
<211> 723
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之Fab重鏈與hSGSH之融合蛋白質Fab HC-GS3-SGSH的胺基酸序列
<400> 128
Figure 106145827-A0305-02-0485-411
Figure 106145827-A0305-02-0486-412
Figure 106145827-A0305-02-0487-413
Figure 106145827-A0305-02-0488-414
<210> 129
<211> 994
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之Fab重鏈與hSGSH之融合蛋白質Tandem Fab HC-SGSH的胺基酸序列
<400> 129
Figure 106145827-A0305-02-0488-416
Figure 106145827-A0305-02-0489-417
Figure 106145827-A0305-02-0490-418
Figure 106145827-A0305-02-0491-419
Figure 106145827-A0305-02-0492-420
<210> 130
<211> 944
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hGBA之融合蛋白質IgG4 HC-GBA的胺基酸序列
<400> 130
Figure 106145827-A0305-02-0492-422
Figure 106145827-A0305-02-0493-423
Figure 106145827-A0305-02-0494-424
Figure 106145827-A0305-02-0495-425
<210> 131
<211> 967
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hGBA之融合蛋白質IgG4 HC-GS5-GBA的胺基酸序列
<400> 131
Figure 106145827-A0305-02-0495-427
Figure 106145827-A0305-02-0496-428
Figure 106145827-A0305-02-0497-429
Figure 106145827-A0305-02-0498-430
Figure 106145827-A0305-02-0499-431
<210> 132
<211> 992
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hGBA之融合蛋白質IgG4 HC-GS10-GBA的胺基酸序列
<400> 132
Figure 106145827-A0305-02-0499-433
Figure 106145827-A0305-02-0500-434
Figure 106145827-A0305-02-0501-435
Figure 106145827-A0305-02-0502-436
Figure 106145827-A0305-02-0503-437
<210> 133
<211> 1042
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hGBA之融合蛋白質IgG4 HC-GS20-GBA的胺基酸序列
<400> 133
Figure 106145827-A0305-02-0503-439
Figure 106145827-A0305-02-0504-440
Figure 106145827-A0305-02-0505-441
Figure 106145827-A0305-02-0506-442
Figure 106145827-A0305-02-0507-443
<210> 134
<211> 738
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之Fab重鏈與hGBA之融合蛋白質Fab HC-GS3-GBA的胺基酸序列
<400> 134
Figure 106145827-A0305-02-0507-445
Figure 106145827-A0305-02-0508-446
Figure 106145827-A0305-02-0509-447
Figure 106145827-A0305-02-0510-448
<210> 135
<211> 1009
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之Fab重鏈與hGBA之融合蛋白質Tandem Fab HC-GBA的胺基酸序列
<400> 135
Figure 106145827-A0305-02-0510-450
Figure 106145827-A0305-02-0511-451
Figure 106145827-A0305-02-0512-452
Figure 106145827-A0305-02-0513-453
Figure 106145827-A0305-02-0514-454
<210> 136
<211> 991
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hTPP-1之融合蛋白質IgG4 HC-TPP1的胺基酸序列
<400> 136
Figure 106145827-A0305-02-0514-456
Figure 106145827-A0305-02-0515-457
Figure 106145827-A0305-02-0516-458
Figure 106145827-A0305-02-0517-459
Figure 106145827-A0305-02-0518-460
<210> 137
<211> 1014
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hTPP-1之融合蛋白質IgG4 GS5-TPP1的胺基酸序列
<400> 137
Figure 106145827-A0305-02-0518-461
Figure 106145827-A0305-02-0519-462
Figure 106145827-A0305-02-0520-463
Figure 106145827-A0305-02-0521-464
Figure 106145827-A0305-02-0522-465
<210> 138
<211> 1039
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hTPP-1之融合蛋白質IgG4 GS10-TPP1的胺基酸序列
<400> 138
Figure 106145827-A0305-02-0522-466
Figure 106145827-A0305-02-0523-467
Figure 106145827-A0305-02-0524-468
Figure 106145827-A0305-02-0525-469
Figure 106145827-A0305-02-0526-470
<210> 139
<211> 1089
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hTPP-1之融合蛋白質IgG4 GS20-TPP1的胺基酸序列
<400> 139
Figure 106145827-A0305-02-0526-471
Figure 106145827-A0305-02-0527-472
Figure 106145827-A0305-02-0528-473
Figure 106145827-A0305-02-0529-474
Figure 106145827-A0305-02-0530-475
<210> 140
<211> 785
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之Fab重鏈與hTPP-1之融合蛋白質Fab HC-GS3-TPP1的胺基酸序列
<400> 140
Figure 106145827-A0305-02-0531-477
Figure 106145827-A0305-02-0532-478
Figure 106145827-A0305-02-0533-479
<210> 141
<211> 1056
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之Fab重鏈與hTPP-1之融合蛋白質Tandem Fab HC-TPP1的胺基酸序列
<400> 141
Figure 106145827-A0305-02-0534-481
Figure 106145827-A0305-02-0535-482
Figure 106145827-A0305-02-0536-483
Figure 106145827-A0305-02-0537-484
Figure 106145827-A0305-02-0538-485
<210> 142
<211> 1167
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hNAGLU之融合蛋白質IgG4 HC-NAGLU的胺基酸序列
<400> 142
Figure 106145827-A0305-02-0538-486
Figure 106145827-A0305-02-0539-487
Figure 106145827-A0305-02-0540-488
Figure 106145827-A0305-02-0541-489
Figure 106145827-A0305-02-0542-490
<210> 143
<211> 1190
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hNAGLU之融合蛋白質IgG4 HC-GS5-NAGLU的胺基酸序列
<400> 143
Figure 106145827-A0305-02-0542-491
Figure 106145827-A0305-02-0543-492
Figure 106145827-A0305-02-0544-493
Figure 106145827-A0305-02-0545-494
Figure 106145827-A0305-02-0546-495
Figure 106145827-A0305-02-0547-496
<210> 144
<211> 1215
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hNAGLU之融合蛋白質IgG4 HC-GS10-NAGLU的胺基酸序列
<400> 144
Figure 106145827-A0305-02-0547-497
Figure 106145827-A0305-02-0548-498
Figure 106145827-A0305-02-0549-499
Figure 106145827-A0305-02-0550-500
Figure 106145827-A0305-02-0551-501
Figure 106145827-A0305-02-0552-502
<210> 145
<211> 1265
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hNAGLU之融合蛋白質IgG4 HC-GS20-NAGLU的胺基酸序列
<400> 145
Figure 106145827-A0305-02-0552-504
Figure 106145827-A0305-02-0553-505
Figure 106145827-A0305-02-0554-506
Figure 106145827-A0305-02-0555-507
Figure 106145827-A0305-02-0556-508
Figure 106145827-A0305-02-0557-509
<210> 146
<211> 961
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之Fab重鏈與hNAGLU之融合蛋白質Fab HC-GS3-NAGLU的胺基酸序列
<400> 146
Figure 106145827-A0305-02-0557-511
Figure 106145827-A0305-02-0558-512
Figure 106145827-A0305-02-0559-513
Figure 106145827-A0305-02-0560-514
Figure 106145827-A0305-02-0561-515
<210> 147
<211> 971
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之Fab重鏈與hNAGLU之融合蛋白質Fab HC-GS5-NAGLU的胺基酸序列
<400> 147
Figure 106145827-A0305-02-0561-516
Figure 106145827-A0305-02-0562-517
Figure 106145827-A0305-02-0563-518
Figure 106145827-A0305-02-0564-519
<210> 148
<211> 996
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之Fab重鏈與hNAGLU之融合蛋白質Fab HC-GS10-NAGLU的胺基酸序列
<400> 148
Figure 106145827-A0305-02-0565-520
Figure 106145827-A0305-02-0566-521
Figure 106145827-A0305-02-0567-522
Figure 106145827-A0305-02-0568-523
<210> 149
<211> 1046
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之Fab重鏈與hNAGLU之融合蛋白質Fab HC-GS20-NAGLU的胺基酸序列
<400> 149
Figure 106145827-A0305-02-0569-524
Figure 106145827-A0305-02-0570-525
Figure 106145827-A0305-02-0571-526
Figure 106145827-A0305-02-0572-527
<210> 150
<211> 1076
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hGUSB之融合蛋白質IgG4 HC-GUSB的胺基酸序列
<400> 150
Figure 106145827-A0305-02-0573-530
Figure 106145827-A0305-02-0574-531
Figure 106145827-A0305-02-0575-532
Figure 106145827-A0305-02-0576-533
Figure 106145827-A0305-02-0577-534
<210> 151
<211> 1099
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hGUSB之融合蛋白質IgG4 HC-GS5-GUSB的胺基酸序列
<400> 151
Figure 106145827-A0305-02-0577-535
Figure 106145827-A0305-02-0578-536
Figure 106145827-A0305-02-0579-537
Figure 106145827-A0305-02-0580-538
Figure 106145827-A0305-02-0581-539
<210> 152
<211> 1124
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hGUSB之融合蛋白質IgG4 HC-GS10-GUSB的胺基酸序列
<400> 152
Figure 106145827-A0305-02-0581-540
Figure 106145827-A0305-02-0582-541
Figure 106145827-A0305-02-0583-542
Figure 106145827-A0305-02-0584-543
Figure 106145827-A0305-02-0585-544
<210> 153
<211> 1174
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hGUSB之融合蛋白質IgG4 HC-GS20-GUSB的胺基酸序列
<400> 153
Figure 106145827-A0305-02-0586-547
Figure 106145827-A0305-02-0587-548
Figure 106145827-A0305-02-0588-549
Figure 106145827-A0305-02-0589-550
Figure 106145827-A0305-02-0590-551
<210> 154
<211> 870
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之Fab重鏈與hGUSB之融合蛋白質Fab HC-GS3-GUSB的胺基酸序列
<400> 154
Figure 106145827-A0305-02-0590-552
Figure 106145827-A0305-02-0591-553
Figure 106145827-A0305-02-0592-554
Figure 106145827-A0305-02-0593-555
Figure 106145827-A0305-02-0594-556
<210> 155
<211> 880
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之Fab重鏈與hGUSB之融合蛋白質Fab HC-GS5-GUSB的胺基酸序列
<400> 155
Figure 106145827-A0305-02-0594-558
Figure 106145827-A0305-02-0595-559
Figure 106145827-A0305-02-0596-560
Figure 106145827-A0305-02-0597-561
<210> 156
<211> 905
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之Fab重鏈與hGUSB之融合蛋白質Fab HC-GS10-GUSB的胺基酸序列
<400> 156
Figure 106145827-A0305-02-0597-562
Figure 106145827-A0305-02-0598-563
Figure 106145827-A0305-02-0599-564
Figure 106145827-A0305-02-0600-565
Figure 106145827-A0305-02-0601-566
<210> 157
<211> 955
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之Fab重鏈與hGUSB之融合蛋白質Fab HC-GS20-GUSB的胺基酸序列
<400> 157
Figure 106145827-A0305-02-0601-567
Figure 106145827-A0305-02-0602-568
Figure 106145827-A0305-02-0603-569
Figure 106145827-A0305-02-0604-570
<210> 158
<211> 1090
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hGALC之融合蛋白質IgG4 HC-GALC的胺基酸序列
<400> 158
Figure 106145827-A0305-02-0605-571
Figure 106145827-A0305-02-0606-572
Figure 106145827-A0305-02-0607-573
Figure 106145827-A0305-02-0608-574
Figure 106145827-A0305-02-0609-575
<210> 159
<211> 1113
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hGALC之融合蛋白質IgG4 HC-GS5-GALC的胺基酸序列
<400> 159
Figure 106145827-A0305-02-0609-576
Figure 106145827-A0305-02-0610-577
Figure 106145827-A0305-02-0611-578
Figure 106145827-A0305-02-0612-579
Figure 106145827-A0305-02-0613-580
<210> 160
<211> 1138
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hGALC之融合蛋白質IgG4 HC-GS10-GALC的胺基酸序列
<400> 160
Figure 106145827-A0305-02-0613-581
Figure 106145827-A0305-02-0614-582
Figure 106145827-A0305-02-0615-583
Figure 106145827-A0305-02-0616-584
Figure 106145827-A0305-02-0617-585
<210> 161
<211> 1188
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hGALC之融合蛋白質IgG4 HC-GS20-GALC的胺基酸序列
<400> 161
Figure 106145827-A0305-02-0618-586
Figure 106145827-A0305-02-0619-587
Figure 106145827-A0305-02-0620-588
Figure 106145827-A0305-02-0621-589
Figure 106145827-A0305-02-0622-590
<210> 162
<211> 884
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之Fab重鏈與hGALC之融合蛋白質Fab HC-GS3-GALC的胺基酸序列
<400> 162
Figure 106145827-A0305-02-0622-591
Figure 106145827-A0305-02-0623-592
Figure 106145827-A0305-02-0624-593
Figure 106145827-A0305-02-0625-594
Figure 106145827-A0305-02-0626-595
<210> 163
<211> 894
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之Fab重鏈與hGALC之融合蛋白質Fab HC-GS5-GALC的胺基酸序列
<400> 163
Figure 106145827-A0305-02-0626-596
Figure 106145827-A0305-02-0627-597
Figure 106145827-A0305-02-0628-598
Figure 106145827-A0305-02-0629-599
<210> 164
<211> 919
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之Fab重鏈與hGALC之融合蛋白質Fab HC-GS10-GALC的胺基酸序列
<400> 164
Figure 106145827-A0305-02-0629-600
Figure 106145827-A0305-02-0630-601
Figure 106145827-A0305-02-0631-602
Figure 106145827-A0305-02-0632-603
Figure 106145827-A0305-02-0633-604
<210> 165
<211> 969
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之Fab重鏈與hGALC之融合蛋白質Fab HC-GS20-GALC的胺基酸序列
<400> 165
Figure 106145827-A0305-02-0633-606
Figure 106145827-A0305-02-0634-607
Figure 106145827-A0305-02-0635-608
Figure 106145827-A0305-02-0636-609
Figure 106145827-A0305-02-0637-610
<210> 166
<211> 821
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hAC之融合蛋白質IgG4 HC-AC的胺基酸序列
<400> 166
Figure 106145827-A0305-02-0637-612
Figure 106145827-A0305-02-0638-613
Figure 106145827-A0305-02-0639-614
Figure 106145827-A0305-02-0640-615
<210> 167
<211> 844
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hAC之融合蛋白質IgG4 HC-GS5-AC的胺基酸序列
<400> 167
Figure 106145827-A0305-02-0640-617
Figure 106145827-A0305-02-0641-618
Figure 106145827-A0305-02-0642-619
Figure 106145827-A0305-02-0643-620
<210> 168
<211> 869
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hAC之融合蛋白質IgG4 HC-GS10-AC的胺基酸序列
<400> 168
Figure 106145827-A0305-02-0643-621
Figure 106145827-A0305-02-0644-624
Figure 106145827-A0305-02-0645-625
Figure 106145827-A0305-02-0646-626
Figure 106145827-A0305-02-0647-627
<210> 169
<211> 919
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hAC之融合蛋白質IgG4 HC-GS20-AC的胺基酸序列
<400> 169
Figure 106145827-A0305-02-0647-629
Figure 106145827-A0305-02-0648-630
Figure 106145827-A0305-02-0649-631
Figure 106145827-A0305-02-0650-632
<210> 170
<211> 615
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之Fab重鏈與hAC之融合蛋白質Fab HC-GS3-AC的胺基酸序列
<400> 170
Figure 106145827-A0305-02-0650-634
Figure 106145827-A0305-02-0651-635
Figure 106145827-A0305-02-0652-636
Figure 106145827-A0305-02-0653-637
<210> 171
<211> 625
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之Fab重鏈與hAC之融合蛋白質Fab HC-GS5-AC的胺基酸序列
<400> 171
Figure 106145827-A0305-02-0653-639
Figure 106145827-A0305-02-0654-640
Figure 106145827-A0305-02-0655-641
<210> 172
<211> 650
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之Fab重鏈與hAC之融合蛋白質Fab HC-GS10-AC的胺基酸序列
<400> 172
Figure 106145827-A0305-02-0656-643
Figure 106145827-A0305-02-0657-644
Figure 106145827-A0305-02-0658-645
<210> 173
<211> 700
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之Fab重鏈與hAC之融合蛋白質Fab HC-GS20-AC的胺基酸序列
<400> 173
Figure 106145827-A0305-02-0658-647
Figure 106145827-A0305-02-0659-648
Figure 106145827-A0305-02-0660-649
Figure 106145827-A0305-02-0661-650
<210> 174
<211> 882
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hFUCA1之融合蛋白質IgG4 HC-FUCA1的胺基FUCA1id序列
<400> 174
Figure 106145827-A0305-02-0661-652
Figure 106145827-A0305-02-0662-653
Figure 106145827-A0305-02-0663-654
Figure 106145827-A0305-02-0664-655
<210> 175
<211> 905
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hFUCA1之融合蛋白質IgG4 HC-GS5-FUCA1的胺基FUCA1id序列
<400> 175
Figure 106145827-A0305-02-0664-656
Figure 106145827-A0305-02-0665-657
Figure 106145827-A0305-02-0666-658
Figure 106145827-A0305-02-0667-659
Figure 106145827-A0305-02-0668-660
<210> 176
<211> 930
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hFUCA1之融合蛋白質IgG4 HC-GS10-FUCA1的胺基FUCA1id序列
<400> 176
Figure 106145827-A0305-02-0668-661
Figure 106145827-A0305-02-0669-663
Figure 106145827-A0305-02-0670-664
Figure 106145827-A0305-02-0671-665
Figure 106145827-A0305-02-0672-666
<210> 177
<211> 980
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hFUCA1之融合蛋白質IgG4 HC-GS20-FUCA1的胺基FUCA1id序列
<400> 177
Figure 106145827-A0305-02-0672-667
Figure 106145827-A0305-02-0673-668
Figure 106145827-A0305-02-0674-670
Figure 106145827-A0305-02-0675-673
<210> 178
<211> 676
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之Fab重鏈與hFUCA1之融合蛋白質Fab HC-GS3-FUCA1的胺基FUCA1id序列
<400> 178
Figure 106145827-A0305-02-0676-674
Figure 106145827-A0305-02-0677-675
Figure 106145827-A0305-02-0678-676
<210> 179
<211> 686
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之Fab重鏈與hFUCA1之融合蛋白質Fab HC-GS5-FUCA1的胺基FUCA1id序列
<400> 179
Figure 106145827-A0305-02-0678-677
Figure 106145827-A0305-02-0679-678
Figure 106145827-A0305-02-0680-679
Figure 106145827-A0305-02-0681-680
<210> 180
<211> 711
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之Fab重鏈與hFUCA1之融合蛋白質Fab HC-GS10-FUCA1的胺基FUCA1id序列
<400> 180
Figure 106145827-A0305-02-0681-682
Figure 106145827-A0305-02-0682-683
Figure 106145827-A0305-02-0683-684
Figure 106145827-A0305-02-0684-685
<210> 181
<211> 761
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之Fab重鏈與hFUCA1之融合蛋白質Fab HC-GS20-FUCA1的胺基FUCA1id序列
<400> 181
Figure 106145827-A0305-02-0684-687
Figure 106145827-A0305-02-0685-688
Figure 106145827-A0305-02-0686-690
Figure 106145827-A0305-02-0687-691
<210> 182
<211> 1409
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hLAMAN之融合蛋白質IgG4 HC-LAMAN的胺基LAMANid序列
<400> 182
Figure 106145827-A0305-02-0687-693
Figure 106145827-A0305-02-0688-694
Figure 106145827-A0305-02-0689-695
Figure 106145827-A0305-02-0690-696
Figure 106145827-A0305-02-0691-697
Figure 106145827-A0305-02-0692-698
<210> 183
<211> 1432
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hLAMAN之融合蛋白質IgG4 HC-GS5-LAMAN的胺基LAMANid序列
<400> 183
Figure 106145827-A0305-02-0693-702
Figure 106145827-A0305-02-0694-703
Figure 106145827-A0305-02-0695-704
Figure 106145827-A0305-02-0696-705
Figure 106145827-A0305-02-0697-706
Figure 106145827-A0305-02-0698-707
<210> 184
<211> 1457
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hLAMAN之融合蛋白質IgG4 HC-GS10-LAMAN的胺基LAMANid序列
<400> 184
Figure 106145827-A0305-02-0698-709
Figure 106145827-A0305-02-0699-710
Figure 106145827-A0305-02-0700-711
Figure 106145827-A0305-02-0701-712
Figure 106145827-A0305-02-0702-713
Figure 106145827-A0305-02-0703-714
Figure 106145827-A0305-02-0704-715
<210> 185
<211> 1507
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之重鏈(IgG4)與hLAMAN之融合蛋白質IgG4 HC-GS20-LAMAN的胺基LAMANid序列
<400> 185
Figure 106145827-A0305-02-0704-716
Figure 106145827-A0305-02-0705-717
Figure 106145827-A0305-02-0706-718
Figure 106145827-A0305-02-0707-719
Figure 106145827-A0305-02-0708-720
Figure 106145827-A0305-02-0709-721
Figure 106145827-A0305-02-0710-722
<210> 186
<211> 1203
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之Fab重鏈與hLAMAN之融合蛋白質Fab HC-GS3-LAMAN的胺基LAMANid序列
<400> 186
Figure 106145827-A0305-02-0710-724
Figure 106145827-A0305-02-0711-725
Figure 106145827-A0305-02-0712-726
Figure 106145827-A0305-02-0713-727
Figure 106145827-A0305-02-0714-728
<210> 187
<211> 1213
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之Fab重鏈與hLAMAN之融合蛋白質Fab HC-GS5-LAMAN的胺基LAMANid序列
<400> 187
Figure 106145827-A0305-02-0715-731
Figure 106145827-A0305-02-0716-732
Figure 106145827-A0305-02-0717-733
Figure 106145827-A0305-02-0718-734
Figure 106145827-A0305-02-0719-735
<210> 188
<211> 1238
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之Fab重鏈與hLAMAN之融合蛋白質Fab HC-GS10-LAMAN的胺基LAMANid序列
<400> 188
Figure 106145827-A0305-02-0719-737
Figure 106145827-A0305-02-0720-738
Figure 106145827-A0305-02-0721-739
Figure 106145827-A0305-02-0722-740
Figure 106145827-A0305-02-0723-741
Figure 106145827-A0305-02-0724-742
<210> 189
<211> 1288
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人類化抗hTfR抗體3N號之Fab重鏈與hLAMAN之融合蛋白質Fab HC-GS20-LAMAN的胺基LAMANid序列
<400> 189
Figure 106145827-A0305-02-0724-743
Figure 106145827-A0305-02-0725-745
Figure 106145827-A0305-02-0726-746
Figure 106145827-A0305-02-0727-747
Figure 106145827-A0305-02-0728-748
Figure 106145827-A0305-02-0729-749

Claims (53)

  1. 一種抗體，其係抗人類運鐵蛋白受體抗體，且係於重鏈之可變區中，(a)CDR1為包含序列編號62或序列編號63之胺基酸序列而成，(b)CDR2為包含序列編號13或序列編號14之胺基酸序列而成，(c)CDR3為包含序列編號15或序列編號16之胺基酸序列而成，(d)架構區3為包含序列編號64之胺基酸序列而成者，於該抗體之輕鏈之可變區中，(a)CDR1為包含序列編號6或序列編號7之胺基酸序列而成，(b)CDR2為包含序列編號8或序列編號9之胺基酸序列、或者胺基酸序列Lys-Val-Ser而成，且(c)CDR3為包含序列編號10之胺基酸序列而成者。
  2. 如請求項1之抗體，其中該重鏈之可變區為包含序列編號65之胺基酸序列而成者。
  3. 如請求項1或2之抗體，其中該抗體之輕鏈之可變區為包含序列編號17、序列編號18、序列編號19、序列編號20、序列編號21或序列編號22之胺基酸序列而成者。
  4. 如請求項1或2之抗體，其中該輕鏈之可變區為包含相對於序列編號17、序列編號18、序列編號19、序列編號20、序列編號21或序列編號22 之胺基酸序列具有80%以上之同源性的胺基酸序列而成者。
  5. 如請求項1或2之抗體，其中該輕鏈之可變區為包含相對於序列編號17、序列編號18、序列編號19、序列編號20、序列編號21或序列編號22之胺基酸序列具有90%以上之同源性的胺基酸序列而成者。
  6. 如請求項1或2之抗體，其中該輕鏈之可變區為包含相對於序列編號17、序列編號18、序列編號19、序列編號20、序列編號21或序列編號22之胺基酸序列有1~5個胺基酸經置換、缺失或附加之修飾之胺基酸序列而成者。
  7. 如請求項1或2之抗體，其中該輕鏈之可變區為包含相對於序列編號17、序列編號18、序列編號19、序列編號20、序列編號21或序列編號22之胺基酸序列有1~3個胺基酸經置換、缺失或附加之修飾之胺基酸序列而成者。
  8. 如請求項1或2之抗體，其中該抗體之輕鏈為包含序列編號23、序列編號25、序列編號27或序列編號29之胺基酸序列而成者。
  9. 如請求項1或2之抗體，其中該抗體之輕鏈為包含相對於序列編號23、序列編號25、序列編號27或序列編號29之胺基酸序列具有80%以上之同源性之胺基酸序列而成者。
  10. 如請求項1或2之抗體，其中該抗體之輕鏈為包含相對於序列編號23、序列編號25、序列編號27或序列編號29之胺基酸序列具有90%以上之同源性之胺基酸序列而成者。
  11. 如請求項1或2之抗體，其中該抗體之輕鏈為包含相對於序列編號23、序列編號25、序列編號27或序列編號29之胺基酸序列有1~5個胺基酸經置換、缺失或附加之修飾之胺基酸序列而成者。
  12. 如請求項1或2之抗體，其中該抗體之輕鏈為包含相對於序列編號23、序列編號25、序列編號27或序列編號29之胺基酸序列有1~3個胺基酸經置換、缺失或附加之修飾之胺基酸序列而成者。
  13. 如請求項1或2之抗體，其係對於人類運鐵蛋白受體之細胞外區域及猴運鐵蛋白受體之細胞外區域兩者具有親和性者。
  14. 如請求項13之抗體，其係與人類運鐵蛋白受體之細胞外區域之解離常數為1×10-10M以下者，且係與猴運鐵蛋白受體之細胞外區域之解離常數為1×10-9M以下者。
  15. 如請求項1或2之抗體，其係Fab抗體、F(ab')2抗體、或F(ab')抗體。
  16. 如請求項1或2之抗人類運鐵蛋白受體抗體，其係選自由scFab、scF(ab')、scF(ab')2及scFv所組成之群中之單鏈抗體。
  17. 如請求項16之抗體，其係經由連接子序列將該抗體之輕鏈與重鏈結合者。
  18. 如請求項17之抗體，其係於該輕鏈之C末端側經由連接子序列而結合該重鏈者。
  19. 如請求項16之抗體，其係於該重鏈之C末端側經由連接子序列而結合該輕鏈者。
  20. 如請求項17之抗體，其中該連接子序列為包含8~50個胺基酸殘基者。
  21. 如請求項20之抗體，其中該連接子序列為包含選自由胺基酸序列Gly-Ser、胺基酸序列Gly-Gly-Ser、胺基酸序列Gly-Gly-Gly、序列編號3、序列編號4、序列編號5之各胺基酸序列、將3個序列編號3之胺基酸序列接連而成之胺基酸序列、及將1~10個該等連接子之胺基酸序列接連而成之胺基酸序列中者。
  22. 一種融合蛋白質，其係抗人類運鐵蛋白受體抗體與其他蛋白質(A)之融合蛋白質，並且該抗人類運鐵蛋白受體抗體為如請求項1或2之抗體，該蛋白質(A)係應到達至腦內而發揮其功能者， 該蛋白質(A)為結合至該抗體之輕鏈之C末端側或N末端側者。
  23. 如請求項22之融合蛋白質，其中該蛋白質(A)為直接或經由連接子而結合至該輕鏈之C末端側或N末端側者。
  24. 如請求項23之融合蛋白質，其中該蛋白質(A)為經由連接子而結合至該輕鏈之C末端側或N末端側者。
  25. 如請求項24之融合蛋白質，其中該連接子為包含1~50個胺基酸殘基之肽。
  26. 如請求項25之融合蛋白質，其中該連接子為包含選自由1個甘胺酸、1個絲胺酸、胺基酸序列Gly-Ser、胺基酸序列Gly-Gly-Ser、序列編號3之胺基酸序列、序列編號4之胺基酸序列、序列編號5之胺基酸序列、及將1~10個該等連接子之胺基酸序列接連而成之胺基酸序列所組成之群中之胺基酸序列而成之肽。
  27. 一種融合蛋白質，其係抗人類運鐵蛋白受體抗體與其他蛋白質(A)之融合蛋白質，並且該抗人類運鐵蛋白受體抗體為如請求項1或2之抗體，該蛋白質(A)係應到達至腦內而發揮其功能者，該蛋白質(A)為結合至該抗體之重鏈之C末端側或N末端側者。
  28. 如請求項27之融合蛋白質，其中該蛋白質(A)為直接或經由連接子而結合至該重鏈之C末端側或N末端側者。
  29. 如請求項27或28之融合蛋白質，其中該蛋白質(A)為經由連接子而結合至該重鏈之C末端側或N末端側者。
  30. 如請求項29之融合蛋白質，其中該連接子序列為包含1~50個胺基酸殘基之肽。
  31. 如請求項30之融合蛋白質，其中該連接子為包含選自由1個甘胺酸、1個絲胺酸、胺基酸序列Gly-Ser、胺基酸序列Gly-Gly-Ser、序列編號3之胺基酸序列、序列編號4之胺基酸序列、序列編號5之胺基酸序列、及將1~10個該等連接子之胺基酸序列接連而成之胺基酸序列所組成之群中之胺基酸序列而成之肽。
  32. 如請求項22之融合蛋白質，其中該蛋白質(A)為源自人類之蛋白質。
  33. 如請求項22之融合蛋白質，其中該蛋白質(A)為選自由神經生長因子(NGF)、溶酶體酶、睫狀神經滋養因子(CNTF)、神經膠細胞株神經滋養因子(GDNF)、神經滋養素3、神經滋養素4/5、神經滋養素6、神經調節蛋白1、紅血球生成素、達貝泊汀、活化素、鹼性纖維芽細胞生長因子(bFGF)、纖維芽細胞生長因子2(FGF2)、上皮細胞生長因子(EGF)、血管內皮生長因子(VEGF)、干擾素α、干擾素β、干擾素γ、介白素6、顆粒球 巨噬細胞菌落刺激因子(GM-CSF)、顆粒球菌落刺激因子(G-CSF)、巨噬細胞菌落刺激因子(M-CSF)、各種細胞激素、腫瘤壞死因子α受體(TNF-α受體)、PD-1配體、PD-L1、PD-L2、具有分解β澱粉樣蛋白之活性之酶、抗β澱粉樣蛋白抗體、抗BACE抗體、抗EGFR抗體、抗PD-1抗體、抗PD-L1抗體、抗PD-L2抗體、抗HER2抗體、抗TNF-α抗體、抗CTLA-4抗體、及其他抗體醫藥所組成之群中者。
  34. 如請求項22之融合蛋白質，該蛋白質(A)為溶酶體酶，且該溶酶體酶為選自由α-L-艾杜糖醛酸酶、艾杜糖醛酸-2-硫酸酯酶、人類酸性α-葡萄糖苷酶、葡萄糖腦苷脂酶、β-半乳糖苷酶、GM2活化蛋白質、β-己糖胺酶A、β-己糖胺酶B、N-乙醯葡萄糖胺-1-磷酸轉移酶、α-甘露糖苷酶、β-甘露糖苷酶、半乳糖神經醯胺酶、脂結合蛋白C、芳基硫酸酯酶A、α-L-岩藻糖苷酶、天冬胺醯胺基葡糖苷酶、α-N-乙醯基半乳糖苷酶、酸性神經磷脂酶、α-半乳糖苷酶A、β-葡萄糖醛酸苷酶、乙醯肝素N-硫酸酯酶、α-N-乙醯葡萄糖胺苷酶、乙醯輔酶Aα-胺基葡糖苷N-乙醯轉移酶、N-乙醯葡萄糖胺-6-硫酸酯酶、酸性神經醯胺酶、澱粉-1,6-葡萄糖苷酶、唾液酸酶、棕櫚醯蛋白硫酯酶-1、三肽基肽酶-1、玻尿酸酶-1、CLN1及CLN2所組成之群中者。
  35. 如請求項22之融合蛋白質，其中該蛋白質(A)為人類艾杜糖醛酸-2-硫酸酯酶、人類酸性α-葡萄糖苷酶、或人類α-L-艾杜糖醛酸酶之任一者。
  36. 如請求項32之融合蛋白質，其中該蛋白質(A)為人類酸性α-葡萄糖苷 酶，(1)該抗體之輕鏈為包含序列編號23之胺基酸序列而成，且(2)該抗體之重鏈於其C末端側經由胺基酸序列Gly-Ser而與人類酸性α-葡萄糖苷酶結合，藉此形成有序列編號57或序列編號58之胺基酸序列。
  37. 如請求項32之融合蛋白質，其中該蛋白質(A)為人類酸性α-葡萄糖苷酶，(1)該抗體之輕鏈為包含序列編號23之胺基酸序列而成，且(2)該抗體之重鏈為包含序列編號66或序列編號68之胺基酸序列而成，且該重鏈於其C末端側經由胺基酸序列Gly-Ser而與具有序列編號55或序列編號56之胺基酸序列之人類酸性α-葡萄糖苷酶結合。
  38. 如請求項32之融合蛋白質，其中該蛋白質(A)為人類酸性α-葡萄糖苷酶，該抗體為Fab抗體，(1)該抗體之輕鏈為包含序列編號23之胺基酸序列而成，且(2)該抗體之重鏈於其C末端側經由將3個序列編號3之胺基酸序列接連而成之胺基酸序列，而與人類酸性α-葡萄糖苷酶結合，藉此形成有序列編號89之胺基酸序列。
  39. 如請求項32之融合蛋白質，其中該蛋白質(A)為人類酸性α-葡萄糖苷酶，該抗體為Fab抗體，(1)該抗體之輕鏈為包含序列編號23之胺基酸序列而成，且(2)該抗體之重鏈為包含序列編號61之胺基酸序列而成，且該重鏈於 其C末端側經由將3個序列編號3之胺基酸序列接連而成之胺基酸序列，而與具有序列編號55或序列編號56之胺基酸序列之人類酸性α-葡萄糖苷酶結合。
  40. 如請求項32之融合蛋白質，其中該蛋白質(A)為人類α-L-艾杜糖醛酸酶，該抗體為Fab抗體，(1)該抗體之輕鏈為包含序列編號23之胺基酸序列而成，且(2)該抗體之重鏈於其C末端側經由將3個序列編號3之胺基酸序列接連而成之胺基酸序列，而與人類α-L-艾杜糖醛酸酶結合，藉此形成有序列編號93之胺基酸序列。
  41. 如請求項32之融合蛋白質，其中該蛋白質(A)為人類α-L-艾杜糖醛酸酶，該抗體為Fab抗體，(1)該抗體之輕鏈為包含序列編號23之胺基酸序列而成，且(2)該抗體之重鏈為包含序列編號61之胺基酸序列而成，且該重鏈於其C末端側經由將3個序列編號3之胺基酸序列接連而成之胺基酸序列，而與具有序列編號75或序列編號76之胺基酸序列之人類α-L-艾杜糖醛酸酶結合。
  42. 如請求項22之融合蛋白質，其係將人類IgG Fc區域或其一部分導入至該蛋白質(A)與該抗體之間而成者。
  43. 如請求項42之融合蛋白質，其係於該蛋白質(A)之C末端側直接或經 由連接子序列結合人類IgG Fc區域而成，且於該人類IgG Fc區域之C末端側直接或經由連接子序列而結合該抗體之重鏈或輕鏈而成者。
  44. 如請求項42之融合蛋白質，其中人類IgG Fc區域為包含序列編號70之胺基酸序列而成者。
  45. 如請求項44之融合蛋白質，其係包含序列編號71之胺基酸序列而成者，該胺基酸序列係藉由將人類IgG Fc區域經由連接子序列與包含序列編號61之胺基酸序列之Fab重鏈結合而形成。
  46. 一種DNA片段，其編碼如請求項1或2之抗人類運鐵蛋白受體抗體之胺基酸序列。
  47. 一種DNA片段，其編碼如請求項22之融合蛋白質之胺基酸序列。
  48. 一種表現載體，其係組入如請求項46之DNA片段而成。
  49. 一種哺乳動物細胞，其係利用如請求項48之表現載體進行轉形而獲得。
  50. 一種抗人類運鐵蛋白受體抗體-藥理活性物質複合體，其係於使通過血腦障壁而應於腦內發揮功能之低分子量藥理活性物質與如請求項1或2之抗人類運鐵蛋白受體抗體之輕鏈及/或重鏈之任一者結合而成者。
  51. 一種如請求項1或2之抗人類運鐵蛋白受體抗體之用途，其係用於製造用以治療中樞神經系統之疾病狀態之血中投予用藥劑，而與針對該疾病狀態之生理活性蛋白質或藥理活性低分子化合物之分子結合。
  52. 一種如請求項35之融合蛋白質之用途，其係用於製造用以治療龐貝氏症所伴隨之中樞神經系統之疾病狀態之血中投予用藥劑。
  53. 一種如請求項35之融合蛋白質之用途，其係用於製造用以治療Hurler症候群或Hurler-Scheie症候群所伴隨之中樞神經系統之疾病狀態的血中投予用藥劑。
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