TWI225404B - Pharmaceutical composition for treating hypercoagulable states or acquired protein C deficiency - Google Patents

Pharmaceutical composition for treating hypercoagulable states or acquired protein C deficiency Download PDF

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TWI225404B
TWI225404B TW087117061A TW87117061A TWI225404B TW I225404 B TWI225404 B TW I225404B TW 087117061 A TW087117061 A TW 087117061A TW 87117061 A TW87117061 A TW 87117061A TW I225404 B TWI225404 B TW I225404B
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Description

1225404
本發明係有關馐學,特定言之治療與活化蛋白質C有關 之凝血過快狀態或後天蛋白質c缺乏之方法。 蛋白質C為一種絲胺酸蛋白酶及天然之抗凝血劑,其透 過在一連串凝血過程中使“與^118因子不活化來阻斷凝 血酶生成之能力而在調節止血作用上扮演一個角色。人類 蛋白質C在活體内主要在肝中製造,為含461個胺基酸之單 一多肽。此前體分子進行多項轉譯後之修飾作用,包括n 製解一段42個胺基酸之訊號序列;2)自一條鏈型酶原上第 155位置之離胺酸及156位置上之精胺酸殘質上進行蛋白質 分解脫除,形成雙鏈型分子(亦即一條含155個胺基酸殘基 之輕鏈利用二硫橋連附接含絲胺酸蛋白酶之含2 6 2個胺基 酸殘基之重鏈),3)由群集在輕鏈上前42個胺基酸中之9個 麩胺酸殘基依賴維生素K進行叛基化作用,產生9個叛 基麩胺酸殘基;及4)於4個位置上附接碳水化合物(一個夂位 置在輕鏈上,其他三個在重鏈上)。重鏈含有已完全確認 為Asp 2 5 7、His 211與Ser 3 6 0之絲胺酸蛋白酶活體。最 後,成環狀之雙鏈酶原於活體内,於鈣離子之存在下,於 磷脂表面上、經凝血酶活化。由重鏈之N-末端處十肽脫除 而造成活化,產生具有酵素活性之活化蛋白質C ( a p c )。 aPC與其他蛋、白質結合時,其功能可能作為凝血作用中 最重要之向下調節物’以防止血栓。除了其抗凝血功能 外,aPC經由其抑制細胞素(例如:TNF與IL-1 )生成作用而 具有抗發炎效果,而且亦具有溶解血纖維蛋白原之性質, 有助於溶解血塊。因此蛋白質C酵素系統代表抗凝血、抗
D:\55136.ptd 第4頁 1225404 五、發明說明(2) 發炎、及溶解血纖維蛋白之主要生理機轉。 敗血病 敗血病之定義為對感染之全身性發炎反應,與許多宿主 防衛機轉(包括細胞素網路、白血球及補體與凝血/血纖維 蛋白溶解系統)之活化作用有關並受其調節。[米斯特 (Mesters)等人,血液學(Bl00d) 8 8:8 8 1 _ 8 8 6,1 9 9 6 ]。敗 血病/敗血丨生休克之早期症狀為多發性血管内凝血[D丨c ], 並於各種不同器官之微血管中有普遍血纖維蛋白沈積現 象。DIC為多重器官衰竭症候群發展之重要調節劑,且對 敗血病休克患者之預後有不良影響[弗利爾(F〇urrier)等 人,胸腔學(Chest) 101:8 1 6-8 23 ,1 992]。 已有文獻報告數項於各種動物模式中採用蛋白質c之令 人舞鼓之臨床前試驗。由泰勒(Tayl〇r)等人於狒狒敗血7病 模式中之研九[J· Clin. Invest, 79:918-25,1987]係採 用衍生白血t之人類活化蛋白質C。動物接受預防性處理 (亦即在開始2小時期間,藉由輸液LD⑽大腸桿菌來投與 aPC) °五隻動物中有五隻存活七天,且認為應為該實驗法 之永久存活者。在接受相同大腸桿菌輸液之對照組動物 中’五隻動物中有五隻於24至32小時内死亡。有效劑量為 7至8毫克/公斤。 = 在老鼠之脂多醣(LPS ;大楊桿菌)敗血病模式中[慕拉卡 米(Murakami)等人,血液學(Blood) 8 7:642- 647, 1996],因LPS誘發之肺血官傷害可受1〇〇微克/公斤劑吾下 之衍生自人類i漿之活化蛋白質C抑制。此外,在兔子^之
D:\55136.ptd 1225404 五、發明說明(3) --- 結紮與穿刺敗血病模式中,歐卡莫(〇kam〇t〇)等人[胃腸病 學(Gastroenterology )1〇6: A747 , 1994]證明衍生自血 水之人類活化蛋白質C於1 2微克/公斤/小時劑量下投與9小 %呀,可有效預防動物發生凝血病變。由於aPC具品種專 一性’因此此等動物所得之結果不一定可用於治療人類。 人類活化蛋白質C之有效劑量變化相當大,且無法依所選 用之動物模式預估。例如:人類活化蛋白質C在人體血清中 之半衰期為30至40分鐘,相較於在狒狒之半衰期為8至1〇 分鐘,在兔子體内則為9〇分鐘。 近年來有諍多研究試圖治療敗血病,大部份係採用可阻 斷與此疾病之病理生理學有關之發炎介體之藥劑。然而, 許多阻斷發炎介體之藥劑之臨床研究均未成功[參見納坦 森(Natanson)等人,Ann. Intern, Med· 1 2 0:7 7 1 - 7 8 3, 1994,吉巴地(Gibaldi),藥理醫療學(pharmacotherapy) 1 3 : 3 0 2 - 3 0 8,1 9 9 3 ]。由於許多涉及發炎之介體為代償性 反應,且因此有值待尊重的效果,許多研究者認為阻斷其 作用之作法並不適當[例如:帕里洛(p a r r i 1 1 〇),N. E n g 1. J· Med. 3 2 8 M 47 1 - 1 477,1 9 9 3 ]。 近年來’已有人提出阻斷DIC之作法為敗血病臨床試驗 之新目標(例如李維(Levi )等人,JAMA 270:975-979, 1 9 9 3 )。然而,單純地阻斷敗血病之凝缺陷並不足夠。如 艾斯蒙(E s m 〇 n)之討論,[動脈硬化與血栓 (Arteriosclerosis & Thromb·) 12:135-145 , 1992],數 種抗凝血劑在狒狒敗血病模式中並未展現功效,包括阻斷
D:\55136.ptd 第6頁 1225404 五、發明說明(4) 活性位置之Xa因子[泰勒(Tayi〇r)等人,血液學(M〇〇d) 78.364 368,1991]、血經素與hirulog[馬拉加法 (Maraganore) ’ 藥物發現與設計(perSpective in Drug Discovery and Design) 1:46 卜 47 8 ’1 9 94 ]。此等抗凝血 劑分別可阻斷動物之耗損性凝血病變,但無法改善存活 率。此外’日本的研究者[專利申請案JP7097335A]已提出 使用衍生自血漿之活化蛋白質C治療與肝功能不足有關之 凝血病變之方法,肝功能不足可能發展出類似D I C之症 狀。 目前,衍生自血漿之人類蛋白質C酶原已成功地用為積 極傳統療法之輔藥,在處理之2 5位罹患細菌性敗血病之暴 發性紫斑症時,有22位存活(奇爾森(Gerson)等人,小兒 科學(Pediatrics) 9 1:4 1 8-422,1 9 9 3 ;史密特(Smith)等 人,Thromb, Haemost,PS 1 7 0 9,p419,1 9 9 7 ;林塔拉 (Rintala)等人 ’Lancet 347:1767,1996 ;李瓦德 (Rivard)等人,J. Pediatr· 126:646-652,1995)。奇爾 森等人(1 9 9 3 )說明一項治療經證實罹患格蘭陽性細菌血症 及暴發性紫斑症之兒里之研究’該患者對積極性傳統療法 沒有反應。以衍生自血漿之人類蛋白質C酶原(280微克/公 斤大丸劑+ 4 0微克/公斤/小時輸液)治療患者時,連帶修正 凝血病變與D I C,並遏止與敗血性休克有關之暴發性紫斑 症之臨床症狀發展。林塔拉(Rintala)等人[1996]之報告 提出治療2位罹患出現暴發性紫斑之腦膜炎球菌性敗血病 之成人之方法。患者接受衍生自I漿之蛋白質C酶原,於
D:\55136.ptd 第7頁 1225404 五、發明說明(5) 4 0 0微克/公斤大丸劑劑量下,每6小時治療一次,共8至1 〇 天。一位死亡,一位存活。李瓦德等人[·1 9 9 5 ]之報告指 出,依人類蛋白質C酶原療法治療四位罹患出現暴發性紫 斑之腦膜炎球菌血症患者時,全部存活。此等患者每6小 時接受4 0 0微克/公斤大丸劑之劑量處理。雖然此等研究之 樣本數少,但與出現暴發性紫斑症之腦膜炎球S血症有關 之死亡率超過50 % [包瓦爾(Powars)等人,臨床傳染病學 (Clin· Infectious Diseases 17:254-261 , 1993]。然 而,由於此等研究係採用人類蛋白質C酶原進行,因此對 活化蛋白質C療法應採用之劑量及時間期之建議不多。 除了腦膜炎球菌血症外,暴發性紫斑症與/或D I C亦與數 種細菌性、病毒性、或原蟲感染有關,其包括(但不限 於):由立克次體(洛磯山斑疹熱、壁蝨熱、斑疹傷寒,等 等)[葛雷畢爾(Graybill)等人,南方醫學期刊(Southern Medical Journal),66(4):410-413,1973 ;洛伯斯 (Loubser)等人,熱帶小兒科年報(Annals of Tropical Paediatrics) 13 : 2 7 7 - 2 8 0,1 9 9 3 ];沙門氏菌(傷寒、鼠 疫)[高爾(Koul)等人,Acta Haematol ,93:13-19, 1995];肺炎球菌[卡本特(Carpenter)等人,Scand J Infect Dis ,2 9 : 47 9-48 3 ,1 9 9 7 ]、耶爾氏菌(Yersina pest is)(淋巴腺鼠疫)[布德勒(But ler)等人,傳染病期刊 (The Journal of Infectious Disease) j 129:578-584 ? 1974] ; Legionella pneumophila (Legiona.ires 症);瘧 原蟲(Plasmodium falciparuni)(腦型癔)[李卡里
D:\55136. ptd 第8頁 1225404 五、發明說明(6) (Lercari)等人 ’Journal of Clinical Apheres i s, 7:9 3 - 9 6,1 9 9 2 ];類鼻疽布克哈菌(Burkholderia pseudomallei)(類鼻疽);類鼻疽假單胞菌(類鼻疽)[布特 奇里(Puthucheary)等人,熱帶醫學與衛生皇家學會會報 (Transactions 〇f the Royal Society of Tropical Medicine and Hygiene) ’86:683-685,1992];鏈球菌 (齒質原感染)[Υ·歐塔(Ota),日本感染病學會期刊(j. Japanese Assoc. Infect. Dis,68:157-161];帶狀皰療 病毒[尼克彥(N g u y e η )等人,歐洲小兒科期刊(E u r. J.Pediatr ’153:646-649,1994];炭疽芽泡桿菌(Bacillus anthracis)(炭疽)[法蘭S(Franz)等人,美國醫學會期刊 (Journal of the American Medical Assoc.), 278(5):399-411,1997];細螺旋體(Leptospira interrogans)(細螺旋體病)[希爾(Hill)等人,呼吸感染 症論文報告(Seminars in Respiratory Infections, 12(1):44-49 ’1997];葡萄球菌[Μ·李文(Levin),小兒腎 病學(Pediatric Nephrology) 8:2 23-2 2 9 ];埃及嗜血桿 菌(Haemophilus aegyptius)(巴西紫斑熱);奈瑟氏菌 (N e 1 s s e r i a )(淋球菌血症、腦膜尖球菌血症);及結核桿 菌(mycobacterium tuberculosis)(粟粒狀結核)。 雖然敗血病/敗血性休克或其他感染症中之暴發性紫斑 症、D I C或後天蛋白質C缺乏症等病症已如上述詳細說明於 文獻中,但有關以此等活化蛋白質C治療此等患者之數據 太少。由於蛋白質C之生物作用具品種專一性,因此很難
D:\55136.ptd 第9頁 1225404 五、發明說明(7) 由動物模式中以活化人類蛋白質C處理所產生臨床前藥理 數據來確立人類劑量。 移植 汗多與移植有關之血栓性插塞併發症可能發生在骨髓移 植(BMT)、肝、腎或其他器官移植之後[哈里(Ha i re)等 人 ’JAMA 274:1289-1295 ’(1995);哈普(Harper)等人, Lancet 9 2 4- 9 2 7 ( 1 98 8 );及索倫森(Sorensen)等人,J, Inter· Med· 2 2 6:1 0 1 - 1 0 5 ( 1 9 8 9 );高登(Gordon)等人, 骨髓移植(Bone Marrow Transplan 1 1:6 1 - 65 ( 1 9 9 3 )]。 有報告指出在BMT[巴查巴奇(Bazarbachi)等人,Nouv Rev Fr Hematol 35:135-140 (1993);高登(Gordon)等人,骨 驗移植11:61-65 (1993)]、腎移植[索倫森等人,j. Inter· Med· 226:101-105 (1989)]及肝移植[哈普等人, Lancet 924-927 (1988)]之後’循ί哀之蛋白質c含量減 少。此蛋白質C缺乏造成凝血過快狀態,使得患者處於併 發血栓性插塞之危險。 例如:肝之靜脈閉塞症(V0D)為ΒΜΤ之移植前療程中主要 受劑量限制之併發症。由於血管内有血纖維蛋白沈積,用 此V0D可能為肝微靜脈内小堵塞之結果。[費歐尼(Fa ion i ) 等人,血液學(Blood) 81:34〇8_3462 (1993)]。此外, V0D導致BMT之後之發病率及死亡率相當高(柯林斯(Collins)等人,Throm and Haemo '72:28-33 (1994)]。 已有報告指出蛋白質c含量下降之現象與V0D發生率之高峰 一致。[哈普等人,骨髓移植5 : 3 9 - 4 2 ( 1 9 9 0 )]且似乎為造
D:\55136.ptd 第10頁 1225404 五、發明說明(8) 成此病症之因素。 BMT後之器官功能障礙包括肺、中樞神經系統、肝或 月,為移植患者常出現之南百分比併發症。(哈里等人, JAMA 2 74:1 2 8 9 - 1 2 9 5 ( 1 9 9 5)]。BMT 中單一器官功能障礙 為導致BMT患者死亡之多重器官功能障礙症候群(於〇])3)之 強烈預測因素。因凝血系統大量活化所造成之多發性血管 内凝血(D I C)及血纖維蛋白廣泛沈積在各種不同器官之微 血營中之中現象為發展成MODS之重要介體(弗瑞爾 (Fourrier)等人,胸腔學(Chest) 1〇1:816_823 (1 9 9 2 )]。因此已進行骨髓移植或其他器官移植之患者之 蛋白質C含量缺乏會造成凝血過快狀態,使患者容^併發 靜脈血栓性插塞'器官功能障礙,目前需要決定一種利又 活化蛋白質C治療羅患i哭官務措右μ 人類之方法。 一-“多植有關之砝血過快狀態之 燒傷 長久以來即已知嚴重掉卢έ本山 發症(柯里α町eri)等;^Α ^現與凝血過快有關之併 (19川]。燒傷患者具有超手正\Sum:161 — 163 經常發展出DIC,其特徵p妖::试官内凝結活性’且 纖維蛋白質、血小板、上發作擴散性出血;消耗血 發性血纖維蛋白溶解; *子活性;血管内溶血;續 斯(McMan i s )等人,|彳昨从血锃之活體檢視證據[麥卡尼 1 3:4 1 6 -422,1 9 7 3 ]期刊(J.〇nra剛) 之蛋白質C含量大幅下=來^有報告指出,嚴重燒傷患者 牛,^種天然抗凝血劑減少會提高
D:\55136.ptd 第Η頁 1225404 五、發明說明(9) ---------—«—_ DK之危險性[羅(L〇)等人,燒傷(Burns) 2 0:1 8 6 — 1 8 7 ( 1 9 94 )]此外,烏亞瑪(ueyama)等人在討論到燒傷早期 之D I C發病丁蚪,其結論為凝血酶形成量增加及抗凝血 活下降的程度可隨燒傷嚴重性呈比例變化(烏亞瑪 人 Nippon Geka Gakkai Zasshi 9 2 : 9 0 7- 1 2 ( 1 9 9 1 )] DIC為嚴重燒傷患者常見之併發症之一。 。 、如上述文獻指出,嚴重燒傷患者會出現蛋白質c缺乏, 然而,很少有數據提及蛋白質C置換療法是否有、 使用活化蛋白質C治療此等患者。 文$如何 懷孕 、2知懷孕會,致凝血系統出現多重變化,造成凝血過快 狀恶。例如:懷孕期間及分娩後,靜脈血栓之危險率幾 比未懷孕狀態高5倍導诜外,凝結因子增加、凝血作用之 天然抑制劑減少、血纖維蛋白溶解系統發生變化、靜脈營 滯提高、及分娩排出胎盤 '剖腹產或感染時之血管受傷辦 加[巴伯(Barbour)等人,〇bstet Gynecol· 86:621-633, 1 9 9 5 ]。 …, 雖然沒有任何危險因子之婦女因此凝血過快狀態而產生 併發症之危險性很小,但有血栓性插塞病史的婦女則在卜牵 孕時會提高會復發的危險性。此外,處於凝血過快狀離^ 婦女(包括最近發現對活化蛋白質C有遺傳性抗性者)亦有 復發的高危險性[達貝克(Dahlback),血液學(Bl〇〇d) 85 . 607-614 , 1995] 。 * 因此,有人認為被發現缺乏抗凝血酶-I I I、蛋白質c或
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1225404 五、發明說明(ίο) 蛋白質S之靜脈血栓性插塞病史之婦女復發血栓之危險性 相當大,且應接受預防性抗凝血療法[康拉德(Conrad)等 人,Throm Haemost 63:319-320 , 1990]。 孕婦之初期子齋與子癲似羊為凝血病變提高之狀態,因 為血纖維蛋白之形成增加、血纖維蛋白溶解系統活化、血 小板活化及血小板數減少[C 1 i η 0 b s t e t G y n e c ο 1 3 a : 3 3 8 - 3 5 0,1 9 9 2 ]。初期子癲被視為因胎盤之n血管附著 π異常而致之子宮與胎盤缺血。初期子癲後果包括高血壓 及D I C ’導致許多微血栓釋出,造成胎盤、腎、肝及腦損 害(Rev· Fr Gynecol Obstet 86:158-163 , 1991]。此 外,初期子癲可能導致嚴重的致命病症,已知為HELLP症 候群’其定義為併發血小板減少、溶血及肝功能障礙之初 期子癲[拉格柏(Rathgeber)等人,Anasth Intensivther Notfallmed 25:2 0 6 - 2 1 1,1 9 9 0 ]。此外,已有文獻證實罹 患嚴重初期子癲之孕婦相較於正常孕婦,具有減少之蛋白 kC 含 I[狄史帝务諾(j)e Stefano)等人,Thromb Haemost 74: 7 9 3 - 7 94,1 9 9 5 ]。 因此,孕婦之主要顧慮為發生靜脈血栓性插塞併發症之 危險’尤其是有血栓性插塞病史之婦女。雖然嚴重併發症 (如:初期子癲或D I C)之可能性相當低,但有人認為當一旦 經診斷出即應開始治療D I C,開始抑制活化凝血系統。[拉 柏格等人,Anasth Intensivther Notfallmed 2 5 · 2 0 6 - 2 1 1 ’ 1 9 9 0 ]。初期子癲或D I C之併發症類似敗血病 所出現之症狀,亦即凝血過快狀態及蛋白質C含量下降。
D:\55136.ptd 第13頁 1225404 五、發明說明(11) 重大手術/創傷 自重大手術或意外創傷中恢復之患者經常因誘發凝血過 快狀態而發生金液凝結併發症(華金斯(Watkins)等人,
Klin Wochenschr 63:1019-1027 ,1985]。手術患者因靜 脈血栓性插塞而致凝血過快狀態之情形逐漸增加[湯瑪斯
(Thomas)等人,Am J Surg, 158:49 卜 494,1989 ;J.R.李 克拉克(L e C 1 e r c ) ’ C 1 i n A p p 1 T h r ο ni b 〇 s i s / H e m 〇 s t a s i s 3 ( 3 ) : 1 5 3 - 1 5 6,1 9 9 7 ]。此外,這種凝血過快狀態可能併 發類似D I C之症狀,這種情形不常見,但一旦發生則會受 害且經常致死。[柯林斯(Collins)等人,Am J Surg· 1 24: 3 7 5 - 3 8 0,1 9 9 7 ]。 —此外’進行冠狀動脈繞道移植(CABG)[孟格斯(Menges) 等人,J. Cardiothor Vase An· 10:482-489 , 1996]、重 大 24 脊柱手術[邁爾(Mayer)等人,Cl in Orthop. 0:83-89,1 9 8 9 ]、重大腹部手術[布拉米(Biamey)等 人 ’Thromb· Haemost. 54:622-625,1985]、重大整形手
禽或下肢關節造形術[李克拉克,1 9 9 7 ]或其他型態的早術 [旬瑪斯等人,Am J. Surg. 1 5 8:4 9 1 -4 94,1 9 8 9 ]之患 者’經常發展出靜脈血栓性插塞併發症。此外,日本的研 九者已提出對成人使用1至1 〇毫克/天劑量(或較佳者’分 成1至2次,每次2至6毫克)之衍生自血漿之蛋白質c,奚大 丸刻或利用靜脈内輸液之方式,治療與脊柱傷害有關之微 皿官贏检之方法[專利申請案JP8325161 A]。 有人認為抗凝血療法為預防重大手術或創傷患者出現靜
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五、發明說明(12) 脈血栓性插塞之重要預防性療法[湯瑪斯等人,工9 8 ^ . 克拉克,1 9 9 7 ]。例如:許多因肺拾塞而死亡之患』9/李 床證據顯示曾患血栓性插塞’且在診斷及治療^ ς 亡[李克拉克,1 9 9 7 ]。現有之預防方法例如:威化愈 死 (warfarin)(係低分子量肝素)受限於如二 或需要經常調整劑量。 ·殘邊之近側血栓
ARDS 成人呼吸困難症候群[ARDS]之特徵為肺水腫、微血栓、 發炎細胞浸潤、及晚期纖維變性。此等多重細胞與發炎反 應之重點在於活化凝血作用,造成凝血過快狀態。^見與 ARDS有關之/旋企病變包括血管内凝血及抑制血纖維蛋白溶 解。因凝血系統活化及抑制血纖維蛋白溶解而形成之血纖 維蛋白為急性肺傷害之發病原因。敗血病、創傷或其他重 大疾病為k成ARDS之重要危險因子[哈加瓦(Hasegawa)等 人’胸腔學(Chest) 105 (1):268-277 ,1994]。 ARDS與凝血作用活化及抑制血纖維蛋白溶解有關。現已 有相當多臨床證據顯示肺部出現肺血管微血栓,此點類似 D 1 C出現之凝血過快狀態。因此目前需要有效治療與ARDS 有關之凝i過快狀態之方法。 為了方便比較文獻及專利案件中說明之蛋白質C劑量, 在表ί出示數項人類或非人類靈長類研究之規格化劑量。 此5數據確遇高於或低於本發明所提供劑量之劑量。值得 主思的是’人類研究中採用衍生自血漿之蛋白質C酶原, 而非人類靈長類研究中採用重組之人類aPC進行。
1225404 五、發明說明(13) 表I 參考文獻 公佈之劑量 規格化劑量一 泰勒(Taylor)等 人,美國專利案 No,5,009,889 經靜脈內投與2至64微克aPC/公 斤/分鐘;可另投與1至10毫克aPC 之大九劑[第5欄,第14-19行] 120微克/公斤/小 時至3800微克/公 斤/小時輸液8至10 小時 李瓦德(Rivard) 等人,J. Ped. 126:646,1995 在急性期待,每6小時,於15至 20分鐘期間,經靜脈內投與100 IU*/公斤衍生自血漿之蛋白質C酶 原,然後每天1至2次,共9天。 [p.648,第1攔,第1段] 15至20分鐘內 400微克/公斤 易 ^^(Gersoii)寺人 ,Ped. 91:418-422 ,1993 每6小時經靜脈內投與大丸劑劑量 70 IU*/公斤衍生自血漿之蛋白質C 酶原。隨後連續輸液10 IU/公斤/ 小時共11天。 [ρ·419,第2欄,第1段] 每6天投與280 微克/公斤大丸劑, 然後連續輸液40 微克/公斤/小時, 共11天 林塔拉(Rintala)等 人,Lancet, 347:1767,1996 得到許可後3小時開始經靜脈內投 藥,連續7天。每6小時100 IU*/ 公斤衍生自血漿之蛋白質C,隨後 調整劑量至血漿蛋白質C活性 [p.1767,第2欄,第2段] 每6小時400 微克/公斤大九劑, 共7天 史密特(Smith)等 人 ’Thromb. Haem., PS-1709 , 1997 每位患者之承載劑量爲100IU*/公 斤衍生自血漿之蛋白質C酶原, 然後連續輸液15 IU/公斤 [p.419,第 1欄,PS-1709] 4〇〇微克/公斤大九 劑+ 60微克/公斤/ 小時(未出示輸液 時間) _規格化劑量爲已轉換爲相當於微克/公斤/小時之報告齊懂 等於約4微克PC *
D:\55136.ptd 第16頁 五、發明說明(14) 表I (續) 參考文獻 公佈之劑量 規格化劑量· Fujiwara 等人, 曰本專利案 JP7097335A 一般劑量爲20-1000 U**衍生自血 漿之APC/公斤體重沃,或更高, 以50至300 U/公斤較佳,分1至 2次投藥。投藥方法最常用靜脈內 輸液法[ρ·9,第0016段] 4微克/公斤至 200微克/公斤 未出示輸液時間 Okajima 等人 曰本專利案 JP8325161A 衍生自血漿之PC或APC對成人 之有效劑量爲1至10毫克/天,或 最好分成1至2次共投與2至6 毫克。投藥方法可使用大九劑投藥 (單次投藥)或靜脈內輸液 [p.10,第 0013 段] 42微克/小時至 420微克/小時 Okajima 等人, Aner. J. of Hematology, 33:277-278 (1990) 投與衍生自血漿之APC (3毫克/天,共2天,然後6毫克/ 天,共3天) [p.278,第1欄,第一段全段] 2微克/公斤/小時 及 · 4微克/公斤/小時 班(Bang)等人, 美國專利案 4,775,624 活化之蛋白質C之承載劑量範圍 爲1至10毫克,然後連續輸液, 劑量範圍爲3至30毫克/天 [第丨9欄,第55·59行] 1.8至18微克/公斤 /小時 未出示輸液時間 ,IU之定義爲使正常人類血漿中活化凝血酶原時間(APTT)加倍時之劑
量。換算成約5單位/微克APO 第17頁 ΰ:\55136. ptd
1225404 五、發明說明(15) 然而儘官有了 些報告,對罹患與敗血病、移植、燒 傷、懷孕、重大手術、創傷或ARDS有關之後天凝Α過快狀 態或後天蛋白質C缺乏之患者安全且有效療法之劑量療程 卻仍不f。疋公研九然法頂估本發明重纟且活化蛋白質C於 治療人類之凝血過快狀態或後天蛋白質c缺乏上之用途。 本發明揭示aPC於嚴重敗血病患者之臨床試驗上之用 途。此开思者中’ T-aPC處理組證實在器官功能、降低 D I C標記物及降低死亡罕上’均比安慰劑對照組有統計上 顯者之改舌。嚴重敗血病思者採用之a P C劑吾為在4 8小時 輸液中之12、18、24與30微克/公斤/小時。此研究中,μ 及1 8微克/公斤/小時之劑量無效。令人驚舒的是,此研究 中採用之24與30微克/公斤/小時為有效劑量,且意外地大 幅低於已公開之臨床前醫榮數據。 此外,本申請者已發現,非人類靈長類之臨床毒物學試 驗中指出輸液96小時之aPC之安全劑量上限為約5〇微克/公 斤/小時=當與先前技藝比較時,此等數據亦令人意外3 子灵上,根據上述臨床前及臨床研究之人類之apC劑量將 超過上述毒物學研究中所確立之毒性範圍。 μ +發明提供一種治療罹患後天隸血過快狀態或後天蛋白 ,貝c故乏之人類患者之方法,其包枯對該患者持續輸液約 24 ^約144小時之活化蛋白質C,其劑量為約20微克/公斤/ J Ί主Ά 〇 0微克/公斤/小時。 本發明尚提供一種治療罹患後夭凝血過快狀態或後天蛋
1225404 五、發明說明(丨6) 量之活化蛋白質C,使活化蛋白質C之A漿含量達2毫微克/ 毫升至200亳微克/毫升之範圍。 因此,本發明建立利用aPC治療人類患者與敗血病、暴 發性紫斑症、及緇膜炎球菌血症有關之凝血過快狀態之方 法。 本發明建立利用aPC治療與嚴重燒傷有關之凝血過快狀 態或蛋白質C缺乏之方法。 本發明建立利用aPC治療與骨髓及其他器官移植有關之 凝血過快狀態或蛋白質C缺乏之方法。 本發明建立利用aPC治療與接受重大手術或嚴重創傷或 自其中恢復之人類患者有關之凝血過侠狀態或蛋白質C缺 乏之方法。 本發明建立利用aPC治療與懷孕期間併發症有關之凝A 過快狀態或蛋白質C缺乏之方法。 本發明尚提供一種治療人類患者與ARDS有關之後天凝血 過快狀態或後天蛋白質C缺乏之方法。 為了本發明之目的本文所說明及申請專利範圍所述之本 發明目的,下列名詞之定義如下。 a P C或活化蛋白質〔係指重組活化蛋白質(3。3?0包括較佳 者之人類蛋白質C, 但aPC亦可包括具有完整蛋白質C蛋白 質分解活性、趋胺基分解活性、詣分解活性、及生物活性 (抗凝血與溶解血纖維蛋白原)之其他物質或衍生物。蛋白 質C衍生物實例已說明於葛立茲(Ge r 1 11 z )等人,美國專利 案No. 5, 4 5 3, 3 7 3,及弗斯特(Foster)等人,美國專利案
D:\55136.ptd 第19頁 1225404 五、發明說明(17) No. 5, 516, 650,該等文獻之完整内容係以提及之方式併 入本文中。重組活化蛋白質C可於試管内由活化重組人類 蛋白質C酶原製造或直接分泌蛋白質C之活化型產生。蛋白 質C可於細胞、真核細胞、導入外來基因之動物、或導入 外來基因之植物中產生,包括例如:由人類腎2 9 3細胞分泌 為酶原,然後利用相關技藝已知之技術純化及活化。 治療-係說明為了對抗疾病、病症或病變而進行之處理 與照護,包括預防性投與aPC,以防止該疾病、病症或病 變之症狀或併發症開始出現,或投與aPC以消除該疾病、 病症或病變。 連續輸液-連續且實質上不間斷地在靜脈中輸入溶液一 段指定的時間期。 大丸劑注射-在一段至長約1 2 0分鐘之時間内注射指定量 之藥物(稱為大丸劑)。 適合投藥-指一種適合作為醫療劑投與之冷凍乾燥調配 物或溶液。 容器-指用於接收指定物質,亦即之aPC容器如:小瓶或 大瓶。 單位劑型-係指適合單位投藥給人類患者之物理性分離 單位,每單位包含經計算可產生所需療效之預定量活性物 質,與合適之醫藥賦形劑組合。 凝血過快狀態-與多發性血管内凝jk作用、血栓前病 症、凝血作用活化或先天或後天凝結因子(如a P C )缺之等 有關之凝血過诀.。
D:\55136.ptd 第20頁 1225404 五、發明說明(18) 酶原-在本文中係指蛋白質C酶原,並指蛋白質C之分泌 不活化型,不論一條鏈或兩條鏈。 未成年-指包括(但不限於)18歲以下之新生兒、嬰兒及 兒童之人類患者。 有效量-某醫藥化合物之醫療有效量。 暴發性紫斑症-與細菌性敗血症、病毒、細菌或原生ά 感染有關之瘀斑性皮膚損傷、發燒、低血壓。通常出現多 發性血管内凝血。 本發明係有關以活化蛋白質c治療或預防與敗Α病、移 植、燒傷、懷孕、重大手術、創傷或ARDS有關之凝血過快 狀態或後天蛋白質C缺乏之方法。aPC可依相關技藝習知之 技術採用真核細胞株、導入外來基因之動物或導入外來基 因之植物製備。相關技藝專家們咸了解,適當之宿主真核 細胞株包括(但不限於):HEPG*~2、LLC -MK2 'CH0-K1、 2 9 3、或AV 12細胞,其實例已說明葛林奈爾(Grinnel 1)之 美國專利系N 〇, 5,6 8 1,9 3 2 ’該案係以提及之方式併入本 文中。此外,重組蛋白質之導入外來基因式生產實例說明 於達拉漢(Drohan)等人之美國專利案No. 5,589,604及阿 奇巴德(Archibald)等人之美國專利案No. 5,650,503,該 案係以提及之方式併入本文中。 依此等任何方法製成之a PC為了可在本方法中完全活化 及操作,必須進行後轉譯修飾,如:添加9個7 -羧基-麩胺 酸鹽(r -羧酸化,亦即G 1 a含量),添加1個赤藓。/5 -羥基 -A S P ( /3 -羥基化),添加4個A s η -鏈結之寡聽(糖基化),排
D:\55136.ptd 第頁 !2254〇4 五、發明說明α9) 除前導序列(42個胺基酸殘基)及排除二肽Lys 156-Arg 1 57。若未經過這種後轉譯修飾時,aPC無法發揮其完全功 貪匕或無功能。
Ape可根據已知方法調配成醫藥上適用之組合物。apc將 依非經腸式投藥,依有效形式,利用連續輸液約24至約 144小時之方式注射適當劑量,以確實傳送至血流中。aPC 之投藥量約2 0微克/公斤/小時至約5 0微克/公斤/小時。更 佳者,aPC之投藥量約22微克/公斤/小時至約40微克/公斤 /小時。甚至更佳者,a P C之投藥量為約2 2微克/公斤/小时 至約30微克/公斤/小時。最佳之aPC之投藥量為約24微克/ 公斤/小時或約3 0微克/公斤/小時。 或者,aPC之投藥量為每小時利用大丸劑注射約5分鐘至 約1 2 0分鐘,注射一部份(1 / 3至1 / 2 )適當劑量後,連續輸 液適當劑量約23小時至約1 44小時,使得在24小時至1 44小 時期間内投與適當劑量。 本申請者只在小心控制之臨床試驗及洋淘之貫驗研九之 後方發現連續輸.入約2 0微克/公斤/小時至約5 0微克/公斤/ 小時之劑量約2 4小時至約1 4 4小時後,可產生有效醫療。 治療本文所述罹患後天凝血過快狀態或後天蛋白質c缺乏 之人類患者之最佳a P C投藥劑量為約2 4徵克/公斤/小吟3 製法1 人類蛋白質C之製法 依相關技藝專家習知之技術’如楊(Yan)於美國專利案 Ν〇· 4, 981,9 5 2 (該案全部以提及之方式併入本文中)中說
D:\55136.ptd 第22頁 5404 五、發明說明(20) 明之技術,於人類腎2 9 3細胞中生產重組人類蛋白質c ( r 〜hPC)。編碼人類蛋白質c之基因已揭示於班(Bang)等人之 美國專利案No· 4, 775, 624(該案全部以提及之方式併入本 文中)中’並申頭寻利權。用於在293細胞中表現人類蛋白 貝C之質體為質體p l p c,其係揭示於班等人之美國專利案 4,992, 373,該案全部以提及之方式併入本文中。質體 pLPC之構築法亦說明於歐洲專利公告#Ν〇· 〇 445 9 3 9, 及葛林著爾(Grinnell)等人,1987,生物技術學 (Bio/Technology) 5:1 1 8 9 - 1 1 9 2,該案亦以提及之方式併 入本文中。簡言之,將質體轉感染至2 9 3細胞中後,鑑別 穩定之轉形體,次培養,並於無血清培養基中生長。醱酵 後,經微過濾法得到無細胞之培養基。 採用楊(YAN)述於美國專利案No. 4, 981,9 5 2之技術(該 案全部以提及之方式併入本文中),自培養液中分離人類 蛋白質C。澄清化之培養基先於EDTA中調至4 πιΜ後,再吸 附在陰離子交換樹脂(快流Q,法馬公司(F a s t - F 1 〇 w Q, Pharmacia)上。以4 倍管柱體積之 20 m M Tris,200 m Μ
NaCl,pH 7. 4 及2 倍管柱體積之20 mM Tr is、150 mM N a C 1,p H 7 · 4 洗蘇後’以 2 0 m Μ T r i s、1 5 〇 m Μ N a C 1、1 〇 ni M C a C “,p H 7 . 4溶離結合之重組人類蛋白質C酶原。溶 出之蛋白質於溶離後經過SDS聚丙烯醯胺凝膠電泳法判斷 之純度在9 5 %以上。 蛋白質之進一步纯化法為由蛋白質於NaCl中調成3 Μ, 然後吸附在已於20 niM Tris、3 M NaCl、10 mM CaCl2,
D:\55136.ptd 第23頁 1225404 五、發明說明(21) Ρ Η 7 . 4中平衡之疏水性父互作用樹脂上(了 〇 y 〇 p e a Γ 1 Pheny 1 650 Μ,TosoHaas)。 以2倍管柱體積不含CaCi2之 平衡邊衝液洗蘇後,以2 0 nuM T r i s p Η 7 . 4溶出重組人類 蛋白質C。 所溶出之蛋白質經排除殘留之鈣而活化。使重組人類蛋 白質C通過金屬親和性管柱(Chelex_1〇〇,Bi〇 — Rad)以排除 舞’再度結合在陰離子交換劑上(快流Q,法馬公司)。這 兩支管柱係接續排列,並於2〇 _ Tris、15〇 g NaCl、5 mM EDTA,PH 6·5中平衡。添加蛋白質後,以一倍管柱體 積之相同緩衝液洗滌Cheiex-ioo管柱後才拆開。以3倍管 柱體積之平衡缓衝液洗滌陰離子交換管柱後,以〇. 4 μ NaCl、20 mM Tris-乙酸鹽,pH 6. 5溶離蛋白質。分別以 U V 2 8 0 nm消光度Ε<)· L°二1 · 8 5或1. 9 5測定重組人類蛋白質C與 重組活化蛋白質C溶液之蛋白質濃度。 製法2 重組人翻I白曾p夕、;壬介 由牛=^酶於5〇_肚?^,1)}17.5之存在下,於41 下 ’、 UCH賽弗洛斯(sepharose) 4B(法馬公司)偶 合/於^裝填至管柱中之樹脂上,使闻约5〇〇〇單位凝血酶 /樹脂進行偽合反應。凝血酶溶液先流經管柱循環约3 小時後’方添加MEA至循環溶液中濃度達〇· 6毫升/升。含 Μ E A各液ττ如每1 〇至1 2小時,確使樹脂上未反應之胺完全 封阻。封阻後’與凝血酶偶合之樹脂以1 〇倍管柱體積之1 M NaC1 2(3 mM Tris ’ pH 6. 5洗滌,以排除所有非專一性
O:\55136. ptcl 第24頁 1225404 五、發明說明(22) 結合之蛋白質,並於活化缓衝液中平衡後,用於活化反 應。 純化之r-hPC於EDTA中調至5 mM (以螫合任何殘留之 鈣),並以20 mM Tris,pH 7. 4 或2 0 mM Tris-乙酸鹽,pH 6. 5稀釋至濃度2毫克/毫升。此物質流經已於37 °C下經50 mM NaCl 及 20 mM Tris pH 7.4 或 20 mM Tris-乙酸鹽,pH 6. 5平衡之凝血酶管柱。調整流速,使了-hPC與凝血酶樹 脂之間之接觸時間約2 0分鐘。收集流出液,立即分析建胺 基分解活性。若該物質之比活性(醯胺基分解活性)未相當 於已知之aPC標準時,則再經凝血酶管柱循環,使r -hPC 完全活化。然後依上述以2 0 mM缓衝液稀釋物質1 : 1,其 p Η在7 . 4或6 · 0間(較低之p Η較適於防止自體分解),以係持 aPC在較低濃度下,同時等候用於下一個加工步騾。 自a P C物質中排除濾出凝血酶之作法為由a P C結合在已於 活化作用緩衝液(2 0 in Μ 丁 r i s,p Η 7 . 4或較佳者2 0 m Μ Tris-乙酸鹽,pH 6.5)中使用150 mM NaCl平衡之陰難子 交換樹脂(快流Q 7法馬公司)上。使凝血酶通過管柱,以2 至6倍管柱體積之2 0 ππ\1平衡缓衝液洗滌時溶離出。結合之 a P C則使用含0 . 4 Μ N a C 1之5 m Μ T r i s -乙酸鹽,ρ Η 6 . 5或 2 0 mM Τη s,pH 7. 4分段梯度溶離出。使用更多倍管抂體 積洗滌可更完全排出該十二肽。自此管柱溶離出之物質存 放在冷凍溶液中(-2 0 °C )或呈冷凍乾燥粉末。 aPC之醯胺基分解活性(AU)測定法係採用貝克曼 (B e c k m a n ) D U - 7 4 0 0雙極排列光度計,測定合成性受質
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Η-D-Phe-Pip-Arg-對硝基醯基替关 一 y 八 、 本 fe(S一 223 8 )(購自卡比 非成么司(Kabi VUrum)釋出之對硝基醯美 一 位活化蛋白質C之定義為於25 °C及dH 7 4 土 " 早 > 久ΡΗ 7.4下,於1分鐘肉择 出1微莫耳對硝基醯基替苯胺時所费 主3 ' ^ 對石肖基基替苯胺於4 0 5 nm下之洁古作如达 、:1 < ♦先係數為9 6 2 0 M^cnT1測 定0 =化蛋曰質C之抗凝血活性t測定法為纟活化部份 血酶原激酶時間(APTT)凝結分析法測定凝結時間延長程 度。於稀釋緩衝液(1毫克/毫升放射免疫分析級BSA,?0 mM Tns,PH 7.4 ’150 mM IC1 ,0.02% NaN3)中,蛋白 質濃度範圍在125至1000毫微克/毫升下’製備標準曲線’ 同時在此,度範圍内。於數種稀釋度下製備樣本。在每個 樣本測光管中,添加5 0微升冷的馬血漿及5 〇微升再組合之 活化部份促凝血酶原激酶時間試劑(APTT試劑,希袼馬藥 廢(Sigma) ’於37 C下培養5分鐘。培養後,在各測光管中 添加50微升適當樣本或標準物。測定基礎凝結時間時' 則改用稀釋缓衝液替代樣本或標準物,於3 7。〇下,添加5 ◦ 微升3 0 mM CaCl2至各樣本或標準物中,開始啟動血纖維 蛋白測定計(f ibrometer)(美國實驗室之C〇A篩選器止血分 析法(CoA Screener Hemostasis Analyzer , American L a b o r ))之計時器。由標準西線之線性回歸方程式計算樣 本中活化蛋白質C濃度。本文提出之凝結時間為至少三次 重覆之平均值,包括標準西線標準物亦如此。 相關技藝專家可根據上述說明製備aPC,並用於治療與
1225404 五、發明說明(24) (但不限於)敗jk病、移植、燒傷、懷孕、重大手術/創 傷、及ARDS有關之凝血過快狀態或後天蛋白質C缺乏。 實例1 人類血漿中aPC含量 於24小時期間,為6位人類患者經靜脈内輸液aPC,1毫 克/米2 /小時或約0. 0 24毫克/公斤/小時。投與之aPC為含 10毫克aPC、5 mM乙酸醯缓衝液、及100 mM氯化朝之冷康 乾燥調配物,使用2毫升水再組成並調至Ph 6. 5。. 採用免疫捕捉-醯胺基分解分析法測定aPC之血槳濃度。 於檸檬酸鹽抗凝血劑與苯曱眯(一種可逆性aPC抑制劑)之 存在下收集血液。利用固定在微滴定板上之aPC專一性老 鼠單株抗體C3捕捉血漿中之酵素。洗滌排除抑制劑,採用 寡肽產色性受質測定醯胺基分解活性或aPC。隨後於37 t 下培養1 6至2 0小時。於4 0 5 nm下測定吸光度,利用加權線 性曲線代入互除法分析數據。自濃度範圍在0至1 0 0毫徵克 /毫升之標準曲線估算aPC濃度。此分析法之定量極限為 1 . 0毫微克/毫升。於約24小時時測定aPC劑量及血漿濃 度。0 . 0 2 4毫克/公斤/小時之劑量於2 4小時時產生约5 0毫 微克/毫升之也漿濃度。 實例2 敗血病人類患者之雙盲安慰劑-對照試驗,喑段1 此方法為嚴重敗血病患者之兩階段雙盲安慰劑-對照試 驗,階段1中,共7 2位患者接受重組人類活化蛋白質C ( τ -a P C )輸液4 8小時。
D:\55136.ptd 第27頁 1225404 五、發明說明(25) 接受標準包括四項常見之敗血病中之三項(心跳速率、 呼吸難易度 '體溫上升/下降、白血球數上升/下降)。患 者亦必須證實有某種程度之器官功能障礙,其定義為休 克、排尿量減少,或血氧過少。採用四種不同劑量:1 2、 18、24、30微克/公斤/小時。利用連續輸液法,輸入aPC 4 8小時。此研究之主要终點在於:安全性與劑量及投藥時 間長短之函數關係;及T - aPC修正凝血病變之能力與劑 量及投藥時間長之函數關係。 死亡率資料包括所有劑量,甚至最低劑量,除非另有說 明。其重點為應注意本試驗安慰劑死亡率與預期之安慰劑 死亡率一致。接受安慰劑患者相對接受T - aPC患者比較 之終點為全部死亡時之2 8天。 整體觀察到之安慰劑死亡率為3 8 % (1 0 / 2 6 ),整體觀察 到之r - aPC死亡率為20% (9/46)。另一小組涉及僅最高兩 種7 - a P C劑量(2 4與3 0微克/公斤/小時)相對安慰劑患者觀 察到之死亡率為13% (3/24)。 第二小組分析包括患有後天蛋白質C换乏之患者。其定 義為基礎線蛋白質C活性低於6 0 %。在可取得基礎線蛋白質 C活性數據之6 4位患者中,有6 1位或9 5 %患者在進入本試驗 時患有後天蛋白質C缺乏,蛋白質C缺乏患者觀察到之安慰 劑組死亡率為41 % (9/22),而蛋白質C缺乏患者觀察到之 r -aPC 死亡率為18% (7/39)。 有一項重要的資料顯示,低劑量了 - aPC處理有利於嚴重 敗A病患者,包括安慰劑患者相對於處理組患者之平均死
D:\55136.ptd 第28頁 12254〇4 五 '發明說明(26) 亡日寸間比較。在安慰劑組死亡之丨〇位患者之平均死亡時間 為6天。了 —aPC處理組患者之平均死亡時間為1 4天。此 外’ .r - a P C處理組中9位死亡之患者中有4位存活了 2 1天或 更久’且最後因與其第一次敗血病發作無關之病症死亡。 四位罕父晚死亡之病例中有二位出現在低劑量組(1 2微克/公 斤/小時)。這二位患者在整個試驗期間均留在I CU中並使 用呼吸器,直到死亡為止(2 7天)。另二較晚死亡之患者則 為南劍f ?且(3 0微克/公斤/小時),此二位患者初期有改 善。二週内即拔掉呼吸器並離開丨C U。一週後,一位患者 死於敗血病誘發之呼吸困難,在”不急救"(DNR)之請求丁 死亡。等二位患者於與第二次敗血病發作有關之肺功能^ 足發作下死亡。此患者亦請求D N A狀態,因此未再插管處 理。應注意,接受T _ a P C再處理且在2 8天期間第二::欠發 作嚴重敗血病之患者不合乎本試驗之資格。 本試驗之死亡率資料令人驚奇且意外。沒有其他雙盲安 慰劑對照敗血病試驗法在2 8天全部死亡率之數據中達到這 種顯著減少的幅度。 實例3 活化蛋白質C之調配物、 活化蛋白質C之安定之冷凍乾燥調配物之製法包括由含 約2 . 5毫克/毫升活化蛋白質C、約1 5毫克/毫升蔗糖 '約2 〇 毫克/毫升N a C 1及p Η大於5 . 5但小於6 . 5之檸檬酸鈉缓衝旋 之溶液冷凍乾燥。此外,活化蛋白質C之安定之冷凍乾淳、 調配物包括由含約5堂克/毫升活化蛋白質C、約3 0堂克/臺
D:\55136.ptd 第29頁 1225404 五、發明說明(27) 升食糖、約3 8愛克/毫升N a C 1及ρ Η大於5 . 5但小於6 . 5之棒 檬酸缓衝液之溶液冷凍乾燥。 a P C :鹽··填充劑比例(w : w : w)為調配適合冷;東乾燥法之調 配物之重要因素。該比例隨aPC濃度、選用之鹽與濃度, 及選用之填充劑與濃度而定。特定言之較佳比例為約1份 活化蛋白質C對約7,6份鹽對約6份填充劑。 適合經由連續輸液投藥之活化蛋白質C之單位劑量調配 物之製法為混合活化蛋白質C、NaC 1、蔗糖、及檸檬酸鈉 缓衝液。混合後,取4毫升溶液移至單位劑量容器中,冷 凍乾燥。單位劑量容器中含約5毫克至約2 0毫克活化蛋白 質C,適合為有此需要之患者投與約0 . 0 2毫克/公斤/小時 至约0. 05毫克/公斤/小時之劑量,其密封後,保存至使用 時為止。
D:\55136.ptd 第30頁 申請曰期: 面別·· |案號:87117〇i JL· a|
(以上各橱.由本爲填庄)_t ~~ -ί 修. U ; 發明專利說明書 1225綱 、 發明名稱 中文 ’/台療凝血過快狀態或後天蛋白質c缺乏之醫藥組合物 英文 C0MP0SITIU1N TREATING HYPERCOAGULABLE STATES OR ACQUIRED PROTEIN C DEFICIENCY 發明人 姓名 (中文) 1. 布蘭威廉葛林尼爾 2. 丹尼爾勞倫斯哈特曼 3. 守崎貝蒂楊 姓名 (英文) 1. BRIAN WILLIAM GRINNELL \ 2. DANIEL LAWRENCE HARTMAN 3. SAU-CHI BETTY YAN 國籍 Γ·美國2.美國3.美國 ~ ^ 住、居所 k f圍S1 ί1//1 f Ϊ f利市東七十一街3625號 f S ί 1 ί那州印第安那普利市歐克斯泊路6398號 3.吳國印第安那州印第安那普利市曼洛圓環東路813!號 申請人 姓名 (名稱) (中文3 1·美國禮來大藥廠 姓名 (名稱) (英文) 1. ELI LILLY 屬 COMPANY' 國籍 1.美國 ( 住、居戶斤 (事務所) i.美國印第安那州印第受那普利市禮來公司中心 代表人 姓名 〔中文) L彼得G.泛君格 代表人 姓名 (英文) l.FETER G. STRINGER
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Claims (1)

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公备號本?1ΐ7061 Γ; 奇料偷 领 ^ i 1. 一種治療或預防人類後天-凝厂命快或後天蛋白質 C缺乏之醫藥組合物,其包括2 0微克/公斤/小時至5 0微克/ 公斤/小時之劑量之人類活化蛋白質C ,其中投予該醫藥組 合物時係將其連續灌注2 4至1 4 4小時。 2 .根據申請專利範圍第1項之醫藥組合物,其中該凝血 過快狀態或蛋白質C缺乏係與敗血病有關。 3 .根據申請專利範圍第1項之醫藥組合物,其中該凝血 過快狀態或蛋白質C缺乏係與暴發性紫斑症有關。 4.根據申請專利範圍第1項之醫藥組合物,其中該凝血 過快狀態或蛋白質C缺乏係與腦膜炎球菌血症有關。 5 .根據申請專利範圍第4項之醫藥組合物,其中該人類 患者未成年。 6 .根據申請專利範圍第1項之醫藥組合物,其中該凝血 過快狀態或蛋白質C缺乏與燒傷有關。 7.根據申請專利範圍第1項之醫藥組合物,其中該治療 或預防係用於罹患與骨髓或其他器官移植有關之靜脈血栓 性插塞併發症之人類。 8 .根據申請專利範圍第1項之醫藥組合物,其中該治療 或預防係用於罹患與手術或創傷有關之靜脈血栓性插塞併 發症之人類。 9 .根據申請專利範圍第1項之醫藥組合物,其中該治療 係用於在懷孕期間罹患與靜脈血栓性插塞併發症有關之後 天凝血過快狀態或蛋白質C缺乏之人類。 1 0 .根據申請專利範圍第1項之醫藥組合物,其中該凝血
O:\55\55136-930702.ptc 第32頁 1225404 案號 87117061 年丨月 修正 々、申請專利範圍 過快狀態或蛋白質C缺乏係與A R D S有關。 1 1 .根據申請專利範圍第1 0項之醫藥組合物,其中人類 活化蛋白質C之劑量係為2 2微克/公斤/小時至3 0微克/公斤 /小時。 1 2 .根據申請專利範圍第1項之醫藥組合物,其中該醫藥 組合物係經連續灌注2 4至1 4 4小時,使血漿中活化蛋白質C 濃度達到2毫微克/毫升至2 0 0毫微克/毫升之範圍。
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