經濟部中央橾準局員工消費合作社印製 4 344 3 7 ΑΊ Α7 Β7五、發明説明（1 ) 發明赀景 本發明傜關於隱形眼鏡清潔及消毒之領域。本發明尤 其係關於液態酵素組成物及利用該等組成物消毒人所配戴 之隱形眼鏡的方法。本發明亦關於藉由將本發明之液態酵 素組成物與化學消毒劑組合以同時清潔及消毒隱形眼鏡的 方法。 許多不同用於清潔隱形眼鏡的方法已掲露於專利及科 學文獻中。此等方法中有些已用含有界面活性劑或酵素 之組成物以促進鏡片的清潔。首先討論使用蛋白質水解酵 素以清潔隱形眼鏡者為，由L0等人在Jotirnal of The A ra e r i c a η 0 p t o m e r i c A s s o c ί a t i ο η，第 4 0 卷，第 110 6— 11 09頁（1969)所發表的一篇文章。自從L0等人所發表之第 一篇文章後，藉由蛋白質水解酵素自隱形眼鏡去除蛋白質 沈澱物之方法已掲露於許多刊物中，S括美國專利第 3,910，2 9 6 號（K a r* a g e 〇 2 i a η 等人）° 許多甩於消毒陲形眼鏡的組成物及方法已被揭露。此 等方法一般皆具有涉及使用熱及/或化學試劑之持擻。用 於此目的之代表性化學試劑包含如氯化苄烷銨及洗必泰f 雙氯苯雙胍己烷）之有機抗菌劑，及如過氧化氫及過氧化 物生成化合物之無機抗菌劑。美國專利第4,407.7S1及 4,525,346號（Stark)描述使用聚合四级銨化合物以消毒1S 形眼鏡及保有隱形眼鏡之安金産品：美國專利第 4,758,595及4,836,986號（Ogunbiyi)描述使用聚合雙縮胍 以達到相同目的=_ ---^------装------ΐτ------^ (請先閱讀背面之注意事項異填寫本覓) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Μ規格（210Χ：297公釐） W- A7 B7 五、發明説明（2 ) 許多不同之同時清潔及消毒隱形眼鏡的方法已被提出 。涉及蛋白質水解酵毒及過氣化物组合使用以同時清潔及 消毒隱形眼鏡的方法描述於美國專利第R£32,672號（Hu th 等人)。渉及使用蛋白質水解酵素及四级铵化合物之同時 清潔及消毒隱形眼鏡之代表性方法描述於曰本專利公開案 第57-24526號（Boghos丨an等人）。雙縮胍（即洗必泰）與液 態酵素之組合使用以同時清潔及消毒隱形眼鏡描述於加拿 大專利第1, 150,907號（Ludwig等人）。涉及組合使用用以 清潔之溶解蛋白質水解酵素及用以消毒之加熱的方法描述 於美國專利第4,614,549號丨[^^1^7丨）。蛋白質水解酵素 及聚合雙縮胍或聚合四级銨化合物之組合使用描述於共同 專利申_案* 一般經讓渡之美國專利申請案序號第08/ 156,043號及描述於對應之歐洲專利申請公開案第 0456467A2i. Rosenthal等人），及描述於美國專利桌 5,096,60 7號（1^(^「”-1^!^8等人）。 大部分習知酵素性清潔産品之商業可行性’依安定之 酵素片劑的使用而定。更明確地説，固態酵素性清潔組成 物之使用已必確保酵素使用前之安定性。為了使用此種組 成物，必須打開一包含片劑之分開的包裝，該片劑必須置 於一含有溶液之分開的小瓶中，且該片割必須溶解以將酵 素釋放至溶液中：因為麻煩不便及令人討厭的步驟及剌激 性及毒性之潛在危險，一般之習慣為每一星期僅進行一次 再者，酵素清潔片劑包含大量的賦形劑，如泡騰劑（例 如碳酸氫鹽）及填充劑（例如氮化納）」如下文所解說者’ 本紙張尺度適用中國國家橾隼（CNS ) A4規格（210X297公釐） --· ·1*' I - - -I..... I (請先S讀背面之注意事項再填寫本X) 訂 經濟部中央標準局賈工消費合作社印製 f- 4 34 4 3 7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A7 _B7_五、發明説明（3 ) 此類賦形劑對隱形眼鏡之清潔及消毒有負面的影饗。 習知技莛己嘗試使用液態酵素組成物以清潔隱形眼鏡 。然而，該等嘗試已由水性溶液本質上不安定之事實所阻 癍。當蛋白質水解酵素置於水溶液中一段長時間（即數個 月或更久），酵素可能損失所有或部分蛋白質水解活性。 可採取步驟以安定化組成物，但使用安定劑可能對酵素之 活性有負面影_。舉例而言，安定劑可在酵素以水性液體 儲存期間，藉由使酵素處於蟄伏之物理構形以保護酵素免 於化學不安定性的問題。在此所指之構形傜如“部分變性 ”。然而*此類試劑亦可能抑制酵素在使用時再活化之能 力（卽，變成“復性”。最後，除了上述的一般性問題之 外，商業上可存活之用於處理隱形眼鏡之液態酵素製劑必 須相當無毒性，且必須可與其他用於處理隱形眼鏡之化學 學試劑相容，待別是用於消毒鏡片之抗菌劑。 下述之專利偽關於其他有關習知安定化掖態酵素配方 之嘗試的背景知識：美画專利第4,462,922號（Boskamp); 第 4,537,706 號（Severson);及第 5,089,163 號（Aronson) 。此等專利描述包含酵素之清潔劑組成物=此清潔劑組成 物可用於處理方物，以及其他工業用途。此等清潔劑並不 適用於處理隱形眼鏡，本發明之組成物不含清潔劑，或其 他具有潛在危險性或對眼睛有刺激性之試劑。 美國專利第5,281,277號（^1<383«3)及日本專利公開 案第 92-370197 ; 92-143718 ;及 92-243215號描述用於處 理隱形眼鏡之液態酵素組成物：相對於該等申請案所描述 -8 - 本紙張足度適用中國國家標隼（CNS ) Λ4規格（210X297公釐） t--------------^.------IT------^ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央橾準局員工消費合作社印裝 ^ 4 34 4 3 7 A7 _B7_ 五、發明説明（4 ) 之組成物，確信本發明之組成物可提供顯箸之改良。 转明概沭 本發明之液態酵素組成物包含精確量之經選擇的安定 • 劑。這些安定劑為硼酸鹽或硼酸化合物及一或多個磺之多 元醇的组合。所使用之安定劑的量已精確地平衡，藉此以 達到最大的安定度•同時在隨後使用組成物時，可獲得最 大活性。再者*當组成物以供多次使用之容器包裝時，硼 酸鹽或硼酸化合物亦可保存本發明之液態酵素組成物免遭 微生物污染。 本發明亦提供以上述液態酵素組成物清潔隱形眼鏡之 方法。為了清潔髒污之鏡片，將鏡片置於數毫升水性溶液 中，並將少量，一般為1至2滴之酵素組成物加入該溶液中 。接著將鏡片在所得清潔液中浸泡一段足夠清潔鏡片之時 間。 本發明之液態酵素組成物較佳俱與水性消毒液組合以 同時清潔及消毒膳形眼鏡。正如熟於此技藝所知，消毒掖 必須經調配以與隱形眼鏡相容。許多化學消毒劑之抗®活 性會被離子性溶質（如氣化鈉）所負面影響。如下文所述* 本發明之液態酵素組成物搡實質上非離子性，且因此不會 負面影饗此類消毒劑之抗菌活性。此點可視為本發明之最 大優點。 本發明之酵素組成物係調配成濃縮、多劑量掖體，且 因此不包含習知酵素片劑赋形劑 > 如氛化鈉（瑱充劑）及頎 酸氫鹽（泡騰劑）：本發明之肢態酵素組成物利用一水性媒 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4現格（2丨ΟX 297公釐） -----Ί.--一---裝------訂------線 (請先閲讀背面之注意事項-¾填寫本頁) 卜 43443 A7 經濟部中央標準扃員工消費合作社印製 B7_五、發明説明（5 ) 介物。媒介物之主要成分為一或多種多元醇及水。這些成 分皆為非離子性。本發明之液態酵素組成物因此實質上為 非離子性，且因此對消毒液之離子強度影鬱極小，且幾乎 不影響消毒液之抗菌活性。 本發明之組成物及方法相當容易使用。使用容易使得 配載隱形眼鏡者可每週清潔其鏡片2至3次，或較佳為更多 次，或每天。已發現與目前所使用之每星期一次的酵素清 潔處理柑較，每天使用本發明之液態組成物可出乎意料地 産生較好的清潔效果及安全性。 圖式；夕簡垂説明 第1圖傜詳述在135天之臨床研究期間中，當每天使 用時，本發明之液態酵素Μ成物對第I Π型及第IV型沈澱 物之效果的頻率分布圖； 第2圖說明於該研究期間中，替換鏡Μ之頻率及理由 ;及 第3圖説明於臨床研究期間中，以頚著看見裂痕發生 之發生率為基準，本發明之液態酵素Μ成饬相對於習知酵 素清潔劑組成物之安全性。 發明之詳細説明 已發現多元醇與硼酸鹽或硼酸之組合使用可達到本發 明之液態酵素組成物所要求的安定性及可延效之活性。然 而，申請人不希望被任何理論所束缚，吾人相信藉由使蛋 白質部分變性可增進.本發明所使用之酵素的安定性：藉由 舆安定劑形成錯合物以使酵素部分變性·.將酵素變性至酵 ---------------裝------訂------線 (請先W請背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家梯率（CNS ) Α4規格（210X297公釐） f- 4 344 3 7 經濟部中夬樣隼局負工消費合作社印裝 A7 B7五、發明説明（6) 素失活之程度*但藉由變性酵素/安定劑錯合物於水性介 質中之稀釋作用可容易地達到復性。吾人相信安定劑與水 競爭蛋白質上之氫鍵结合位置。因此，一定比例之這些試 劑可有效地取代一定比例之水分子。結果，蛋白質改變搆 (部分變性）失活及錯合（與安定劑）的形式。當酵素為一失 活的形式時*可避免其自身降解及其他自發地、化學地不 可逆反應。另一方面，過多水分子之取代會導致蛋白質之 不可逆的構形改變。為了獲得具有顯箸半生期且因而具有 商業存活力之安定的液態酵素組成物，必須確定最大安定 性與最大可逆復性之精確平衡。關於此點目前己被發現。 本發明中所使甩之多元醇為2-3碩之多元醇。在此所 用之“2-3磺多元醇” 一詞涤指具有2至3磺原子及至少2羥 基之化合物。2-3磺之多元醇之例子為丙三醇（甘油）、1,2 -丙二醇、1,3-丙二醇及乙二醇。丙二醇為較佳之2-3碩的 多元醇。 可用於本發明之硼酸鹽或硼酸化合物包含硼酸鹽、硼 酸及硼砂之鹼金靥鹽。最佳之硼酸鹽或硼酸化合物為硼酸 鈉。如上所述，硼酸鹽或硼酸化合物亦有肋於使本發明之 液態酵素組成物的抗菌保存可達到有效作為多次使用調劑 的程度。 已發現待定量之2-3碳的多元醇及硼酸鹽或硼酸化合 物對擭得本發明之液態酵素組成物所要求之安定性及可延 效活性具有決定性。已發現50-70% (體積/體積》( “ ％ v/v”）2-3磺之多元醇及4-3% (重量/體積.）ί “％ tf/v”） ----τ---^---裝------訂------線 (請先閲讀背面之注意事項填寫本頁) 本紙浪尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（2i〇x297公釐） ^ 4 34 4 3 7 A7 B7 經濟部中夬標準局員工消費合作.杜印製 五、發明説明（7) 硼酸鹽或硼酸化合物的組合偽屬必需，以達到如上所述之 有效及商業存活力之疲態酵素組成物的必要標準。最佳為 約50% v/v之2-3磺多元醇及約7.6% w/v硼酸鈉之組合。下 述實施例1、2及3進一步説明此等安定劑之適當及不適 當濃度。 可用於本發明之組成物及方法的酵素包含下述所有酵 素‘·（1)可用於自隱形眼鏡去除沈澱物；（2)未充分清洗隱 形眼鏡而造成之少量酵素接觸眼睛時，大部分僅造成稍撤 的眼部剌激；（3)在下述之抗菌劑存在下，為相當化學安 定且有效；及（4)不會負面影響所處理之鏡片的物理及化 學性質。在此所使用之蛋白質水解酵素必須至少具有部分 水解肽-醯胺鍵之能力以分解鏡片沈澱物中所發現之蛋白 質類物質成為較小的水溶性次單元。通常此等酵素將伴隨 蛋白質水解活性呈現部分脂質分解、澱粉水解或有關活性 ，且可為中性、酸性或鹼性。再者’個別之脂質酶或賻酶 亦可與蛋白質水解酶組合使用°為了本發明說明書之目的 ，符合前述要求之酵素傜稱為“眼部可接受的”。 本發明可使用之眼部可接受的蛋白質水解酵素包含但 不限於胰酶、胰蛋白誨、枯草捍菌蛋白酶、膠原酶、角蛋 白酶、羧肽酶、木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶、氨基肽酶、彈 性蛋白酶、曲徽肽酶、鏈微蛋白酶（得自灰色鏈遨菌（s r ΐ s ^ u s) ) .、d i p a s e (得自多黏夺抱桿菌（B ag-i 11 u.s p n 1 v m v x 3 )及其等之混合物。若使用木瓜蛋白酶，則必須 使用如N-乙醯基半肤胺酸之還原劑n -----„-------裝-- (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂· 線 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公嫠） t 434437 經濟部中夹標準局員工消費合作社印製 A7 B7_五、發明説明（3 ) 徹生物衍生之酵素，如該等衍生自芽孢桿菌、鍺黴菌 及曲徽菌等徹生物，代表可用於本發明之酵素的較佳形式 。所有酵素之子群中，最佳者為穿孢捍菌所衍生之鹼性蛋 白酶，稱為“祜草桿菌蛋白酶”酵素。 酵素之鑑定、分離及純化已為熟習此技藝者所知。許 多用於酵素分離之鑑定及純化技術記載於一般科學文獻中 ，該酵素包含具有蛋白質水解及混合的蛋白質水解/脂質 分解/澱粉水解活性者。可用於本發明之酵素可容易地藉 由習知技術自植物、動物或擻生物源獲得。 利用重組DNA技術之盅現*預期將可獲得安定之蛋白 質水解酵素的新來源及形式。只要符合本文所述之標準， .所者量酵素應落於本發明之範圍中。 本發明所使用之酵素•以胰酶及祜草捍菌蛋白酶較佳 酵素，及以胰蛋白酶為最佳。胰酶係自哺乳動物之胰臟萃 取，及可取自不同來源之市售商品，包含Scientific Protein Laboratories) (Waunakee,威斯康辛州，美國 )、Novo Industries (Bagsvaerd,丹麥）、Sigma Chemical Co.(聖路易，密蘇里州，美國），及Boehringer Mannheim(Indianapoiis,印第安納州，美國）。胰酶 USP 為蛋白水解酶、脂質分解酶及澱粉水解酶之混合物，且由 差國藥典(Unit fid States Pharmacopeia) ( “ U S P ’’）予以 定義。胰誨之最佳形式為胰酶9X。如本文中所應用者，“ 胰酶9X”意指可被過濾（0.2微米）之包含9倍USP蛋白質水 解含量的胰酶.：祜草桿菌蛋白誨偽衍生自枯草捍菌，且在 -11 - 111 J , n 一 II 訂 I 線 (請先閲讀背面之注意事項為填寫本頁) 本紙伕尺度適用十國國家標準（^5)/\4規格（2!0乂 297公釐） 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A7 B7__五、發明说明ί 9 ). 商業上可取自不同之商業來源I包括Novo Industries( B a g s v a e r d，丹麥）、F 1 u k a Β ί o c h e m i k a (B u c h s ,瑞士）及 Boehringer Mannheim(Indianap〇ns,印第安纳州，美國 >。胰蛋白酶偽純化自許多不同動物源且在商業上可取自 Signa Chemical Co,及Boehringer Mannheim。 本發明之液態水解酵素組成物，在少量之組成物添加 至稀釋劑時，將具有足以提供有效量之酵素以實質去除或 頴著降低一般在人配戴之膳形眼鏡上可發現之蛋白質、脂 質、粘多醣沈澱物及其他物質之嬝度。在本文中所使用者 此一濃度傜指“可有效清潔鏡片之量”。本發明之液態 酵素組成物中所使用之酵素量的範圍一般為約0.05% w/v 至5% w/v。待定濃度之選擇將依不同之因子而定，如所 選擇之酵素或酵素組合；所選擇之酵素的純度、專一性及 效力；所欲清潔之鏡片的形式；所欲之清潔頻率（例如， 每天或每週）；及每次清潔所欲進行之時間。 在儲存期間，酵素之部分活性可能喪失，依儲存時間 長度及溫度條件而定。因此|本發明之液態酵素組成物可 以超過在此所述之濃度範圍的酵素初始量製備。本發明之 較佳組成物一般將包含一或多種酵素，其量约300-6000 ?八1]/1111。組成物最佳包含約900-2200 ?&1]/1111，其對應於 胰酶傜在約1至2% w/v之範圍内，對應於枯草捍菌蛋白酶 偽在約0 . 1至0.3% w/v之範圍内，及對應於胰蛋白酶係在 约0 . 1至0.3% w/ v之範圍内。為了本説明書之目的，一“ 蛋白質水解活性單泣”或“ PAU”偽定義為每分鐘必須産 -12 - ----,,--------^------1T------^ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） A7 B7 34 4 3 7 五、發明説明（ιυ) 生1徹克（meg)酪胺酸（“Dies Tyr/ciin” >之酵素活性的量 ，偽由下述酪蛋白消化測定法、bb色測定法測定。 酩蛋白-泊化測宙法 將5.0 ml酪蛋白基質（0.65%酪蛋白w/v)在37°C下平 衡10分鐘（min) ±5秒（sec)。接著將1.0 ml酵素液（2 mg/ ml)添加至酪蛋白基質並使混合物振盪•接箸在3710下保 溫10 min ± 5 sec。於保溫後，加入5.0 ml之14%三氛醋 酸並立刻將所得混合物振盪。將混合物至少另保溫30分鐘 ，接著振盪及離心15-20 min(約2000 rpm)。將離心樣品 之上層液過濾至血清濾膜取樣器並取出2 . 0 m 1。將5.0 a I 之5.3%Na2C〇3添加至該2.0 ml樣品中=將樣品振盪，加 入福林氏酚（Folin’s Phenol)試劑*且立刻將樣品再次振 盪，接著在37υ下保溫60 min。接箸將樣品置於可見光分 光光度計中，在660毫撤米（nia)下，相對於作為參考點之 純水讀取吸光值。樣品濃度偽接著藉由與酪胺酸標準曲線 比較而決定。 利用本發明之液態酵素組成物所獲得之清潔力為時間 之函數。所使用之浸泡時間一般約1小時至隔夜。然而， 若應用較長之浸泡時間（如24小時）則可使用低於上述濃 度之組成物濃度。 本發明之清潔方法包含使用少量之上述液態酵素組成 物以促進自隱形眼鏡去除蛋白質及其他沈澱物.=在本發明 之持定具體例所使用之液態酵素組成量可砍不同因子而改 -13 - 本紙張尺度適用中國國家標隼（CNS ) A4規格（210 X 297公釐） ---1----裝------訂--- (請先閱讀背面之注意事項A填寫本頁) 經濟部中央標隼局員工消費合作杜印製 ^ 4 34 4 3 Α7 Β7 經濟部-6-央標隼局員工消費合作社印装 五、發明説明（ 變，該等因子如所使用之酵素的纯度、欲將鏡片暴露於组 成物中之時間、鏡片處理保養法之本質（如消毒及清潔之 頻率）、所欲處理之鏡Η形式，及輔佐清潔劑之使用（如界 面活性劑 >。然而，本發明之清潔方法一股將應用足量之 上述液態酵素组成物量，於將液態酵素組成物分布於消毒 掖或其他水性溶劑後•可提供最終酵素孃度約5-75 PAU/ m 1之溶液。 如上所述，本發明之液態酵素組成物包含相當少量之 離子性溶質。更特別地，此組成物不含《充劑、騰泡劑或 其他習知酵素Η常包含之離子性溶質。本發明之組成物含 有硼酸鹽或硼酸化合物及氫氣酸及/或氫氣化納等離子性 溶質*但於本發明中，該等溶質之濃度相當低。因此該组 成物實質上傜為非離子性。再者*基於此組成物傜配製成 濃縮、多劑量液體之事實，故僅需少量之組成物即可清潔 隱形眼鏡，一般為1或2滴。因此本發明之組成物對消毒液 之離子強度影響極小3如下述說明，當液態酵素組成物與 含有如聚四级鐵-1之離子性抗菌劑的消毒液時，本發明之 待擻持別重要。 消毒劑之抗菌活性，特別是聚合四级銨化合物，如聚 四级鐵-1，可被高濃度之氯化鈉或其他離子性溶質負面影 響。更持別地*當消毒液中離子性溶質之濃度增加時’聚 合四级鍈化合物，及尤其是下述式（Π所述者會喪失抗菌 活性。因此，以使用具有低雞子強度之溶液（即低濃度之 離子性溶質，如氯化納）為較佳。因為離子性溶質（如氯化 (請先Μ讀背面之注意事項苒填寫本頁) .裝_ ir 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐）
經濟部中央標準局員工消費合作社印製 卜 4 34 4 3 7 A7 B7____ 五、發明説明（12) 納）及非離子性溶質（如乙二醇）會影響溶液之潔透性及張 力性，滲透性及張力性為離子強度之接間測量。然而，較 佳使用於本發明之清潔及消毒方法的低離子強度一般偽對 應於高張至等張範圍之滲透性/張力性，且更佳之範圍為 150至350撤Osmoies/公斤UOs/kg)。特別佳之範圍為200 至300 mOs/kg，及最佳張力性為約220 Bi0s/kgs 本發明之液態酵素組成物證實具有有效的清潔效力且 呈現最低之負面影響*或更佳地，促進消毒液在抗菌活性 上之效果出乎意料地發現本發明之液態酵素組成物可促 進含有聚四级鎌-1，聚合四级銨消毒劑之消毒液的抗菌活 性。亦發現當將鏡片處理約1小時至隔夜之較長時間時· 液態酵素組成物與聚四级錨-1消毒液之組合甚至比單撣使 用聚四级錯-1消毒液更有效，以4至8小時為較佳。因為為 了方便的目的，隱形眼鏡一般傜浸泡隔液以利用酵素清潔 或利用化學試劑消毒*故此發現具有實用上之重要性。然 而，申請人不願受到任何理論之東縛，相信上述之抗麵活 性增進傜因處理時間中*酵素破壞或分解蘭膜所致。 本發明之清潔方法使用一水性溶劑。此水性溶劑可包 含各種不同之如氯化鈉及氱化押的鹽類，如硼酸及硼酸鈉 之緩衝劑*及如螯合劑及防腐劑之其他試劑。一適當之水 性溶劑的例子為鹽水’i容液，如Uni sol® Plus So Ution( Mcon Laboratories之註冊商標）c 本發明之清.潔及消毒方法傜利用一含有抗菌劑之消毒 液。抗菌劑可為氧化性，如過氧化氫，或非氧化性，如經 - 15 _ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（2丨0X297公釐） ------------裝------訂------線 (請先閲讀背面之注意事項苒填寫本瓦) ^ 4 34 4 3 7 A7 B7 五、發明説明（13) 由與擻生物之化學或生理化學交互作用而誘導其抗菌活性 之聚合抗菌劑。如本案說明書所使用者，“聚合抗菌劑” 一訶傜指任何具有抗菌活性之含氮聚合物或共聚物。較佳 之聚合抗菌劑包含：聚四级錨-1，其為一聚合四级銨化合 物；及聚亞己基雙胍（）或聚胺丙基雙胍（“PAPB ”），其為聚合雙胍。此等較佳抗菌劑傺分別掲露於頒發 給Stark之美國專利第4,407,791及4,523,346號，及頒發 給Ogunbiyi之美國專利第4,753,595及4,836,986號。前述 公開案之整個内容在此併入本案說明書以供參考。其他適 用於本發明之方法的抗菌劑包含：其他四级銨化合物•如 苯甲羥銨鹵化物，及其他雙胍•如洗必泰（雙氯苯雙胍己 烷）。在此所使用之抗菌劑較佳係於如硫汞撒（乙汞硫代水 揚酸納）之含汞化合物存在下應用。 最佳之抗菌劑為具有下述結搆之聚合四级銨化合物：
(ϋ+1)χ· (I) ------L-------裝------訂---------線 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作杜印製 其中： R 1及R 2可相同或不同且傜選自於： r (ch2che〇h)3χ-， H (CH3)2或 OH， X -為藥用上可接受之陰離子，較佳為氯；及η = 1至50 -16 - 本纸乐尺度通用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X29?公釐） 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 Π344 3 7 A7 B7_五、發明説明（14) 之整數。 此結構之最佳化合物為聚四级_-1 *其亦為習知之Onamer (Onyx Chemical Corporation之註册商標）或 Polyqiiad® (Alcon Laboratories, Inc.之註册商標）。聚 四级錨Μ為上述參考化合物之混合物，其中X·為氯且Ri · 1?2及^偽如上述之定義。 上述抗菌劑偽根據如美國食品及藥物管理局之官方管 理機闊之規定，以一可有效實質去除或顯著降低隱形眼鏡 上發現之活徹生物數目之量使用於本發明之方法中。為了 本案説明書之目的*該量係稱為“一有效消毒量”或“一 有效抗菌量”。所應用之抗菌劑量將依如鏡片處理保養之 形式所應用的方法等因子而改變。舉例而言♦在鏡片處理 保養中*使用一有效量之日用清潔劑可實質降低鏡片上沈 澱物質的量*包含徽生锪，及藉此減少消毒鏡片所需之抗 菌劑量。欲處理之鏡片形式（如“硬式”對“軟式”鏡片） 亦為一因子。一般而言，所應用之濃度範圍為约0.000001 重量％至約0.01童量％之一或多種上述抗菌劑。式（I)之 聚合四級銨化合物的最佳濃度為約0.001重量％。 氣化性消毒劑亦可應用於本發明之方法中。此類氯化 性消毒劑包含許多不同之可於溶液中産生活性氣的過氧化 物。較佳之方法可應用〇 . 3至3.0%範圍内之過氧化氫以消 毒鏡片。利用氧化性消毒条.统之方法偽掲露於美國專利第 32,672號（Huth等人卜該前案之芏部内容在此併入本案說-17 - ----1--Ί---裝------訂------線 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 4 34437 經濟部中央標準局員工消費合作社印裝 A7 B7 五、發明説明（15 ) 明書以供參考。 正如熟習此項技藝者所知*本發明所使用之消毒劑除 了上述抗菌劑外，可包含許多不同之成分，如適當之填充 劑、螯合劑及張力調整劑。消毒液亦包含界面活性劑。 本發明之方法一般包含將少量之本發明的液態酵素組 成物加入2至1 〇 Π)丨水性溶劑或消毒液，將髒污之鏡片置於 此酵素/溶劑或酵素/濟毒溶液中I及將鏡片浸泡一段時 間以有效清潔或清潔及消毒鏡片。所使用之液態酵素組成 物量可依照如所使用之水性溶劑或消毒液之量的因子為基 準而改變，但一般為約1至2滴。較佳之方法包含添加1滴（ 約30 u丨）至5 m 1水性溶劑或消毒液。髒污之鏡片可於液態 酵素组成物之添加前或後置於水性溶劑或消毒液中。可取 捨地，隱形眼鏡在浸泡至酵素/溶劑或酵素/消毒液之前 ，首先以非酵素性之曰用界面活性劑清潔劑撫摩。此鏡片 一般偽浸泡隔液*但藉由本發明之方法可企圔縮短或延長 時間。較佳為浸泡時問為4至8小時。本發明之方法容許每 週進行一次上述之保養法，但最好每天進行二 下述之實施例傜提供進一步說明本發明之各種不同方 面，但不可藉此欲以任何方式限制本發明之範圍。 啻掄例1 本發明之一較佳液態酵素組成物’及一適於與該組成 物組合使用之消毒丨夜揭示如下： A 游熊胰酶紐成1 下述之液態酵素組成物表示本發明之一較佳具體例： _ 18 _ 本紙浪尺度適财S醇標準（CNS ) Λ4· (21GX297公缓） ---1--J---裝------訂-------線 (請先閲讀背面之注意事項4填寫本頁) 卜· 4 34437 A7 B7五、發明説明i π) 組成分 量 胰酶（9X) 2200 PAL/ml 硼酸納 7.62¾ (w / v) 丙二醇 50¾ (v/v) 水 QS 氫氯酸/氫氧化鈉 QS" 經濟部中央揉準局員工消费合作社印裝 〃對應於將pH讁整至6.0的量 註解：U/v)意指重量/體積；（v/v)意指體積/體積； 及QS意指足夠量。 上述配方偽藉由首先依序將丙二醇、純水、氫氛酸及 硼酸納混合在一起。將溶液完全過濾Π . 2卿濾膜）至一滅 菌收集桶，並接箸進行無菌過濾（〇. 2卿濾膜）。接著將所 需量之胰酶（约1-2% v/v)溶於適量之水中並使該溶液完 全過濾（0.6pi濾膜）。接著將酵素溶液無菌過濾（〇 . 2卿濾 膜）至含有無菌丙二醇/硼酸鈉溶液之滅菌收集桶。混合時 ，同時以適量之水增加收集桶之内容物的體積。上述配方 之最適pH範圍為6-7 ;最佳之pH為6。 -----1--------裝------訂------線 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS〉A4規格（2丨〇><297公釐） Γ 4 3443 經濟部中央標準局負工消費合作社印製 A7 B7 五、發明説明（17) r -mm m 下述配方表示一較佳消毒掖：
Μ成分 % ( V / V ) 聚四级鑷-1 0.001 + 10¾ 過量 氣化納 0.48 乙二胺四乙酸二鈉 0*05 檸樣酸一水物 0.021 檸檬酸納二水物 0.56 純水 QS 為了製備上述配方*將檸檬酸納二水物、檸檬酸一水 物、乙二胺四乙酸二鈉、氯化鈉及聚四级鏡-1以上 述之相對濃度，與純水混合並藉由攪拌器使該等組成分溶 解。添加純水使溶液幾乎達100%。記錄pH為6 ·3並以NaOH 調整至7.0。接著加入純水使溶液達100%。攪拌溶液且讀 取到pH為7.0。接著将溶液過濾至滅菌瓶並加蓋。
窨施例E 將本發明之較佳液態祜草桿》蛋白酶及液態胰蛋白酶 組成物與適當之消毒液組合使用’如實施例1 Β，描述如 下·· 本紙浪尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（2丨〇Χ 297公釐） ---^-------------II------^ (請先閲讀背面之注意事項爿填寫本頁) 4 34 4 3 7 A7 B7 五、發明説明（！8) I ， 液熊脯蛋甶酿甜成楙 組成分 量 胰蛋白酶 2200 PAU/inl 硼酸納 7.62% (w/v) 丙二醇 50¾ (v/v) 水 QS 氫氯酸/氫氣化納 QS* * 〃對瞜於將pH調整至6.0的童 Ϊ 液篛枯茸揑闇帯白_甜成物 經濟部令央標準局員工消費合作社印製 組成分 量 祜草桿菌蛋白酶 900 PAU/ml 硼酸鈉 7.62% (v/v) 丙二醇 5096 (v/v) 水 QS 氫氣酸/氫氣化鈉 QS" η對應於將pH諏整至6.0的量 -21 - 本纸張尺度適用中國國家榇隼（CNS ) A4規格（210X297公釐） Ί* 7 1 訂 ^ (請先閱讀背面之注意事項其填寫本頁) 經濟部中央標準局舅工消費合作社印装 4 344 3 7 A7 £7_ 五、發明説明（19) 上述液態枯草桿菌蛋白酶及胰蛋白酶組成物葆以與實施例 1所述之液態胰酶组成物相同之方式製備。 啻旃例 進行改變液態酵素組成物中硼酸鹽及丙二醇量之效果 的研究。將組成物分成數份貯存於溫度控制室（2δ . 7 ± 21C )。在6週及12週時，藉由上述之酪蛋白-消化測定各部份 組成物之酵素活性。將活性強度與初始值比較且以殘存活 性百分比表示。數據證實本發明之液態酵素組成物所使用 之硼酸鈉及丙二醇量對替代物百分比量之重要性，其為酵 素活性之函數《如第I表所述： 第Γ表：替代液態酵素組成物對本發明 組成物之安定性比較 組成物 1 2 3 4 5 6 胰酶9Χ% (w/v) 1.7 1.7 1.7 1.7 1.7 1.7 硼酸％ (v/v) 0.155 0.155 0.155 0.155 0.155 硼酸鈉％ (w/v) 0.035 0.035 0.035 0.035 0.035 7.62 純水（qs) 60 50 40 30 10 50 丙二醇％ (v/v.) 40 50 60 70 90 50 6週時之活性 (初始活性％ ) 71.9 86.6 88.2 92.9 齡 97.7 12週時之活性 (初始活性％) 44 66 65 74 4 98.4 "初始值顯示低活性 -22 - 本紙張尺度適用中國國家操準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐） ----ί---------裝------訂------線 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本I) 經濟部中央標隼局員工消費合作社印裝 A7 _B7_ 五、發明説明（20 ) 組成物6説明本發明之較佳具體例。組成物2，3及 4包含本發明所需量之丙二醇*但不包含本發明所需量之 硼酸鹽（硼酸鈉及硼酸）。組成物1及5所含丙二醇及硼酸 鹽之量超出本發明所需量範圍。 包含50-70%丙二醇之組成物2 - 4所獲得之活性測 定值，與經過保溫6週者呈現類似之安定性（86.2-92.9% ，在室溫下），而包含10至90%丙二醇之組成物1及5則 較不安定（分別為71 · 9%及無法測定之程度）。經過6週之 保溫|組成物1 - 5 (7.19-92%)明顯比組成物6 (97.9% )較不安定。再者，與組成物1 - 5之44-74%範圍相較， 組成物6呈現較長時間之安定性，12週時為98.4%。 甯旆例4 數據證明實施例1之液態酵素組成物在一般貯存溫度 下可確定其安定性。將各部份組成物貯存於溫度控制室（ 26.7°± 2°C，RT)，或在保持35°C之腔室中。在適當時間 下 > 藉由上述酪蛋白-消化方法測定酵素活性。將活性強 度與初始強度比較並以殘存活性百分比表示。結果如第 II表所示： 第11表：在室溫（RT)及35 °C下貯存時間對液態酵素組成物 之影響 本纸張尺度邊用中國國家標準（<^^)六4規格（210乂297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝
*1T f- 4 34 4 3 7 A7 B7 經濟部中央標隼局員工消費合作社印裝 五、發明説明（21 ) 殘存活性％ 時間（週） RT 35r 2 94.4 83.0 4 94.0 76.5 6 97.7 81.1 8 99.0 80.2 12 98.4 78.3 第II表之數據確認本發明之掖態酵素組成物的安定性 。數據傜基於4個別部分及實驗之複雜度。數據顯示事實 上在室溫下經過12週對酵素.活性無有害之影響，最後之測 定值為98.4%。實施例1之液態酵素組成物在35 °C之高溫 下經過12週仍可維持活性，顯示活性喪失約20%。
音掄例FS 已發現胰酶、胰蛋白酶之蛋白水解酶成分之一顯箸地 比其他蛋白質水解酶，胰凝乳蛋白酶，成分之一安定。此 發現已藉由比較分別含有0. 3% w/v之胰蛋白酶及胰凝乳蛋 白誨之液態酵素組成物的研究而確定，此組成物除了酵素 成分以外，與上述實施例1所述之組成物相同：.將數份組 成物貯存於維持在3 5 t之腔室内：在所指定之時間，藉由 -24 - 本紙張尺度適用中國國家標隼（CNS ) Α4規格（210Χ 297公釐） ---；---Ί.---裝------訂------線 (請先閲讀背面之注意事^填寫本頁) 卜 434437 經濟部中央標準局負工消費合作社印架 Α7 Β7 五、發明説明（22) 下述之偶氮酪蛋白-消化法測定酵素活性。將活性強度與 初始強度比較並以殘存活性百分比表示。研究結果表示於 下述第III表。 厲氩酩番（^法 下述為用於本測定法之溶液： 1) 缓衝液：0.05M礤酸鹽緩衝液，含有0.9%氛化納， pH 7.6 。 2) 基質溶液：2 mg/ml偶氮酪蛋白，溶於上述之緩衝 溶液中。 此測定法偽藉由將IniI適當稀釋（以使酵素活性落於標 準曲線之範圍内）之酵素組成物的磷酸鹽缓衝液與2 rai禺 氮酪蛋白基質溶液（2 itig/m 1)混合而開始。於在371C下保 溫20分鐘後，將混合物自保溫箱移出並加入一滴三氯醋酸 (14% w/v)以終止反應。將混合物充分振盪並使其於室溫 下保持20分鐘。在2500rpnt(利用Beckman GS-6R離心機）下 離心15分鐘，以血漿取樣器過濾上層掖。接著將2 m U青澈 之黃色上層液以0.4 ml之0.1 N氫氣化納調整至中性pH並 利用分光光度計於44〇nin波長下測定吸光值。偶氮酪蛋白 之水解置偽以在相同條件下産生之已知濃度之偶氮酪蛋白 的標準曲線為基準予以評估。酵素活性單位（“ ΑΖίΓ )偽 定義為37 °C下水解1 w g ί禹氮酪蛋白之酵素量。 本纸浪尺度適用中國國家榡準（CNS ) A4规格（；Π0Χ 297公釐） -----.-------裝------訂------線 (锖先鬩讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標隼局負工消費合作社印裝 s 4 344 3 7 A7 B7 _ 五'、發明説明（23) 第III表：貯存在35°C下含有胰蛋白酶或胰凝乳蛋白酶之 液態酵素組成物之安定性比較 殘存活性％ 時間 胰蛋白酶 胰凝乳蛋白海 2 4小時 100 79.8 1週 100 7.3 2週 96.0 --- 3週 93.2 Η 4週 93.2 Η •當所有活性皆喪失，於2週後之時間點無測定值。 在35 °C下，與非本發明之部分替代組成物的胰凝乳蛋 白酶組成物相較，證簧胰蛋白酶組成物有絶佳之安定性輪 廓。因此，僅包含胰蛋酶之液態酵素組成物為本發明之最 佳組成物。 窖旃例 數據證明在不同之溫度下可確認實施例2之液態胰蛋 白海組成物的安定性。將各部份之组成物貯存在室溫（“ ίίΤ”），或35 C、40Ϊ或45 t下。到指定之時間時，蕕由 -26 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐） -----·----------------ΐτ------0 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標隼局員工消費合作杜印製 4 34 4 3 7 A7 ___B7_ 五、發明説明（24) 上述之偶氮酪蛋白法測定各部分之酵素活性。將活性強度 與初始值比較並以殘存活性百分比表示。結果如下述之第 IV表所示： 第IV表：液態酵素組成物在不同貯存溫度下之安定性 殘存活性炻 溫度) 週 RT 35 40 45 0 100.0 100.0 100.0 100.0 1 98.4 97.8 98.4 61.1 2 100.0 99.4 100.0 56.3 4 100.0 93.2 96.0 42.5 8 100.0 97.8 95.6 12 100.0 95.9 93.8 奮旆例7 藉由測定由上述實施例1所述之液態酵素組成物與消 毒液組合形成之水性条統所達到的殺滅速率及程度評估本 發明之消毒效力將条統對6種微生物進行測試：表皮® -27 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（2】〇x297公釐） ----1-------裝------訂------線 (請先閲讀背面之注意事項.再填寫本頁) tr 4 34 4 3 7 A7 B7 經濟部中央標準局貝工消费合作社印製 五、發明説明（25) 萄球菌（Staphylococcus ep idermid is)、銷綠假單胞菌（ Pseudomonas aeruginosa)、黏質沙雷氏菌(S e r r a t i a marcesf!F-ny：) +、白色念珠菌（Candida albicans)、煙曲徵 菌（Aspergillus f .u.m.i s ，及單純性瘤矮"病毒（Heroes simplex)。測試步驟及結果描述如下1:1 利用下述步驟進行對表皮®萄球菌、銅缘假單胞菌、 黏質沙雷氏B、白色念珠菌、煙曲徽菌|及單純性疱疹病 毒之測試： 首先將0.1 ml接種物U〇e菌落形成單位/ml)添加至10 m I體積之實施例1的消毒液，接著添加2滴實施例1之掖 態酵素組成物。將一類似之經培養的10 醴積之實施例 1的消毒液作為對照組。將溶液在整値测試過程中保持於 室溫。每一種徹生物及測試溶骹皆分別測試。毎種微生物 皆測試4組二重復U = 8)之樣品。 在1，2，3，4，6，8及24小時之選擇的時間區間内， 取出含有表皮®萄球菌、銅縴假單胞菌、黏質沙雷氏菌、 白色念珠、煙曲徽菌，及單純性疱疹病毒之接種測試溶 液1 m 1並於無菌0 . 9%氯化鈉溶液空白組製備適當的連缜稀 釋液。以包含0.07% Asolect丨η及0.5%多乙氣基® 80之大 豆-酪蛋白消化洋菜，利用傾倒法製備培養皿。在時間為〇 時•取出1.0 in 1體積之鹽水對照組及利用相同之回收培養 基及稀釋空白組製備連續稀釋之傾倒法培養皿。時間為〇 時，以鹽水對照.组作為起始計數將傾倒法製得之培養皿 在30 -35 f下培養適當之培育時間。測定每一時間區間之 -28 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） ----1--Ί---裝------訂------線 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 4 34 4 3 7 A7 B7 五、發明説明（26 ) 存活擻生物數目。结果歸納於下述之第V- IX表。 為了對單純性疱彦病毒進行測試，利用下述步驟： 在5 m 1包含1滴實施例1之液態_素組成物之黄施例 1的消毒液，及一包含5 m I消毒液的對照組溶液中*接箸 125徹升之單純性疱疹病毒以産生約1 X 1〇 5的組織培養感 染劑量-50 (TCIDsa)。在1，2，3，4，6及8之時間區間内 ，取出測試組及對照組溶液部分並藉由與AOAC中和劑（40 gAsolectln及280 ml多乙氧基醚80溶於1升之0.25 Μ磷酸 鹽緩衝掖，PH 7 · 2)以1 : 1混合而中和，並以最低基礎培 養基（MEM)稀釋10倍。將1 ml部分平舖成VER0單層，每一 稀釋倍數進行4重覆且容許於37土 rc下、在含有5±1% C0 2之空氣中吸收30分鐘。每個時間點之樣品分別抱2次 。結果歸納於下述第X表。 (請先閎讀背面之注意事項4·填寫本頁) .裝 訂 線 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 9 2 本紙浪尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 卜 434437 A7 B7 五、發明説明（27) 第V表：抗菌活性：表皮®萄球菌 樣品 時間 (HR) 對數減少值 實施例1之液 態胰酶組成物 及消毒掖 1 2.7士 0 . 2 2 3 . 3± 0 · 1 3 3.6± 0.2 4 4.2± 0.2 6 4.8± 0.2 8 4.9± 0. 1 24 4.8土 0. 1 對照組（實施 例1之消毒液> 1 2 . 2 ± 0 . 1 2 2·7± 0. 1 3 3 . 1 土 0 . 1 4 3.3± 0.1 6 3.7± 0 1 8 4. 1± 0.3 24 4· 9± 0· 1 I---1------^------11------0(請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) -30 -本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 經濟部中央標準局員工消費合作社印裂 ^ 4 34 43 7 A7 B7 五、發明説明（28) 第VI表：抗菌活性：銅綠假單胞g 樣品 時間 (HR) 對數減少值 實施例1之液 態胰酶組成物 及消毒液 1 2. 2± 0. 1 2 2、7 土 0 ] 3 3.1± 0.2 4 3.1土 0.2 6 3.6± 0. 1 8 3.9土 0.2 24 5.0± 0.2 對照組（實施 例1之消毒液） 1 1,7± 0· 1 2 2.1土 0· 1 3 2.4± 0. 1 4 2.6± 0, 1 6 3· 1± 0*2 8 3 . 5士 0 , 1 24 4.8± 0.4 I---L--.----^------,-ιτ------A (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -31 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 經濟部中央橾準局員工消費合作社印製 4 34 4 3 7 A7 B7 五、發明説明（29) 第VII表：抗菌活性：黏質沙雷氏菌 樣品 時間 (HR) 對數減少值 實施例1之液 態胰酶組成物 及消毒液 1 0.8士 0. 1 2 1 . 2 土 0 . 1 3 1.5± 0. 1 4 1.9士 0·0 8 2.δ± 0.1 8 3,0土 0, 1 24 4.8± 0.6 對照組（實施 例1之消毒液） 1 0」± 0.1 2 0.4± 0. 1 3 0.6± 0, 1 4 0.9土 0. i 6 1 · 1 土 0 . 1 δ 1.4土 0 ‘ 1 24 3.3 ± 0 · 1 -----1'--一----裝------訂------線 (请先閲讀背面之注意事項另填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標孪（CNS ) A4规格（210 X 297公釐） i 4 34 4 ^ 7 A7 B7 五、發明説明（30) 經濟部中央標隼局員工消費合作社印製 第VIII表：抗諸活性：白色念珠菌 樣品 時間 (HR) 對數減少值 實施例1之液 態胰酶組成物 及消毒液 1 0.1± 0. 1 2 0 . 1 土 0 . 1 3 0,1土 0· 1 4 0‘1土 0.0 6 0‘ 1 土 0·0 8 0·2土 0. 1 24 0_2± 0·0 對照組（實施 例1之消毒液） 1 0.1± 0. 1 2 0.0± 0· 1 3 0.1± 0.0 4 0.1土 0.0 6 0.1± 0.0 8 0.1士 0. 1 24 0.1± 0. 1 -33 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） -------„--„----^------1T------it (請先聞讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局肩工消費合作社印製 ^ 4 34 4 3 7 A7 B7 五、發明説明（31 ) 第IX表：抗菌活性：煙曲徽菌 樣品 時間 (HR) 對數減少值 實施例1之液 態胰酶組成物 及消毒液 1 0.1± 0.1 2 0,1± 0·0 3 0 1± 0.0 4 0.2± 0. 1 6 0. 3± 0‘ 1 8 0.3± 0‘ 1 24 0.5± 0. 1 對照组（實施 例1之消毒液） 1 0. 1± 0· 1 2 0· 1± 0. 1 3 0.1± 0 . 0 4 0 . 1 土 0 . 1 6 0·2土 0·1 8 0 * 3 土 0 , 1 24 0.5± 0 . 1 ---t--Ί.---裝------訂------線 (請先閱讀背面之注意事項"填寫本頁) -34 -本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 經濟部中央標準局員工消費合作杜印製 i 4 3d A7 B7 五、發明説明（32 ) 第X表：抗菌活性：單純性疱疹病毒 律 口 係口口 時間 (HR) 對數減少值 實施例I之液 態趟酶組成物 及Sw液 I 0·9土 0. 7 2 0.7± 0. 5 3 1. 4土 I · 8 4 3. 7± 0.4 6 3.7土 0‘3 8 3.9 ± 0 . I 對照組（實施 例I之消毒液） I 0.2 ± 0.2 2 0·2 ± 0 . 3 3 0·2土 0.2 4 0.3土 0.2 6 0. 2± 0, 2 8 0.3± 0.4 ---1---^---裝------訂-------線 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -35 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CMS ) A4規格（210 X 29?公釐） ^ 4 34 4 3 7 A7 B7 一 I —— -- — --- —- - 五、發明説明（33 ) 如第V-X表所述，利用液態酵素/消毒掖之組合所達 到之對數減少一般大於消毒液對照組所能逹到之對數減少 。表皮萄萄球菌、銅線假單胞菌、黏質沙雷氏菌及單純 性疱疹病毒間之差異為统計上顯箸：對白色念珠菌及煙曲 徽菌之抗菌活性約相等。 本發明之另一具體例之消毒效力係_由測定利用由實 施例2之祜草捍菌蛋白酶組成物及實施例1之消毒液組合 所組成之水性条統可達到之殺滅速率或程度而評估。將此 系統對粘質沙雷氏菌進行測試。依循實施例7之測試步驟 。採樣時間為2、4、24小蒔及7天，並評估4及24小時之對 數減少值。測試結果以對數減少值表示，例示於下述第XI 表中。 第XI表：含祜草桿菌蛋白酶之丨夜態酵素组成物在聚四级鏹 淸毒液之抗菌活性上的效果 m- m ^^11 - ^ u am nn 1 i i {請先閲讀背面之注意事項-S填寫本頁) 經濟部_央標準局員工消費合作杜印製 殘存活性％ 畤間 消毒液 對照組 液態酵素（枯草捍菌蛋 白_ > ♦消毒液 4小時 0.9土 0.1 1 . 3 ± 0 . 2 2 4小時 3.7土 0.4 3.4土 1. 0 -36 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格< 210X 297公釐） I 434^27 A7 B7 五、發明説明（34 如第XI表所示，含祜草桿®蛋白酶之液態酵素組成物對實 施例1之消毒液的抗_活性在4小時内有增進的效率° 本發明之另一具體例之消毒效力傜藉由測定利用由實 施例2之液態蛋白酶組成物及實施例1之消毒液組合所形 成之水性条統可逹到之殺滅速率或程度而評估。將此条統 對粘質沙雷氏菌、表皮葡萄球菌、銅綠假單胞菌、白色念 珠菌及鎌刀菌(Fusur iiii soiani)進行測試。依循實施例 7之測試步驟。採樣時間為2、4、24小時及7天，並評沽4 及2 4小時之對數減少值。測試結果以對數減少值表示，洌 示於下述第XII表中。 t ^ _ ί 1Ί J 批水 I I I I 訂 I n 線 (請先閱讀背面之注^^項"填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消费合作社印裝 -37 本紙張尺度適用中國ϋ家標準（CNS ) 規格（：似297公康 經濟部中央榇準局員工消費合作社印製 .4 34。' A7 B7 五、發明説明（35 ) 第XII表：含胰蛋白酶之液態酵素組成物在貰施例1之聚 四级鑷-丨消毒液之抗菌活性上的效果 對數減少值 微生物 時間 (小時） 液態胰蛋白 酶組成物及 消毒掖 僅有 消毒液 粘質沙雷氏菌 4 1.9土 0‘ 1 1.3土 0. 1 6 2 · 0 土 0.6 1 · 5土 0‘ 1 24 4. 4± 0.8 3.4± 0 5 表皮ϋ萄球S 4 3. 1 土 0.2 2.6± 0.2 6 3, 5± 0. 3 3,0 土 0 · 0 24 U 土 0.0 U± 0.3 銅綠假單胞菌 4 3.8± 1.0 2.3土 0.9 6 4.2± 0.7 2.9土 1.0 24 4.9± 0.0 4.4± 0.5 白色念珠菌 4 0. 1土 0. 1 0 ‘ I ± 0 . 2 6 0. 1± 0.2 0.i ± 0.2 24 0‘1土 0 ‘ 2 0. 2± 0.3 鎌刀蘭 4 3.8± 0.6 3.4土 1. 3 6 4.5 ± 0.4 3.6 ± 0.3 24 4.6 ± 0 . 2 4. 3 ± 0 . 5 ----.------^------1T------^(請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) "38 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 鯉濟部中央標準局員工消費合作社印製 A7 B7 、發明説明（36 ) 審飾例10 下述比較例可.證實含不同消毒劑之本發明的液態酵素 組成物之功效。本發明之液態酵素組成物的功效，尤其實 施例1的液態酵素組成物（下文中以“液態酵素”或“ LE ”表示），在聚四级編-1多效溶液（實施例1 B )及聚合雙 胍溶液（ReNu®多效溶疲）之抗菌活性上的評估。 將2滴液態酵素添加至10 in 1之聚四级锡消毒液或聚合 雙胍消毒液中。亦測試値別消毒液本身以作為對照组°依 循實施例7之實驗方式進行。微生物學上之數據偽以對數 減少值之方法表示，確認在4小時内可達到抗表皮®萄球 菌、銅綠假單胞菌、粘質沙雷氏菌、白色念珠菌及煙曲徽 菌之功效。結果如下述第X I Π表所示3 微生物 聚四级錯多 效溶液+LE" 聚四级镟多 效溶液 聚合雙脚多 效溶液+LE1*· 聚合雙腮多 效溶液 煙曲徽菌 0.2 0.1 0.1 0.2 白色念珠圍 0.1 0.1 0.2 1.3 粘質沙雷氏菌 1.9 0.9 1.1 3.2 銅綠假單胞菌 3.1 2.6 3.3 4.0 表皮葡萄球® 4.2 3.3 1.8 2.3 "消毒時間4小時 "* LE =實施例1之液態酵袤組成物 本紙掁尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐） ----ί—_-----裝------訂------線 (請先閲讀背面之注意事項Λ填寫本頁) 經濟部中央樣準局員工消费合作社印裝 Γ 4 34 ^ Α7 Β7 五、發明説明（37 ) 結果證明液態酵素對聚四级親-1消毒液不具有害效果 ，且在4小時後可促進殺滅粘質沙雷氏菌、白色念珠菌及 煙曲徽菌。相反地，液態酵素組成物對聚合雙胍消毒液之 抗菌活性有負面效果。此等結果説明利用本發明之較佳方 法所獲得之出乎意料的結果 > 其中聚四级錫消毒液傜與本 發明之液態酵素組成物組合。 進行一為期135天的研究以比較本發明之組成物及方 法與習知組成物及方法的功效。進行3種不同的臨床觀察 :1)第III型第IV型鏡Μ沈澱物賴率（Rudko分级条統）； 2)鏡片替換之頻率及理由；以及3)裂隙燈發現之頻率 。M第111型”及“第IV型”鏡片沈澱物被認為是駸重沈 澱的鏡片。“裂隙燈發現”偽定義為由臨床翳師使用驗光 師之“裂隙燈”裝置在眼角膜上所觀察到的缺陷。 將3種不同之清潔配方及其相關方法與本發明（“ LE” )之方法比較：η “病史對照組” _ 一組包含5種不同研 究之數據，其中鏡Η偽每天以界面活性劑清潔*並接箸於 消毒液中浸泡8小時’並配合每週一次將鏡Μ浸泡於含有 溶解的胰酶片之消毒液中8小時；2 ) “記錄1 ” -利用 含有檸檬酸鹽之聚四级錨消毒液（實施例1 Β )之溶胶中8 小時，並配合每週一次將鏡Κ浸泡於含有溶解的胰誨片之 聚四级錨-1消毒液（實施例1 Β配方）中8小時；3 ) “記 錄2 ” 一利用含有界面活性劑之聚合雙胍消毒液之記錄’ -40 - 本紙張尺度適用中國國家橾準（CNS > A4規格（210X297公釐） ----Ί.-----裝------訂------線 (請先閱讀背面之注意事項Λ填寫本頁) 經濟部中央橾準局員工消費合作社印製 t ___B7_五、發明説明（3δ ) 其中鏡片偽每天撫摩數秒並接箸浸泡8小時，並配合每週 一次將眼鏡浸泡於含有界面活性劑及溶解的祜草捍菌蛋白 酶Η之聚雙胍消毒液中至少15分鐘·接箸取出鏡片並將其 置於含有界商活性劑新鮮配製之聚合雙胍中並浸泡8小時 :以及4 > “ LE” 一本發明之方法及紐成物，其中鏡片傜 每天以界面活性劑清潔撫摩，接著於5 m 1聚四级鎌-1溶液 (實施例1 B配方）及1滴實施例1之液態酵素組成物（“液 態酵素”）中浸泡δ小時。下述第XIV表提供組成物及本研 究記錄之表列式比較= 4 / A7 ----α---------裝------訂------線. (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) -41 ~ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4规格（210Χ297公農’ 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 病史 記錄1 記錄2 L E 每天，使用 每天*使用 每天，使用 每天，使用 清潔 界面活性劑 聚四級錨-i ReNu®聚合 界面活性劑 清潔劑 溶液 雙胍溶液 清潔割 每天（8小時 每天（8小時 毎天（8小時 每天（8小時 消毒 )，使用消 ) >使用聚 )，使用 ) >使用聚 毒液 四级錨-1溶 ReNu®聚合 四级錨溶液 液 雙胍溶液 每週（8小時 每週（3小時 每週（15分 每週（8小時 )，使用含 )，使用含 鐘.），使用 )，使用含 有溶解之胰 有溶解之胰 溶解枯草捍 有1滴液態 酵素性清 酶片的消毒 酶Η的聚四 菌蛋白酶片 酵素之四级 潔劑 液 级鏺溶液， 之ReNu®聚 鐵-1溶液 無另外的消 合雙胍溶液 毒步驟 •接著進行 消毒步驟 ^ 43dd37 A7 B7 五、發明説明（39 ) 結果圖示於第1 - 3圖。證實包含本發明之液態酵素 組成物（“ LE”）之記錄在維持鏡Η無第I Π型及第IV型之 沈澱物上，與其他習知方法及組成物相較，呈現較佳功效 。如第1圖所示，當其他記錄呈現6 . 5-8 . 4%鏡片沈澱物 頻率時1本發明可去除第111型及第IV型鏡片沈殿物（0 . 0 %頻率.）， 第2圔進一步證明本發明之組成物及方法的清潔功效 。將鏡片似L Ε組成物清潔時，因為鏡Η沈澱物需要替換之 頻率為0.3% ·所研究之其他用於比較的組成物及方法則 本紙浪尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） ----ir---L---¾------tr-------0 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) Α7 Β7 4 34 4. 五、發明説明（40 ) 為1. 4-8.5%之範圍·與其他3種組成物及方法相較，LE組 成物亦證實具有較低之“裂隙燈發現〃（第3圖） 本發明在其較廣的範圍内並不拘限於上述特定細節。 可在本案後附之申請專利範圍的主張範圍内，但未偏離本 發明之原則及未犧牲本韹明之優點下，進行該等細節之變 化ϋ .....II (-^1 I» - f 11 I « (許先聞讀背面之注意事項再填寫本頁) -打· 經濟部中央標準局貝工消費合作社印製 3 4 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X 297公釐）