TW419455B

TW419455B - Amino acid-substituted benzoylguanidine, a process for their preparation, and their pharmaceutical composition for use in cardiovascular treatment or diagnosis

Info

Publication number: TW419455B
Application number: TW083111975A
Authority: TW
Inventors: Heinz-Werner Kleemann; Hans-Jochen Lang; Jan-Robert Schwark; Andreas Weichert; Wolfgang Scholz
Original assignee: Hoechst Ag
Priority date: 1994-09-09
Filing date: 1994-12-21
Publication date: 2001-01-21
Also published as: HUT72629A; EP0700899A1; FI954192A0; GR3030365T3; ATE178315T1; IL115195A0; DK0700899T3; PL310343A1; HU220762B1; HU9502632D0; CN1127749A; SI9500282B; CN1057760C; EP0700899B1; ES2131241T3; DE59505487D1; JP3828597B2; NO953553L; IL115195A; CA2157859C

Description

A7 B7 五、發明説明（）本發明係有關式I苯甲醯胍類R(1 )

經濟部中央標準局員工消費合作社印製式中三種R(1)，R(2)及R(3)取代基之一為 -Y-4-[(CH2)k-CHR(7HC=〇)R ⑼]-苯基， -Y-3-[(CH2)k-CHR(7)-(O0)R(8)]-苯基，或 -Y-2-[(CH2)k-CHR(7)-(C=0)R(8)]-苯基，其中苯基係分別未經取代或經1至2個選自下列之取代基取代：F，Cl，-CF3 ，甲基，羥基，甲氧基及-NR(37)R(38)； R(37>與R(38)分別為氫或-CH3 ; Y為一個鍵，氧，-S-或-NR(9); R⑼為風或燒基， R⑺為-OR(10)或-NR(10)R(11); R(10)與R(11)分別為氫，-(CrC8h烷基，-(CVC8)-烷醯基，-(CfC^)-烷氧羰基，苄基，苄氧羰基；或 R(1〇)為三苯甲基； (請先閱讀背面之注意事夂再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(210X297公釐)

Μ 9 4 5 5 五、發明説明（a ) R⑼為-0R(12}或-NR(12)R(13): 叩2)與R(13)分別為氫，-(CrC8)-烷基或苄基； k為零，..1，2，3或4 ; 且其他特定取代基R(1)，R(2)或R(3)分別為 -(CrC^)-燒基 ’ -(C2_C8)-雄基或-(CH2)mR(14)’ m為零，1或2 ; R〇4)為-(CfCJ-環烷基或苯基，其係未經取代戒經1 至3個選自下列之基團取代：F，ci，-CF3 1中基’ 曱氧基及-NR(15)R(16); R(15)與R(16)為氫或-ch3 ; 或其他特定取代基R(1)，R(2)或R(3)分別為 R{18)R(19)N-(C=Y')-NH-S〇2-；丫’為氧，-S-或-N-R(20); R(18)與R(19)分別為氫，-(tVC^)-烷基，_(C；rCs卜嫁基或-(CH2)t-R(21); t為零，1，2，3或4 ; R(21)為-(c5-c7)-環烷基或苯基，其係未經取代或經1至3個選自下列之基團取代：f，Cl，—CF；3 甲氧基及烷基；或叩8)與R(19)共同形成4或5個亞甲基，其中〆個〇Η2美團可被氧，-S- 1 -NH-，-N-CH3或苄基置换， R(2〇)如R(18)之定義或為脒；本紙張尺度適用中國國家梯率（CNS ) A4规格（21〇><別公釐） ---------裝------ir------疼 c请先閱讀背面之泣意事項#填寫本育〇經濟部中央標隼局員工消費合作社印製經濟部中央標準扃I工消費合作社印繁 419455 at B7 五、發明説明（》）或其他特定取代基R(1)，R(2)或R(3)分別為：氫，卩，0,日「，1’-。三〜，\-((^2)「((^_)，叫22)-S〇u -，R(23)R(24)N-CO-，R(25)-C0-或 R(26)-R(27)-N-S02- r其中全氟烷基為直鏈或分支； X為一個鍵，氧，-S-或-NR(28); u為零，1或2 ; p為零，1或2 ; q為 1 ’ 2，3，4，5或 6 ; R(22) ’ R(23)，R(25)與 R(26)分別為 -(CrC8)-烷基 ’ -(C3-Cs)~ 烯基，-(CH2)n -R(29)或 -GF3 ; ,n為零，1，2，3或4 ; R(28)為風或-(〇「C3)-燒基， R(29)為-(C3-C7)-環院基或苯基，其係未經取代或經 1-3個選自下列之基團取代：F，Cl，-CF3 ，甲基，甲氧基與-NR(3〇)R(31); R(30)與 R(31)為氫或烷基；或 R(23)，R(25)與 R(26)為氫； R(24)與R(27)分別為氫或-(CVCd-烷基；或 R(23)與R(24)，及R(26)與R(27)共同形成4或5個亞甲基’其中一個CH2基團可被氧，，-NH-，-N - CH3或-N-苄基置換；

(請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐）

經濟部中央標準局員工消費合作社印製其他特定取代基R(1)，R(2)或R(3)分別為 -OR(35)*r,NR(35)R(36); R(35)與R(36)分別為氫或-(CVCe)-烷基；或 R(35)與R(36)共同形成心7個亞甲基，其中一個CH2基團可被氧，-S-，-NH-，^-01~13或-屮苄基置拷； R(4)與 R(5)分別為氫…(C^-CJ-烷基，F，Cf，-〇R(32)，-NR(33)R(34)或-CrF加，； R(32)，R(33)與R(34)分別為氫或-((ν〇3)-烷基； r為1，2，3或 4 ; 及其醫藥上可耐受之鹽。較佳式I化合物為彼等式中： R⑴為-(CrCJ-燒基，-(C2-CJ-晞基或-(CH2)mR(14); m為零，1或2 ; v R(M)為-(C5-Ceh環烷基或苯基，其係未經取代或經1 至2個選自下列之取代基取代：F，C!，-CF3，甲基，曱氧基及-NR(15)R(16); R(15)與R(16)分別為氫或-GH3 ; 或 R(1)為 R(18)R(19)N-(C=Y，)-NH-S〇2-; r為氧，或-N-R(20); R(18)與R(19)分別為風’ -((^-(^丨-燒基’ -(C3_C4)-缔基或-(CHJrR(21); 本紙乐尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） ---------^------IT------.^ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) A7 B7 五、發明説明（5) t為零，1或2 ; R(21)為-(C5-C6)-環烷基或苯基，其係未經取代或經 1-2個選自下列之取代基取代：F，Cl，-CF3，〒氧基及甲基；或 R(18>與R(19>共同形成4或5個亞甲基，其中一個CH2基團可經氧’ -S-，-NH-，-N-CH34-N-苄基置换； R(2〇)如R(18)之定義或為脒；或 R⑴為氫 ’ F，a，Br，丨，N，R(22)-S〇2-，R(23)一 R(24)N-CO-，R<25)-CO-或闩(26)闪(27)(\!-3〇2-; R(22)，R《23) ’ R(25)與 R(26)分別為 -{Ci-C4)-燒基 ’ ·~(〇3-C4)-缔基 ’ -(CH2)n-R(29) 或-cf3 ; π為零，(或2 ; R(29)為-(C5-C6)-環烷基或苯基，其係未經取代或經 1-2個選自下列之取代基取代：F，Q，-CF3，甲基，曱氧基與-NR(30)R(31); R(30>與R{31)分別為氫或甲基；或經濟部中央棣準局員工消費合作社印装 t请先閲讀背而之注^^項再填寫本萸) R(23)，R<25)與 R(26)為氫； R(24)與R(27)分別為氫或甲基；或 R(23)與叩4)，及R(26)與R(27)共同形成4或5個亞甲基，本紙張尺度逍用中國國家樣準（CNS ) A4規格（210X297公釐）經濟部中央標準扃員工消費合作社印裝 ' V A' 9 A 5 3 A7 —j_B7五、發明説明（6) 其中一個CH2基團可被氧，-S-，-NH-，-心(^3或-N-苄基置換；或 R(1)為-OR(35)或-NR(35)R(36); R(35)與R(36)分別為氫或-(CrC4)-烷基；或 R(35)與R(36)共同形成4-5個亞甲基，其中一個CH2基團可被氧，-S-，-NH-，-‘0^3或-卜苄基置換； R(2)或R(3)取代基之一為 -Y-4-[(CH2)k-CHR(7)-(〇〇)R(8)]-苯基， -Y-3-[(CH2)k-CHR(7HC=〇)R(8)]_ 苯基或 -Y-2-[(CH2)k-CHR(7)-(C=〇)R(8)]-苯基，其中各苯基係未經取代或經1-2個選自下列之取代基取代：F，C卜-CF3 ，甲基，羥基，甲氧基或-NR(37)R(38)； R(37)與R<38)分別為氫或-CH3 ; Y為一個鍵，氧，-S-或-NR(9);R(9)為氫或甲基； R(7)為-OR(10)或-NR(10)R(11); R(10)與R(11)分別為氫，-(CrC^)-烷基， -(CfC5卜烷醯基，-(C^-CJ-烷氧羰基，苄基或苄氧羰基；或R(10)為三苯甲基； ---------—^------、玎------^ (诗先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

•-'w Q 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 419455 經濟部中央標準局負工消費合作社印製 A7 ~_______B7 __ 五、發明説明（7) R⑻為-0R(12)或-NR(12)R(13); R(12)與R(13)分別為氫，-(CVC，烷基或苄基； k為零，1或2 ; 且R(2)或R(3)中另一個特定取代基為-d-CJ-烷基，氫，F ，Cl，Br或 I ; R⑷與R(5)分別為氫，甲基，F，Cl，-OR(32)，-NR(33)R(34) 或-CF3 ; R(32>，R(33)與R(34)分別為氫或甲基；及其醫藥上可耐受之鹽。特別佳之式I化合物為彼等式中： R⑴為-(CrCj-娱*基 ’ ~(C2-C4)-稀基或-(CH2)mR(14); m為零，1或2 ; R(14)為-(C5-C6)-環燒>基或苯基’其係未經取代或經Ί-2個選自下列之取代基取代：F，α，-CF3，甲基，甲氧基及-NR(15)R(16); R(15)與R(16)分別為氫或-CH3 ; 或為氫，卩，01，6「，1，-〇三(\1，|=1<22)-8〇2-，^23)- R(24)N-CO-，R(25)-CO-或叫26)闩(27)料〇2一； R(22)，叩3)，R(25)與R(26)分別為甲基或_CF， ο 或 R(23)，R(25)與 R(26)為氫； R(24)與R(27)分別為氫或甲基； ---------1^------1T------^ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 9 本紙張尺度適用中國國家橾準（CNS > A4規格（210X297公釐）經濟部中央標準局員工消費合作社印製

五、發明説明（8) R(1)為-OR(35)或-NR(35)R(36); R(35)與R(36)分別為氫或-(CVCd-烷基；或R(35)與R(36)共同形成4_5個亞甲基，其中一個(^2基團可被氧，-S-，-NH-，-N-01~13或-唂苄基置換； R(2)與R(3)取代基之一為 -Y-4 - [(CH2}k-CHR ⑺-(C=0)R(8)]-苯基， -Y-3-[(CH2)k-CHR(7)-(C=0)R(8)]-苯基或 -Y-2-[(CH2)k-CHR(7)-(C=0)R(8)]-苯基，其中各苯基係未經取代或經一個選自下列之取代基取代：F，Cl，-CF3，甲基，羥基，甲氧基及 -NR(37)R(38)； R(37)與R(38)分別為氫或-CH3 ; Y為一個鍵，氧，-S-或-NR(9);R(9)為氫或甲基； R⑺為-NR(10)R(11);R(10>與R(1 1)分別為氫，-(CVD-烷基，院酿基，-(CrCJ-院氧叛基’午基或节氧羰基；或R(10)為三苯甲基； R⑹為-0R(12)或-NR(12)R(13); R(12)與R(13)分別為氫，-(CVC，烷基或苄基；且R(2)或R(3)中另一個特定取代基為-(A-C4)-烷基，氫，F ---------------11------^ (請先聞讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS > A4規格（210X297公釐）

.t 419455 五、發明説明（7) 或ci; R(4)與R(5)分別為氫，甲基，F，C卜-〇R(32)， -NA(33)R(34)或-CF3 ; R(32) ’ R(33)與R(34)分別為氫或甲基；及其醫藥上可射受之鹽類。各取代基R⑴至R(5)之一含有一個或多個不對稱中心時，此等中心可分別呈S-或R—組態。此等化合物可出現旋光異構物，非對映異構物，消旋物或其混合物。所指定之院基基團可呈直鍵或分支。本發明尚有關一種製備式|化合物之方法，其包括使式丨ί化合物與胍反應式中R⑴至R(5)如上述定義，且L為容易經親核性取代之釋離基。式丨丨活化酸衍生物，式中[_為虎氧基，以甲氧基較佳，或尽氧基，表硫基，曱硫基或2- P比咬硫基，或為各氣雜错的基團，以1_咪唑基較佳，其製法宜依本身已ς方式，由其基％之複基氯（式II，L=CI)製得，其羰基氯部份則再依本身已知方式由其基礎之羧酸(式丨丨’ U0H)製得，例如：使用亞硫醯氯。除了式丨I羰基氯(L=C〇外，亦可製備其他式丨丨活化酸衍生物，其係依本身已知方式，直接由其基礎之苯甲 '11 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS )八4規格（210X2W公釐） ---------¢------ΐτ------^ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製經濟部中央椟準局舅工消費合作社印敢 ___B7__ 五、發明説明（10) 酸衍生物（式丨丨，L=OH)製得，如，例如·製備式丨丨中，L=0 CH3之甲酯時，以含HCI氣體之甲醇溶液處理，製備式丨丨咪唑化物時，以羰基二咪唑處理[L=1-咪唑基，Staab, Angew, Chem. Int_ Ed Engl. 1，351-367(1962)]，製備混合酸酐丨丨時，以CI-COO-C2H5或甲苯磺醯氯於三乙胺之存在下，於惰性溶劑中處理，及活化苯甲酸時，以二環己基碳化二亞胺 (DCC)或以0-[(氰基-(乙氧羰基）亞甲基)胺基K1,3,3，-四甲基糖醛鎗四氟硼酸鹽（"TOTU")處理[第21屆歐洲胜肽研討會記錄，胜肽1"0年，編輯者：E.奇拉特與D.安德魯，伊斯康，萊登，1991 年{Proceedings of the 21st European Peptide Symposium, Peptide 1990, Editors E. Giralt and D. Andreu, Escom, Leiden, (1991)]。許多製備式丨丨活化羧酸衍生物之方法及其文獻來源示於J·馬奇之"高級有機化學"，第3版，強威利父子公司，1985年，第350頁(J. March, Advanced Organic Chemistry, 3rd Edition, John Wiley & Sons, 1985，ρ· 350}。式丨I活化羧酸衍生物與胍之反應係依本身已知方式，於質子性或非質子性之極性但惰性有機溶劑中進行。此時已證實甲醇’異丙醇或THF，於2〇°C至此等溶劑之沸點溫度下，適用於苯甲酸甲酯(Π，UOMe)與胍之反應。化合物|| 與無鹽胍之大多數反應宜使用情性溶劑如：THF，二p氧乙龍，二氧陸園或異丙醇。然而，亦可使用水。當L為C丨時’適宜添加一種捕酸劑，例如：呈過量脈之形式，以與氫齒酸結合。未知之式II化合物可利用文獻上已知之方法製備，例本紙張尺度適用中圏國家棵率（CNS ) A4规格（210X297公董） ---------—------t·------線 (諳先聞讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局貝工消費合作社印策 4 19455 at 一_一 B7 五、發明説明（11) 如：以氨或胺轉化4-函-3-氣磺醯基苯甲酸，形成3_胺磺醯基一4—齒-苯甲酸，或以弱還原劑(如：亞硫酸氫鈉)轉化成3_ 烷磺醯基-4-由-苯甲酸，隨後進行烷化作用，所得產物依上述一種製程反應’得到根據本發明化合物丨。苯基部份經硫’氧或氮親核物取代之苯基丙胺酸衍生物之引進過程依文獻上已知之芳香系上親核性取代作用之方法進行。已證實#離子與三氟甲磺酸根適用為此取代作用中苯甲酸衍生物上之釋離基。該反應宜在雙極性非質子性溶劑中，如：DMF或TMU，在0°C至高達溶劑之沸點之溫度下，最好在80°C至高達溶劑之沸點下進行。以含有高驗性及低親核性陰離子之鹼金屬或鹼土金屬鹽類，例如： K2C03或〇3〇03適宜作為捕酸劑。可選用已知之標準方法來保護胺基酸之官能基。已證實三級丁氧羰基，苄氧羰基，二苄基與三苯甲基適用氮上。酸官能基可不保護即使用，或可使用合適酿或合適驢胺。引進烷基或芳基取代基時，可利用文獻上已知方法，由芳基齒化物與例如：有機鋅化合物，有機錫酸鹽化合物，有機硼酸類或有機硼烷進行鈀媒介之交叉偶合反應。苯甲醯胍類I通常為弱鹼，且可與酸結合，形成鹽。所有醫藥上可耐受之鹽類，例如：鹵化物（特定言之鹽酸鹽），乳酸鹽，硫酸鹽，檸檬酸鹽’酒石酸鹽’乙酸鹽，鱗酸鹽，甲績酸鹽，及對甲苯績酸壤均為合適之酸加成鹽〇化合物I為經取代之醯基胍類。最具代表性之醯基胍 ----------^------1T------^ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 〜13〜五、發明説明（12) A7 B7 類為吡畊衍生物艾莫德（amiloride)，其在療法中作為保留神之利尿劑使用。文獻中亦説明許多種其他艾莫德類化合物，如，例如，二甲基艾莫德或乙基異丙基艾莫德。 0Π

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'NH A% 請先閲讀背爲、 τ 項再經濟部中央標率局貝工消費合作社印製艾莫德：R，，FT=H 二甲基艾莫德：R’，R"=CH3 乙基異丙基艾莫德：r，=ch2h5，r"=ch(ch3)2 此外，已有研究發現艾莫德具有抗節律不整性質 (Circulation氓1257至1263(1昍9))。然而，反對廣泛使用艾莫德作為抗節律不整劑的因素為此效應表現相當微弱且伴隨出現抗高血壓及促尿排泄氯化鈉之效應，後者副效應係當治療心律不整時不期望者。在單離之動物心臟上進行實驗時，亦得到艾莫德具有抗節律不整性質之現象(Eur. Heart J. 9(suppl. 1): 167〇988)(摘要本1·))。因此發現，使用例如：老鼠心臟時，艾莫德可以完全抑制人工誘發之心室纖維顫動。上述艾莫德衍生物 ’乙基異丙基艾莫德在此模式系統上甚至比艾莫德更有效力。美國專利案5 091 394(HOE 89/F 288)中曾説明在相當於養裝訂本紙張纽適用tS®家祿準（CNS ) 21()><;297公爱） A7 B7 石年丨2月3D日 fiif 經濟部中央標準局員工消費合作社印製五、發明説明（13 ) ί利申請案第831Π975號 ROC Patent Appln. No. 83111975 c , 」n福充$中文説明書第15-16頁-附件一

Supplemented Pajfes 15-16 of the Chinese Specification~Encl. f國85年12月抑日送呈） (bubraitted on December , 1996) 取代基R(l)、R(4)及R(5)位置上帶有一個氫屈子之笨甲銥胍類。然而歐洲公開説明書0 556 674(H〇E 9^/F 034)曾説明苯甲醯胍類，其t1取代基不具有根據本發明妒請專利範園中之定義》其中未説明胺基酸衍生物。此外，此等已知之苯甲醯胍類仍需要提向水溶性。 » » 美國專利案3 78〇〇27中申請專利之酿基胍類之結構類似式I化合物f且係衍生自市售利尿劑商品如：布坦奈德 (bumetanide)。這些化合物據報告指出具有強烈之利尿棑鹽活性。本發明化合物適用爲具有保護心臟成份之抗節律不整藥劑，供預防及治療梗塞，及治療狹心症，該等化合物亦保謾性地抑制或強力減低絕血誘發傷害形成期間之病理生理病變，特定言之在絕血誘發心律不整期問之病理生理病變。由於其具有對抗病理性缺氧與絕血狀態之保護效果，根據本發明式I化合物因可抑制细胞 Na+/H+交換機制’因此可作為治療所有因絕血引發之所有急性或fe性傷害’或因而原發性或續發性誘發之疾病<7此點使其適用為外科手術之藥劑，例如：用於器官移植靡間 ’可在摘除器官之前及期間保護在供給者體内之器官T並保護已摘除之器官，例如：當以生理浴液體處理時，或當存放在此等液體中時，亦可用於器官植入受體期間。當在 -15 _ 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（ 210X297公麓〉 - -----I .....- ---n I I- I I - 1^1 E— - - I —I ; I t請先閲请背面之注意事項再填寫本f ) 419455 A7 ---__ B7 五、發明說明（14 ) 例如，心職或周邊血管上進行血管造形手術時，此等化A 物同樣，有價値之保護性藥劑。根據其對抗絕血性誘^ ίΐ疋保護作用，該等化合物.亦適用為治療神經系統（特疋5之CNS)絕血之藥劑，例如供治療中風或腦水腫。此外根據本發明式I化合物同樣桃適用於治療各種休克形式，如，例如，過敏性休克，心臟性休克，血容積減少性休克及細菌性休克，报據本發明化合物為細胞鈉/質子反向運輸子(antip〇rter)( Na/H哭換子）之有效抑制劑，Na»/H+交楗乎係在許多種病變中（j：.本上指高血壓，動脈硬化，糖尿病，等等），於細胞中含·$：增加，很容易測得，如.，例如：可出現在紅血球 ’ ▲小板或白血球上。因此根據本發明化合物適用為優秀且問便之科學工具’例如：可用為判斷及分辨高血恩特定形式之診斷劑，亦可診斷動脈硬化，糖尿病，增殖性病變 ’等等β此*卜，式I化合物適甩於預防療法，供預防形成 .高血壓例如，自發性高血壓。可證明各種疾病與禁理作用/試驗之間的闞係之文獻資料如下：，經濟部中央樣準局貝工消費合作社印装 * *1 I 11. I I n n n I~ 訂 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 狹心症與節律不整：狹心症之形成乃係由於冠狀動脈之暫時關閉，而使得血液之供應暫時短缺，此一短暫的時間造成了心律失常’降低了心臟的效率’進而使心臟受損。上迷之情形可以藉著抑制"antiporter"而減至最小，蓋其可避免細 ~ 16 ~ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4说格（2I0XM7公釐） 4194-55 A7 B7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製五、發明説明（14-1) 胞内之齊堆積。當心臟再灌注之血液（區域或整體的）中氧短缺後，於再灌注期開始之際，亦即在補充氧氣時，會發生節律不整的現象，而NHE-交換抑制劑會減少這些節律不整的發生次數與持續時間。參考文獻： l.Sdiolz W, Aibus Uf Lang HJ, Linz W, Martorana PA, Englert HC, Schiilkens BA. Hoc 694, a new Na+ZH4" exchange inhibitor and its effects in cardiac isch^emie, Br J Pharmacol 1993;109:562-568. 2.Dexmis SC, Cotzee WA, Crag〇6 EJ, Opic LH. Effects of proton buffering sod of amiloride derivatives on reperftisiati anliythmiafl ia isolated rat heatte. Cixc Res 1990;66:1156-1159. 3-Scliolz W, Albus U, Linz W, Martorana P, Lang HJ, Scholkcns BA. Effects of Na+/H+ exchange inhibitors in, cardiac iacliemia. J Mol Cell Cardiol 1992^14:731-739' 4.Scholz W, Albus U, Na+/H+ exekaage and its iiihibition in cardiac ischemia and rqjcrfijsion. Basic Rj?» Cardiol 1993；88:443455. 梗塞與心臟移植：兩者均會干擾血液供給之結果（於梗塞的大部份情形中，僅發生於一些區域中），而造成缺氧〇可藉由NHE (Na+/H+-交換子）-抑制避免細胞之破壞，即由於質子（其由厭氧沾流程‘中產生）無法交換以對抗細胞外的鈉，故鈣無法流入。藉著於細胞内堆積質子，可減少細胞之代謝，直至產生再氧化。以上之説明係參酌：1 the reirew of Scholz et al . , Basic Res. Cardiol. 88, 443(1993)2. by Hendrikx et al., Circulation 89, 2787(1994)-16~1 - -n- i I - _ - In 1^1 ^^^1 ^^^1 HI - 0¾. Te {請先M讀背面之注意事項再填窝本頁) 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐）經濟部中央橾準扃貝工消费合作社印装 Μ、4_55 , Α7 _____Β7_ 五、發明説明（14-2) 3. by Scholz et al., Br. J. Pharmacol, 109, 562( 1993) 有關於增殖：動脈粥樣硬化：較新的學説咸認爲動脈粥樣硬化之特徵係在於細胞膜中之生長及增殖過程，且NHE-活化與動脈粥樣硬化間係具有因果關係。舉例而言，典型的血_管收縮藥（如管緊張素Π )(其可活化NHE)具有致有絲分裂之效應，於纖維“胞與平滑肌細胞中均可證實ΝΗΕ-活性與DNA-合成間具有密切的關聯。再者，可檢測到肥大劑（hypertrophic agent,血管緊張素Π )與增生劑係以不同的方式刺激NHE。於具有相當高的代謝的增殖血管平滑肌細胞中，NHE亦具有防止質子於細胞内堆積之功能，以確保有絲分裂。以上之説明係參酌： 1 Lapointe et al., Am. J. Med. Sci. 307, Suppl 1 ,P9(1994) 2. Buhler et al., J. Biol. Chem. 264, 12582(1989) 3. Raul et al., FEBS Lett. 299, 19 (1992) 4Jg et al., Kidney Intern. 41, 872 (1992) 5. Seraplicini et al . , Am. J. Med. Sci. 307, Suppl. 1, P43-16(1994) ，16-2 _ 本紙伕尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） ---------- 裝------訂------ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 419 455 a? B7 五、發明铣明（14_3) 一般增殖：不同之研究已顯示細胞内的酸中毒可減緩細胞增殖現象，而最終使知胞增殖現象停止。NHE-1於細抱之pH 原狀穩定（pH胃homeostasis)中的中樞功能使其於生長與增殖障礙中必須扮演一首要角色，此則暗示降低了缺少 antiporter的細胞的致癌能力。以上之説明係參酌： j. Cragoe et al., J. Biol. Chem. 259, 4313(1984) 2. Chigo et al., J. Cell Physiol. 145, 147(1990) 3. Gragoe at al., Cancer Res. 51, 3212(1991) 4. Horvat et al., Eur. J. Cancer 29A, 132(1993) 腫瘤：特别地，選擇性的NHE抑制對於可以高溫治療的腫瘤應具有利的影響，以下之刊物則證實了可使用脒毗嗪 (ami lor ide)與脒嘻衍生物之組合進行治療。

_» I 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 — .1 — - — III —裝-I (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) J. Song et al., Int. J. Radiation Oncology Biol. Phys., Vol. 25, 95-103(1992) 2. Song et al ., Radiotherapy and Oncology, 27, 252-258(1993) 3. Tannock et al . , Br. J. Cancer, 67, 297-303( 1993) -16~3 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4规格（210X297公釐） 2. 4^9455 專利申請案第83111975號 ROC PatenMppln. No. 83111975 補充之中文說明書壤16-4及16-5頁-附件- 五於明说明(呂即巧613161^ Pages 16-4 and 16-5 of the Chinese Specification- Enel. ΙΠ (Submitted on February Z^, 2000) Ά-- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 4. Di-San Junyi Daxue Xuebao (1998)，20⑹，476-479. Induction of the acidification and apoptosis of human lung cancer cell line through inhibition of Na+/H+ exchanger-1 with dimethyl amiloride. Wu, Guoming; Li, Weiliang; Huang, Guijun; Qian, Guisheng. Xinqiao Hospital, Third Military Medical University, Chungking, P.R.C. CODEN:DYXUE8 ISSN: 1000-5404. Journal written in Chinese. CAN 131:153513. AN 1999:359555. 5. Wu, Guoming; Huang, Guijun; Li, Weiliang; Qimi, Guisheng; Chen, Weizhong. Department of Respiratory Diseases, Xinqial Hospital, Third Military Medical University, Chungking, P.R.C. J. Med. Coll. PLA(1998), 13(4), 291-294. Acidification and apoptosis of human lung cancer cells induced with antisense nucleotides against NHE-1 gene. ISSN: 1000-1948. Journal written in English. CAN 131:53649. AN 1999:198132 6. Wang, Huayan; Singh, Dyal; Fliegel, Larry. Department of Pediatrics, Faculty of Medicine, University of Alberta, Edmonton, AB, Can. J. Biol. Chem. (1997), 272(42), 26545-26549. 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製

The Na+/H+ antiporter potentiates growth and retinoic acid-induced differentiation of PI 9 embryonal carcinoma cells. CODEN:JBCHA3 ISSN:0021-9258. Journal written in English. CAN 128:2267. AN 1997:689138. 纖維變性： 1. Paradiso, A.M., Am. J. Physiol. Lung Cell. Mol. Physiol. 273(1):L 148:L158 (1997 Jul): ATP-activated basolateral Na+/H+ exchange in human nonnal and cystic fibrosis airway epithelium -16-4-本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐 419455 A7 B7 五、發明説明（ 2. Fibrogenic effect of oxidative stress on rat hepatic stellate cells. Baroni, Gianluca Svegliati; D' Ambrosio, Letizia; Ferretti, Gianna; Casini, Alessandro; Di Sario, Antonio; Salzano, Renata; Ridolfi, Francesco; Saccomanno, Stefania; Jezequel, Anne Marie; Benedetti, Antonio. Department of Gastroenterology, University of Ancona, Ancona, Italy. Hepatology (Philadelphia) (1998), 27(3), 720-726. CODEN:HPTLD9; ISSN; 0270-9139. Jounal written in English. AN 1998:175200 (請先閱讀背面之注項再填寫本頁) 訂經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 -16-5 本紙張尺度適用中國國家榡準（CNS ) A4規格（210X2.97公釐） 4194 A7 B7 可使用抗氧化劑，勻散劑 ’防腐劑，溶解劑或染料為了製備口服用形式添加物混合，如：賦形劑五、發明説明（15) 相較於已知化合物，根據本發明化合物顯著改良了水溶性。因此較適用於靜脈内投藥。含化合物I之藥劑可經口，非經腸式，經靜脈内或經直腸式，或吸入式投藥，較佳投藥途徑尚依病變本身狀況而定。化合物I可單獨使用或與醫藥辅助物質併用，不論用於獸醫或人類醫學皆然。 11 相關技藝專豕們憑其專業知識即熟悉那一種輔劑適合所需之醫藥調配物。除了溶劑外，可使用例如：凝膠形成劑’栓劑基質’錠劑辅劑，及其他活性成份之賦形劑，亦乳化劑，消泡劑，口味改良劑活性化合物與適用於此目的之 .安定劑或惰性稀釋劑，且依習知方法轉化成適合投藥之形式，如：鍵劑’包衣錠劑，栓劑明膠囊或水性，酒精性或油性溶液。可使用例如：阿拉伯樹膠，氧化鎂，碳酸鎂，磷酸鉀，乳糖，葡萄糖或澱粉特定言之玉米澱粉，作為惰性賦形劑。調配物可製成乾性或濕性顆粒。植物油或動物油，例如，如葵花油或鳕魚油適用為油性賦形劑或作為溶劑。供經皮下或靜脈内投藥時，活性化合物若需要時，與此目的常用之物質，如：溶解劑，乳化劑，或其他輔劑共同溶解’懸浮或乳化。合適溶劑實例為：水，生理食鹽溶液’或醇類，例如：乙醇，丙醇及甘油，及糖溶液，如：葡萄糖或甘露糖醇溶液，或該等不同溶劑之混合物。私紙張尺度逋用中國國家榡準（CNS ) A4規格（210X297公釐） I I— n 、ΤΓ------^ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央樣準局貝工消費合作社印袈 Α7 Β7 419455 五、發明説明（16) 含於醫藥上可接受溶劑如，特定言之例如：乙醇或水 ’或此等溶劑混合物中之式I活性化合物之溶液，懸浮液或乳液適用為呈氣溶膠或噴霧液形式投與之醫藥調配物。調配物中若需要時亦可包含其他醫藥辅劑，如：界面活性劑，乳化劑或安定劑，及推進劑氣體。這種調配物之一般活性化合物含量濃度為約0.1至10，特定言之約〇3至3重量。/。〇式I活性化合物之投藥劑量及投藥頻率依所使用化合物效果之強度及延續時間長短而定，此外亦依待處理疾病之性質及嚴重性而定，且依待處理哺乳動物之性別，年齡 ’體重及個別反應程度而定。體重約75公斤患者之式I化合物每日劑量平均為至少〇,〇〇1毫克/公斤體重，以o.m毫克/公斤體重較佳，至不超過1〇毫克/公斤體重，不超過1毫克/公斤體重較佳。苦出規氧性病症時’例如：心肌梗塞後，立即投與甚至更高劑量厂且特定言之，更頻繁劑量亦可能有必要，例如：每日至高4 次單獨劑量。若經靜脈内投藥使用時，特定言之，例如：需積極照料之梗塞患者，可能有必要至高每日投藥1〇〇毫克。雜寫列<

MeOH 甲醇 DMF Ν,Ν-二甲基甲醯胺 Ν,Ν，Ν，，Ν’-四甲基腺〜18〜本紙張尺度適用中國國家榡準（CNS ) Α4规格（UOX297公釐）丨—裝------訂------線 (錆先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央棣準局貝工消費合作社_製 A7 B7 五、發明説明（17) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 NBS N-溴琥珀醯亞胺 AIBN α, α-偶氮-雙-異丁腈 EI 電子撞擊 DCI 解吸-化學離子化作用 RT 室溫 EA 乙酸乙酯（EtOAc) DIP 二異丙基醚 MTB 甲基三級丁基醚 m.p. 熔點 HEP 正庚烷 DME 二甲氧乙烷 FAB 快速原子撞擊 ch2ci2 二氯曱烷 THF 四氫呋喃 eq- 當量 ES 電子噴灑離子化作用 Me 甲基 Et 乙基 Bn 节基 CNS 中樞神經系統鹽水飽和NaC 1水溶液實驗部份苯甲醯胍類(1)製法之一般説明〜19〜 (請先聞讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐）

A7 B7 五、發明説明（冴） A項：由苯甲酸(j|，L=〇H)製備取〇.〇1莫耳式丨丨苯甲酸衍生物溶解或懸浮於6〇毫升無水丁HF中’添加1.78克(0·〇11莫耳）羰基二咪唑，混合物於耵下攪拌2小時後，添加2.95克(O.OSM)胍至反應溶液中。混合物搅拌一夜後’減壓蒸餾排除THF(旋轉蒸發器），加水，使用2N HC1調至pH6至7，濾出相應之苯曱醯胍（式丨）。所得苯曱醯胍經鹽酸或其他醫藥上可耐受之酸之水溶液曱醇溶液或醚溶液處理，轉化成相應鹽類。苯甲醯胍類(丨)製法之一般説明 B項：由苯甲酸烷基酯(丨卜L=〇_烷基)製備取5毫莫耳式Μ苯甲酸烷基酯及a毫莫耳胍（游離鹼）溶於15毫升異丙醇中，或懸浮於Ί5毫升THF中，溶液或懸浮液於回流下煮沸，直到完全轉化為止（薄層層析法追蹤；典型反應時間2至S小時）。減壓蒸餾排除溶劑(旋轉蒸發器），殘質溶於300毫升ΕΑ ’以各50毫升NaHC〇3溶液洗務V合物3次。經Nap%脱水’眞空蒸餾排除溶劑，殘質經碎& 使用合適移動相(例如：EA/MeOH 5:1)進行層析。(鹽之形成法請參見A項）。 ^ 實例1 t請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝線經濟部中央標準局員工消費合作杜印製

本紙張尺度適用中國國家橾牟（CMS ) A4規格（210X297公釐） A7 B7 經濟部中央標準局貝工消費合作社印装五、發明説明（19) N-三級丁氧羰基-4-[(4-胍羰基―2—甲磺醯基）苯氧基卜苯基丙胺酸

取1 _8克N-二級丁乳幾基-4-[(4_甲乳数基—2_甲績酿基）苯氧基】-苯基丙胺酸及1·1克脈，根據B項反應，產生7〇〇毫克無色固體。 mp>270〇C

Rf (丙酮/水 1 〇:1 )=0.37 MS(FAB):521 (M+H) + a) N-三級丁氧羰基_4-[(4-甲氧羰基_2_甲磺醯基）苯氧基】—苯基丙胺酸取4.5克N-三級丁氧羰基—4-[(4_甲氧羰基―2—曱磺醯基)_ 苯氧基]-苯基丙胺酸苄酯及500毫克10%Pd/C於50毫升MeOH 中，在正常氫氣壓下氫化2〇小時。遽除觸媒，眞空排除溶劑，以EA/MeOH 10:1層析。得到2.1克無色粘稠油。

Rf(EA/MeOH 10:1)=0.12 MS(DCI):494(M+H) + b) N-三級丁氧羰基-4-([4-甲氧羰基_2-甲磺醯基）苯氧基卜苯基丙胺酸苄酯取2_8克N-三級丁氧羰基酪胺酸苄酯，2·2克4-氟-3-三氟甲基苯甲酸甲酯及4.0克心003於100毫升(無水)DMF中，在下攪拌45分鐘。反應混合物倒至500毫升水中，以 NaHS04調至pH2，以各200毫升EA萃取混合物3次。萃液經 Na2S04脱水，眞空排除溶劑。4.2克無色油。

Rf(DIP)=0.12 MS(ES):584(M+H) + 〜21〜本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4说格{ 210X297公釐） ---------i------IT------線' (請先閲讀背面之注$項再填寫本頁) ____________-1 419^55 A7 B7 修a 五、發明説明（20 ) 專利申請案第83111975號 ROC Patent Appln. No.83111975 補充之實例3—8及試驗資料中文本一附件二 Supplemental Examples 3-8 and Test Data in Chinese — Enc1. Π (民國84年9月幺日送呈） (Submitted on September % , 1995) 實例2

4-[(4-胍羰基-2-甲磺醯基)苯氧基]苯基丙胺酸取170毫克—實例1標題化合物懸浮於5毫升〇叱0丨2中，於 RT下添加61微升三氟甲磺酸。混合物於此溫度下攪拌90分鐘後，倒至50毫升飽和\叩〇4水溶液中。再以各1〇〇毫升 EA萃取3次，萃液經Na2S04脱水，眞空排除溶劑。得到125 毫克不定形固體。 R,(EA/MeOH 1:1)=0.43 MS(ES):421(M+H) + (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) .裝. 線經濟部中央標準局員工消費合作杜印製實例3 : N-第三丁氧羰基-4-[(4-胍羰基-2-三氟曱基）苯氧基] 苯基丙胺酸

本紙張尺度適用中國國家標♦ ( CNS ) A4規格（210X297公釐） A7 419455 B7 五、發明説明（21)

經濟部中央標準局—工消費合作社印裂根據B項方式’以2.2克胍於10毫升異丙醇中將3,5克第三丁氧羰基4-[(4-甲氧黢基-2-三氟甲基)苯氧基]苯基丙胺酸脉基化，獲得U8克無色固體，熔點23FC。

Rf (丙酮/水2〇: 1 )二0.30 MS(FAB)=512(M+H)+ a) N-第三丁氧绽基-4-[(4-甲氧羰基-2-三氟甲基)苯氧基]苯基丙胺酸令4.6克N-第三丁氧羰基-4-[(4-甲氧羰基-2-三氟甲基)苯氧基]苯基丙胺酸苄酯及860毫克10%披鈀活性炭(水分含量 50%)於1〇〇毫升MeOH中、在H2及大氣壓力下，且於室溫下攪拌24小時，然後濾除催化劑並於眞空中去除揮發性成份，獲得3.5克無色油。

Rf(EA/MeOH 10:1)=0.10 MS(ES):484 (M+H)+ b) N-第三丁氧羰基-4-[(4-曱氧绽基-2-三氟曱基)苯氧基]苯基丙胺酸苄酯令4.0克如(^71-{^11、2.4克4-氟-3-三氟甲基苯甲酸甲酯及7.0克CsAO3於30毫升無水四甲基脉中在11 〇它下攪拌2 小時，冷卻該混合物，以8〇〇毫升EA稀釋之並以3 X100毫升水及3 X100毫升飽和NaCl水溶液洗滌之，以Na2S〇4乾燥其有機相’於眞空中移除溶劑，以DIP於石夕膠上層析可得 4 _ 6克無色油。

Rf(DIP)=〇,41 MS(FAB)=574(M+H)+ -23 - 本紙張尺度適财®!!家梂準（CNS }从麟（加以们公 ---------装------訂------^ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

經濟部中央標準局員工消費合作杜印製實例4 : 4-[(4-胍羰基-2-三氟甲基）苯氧基]苯基丙胺酸，二鹽酸鹽

將0.8克第三丁氧羰基-4-[(4-胍羰基-2-三氟甲基）苯氧基]苯基丙胺酸溶於50毫升CH2CI2中，並於0eC下添加277微升之三氟甲磺酸，令此混合物昇至室溫，此際會生成多塊狀沈澱物。以50毫升DME稀釋混合物，然後於室溫下攪拌一小時；於眞空中移除溶劑，將殘餘物溶取於15亳升水中，以飽和之NaHC〇3水溶液將混合物之pH調至7，遽出形成之沈殿物並以（^2〇丨2/]^011/112〇/11(^8:4:1:1於發膠上層析，將產物溶於2毫升4N HC1中’並於眞空中移除揮發性成份，獲得100毫克無色結晶，熔點245¾。

Rf(CH2C12/Me0H/H20/H0Ac 8:4:1:1)=0.27 MS(FAB):411(M+H)+ -24 - 本紙張尺度適用中國國家橾準（CNS ) A4規格（2!OX297公釐） ί - tn —n^i ^βί. - -- ϊ - -- -I n I-1— furl -li 1-- ill、"r0Jt f I I— tit - - ! (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) A7 B7 i、發明说明（23)

實例5 : N-第三丁氧缓基-4-[(胍默基-2-乙醯基)苯氧基]笨基丙胺酸

m. -.jm, Y wr* 經濟部中央標準局員工消費合作社印製根據B項方式，以200毫克胍於2毫升異丙醇中將350毫克N-第三丁氧羰基-4-[(4-正丁氧羰基-2-乙罐基）笨氧基 ]苯基丙胺酸脒基化，獲得170毫克無色不定形固體。 Rf (丙酮/水20: 1 )=0.20 MS(FAB)=485(M+H)+ a)N-第三丁氧羰基-4-[(4-正丁氧羰基-2-乙醯基）苯氧基]苯基丙胺酸令460毫克N-第三丁氧羰基-4-[(4_正丁氧羰基-2-乙醯基）木氧基]苯基丙胺酸苄S旨及86毫克1〇 %披绝活性炭 (水分含量50%)於10毫升MeOH中、在H2及大氣壓力下，且於室溫下攪拌24小時，然後濾除催化劑並於眞空中去除揮發性成份，獲得350毫克無色油。 Rf(EA/MeOH 10:1)=0.10 MS(ES):500 (M+H)+ b)N-第三丁氧羰基_4—[(4-正丁氧羰基-2-乙醯基）苯氧基]苯基丙胺酸苄啮 -25 - 尺度適用中國國^^7^72.0X297^· (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁；！ .裝. --d 線 f ‘ 41945 5

五、發明説明（25)

經濟部中央榇準局員工消費合作社印裝之溶液逐滴加入，於室溫下攪拌此混合物1小時，然後將其倒至1公斤冰上，且以2〇〇毫升CH2C丨2萃取3 次。以NasSO4乾燥該混合物並於眞空中移除溶劑，分餾其殘餘物後獲得12.4克無色油，沸點爲70它（2毫巴）°

Rf(CH2Ch)=〇.53 MS(ES):217 (M+H). 實例6 : 4-[(胍羰基，2-乙醢基)苯氧基]苯基丙胺酸，二鹽酸鹽

將80毫克N-第三丁氡绽基-4-[(4-胍羰基-2-乙醯基）苯氧基 ]苯基丙胺酸溶於5毫升CH2CI2中，並於01〇下添加28微升之三氟甲磺酸，令此混合物异至室溫，此際會生成多塊狀沈澱物。以5毫升DME稀釋混合物，然後於室溫下攪拌一小時；於眞空中移除溶劑，將殘餘物溶取於5毫升水中，以飽和之NaliC〇3水溶液將混合物之pH調至7，濾出形成之沈澱物並以CihCk/MeOH/HaO/HOAc 8:4:1:1於矽膠上層析，將產物溶於2毫升4N HC1中，並於眞空中移除揮發性成份，獲得40毫克無色結晶，熔點210eC(分解）。

Rf(CH2Cl2/Me0H/H20/H0Ac 8:4:1:1)=0.20 MS(FAB):385 (M+H)+ -27 - 本紙張尺度適用中國國家榡準（CNS ) A4規格（210公釐） ---------批衣------tr------線 (請先鬩讀背面之注意事項再填寫本頁) A7 B7 419455 五、發明説明（24) Cj- 令8.1克Boc-Tyr-OBn、5.1克4-氟-3-乙醯基苯甲酸正丁酯及14.2克CsAO3於60毫升無水N-甲基毗咯啶g同中在 110eC下攪拌2小時，冷卻該混合物，以1毫升EA稀釋之並以1 X 200毫升水及3 X 100毫升飽和NaC丨水溶液洗滌之，以NaAO4乾燥其有機相，於眞空中移除溶劑，以DIP於矽膠上層析可得8.6克無色油。

Rf(DIP)二0.25 MS(FAB)=590 (M+H)+ c) 4-氟-3-乙醢基苯甲酸正丁醏令12.4克2-氟-5-溴苯乙綱、30毫升三一正丁胺、5.6 克乙酸鈀（I )鹽及10克1,3-雙（二苯膦基）丙烷於80亳升正丁醇及160毫升DMF中在110¾下攪拌3小時，然後將混合物冷卻至室溫並於眞空中移除揮發性成份；將殘餘物溶取於1升EA中，滤出含鈀之殘餘物，將據液以500毫升5 % NaHS〇4水溶液洗兩次，以500毫升水洗一次。以Na2S〇4乾燥該混合物，於眞空中移除緣劑，並以EA/HEP 1:4於矽膠上層析其殘餘物，獲得 7.8克無色油。

Rf(EA/HEP 1:4)=0.59 MS(EI):239 (M+H)+ d) 2-氟-5-溴苯乙酮將20克2-氟苯乙酮溶於76毫升96%H2S〇4中，於室温下將一由20克二溴氰尿酸於230毫升96 %H2S〇4中形成 -26 - 本紙張尺度適用中國囡家榡準{ CNS > A4規格（210X297公釐） ' 裝------訂------線 (請先聞讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印裝 9455 A7 B7

五、發明説明（26)

經濟部中央標準局員工消費合作社印製實例7 : N-第三丁氧羰基_4-[(4-胍羰基-2-異丙基）苯氧基]苯基两胺酸

根據B項方式，以l.o克胍於10毫升異丙醇中將1.75克N-第三丁氧羰基-4-[(4-正丁氧羰基-2-異丙基)苯氧基]苯基丙胺酸脒基化，獲得950毫克不定形無色固體。

Rf (丙酮/水2〇: 1 )=0.25 MS (FAB )=485 (M+H)+ a) N-第三丁氧羰基(4-正丁氧羰基-2-異丙基)苯氧基]苯基丙胺酸令2.3克N-第三丁氧羰基-4-[(4-正丁氧默基-2-異丙稀基）苯氧基]苯基丙胺酸苄酯及400毫克10%披鈀活性炭（水分含量50%)於50毫升MeOH中、在H2及大氣壓力下，且於室溫下攪拌24小時，然後濾除催化劑並於眞空中去除揮發性成份，獲得1.805克無色油。

Rf(EA/MeOH 10:1)-0.10 MS(ES):500 (M+H)+ b) N-第三丁氧莰基-4-[(4-正丁氧羰基-2-異丙烯基）苯氧基] 苯基丙胺酸苄酯將4.2克甲基三苯基銷碘化物懸浮於100毫升THF中，加入 1.2克第三丁酸鉀並於室溫下攪拌此混合物3小時，然後將一由5.9克N-第三丁氧羰基_4-[ (4-正丁氧羰基-2-乙醯 -28 本紙張尺度適用4,國國家橾準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 1 衣 I~~. I ^ H ,^ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

'1945 5 A7 f^r ___B7 五、發明説明（27) 基）苯氧基]苯基丙胺酸苄酯於50毫升THF中形成之溶液注入’並於室溫下攪拌混合物30分鐘，接著將反應混合物倒入100毫升飽和之NaHC〇3水溶液中，且以1〇〇毫升EA萃取3 次。以NaAO4乾燥其萃出物，於眞空中去除溶劑並以Dip 於矽膠上層析其殘餘物，獲得2,7克無色油。

Rf(DIP)二0_35 MS(FAB):588 (M+H)+ 實例8 : 4-[(4_胍羰基-2-異丙基）苯氧基]苯基丙胺酸，二鹽酸鹽

將800克N-第三丁氧羰基-4-[(4-胍绽基-2-異丙基)苯氧基]苯基丙胺酸溶於50毫升CH2Cl2中，並於(TC下添加280微升之三氟甲磺酸，令此混合物昇至室溫，此際會生成多塊狀沈澱物。以 50毫升DME稀釋混合物，然後於室溫下攪拌一小時；於眞空中移除溶劑，將殘餘物溶取於50毫升水中，以飽和之NaHCOs水溶液將混合物之pH調至7，濾出形成之沈澱物並以CH2Cl2/MeOH /玨2〇/11(^〇8:4:1:1於矽膠上層析，將產物溶於2〇毫升仙 HC1中，並於眞空中移除揮發性成份，獲得320毫克無色結晶，熔點230°C (分解）。

Rf (CH2C l2/Me0H/H20/H0Ac 8:4:1:1)=0.30 MS(FAB):385 (M+H)+ ~ 29 - 本紙張尺度適用中國國家橾準（CNS ) A4規格（210 X 297公慶） ----------裝------IT------.^ (諳先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印繁

：1945 5 A7 _ B7___ 五、發明説明（28) 藥理數據：對兔子紅血球之Na+/Hf交換子之抑制作用 {請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 紐西蘭白兔（伊凡諾斯品種（丨vanovas))接受含2%膽固醇之標準飼料6週，活化Na+/H"交換作用，並得以利用火焰光度計測定經由NaVH+交換而流入紅血球之Na>。自耳動脈取血樣，使用25丨U肝素鉀避免血樣嶷固。各取一部份血樣離心’測定血球容積重覆2次。各取100微升液體測定紅血球最初之Na+含量a 為了測疋對又莫德敏感之釣流入量，各取彳〇〇微升灰樣，於pH7.4及37C下，於5毫升過滲透性鹽/蔗糖介質中（毫莫耳/升·: 14〇鬆丨，3 KCf，15〇蔗糖，烏本誓⑽咖叫 ’ 20參(舒基)胺基f貌)培養。隨後以冰冷之㈣丨〆烏本誓溶液(毫莫耳/毫升：112 ’ 〇1烏本郭先蔽紅血球3 次，於2騎升蒸館水中溶血。利用火蹈鈉含量。 +由初鈉含量値與紅血球培養後之鈉含量之間差異計算 Na+淨流人量’由使用及不使毅莫德3χι〇_4莫耳/升培養經濟部中央標準局員工消費合作社印製紅=球後之納含量差異計算艾莫德所抑制之納流入量。此万法吓用於分析根據本發明化合物。本紙張尺度適用中國國象標準{ CNS ) A4说格（210X297公釐） \59a'以55五、發明説明 A7 B7 29) 結果對Na+/H +交換子之抑制作用：實例 IC50微莫耳/升 1 0.43 2 1.0 4 0.026 -31 - 本紙張尺度通用中國國家標準（CNS ) A4规格（210x297公釐）

Claims

六、申請專利範圍專利申請案第83111975號、 ROC Patent Appln. No.83111975 修正之申請專利範圍中文本-附件㈠ Amended Claims in Chinese - Enel.(I)alTO (Submitted on February ^ , 2000) 1. 一種如下列化學式I所示之苯甲醯胍衍生物或其藥學上可接受之鹽類

,ΝΗ ΝΗ 式中 R(l)為（CrC3)-自代烷基、（Ct-C4)-烷磺醯基、（CrC4)-烷基羰基、或(CVQ)-烷基， (請先Μ讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 R⑺為-0-4-[CH2-CHR(7)-C-0H]-苯基，其中 R(7)為 -NH2 或((^-(：8)-烷氧羰基-NH-。 2.—種製備如申請專利範圍第1項之式I化合物之方法其包括：使式II化合物與胍反應

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） H83416-claim/EC 5 5 4 9 H 4 A8B8C8D8 經濟部智慧財產局員工消費合作杜印製六、申請專利範圍式中R(l)與R(2)如申請專利範圍第1項中之定義，且其中L為容易經親核性取代之釋離基。 3.根據申請專利範圍第1項之式I化合物，其係用於治療節律不整。 4根據申請專利範圍第1項之式I化合物，其係用於治療狹心症。 5. 根據申請專利範圍第1項之式I化合物，其係用於治療或預防心肌梗塞。 6. 根據申請專利範圍第1項之式I化合物，其係用於治療或預防狹心症。 7. 根據申請專利範圍第1項之式I化合物，其係用於治療或預防心臟絕血病症。 8. 根據申請專利範圍第1項之式I化合物，其係用於外科手術及器官移植上。 9. 根據申請專利範圍第1項之式I化合物，其係用於防腐及保存施行手術之移植物。 10. 根據申請專利範圍第1項之式I化合物，其係用於治療以細胞增殖作用為原發性或續發性病因之疾病。 11. 根據申請專利範圍第1項之式I化合物，其係用於抑制 Na+/H+交換子及供診斷高血壓與增殖性病變。 -25 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (諳先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂---------線口 p---- j 太I r'j 修正年丹日Λ 、申請曰期 --- νΚ--_ΓΤ Γι IF 11 ί. 1 案號類別 (以上各棚由本届追益 C4 經濟部"!i^T 4 ：? a〔工湞費合作社印製 |恐專利說明書 -- ^/r-7V4^ wu* ^ ^ 曰發明Α Λ —、新型名稱中文一種經胺基酸取代之笨曱醢胍類，其製法，其做為心血管治療或診斷之醫藥组合物英文 Amino acid-substituted benzoylguanidine, a process for their preparation, and their pharmaceutical composition for use in cardiovascular treatment or diagnosis 姓名 1. 柯漢威（Heinz-Werner KLEEMA丽） 2. 賴漢喬(Hans-Jochen LANG) 3. 史傑洛(Jan-Robert SCHWARK) „發明一'册人國藉住、居所 1.-3.皆德國籍 1. 德國貝哈格城安德亨街3號 An der Hohlen Eiche 3, D-61350 Bad Homburg, Germany 2. 德國哈夫漢城洛德錫衔7號 Riidesheimer StraBe 7, D-65719 Hofheim, Germany 3. 德國法蘭克福城羅瑞街63號 LoreleistraBe 63, D-65929 Frankfurt, Germany 姓名 (名稱）德商赫斯脫化工廠股份有限公司 Hoechst Aktiengesellschaft ~ 國籍德國三、申請人住、居所 (事務所）德國法蘭克福城65926號 D-65926 Frankfurt am Main, Federal Republic of Germany 代表人姓名漢斯•勞恩(Dr. HansZauner) 烏利希•特高(Dr. Ulrich Tergau) 訂線本紙張尺度適用中國國家榡丰（CNS) A4規格（2I0X297公釐） :d on February 乙?，2000) 專利申請案第83111975號 ROC Patent Appln. No.83111975 修正之中文說明書第卜2 * 2叫頁-附件㈡ Amended Pages ) - 2 * Z-\ of the Chinese Specification - Encl.(Il) (民@年2月*^曰]......... (Subrmffrec " 斗装 (由本局填寫)

I PC分類本案已向：德國（地區〉申請專利，申請曰期：案號：：□有□無主張優先權 1994取月9日 P 44 32 101.5 有關微生物已寄存於：，寄存日期：，寄存號碼： I. ;; [ i H 訂 II.... 1 矣 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁各櫊) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製〜2 - 3〜本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐}

Μ 9 4 5 5 五、發明説明（a ) R⑼為-0R(12}或-NR(12)R(13): 叩2)與R(13)分別為氫，-(CrC8)-烷基或苄基； k為零，..1，2，3或4 ; 且其他特定取代基R(1)，R(2)或R(3)分別為 -(CrC^)-燒基 ’ -(C2_C8)-雄基或-(CH2)mR(14)’ m為零，1或2 ; R〇4)為-(CfCJ-環烷基或苯基，其係未經取代戒經1 至3個選自下列之基團取代：F，ci，-CF3 1中基’ 曱氧基及-NR(15)R(16); R(15)與R(16)為氫或-ch3 ; 或其他特定取代基R(1)，R(2)或R(3)分別為 R{18)R(19)N-(C=Y')-NH-S〇2-；丫’為氧，-S-或-N-R(20); R(18)與R(19)分別為氫，-(tVC^)-烷基，_(C；rCs卜嫁基或-(CH2)t-R(21); t為零，1，2，3或4 ; R(21)為-(c5-c7)-環烷基或苯基，其係未經取代或經1至3個選自下列之基團取代：f，Cl，—CF；3 甲氧基及烷基；或叩8)與R(19)共同形成4或5個亞甲基，其中〆個〇Η2美團可被氧，-S- 1 -NH-，-N-CH3或苄基置换， R(2〇)如R(18)之定義或為脒；本紙張尺度適用中國國家梯率（CNS ) A4规格（21〇><別公釐） ---------裝------ir------疼 c请先閱讀背面之泣意事項#填寫本育〇經濟部中央標隼局員工消費合作社印製經濟部中央標準扃I工消費合作社印繁 419455 at B7 五、發明説明（》）或其他特定取代基R(1)，R(2)或R(3)分別為：氫，卩，0,日「，1’-。三〜，\-((^2)「((^_)，叫22)-S〇u -，R(23)R(24)N-CO-，R(25)-C0-或 R(26)-R(27)-N-S02- r其中全氟烷基為直鏈或分支； X為一個鍵，氧，-S-或-NR(28); u為零，1或2 ; p為零，1或2 ; q為 1 ’ 2，3，4，5或 6 ; R(22) ’ R(23)，R(25)與 R(26)分別為 -(CrC8)-烷基 ’ -(C3-Cs)~ 烯基，-(CH2)n -R(29)或 -GF3 ; ,n為零，1，2，3或4 ; R(28)為風或-(〇「C3)-燒基， R(29)為-(C3-C7)-環院基或苯基，其係未經取代或經 1-3個選自下列之基團取代：F，Cl，-CF3 ，甲基，甲氧基與-NR(3〇)R(31); R(30)與 R(31)為氫或烷基；或 R(23)，R(25)與 R(26)為氫； R(24)與R(27)分別為氫或-(CVCd-烷基；或 R(23)與R(24)，及R(26)與R(27)共同形成4或5個亞甲基’其中一個CH2基團可被氧，，-NH-，-N - CH3或-N-苄基置換；

(請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐）

經濟部中央標準局員工消費合作社印製其他特定取代基R(1)，R(2)或R(3)分別為 -OR(35)*r,NR(35)R(36); R(35)與R(36)分別為氫或-(CVCe)-烷基；或 R(35)與R(36)共同形成心7個亞甲基，其中一個CH2基團可被氧，-S-，-NH-，^-01~13或-屮苄基置拷； R(4)與 R(5)分別為氫…(C^-CJ-烷基，F，Cf，-〇R(32)，-NR(33)R(34)或-CrF加，； R(32)，R(33)與R(34)分別為氫或-((ν〇3)-烷基； r為1，2，3或 4 ; 及其醫藥上可耐受之鹽。較佳式I化合物為彼等式中： R⑴為-(CrCJ-燒基，-(C2-CJ-晞基或-(CH2)mR(14); m為零，1或2 ; v R(M)為-(C5-Ceh環烷基或苯基，其係未經取代或經1 至2個選自下列之取代基取代：F，C!，-CF3，甲基，曱氧基及-NR(15)R(16); R(15)與R(16)分別為氫或-GH3 ; 或 R(1)為 R(18)R(19)N-(C=Y，)-NH-S〇2-; r為氧，或-N-R(20); R(18)與R(19)分別為風’ -((^-(^丨-燒基’ -(C3_C4)-缔基或-(CHJrR(21); 本紙乐尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） ---------^------IT------.^ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

.t 419455 五、發明説明（7) 或ci; R(4)與R(5)分別為氫，甲基，F，C卜-〇R(32)， -NA(33)R(34)或-CF3 ; R(32) ’ R(33)與R(34)分別為氫或甲基；及其醫藥上可射受之鹽類。各取代基R⑴至R(5)之一含有一個或多個不對稱中心時，此等中心可分別呈S-或R—組態。此等化合物可出現旋光異構物，非對映異構物，消旋物或其混合物。所指定之院基基團可呈直鍵或分支。本發明尚有關一種製備式|化合物之方法，其包括使式丨ί化合物與胍反應式中R⑴至R(5)如上述定義，且L為容易經親核性取代之釋離基。式丨丨活化酸衍生物，式中[_為虎氧基，以甲氧基較佳，或尽氧基，表硫基，曱硫基或2- P比咬硫基，或為各氣雜错的基團，以1_咪唑基較佳，其製法宜依本身已ς方式，由其基％之複基氯（式II，L=CI)製得，其羰基氯部份則再依本身已知方式由其基礎之羧酸(式丨丨’ U0H)製得，例如：使用亞硫醯氯。除了式丨I羰基氯(L=C〇外，亦可製備其他式丨丨活化酸衍生物，其係依本身已知方式，直接由其基礎之苯甲 '11 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS )八4規格（210X2W公釐） ---------¢------ΐτ------^ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A7 B7 石年丨2月3D日 fiif 經濟部中央標準局員工消費合作社印製五、發明説明（13 ) ί利申請案第831Π975號 ROC Patent Appln. No. 83111975 c , 」n福充$中文説明書第15-16頁-附件一 Supplemented Pajfes 15-16 of the Chinese Specification~Encl. f國85年12月抑日送呈） (bubraitted on December , 1996) 取代基R(l)、R(4)及R(5)位置上帶有一個氫屈子之笨甲銥胍類。然而歐洲公開説明書0 556 674(H〇E 9^/F 034)曾説明苯甲醯胍類，其t1取代基不具有根據本發明妒請專利範園中之定義》其中未説明胺基酸衍生物。此外，此等已知之苯甲醯胍類仍需要提向水溶性。 » » 美國專利案3 78〇〇27中申請專利之酿基胍類之結構類似式I化合物f且係衍生自市售利尿劑商品如：布坦奈德 (bumetanide)。這些化合物據報告指出具有強烈之利尿棑鹽活性。本發明化合物適用爲具有保護心臟成份之抗節律不整藥劑，供預防及治療梗塞，及治療狹心症，該等化合物亦保謾性地抑制或強力減低絕血誘發傷害形成期間之病理生理病變，特定言之在絕血誘發心律不整期問之病理生理病變。由於其具有對抗病理性缺氧與絕血狀態之保護效果，根據本發明式I化合物因可抑制细胞 Na+/H+交換機制’因此可作為治療所有因絕血引發之所有急性或fe性傷害’或因而原發性或續發性誘發之疾病<7此點使其適用為外科手術之藥劑，例如：用於器官移植靡間 ’可在摘除器官之前及期間保護在供給者體内之器官T並保護已摘除之器官，例如：當以生理浴液體處理時，或當存放在此等液體中時，亦可用於器官植入受體期間。當在 -15 _ 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（ 210X297公麓〉 - -----I .....- ---n I I- I I - 1^1 E— - - I —I ; I t請先閲请背面之注意事項再填寫本f ) 2. 4^9455 專利申請案第83111975號 ROC PatenMppln. No. 83111975 補充之中文說明書壤16-4及16-5頁-附件- 五於明说明(呂即巧613161^ Pages 16-4 and 16-5 of the Chinese Specification- Enel. ΙΠ (Submitted on February Z^, 2000) Ά-- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)
4. Di-San Junyi Daxue Xuebao (1998)，20⑹，476-479. Induction of the acidification and apoptosis of human lung cancer cell line through inhibition of Na+/H+ exchanger-1 with dimethyl amiloride. Wu, Guoming; Li, Weiliang; Huang, Guijun; Qian, Guisheng. Xinqiao Hospital, Third Military Medical University, Chungking, P.R.C. CODEN:DYXUE8 ISSN: 1000-5404. Journal written in Chinese. CAN 131:153513. AN 1999:359555.
5. Wu, Guoming; Huang, Guijun; Li, Weiliang; Qimi, Guisheng; Chen, Weizhong. Department of Respiratory Diseases, Xinqial Hospital, Third Military Medical University, Chungking, P.R.C. J. Med. Coll. PLA(1998), 13(4), 291-294. Acidification and apoptosis of human lung cancer cells induced with antisense nucleotides against NHE-1 gene. ISSN: 1000-1948. Journal written in English. CAN 131:53649. AN 1999:198132
6. Wang, Huayan; Singh, Dyal; Fliegel, Larry. Department of Pediatrics, Faculty of Medicine, University of Alberta, Edmonton, AB, Can. J. Biol. Chem. (1997), 272(42), 26545-26549. 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 The Na+/H+ antiporter potentiates growth and retinoic acid-induced differentiation of PI 9 embryonal carcinoma cells. CODEN:JBCHA3 ISSN:0021-9258. Journal written in English. CAN 128:2267. AN 1997:689138. 纖維變性： 1. Paradiso, A.M., Am. J. Physiol. Lung Cell. Mol. Physiol. 273(1):L 148:L158 (1997 Jul): ATP-activated basolateral Na+/H+ exchange in human nonnal and cystic fibrosis airway epithelium -16-4-本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐

A7 B7 五、發明説明（冴） A項：由苯甲酸(j|，L=〇H)製備取〇.〇1莫耳式丨丨苯甲酸衍生物溶解或懸浮於6〇毫升無水丁HF中’添加1.78克(0·〇11莫耳）羰基二咪唑，混合物於耵下攪拌2小時後，添加2.95克(O.OSM)胍至反應溶液中。混合物搅拌一夜後’減壓蒸餾排除THF(旋轉蒸發器），加水，使用2N HC1調至pH6至7，濾出相應之苯曱醯胍（式丨）。所得苯曱醯胍經鹽酸或其他醫藥上可耐受之酸之水溶液曱醇溶液或醚溶液處理，轉化成相應鹽類。苯甲醯胍類(丨)製法之一般説明 B項：由苯甲酸烷基酯(丨卜L=〇_烷基)製備取5毫莫耳式Μ苯甲酸烷基酯及a毫莫耳胍（游離鹼）溶於15毫升異丙醇中，或懸浮於Ί5毫升THF中，溶液或懸浮液於回流下煮沸，直到完全轉化為止（薄層層析法追蹤；典型反應時間2至S小時）。減壓蒸餾排除溶劑(旋轉蒸發器），殘質溶於300毫升ΕΑ ’以各50毫升NaHC〇3溶液洗務V合物3次。經Nap%脱水’眞空蒸餾排除溶劑，殘質經碎& 使用合適移動相(例如：EA/MeOH 5:1)進行層析。(鹽之形成法請參見A項）。 ^ 實例1 t請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝線經濟部中央標準局員工消費合作杜印製

本紙張尺度適用中國國家橾牟（CMS ) A4規格（210X297公釐） 419^55 A7 B7 修a 五、發明説明（20 ) 專利申請案第83111975號 ROC Patent Appln. No.83111975 補充之實例3—8及試驗資料中文本一附件二 Supplemental Examples 3-8 and Test Data in Chinese — Enc1. Π (民國84年9月幺日送呈） (Submitted on September % , 1995) 實例2

4-[(4-胍羰基-2-甲磺醯基)苯氧基]苯基丙胺酸取170毫克—實例1標題化合物懸浮於5毫升〇叱0丨2中，於 RT下添加61微升三氟甲磺酸。混合物於此溫度下攪拌90分鐘後，倒至50毫升飽和\叩〇4水溶液中。再以各1〇〇毫升 EA萃取3次，萃液經Na2S04脱水，眞空排除溶劑。得到125 毫克不定形固體。 R,(EA/MeOH 1:1)=0.43 MS(ES):421(M+H) + (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) .裝. 線經濟部中央標準局員工消費合作杜印製實例3 : N-第三丁氧羰基-4-[(4-胍羰基-2-三氟曱基）苯氧基] 苯基丙胺酸

本紙張尺度適用中國國家標♦ ( CNS ) A4規格（210X297公釐） A7 419455 B7 五、發明説明（21)

經濟部中央標準局—工消費合作社印裂根據B項方式’以2.2克胍於10毫升異丙醇中將3,5克第三丁氧羰基4-[(4-甲氧黢基-2-三氟甲基)苯氧基]苯基丙胺酸脉基化，獲得U8克無色固體，熔點23FC。 Rf (丙酮/水2〇: 1 )二0.30 MS(FAB)=512(M+H)+ a) N-第三丁氧绽基-4-[(4-甲氧羰基-2-三氟甲基)苯氧基]苯基丙胺酸令4.6克N-第三丁氧羰基-4-[(4-甲氧羰基-2-三氟甲基)苯氧基]苯基丙胺酸苄酯及860毫克10%披鈀活性炭(水分含量 50%)於1〇〇毫升MeOH中、在H2及大氣壓力下，且於室溫下攪拌24小時，然後濾除催化劑並於眞空中去除揮發性成份，獲得3.5克無色油。 Rf(EA/MeOH 10:1)=0.10 MS(ES):484 (M+H)+ b) N-第三丁氧羰基-4-[(4-曱氧绽基-2-三氟曱基)苯氧基]苯基丙胺酸苄酯令4.0克如(^71-{^11、2.4克4-氟-3-三氟甲基苯甲酸甲酯及7.0克CsAO3於30毫升無水四甲基脉中在11 〇它下攪拌2 小時，冷卻該混合物，以8〇〇毫升EA稀釋之並以3 X100毫升水及3 X100毫升飽和NaCl水溶液洗滌之，以Na2S〇4乾燥其有機相’於眞空中移除溶劑，以DIP於石夕膠上層析可得 4 _ 6克無色油。 Rf(DIP)=〇,41 MS(FAB)=574(M+H)+ -23 - 本紙張尺度適财®!!家梂準（CNS }从麟（加以们公 ---------装------訂------^ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

經濟部中央標準局員工消費合作杜印製實例4 : 4-[(4-胍羰基-2-三氟甲基）苯氧基]苯基丙胺酸，二鹽酸鹽

將0.8克第三丁氧羰基-4-[(4-胍羰基-2-三氟甲基）苯氧基]苯基丙胺酸溶於50毫升CH2CI2中，並於0eC下添加277微升之三氟甲磺酸，令此混合物昇至室溫，此際會生成多塊狀沈澱物。以50毫升DME稀釋混合物，然後於室溫下攪拌一小時；於眞空中移除溶劑，將殘餘物溶取於15亳升水中，以飽和之NaHC〇3水溶液將混合物之pH調至7，遽出形成之沈殿物並以（^2〇丨2/]^011/112〇/11(^8:4:1:1於發膠上層析，將產物溶於2毫升4N HC1中’並於眞空中移除揮發性成份，獲得100毫克無色結晶，熔點245¾。 Rf(CH2C12/Me0H/H20/H0Ac 8:4:1:1)=0.27 MS(FAB):411(M+H)+ -24 - 本紙張尺度適用中國國家橾準（CNS ) A4規格（2!OX297公釐） ί - tn —n^i ^βί. - -- ϊ - -- -I n I-1— furl -li 1-- ill、"r0Jt f I I— tit - - ! (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) A7 B7 i、發明说明（23)

實例5 : N-第三丁氧缓基-4-[(胍默基-2-乙醯基)苯氧基]笨基丙胺酸

m. -.jm, Y wr* 經濟部中央標準局員工消費合作社印製根據B項方式，以200毫克胍於2毫升異丙醇中將350毫克N-第三丁氧羰基-4-[(4-正丁氧羰基-2-乙罐基）笨氧基 ]苯基丙胺酸脒基化，獲得170毫克無色不定形固體。 Rf (丙酮/水20: 1 )=0.20 MS(FAB)=485(M+H)+ a)N-第三丁氧羰基-4-[(4-正丁氧羰基-2-乙醯基）苯氧基]苯基丙胺酸令460毫克N-第三丁氧羰基-4-[(4_正丁氧羰基-2-乙醯基）木氧基]苯基丙胺酸苄S旨及86毫克1〇 %披绝活性炭 (水分含量50%)於10毫升MeOH中、在H2及大氣壓力下，且於室溫下攪拌24小時，然後濾除催化劑並於眞空中去除揮發性成份，獲得350毫克無色油。 Rf(EA/MeOH 10:1)=0.10 MS(ES):500 (M+H)+ b)N-第三丁氧羰基_4—[(4-正丁氧羰基-2-乙醯基）苯氧基]苯基丙胺酸苄啮 -25 - 尺度適用中國國^^7^72.0X297^· (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁；！ .裝. --d 線

：1945 5 A7 _ B7___ 五、發明説明（28) 藥理數據：對兔子紅血球之Na+/Hf交換子之抑制作用 {請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 紐西蘭白兔（伊凡諾斯品種（丨vanovas))接受含2%膽固醇之標準飼料6週，活化Na+/H"交換作用，並得以利用火焰光度計測定經由NaVH+交換而流入紅血球之Na>。自耳動脈取血樣，使用25丨U肝素鉀避免血樣嶷固。各取一部份血樣離心’測定血球容積重覆2次。各取100微升液體測定紅血球最初之Na+含量a 為了測疋對又莫德敏感之釣流入量，各取彳〇〇微升灰樣，於pH7.4及37C下，於5毫升過滲透性鹽/蔗糖介質中（毫莫耳/升·: 14〇鬆丨，3 KCf，15〇蔗糖，烏本誓⑽咖叫 ’ 20參(舒基)胺基f貌)培養。隨後以冰冷之㈣丨〆烏本誓溶液(毫莫耳/毫升：112 ’ 〇1烏本郭先蔽紅血球3 次，於2騎升蒸館水中溶血。利用火蹈鈉含量。 +由初鈉含量値與紅血球培養後之鈉含量之間差異計算 Na+淨流人量’由使用及不使毅莫德3χι〇_4莫耳/升培養經濟部中央標準局員工消費合作社印製紅=球後之納含量差異計算艾莫德所抑制之納流入量。此万法吓用於分析根據本發明化合物。本紙張尺度適用中國國象標準{ CNS ) A4说格（210X297公釐） \59a'以55五、發明説明 A7 B7 29) 結果對Na+/H +交換子之抑制作用：實例 IC50微莫耳/升 1 0.43 2 1.0 4 0.026 -31 - 本紙張尺度通用中國國家標準（CNS ) A4规格（210x297公釐）