TW202108148A - 作為sting調節劑之經修飾環狀二核苷化合物 - Google Patents

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山托許 庫瑪 塔迪孔達
安蒂薩 迪米特羅娃 斯托切瓦
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Abstract

本文提供式(I)、式(II)及/或式(III)之化合物或上述中任一者之醫藥上可接受之鹽、包括本文所闡述化合物(包括本文所闡述化合物之醫藥上可接受之鹽)之醫藥組合物及其合成方法。本文亦提供利用式(I)、式(II)及/或式(III)之化合物或上述中任一者之醫藥上可接受之鹽治療疾病及/或病狀之方法。

Description

作為STING調節劑之經修飾環狀二核苷化合物
本申請案係關於化學、生物化學及醫學領域。本文揭示式(I)、式(II)及式(III)之化合物或上述中任一者之醫藥上可接受之鹽；包括本文所闡述化合物(包括本文所闡述化合物之醫藥上可接受之鹽)之醫藥組合物；及其合成方法。本文亦揭示利用式(I)、式(II)及式(III)之化合物或上述中任一者之醫藥上可接受之鹽治療疾病及/或病狀之方法。
先天性免疫反應包含一系列細胞感受器及信號傳導路徑，該等細胞感受器及信號傳導路徑因應於宿主暴露於微生物病原體(例如病毒、細菌及真菌)而活化宿主之防禦機制。暴露於細胞內DNA及/或DNA病原體可觸發先天性免疫反應之活化，此可刺激宿主之防禦機制。
本文所揭示之一些實施例係關於式(I)化合物或其醫藥上可接受之鹽。本文所揭示之其他實施例係關於式(II)化合物或其醫藥上可接受之鹽。本文所揭示之其他實施例係關於式(III)化合物或其醫藥上可接受之鹽。
本文所揭示之一些實施例係關於醫藥組合物，其可含有有效量之式(I)、式(II)及/或式(III)之化合物或上述中任一者之醫藥上可接受之鹽。
本文所闡述之一些實施例係關於治療調節STING有益之個體之疾病或病狀之方法，其可包括向該個體投與有效量之如本文所闡述之化合物或其醫藥上可接受之鹽或包括有效量之如本文所闡述之化合物或其醫藥上可接受之鹽之醫藥組合物。本文所闡述之其他實施例係關於如本文所闡述之化合物或其醫藥上可接受之鹽或包括有效量之如本文所闡述之化合物或其醫藥上可接受之鹽之醫藥組合物，其用於治療調節STING有益之個體之疾病或病狀。
本文所揭示之一些實施例係關於治療調節STING有益之個體之發炎性病狀、傳染性疾病、病毒性疾病及/或癌症之方法，其可包括向該個體投與有效量之如本文所闡述之化合物或其醫藥上可接受之鹽或包括有效量之如本文所闡述之化合物或其醫藥上可接受之鹽之醫藥組合物。本文所闡述之其他實施例係關於如本文所闡述之化合物或其醫藥上可接受之鹽或包括有效量之如本文所闡述之化合物或其醫藥上可接受之鹽之醫藥組合物，其用於治療調節STING有益之發炎性病狀、傳染性疾病、病毒性疾病及/或癌症。
本文所揭示之一些實施例係關於誘導個體之免疫反應之方法，其可包括向該個體投與有效量之如本文所闡述之化合物或其醫藥上可接受之鹽或包括有效量之如本文所闡述之化合物或其醫藥上可接受之鹽之醫藥組合物。本文所闡述之其他實施例係關於如本文所闡述之化合物或其醫藥上可接受之鹽或包括有效量之如本文所闡述之化合物或其醫藥上可接受之鹽之醫藥組合物，其用於誘導免疫反應。
本文所揭示之一些實施例係關於誘導細胞中之STING依賴性I型干擾素產生之方法，其可包括使該細胞接觸有效量之如本文所闡述之化合物或其醫藥上可接受之鹽或包括有效量之如本文所闡述之化合物或其醫藥上可接受之鹽之醫藥組合物。本文所闡述之其他實施例係關於如本文所闡述之化合物或其醫藥上可接受之鹽或包括有效量之如本文所闡述之化合物或其醫藥上可接受之鹽之醫藥組合物，其用於誘導STING依賴性I型干擾素產生。
本文所揭示之一些實施例係關於使細胞中之STING受體活化之方法，其可包括使該細胞接觸有效量之如本文所闡述之化合物或其醫藥上可接受之鹽或包括有效量之如本文所闡述之化合物或其醫藥上可接受之鹽之醫藥組合物。本文所闡述之其他實施例係關於如本文所闡述之化合物或其醫藥上可接受之鹽或包括有效量之如本文所闡述之化合物或其醫藥上可接受之鹽之醫藥組合物，其用於使STING受體活化。
下文更詳細地闡述該等及其他實施例。
以引用方式併入之任何優先權申請案
例如在申請資料清單或請求中與本申請案一起提出申請之鑒定國外或國內優先權聲明之任何及所有申請案均係根據37 CFR 1.57以及條例4.18及20.6以引用的方式併入本文中，包括2019年5月9日提出申請之美國臨時申請案第62/845703號及2020年2月25日提出申請之美國臨時申請案第62/981475號。
cGAS (環狀GMP-AMP合酶)感測胞質液中之外源雙鏈DNA，且經由產生CDN (環狀二核苷酸) 2’3’cGAMP使STING (干擾素基因刺激蛋白(stimulatoro fin terferong enes)，亦稱為MITA、MPYS、ERIS或TMEM173)活化。STING係定位至內質網之跨膜蛋白，其因應於環狀二核苷酸(CDN)之直接結合而經歷構形變化。此進而觸發涉及TBK1 (TANK結合激酶1)及IRF3 (干擾素調控因子3)之磷酸化之信號傳導級聯，從而導致I型干擾素基因之表現以及IFN-β及其他細胞介素之產生(例如促發炎細胞介素(IL-1a、IL-1β、IL-2、IL-6、TNF-a等)之產生)。此路徑可用於癌症免疫療法，其中腫瘤內注射合成STING促效劑。在STING路徑參與後，干擾素之表現使得樹突細胞成熟，此進而促使活化之CD8 T細胞攻擊腫瘤細胞。定義
除非另有定義，否則本文所使用之所有技術及科學術語均具有與熟習此項技術者通常所理解相同之含義。除非另有說明，否則本文所提及之所有專利、申請案、公開申請案及其他公開案均係以全文引用的方式併入本文中。除非另有說明，否則在本文術語存在複數種定義之情況下，以此部分中之彼等定義為準。
只要基團闡述為「視情況經取代」，則該基團可未經取代或經所指示取代基中之一或多者取代。同樣，在基團闡述為「未經取代或經取代」時，若經取代，則取代基可選自所指示取代基中之一或多者。若未指示取代基，則意味著指示之「視情況經取代」或「經取代」之基團可經一或多個個別且獨立地選自以下之基團取代：氘、烷基、烯基、炔基、環烷基、環烯基、芳基、雜芳基、雜環基、芳基(烷基)、雜芳基(烷基)、雜環基(烷基)、羥基、烷氧基、醯基、氰基、鹵素、硫代羰基、O-胺甲醯基、N-胺甲醯基、O-硫代胺甲醯基、N-硫代胺甲醯基、C-醯胺基、N-醯胺基、S-磺醯胺基、N-磺醯胺基、C-羧基、O-羧基、異氰酸基、硫氰酸基、硝基、疊氮基、矽基、亞氧硫基、亞磺醯基、磺醯基、鹵代烷基、鹵代烷氧基、三鹵代甲烷磺醯基、三鹵代甲烷磺醯胺基、胺基、單取代之胺基及二取代之胺基。
如本文所使用，「Ca 至Cb 」(其中「a」及「b」係整數)係指烷基、烯基或炔基中之碳原子之數目或環烷基、環烯基、芳基、雜芳基或雜環基之環中之碳原子之數目。亦即，烷基、烯基、炔基、環烷基之環、環烯基之環、芳基之環、雜芳基之環或雜環基之環可含有「a」至「b」(包括「a」及「b」)個碳原子。因此，舉例而言，「C1 至C4 烷基」係指具有1至4個碳之所有烷基，亦即CH3 -、CH3 CH2 -、CH3 CH2 CH2 -、(CH3 )2 CH-、CH3 CH2 CH2 CH2 -、CH3 CH2 CH(CH3 )-及(CH3 )3 C-。若關於烷基、烯基、炔基、環烷基、環烯基、芳基、雜芳基或雜環基未指定「a」及「b」，則假定該等定義中所闡述之最寬範圍。
如本文所使用，「烷基」係指包含完全飽和(無雙鍵或三鍵)烴基團之直鏈或具支鏈烴鏈。烷基可具有1至20個碳原子(只要其在本文中出現，則數值範圍(例如「1至20」)係指給定範圍內之每一整數；例如，「1至20個碳原子」意指烷基可由1個碳原子、2個碳原子、3個碳原子等、最多且包括20個碳原子組成，但本定義亦涵蓋出現未指定數值範圍之術語「烷基」。烷基亦可為具有1至10個碳原子之中等大小之烷基。烷基亦可為具有1至6個碳原子之低碳數烷基。化合物之烷基可指定為「C1 -C4 烷基」或類似名稱。僅舉例而言，「C1 -C4 烷基」指示在烷基鏈中存在1至4個碳原子，即烷基鏈係選自甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第二丁基及第三丁基。典型烷基包括(但決不限於)甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、第三丁基、戊基及己基。烷基可經取代或未經取代。
如本文所使用，「烯基」係指直鏈或具支鏈烴鏈中含有一或多個雙鍵之烷基。烯基之長度可變化。舉例而言，烯基可為C2-4 烯基、C2-6 烯基或C2-8 烯基。烯基之實例包括聯烯基、乙烯基甲基及乙烯基。烯基可未經取代或經取代。
如本文所使用，「炔基」係指直鏈或具支鏈烴鏈中含有一或多個三鍵之烷基。炔基之長度可變化。舉例而言，炔基可為C2-4 炔基、C2-6 炔基或C2-8 炔基。炔基之實例包括乙炔基及丙炔基。炔基可未經取代或經取代。
如本文所使用，「環烷基」係指完全飽和(無雙鍵或三鍵)之單環或多環烴環系統。當由兩個或更多個環構成時，該等環可以稠合方式接合在一起。環烷基可含有3至10個環原子、3至8個環原子或3至6個環原子。環烷基可未經取代或經取代。典型環烷基包括(但決不限於)環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環庚基及環辛基。
如本文所使用，「環烯基」係指在至少一個環中含有一或多個雙鍵之單環或多環烴環系統；但是，若存在一個以上雙鍵，則該等雙鍵在所有環中不能形成完全離域之π-電子系統(否則該基團將係如本文所定義之「芳基」)。當由兩個或更多個環構成時，該等環可以稠合方式連結在一起。環烯基可含有3至10個環原子或3至8個環原子。環烯基可未經取代或經取代。
如本文所使用，「芳基」係指所有環中具有完全離域之π-電子系統之碳環(全碳)單環或多環芳香族環系統(包括其中兩個碳環共享化學鍵之稠合環系統)。芳基中之碳原子數可變化。舉例而言，芳基可為C6 -C14 芳基、C6 -C10 芳基或C6 芳基。芳基之實例包括(但不限於)苯、萘及薁。芳基可經取代或未經取代。
如本文所使用，「雜芳基」係指含有一或多個雜原子(例如1至5個雜原子) (亦即，除碳以外之元素，包括(但不限於)氮、氧及硫)之單環、二環及三環芳香族環系統(具有完全離域之π-電子系統之環系統)。雜芳基之環原子數可變化。舉例而言，雜芳基可含有4至14個環原子、5至10個環原子或5至6個環原子。此外，術語「雜芳基」包括其中兩個環(例如至少一個芳基環及至少一個雜芳基環或至少兩個雜芳基環)共享至少一個化學鍵之稠合環系統。雜芳基環之實例包括(但不限於)呋喃、呋呫、噻吩、苯并噻吩、酞嗪、吡咯、噁唑、苯并噁唑、1,2,3-噁二唑、1,2,4-噁二唑、噻唑、1,2,3-噻二唑、1,2,4-噻二唑、苯并噻唑、咪唑、苯并咪唑、吲哚、吲唑、吡唑、苯并吡唑、異噁唑、苯并異噁唑、異噻唑、三唑、苯并三唑、噻二唑、四唑、吡啶、嗒嗪、嘧啶、吡嗪、嘌呤、喋啶、喹啉、異喹啉、喹唑啉、喹喏啉、㖕啉及三嗪。雜芳基可經取代或未經取代。
如本文所使用，「雜環基」係指單環、二環及三環系統，其中碳原子與1至5個雜原子一起構成該環系統。雜環可視情況含有一或多個不飽和鍵，但是該等不飽和鍵係以所有環中不存在完全離域之π-電子系統之方式定位。雜環基之環原子數可變化。舉例而言，雜環基可含有4至14個環原子、5至10個環原子或5至6個環原子。雜原子係除碳以外之元素，包括(但不限於)氧、硫及氮。雜環可進一步含有一或多個羰基或硫代羰基官能基，以使該定義包括側氧基系統及硫代系統，例如內醯胺、內酯、環狀醯亞胺、環狀硫代醯亞胺及環狀胺基甲酸酯。當由兩個或更多個環構成時，該等環可以稠合方式接合在一起。另外，雜環基中之任何氮可經四級銨化。雜環基可未經取代或經取代。此等「雜環基」之實例包括(但不限於) 1,3-二氧雜環己烯、1,3-二噁烷、1,4-二噁烷、1,2-二氧雜環戊烷、1,3-二氧雜環戊烷、1,4-二氧雜環戊烷、1,3-氧雜硫雜環己烷、1,4-氧雜硫雜環己二烯、1,3-氧雜硫雜環戊烷、1,3-二硫雜環戊二烯、1,3-二硫雜環戊烷、1,4-氧雜硫雜環己烷、四氫-1,4-噻嗪、2H-1,2-噁嗪、馬來醯亞胺、琥珀醯亞胺、巴比妥酸(barbituric acid)、硫代巴比妥酸、二側氧基六氫吡嗪、乙內醯脲、二氫尿嘧啶、三噁烷、六氫-1,3,5-三嗪、咪唑啉、咪唑啶、異噁唑啉、異噁唑啶、噁唑啉、噁唑啶、噁唑啶酮、噻唑啉、噻唑啶、嗎啉、氧雜環丙烷、六氫吡啶N -氧化物、六氫吡啶、六氫吡嗪、吡咯啶、吡咯啶酮、吡咯啶二酮、4-六氫吡啶酮、吡唑啉、吡唑啶、2-側氧基吡咯啶、四氫吡喃、4H-吡喃、四氫噻喃、硫代嗎啉、硫代嗎啉亞碸、硫代嗎啉碸及其苯并稠合類似物(例如苯并咪唑啶酮、四氫喹啉及3,4-亞甲基二氧基苯基)。
如本文所使用，「芳基(烷基)」係指作為取代基經由低碳數伸烷基連結之芳基。芳基(烷基)之低碳數伸烷基及芳基可經取代或未經取代。實例包括(但不限於)苄基、2-苯基(烷基)、3-苯基(烷基)及萘基(烷基)。
如本文所使用，「雜芳基(烷基)」係指作為取代基經由低碳數伸烷基連結之雜芳基。雜芳基(烷基)之低碳數伸烷基及雜芳基可經取代或未經取代。實例包括(但不限於) 2-噻吩基(烷基)、3-噻吩基(烷基)、呋喃基(烷基)、噻吩基(烷基)、吡咯基(烷基)、吡啶基(烷基)、異噁唑基(烷基)、咪唑基(烷基)及其苯并稠合類似物。
「(雜環基)烷基」係指作為取代基經由低碳數伸烷基連結之雜環基。雜環基(烷基)之低碳數伸烷基及雜環基可經取代或未經取代。實例包括(但不限於)四氫-2H-吡喃-4-基(甲基)、六氫吡啶-4-基(乙基)、六氫吡啶-4-基(丙基)、四氫-2H-噻喃-4-基(甲基)及1,3-噻嗪烷-4-基(甲基)。
「低碳數伸烷基」係直鏈-CH2 -系鏈基團，從而形成經由其末端碳原子連結分子片段之鍵。實例包括(但不限於)亞甲基(-CH2 -)、伸乙基(-CH2 CH2 -)、伸丙基(-CH2 CH2 CH2 -)及伸丁基(-CH2 CH2 CH2 CH2 -)。低碳數伸烷基可藉由用「經取代」定義下列舉之取代基替代低碳數伸烷基之一或多個氫而經取代。
如本文所使用，「烷氧基」係指式-OR，其中R係烷基、烯基、炔基、環烷基、環烯基、芳基、雜芳基、雜環基、芳基(烷基)、雜芳基(烷基)或雜環基(烷基)在本文中定義。烷氧基之非限制性列表係甲氧基、乙氧基、正丙氧基、1-甲基乙氧基(異丙氧基)、正丁氧基、異丁氧基、第二丁氧基、第三丁氧基、苯氧基及苯甲醯氧基。烷氧基可未經取代或經取代。
如本文所使用，「醯基」係指作為取代基經由羰基連結之氫、烷基、烯基、炔基、環烷基、環烯基、芳基、雜芳基、雜環基、芳基(烷基)、雜芳基(烷基)或雜環基(烷基)。實例包括甲醯基、乙醯基、丙醯基、苯甲醯基及丙烯基。醯基可經取代或未經取代。
如本文所使用，「鹵代烷基」係指其中一或多個氫原子由鹵素替代之烷基(例如單鹵代烷基、二鹵代烷基及三鹵代烷基)。此等基團包括(但不限於)氯甲基、氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、1-氯-2-氟甲基及2-氟異丁基。鹵代烷基可經取代或未經取代。
如本文所使用，「鹵代烷氧基」係指其中一或多個氫原子由鹵素替代之O-烷基(例如單鹵代烷氧基、二鹵代烷氧基及三鹵代烷氧基)。此等基團包括(但不限於)氯甲氧基、氟甲氧基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、1-氯-2-氟甲氧基及2-氟異丁氧基。鹵代烷氧基可經取代或未經取代。
「亞氧硫基」係指「-SR」基團，其中R可為氫、烷基、烯基、炔基、環烷基、環烯基、芳基、雜芳基、雜環基、芳基(烷基)、雜芳基(烷基)或雜環基(烷基)。亞氧硫基可經取代或未經取代。
「亞磺醯基」係指「-S(=O)-R」基團，其中R可與關於亞氧硫基所定義相同。亞磺醯基可經取代或未經取代。
「磺醯基」係指「SO2 R」基團，其中R可與關於亞氧硫基所定義相同。磺醯基可經取代或未經取代。
「O-羧基」係指「RC(=O)O-」基團，其中R可為氫、如本文所定義之烷基、烯基、炔基、環烷基、環烯基、芳基、雜芳基、雜環基、芳基(烷基)、雜芳基(烷基)或雜環基(烷基)。O-羧基可經取代或未經取代。
術語「酯」及「C-羧基」係指「-C(=O)OR」基團，其中R可與關於O-羧基所定義相同。酯及C-羧基可經取代或未經取代。
「硫代羰基」係指「-C(=S)R」基團，其中R可與關於O-羧基所定義相同。硫代羰基可經取代或未經取代。
「三鹵基甲烷磺醯基」係指「X3 CSO2 -」基團，其中每一X係鹵素。
「三鹵基甲烷磺醯胺基」係指「X3 CS(O)2 N(RA )-」基團，其中每一X係鹵素，且RA 係氫、烷基、烯基、炔基、環烷基、環烯基、芳基、雜芳基、雜環基、芳基(烷基)、雜芳基(烷基)或雜環基(烷基)。
如本文所使用之術語「胺基」係指-NH2 基團。
如本文所使用，術語「羥基」係指-OH基團。
「氰基」係指「-CN」基團。
如本文所使用之術語「迭氮基」係指-N3 基團。
「異氰酸基」係指「-NCO」基團。
「硫氰酸基」係指「-CNS」基團。
「異硫氰酸基」係指「-NCS」基團。
「巰基」係指「-SH」基團。
「羰基」係指C=O基團。
「S-磺醯胺基」係指「-SO2 N(RA RB )」基團，其中RA 及RB 可獨立地為氫、烷基、烯基、炔基、環烷基、環烯基、芳基、雜芳基、雜環基、芳基(烷基)、雜芳基(烷基)或雜環基(烷基)。S-磺醯胺基可經取代或未經取代。
「N-磺醯胺基」係指「RSO2 N(RA )-」基團，其中R及RA 可獨立地為氫、烷基、烯基、炔基、環烷基、環烯基、芳基、雜芳基、雜環基、芳基(烷基)、雜芳基(烷基)或雜環基(烷基)。N-磺醯胺基可經取代或未經取代。
「O-胺甲醯基」係指「-OC(=O)N(RA RB )」基團，其中RA 及RB 可獨立地為氫、烷基、烯基、炔基、環烷基、環烯基、芳基、雜芳基、雜環基、芳基(烷基)、雜芳基(烷基)或雜環基(烷基)。O-胺甲醯基可經取代或未經取代。
「N-胺甲醯基」係指「ROC(=O)N(RA )-」基團，其中R及RA 可獨立地為氫、烷基、烯基、炔基、環烷基、環烯基、芳基、雜芳基、雜環基、芳基(烷基)、雜芳基(烷基)或雜環基(烷基)。N-胺甲醯基可經取代或未經取代。
「O-硫代胺甲醯基」係指「-OC(=S)-N(RA RB )」基團，其中RA 及RB 可獨立地為氫、烷基、烯基、炔基、環烷基、環烯基、芳基、雜芳基、雜環基、芳基(烷基)、雜芳基(烷基)或雜環基(烷基)。O-硫代胺甲醯基可經取代或未經取代。
「N-硫代胺甲醯基」係指「ROC(=S)N(RA )-」基團，其中R及RA 可獨立地為氫、烷基、烯基、炔基、環烷基、環烯基、芳基、雜芳基、雜環基、芳基(烷基)、雜芳基(烷基)或雜環基(烷基)。N-硫代胺甲醯基可經取代或未經取代。
「C-醯胺基」係指「-C(=O)N(RA RB )」基團，其中RA 及RB 可獨立地為氫、烷基、烯基、炔基、環烷基、環烯基、芳基、雜芳基、雜環基、芳基(烷基)、雜芳基(烷基)或雜環基(烷基)。C-醯胺基可經取代或未經取代。
「N-醯胺基」係指「RC(=O)N(RA )-」基團，其中R及RA 可獨立地為氫、烷基、烯基、炔基、環烷基、環烯基、芳基、雜芳基、雜環基、芳基(烷基)、雜芳基(烷基)或雜環基(烷基)。N-醯胺基可經取代或未經取代。
如本文所使用之術語「鹵素原子」或「鹵素」意指元素週期表第7行之放射穩定原子中之任一者，例如氟、氯、溴及碘。
倘若未指定取代基(例如鹵代烷基)之數目，則可存在一或多個取代基。舉例而言，「鹵代烷基」可包括一或多個相同或不同鹵素。作為另一實例，「C1 -C3 烷氧基苯基」可包括一或多個含有1、2或3個原子之相同或不同烷氧基。
如本文所使用，除非另有指示，否則任何保護基團、胺基酸及其他化合物之縮寫均係根據其常用法、公認縮寫或IUPAC-IUB生物化學命名委員會(IUPAC-IUB Commission on Biochemical Nomenclature) (參見Biochem. 11:942-944 (1972))。
術語「醫藥上可接受之鹽」係指不會對其所投與之生物體造成顯著刺激且不會消除該化合物之生物活性及性質之化合物之鹽。在一些實施例中，鹽係化合物之酸加成鹽。醫藥鹽可藉由使化合物與無機酸反應來獲得，該等無機酸係例如氫鹵酸(例如鹽酸或氫溴酸)、硫酸、硝酸及磷酸。醫藥鹽亦可藉由使化合物與有機酸反應來獲得，該有機酸係例如脂肪族或芳香族羧酸或磺酸，例如甲酸、乙酸、琥珀酸、乳酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、抗壞血酸、菸鹼酸、甲磺酸、乙磺酸、對甲苯磺酸、柳酸或萘磺酸。醫藥鹽亦可藉由使化合物與鹼反應以形成諸如以下等鹽來獲得：銨鹽(例如銨鹽或三乙基銨鹽)；鹼金屬鹽，例如鋰鹽、鈉鹽或鉀鹽；鹼土金屬鹽，例如鈣鹽或鎂鹽；有機鹼(例如二環己基胺、N-甲基-D-葡萄糖胺、參(羥甲基)甲胺、C1 -C7 烷基胺、環己基胺、三乙醇胺、乙二胺)之鹽；及與胺基酸(例如精胺酸及離胺酸)之鹽。
除非另外明確說明，否則本申請案中、尤其隨附申請專利範圍所使用之術語及片語及其變化形式應解釋為開放性的而非限制性的。作為上述之實例，術語「包括」應解讀為意指「包括(但不限於) (including, without limitation)」、「包括(但不限於) (including but not limited to)」或諸如此類；如本文所使用之術語「包含」與「包括」、「含有」或「特徵在於」同義，且其為包括性或開放性的，且不排除其他未列舉之要素或方法步驟；術語「具有」應解釋為「至少具有」；術語「包括」應解釋為「包括(但不限於)」；術語「實例」用於為所論述物項提供例示性例證而非其窮盡性或限制性列表。另外，術語「包含」應解釋為與片語「至少具有」或「至少包括」同義。當用於化合物或組合物之背景中時，術語「包含」意指該化合物或組合物至少包括所列舉之特徵或組分，但亦可包括其他特徵或組分。
關於本文中實質上任何複數及/或單數術語之使用，熟習此項技術者可在適於上下文及/或應用時自複數轉變成單數及/或自單數轉變成複數。為清晰起見，可明確地陳述各種單數/複數排列。不定冠詞「一(a或an)」並不排除複數個。
應理解，在本文所闡述具有一或多個手性中心之任一化合物中，若未明確指示絕對立體化學，則每一中心可獨立地為(R)構形或(S)構形或其混合物。因此，本文所提供之化合物可為鏡像異構純、鏡像異構富集、外消旋混合物、非鏡像異構純、非鏡像異構富集或立體異構混合物。另外，應理解，在本文所闡述具有一或多個產生幾何異構物(可定義為E或Z)之雙鍵之任一化合物中，每一雙鍵可獨立地為E或Z或其混合物。同樣，應理解，在所闡述之任一化合物中，亦意欲包括所有互變異構形式。
術語「硫代磷酸酯(phosphorothioate及phosphothioate)」係指通式
Figure 02_image019
之部分、其質子化形式(例如
Figure 02_image021
及
Figure 02_image023
)及其互變異構物(例如
Figure 02_image025
及
Figure 02_image027
)。
應理解，倘若本文所揭示之化合物具有未填充之化合價，則利用氫或其同位素(例如氫-1 (氕)及氫-2 (氘))來填充該等化合價。
應理解，本文所闡述之化合物可經同位素標記。利用同位素(例如氘)進行取代可提供源於更強代謝穩定性之某些治療優勢，例如延長活體內半衰期或降低劑量需求。如化合物結構中所表示之每一化學元素可包括該元素之任何同位素。舉例而言，在化合物結構中，氫原子可明確地揭示或理解為存在於該化合物中。在化合物之可存在氫原子之任何位置處，氫原子可為氫之任何同位素，包括(但不限於)氫-1 (氕)及氫-2 (氘)。因此，除非上下文另外明確地指明，否則本文對化合物之提及涵蓋所有潛在的同位素形式。
當提供一系列值時，應理解上限及下限以及該範圍之上限與下限之間的每一中間值涵蓋於實施例內。化合物
本文所揭示之一些實施例係關於選自式(I)、式(II)及式(III)之化合物或上述中任一者之醫藥上可接受之鹽：
Figure 02_image029
(I)
Figure 02_image031
(II)
Figure 02_image033
(III) 其中：環A1A 、環A1B 及環A1C 可獨立地選自
Figure 02_image035
及
Figure 02_image037
；環A2A 、環A2B 及環A2C 可獨立地選自
Figure 02_image039
Figure 02_image041
及
Figure 02_image043
；B1A 可為視情況經取代之[5,6]二環雜芳基及視情況經取代之[5,6]二環雜環基，且其中B1A 可連接至環A1A 之1’位；B2A 可為視情況經取代之[5,6]二環雜芳基及視情況經取代之[5,6]二環雜環基，且其中B2A 可連接至環A2A 之1’位；B1B 可為視情況經取代之[5,6]二環雜芳基及視情況經取代之[5,6]二環雜環基，且其中B1B 可連接至環A1B 之1’位；B2B 可為視情況經取代之[5,6]二環雜芳基及視情況經取代之[5,6]二環雜環基，且其中B2B 可連接至環A2B 之1’位；B1C 可為視情況經取代之[5,6]二環雜芳基及視情況經取代之[5,6]二環雜環基，且其中B1C 可連接至環A1C 之1’位；B2C 可為視情況經取代之[5,6]二環雜芳基及視情況經取代之[5,6]二環雜環基，且其中B2C 可連接至環A2C 之1’位；X1A 、X3A 、X1B 、X3B 、X1C 及X3C 可獨立地為OH、O- 、SH、S- 、O(未經取代之C1-4 烷基)、S(未經取代之C1-4 烷基)、O-CH2 -O-C(=O)-(未經取代之C1-4 烷基)、S-CH2 -O-C(=O)-(未經取代之C1-4 烷基)、O-CH2 -O-C(=O)-O-(未經取代之C1-4 烷基)、S-CH2 -O-C(=O)-O-(未經取代之C1-4 烷基)、
Figure 02_image045
或
Figure 02_image047
；X2A 、X4A 、X2B 、X4B 、X2C 及X4C 可獨立地為O (氧)或S (硫)；R1A 可為氫或鹵素，且其中R1A 可連接至環A1A 之2’位；R2A 可選自氫、鹵素、羥基、未經取代之C1-4 烷氧基及
Figure 02_image049
，且其中R2A 可連接至環A1A 之2’位，且當R2A 係
Figure 02_image051
時，則*指示與環A1A 之4’位之連接點；R3A 可為氫或鹵素，且其中R3A 可連接至環A2A 之3’位；R4A 可選自氫、鹵素、羥基及未經取代之C1-4 烷氧基，且其中R4A 可連接至環A2A 之3’位；R5A 可為氫，且其中R5A 連接至環A2A 之4’位；或R4A 及R5A 可一起形成
Figure 02_image053
，其中每一*指示與環A2A 之連接點，且其中R4A 連接至3’位且R5A 連接至4’位；R1B 可獨立地為氫或鹵素，其中R1B 可連接至環A1B 之3’位；R2B 可選自氫、鹵素、羥基及未經取代之C1-4 烷氧基，且其中R2B 可連接至環A1B 之3’位；R3B 可為氫或鹵素，且其中R3B 可連接至環A2B 之3’位；R4B 可選自氫、鹵素、羥基及未經取代之C1-4 烷氧基，且其中R4B 可連接至環A2B 之3’位；R5B 可為氫，且其中R5B 連接至環A1B 之4’位；R6B 可為氫，且其中R6B 連接至環A1B 之4’位；或R2B 及R5B 可一起形成
Figure 02_image055
，其中每一*指示與環A1B 之連接點，且其中R2B 連接至3’位且R5B 連接至4’位；R4B 及R6B 可一起形成
Figure 02_image057
，其中每一*指示與環A2B 之連接點；R1C 可為氫或鹵素，其中R1C 可連接至環A1C 之2’位，且其中R4B 連接至3’位且R6B 連接至4’位；R2C 可選自氫、鹵素、羥基、未經取代之C1-4 烷氧基及
Figure 02_image059
，且其中R2C 可連接至環A1C 之2’位，且當R2C 係
Figure 02_image061
時，則*指示與環A1C 之4’位之連接點；R3C 可為氫或鹵素，其中R3C 可連接至環A2C 之2’位；且R4C 可選自氫、鹵素、羥基、未經取代之C1-4 烷氧基及
Figure 02_image063
，且其中R4C 可連接至環A2C 之2’位，且當R4C 係
Figure 02_image065
時，則*指示與環A2C 之4’位之連接點。
本文所揭示之一些實施例係關於式(I)化合物或其醫藥上可接受之鹽。如本文所闡述，環A1A 及環A2A 可為各種5員環。舉例而言，在一些實施例中，環A1A 可為
Figure 02_image067
。在其他實施例中，環A1A 可為
Figure 02_image069
。在其他實施例中，環A1A 可為
Figure 02_image071
。在其他實施例中，環A1A 可為
Figure 02_image073
。在一些實施例中，環A1A 可為
Figure 02_image075
。在其他實施例中，環A1A 可為
Figure 02_image077
。
在一些實施例中，包括前一段落之彼等實施例，環A2A 可為
Figure 02_image079
。在其他實施例中，包括前一段落之彼等實施例，環A2A 可為
Figure 02_image081
。在其他實施例中，包括前一段落之彼等實施例，環A2A 可為
Figure 02_image083
。在其他實施例中，包括前一段落之彼等實施例，環A2A 可為
Figure 02_image085
。在一些實施例中，包括前一段落之彼等實施例，環A2A 可為
Figure 02_image087
。在其他實施例中，包括前一段落之彼等實施例，環A2A 可為
Figure 02_image089
。在其他實施例中，包括前一段落之彼等實施例，環A2A 可為
Figure 02_image091
。
熟習此項技術者理解，式(I)或其醫藥上可接受之鹽可為2’,3’-環狀二-核苷酸(2’,3’-CDN)。式(I)化合物或其醫藥上可接受之鹽之例示性結構包括以下：
Figure 02_image093
(Ia)
Figure 02_image095
(Ib)及
Figure 02_image097
(Ic)，包括上述中任一者之醫藥上可接受之鹽。在此段落之一些實施例中，B1A 及B2A 中之至少一者不為
Figure 02_image099
。在此段落之一些實施例中，B1A 及B2A 中之至少一者不為
Figure 02_image101
。在此段落之一些實施例中，B1A 及B2A 中之一者可選自
Figure 02_image103
、
Figure 02_image105
及
Figure 02_image107
。在此段落之一些實施例中，R1A 、R3A 及R5A 可各自為氫；且R4A 可為甲氧基。在此段落之一些實施例中，R2A 可為氫、鹵素或羥基。在此段落之一些實施例中，X1A 及X3A 可各自為OH；且X2A 及X4A 可各自為O。在此段落之一些實施例中，X1A 及X3A 可各自為OH；且X2A 及X4A 中之至少一者可為S。
在一些實施例中，環A1A 可為
Figure 02_image109
；且環A2A 可為
Figure 02_image111
。在其他實施例中，環A1A 可為
Figure 02_image113
；且環A2A 可為
Figure 02_image115
。在其他實施例中，環A1A 可為
Figure 02_image117
；且環A2A 可為
Figure 02_image119
。在其他實施例中，環A1A 可為
Figure 02_image121
；環A2A 可為
Figure 02_image123
；且B1A 及B2A 中之至少一者不選自腺嘌呤及鳥嘌呤。在一些實施例中，環A1A 可為
Figure 02_image125
；且環A2A 可為
Figure 02_image127
。在其他實施例中，環A1A 可為
Figure 02_image129
；且環A2A 可為
Figure 02_image131
。在其他實施例中，環A1A 可為
Figure 02_image133
；且環A2A 可為
Figure 02_image135
。在其他實施例中，環A1A 可為
Figure 02_image137
；且環A2A 可為
Figure 02_image139
。在一些實施例中，環A1A 可為
Figure 02_image141
；且環A2A 可為
Figure 02_image143
。在其他實施例中，環A1A 可為
Figure 02_image145
；且環A2A 可為
Figure 02_image147
。
多種二環雜芳基及二環雜環基可連接至環A1A 及環A2A 。一個二環雜芳基或二環雜環基可連接至環A1A 之1’位，且另一二環雜芳基或二環雜環基可連接至環A2A 之1’位。二環雜芳基可為視情況經取代之9員雜芳基(例如視情況經取代之[5,6]二環雜芳基)，且二環雜環基可為視情況經取代之9員雜環基(例如視情況經取代之[5,6]二環雜環基)。二環雜芳基可為視情況經取代之含氮二環雜芳基，且二環雜環基可為視情況經取代之含氮二環雜環基。當B1A 連接至環A1A 之1’位時，B1A 可經由碳或氮原子連接。在一些實施例中，B1A 可為視情況經取代之C-連接之二環雜芳基、視情況經取代之C-連接之二環雜環基、視情況經取代之N-連接之二環雜芳基或視情況經取代之N-連接之二環雜環基。類似地，B2A 可經由碳或氮原子連接至環A2A 之1’位。在一些實施例中，B2A 可為視情況經取代之C-連接之二環雜芳基、視情況經取代之C-連接之二環雜環基、視情況經取代之N-連接之二環雜芳基或視情況經取代之N-連接之二環雜環基。
在一些實施例中，B1A 及/或B2A 可具有通用結構
Figure 02_image149
，其中Y1 可為5員環；且Z1 可為6員含氮環。在一些實施例中，環Y1 可選自未經取代或經取代之咪唑、未經取代或經取代之呋喃、未經取代或經取代之噻吩、未經取代或經取代之異噻唑、未經取代或經取代之異噁唑、未經取代或經取代之吡咯、未經取代或經取代之吡唑及未經取代或經取代之1,2,3-三唑。在一些實施例中，環Z1 可選自
Figure 02_image151
及
Figure 02_image153
，其中R1Z 及R2Z 可獨立地為氫或胺基；且每一「*」指示與環Y1 之連接點。
在一些實施例中，B1A 可為視情況經取代之嘌呤鹼基。在一些實施例中，B2A 可為視情況經取代之嘌呤鹼基。嘌呤鹼基之實例包括腺嘌呤、鳥嘌呤、次黃嘌呤、黃嘌呤、可可鹼、咖啡因、尿酸及異鳥嘌呤。在一些實施例中，B1A 可選自
Figure 02_image155
，
Figure 02_image157
Figure 02_image159
及
Figure 02_image161
。在一些實施例中，B2A 可選自
Figure 02_image163
，
Figure 02_image165
Figure 02_image167
及
Figure 02_image169
。在一些實施例中，B1A 及B2A 中之至少一者可為
Figure 02_image171
或
Figure 02_image173
；且B1A 及B2A 中之另一者可為
Figure 02_image175
,
Figure 02_image177
Figure 02_image179
或
Figure 02_image181
。
環A1A 之2’位可包括各種取代基。在一些實施例中，R1A 可為氫。在其他實施例中，R1A 可為鹵素，例如氟或氯。在一些實施例中，R2A 可為氫。在其他實施例中，R2A 可為鹵素，例如氟或氯。在其他實施例中，R2A 可為羥基。在其他實施例中，R2A 可為未經取代之C1-4 烷氧基。未經取代之C1-4 烷氧基之實例包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基、第二丁氧基及第三丁氧基。在一些實施例中，R2A 可為
Figure 02_image183
，其中R2A 連接至環A1A 之2’位且*指示與環A1A 之4’位之連接點。當R2A 係
Figure 02_image185
時，環A1A 可具有結構
Figure 02_image187
。
在一些實施例中，R1A 可為氫；且R2A 可為羥基。在其他實施例中，R1A 可為氫；且R2A 可為氫。在其他實施例中，R1A 可為氫；且R2A 可為鹵素(例如F)。在其他實施例中，R1A 可為氫；且R2A 可為未經取代之C1-4 烷氧基。在一些實施例中，R1A 可為鹵素；且R2A 可為鹵素。在其他實施例中，R1A 可為鹵素(例如F)；且R2A 可為氫。
環A2A 之3’位處亦可存在各種取代基。在一些實施例中，R3A 可為氫。在其他實施例中，R3A 可為鹵素，例如氟或氯。在一些實施例中，R4A 可為氫。在其他實施例中，R4A 可為鹵素。舉例而言，鹵素可為氟或氯。在其他實施例中，R4A 可為羥基。在其他實施例中，R4A 可為未經取代之C1-4 烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基、第二丁氧基及第三丁氧基。在一些實施例中，R3A 可為氫；且R4A 可為羥基。在其他實施例中，R3A 可為氫；且R4A 可為未經取代之C1-4 烷氧基。在其他實施例中，R3A 可為鹵素(例如F)；且R4A 可為氫。
環A2A 之4’位可為氫。在一些實施例中，R5A 可為氫。環A2A 之4’位可經由CH2 部分連結至環A2A 之3’位。在一些實施例中，R4A 及R5A 可一起形成
Figure 02_image189
，其中每一*指示與環A2A 之連接點。當R4A 及R5A 可一起形成
Figure 02_image191
時，環A2A 可具有結構
Figure 02_image193
。
本文所揭示之一些實施例係關於式(II)化合物或其醫藥上可接受之鹽。若干種5員環適於環A1B 及環A2B 。在一些實施例中，環A1B 可為
Figure 02_image195
。在其他實施例中，環A1B 可為
Figure 02_image197
。在其他實施例中，環A1B 可為
Figure 02_image199
。在其他實施例中，環A1B 可為
Figure 02_image201
。在一些實施例中，環A1B 可為
Figure 02_image203
。在其他實施例中，環A1B 可為
Figure 02_image205
。
在一些實施例中，包括前一段落之彼等實施例，環A2B 可為
Figure 02_image207
。在其他實施例中，包括前一段落之彼等實施例，環A2B 可為
Figure 02_image209
。在其他實施例中，包括前一段落之彼等實施例，環A2B 可為
Figure 02_image211
。在其他實施例中，包括前一段落之彼等實施例，環A2B 可為
Figure 02_image213
。在一些實施例中，包括前一段落之彼等實施例，環A2B 可為
Figure 02_image215
。在其他實施例中，包括前一段落之彼等實施例，環A2B 可為
Figure 02_image217
。在其他實施例中，包括前一段落之彼等實施例，環A2B 可為
Figure 02_image219
。
熟習此項技術者理解，式(II)或其醫藥上可接受之鹽可為2’,2’-環狀二-核苷酸(2’,2’-CDN)。式(II)化合物或其醫藥上可接受之鹽之一個實例係
Figure 02_image221
(IIa)、
Figure 02_image223
(IIb)及
Figure 02_image225
(IIc)。在此段落之一些實施例中，B1B 及B2B 中之至少一者不為
Figure 02_image227
。在此段落之一些實施例中，B1B 及B2B 中之至少一者不為
Figure 02_image229
。在此段落之一些實施例中，B1B 及B2B 中之一者可選自
Figure 02_image231
Figure 02_image233
及
Figure 02_image235
。在此段落之一些實施例中，R1B 、R3B 、R6B 及R6B 可各自為氫；且R4B 可為氫、鹵素、羥基或甲氧基。在此段落之一些實施例中，X1B 及X3B 可各自為OH；且X2B 及X4B 可各自為O。在此段落之一些實施例中，X1B 及X3B 可各自為OH；且X2B 及X4B 中之至少一者可為S。
在一些實施例中，環A1B 可為
Figure 02_image237
；且環A2B 可為
Figure 02_image239
。在其他實施例中，環A1B 可為
Figure 02_image241
；且環A2B 可為
Figure 02_image243
。在其他實施例中，環A1B 可為
Figure 02_image245
；且環A2B 可為
Figure 02_image247
。在其他實施例中，環A1B 可為
Figure 02_image249
；環A2B 可為
Figure 02_image251
；且B1B 及B2B 中之至少一者不選自腺嘌呤及鳥嘌呤。在一些實施例中，環A1B 可為
Figure 02_image253
；且環A2B 可為
Figure 02_image255
。在其他實施例中，環A1B 可為
Figure 02_image257
；且環A2B 可為
Figure 02_image259
。在其他實施例中，環A1B 可為
Figure 02_image261
；且環A2B 可為
Figure 02_image263
。在其他實施例中，環A1B 可為
Figure 02_image265
；且環A2B 可為
Figure 02_image267
。在一些實施例中，環A1B 可為
Figure 02_image269
；且環A2B 可為
Figure 02_image271
。在其他實施例中，環A1B 可為
Figure 02_image273
；且環A2B 可為
Figure 02_image275
。
環A1B 及環A2B 可在其各別1’位處連接各種二環雜芳基及二環雜環基。二環雜芳基及二環雜環基可在其環中包括9個原子。在一些實施例中，環A1B 及/或環A2B 可為視情況經取代之9員二環雜芳基。在其他實施例中，環A1B 及/或環A2B 可為視情況經取代之9員二環雜環基。視情況經取代之9員二環雜芳基可為視情況經取代之[5,6]二環雜芳基，且視情況經取代之9員二環雜環基可為視情況經取代之[5,6]二環雜環基。在一些實施例中，環A1B 及/或環A2B 可為視情況經取代之含氮二環雜芳基。在其他實施例中，環A1B 及/或環A2B 可為視情況經取代之含氮二環雜環基。當B1B 連接至環A1B 之1’位時，B1B 可經由碳或氮原子連接。在一些實施例中，B1B 可為視情況經取代之C-連接之二環雜芳基或視情況經取代之C-連接之二環雜環基。在其他實施例中，B1B 可為視情況經取代之N-連接之二環雜芳基或視情況經取代之N-連接之二環雜環基。當B2B 連接至環A2B 之1’位時，B2B 可經由碳或氮原子連接。在一些實施例中，B2B 可為視情況經取代之C-連接之二環雜芳基或視情況經取代之C-連接之二環雜環基。在其他實施例中，B2B 可為視情況經取代之N-連接之二環雜芳基或視情況經取代之N-連接之二環雜環基。
在一些實施例中，B1B 及/或B2B 可具有通用結構
Figure 02_image277
，其中Y2 可為5員環；且Z2 可為6員含氮環。在一些實施例中，環Y2 可選自未經取代或經取代之咪唑、未經取代或經取代之呋喃、未經取代或經取代之噻吩、未經取代或經取代之異噻唑、未經取代或經取代之異噁唑、未經取代或經取代之吡咯、未經取代或經取代之吡唑及未經取代或經取代之1,2,3-三唑。在一些實施例中，環Z2 可選自
Figure 02_image279
及
Figure 02_image281
，其中R3Z 及R4Z 可獨立地為氫或胺基；且每一「*」指示與環Y2 之連接點。
在一些實施例中，B1B 可為視情況經取代之嘌呤鹼基。在一些實施例中，B2B 可為視情況經取代之嘌呤鹼基。例示性嘌呤鹼基可包括腺嘌呤、鳥嘌呤、次黃嘌呤、黃嘌呤、可可鹼、咖啡因、尿酸及異鳥嘌呤。在一些實施例中，B1B 可選自
Figure 02_image283
、
Figure 02_image285
Figure 02_image287
及
Figure 02_image289
。在一些實施例中，B2B 可選自
Figure 02_image291
、
Figure 02_image293
Figure 02_image295
及
Figure 02_image297
。在一些實施例中，B1B 及B2B 中之至少一者可為
Figure 02_image299
或
Figure 02_image301
；且B1B 及B2B 中之另一者可為
Figure 02_image303
、
Figure 02_image305
Figure 02_image307
或
Figure 02_image309
。
環A1B 之3’位可連接各種取代基。在一些實施例中，R1B 可為氫。在一些實施例中，R1B 可為鹵素。舉例而言，R1B 可為氟。作為另一實例，R1B 可為氯。在一些實施例中，R2B 可為氫。在其他實施例中，R2B 可為鹵素，例如氟或氯。在其他實施例中，R2B 可為羥基。在其他實施例中，R2B 可為未經取代之C1-4 烷氧基。例示性未經取代之C1-4 烷氧基包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基、第二丁氧基及第三丁氧基。在一些實施例中，R1B 可為氫；且R2B 可為羥基。在其他實施例中，R1B 可為氫；且R2B 可為未經取代之C1-4 烷氧基，例如本文所闡述之彼等。在其他實施例中，R1B 可為鹵素(例如F)；且R2B 可為氫。
環A2B 之3’位亦可連接各種取代基。在一些實施例中，R3B 可為氫。在其他實施例中，R3B 可為鹵素，例如氟或氯。在一些實施例中，R4B 可為氫。在其他實施例中，R4B 可為鹵素，例如氟或氯。在其他實施例中，B4B 可為羥基。在其他實施例中，B4B 可為未經取代之C1-4 烷氧基。適宜未經取代之C1-4 烷氧基闡述於本文中且包括前一段落中所提供之彼等。在一些實施例中，R3B 可為氫；且R4B 可為羥基。在其他實施例中，R3B 可為氫；且R4B 可為氫。在其他實施例中，R3B 可為氫；且R4B 可為鹵素(例如F)。在其他實施例中，R3B 可為氫；且R4B 可為未經取代之C1-4 烷氧基。在一些實施例中，R3B 可為鹵素；且R4B 可為鹵素。在其他實施例中，R3B 可為鹵素(例如F)；且R4B 可為氫。
環A1B 及環A2B 中之每一者之4’位可為氫。在一些實施例中，R5B 可為氫。在一些實施例中，R6B 可為氫。環A1B 之3’位及4’位可經由-CH2 -部分連結。環A2B 之3’位及4’位亦可經由-CH2 -部分連結。當3’位及4’位以-CH2 -部分連結時，環A1B 及環A2B 之實例結構分別為
Figure 02_image311
及
Figure 02_image313
。在一些實施例中，R2B 及R5B 可一起形成
Figure 02_image315
，其中每一*指示與環A1B 之連接點。在一些實施例中，R4B 及R6B 可一起形成
Figure 02_image315
，其中每一*指示與環A2B 之連接點。
本文所揭示之一些實施例係關於式(III)化合物或其醫藥上可接受之鹽。如本文所示，環A1C 及環A2C 可為各種5員環。在一些實施例中，環A1C 可為
Figure 02_image318
。在其他實施例中，環A1C 可為
Figure 02_image320
。在其他實施例中，環A1C 可為
Figure 02_image322
。在其他實施例中，環A1C 可為
Figure 02_image324
。在一些實施例中，環A1C 可為
Figure 02_image326
。在其他實施例中，環A1C 可為
Figure 02_image328
。
在一些實施例中，包括前一段落之彼等實施例，環A2C 可為
Figure 02_image330
。在其他實施例中，包括前一段落之彼等實施例，環A2C 可為
Figure 02_image332
。在其他實施例中，包括前一段落之彼等實施例，環A2C 可為
Figure 02_image334
。在其他實施例中，包括前一段落之彼等實施例，環A2C 可為
Figure 02_image336
。在一些實施例中，包括前一段落之彼等實施例，環A2C 可為
Figure 02_image338
。在其他實施例中，包括前一段落之彼等實施例，環A2C 可為
Figure 02_image340
。在其他實施例中，包括前一段落之彼等實施例，環A2C 可為
Figure 02_image342
。
熟習此項技術者理解，式(III)或其醫藥上可接受之鹽可為3’,3’-環狀二-核苷酸(3’,3’-CDN)。式(III)化合物或其醫藥上可接受之鹽之實例係
Figure 02_image344
(IIIa)、
Figure 02_image346
(IIIb)及
Figure 02_image348
(IIIc)。在此段落之一些實施例中，B1C 及B2C 中之至少一者不為
Figure 02_image350
。在此段落之一些實施例中，B1C 及B2C 中之至少一者不為
Figure 02_image352
。在此段落之一些實施例中，B1C 及B2C 中之一者可選自
Figure 02_image354
Figure 02_image356
及
Figure 02_image358
。在此段落之一些實施例中，R1C 及R3C 可各自為氫；且R4C 可為氫、鹵素、羥基或甲氧基。在此段落之一些實施例中，X1C 及X3C 可各自為OH；且X2C 及X4C 可各自為O。在此段落之一些實施例中，X1C 及X3C 可各自為OH；且X2C 及X4C 中之至少一者可為S。
在一些實施例中，環A1C 可為
Figure 02_image360
；且環A2C 可為
Figure 02_image362
。在其他實施例中，環A1C 可為
Figure 02_image364
；且環A2C 可為
Figure 02_image366
。在其他實施例中，環A1C 可為
Figure 02_image368
；且環A2C 可為
Figure 02_image370
。在其他實施例中，環A1C 可為
Figure 02_image372
；環A2C 可為
Figure 02_image374
；且B1C 及B2C 中之至少一者不選自腺嘌呤及鳥嘌呤。在一些實施例中，環A1C 可為
Figure 02_image376
；且環A2C 可為
Figure 02_image378
。在其他實施例中，環A1C 可為
Figure 02_image380
；且環A2C 可為
Figure 02_image382
。在其他實施例中，環A1C 可為
Figure 02_image384
；且環A2C 可為
Figure 02_image386
。在其他實施例中，環A1C 可為
Figure 02_image388
；且環A2C 可為
Figure 02_image390
。在一些實施例中，環A1C 可為
Figure 02_image392
；且環A2C 可為
Figure 02_image394
。在其他實施例中，環A1C 可為
Figure 02_image396
；且環A2C 可為
Figure 02_image398
。
多種二環雜芳基及二環雜環基可連接至環A1C 及環A2C 之1’位。在一些實施例中，二環雜芳基可為視情況經取代之9員二環雜芳基，例如視情況經取代之[5,6]二環雜芳基。在其他實施例中，二環雜環基可為視情況經取代之二環雜環基，例如視情況經取代之[5,6]二環雜環基。二環雜芳基可為視情況經取代之含氮二環雜芳基，且二環雜環基可為視情況經取代之含氮二環雜環基。諸如B1C 及B2C 等二環雜芳基及二環雜環基可經由碳或氮原子連接至每一5員環。在一些實施例中，B1C 可為視情況經取代之C-連接之二環雜芳基或視情況經取代之C-連接之二環雜環基。在其他實施例中，B1C 可為視情況經取代之N-連接之二環雜芳基或視情況經取代之N-連接之二環雜環基。在一些實施例中，B2C 可為視情況經取代之C-連接之二環雜芳基或視情況經取代之C-連接之二環雜環基。在其他實施例中，B2C 可為視情況經取代之N-連接之二環雜芳基或視情況經取代之N-連接之二環雜環基。
在一些實施例中，B1C 及/或B2C 可具有通用結構
Figure 02_image400
，其中Y3 可為5員環；且Z3 可為6員含氮環。在一些實施例中，環Y3 可選自未經取代或經取代之咪唑、未經取代或經取代之呋喃、未經取代或經取代之噻吩、未經取代或經取代之異噻唑、未經取代或經取代之異噁唑、未經取代或經取代之吡咯、未經取代或經取代之吡唑及未經取代或經取代之1,2,3-三唑。在一些實施例中，環Z3 可選自
Figure 02_image402
及
Figure 02_image404
，其中R5Z 及R6Z 可獨立地為氫或胺基；且每一「*」指示與環Y3 之連接點。
在一些實施例中，B1C 可為視情況經取代之嘌呤鹼基。在一些實施例中，B2C 可為視情況經取代之嘌呤鹼基。例示性嘌呤鹼基可包括腺嘌呤、鳥嘌呤、次黃嘌呤、黃嘌呤、可可鹼、咖啡因、尿酸及異鳥嘌呤。在一些實施例中，B1C 可選自
Figure 02_image406
、
Figure 02_image408
Figure 02_image410
及
Figure 02_image412
。在一些實施例中，B2C 可選自
Figure 02_image414
、
Figure 02_image416
Figure 02_image418
及
Figure 02_image420
。在一些實施例中，B1C 及B2C 中之至少一者可為
Figure 02_image422
或
Figure 02_image424
；且B1C 及B2C 中之另一者可為
Figure 02_image426
、
Figure 02_image428
Figure 02_image430
或
Figure 02_image432
。
環A1C 及環A2C 之2’位可連接多種基團。在一些實施例中，R1C 可為氫。在其他實施例中，R1C 可為鹵素，例如F或Cl。在一些實施例中，R2C 可為氫。在其他實施例中，R2C 可為鹵素，例如F或Cl。在其他實施例中，R2C 可為羥基。在其他實施例中，R2C 可為未經取代之C1-4 烷氧基。在一些實施例中，R2C 可為
Figure 02_image434
，其中R2A 連接至環A1C 之2’位且*指示與環A1C 之4’位之連接點。當R2C 為
Figure 02_image434
時，環A1A 可具有結構
Figure 02_image437
。在一些實施例中，R1C 可為鹵素(例如氟)；且R2C 可為氫。
對於環A2C 而言，在一些實施例中，R3C 可為氫。在其他實施例中，B3C 可為鹵素。舉例而言，R3C 可為氟或氯。在一些實施例中，R4C 可為氫。在其他實施例中，R4C 可為鹵素，例如氟或氯。在其他實施例中，B4C 可為羥基。在其他實施例中，R4C 可為未經取代之C1-4 烷氧基。R2C 及/或R4C 之適宜未經取代之C1-4 烷氧基包括以下：甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基、第二丁氧基及第三丁氧基。在一些實施例中，R4C 可為
Figure 02_image439
，其中R4C 連接至環A2C 之2’位，則*指示與環A2C 之4’位之連接點。當R4C 為
Figure 02_image439
時，環A2C 可具有結構
Figure 02_image442
。
在一些實施例中，R1C 可為氫；且R2C 可為羥基。在其他實施例中，R1C 可為氫；且R2C 可為氫。在其他實施例中，R1C 可為氫；且R2C 可為鹵素，例如氟。在其他實施例中，R1C 可為氫；且R2C 可為未經取代之C1-4 烷氧基。在一些實施例中，R1C 可為鹵素；且R2C 可為鹵素，例如R1C 及R2C 可各自為F。在一些實施例中，R3C 可為氫；且R4C 可為羥基。在其他實施例中，R3C 可為氫；且R4C 可為氫。在其他實施例中，R3C 可為氫；且R4C 可為鹵素(例如F)。在其他實施例中，R3C 可為氫；且R4C 可為未經取代之C1-4 烷氧基。在一些實施例中，R3C 可為鹵素；且R4C 可為鹵素。作為實例，R3C 及R4C 可各自為氟。在其他實施例中，R3C 可為鹵素(例如氟)；且R4C 可為氫。
式(I)、(II)及(III)之含磷基團之實例包括磷酸酯基、單硫代磷酸酯基及二硫代磷酸酯基。式(I)、(II)及(III)之含磷基團可包括前藥部分。舉例而言，磷酸酯基之一或多個氫可經低碳數烷基、特戊醯基氧基甲基(POM)或異丙基氧基羰基氧基甲基(POC)替代。類似地，單硫代磷酸酯基及/或二硫代磷酸酯基之一或多個氫可經低碳數烷基、特戊醯基氧基甲基(POM)或異丙基氧基羰基氧基甲基(POC)替代。
在一些實施例中，X1A 可為OH或O- ；且X2A 可為O。在其他實施例中，X1A 可為SH或S- ；且X2A 可為O。在其他實施例中，X1A 可為SH或S- ；且X2A 可為S。
在一些實施例中，X1A 可為O(未經取代之C1-4 烷基)；且X2A 可為O。在其他實施例中，X1A 可為O(未經取代之C1-4 烷基)；且X2A 可為S。在其他實施例中，X1A 可為S(未經取代之C1-4 烷基)；且X2A 可為O。在其他實施例中，X1A 可為S(未經取代之C1-4 烷基)；且X2A 可為S。在一些實施例中，X1A 可為O-CH2 -O-C(=O)-(未經取代之C1-4 烷基)；且X2A 可為O。在其他實施例中，X1A 可為O-CH2 -O-C(=O)-(未經取代之C1-4 烷基)；且X2A 可為S。在其他實施例中，X1A 可為S-CH2 -O-C(=O)-(未經取代之C1-4 烷基)；且X2A 可為O。在其他實施例中，X1A 可為S-CH2 -O-C(=O)-(未經取代之C1-4 烷基)；且X2A 可為S。在一些實施例中，X1A 可為O-CH2 -O-C(=O)-O-(未經取代之C1-4 烷基)；且X2A 可為O。在其他實施例中，X1A 可為O-CH2 -O-C(=O)-O-(未經取代之C1-4 烷基)；且X2A 可為S。在其他實施例中，X1A 可為S-CH2 -O-C(=O)-O-(未經取代之C1-4 烷基)；且X2A 可為O。在其他實施例中，X1A 可為S-CH2 -O-C(=O)-O-(未經取代之C1-4 烷基)；且X2A 可為S。在一些實施例中，X1A 可為
Figure 02_image444
；且X2A 可為O。在其他實施例中，X1A 可為
Figure 02_image446
；且X2A 可為O。在其他實施例中，X1A 可為
Figure 02_image448
；且X2A 可為S。在其他實施例中，X1A 可為
Figure 02_image450
；且X2A 可為S。
在一些實施例中，包括前一段落之彼等實施例，X3A 可為OH或O- ；且X4A 可為O。在其他實施例中，X3A 可為SH或S- ；且X4A 可為O。在其他實施例中，X3A 可為SH或S- ；且X4A 可為S。
在一些實施例中，X3A 可為O(未經取代之C1-4 烷基)；且X4A 可為O。在其他實施例中，X3A 可為O(未經取代之C1-4 烷基)；且X4A 可為S。在其他實施例中，X3A 可為S(未經取代之C1-4 烷基)；且X4A 可為O。在其他實施例中，X3A 可為S(未經取代之C1-4 烷基)；且X4A 可為S。在一些實施例中，X3A 可為O-CH2 -O-C(=O)-(未經取代之C1-4 烷基)；且X4A 可為O。在其他實施例中，X3A 可為O-CH2 -O-C(=O)-(未經取代之C1-4 烷基)；且X4A 可為S。在其他實施例中，X3A 可為S-CH2 -O-C(=O)-(未經取代之C1-4 烷基)；且X4A 可為O。在其他實施例中，X3A 可為S-CH2 -O-C(=O)-(未經取代之C1-4 烷基)；且X4A 可為S。在一些實施例中，X3A 可為O-CH2 -O-C(=O)-O-(未經取代之C1-4 烷基)；且X4A 可為O。在其他實施例中，X3A 可為O-CH2 -O-C(=O)-O-(未經取代之C1-4 烷基)；且X4A 可為S。在其他實施例中，X3A 可為S-CH2 -O-C(=O)-O-(未經取代之C1-4 烷基)；且X4A 可為O。在其他實施例中，X3A 可為S-CH2 -O-C(=O)-O-(未經取代之C1-4 烷基)；且X4A 可為S。在一些實施例中，X3A 可為
Figure 02_image452
；且X4A 可為O。在其他實施例中，X3A 可為
Figure 02_image454
；且X4A 可為O。在其他實施例中，X3A 可為
Figure 02_image456
；且X4A 可為S。在其他實施例中，X3A 可為
Figure 02_image458
；且X4A 可為S。
對於式(II)而言，在一些實施例中，X1B 可為OH或O- ；且X2B 可為O。在其他實施例中，X1B 可為SH或S- ；且X2B 可為O。在其他實施例中，X1B 可為SH或S- ；且X2B 可為S。
在一些實施例中，X1B 可為O(未經取代之C1-4 烷基)；且X2B 可為O。在其他實施例中，X1B 可為O(未經取代之C1-4 烷基)；且X2B 可為S。在其他實施例中，X1B 可為S(未經取代之C1-4 烷基)；且X2B 可為O。在其他實施例中，X1B 可為S(未經取代之C1-4 烷基)；且X2B 可為S。在一些實施例中，X1B 可為O-CH2 -O-C(=O)-(未經取代之C1-4 烷基)；且X2B 可為O。在其他實施例中，X1B 可為O-CH2 -O-C(=O)-(未經取代之C1-4 烷基)；且X2B 可為S。在其他實施例中，X1B 可為S-CH2 -O-C(=O)-(未經取代之C1-4 烷基)；且X2B 可為O。在其他實施例中，X1B 可為S-CH2 -O-C(=O)-(未經取代之C1-4 烷基)；且X2B 可為S。在一些實施例中，X1B 可為O-CH2 -O-C(=O)-O-(未經取代之C1-4 烷基)；且X2B 可為O。在其他實施例中，X1B 可為O-CH2 -O-C(=O)-O-(未經取代之C1-4 烷基)；且X2B 可為S。在其他實施例中，X1B 可為S-CH2 -O-C(=O)-O-(未經取代之C1-4 烷基)；且X2B 可為O。在其他實施例中，X1B 可為S-CH2 -O-C(=O)-O-(未經取代之C1-4 烷基)；且X2B 可為S。在一些實施例中，X1B 可為
Figure 02_image460
；且X2B 可為O。在其他實施例中，X1B 可為
Figure 02_image462
；且X2B 可為O。在其他實施例中，X1B 可為
Figure 02_image464
；且X2B 可為S。在其他實施例中，X1B 可為
Figure 02_image466
；且X2B 可為S。
在一些實施例中，包括前一段落之彼等實施例，X3B 可為OH或O- ；且X4B 可為O。在其他實施例中，X3B 可為SH或S- ；且X4B 可為O。在其他實施例中，X3B 可為SH或S- ；且X4B 可為S。
在一些實施例中，X3B 可為O(未經取代之C1-4 烷基)；且X4B 可為O。在其他實施例中，X3B 可為O(未經取代之C1-4 烷基)；且X4B 可為S。在其他實施例中，X3B 可為S(未經取代之C1-4 烷基)；且X4B 可為O。在其他實施例中，X3B 可為S(未經取代之C1-4 烷基)；且X4B 可為S。在一些實施例中，X3B 可為O-CH2 -O-C(=O)-(未經取代之C1-4 烷基)；且X4B 可為O。在其他實施例中，X3B 可為O-CH2 -O-C(=O)-(未經取代之C1-4 烷基)；且X4B 可為S。在其他實施例中，X3B 可為S-CH2 -O-C(=O)-(未經取代之C1-4 烷基)；且X4B 可為O。在其他實施例中，X3B 可為S-CH2 -O-C(=O)-(未經取代之C1-4 烷基)；且X4B 可為S。在一些實施例中，X3B 可為O-CH2 -O-C(=O)-O-(未經取代之C1-4 烷基)；且X4B 可為O。在其他實施例中，X3B 可為O-CH2 -O-C(=O)-O-(未經取代之C1-4 烷基)；且X4B 可為S。在其他實施例中，X3B 可為S-CH2 -O-C(=O)-O-(未經取代之C1-4 烷基)；且X4B 可為O。在其他實施例中，X3B 可為S-CH2 -O-C(=O)-O-(未經取代之C1-4 烷基)；且X4B 可為S。在一些實施例中，X3B 可為
Figure 02_image468
；且X4B 可為O。在其他實施例中，X3B 可為
Figure 02_image470
；且X4B 可為O。在其他實施例中，X3B 可為
Figure 02_image472
；且X4B 可為S。在其他實施例中，X3B 可為
Figure 02_image474
；且X4B 可為S。
對於式(III)而言，在一些實施例中，X1C 可為OH或O- ；且X2C 可為O。在其他實施例中，X1C 可為SH或S- ；且X2C 可為O。在其他實施例中，X1C 可為SH或S- ；且X2C 可為S。
在一些實施例中，X1C 可為O(未經取代之C1-4 烷基)；且X2C 可為O。在其他實施例中，X1C 可為O(未經取代之C1-4 烷基)；且X2C 可為S。在其他實施例中，X1C 可為S(未經取代之C1-4 烷基)；且X2C 可為O。在其他實施例中，X1C 可為S(未經取代之C1-4 烷基)；且X2C 可為S。在一些實施例中，X1C 可為O-CH2 -O-C(=O)-(未經取代之C1-4 烷基)；且X2C 可為O。在其他實施例中，X1C 可為O-CH2 -O-C(=O)-(未經取代之C1-4 烷基)；且X2C 可為S。在其他實施例中，X1C 可為S-CH2 -O-C(=O)-(未經取代之C1-4 烷基)；且X2C 可為O。在其他實施例中，X1C 可為S-CH2 -O-C(=O)-(未經取代之C1-4 烷基)；且X2C 可為S。在一些實施例中，X1C 可為O-CH2 -O-C(=O)-O-(未經取代之C1-4 烷基)；且X2C 可為O。在其他實施例中，X1C 可為O-CH2 -O-C(=O)-O-(未經取代之C1-4 烷基)；且X2C 可為S。在其他實施例中，X1C 可為S-CH2 -O-C(=O)-O-(未經取代之C1-4 烷基)；且X2C 可為O。在其他實施例中，X1C 可為S-CH2 -O-C(=O)-O-(未經取代之C1-4 烷基)；且X2C 可為S。在一些實施例中，X1C 可為
Figure 02_image476
；且X2C 可為O。在其他實施例中，X1C 可為
Figure 02_image478
；且X2C 可為O。在其他實施例中，X1C 可為
Figure 02_image480
；且X2C 可為S。在其他實施例中，X1C 可為
Figure 02_image482
；且X2C 可為S。
在一些實施例中，包括前一段落之彼等實施例，X3C 可為OH或O- ；且X4C 可為O。在其他實施例中，X3C 可為SH或S- ；且X4C 可為O。在其他實施例中，X3C 可為SH或S- ；且X4C 可為S。
在一些實施例中，X3C 可為O(未經取代之C1-4 烷基)；且X4C 可為O。在其他實施例中，X3C 可為O(未經取代之C1-4 烷基)；且X4C 可為S。在其他實施例中，X3C 可為S(未經取代之C1-4 烷基)；且X4C 可為O。在其他實施例中，X3C 可為S(未經取代之C1-4 烷基)；且X4C 可為S。在一些實施例中，X3C 可為O-CH2 -O-C(=O)-(未經取代之C1-4 烷基)；且X4C 可為O。在其他實施例中，X3C 可為O-CH2 -O-C(=O)-(未經取代之C1-4 烷基)；且X4C 可為S。在其他實施例中，X3C 可為S-CH2 -O-C(=O)-(未經取代之C1-4 烷基)；且X4C 可為O。在其他實施例中，X3C 可為S-CH2 -O-C(=O)-(未經取代之C1-4 烷基)；且X4C 可為S。在一些實施例中，X3C 可為O-CH2 -O-C(=O)-O-(未經取代之C1-4 烷基)；且X4C 可為O。在其他實施例中，X3C 可為O-CH2 -O-C(=O)-O-(未經取代之C1-4 烷基)；且X4C 可為S。在其他實施例中，X3C 可為S-CH2 -O-C(=O)-O-(未經取代之C1-4 烷基)；且X4C 可為O。在其他實施例中，X3C 可為S-CH2 -O-C(=O)-O-(未經取代之C1-4 烷基)；且X4C 可為S。在一些實施例中，X3C 可為
Figure 02_image484
；且X4C 可為O。在其他實施例中，X3C 可為
Figure 02_image486
；且X4C 可為O。在其他實施例中，X3C 可為
Figure 02_image488
；且X4C 可為S。在其他實施例中，X3C 可為
Figure 02_image490
；且X4C 可為S。
熟習此項技術者理解，每一磷可為手性中心，此取決於X1A 、X3A 、X1B 、X3B 、X1C 、X3C 、X2A 、X4A 、X2B 、X4B 、X2C 及X4C 之選擇。由於在式(I)、(II)及(III)中之每一者上存在兩個含磷部分，故式(I)、(II)及(III)中之每一者可以兩種或四種非鏡像異構物形式存在。在一些實施例中，式(I)之一個磷可呈R 構形。在一些實施例中，式(I)之一個磷可呈S 構形。在一些實施例中，式(I)之每一磷可呈S 構形。在其他實施例中，式(I)之每一磷可呈R 構形。在其他實施例中，式(I)之一個磷可呈S 構形且式(I)之另一磷可呈R 構形。在一些實施例中，式(II)之一個磷可呈R 構形。在一些實施例中，式(II)之一個磷可呈S 構形。在一些實施例中，式(II)之每一磷可呈S 構形。在其他實施例中，式(II)之每一磷可呈R 構形。在其他實施例中，式(II)之一個磷可呈S 構形且式(II)之另一磷可呈R 構形。在一些實施例中，式(III)之一個磷可呈R 構形。在一些實施例中，式(III)之一個磷可呈S 構形。在一些實施例中，式(III)之每一磷可呈S 構形。在其他實施例中，式(III)之每一磷可呈R 構形。在其他實施例中，式(III)之一個磷可呈S 構形且式(III)之另一磷可呈R 構形。
在一些實施例中，式(I)、(II)及/或(III)之化合物之鹽可選自鈉鹽、鋰鹽、三乙基銨鹽及銨鹽。在一些實施例中，式(I)、(II)及/或(III)之化合物之鹽可為式(I)、(II)及/或(III)之化合物之鈉鹽。
式(I)、(II)及(III)之化合物之實例包括以下：
Figure 02_image492
Figure 02_image494
Figure 02_image496
Figure 02_image498
Figure 02_image500
Figure 02_image502
Figure 02_image504
Figure 02_image506
Figure 02_image508
Figure 02_image510
Figure 02_image512
Figure 02_image514
及
Figure 02_image516
，或上述中任一者之醫藥上可接受之鹽。
熟習此項技術者理解，本文所闡述之某些化合物可為鏡像異構物或非鏡像異構物。下文提供一些非鏡像異構物之實例：
Figure 02_image518
Figure 02_image520
Figure 02_image522
Figure 02_image524
Figure 02_image526
Figure 02_image528
Figure 02_image530
Figure 02_image532
Figure 02_image534
Figure 02_image536
Figure 02_image538
Figure 02_image540
Figure 02_image542
Figure 02_image544
及
Figure 02_image546
，或上述中任一者之醫藥上可接受之鹽。
熟習此項技術者理解，式(I)、(II)及(III)之化合物及其醫藥上可接受之鹽之每一核苷酸繪示為天然核苷酸。顯示每一核苷酸為天然核苷酸之實例係以下：
Figure 02_image548
及
Figure 02_image550
，其中第二結構係與第一結構相同之化合物，且第二結構係第一結構順時針旋轉180度。如由第一及第二結構所示，當第一結構之下部核苷酸順時針旋轉180度(在每一結構中以正方形指示)時，此核苷酸係呈如由第二結構所示之天然核苷酸構形。
在一些實施例中，式(I)化合物或其醫藥上可接受之鹽，當環A1A 係
Figure 02_image552
；環A2A 係
Figure 02_image554
；B1A 係腺嘌呤或鳥嘌呤；且B2A 係腺嘌呤或鳥嘌呤時；則X1A 及X3A 中之至少一者係SH或S- ；或則X2A 及X4A 中之至少一者係S (硫)。在一些實施例中，式(II)化合物或其醫藥上可接受之鹽，當環A1B 係
Figure 02_image556
；環A2B 係
Figure 02_image558
；B1B 係腺嘌呤或鳥嘌呤；且B2B 係腺嘌呤或鳥嘌呤時；則X1B 及X3B 中之至少一者係SH或S- ；或則X2B 及X4B 中之至少一者係S (硫)。在一些實施例中，式(III)化合物或其醫藥上可接受之鹽，當環A1C 係
Figure 02_image560
；環A2C 係
Figure 02_image562
；B1C 係腺嘌呤或鳥嘌呤；且B2C 係腺嘌呤或鳥嘌呤時；則X1C 及X3C 中之至少一者係SH或S- ；或則X2C 及X4C 中之至少一者係S (硫)。
在一些實施例中，當環A1A 係
Figure 02_image564
；且環A2A 係
Figure 02_image566
時，則B1A 及B2A 中之至少一者不為腺嘌呤或鳥嘌呤。在一些實施例中，當環A1B 係
Figure 02_image568
；且環A2B 係
Figure 02_image570
時，則B1B 及B2B 中之至少一者不為腺嘌呤或鳥嘌呤。在一些實施例中，當環A1C 係
Figure 02_image572
；且環A2C 係
Figure 02_image574
時，則B1C 及B2C 中之至少一者不為腺嘌呤或鳥嘌呤。在一些實施例中，當環A1A 係
Figure 02_image576
；且環A2A 係
Figure 02_image578
時，則B1A 不為腺嘌呤。在一些實施例中，當環A1A 係
Figure 02_image580
；且環A2A 係
Figure 02_image582
時，則B1A 不為鳥嘌呤。在一些實施例中，當環A1B 係
Figure 02_image584
；且環A2B 係
Figure 02_image586
時，則B1B 不為腺嘌呤。在一些實施例中，當環A1B 係
Figure 02_image588
；且環A2B 係
Figure 02_image590
時，則B1B 不為鳥嘌呤。在一些實施例中，當環A1C 係
Figure 02_image592
；且環A2C 係
Figure 02_image594
時，則B1C 不為腺嘌呤。在一些實施例中，當環A1C 係
Figure 02_image596
；且環A2C 係
Figure 02_image598
時，則B1C 不為鳥嘌呤。
在一些實施例中，環A1A 不能為
Figure 02_image600
。在一些實施例中，環A2A 不能為
Figure 02_image602
。在一些實施例中，環A1B 不能為
Figure 02_image604
。在一些實施例中，環A2B 不能為
Figure 02_image606
。在一些實施例中，環A1C 不能為
Figure 02_image608
。在一些實施例中，環A2C 不能為
Figure 02_image610
。在一些實施例中，環A1A 、環A1B 及/或環A1C 不能為
Figure 02_image612
。在一些實施例中，環A2A 、環A2B 及/或環A2C 不能為
Figure 02_image614
。在一些實施例中，B1A 不能為腺嘌呤或鳥嘌呤。在一些實施例中，B2A 不能為腺嘌呤或鳥嘌呤。在一些實施例中，B1B 不能為腺嘌呤或鳥嘌呤。在一些實施例中，B2B 不能為腺嘌呤或鳥嘌呤。在一些實施例中，B1C 不能為腺嘌呤或鳥嘌呤。在一些實施例中，B2C 不能為腺嘌呤或鳥嘌呤。在一些實施例中，R2A 不能為羥基。在一些實施例中，R4A 不能為羥基。在一些實施例中，R2C 不能為羥基。合成
式(I)、(II)及(III)之化合物及其醫藥上可接受之鹽、以及本文所闡述之彼等可以各種方式來製備。本文顯示並闡述用於製備式(I)、(II)及(III)之化合物及其醫藥上可接受之鹽之一般合成途徑，以及用於合成本文所闡述化合物之起始材料之一些實例。本文所顯示並闡述之途徑僅具有說明性，且並不意欲、且無論如何不應將其解釋為以任何方式限制申請專利範圍之範疇。熟習此項技術者將能夠認識到所揭示合成之修改形式且基於本文揭示內容設計替代途徑；所有此等修改形式及替代途徑均在申請專利範圍之範疇內。方案 1
Figure 02_image616
在方案1中，環A1A 、環A2A 、B1A 、B2A 、X2A 、X4A 、R1A 及R3A 可如本文所闡述，R2A 及R4A 可如本文所闡述或為如本文所闡述之經保護氧(例如OTBS)，且Y可為適宜鹽相對離子。可使用活化劑(例如5-乙基硫基-1H-四唑、四唑及/或二氰基咪唑)於適宜溶劑或溶劑混合物(例如MeCN、CH2 Cl2 、THF、二噁烷及諸如此類)中在範圍為約-10℃至約60℃之溫度下使適宜經取代之亞磷醯胺1與適當核苷2偶合，以產生相應亞磷酸酯化合物。可使此亞磷酸酯化合物與氧化劑(例如碘、過氧化氫、第三丁基過氧化物、(1S)-(+)-(10-樟腦磺醯基)氧氮環丙烷、Beaucage試劑、二氯-二苯基-三氯乙烷(DDTT)、3-胺基-1,2,4-二噻唑-5-硫酮及/或PADS)於適宜溶劑或溶劑混合物(例如CHCl3 、CH2 Cl2 、THF、MeCN、二噁烷及諸如此類)中在範圍為約-10℃至約80℃之溫度下反應，以生成式3化合物。
可使用適宜酸(例如二氯乙酸、乙酸及/或三氟乙酸)於適宜溶劑或溶劑混合物(例如MeCN、CH2 Cl2 、THF及/或二噁烷)中去除式3化合物之DMTr基團，以提供式4化合物。
可使用式4a之試劑及活化劑(例如5-乙基硫基-1H-四唑、四唑及/或二氰基咪唑)於適宜溶劑或溶劑混合物(例如MeCN、CH2 Cl2 、二氯乙烷、THF、二噁烷及諸如此類)中在範圍為約-10℃至約60℃之溫度下使式4化合物環化，以提供相應亞磷酸酯化合物。然後可使亞磷酸酯化合物與氧化劑(例如碘、過氧化氫、第三丁基過氧化物、(1S)-(+)-(10-樟腦磺醯基)氧氮環丙烷、Beaucage試劑、DDTT、3-胺基-1,2,4-二噻唑-5-硫酮及/或PADS)於適宜溶劑或溶劑混合物(例如CHCl3 、CH2 Cl2 、THF、MeCN、二噁烷及諸如此類)中在範圍為約-10℃至約80℃之溫度下反應，以生成式5之環化化合物。
可使用熟習此項技術者已知之條件去除式5化合物之核鹼基及磷酸酯保護基團。例示性條件包括鹼性條件(例如MeNH2 、tBuNH2 、氫氧化銨及諸如此類)，於適宜溶劑或溶劑混合物中在適宜溫度下，以提供式6化合物。適宜溶劑之實例包括EtOH、H2 O、iPrOH及諸如此類，且適宜溫度可在約-10℃至約120℃範圍內。
可使用TBAF、氟化銨、HF.TEA及諸如此類，於適宜溶劑或溶劑混合物(例如吡啶、THF、二噁烷、MeOH及諸如此類)中在範圍為約-10℃至約120℃之溫度下去除式6化合物之任何矽基保護基團，以產生式7化合物。
可使用Amberlyst及/或Dowex樹脂，使式7 化合物之銨或三乙基銨相對離子與鈉或鋰交換，以提供式(I)化合物或其醫藥上可接受之鹽。方案 2
Figure 02_image618
在方案2中，環A1C 、環A2C 、B1C 、B2C 、X2C 、X4C 、R1C 及R3C 可如本文所闡述，R2C 及R4C 可如本文所闡述或為如本文所闡述之經保護氧(例如OTBS)，且Y可為適宜鹽相對離子。可使用活化劑(例如5-乙基硫基-1H-四唑、四唑及/或二氰基咪唑)使經取代之亞磷醯胺1與經取代之核苷2偶合。此反應可於適宜溶劑或溶劑混合物(例如MeCN、CH2 Cl2 、THF、二噁烷及諸如此類)中在範圍為約-10℃至約60℃之適當溫度下進行，以產生相應亞磷酸酯化合物。可使亞磷酸酯化合物與氧化劑(例如碘、過氧化氫、第三丁基過氧化物、(1S)-(+)-(10-樟腦磺醯基)氧氮環丙烷、Beaucage試劑、DDTT、3-胺基-1,2,4-二噻唑-5-硫酮及/或PADS)於適宜溶劑或溶劑混合物(例如CHCl3 、CH2 Cl2 、THF、MeCN、二噁烷及諸如此類)中在適宜溫度下反應，以生成式3化合物。溫度可在約-10℃至約80℃範圍內。
可使用適宜酸(例如二氯乙酸、乙酸及/或三氟乙酸)於適宜溶劑或溶劑混合物中去除式3化合物之DMTr基團，以提供式4之二醇化合物。適宜溶劑之實例包括MeCN、CH2 Cl2 、THF及/或二噁烷。
可使用式4a化合物及適宜活化劑(例如5-乙基硫基-1H-四唑、四唑及/或二氰基咪唑)於適宜溶劑或溶劑混合物(例如MeCN、CH2 Cl2 、二氯乙烷、THF、二噁烷及諸如此類)中在範圍為約-10℃至約60℃之適當溫度下使式4化合物環化，以產生相應亞磷酸酯化合物。可使此亞磷酸酯化合物與氧化劑於適宜選擇溶劑或溶劑混合物(例如CHCl3 、CH2 Cl2 、THF、MeCN、二噁烷及諸如此類)中在適宜溫度下反應，以生成式5化合物。例示性氧化劑包括(但不限於)碘、過氧化氫、第三丁基過氧化物、(1S)-(+)-(10-樟腦磺醯基)氧氮環丙烷、Beaucage試劑、DDTT、3-胺基-1,2,4-二噻唑-5-硫酮及/或PADS，且適宜溫度係在約-10℃至約80℃範圍內。
可使用適當條件於適宜溶劑或溶劑混合物(例如EtOH、H2 O、iPrOH及諸如此類)中在約-10℃至約120℃範圍內之適宜溫度下去除式5化合物上所存在之保護基團，以產生式6化合物。用於去除式5化合物上所存在之任何保護基團之適當條件包括鹼性條件，例如MeNH2 、tBuNH2 、氫氧化銨及諸如此類。
可使用酸性條件(例如TBAF、氟化銨、HF•TEA及諸如此類)，於適宜溶劑或溶劑混合物中在適當溫度下去除式6化合物上所存在之任何矽基保護基團，以產生式7化合物。適宜溶劑之實例包括吡啶、THF、二噁烷、MeOH及諸如此類。溫度可在約-10℃至約120℃範圍內。
可使用適當樹脂(例如Amberlyst或Dowex樹脂)使式7化合物之銨或三乙基銨相對離子交換成鈉或鋰，以提供式(III)化合物或其醫藥上可接受之鹽。方案 3
Figure 02_image620
在方案3中，環A1B 、環A2B 、B1B 、B2B 、X2B 、X4B 、R1B 及R3B 可如本文所闡述，R2B 及R4B 可如本文所闡述或為如本文所闡述之經保護氧(例如OTBS)，且Y可為適宜鹽相對離子。可使用活化劑於適宜溶劑或溶劑混合物中在適當溫度(例如約-10℃至約60℃範圍內之溫度)下使適宜經取代之亞磷醯胺1與適當經取代之核苷2偶合，以產生相應亞磷酸酯化合物。適宜活化劑闡述於本文中，且包括5-乙基硫基-1H-四唑、四唑及/或二氰基咪唑。適宜溶劑之實例包括MeCN、CH2 Cl2 、THF、二噁烷及諸如此類。可使相應亞磷酸酯化合物與氧化劑(例如碘、過氧化氫、第三丁基過氧化物、(1S)-(+)-(10-樟腦磺醯基)氧氮環丙烷、Beaucage試劑、DDTT、3-胺基-1,2,4-二噻唑-5-硫酮及/或PADS)於適宜溶劑或溶劑混合物(例如CHCl3 、CH2 Cl2 、THF、MeCN、二噁烷及諸如此類)中在約-10℃至約80℃範圍內之適宜溫度下反應，以生成式3化合物。
可使用適宜酸性條件(例如二氯乙酸、乙酸及/或三氟乙酸)於適宜溶劑或溶劑混合物中去除式3化合物上所存在之保護基團，以提供式4化合物。例示性溶劑包括MeCN、CH2 Cl2 、THF及/或二噁烷。
可使用式4a化合物及適當活化劑於適宜選擇溶劑或溶劑混合物(例如MeCN、CH2 Cl2 、二氯乙烷、THF、二噁烷及諸如此類)中在適當溫度下使式4化合物環化，以產生相應亞磷酸酯化合物。適當溫度之實例係在約-10℃至約60℃範圍內。適宜活化劑闡述於本文中且包括5-乙基硫基-1H-四唑、四唑及二氰基咪唑。可使相應亞磷酸酯化合物與氧化劑(例如碘、過氧化氫、第三丁基過氧化物、(1S)-(+)-(10-樟腦磺醯基)氧氮環丙烷、Beaucage試劑、DDTT、3-胺基-1,2,4-二噻唑-5-硫酮及/或PADS)於適宜溶劑或溶劑混合物中在適宜溫度(例如約-10℃至約80℃範圍內之溫度)下反應，以提供式5化合物。適宜溶劑闡述於本文中且包括CHCl3 、CH2 Cl2 、THF、MeCN、二噁烷及諸如此類。
可使用適當條件使式5化合物去保護，以產生式6化合物。適宜條件之實例包括鹼性條件(例如MeNH2 、tBuNH2 、氫氧化銨及諸如此類)，於適宜溶劑或溶劑混合物(例如EtOH、H2 O、iPrOH及諸如此類)中在適當溫度(例如約-10℃至約120℃範圍內之溫度)下。
可使用適當條件使式6化合物去保護，以產生式7化合物。例示性條件闡述於本文中且包括TBAF、氟化銨、HF•TEA及諸如此類，於適宜溶劑或溶劑混合物(例如吡啶、THF、二噁烷、MeOH及諸如此類)中在約-10℃至約120℃範圍內之適當溫度下。
可使用適當樹脂(例如Amberlyst或Dowex樹脂)使式7化合物之銨或三乙基銨相對離子交換成鈉或鋰，以提供式(II)化合物或其醫藥上可接受之鹽。醫藥組合物
本文所闡述之一些實施例係關於醫藥組合物，其可包括有效量之本文所闡述化合物(例如如本文所闡述之式(I)、(II)及/或(III)之化合物或上述中任一者之醫藥上可接受之鹽)及醫藥上可接受之載劑、賦形劑或其組合。本文所闡述之醫藥組合物適於人類及/或獸醫學應用。
如本文所使用，「載劑」係指促進化合物併入至細胞或組織中之化合物。舉例而言(但不限於)，二甲基亞碸(DMSO)係促進許多有機化合物攝取至個體之細胞或組織中之常用載劑。
如本文所使用，「稀釋劑」係指醫藥組合物中無藥理活性但可為醫藥所需或期望之成分。舉例而言，稀釋劑可用於增加因質量太小而無法製造及/或投與之強效藥物之容積。其亦可為用於溶解欲藉由注射、攝取或吸入投與之藥物之液體。業內稀釋劑之常見形式係緩衝水溶液，例如但不限於模擬人類血液組成之磷酸鹽緩衝鹽水。
如本文所使用，「賦形劑」係指添加至醫藥組合物中以為組合物提供(但不限於)容積、一致性、穩定性、結合能力、潤滑、崩解能力等之惰性物質。「稀釋劑」係一類賦形劑。
可以多種形式調配醫藥組合物，例如用於經口投與之錠劑、膠囊或溶液；用於經直腸或經陰道投與之栓劑；用於可注射投與之無菌溶液或懸浮液。可注射劑可以習用形式作為液體溶液或懸浮液、在注射之前適用於液體中之溶液或懸浮液之固體形式或作為乳液來製備。
適當調配物取決於所選投與途徑。調配及投與本文所闡述化合物之技術為熟習此項技術者所已知。業內存在多種投與化合物之技術，包括(但不限於)經口、經直腸、經局部、經氣溶膠、經注射及非經腸遞送，包括肌內、皮下、靜脈內、髓內注射、鞘內、直接心室內、腹膜內、鼻內、腫瘤內及眼內注射。醫藥組合物通常將針對具體預期投與途徑來調整。在一些實施例中，藉由皮下投與方法提供本文所闡述之化合物(例如如本文所闡述之式(I)、(II)及/或(III)之化合物或上述中任一者之醫藥上可接受之鹽)。在一些實施例中，藉由腫瘤內投與方法提供本文所闡述之化合物(例如如本文所闡述之式(I)、(II)及/或(III)之化合物或上述中任一者之醫藥上可接受之鹽)。
亦可以局部方式而非全身方式投與化合物(例如，經由將化合物直接注射至受感染區域中)，通常以儲積物或持續釋放調配物形式投與。此外，可以靶向藥物遞送系統、例如以經組織特異性抗體包衣之脂質體投與化合物。脂質體可靶向至器官且由器官選擇性地吸收。
本文所揭示之醫藥組合物可以其本身已知之方式製造，例如藉助習用混合、溶解、造粒、製糖衣錠、研細、乳化、囊封、包埋或製錠製程。如本文所闡述，醫藥組合物中所使用之化合物可作為與醫藥上相容之相對離子之鹽提供。使用方法
本文所闡述之一些實施例係關於治療調節STING有益之個體之疾病或病狀之方法，其可包括向該個體投與有效量之如本文所闡述之化合物或其醫藥上可接受之鹽(例如式(I)、(II)及/或(III)之化合物或上述中任一者之醫藥上可接受之鹽)或包括有效量之如本文所闡述之化合物或其醫藥上可接受之鹽之醫藥組合物。本文所闡述之其他實施例係關於如本文所闡述之化合物或其醫藥上可接受之鹽或包括有效量之如本文所闡述之化合物或其醫藥上可接受之鹽之醫藥組合物，其用於治療調節STING有益之個體之疾病或病狀。
本文所揭示之一些實施例係關於治療調節STING有益之個體之發炎性病狀、傳染性疾病、病毒性疾病及/或癌症之方法，其可包括向該個體投與有效量之如本文所闡述之化合物或其醫藥上可接受之鹽或包括有效量之如本文所闡述之化合物或其醫藥上可接受之鹽之醫藥組合物(例如式(I)、(II)及/或(III)之化合物或上述中任一者之醫藥上可接受之鹽)。本文所闡述之其他實施例係關於如本文所闡述之化合物或其醫藥上可接受之鹽或包括有效量之如本文所闡述之化合物或其醫藥上可接受之鹽之醫藥組合物，其用於治療調節STING有益之發炎性病狀、傳染性疾病、病毒性疾病及/或癌症。
本文所揭示之一些實施例係關於經由使STING活化而誘導個體之免疫反應之方法，其可包括向該個體投與有效量之如本文所闡述之化合物或其醫藥上可接受之鹽或包括有效量之如本文所闡述之化合物或其醫藥上可接受之鹽之醫藥組合物(例如式(I)、(II)及/或(III)之化合物或上述中任一者之醫藥上可接受之鹽)。本文所闡述之其他實施例係關於如本文所闡述之化合物或其醫藥上可接受之鹽或包括有效量之如本文所闡述之化合物或其醫藥上可接受之鹽之醫藥組合物，其用於經由使STING活化而誘導免疫反應。
本文所揭示之一些實施例係關於誘導個體之STING依賴性I型干擾素產生之方法，其可包括向該個體投與有效量之如本文所闡述之化合物或其醫藥上可接受之鹽或包括有效量之如本文所闡述之化合物或其醫藥上可接受之鹽之醫藥組合物(例如式(I)、(II)及/或(III)之化合物或上述中任一者之醫藥上可接受之鹽)。本文所闡述之其他實施例係關於如本文所闡述之化合物或其醫藥上可接受之鹽或包括有效量之如本文所闡述之化合物或其醫藥上可接受之鹽之醫藥組合物，其用於誘導STING依賴性I型干擾素產生。
本文所揭示之一些實施例係關於使細胞中之STING受體活化之方法，其可包括使該細胞接觸有效量之如本文所闡述之化合物或其醫藥上可接受之鹽或包括有效量之如本文所闡述之化合物或其醫藥上可接受之鹽之醫藥組合物(例如式(I)、(II)及/或(III)之化合物或上述中任一者之醫藥上可接受之鹽)。本文所闡述之其他實施例係關於如本文所闡述之化合物或其醫藥上可接受之鹽或包括有效量之如本文所闡述之化合物或其醫藥上可接受之鹽之醫藥組合物，其用於使STING受體活化。
在一些實施例中，如本文所闡述之化合物或其醫藥上可接受之鹽(例如式(I)、(II)及/或(III)之化合物或上述中任一者之醫藥上可接受之鹽)可用於治療癌症。癌症之實例包括(但不限於)肝細胞癌、肺癌及結腸直腸癌。在一些實施例中，如本文所闡述之化合物或其醫藥上可接受之鹽可用於阻抑/抑制腫瘤生長，且藉此治療癌症，例如結腸癌。
如本文所使用，術語「治療(treat、treating、treatment)」、「治療性」及「療法」不必意指疾病或病狀完全治癒或消失。疾病或病狀在任一程度上之任何不期望徵象或症狀之任何緩和可視為治療及/或療法。此外，治療可包括可使個體之身體狀況或外觀之整體感覺惡化的行為。
如本文所使用，「個體」係指作為治療、觀察或實驗之對象之動物。「動物」包括冷血及溫血脊椎動物及無脊椎動物，例如魚類、貝類、爬行動物及尤其哺乳動物。「哺乳動物」包括(但不限於)小鼠、大鼠、兔、豚鼠、狗、貓、綿羊、山羊、牛、馬、靈長類動物(例如猴、黑猩猩及猿)以及尤其人類。在一些實施例中，個體係人類。
術語「有效量」用於指示活性化合物或醫藥劑引發所指示生物或醫學反應之量。舉例而言，化合物之有效量可為緩和或改善疾病之症狀或延長所治療個體之存活所需之量。此反應可發生在組織、系統、動物或人類中，且包括緩和所治療疾病之徵象或症狀。熟習此項技術者鑒於本文所提供之揭示內容完全有能力確定有效量。本文所揭示之化合物作為劑量所需之有效量將取決於投與途徑、所治療動物(包括人類)之類型及所考慮具體動物之身體特徵。劑量可經調整以達成期望效應，但應取決於諸如以下等因素：重量、飲食、並行用藥及熟習醫學技術者將認識到之其他因素。
在一些實施例中，如本文所闡述之化合物或其醫藥上可接受之鹽之有效量係有效達成持續病毒學反應(例如在治療完成後12個月持續之病毒反應)之量。
劑量可在寬範圍內變化，此取決於期望效應及治療適應症。或者，劑量可基於患者之表面積來計算，如熟習此項技術者所理解。儘管確切劑量將基於藥物相互作用來確定，但在大多數情形下，可使一些藥物之劑量一般化。用於成年人類患者之日劑量方案可為例如介於0.01 mg與3000 mg每一活性成分之間、較佳介於1 mg與700 mg之間、例如5 mg至200 mg之口服劑量。劑量可為單一劑量或在一或多天之時程中根據個體需要給出之一系列兩個或更多個劑量。
在已針對至少一些病狀確立化合物之人類劑量之情況中，可使用彼等相同劑量，或介於已確立人類劑量之約0.1%與500%之間、更佳介於約25%與250%之間的劑量。倘若未確立人類劑量，如對於新發現之醫藥組合物之情形，可根據ED50 或ID50 值或源自活體外或活體內研究之其他適當值(如由動物中之毒性研究及效能研究所鑒定)來推斷適宜人類劑量。
在投與醫藥上可接受之鹽之情形下，劑量可以游離鹼計算。如熟習此項技術者將理解，在某些情形下，可能需要投與超過或甚至遠遠超過上述較佳劑量範圍之量之本文所揭示化合物，以有效且積極地治療尤其嚴重之疾病或感染。
可個別地調整劑量量及間隔以提供足以維持調節效應或最小有效濃度(MEC)之血漿活性部分含量。MEC將針對每一化合物而變化，但可自活體外數據估計。達成MEC所需之劑量將取決於個體特徵及投與途徑。然而，可使用HPLC分析或生物分析來確定血漿濃度。亦可使用MEC值來確定劑量間隔。應使用在10%至90%、較佳介於30%至90%且最佳介於50%至90%時間內維持血漿含量高於MEC之方案投與組合物。在局部投與或選擇性攝取之情形下，藥物之有效局部濃度可能與血漿濃度無關。
應注意，主治醫師應知曉由於毒性或器官功能障礙如何及何時停止、中斷或調整投與。反之，若臨床反應不夠(排除毒性)，則主治醫師亦應知曉調整治療至更高程度。在所關注病症之管控中所投與劑量之量級將隨欲治療病狀之嚴重程度及投與途徑而變。舉例而言，病狀之嚴重程度可部分地藉由標準預後評估方法來評估。此外，劑量及(可能)劑量頻率亦將根據個體患者之年齡、體重及反應而變化。可在獸醫學中使用與上文所論述者相當之程式。
可使用已知方法評估本文所揭示化合物之效能及毒性。舉例而言，可藉由測定對細胞系(例如哺乳動物、包括人類細胞系)之活體外毒性來確立特定化合物或共有某些化學部分之化合物子集之毒物學。此等研究之結果通常可預測在動物(例如哺乳動物)或更具體而言人類中之毒性。或者，可使用已知方法來測定動物模型(例如小鼠、大鼠、兔或猴)中之特定化合物之毒性。可使用若干公認方法(例如活體外方法、動物模型或人類臨床試驗)確立特定化合物之效能。當選擇模型來測定效能時，熟習此項技術者可由現有技術指導來選擇適當模型、劑量、投與途徑及/或方案。組合療法
在一些實施例中，如本文所闡述之化合物或其醫藥上可接受之鹽(例如式(I)、(II)及/或(III)之化合物或上述中任一者之醫藥上可接受之鹽)可與一或多種額外藥劑組合使用，以用於治療調節STING有益之疾病或病狀、誘導免疫反應、誘導STING依賴性I型干擾素產生及/或使細胞中之STING受體活化。舉例而言，如本文所闡述之化合物或其醫藥上可接受之鹽(例如式(I)、(II)及/或(III)之化合物或上述中任一者之醫藥上可接受之鹽)可與一或多種額外藥劑組合使用，以用於治療及/或抑制癌細胞之複製。作為實例，如本文所闡述之化合物或其醫藥上可接受之鹽(例如式(I)、(II)及/或(III)之化合物或上述中任一者之醫藥上可接受之鹽)可與一或多種額外藥劑組合使用，以用於治療發炎性病狀、傳染性疾病及/或病毒性疾病。例示性額外藥劑包括(但不限於)檢查點抑制劑，例如靶向選自以下各項之受體之抑制劑：PD-1 (例如派姆單抗(Pembrolizumab)、尼沃魯單抗(Nivolumab)、斯帕珠單抗(Spartalizumab)、塞米匹單抗(Cemiplimab)、卡瑞珠單抗(Camrelizumab)、信迪利單抗(Sintilimab)、替雷珠單抗(Tislelizumab)、特瑞普利單抗(Toripalimab)、BCD-100、巴替利單抗(BALSTILIMAB)、塞曲利單抗(Cetrelimab)及多塔利單抗(dostarlimab))、PD-L1 (例如阿維魯單抗(Avelumab)、阿替珠單抗(Atezolizumab)、德瓦魯單抗(Durvalumab)、KN035及GS-4224)、CTLA-4 (例如伊匹單抗(Ipilimumab)、澤弗利單抗(ZALIFRELIMAB)及曲美目單抗(Tremelimumab))、OX40 (例如PF-04518600及INCAGN1949)、4-1BB (例如烏瑞魯單抗(Urelumab)及烏托魯單抗(Utomilumab))、TIM-3 (例如INCAGN2390及考伯利單抗(Cobolimab))、LAG-3 (例如INCAGN2385及疝托珠單抗(Xentuzumab))、ILT-4 (例如MK-4830)、CEACAM6 (例如BAY 1834942)及TIGIT。
在一些實施例中，如本文所闡述之化合物或其醫藥上可接受之鹽可與一或多種額外藥劑一起於單一醫藥組合物中投與。在一些實施例中，化合物或其醫藥上可接受之鹽可與一或多種額外藥劑以兩種或更多種單獨醫藥組合物形式一起投與。此外，如本文所闡述之化合物或其醫藥上可接受之鹽與一或多種額外藥劑之投與次序可變化。 實例
以下實例中進一步詳細揭示其他實施例，其不欲以任何方式限制申請專利範圍之範疇。 實例1a 中間體15及15a
Figure 02_image622
在0℃下向13 (7.0 g, 25.26 mmol)於無水吡啶(50 mL)中之溶液逐滴添加苯甲醯氯(17.4 ml , 151.56 mmol)。將混合物在N2 氣氛下在室溫(rt)下攪拌2 h。藉由添加MeOH (5 mL)使反應淬滅。用EtOAc稀釋混合物，且用NaHCO3 洗滌。使有機層經無水硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮，以得到呈黃色油狀物之具有若干個苯甲醯基之化合物。在0℃下向於吡啶(30 mL)中之此混合物中滴加NaOH (2 M，於MeOH: H2 O= 4:1中)，直至pH = 10-11為止。將混合物在0℃下再攪拌1 h。利用4 N HCl將反應之pH調整至7以使反應淬滅。藉由真空去除溶劑，且藉由MPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 120 g，移動相：於水-0%至20% ACN中之0.05% NH4 HCO3 ，流速：50 mL/min H2 O)將所得粗製材料純化為溶析液。將含有期望化合物之流份合併且在減壓下濃縮，以得到呈白色固體之13A (6.6 g, 17.32 mmol, 68.6%)。ESI-MS: m/z 382.1 [M+H]+ 。
在0℃下向13A (6.6 g, 17.32 mmol)於吡啶(50 mL)中之溶液添加DMTr-Cl (6.5 g, 19.05 mmol)。將混合物在室溫下在N2 氣氛下攪拌30 min。藉由添加MeOH (5 mL)使反應淬滅。將混合物在減壓下濃縮以得到粗產物。藉由矽膠管柱(DCM/MeOH = 200:1-50:1)純化殘餘物，以得到呈白色固體之14 (7.5 g, 10.98 mmol, 63.4%)。ESI-LCMS: m/z 684.5 [M+H]+ 。
向14 (2.8 g, 4.10 mmol)於無水DMF (20 mL)中之溶液添加咪唑(1.12 g, 16.4 mmol)。在0℃下滴加TBS-Cl (0.76 g, 4.92 mmol)於DMF (8 mL)中之溶液。將混合物在室溫下在N2 氣氛下攪拌16 h。藉由添加MeOH (3 mL)使反應淬滅。用EA稀釋混合物且用NaHCO3 溶液洗滌。使合併之有機層經Na2 SO4 乾燥且在減壓下濃縮以得到粗產物。藉由矽膠管柱(PE:EA, 10:1-1:1)純化殘餘物，以得到呈白色固體之15a (0.6 g, 0.75 mmol, 18.3%)及15 (1.0 g, 1.25 mmol, 30.5%)。
15a ：1 H NMR (400 MHz, DMSO): δ 11.21 (s, 1H), 8.70 (s, 1H), 8.66 (s, 1H), 8.05 (d,J = 7.4 Hz, 2H), 7.66-7.62 (m, 1H), 7.56-7.53 (m, 2H), 7.42 (d,J = 7.4 Hz, 2H), 7.31-7.26 (m, 5H), 7.23-7.21 (m, 1H), 6.86 (d,J = 8.6 Hz, 4H), 4.91 (d,J = 5.5 Hz, 1H), 4.77 (d,J = 6.2 Hz, 1H), 4.73 (d,J = 3.6 Hz, 1H), 4.30-4.26 (m, 1H), 3.71 (d,J = 0.7 Hz, 6H), 3.50 (d,J = 9.9 Hz, 1H), 2.89-2.85 (m, 1H), 1.67-1.64 (m, 1H), 1.29 (t,J = 4.4 Hz, 1H), 1.17 (t,J = 7.1 Hz, 1H), 0.78 (s, 9H), -0.05 (d,J = 21.2 Hz, 6H)。ESI-LCMS: m/z 798.6 [M+H]+ 。
15 ：1 H NMR (400 MHz, DMSO): δ 11.21 (s, 1H), 8.70 (s, 1H), 8.67 (s, 1H), 8.06 (d,J = 7.4 Hz, 2H), 7.67-7.63 (m, 1H), 7.58-7.54 (m, 2H), 7.46(d,J = 7.6 Hz, 2H), 7.30-7.33 (m, 5H), 7.24-7.20 (m, 1H), 6.89 (dd,J = 7.2, 1.6 Hz, 4H), 4.83-4.78 (m, 1H), 4.37 (d,J = 8.0 Hz, 1H), 3.71 (d,J = 3.8 Hz, 6H), 2.75 (d,J = 10.6 Hz, 1H), 1.64-1.61 (m, 1H), 1.42 (t,J = 4.3 Hz, 1H), 1.18 (t,J = 7.1 Hz, 1H), 0.87 (s, 9H), 0.62-0.65 (m, 1H),  0.03(d,J = 15.8 Hz, 6H)。ESI-LCMS: m/z 798.6 [M+H]+ 。 實例1b 中間體11
Figure 02_image624
在4℃下在N2 下向1 (32.4 g, 75.95 mmol)、1A (38.20 g, 113.92 mmol)及PPh3 (49.80 g, 189.86 mmol)於THF (320 mL)中之溶液添加DIAD (38.39 g, 189.86 mmol, 37.27 mL)。將混合物在70℃下攪拌15 h。去除溶劑且藉由矽膠(PE:EA=20:1~8:1)對產物進行純化，以得到呈白色油狀物之粗製物2 (56.0 g, 75.27 mmol, 99.1%)。ESI-LCMS: m/z 744 [M+H]+ 。
向2 (56 g, 75.27 mmol)於CF3 COOH混合物(200 mL)中之溶液添加THF (100 mL)及水(100 mL)。將混合物在50℃下攪拌。攪拌15 h後，將溶劑去除。藉由MPLC (0.05% NH4 HCO3 水溶液，ACN =90:10)純化殘餘物，以得到呈固體之粗製物3 (16.4 g, 61.82 mmol, 82.1%)。ESI-LCMS: m/z 266 [M+H]+ 。
在0℃下在N2 下向3 (16.4 g, 94.24 mmol)於吡啶(150 mL)中之溶液添加BzCl (79.49 g, 565.47 mmol, 50 mL)。將混合物攪拌1 h。利用水使反應淬滅。用EtOAc萃取混合物且用鹽水洗滌。將溶劑去除。將殘餘物溶解於吡啶中，且在低於5℃下添加2 N NaOH (水溶液)直至pH=8~9為止。將混合物攪拌10 min，且然後添加水。用EA萃取混合物，用鹽水洗滌且經Na2 SO4 乾燥。將溶劑去除。藉由矽膠(DCM:MeOH=50:1~10:1)純化殘餘物，以得到呈黃色固體之4 (8.4 g, 27.07 mmol, 28.7%)。ESI-LCMS: m/z 370 [M+H]+ 。
在N2 下在5℃下向4 (8.4 g, 22.74 mmol)及2,2-二甲氧基丙烷(5.21 g, 50.03 mmol)於無水丙酮(200 mL)中之溶液添加濃硫酸(3.92 g, 39.93 mmol)。將混合物在室溫下攪拌2 h。利用飽和NaHCO3 使反應淬滅。用DCM萃取混合物，用鹽水洗滌且經Na2 SO4 乾燥。將溶劑去除。藉由矽膠(DCM:MeOH=40:1~20:1)純化殘餘物，以得到呈固體之5 (5.4 g, 13.19 mmol, 58.0%)。ESI-LCMS: m/z 410 [M+H]+ 。
在N2 下在室溫下向5 (5.4 g, 14.17 mmol)、TEA (4.30 g, 42.50 mmol, 5.93 mL)及DMAP (34.61 mg, 283.32 umol)於DCM (100 mL)中之溶液添加BzCl (2.99 g, 21.25 mmol)。將混合物在室溫下攪拌2 h。利用氫氧化銨使反應淬滅。用DCM萃取混合物且經Na2 SO4 乾燥。將溶劑去除。藉由矽膠(DCM:MeOH, 100:1~70:1)純化殘餘物，以得到呈固體之6 (6.2 g, 12.07 mmol, 92.5%)。ESI-LCMS: m/z 514 [M+H]+ 。
將6 (6.2 g, 12.07 mmol)於THF (150 mL)及1 N HCl (150 ml)中之溶液在室溫下攪拌2 h。利用飽和NaHCO3 使反應淬滅。用DCM萃取混合物且經Na2 SO4 乾燥。將溶劑去除，且藉由矽膠(DCM:MeOH, 100:1~40:1)純化殘餘物，以得到呈白色固體之7 (4.5 g, 9.50 mmol, 78.9%)。ESI-LCMS: m/z 474 [M+H]+ 。
在室溫下在N2 下向7 (4.3 g, 9.08 mmol)及咪唑(1.85 g, 27.25 mmol)於DMF (30 mL)中之溶液添加TBSCl (1.64 g, 10.90 mmol)。將混合物在室溫下攪拌過夜。利用水使反應淬滅，用EA萃取且經Na2 SO4 乾燥。將溶劑去除，且藉由MPLC (ACN:0.05%NH4 HCO3 水溶液=75:25)純化殘餘物，以得到呈固體之8 (2.0 g, 6.98 mmol, 37.78%)。ESI-LCMS: m/z 588 [M+H]+ 。
將8 (2.0 g, 3.40 mmol)、AgNO3 (578.05 mg, 3.40 mmol)、DMTrCl (13.84 g, 40.83 mmol)及2,4,6-三甲基吡啶(6.19 g, 51.04 mmol)於1,2-二氯乙烷(30 mL)中之溶液在80℃下在N2 下攪拌16 h。利用水使反應淬滅，用EA萃取且經Na2 SO4 乾燥。將溶劑去除，且藉由矽膠(PE:EA=20:1~2:1)純化殘餘物，以得到呈固體之9 (2.5 g, 3.03 mmol, 82.1%)。ESI-LCMS: m/z 890 [M+H]+ 。
在0℃下在N2 下向9 (2.5 g, 3.26 mmol)於吡啶(100 mL)中之溶液添加2 N NaOH。將混合物攪拌10 min。利用水使反應淬滅，用EA萃取，經Na2 SO4 乾燥。將溶劑去除，且藉由矽膠(PE:EA, 10:1~1:1)純化殘餘物，以得到呈固體之10 (2.0 g, 2.93 mmol, 89.5%)。ESI-LCMS: m/z 786 [M+H]+ 。
在0℃下在N2 下向10 (2.0 g, 2.93 mmol)及DIPEA (1.13 g, 8.78 mmol, 1.53 mL)於無水DCM (20 mL)中之溶液添加2-氰基乙基N,N-二異丙基氯亞磷醯胺(1.04 g, 4.39 mmol)。將混合物攪拌1 h。利用飽和NaHCO3 (水溶液)使反應淬滅，用DCM萃取且經Na2 SO4 乾燥。將溶劑去除，且藉由MPLC (0.05% NH4 HCO3 :ACN=0:100)純化殘餘物，以得到呈固體之11 (2.1 g, 2.13 mmol, 83.8%)。1 H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ): δ = 11.13 (s, 1H), 8.70-8.67 (d,J = 12.0 Hz, 1H), 8.60-8.58 (d,J = 8.0 Hz, 1H), 8.07-8.05 (d,J = 8.0 Hz, 2H), 7.65-7.52 (m, 5H), 7.42-7.35 (m, 4H), 7.33-7.27 (m, 2H), 7.24-7.19 (m, 1H), 6.91-6.83 (m, 4H), 5.48-5.30 (m, 1H), 4.63-4.36 (m, 1H),3.74-3.71 (m, 6H), 3.70-3.62 (m, 3H), 3.53-3.46 (m, 2H), 3.44-3.37 (m, 1H), 3.33-3.20 (m, 1H), 2.75-2.71 (m, 2H), 2.40-2.33 (m 1H), 2.10-2.03 (m, 1H), 2.00-1.82 (m, 1H), 1.12-1.10 (d,J = 8.0 Hz, 6H), 1.05-0.96 (m, 6H), 0.70-0.68 (d,J = 8.0 Hz, 9H), -0.24~-0.26 (d,J = 8.0 Hz, 3H), -0.60~-0.65 (d,J = 20.0 Hz, 3H)。31 P-NMR: 146.94、146.77。ESI-LCMS: m/z 986 [M+H]+ 。 實例1c 中間體單體A
Figure 02_image626
使A1 (200.0 g, 0.98 mol)於THF (2 L)中之溶液冰冷卻至0℃且在此溫度下攪拌15 min。緩慢添加NaH (1.5 eq., 1.47 mol, 33.8 g)，且將混合物在0℃下攪拌30 min。緩慢逐滴添加BnBr (1.2 eq., 1.176 mol, 201.1 g)，且將混合物在0℃下攪拌1.5 h直至1 耗盡為止。。使混合物升溫至室溫，且利用冰冷卻之水(300 mL)使反應淬滅。將混合物劇烈攪拌10 min，且經矽藻土餅過濾沈澱物。用EA (2 × 1000 mL)萃取分離之水層。將合併之有機層用水(500 mL)及鹽水(500 mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥且在真空中蒸發以得到粗產物。藉由管柱層析利用於PE中之0%至15% EtOAc梯度純化粗產物，以得到呈白色固體之A2 (140 g, 49%)。ESI-MS: m/z 295.3 [M+H]+ 。
在室溫下向A2 (140 g, 0.476 mol)於80% AcOH (1500 mL)中之溶液，且將混合物加熱至115℃。在N2 氣氛下將混合物在115℃下攪拌2 h直至A2 耗盡為止。將溶劑在真空中在50℃下蒸發且與甲苯共蒸發(2×)以得到粗產物，藉由管柱層析利用於DCM中之0%至5% CH3 OH梯度對其進行純化，以得到呈白色油狀物之A3 (105 g, 87%)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.40-7.31 (m, 5H), 6.34 (d,J = 4.4 Hz, 1H), 5.01 (d,J = 2.9 Hz, 1H), 4.89 (s, 1H), 4.52 (d,J = 7.3 Hz, 2H), 3.94 (td,J = 6.8, 3.3 Hz, 1H), 3.86 (d,J = 4.0 Hz, 1H), 3.65 (dd,J = 7.1, 4.5 Hz, 1H), 3.58 (dd,J = 10.5, 3.4 Hz, 1H), 3.53-3.47 (m, 1H), 3.29 (s, 3H)。
在室溫下向A3 (105 g, 0.413 mol)於DCM (1000 mL)中之溶液添加K2 CO3 (3.0 eq., 1.239 mol, 171.2 g)及I2 (3.0 eq., 1.239 mol, 314.5 g)。將混合物在室溫下攪拌12 h直至藉由TLC檢測到主要期望產物為止。利用飽和Na2 SO3 水溶液使反應淬滅直至深褐色完全消失為止。用EA (2 × 500 mL)萃取混合物。將合併之有機層用水(1 × 500 mL)及鹽水(1 × 500 mL)洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥，在真空中蒸發以得到粗產物。藉由管柱層析利用於PE中之0%至20% EtOAc梯度純化粗產物，以得到呈無色油狀物之A4 (80 g, 77%)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 7.35 (m, 5H), 5.91 (d,J = 7.9 Hz, 1H), 4.57 (dt,J = 8.1, 4.2 Hz, 2H), 4.51 (d,J = 6.0 Hz, 2H), 3.93 (dd,J = 5.6, 0.6 Hz, 1H), 3.70 (d,J = 3.5 Hz, 2H), 3.40 (s, 3H)。
使A4 (80 g, 0.317 mol)於超無水之1,4-二噁烷(800 mL)中之溶液冰冷卻至0℃且在此溫度下攪拌30 min。將2,2,2-三氯乙醯亞胺酸苄基酯(1.5 eq., 0.476 mol, 119.3 g)緩慢逐滴添加至溶液。30 min後，在30 min內緩慢逐滴添加CF3 SO3 H (0.1 eq., 0.0317 mol, 4.75 g)。將混合物在0℃下攪拌1 h直至A4 耗盡且藉由TLC檢測到主要期望產物A5 為止。用飽和NaHCO3 水溶液使反應淬滅，且然後用EA (3 × 300 mL)萃取。將合併之有機層用水(2 × 500 mL)及鹽水(1 × 500 mL)洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥，在真空中蒸發以得到粗產物。藉由管柱層析利用於PE中之0%至25% EtOAc梯度純化粗產物，以得到呈淺黃色油狀物之A5 (60 g, 55%)。ESI-MS: m/z 343.2 [M+H]+ 。
於圓底燒瓶(2 L)中在Ar下將化合物A5 (60 g, 0.175 mol)溶解於無水甲苯(600 mL)中。添加二碘甲烷(2.4 eq., 0.42 mol, 112.5 g)，且使溶液達到-78℃以攪拌30 min。經2.5 h逐滴添加甲基鋰(1.5 M, 1.8 eq., 201 mL)。使溫度緩慢上升且維持在-65℃與-70℃之間。2 h後，利用氯化銨使反應淬滅且然後升溫至室溫。利用於水中之DCM萃取產物。使有機溶液經硫酸鎂乾燥且蒸發至乾燥。利用於PE中之0%至40% EtOAc梯度使殘餘物經受管柱層析，以得到呈淺黃色油狀物之A6 (62 g, 73%)，其不經任何純化即直接用於下一步驟。
於圓底燒瓶(1000 mL)中在Ar下將化合物A6 (62 g, 0.128 mol)溶解於無水DMF (500 mL)中。將溶液置於冰浴中且攪拌10 min，之後添加硫代乙酸鉀(1.5 eq., 0.192 mol, 21.92 g)。1 h後將反應自冰浴移除且在室溫下攪拌1 h。然後將混合物置於冰浴中，且然後添加飽和NaHCO3 (500 mL)及EtOAc (600 mL)。將混合物攪拌若干分鐘。用EtOAc (4 × 200 mL)萃取混合物，之後用水(4 × 300 mL)萃取。使混合物經無水Na2 SO4 乾燥且蒸發至乾燥。藉由管柱層析利用於PE中之0%至30% EtOAc梯度純化殘餘物，以得到呈淺黃色油狀物之A7 (32 g, 58%)。產物為不可分離之異構物混合物，其不經任何純化即直接用於下一步驟。
於圓底燒瓶(1000 mL)中在Ar下將化合物A7 (32 g, 74 mmol)溶解於無水THF (300 mL)中。將溶液置於冰浴中且攪拌30 min。添加LiAlH4 (1.0 M於Et2 O中，0.28 eq., 20.7 mmol, 20.7 mL)。將混合物攪拌2 h，且然後緩慢升溫至室溫。在如經由TLC所監測起始材料耗盡時利用水使反應淬滅。用EtOAc (300 mL)稀釋混合物且經矽藻土過濾。將材料用EtOAc (2 × 300 mL)萃取，且用水(3 × 300 mL)及鹽水(1 × 300 mL)洗滌。使產物經無水Na2 SO4 乾燥且然後蒸發至乾燥。利用管柱層析以於PE中之0%至30% EtOAc梯度純化產物，以得到呈黃色油狀物之粗製物A8 (19.6 g, 68%)，其然後直接用於下一步驟中。
將化合物A8 (19.6 g, 50.2 mmol)溶解於CH3 OH (150 mL)中，之後添加N-甲苯磺醯基氰基酯A8-1 (1.5 eq., 78.0 mmol, 23.09 g)。將混合物短暫地置於音波發生器中，之後於冰浴中攪拌5 min。經5 min逐滴添加嗎啉(2.5 eq., 0.126 mol, 11.0 g)，且於冰浴中將混合物攪拌1 h。然後使混合物升至室溫且攪拌1 h。將黃色溶液蒸發至乾燥，短暫地置於高真空下，且直接加載至管柱上以於PE中之0%至40% EtOAc梯度進行二氧化矽層析，以得到呈黃色油狀物之A9 (13 g, 50%)，其然後直接用於下一步驟中。
在Ar下將化合物A9 (13 g, 25.3 mmol)置於火焰乾燥之圓底燒瓶(250 mL)中且溶解於無水DCM (100 mL)中。添加三乙基矽烷(6.0 eq., 0.152 mol, 17.7 g)，且使燒瓶達到-78℃並攪拌10 min。添加BF3 •OEt2 (3.0 eq., 75.9 mmol, 10.8 g)。經90 min使混合物緩慢達到室溫，自澄清變為黃色溶液。在室溫下2 h後，添加TEA (5.0 eq.)。使混合物在EtOAc (100 mL)與水(100 mL)之間分配，且然後用EtOAc (3 × 100 mL)萃取。使有機層經無水Na2 SO4 乾燥且蒸發至乾燥。藉由管柱層析利用於PE中之0%至20% EtOAc梯度來純化殘餘物，直至溶析出呈黃色油狀物之A10 (6.8 g, 54%)。ESI-MS: m/z 499.2 [M+H]+ 。
於圓底燒瓶(100 mL)中在Ar下將化合物A10 (6.8 g, 13.65 mmol)溶解於無水CH3 CN (60 mL)中。添加乙氧基羰基異硫氰酸酯(2.5 eq., 34.13 mmol, 4.47 g)，且將混合物在室溫下攪拌12 h。添加六甲基二矽氮烷(10 eq., 0.137 mmol, 22.11 g)，之後添加EDC-HCl (2.0 eq., 27.3 mmol, 5.23 g)。將混合物攪拌72 h，且然後蒸發至乾燥並在EtOAc (50 mL)與水(50 mL)之間分配。用HCl水溶液(1 M, 2 × 100 mL)、隨後用飽和NaHCO3 水溶液(100 mL)有機萃取物。使有機萃取物經無水Na2 SO4 乾燥且蒸發至乾燥。藉由管柱層析利用於PE中之0%至30% EtOAc梯度純化殘餘物，以得到呈白色固體之A11 (3.1 g, 43%)。ESI-MS: m/z 567.2 [M+H]+ 。
於圓底燒瓶(50 mL)中在Ar下將化合物A11 (3.1 g, 5.47 mmol)溶解於MeOH (30 mL)中，且添加NaOH水溶液(0.25 M, 2 eq., 10.94 mmol, 43.8 mL)。將混合物加熱至75℃並攪拌4 h。將粗製材料蒸發至乾燥且在EtOAc (50 mL)與水(30 mL)之間分配。使有機層經無水Na2 SO4 乾燥，且然後蒸發至乾燥。藉由管柱層析利用於PE中之0%至80% EtOAc梯度純化殘餘物，以得到呈白色固體之A12 (2.3 g, 85%)。ESI-MS: m/z 495.3 [M+H]+ 。
於圓底燒瓶(250 mL)中在Ar下將化合物A12 (2.3 g, 4.65 mmol)溶解於超無水之DCM (100 mL)中。在室溫下添加1,2-乙二硫醇(25.0 eq., 116.25 mmol, 10.95 g)，之後逐滴添加BF3 •OEt2 (20.0 eq., 93 mmol, 13.2 g)。將溶液攪拌96 h，且然後蒸發至接近乾燥。藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 120g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-0%至60% ACN，流速：30 ml /min)純化粗製材料，以得到呈白色固體之A13 (310 mg, 21%)。ESI-MS: m/z 315.1 [M+H]+ 。
於圓底燒瓶(25 mL)中在Ar下將化合物A13 (310 mg, 0.99 mmol)溶解於無水吡啶(10 mL)中。使混合物冰冷卻至0℃且然後攪拌10 min。緩慢逐滴添加異丁醯氯(6.0 eq., 5.94 mmol, 0.633 g)，且然後攪拌40 min。利用水(10 mL)及CH3 OH (5 mL)使反應淬滅，且用EtOAc (4 × 20 mL)萃取混合物。將合併之有機層用水(2 × 30 mL)及鹽水(50 mL)洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且蒸發至乾燥。於圓底燒瓶(50 mL)中將殘餘物溶解於吡啶(15 mL)中且冰冷卻至0℃。將混合物攪拌10 min。緩慢逐滴添加2 N NaOH (CH3 OH:H2 O=4:1, 10 mL)，且然後將混合物攪拌30 min。在0℃下利用0.5 N HCl使反應中和。用EA (4 × 30 mL)萃取混合物。將合併之有機層用水(2 × 40 mL)及鹽水(50 mL)洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且蒸發至乾燥。藉由快速管柱層析利用於DCM中之0%至20% CH3 OH梯度純化殘餘物，以得到呈褐色固體之粗製物A14 (320 mg, 84%)，其不經任何進一步純化即直接用於下一步驟。ESI-MS: m/z 385.2 [M+H]+ 。
於圓底燒瓶(25 mL)中在Ar下將化合物A14 (320 mg, 0.83 mmol)溶解於無水吡啶(10 mL)中。添加4,4'-二甲氧基三苯甲基氯(1.5 eq., 1.245 mmol, 0.421 g)，且將混合物攪拌1 h。利用水(3 mL)及CH3 OH (3 mL)使反應淬滅，且然後用EtOAc (4 × 25 mL)萃取。將合併之有機層用水(2 × 30 mL)及鹽水(50 mL)洗滌，經無水Na2 SO4 乾燥且蒸發至乾燥。藉由管柱層析利用於PE中之0%至100% EA梯度純化殘餘物，以得到呈白色固體之單體 A 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ 12.19 (s, 1H), 11.64 (s, 1H), 7.44 (d,J = 7.6 Hz, 2H), 7.39 - 7.14 (m, 7H), 6.91 (d,J = 8.9 Hz, 4H), 5.41 (dd,J = 16.4, 4.3 Hz, 2H), 4.47 - 4.31 (m, 1H), 4.13 (dd,J = 8.2, 5.3 Hz, 1H), 3.75 (s, 6H), 3.71 (dd,J = 5.9, 4.8 Hz, 1H), 3.29 (s, 3H), 3.18 (dd,J = 10.4, 5.1 Hz, 1H), 2.87 - 2.77 (m, 1H), 1.13 (d,J = 6.8 Hz, 6H)。ESI-MS: m/z 687.2 [M+H]+ 。 實例1d 中間體單體B
Figure 02_image628
在0℃下向B1 (1.44 g, 3.42 mmol)及咪唑(632.6 mg, 9.29 mmol)於DMF (10 mL)中之溶液緩慢添加TIDPSCl (1.29 g, 4.09 mmol)。將混合物在0℃下攪拌2 h直至如藉由TLC及LC-MS所檢測B1 耗盡為止。將混合物用DCM (200 mL)稀釋且用NaHCO3 溶液(2 × 100 mL)洗滌。將分離之有機層用水(100 mL)及鹽水(100 mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥且在真空中蒸發以得到粗產物。藉由矽膠管柱(PE:EA=2:1)純化粗產物，以得到呈黃色油狀物之B2 (1.9 g, 3.02 mmol, 81.1%)。ESI-MS: m/z 630.2 [M+H]+ 。
將B2 (1.2 g, 1.91 mmol)、1,1'-硫代羰基二咪唑(1.70 g, 9.53 mmol)及DMAP (116.37 mg, 952.51 umol)於DCM (12 mL)中之溶液在室溫下攪拌12 h，直至如藉由TLC及LC-MS所檢測B2 耗盡為止。將溶劑在真空中蒸發以得到粗產物，藉由矽膠管柱(PE:EA = 5:1)對其進行純化，以得到呈黃色固體之B3 (1.1 g, 1.49 mmol, 78.1%)。ESI-MS: m/z 740.2 [M+H]+ 。
將AIBN (159.76 mg, 972.91 umol)及B3 (1.44 g, 1.95 mmol)溶解於甲苯(12 mL)中，且在N2 鼓泡下將溶液在室溫下攪拌5 min。然後使混合物升溫至110℃。添加三丁基氫化錫(1.69 g, 5.84 mmol)，且將混合物在110℃下攪拌3 h直至如藉由TLC及LC-MS所檢測B3 耗盡為止。將混合物用DCM (100 mL)稀釋，用鹽水(2 × 80 mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥且在真空中蒸發以得到粗產物。藉由矽膠管柱(PE:EA=9:1)純化粗產物，以得到呈黃色油狀物之B4 (0.6 g, 977.34 umol, 62.7%)。ESI-MS: m/z 614.2 [M+H]+ 。
將化合物B4 (600 mg, 977.34 umol)溶解於3 HF•TEA (1.58 mmol, 0.5 mL)及THF (2 mL)之混合物溶液中。將混合物在室溫下攪拌4 h直至如藉由TLC及LC-MS所檢測B4 耗盡為止。藉由用N2 鼓泡去除THF以得到粗產物。藉由矽膠管柱(DCM:MeOH=20:1)純化粗產物，以得到呈黃色固體之B5 (280 mg, 753.88 umol, 47.8%)。ESI-MS: m/z 372.1 [M+H]+ 。
在0℃下向B5 (260 mg, 700.04 umol)於吡啶(2 mL)中之溶液添加DMTrCl (284 mg, 840.05 umol)。將混合物在室溫下攪拌3 h直至如藉由TLC及LC-MS所檢測B5 耗盡為止。將混合物用EtOAc (100 mL)稀釋，用飽和NaHCO3 水溶液(2 × 50 mL)及鹽水(80 mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥且在真空中蒸發以得到粗產物。藉由矽膠管柱(PE: EA = 1:1)純化粗產物，以得到呈白色固體之單體 B (300 mg, 445.25 umol, 63.6%)。1 H NMR (400 MHz, DMSO_d 6 ) δ 8.77 (s, 1H), 8.31 (s, 2H), 8.04 (s, 1H), 7.65-7.61 (t,J = 14.0 Hz, 1H), 7.56-7.52 (t,J = 15.1 Hz, 2H), 7.45 (d,J = 7.8 Hz, 2H), 7.34-7.30 (t,J = 7.1 Hz, 6H), 7.25-7.21 (t,J = 7.2 Hz, 1H), 6.9 (d,J = 8.8 Hz, 4H), 5.24 (d,J = 4.0 Hz, 1H), 4.23 (s, 1H), 3.97 (s, 1H), 3.74 (s, 6H), 3.20-3.07 (m, 2H), 2.36-2.32 (m, 1H), 2.11-2.04 (m, 1H)。ESI-MS: m/z 674.2 [M+H]+ 。 實例2 化合物1-1及1-2
Figure 02_image630
將化合物1a (870 mg g, 1.0 mmol)及15 (800 mg, 1.0 mmol)溶解於無水CH3 CN (30.0 mL)中。將4Å分子篩粉末(300 mg, 1 gr/100 mL)添加至混合物。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。將此混合物在室溫下攪拌10 min後，在室溫下添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(5.4 mmol, 12 mL)。攪拌1 h後，將混合物過濾且用無水CH3 CN洗滌。向此混合物添加0.02 M I2 (THF:Py:H2 O, 8:1:1, v/v/v)直至色彩不消退。在室溫下攪拌20-30 min後，利用Na2 SO3 (水溶液)使反應淬滅直至變色為止。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1×)及飽和NaCl水溶液(1×)洗滌。用EtOAc (1×)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至100% ACN，流速：35 mL/min)純化所得粗製材料，以提供呈白色泡沫狀物之2a (1.4 g, 80.2%)。ESI-MS: m/z 1582.8 [M+H]+ 。
將化合物2a (1.4 g, 0.88 mmol)溶解於DCA/DCM (3%, v/v, 11.0 mL)中。將三乙基矽烷(4.4 mL)立即添加至混合物。在室溫下攪拌30 min後，用EtOAc稀釋混合物，且然後用飽和NaHCO3 水溶液中和。分離各層，且用飽和NaCl水溶液(1×)洗滌有機相。將水相合併且然後用EtOAc (3×)反萃取。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至80% ACN，流速：35 mL/min)純化所得粗製殘餘物，以獲得呈白色泡沫狀物之3a (580 mg, 0.59 mmol, 78.6%)。31 P-NMR (162 MHz, DMSO-d 6 ): -1.14, -1.17。ESI-MS: m/z 978.5 [M+H]+ 。
將溶解於無水ACN (30.0 mL)中之化合物3a (580 mg, 590.8 μmol)、於乙腈中之0.45 M四唑(3.76mmol, 8.4 mL)及4 Å分子篩粉末(300 mg, 1 gr/100 mL)合併。將所得混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌20 min後，經25 min至30 min添加於CH3 CN (15.0 mL)中之4a (303 mg, 0.94 mmol)。攪拌2 h後，將混合物過濾且用無水CH3 CN洗滌。向混合物添加0.02 M碘(THF:Py:H2 O, 8:1:1, v/v/v)直至色彩不消退。在室溫下攪拌20-30 min後，利用飽和Na2 SO3 水溶液使反應淬滅。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1×)及飽和NaCl水溶液(1×)洗滌。用EtOAc (1×)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至60% ACN，流速：35 mL/min)純化所得粗製材料，以提供呈白色泡沫狀物之5a (320 mg, 290.3 μmol, 42.8%)。ESI-MS: m/z 1093.5 [M+H]+ 。
利用MeNH2 於EtOH中之溶液(4 mL, 33%)處理化合物5a (320 mg, 290.3 μmol)。在40℃下攪拌2 h後，將混合物蒸發至乾燥。藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-0%至30% ACN，流速：35 mL/min)純化所得粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之6a (160 mg, 196.8 μmol, 76.3%)。ESI-LMS: m/z 813.6 [M+H]+ 。
將6a (160 mg, 196.8 μmol)及3HF• TEA (2.0 mL)之溶液在40℃下攪拌12 h。在0℃下將混合物滴加至TEA (2 mL)於三乙基碳酸氫銨緩衝液(12 ml)中之溶液。將混合物在室溫下攪拌30 min，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 -0%至10% ACN，流速：20 mL/min)純化粗製混合物，以獲得呈白色泡沫狀物之化合物1-1 NH4 鹽(30 mg, 40.9 μmol, 20.8%)及化合物1-2 NH4 鹽(50 mg, 68.3 μmol, 34.7%)。
將Amberlite IR-120 (Na型) (15 mL)添加至管柱中且用去離子水(3 × 15 mL)洗滌。將化合物1-1 NH4 鹽溶解於去離子水中(30 mg於5 mL中)。將所得溶液添加至管柱頂部，且用去離子水溶析。如藉由TLC (UV)所檢測，化合物係在早期流份中溶析出。將產物凍乾，以得到呈白色泡沫狀物之1-1 (22 mg, 31.5 μmol, 77.1%)。31 P NMR (162 MHz, D2 O): -0.54, -2.95。ESI-MS: m/z 699.4 [M+H]+ 。
將化合物1-2 NH4 鹽溶解於去離子水中(50 mg於7 mL中)。將所得溶液添加至管柱頂部且用去離子水溶析。如藉由TLC (UV)所檢測，化合物係在早期流份中溶析出。將產物凍乾，以得到呈白色泡沫狀物之1-2 (44 mg, 63.1 μmol, 92.3%)。31 P NMR (162 MHz, D2 O): 19.16, -1.57。ESI-MS: m/z 699.4 [M+H]+ 。 實例3 化合物1-3
Figure 02_image632
將化合物1b (870 mg, 1.0 mmol)及15a (720 mg, 0.9 mmol)溶解於無水CH3 CN (30.0 mL)中，且添加4Å分子篩粉末(300 mg, 1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌10 min後，在室溫下添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(5.4 mmol, 12 mL)。攪拌1 h後，將混合物過濾，且用無水CH3 CN洗滌。添加0.02 M I2 (THF:Py:H2 O, 8:1:1, v/v/v)直至色彩不消退。在室溫下攪拌20-30 min後，利用Na2 SO3 使反應淬滅(水溶液，直至變色為止)。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1×)及飽和NaCl水溶液(1×)洗滌。用EtOAc (1×)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至100% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之2b (1.0 g, 70.2%)。ESI-MS: m/z 1582.8 [M+H]+ 。
將化合物2b (1.0 g, 0.63 mmol)溶解於DCA/DCM (3%, v/v, 11.0 mL)中，且立即添加三乙基矽烷(4.4 mL)。在室溫下攪拌30 min後，用EtOAc稀釋混合物，且然後用飽和NaHCO3 水溶液中和。分離各層，且用飽和NaCl水溶液(1×)洗滌有機相。將水相合併且然後用EtOAc (3×)反萃取。將合併之有機相蒸發至乾燥。藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至80% ACN，流速：35 mL/min)純化所得粗製殘餘物，以獲得呈白色泡沫狀物之3b (460 mg, 0.47 mmol, 74.6%)。31 P-NMR (162 MHz, DMSO-d 6 ): -2.70, -2.74。ESI-MS: m/z 978.5 [M+H]+ 。
將化合物3b (460 mg, 470.8 μmol)溶解於無水ACN (30.0 mL)中，於CH3 CN中之0.45 M四唑(3.76mmol, 8.4 mL)及4Å分子篩粉末(300 mg, 1 gr/100 mL)。將所得異質混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌20 min後，經25 min至30 min添加於CH3 CN (15.0 mL)中之4a (303 mg, 0.94mmol)。攪拌2 h後，將混合物過濾，且用無水CH3 CN洗滌。添加0.02 M碘(THF:Py:H2 O, 8:1:1, v/v/v)直至色彩不消退。在室溫下攪拌20-30 min後，利用飽和Na2 SO3 水溶液使反應淬滅。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1×)及飽和NaCl水溶液(1×)洗滌。用EtOAc (1×)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至60% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之4b (220 mg, 201.3 μmol, 42.8%)。ESI-MS: m/z 1093.5 [M+H]+ 。
利用MeNH2 於EtOH中之溶液(4 mL, 33%)處理化合物4b (220 mg, 201.5 μmol)。在40℃下攪拌2 h後，將混合物蒸發至乾燥。藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-0%至30% ACN，流速：25 mL/min)純化粗製材料，以提供呈白色泡沫狀物之5b (120 mg, 147.6 μmol, 73.3%)。ESI-LMS: m/z 813.6 [M+H]+ 。
將5b (120 mg, 147.6 μmol)及3HF• TEA (2.0 mL)之溶液在40℃下攪拌2 h。在0℃下將混合物滴入TEA (2 mL)於三乙基碳酸氫銨緩衝液(12 mL)中之溶液中。將混合物在室溫下攪拌30 min。藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 -0%至10% ACN，流速：20 mL/min)純化該混合物，以獲得呈白色泡沫狀物之NH4 鹽產物(60 mg, 85.9 μmol, 58.2%)。將15.0 mL體積之Amberlite IR-120 (Na型)添加至管柱中且用去離子水(3 × 15 mL)洗滌。然後將NH4 鹽產物(60 mg)溶解於去離子水中(60 mg於8 mL中)。將混合物添加至管柱頂部，且用去離子水溶析。如藉由TLC (UV)所檢測，化合物係在早期流份中溶析出。將產物凍乾以獲得呈白色泡沫狀物之化合物1-3 (39 mg, 52.5 μmol, 61.2%)。31 P NMR (162 MHz, D2 O): -0.57, -1.43。ESI-MS: m/z 699.4 [M+H]+ 。 實例4 化合物1-4
Figure 02_image634
將單體 C (720 mg, 0.82 mmol)及15 (600 mg, 0.75 mmol)溶解於無水CH3 CN (18.0 mL)中，且添加4Å分子篩粉末(1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌10 min後，在室溫下添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(4.51 mmol, 10 mL)。攪拌1 h後，將混合物過濾，且用無水CH3 CN洗滌。添加0.02 M I2 (THF:Py:H2 O, 8:1:1, v/v/v)直至色彩不消退。在室溫下攪拌20-30 min後，利用Na2 SO3 使反應淬滅(水溶液，直至變色為止)。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1×)及飽和NaCl水溶液(1×)洗滌。用EtOAc (1×)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至100% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之1c (1.1 g, 96.2%)。ESI-MS: m/z 1582.8 [M+H]+ 。
將化合物1c (1.1 g, 0.69 mmol)溶解於DCA/DCM (3%, v/v, 19.2 mL)中，且立即添加三乙基矽烷(13.2 mL)。在室溫下攪拌30 min後，用EtOAc稀釋混合物，且然後用飽和NaHCO3 水溶液中和。分離各層，且用飽和NaCl水溶液(1×)洗滌有機相。將水相合併且用EtOAc (3×)反萃取。將合併之有機相蒸發至乾燥。藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至80% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製殘餘物，以獲得呈白色泡沫狀物之2c (550 mg, 0.56 mmol, 77.6%)。ESI-MS: m/z 978.5 [M+H]+ 。
溶解於無水CH3 CN (30.0 mL)中之化合物2c (500 mg, 562.9 μmol)、於CH3 CN中之0.45 M四唑(4.09mmol, 9.09 mL)及4Å分子篩粉末(300 mg, 1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌20 min後，經30 min至40 min添加於CH3 CN (10.0 mL)中之4a (308 mg, 1.02mmol)。攪拌2 h後，將混合物過濾且用無水CH3 CN洗滌。添加0.02 M I2 (THF:Py:H2 O, 8:1:1, v/v/v)直至色彩不消退。在室溫下攪拌20-30 min後，利用飽和Na2 SO3 水溶液使反應淬滅(直至變色為止)。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1×)及飽和NaCl水溶液(1×)洗滌。用EtOAc (1×)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至60% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之3c (208 mg, 190.4 μmol, 33.8%)。ESI-MS: m/z 1093.5 [M+H]+ 。
利用MeNH2 於EtOH中之溶液(10 mL, 33%)處理化合物3c (200 mg, 183.1 μmol)。在40℃下攪拌3 h後，將混合物蒸發至乾燥。藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-0%至30% ACN，流速：25 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之4c (115 mg, 141.8 μmol, 81.5%)。ESI-LMS: m/z 812.6 [M+H]+ 。
在40℃下將3HF•TEA (1.5 mL)添加至4c (100 mg, 123.3 μmol)於DMSO (3 mL)中之混合物溶液達8 h。在0℃下將混合物滴入TEA (2 mL)於三乙基碳酸氫銨緩衝液(12 ml)中之溶液中。將混合物在室溫下攪拌30 min，且然後藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 -0%至10% ACN，流速：20 mL/min)純化，以獲得呈白色泡沫狀物之NH4 鹽產物(60 mg, 80.9 μmol, 65.6%)。將一定體積之Amberlite IR-120 (Na型，15.0 mL)添加至管柱中且用去離子水(3 × 15 mL)洗滌。將NH4 鹽產物(60 mg)溶解於去離子水中(60 mg於8 mL中)，且添加至管柱頂部。用去離子水對管柱進行溶析。如藉由TLC (UV)所檢測，化合物係在早期流份中溶析出。將產物凍乾，以得到呈白色泡沫狀物之化合物1-4 (46 mg, 62.1 μmol, 76.6%)。31 P NMR (162 MHz, D2O): -0.46, -2.92。ESI-MS: m/z 698.4 [M+H]+ 。 實例5 單體D
Figure 02_image636
向1d (4.2 g, 18.9 mmol)及2d (6.66 g, 18.9 mmol)於無水MeNO2 (200 mL)中之懸浮液添加4 A MS (4.0 g，在使用之前在600℃下乾燥2 h)。使溶液冷卻至0℃且在此溫度下攪拌15 min。在0℃下經30 min將SnCl4 (39.7 mL, 39.7 mmol, 2.1 eq.，1.0 M於DCM中)逐滴添加至溶液。將混合物加熱至65℃且在此溫度下攪拌2 h。將化合物2d (6.66 g, 18.9 mmol)添加至混合物。在相同溫度下將混合物攪拌過夜。在冷卻至室溫後，將混合物傾倒至飽和NaHCO3 水溶液(300 mL)中且用CH2 Cl2 (150 mL)稀釋。將混合物劇烈攪拌1 h，且經矽藻土餅過濾沈澱物。用CH2 Cl2 (4 × 100 mL)萃取分離之水層。使合併之有機層經Na2 SO4 乾燥且蒸發以得到粗產物。
藉由管柱層析利用CH2 Cl2 :MeOH = 100:1純化殘餘物以得到粗產物。藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 120 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-0%至70% ACN，流速：25 mL/min)將粗產物再純化為溶析液。將含有期望化合物之流份在真空中蒸發，以得到呈淺黃色固體之3d (3.3 g, 34%)。ESI-MS: m/z 515.3 [M+H]+ 。
利用MeNH2 於EtOH中之溶液(45 mL, 33%)處理化合物3d (3.3 g, 6.42 mmol)。在室溫下攪拌2 h後，將混合物蒸發至乾燥。藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 120 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-0%至40% ACN，流速：25 mL/min)純化粗製材料。將含有期望化合物之流份合併且凍乾，以得到呈淺黃色固體之4d (1.65 g, 5.27 mmol, 82.1%)。ESI-MS: m/z 314.1 [M+H]+ 。
在室溫下向4d (1.65 g, 5.27 mmol)於無水DMF (50 mL)中之溶液添加N,N-二甲基甲醯胺二甲基縮醛(1.56 g, 13 mmol, 2.5 eq.)，且將混合物在此溫度下攪拌過夜。使所有揮發性物質蒸發，且使油性殘餘物與DMF (2 × 20 mL)共蒸發，以得到粗製固體5d (1.9 g, 5.16 mmol, 97.9%)，其不經任何純化即直接用於下一步驟。ESI-MS: m/z 369.1 [M+H]+ 。
在室溫下向5d (1.9 g，5.16 mmol，粗製物)於無水吡啶(30 mL)中之溶液添加DMTrCl (2.27 g, 6.71 mmol, 1.3 eq.)。將混合物在此溫度下攪拌1.5 h直至4d 耗盡為止。利用MeOH/H2 O (10 mL/30 mL)使反應淬滅且用EtOAc (4 × 40 mL)萃取。將合併之有機層用水、鹽水洗滌，經無水乾燥且在真空中蒸發以得到粗產物。藉由管柱層析利用PE:EtOAc = 2:1純化殘餘物，以得到呈淺黃色固體之單體 D (2.4 g, 3.58 mmol, 69.4%)。ESI-MS: m/z 671.4 [M+H]+ 實例6 化合物1-5
Figure 02_image638
將化合物1e (1.15 g, 1.31 mmol)及單體 D (800 mg, 1.19 mmol)溶解於無水CH3 CN (40.0 mL)中，且添加4Å分子篩粉末(400 mg, 1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌10 min後，在室溫下添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(7.14 mmol, 15.9 mL)。攪拌1 h後，將混合物過濾，且用無水CH3 CN洗滌。添加0.02 M I2 (THF:Py:H2 O, 8:1:1,v /v /v )直至色彩不消退。在室溫下攪拌20-30 min後，利用Na2 SO3 使反應淬滅(水溶液，直至變色為止)。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1×)及飽和NaCl水溶液(1×)洗滌。用EtOAc (1×)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥。藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至100% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之2e (1.55 g, 89.2%)。ESI-MS: m/z 1461.6 [M+H]+ 。
將化合物2e (1.55 g, 1.06 mmol)溶解於DCA/DCM (3%, v/v, 19.0 mL)中，且立即添加三乙基矽烷(8.0 mL)。在室溫下攪拌30 min後，用EtOAc稀釋混合物，且用飽和NaHCO3 水溶液中和。分離各層，且用飽和NaCl水溶液(1×)洗滌有機相。將水相合併且用EtOAc (3×)反萃取。將合併之有機相蒸發至乾燥。藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至80% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製殘餘物，以獲得呈白色泡沫狀物之3e (730 mg, 0.85 mmol, 80.4%)。31 P NMR (162 MHz, DMSO-d 6 ) δ -2.62, -2.68。19 F NMR (376 MHz, D2 O) δ -201.82, -202.22。ESI-MS: m/z 857.4 [M+H]+ 。
將化合物3e (730 mg, 0.85 mmol)溶解於無水CH3 CN (60.0 mL)中，於CH3 CN中之0.45 M四唑(6.8 mmol, 15 mL)及4Å分子篩粉末(600 mg, 1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌20 min後，經25 min至30 min添加於CH3 CN (20.0 mL)中之4a (512.2 mg, 1.7 mmol)。攪拌2 h後，將混合物過濾且用無水CH3 CN洗滌。添加0.02 M碘(THF:Py:H2 O, 8:1:1,v /v /v )直至色彩不消退。在室溫下攪拌20-30 min後，利用飽和Na2 SO3 水溶液使反應淬滅(直至變色為止)。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1×)及飽和NaCl水溶液(1×)洗滌。用EtOAc (1×)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至60% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之4e (190 mg, 0.196 mmol, 23.1%)。ESI-MS: m/z 972.2 [M+H]+ 。
利用MeNH2 於EtOH中之溶液(15 mL, 33%)處理化合物4e (190 mg, 0.196 mmol)。在40℃下攪拌2 h後，將混合物蒸發至乾燥。藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-0%至30% ACN，流速：25 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之NH4 鹽產物(80 mg, 0.113 mmol, 57.8%)。ESI-LMS: m/z 707.1 [M+H]+ 。
將一定體積之Amberlite IR-120 (Na型，15.0 mL)添加至管柱中且用去離子水(3 × 15 mL)洗滌。將NH4 鹽產物(80 mg)溶解於去離子水中(80 mg於10 mL中)，且添加至管柱頂部。用去離子水對管柱進行溶析。如藉由TLC (UV)所檢測，化合物係在早期流份中溶析出。將產物凍乾，以得到呈白色泡沫狀物之化合物1-5 (65 mg, 0.092 mmol, 81.3%)。31 P NMR (162 MHz, DMSO-d 6 ) δ -1.59, -3.04。19 F NMR (376 MHz, D2 O) δ -202.57。ESI-MS: m/z 707.1 [M+H]+ 。 實例7 化合物1-6a及1-6b
Figure 02_image640
將化合物15 (1.1 g, 1.38 mmol)溶解於無水CH3 CN (44.0 mL)中，且添加單體 C (1.3 g, 1.51 mmol)及4Å分子篩粉末(440 mg, 1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌10 min後，在室溫下添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(8.27 mmol, 3.3 mL)。攪拌1 h後，將混合物過濾且用無水CH3 CN洗滌。將吡啶(436 mg, 5.52 mmol)及5-胺基-3H-1,2,4-二噻唑-3-硫酮(414 mg, 2.76 mmol)添加至混合物。在室溫下攪拌20-30 min後，利用Na2 SO3 使反應淬滅(水溶液，直至變色為止)。然後用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1 × 50 mL)及飽和NaCl水溶液(1 × 50 mL)洗滌。用EtOAc (1 × 50 mL)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-60%至100% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製材料，以得到呈白色泡沫狀物之1f (1.9 g, 1.19 mmol, 86.21%)。ESI-MS: m/z 1598.7 [M+H]+ 。
將化合物1f (1.9 g, 1.19 mmol)溶解於DCA/DCM (3%, v/v, 50.0 mL)中。將三乙基矽烷(10.0 mL)添加至混合物。在室溫下攪拌30 min後，利用吡啶使混合物中和且然後蒸發至乾燥。藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至80% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製殘餘物，以得到呈白色泡沫狀物之2f (985 mg, 990.85 umol, 83.38%)。ESI-MS: m/z 994.4 [M+H]+ 。
將化合物2f (500 mg, 503.02 umol)溶解於無水CH3 CN (40.0 mL)中，且添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(4.02mmol, 8.9 mL)及4 Å分子篩粉末(500 mg, 1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌20 min後，經25 min至30 min添加於CH3 CN (5.0 mL)中之4a (304 mg, 1.00 mmol)。攪拌2 h後，將混合物過濾出，且然後用無水CH3 CN洗滌。將吡啶(159 mg, 2.01mmol)及5-胺基-3H-1,2,4-二噻唑-3-硫酮(151 mg, 2.76mmol)添加至混合物。在室溫下攪拌20-30 min後，利用飽和Na2 SO3 水溶液使反應淬滅(直至變色為止)，且然後用EtOAc稀釋。分離各層，且將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1 × 50 mL)及飽和NaCl水溶液(1 × 50 mL)洗滌。用EtOAc (1 × 50 mL)反萃取合併之水相，且然後蒸發至乾燥。藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至60% ACN，流速：25 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之3f (205 mg, 182.19 umol, 36.18%)。ESI-MS: m/z 1125.4 [M+H]+ 。
利用MeNH2 於EtOH中之溶液(15 mL, 33%)處理化合物3f (205 mg, 182.19 umol)。在40℃下攪拌2 h後，將混合物蒸發至乾燥。藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35μm 100A 20g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-0%至30% ACN，流速：20 mL/min)純化粗製材料，以得到呈白色泡沫狀物之4f (102 mg, 120.73umol, 66.26%)。ESI-MS: m/z 845.3 [M+H]+ 。
將化合物4f (182 mg, 169.64 umol)及3HF• TEA (1.0 mL)於THF (2.0 mL)中在40℃下攪拌6 h。在0℃下將混合物滴入TEA (3 mL)於三乙基碳酸氫銨緩衝液(18 mL)中之溶液中。將混合物在室溫下攪拌30 min，且然後藉由反相製備型HPLC (管柱：XBridge 30×100 mm，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-0%至10% ACN，流速：20 mL/min)進行純化，以獲得呈白色泡沫狀物之1-6a (38 mg, 52.05 μmol, 30.69%)及1-6b (21 mg, 28.77 μmol, 16.96%)。將Amberlite IR-120 (15.0 mL，Na型)添加至管柱中且用去離子水(3 × 15 mL)洗滌。將化合物1-6a (38 mg)溶解於去離子水中(38 mg於6 mL中)並添加至管柱頂部，且然後用去離子水溶析。如藉由TLC (UV)所檢測，化合物1-6a 係在早期流份中溶析出。將產物凍乾，以得到呈白色泡沫狀物之1-6a (32 mg)。將異構物1-6b (21 mg)溶解於去離子水中(21 mg於5 mL中)並添加至管柱頂部，且然後用去離子水溶析。如藉由TLC (UV)所檢測，化合物1-6b 係在早期流份中溶析出。將產物凍乾，以得到呈白色泡沫狀物之1-6b (13 mg)。
1-6a ： 1 H NMR (400 MHz,D2 O ): δ 8.30 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 5.85 (d,J = 8.8 Hz, 1H), 5.65-5.59 (m, 1H), 5.23 (t,J = 7.6 Hz, 1H), 4.83 (s, 1H), 4.52 (s, 1H), 4.39-3.28 (m, 3H), 3.22-3.13 (m, 2H), 3.77-3.74 (m, 1H), 3.53 (s, 3H), 1.85-1.83 (m, 1H), 1.68-1.66 (m, 1H), 1.03 (t,J = 7.6 Hz, 1H)。31 P-NMR (162 MHz,D2 O ): 53.72, 52.99。ESI-MS: m/z 731.3 [M+H]+ 。
1-6b ： 1 H NMR (400 MHz,D2 O ): δ 8.39 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.80 (s, 1H), 5.85-5.77 (m, 2H), 5.39 (t,J = 7.6 Hz, 1H), 4.84 (s, 1H), 4.53 (s, 1H), 4.40-3.34 (m, 2H), 4.26 (d,J = 3.6 Hz, 1H), 4.16 (d,J = 5.6 Hz, 1H), 4.05 (d,J = 11.2 Hz, 1H), 3.68 (d,J = 10.8 Hz, 1H), 1.87 (t,J = 4.8 Hz, 1H), 1.75 (t,J = 4.8 Hz, 1H), 1.04 (t,J = 7.6 Hz, 1H)。31 P-NMR (162 MHz,D2 O ): 54.99, 53.25。ESI-MS: m/z 731.3 [M+H]+ 。 實例8 化合物1-7
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Figure 02_image644
向1g (15 g, 51.84 mmol)於1,4-二噁烷(1000 mL)中之溶液添加TEA (5.25 g, 51.84 mmol)及14g (10.95 g, 57.02 mmol)。使混合物回流16 h。過濾該混合物以收集濾液，且將濾液在真空中濃縮以得到粗製物。藉由在矽膠上進行急速管柱層析(PE:EtOAc 4:1)來純化殘餘物，以得到呈黃色固體之2g (11.5 g, 25.85 mmol, 49.8%)。ESI-MS: m/z 445.2 [M+H]+ 。
將化合物2g (11.5 g, 25.85 mmol)溶解於乙酸二乙氧基甲酯(9 mL)中。在120℃下攪拌1 h後，將混合物在真空中濃縮以得到粗製物。藉由相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 330g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 -50%至100% ACN，流速：50 mL/min)純化殘餘物，以得到呈黃色固體之3g (10 g, 23.42 mmol, 90.6%)。ESI-MS: m/z 427.2 [M+H]+ 。
將化合物3g (10 g, 23.42 mmol)溶解於1,4-二噁烷:氫氧化銨(1:1, 40 mL,v/v, 1:1)中。將混合物在90℃下攪拌16 h。在真空中濃縮該混合物以得到粗製物。藉由在矽膠上進行急速管柱層析(DCM:MeOH 60:1)來純化殘餘物，以得到呈黃色固體之4g (9 g, 22.09 mmol, 94.3%)。ESI-MS: m/z 408.2 [M+H]+ 。
向4 g (12.5 g, 30.68 mmol)於甲醇(500 mL)中之溶液添加Pd/C (3 g, 24.70 mmol)及甲酸(25 mL)。將混合物在60℃下在H2 下攪拌16 h。在真空中濃縮該混合物以得到粗製物。藉由相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 120g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 -50%至100% ACN，流速：50 mL/min)純化殘餘物，以得到呈黃色固體之5g (8 g, 25.21 mmol, 82.1%)。ESI-MS: m/z 318.2 [M+H]+ 。
將化合物5g (7.8 g, 24.58 mmol)溶解於吡啶(140 mL)中。在N2 下使混合物冷卻至0℃，且然後添加苯甲醯氯(13.82 g, 98.32 mmol)。將混合物在相同溫度下攪拌1 h。藉由添加H2 O (50 mL)使反應淬滅，且然後用EtOAc (3 × 100 mL)萃取。使有機層經Na2 SO4 乾燥且在真空中濃縮以得到粗製物。用吡啶(100 mL)溶解粗製物且冷卻至0℃。添加於CH3 OH:H2 O 4:1中之2 N NaOH (20 mL)。將混合物在相同溫度下攪拌30 min。利用6 N HCl將混合物之pH調整至pH ＜7，且用EtOAc (3 × 100 mL)萃取。使有機層經Na2 SO4 乾燥且在真空中濃縮以得到粗製物。藉由相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 120g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 -50%至80% ACN，流速：50 mL/min)純化殘餘物，以得到兩種異構物。藉由SFC (OD-C5_MB_15% EtOH_l cm. 1 mL/min-8 min，滯留時間= 7.691 min)分離該等異構物，以得到呈黃色固體之6g-P2 (6.5 g, 15.42 mmol, 62.7%)。ESI-MS: m/z 422.1 [M+H]+ 。
將化合物6g-P2 (2.4 g, 5.69 mmol)溶解於2 N HCl:THF (1:1) (40 mL)中。將混合物在室溫下攪拌1 h。利用飽和碳酸氫鈉溶液將混合物之pH調整至pH = 6。在真空中濃縮該混合物以得到粗製物。藉由相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80g，移動相：於水中之0.05% TFA-0%至20% ACN，流速：30 mL/min)純化殘餘物，以得到呈黃色固體之7g (1.7 g, 4.46 mmol, 78.2%)。ESI-MS: m/z 382.1 [M+H]+ 。
向7g (1.7 g, 4.46 mmol)於吡啶(25 mL)中之溶液添加DMTrCl (2.27 g, 6.69 mmol)。將混合物在室溫下在N2 下攪拌1 h。藉由添加H2 O使反應淬滅，且然後用EtOAc (3 × 300 mL)萃取。使有機層經Na2 SO4 乾燥且在真空中濃縮以得到粗製物。藉由在矽膠上進行急速管柱層析(DCM:MeOH 30:1)來純化殘餘物，以得到呈黃色固體之8g (2.6 g, 3.80 mmol, 85.3%)。ESI-MS: m/z 684.4 [M+H]+ 。
向8g (2.6 g, 3.80 mmol)於DMF (30 mL)中之溶液添加咪唑(776.60 mg, 11.41 mmol)。使混合物冷卻至0℃，且添加於DMF (50 mL)中之TBSCl (687.75 mg, 4.56 mmol)。將混合物在室溫下在N2 下攪拌16 h。藉由添加飽和碳酸氫鈉溶液使反應淬滅，且然後用EtOAc (3 × 400 mL)萃取。將有機層用H2 O (200 mL)及鹽水(200 mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥且在真空中濃縮以得到粗製物。藉由在矽膠上進行急速管柱層析(PE:EtOAc, 3:1)來純化殘餘物，以得到呈黃色固體之9g (1.2 g, 1.50 mmol, 39.5%)及9g-A (650 mg, 814.53 umol, 21.4%)。ESI-MS: m/z 798.5 [M+H]+ 。
將化合物9g (600 mg, 751.87 umol)及單體 C (784.90 mg, 902.24 umol)溶解於無水CH3 CN (18.0 mL)中，且然後添加4Å分子篩粉末(240 mg, 1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌10 min後，在室溫下添加於CH3 CN中之0.25 N ETT (4.5 mmol, 18 mL)。攪拌1 h後，將混合物過濾且用無水CH3 CN洗滌。然後添加0.02 M I2 (THF:Py:H2 O, 8:1:1, v/v/v)直至色彩不消退。在室溫下攪拌20-30 min後，利用Na2 SO3 使反應淬滅(水溶液，直至變色為止)。然後用EtOAc稀釋混合物，且分離有機層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1 × 10 mL)及飽和NaCl水溶液(1 × 10 mL)洗滌。用EtOAc (1 × 15 mL)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80g，移動相：於水中之0.5% NH4 HCO3 (m/m)-30%至100% ACN，流速：35 mL/min)純化所得粗製材料，以得到呈白色泡沫狀物之10g (1.1 g, 694.99 umol, 92.4%)。ESI-MS: m/z 1583.7 [M+H]+ 。
將化合物10g (1.1 g, 694.99 umol)溶解於DCA/DCM (3%, v/v, 15.0 mL)中，且然後立即添加三乙基矽烷(4 mL)。在室溫下攪拌30 min後，用EtOAc稀釋混合物，且然後用飽和NaHCO3 水溶液中和。分離各層，且用飽和NaCl水溶液(1 × 10 mL)洗滌有機相。將水相合併且用EtOAc (3 × 15 mL)反萃取。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至80% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製殘餘物，以得到呈白色泡沫狀物之11g (670 mg, 685.05 umol, 98.5%)。ESI-MS: m/z 978.4 [M+H]+ 。
溶解於無水CH3 CN (50.0 mL)中之化合物11g (660 mg, 674.83 μmol)、於CH3 CN中之0.25 M ETT (5.4 mmol, 21.6 mL)及4Å分子篩粉末(220 mg, 1 gr/100 mL)。將異質混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌20 min後，經25 min至30 min添加於CH3 CN (15.0 mL)中之4a (407 mg, 1.35 mol)。攪拌2 h後，將混合物過濾，且然後用無水CH3 CN洗滌。向混合物添加0.02 M Is (THF:Py:H2 O, 8:1:1, v/v/v)直至色彩不消退。在室溫下攪拌20-30 min後，利用飽和Na2 SO3 水溶液使反應淬滅，且然後用EtOAc稀釋。分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1 × 20 mL)及飽和NaCl水溶液(1 × 20 mL)洗滌。用EtOAc (1 × 40 mL)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至60% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製物，以獲得呈白色泡沫狀物之12g (348 mg, 318.37 μmol, 47.1%)。ESI-MS: m/z 1093.4 [M+H]+ 。
利用33% MeNH2 於EtOH (10 mL)中之溶液處理化合物12g (348 mg, 318.37 μmol)。在40℃下攪拌2 h後，將混合物蒸發至乾燥。藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40g，移動相：於水中之0.5% NH4 HCO3 (m/m)-0%至30% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製物，以得到呈白色泡沫狀物之13g (195 mg, 239.9 μmol, 75.3%)。ESI-MS: m/z 813.4 [M+H]+ 。
將13g (195 mg, 239.9 μmol)於DMSO (2.0 mL)及3 HF•TEA (2.0 mL)中之溶液在40℃下攪拌16 h。在0℃下將混合物滴加至TEA (2 mL)於三乙基碳酸氫銨緩衝液(12 ml)中之溶液中。將混合物在室溫下攪拌30 min且然後藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 -0%至10% ACN，流速：20 mL/min)純化4次，以獲得呈白色泡沫狀物之NH4 鹽化合物(120.0 mg, 171.8 μmol, 71.6%)。將一定體積之Amberlite IR-120 (15.0 mL，Na型)添加至管柱中且用去離子水(3 × 15 mL)洗滌。將NH4 鹽化合物(120 mg)溶解於去離子水中(120 mg於10 mL中)，且然後添加至管柱頂部。用去離子水對管柱進行溶析。如藉由TLC (UV)所檢測，化合物係在早期流份中溶析出。將產物凍乾，以得到呈白色泡沫狀物之1-7 (101 mg, 144.6 μmol, 84.2%)。1 H NMR (400 MHz,D2 O ) δ 8.10 (d,J = 16.0 Hz, 2H), 7.71 (s, 1H), 5.83 (d,J = 8.3 Hz, 1H), 5.27 (h,J = 4.5 Hz, 2H), 4.47 (dd,J = 3.9, 2.1 Hz, 1H), 4.27 (d,J = 5.7 Hz, 1H), 4.20 - 4.02 (m, 5H), 3.59 - 3.46 (m, 3H), 2.43 (d,J = 3.1 Hz, 1H), 2.08 (t,J = 5.6 Hz, 1H), 1.81 (dd,J = 9.4, 5.0 Hz, 1H), 1.40 (ddd,J = 8.5, 6.2, 1.8 Hz, 1H)。31 P-NMR (162 MHz,D2 O ) δ -1.01, -1.23。ESI-MS: m/z 699.2 [M+H]+ 。 實例9 化合物1-8
Figure 02_image646
將化合物1h (600 mg，0.8 mmol)及2h (920 mg, 0.84 mmol)溶解於無水CH3 CN (18.0 mL)中，且添加4Å分子篩粉末(180 mg, 1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌10 min後，在室溫下添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(4.1 mmol, 11 mL)。攪拌1 h後，將混合物過濾且用無水CH3 CN洗滌。添加0.02 M I2 (THF:Py:H2 O, 8:1:1, v/v/v)直至色彩不消退。在室溫下攪拌20-30 min後，利用Na2 SO3 使反應淬滅(水溶液，直至變色為止)。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1 × 50 mL)及飽和NaCl水溶液(1 × 50 mL)洗滌。用EtOAc (1 × 50 mL)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至100% ACN，流速：35 mL/min)純化所得粗製物，以得到呈白色泡沫狀物之3h (1.1 g, 0.71 mmol, 88%)。ESI-MS: m/z 1570.7 [M+H]+ 。
將化合物3h (1.1 g, 0.70 mmol)溶解於DCA/DCM (3%, v/v, 22.0 mL)中，且立即添加三乙基矽烷(11 mL)。在室溫下攪拌30 min後，用EtOAc稀釋混合物且用飽和NaHCO3 水溶液中和。分離各層，且將有機相用飽和NaCl水溶液(1 × 50 mL)洗滌。將水相合併且用EtOAc (3 × 50 mL)反萃取。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至80% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製殘餘物，以得到呈白色泡沫狀物之4h (500 mg, 0.52 mmol, 74%)。ESI-MS: m/z 966.5 [M+H]+ 。
將化合物4h (500 mg, 0.52mmol)溶解於無水CH3 CN (15.0 mL)中，添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(4.16 mmol, 9.2 mL)及4Å分子篩粉末(150 mg, 1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌20 min後，經25 min至30 min添加於CH3 CN (15.0 mL)中之4a (310 mg, 1.04 mmol)。攪拌2 h後，將混合物過濾且用無水CH3 CN洗滌。添加0.02 M碘(THF:Py:H2 O, 8:1:1, v/v/v)直至色彩不消退。在室溫下攪拌20-30 min後，利用飽和Na2 SO3 水溶液使反應淬滅(直至變色為止)。用EtOAc稀釋混合物且分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1 × 50 mL)及飽和NaCl水溶液(1 × 50 mL)洗滌。用EtOAc (1 × 50 mL)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至60% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製物，以獲得呈白色泡沫狀物之5h (140 mg, 130.3 μmol, 28%)。ESI-MS: m/z 1081.5 [M+H]+ 。
利用33% MeNH2 於EtOH (4 mL)中之溶液處理化合物5h (140 mg, 130.3 μmol)。在40℃下攪拌2 h後，將混合物蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-0%至30% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製物，以得到呈白色泡沫狀物之6h (90 mg, 112.3 μmol, 86.8%)。ESI-LMS: m/z 801.6 [M+H]+ 。
將6h (90 mg, 112.3 μmol)於DMSO (2.0 mL)及3 HF• TEA (2.0 mL)中之溶液在40℃下攪拌6 h。在0℃下將混合物滴入TEA (2 mL)於三乙基碳酸氫銨緩衝液(12 mL)中之溶液中。將混合物在室溫下攪拌30 min，且然後藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 -0%至10% ACN，流速：20 mL/min)純化4次，以獲得呈白色泡沫狀物之NH4 鹽(7.0 mg, 9.7 μmol, 8.7%)。將一定體積之Amberlite IR-120 (15 mL，Na型)添加至管柱中且用去離子水(3 × 15 mL)洗滌。將NH4 鹽(7 mg)溶解於去離子水中(7 mg於2 mL中)，添加至管柱頂部且用去離子水溶析。如藉由TLC (UV)所檢測，化合物係在早期流份中溶析出。將產物凍乾，以得到呈白色泡沫狀物之1-8 (6.4 mg, 8.2 μmol, 90%)。1 H NMR (400 MHz, D2 O): δ 8.20 (t,J = 3.68 Hz,2H), 7.65 (s, 1H), 6.38 (d,J = 13.9 Hz, 1H), 5.55 (dd,J = 2.8 Hz,2.8 Hz, 1H), 5.37-5.32 (m,,1H), 5.05-4.97 (m,2H), 4.53-4.49 (m, 2H), 4.42 (d,J = 12.2 Hz, 1H), 4.27 (d,J = 9.2 Hz, 1H), 4.15-4.11 (m,1H), 3.32-3.28 (m, 1H), 1.57 (t,J =3.8 Hz,1H), 1.07-1.03(m, 1H)。31 P-NMR (162 MHz, D2 O): -4.41, -4.61。19 F-NMR (376 MHz, DMSO-d 6 ): -201.78, -204.90。ESI-MS: m/z 687.4 [M+H]+ 。 實例10 化合物1-8
Figure 02_image648
Figure 02_image650
向1i (10 g, 22.80 mmol)及1i-A (12.72 g, 34.20 mmol)於THF (100 mL)中之攪拌溶液添加PPh3 (8.97 g, 34.20 mmol)。使混合物冷卻至0℃且分多次添加DIAD (6.92 g, 34.20 mmol, 6.71 mL)。將混合物加熱至50℃且然後攪拌16 h。將混合物傾倒至水中且然後用EtOAc (2 × 200 mL)萃取。分離各層。將有機層用鹽水洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮至乾燥以得到粗產物。藉由矽膠(PE:EtOAc 1:1)純化粗產物，以得到呈白色泡沫狀物之2i (15 g, 18.03 mmol, 79.08%)。ESI-MS: m/z 791.4 [M+H]+ 。
向2i (15.00 g, 18.03 mmol)於H2 O (20 mL)及THF (20 mL)中之攪拌溶液添加TFA (150 g, 1.3 mol, 100 mL)。將混合物在50℃下攪拌16 h。將混合物濃縮至乾燥以得到粗製物。藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至80% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製物，以得到呈白色泡沫狀物之3i (3.0 g，9.21 mmol，51.07%，90%純度)。ESI-MS: m/z 294.5 [M+H]+ 。
向3i ((3.0 g, 9.21 mmol)於吡啶(30 mL)中之攪拌溶液添加異丁醯氯(6.90 g, 64.78 mmol)。將混合物在室溫下攪拌3 h，且然後濃縮至乾燥。將粗製物溶解於吡啶(50 mL)中。向混合物添加MeOH:H2 O (4:1)中之1 M NaOH溶液以調整至pH = 10。向混合物添加HCl水溶液(6 N)以調整至pH = 6。將混合物濃縮至乾燥且然後溶解於DCM:MeOH (5:1)中。過濾混合物，且將濾液濃縮以得到黃色油狀物。藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至60% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製物，以得到呈黃色泡沫狀物之4i (1.8 g，4.95 mmol，51.02%，90%純度)。ESI-MS: m/z 364.5 [M+H]+ 。
向4i (1.8 g, 4.46 mmol)於吡啶(10 mL)中之攪拌溶液添加DMTrCl (1.66 g, 4.90 mmol)。將混合物在室溫下攪拌3 h。將混合物傾倒至水中且用EtOAc (2 × 100 mL)萃取。分離有機層。將有機層用鹽水洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮至乾燥以得到粗製物。藉由矽膠(DCM:MeOH 50:1)純化粗製物，以得到呈白色固體之5i (2.6 g，3.71 mmol，83.22%，95%純度)。ESI-MS: m/z 666.7 [M+H]+ 。
向5i (2.6 g, 3.71 mmol)及咪唑(1.01 mg, 14.84 mmol)於DMF (40 mL)中之攪拌溶液分多次添加TBSCl (671.05 mg, 4.45 mmol)。將混合物在室溫下攪拌3 h。將該混合物傾倒至水中且用EtOAc (2 × 200 mL)萃取。將分離之有機層用鹽水洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮以得到粗製物。藉由矽膠(PE:EtOAc 1:1)純化粗製物，以得到呈白色泡沫狀物之6i (800 mg, 1.01 mmol, 27.09%)及2h (600 mg, 753.85 umol, 20.32%)。
化合物6i ： 1 H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ): δ 12.09 (s, 1H), 11.39 (s, 1H) , 8.19 (s, 1H), 7.36 (d,J =7.44 Hz, 2H), 7.29 (t,J = 7.8 Hz, 2H), 7.24-7.20 (m,5H), 6.85 (d,J =8.8 Hz, 4H), 4.79 (t,J = 7.16 Hz,1H), 4.55 (d,J =1.5 Hz, 1H), 4.28(d,J = 8.0 Hz,1H), 4.11(d,J = 6.4 Hz,1H), 3.74-3.73 (m, 6H),3.61(d,J =9.8 Hz,1H),2.77-2.74 (m, 2H),1.36-1.33 (m, 1H), 1.27(t,J = 4.4 Hz,1H),1.10 (t,J = 7.12 Hz,6H), 0.83 (m,9H), 0.62-0.58 (m,1H),0.002--0.01 (m, 6H)。ESI-LMS: m/z 780.6 [M+H]+ 。化合物2h ： 1 H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ): δ 12.11 (s, 1H), 11.66 (s, 1H), 8.26(, 1H), 7.39 (d,J =9.12 Hz, 2H), 7.32 (t,J = 7.2 Hz, 2H), 7.26-7.20 (m,5H), 6.85 (dd,J =2.2 Hz, 2.2 Hz, 4H), 4.79 (d,J = 6.32 Hz,1H), 4.65 (d,J =4.88 Hz, 1H), 4.59(d,J = 2.08 Hz,1H), 3.98(m,1H), 3.74-3.73 (m, 6H),3.52(d,J =10Hz,1H),2.86-2.77 (m, 2H),1.46-1.44 (m, 1H),1.28 (t,J = 4.4 Hz,1H), 1.14-1.12 (m,6H), 0.77(m,9H),0.68-0.65 (m, 1H), 0.0--0.06 (m, 7H)。ESI-LMS: m/z 780.6 [M+H]+ 。
將化合物6i (800 mg，1.03 mmol)及7i (898.0 mg, 1.03 mmol)溶解於無水CH3 CN (24.0 mL)中，且添加4Å分子篩粉末(240 mg, 1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌10 min後，在室溫下添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(4.1 mmol, 11 mL)。攪拌1 h後，將混合物過濾且用無水CH3 CN洗滌。添加0.02 M碘(THF:Py:H2 O, 8:1:1, v/v/v)直至色彩不消退。將混合物在室溫下攪拌20-30 min後，利用Na2 SO3 使反應淬滅(水溶液，直至變色為止)。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1 × 50 mL)及飽和NaCl水溶液(1×)洗滌。用EtOAc (1 × 50 mL)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至100% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製物，以得到呈白色泡沫狀物之8i (1.1 g, 0.70 mmol, 67.9%)。ESI-MS: m/z 1570.7 [M+H]+ 。
將化合物8i (1.2 g, 0.76 mmol)溶解於DCA/DCM (3%, v/v, 11.0 mL)中，且立即添加三乙基矽烷(4.4 mL)。在室溫下攪拌30 min後，用EtOAc稀釋混合物，且然後用飽和NaHCO3 水溶液中和。分離各層，且將有機相用飽和NaCl水溶液(1 × 50 mL)洗滌。將水相合併且用EtOAc (3×)反萃取。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至80% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製物，以獲得呈白色泡沫狀物之9i (610 mg, 0.62 mmol, 82.7%)。ESI-MS: m/z 966.0 [M+H]+ 。
將化合物9i (610 mg, 620 μmol)溶解於無水CH3 CN (18.0 mL)中，添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(3.76mmol, 8.4 mL)及4Å分子篩粉末(180 mg, 1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌20 min後，經25 min至30 min添加於CH3 CN (15.0 mL)中之4a (380 mg, 124 mmol)。攪拌2 h後，將混合物過濾且用無水CH3 CN洗滌。添加0.02 M碘(THF:Py:H2 O, 8:1:1, v/v/v)直至色彩不消退。在室溫下攪拌20-30 min後，利用飽和Na2 SO3 水溶液使反應淬滅(直至變色為止)。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1 x)及飽和NaCl水溶液(1 × 50 mL)洗滌。用EtOAc (1 × 50 mL)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至60% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製物，以獲得呈白色泡沫狀物之10i (400 mg, 370.3 μmol, 58.0%)。ESI-MS: m/z 1081.5 [M+H]+ 。
利用33% MeNH2 於EtOH (10 mL)中之溶液處理化合物10i (400 mg, 370.3 μmol)。在40℃下攪拌2 h後，將混合物蒸發至乾燥。藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-0%至30% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製物，以得到呈白色泡沫狀物之11i (200 mg, 250.3 μmol, 67.5%)。ESI-LMS: m/z 801.6 [M+H]+ 。
將11i (200 mg, 250.3 μmol)於DMSO (4.0 mL)及3HF• TEA (4.0 mL)中之溶液在40℃下攪拌6 h。在0℃下將混合物滴入TEA (2 mL)於三乙基碳酸氫銨緩衝液(12 mL)中之溶液中。將混合物在室溫下攪拌30 min，且然後藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 -0%至10% ACN，流速：20 mL/min)純化4次，以獲得呈白色泡沫狀物之NH4 鹽產物(90.0 mg, 124 μmol, 50.5%)。將一定體積之Amberlite IR-120 (15 mL，Na型)添加至管柱中且用去離子水(3 × 15 mL)洗滌。將NH4 鹽產物1 (90 mg)溶解於去離子水中(90 mg於2 mL中)，添加至管柱頂部且用去離子水溶析。如藉由TLC (UV)所檢測，化合物係在早期流份中溶析出。將產物凍乾，以得到呈白色泡沫狀物之1-9 (87 mg, 120 μmol, 96%)。1 H NMR (400 MHz,D2 O ): δ 8.19 (s,1H), 7.93 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.20 (d, J = 15.9 Hz, 1H), 5.73-5.60 (m, 1H), 5.18 (t, J =6.4 Hz,2H), 4.53 (s,1H), 4.49 (s,1H), 4.44-4.41 (m, 2H), 4.16 (d, J = 4.36 Hz, 1H), 4.07 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 3.51 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 1.95 (d, J =5.2, 1H), 1.62 (d, J = 4.24 Hz, 1H), 0.97 (t, J =6.9 Hz,1H)。31 P- NMR (162 MHz,D2 O ): -1.32, -2.19,19 F-NMR (376 MHz,D2 O ): -202.52, -204.90。ESI-MS: m/z 687.4 [M+H]+ 。 實例11 化合物1-10a及1-10b
Figure 02_image652
將化合物15 (1.1 g, 1.38 mmol)溶解於無水CH3 CN (44.0 mL)中，且添加單體 C (1.3 g, 1.51 mmol)及4Å分子篩粉末(440 mg, 1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌10 min後，在室溫下添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(8.27 mmol, 3.3 mL)。攪拌1 h後，將混合物過濾，且用無水CH3 CN洗滌。向此溶液中添加0.1 M DDTT直至反應完成為止。在室溫下攪拌20-30 min後，利用Na2 SO3 使反應淬滅(水溶液，直至變色為止)，且然後用EtOAc稀釋。分離各層，且將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1 × 50 mL)及飽和NaCl水溶液(1 × 50 mL)洗滌。用EtOAc (1 × 50 mL)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-60%至100% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製物，以得到呈白色泡沫狀物之1j (1.9 g, 1.19 mmol, 86.21%)。ESI-MS: m/z 1598.7 [M+H]+ 。
將化合物1j (1.9 g, 1.19 mmol)溶解於DCA/DCM (3%, v/v, 50.0 mL)中，且立即添加三乙基矽烷(10.0 mL)。在室溫下攪拌30 min後，利用吡啶使混合物中和且蒸發至乾燥。藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至80% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製殘餘物，以獲得呈白色泡沫狀物之2j (985 mg, 990.85 umol, 83.38%)。ESI-MS: m/z 994.4 [M+H]+ 。
將化合物2j (500 mg, 503.02 umol)溶解於無水CH3 CN (40.0 mL)中，且添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(4.02 mmol, 8.9 mL)及4Å分子篩粉末(500 mg, 1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌20 min後，經25 min至30 min添加於CH3 CN (5.0 mL)中之4a (304 mg, 1.00 mmol)。攪拌2 h後，將混合物過濾，且用無水CH3 CN洗滌。添加0.02 M I2 (THF:Py:H2 O, 8:1:1, v/v/v)直至色彩不消退。在室溫下攪拌20-30 min後，利用飽和Na2 SO3 水溶液使反應淬滅(直至變色為止)，且然後用EtOAc稀釋。分離各層，且將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1 × 50 mL)及飽和NaCl水溶液(1 × 50 mL)洗滌。用EtOAc (1 × 50 mL)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至60% ACN，流速：25 mL/min)純化粗製物，以得到呈白色泡沫狀物之3j (175 mg, 157.78 umol, 36.48%)。ESI-MS: m/z 1109.4 [M+H]+ 。
利用33% MeNH2 於EtOH (15 mL)中之溶液處理化合物3j (175 mg, 157.78 umol)。在40℃下攪拌2 h後，將混合物蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 20 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-0%至30% ACN，流速：20 mL/min)純化粗製材料，以得到呈白色泡沫狀物之4j (105 mg, 126.69 umol, 81.46%)。ESI-MS: m/z 829.4 [M+H]+ 。
將化合物4j (105 mg，126.69 umol，81.46%產率)及3 HF• TEA (1.0 mL)於DMSO (2.0 mL)中在40℃下攪拌6 h。在0℃下將混合物滴入TEA (3 mL)於三乙基碳酸氫銨緩衝液(18 mL)中之溶液中。將混合物在室溫下攪拌30 min，且然後藉由反相製備型HPLC (管柱：XBridge 30×100 mm，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-0%至10% ACN，流速：20 mL/min)進行純化，以獲得呈白色泡沫狀物之異構物1 (31 mg, 52.05 μmol, 30.69%)及異構物2 (22 mg, 28.77 μmol, 16.96%)。將一定體積之Amberlite IR-120 (15 mL，Na型)添加至管柱中且用去離子水(3 × 15 mL)洗滌。將異構物1 (38 mg)溶解於去離子水中(31 mg於6 mL中)，添加至管柱頂部且用去離子水溶析。如藉由TLC (UV)所檢測，化合物係在早期流份中溶析出。將產物凍乾，以得到呈白色泡沫狀物之1-10a (23 mg)。將異構物2 (22 mg)溶解於去離子水中(22 mg於5 mL中)，添加至管柱頂部且用去離子水溶析。如藉由TLC (UV)所檢測，化合物係在早期流份中溶析出。將產物凍乾，以得到呈白色泡沫狀物之1-10b (15 mg)。
化合物1-10a ： 1 H NMR (400 MHz,D2 O ): δ 8.05 (s, 2H), 7.96 (s, 1H), 5.83 (d,J = 8.4 Hz, 1H), 5.38-5.33 (m, 1H), 5.11 (t,J = 7.6 Hz, 1H), 4.78 (s, 1H), 4.55 (s, 1H), 4.48 (d,J = 10.4 Hz, 1H), 4.37 (d,J = 6.0 Hz, 1H), 4.28 (d,J = 3.2 Hz, 1H), 4.20-4.12 (m, 2H), 3.58 (d,J = 11.2 Hz, 1H), 3.51 (s, 3H), 1.82 (d,J = 4.8 Hz, 1H), 1.59 (t,J = 5.6 Hz, 1H), 0.96 (t,J = 6.8 Hz, 1H)。31 P-NMR (162 MHz,D2 O ): 52.84, -2.89。ESI-MS: m/z 715.3 [M+H]+ 。
化合物1-10b ： 1 H NMR (400 MHz,D2 O ): δ 8.18 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.71 (s, 1H), 5.72 (s, 2H), 5.25 (t,J = 8.8 Hz, 1H), 4.57 (s, 2H), 4.29 (d,J = 10.4 Hz, 1H), 4.18 (s, 1H), 4.05 (d,J = 10.8 Hz, 1H), 3.94 (d,J = 4.4 Hz, 1H), 3.52 (s, 3H), 3.35 (s, 1H), 1.62 (s, 1H), 1.53 (s, 1H), 0.97 (s, 1H)。31 P-NMR (162 MHz,D2 O ): 55.69, -3.80。ESI-MS: m/z 715.3 [M+H]+ 。 實例12 化合物1-11
Figure 02_image654
在0℃下將苯甲醯氯(8.38 g, 59.60 mmol)添加至1j (2.00 g, 7.45 mmol)於吡啶(20 mL)中之混合物。將混合物在室溫下攪拌2 h，且然後將H2 O (100 mL)添加至混合物。用EtOAc (3×)萃取混合物。將合併之EtOAc層用飽和NaCl水溶液(1×)洗滌。將合併之有機相在真空中濃縮以得到殘餘物。將殘餘物溶解於吡啶(20 mL)中，且使用2 N NaOH (MeOH:H2 O, 4:1, v/v)將pH調整至10。將混合物在室溫下攪拌40 min。然後用NH4 Cl稀釋該混合物且用DCM (3×)萃取。將合併之有機相用飽和NaCl水溶液(1×)洗滌。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由矽膠(DCM:MeOH, 1:1)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之2j (2.50 g, 6.71 mmol, 90.0%)。ESI-MS: m/z 373.1 [M+H]+ 。
將DMTrCl (2.50 g, 7.39 mmol)於無水吡啶(10 mL)中之溶液逐滴添加至2j (2.30 g, 6.17 mmol)於無水吡啶(20 mL)中之懸浮液。將混合物在室溫下攪拌1 h。然後將水(2 mL)添加至混合物。將混合物蒸發至乾燥，且藉由矽膠(EtOAc:PE, 1:1)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之3j (2.50 g, 4.38 mmol, 70.93%)。ESI-MS: m/z 675.2 [M+H]+ 。
在0℃下將咪唑(1.00 g, 14.70 mmol)及TBSCl (666.67 mg, 4.44 mmol)添加至3j (2.50 g, 3.70 mmol)於DMF (30 mL)中之溶液。將混合物在室溫下攪拌60 h。使混合物在EtOAc與H2 O之間分配。用鹽水洗滌有機層，經Na2 SO4 乾燥且在減壓下濃縮。藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-60%至85% ACN，流速：25 mL/min)純化殘餘物，以得到呈白色泡沫狀物之4j (435 mg, 551.30 umol, 14.89%)。ESI-MS: m/z 789.6 [M+H]+ 。
將單體 C (467.00 mg, 0.53 mmol)及4j (385.00 mg, 0.48 mmol)溶解於無水CH3 CN (23.0 mL)中，且添加4Å分子篩粉末(1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌10 min後，在室溫下添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(2.92 mmol, 6.5 mL)。攪拌1 h後，將混合物過濾，且然後用無水CH3 CN洗滌。添加0.02 M I2 (THF:Py:H2 O, 8:1:1, v/v/v)直至色彩不消退。在室溫下攪拌20-30 min後，利用Na2 SO3 使反應淬滅(水溶液，直至變色為止)，且然後用EtOAc稀釋。分離各層，且將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1 × 50 mL)及飽和NaCl水溶液(1 × 50 mL)洗滌。用EtOAc (1 × 50 mL)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 8 0g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至100% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製材料，以得到呈白色泡沫狀物之5j (800.0 mg, 92.2%)。ESI-MS: m/z 1573.6 [M+H]+ 。
將化合物5j (750.0 mg, 0.47 mmol)溶解於DCA/DCM (3%, v/v, 13.30 mL)中，且立即添加三乙基矽烷(5.25 mL)。在室溫下攪拌30 min後，用EtOAc稀釋混合物且用飽和NaHCO3 水溶液中和。分離各層，且將有機相用飽和NaCl水溶液(1 × 50 mL)洗滌。將水相合併且用EtOAc (3×)反萃取。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至80% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製殘餘物，以獲得呈白色泡沫狀物之6j (425 mg, 0.43 mmol, 86.4%)。ESI-MS: m/z 969.5 [M+H]+ 。
將化合物6j (375 mg, 387.00 μmol)溶解於無水CH3 CN (25.0 mL)中，添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(3.09 mmol, 6.87 mL)及4Å分子篩粉末(300 mg, 1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌20 min後，經30 min至40 min添加於CH3 CN (10.0 mL)中之4a (233.2 mg, 773.40 umol)。攪拌2 h後，將混合物過濾且用無水CH3 CN洗滌。添加0.02 M I2 (THF:Py:H2 O, 8:1:1, v/v/v)直至色彩不消退。在室溫下攪拌20-30 min後，利用飽和Na2 SO3 水溶液使反應淬滅(直至變色為止)，且然後用EtOAc稀釋。分離各層，且將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1×)及飽和NaCl水溶液(1×)洗滌。用EtOAc (1×)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至60% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之7j (100 mg, 92.3 μmol, 23.8%)。ESI-MS: m/z 1084.5 [M+H]+ 。
利用33% MeNH2 於EtOH (16 mL)中之溶液處理化合物7j (78 mg, 71.9 μmol)。在40℃下攪拌3 h後，將混合物蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-0%至30% ACN，流速：25 mL/min)純化粗製材料，以得到呈白色泡沫狀物之8j (54 mg, 67.2 μmol, 93.4%)。ESI-LMS: m/z 804.6 [M+H]+ 。
在40℃下將3 HF•TEA (1.0 mL)添加至8j (65 mg, 80.8 μmol)於DMSO (2 mL)中之混合物溶液中達2 h。在0℃下將混合物滴入TEA (2 mL)於三乙基碳酸氫銨緩衝液(12 mL)中之溶液中。將混合物在室溫下攪拌30 min，且然後藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 -0%至10% ACN，流速：20 mL/min)進行純化，以獲得呈白色泡沫狀物之NH4 鹽產物(28 mg, 40.6 μmol, 50.2%)。將一定體積之Amberlite IR-120 (15 mL，Na型)添加至管柱中且用去離子水(3 × 15 mL)洗滌。將NH4 鹽產物(60 mg)溶解於去離子水中(60 mg於8 mL中)，添加至管柱頂部且用去離子水溶析。如藉由TLC (UV)所檢測，化合物係在早期流份中溶析出。將產物凍乾，以得到呈白色泡沫狀物之1-11 (23 mg, 33.4 μmol, 41.2%)。1 H NMR (400 MHz,D2 O ): δ 8.12 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 6.53 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 5.97 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 5.34 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 5.25 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 5.08 - 5.00 (m, 1H), 4.51 (s, 1H), 4.41 (s, 1H), 4.26 - 4.19 (m, 2H), 4.15 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 4.10 - 4.03 (m, 1H), 3.97 (d, J = 11.8 Hz, 1H), 3.52 (s, 3H)。31 P-NMR (162 MHz,D2 O ): -0.83, -1.72。ESI-MS: m/z 698.4 [M+H]+ 。 實例13 化合物1-12
Figure 02_image656
將單體 D (300 mg, 0.45 mmol)溶解於無水CH3 CN (15.0 mL)中，且添加1k (492 mg, 0.49 mmol)及4Å分子篩粉末(300 mg, 1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌10 min後，在室溫下添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(2.69 mmol, 6.0 mL)。攪拌1 h後，將混合物過濾且用無水CH3 CN洗滌。添加0.02 M I2 (THF:Py:H2 O, 8:1:1,v/v/v )直至色彩不消退。在室溫下攪拌20-30 min後，利用Na2 SO3 使反應淬滅(水溶液，直至變色為止)。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1×)及飽和NaCl水溶液(1×)洗滌。用EtOAc (1×)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-60%至100% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製材料，以得到呈白色泡沫狀物之2k (605 mg, 0.38 mmol, 84.4%)。ESI-MS: m/z 1584.6 [M+H]+ 。
將化合物2k (605 mg, 0.38 mmol)溶解於DCA/DCM (3%, v/v, 20.0 mL)中，且立即添加三乙基矽烷(7.0 mL)。在室溫下攪拌30 min後，利用吡啶使混合物中和且然後蒸發至乾燥。藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至80% ACN，流速：30 mL/min)純化粗製殘餘物，以獲得呈白色泡沫狀物之3k (226 mg, 0.23 mmol, 60.8%)。ESI-MS: m/z 979.4 [M+H]+ 。
將化合物3k (226 mg, 0.23 mmol)溶解於無水CH3 CN (20.0 mL)中，添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(1.84 mmol, 4.1 mL)及4Å分子篩粉末(220 mg, 1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌20 min後，經25 min至30 min添加於CH3 CN (5.0 mL)中之4a (138 mg, 0.46 mmol)。攪拌2 h後，將混合物過濾且用無水CH3 CN洗滌。添加0.02 M I2 (THF:Py:H2 O, 8:1:1, v/v/v)直至色彩不消退。在室溫下攪拌20-30 min後，利用飽和Na2 SO3 水溶液使反應淬滅(直至變色為止)。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1×)及飽和NaCl水溶液(1×)洗滌。用EtOAc (1×)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至60% ACN，流速：20 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之4k (42 mg, 38.39 μmol, 16.7%)。ESI-MS: m/z 1094.4 [M+H]+ 。
利用MeNH2 於EtOH中之溶液(5 mL, 33%)處理化合物4k (42 mg, 38.39 μmol)。在40℃下攪拌2 h後，將混合物蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 20 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-0%至20% ACN，流速：15 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之5k (22 mg, 26.56 umol, 69.2%)。ESI-MS: m/z 829.3 [M+H]+ 。
將5k (22 mg, 26.56 umol)及3HF . TEA (0.5 mL)於THF (1.0 mL)中之溶液在40℃下攪拌6 h。在0℃下將混合物滴入TEA (3 mL)於三乙基碳酸氫銨緩衝液(6 mL)中之溶液中。將混合物在室溫下攪拌30 min，且然後藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 12 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-0%至10% ACN，流速：10 mL/min)進行純化，以獲得呈白色泡沫狀物之銨鹽產物(3.2 mg)。將一定體積之Amberlite IR-120 (12 mL，Na型)添加至管柱中且用去離子水(3 × 15 mL)洗滌。將銨鹽產物(3.2 mg)溶解於去離子水中(88 mg於10 mL中)，添加至管柱頂部且用去離子水溶析。如藉由TLC (UV)所檢測，化合物係在早期流份中溶析出。將產物凍乾，以獲得呈白色泡沫狀物之1-12 (1.5 mg, 2.10 μmol, 7.9%)。1 H NMR (400 MHz,D2 O ): δ 8.17 (s, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 5.24 (d,J = 9.6 Hz, 1H), 5.11 (t,J = 6.8 Hz, 1H), 4.89-4.83 (m, 2H), 4.54 (d,J = 15.2 Hz, 1H), 4.43 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 4.26 (d,J = 4.4 Hz, 1H), 4.18-4.12 (m, 2H), 4.08-4.05 (m, 1H), 3.66 (d,J = 11.2 Hz, 1H), 3.50 (s, 3H), 1.87-1.85 (m, 1H), 1.63 (t,J = 5.2 Hz, 1H), 0.97 (t,J = 7.6 Hz, 1H)。31 P-NMR (162 MHz, D2 O): -0.91, -2.79。ESI-MS: m/z 715.2 [M+H]+ 。 實例14 化合物1-13
Figure 02_image658
將化合物7i (630 mg, 0.72 mmol)及單體 A (450 mg, 0.65 mmol)溶解於無水CH3 CN (20.0 mL)中，且添加4Å分子篩粉末(200 mg, 1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌10 min後，在室溫下添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(3.9 mmol, 8.7 mL)。攪拌1 h後，將混合物過濾，且然後用無水CH3 CN洗滌。添加0.02 M I2 (THF:Py:H2 O, 8:1:1,v /v /v )直至色彩不消退。在室溫下攪拌20-30 min後，利用Na2 SO3 使反應淬滅(水溶液，直至變色為止)。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1×)及飽和NaCl水溶液(1×)洗滌。用EtOAc (1×)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至100% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之1l (680 mg, 70.2%)。ESI-MS: m/z 1477.5 [M+H]+ 。
將化合物1l (680 mg, 0.46 mmol)溶解於DCA/DCM (3%, v/v, 10 mL)中，且立即添加三乙基矽烷(4 mL)。在室溫下攪拌30 min後，用EtOAc稀釋混合物，且用飽和NaHCO3 水溶液中和。分離各層，且用飽和NaCl水溶液(1×)洗滌有機相。將水相合併且用EtOAc (3×)反萃取。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至80% ACN，流速：15 mL/min)純化粗製殘餘物，以獲得呈白色泡沫狀物之2l (120 mg, 30%)。ESI-MS: m/z 873.4 [M+H]+ 。
將化合物2l (120 mg, 0.138 mmol)溶解於無水CH3 CN (15.0 mL)中，添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(1.1 mmol, 2.45 mL)及4Å分子篩粉末(150 mg, 1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌20 min後，經10 min至15 min添加於CH3 CN (4.0 mL)中之4a (83.1 mg, 0.276 mmol)。攪拌2 h後，將混合物過濾且用無水CH3 CN洗滌。添加0.02 M I2 (THF:Py:H2 O, 8:1:1,v /v /v )直至色彩不消退。在室溫下攪拌20-30 min後，利用飽和Na2 SO3 水溶液使反應淬滅(直至變色為止)。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1×)及飽和NaCl水溶液(1×)洗滌。用EtOAc (1×)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 20 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至60% ACN，流速：10 mL/min)純化粗製材料，以得到呈白色泡沫狀物之3l (52 mg, 0.053 mmol, 38.3%)。ESI-MS: m/z 988.3 [M+H]+ 。
利用MeNH2 於EtOH中之溶液(10 mL, 33%)處理化合物3l (52mg, 0.053 mmol)。在40℃下攪拌2 h後，將混合物蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 20 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-0%至30% ACN，流速：10 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之NH4 鹽產物(31 mg, 0.044 mmol, 82.9%)。ESI-LMS: m/z 707.9 [M+H]+ 。將一定體積之Amberlite IR-120 (15 mL，Na型)添加至管柱中且用去離子水(3 × 15 mL)洗滌。將NH4 鹽產物(24 mg)溶解於去離子水中(31 mg於6 mL中)，添加至管柱頂部且用去離子水溶析。如藉由TLC (UV)所檢測，化合物係在早期流份中溶析出。將產物凍乾，以得到呈白色泡沫狀物之1-13 (22 mg, 0.029 mmol, 66.6%)。1 H NMR (400 MHz,D2 O ) δ 8.02 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 6.28 (d,J = 15.1 Hz, 1H), 5.53 (d,J = 3.0 Hz, 0.5H), 5.40 (d,J = 3.1 Hz, 0.5H), 5.25 (d,J = 9.6 Hz, 1H), 4.96 (d,J = 22.5 Hz, 2H), 4.49 - 4.36 (m, 3H), 4.15 (dd,J = 22.6, 8.1 Hz, 4H), 3.51 (s, 3H)。31 P-NMR (162 MHz,D2 O ) δ -1.61, -2.76。19 F-NMR (376 MHz,D2 O ) δ -202.42。ESI-MS: m/z 708.3 [M+H]+ 。 實例15 化合物1-14a、1-14b、1-14c及1-14d
Figure 02_image660
Figure 02_image662
Figure 02_image664
將單體 E (4.1 g, 4.10 mmol)及15 (3.0 g, 3.70 mmol)溶解於無水CH3 CN (250.0 mL)中，且添加4Å分子篩粉末(1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌10 min後，在室溫下添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(22.5 mmol, 50.1 mL)。攪拌1 h後，將混合物過濾且用無水CH3 CN洗滌。添加0.1 M DDTT (溶劑：py)，直至反應完成為止。在室溫下攪拌20-30 min後，利用Na2 SO3 使反應淬滅(水溶液，直至變色為止)。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1×)及飽和NaCl水溶液(1×)洗滌。用EtOAc (1×)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至100% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之1m (4.4 g, 68.1%)。ESI-MS: m/z 1717.3 [M+H]+ 。
將化合物1m (4.4 g, 2.56 mmol)溶解於DCA/DCM (3%, v/v, 78.2 mL)中，且立即添加三乙基矽烷(30.8 mL)。在室溫下攪拌30 min後，用EtOAc稀釋混合物，且用飽和NaHCO3 水溶液中和。分離各層，且用飽和NaCl水溶液(1×)洗滌有機相。將水相合併且用EtOAc (3×)反萃取。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由矽膠管柱(於DCM中之0%至100%之丙酮)純化粗製殘餘物，以獲得呈白色泡沫狀物之2m (1.9 g, 1.70 mmol, 66.9%)。ESI-MS: m/z 1112.5 [M+H]+ 。
將化合物3m (1.9 g, 1.70 mmol)溶解於無水CH3 CN (76.0 mL)中，添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(13.6 mmol, 30.3 mL)及4Å分子篩粉末(1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌20 min後，經30 min至40 min添加於CH3 CN (15.0 mL)中之4a (1.0 g, 3.30 mmol)。攪拌2 h後，將混合物過濾且用無水CH3 CN洗滌。添加0.1 M DDTT (溶劑：py)，直至反應完成為止。在室溫下攪拌20-30 min後，利用飽和Na2 SO3 水溶液使反應淬滅(直至變色為止)。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1×)及飽和NaCl水溶液(1×)洗滌。用EtOAc (1×)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至60% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之3m (1.15 g, 925.1 μmol, 53.5%)。ESI-MS: m/z 1243.4 [M+H]+ 。
利用MeNH2 於EtOH中之溶液(35 mL, 33%)處理化合物3m (1.15 g, 925.1 μmol)。在40℃下攪拌3 h後，將混合物蒸發至乾燥。藉由反相製備型HPLC (管柱：XBridge 30×100 mm，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-0%至10% ACN，流速：20 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之4m-P1 (82 mg, 88.2 μmol, 9.7%)，31 P-NMR (162 MHz, DMSO-d 6 ): 54.83, 54.72。4m-P2 (145 mg，156.0 μmol，16.8%產率)，31 P-NMR (162 MHz, DMSO-d 6 ): 52.92, 50.14。4m-P3 (70 mg，75.3 μmol，8.1%產率)，31 P-NMR (162 MHz, DMSO-d 6 ): 55.26, 51.23。4m-P4 (190 mg，204.5 μmol，22.1%產率)，31 P-NMR (162 MHz, DMSO-d 6 ): 54.75, 50.38。ESI-LMS: m/z 929.6 [M+H]+ 。
在40℃下將3 HF•TEA (1.0 mL)添加至4m-P1 (82 mg, 88.2 μmol)於DMSO (2 mL)中之混合物溶液達48 h，且然後冷卻至室溫。添加TEA (1.0 mL)及異丙氧基三甲基矽烷(8.0 mL)。將混合物在室溫下攪拌1 h，且然後蒸發至乾燥。藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 -0%至10% ACN，流速：20 mL/min)純化殘餘物，以獲得呈白色泡沫狀物之NH4 鹽產物(20 mg, 28.5 μmol, 32.3%)。將一定體積之Amberlite IR-120 (15 mL，Na型)添加至管柱中且用去離子水(3 × 15 mL)洗滌。將NH4 鹽產物(20 mg)溶解於去離子水中(20 mg於8 mL中)，添加至管柱頂部且用去離子水溶析。如藉由TLC (UV)所檢測，化合物係在早期流份中溶析出。將產物凍乾，以得到呈白色泡沫狀物之1-14a (18 mg, 25.6 μmol, 29.0%)。1 H NMR (400 MHz,D2 O ): δ 8.65 (s, 1H), 8.01-7.94 (m, 3H), 6.15-6.13 (d,J =8.16 Hz, 1H), 5.39-5.35 (m, 1H), 5.12-5.07 (m, 1H), 4.75 (m, 1H), 4.66-4.65 (m, 1H), 4.41-4.37 (m, 3H), 4.19-4.16 (m, 1H), 4.09 (m, 1H), 3.76-3.78 (d,J =9.36 Hz, 1H), 1.78-1.76 (m, 1H), 1.60-1.57 (m, 1H), 1.00-0.96 (m, 1H)。31 P-NMR (162 MHz,D2 O ): 54.60, 53.92。ESI-MS: m/z 701.4 [M+H]+ 。化合物1-14b 、1-14c 及1-14d 係使用與1-14a 類似之程序，分別使用4m-P2 、4m-P3 及4m-P4 來獲得。
1-14b ：(21 mg, 29.9 μmol, 19.2%)1 H NMR (400 MHz,D2 O ): δ 8.46 (m, 1H), 8.26 (m, 1H), 7.78 (m, 1H), 7.68 (m, 1H), 5.72 (m, 1H), 4.86 (m, 2H), 4.69 (m, 1H) , 4.41-4.40 (m, 2H), 4.20 (m, 1H), 4.03 (m, 1H), 3.90 (m, 1H), 3.64-3.62 (m, 1H), 3.40 (m, 1H),1.77 (m, 1H),1.63 (m, 1H), 1.03 (m, 1H)。31 P-NMR (162 MHz,D2 O ): 55.59, 49.77。ESI-MS: m/z 701.4 [M+H]+ 。
呈白色泡沫狀物之1-14c ：(23 mg, 32.8 μmol, 43.5%)。1 H NMR (400 MHz,D2 O ): δ 8.47 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.96 (s, 1H) 6.19-6.17 (d,J =8.2 Hz, 1H), 5.45-5.39 (m, 1H), 5.28-5.25 (t,J =7.1 Hz, 1H), 4.79 (s, 1H), 4.66-4.68 (m, 1H), 4.44 (s, 1H), 4.39-4.34 (m, 1H), 4.24-4.21 (m, 2H), 4.07-4.03 (dd,J =11.92 Hz, 1H),3.99-3.95 (m, 1H), 1.79-1.77 (m, 1H), 1.65-1.62 (m, 1H), 1.05-1.01 (m, 1H)。31 P-NMR (162 MHz,D2 O ): 54.86, 54.11。ESI-MS: m/z 701.4 [M+H]+ 。
呈白色泡沫狀物之1-14d ：(23 mg, 32.8 μmol, 43.5%)。1 H NMR (400 MHz,D2 O ): δ 8.40 (s, 1H), 8.24 (m, 1H), 7.97-7.95 (d,J =11.2 Hz, 2H),,6.00 (m, 1H), 5.16-5.12 (m, 2H), 4.81 (s, 1H), 4.68 (m, 1H), 4.38-4.35 (d,J =11.2 Hz , 1H), 4.28-4.22 (m, 3H), 3.84 (m, 1H), 3.69-3.67 (d,J =10.52 Hz, 1H), 1.81-1.80 (m, 1H), 1.67-1.66 (m, 1H), 1.03-1.00 (m, 1H)。31 P-NMR (162 MHz,D2 O ): 55.03, 50.63。ESI-MS: m/z 701.4 [M+H]+ 。 實例16 化合物1-15a及1-15b
Figure 02_image666
將化合物2m (700 mg, 629.49 μmol)溶解於無水CH3 CN (60.0 mL)中，添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(5.03 mmol, 11 mL)及4Å分子篩粉末(800 mg, 1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌20 min後，經25 min至30 min添加於CH3 CN (10.0 mL)中之4a (378 mg, 1.26 mmol)。攪拌2 h後，將混合物過濾且用無水CH3 CN洗滌。向此溶液中添加5 M t-BuOOH直至反應完成為止。在室溫下攪拌20-30 min後，利用飽和Na2 SO3 水溶液使反應淬滅(直至變色為止)。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1×)及飽和NaCl水溶液(1×)洗滌。用EtOAc (1×)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至60% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之1n (400 mg, 326.26 μmol, 51.8%)。ESI-MS: m/z 1227.4 [M+H]+ 。
利用MeNH2 於EtOH中之溶液(20 mL, 33%)處理化合物1n (400 mg, 326.26 μmol)。在40℃下攪拌2 h後，將混合物蒸發至乾燥。藉由反相製備型HPLC (管柱：XBridge 30×100 mm，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-0%至10% ACN，流速：20 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之2n-P1 (75 mg, 82.23 μmol, 25.2%)及2n-P2 (72 mg, 78.95 μmol, 24.2%)。2n-P1 ： 31 P-NMR (162 MHz, DMSO-d6 ): 51.86, -6.29。ESI-MS: m/z 913.3 [M+H]+ 。2n-P2 ： 31 P-NMR (162 MHz, DMSO-d6 ): 54.76, 54.53, -5.81, -6.26。ESI-MS: m/z 913.3 [M+H]+ 。
將2n-P1 (75 mg, 82.23 μmol)及3 HF• TEA (2.0 mL)於DMSO (2.0 mL)中之溶液在40℃下攪拌48 h。使混合物冷卻至室溫，且然後添加TEA (2 mL)及異丙氧基三甲基矽烷(16 mL)。將混合物在室溫下攪拌1 h，且然後蒸發至乾燥。藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-0%至15% ACN，流速：20 mL/min)純化殘餘物，以獲得呈白色泡沫狀物之氨鹽產物(42 mg, 61.4 μmol, 74.6%)。將一定體積之Amberlite IR-120 (15 mL，Na型)添加至管柱中且用去離子水(3 × 15 mL)洗滌。將氨鹽產物(42 mg)溶解於去離子水中(42 mg於15 mL中)，添加至管柱頂部且用去離子水溶析。如藉由TLC (UV)所檢測，化合物係在早期流份中溶析出。將產物凍乾，以得到呈白色泡沫狀物之1-15a (38 mg, 55.5 μmol, 90.4%)。1 H NMR (400 MHz,D2 O ): δ 8.71 (s, 1H), 8.04 (d,J = 13.6 Hz, 3H), 6.16 (d,J = 7.6 Hz, 1H), 5.24 (s, 1H), 5.07-5.03 (m, 1H), 4.83 (s, 1H), 4.56 (d,J = 10.8 Hz, 2H), 4.43 (d,J = 6 Hz, 2H), 4.16 (s, 2H), 3.60 (d,J = 10.8Hz, 1H), 1.83-1.78 (m, 1H), 1.63-1.60 (t,J = 4.8 Hz, 1H), 1.00-0.97 (t,J = 7.2 Hz, 1H)。31 P-NMR (162 MHz,D2 O ): 54.17, -3.03。ESI-MS: m/z 685.5 [M+H]+ 。化合物1-15b (28 mg, 40.93 μmol, 87.5%)係以類似方式使用呈白色泡沫狀物之2n-P2 來獲得。1 H NMR (400 MHz,D2 O ): δ 8.48 (s, 1H), 8.04-7.97 (t,J = 14.8 Hz, 3H), 6.17 (d,J = 8 Hz, 1H), 5.30-5.25 (m, 1H), 5.20-5.16 (t,J = 7.2 Hz, 1H), 4.77 (s, 1H), 4.53 (d,J = 10.8 Hz, 2H), 4.45 (s, 1H), 4.32-4.29 (t,J = 9.6 Hz, 1H), 4.18 (d,J = 6.4 Hz, 1H), 4.08-4.04 (m, 1H), 3.65 (d,J = 10.8 Hz, 1H), 1.78-1.76 (t,J = 8.4 Hz, 1H), 1.63-1.61 (t,J = 4.8 Hz, 1H), 1.00-0.96 (t,J = 7.2 Hz, 1H)。31 P-NMR (162 MHz, D2 O): 54.74, -2.73。ESI-MS: m/z 685.5 [M+H]+ 。 實例17 化合物1-16a及1-16b
Figure 02_image668
Figure 02_image670
將單體 C (780.00 mg, 0.89 mmol)及9g (650.00 mg, 0.81 mmol)溶解於無水CH3 CN (45.0 mL)中，且添加4Å分子篩粉末(1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌10 min後，在室溫下添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(4.88 mmol, 10.8 mL)。攪拌1 h後，將混合物過濾且用無水CH3 CN洗滌。添加0.1 M DDTT (溶劑：py)，直至反應完成為止。在室溫下攪拌20-30 min後，利用Na2 SO3 使反應淬滅(水溶液，直至變色為止)。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1×)及飽和NaCl水溶液(1×)洗滌。用EtOAc (1×)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至100% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之1o (1.10 g, 688.00 umol, 84.5%)。ESI-MS: m/z 1598.6 [M+H]+ 。
將化合物1o (1.10 g, 688.00 umol)溶解於DCA/DCM (3%, v/v, 19.50 mL)中，且立即添加三乙基矽烷(7.70 mL)。在室溫下攪拌30 min後，用EtOAc稀釋混合物且用飽和NaHCO3 水溶液中和。分離各層，且用飽和NaCl水溶液(1×)洗滌有機相。將水相合併且用EtOAc (3×)反萃取。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至80% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製殘餘物，以獲得呈白色泡沫狀物之2o (630 mg, 633.74 umol, 92.11%)。ESI-MS: m/z 994.5 [M+H]+ 。
將化合物2o (600 mg, 603.56 umol)溶解於無水CH3 CN (25.0 mL)中，添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(4.82 mmol, 10.73 mL)及4Å分子篩粉末(1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌20 min後，經30 min至40 min添加於CH3 CN (10.0 mL)中之4a (363.84 mg, 1.21 mmol)。攪拌2 h後，將混合物過濾且用無水CH3 CN洗滌。向此溶液中添加5 M t-BuOOH直至反應完成為止。在室溫下攪拌20-30 min後，利用飽和Na2 SO3 水溶液使反應淬滅(直至變色為止)。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1×)及飽和NaCl水溶液(1×)洗滌。用EtOAc (1×)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至60% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之3o (297 mg, 267.78 umol, 44.37%)。ESI-MS: m/z 1109.5 [M+H]+ 。
利用MeNH2 於EtOH中之溶液(42 mL, 33%)處理化合物3o (293 mg, 264.17 umol)。在40℃下攪拌3 h後，將混合物蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：XBridge 30×100 mm，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-0%至10% ACN，流速：20 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之4o-P1 (63 mg, 67.8 μmol, 25.6%)，31 P-NMR (162 MHz, DMSO-d 6 ): 57.98, -0.84，及4o-P2 (63 mg, 67.8 μmol, 25.6%)，31 P-NMR (162 MHz, DMSO-d 6 ): 53.31, -0.75。ESI-LMS: m/z 829.4 [M+H]+ 。
在40℃下將3 HF•TEA (1.0 mL)添加至4o-P1 (63 mg, 67.8 μmol)於DMSO (1 mL)中之混合物溶液達48 h，且然後冷卻至室溫。添加TEA (1.0 mL)及異丙氧基三甲基矽烷(8.0 mL)。將混合物在室溫下攪拌1 h，且然後蒸發至乾燥。藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 -0%至10% ACN，流速：20 mL/min)純化殘餘物，以獲得呈白色泡沫狀物之NH4 鹽產物(28 mg, 40.6 μmol, 50.2%)。將一定體積之Amberlite IR-120 (15 mL，Na型)添加至管柱中且用去離子水(3 × 15 mL)洗滌。將NH4 鹽產物(20 mg)溶解於去離子水中(20 mg於8 mL中)，添加至管柱頂部且用去離子水溶析。如藉由TLC (UV)所檢測，化合物係在早期流份中溶析出。將產物凍乾，以得到呈白色泡沫狀物之1-16a (19 mg, 23.3 μmol, 34.4%)。1 H NMR (400 MHz,D2 O ): δ 8.14 (s, 2H), 7.95 (s, 1H) , 5.87-5.85 (d,J = 8.4 Hz, 1H), 5.35-5.32 (m, 1H), 5.13-5.08 (m, 1H), 4.46 (s, 1H), 4.24-4.22 (m, 1H), 4.14-4.10 (m, 4H), 4.05-4.02 (m, 1H), 3.51 (s, 3H), 2.42 (m, 1H), 2.09-2.06 (m, 1H), 1.85-1.81 (m, 1H), 1.47-1.43 (m, 1H)。31 P-NMR (162 MHz,D2 O ): 56.50, -1.14。ESI-MS: m/z 715.3 [M+H]+ 。
化合物1-16b (白色，泡沫狀物，8 mg，9.8 μmol，14.5%)係以與1-16a 類似之方式使用4o-P2 來獲得。1 H NMR (400 MHz,D2 O ): δ 8.13 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.70 (s, 1H) , 5.83-5.81 (m, 1H), 5.41 (m, 1H), 5.23-5.18 (m, 1H), 4.52 (m, 1H), 4.40-4.38 (d,J = 10.56 Hz,, 1H), 4.31--4.28 (m, 1H),4.12 (m, 3H) 4.04-4.01 (m, 1H), 3.51 (s, 3H), 2.42 (m, 1H), 2.10-2.08 (m, 1H), 1.82-1.79 (m, 1H), 1.43-1.39 (m, 1H)。31 P-NMR (162 MHz,D2 O ): 50.33, -1.37。ESI-MS: m/z 715.3 [M+H]+ 。 實例18 化合物1-17
Figure 02_image672
將單體 E (468 mg, 0.48 mmol)及9g (350 mg, 0.43 mmol)溶解於無水CH3 CN (18.0 mL)中，且添加4Å分子篩粉末(1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌10 min後，在室溫下添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(2.63 mmol, 5.8 mL)。攪拌1 h後，將混合物過濾且用無水CH3 CN洗滌。向此溶液中添加5 M t-BuOOH直至反應完成為止。在室溫下攪拌20-30 min後，利用Na2 SO3 使反應淬滅(水溶液，直至變色為止)。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1×)及飽和NaCl水溶液(1×)洗滌。用EtOAc (1×)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至100% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之1p (680 mg, 92.4%)。ESI-MS: m/z 1683.1 [M+H]+ 。
將化合物1p (680 mg, 0.40 mmol)溶解於DCA/DCM (3%, v/v, 12.2 mL)中，且立即添加三乙基矽烷(4.8 mL)。在室溫下攪拌30 min後，用EtOAc稀釋混合物，且然後用飽和NaHCO3 水溶液中和。分離各層，且用飽和NaCl水溶液(1×)洗滌有機相。將水相合併且用EtOAc (3×)反萃取。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由矽膠管柱(於DCM中之0%至100%之丙酮)純化粗製殘餘物，以獲得呈白色泡沫狀物之2p (325 mg, 0.30 mmol, 74.7%)。ESI-MS: m/z 1078.5 [M+H]+ 。
將化合物2p (325 mg, 301.5 μmol)溶解於無水CH3 CN (20.0 mL)中，且添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(2.41 mmol, 5.36 mL)及4Å分子篩粉末(300 mg, 1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌20 min後，經30 min至40 min添加於CH3 CN (5.0 mL)中之4a (181.7 mg, 0.60 mmol)。攪拌2 h後，將混合物過濾，且然後用無水CH3 CN洗滌。向此溶液中添加5 M t-BuOOH直至反應完成為止。在室溫下攪拌20-30 min後，利用飽和Na2 SO3 水溶液使反應淬滅(直至變色為止)。用EtOAc稀釋混合物，且然後分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1×)及飽和NaCl水溶液(1×)洗滌。用EtOAc (1×)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至60% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之3p (134 mg, 112.3 μmol, 37.2%)。ESI-MS: m/z 1193.3 [M+H]+ 。
利用MeNH2 於EtOH中之溶液(24 mL, 33%)處理化合物3p (134 mg, 112.3 μmol)。在40℃下攪拌4 h後，將混合物蒸發至乾燥。藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-0%至30% ACN，流速：25 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之4p (43 mg, 47.1 μmol, 41.5%)。ESI-LMS: m/z 913.3 [M+H]+ 。
在40℃下將3 HF•TEA (1.5 mL)添加至4p (43 mg, 47.1 μmol)於DMSO (2 mL)中之混合物溶液達48小時。使混合物冷卻至室溫，且然後添加TEA (2.0 mL)及異丙氧基三甲基矽烷(16.0 mL)。將混合物在室溫下攪拌1 h，且然後蒸發至乾燥。藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 -0%至10% ACN，流速：20 mL/min)純化殘餘物，以獲得呈白色泡沫狀物之NH4 鹽產物(6 mg, 8.7 μmol, 18.5%)。將一定體積之Amberlite IR-120 (15 mL，Na型)添加至管柱中且用去離子水(3 × 15 mL)洗滌。將NH4 鹽產物(6 mg)溶解於去離子水中(6 mg於8 mL中)，且添加至管柱頂部。用去離子水對管柱進行溶析。如藉由TLC (UV)所檢測，化合物係在早期流份中溶析出。將產物凍乾，以得到呈白色泡沫狀物之1-17 (4.5 mg, 6.5 μmol, 13.8%)。1 H NMR (400 MHz,D2 O ): δ 8.26 (s, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.74 (s, 1H), 5.83-5.82 (m, 1H), 5.05-5.01 (m, 1H), 4.82 (m, 1H), 4.78 (m, 1H), 4.31 (m, 1H), 4.22-4.08 (m, 4H), 3.97-3.94 (m, 1H), 2.38 (s, 1H), 2.04-2.02 (m, 1H), 1.90-1.87 (m, 1H), 1.41 (m, 1H)。31 P-NMR (162 MHz,D2 O ): -0.50, -0.55。ESI-MS: m/z 685.4 [M+H]+ 。 實例19 化合物1-18
Figure 02_image674
將單體 B (300 mg, 0.45 mmol)及單體 C (426 mg, 0.49 mmol)溶解於無水CH3 CN (15.0 mL)中，且添加4Å分子篩粉末(1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌10 min後，在室溫下添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(2.7 mmol, 6.0 mL)。攪拌1 h後，將混合物過濾，且然後用無水CH3 CN洗滌。向此溶液中添加5 M t-BuOOH直至反應完成為止。在室溫下攪拌20-30 min後，利用Na2 SO3 使反應淬滅(水溶液，直至變色為止)。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(100 mL)及飽和NaCl水溶液(100 mL)洗滌。用EtOAc (1 × 50 mL)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至100% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之1q (600 mg, 0.41 mmol 91.1%)。ESI-MS: m/z 1458.5 [M+H]+ 。
將化合物1q (600 mg, 0.41 mmol)溶解於DCA/DCM (3%, v/v, 12.2 mL)中，且立即添加三乙基矽烷(4.8 mL)。在室溫下攪拌30 min後，用EtOAc稀釋混合物，且然後用飽和NaHCO3 水溶液中和。分離各層，且將有機相用飽和NaCl水溶液(1 × 50 mL)洗滌。將水相合併且用EtOAc (3 × 50 mL)反萃取。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由矽膠管柱(於DCM中之0%至100%之丙酮)純化粗製殘餘物，以獲得呈白色泡沫狀物之2q (250 mg, 0.29 mmol, 71.5%)。ESI-MS: m/z 854.2 [M+H]+ 。
將化合物2q (250 mg, 0.29 mmol)溶解於無水CH3 CN (20.0 mL)中，且添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(2.32 mmol, 5.1 mL)及4Å分子篩粉末(300 mg, 1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌20 min後，經30 min至40 min添加於CH3 CN (5.0 mL)中之4a (192 mg, 0.58 mmol)。攪拌2 h後，將混合物過濾且然後用無水CH3 CN洗滌。向此溶液中添加5 M t-BuOOH直至反應完成為止。在室溫下攪拌20-30 min後，利用飽和Na2 SO3 水溶液使反應淬滅(直至變色為止)。用EtOAc稀釋混合物，且然後分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1 × 50 mL)及飽和NaCl水溶液(1 × 50 mL)洗滌。用EtOAc (1 × 100 mL)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至60% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製材料，以得到呈白色泡沫狀物之3q (100 mg, 103.3 μmol, 35.5%)。ESI-MS: m/z 969.2 [M+H]+ 。
利用7 M NH3 於MeOH中之溶液(10 mL, 33%)處理化合物3q (100 mg, 103.3 μmol)。在室溫下攪拌12 h後，將混合物蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-0%至30% ACN，流速：25 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之NH4 鹽產物(24 mg, 34.9 μmol, 33.7%)。將一定體積之Amberlite IR-120 (15 mL，Na型)添加至管柱中且用去離子水(3 × 15 mL)洗滌。將NH4 鹽產物(24 mg)溶解於去離子水中(24 mg於8 mL中)，添加至管柱頂部且用去離子水溶析。如藉由TLC (UV)所檢測，化合物係在早期流份中溶析出。將產物凍乾，以得到呈白色泡沫狀物之1-18 (20 mg, 29.1 μmol, 83.3%)。1 H NMR (400 MHz,D2 O ): δ 8.18 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.92 (s, 1H), 5.88-5.85 (t,J = 8.4 Hz, 2H), 5.43-5.37 (m, 1H), 5.01-4.98 (t,J = 5.6 Hz, 1H), 4.50 (s, 1H), 4.31 (m, 1H), 4.20-4.16 (m, 4H), 4.04 (s, 2H), 3.52 (s, 3H), 2.74-2.67 (m, 1H), 2.58-2.52 (m, 1H)。31 P-NMR (162 MHz,D2 O ): -0.88, -1.52。ESI-MS: m/z 689.1 [M+H]+ 。 實例20 化合物1-19a及1-19b
Figure 02_image676
將化合物7i (1.35 g, 1.54 mmol)及6i (1.0 g, 1.28 mmol)溶解於無水CH3 CN (30.0 mL)中，且添加4Å分子篩粉末(1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌10 min後，在室溫下添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(13.5 mmol, 30.0 mL)。攪拌1 h後，將混合物過濾，且然後用無水CH3 CN洗滌。向此溶液中添加5 M t-BuOOH直至反應完成為止。在室溫下攪拌20-30 min後，利用Na2 SO3 使反應淬滅(水溶液，直至變色為止)。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1×)及飽和NaCl水溶液(1×)洗滌。用EtOAc (1×)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至100% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之1r (1.8 g, 88.1%)。ESI-MS: m/z 1570.3 [M+H]+ 。
將化合物1r (1.8 g, 1.14 mmol)溶解於DCA/DCM (3%, v/v, 30.0 mL)中，且立即添加三乙基矽烷(5.0 mL)。在室溫下攪拌30 min後，用EtOAc稀釋混合物，且然後用飽和NaHCO3 水溶液中和。分離各層，且然後將有機相用飽和NaCl水溶液(1×)洗滌。將水相合併且用EtOAc (3×)反萃取。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至80% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製殘餘物，以獲得呈白色泡沫狀物之2r (600 mg, 0.62 mmol, 55.8%)。ESI-MS: m/z 966.0 [M+H]+ 。
將化合物2r (600 mg, 0.62 mmol)溶解於無水CH3 CN (44.0 mL)中，添加於ace CH3 CN中之0.45 M四唑(9.0 mmol, 20 mL)及4Å分子篩粉末(1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌20 min後，經30 min至40 min添加於CH3 CN (10.0 mL)中之4a (450 mg, 1.49 mmol)。攪拌2 h後，將混合物過濾且然後用無水CH3 CN洗滌。向此添加0.1 M DDTT (溶劑：py)，直至反應完成為止。在室溫下攪拌20-30 min後，利用飽和Na2 SO3 水溶液使反應淬滅。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1×)及飽和NaCl水溶液(1×)洗滌。用EtOAc (1×)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至60% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之3r (400 mg, 364.1 μmol, 58.5%)。ESI-MS: m/z 1097.0 [M+H]+ 。
利用33% MeNH2 於EtOH (10 mL)中之溶液處理化合物3r (400 mg, 364.1 μmol)。在40℃下攪拌3 h後，將混合物蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-0%至30% ACN，流速：25 mL/min)純化粗製材料，以得到呈白色泡沫狀物之4r (260 mg, 319.0 umol, 22.1%)。ESI-LMS: m/z 817.2 [M+H]+ 。
將4r (260 mg, 319.39 μmol)及3 HF• TEA (2.0 mL)於DMSO (2.0 mL)中之溶液在40℃下攪拌48 h。使混合物冷卻至室溫，且然後添加TEA (2.0 mL)及異丙氧基三甲基矽烷(16.0 mL)。將混合物在室溫下攪拌1 h，且然後蒸發至乾燥。藉由反相製備型HPLC (管柱：XBridge 30 × 100 mm，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 -0%至10% ACN，流速：20 mL/min)純化殘餘物，以獲得呈白色泡沫狀物之氨鹽產物6s-P1 (25.0 mg, 35.61μmol, 11.5%)及6s-P2 (80 mg, 126.45 μmol, 35.6%)。將一定體積之Amberlite IR-120 (15 mL，Na型)添加至管柱中且用去離子水(3 × 15 mL)洗滌。將每一氨鹽產物溶解於去離子水(15 mL)中，添加至管柱頂部且用去離子水溶析。如藉由TLC (UV)所檢測，每一化合物係在早期流份中溶析出。將產物凍乾，以得到呈白色泡沫狀物之1-19a (7.0 mg, 10.70 umol, 28.1%)及1-19b (61.2 mg, 87.01 umol, 76.2%)。
1-19a ： 1 H NMR (400 MHz,D2 O ): δ 8.23 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 5.80 (d,J = 16.86 Hz, 1H), 5.86 (dd,J = 3.48 Hz, 3.48 Hz,1H), 5.05 (m,1H), 4.75 (m, 2H), 4.56 (s, 2H), 4.51 (d,J = 8.52 Hz, 1H), 4.43-4.34 (m, 2H), 4.19-4.15 (m, 2H), 3.64 (d,J = 9.96 Hz,1H), 1.85-1.82 (m, 1H),1.57(t,J = 4.8Hz,1H)。19 F NMR (162 MHz, D2 O): -201.59。31 P NMR (162 MHz,D2 O ): 53.97, -1.43。ESI-MS: m/z703.4 [M+H]+ 。
1-19b ： 1 H NMR (400 MHz, D2 O): δ 8.09 (s, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.71 (s, -1H), 6.01 (d,J =11.2 Hz, 1H), 5.72-5.59 (d,J =50.2 Hz, 1H), 5.12 (m, 2H), 4.49-4.35 (m, 4H), 4.10 (d,J =50.8 Hz, 2H), 3.56 (s, 1H), 1.87 (s, 1H) ,1.60 (s, 1H), 0.917 (s, 1H)。19 F NMR (162 MHz, D2 O): -204.36。31 P-NMR (162 MHz,D2 O ): 51.21, -3.65。ESI-MS: m/z703.4 [M+H]+ 。 實例21 化合物1-20a及1-20b
Figure 02_image678
將化合物1s (1.00 g, 1.75 mmol)及1k (2.09 g, 2.09 mmol)溶解於無水CH3 CN (40.0 mL)中，且添加4Å分子篩粉末(400 mg, 1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌20 min後，在室溫下添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(10.49 mmol, 40.0 mL)。攪拌1 h後，將混合物過濾且然後用無水CH3 CN洗滌。向此溶液中添加5 M t-BuOOH直至反應完成為止。在室溫下攪拌20-30 min後，將混合物過濾。利用Na2 SO3 (水溶液)使反應淬滅。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1 × 50.0 mL)及飽和NaCl水溶液(1 × 50.0 mL)洗滌。用EtOAc (1 × 50.0 mL)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-60%至100% ACN，流速：35.0 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之2s (2.20g, 1.48 mmol, 84.6%)。ESI-MS: m/z 1485.6 [M+H]+ 。
將化合物2s (1.60 g, 1.08 mmol)溶解於DCA/DCM (3%, v/v, 30.0 mL)中，且立即添加三乙基矽烷(10.0 mL)。在室溫下攪拌20 min後，利用冰飽和NaHCO3 (水溶液)使反應中和。用EtOAc (3 × 60.0 mL)萃取混合物。將有機層用飽和NaCl水溶液(1× 150.0 mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥且在減壓下濃縮以得到殘餘物。藉由矽膠管柱層析(DCM/丙酮，0-100%丙酮)純化粗製殘餘物，以得到呈白色固體之3s (812.50 mg, 922.35 μmol, 85.4%)。ESI-MS: m/z 881.4 [M+H]+ 。
將化合物3s (812.50 mg, 922.35 μmol)溶解於無水CH3 CN (100.0 mL)中，添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(77.39 mmol, 29.55mL)及4Å分子篩粉末(1.0 g, 1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌20 min後，經25 min至30 min在室溫下添加於CH3 CN (10.0 mL)中之4a (485.50 mg, 1.52 mmol)。攪拌2 h後，將混合物過濾且然後用無水CH3 CN洗滌。向此溶液中添加0.1 M DDTT直至反應完成為止。在室溫下攪拌20-30 min後，利用飽和NaS2 O3 水溶液使反應淬滅。用EtOAc稀釋混合物，且分離有機層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1 × 50.0 mL)及飽和NaCl水溶液(1 × 50.0 mL)洗滌。用EtOAc (1×)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至60% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之4s (400 mg, 395.53 μmol, 42.9%)。ESI-MS: m/z 1012.3 [M+H]+ 。
利用MeNH2 於EtOH中之溶液(12.0 mL, 33%)處理化合物4s (400 mg, 395.53 μmol)。在40℃下攪拌2 h後，將混合物蒸發至乾燥。藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40 g，移動相A：於水中之0.05% NH4 HCO3 ，m/m-0%至10% ACN，流速：20 mL/min)純化粗製材料，以得到呈白色泡沫狀物之5s (300 mg, 374.39 μmol, 94.7%)。ESI-MS: m/z 802.3 [M+H]+ 。
將5s (300 mg, 374.39 μmol)及3 HF• TEA (2.0 mL)於DMSO (2.0 mL)中之溶液在40℃下攪拌48 h。使混合物冷卻至室溫，且然後添加TEA (2.0 mL)及異丙氧基三甲基矽烷(16.0 mL)。將混合物在室溫下攪拌1 h，且然後蒸發至乾燥。藉由反相製備型HPLC (管柱：XBridge 30 × 100 mm，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-0%至12% ACN，流速：15 mL/min)純化殘餘物，以獲得呈白色泡沫狀物之氨鹽產物7s-P1 (62.5 mg, 90.96 μmol, 24.3%)及7s-P2 (80 mg, 116.42μmol, 31.1%)。將一定體積之Amberlite IR-120 (15 mL，Na型)添加至管柱中且用去離子水(3 × 15 mL)洗滌。將氨鹽產物溶解於去離子水(15 mL)中，添加至管柱頂部且用去離子水溶析。如藉由TLC (UV)所檢測，化合物係在早期流份中溶析出。將產物凍乾，以得到呈白色泡沫狀物之1-20a (52 mg, 73.24 μmol, 80.5%)及1-20b (74 mg, 104.23 μmol, 89.5%)。
1-20a ： 1 H NMR (400 MHz,D2 O ): δ 8.34 (d,J = 5Hz, 2H), 8.07 (d,J = 3.28 Hz, 1H), 7.86 (s, 1H), 6.33 (d,J = 16.4 Hz, 1H), 5.57 (d,J = 51.92Hz, 1H), 5.08 (m, 2H), 4.80 (d,J = 2.56Hz, 1H), 4.53 (m, 4H), 4.20 (d,J = 11.36 Hz, 1H), 3.56 (d,J= 10.84 Hz,1H), 1.96(s, 1H), 1.62 (s, 1H), 1.00 (s, 1H)。19 F NMR (376 MHz,D2 O ): -201.93。31 P NMR (162 MHz,D2 O ): 54.26, -1.95。ESI-MS: m/z 688.1 [M+H]+
1-20b ： 1 H NMR (400 MHz,D2 O ): δ 8.23 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.88 (d, 2H), 6.26 (d,J = 16.36 Hz 1H), 5.57 (m, 1H), 5.21 (t,J = 7.28 Hz, 1H), 5.08 (m, 1H), 4.47 (m, 4H), 4.14 (m, 2H), 3.55 (s, 1H), 1.96 (d,J = 4.92Hz, 1H), 1.64 (s, 1H), 0.99 (t,J = 7.24 Hz, 1H)。19 F NMR (376 MHz,D2 O ): -202.14。31 P NMR (162 MHz,D2 O ): 54.10, -2.03。ESI-MS: m/z 688.1 [M+H]+ 實例22 化合物1-21a及1-21b
Figure 02_image680
將化合物1t (1.00 g, 1.38 mmol)及2t (1.28 g, 1.50 mmol)溶解於無水CH3 CN (30.0 mL)中，且添加4Å分子篩粉末(300 mg, 1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌20 min後，在室溫下添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(10.03 mmol, 40.0 mL)。攪拌1 h後，將混合物過濾且然後用無水CH3 CN洗滌。向此溶液中添加5 M t-BuOOH直至反應完成為止。在室溫下攪拌20-30 min後，將混合物過濾，且然後利用Na2 SO3 (水溶液)使反應淬滅。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1 × 50.0 mL)及飽和NaCl水溶液(1 × 50.0 mL)洗滌。用EtOAc (1 × 50.0 mL)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-60%至100% ACN，流速：35.0 mL /min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之3t (1.80 g, 1.15 mmol, 83.3%)。ESI-MS: m/z 1566.5 [M+H]+ 。
將化合物3t (1.60 g, 1.15 mmol)溶解於DCA/DCM (3%, v/v, 50.0 mL)中，且立即添加三乙基矽烷(30.0 mL)。在室溫下攪拌20 min後，利用冰飽和NaHCO3 (水溶液)使混合物中和，且然後用EtOAc (3 × 60.0 mL)萃取。將有機層用飽和NaCl水溶液(1 × 150.0 mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥且在減壓下濃縮以得到殘餘物。藉由矽膠管柱層析(DCM/丙酮，0-100%丙酮)純化粗製殘餘物，以得到呈白色固體之4t (800.00 mg, 832.45 μmol, 72.4%)。ESI-MS: m/z= 961.4 [M+H]+ 。
將化合物4t (700.00 mg, 728.39 μmol)溶解於無水CH3 CN (100.0 mL)中，添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(5.83 mmol, 23.31mL)及4Å分子篩粉末(10.0 g, 1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌20 min後，經25 min至30 min在室溫下添加於CH3 CN (10.0 mL)中之4a (435.80 mg, 1.45 mmol)。攪拌2 h後，將混合物過濾且然後用無水CH3 CN洗滌。向此溶液中添加0.1 M DDTT直至反應完成為止。在室溫下攪拌20-30 min後，利用飽和NaS2 O3 水溶液使反應淬滅。用EtOAc稀釋混合物，且分離有機層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1 × 50.0 mL)及飽和NaCl水溶液(1 × 50.0 mL)洗滌。用EtOAc (1 × 100 mL)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至60% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之5t (400 mg, 366.26 μmol, 50.28%)。ESI-MS: m/z 1092.3 [M+H]+ 。
利用MeNH2 於EtOH中之溶液(12.0 mL, 33%)處理化合物5t (400 mg, 366.26 μmol)。在40℃下攪拌2 h後，將混合物蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40 g，移動相A：於水中之0.05% NH4 HCO3 ，m/m-0%至10% ACN，流速：20 mL/min)純化粗製材料，以得到呈白色泡沫狀物之6t (300 mg, 362.85 μmol, 99.07%)。ESI-MS: m/z 827.3 [M+H]+ 。
將6t (300 mg, 362.85 μmol)及3 HF• TEA (2.0 mL)於DMSO (2.0 mL)中之溶液在40℃下攪拌48 h。使混合物冷卻至室溫，且然後添加TEA (2.0 mL)及異丙氧基三甲基矽烷(16.0 mL)。將混合物在室溫下攪拌1 h，且然後蒸發至乾燥。藉由反相製備型HPLC (管柱：XBridge 30 × 100 mm，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 -0%至15% ACN，流速：20 mL/min)純化殘餘物，以獲得呈白色泡沫狀物之氨鹽產物7t-P1 (70.00 mg, 98.31μmol, 27.0%)及7t-P2 (20 mg, 28.09μmol, 7.7%)。將一定體積之Amberlite IR-120 (15 mL，Na型)添加至管柱中且用去離子水(3 × 15 mL)洗滌。將氨鹽產物溶解於去離子水(15 mL)中，添加至管柱頂部且用去離子水溶析。如藉由TLC (UV)所檢測，化合物係在早期流份中溶析出。將產物凍乾，以得到呈白色泡沫狀物之1-21a (50.00 mg, 66.14 μmol, 67.3%)及1-21b (19.00 mg, 25.13 μmol, 89.5%)。
1-21a ： 1 H NMR (400 MHz,D2 O ): δ 8.31 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.9 (s,1H), 5.8 (s, 1H), 5.09 (m, 1H), 4.85 (s, 1H), 4.83 (d, J=5.8 Hz, 2H), 4.77 (s, 1H), 4.48 (d, J=10.2 Hz, 1H), 4.36 (m, J=6.16 Hz, 2H), 4.24 (d, J=11.32 Hz, 1H), 4.09 (d, J=8.12 Hz, 1H), 3.99 (d, J=8.16 Hz, 1H)。31 P NMR (162 MHz,D2 O ): 54.30, -1.91。ESI-MS: m/z 713.2 [M+H]+ 。
1-21b ： 1 H NMR (400 MHz,D2 O ): δ 8.32 (s, 1H), 8.00 (d, J=16.8 Hz, 1H), 7.65 (d, J=14.52 Hz, 1H) 5.86 (d, J=6.36 Hz, 1H) 5.17 (t, J=7.36 Hz, 1H), 4.94 (d, J=6.9 2Hz, 1H), 4.86 (s, 1H), 4.79 (s, 1H), 4.51 (d, J=10.2 Hz, 1H), 4.41 (d, J=11.64 Hz, 1H), 4.16 (m, 2H), 4.10 (d, J=8.2 Hz, 1H), 3.98 (d, J=8.12 Hz, 1H) 3.53 (d, J=10.96 Hz, 1H)。31 P NMR (162 MHz,D2 O ): 54.10, -2.06。ESI-MS: m/z 713.2 [M+H]+ 。 實例23 化合物1-22a及1-22b
Figure 02_image682
將化合物2u (1.0 g, 1.54 mmol)及1u (1.3 g, 1.85 mmol)溶解於無水CH3 CN (30.0 mL)中，且添加4Å分子篩粉末(1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌10 min後，在室溫下添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(13.5 mmol, 30.0 mL)。在攪拌1 h後，將混合物過濾，且然後用無水CH3 CN洗滌。向此溶液中添加0.1 M DDTT (溶劑：py)，直至反應完成為止。在室溫下攪拌20-30 min後，利用Na2 SO3 使反應淬滅(水溶液，直至變色為止)。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1×)及飽和NaCl水溶液(1×)洗滌。用EtOAc (1×)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至100% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之3u (1.9 g, 85.0%)。ESI-MS: m/z 1768.3 [M+H]+ 。
將化合物3u (1.9 g, 1.07 mmol)溶解於DCA/DCM (3%, v/v, 30.0 mL)中，且立即添加三乙基矽烷(5.0 mL)。在室溫下攪拌30 min後，用EtOAc稀釋混合物，且然後用飽和NaHCO3 水溶液中和。分離各層，且用飽和NaCl水溶液(1×)洗滌有機相。將水相合併且用EtOAc (3×)反萃取。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至80% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製殘餘物，以獲得呈白色泡沫狀物之4u (1.0 g, 0.85 mmol, 81.0%)。ESI-MS: m/z 966.0 [M+H]+ 。
將化合物4u (1.0 g, 0.85 mmol)溶解於無水CH3 CN (80.0 mL)中，添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(14.0 mmol, 32 mL)及4Å分子篩粉末(1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌20 min後，經30 min至40 min添加於CH3 CN (10.0 mL)中之5e (600 mg, 1.70 mmol)。攪拌2 h後，將混合物過濾且然後用無水CH3 CN洗滌。向此溶液中添加5 M t-BuOOH直至反應完成為止。在室溫下攪拌20-30 min後，利用飽和Na2 SO3 水溶液使反應淬滅(直至變色為止)。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1×)及飽和NaCl水溶液(1×)洗滌。用EtOAc (1×)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至60% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之5u (500 mg, 391.1 μmol, 46.5%)。ESI-MS: m/z 1278.0 [M+H]+ 。
利用MeNH2 於EtOH中之溶液(10 mL, 33%)處理化合物5u (500 mg, 391.1 μmol)。在40℃下攪拌3 h後，將混合物蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-0%至30% ACN，流速：25 ml /min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之6u (200 mg, 245.00 umol, 63.1%)。ESI-LMS: m/z 817.2 [M+H]+ 。
將6u (200 mg, 245.00 μmol)及3 HF• TEA (2.0 mL)於DMSO (2.0 mL)中之溶液在40℃下攪拌48 h。使混合物冷卻至室溫，且然後添加TEA (2.0 mL)及異丙氧基三甲基矽烷(16.0 mL)。將混合物在室溫下攪拌1 h，且然後蒸發至乾燥。藉由反相製備型HPLC (管柱：XBridge 30 × 100 mm，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 -0%至13% ACN，流速：20 mL/min)純化殘餘物，以獲得呈白色泡沫狀物之氨鹽產物7u-P1 (55.0 mg, 78.34 μmol, 31.84%)及7u-P2 (31 mg, 44.45 μmol, 12.60%)。將一定體積之Amberlite IR-120 (15 mL，Na型)添加至管柱中且用去離子水(3 × 15 mL)洗滌。將氨鹽產物溶解於去離子水(15 mL)中，添加至管柱頂部且用去離子水溶析。如藉由TLC (UV)所檢測，化合物係在早期流份中溶析出。將產物凍乾，以得到呈白色泡沫狀物之1-22a (28.0 mg, 37.83 umol, 50.9%)及1-22b (16.0 mg, 21.62 umol, 51.6%)。
1-22a ： 1 H NMR (400 MHz,D2 O ): δ 8.10 (s, 2H), 7.81 (s, 1H), 5.86 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.45 (t, J = 44.4 Hz, 2H), 5.10 (s, 1H), 4.62 (s, 2H), 4.41 (d, J = 9.9 Hz, 1H), 4.31 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 4.20 (s, 1H), 4.09 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 3.53 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 1.55 (d, J = 18.5 Hz, 2H), 0.96 (s, 1H)。19 F NMR (376 MHz,D2 O ): -200.39。31 P NMR (162 MHz,D2 O ): 52.48, -3.52。ESI-MS: m/z 703.4 [M+H]+ 。
1-22b ： 1 H NMR (400 MHz,D2 O ): δ 8.20 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.79 (s, 1H), 5.94 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 5.66 (d, J = 26.7 Hz, 1H), 5.55 - 5.21 (m, 2H), 4.77 (s, 2H), 4.45 (dd, J = 26.4, 11.2 Hz, 2H), 4.14 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 4.01 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 3.58 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 1.87 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 1.70 (s, 1H), 0.99 (d, J = 6.7 Hz, 1H)。19 F NMR (376 MHz,D2 O ): -200.66。31 P NMR (162 MHz,D2 O ): 54.81, -3.07。ESI-MS: m/z 703.4 [M+H]+ 。 實例23 化合物1-23
Figure 02_image684
將化合物6i (500 mg, 0.64 mmol)溶解於無水CH3 CN (15.0 mL)中，且添加11 (695 mg, 0.70 mmol)及4Å分子篩粉末(150 mg, 1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌20 min後，在室溫下添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(3.84 mmol, 15 mL)。攪拌1 h後，將混合物過濾且然後用無水CH3 CN洗滌。向此溶液中添加5 M t-BuOOH直至反應完成為止。在室溫下攪拌20-30 min後，利用Na2 SO3 使反應淬滅(水溶液，直至變色為止)。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1×)及飽和NaCl水溶液(1×)洗滌。用EtOAc (1×)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-60%至100% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之1v (670 mg, 0.40 mmol, 62.1%)。ESI-MS: m/z 1680.7 [M+H]+ 。
將化合物1v (670 mg, 0.40 mmol)溶解於DCA/DCM (3%, v/v, 13 mL)中，且立即添加三乙基矽烷(5.0 mL)。在室溫下攪拌30 min後，用EtOAc稀釋混合物，且然後用飽和NaHCO3 中和。分離各層，且將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1×)及飽和NaCl水溶液(1×)洗滌。用EtOAc (1×)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由矽膠(DCM:丙酮，0:100)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之2v (350 mg, 0.32 mmol, 81.8%)。ESI-MS: m/z 1076 [M+H]+ 。
將化合物2v (350 mg, 0.32 mmol)溶解於無水CH3 CN (30.0 mL)中，添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(2.56 mmol, 10.5 mL)及4Å分子篩粉末(600 mg, 1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌20 min後，經25 min至30 min添加於CH3 CN (5.0 mL)中之4a (196 mg, 0.64 mmol)。攪拌2 h後，將混合物過濾，且然後用無水CH3 CN洗滌。向此溶液中添加5 M t-BuOOH直至反應完成為止。在室溫下攪拌20-30 min後，利用飽和Na2 SO3 水溶液使反應淬滅(直至變色為止)。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1×)及飽和NaCl水溶液(1×)洗滌。用EtOAc (1×)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至80% ACN，流速：20 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之3v (150 mg, 126.05 μmol, 38.7%)。ESI-MS: m/z 1191 [M+H]+ 。
利用33% MeNH2 於EtOH (10 mL)中之溶液處理化合物3 v (150 mg, 126.05 μmol)。在40℃下攪拌2 h後，將混合物蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 20 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-0%至30% ACN，流速：15 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之4v (71 mg, 104.03 umol, 79.0%)。ESI-MS: m/z 994 [M+H]+ 。
將4v (71 mg, 104.03 umol)及3 HF•TEA (0.5 mL)於THF (3.0 mL)中之溶液在40℃下攪拌48 h。使混合物冷卻至室溫，且然後添加TEA (2 mL)及異丙氧基三甲基矽烷(16 mL)。將混合物在室溫下攪拌1 h，且然後蒸發至乾燥。藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 12 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-0%至10% ACN，流速：10 mL/min)純化殘餘物，以獲得呈白色泡沫狀物之銨鹽化合物(5v ) (28 mg)。將一定體積之Amberlite IR-120 (12 mL，Na型)添加至管柱中且用去離子水(5 × 15 mL)洗滌。將銨鹽產物(28 mg)溶解於去離子水中(88 mg於10 mL中)，添加至管柱頂部且用去離子水溶析。如藉由TLC (UV)所檢測，化合物係在早期流份中溶析出。將產物凍乾，以得到呈白色泡沫狀物之1-23 (20 mg, 2.10 μmol, 38.5%)。1 H NMR (400 MHz,D2 O ): δ 8.26 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 5.07-5.03 (t, J = 12 Hz, 1H), 4.83-4.78 (m, 2H), 4.60-4.55 (m, 1H), 4.48-4.45 (t, J = 12 Hz, 2H), 4.12-4.09 (t, 2H), 4.00-3.98 (d, J = 8 Hz, 1H), 3.53-3.50 (d, J = 8 Hz, 1H), 2.55-2.47 (m, 2H), 2.06-1.98 (m, 1H), 1.81-1.79 (d, J = 8 Hz, 1H), 1.52 (s, 1H), 0.95-0.91 (t, J = 12Hz, 1H)。31 P NMR (162 MHz,D2 O ): -0.58, -0.91。ESI-MS: m/z 727 [M+H]+ 。 實例24 化合物1-27
Figure 02_image686
向100 mL圓底燒瓶中添加1w (1.50 g, 4.29 mmol)、DMF (15 mL)及咪唑(1.75 g, 25.76 mmol)。然後將於DMF (5 mL)中之TBSCl (1.42 g, 9.45 mmol)逐滴添加至混合物，且將混合物在室溫下攪拌3 h。將混合物添加至NaHCO3 水溶液且用EtOAc (5 × 50 mL)萃取。將合併之EtOAc層用鹽水洗滌且在真空中濃縮以得到粗產物，藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 -50%至75% ACN，流速：25 ml /min)對其進行純化，以獲得呈白色固體之2w (1.0 g, 2.16 mmol, 50.24%)。ESI-MS: m/z 464.2 [M+H]+ 。
向250 mL圓底燒瓶中依次添加2w (1.50 g, 3.24 mmol)、DCE (25 mL)、2,6-二甲基吡啶(1.39 g, 12.94 mmol)。添加硝酸銀(549.62 mg, 3.24 mmol)及4,4'-二甲氧基三苯甲基氯(2.74 g, 8.09 mmol)，且將混合物在40℃下攪拌2 h。向混合物中添加DCM (10 mL)且過濾。將濾液在真空中濃縮以得到粗產物，藉由矽膠管柱(EtOAc:PE, 1:1)對其進行純化，以獲得呈白色固體之3w (2.38 g, 3.11 mmol, 96.03%)。ESI-MS: m/z 766.4 [M+H]+ 。
在室溫下將於THF (10 ml)中之化合物3w (2.38 g, 3.11 mmol)添加至三乙胺(3.14 g, 31.07 mmol, 4.33 mL)及三乙胺三氫氟酸鹽(2.00 g, 12.43 mmol)於THF (20 mL)中之溶液。將混合物在40℃下攪拌16 h。將混合物添加至NaHCO3 水溶液且用EtOAc (5 × 100 mL)萃取。將合併之EtOAc層用鹽水洗滌且在真空中濃縮以得到粗產物，藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 -30%至75% ACN，流速：25 ml /min)對其進行純化，以獲得呈白色固體之4w (1.6 g, 2.46 mmol, 79.01%)。ESI-MS: m/z 652.3 [M+H]+
將化合物4w (600 mg, 920.66 umol)及單體 F (1.06 g, 1.20 mmol)溶解於無水CH3 CN (36.0 mL)中，且添加4Å分子篩粉末(300 mg, 1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌20 min後，在室溫下添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(5.52 mmol, 12.3 mL)。攪拌1 h且過濾後，用無水CH3 CN洗滌混合物。向此溶液中添加5 M t-BuOOH直至反應完成為止。在室溫下攪拌20-30 min後，將混合物過濾，且然後利用Na2 SO3 (水溶液)使反應淬滅。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1 × 50.0 mL)及飽和NaCl水溶液(1 × 50.0 mL)洗滌。用EtOAc (1 × 50.0 mL)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-60%至100% ACN，流速：35.0 mL /min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之5w (1.24 g, 853.73 umol, 92.73%)。31 P-NMR (162 MHz, DMSO-d6 ): -3.15, -3.20。ESI-MS: m/z 1452.6 [M+H]+ 。
將化合物5w (1.24 g, 853.73 umol)溶解於DCA/DCM (3%, v/v, 22.0 mL)中，且立即添加三乙基矽烷(8.7 mL)。在室溫下攪拌20 min後，利用吡啶(22 mL)使混合物中和。然後將混合物在真空中濃縮以獲得粗產物，藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-0%至60% ACN，流速：35.0 mL /min)對其進行純化，以獲得呈白色固體之6w (580 mg, 684.18 umol, 80.14%)。ESI-MS: m/z= 961.4 [M+H]+ 。
將化合物6w (520 mg, 613.41 umol)溶解於無水CH3 CN (78.0 mL)中，添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(4.91 mmol, 10.90 mL)及4 Å分子篩粉末(10.0 g, 1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌後，經25 min至30 min在室溫下添加於CH3 CN (10.0 mL)中之4a (369.77 mg, 1.23 mmol)。攪拌2 h後，將混合物過濾且然後用無水CH3 CN洗滌。向此溶液中添加5 M t-BuOOH直至反應完成為止。在室溫下攪拌20-30 min後，利用飽和NaS2 O3 水溶液使反應淬滅。用EtOAc稀釋混合物，且分離有機層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1 × 50.0 mL)及飽和NaCl水溶液(1 × 50.0 mL)洗滌。用EtOAc (1 × 100 mL)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-0%至50% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之7w (30 mg, 31.16 umol, 5.08%)。ESI-MS: m/z 963.4 [M+H]+ 。
利用MeNH2 於EtOH中之溶液(16.0 mL, 33%)處理化合物7w (33 mg, 34.28 umol)。在40℃下攪拌2 h後，將混合物蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40g，移動相A：於水中之0.05% NH4 HCO3 ，m/m-0%至10% ACN，流速：20 ml /min)純化粗製材料，以得到呈白色泡沫狀物之NH4 鹽產物8 (20.5 mg, 30.04 umol, 87.64%)。將15.0 mL體積之Amberlite IR-120 (Na型)添加至管柱中且用去離子水(3 × 15 mL)洗滌。將NH4 鹽產物(20.5 mg)溶解於去離子水中(15 mg於10 mL中)，且然後添加至管柱頂部。用去離子水對管柱進行溶析。如藉由TLC (UV)所檢測，化合物係在早期流份中溶析出。將產物凍乾，以得到呈白色泡沫狀物之化合物1-27 (18 mg, 26.37 umol, 76.95%)。1 H NMR (400 MHz,D2 O )δ :  8.14 (s, 1H), 7.75 (d,J = 17.0 Hz, 2H), 6.04 (s, 1H), 5.79-5.72 (m, 1H), 5.56 (d,J = 7.2 Hz, 1H), 5.18 (d,J = 18.8 Hz, 3H), 4.50 - 4.36 (m, 3H), 4.13 (d,J = 8.2 Hz, 1H), 3.95 (d,J = 8.2 Hz, 1H), 3.80 (t,J = 12.4 Hz, 1H), 2.06 (q,J = 6.8 Hz, 1H), 1.60 (t,J = 7.0 Hz, 1H), 1.17 (t,J = 8.5 Hz, 1H)。31 P-NMR (162 MHz, DMSO-d6 ): -1.64, -2.73。ESI-MS: m/z 683.4 [M+H]+ 。 實例25 化合物1-24
Figure 02_image688
在0℃下向1x (450 mg, 577.7 umol)於DCM (10 mL)中之溶液添加DIPEA (224 mg, 1.73mol)及CepCl (217 mg, 865.5 umol)。將混合物在35℃下在Ar下攪拌4 h。利用飽和NaHCO3 水溶液使反應淬滅，且然後用EtOAc (4 × 50 mL)萃取。將合併之EtOAc層用鹽水洗滌且在真空中濃縮以獲得粗產物。藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至100% ACN，流速：20 mL/min)純化粗製物，以獲得呈白色固體之2x (310 mg, 316.6 umol, 54%)。ESI-MS: m/z 980.5 [M+H]+ 。
將化合物2x (310 mg, 316.6 umol)及化合物3x (256 mg, 379.9 umol)溶解於無水CH3 CN (20.0 mL)中，且添加4Å分子篩粉末(1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌10 min後，在室溫下添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(1.9 mmol, 4.2 mL)。攪拌1 h後，將混合物過濾且用無水CH3 CN洗滌。添加t-BuOOH (1 mL)，直至反應完成為止。在室溫下攪拌20-30 min後，利用Na2 SO3 使反應淬滅(水溶液，直至變色為止)。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1×)及飽和NaCl水溶液(1×)洗滌。用EtOAc (1×)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至100% ACN，流速：20 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之4x (400 mg, 254.9 umol, 80.6%)。31 P-NMR (162 MHz, DMSO-d 6 ): -2.06, -2.08,-2.29。ESI-MS: m/z 1570.6 [M+H]+ 。
將化合物4x (400 mg, 254.9 umol)溶解於DCA/DCM (3%, v/v, 7.10 mL)中，且立即添加三乙基矽烷(2.80 mL)。在室溫下攪拌30 min後，用EtOAc稀釋混合物，且然後用飽和NaHCO3 水溶液中和。分離各層，且用飽和NaCl水溶液(1×)洗滌有機相。將水相合併，且然後用EtOAc (3×)反萃取。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至80% ACN，流速：20 mL/min)純化粗製殘餘物，以獲得呈白色泡沫狀物之5x (150 mg, 155.4 umol, 61.2%)。ESI-MS: m/z 966.3 [M+H]+ 。
將化合物5x (150 mg, 155.4 umol)溶解於無水CH3 CN (25.0 mL)中，添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(1.24 mmol, 2.7 mL)及4 Å分子篩粉末(300 mg, 1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌20 min後，經30 min至40 min添加於CH3 CN (10.0 mL)中之4a (94 mg, 310.8 umol)。攪拌2 h後，將混合物過濾且然後用無水CH3 CN洗滌。添加t-BuOOH (1 mL)，直至反應完成為止。在室溫下攪拌20-30 min後，利用飽和Na2 SO3 水溶液使反應淬滅(直至變色為止)。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1×)及飽和NaCl水溶液(1×)洗滌。用EtOAc (1×)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至60% ACN，流速：20 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之6x (60 mg, 55.6 umol, 35.8%)。ESI-MS: m/z 1081.3 [M+H]+ 。
利用MeNH2 於EtOH中之溶液(4 mL, 33%)處理化合物6x (60 mg, 55.6 umol)。在40℃下攪拌3 h後，將混合物蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-0%至30% ACN，流速：20 ml /min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之7x (30 mg, 37.5 umol, 67.4%)。ESI-LMS: m/z 801.2 [M+H]+ 。
將化合物7x (30 mg, 37.5 umol)於3 HF• TEA (1.0 mL)及DMSO (2 mL)中在40℃下攪拌32 h。使混合物冷卻至室溫，且然後添加TEA (2 mL)及異丙氧基三甲基矽烷(8 mL)。將混合物在室溫下攪拌1 h，且然後蒸發至乾燥。藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 -0%至10% ACN，流速：20 ml /min)純化殘餘物，以獲得呈白色泡沫狀物之NH4 鹽(18 mg, 26.2 μmol, 69.9%)。將15.0 mL體積之Amberlite IR-120 (Na型)添加至管柱中，且然後用去離子水(3 × 15 mL)洗滌。將NH4 鹽(18 mg)溶解於去離子水中(15 mg於10 mL中)，且然後添加至管柱頂部。用去離子水對管柱進行溶析。如藉由TLC (UV)所檢測，化合物係在早期流份中溶析出。將產物凍乾，以得到呈白色泡沫狀物之1-24 (14 mg, 20.4 umol, 77.8%)。1 H NMR (400 MHz,D2 O )δ :  8.36 (s, 0.5H), 8.30 (s, 0.5H), 8.17 (s, 0.5H), 8.15 (s, 0.5H), 7.67 (d,J = 4.2 Hz, 1H), 6.36 (t,J = 15.7 Hz, 1H), 5.61-5.35 (m, 1H), 5.08-4.82 (m, 2.5H), 4.58-4.53 (m, 0.5H), 4.46-4.28 (m, 2.5H), 4.18-4.08 (m, 2.5H), 2.50-2.46 (m, 0.5H), 2.22 (s, 0.5H), 1.90-1.87 (m, 0.5H), 1.72-1.64 (m, 1.3H), 1.40 - 1.32 (m, 1.2H)。31 P NMR (162 MHz,D2 O ): 0.43, -1.18,-1.88。ESI-MS: m/z 687.1 [M+H]+ 。 實例26 化合物1-29
Figure 02_image690
Figure 02_image692
向80 mL高壓罐中依次添加1y (7.00 g, 12.11 mmol)、NH3 •H2 O (25 mL)及1,4-二噁烷(50 mL)。將混合物在70℃下攪拌17 h。在真空中濃縮該混合物以獲得粗產物，藉由矽膠管柱(DCM:MeOH=30:1)對其進行純化，以獲得呈白色固體之2y (5.0 g, 8.95 mmol, 73.91%)。
向250 mL圓底燒瓶中依次添加2y (10.00 g, 17.90 mmol)及80% AcOH (100 mL)。將混合物在70℃下攪拌過夜。在真空中濃縮該混合物以獲得粗產物，藉由EtOAc對其進行純化，以獲得呈白色固體之3y (9.80 g，粗製物)。ESI-MS: m/z 519.4 [M+H]+ 。
向500 mL圓底燒瓶中依次添加3y (1.00 g, 1.93 mmol)、DMF (35.6 mL)及SnCl2 .H2 O (104.41 mg, 462.71 umol)。然後將混合物置於50℃油浴鍋中。將混合物在50℃下攪拌10 min後，逐滴添加TMSCH2 N2 (6.94 mmol, 3.5 mL)。將混合物在50℃下攪拌過夜。將H2 O (400 mL)添加至混合物，且然後用EtOAc (5 × 50 mL)萃取。將合併之有機層用鹽水洗滌且在真空中濃縮以得到粗產物。藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 -0%至65% ACN，流速：30 mL/min)純化粗製物，以獲得呈白色固體之4y (300 mg, 563.16 umol, 29.21%)。ESI-MS: m/z 533.4 [M+H]+ 。
向50 mL圓底燒瓶中依次添加4y (1.40 g, 2.63 mmol)、DMF (20 mL)及咪唑(715.68 mg, 10.51 mmol)。將於DMF (3 mL)中之TBSCl (792.21 mg, 5.26 mmol)逐滴添加至混合物，且然後在室溫下攪拌過夜。將H2 O (200 mL)添加至混合物，且然後用EtOAc (5 × 50 mL)萃取。將合併之有機層用鹽水洗滌，且然後在真空中濃縮以獲得粗產物，藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 -50%至100% ACN，流速：20 mL/min)對其進行純化，以獲得呈白色固體之5y (1.30 g, 2.01 mmol, 76.46%)。ESI-MS: m/z 647.3 [M+H]+ 。
向25 mL圓底燒瓶中依次添加5y (1.56 g, 2.41 mmol)及吡啶(48 mL)。在-15℃下將異丁醯氯(411.07 mg, 3.86 mmol)逐滴添加至混合物達2 h。將H2 O (4 mL)添加至混合物，且然後在真空中濃縮以得到粗產物。藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 -50%至100% ACN，流速：20 mL/min)純化粗製物，以獲得呈白色固體之6y (1.2 g, 1.67 mmol, 69.40%)。ESI-MS: m/z 717.5 [M+H]+ 。
向250 mL圓底燒瓶中依次添加6y (1.0 g, 1.39 mmol)及AcOH (40 mL)。將亞硝酸鈉(38.49 g, 557.84 mmol)溶解於H2 O (5 mL)中，將其逐滴添加至混合物。將混合物在室溫下攪拌30 h。將H2 O (500 mL)添加至該混合物，且然後用EtOAc (5 × 50 mL)萃取。將合併之有機層用鹽水洗滌且然後在真空中濃縮以獲得粗產物，藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 -50%至100% ACN，流速：20 mL/min)純化該粗產物，以獲得呈黃色固體之7y (650 mg, 905.24 umol, 64.91%)。ESI-MS: m/z 718.3 [M+H]+ 。
向50 mL圓底燒瓶中依次添加7y (600.00 mg, 835.61 umol)、THF (10 mL)及3 HF•TEA (1.35 g, 8.36 mmol)。將混合物在50℃下攪拌過夜。將混合物在真空中濃縮以獲得粗產物，藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 -30%至75% ACN，流速：20 mL/min)對其進行純化，以獲得呈白色固體之8y (300 mg, 821.06 umol, 98.26%)。ESI-MS: m/z 366.1 [M+H]+ 。
向25 mL圓底燒瓶中依次添加8y (300 mg, 821.06 umol)及吡啶(5 mL)。逐滴添加於吡啶(0.5 mL)中之4,4'-二甲氧基三苯甲基氯(417.30 mg, 1.23 mmol)。將混合物在室溫下攪拌5 h。將H2 O (100 mL)添加至混合物，且然後用EtOAc (4 × 50 mL)萃取該混合物。將合併之EtOAc層用鹽水洗滌，且然後在真空中濃縮以得到粗產物。藉由矽膠急速層析DCM:MeOH=50:1純化粗製物，以獲得9y (498 mg, 745.79 umol, 90.83%)。ESI-MS: m/z 668.5 [M+H]+ 。
將化合物1k (411.10 mg, 411.83 umol)及9y (250.00 mg, 374.39 umol)溶解於無水CH3 CN (20.0 mL)中，且添加4Å分子篩粉末(1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌10 min後，在室溫下添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(2.24 mmol, 4.99 mL)。攪拌1 h後，將混合物過濾，且然後用無水CH3 CN洗滌。添加t-BuOOH (1 mL)，直至反應完成為止。在室溫下攪拌20-30 min後，利用Na2 SO3 使反應淬滅(水溶液，直至變色為止)。用EtOAc稀釋混合物，且然後分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1×)及飽和NaCl水溶液(1×)洗滌。用EtOAc (1×)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至100% ACN，流速：20 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之10y (400 mg, 253.04 umol, 67.59%)。31 P-NMR (162 MHz, DMSO-d 6 ): -2.28, -2.63。ESI-MS: m/z 1581.7 [M+H]+ 。
將化合物10y (400 mg, 253.04 umol)溶解於DCA/DCM (3%, v/v, 7.10 mL)中，且立即添加三乙基矽烷(2.80 mL)。在室溫下攪拌30 min後，用EtOAc稀釋混合物，且然後用飽和NaHCO3 水溶液中和。分離各層，且用飽和NaCl水溶液(1×)洗滌有機相。將水相合併且用EtOAc (3×)反萃取。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至80% ACN，流速：20 mL/min)純化粗製殘餘物，以獲得呈白色泡沫狀物之11y (190 mg, 194.66 umol, 76.93%)。31 P-NMR (162 MHz, DMSO-d 6 ): -2.39, -2.68。ESI-MS: m/z 976.5 [M+H]+ 。
將化合物11y (190 mg, 194.66 umol)溶解於無水CH3 CN (25.0 mL)中，添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(1.55 mmol, 3.46 mL)及4 Å分子篩粉末(300 mg, 1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌20 min後，經30 min至40 min添加於CH3 CN (10.0 mL)中之4a (117.35 mg, 389.32 umol)。攪拌2 h後，將混合物過濾且然後用無水CH3 CN洗滌。添加t-BuOOH (1 mL)，直至反應完成為止。在室溫下攪拌20-30 min後，利用飽和Na2 SO3 水溶液使反應淬滅(直至變色為止)。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1×)及飽和NaCl水溶液(1×)洗滌。用EtOAc (1×)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至60% ACN，流速：20 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之12y (82 mg, 75.15 umol, 38.61%)。ESI-MS: m/z 1091.3 [M+H]+ 。
利用MeNH2 於EtOH中之溶液(4 mL, 33%)處理化合物12y (80 mg, 73.32 umol)。在40℃下攪拌3 h後，將混合物蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-0%至30% ACN，流速：20 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之13y (45 mg, 55.50 umol, 75.70%)。ESI-LMS: m/z 811.6 [M+H]+ 。
將13y (47 mg, 57.97 umol)於3 HF•TEA (1.0 mL)及DMSO (2 mL)中之溶液在40℃下攪拌32 h。使混合物冷卻至室溫，添加TEA (2 mL)及異丙氧基三甲基矽烷(8 mL)。將混合物在室溫下攪拌1 h，且然後蒸發至乾燥。藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 -0%至10% ACN，流速：20 ml /min)純化殘餘物，以獲得呈白色泡沫狀物之NH4 鹽14y (15 mg, 21.53 μmol, 37.14%)。將15.0 mL體積之Amberlite IR-120 (Na型)添加至管柱中，且然後用去離子水(3 × 15 mL)洗滌。將NH4 鹽(75 mg)溶解於去離子水中(15 mg於10 mL中)，且然後添加至管柱頂部。用去離子水對管柱進行溶析。如藉由TLC (UV)所檢測，化合物係在早期流份中溶析出。將產物凍乾，以得到呈白色泡沫狀物之1-29 (11 mg, 15.79 umol, 27.24%)。1 H NMR (400 MHz,D2 O )δ :  8.26 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.65 (s, 1H), 5.37 (ddd,J = 11.1, 7.0, 4.3 Hz, 1H), 5.22 (t,J = 6.9 Hz, 1H), 4.86 (s, 1H), 4.50 (d,J = 11.0 Hz, 1H), 4.20 (dd,J = 6.2, 1.5 Hz, 1H), 4.12 (dt,J = 9.9, 2.6 Hz, 1H), 3.97 (dt,J = 9.9, 2.9 Hz, 1H), 3.93 (d,J = 4.4 Hz, 1H), 3.54 (d,J = 11.0 Hz, 1H), 3.43 (s, 3H), 2.51 (dt,J = 20.4, 8.4 Hz, 2H), 2.30-2.20 (m, 1H), 1.87 (dd,J = 8.9, 4.1 Hz, 1H), 1.69 (t,J = 5.1 Hz, 1H), 0.96 (td,J = 6.7, 5.9, 2.7 Hz, 1H)。31 P NMR (162 MHz,D2 O ): -0.09, -2.69。ESI-MS: m/z 696.3 [M+H]+ 。 實例27 化合物1-25
Figure 02_image694
在0℃下在Ar下向1z (2.30 g, 8.07 mmol)於無水吡啶(30 mL)中之溶液逐滴添加1,1,3,3-四異丙基-1,3-二氯矽氧烷(3.82 g, 12.10 mmol)。將混合物在室溫下攪拌3 h。藉由添加水使反應淬滅，且用EtOAc (3 × 50 mL)萃取混合物。使有機層經無水硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮以得到粗產物。藉由矽膠管柱層析(PE:EtOA, 5:1，然後DCM:MeOH, 30:1)純化殘餘物，以得到呈白色固體之2z (3.60 g, 6.84 mmol, 85%)。ESI-MS: m/z 527.3 [M+H]+ 。
向2z (3.60 g, 6.84 mmol)於無水CH3 CN (50 mL)中之溶液添加2z-a (1.42 g, 8.21 mmol)。將混合物在室溫下攪拌10 h。藉由添加水使反應淬滅，且用DCM (3 × 50 mL)萃取混合物。使有機層經無水硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮以得到粗產物。藉由矽膠管柱層析(PE:EtOAc, 5:1，然後DCM:MeOH, 30:1)純化殘餘物，以得到呈黃色固體之3z (3.5 g, 5.28 mmol, 77%)。ESI-MS: m/z 663.3 [M+H]+ 。
將AIBN (346.77 mg, 2.11 mmol)及Bu3 SnH (2.30 g, 7.92 mmol)溶解於無水甲苯(50 mL)中。將化合物3z (3.5 g, 5.28 mmol)溶解於甲苯中且逐滴添加至混合物。在110℃下攪拌2 h後，用水洗滌該混合物，且用EtOAc (3 × 50 mL)萃取該混合物。使有機層經無水硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮以得到粗產物。藉由矽膠管柱層析(PE:EtOAc, 5:1，然後DCM:MeOH, 30:1)純化殘餘物，以得到呈黃色固體之4z (2.2 g, 4.31 mmol, 82%)。ESI-MS: m/z 511.3 [M+H]+ 。
將化合物4z (2.2 g, 4.31 mmol)溶解於無水吡啶(20 mL)中，且在Ar下逐滴添加BzCl (1.82 g, 12.93 mmol)。將混合物在0℃下攪拌1 h。用水洗滌該混合物，且用EtOAc (3 × 50 mL)萃取該混合物。使有機層經無水硫酸鈉乾燥且在減壓下濃縮以得到粗產物。藉由矽膠管柱層析(PE:EtOAc, 5:1，然後DCM:MeOH, 30:1)純化殘餘物，以得到呈黃色固體之5z (1.7 g, 2.77 mmol, 64%)。ESI-MS: m/z 615.4 [M+H]+ 。
將化合物5z (1.7 g, 2.77 mmol)溶解於無水THF (20 mL)中，且逐滴添加3 HF•NEt3 (1.34 g, 8.31 mmol)。將混合物在室溫下攪拌1 h。用水洗滌該混合物，且用EtOAc (3 × 50 mL)萃取該混合物。將有機相蒸發至乾燥，且藉由矽膠管柱層析(DCM:MeOH, 20:1)純化粗製材料，以獲得呈白色固體之6z (0.72 g, 1.94 mmol, 70%)。ESI-MS: m/z 373.1 [M+H]+ 。
將化合物6z (700 mg, 1.94 mmol)溶解於無水吡啶(15 mL)中，且在Ar下添加DMTrCl (698.77 mg, 2.06 mmol)。將混合物在室溫下攪拌1 h。利用NaHCO3 水溶液使反應淬滅。用水洗滌混合物且用EtOAc (3 × 50 mL)萃取。將有機相蒸發至乾燥，且藉由矽膠管柱層析(DCM:MeOH =30:1)純化粗製材料，以獲得呈黃色固體之7z (700 mg, 1.04 mmol, 54%)。ESI-MS: m/z 675.1 [M+H]+ 。
將化合物7z (300 mg, 445 umol)及單體 C (465 mg, 534 umol)溶解於無水CH3 CN (30 mL)中。添加於乙腈(10.7 mL)中之0.45 M四唑及4 Å分子篩粉末。將混合物用N2 氣鼓泡10 min。攪拌2 h後，添加TBHP (80 mg, 890 umol)且然後攪拌0.5 h。將混合物過濾，且然後用EA洗滌。利用Na2 SO3 水溶液使反應淬滅。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用NaHCO3 水溶液(1 × 60 mL)及NaCl水溶液(1 × 60 mL)洗滌。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由RPC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 -70%至80% ACN，流速：30 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色固體之8z (555 mg, 380.7 μmol, 82%)。31 P NMR (162 MHz, DMSO-d6 ): -3.0, -3.03。ESI-MS: m/z 1459.5 [M+H]+ 。
將化合物8z (310 mg, 212.6 umol)溶解於DCA/DCM (3%, v/v, 10.0 mL)中，且添加三乙基矽烷(2.5 mL)。在室溫下攪拌30 min後，在0℃下利用飽和碳酸氫鈉溶液使混合物中和。將混合物蒸發至乾燥，且藉由矽膠管柱層析(DCM:丙酮，10:1~1:1)純化粗製殘餘物，以獲得呈黃色固體之9z (128 mg, 149.9 umol, 69%)。31 P NMR (162 MHz, DMSO-d6 ):-2.66, -2.69。ESI-MS: m/z 855.3 [M+H]+ 。
將化合物9z (130 mg, 152.2 umol)溶解於無水CH3 CN (30 mL)中，然後添加於CH3 CN (10.7 mL)中之0.45 M四唑及4 Å分子篩粉末。將混合物用N2 氣鼓泡10 min。逐滴添加化合物4a (918 mg, 305 umol)。攪拌2 h後，添加TBHP (80 mg, 890 umol)，且將混合物攪拌0.5 h。過濾該混合物，且用EA洗滌。利用Na2 SO3 水溶液使反應淬滅。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用NaHCO3 水溶液(1 × 60 mL)及NaCl水溶液(1 × 60 mL)洗滌。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由RPC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 -70%至80% ACN，流速：30 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色固體之10z (20 mg, 20.6 μmol, 14%)。ESI-MS: m/z 970.3 [M+H]+ 。
利用33% MeNH2 於EtOH中之溶液(3 mL)處理化合物10z (20 mg, 20.6 μmol)。在40℃下攪拌2 h後，將混合物蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 20g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-0%至30% ACN，流速：15 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之1-25 (2 mg, 2.9 umol, 14%)。ESI-MS: m/z 690.0 [M+H]+ 。
將15.0 mL體積之Amberlite IR-120 (Na型)添加至管柱中且用去離子水(3 × 15 mL)洗滌。將1-25 之NH4 鹽(2 mg)溶解於去離子水中(2 mg於10 mL中)，且添加至管柱頂部。用去離子水溶析。如藉由TLC (UV)所檢測，化合物係在早期流份中溶析出。將產物凍乾，以得到呈白色泡沫狀物之1-25 (1.9 mg，2.5 μmol，86%產率)。1 H NMR (400 MHz,D2 O ) 8.15 (s, 1H), 7.87 (s, 1H), 5.93 (dd, J=4.4Hz, 3.6Hz, 1H), 5.85 (d, J=4.4Hz, 1H), 5.4 (dt, J=4.4Hz, 8.4Hz, 1H), 5.0 (q, J=6.8Hz, 1H), 4.5(d, J=3.2Hz, 1H), 4.19 (d, J=4.4Hz, 2H), 4.13 (d, J=2.8Hz, 2H), 4.07 (t, J=4.0Hz, 2H), 3.50 (s, 3H), 2.80 (m, 1H), 2.65 (m, 1H)。31 P NMR (162 MHz,D2 O ):-0.88, -1.58。ESI-MS: m/z 690.0 [M+H]+ 。 實例28 化合物1-37
Figure 02_image696
將化合物1k (1.23 g, 1.23 mmol)及1aa (800 mg, 1.03 mmol)溶解於無水CH3 CN (50.0 mL)中，且添加4Å分子篩粉末(1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌10 min後，在室溫下添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(6.15 mmol, 13.67 mL)。攪拌1 h後，將混合物過濾且用無水CH3 CN洗滌。添加5 M t-BuOOH直至反應完成為止。在室溫下攪拌20-30 min後，利用Na2 SO3 使反應淬滅(水溶液，直至變色為止)。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1×)及飽和NaCl水溶液(1×)洗滌。用EtOAc (1×)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至100% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之2aa (1.52 g, 897.80 umol, 87.53%)。31 P-NMR (162 MHz, DMSO-d 6 ): -2.36, -3.11。ESI-MS: m/z 1693.8 [M+H]+ 。
將化合物2aa (1.52 g, 897.80 umol)溶解於DCA/DCM (3%, v/v, 28.5 mL)中，且立即添加三乙基矽烷(10.6 mL)。在室溫下攪拌30 min後，用EtOAc稀釋混合物，且用飽和NaHCO3 水溶液中和。分離各層，且用飽和NaCl水溶液(1×)洗滌有機相。將水相合併且用EtOAc (3×)反萃取。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由矽膠管柱(於DCM中之0%至100%之丙酮)純化粗製殘餘物，以獲得呈白色泡沫狀物之3aa (325 mg, 0.30 mmol, 74.7%)。31 P-NMR (162 MHz, DMSO-d 6 ): -2.70, -2.72。ESI-MS: m/z 1088.5 [M+H]+ 。
將化合物3aa (800 mg, 735.09 umol)溶解於無水CH3 CN (112.0 mL)中。添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(5.88 mmol, 13.70 mL)及4 Å分子篩粉末(300 mg, 1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌20 min後，經30 min至40 min添加於CH3 CN (10.0 mL)中之4a (443.13 mg, 1.47 mmol)。在將反應攪拌2 h後，過濾混合物且用無水CH3 CN洗滌。向此溶液中添加0.1 M DDTT (11 mL)，直至反應完成為止。在室溫下攪拌20-30 min後，利用飽和Na2 SO3 水溶液使反應淬滅。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1×)及飽和NaCl水溶液(1×)洗滌。用EtOAc (1×)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至60% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之4aa (400 mg, 328.03 umol, 44.62%)。ESI-MS: m/z 1219.3 [M+H]+ 。
利用MeNH2 於EtOH中之溶液(55 mL, 33%)處理化合物4aa (420 mg, 344.43 umol)。在40℃下攪拌4 h後，將混合物蒸發至乾燥。藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-0%至30% ACN，流速：30 ml /min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之5aa (294 mg, 313.07 umol, 90.90%)。31 P-NMR (162 MHz, DMSO-d 6 ): 52.82, -7.12。ESI-LMS: m/z 939.4 [M+H]+ 。
將5aa (280 mg, 298.17 umol)於3 HF•TEA (1.5 mL)及DMSO (3 mL)中之溶液在40℃下攪拌32 h。使混合物冷卻至室溫。將TEA (1.5 mL)及異丙氧基三甲基矽烷(12 mL)添加至混合物，且然後將混合物在室溫下攪拌1 h。將混合物蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 -0%至10% ACN，流速：20 ml /min)純化殘餘物，以獲得呈白色泡沫狀物之NH4 鹽6aa (120 mg, 168.88 umol, 56.64%)。將15.0 mL體積之Amberlite IR-120 (Na型)添加至管柱中且用去離子水(3× 15 mL)洗滌。將NH4 鹽(120 mg)溶解於去離子水中(15 mg於10 mL中)，且添加至管柱頂部。用去離子水對管柱進行溶析。如藉由TLC (UV)所檢測，化合物係在早期流份中溶析出。將產物凍乾，以得到呈白色泡沫狀物之1-37 (115 mg, 161.84 umol, 54.24%)。1 H NMR (400 MHz,D2 O )δ :  8.25 (s, 1H), 8.17 (d,J = 0.9 Hz, 1H), 7.67 (s, 1H), 5.29 (dd,J = 10.0, 6.3 Hz, 1H), 5.14-5.06 (m, 1H), 4.89 (s, 1H), 4.63 (d,J = 4.6 Hz, 2H), 4.55 (dd,J = 10.0, 3.3 Hz, 1H), 4.46 (d,J = 6.4 Hz, 1H), 4.17 (dd,J = 10.0, 3.1 Hz, 1H), 3.58 (d,J = 11.3 Hz, 1H), 3.38 (dd,J = 10.1, 5.3 Hz, 1H), 1.89 (dd,J = 9.1, 4.3 Hz, 1H), 1.75 (dt,J = 8.2, 3.9 Hz, 1H), 1.65 (t,J = 5.2 Hz, 1H), 1.28-1.22 (m, 1H), 1.06-0.97 (m, 2H)。31 P NMR (162 MHz,D2 O ): δ 51.62, -2.96。ESI-MS: m/z 711.3 [M+H]+ 。 實例29 化合物1-38a及1-38b
Figure 02_image698
將化合物1bb (850 mg, 1.09 mmol)及1k (1.20 g, 1.20 mmol)溶解於無水CH3 CN (40.0 mL)中。添加4Å分子篩粉末(400 mg, 1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌20 min後，在室溫下添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(6.54 mmol, 14.5 mL)。攪拌1 h後，用無水CH3 CN洗滌混合物。向此溶液中添加5 M t-BuOOH直至反應完成為止。在室溫下攪拌20-30 min後，將混合物過濾。利用Na2 SO3 (水溶液)使反應淬滅。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1 × 50.0 mL)及飽和NaCl水溶液(1 × 50.0 mL)洗滌。用EtOAc (1 × 50.0 mL)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-60%至100% ACN，流速：35.0 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之2bb (1.48g, 0.87 mmol, 80.2%)。31 P NMR (162 MHz, DMSO-d6 ): -1.853, -3.54。ESI-MS: m/z 1693.07 [M+H]+ 。
將化合物2bb (1.48 g, 0.87 mmol)溶解於DCA/DCM (3%, v/v, 30.0 mL)中，且立即添加三乙基矽烷(10.0 mL)。在室溫下攪拌20 min後，利用冰冷的飽和NaHCO3 (水溶液)使混合物中和。用EtOAc (3 × 60.0 mL)萃取混合物。將有機層用飽和NaCl水溶液(1 × 150.0 mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥且在減壓下濃縮以得到殘餘物。藉由矽膠管柱層析(DCM/丙酮，0-100%丙酮)純化粗製殘餘物，以得到呈白色固體之3bb (900 mg, 826.96 μmol, 93.34%)。31 P NMR (162 MHz, DMSO-d6 ): -1.407, -1.506。ESI-MS: m/z= 1088.5 [M+H]+ 。
將化合物3bb (900 mg, 0.82 mmol)溶解於CH3 CN (100.0 mL)中。添加於CH3 CN中之四唑(6.62 mmol, 0.45 M, 14.71 mL)及4 Å分子篩粉末(1.0 g, 1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌20 min後，經25 min至30 min在室溫下添加於CH3 CN (10.0 mL)中之4a (497.83 mg, 1.65 mmol)。在將反應攪拌2 h後，過濾混合物且用無水CH3 CN洗滌。向此溶液中添加0.1 M DDTT直至反應完成為止。在室溫下攪拌20-30 min後，利用飽和NaS2 O3 水溶液使反應淬滅。用EtOAc稀釋混合物，且分離有機層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1 × 50.0 mL)及飽和NaCl水溶液(1 × 50.0 mL)洗滌。用EtOAc (1×)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至60% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之4bb (400 mg, 395.53 μmol, 42.9%)。ESI-MS: m/z 1219.4 [M+H]+ 。
利用MeNH2 於EtOH中之溶液(12.0 mL, 33%)處理化合物4bb (440 mg, 365.93 μmol)。在40℃下攪拌2 h後，將混合物蒸發至乾燥。藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40g，移動相A：於水中之0.05% NH4 HCO3 ，m/m-0%至10% ACN，流速：20 ml /min)純化粗製材料，以得到呈白色泡沫狀物之5bb (300 mg, 319.46 μmol, 88.54%)。31 P NMR (162 MHz, DMSO-d6 ): 52.72, 51.92, -3.88。ESI-MS: m/z 939.08 [M+H]+ 。
將5bb (300 mg, 319.46 μmol)於12% TEAF (於DMSO中，10.0 mL)中之溶液在50℃下攪拌24 h。使混合物冷卻至室溫。將15.0 mL體積之Amberlite IR-120 (Na型)添加至管柱中且用去離子水(3 × 15 mL)洗滌。將粗產物溶解於去離子水(15 mL)中，且添加至管柱頂部。用去離子水對管柱進行溶析。藉由反相製備型HPLC管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-0%至15% ACN，流速：20 mL/min)純化殘餘物，以獲得呈白色泡沫狀物之NH4 鹽(P1, 61 mg, 85.85 μmol, 26.87%)及(P2, 80 mg, 112.68μmol, 35.27%)。將15.0 mL體積之Amberlite IR-120 (Na型)添加至管柱中且用去離子水(3 × 15 mL)洗滌。將NH4 鹽溶解於去離子水(15 mL)中，且添加至管柱頂部。用去離子水對管柱進行溶析。如藉由TLC (UV)所檢測，化合物係在早期流份中溶析出。將產物凍乾，以得到呈白色泡沫狀物之1-38a (50 mg, 70.32 μmol, 81.91%)及1-38b (70 mg, 98.45 μmol, 87.37%)。
1-38a ：1 H NMR (400 MHz,D2 O )δ: 8.35 (s, 1H)¸ 8.07 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 5.13 (q,J =6.44Hz, 1H), 5.06 (t,J =7.36Hz, 1H), 4.82 (s, 1H), 4.56 (d,J =8.52Hz, 2H), 4.46 (m, 1H), 4.38 (d,J =6.12Hz, 1H), 4.14 (d,J =6.28Hz, 1H), 3.70 (d,J =10.6Hz, 1H), 3.57 (d,J =10.92Hz, 1H), 1.90 (m, 1H), 1.79 (m, 1H), 1.59 (m, 2H), 0.98 (m, 2H)。31 P NMR (162 MHz,D2 O ): 53.75, 1.42。ESI-MS: m/z= 711.3 [M+H]+ 。
1-38b ：1 H NMR (400 MHz,D2 O )δ: 8.26(s, 1H)¸ 7.96 (s, 1H), 7.80 (s, 1H), 5.27 (t,J =7.36 Hz, 1H), 5.16 (t,J =6.72 Hz, 1H), 4.76 (s, 1H), 4.54 (d,J =13.52Hz, 2H), 4.45 (t, 1H), 4.20 (d,J =5.92Hz, 1H), 4.09 (d,J =6.00Hz, 1H), 3.65 (d,J =10.96Hz, 1H), 3.55 (d,J =10.84Hz, 1H), 1.88 (m, 2H), 1.60 (s, 2H), 0.97 (m, 2H)；31 P NMR (162 MHz,D2 O ): 53.44, -1.41。ESI-MS: m/z= 711.3 [M+H]+ 。 實例30 化合物1-30a及1-30b
Figure 02_image700
Figure 02_image702
向1cc (10 g, 17.79 mmol)及1cc-A (5.02 g, 26.60 mmol)於DCE (100 mL)中之攪拌溶液添加BSA (17.4 g, 74.16 mmol)。將混合物在50℃下攪拌30 min。使混合物冷卻至0℃，且逐滴添加TMSOTf (5.20 mL, 26.6 mmol)。將混合物加熱至回流，且然後將混合物攪拌16 h。將混合物傾倒至水中且然後用EtOAc (2 × 200 mL)萃取。將分離之有機層用鹽水洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮至乾燥以得到粗產物。藉由矽膠純化該粗產物，以得到呈黃色泡沫狀物之2cc (5.50 g，8.70 mmol，49.08%，95%純度)。ESI-MS: m/z 672.4 [M+H]+ 。
在0℃下向2cc ((5.50 g, 8.70 mmol)於吡啶(30 mL)中之攪拌溶液添加異丁醯氯(1.2 ml, 13.05 mmol)。將反應在室溫下攪拌1 h。將混合物傾倒至水中且用EA (2×)萃取。將分離之有機層用鹽水洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮至乾燥以得到粗產物。將粗製物溶解於DMF (50 mL)中，且然後添加DBACO (974.00 mg, 8.70 mmol)、Cs2 Ac (4.98 g, 26.10 mmol)及TEA (3.0 mL，26.10 mmol)。將反應攪拌16 h。然後將反應混合物傾倒至水中且用EtOAc (2 × 200 mL)萃取。將分離之有機層用鹽水洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮至乾燥，以得到呈黃色油狀物之3cc (9.20 g，70%純度，直接使用)。ESI-MS: m/z 724.4 [M+H]+ 。
向3cc (9.2 g)於吡啶(10 mL)中之攪拌溶液添加2 N NaOH水溶液，以將pH調整至12。將混合物在室溫下攪拌30 min。將混合物傾倒至水中且用EtOAc (2 × 200 mL)萃取。將有機層分離，用鹽水洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮至乾燥以得到粗產物。藉由矽膠純化該粗產物，以得到4cc (2.1 g，5.41 mmol，62.02%，3步，95%純度)。ESI-MS: m/z 370.5 [M+H]+ 。
向4cc (2.10 g, 5.41 mmol)於吡啶(20 mL)中之攪拌溶液添加DMTrCl (2.12 g, 6.50 mmol)。將反應在室溫下攪拌3 h。將混合物傾倒至水中且用EA (2×)萃取。將有機層分離，用鹽水洗滌，經Na2 SO4 乾燥且濃縮至乾燥以得到粗產物。藉由矽膠純化該粗產物，以得到5cc (3.2 g，4.76 mmol，88.00%，95%純度)。ESI-MS: m/z 672.2 [M+H]+ 。
向5cc (3.2 g, 4.76 mmol)及咪唑(1.07 g, 14.84 mmol)於DMF (40 mL)中之攪拌溶液分多次添加第三丁基二甲基矽基氯(971.05 mg, 6.60 mmol)。將混合物在室溫下攪拌3 h。將該混合物傾倒至水中且用EtOAc (2 × 200 mL)萃取。將分離之有機層用鹽水洗滌，經Na2 SO4 乾燥並濃縮以得到粗產物。藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-60%至100% ACN，流速：35.0 mL/min)純化粗產物，以獲得呈白色泡沫狀物之6cc (1.3 g，1.65 mmol，34.09%，98%純度)及6cc-A (1.4 g，1.78 mmol，47.5%，98%純度)。
6cc ：1 H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6 )δ :  12.06 (s, 1H), 11.70 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.46 - 7.20 (m, 10H), 6.96 - 6.86 (m, 5H), 5.87 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 5.44 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 4.41 (dd, J = 7.3, 3.4 Hz, 1H), 4.19 (q, J = 3.5 Hz, 1H), 3.76 (s, 7H), 3.52 - 3.37 (m, 2H), 3.30 (dd, J = 9.3, 5.8 Hz, 6H), 2.76 (hept, J = 6.8 Hz, 1H), 2.08 (s, 2H), 1.12 (d, J = 6.8 Hz, 7H), 0.70 (s, 9H), -0.07 (s, 3H), -0.29 (s, 3H)。ESI-LMS: m/z 786.6 [M+H]+ 。
6cc-A ：1 H-NMR (400 MHz, DMSO-d 6 )δ :  12.10 (s, 1H), 11.65 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.44 - 7.36 (m, 2H), 7.36 - 7.20 (m, 8H), 6.94 - 6.85 (m, 4H), 5.69 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 5.62 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 4.49 (ddd, J = 7.2, 5.8, 3.5 Hz, 1H), 4.27 (t, J = 3.1 Hz, 1H), 3.74 (s, 6H), 3.48 (dd, J = 10.1, 7.2 Hz, 1H), 3.38 - 3.21 (m, 6H), 2.78 (p, J = 6.8 Hz, 1H), 2.07 (s, 2H), 1.12 (d, J = 6.8 Hz, 6H), 0.84 (s, 9H), 0.05 (s, 6H)。ESI-LMS: m/z 786.6 [M+H]+ 。
將化合物6cc (700 mg, 0.89 mmol)及1k (1.0 g, 1.10 mmol)溶解於無水CH3 CN (30.0 mL)中，且添加4Å分子篩粉末(300 mg, 1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌20 min後，在室溫下添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(10.03 mmol, 40.0 mL)。攪拌1 h後，用無水CH3 CN洗滌混合物。向此溶液中添加5 M t-BuOOH直至反應完成為止。在室溫下攪拌20-30 min後，將混合物過濾。利用Na2 SO3 (水溶液)使反應淬滅。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1 × 50.0 mL)及飽和NaCl水溶液(1 × 50.0 mL)洗滌。用EtOAc (1 × 50.0 mL)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-60%至100% ACN，流速：35.0 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之7cc (1.30 g, 0.77 mmol, 86.7%)。ESI-MS: m/z 1685.1 [M+H]+ 。
將化合物7cc (1.30 g, 0.77 mmol)溶解於DCA/DCM (3%, v/v, 50.0 mL)中，且立即添加三乙基矽烷(30.0 mL)。在室溫下攪拌20 min後，利用冰飽和NaHCO3 (水溶液)使混合物中和。用EtOAc (3 × 60.0 mL)萃取混合物。將有機層用飽和NaCl水溶液(1 × 150.0 mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥且在減壓下濃縮以得到殘餘物。藉由矽膠管柱層析(DCM/丙酮，0-100%丙酮)純化粗製殘餘物，以得到呈白色固體之8cc (800.00 mg, 0.69 mmol, 90.0%)。31 P-NMR (162 MHz, DMSO-d6 ): -2.56, -2.56。ESI-MS: m/z 1080.0 [M+H]+ 。
將化合物8cc (800.00 mg, 0.69 mmol)溶解於無水CH3 CN (100.0 mL)中。添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(5.83 mmol, 23.31mL)及4 Å分子篩粉末(10.0 g, 1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌20 min後，經25 min至30 min在室溫下添加於CH3 CN (10.0 mL)中之4a (435.80 mg, 1.45 mmol)。攪拌2 h後，將混合物過濾且用無水CH3 CN洗滌。向此溶液中添加0.1 M DDTT直至反應完成為止。在室溫下攪拌20-30 min後，利用飽和NaS2 O3 水溶液使反應淬滅。用EtOAc稀釋混合物，分離有機層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1 × 50.0 mL)及飽和NaCl水溶液(1 × 50.0 mL)洗滌。用EtOAc (1 × 100 mL)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至60% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之9cc (480 mg, 396.26 μmol, 50.28%)。ESI-MS: m/z 1211.5 [M+H]+ 。
利用MeNH2 於EtOH中之溶液(12.0 mL, 33%)處理化合物9cc (480 mg, 396.26 μmol)。在40℃下攪拌2 h後，將混合物蒸發至乾燥。藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40g，移動相A：於水中之0.05% NH4 HCO3 ，m/m-0%至10% ACN，流速：20 ml /min)純化粗製材料，以得到呈白色泡沫狀物之10cc (210 mg, 144.85 μmol, 56.0%)。ESI-MS: m/z 945.3 [M+H]+ 。
將10cc (210 mg, 144.85 μmol)及3 HF•TEA (2.0 mL)於DMSO (2.0 mL)中之溶液在40℃下攪拌48 h。使混合物冷卻至室溫，添加TEA (2.0 mL)及異丙氧基三甲基矽烷(16.0 mL)。將混合物在室溫下攪拌1 h，且然後蒸發至乾燥。藉由反相製備型HPLC (管柱：XBridge 30×100 mm，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 -0%至15% ACN，流速：20 ml /min)純化殘餘物，以獲得呈白色泡沫狀物之NH4 鹽(P1，70.00 mg，98.31 μmol，27.0%及P2，20 mg，28.09 μmol，7.7%)。將15.0 mL體積之Amberlite IR-120 (Na型)添加至管柱中且用去離子水(3 × 15 mL)洗滌。將NH4 鹽溶解於去離子水(15 mL)中，且添加至管柱頂部。用去離子水對管柱進行溶析。如藉由TLC (UV)所檢測，化合物係在早期流份中溶析出。將產物凍乾，以得到呈白色泡沫狀物之1-30a (90.00 mg, 118.4 μmol, 56.2%)及1-30b (2.0 mg，2.3 μmol，1.60%產率)。
1-30a ： 1 H NMR (400 MHz,D2 O ) δ:  8.15 (d, J = 19.7 Hz, 2H), 7.86 (s, 1H), 5.93 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.75 (s, 1H), 5.04 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 4.82 (s, 1H), 4.78-4.75 (m, 1H), 4.63 (s, 1H), 4.41 (t, J = 7.9 Hz, 2H), 4.16 (dd, J = 10.9, 5.0 Hz, 1H), 3.60 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 3.53 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 1.55 (t, J = 5.0 Hz, 1H), 0.96 (t, J = 7.4 Hz, 1H)。31 P NMR (162 MHz,D2 O ): 53.65, -2.90。ESI-MS: m/z 717.2 [M+H]+ 。
1-30b ： 31 P NMR (162 MHz,D2 O ) 53.93, -2.56。ESI-MS: m/z 717.2 [M+H]+ 。 實例31 化合物1-46a及1-46b
Figure 02_image704
將化合物1dd (700 mg, 0.79 mmol)溶解於無水CH3 CN (50.0 mL)中，且添加9g (550 mg, 0.69 mmol)及4Å分子篩粉末(150 mg, 1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌20 min後，在室溫下添加於CH3 CN中之0.25 M ETT (4.0 mmol, 16 mL)。攪拌1 h後，將混合物過濾且用無水CH3 CN洗滌。向此溶液中添加於吡啶(2 mL)中之0.1 N DDTT，直至反應完成為止。在室溫下攪拌20-30 min後，利用Na2 SO3 使反應淬滅(水溶液，直至變色為止)。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1×)及飽和NaCl水溶液(1×)洗滌。用EtOAc (1×)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-60%至100% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之2dd (1.0 g, 0.619 mmol, 89.7%)。31 P NMR (162 MHz, DMSO-d6 )δ :  68.29, 67.84。ESI-MS: m/z 1616.45 [M+H]+ 。
將化合物2dd (1.0 mg, 0.619 mmol)溶解於DCA/DCM (3%, v/v, 20 mL)中，且立即添加三乙基矽烷(5 mL)。在室溫下攪拌30 min後，在0℃下利用飽和碳酸氫鈉溶液使混合物中和且蒸發至乾燥。藉由矽膠管柱層析(DCM:丙酮，10:1~1:1)純化粗製殘餘物，以獲得呈黃色固體之3dd (600 mg, 594 umol, 96.0)。ESI-MS: m/z 1010.4 [M+H]+ 。
將化合物3dd (600 mg, 594 umol)溶解於無水CH3 CN (60.0 mL)中，添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(19 mL)及4 Å分子篩粉末(200 mg, 1 gr/100 mL)。將混合物用N2 氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌20 min後，經25 min至30 min添加於CH3 CN (10.0 mL)中之4a (360 mg, 1.2 mmol)。攪拌2 h後，將混合物過濾且用無水THF洗滌。添加5 M第三丁基過氧化氫直至反應完成為止。在室溫下攪拌20-30 min後，利用飽和Na2 SO3 水溶液使反應淬滅。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1 × 60 mL)及飽和NaCl水溶液(1 × 60 mL)洗滌。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 -70%至80% ACN，流速：30 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之4dd (375 mg, 338 μmol, 56.9%)。ESI-MS: m/z 1126.35 [M+H]+ 。
利用33% MeNH2 於EtOH (10 mL)中之溶液處理化合物4dd (375 mg, 338 μmol)。在40℃下攪拌2 h後，將混合物蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 -0%至30% ACN，流速：20 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之5dd 之第一異構物(30 mg, 35.5 μmol, 10.5%)及5dd 之第二異構物(80 mg, 94.7 μmol, 28.0%)。31 P NMR (162 MHz, DMSO-d 6 ) δ 56.58, 3.02。ESI-MS: m/z 812.2 [M+H]+ 。
將5dd 之第一異構物(30 mg, 35.5 μmol)於3 HF•TEA (0.5 mL)及DMSO (1 mL)中及5dd 之第二異構物(80 mg, 94.7 μmol)於3 HF•TEA (1 mL)及DMSO (2 mL)中之溶液在40℃下攪拌32 h。使混合物冷卻至室溫。將TEA (2 mL)及異丙氧基三甲基矽烷(16 mL)添加至混合物。將混合物在室溫下攪拌1 h，且然後蒸發至乾燥。藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 -0%至10% ACN，流速：20 mL/min)純化殘餘物，以獲得呈泡沫狀物之NH4 鹽(6dd 之第一異構物(16 mg, 21.9 μmol, 61.7%)及6dd 之第二異構物(46 mg, 62.9 μmol, 66.5%))。將15.0 mL體積之Amberlite IR-120 (Na型)添加至管柱中且用去離子水(3 × 15 mL)洗滌。將6dd 之第一異構物及6dd 之第二異構物的NH4 鹽溶解於去離子水(15 mL)中，且添加至管柱頂部。用去離子水對管柱進行溶析。如藉由TLC (UV)所檢測，化合物係在早期流份中溶析出。將產物凍乾，以得到呈白色泡沫狀物之1-46a (12 mg, 15.5 μmol, 43.6%)及1-46b (41 mg, 52.9 μmol, 55.9%)。
1-46a ：1 H NMR (400 MHz,D2 O ) δ:  8.10-8.03 (m, 1H), 7.82-7.73 (m, 1H), 5.23 (d,J = 11.3 Hz, 1H), 5.10 (s, 1H), 4.57 (s, 1H), 4.46 (d,J = 4.9 Hz, 1H), 4.27-4.02 (m, 6H), 3.46 (s, 3H), 2.49-2.37 (m, 1H), 1.99 (t,J = 5.6 Hz, 1H), 1.80 (s, 1H), 1.31 (t,J = 8.1 Hz, 1H)。31 P NMR (162 MHz,D2 O ) δ:  55.86, -1.63。ESI-MS: m/z 698.3 [M+H]+ 。
1-46b ：1 H NMR (400 MHz,D2 O ) δ:  8.05 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 5.22 (d,J = 9.5 Hz, 1H), 5.11 (t,J = 5.8 Hz, 1H), 4.50 (s, 1H), 4.46 (d,J = 3.1 Hz, 1H), 4.41 (dd,J = 5.9, 1.4 Hz, 1H), 4.37 (dd,J = 11.8, 6.4 Hz, 1H), 4.19 (dt,J = 10.1, 3.1 Hz, 1H), 4.15-4.03 (m, 3H), 3.46 (d,J = 1.0 Hz, 3H), 2.46-2.39 (m, 1H), 2.02 (t,J = 5.5 Hz, 1H), 1.79 (dd,J = 9.4, 4.9 Hz, 1H), 1.31 - 1.23 (m, 1H)。31 P NMR (162 MHz,D2 O ) δ:  53.42, -1.73。ESI-MS: m/z 698.3 [M+H]+ 。 實例32 化合物1-28a及1-28b
Figure 02_image706
將化合物1ee (400 mg, 613.77 umol)及單體 F (706.90 mg, 797.90 umol)溶解於無水CH3 CN (24.0 mL)中，且添加4Å分子篩粉末(300 mg, 1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌20 min後，在室溫下添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(613.77 umol, 8.17 mL)。攪拌1 h後，用無水CH3 CN洗滌混合物。向此溶液中添加5 M t-BuOOH直至反應完成為止。在室溫下攪拌20-30 min後，將混合物過濾。利用Na2 SO3 (水溶液)使反應淬滅。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1 × 50.0 mL)及飽和NaCl水溶液(1 × 50.0 mL)洗滌。用EtOAc (1 × 50.0 mL)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-60%至100% ACN，流速：35.0 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之2ee (810 mg, 557.68 umol, 90.86%)。31 P-NMR (162 MHz, DMSO-d6 ):  -3.15, -3.20。ESI-MS: m/z 1452.6 [M+H]+ 。
將化合物2ee (810 mg, 557.68 umol)溶解於DCA/DCM (3%, v/v, 14.5 mL)中，且立即添加三乙基矽烷(5.7 mL)。在室溫下攪拌20 min後，利用吡啶(14.5 mL)使混合物中和。將混合物在真空中濃縮以獲得粗製材料，藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-0%至60% ACN，流速：35.0 mL /min)對其進行純化，以獲得呈白色固體之3ee (357 mg, 421.13 umol, 75.51%)。31 P-NMR (162 MHz, DMSO-d6 ):  -2.90, -3.07。ESI-MS: m/z= 848.5 [M+H]+ 。
將化合物3ee (300 mg, 353.89 umol)溶解於無水CH3 CN (45.0 mL)中，添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(2.83 mmol, 6.28 mL)及4 Å分子篩粉末(1 gr/100 mL)。將混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌20 min後，經25 min至30 min在室溫下添加於CH3 CN (5.0 mL)中之4a (213.33 mg, 707.78 umol)。攪拌2 h後，將混合物過濾且用無水CH3 CN洗滌。向此溶液中添加0.1 M DDTT (5.30 mL)，直至反應完成為止。在室溫下攪拌20-30 min後，利用飽和NaS2 O3 水溶液使反應淬滅。用EtOAc稀釋混合物，且分離有機層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1 × 50.0 mL)及飽和NaCl水溶液 (1 × 50.0 mL)洗滌。用EtOAc (1 × 100 mL)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-0%至50% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之4ee (20 mg, 20.43 umol, 5.77%)。ESI-MS: m/z 979.3 [M+H]+ 。
利用MeNH2 於EtOH中之溶液(5.0 mL, 33%)處理化合物4ee (20 mg, 20.43 umol)。在40℃下攪拌2 h後，將混合物蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40g，移動相A：於水中之0.05% NH4 HCO3 ，m/m-0%至10% ACN，流速：12 mL/min)純化粗製材料，以得到呈白色泡沫狀物之1-28 (異構物混合物)之NH4 鹽(8.6 mg, 12.31 umol, 60.26%)。藉由反相製備型HPLC (管柱：XBridge 30×100 mm，移動相：於水中之10 mM TEAA (m/m)-0%至8% ACN，流速：20 mL/min)純化該混合物並凍乾，獲得呈白色泡沫狀物之1-28a 之NH4 鹽(2 mg, 2.86 μmol, 21.0%,31 P-NMR (162 MHz, DMSO-d 6 ): 55.41, -2.65)及1-28b 之NH4 鹽(1 mg, 1.43 μmol, 21.0%,31 P-NMR (162 MHz, DMSO-d 6 ): 53.63, -2.68)。ESI-LMS: m/z 699.4 [M+H]+ 。
將15.0 mL體積之Amberlite IR-120 (Na型)添加至管柱中且用去離子水(3 × 15 mL)洗滌。將1-28a 之NH4 鹽(2 mg)溶解於去離子水中(2 mg於10 mL中)，且添加至管柱頂部。用去離子水對管柱進行溶析。如藉由TLC (UV)所檢測，化合物係在早期流份中溶析出。將產物凍乾，以得到呈白色泡沫狀物之1-28a (1 mg, 1.43 umol, 50%)。1 H NMR (400 MHz, D2 O) δ:  8.18 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.71 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 5.97- 5.95 (m, 1H), 5.58-5.57 (d,J = 6.92 Hz, 1H), 5.26 (s, 1H), 5.16 (s, 1H), 4.49-4.41 (m, 2H), 4.37-4.33 (m, 1H), 4.18-4.16(m, 1H), 4.00-3.97 (d,J = 8.0 Hz, 1H), 3.86-3.80 (m, 1H), 2.21-2.14 (m, 1H), 1.69-1.63 (m, 1H), 1.22-1.15 (m, 1H)。31 P-NMR (162 MHz, DMSO-d6 ): 55.41, -2.65。ESI-MS: m/z 699.4 [M+H]+ 。
將15.0 mL體積之Amberlite IR-120 (Na型)添加至管柱中且用去離子水(3 × 15 mL)洗滌。將1-28b 之NH4 鹽(1 mg)溶解於去離子水中(1 mg於10 mL中)，且添加至管柱頂部。用去離子水對管柱進行溶析。如藉由TLC (UV)所檢測，化合物係在早期流份中溶析出。將產物凍乾，以得到呈白色泡沫狀物之1-28b (0.5 mg, 0.71 umol, 50%)。1 H NMR (400 MHz, D2 O) δ:  8.19 (s, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.71 (s, 1H), 6.12 (s, 1H), 5.87 - 5.85 (m, 1H), 5.56-5.54 (d,J = 7.24 Hz, 1H), 5.22 (s, 1H), 5.18 (s, 1H), 4.46-4.35 (m, 2H), 4.17-4.15(m, 1H), 3.99-3.97 (d,J = 8.0 Hz, 1H), 3.84-3.77 (m, 1H), 2.14-2.09 (m, 1H), 1.61-1.58 (m, 1H), 1.17-1.14 (m, 1H)。31 P-NMR (162 MHz, DMSO-d6 ): 53.63, -2.68。ESI-MS: m/z 699.4 [M+H]+ 。 實例33 化合物1-34a及1-34b
Figure 02_image708
在Ar下將化合物1ff (2.0 g, 5.64 mmol)及DMTrCl (2.30 g, 6.77 mmol)溶解於無水吡啶(30 mL)中。將混合物在室溫下攪拌2 h。利用NaHCO3 (水溶液)使反應淬滅，且用EA (3 × 40 mL)萃取。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1 × 50.0 mL)及飽和NaCl水溶液(1 × 50.0 mL)洗滌。用EtOAc (1 × 50.0 mL)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由cc (DCM:MeOH = 15:1)純化粗製材料，以得到呈白色固體之2ff (2.3 g，3.50 mmol，62.05%產率)。ESI-MS: m/z 657.4 [M+H]+ 。
將化合物2ff (2.2 g, 3.35 mmol)及咪唑(1.37 g, 20.10 mmol)溶解於無水DMF (30 mL)中。添加TBSCl (331.08 mg, 4.02 mmol)，且將混合物在室溫下攪拌2 h。利用NaHCO3 (水溶液)使反應淬滅，且用EtOAc (3 × 30 mL)萃取。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1 × 50.0 mL)及飽和NaCl水溶液(1 × 50.0 mL)洗滌。用EtOAc (1 × 50.0 mL)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由cc (DCM:MeOH=30:1)純化粗製材料，以得到呈白色固體之3ff (850 mg，1.10 mmol，32.91%產率)。ESI-MS: m/z 771.5 [M+H]+ 。
將化合物3ff (0.85 g, 1.10 mmol)及1k (1.21 g, 1.21 mmol)溶解於無水CH3 CN (30.0 mL)中，且添加4Å分子篩粉末(300 mg, 1 gr/100 mL)。將異質混合物用Ar氣鼓泡5 min。在室溫下攪拌20 min後，在室溫下添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(6.60 mmol, 15.0 mL)。攪拌1 h後，用無水CH3 CN洗滌混合物。向此溶液中添加5 M t-BuOOH直至反應完成為止。將混合物在室溫下攪拌30 min後，過濾該混合物。利用Na2 SO3 (水溶液)使反應淬滅且用EtOAc (3 × 40 mL)萃取。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1 × 50.0 mL)及飽和NaCl水溶液(1 × 50.0 mL)洗滌。用EtOAc (1 × 50.0 mL)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-60%至100% ACN，流速：35.0 mL /min)純化粗製材料，以獲得呈白色固體之4ff (1.60 g，0.95 mmol，86%產率)。31 P-NMR (162 MHz, DMSO-d6 ): -2.51, -2.69；ESI-MS: m/z 1684.7 [M+H]+ 。
將化合物4ff (1.50 g, 0.89 mmol)溶解於AcOH:CH3 CN (v:v=4:1, 20.0 mL)中。在40℃下攪拌3 h後，利用冰飽和NaHCO3 (水溶液)使混合物中和且用EtOAc (3 × 30.0 mL)萃取。將有機層用飽和NaCl水溶液(1 × 50.0 mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥且在減壓下濃縮以得到殘餘物。藉由矽膠管柱層析(DCM:丙酮，0-100%丙酮)純化粗製殘餘物，以得到呈白色固體之5ff (700.0 mg，649.2 μmol，72.8%產率)。ESI-MS: m/z=1079.5[M+H]+ 。
將化合物5ff (600.0 mg, 555.9 μmol)溶解於無水CH3 CN (70.0 mL)中，且添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(3.36 mmol, 7.5 mL)及4 Å分子篩粉末(7.0 g, 1 gr/100 mL)。將異質混合物用Ar氣鼓泡4 min。在室溫下攪拌20 min.後，經25 min至30 min在室溫下添加於CH3 CN (10.0 mL)中之4a (335.1 mg, 1.11 mmol)。攪拌2 h後，將混合物過濾，且用無水CH3 CN洗滌。添加0.1 M DDTT (0.1 M 11 mL)直至反應完成為止。在室溫下攪拌30 min後，將混合物過濾。利用Na2 SO3 (水溶液)使反應淬滅，且用EtOAc (3 × 40 mL)萃取。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1 × 50.0 mL)及飽和NaCl水溶液(1 × 50.0 mL)洗滌。用EtOAc (1 × 50.0 mL)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至60% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製材料，以獲得呈白色泡沫狀物之6ff (270 mg，223.3 μmol，40%產率)。ESI-MS: m/z 1211.4 [M+H]+ 。
利用NH3 於MeOH中之溶液(10.0 mL, 7 M)處理化合物6ff (260 mg, 214.8 μmol)。在室溫下攪拌24 h後，將混合物蒸發至乾燥。藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40g，移動相A：於水中之0.05% NH4 HCO3 ，m/m-0%至10% ACN，流速：20 ml /min)純化粗製材料，以得到呈白色泡沫狀物之7ff (165 mg，177.4 μmol，82.6%產率)。ESI-MS: m/z 931.3 [M+H]+ 。
將7ff (160 mg, 172.0 μmol)及TEAF (12%)於DMSO (5.0 mL)中之溶液在40℃下攪拌12 h。使混合物冷卻至室溫且然後蒸發至乾燥。藉由反相製備型HPLC (管柱：XBridge 30×100 mm，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 -0%至15% ACN，流速：20 ml /min)純化殘餘物，以獲得呈白色泡沫狀物之氨鹽8ff-P1 (26.1 mg，37.1 μmol，22%產率)及8ff-P2 (59.2 mg，84.1 μmol，49%產率)。將15.0 mL體積之Amberlite IR-120 (Na型)添加至管柱中且用去離子水(3 × 15 mL)洗滌。將氨鹽產物溶解於去離子水(15 mL)中。將化合物添加至管柱頂部，且用去離子水溶析。如藉由TLC (UV)所檢測，化合物係在早期流份中溶析出。將產物凍乾，以得到呈白色泡沫狀物之1-34a (16 mg，21.5 μmol，58%產率)及1-34b (51.0 mg，67.1μmol，80%產率)。
1-34a ： 1 H NMR (400 MHz,D2 O ): δ 8.26 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 6.23 (d, J=8.4Hz, 1H), 5.78 (s, 1H), 5.67 (t, J=7.0Hz, 1H), 4.91 (s, 1H), 4.67 (s, 1H), 4.5 (d, J=8.0Hz, 1H), 4.44 (s, 1H), 4.30 (m, 1H), 4.28 (d, J=6.0Hz, 1H), 3.96 (d, J=11.72Hz, 1H), 3.60 (d, J=11.08Hz, 1H), 1.88 (d, J=5.12Hz, 1H), 1.69 (s, 1H), 0.99 (t, J=5.92Hz, 1H)。31 P NMR (162 MHz,D2 O ):  54.25, -2.65。ESI-MS: m/z 702.2 [M+H]+ 。
1-34b ： 1 H NMR (400 MHz,D2 O ): δ 8.26 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 6.21 (d, J=8.36Hz, 1H), 5.77 (s, 1H), 5.64 (t, J=7.48Hz, 1H), 4.94 (s, 1H), 4.55 (m, 2H), 4.43 (s, 1H), 4.42-4.05 (dd, J1 =30.12Hz, J2 =11.36Hz, 2H), 3.61 (d, J=10.96Hz, 1H), 3.60 (d, J=11.08Hz, 1H), 1.87 (d, J=5.04Hz, 1H), 1.63 (s, 1H), 0.99 (t, J=6.84Hz, 1H)。31 P NMR (162 MHz,D2 O ): 52.74, -2.60。ESI-MS: m/z 702.2 [M+H]+ 。 實例34 化合物1-35a及1-35b
Figure 02_image710
Figure 02_image712
向1000 mL圓底燒瓶中添加1gg (50 g, 192.10 mmol)及THF (500 mL)、KOH (26.95 g, 480.25 mmol)。然後逐滴添加PTSM (53.66 g, 288.15 mmol)。將混合物在25℃下攪拌過夜。將混合物添加至NH4 Cl水溶液，且然後用EtOAc (3 × 200 mL)萃取。將合併之EtOAc層用鹽水洗滌且在真空中濃縮，以得到粗製物2gg (70.00 g)。
向1000 mL圓底燒瓶中添加2gg (70 g, 255.19 mmol)及60% AcOH (480 mL)。將混合物在30℃下攪拌過夜。利用NaHCO3 將混合物調整至pH=7-8。將混合物過濾，且用DCM:MeOH=20:1 (500 mL)洗滌濾餅。將濾液在真空中濃縮以得到粗製物，藉由二氧化矽管柱層析(DCM:MeOH=20:1)對其進行純化，以獲得3gg (38.00 g，162.22 mmol，63.57%產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ): δ 5.69 (d, J = 3.7 Hz, 1H), 4.82 (d, J = 4.7 Hz, 1H), 4.69 (t, J = 4.2 Hz, 1H), 4.49 (dd, J = 6.3, 5.0 Hz, 1H), 3.88 (dd, J = 8.7, 2.3 Hz, 1H), 3.75 (dd, J = 8.7, 4.5 Hz, 1H), 3.65 (ddt, J = 7.1, 5.1, 2.7 Hz, 1H), 3.43 - 3.35 (m, 1H), 3.30 (m, 4H), 1.43 (s, 3H), 1.28 (s, 3H)。
向1000 mL圓底燒瓶中添加3gg (38.00 g, 162.22 mmol)及EtOH (225 mL)、H2O (225 mL)。在0℃下將過碘酸鈉(52.05 g, 243.33 mmol)添加至混合物。將混合物在0℃下攪拌2 h，且此混合物直接用於下一步驟。
在0℃下將硼氫化鈉(9.20 g, 243.32 mmol)添加至來自前一步驟之混合物，且然後在0℃下攪拌30 min。將混合物添加至NH4 Cl水溶液，且用EtOAc (4 × 200 mL)萃取。將合併之EtOAc層用鹽水洗滌且在真空中濃縮以得到粗製物。藉由二氧化矽管柱層析(DCM:MeOH=30:1)對該粗製物進行純化，以獲得5gg (29.40 g，143.96 mmol，88.75%產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ): δ 5.71 (d, J = 3.8 Hz, 1H), 4.74 (s, 1H), 4.70 (s, 1H), 3.78 (ddd, J = 9.1, 4.6, 2.1 Hz, 1H), 3.62 (dd, J = 12.5, 2.1 Hz, 1H), 3.54 (dd, J = 9.0, 4.4 Hz, 1H), 3.40 (dd, J = 12.3, 4.4 Hz, 1H), 3.32 (s, 3H), 1.43 (s, 3H), 1.28 (s, 3H)。
向500 mL圓底燒瓶中添加5gg (28.5 g, 139.56 mmol)及吡啶(250 mL)。在0℃下將苯甲醯氯(49.04 g, 348.89 mmol)逐滴添加至混合物。將混合物在0℃下攪拌2 h。將該混合物添加至NaHCO3 水溶液中且用EtOAc (4 × 50 mL)萃取。將合併之EtOAc層用鹽水洗滌且在真空中濃縮以得到粗製物，藉由二氧化矽管柱層析(EtOAc: PE=5:1)對其進行純化，以獲得6gg (37.00 g，120.00 mmol，85.99%產率)。ESI-MS: m/z 309.3 [M+H]+ 。
向500 mL圓底燒瓶中添加6gg (47.5 g, 154.06 mmol)及THF (237 mL)及H2 O (47 mL)。添加對甲苯磺酸(5.31 g, 30.81 mmol)，且將混合物在65℃下攪拌40 h。將混合物在真空中濃縮以去除幾乎所有THF，且用EtOAc (5 × 200 mL)萃取殘餘物。將合併之EtOAc層用鹽水洗滌且在真空中濃縮以得到粗製物，藉由二氧化矽管柱層析(DCM:MeOH=50:1)對其進行純化，以獲得7gg (33.00 g，123.01 mmol，79.85%產率)。ESI-MS: m/z 269.2 [M+H]+ 。
將三乙胺(99.58 g, 984.11 mmol, 137.26 mL)及4-二甲基胺基吡啶(1.50 g, 12.30 mmol)添加至7gg (33.00 g, 123.01 mmol)於DCM (330 mL)中之溶液。在0℃下添加乙酸酐(52.17 g, 492.06 mmol)。將混合物在室溫下攪拌1 h。將混合物添加至NaHCO3 水溶液中且用DCM (5 × 500 mL)萃取。將合併之DCM層用鹽水洗滌且在真空中濃縮以得到粗製物，藉由二氧化矽管柱層析(EtOAc:PE=1:15)對其進行純化，以獲得8gg (34.00 g，96.50 mmol，78.45%產率)。ESI-MS: m/z 353.3 [M+H]+ 。
將化合物8a-gg (6.86 g, 45.13 mmol)及N,O-雙(三甲基矽基)乙醯胺(36.72 g, 180.51 mmol)添加至8gg (15.90 g, 45.13 mmol)於ACN (320 mL)中之溶液。將混合物在70℃下攪拌2 h。在0℃下將三氟甲磺酸三甲基矽基酯(15.05 g, 67.69 mmol)逐滴添加至混合物中。然後將混合物在80℃下攪拌2 h。將混合物添加至NH4 HCO3 水溶液中且用EtOAc (4 × 50 mL)萃取。將合併之EtOAc層用鹽水洗滌且在真空中濃縮以得到粗製物，藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 -0%至40% ACN，流速：20 mL/min)對其進行純化，以獲得9gg (4.80 g，10.80 mmol，23.93%產率)。ESI-MS: m/z 445.1 [M+H]+ 。
將異丁酸酐(6.83 g, 43.20 mmol)添加至9gg (4.8 g, 10.80 mmol)於DMF (40 mL)中之溶液。將混合物在80℃下攪拌過夜。將混合物添加至NaHCO3 水溶液中且用EtOAc (4 × 100 mL)萃取。將合併之EtOAc層用鹽水洗滌且在真空中濃縮，以得到粗製物10gg (7 g)。ESI-MS: m/z 515.1 [M+H]+ 。
將2 N NaOH (19 mL) (溶劑：MeOH:H2 O=4:1)添加至10gg (9.67 g, 18.80 mmol)於吡啶(58 mL)中之溶液。將混合物在0℃下攪拌30 min。利用1 N HCl將混合物調整至pH=6-7。將混合物在真空中濃縮以得到粗製物，藉由二氧化矽管柱層析(EtOAc:PE=1:1)對其進行純化，以獲得11gg (3.6 g，9.77 mmol，52.00%產率)。ESI-MS: m/z 369.1 [M+H]+ 。
將4,4'-二甲氧基三苯甲基氯(4.97 g, 14.66 mmol)添加至11gg (3.60 g, 9.77 mmol)於吡啶(30 mL)中之溶液。將混合物在室溫下攪拌1.5 h。將混合物添加至NaHCO3 水溶液中且用EtOAc (4 × 100 mL)萃取。將合併之EtOAc層用鹽水洗滌且在真空中濃縮以得到粗製物。藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 120 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 -50%至70% ACN，流速：25 mL/min)純化該粗製物，以獲得12gg (5.9 g，8.80 mmol，90.01%產率)。ESI-MS: m/z 671.3 [M+H]+ 。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ): δ 12.13 (d, J = 91.8 Hz, 2H), 8.62-8.54 (m, 1H), 7.31-7.16 (m, 5H), 7.16-7.11 (m, 4H), 6.79 (ddd, J = 9.0, 6.3, 2.8 Hz, 4H), 6.06 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 5.78 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 5.01 (s, 1H), 4.25-4.17 (m, 2H), 3.71 (s, 6H), 3.36 (s, 3H), 3.18 (dd, J = 10.6, 2.1 Hz, 1H), 3.10-3.03 (m, 1H), 2.80 (p, J = 6.9 Hz, 1H), 1.14 (d, J = 6.8 Hz, 6H)。
將單體 2 (1.10 g, 1.10 mmol)及12gg (740.00 mg, 1.10 mmol)溶解於無水CH3 CN (50.0 mL)中，且添加4Å分子篩粉末(1 gr/100 mL)。將異質混合物用Ar鼓泡4 min。在室溫下攪拌10 min後，在室溫下添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(6.61 mmol, 14.70 mL)。攪拌1 h後，將混合物過濾，且用無水CH3 CN洗滌。添加t-BuOOH (5 mL)直至反應完成為止。在室溫下攪拌20-30 min後，利用Na2 SO3 (水溶液)使反應淬滅。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1 × 50 mL)及飽和NaCl水溶液(1 × 50 mL)洗滌。用EtOAc (1 × 50 mL)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至100% ACN，流速：20 ml /min)純化粗製材料，以得到呈白色泡沫狀物之13gg (1.27 g，801.90 umol，72.68%產率)。31 P-NMR (162 MHz, DMSO-d 6 ):  -2.46, -2.89。ESI-MS: m/z 1583.8 [M+H]+ 。
將化合物13gg (1.17 g, 738.75 umol)溶解於DCA/DCM (3%, v/v, 22.00 mL)中，且立即添加三乙基矽烷(8.20 mL)。在室溫下攪拌30 min後，用EtOAc稀釋混合物，且用飽和NaHCO3 水溶液中和。分離各層，且將有機相用飽和NaCl水溶液(1 × 50 mL)洗滌。將水相合併且用EtOAc (3 × 50 mL)反萃取。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至80% ACN，流速：20 mL/min)純化粗製殘餘物，以得到呈白色泡沫狀物之14gg (600 mg，612.86 umol，82.96%產率)。31 P-NMR (162 MHz, DMSO-d 6 ): -2.13, -2.50。ESI-MS: m/z 979.3 [M+H]+ 。
將化合物14gg (380 mg, 388.14 umol)溶解於無水CH3 CN (63.3 mL)中，且添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(3.10 mmol, 6.90 mL)及4 Å分子篩粉末(300 mg, 1 gr/100 mL)。將異質混合物用Ar鼓泡4 min。在室溫下攪拌20 min後，經30 min至40 min添加於MeCN (10.0 mL)中之4a (233.44 mg, 774.46 umol)。攪拌2 h後，將混合物過濾且用無水CH3 CN洗滌。添加DDTT (5.82 mL)直至反應完成為止。在室溫下攪拌20-30 min後，利用飽和Na2 SO3 水溶液使反應淬滅。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1 × 50 mL)及飽和NaCl水溶液(1 × 50 mL)洗滌。用EtOAc (1 × 50 mL)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至60% ACN，流速：20 mL/min)純化粗製材料，以得到呈白色泡沫狀物之15gg (95 mg，85.58 umol，22.05%產率)。ESI-MS: m/z 1110.3 [M+H]+ 。
利用NH3 於MeOH中之溶液(25 mL, 33%)處理化合物15gg (180 mg, 162.15 umol)。在40℃下攪拌3 h後，將混合物蒸發至乾燥。藉由反相製備型HPLC (管柱：XBridge 30×100 mm，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-20%至30% ACN，流速：50 mL/min)純化粗製材料，以得到呈白色泡沫狀物之16gg-P1 (50.00 mg，60.25 umol，37.16%產率)。ESI-LMS: m/z 829.7 [M+H]+ ，及呈白色泡沫狀物之16gg-P2 (10.00 mg，12.05 umol，7.43%產率)。ESI-LMS: m/z 829.7 [M+H]+ 。
將16gg-P1 (50.00 mg, 60.25 umol)於12% TBAF (2 mL) (溶劑：DMSO)中之溶液在40℃下攪拌2 h。將混合物添加至去離子水(10 mL)中且然後藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 -0%至10% ACN，流速：20 mL/min)進行純化，以得到呈白色泡沫狀物之NH4 鹽產物17gg-P1 (43 mg，60.13 μmol，99.78%產率)。將15.0 mL體積之Amberlite IR-120 (Na型)添加至管柱中且用去離子水(3 × 15 mL)洗滌。將化合物17gg-P1 (43 mg)溶解於去離子水中(43 mg於20 mL中)並添加至管柱頂部，且用去離子水溶析。如藉由TLC (UV)所檢測，化合物係在早期流份中溶析出。將產物凍乾，以得到呈白色泡沫狀物之1-35a (43 mg，60.13 umol，99.78%產率)。1 H NMR (400 MHz, D2 O): δ 8.22 (dd, J = 2.2, 1.1 Hz, 1H), 8.19 (dd, J = 2.3, 1.2 Hz, 1H), 6.14 (dd, J = 8.5, 2.1 Hz, 1H), 5.85 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 5.68 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 4.92 (s, 1H), 4.60 - 4.51 (m, 3H), 4.40 - 4.33 (m, 1H), 4.11 (d, J = 3.6 Hz, 2H), 3.65 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 3.55 (dd, J = 2.3, 1.2 Hz, 3H), 1.85 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 1.61 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 0.99 (t, J = 7.5 Hz, 1H).31 P NMR (162 MHz,D2 O ):  53.10, -2.80。ESI-MS: m/z 716.5 [M+H]+ 。
化合物1-35b 係遵循用於獲得1-35a之程序自16gg-P2 開始來獲得。獲得呈白色泡沫狀物之化合物1-35b (7.5 mg，10.47 umol，86.95%產率)。1 H NMR (400 MHz, D2 O): δ 8.25 (s, 1H), 8.19 (q,J = 1.1 Hz, 1H), 6.19 (d,J = 8.6 Hz, 1H), 5.87 - 5.77 (m, 1H), 5.66 (t,J = 7.7 Hz, 1H), 4.90 (s, 1H), 4.59 (d,J = 3.4 Hz, 1H), 4.51 (d,J = 11.0 Hz, 1H), 4.38 - 4.31 (m, 2H), 4.27 (d,J = 6.3 Hz, 1H), 4.00 (d,J = 11.7 Hz, 1H), 3.61 (d,J = 11.0 Hz, 1H), 3.54 (d,J = 1.3 Hz, 3H), 1.88 (d,J = 8.5 Hz, 1H), 1.69 (t,J = 5.1 Hz, 1H), 0.99 (t,J = 7.6 Hz, 1H)。31 P NMR (162 MHz,D2 O ):  54.21, -2.92。ESI-MS: m/z 716.5 [M+H]+ 。 實例35 化合物1-48a、1-48b、1-48c及1-48d
Figure 02_image714
將化合物1hh (1.5 g, 2.19 mmol)溶解於無水CH3 CN (80 mL)中，且添加7i (2.30 g, 2.62 mmol)及4Å分子篩粉末(800 mg, 1 gr/100 mL)。將異質混合物用Ar鼓泡4 min。在室溫下攪拌20 min後，在室溫下添加0.45 M四唑(13.1 mmol, 52.5 mL)。攪拌1 h後，將混合物過濾且用無水CH3 CN洗滌。添加0.1 M DDTT直至反應完成為止。在室溫下攪拌20-30 min後，利用Na2 SO3 (水溶液)使反應淬滅。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1 × 80 mL)及飽和NaCl水溶液(1 × 80 mL)洗滌。用EtOAc (1 × 150 mL)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 120 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-60%至100% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製材料，以得到呈白色泡沫狀物之2hh (2.9 g，1.94 mmol，88.8%產率)。31 P NMR (162 MHz, DMSO-d6 ): δ 67.46, 66.81。ESI-MS: m/z 1493.6 [M+H]+ 。
將化合物2hh (2.9 mg, 1.94 mmol)溶解於DCA/DCM (3%, v/v, 40 mL)中，且立即添加三乙基矽烷(10 mL)。在室溫下攪拌30 min後，用EtOAc稀釋混合物，且用飽和NaHCO3 中和。分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1 × 50 mL)及飽和NaCl水溶液(1 × 100 mL)洗滌。用EtOAc (3 × 100 mL)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 120 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-60%至100% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製材料，以得到呈白色泡沫狀物之3hh (1.4 g，1.58 mmol，81.3%產率)。31 P NMR (162 MHz, DMSO-d6 ): δ 67.10, 66.65。ESI-MS: m/z 889.2 [M+H]+ 。
將化合物3gg (1.4 g, 1.58 mmol)溶解於無水CH3 CN (200 mL)中，且添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(12.65 mmol, 50.6 mL)及4 Å分子篩粉末(600 mg, 1 gr/100 mL)。將異質混合物用Ar鼓泡4 min。在室溫下攪拌20 min後，經25 min至30 min添加於CH3 CN (5.0 mL)中之4a (952.5 mg, 3.16 mmol)。攪拌2 h後，將混合物過濾，且用無水CH3 CN洗滌。添加0.1 M DDTT直至反應完成為止。在室溫下攪拌20-30 min後，利用飽和Na2 SO3 水溶液使反應淬滅。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1 × 100 mL)及飽和NaCl水溶液(1 × 100 mL)洗滌。用EtOAc (1 × 150 mL)反萃取合併之水相，且然後蒸發至乾燥。藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至80% ACN，流速：30 mL/min)純化粗製材料，以得到呈白色泡沫狀物之4gg (500 mg，490.7 μmol，31.1%產率)。ESI-MS: m/z 1020.2 [M+H]+ 。
利用33% MeNH2 於EtOH (30 mL)中之溶液處理化合物4gg (500 mg, 480.7 μmol)。在25℃下攪拌2 h後，將混合物蒸發至乾燥。藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 20 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-0%至30% ACN，流速：15 mL/min)純化粗製材料，以獲得5gg-P1 (101.4 mg，141.3 umol，28.8%產率)、5gg-P2 (95 mg，128.6 umol，26.2%產率)、5gg-P3 (16 mg，21.7 umol，4.4%產率)及5gg-P4 (6 mg，8.1 umol，1.7%產率)，其各自呈白色泡沫狀物。ESI-MS: m/z 740.1 [M+H]+ 。
將15.0 mL體積之Amberlite IR-120 (Na型)添加至管柱中且用去離子水(3 × 15 mL)洗滌。將氨鹽產物溶解於去離子水(15 mL)中並添加至管柱頂部，且用去離子水溶析。如藉由TLC (UV)所檢測，化合物係在早期流份中溶析出。將產物凍乾，以得到來自5gg-P1 之1-48a (100.5 mg，136.0 umol，27.8%產率)、來自5gg-P2 之1-48b (93 mg，125.8 umol，25.6%產率)、來自5gg-P3 之1-48c (13 mg，17.6 umol，3.6%產率)及來自5gg-P4 之1-48d (5 mg，6.8 umol，1.4%產率)，其各自呈白色泡沫狀物。
1-48a ： 1 H NMR (400 MHz, D2 O): δ 8.20-8.07 (m, 2H), 6.33 (d,J = 15.5 Hz, 1H), 5.73 (dd,J = 50.7, 3.7 Hz, 1H), 5.30 (d,J = 9.5 Hz, 1H), 5.14-4.90 (m, 2H), 4.49 (d,J = 10.2 Hz, 2H), 4.40 (dd,J = 11.7, 3.3 Hz, 1H), 4.23-4.05 (m, 4H), 3.51 (d,J = 1.6 Hz, 3H)。31 P NMR (162 MHz, D2 O): δ 54.27。19 F NMR (376 MHz, D2 O): δ -201.77。
1-48b ： 1 H NMR (400 MHz, D2 O): δ 8.14 (d,J = 2.3 Hz, 1H), 7.86 (s, 1H), 6.30 (d,J = 15.9 Hz, 1H), 5.73 (d,J = 50.9 Hz, 1H), 5.30 (d,J = 9.7 Hz, 1H), 4.90 (s, 2H), 4.55-4.32 (m, 4H), 4.29-4.05 (m, 3H), 3.49 (d,J = 1.8 Hz, 3H)。31 P NMR (162 MHz, D2 O): δ 54.02, 52.05。19 F NMR (376 MHz, D2 O): δ -201.76。
1-48c ： 1 H NMR (400 MHz, D2 O): δ 8.21 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 6.32 (d,J = 14.9 Hz, 1H), 5.53 (dd,J = 51.0, 3.6 Hz, 1H), 5.29-5.10 (m, 3H), 4.54-4.37 (m, 4H), 4.17 - 4.05 (m, 3H), 3.53 (s, 3H)。31 P NMR (162 MHz, D2 O): δ 55.80, 54.57。19 F NMR (376 MHz, D2 O): δ -201.83。
1-48d ： 1 H NMR (400 MHz, D2 O): δ 8.18 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 6.35 (d,J = 15.5 Hz, 1H), 5.62-5.42 (m, 1H), 5.33 (d,J = 9.7 Hz, 1H), 5.08 (s, 2H), 4.51 (s, 2H), 4.45 - 4.30 (m, 3H), 4.27-4.18 (m, 1H), 4.07 (d,J = 12.1 Hz, 1H), 3.51 (s, 3H)。31 P NMR (162 MHz, D2 O): δ 55.12, 51.95。19 F NMR (376 MHz, D2 O): δ -201.26。 實例36 化合物1-49
Figure 02_image716
將化合物1ii (400 mg, 0.58 mmol)溶解於無水CH3 CN (12.5 mL)中，且添加2ii (647 mg, 0.70 mmol)及4Å分子篩粉末(150 mg, 1 gr/100 mL)。將異質混合物用Ar鼓泡4 min。在室溫下攪拌20 min後，在室溫下添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(3.48 mmol, 12.5 mL)。攪拌1 h後，將混合物過濾且用無水CH3 CN洗滌。添加5 M t-BuOOH直至反應完成為止。在室溫下攪拌20-30 min後，利用Na2 SO3 (水溶液)使反應淬滅。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1 × 50 mL)及飽和NaCl水溶液(1 × 50 mL)洗滌。用EtOAc (1 × 50 mL)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-60%至100% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製材料，以得到呈白色泡沫狀物之3ii (800 mg，0.53 mmol，89.7%產率)。31 P NMR (162 MHz, DMSO): -3.11, -3.21。ESI-MS: m/z 1487 [M+H]+ 。
將化合物3ii (800 mg, 0.53 mmol)溶解於3% DCA/DCM (13 mL)中，且立即添加三乙基矽烷(5.0 mL)。在室溫下攪拌30 min後，用EtOAc稀釋混合物，且用飽和NaHCO3 中和。分離各層，且將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1 × 50 mL)及飽和NaCl水溶液(1 × 50 mL)洗滌。用EtOAc (1 × 50 mL)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由矽膠(DCM:丙酮=0:100)純化粗製材料，以得到呈白色泡沫狀物之4ii (350 mg，0.39 mmol，73.5%產率)。ESI-MS: m/z 883.2 [M+H]+ 。
將化合物4ii (350 mg, 0.39 mmol)溶解於無水CH3 CN (30.0 mL)中，且添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(2.56 mmol, 10.5 mL)及4 Å分子篩粉末(600 mg, 1 gr/100 mL)。將異質混合物用Ar鼓泡4 min。在室溫下攪拌20 min後，經25 min至30 min添加於CH3 CN (5.0 mL)中之4a (196 mg, 0.64 mmol)。攪拌2 h後，將混合物過濾且用無水CH3 CN洗滌。添加5 M t-BuOOH直至反應完成為止。在室溫下攪拌20-30 min後，利用飽和Na2 SO3 水溶液使反應淬滅。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1 × 50 mL)及飽和NaCl水溶液(1 × 50 mL)洗滌。用EtOAc (1 × 50 mL)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至80% ACN，流速：20 mL/min)純化粗製材料，以得到呈白色泡沫狀物之5ii (92 mg，90.07 μmol，31.0%產率)。ESI-MS: m/z 998 [M+H]+ 。
利用33% MeNH2 於EtOH (3 mL)中之溶液處理化合物5ii (92 mg, 90.07 μmol)。在40℃下攪拌2 h後，將混合物蒸發至乾燥。藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 20 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-0%至30% ACN，流速：15 mL/min)純化粗製材料，以得到呈白色泡沫狀物之6ii (11 mg)。
將12.0 mL體積之Amberlite IR-120 (Na型)添加至管柱中且用去離子水(5*15 mL)洗滌。將化合物6ii (11 mg)溶解於去離子水中(88 mg於10 mL中)並添加至管柱頂部，且用去離子水溶析。如藉由TLC (UV)所檢測，化合物係在早期流份中溶析出。將產物凍乾，以得到呈白色泡沫狀物之1-49 (3 mg，3.94 μmol，4.38%產率)。1 H NMR (400 MHz, D2 O): δ 8.16 (s, 1H), 7.86 (s, 1H), 6.07 (s, 1H), 5.33 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 4.94 (d, J = 22.7 Hz, 2H), 4.75 (d, J = 4.2 Hz, 1H), 4.45 (s, 1H), 4.29-4.09 (m, 6H), 3.98 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 3.50 (s, 3H)。31 P NMR (162 MHz, D2 O): δ -1.74, -2.53。ESI-MS: m/z 718 [M+H]+ 。 實例36 化合物1-50a及1-50b
Figure 02_image718
將化合物1-48a (20 mg, 25.5 umol)溶解於丙酮:H2 O=1:1 (2 mL)中，且添加新戊酸碘甲基酯(61.8 mg, 255.4 umol)。將混合物在室溫下攪拌1.5 h後，用EtOAc稀釋該混合物，且用飽和NaHCO3 水溶液中和。分離各層，且將有機相用飽和NaCl水溶液(1 × 10 mL)洗滌。將水相合併且用EtOAc (3 × 10 mL)反萃取。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 12 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至60% ACN，流速：8 mL/min)純化粗製材料，以得到呈白色泡沫狀物之1-50a (5 mg，5.2 μmol，20.3%產率)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ): δ 8.26 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.42 (s, 2H), 6.51 (s, 1H), 6.48-6.22 (m, 2H), 5.55-5.47 (m, 3H), 5.46-5.38 (m, 1H), 5.13 (d,J = 20.8 Hz, 2H), 4.76 (td,J = 9.0, 4.0 Hz, 1H), 4.61 (d,J = 15.1 Hz, 2H), 4.55-4.40 (m, 2H), 4.40-4.16 (m, 4H), 3.50 (s, 3H), 1.13 (d,J = 1.9 Hz, 9H), 0.95 (s, 9H)。31 P NMR (162 MHz, DMSO-d 6 ): δ 25.83, 24.34。19 F NMR (376 MHz, DMSO-d 6 ): δ -208.80。ESI-MS: m/z 968.2 [M+H]+ 。
化合物1-50b 係以與製備1-50a類似之方式自1-48b 開始來製備。獲得呈白色泡沫狀物之化合物1-50b (4.2 mg)。1 H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ): δ 8.40 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.44 (s, 2H), 6.51 (s, 2H), 6.42 (dd,J = 17.8, 6.4 Hz, 2H), 5.49 (dt,J = 13.5, 9.1 Hz, 5H), 5.43 - 5.33 (m, 2H), 4.85-4.72 (m, 2H), 4.68-4.55 (m, 2H), 4.50 (d,J = 3.7 Hz, 1H), 4.23 (dd,J = 15.4, 4.3 Hz, 2H), 4.12 (dt,J = 9.9, 4.4 Hz, 1H), 3.43 (s, 3H), 1.13 (s, 9H), 1.04 (s, 9H)。31 P NMR (162 MHz, DMSO-d 6 ): δ 25.52, 24.76。19 F NMR (376 MHz, DMSO-d 6 ): δ -213.67。ESI-MS: m/z 968.2 [M+H]+ 。 實例37 化合物1-51a及1-51b
Figure 02_image720
將化合物1jj (450.00 mg, 0.45 mmol)溶解於無水CH3 CN (56.0 mL)中，且添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(3.60 mmol, 23.00 mL)及4 Å分子篩粉末(3.0 g, 1 gr/100 mL)。將異質混合物用Ar鼓泡4 min。在室溫下攪拌20 min後，經25 min至30 min在室溫下添加於CH3 CN (10.0 mL)中之1A-jj (372.00 mg, 1.35 mmol)。攪拌2 h後，將混合物過濾且用無水CH3 CN洗滌。添加5 M t-BuOOH直至反應完成為止。在室溫下攪拌20-30 min後，利用飽和NaS2 O3 水溶液使反應淬滅。用EtOAc稀釋混合物，且分離有機層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1 × 50.0 mL)及飽和NaCl水溶液 (1 × 50.0 mL)洗滌。用EtOAc (1 × 100 mL)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至60% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製材料，以得到呈白色泡沫狀物之2jj (320.00 mg，295.47 μmol，45.28%產率)。ESI-MS: m/z 1084.3 [M+H]+ 。
利用NH3 於MeOH中之溶液(12.0 mL, 7 M)處理化合物2jj (320.00 mg, 295.47 μmol)。在40℃下攪拌18 h後，將混合物蒸發至乾燥。藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40g，移動相A：於水中之0.05% NH4 HCO3 ，m/m-0%至10% ACN，流速：20 mL/min)純化粗製材料，以得到呈白色泡沫狀物之3jj (180 mg，210.28 μmol，71.5%產率)。ESI-MS: m/z 857.1 [M+H]+ 。
將化合物3jj (180 mg, 210.28 μmol)及3HF•TEA (2.0 mL)於DMSO (2.0 mL)中在40℃下攪拌48 h。使混合物冷卻至室溫，且然後添加TEA (2.0 mL)及異丙氧基三甲基矽烷(16.0 mL)。將混合物在室溫下攪拌1 h，且然後蒸發至乾燥。藉由反相製備型HPLC (管柱：XBridge 30×100 mm，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 -0%至15% ACN，流速：20 mL/min)純化殘餘物，以獲得呈白色泡沫狀物之NH4 鹽產物4jj -P2 (3.0 mg，3.93 μmol，1.8%產率)及4jj -P4 (8.5 mg，11.13 μmol，5.3%產率)。
將15.0 mL體積之Amberlite IR-120 (Na型)添加至管柱中且用去離子水(3 × 15 mL)洗滌。將該等氨鹽產物溶解於去離子水(15 mL)中，添加至管柱頂部且用去離子水溶析。如藉由TLC (UV)所檢測，化合物係在早期流份中溶析出。將產物凍乾，以得到呈白色泡沫狀物之1-51a (1.5 mg，1.96 μmol，0.98%產率)及1-51b (6.4 mg，8.31 μmol，3.99%產率)。
1-51a ： 1 HNMR (400 MHz, D2 O): δ 8.21 (s, 1H),7.96 (s, 1H), 7.86 (s, 1H), 5.95 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 5.85 (td, J = 9.0, 4.0 Hz, 1H), 5.32 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 4.91 (s, 1H), 4.60 (s, 1H), 4.38 (dd, J = 16.8, 6.1 Hz, 1H), 4.23 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 4.02 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 3.97-3.77 (m, 3H), 3.54 (s, 3H), 2.04 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 1.80 (t, J = 4.9 Hz, 1H), 1.05 (t, J = 7.1 Hz, 4H)。31 P NMR (162 MHz, D2 O): δ 53.01, -5.20。ESI-MS: m/z 743.59 [M+H]+ 。
1-51b ： 1 HNMR (400 MHz, D2 O): δ 8.14 (d, J = 11.8 Hz, 1H), 7.98 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 7.80 (d, J = 13.3 Hz, 1H), 5.92 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.79 (s, 1H), 5.34-5.24 (m, 1H), 4.61 (s, 1H), 4.49-4.35 (m, 2H), 4.21 (dt, J = 12.0, 6.3 Hz, 3H), 3.98 (dd, J = 21.4, 11.4 Hz, 2H), 3.53 (d, J = 11.8 Hz, 3H), 1.94 (s, 1H), 1.76 (s, 1H), 1.49-1.12 (m, 3H), 1.01 (s, 1H)。31 PNMR (162 MHz, D2 O): δ 54.95, -4.29。ESI-MS: m/z 743.59 [M+H]+ 。 實例38 化合物1-52
Figure 02_image722
將化合物1kk (200 mg, 0.296 mmol)及1a-kk (327 mg, 0.384 mmol)溶解於無水CH3 CN (10 mL)中，且添加於CH3 CN (3.4 mL)中之0.45 M四唑及4 Å分子篩粉末。將異質混合物用N2 氣鼓泡10 min。攪拌2 h後，添加0.05 M I2 (THF:H2 O:Py; 8:1:1)。將混合物攪拌20 min。過濾該混合物且用EA洗滌。利用Na2 SO3 水溶液使反應淬滅。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用NaHCO3 水溶液(1 × 60 mL)及NaCl水溶液(1 × 60 mL)洗滌。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由急速二氧化矽管柱層析(於CH2 Cl2 中之0-10 MeOH)純化粗製材料，以得到呈白色固體之2kk (360 mg, 88%)。ESI-MS: m/z 1442.6 [M+H]+ 。
將化合物2kk (320 mg, 0.222 mmol)溶解於DCA/DCM (3%, v/v, 4 mL)中，且添加三乙基矽烷(1.5 mL)。在室溫下攪拌30 min後，在0℃下利用飽和碳酸氫鈉溶液使混合物中和。將混合物蒸發至乾燥，且藉由急速二氧化矽管柱層析(於CH2 Cl2 中之0-20 MeOH)純化粗製殘餘物，以得到呈白色固體之3kk (135 mg, 72%)。ESI-MS: m/z 838.32 [M+H]+ 。
將化合物3kk (40 mg, 0.048 mmol)溶解於無水CH3 CN:DMF:THF (4:2:4, v:v:v)中，且添加於CH3 CN (0.85 mL)中之0.45 M四唑及4 Å分子篩粉末。將異質混合物用N2 鼓泡10 min。逐滴添加化合物1A-kk (29 mg, 0.096 mmol)。攪拌2 h後，添加0.05 M I2 (THF:H2 O:Py=8:1:1)，且將混合物攪拌20 min。過濾該混合物且用EA洗滌。利用Na2 SO3 水溶液使反應淬滅。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用NaHCO3 水溶液(1 × 60 mL)及NaCl水溶液(1 × 60 mL)洗滌。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由急速二氧化矽管柱層析(於CH2 Cl2 中之0-20 MeOH)純化粗製材料，以得到呈黃色固體之4kk (15 mg，不純)。ESI-MS: m/z 838.32 [M+H]+ 。
利用二異丙胺:MeOH:H2 O溶液(3 mL, 1:1:2, v:v:v)處理化合物4kk (15 mg)。在室溫下攪拌16 h後，將混合物蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18管柱，21 × 250 mm，移動相：A：於水中之50 mM TEAA，B：MeCN；梯度：在30 min內0%至25% B，流速：15 mL/min)純化粗製材料，以得到呈白色泡沫狀物之三乙基銨鹽形式之5kk (2.3 mg)。ESI-MS: m/z 686.06 [M+H]+ 。
將Dowex 50W x 8, 200-400 (H型，10 mL)添加至燒杯中且用去離子水(2×)洗滌。向樹脂中添加於去離子H2 O (50 mL)中之15% H2 SO4 ，且將混合物攪拌15 min並傾析(l×)。利用於去離子H2 O中之15% H2 SO4 將樹脂轉移至管柱中並用15% H2 SO4 洗滌(至少4 CV)，且然後用去離子H2 O洗滌直至其為中性為止。將樹脂轉移回至燒杯中並添加於去離子H2 O中之15% NaOH溶液(50 mL)，且將混合物攪拌15 min並傾析(l×)。將樹脂轉移至管柱中並用於去離子H2 O中之15% NaOH洗滌(至少4 CV)，且然後用去離子H2 O洗滌直至其為中性為止(至少4 CV)。將化合物5kk 三乙基銨鹽溶解於去離子H2 O中(2.3 mg於2 mL中)，添加至管柱頂部，且用去離子H2 O溶析。如藉由TLC (UV)所檢測，轉換之鈉鹽係在早期流份中溶析出。將產物凍乾，以得到呈白色固體之1-52 (鈉鹽，1.8 mg)。1 H NMR (400 MHz, D2 O): δ 7.98 (s, 1H), 7.63 (s,1H), 5.80-5.86 (m, 2H), 4.79-4.94 (m, 3H), 4.12-4.15 (m, 2H), 4.01-4.10 (m, 4H), 3.86-3.90 (d,J = 8.4 Hz, 1H), 2.55-2.75 (m, 4H)。31 P NMR (162 MHz, D2 O): δ -1.35, -1.40。ESI-MS: m/z 686.05 [M-H]+ 。 實例39 化合物1-53
Figure 02_image724
將化合物1ll (300 mg, 0.44 mmol)及2ll (450 mg, 0.46 mmol)溶解於無水CH3 CN (18.0 mL)中，且添加4Å分子篩粉末(180 mg, 1 gr/100 mL)。將異質混合物用Ar鼓泡4 min。在室溫下攪拌20 min後，在室溫下添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(2.67 mmol, 6.00 mL)。攪拌1 h後，用無水CH3 CN洗滌混合物。向此溶液中添加I2 於吡啶中之溶液(0.05 M)，直至反應完成為止。在室溫下攪拌20-30 min後，將混合物過濾，且然後利用Na2 SO3 (水溶液)使反應淬滅。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1 × 20.0 mL)及飽和NaCl水溶液(1 × 20.0 mL)洗滌。用EtOAc (1 × 20.0 mL)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-60%至100% ACN，流速：35.0 mL/min)純化粗製材料，以得到呈白色泡沫狀物之3ll (550.00 mg，0.35 mmol，79.26%產率)。31 P NMR (162 MHz, DMSO-d 6 ): δ -2.82, -2.86。ESI-MS: m/z=1561.0[M+H]+
將化合物3ll (550.00, 0.35 mmol)溶解於CH3 COOH: CH3 CN=4:1溶液(v/v, 5.0 mL)中。在40℃下攪拌1 h後，利用冰飽和NaHCO3 (水溶液)使混合物中和且用EtOAc (3 × 20.0 mL)萃取。將有機層用飽和NaCl水溶液(1 × 60.0 mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥且在減壓下濃縮以得到殘餘物。藉由矽膠管柱層析(DCM/丙酮，0-100%丙酮)純化粗製殘餘物，以得到呈白色固體之4ll (170 mg，177.82 μmol，50.46%產率)。31 P-NMR (162 MHz, DMSO-d 6 ): δ -2.82, -2.86。ESI-MS: m/z= 956.2[M+H]+
將化合物4ll (170 mg, 177.82 μmol)溶解於無水CH3 CN (20.0 mL)中，且添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(5.31 mmol, 3.20 mL)及4 Å分子篩粉末(200 mg, 1 gr/100 mL)。將異質混合物用Ar鼓泡4 min。在室溫下攪拌20 min後，經25 min至30 min在室溫下添加於CH3 CN (2.0 mL)中之4a (107 mg, 0.36 mmol)。攪拌2 h後，將混合物過濾且用無水CH3 CN洗滌。向此溶液中添加於吡啶中之0.05 M I2 ，直至反應完成為止。在室溫下攪拌20-30 min後，利用飽和NaS2 O3 水溶液使反應淬滅。用EtOAc稀釋混合物，且分離有機層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1 × 20.0 mL)及飽和NaCl水溶液(1 × 20.0 mL)洗滌。用EtOAc (1 × 50 mL)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至60% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製材料，以得到呈白色泡沫狀物之5ll (40 mg，37.35 μmol，21.01%產率)。ESI-MS: m/z= 1071.7 [M+H]+ 。
利用NH3 於CH3 OH中之溶液(5.0 mL, 7 M)處理化合物6ll (40 mg, 37.35 μmol)。在40℃下攪拌2 h後，將混合物蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40 g，移動相A：於水中之0.05% NH4 HCO3 ，m/m-0%至10% ACN，流速：20 mL/min)純化粗製材料，以得到呈白色泡沫狀物之6ll (12.8 mg，16.19 μmol，43.33%產率)。31 P-NMR (162 MHz, DMSO-d 6 ): δ -1.50, -3.00。ESI-MS: m/z =791.1 [M+H]+
將7ll (12.8 mg, 16.19 μmol)於12% TEAF (於DMSO中，2 mL)中之溶液在室溫下攪拌48 h。使混合物冷卻至室溫。將15.0 mL體積之Amberlite IR-120 (Na型)添加至管柱中且用去離子水(3 × 15 mL)洗滌。將粗產物溶解於去離子水(5 mL)中，添加至管柱頂部且用去離子水溶析。藉由反相製備型HPLC管柱：C18 spherical 20-35μm 100A 40 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-0%至15% ACN，流速：20 mL/min)純化殘餘物，以獲得呈白色泡沫狀物之氨鹽產物8ll-P1 (8.0 mg，11.83 μmol，73.06%產率)。將15.0 mL體積之Amberlite IR-120 (Na型)添加至管柱中且用去離子水(3 × 5 mL)洗滌。將氨鹽產物溶解於去離子水(5 mL)中，添加至管柱頂部且用去離子水溶析。如藉由TLC (UV)所檢測，化合物係在早期流份中溶析出。將產物凍乾，以得到1-53 (6.2 mg，8.61 μmol，72.77%產率)。1 H-NMR (400 MHz, D2 O): δ 8.10 (s, 1H)¸ 6.21 (d, 1H), 5.94 (t, 6.4, 1H), 5.65 (s, 1H), 5.18 (m, 1H), 4.58 (s, 2H), 4.39 (s, 1H), 4.24 (s, 1H), 4.15 (s, 1H), 4.05 (m, 3H), 2.82 (s, 1H), 2.61 (s, 1H)。31 P-NMR (162 MHz, D2 O-d 6 ): δ -1.01, -1.21。ESI-MS: m/z= 677.0 [M+H]+ 。 實例40 化合物1-54
Figure 02_image726
向50 mL圓底燒瓶中添加1mm (650.00 mg, 963.30 umol)及DCM (10 mL)及4,5-二氰基咪唑(102.39 mg, 866.97 umol)。添加化合物4a (377.45 mg, 1.25 mmol)，且將混合物在室溫下攪拌2 h。用H2 O (2 × 30 mL)及鹽水(1 × 50 mL)洗滌該混合物。將DCM層在真空中濃縮以得到粗製物，藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 -70%至100% ACN，流速：25 mL/min)對其進行純化，以獲得呈白色固體之2mm (630 mg，720.02 umol，74.74%產率)。ESI-MS: m/z 875.7 [M+H]+ 。
將化合物2A-mm (400 mg, 582.43 umol)及2mm (611.54 mg, 698.92 umol)溶解於無水CH3 CN (28.0 mL)中，且添加4Å分子篩粉末(300 mg, 1 gr/100 mL)。將異質混合物用Ar鼓泡4 min。在室溫下攪拌20 min後，在室溫下添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(3.49 mmol, 7.7 mL)。攪拌1 h後，將混合物過濾且用無水CH3 CN洗滌。添加0.05 M I2 (23.3 mL)直至反應完成為止。在室溫下攪拌20-30 min後，將混合物過濾，且然後利用Na2 SO3 (水溶液)使反應淬滅。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1 × 50.0 mL)及飽和NaCl水溶液(1 × 50.0 mL)洗滌。用EtOAc (1 × 50.0 mL)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-60%至100% ACN，流速：35.0 mL/min)純化粗製材料，以得到呈白色泡沫狀物之3mm (700 mg，474.07 umol，81.40%產率)。31 P-NMR (162 MHz, DMSO-d6 ): δ -2.73, -2.84。ESI-MS: m/z 1476.1 [M+H]+ 。
於25 mL圓底燒瓶中，將3mm (700 mg, 474.07 umol)添加至CH3 CN (4 mL)及AcOH (1 mL)之溶液中。在室溫下攪拌過夜後，利用冷卻之NaHCO3 水溶液使混合物中和且用EtOAc (4 × 100 mL)萃取。將合併之EtOAc層用鹽水洗滌且在真空中濃縮以得到粗製物。藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-0%至60% ACN，流速：35.0 mL/min)純化粗製物，以得到呈白色固體之4mm (230 mg，263.81 umol，55.65%產率)。ESI-MS: m/z= 872.1 [M+H]+ 。
將化合物4mm (215 mg, 246.61 umol)溶解於無水CH3 CN (20 mL)中，且添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(1.97 mmol, 4.37mL)及4Å分子篩粉末(1.0 g, 1 gr/100 mL)。將異質混合物用Ar鼓泡4 min。在室溫下攪拌20 min後，經25 min至30 min在室溫下添加於CH3 CN (10.0 mL)中之4a (148.31 mg, 492.05 umol)。攪拌2 h後，將混合物過濾且用無水CH3 CN洗滌。向此溶液中添加0.05 M I2 (9.86 mL)，直至反應完成為止。在室溫下攪拌20-30 min後，利用飽和NaS2 O3 水溶液使反應淬滅。用EtOAc稀釋混合物，且分離有機層。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1 × 50.0 mL)及飽和NaCl水溶液(1 × 50.0 mL)洗滌。用EtOAc (1 × 100 mL)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-0%至50% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製材料，以得到呈白色泡沫狀物之5mm (60 mg，60.80 umol，24.65%產率)。ESI-MS: m/z 987.0 [M+H]+ 。
利用7 M NH3 於MeOH中之溶液(12.0 mL, 33%)處理化合物5mm (60 mg, 60.80 umol)。在室溫下攪拌5 h後，將混合物蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40 g，移動相A：於水中之0.05% NH4 HCO3 ，m/m-0%至10% ACN，流速：20 mL/min)純化粗製材料，以得到呈白色泡沫狀物之NH4 鹽產物6mm-P1 (12.0 mg，16.97 umol，27.9%產率)。
將15.0 mL體積之Amberlite IR-120 (Na型)添加至管柱中且用去離子水(3 × 15 mL)洗滌。將NH4 鹽產物(12.0 mg)溶解於去離子水中(12 mg於10 mL中)，添加至管柱頂部且用去離子水溶析。如藉由TLC (UV)所檢測，化合物係在早期流份中溶析出。將產物凍乾，以得到呈白色泡沫狀物之1-54 (10 mg，14.14 umol，23.25%產率)。1 H NMR (400 MHz, D2 O): δ 8.08 (s, 1H), 5.88-5.82 (m, 1H), 5.31-5.29 (d,J = 9.6 Hz, 1H), 4.78 (m, 2H), 4.46 (s, 1H), 4.22-4.04 (m, 5H), 3.97-3.93 (m, 1H), 3.51 (s, 3H), 2.82-2.76 (m, 1H), 2.41-2.38 (m, 1H)。31 P-NMR (162 MHz, DMSO-d6 ): δ -1.08, -1.38。ESI-MS: m/z 707.1 [M+H]+ 。 實例41 化合物1-55a、1-55b、1-55c及1-55d
Figure 02_image728
Figure 02_image730
將化合物1nn (950.0 mg, 1.41 mmol)及單體 C (1.59 g, 1.83 mmol)溶解於無水CH3 CN (50.0 mL)中，且添加於CH3 CN中之0.25 M四唑(8.46 mmol, 33.8 mL)及4 Å分子篩粉末(5.0 g, 1 gr/100 mL)。攪拌2 h後，添加0.1 M DDTT (0.1 M 28 mL)，直至反應完成為止。在室溫下攪拌1 h後，利用Na2 SO3 (水溶液)使反應淬滅。將混合物過濾，用無水CH3 CN洗滌且用EtOAc (3 × 40.0 mL)萃取。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1 × 50.0 mL)及飽和NaCl水溶液(1 × 50.0 mL)洗滌。用EtOAc (1 × 50.0 mL)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型MPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m) -30%至60% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製材料，以得到呈白色泡沫狀物之2nn (2 g，1.36 mmol，96%產率)。31 P NMR (162 MHz, D2 O): δ 66.34, 66.21。ESI-MS: m/z 1476.5 [M+H]+ 。
將化合物2nn (2.0 g, 1.36 mmol)溶解於溶解有AcOH (28.0 mL)之CH3 CN (7.0 mL)中。在室溫下攪拌30 min後，用EtOAc (3 × 40.0 mL)萃取混合物。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1 × 50.0 mL)及飽和NaCl水溶液(1 × 50.0 mL)洗滌。用EtOAc (1 × 50.0 mL)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型MPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 80 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-20%至50% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製材料，以得到呈白色泡沫狀物之3nn (600.0 mg，688.98 μmol，51%產率)。31 P NMR (162 MHz, D2 O): δ 66.05, 65.94。ESI-MS: m/z 871.1 [M+H]+ 。
將化合物3nn (580.0 mg, 666.02 μmol)溶解於無水CH3 CN (150.0 mL)中，且添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(5.33 mmol, 21.3 mL)及4 Å分子篩粉末(5.0 g, 1 gr/100 mL)。將異質混合物用Ar鼓泡5 min。在室溫下攪拌30 min後，經50 min在室溫下逐滴添加溶解於CH3 CN (20.0 mL)中之4a (401.48 mg, 1.33 mmol)。攪拌2 h後，添加0.1 M DDTT (0.1 M 28 mL)，直至反應完成為止。在室溫下攪拌30 min後，利用Na2 SO3 (水溶液)使反應淬滅。將混合物過濾，用無水CH3 CN洗滌且用EtOAc (3 × 40.0 mL)萃取。將有機相用飽和NaHCO3 水溶液(1 × 50.0 mL)及飽和NaCl水溶液(1 × 50.0 mL)洗滌。用EtOAc (1 × 50.0 mL)反萃取合併之水相。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由反相製備型MPLC (管柱：C18 spherical 20-35 μm 100A 40 g，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 (m/m)-30%至60% ACN，流速：35 mL/min)純化粗製材料，以得到呈白色泡沫狀物之4nn (200.0 mg，199.61 μmol，30%產率)。ESI-MS: m/z 1002.0 [M+H]+ 。
將化合物4nn (200.0 mg, 199.61 μmol)溶解於7 M NH3 /MeOH (20 mL)中，且將混合物在室溫下攪拌12 h。將混合物蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：XBridge 30 × 100 mm，移動相：於水中之0.05% NH4 HCO3 -0%至15% ACN，流速：20 mL/min)純化殘餘物，以獲得氨鹽產物5nn-P1 (24.0 mg，33.25 μmol，17%產率)、5nn-P2 (20.3 mg，28.13 μmol，14%產率)、5nn-P3 (4.2 mg，5.82 μmol，3%產率)及5nn-P4 (4.3 mg，5.96 μmol，3%產率)，其各自呈白色泡沫狀物。
將15.0 mL體積之Amberlite IR-120 (Na型)添加至管柱中且用去離子水(3 × 15.0 mL)洗滌。將該等氨鹽產物溶解於去離子水(15.0 mL)中，添加至管柱頂部且用去離子水溶析。如藉由TLC (UV)所檢測，化合物係在早期流份中溶析出。將產物凍乾，以得到來自5nn-P1 之1-55a (21.0 mg, 27.43 μmol, 82%產率)、來自5nn-P2 之1-55b (4.0 mg, 5.22 μmol, 19%產率)、來自5nn-P3 之1-55c (2.0 mg, 2.61 μmol, 45%產率)及來自5nn-P4 之1-55d (2.0 mg, 2.61 μmol, 44%產率)，其各自呈白色泡沫狀物。
1-55a ： 1 H NMR (400 MHz, D2 O): δ 8.44 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 5.96 (d, J=8.8Hz, 1H), 5.90 (dd, J1 =10.0Hz, J2 =5.6Hz, 1H), 5.38 (dd, J=8.0Hz, 1H), 5.31 (m, 1H), 4.48 (s, 1H), 4.42 (d, J=7.2Hz, 1H), 4.19-4.14 (m, 2H), 4.08 (m, 2H), 3.99 (m, 1H), 3.56 (s, 3H), 3.07 (m, 1H), 2.36(m, 1H)。31 P NMR (162 MHz, D2 O): δ 60.32, 54.75。ESI-MS: m/z 722.0 [M+H]+ 。
1-55b ： 1 H NMR (400 MHz, D2 O): δ 8.23 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 5.92 (m, 2H), 5.28 (dt, J1 =9.6Hz, J2 =4.0Hz, 1H), 4.99 (m, 1H), 4.55 (s, 1H), 4.40 (d, J=4.0Hz, 1H), 4.32 (s, 1H), 4.21-4.10 (m, 3H), 4.03 (m, 1H), 3.51 (s, 3H), 2.87 (m, 1H), 2.71 (m, 1H)。31 P NMR (162 MHz, D2 O): δ 53.65, 53.00。ESI-MS: m/z 722.0 [M+H]+ 。
1-55c ： 1 H NMR (400 MHz, D2 O): δ 8.14 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 5.94 (t, J=7.8Hz, 1H), 5.90(d, J=8.4Hz, 1H), 5.44 (m, 1H), 5.33 (d, 1H), 4.56 (s, 1H), 4.35 (d, J=8.4Hz, 1H), 4.28 (t, J=9.6Hz, 1H), 4.11-4.06 (m, 3H), 3.98-3.96 (m, 1H), 3.54 (s, 3H), 2.90 (m, 1H), 2.45 (m, 1H)。31 P NMR (162 MHz, D2 O): δ 53.68, 54.75。ESI-MS: m/z 722.0 [M+H]+ 。
1-55d ： 1 H NMR (400 MHz, D2 O): δ 8.15 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 5.95 (dd, J1 =8.0Hz, J2 =4.4Hz, 1H), 5.87 (d, J=8.8Hz, 1H), 5.48 (dt, J1 =8.8Hz, J2 =4.4Hz,1H), 5.20 (t, J=6.8Hz, 1H), 4.56 (s, 1H), 4.33 (d, J=4.0Hz, 1H), 4.27 (d, J=2.4Hz, 2H), 4.11-4.07 (m, 3H), 3.08 (s, 3H), 2.84 (m, 1H), 2.67 (m, 1H)。31 P NMR (162 MHz, D2 O): δ 54.67, 52.56。ESI-MS: m/z 721.9 [M+H]+ 。 實例42 化合物1-56
Figure 02_image732
將化合物1oo (120 mg, 0.178 mmol)及2oo (178 mg, 0.231 mmol)溶解於無水CH3 CN (10 mL)中，且添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(1.6 mL, 0.72 mmol)及4 Å分子篩粉末。將異質混合物用N2 鼓泡10 min。攪拌2 h後，添加0.05 M I2 (THF:H2 O:Py=8:1:1)。將混合物攪拌20 min。過濾該混合物，且用EA洗滌。利用Na2 SO3 水溶液使反應淬滅。用EtOAc稀釋混合物。分離各層。將有機相用NaHCO3 水溶液(1 × 60 mL)及NaCl水溶液(1 × 60 mL)洗滌。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由急速二氧化矽管柱層析(於CH2 Cl2 中之0-10 MeOH)純化粗製材料，以得到呈白色固體之3oo (145 mg, 60%)。ESI-MS: m/z 1362.51 [M+H]+ 。
將化合物3oo (145 mg, 0.106 mmol)溶解於DCA/DCM (3%, v/v, 3 mL)中，且添加三乙基矽烷(1.5 mL)。在室溫下攪拌1 h後，在0℃下利用飽和碳酸氫鈉溶液使混合物中和。將混合物蒸發至乾燥，且藉由急速二氧化矽管柱層析(於CH2 Cl2 中之0-20 MeOH)純化粗製殘餘物，以得到呈白色固體之4oo (30 mg, 38%)。ESI-MS: m/z 758.21 [M+H]+ 。
將化合物4oo (30 mg, 0.039 mmol)溶解於無水CH3 CN:DMF:THF (4:2:4, v:v:v)中，且添加於CH3 CN中之0.45 M四唑(0.7 mL, 0.316)及4 Å分子篩粉末。將異質混合物用N2 鼓泡10 min。逐滴添加化合物4a (24 mg, 0.078 mmol)。攪拌2 h後，添加0.05 M I2 (THF:H2 O:Py=8:1:1)。將混合物攪拌20 min。過濾該混合物，且用EA洗滌。利用Na2 SO3 水溶液使反應淬滅。用EtOAc稀釋混合物，且分離各層。將有機相用NaHCO3 水溶液(1 × 60 mL)及NaCl水溶液(1 × 60 mL)洗滌。將合併之有機相蒸發至乾燥，且藉由急速二氧化矽管柱層析(於CH2 Cl2 中之0-20 MeOH)純化粗製材料，以得到呈黃色固體之5oo (12 mg，不純)。ESI-MS: m/z 873.31 [M+H]+ 。
利用二異丙胺:MeOH:H2 O溶液(3 mL, 1:1:2, v:v:v)處理化合物5oo (12 mg，不純)。在室溫下攪拌16 h後，將混合物蒸發至乾燥，且藉由反相製備型HPLC (管柱：C18管柱，21 × 250 mm，移動相：A：於水中之0.1%甲酸，B：MeCN；梯度：在30 min內0%至25% B，流速：15 mL/min)純化粗製材料，以得到呈白色泡沫狀物之游離酸形式之6oo (2.1 mg)。ESI-MS: m/z 663.51 [M+H]+ 。
將Dowex 50W x 8, 200-400 (H型，10 mL)添加至燒杯中且用去離子水(2×)洗滌。然後向樹脂中添加於去離子H2 O (50 mL)中之15% H2 SO4 ，且將混合物攪拌15 min並傾析(l×)。利用於去離子H2 O中之15% H2 SO4 將樹脂轉移至管柱中並用15% H2 SO4 洗滌(至少4 CV)，且然後用去離子H2 O洗滌直至其為中性為止。將樹脂轉移回至燒杯中，且添加於去離子H2 O中之15% NaOH溶液(50 mL)。將混合物攪拌15 min並傾析(l×)。將樹脂轉移至管柱中，用於去離子H2 O中之15% NaOH洗滌(至少4 CV)，且然後用去離子H2 O洗滌直至其為中性為止(至少4 CV)。將化合物6oo 三乙基銨鹽溶解於去離子H2 O中(2.3 mg於2 mL中)，添加至管柱頂部，且用去離子H2 O溶析。如藉由TLC (UV)所檢測，轉換之鈉鹽係在早期流份中溶析出。將產物凍乾，以得到呈白色固體之1-56 鈉鹽(1.1 mg)。ESI-MS: m/z 663.05 [M+H]+ 。 實例43 其他化合物
上述合成係例示性的且可用作起始點以製備大量其他化合物。下文提供式(I)、(II)及(III)之化合物之實例，其可以各種方式(包括本文所顯示且闡述之彼等合成方案)來製備。熟習此項技術者能夠識別所揭示合成之修飾形式並基於本文揭示內容設計途徑；所有此等修飾形式及替代途徑均在申請專利範圍之範疇內。
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(包括其醫藥上可接受之鹽)。 實例A DSF結合分析
在Applied Biosystems 7900HT即時PCR機器中實施差示掃描螢光測定(DSF)，其中ROX檢測器之激發及發射分別設為492 nm及610 nm。每一樣品係以40 μL之總體積來製備，其含有5×最終濃度之於緩衝液(20 mM HEPES pH 7.5、150 mM NaCl、1mM DTT及1 mM MgCl2 )中之SYPRO橙(Invitrogen)及4 uM有及沒有化合物之STING CTD結構域蛋白質。將所有樣品以1℃/min之速率分別以100%及1%之斜坡速率自20℃加熱至99℃，且在整個過程中收集數據。使用自原始解離曲線數據得到之螢光強度來確定單獨或與化合物一起之STING蛋白之熔融溫度或Tm。然後自在化合物存在下蛋白質之所有Tm減去單獨蛋白質之Tm，且所得Tm對化合物濃度提供如使用GraphPadTM Prism 8.0中之S形劑量反應(可變斜率)方程式所生成之表觀Kd值。 實例B 293T R232細胞報導基因分析
於96孔板中將293T-Dual hSTING-R232細胞(Invivogen)以5 × 104 個細胞/孔之密度平鋪於補充有10% FBS、1% Pen-Strep、1%非必需胺基酸、1%麩醯胺酸及1% HEPES之DMEM中。在使細胞黏附48 h後進行分析設置。將溶解於水中之化合物於含有10 µg/mL毛地黃皂苷之投藥緩衝液中連續稀釋。自細胞吸出培養基，且以一式三份添加50 µL含有化合物之緩衝液。在37℃下30 min後，將緩衝液吸出且更換100 µL培養基。將細胞在37℃、5% CO2 下培育20 h。分別基於螢光素酶及鹼性磷酸酶報導基因活性來量測IFN-β表現及干擾素調控因子(IRF)之活化。同時測定細胞存活率。
如表1中所示，本文所闡述之化合物係STING促效劑，其中「A」指示EC50 ＜ 0.25 μM，「B」指示EC50 ≥ 0.25 μM且＜ 100 μM，且「C」指示EC50 ≥ 100 μM。表 1
化合物 HEK 293T報導基因分析
EC50 [μM] IRF報導基因 EC50 [μM] IRN-β報導基因
1-1 A A
1-3 B C
1-4 A A
1-5 A A
1-6a B B
1-6b B B
1-7 A A
1-8 B B
1-9 A A
1-10a B B
1-10b A A
1-11 C C
1-12 C C
1-13 A A
1-14a B C
1-14b B C
1-14c B B
1-14d B B
1-15a C C
1-15b B B
1-16a B B
1-16b A A
1-17 A A
1-18 A A
1-19a B B
1-19b A A
1-20a B B
1-20b A A
1-21a B B
1-21b A A
1-22a B B
1-22b A A
1-23 B B
1-24 B C
1-25 A A
1-26 B B
1-27 A A
1-28a A A
1-29b B B
1-29 B B
1-30a B B
1-30b C C
1-34a A B
1-34b B B
1-35a B B
1-35b A B
1-37 B C
1-38a C C
1-38b C C
1-46a B B
1-46b A A
1-47a C C
1-47b A A
1-48a B B
1-48b A A
1-48c A B
1-48d A B
1-49 A B
1-50a A B
1-50b A B
1-52 A B
實例C CT26小鼠結腸癌活體內效能研究
在小鼠CT26結腸癌模型中研究式(I)化合物之活體內抗腫瘤活性。向10隻雌性9週齡BALB/c小鼠/組之側腹上皮下植入3 × 105 個細胞。在前8天內每天實施測徑器量測以評價腫瘤體積(TV)及體重量測值，且此後每兩週實施一次直至研究結束。當腫瘤體積達到100 mm3 之大小時開始投藥。在兩個單獨研究中對式(I)化合物及其各別媒劑對照進行測試。式(I)化合物係以25 μg或100 μg以三天間隔腫瘤內投用3次。將人類終點預定為TV為2000 mm3 。
在兩個研究中，媒劑對照中之腫瘤生長迅速，且在大多數動物中，在第15天與第22天之間達到2000 mm3 TV之人類終點(實心圓圈)。三個25 μg腫瘤內劑量之10-b (圖1中之實心正方形)將4隻動物之腫瘤生長延遲大約14天，同時5隻動物至研究結束不具有可量測之腫瘤。100 μg10-b 治療(圖1中之實心菱形)使10隻動物中有9隻無腫瘤且僅有1隻動物達到TV = 2000mm3 。1-13 觀察到類似效能。與媒劑對照相比，三個25 μg劑量之1-13 (圖2中之實心正方形)在8隻動物中引起腫瘤生長延遲，同時2隻動物在研究結束時無腫瘤。在100 μg之1-13 (圖2中之實心菱形)下，10隻動物中有9隻無腫瘤，且僅1隻動物達到TV = 2000 mm3 。三個100 μg腫瘤內劑量之1-1 (圖3中之實心三角形/實線)使得10隻動物中有4隻至研究結束無腫瘤。表2中提供該等結果之匯總。表 2
化合物 量 治癒率 (TV ＜ 10 mm3 ) 治療失敗 (TV ＞ 2000 mm3 )
媒劑    0% 100%
1-1 100 μg 40% 40%
10-b 25 μg 50% 40%
10-b 100 μg 90% 10%
1-13 25 μg 20% 80%
1-13 100 μg 90% 10%
1-19b 100 μg 70% 30%
1-20b 100 μg 50% 50%
1-21b 100 μg 50% 50%
1-22b 100 μg 56% 44%
在小鼠CT26結腸癌模型中研究式(I)化合物在腫瘤內皮下投與後之活體內抗腫瘤活性。如實例C之第一段中一般來實施該研究。式(I)化合物係以25 μg或100 μg腫瘤內或以1 mg/kg或4 mg/kg皮下以間隔三天(q3d)或間隔7天(qw)投用2或3次。
在此研究中，媒劑對照中之腫瘤生長迅速，且平均而言至第16天達到2000 mm3 TV之人類終點。與媒劑組相比，以4 mg/kg皮下投與兩次10-b 使腫瘤生長延遲大約8天。以4 mg/kg皮下投用三次10-b 使腫瘤生長進一步延遲；與以100 μg腫瘤內投用之4/10的動物相比，1/10的動物達成完全腫瘤抑制。 實例D 組合研究
在小鼠CT26結腸癌模型中研究式(I)化合物與免疫檢查點抑制劑抗CTLA-4 (純系9H10)組合之活體內抗腫瘤活性。如實例C之第一段中所闡述來實施該研究。
在此研究中，媒劑對照中之腫瘤生長迅速，且平均而言至第16天達到2000 mm3 TV之人類終點(圖4中之實心圓圈)。三個25 μg IT劑量之10-b 使腫瘤生長延遲大約8天(圖4中之藍色三角形)。類似地，三個腹膜內劑量之檢查點抑制劑抗CTLA-4純系9H10 (第1劑量5 mg/kg，第2劑量及第3劑量1 mg/kg)使腫瘤生長延遲大約7天(圖4中之紅色正方形)。抗CTLA-4 + 25 μg10-b 之組合引起強勁之抗腫瘤反應，其中4/10的動物在研究結束時無腫瘤(圖4中之紫色六邊形)。其他資訊提供於表3中。表 3
化合物 劑量 途徑/頻率 完全腫瘤抑制 治療失敗
媒劑 - SC/ 3× q3d 0 100
10-b 25 μg IT/ 3× q3d 0 100
抗CTLA4 5 mg/kg -1mg/kg IP/3× q3d 0 100
抗CTLA4 + 10-b 5 mg/kg -1mg/kg 25 μg IP/3× q3d IT/ 3× q3d 40 40
完全腫瘤抑制= TV ＜ 10 mm3 ；治療失敗= TV ＞ 2000 mm3 。
如本文所提供之結果所展示，式(I)化合物以及其醫藥上可接受之鹽作為單一療法及/或與檢查點抑制劑組合有效治療結腸癌。
儘管已出於清晰及理解之目的藉助說明及實例相當詳細地闡述上文，但熟習此項技術者應理解，可在不背離本揭示內容之精神之情形下作出多種及各種修改。因此，應清楚地理解，本文所揭示之形式僅具有說明性且不意欲限制本揭示內容之範疇，而是亦涵蓋在本發明之真實範疇及精神內之所有修改及替代形式。
圖1顯示使用化合物1-10b 在兩種不同投藥量下進行結腸癌研究之結果。
圖2顯示使用化合物1-13 在兩種不同投藥量下進行結腸癌研究之結果。
圖3顯示使用化合物1-1 在兩種不同投藥量下進行結腸癌研究之結果。
圖4顯示使用化合物1-10b 與CTLA-4之組合進行結腸癌研究之結果。
Figure 109115398-A0101-11-0003-2

Claims (138)

  1. 一種選自式(I)、式(II)及式(III)之化合物或上述中任一者之醫藥上可接受之鹽，
    Figure 03_image748
    (I)
    Figure 03_image750
    (II)
    Figure 03_image752
    (III) 其中： 環A1A 、環A1B 及環A1C 獨立地選自由以下組成之群：
    Figure 03_image754
    及
    Figure 03_image756
    ； 環A2A 、環A2B 及環A2C 獨立地選自由以下組成之群：
    Figure 03_image758
    Figure 03_image760
    及
    Figure 03_image762
    ； B1A 係視情況經取代之[5,6]二環雜芳基或視情況經取代之[5,6]二環雜環基，且其中B1A 連接至環A1A 之1’位； B2A 係視情況經取代之[5,6]二環雜芳基或視情況經取代之[5,6]二環雜環基，且其中B2A 連接至環A2A 之1’位； B1B 係視情況經取代之[5,6]二環雜芳基或視情況經取代之[5,6]二環雜環基，且其中B1B 連接至環A1B 之1’位； B2B 係視情況經取代之[5,6]二環雜芳基或視情況經取代之[5,6]二環雜環基，且其中B2B 連接至環A2B 之1’位； B1C 係視情況經取代之[5,6]二環雜芳基或視情況經取代之[5,6]二環雜環基，且其中B1C 連接至環A1C 之1’位； B2C 係視情況經取代之[5,6]二環雜芳基或視情況經取代之[5,6]二環雜環基，且其中B2C 連接至環A2C 之1’位； X1A 、X3A 、X1B 、X3B 、X1C 及X3C 獨立地係OH、O- 、SH、S- 、O(未經取代之C1-4 烷基)、S(未經取代之C1-4 烷基)、O-CH2 -O-C(=O)-(未經取代之C1-4 烷基)、S-CH2 -O-C(=O)-(未經取代之C1-4 烷基)、O-CH2 -O-C(=O)-O-(未經取代之C1-4 烷基)、S-CH2 -O-C(=O)-O-(未經取代之C1-4 烷基)、
    Figure 03_image764
    或
    Figure 03_image766
    ； X2A 、X4A 、X2B 、X4B 、X2C 及X4C 獨立地係O或S； R1A 係氫或鹵素，且其中R1A 連接至環A1A 之2’位； R2A 係選自由以下組成之群：氫、鹵素、羥基、未經取代之C1-4 烷氧基及
    Figure 03_image768
    ，且其中R2A 連接至環A1A 之2’位，且當R2A 係
    Figure 03_image768
    時，則該*指示與環A1A 之4’位之連接點； R3A 係氫或鹵素，且其中R3A 連接至環A2A 之3’位； R4A 係選自由以下組成之群：氫、鹵素、羥基及未經取代之C1-4 烷氧基，且其中R4A 連接至環A2A 之3’位； R5A 係氫，且其中R5A 連接至環A2A 之4’位；或 R4A 及R5A 一起形成
    Figure 03_image771
    ，其中每一*指示與環A2A 之連接點； R1B 係氫或鹵素，其中R1B 連接至環A1B 之3’位； R2B 係選自由以下組成之群：氫、鹵素、羥基及未經取代之C1-4 烷氧基，且其中R2B 連接至環A1B 之3’位； R3B 係氫或鹵素，且其中R3B 連接至環A2B 之3’位； R4B 係選自由以下組成之群：氫、鹵素、羥基及未經取代之C1-4 烷氧基，且其中R4B 連接至環A2B 之3’位； R5B 係氫，且其中R5B 連接至環A1B 之4’位； R6B 係氫，且其中R6B 連接至環A1B 之4’位；或 R2B 及R5B 一起形成
    Figure 03_image773
    ，其中每一*指示與環A1B 之連接點； R4B 及R6B 一起形成
    Figure 03_image773
    ，其中每一*指示與環A2B 之連接點； R1C 係氫或鹵素，其中R1C 連接至環A1C 之2’位； R2C 係選自由以下組成之群：氫、鹵素、羥基、未經取代之C1-4 烷氧基及
    Figure 03_image775
    ，且其中R2C 連接至環A1C 之2’位，且當R2C 係
    Figure 03_image775
    時，則該*指示與環A1C 之4’位之連接點； R3C 係氫或鹵素，其中R3C 連接至環A2C 之2’位；且 R4C 係選自由以下組成之群：氫、鹵素、羥基、未經取代之C1-4 烷氧基及
    Figure 03_image775
    ，且其中R4C 連接至環A2C 之2’位，且當R4C 係
    Figure 03_image775
    時，則該*指示與環A2C 之4’位之連接點；且 條件係當該化合物具有式(I)之結構；環A1A 係
    Figure 03_image778
    ；環A2A 係
    Figure 03_image780
    ；B1A 係腺嘌呤或鳥嘌呤；B2A 係腺嘌呤或鳥嘌呤時；則X1A 及X3A 中之至少一者係SH或S- ；或則X2A 及X4A 中之至少一者係S； 條件係當該化合物具有式(I)之結構；環A1A 係
    Figure 03_image782
    ；環A2A 係
    Figure 03_image784
    ；X1A 及X3A 係OH或O- ；且X2A 及X4A 係O時；則B1A 及B2A 中之至少一者不選自腺嘌呤及鳥嘌呤； 條件係當該化合物具有式(II)之結構；環A1B 係
    Figure 03_image786
    ；環A2B 係
    Figure 03_image788
    ；B1B 係腺嘌呤或鳥嘌呤；B2B 係腺嘌呤或鳥嘌呤時；則X1B 及X3B 中之至少一者係SH或S- ；或則X2B 及X4B 中之至少一者係S； 條件係當該化合物具有式(II)之結構；環A1B 係
    Figure 03_image790
    ；環A2B 係
    Figure 03_image792
    ；X1B 及X3B 係OH或O- ；且X2B 及X4B 係O時；則B1B 及B2B 中之至少一者不選自腺嘌呤及鳥嘌呤； 條件係當該化合物具有式(III)之結構；環A1C 係
    Figure 03_image794
    ；環A2C 係
    Figure 03_image796
    ；B1C 係腺嘌呤或鳥嘌呤；B2C 係腺嘌呤或鳥嘌呤時；則X1C 及X3C 中之至少一者係SH或S- ；或則X2C 及X4C 中之至少一者係S； 條件係當該化合物具有式(III)之結構；環A1C 係
    Figure 03_image798
    ；環A2C 係
    Figure 03_image800
    ；X1C 及X3C 係OH或O- ；且X2C 及X4C 係O時；則B1C 及B2C 中之至少一者不選自腺嘌呤及鳥嘌呤。
  2. 如請求項1之化合物，其中該化合物係式(I)化合物或其醫藥上可接受之鹽。
  3. 如請求項2之化合物，其中環A1A 係
    Figure 03_image802
    。
  4. 如請求項2之化合物，其中環A1A 係
    Figure 03_image804
    。
  5. 如請求項2之化合物，其中環A1A 係
    Figure 03_image806
    。
  6. 如請求項2之化合物，其中環A1A 係
    Figure 03_image808
    。
  7. 如請求項2之化合物，其中環A1A 係
    Figure 03_image810
    。
  8. 如請求項2之化合物，其中環A1A 係
    Figure 03_image812
    。
  9. 如請求項2至8中任一項之化合物，其中環A2A 係
    Figure 03_image814
    。
  10. 如請求項2至8中任一項之化合物，其中環A2A 係
    Figure 03_image816
    。
  11. 如請求項2至8中任一項之化合物，其中環A2A 係
    Figure 03_image818
    。
  12. 如請求項2至8中任一項之化合物，其中環A2A 係
    Figure 03_image820
    。
  13. 如請求項2至8中任一項之化合物，其中環A2A 係
    Figure 03_image822
    。
  14. 如請求項2至8中任一項之化合物，其中環A2A 係
    Figure 03_image824
    。
  15. 如請求項2至8中任一項之化合物，其中環A2A 係
    Figure 03_image826
    。
  16. 如請求項2至15中任一項之化合物，其中B1A 係視情況經取代之[5,6]二環雜芳基。
  17. 如請求項2至15中任一項之化合物，其中B1A 係視情況經取代之[5,6]二環雜環基。
  18. 如請求項2至15中任一項之化合物，其中B1A 係視情況經取代之嘌呤鹼基。
  19. 如請求項2至18中任一項之化合物，其中B2A 係視情況經取代之[5,6]二環雜芳基。
  20. 如請求項2至18中任一項之化合物，其中B2A 係視情況經取代之[5,6]二環雜環基。
  21. 如請求項2至18中任一項之化合物，其中B2A 係視情況經取代之嘌呤鹼基。
  22. 如請求項18或21之化合物，其中該視情況經取代之嘌呤鹼基係腺嘌呤或鳥嘌呤。
  23. 如請求項2至15中任一項之化合物，其中B1A 係選自由以下組成之群：
    Figure 03_image828
    Figure 03_image830
    及
    Figure 03_image832
    。
  24. 如請求項2至18或23中任一項之化合物，其中B2A 係選自由以下組成之群：
    Figure 03_image834
    Figure 03_image836
    及
    Figure 03_image838
    。
  25. 如請求項2至24中任一項之化合物，其中R1A 係氫。
  26. 如請求項2至24中任一項之化合物，其中R1A 係鹵素。
  27. 如請求項2至26中任一項之化合物，其中R2A 係氫。
  28. 如請求項2至26中任一項之化合物，其中R2A 係鹵素。
  29. 如請求項2至26中任一項之化合物，其中R2A 係羥基。
  30. 如請求項2至26中任一項之化合物，其中R2A 係未經取代之C1-4 烷氧基。
  31. 如請求項2至26中任一項之化合物，其中R2A 係
    Figure 03_image840
    ，其中R2A 連接至環A1A 之2’位，且該*指示與環A1A 之4’位之連接點。
  32. 如請求項2至31中任一項之化合物，其中R3A 係氫。
  33. 如請求項2至31中任一項之化合物，其中R3A 係鹵素。
  34. 如請求項2至33中任一項之化合物，其中R4A 係氫。
  35. 如請求項2至33中任一項之化合物，其中R4A 係鹵素。
  36. 如請求項2至33中任一項之化合物，其中R4A 係羥基。
  37. 如請求項2至33中任一項之化合物，其中R4A 係未經取代之C1-4 烷氧基。
  38. 如請求項2至37中任一項之化合物，其中R5A 係氫。
  39. 如請求項2至33中任一項之化合物，其中R4A 及R5A 一起形成
    Figure 03_image842
    ，其中每一*指示與環A2A 之連接點。
  40. 如請求項1之化合物，其中該化合物係式(II)化合物或其醫藥上可接受之鹽。
  41. 如請求項40之化合物，其中環A1B 係
    Figure 03_image844
    。
  42. 如請求項40之化合物，其中環A1B 係
    Figure 03_image846
    。
  43. 如請求項40之化合物，其中環A1B 係
    Figure 03_image848
    。
  44. 如請求項40之化合物，其中環A1B 係
    Figure 03_image850
    。
  45. 如請求項40之化合物，其中環A1B 係
    Figure 03_image852
    。
  46. 如請求項40之化合物，其中環A1B 係
    Figure 03_image854
    。
  47. 如請求項40至46中任一項之化合物，其中環A2B 係
    Figure 03_image856
    。
  48. 如請求項40至46中任一項之化合物，其中環A2B 係
    Figure 03_image858
    。
  49. 如請求項40至46中任一項之化合物，其中環A2B 係
    Figure 03_image860
    。
  50. 如請求項40至46中任一項之化合物，其中環A2B 係
    Figure 03_image862
    。
  51. 如請求項40至46中任一項之化合物，其中環A2B 係
    Figure 03_image864
    。
  52. 如請求項40至46中任一項之化合物，其中環A2B 係
    Figure 03_image866
    。
  53. 如請求項40至46中任一項之化合物，其中環A2B 係
    Figure 03_image868
    。
  54. 如請求項40至53中任一項之化合物，其中B1B 係視情況經取代之[5,6]二環雜芳基。
  55. 如請求項40至53中任一項之化合物，其中B1B 係視情況經取代之[5,6]二環雜環基。
  56. 如請求項40至53中任一項之化合物，其中B1B 係視情況經取代之嘌呤鹼基。
  57. 如請求項40至56中任一項之化合物，其中B2B 係視情況經取代之[5,6]二環雜芳基。
  58. 如請求項40至56中任一項之化合物，其中B2B 係視情況經取代之[5,6]二環雜環基。
  59. 如請求項40至56中任一項之化合物，其中B2B 係視情況經取代之嘌呤鹼基。
  60. 如請求項56或59之化合物，其中該視情況經取代之嘌呤鹼基係腺嘌呤或鳥嘌呤。
  61. 如請求項40至53中任一項之化合物，其中B1B 係選自由以下組成之群：
    Figure 03_image870
    Figure 03_image872
    及
    Figure 03_image874
    。
  62. 如請求項40至56或61中任一項之化合物，其中B2B 係選自由以下組成之群：
    Figure 03_image876
    Figure 03_image878
    及
    Figure 03_image880
    。
  63. 如請求項40至62中任一項之化合物，其中R1B 係氫。
  64. 如請求項40至62中任一項之化合物，其中R1B 係鹵素。
  65. 如請求項40至64中任一項之化合物，其中R2B 係氫。
  66. 如請求項40至64中任一項之化合物，其中R2B 係鹵素。
  67. 如請求項40至64中任一項之化合物，其中R2B 係羥基。
  68. 如請求項40至64中任一項之化合物，其中R2B 係未經取代之C1-4 烷氧基。
  69. 如請求項40至68中任一項之化合物，其中R3B 係氫。
  70. 如請求項40至68中任一項之化合物，其中R3B 係鹵素。
  71. 如請求項40至70中任一項之化合物，其中R4B 係氫。
  72. 如請求項40至70中任一項之化合物，其中R4B 係鹵素。
  73. 如請求項40至70中任一項之化合物，其中R4B 係羥基。
  74. 如請求項40至70中任一項之化合物，其中R4B 係未經取代之C1-4 烷氧基。
  75. 如請求項40至74中任一項之化合物，其中R5B 係氫。
  76. 如請求項40至75中任一項之化合物，其中R6B 係氫。
  77. 如請求項40至64或69至74中任一項之化合物，其中R2B 及R5B 一起形成
    Figure 03_image882
    ，其中每一*指示與環A1B 之連接點。
  78. 如請求項40至70或75中任一項之化合物，其中R4B 及R6B 一起形成
    Figure 03_image884
    ，其中每一*指示與環A2B 之連接點。
  79. 如請求項1之化合物，其中該化合物係式(III)化合物或其醫藥上可接受之鹽。
  80. 如請求項79之化合物，其中環A1C 係
    Figure 03_image886
    。
  81. 如請求項79之化合物，其中環A1C 係
    Figure 03_image888
    。
  82. 如請求項79之化合物，其中環A1C 係
    Figure 03_image890
    。
  83. 如請求項79之化合物，其中環A1C 係
    Figure 03_image892
    。
  84. 如請求項79之化合物，其中環A1C 係
    Figure 03_image894
    。
  85. 如請求項79之化合物，其中環A1C 係
    Figure 03_image896
    。
  86. 如請求項79至85中任一項之化合物，其中環A2C 係
    Figure 03_image898
    。
  87. 如請求項79至85中任一項之化合物，其中環A2C 係
    Figure 03_image900
    。
  88. 如請求項79至85中任一項之化合物，其中環A2C 係
    Figure 03_image902
    。
  89. 如請求項79至85中任一項之化合物，其中環A2C 係
    Figure 03_image904
    。
  90. 如請求項79至85中任一項之化合物，其中環A2C 係
    Figure 03_image906
    。
  91. 如請求項79至85中任一項之化合物，其中環A2C 係
    Figure 03_image908
    。
  92. 如請求項79至85中任一項之化合物，其中環A2C 係
    Figure 03_image910
    。
  93. 如請求項79至92中任一項之化合物，其中B1C 係視情況經取代之[5,6]二環雜芳基。
  94. 如請求項79至92中任一項之化合物，其中B1C 係視情況經取代之[5,6]二環雜環基。
  95. 如請求項79至92中任一項之化合物，其中B1C 係視情況經取代之嘌呤鹼基。
  96. 如請求項79至95中任一項之化合物，其中B2C 係視情況經取代之[5,6]二環雜芳基。
  97. 如請求項79至95中任一項之化合物，其中B2C 係視情況經取代之[5,6]二環雜環基。
  98. 如請求項79至95中任一項之化合物，其中B2C 係視情況經取代之嘌呤鹼基。
  99. 如請求項95或98之化合物，其中該視情況經取代之嘌呤鹼基係腺嘌呤或鳥嘌呤。
  100. 如請求項79至92中任一項之化合物，其中B1C 係選自由以下組成之群：
    Figure 03_image912
    Figure 03_image914
    及
    Figure 03_image916
    。
  101. 如請求項79至95或100中任一項之化合物，其中B2C 係選自由以下組成之群：
    Figure 03_image918
    Figure 03_image920
    及
    Figure 03_image922
    。
  102. 如請求項79至101中任一項之化合物，其中R1C 係氫。
  103. 如請求項79至101中任一項之化合物，其中R1C 係鹵素。
  104. 如請求項79至103中任一項之化合物，其中R2C 係氫。
  105. 如請求項79至103中任一項之化合物，其中R2C 係鹵素。
  106. 如請求項79至103中任一項之化合物，其中R2C 係羥基。
  107. 如請求項79至103中任一項之化合物，其中R2C 係未經取代之C1-4 烷氧基。
  108. 如請求項79至103中任一項之化合物，其中R2C 係
    Figure 03_image924
    ，且其中R2C 連接至環A1C 之2’位，且該*指示與環A1C 之4’位之連接點。
  109. 如請求項79至108中任一項之化合物，其中R3C 係氫。
  110. 如請求項79至108中任一項之化合物，其中R3C 係鹵素。
  111. 如請求項79至110中任一項之化合物，其中R4C 係氫。
  112. 如請求項79至110中任一項之化合物，其中R4C 係鹵素。
  113. 如請求項79至110中任一項之化合物，其中R4C 係羥基。
  114. 如請求項79至110中任一項之化合物，其中R4C 係未經取代之C1-4 烷氧基。
  115. 如請求項79至110中任一項之化合物，其中R4C 係
    Figure 03_image926
    ，其中R4C 連接至環A2C 之2’位，且該*指示與環A2C 之4’位之連接點。
  116. 如請求項26、28、33、35、64、66、70、72、103、105、110或112之化合物，其中該鹵素係F。
  117. 如請求項30、37、68、74、107或114之化合物，其中該未經取代之C1-4 烷氧基係甲氧基。
  118. 如請求項1之化合物，其中該化合物係選自由以下組成之群：
    Figure 03_image928
    Figure 03_image930
    Figure 03_image932
    Figure 03_image934
    Figure 03_image936
    Figure 03_image938
    Figure 03_image940
    Figure 03_image942
    Figure 03_image944
    Figure 03_image946
    Figure 03_image948
    及
    Figure 03_image950
    ，或上述中任一者之醫藥上可接受之鹽。
  119. 如請求項1之化合物，其中該化合物係選自由以下組成之群：
    Figure 03_image952
    Figure 03_image954
    Figure 03_image956
    Figure 03_image958
    Figure 03_image960
    Figure 03_image962
    Figure 03_image964
    Figure 03_image966
    Figure 03_image968
    Figure 03_image970
    Figure 03_image972
    Figure 03_image974
    Figure 03_image976
    Figure 03_image978
    及
    Figure 03_image980
    ，或上述中任一者之醫藥上可接受之鹽。
  120. 一種醫藥組合物，其包含有效量之如請求項1至119中任一項之化合物或其醫藥上可接受之鹽及賦形劑。
  121. 如請求項1至119中任一項之化合物或其醫藥上可接受之鹽，其用於治療調節STING有益之疾病或病狀。
  122. 如請求項1至119中任一項之化合物或其醫藥上可接受之鹽，其用於誘導免疫反應。
  123. 如請求項1至119中任一項之化合物或其醫藥上可接受之鹽，其用於誘導STING依賴性I型干擾素產生。
  124. 如請求項1至119中任一項之化合物或其醫藥上可接受之鹽，其用於使STING受體活化。
  125. 如請求項1至119中任一項之化合物或其醫藥上可接受之鹽，其用於治療癌症。
  126. 如請求項125之化合物，其中該癌症係結腸癌。
  127. 如請求項125至126中任一項之化合物，其中該化合物與檢查點抑制劑組合使用，該檢查點抑制劑靶向選自由以下組成之群之受體：PD-1、PD-L1、CTLA-4、OX40、4-1BB、TIM-3、LAG-3、ILT-4、CEACAM6及/或TIGIT。
  128. 如請求項121至127中任一項之化合物，其中該化合物係經皮下提供。
  129. 如請求項121至127中任一項之化合物，其中該化合物係經腫瘤內提供。
  130. 一種治療調節STING有益之疾病或病狀之方法，其包含向有需要之個體投與有效量之如請求項1至119中任一項之化合物或其醫藥上可接受之鹽。
  131. 一種誘導免疫反應之方法，其包含向有需要之個體投與有效量之如請求項1至119中任一項之化合物或其醫藥上可接受之鹽。
  132. 一種誘導STING依賴性I型干擾素產生之方法，其包含向有需要之個體投與有效量之如請求項1至119中任一項之化合物或其醫藥上可接受之鹽。
  133. 一種使細胞中之STING受體活化之方法，其包含使該細胞與有效量之如請求項1至119中任一項之化合物或其醫藥上可接受之鹽接觸。
  134. 一種治療癌症之方法，其包含在有需要之個體中使癌細胞與有效量之如請求項1至119中任一項之化合物或其醫藥上可接受之鹽接觸。
  135. 如請求項134之方法，其中該癌症係結腸癌。
  136. 如請求項134至135中任一項之方法，其進一步包含投與靶向選自由以下組成之群的受體之檢查點抑制劑：PD-1、PD-L1、CTLA-4、OX40、4-1BB、TIM-3、LAG-3、ILT-4、CEACAM6及/或TIGIT。
  137. 如請求項130至136中任一項之方法，其中該化合物係經皮下提供。
  138. 如請求項130至136中任一項之方法，其中該化合物係經腫瘤內提供。
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