TW201443063A - 用於治療細菌感染之化合物及方法 - Google Patents

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TW201443063A TW103102537A TW103102537A TW201443063A TW 201443063 A TW201443063 A TW 201443063A TW 103102537 A TW103102537 A TW 103102537A TW 103102537 A TW103102537 A TW 103102537A TW 201443063 A TW201443063 A TW 201443063A
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曼德赫斯漢 瑞迪 葛瑞沃芮
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Abstract

本發明揭示式(I)化合物、其醫藥學上可接受之鹽，及式(I)化合物用於治療細菌感染之用途。□

Description

用於治療細菌感染之化合物及方法 相關申請案
本申請案依據35 U.S.C§119(e)主張2013年7月30日申請之美國臨時專利申請案第61/859,910號及2013年1月23日申請之美國臨時專利申請案第61/755,537號的權益。前述各申請案之內容係以全文引用的方式併入本文中。
序列表
本申請案含有序列表，該序列表已以ASCII格式電子提交且以全文引用的方式併入本文中。該ASCII複本於2014年1月6日創建，名稱為200070-WO-PCT_SL.txt且大小為772個位元組。
抗生素耐受性及抗性已成為許多常見細菌感染之成功治療的嚴重威脅。實際上，根據美國感染疾病學會(Infectious Disease Society of America)，二甲氧苯青黴素抗性金黃色葡萄球菌(methicillin resistant Staphylococcus aureus，MRSA)每年殺死的美國人多於肺氣腫、HIV/AIDS、帕金森氏病(Parkinson's disease)及兇殺的組合。不僅普通感染性革蘭氏陽性(Gram-positive)與革蘭氏陰性病原體(諸如屎腸球菌(Enterococcus faecium)、金黃色葡萄球菌、肺炎克雷伯氏桿菌(Klebsiella pneumoniae)、鮑氏不動桿菌(Acinetobacter baumannii)、綠 膿桿菌(Pseudomonas aeruginosa)、結核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis)及腸內桿菌屬(Enterobacter species))中之多藥物抗性正在增加，而且抗性證據正見於沙門氏菌(Salmonella)及艱難梭菌(Clostridium difficile)及愈來愈多之淋病奈瑟氏菌(Neisseria gonorrheae)中(Gerard D.Wright,「Antibiotics：A New Hope」,19(2012)3-10)。由於此抗性增加，故開發新抗細菌劑為重要的醫學要求。
仍需要用於治療細菌感染的新療法。本發明提供用於治療細菌感染的新化合物及使用其之方法。
在一個態樣中，本發明提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽：
其中 X為氟或氯； R1係選自由以下組成之群：氫、苯基、-C≡N、四氫哌喃基、N-甲基-1,2,4-三唑基、嘧啶基、吡啶基、吡嗪基、環丙基、-C≡CH、-CH=CH2及C1-C3烷基，該C1-C3烷基視情況經以下中之一或多者取代：-OR10、鹵素、-C≡N、-N3、-SO2CH3、-SCH3、-CH=CH2、-CH=NOR11及苯基； R2係選自由以下組成之群：氫、-C≡N、吡啶基、C1-C3烷基，該C1-C3烷基視情況經以下中之一或多者取代：鹵素、-OR20及-CH=NOR21； R3為氫或C1-C3烷基；R10每次出現時獨立地選自由以下組成之群：氫、C1-C4烷基及-(CH2)2OCH3；且R11、R20及R21每次出現時獨立地為氫或C1-C4烷基。
在一個態樣中，本發明提供一種醫藥組合物，其包含式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽及醫藥學上可接受之賦形劑或稀釋劑。
在一個態樣中，本發明提供一種為有需要之個體治療細菌感染的方法，其包含向該個體投與有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。
在一個態樣中，本發明提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽用於治療細菌感染的用途。
在一個態樣中，本發明提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽用於製造供治療細菌感染之藥劑的用途。
在一個態樣中，本發明提供包含式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的醫藥組合物，用於治療細菌感染。
在一個態樣中，本發明提供一種抑制有需要之個體之細菌DNA旋轉酶的方法，其包含投與有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。
在一個態樣中，本發明提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽用於抑制細菌DNA旋轉酶的用途。
在一個態樣中，本發明提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽用於製造供抑制細菌DNA旋轉酶之藥劑的用途。
在一個態樣中，本發明提供包含式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的醫藥組合物，用於抑制細菌DNA旋轉酶。
圖1為說明實例5在金黃色葡萄球菌USA100誘發之嗜中性白血球 減少症CD1小鼠的大腿病變模型中之功效的圖。
圖2為說明實例5在化膿鏈球菌(S.pyogenes)ATCC12384誘發之嗜中性白血球減少症小鼠的大腿病變模型中之功效的圖。
化合物
本發明至少部分提供式(I)化合物及其醫藥學上可接受之鹽：
其中X為氟或氯；R1係選自由以下組成之群：氫、苯基、-C≡N、四氫哌喃基、N-甲基-1,2,4-三唑基、嘧啶基、吡啶基、吡嗪基、環丙基、C≡CH、-CH=CH2及C1-C3烷基，該C1-C3烷基視情況經以下中之一或多者取代：-OR10、鹵素、-C≡N、-N3、-SO2CH3、-SCH3、-CH=CH2、-CH=NOR11及苯基；R2係選自由以下組成之群：氫、-C≡N、吡啶基、C1-C3烷基，該C1-C3烷基視情況經以下中之一或多者取代：鹵素、-OR20及-CH=NOR21；R3為氫或C1-C3烷基；R10每次出現時獨立地選自由以下組成之群：氫、C1-C4烷基及-(CH2)2OCH3；且R11、R20及R21每次出現時獨立地為氫或C1-C4烷基。
在一個態樣中，R1為氫、甲基、乙基、苯基、-CH2-苯基、- CH2F、-CH2OCH3、-CH2CH=CH2、四氫哌喃基、-(CH2)3OH、-(CH2)3F、-(CH2)3OH、-(CH2)3F、-CH=CH2、-C≡N、-CH=NOCH3、-CH2SCH3、-CH2SO2CH3、-CH2N3、-CH2OCH2CH3、-CH2O(CH2)2OCH3、環丙基、吡啶基、-CH(CH3)OCH3、嘧啶基、吡嗪基、-C≡CH、N-甲基-1,2,4-三唑基、-CH(OH)CH3、-CH=NOH或-CH2OH。
在一個態樣中，R2為氫、甲基、乙基、-CH2F、-CH2OCH3、-CH2OH、-CH=NOH、-CH2N3、吡啶基、-C≡N或-CH=NHOCH3。
在一個態樣中，R3為氫或甲基。
在一個態樣中，R10為氫、甲基、乙基或-(CH2)2OCH3。
在一個態樣中，R11為氫或甲基。
在一個態樣中，R20為氫、甲基或乙基。
在一個態樣中，R21為氫或甲基。
在一個態樣中，在式(I)化合物中，X為氟且R1、R2及R3各自為氫。
在一個態樣中，在式(I)化合物中，X為氟，R1為甲基且R2及R3各自為氫。
在一個態樣中，在式(I)化合物中，X為氟，R1及R3各自為氫且R2為甲基。
在一個態樣中，在式(I)化合物中，X為氟，R1為乙基且R2及R3各自為氫。
在一個態樣中，在式(I)化合物中，X為氟，R1為苯基且R2及R3各自為氫。
在一個態樣中，在式(I)化合物中，X為氟，R1為-CH2-苯基且R2及R3各自為氫。
在一個態樣中，在式(I)化合物中，X為氟，R1為氫且R2及R3各自為甲基。
在一個態樣中，在式(I)化合物中，X為氟，R1及R3各自為氫且R2為乙基。
在一個態樣中，在式(I)化合物中，X為氟，R1為-CH2F且R2及R3各自為氫。
在一個態樣中，在式(I)化合物中，X為氟，R1為-CH2OCH3且R2及R3各自為氫。
在一個態樣中，在式(I)化合物中，X為氟，R1及R3各自為氫且R2為-CH2F。
在一個態樣中，在式(I)化合物中，X為氯，R1及R3各自為氫且R2為-CH2OCH3。
在一個態樣中，在式(I)化合物中，X為氯，R1及R3各自為氫且R2為甲基。
在一個態樣中，在式(I)化合物中，X為氟，R1及R2各自為甲基且R3為氫。
在一個態樣中，在式(I)化合物中，X為氟，R1為-CH2CH=CH2且R2及R3各自為氫。
在一個態樣中，在式(I)化合物中，X為氟，R1及R3各自為氫且R2為-CH2OH。
在一個態樣中，在式(I)化合物中，X為氟，R1為四氫哌喃基且R2及R3各自為氫。
在一個態樣中，在式(I)化合物中，X為氟，R1為-(CH2)3OH且R2及R3各自為氫。
在一個態樣中，在式(I)化合物中，X為氟，R1為-(CH2)3F且R2及R3各自為氫。
在一個態樣中，在式(I)化合物中，X為氯，R1及R3各自為氫且R2為-CH2F。
在一個態樣中，在式(I)化合物中，X為氯，R1為-(CH2)3OH且R2及R3各自為氫。
在一個態樣中，在式(I)化合物中，X為氯，R1為-(CH2)3F且R2及R3各自為氫。
在一個態樣中，在式(I)化合物中，X為氟，R1及R3各自為氫且R2為-CH2OCH3。
在一個態樣中，在式(I)化合物中，X為氟，R1為-CH=CH2且R2及R3各自為氫。
在一個態樣中，在式(I)化合物中，X為氟，R1及R3各自為氫且R2為-CH=NOH。
在一個態樣中，在式(I)化合物中，X為氟，R1為-C≡N且R2及R3各自為氫。
在一個態樣中，在式(I)化合物中，X為氟，R1為-CH=NOCH3且R2及R3各自為氫。
在一個態樣中，在式(I)化合物中，X為氟，R1及R3各自為氫且R2為-CH=NHOCH3。
在一個態樣中，在式(I)化合物中，X為氟，R1及R3各自為氫且R2為-CH2N3。
在一個態樣中，在式(I)化合物中，X為氟，R1為-CH2SCH3且R2及R3各自為氫。
在一個態樣中，在式(I)化合物中，X為氟，R1為-CH2SO2CH3且R2及R3各自為氫。
在一個態樣中，在式(I)化合物中，X為氟，R1為-CH2N3且R2及R3各自為氫。
在一個態樣中，在式(I)化合物中，X為氟，R1為-CH2OCH2CH3且R2及R3各自為氫。
在一個態樣中，在式(I)化合物中，X為氟，R1為-CH2O(CH2)2OCH3且R2及R3各自為氫。
在一個態樣中，在式(I)化合物中，X為氟，R1為-CHF2且R2及R3各自為氫。
在一個態樣中，在式(I)化合物中，X為氟，R1為環丙基且R2及R3各自為氫。
在一個態樣中，在式(I)化合物中，X為氟，R1及R3各自為氫且R2為吡啶基。
在一個態樣中，在式(I)化合物中，X為氟，R1為吡啶基且R2及R3各自為氫。
在一個態樣中，在式(I)化合物中，X為氟，R1為-CH(CH3)OCH3且R2及R3各自為氫。
在一個態樣中，在式(I)化合物中，X為氟，R1為嘧啶基且R2及R3各自為氫。
在一個態樣中，在式(I)化合物中，X為氟，R1為吡嗪基且R2及R3各自為氫。
在一個態樣中，在式(I)化合物中，X為氟，R1為-C≡CH且R2及R3各自為氫。
在一個態樣中，在式(I)化合物中，X為氯，R1為甲基且R2及R3各自為氫。
在一個態樣中，在式(I)化合物中，X為氟，R1為N-甲基-1,2,4-三唑基且R2及R3各自為氫。
在一個態樣中，在式(I)化合物中，X為氟，R1為-CH(OH)CH3且R2及R3各自為氫。
在一個態樣中，在式(I)化合物中，X為氟，R1為-CH(OH)CH2OH且R2及R3各自為氫。
在一個態樣中，在式(I)化合物中，X為氟，R1為-CH=NOH且R2及R3各自為氫。
在一個態樣中，在式(I)化合物中，X為氟，R1及R3各自為氫且R2為-C≡N。
在一個態樣中，在式(I)化合物中，X為氟，R1為-CH2OCH3，R2為甲基且R3為氫。
在一個態樣中，在式(I)化合物中，X為氟，R1為-CH2F，R2為甲基且R3為氫。
在一個態樣中，在式(I)化合物中，X為氟，R1為-CH2OH且R2及R3各自為氫。
在一些實施例中，式(I)化合物具有式(Ia)之結構，或其醫藥學上可接受之鹽：
其中R1a為氫或C1-C3烷基，該C1-C3烷基視情況經鹵素或OR11a取代；R2a為氫或C1-C3烷基，該C1-C3烷基視情況經鹵素或OR21a取代；且R11a及R21a每次出現時獨立地為氫或C1-C4烷基。
在一個態樣中，R1a為氫、-(CH2)3OH、-(CH2)3F或甲基。
在一個態樣中，R2a為-CH2OCH3、甲基、-CH2F或氫。
在一個態樣中，R11a為氫或甲基。
在一個態樣中，R21a為氫或甲基。
在一個態樣中，在式(Ia)化合物中，R1a為氫且R2a為-CH2OCH3。
在一個態樣中，在式(Ia)化合物中，R1a為氫且R2a為甲基。
在一個態樣中，在式(Ia)化合物中，R1a為氫且R2a為-CH2F。
在一個態樣中，在式(Ia)化合物中，R1a為-(CH2)3OH且R2a為氫。
在一個態樣中，在式(Ia)化合物中，R1a為-(CH2)3F且R2a為氫。
在一個態樣中，在式(Ia)化合物中，R1a為甲基且R2a為氫。
在一些實施例中，式(I)化合物具有式(Ib)之結構：
其中R1b係選自由以下組成之群：氫、苯基、-C≡N、四氫哌喃基、1,2,4-三唑基、嘧啶基、吡啶基、吡嗪基、環丙基、-C≡CH、-CH=CH2及C1-C3烷基，該C1-C3烷基視情況經以下中之一或多者取代：OR10b、鹵素、-C≡N、-N3、-SO2CH3、-SCH3、-CH=CH2、-CH=NOR11b及苯基；R2b係選自由以下組成之群：氫、-C≡N、C1-C3烷基，該C1-C3烷基視情況經以下中之一或多者取代：鹵素、OR20b及CH=NOR21b；R3b為氫或C1-C4烷基；R10b每次出現時獨立地選自由以下組成之群：氫、C1-C4烷基及-(CH2)2OCH3；且R11b、R20b、及R21b每次出現時獨立地為氫或C1-C4烷基。
在一個態樣中，R1b為氫、甲基、乙基、苯基、-CH2-苯基、-CH2F、-CH2OCH3、-CH2CH=CH2、四氫哌喃基、-(CH2)3OH、-(CH2)3F、-(CH2)3OH、-(CH2)3F、-CH=CH2、-C≡N、-CH=NOCH3、-CH2SCH3、-CH2SO2CH3、-CH2N3、-CH2OCH2CH3、-CH2O(CH2)2OCH3、 環丙基、吡啶基、-CH(CH3)OCH3、嘧啶基、吡嗪基、-C≡CH、N-甲基-1,2,4-三唑基、-CH(OH)CH3、-CH=NOH或-CH2OH。
在一個態樣中，R2b為氫、甲基、乙基、-CH2F、-CH2OH、-CH=NOH、-CH2N3、吡啶基、-C≡N或-CH=NHOCH3。
在一個態樣中，R3b為氫或甲基。
在一個態樣中，R10b為氫、甲基、乙基或-(CH2)2OCH3。
在一個態樣中，R11b為氫或甲基。
在一個態樣中，R20b為氫、甲基或乙基。
在一個態樣中，R21b為氫或甲基。
在一個態樣中，在式(Ib)化合物中，R1b為甲基且R2b及R3b各自為氫。
在一個態樣中，在式(Ib)化合物中，R1b及R3b各自為氫且R2b為甲基。
在一個態樣中，在式(Ib)化合物中，R1b為乙基且R2b及R3b各自為氫。
在一個態樣中，在式(Ib)化合物中，R1b為苯基且R2b及R3b各自為氫。
在一個態樣中，在式(Ib)化合物中，R1b為-CH2-苯基且R2b及R3b各自為氫。
在一個態樣中，在式(Ib)化合物中，R1b為氫且R2b及R3b各自為甲基。
在一個態樣中，在式(Ib)化合物中，R1b及R3b各自為氫且R2b為乙基。
在一個態樣中，在式(Ib)化合物中，R1b為-CH2F且R2b及R3b各自為氫。
在一個態樣中，在式(Ib)化合物中，R1b為-CH2OCH3且R2b及R3b各 自為氫。
在一個態樣中，在式(Ib)化合物中，R1b及R3b各自為氫且R2b為-CH2F。
在一個態樣中，在式(Ib)化合物中，R1b及R2b各自為甲基且R3b為氫。
在一個態樣中，在式(Ib)化合物中，R1b為-CH2CH=CH2且R2b及R3b各自為氫。
在一個態樣中，在式(Ib)化合物中，R1b及R3b各自為甲基且R2b為-CH2OH。
在一個態樣中，在式(Ib)化合物中，R1b為四氫哌喃基且R2b及R3b各自為氫。
在一個態樣中，在式(Ib)化合物中，R1b為-(CH2)3OH且R2b及R3b各自為氫。
在一個態樣中，在式(Ib)化合物中，R1b為-(CH2)3F且R2b及R3b各自為氫。
在一個態樣中，在式(Ib)化合物中，R1b及R3b各自為氫且R2b為-CH2OCH3。
在一個態樣中，在式(Ib)化合物中，R1b為-CH=CH2且R2b及R3b各自為氫。
在一個態樣中，在式(Ib)化合物中，R1b及R3b各自為氫且R2b為-CH=NOH。
在一個態樣中，在式(Ib)化合物中，R1b為-C≡N且R2b及R3b各自為氫。
在一個態樣中，在式(Ib)化合物中，R1b為-CH=NOCH3且R2b及R3b各自為氫。
在一個態樣中，在式(Ib)化合物中，R1b及R3b各自為氫且R2b為- CH=NHOCH3。
在一個態樣中，在式(Ib)化合物中，R1b及R3b各自為氫且R2b為-CH2N3。
在一個態樣中，在式(Ib)化合物中，R1b為-CH2SCH3且R2b及R3b各自為氫。
在一個態樣中，在式(Ib)化合物中，R1b為-CH2SO2CH3且R2b及R3b各自為氫。
在一個態樣中，在式(Ib)化合物中，R1b為-CH2N3且R2b及R3b各自為氫。
在一個態樣中，在式(Ib)化合物中，R1b為-CH2OCH2CH3且R2b及R3b各自為氫。
在一個態樣中，在式(Ib)化合物中，R1b為-CH2O(CH2)2OCH3且R2b及R3b各自為氫。
在一個態樣中，在式(Ib)化合物中，R1b為-CHF2且R2b及R3b各自為氫。
在一個態樣中，在式(Ib)化合物中，R1b為環丙基且R2b及R3b各自為氫。
在一個態樣中，在式(Ib)化合物中，R1b及R3b各自為氫且R2b為吡啶基。
在一個態樣中，在式(Ib)化合物中，R1b為吡啶基且R2b及R3b各自為氫。
在一個態樣中，在式(Ib)化合物中，R1b為-CH(CH3)OCH3且R2b及R3b各自為氫。
在一個態樣中，在式(Ib)化合物中，R1b為嘧啶基且R2b及R3b各自為氫。
在一個態樣中，在式(Ib)化合物中，R1b為吡嗪基且R2b及R3b各自 為氫。
在一個態樣中，在式(Ib)化合物中，R1b為-C≡CH且R2b及R3b各自為氫。
在一個態樣中，在式(Ib)化合物中，R1b為N-甲基-1,2,4-三唑基且R2b及R3b各自為氫。
在一個態樣中，在式(Ib)化合物中，R1b為-CH(OH)CH3且R2b及R3b各自為氫。
在一個態樣中，在式(Ib)化合物中，R1b為-CH(OH)CH2OH且R2b及R3b各自為氫。
在一個態樣中，在式(Ib)化合物中，R1b為-CH=NOH且R2b及R3b各自為氫。
在一個態樣中，在式(Ib)化合物中，R1b及R3b各自為氫且R3b為-C≡N。
在一個態樣中，在式(Ib)化合物中，R1b為-CH2OCH3，R2b為甲基且R3b為氫。
在一個態樣中，在式(Ib)化合物中，R1b為-CH2F，R2b為甲基且R3b為氫。
在一個態樣中，在式(Ib)化合物中，R1b為-CH2OH且R2b及R3b各自為氫。
在一些實施例中，式(I)化合物具有式(Ic)之結構，或其醫藥學上可接受之鹽：
其中 R1c為苯基、N-甲基-1,2,4-三唑基、四氫哌喃基、嘧啶基、吡啶基、吡嗪基或C1-C3烷基，該C1-C3烷基視情況經以下中之一或多者取代：苯基、鹵素、-N3或OR10c；且R10c每次出現時為氫或C1-C4烷基。
在一個態樣中，R1c為甲基、乙基、苯基、-CH2-苯基、-CH2F、-CH2OCH3、四氫哌喃基、-CH2N3、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、-CH(CH3)OCH3、N-甲基-1,2,4-三唑基或-CH2OH。
在一個態樣中，R10c為氫或甲基。
在一個態樣中，在式(Ic)化合物中，R1c為甲基。
在一個態樣中，在式(Ic)化合物中，R1c為乙基。
在一個態樣中，在式(Ic)化合物中，R1c為苯基。
在一個態樣中，在式(Ic)化合物中，R1c為-CH2-苯基。
在一個態樣中，在式(Ic)化合物中，R1c為-CH2F。
在一個態樣中，在式(Ic)化合物中，R1c為-CH2OCH3。
在一個態樣中，在式(Ic)化合物中，R1c為四氫哌喃基。
在一個態樣中，在式(Ic)化合物中，R1c為-CH2N3。
在一個態樣中，在式(Ic)化合物中，R1c為吡啶基。
在一個態樣中，在式(Ic)化合物中，R1c為嘧啶基。
在一個態樣中，在式(Ic)化合物中，R1c為吡嗪基。
在一個態樣中，在式(Ic)化合物中，R1c為-CH(CH3)OCH3。
在一個態樣中，在式(Ic)化合物中，R1c為N-甲基-1,2,4-三唑基。
在一個態樣中，在式(Ic)化合物中，R1c為-CH2OH。
在一些實施例中，式(I)化合物具有式(Id)之結構，或其醫藥學上可接受之鹽：
其中X為氯或氟；R1d係選自由以下組成之群：氫、苯基、-C≡N、四氫哌喃基、N-甲基-1,2,4-三唑基、嘧啶基、吡啶基、吡嗪基、環丙基、-C≡CH、-CH=CH2及C1-C3烷基，該C1-C3烷基視情況經以下中之一或多者取代：-OR10d、鹵素、-C≡N、-N3、-SO2CH3、-SCH3、-CH=CH2、-CH=NOR11d及苯基；R10d每次出現時獨立地選自由以下組成之群：氫、C1-C4烷基及-(CH2)2OCH3；且R11d每次出現時獨立地為氫或C1-C4烷基。
在一個態樣中，R1d為甲基、乙基、苯基、-CH2-苯基、-CH2F、-CH2OCH3、-CH2CH=CH2、四氫哌喃基、-(CH2)3OH、-(CH2)3F、-CH=CH2、-C≡N、-CH=NOCH3、-CH2SCH3、-CH2SO2CH3、-CH2N3、-CH2OCH2CH3、-CH2O(CH2)2OCH3、吡啶基、-CH(CH3)OCH3、嘧啶基、吡嗪基、-C≡CH、N-甲基-1,2,4-三唑基、-CH(OH)CH3、-CH(OH)CH2OH或-CH=NOH。
在一個態樣中，R10d為氫、甲基或乙基。
在一個態樣中，R10d為氫或甲基。
在一個態樣中，在式(Id)化合物中，X為氟且R1d為甲基。
在一個態樣中，在式(Id)化合物中，X為氟且R1d為乙基。
在一個態樣中，在式(Id)化合物中，X為氟且R1d為苯基。
在一個態樣中，在式(Id)化合物中，X為氟且R1d為-CH2-苯基。
在一個態樣中，在式(Id)化合物中，X為氟且R1d為-CH2F。
在一個態樣中，在式(Id)化合物中，X為氟且R1d為-CH2OCH3。
在一個態樣中，在式(Id)化合物中，X為氟且R1d為-CH2CH=CH2。
在一個態樣中，在式(Id)化合物中，X為氟且R1d為四氫哌喃基。
在一個態樣中，在式(Id)化合物中，X為氟且R1d為-(CH2)2OH。
在一個態樣中，在式(Id)化合物中，X為氟且R1d為-(CH2)2F。
在一個態樣中，在式(Id)化合物中，X為氯且R1d為-(CH2)3OH。
在一個態樣中，在式(Id)化合物中，X為氯且R1d為-(CH2)3F。
在一個態樣中，在式(Id)化合物中，X為氟且R1d為-(CH2)3OH。
在一個態樣中，在式(Id)化合物中，X為氟且R1d為-CH=CH2。
在一個態樣中，在式(Id)化合物中，X為氟且R1d為-(CH2)3OH。
在一個態樣中，在式(Id)化合物中，X為氟且R1d為-C≡N。
在一個態樣中，在式(Id)化合物中，X為氟且R1d為-CH=NOCH3。
在一個態樣中，在式(Id)化合物中，X為氟且R1d為-CH2SCH3。
在一個態樣中，在式(Id)化合物中，X為氟且R1d為-CH2SO2CH3。
在一個態樣中，在式(Id)化合物中，X為氟且R1d為-CH2N3。
在一個態樣中，在式(Id)化合物中，X為氟且R1d為-CH2OCH2CH3。
在一個態樣中，在式(Id)化合物中，X為氟且R1d為-CH2O(CH2)2OCH3。
在一個態樣中，在式(Id)化合物中，X為氟且R1d為-CHF2。
在一個態樣中，在式(Id)化合物中，X為氟且R1d為吡啶基。
在一個態樣中，在式(Id)化合物中，X為氟且R1d為-CH(CH3)OCH3。
在一個態樣中，在式(Id)化合物中，X為氟且R1d為嘧啶基。
在一個態樣中，在式(Id)化合物中，X為氟且R1d為吡嗪基。
在一個態樣中，在式(Id)化合物中，X為氟且R1d為-C≡CH。
在一個態樣中，在式(Id)化合物中，X為氯且R1d為甲基。
在一個態樣中，在式(Id)化合物中，X為氟且R1d為N-甲基-1,2,4-三唑基。
在一個態樣中，在式(Id)化合物中，X為氟且R1d為-CH(OH)CH3。
在一個態樣中，在式(Id)化合物中，X為氟且R1d為-CH(OH)CH2OH。
在一個態樣中，在式(Id)化合物中，X為氟且R1d為-CH=NOH。
在一些實施例中，式(I)化合物具有式(Ie)之結構，或其醫藥學上可接受之鹽：
其中X為氯或氟；R2e係選自由以下組成之群：吡啶基、-C≡N或C1-C3烷基，該C1-C3烷基視情況經以下中之一或多者取代：OR20e、鹵素、疊氮基及CH=NOR21e；且R20e及R21e每次出現時獨立地為氫或C1-C4烷基。
在一個態樣中，R2e為甲基、乙基、-CH2OCH3、-CH2OH、-CH2F、-CH2N3、吡啶基、-CH=NOH或-CH=NOCH3。
在一個態樣中，R20e為氫或甲基。
在一個態樣中，R21e為氫或甲基。
在一個態樣中，在式(Ie)化合物中，X為氟且R2e為甲基。
在一個態樣中，在式(Ie)化合物中，X為氟且R2e為乙基。
在一個態樣中，在式(Ie)化合物中，X為氯且R2e為-CH2OCH3。
在一個態樣中，在式(Ie)化合物中，X為氯且R2e為甲基。
在一個態樣中，在式(Ie)化合物中，X為氟且R2e為-CH2OCH3。
在一個態樣中，在式(Ie)化合物中，X為氟且R2e為-CH2OH。
在一個態樣中，在式(Ie)化合物中，X為氟且R2e為-CH2F。
在一個態樣中，在式(Ie)化合物中，X為氟且R2e為-CH2N3。
在一個態樣中，在式(Ie)化合物中，X為氟且R2e為吡啶基。
在一個態樣中，在式(Ie)化合物中，X為氟且R2e為-CH=NOH。
在一個態樣中，在式(Ie)化合物中，X為氟且R2e為-CH=NOCH3。
在一些實施例中，式(I)化合物具有式(If)之結構，或其醫藥學上可接受之鹽：
其中X為氯或氟；R2f為吡啶基或C1-C3烷基，該C1-C3烷基視情況經一或多個鹵素或-OR20f取代；且R20f每次出現時獨立地為氫或C1-C4烷基。
在一個態樣中，R2f為甲基、乙基、-CH2F、-CH2OCH3或-CH2OH。
在一個態樣中，R20f為氫或甲基。
在一個態樣中，在式(If)化合物中，X為氟且R2f為甲基。
在一個態樣中，在式(If)化合物中，X為氟且R2f為乙基。
在一個態樣中，在式(If)化合物中，X為氟且R2f為-CH2F。
在一個態樣中，在式(If)化合物中，X為氯且R2f為-CH2OCH3。
在一個態樣中，在式(If)化合物中，X為氯且R2f為甲基。
在一個態樣中，在式(If)化合物中，X為氟且R2f為-CH2OH。
在一個態樣中，在式(If)化合物中，X為氯且R2f為-CH2F。
在一個態樣中，在式(If)化合物中，X為氟且R2f為-CH2OCH3。
在一些實施例中，式(I)化合物具有式(Ig)之結構，或其醫藥學上可接受之鹽：
其中R1g為視情況經鹵素及OR10g中之一或多者取代之C1-C3烷基；R2g為C1-C3烷基；且R10g每次出現時獨立地為氫或C1-C4烷基。
在一個態樣中，R1g為甲基、-CH2OCH3或-CH2F。
在一個態樣中，R2g為甲基。
在一個態樣中，R10g為氫或甲基。
在一個態樣中，在式(Ig)化合物中，X為氟，R1g及R2d各自為甲基。
在一個態樣中，在式(Ig)化合物中，X為氟，R1g為-CH2OCH3且R2d為甲基。
在一個態樣中，在式(Ig)化合物中，X為氟，R1g為-CH2F且R2d為甲基。
在一個態樣中，本發明至少部分地提供下列化合物或其醫藥學上可接受之鹽：
在一個態樣中，本發明係關於可藉由本發明之舉例說明中所述之任何方法獲得的產物。
術語「烷基」包括具有指定數目個碳原子之直鏈及分支鏈飽和烴基。舉例而言，「C1-C3烷基」包括具有1至3個碳原子的烷基，例如甲基、乙基、正丙基及異丙基。同樣，語言「C1-C4烷基」包括具有1至4個碳原子的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、 異丁基及第三丁基。
術語「鹵素」包括氯、氟、溴及碘。
術語「四氫哌喃基」包括及
術語「N-甲基-1,2,4-三唑基」包括及
術語「吡啶基」包括及
術語「嘧啶基」包括及
術語「吡嗪基」包括
語言「醫藥學上可接受之鹽」包括保留本發明化合物之生物有效性及性質且通常在生物學上或其他方面合乎需要之酸加成鹽或鹼式鹽。在許多情況下，本發明之化合物由於存在胺基及/或羧基或其類似基團而能夠形成酸式鹽及/或鹼式鹽。
醫藥學上可接受之酸加成鹽可用無機酸及有機酸形成，例如乙酸鹽、天冬胺酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、溴化物/氫溴酸鹽、碳酸氫鹽/碳酸鹽、硫酸氫鹽/硫酸鹽、樟腦磺酸鹽、氯化物/鹽酸鹽、氯茶鹼鹽、檸檬酸鹽、乙烷二磺酸鹽、反丁烯二酸鹽、葡庚糖酸鹽、葡糖酸鹽、葡糖醛酸鹽、馬尿酸鹽、氫碘酸鹽/碘化物、羥乙基磺酸鹽、乳酸鹽、乳糖酸鹽、月桂基硫酸鹽、蘋果酸鹽、順丁烯二酸鹽、丙二酸鹽、杏仁酸鹽、甲磺酸鹽、甲基硫酸鹽、萘甲酸鹽、萘磺酸鹽、菸鹼酸鹽、硝酸鹽、十八烷酸鹽、油酸鹽、草酸鹽、棕櫚酸鹽、雙羥萘酸鹽(palmoate)、磷酸鹽/磷酸氫鹽/磷酸二氫鹽、聚半乳糖醛酸鹽、丙酸鹽、硬脂酸鹽、丁二酸鹽、次水楊酸鹽、酒石酸鹽、甲苯磺酸鹽及 三氟乙酸鹽。可衍生得到該等鹽之無機酸包括例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸及其類似物。可衍生得到該等鹽之有機酸包括例如乙酸、丙酸、乙醇酸、草酸、順丁烯二酸、丙二酸、丁二酸、反丁烯二酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、杏仁酸、甲烷磺酸、乙烷磺酸、甲苯磺酸、三氟乙酸、磺基水楊酸及其類似物。醫藥學上可接受之鹼加成鹽可用無機鹼及有機鹼形成。
可衍生得到該等鹽之無機鹼包括例如銨鹽及週期表第I欄至第XII欄之金屬。在某些實施例中，該等鹽衍生自鈉、鉀、銨、鈣、鎂、鐵、銀、鋅及銅；尤其適合之鹽包括銨鹽、鉀鹽、鈉鹽、鈣鹽及鎂鹽。可衍生得到該等鹽之有機鹼包括例如一級、二級及三級胺；經取代之胺，包括天然存在之經取代之胺；環胺；鹼離子交換樹脂及其類似物。某些有機胺包括異丙胺、苄星青黴素(benzathine)、膽茶鹼(cholinate)、二乙醇胺、二乙胺、離胺酸、葡甲胺(meglumine)、哌嗪及緩血酸胺(tromethamine)。
可藉由習知化學方法自鹼性或酸性部分合成本發明之醫藥學上可接受之鹽。一般而言，可藉由使此等化合物之游離酸形式與化學計量之量的適當鹼(諸如Na+、Ca2+、Mg2+或K+之氫氧化物、碳酸鹽、碳酸氫鹽或其類似物)反應或藉由使此等化合物之游離鹼形式與化學計量之量的適當酸反應來製備此等鹽。該等反應通常在水中或在有機溶劑中或在二者之混合物中進行。一般而言，在可行時，需要使用非水性介質，如乙醚、乙酸乙酯、乙醇、異丙醇或乙腈。其他適合鹽之清單可見於例如「Remington's Pharmaceutical Sciences」，第20版，Mack Publishing Company,Easton,Pa.,(1985)；及Stahl及Wermuth,「Handbook of Pharmaceutical Salts：Properties,Selection,and Use」(Wiley-VCH,Weinheim,Germany,2002)中。
本文中指定之任何式子亦意欲表示式(I)化合物之未標記形式以 及同位素標記形式。同位素標記化合物具有本文中所指定之式子所描繪之結構，除了一或多個原子經具有所選原子質量或質量數之原子置換。可併入式(I)化合物中之同位素的實例包括氫、碳、氮、氧、磷、氟及氯之同位素，諸如2H、3H、11C、13C、14C、15N、16F、31P、32P、35S、36Cl及125I。本發明包括存在放射性同位素(諸如2H、3H、13C及14C)之各種同位素標記之式(I)化合物。同位素標記之式(I)化合物一般可藉由熟習此項技術者已知之習知技術或藉由類似於隨附實例中所述之方法使用適當同位素標記試劑代替先前所用之非標記試劑來製備。
式(I)化合物可具有不同異構形式。語言「光學異構體」或「立體異構體」係指本發明之指定化合物可存在之各種立體異構組態中之任一者。應瞭解，取代基可在碳原子之對掌性中心連接且因此本發明包括化合物之對映異構體、非對映異構體及外消旋體。術語「對映異構體」包括彼此間互為不可重疊之鏡像的立體異構體對。對映異構體對之1：1混合物為外消旋混合物。適當時，該術語用於指定外消旋混合物。術語「非對映異構體(diastereomer/diastereoisomer)」包括具有至少兩個不對稱原子，但彼此間不互為鏡像的立體異構體。絕對立體化學係根據卡恩-英格爾-普雷洛格R-s系統(Cahn-Ingold-Prelog R-S system)進行說明。當化合物為純對映異構體時，各對掌性中心處之立體化學可由R或S來說明。絕對組態未知之經解析化合物可視其在鈉D線之波長下使平面偏振光旋轉之方向(右旋或左旋)而定指定為(+)或(-)。本文所述之某些化合物含有一或多個不對稱中心或軸，且因此可產生可就絕對立體化學而言定義為(R)-或(S)-之對映異構體、非對映異構體及其他立體異構形式。本發明意欲包括所有該等可能異構體，包括外消旋混合物、光學純形式及中間混合物。光學活性(R)-異構體及(S)-異構體可使用對掌性合成組元或對掌性試劑製備，或使用 此項技術中熟知之習知技術(諸如對掌性HPLC)解析。
醫藥組合物
在一些實施例中，本發明提供包含式(I)化合物及醫藥學上可接受之賦形劑或稀釋劑的醫藥組合物。
語言「醫藥學上可接受之賦形劑或稀釋劑」包括在正確醫學判斷範疇內適用於與人類及動物之組織接觸而無過度毒性、刺激、過敏反應或其他問題或併發症且與合理益處/風險比對應的化合物、材料、組合物及/或劑型。
本發明之組合物可呈適於以下之形式：經口使用(例如呈錠劑、口含劑、硬膠囊或軟膠囊、水性或油性懸浮液、乳液、可分散性散劑或顆粒劑、糖漿或酏劑形式)、局部使用(例如呈乳膏、軟膏、凝膠或水性或油性溶液或懸浮液形式)、吸入投與(例如呈細粉狀散劑或液體氣溶膠形式)、吹入投與(例如呈細粉狀散劑形式)、或非經腸投與(例如呈供靜脈內、皮下、肌肉內或肌肉內給藥之無菌水性或油性溶液形式或呈供直腸給藥之栓劑形式)或眼內投與。本發明之組合物可藉由習知程序使用此項技術中熟知之習知醫藥賦形劑獲得。因此，意欲用於經口使用之組合物可含有例如一或多種著色劑、甜味劑、調味劑及/或防腐劑。
適用於錠劑調配物之醫藥學上可接受之賦形劑包括例如惰性稀釋劑，諸如乳糖、碳酸鈉、磷酸鈣或碳酸鈣；造粒劑及崩解劑，諸如，玉米澱粉或海藻酸；黏合劑，諸如澱粉；潤滑劑，諸如硬脂酸鎂、硬脂酸或滑石；防腐劑，諸如對羥基苯甲酸乙酯或對羥基苯甲酸丙酯；及抗氧化劑，諸如抗壞血酸。錠劑調配物可未包覆包衣或經包覆包衣以改進其崩解及隨後活性成分在胃腸道內之吸收，或改良其穩定性及/或外觀，在任一情況下，均使用此項技術中所熟知之習知包衣劑及程序。
供經口使用之組合物可呈活性成分與惰性固體稀釋劑(例如碳酸鈣、磷酸鈣或高嶺土)混合之硬明膠膠囊形式，或呈活性成分與水或油(諸如花生油、液體石蠟或橄欖油)混合之軟明膠膠囊形式。
水性懸浮液一般含有呈細粉形式或呈奈米顆粒或微米尺寸化顆粒形式之活性成分以及一或多種懸浮劑，諸如羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、海藻酸鈉、聚乙烯吡咯啶酮、黃蓍膠及阿拉伯膠(gum acacia)；分散劑或濕潤劑，諸如卵磷脂，或氧化烯與脂肪酸之縮合產物(例如聚氧乙烯硬脂酸酯)，或氧化乙烯與長鏈脂族醇之縮合產物(例如十七伸乙基氧基十六醇)，或氧化乙烯與衍生自脂肪酸及己醣醇之偏酯的縮合產物(諸如聚氧乙烯山梨糖醇單油酸酯)，或氧化乙烯與長鏈脂族醇之縮合產物(例如十七伸乙基氧基十六醇)，或氧化乙烯與衍生自脂肪酸及己醣醇之偏酯的縮合產物(諸如聚氧乙烯山梨糖醇單油酸酯)，或氧化乙烯與衍生自脂肪酸及己醣醇酐之偏酯的縮合產物(例如聚乙烯脫水山梨糖醇單油酸酯)。水性懸浮液亦可含有一或多種防腐劑，諸如對羥基苯甲酸乙酯或對羥基苯甲酸丙酯；抗氧化劑，諸如抗壞血酸；著色劑；調味劑；及/或甜味劑，諸如蔗糖、糖精或阿斯巴甜糖。
可藉由將活性成分懸浮於植物油(諸如花生油、橄欖油、芝麻油或椰子油)或礦物油(諸如液體石蠟)中來調配油性懸浮液。油性懸浮液亦可含有增稠劑，諸如蜂蠟、硬石蠟或十六醇。可添加甜味劑(諸如上文所列之甜味劑)及調味劑以提供適口之口服製劑。此等組合物可藉由添加抗氧化劑(諸如抗壞血酸)來防腐。
適於藉由添加水來製備水性懸浮液之可分散性散劑及顆粒劑一般含有活性成分以及分散劑或濕潤劑、懸浮劑及一或多種防腐劑。適合分散劑或濕潤劑及懸浮劑藉由上文已提及之彼等物來例示。亦可存在其他賦形劑，諸如甜味劑、調味劑及著色劑。
本發明之醫藥組合物亦可呈水包油乳液形式。油相可為諸如橄欖油或花生油之植物油，或諸如液體石蠟之礦物油，或任何此等物質之混合物。適合乳化劑可為例如天然存在之膠(諸如阿拉伯膠或黃蓍膠)、天然存在之磷脂(諸如大豆、卵磷脂)、衍生自脂肪酸及己醣醇酐之酯或偏酯(例如脫水山梨糖醇單油酸酯)及該等偏酯與氧化乙烯之縮合產物，諸如聚氧乙烯脫水山梨糖醇單油酸酯。乳液亦可含有甜味劑、調味劑及防腐劑。
糖漿及酏劑可用甜味劑(諸如甘油、丙二醇、山梨糖醇、阿斯巴甜糖或蔗糖)調配，且亦可含有緩和劑、防腐劑、調味劑及/或著色劑。
醫藥組合物亦可呈無菌可注射水性或油性懸浮液之形式，其可根據已知程序使用上文已提及之適當分散劑或濕潤劑及懸浮劑中之一或多者來調配。無菌可注射製劑亦可為於非經腸可接受之無毒稀釋劑或溶劑中之無菌可注射溶液或懸浮液，例如於1,3-丁二醇中之溶液。
供吸入投與之組合物可呈習知加壓氣溶膠形式，其經配置以使活性成分以含有細粉狀固體或液滴之氣溶膠形式分配。可使用習知氣溶膠推進劑，諸如揮發性氟化烴或烴，且氣溶膠裝置經適當配置以分配定量之活性成分。有關調配物之其他資訊，請讀者參考Comprehensive Medicinal Chemistry(Corwin Hansch；編委會主席)，Pergamon Press 1990之第5卷，第25.2章。
與一或多種賦形劑組合以產生單一劑型之活性成分的量將必需視所治療主體及特定投藥途徑而變化。有關投藥途徑及給藥方案之其他資訊，請讀者參考Comprehensive Medicinal Chemistry(Corwin Hansch；編委會主席)，Pergamon Press 1990之第5卷，第25.3章。
在一些實施例中，投與個體之式(I)化合物之總量可在400mg至10之間、400mg-4g之間、400-4000mg之間、400-2000mg之間、 500-1900mg之間、600-1800mg、700-1700mg之間或800-1600mg之間，例如800mg、825mg、875mg、900mg、925mg、950mg、975mg、1000mg、1025mg、1050mg、1075mg、1100mg、1125mg、1150mg、1175mg、1200mg、1225mg、1250mg、1275mg、1300mg、1325mg、1350mg、1375mg、1400mg、1425mg、1450mg、1475mg、1500mg、1525mg、1550mg、1575mg或1600mg。在一些實施例中，投與個體之式(I)化合物之總量可在400-500mg、500-600mg、600-700mg、700-800mg、800-900mg、900-1000mg、1000-1100mg、1100-1200mg、1200-1300mg、1300-1400mg、1400-1500mg、1500-1600mg、1600-1700mg、1700-1800mg、1800-1900mg或1900-2000mg之間。
式(I)化合物可一日投與一次、兩次、三次，或如醫學所必需，在24小時期間投與多次。熟習此項技術者將能夠容易地根據個體確定各個別劑量之量。在一些實施例中，式(I)化合物係以一種劑型投與。在一些實施例中，式(I)化合物係以多種劑型投與。
使用方法
在一個態樣中，本發明提供一種為有需要之個體治療細菌感染的方法，其包含投與有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。
在一個態樣中，本發明提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽用於治療細菌感染的用途。
在一個態樣中，本發明提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽用於製造供治療細菌感染之藥劑的用途。
在一個態樣中，本發明提供一種包含式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的醫藥組合物，用於治療細菌感染。
語言「細菌感染」包括由革蘭氏陰性、革蘭氏陽性或非典型細菌中之一或多種引起的感染。
在一些實施例中，細菌感染係由革蘭氏陽性細菌引起，諸如金黃色葡萄球菌、化膿鏈球菌(Streptococcus pyogenes)、肺炎鏈球菌(Streptococcus pneumoniae)、無乳鏈球菌(Streptococcus agalactiae)、炭疽芽孢桿菌(Bacillus anthracis)、仙人掌芽孢桿菌(Bacillus cereus)及枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)。
在一些實施例中，感染係由革蘭氏陰性細菌引起，諸如流行性感冒嗜血桿菌(Haemophilus influenzae)、鮑氏不動桿菌、弗氏檸檬酸桿菌(Citrobacter freundii)、大腸桿菌(Escherichia coli)、陰溝腸內桿菌(Enterobacter cloacae)、綠膿桿菌(Pseudomonas aeruginosa)、肺炎克雷伯氏桿菌及淋病奈瑟氏菌(Neisseria gonorrhoeae)。
在一些實施例中，感染係由分枝桿菌科(Mycobacteriaceae)引起，諸如結核分枝桿菌、鳥胞內分枝桿菌(Mycobacterium avium-intracellulare)、海洋分枝桿菌(Mycobacterium marinum)、潰瘍分枝桿菌(Mycobacterium ulcerans)及堪薩斯分枝桿菌(Mycobacterium kansasii)。
在一些實施例中，感染係由非典型細菌引起，諸如肺炎黴漿菌(Mycoplasma pneumoniae)、肺炎披衣菌(Chlamyaophila pneumoniae)及嗜肺性退伍軍人桿菌(Legionella pneumophila)。
在一些實施例中，細菌對除本文所述之式(I)化合物外的一或多種抗細菌劑具有抗性。語言「抗性」及「抗細菌劑抗性」係指細菌在暴露於一或多種抗細菌劑的情況下能夠存活。在一些實施例中，抗細菌劑抗性細菌包括化膿鏈球菌、無乳鏈球菌、肺炎鏈球菌(包括青黴素抗性肺炎鏈球菌)、金黃色葡萄球菌(包括萬古黴素(vancomycin)抗性金黃色葡萄球菌(VRSA))、二甲氧苯青黴素抗性金黃色葡萄球菌(MRSA)(包括醫院感染型MRSA、社區感染型MRSA及凝固酶陰性葡萄球菌)及淋病奈瑟氏菌(包括青黴素抗性淋病奈瑟氏菌，例如染色體 介導之青黴素抗性淋病奈瑟氏菌(CMRNG)及青黴素酶介導之抗性淋病奈瑟氏菌(PPNG)；頭孢菌素(cephalosporin)抗性淋病奈瑟氏菌，例如頭孢曲松(ceftriaxone)抗性淋病奈瑟氏菌及頭孢克肟(cefixime)抗性淋病奈瑟氏菌；喹諾酮(quinolone)抗性淋病奈瑟氏菌(QRNG)，例如環丙沙星(ciprofloxacin)抗性淋病奈瑟氏菌、四環素(tetracycline)抗性淋病奈瑟氏菌(例如染色體介導之四環素抗性淋病奈瑟氏菌及質體介導之青黴素抗性淋病奈瑟氏菌)；複方新諾明(co-trimoxazole)抗性淋病奈瑟氏菌及胺基醣苷抗性淋病奈瑟氏菌，例如卡那黴素(kanamycin)抗性淋病奈瑟氏菌及慶大黴素(gentamicin)抗性淋病奈瑟氏菌；磺醯胺抗性淋病奈瑟氏菌及巨環內酯抗性淋病奈瑟氏菌，例如阿奇黴素(azithromycin)抗性淋病奈瑟氏菌)。
在一些實施例中，淋病奈瑟氏菌為多藥抗性淋病奈瑟氏菌(MDRNG)。語言「多藥抗性淋病奈瑟氏菌」包括對通常用於治療淋病奈瑟氏菌感染之抗生素中之兩者或兩者以上具有抗性的淋病奈瑟氏菌，此等抗生素例如四環素、青黴素、頭孢菌素(例如頭孢曲松或頭孢克肟)、喹諾酮(例如諾氟沙星(norfloxacin)、環丙沙星或氧氟沙星(oflozacin))、複方新諾明、磺醯胺、胺基醣苷(例如卡那黴素或慶大黴素)及巨環內酯(例如阿奇黴素)。
在一個態樣中，本發明提供一種為有需要之個體治療革蘭氏陽性細菌感染的方法，其包含投與有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。
在一個態樣中，本發明提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽用於治療革蘭氏陽性細菌感染的用途。
在一個態樣中，本發明提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽用於製造供治療革蘭氏陽性細菌感染之藥劑的用途。
在一個態樣中，本發明提供一種包含式(I)化合物或其醫藥學上 可接受之鹽的醫藥組合物，用於治療革蘭氏陽性細菌感染。
在一個態樣中，本發明提供一種為有需要之個體治療複雜性皮膚及皮膚結構感染的方法，其包含投與有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。
在一個態樣中，本發明提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽用於治療複雜性皮膚及皮膚結構感染的用途。
在一個態樣中，本發明提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽用於製造供治療複雜性皮膚及皮膚結構感染之藥劑的用途。
在一個態樣中，本發明提供一種包含式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的醫藥組合物，用於治療複雜性皮膚及皮膚結構感染。
語言「複雜性皮膚及皮膚結構感染」包括可能需要重大手術介入的皮膚及周圍軟組織感染，包括例如感染性潰瘍、燒傷或嚴重膿腫。在一些實施例中，複雜性皮膚及皮膚結構感染係由化膿鏈球菌、無乳鏈球菌或金黃色葡萄球菌(包括MRSA及/或VRSA)引起。
在一個態樣中，本發明提供一種為有需要之個體治療肺炎的方法，其包含投與有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。
在一個態樣中，本發明提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽用於治療肺炎的用途。
在一個態樣中，本發明提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽用於製造供治療肺炎之藥劑的用途。
在一個態樣中，本發明提供一種包含式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的醫藥組合物，用於治療肺炎。
術語「肺炎」係指由細菌感染引起之肺部發炎病狀。在一些實施例中，肺炎係由肺炎鏈球菌或金黃色葡萄球菌感染引起。在一些實施例中，肺炎為院內感染型肺炎(例如醫院感染型肺炎)或社區感染型肺炎。在一些實施例中，肺炎係由青黴素抗性肺炎鏈球菌引起。
在一個態樣中，本發明提供一種為有需要之個體治療革蘭氏陰性細菌感染的方法，其包含投與有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。
在一個態樣中，本發明提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽用於治療革蘭氏陰性細菌感染的用途。
在一個態樣中，本發明提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽用於製造供治療革蘭氏陰性細菌感染之藥劑的用途。
在一個態樣中，本發明提供一種包含式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的醫藥組合物，用於治療革蘭氏陰性細菌感染。
在一個態樣中，本發明提供一種為有需要之個體治療非典型細菌感染的方法，其包含投與有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。
在一個態樣中，本發明提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽用於治療非典型細菌感染的用途。
在一個態樣中，本發明提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽用於製造供治療非典型細菌感染之藥劑的用途。
在一個態樣中，本發明提供一種包含式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的醫藥組合物，用於治療非典型細菌感染。
在一個態樣中，本發明提供一種抑制有需要之個體中之細菌DNA旋轉酶的方法，其包含投與有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。
在一個態樣中，本發明提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽用於抑制細菌DNA旋轉酶的用途。
在一個態樣中，本發明提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽用於製造供抑制細菌DNA旋轉酶之藥劑的用途。
在一個態樣中，本發明提供一種包含式(I)化合物或其醫藥學上 可接受之鹽的醫藥組合物，用於抑制細菌DNA旋轉酶。
語言「細菌DNA旋轉酶」係指將負超螺旋引入DNA中之II型細菌拓撲異構酶。
語言「有效量」包括式(I)化合物將引發個體之例如以下生物或醫學反應的量：與細菌DNA旋轉酶或細菌感染有關之酶或蛋白質活性降低或抑制、細菌感染症狀改善或細菌感染進展減緩或延遲。在一些實施例中，語言「有效量」包括式(I)化合物當投與個體時有效達成以下之量：至少部分地緩解、抑制及/或改善細菌感染；或抑制細菌DNA旋轉酶；及/或減少或抑制細菌生長、複製或細菌於個體中之細菌負荷。
在一個態樣中，本發明提供一種為有需要之個體治療淋病奈瑟氏菌感染的方法，其包含投與有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。
在一個態樣中，本發明提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽用於治療淋病奈瑟氏菌感染的用途。
在一個態樣中，本發明提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽用於製造供治療淋病奈瑟氏菌感染之藥劑的用途。
在一個態樣中，本發明提供一種包含式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的醫藥組合物，用於治療淋病奈瑟氏菌感染。
術語「個體」包括溫血哺乳動物，例如靈長類動物、牛、豬、羊、犬、貓、兔、大鼠及小鼠。在一些實施例中，個體為靈長類動物，例如人類。在一些實施例中，個體罹患革蘭氏陽性細菌感染。在一些實施例中，個體需要治療(例如個體在生物學上或醫學上受益於治療)。在一些實施例中，個體罹患使得對細菌感染治療的反應複雜化之嚴重基礎疾病病況，例如糖尿病。
語言「抑制(inhibit/inhibition/inhibiting)」包括生物活性或過程 之基線活性降低。
語言「治療(treat/treating/treatment)」包括與個體之細菌感染或細菌DNA旋轉酶有關之酶或蛋白質活性降低或抑制、個體之細菌感染之一或多種症狀改善或個體之細菌感染進展減緩或延遲。語言「治療」亦包括細菌生長、複製之減少或抑制或細菌於個體中之細菌負荷降低或抑制。
本發明之舉例說明
本發明係藉由(但不限於)以下實例來說明：
合成方法
除非另有說明，否則：
(i)藉由真空旋轉蒸發進行蒸發且在藉由過濾移除殘餘固體後進行處理程序；
(ii)溫度係以℃引述；操作係在通常在18-26℃範圍內的室溫下進行且除非另有說明或除非熟習此項技術者以其他方式在惰性氛圍下工作，否則無需排除空氣；
(iii)除非另有說明，否則使用管柱層析(藉由急驟程序)純化化合物且在Merck Kieselgel二氧化矽(Art.9385)上執行；
(iv)一般而言，反應過程之後進行TLC、HPLC或LC/MS且反應時間僅出於說明之目的而給出；產率僅出於說明之目的而給出且未必為可得到之最大值；
(v)本發明之終產物之結構一般藉由NMR及質譜技術確認。質子核磁共振譜(1H NMR)一般使用Bruker DRX-300光譜儀或Bruker DRX-400光譜儀(分別在300MHz或400MHz之場強下操作)測定。在NMR譜複雜之情況下，僅報導診斷信號。化學位移係在外標物四甲基矽烷之低場以百萬分率報導(δ標度)且因此顯示峰多重性：s，單峰；d，二重峰；dd，雙二重峰；dt，雙三重峰；dm，雙多重峰；t， 三重峰；m，多重峰；br，寬峰。化學位移係以±0.1ppm之誤差報導。一般在電噴霧操作中使用平台式光譜儀(由Micromass供應)獲得快速原子轟擊(FAB)質譜資料且適當時，使用裝備有Sedex 75ELSD之Agilent 1100系列LC/MS收集正離子資料或負離子資料，且適當時，收集正離子資料或負離子資料。報導分子之最低質量主要離子，其中同位素分裂產生多個質譜峰(例如當存在氯時)。在Agilent儀器上使用YMC Pack ODS-AQ(100×20mmID，S-5μ粒度，12nm孔徑)進行逆相HPLC；且
(vi)各中間物純化至後續階段所需之標準且經足夠詳細地表徵以確認所指定結構為正確的；藉由HPLC(高壓液相層析)、TLC或NMR評估純度且適當時藉由紅外光譜(IR)、質譜(MS)或NMR譜確定身分。
(vii)化合物係使用ACD/名稱(Release 12.00，產品版本12.01)命名。
中間物1 3-氯-6-[(2R,6S)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-7-氟-1,2-苯并噁唑-5-甲醛
向3-氯-6,7-二氟-1,2-苯并噁唑-5-甲醛(根據國際申請公開案第WO 2010/043893號中所述之程序製備，5.0g，23.0mmol)於無水乙腈(50ml)中之冰冷卻溶液中依次添加二異丙基乙胺(5.9g，45.9mmol)及順-2,6-二甲基嗎啉(2.6g，23.0mmol)，且在密封管中在85℃下加熱混合物12小時。將溶液冷卻至室溫且真空移除揮發物。將殘餘物溶解於乙酸乙酯中，依次用水及鹽水洗滌且接著經無水Na2SO4乾燥。真空移除溶劑，得到粗產物，使用乙酸乙酯/石油醚之梯度經矽膠管柱純化粗 產物，得到呈固體之標題化合物。產量：6.0g(84%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：1.0(d,6H),2.9(t,2H),3.1(d,2H),3.8(m,2H),7.7(s,1H),10.2(s,1H)。C14H14ClFN2O3 MS(ES)MH+：313。
中間物2 3-氯-5-(二甲氧基甲基)-6-[(2R,6S)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-7-氟-1,2-苯并噁唑
將中間物1(3.0g，9.6mmol)與一撮對甲苯磺酸於2,2'-二甲氧基丙烷(15mL)中之溶液在60℃下加熱3小時。在室溫下，向反應混合物中添加水(10mL)。用乙酸乙酯(3×10mL)萃取，將合併之有機層乾燥(Na2SO4)且真空移除溶劑，隨後用冷乙醚(15mL)濕磨，得到呈黃色固體之粗產物。產量：2.7g(80%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：1.1(d,6H),2.8(t,2H),3.0(d,2H),3.3(s,6H),3.8(m,2H),5.7(s,1H),7.6(s,1H)。
中間物3 3-{5-(二甲氧基甲基)-6-[(2R,6S)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-1,3-噁唑啶-2-酮
在0℃下，將2-噁唑啶酮(0.18g，2.1mmol)於二甲基甲醯胺(1mL)中之溶液緩慢添加至NaH(0.06g，2.5mmol)於二甲基甲醯胺(1mL)中之經攪拌懸浮液中。在室溫下攪拌混合物30分鐘，且在相同溫 度下添加中間物2(0.25g，0.7mmol)於二甲基甲醯胺(3mL)中之溶液。在60℃下加熱此混合物16小時，傾入冰冷卻水中，且用乙酸乙酯(2×20mL)萃取。經無水Na2SO4乾燥有機層且真空移除溶劑。使用乙酸乙酯/石油醚之梯度藉由矽膠管柱層析純化粗產物，得到標題化合物。產量：37mg(13%)。C19H24FN3O6 MS(ES)MH+：410.4。
中間物4 3-氯-6-[(2R,6R)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-7-氟-1,2-苯并噁唑-5-甲醛
向3-氯-6,7-二氟-1,2-苯并噁唑-5-甲醛(根據國際申請公開案第WO 2010/043893號中所述之程序製備，10.0g，46.0mmol)於無水乙腈(50ml)中之冰冷卻溶液中依次添加二異丙基乙胺(11.9g，91.9mmol)及(2R,6R)-2,6-二甲基嗎啉(5.2g，46.0mmol)，且在密封管中在85℃下加熱混合物12小時。冷卻至室溫後，真空移除揮發物。將殘餘物溶解於乙酸乙酯(50mL)中，依次用水(2×15mL)及鹽水洗滌，且接著經無水Na2SO4乾燥。真空移除溶劑，得到粗產物，將其使用乙酸乙酯/石油醚之梯度、經矽膠管柱純化，得到呈固體之標題化合物。產量：11.0g(76%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：1.2(d,6H),3.0(m,2H),3.4(m,2H),4.1(m,2H),8.0(s,1H),10.3(s,1H)。C14H14ClFN2O3 ES MH+：313.3。
中間物5 3-氯-5-(二甲氧基甲基)-6-((2R,6R)-2,6-二甲基(N-嗎啉基))-7-氟苯并[d]異噁唑
將中間物4(14.42g，46.10mmol)、2,2-二甲氧基丙烷(57.4ml，461.00mmol)及對甲苯磺酸(0.088g，0.46mmol)之混合物在室溫下攪拌16小時。添加飽和NaHCO3水溶液來淬滅反應且用乙酸乙酯萃取。用水、鹽水洗滌有機層且經Na2SO4乾燥。真空濃縮濾液，得到標題化合物(15.35g，90%)。C16H20ClFN2O4 MS(ES)MH+：359。
中間物6 3-(5-(二甲氧基甲基)-6-((2R,6R)-2,6-二甲基(N-嗎啉基))-7-氟苯并[d]異噁唑-3-基)噁唑啶-2-酮
將含噁唑啶-2-酮(購自Sigma-Aldrich，728mg，8.36mmol)之二甲基甲醯胺(1mL)添加至NaH(290mg，7.25mmol，60%於礦物油中)於二甲基甲醯胺(1mL)中之懸浮液中，且在室溫下攪拌混合物10分鐘。緩慢添加含中間物5(2.0g，5.57mmol)之二甲基甲醯胺(2mL)。在80℃下加熱所得混合物5小時，隨後冷卻且傾入冰冷卻NH4Cl水溶液中，且用乙酸乙酯萃取。用水、鹽水洗滌有機層且乾燥(Na2SO4)。濃縮後，在矽膠管柱(20-50%乙酸乙酯/CHCl3溶離)上純化殘餘物，得到標題化合物(800mg，35%)。1H NMR(300MHz,DMSO-D6)δ：1.2(br s,6H)2.7-2.9(m,2H)3.06-3.35(m,8H)3.9-4.25(m,4H)4.45-4.7(m,2H)5.7(s,1H)8.35(s,1H)。C19H24FN3O6 MS(ES)MH+：410。
中間物7 3-氯-6-[(2R,6S)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑
將中間物1(16.3g，52.2mmol)、乙二醇(8.1g，130.6mmol)及對甲苯磺酸吡錠(1.31g，5.2mmol)於甲苯(300mL)中之溶液在迪恩-斯達克設備(Dean-Stark apparatus)中在回流下加熱16小時。真空移除溶劑且將殘餘物溶解於乙醚(75mL)中，用水(3×25mL)及鹽水溶液(25mL)洗滌。將有機層經無水Na2SO4乾燥且過濾。真空移除溶劑，得到標題化合物，將其藉由用熱己烷濕磨來進一步純化。產量：18.0g(80%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：1.1(d,6H),2.8(t,2H),3.0(d,2H),3.3(m,4H),3.8(m,2H),5.7(s,1H),7.6(s,1H)。
中間物8 (4R)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-4-甲基-1,3-噁唑啶-2-酮
在0℃下，歷時10分鐘之時間向NaH(0.24g，9.9mmol)於二甲基甲醯胺(10mL)中之經攪拌溶液中緩慢添加(4R)-4-甲基-1,3-噁唑啶-2-酮(根據Nishiyama,T.；Matsui,Shigeki；Yamada,F.J.Het.Chem.(1986),23(5),1427-9中所述之程序合成)(1.0g，9.9mmol)於二甲基甲醯胺(10mL)中之溶液。在室溫下攪拌混合物30分鐘，且在相同溫度下添加中間物7(1.1g，3.1mmol)於二甲基甲醯胺(5mL)中之溶 液。在80℃下加熱此混合物12小時且傾入冰冷卻水中，且用乙酸乙酯(2×20mL)萃取。經無水Na2SO4乾燥有機層且真空移除溶劑。使用乙酸乙酯/石油醚之梯度藉由矽膠管柱層析純化粗產物。產量：0.15g(12%)。C20H24FN3O6 MS(ES)MH+：422.4。
中間物9及10係使用類似於關於中間物8之合成所述的方法由中間物7及指定噁唑啶酮起始物質製備。
中間物9 (5S)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-5-甲基-1,3-噁唑啶-2-酮
起始物質：(5S)-5-甲基-1,3-噁唑啶-2-酮(根據Rein,K.；Goicoechea-Pappas,M.；Anklekar,T.V.；Hart,G.C.；Smith,G.A.；Gawley,R.E.JACS(1989),111(6),2211-17中所述之程序合成)。C20H24FN3O6 MS(ES)MH+：422.4。
中間物10 (5R)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-5-甲基-1,3-噁唑啶-2-酮
起始物質：(5R)-5-甲基-1,3-噁唑啶-2-酮(根據Chouhan,G.；Alper, H.J.Org.Chem.(2009),74(16),6181-6189中所述之程序合成)。C20H24FN3O6 MS(ES)MH+：422.4。
中間物11 3-氯-6-[(2R,6R)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑
將中間物4(11.0g，35.3mmol)、乙二醇(5.7g，91.9mmol)及對甲苯磺酸吡錠(0.92g，3.7mmol)於甲苯中之溶液在迪恩-斯達克設備中在回流下加熱16小時。真空移除溶劑且將殘餘物溶解於乙醚(75mL)中，依次用水(3×25mL)和鹽水溶液(25mL)洗滌。經無水Na2SO4乾燥有機層且過濾。真空移除溶劑，得到標題化合物，將其藉由用熱己烷濕磨來進一步純化。產量：9.0g(72%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：1.2(d,6H),2.9(m,2H),3.2(d,2H),4.05(m,4H),4.15(m,2H),6.2(s,1H),7.7(s,1H)。C16H18ClFN2O4 MS(ES)MH+：357.3。
中間物12 (R)-3-(6-((2R,6R)-2,6-二甲基(N-嗎啉基))-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟苯并[d]異噁唑-3-基)-5-甲基噁唑啶-2-酮
將含(R)-5-甲基噁唑啶-2-酮(1.134g，11.21mmol，根據Chouhan, G.；Alper,H.J.Org.Chem.(2009),74(16),6181-6189中所述之程序合成)之二甲基甲醯胺(10mL)添加至NaH(0.448g，11.21mmol，60%於礦物油中)於二甲基甲醯胺(10mL)中之懸浮液中。在室溫下攪拌混合物30分鐘。緩慢添加含中間物11(4g，11.2mmol)之二甲基甲醯胺(10mL)，且在80℃下加熱所得混合物2小時。冷卻反應物，傾入冰冷卻NH4Cl水溶液中且用乙酸乙酯萃取。用水、鹽水洗滌有機層且乾燥。濃縮後將粗產物在矽膠管柱(40-50%乙酸乙酯/己烷溶離)上純化，得到標題化合物。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6)δ 1.2(d,6H),1.5(d,3H),2.8-3.3(m,4H),3.7-4.3(m,8H),4.9-5.1(m,1H),6.2(s,1H),8.4(s,1H)。C20H24FN3O6 MS(ES)MH+：422。
中間物13 2-(2,3,4-三氟苯基)-1,3-二氧雜環戊烷
在周圍溫度下，將乙二醇(348.7g，5.62mol)一次性添加至2,3,4-三氟苯甲醛(300.0g，1.87mol)及單水合對甲苯磺酸(35.6g，0.18mol)於甲苯(4.5L)中之經攪拌混合物中。使用迪恩-斯達克設備在回流下加熱所得混合物，且共沸移除水。不時地移除水(3小時間隔)。24小時後，移除甲苯且將殘餘物用乙酸乙酯(1.5L)稀釋且用飽和NaHCO3水溶液(2×750mL)、水(2×500mL)及鹽水溶液(500mL)洗滌。經硫酸鈉乾燥有機層且真空移除溶劑。在60-70℃下在高真空(0.1mm Hg)中對粗產物進行蒸餾，以移除起始物質及雜質。在75-85℃(0.1mm Hg)下所獲得之餾分與標題化合物一致。產量：300.0g(78%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：3.9-4.1(m,4H),6.0(s,1H),7.3-7.4(m,2H)。
中間物14 5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-2,3,4-三氟苯甲醛
在-70℃下，歷時45分鐘，將正丁基鋰(2.5M己烷溶液，300mL，0.75mol)逐滴添加至中間物13(118.0g，0.57mol)於四氫呋喃(2.3L)中之溶液中，且在此溫度下攪拌混合物1小時。在-70℃下，在攪拌下，歷時30分鐘之時間逐滴添加二甲基甲醯胺(236mL，3.27mol)且在相同溫度下繼續攪拌1小時，隨後在0℃下用飽和NH4Cl水溶液淬滅。用乙酸乙酯(2×500mL)萃取混合物且用水(2×500mL)、鹽水(500mL)洗滌有機層且經Na2SO4乾燥。使用10%乙酸乙酯/石油醚之梯度藉由矽膠(60-120目)急驟管柱層析純化粗產物。產量：125.0g(93%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：4.0-4.1(m,4H),6.05(s,1H),7.8(m,1H),10.1(s,1H)。
中間物15 1-[5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-2,3,4-三氟苯基]-N-羥基甲亞胺
在0℃下，將吡啶(95.3g，1.2mol)及鹽酸羥胺(62.8g，0.90mol)依序添加至中間物14(140.0g，0.60mol)於乙醇(1500mL)中之經攪拌溶液中。在室溫下攪拌混合物18小時。真空移除揮發物且將殘餘物用乙酸乙酯(2.0L)稀釋且用水(2×500mL)、鹽水(2×500mL)洗滌且經硫酸鈉乾燥。移除溶劑，獲得粗產物，將其藉由用乙醚與庚烷之混合物(1：9)洗滌加以純化。產量：100.0g(第1批)。使用乙酸乙酯/石油醚之 梯度對獲自第一批之母液進行矽膠管柱純化，亦獲得20g產物。總產量：120.0g(80%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：3.95-4.1(m,4H),6.0(s,1H),7.6(m,1H),8.2(s,1H),11.8(s,1H)。
中間物16 5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-2,3,4-三氟-N-羥基苯甲醯亞胺醯氯
在周圍溫度下，在N2氛圍下，將N-氯丁二醯亞胺(49.0g，0.36mol)逐份添加至中間物15(70.0g，0.28mol)於二甲基甲醯胺(360mL)中之經攪拌溶液中。攪拌4小時後，使N2鼓泡通過反應混合物30分鐘，隨後將混合物傾入冰水(2L)中。攪拌所得混合物1小時且過濾固體且用水(2×250mL)洗滌。將固體在甲苯(300mL)中攪拌30分鐘且過濾，獲得53.0g作為第一批。用庚烷(400ml)處理甲苯濾液，沈澱出額外的固體，將其過濾且再用庚烷(50mL)洗滌，得到7g作為第二批。總產量：60.0g(76%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：3.95-4.1(m,4H),6.0(s,1H),7.6(m,1H),12.8(s,1H)。
中間物17 (2R)-1-[[5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-6,7-二氟-1,2-苯并噁唑-3-基]胺基]丙-2-醇
在周圍溫度下，將(R)-1-胺基丙-2-醇(1.3ml，16.6mmol)添加至中間物16(2.22g，7.88mmol)於二甲基甲醯胺(30mL)中之溶液中。反應緩慢放熱。攪拌10分鐘後，LC-MS顯示起始物質消耗，出現新的 中間物(MH+=321)。再攪拌30分鐘後，一次性添加第三丁醇鉀(1.77g，15.8mmol)。接著發生緩慢放熱。攪拌1小時後，LC-MS顯示轉化為與標題化合物一致之物質(MH+=301)，且剩餘一些與中間物一致(MH+=321)。再添加第三丁醇鉀(400mg，3.6mmol)，且在室溫下攪拌混合物1小時。LC-MS顯示完全轉化為MH+=321之物質。用NH4Cl水溶液淬滅混合物，且真空移除溶劑。在將固體塊破碎的同時將固體殘餘物溶解於水(50mL)中，且在周圍溫度下攪拌混合物隔夜。過濾固體且用水沖洗，隨後真空乾燥，得到與標題化合物一致之物質。產量2.24g(95%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ：1.1(d,3H)3.2(t,2H)3.8-4.0(m,1H)4.0-4.1(m,4H)4.8(d,1H)6.1(s,1H)7.3(t,1H)8.0(dd,1H)。C13H14F2N2O4 ES MH+：301。
中間物18 (R)-3-(5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-6,7-二氟苯并[d]異噁唑-3-基)-5-甲基噁唑啶-2-酮
將中間物17(500mg，1.67mmol)、二(1H-咪唑-1-基)甲酮(405mg，2.50mmol)及二甲基胺基吡啶(102mg，0.83mmol)於四氫呋喃(10mL)中之混合物在回流下加熱隔夜(21小時)。移除溶劑，得到油性殘餘物。將殘餘物溶解於1N HCl中，且在周圍溫度下攪拌混合物90分鐘，得到固體。過濾固體且用水充分沖洗，用刮勺使其破碎，隨後真空乾燥。該物質與標題化合物一致，其由於水解為相應醛而具有約5%雜質。產量407mg(75%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ：1.5(d,3H)3.8(dd,1H)4.0-4.1(m,4H)4.3(t,1H)5.0(m,1H)6.1(s,1H)8.45 (d,1H)。C14H12F2N2O5 ES MH+：327。
中間物19 (R)-6,7-二氟-3-(5-甲基-2-側氧基噁唑啶-3-基)苯并[d]異噁唑-5-甲醛
將中間物18(404mg，1.24mmol)於HCl(1.0M水溶液)(10mL，10.00mmol)與四氫呋喃(10mL)中之溶液在室溫下攪拌3天。將反應混合物用水稀釋且用乙酸乙酯萃取2次且用鹽水洗滌各萃取物。合併有機層且經MgSO4乾燥，過濾且蒸發，得到呈灰白色固體之與標題化合物一致之物質。產量350mg(100%)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ：1.6(d,3H)3.8(dd,1H)4.3(dd,1H)4.9(m,1H)8.9(dd,1H)10.2(s,1H)。C12H8F2N2O4 ES MH+：283。
中間物20 6-((2R,6R)-2,6-二甲基(N-嗎啉基))-7-氟-3-((R)-5-甲基-2-側氧基噁唑啶-3-基)苯并[d]異噁唑-5-甲醛
將中間物19(92mg，0.33mmol)、(2R,6R)-2,6-二甲基嗎啉(45.1mg，0.39mmol)及K2CO3於丁腈(3mL)及水(0.5mL)中之混合物在微波反應容器中在100℃下加熱。移除溶劑且將殘餘物用水稀釋且用乙酸乙酯萃取2次，且用鹽水洗滌各萃取物。合併有機層且經MgSO4乾燥，過濾且蒸發，得到物質，將其在矽膠上加以層析(50%己烷 /CH2CH2，隨後梯度溶離至100% CH2CH2)，得到與標題化合物一致之黃色固體。產量100mg(81%)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.2(d,6H)1.5(d,3H)2.9-3.0(m,2H)3.4(dt,2H)3.7(dd,1H)4.1-4.3(m,3H)4.8-5.0(m,1H)8.7(d,1H)10.3(s,1H)。C18H20FN3O5 MS(ES)MH+：378。
中間物21 (4S)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-4-甲基-1,3-噁唑啶-2-酮
以類似於關於中間物8之合成所述的方法使用(4S)-4-甲基-1,3-噁唑啶-2-酮(根據Nishiyama,T.；Matsui,Shigeki；Yamada,F.J.Het.Chem.(1986),23(5),1427-9中所述之程序合成)由中間物7製備中間物21。C20H24FN3O6 MS(ES)MH+：422.4。
中間物22 (S)-3-(6-((2R,6R)-2,6-二甲基(N-嗎啉基))-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟苯并[d]異噁唑-3-基)-4-甲基噁唑啶-2-酮
使用類似於關於中間物12之合成所述的方法由中間物11及(4S)-4-甲基-1,3-噁唑啶-2-酮(根據Nishiyama,T.；Matsui,Shigeki；Yamada,F.J.Het.Chem.(1986),23(5),1427-9中所述之程序合成)製備中間物 22。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6)δ：1.2(d,6H),1.35-1.5(m,3H),2.8-3.3(m,4H),3.9-4.3(m,7H),4.6-4.8(m,2H),6.0-6.3(m,1H),6.2(s,1H),8.2(s,1H)。C20H24FN3O6 MS(ES)MH+：422。
使用類似於關於中間物8之合成所述的方法由中間物7及指定噁唑啶酮起始物質製備中間物23至29。
中間物23 (4S)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-4-乙基-1,3-噁唑啶-2-酮
起始物質：(4S)-4-乙基-1,3-噁唑啶-2-酮(根據Begis,G.；Cladingboel,D.E.；Jerome,L.；Motherwell,W.B.；Sheppard,T.D.Eur.J.Org.Chem.(2009),(10),1532-1548中所述之程序合成)。C21H26FN3O6 MS(ES)MH+：436.4。
中間物24 (4R)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-4-乙基-1,3-噁唑啶-2-酮
起始物質：(4R)-4-乙基-1,3-噁唑啶-2-酮-(5R)-5-甲基-1,3-噁唑啶-2-酮(根據Chouhan,G.；Alper,H.J.Org.Chem.(2009),74(16),6181-6189中所述之程序合成)。C21H26FN3O6 MS(ES)MH+：436.4。
中間物25 (4R)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-4-苯基-1,3-噁唑啶-2-酮
起始物質：(4R)-4-苯基-1,3-噁唑啶-2-酮(根據Begis,G.；Cladingboel,D.E.；Jerome,L.；Motherwell,W.B.；Sheppard,T.D.Eur.J.Org.Chem.(2009),(10),1532-1548中所述之程序合成)。C25H26FN3O6 MS(ES)MH+：484.5。
中間物26 (4S)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-4-苯基-1,3-噁唑啶-2-酮
起始物質：(4S)-4-苯基-1,3-噁唑啶-2-酮(根據MacNevin,C.J.；Moore,R.L.；Liotta,D.C.J.Org.Chem.(2008),73(4),1264-1269中所述之程序合成)。C25H26FN3O6 MS(ES)MH+：484.5。
中間物27 (4R)-4-苯甲基-3-{6-[(2R,6S)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-1,3-噁唑啶-2-酮
起始物質：(4R)-4-苯甲基-1,3-噁唑啶-2-酮(根據Paz,J.；Perez-Balado,C.；Iglesias,B.；Munoz,L.J.Org.Chem.(2010),75(9),3037-3046中所述之程序合成)。C26H28FN3O6 MS(ES)MH+：498.5。
中間物28 (4S)-4-苯甲基-3-{6-[(2R,6S)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-1,3-噁唑啶-2-酮
起始物質：(4S)-4-苯甲基-1,3-噁唑啶-2-酮(根據Begis,G.；Cladingboel,D.E.；Jerome,L.；Motherwell,W.B.；Sheppard,T.D.Eur.J.Org.Chem.(2009),(10),1532-1548中所述之程序合成)。C26H28FN3O6 MS(ES)MH+：498.5。
中間物29 3-{6-[(2R,6S)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-5,5-二甲基-1,3-噁唑啶-2-酮
起始物質：5,5-二甲基-1,3-噁唑啶-2-酮(根據Jones,S.；Smanmoo,C.Tet.Lett.(2004),45(8),1585-1588中所述之程序合成)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：1.1(d,6H),1.5(s,6H),2.8(t,2H),3.1(d,2H),3.8(m,2H),4.0(m,4H),4.1(m,2H),6.1(s,1H),8.4(s,1H)。C21H26FN3O6 MS(ES)MH+：436.4。
中間物30與31之混合物 (5R)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-5-乙基-1,3-噁唑啶-2-酮及(5S)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-5-乙基-1,3-噁唑啶-2-酮
中間物30及31係使用類似於關於中間物12之合成所述的方法由中間物11及5-乙基-1,3-噁唑啶-2-酮(根據歐洲專利申請公開案第EP 244810號中所述之程序合成)製備。非對映異構體係使用Chiralpak IC(250×4.6)mm(己烷：乙醇，80：20，1.0ml/min)、經由HPLC分離。
中間物30((5R)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-5-乙基-1,3-噁唑啶-2-酮)為第一溶離非對映異構體。RT=16.2min；1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 ) δ：1.0(t,3H),0.95-1.0(m,6H),1.8(m,2H),2.9(m,2H),3.2(m,2H),3.8(dd,1H),4.0(m,2H),4.0-4.05(m,4H),4.2(t,1H),6.2(s,1H),8.4(s,1H)。C21H26FN3O6 MS(ES)MH+：436.4。
中間物31((5S)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-5-乙基-1,3-噁唑啶-2-酮)為第二溶離非對映異構體。RT=18.9min；1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：1.0(t,3H),0.95-1.0(m,6H),1.8(m,2H),2.9(m,2H),3.2(m,2H),3.8(dd,1H),4.0(m,2H),4.0-4.05(m,4H),4.2(t,1H),6.2(s,1H),8.4(s,1H)。C21H26FN3O6 MS(ES)MH+：436.4。
中間物32 (4R)-4-({[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧基}甲基)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-1,3-噁唑啶-2-酮
在0℃下，歷時10分鐘之時間將(4R)-4-({[第三丁基(二苯基)矽烷基]氧基}甲基)-1,3-噁唑啶-2-酮(根據Berkowitz,D.B.；Sloss,D.G.J.Org.Chem.(1995),60(21),7047-50中所述之程序合成)於二甲基甲醯胺(15mL)中之溶液添加至NaH(0.83g，34.6mmol)於二甲基甲醯胺(10mL)中之經攪拌溶液中。在室溫下攪拌混合物30分鐘，且在相同溫度下添加中間物7(6.17g，17.3mmol)於二甲基甲醯胺(25mL)中之溶液。在60℃下加熱此混合物2小時且傾入冰冷卻水中，用乙酸乙酯(2×20mL)萃取。經無水Na2SO4乾燥有機層且真空移除溶劑。使用乙 酸乙酯/石油醚之梯度藉由矽膠管柱層析純化粗產物。產量：1.2g(13%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：-0.2(s,3H),-0.1(s,3H),0.75(s,9H),1.1(d,6H),2.8(t,2H),3.1(d,2H),3.7(m,3H),4.0(m,2H),4.0-4.1(m,2H),4.1(d,1H),4.4(d,1H),4.7(d,2H),6.1(s,1H),8.3(s,1H)。C26H38FN3O7Si MS(ES)MH+：552.6。
中間物33與34之混合物 (4S)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-4-(羥甲基)-1,3-噁唑啶-2-酮及(4R)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-4-(羥甲基)-1,3-噁唑啶-2-酮
在0℃下，向中間物32(1.5g，2.7mmol)於四氫呋喃(50mL)中之經攪拌溶液中添加氟化四丁基銨於四氫呋喃(1.4g，5.4mmol)中之1M溶液，且在室溫下攪拌混合物10分鐘。添加水(3mL)至反應混合物中且分離有機層且經無水Na2SO4乾燥。真空蒸發溶劑，得到固體，藉由對掌性HPLC分析，其為對映異構體之68%+27%混合物。產量：1.1g(92%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：1.1(d,6H),2.8(t,2H),3.1(d,2H),3.5-3.6(m,1H),3.7-3.8(m,2H),3.9-4.0(m,3H),4.05-4.1(m,2H),4.5(dd,1H),4.6-4.65(m,2H),5.2(t,1H),6.1(s,1H),8.3(s,1H)。C20H24FN3O7 MS(ES)MH+：438.4。
中間物33與34之混合物中的R與S對映異構體係使用Chiralpak IC(250×4.6mm)管柱(己烷：乙醇(80：20)；1.0mL/min)藉由對掌性HPLC分離，得到2種組分：作為主要組分之中間物33及作為次要組分之中間 物34。
中間物33((4S)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-4-(羥甲基)-1,3-噁唑啶-2-酮)為第一溶離對映異構體。RT=10.86min；產量：550mg。C20H24FN3O7 MS(ES)MH+：438.4。
中間物34((4R)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-4-(羥甲基)-1,3-噁唑啶-2-酮)為第二溶離對映異構體。RT=14.99min；產量：420mg。C20H24FN3O7 MS(ES)MH+：438.4。
中間物35 (4R)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-4-(氟甲基)-1,3-噁唑啶-2-酮
在-78℃下，將三氟化二乙胺基硫(1.0g，6.3mmol)添加至中間物33(0.55g，1.25mmol)於四氫呋喃(25mL)中之經攪拌溶液中，且攪拌混合物1小時，隨後升溫至室溫維持1小時。添加甲醇(1mL)，且真空移除揮發物。將殘餘物溶解於乙酸乙酯(15mL)中且用飽和NaHCO3(5mL)、水(10mL)及鹽水溶液洗滌。經Na2SO4乾燥有機層，且真空移除溶劑，得到呈固體之標題化合物。產量：0.44g(80%)。C20H23F2N3O6 MS(ES)MH+：440.4。
中間物36 (4S)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-4-(氟甲基)-1,3-噁唑啶-2-酮
使用類似於關於中間物35之合成所述的方法由中間物34製備中間物36。C20H23F2N3O6 MS(ES)MH+：440.4。
中間物37與38之混合物 (4R)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-4-(甲氧基甲基)-1,3-噁唑啶-2-酮及(4S)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-4-(甲氧基甲基)-1,3-噁唑啶-2-酮
在0℃下，將中間物33與34之混合物(0.55g，1.3mmol)及碘甲烷(0.54g，3.8mmol)添加至NaH(0.06g，2.5mmol)於二甲基甲醯胺(5mL)中之經攪拌混合物中，且在室溫下攪拌所得混合物1小時。用飽和NH4Cl水溶液(5ml)淬滅反應混合物且用乙酸乙酯(3×10ml)萃取。將合併之有機層用水洗滌且經Na2SO4乾燥。真空蒸發溶劑，得到粗標題化合物，使用乙酸乙酯/石油醚之梯度藉由急驟管柱矽膠層析將其純化。產量：0.4g(70%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：1.1(d,6H),2.8(t,2H),3.1(d,2H),3.2(s,3H),3.5(dd,1H),3.7-3.75(m,2H),3.9(d,1H),3.9-34.0(m,2H),4.0-4.1(m,2H),4.4(dd,1H),4.6-4.7(m,2H),6.1(s,1H),8.3(s,1H)。C21H26FN3O7MS(ES)MH+：452.4。
中間物39 (4S)-4-(甲氧基甲基)-1,3-噁唑啶-2-酮
在0℃下，向[(2R)-1-羥基-3-甲氧基丙-2-基]胺基甲酸第三丁酯(根據Sowinski,J.A.；Toogood,P.L.J.Org.Chem.(1996),61(22),7671-7676中所述之程序合成)(8.3g，40.4mmol)於四氫呋喃(100mL)中之經攪拌溶液中逐滴添加第三丁醇鉀於四氫呋喃(80.9mL，80.9mmol)中之1M溶液，且在室溫下攪拌混合物2小時。添加水(20ml)至反應混合物中且用乙酸乙酯(3×50ml)萃取。將合併之有機層用鹽水洗滌且經Na2SO4乾燥。產量：5.0g(94%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ：3.3(s,3H),3.3(m,2H),3.9(m,1H),4.0(dd,1H),4.3(t,1H),7.7(d,1H)。[α]D 25=-5.876。
中間物40 (4S)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-4-(甲氧基甲基)-1,3-噁唑啶-2-酮
使用類似於關於中間物32之合成所述的方法由中間物39及中間物7製備中間物40。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：1.1(d,6H),2.8(t,2H),3.1(d,2H),3.2(s,3H),3.5(dd,1H),3.7-3.75(m,2H),3.9(d,1H),3.95-4.0(m,2H),4.0-4.1(m,2H),4.4(dd,1H),4.45-4.7(m,2H),6.1(s,1H),8.3(s,1H)。C21H26FN3O7 MS(ES)MH+：452.4。
中間物41 (S)-5-((第三丁基二苯基矽烷基氧基)甲基)噁唑啶-2-酮
將(S)-5-(羥甲基)噁唑啶-2-酮(570mg，4.87mmol，如Danielmeier,K.；Steckhan,E.Tet.Asymmetry,6(5),1995,1181所述)及咪唑(331mg，4.87mmol)溶解於二甲基甲醯胺(5mL)中且冷卻至0℃。在0℃下逐滴添加第三丁基氯二苯基矽烷(1.34g，4.87mmol)。 將反應混合物升溫至室溫且攪拌5小時。將混合物傾入0.5N HCl(50ml)中，且用乙酸乙酯萃取所得混合物。分離各層，且用飽和碳酸氫鈉、水及鹽水洗滌有機相。經硫酸鈉乾燥有機相且移除溶劑，得到粗物質，將其在矽膠管柱(50%乙酸乙酯/己烷)上純化，得到標題化合物(1.28g，74.0%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ：1.0(s,9H)3.3-3.6(m,2H)3.6-3.9(m,2H)4.6-4.8(m,1H)7.3-7.8(m,11H)。C20H25NO3Si之Na+加合物MS(ES)(M+23)+：278。
中間物42 (S)-5-((第三丁基二苯基矽烷基氧基)甲基)-3-(6-((2R,6R)-2,6-二甲基(N-嗎啉基))-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟苯并[d]異噁唑-3-基)噁唑啶-2-酮
使用類似於關於中間物32之合成所述的方法由中間物41及中間物11製備中間物42。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ：0.9(s,9H)1.2(d,6H)2.9(dd,2H)3.2-3.3(m,2H)3.8-4.1(m,9H)4.3(t,1H)4.95-5.1(m,1H)6.2(s,1H)7.3-7.7(m,10H)8.5(s,1H)。C36H42FN3O7Si MS (ES)MH+：676。
中間物43 (S)-3-(6-((2R,6R)-2,6-二甲基(N-嗎啉基))-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟苯并[d]異噁唑-3-基)-5-(羥甲基)噁唑啶-2-酮
將乙酸(0.89mL，15.5mmol)及氟化四丁基銨(3.1mL，3.1mmol)於四氫呋喃中之1M溶液依序添加至中間物42(2.1g，3.11mmol)溶解於15mL四氫呋喃中之溶液中。在室溫下攪拌混合物18小時。用水稀釋反應混合物且用乙酸乙酯萃取，濃縮，得到粗物質，將其在矽膠管柱(50-70%乙酸乙酯/己烷梯度)上純化，得到標題化合物(1.33g，98%產率)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ：1.2(d,6H)2.8-3.3(m,4H)3.5-3.8(m,2H)3.9-4.3(m,8H)4.7-5.05(m,1H)6.2(s,1H)8.4(s,1H)。C20H24FN3O7 MS(ES)MH+：438。
中間物44 (S)-3-(6-((2R,6R)-2,6-二甲基(N-嗎啉基))-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟苯并[d]異噁唑-3-基)-5-(氟甲基)噁唑啶-2-酮
使用類似於關於中間物35之合成所述的方法由中間物43製備中間物44。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ：1.3(d,6H).3.0(dd,2H)4.0-4.2 (m,8H)4.3(t,1H)4.55-4.9(m,3H)5.0-5.25(m,1H)6.3(s,1H)8.5(s,1H)。C20H23F2N3O6MS(ES)MH+：440。
中間物45 3-氯-4-氟-2-羥基苯甲酸
將氫氧化鈉(208g，5.21mol)逐份添加至3-氯-2,4-二氟苯甲酸(200g，1.04mol)於1,3-二甲基咪唑啶-2-酮(1L)中之經攪拌溶液中，且加熱至混合物140℃維持2小時。將反應混合物冷卻至室溫且用冰冷卻之2N HCl(350mL)中和，沈澱出白色固體，將其藉由過濾收集。將所過濾固體溶解於甲基第三丁基醚(500mL)中，用飽和鹽水溶液(150mL)洗滌且經Na2SO4乾燥。真空移除溶劑，得到呈灰白色固體之標題化合物。產量：180g(91%)。1H NMR(300MHz,MeOH-d4)δ：6.8(t,1H),7.90(dd,1H),11.3(s,1H)。C7H4ClFO3 MS(ES)MH-：189。
中間物46 3-氯-4-氟-2-羥基苯甲酸甲酯
將乙二醯氯(75.9g，0.60mol)及二甲基甲醯胺(1mL)依序添加至中間物45(57.0g，0.29mol)於無水二氯甲烷(570mL)中之冰冷卻且經攪拌溶液中，且在室溫下攪拌混合物16小時。真空移除揮發物，得到黃色固體，在0℃下向其中添加甲醇(350mL)，且在相同溫度下攪拌所得混合物1小時。將反應混合物緩慢傾入2N HCl之冰冷卻溶液(1.0L)中，過濾收集沈澱固體。將此濕固體溶解於乙醚(1.5L)中，分離且 經Na2SO4乾燥。真空移除溶劑，得到呈白色固體之標題化合物。產量：58.0g(95%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：3.9(s,3H),7.0(t,1H),7.8(dd,1H),11.3(s,1H)。
中間物47 3-氯-4-氟-N,2-二羥基苯甲醯胺
在0℃下，將鹽酸羥胺(43.3g，0.62mol)及KOH丸粒(73.2g，1.30mol)依序添加至中間物46(58.0g，0.28mol)於甲醇(580mL)中之溶液中，且將混合物回流16小時。將反應混合物冷卻至10℃且藉由添加1.5N HCl之冰浴冷卻溶液(3.0L)將溶液pH值調節至2，沈澱出白色固體。過濾固體且充分真空乾燥。接著將固體溶解於乙酸乙酯(500mL)中，用1.5N鹽酸(200mL)、鹽水溶液(200mL)洗滌且經Na2SO4乾燥。移除溶劑，得到呈白色固體之標題產物。產量：55.0g(94%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ：7.0(t,1H),7.7(dt,1H),9.6(br s,1H),11.9(s,1H),13.9(s,1H)。C7H5ClFNO3 MS(ES)MH+：206。
中間物48 7-氯-6-氟苯并[d]異噁唑-3(2H)-酮
在70℃下，歷時1小時，將含羰基二咪唑(86.75g，0.54mol)之無水四氫呋喃(100mL)逐滴添加至中間物47(55.0g，0.27mol)於無水四氫呋喃(550mL)中之經攪拌溶液中，且在相同溫度下再攪拌反應混合物一小時。真空移除溶劑，且將所獲得之半固體與冰冷卻之2N鹽酸(500mL)一起劇烈攪拌10分鐘。過濾所獲得之白色固體，溶解於乙酸 乙酯(500mL)中，用鹽水溶液(150mL)洗滌且經Na2SO4乾燥。移除溶劑，得到呈白色固體之標題化合物。產量：47.0g(94%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ：8.0(t,1H),8.4(dd,1H),13.5(br s,1H)。C7H3ClFNO2 MS(ES)MH-：186。
中間物49 3,7-二氯-6-氟苯并[d]異噁唑
向中間物48(47.0g，0.25mol)之冰冷卻混合物中添加氧氯化磷(114.3g，0.75mol)及三乙胺(25.36g，0.25mol)且在密封管中在140℃下加熱混合物6小時。將反應主體冷卻至室溫且接著在劇烈攪拌下緩慢添加冰冷卻水。過濾所獲得之固體且用飽和碳酸氫鈉溶液(200mL)及冰冷卻水洗滌。接著將濕固體溶解於乙醚(2.0L)中，經Na2SO4乾燥。在35℃下移除溶劑，得到呈淺褐色固體之標題化合物。產量：32.0g(62%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ：7.6(t,1H),7.9(dd,1H)。C7H2Cl2FNO MS(ES)MH-：206.0。
中間物50 3,7-二氯-6-氟苯并[d]異噁唑-5-甲醛
在-10℃下，將正丁基鋰(194.17mL，0.31mol)於己烷中之1.6M溶液之溶液逐滴添加至四甲基哌啶(48.26g，0.34mol)於四氫呋喃(160mL)中之溶液中，且攪拌溶液40分鐘。將反應混合物冷卻至-78℃且向其中添加含中間物49(32.0g，0.16mol)之四氫呋喃(160mL)。在-78℃下攪拌2小時後，添加二甲基甲醯胺(22.69g，0.31mol) 且在-78℃下繼續攪拌1小時。藉由添加乙酸(46.6g，0.78mol)淬滅反應且升溫至室溫。用水稀釋混合物且用乙酸乙酯(2×250mL)萃取。將合併之有機層用水及鹽水洗滌且接著經無水Na2SO4乾燥。真空移除溶劑，得到粗產物，使用2%乙酸乙酯/石油醚之梯度經矽膠管柱(230-400目)將其純化。產量：27.5g(76%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：8.4(d,1H),10.2(s,1H)。C8H2Cl2FNO2 MS(ES)MH+：233。
中間物51 3,7-二氯-6-((2R,6R)-2,6-二甲基(N-嗎啉基))苯并[d]異噁唑-5-甲醛
將中間物50(15g，64.10mmol)、(2R,6R)-2,6-二甲基嗎啉(7.38g，64.10mmol)及K2CO3(13.29g，96.15mmol)於丁腈(80mL)及水(8mL)中之混合物在回流下加熱6小時。移除溶劑。用乙酸乙酯稀釋混合物且用水及鹽水洗滌。將合併之水層用乙酸乙酯萃取，用水及鹽水洗滌。將合併之乙酸乙酯萃取物乾燥(Na2SO4)且濃縮，得到與標題化合物一致之淺黃色固體(21.2g，100%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ：1.2(d,6H)3.0(dd,2H)3.55(dd,2H)4.1-4.2(m,2H)8.1(s,1H)10.3(s,1H)。C14H14Cl2N2O3 MS(ES)MH+：329。
中間物52 3,7-二氯-6-((2R,6R)-2,6-二甲基(N-嗎啉基))-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)苯并[d]異噁唑
向中間物51(21g，63.8mmol)溶解於200mL甲苯中之溶液中添 加乙-1,2-二醇(15.8g，255mmol)及4-甲基苯磺酸(0.55g，3.19mmol)。在回流下加熱混合物4小時，且共沸移除水。冷卻反應物且用乙醚稀釋，用水、NaHCO3水溶液及水洗滌。乾燥(MgSO4)且移除溶劑，得到殘餘物，將其在矽膠(25%乙酸乙酯/己烷)上純化，得到標題化合物(21.35g，90%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ：1.2(br.s.,3H)1.3(br.s.,3H)2.7-3.2(m,3H)3.5-3.75(m,1H)3.9-4.25(m,6H)6.2(s,1H)7.9(s,1H)。C16H18Cl2N2O4 MS(ES)MH+：373。
以下3種中間物係使用類似於關於中間物42之合成所述的方法由指定起始物質製備。
中間物53 (S)-3-(6-((2R,6R)-2,6-二甲基(N-嗎啉基))-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氯苯并[d]異噁唑-3-基)-5-(甲氧基甲基)噁唑啶-2-酮
起始物質：(S)-5-(甲氧基甲基)噁唑啶-2-酮(購自Sanyo Co.,LTD)及中間物52。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ：1.0-1.3(m,3H),1.3-1.6(m,3H),2.8(d,1H),2.9(s,1H),3.0(s,1H),3.05(d,1H),3.2(d,1H)3.4-3.5(m,3H),3.7(qd,2H),3.8-4.0(m,1H),4.1-4.35(m,6H),4.9(ddd,1H),6.35(s,1H),8.7(s,1H)。C21H26ClN3O7 MS(ES)MH+：468。
中間物54 (R)-3-(6-((2R,6R)-2,6-二甲基(N-嗎啉基))-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟苯并[d]異噁唑-3-基)-5-(甲氧基甲基)噁唑啶-2-酮
起始物質：(R)-5-(甲氧基甲基)噁唑啶-2-酮(購自Sanyo Co.,LTD)及中間物52。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ：1.2(m,3H),1.45(m,3H)2.8(d,1H),3.1(d,1H),3.2-3.4(m,2H),3.4-3.5(m,3H),3.7(qd,2H),3.85(d,2H),3.9-4.3(m,6H),4.8-5.0(m,1H)6.35(s,1H)8.7(s,1H)。C21H26FN3O7 MS(ES)MH+：468。
中間物55 (R)-3-(7-氯-6-((2R,6R)-2,6-二甲基(N-嗎啉基))-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)苯并[d]異噁唑-3-基)-5-甲基噁唑啶-2-酮
起始物質：(R)-5-甲基噁唑啶-2-酮(根據Chouhan,G.；Alper,H.J.Org.Chem.(2009),74(16),6181-6189中所述之程序合成)及中間物52。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ：1.1(s,3H)1.3(s,3H)1.5(d,3H)2.7-3.2(m,3H)3.5-4.3(m,9H)4.9-5.2(m,1H)6.2(s,1H)8.6(s,1H)。C20H24ClN3O6 MS(ES)MH+：438。
中間物56及57 (4S,5R)-3-[6-[(2R,6R)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基]-4,5-二甲基-噁唑啶-2-酮及(4R,5S)-3-[6-[(2R,6R)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟-1,2-苯 并噁唑-3-基]-4,5-二甲基-噁唑啶-2-酮
在室溫下，將NaH於10mL二甲基甲醯胺中之懸浮液緩慢添加至4,5-二甲基噁唑啶-2-酮(2.7g，18.8mmol，根據Chouchan,Gagan；C.J.O.C.,2009,74，第6181頁中所述之程序合成)於50mL二甲基甲醯胺中之溶液中。攪拌10分鐘後，添加中間物11(6.7g，18.8mmol)且在微波中在100℃下加熱混合物1小時。冷卻所得混合物，且傾入冰冷的NH4Cl水溶液中且用乙酸乙酯萃取。用水、鹽水洗滌有機層且乾燥(Na2SO4)。濃縮後，在矽膠管柱(用0-5%甲醇/CHCl3溶離)上純化殘餘物，得到呈非對映異構體混合物形式之固體。使用Chiralpak IC(250×4.6mm)管柱(己烷：甲醇：乙醇(70：15：15)1.0ml/min)藉由對掌性HPLC分離非對映異構體，得到2種組分：作為第一溶離異構體之中間物56及作為第二溶離異構體之中間物57。
中間物56為第一溶離異構體。產量：840mg(10%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ：1.2(d,6H),1.3(d,3H),1.4(d,3H),2.9(s,2H),3.2(d,2H),3.9-4.2(m,6H),4.7(s,1H),5.1(s,1H),6.2(s,1H),8.3(s,1H)。C21H26ClN3O6 MS(ES)MH+：436。
中間物57為第二溶離異構體。產量：920mg(11%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ：1.2(d,6H),1.3(d,3H),1.4(d,3H),2.9(dd,2H),3.2(d,2H),3.9-4.2(m,6H),4.5-4.9(m,1H),4.9-5.2(m,1H),6.2(s,1H),8.3(s,1H)。C21H26ClN3O6 MS(ES)MH+：436。
中間物58 (S)-2-(5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-6,7-二氟苯并[d]異噁唑-3-基胺基)戊-4-烯-1-醇
使用關於中間物17之合成所述的方法由中間物16及(S)-2-胺基戊-4-烯-1-醇製備中間物58。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ：1.6(br.s,1H),2.5(t,2H),3.7-4.0(m,3H),4.0-4.35(m,4H),4.5(d,1H),5.0-5.3(m,2H),5.7-6.0(m,1H),6.1(s,1H),7.5(dd,1H)。C15H16F2N2O4 MS(ES)MH+：327。
中間物59 (S)-3-(5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-6,7-二氟苯并[d]異噁唑-3-基)-4-烯丙基噁唑啶-2-酮
使用關於中間物18之合成所述的方法由中間物58製備中間物59。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ：2.5-2.7(m,1H),2.7-2.9(m,1H),4.0-4.3(m,4H),4.4(dd,1H),4.6(t,1H),4.7-4.9(m,1H),5.1-5.3(m,2H),5.6-5.9(m,1H),6.1(s,1H),8.4(dd,1H)。C16H14F2N2O5 MS(ES)MH+：353。
中間物60 (S)-3-(4-烯丙基-2-側氧基噁唑啶-3-基)-6,7-二氟苯并[d]異噁唑-5-甲醛
使用關於中間物19之合成所述的方法由中間物59製備中間物60。C14H10F2N2O4 MS(ES)MH+：309。
中間物61 3-((S)-4-烯丙基-2-側氧基噁唑啶-3-基)-6-((2R,6R)-2,6-二甲基(N-嗎啉基))-7-氟苯并[d]異噁唑-5-甲醛
使用關於中間物20之合成所述的方法由中間物60製備中間物61。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ：1.2-1.4(m,6H),2.5-2.7(m,1H),2.7-2.9(m,1H),2.9-3.1(m,2H),3.4(dt,2H),3.9-4.3(m,2H),4.3-4.5(m,1H),4.5-4.8(m,2H),5.0-5.4(m,2H),5.5-5.9(m,1H),8.7(s,1H),10.4(s,1H)。C20H22FN3O5 MS(ES)MH+：404。
中間物62 2-(5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-6,7-二氟苯并[d]異噁唑-3-基胺基)-2-(四氫-2H-吡喃-4-基)乙醇
使用關於中間物17之合成所述的方法由中間物16及4-(四氫-2H-哌喃-4-基)噁唑啶-2-酮(購自Pharmacore,Inc.)製備中間物62。 C17H20F2N2O5 MS(ES)MH+：371。
中間物63 3-(5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-6,7-二氟苯并[d]異噁唑-3-基)-4-(四氫-2H-哌喃-4-基)噁唑啶-2-酮
使用關於中間物18之合成所述的方法由中間物62製備中間物63。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ：0.7-1.0(m,2H),1.4-1.6(m,5H),2.6(d,1H),3.15-3.5(m,2H),3.9-4.2(m,6H),4.35-4.7(m,3H),5.1-5.5(m,2H),6.1(s,1H),8.4(dd,1H)。C18H18F2N2O6 MS(ES)MH+：397。
中間物64 6,7-二氟-3-(2-側氧基-4-(四氫-2H-哌喃-4-基)噁唑啶-3-基)苯并[d]異噁唑-5-甲醛
使用關於中間物19之合成所述的方法由中間物63製備中間物64。C16H14F2N2O5 MS(ES)MH+：353。
中間物65 6-((2R,6R)-2,6-二甲基(N-嗎啉基))-7-氟-3-((2-側氧基-4-(四氫-2H-哌喃-4-基)-2-噁唑啶-3-基)苯并[d]異噁唑-5-甲醛
使用關於中間物20之合成所述的方法由中間物64製備中間物65。C22H26FN3O6 MS(ES)MH+：448。
中間物66 (S)-4-(3-羥丙基)噁唑啶-2-酮
將NaH(0.365g，9.12mmol，60%分散液)逐份添加至(S)-1,5-二羥基戊-2-基胺基甲酸第三丁酯(1g，4.56mmol)溶解於10mL四氫呋喃中之冰浴冷卻混合物中。將混合物升溫至60℃維持2.5小時。冷卻至室溫後，溶液用10% HCl酸化且濃縮。用甲醇稀釋殘餘物且濾去任何不溶性物質。濃縮濾液，得到粗噁唑啶酮且不經任何進一步純化即用於下一步驟。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ：1.1-1.2(m,3H)3.4(d,2H)3.5(q,2H)3.8-4.0(m,1H)4.0-4.1(m,1H)4.2-4.4(m,1H)4.6-4.7(m,2H)7.7(br.s,1H)。
中間物67 (S)-4-(3-(第三丁基二苯基矽烷基氧基)丙基)噁唑啶-2-酮
使用類似於中間物41之合成的方法由中間物66製備中間物67。 1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ：1.0(s,9H)1.45-1.7(m,4H)3.6-3.8(m,3H)3.9(dd,1H)4.3(t,1H)7.4-7.5(m,6H)7.6-7.7(m,4H)7.7(s,1H)。
中間物68 (S)-4-(3-(第三丁基二苯基矽烷基氧基)丙基)-3-(6-((2R,6R)-2,6-二甲基(N-嗎啉基))-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟苯并[d]異噁唑-3-基)噁唑啶 -2-酮
使用類似於關於中間物42之合成所述的方法由中間物67及中間物11製備中間物68。C38H46FN3O7Si MS(ES)MH+：704。
中間物69 (S)-3-(6-((2R,6R)-2,6-二甲基(N-嗎啉基))-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟苯并[d]異噁唑-3-基)-4-(3-羥丙基)噁唑啶-2-酮
使用關於中間物43之合成所述的方法由中間物68製備中間物69。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ：1.2(d,5H)1.3-1.5(m,2H)1.7-2.0(m,2H)2.9(dd,2H)3.2-3.4(m.4H)3.95-4.1(m,6H)4.3-4.5(m,2H)4.6-4.8(m,2H)6.2(s,1H)8.25(s,1H)。C22H28FN3O7 MS(ES)MH+：466。
中間物70 (S)-3-(6-((2R,6R)-2,6-二甲基(N-嗎啉基))-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟苯并[d]異噁唑-3-基)-4-(3-氟丙基)噁唑啶-2-酮
將三氟化雙(2-甲氧基乙基)胺基-硫(0.149ml，50%於四氫呋喃中，0.40mmol)之溶液添加至中間物69(125mg，0.27mmol)於10mL CH2Cl2中之冰浴冷卻溶液中。將溶液在攪拌下升溫至室溫維持18小時。用NaHCO3水溶液淬滅後，用CH2Cl2萃取混合物。自有機萃取物中移除溶劑，且將殘餘物在矽膠(50%乙酸乙酯/己烷)上層析，得到83mg(66%產率)標題化合物。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ：1.2(d,6H)1.5-2.1(m,4H)2.9(dd,2H)3.2-3.3(m,2H)3.9-4.1(m,6H)4.3-4.6(m,3H)4.6-4.8(m,2H)6.2(s,1H)8.25(s,1H)。C22H27F2N3O6 MS(ES)MH+：468。
中間物71 N-(1,4-二羥基丁-2-基)-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-2,3,4-三氟-N'-羥基苯甲脒
將中間物16(2.07g，7.34mmol)及(S)-2-胺基丁-1,4-二醇(1.3g，9.18mmol)於50mL二甲基甲醯胺中攪拌，同時用冰水浴冷卻。歷時約10分鐘緩慢添加三乙胺(7.68mL，55.09mmol)，且使反應物在攪拌下升溫至室溫維持18小時。移除溶劑，且將殘餘物溶解於4mL水及5mL乙酸乙酯中。將稠溶液用乙酸乙酯溶離經由矽膠管(10mL容量)過濾。濃縮溶離液，得到3.45g(100%產率)。1H NMR(300MHz, DMSO-d6)δ：1.4-1.7(m,2H)3.3(t,2H)3.3-3.5(m,3H)3.9-4.1(m,6H)4.3(t,1H)4.6(t,1H)5.7(d,1H)5.9-6.1(m,1H)7.3(td,1H)9.9(s,1H)。C14H17F3N2O5 MS(ES)MH+：351。
中間物72 (S)-2-(5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-6,7-二氟苯并[d]異噁唑-3-基胺基)丁-1,4-二醇
將中間物71(3.2g，9.14mmol)與CsCO3(5.95g，18.27mmol)之混合物溶於二甲基甲醯胺(50mL)中，在室溫下攪拌隔夜。自固體鹽中傾析出溶液且過濾。將固體用乙醚洗滌3次且過濾。將合併之濾液濃縮且將殘餘物分配於水與乙酸乙酯之間。分離乙酸乙酯且將水層用乙酸乙酯萃取3次。將有機層用飽和NaCl水溶液洗滌3次，經MgSO4乾燥且濃縮，得到油狀物。將油狀物使用CH2Cl2至10% CH2Cl2/乙酸乙酯之梯度在矽膠管柱上純化，得到標題化合物。產量1.0g,33%。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ：1.6-1.9(m,2H)3.4-3.6(m,4H)3.7(td,1H)3.9-4.2(m,4H)4.4(t,1H)4.6-4.8(m,1H)5.7-5.8(m,1H)6.1(s,1H)7.05(d,1H)8.0(dd,1H)。C14H16F2N2O5 MS(ES)MH+：331。
中間物73 (S)-6,7-二氟-3-(4-(2-羥乙基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)苯并[d]異噁唑-5-甲醛
將中間物72(220mg，0.67mmol)及羰基二咪唑(412mg，2.54mmol)溶解於二甲基甲醯胺(20mL)中。添加二甲基胺基吡啶(31mg，0.25mmol)且在60℃下攪拌反應物2小時。冷卻至室溫後，添加5mL 1N HCl水溶液且加熱反應混合物至60℃維持4小時。接著，添加2mL 6N HCl，且在60℃下攪拌反應混合物2小時。濃縮反應混合物且將殘餘物用乙酸乙酯萃取3次。用鹽水洗滌有機層，經MgSO4乾燥且濃縮，得到油狀物。將殘餘物使用己烷至乙酸乙酯之梯度在矽膠管柱上純化，得到100mg(48%產率)標題化合物。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ：1.9(m,1H),2.2(m,1H)3.5(q,2H),4.5-4.6(m,1H),4.6-4.7(m,2H),4.7-4.8(m,2H),8.7(dd,1H),10.2(s,1H)。C13H10F2N2O5 MS(ES)MH+：313。
中間物74 6-((2R,6R)-2,6-二甲基(N-嗎啉基))-7-氟-3-((S)-4-(2-羥乙基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)苯并[d]異噁唑-5-甲醛
將中間物73(100mg，0.32mmol)、二異丙基乙胺(225μL，1.29mmol)及(2R,6R)-2,6-二甲基嗎啉(44μL，0.35mmol)於5mL乙腈中之溶液在80℃下加熱18小時。用水稀釋反應混合物且用乙酸乙酯萃取3次。將有機層用鹽水洗滌兩次，經MgSO4乾燥且濃縮，得到油狀物。將殘餘物使用己烷至乙酸乙酯之梯度在矽膠管柱上純化，得到標題化合物(60mg，0.147mmol，46.0%產率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ：1.3-1.4(m,6H),1.9-2.1(m,1H),2.3-2.5(m,1H),3.0(ddd,2H),3.4(dt,2H),3.7-3.9(m,2H),4.2-4.3(m,2H),4.5-4.5(m,1H),4.7-4.9(m, 2H),8.7(d,1H),10.4(s,1H)。C19H22FN3O6 MS(ES)MH+：408。
中間物75 (S)-5-((第三丁基二苯基矽烷基氧基)甲基)-3-(7-氯-6-((2R,6R)-2,6-二甲基(N-嗎啉基))-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)苯并[d]異噁唑-3-基)噁唑啶-2-酮
使用關於中間物32之合成所述的方法由中間物41及52製備中間物75。C36H42ClN3O7Si MS(ES)MH+：693。
中間物76 (S)-3-(7-氯-6-((2R,6R)-2,6-二甲基(N-嗎啉基))-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)苯并[d]異噁唑-3-基)-5-(羥甲基)噁唑啶-2-酮
使用關於中間物43之合成所述的方法由中間物75製備中間物76。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ：1.1(br.s,3H)1.3(br.s,3H)2.7-2.9(m,1H)3.0-3.2(m,2H)3.6-3.8(m,3H)3.9-4.2(m,8H)4.8-5.0(m,1H)5.3(t,1H)6.2(s,1H)8.6(s,1H)。C20H24ClN3O7 MS(ES)MH+：454。
中間物77 (S)-3-(7-氯-6-((2R,6R)-2,6-二甲基(N-嗎啉基))-5-(1,3-二氧雜環戊-2- 基)苯并[d]異噁唑-3-基)-5-(氟甲基)噁唑啶-2-酮
使用類似於關於中間物70之合成所述的方法由中間物76製備中間物77。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ：1.1(br s,3H)1.3(br s,3H)2.65-2.9(m,1H)2.9-3.2(m,2H)3.5-3.7(m,1H)3.8-4.2(m,7H)4.2-4.35(m,1H)4.6-4.9(m,2H)5.05-5.3(m,1H)6.2(s,1H)8.6(s,1H)。C20H23ClFN3O6 MS(ES)MH+：456。
中間物78 (S)-4-(3-(第三丁基二苯基矽烷基氧基)丙基)-3-(7-氯-6-((2R,6R)-2,6-二甲基(N-嗎啉基))-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)苯并[d]異噁唑-3-基)噁唑啶-2-酮
使用類似於關於中間物42之合成所述的方法由中間物67及中間物52製備中間物78。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ：0.9(s,9H)1.1(br.s.,3H)1.3(br.s.,3H)1.4-1.65(m,2H)1.85-2.0(m,2H)2.7-3.1(m,3H)3.5-3.7(m,3H)3.95-4.2(m,6H)4.3-4.4(m,1H)4.6-4.8(m,2H)6.2(s,1H)7.3-7.5(m,6H)7.5-7.6(m,4H)8.4(s,1H)。C38H46ClN3O7Si MS(ES)MH+：720。
中間物79 (S)-3-(7-氯-6-((2R,6R)-2,6-二甲基(N-嗎啉基))-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)苯并[d]異噁唑-3-基)-4-(3-羥丙基)噁唑啶-2-酮
使用關於中間物43之合成所述的方法由中間物78製備中間物79。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ：1.1(br.s,3H)1.25-1.5(m,5H)1.7-2.0(m,2H)2.7-2.9(m,1H)3.0-3.2(m,2H)3.3-3.45(m,2H)3.5-3.7(m,1H)3.9-4.15(m,6H)4.3-4.5(m,2H)4.6-4.8(m,2H)6.2(s,1H)8.4(s,1H)。C22H28ClN3O7 MS(ES)MH+：482。
中間物80 (S)-3-(7-氯-6-((2R,6R)-2,6-二甲基(N-嗎啉基))-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)苯并[d]異噁唑-3-基)-4-(3-氟丙基)噁唑啶-2-酮
使用關於中間物70之合成所述的方法由中間物79製備中間物80。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ：1.1(br.s,3H)1.3(br.s,3H)1.5-2.0(m,4H)2.7-2.9(m,1H)3.0-3.1(m,2H)3.5-3.7(m,1H)3.9-4.15(m,6H)4.3-4.6(m,3H)4.65-4.8(m,2H)6.2(s,1H)8.4(s,1H)。C22H27ClFN3O6 MS(ES)MH+：484。
中間物81 (S)-3-(6-((2R,6R)-2,6-二甲基(N-嗎啉基))-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7- 氟苯并[d]異噁唑-3-基)-5-(甲氧基甲基)噁唑啶-2-酮
使用關於中間物12所述的方法由中間物11及(S)-5-(甲氧基甲基)噁唑啶-2-酮(購自Daisco Co.，LTD)製備中間物81。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6)δ：1.2(d,6H),2.9(dd,2H),3.2-3.3(m,2H),3.3(s,3H),3.6-4.3(m,9H),4.9-5.2(m,1H),6.2(s,1H),8.4(s,1H)。C21H26FN3O7 MS(ES)MH+：452。
中間物82 (R)-3-(6-((2R,6R)-2,6-二甲基(N-嗎啉基))-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟苯并[d]異噁唑-3-基)-5-(甲氧基甲基)噁唑啶-2-酮
使用關於中間物12之合成所述的方法由(R)-5-(甲氧基甲基)噁唑啶-2-酮(購自Daisco Co.，LTD)及中間物11製備中間物82。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6)δ：1.2(d,6H)2.9(dd,4.8Hz,2H)3.1-3.3(m,2H)3.3(s,3H)3.6-4.3(m,9H)4.9-5.1(m,1H)6.2(s,1H)8.4(s,1H)。C21H26FN3O7 MS(ES)MH+：452。
中間物83 (5R)-5-(羥甲基)-1,3-噁唑啶-2-酮
向3-胺基-1,2-丙二醇(5.07g，55.7mmol)於水(60mL)中之經攪拌溶液中依次逐份添加碳酸氫鈉(20.70g，195.3mmol)及三光氣(4.70g，15.8mmol)且在室溫下攪拌混合物16小時。將反應混合物小心地用1.5N鹽酸中和且真空移除水，且將殘餘物溶解於乙醇(250mL)中且經由矽藻土過濾。用乙醇(250mL)洗滌殘餘物且真空移除濾液中之溶劑。將由此獲得之固體使用甲醇/乙酸乙酯之梯度藉由矽膠管柱層析加以純化。產量：3.30(51%)1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ：3.18-3.30(m,1H),3.45-3.56(m,3H),4.47-4.55(m,1H),4.05(t,1H),7.39(s,1H)。
中間物84 (5R)-5-[(四氫-2H-哌喃-2-基氧基)甲基]-1,3-噁唑啶-2-酮
向中間物83(5.0g，42.7mmol)於二氯甲烷(50mL)中之經攪拌溶液中添加對甲苯磺酸吡錠(1.07g，4.27mmol)及3,4-二氫哌喃(5.84mL，64.1mmol)且在室溫下攪拌混合物16小時。用鹽水溶液(25mL)淬滅反應混合物且用二氯甲烷(3×25mL)萃取。將合併之有機層經硫酸鈉乾燥且真空移除溶劑。將所獲得之粗產物使用50%乙酸乙酯/己烷藉由矽膠急驟管柱層析加以純化。產量：5.0g(58%)1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )：δ 1.45-1.49(m,4H),1.57-1.73(m,2H),3.12-3.28(m,1H),3.45-3.55(m,3H),3.67-3.75(m,2H),4.62-4.63(m,1H),4.70-4.72(m,1H),7.50(s,1H)。C9H15FNO4 MS(ELSD)MH+：202.2。
中間物85 (5R)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-5-[(四氫-2H-哌喃-2-基氧基)甲基]-1,3-噁唑啶- 2-酮
在0℃下，歷時10分鐘之時間向氫化鈉(0.61g，25.5mmol)於二甲基甲醯胺(10mL)中之經攪拌溶液中緩慢添加中間物84(2.57g，12.7mmol)於二甲基甲醯胺(20mL)中之溶液。在室溫下攪拌混合物30分鐘且在相同溫度下添加中間物11(4.55g，12.7mmol)於二甲基甲醯胺(20mL)中之溶液且在60℃下加熱混合物2小時。用飽和氯化銨溶液(10mL)淬滅反應，用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。將合併之有機層經無水硫酸鈉乾燥且真空移除溶劑。使用乙酸乙酯/己烷之梯度藉由矽膠管柱層析純化粗產物。產量：2.0g(30%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：1.16(d,6H),1.39-1.48(m,5H),2.85-2.90(m,2H),3.18-3.21(m,4H),3.58-3.83(m,2H),3.93-3.99(m,2H),4.04-4.07(m,5H),4.46-4.58(m,2H),4.67-4.76(m,2H),6.15(s,1H),8.25(d,1H)。C25H32FN3O8 MS(ES)MH+：522.2。
中間物86 (5R)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-5-(羥甲基)-1,3-噁唑啶-2-酮
向中間物85(2.6g，4.99mmol)於甲苯(20mL)中之經攪拌溶液中依次添加乙二醇(2.0mL)及對甲苯磺酸吡錠(0.23g，0.99mmol)且在110℃下加熱混合物1.5小時。用飽和碳酸氫鈉溶液(10mL)淬滅反應混合物且用乙酸乙酯(3×25mL)萃取。用鹽水洗滌有機層，經硫酸鈉乾燥且真空移除溶劑。使用30%乙酸乙酯/己烷藉由急驟管柱矽膠層析純化粗產物。產量：1.40g(66%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：1.20(d,6H),2.88-2.92(m,2H),3.21-3.23(m,2H),3.61-3.65(m,1H),3.72-3.77(m,1H),3.93-4.01(m,3H),4.04-4.10(m,4H),4.19(t,1H),4.88-4.92(m,1H),5.30(t,1H),6.18(s,1H),8.45(s,1H)。C20H24FN3O7 MS(ES)MH+：438.4。
中間物87 (5R)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-5-(氟甲基)-1,3-噁唑啶-2-酮
在-78℃下，向中間物86(0.10g，0.21mmol)於四氫呋喃(3mL)中之經攪拌溶液中添加三氟化二乙胺基硫(0.17g，1.06mmol)且在相同溫度下再攪拌混合物1小時且接著在室溫下攪拌2小時。添加甲醇(1mL)至反應混合物中，且真空移除揮發物。將殘餘物溶解於乙酸乙酯(15mL)中且用飽和碳酸氫鈉(5mL)、水(10mL)且最後用鹽水溶液洗滌。經硫酸鈉乾燥有機層且真空移除溶劑。所獲得之固體足夠純且其不經進一步純化即用於下一步驟。產量：0.05g(55%)。C20H23F2N3O6 MS(ES)MH+：440.4。
中間物88 (4S)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-4-乙烯基-1,3-噁唑啶-2-酮
在0℃下，歷時10分鐘之時間向氫化鈉(0.71g，17.6mmol)於二甲基甲醯胺(10mL)中之經攪拌懸浮液中緩慢添加(4S)-4-乙烯基-1,3-噁唑啶-2-酮(根據文獻程序Chem.Eur.J.2006,12,6607-6620製備，2.0g，及17.6mmol)於二甲基甲醯胺(10mL)中之溶液。在室溫下攪拌混合物30分鐘，且在相同溫度下添加中間物11(3.1g，8.84mmol)於二甲基甲醯胺(10mL)中之溶液。在80℃下加熱此混合物12小時且傾入冰冷卻水中，且用乙酸乙酯(3×25mL)萃取。經無水硫酸鈉乾燥有機層且真空移除溶劑。使用乙酸乙酯/石油醚之梯度藉由矽膠管柱層析純化粗產物。產量：0.70g(19%)。C21H24FN3O6 MS(ES)MH+：434.3。
中間物89 (5R)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-5-[(E)-(羥亞胺基)甲基]-1,3-噁唑啶-2-酮
在-80℃下，在氮氣氛圍下，向二甲亞碸(0.22g，2.74mmol)於二 氯甲烷(3mL)中之溶液中添加乙二醯氯(0.18g，1.37mmol)且在此溫度下攪拌混合物30分鐘。在相同溫度下，向此混合物中逐滴添加中間物86(0.4g，0.92mmol)於二氯甲烷(3mL)中之溶液且在此溫度下攪拌反應混合物3小時，隨後在相同溫度下添加三乙胺(0.46g，4.50mmol)。接著使其達至0℃，此時攪拌1.5小時且向其中添加水(5mL)且用二氯甲烷(5mL)稀釋。萃取有機層且經硫酸鈉乾燥且在室溫下真空移除溶劑。將粗物質(0.36g)溶解於絕對乙醇(10mL)中且依次添加鹽酸羥胺(0.9g，1.20mmol)及乙酸鈉(0.08g，1.20mmol)且將混合物回流3小時。移除揮發物且將殘餘物傾入水中且過濾，且將沈澱物用水(25mL)洗滌且乾燥。使用乙酸乙酯/石油醚之梯度藉由矽膠急驟管柱層析純化粗產物。所獲得之化合物為未定義之E型與Z型異構體混合物(藉由1H NMR測定比率為1：2)。產量：0.13g(35%)1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：1.24(br s,6H),2.89-2.93(m,2H),3.21-3.24(m,2H),3.95-4.00(m,2H),4.02-4.11(m,4H),4.20(t,1H),4.34及4.44(t,1H),5.43及5.82(quin,1H),6.18(s,1H),7.21及7.65(d,1H),8.41-8.42(m,1H),11.58及11.78(s,1H)。C20H23FN4O7 MS(ES)MH+：451.4。
中間物90 (4R)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-2-側氧基-1,3-噁唑啶-4-甲醛
向中間物88(0.4g，0.92mmol)於四氫呋喃(4mL)及水(4mL)中之溶液中添加N-甲基嗎啉-N-氧化物(0.22g，1.84mmol)及四氧化鋨於第三丁醇中之2wt%溶液(0.02g，0.05mmol)且在室溫下攪拌混合物3 小時。向此溶液中添加二乙酸碘苯(0.75g，2.3mmol)且將其攪拌16小時。將反應主體用乙酸乙酯(3×20mL)萃取，將合併之有機層用水(15mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥且真空移除溶劑。固體不經進一步純化即用於下一步驟。產量：0.40g(粗)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：1.24(d,6H),2.89-2.96(m,2H),3.31-3.50(m,2H),4.02-4.17(m,8H),4.56-4.74(m,1H),6.32(s,1H),8.52(s,1H),9.90(s,1H)。C20H22FN3O7 MS(ES)MH+：451.4。
中間物91 (4S)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-4-[(E)-(羥亞胺基)甲基]-1,3-噁唑啶-2-酮
向中間物90(0.4g，0.92mmol)於吡啶(5mL)及甲醇(5mL)中之溶液中添加鹽酸羥胺(0.08g，1.1mmol)且在95℃下加熱混合物30分鐘。真空移除揮發物且將粗產物溶解於乙酸乙酯(30mL)中，用水(2×15mL)及鹽水(15mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥。真空移除溶劑，得到呈E/Z型異構體之40：60混合物形式之標題化合物，將其藉由用己烷(25mL)洗滌而進一步純化。產量：0.37g(90%)1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：1.24(d,6H),2.89-2.91(m,2H),3.19-3.22(m,2H),3.96-4.07(m,6H),4.31及4.52(dd,1H),4.75及4.87(t,1H),5.25-5.29及5.51-5.61(m,1H),6.16及6.17(s,1H),7.12及7.53(d,1H),8.27及8.37(s,1H),11.24及11.55(s,1H)。C20H23FN4O7 MS(ES)MH+：451.4。
中間物92 (4S)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7- 氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-2-側氧基-1,3-噁唑啶-4-甲腈
將中間物91(0.18g，0.4mmol)於三氯乙腈(10mL)中之溶液在95℃下加熱1小時。蒸發揮發物且使用乙酸乙酯及己烷使粗產物再結晶。產量：0.09g(53%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：1.21(d,6H),2.87-2.93(m,2H),3.23(d,2H),3.94-4.04(m,6H),4.85(d,2H),5.64(dd,1H),6.17(s,1H),8.32(s,1H)。C20H23FN4O7 MS(ES)MH+：436.4。
中間物93 (4S)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-4-[(E)-(甲氧亞胺基)甲基]-1,3-噁唑啶-2-酮
使用關於中間物91之合成所述之方法由中間物90及鹽酸O-甲基羥胺製備中間物93。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：1.24(d,6H),2.89-2.91(m,2H),3.19-3.22(m,2H),3.32及3.72(s,3H),3.96-4.09(m,6H),4.31及4.52(dd,1H),4.75及4.87(t,1H),5.25-5.29及5.51-5.61(m,1H),6.17(s,1H),7.25及7.66(d,1H),8.27及8.36(s,1H)。C21H25FN4O7 MS(ES)MH+：465.4。
中間物94 (5R)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7- 氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-5-[(E)-(甲氧亞胺基)甲基]-1,3-噁唑啶-2-酮
使用關於中間物86之合成所述之方法由中間物85及鹽酸O-甲基羥胺製備中間物94。所獲得之化合物呈未定義之E型與Z型異構體混合物(1：2.3)形式。產量：0.13(30%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：1.24(d,6H),2.86-2.91(m,2H),3.19-3.25(m,2H),3.76及3.83(s,3H),3.91-3.99(m,2H),4.00-4.07(m,4H),4.14-4.19(m,1H),4.32-4.44(m,1H),5.25-5.39-5.46及5.75-5.76(m,1H),6.16(s,1H),7.31及7.75(d,1H),8.40(s,1H)。C21H25FN4O7 MS(ES)MH+：465.3。
中間物95 4-甲基苯磺酸[(5R)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-2-側氧基-1,3-噁唑啶-5-基]甲酯
在0℃下，向中間物86(2.7g，6.10mmol)於二氯甲烷(50mL)中之經攪拌溶液中依次添加4-二甲基胺基吡啶(1.50g，12.3mmol)及對甲苯磺醯氯(1.76g，9.20mmol)。在相同溫度下攪拌1小時後，使所得溶液達到室溫，此時將其再攪拌1小時。用檸檬酸溶液(25mL)、水 (25mL)、飽和碳酸氫鈉溶液(25mL)且再次用水(2×25mL)洗滌反應混合物。經硫酸鈉乾燥有機層且真空移除溶劑，獲得粗產物，將其使用乙酸乙酯/己烷之梯度藉由矽膠急驟管柱層析加以純化。產量：3.2g(88%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：1.20(d,6H),2.39(s,3H),2.88-2.92(m,2H),3.19-3.22(m,2H),3.78(dd,1H),3.94-3.99(m,2H),4.04-4.10(m,4H),4.19(t,1H),4.41(d,2H),5.05-5.07(m,1H),6.16(s,1H),7.45(d,2H),7.77(d,2H),8.38(s,1H)。C27H30FN3O9S MS(ES)MH+：592.4。
中間物96 (5R)-5-(疊氮基甲基)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-1,3-噁唑啶-2-酮
向密封管中之中間物95(3.20g，5.40mmol)於二甲基甲醯胺(30mL)中之經攪拌溶液中添加疊氮化鈉(1.0g，16.20mmol)且在90℃下加熱混合物3小時。在達到室溫後，用水(15mL)淬滅反應物，且用乙酸乙酯(2×15mL)萃取。將合併之有機層用水(2×10mL)及鹽水溶液(10mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥且真空移除溶劑，得到粗標題化合物，將其使用乙酸乙酯/石油醚之梯度藉由急驟管柱層析進一步純化，獲得呈無色黏液狀之純產物。產量：2.1g(51%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：1.24(d,6H),2.90(dd,2H),3.22(d,2H),3.82(d,2H),3.88(dd,1H),3.95-4.00(m,2H),4.02-4.10(m,4H),4.25(t,1H),5.08-5.11(m,1H),6.18(s,1H),8.44(s,1H)。C20H23FN6O6 MS(ES)MH+： 463.4。
中間物97 (4R)-2-側氧基-1,3-噁唑啶-4-甲酸甲酯
在0℃下，向D-絲胺酸甲酯鹽酸鹽(25.0g，160.7mmol)於四氫呋喃(150mL)中之懸浮液中添加三光氣(47.68g，160.7mmol)於四氫呋喃(100mL)中之溶液且在80℃下攪拌混合物2小時。真空蒸發揮發物且將殘餘物使用5%甲醇/氯仿進行急驟管柱矽膠層析。產量：17.5g(75%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：3.69(s,3H),4.32-4.33(m,1H),4.32-4.33(m,2H),8.22(s,1H)。
中間物98 (4S)-4-(羥甲基)-1,3-噁唑啶-2-酮
在0℃下，向中間物97(15.0g，103.4mmol)於乙醇(100mL)中之經攪拌溶液中逐份添加硼氫化鈉(1.96g，51.7mmol)且在室溫下攪拌混合物30分鐘。向此混合物中添加1.5N鹽酸且真空移除揮發物。添加甲醇(50mL)至殘餘物中，經由矽藻土過濾且真空移除溶劑。獲得呈無色油狀之標題化合物，其不經純化即用於下一步驟。對掌性HPLC資料顯示91.3：8.7對映異構體之混合物[管柱：Chiralpak AD-H(250×4.6)mm 5μm；移動相：己烷：乙醇(85：15)]。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：3.34-3.35(m,2H),3.70-3.72(m,1H),4.04(dd,1H),2.96(t,1H),4.96(t,1H),7.59(s,1H)。
中間物99 4-甲基苯磺酸[(4R)-2-側氧基-1,3-噁唑啶-4-基]甲酯
在0℃下，向中間物98(11.0g，94.0mmol)於二氯甲烷(250mL)中之經攪拌溶液中添加4-二甲基胺基吡啶(22.94g，188.0mmol)及對甲苯磺醯氯(26.88g，141.0mmol)且將其攪拌1小時，隨後使之達到室溫，且攪拌反應物1小時。用1.5N鹽酸(50mL)、水(50mL)、飽和碳酸氫鈉(50mL)洗滌且最後用鹽水洗滌反應混合物。經硫酸鈉乾燥有機層且真空移除溶劑。接著使用乙酸乙酯/石油醚之梯度藉由矽膠急驟管柱層析純化粗產物。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ：2.49(s,3H),3.91-3.95(m,2H),3.99-4.02(m,2H),4.30(t,1H),7.49(d,2H),7.80(d,2H),7.88(s,1H)。產量：12.0g(47%)。
中間物100 (R)-4-((甲硫基)甲基)噁唑啶-2-酮
向密封管中之中間物99(4.00g，14.76mmol)於甲醇(30mL)中之經攪拌溶液中添加硫甲醇鈉(3.12g，44.28mmol)且在室溫下攪拌混合物2小時。真空移除揮發物且將殘餘物溶解於二氯甲烷(50mL)中且用水(2×25mL)、鹽水(25mL)洗滌有機層且經硫酸鈉乾燥。移除溶劑，得到標題化合物。產量：0.82g(38%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ：2.08(s,3H),2.59(d,2H),3.93-4.03(m,2H),4.37(t,1H),7.78(s,1H)。
中間物101 (R)-3-(6-((2R,6R)-2,6-二甲基(N-嗎啉基))-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟苯并[d]異噁唑-3-基)-4-((甲硫基)甲基)噁唑啶-2-酮
在0℃下，歷時10分鐘之時間向氫化鈉(0.22g，5.5mmol)於二甲基甲醯胺(5mL)中之經攪拌懸浮液中緩慢添加中間物100(0.82g，且5.5mmol)於二甲基甲醯胺(10mL)中之溶液。在室溫下攪拌混合物10分鐘，且在相同溫度下添加中間物11(1.96g，5.50mmol)於二甲基甲醯胺(10mL)中之溶液。在80℃下加熱混合物2小時且傾入冰冷卻之飽和氯化銨溶液(20mL)中且用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。經無水硫酸鈉乾燥有機層且真空移除溶劑。使用乙酸乙酯/石油醚之梯度藉由矽膠管柱層析純化粗產物。產量：0.70g(27%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ：1.22(br s,6H),2.04(s,3H),2.86-2.91(m,2H),3.02-3.04(m,2H),3.19-3.22(m,2H),3.96-4.07(m,6H),4.42(dd,1H),4.73(t,1H),4.84-4.86(m,1H),6.16(s,1H),8.28(s,1H)。C21H26FN3O6S MS(ES)MH+：468.2。
中間物102 (R)-3-(6-((2R,6R)-2,6-二甲基(N-嗎啉基))-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟苯并[d]異噁唑-3-基)-4-((甲磺醯基)甲基)噁唑啶-2-酮
向中間物101(0.20g，0.42mmol)於四氫呋喃(5mL)中之經攪拌溶液中添加間氯過苯甲酸(0.37g，2.14mmol)且在室溫下攪拌混合物 2小時。添加水(2ml)至反應混合物中且用乙酸乙酯(3×5ml)萃取。將合併之有機層用水(2×5mL)、鹽水(5mL)洗滌且經硫酸鈉乾燥。真空移除溶劑，得到呈淺黃色固體之標題化合物。產量：0.20g(94%)。 1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ：1.22(br s,6H),2.88-2.92(m,2H),3.10(s,3H),3.20-3.23(m,2H),3.77-3.83(m,1H),3.88-3.93(m,1H),3.96-4.00(m,2H),4.02-4.10(m,4H),4.68(dd,1H),4.81(t,1H),5.10-5.14(m,1H),6.17(s,1H),8.27(s,1H)。C21H26FN3O8S MS(ES)MH+：500.3。
中間物103 N-(第三丁氧基羰基)-O-(四氫-2H-哌喃-2-基)-L-絲胺酸甲酯
向N-(第三丁氧基羰基)-L-絲胺酸甲酯(根據報導程序製備：Bioorg.Med.Chem. 2007,15,2860-2867，10.0g，64.27mmol)於二氯甲烷(100mL)中之經攪拌溶液中添加對甲苯磺酸(0.24g，1.28mmol)及3,4-二氫-1H-哌喃(8.8mL，96.67mmol)且在室溫下攪拌混合物16小時。將反應混合物用飽和碳酸氫鈉溶液(50mL)淬滅且用二氯甲烷(3×50mL)萃取。將合併之有機層用水(2×50mL)、鹽水溶液(50mL)洗滌且經硫酸鈉乾燥。真空移除溶劑且亦高真空移除過量的3,4-二氫-1H-哌喃。將殘餘物溶解於乙酸乙酯(10mL)中且在將其攪拌10分鐘期間，添加石油醚(100mL)。過濾所獲得之固體且用石油醚(50mL)洗滌。產量：12.0g(78%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：1.33-1.34(m,1H),1.39(s,9H),1.41-1.68(m,6H),3.41-3.45(m,1H),3.55-3.59(m,1H),3.61(s,3H),3.81-3.84(m,1H),4.23-4.28(m,1H),4.58(br s,1H),7.15(d,1H)。
中間物104 [(2R)-1-羥基-3-(四氫-2H-哌喃-2-基氧基)丙-2-基]胺基甲酸第三丁酯
在0℃下，向中間物103(41.0g，135.0mmol)於四氫呋喃(250mL)及甲醇(125mL)中之經攪拌溶液中逐份添加硼氫化鈉(15.32g，405.0mmol)且在室溫下攪拌混合物30分鐘。真空移除揮發物且將殘餘物溶解於乙酸乙酯(250mL)中且用水(2×50mL)及鹽水溶液(50mL)洗滌。經硫酸鈉乾燥有機層且真空移除溶劑。使用矽膠(40%乙酸乙酯/石油醚)藉由急驟管柱層析純化粗產物。產量：35.5g(96%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ：1.41(s,9H),1.44-1.70(m,7H),3.34-3.41(m,3H),3.47-3.69(m,2H),3.70-3.75(m,1H),4.53-4.61(m,2H),6.46(d,1H)。
中間物105 (4S)-4-[(四氫-2H-哌喃-2-基氧基)甲基]-1,3-噁唑啶-2-酮
在0℃下，向中間物104(35.5g，129.0mmol)於四氫呋喃(250mL)中之經攪拌溶液中添加第三丁醇鉀於四氫呋喃(258.0mL，258.0mmol)中之1M溶液且在室溫下攪拌混合物30分鐘。用0℃下之水(50mL)淬滅反應混合物且用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。將合併之有機層用水(50mL)、鹽水溶液(50mL)洗滌且經硫酸鈉乾燥且真空移除溶劑。使用乙酸乙酯/己烷之梯度藉由矽膠急驟管柱層析純化所獲得之粗產物。產量：22.0g(85%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )：δ 1.38-1.51(m,4H),1.59-1.62(m,1H),1.73-1.75(m,1H),3.35-3.37(m,1H),3.45- 3.47(m,1H),3.56-3.59(m,1H),3.72-3.77(m,1H),3.93(h,1H),4.05-4.08(m,1H),4.35(t,1H),4.60(t,1H),7.75(t,1H)。C9H15FNO4 MS(ELSD)MH+：202.2。
中間物106 (4S)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-4-[(四氫-2H-哌喃-2-基氧基)甲基]-1,3-噁唑啶-2-酮
在0℃下，歷時10分鐘之時間向氫化鈉(1.41g，35.3mmol)於二甲基甲醯胺(10mL)中之經攪拌溶液中緩慢添加中間物105(7.1g，35.3mmol)於二甲基甲醯胺(50mL)中之溶液且在室溫下攪拌混合物30分鐘。在相同溫度下添加中間物11(12.59g，35.3mmol)於二甲基甲醯胺(50mL)中之溶液且在60℃下加熱混合物2小時。用飽和氯化銨溶液(10mL)淬滅反應，用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。將合併之有機層經無水硫酸鈉乾燥且真空移除溶劑。使用3%甲醇/氯仿藉由矽膠管柱層析純化粗產物。產量：4.3g(23%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：1.18(d,6H),1.30-1.58(m,5H),2.85-2.90(m,2H),3.18-3.21(m,4H),3.58-3.83(m,2H),3.93-3.99(m,2H),4.04-4.07(m,5H),4.46-4.58(m,2H),4.67-4.76(m,2H),6.15(s,1H),8.25(d,1H)。C25H32FN3O8 MS(ES)MH+：522.2。
中間物107 (4S)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7- 氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-4-(羥甲基)-1,3-噁唑啶-2-酮
向中間物106(3.2g，6.21mmol)於甲苯(30mL)中之經攪拌溶液中依次添加乙二醇(2.0mL)及對甲苯磺酸吡錠(0.59g，23.6mmol)，且在110℃下加熱混合物1.5小時。將反應混合物用飽和碳酸氫鈉溶液(10mL)淬滅且用乙酸乙酯(3×25mL)萃取。用鹽水洗滌有機層，經硫酸鈉乾燥且真空移除溶劑。使用30%乙酸乙酯/己烷藉由急驟管柱矽膠層析純化由此獲得之粗產物。對掌性HPLC資料顯示，其為97%非對映異構體過量(de)[管柱：Chiralpak IC(250×4.6mm)；移動相：己烷：乙醇(80：20)]。產量：1.63g(60%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：1.09(d,6H),2.83(t,2H),3.08(d,2H),3.53-3.57(m,1H),3.73-3.76(m,2H),3.91-3.99(m,3H),4.06-4.09(m,2H),4.48(dd,1H),4.63-4.65(m,2H),5.19(t,1H),6.11(s,1H),8.32(s,1H)。C20H24FN3O7MS(ES)MH+：438.4。
中間物108 4-甲基苯磺酸((R)-3-(6-((2R,6R)-2,6-二甲基(N-嗎啉基))-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟苯并[d]異噁唑-3-基)-2-側氧基噁唑啶-4-基)甲酯
向中間物107(4.5g，10.29mmol)於二氯甲烷(100mL)中之經攪 拌溶液中添加N,N-二甲基胺基吡啶(2.51g，20.59mmol)及對甲苯磺醯氯(2.94g，15.43mmol)且在0℃下攪拌溶液1小時，隨後使其達到室溫，此時再攪拌1小時。用1.5N鹽酸(50mL)、水(2×50mL)及飽和碳酸氫鈉溶液(50mL)洗滌反應混合物，經硫酸鈉乾燥。真空移除溶劑，得到灰白色固體，將其使用乙酸乙酯/己烷之梯度藉由矽膠急驟管柱層析進一步純化。產量：5.0g(82%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ：1.21(d,6H),2.16(s,3H),2.86-2.92(m,2H),3.08(d,2H),3.95-4.10(m,6H),4.35(d,1H),4.44-4.47(m,1H),4.55(d,1H),4.67(t,1H),4.78-4.83(m,1H),6.19(s,1H),7.1(d,2H),7.54(d,2H),8.29(s,1H)。C27H30FN3O9S MS(ES)MH+：592.6。
中間物109 (S)-4-(疊氮基甲基)-3-(6-((2R,6R)-2,6-二甲基(N-嗎啉基))-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟苯并[d]異噁唑-3-基)噁唑啶-2-酮
向密封管中之中間物108(1.5g，2.53mmol)於二甲基甲醯胺(15mL)中之經攪拌溶液中添加疊氮化鈉(0.99g，15.22mmol)且在90℃下加熱混合物2小時。達到室溫後，用水(15mL)淬滅反應，且用乙酸乙酯(2×30mL)萃取。將合併之有機層用水(2×10mL)及鹽水溶液(10mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥且真空移除溶劑，得到粗標題化合物，將其使用乙酸乙酯/石油醚之梯度藉由急驟管柱層析進一步純化，獲得呈無色黏液狀之純產物。產量：0.85g(73%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：1.20(br s,6H),2.91-2.93(m,2H),3.21-3.23(m,2H),3.70(d,2H),3.98-4.15(m,7H),4.71(t,1H),4.80-4.82(m,1H),6.18(s,1H), 8.29(s,1H)。C20H23FN6O6 MS(ES)MH+：463.4。
中間物110 N-[(苯甲氧基)羰基]-O-乙基-L-絲胺酸甲酯
在0℃下，向(S)-氮丙啶-1,2-二甲酸1-苯甲酯2-甲酯(根據文獻程序製備：Org.Biomol.Chem.,2005,3,3357，2.7g，11.4mmol)於二氯甲烷(30mL)中之經攪拌溶液中依次添加醚合三氟化硼(0.01mL，0.11mmol)及絕對乙醇(1.05g，22.9mmol)。在室溫下攪拌反應混合物1小時，其後用飽和碳酸氫鹽溶液(2mL)淬滅溶液，用二氯甲烷(3×25mL)萃取，用水(25mL)、鹽水溶液(25mL)洗滌有機層且經硫酸鈉乾燥。移除溶劑，得到粗產物，將其使用乙酸乙酯/石油醚之梯度藉由矽膠管柱層析加以純化。產量：2.0g(63%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：1.08(t,3H),3.38-3.46(m,2H),3.57-3.63(m,2H),3.70(s,3H),4.26-4.31(m,1H),5.04(s,2H),7.30-7.39(m,5H),7.73(d,1H)。
中間物111 [(2R)-1-乙氧基-3-羥基丙-2-基]胺基甲酸苯甲酯
在0℃下，向中間物110(2.0g，7.10mmol)於四氫呋喃與甲醇之9：1混合物(20mL)中之經攪拌溶液中逐份添加硼氫化鈉(0.54g，14.21mmol)且在室溫下攪拌混合物2小時。用水(5mL)淬滅反應，傾入冰冷卻水(25mL)中，且用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。用水(20mL)、鹽水溶 液(20mL)洗滌有機層且經硫酸鈉乾燥。移除溶劑，得到粗產物，將其使用乙酸乙酯/石油醚之梯度經矽膠管柱層析加以純化。產量：0.7g(35%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：1.07(t,3H),3.35-3.46(m,6H),3.55-3.60(m,1H),4.65(t,1H),5.00(s,2H),7.02(d,1H),7.27-7.35(m,5H)。
中間物112 (4S)-4-(乙氧基甲基)-1,3-噁唑啶-2-酮
在0℃下，向中間物111(1.20g，4.49mmol)於四氫呋喃(50mL)中之經攪拌溶液中添加第三丁醇鉀於四氫呋喃(9.0mL，8.98mmol)中之1M溶液且在室溫下攪拌混合物30分鐘。用0℃下之水(25mL)淬滅反應混合物且用乙酸乙酯(3×25mL)萃取。將合併之有機層用水(20mL)、鹽水溶液(20mL)洗滌且經硫酸鈉乾燥且真空移除溶劑。使用乙酸乙酯/石油醚之梯度藉由矽膠急驟管柱層析純化所得粗產物。產量：0.31g(48%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：1.09(t,3H),3.45(q,2H),3.86(quin,1H),3.99(dd,1H),4.31(t,1H),7.72(br s,1H)。注意：兩個環CH2質子與DMSO-d 6 水峰融合。
中間物113 (4S)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-4-(乙氧基甲基)-1,3-噁唑啶-2-酮
在0℃下，歷時10分鐘之時間向氫化鈉(0.06g，2.19mmol)於二甲基甲醯胺(15mL)中之經攪拌溶液中緩慢添加中間物112(0.32g，2.19mmol)於二甲基甲醯胺(15mL)中之溶液且在室溫下攪拌混合物1小時。在相同溫度下添加中間物11(0.60g，1.68mmol)於二甲基甲醯胺(15mL)中之溶液且在90℃下加熱混合物3小時。用飽和氯化銨溶液(10mL)淬滅反應且用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。將合併之有機層經無水硫酸鈉乾燥且真空移除溶劑。使用乙酸乙酯/石油醚之梯度藉由矽膠管柱層析純化粗產物且獲得呈無色固體之產物。產量：0.20g(25%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：1.00(t,3H),1.12(br s,6H),2.89-2.91(m,2H),3.19-3.26(m,2H),3.37-3.46(m,2H),3.58-3.61(m,1H),3.83-3.88(m,1H),3.93-4.09(m,6H),4.43(dd,1H),4.67-4.70(m,2H),6.16(S,1H),8.27(s,1H)。C22H28FN3O7 MS(ES)MH+：466.5。
中間物114 N-[(苯甲氧基)羰基]-O-(2-甲氧基乙基)-L-絲胺酸甲酯
使用(S)-氮丙啶-1,2-二甲酸1-苯甲酯2-甲酯(2.0g，8.03mmol)及2-甲氧基乙醇(4.2mL，53.15mmol)，依循關於中間物110之製備所述的程序合成中間物114。產量：2.0g(80%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ：3.16(s,3H),3.38-3.41(m,2H),3.42-3.52(m,2H),3.55-3.65(m,4H),4.26-4.29(m,1H),4.47-4.48(m,1H),5.03(s,2H),7.21-7.34(m,5H),7.71(d,1H)。
中間物115 [(2R)-1-羥基-3-(2-甲氧基乙氧基)丙-2-基]胺基甲酸苯甲酯
使用中間物114(2.0g，6.43mmol)，依循關於中間物111之製備所述的程序合成中間物115。產量：1.0g(54%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ：3.23(s,3H),3.40-3.41(m,2H),3.44-3.47(m,2H),3.51-3.54(m,2H),3.58-3.629m,1H),4.47(d,1H),4.66(t,1H),4.99(s,2H),7.03(d,1H),7.19-7.34(m,5H)。
中間物116 [(2R)-1-羥基-3-(2-甲氧基乙氧基)丙-2-基]胺基甲酸苯甲酯
使用中間物115(1.0g，3.50mmol)，依循關於中間物112之製備所述的程序合成中間物116，除了粗產物不經純化即用於下一步驟。產量：0.32g(粗)。
中間物117 (4S)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-4-[(2-甲氧基乙氧基)甲基]-1,3-噁唑啶-2-酮
使用中間物116(0.32g，1.82mmol)及中間物11(0.50g，1.40mmol)，依循關於中間物113之製備所述的程序合成中間物117。使用 甲醇自矽膠管柱溶離出產物混合物。UPLC分析顯示溶離份含有37%產物，此產物不經進一步純化即用於下一步驟。產量：0.15g(37%產物)。C23H30FN3O8 MS(ES)MH+：496.5。
中間物118 5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-2,3,4-三氟-N'-羥基-N-[(2S)-1-羥基丁-3-烯-2-基]苯甲脒
使用類似於關於中間物71之合成所述的方法由中間物16(2.0g，7.1mmol)及(2S)-2-胺基丁-3-烯-1-醇(0.74g，8.54mmol，根據文獻程序Eur.J.Chem.2006,12,6607-6620製備)製備中間物118。產量：1.4g(59%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ：3.36-3.40(m,3H),3.95-4.05(m,4H),4.83-5.00(m,3H),5.87-5.90(m,1H),6.01(s,1H),7.26(t,1H),8.30(s,1H),10.12(s,1H)。C14H15F3N2O4 MS(ES)MH+：333.3。
中間物119 (2S)-2-{[5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-6,7-二氟-1,2-苯并噁唑-3-基]胺基}丁-3-烯-1-醇
使用類似於關於中間物72之合成所述的方法由中間物118(1.4g，4.2mmol)製備中間物119。產量：0.75g(57%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：3.56(t,2H),4.01-4.14(m,5H),4.92(t,1H),5.17 (d,1H),5.29(d,1H),5.90(ddd,1H),6.09(s,1H),7.34(d,1H),8.07(d,1H)。C14H14F2N2O4 MS(ES)MH+：313.3。
中間物120 (4S)-3-[5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-6,7-二氟-1,2-苯并噁唑-3-基]-4-乙烯基-1,3-噁唑啶-2-酮
使用類似於關於中間物73之合成所述的方法由中間物119(0.75，2.4mmol)製備中間物120。產量：0.60g(74%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：4.00-4.08(m,4H),4.33(dd,1H),4.79(t,1H),5.17(q,1H),5.32(d,1H),5.40(d,1H),5.93(ddd,1H),6.10(s,1H),8.23-8.25(m,1H)。產量：0.60g(74%)。C15H12F2N2O5 MS(ES)MH+：339.2。
中間物121 (R)-3-(5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-6,7-二氟苯并[d]異噁唑-3-基)-4-(二氟甲基)噁唑啶-2-酮
向中間物120(0.50g，0.30mmol)於四氫呋喃與水之2：1混合物(20mL)中之經攪拌溶液中添加氧化鋨(IV)(0.2mL，2.5%第三丁醇溶液)。在室溫下攪拌所得混合物10分鐘。歷時1小時之時間向此混合物中逐份添加偏高碘酸鈉(3.16g，14.75mmol)且再攪拌反應混合物16小時。將反應混合物傾入冰水(15mL)中且用二氯甲烷(3×15ml)萃取，用水(15mL)、鹽水洗滌且經硫酸鈉乾燥有機層。在10℃下真空移除溶劑且將所得殘餘物溶解於二氯甲烷(15mL)中。在-10℃下添加 二乙胺基三氟化硫(1mL)且在室溫下攪拌所得混合物6小時，隨後用冰冷卻水(10mL)淬滅。用飽和碳酸氫鈉溶液(5mL)、水(5mL)、鹽水(5mL)洗滌有機層且經硫酸鈉乾燥有機層。真空移除溶劑，得到標題化合物，其不經進一步純化即用於下一步驟。產量：0.25g(47%)。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：3.99-4.08(m,4H),4.69-4.79(m,2H),5.08-5.15(m,1H),6.10(s,1H),6.59(dt,1H),8.28(dd,1H)。19F NMR(376.5MHz,DMSO-d 6 )δ：-130.0(d),132.4(d),-139.9(d),-160.7(d)。 C14H10F4N2O5 MS(ES)MH+：363.3。
中間物122 (R)-3-(4-(二氟甲基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)-6,7-二氟苯并[d]異噁唑-5-甲醛
在0℃下，將一定量之6N鹽酸(2.0mL)添加至中間物121(0.25g，0.69mmol)於1,4-二噁烷(10mL)中之經攪拌溶液中，且在室溫下攪拌混合物8小時。將混合物傾入冰冷卻水(25mL)中且用乙酸乙酯(2×50ml)萃取。將合併之有機層用水(15mL)及鹽水溶液(15mL)洗滌，隨後經Na2SO4乾燥。移除溶劑，得到標題產物。產量：0.20g(91%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ：4.03-4.04(m,1H),4.71-4.81(m,1H),5.11-5.17(m,1H),6.60(t,1H),8.68(d,1H),10.19(s,1H)。C12H6F4N2O4 MS(ES)MH+：319.2。
中間物123 (3-((R)-4-(二氟甲基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)-6-((2R,6R)-2,6-二甲基(N-嗎啉基))-7-氟苯并[d]異噁唑-5-甲醛
將中間物122(0.2g，0.63mmol)、二異丙基乙胺(0.15g，1.2mmol)及(2R,6R)-2,6-二甲基嗎啉(80mg，0.67mmol)於乙腈(5mL)中之經攪拌溶液在密封管中在80℃下加熱16小時。冷卻至室溫後，真空移除揮發物。使用CHCl3/乙酸乙酯之梯度藉由矽膠層析純化粗產物，得到呈淺黃色固體之標題化合物。產量：0.16g(62%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ：1.20(d,6H),3.02-3.05(m,2H),3.38-3.41(m,2H),4.10-4.16(m,2H),4.70-4.77(m,2H),5.11-5.15(m,1H),6.47(dt,1H),8.54(s,1H),10.31(s,1H)。C18H18F3N3O5 MS(ES)MH+：414.4。
中間物124 (S)-N-(1-環丙基-2-羥乙基)-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-2,3,4-三氟-N'-羥基苯甲脒
使用(S)-2-胺基-2-環丙基乙醇(1.38g，13.30mmol)及中間物16(2.50g，8.89mmol)，依循關於中間物118之製備所述之程序合成中間物124。產量：2.2g(72%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ：-0.79--0.89(m,1H),-0.92-0.10(m,1H),0.31(d,2H),0.88-0.90(m,1H),2.15-2.30(m,1H),3.39(t,2H),3.94-4.06(m,4H),4.71(t,1H),5.81(d,1H),6.02(s,1H),7.30(t,1H),9.98(s,1H)。
中間物125 (S)-2-((5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-6,7-二氟苯并[d]異噁唑-3-基)胺基)-2- 環丙基乙醇
使用中間物124(2.20g，6.40mmol)，依循關於中間物119之製備所述之程序合成中間物125。產量：1.80g(87%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.23-0.25(m,1H),0.37-0.45(m,3H),1.01-1.12(m,1H),3.03-3.05(m,1H),3.53-3.56(m,1H),3.64-3.65(m,1H),4.03-4.10(m,4H),4.75(t,1H),6.08(s,1H),7.16(d,1H),8.05(dd,1H)。C15H16F2N2O4 MS(ES)MH+：327.3。
中間物126 (S)-3-(5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-6,7-二氟苯并[d]異噁唑-3-基)-4-環丙基噁唑啶-2-酮
使用中間物125(1.20g，3.67mmol)，依循關於中間物120之製備所述之程序合成中間物126。產量：1.10g(85%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.28-0.31(m,1H),0.42-0.44(m,1H),0.53-0.56(m,2H),1.21-1.23(m,1H),4.01-4.08(m,4H),4.21-4.25(m,1H),4.30-4.33(m,1H),4.70(t,1H),6.10(s,1H),8.21(dd,1H)。C16H14F2N2O5 MS(ES)MH+：353.3。
中間物127 (S)-3-(4-環丙基-2-側氧基噁唑啶-3-基)-6,7-二氟苯并[d]異噁唑-5-甲醛
使用中間物126(1.10g，3.12mmol)，依循關於中間物122之製備所述之程序合成中間物127。產量：0.91g(95%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.30-0.34(m,1H),0.44-0.49(m,1H),0.56-0.62(m,2H),1.21-1.25(m,1H),4.24-4.28(m,1H),4.32-4.36(m,1H),4.72(t,1H),8.64(dd,1H),10.20(s,1H)。C14H10F2N2O4 MS(ES)MH+：309.3。
中間物128 3-((S)-4-環丙基-2-側氧基噁唑啶-3-基)-6-((2R,6R)-2,6-二甲基(N-嗎啉基))-7-氟苯并[d]異噁唑-5-甲醛
使用中間物127，依循關於中間物123之製備所述之程序合成中間物128。產量：1.0g(86%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ：0.30-0.34(m,1H),0.44-0.49(m,1H),0.57-0.60(m,2H),1.20(d,6H),2.99-3.03(m,2H),3.31-3.39(m,2H),4.10-4.15(m,2H),4.19-4.33(m,2H),4.69(t,1H),8.30(s,1H),8.47(s,1H),10.31(s,1H)。C20H22FN3O5 MS(ES)MH+：404.4。
中間物129 5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-2,3,4-三氟-N'-羥基-N-(2-羥基-2-(吡啶-2-基)乙基)苯甲脒
使用2-胺基-1-(吡啶-2-基)乙醇(1.35g，6.40mmol)及中間物16(1.50g，5.33mmol)，依循關於中間物118之製備所述之程序合成中間物129。產量：1.70g(83%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ：3.02-3.09(m,1H),3.19-3.39(m,1H),3.96-4.05(m,4H),4.55(d,1H),5.72(d,1H),6.02(m,2H),7.10(t,1H),7.22(t,1H),7.41(t,1H),7.74(t,1H),8.37(d,1H),9.96(S,1H)。19F NMR(376.5MHz,DMSO-d 6 )δ：-134.3(dd),-138.3(dd),-159.91(d)。C17H16F3N3O4 MS(ES)MH+：384.3。
中間物130 2-((5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-6,7-二氟苯并[d]異噁唑-3-基)胺基)-1-(吡啶-2-基)乙醇
使用中間物129(1.60g，4.17mmol)，依循關於中間物119之製備所述之程序合成中間物130。產量：1.30g(86%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：3.66(dd,1H),4.00-4.09(m,4H),4.92(t,1H),5.75(d,1H),6.08(s,1H),7.28(dd,1H),7.50(t,1H),7.55(d,1H),7.80(t,1H),8.04(d,1H),8.52(d,1H)。注意：一或多個CH質子與DMSO-d 6 峰融合。C17H15F2N3O4 MS(ES)MH+：364.3。
中間物131 3-(5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-6,7-二氟苯并[d]異噁唑-3-基)-5-(吡啶-2-基)噁唑啶-2-酮
使用中間物130(1.20g，3.30mmol)，依循關於中間物120之製備所述之程序合成中間物131。產量：1.20g(93%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ：3.98-4.09(m,4H),4.22-4.35(m,1H),4.58(t,1H),6.01(dd,1H),6.10(s,1H),7.46(dd,1H),7.65(d,1H),7.91(t,1H),8.47(d,1H),8.65(d,1H)。19F NMR(376.5MHz,DMSO-d 6 )δ：-140.4(d),-161.10(d)。C18H13F2N3O5 MS(ES)MH+：390.3。
中間物132 6,7-二氟-3-(2-側氧基-5-(吡啶-2-基)噁唑啶-3-基)苯并[d]異噁唑-5-甲醛
使用中間物131(1.20g，3.09mmol)，依循關於中間物122之製備所述之程序合成中間物132。產量：1.0g(94%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：4.35(dd,1H),4.60(t,1H),6.04(dd,1H),7.45-7.49(m,1H),7.70(d,1H),7.93(t,1H),8.65(d,1H),8.86(d,1H),10.20(s,1H)。19F NMR(376.5MHz,DMSO-d 6 )δ：-143.1(d),-160.4(d)。 C16H9F2N3O4 MS(ES)MH+：346.3。
中間物133 6-((2R,6R)-2,6-二甲基(N-嗎啉基))-7-氟-3-(2-側氧基-5-(吡啶-2-基)噁唑啶-3-基)苯并[d]異噁唑-5-甲醛
使用中間物132(1.0g，2.89mmol)，依循關於中間物123之製備所述之程序合成中間物133。產量：1.0g(78%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：1.21(d,6H),3.00-3.04(m,2H),3.37-3.40(m,2H),4.12-4.15(m,2H),4.33(dd,1H),4.57(t,1H),6.02(dd,1H),7.46-7.48(m,1H),7.66(d,1H),7.91(t,1H),8.65(d,1H),8.71(s,1H),10.30(s,1H)。C22H21FN4O5 MS(ES)MH+：441.4。
中間物134 5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-2,3,4-三氟-N'-羥基-N-(2-羥基-1-(吡啶-2-基)乙基)苯甲脒
使用中間物16(1.0g，3.55mmol)，依循關於中間物118之製備所述之程序合成中間物134。產量：1.05g(78%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ：3.59(t,2H),3.93-4.08(s,5H),4.94(t,1H),5.96(s,1H), 6.41(d,1H),7.09(t,1H),7.20-7.25(m,2H),7.72(t,1H),8.43(d,1H),10.20(s,1H)。C17H16F3N3O4 MS(ES)MH+：384.3。
中間物135 2-((5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-6,7-二氟苯并[d]異噁唑-3-基)胺基)-2-(吡啶-2-基)乙醇
使用中間物134(1.60g，2.60mmol)，依循關於中間物119之製備所述之程序合成中間物135。產量：0.78g(73%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：3.79-3.85(m,2H),4.03-4.14(m,4H),4.74(q,1H),5.02(t,1H),6.10(s,1H),7.26(dd,1H),7.41(d,1H),7.72(t,1H),7.74(dd,1H),8.17(d,1H),8.54(d,1H)。C17H15F2N3O4 MS(ES)MH+：364.3。
中間物136 3-(5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-6,7-二氟苯并[d]異噁唑-3-基)-4-(吡啶-2-基)噁唑啶-2-酮
使用中間物135(1.0g，2.75mmol)，依循關於中間物120之製備所述之程序合成中間物136。產量：0.90g(84%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ：3.99-4.10(m,4H),4.44(dd,1H),4.97(t,1H),5.75(dd,1H),6.09(s,1H),7.34(dd,1H),7.55(d,1H),7.82(t,1H),8.41(d,1H),8.51(d,1H)。C18H13F2N3O5 MS(ES)MH+：390.3。
中間物137 6,7-二氟-3-(2-側氧基-4-(吡啶-2-基)噁唑啶-3-基)苯并[d]異噁唑-5-甲醛
使用中間物136(0.90g，2.31mmol)，依循關於中間物122之製備所述之程序合成中間物137。產量：0.75g(94%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：4.49(dd,1H),5.01(t,1H),5.79(dd,1H),7.35-7.38(m,1H),7.59(d,1H),7.85(dt,1H),8.54(d,1H),8.83(d,1H),10.20(s,1H)。C16H9F2N3O4 MS(ES)MH+：346.3。
中間物138 6-((2R,6R)-2,6-二甲基(N-嗎啉基))-7-氟-3-(2-側氧基-4-(吡啶-2-基)噁唑啶-3-基)苯并[d]異噁唑-5-甲醛
使用中間物137(0.75g，2.17mmol)，依循關於中間物123之製備所述之程序合成中間物138。產量：0.85g(89%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ：1.20(d,6H),2.96-3.00(m,2H),3.31-3.36(m,2H),4.00-4.13(m,2H),4.45(dd,1H),4.98(t,1H),5.75(dd,1H),7.33(t,1H),7.54(d,1H),7.82(t,1H),8.51(d,1H),8.65(d,1H),10.30(s,1H)。C22H21FN4O5 MS(ES)MH+：441.4。
中間物139 5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-2,3,4-三氟-N'-羥基-N-(2-羥基-1-(吡啶-4-基)乙基)苯甲脒
使用中間物16(1.08g，3.84mmol)，依循關於中間物118之製備所述之程序合成中間物139。產量：0.91g(62%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ：3.55-3.68(m,2H),3.82-3.92(m,4H),3.98-4.08(m,1H),5.05(t,1H),5.93(s,1H),6.51(d,1H),6.92-6.96(m,1H),7.11(d,2H),8.41(d,2H),10.30(s,1H)。C17H16F3N3O4 MS(ES)MH+：384.3。
中間物140 2-((5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-6,7-二氟苯并[d]異噁唑-3-基)胺基)-2-(吡啶-4-基)乙醇
使用中間物139(0.90g，2.34mmol)，依循關於中間物119之製備所述之程序合成中間物140。產量：0.60g(71%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ：3.73(t,2H),4.00-4.12(m,4H),4.66(q,1H),5.12(t,1H),6.08(s,1H),7.39(d,2H),7.89(d,1H),8.11(t,1H),8.49(d,2H)。C17H15F2N3O4 MS(ES)MH+：364.3。
中間物141 3-(5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-6,7-二氟苯并[d]異噁唑-3-基)-4-(吡啶-4-基)噁唑啶-2-酮
使用中間物140(0.60g，1.65mmol)，依循關於中間物120之製備所述之程序合成中間物141。產量：0.61g(95%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：4.01-4.10(m,4H),4.36(dd,1H),5.02(t,1H),5.75(dd,1H),6.10(s,1H),7.49(dd,2H),8.38(dd,1H),8.55(dd,2H)。C18H13F2N3O5 MS(ES)MH+：390.3。
中間物142 6,7-二氟-3-(2-側氧基-4-(吡啶-4-基)噁唑啶-3-基)苯并[d]異噁唑-5-甲醛
使用中間物141(0.60g，1.54mmol)，依循關於中間物122 TQ-100-14-V之製備所述之程序合成中間物142。產量：0.47g(88%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：4.40(dd,1H),5.05(t,1H),5.77(dd,1H),7.51(d,2H),8.57(d,2H),8.78(d,1H),10.22(s,1H)。C16H9F2N3O4 MS(ES)MH+：346.3。
中間物143 6-((2R,6R)-2,6-二甲基(N-嗎啉基))-7-氟-3-(2-側氧基-4-(吡啶-4-基)噁唑啶-3-基)苯并[d]異噁唑-5-甲醛
使用中間物142(0.46g，1.33mmol)，依循關於中間物123之製備所述之程序合成中間物143。產量：0.52g(89%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ：1.36(d,6H),2.87-2.99(m,2H),3.31-3.37(m,2H),4.08- 4.12(m,2H),4.36(t,1H),5.01(t,1H),5.74(t,1H),7.46(d,2H),8.54(d,2H),8.62(d,1H),10.31(s,1H)。C22H21FN4O5 MS(ES)MH+：441.4。
中間物144 (2R,3R)-2-胺基-3-甲氧基丁-1-醇
向(2S,3R)-2-胺基-3-甲氧基丁酸甲酯(10.0g，75.19mmol)於四氫呋喃(150mL)中之經攪拌溶液中添加硼氫化鈉(10.28g，270.7mmol)及碘(24.7g，97.77mmol)且歷時16小時之時間將混合物回流。過濾混合物且真空移除揮發物且粗產物不經進一步純化即用於下一步驟。產量：7.0g(78%)。
中間物145
5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-2,3,4-三氟-N'-羥基-N-((2R,3R)-1-羥基-3-甲氧基丁-2-基)苯甲脒
向中間物144(7.0g，58.82mmol)於二甲基甲醯胺(25mL)中之經攪拌溶液中添加三乙胺(11.91g，117.64mmol)且在室溫下攪拌混合物20分鐘。向此溶液中添加中間物16(3.50g，12.43mmol)且在室溫下再攪拌混合物2小時。將混合物傾入冰冷水(50ml)中且用乙酸乙酯(3×50ml)萃取。用水(2×25mL)、鹽水溶液(25mL)洗滌有機層且經硫酸鈉乾燥。移除溶劑，得到粗產物，將其使用乙酸乙酯/石油醚之梯度藉由矽膠急驟管柱層析加以純化。產量：1.8g(40%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：1.02(d,3H),2.72-2.74(m,1H),3.22(s,3H), 3.41-3.43(m,1H),3.98-4.05(m,4H),4.69(t,1H),5.51(d,1H),6.04(s,1H),7.34(t,1H),10.08(s,1H)。注意：NH及OH質子未出現。19F NMR(376.5MHz,DMSO-d 6 )δ：-134.33(m),-138.45(m),-159.75(m)。C15H19F3N2O5 MS(ES)MH+：365.2。
中間物146 (2R,3R)-2-((5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-6,7-二氟苯并[d]異噁唑-3-基)胺基)-3-甲氧基丁-1-醇
向中間物145(1.8g，4.96mmol)於二甲基甲醯胺(20mL)中之經攪拌溶液中添加碳酸銫(3.55g，10.90mmol)且在室溫下攪拌混合物16小時。添加水(10ml)至混合物中且用乙酸乙酯(3×25ml)萃取。用水(2×15mL)、鹽水溶液(15mL)洗滌有機層且經硫酸鈉乾燥。移除溶劑，得到粗產物，將其使用75%乙酸乙酯/石油醚藉由矽膠急驟管柱層析進一步純化。產量：1.30g(76%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：1.12(d,3H),3.30(s,3H),3.51-3.52(m,1H),3.59-3.66(m,3H),4.01-4.10(m,4H),4.74(t,1H),6.07(s,1H),7.12(d,1H),8.16(d,1H)。19F NMR(376.5MHz,DMSO-d 6 )δ：-143.58(d),-162.18(d)。C15H18F2N2O5 MS(ES)MH+：345.2。
中間物147 (R)-3-(5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-6,7-二氟苯并[d]異噁唑-3-基)-4-((R)-1-甲氧基乙基)噁唑啶-2-酮
在0℃下，向中間物146(1.30g，3.78mmol)於乙腈(20mL)中之經攪拌溶液中添加三乙胺(0.76g，7.56mmol)且攪拌混合物15分鐘。在0℃下，向此溶液中添加雙(2,5-二側氧基吡咯啶-1-基)碳酸酯(或)碳酸二丁二醯亞胺酯(1.06g，4.16mmol)且在室溫下攪拌混合物16小時。真空移除揮發物且將殘餘物溶解於乙酸乙酯(25mL)中，用水(10mL)、鹽水溶液(10mL)洗滌且經硫酸鈉乾燥。真空移除溶劑，得到淺黃色固體，將其使用乙酸乙酯/石油醚之梯度在Combi-Flash儀器中純化。產量：0.40g(29%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ：1.03(d,3H),3.32(s,3H),3.96-4.08(m,4H),4.49-4.53(m,1H),4.63(t,1H),4.78-4.83(m,1H),6.08(s,1H),8.27(d,1H)。19F NMR(376.5MHz,DMSO-d 6 )δ：-140.41(d),-161.03(d)。C16H16F2N2O6 MS(ES)MH+：371.3。
中間物148 6,7-二氟-3-((R)-4-((R)-1-甲氧基乙基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)苯并[d]異噁唑-5-甲醛
在0℃下，向中間物147(0.40g，1.08mmol)於1,4-二噁烷(4mL)中之經攪拌溶液中添加6N鹽酸(2mL)，且在室溫下攪拌混合物1小時。將混合物傾入冰冷卻水(25mL)中且用乙酸乙酯(3×25ml)萃取。用水(15mL)、鹽水溶液(15mL)洗滌有機層且經硫酸鈉乾燥。移除溶 劑，得到標題產物。產量：0.35g(99%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ：1.03(d,3H),3.32(s,3H),3.96-4.08(m,4H),4.49-4.53(m,1H),4.63(t,1H),4.78-4.83(m,1H),6.08(s,1H),8.27(d,1H)。19F NMR(376.5MHz,DMSO-d 6 )δ：-140.41(d),-161.03(d)。C14H12F2N2O5 MS(ES)MH+：327.2。
中間物149 6-((2R,6R)-2,6-二甲基(N-嗎啉基))-7-氟-3-((R)-4-((R)-1-甲氧基乙基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)苯并[d]異噁唑-5-甲醛
向中間物148(0.35g，1.07mmol)於乙腈(4mL)中之經攪拌溶液中依次添加二異丙基乙胺(0.21g，1.61mmol)及(2R,6R)-2,6-二甲基嗎啉(0.13g，1.07mmol)且在密封管中在80℃下加熱混合物16小時。將其冷卻至室溫且真空移除揮發物，以獲得粗產物，將其使用乙酸乙酯/石油醚之梯度在Combi-Flash儀器中純化，獲得呈淺黃色固體之標題化合物。產量：0.25g(56%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ：1.02(d,3H),1.20(d,6H),2.97-3.03(m,2H),3.28(s,3H),3.35-3.39(m,2H),3.97-4.01(m,1H),4.10-4.15(m,2H),4.51-4.54(m,1H),4.63(t,1H),4.81-4.84(m,1H),8.54(s,1H),10.29(s,1H)。19F NMR(376.5MHz,DMSO-d 6 )δ：-146.80(s)。C20H24FN3O6 MS(ES)MH+：422.5。
中間物150 ((2R,3S)-1-羥基-3-甲氧基丁-2-基)胺基甲酸苯甲酯
向(2S,3S)-2-(((苯甲氧基)羰基)胺基)-3-甲氧基丁酸甲酯(根據文獻程序製備：Bioorg.Med.Chem.Lett.15(2005)1447-1449，1.60g，5.68mmol)於四氫呋喃與甲醇之3：1混合物(12mL)中之經攪拌溶液中添加硼氫化鈉(0.43g，11.38mmol)且在室溫下攪拌混合物2小時。移除揮發物且將殘餘物溶解於乙酸乙酯(25mL)中且用鹽水(10mL)洗滌。移除溶劑，得到粗產物，將其使用乙酸乙酯/石油醚之梯度藉由矽膠管柱層析加以純化。產量：1.32g(92%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：1.01(d,3H),3.22(s,3H),3.36-3.42(m,3H),3.57-3.60(m,1H),4.57(t,1H),5.02(s,2H),6.98-7.01(m,1H),7.31-7.37(m,5H)。C13H19F3NO4 MS(ES)MH+：254.4。
中間物151 (2R,3S)-2-胺基-3-甲氧基丁-1-醇
向中間物150(1.32g，5.20mmol)於乙酸乙酯(50mL)中之經攪拌溶液中添加10%鈀/炭(0.13g，10wt%)且在室溫下在20mm氫氣壓力下攪拌混合物6小時。過濾混合物且真空移除揮發物且粗產物不經進一步純化即用於下一步驟。產量：0.47g(47%)。
中間物152 5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-2,3,4-三氟-N'-羥基-N-((2R,3S)-1-羥基-3-甲氧基丁-2-基)苯甲脒
使用中間物151(0.47g，4.02mmol)，依循關於中間物145之製備所述之程序合成中間物152。產量：0.50g(35%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：1.00(d,3H),3.02(s,3H),3.27-3.32(m,2H),3.41(d,2H),3.96-4.06(m,4H),4.68(t,1H),5.67(d,1H),6.03(s,1H),7.33-7.34(m,1H),10.03(s,1H)。19F NMR(376.5MHz,DMSO-d 6 )δ：-134.26(m),-138.79(m),-160.03(m)。C15H19F3N2O5 MS(ES)MH+：365.5。
中間物153 (2R,3S)-2-((5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-6,7-二氟苯并[d]異噁唑-3-基)胺基)-3-甲氧基丁-1-醇
使用中間物152(0.50g，1.37mmol)，依循關於中間物146之製備所述之程序合成中間物153。產量：0.32g(67%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ：1.15(d,3H),3.25(s,3H),3.52-3.60(m,4H),3.98-4.10(m,4H),4.70(t,1H),6.06(s,1H),7.09(d,1H),8.09(d,1H)。19F NMR(376.5MHz,DMSO-d 6 )δ：-143.51(d),-162.06(d)。C15H18F2N2O5 MS(ES)MH+：345.5。
中間物154 (R)-3-(5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-6,7-二氟苯并[d]異噁唑-3-基)-4-((S)-1-甲氧基乙基)噁唑啶-2-酮
使用中間物153(0.25g，0.72mmol)，依循關於中間物147之製備所述之程序合成中間物154。產量：0.08g(30%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：1.11(d,3H),3.15(s,3H),3.98-4.08(m,5H),4.55-4.61(m,3H),6.09(s,1H),8.30(d,1H)。19F NMR(376.5MHz,DMSO-d 6 )δ：-140.43(d),-161.01(d)。C16H16F2N2O6 MS(ES)MH+：371.4。
中間物155 6,7-二氟-3-((R)-4-((S)-1-甲氧基乙基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)苯并[d]異噁唑-5-甲醛
使用中間物154(0.08g，0.22mmol)，依循關於中間物148之製備所述之程序合成中間物155。粗產物不經純化即用於下一步驟。產量：0.06g(85%)。
中間物156 6-((2R,6R)-2,6-二甲基(N-嗎啉基))-7-氟-3-((R)-4-((S)-1-甲氧基乙基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)苯并[d]異噁唑-5-甲醛
使用中間物155(0.06g，0.18mmol)，依循關於中間物149之製備 所述之程序合成中間物156。粗產物不經純化即用於下一步驟。產量：0.04g(52%)。C20H24FN3O6 MS(ES)MH+：422.5。
中間物157 2-((二苯基亞甲基)胺基)-2-(吡嗪-2-基)乙酸乙酯
將2-((二苯基亞甲基)胺基)乙酸乙酯(6.0g，22.47mmol)、2-溴吡嗪(7.1g，44.90mmol)、碳酸鉀(9.30g，67.40mmol)及碘化四丁基銨(8.10g，22.40mmol)於N-甲基-2-吡咯啶酮(25mL)中之混合物在密封管中在110℃下加熱16小時。將混合物傾入水(100ml)中且用乙酸乙酯(3×50ml)萃取。用鹽水(25mL)洗滌有機層且經硫酸鈉乾燥。真空移除溶劑，得到粗產物，將其使用甲醇/氯仿之梯度在Combi-Flash儀器中純化。產量：4.90g(63%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ：1.16(t,3H),4.07(q,2H),5.26(s,1H),7.18(dd,2H),7.38-7.61(m,8H),8.56(d,1H),8.57(d,1H),8.60(s,1H)。C21H19N3O2 MS(ES)MH+：346.3。
中間物158 2-胺基-2-(吡嗪-2-基)乙酸乙酯
向中間物157(4.9g，14.20mmol)於二噁烷(20mL)中之經攪拌溶液中添加3N鹽酸(20mL)且在室溫下攪拌混合物3小時。在真空下完全移除揮發物且所獲得之呈鹽酸鹽形式之產物不經純化即用於下一步驟。產量：2.4g(92%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ：1.13(t,3H),4.19(q,2H),5.66(s,1H),8.73-8.77(m,2H),8.95(d,1H),9.19(br s, 3H)。C8H11N3O2 MS(ES)MH+：182.3。
中間物159 2-((第三丁氧基羰基)胺基)-2-(吡嗪-2-基)乙酸乙酯
向中間物158(2.4g，11.60mmol)於二氯甲烷(25mL)中之經攪拌溶液中添加二碳酸二-第三丁酯(2.88g，12.76mmol)及三乙胺(5mL)且將混合物回流2小時。在真空下完全移除揮發物且粗產物不經純化即用於下一步驟。產量：2.80g(90%)。
中間物160 (2-羥基-1-(吡嗪-2-基)乙基)胺基甲酸第三丁酯
向中間物163(2.80g，9.96mmol)於四氫呋喃與甲醇之1：1混合物(50mL)中之經攪拌溶液中添加硼氫化鈉(0.37g，9.96mmol)且在室溫下攪拌混合物16小時。真空移除揮發物且將殘餘物溶解於乙酸乙酯(25mL)中且用鹽水(10mL)洗滌。移除溶劑，得到粗產物，其不經純化即用於下一步驟。產量：1.8g(76%)。
中間物161 2-胺基-2-(吡嗪-2-基)乙醇
向中間物160(1.80g，7.50mmol)之經攪拌溶液中添加含有3N鹽酸之乙醚(20mL)且在室溫下攪拌混合物3小時。在真空下完全移除揮發物且產物不經純化即用於下一步驟。產量：1.1g(83%)。C6H9N3O MS(ES)MH+：140.2。
中間物162 5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-2,3,4-三氟-N'-羥基-N-(2-羥基-1-(吡嗪-2-基)乙基)苯甲脒
使用中間物161(1.10g，6.32mmol)及中間物16(1.78g，6.32mmol)，依循關於中間物118之製備所述的程序合成中間物162。產量：0.96g(40%)。C16H15F3N4O4 MS(ES)MH+：385.4。
中間物163 2-((5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-6,7-二氟苯并[d]異噁唑-3-基)胺基)-2-(吡嗪-2-基)乙醇
使用中間物162(0.96g，2.50mmol)，依循關於中間物119之製備所述之程序合成中間物163。產量：0.52g(55%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：3.87(t,2H),4.00-4.09(m,4H),4.80(q,1H),5.09(t,1H),6.08(s,1H),7.96(d,1H),8.13(d,1H),8.54(d,1H),8.61(d,1H),8.68(s,1H)。C16H14F2N4O4 MS(ES)MH+：365.4。
中間物164 3-(5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-6,7-二氟苯并[d]異噁唑-3-基)-4-(吡嗪-2-基)噁唑啶-2-酮
使用中間物163(0.25g，0.69mmol)，依循關於中間物120之製備所述之程序合成中間物164。產量：0.16g(59%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ：3.98-4.09(m,4H),4.54(dd,1H),4.99(t,1H),5.87(dd,1H),6.09(s,1H),8.39(dd,1H),8.61-8.63(m,2H),8.86(d,1H)。19F NMR(376.5MHz,DMSO-d 6 )δ：-140.24(d),-160.93(d)。C17H12F2N4O5 MS(ES)MH+：391.4。
中間物165 6,7-二氟-3-(2-側氧基-4-(吡嗪-2-基)噁唑啶-3-基)苯并[d]異噁唑-5-甲醛
使用中間物164(0.16g，2.41mmol)，依循關於中間物122之製備所述之程序合成中間物165。產量：0.12g(86%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ：4.56(dd,1H),5.01(t,1H),5.88(dd,1H),8.61-8.64(m,2H),8.80(d,1H),8.88(d,1H),10.18(s,1H)。19F NMR(376.5MHz,DMSO-d 6 )δ：-142.93(d),-160.18(d)。C15H8F2N4O4 MS(ES)MH+：347.4。
中間物166 6-((2R,6R)-2,6-二甲基(N-嗎啉基))-7-氟-3-(2-側氧基-4-(吡嗪-2-基)噁唑啶-3-基)苯并[d]異噁唑-5-甲醛
使用中間物165(0.12g，0.35mmol)，依循關於中間物123之製備所述之程序合成中間物166。產量：0.12g(80%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ：1.21(d,6H),2.98-3.00(m,2H),3.31-3.33(m,2H，融合於DMSO峰中)，4.11-4.13(m,2H),4.56(dd,1H),5.01(t,1H),5.88(dd,1H),8.63-8.67(m,3H),8.88(s,1H),10.31(s,1H)。19F NMR(376.5MHz,DMSO-d 6 )δ：-142.93(d),-160.18(d)。C21H20FN5O5 MS(ES)MH+：442.5。
中間物167 5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-2,3,4-三氟-N'-羥基-N-(2-羥基-1-(嘧啶-2-基)乙基)苯甲脒
使用2-胺基-2-(嘧啶-2-基)乙醇中間物161(1.0g，5.7mmol)及中間物16(1.60g，5.71mmol)，依循關於中間物118之製備所述之程序合成中間物167。產量：1.0g(42%)。C16H15F3N4O4 MS(ES)MH+：385.5。
中間物168 2-((5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-6,7-二氟苯并[d]異噁唑-3-基)胺基)-2-(嘧啶-2-基)乙醇
使用中間物167(1.0g，2.51mmol)，依循關於中間物119之製備所述之程序合成中間物168。產量：0.42g(45%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：3.86-3.94(m,2H),4.01-4.11(m,4H),4.84-4.87(m,1H),5.02(t,1H),6.10(s,1H),7.39(t,1H),7.85(d,1H),8.18(d,1H),8.76(d,2H)。19F NMR(376.5MHz,DMSO-d 6 )δ：-143.35(d),161.90(d)。C16H14F2N4O4 MS(ES)MH+：365.4。
中間物169 3-(5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-6,7-二氟苯并[d]異噁唑-3-基)-4-(嘧啶-2-基)噁唑啶-2-酮
使用中間物168(0.34g，0.93mmol)，依循關於中間物120之製備所述之程序合成中間物169。產量：0.25g(70%)。C17H12F2N4O5 MS(ES)MH+：391.4。
中間物170 6,7-二氟-3-(2-側氧基-4-(嘧啶-2-基)噁唑啶-3-基)苯并[d]異噁唑-5-甲醛
使用中間物169(0.25g，2.41mmol)，依循關於中間物122之製備 所述之程序合成中間物170。粗產物不經純化即用於下一步驟。產量：0.14g(64%)。C15H8F2N4O4 MS(ES)MH+：347.4。
中間物171 6-((2R,6R)-2,6-二甲基(N-嗎啉基))-7-氟-3-(2-側氧基-4-(嘧啶-2-基)噁唑啶-3-基)苯并[d]異噁唑-5-甲醛
使用中間物170(0.14g，0.26mmol)，依循關於中間物123之製備所述之程序合成中間物171。產量：0.12g(63%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：1.22(d,6H),2.98-3.02(m,2H),3.36-3.39(m,2H),4.11-4.14(m,2H),4.54(dd,1H),5.05(t,1H),5.75(s,1H),7.49-7.52(m,1H),8.69(d,1H),8.81-8.83(m,2H),10.31(s,1H)。19F NMR(376.5MHz,DMSO-d 6 )δ：-146.69(d)。C21H20FN5O5 MS(ES)MH+：442.5。
中間物172 (S)-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-2,3,4-三氟-N'-羥基-N-(1-羥基丁-3-炔-2-基)苯甲脒
使用(S)-2-胺基丁-3-炔-1-醇(根據文獻程序由嘎勒醛(Garner aldehyde)製備；Eur.J.Org.Chem.2009,3619-3627，0.30g，2.44mmol)及中間物16(0.65g，2.32mmol)，依循關於中間物118之製備所述之程序合成中間物172。產量：0.53g(65%)。1H NMR(300MHz, DMSO-d 6 )δ：3.16(d,1H),3.50(t,2H),3.60-3.70(m,1H),3.98-4.05(m,4H),5.12(t,1H),6.04-6.10(m,2H),7.34(t,1H),10.23(s,1H)。 19F NMR(376.5MHz,DMSO-d 6 )δ：-133.64(m),-138.05(m),-159.54(m)。C14H13F3N2O4 MS(ES)MH+：331.4。
中間物173 (S)-2-((5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-6,7-二氟苯并[d]異噁唑-3-基)胺基)丁-3-炔-1-醇
使用中間物172(0.51g，1.55mmol)，依循關於中間物119之製備所述之程序合成中間物173。產量：0.27g(55%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ：3.24(d,1H),3.65(t,2H),3.98-4.05(m,4H),4.32-4.34(m,1H),5.20(t,1H),6.08(s,1H),7.70(d,1H),8.01(d,1H)。19F NMR(376.5MHz,DMSO-d 6 )δ：-142.96(d),-161.66(d)。C14H12F2N2O4 MS(ES)MH+：311.4。
中間物174 (S)-3-(5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-6,7-二氟苯并[d]異噁唑-3-基)-4-乙炔基噁唑啶-2-酮
使用中間物173(0.25g，0.81mmol)，依循關於中間物120之製備所述之程序合成中間物174。產量：0.25g(92%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：3.69(d,1H),3.99-4.08(m,4H),4.56(dd,1H),4.85(t, 1H),5.41-5.45(m,1H),6.11(s,1H),8.27(dd,1H)。19F NMR(376.5MHz,DMSO-d 6 )δ：-140.16(d),-160.70(d)。C15H10F2N2O5 MS(ES)MH+：337.4。
中間物175 (S)-3-(4-乙炔基-2-側氧基噁唑啶-3-基)-6,7-二氟苯并[d]異噁唑-5-甲醛
使用中間物174(0.25g，0.74mmol)，依循關於中間物122之製備所述之程序合成中間物175。產量：0.14g(65%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ：3.70(d,1H),4.58(dd,1H),4.86(t,1H),5.41-5.46(m,1H),8.67(dd,1H),10.18(s,1H)。19F NMR(376.5MHz,DMSO-d 6 )δ：-142.87(d),-159.98(d)。C13H6F2N2O4 MS(ES)MH+：293.3。
中間物176 6-((2R,6R)-2,6-二甲基(N-嗎啉基))-3-((S)-4-乙炔基-2-側氧基噁唑啶-3-基)-7-氟苯并[d]異噁唑-5-甲醛
使用中間物175(0.14g，0.48mmol)，依循關於中間物123之製備所述之程序合成中間物176。產量：0.08g(43%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ：1.21(d,6H),2.98-3.04(m,2H),3.36-3.40(m,2H),3.67(d,1H),4.12-4.13(m,2H),4.56(dd,1H),4.81(t,1H),5.39-5.43(m,1H),8.51(s,1H),10.30(s,1H)。19F NMR(376.5MHz,DMSO-d 6 )δ：-146.52(S)。C19H18FN3O5 MS(ES)MH+：388.5。
中間物177 (S)-3-(7-氯-6-((2R,6R)-2,6-二甲基(N-嗎啉基))-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)苯并[d]異噁唑-3-基)-4-甲基噁唑啶-2-酮
使用(S)-4-甲基噁唑啶-2-酮(根據Nishiyama,T.；Matsui,Shigeki；Yamada,F.J.Het.Chem.(1986),23(5),1427-9中所述之程序合成)及中間物52，依循關於中間物42之製備所述之程序合成中間物177。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ：1.1(br.s.,3H)1.3(br.s.,3H)1.4(d,3H)2.7-2.8(m,1H)2.95-3.2(m,2H)3.5-3.7(m,1H)3.9-4.1(m,7H)4.6-4.8(m,2H)6.2(s,1H)8.4(s,1H)。C20H24ClN3O6 MS(ES)MH+：438。
中間物178 S(S)-N-[(1S)-2-[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧基-1-(2-甲基-1,2,4-三唑-3-基)乙基]-2-甲基-丙-2-亞磺醯胺
在-78℃下，在氮氣下，將正丁基鋰(185ml，462mmol)逐滴添加至1-甲基-1H-[1,2,4]三唑(8g，96.43mmol)於四氫呋喃(1000mL)中之溶液中，且在此溫度下攪拌溶液30分鐘。在-78℃下，逐滴添加[S(S)]-N-[2-[[(1,1-二甲基乙基)二甲基矽烷基]氧基]亞乙基]-2-甲基-2-丙烷亞磺醯胺(107g，385mmol)(Rech,J.C.等人，JACS(2007),129(3),490-491)於1200mL四氫呋喃中之溶液且攪拌3小時。用飽和NH4Cl水溶液 (200ml)淬滅混合物且用乙酸乙酯(1000ml×3)萃取。將合併之有機層用飽和NaCl水溶液洗滌且經Na2SO4乾燥。濾去固體，且濃縮濾液，得到粗物質，將其藉由矽膠管柱層析(使用20/1至3/1之石油醚/乙酸乙酯進行梯度溶離)純化，得到呈黃色油狀之標題化合物(100g，72%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 0.00(s,3H),0.04(s,3H),0.85(s,3H),1.3(s,9H),4.0(s,3H),4.2-4.6(m,2H),4.7(m,1H),7.9(s,1H)。
中間物179 (2S)-2-胺基-2-(2-甲基-1,2,4-三唑-3-基)乙醇
在0℃下，將一定量之含2M HCl之第三丁基甲基醚(320mL)緩慢添加至中間物178(70g，194mmol)於MeOH(330mL)中之溶液中。在冷卻浴中攪拌混合物隔夜。添加第三丁基甲基醚(200mL)且攪拌混合物1小時。自混合物中過濾出固體，得到呈白色固體雙鹽酸鹽之標題化合物(23g，87%)。1H NMR(400MHz,D2O)δ 3.75(s,3H),3.8(d,2H)4.7(t,1H),7.8(s,1H)。C5H10F2N4O MS(ES)MH+：143。
中間物180 (S)-2-(5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-6,7-二氟苯并[d]異噁唑-3-基胺基)-2-(1-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)乙醇
使用中間物179及中間物16，依循關於中間物17之製備所述之程序合成中間物180。C15H15F2N5O4 MS(ES)MH+：368。
中間物181 (S)-3-(5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-6,7-二氟苯并[d]異噁唑-3-基)-4-(1-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)噁唑啶-2-酮
使用中間物180，依循關於中間物18之製備所述之程序合成中間物181。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.6(br.s.,4H),4.0-4.1(m,2H),4.15(s,3H),4.8-5.0(m,1H),5.8(dd,1H),7.9(s,1H),8.4(dd,1H)。C16H13F2N5O5 MS(ES)MH+：394。
中間物182 (S)-6,7-二氟-3-(4-(1-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)苯并[d]異噁唑-5-甲醛
使用中間物181，依循關於中間物19之製備所述之程序合成中間物182。C14H9F2N2O4 MS(ES)MH+：350。
中間物183 6-((2R,6R)-2,6-二甲基(N-嗎啉基))-7-氟-3-((S)-4-(1-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)苯并[d]異噁唑-5-甲醛
使用中間物182，依循關於中間物20之製備所述之程序合成中間物183。C20H21FN6O5 MS(ES)MH+：445。
中間物184 S(R)-N-[(1R)-2-[第三丁基(二甲基)矽烷基]氧基-1-(2-甲基-1,2,4-三唑-3-基)乙基]-2-甲基-丙-2-亞磺醯胺
在-78℃下，在氮氣下，將一定量之正丁基鋰(38.57ml，96.43mmol)逐滴添加至1-甲基-1H-[1,2,4]三唑(8g，96.43mmol)於四氫呋喃(250mL)中之溶液中，且在此溫度下攪拌溶液30分鐘。在-78℃下，逐滴添加[S(R)]-N-[2-[[(1,1-二甲基乙基)二甲基矽烷基]氧基]亞乙基]-2-甲基-2-丙烷亞磺醯胺(22.3g，80.36mmol)(Seguin,C.等人，J.Org.Chem.(2009),74(18),6986-6992)於20mL四氫呋喃中之溶液且攪拌3小時。用飽和NH4Cl水溶液(40ml)淬滅混合物。在第二批中再次進行上述反應。在NH4Cl水溶液之後，將兩批合併且用乙酸乙酯(100ml×3)萃取。將合併之有機層用飽和NaCl水溶液洗滌且經Na2SO4乾燥。濾去固體，且濃縮濾液，得到粗物質，將其藉由矽膠管柱層析(使用20/1至3/1之石油醚/乙酸乙酯進行梯度溶離)純化，得到呈黃色油狀之標題化合物(31.8g，55%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 0.00(s,3H),0.04(s,3H),0.85(s,3H),1.3(s,9H),4.0(s,3H),4.2-4.6(m,2H),4.7(m,1H),7.9(s,1H)。
中間物185 (2R)-2-胺基-2-(2-甲基-1,2,4-三唑-3-基)乙醇
在0℃下，將一定量之含2M HCl之第三丁基甲基醚(210mL)緩慢添加至中間物184(45g，135mmol)於MeOH(210mL)中之溶液中。在冷卻浴中攪拌混合物隔夜。添加第三丁基甲基醚(200mL)且攪拌混合物1小時。自混合物中過濾出固體，得到呈白色固體雙鹽酸鹽之標題化合物(23g，87%)。1H NMR(400MHz,d4-MeOH)δ 3.9(d,2H)4.0(s,3H),4.8(t,1H),8.0(s,1H)。C5H10F2N4O MS(ES)MH+：143。
中間物186 (R)-2-(5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-6,7-二氟苯并[d]異噁唑-3-基胺基)-2-(1-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)乙醇
使用中間物185及中間物16，依循關於中間物17之製備所述之程序合成中間物186。C15H15F2N5O4 MS(ES)MH+：368。
中間物187 (R)-3-(5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-6,7-二氟苯并[d]異噁唑-3-基)-4-(1-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)噁唑啶-2-酮
使用中間物186，依循關於中間物18之製備所述之程序合成中間物187。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.6(br.s.,4H),4.0-4.1(m,2H), 4.15(s,3H),4.75-5.0(m,1H),5.8(dd,1H),7.9(s,1H),8.4(dd,1H)。C16H13F2N5O5 MS(ES)MH+：394。
中間物188 (R)-6,7-二氟-3-(4-(1-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)苯并[d]異噁唑-5-甲醛
使用中間物187，依循關於中間物19之製備所述之程序合成中間物188。C14H9F2N2O4 MS(ES)MH+：350。
中間物189 6-((2R,6R)-2,6-二甲基(N-嗎啉基))-7-氟-3-((R)-4-(1-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)苯并[d]異噁唑-5-甲醛
使用中間物188，依循關於中間物20之製備所述之程序合成中間物189。C20H21FN6O5 MS(ES)MH+：445。
中間物190 (2S,3S)-2-(((苯甲氧基)羰基)胺基)-3-羥基丁酸甲酯
向(2S,3S)-2-胺基-3-羥基丁酸甲酯(2.5g，14.73mmol)於四氫呋喃與水之1：1混合物(50mL)中之經攪拌溶液中添加碳酸氫鈉(1.9g， 22.10mmol)且將混合物冷卻至0℃且歷時30分鐘之時間向其中逐滴添加氯甲酸苯甲酯(2.76g，16.21mmol)。接著，在室溫下攪拌混合物16小時。用乙酸乙酯(25mL)稀釋反應混合物，分離有機層，用鹽水(25mL)洗滌且經硫酸鈉乾燥。真空移除溶劑，得到粗產物，將其使用乙酸乙酯/石油醚之梯度藉由矽膠管柱層析(230-400目)加以純化。 產量：3.4g(86%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：1.09(d,3H),3.89(s,3H),3.99(t,1H),4.01-4.06(m,1H),5.00(d,1H),5.04(s,2H),7.30-7.40(m,5H),7.63(d,1H)。C13H17NO5 MS(ES)MH+：268.1。
中間物191 (2S,3S)-2-(((苯甲氧基)羰基)胺基)-3-((四氫-2H-哌喃-2-基)氧基)丁酸甲酯
向中間物190(2.0g，7.89mmol)於二氯甲烷(20mL)中之經攪拌溶液中一次性添加對甲苯磺酸吡錠(0.79g，3.16mmol)及2,3-二氫哌喃(1.02g，11.85mmol)且在室溫下攪拌溶液16小時。將飽和碳酸氫鈉溶液(50mL)添加至反應混合物中，分離有機層且用二氯甲烷(2×50mL)萃取水層。將合併之有機層用水(50mL)及鹽水溶液(50mL)洗滌且經硫酸鈉乾燥。移除溶劑，得到粗產物，將其使用乙酸乙酯/石油醚之梯度藉由急驟管柱層析(矽膠：60-120目)加以純化。產量：2.4g(87%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ：1.10及1.15(d,3H),1.41-1.58(m,6H),3.36-3.43(m,1H),3.63(s,3H),3.69-3.73(m,1H),3.99(q,1H),4.15及4.27(t,1H),4.57及4.72(s,1H),5.03(s,2H),7.28-7.34(m,5H),7.71及7.79(d,1H)。
中間物192 ((2R,3S)-1-羥基-3-((四氫-2H-哌喃-2-基)氧基)丁-2-基)胺基甲酸苯甲酯
在5℃下，向中間物191(2.4g，7.12mmol)於四氫呋喃與甲醇之7：3混合物(20mL)中之經攪拌溶液中逐份添加硼氫化鈉(0.32g，8.55mmol)且在室溫下攪拌溶液3小時。真空移除揮發物且將殘餘物溶解於乙酸乙酯(50mL)中且用水(25mL)洗滌。用乙酸乙酯(2×25mL)萃取水層。將合併之有機層用鹽水溶液(25mL)洗滌且經硫酸鈉乾燥。移除溶劑，得到粗產物，其不經進一步純化即用於下一步驟。產量：1.6g(70%)。
中間物193 (2R,3S)-2-胺基-3-((四氫-2H-哌喃-2-基)氧基)丁-1-醇
向中間物192(1.6g，4.95mmol)於乙酸乙酯(20mL)中之經攪拌溶液中添加三乙胺(1mL)及10%鈀/炭(0.16g，10wt%)且在室溫下在20mm氫氣壓力下攪拌混合物6小時。過濾混合物且真空移除揮發物且粗產物不經純化即用於下一步驟。產量：0.93g(99%)。
中間物194 5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-2,3,4-三氟-N'-羥基-N-((2R,3S)-1-羥基-3-((四氫-2H-哌喃-2-基)氧基)丁-2-基)苯甲脒
向中間物194(0.95g，5.02mmol)於二甲基甲醯胺(10mL)中之經攪拌溶液中添加三乙胺(0.76g，7.53mmol)且在室溫下攪拌混合物20分鐘。添加中間物16(1.41g，5.02mmol)且在室溫下再攪拌混合物2小時。將混合物傾入冰冷水(50ml)中且用乙酸乙酯(3×50ml)萃取。用水(2×25mL)、鹽水溶液(25mL)洗滌有機層且經硫酸鈉乾燥。移除溶劑，得到粗產物，將其使用乙酸乙酯/石油醚之梯度藉由矽膠急驟管柱層析加以純化。以非對映異構體混合物形式獲得此化合物。產量：1.0g(46%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：1.01及1.09(d,3H),1.16-1.56(m,6H),2.77-2.79及2.88-2.90(m,1H),3.38-3.78(m,5H),3.99-4.05(m,4H),4.43及4.56(s,1H),4.66及4.74(t,1H),5.69及5.80(d,1H),6.03(s,1H),7.36-7.38(m,1H),10.00及10.09(s,1H)。19F NMR(376.5MHz,DMSO-d 6 )δ：-133.89(m),-138.56(m),-159.90(m)。C19H25F3N2O6 MS(ES)MH+：435.3。
中間物195 (2R,3S)-2-((5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-6,7-二氟苯并[d]異噁唑-3-基)胺基)-3-((四氫-2H-哌喃-2-基)氧基)丁-1-醇
向中間物194(1.0g，2.30mmol)於二甲基甲醯胺(10mL)中之經攪拌溶液中添加碳酸銫(1.13g，3.45mmol)且在室溫下攪拌混合物16 小時。添加水(10ml)至混合物中且用乙酸乙酯(3×25ml)萃取溶液。用水(25mL)、鹽水溶液(25mL)洗滌有機層且經硫酸鈉乾燥。移除溶劑，得到粗產物，將其使用75%乙酸乙酯/石油醚藉由矽膠急驟管柱層析進一步純化。以非對映異構體混合物形式獲得此化合物。產量：0.60g(63%)。C19H24F2N2O6 MS(ES)MH+：415.3。
中間物196 (4R)-3-(5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-6,7-二氟苯并[d]異噁唑-3-基)-4-((1S)-1-((四氫-2H-哌喃-2-基)氧基)乙基)噁唑啶-2-酮
在0℃下，向中間物195(0.60g，1.45mmol)於乙腈(10mL)中之經攪拌溶液中添加三乙胺(0.5mL，3.62mmol)且攪拌混合物15分鐘。在0℃下，向此溶液中添加雙(2,5-二側氧基吡咯啶-1-基)碳酸酯(或)碳酸二丁二醯亞胺酯(0.93g，3.62mmol)且在室溫下攪拌混合物16小時。真空移除揮發物且將殘餘物溶解於乙酸乙酯(10mL)中，用水(5mL)、鹽水溶液(5mL)洗滌且經硫酸鈉乾燥。真空移除溶劑，得到淺黃色固體，將其使用乙酸乙酯/石油醚之梯度在Combi-Flash儀器中純化。以非對映異構體混合物形式獲得此化合物。產量：0.23g(36%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：1.10及1.19(d,3H),1.22-1.72(m,6H),2.85-2.92及3.01-3.12(m,1H),3.65-3.67(m,1H),4.00-4.05(m,4H),4.32-4.35(m,1H),4.57-4.65(m,4H),6.09(s,1H),8.26及8.36(d,1H)。19F NMR(376.5MHz,DMSO-d 6 )δ：-140.34及-140.59(d),-160.87及161.19(d)。
中間物197 6,7-二氟-3-((R)-4-((S)-1-羥乙基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)苯并[d]異噁唑-5-甲醛
在0℃下，向中間物196(0.23g，0.68mmol)於1,4-二噁烷(3mL)中之經攪拌溶液中添加6N鹽酸(3mL)，且在室溫下攪拌混合物1小時。將混合物傾入冰冷卻水(25mL)中且用乙酸乙酯(3×25ml)萃取。用水(15mL)、鹽水溶液(15mL)洗滌有機層且經硫酸鈉乾燥。移除溶劑，得到粗產物，其不經純化即用於下一步驟。產量：0.15g(92%)。C13H10F2N2O5 MS(ES)MH+：313.1。
中間物198 6-((2R,6R)-2,6-二甲基(N-嗎啉基))-7-氟-3-((R)-4-((S)-1-羥乙基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)苯并[d]異噁唑-5-甲醛
向中間物197(0.15g，0.48mmol)於乙腈(2mL)中之經攪拌溶液中依次添加二異丙基乙胺(0.09g，0.72mmol)及(2R,6R)-2,6-二甲基嗎啉(0.06g，0.53mmol)且在密封管中在80℃下加熱混合物6小時。將溶液冷卻至室溫且真空移除溶液，獲得粗產物，將其使用乙酸乙酯/石油醚之梯度在Combi-Flash儀器中純化，獲得呈淺黃色固體之標題化合物。產量：0.12g(77%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：1.05(d,3H),1.22(d,6H),2.99-3.04(m,2H),3.36-3.39(m,2H),4.12-4.15(m,2H),4.31-4.33(m,1H),4.52-4.60(m,3H),5.22(d,1H),8.63(s,1H), 10.32(s,1H)。19F NMR(376.5MHz,DMSO-d 6 )δ：-146.94(d)。C19H22FN3O6 MS(ES)MH+：408.3。
中間物199 [(4R)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-2-側氧基-1,3-噁唑啶-4-基]甲烷磺酸甲酯
在0℃下，向中間物107(0.3g，0.68mmol)於二氯甲烷(5mL)中之經攪拌溶液中添加三乙胺(0.14mL，1.02mmol)及甲烷磺醯氯(0.12g，1.02mmol)，隨後添加甲烷磺醯氯(1.63g，8.55mmol)。在室溫下攪拌所得溶液1小時。添加水(2mL)至反應混合物中且將其用乙酸乙酯(2×10mL)萃取。用鹽水溶液(5mL)洗滌有機層，經硫酸鈉乾燥且真空移除溶劑，獲得粗產物，將其使用乙酸乙酯/己烷之梯度藉由矽膠急驟管柱層析加以純化。產量：0.25g(71%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：1.18(d,6H),2.88-2.92(m,2H),3.18(s,3H),3.21-3.24(m,2H),3.95-4.01(m,2H),4.04-4.10(m,4H),4.46-4.52(m,2H),4.74-4.78(m,2H),4.94-4.95(m,1H),6.17(s,1H),8.23(s,1H)。C21H26FN3O9S MS(ES)MH+：516.4。
中間物200 [(4S)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-7-氟-5-甲醯基-1,2-苯并噁唑-3-基}-2-側氧基-1,3-噁唑啶-4-基]乙腈
向中間物199(0.28g，0.54mmol)於乙腈(5mL)中之經攪拌溶液中添加氟化四丁基銨於四氫呋喃(0.2mL，0.65mmol)及氰化三甲基矽烷(0.08mL，0.65mmol)中之1M溶液且在室溫下攪拌混合物2天。添加水(2mL)至反應混合物中且將其用乙酸乙酯(2×10mL)萃取。用鹽水溶液(5mL)洗滌有機層，經硫酸鈉乾燥且真空移除溶劑，獲得粗產物，將其使用乙酸乙酯/己烷之梯度藉由矽膠急驟管柱層析加以純化。產量：0.11g(50%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：1.20(d,6H),2.98-3.04(m,2H),3.14-3.20(m,2H),3.32-3.40(m,2H),4.08-4.12(m,2H),4.47-4.51(m,1H),4.81(t,1H),4.90-4.92(m,1H),8.56(s,1H),10.30(s,1H)。C19H19FN4O5 MS(ES)MH+：403.4。
中間物201 (R)-4-((R)-1,2-二羥乙基)-3-(6-((2R,6R)-2,6-二甲基(N-嗎啉基))-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟苯并[d]異噁唑-3-基)噁唑啶-2-酮
向中間物120(0.50g，1.15mmol)於第三丁醇與水之混合物(10mL；1：1)中之溶液中添加AD-混合物-β(5.0g)且在室溫下攪拌混合物16小時。在0℃下，將固體亞硫酸鈉(5.0g)添加至此混合物中且將其在室溫下攪拌1小時。用乙酸乙酯(3×15mL)萃取混合物且將合併之有機層用水(10mL)、鹽水(10mL)洗滌且經硫酸鈉乾燥。真空移除溶 劑，得到固體，其不經進一步純化即用於下一步驟。產量：0.50g(93%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：1.22(br s,6H),2.88-2.92(m,2H),3.20-3.22(m,2H),3.32-3.36(m,1H),3.43-3.44(m,1H),3.96-4.01(m,2H),4.03-4.10(m,4H),4.16-4.18(m,1H),4.56-4.62(m,2H),4.75-4.76(m,1H),4.86(t,1H),5.36(d,1H),6.18(s,1H),8.33(s,1H)。 C21H26FN3O8 MS(ES)MH+：468.3。
中間物202 (R)-4-((S)-1,2-二羥乙基)-3-(6-((2R,6R)-2,6-二甲基(N-嗎啉基))-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟苯并[d]異噁唑-3-基)噁唑啶-2-酮
使用中間物120(0.50g，1.15mmol)及AD-混合物-α(5.0g)，依循關於中間物201之製備所述之程序合成中間物202。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：1.23(br s,6H),2.87-2.91(m,2H),3.20-3.22(m,2H),3.33-3.36(m,1H),3.43-3.44(m,1H),3.96-4.02(m,2H),4.03-4.10(m,4H),4.16-4.17(m,1H),4.56-4.64(m,2H),4.75-4.76(m,1H),4.86(t,1H),5.36(d,1H),6.18(s,1H),8.33(s,1H)。C21H26FN3O8 MS(ES)MH+：468.3。
中間物203 (5R)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-二甲基嗎啉-4-基]-5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-7-氟-1,2-苯并噁唑-3-基}-2-側氧基-1,3-噁唑啶-5-甲腈
將中間物89(0.38g，0.84mmol)於三氯乙腈(5mL)中之溶液在95℃下加熱2小時。蒸發揮發物且使用25-30%乙酸乙酯/己烷之梯度藉由矽膠急驟管柱層析純化粗產物。產量：0.13g(36%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：1.25(br s,6H),2.88-2.92(m,2H),3.22(d,2H),3.96-4.01(m,2H),4.04-4.10(m,4H),4.34-4.37(m,1H),4.48(t,1H),5.93(dd,1H),6.17(s,1H),8.35(s,1H)。C20H21FN4O6 MS(ES)MH+：433.3。
中間物204 (2S,3R)-2-(((苯甲氧基)羰基)胺基)-3-((四氫-2H-哌喃-2-基)氧基)丁酸甲酯
向(2S,3R)-2-(((苯甲氧基)羰基)胺基)-3-羥基丁酸甲酯(5.0g，18.72mmol)於二氯甲烷(100mL)中之經攪拌溶液中一次性添加對甲苯磺酸吡錠(0.47g，1.87mmol)及2,3-二氫哌喃(2.6mL，28.08mmol)且在室溫下攪拌溶液16小時。添加飽和碳酸氫鈉溶液(50mL)至反應混合物中，分離有機層且用二氯甲烷(2×50mL)萃取水層。將合併之有機層用水(50mL)及鹽水溶液(50mL)洗滌且經硫酸鈉乾燥。移除溶 劑，得到粗產物，將其使用乙酸乙酯/石油醚之梯度藉由急驟管柱層析(矽膠：60-120目)加以純化。以非對映異構體混合物形式獲得產物。產量：5.9g(90%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：1.10及1.15(d,3H),1.38-1.72(m,6H),3.39-3.41(m,1H),3.60-3.64(m,1H),3.65(s,3H),4.17-4.25(m,2H),4.57及4.67(t,1H),5.05及5.06(s,2H),7.31-7.37(m,5H),7.26及7.58(d,1H)。
中間物205 ((2R,3R)-1-羥基-3-((四氫-2H-哌喃-2-基)氧基)丁-2-基)胺基甲酸苯甲酯
在5℃下，向中間物204(5.90g，16.80mmol)於四氫呋喃與甲醇之7：3混合物(200mL)中之經攪拌溶液中逐份添加硼氫化鈉(1.60g，42.02mmol)且在室溫下攪拌溶液3小時。真空移除揮發物且將殘餘物溶解於乙酸乙酯(50mL)中，用水(25mL)洗滌且用乙酸乙酯(2×25mL)萃取水層。將合併之有機層用鹽水溶液(25mL)洗滌且經硫酸鈉乾燥。移除溶劑，得到粗產物，其不經進一步純化即用於下一步驟。產量：4.9g(90%)。C17H25NO5 MS(ES)MH+：324.3。
中間物206 (2R,3R)-2-胺基-3-((四氫-2H-哌喃-2-基)氧基)丁-1-醇
向中間物205(4.9g，15.17mmol)於乙酸乙酯(50mL)中之經攪拌之溶液中添加三乙胺(1mL)及10%鈀/炭(1.0g，10wt%)且在室溫下在 20mm氫氣壓力下攪拌混合物6小時。過濾混合物且真空移除揮發物且粗產物不經純化即用於下一步驟。產量：2.5g(87%)。
中間物207 5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-2,3,4-三氟-N'-羥基-N-((2R,3R)-1-羥基-3-((四氫-2H-哌喃-2-基)氧基)丁-2-基)苯甲脒
向中間物206(2.5g，13.22mmol)於二甲基甲醯胺(20mL)中之經攪拌溶液中添加三乙胺(2.0g，19.84mmol)且在室溫下攪拌混合物20分鐘。向此混合物中添加中間物16(3.1g，11.24mmol)且在室溫下再攪拌混合物2小時。將混合物傾入冰冷水(50mL)中，用乙酸乙酯(3×50mL)萃取，用水(2×25mL)、鹽水溶液(25mL)洗滌有機層且經硫酸鈉乾燥。移除溶劑，得到粗產物，將其使用乙酸乙酯/石油醚之梯度藉由矽膠急驟管柱層析加以純化。產量：2.2g(38%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：1.08及1.12(d,3H),1.44-1.72(m,6H),3.65-3.85(m,1H),3.36-3.42(m,2H),3.76-3.78(m,2H),3.96-4.05(m,5H),4.57-4.75(m,2H),5.61(d,1H),6.04(s,1H),7.36-7.38(m,1H),10.04及10.08(s,1H)。19F NMR(376.5MHz,DMSO-d 6 )δ：-134.33(m),-138.45(m),-159.79(m)。C19H25F3N2O6 MS(ES)MH+：435.3。
中間物208 (2R,3R)-2-((5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-6,7-二氟苯并[d]異噁唑-3-基)胺基)-3-((四氫-2H-哌喃-2-基)氧基)丁-1-醇
向中間物207(2.2g，5.07mmol)於二甲基甲醯胺(25mL)中之經攪拌溶液中添加碳酸銫(3.65g，11.19mmol)且在室溫下攪拌混合物16小時。添加水(10mL)至混合物中，用乙酸乙酯(3×25mL)萃取，用水(25mL)、鹽水溶液(25mL)洗滌有機層且經硫酸鈉乾燥。移除溶劑，得到粗產物，將其使用75%乙酸乙酯/石油醚藉由矽膠急驟管柱層析進一步純化。產量：1.3g(62%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：1.10及1.18(d,3H),1.41-1.80(m,6H),3.42-3.44(m,1H),3.57-3.60(m,2H),3.61-3.63(m,1H),3.70-3.72(m,1H),4.00-4.08(m,5H),4.65-4.77(m,2H),6.07(s,1H),7.09及7.11(d,1H),8.13(t,1H)。19F NMR(376.5MHz,DMSO-d 6 )δ：-143.47(m),-162.10(m)。C19H24F2N2O6 MS(ES)MH+：415.3。
中間物209 (4R)-3-(5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-6,7-二氟苯并[d]異噁唑-3-基)-4-((1R)-1-((四氫-2H-哌喃-2-基)氧基)乙基)噁唑啶-2-酮
在0℃下，向中間物208(0.35g，0.84mmol)於乙腈(10mL)中之經攪拌溶液中添加三乙胺(0.17g，1.69mmol)且攪拌混合物15分鐘。在0℃下，向此混合物中添加雙(2,5-二側氧基吡咯啶-1-基)碳酸酯或碳酸二丁二醯亞胺酯(0.23g，0.89mmol)且在室溫下攪拌混合物16小 時。真空移除揮發物且將殘餘物溶解於乙酸乙酯(10mL)中，用水(5mL)、鹽水溶液(5mL)洗滌且經硫酸鈉乾燥。真空移除溶劑，得到淺黃色固體，將其使用乙酸乙酯/石油醚之梯度在Combi-Flash儀器中純化。產量：0.12g(32%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ：1.03及1.09(d,3H),1.22-1.72(m,6H),3.42-3.44(m,1H),3.70-3.85(m,1H),4.00-4.04(m,4H),4.35(t,1H),4.55(t,1H),4.62-4.68(m,2H),4.79(t,1H),6.09(s,1H),8.25(d,1H)。19F NMR(376.5MHz,DMSO-d 6 )δ：-140.46(d),-161.07(m)。
中間物210 6,7-二氟-3-((R)-4-((R)-1-羥乙基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)苯并[d]異噁唑-5-甲醛
在0℃下，向中間物209(0.12g，0.27mmol)於1,4-二噁烷(2mL)中之經攪拌溶液中添加6N鹽酸(2mL)，且在室溫下攪拌混合物1小時。將混合物傾入冰冷卻水(25mL)中且用乙酸乙酯(3×25ml)萃取。用水(15mL)、鹽水溶液(15mL)洗滌有機層且經硫酸鈉乾燥。移除溶劑，得到標題產物。產量：0.07g(82%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ：0.99(d,3H),4.27-4.28(m,1H),4.57-4.66(m,3H),5.28(d,1H),8.70(d,1H),10.18(s,1H)。19F NMR(376.5MHz,DMSO-d 6 )δ：-140.41(d),-161.03(d)。C13H10F2N2O5 MS(ES)MH+：313.1。
中間物211 6-((2R,6R)-2,6-二甲基(N-嗎啉基))-7-氟-3-((R)-4-((R)-1-羥乙基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)苯并[d]異噁唑-5-甲醛
向中間物210(0.07g，0.22mmol)於乙腈(2mL)中之經攪拌溶液中依次添加二異丙基乙胺(0.04g，0.34mmol)及(2R,6R)-2,6-二甲基嗎啉(0.03g，0.25mmol)且在密封管中在80℃下加熱混合物6小時。將溶液冷卻至室溫且真空移除溶液，獲得粗產物，將其使用乙酸乙酯/石油醚之梯度在Combi-Flash儀器中純化，獲得呈淺黃色固體之標題化合物。產量：0.07g(77%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ：0.98(d,3H),1.20(d,6H),2.99-3.03(m,2H),3.35-3.39(m,2H),4.11-4.13(m,1H),4.25-4.35(m,1H),4.57-4.63(m,4H),5.25(d,1H),8.55(s,1H),10.30(s,1H)。19F NMR(376.5MHz,DMSO-d 6 )δ：-161.03(d)。 C19H22FN3O6 MS(ES)MH+：408.3。
中間物212 5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-2,3,4-三氟-N-((2R,3R)-1-氟-3-羥基丁-2-基)-N'-羥基苯甲脒
使用(2R,3S)-3-胺基-4-氟丁-2-醇(0.35g，2.48mmol)(根據文獻程序製備：Tet.Lett.1985,26,4687及WO2005/66119 A2,2005，第27-28欄)及中間物16(0.84g，2.98mmol)，依循製備中間物207之程序合成中間物212。產量：0.55g(83%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ：1.02(d,3H),3.69(br s,2H),3.97-4.00(m,4H),4.17-4.44(m,3H),5.76 (d,1H),6.03(s,1H),7.29(t,1H),10.18(s,1H)。C14H16F4N2O4 MS(ES)MH+：353.4。
中間物213 (2R,3R)-3-((5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-6,7-二氟苯并[d]異噁唑-3-基)胺基)-4-氟丁-2-醇
使用中間物204(0.39g，1.08mmol)，依循製備中間物208之程序合成中間物213。產量：0.26g(73%)。C14H15F3N2O4 MS(ES)MH+：333.4。
中間物214 (4R,5R)-3-(5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-6,7-二氟苯并[d]異噁唑-3-基)-4-(氟甲基)-5-甲基噁唑啶-2-酮
使用中間物205(0.26g，0.78mmol)，依循製備中間物209之程序合成中間物214。產量：0.07g(25%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ：1.52(d,3H),4.00-4.05(m,4H),4.49(d,1H),4.73(dd,1H),4.86-5.06(m,2H),6.09(s,1H),8.30(d,1H)。19F NMR(376.5MHz,DMSO-d 6 )δ：-140.27(d),-161.04(d),-236.04(s)。C15H13F3N2O5 MS(ES)MH+：359.3。
中間物215 6,7-二氟-3-((4R,5R)-4-(氟甲基)-5-甲基-2-側氧基噁唑啶-3-基)苯并[d]異噁唑-5-甲醛
使用中間物206(0.07g，0.20mmol)，依循製備中間物210之程序合成中間物215。產量：0.06g(85%)。C13H9F3N2O4 MS(ES)MH+：315.3。
中間物216 6-((2R,6R)-2,6-二甲基(N-嗎啉基))-7-氟-3-((4R,5R)-4-(氟甲基)-5-甲基-2-側氧基噁唑啶-3-基)苯并[d]異噁唑-5-甲醛
使用中間物207(0.06g，0.18mmol)，依循製備中間物211之程序合成中間物216。產量：0.03g(33%)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ：1.20(d,6H),1.52(d,3H),2.99-3.03(m,2H),4.10-4.12(m,3H),4.49(d,2H),4.73(dd,1H),4.87-4.94(m,1H),5.05(d,1H),8.55(s,1H),10.30(s,1H)。19F NMR(376.5MHz,DMSO-d 6 )δ：-146.81(s),-236.15(s)。
中間物217 5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-2,3,4-三氟-N'-羥基-N-((2S,3R)-3-羥基-1-甲氧基丁-2-基)苯甲脒
使用(2R,3S)-3-胺基-4-甲氧基丁-2-醇(0.73g，4.70mmol，根據文獻程序製備：Tet.Lett.1985,26,4687)(該胺基醇係以1：3比率之非對映異構體混合物形式製備)及中間物16(1.45g，5.15mmol)，依循製備中間物207之程序合成中間物217。產物未經進一步純化即用於下一步驟。產量：1.25g(73%)。C15H19F3N2O5 MS(ES)MH+：365.4。
中間物218 (2R,3S)-3-((5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-6,7-二氟苯并[d]異噁唑-3-基)胺基)-4-甲氧基丁-2-醇
使用中間物217(1.25g，3.43mmol)，依循製備中間物208之程序合成中間物218。產物未經進一步純化即用於下一步驟。產量：0.60g(51%)。C15H18F2N2O5 MS(ES)MH+：345.4。
中間物219 (4S,5R)-3-(5-(1,3-二氧雜環戊-2-基)-6,7-二氟苯并[d]異噁唑-3-基)-4-(甲氧基甲基)-5-甲基噁唑啶-2-酮
使用中間物218(0.50g，1.45mmol)，依循關於中間物209之製備 所述之程序合成中間物219。產物未經進一步純化即用於下一步驟。產量：0.33g(61%)。C16H16F2N2O6 MS(ES)MH+：371.4。
中間物220 6,7-二氟-3-((4S,5R)-4-(甲氧基甲基)-5-甲基-2-側氧基噁唑啶-3-基)苯并[d]異噁唑-5-甲醛
使用中間物219(0.33g，0.89mmol)，依循關於中間物210之製備所述之程序合成中間物220且產物不經進一步純化即用於下一步驟。產量：0.28g(96%)。C14H12F2N2O5 MS(ES)MH+：327.4。
中間物221 6-((2R,6R)-2,6-二甲基(N-嗎啉基))-7-氟-3-((4S,5R)-4-(甲氧基甲基)-5-甲基-2-側氧基噁唑啶-3-基)苯并[d]異噁唑-5-甲醛
使用中間物220(0.38g，0.86mmol)，依循關於中間物211之製備所述之程序合成中間物221。產物不經進一步純化即用於下一步驟。產量：0.28g(77%)。C20H24FN3O6 MS(ES)MH+：422.5。
實例 實例1 (2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-(2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基)-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]- 2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
將中間物17(0.04g，0.1mmol)及巴比妥酸(barbituric acid)(0.01g，0.1mmol)於乙酸(3ml)中之混合物在110℃下加熱2小時。蒸發溶劑且將殘餘物溶解於甲醇(1mL)中。添加水(3mL)以沈澱固體，將其過濾且藉由逆相HPLC(10mM乙酸銨/水，CH3CN)純化，得到呈固體形式之作為外消旋混合物之一部分的標題化合物。產量：15mg(35%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.9(d,3H),1.1(d,3H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.7(t,2H),3.8(m,1H),3.9(d,1H),4.1(m,3H),4.6(t,2H),7.75(s,1H),11.5(s,1H),11.8(s,1H)。C21H20FN5O7 MS(ES)MH+：474.4。
實例1之替代合成法
將於乙酸(8mL)與水(2mL)之混合物中之中間物6(800mg，1.95mmol)及嘧啶-2,4,6(1H,3H,5H)-三酮(250mg，1.95mmol)在110℃下加熱3.5小時。移除溶劑且使用超臨界流體層析(具有40%異丙醇及60%CO2移動相之Chiralpak IA管柱)純化反應混合物，得到呈固體之標題化合物(571mg，61.7%產率)作為第一溶離化合物。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6 )δ 0.9(d,3H)1.1(d,3H)2.8-3.2(m,2H)7.7(s,1H)11.4(s,1H)11.8(s,1H)。C21H20FN5O7 MS(ES)MH+：474。
亦自實例1之替代合成法之合成分離出(2R,4R,4aR)-11-氟-2,4-二甲基-8-(2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基)-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮(40mg)作為自HPLC純化溶離之第二組分：
1H NMR(300MHz,DMSO-d 6)δ 0.95(d,3H),1.3(d,3H),3.1(d,1H),3.45-4.3(m,8H),4.5-4.7(m,2H),7.75(s,1H),11.45(br.s.,1H),11.7(br.s.,1H)。C21H20FN5O7 MS(ES)MH+：474。
實例2 (2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-[(4R)-4-甲基-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
將中間物8(0.15g，0.36mmol)及巴比妥酸(0.04g，0.3mmol)於乙酸(1ml)中之經攪拌混合物在85℃下加熱16小時。蒸發溶劑，將殘餘物溶解於甲醇(2ml)中且添加水(5ml)。過濾所沈澱之固體且藉由逆相HPLC(10mM乙酸銨/水，CH3CN)純化，溶離出兩種組分。第二溶離組分以固體形式分離且經鑑別為標題化合物。產量：35mg(21%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.9(d,3H),1.3(d,3H),1.4(d,3H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.6-3.65(m,2H),3.8(m,1H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.2(q,1H),4.6-4.7(m,2H),7.6(s,1H),11.5(s,1H),11.8(s,1H)。C22H22FN5O7 MS(ES)MH+：488.4：[α]D 20=-239(c=1；MeOH)。
亦自實例2之合成分離出(2S,4R,4aR)-11-氟-2,4-二甲基-8-[(4R)-4- 甲基-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基)-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮作為自HPLC純化溶離之第一組分：
產量：20mg(12%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.9(d,3H),1.3(d,3H),1.4(d,3H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.6(m,2H),3.75(m,1H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.2(q,1H),4.6-4.7(m,2H),7.6(s,1H),11.45(s,1H),11.8(s,1H)。C22H22FN5O7 MS(ES)MH+：488.4[α]D 20=+73(c=1；MeOH)。
除非另外指出，否則實例3至34係使用關於實例2之合成所述之方法(具有所指出之任何變化)由巴比妥酸及指定起始物質製備。
實例3 (2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-[(5S)-5-甲基-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
實例3係由中間物9製備。獲得作為HPLC純化之第二溶離組分之標題化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.9(d,3H),1.1(d,3H),1.45(d,3H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.65-3.7(m,2H),3.75(m,2H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.2(t,1H),4.95(h,1H),7.7(s,1H),11.4(s, 1H),11.8(s,1H)。C22H22FN5O7 MS(ES)MH+：488.4；[α]D 20=-130(c=1；MeOH)。
亦自實例3之合成分離出(2S,4R,4aR)-11-氟-2,4-二甲基-8-[(5S)-5-甲基-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基)-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮作為自HPLC純化溶離之第一組分：
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.9(d,3H),1.1(d,3H),1.45(d,3H),2.9(d,1H),3.10(t,1H),3.65(m,2H),3.7(m,2H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.2(t,1H),4.95(h,1H),7.75(s,1H),11.4(s,1H),11.8(s,1H)。C22H22FN5O7 MS(ES)MH+：488.4；[α]D 20=+101(c=1；MeOH)。
實例4 (2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-[(5R)-5-甲基-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
實例4係由中間物10製備。獲得作為HPLC純化之第一溶離組分之標題化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.9(d,3H),1.1(d,3H),1.45(d,3H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.65(m,2H),3.7-3.8(m,2H),3.9 (d,1H),4.1(d,1H),4.2(t,1H),4.95(h,1H),7.75(s,1H),11.45(s,1H),11.8(s,1H)。C22H22FN5O7 MS(ES)MH+：488.4；[α]D 20=-188(c=1；MeOH)。
亦自實例4之合成分離出(2S,4R,4aR)-11-氟-2,4-二甲基-8-[(5R)-5-甲基-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基)-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮作為自HPLC純化溶離之第二組分：
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.9(d,3H),1.1(d,3H),1.45(d,3H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.65(m,2H),3.7-3.8(m,2H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.2(t,1H),4.95(h,1H),7.7(s,1H),11.4(s,1H),11.8(s,1H)。C22H22FN5O7 MS(ES)MH+：488.4。[α]D 20=+179(c=1；MeOH)。
實例4之替代合成法 第一替代合成法
將於乙酸(8mL)與水(2mL)之混合物中之中間物12(1.67g，3.96mmol)及嘧啶-2,4,6(1H,3H,5H)-三酮(0.508g，3.96mmol)在110℃下加熱2小時。移除溶劑且藉由超臨界流體層析(具有30%異丙醇及70% CO2移動相之Chiralpak IA管柱)純化反應混合物，得到呈固體之標題化合物(1.560g，81%)作為第一溶離組分。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6)δ：0.9(d,3H),1.1(d,3H),1.45(d,3H),2.8-3.2(m,2H),3.6-4.3(m,7H),4.9-5.1(m,1H),7.75(s,1H),11.4(s,1H),11.8(s,1H)。C22H22FN5O7 MS(ES)MH+：488。
亦自實例4之合成(第一替代合成法)分離出(2R,4R,4aR)-11-氟-2,4-二甲基-8-[(5R)-5-甲基-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基)-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮作為自HPLC純化溶離之第二組分：
1H NMR(300MHz,DMSO-d 6)δ：0.95(d,3H),1.3(d,3H),1.5(d,3H),3.1(d,1H),3.5-4.3(m,8H),4.8-5.1(m,1H),7.75(s,1H),11.5(br.s.,2H)。C22H22FN5O7 MS(ES)MH+：488。
實例4(第二替代合成法)
將於3mL乙醇中之中間物20(64mg，0.17mmol)及嘧啶-2,4,6(1H,3H,5H)-三酮(25mg，0.20mmol)在120℃下加熱2小時。移除溶劑且藉由超臨界流體層析(具有30%異丙醇及70% CO2移動相之Chiralpak IA管柱)純化反應混合物，得到呈固體之標題化合物作為第一溶離組分。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6)δ 0.9(d,3H),1.1(d,3H),1.45(d,3H),2.8-3.2(m,2H),3.6-4.3(m,7H),4.9-5.1(m,1H),7.75(s,1H),11.4(s,1H),11.8(s,1H)。C22H22FN5O7 MS(ES)MH+：488。
實例5 (2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-[(4S)-4-甲基-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
實例5係由中間物21製備。藉由逆相HPLC(10mM乙酸銨/水，CH3CN)分離出標題化合物作為兩種組分中之第一溶離組分。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.9(d,3H),1.15(d,3H),1.4(d,3H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.5-3.6(m,2H),3.8(m,1H),3.9(d,1H),4.0(d,1H),4.2(q,1H),4.6-4.7(m,2H),7.6(s,1H),11.5(s,1H),11.8(s,1H)。C22H22FN5O7 MS(ES)MH+：488.4；[α]D 20=-92(c=1；MeOH)。
亦自實例5之合成分離出(2S,4R,4aR)-11-氟-2,4-二甲基-8-[(4S)-4-甲基-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基)-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮作為自HPLC純化溶離之第二組分：
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.9(d,3H),1.15(d,3H),1.4(d,3H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.6-3.7(m,2H),3.8-4.0(m,1H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.2(q,1H),4.6-4.7(m,2H),7.6(s,1H),11.5(s,1H),11.8(s,1H)。C22H22FN5O7 MS(ES)MH+：488.4；[α]D 20=+224(c=1；MeOH)。
實例5之替代合成法
將中間物22(1.14g，2.71mmol)及嘧啶-2,4,6(1H,3H,5H)-三酮(0.346g，2.71mmol)於乙酸(8mL)及水(2mL)中之溶液在110℃下加 熱2小時。移除溶劑且使用超臨界流體層析(具有30%甲醇及70% CO2移動相之Chiralpak IC管柱)純化反應混合物。將第一溶離化合物藉由溶解於乙腈(30mL)中且用水(60mL)稀釋來進一步純化，得到呈固體之標題化合物(0.910g，69.0%產率)。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6)δ：δ 0.9(d,3H),1.15(d,3H),1.4(d,3H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.6-3.7(m,2H),3.8(m,1H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.2(q,1H),4.6-4.75(m,2H),7.6(s,1H),11.4(s,1H),11.8(s,1H)。C22H22FN5O7 MS(ES)MH+：488。
亦自實例5之替代合成法之合成分離出(2R,4R,4aR)-11-氟-2,4-二甲基-8-[(4S)-4-甲基-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基)-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮作為自HPLC純化溶離之第二組分：
1H NMR(300MHz,DMSO-d 6)δ：1.0(d,3H),1.3(d,3H),1.4(d,3H),3.1(d,1H),3.5-4.3(m,7H),4.5-4.8(m,2H),7.6(s,1H),11.5(br.s.,1H),11.7(br.s.,1H)。C22H22FN5O7 MS(ES)MH+：488。
實例6 (2R,4S,4aS)-8-[(4S)-4-乙基-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-11-氟-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
實例6係由中間物23製備。獲得作為HPLC純化之第一溶離組分之標題化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.8(t,3H),0.9(d,3H),1.1(d,3H),1.75-1.9(m,2H),2.90(d,1H),1.8(t,1H),3.5(m,1H),3.65-3.7(m,1H),3.8-4.0(m,1H),3.9(d,1H),419(d,1H),4.3-4.3(m,1H),4.55(m,1H),4.6-4.7(m,1H),7.6(s,1H)。C23H24FN5O7 MS(ES)MH+：502.4；[α]D 20=-24(c=1；MeOH)。
亦自實例6之合成分離出(2S,4R,4aR)-8-[(4S)-4-乙基-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基)-11-氟-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,6-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮作為自HPLC純化溶離之第二組分：
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.8(t,3H),0.9(d,3H),1.1(d,3H),1.8(m,2H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.5-3.6(m,1H),3.6-3.7(m,1H),3.7(m,1H),3.8(m,1H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.3-4.35(m,1H),4.5-4.6(m,1H),7.6(s,1H)。C23H24FN5O7 MS(ES)MH+：502.4；[α]D 20=+101(c=1；MeOH)。
實例7 (2R,4S,4aS)-8-[(4R)-4-乙基-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-11-氟-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉- 5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
實例7係由中間物24製備。獲得作為HPLC純化之第二溶離組分之標題化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.8(t,3H),0.9(d,3H),1.15(d,3H),1.8-1.85(m,2H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.65(m,2H),3.8(m,1H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.3-4.4(m,1H),4.5-4.6(m,1H),4.6-4.7(m,1H),7.6(s,1H),11.5(s,1H),11.8(s,1H)。C23H24FN5O7 MS(ES)MH+：502.4；[α]D 20=+101(c=1；MeOH)。
亦自實例7之合成分離出(2S,4R,4aR)-8-[(4R)-4-乙基-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基)-11-氟-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮作為自HPLC純化溶離之第一組分：
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.8(t,3H),0.9(d,3H),1.15(d,3H),1.8-1.9(m,2H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.6-3.7(m,2H),3.8(m,1H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.3-4.35(m,1H),4.6(m,1H),4.65-4.7(m,1H),7.6(s,1H),11.5(s,1H),11.8(s,1H)。C23H24FN5O7 MS(ES)MH+：502.4；[α]D 20=+59(c=1；MeOH)。
實例8 (2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-[(4R)-4-甲基-2-側氧基-4-苯基-1,3-噁 唑啶-3-基]-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
實例8係由中間物25製備。獲得作為HPLC純化之第二溶離組分之標題化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.9(d,3H),1.1(d,3H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.6-3.7(m,2H),3.8(m,1H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.3(q,1H),5.0(t,1H),5.7(q,1H),7.2-7.4(m,5H),7.65(s,1H),11.6(br s,2H)。C27H24FN5O7 MS(ES)MH+：550.5；[α]D 20=-125(c=0.1；MeOH)。
亦自實例8之合成分離出(2S,4R,4aR)-11-氟-2,4-二甲基-8-[(4R)-2-側氧基-4-苯基-1,3-噁唑啶-3-基)-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮作為自HPLC純化溶離之第一組分：
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.9(d,3H),1.1(d,3H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.6-3.7(m,2H),3.7-3.8(m,1H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.3(q,1H),5.0(t,1H),5.7(q,1H),7.3-7.4(m,5H),7.65(s,1H),11.5(br s,1H),11.9(br s,1H)。C27H24FN5O7 MS(ES)MH+：550.5；[α]D 20=+249(c=0.1；MeOH)。
實例9 (2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-[(4S)-2-側氧基-4-苯基-1,3-噁唑啶-3-基]-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
實例9係由中間物26製備。獲得作為HPLC純化之第一溶離組分之標題化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.9(d,3H),1.1(d,3H),2.95(d,1H),3.1(t,1H),3.6(m,2H),3.65-3.7(m,1H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.35(q,1H),5.0(t,1H),5.7(q,1H),7.3-7.65(m,5H),7.65(s,1H),11.5(s,1H),11.8(s,1H)。C27H24FN5O7 MS(ES)MH+：550.5；[α]D 20=-228(c=1；MeOH)。
亦自實例9之合成分離出(2S,4R,4aR)-11-氟-2,4-二甲基-8-[(4S)-2-側氧基-4-苯基-1,3-噁唑啶-3-基)-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮作為自HPLC純化溶離之第二組分：
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.9(d,3H),1.1(d,3H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.6-3.7(m,2H),3.75(m,1H),3.9(d,1H),4.05(d,1H),4.3(q,1H),5.0(t,1H),5.7(q,1H),7.3-7.4(m,5H),7.7(s,1H),11.5(s,1H),11.8(s,1H)。C27H24FN5O7 MS(ES)MH+：550.5；[α]D 20=+151(c=1；MeOH)。
實例10 (2R,4S,4aS)-8-[(4R)-4-苯甲基-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-11-氟-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
實例10係由中間物27製備。獲得作為HPLC純化之第二溶離組分之標題化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.9(d,3H),1.1(d,3H),2.9(d,1H),3.1-3.2(m,3H),3.6-3.7(m,2H),3.8(m,1H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.3-4.4(m,1H),4.5(t,1H),4.8(m,1H),7.2(m,2H),7.2-7.3(m,3H),7.6(s,1H),11.65(br s,2H)。C28H26FN5O7 MS(ES)MH+：564.5；[α]D 20=-274(c=0.1；MeOH)。
亦自實例10之合成分離出(2S,4R,4aR)-8-[(4R)-4-苯甲基-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基)-11-氟-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮作為自HPLC純化溶離之第一組分：
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.9(d,3H),1.1(d,3H),2.9(d,1H),3.05-3.1(m,2H),3.1-3.2(m,1H),3.6-3.7(m,2H),3.8(m,1H),3.95(d,1H),4.1(d,1H),4.4(dd,1H),4.5(t,1H),4.8(m,1H),7.2(m,2H),7.2-7.3(m,3H),7.6(s,1H),11.7(br s,2H)。C28H26FN5O7 MS (ES)MH-：562.4；[α]D 20=+224(c=0.1；MeOH)。
實例11 (2R,4S,4aS)-8-[(4S)-4-苯甲基-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-11-氟-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
實例11係由中間物28製備。獲得作為HPLC純化之第一溶離組分之標題化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.9(d,3H),1.1(d,3H),2.9(d,1H),3.1-3.15(m,2H),3.2(m,1H),3.6-3.7(m,2H),3.8(m,1H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.4(dd,1H),4.5(t,1H),4.8(m,1H),7.2(m,2H),7.2-7.3(m,3H),7.6(s,1H),11.45(br s,1H),11.85(br s,1H)。C28H26FN5O7 MS(ES)MH+：564.5；[α]D 20=-115(c=0.1；McOH)。
亦自實例11之合成分離出(2S,4R,4aR)-8-[(4S)-4-苯甲基-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基)-11-氟-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮作為自HPLC純化溶離之第二組分：
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.9(d,3H),1.1(d,3H),2.9(d,1H),3.1-3.2(m,3H),3.6-3.7(m,2H),3.8(m,1H),3.9(d,1H),4.1(d, 1H),4.4(dd,1H),4.55(t,1H),4.8(m,1H),7.2-7.3(m,5H),7.6(s,1H),11.6(br s,2H)。C28H26FN5O7 MS(ES)MH+：564.5；[α]D 20=+163(c=0.1；MeOH)。
實例12 (2R,4S,4aS)-8-(5,5-二甲基-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基)-11-氟-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
實例12係由中間物29製備。獲得作為外消旋混合物之一部分之標題化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.9(d,3H),1.1(d,3H),1.5(s,6H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.65-3.7(m,2H),3.8(m,1H),3.9-3.95(m,3H),4.1(d,1H),7.8(s,1H),11.5(s,1H),11.8(s,1H)。C23H24FN5O7 MS(ES)MH+：502.4。
實例13 (2R,4S,4aS)-8-[(5S)-5-乙基-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-11-氟-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3H)-三酮
實例13係由中間物31製備。關於反應，使用100%乙酸，且在90℃下加熱3小時。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.9(d,3H),1.0(t,3H), 1.1(d,3H),1.8(q,2H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.6-3.7(m,2H),3.7-3.8(m,2H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.2(t,1H),4.8(q,1H),7.8(s,H),11.5(s,H),11.8(s,H)。
實例14 (2R,4S,4aS)-8-[(5R)-5-乙基-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-11-氟-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
實例14係由中間物30製備。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.9(d,3H),1.0(t,3H),1.1(d,3H),1.8(q,2H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.6-3.7(m,2H),3.8(m,2H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.2(t,1H),4.8(q,1H),7.7(s,1H),11.45(s,1H),11.8(s,1H)。C23H24FN5O7 MS(ES)MH+：502.4；[α]D 20=-177(c=1；MeOH)。
實例15 (2R,4S,4aS)-11-氟-8-[(4R)-4-(氟甲基)-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
實例15係由中間物35製備。獲得作為HPLC純化之第一溶離組分之標題化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.9(d,3H),1.1(d, 3H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.9(d,1H),3.65-3.7(m,1H),3.75-3.8(m,1H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.5(dd,1H),4.6(d,1H),4.7(m,1H),4.9(m,2H),7.6(s,1H),11.0(br s,2H)。C22H21F2N5O7 MS(ES)MH+：506.5；[α]D 20=-74.4(c=1.12；MeOH),RT=14.08min。
亦自實例15之合成分離出(2S,4R,4aR)-11-氟-8-[(4R)-4-(氟甲基)-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮作為自HPLC純化溶離之第二組分
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.9(d,3H),1.1(d,3H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.6(d,1H),3.65-3.7 m,1H),3.75-3.8(m,1H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.5(dd,1H),4.59(d,1H),4.70(m,1H),4.9(m,2H),7.6(s,1H),11.0(br s,2H)。C22H21F2N5O7 MS(ES)MH+：506.5；[α]D 20=+210(c=1.08；MeOH)；RT=14.78min。
實例16 (2R,4S,4aS)-11-氟-8-[(4S)-4-(氟甲基)-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
實例16係由中間物36製備。獲得作為HPLC純化之第二溶離組分 之標題化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.9(d,3H),1.1(d,3H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.6(d,1H),3.65-3.7(m,1H),3.75-3.8(m,1H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.5(dd,1H),4.6(d,1H),4.70(m,1H),4.9(m,2H),7.6(s,1H),11.5(s,1H),11.8(s,1H)。C22H21F2N5O7 MS(ES)MH+：506.5；[α]D 20=-38.6(c=1.08；MeOH),RT=21.50min。
亦自實例16之合成分離出(2S,4R,4aR)-11-氟-8-[(4S)-4-(氟甲基)-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮作為自HPLC純化溶離之第一組分：
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.9(d,3H),1.1(d,3H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.6(d,1H),3.65-3.7(m,1H),3.75-38(m,1H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.5(dd,1H),4.6(d,1H),4.70(m,1H),4.9(m,2H),7.6(s,1H),11.5(s,1H),11.8(s,1H)。C22H21F2N5O7 MS(ES)MH+：506.5；[α]D 20=+64.9(c=1.07；MeOH)：RT=17.62min。
實例17及18 (2R,4S,4aS)-11-氟-8-[(4S)-4-(甲氧基甲基)-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮及(2R,4S,4aS)-11-氟-8-[(4R)-4-(甲氧基甲基)-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
起始物質為中間物37與中間物38之混合物。根據指定程序進行起始物質之反應產生上述兩種非對映異構體，以及各非對映異構體相應的對映異構體。經由HPLC分離兩種非對映異構體。獲得各非對映異構體以及其相應對映異構體。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.9(d,3H),1.15(d,3H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.2(s,3H),3.5-3.55(m,1H),3.65-3.7(m,2H),3.8-3.9(m,2H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.45-4.5(m,1H),4.6-4.65(m,2H),7.7(s,1H),11.5(br s,1H),11.8(br s,1H)。C23H24FN5O8 MS(ES)MH+：518.4。
使用超臨界流體層析(具有20%甲醇及80% CO2移動相之Chiralpak IA管柱)自實例17與18之混合物中分離非對映異構體。分離到四種組分。
實例17 (2R,4S,4aS)-11-氟-8-[(4S)-4-(甲氧基甲基)-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
獲得作為HPLC純化之第一溶離組分之標題化合物。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ：0.9(s,3H),1.1(s,3H),2,9(d,1H),3.1(t,1H),3.25(s,3H),3.5(d,1H),3.6-3.7(m,2H),3.7-3.9(m,2H),3.9(d,1H), 4.1(d,1H),4.4(m,1H),4.6-4.7(m,2H),7.65(s,1H),11.5(br s,2H)。旋光度：[α]D 20=-128；C23H24FN5O8 MS(ES)MH+：518。
實例18 (2R,4S,4aS)-11-氟-8-[(4R)-4-(甲氧基甲基)-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
獲得作為HPLC純化之第四溶離組分之標題化合物。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ：0.9(s,3H),1.1(s,3H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.2(s,3H),3.5-3.7(m,3H),3.7-3.9(m,2H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.4(m,1H),4.6-4.7(m,2H),7.1(s,1H),11.5(br s,2H)。旋光度：[α]D 20=-189：C23H24FN5O8 MS(ES)MH+：518。
亦自實例17及18之合成分離出(2S,4R,4aR)-11-氟-8-[(4R)-4-(甲氧基甲基)-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮作為自HPLC純化溶離之第二組分：
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ：0.88(s,3H),1.1(s,3H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.25(s,3H),3.5-3.7(m,3H),3.7-3.9(m,2H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.4(m,1H),4.6-4.7(m,2H),7.6(s,1H),11.55(br s, 2H)。旋光度：[α]D 20=+135；C23H24FN5O8 MS(ES)MH+：518。
亦自實例17及18之合成分離出(2S,4R,4aR)-11-氟-8-[(4S)-4-(甲氧基甲基)-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮作為自HPLC純化溶離之第三組分：
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ：0.9(s,3H),1.1(s,3H),2.1(d,1H),3.1(t,1H),3.2(s,3H),3.5-3.7(m,3H),3.7-3.9(m,2H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.4(m,1H),4.6-4.7(m,2H),7.1(s,1H),11.6(br s,2H)。旋光度：[α]D 20=+208；C23H24FN5O8 MS(ES)MH+：518。
實例17之替代合成法
將中間物40(0.67g，1.5mmol)及巴比妥酸(0.21g，1.6mmol)於乙酸(10mL)中之經攪拌溶液加熱至95℃維持4小時。蒸發溶劑且將殘餘物溶解於甲醇(2mL)中。添加水(5mL)以沈澱固體，將其收集且藉由對掌性HPLC[Chiralpak IC(250×4.6)mm；己烷：乙醇(80：20)；1.0ml/min]層析，以分離作為第二溶離組分之標題化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.9(d,3H),1.1(d,3H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.25(s,3H),3.5(d,1H),3.6-3.7(m,2H),3.85(m,1H),3.85-3.9(d,1H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.45-4.5(m,1H),4.6-4.7(m,2H),7.65(s,1H),11.5(s,1H),11.8(s,1H)。C23H24FN5O8 MS(ES)MH+：518.4；[α]D 20=-93.8(c=1.14；MeOH),RT=20.7min。
亦自實例17之合成(替代合成法)分離出(2S,4R,4aR)-11-氟-8-[(4S)-4-(甲氧基甲基)-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基)-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫- 2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮作為自HPLC純化溶離之第一組分：
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.9(d,3H),1.1(d,3H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.2(s,3H),3.5(d,1H),3.6-3.7(m,2H),3.85(m,1H),3.85-3.9(d,1H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.45-4.5(m,1H),4.6-4.65(m,2H),7.7(s,1H),11.5(s,1H),11.8(s,1H)。C23H24FN5O8 MS(ES)MH+：518.4；[α]D 20=+159.4(c=1.04；MeOH),RT=17.8min。
實例19 (2R,4S,4aS)-11-氟-8-((S)-5-(氟甲基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
實例19由中間物44製備。獲得作為用以分離主要溶離組分之超臨界流體層析(Chiralpak IA管柱，80% CO2，20%異丙醇)之主要溶離組分之標題化合物。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ：0.9(d,3H)1.1(d,3H)2.8-3.2(m,2H)3.6-4.0(m,5H)4.0-4.3(m,2H)4.6-5.2(m,3H)7.75(s,1H)11.4(s,1H)11.8(s,1H)。C22H21F2N5O7 MS(ES)MH+：506。
實例20 (2R,4S,4aS)-11-氯-8-[(5S)-4-(甲氧基甲基)-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
實例20係由中間物53製備。獲得作為逆相HPLC(20-50%乙腈/水梯度加上0.1% TFA)之主要溶離組分之標題化合物。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ：0.9(d,3H),1.2(d,3H),2.8-3.2(m,2H),3.3(d,6H),3.5-3.75(m,3H),3.75-4.1(m,3H),4.2(t,1H),4.5(d,1H)4.8-5.3(m,1H),7.85(s,1H),11.4(br.s,1H),11.8(br s.,1H)。C23H24ClN5O8 MS(ES)MH+：534。
實例21 (2R,4S,4aS)-11-氯-8-[(5R)-4-(甲氧基甲基)-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
起始物質為中間物54。獲得作為之逆相HPLC(20-50%乙腈/水梯度加上0.1% TFA)之主要溶離組分之標題化合物。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ：0.9(d,3H),1.2(d,3H),2.9-3.2(m,2H),3.2-3.45(m,6H),3.5-3.75(m,3H),3.8-4.1(m,3H),4.15(t,1H),4.35-4.6(m,1H),4.85-5.1(m,1H),7.85(s,1H)。C23H24ClN5O8 MS(ES)MH+：534。
實例22 ((2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((R)-5-甲基-2-側氧基噁唑啶-3-基)-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
實例22係由中間物55製備。獲得作為超臨界流體層析(Chiralpak IA管柱，60% CO2，40% MeOH)之主要溶離組分之標題化合物。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ：0.9(d,3H)1.2(d,3H)1.45(d,3H)2.9-3.1(m,2H)3.6-3.8(m,3H)3.9-4.05(m,2H)4.2(dd,1H)4.5(d,1H)7.85(s,1H)11.4(s,1H)11.8(s,1H)。C22H22ClN5O7 MS(ES)MH+：504。
實例23 (2R,4S,4aS)-8-((4S,5R)-4,5-二甲基-2-側氧基噁唑啶-3-基)-11-氟-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
實例23係由中間物56製備。獲得作為逆相HPLC(20-50%乙腈/水梯度加上0.1% TFA)之主要溶離組分之標題化合物。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ：0.9(d,3H)1.15(d,3H),1.3(d,3H),1.4(d,3H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.6-3.7(m,2H),3.7-3.8(m,1H),3.9(d,1H), 4.1(d,1H),4.5-4.6(m,1H),4.8-5.1(m,1H),7.6(s,1H),11.4(s,1H),11.8(s,1H)。C23H24FN5O7 MS(ES)MH+：502；[α]D20=-221(c=0.1；MeOH)。
實例24 (2R,4S,4aS)-8-((4R,5S)-4,5-二甲基-2-側氧基噁唑啶-3-基)-11-氟-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
實例24係由中間物57製備。獲得作為逆相HPLC(20-50%乙腈/水梯度加上0.1% TFA)之主要溶離組分之標題化合物。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ：0.9(d,3H),1.15(d,3H),1.35(d,3H),1.33(d,3H),2.8-3.0(m,1H),3.1(t,1H),3.5-3.7(m,2H),3.7-3.9(m,1H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.6(m,1H),5.0(m,1H),7.6(s,1H),11.5(s,1H),11.8(s,1H)。C23H24FN5O7 MS(ES)MH+：502；[α]D20=-117(c=0.1；MeOH)。
實例25 (2R,4S,4aS)-8-((S)-4-烯丙基-2-側氧基噁唑啶-3-基)-11-氟-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
實例25係由中間物61製備。獲得作為逆相HPLC(20-50%乙腈/水梯度加上0.1% TFA)之主要溶離組分之標題化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：0.7-1.0(m,3H),1.1(d,3H),2.55-2.65(m,2H),2.7(d,1H),2.8-3.0(m,2H),3.1(t,1H),3.5-3.7(m,2H),3.7-3.9(m,1H),4.1(d,1H),4.6-4.7(m,2H),5.0-5.3(m,2H),5.7-5.85(m,1H),7.6(s,1H),11.4(s,1H),11.8(s,1H)。C24H24FN5O7 MS(ES)MH+：514。
實例26 (2R,4S,4aS)-11-氟-8-((S)-5-(羥甲基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
實例26係由中間物43製備。獲得作為用以分離主要溶離組分之超臨界流體層析(Chiralpak IA管柱，70% CO2，30%甲醇)之主要溶離組分之標題化合物。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ：0.9(d,3H)1.1(d,3H)2.9(d,1H)3.0-3.2(m,1H)3.5-3.8(m,5H)3.85-4.0(m,2H)4.0-4.2(m,2H)4.75-4.9(m,1H)5.2(t,1H)7.8(s,1H)11.4(s,1H)11.75(s,1H)。C22H22FN5O8 MS(ES)MH+：504。
實例27及28 (2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-[(4R-(四氫-2H-哌喃-4-基)-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮及(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-[(4S-(四氫-2H-哌喃-4-基)-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并 [4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
實例27及實例28係由中間物65製備。藉由逆相HPLC(20-50%乙腈/水梯度加上0.1% TFA)純化分離標題化合物。分離到對應於標題化合物之兩種非對映異構體，但各噁唑啶酮環之組態不確定。
實例27為第一溶離非對映異構體。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：0.9(d,3H),1.15(d,3H),1.2-1.5(m,4H),2.9(d,1H),3.0-3.3(m,4H),3.6-3.7(m,4H),3.7-4.0(m,3H),4.1(d,1H),4.4-4.7(m,2H),7.6(s,1H),11.5(s,1H),11.8(s,1H)。C26H28FN5O8 MS(ES)MH+：558。
實例28為第二溶離非對映異構體。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：0.9(d,3H)1.15(d,3H)1.2-1.5(m,4H)2.2-2.4(m,1H)2.9(d,1H)3.0-3.3(m,3H)3.5-3.7(m,2H)3.7-4.0(m,4H)4.1(d,1H)4.4-4.7(m,3H)7.6(s,1H)11.45(s,1H)11.8(s,1H)。C26H28FN5O8 MS(ES)MH+：558。
實例29 (2R,4S,4aS)-11-氟-8-((S)-4-(3-羥丙基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
實例29係由中間物69製備。獲得作為用以分離主要溶離組分的超臨界流體層析(Chiralpak IA管柱)之主要溶離組分之標題化合物。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ：0.9(d,3H)1.1(d,3H)1.3-1.5(m,2H)1.7-2.0(m,2H)2.9(d,1H)3.0-3.2(m,1H)3.3-3.45(m,2H)3.6-3.85(m,3H)3.9-4.15(m,2H)4.3-4.7(m,4H)7.6(s,1H)11.45(s,1H)11.8(s,1H)。C24H26FN5O8 MS(ES)MH+：532。
實例30 (2R,4S,4aS)-11-氟-8-((S)-4-(3-氟丙基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
起始物質為中間物70。用獲得作為以分離主要溶離組分的超臨界流體層析(Chiralpak IA管柱)之主要溶離組分之標題化合物。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ：0.9(d,3H)1.15(d,3H)1.5-2.05(m,4H)2.9(d,1H)3.05-3.2(m,1H)3.6-4.2(m,5H)4.3-4.7(m,5H)7.6(s,1H)11.5(s,1H)11.7(s,1H)。C24H25F2N5O7 MS(ES)MH+：534。
實例31 (2R,4S,4aS)-11-氟-8-((S)-4-(2-羥乙基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
實例13係由中間物74製備。獲得作為超臨界流體層析(Chiralpak IA管柱)之主要溶離組分之標題化合物。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ：0.9(d,3H),1.2(d,3H),1.8-1.9(m,1H),2.1-2.3(m,1H),3.0(d,1H),3.1-3.2(m,1H),3.5-3.6(m,2H),3.6-3.7(m,2H),3.8-3.9(m,1H),4.0(d,1H),4.1(d,1H),4.5(q,1H),4.6-4.8(m,3H),7.7(s,1H),11.5,(br.s,2H)。C23H24FN5O8 MS(ES)MH+：518.5。
實例32 (2R,4S,4aS)-11-氯-8-((S)-5-(氟甲基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
實例32係由中間物77製備。獲得作為用以分離主要溶離組分之超臨界流體層析(Chiralpak IA管柱，70% CO2，30% EtOH)之主要溶離組分之標題化合物。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ：0.9(d,3H)1.3(d,3H)2.9-3.1(m,2H)3.6-3.7(m,2H)3.8-4.0(m,3H)4.25(t,1H)4.45-4.9(m,3H)5.0-5.2(m,1H)7.85(s,1H)11.5(s,1H)11.7(s,1H)。C22H22ClFN5O7 MS(ES)MH+：522。
實例33 (2R,4S,4aS)-11-氯-8-((S)-4-(3-羥丙基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)-2,4-二甲 基-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
實例33係由中間物79製備。獲得作為用以分離主要溶離組分之超臨界流體層析(Chiralpak IA管柱，70% CO2，30%甲醇)之主要溶離組分之標題化合物。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ：0.9(d,3H)1.15(d,3H)1.5-2.05(m,4H)2.9(d,1H)3.05-3.2(m,1H)3.6-4.2(m,5H)4.3-4.7(m,5H)7.6(s,1H)11.5(s,1H)11.7(s,1H)。C24H25F2N5O7 MS(ES)MH+：534。
實例34 (2R,4S,4aS)-11-氯-8-((S)-4-(3-氟丙基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
實例34係由中間物80製備。獲得作為用以分離主要溶離組分之超臨界流體層析(Chiralpak IA管柱，60% CO2，40% MeOH)之主要溶離組分之標題化合物。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ：0.9(d,3H)1.2(d,3H)1.5-2.0(m,4H)2.9-3.1(m,2H)3.5-3.7(m,2H)3.9-4.05(m,2H)4.3-4.75(m,6H)7.7(s,1H)11.4(s.,1H)11.75(s,1H)。 C24H25ClFN5O7 MS(ES)MH+：550。
實例35 (2R,4S,4aS)-11-氟-8-[(5S)-4-(甲氧基甲基)-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
將於乙酸(8mL)與水(2mL)之混合物中之中間物81(445mg，0.99mmol)及嘧啶-2,4,6(1H,3H,5H)-三酮(126mg，0.99mmol)在110℃下加熱2h。移除溶劑且使用超臨界流體層析(具有25%之85：15乙腈：甲醇及75% CO2移動相之(S,S)Whelk-O1管柱)純化反應混合物，得到呈固體之(2R,4S,4aS)-11-氟-8-((S)-5-(甲氧基甲基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮(368mg，72.1%)作為第一溶離化合物。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6)δ：1.0(d,3H),1.3(d,3H),1.4(d,3H),3.1(d,1H),3.-4.3(m,7H),4.5-4.8(m,2H),7.6(s,1H),11.5(br.s.,1H),11.7(br.s.,1H)。C23H24FN5O8 MS(ES)MH+：518。
亦自實例35之合成分離出((2R,4R,4aR)-11-氟-8-[(5S)-4-(甲氧基甲基)-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基)-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮(27mg)作為自HPLC純化溶離之第二組分：
1H NMR(300MHz,DMSO-d 6)δ：0.9(d,3H),1.3(d,3H),3.1(d,1H),3.3(s,3H),3.5-4.3(m,10H),4.8-5.1(m,1H),7.8(s,1H),11.4(s,1H),11.7(s,1H)。C23H24FN5O8 MS(ES)MH+：518。
實例36 (2R,4S,4aS)-11-氟-8-[(5R)-4-(甲氧基甲基)-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
將中間物82(487mg，1.08mmol)及嘧啶-2,4,6(1H,3H,5H)-三酮(138g，1.08mmol)於乙酸(8mL)及水(2mL)中之混合物在110℃下加熱2小時。移除溶劑且使用超臨界流體層析(具有40%異丙醇及60% CO2移動相之Chiralpak IA管柱)純化反應混合物，得到呈固體之標題化合物(408mg，73.1%)作為第一溶離組分。1H NMR(300MHz,DMSO-d 6)δ：0.9(d,3H),1.1(d,3H),2.9-3.2(m,2H),3.3(s,3H),3.6-4.2(m,9H),4.9-5.1(m,1H),7.75(s,1H),11.4(s,1H),11.8(s,1H)。 C23H24FN5O8 MS(ES)MH+：518。
實例37 (2R,4S,4aS)-11-氟-8-[(5R)-5-(羥甲基)-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g] 喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
向中間物87(0.10g，0.22mmol)於乙酸(5mL)中之溶液中添加巴比妥酸(0.04g，0.3mmol)且在95℃下加熱混合物3小時。在真空下完全移除揮發物，添加水(2mL)至殘餘物中且過濾。使用乙酸銨方法使殘餘物經受製備型HPLC，獲得純標題化合物。產量：0.03g(26%)1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.88(d,3H),1.13(d,3H),2.90(d,1H),3.13(t,1H),3.58-3.78(m,5H),3.89-3.94(m,2H),4.08-4.14(m,2H),4.86-4.87(m,1H),5.26(t,1H),7.77(s,1H),11.44(s,1H),11.81(s,1H)。C22H22FN5O8 MS(ES)MH+：504.3。
實例38 (2R,4S,4aS)-11-氟-8-[(5R)-5-(氟甲基)-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
向中間物84(0.05g，0.11mmol)於乙酸(2mL)中之溶液中添加巴比妥酸(0.02g，0.11mmol)且在95℃下加熱混合物3小時。在真空下完全移除揮發物，添加水(2mL)至殘餘物中且過濾。在使用乙酸銨及乙腈方法藉由製備型HPLC純化之後，獲得標題化合物。產量：0.02g(34%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.89(d,3H),1.14(d,3H), 2.90(d,1H),3.11(t,1H),3.62-3.71(m,2H),3.71-3.78(m,1H),3.88-3.95(m,2H),4.10(d,1H),4.22(t,1H),4.67-4.71(m,1H),4.77-4.84(m,1H),5.09-5.12(m,1H),7.76(s,1H),11.46(s,1H),11.83(s,1H)。C22H21F2N5O7 MS(ES)MH+：506.5。
實例39 (2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((S)-2-側氧基-4-乙烯基噁唑啶-3-基)-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
向中間物88(0.15g，0.34mmol)於乙酸(5mL)中之經攪拌溶液中添加巴比妥酸(0.05g，0.38mmol)且在95℃下加熱混合物3小時。真空移除揮發物且將所得殘餘物溶解於甲醇(0.5mL)中，向其中添加水(3mL)且過濾且用水洗滌殘餘物，獲得標題化合物。產量：0.05g(30%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.90(d,3H),1.14(d,3H),2.94(d,1H),3.11(t,1H),3.64-3.68(m,2H),3.76-3.80(m,1H),3.94(d,1H),4.10(d,1H),4.28-4.31(m,1H),4.76(t,1H),5.11(q,1H),5.30(d,1H),5.36(d,1H),5.90(dd,1H),7.57(m,1H),11.48(s,1H),11.84(s,1H)。C23H22FN5O7 MS(ES)MH+：500.3。
實例40 (2R,4S,4aS)-11-氟-8-{(5R)-5-[(羥亞胺基)甲基]-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基}-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
向中間物89(0.15g，0.3mmol)於乙酸(10mL)中之溶液中添加巴比妥酸(0.05g，0.4mmol)且在95℃下加熱混合物3小時。在真空下完全移除揮發物，添加水(4mL)至殘餘物中且過濾。將由此獲得之固體使用氯仿/甲醇之梯度藉由矽膠管柱層析進一步純化。獲得呈未定義之E型與Z型異構體(比率為1：2)混合物形式之此化合物。產量：0.06g(34%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.89(d,3H),1.14(d,3H),2.93(d,1H),3.11(t,1H),3.65-3.80(m,3H),3.94(d,1H),4.10(d,1H),4.30-4.32及4.47-4.51(m,1H),4.76及4.88(t,1H),5.24-5.30及5.48-5.55(m,1H),7.10-7.14及7.51-7.75(m,2H),11.28及11.48(s,1H),11.45(s,1H),11.85(s,1H)。C22H21FN6O8 MS(ES)MH+：517.3。
實例41 (4S)-3-[(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-2',4',6'-三側氧基-1,1',2,3',4,4',4a,6'-八氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-8-基]-2-側氧基-1,3-噁唑啶-4-甲腈
向中間物92(0.08g，0.17mmol)於乙酸(5mL)中之溶液中添加巴比妥酸(0.03g，0.2mmol)且在95℃下加熱混合物3小時。在真空下完全移除揮發物，添加水(2mL)至殘餘物中且過濾。將所獲得之固體使用氯仿與甲醇之9：1混合物藉由製備型TLC進一步純化。產量：0.03g (34%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.89(d,3H),1.15(d,3H),2.92(d,1H),3.13(t,1H),3.65-3.82(m,2H),3.95(d,1H),4.82-4.86(m,2H),5.58-5.61(m,1H),7.68(s,1H),11.49(s,1H),11.84(s,1H)。 C22H19FN6O7 MS(ES)MH+：499.3。
實例42 (2R,4S,4aS)-11-氟-8-{(4S)-4-[(甲氧亞胺基)甲基]-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基}-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
向中間物93(0.07g，0.15mmol)於乙酸(5mL)中之溶液中添加巴比妥酸(0.03g，0.2mmol)且在95℃下加熱混合物3小時。在真空下完全移除揮發物，添加水(2mL)至殘餘物中且過濾。將所得固體使用氯仿與甲醇之9：1混合物藉由製備型TLC進一步純化。獲得呈未定義之E型與Z型異構體(比率為約1：0.65)混合物形式之此化合物。產量：0.03g(30%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.89(d,3H),1.13(d,3H),2.93(d,1H),3.11(t,1H),3.65-3.80(m,3H),3.74及3.85(s,3H),3.94(d,1H),4.10(d,1H),4.30-4.32及4.47-4.51(m,1H),4.76及4.88(t,1H),5.24-5.30及5.48-5.55(m,1H),7.27及7.68(d,1H),7.63及7.74(s,1H),11.45(s,1H),11.82(s,1H)。C23H23FN6O8 MS(ES)MH+：531.2。
實例43 (2R,4S,4aS)-11-氟-8-{(5R)-5-(甲氧亞胺基)甲基]-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基}-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
向中間物94(0.13g，0.28mmol)於乙酸(5mL)中之溶液中添加巴比妥酸(0.04g，0.28mmol)且在95℃下加熱混合物3小時。在真空下完全移除揮發物，添加水(2mL)至殘餘物中且過濾。將由此獲得之固體使用氯仿與甲醇之9：1混合物藉由製備型TLC進一步純化。獲得呈未定義之E型與Z型異構體(比率為約3：1)混合物形式之此化合物。產量：0.03g(20%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.94(d,3H),1.14(d,3H),2.91(d,1H),3.11(t,1H),3.62-3.67(m,2H),3.71-3.81(m,1H),3.84-3.95(m,4H),4.10-4.16(m,2H),4.29-4.39(m,1H),5.37-5.42及5.73-5.75(m,1H),7.30及7.73(d,1H),7.76(s,1H),11.46(s,1H),11.83(s,1H)。C23H23FN6O8 MS(ES)MH+：531.2。
實例44 (2R,4S,4aS)-8-[(5R)-5-(疊氮基甲基)-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-11-氟-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
向中間物96(0.12g，0.25mmol)於乙酸(3mL)中之溶液中添加巴比妥酸(0.03g，0.25mmol)且在95℃下加熱混合物3小時。在真空下完全移除揮發物，添加水(2mL)至殘餘物中且過濾。使用甲酸/乙腈方法使殘餘物經受製備性HPLC，獲得純標題化合物。產量：0.03g (22%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.88(d,3H),1.13(d,3H),2.90(d,1H),3.14(t,1H),3.63-3.70(m,2H),3.74-3.86(m,4H),3.93(d,1H),4.10(d,1H),4.18(t,1H),5.00-5.06(m,1H),7.75(s,1H),11.44(s,1H),11.81(s,1H)。C22H21FN8O7 MS(ES)MH+：529.3。
實例45 (2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((R)-4-((甲硫基)甲基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
向中間物101(0.20g，0.43mmol)於乙酸(10mL)中之溶液中添加巴比妥酸(0.066g，0.51mmol)且在95℃下加熱混合物3小時。在真空下完全移除揮發物，添加水(2mL)至殘餘物中且過濾。將由此獲得之固體使用乙酸銨/乙腈方法藉由製備型HPLC進一步純化。產量：0.05g(22%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.87(d,3H),1.13(d,3H),2.04(s,3H),2.9(d,1H),3.01-3.07(m,2H),3.10(t,1H),3.62-3.68(m,2H),3.75-3.79(m,1H),3.92(d,1H),4.09(d,1H),4.37(dd,1H),4.67-4.72(m,1H),4.78-4.83(m,1H),7.64(s,1H),11.47(s,1H),11.82(s,1H)。C23H24FN5O7S MS(ES)MH+：534.4。
實例46 (2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((R)-4-((甲磺醯基)甲基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
使用中間物102(0.20g，0.40mmol)，依循關於實例45之製備所述之程序合成實例46。產量：0.06(26%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.88(d,3H),1.14(d,3H),2.92(d,1H),3.09-3.14(m,4H),3.63-3.69(m,2H),3.77-3.82(m,2H),3.91-3.95(m,2H),4.09(d,1H),4.64(dd,1H),4.78(t,1H),5.07-5.08(m,1H),7.63(s,1H),11.44(s,1H),11.83(s,1H)。C23H24FN5O9S MS(ES)MH+：566.2；[α]D 20=-105.76(c=1.00；MeOH)。
實例47及實例48 (2R,4S,4aS)-8-((R)-4-(疊氮基甲基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)-11-氟-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮及(2R,4S,4aS)-8-((S)-4-(疊氮基甲基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)-11-氟-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
向中間物109(0.25g，0.54mmol)於乙酸(10mL)中之溶液中添加巴比妥酸(0.07g，0.54mmol)且在90℃下加熱混合物16小時。在真空下完全移除揮發物，添加水(2mL)至殘餘物中且過濾。將由此獲得之固體使用甲醇/氯仿之梯度藉由矽膠管柱層析進一步純化。產量：0.25g(86%)。
對掌性HPLC分析[chiralcel OD-H(250×4.6)mm,5μm；移動相『A』：己烷；移動相『B』：乙醇(50：50)]顯示存在1：1比率之兩種異構體，將其藉由對掌性HPLC[管柱：chiralcel OD-H；移動相：己烷：乙醇(50：50)]分離。
實例47為第一溶離非對映異構體。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.89(d,3H),1.15(d,3H),2.92(d,1H),3.12(t,1H),3.64-3.81(m,4H),3.94(d,1H),4.09-4.15(m,2H),4.37-4.43(m,1H),4.67(t,1H),4.76-4.79(m,1H),7.67(s,1H),11.48(s,1H),11.84(s,1H)。RT=8.21min：產量：0.04g。C22H21FN8O7 MS(ES)MH+：529.3。
實例48為第二溶離非對映異構體。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.89(d,3H),1.15(d,3H),2.92(d,1H),3.11(t,1H),3.63-3.79(m,4H),3.94(d,1H),4.09-4.16(m,2H),4.39-4.41(m,1H),4.67(t,1H),4.74-4.76(m,1H),7.64(s,1H),11.48(s,1H),11.84(s,1H)。RT=11.40min：產量：0.03g。C22H21FN8O7 MS(ES)MH+：529.3。
實例49 (2R,4S,4aS)-8-[(4S)-4-(乙氧基甲基)-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-11-氟-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
向中間物113(0.20g，0.43mmol)於乙酸(4mL)中之溶液中添加巴比妥酸(0.06g，0.43mmol)且在95℃下加熱混合物2小時。在真空下完全移除揮發物，且將殘餘物使用乙酸銨/乙腈方法藉由逆相製備型HPLC純化。將由此獲得之灰白色固體於水(1mL)中攪拌10分鐘，過 濾且乾燥。產量：0.08g(35%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：0.88(d,3H),1.03(t,3H),1.14(d,3H),2.91(d,1H),3.11(t,1H),3.40-3.44(m,2H),3.56-3.68(m,3H),3.74-3.80(m,1H),3.85(dd,1H),3.93(d,1H),4.09(d,1H),4.41(dd,1H),4.62-4,70(m,2H),7.64(s,1H),11.45(s,1H),11.81(s,1H)。C24H26FN5O8 MS(ES)MH+：532.4。
實例50 (2R,4S,4aS)-11-氟-8-{(4S)-4-[(2-甲氧基乙氧基)甲基]-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基}-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
使用中間物117(0.15g，具有37%產物)，依循關於實例49之製備所述之程序合成實例50。使用乙酸銨/甲醇方法藉由逆相製備型HPLC進行純化。產量：0.01g。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.88(d,3H),1.14(d,3H),2.91(d,1H),3.08-3.14(m,1H),3.15(s,3H),3.34-3.38(m,2H),3.50-3.52(m,2H),3.60-3.68(m,3H),3.74-3.80(m,1H),3.88-3.94(m,2H),4.09(d,1H),4.40-4.43(m,1H),4.64-4.68(m,2H),7.64(s,1H),11.60(br s,2H)。C22H28FN5O9 MS(ES)MH+：562.4。
實例51 (2R,4S,4aS)-8-((R)-4-(二氟甲基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)-11-氟-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
中間物123(90mg，0.13mmol)及17mg巴比妥酸(17mg，0.13mmol)於2-丙醇(5mL)中之混合物在90℃下加熱16小時。真空移除揮發物，且將殘餘物於水(5mL)中攪拌10分鐘且過濾。對所收集之固體殘餘物之分析顯示存在兩種非對映異構體之混合物。將固體懸浮於甲醇(5mL)中且在微波反應器中在150℃下加熱2小時。添加水(10mL)且藉由過濾收集固體且真空乾燥。將由此獲得之固體使用乙酸銨水溶液/乙腈梯度藉由製備型HPLC進一步純化。產量：70mg(60%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.89(d,3H),1.15(d,3H),2.92(d,1H),3.12(t,1H),3.65-3.72(m,2H),3.78-3.82(m,1H),3.95(d,1H),4.11(d,1H),4.66(dd,1H),4.73(t,1H),5.04-5.10(m,1H),6.59(t,1H),7.64(s,1H),11.65(s,1H),11.83(s,1H)。19F NMR(376.5MHz,DMSO-d6)δ：-130.45(d),-133.57(d),-158.12(s)。C22H20F3N5O7 MS(ES)MH+：524.4。
實例52 (2R,4S,4aS)-8-((S)-4-環丙基-2-側氧基噁唑啶-3-基)-11-氟-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
將中間物128(1.0g，2.48mmol)、巴比妥酸(0.04g，0.29mmol) 於2-丙醇(2mL)中之混合物在微波爐中在130℃下加熱2小時。真空移除揮發物，且將殘餘物於水(5mL)中攪拌10分鐘且過濾。將此物懸浮於甲醇(2mL)中且向其中添加水(5mL)且過濾。產量：1.0g(79%)。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.28-0.30(m,1H),0.42-0.44(m,1H),0.52-0.57(m,2H),0.89(d,3H),1.15(d,3H),2.94(d,1H),3.12(t,1H),3.62-3.69(m,2H),3.73-3.82(m,1H),3.95(d,1H),4.11(d,1H),4.19-4.21(m,1H),4.23-4.28(m,1H),4.66(t,2H),7.53(s,1H),11.48(s,1H),11.84(s,1H)。C24H24FN5O7 MS(ES)MH+：514.4。
實例53及54 (2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((R)-2-側氧基-5-(吡啶-2-基)噁唑啶-3-基)-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮及(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((S)-2-側氧基-5-(吡啶-2-基)噁唑啶-3-基)-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
使中間物133(1.0g，2.27mmol)、巴比妥酸(0.32g，2.50mmol)於2-丙醇(10mL)中之混合物在微波爐中在130℃下歷時2小時之時間。真空移除揮發物，且將殘餘物於水(5mL)中攪拌10分鐘且過濾。將殘餘物在Combi-Flash儀器中使用甲醇/氯仿之梯度加以純化。產量：1.0g(80%)。對掌性HPLC分析[管柱：Chiralpak IC(250×4.6)mm，移動相：己烷：乙醇(25：75)]顯示存在45%+6%+5%+42%之異構體。藉由對掌性HPLC[管柱：Chiralpak IC；移動相：己烷：乙醇(25：75)]分離兩種主要異構體。
實例53為第一溶離非對映異構體。RT=8.98min：[α]D 25=-197.07(c=0.123；二甲基甲醯胺)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.88(d,3H),1.13(d,3H),2.92(d,1H),3.11(t,1H),3.63-3.70(m,2H),3.76-3.81(m,1H),3.93(d,1H),4.10(d,1H),4.26(dd,1H),4.54(t,1H),5.95(dd,1H),7.45(ddd,1H),7.62(d,1H),7.78(s,1H),7.91(dt,1H),8.65(d,1H),11.40(s,1H),11.80(s,1H)。19F NMR(376.5MHz,DMSO-d 6 )δ：-158.1(s)。產量：0.25g。C26H23FN6O7 MS(ES)MH+：551.4。
實例54為第二溶離非對映異構體。RT=17.50min：[α]D 25=-109.13(c=0.103；二甲基甲醯胺)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.88(d,3H),1.14(d,3H),2.92(d,1H),3.12(t,1H),3.62-3.69(m,2H),3.77-3.81(m,1H),3.93(d,1H),4.10(d,1H),4.28(dd,1H),4.52(t,1H),5.95(dd,1H),7.45(ddd,1H),7.63(d,1H),7.78(s,1H),7.91(dt,1H),8.64(d,1H),11.40(s,1H),11.80(s,1H)。19F NMR(376.5MHz,DMSO-d 6 )δ：-158.1(s)。產量：0.22g。C26H23FN6O7 MS(ES)MH+：551.4。
實例55及56 (2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((R)-2-側氧基-4-(吡啶-2-基)噁唑啶-3-基)-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮及(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((S)-2-側氧基-4-(吡啶-2-基)噁唑啶-3-基)-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
將中間物138(1.0g，2.27mmol)、巴比妥酸(0.32g，2.50mmol)於2-丙醇(10mL)中之混合物在微波爐中在130℃下加熱2小時。真空移除揮發物，且將殘餘物於水(5mL)中攪拌10分鐘且過濾。將殘餘物在Combi-Flash儀器中使用甲醇/氯仿之梯度加以純化。產量：0.95g(90%)。對掌性HPLC分析[管柱：Chiralpak IC(250×4.6)mm，移動相：己烷：乙醇(25：75)]顯示存在45%+6%+5%+42%之異構體。藉由對掌性HPLC[管柱：Chiralpak IC；移動相：己烷：乙醇(25：75)]分離兩種主要異構體。
實例55為第一溶離非對映異構體。RT=10.22min：[α]D 25=-339.4(c=0.10；二甲基甲醯胺)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.88(d,3H),1.12(d,3H),2.91(d,1H),3.09(t,1H),3.60-3.67(m,2H),3.71-3.76(m,1H),3.93(d,1H),4.09(d,1H),4.35-4.43(m,1H),4.94(t,1H),5.72(dd,1H),7.33-7.37(m,1H),7.51(d,1H),7.75(s,1H),7.82(dt,1H),8.54(d,1H),11.48(s,1H),11.83(s,1H)。19F NMR(376.5MHz,DMSO-d 6 )δ：-158.3(s)。產量：0.20g。C26H23FN6O7 MS(ES)MH+：551.4。
實例56為第二溶離非對映異構體。RT=6.67min：[α]D 25=-109.13(c=0.112；二甲基甲醯胺)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.89(d,3H),1.12(d,3H),2.92(d,1H),3.08(t,1H),3.64-3.67(m,2H),3.69-3.71(m,1H),3.92(d,1H),4.07(d,1H),4.39-4.42(m,1H),4.94(t,1H),5.70(dd,1H),7.33-7.36(m,1H),7.49(d,1H),7.72(s,1H),7.82(dt,1H),8.52(d,1H),11.48(s,1H),11.83(s,1H)。19F NMR(376.5MHz,DMSO-d 6 )δ：-158.2(s)。產量：0.22g。C26H23FN6O7 MS(ES)MH+：551.4。
實例57及58 (2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((R)-2-側氧基-4-(吡啶-4-基)噁唑啶- 3-基)-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮及(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((S)-2-側氧基-4-(吡啶-4-基)噁唑啶-3-基)-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
將中間物143(0.52g，1.18mmol)、巴比妥酸(0.17g，1.3mmol)於2-丙醇(5mL)中之混合物在微波爐中在130℃下加熱2小時。真空移除揮發物，且將殘餘物於水(5mL)中攪拌10分鐘且過濾。將殘餘物在Combi-Flash儀器中使用甲醇/氯仿之梯度加以純化。產量：0.63g(97%)。對掌性HPLC分析[管柱：Chiralpak IC(250×4.6)mm，移動相：己烷：乙醇(50：50)]顯示存在41%+5%+5%+44%之異構體。藉由對掌性HPLC[管柱：Chiralpak IC；移動相：己烷：乙醇(25：75)加上0.1%二乙胺]分離兩種主要異構體。最終化合物之1H NMR表明樣品含有二乙胺雜質。
實例57為第一溶離非對映異構體。tR=7.61min：[α]D 25=-130.1(c=0.10；二甲基甲醯胺)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.88(d,3H),1.14(d,3H),2.94(d,1H),3.09(t,1H),3.58-3.67(m,2H),3.74-3.76(m,1H),3.94(d,1H),4.08(d,1H),4.33(dd,1H),4.98(t,1H),5.69(dd,1H),7.41(dd,2H),7.71(s,1H),8.57(dd,2H)。注意：與NH質子對應之峰未出現。產量：0.81g。C26H23FN6O7 MS(ES)MH+：551.4。
實例58為第二溶離非對映異構體。tR=15.38min：[α]D 25=-73.39 (c=0.112；二甲基甲醯胺)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.89(d,3H),1.13(d,3H),2.92(d,1H),3.08(t,1H),3.62-3.66(m,2H),3.67-3.69(m,1H),3.93(d,1H),4.06(d,1H),4.32(dd,1H),4.99(t,1H),5.70(dd,1H),7.39(d,2H),7.70(s,1H),8.55(dd,2H)。注意：與NH質子對應之峰未出現。產量：0.11g。C26H23FN6O7 MS(ES)MH+：551.4。
實例59 (2R,4S,4aS)-11-氟-8-((R)-4-((R)-1-甲氧基乙基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
將中間物149(0.25g，0.59mmol)、巴比妥酸(0.08g，0.59mmol)於2-丙醇(9mL)中之混合物在微波反應器中在130℃下加熱2小時。真空移除揮發物，且將殘餘物於水(2mL)中攪拌10分鐘且過濾。產量：0.26g(81%)。UPLC顯示存在非對映異構體之9：1混合物，且藉由對掌性HPLC使用chiralpak IC[己烷：乙醇(70：30)；tR=8.67min]分離主要異構體且表徵。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.88(d,3H),1.01(d,3H),1.13(d,3H),2.91(d,1H),3.10(t,1H),3.28(s,3H),3.63-3.69(m,2H),3.76-3.78(m,1H),3.93(d,1H),3.96-3.99(m,1H),4.10(d,1H),4.46-4.49(m,1H),4.59(t,1H),4.76-4.79(m,1H),7.62(s,1H),11.48(s,1H),11.82(s,1H)。19F NMR(376.5MHz,DMSO-d 6 )δ：-158.11(s)。C24H26FN5O8 MS(ES)MH+：532.4。
實例60 (2R,4S,4aS)-11-氟-8-((R)-4-((S)-1-甲氧基乙基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
將中間物156(0.04g，0.1mmol)、巴比妥酸(0.01g，0.1mmol)於2-丙醇(1mL)中之混合物在微波反應器中在130℃下加熱2小時。真空移除揮發物，且將殘餘物於水(0.5mL)中攪拌10分鐘且過濾。產量：0.05g(98%)。UPLC顯示存在非對映異構體之61%+5%+18%+3%混合物，且藉由對掌性HPLC使用chiralpak IC管柱[己烷：乙醇(70：30)；tR=8.42min]分離主要異構體(61%)且表徵。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.89(d,3H),1.10(d,3H),1.15(d,3H),2.91(d,1H),3.12(t,1H),3.15(s,3H),3.63-3.70(m,2H),3.76-3.80(m,1H),3.93-3.99(m,2H),4.11(d,1H),4.51-4.26(m,3H),7.65(s,1H),11.44(s,1H),11.78(s,1H)。19F NMR(376.5MHz,DMSO-d 6 )δ：-158.17(s)。C24H26FN5O8 MS(ES)MH+：532.5。
實例61及62 (2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((R)-2-側氧基-4-(吡嗪-2-基)噁唑啶-3-基)-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮及(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((S)-2-側氧基-4-(吡嗪-2-基)噁唑啶-3-基)-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
將中間物166(0.12g，0.27mmol)、巴比妥酸(0.04g，0.27mmol)於2-丙醇(1.5mL)中之混合物在微波爐中在130℃下加熱2小時。真空移除揮發物，且將殘餘物於水(5mL)中攪拌10分鐘且過濾。產量：0.13g(87%)。對掌性HPLC分析[管柱：Chiralpak IA(250×4.6)mm，移動相：己烷：乙醇(40：60)]顯示存在45%+6%+5%+42%之異構體。藉由對掌性HPLC[管柱：Chiralpak IA；移動相：己烷：乙醇(40：60)]分離兩種主要異構體。
實例61為第一溶離非對映異構體。tR=9.43min：[α]D 25=-310.4(c=0.2；MeOH)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.87(d,3H),1.11(d,3H),2.90(d,1H),3.09(t,1H),3.62-3.69(m,2H),3.73-3.77(m,1H),3.91(d,1H),4.05(d,1H),4.48(dd,1H),4.94(t,1H),5.80(dd,1H),7.71(s,1H),8.61-8.62(m,2H),8.81(s,1H),11.46(s,1H),11.83(s,1H)。19F NMR(376.5MHz,DMSO-d 6 )δ：-158.25(s)。產量：0.04g。C25H22FN7O7 MS(ES)MH+：552.5。
實例62為第二溶離非對映異構體。tR=18.04min：[α]D 25=-176.0(c=0.2；MeOH)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.87(d,3H),1.11(d,3H),2.90(d,1H),3.08(t,1H),3.60-3.75(m,3H),3.91(d,1H),4.06(d,1H),4.48(dd,1H),4.95(t,1H),5.81(dd,1H),7.74(s,1H),8.62(s,2H),8.82(s,1H),11.47(br s,1H),11.81(br s,1H)。19F NMR(376.5MHz,DMSO-d 6 )δ：-158.15(s)。產量：0.05g。C25H22FN7O7 MS(ES)MH+：552.5。
實例63及64 (2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((R)-2-側氧基-4-(嘧啶-2-基)噁唑啶-3-基)-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮及(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((S)-2-側氧基-4-(嘧啶-2-基)噁唑啶-3-基)-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
將中間物171(0.12g，0.27mmol)、巴比妥酸(0.04g，0.27mmol)於2-丙醇(1.5mL)中之混合物在微波爐中在130℃下加熱2小時。真空移除揮發物，且將殘餘物於水(5mL)中攪拌10分鐘且過濾。產量：0.13g(87%)。對掌性HPLC分析[管柱：Chiralpak IC(250×4.6)mm，移動相：己烷：乙醇(70：30)]顯示存在45%+6%+5%+42%之異構體。藉由對掌性HPLC[管柱：Chiralpak IC；移動相：己烷：乙醇(70：30)]分離兩種主要異構體。
實例63為第一溶離非對映異構體。tR=13.09min：[α]D 25=-183.23(c=0.31；MeOH)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.89(d,3H),1.13(d,3H),2.92(d,1H),3.10(t,1H),3.63-3.77(m,3H),3.94(d,1H),4.08(d,1H),4.47(dd,1H),5.01(t,1H),5.71(dd,1H),7.50(t,1H),7.82(s,1H),8.84(d,2H),11.51(s,1H),11.83(s,1H)。19F NMR(376.5MHz,DMSO-d 6 )δ：-158.30(s)。C25H22FN7O7 MS(ES)MH+：552.5。
實例64為第二溶離非對映異構體。tR=30.80min：[α]D 25=-112.25(c=0.38；MeOH)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.89(d,3H),1.13 (d,3H),2.94(d,1H),3.10(t,1H),3.64-3.79(m,3H),3.94(d,1H),4.07(d,1H),4.31(dd,1H),5.01(t,1H),5.68(dd,1H),7.49(t,1H),7.75(s,1H),8.82(d,2H),11.46(br s,1H),11.81(br s,1H)。19F NMR(376.5MHz,DMSO-d 6 )δ：-158.15(s)。C25H22FN7O7 MS(ES)MH+：552.5。
實例65 (2R,4S,4aS)-8-((S)-4-乙炔基-2-側氧基噁唑啶-3-基)-11-氟-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
將中間物176(0.08g，0.21mmol)、巴比妥酸(0.03g，0.21mmol)於2-丙醇(2mL)中之混合物在微波爐中在130℃下加熱歷時2小時之時間。真空移除揮發物，且將殘餘物於水(5mL)中攪拌10分鐘且過濾。將此物懸浮於甲醇(0.5mL)中且向其中添加水(5mL)且過濾。產量：0.09g(92%)。Phenomenex Gemini C18(250×4.6)mm,5μm中之逆相HPLC分析[移動相『A』：10mM乙酸銨/水；移動相『B』：乙腈；tR=9.72min]顯示存在非對映異構體之7%+87%混合物，且藉由逆相HPLC[Phenomenex Gemini C18(移動相『A』：10mM乙酸銨/水；移動相『B』：乙腈)]分離主要異構體。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.88(d,3H),1.14(d,3H),2.92(d,1H),3.11(t,1H),3.62(d,1H),3.64-3.68(m,2H),3.77-3.79(m,1H),3.94(d,1H),4.10(d,1H),4.51(dd,1H),4.80(t,1H),5.35-5.39(m,1H),7.59(s,1H),11.45(s,1H),11.82(s,1H)。C23H20FN5O7 MS(ES)MH+：498.4。
實例66 ((2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((S)-4-甲基-2-側氧基噁唑啶-3-基)-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
使用中間物177，依循關於實例2之製備所述之程序合成實例66。如下獲得標題化合物：在矽膠上層析(50%乙酸乙酯/己烷)以分離主要溶離組分，將其藉由用以分離主要溶離組分之超臨界流體層析(Chiralpak IA管柱)進一步純化。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ：0.9(d,3H)1.2(d,3H)1.4(d,3H)2.9-3.15(m,2H)3.5-3.7(m,2H)3.9-4.1(m,2H)4.1-4.25(m,1H)4.4-4.8(m,3H)7.7(s,1H)11.4(s,1H)11.8(s,1H)。C22H22ClN5O7 MS(ES)MH+：504。
實例67 (2R,4S,4aS)-11-氟-8-[(4S)-4-(甲氧基甲基)-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
將中間物40(0.67g，1.5mmol)及巴比妥酸(0.21g，1.6mmol)於乙酸(10mL)中之經攪拌溶液加熱至95℃維持4小時。蒸發溶劑且將殘餘物溶解於甲醇(2mL)中。添加水(5mL)以沈澱固體，將其收集且藉由對掌性HPLC[Chiralpak IC(250×4.6)mm；己烷：乙醇(80：20)；1.0 ml/min]層析，以分離作為第二溶離組分之標題化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.9(d,3H),1.1(d,3H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.25(s,3H),3.5(d,1H),3.6-3.7(m,2H),3.85(m,1H),3.85-3.9(d,1H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.45-4.5(m,1H),4.6-4.7(m,2H),7.65(s,1H),11.5(s,1H),11.8(s,1H)。C23H24FN5O8 MS(ES)MH+：518.4；[α]D 20=-93.8(c=1.14；MeOH),RT=20.7min。
自實例67之合成亦分離出(2S,4R,4aR)-11-氟-8-[(4S)-4-(甲氧基甲基)-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮(來自對掌性HPLC純化之第一溶離組分)：
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.9(d,3H),1.1(d,3H),2.9(d,1H),3.1(t,1H),3.2(s,3H),3.5(d,1H),3.6-3.7(m,2H),3.85(m,1H),3.85-3.9(d,1H),3.9(d,1H),4.1(d,1H),4.45-4.5(m,1H),4.6-4.65(m,2H),7.7(s,1H),11.5(s,1H),11.8(s,1H)。C23H24FN5O8 MS(ES)MH+：518.4；[α]D 20=+159.4(c=1.04；MeOH),RT=17.8min。
實例68 (2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((S)-4-(1-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
使用中間物183，依循關於實例2之製備所述之程序合成實例68。使用Chiralpak OJ(250×4.6mm)管柱(二氧化碳：乙醇(75：25)；1.0mL/min)藉由SFC純化獲得標題化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 0.9(d,3H),1.1(d,3H),2.9(d,1H),3.15(m,1H)3.5-3.8(m,3H),3.8-4.2(m,5H),4.55(dd,1H),4.8-5.1(m,1H),5.0(dd,1H),7.7(s,1H),7.9(s,1H)11.4(s,1H),11.8(s,1H)。C24H23FN8O7 MS(ES)MH+：558。
實例69 (2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((R)-4-(1-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
使用中間物189，依循關於實例2之製備所述之程序合成實例69。使用Chiralpak OJ(250×4.6mm)管柱(二氧化碳：乙醇(75：25)；1.0ml/min)藉由SFC純化獲得標題化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 0.9(d,3H),1.1(d,3H),2.9(d,1H),3.15(m,1H)3.5-3.8(m,3H),3.8-4.2(m,5H),4.55(dd,1H),4.8-5.1(m,1H),6.0(dd,1H),7.7(s,1H),7.9(s,1H)11.4(s,1H),11.8(s,1H)。C24H23FN8O7 MS(ES)MH+：558。
實例70 (2R,4S,4aS)-11-氟-8-((R)-4-((S)-1-羥乙基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
將中間物198(0.12g，0.30mmol)及巴比妥酸(0.04g，0.30mmol)於2-丙醇(2mL)中之混合物在微波反應器中在130℃下加熱歷時2小時之時間。真空移除揮發物，且將殘餘物於水(0.5mL)中攪拌10分鐘且過濾。產量：0.05g(61%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.89(d,3H),1.04(d,3H),1.14(d,3H),2.92(d,1H),3.10(t,1H),3.59-3.69(m,2H),3.77-3.78(m,1H),3.94(d,1H),4.10(d,1H),4.32(quin,1H),4.45-4.49(m,1H),4.53-4.55(m,2H),5.29(d,1H),7.73(s,1H),11.83(br s,2H)。19F NMR(376.5MHz,DMSO-d 6 )δ：-158.38(s)。C23H24FN5O8 MS(ES)MH+：518.3。
實例71 {(4S)-3-[(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-2',4',6'-三側氧基-1,1',2,3',4,4',4a,6'-八氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-8-基]-2-側氧基-1,3-噁唑啶-4-基}乙腈
向中間物200(0.1g，0.23mmol)於異丙醇(5mL)中之經攪拌溶液 中添加巴比妥酸(0.03g，0.25mmol)，且在95℃下攪拌混合物16小時。在真空下完全移除揮發物，且添加水(5mL)至殘餘物中且過濾。產量：0.10g(77%)。對掌性HPLC分析[管柱：chiralcel OD-H，溶離劑：己烷：乙醇(50：50)]顯示其為比率為33：45：17：5之四種異構體之混合物。藉由對掌性HPLC[管柱：chiralcel OD-H，溶離劑：己烷：乙醇(50：50)]分離出比率為33%之異構體且經鑑別為實例71。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.89(d,3H),1.15(d,3H),2.92(d,1H),3.12-3.19(m,2H),3.39-3.40(m,1H),3.65-3.70(m,2H),3.74-3.78(m,1H),3.94(d,1H),4.10(d,1H),4.44(dd,1H),4.78(t,1H),4.87-4.89(m,1H),7.69(s,1H),11.47(s,1H),11.83(s,1H)。C23H21FN6O7 MS(ES)MH+：513.2。
實例72 (2R,4S,4aS)-8-((R)-4-((R)-1,2-二羥乙基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)-11-氟-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
向中間物201(0.35g，0.75mmol)於乙醇(4mL)中之經攪拌溶液中添加巴比妥酸(0.19g，14.9mmol)及2N鹽酸(4mL)且在微波反應器中在120℃下加熱混合物2小時。在真空下完全移除揮發物，添加水(3mL)且過濾固體，得到標題化合物。產量：0.35g(88%)注意：對掌性HPLC分析[管柱：Chiralpak AD-H(250×4.6)mm；移動相：己烷：乙醇(70：30)]顯示反應混合物為89%非對映異構體過量。藉由對掌性HPLC[管柱：Chiralpak AD-H；移動相：己烷：乙醇(70：30)]分離主要 異構體(實例72)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.88(d,3H),1.13(d,3H),2.92(d,1H),3.10(t,1H),3.34-3.40(m,2H),3.62-3.68(m,2H),3.75-3.79(m,1H),3.92(d,1H),4.09(d,1H),4.18(q,1H),4.48-4.53(m,1H),4.56-4.59(m,1H),4.69-4.73(m,1H),4.84(t,1H),5.40(q,1H),7.72(s,1H),11.44(s,1H),11.82(s,1H)。C23H24FN5O9 MS(ES)MH+：534.2。
實例73 (2R,4S,4aS)-8-((R)-4-((S)-1,2-二羥乙基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)-11-氟-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
使用中間物202(0.40g，0.85mmol)，依循關於實例72之製備所述之程序合成實例73。在藉由乙酸銨方法進行逆相HPLC純化之後獲得產物。產量：0.25g(54%)。注意：對掌性HPLC分析[管柱：Chiralpak AD-H(250×4.6)mm；移動相：己烷：乙醇(70：30)]顯示反應產生58%非對映異構體過量之化合物之混合物。藉由對掌性HPLC分離主要異構體(實例73)與次要異構體。
主要異構體(實例73)為第二溶離非對映異構體：RT=9.99min。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.88(d,3H),1.13(d,3H),2.92(d,1H),3.10(t,1H),3.32-3.44(m,2H),3.64-3.68(m,2H),3.76-3.80(m,1H),3.93(d,1H),4.10(d,1H),4.19(q,1H),4.49-4.53(m,1H),4.56-4.60(m,1H),4.70-4.73(m,1H),4.84(t,1H),5.40(q,1H),7.72(s,1H),11.43(s,1H),11.81(s,1H)。C23H24FN5O9 MS(ES)MH+：534.2。
實例74 (2R,4S,4aS)-11-氟-8-{(4S)-4-[(羥亞胺基)甲基]-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基}-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮
向中間物91(0.15g，0.3mmol)於乙酸(10mL)中之溶液中添加巴比妥酸(0.05g，0.4mmol)且在95℃下加熱混合物3小時。在真空下完全移除揮發物，添加水(4mL)至殘餘物中且過濾溶液。將由此獲得之固體使用氯仿/甲醇之梯度藉由矽膠管柱層析進一步純化。獲得呈未定義之E型與Z型異構體(比率為約1：0.65)混合物形式之化合物。產量：0.06g(34%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.89(d,3H),1.14(d,3H),2.93(d,1H),3.11(t,1H),3.65-3.80(m,3H),3.94(d,1H),4.10(d,1H),4.30-4.32及4.47-4.51(m,1H),4.76及4.88(t,1H),5.24-5.30及5.48-5.55(m,1H),7.10-7.14及7.51-7.75(m,2H),11.28及11.48(s,1H),11.45(s,1H),11.85(s,1H)。C22H21FN6O8 MS(ES)MH+：517.3。
實例75及76 (5R)-3-[(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-2',4',6'-三側氧基-1,1',2,3',4,4',4a,6'-八氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-8-基]-2-側氧基-1,3-噁唑啶-5-甲腈及(5S)-3-[(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-2',4',6'-三側氧基-1,1',2,3',4,4',4a,6'-八氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-8-基]-2-側氧基-1,3-噁唑啶-5-甲腈
向中間物203(0.13g，0.3mmol)於乙酸(5mL)中之溶液中添加巴比妥酸(0.04g，0.3mmol)且在95℃下加熱混合物3小時。在真空下完全移除揮發物且添加水(2mL)至殘餘物中且過濾溶液。HPLC分析[管柱Xbridge C18(150mm×4.6mm)3.5μ，移動相：10mM乙酸銨/水及甲醇]顯示，反應產生異構體之1：1混合物，將其藉由逆相HPLC(Xbridge C18；移動相：10mM乙酸銨/水及甲醇)分離。產量：0.03g(34%)。
實例75(較小極性異構體)：1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.88(d,3H),1.13(d,3H),2.88(d,1H),3.10(t,1H),3.58-3.68(m,2H),3.76-3.82(m,1H),3.94(d,1H),4.10(d,1H),4.31-4.35(m,1H),4.45(t,1H),5.88(dd,1H),7.67(s,1H),11.60(br s,2H)。C22H19FN6O7 MS(ES)MH+：499.3。
實例76(較大極性異構體)：1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.88(d,3H),1.13(d,3H),2.90(d,1H),3.11(t,1H),3.64-3.70(m,2H),3.74-3.80(m,1H),3.93(d,1H),4.09(d,1H),4.30-4.34(m,1H),4.47(t,1H),5.89(dd,1H),7.67(s,1H),11.44(s,1H),11.81(s,1H)。C22H19FN6O7 MS(ES)MH+：499.3。
實例77 (2R,4S,4aS)-11-氟-8-((R)-4-((R)-1-羥乙基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
將中間物211(0.07g，0.17mmol)及巴比妥酸(0.02g，0.17mmol)於2-丙醇(1mL)中之混合物在微波反應器中在130℃下加熱歷時2小時之時間。真空移除揮發物，且將殘餘物於水(0.5mL)中攪拌10分鐘且過濾。產量：0.08g(90%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.89(d,3H),0.98(d,3H),1.15(d,3H),2.92(d,1H),3.12(t,1H),3.64-3.69(m,2H),3.75-3.78(m,1H),3.93(d,1H),4.10(d,1H),4.29(br s,1H),4.52-4.60(m,3H),5.27(d,1H),7.64(s,1H),11.49(s,1H),11.83(s,1H)。19F NMR(376.5MHz,DMSO-d 6 )δ：-158.15(s)。C23H24FN5O8 MS(ES)MH+：518.4。
實例78 (2R,4S,4aS)-11-氟-8-((4R,5R)-4-(氟甲基)-5-甲基-2-側氧基噁唑啶-3-基)-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
將中間物216(0.03g，0.06mmol)及巴比妥酸(0.008g，0.06mmol)於2-丙醇(0.5mL)中之混合物在微波反應器中在130℃下加熱歷時2小時之時間。真空移除揮發物，且將殘餘物於水(1mL)中攪拌10分鐘且過濾。將此物懸浮於甲醇(0.5mL)中，向其中添加水(1mL)且過濾。產量：0.03g(81%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.89(d, 3H),1.15(d,3H),1.51(d,3H),2.93(d,1H),3.12(t,1H),3.65-3.70(m,2H),3.77-3.78(m,1H),3.95(d,1H),4.11(d,1H),4.35-4.58(m,1H),4.71(dd,1H),4.86-4.89(m,1H),4.99-5.01(m,1H),7.63(s,1H),11.46(s,1H),11.82(s,1H)。C23H23F2N5O7 MS(ES)MH+：520.5。
實例79及80 (2R,4S,4aS)-11-氟-8-((4S,5R)-4-(甲氧基甲基)-5-甲基-2-側氧基噁唑啶-3-基)-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮及(2R,4S,4aS)-11-氟-8-((4R,5R)-4-(甲氧基甲基)-5-甲基-2-側氧基噁唑啶-3-基)-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮
將中間物221(0.28g，0.67mmol)、巴比妥酸(0.09g，0.67mmol)於2-丙醇(5mL)中之混合物在微波爐中在130℃下加熱歷時2小時之時間。真空移除揮發物，且將殘餘物於水(5mL)中攪拌10分鐘且過濾。將產物懸浮於甲醇(0.5mL)中且向其中添加水(5mL)且過濾。產量：0.34g(96%)。對掌性HPLC[管柱：Chiralpak IA(250×4.6)mm，移動相：0.1%二乙胺/己烷：乙醇(50：50)]顯示存在17%+51%之非對映異構體。已藉由逆相HPLC[Chiralpak IA；移動相：0.1%二乙胺/己烷：乙醇(50：50)]分離此等峰。
實例79(第一溶離非對映異構體)：t R =6.53min；[α]D 25=-121.46(c=0.22；MeOH)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.88(d,3H),1.13 (d,3H),1.46(d,3H),2.88(d,1H),3.09(t,1H),3.19(s,3H),3.56-3.59(m,2H),3.67(t,1H),3.74-3.77(m,1H),3.85-3.88(m,1H),3.93-3.95(m,1H),4.09(d,1H),4.55(s,1H),5.02(t,1H),7.66(s,1H),11.40(br s,2H)。19F NMR(376.5MHz,DMSO-d 6 )δ：-158.49(s)。C24H26FN5O8 MS(ES)MH+：532.5。
實例80(第二溶離非對映異構體)：t R =8.22min；[α]D 25=-129.17(c=0.30；MeOH)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ：0.89(d,3H),1.14(d,3H),1.45(d,3H),2.90(d,1H),3.12(t,1H),3.22(s,3H),3.55-3.62(m,2H),3.66(t,1H),3.77-3.78(m,1H),3.82-3.86(m,1H),3.92-3.94(m,1H),4.10(d,1H),4.23(s,1H),4.76(t,1H),7.61(s,1H),11.18(br s,2H)。19F NMR(376.5MHz,DMSO-d 6 )δ：-158.21(s)。C24H26FN5O8 MS(ES)MH+：532.5。
生物活性
式(I)化合物抑制細菌DNA旋轉酶且因此因其抗細菌效果而受到關注。化合物針對革蘭氏陽性、革蘭氏陰性及非典型細菌具有活性。此等特性可使用例如下述分析加以評估。
敏感性測試(MIC)-分析1
最低抑制濃度(MIC)係藉由培養液微量稀釋法根據臨床及實驗室標準協會(Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI)準則加以測定。簡言之，調節生物體懸浮液至0.5麥氏標準(McFarland standard)，以產生3×105與7×105個群落形成單位(colony-forming unit，CFU)/毫升之間的最終接種物。製備大部分生物體於經陽離子調節之無菌繆勒-欣頓培養液(Mueller-Hinton Broth)(Beckton Dickinson)中之細菌接種物。如上所述在添加2.5%經溶胞之馬血(Hema Resource & Supply Inc.)之經陽離子調節之繆勒-欣頓培養液中製備鏈球菌。將100μL體積之接種物添加至含有含藥物之2倍連續稀 釋液之2μL DMSO的孔中(使用Tecan EVO機器人)。所有經接種之微量稀釋盤在35℃下在周圍空氣中培育18-24小時。培育之後，防止可見生長(如在OD600 nm處所讀取且使用測試讀取鏡藉由目視讀數來確認)之最低藥物濃度記錄為MIC。藉由使用實驗室品質對照菌株及具有規定之MIC範圍之市購對照化合物根據CLSI準則監視分析之效能。 表1提供分析1中實例1-77之MIC結果(μM)。表2提供分析1中所測試之實例78-80之MIC(μg/mL)結果。
a化膿鏈球菌，活體內菌株。b肺炎鏈球菌，活體內菌株。c肺炎鏈球菌，活體內菌株。d金黃色葡萄球菌，活體內菌株，MSQS。e金黃色葡萄球菌，活體內菌株，MRQR。f金黃色葡萄球菌，血清。
a化膿鏈球菌，活體內菌株。b肺炎鏈球菌，活體內菌株。c肺炎鏈球菌，ATCC 49619。d金黃色葡萄球菌，活體內菌株，ATCC 29213。e金黃色葡萄球菌，活體內菌株，MRQR。f金黃色葡萄球菌，活體內菌株，MRSA。
敏感性測試(MIC)-分析2
最低抑制濃度(MIC)係藉由培養液微量稀釋法根據臨床及實驗室標準協會(CLSI)準則加以測定。簡言之，調節生物體懸浮液直至0.5麥氏標準，以產生3×105與7×105個群落形成單位(CFU)/毫升之間的最終接種物。一般在包括大腸桿菌、肺炎克雷伯氏桿菌及綠膿桿菌之經陽離子調節之無菌繆勒-欣頓培養液(Becton Dickinson)中製備細菌接種物。流行性感冒嗜血桿菌細菌接種物於經陽離子調節之無菌繆勒-欣頓培養液(Becton Dickinson)中製備，此培養液含有0.5%酵母萃(Becton Dickinson)加上30mL之15μg/mL牛血色素儲備液(Sigma)及3mL之15μg/mL β-菸醯胺腺嘌呤二核苷酸(Sigma)。使用瓊脂稀釋方法根據CLSI準則測試奈瑟氏菌屬菌株之MIC。關於培養液微量稀釋法測試，將100μL體積接種物添加至含有含藥物之2倍連續稀釋液之2μL DMSO的孔中(使用Tecan EVO機器人)。所有經接種之微量稀釋盤在35℃下在周圍空氣中培育18-24小時。培育之後，防止可見生長(如在OD600nm處所讀取且使用測試讀取鏡藉由目視讀數來確認)之最低藥物濃度記錄為MIC。藉由使用實驗室品質對照菌株及具有規定之MIC範圍之市購對照化合物根據CLSI準則監視分析之效能。表3提供分析 2中實例1-77之MIC結果(μM)。表4提供分析2中所測試之實例78-80的MIC(μg/mL)結果。
a流行性感冒嗜血桿菌，ATCC 51907，活體內菌株。b大腸桿菌，K12。c肺炎克雷伯氏桿菌，臨床分離株，類黏蛋白。d綠膿桿菌，PAO1。
a流行性感冒嗜血桿菌，ATCC 49247。b大腸桿菌，活體內菌株，ATCC 25922。c大腸桿菌，ATCC 35218。d肺炎克雷伯氏桿菌，臨床分離株，類黏蛋白。e肺炎克雷伯氏桿菌，ATCC 700603。f綠膿桿菌，PAO1。
DNA旋轉酶超螺旋活性螢光偏振分析
在黑色384孔聚苯乙烯分析盤中，30微升/孔之5nM大腸桿菌DNA旋轉酶A/B四聚體及130微克/毫升含有三顯體形成序列TTCTTCTTCTTCTTCTTCTTCTTCTTC(SEQ ID NO：1)之拓撲鬆馳型質體於分析緩衝液中、在5-10種不同濃度之測試化合物不存在或存在下、在周圍溫度下培育(通常30分鐘)，該分析緩衝液由以下組成：35mM Tris-HCl(pH 7.5)、24mM KCl、4mM MgCl2、2mM二硫蘇糖醇、1.8mM亞精胺、5%(v/v)甘油、200nM牛血清白蛋白、0.8%二甲亞碸及0.3mM ATP。超螺旋反應係藉由添加10微升/孔之含40nM寡脫氧核苷酸探針之3×三顯體形成緩衝液加以淬滅，此緩衝液係由150mM NaCl及150mM乙酸鈉(pH 3.5)組成。寡脫氧核苷酸探針為經5'-BODIPY-FL標記之TTCTTCTTC(SEQ ID NO：2)。60分鐘之後，使用裝備有偏振器之485nm激發及535nm發射濾光器以Tecan Ultra讀盤器量測BODIPY-FL之螢光各向異性。使用雙對照反應藉由非線性回歸確定IC50。第一對照反應不含測試化合物，但含有0.8% DMSO(100%活性)，而第二對照反應含有5μM環丙沙星及0.8% DMSO(0%活性)。
當在活體外分析中基於上述DNA旋轉酶超螺旋活性螢光偏振分析進行測試時，如表5中所示測得實例1-77之大腸桿菌DNA旋轉酶超螺旋IC50分析抑制活性。
實例5在小鼠大腿模型中針對金黃色葡萄球菌之活體內功效
研究目標為確定實例5在小鼠大腿感染模型中針對金黃色葡萄球菌(S.aureus)之功效及藥物動力學/藥效學(PK/PD)關係。
所用金黃色葡萄球菌菌株包括獲自美國菌種保存中心(American Type Culture Collection)之二甲氧苯青黴素抗性分離株(ATCC33591)(MRSA)。另外，使用三株金黃色葡萄球菌臨床分離株：(1)二甲氧苯青黴素敏感性分離株(MSSA)；(2)USA300基因型之新近二甲氧苯青 黴素抗性臨床分離株(USA300)及(3)USA100基因型之新近二甲氧苯青黴素抗性臨床分離株(USA1000)。
針對各分離株之MIC係使用培養液微量稀釋法依循CLSI準則加以測定(Rayner等人，Clinical pharmacodynamics of linezolid in seriously ill patients treated in a compassionate use program.Clin Pharmacokinet 2003.42：1411-23)。各菌株執行十次個別測定且使用模態MIC進行所有PK/PD計算。
所有程序均根據實驗動物照護及使用委員會(Institutional Animal Care and Use Committee，IACUC)批准之方案11-03-i進行。第-4天使用150mg/kg環磷醯胺(經腹膜內)且第-1天使用100mg/kg環磷醯胺(經腹膜內)使得小鼠出現嗜中性白血球減少(Andes等人，In vivo pharmacodynamics of a new Oxazolidinone(Linezolid)AAC 2002,46(11)：3484-9)。感染前2小時，小鼠經口接受投與50mg/kg胺基苯并三唑(ABT)，以抑制細胞色素P450(CYP450)活性；12h後，小鼠接受第二次投與50mg/kg。分別依類似方式製備各金黃色葡萄球菌分離株。使用新的隔夜培養盤接種胰蛋白酶大豆培養液(TSB)之25mL培養物。培養物在37℃下在200rpm振盪培育隔夜。隔夜培養物在TSB中1：10稀釋，測定OD600，且輸入針對該分離株之稀釋計算機中。吸取所計算體積之隔夜培養物至適當體積之生理鹽水中，以獲得每隻大腿5×105CFU之目標接種物含量且依一式兩份測定活菌計數。
接著將小鼠分成對照組或處理組。感染後2小時，將一組10隻小鼠安樂死，以確定處理開始時所感染大腿中之活菌計數。其餘組之小鼠則接受投與(1)實例5、(2)對照化合物(左旋氧氟沙星(levofloxacin)或利奈唑胺(linezolid))或(3)媒劑。處理開始後24小時，測定功效。藉由二氧化碳窒息及頸椎脫位術將小鼠安樂死，且取出經感染大腿並解剖。將大腿稱重且轉移至含有1mL生理鹽水之管中以便均質化。使 大腿組織均質化(Omni TH均質化器，Omni International,Warrenton,VA)且將100μL組織勻漿於生理鹽水中連續稀釋且塗鋪於胰蛋白酶大豆瓊脂盤上，以便確定活菌計數。將各盤在37℃下培育隔夜。
首先，對各分離株進行單劑量時程研究，以確定最佳給藥方案。針對金黃色葡萄球菌MRSA分離株，已確定每日投藥一次(uid)為最佳方案；對於所有其他分離株，則已確定每日兩次(bid，q12)方案為最佳。時程研究之後，各分離株分別進行兩次劑量反應研究，且將結果組合，以獲得與功效有關之AUC/MIC比率。小鼠係藉由腹膜內快速給藥，每日給藥2.5至160mg/kg(依指定之qd或bid q12)，投藥體積為10mL/kg，且處理持續時間為24小時。
使用經金黃色葡萄球菌感染之各組衛星小鼠測定血漿濃度。感染後2小時開始給藥且在時間點0.5、1、2、4、6、8、12及24h，在二氧化碳窒息及頸椎脫位術之後以下頜下放血或藉由心臟穿刺來獲取全血樣品。將全血樣品取樣至含有乙二胺四乙酸(EDTA)(Beckton Dickenson)之微容器管中。每個時間點使用三隻小鼠。藉由在13200rpm下離心五分鐘來分離血漿且儲存在-20℃下直至生物分析。
使用蛋白質沈澱法萃取含有實例5之生物樣品。向一體積之樣品中添加5體積之含有內標物(格列本脲(Glyburide))的乙腈。接著將混合物混合且將培養盤在3200rpm下離心5min。將200μL體積之上清液乾燥，且於移動相中復原且將混合物注射至液相層析-質譜分析儀(LC-MS)上。使用由Analyst v1.4.2控制的Sciex API 4000獲取資料且定量實例5。LC-MS儀器參數提供於以下表6及7中。
藥物動力學資料分析： 藉由計算每個時間點化合物在三隻動物每一者中之平均血漿濃度來獲得各劑量組之血漿概況。零至無窮大之血漿濃度時間曲線下面積(AUC)；最大血漿藥物濃度(Cmax)；達到最大濃度之時間(tmax)；及各劑量組之血漿半衰期(t1/2)係藉由非隔室分析(WinNonLin 5.2,Pharsight)加以測定。分析中使用非隔室模型200。
bid給藥方案之AUC係藉由將單次給藥後所獲得之AUC值乘以2而確定(假定第二次給藥之後無積聚)。
藥效學資料分析：考慮到樣品稀釋及組織重量，調整各動物之大腿中所生長之群落數目以確定每公克組織之CFU(CFU/g)。藉由計算各組內動物之間的標準誤差來確定各劑量組之變化性。
藥物動力學/藥效學分析： 自處理組中各個別動物所獲得之log CFU/g減去預處理組所獲得之平均log CFU/g。測定功效組中各動物之log CFU/g的△值且用於PK/PD分析。使用四分位法確定統計離群值且自分析中排除。
各劑量組之AUC藥物動力學參數與針對各金黃色葡萄球菌分離株之實例5之MIC有關。確定各劑量組之AUC與MIC之比率且針對各動物之CFU/g作圖。使用22.1%之鼠未結合分率計算游離血漿濃度。此值得自1μM至50μM範圍內之實例5之小鼠蛋白質未結合分率之平均值。
功效與PK/PD指數總AUC之間的相關性係藉由非線性回歸(WinNonlin 5.2,Pharsight)確定。使用下文所示之S形Emax模型對資料模型化，其中Emax為藥物不存在下所觀測到之最大生長濃度；E0為最大殺死濃度，EC50為得到50%反應之濃度，且N為希爾因數(Hill factor)。
對組合劑量組以及個別給藥方案進行PK/PD分析。藉由模型計算之參數之變化性的評估、艾凱科準則(Aikaike criteria)及加權殘差的分析來確定擬合優度。
藉由模型化所確定之PK/PD參數用於確定達成靜態反應以及群落計數比治療開始時之計數減少1個對數所需要之暴露。
針對實例5所測定之四株金黃色葡萄球菌分離株之MIC值呈現於表8中。
與在ABT存在下腹膜內投與實例5有關之血漿暴露係在經金黃色葡萄球菌MSSA、MRSA及USA300感染之嗜中性白血球減少症小鼠大腿中加以測定。分析組合資料以建立一致的劑量/暴露關係。最佳關係與冪關係有關：Y=(1,022.7)*(X1.2019)，其中Y為無窮大AUC(ηg h/mL)且X為所測劑量(mg/kg)。
圖1說明在經ABT預處理之嗜中性白血球減少症小鼠之大腿中，實例5針對金黃色葡萄球菌USA100之劑量反應。各點代表5隻動物之平均值。誤差條代表標準誤差。治療開始時，細菌負荷為5.93±0.09CFU/g。在媒劑組中，細菌生長3.3 log CFU/g。在各別實驗中腹膜內投與利奈唑胺用於比較。
自處理開始，媒劑對照組中之各金黃色葡萄球菌分離株生長至少兩個對數；其中MSSA、MRSA、USA100及USA300分別生長1.96±0.08、3.2±0.12、2.66±0.16及3.1±0.21CFU/g。由於所測試劑量組皆未再生長至相當於媒劑對照組的程度，故金黃色葡萄球菌MRSA每日投與一次(uid)。使用相隔十二小時投與兩次相等劑量之投藥方案(bid，q12)對其他三株分離株進行測試。
計算簡單劑量反應研究之PK/PD參數。假定AUC/MIC參數為與活性最相關之參數，因為此驅動因素已顯示與活體外功效均最相關。在所有劑量反應研究中，分析給藥溶液以評估所測劑量且使用一致暴露關係估算血漿暴露。
金黃色葡萄球菌MSSA在嗜中性白血球減少症小鼠模型中之PK/PD參數係產生自兩次劑量反應研究。停滯及1-log降低情況下之AUC值經測定分別為28及69μg.h/mL。
金黃色葡萄球菌MRSA在嗜中性白血球減少症小鼠模型中之PK/PD參數係產生自兩次劑量反應研究之結果。停滯及1-log降低情況下之AUC值經測定分別為24及55μg.h/mL。
金黃色葡萄球菌USA300在嗜中性白血球減少症小鼠模型中之PK/PD參數係產生自兩次劑量反應研究之結果。停滯及1-log降低情況下之AUC值經測定分別為91及150μg.h/mL。
金黃色葡萄球菌USA100在嗜中性白血球減少症小鼠模型中之PK/PD參數係產生自兩次劑量反應研究之結果。停滯及1-log降低情況下之AUC值經測定分別為25及47μg.h/mL。
所計算之關於功效之游離血漿AUC/MIC比率
針對金黃色葡萄球菌動物模型所計算之游離血漿AUC/MIC量值呈現於表9中。
a研究次數。
b效應濃度中值±平均數標準誤差(變異係數%)。
c停滯±平均數標準誤差(變異係數%)。
d1-log降低±平均數標準誤差(變異係數%)。
總結
實例5在給藥範圍內顯示非線性藥物動力學。吸收良好，且投藥後0.5h時獲得最大濃度。基於來自多次功效研究之血漿PK暴露及給 藥溶液之所測濃度來確立劑量/暴露關係。使用此一致暴露結合個別分離株之模態MIC值及小鼠游離血漿含量來確定模型中與抑菌作用有關及1-log降低情況下之游離AUC/MIC量值。
在嗜中性白血球減少症大腿模型中進行劑量反應研究以確定功效所需之相對游離AUC/MIC量值。抑菌作用及相對於初始細菌負荷減少1-log所需之游離AUC/MIC比率分別在43至98及83至245範圍內。
實例5在小鼠大腿模型中針對化膿鏈球菌之活體內功效
研究目標為確定實例5在小鼠嗜中性白血球減少症大腿感染模型中針對化膿鏈球菌(S.pyogenes)之功效及藥物動力學/藥效學(PK/PD)關係。此研究中使用獲自美國菌種保存中心的化膿鏈球菌ATCC12384。
使用培養液微量稀釋法依循CLSI準則確定針對化膿鏈球菌ATCC12384之MIC。各菌株執行三次個別測定且使用模態MIC進行所有PK/PD計算。所有動物實驗皆在英國內政部特許(UK Home Office Licensure)下在地方倫理委員會許可下執行。所有實驗皆由已完成內政部個人許可證課程之第1、2及3部分且持有現行個人許可證之技術人員執行。
藉由腹膜內注射藉由用環磷醯胺(Baxter,Norfolk,UK)在感染之前4天以150mg/kg且在感染之前1天以100mg/kg進行免疫抑制使得所有小鼠暫時嗜中性白血球減少(Andes等人，下文)。第二輪免疫抑制後二十四小時，藉由在暫時吸入麻醉(3%異氟烷)下，在大腿兩側肌肉中肌內注射化膿鏈球菌ATCC12384以感染小鼠，每隻小鼠大腿使用約5×105CFU。向研究中之所有小鼠皮下(SC)投與0.06mg/kg丁基原啡因(Buprenorphine)，在此研究中，大腿疼痛通常導致受影響肢體之跛行及使用功能喪失。以感染時間開始，以12小時時間間隔再投與丁基原啡因以確保正發生之疼痛緩解。
在功效研究中，在感染後2小時預處理組中使用6隻小鼠；媒劑對照組及治療性處理組中使用8隻小鼠。感染之前十五分鐘及感染後十二小時藉由經口管飼法將50mg/kg 1-胺基苯并三唑投與待用測試劑及媒劑處理之動物。感染後2h及14h施以抗細菌劑處理，以10mL/kg腹膜內遞送)。感染後2h及14h，藉由SC傳遞，用100mg/kg利奈唑胺處理比較組。對照組僅用媒劑(0.2M葡甲胺/30% HPβCD)處理。
關於感染後24小時(或更早，若小鼠達到預先規定之終點)之功效研究，評估所有動物之臨床狀況，隨後使用過度劑量之戊巴比妥(pentabarbitone)人道地將其安樂死。移除兩大腿且個別地稱重。使用珠粒打漿機在冰冷無菌磷酸鹽緩衝鹽水中將個別大腿組織樣品均質化。接著，將大腿組織勻漿於血液瓊脂上定量培養且在37℃下培育24小時，隨後計數。
使用如上所述之經化膿鏈球菌感染之各組衛星小鼠測定血漿濃度。感染後2小時開始給藥且在0.5、1、2、4、6、8、12及24h時獲取全血樣品。藉由在處理後之規定時間點吸入5%異氟烷將衛星PK研究之小鼠安樂死，隨即藉由心臟穿刺將小鼠放血。將肝素化血液樣品藉由離心在13200rpm下分離五分鐘。將血漿樣品在-80℃下儲存，隨後轉移至客戶用於分析。
在研究之PK分支中，每個時間點每單位劑量使用3隻小鼠。由於最終工作順序之無意變化，故80及160mg/kg給藥組初始投與實例5而不用胺基苯并三唑預先處理。一旦此舉實現，則剩餘小鼠在給藥組之間再分配且將組規模減小為每個時間點兩隻小鼠。
使用蛋白質沈澱法萃取含有實例5之生物樣品。向一體積之樣品中添加5體積之含有內標物(格列本脲)的乙腈。接著，將混合物混合且以3200rpm離心培養盤5分鐘。將200μL體積之上清液乾燥，且於移動相中復原且將混合物注射至液相層析-質譜分析儀(LC-MS)上。使 用由Analyst v1.4.2控制之Sciex API 4000獲取資料且定量實例5。LC-MS儀器參數提供於以下表6及7中。
藉由計算每個時間點化合物在兩至三隻動物中每一者中之平均血漿濃度來獲得各劑量組之血漿概況。零至無窮大之血漿濃度時間曲線下面積(AUC)；最大血漿藥物濃度(Cmax)；達到最大濃度之時間(tmax)；及各劑量組之血漿半衰期(t1/2)係藉由非隔室分析(WinNonLin 5.2,Pharsight)加以測定。分析中使用非隔室模型200。bid給藥方案之AUC係藉由將單次給藥後所獲得之AUC值乘以2而確定(假定第二次給藥之後無積聚)。考慮到樣品稀釋，調整各動物之大腿中所生長之群落數目以確定每隻大腿CFU(CFU/大腿)。藉由計算各組內動物之間的標準誤差來確定各劑量組之變化性。
自處理組中各個別動物所獲得之log CFU/g減去預處理組所獲得之平均log CFU/g。測定功效組中各動物之log CFU/g的△值且用於PK/PD分析。使用四分位法確定統計離群值且自分析中排除。
各劑量組之AUC藥物動力學參數與針對化膿鏈球菌ATCC12384之實例5之MIC有關。確定各劑量組之AUC與MIC之比率且針對各動物之CFU/大腿作圖。使用22.1%之鼠未結合分率計算游離血漿濃度。 此值得自1μM至50μM範圍內之實例5之小鼠蛋白質未結合分率之平均值。
功效與PK/PD指數總AUC之間的相關性係藉由非線性回歸(WinNonlin 5.2,Pharsight)確定。使用下文所示之S形Emax模型對資料模型化，其中Emax為藥物不存在下所觀測到之最大生長濃度；E0為最大殺死濃度，EC50為得到50%反應之濃度，且N為希爾因數。
對組合劑量組以及個別給藥方案進行PK/PD分析。藉由模型計算 之參數之變化性的評估、艾凱科準則及加權殘差之分析來確定擬合優度。
使用藉由模型所確定之PK/PD參數確定達成靜態反應以及群落計數比治療開始時之計數減少1個對數及2個對數所需要之暴露。
針對實例5所測定之化膿鏈球菌ATCC12384之MIC值為0.125μg/mL。
與在ABT存在下腹膜內投與實例5有關之血漿暴露係在經化膿鏈球菌ATCC12384感染之嗜中性白血球減少症小鼠大腿中加以測定。針對各衛星PK所計算之藥物動力學參數呈現於表10中。將此資料與針對金黃色葡萄球菌嗜中性白血球減少大腿模型中之血漿暴露所建立之一致劑量/暴露關係進行對比。一致關係定義為Y=(1,022.7)*(X1.2019)，其中Y為無窮大AUC(ηg h/mL)且X為所測劑量(mg/kg)。
圖2說明在經ABT預處理之嗜中性白血球減少症小鼠之大腿中，實例5針對化膿鏈球菌ATCC12384之劑量反應。各點代表16隻大腿之平均值。治療開始時，細菌負荷為6.38±0.03CFU/g。在媒劑組中，細菌生長2.6-log CFU/g。在用於比較的各別實驗中，腹膜內投與阿莫西林(Amoxicillin)。
計算劑量反應研究之PK/PD參數。假定AUC/MIC參數為與活性最相關之參數，因為此驅動因素已顯示與前述系列化合物之功效均最相 關且與活體外功效高度相關。分析給藥溶液以評估所測劑量且使用一致暴露關係估算血漿暴露。AUC計算值係以μg h/mL呈現。
化膿鏈球菌ATCC12384在嗜中性白血球減少症小鼠模型中的PK/PD參數係產生自單一劑量反應研究。停滯、1-log及2-log降低情況下之AUC值經確定分別為60、76及95μg.h/mL。
針對化膿鏈球菌ATCC12384所計算之游離血漿AUC/MIC量值呈現於表11中。
a研究次數。
b效應濃度中值±平均數標準誤差(變異係數%)。
總結
實例5在劑量範圍內之藥物動力學顯示與金黃色葡萄球菌嗜中性白血球減少症大腿模型中所顯示之暴露一致的暴露。使用此一致暴露結合化膿鏈球菌ATC12384 MIC值及小鼠游離血漿含量來確定模型中與抑菌作用有關及1-log及2-log降低情況下之游離AUC/MIC量值。
實例5在嗜中性白血球減少症小鼠中針對化膿鏈球菌ATC12384顯示活體內劑量依賴性功效。抑菌作用及相對於初始細菌負荷減少1個對數及2個對數所需之游離AUC/MIC比率分別為106、135及168。
實例5之活體外抗細菌活性
此研究之目標為確定實例5針對一組革蘭氏陽性、革蘭氏陰性、營養苛求性及厭氧性細菌分離株的活體外抗細菌活性。所執行之測試包括最小抑制濃度(MIC)、最小殺細菌濃度(MBC)及血清(小鼠及人類) 存在下之MIC。此等研究中所用之細菌分離株主要由新近獲得之地理位置多樣的臨床分離株組成，但亦包括CLSI品質對照參考菌株、內部篩選盤培養物及具有所定義之抗性機制的分離株。
MIC值係使用CLSI培養液微量稀釋或瓊脂稀釋(淋病奈瑟氏菌)方法確定。在培養液微量稀釋敏感性測試中，製備儲備液化合物母盤且用於將藥物之2倍連續稀釋液之2μL等分試樣點樣於96孔子盤之第1-11行中。第12行不含藥物且充當生長對照。使用Tecan Freedom EVO或Perkin-Elmer MiniTrakTM MultiPosition液體操作機器人將100μL(5×10E5CFU/mL)體積接種物直接添加至96孔盤之各孔中。對於含有10株分離株之生物體組，測定MIC範圍、MIC50及MIC90。MIC50及MIC90分別定義為經組合之各組所測試臨床分離株之生長抑制50%及90%的化合物濃度。使用至少一種CLSI品質對照參考生物體及對照化合物驗證敏感性測試，以確保測試日期或對照化合物之間不存在偏差。針對各生物體/藥物組合所獲得之MIC及MBC值係依循臨床及實驗室標準協會準則(Clinical and Laboratory Standards Institute Guidelines)確定(Methods for dilution antimicrobial susceptibility tests for bacteria that grow aerobically；經批准之標準.第9版.Wayne,PA.第32卷.第2期；Methods for antimicrobial susceptibility testing of anaerobic bacteria；經批准之標準.第7版.Wayne,PA.第27卷第2期；及Methods for determining bactericidal activity of antimicrobial agents；approved guideline；經批准之標準.Wayne,PA.第19卷第18期)。針對參考化合物之敏感性斷點解釋以及參考菌株之QC範圍描述於以下CLSI文件中：Performance standards for antimicrobial susceptibility testing；第21次資訊增刊.Wayne,PA.第31卷.第1期；及Performance standards for antimicrobial susceptibility testing；第22次資訊增刊.Wayne,PA.第32卷.第3期。所有測試菌種均執行培養液微量稀釋法 MIC測試，除了厭氧菌及淋病奈瑟氏菌使用瓊脂稀釋。嗜肺性退伍軍人桿菌於退伍軍人桿菌培養液中執行培養液微量稀釋法MIC。嗜肺性退伍軍人桿菌菌株首先在經緩衝之炭酵母萃(BCYE)瓊脂盤中生長48小時，隨後轉移。
個別分離株之MIC值可目視讀取，MIC測定值(MIC範圍、MIC50、MIC90)及累積百分比抑制曲線圖係使用CUMPER(累積百分比之縮寫)(一種內部統計軟體程式)產生。
實例5針對個別革蘭氏陽性、革蘭氏陰性及厭氧細菌分離株之抗細菌譜呈現於表12及13中。總體而言，實例5針對所測試之以下分離株具有活性：葡萄球菌屬、鏈球菌屬、流行性感冒嗜血桿菌、黏膜莫拉克氏菌(Moraxella catarrhalis)、梭菌屬(Clostridium spp.)、大芬戈爾德菌(Finegoldia magna)及產黑素普雷沃氏菌(Prevotella melaninogenica)。亦評估實例5及比較實例針對金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌及化膿鏈球菌菌株(以旋轉酶及拓撲異構酶突變為特徵)之抗細菌活性。發現實例5針對細菌臨床分離株無交叉抗性，此等臨床分離株在gyrA、gyrB、ParC或ParE中經常遇到突變，已知此等突變可產生對喹諾酮、新生黴素(novobiocin)及香豆黴素A1(Coumermycin A1)之抗性。
在MIC90研究中，針對新近獲得之一組676株革蘭氏陽性及營養苛求性革蘭氏陰性細菌臨床分離株，對實例5及比較物進行評估。針對100株金黃色葡萄球菌菌株，實例5(MIC90 0.25μg/mL)為所測試之最具活性的化合物且針對對左旋氧氟沙星、利奈唑胺及萬古黴素有抗性之分離株維持此活性。亦針對包括以下之凝固酶陰性葡萄球菌屬之99個菌株觀測到此高度抗細菌活性及缺少交叉抗性：表皮葡萄球菌(S.epidermidis)(MIC90 0.25μg/mL，n=37)、溶血性葡萄球菌(S.haemolyticus)(MIC90 0.25μg/mL，n=21)、里昂葡萄球菌(S. lugdunensis)(MIC90 0.5μg/mL，n=11)及腐生葡萄球菌(S.saprophyticus)(MIC90 0.5μg/mL，n=16)。實例5針對肺炎鏈球菌、化膿鏈球菌及產膿鏈球菌中每一者之100株菌株具有很大活性，其中MIC50及MIC90值分別為0.125μg/mL及0.25μg/mL。對於對左旋氧氟沙星、紅黴素或阿莫西林具有抗性的任何鏈球菌均未觀測到對實例5具有交叉抗性。
與葡萄球菌屬及鏈球菌屬相比，觀測到實例5針對腸球菌之活性降低，其中糞腸球菌(E.faecalis)(n=51)產生最低MIC(MIC範圍為0.125-2μg/mL且MIC90 2μg/mL)且屎腸球菌MIC為約8倍(MIC90 16μg/mL)。量測實例5針對枯草芽孢桿菌及仙人掌芽孢桿菌(替代炭疽芽胞桿菌(B.anthracis))中每一者之11株菌株的活性。針對兩種菌種之MIC90均為0.5μg/mL。實例5針對炭疽芽胞桿菌之BSL3測試證實此活性(MIC範圍為0.125-1μg/mL，且MIC90 0.5μg/mL)。
實例5之抗細菌活性亦涵蓋營養苛求性革蘭氏陰性生物體，包括流行性感冒嗜血桿菌(n=29)、嗜肺性退伍軍人桿菌(n=11)，及17株淋病奈瑟氏菌菌株。相對於此等生物體組之MIC範圍分別為0.125-1μg/mL、0.008-0.06μg/mL及0.03-0.25μg/mL。相應MIC90分別為1μg/mL、0.06μg/mL及0.125μg/mL。在對環丙沙星有抗性之淋病奈瑟氏菌菌株中，未觀測到實例5之交叉抗性。
評估不同濃度之小鼠與人類血清(0、10、25及50%)中之血清蛋白結合對實例5之MIC值的影響。觀測到在50%人類血清存在下實例5針對9株所測試之金黃色葡萄球菌菌株的MIC增加2倍至8倍且在50%小鼠血清中觀測到較大蛋白結合效應(MIC增加8倍至32倍)。
評估實例5及比較實例針對7株金黃色葡萄球菌菌株及1株化膿鏈球菌菌株的殺細菌活性。實例5、左旋氧氟沙星及萬古黴素針對所有測試菌株具有殺細菌活性，其中最小殺細菌濃度(MBC)在2倍MIC 內。活體外殺死時間研究證實實例5之殺細菌活性。
總結
實例5為DNA旋轉酶/拓撲異構酶抑制劑，其針對以下具有活體外抗細菌活性：主要革蘭氏陽性(金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、溶血性葡萄球菌、肺炎鏈球菌、化膿鏈球菌及產膿鏈球菌)、營養苛求性革蘭氏陰性(流行性感冒嗜血桿菌、嗜肺性退伍軍人桿菌、黏膜莫拉克氏菌、淋病奈瑟氏菌)及厭氧(艱難梭菌)細菌菌種，包括已知對氟喹諾酮具有抗性之分離株。針對對其他類別藥物(包括巨環內酯、β-內醯胺、糖肽及噁唑啶酮)具有抗性的新近細菌臨床分離株，未觀測 到實例5具有交叉抗性。
連續繼代之金黃色葡萄球菌及化膿鏈球菌出現抗性
此研究之目標為確定二甲氧苯青黴素敏感性金黃色葡萄球菌、二甲氧苯青黴素抗性金黃色葡萄球菌及化膿鏈球菌之代表性分離株在連續繼代期間出現之對實例5之抗性。
自血液瓊脂盤(Remel,Lenexa KS)收穫新生長之金黃色葡萄球菌516及2398以及化膿鏈球菌838，懸浮於3mL經陽離子調節之繆勒-欣頓2培養液(MHB2)(Sigma-Aldrich,St.Louis MO)中且冷凍樣品作為零代。將此等培養物於無菌生理鹽水(Remel)中稀釋至0.5麥氏濃度，接著1：200稀釋至新鮮培養液中且用作接種物。整個實驗中所用之培養基及培育條件對於金黃色葡萄球菌而言為MHB2及36℃，於周圍空氣中；且對於化膿鏈球菌838而言為添加有2.5%經溶胞之馬血液之MHB2及36℃，於5% CO2中(Hema Resource Inc.,Aurora,OR)。
於DMSO中製成一系列兩倍遞增濃度之實例5且將40μL各濃度分配於24孔培養盤(Costar,Corning NY)之孔中。將培養盤密封且在-80℃下冷凍且每天解凍。向各孔中添加總共2mL接種物且使培養盤維持20至24小時。將含有允許可見細菌生長之最高濃度之測試化合物之孔中的細菌細胞在20%甘油中冷凍且在-70℃下儲存且亦於無菌生理鹽水(Remel)中稀釋回至0.5麥氏濃度且隨後稀釋至新鮮培養基中。接著，將此經稀釋培養物(代表0.5×MIC之細胞)分配至含有一系列遞增濃度之測試化合物的新鮮24孔培養盤中。將此重複二十天。
接著，將冷凍樣品在血液瓊脂盤上在化合物不存在下進行單一群落純化且使用標準培養液微量稀釋分析測試敏感性，此分析係根據臨床實驗室標準協會之文件M07-A8(Methods for dilution antimicroia susceptibility tests for bacteria that grow aerobically；經批准之標準.第8版.Wayne,PA.第29卷.第2期.2009)執行。選擇針對實例5之MIC 值提高(表示敏感性降低)之來自若干繼代之分離株藉由序列分析進行研究。使用標準基因組DNA製備套組(Promega,Madison WI)，由所選分離株製備完整基因組DNA。使用高保真PCR混合物(Roche,Nutley,NJ)擴增編碼DNA旋轉酶(gyrA及gyrB)與拓撲異構酶IV(parC及parE)之兩個亞單元的基因。使用QIAquick PCR純化套組(Qiagen,Valencia,CA)純化聚合酶鏈反應(PCR)產物且使用適用於金黃色葡萄球菌及肺炎鏈球菌之引子在應用生物系統(Applied Biosystems)3100遺傳學分析儀(ABI,Foster City,CA)中測序。若觀測到變化，則對第二獨立PCR產物進行擴增且測序以確認變異為真正的且並非為PCR擴增期間併入錯誤之結果。
使金黃色葡萄球菌及化膿鏈球菌在含有次抑制性濃度之實例5的液體培養基中生長繼代二十次，以研究抗性之出現。在實例5之遞增選擇壓力存在下繼代二十次之後，已分離出金黃色葡萄球菌及化膿鏈球菌ARC838之變異體，其與起始培養物相比顯示32倍、16倍及8倍之敏感性降低。對實例5之此敏感性降低與對利奈唑胺、萬古黴素及左旋氧氟沙星之大於4倍之任何敏感性變化不相關。
所測試之實例5針對淋病奈瑟氏菌之活體外活性及效能
淋病奈瑟氏菌為全世界性傳播疾病之重要原因。青黴素在歷史上可有效治療淋病，但質體介導之產生青黴素酶之淋病奈瑟氏菌(PPNG)菌株已在全世界擴散，其限制青黴素經驗性用於已知PPNG盛行率較低(其他青黴素抗性機制)之某些地理區域。另外，若干替代抗微生物類藥劑(包括氟喹諾酮(環丙沙星)、四環素及巨環內酯(阿奇黴素))用於淋球菌感染之經驗性治療時，已發生抗性發展。針對實例5及比較實例藥劑，藉由CLSI參考瓊脂稀釋法對一組100株淋病奈瑟氏菌(包括對阿奇黴素、環丙沙星、青黴素及四環素不敏感之分離株)進行活體外測試。結果表明，實例5對所測試之所有分離株具有高度活 性(MIC值0.25μg/mL)且與所測試之其他比較實例類別似乎不存在交叉抗性。
在JMI Laboratories(North Liberty,Iowa USA)，對該組總共100株臨床儲備及ATCC品質對照淋病奈瑟氏菌分離株進行測試。該組包括具有以下特徵之菌株：
a主要為北美分離株且少許為歐洲分離株
b北美分離株與歐洲分離株數目大致相等
c主要為北美分離株且少許為歐洲分離株
d二十七個分離株數的阿奇黴素MIC0.5μg/mL(不敏感)方法：
A.淋病奈瑟氏菌之MIC值係使用如M07-A9[2012]中所述的針對淋球菌之參考CLSI瓊脂稀釋法測定。
B.用於淋病奈瑟氏菌測試之瓊脂稀釋盤(具有1%規定之補充物之GC瓊脂基質)係由JMI Laboratories製造。
C.比較實例藥劑係由JMI Laboratories經由Sigma-Aldrich或其各別製造商提供。
D.比較實例化合物之品質對照(QC)範圍及解釋性準則如CLSI M100-S23[2013]及EUCAST[2013]中所公佈。QC菌株為淋病奈瑟氏菌ATCC 49226。
實例5針對所測試之所有淋病奈瑟氏菌菌株具有活性，其展現0.004至0.25μg/mL之MIC範圍及0.06/0.125μg/mL之MIC50/90。總共99.0%分離株展現0.125μg/mL之MIC值。僅有一株分離株之MIC值為 0.25μg/mL。
實例5針對青黴素中間株及青黴素抗性株展現相似活性，其中模態MIC值為0.06μg/mL且MIC50/90值分別為0.06/0.06μg/mL及0.06/0.12μg/mL[85.7%分離株0.06μg/mL]。
環丙沙星中間株及環丙沙星抗性株對實例5亦顯示0.06μg/mL之模態MIC值，且MIC50/90值為0.06/0.12μg/mL。
實例5針對四環素中間株及四環素抗性株展現相似活性，其中模態MIC值為0.06μg/mL且MIC50/90值分別為0.06/0.06μg/mL及0.06/0/0.12μg/mL[66.7%分離株0.06μg/mL]。
阿奇黴素敏感性分離株及阿奇黴素中間分離株之模態值為0.06μg/mL，MIC50/90值分別為0.06/0.06μg/mL及0.06/0/0.12μg/mL[66.7%分離株0.06μg/mL]。
針對所有100株分離株之MIC50/90值對於阿奇黴素而言為0.25/0.5μg/mL；對於頭孢克肟而言，為0.03/0.06μg/mL；對於頭孢曲松而言，為0.015/0.06μg/mL；對於環丙沙星而言，為0.25/>2μg/mL；對於青黴素而言，為2/>2μg/mL；且對於四環素而言，為1/2μg/mL。
實例5(MIC90，0.12μg/mL)之活性為阿奇黴素(MIC90，0.5μg/mL)之四倍，為頭孢克肟及頭孢曲松(MIC90，0.06μg/mL)之二分之一，為四環素(MIC90，2μg/mL)之16倍且為環丙沙星及青黴素(MIC90，2μg/mL)之>32倍。
針對QC菌株(淋病奈瑟氏菌ATCC 49226)測試時，實例5 MIC值為0.06、0.12及0.12μg/mL。
總結：實例5針對淋病奈瑟氏菌分離株具有高度活性，其中99.0%分離株展現0.125μg/mL之MIC值。實例5之活性為頭孢克肟及頭孢曲松之二分之一且其活性在阿奇黴素、環丙沙星、青黴素及四環素活性之4倍至>32倍範圍內。實例5針對不同亞組之分離株(包括對比 較實例藥劑不敏感之分離株)之模態MIC值保持相同(0.06μg/mL)。針對敏感性表現型(環丙沙星敏感性、四環素敏感性及阿奇黴素敏感性)之MIC90值為0.06μg/mL。對於不敏感性表現型而言，MIC90值為0.06-0.12μg/mL，表明活性程度高且實例5與比較實例藥劑不存在顯著交叉抗性。
<110> 瑞典商阿斯特捷利康公司
<120> 用於治療細菌感染之化合物及方法
<130> 200070-WO-PCT
<140>
<141>
<150> 61/755,537
<151> 2013-01-23
<150> 61/859,910
<151> 2013-07-30
<160> 2
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 27
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「人工序列之描述：合成寡核苷酸」
<400> 1
<210> 2
<211> 9
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<221> source
<223> /註釋=「人工序列之描述：合成寡核苷酸」
<400> 2

Claims (14)

  1. 一種化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該化合物具有式(I)之結構： 其中X為氟或氯；R1係選自由以下組成之群：氫、苯基、-C≡N、四氫哌喃基、N-甲基-1,2,4-三唑基、嘧啶基、吡啶基、吡嗪基、環丙基、-C≡CH、-CH=CH2及C1-C3烷基，該C1-C3烷基視情況經以下中之一或多者取代：-OR10、鹵素、-C≡N、-N3、-SO2CH3、-SCH3、-CH=CH2、-CH=NOR11及苯基；R2係選自由以下組成之群：氫、-C≡N、吡啶基、C1-C3烷基，該C1-C3烷基視情況經以下中之一或多者取代：鹵素、-OR20及-CH=NOR21；R3為氫或C1-C3烷基；R10每次出現時獨立地選自由以下組成之群：氫、C1-C4烷基及-(CH2)2OCH3；且R11、R20及R21每次出現時獨立地為氫或C1-C4烷基。
  2. 如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R10為氫、甲基、乙基或-(CH2)2OCH3。
  3. 如請求項1或2之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R11為氫或甲基。
  4. 如請求項1至3中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R20為氫、甲基或乙基。
  5. 如請求項1至4中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R21為氫或甲基。
  6. 如請求項1至5中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R1係選自由以下組成之群：氫、甲基、乙基、苯基、-CH2-苯基、-CH2F、-CH2OCH3、-CH2CH=CH2、四氫哌喃基、-(CH2)3OH、-(CH2)3F、-(CH2)3OH、-(CH2)3F、-CH=CH2、-C≡N、-CH=NOCH3、-CH2SCH3、-CH2SO2CH3、-CH2N3、-CH2OCH2CH3、-CH2O(CH2)2OCH3、環丙基、吡啶基、-CH(CH3)OCH3、嘧啶基、吡嗪基、-C≡CH、N-甲基-1,2,4-三唑基、-CH(OH)CH3、-CH=NOH及-CH2OH。
  7. 如請求項1至6中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R2係選自由以下組成之群：氫、甲基、乙基、-CH2F、-CH2OCH3、-CH2OH、-CH=NOH、-CH2N3、吡啶基、-C≡N及-CH=NHOCH3。
  8. 如請求項1至7中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R3為氫或甲基。
  9. 如請求項1至8中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該化合物係選自由以下組成之群：(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-(2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基)-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-[(4R)-4-甲基-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮； (2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-[(5S)-5-甲基-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-[(5R)-5-甲基-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-[(4S)-4-甲基-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-8-[(4S)-4-乙基-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-11-氟-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-8-[(4R)-4-乙基-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-11-氟-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮)；(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-[(4R)-2-側氧基-4-苯基-1,3-噁唑啶-3-基]-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-[(4S)-2-側氧基-4-苯基-1,3-噁唑啶-3-基]-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-8-[(4R)-4-苯甲基-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-11-氟-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-8-[(4S)-4-苯甲基-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-11-氟-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑 并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-8-(5,5-二甲基-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基)-11-氟-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-8-[(5S)-5-乙基-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-11-氟-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-8-[(5R)-5-乙基-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-11-氟-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-11-氟-8-[(4R)-4-(氟甲基)-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-11-氟-8-[(4S)-4-(氟甲基)-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-11-氟-8-[(4S)-4-(甲氧基甲基)-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-11-氟-8-[(4R)-4-(甲氧基甲基)-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-11-氟-8-((S)-5-(氟甲基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-11-氯-8-[(5S)-4-(甲氧基甲基)-2-側氧基-1,3-噁唑啶 -3-基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-11-氯-8-[(5R)-4-(甲氧基甲基)-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；((2R,4S,4aS)-11-氯-2,4-二甲基-8-((R)-5-甲基-2-側氧基噁唑啶-3-基)-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-8-((4S,5R)-4,5-二甲基-2-側氧基噁唑啶-3-基)-11-氟-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-8-((4R,5S)-4,5-二甲基-2-側氧基噁唑啶-3-基)-11-氟-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-8-((S)-4-烯丙基-2-側氧基噁唑啶-3-基)-11-氟-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-11-氟-8-((S)-5-(羥甲基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；((2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-[(4R-(四氫-2H-哌喃-4-基)-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-[(4S-(四氫-2H-哌喃-4-基)-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮； (2R,4S,4aS)-11-氟-8-((S)-4-(3-羥丙基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-11-氟-8-((S)-4-(3-氟丙基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-11-氟-8-((S)-4-(2-羥乙基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-11-氯-8-((S)-5-(氟甲基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-11-氯-8-((S)-4-(3-羥丙基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-11-氯-8-((S)-4-(3-氟丙基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-11-氟-8-[(5S)-4-(甲氧基甲基)-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-11-氟-8-[(5R)-4-(甲氧基甲基)-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-11-氟-8-[(5R)-5-(羥甲基)-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁 唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-11-氟-8-[(5R)-5-(氟甲基)-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((S)-2-側氧基-4-乙烯基噁唑啶-3-基)-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-11-氟-8-{(5R)-5-[(羥基亞胺基)甲基]-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基}-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；(4S)-3-[(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-2',4',6'-三側氧基-1,1',2,3',4,4',4a,6'-八氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-8-基]-2-側氧基-1,3-噁唑啶-4-甲腈；(2R,4S,4aS)-11-氟-8-{(4S)-4-[(甲氧基亞胺基)甲基]-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基}-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-11-氟-8-{(5R)-5-(甲氧基亞胺基)甲基]-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基}-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-8-[(5R)-5-(疊氮基甲基)-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-11-氟-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((R)-4-((甲硫基)甲基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((R)-4-((甲磺醯基)甲基)-2-側 氧基噁唑啶-3-基)-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-8-((R)-4-(疊氮基甲基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)-11-氟-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-8-((S)-4-(疊氮基甲基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)-11-氟-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-8-[(4S)-4-(乙氧基甲基)-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-11-氟-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-11-氟-8-{(4S)-4-[(2-甲氧基乙氧基)甲基]-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基}-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-8-((R)-4-(二氟甲基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)-11-氟-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-8-((S)-4-環丙基-2-側氧基噁唑啶-3-基)-11-氟-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((R)-2-側氧基-5-(吡啶-2-基)噁唑啶-3-基)-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((S)-2-側氧基-5-(吡啶-2-基)噁唑啶-3-基)-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮； (2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((R)-2-側氧基-4-(吡啶-2-基)噁唑啶-3-基)-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((S)-2-側氧基-4-(吡啶-2-基)噁唑啶-3-基)-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((R)-2-側氧基-4-(吡啶-4-基)噁唑啶-3-基)-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((S)-2-側氧基-4-(吡啶-4-基)噁唑啶-3-基)-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-11-氟-8-((R)-4-((R)-1-甲氧基乙基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-11-氟-8-((R)-4-((S)-1-甲氧基乙基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((R)-2-側氧基-4-(吡嗪-2-基)噁唑啶-3-基)-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((S)-2-側氧基-4-(吡嗪-2-基)噁唑啶-3-基)-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((R)-2-側氧基-4-(嘧啶-2-基)噁唑啶-3-基)-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并 [4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((S)-2-側氧基-4-(嘧啶-2-基)噁唑啶-3-基)-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-8-((S)-4-乙炔基-2-側氧基噁唑啶-3-基)-11-氟-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-11-氯-2,4-二甲基-8-((S)-4-甲基-2-側氧基噁唑啶-3-基)-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-11-氟-8-[(4S)-4-(甲氧基甲基)-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基]-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((S)-4-(1-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-8-((R)-4-(1-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-11-氟-8-((R)-4-((S)-1-羥乙基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；{(4S)-3-[(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-2',4',6'-三側氧基-1,1',2,3',4,4',4a,6'-八氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-8-基]-2-側氧基-1,3-噁唑啶-4-基}乙腈；(2R,4S,4aS)-8-((R)-4-((R)-1,2-二羥乙基)-2-側氧基噁唑啶-3- 基)-11-氟-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-8-((R)-4-((S)-1,2-二羥乙基)-2-側氧基噁唑啶-3-基)-11-氟-2,4-二甲基-2,4,4a,6-四氫-1H,1'H-螺[異噁唑并[4,5-g][1,4]噁嗪并[4,3-a]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(3'H)-三酮；(2R,4S,4aS)-11-氟-8-{(4S)-4-[(羥基亞胺基)甲基]-2-側氧基-1,3-噁唑啶-3-基}-2,4-二甲基-1,2,4,4a-四氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-2',4',6'(1'H,3'H)-三酮；(5R)-3-[(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-2',4',6'-三側氧基-1,1',2,3',4,4',4a,6'-八氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-8-基]-2-側氧基-1,3-噁唑啶-5-甲腈；及(5S)-3-[(2R,4S,4aS)-11-氟-2,4-二甲基-2',4',6'-三側氧基-1,1',2,3',4,4',4a,6'-八氫-2'H,6H-螺[1,4-噁嗪并[4,3-a][1,2]噁唑并[4,5-g]喹啉-5,5'-嘧啶]-8-基]-2-側氧基-1,3-噁唑啶-5-甲腈，或其醫藥學上可接受之鹽。
  10. 一種醫藥組合物，其包含如請求項1至9中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，及醫藥學上可接受之賦形劑或稀釋劑。
  11. 一種如請求項1至9中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽的用途，其係用於治療細菌感染或用於抑制細菌DNA旋轉酶。
  12. 一種如請求項1至9中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽的用途，其係用於製造供治療細菌感染或抑制細菌DNA旋轉酶之藥劑。
  13. 一種為有需要之個體治療細菌感染的方法，其包括投與有效量之如請求項1至9中任一項之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。
  14. 一種抑制細菌DNA旋轉酶的方法，其包括投與有效量之如請求項1至9中任一項之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。
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