BR112015017519B1 - Compostos para o tratamento de infecções bacterianas, composição farmacêutica e usodos mesmos - Google Patents

Abstract

COMPOSTOS PARA O TRATAMENTO DE INFECÇÕES BACTERIANAS, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA E USO DOS MESMOS. A presente invenção refere-se a compostos da fórmula (I), I sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos e usos dos compostos da fórmula (I) para o tratamento de infecções bacterianas.

Description

Pedidos Relacionados

[0001] Este pedido reivindica o benefício sob a 35 U.S.C § 119(e) do Pedido de Patente Provisório N°. US 61/859,910, depositado em 30 de julho de 2013 e Pedido de Patente Provisório N°. US 61/755,537, depositado em 23 de janeiro de 2013. O conteúdo de cada um dos pedidos acima é incorporado por referência por meio deste em sua totalidade.

Listagem de Sequência

[0002] O presente pedido contém uma Listagem de Sequência que foi submetida eletronicamente em formato ASCII e é incorporado por referência por meio deste em sua totalidade. Dita cópia ASCII, criada em 6 de janeiro de 2014, é denominada 200070-WO-PCT_SL.txt e tem 772 bytes de tamanho.

Antecedentes da Invenção

[0003] Tolerância e resistência a antibióticos se tornou uma grande ameaça ao tratamento bem sucedido de muitas infecções bacteria- nas comuns. De fato, de acordo com a Sociedade de Doenças Infecciosas da América, Staphilococcus aureus resistente a meticilina (MRSA) mata mais americanos todos os anos do que enfisema, HIV/AIDS, doença de Parkinson e homicídio combinados. Não somente a resistência a múltiplas drogas em patógenos infecciosos Gram- positivos e negativos comuns, tais como Enterococcus faecium, Sta- philococcus aureus, Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Mycobacterium tuberculosis e espécies En- terobacter, está crescendo, mas também evidência de resistência está sendo vista em Salmonella e Clostridium difficile, e de forma crescente em Neisseria gonorrheae (Gerard D. Wright, "Antibióticos: A New Hope," 19 (2012) 3-10). Devido a este aumento na resistência, o de- senvolvimento de novos antibacterianos é uma importante necessida-demédica.

Sumário

[0004] Ainda há uma necessidade de novas terapias para tratar infecções bacterianas. A presente invenção provê novos compostos e métodos para usar a mesma para tratar infecções bacterianas.

[0005] Em um aspecto, a invenção provê um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo:

[0006] em que: X é flúor ou cloro; R1é selecionado a partir do grupo consistindo em hidrogênio, fenila, -CEN, tetra-hidropiranila, N-metil-1,2,4-triazolila, pirimidinila, piridinila, pirazinila, ciclopropila, -CECH, -CH=CH2, e alquila C1-C3, alquila C1-C3 que é opcionalmente substituído com um ou mais dentre: -OR10, halogênio, -CEN, -N3, -SO2CH3, -SCH3, -CH=CH2, -CH=NOR11 e fenila; R2é selecionado a partir do grupo consistindo em hidrogênio, -CeN, piridinila, alquila C1-C3, alquila C1-C3 que é opcionalmente substituído com um ou mais dentre: halogênio, -OR20 e -CH=NOR21; R3é hidrogênio ou alquila C1-C3; R10é, para cada ocorrência, selecionado independentemente a partir do grupo consistindo em hidrogênio, alquila C1-C4 e -(CH2)2OCH3; e R11, R20 e R21são, para cada ocorrência, independente-mentehidrogênio ou alquila C1-C4.

[0007] Em um aspecto, a invenção provê uma composição farmacêutica compreendendo um composto de fórmula (I), ou um sal farma- ceuticamente aceitável do mesmo, e um excipiente ou diluente farma- ceuticamente aceitável.

[0008] Em um aspecto, a invenção provê um método para tratar uma infecção bacteriana em um sujeito em necessidade do mesmo, compreendendo administrar uma quantia efetiva de um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ao sujeito.

[0009] Em um aspecto, a invenção provê o uso de um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para tratar uma infecção bacteriana.

[00010] Em um aspecto, a invenção provê o uso de um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, na fabricação de um medicamento para tratar uma infecção bacteriana.

[00011] Em um aspecto, a invenção provê uma composição farmacêutica compreendendo um composto de fórmula (I), ou um sal farma- ceuticamente aceitável do mesmo, para tratar uma infecção bacteria- na.

[00012] Em um aspecto, a invenção provê um método para inibir DNA girase bacteriana em um sujeito em necessidade do mesmo, compreendendo administrar uma quantia efetiva de um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[00013] Em um aspecto, a invenção provê o uso de um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para inibir DNA girase bacteriana.

[00014] Em um aspecto, a invenção provê o uso de um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, na fabricação de um medicamento para inibir DNA girase bacteriana.

[00015] Em um aspecto, a invenção provê uma composição farmacêutica compreendendo um composto de fórmula (I), ou um sal farma- ceuticamente aceitável do mesmo, para inibir DNA girase bacteriana.

Breve Descrição das Figuras

[00016] A Figura 1 é um gráfico que ilustra a eficácia do Exemplo 5 em um modelo de lesão na coxa induzida por S. aureus USA100 em camundongos CD1 neutropênicos.

[00017] A Figura 2 é um gráfico que ilustra a eficácia do Exemplo 5 em um modelo de lesão na coxa induzida por S. pyogenes ATCC12384 em camundongos neutropênicos.

Descrição Detalhada da Invenção Compostos

[00018] A presente invenção provê, pelo menos em parte, compostos e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, de fórmula (I):

[00019] em que: X é flúor ou cloro; R1 é selecionado a partir do grupo consistindo em hidrogênio, fenila, -CEN, tetra-hidropiranila, N-metil-1,2,4-triazolila, pirimidinila, piridinila, pirazinila, ciclopropila, -CECH, -CH=CH2, e alquila C1-C3, alquila C1-C3 que é opcionalmente substituído com um ou mais dentre: -OR10, halogênio, -CEN, -N3, -SO2CH3, -SCH3, -CH=CH2, -CH=NOR11 e fenila; R2é selecionado a partir do grupo consistindo em hidrogênio,-CHN, piridinila, alquila C1-C3, alquila C1-C3 que é opcionalmente substituído com um ou mais dentre: halogênio, -OR20 e -CH=NOR21; R3 é hidrogênio ou alquila C1-C3; R10 é, para cada ocorrência, selecionado independentemente a partir do grupo consistindo em hidrogênio, alquila C1-C4 e -(CH2)2OCH3; e R11, R20 e R21 são, para cada ocorrência, independentemente hidrogênio ou alquila C1-C4.

[00020] Em um aspecto, R1 é hidrogênio, metila, etila, fenila, -CH2- fenila, -CH2F, -CH2OCH3, -CH2CH=CH2, tetra-hidropiranila, -(CH2)3OH, -(CH^F, -(CH^OH, -(CH2)3F, -CH=CH2, -CEN, -CH=NOCH3, -CH2SCH3, -CH2SO2CH3, -CH2N3, -CH2OCH2CH3, -CH2O(CH2)2OCH3, ciclopropila, piridinila, -CH(CH3)OCH3, pirimidinila, pirazinila, -CeCH, N-metil-1,2,4-triazolila, -CH(OH)CH3, -CH=NOH ou -CH2OH.

[00021] Em um aspecto, R2 é hidrogênio, metila, etila, -CH2F, -CH2OCH3, -CH2OH, -CH=NOH, -CH2N3, piridinila, -CeN ou -CH=NHOCH3.

[00022] Em um aspecto, R3 é hidrogênio ou metila.

[00023] Em um aspecto, R10 é hidrogênio, metila, etila ou -(CH2)2OCH3.

[00024] Em um aspecto, R11 é hidrogênio ou metila.

[00025] Em um aspecto, R20 é hidrogênio, metila ou etila.

[00026] Em um aspecto R21 é hidrogênio ou metila.

[00027] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), X é flúor e R1, R2 e R3 são, cada um, hidrogênio.

[00028] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), X é flúor, R1 é metila e R2 e R3 são, cada um, hidrogênio.

[00029] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), X é flúor, R1 e R3 são, cada um, hidrogênio e R2 é metila.

[00030] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), X é flúor, R1é etila e R2 e R3são, cada um, hidrogênio.

[00031] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), X é flúor, R1é fenila e R2 e R3são, cada um, hidrogênio.

[00032] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), X é flúor, R1é - CH2-fenila e R2 e R3são, cada um, hidrogênio.

[00033] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), X é flúor, R1é hidrogênio e R2 e R3são, cada um, metila.

[00034] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), X é flúor, R1 e R3são, cada um, hidrogênio e R2é etila.

[00035] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), X é flúor, R1é - CH2F e R2 e R3são, cada um, hidrogênio.

[00036] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), X é flúor, R1é -CH2OCH3 e R2 e R3são, cada um, hidrogênio.

[00037] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), X é flúor, R1 e R3são, cada um, hidrogênio e R2é -CH2F.

[00038] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), X é cloro, R1 e R3são, cada um, hidrogênio e R2é -CH2OCH3.

[00039] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), X é cloro, R1 e R3são, cada um, hidrogênio e R2é metila.

[00040] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), X é flúor, R1 e R2são, cada um, metila e R3é hidrogênio.

[00041] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), X é flúor, R1é -CH2CH=CH2 e R2 e R3são, cada um, hidrogênio.

[00042] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), X é flúor, R1 e R3são, cada um, hidrogênio e R2é -CH2OH.

[00043] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), X é flúor, R1é tetra-hidropiranila e R2 e R3são, cada um, hidrogênio.

[00044] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), X é flúor, R1é -(CH2)3OH e R2 e R3são, cada um, hidrogênio.

[00045] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), X é flúor, R1é -(CH2)3F e R2 e R3são, cada um, hidrogênio.

[00046] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), X é cloro, R1 e R3são, cada um, hidrogênio e R2é-CH2F.

[00047] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), X é cloro, R1é - (CH2)3OH e R2 e R3são, cada um, hidrogênio.

[00048] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), X é cloro, R1é - (CH2)3F e R2 e R3são, cada um, hidrogênio.

[00049] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), X é flúor, R1 e R3são, cada um, hidrogênio e R2é -CH2OCH3.

[00050] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), X é flúor, R1é -CH=CH2 e R2 e R3são, cada um, hidrogênio.

[00051] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), X é flúor, R1 e R3são, cada um, hidrogênio e R2é-CH=NOH.

[00052] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), X é flúor, R1é - C^N e R2 e R3 são, cada um, hidrogênio.

[00053] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), X é flúor, R1 é - CH=NOCH3 e R2 e R3 são, cada um, hidrogênio.

[00054] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), X é flúor, R1 e R3 são, cada um, hidrogênio e R2 é -CH=NHOCH3.

[00055] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), X é flúor, R1 e R3 são, cada um, hidrogênio e R2 é -CH2N3.

[00056] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), X é flúor, R1 é - CH2SCH3 e R2 e R3 são, cada um, hidrogênio.

[00057] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), X é flúor, R1 é - CH2SO2CH3 e R2 e R3 são, cada um, hidrogênio.

[00058] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), X é flúor, R1 é - CH2N3 e R2 e R3 são, cada um, hidrogênio.

[00059] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), X é flúor, R1 é -CH2OCH2CH3 e R2 e R3 são, cada um, hidrogênio.

[00060] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), X é flúor, R1é -CH2O(CH2)2OCH3 e R2 e R3são, cada um, hidrogênio.

[00061] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), X é flúor, R1é - CHF2 e R2 e R3são, cada um, hidrogênio.

[00062] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), X é flúor, R1é ciclopropila e R2 e R3são, cada um, hidrogênio.

[00063] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), X é flúor, R1 e R3são, cada um, hidrogênio e R2é piridinila.

[00064] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), X é flúor, R1é piridinila e R2 e R3são, cada um, hidrogênio.

[00065] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), X é flúor, R1é -CH(CH3)OCH3 e R2 e R3são, cada um, hidrogênio.

[00066] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), X é flúor, R1é pirimidinila e R2 e R3são, cada um, hidrogênio.

[00067] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), X é flúor, R1é pirazinila e R2 e R3são, cada um, hidrogênio.

[00068] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), X é flúor, R1é - C=CH e R2 e R3 são, cada um, hidrogênio.

[00069] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), X é cloro, R1 é metila e R2 e R3 são, cada um, hidrogênio.

[00070] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), X é flúor, R1 é N-metil-1,2,4-triazolila e R2 e R3 são, cada um, hidrogênio.

[00071] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), X é flúor, R1 é - CH(OH)CH3 e R2 e R3 são, cada um, hidrogênio.

[00072] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), X é flúor, R1 é - CH(OH)CH2OH e R2 e R3 são, cada um, hidrogênio.

[00073] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), X é flúor, R1 é - CH=NOH e R2 e R3 são, cada um, hidrogênio.

[00074] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), X é flúor, R1 e R3 são, cada um, hidrogênio e R2 é -C^N.

[00075] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), X é flúor, R1é -CH2OCH3, R2é metila e R3é hidrogênio.

[00076] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), X é flúor, R1é - CH2F, R2é metila e R3é hidrogênio.

[00077] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), X é flúor, R1é - CH2OH e R2 e R3são, cada um, hidrogênio.

[00078] Em algumas modalidades, o composto de fórmula (I) tem a estrutura de fórmula (Ia), ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma:

[00079] em que: R1a é hidrogênio ou alquila C1-C3, alquila C1-C3 que é opci-onalmente substituído com halogênio ou OR11a; R2a é hidrogênio ou alquila C1-C3, alquila C1-C3 que é opci-onalmente substituído com halogênio ou OR21a; e R11a e R21a são, para cada ocorrência, independentemente hidrogênio ou alquila C1-C4.

[00080] Em um aspecto, R1a é hidrogênio, -(CH2)3OH, -(CH2)3F ou metila.

[00081] Em um aspecto, R2a é -CH2OCH3, metila, -CH2F ou hidrogênio.

[00082] Em um aspecto, R11a é hidrogênio ou metila.

[00083] Em um aspecto, R21a é hidrogênio ou metila.

[00084] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ia), R1a é hidrogênio e R2a é -CH2OCH3.

[00085] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ia), R1aé hidrogênio e R2aé metila.

[00086] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ia), R1aé hidrogênio e R2aé -CH2F.

[00087] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ia), R1aé - (CH2)3OH e R2aé hidrogênio.

[00088] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ia), R1aé - (CH2)3F e R2aé hidrogênio.

[00089] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ia), R1aé metila e R2aé hidrogênio.

[00090] Em algumas modalidades, o composto de fórmula (I) tem a estrutura de fórmula (Ib):

[00091] em que: R1bé selecionado a partir do grupo consistindo em hidrogênio, fenila, -CEN, tetra-hidropiranila, 1,2,4-triazolila, pirimidinila, piridinila, pirazinila, ciclopropila, -CECH, -CH=CH2 e alquila C1-C3, alquila C1C3que é opcionalmente substituído com um ou mais dentre: OR10b, halogênio, -CEN, -N3, -SO2CH3, -SCH3, -CH=CH2, -CH=NOR11b e feni- la; R2bé selecionado a partir do grupo consistindo em hidrogênio, -CeN, alquila C1-C3, alquila C1-C3 que é opcionalmente substituído com um ou mais dentre: halogênio, OR20b e CH=NOR21b; R3bé hidrogênio ou alquila C1-C4; R10bé, para cada ocorrência, selecionado independente- mente a partir do grupo consistindo em hidrogênio, alquila C1-C4 e -(CH2)2OCH3; e R11b, R20b e R21bsão, para cada ocorrência, independente-mentehidrogênio ou alquila C1-C4.

[00092] Em um aspecto, R1bé hidrogênio, metila, etila, fenila, -CH2- fenila, -CH2F, -CH2OCH3, -CH2OH=CH2, tetra-hidropiranila, -(CH2)3OH, -(CHfeF, -(CH2)3OH, -(CH2)3F, -CH=CH2, -C=N, -CH=NOCH3, -CH2SCH3, -CH2SO2CH3, -CH2N3, -CH2OCH2CH3, -CH2O(CH2)2OCH3, ciclopropila, piridinila, -CH(CH3)OCH3, pirimidinila, pirazinila, -CECH, N-metil-1,2,4-triazolila, -CH(OH)CH3, -CH=NOH ou -CH2OH.

[00093] Em um aspecto, R2bé hidrogênio, metila, etila, -CH2F, -CH2OH, -CH=NOH, -CH2N3, piridinila, -CEN ou -CH=NHOCH3.

[00094] Em um aspecto, R3bé hidrogênio ou metila.

[00095] Em um aspecto, R10bé hidrogênio, metila, etila ou -(CH2)2OCH3.

[00096] Em um aspecto, R11bé hidrogênio ou metila.

[00097] Em um aspecto, R20bé hidrogênio, metila ou etila.

[00098] Em um aspecto R21bé hidrogênio ou metila.

[00099] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ib), R1bé metila e R2b e R3bsão, cada um, hidrogênio.

[000100] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ib), R1b e R3b são, cada um, hidrogênio e R2bé metila.

[000101] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ib), R1bé etila e R2b e R3bsão, cada um, hidrogênio.

[000102] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ib), R1bé fenila e R2b e R3bsão, cada um, hidrogênio.

[000103] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ib), R1bé -CH2- fenila e R2b e R3bsão, cada um, hidrogênio.

[000104] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ib), R1bé hidrogênio e R2b e R3bsão, cada um, metila.

[000105] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ib), R1b e R3b são, cada um, hidrogênio e R2bé etila.

[000106] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ib), R1bé -CH2F e R2b e R3bsão, cada um, hidrogênio.

[000107] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ib), R1bé - CH2OCH3 e R2b e R3bsão, cada um, hidrogênio.

[000108] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ib), R1b e R3b são, cada um, hidrogênio e R2bé -CH2F.

[000109] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ib), R1b e R2b são, cada um, metila e R3bé hidrogênio.

[000110] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ib), R1bé - CH2CH=CH2 e R2b e R3bsão, cada um, hidrogênio.

[000111] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ib), R1b e R3b são, cada um, hidrogênio e R2bé -CH2OH.

[000112] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ib), R1bé tetra- hidropiranila e R2b e R3bsão, cada um, hidrogênio.

[000113] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ib), R1bé - (CH2)3OH e R2b e R3bsão, cada um, hidrogênio.

[000114] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ib), R1bé - (CH2)3F e R2b e R3bsão, cada um, hidrogênio.

[000115] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ib), R1b e R3b são, cada um, hidrogênio e R2bé -CH2OCH3.

[000116] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ib), R1bé - CH=CH2 e R2b e R3bsão, cada um, hidrogênio.

[000117] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ib), R1b e R3b são, cada um, hidrogênio e R2bé -CH=NOH.

[000118] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ib), R1b é -C^N e R2b e R3b são, cada um, hidrogênio.

[000119] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ib), R1b é -CH=NOCH3 e R2b e R3b são, cada um, hidrogênio.

[000120] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ib), R1b e R3b são, cada um, hidrogênio e R2bé -CH=NHOCH3.

[000121] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ib), R1b e R3b são, cada um, hidrogênio e R2bé -CH2N3.

[000122] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ib), R1bé - CH2SCH3 e R2b e R3bsão, cada um, hidrogênio.

[000123] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ib), R1bé - CH2SO2CH3 e R2b e R3bsão, cada um, hidrogênio.

[000124] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ib), R1bé -CH2N3 e R2b e R3bsão, cada um, hidrogênio.

[000125] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ib), R1bé - CH2OCH2CH3 e R2b e R3bsão, cada um, hidrogênio.

[000126] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ib), R1bé -CH2O(CH2)2OCH3 e R2b e R3bsão, cada um, hidrogênio.

[000127] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ib), R1bé -CHF2 e R2b e R3bsão, cada um, hidrogênio.

[000128] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ib), R1bé ciclo- propila e R2b e R3bsão, cada um, hidrogênio.

[000129] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), R1b e R3bsão, cada um, hidrogênio e R2bé piridinila.

[000130] Em um aspecto, no composto de fórmula (I), R1bé piridinila e R2b e R3bsão, cada um, hidrogênio.

[000131] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ib), R1bé - CH(CH3)OCH3 e R2b e R3bsão, cada um, hidrogênio.

[000132] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ib), R1bé pirimi- dinila e R2b e R3bsão, cada um, hidrogênio.

[000133] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ib), R1bé pirazini- la e R2b e R3bsão, cada um, hidrogênio.

[000134] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ib), R1b é -C^CH e R2b e R3b são, cada um, hidrogênio.

[000135] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ib), R1bé N-metil- 1,2,4-triazolila e R2b e R3bsão, cada um, hidrogênio.

[000136] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ib), R1bé -CH(OH)CH3 e R2b e R3bsão, cada um, hidrogênio.

[000137] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ib), R1bé -CH(OH)CH2OH e R2b e R3bsão, cada um, hidrogênio.

[000138] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ib), R1bé - CH=NOH e R2b e R3bsão, cada um, hidrogênio.

[000139] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ib), R1b e R3b são, cada um, hidrogênio e R3b é -C^N.

[000140] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ib), R1b é - CH2OCH3, R2b é metila e R3b é hidrogênio.

[000141] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ib), R1b é -CH2F, R2b é metila e R3b é hidrogênio.

[000142] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ib), R1b é

[000143] -CH2OH e R2b e R3b são, cada um, hidrogênio.

[000144] Em algumas modalidades, o composto de fórmula (I) tem a estrutura de fórmula (Ic), ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma:

[000145] em que R1c é fenila, N-metil-1,2,4-triazolila, tetra-hidropiranila, piri- midinila, piridinila, pirazinila ou alquila C1-C3, alquila C1-C3 que é opci-onalmente substituído com um ou mais dentre: fenila, halogênio, -N3 ou OR10c; e R10cé, para cada ocorrência, hidrogênio ou alquila C1-C4.

[000146] Em um aspecto, R1cé metila, etila, fenila, -CH2-fenila, -CH2F, -CH2OCH3, tetra-hidropiranila, -CH2N3, piridinila, pirimidinila, pirazinila, -CH(CH3)OCH3, N-metil-1,2,4-triazolila ou -CH2OH.

[000147] Em um aspecto, R10cé hidrogênio ou metila.

[000148] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ic), R1c é metila.

[000149] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ic), R1c é etila.

[000150] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ic), R1c é fenila.

[000151] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ic), R1cé -CH2- fenila.

[000152] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ic), R1cé -CH2F.

[000153] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ic), R1cé -CH2OCH3.

[000154] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ic), R1cé tetra- hidropiranila.

[000155] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ic), R1cé -CH2N3.

[000156] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ic), R1cé piridini- la.

[000157] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ic), R1cé pirimi- dinila.

[000158] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ic), R1cé pirazinila.

[000159] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ic), R1cé -CH(CH3)OCH3.

[000160] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ic), R1cé N-metil- 1,2,4-triazolila.

[000161] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ic), R1cé

[000162] -CH2OH.

[000163] Em algumas modalidades, o composto de fórmula (I) tem a estrutura de fórmula (Id), ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma:

[000164] em que X é cloro ou flúor; R1d é selecionado a partir do grupo consistindo em hidrogênio, fenila, -C=N, tetra-hidropiranila, N-metil-1,2,4-triazolila, pirimidinila, piridinila, pirazinil: ciclopropila, -C=CH, -CH=CH2, e alquila C1-C3, alquila C1-C3 que é opcionalmente substituído com um ou mais dentre: -OR10d, halogênio, -C=N, -N3, -SO2CH3, -SCH3, -CH=CH2, -CH=NOR11d e fenila; R10d é, para cada ocorrência, selecionado independentemente a partir do grupo consistindo em hidrogênio, alquila C1-C4 e- (CH2)2OCH3; e R11d é, para cada ocorrência, independentemente hidrogênio ou alquila C1-C4.

[000165] Em um aspecto, R1d é metila, etila, fenila, -CH2-fenila, -CH2F, -CH2OCH3, -CH2CH=CH2, tetra-hidropiranila, -(CH2)3OH, -(CH^F, -CH=CH2, -C=N, -CH=NOCH3, -CH2SCH3, -CH2SO2CH3, -CH2N3, -CH2OCH2CH3, -CH2O(CH2)2OCH3, piridinila, CH(CH3)OCH3, pirimidinila, pirazinila, -C=CH, N-metil-1,2,4-triazolila, -CH(OH)CH3, -CH(OH)CH2OH ou -CH=NOH.

[000166] Em um aspecto, R10d é hidrogênio, metila ou etila.

[000167] Em um aspecto, R10d é hidrogênio ou metila.

[000168] Em um aspecto, no composto de fórmula (Id), X é flúor e R1d é metila.

[000169] Em um aspecto, no composto de fórmula (Id), X é flúor e R1d é etila.

[000170] Em um aspecto, no composto de fórmula (Id), X é flúor e R1dé fenila.

[000171] Em um aspecto, no composto de fórmula (Id), X é flúor e R1dé -CH2-fenila.

[000172] Em um aspecto, no composto de fórmula (Id), X é flúor e R1dé -CH2F.

[000173] Em um aspecto, no composto de fórmula (Id), X é flúor e R1dé -CH2OCH3.

[000174] Em um aspecto, no composto de fórmula (Id), X é flúor e R1dé -CH2CH=CH2.

[000175] Em um aspecto, no composto de fórmula (Id), X é flúor e R1dé tetra-hidropiranila.

[000176] Em um aspecto, no composto de fórmula (Id), X é flúor e R1dé -(CH2)2OH.

[000177] Em um aspecto, no composto de fórmula (Id), X é flúor e R1dé -(CH2)2F.

[000178] Em um aspecto, no composto de fórmula (Id), X é cloro e R1dé -(CH2)3OH.

[000179] Em um aspecto, no composto de fórmula (Id), X é cloro e R1dé -(CH2)3F.

[000180] Em um aspecto, no composto de fórmula (Id), X é flúor e R1dé -(CH2)3OH.

[000181] Em um aspecto, no composto de fórmula (Id), X é flúor e R1dé -CH=CH2.

[000182] Em um aspecto, no composto de fórmula (Id), X é flúor e R1dé -(CH2)3OH.

[000183] Em um aspecto, no composto de fórmula (Id), X é flúor e R1d é -C=N.

[000184] Em um aspecto, no composto de fórmula (Id), X é flúor e R1dé -CH=NOCH3.

[000185] Em um aspecto, no composto de fórmula (Id), X é flúor e R1dé -CH2SCH3.

[000186] Em um aspecto, no composto de fórmula (Id), X é flúor e R1dé -CH2SO2CH3.

[000187] Em um aspecto, no composto de fórmula (Id), X é flúor e R1dé -CH2N3.

[000188] Em um aspecto, no composto de fórmula (Id), X é flúor e R1dé -CH2OCH2CH3.

[000189] Em um aspecto, no composto de fórmula (Id), X é flúor e R1dé -CH2O(CH2)2OCH3.

[000190] Em um aspecto, no composto de fórmula (Id), X é flúor e R1d é -CHF2.

[000191] Em um aspecto, no composto de fórmula (Id), X é flúor e R1d é piridinila.

[000192] Em um aspecto, no composto de fórmula (Id), X é flúor e R1d é -CH(CH3)OCH3.

[000193] Em um aspecto, no composto de fórmula (Id), X é flúor e R1d é pirimidinila.

[000194] Em um aspecto, no composto de fórmula (Id), X é flúor e R1d é pirazinila.

[000195] Em um aspecto, no composto de fórmula (Id), X é flúor e R1dé -CHCH.

[000196] Em um aspecto, no composto de fórmula (Id), X é cloro e R1dé metila.

[000197] Em um aspecto, no composto de fórmula (Id), X é flúor e R1dé N-metil-1,2,4-triazolila.

[000198] Em um aspecto, no composto de fórmula (Id), X é flúor e R1dé -CH(OH)CH3.

[000199] Em um aspecto, no composto de fórmula (Id), X é flúor e R1dé -CH(OH)CH2OH.

[000200] Em um aspecto, no composto de fórmula (Id), X é flúor e R1d é -CH=NOH.

[000201] Em algumas modalidades o composto de fórmula (I) tem a estrutura de fórmula (le) ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma:

[000202] em que X é cloro ou flúor; R2eé selecionado a partir do grupo consistindo em piridinila, -C^N ou alquila C1-C3, alquila C1-C3 que é opcionalmente substituído com um ou mais dentre: OR20e, halogênio, azido e CH=NOR21e; e R20e e R21e são, para cada ocorrência, independentemente hidrogênio ou alquila C1-C4.

[000203] Em um aspecto, R2e é metila, etila, -CH2OCH3, -CH2OH, -CH2F, -CH2N3, piridinila, -CH=NOH ou -CH=NOCH3.

[000204] Em um aspecto R20e é hidrogênio ou metila.

[000205] Em um aspecto, R21e é hidrogênio ou metila.

[000206] Em um aspecto, no composto de fórmula (le), X é flúor e R2e é metila.

[000207] Em um aspecto, no composto de fórmula (le), X é flúor e R2e é etila.

[000208] Em um aspecto, no composto de fórmula (le), X é cloro e R2e é -CH2OCH3.

[000209] Em um aspecto, no composto de fórmula (le), X é cloro e R2e é metila.

[000210] Em um aspecto, no composto de fórmula (le), X é flúor e R2eé -CH2OCH3.

[000211] Em um aspecto, no composto de fórmula (le), X é flúor e R2eé -CH2OH.

[000212] Em um aspecto, no composto de fórmula (le), X é flúor e R2eé -CH2F.

[000213] Em um aspecto, no composto de fórmula (le), X é flúor e R2eé -CH2N3.

[000214] Em um aspecto, no composto de fórmula (le), X é flúor e R2eé piridinila.

[000215] Em um aspecto, no composto de fórmula (le), X é flúor e R2eé -CH=NOH

[000216] Em um aspecto, no composto de fórmula (le), X é flúor e R2eé -CH=NOCH3.

[000217] Em algumas modalidades, o composto de fórmula (I) tem a estrutura de fórmula (If) ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma:

[000218] em que X é cloro ou flúor; R2fé piridinila ou alquila C1-C3, alquila C1-C3 que é opcio-nalmentesubstituído com um ou mais halogênio ou -OR20f; e R20fé, para cada ocorrência, independentemente hidrogênio ou alquila C1-C4.

[000219] Em um aspecto, R2fé metila, etila, -CH2F, -CH2OCH3 ou -CH2OH.

[000220] Em um aspecto, R20fé hidrogênio ou metila.

[000221] Em um aspecto, no composto de fórmula (If), X é flúor e R2f é metila.

[000222] Em um aspecto, no composto de fórmula (If), X é flúor e R2f é etila.

[000223] Em um aspecto, no composto de fórmula (If), X é flúor e R2f é -CH2F.

[000224] Em um aspecto, no composto de fórmula (If), X é cloro e R2f é -CH2OCH3.

[000225] Em um aspecto, no composto de fórmula (If), X é cloro e R2f é metila.

[000226] Em um aspecto, no composto de fórmula (If), X é flúor e R2f é -CH2OH.

[000227] Em um aspecto, no composto de fórmula (If), X é cloro e R2f é -CH2F.

[000228] Em um aspecto, no composto de fórmula (If), X é flúor e R2f é -CH2OCH3.

[000229] Em algumas modalidades, o composto de fórmula (I) tem a estrutura de fórmula (Ig) ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma:

[000230] em que R1g é alquila C1-C3 opcionalmente substituído por um ou mais de halogênio e OR10g; R2g é alquila C1-C3; e R10g é, para cada ocorrência, independentemente hidrogê- nio ou alquila C1-C4.

[000231] Em um aspecto, R1gé metila, -CH2OCH3 ou -CH2F.

[000232] Em um aspecto, R2gé metila.

[000233] Em um aspecto, R10gé hidrogênio ou metila.

[000234] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ig), X é flúor, R1g e R2dsão, cada um, metila.

[000235] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ig), X é flúor, R1g é -CH2OCH3 e R2dé metila.

[000236] Em um aspecto, no composto de fórmula (Ig), X é flúor, R1g é -CH2F e R2gé metila.

[000237] Em um aspecto, a presente invenção provê, pelo menos em parte, os seguintes compostos, ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos:

[000238] Em um aspecto, a invenção pertence a um produto obtenível por qualquer processo descrito na Exemplificação da invenção.

[000239] O termo "alquila" inclui radicais hidrocarboneto saturados de cadeia linear e ramificada que têm o número especificado de átomos de carbono. Por exemplo, "alquila C1-C3" inclui grupos alquil com 1-3 átomos de carbono, por exemplo, grupos metila, etila, n-propila e isopropila. Da mesma forma, o termo "alquila C1-C4" inclui grupos al- quil com 1-4 átomos de carbono, por exemplo, grupos metila, etila, n- propila, isopropila, n-butila, isobutila e terc-butila.

[000240] O termo "halogênio"inclui cloro, flúor, bromo e iodo.

[000241] O termo "tetra-hidropiranila" inclui

[000242] O termo "N-metil-1,2,4-triazolila" inclui

[000243] O termo "piridinila" inclui

[000244] O termo "pirimidinila" inclui ”

[000245] O termo "pirazinila"inclui.

[000246] O termo "sal farmaceuticamente aceitável" inclui sais de adição de ácido ou base que retêm a efetividade biológica e proprie-dades dos compostos desta invenção e, os quais tipicamente não se-jam indesejáveis biologicamente ou de outra forma. Em muitos casos, os compostos da presente invenção são capazes de formar sais ácidos e/ou básicos em virtude da presença de grupos amino e/ou carbo- xila ou grupos semelhantes aos mesmos.

[000247] Sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis podem ser formados com ácidos inorgânicos e ácidos orgânicos, por exemplo, sais acetato, aspartato, benzoato, besilato, brome- to/bromidrato, bicarbonato/carbonato, bissulfato/sulfato, camforsulfona- to, cloreto/cloridrato, clorteofilonato, citrato, etandissulfonato, fumarato, gluceptato, gluconato, glucuronato, hipurato, iodidrato/iodeto, isetiona- to, lactato, lactobionato, laurilsulfato, malato, maleato, malonato, man- delato, mesilato, metilsulfato, naftoato, napsilato, nicotinato, nitrato, octadecanoato, oleato, oxalato, palmitato, palmoato, fosfato/hidrogênio fosfato/di-hidrogênio fosfato, poligalacturonato, propionato, estearato, succinato, subsalicilato, tartrato, tosilato e trifluoroacetato. Ácidos inor-gânicos a partir dos quais sais podem ser derivados incluem, por exemplo, ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido sulfúrico, ácido nítri-co, ácido fosfórico, e semelhantes. Ácidos orgânicos a partir dos quais sais podem ser derivados incluem, por exemplo, ácido acético, ácido propiônico, ácido glicólico, ácido oxálico, ácido maleico, ácido malôni- co, ácido succínico, ácido fumárico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido benzoico, ácido mandélico, ácido metanossulfônico, ácido etanossul- fônico, ácido toluenossulfônico, ácido trifluoroacético, ácido sulfossali- cílico, e semelhantes. Sais de adição de base farmaceuticamente acei-táveis podem ser formados com bases inorgânicas e orgânicas.

[000248] Bases inorgânicas a partir das quais sais podem ser deri-vados incluem, por exemplo, sais de amônio e metais das colunas I a XII da tabela periódica. Em certas modalidades, os sais são derivados de sódio, potássio, amônio, cálcio, magnésio, ferro, prata, zinco, e co-bre; sais particularmente adequados incluem sais de amônio, potássio, sódio, cálcio e magnésio. Bases orgânicas a partir das quais sais po-dem ser derivados incluem, por exemplo, aminas primárias, secundá-rias, e terciárias, aminas substituídas incluindo aminas de ocorrência natural substituídas, aminas cíclicas, resinas de troca de íons básicas, e semelhantes. Certas aminas orgânicas incluem isopropilamina, ben- zatina, colinato, dietanolamina, dietilamina, lisina, meglumina, pipera- zina e trometamina.

[000249] Os sais farmaceuticamente aceitáveis da presente invenção podem ser sintetizados a partir de uma fração básica ou ácida, por mé-todosquímicos convencionais. Geralmente, tais sais podem ser prepa-rados através da reação de formas ácidas livres desses compostos com uma quantia estequiométrica da base apropriada (tal como hidró-xido de Na+, Ca2+, Mg2+, ou K+, carbonato, bicarbonato ou semelhan-tes), ou através da reação de formas básicas livres desses compostos com uma quantia estequiométrica do ácido apropriado. Tais reações são tipicamente realizadas em água ou em um solvente orgânico, ou em uma mistura dos dois. Geralmente, o uso de meios não aquosos como éter, acetato de etila, etanol, isopropanol, ou acetonitrila é dese-jável, onde praticável. Listas de sais adequados adicionais podem ser encontradas, por exemplo, em "Remington's Pharmaceutical Sciences," 20aed., Mack Publishing Company, Easton, Pa., (1985); e em "Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use" por Stahl e Wermuth (Wley-VCH, Weinheim, Alemanha, 2002).

[000250] Qualquer fórmula dada aqui também se destina a representar formas não marcadas, assim como formas marcadas isotopicamente para o composto de fórmula (I). Compostos marcados isotopicamente têm estruturas representadas pelas fórmulas dadas aqui, exceto que um ou mais átomos são substituídos por um átomo que tenha uma massa atômica ou número de massa selecionado. Exemplos de isótopos que podem ser incorporados no composto de fórmula (I) incluem isótopos de hidrogênio, carbono, nitrogênio, oxigênio, fósforo, flúor e cloro, tais co- 2 3 11 13 14 15 16 31 32 35 36 125 mo H, H, C, C, C, N, F, P, P, S, Cl e I. A invenção inclui vários compostos de fórmula (I) marcados isotopicamente nos quais isótopos radioativos, tais como 2H, 3H, 13C e 14C, estão presentes. Compostos marcados isotopicamente de fórmula (I) geralmente podem ser preparados por técnicas convencionais conhecidas por aqueles ver-sados na técnica ou por processos análogos àqueles descritos nos Exemplos anexos usando reagentes isotopicamente marcados apropri-ados no lugar dos reagentes não marcados empregados previamente.

[000251] Os compostos de fórmula (I) podem ter diferentes formas isoméricas. O termo "isômero óptico"ou "estereoisômero"se refere a qualquer uma das várias configurações estereoméricas que podem existir para um dado composto da presente invenção. Entende-se que um substituinte pode ser unido a um centro quiral de um átomo de carbono e, portanto, a invenção inclui enantiômeros, diastereômeros e racematos do composto. O termo "enantiômero"inclui pares de este- reoisômeros que são imagens especulares não sobreponíveis um do outro. Uma mistura 1:1 de um par de enantiômeros é uma mistura ra- cêmica. O termo é usado para designar uma mistura racêmica onde apropriado. Os termos "diastereômeros"ou "diastereoisômeros" inclu-emestereoisômeros que têm pelo menos dois átomos assimétricos, mas os quais não são imagens especulares um do outro. A estereo- química absoluta é especificada de acordo com o sistema R-S de Cahn-lngold-Prelog. Quando um composto é um enantiômero puro, a estereoquímica em cada centro quiral pode ser especificada por R ou S. Compostos resolvidos cuja configuração absoluta é desconhecida podem ser designados (+) ou (-) dependendo da direção (destro-ou levorrotatória) na qual eles rotacionam a luz plano-polarizada no com-primento de onda da linha D de sódio. Certos compostos descritos aqui contêm um ou mais centros ou eixos assimétricos e podem, assim, dar origem a enantiômeros, diastereômeros ou outras formas es- tereoisoméricas que podem ser definidas, em termos de estereoquími- ca absoluta, como (R)- ou (S)-. A presente invenção se destina a incluir todos esses tais isômeros possíveis, incluindo misturas racêmicas, formas opticamente puras e misturas intermediárias. Isômeros (R) e (S) opticamente ativos podem ser preparados usando síntons quirais ou reagentes quirais, ou resolvidos usando técnicas convencionais bem conhecidas na técnica, tais como HPLC quiral.

Composições Farmacêuticas

[000252] Em algumas modalidades, a invenção provê uma composição farmacêutica compreendendo um composto de fórmula (I) e um excipiente ou diluente farmaceuticamente aceitável.

[000253] O termo "excipiente ou diluente farmaceuticamente aceitável" inclui compostos, materiais, composições, e/ou formas de dosagem que são, dentro do escopo de julgamento médico razoável, adequados para uso em contato com os tecidos de seres humanos e animais sem toxicidade excessiva, irritação, resposta alérgica, ou outro problema ou complicação, proporcional a uma razão risco/benefício razoável.

[000254] As composições da invenção podem ser em uma forma adequada para uso oral (por exemplo, como comprimidos, lozangos, cápsulas duras ou moles, suspensões aquosas ou oleosas, emulsões, pós ou grânulos dispersíveis, xaropes (ou elixires), para uso tópico (por exemplo, como cremes, pomadas, géis, ou soluções ou suspensões aquosas ou oleosas), para administração por inalação (por exemplo, como um pó finamente dividido ou um aerossol líquido), para administração por insuflação (por exemplo, como um pó finamente dividido), for administração parenteral (por exemplo, como uma solução estéril aquosa ou oleosa para dosagem intravenosa, subcutânea, intramuscular ou como um supositório para dosagem retal) ou para administração intraocular. As composições da invenção podem ser obtidas por procedimentos convencionais usando excipi- entes farmacêuticos convencionais bem conhecidos na técnica. As-sim,composições destinadas para uso oral podem conter, por exemplo, um ou mais agentes corantes, edulcorantes, flavorizantes e/ou coservantes.

[000255] Excipientes farmaceuticamente aceitáveis adequados para uma formulação de comprimido incluem, por exemplo, diluentes inertes, tais como lactose, carbonato de sódio, fosfato de cálcio ou carbonato de cálcio; agentes granulantes e desintegrantes, tais como amido de milho ou ácido algênico; agentes aglutinantes, tais como amido; agentes lubrificantes, tais como estearato de magnésio, ácido esteárico ou talco; agentes conservantes, tais como p-hidroxibenzoato de eti- la ou propila; e antioxidantes, tais como ácido ascórbico. Fomulações de comprimido podem ser revestidas ou não para modificar sua desin-tegração e a subsequente absorção do ingrediente ativo dentro do trato gastrointestinal, ou para melhorar sua estabilidade e/ou aparência, em ambos os casos, usando agentes de revestimento convencionais e procedimentos bem conhecidos na técnica.

[000256] Composições para uso oral podem ser na forma de cápsulas duras de gelatina, nas quais o ingrediente ativo é misturado com um diluente sólido inerte, por exemplo, carbonato de cálcio, fosfato de cálcio ou caulim, ou como cápsulas moles de gelatina, nas quais o in-grediente ativo é misturado com água ou um óleo, tal como óleo de amendoim, parafina líquida, ou óleo de oliva.

[000257] Suspensões aquosas geralmente contêm o ingrediente ativo em forma finamente pulverizada ou na forma de nanopartículas ou partículas micronizadas juntamente com um ou mais agentes de suspensão, tais como carboximetilcelulose sódica, metilcelulose, hidroxipropil metilcelulose, alginato de sódio, polivinil-pirrolidono, goma tragacanto e goma acácia; agentes dispersantes ou umidifi- cantes, tais como lecitina ou produtos de condensação de um óxido de alquileno com ácidos graxos (por exemplo, estearato de polioxeti- leno), ou produtos de condensação de óxido de etileno com álcoois alifáticos de cadeia longa, por exemplo, heptadecaetilenoxicetanol, ou produtos de condensação de óxido de etileno com ésteres parciais derivados de ácidos graxos e um hexitol, tal como monoleato de polioxietileno sorbitol, ou produtos de condensação de óxido de eti- leno com álcoois alifáticos de cadeia longa, por exemplo, heptade- caetilenoxicetanol, ou produtos de condensação de óxido de etileno com ésteres parciais derivados de ácidos graxos e um hexitol, tal como monooleato de polioxietileno sorbitol, ou produtos de condensação de óxido de etileno com ésteres parciais derivados de ácidos graxos e anidridos de hexitol, por exemplo, monooleato de polietile- no sorbitan. As suspensões aquosas também podem conter um ou mais conservantes, tais como p-hidroxibenzoato de etila ou propila; antioxidantes, tais como ácido ascórbico; agentes corantes; agentes flavorizantes; e/ou agentes edulcorantes, tais como sacarose, sacarina ou aspartame.

[000258] Suspensões oleosas podem ser formuladas através da suspensão do ingrediente ativo em um óleo vegetal, tal como óleo de araquis, óleo de oliva, óleo de gergelim ou óleo de coco, ou em um óleo mineral, tal como parafina líquida. As suspensões oleosas também podem conter um agente espessante, tal como cera de abelha, parafina dura ou álcool cetílico. Agentes edulcorantes, tais como aqueles estabelecidos acima, e agentes flavorizantes podem ser adicionados para prover uma preparação oral palatável. Essas composições podem ser conservadas pela adição de um antioxidante, tal como áci-doascórbico.

[000259] Pós e grânulos dispersíveis adequados para a preparação de uma suspensão aquosa pela adição de água geralmente contêm o ingrediente ativo juntamente com um agente dispersante ou umectan- te, agente de suspensão e um ou mais conservantes. Agentes disper- santes ou umectantes e agentes de suspensão adequados são exem-plificados por aqueles já mencionados acima. Excipientes adicionais, tais como agentes edulcorantes, flavorizantes e corantes, também po-dem estar presentes.

[000260] As composições farmacêuticas da invenção também podem estar na forma de emulsões de óleo em água. A fase oleosa pode ser um óleo vegetal, tal como óleo de oliva ou óleo de araquis, ou um óleo mineral, tal como, por exemplo, parafina líquida ou uma mistura de quaisquer desses. Agentes emulsificantes adequados podem ser, por exemplo, gomas de ocorrência natural, tais como goma acácia ou goma tragacanto, fosfatídeos de ocorrência natural, tais como soja, lecitina, um éster ou ésteres parciais derivados de ácidos graxos e anidri- dos de hexitol (por exemplo, monooleato se rbitan) e produtos de con-densação dos ditos ésteres parciais com óxido de etileno, tais como monooleato de polioxietileno sorbitan. As emulsões também podem conter agentes edulcorantes, flavorizantes e conservantes.

[000261] Xaropes e elixires podem ser formulados com agentes edulcorantes, tais como glicerol, propileno glicol, sorbitol, aspartame ou sacarose, e também podem conter um agente demulcente, conser-vante, flavorizante e/ou corante.

[000262] As composições farmacêuticas também podem estar na forma de uma suspensão aquosa ou oleosa estéril injetável, a qual pode ser formulada de acordo com procedimentos conhecidos usando um ou mais dos agentes dispersantes ou umectantes apropriados e agentes de suspensão, os quais foram mencionados acima. Uma preparação injetável estéril também pode ser uma solução injetável estéri- la ou suspensão em um diluente ou solvente não tóxico aceitável por via parenteral, por exemplo, uma solução em 1,3-butanodiol.

[000263] Composições para administração por inalação podem estar na forma de um aerossol pressurizado convencional arranjado para dispensar o ingrediente ativo como um aerossol contendo gotículas sólidas ou líquidas finamente divididas. Propelentes de aerossol con-vencionais, tais como hidrocarbonetos fluorinados voláteis ou hidro- carbonetos, podem ser usados e o dispositivo de aerossol é arranjado de forma conveniente para dispensar uma quantidade medida de in-grediente ativo. Para informação adicional sobre a formulação, o leitor é direcionado ao Capítulo 25,2 no Volume 5 de Comprehensive Medicinal Chemistry (Corwin Hansch; Presidente do Conselho Editorial), Pergamon Press 1990.

[000264] A quantia de ingrediente ativo que é combinada com um ou mais excipientes para produzir uma única forma de dosagem necessa-riamentevariará dependendo do hospedeiro tratado e da rota de ad-ministração em particular. Para informação adicional sobre Rotas de Administração e Regimes de Dosagem, o leitor é direcionado ao Capí-tulo 25,3 no Volume 5 de Comprehensive Medicinal Chemistry (Corwin Hansch; Presidente do Conselho Editorial), Pergamon Press 1990.

[000265] Em algumas modalidades, a quantia total de um composto de fórmula (I) administrada a um sujeito pode estar entre 400 mg a 10 g, entre 400 mg-4 g, entre 400-4000 mg, entre 400-2000 mg, entre 500-1900 mg, entre 600-1800 mg, entre 700-1700 mg ou entre 800-1600 mg, por exemplo, 800 mg, 825 mg, 875 mg, 900 mg, 925 mg, 950 mg, 975 mg, 1000 mg, 1025 mg, 1050 mg, 1075 mg, 1100 mg, 1125 mg, 1150 mg, 1175 mg, 1200 mg, 1225 mg, 1250 mg, 1275 mg, 1300 mg, 1325 mg, 1350 mg, 1375 mg, 1400 mg, 1425 mg, 1450 mg, 1475 mg, 1500 mg, 1525 mg, 1550 mg, 1575 mg ou 1600 mg. Em algumas moda-lidades, a quantia total de um composto de fórmula (I) administrada a um sujeito pode estar entre 400-500 mg, 500-600 mg, 600-700 mg, 700-800 mg, 800-900 mg, 900-1000mg, 1000-1100mg, 1100-1200mg, 1200-1300mg, 1300-1400mg, 1400-1500 mg, 1500-1600 mg, 1600-1700 mg, 1700-1800 mg, 1800-1900 mg ou 1900-2000 mg.

[000266] O composto de fórmula (I) pode ser administrado uma vez, duas vezes, três vezes por dia ou quantas vezes em um período de 24 horas forem medicamente necessárias. Alguém versado na técnica seria prontamente capaz de determinar a quantia de cada dose indivi-dual com base no sujeito. Em algumas modalidades, o composto de fórmula (I) é administrado em uma forma de dosagem. Em algumas modalidades, o composto de fórmula (I) é administrado em múltiplas formas de dosagem. Métodos de Uso

[000267] Em um aspecto, a invenção provê um método para tratar uma infecção bacteriana em um sujeito em necessidade do mesmo, compreendendo administrar uma quantia efetiva de um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[000268] Em um aspecto, a invenção provê o uso de um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para tratar uma infecção bacteriana.

[000269] Em um aspecto, a invenção provê o uso de um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, na fabricação de um medicamento para tratar uma infecção bacteriana.

[000270] Em um aspecto, a invenção provê uma composição farma-cêutica compreendendo um composto de fórmula (I), ou um sal far- maceuticamente aceitável do mesmo, para tratar uma infecção bacte- riana.

[000271] O termo "infecção bacteriana" inclui infecções causadas por uma ou mais espécies de bactérias Gram-negativas, Gram-positivas, ou atípicas.

[000272] Em algumas modalidades, a infecção bacteriana é causada por bactérias Gram-positivas, tais como Staphilococcus aureus, Strep-tococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae, Streptococcus aga- lactiae, Bacillus anthracis, Bacillus cereus e Bacillus subtilis.

[000273] Em algumas modalidades, a infecção é causada por bactérias Gram-negativas, tais como Haemophilus influenzae, Acinetobacter baumannii, Citrobacter freundii, Escherichia coli, Enterobacter cloacae, Pseudomonas aeruginosa, Klebsiella pneumoniae, e Neisseria gonor- rhoeae.

[000274] Em algumas modalidades, a infecção é causada por Myco- bacteriaceae, tais como Mycobacterium tuberculosis, Mycobacterium avium-intracellulare, Mycobacterium marinum, Mycobacterium ulcerans e Mycobacterium kansasii.

[000275] Em algumas modalidades, a infecção é causada por bacté-riasatípicas, tais como Mycoplasma pneumoniae, Chiamydophila pneumoniae, e Legionella pneumophila.

[000276] Em algumas modalidades, as bactérias são resistentes a um ou mais antibacterianos diferentes dos compostos de fórmula (I) descritos aqui. O termo "resistência"e "resistência antibacteriana" se refere a bactérias que são capazes de sobreviver à exposição a um ou mais antibacterianos. Em algumas modalidades, as bactérias resisten-tes a antibacterianos incluem Streptococcus pyogenes, Streptococcus agalactiae, Streptococcus pneumoniae (incluindo Streptococcus pneumoniae resistente à penicilina), Staphilococcus aureus (incluindo Staphilococcus aureus resistente à vancomicina (VRSA)), Staphilococ- cus aureus resistente à meticilina (MRSA) (incluindo MRSA adquirida em hospital, MRSA adquirida em comunidade e staphilocci negativos para coagulase) e Neisseria gonorrhoeae (incluindo Neisseria gonor- rhoeae resistente à penicilina, por exemplo, Neisseria gonorrhoeae resistente à penicilina mediado cromossomicamente (CMRNG) e Neis-seria gonorrhoeae resistente mediado por penicilinase (PPNG), Neis-seria gonorrhoeae resistente à cefalosporina, por exemplo, Neisseria gonorrhoeae resistente à ceftriaxona e Neisseria gonorrhoeaeresistente a cefixime, Neisseria gonorrhoeae resistente à quinolona (QRNG), por exemplo, Neisseria gonorrhoeae resistente à ciprofloxa- cina, Neisseria gonorrhoeae resistente à tetraciclina, por exemplo, Neisseria gonorrhoeae resistente à tetraciclina mediado cromossomi- camente e Neisseria gonorrhoeae resistente à penicilina mediado por plasmídeo, Neisseria gonorrhoeae resistente a cotrimoxazol e Neisseria gonorrhoeae resistente a aminoglicosídeo, por exemplo, Neisseria gonorrhoeae resistente à canamicina e Neisseria gonorrhoeaeresis-tenteà gentamicina, Neisseria gonorrhoeae resistente à sulfonamida e Neisseria gonorrhoeae resistente a macrolídeo, por exemplo, Neisseria gonorrhoeae resistente à azitromicina).

[000277] Em algumas modalidades, a Neisseria gonorrhoeaeé Neis-seria gonorrhoeae resistente a múltiplas drogas (MDRNG). O termo "Neisseria gonorrhoeae resistente a múltiplas drogas" inclui Neisseria gonorrhoeae que é resistente a dois ou mais dos antibióticos tipica-mente usados para o tratamento de infecções por Neisseria gonor- rhoeae, por exemplo, tetraciclina, penicilina, cefalosporinas (por exem- plo, ceftriazono ou cefixime), quinolonas (por exemplo, norfloxacin, ci-profloxacin ou ofloxacin), cotrimoxazol, sulfonamidas, aminoglicosí- deos (por exemplo, canamicina ou gentamicina) e macrolídeos (por exemplo, azitromicina).

[000278] Em um aspecto, a invenção provê um método para tratar uma infecção bacteriana Gram-positiva em um sujeito em necessidade do mesmo, compreendendo administrar uma quantia efetiva de um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[000279] Em um aspecto, a invenção provê o uso de um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para tratar uma infecção bacteriana Gram-positiva.

[000280] Em um aspecto, a invenção provê o uso de um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, na fabricação de um medicamento para tratar uma infecção bacteriana Gram-positiva.

[000281] Em um aspecto, a invenção provê uma composição farma-cêutica compreendendo um composto de fórmula (I), ou um sal farma- ceuticamente aceitável do mesmo, para tratar uma infecção bacteriana Gram-positiva.

[000282] Em um aspecto, a invenção provê um método para tratar infecções complicadas de pele e da estrutura da pele em um sujeito em necessidade do mesmo, compreendendo administrar uma quantia efetiva de um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[000283] Em um aspecto, a invenção provê o uso de um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para tratar infecções complicadas de pele e da estrutura da pele.

[000284] Em um aspecto, a invenção provê o uso de um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, na fabricação de um medicamento para tratar infecções complicadas de pele e da estrutura da pele.

[000285] Em um aspecto, a invenção provê uma composição farma-cêutica compreendendo um composto de fórmula (I), ou um sal farma- ceuticamente aceitável do mesmo, para tratar infecções complicadas de pele e da estrutura da pele.

[000286] O termo "infecções complicadas de pele e da estrutura da pele" inclui infecções da pele e dos tecidos moles circundantes que podem requerer intervenção cirúrgica significativa, incluindo, por exemplo, úlceras infectadas, queimaduras ou grandes abcessos. Em algumas modalidades, as infecções complicadas de pele e da estrutura da pele são causadas por Streptococcus pyogenes, Streptococcus agalactiae, ou Staphilococcus aureus, incluindo MRSA e/ou VRSA.

[000287] Em um aspecto, a invenção provê um método para tratar pneumonia em um sujeito em necessidade do mesmo, compreendendo administrar uma quantia efetiva de um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[000288] Em um aspecto, a invenção provê o uso de um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para tratar pneumonia.

[000289] Em um aspecto, a invenção provê o uso de um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, na fabricação de um medicamento para tratar pneumonia.

[000290] Em um aspecto, a invenção provê uma composição farma-cêutica compreendendo um composto de fórmula (I), ou um sal farma- ceuticamente aceitável do mesmo, para tratar pneumonia.

[000291] O termo "pneumonia" se refere a uma condição inflamatória dos pulmões causada por uma infecção bacteriana. Em algumas mo-dalidades, a pneumonia é causada por uma infecção por Streptococcus pneumoniae ou Staphilococcus aureus. Em algumas modalidades, a pneumonia é pneumonia nocosomial (por exemplo, pneumonia ad-quirida em hospital) ou pneumonia adquirida em comunidade. Em al-gumas modalidades, a pneumonia é causada por Streptococcus pneumoniae resistente à penicilina.

[000292] Em um aspecto, a invenção provê um método para tratar uma infecção bacteriana Gram-negativa em um sujeito em necessidade do mesmo, compreendendo administrar uma quantia efetiva de um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[000293] Em um aspecto, a invenção provê o uso de um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para tratar uma infecção bacteriana Gram-negativa.

[000294] Em um aspecto, a invenção provê o uso de um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, na fa-bricação de um medicamento para tratar uma infecção bacteriana Gram-negativa.

[000295] Em um aspecto, a invenção provê uma composição farma-cêutica compreendendo um composto de fórmula (I), ou um sal farma- ceuticamente aceitável do mesmo, para tratar uma infecção bacteriana Gram-negativa.

[000296] Em um aspecto, a invenção provê um método para tratar uma infecção bacteriana atípica em um sujeito em necessidade do mesmo, compreendendo administrar uma quantia efetiva de um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[000297] Em um aspecto, a invenção provê o uso de um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para tratar uma infecção bacteriana atípica.

[000298] Em um aspecto, a invenção provê o uso de um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, na fabricação de um medicamento para tratar uma infecção bacteriana atípica.

[000299] Em um aspecto, a invenção provê uma composição farma-cêutica compreendendo um composto de fórmula (I), ou um sal farma- ceuticamente aceitável do mesmo, para tratar uma infecção bacteriana atípica.

[000300] Em um aspecto, a invenção provê um método para inibir DNA girase bacteriana em um sujeito em necessidade do mesmo, compreendendo administrar uma quantia efetiva de um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[000301] Em um aspecto, a invenção provê o uso de um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para inibir DNA girase bacteriana.

[000302] Em um aspecto, a invenção provê o uso de um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, na fabricação de um medicamento para inibir DNA girase bacteriana.

[000303] Em um aspecto, a invenção provê uma composição farma-cêutica compreendendo um composto de fórmula (I), ou um sal farma- ceuticamente aceitável do mesmo, para inibir DNA girase bacteriana.

[000304] O termo "DNA girase bacteriana" se refere a uma topoiso-merase type II bacteriana que introduz superenovelamentos negativos no DNA.

[000305] O termo "quantia efetiva" inclui uma quantia do composto de fórmula (I) que promoverá uma resposta biológica ou médica de um sujeito, por exemplo, a redução ou inibição de atividade enzimática ou proteica relacionada a uma DNA girase bacteriana ou uma infecção bacteriana, melhora de sintomas de uma infecção bacteriana, ou o re-tardamento ou atraso da progressão de uma infecção bacteriana. Em algumas modalidades, o termo "quantia efetiva" inclui a quantia de um composto de fórmula (I) que, quando administrada a um sujeito, é efe- tiva para pelo menos parcialmente aliviar, inibir, e/ou melhorar uma infecção bacteriana ou inibir DNA girase bacteriana, e/ou reduzir ou inibir o crescimento bacteriano, replicação ou carga bacteriana de uma bactéria em um sujeito.

[000306] Em um aspecto, a invenção provê um método para tratar uma infecção por Neisseria gonorrhoeae em um sujeito em necessidade do mesmo, compreendendo administrar uma quantia efetiva de um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[000307] Em um aspecto, a invenção provê o uso de um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para tratar uma infecção por Neisseria gonorrhoeae.

[000308] Em um aspecto, a invenção provê o uso de um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, na fabricação de um medicamento para tratar uma infecção por Neisseria gonorrhoeae.

[000309] Em um aspecto, a invenção provê uma composição farma-cêutica compreendendo um composto de fórmula (I), ou um sal farma- ceuticamente aceitável do mesmo, para tratar uma infecção por Neis-seria gonorrhoeae.

[000310] O termo "sujeito" inclui mamíferos de sangue quente, por exemplo, primatas, bovinos, suínos, caprinos, cães, gatos, coelhos, ratos, e camundongos. Em algumas modalidades, o sujeito é um pri-mata, por exemplo, um humano. Em algumas modalidades, o sujeito está sofrendo de uma infecção bacteriana Gram-positiva. Em algumas modalidades, o sujeito está em necessidade de tratamento (por exem-plo, o sujeito se beneficiaria biologicamente ou medicamente do trata-mento). Em algumas modalidades, o sujeito está sofrendo de um esta-do de doença subjacente significativo que complica a resposta ao tra-tamento de uma infecção bacteriana, por exemplo, diabetes mellitus.

[000311] O termo "inibir,""inibição"ou "inibindo" inclui uma diminuição na atividade de linha de base de uma atividade ou processo biológico.

[000312] O termo "tratar,""tratando" e "tratamento" inclui a redução ou inibição de atividade enzimática ou proteica relacionada a uma infecção bacteriana ou DNA girase bacteriana em um sujeito, melhora de um ou mais sintomas de uma infecção bacteriana em um sujeito, ou o retardamento ou atraso de progressão de uma infecção bacteriana em um sujeito. O termo "tratar,""tratando" e "tratamento"também inclui a redução ou inibição do crescimento bacteriano, replicação ou uma redução ou inibição da carga bacteriana de bactérias em um sujeito. Exemplificação da Invenção

[000313] A invenção é agora ilustrada por, mas não limitada a, os se-guintes Exemplos: Métodos Sintéticos

[000314] A menos que relatado de outra forma: evaporações foram realizadas por evaporação rotativa em vácuo e procedimentos de work-up foram realizados após a remoção de sólidos residuais por filtração; temperaturas são cotadas como °C; operações foram reali-zadas à temperatura ambiente, que está tipicamente na faixa de 18-26°C e sem a exclusão de ar, a menos que relatado d e outra forma, ou a menos que a pessoa versada trabalharia de outra forma sob uma atmosfera inerte; cromatografia em coluna (pelo procedimento flash) foi usada para purificar compostos e foi desempenhada em sílica Merck Ki- eselgel (Art. 9385), a menos que relatado de outra forma; em geral, o curso das reações foi seguido de TLC, HPLC, ou LC/MS e tempos de reação são dados para ilustração somente; rendimentos são dados para ilustração somente e não são necessari-amente o máximo atingível; uma estrutura dos produtos finais da invenção foi geralmen-te confirmada por RMN e técnicas espectrais em massa. Espectros de ressonância magnética de próton (1H RMN) foram geralmente deter-minados usando um espectrômetro Bruker DRX-300 ou um espectrô- metro Bruker DRX-400, operando a uma força de campo de 300 MHz, ou 400 MHz, respectivamente. Em casos onde o espectro de RMN é complexo, somente sinais diagnósticos são relatados. Deslocamentos químicos são relatados em partes por milhão campo abaixo do tetra- metilsilano como um padrão externo (escala δ) e multiplicidades de picos são mostradas assim: s, singleto; d, dupleto; dd, dupleto de du- pletos; dt, dupleto de tripletos; dm, dupleto de multipletos; t, tripleto, m, multipleto; br, largo. Deslocamentos químicos são relatados com erros de ± 0,1 ppm. Dados espectrais de massa de bombardeamento de átomos rápidos (FAB) foram geralmente obtidos usando um espectrô- metro Platform (fornecido por Micromass) executado em electrospray e, onde apropriado, dados de íons positivos ou dados de íons negativos foram coletados usando Agilent 1100 series LC/MS equipado com Sedex 75ELSD, e, onde apropriado, dados de íons positivos ou dados de íons negativos foram coletados. O principal íon de menor massa é relatado para moléculas onde a divisão de isótopos resulta em múlti-plos picos espectrais de massa (por exemplo, quando cloro está pre-sente). HPLC de Fase Reversa foi realizada usando YMC Pack ODS- AQ (100x20 mmID, tamanho de partícula S-5μ, tamanho de poro 12 nm) em instrumentos Agilent; e cada intermediário foi purificado ao padrão requerido para o estágio subsequente e foi caracterizado em detalhe suficiente para confirmar que a estrutura designada estava correta; pureza foi avaliada por HPLC (cromatografia líquida de alta pressão), TLC, ou RMN e a identidade foi determinada por espectroscopia no infravermelho (IR), espectroscopia de massa (MS) ou espectroscopia por RMN, como apropriado. compostos foram denominados usando ACD/Name (Libe-ração 12,00, Versão do Produto 12,01). Intermediário 1 3-Cloro-6-[(2R,6S)-2,6-dimetilmorfolin-4-il]-7-flúor-1,2-benzoxazol-5- carbaldeído

[000315] A uma solução gelada de 3-cloro-6,7-diflúor-1,2-benzoxazol- 5-carbaldeído (preparada de acordo com o procedimento descrito na Publicação de Pedido Internacional N°. WO 2010/043893, 5,0 g, 23,0 mmols) em acetonitrila anidra (50 mL), foi adicionada diisopropiletila- mina (5,9 g, 45,9 mmols) seguida de cis-2,6-dimetilmorfolina (2,6 g, 23,0 mmols) e a mistura foi aquecida a 85°C por 12 horas em um tubo vedado. Uma solução foi resfriada à temperatura ambiente e os voláteis foram removidos sob vácuo. O resíduo foi dissolvido em acetato de etila, lavado com água seguida de salmoura e então seco sobre Na2SO4 anidro. Remoção de solvente sob vácuo rendeu o produto bru-to, o qual foi purificado sobre coluna de sílica-gel usando um gradiente de acetato de etila em éter pet. para resultar no composto do título como sólido. Rendimento: 6,0 g (84%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,0 (d, 6H), 2,9 (t, 2H), 3,1 (d, 2H), 3,8 (m, 2H), 7,7 (s, 1H), 10,2 (s, 1H). MS (ES) MH+: 313 para C14H14ClFN2O3. Intermediário 23-Cloro-5-(dimetoximetil)-6-[(2R,6S)-2,6-dimetilmorfolin-4-il]-7-flúor- 1,2-benzoxazol

[000316] Uma solução de Intermediário 1 (3,0 g, 9,6 mmols) e uma pitada de ácido p-toluenossulfônico em 2,2'-dimetoxipropano (15 mL) foi aquecida a 60°C por 3 horas. Água (10 mL) foi a dicionada à mistura de reação à temperatura ambiente. Extração com acetato de etila (3 x 10 mL), secagem (Na2SO4) das camadas orgânicas combinadas e re-moção de solventes sob vácuo seguida de trituração com éter dietílico frio (15 mL) rendeu o produto bruto como um sólido amarelo. Rendi-mento: 2,7 g (80%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,1 (d, 6H), 2,8 (t, 2H), 3,0 (d, 2H), 3,3 (s, 6H), 3,8 (m, 2H), 5,7 (s, 1H), 7,6 (s, 1H). Intermediário 33-{5-(Dimetoximetil)-6-[(2R,6S)-2,6-dimetilmorfolin-4-il]-7-flúor-1,2- benzoxazol-3-il}-1,3-oxazolidin-2-ona

[000317] Uma solução de 2-oxazolidinona (0,18 g, 2,1 mmols) em dimetilformamida (1 mL) foi adicionada lentamente a uma suspensão agitada de NaH (0,06 g, 2,5 mmols) em dimetilformamida (1 mL) a 0°C A mistura foi agitada à temperatura ambiente por 30 minutos, e uma solução de Intermediário 2 (0,25 g, 0,7 mmol) em dimetilformamida (3 mL) foi adicionada à mesma temperatura. Essa mistura foi aquecida a 60°C por 16 horas, vertida em água gelada, e extraída com acetato de etila (2 x 20 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 anidro e os solventes foram removidos sob vácuo. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel usando um gradi-ente de acetato de etila em éter pet. para render o composto do título. Rendimento: 37 mg (13%). MS (ES) MH+: 410,4 para C19H24FN3O6. Intermediário 4 3-Cloro-6-[(2R,6R)-2,6-dimetilmorfolin-4-il]-7-flúor-1,2-benzoxazol-5- carbaldeído

[000318] A uma solução gelada de 3-cloro-6,7-diflúor-1,2-benzoxazol- 5-carbaldeído (preparada de acordo com o procedimento descrito na Publicação de Pedido Internacional N°. WO 2010/043893, 10,0 g, 46,0 mmols) em acetonitrila anidra (50 mL), foi adicionada diisopropiletila- mina (11,9 g, 91,9 mmols) seguida de (2R,6R)-2,6-dimetilmorfolina (5,2 g, 46,0 mmols) e a mistura foi aquecida a 85°C por 12 horas em um tubo vedado. Após resfriamento à temperatura ambiente, os voláteis foram removidos sob vácuo. O resíduo foi dissolvido em acetato de etila (50 mL), lavado com água (2 x 15 mL) seguida de salmoura e então seco sobre Na2SO4 anidro. Remoção de solvente sob vácuo rendeu o produto bruto que foi purificado sobre coluna de sílica-gel usando um gradiente de acetato de etila em éter pet. para resultar no composto do título como sólido. Rendimento: 11,0 g (76%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,2 (d, 6H), 3,0 (m, 2H), 3,4 (m, 2H), 4,1 (m, 2H), 8,0 (s, 1H), 10,3 (s, 1H). ES MH+: 313,3 para C14H14ClFN2O3. Intermediário 53-Cloro-5-(dimetoximetil)-6-((2R,6R)-2,6-dimetilmorfolino)-7-fluoroben- zo[d]isoxazol

[000319] Uma mistura de Intermediário 4 (14,42 g, 46,10 mmols), 2,2- dimetoxipropano (57,4 mL, 461,00 mmols) e ácido p-toluenossulfônico (0,088 g, 0,46 mmol) foi agitada à temperatura ambiente por 16 horas. A reação foi extinta com a adição de solução aquosa saturada de NaHCO3 e extraída com acetato de etila. A camada orgânica foi lavada com água, salmoura, e seca sobre Na2SO4. O filtrado foi concentrado sob vácuo para resultar no composto do título (15,35 g, 90%). MS (ES) MH+: 359 para C16H20ClFN2O4. Intermediário 6 3-(5-(Dimetoximetil)-6-((2R,6R)-2,6-dimetilmorfolino)-7- fluorobenzo[d]isoxazol-3-il)oxazolidin-2-ona

[000320] Oxazolidin-2-ona (adquirida de Sigma-Aldrich, 728 mg, 8,36 mmols) em 1 dimetilformamida (1 mL) foi adicionada a uma suspensão de NaH (290 mg, 7,25 mmols, 60% em óleo mineral) em dimetilforma- mida (1 mL), e a mistura foi agitada à temperatura ambiente por 10 minutos. Intermediário 5 (2,0 g, 5,57 mmols) em dimetilformamida (2 mL) foi adicionado lentamente. A mistura resultante foi aquecida a 80°C por 5 horas antes de ser resfriada e vertida e m NH4CI aquoso gelado, e extraída com acetato de etila. A camada orgânica lavada com água, salmoura, e seca (Na2SO4). Após concentração, o resíduo foi purificado em uma coluna de sílica-gel (eluição de acetato de etila 20-50% em CHCl3) para resultar no composto do título (800 mg, 35%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-D6) δ: 1,2 (br s, 6 H) 2,7-2,9 (m, 2H) 3,06 - 3,35 (m, 8H) 3,9-4,25 (m, 4H) 4,45 -4,7 (m, 2H) 5,7 (s, 1H) 8,35 (s, 1H). MS (ES) MH+: 410 para C19H24FN3O6. Intermediário 7 3-Cloro-6-[(2R,6S)-2,6-dimetilmorfolin-4-il]-5-(1,3-dioxolan-2-il)-7-flúor- 1,2-benzoxazol

[000321] Uma solução de Intermediário 1 (16,3 g, 52,2 mmols), etile- no glicol (8,1 g, 130,6 mmols) e p-toluenossulfonato de piridínio (1,31 g, 5,2 mmols) em tolueno (300 mL) foi aquecida em refluxo em um aparato de Dean-Stark por 16 horas. Os solventes foram removidos sob vácuo e o resíduo foi dissolvido em éter dietílico (75 mL), lavado com água (3 x 25 mL) e salmoura aquosa (25 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 anidro e filtradas. Remoção de solventes sob vácuo rendeu o composto do título, o qual foi purificado adicionalmente por trituração com hexano quente. Rendimento: 18,0 g (80%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,1 (d, 6H), 2,8 (t, 2H), 3,0 (d, 2H), 3,3 (m, 4H), 3,8 (m, 2H), 5,7 (s, 1H), 7,6 (s, 1H). Intermediário 8 (4R)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-dimetilmorfolin-4-il]-5-(1,3-dioxolan-2-il)-7-flúor- 1,2-benzoxazol-3-il}-4-metil-1,3-oxazolidin-2-ona

[000322] A uma solução agitada de NaH (0,24 g, 9,9 mmols) em di- metilformamida (10 mL), uma solução de (4R)-4-metil-1,3-oxazolidin-2- ona (sintetizada de acordo com o procedimento descrito em Nishiya- ma, T.; Matsui, Shigeki; Yamada, F. J. Het. Chem. (1986), 23(5), 1427-9) (1,0 g, 9,9 mmols) em dimetilformamida (10 mL) foi adicionada len-tamente a 0°C ao longo de um período de 10 minutos. A mistura foi agitada à temperatura ambiente por 30 minutos e uma solução de In-termediário 7 (1,1 g, 3,1 mmols) em dimetilformamida (5 mL) foi adici-onada à mesma temperatura. Essa mistura foi aquecida a 80°C por 12 horas e vertida em água gelada e extraída com acetato de etila (2 x 20 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 anidro e os solventes foram removidos sob vácuo. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel usando um gradiente de acetato de etila em éter pet.. Rendimento: 0,15 g (12%). MS (ES) MH+: 422,4 para C20H24FN3O6.

[000323] Intermediários 9 e 10 foram preparados a partir do Inter-mediário 7 e do material de partida de oxazolidinona indicado usando um método semelhante àquele descrito para a síntese de Intermediário 8. Intermediário 9 (5S)-3-(6-[(2R,6S)-2,6-dimetilmorfolin-4-il]-5-(1,3-dioxolan-2-il)-7-flúor- 1,2-benzoxazol-3-il}-5-metil-1,3-oxazolidin-2-ona

[000324] Material de partida: (5S)-5-metil-1,3-oxazolidin-2-ona (sinte-tizada de acordo com o procedimento descrito em Rein, K.; Goicoe-chea-Pappas, M.; Anklekar, 1. V.; Hart, G. C.; Smith, G. A.; Gawley, R. F. JACS (1989), 111(6), 2211-17). MS(ES) MH+: 422,4 para C20H24FN3O6. Intermediário 10 (5R)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-dimetilmorfolin-4-il]-5-(1,3-dioxolan-2-il)-7-flúor- 1,2-benzoxazol-3-il}-5-metil-1,3-oxazolidin-2-ona

[000325] Material de partida: (5R)-5-metil-1, 3-oxazolidin-2-ona (sinte-tizada de acordo com o procedimento descrito em Chouhan, G.; Alper, H. J. Org. Chem. (2009), 74(16), 6181-6189). MS (ES) MH+: 422,4 para C20H24FN3O6. Intermediário 113-Cloro-6-[(2R,6R)-2,6-dimetilmorfolin-4-il]-5-(1,3-dioxolan-2-yI)-7-flúor- 1,2-benzoxazol

[000326] Uma solução de Intermediário 4 (11,0 g, 35,3 mmols), etile- no glicol (5,7 g, 91,9 mmols) e ácido p-toluenossulfônico piridínio (0,92 g, 3,7 mmols) em tolueno foi aquecida em refluxo em um aparato de Dean-Stark por 16 horas. Os solventes foram removidos sob vácuo e o resíduo foi dissolvido em éter dietílico (75 mL), lavado com água (3 x 25 mL) seguido de solução de salmoura (25 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 anidro e filtradas. Remoção de solventes sob vácuo rendeu o composto do título, o qual foi purificado adicio-nalmente por trituração com hexano quente. Rendimento: 9,0 g (72 %). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,2 (d, 6H), 2,9 (m, 2H), 3,2 (d, 2H), 4,05 (m, 4H), 4,15 (m, 2H), 6,2 (5, 1H), 7,7 (5, 1H). MS (ES) MH+: 357,3 para C13H13ClFN2O4. Intermediário 12 (R)-3-(6-((2R,6R)-2,6-Dimetilmorfolino)-5-(1,3-dioxolan-2-il)-7- fluorobenzo[d]isoxazol-3-il)-5-metiloxazolidin-2-ona

[000327] (R)-5-Metiloxazolidin-2-ona (1,134 g, 11,21 mmols, sintetizada de acordo com o procedimento descrito em Chouhan, G.; Alper, H. J. Org. Chem. (2009), 74(16), 6181-6189) em dimetilformamida (10 mL) foi adicionada a uma suspensão de NaH (0,448 g, 11,21 mmols, 60% em óleo mineral) em dimetilformamida (10 mL). A mistura foi agitada à temperatura ambiente por 30 minutos. Intermediário 11 (4 g, 11,2 mmols) em dimetilformamida (10 mL) foi adicionado lentamente, e a mistura resultante foi aquecida a 80°C por duas horas. A reação foi resfriada, vertida em NH4CI aquoso gelado e extraída com acetato de etila. A camada orgânica lavada com água, salmoura, e seca. O produto bruto após concentração foi purificado em uma coluna de síli-ca-gel(eluição de acetato de etila 40-50% em hexanos) para resultar no composto do título. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 1,2 (d, 6H), 1,5 (d, 3H), 2,8-3,3 (m, 4H), 3,7-4,3 (m, 8H), 4,9-5,1 (m, 1H), 6,2 (5, 1H), 8,4 (5, 1H). MS (ES) MH+: 422 para C20H24FN3O6. Intermediário 13 2-(2,3,4-Trifluorofenil)-1,3-dioxolano

[000328] Etileno glicol (348,7 g, 5,62 mols) foi adicionado em uma porção a uma mistura agitada de 2,3,4-trifluorobenzaldeído (300,0 g, 1,87 mol) e ácido p-toluenossulfônico monohidratado (35,6 g, 0,18 mol) em tolueno (4,5 L) à temperatura ambiente. A mistura resultante foi aquecida em refluxo com remoção azeotrópica de água usando um aparato de Dean-Stark. A água foi removida de tempos em tempos (intervalos de 3 horas). Após 24 horas, o tolueno foi removido e o resí-duo foi diluído com acetato de etila (1,5 L) e lavado com NaHCO3 aquoso saturado (2 x 750 mL), água (2 x 500 mL) e solução de sal-moura (500 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre sulfato de sódio e o solvente foi removido sob vácuo. O produto bruto foi subme- tido a destilação a 60-70°C em alto vácuo (0,1 mm d e Hg) para remo-ver o material de partida e impurezas. A fração obtida a 75-85°C (0,1 mm de Hg) é consistente com o composto do título. Rendimento: 300,0 g (78%). 1H RMN (400MHz, DMSO-d6) δ: 3,9-4,1 (m, 4H), 6,0 (s, 1H), 7,3-7,4 (m, 2H). Intermediário 14 5-( 1,3-Dioxolan-2-il)-2,3,4-trifluorobenzaldeído

[000329] n-Butillítio (2,5 M solução em hexano, 300 mL 0,75 mol) foi adicionado gota a gota a uma solução de Intermediário 13 (118,0 g, 0,57 mol) em tetra-hidrofurano (2,3 L) a -70°C ao l ongo de 45 minutos, e a mistura foi agitada a essa temperatura por uma hora. Dimetilfor- mamida (236 mL, 3,27 mols) foi adicionada gota a gota ao longo de um período de 30 minutos, agitando a -70°C e a agitação foi continuada à mesma temperatura por uma hora antes de extinção com solução de NH4Cl aquosa saturada a 0°C A mistura foi extraída com acetato de etila (2 x 500 mL) e as camadas orgânicas foram lavadas com água (2 x 500 mL), salmoura (500 mL) e secas sobre Na2SO4. O produto bruto foi purificado por cromatografia flash em coluna de sílica-gel (60-120 mesh) usando gradiente de 10% acetato de etila em éter pet.. Rendi-mento: 125,0 g (93%). 1H RMN (400MHz, DMSO-d6) δ: 4,0-4,1 (m, 4H), 6,05 (s, 1H), 7,8 (m, 1H), 10,1 (s, 1H). Intermediário 15 1 -[5-( 1,3-Dioxolan-2-il)-2,3,4-trifluorofenil]-N-hidroximetanimina

[000330] Piridina (95,3 g, 1,2 mol) e cloridrato de hidroxilamina (62,8 g, 0,90 mol) foram adicionados sequencialmente a uma solução agitada de Intermediário 14 (140,0 g, 0,60 mol) em etanol (1500 mL) a 0°C A mistura foi agitada à temperatura ambiente por 18 horas. Os voláteis foram removidos sob vácuo e o resíduo foi diluído com acetato de etila (2,0 L) e lavado com água (2 x 500 mL), salmoura (2 x 500 mL) e seco sobre sulfato de sódio. Solventes foram removidos para obter o produto bruto que foi purificado por lavagem com uma mistura de éter dietíli- co e heptano (1:9). Rendimento: 100,0 g (1a produção). 20 g do produto também foram obtidos por purificação em coluna de sílica-gel da solução-mãe obtida da 1a produção usando gradiente de acetato de etila em pet éter. Rendimento total: 120,0 g (80%). 1H RMN (400MHz, DMSO-d6) δ: 3,95-4,1 (m, 4H), 6,0 (s, 1H), 7,6 (m, 1H), 8,2 (s, 1H), 11,8 (s, 1H). Intermediário 16 Cloreto de 5-( 1,3-dioxolan-2-il)-2,3,4-trifluoro-N-hidroxibenzimidoil

[000331] N-Clorosuccinimida (49,0 g, 0,36 mol) foi adicionada em porções a uma solução agitada de Intermediário 15 (70,0 g, 0,28 mol) em dimetilformamida (360 mL) à temperatura ambiente sob uma at-mosfera de N2. Após agitação por 4 horas, N2 foi borbulhado através da mistura de reação por 30 minutos antes de verter a mistura em água gelada (2 L). A mistura resultante foi agitada por uma hora e os sólidos foram filtrados e lavados com água (2x250 mL). Os sólidos foram agitados em tolueno (300 mL) por 30 min. e filtrados para obter 53,0 g como uma 1a produção. O tolueno filtrado foi tratado com heptano (400 mL), precipitando sólidos adicionais que foram filtrados e lavados com heptano adicional (50 mL), rendendo 7 g como 2a produção. Rendimento total: 60,0 g (76%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 3,95-4,1 (m, 4H), 6,0 (s, 1H), 7,6 (m, 1H), 12,8 (s, 1H). Intermediário 17 (2R)-1-[[5-( 1,3-dioxolan-2-il)-6,7-diflúor-1,2-benzoxazol-3-il]amino]pro- pan-2-ol

[000332] (R)-1-aminopropan-2-ol (1,3 mL, 16,6 mmols) foi adicionado a uma solução de Intermediário 16 (2,22 g, 7,88 mmols) em dimetil- formamida (30 mL) à temperatura ambiente. Houve uma lenta exoter- ma para a reação. Após agitação por 10 minutos, LC-MS mostrou con-sumo de material de partida com um novo material intermediário (MH+=321). Após agitação por mais 30 minutos, terc-butóxido de po-tássio (1,77 g, 15,8 mmols) foi adicionado todo de uma vez. Uma lenta exoterma sucedeu-se. Após agitação por uma hora, LC-MS mostrou conversão ao material consistente com o composto do título (MH+=301), com algum material intermediário consistente (MH+=321) permanecendo. Terc-butóxido de potássio adicional foi adicionado (400 mg, 3,6 mmols), e a mistura foi agitada à temperatura ambiente por uma hora. LC-MS mostrou conversão completa em material com MH+=321. A mistura foi extinta com NH4Cl aquoso, e solvente foi re- movido em vácuo. O resíduo sólido foi recolhido em água (50 mL) en-quanto se quebrava a massa sólida, e a mistura foi agitada à tempera-tura ambiente durante a noite. Os sólidos foram filtrados e enxaguados com água antes de serem secos em vácuo para resultar no material consistente com o composto do título. Rendimento 2,24 g (95%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,1 (d, 3H) 3,2 (t, 2H) 3,8-4,0 (m, 1H) 4,0-4,1 (m, 4H) 4,8 (d, 1H) 6,1 (s, 1H) 7,3 (t, 1H) 8,0 (dd, 1H). ES MH+: 301 para C13H14F2N2O4. Intermediário 18 (R)-3-(5-(1,3-dioxolan-2-il)-6,7-diflúorbenzo[d]isoxazol-3-il)-5-metiloxa- zolidin-2-ona

[000333] Uma mistura de Intermediário 17 (500 mg, 1,67 mmol), di(1H-imidazol-1-il)metanona (405 mg, 2,50 mmols), e dimetilaminopi- ridina (102 mg, 0,83 mmol) em tetra-hidrofurano (10 mL) foi aquecida em refluxo durante a noite (21 horas). O solvente foi removido para render um resíduo oleoso. O resíduo foi recolhido em HCl 1N, e a mistura foi agitada à temperatura ambiente por 90 minutos, rendendo sólidos. Os sólidos foram filtrados e enxaguados bem com água, quebrando-os com uma espátula antes de secagem em vácuo. O material é consistente com o composto do título com cerca de 5% de impureza devido à hidrólise ao aldeído correspondente. Rendimento 407 mg (75%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 1,5 (d, 3H) 3,8 (dd, 1H) 4,04,1 (m, 4H) 4,3 (t, 1H) 5,0 (m, 1H) 6,1 (s, 1H) 8,45 (d, 1H). ES MH+: 327 para C14H12F2N2O5; Intermediário 19 (R)-6,7-Diflúor-3-(5-metil-2-oxoxazolidin-3-il)benzo[d]isoxazol-5- carbaldeído

[000334] Uma solução de Intermediário 18 (404 mg, 1,24 mmol) em HCl (1,0 M em água) (10 mL, 10,00 mmols) e tetra-hidrofurano (10 mL) foi agitada à temperatura ambiente por 3 dias. A mistura de reação foi diluída com água e extraída duas vezes com acetato de etila e cada extrato foi lavado com salmoura. As camadas orgânicas foram combi-nadas e secas sobre MgSO4, filtradas e evaporadas para render mate-rial como um sólido esbranquiçado consistente com o composto do título. Rendimento 350 mg (100%). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ: 1,6 (d, 3H) 3,8 (dd, 1H) 4,3 (dd, 1H) 4,9 (m, 1H) 8,9 (dd, 1H) 10,2 (s, 1H). ES MH+: 283 para C12H8F2N2O4. Intermediário 20 6-((2R,6R)-2,6-Dimetilmorfolino)-7-flúor-3-((R)-5-metil-2-oxoxazolidin- 3-il)-benzo[d]isoxazol-5-carbaldeído

[000335] Uma mistura de Intermediário 19 (92 mg, 0,33 mmol), (2R,6R)-2,6-dimetilmorfolina (45,1 mg, 0,39 mmol) e K2CO3 em butiro- nitrila (3 mL) e água (0,5 mL) foi aquecida a 100°C em um vaso reator de microondas. O solvente foi removido e o resíduo diluído com água e extraído duas vezes com acetato de etila, com cada extrato sendo lavado com salmoura. As camadas orgânicas foram combinadas e se-cas sobre MgSO4, filtradas e evaporadas para render material que foi cromatografado em sílica-gel (hexanos 50% em CH2CH2 seguido de eluição gradiente a CH2CH2 100%) para render um sólido amarelo consistente com o composto do título. Rendimento 100 mg (81%). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 1,2 (d, 6H) 1,5 (d, 3H) 2,9-3,0 (m, 2H) 3,4 (dt, 2H) 3,7 (dd, 1H) 4,1-4,3 (m, 3H) 4,8-5,0 (m, 1H) 8,7 (d, 1H) 10,3 (s, 1H). MS (ES) MH+: 378 para C18H20FN3O5. Intermediário 21 (4S)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-dimetilmorfolin-4-il]-5-(1,3-dioxolan-2-il)-7-flúor- 1,2-benzoxazol-3-il}-4-metil-1,3-oxazolidin-2-ona

[000336] Intermediário 21 foi preparado a partir do Intermediário 7 usando (4S)-4-metil-1,3-oxazolidin-2-ona (sintetizada de acordo com o procedimento descrito em Nishiyama, T.; Matsui, Shigeki; Yamada, F. J. Het. Chem. (1986), 23(5), 1427-9) em um método semelhante àquele descrito para a síntese de Intermediário 8. MS (ES) MH+: 422,4 para C20H24FN3O6. Intermediário 22 (S)-3-(6-((2R,6R)-2,6-Dimetilmorfolino)-5-(1,3-dioxolan-2-il)-7- fluorobenzo[d]isoxazol-3-il)-4-metiloxazolidin-2-ona

[000337] Intermediário 22 foi preparado a partir do Intermediário 11 e (4S)-4-metil-1,3-oxazolidin-2-ona (sintetizada de acordo com o proce-dimento descrito em Nishiyama, T.; Matsui, Shigeki; Yamada, F. J. Het. Chem. (1986), 23(5), 1427-9) usando um método semelhante àquele descrito para a síntese de Intermediário 12. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 1,2 (d, 6H), 1,35-1,5 (m, 3H), 2,8-3,3 (m, 4H), 3,9-4,3 (m, 7H), 4,6-4,8 (m, 2H), 6,0-6,3 (m, 1H), 6,2 (s, 1H), 8,2 (s, 1H). MS (ES) MH+: 422. para C20H24FN3O6.

[000338] Intermediários 23-29 foram preparados a partir do Interme-diário 7 e do material de partida de oxazolidinona indicado usando um método semelhante àquele descrito para a síntese de Intermediário 8. Intermediário 23 (4S)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-Dimetilmorfolin-4-il]-5-(1,3-dioxolan-2-il)-7-flúor- 1,2-benzoxazol-3-il}-4-etil-1,3-oxazolidin-2-ona

[000339] Material de partida: (4S)-4-etil-1,3-oxazolidin-2-ona (sinteti-zada de acordo com o procedimento descrito em Begis, G.; Cla- dingboel, D. E.; Jerome, L.; Motherwell, W. B.; Sheppard, T. D. Eur. J. Org. Chem. (2009), (10), 1532-1548). MS (ES) MH+: 436,4 para C21H26FN3O6. Intermediário 24 (4R)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-dimetilmorfolin-4-il]-5-(1,3-dioxolan-2-il)-7-flúor- 1,2-benzoxazol-3-il}-4-etil-1,3-oxazolidin-2-ona

[000340] Material de partida: (4R)-4-etil-1,3-oxazolidin-2-ona-(5R)-5- metil-1,3-oxazolidin-2-ona (sintetizada de acordo com o procedimento descrito em Chouhan, G.; Alper, H. J. Org. Chem. (2009), 74(16), 6181-6189). MS (ES) MH+: 436,4 para C21H26FN3O6. Intermediário 25 (4R)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-dimetHmorfoHn-4-H]-5-(1,3-dioxolan-2-H)-7-flúor- 1,2-benzoxazol-3-il}-4-fenil-1,3-oxazolidin-2-ona

[000341] Material de partida: (4R)-4-fenil-1,3-oxazolidin-2-ona (sinte-tizada de acordo com o procedimento descrito em Begis, G.; Cla- dingboel, D. E.; Jerome, L.; Motherwell, W. B.; Sheppard, T. D. Eur. J. Org. Chem. (2009), (10), 1532-1548). MS (ES) MH+: 484,5 para C25H26FN3O6. Intermediário 26 (4S)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-Dimetilmorfolin-4-il]-5-(1,3-dioxolan-2-il)-7-flúor- 1,2-benzoxazol-3-il}-4-fenil-1,3-oxazolidin-2-ona

[000342] Material de partida: (4S)-4-fenil-1,3-oxazolidin-2-ona (sinteti-zada de acordo com o procedimento descrito em MacNevin, C. J.; Mo-ore, R. L.; Liotta, D. C. J. Org. Chem. (2008), 73(4), 1264-1269). MS (ES) MH+: 484,5 para C25H26FN3O6. Intermediário 27 (4R)-4-benzil-3-{6-[(2R,6S)-2,6-dimetilmorfolin-4-il]-5-(1,3-dioxolan-2- il)-7-flúor-1,2-benzoxazol-3-il}-1,3-oxazolidin-2-ona

[000343] Material de partida: (4R)-4-benzil-1,3-oxazolidin-2-ona (sin-tetizada de acordo com o procedimento descrito em Paz, J.; Perez- Balado, C.; Iglesias, B.; Munoz, L. J. Org. Chem. (2010), 75(9), 3037-3046). MS (ES) MH+: 498,5 para C26H28FN3O6. Intermediário 28 (4S)-4-benzil-3-{6-[(2R,6S)-2,6-dimetilmorfolin-4-il]-5-(1,3-dioxolan-2- il)-7-flúor-1,2-benzoxazol-3-il}-1,3-oxazolidin-2-ona

[000344] Material de partida: (4S)-4-benzil-1,3-oxazolidin-2-ona (sin-tetizada de acordo com o procedimento descrito em Begis, G.; Cla- dingboel, D. E.; Jerome, L.; Motherwell, W. B.; Sheppard, T. D. Eur. J. Org. Chem. (2009), (10), 1532-1548). MS (ES) MH+: 498,5 para C26H28FN3O6. Intermediário 29 3-{6-[(2R,6S)-2,6-Dimetilmorfolin-4-il]-5-(1,3-dioxolan-2-il)-7-flúor-1,2- benzoxazol-3-il}-5,5-dimetil-1,3-oxazolidin-2-ona

[000345] Material de partida: 5,5-dimetil-1,3-oxazolidin-2-ona (sinteti-zada de acordo com o procedimento descrito em Jones, S.; Smanmoo, C. Tet. Lett. (2004), 45(8), 1585-1588). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,1 (d, 6H), 1,5 (s, 6H), 2,8 (t, 2H), 3,1 (d, 2H), 3,8 (m, 2H), 4,0 (m, 4H), 4,1 (m, 2H), 6,1 (s, 1H), 8,4 (s, 1H). MS (ES) MH+: 436,4 para C21H26FN3O6. Mistura de Intermediários 30 e 31 (5R)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-dimetilmorfolin-4-il]-5-(1,3-dioxolan-2-il)-7-flúor- 1,2-benzoxazol-3-il}-5-etil-1,3-oxazolidin-2-ona e (5S)-3-{6-[(2R,6S)- 2,6-dimetilmorfolin-4-il]-5-(1,3-dioxolan-2-il)-7-flúor-1,2-benzoxazol-3- il}-5-etil-1,3-oxazolidin-2-ona

[000346] Intermediários 30 e 31 foram preparados a partir do Inter-mediário 11 e 5-etil-1,3-oxazolidin-2-ona (sintetizada de acordo com o procedimento descrito na Publicação de Pedido de Patente Europeia N°. EP 244810) usando um método semelhante àquele descrito para a síntese de Intermediário 12. Os diastereômeros foram separados por meio de HPLC usando Chiralpak IC (250x4,6) mm (hexano:etanol, 80:20, 1,0 mL/min).

[000347] Intermediário 30 ((5R)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-dimetilmorfolin-4-il]- 5-(1,3-dioxolan-2-il)-7-flúor-1,2-benzoxazol-3-il}-5-etil-1,3-oxazolidin-2- ona) foi o primeiro diastereômero a eluir. RT=16,2 min; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,0 (t, 3H), 0,95-1,0 (m, 6H), 1,8 (m, 2H), 2,9 (m, 2H), 3,2 (m, 2H), 3,8 (dd, 1H), 4,0 (m, 2H), 4,0-4,05 (m, 4H), 4,2 (t, 1H), 6,2 (s, 1H), 8,4 (s, 1H). MS (ES) MH+: 436,4 para C21H26FN3O6.

[000348] Intermediário 31 ((5S)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-dimetilmorfolin-4-il]- 5-(1,3-dioxolan-2-il)-7-flúor-1,2-benzoxazol-3-il}-5-etil-1,3-oxazolidin-2- ona) foi o segundo diastereômero a eluir. RT=18,9 min; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,0 (t, 3H), 0,95-1,0 (m, 6H), 1,8 (m, 2H), 2,9 (m, 2H), 3,2 (m, 2H), 3,8 (dd, 1H), 4,0 (m, 2H), 4,0-4,05 (m, 4H), 4,2 (t, 1H), 6,2 (s, 1H), 8,4 (s, 1H). MS (ES) MH+: 436,4 para C21H26FN3O6. Intermediário 32 (4R)-4-({[terc-Butil(dimetil)silil]oxi}metil)-3-{6-[(2R,6S)-2,6- dimetilmorfolin-4-il]-5-( 1,3-dioxolan-2-il)-7-flúor-1,2-benzoxazol-3-il}- 1,3-oxazolidin-2-ona

[000349] Uma solução de (4R)-4-({[terc-butil(difenil)silil]óxi}metil)-1,3- oxazolidin-2-ona (sintetizada de acordo com o procedimento descrito em Berkowitz, D. B.; Sloss, D. G. J. Org. Chem. (1995), 60(21), 7047-50) em dimetilformamida (15 mL) foi adicionada a uma solução agitada de NaH (0,83 g, 34,6 mmols) em dimetilformamida (10 mL) a 0°C ao longo de um período de 10 minutos. A mistura foi agitada à temperatura ambiente por 30 minutos e uma solução de Intermediário 7 (6,17 g, 17,3 mmols) em dimetilformamida (25 mL) foi adicionada à mesma temperatura. Essa mistura foi aquecida a 60°C por d uas horas e verti-da em água gelada, extraída com acetato de etila (2x20 mL). As ca-madas orgânicas foram secas sobre Na2SO4 anidro e os solventes fo-ram removidos sob vácuo. O produto bruto foi purificado por cromato- grafia em coluna de sílica-gel usando um gradiente de acetato de etila em éter pet.. Rendimento: 1,2 g (13%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: -0,2 (s, 3H), -0,1 (s, 3H), 0,75 (s, 9H), 1,1 (d, 6H), 2,8 (t, 2H), 3,1 (d, 2H), 3,7 (m, 3H), 4,0 (m, 2H), 4,0-4,1 (m, 2H), 4,1 (d, 1H), 4,4 (d, 1H), 4,7 (d, 2H), 6,1 (s, 1H), 8,3 (s, 1H). MS (ES) MH+: 552,6 para C26H38FN3O7Si. Mistura de Intermediários 33 e 34 (4S)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-dimetilmorfolin-4-il]-5-(1,3-dioxolan-2-il)-7-flúor- 1,2-benzoxazol-3-il}-4-(hidroximetil)-1,3-oxazolidin-2-ona e (4R)-3-{6- [(2R,6S)-2,6-dimetilmorfolin-4-il]-5-(1,3-dioxolan-2-il)-7-flúor-1,2- benzoxazol-3-il}-4-(hidroximetil)-1,3-oxazolidin-2-ona

[000350] A uma solução agitada de Intermediário 32 (1,5 g, 2,7 mmols) em tetra-hidrofurano (50 mL), solução 1M de fluoreto de tetra- butilamônio em tetra-hidrofurano (1,4 g, 5,4 mmols) foi adicionada a 0°C, e a mistura foi agitada à temperatura ambiente por 10 minutos. Água (3 mL) foi adicionada à mistura de reação e a camada orgânica foi separada e seca sobre Na2SO4 anidro. Evaporação do solvente sob vácuo rendeu um sólido que foi uma mistura de enantiômeros 68%+27% por análise de HPLC quiral. Rendimento: 1,1 g (92%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,1 (d, 6H), 2,8 (t, 2H), 3,1 (d, 2H), 3,53,6 (m, 1H), 3,7-3,8 (m, 2H), 3,9-4,0 (m, 3H), 4,05-4,1 (m, 2H), 4,5 (dd, 1H), 4,6-4,65 (m, 2H), 5,2 (t, 1H), 6,1 (s, 1H), 8,3 (s, 1H). MS (ES) MH+: 438,4 para C20H24FN3O7.

[000351] Os enantiômeros R e S da Mistura de Intermediários 33 e 34 foram separados por HPLC quiral usando coluna Chiralpak IC (250x4,6 mm) (hexano:etanol (80:20); 1,0 mL/min) para render 2 componentes, Intermediário 33 como o componente principal e Intermediário 34 como o componente secundário.

[000352] Intermediário 33 ((4S)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-dimetilmorfolin-4-il]- 5-(1,3-dioxolan-2-il)-7-flúor-1,2-benzoxazol-3-il}-4-(hidroximetil)-1,3- oxazolidin-2-ona) foi o primeiro enantiômero a eluir. RT=10,86 min; rendimento: 550 mg. MS (ES) MH+: 438,4 para C20H24FN3O7.

[000353] Intermediário 34 ((4R)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-dimetilmorfolin-4-il]- 5-(1,3-dioxolan-2-il)-7-flúor-1,2-benzoxazol-3-il}-4-(hidroximetil)-1,3- oxazolidin-2-ona) foi o segundo enantiômero a eluir. RT=14,99 min; rendimento: 420 mg. MS (ES) MH+: 438,4 para C20H24FN3O7. Intermediário 35 (4R)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-Dimetilmorfolin-4-il]-5-(1,3-dioxolan-2-il)-7-flúor- 1,2-benzoxazol-3-il}-4-(fluorometil)-1,3-oxazolidin-2-ona

[000354] Trifluoreto de dietilaminoenxofre (1,0 g, 6,3 mmols) foi adici-onado a uma solução agitada de Intermediário 33 (0,55 g, 1,25 mmol) em tetra-hidrofurano (25 mL) a -78°C, e a mistura foi agitada por uma hora antes de aquecimento à temperatura ambiente por uma hora. Me-tanol (1 mL) foi adicionado, e os voláteis foram removidos sob vácuo. O resíduo foi dissolvido em acetato de etila (15 mL) e lavado com NaHCO3 saturado (5 mL), água (10 mL) e salmoura aquosa. A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4, e o solvente foi removido sob vácuo para render o composto do título como um sólido. Rendimento: 0,44 g (80%). MS (ES) MH+: 440,4 para C20H23F2N3O6. Intermediário 36 (4S)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-Dimetilmorfolin-4-il]-5-(1,3-dioxolan-2-il)-7-flúor- 1,2-benzoxazol-3-il}-4-(fluorometil)-1,3-oxazolidin-2-ona

[000355] Intermediário 36 foi preparado a partir do Intermediário 34 usando um método semelhante àquele descrito para a síntese de In-termediário 35. MS (ES) MH+: 440,4 para C20H23F2N3O6. Mistura de Intermediários 37 e 38 (4R)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-Dimetilmorfolin-4-il]-5-(1,3-dioxolan-2-il)-7-flúor- 1,2-benzoxazol-3-il}-4-(metoximetil)-1,3-oxazolidin-2-ona e (4S)-3-{6- [(2R,6S)-2,6-dimetilmorfolin-4-il]-5-(1,3-dioxolan-2-il)-7-flúor-1,2- benzoxazol-3-il}-4-(metoximetil)-1,3-oxazolidin-2-ona

[000356] Uma mistura de Intermediários 33 e 34, 0,55 g, 1,3 mmol) e iodeto de metila (0,54 g, 3,8 mmols) foi adicionada a uma mistura agi-tada de NaH (0,06 g, 2,5 mmols) em dimetilformamida (5 mL) a 0°C, e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente por uma hora. A mistura de reação foi extinta com NH4Cl aquoso saturado (5 mL) e extraída com acetato de etila (3x10 mL). As camadas orgânicas com-binadas foram lavadas com água e secas sobre Na2SO4. Evaporação do solvente sob vácuo rendeu o composto do título bruto, o qual foi purificado por cromatografia flash em coluna de sílica-gel usando um gradiente de acetato de etila em éter pet.. Rendimento: 0,4 g (70%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,1 (d, 6H), 2,8 (t, 2H), 3,1 (d, 2H), 3,2 (s, 3H), 3,5 (dd, 1H), 3,7-3,75 (m, 2H), 3,9 (d, 1H), 3,9-34,0 (m, 2H), 4,0-4,1 (m, 2H), 4,4 (dd, 1H), 4,6-4,7 (m, 2H), 6,1 (s, 1H), 8,3 (s, 1H). MS (ES) MH+: 452,4 para C21H26FN3O7. Intermediário 39 (4S)-4-(Metoximetil)-1,3-oxazolidin-2-ona

[000357] A uma solução agitada de [(2R)-1-hidróxi-3-metoxipropan-2- il]carbamato de terc-butila (sintetizado de acordo com o procedimento descrito em Sowinski, J. A.; Toogood, P. L. J. Org. Chem. (1996), 61(22), 7671-7676) (8,3 g, 40,4 mmols) tetra-hidrofurano (100 mL), so-lução 1M de t-butóxido de potássio em tetra-hidrofurano (80,9 mL, 80,9 mmols) foi adicionada gota a gota a 0°C e a mistura foi agitada à tem-peratura ambiente por duas horas. Água (20 mL) foi adicionada à mis-tura de reação e extraída com acetato de etila (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura e secas sobre Na2SO4. Rendimento: 5,0 g (94%),1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 3,3 (s, 3H), 3,3 (m, 2H), 3,9 (m, 1H), 4,0 (dd, 1H), 4,3 (t, 1H), 7,7 (d, 1H). [α]D 25=-5,876. Intermediário 40 (4S)-3-{6-[(2R,6S)-2,6-dimetilmorfolin-4-il]-5-(1,3-dioxolan-2-il)-7-flúor- 1,2-benzoxazol-3-il}-4-(metoximetil)-1,3-oxazolidin-2-ona

[000358] Intermediário 40 foi preparado a partir do Intermediário 39 e Intermediário 7 usando um método semelhante àquele descrito para a síntese de Intermediário 32. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,1 (d, 6H), 2,8 (t, 2H), 3,1 (d, 2H), 3,2 (s, 3H), 3,5 (dd, 1H), 3,7-3,75 (m, 2H), 3,9 (d, 1H), 3,95-4,0 (m, 2H), 4,0-4,1 (m, 2H), 4,4 (dd, 1H), 4,45-4,7 (m, 2H), 6,1 (s, 1H), 8,3 (s, 1H). MS (ES) MH+: 452,4 para C21H26FN3O7. Intermediário 41 (S)-5-((terc-Butildifenilsililóxi)metil)oxazolidin-2-ona

[000359] (S)-5-(hidroximetil)oxazolidin-2-ona (570 mg, 4,87 mmols, como descrito por Danielmeier, K.; Steckhan, E. Tet. Asymmetry,6(5), 1995, 1181) e imidazol (331 mg, 4,87 mmols) foram dissolvidos em dimetilformamida (5 mL) e resfriados a 0°C terc-But ilclorodifenilsilano (1,34 g, 4,87 mmols) foi adicionado gota a gota a 0°C Permitiu-se que a mistura de reação se aquecesse à temperatura ambiente e foi agitada por 5 horas. A mistura foi vertida em HCl 0,5 N (50 mL), e a mistura resultante foi extraída com acetato de etila. As camadas foram sepa-radas, e a fase orgânica foi lavada com bicarbonato de sódio saturado, água e salmoura. A fase orgânica foi seca sobre sulfato de sódio e o solvente removido para render material bruto que foi purificado em uma coluna de sílica-gel (acetato de etila 50% em hexanos) para resultar no composto do título (1,28 g, 74,0%),1H RMN (300 MHz, DMSO- d6) δ: 1,0 (s, 9H) 3,3-3,6 (m, 2H) 3,6-3,9 (m, 2H) 4,6-4,8 (m, 1H) 7,37,8 (m, 11H). MS (ES) (M+23)+: 278 para o aduto de Na+ de C20H25NO3Si. Intermediário 42 (S)-5-((terc-Butildifenilsililóxi)metil)-3-(6-((2R,6R)-2,6-dimetilmorfolino)- 5-(1,3-dioxolan-2-il)-7-fluorobenzo[d]isoxazol-3-il)oxazolidin-2-ona

[000360] Intermediário 42 foi preparado a partir do Intermediário 41 e Intermediário 11 usando um método semelhante àquele descrito para a síntese de Intermediário 32. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 0,9 (s, 9H) 1,2 (d, 6H) 2,9 (dd, 2H) 3,2-3,3 (m, 2H) 3,8-4,1 (m, 9H) 4,3 (t, 1H) 4,95-5,1 (m, 1H) 6,2 (s, 1H) 7,3-7,7 (m, 10H) 8,5 (s, 1H). MS (ES) MH+: 676 para C36H42FN3O7Si. Intermediário 43 (S)-3-(6-((2R,6R)-2,6-Dimetilmorfolino)-5-(1,3-dioxolan-2-il)-7- fluorobenzo[d]isoxazol-3-il)-5-(hidroximetil)oxazolidin-2-ona

[000361] Ácido acético (0,89 mL, 15,5 mmols) e uma solução 1M de fluoreto de tetrabutilamônio (3,1 mL, 3,1 mmols) em tetra-hidrofurano foram adicionados sequencialmente a uma solução de Intermediário 42 (2,1 g, 3,11 mmols) dissolvido em 15 mL de tetra-hidrofurano. A mistura foi agitada à temperatura ambiente por 18 horas. A mistura de reação foi diluída com água e extraída com acetato de etila, a qual foi concentrada para render material bruto que foi purificado em uma co-luna de sílica-gel (gradiente de acetato de etila 50-70% em hexanos) para resultar no composto do título (1,33 g, rendimento de 98%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 1,2 (d, 6H) 2,8-3,3 (m, 4H) 3,5-3,8 (m, 2H) 3,9-4,3 (m, 8H) 4,7-5,05 (m, 1H) 6,2 (s, 1H) 8,4 (s, 1H). MS (ES) MH+: 438 para C20H24FN3O7. Intermediário 44 (S)-3-(6-((2R,6R)-2,6-dimetilmorfolino)-5-(1,3-dioxolan-2-il)-7-fluoro- benzo[d]isoxazol-3-il)-5-(fluorometil)oxazolidin-2-ona

[000362] Intermediário 44 foi preparado a partir do Intermediário 43 usando um método semelhante àquele descrito para a síntese de In-termediário 35. 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ: 1,3 (d, 6H) 3,0 (dd, 2H) 4,0-4,2 (m, 8H) 4,3 (t, 1H) 4,55-4,9 (m, 3H) 5,0-5,25 (m, 1H) 6,3 (s, 1H) 8,5 (s, 1H). MS (ES) MH+: 440 para C20H23F2N3O6. Intermediário 45 ácido 3-Cloro-4-flúor-2-hidroxibenzoico

[000363] Hidróxido de sódio (208 g, 5,21 mols) foi adicionado em porções a uma solução agitada de ácido 3-cloro-2,4-diflúorbenzoico (200 g, 1,04 mol) em 1,3-dimetilimidazolidin-2-ona (1 L), e a mistura foi aquecida a 140°C por duas horas. A mistura de reaçã o foi resfriada à temperatura ambiente e neutralizada com HCl 2N resfriado em gelo (350 mL), precipitando um sólido branco que foi coletado por filtração. O sólido filtrado foi dissolvido em metil t-butil éter (500 mL), lavado com solução de salmoura saturada (150 mL) e seco sobre Na2SO4. Remoção de solvente sob vácuo rendeu o composto do título como sólido esbranquiçado. Rendimento: 180 g (91%). 1H RMN (300 MHz, MeOH-d4) δ: 6,8 (t, 1H), 7,90 (dd, 1H), 11,3 (s, 1H). MS (ES) MH-: 189 para C7H4ClFO3. Intermediário 46 3-cloro-4-flúor-2-hidroxibenzoato de metila

[000364] Cloreto de oxalila (75,9 g, 0,60 mol) e dimetilformamida (1 mL) foram adicionados sequencialmente a uma solução resfriada em gelo e agitada de Intermediário 45 (57,0 g, 0,29 mol) em diclorome- tano seco (570 mL), e a mistura foi agitada à temperatura ambiente por 16 horas. Voláteis foram removidos sob vácuo, rendendo um sólido amarelo, ao qual metanol (350 mL) foi adicionado a 0°C, e a mistura resultante foi agitada à mesma temperatura por uma hora. A mistura de reação foi vertida lentamente em uma solução resfriada em gelo de HCl 2N (1,0 L), precipitando um sólido que foi coletado por filtração. Esse sólido úmido foi dissolvido em éter dietílico (1,5 L), o qual foi separado e seco sobre Na2SO4. Remoção do solvente sob vácuo rendeu o composto do título como sólido branco. Rendimento: 58,0 g (95%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 3,9 (s, 3H), 7,0 (t, 1H), 7,8 (dd, 1H), 11,3 (s, 1H). Intermediário 47 3-Cloro-4-flúor-N,2-di-hidroxibenzamida

[000365] Cloridrato de hidroxilamina (43,3 g, 0,62 mol) e péletes de KOH (73,2 g, 1,30 mol) foram adicionados sequencialmente a uma so-lução de Intermediário 46 (58,0 g, 0,28 mol) em metanol (580 mL) a 0°C, e a mistura foi refluxada por 16 horas. A mist ura de reação foi resfriada a 10°C e o pH da solução foi ajustado a 2 por adição de uma solução resfriada em banho de gelo de HCl 1,5N (3,0 L), precipitando sólidos brancos. Os sólidos foram filtrados e secos bem sob vácuo. Os sólidos foram então dissolvidos em acetato de etila (500 mL), os quais foram lavados com ácido clorídrico 1,5N (200 mL), solução de salmoura (200 mL) e secos sobre Na2SO4. Remoção de solvente rendeu o produto do título como sólido branco. Rendimento: 55,0 g (94%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 7,0 (t, 1H), 7,7 (dt, 1H), 9,6 (br s, 1H), 11,9 (s, 1H), 13,9 (s, 1H). MS (ES) MH+: 206 para C7H5ClFNO3. Intermediário 48 7-Cloro-6-fluorobenzo[d]isoxazol-3(2H)-ona

[000366] Carbonil diimidazol (86,75 g, 0,54 mol) em tetra-hidrofurano seco (100 mL) foi adicionado gota a gota a uma solução agitada de Intermediário 47 (55,0 g, 0,27 mol) em tetra-hidrofurano seco (550 mL) a 70°C ao longo de uma hora, e a mistura de reação foi agitada à mesma temperatura por mais uma hora. Solventes foram removidos sob vácuo, e o semissólido obtido foi agitado vigorosamente com ácido clorídrico 2N resfriado em gelo (500 mL) por 10 minutos. O sólido branco obtido foi filtrado, dissolvido em acetato de etila (500 mL), o qual foi lavado com solução de salmoura (150 mL) e seco sobre Na2SO4. Remoção de solvente rendeu o composto do título como sólido branco. Rendimento: 47,0 g (94%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 8,0 (t, 1H), 8,4 (dd, 1H), 13,5 (br s, 1H). MS (ES) MH-: 186 para C7H3ClFNO2. Intermediário 49 3,7-Dicloro-6-fluorobenzo[d]isoxazol

[000367] A uma mistura resfriada em gelo de Intermediário 48 (47,0 g, 0,25 mol), oxicloreto de fósforo (114,3 g, 0,75 mol) e trietilamina (25,36 g, 0,25 mol) foram adicionados e a mistura foi aquecida a 140°C em um tubo vedado por 6 horas. A massa de rea ção foi resfriada à temperatura ambiente e então água gelada foi adicionada lenta- mente com agitação vigorosa. O sólido obtido foi filtrado e lavado com solução saturada de bicarbonato de sódio (200 mL) e água gelada. O sólido úmido foi então dissolvido em éter dietílico (2,0 L), o qual foi seco sobre Na2SO4. Remoção de solvente a 35°C rendeu o composto do título como sólido marrom pálido. Rendimento: 32,0 g (62%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 7,6 (t, 1H), 7,9 (dd, 1H). MS (ES) MH-: 206,0 para C7H2Cl2FNO. Intermediário 50 3,7-Dicloro-6-fluorobenzo[d]isoxazol-5-carbaldeído

[000368] Uma solução de solução 1,6 M de n-butillítio (194,17 mL, 0,31 mol) em hexanos foi adicionada gota a gota a uma solução de tetrametilpiperidina (48,26 g, 0,34 mol) em tetra-hidrofurano (160 mL) a -10°C, e a solução agitada por 40 minutos. A mistura de reação foi resfriada a -78°C e nela foi adicionado Intermediário 49 (32,0 g, 0,16 mol) em tetra-hidrofurano (160 mL). Após agitação -78°C por duas horas, dimetilformamida (22,69 g, 0,31 mol) foi adicionada e a agitação foi continuada a -78°C por uma hora. A reação foi e xtinta pela adição de ácido acético (46,6 g, 0,78 mol) e aquecida à temperatura ambiente. A mistura foi diluída com água e extraída com acetato de etila (2x250 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água e salmoura e então secas sobre Na2SO4 anidro. Remoção do solvente sob vácuo rendeu o produto bruto, o qual foi purificado sobre a coluna de sílica-gel (230-400 mesh) usando um gradiente de acetato de etila 2% em éter pet.. Rendimento: 27,5 g (76%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8,4 (d, 1H), 10,2 (s, 1H). MS (ES) MH+: 233 para C8H2Cl2FNO2. Intermediário 51 3,7-Dicloro-6-((2R,6R)-2,6-dimetilmorfolino)benzo[d]isoxazol-5- carbaldeído

[000369] Uma mistura de Intermediário 50 (15 g, 64,10 mmols), (2R,6R)-2,6-dimetilmorfolina (7,38 g, 64,10 mmols), e K2CO3 (13,29 g, 96,15 mmols) em butironitrila (80 mL) e água (8 mL) foi aquecida em refluxo por 6 horas. O solvente foi removido. A mistura foi diluída com acetato de etila e lavada com água e salmoura. As camadas aquosas combinadas foram extraídas com acetato de etila, o qual foi lavado com água e salmoura. Os extratos de acetato de etila combinados foram secos (Na2SO4) e concentrados para resultar em um sólido amarelo pálido que é consistente com o composto do título (21,2 g, 100%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 1,2 (d, 6H) 3,0 (dd, 2H) 3,55 (dd, 2H) 4,1-4,2 (m, 2H) 8,1 (s, 1H) 10,3 (s, 1H). MS (ES) MH+: 329 para C14H14Cl2N2O3. Intermediário 52 3,7-Dicloro-6-((2R,6R)-2,6-dimetilmorfolino)-5-(1,3-dioxolan-2- il)benzo[d]isoxazol

[000370] A uma solução de Intermediário 51 (21 g, 63,8 mmols) dis-solvido em 200 mL de tolueno, foi adicionado etano-1,2-diol (15,8 g, 255 mmols) e ácido 4-metilbenzenossulfônico (0,55 g, 3,19 mmols). A mistura foi aquecida em refluxo com remoção azeotrópica de água por 4 horas. A reação foi resfriada e diluída com éter, o qual foi lavado com água, NaHCO3 aquoso, e água. Secagem (MgSO4) e remoção de solvente resultou em um resíduo que foi purificado em sílica-gel (ace-tato de etila 25% em hexanos) para resultar no composto do título (21,35 g, 90%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 1,2 (br. s., 3H) 1,3 (br. s., 3H) 2,7-3,2 (m, 3H) 3,5-3,75 (m, 1H) 3,9-4,25 (m, 6H) 6,2 (s, 1H) 7,9 (s, 1H). MS (ES) MH+: 373 para C16H18Cl2N2O4.

[000371] Os 3 Intermediários seguintes foram preparados a partir dos materiais de partida indicados usando um método semelhante àquele descrito para a síntese de Intermediário 42. Intermediário 53 (S)-3-(6-((2R,6R)-2,6-dimetilmorfolino)-5-(1,3-dioxolan-2-il)-7-cloroben- zo[d]isoxazol-3-il)-5-(metoximetil)oxazolidin-2-ona

[000372] Materiais de partida: (S)-5-(metoximetil)oxazolidin-2-ona (adquirida de Sanyo Co., LTD) e Intermediário 52. 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ: 1,0-1,3 (m, 3H), 1,3-1,6 (m, 3H), 2,8 (d, 1H), 2,9 (s, 1H), 3,0 (s, 1H), 3,05 (d, 1H), 3,2 (d, 1H) 3,4-3,5 (m, 3H), 3,7 (qd, 2H), 3,8-4,0 (m, 1H), 4,1-4,35 (m, 6H), 4,9 (ddd, 1H), 6,35 (s, 1H), 8,7 (s, 1H). MS (ES) MH+: 468 para C21H26ClN3O7. Intermediário 54 (R)-3-(6-((2R,6R)-2,6-dimetilmorfolino)-5-(1,3-dioxolan-2-il)-7- fluorobenzo[d]isoxazol-3-il)-5-(metoximetil)oxazolidin-2-ona

[000373] Material de partida: (R)-5-(metoximetil)oxazolidin-2-ona (ad-quirida de SanyoCo., LTD) e Intermediário 52. 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ: 1,2 (m, 3H), 1,45 (m, 3H) 2,8 (d, 1H), 3,1 (d, 1H), 3,2-3,4 (m, 2H), 3,4-3,5 (m, 3H), 3,7 (qd, 2H), 3,85 (d, 2H), 3,9-4,3 (m, 6H), 4,8-5,0 (m, 1H) 6,35 (s, 1H) 8,7 (s, 1H). MS (ES) MH+: 468 para C21H26FN3O7. Intermediário 55 (R)-3-(7-Cloro-6-((2R,6R)-2,6-dimetilmorfolino)-5-(1,3-dioxolan-2- il)benzo[d]isoxazol-3-il)-5-metiloxazolidin-2-ona

[000374] Material de partida: (R)-5-metiloxazolidin-2-ona (sintetizada de acordo com o procedimento descrito em Chouhan, G.; Alper, H.J. Org. Chem. (2009), 74(16), 6181-6189) e Intermediário 52. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 1,1 (s, 3H) 1,3 (s, 3H) 1,5 (d, 3H) 2,7-3,2 (m, 3H) 3,5-4,3 (m, 9H) 4,9-5,2 (m, 1H) 6,2 (s, 1H) 8,6 (s, 1H). MS (ES) MH+: 438 para C20H24ClN3O6. Intermediário 56 e 57 (4S,5R)-3-[6-[(2R,6R)-2,6-dimetilmorfolin-4-il]-5-(1,3-dioxolan-2-il)-7- flúor-1,2-benzoxazol-3-il]-4,5-dimetil-oxazolidin-2-ona e (4R,5S)-3-[6- [(2R,6R)-2,6-dimetilmorfolin-4-il]-5-(1,3-dioxolan-2-il)-7-flúor-1,2- benzoxazol-3-il]-4,5-dimetil-oxazolidin-2-ona

[000375] Uma suspensão de NaH em 10 mL de dimetilformamida foi adicionada lentamente a uma solução de 4,5-dimetiloxazolidin-2-ona (2,7 g, 18,8 mmols, sintetizada de acordo com o procedimento descrito em Chouchan, Gagan; C. J.O.C., 2009, 74, pg 6181) em 50 mL de di- metilformamida à temperatura ambiente. Após 10 minutos de agitação, Intermediário 11 (6,7 g, 18,8 mmols) foi adicionado e a mistura foi aquecida no microondas a 100°C por uma hora. A mistura resultante foi resfriada e vertida em NH4Cl aquoso gelado, e extraída com acetato de etila. A camada orgânica foi lavada com água, salmoura, e seca (Na2SO4). Após concentração, o resíduo foi purificado em uma coluna de sílica-gel (eluição com 0-5% metanol em CHCl3) para resultar em um sólido como uma mistura de diastereômeros. Os diastereômeros foram separados por HPLC quiral usando Coluna Chiralpak IC (250x4,6 mm) (hexano:metanol:etanol (70:15:15) 1,0 mL/min) para render 2 componentes, Intermediário 56 como o primeiro isômero a eluir e Intermediário 57 como o segundo isômero a eluir.

[000376] Intermediário 56 foi o primeiro isômero a eluir. Rendimento: 840 mg (10%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 1,2 (d, 6H), 1,3 (d, 3H), 1,4 (d, 3H), 2,9 (s, 2H), 3,2 (d, 2H), 3,9-4,2 (m, 6H), 4,7 (s, 1H), 5,1 (s, 1H), 6,2 (s, 1H), 8,3 (s, 1H). MS (ES) MH+: 436 para C21H26ClN3O6.

[000377] Intermediário 57 foi o segundo isômero a eluir. Rendimento: 920 mg (11%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 1,2 (d, 6H), 1,3 (d, 3H), 1,4 (d, 3H), 2,9 (dd, 2H), 3,2 (d, 2H), 3,9-4,2 (m, 6H), 4,5-4,9 (m, 1H), 4,9-5,2 (m, 1H), 6,2 (s, 1H), 8,3 (s, 1H). MS (ES) MH+: 436 para C21H26ClN3O6. Intermediário 58 (S)-2-(5-(1,3-dioxolan-2-il)-6,7-diflúorbenzo[d]isoxazol-3-ilamino)pent- 4-en-1-ol

[000378] Intermediário 58 foi preparado a partir do Intermediário 16 e (S)-2-aminopent-4-en-1-ol usando o método descrito para a síntese de Intermediário 17. 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ: 1,6 (br. s, 1H), 2,5 (t, 2H), 3,7-4,0 (m, 3H), 4,0-4,35 (m, 4H), 4,5 (d, 1H), 5,0-5,3 (m, 2H), 5,7-6,0 (m, 1H), 6,1 (s, 1H), 7,5 (dd, 1H). MS (ES) MH+: 327 para C15H16F2N2O4. Intermediário 59 (S)-3-(5-(1,3-Dioxolan-2-il)-6,7-diflúorbenzo[d]isoxazol-3-il)-4- alliloxazolidin-2-ona

[000379] Intermediário 59 foi preparado a partir do Intermediário 58 usando o método descrito para a síntese de Intermediário 18. 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ: 2,5-2,7 (m, 1H), 2,7-2,9 (m, 1H), 4,0-4,3 (m, 4H), 4,4 (dd, 1H), 4,6 (t, 1H), 4,7-4,9 (m, 1H), 5,1-5,3 (m, 2H), 5,6-5,9 (m, 1H), 6,1 (s, 1H), 8,4 (dd, 1H). MS (ES) MH+: 353 para C16H14F2N2O5. Intermediário 60 (S)-3-(4-Allil-2-oxoxazolidin-3-il)-6,7-diflúorbenzo[d]isoxazol-5- carbaldeído

[000380] Intermediário 60 foi preparado a partir do Intermediário 59 usando o método descrito para a síntese de Intermediário 19. MS (ES) MH+: 309 para C14H10F2N2O4. Intermediário 61 3-((S)-4-Allil-2-oxoxazolidin-3-il)-6-((2R,6R)-2,6-dimetilmorfolino)-7- fluorobenzo[d]isoxazol-5-carbaldeído

[000381] Intermediário 61 foi preparado a partir do Intermediário 60 usando o método descrito para a síntese de Intermediário 20. 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ: 1,2-1,4 (m, 6H), 2,5-2,7 (m, 1H), 2,7-2,9 (m, 1H), 2,9-3,1 (m, 2H), 3,4 (dt, 2H), 3,9-4,3 (m, 2H), 4,3-4,5 (m, 1H), 4,5-4,8 (m, 2H), 5,0-5,4 (m, 2H), 5,5-5,9 (m, 1H), 8,7 (s, 1H), 10,4 (s, 1H). MS (ES) MH+: 404 para C20H22FN3O5. Intermediário 62 2-(5-(1,3-Dioxolan-2-il)-6,7-diflúorbenzo[d]isoxazol-3-ilamino)-2-(tetra- hidro-2H-piran-4-il)etanol

[000382] Intermediário 62 foi preparado a partir do Intermediário 16 e 4-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)oxazolidin-2-ona (adquirida de Pharmacore, Inc.) usando o método descrito para a síntese de Intermediário 17. MS (ES) MH+: 371 para C17H20F2N2O5. Intermediário 63 3-(5-(1,3-Dioxolan-2-il)-6,7-diflúorbenzo[d]isoxazol-3-il)-4-(tetra-hidro- 2H-piran-4-il)oxazolidin-2-ona

[000383] Intermediário 63 foi preparado a partir do Intermediário 62 usando o método descrito para a síntese de Intermediário 18. 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ: 0,7-1,0 (m, 2H), 1,4-1,6 (m, 5H), 2,6 (d, 1H), 3,15-3,5 (m, 2H), 3,9-4,2 (m, 6H), 4,35-4,7 (m, 3H), 5,1-5,5 (m, 2H), 6,1 (s, 1H), 8,4 (dd, 1H). MS (ES) MH+: 397 para C18H18F2N2O6. Intermediário 64 6,7-Diflúor-3-(2-oxo-4-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)oxazolidin-3- il)benzo[d]isoxazol-5-carbaldeído

[000384] Intermediário 64 foi preparado a partir do Intermediário 63 usando o método descrito para a síntese de Intermediário 19. MS (ES) MH+: 353 para C16H14F2N2O5. Intermediário 656-((2R,6R)-2,6-Dimetilmorfolino)-7-flúor-3-((2-oxo-4-(tetra-hidro-2H- piran-4-il)-2-oxazolidin-3-il)benzo[d]isoxazol-5-carbaldeído

[000385] Intermediário 65 foi preparado a partir do Intermediário 64 usando o método descrito para a síntese de Intermediário 20. MS (ES) MH+: 448 para C22H26FN3O6. Intermediário 66 (S)-4-(3-Hidroxipropil)oxazolidin-2-ona

[000386] NaH (0,365 g, 9,12 mmols, 60% dispersão) foi adicionado em porções a uma mistura resfriada em banho de gelo de 1,5-di- hidroxipentan-2-ilcarbamato (S)-terc-butila (1 g, 4,56 mmols) dissolvido em 10 mL de tetra-hidrofurano. A mistura foi aquecida a 60°C por 2,5 horas. Após resfriamento à temperatura ambiente, a solução foi acidifi-cada com HCl 10% e concentrada. O resíduo foi diluído com metanol e qualquer material insolúvel foi extraído por filtração. O filtrado foi con-centrado para resultar na oxazolidinona bruta e usado na próxima eta-pa sem qualquer purificação adicional. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 1,1-1,2 (m, 3H) 3,4 (d, 2H) 3,5 (q, 2H) 3,8-4,0 (m, 1H) 4,0-4,1 (m, 1H) 4,2-4,4 (m, 1H) 4,6-4,7 (m, 2H) 7,7 (br. s, 1H). Intermediário 67 (S)-4-(3-(terc-Butildifenilsililóxi)propil)oxazolidin-2-ona

[000387] Intermediário 67 foi preparado a partir do Intermediário 66 usando o método semelhante à síntese de Intermediário 41. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 1,0 (s, 9H) 1,45-1,7 (m, 4H) 3,6-3,8 (m, 3H) 3,9 (dd, 1H) 4,3 (t, 1H) 7,4-7,5 (m, 6H) 7,6-7,7 (m, 4H) 7,7 (s, 1H). Intermediário 68 (S)-4-(3-(terc-Butildifenilsililóxi)propil)-3-(6-((2R,6R)-2,6- dimetilmorfolino)-5-(1,3-dioxolan-2-il)-7-fluorobenzo[d]isoxazol-3- il)oxazolidin-2-ona

[000388] Intermediário 68 foi preparado a partir do Intermediário 67 e Intermediário 11 usando o método semelhante àquele descrito para a síntese de Intermediário 42. MS (ES) MH+: 704 para C38H46FN3O7Si. Intermediário 69 (S)-3-(6-((2R,6R)-2,6-dimetilmorfolino)-5-(1,3-dioxolan-2-il)-7- fluorobenzo[d]isoxazol-3-il)-4-(3-hidroxipropil)oxazolidin-2-ona

[000389] Intermediário 69 foi preparado a partir do Intermediário 68 usando o método descrito para a síntese de Intermediário 43. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 1,2 (d, 5H) 1,3-1,5 (m, 2H) 1,7-2,0 (m, 2H) 2,9 (dd, 2H) 3,2-3,4 (m. 4H) 3,95-4,1 (m, 6H) 4,3-4,5 (m, 2H) 4,6-4,8 (m, 2H) 6,2 (s, 1H) 8,25 (s, 1H). MS (ES) MH+: 466 para C22H28FN3O7. Intermediário 70 (S)-3-(6-((2R,6R)-2,6-Dimetilmorfolino)-5-(1,3-dioxolan-2-il)-7- fluorobenzo[d]isoxazol-3-il)-4-(3-fluoropropil)oxazolidin-2-ona

[000390] Uma solução de trifluoreto de bis(2-metoxietil)amino-enxofre (0,149 mL, 50% em tetra-hidrofurano, 0,40 mmol) foi adicionada a uma solução resfriada em banho de gelo de Intermediário 69 (125 mg, 0,27 mmol) em 10 mL de CH2Cl2. A solução foi aquecida à temperatura ambiente com agitação por 18 horas. Após extinção com NaHCO3 aquoso, a mistura foi extraída com CH2Cl2. Solvente foi removido do extrato orgânico, e o resíduo foi cromatografado em sílica-gel (acetato de etila 50% em hexanos) para render 83 mg (66% de rendimento) do composto do título. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 1,2 (d, 6H) 1,52,1 (m, 4H) 2,9 (dd, 2H) 3,2-3,3 (m, 2H) 3,9-4,1 (m, 6H) 4,3-4,6 (m, 3H) 4,6-4,8 (m, 2H) 6,2 (s, 1H) 8,25 (s, 1H). MS (ES) MH+: 468 para C22H27F2N3O6. Intermediário 71 N-( 1,4-Di-hidroxibutan-2-il)-5-( 1,3-dioxolan-2-il)-2,3,4-trifluoro-N'- hidroxibenzimidamida

[000391] Intermediário 16 (2,07 g, 7,34 mmols) e (S)-2-aminobutano- 1,4-diol (1,3 g, 9,18 mmols) foram agitados em 50 mL de dimetilfor- mamida enquanto eram resfriados com um banho de água gelada. Tri- etilamina (7,68 mL, 55,09 mmols) foi lentamente adicionada ao longo de ~10 minutos, e permitiu-se que a reação se aquecesse à tempera-tura ambiente com agitação por 18 horas. O solvente foi removido, e o resíduo foi dissolvido em 4 mL de água e 5 mL de acetato de etila. A solução espessa foi filtrada através um tubo de sílica-gel (capacidade de 10 mL) com eluição com acetato de etila. O eluente foi concentrado para render 3,45 g (100% de rendimento). 1H RMN (300 MHz, DMSO- d6) δ: 1,4-1,7 (m, 2H) 3,3 (t, 2H) 3,3-3,5 (m, 3H) 3,9-4,1 (m, 6H) 4,3 (t, 1H) 4,6 (t, 1H) 5,7 (d, 1H) 5,9-6,1 (m, 1H) 7,3 (td, 1H) 9,9 (s, 1H). MS (ES) MH+: 351 para C14H17F3N2O5. Intermediário 72 (S)-2-(5-( 1,3-dioxolan-2-il)-6,7-diflúorbenzo[d]isoxazol-3- ilamino)butano-1,4-diol

[000392] Uma mistura de Intermediário 71 (3,2 g, 9,14 mmols) e CsCO3 (5,95 g, 18,27 mmols) foi dissolvida em dimetilformamida (50 mL) e foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. A solução foi extraída por decantação dos sais sólidos e filtrada. Os sólidos foram lavados 3x com éter e filtrados. Os filtrados combinados foram concentrados e o resíduo foi particionado entre água e acetato de etila. O acetato de etila foi separado e a camada aquosa foi extraída 3 vezes com acetato de etila. As camadas orgânicas foram lavadas 3 vezes com NaCl aquoso saturado, secas sobre MgSO4 e concentradas para resultar em um óleo. O óleo foi purificado em coluna de sílica-gel usando um gradiente de CH2Cl2 a CH2Cl2 10% em acetato de etila para render o composto do título. Rendimento 1,0 g, 33%. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 1,6-1,9 (m, 2H) 3,4-3,6 (m, 4H) 3,7 (td, 1H) 3,9-4,2 (m, 4H) 4,4 (t, 1H) 4,6-4,8 (m, 1H) 5,7-5,8 (m, 1H) 6,1 (s, 1H) 7,05 (d, 1H) 8,0 (dd, 1H). MS (ES) MH+: 331 para C14H16F2N2O5. Intermediário 73 (S)-6,7-Diflúor-3-(4-(2-hidroxietil)-2-oxoxazolidin-3-il)benzo[d]isoxazol- 5-carbaldeído

[000393] Intermediário 72 (220 mg, 0,67 mmol) e carbonil diimidazol (412 mg, 2,54 mmols) foram dissolvidos em dimetilformamida (20 mL). Dimetilaminopiridina (31 mg, 0,25 mmol) foi adicionada e a reação foi agitada a 60°C por duas horas. Após resfriamento à temperatura am-biente, os 5 mL de HCl 1N aquoso foram adicionados e a mistura de reação aquecida a 60°C por 4 horas. Então, 2 mL de HCl 6N foram adicionados, e a mistura de reação foi agitada a 60°C por duas horas. A mistura de reação foi concentrada e o resíduo foi extraído 3 vezes com acetato de etila. As camadas orgânicas foram lavadas com sal-moura, secas sobre MgSO4 e concentradas para resultar em um óleo. O resíduo foi purificado em uma coluna de sílica-gel usando um gradi-ente de hexanos a acetato de etila para resultar nos 100 mg (48% de rendimento) do composto do título. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 1,9 (m, 1H), 2,2 (m, 1H) 3,5 (q, 2H), 4,5-4,6 (m, 1H), 4,6-4,7 (m, 2H), 4,7-4,8 (m, 2H), 8,7 (dd, 1H), 10,2 (s, 1H). MS (ES) MH+: 313 para C13H10F2N2O5. Intermediário 74 6-((2R,6R)-2,6-Dimetilmorfolino)-7-flúor-3-((S)-4-(2-hidroxietil)-2- oxoxazolidin-3-il)benzo[d]isoxazol-5-carbaldeído

[000394] Uma solução de Intermediário 73 (100 mg, 0,32 mmol), diisopropiletilamina (225 μL, 1,29 mmol) e (2R,6R)-2,6-dimetilmorfolina (44 μl, 0,35 mmol) em 5 mL de acetonitrila foi aquecida at 80°C por 18 horas. A mistura de reação foi diluída com água e extraída 3 vezes com acetato de etila. As camadas orgânicas foram lavadas duas vezes com salmoura, secas sobre MgSO4 e concentradas para resultar em um óleo. O resíduo foi purificado em uma coluna de sílica-gel usando um gradiente de hexanos a acetato de etila para render o composto do título (60 mg, 0,147 mmol, 46,0% de rendimento). 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ: 1,3-1,4 (m, 6H), 1,9-2,1 (m, 1H), 2,3-2,5 (m, 1H), 3,0 (ddd, 2H), 3,4 (dt, 2H), 3,7-3,9 (m, 2H), 4,2-4,3 (m, 2H), 4,5-4,5 (m, 1H), 4,7-4,9 (m, 2H), 8,7 (d, 1H), 10,4 (s, 1H). MS (ES) MH+: 408 para C19H22FN3O6. Intermediário 75 (S)-5-((terc-Butildifenilsililóxi)metil)-3-(7-cloro-6-((2R,6R)-2,6- dimetilmorfolino)-5-(1,3-dioxolan-2-il)benzo[d]isoxazol-3-il)oxazolidin-2- ona

[000395] Intermediário 75 foi preparado a partir dos Intermediários 41 e 52 usando o método descrito para a síntese de Intermediário 32. MS (ES) MH+: 693 para C36H42ClN3O7Si. Intermediário 76 (S)-3-(7-Cloro-6-((2R,6R)-2,6-dimetilmorfolino)-5-(1,3-dioxolan-2- il)benzo[d]isoxazol-3-il)-5-(hidroximetil)oxazolidin-2-ona

[000396] Intermediário 76 foi preparado a partir do Intermediário 75 usando o método descrito para a síntese de Intermediário 43. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 1,1 (br. s, 3H) 1,3 (br. s, 3H) 2,7-2,9 (m, 1H) 3,0-3,2 (m, 2H) 3,6-3,8 (m, 3H) 3,9-4,2 (m, 8H) 4,8-5,0 (m, 1H) 5,3 (t, 1H) 6,2 (s, 1H) 8,6 (s, 1H). MS (ES) MH+: 454 para C20H24ClN3O7. Intermediário 77 (S)-3-(7-Cloro-6-((2R,6M-2,6-dimetilmorfolino)-5-(1,3-dioxolan-2- il)benzo[d]isoxazol-3-il)-5-(fluorometil)oxazolidin-2-ona

[000397] Intermediário 77 foi preparado a partir do Intermediário 76 usando um método semelhante àquele descrito para a síntese de In-termediário 70. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 1,1 (br s, 3H) 1,3 (br s, 3H) 2,65-2,9 (m, 1H) 2,9-3,2 (m, 2H) 3,5-3,7 (m, 1H) 3,8-4,2 (m, 7H) 4,2-4,35 (m, 1H) 4,6-4,9 (m, 2H) 5,05-5,3 (m, 1H) 6,2 (s, 1H) 8,6 (s, 1H). MS (ES) MH+: 456 para C20H23ClFN3O6. Intermediário 78 (S)-4-(3-(terc-Butildifenilsililóxi)propil)-3-(7-cloro-6-((2R,6R)-2,6- dimetilmorfolino)-5-(1,3-dioxolan-2-il)benzo[d]isoxazol-3-il)oxazolidin-2-ona

[000398] Intermediário 78 foi preparado a partir do Intermediário 67 e Intermediário 52 usando um método semelhante àquele descrito para a síntese de Intermediário 42. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 0,9 (s, 9H) 1,1 (br. s., 3H) 1,3 (br. s., 3H) 1,4-1,65 (m, 2H) 1,85-2,0 (m, 2H) 2,7-3,1 (m, 3H) 3,5-3,7 (m, 3H) 3,95-4,2 (m, 6H) 4,3-4,4 (m, 1H) 4,6- 4,8 (m, 2H) 6,2 (s, 1H) 7,3-7,5 (m, 6H) 7,5-7,6 (m, 4H) 8,4 (s, 1H). MS (ES) MH+: 720 para C38H46IN3O7Si. Intermediário 79 (S)-3-(7-cloro-6-((2R,6R)-2,6-dimetilmorfolino)-5-(1,3-dioxolan-2- il)benzo[d]isoxazol-3-il)-4-(3-hidroxipropil)oxazolidin-2-ona

[000399] Intermediário 79 foi preparado a partir do Intermediário 78 usando o método descrito para a síntese de Intermediário 43. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 1,1 (br. s, 3H) 1,25-1,5 (m, 5H) 1,7-2,0 (m, 2H) 2,7-2,9 (m, 1H) 3,0-3,2 (m, 2H) 3,3-3,45 (m, 2H) 3,5-3,7 (m, 1H) 3,94,15 (m, 6H) 4,3-4,5 (m, 2H) 4,6-4,8 (m, 2H) 6,2 (s, 1H) 8,4 (s, 1H). MS (ES) MH+: 482 para C22H28ClN3O7. Intermediário 80 (S)-3-(7-cloro-6-((2R,6R)-2,6-dimetilmorfolino)-5-(1,3-dioxolan-2- il)benzo[d]isoxazol-3-il)-4-(3-fluoropropil)oxazolidin-2-ona

[000400] Intermediário 80 foi preparado a partir do Intermediário 79 usando o método descrito para a síntese de Intermediário 70. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 1,1 (br. s, 3H) 1,3 (br. s, 3H) 1,5-2,0 (m, 4H) 2,7-2,9 (m, 1H) 3,0-3,1 (m, 2H) 3,5-3,7 (m, 1H) 3,9-4,15 (m, 6H) 4,34,6 (m, 3H) 4,65-4,8 (m, 2H) 6,2 (s, 1H) 8,4 (s, 1H). MS (ES) MH+: 484 para C22H27ClFN3O6. Intermediário 81 (S)-3-(6-((2R,6R)-2,6-Dimetilmorfolino)-5-(1,3-dioxolan-2-il)-7- fluorobenzo[d]isoxazol-3-il)-5-(metoximetil)oxazolidin-2-ona

[000401] Intermediário 81 foi preparado a partir do Intermediário 11 e (S)-5-(metoximetil)oxazolidin-2-ona (adquirida de Daisco Co., LTD) usando o método descrito para o Intermediário 12. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 1,2 (d, 6H), 2,9 (dd, 2H), 3,2-3,3 (m, 2H), 3,3 (s, 3H), 3,6-4,3 (m, 9H), 4,9-5,2 (m, 1H), 6,2 (s, 1H), 8,4 (s, 1H). MS (ES) MH+: 452 para C21H26FN3O7. Intermediário 82 (R)-3-(6-((2R,6R)-2,6-Dimetilmorfolino)-5-(1,3-dioxolan-2-il)-7- fluorobenzo[d]isoxazol-3-il)-5-(metoximetil)oxazolidin-2-ona

[000402] Intermediário 82 foi preparado a partir de (R)-5- (metoximetil)oxazolidin-2-ona (adquirida de Daisco Co., LTD) e Inter-mediário 11 usando o método descrito para a síntese de Intermediário 12. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 1,2 (d, 6H) 2,9 (dd, 4,8 Hz, 2H) 3,1-3,3 (m, 2H) 3,3 (s, 3H) 3,6-4,3 (m, 9H) 4,9-5,1 (m, 1H) 6,2 (s, 1H) 8,4 (s, 1H). MS (ES) MH+: 452 para C21H26FN3O7. Intermediário 83 (5R)-5-(Hidroximetil)-1,3-oxazolidin-2-ona

[000403] A uma solução agitada de 3-amino-1,2-propanodiol (5,07 g, 55,7 mmols) em água (60 mL), bicarbonato de sódio (20,70 g, 195,3 mmols) seguido de trifosgênio (4,70 g, 15,8 mmols) em porções e a mistura foi agitada à temperatura ambiente por 16 horas. A mistura de reação foi neutralizada com ácido clorídrico 1,5N cuidadosamente e a água foi removida sob vácuo e o resíduo foi dissolvido em etanol (250 mL) e filtrada através de celite. O resíduo foi lavado com etanol (250 mL) e os solventes dos filtrados foram removidos sob vácuo. O sólido assim obtido foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel usando um gradiente de metanol em acetato de etila. Rendimento: 3,30 (51%) 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 3,18-3,30 (m, 1H), 3,453,56 (m, 3H), 4,47-4,55 (m, 1H), 4,05 (t, 1H), 7,39 (s, 1H). Intermediário 84 (5R)-5-[(Tetra-hidro-2H-piran-2-ilóxi)metil]-1,3-oxazolidin-2-ona

[000404] A uma solução agitada de Intermediário 83 (5,0 g, 42,7 mmols) em diclorometano (50 mL), p-toluenossulfonato de piridínio (1,07 g, 4,27 mmols) e 3,4-di-hidropiran (5,84 mL, 64,1 mmols) foram adicionados e a mistura foi agitada à temperatura ambiente por 16 ho-ras. A mistura de reação foi extinta com solução de salmoura (25 mL) e extraída com diclorometano (3x25 mL). As camadas orgânicas com-binadas foram secas sobre sulfato de sódio e os solventes foram re-movidos sob vácuo. O produto bruto obtido foi purificado por cromato- grafia flash em coluna de sílica-gel usando acetato de etila 50% em hexano. Rendimento: 5,0 g (58%) 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6): δ 1,45-1,49 (m, 4H), 1,57-1,73 (m, 2H), 3,12-3,28 (m, 1H), 3,45-3,55 (m, 3H), 3,67-3,75 (m, 2H), 4,62-4,63 (m, 1H), 4,70-4,72 (m, 1H), 7,50 (s, 1H). MS (ELSD) MH+: 202,2 para C9H15FNO4. Intermediário 85 (5R)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-Dimetilmorfolin-4-il]-5-(1,3-dioxolan-2-il)-7-flúor- 1,2-benzoxazol-3-il}-5-[(tetra-hidro-2H-piran-2-ilóxi)metil]-1,3- oxazolidin-2-ona

[000405] A uma solução agitada de hidreto de sódio (0,61 g, 25,5 mmols) em dimetil formamida (10 mL), uma solução de Intermediário 84 (2,57 g, 12,7 mmols) em dimetil formamida (20 mL) foi adicionada lentamente a 0°C ao longo de um período de 10 minutos. A mistura foi agitada à temperatura ambiente por 30 minutos e uma solução de In-termediário 11 (4,55 g, 12,7 mmols) em dimetil formamida (20 mL) foi adicionada à mesma temperatura e a mistura foi aquecida a 60°C por duas horas. A reação foi extinta com solução saturada de cloreto de amônio (10 mL), extraída com acetato de etila (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre sulfato de sódio anidro e os solventes foram removidos sob vácuo. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel usando um gradiente de acetato de etila em hexano. Rendimento: 2,0 g (30%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,16 (d, 6H), 1,39-1,48 (m, 5H), 2,85-2,90 (m, 2H), 3,18-3,21 (m, 4H), 3,58-3,83 (m, 2H), 3,93-3,99 (m, 2H), 4,04-4,07 (m, 5H), 4,46-4,58 (m, 2H), 4,67-4,76 (m, 2H), 6,15 (s, 1H), 8,25 (d, 1H). MS (ES) MH+: 522,2 para C25H32FN3O8. Intermediário 86 (5R)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-dimetilmorfolin-4-il1-5-(1,3-dioxolan-2-il)-7-flúor- 1,2-benzoxazol-3-il}-5-(hidroximetil)-1,3-oxazolidin-2-ona

[000406] A uma solução agitada de Intermediário 85 (2,6 g, 4,99 mmols) em tolueno (20 mL), etileno glicol (2,0 mL) seguido de p- tolueno sulfonato de piridínio (0,23 g, 0,99 mmol) e a mistura foi aque-cida a 110°C por 1,5 horas. A mistura de reação foi extinta com solução saturada de bicarbonato de sódio (10 mL) e extraída com acetato de etila (3x25 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura, secas sobre sulfato de sódio e os solventes foram removidos sob vácuo. O produto bruto foi purificado por cromatografia flash em coluna de sílica-gel usando acetato de etila 30% em hexano. Rendimento: 1,40 g (66%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,20 (d, 6H), 2,88-2,92 (m, 2H), 3,21-3,23 (m, 2H), 3,61-3,65 (m, 1H), 3,72-3,77 (m, 1H), 3,93-4,01 (m, 3H), 4,04-4,10 (m, 4H), 4,19 (t, 1H), 4,88-4,92 (m, 1H), 5,30 (t, 1H), 6,18 (s, 1H), 8,45 (s, 1H). MS (ES) MH+: 438,4 para C20H24FN3O7. Intermediário 87(5R)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-Dimetilmorfolin-4-il]-5-(1,3-dioxolan-2-il)-7-flúor- 1,2-benzoxazol-3-il}-5-(fluorometil)-1,3-oxazolidin-2-ona

[000407] A uma solução agitada de Intermediário 86 (0,10 g, 0,21 mmol) em tetra-hidrofurano (3 mL), trifluoreto de dietilaminoenxofre (0,17 g, 1,06 mmol) foi adicionado a -78°C e a mistura foi agitada à mesma temperatura por mais uma hora e então ela foi agitada à tem-peratura ambiente por duas horas. Metanol (1 mL) foi adicionado à mistura de reação e os voláteis foram removidos sob vácuo. O resíduo foi dissolvido em acetato de etila (15 mL) e lavado com bicarbonato de sódio saturado (5 mL), água (10 mL) e finalmente com solução de salmoura. A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio e o sol-vente foi removido sob vácuo. O sólido obtido foi suficientemente puro e ele foi levado à próxima etapa sem purificação adicional. Rendimen-to: 0,05 g (55%). MS (ES) MH+: 440,4 para C20H23F2N3O6 Intermediário 88 (4S)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-dimetilmorfolin-4-il]-5-(1,3-dioxolan-2-il)-7-flúor- 1,2-benzoxazol-3-il}-4-etenil-1,3-oxazolidin-2-ona

[000408] A uma suspensão agitada de hidreto de sódio (0,71 g, 17,6 mmols) em dimetil formamida (10 mL), uma solução de (4S)-4-etenil- 1,3-oxazolidin-2-ona (preparada de acordo com o procedimento da lite-raturaChem. Eur. J. 2006, 12, 6607-6620, 2,0 g, e 17,6 mmols) em dimetilformamida (10 mL) foi adicionada lentamente a 0°C ao longo de um período de 10 minutos. A mistura foi agitada à temperatura ambi-ente por 30 minutos e uma solução de Intermediário 11 (3,1 g, 8,84 mmols) em dimetilformamida (10 mL) foi adicionada à mesma tempe-ratura. Essa mistura foi aquecida a 80°C por 12 horas e vertida em água gelada e extraída com acetato de etila (3x25 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre sulfato de sódio anidro e os solventes foram removidos sob vácuo. O produto bruto foi purificado por croma- tografia em coluna de sílica-gel usando um gradiente de acetato de etila em éter pet.. Rendimento: 0,70 g (19%). MS (ES) MH+: 434,3 para C21H24FN3O6. Intermediário 89 (5R)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-dimetilmorfolin-4-il]-5-(1,3-dioxolan-2-il)-7-flúor- 1,2-benzoxazol-3-il}-5-[(E)-(hidroxiimino)metil]-1,3-oxazolidin-2-ona

[000409] A uma solução de dimetil sufóxido (0,22 g, 2,74 mmols), em diclorometano (3 mL), cloreto de oxalila (0,18 g, 1,37 mmol) foi adicio-nado a -80°C sob atmosfera de nitrogênio e a mistura foi agitada a essa temperatura por 30 minutos. A esta, uma solução de Intermediário 86 (0,4 g, 0,92 mmol) em diclorometano (3 mL) foi adicionada gota a gota à mesma temperatura e a mistura de reação foi agitada a essa temperatura por 3 horas antes de adicionar trietilamina (0,46 g, 4,50 mmols) à mesma temperatura. Então ela foi trazida a 0°C, onde ela foi agitada por 1,5 horas e água foi adicionada a ela (5 mL) e diluída com diclorometano (5 mL). As camadas orgânicas foram extraídas e secas sobre sulfato de sódio e o solvente foi removido sob vácuo à tempera-tura ambiente. O material bruto (0,36 g) foi dissolvido em etanol abso-luto (10 mL) e cloridrato de hidroxilamina (0,9 g, 1,20 mmol) foi adicio-nado seguido de acetato de sódio (0,08 g, 1,20 mmol) e a mistura foi refluxada por 3 horas. Voláteis foram removidos e o resíduo foi vertido em água e filtrado e os precipitados foram lavados com água (25 mL) e secos. O produto bruto foi purificado por cromatografia flash em coluna de sílica-gel usando um gradiente de acetato de etila em éter pet.. O composto foi obtidos como uma mistura indefinida de isômeros E & Z (razão de 1:2 por 1H RMN).

[000410] Rendimento: 0,13 g (35%) 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,24 (br s, 6H), 2,89-2,93 (m, 2H), 3,21-3,24 (m, 2H), 3,95-4,00 (m, 2H), 4,02-4,11 (m, 4H), 4,20 (t, 1H), 4,34 & 4,44 (t, 1H), 5,43 & 5,82 (quin, 1H), 6,18 (s, 1H), 7,21 & 7,65 (d, 1H), 8,41-8,42 (m, 1H), 11,58 & 11,78 (s, 1H). MS (ES) MH+: 451,4 para C20H23FN4O7. Intermediário 90(4R)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-dimetilmorfolin-4-il]-5-(1,3-dioxolan-2-il)-7-flúor- 1,2-benzoxazol-3-il}-2-oxo-1,3-oxazolidina-4-carbaldeído

[000411] A uma solução de Intermediário 88 (0,4 g, 0,92 mmol) em tetra-hidrofurano (4 mL) e água (4 mL), morfolina-N-óxido de N-metila (0,22 g, 1,84 mmol) e 2% em peso de tetróxido de ósmio em solução em t-butanol (0,02 g, 0,05 mmol) foram adicionados e a mistura foi agi-tadaà temperatura ambiente por 3 horas. A essa solução, iodosodia- cetato de benzeno (0,75 g, 2,3 mmols) foi adicionado e ela foi agitada por 16 horas. A massa de reação foi extraída com acetato de etila (3x20 mL), as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (15 mL), secas sobre sulfato de sódio e os solventes foram re-movidos sob vácuo. O sólido foi levado à próxima etapa sem purifica-ção adicional. Rendimento: 0,40 g (bruta). 1H RMN (400 MHz, DMSO- d6) δ: 1,24 (d, 6H), 2,89-2,96 (m, 2H), 3,31-3,50 (m, 2H), 4,02-4,17 (m, 8H), 4,56-4,74 (m, 1H), 6,32 (s, 1H), 8,52 (s, 1H), 9,90 (s, 1H). MS (ES) MH+: 451,4 para C20H22FN3O7. Intermediário 91 (4S)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-dimetilmorfolin-4-ill-5-(1,3-dioxolan-2-il)-7-flúor- 1,2-benzoxazol-3-il}-4-[(E)-(hidroxiimino)metil]-1,3-oxazolidin-2-ona

[000412] A uma solução de Intermediário 90 (0,4 g, 0,92 mmol) em piridina (5 mL) e metanol (5 mL), cloridrato de hidroxilamina (0,08 g, 1,1 mmol) foi adicionado e a mistura foi aquecida a 95°C por 30 minutos. Os voláteis foram removidos sob vácuo e o produto bruto foi dissolvido em acetato de etila (30 mL), lavado com água (2x15 mL) e salmoura (15 mL) e seco sobre sulfato de sódio. Remoção de solvente sob vácuo rendeu o composto do título como uma mistura 40:60 de isômeros E/Z, a qual foi purificada adicionalmente por lavagem com hexano (25 mL). Rendimento: 0,37 g (90%) 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,24 (d, 6H), 2,89-2,91 (m, 2H), 3,19-3,22 (m, 2H), 3,96- 4,07 (m, 6H), 4,31 & 4,52 (dd, 1H), 4,75 & 4,87 (t, 1H), 5,25-5,29 & 5,51-5,61 (m, 1H), 6,16 & 6,17 (s, 1H), 7,12 & 7,53 (d, 1H), 8,27 & 8,37 (s, 1H), 11,24 & 11,55 (s, 1H). MS (ES) MH+: 451,4 para C20H23FN4O7. Intermediário 92 (4S)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-Dimetilmorfolin-4-il]-5-(1,3-dioxolan-2-il)-7-flúor- 1,2-benzoxazol-3-il}-2-oxo-1,3-oxazolidina-4-carbonitrila

[000413] Uma solução de Intermediário 91 (0,18 g, 0,4 mmol) em tri- cloroacetonitrila (10 mL) foi aquecida a 95°C por u ma hora. Os voláteis foram evaporados e o produto bruto foi recristalizado usando acetato de etila e hexano. Rendimento: 0,09 g (53%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,21 (d, 6H), 2,87-2,93 (m, 2H), 3,23 (d, 2H), 3,94-4,04 (m, 6H), 4,85 (d, 2H), 5,64 (dd, 1H), 6,17 (s, 1H), 8,32 (s, 1H). MS (ES) MH+: 436,4 para C20H23FN4O7. Intermediário 93 (4S)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-Dimetilmorfolin-4-il]-5-(1,3-dioxolan-2-il)-7-flúor- 1,2-benzoxazol-3-il}-4-[(E)-(metoxiimino)metil]-1,3-oxazolidin-2-ona

[000414] Intermediário 93 foi preparado a partir do Intermediário 90 e cloridrato de O-metil hidroxilamina usando o método descrito para a síntese de Intermediário 91. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,24 (d, 6H), 2,89-2,91 (m, 2H), 3,19-3,22 (m, 2H), 3,32 & 3,72 (s, 3H), 3,964,09 (m, 6H), 4,31 & 4,52 (dd, 1H), 4,75 & 4,87 (t, 1H), 5,25-5,29 & 5,51-5,61 (m, 1H), 6,17 (s, 1H), 7,25 & 7,66 (d, 1H), 8,27 & 8,36 (s, 1H). MS (ES) MH+: 465,4 para C21H25FN4O7. Intermediário 94 (5R)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-Dimetilmorfolin-4-il]-5-(1,3-dioxolan-2-il)-7-flúor- 1,2-benzoxazol-3-il}-5-[(E)-(metoxiimino)metil]-1,3-oxazolidin-2-ona

[000415] Intermediário 94 foi preparado a partir do Intermediário 85 e cloridrato de O-metil hidroxilamina usando o método descrito para a síntese de Intermediário 86. O composto foi obtido como uma mistura indefinida de isômeros E & Z (1:2,3). Rendimento: 0,13 (30%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,24 (d, 6H), 2,86-2,91 (m, 2H), 3,19-3,25 (m, 2H), 3,76 & 3,83 (s, 3H), 3,91-3,99 (m, 2H), 4,00-4,07 (m, 4H), 4,144,19 (m, 1H), 4,32-4,44 (m, 1H), 5,25-5,39-5,46 & 5,75-5,76 (m, 1H), 6,16 (s, 1H), 7,31 & 7,75 (d, 1H), 8,40 (s, 1H). MS (ES) MH+: 465,3 para C21H25F N4O7. Intermediário 95 4-metilbenzenossulfonato de [(5R)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-dimetilmorfolin-4- il]-5-(1,3-dioxolan-2-il)-7-flúor-1,2-benzoxazol-3-il]-2-oxo-1,3- oxazolidin-5-il}metil

[000416] A uma solução agitada de Intermediário 86 (2,7 g, 6,10 mmols) em diclorometano (50 mL), 4-dimetilaminopiridina (1,50 g, 12,3 mmols) foi adicionada a 0°C seguida de cloreto de p-tolueno sulfonila (1,76 g, 9,20 mmols). A solução resultante foi trazida à temperatura ambiente após agitação à mesma temperatura por uma hora, onde ela foi agitada por um período adicional de uma hora. A mistura de reação foi lavada com solução de ácido cítrico (25 mL), água (25 mL), solução saturada de bicarbonato de sódio (25 mL) e novamente com água (2x25 mL). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio e os solventes foram removidos sob vácuo para obter o produto bruto, o qual foi purificado por cromatografia flash em coluna de sílica-gel usando um gradiente de acetato de etila em hexano. Rendimento: 3,2 g (88%) 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,20 (d, 6H), 2,39 (s, 3H), 2,88-2,92 (m, 2H), 3,19-3,22 (m, 2H), 3,78 (dd, 1H), 3,94-3,99 (m, 2H), 4,04-4,10 (m, 4H), 4,19 (t, 1H), 4,41 (d, 2H), 5,05-5,07 (m, 1H), 6,16 (s, 1H), 7,45 (d, 2H), 7,77 (d, 2H), 8,38 (s, 1H). MS (ES) MH+: 592,4 para C27H30FN3O9S. Intermediário 96 (5R)-5-(Azidometil)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-dimetilmorfolin-4-il]-5-(1,3- dioxolan-2-il)-7-flúor-1,2-benzoxazol-3-il}-1,3-oxazolidin-2-ona

[000417] A uma solução agitada de Intermediário 95 (3,20 g, 5,40 mmols) em dimetilformamida (30 mL) em um tubo vedado, azida de sódio (1,0 g, 16,20 mmols) foi adicionada e a mistura foi aquecida a 90°C por 3 horas. A reação foi extinta com água (15 mL) após ser tra-zida à temperatura ambiente e extraída com acetato de etila (2x15 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (2x10 mL) e solução de salmoura (10 mL), secas sobre sulfato de sódio e o solvente foi removido sob vácuo, rendendo o composto do título bruto, o qual foi purificado adicionalmente por cromatografia flash em coluna usando um gradiente de acetato de etila em éter pet. para obter o produto puro como líquido viscoso incolor. Rendimento: 2,1 g (51%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,24 (d, 6H), 2,90 (dd, 2H), 3,22 (d, 2H), 3,82 (d, 2H), 3,88 (dd, 1H), 3,95-4,00 (m, 2H), 4,02-4,10 (m, 4H), 4,25 (t, 1H), 5,08-5,11 (m, 1H), 6,18 (s, 1H), 8,44 (s, 1H). MS (ES) MH+: 463,4 para C20H23FN6O6. Intermediário 97 (4R)-2-oxo-1,3-oxazolidina-4-carboxilato de metila

[000418] A uma suspensão de metil éster cloridrato de D-serina (25,0 g, 160,7 mmols) em tetra-hidrofurano (150 mL), uma solução de trifos- gênio (47,68 g, 160,7 mmols) em tetra-hidrofurano (100 mL) foi adicio-nada a 0°C e a mistura foi agitada a 80°C por duas horas. Os voláteis foram evaporados sob vácuo e o resíduo foi submetido a cromatogra- fia flash em coluna de sílica-gel usando metanol 5% em clorofórmio. Rendimento: 17,5 g (75%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 3,69 (s, 3H), 4,32-4,33 (m, 1H), 4,32-4,33 (m, 2H), 8,22 (s, 1H). Intermediário 98 (4S)-4-(Hidroximetil)-1,3-oxazolidin-2-ona

[000419] A uma solução agitada de Intermediário 97 (15,0 g, 103,4 mmols) em etanol (100 mL), borohidreto de sódio (1,96 g, 51,7 mmols) foi adicionado em porções a 0°C e a mistura foi agi tada à temperatura ambiente por 30 minutos. A essa mistura, 1,5 N ácido clorídrico foi adi-cionado e os voláteis foram removidos sob vácuo. Metanol (50 mL) foi adicionado ao resíduo, filtrado através de celite e os solventes foram removidos sob vácuo. O composto do título foi obtido como um óleo incolor, o qual foi usado na etapa seguinte sem purificação. Dados de HPLC quiral mostraram uma mistura de enantiômeros 91,3:8,7 [Coluna: Chiralpak AD-H (250x4,6) mm 5 μm; Fase Móvel: Hexano:Etanol (85:15)]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 3,34-3,35 (m, 2H), 3,70-3,72 (m, 1H), 4,04 (dd, 1H), 2,96 (t, 1H), 4,96 (t, 1H), 7,59 (s, 1H). Intermediário 99 4-metilbenzenossulfonato de [(4R)-2-oxo-1,3-oxazolidin-4-il]metila

[000420] A uma solução agitada de Intermediário 98 (11,0 g, 94,0 mmols) em diclorometano (250 mL), 4-dimetilamino piridina (22,94 g, 188,0 mmols) e sulfonilcloreto de p-tolueno (26,88 g, 141,0 mmols) fo-ram adicionados a 0°C e ela foi agitada por uma hora antes de trazê-la à temperatura ambiente, e a reação foi agitada por uma hora. A mistura de reação foi lavada com ácido clorídrico 1,5N (50 mL), água (50 mL), bicarbonato de sódio saturado (50 mL) e finalmente com salmoura. A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio e o solvente foi removido sob vácuo. O produto bruto foi então purificado por cromato- grafia flash em coluna em sílica-gel usando um gradiente de acetato de etila em éter pet.. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 2,49 (s, 3H), 3,91-3,95 (m, 2H), 3,99-4,02 (m, 2H), 4,30 (t, 1H), 7,49 (d, 2H), 7,80 (d, 2H), 7,88 (s, 1H). Rendimento: 12,0 g (47%). Intermediário 100 (R)-4-((Metiltio)metil)oxazolidin-2-ona

[000421] A uma solução agitada Intermediário 99 (4,00 g, 14,76 mmols) em metanol (30 mL) em um tubo vedado, tiometóxido de sódio (3,12 g, 44,28 mmols) foi adicionada e a mistura foi agitada à temperatura ambiente por duas horas. Os voláteis foram removidos sob vácuo e o resíduo foi dissolvido em diclorometano (50 mL) e a camada orgânica foi lavada com água (2x25 mL), salmoura (25 mL) e seca sobre sulfato de sódio. Remoção do solvente rendeu o composto do título. Rendimento: 0,82 g (38%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 2,08 (s, 3H), 2,59 (d, 2H), 3,93-4,03 (m, 2H), 4,37 (t, 1H), 7,78 (s, 1H). Intermediário 101 (R)-3-(6-((2R,6R)-2,6-dimetilmorfolino)-5-(1,3-dioxolan-2-il)-7- fluorobenzo[d]isoxazol-3-il)-4-((metiltio)metil)oxazolidin-2-ona

[000422] A uma suspensão agitada de hidreto de sódio (0,22 g, 5,5 mmols) em dimetil formamida (5 mL), uma solução de Intermediário 100 (0,82 g, e 5,5 mmols) em dimetilformamida (10 mL) foi adicionada lentamente a 0°C ao longo de um período de 10 minutos. A mistura foi agitada à temperatura ambiente por 10 minutos e uma solução de In-termediário 11 (1,96 g, 5,50 mmols) em dimetilformamida (10 mL) foi adicionada à mesma temperatura. Essa mistura foi aquecida a 80°C por duas horas e vertida em solução saturada de cloreto de amônio gelada (20 mL) e extraída com acetato de etila (3x20 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre sulfato de sódio anidro e os solventes foram removidos sob vácuo. O produto bruto foi purificado por croma- tografia em coluna de sílica-gel usando um gradiente de acetato de etila em éter pet.. Rendimento: 0,70 g (27%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 1,22 (br s, 6H), 2,04 (s, 3H), 2,86-2,91 (m, 2H), 3,02-3,04 (m, 2H), 3,19-3,22 (m, 2H), 3,96-4,07 (m, 6H), 4,42 (dd, 1H), 4,73 (t, 1H), 4,84-4,86 (m, 1H), 6,16 (s, 1H), 8,28 (s, 1H). MS (ES) MH+: 468,2 para C21H26FN3O6S. Intermediário 102 (R)-3-(6-((2R,6R)-2,6-dimetilmorfolino)-5-(1,3-dioxolan-2-il)-7- fluorobenzo[d]isoxazol-3-il)-4-((metilsulfonil)metil)oxazolidin-2-ona

[000423] A uma solução agitada de Intermediário 101 (0,20 g, 0,42 mmol) em tetra-hidrofurano (5 mL), ácido m-cloroperbenzoico (0,37 g, 2,14 mmols) foi adicionado e a mistura foi agitada à temperatura ambi-ente por duas horas. Água (2 mL) foi adicionada à mistura de reação e extraída com acetato de etila (3x5 mL). As camadas orgânicas combi-nadas foram lavadas com água (2x5 mL), salmoura (5 mL) e secas sobre sulfato de sódio. Remoção do solvente sob vácuo rendeu o composto do título como um sólido amarelo pálido. Rendimento: 0,20 g (94%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 1,22 (br s, 6H), 2,88-2,92 (m, 2H), 3,10 (s, 3H), 3,20-3,23 (m, 2H), 3,77-3,83 (m, 1H), 3,88-3,93 (m, 1H), 3,96-4,00 (m, 2H), 4,02-4,10 (m, 4H), 4,68 (dd, 1H), 4,81 (t, 1H), 5,10-5,14 (m, 1H), 6,17 (s, 1H), 8,27 (s, 1H). MS (ES) MH+: 500,3 para C21H26FN3O8S. Intermediário 103 N-(terc-butoxicarbonil)-O-(tetra-hidro-2H-piran-2-il)-L-serinato de metila

[000424] A uma solução agitada de N-(terc-butoxicarbonil)-L-serinato de metila (preparada de acordo com o procedimento relatado: Bioorg. Med. Chem. 2007, 15, 2860-2867, 10,0 g, 64,27 mmols) em diclorome- tano (100 mL), ácido p-toluenossulfônico (0,24 g, 1,28 mmol) e 3,4-di- hidro-1H-piran (8,8 mL, 96,67 mmols) foram adicionados e a mistura foi agitada à temperatura ambiente por 16 horas. A mistura de reação foi extinta com solução saturada de bicarbonato de sódio (50 mL) e extraída com diclorometano (3x50 mL). As camadas orgânicas combi-nadas foram lavadas com água (2x50 mL), solução de salmoura (50 mL) e secas sobre sulfato de sódio. Remoção de solvente sob vácuo e também alto vácuo para remover excesso de 3,4-di-hidro-1H-piran. O resíduo foi dissolvido em acetato de etila (10 mL) e éter pet. (100 mL) foi adicionado sobre ele e foi agitado por 10 minutos. O sólido obtido foi filtrado e lavado com éter pet. (50 mL). Rendimento: 12,0 g (78%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,33-1,34 (m, 1H), 1,39 (s, 9H), 1,41-1,68 (m, 6H), 3,41-3,45 (m, 1H), 3,55-3,59 (m, 1H), 3,61 (s, 3H), 3,81-3,84 (m, 1H), 4,23-4,28 (m, 1H), 4,58 (br s, 1H), 7,15 (d, 1H). Intermediário 104 [(R)-1-hidróxi-3-(tetra-hidro-2H-piran-2-ilóxi)propan-2-il]carbamato de terc-Butila

[000425] A uma solução agitada de Intermediário 103 (41,0 g, 135,0 mmols) em tetra-hidrofurano (250 mL) e metanol (125 mL), borohidreto de sódio (15,32 g, 405,0 mmols) foi adicionado em porções a 0°C e a mistura foi agitada à temperatura ambiente por 30 minutos. Os voláteis foram removidos em vácuo e o resíduo foi levado em acetato de etila (250 mL) e lavado com água (2x50 mL) e solução de salmoura (50 mL). As camadas orgânicas foram secas sobre sulfato de sódio e os solventes foram removidos sob vácuo. O produto bruto foi purificado por cromatografia flashem coluna usando sílica-gel (acetato de etila 40% em éter pet.). Rendimento: 35,5 g (96%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 1,41 (s, 9H), 1,44-1,70 (m, 7H), 3,34-3,41 (m, 3H), 3,47-3,69 (m, 2H), 3,70-3,75 (m, 1H), 4,53-4,61 (m, 2H), 6,46 (d, 1H). Intermediário 105 (4S)-4-[(Tetra-hidro-2H-piran-2-ilóxi)metil]-1,3-oxazolidin-2-ona

[000426] A uma solução agitada de Intermediário 104 (35,5 g, 129,0 mmols) em tetra-hidrofurano (250 mL), solução de t-butóxido de potás-sio 1M em tetra-hidrofurano (258,0 mL, 258,0 mmols) foi adicionada a 0°C e a mistura foi agitada à temperatura ambiente por 30 minutos. A mistura de reação foi extinta com água (50 mL) a 0°C e extraída com acetato de etila (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (50 mL), solução de salmoura (50 mL) e secas sobre sulfato de sódio e os solventes foram removidos sob vácuo. O produto bruto obtido foi purificado por cromatografia flashem coluna de sílica-gel usando um gradiente de acetato de etila em hexano. Rendimento: 22,0 g (85%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 1,38-1,51 (m, 4H), 1,59-1,62 (m, 1H), 1,73-1,75 (m, 1H), 3,35-3,37 (m, 1H), 3,45-3,47 (m, 1H), 3,56-3,59 (m, 1H), 3,72-3,77 (m, 1H), 3,93 (h, 1H), 4,05-4,08 (m, 1H), 4,35 (t, 1H), 4,60 (t, 1H), 7,75 (t, 1H). MS (ELSD) MH+: 202,2 para C9H16FNO4. Intermediário 106 (4S)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-dimetilmorfolin-4-il]-5-(1,3-dioxolan-2-il)-7-flúor- 1,2-benzoxazol-3-il}-4-[(tetra-hidro-2H-piran-2-ilóxi)metil]-1,3- oxazolidin-2-ona

[000427] A uma solução agitada de hidreto de sódio (1,41 g, 35,3 mmols) em dimetil formamida (10 mL), uma solução de Intermediário 105 (7,1 g, 35,3 mmols) em dimetil formamida (50 mL) foi adicionada lentamente a 0°C ao longo de um período de 10 minutos e a mistura foi agitada à temperatura ambiente por 30 minutos. Uma solução de Intermediário 11 (12,59 g, 35,3 mmols) em dimetil formamida (50 mL) foi adicionada à mesma temperatura e a mistura foi aquecida a 60°C por duas horas. A reação foi extinta com solução saturada de cloreto de amônio (10 mL), extraída com acetato de etila (3x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre sulfato de sódio anidro e os solventes foram removidos sob vácuo. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel usando metanol em clorofórmio a 3%. Rendimento: 4,3 g (23%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,18 (d, 6H), 1,30-1,58 (m, 5H), 2,85-2,90 (m, 2H), 3,18-3,21 (m, 4H), 3,58-3,83 (m, 2H), 3,93-3,99 (m, 2H), 4,04-4,07 (m, 5H), 4,46-4,58 (m, 2H), 4,67-4,76 (m, 2H), 6,15 (s, 1H), 8,25 (d, 1H). MS (ES) MH+: 522,2 para C25H32FN3O8. Intermediário 107 (4S)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-dimetilmorfolin-4-il]-5-(1,3-dioxolan-2-il)-7-flúor- 1,2-benzoxazol-3-il}-4-(hidroximetil)-1,3-oxazolidin-2-ona

[000428] A uma solução agitada de Intermediário 106 (3,2 g, 6,21 mmols) em tolueno (30 mL), etileno glicol (2,0 mL) seguido de p- tolueno sulfonato de piridínio (0,59 g, 23,6 mmols) e a mistura foi aquecida a 110°C por 1,5 horas. A mistura de reação foi extinta com solução saturada de bicarbonato de sódio (10 mL) e extraída com ace-tato de etila (3x25 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura, secas sobre sulfato de sódio e os solventes foram removidos sob vácuo. O produto bruto assim obtido foi purificado por croma- tografia flash em coluna de sílica-gel usando acetato de etila 30% em hexano. Dados de HPLC quiral mostram que foi 97% de [Coluna: Chi- ralpak IC (250x4,6 mm); Fase Móvel: hexano:etanol (80:20)]. Rendi-mento: 1,63 g (60%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,09 (d, 6H), 2,83 (t, 2H), 3,08 (d, 2H), 3,53-3,57 (m, 1H), 3,73-3,76 (m, 2H), 3,91-3,99 (m, 3H), 4,06-4,09 (m, 2H), 4,48 (dd, 1H), 4,63-4,65 (m, 2H), 5,19 (t, 1H), 6,11 (s, 1H), 8,32 (s, 1H). MS (ES) MH+: 438,4 para C20H24FN3O7. Intermediário 108 4-metilbenzenossulfonato de ((R)-3-(6-((2R,6R)-2,6-dimetilmorfolino)- 5-(1,3-dioxolan-2-il)-7-fluorobenzo[d]isoxazol-3-il)-2-oxoxazolidin-4- il)metila

[000429] A uma solução agitada de Intermediário 107 (4,5 g, 10,29 mmols) em diclorometano (100 mL), N,N-dimetilaminopiridina (2,51 g, 20,59 mmols, 20,59 mmols) e sulfonil cloreto de p-tolueno (2,94 g, 15,43 mmols) foram adicionados e a solução foi agitada a 0°C por uma hora antes de ser trazida à temperatura ambiente, onde ela foi agitada por mais uma hora. A mistura de reação foi lavada com ácido clorídrico 1,5 N (50 mL), água (2x50 mL) e solução saturada de bicarbonato de sódio (50 mL), seco sobre sulfato de sódio. Remoção de solvente sob vácuo rendeu sólido esbranquiçado, o qual foi purificado adicionalmen-te por cromatografia flash em coluna de sílica-gel usando um gradiente de acetato de etila em hexano. Rendimento: 5,0 g (82%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 1,21 (d, 6H), 2,16 (s, 3H), 2,86-2,92 (m, 2H), 3,08 (d, 2H), 3,95-4,10 (m, 6H), 4,35 (d, 1H), 4,44-4,47 (m, 1H), 4,55 (d, 1H), 4,67 (t, 1H), 4,78-4,83 (m, 1H), 6,19 (s, 1H), 7,1 (d, 2H), 7,54 (d, 2H), 8,29 (s, 1H). MS (ES) MH+: 592,6 para C27H30FN3O9S. Intermediário 109 (S)-4-(Azidometil)-3-(6-((2R,6R)-2,6-dimetilmorfolino)-5-(1,3-dioxolan- 2-il)-7-fluorobenzo[d]isoxazol-3-il)oxazolidin-2-ona

[000430] A uma solução agitada de Intermediário 108 (1,5 g, 2,53 mmols) em dimetilformamida (15 mL) em um tubo vedado, azida de sódio (0,99 g, 15,22 mmols) foi adicionada e a mistura foi aquecida a 90°C por duas horas. A reação foi extinta com água (15 mL) após ser trazida à temperatura ambiente e extraída com acetato de etila (2x30 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (2x10 mL) e solução de salmoura (10 mL), secas sobre sulfato de sódio e o solvente foi removido sob vácuo, rendendo o composto do título bruto, o qual foi purificado adicionalmente por cromatografia flash em coluna usando um gradiente de acetato de etila em éter pet. para obter o produto puro como líquido viscoso incolor. Rendimento: 0,85 g (73%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,20 (br s, 6H), 2,91-2,93 (m, 2H), 3,21-3,23 (m, 2H), 3,70 (d, 2H), 3,98-4,15 (m, 7H), 4,71 (t, 1H), 4,80-4,82 (m, 1H), 6,18 (s, 1H), 8,29 (s, 1H). MS (ES) MH+: 463,4 para C20H23FN6O6. Intermediário 110 N—[(benzilóxi)carbonil]-O-etil-L-serinato de metila

[000431] A uma solução agitada de aziridina-1,2-dicarboxilato de (S)- 1-benzil 2-metil (preparado de acordo com o procedimento da literatura: Org. Biomol. Chem., 2005, 3, 3357, 2,7 g, 11,4 mmols) em dicloro- metano (30 mL), eterato de trifluoreto de boro (0,01 mL, 0,11 mmol) foi adicionado a 0°C seguido de etanol absoluto (1,05 g, 22,9 mmols). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por uma hora, após a qual a solução foi extinta com solução de bicarbonato saturada (2 mL), extraída com diclorometano (3x25 mL), as camadas orgânicas foram lavadas com água (25 mL), solução de salmoura (25 mL) e secas sobre sulfato de sódio. A remoção de solventes rendeu o produto bruto, o qual foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel usando um gradiente de acetato de etila em éter pet.. Rendimento: 2,0 g (63%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,08 (t, 3H), 3,38-3,46 (m, 2H), 3,57-3,63 (m, 2H), 3,70 (s, 3H), 4,26-4,31 (m, 1H), 5,04 (s, 2H), 7,30-7,39 (m, 5H), 7,73 (d, 1H). Intermediário 111[(2R)-1-etóxi-3-hidroxipropan-2-il]carbamato de benzila

[000432] A uma solução agitada de Intermediário 110 (2,0 g, 7,10 mmols) em uma mistura 9:1 de tetra-hidrofurano e metanol (20 mL), borohidreto de sódio (0,54 g, 14,21 mmols) foi adicionado em porção a 0°C e a mistura foi agitada à temperatura ambiente por duas horas. A reação foi extinta com água (5 mL), vertida em água gelada (25 mL) e extraída com acetato de etila (3x20 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com água (20 mL), solução de salmoura (20 mL) e secas so- bre sulfato de sódio. Remoção de solvente rendeu o produto bruto, o qual foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel usando um gradiente de acetato de etila em éter pet.. Rendimento: 0,7 g (35%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,07 (t, 3H), 3,35-3,46 (m, 6H), 3,55-3,60 (m, 1H), 4,65 (t, 1H), 5,00 (s, 2H), 7,02 (d, 1H), 7,277,35 (m, 5H). Intermediário 112 (4S)-4-(Etoximetil)-1,3-oxazolidin-2-ona

[000433] A uma solução agitada de Intermediário 111 (1,20 g, 4,49 mmols) em tetra-hidrofurano (50 mL), solução de t-butóxido de potássio 1M em tetra-hidrofurano (9,0 mL, 8,98 mmols) foi adicionada a 0°C e a mistura foi agitada à temperatura ambiente por 30 minutos. A mistura de reação foi extinta com água (25 mL) a 0°C e extraída com acetato de etila (3x25 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (20 mL), solução de salmoura (20 mL) e secas sobre sulfato de sódio e os solventes foram removidos sob vácuo. O produto bruto obtido foi purificado por cromatografia flash em coluna de sílica- gel usando um gradiente de acetato de etila em éter pet.. Rendimento: 0,31 g (48%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,09 (t, 3H), 3,45 (q, 2H), 3,86 (quin, 1H), 3,99 (dd, 1H), 4,31 (t, 1H), 7,72 (br s, 1H). Nota: dois dos prótons CH2 do anel se misturaram com o pico de água de DMSO-d6 . Intermediário 113 (4S)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-Dimetilmorfolin-4-il]-5-(1,3-dioxolan-2-il)-7-flúor- 1,2-benzoxazol-3-il}-4-(etoximetil)-1,3-oxazolidin-2-ona

[000434] A uma solução agitada de hidreto de sódio (0,06 g, 2,19 mmols) em dimetil formamida (15 mL), uma solução de Intermediário 112 (0,32 g, 2,19 mmols) em dimetil formamida (15 mL) foi adicionada lentamente a 0°C ao longo de um período de 10 minutos e a mistura foi agitada à temperatura ambiente por uma hora. Uma solução de In-termediário 11 (0,60 g, 1,68 mmol) em dimetil formamida (15 mL) foi adicionada à mesma temperatura e a mistura foi aquecida a 90°C por 3 horas. A reação foi extinta com solução saturada de cloreto de amô- nio (10 mL) e extraída com acetato de etila (3x10 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre sulfato de sódio anidro e os solventes foram removidos sob vácuo. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel usando um gradiente de acetato de etila em éter pet. e o produto obtido como sólido incolor. Rendimento: 0,20 g (25%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,00 (t, 3H), 1,12 (br s, 6H), 2,89-2,91 (m, 2H), 3,19-3,26 (m, 2H), 3,37-3,46 (m, 2H), 3,58-3,61 (m, 1H), 3,83-3,88 (m, 1H), 3,93-4,09 (m, 6H), 4,43 (dd, 1H), 4,67-4,70 (m, 2H), 6,16 (s, 1H), 8,27 (s, 1H). MS (ES) MH+: 466,5 para C22H28FN3O7. Intermediário 114 N-[(benzilóxi)carbonil]-O-(2-metoxietil)-L-serinato de metila

[000435] Intermediário 114 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 110 usando aziridina-1,2- dicarboxilato de (S)-1-benzil 2-metil (2,0 g, 8,03 mmols) e 2-metóxi etanol (4,2 mL, 53,15 mmols). Rendimento: 2,0 g (80%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 3,16 (s, 3H), 3,38-3,41 (m, 2H), 3,42-3,52 (m, 2H), 3,55-3,65 (m, 4H), 4,26-4,29 (m, 1H), 4,47-4,48 (m, 1H), 5,03 (s, 2H), 7,21-7,34 (m, 5H), 7,71 (d, 1H). Intermediário 115 [(2R)-1-hidróxi-3-(2-metoxietóxi)propan-2-il]carbamato de benzila

[000436] Intermediário 115 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 111 usando Intermediário 114 (2,0 g, 6,43 mmols). Rendimento: 1,0 g (54%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 3,23 (s, 3H), 3,40-3,41 (m, 2H), 3,44-3,47 (m, 2H), 3,51-3,54 (m, 2H), 3,58-3,62 9m, 1H), 4,47 (d, 1H), 4,66 (t, 1H), 4,99 (s, 2H), 7,03 (d, 1H), 7,19-7,34 (m, 5H). Intermediário 116[(2R)-1-hidróxi-3-(2-metoxietóxi)propan-2-il]carbamato de benzila

[000437] Intermediário 116 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 112 usando Intermediário 115 (1,0 g, 3,50 mmols), exceto que o produto bruto foi levado à pró-xima etapa sem purificação. Rendimento: 0,32 g (bruto). Intermediário 117(4S)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-dimetilmorfolin-4-il]-5-(1,3-dioxolan-2-il)-7-flúor- 1,2-benzoxazol-3-il}-4-[(2-metoxietóxi)metil]-1,3-oxazolidin-2-ona

[000438] Intermediário 117 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 113 usando Intermediário 116 (0,32 g, 1,82 mmol) e Intermediário 11 (0,50 g, 1,40 mmol). Uma mistura do produto foi eluída de uma coluna de sílica-gel com metanol. A análise por UPLC mostrou que a fração continha 37% de produto, o qual foi levado à próxima etapa sem purificação adicional. Rendimento: 0,15 g (37% produto). MS (ES) MH+: 496,5 para C23H30FN3O8. Intermediário 118 5-(1,3-Dioxolan-2-il)-2,3,4-Trifluoro-M-hidróxi-N-[(2S)-1-hidroxibut-3- en-2-il]benzenocarboximidamida

[000439] Intermediário 118 foi preparado a partir do Intermediário 16 (2,0 g, 7,1 mmols) e (2S)-2-aminobut-3-en-1-ol (0,74 g, 8,54 mmols, preparado de acordo com o procedimento da literatura, Eur. J. Chem. 2006, 12, 6607-6620) usando um método semelhante àquele descrito para a síntese de Intermediário 71. Rendimento: 1,4 g (59%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 3,36-3,40 (m, 3H), 3,95-4,05 (m, 4H), 4,83-5,00 (m, 3H), 5,87-5,90 (m, 1H), 6,01 (s, 1H), 7,26 (t, 1H), 8,30 (s, 1H), 10,12 (s, 1H). MS (ES) MH+: 333,3 para C14H15F3N2O4. Intermediário 119 (2S)-2-{[5-(1,3-Dioxolan-2-il)-6,7-diflúor-1,2-benzoxazol-3-il]amino}but- 3-en-1-ol

[000440] Intermediário 119 foi preparado a partir do Intermediário 118 (1,4 g, 4,2 mmols) usando um método semelhante àquele descrito para a síntese de Intermediário 72. Rendimento: 0,75 g (57%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 3,56 (t, 2H), 4,01-4,14 (m, 5H), 4,92 (t, 1H), 5,17 (d, 1H), 5,29 (d, 1H), 5,90 (ddd, 1H), 6,09 (s, 1H), 7,34 (d, 1H), 8,07 (d, 1H). MS (ES) MH+: 313,3 para C14H14F2N2O4. Intermediário 120 (4S)-3-[5-(1,3-dioxolan-2-il)-6,7-diflúor-1,2-benzoxazol-3-il]-4-etenil-1,3- oxazolidin-2-ona

[000441] Intermediário 120 foi preparado a partir do Intermediário 119 (0,75, 2,4 mmols) usando um método semelhante àquele descrito para a síntese de Intermediário 73. Rendimento: 0,60 g (74%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 4,00-4,08 (m, 4H), 4,33 (dd, 1H), 4,79 (t, 1H), 5,17 (q, 1H), 5,32 (d, 1H), 5,40 (d, 1H), 5,93 (ddd, 1H), 6,10 (s, 1H), 8,23-8,25 (m, 1H). Rendimento: 0,60 g (74%). MS (ES) MH+: 339,2 para C15H12F 2N2O5. Intermediário 121 (R)-3-(5-(1,3-dioxolan-2-il)-6,7-diflúorbenzo[d]isoxazol-3-il)-4- (diflúormetil)oxazolidin-2-ona

[000442] A uma solução agitada de Intermediário 120 (0,50 g, 0,30 mmol) em uma mistura 2:1 de tetra-hidrofurano e água (20 mL), óxido de ósmio (IV) (0,2 mL, 2,5% solução em t-butanol) foi adicionado. A mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente por 10 minutos. A esta, metaperiodato de sódio (3,16 g, 14,75 mmols) foi adicionado em porções ao longo de um período de uma hora e a mistura de reação foi agitada por mais 16 horas. A mistura de reação foi vertida em água gelada (15 mL) e extraída com diclorometano (3x15 mL), lavada com água (15 mL), salmoura e a camada orgânica foi seca sobre sul-fato de sódio. Solventes foram removidos sob vácuo a 10°C e o resíduo resultante foi dissolvido em diclorometano (15 mL). Trifluoreto de dietilaminoenxofre (1 mL) foi adicionado a -10°C e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente por 6 horas antes de extinção com água gelada (10 mL). A camada orgânica foi lavada com solução satu-rada de bicarbonato de sódio (5 mL), água (5 mL), salmoura (5 mL) e a camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio. Remoção de solvente sob vácuo rendeu o composto do título, o qual foi levado à próxima etapa sem purificação adicional. Rendimento: 0,25 g (47%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 3,99-4,08 (m, 4H), 4,69-4,79 (m, 2H), 5,085,15 (m, 1H), 6,10 (s, 1H), 6,59 (dt, 1H), 8,28 (dd, 1H). 19F RMN (376,5 MHz, DMSO-d6) δ: -130,0 (d), 132,4 (d), -139,9 (d), -160,7 (d). MS (ES) MH+: 363,3 para C14H10F4N2O5. Intermediário 122 (R)-3-(4-(diflúormetil)-2-oxoxazolidin-3-il)-6,7-diflúorbenzo[d]isoxazol-5- carbaldeído

[000443] Uma quantia de ácido clorídrico 6 N (2,0 mL) foi adicionada a uma solução agitada de Intermediário 121 (0,25 g, 0,69 mmol) em 1,4-dioxano (10 mL) a 0°C, e a mistura foi agitada à temperatura ambiente por 8 horas. A mistura foi vertida em água gelada (25 mL) e extraída com acetato de etila (2x50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (15 mL) e solução de salmoura (15 mL antes de secagem sobre Na2SO4). Remoção de solvente rendeu o produto do título. Rendimento: 0,20 g (91%),1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 4,03-4,04 (m, 1H), 4,71-4,81 (m, 1H), 5,11-5,17 (m, 1H), 6,60 (t, 1H), 8,68 (d, 1H), 10,19 (s, 1H). MS (ES) MH+: 319,2 para C^HβF 4N2O4. Intermediário 123(3-((R)-4~(Diflúormetil)-2-oxoxazolidin-3-il)-6-((2R,6R)-2,6- dimetilmorfolino)-7-fluorobenzo[d]isoxazol-5-carbaldeído

[000444] Uma solução agitada de Intermediário 122 (0,2 g, 0,63 mmol), diisopropil etilamina (0,15 g, 1,2 mmol) e (2R,6R)-2,6- dimetilmorfolina (80 mg, 0,67 mmol) em acetonitrila (5 mL) foi aquecida a 80°C por 16 horas em um tubo vedado. Após resfria mento à temperatura ambiente, os voláteis foram removidos sob vácuo. O produto bruto foi purificado por cromatografia sobre sílica-gel usando um gradiente de CHCl3em acetato de etila para resultar no composto do título como sólido amarelo pálido. Rendimento: 0,16 g (62%),1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 1,20 (d, 6H), 3,02-3,05 (m, 2H), 3,38-3,41 (m, 2H), 4,10-4,16 (m, 2H), 4,70-4,77 (m, 2H), 5,11-5,15 (m, 1H), 6,47 (dt, 1H), 8,54 (s, 1H), 10,31 (s, 1H). MS (ES) MH+: 414,4 para C18H18F3N3O5. Intermediário 124 (S)—N-( 1 -Ciclopropil-2-hidroxietil)-5-( 1,3-dioxolan-2-il)-2,3,4-trifluoro- N'-hidroxibenzimidamida

[000445] Intermediário 124 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 118 usando (S)-2-amino- 2-ciclopropiletanol (1,38 g, 13,30 mmols) e Intermediário 16 (2,50 g, 8,89 mmols). Rendimento: 2,2 g (72%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: -0,79-0,89 (m, 1H), -0,92-0,10 (m, 1H), 0,31 (d, 2H), 0,88-0,90 (m, 1H), 2,15-2,30 (m, 1H), 3,39 (t, 2H), 3,94-4,06 (m, 4H), 4,71 (t, 1H), 5,81 (d, 1H), 6,02 (s, 1H), 7,30 (t, 1H), 9,98 (s, 1H). Intermediário 125 (S)-2-((5-(1,3-dioxolan-2-il)-6,7-diflúorbenzo[d]isoxazol-3-il)amino)-2- ciclopropiletanol

[000446] Intermediário 125 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 119 usando Intermediário 124 (2,20 g, 6,40 mmols). Rendimento: 1,80 g (87%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,23-0,25 (m, 1H), 0,37-0,45 (m, 3H), 1,01-1,12 (m, 1H), 3,03-3,05 (m, 1H), 3,53-3,56 (m, 1H), 3,64-3,65 (m, 1H), 4,03-4,10 (m, 4H), 4,75 (t, 1H), 6,08 (s, 1H), 7,16 (d, 1H), 8,05 (dd, 1H). MS (ES) MH+: 327,3 para C16H16F2N2O4. Intermediário 126 (S)-3-(5-(1,3-dioxolan-2-il)-6,7-diflúorbenzo[d]isoxazol-3-il)-4- ciclopropiloxazolidin-2-ona

[000447] Intermediário 126 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 120 usando Intermediário 125 (1,20 g, 3,67 mmols). Rendimento: 1,10 g (85%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,28-0,31 (m, 1H), 0,42-0,44 (m, 1H), 0,53-0,56 (m, 2H), 1,21-1,23 (m, 1H), 4,01-4,08 (m, 4H), 4,21-4,25 (m, 1H), 4,30-4,33 (m, 1H), 4,70 (t, 1H), 6,10 (s, 1H), 8,21 (dd, 1H). MS (ES) MH+: 353,3 para C16H14F2N2O5. Intermediário 127 (S)-3-(4-ciclopropil-2-oxoxazolidin-3-il)-6,7-diflúorbenzo[d]isoxazol-5- carbaldeído

[000448] Intermediário 127 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 122 usando Intermediário 126 (1,10 g, 3,12 mmols). Rendimento: 0,91 g (95%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,30-0,34 (m, 1H), 0,44-0,49 (m, 1H), 0,56-0,62 (m, 2H), 1,21-1,25 (m, 1H), 4,24-4,28 (m, 1H), 4,32-4,36 (m, 1H), 4,72 (t, 1H), 8,64 (dd, 1H), 10,20 (s, 1H). MS (ES) MH+: 309,3 para C14H10F 2N2O4. Intermediário 128 3-((S)-4-ciclopropil-2-oxoxazolidin-3-il)-6-(2R,6R)-2,6-dimetilmorfolino)- 7-fluorobenzo[d]isoxazol-5-carbaldeído

[000449] Intermediário 128 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 123 usando Intermediário 127. Rendimento: 1,0 g (86%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 0,30-0,34 (m, 1H), 0,44-0,49 (m, 1H), 0,57-0,60 (m, 2H), 1,20 (d, 6H), 2,99-3,03 (m, 2H), 3,31-3,39 (m, 2H), 4,10-4,15 (m, 2H), 4,19-4,33 (m, 2H), 4,69 (t, 1H), 8,30 (s, 1H), 8,47 (s, 1H), 10,31 (s, 1H). MS (ES) MH+: 404,4 para C20H22FN3O5.

[000450] para C20H22FN3O5. Intermediário 129 5-(1,3-Dioxolan-2-il)-2,3,4-trifluoro-N'-hidróxi-N-(2-hidróxi-2-(piridin-2- il)-etil)benzimidamida

[000451] Intermediário 129 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 118 usando 2-amino-1- (piridin-2-il)etanol (1,35 g, 6,40 mmols) e Intermediário 16 (1,50 g, 5,33 mmols). Rendimento: 1,70 g (83%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 3,02-3,09 (m, 1H), 3,19-3,39 (m, 1H), 3,96-4,05 (m, 4H), 4,55 (d, 1H), 5,72 (d, 1H), 6,02 (m, 2H), 7,10 (t, 1H), 7,22 (t, 1H), 7,41 (t, 1H), 7,74 (t, 1H), 8,37 (d, 1H), 9,96 (s, 1H). 19F RMN (376,5 MHz, DMSO-d6) δ: -134,3 (dd), -138,3 (dd), -159,91 (d). MS (ES) MH+: 384,3 para C17H16F3N3O4. Intermediário 130 2-((5-(1,3-Dioxolan-2-il)-6,7-diflúorbenzo[d]isoxazol-3-il)amino)-1- (piridin-2-il)etanol

[000452] Intermediário 130 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 119 usando Intermediário 129 (1,60 g, 4,17 mmols). Rendimento: 1,30 g (86%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-de) δ: 3,66 (dd, 1H), 4,00-4,09 (m, 4H), 4,92 (t, 1H), 5,75 (d, 1H), 6,08 (s, 1H), 7,28 (dd, 1H), 7,50 (t, 1H), 7,55 (d, 1H), 7,80 (t, 1H), 8,04 (d, 1H), 8,52 (d, 1H). Nota: mais um próton CH misturou com o pico de DMSO-d6. MS (ES) MH+: 364,3 para C17H15F2N3O4. Intermediário 131 3-(5-(1,3-Dioxolan-2-il)-6,7-diflúorbenzo[d]isoxazol-3-il)-5-(piridin-2- il)oxazolidin-2-ona

[000453] Intermediário 131 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 120 usando Intermediário 130 (1,20 g, 3,30 mmols). Rendimento: 1,20 g (93%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 3,98-4,09 (m, 4H), 4,22-4,35 (m, 1H), 4,58 (t, 1H), 6,01 (dd, 1H), 6,10 (s, 1H), 7,46 (dd, 1H), 7,65 (d, 1H), 7,91 (t, 1H), 8,47 (d, 1H), 8,65 (d, 1H). 19F RMN (376,5 MHz, DMSO-d6) δ: -140,4 (d), -161,10 (d). MS (ES) MH+: 390,3 para C18H13F2N3O5 Intermediário 132 6,7-Diflúor-3-(2-oxo-5-(piridin-2-il)oxazolidin-3-il)benzo[d]isoxazol-5- carbaldeído

[000454] Intermediário 132 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 122 usando Intermediário 131 (1,20 g, 3,09 mmols). Rendimento: 1,0 g (94%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 4,35 (dd, 1H), 4,60 (t, 1H), 6,04 (dd, 1H), 7,45-7,49 (m, 1H), 7,70 (d, 1H), 7,93 (t, 1H), 8,65 (d, 1H), 8,86 (d, 1H), 10,20 (s, 1H). 19F RMN (376,5 MHz, DMSO-d6) δ: -143,1 (d), -160,4 (d). MS (ES) MH+: 346,3 para C16H9F2N3O4. Intermediário 1336-((2R,6R)-2,6-Dimetilmorfolino)-7-flúor-3-(2-oxo-5-(piridin-2- il)oxazolidin-3-il)-benzo[d]isoxazol-5-carbaldeído

[000455] Intermediário 133 foi descrito para a preparação de Intermediário 123 usando Intermediário 132 (1,0 g, 2,89 mmols). Rendimento: 1,0 g (78%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,21 (d, 6H), 3,00-3,04 (m, 2H), 3,37-3,40 (m, 2H), 4,12-4,15 (m, 2H), 4,33 (dd, 1H), 4,57 (t, 1H), 6,02 (dd, 1H), 7,46-7,48 (m, 1H), 7,66 (d, 1H), 7,91 (t, 1H), 8,65 (d, 1H), 8,71 (s, 1H), 10,30 (s, 1H). MS (ES) MH+: 441,4 para C22H21FN4O5. Intermediário 134 5-(1,3-Dioxolan-2-il)-2,3,4-trifluoro-N'-hidróxi-N-(2-hidróxi-1-(piridin-2- il)etil)benzimidamida

[000456] Intermediário 134 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 118 usando Intermediário 16 (1,0 g, 3,55 mmols). Rendimento: 1,05 g (78%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 3,59 (t, 2H), 3,93-4,08 (s, 5H), 4,94 (t, 1H), 5,96 (s, 1H), 6,41 (d, 1H), 7,09 (t, 1H), 7,20-7,25 (m, 2H), 7,72 (t, 1H), 8,43 (d, 1H), 10,20 (s, 1H). MS (ES) MH+: 384,3 para C17H16F3N3O4. Intermediário 135 2-((5-(1,3-Dioxolan-2-il)-6,7-diflúorbenzo[d]isoxazol-3-il)amino)-2- (piridin-2-il)etanol

[000457] Intermediário 135 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 119 usando Intermediário 134 (1,60 g, 2,60 mmols). Rendimento: 0,78 g (73%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 3,79-3,85 (m, 2H), 4,03-4,14 (m, 4H), 4,74 (q, 1H), 5,02 (t, 1H), 6,10 (s, 1H), 7,26 (dd, 1H), 7,41 (d, 1H), 7,72 (t, 1H), 7,74 (dd, 1H), 8,17 (d, 1H), 8,54 (d, 1H). MS (ES) MH+: 364,3 para C17H15F2N3O4. Intermediário 136 3-(5-(1,3-Dioxolan-2-il)-6,7-diHúorbenzo[d]isoxazol-3-il)-4-(piridin-2- il)oxazolidin-2-ona

[000458] Intermediário 136 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 120 usando Intermediário 135 (1,0 g, 2,75 mmols). Rendimento: 0,90 g (84%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 3,99-4,10 (m, 4H), 4,44 (dd, 1H), 4,97 (t, 1H), 5,75 (dd, 1H), 6,09 (s, 1H), 7,34 (dd, 1H), 7,55 (d, 1H), 7,82 (t, 1H), 8,41 (d, 1H), 8,51 (d, 1H). MS (ES) MH+: 390,3 para C18H13F2N3O5. Intermediário 137 6,7-Diflúor-3-(2-oxo-4-(piridin-2-il)oxazolidin-3-il)benzo[d]isoxazol-5- carbaldeído

[000459] Intermediário 137 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 122 usando Intermediário 136 (0,90 g, 2,31 mmols). Rendimento: 0,75 g (94%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 4,49 (dd, 1H), 5,01 (t, 1H), 5,79 (dd, 1H), 7,35-7,38 (m, 1H), 7,59 (d, 1H), 7,85 (dt, 1H), 8,54 (d, 1H), 8,83 (d, 1H), 10,20 (s, 1H). MS (ES) MH+: 346,3 para C16H9F2N3O4. Intermediário 138 6-((2R,6R)-2,6-Dimetilmorfolino)-7-flúor-3-(2-oxo-4-(piridin-2- il)oxazolidin-3-il)-benzo[d]isoxazol-5-carbaldeído

[000460] Intermediário 138 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 123 usando Intermediário 137 (0,75 g, 2,17 mmols). Rendimento: 0,85 g (89%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 1,20 (d, 6H), 2,96-3,00 (m, 2H), 3,31-3,36 (m, 2H), 4,00-4,13 (m, 2H), 4,45 (dd, 1H), 4,98 (t, 1H), 5,75 (dd, 1H), 7,33 (t, 1H), 7,54 (d, 1H), 7,82 (t, 1H), 8,51 (d, 1H), 8,65 (d, 1H), 10,30 (s, 1H). MS (ES) MH+: 441,4 para C22H21FN4O5. Intermediário 139 5-(1,3-Dioxolan-2-il)-2,3,4-trifluoro-N'-hidróxi-N-(2-hidróxi-1-(piridin-4- il)etil)benzimidamida

[000461] Intermediário 139 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 118 usando Intermediário 16 (1,08 g, 3,84 mmols). Rendimento: 0,91 g (62%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 3,55-3,68 (m, 2H), 3,82-3,92 (m, 4H), 3,98-4,08 (m, 1H), 5,05 (t, 1H), 5,93 (s, 1H), 6,51 (d, 1H), 6,92-6,96 (m, 1H), 7,11 (d, 2H), 8,41 (d, 2H), 10,30 (s, 1H). MS (ES) MH+: 384,3 para C17H16F3N3O4. Intermediário 140 2-((5-(1,3-Dioxolan-2-il)-6,7-diflúorbenzo[d]isoxazol-3-il)amino)-2- (piridin-4-il)etanol

[000462] Intermediário 140 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 119 usando Intermediário 139 (0,90 g, 2,34 mmols). Rendimento: 0,60 g (71%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 3,73 (t, 2H), 4,00-4,12 (m, 4H), 4,66 (q, 1H), 5,12 (t, 1H), 6,08 (s, 1H), 7,39 (d, 2H), 7,89 (d, 1H), 8,11 (t, 1H), 8,49 (d, 2H). MS (ES) MH+: 364,3 para C17H16F2N3O4. Intermediário 141 3-(5-(1,3-Dioxolan-2-il)-6,7-diflúorbenzo[d]isoxazol-3-il)-4-(piridin-4- il)oxazolidin-2-ona

[000463] Intermediário 141 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 120 usando Intermediário 140 (0,60 g, 1,65 mmol). Rendimento: 0,61 g (95%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 4,01-4,10 (m, 4H), 4,36 (dd, 1H), 5,02 (t, 1H), 5,75 (dd, 1H), 6,10 (s, 1H), 7,49 (dd, 2H), 8,38 (dd, 1H), 8,55 (dd, 2H). MS (ES) MH+: 390,3 para C18H13F2N3O5. Intermediário 142 6,7-Diflúor-3-(2-oxo-4-(piridin-4-il)oxazolidin-3-il)benzo[d]isoxazol-5- carbaldeído

[000464] Intermediário 142 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 122 TQ-100-14-V usando Intermediário 141 (0,60 g, 1,54 mmol). Rendimento: 0,47 g (88%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 4,40 (dd, 1H), 5,05 (t, 1H), 5,77 (dd, 1H), 7,51 (d, 2H), 8,57 (d, 2H), 8,78 (d, 1H), 10,22 (s, 1H). MS (ES) MH+: 346,3 para C16H9F2N3O4. Intermediário 143 6-((2R,6R)-2,6-Dimetilmorfolino)-7-flúor-3-(2-oxo-4-(piridin-4- il)oxazolidin-3-il)benzo[d]isoxazol-5-carbaldeído

[000465] Intermediário 143 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 123 usando Intermediário 142 (0,46 g, 1,33 mmol). Rendimento: 0,52 g (89%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 1,36 (d, 6H), 2,87-2,99 (m, 2H), 3,31-3,37 (m, 2H), 4,08-4,12 (m, 2H), 4,36 (t, 1H), 5,01 (t, 1H), 5,74 (t, 1H), 7,46 (d, 2H), 8,54 (d, 2H), 8,62 (d, 1H), 10,31 (s, 1H). MS (ES) MH+: 441,4 para C22H21FN4O5. Intermediário 144 (2R,3R)-2-Amino-3-metoxibutan-1-ol

[000466] A uma solução agitada de 2-amino-3-metoxibutanoato de (2S,3R)-metila (10,0 g, 75,19 mmols) em tetra-hidrofurano (150 mL), borohidreto de sódio (10,28 g, 270,7 mmols) e iodo (24,7 g, 97,77 mmols) foram adicionados e a mistura foi refluxada ao longo de um período de 16 horas. A mistura foi filtrada e os voláteis foram removi-dos sob vácuo e o produto bruto foi levado à próxima etapa sem purifi-cação adicional. Rendimento: 7,0 g (78%). Intermediário 145 5-(1,3-Dioxolan-2-il)-2,3,4-trifluoro-N'-hidróxi-N-((2R,3R)-1-hidróxi-3- metoxibutan-2-il)benzimidamida

[000467] A uma solução agitada de Intermediário 144 (7,0 g, 58,82 mmols) em dimetil formamida (25 mL), trietilamina (11,91 g, 117,64 mmols) foi adicionada e a mistura foi agitada à temperatura ambiente por 20 minutos. A esta solução, Intermediário 16 (3,50 g, 12,43 mmols) foi adicionado e a mistura foi agitada à temperatura ambiente por mais 2 horas. A mistura foi vertida em água gelada (50 mL) e extraída com acetato de etila (3x50 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com água (2x25 mL), solução de salmoura (25 mL) e secas sobre sulfato de sódio. Remoção de solvente rendeu o produto bruto, o qual foi puri-ficado por cromatografia flash em coluna de sílica-gel usando um gra- diente de acetato de etila em éter pet.. Rendimento: 1,8 g (40%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,02 (d, 3H), 2,72-2,74 (m, 1H), 3,22 (s, 3H), 3,41-3,43 (m, 1H), 3,98-4,05 (m, 4H), 4,69 (t, 1H), 5,51 (d, 1H), 6,04 (s, 1H), 7,34 (t, 1H), 10,08 (s, 1H). Nota: NH e OH prótons did not appear. 19F RMN (376,5 MHz, DMSO-d6) δ: -134,33 (m), -138,45 (m), -159,75 (m). MS (ES) MH+: 365,2 para C16H19F3N2O5. Intermediário 146 (2R,3R)-2-(5-(1,3-dioxolan-2-il)-6,7-diflúorbenzo[d]isoxazol-3-il)amino)- 3-metoxibutan-1-ol

[000468] A uma solução agitada de Intermediário 145 (1,8 g g, 4,96 mmols) em dimetil formamida (20 mL), carbonato de césio (3,55 g, 10,90 mmols) foi adicionado e a mistura foi agitada à temperatura am-biente por 16 horas. Água (10 mL) foi adicionada à mistura e extraída com acetato de etila (3x25 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com água (2x15 mL), solução de salmoura (15 mL) e secas sobre sul-fato de sódio. Remoção do solvente rendeu o produto bruto, o qual foi purificado adicionalmente por cromatografia flash em coluna de sílica- gel usando acetato de etila 75% em éter pet.. Rendimento: 1,30 g (76%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,12 (d, 3H), 3,30 (s, 3H), 3,51-3,52 (m, 1H), 3,59-3,66 (m, 3H), 4,01-4,10 (m, 4H), 4,74 (t, 1H), 6,07 (s, 1H), 7,12 (d, 1H), 8,16 (d, 1H). 19F RMN (376,5 MHz, DMSO- d6) δ: -143,58 (d), -162,18 (d). MS (ES) MH+: 345,2 para C16H18F2N2O5. Intermediário 147 (R)-3-(5-(1,3-dioxolan-2-il)-6,7-diflúorbenzo[d]isoxazol-3-il)-4-((R)-1- metoxietil)oxazolidin-2-ona

[000469] A uma solução agitada de Intermediário 146 (1,30 g, 3,78 mmols) em acetonitrila (20 mL), trietilamina (0,76 g, 7,56 mmols) foi adicionada a 0°C e a mistura foi agitada por 15 min utos. A esta solu-ção, carbonato de bis(2,5-dioxopirrolidin-1-il) (ou) carbonato de disuc- cinimidil (1,06 g, 4,16 mmols) foi adicionado a 0°C e a mistura foi agi-tada à temperatura ambiente por 16 horas. Os voláteis foram removi-dos sob vácuo e o resíduo foi dissolvido em acetato de etila (25 mL), lavado com água (10 mL), solução de salmoura (10 mL) e seco sobre sulfato de sódio. Remoção de solvente sob vácuo rendeu um sólido amarelo pálido, o qual foi purificado em um instrumento Combi-Flash usando um gradiente de acetato de etila em éter pet.. Rendimento: 0,40 g (29%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 1,03 (d, 3H), 3,32 (s, 3H), 3,96-4,08 (m, 4H), 4,49-4,53 (m, 1H), 4,63 (t, 1H), 4,78-4,83 (m, 1H), 6,08 (s, 1H), 8,27 (d, 1H). 19F RMN (376,5 MHz, DMSO-d6) δ: -140,41 (d), -161,03 (d). MS (ES) MH+: 371,3 para C16H16F2N2O6. Intermediário 148 6,7-Diflúor-3-((R)-4-(R)-1-metoxietil)-2-oxoxazolidin-3-il)benzo[d]isoxa- zol-5-carbaldeído

[000470] A uma solução agitada de Intermediário 147 (0,40 g, 1,08 mmol) em 1,4-dioxano (4 mL), ácido clorídrico 6N (2 mL) foi adicionado a 0°C e a mistura foi agitada à temperatura ambiente por uma hora. A mistura foi vertida em água gelada (25 mL) e extraída com acetato de etila (3x25 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com água (15 mL), solução de salmoura (15 mL) e secas sobre sulfato de sódio. Remoção do solvente rendeu o produto do título. Rendimento: 0,35 g (99%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 1,03 (d, 3H), 3,32 (s, 3H), 3,96-4,08 (m, 4H), 4,49-4,53 (m, 1H), 4,63 (t, 1H), 4,78-4,83 (m, 1H), 6,08 (s, 1H), 8,27 (d, 1H). 19F RMN (376,5 MHz, DMSO-d6) δ: -140,41 (d), -161,03 (d). MS (ES) MH+: 327,2 para C14H12F2N2O5. Intermediário 1496-((2R,6R)-2,6-Dimetilmorfolino)-7-flúor-3-((R)-4-(R)-1-metoxietil)-2- oxoxazolidin-3-il)benzo[d]isoxazol-5-carbaldeído

[000471] A uma solução agitada de Intermediário 148 (0,35 g, 1,07 mmol) em acetonitrila (4 mL), foi adicionada diisopropil etilamina (0,21 g, 1,61 mmol) seguida de (2R,6R)-2,6-dimetilmorfolina (0,13 g, 1,07 mmol) e a mistura foi aquecida a 80°C por 16 horas em um tubo veda-do. Ela foi resfriada à temperatura ambiente e os voláteis foram remo-vidos sob vácuo para obter o produto bruto, que foi purificado em um instrumento Combi-Flash usando um gradiente de acetato de etila em éter pet. para obter o composto do título como um sólido amarelo páli-do. Rendimento: 0,25 g (56%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 1,02 (d, 3H), 1,20 (d, 6H), 2,97-3,03 (m, 2H), 3,28 (s, 3H), 3,35-3,39 (m, 2H), 3,97-4,01 (m, 1H), 4,10-4,15 (m, 2H), 4,51-4,54 (m, 1H), 4,63 (t, 1H), 4,81-4,84 (m, 1H), 8,54 (s, 1H), 10,29 (s, 1H). 19F RMN (376,5 MHz, DMSO-d6) δ: -146,80 (s). MS (ES) MH+: 422,5 para C20H24FN3O6. Intermediário 150 ((2R,3S)-1-hidróxi-3-metoxibutan-2-il)carbamato de benzila

[000472] A uma solução agitada de 2-(((benzilóxi)carbonil)amino)-3- metoxibutanoato de (2S,3S)-metila (preparada de acordo com o pro-cedimento da literatura: Bioorg. Med. Chem. Lett. 15 (2005) 14471449, 1,60 g, 5,68 mmols) em uma mistura 3:1 de tetra-hidrofurano e metanol (12 mL), borohidreto de sódio (0,43 g, 11,38 mmols) foi adicionado e a mistura foi agitada à temperatura ambiente por duas horas. Os voláteis foram removidos e o resíduo foi dissolvido em acetato de etila (25 mL) e lavado com salmoura (10 mL). Remoção do solvente rendeu o produto bruto, o qual foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel usando um gradiente de acetato de etila em éter pet.. Rendimento: 1,32 g (92%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,01 (d, 3H), 3,22 (s, 3H), 3,36-3,42 (m, 3H), 3,57-3,60 (m, 1H), 4,57 (t, 1H), 5,02 (s, 2H), 6,98-7,01 (m, 1H), 7,31-7,37 (m, 5H). MS (ES) MH+: 254,4 para C13H19F3NO4. Intermediário 151 (2R,3S)-2-Amino-3-metoxibutan-1-ol

[000473] A uma solução agitada de Intermediário 150 (1,32 g, 5,20 mmols) em acetato de etila (50 mL), paládio em carvão 10% (0,13 g, 10% em peso) foi adicionado e a mistura foi agitada à temperatura ambiente sob 20 mm de pressão de hidrogênio por 6 horas. A mistura foi filtrada e os voláteis foram removidos sob vácuo e o produto bruto foi levado à próxima etapa sem purificação adicional. Rendimento: 0,47 g (47%) Intermediário 152 5-(1,3-Dioxolan-2-il)-2,3,4-trifluoro-N'-hidróxi-N-((2R,3S)-1-hidróxi-3- metoxibutan-2-il)benzimidamida

[000474] Intermediário 152 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 145 usando Intermediário 151 (0,47 g, 4,02 mmols). Rendimento: 0,50 g (35%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,00 (d, 3H), 3,02 (s, 3H), 3,27-3,32 (m, 2H), 3,41 (d, 2H), 3,96-4,06 (m, 4H), 4,68 (t, 1H), 5,67 (d, 1H), 6,03 (s, 1H), 7,33-7,34 (m, 1H), 10,03 (s, 1H),19F RMN (376,5 MHz, DMSO-d6) δ: -134,26 (m), -138,79 (m), -160,03 (m). MS (ES) MH+: 365,5 para C15H19F3N2O5. Intermediário 153 (2R,3S)-2-((5-(1,3-dioxolan-2-il)-6,7-diflúorbenzo[d]isoxazol-3-il)ami- no)-3-metoxibutan-1-ol

[000475] Intermediário 153 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 146 usando Intermediário 152 (0,50 g, 1,37 mmol). Rendimento: 0,32 g (67%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 1,15 (d, 3H), 3,25 (s, 3H), 3,52-3,60 (m, 4H), 3,98-4,10 (m, 4H), 4,70 (t, 1H), 6,06 (s, 1H), 7,09 (d, 1H), 8,09 (d, 1H). 19F RMN (376,5 MHz, DMSO-d6) δ: -143,51 (d), -162,06 (d). MS (ES) MH+: 345,5 para C15H18F2N2O5. Intermediário 154 (R)-3-(5-(1,3-Dioxolan-2-il)-6,7-diflúorbenzoíd]isoxazol-3-il)-4-(S)-1- metoxieti l)oxazolidi n-2-ona

[000476] Intermediário 154 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 147 usando Intermediário 153 (0,25 g, 0,72 mmol). Rendimento: 0,08 g (30%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,11 (d, 3H), 3,15 (s, 3H), 3,98-4,08 (m, 5H), 4,55-4,61 (m, 3H), 6,09 (s, 1H), 8,30 (d, 1H). 19F RMN (376,5 MHz, DMSO- d6) δ: -140,43 (d), -161,01 (d). MS (ES) MH+: 371,4 para C16H16F2N2O6 Intermediário 155 6,7-Diflúor-3-((R)-4-(S)-1-metoxietil)-2-oxoxazolidin-3-il)benzo[d]isoxa- zol-5-carbaldeído

[000477] Intermediário 155 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 148 usando Intermediário 154 (0,08 g, 0,22 mmol). O produto bruto foi levado à próxima etapa sem purificação. Rendimento: 0,06 g (85%). Intermediário 1566-((2R,6R)-2,6-Dimetilmorfolino)-7-flúor-3-((R)-4-((S)-1-metoxietil)-2- oxoxazolidin-3-il)benzo[d]isoxazol-5-carbaldeído

[000478] Intermediário 156 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 149 usando Intermediário 155 (0,06 g, 0,18 mmol). O produto bruto foi levado à próxima etapa sem purificação. Rendimento: 0,04 g (52%). MS (ES) MH+: 422,5 para C20H24FN3O6 Intermediário 1572-((difenilmetileno)amino)-2-(pirazin-2-il)acetato de etila

[000479] Uma mistura de 2-((difenilmetileno)amino)acetato de etila (6,0 g, 22,47 mmols), 2-bromopirazina (7,1 g, 44,90 mmols), carbonato de potássio (9,30 g, 67,40 mmols) e iodeto de tetrabutil amônio (8,10 g, 22,40 mmols) em N-metil-2-pirrolidona (25 mL) foi aquecida em um tubo vedado a 110°C por 16 horas. A mistura foi vertida em água (100 mL) e extraída com acetato de etila (3x50 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura (25 mL) e secas sobre sulfato de sódio. Remoção de solvente sob vácuo rendeu o produto bruto, o qual foi pu-rificado em instrumento Combi-Flash usando um gradiente de metanol em clorofórmio. Rendimento: 4,90 g (63%). 1H RMN (300 MHz, DMSO- d6) δ: 1,16 (t, 3H), 4,07 (q, 2H), 5,26 (s, 1H), 7,18 (dd, 2H), 7,38-7,61 (m, 8H), 8,56 (d, 1H), 8,57 (d, 1H), 8,60 (s, 1H). MS (ES) MH+: 346,3 para C21H19N3O2. Intermediário 1582-amino-2-(pirazin-2-il)acetato de etila

[000480] A uma solução agitada de Intermediário 157 (4,9 g, 14,20 mmols) em dioxano (20 mL), ácido clorídrico 3N (20 mL) foi adicionado e a mistura foi agitada à temperatura ambiente por 3 horas. Os voláteis foram removidos completamente sob vácuo e o produto obtido como seu sal cloridrato foi levado à próxima etapa sem purificação. Rendi-mento: 2,4 g (92%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 1,13 (t, 3H), 4,19 (q, 2H), 5,66 (s, 1H), 8,73-8,77 (m, 2H), 8,95 (d, 1H), 9,19 (br s, 3H). MS (ES) MH+: 182,3 para C8H11N3O2. Intermediário 159 2-((terc-butoxicarbonil)amino)-2-(pirazin-2-il)acetato de etila

[000481] A uma solução agitada de Intermediário 158 (2,4 g, 11,60 mmols) em diclorometano (25 mL), dicarbonato de di-t-butila (2,88 g, 12,76 mmols) e trietilamina (5 mL) foram adicionados e a mistura foi refluxada por duas horas. Os voláteis foram removidos completamente sob vácuo e o produto bruto foi levado à próxima etapa sem purifica-ção. Rendimento: 2,80 g (90%). Intermediário 160 (2-hidróxi-1-(pirazin-2-il)etil)carbamato de terc-butila

[000482] A uma solução agitada de Intermediário 163 (2,80 g, 9,96 mmols) em uma mistura 1:1 de tetra-hidrofurano e metanol (50 mL), borohidreto de sódio (0,37 g, 9,96 mmols) foi adicionado e a mistura foi agitada à temperatura ambiente por 16 horas. Os voláteis foram remo-vidos sob vácuo e o resíduo foi dissolvido em acetato de etila (25 mL) e lavado com salmoura (10 mL). Remoção do solvente rendeu o produto bruto, o qual foi levado à próxima etapa sem purificação. Rendimento: 1,8 g (76%) Intermediário 161 2-Amino-2-(pirazin-2-il)etanol

[000483] A uma solução agitada de Intermediário 160 (1,80 g, 7,50 mmols) ácido clorídrico 3N em éter dietílico (20 mL) foi adicionado e a mistura foi agitada à temperatura ambiente por 3 horas. Os voláteis foram removidos completamente sob vácuo e o produto foi levado à próxima etapa sem purificação. Rendimento: 1,1 g (83%). MS (ES) MH+: 140,2 para C6H9N3O. Intermediário 162 5-(1,3-Dioxolan-2-il)-2,3,4-trifluoro-N'-hidróxi-N-(2-hidróxi-1-(pirazin-2- il)etil)benzimidamida

[000484] Intermediário 162 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 118 usando Intermediário 161 (1,10 g, 6,32 mmols) e Intermediário 16 (1,78 g, 6,32 mmols). Rendimento: 0,96 g (40%). MS (ES) MH+: 385,4 para C16H15F3N4O4 Intermediário 163 2-((5-(1,3-Dioxolan-2-il)-6,7-diflúorbenzo[d]isoxazol-3-il)amino)-2- (pirazin-2-il)etanol

[000485] Intermediário 163 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 119 usando Intermediário 162 (0,96 g, 2,50 mmols). Rendimento: 0,52 g (55%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 3,87 (t, 2H), 4,00-4,09 (m, 4H), 4,80 (q, 1H), 5,09 (t, 1H), 6,08 (s, 1H), 7,96 (d, 1H), 8,13 (d, 1H), 8,54 (d, 1H), 8,61 (d, 1H), 8,68 (s, 1H). MS (ES) MH+: 365,4 para C16H14F2N4O4. Intermediário 164 3-(5-(1,3-Dioxolan-2-il)-6,7-diflúorbenzo[d]isoxazol-3-il)-4-(pirazin-2- il)oxazolidin-2-ona

[000486] Intermediário 164 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 120 usando Intermediário 163 (0,25 g, 0,69 mmol). Rendimento: 0,16 g (59%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 3,98-4,09 (m, 4H), 4,54 (dd, 1H), 4,99 (t, 1H), 5,87 (dd, 1H), 6,09 (s, 1H), 8,39 (dd, 1H), 8,61-8,63 (m, 2H), 8,86 (d, 1H). 19F RMN (376,5 MHz, DMSO-d6) δ: -140,24 (d), -160,93 (d). MS (ES) MH+: 391,4 para C17H12F2N4O5. Intermediário 165 6,7-Diflúor-3-(2-oxo-4-(pirazin-2-il)oxazolidin-3-il)benzo[d]isoxazol-5- carbaldeído

[000487] Intermediário 165 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 122 usando Intermediário 164 (0,16 g, 2,41 mmols). Rendimento: 0,12 g (86%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 4,56 (dd, 1H), 5,01 (t, 1H), 5,88 (dd, 1H), 8,61-8,64 (m, 2H), 8,80 (d, 1H), 8,88 (d, 1H), 10,18 (s, 1H). 19F RMN (376,5 MHz, DMSO-d6) δ: -142,93 (d), -160,18 (d). MS (ES) MH+: 347,4 para C15H8F2N4O4. Intermediário 166 6-((2R,6R)-2,6-Dimetilmorfolino)-7-flúor-3-(2-oxo-4-(pirazin-2- il)oxazolidin-3-il)-benzo[d]isoxazol-5-carbaldeído

[000488] Intermediário 166 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 123 usando Intermediário 165 (0,12 g, 0,35 mmol). Rendimento: 0,12 g (80%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-de) δ: 1,21 (d, 6H), 2,98-3,00 (m, 2H), 3,31-3,33 (m, 2H, merged em DMSO pico), 4,11-4,13 (m, 2H), 4,56 (dd, 1H), 5,01 (t, 1H), 5,88 (dd, 1H), 8,63-8,67 (m, 3H), 8,88 (s, 1H), 10,31 (s, 1H). 19F RMN (376,5 MHz, DMSO-d6) δ: -142,93 (d), -160,18 (d). MS (ES) MH+: 442,5 para C21H20FN5O5. Intermediário 167 5-(1,3-Dioxolan-2-il)-2,3,4-trifluoro-N'-hidróxi-N-(2-hidróxi-1-(pirimidin- 2-il)etil)benzimidamida

[000489] Intermediário 167 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 118 usando 2-amino-2- (pirimidin-2-il)etanol Intermediário 161 (1,0 g, 5,7 mmols) e Intermediá-rio 16 (1,60 g, 5,71 mmols). Rendimento: 1,0 g (42%). MS (ES) MH+: 385,5 para C16H15F 3N4O4 Intermediário 168 2-((5-(1,3-Dioxolan-2-il)-6,7-diflúorbenzo[d]isoxazol-3-il)amino)-2- (pirimidin-2-il)etanol

[000490] Intermediário 168 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 119 usando Intermediário 167 (1,0 g, 2,51 mmols). Rendimento: 0,42 g (45%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 3,86-3,94 (m, 2H), 4,01-4,11 (m, 4H), 4,84-4,87 (m, 1H), 5,02 (t, 1H), 6,10 (s, 1H), 7,39 (t, 1H), 7,85 (d, 1H), 8,18 (d, 1H), 8,76 (d, 2H). 19F RMN (376,5 MHz, DMSO-d6) δ: -143,35 (d), 161,90 (d). MS (ES) MH+: 365,4 para C16H14F2N4O4. Intermediário 169 3-(5-(1,3-Dioxolan-2-il)-6,7-diflúorbenzo[d]isoxazol-3-il)-4-(pirimidin-2- il)oxazolidin-2-ona

[000491] Intermediário 169 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 120 usando Intermediário 168 (0,34 g, 0,93 mmol). Rendimento: 0,25 g (70%). MS (ES) MH+: 391,4 para C17H12F 2N4O5. Intermediário 170 6,7-Diflúor-3-(2-oxo-4-(pirimidin-2-il)oxazolidin-3-il)benzo[d]isoxazol-5- carbaldeído

[000492] Intermediário 170 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 122 usando Intermediário 169 (0,25 g, 2,41 mmols). O produto bruto foi levado à próxima etapa sem purificação. Rendimento: 0,14 g (64%). MS (ES) MH+: 347,4 para C16H8F2N4O4. Intermediário 171 6-((2R,6R)-2,6-Dimetilmorfolino)-7-flúor-3-(2-oxo-4-(pirimidin-2- il)oxazolidin-3-il)-benzo[d]isoxazol-5-carbaldeído

[000493] Intermediário 171 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 123 usando Intermediário 170 (0,14 g, 0,26 mmol). Rendimento: 0,12 g (63%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,22 (d, 6H), 2,98-3,02 (m, 2H), 3,36-3,39 (m, 2H), 4,11-4,14 (m, 2H), 4,54 (dd, 1H), 5,05 (t, 1H), 5,75 (s, 1H), 7,49-7,52 (m, 1H), 8,69 (d, 1H), 8,81-8,83 (m, 2H), 10,31 (s, 1H). 19F RMN (376,5 MHz, DMSO-d6) δ: -146,69 (d). MS (ES) MH+: 442,5 para C21H20FN5O5. Intermediário 172 (S)-5-(1,3-Dioxolan-2-il)-2,3,4-trifluoro-N'-hidróxi-N-(1-hidroxibut-3-il)-2- il)benzimidamida

[000494] Intermediário 172 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 118 usando (S)-2- aminobut-3-il)-1-ol (preparado de acordo com o procedimento da litera-tura a partir de aldeído Garner; Eur. J. Org. Chem. 2009, 3619-3627, 0,30 g, 2,44 mmols) e Intermediário 16 (0,65 g, 2,32 mmols). Rendi-mento: 0,53 g (65%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 3,16 (d, 1H), 3,50 (t, 2H), 3,60-3,70 (m, 1H), 3,98-4,05 (m, 4H), 5,12 (t, 1H), 6,046,10 (m, 2H), 7,34 (t, 1H), 10,23 (s, 1H),19F RMN (376,5 MHz, DMSO- d6) δ: -133,64 (m), -138,05 (m), -159,54 (m). MS (ES) MH+: 331,4 para C14H13F 3N2O4. Intermediário 173(S)-2-((5-(1,3-Dioxolan-2-il)-6,7-diflúorbenzo[d]isoxazol-3-il)amino)but- 3-il)-1-ol

[000495] Intermediário 173 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 119 usando Intermediário 172 (0,51 g, 1,55 mmol). Rendimento: 0,27 g (55%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 3,24 (d, 1H), 3,65 (t, 2H), 3,98-4,05 (m, 4H), 4,32-4,34 (m, 1H), 5,20 (t, 1H), 6,08 (s, 1H), 7,70 (d, 1H), 8,01 (d, 1H). 19F RMN (376,5 MHz, DMSO-d6) δ: -142,96 (d), -161,66 (d). MS (ES) MH+: 311,4 para C14H12F2N2O4. Intermediário 174 (S)-3-(5-(1,3-dioxolan-2-il)-6,7-diflúorbenzo[d]isoxazol-3-il)-4- etiniloxazolidin-2-ona

[000496] Intermediário 174 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 120 usando Intermediário 173 (0,25 g, 0,81 mmol). Rendimento: 0,25 g (92%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 3,69 (d, 1H), 3,99-4,08 (m, 4H), 4,56 (dd, 1H), 4,85 (t, 1H), 5,41-5,45 (m, 1H), 6,11 (s, 1H), 8,27 (dd, 1H). 19F RMN (376,5 MHz, DMSO-d6) δ: -140,16 (d), -160,70 (d). MS (ES) MH+: 337,4 para C15H10F2N2O5. Intermediário 175 (S)-3-(4-Etinil-2-oxoxazolidin-3-il)-6,7-diflúorbenzo[d]isoxazol-5- carbaldeído

[000497] Intermediário 175 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 122 usando Intermediário 174 (0,25 g, 0,74 mmol). Rendimento: 0,14 g (65%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 3,70 (d, 1H), 4,58 (dd, 1H), 4,86 (t, 1H), 5,41-5,46 (m, 1H), 8,67 (dd, 1H), 10,18 (s, 1H). 19F RMN (376,5 MHz, DMSO-d6) δ: -142,87 (d), -159,98 (d). MS (ES) MH+: 293,3 para C13H6F2N2O4. Intermediário 176 6-((2R,6R)-2,6-dimetilmorfolino)-3-((S)-4-etinil-2-oxoxazolidin-3-il)-7- fluorobenzo[d]isoxazol-5-carbaldeído

[000498] Intermediário 176 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 123 usando Intermediário 175 (0,14 g, 0,48 mmol). Rendimento: 0,08 g (43%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 1,21 (d, 6H), 2,98-3,04 (m, 2H), 3,36-3,40 (m, 2H), 3,67 (d, 1H), 4,12-4,13 (m, 2H), 4,56 (dd, 1H), 4,81 (t, 1H), 5,39-5,43 (m, 1H), 8,51 (s, 1H), 10,30 (s, 1H). 19F RMN (376,5 MHz, DMSO-d6) δ: -146,52 (s). MS (ES) MH+: 388,5 para C19H18FN3O5. Intermediário 177 (S)-3-(7-cloro-6-((2R,6R)-2,6-dimetilmorfolino)-5-(1,3-dioxolan-2- il)benzo[d]isoxazol-3-il)-4-metiloxazolidin-2-ona

[000499] Intermediário 177 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 42 usando (S)-4- metiloxazolidin-2-ona (sintetizada de acordo com o procedimento des-crito em Nishiyama, T.; Matsui, Shigeki; Yamada, F. J. Het. Chem. (1986), 23(5), 1427-9) e Intermediário 52. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 1,1 (br. s., 3H) 1,3 (br. s., 3H) 1,4 (d, 3H) 2,7-2,8 (m, 1H) 2,95-3,2 (m, 2H) 3,5-3,7 (m, 1H) 3,9-4,1 (m, 7H) 4,6-4,8 (m, 2H) 6,2 (s, 1H) 8,4 (s, 1H). MS (ES) MH+: 438 para C20H24ClN3O6. Intermediário 178 S(S)—N-[(1 S)-2-[terc-Butil (dimetil)silil]óxi-1-(2-metil-1,2,4-triazol-3— il)etil]-2-metil-propano-2-sulfinamida

[000500] n-Butil lítio (185 mL, 462 mmols) foi adicionado gota a gota a -78°C sob nitrogênio a uma solução de 1-metil-1H-[1,2,4]triazol (8 g, 96,43 mmols) em tetra-hidrofurano (1000 mL), e a solução foi agitada a esta temperatura por 30 minutos. Uma solução de [S(S)]—N-[2- [[(1,1 -dimetiletil)dimetilsilil]oxi]etilideno]-2-metil-2-propanossulfinamida (107 g, 385 mmols) Rech, J. C. et al. JACS (2007), 129(3), 490-491) em 1200 mL de tetra-hidrofurano foi adicionada gota a gota a -78°C e agitada por 3 horas. A mistura foi extinta com NH4Cl aquoso saturado (200 mL) e extraída com acetato de etila (1000 mL*3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com NaCl aquoso saturado e secas sobre Na2SO4. Sólidos foram eliminados por filtração, e o filtrado foi concentrado para resultar no material bruto que foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (eluição gradiente com éter de petróleo/acetato de etila de 20/1 a 3/1) para resultar no composto do título (100 g, 72%) como um óleo amarelo. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 0,00 (s, 3H), 0,04 (s, 3H), 0,85 (s, 3H), 1,3 (s, 9H), 4,0 (s, 3H), 4,24,6 (m, 2H), 4,7 (m, 1H), 7,9 (s, 1H). Intermediário 179(2S)-2-Amino-2-(2-metil-1,2,4-triazol-3-il)etanol

[000501] Uma quantia de 2 M de HCl em terc-butil metil éter (320 mL) foi adicionada lentamente a uma solução de Intermediário 178 (70 g, 194 mmols) em MeOH (330 mL) a 0°C A mistura foi agitada em banho de resfriamento durante a noite. Terc-butil metil éter (200 mL) foi adicionado e a mistura foi agitada por uma hora. Sólidos da mistura foram filtrados para resultar no composto do título como um sólido branco do sal bis-HCl (23 g, 87%). 1H RMN (400 MHz, D2O) δ 3,75 (s, 3H), 3,8 (d, 2H) 4,7 (t, 1H), 7,8 (s, 1H). MS (ES) MH+: 143 para C5H10F2N4O. Intermediário 180 (S)-2-(5-( 1,3-dioxolan-2-il)-6,7-diflúorbenzo[d]isoxazol-3-ilamino)-2-( 1 - metil-1 H-1,2,4-triazol-5-il)etanol

[000502] Intermediário 180 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 17 usando Intermediário 179 e Intermediário 16. MS (ES) MH+: 368 para C15H15F2N5O4. Intermediário 181 (S)-3-(5-( 1,3-Dioxolan-2-il)-6,7-diflúorbenzo[d]isoxazol-3-il)-4-( 1 -metil- 1H-1,2,4-triazol-5-il)oxazolidin-2-ona

[000503] Intermediário 181 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 18 usando Intermediário 180. 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 1,6 (br.s., 4H), 4,0-4,1 (m, 2H), 4,15 (s, 3H), 4,8-5,0 (m, 1H), 5,8 (dd, 1H), 7,9 (s, 1H), 8,4 (dd, 1H). MS (ES) MH+: 394 para C16H13F2N5O5. Intermediário 182 (S)-6,7-Diflúor-3-(4-(1-metil-1 H-1,2,4-triazol-5-il)-2-oxoxazolidin-3- il)benzo[d]isoxazol-5-carbaldeído

[000504] Intermediário 182 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 19 usando Intermediário 181. MS (ES) MH+: 350 para C14H9F2N2O4. Intermediário 1836-((2R,6R)-2,6-Dimetilmorfolino)-7-flúor-3-((S)-4-(1-metil-1 H-1,2,4- triazol-5-il)-2-oxoxazolidin-3-il)benzo[d]isoxazol-5-carbaldeído

[000505] Intermediário 183 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 20 usando Intermediário 182. MS (ES) MH+: 445 para C20H21FN6O5. Intermediário 184 S(R)—N-[(1 R)-2-[terc-Butil(dimetil)silil]óxi-1 -(2-metil-1,2,4-triazol-3- il)etil]-2-metil-propano-2-sulfinamida

[000506] Uma quantia de n-butil lítio (38,57 mL, 96,43 mmols) foi adicionada gota a gota a -78°C sob nitrogênio a uma solução de 1- metil-1H-[1,2,4]triazol (8 g, 96,43 mmols) em tetra-hidrofurano (250 mL), e a solução foi agitada a esta temperatura por 30 minutos. Uma solução de [S(R)]-N-[2-[[(1,1-dimetiletil)dimetilsilil]oxi]etilideno]-2-metil- 2-propanossulfinamida (22,3 g (80,36 mmols) (Seguin, C. et al. J. Org. Chem. (2009), 7-((18), 6986-6992) em 20 mL de tetra-hidrofurano foi adicionada gota a gota a -78°C e agitada por 3 horas. A mistura foi extinta com NH4Cl aquoso saturado (40 mL). A reação acima foi reali-zada novamente em um segundo lote. Os dois lotes, após o NH4Cl aquoso, foram combinados e extraídos com acetato de etila (100 mLx3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com NaCl aquoso saturado e secas sobre Na2SO4. Sólidos foram eliminados por filtração, e o filtrado foi concentrado para resultar no material bruto que foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (eluição gradi-ente com éter de petróleo/acetato de etila de 20/1 a 3/1) para resultar no composto do título (31,8 g, 55%) como um óleo amarelo. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 0,00 (s, 3H), 0,04 (s, 3H), 0,85 (s, 3H), 1,3 (s, 9H), 4,0 (s, 3H), 4,2-4,6 (m, 2H), 4,7 (m, 1H), 7,9 (s, 1H). Intermediário 185 (2R)-2-Amino-2-(2-metil-1,2,4-triazol-3-il)etanol

[000507] Uma quantia de 2 M de HCl em terc-butil metil éter (210 mL) foi adicionada lentamente a uma solução de Intermediário 184 (45 g, 135 mmols) em MeOH (210 mL) a 0°C A mistura foi agitada em banho de resfriamento durante a noite. Terc-butil metil éter (200 mL) foi adicionado e a mistura foi agitada por uma hora. Sólidos da mistura foram filtrados para resultar no composto do título como um sólido branco do sal bis-HCl (23 g, 87%). 1H RMN (400 MHz, d4-MeOH) δ 3,9 (d, 2H) 4,0 (s, 3H), 4,8 (t, 1H), 8,0 (s, 1H). MS (ES) MH+: 143 para C5H10F2N4O. Intermediário 186 (R)-2-(5-(1,3-Dioxolan-2-il)-6,7-diflúorbenzo[d]isoxazol-3-ilamino)-2-(1- metil-1 H-1,2,4-triazol-5-il)etanol

[000508] Intermediário 186 foi sintetizado segundo o procedimento para a preparação de Intermediário 17 usando Intermediário 185 e In-termediário 16. MS (ES) MH+: 368 para C15H15F2N5O4. Intermediário 187 (R)-3-(5-(1,3-Dioxolan-2-il)-6,7-diflúorbenzo[d]isoxazol-3-il)-4-(1-metil- 1 H-1,2,4-triazol-5-il)oxazolidin-2-ona

[000509] Intermediário 187 foi sintetizado segundo o procedimento para a preparação de Intermediário 18 usando Intermediário 186. 1H RMN (300 MHz, CDCl3) δ 1,6 (br.s., 4H), 4,0-4,1 (m, 2H), 4,15 (s, 3H), 4,75-5,0 (m, 1H), 5,8 (dd, 1H), 7,9 (s, 1H), 8,4 (dd, 1H). MS (ES) MH+: 394 para C16H13F2N5O5. Intermediário 188(R)-6,7-Diflúor-3-(4-(1-metil-1H-1,2,4-triazol-5-il)-2-oxoxazolidin-3- il)benzo[d]isoxazol-5-carbaldeído

[000510] Intermediário 188 foi sintetizado segundo o procedimento para a preparação de Intermediário 19 usando Intermediário 187. MS (ES) MH+: 350 para C14H9F2N2O4. Intermediário 1896-((2R,6R)-2,6-Dimetilmorfolino)-7-flúor-3-((R)-4-(1-metil-1H-1,2,4- triazol-5-il)-2-oxoxazolidin-3-il)benzo[d]isoxazol-5-carbaldeído

[000511] Intermediário 189 foi sintetizado segundo o procedimento para a preparação de Intermediário 20 usando Intermediário 188. MS (ES) MH+: 445 para C20H21FN6O5. Intermediário 190 2-(((benzilóxi)carbonil)amino)-3-hidroxibutanoato de (2S,3S)-metila

[000512] A uma solução agitada de (2S,3S)-metil 2-amino-3- hidroxibutanoato (2,5 g, 14,73 mmols) em uma mistura 1:1 de tetra- hidrofurano e água (50 mL), bicarbonato de sódio (1,9 g, 22,10 mmols) foi adicionado e a mistura foi resfriada a 0°C e, a esta, cloroformato de benzila (2,76 g, 16,21 mmols) foi adicionado gota a gota ao longo de um período de 30 minutos. A mistura foi então agitada à temperatura ambiente por 16 horas. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila (25 mL), camadas orgânicas foram separadas, lavadas com sal-moura (25 mL) e secas sobre sulfato de sódio. Remoção de solventes sob vácuo rendeu o produto bruto, o qual foi purificado por cromato- grafia em coluna de sílica-gel (230-400 mesh) usando um gradiente de acetato de etila em éter pet.. Rendimento: 3,4 g (86%) 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,09 (d, 3H), 3,89 (s, 3H), 3,99 (t, 1H), 4,01-4,06 (m, 1H), 5,00 (d, 1H), 5,04 (s, 2H), 7,30-7,40 (m, 5H), 7,63 (d, 1H). MS (ES) MH+: 268,1 para C13H17NO5. Intermediário 191 2-(((benzilóxi)carbonil)amino)-3-((tetra-hidro-2H-piran-2-il)óxi)buta- noato de (2S,3S)-metila

[000513] A uma solução agitada de Intermediário 190 (2,0 g, 7,89 mmols) em diclorometano (20 mL), p-tolueno sulfonato de piridínio (0,79 g, 3,16 mmols) e 2,3-di-hidropiran (1,02 g, 11,85 mmols) foram adicionados de uma vez e a solução foi agitada à temperatura ambien-te por 16 horas. Solução saturada de bicarbonato de sódio (50 mL) foi adicionada à mistura de reação, a camada orgânica foi separada e a camada aquosa foi extraída com diclorometano (2x50 mL). Camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (50 mL) e solução de salmoura (50 mL) e secas sobre sulfato de sódio. Remoção de solvente rendeu o produto bruto, o qual foi purificado por cromatografia flash em coluna (sílica-gel: 60-120 mesh) usando um gradiente de acetato de etila em éter pet.. Rendimento: 2,4 g (87%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 1,10 & 1,15 (d, 3H), 1,41-1,58 (m, 6H), 3,36-3,43 (m, 1H), 3,63 (s, 3H), 3,69-3,73 (m, 1H), 3,99 (q, 1H), 4,15 & 4,27 (t, 1H), 4,57 & 4,72 (s, 1H), 5,03 (s, 2H), 7,28-7,34 (m, 5H), 7,71 & 7,79 (d, 1H). Intermediário 192 ((2R,3S)-1-hidróxi-3-((tetra-hidro-2H-piran-2-il)óxi)butan-2-il)carbamato de benzila

[000514] A uma solução agitada de Intermediário 191 (2,4 g, 7,12 mmols) em uma mistura 7:3 de tetra-hidrofurano e metanol (20 mL), borohidreto de sódio (0,32 g, 8,55 mmols) foi adicionado em porções a 5°C e a solução foi agitada à temperatura ambiente por 3 horas. Os voláteis foram removidos sob vácuo e o resíduo foi dissolvido em ace-tato de etila (50 mL) e lavado com água (25 mL). A camada aquosa foi extraída com acetato de etila (2x25 mL). As camadas orgânicas com-binadas foram lavadas com solução de salmoura (25 mL) e secas so-bre sulfato de sódio. Remoção de solventes rendeu o produto bruto, o qual foi levado à próxima etapa sem purificação adicional. Rendimento: 1,6 g (70%). Intermediário 193 (2R,3S)-2-amino-3-((tetra-hidro-2H-piran-2-il)óxi)butan-1-ol

[000515] A uma solução agitada Intermediário 192 (1,6 g, 4,95 mmols) em acetato de etila (20 mL), trietilamina (1 mL) e paládio em carvão 10% (0,16 g, 10% em peso) foram adicionados e a mistura foi agitada à temperatura ambiente sob 20 mm de pressão de hidrogênio por 6 horas. A mistura foi filtrada e os voláteis foram removidos sob vácuo e o produto bruto foi levado à próxima etapa sem purificação. Rendimento: 0,93 g (99%). Intermediário 194 5-(1,3-dioxolan-2-il)-2,3,4-Trifluoro-N'-hidróxi-N-((2R,3S)-1-hidróxi-3- ((tetra-hidro-2H-piran-2-il)óxi)butan-2-il)benzimidamida

[000516] A uma solução agitada de Intermediário 194 (0,95 g, 5,02 mmols) em dimetil formamida (10 mL), trietilamina (0,76 g, 7,53 mmols) foi adicionada e a mistura foi agitada à temperatura ambiente por 20 minutos. Intermediário 16 (1,41 g, 5,02 mmols) foi adicionado e a mistura foi agitada à temperatura ambiente por mais duas horas. A mistura foi vertida em água gelada (50 mL) e extraída com acetato de etila (3x50 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com água (2x25 mL), solução de salmoura (25 mL) e secas sobre sulfato de sódio. Remoção de solvente rendeu o produto bruto, o qual foi purificado por cromatografia flashem coluna de sílica-gel usando um gradiente de acetato de etila em éter pet.. Este composto foi obtido como um mistura de diastereômeros. Rendimento: 1,0 g (46%) 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,01 & 1,09 (d, 3H), 1,16-1,56 (m, 6H), 2,77-2,79 &2,88-2,90 (m, 1H), 3,38-3,78 (m, 5H), 3,99-4,05 (m, 4H), 4,43 & 4,56 (s, 1H), 4,66 & 4,74 (t, 1H), 5,69 & 5,80 (d, 1H), 6,03 (s, 1H), 7,36-7,38 (m, 1H), 10,00 & 10,09 (s, 1H). 19F RMN (376,5 MHz, DMSO-d6) δ: -133,89 (m), -138,56 (m), -159,90 (m). MS (ES) MH+: 435,3 para C19H25F 3N2O6- Intermediário 195 (2R,3S)-2-(5-(1,3-Dioxolan-2-il)-6,7-diflúorbenzo[d]isoxazol-3-il)amino)- 3-((tetra-hidro-2H-piran-2-il)óxi)butan-1-ol

[000517] A uma solução agitada de Intermediário 194 (1,0 g, 2,30 mmols) em dimetil formamida (10 mL), carbonato de césio (1,13 g, 3,45 mmols) foi adicionado e a mistura foi agitada à temperatura ambiente por 16 horas. Água (10 mL) foi adicionada à mistura e a solução foi extraída com acetato de etila (3x25 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com água (25 mL), solução de salmoura (25 mL) e secas sobre sulfato de sódio. Remoção de solvente rendeu o produto bruto, o qual foi purificado adicionalmente por cromatografia flashem coluna de sílica-gel usando acetato de etila 75% em éter pet.. Este composto foi obtido como uma mistura de diastereômeros. Rendimento: 0,60 g (63%). MS (ES) MH+: 415,3 para ^^Fa^Oe- Intermediário 196 (4R)-3-(5-(1,3-dioxolan-2-il)-6,7-diflúorbenzo[d]isoxazol-3-il)-4-(1 S)-1- ((tetra-hidro-2H-piran-2-il)óxi)etil)oxazolidin-2-ona

[000518] A uma solução agitada de Intermediário 195 (0,60 g, 1,45 mmol) em acetonitrila (10 mL), trietilamina (0,5 mL, 3,62 mmols) foi adicionada a 0°C e a mistura foi agitada por 15 min utos. A esta, car-bonato de bis(2,5-dioxopirrolidin-1-il) (ou) carbonato de disuccinimidil (0,93 g, 3,62 mmols) foi adicionado a 0°C e a mistura foi agitada à temperatura ambiente por 16 horas. Os voláteis foram removidos sob vácuo e o resíduo foi dissolvido em acetato de etila (10 mL), lavado com água (5 mL), solução de salmoura (5 mL) e seco sobre sulfato de sódio. Remoção de solvente sob vácuo rendeu um sólido amarelo pá-lido, o qual foi purificado em um instrumento Combi-Flash usando um gradiente de acetato de etila em éter pet.. Este composto foi obtido como uma mistura de diastereômeros. Rendimento: 0,23 g (36%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,10 & 1,19 (d, 3H), 1,22-1,72 (m, 6H), 2,85-2,92 & 3,01-3,12 (m, 1H), 3,65-3,67 (m, 1H), 4,00-4,05 (m, 4H), 4,32-4,35 (m, 1H), 4,57-4,65 (m, 4H), 6,09 (s, 1H), 8,26 & 8,36 (d, 1H). 19F RMN (376,5 MHz, DMSO-d6) δ: -140,34 & -140,59 (d), -160,87 & 161,19 (d). Intermediário 197 6,7-Diflúor-3-((R)-4-(S)-1-hidroxietil)-2-oxoxazolidin-3-il)benzo[d]isoxa- zol-5-carbaldeído

[000519] A uma solução agitada de Intermediário 196 (0,23 g, 0,68 mmol) em 1,4-dioxano (3 mL), ácido clorídrico 6N (3 mL) foi adicionado a 0°C e a mistura foi agitada à temperatura ambiente por uma hora. A mistura foi vertida em água gelada (25 mL) e extraída com acetato de etila (3x25 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com água (15 mL), solução de salmoura (15 mL) e secas sobre sulfato de sódio. Remoção de solvente rendeu o produto bruto, o qual foi levado à pró-xima etapa sem purificação. Rendimento: 0,15 g (92%). MS (ES) MH+: 313,1 para C13H10F2N2O5. Intermediário 198 6-((2R,6R)-2,6-Dimetilmorfolino)-7-flúor-3-((R)-4-((S)-1-hidroxietil)-2- oxoxazolidin-3-il)benzo[d]isoxazol-5-carbaldeído

[000520] A uma solução agitada de Intermediário 197 (0,15 g, 0,48 mmol) em acetonitrila (2 mL), foi adicionada diisopropil etilamina (0,09 g, 0,72 mmol) seguida de (2R,6R)-2,6-dimetilmorfolina (0,06 g, 0,53 mmol) e a mistura foi aquecida a 80°C por 6 horas em um tubo vedado. A solução foi resfriada à temperatura ambiente e os voláteis foram removidos sob vácuo para obter o produto bruto, o qual foi purificado em um instrumento Combi-Flash usando um gradiente de acetato de etila em éter pet. para obter o composto do título como sólido amarelo pálido. Rendimento: 0,12 g (77%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,05 (d, 3H), 1,22 (d, 6H), 2,99-3,04 (m, 2H), 3,36-3,39 (m, 2H), 4,12-4,15 (m, 2H), 4,31-4,33 (m, 1H), 4,52-4,60 (m, 3H), 5,22 (d, 1H), 8,63 (s, 1H), 10,32 (s, 1H). 19F RMN (376,5 MHz, DMSO-d6) δ: -146,94 (d). MS (ES) MH+: 408,3 para C19H22FN3O6. Intermediário 199 Metanossulfonato de [(4R)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-dimetilmorfolin-4-il]-5- (1,3-dioxolan-2-il)-7-flúor-1,2-benzoxazol-3-il}-2-oxo-1,3-oxazolidin-4- il]metila

[000521] A uma solução agitada de Intermediário 107 (0,3 g, 0,68 mmol) em diclorometano (5 mL), trietilamina (0,14 mL, 1,02 mmol) e metanossulfonil cloreto (0,12 g, 1,02 mmol) foram adicionados a 0°C seguidos de cloreto de metanossulfonila (1,63 g, 8,55 mmols). A solu-ção resultante foi agitada à temperatura ambiente por um período de uma hora. Água (2 mL) foi adicionada à mistura de reação e ela foi ex-traída com acetato de etila (2x10 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com solução de salmoura (5 mL), secas sobre sulfato de sódio e solventes foram removidos sob vácuo para obter o produto bruto, o qual foi purificado por cromatografia flash em coluna de sílica-gel usando um gradiente de acetato de etila em hexano. Rendimento: 0,25 g (71%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,18 (d, 6H), 2,88-2,92 (m, 2H), 3,18 (s, 3H), 3,21-3,24 (m, 2H), 3,95-4,01 (m, 2H), 4,04-4,10 (m, 4H), 4,46-4,52 (m, 2H), 4,74-4,78 (m, 2H), 4,94-4,95 (m, 1H), 6,17 (s, 1H), 8,23 (s, 1H). MS (ES) MH+: 516,4 para C21H26FN3O9S. Intermediário 200 [(4S)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-Dimetilmorfolin-4-il]-7-flúor-5-formil-1,2- benzoxazol-3-il}-2-oxo-1,3-oxazolidin-4-il]acetonitrila

[000522] A uma solução agitada de Intermediário 199 (0,28 g, 0,54 mmol) em acetonitrila (5 mL), solução 1M de tetrabutil amônio fluoreto em tetra-hidrofurano (0,2 mL, 0,65 mmol) e cianeto de trimetilsilil (0,08 mL, 0,65 mmol) foram adicionados e a mistura foi agitada à temperatu-ra ambiente por 2 dias. Água (2 mL) foi adicionada à mistura de reação e ela foi extraída com acetato de etila (2x10 mL). As camadas orgâni-cas foram lavadas com solução de salmoura (5 mL), secas sobre sul-fato de sódio e solventes foram removidos sob vácuo para obter o pro-duto bruto, o qual foi purificado por cromatografia flash em coluna de sílica-gel usando um gradiente de acetato de etila em hexano. Rendi-mento: 0,11 g (50%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,20 (d, 6H), 2,98-3,04 (m, 2H), 3,14-3,20 (m, 2H), 3,32-3,40 (m, 2H), 4,08-4,12 (m, 2H), 4,47-4,51 (m, 1H), 4,81 (t, 1H), 4,90-4,92 (m, 1H), 8,56 (s, 1H), 10,30 (s, 1H). MS (ES) MH+: 403,4 para C19H19FN4O5. Intermediário 201 (R)-4-(R)-1,2-Di-hidroxietil)-3-(6-((2R,6R)-2,6-dimetilmorfolino)-5-(1,3- dioxolan-2-il)-7-fluorobenzo[d]isoxazol-3-il)oxazolidin-2-ona

[000523] A uma solução de Intermediário 120 (0,50 g, 1,15 mmol) em uma mistura de t-butanol e água (10 mL; 1:1), AD-mix-β (5,0 g) foi adi-cionado e a mistura foi agitada à temperatura ambiente por 16 horas. Sulfito de sódio sólido (5,0 g) foi adicionado a essa mistura a 0°C e ela foi agitada à temperatura ambiente por uma hora. A mistura foi extraída com acetato de etila (3x15 mL) e as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (10 mL), salmoura (10 mL) e secas sobre sulfato de sódio. Remoção de solvente sob vácuo rendeu sólido, o qual foi levado à próxima etapa sem purificação adicional. Rendimento: 0,50 g (93%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,22 (br s, 6H), 2,88-2,92 (m, 2H), 3,20-3,22 (m, 2H), 3,32-3,36 (m, 1H), 3,43-3,44 (m, 1H), 3,96-4,01 (m, 2H), 4,03-4,10 (m, 4H), 4,16-4,18 (m, 1H), 4,56-4,62 (m, 2H), 4,75-4,76 (m, 1H), 4,86 (t, 1H), 5,36 (d, 1H), 6,18 (s, 1H), 8,33 (s, 1H). MS (ES) MH+: 468,3 para C21H26FN3O8. Intermediário 202 (R)-4-(S)-1,2-Di-hidroxietil)-3-(6-((2R,6R)-2,6-dimetilmorfolino)-5-(1,3- dioxolan-2-il)-7-fluorobenzo[d]isoxazol-3-il)oxazolidin-2-ona

[000524] Intermediário 202 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 201 usando Intermediário 120 (0,50 g, 1,15 mmol) e AD-mix-α (5,0 g). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,23 (br s, 6H), 2,87-2,91 (m, 2H), 3,20-3,22 (m, 2H), 3,33-3,36 (m, 1H), 3,43-3,44 (m, 1H), 3,96-4,02 (m, 2H), 4,03-4,10 (m, 4H), 4,16-4,17 (m, 1H), 4,56-4,64 (m, 2H), 4,75-4,76 (m, 1H), 4,86 (t, 1H), 5,36 (d, 1H), 6,18 (s, 1H), 8,33 (s, 1H). MS (ES) MH+: 468,3 para C21H26FN3O8. Intermediário 203 (5R)-3-{6-[(2R,6R)-2,6-dimetilmorfolin-4-il]-5-(1,3-dioxolan-2-il)-7-flúor- 1,2-benzoxazol-3-il}-2-oxo-1,3-oxazolidina-5-carbonitrila

[000525] Uma solução de Intermediário 89 (0,38 g, 0,84 mmol) em tricloroacetonitrila (5 mL) foi aquecida a 95°C por duas horas. Os volá-teis foram evaporados e o produto bruto foi purificado por cromatogra- fia flash em coluna de sílica-gel usando um gradiente de acetato de etila em hexano 25-30%. Rendimento: 0,13 g (36%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-dθ) δ: 1,25 (br s, 6H), 2,88-2,92 (m, 2H), 3,22 (d, 2H), 3,96-4,01 (m, 2H), 4,04-4,10 (m, 4H), 4,34-4,37 (m, 1H), 4,48 (t, 1H), 5,93 (dd, 1H), 6,17 (s, 1H), 8,35 (s, 1H). MS (ES) MH+: 433,3 para C20H21FN4O6. Intermediário 204 2-(((benzilóxi)carbonil)amino)-3-((tetra-hidro-2H-piran-2- il)óxi)butanoato de (2S,3R)-metila

[000526] A uma solução agitada de (2S,3R)-metil 2- (((benzilóxi)carbonil)amino)-3-hidroxibutanoato (5,0 g, 18,72 mmols) em diclorometano (100 mL), p-tolueno sulfonato de piridínio (0,47 g, 1,87 mmol) e 2,3-di-hidropiran (2,6 mL, 28,08 mmols) foram adiciona-dos de uma vez e a solução foi agitada à temperatura ambiente por 16 horas. Solução saturada de bicarbonato de sódio (50 mL) foi adiciona-da à mistura de reação, a camada orgânica foi separada e a camada aquosa foi extraída com diclorometano (2x50 mL). As camadas orgâ-nicas combinadas foram lavadas com água (50 mL) e solução de sal-moura (50 mL) e secas sobre sulfato de sódio. Remoção de solvente rendeu o produto bruto, o qual foi purificado por cromatografia flashem coluna (sílica-gel: 60-120 mesh) usando um gradiente de acetato de etila em éter pet.. O produto foi obtido como uma mistura de diaste- reômeros. Rendimento: 5,9 g (90%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,10 & 1,15 (d, 3H), 1,38-1,72 (m, 6H), 3,39-3,41 (m, 1H), 3,60-3,64 (m, 1H), 3,65 (s, 3H), 4,17-4,25 (m, 2H), 4,57 & 4,67 (t, 1H), 5,05 & 5,06 (s, 2H), 7,31-7,37 (m, 5H), 7,26 & 7,58 (d, 1H). Intermediário 205 ((2R,3R)-1-hidróxi-3-((tetra-hidro-2H-piran-2-il)óxi)butan-2-il)carbamato de benzila

[000527] A uma solução agitada de Intermediário 204 (5,90 g, 16,80 mmols) em uma mistura 7:3 de tetra-hidrofurano e metanol (200 mL), borohidreto de sódio (1,60 g, 42,02 mmols) foi adicionado em porções a 5°C e a solução foi agitada à temperatura ambiente por 3 horas. Vo-láteis foram removidos sob vácuo e o resíduo foi dissolvido em acetato de etila (50 mL), lavado com água (25 mL) e a camada aquosa foi ex-traída com acetato de etila (2x25 mL). As camadas orgânicas combi- nadas foram lavadas com solução de salmoura (25 mL) e secas sobre sulfato de sódio. Remoção de solventes rendeu o produto bruto, o qual foi levado à próxima etapa sem purificação adicional. Rendimento: 4,9 g (90%). MS (ES) MH+: 324,3 para C17H25NO5 Intermediário 206 (2R,3R)-2-Amino-3-((tetra-hidro-2H-piran-2-il)óxi)butan-1-ol

[000528] A uma solução agitada de Intermediário 205 (4,9 g, 15,17 mmols) em acetato de etila (50 mL), trietilamina (1 mL) e paládio em carvão 10% (1,0 g, 10% em peso) foram adicionados e a mistura foi agitada à temperatura ambiente sob 20 mm de pressão de hidrogênio por 6 horas. A mistura foi filtrada e os voláteis foram removidos sob vácuo e o produto bruto foi levado à próxima etapa sem purificação. Rendimento: 2,5 g (87%) Intermediário 207 5-(1,3-Dioxolan-2-il)-2,3,4-trifluoro-N'-hidróxi-N-((2R,3R)-1-hidróxi-3- ((tetra-hidro-2H-piran-2-il)óxi)butan-2-il)benzimidamida

[000529] A uma solução agitada de Intermediário 206 (2,5 g, 13,22 mmols) em dimetil formamida (20 mL), trietilamina (2,0 g, 19,84 mmols) foi adicionada e a mistura foi agitada à temperatura ambiente por 20 minutos. A esta, Intermediário 16 (3,1 g, 11,24 mmols) foi adicionado e a mistura foi agitada à temperatura ambiente por mais duas horas. A mistura foi vertida em água gelada (50 mL), extraída com acetato de etila (3x50 mL), camadas orgânicas foram lavadas com água (2x25 mL), solução de salmoura (25 mL) e secas sobre sulfato de sódio. Remoção de solvente rendeu o produto bruto, o qual foi puri-ficado por cromatografia flash em coluna de sílica-gel usando um gra-diente de acetato de etila em éter pet.. Rendimento: 2,2 g (38%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,08 & 1,12 (d, 3H), 1,44-1,72 (m, 6H), 3,65-3,85 (m, 1H), 3,36-3,42 (m, 2H), 3,76-3,78 (m, 2H), 3,96-4,05 (m, 5H), 4,57-4,75 (m, 2H), 5,61 (d, 1H), 6,04 (s, 1H), 7,36-7,38 (m, 1H), 10,04 & 10,08 (s, 1H). 19F RMN (376,5 MHz, DMSO-d6) δ: -134,33 (m), -138,45 (m), -159,79 (m). MS (ES) MH+: 435,3 para C19H25F 3N2O6. Intermediário 208 (2R,3R)-2-((5-(1,3-Dioxolan-2-il)-6,7-diflúorbenzo[d]isoxazol-3-il)ami- no)-3-((tetra-hidro-2H-piran-2-il)óxi)butan-1-ol

[000530] A uma solução agitada de Intermediário 207 (2,2 g, 5,07 mmols) em dimetil formamida (25 mL), carbonato de césio (3,65 g, 11,19 mmols) foi adicionado e a mistura foi agitada à temperatura am-biente por 16 horas. Água (10 mL) foi adicionada à mistura, extraída com acetato de etila (3x25 mL), as camadas orgânicas foram lavadas com água (25 mL), solução de salmoura (25 mL) e secas sobre sulfato de sódio. Remoção de solvente rendeu o produto bruto, o qual foi puri-ficado adicionalmente por cromatografia flash em coluna de sílica-gel usando acetato de etila 75% em éter pet.. Rendimento: 1,3 g (62%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,10 & 1,18 (d, 3H), 1,41-1,80 (m, 6H), 3,42-3,44 (m, 1H), 3,57-3,60 (m, 2H), 3,61-3,63 (m, 1H), 3,70-3,72 (m, 1H), 4,00-4,08 (m, 5H), 4,65-4,77 (m, 2H), 6,07 (s, 1H), 7,09 & 7,11 (d, 1H), 8,13 (t, 1H). 19F RMN (376,5 MHz, DMSO-de) δ: -143,47 (m), -162,10 (m). MS (ES) MH+: 415,3 para C19H24F2N2O6. Intermediário 209 (4R)-3-(5-(1,3-Dioxolan-2-il)-6,7-diflúorbenzo[d]isoxazol-3-il)-4-(1 R)-1 - ((tetra-hidro-2H-piran-2-il)óxi)etil)oxazolidin-2-ona

[000531] A uma solução agitada de Intermediário 208 (0,35 g, 0,84 mmol) em acetonitrila (10 mL), trietilamina (0,17 g, 1,69 mmol) foi adi-cionada a 0°C e a mistura foi agitada por 15 minuto s. A esta, bis(2,5- dioxopirrolidin-1-il)carbonato ou carbonato de disuccinimidila (0,23 g, 0,89 mmol) foi adicionado a 0°C e a mistura foi agi tada à temperatura ambiente por 16 horas. Voláteis foram removidos sob vácuo e o resí-duo foi dissolvido em acetato de etila (10 mL), lavado com água (5 mL), solução de salmoura (5 mL) e seco sobre sulfato de sódio. Remoção de solvente sob vácuo rendeu sólido amarelo pálido, o qual foi purificado em um instrumento Combi-Flash usando um gradiente de acetato de etila em éter pet.. Rendimento: 0,12 g (32%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 1,03 & 1,09 (d, 3H), 1,22-1,72 (m, 6H), 3,42-3,44 (m, 1H), 3,70-3,85 (m, 1H), 4,00-4,04 (m, 4H), 4,35 (t, 1H), 4,55 (t, 1H), 4,62-4,68 (m, 2H), 4,79 (t, 1H), 6,09 (s, 1H), 8,25 (d, 1H). 19F RMN (376,5 MHz, DMSO-d6) δ: -140,46 (d), -161,07 (m). Intermediário 2106,7-Diflúor-3-((R)-4-(R)-1-hidroxietil)-2-oxoxazolidin-3- il)benzo[d]isoxazol-5-carbaldeído

[000532] A uma solução agitada de Intermediário 209 (0,12 g, 0,27 mmol) em 1,4-dioxano (2 mL), ácido clorídrico 6N (2 mL) foi adicionado a 0°C e a mistura foi agitada à temperatura ambiente por uma hora. A mistura foi vertida em água gelada (25 mL) e extraída com acetato de etila (3x25 mL). Camadas orgânicas foram lavadas com água (15 mL), solução de salmoura (15 mL) e secas sobre sulfato de sódio. Remoção de solvente rendeu o produto do título. Rendimento: 0,07 g (82%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 0,99 (d, 3H), 4,27-4,28 (m, 1H), 4,574,66 (m, 3H), 5,28 (d, 1H), 8,70 (d, 1H), 10,18 (s, 1H). 19F RMN (376,5 MHz, DMSO-d6) δ: -140,41 (d), -161,03 (d). MS (ES) MH+: 313,1 para C13H10F2N2O5. Intermediário 211 6-((2R,6R)-2,6-dimetilmorfolino)-7-flúor-3-((R)-4-(R)-1-hidroxietil)-2- oxoxazolidin-3-il)benzo[d]isoxazol-5-carbaldeído

[000533] A uma solução agitada de Intermediário 210 (0,07 g, 0,22 mmol) em acetonitrila (2 mL), foi adicionada diisopropil etilamina (0,04 g, 0,34 mmol) seguida de (2R,6R)-2,6-dimetilmorfolina (0,03 g, 0,25 mmol) e a mistura foi aquecida a 80°C por 6 ho ras em um tubo vedado. A solução foi resfriada à temperatura ambiente e os voláteis foram removidos sob vácuo para obter o produto bruto, o qual foi puri-ficado em um instrumento Combi-Flash usando um gradiente de aceta-to de etila em éter pet. para obter o composto do título como sólido amarelo pálido. Rendimento: 0,07 g (77%). 1H RMN (300 MHz, DMSO- d6) δ: 0,98 (d, 3H), 1,20 (d, 6H), 2,99-3,03 (m, 2H), 3,35-3,39 (m, 2H), 4,11-4,13 (m, 1H), 4,25-4,35 (m, 1H), 4,57-4,63 (m, 4H), 5,25 (d, 1H), 8,55 (s, 1H), 10,30 (s, 1H). 19F RMN (376,5 MHz, DMSO-d6) δ: -161,03 (d). MS (ES) MH+: 408,3 para C19H22FN3O6. Intermediário 212 5-(1,3-Dioxolan-2-il)-2,3,4-trifluoro-N-((2R,3R)-1-flúor-3-hidroxibutan-2- il)-N'-hidroxibenzimidamida

[000534] Intermediário 212 foi sintetizado segundo o procedimento para a preparação de Intermediário 207 usando (2R,3S)-3-amino-4- fluorobutan-2-ol (0,35 g, 2,48 mmols) (preparados de acordo com o procedimento da literatura; Tet. Lett.1985, 26, 4687 & WO2005/66119 A2, 2005, coluna 27-28 e Intermediário 16 (0,84 g, 2,98 mmols). Ren-dimento: 0,55 g (83%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 1,02 (d, 3H), 3,69 (br s, 2H), 3,97-4,00 (m, 4H), 4,17-4,44 (m, 3H), 5,76 (d, 1H), 6,03 (s, 1H), 7,29 (t, 1H), 10,18 (s, 1H). MS (ES) MH+: 353,4 para C14H16F 4N2O4. Intermediário 213 (2R,3R)-3-(5-(1,3-Dioxolan-2-il)-6,7-diflúorbenzo[d]isoxazol-3-il)amino)- 4-fluorobutan-2-ol

[000535] Intermediário 213 foi sintetizado segundo o procedimento para a preparação de Intermediário 208 usando Intermediário 204 (0,39 g, 1,08 mmol). Rendimento: 0,26 g (73%). MS (ES) MH+: 333,4 para C14H15F 3N2O4. Intermediário 214 (4R,5R)-3-(5-(1,3-Dioxolan-2-il)-6,7-diflúorbenzo[d]isoxazol-3-il)-4- (fluorometil)-5-metiloxazolidin-2-ona

[000536] Intermediário 214 foi sintetizado segundo o procedimento para a preparação de Intermediário 209 usando Intermediário 205 0,26 g, 0,78 mmol). Rendimento: 0,07 g (25%). 1H RMN (300 MHz, DMSO- d6) δ: 1,52 (d, 3H), 4,00-4,05 (m, 4H), 4,49 (d, 1H), 4,73 (dd, 1H), 4,865,06 (m, 2H), 6,09 (s, 1H), 8,30 (d, 1H). 19F RMN (376,5 MHz, DMSO- d6) δ: -140,27 (d), -161,04 (d), -236,04 (s). MS (ES) MH+: 359,3 para C15H13F3N2O5. Intermediário 215 6,7-Diflúor-3-((4R,5R)-4-(fluorometil)-5-metil-2-oxoxazolidin-3- il)benzo[d]isoxazol-5-carbaldeído

[000537] Intermediário 215 foi sintetizado segundo o procedimento para a preparação de Intermediário 210 usando Intermediário 206 (0,07 g, 0,20 mmol). Rendimento: 0,06 g (85%). MS (ES) MH+: 315,3 para C13H9F3N2O4. Intermediário 216 6-((2R,6R)-2,6-dimetilmorfolino)-7-flúor-3-((4R,5R)-4-(fluorometil)-5- metil-2-oxoxazolidin-3-il)benzo[d]isoxazol-5-carbaldeído

[000538] Intermediário 216 foi sintetizado segundo o procedimento para a preparação de Intermediário 211 usando Intermediário 207 (0,06 g, 0,18 mmol). Rendimento: 0,03 g (33%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 1,20 (d, 6H), 1,52 (d, 3H), 2,99-3,03 (m, 2H), 4,10-4,12 (m, 3H), 4,49 (d, 2H), 4,73 (dd, 1H), 4,87-4,94 (m, 1H), 5,05 (d, 1H), 8,55 (s, 1H), 10,30 (s, 1H). 19F RMN (376,5 MHz, DMSO-d6) δ: -146,81 (s), -236,15 (s). Intermediário 217 5-(1,3-Dioxolan-2-il)-2,3,4-trifluoro-N'-hidróxi-N-((2S,3R)-3-hidróxi-1- metoxibutan-2-il)benzimidamida

[000539] Intermediário 217 foi sintetizado segundo o procedimento para a preparação de Intermediário 207 usando (2R,3S)-3-amino-4- metoxibutan-2-ol (0,73 g, 4,70 mmols), preparado de acordo com o procedimento da literatura; Tet. Lett,1985, 26, 4687. (O amino álcool foi preparado como uma mistura de diastereômeros na razão de 1:3) e Intermediário 16 (1,45 g, 5,15 mmols). O produto foi levado à próxima etapa sem purificação adicional. Rendimento: 1,25 g (73%). MS (ES) MH+: 365,4 para C15H19F3N2O5. Intermediário 218 (2R,3S)-3-(5-(1,3-dioxolan-2-il)-6,7-diflúorbenzo[d]isoxazol-3-il)amino)- 4-metoxibutan-2-ol

[000540] Intermediário 218 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 208 usando Intermediário 217 (1,25 g, 3,43 mmols). O produto foi levado à próxima etapa sem purificação adicional. Rendimento: 0,60 g (51%). MS (ES) MH+: 345,4 para C15H18F2N2O5. Intermediário 219 (4S,5R)-3-(5-(1,3-Dioxolan-2-il)-6,7-diflúorbenzo[d]isoxazol-3-il)-4- (metoximetil)-5-metiloxazolidin-2-ona

[000541] Intermediário 219 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 209 usando Intermediário 218 (0,50 g, 1,45 mmol). O produto foi levado à próxima etapa sem purificação adicional. Rendimento: 0,33 g (61%). MS (ES) MH+: 371,4 para C16H16F2N2O6. Intermediário 220 6,7-Diflúor-3-((4S,5R)-4-(metoximetil)-5-metil-2-oxoxazolidin-3- il)benzo[d]isoxazol-5-carbaldeído

[000542] Intermediário 220 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 210 usando Intermediário 219 (0,33 g, 0,89 mmol) e o produto foi levado à próxima etapa sem purificação adicional. Rendimento: 0,28 g (96%). MS (ES) MH+: 327,4 para C14H12F2N2O5. Intermediário 221 6-((2R,6R)-2,6-dimetilmorfolino)-7-flúor-3-((4S,5R)-4-(metoximetil)-5- metil-2-oxoxazolidin-3-il)benzo[d]isoxazol-5-carbaldeído

[000543] Intermediário 221 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação de Intermediário 211 usando Intermediário 220 (0,38 g, 0,86 mmol). O produto foi levado à próxima etapa sem purificação adicional. Rendimento: 0,28 g (77%). MS (ES) MH+: 422,5 para C20H24FN3O6. Exemplos Exemplo 1 (2R,4S,4aS)-11-flúor-2,4-dimetil-8-(2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il)-1,2,4,4a- tetra-hidro-2'H,6H-spiro[ 1,4-oxazino[4,3-a][ 1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina- 5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona

[000544] Uma mistura de Intermediário 17 (0,04 g, 0,1 mmol) e ácido barbitúrico (0,01 g, 0,1 mmol) em ácido acético (3 mL) foi aquecida a 110°C por duas horas. Os solventes foram evaporados e o resíduo foi dissolvido em metanol (1 mL). Água (3 mL) foi adicionada para precipi-tar sólidos, que foram filtrados e purificados por HPLC de fase reversa (acetato de amônio 10 mM em água, CH3CN) para render o composto do título como parte de uma mistura racêmica na forma de um sólido. Rendimento: 15 mg (35%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,9 (d, 3H), 1,1 (d, 3H), 2,9 (d, 1H), 3,1 (t, 1H), 3,7 (t, 2H), 3,8 (m, 1H), 3,9 (d, 1H), 4,1 (m, 3H), 4,6 (t, 2H), 7,75 (s, 1H), 11,5 (s, 1H), 11,8 (s, 1H). MS (ES) MH+: 474,4 para C21H20FN5O7. Síntese Alternativa do Exemplo 1

[000545] Intermediário 6 (800 mg, 1,95 mmol) e pirimidina- 2,4,6(1H,3H,5H)-triona (250 mg, 1,95 mmol) em uma mistura de ácido acético (8 mL) e água (2 mL) foram aquecidos a 110°C por 3,5 horas. O solvente foi removido e a mistura de reação foi purificada usando Cromatografia de Fluido Supercrítico (coluna Chiralpak IA com Fase Móvel isopropanol 40% e CO2 60%) para resultar no composto do título (571 mg, 61,7% de rendimento) como um sólido como primeiro composto a eluir. -1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 0,9 (d, 3H) 1,1 (d, 3H) 2,8-3,2 (m, 2H) 7,7 (s, 1H) 11,4 (s, 1H) 11,8 (s, 1H). MS (ES) MH+: 474 para C21H20FN5O7.

[000546] Também isolado da síntese da Síntese Alternativa do Exemplo 1 como o segundo componente a eluir da purificação por HPLC foi (2R,4R,4aR)-11-flúor-2,4-dimetil-8-(2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il)- 1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3-a][1,2]oxazolo[4,5- g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona (40 mg):

[000547] 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 0,95 (d, 3H), 1,3 (d, 3H), 3,1 (d, 1H), 3,45-4,3 (m, 8H), 4,5-4,7 (m, 2H), 7,75 (s, 1H), 11,45 (br. s., 1H), 11,7 (br. s., 1H). MS (ES) MH+: 474 para C21H20F N5O7. Exemplo 2 (2R,4S,4aS)-11 -flúor-2,4-dimetil-8-[(4R)-4-metil-2-oxo-1,3-oxazolidin-3- il]-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3-a][1,2]oxazolo[4,5- g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona

[000548] Uma mistura agitada de Intermediário 8 (0,15 g, 0,36 mmol) e ácido barbitúrico (0,04 g, 0,3 mmol) em ácido acético (1 mL) foi aquecida a 85°C por 16 horas. Os solventes foram evaporados, o resí-duo foi dissolvido em metanol (2 mL) e água (5 mL) foi adicionada. Os sólidos precipitados foram filtrados e purificados por HPLC de fase re-versa (acetato de amônio 10 mM em água, CH3CN), eluindo dois com-ponentes. O segundo componente a eluir foi isolado como um sólido e identificado como o composto do título. Rendimento: 35 mg (21%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,9 (d, 3H), 1,3 (d, 3H), 1,4 (d, 3H), 2,9 (d, 1H), 3,1 (t, 1H), 3,6-3,65 (m, 2H), 3,8 (m, 1H), 3,9 (d, 1H), 4,1 (d, 1H), 4,2 (q, 1H), 4,6-4,7 (m, 2H), 7,6 (s, 1H), 11,5 (s, 1H), 11,8 (s, 1H). MS (ES) MH+: 488,4 para C22H22FN6O7: [α]D20=—239 (c=1; MeOH).

[000549] Também isolado da síntese do Exemplo 2 como o primeiro componente a eluir da purificação por HPLC foi (2S,4R,4aR)-11-flúor- 2,4-dimetil-8-[(4R)-4-metil-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il]-1,2,4,4a-tetra- hidro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3-a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'- pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona:

[000550] Rendimento: 20 mg (12%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,9 (d, 3H), 1,3 (d, 3H), 1,4 (d, 3H), 2,9 (d, 1H), 3,1 (t, 1H), 3,6 (m, 2H), 3,75 (m, 1H), 3,9 (d, 1H), 4,1 (d, 1H), 4,2 (q, 1H), 4,6-4,7 (m, 2H), 7,6 (s, 1H), 11,45 (s, 1H), 11,8 (s, 1H). MS (ES) MH+: 488,4 para C22H22FN5O7[α]D20=+73 (c=1; MeOH).

[000551] Exemplos 3 a 34 foram preparados a partir de ácido barbi-túrico e o material de partida indicado usando o método descrito (com qualquer variação notada) para a síntese do Exemplo 2, a menos que notado de outra forma. Exemplo 3 (2R,4S,4aS)-11-flúor-2,4-dimetil-8-[(5S)-5-metil-2-oxo-1,3-oxazolidin-3- ill-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3-a][1,2]oxazolo[4,5- g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona

[000552] Exemplo 3 foi preparado a partir do Intermediário 9. O com-posto do título foi obtido como o segundo componente a eluir da purifi-cação por HPLC. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,9 (d, 3H), 1,1 (d, 3H), 1,45 (d, 3H), 2,9 (d, 1H), 3,1 (t, 1H), 3,65-3,7 (m, 2H), 3,75 (m, 2H), 3,9 (d, 1H), 4,1 (d, 1H), 4,2 (t, 1H), 4,95 (h, 1H), 7,7 (s, 1H), 11,4 (s, 1H), 11,8 (s, 1H). MS (ES) MH+: 488,4 para C22H22FN5O7, [α]D 20=-13O (c=1; MeOH).

[000553] Também isolado da síntese do Exemplo 3 como o primeiro componente a eluir da purificação por HPLC foi (2S,4R,4aR)-11-flúor- 2,4-dimetil-8-[(5S)-5-metil-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il]-1,2,4,4a-tetra- hidro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3-a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'- pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona:

[000554] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,9 (d, 3H), 1,1 (d, 3H), 1,45 (d, 3H), 2,9 (d, 1H), 3,10 (t, 1H), 3,65 (m, 2H), 3,7 (m, 2H), 3,9 (d, 1H), 4,1 (d, 1H), 4,2 (t, 1H), 4,95 (h, 1H), 7,75 (s, 1H), 11,4 (s, 1H), 11,8 (s, 1H). MS (ES) MH+: 488,4 para C22H22FN5O7; [α]D20=+101 (c=1; MeOH). Exemplo 4 (2R,4S,4aS)-11-flúor-2,4-dimetil-8-[(5R)-5-metil-2-oxo-1,3-oxazolidin-3- il]-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3-a][1,2]oxazolo[4,5- g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona

[000555] Exemplo 4 foi preparado a partir do Intermediário 10. O composto do título foi obtido como o primeiro componente a eluir da purificação por HPLC. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,9 (d, 3H), 1,1 (d, 3H), 1,45 (d, 3H), 2,9 (d, 1H), 3,1 (t, 1H), 3,65 (m, 2H), 3,7-3,8 (m, 2H), 3,9 (d, 1H), 4,1 (d, 1H), 4,2 (t, 1H), 4,95 (h, 1H), 7,75 (s, 1H), 11,45 (s, 1H), 11,8 (s, 1H). MS (ES) MH+: 488,4 para C22H22FN5O7, [α]D20=-188 (c=1; MeOH).

[000556] Também isolado da síntese do Exemplo 4 como o segundo componente a eluir da purificação por HPLC foi (2S,4R,4aR)-11-flúor- 2,4-dimetil-8-[(5R)-5-metil-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il]-1,2,4,4a-tetra- hidro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3-a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'- pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona:

[000557] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,9 (d, 3H), 1,1 (d, 3H), 1,45 (d, 3H), 2,9 (d, 1H), 3,1 (t, 1H), 3,65 (m, 2H), 3,7-3,8 (m, 2H), 3,9 (d, 1H), 4,1 (d, 1H), 4,2 (t, 1H), 4,95 (h, 1H), 7,7 (s, 1H), 11,4 (s, 1H), 11,8 (s, 1H). MS (ES) MH+: 488,4 para C22H22FN5O7. [α]D20=+179 (c=1; MeOH). Sínteses Alternativas Para Exemplo 4 Primeira Síntese Alternativa

[000558] Intermediário 12 (1,67 g, 3,96 mmols) e pirimidina- 2,4,6(1H,3H,5H)-triona (0,508 g, 3,96 mmols) em uma mistura de ácido acético (8 mL) e água (2 mL) foi aquecido a 110°C por duas horas. O solvente foi removido e a mistura de reação foi purificada por Cro- matografia de Fluido Supercrítico (coluna Chiralpak IA com 30% iso-propanol e 70% CO2 Fase Móvel) para resultar no composto do título (1,560 g, 81%) como um sólido como o primeiro componente a eluir. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 0,9 (d, 3H), 1,1 (d, 3H), 1,45 (d, 3H), 2,8-3,2 (m, 2H), 3,6-4,3 (m, 7H), 4,9-5,1 (m, 1H), 7,75 (s, 1H), 11,4 (s, 1H), 11,8 (s, 1H). MS (ES) MH+: 488 para C22H22FN5O7.

[000559] Também isolado da síntese do Exemplo 4 (Primeira Síntese Alternativa) como o segundo componente a eluir da purificação por HPLC foi (2R,4R,4aR)-11-flúor-2,4-dimetil-8-[(5R)-5-metil-2-oxo-1,3- oxazolidin-3-il]-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3- a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona:

[000560] 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 0,95 (d, 3H), 1,3 (d, 3H), 1,5 (d, 3H), 3,1 (d, 1H), 3,5-4,3 (m, 8H), 4,8-5,1 (m, 1H), 7,75 (s, 1H), 11,5 (br. s., 2H). MS (ES) MH+: 488 para C22H22FN5O7. Exemplo 4 (Segunda Síntese Alternativa)

[000561] Intermediário 20 (64 mg, 0,17 mmol) e pirimidina- 2,4,6(1H,3H,5H)-triona (25 mg, 0,20 mmol) em 3 mL de etanol foram aquecidos a 120°C por duas horas. Solvente foi removido e a mistura de reação foi purificada por Cromatografia de Fluido Supercrítico (co-luna Chiralpak IA com 30% isopropanol e 70% CO2Fase Móvel) para resultar no composto do título como um sólido como o primeiro com-ponente a eluir. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 0,9 (d, 3H), 1,1 (d, 3H), 1,45 (d, 3H), 2,8-3,2 (m, 2H), 3,6-4,3 (m, 7H), 4,9-5,1 (m, 1H), 7,75 (s, 1H), 11,4 (s, 1H), 11,8 (s, 1H). MS (ES) MH+: 488 para C22H22FN5O7. Exemplo 5 (2R,4S,4aS)-11-flúor-2,4-dimetil-8-[(4S)-4-metil-2-oxo-1,3-oxazolidin-3- il]-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3-a][1,2]oxazolo[4,5- g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona

[000562] Exemplo 5 foi preparado a partir do Intermediário 21. O composto do título foi isolado por HPLC de fase reversa (acetato de amônio 10 mM em água, CH3CN) como o primeiro a eluir de dois componentes. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,9 (d, 3H), 1,15 (d, 3H), 1,4 (d, 3H), 2,9 (d, 1H), 3,1 (t, 1H), 3,5-3,6 (m, 2H), 3,8 (m, 1H), 3,9 (d, 1H), 4,0 (d, 1H), 4,2 (q, 1H), 4,6-4,7 (m, 2H), 7,6 (s, 1H), 11,5 (s, 1H), 11,8 (s, 1H). MS (ES) MH+: 488,4 para C22H22FN5O7, [α]D 20=-92 (c=1; MeOH).

[000563] Também isolado da síntese do Exemplo 5 como o segundo componente a eluir da purificação por HPLC foi (2S,4R,4aR)-11-flúor- 2,4-dimetil-8-[(4S)-4-metil-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il]-1,2,4,4a-tetra- hidro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3-a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'- pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona

[000564] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,9 (d, 3H), 1,15 (d, 3H), 1,4 (d, 3H), 2,9 (d, 1H), 3,1 (t, 1H), 3,6-3,7 (m, 2H), 3,8-4,0 (m, 1H), 3,9 (d, 1H), 4,1 (d, 1H), 4,2 (q, 1H), 4,6-4,7 (m, 2H), 7,6 (s, 1H), 11,5 (s, 1H), 11,8 (s, 1H). MS (ES) MH+: 488,4 para C22H22FN5O7, [α]D20=+224 (c=1; MeOH). Síntese Alternativa do Exemplo 5

[000565] Uma solução de Intermediário 22 (1,14 g, 2,71 mmols) e pirimidina-2,4,6(1H,3H,5H)-triona (0,346 g, 2,71 mmols) em ácido acé-tico (8 mL) e de água (2 mL) foi aquecida a 110°C por duas horas. O solvente foi removido e a mistura de reação foi purificada usando Cromatografia de Fluido Supercrítico (Chiralpak IC coluna com 30% metanol e 70% CO2 Fase Móvel). O primeiro composto a eluir foi purifi-cado adicionalmente por dissolução em acetonitrila (30 mL) e diluição com água (60 mL) para resultar no composto do título como um sólido. (0,910 g, 69,0% de rendimento). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: δ 0,9 (d, 3H), 1,15 (d, 3H), 1,4 (d, 3H), 2,9 (d, 1H), 3,1 (t, 1H), 3,6-3,7 (m, 2H), 3,8 (m, 1H), 3,9 (d, 1H), 4,1 (d, 1H), 4,2 (q, 1H), 4,6-4,75 (m, 2H), 7,6 (s, 1H), 11,4 (s, 1H), 11,8 (s, 1H). MS (ES) MH+: 488 para C22H22FN5O7.

[000566] Também isolado da síntese de Síntese Alternativa do Exemplo 5 como o segundo componente a eluir da purificação por HPLC foi (2R,4R,4aR)-11-flúor-2,4-dimetil-8-[(4S)-4-metil-2-oxo-1,3- oxazolidin-3-il]-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3- a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona:

[000567] 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 1,0 (d, 3H), 1,3 (d, 3H), 1,4 (d, 3H), 3,1 (d, 1H), 3,5-4,3 (m, 7H), 4,5-4,8 (m, 2H), 7,6 (s, 1H), 11,5 (br. s., 1H), 11,7 (br. s., 1H). MS (ES) MH+: 488 para C22H22FN5O7. Exemplo 6 (2R,4S,4aS)-8-í(4S)-4-etil-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-ill-11-flúor-2,4-dime- til-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3-a][1,2]oxazolo[4,5- g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona

[000568] Exemplo 6 foi preparado a partir do Intermediário 23. O composto do título foi obtido como o primeiro componente a eluir da purificação por HPLC. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,8 (t, 3H), 0,9 (d, 3H), 1,1 (d, 3H), 1,75-1,9 (m, 2H), 2,90 (d, 1H), 1,8 (t, 1H), 3,5 (m, 1H), 3,65-3,7 (m, 1H), 3,8-4,0 (m, 1H), 3,9 (d, 1H), 419 (d, 1H), 4,3-4,3 (m, 1H), 4,55 (m, 1H), 4,6-4,7 (m, 1H), 7,6 (s, 1H). MS (ES) MH+: 502,4 para C23H24FN5O7, [C]D20=-24 (c=1; MeOH).

[000569] Também isolado da síntese do Exemplo 6 como o segundo componente a eluir da purificação por HPLC foi (2S,4R,4aR)-8-[(4S)-4- etil-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il]-11-flúor-2,4-dimetil-1,2,4,4a-tetra-hidro- 2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3-a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'- pirimidina]-2',4',6(1'H,3'H)-triona:

[000570] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,8 (t, 3H), 0,9 (d, 3H), 1,1 (d, 3H), 1,8 (m, 2H), 2,9 (d, 1H), 3,1 (t, 1H), 3,5-3,6 (m, 1H), 3,6-3,7 (m, 1H), 3,7 (m, 1H), 3,8 (m, 1H), 3,9 (d, 1H), 4,1 (d, 1H), 4,3-4,35 (m, 1H), 4,5-4,6 (m, 1H), 7,6 (s, 1H). MS (ES) MH+: 502,4 para C23H24FN5O7; [c]D20=+101 (c=1; MeOH). Exemplo 7 (2R,4S,4aS)-8-[(4R)-4-etil-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il]-11-flúor-2,4-dime- til-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3-a][1,2]oxazolo[4,5- g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona)

[000571] Exemplo 7 foi preparado a partir do Intermediário 24. O composto do título foi obtido como o segundo componente a eluir da purificação por HPLC. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,8 (t, 3H), 0,9 (d, 3H), 1,15 (d, 3H), 1,8-1,85 (m, 2H), 2,9 (d, 1H), 3,1 (t, 1H), 3,65 (m, 2H), 3,8 (m, 1H), 3,9 (d, 1H), 4,1 (d, 1H), 4,3-4,4 (m, 1H), 4,5-4,6 (m, 1H), 4,6-4,7 (m, 1H), 7,6 (s, 1H), 11,5 (s, 1H), 11,8 (s, 1H). MS (ES) MH+: 502,4 para C23H24FN5O7; [α]D 20=+101 (c=1; MeOH).

[000572] Também isolado da síntese do Exemplo 7 como o primeiro componente a eluir da purificação por HPLC foi (2S,4R,4aR)-8-[(4R)-4- etil-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il]-11 -flúor-2,4-dimetil-1,2,4,4a-tetra-hidro- 2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3-a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'- pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona:

[000573] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,8 (t, 3H), 0,9 (d, 3H), 1,15 (d, 3H), 1,8-1,9 (m, 2H), 2,9 (d, 1H), 3,1 (t, 1H), 3,6-3,7 (m, 2H), 3,8 (m, 1H), 3,9 (d, 1H), 4,1 (d, 1H), 4,3-4,35 (m, 1H), 4,6 (m, 1H), 4,65-4,7 (m, 1H), 7,6 (s, 1H), 11,5 (s, 1H), 11,8 (s, 1H). MS (ES) MH+: 502,4 para C23H24FN6O7; [α]D 20=+59 (c=1; MeOH). Exemplo 8 (2R,4S,4aS)-11-flúor-2,4-dimetil-8-[(4R)-2-oxo-4-fenil-1,3-oxazolidin-3- il]-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3-a][1,2]oxazolo[4,5- g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona

[000574] Exemplo 8 foi preparado a partir do Intermediário 25. O composto do título foi obtido como o segundo componente a eluir da purificação por HPLC. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,9 (d, 3H), 1,1 (d, 3H), 2,9 (d, 1H), 3,1 (t, 1H), 3,6-3,7 (m, 2H), 3,8 (m, 1H), 3,9 (d, 1H), 4,1 (d, 1H), 4,3 (q, 1H), 5,0 (t, 1H), 5,7 (q, 1H), 7,2-7,4 (m, 5H), 7,65 (s, 1H), 11,6 (br s, 2H). MS (ES) MH+: 550,5 para C27H24FN5O7; [α]D 20=-125 (c=0,1; MeOH).

[000575] Também isolado da síntese do Exemplo 8 como o primeiro componente a eluir da purificação por HPLC foi (2S,4R,4aR)-11-flúor- 2,4-dimetil-8-[(4R)-2-oxo-4-fenil-1,3-oxazolidin-3-il]-1,2,4,4a-tetra-hidro- 2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3-a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'- pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona

[000576] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,9 (d, 3H), 1,1 (d, 3H), 2,9 (d, 1H), 3,1 (t, 1H), 3,6-3,7 (m, 2H), 3,7-3,8 (m, 1H), 3,9 (d, 1H), 4,1 (d, 1H), 4,3 (q, 1H), 5,0 (t, 1H), 5,7 (q, 1H), 7,3-7,4 (m, 5H), 7,65 (s, 1H), 11,5 (br s, 1H), 11,9 (br s, 1H). MS (ES) MH+: 550,5 para C27H24FN5O7; [α]20=+249 (c=0,1; MeOH). Exemplo 9 (2R,4S,4aS)-11-flúor-2,4-dimetil-8-[(4S)-2-oxo-4-fenil-1,3-oxazolidin-3- il]-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3-a][1,2]oxazolo[4,5- g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona

[000577] Exemplo 9 foi preparado a partir do Intermediário 26. O composto do título foi obtido como o primeiro componente a eluir da purificação por HPLC. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,9 (d, 3H), 1,1 (d, 3H), 2,95 (d, 1H), 3,1 (t, 1H), 3,6 (m, 2H), 3,65-3,7 (m, 1H), 3,9 (d, 1H), 4,1 (d, 1H), 4,35 (q, 1H), 5,0 (t, 1H), 5,7 (q, 1H), 7,3-7,65 (m, 5H), 7,65 (s, 1H), 11,5 (s, 1H), 11,8 (s, 1H). MS (ES) MH+: 550,5 para C27H24FN5O7; [α]D 20=-228 (c=1; MeOH).

[000578] Também isolado da síntese do Exemplo 9 como o segundo componente a eluir da purificação por HPLC foi (2S,4R,4aR)-11-flúor- 2,4-dimetil-8-[(4S)-2-oxo-4-fenil-1,3-oxazolidin-3-il]-1,2,4,4a-tetra-hidro- 2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3-a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'- pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona:

[000579] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,9 (d, 3H), 1,1 (d, 3H), 2,9 (d, 1H), 3,1 (t, 1H), 3,6-3,7 (m, 2H), 3,75 (m, 1H), 3,9 (d, 1H), 4,05 (d, 1H), 4,3 (q, 1H), 5,0 (t, 1H), 5,7 (q, 1H), 7,3-7,4 (m, 5H), 7,7 (s, 1H), 11,5 (s, 1H), 11,8 (s, 1H). MS (ES) MH+: 550,5 para C27H24FN5O7; [α]D 20=+151 (c=1; MeOH). Exemplo 10 (2R,4S,4aS)-8-[(4R)-4-benzil-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il]-11-flúor-2,4- dimetil-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3-a][1,2]oxazo- lo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona

[000580] Exemplo 10 foi preparado a partir do Intermediário 27. O composto do título foi obtido como o segundo componente a eluir da purificação por HPLC. 1H RMN (400 MHz, DMSO<k) δ: 0,9 (d, 3H), 1,1 (d, 3H), 2,9 (d, 1H), 3,1-3,2 (m, 3H), 3,6-3,7 (m, 2H), 3,8 (m, 1H), 3,9 (d, 1H), 4,1 (d, 1H), 4,3-4,4 (m, 1H), 4,5 (t, 1H), 4,8 (m, 1H), 7,2 (m, 2H), 7,2-7,3 (m, 3H), 7,6 (s, 1H), 11,65 (br s, 2H). MS (ES) MH+: 564,5 para C28H26FN5O7; [α]D 20=-274 (c=0,1; MeOH).

[000581] Também isolado da síntese do Exemplo 10 como o primeiro componente a eluir da purificação por HPLC foi (2S,4R,4aR)-8-[(4R)-4- benzil -2-oxo-1,3-oxazoli din-3-il]-11-flúor-2,4-dimetil-1,2,4,4a-tetra- hidro-2,H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3-a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'- pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona:

[000582] 1H RMN (400 MHz, DMSO-dθ) δ: 0,9 (d, 3H), 1,1 (d, 3H), 2,9 (d, 1H), 3,05-3,1 (m, 2H), 3,1-3,2 (m, 1H), 3,6-3,7 (m, 2H), 3,8 (m, 1H), 3,95 (d, 1H), 4,1 (d, 1H), 4,4 (dd, 1H), 4,5 (t, 1H), 4,8 (m, 1H), 7,2 (m, 2H), 7,2-7,3 (m, 3H), 7,6 (s, 1H), 11,7 (br s, 2H). MS (ES) MH-: 562,4 para C28H26FN5O7; [α]D 20=+224 (c=0,1; MeOH). Exemplo 11 (2R,4S,4aS)-8-[(4S)-4-benzil-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il]-11-flúor-2,4- dimetil-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3-a][1,2]oxazo- lo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona

[000583] Exemplo 11 foi preparado a partir do Intermediário 28. O composto do título foi obtido como o primeiro componente a eluir da purificação por HPLC. 1H RMN (400 MHz, DMSO-dθ) δ: 0,9 (d, 3H), 1,1 (d, 3H), 2,9 (d, 1H), 3,1-3,15 (m, 2H), 3,2 (m, 1H), 3,6-3,7 (m, 2H), 3,8 (m, 1H), 3,9 (d, 1H), 4,1 (d, 1H), 4,4 (dd, 1H), 4,5 (t, 1H), 4,8 (m, 1H), 7,2 (m, 2H), 7,2-7,3 (m, 3H), 7,6 (s, 1H), 11,45 (br s, 1H), 11,85 (br s, 1H). MS (ES) MH+: 564,5 para C28H26FN5O7; [α]o 20=-115 (c=0,1; MeOH).

[000584] Também isolado da síntese do Exemplo 11 como o segundo componente a eluir da purificação por HPLC foi (2S,4R,4aR)-8- [(4S)-4-benzil-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il]-11-flúor-2,4-dimetil-1,2,4,4a- tetra-hidro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3-a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina- 5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona:

[000585] 1H RMN (400 MHz, DMSO-dθ) δ: 0,9 (d, 3H), 1,1 (d, 3H), 2,9 (d, 1H), 3,1-3,2 (m, 3H), 3,6-3,7 (m, 2H), 3,8 (m, 1H), 3,9 (d, 1H), 4,1 (d, 1H), 4,4 (dd, 1H), 4,55 (t, 1H), 4,8 (m, 1H), 7,2-7,3 (m, 5H), 7,6 (s, 1H), 11,6 (br s, 2H). MS (ES) MH+: 564,5 para C28H26FN5O7; [α]D 20=+163 (c=0,1; MeOH). Exemplo 12 (2R,4S,4aS)-8-(5,5-dimetil-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il)-11-flúor-2,4-dime- til-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3-a][1,2]oxazolo[4,5- g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona

[000586] Exemplo 12 foi preparado a partir do Intermediário 29. O composto do título foi obtido como parte de uma mistura racêmica. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,9 (d, 3H), 1,1 (d, 3H), 1,5 (s, 6H), 2,9 (d, 1H), 3,1 (t, 1H), 3,65-3,7 (m, 2H), 3,8 (m, 1H), 3,9-3,95 (m, 3H), 4,1 (d, 1H), 7,8 (s, 1H), 11,5 (s, 1H), 11,8 (s, 1H). MS (ES) MH+: 502,4 para C23H24FN5O7. Exemplo 13 (2R,4S,4aS)-8-[(5S)-5-etil-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il]-11-flúor-2,4-dime- til-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3-a][1,2]oxazolo[4,5- g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona

[000587] Exemplo 13 foi preparado a partir do Intermediário 31. Para a reação, 100% ácido acético foi usado com aquecimento por 3 horas a 90°C 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,9 (d, 3H), 1,0 (t, 3H), 1,1 (d, 3H), 1,8 (q, 2H), 2,9 (d, 1H), 3,1 (t, 1H), 3,6-3,7 (m, 2H), 3,7-3,8 (m, 2H), 3,9 (d, 1H), 4,1 (d, 1H), 4,2 (t, 1H), 4,8 (q, 1H), 7,8 (s, H), 11,5 (s, H), 11,8 (s, H). Exemplo 14 (2R,4S,4aS)-8-í(5R)-5-etil-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-ill-11-flúor-2,4-dime- til-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3-a][1,2]oxazolo[4,5- g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona

[000588] Exemplo 14 foi preparado a partir do Intermediário 30. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,9 (d, 3H), 1,0 (t, 3H), 1,1 (d, 3H), 1,8 (q, 2H), 2,9 (d, 1H), 3,1 (t, 1H), 3,6-3,7 (m, 2H), 3,8 (m, 2H), 3,9 (d, 1H), 4,1 (d, 1H), 4,2 (t, 1H), 4,8 (q, 1H), 7,7 (s, 1H), 11,45 (s, 1H), 11,8 (s, 1H). MS (ES) MH+: 502,4 para C23H24FN6O7; [α]D20=-177 (c=1; MeOH). Exemplo 15 (2R,4S,4aS)-11-flúor-8-[(4R)-4-(fluorometil)-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il]- 2,4-dimetil-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3-a][1,2]oxa- zolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona

[000589] Exemplo 15 foi preparado a partir do Intermediário 35. O composto do título foi obtido como o primeiro componente a eluir da purificação por HPLC. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,9 (d, 3H), 1,1 (d, 3H), 2,9 (d, 1H), 3,1 (t, 1H), 3,9 (d, 1H), 3,65-3,7 (m, 1H), 3,75-3,8 (m, 1H), 3,9 (d, 1H), 4,1 (d, 1H), 4,5 (dd, 1H), 4,6 (d, 1H), 4,7 (m, 1H), 4,9 (m, 2H), 7,6 (s, 1H), 11,0 (br s, 2H). MS (ES) MH+: 506,5 para C22H21F2N5O7, [α]D20=-74,4 (c=1,12; MeOH), RT=14,08 min.

[000590] Também isolado da síntese do Exemplo 15 como o segundo componente a eluir da purificação por HPLC foi (2S,4R,4aR)-11- flúor-8-[(4R)-4-(fluorometil)-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il]-2,4-dimetil- 1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3-a][1,2]oxazolo[4,5- g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona

[000591] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,9 (d, 3H), 1,1 (d, 3H), 2,9 (d, 1H), 3,1 (t, 1H), 3,6 (d, 1H), 3,65-3,7 m, 1H), 3,75-3,8 (m, 1H), 3,9 (d, 1H), 4,1 (d, 1H), 4,5 (dd, 1H), 4,59 (d, 1H), 4,70 (m, 1H), 4,9 (m, 2H), 7,6 (s, 1H), 11,0 (br s, 2H). MS (ES) MH+: 506,5 para C22H2IF2N5O7;[α]D20=+210 (c=1,08; MeOH); RT=14,78 min. Exemplo 16 (2R,4S,4aS)-11-flúor-8-[(4S)-4-(fluorometil)-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il]- 2,4-dimetil-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3-a][1,2]oxa- zolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona

[000592] Exemplo 16 foi preparado a partir do Intermediário 36. O composto do título foi obtido como o segundo componente a eluir da purificação por HPLC. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,9 (d, 3H), 1,1 (d, 3H), 2,9 (d, 1H), 3,1 (t, 1H), 3,6 (d, 1H), 3,65-3,7 (m, 1H), 3,75-3,8 (m, 1H), 3,9 (d, 1H), 4,1 (d, 1H), 4,5 (dd, 1H), 4,6 (d, 1H), 4,70 (m, 1H), 4,9 (m, 2H), 7,6 (s, 1H), 11,5 (s, 1H), 11,8 (s, 1H). MS (ES) MH+: 506,5 para C22H21F2N5O7, [α]D20=-38,6 (c=1,08; MeOH), RT=21,50min.

[000593] Também isolado da síntese do Exemplo 16 como o primeiro componente a eluir da purificação por HPLC foi (2S,4R,4aR)-11-flúor- 8-[(4S)-4-(fluorometil)-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il]-2,4-dimetil-1,2,4,4a- tetra-hidro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3-a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina- 5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona:

[000594] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,9 (d, 3H), 1,1 (d, 3H), 2,9 (d, 1H), 3,1 (t, 1H), 3,6 (d, 1H), 3,65-3,7 (m, 1H), 3,75-38 (m, 1H), 3,9 (d, 1H), 4,1 (d, 1H), 4,5 (dd, 1H), 4,6 (d, 1H), 4,70 (m, 1H), 4,9 (m, 2H), 7,6 (s, 1H), 11,5 (s, 1H), 11,8 (s, 1H). MS (ES) MH+: 506,5 para C22H21F2N5O7; [α]D 20=+64,9 (c=1,07; MeOH): RT=17,62min. Exemplos 17 e 18 (2R,4S,4aS)-11-flúor-8-[(4S)-4-(metoximetil)-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il]- 2,4-dimetil-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3-a][1,2]oxa- zolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona e (2R,4S,4aS)-11-flúor-8-[(4R)-4-(metoximetil)-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il]- 2,4-dimetil-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3-a][1,2]oxa- zolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona

[000595] O material de partida foi uma mistura de Intermediário 37 e Intermediário 38. A reação do material de partida de acordo com o procedimento indicado produziu os dois diastereômeros representados acima, juntamente com o enantiômero correspondente de cada diaste- reômero. Os dois diastereômeros foram separados por meio de HPLC. Cada diastereômero foi obtido juntamente com seu enantiômero cor-respondente. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,9 (d, 3H), 1,15 (d, 3H), 2,9 (d, 1H), 3,1 (t, 1H), 3,2 (s, 3H), 3,5-3,55 (m, 1H), 3,65-3,7 (m, 2H), 3,8-3,9 (m, 2H), 3,9 (d, 1H), 4,1 (d, 1H), 4,45-4,5 (m, 1H), 4,6-4,65 (m, 2H), 7,7 (s, 1H), 11,5 (br s, 1H), 11,8 (br s, 1H). MS (ES) MH+: 518,4 para C23H24FN5O8.

[000596] Os diastereômeros da mistura dos Exemplos 17 e 18 foram separados usando Cromatografia de Fluido Supercrítico (coluna Chi- ralpak IA com 20% metanol e 80% CO2Fase Móvel). Quatro compo-nentes foram separados. Exemplo 17 (2R,4S,4aS)-11-flúor-8-[(4S)-4-(metoximetil)-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il]- 2,4-dimetil-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3-a][1,2]oxa- zolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona

[000597] O composto do título foi obtido como o primeiro componente a eluir da purificação por HPLC. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 0,9 (s, 3H), 1,1 (s, 3H), 2,9 (d, 1H), 3,1 (t, 1H), 3,25 (s, 3H), 3,5 (d, 1H), 3,6-3,7 (m, 2H), 3,7-3,9 (m, 2H), 3,9 (d, 1H), 4,1 (d, 1H), 4,4 (m, 1H), 4,6-4,7 (m, 2H), 7,65 (s, 1H), 11,5 (br s, 2H). Rotação Óptica: [α]D20=-128; MS (ES) MH+: 518 para C23H24FN5O8. Exemplo 18 (2R,4S,4aS)-11-flúor-8-[(4R)-4-(metoximetil)-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il]- 2,4-dimetil-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3-a][1,2]oxa- zolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona

[000598] O composto do título foi obtido como o quarto componente a eluir da purificação por HPLC. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 0,9 (s, 3H), 1,1 (s, 3H), 2,9 (d, 1H), 3,1 (t, 1H), 3,2 (s, 3H), 3,5-3,7 (m, 3H), 3,7-3,9 (m, 2H), 3,9 (d, 1H), 4,1 (d, 1H), 4,4 (m, 1H), 4,6-4,7 (m, 2H), 7,1 (s, 1H), 11,5 (br s, 2H). Rotação Óptica: [α]D20=-189: MS (ES) MH+: 518 para C23H24FN5O8.

[000599] Também isolado da síntese dos Exemplos 17 e 18 como o segundo componente a eluir da purificação por HPLC foi (2S,4R,4aR)- 11-flúor-8-[(4R)-4-(metoximetil)-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il]-2,4-dimetil- 1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3-a][1,2]oxazolo[4,5- g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona:

[000600] 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 0,88 (s, 3H), 1,1 (s, 3H), 2,9 (d, 1H), 3,1 (t, 1H), 3,25 (s, 3H), 3,5-3,7 (m, 3H), 3,7-3,9 (m, 2H), 3,9 (d, 1H), 4,1 (d, 1H), 4,4 (m, 1H), 4,6-4,7 (m, 2H), 7,6 (s, 1H), 11,55 (br s, 2H). Rotação Óptica: [α]D20=+135; MS (ES) MH+: 518 para C23H24FN5O8-

[000601] Também isolado da síntese dos Exemplos 17 e 18 como o terceiro componente a eluir da purificação por HPLC foi (2S,4R,4aR)- 11-flúor-8-[(4S)-4-(metoximetil)-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il]-2,4-dimetil- 1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3-a][1,2]oxazolo[4,5- g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona:

[000602] 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 0,9 (s, 3H), 1,1 (s, 3H), 2,1 (d, 1H), 3,1 (t, 1H), 3,2 (s, 3H), 3,5-3,7 (m, 3H), 3,7-3,9 (m, 2H), 3,9 (d, 1H), 4,1 (d, 1H), 4,4 (m, 1H), 4,64,7 (m, 2H), 7,1 (s, 1H), 11,6 (br s, 2H). Rotação Óptica: [α]D20=+208; MS (ES) MH+: 518 para C23H24FN5O8- Síntese Alternativa do Exemplo 17

[000603] Uma solução agitada de Intermediário 40 (0,67 g, 1,5 mmol) e ácido barbitúrico (0,21 g, 1,6 mmol) em ácido acético (10 mL) foi aquecida a 95°C por 4 horas. Os solventes foram eva porados e o resí-duo foi dissolvido em metanol (2 mL). Água (5 mL) foi adicionada para precipitar sólidos que foram coletados e cromatografados por HPLC quiral [Chiralpak IC (250x4,6) mm; hexano:etanol (80:20); 1,0 mL/min] para separar o composto do título como o segundo componente a eluir. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,9 (d, 3H), 1,1 (d, 3H), 2,9 (d, 1H), 3,1 (t, 1H), 3,25 (s, 3H), 3,5 (d, 1H), 3,6-3,7 (m, 2H), 3,85 (m, 1H), 3,85-3,9 (d, 1H), 3,9 (d, 1H), 4,1 (d, 1H), 4,45-4,5 (m, 1H), 4,6-4,7 (m, 2H), 7,65 (s, 1H), 11,5 (s, 1H), 11,8 (s, 1H). MS (ES) MH+: 518,4 para C23H24FN6O8; [α]D20=-93,8 (c=1,14; MeOH), RT=20,7 min.

[000604] Também isolado da síntese do Exemplo 17 (Síntese Alter-nativa) como o primeiro componente a eluir da purificação por HPLC foi (2S,4R,4aR)-11-flúor-8-[(4S)-4-(metoximetil)-2-oxo-1,3-oxazolidin-3- il]-2,4-dimetil-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3-a][1,2]- oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona:

[000605] 1H RMN (400 MHz, DMSO-de) δ: 0,9 (d, 3H), 1,1 (d, 3H), 2,9 (d, 1H), 3,1 (t, 1H), 3,2 (s, 3H), 3,5 (d, 1H), 3,6-3,7 (m, 2H), 3,85 (m, 1H), 3,85-3,9 (d, 1H), 3,9 (d, 1H), 4,1 (d, 1H), 4,45-4,5 (m, 1H), 4,64,65 (m, 2H), 7,7 (s, 1H), 11,5 (s, 1H), 11,8 (s, 1H). MS (ES) MH+: 518,4 para C23H24FN5O8; [α]D20=+159,4 (c=1,04; MeOH), RT=17,8 min. Exemplo 19 (2R,4S,4aS)-11-flúor-8-((S)-5-(fluorometil)-2-oxoxazolidin-3-il)-2,4-dimetil- 2,4,4a,6-tetra-hidro-1 H,1 'H-spiro[isoxazolo[4,5-g][ 1,4]oxazino[4,3-a]quino- lina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona

[000606] Exemplo 19 foi preparado a partir do Intermediário 44. O composto do título foi obtido com o principal componente a eluir da Cromatografia de Fluido Supercrítico (coluna Chiralpak IA, 80% CO2, 20% isopropanol) para isolar o principal componente a eluir. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 0,9 (d, 3H) 1,1 (d, 3H) 2,8-3,2 (m, 2H) 3,6-4,0 (m, 5H) 4,0-4,3 (m, 2H) 4,6-5,2 (m, 3H) 7,75 (s, 1H) 11,4 (s, 1H) 11,8 (s, 1H). MS (ES) MH+: 506 para C22H21F2N5O7. Exemplo 20 (2R,4S,4aS)-1'-cloro-8-[(5S)-4-(metoximetil)-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il]- 2,4-dimetil-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3-a][1,2]- oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona

[000607] Exemplo 20 foi preparado a partir do Intermediário 53. O composto do título foi obtido como o principal componente a eluir da purificação por HPLC de fase reversa (gradiente de acetonitrila/água 20-50% com TFA 0,1%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 0,9 (d, 3H), 1,2 (d, 3H), 2,8-3,2 (m, 2H), 3,3 (d, 6H), 3,5-3,75 (m, 3H), 3,75-4,1 (m, 3H), 4,2 (t, 1H), 4,5 (d, 1H) 4,8-5,3 (m, 1H), 7,85 (s, 1H), 11,4 (br. s, 1H), 11,8 (br s., 1H). MS (ES) MH+: 534 para C23H24ClN5O8. Exemplo 21 (2R,4S,4aS)-11 -cloro-8-[(5R)-4-(metoximetil)-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il]- 2,4-dimetil-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3-a][1,2]oxa- zolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona

[000608] O material de partida foi Intermediário 54. O composto do título foi obtido como o principal componente a eluir da purificação por HPLC de fase reversa (gradiente de acetonitrila/água 20-50% com TFA 0,1%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 0,9 (d, 3H), 1,2 (d, 3H), 2,9-3,2 (m, 2H), 3,2-3,45 (m, 6H), 3,5-3,75 (m, 3H), 3,8-4,1 (m, 3H), 4,15 (t, 1H), 4,35-4,6 (m, 1H), 4,85-5,1 (m, 1H), 7,85 (s, 1H). MS (ES) MH+: 534 para C23H24ClN5O8. Exemplo 22 ((2R,4S,4aS)-11-cloro-2,4-dimetil-8-((R)-5-metil-2-oxoxazolidin-3-il)- 2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-spiro[isoxazolo[4,5-g][1,4]oxazino[4,3- a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona

[000609] Exemplo 22 foi preparado a partir do Intermediário 55. O composto do título foi obtido como o principal componente a eluir da Cromatografia de Fluido Supercrítico (coluna Chiralpak IA, 60% CO2, 40% MeOH). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 0,9 (d, 3H) 1,2 (d, 3H) 1,45 (d, 3H) 2,9-3,1 (m, 2H) 3,6-3,8 (m, 3H) 3,9-4,05 (m, 2H) 4,2 (dd, 1H) 4,5 (d, 1H) 7,85 (s, 1H) 11,4 (s, 1H) 11,8 (s, 1H). MS (ES) MH+: 504 para C22H22ClN5O7. Exemplo 23 (2R,4S,4aS)-8-(4S,5R)-4,5-dimetil-2-oxoxazolidin-3-il)-11-flúor-2,4- dimetil-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-spiro[isoxazolo[4,5-g][1,4]oxa- zino[4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona

[000610] Exemplo 23 foi preparado a partir do Intermediário 56. O composto do título foi obtido como o principal componente a eluir da purificação por HPLC de fase reversa (gradiente de acetonitrila/água 20-50% com TFA 0,1%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 0,9 (d, 3H) 1,15 (d, 3H), 1,3 (d, 3H), 1,4 (d, 3H), 2,9 (d, 1H), 3,1 (t, 1H), 3,6-3,7 (m, 2H), 3,7-3,8 (m, 1H), 3,9 (d, 1H), 4,1 (d, 1H), 4,54,6 (m, 1H), 4,8-5,1 (m, 1H), 7,6 (s, 1H), 11,4 (s, 1H), 11,8 (s, 1H). MS (ES) MH+: 502 para C23H24FN5O7; [α]D20=-221 (c=0,1; MeOH). Exemplo 24 (2R,4S,4aS)-8-(4R,5S)-4,5-Dimetil-2-oxoxazolidin-3-il)-11-flúor-2,4- dimetil-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-spiro[isoxazolo[4,5-g][1,4]oxazino- [4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona

[000611] Exemplo 24 foi preparado a partir do Intermediário 57. O composto do título foi obtido como o principal componente a eluir da purificação por HPLC de fase reversa (gradiente de acetonitrila/água 20-50% com TFA 0,1%). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 0,9 (d, 3H), 1,15 (d, 3H), 1,35 (d, 3H), 1,33 (d, 3H), 2,8-3,0 (m, 1H), 3,1 (t, 1H), 3,5-3,7 (m, 2H), 3,7-3,9 (m, 1H), 3,9 (d, 1H), 4,1 (d, 1H), 4,6 (m, 1H), 5,0 (m, 1H), 7,6 (s, 1H), 11,5 (s, 1H), 11,8 (s, 1H). MS (ES) MH+: 502 para C23H24FN5O7; [α]D20=-117 (c=0,1; MeOH). Exemplo 25 (2R,4S,4aS)-8-((S)-4-allil-2-oxoxazolidin-3-il)-11-flúor-2,4-dimetil- 2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-spiro[isoxazolo[4,5-g][1,4]oxazino[4,3- a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona

[000612] Exemplo 25 foi preparado a partir do Intermediário 61. O composto do título foi obtido como o principal componente a eluir da purificação por HPLC de fase reversa (gradiente de acetonitrila/água 20-50% com TFA 0,1%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,7-1,0 (m, 3H), 1,1 (d, 3H), 2,55-2,65 (m, 2H), 2,7 (d, 1H), 2,8-3,0 (m, 2H), 3,1 (t, 1H), 3,5-3,7 (m, 2H), 3,7-3,9 (m, 1H), 4,1 (d, 1H), 4,6-4,7 (m, 2H), 5,0-5,3 (m, 2H), 5,7-5,85 (m, 1H), 7,6 (s, 1H), 11,4 (s, 1H), 11,8 (s, 1H). MS (ES) MH+: 514 para C24H24FN5O7. Exemplo 26 (2R,4S,4aS)-11-flúor-8-((S)-5-(hidroximetil)-2-oxoxazolidin-3-il)-2,4- dimetil-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-spiro[isoxazolo[4,5-g][1,4]oxazino- [4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona

[000613] Exemplo 26 foi preparado a partir do Intermediário 43. O composto do título foi obtido como o principal componente a eluir da Cromatografia de Fluido Supercrítico (coluna Chiralpak IA, CO2 70%, MeOH 30%) para isolar o principal componente a eluir, 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 0,9 (d, 3H) 1,1 (d, 3H) 2,9 (d, 1H) 3,0-3,2 (m, 1H) 3,5-3,8 (m, 5H) 3,85-4,0 (m, 2H) 4,0-4,2 (m, 2H) 4,75-4,9 (m, 1H) 5,2 (t, 1H) 7,8 (s, 1H) 11,4 (s, 1H) 11,75 (s, 1H). MS (ES) MH+: 504 para C22H22FN5O8- Exemplos 27 e 28 ((2R,4S,4aS)-11-flúor-2,4~dimetil-8-í(4R-(tetra-hidro-2H-piran-4~il)-2- oxo-1,3-oxazolidin-3-il1-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino- [4,3-a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)- triona e (2R,4S,4aS)-11-flúor-2,4-dimetil-8-[(4S-(tetra-hidro-2H-piran-4- il)-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il]-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-spiro[1,4- oxazino[4,3-a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]- 2',4',6'(1'H,3'H)-triona

[000614] Exemplo 27 e Exemplo 28 foram preparados a partir do In-termediário 65. Os compostos do título foram separados por purificação por HPLC de fase reversa (gradiente de acetonitrila/água 20-50% com TFA 0,1%). Dois diastereômeros correspondentes aos compostos do título foram isolados, mas as configurações para cada um dos anéis oxazolidinona não foram determinadas.

[000615] Exemplo 27 foi o primeiro diastereômero a eluir. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,9 (d, 3H), 1,15 (d, 3H), 1,2-1,5 (m, 4H), 2,9 (d, 1H), 3,0-3,3 (m, 4H), 3,6-3,7 (m, 4H), 3,7-4,0 (m, 3H), 4,1 (d, 1H), 4,4-4,7 (m, 2H), 7,6 (s, 1H), 11,5 (s, 1H), 11,8 (s, 1H). MS (ES) MH+: 558 para C26H28FN5O8.

[000616] Exemplo 28 foi o segundo diastereômero a eluir. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,9 (d, 3H) 1,15 (d, 3H) 1,2-1,5 (m, 4H) 2,2-2,4 (m, 1H) 2,9 (d, 1H) 3,0-3,3 (m, 3H) 3,5-3,7 (m, 2H) 3,7-4,0 (m, 4H) 4,1 (d, 1H) 4,4-4,7 (m, 3H) 7,6 (s, 1H) 11,45 (s, 1H) 11,8 (s, 1H). MS (ES) MH+: 558 para C26H28FN5O8. Exemplo 29 (2R,4S,4aS)-11-flúor-8-((S)-4-(3-hidroxipropil)-2-oxoxazolidin-3-il)-2,4- dimetil-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-spiro[isoxazolo[4,5-g][1,4]oxazino- [4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona

[000617] Exemplo 29 foi preparado a partir do Intermediário 69. O composto do título foi obtido como o principal componente a eluir da Cromatografia de Fluido Supercrítico (coluna Chiralpak IA) para isolar o principal componente a eluir. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 0,9 (d, 3H) 1,1 (d, 3H) 1,3-1,5 (m, 2H) 1,7-2,0 (m, 2H) 2,9 (d, 1H) 3,0-3,2 (m, 1H) 3,3-3,45 (m, 2H) 3,6-3,85 (m, 3H) 3,9-4,15 (m, 2H) 4,3-4,7 (m, 4H) 7,6 (s, 1H) 11,45 (s, 1H) 11,8 (s, 1H). MS (ES) MH+: 532 para C24H26FN5O8. Exemplo 30 (2R,4S,4aS)-11-flúor-8-((S)-4-(3-fluoropropil)-2-oxoxazolidin-3-il)-2,4- dimetil-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-spiro[isoxazolo[4,5-g][1,4]oxazino- [4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona

[000618] O material de partida foi Intermediário 70. O composto do título foi obtido como o principal componente a eluir da Cromatografia de Fluido Supercrítico (coluna Chiralpak IA) para isolar o principal componente a eluir. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 0,9 (d, 3H) 1,15 (d, 3H) 1,5-2,05 (m, 4H) 2,9 (d, 1H) 3,05-3,2 (m, 1H) 3,6-4,2 (m, 5H) 4,3-4,7 (m, 5H) 7,6 (s, 1H) 11,5 (s, 1H) 11,7 (s, 1H). MS (ES) MH+: 534 para C24H25F2N5O7. Exemplo 31 (2R,4S,4aS)-11-flúor-8-((S)-4-(2-hidroxietil)-2-oxoxazolidin-3-il)-2,4- dimetil-2,4,4a,6-tetra-hidro-1 H,1'H-spiro[isoxazolo[4,5-g][1,4]oxazino- [4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona

[000619] Exemplo 31 foi preparado a partir do Intermediário 74. O composto do título foi obtido como o principal componente a eluir da Cromatografia de Fluido Supercrítico (coluna Chiralpak IA). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 0,9 (d, 3H), 1,2 (d, 3H), 1,8-1,9 (m, 1H), 2,12,3 (m, 1H), 3,0 (d, 1H), 3,1-3,2 (m, 1H), 3,5-3,6 (m, 2H), 3,6-3,7 (m, 2H), 3,8-3,9 (m, 1H), 4,0 (d, 1H), 4,1 (d, 1H), 4,5 (q, 1H), 4,6-4,8 (m, 3H), 7,7 (s, 1H), 11,5, (br. s, 2H). MS (ES) MH+: 518,5 para C23H24FN5O8. Exemplo 32 (2R,4S,4aS)-11-cloro-8-((S)-5-(fluorometil)-2-oxoxazolidin-3-il)-2,4- dimetil-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-spiro[isoxazolo[4,5-g][1,4]oxazino- [4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona

[000620] Exemplo 32 foi preparado a partir do Intermediário 77. O composto do título foi obtido como o principal componente a eluir da Cromatografia de Fluido Supercrítico (coluna Chiralpak IA, 70% CO2, 30% EtOH) para isolar o principal componente a eluir,1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 0,9 (d, 3H) 1,3 (d, 3H) 2,9-3,1 (m, 2H) 3,6-3,7 (m, 2H) 3,8-4,0 (m, 3H) 4,25 (t, 1H) 4,45-4,9 (m, 3H) 5,0-5,2 (m, 1H) 7,85 (s, 1H) 11,5 (s, 1H) 11,7 (s, 1H). MS (ES) MH+: 522 para C22H22CFN5O7. Exemplo 33 (2R,4S,4aS)-11-cloro-8-((S)-4-(3-hidroxpropil)-2-oxoxazolidin-3-il)-2,4- dimetil-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-spiro[isoxazolo[4,5-g][1,4]oxazino- [4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona

[000621] Exemplo 33 foi preparado a partir do Intermediário 79. O composto do título foi obtido como o principal componente a eluir da Cromatografia de Fluido Supercrítico (coluna Chiralpak IA, 70% CO2, 30% MeOH) para isolar o principal componente a eluir,1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 0,9 (d, 3H) 1,15 (d, 3H) 1,5-2,05 (m, 4H) 2,9 (d, 1H) 3,05-3,2 (m, 1H) 3,6-4,2 (m, 5H) 4,3-4,7 (m, 5H) 7,6 (s, 1H) 11,5 (s, 1H) 11,7 (s, 1H). MS (ES) MH+: 534 para C24H25F2N5O7. Exemplo 34 (2R,4S,4aS)-11-cloro-8-((S)-4-(3-fluoropropil)-2-oxoxazolidin-3-il)-2,4- dimetil-2,4,4a,6-tetra-hidro-1 H,1 'H-spiro[isoxazolo[4,5-g][ 1,4]oxazino- [4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona

[000622] Exemplo 34 foi preparado a partir do Intermediário 80. O composto do título foi obtido como o principal componente a eluir da Cromatografia de Fluido Supercrítico (coluna Chiralpak IA, 60% CO2, 40% MeOH) para isolar o principal componente a eluir,1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 0,9 (d, 3H) 1,2 (d, 3H) 1,5-2,0 (m, 4H) 2,9-3,1 (m, 2H) 3,5-3,7 (m, 2H) 3,9-4,05 (m, 2H) 4,3-4,75 (m, 6H) 7,7 (s, 1H) 11,4 (s., 1H) 11,75 (s, 1H). MS (ES) MH+: 550 para C24H26ClFN5O7. Exemplo 35 (2R,4S,4aS)-11-flúor-8-[(5S)-4-(metoximetil)-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il]- 2,4-dimetil-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3-a][1,2]oxa- zolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona

[000623] Intermediário 81 (445 mg, 0,99 mmol) e pirimidina- 2,4,6(1H,3H,5H)-triona (126 mg, 0,99 mmol) em uma mistura de ácido acético (8 mL) e água (2 mL) foram aquecidos a 110°C por duas horas. O solvente foi removido e a mistura de reação foi purificada usando Cromatografia de Fluido Supercrítico ((S,S) coluna Whelk-O1 com Fase Móvel 25% de acetonitrila/metanol 85:15 e 75% de CO2) para resultar no (2R,4S,4aS)-11-flúor-8-((S)-5-(metoximetil)-2-oxoxazolidin- 3-il)-2,4-dimetil-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-spiro[isoxazolo[4,5-g][1,4]- oxazino[4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona (368 mg, 72,1%) como um sólido como o primeiro composto a eluir. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 1,0 (d, 3H), 1,3 (d, 3H), 1,4 (d, 3H), 3,1 (d, 1H), 3.-4,3 (m, 7H), 4,5-4,8 (m, 2H), 7,6 (s, 1H), 11,5 (br. s., 1H), 11,7 (br. s., 1H). MS (ES) MH+: 518 para C23H24FN5O8.

[000624] Também isolado da síntese do Exemplo 35 como o segundo componente a eluir da purificação por HPLC foi ((2R,4R,4aR)-11- flúor-8-[(5S)-4-(metoximetil)-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il]-2,4-dimetil- 1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3-a][1,2]oxazolo[4,5- g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona (27 mg)

[000625] 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 0,9 (d, 3H), 1,3 (d, 3H), 3,1 (d, 1H), 3,3 (s, 3H), 3,5-4,3 (m, 10H), 4,8-5,1 (m, 1H), 7,8 (s, 1H), 11,4 (s, 1H), 11,7 (s, 1H). MS (ES) MH+: 518 para C23H24FN5O8. Exemplo 36 (2R,4S,4aS)-11-flúor-8-[(5R)-4-(metoximetil)-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il]- 2,4-dimetil-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3-a][1,2]oxa- zolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona

[000626] Uma mistura de Intermediário 82 (487 mg, 1,08 mmol) e pirimidina-2,4,6(1H,3H,5H)-triona (138 mg, 1,08 mmol) em ácido acéti-co (8 mL) e água (2 mL) foi aquecida a 110°C por du as horas. O sol-vente foi removido e a mistura de reação foi purificada usando Croma-tografia de Fluido Supercrítico (coluna Chiralpak IA com Fase Móvel isopropanol 40% e CO2 60%) para resultar no composto do título (408 mg, 73,1%) como um sólido como o primeiro componente a eluir. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 0,9 (d, 3H), 1,1 (d, 3H), 2,9-3,2 (m, 2H), 3,3 (s, 3H), 3,64,2 (m, 9H), 4,9-5,1 (m, 1H), 7,75 (s, 1H), 11,4 (s, 1H), 11,8 (s, 1H). MS (ES) MH+: 518 para C23H24FN5O8. Exemplo 37 (2R,4S,4aS)-11 -flúor-8-[(5R)-5-(hidroximetil)-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il]- 2,4-dimetil-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3-a][1,2]oxa- zolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona

[000627] A uma solução de Intermediário 87 (0,10 g, 0,22 mmol) em ácido acético (5 mL), ácido barbitúrico (0,04 g, 0,3 mmol) foi adicionado e a mistura foi aquecida a 95°C por 3 horas. Vol áteis foram removidos completamente sob vácuo, água (2 mL) foi adicionada ao resíduo e filtrada. O resíduo foi submetido a HPLC preparativa usando acetato de amônio método para obter o composto do título puro. Rendimento: 0,03 g (26%) 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,88 (d, 3H), 1,13 (d, 3H), 2,90 (d, 1H), 3,13 (t, 1H), 3,58-3,78 (m, 5H), 3,89-3,94 (m, 2H), 4,08-4,14 (m, 2H), 4,86-4,87 (m, 1H), 5,26 (t, 1H), 7,77 (s, 1H), 11,44 (s, 1H), 11,81 (s, 1H). MS (ES) MH+: 504,3 para C22H22FN5O8. Exemplo 38 (2R,4S,4aS)-11 -flúor-8-[(5R)-5-(fluorometil)-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il]- 2,4-dimetil-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3-a][1,2]oxa- zolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona

[000628] A uma solução de Intermediário 84 (0,05 g, 0,11 mmol) em ácido acético (2 mL), ácido barbitúrico (0,02 g, 0,11 mmol) foi adicio-nado e a mistura foi aquecida a 95°C por 3 horas. Voláteis foram re-movidos completamente sob vácuo, água (2 mL) foi adicionada ao re-síduo e filtrada. O composto do título foi obtido após purificação por método de HPLC preparativa usando acetato de amônio e acetonitrila. Rendimento: 0,02 g (34%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,89 (d, 3H), 1,14 (d, 3H), 2,90 (d, 1H), 3,11 (t, 1H), 3,62-3,71 (m, 2H), 3,713,78 (m, 1H), 3,88-3,95 (m, 2H), 4,10 (d, 1H), 4,22 (t, 1H), 4,67-4,71 (m, 1H), 4,77-4,84 (m, 1H), 5,09-5,12 (m, 1H), 7,76 (s, 1H), 11,46 (s, 1H), 11,83 (s, 1H). MS (ES) MH+: 506,5 para C22H21F2N5O7 Exemplo 39 (2R,4S,4aS)-11-flúor-2,4-dimetil-8-((S)-2-oxo-4-viniloxazolidin-3-il)- 2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-spiro[isoxazolo[4,5-g][1,4]oxazino[4,3- a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona

[000629] A uma solução agitada de Intermediário 88 (0,15 g, 0,34 mmol) em ácido acético (5 mL), ácido barbitúrico (0,05 g, 0,38 mmol) foi adicionado e a mistura foi aquecida a 95°C por 3 horas. Voláteis foram removidos sob vácuo e o resíduo resultante foi dissolvido em metanol (0,5 mL), água (3 mL) foi adicionada a ele e filtrada e o resíduo foi lavado com água para obter o composto do título. Rendimento: 0,05 g (30%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,90 (d, 3H), 1,14 (d, 3H), 2,94 (d, 1H), 3,11 (t, 1H), 3,64-3,68 (m, 2H), 3,76-3,80 (m, 1H), 3,94 (d, 1H), 4,10 (d, 1H), 4,28-4,31 (m, 1H), 4,76 (t, 1H), 5,11 (q, 1H), 5,30 (d, 1H), 5,36 (d, 1H), 5,90 (dd, 1H), 7,57 (m, 1H), 11,48 (s, 1H), 11,84 (s, 1H). MS (ES) MH+: 500,3 para C23H22FN5O7. Exemplo 40 (2R,4S,4aS)-11-flúor-8-{(5R)-5-[(hidroxiimino)metil]-2-oxo-1,3-oxazoli- din-3-il}-2,4-dimetil-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3a]- [1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona

[000630] A uma solução de Intermediário 89 (0,15 g, 0,3 mmol) em ácido acético (10 mL), ácido barbitúrico (0,05 g, 0,4 mmol) foi adicio-nado e a mistura foi aquecida a 95°C por 3 horas. Voláteis foram re-movidos completamente sob vácuo, água (4 mL) foi adicionada ao re-síduo e filtrada. O sólido assim obtido foi purificado adicionalmente por cromatografia em coluna de sílica-gel usando um gradiente de cloro-fórmio em metanol. Nós obtivemos este composto como uma mistura indefinida de isômeros E & Z (1:2 é a razão). Rendimento: 0,06 g (34%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,89 (d, 3H), 1,14 (d, 3H), 2,93 (d, 1H), 3,11 (t, 1H), 3,65-3,80 (m, 3H), 3,94 (d, 1H), 4,10 (d, 1H), 4,30-4,32 & 4,47-4,51 (m, 1H), 4,76 & 4,88 (t, 1H), 5,24-5,30 &5,485,55 (m, 1H), 7,10-7,14 & 7,51-7,75 (m, 2H), 11,28 & 11,48 (s, 1H), 11,45 (s, 1H), 11,85 (s, 1H). MS (ES) MH+: 517,3 para C22H21FN6O8. Exemplo 41 (4S)-3-[(2R,4S,4aS)-11-flúor-2,4-dimetil-2',4',6'-trioxo-1,1',2,3',4,4',4a,6'- octa-hidro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3-a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina- 5,5'-pirimidin]-8-il]-2-oxo-1,3-oxazolidina-4-carbonitrila

[000631] A uma solução de Intermediário 92 (0,08 g, 0,17 mmol) em ácido acético (5 mL), ácido barbitúrico (0,03 g, 0,2 mmol) foi adicionado e a mistura foi aquecida a 95°C por 3 horas. Vol áteis foram removidos completamente sob vácuo, água (2 mL) foi adicionada ao resíduo e filtrada. O sólido obtido foi purificado adicionalmente por TLC prepa-rativa usando mistura 9:1 de clorofórmio e metanol. Rendimento: 0,03 g (34%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,89 (d, 3H), 1,15 (d, 3H), 2,92 (d, 1H), 3,13 (t, 1H), 3,65-3,82 (m, 2H), 3,95 (d, 1H), 4,82-4,86 (m, 2H), 5,58-5,61 (m, 1H), 7,68 (s, 1H), 11,49 (s, 1H), 11,84 (s, 1H). MS (ES) MH+: 499,3 para C22H19FN6O7. Exemplo 42 (2R,4S,4aS)-11-flúor-8-{(4S)-4-[(metoxiimino)metil]-2-oxo-1,3-oxazoli- din-3-il}-2,4-dimetil-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3- a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona

[000632] A uma solução de Intermediário 93 (0,07 g, 0,15 mmol) em ácido acético (5 mL), ácido barbitúrico (0,03 g, 0,2 mmol) foi adicionado e a mistura foi aquecida a 95°C por 3 horas. Os voláteis foram re-movidos completamente sob vácuo, água (2 mL) foi adicionada ao re-síduo e filtrada. O sólido obtido foi purificado adicionalmente por TLC preparativa usando mistura 9:1 de clorofórmio e metanol. Nós obtive-mos este composto como uma mistura indefinida de isômeros E & Z (-1:0,65 é a razão). Rendimento: 0,03 g (30%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,89 (d, 3H), 1,13 (d, 3H), 2,93 (d, 1H), 3,11 (t, 1H), 3,65-3,80 (m, 3H), 3,74 & 3,85 (s, 3H), 3,94 (d, 1H), 4,10 (d, 1H), 4,30-4,32 & 4,47-4,51 (m, 1H), 4,76 & 4,88 (t, 1H), 5,24-5,30 & 5,48-5,55 (m, 1H), 7,27 & 7,68 (d, 1H), 7,63 & 7,74 (s, 1H), 11,45 (s, 1H), 11,82 (s, 1H). MS (ES) MH+: 531,2 para C23H23FN6O8. Exemplo 43 (2R,4S,4aS)-11-flúor-8-{(5R)-5-(metoxiimino)metil]-2-oxo-1,3-oxazoli- din-3-il}-2,4-dimetil-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3- a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona

[000633] A uma solução de Intermediário 94 (0,13 g, 0,28 mmol) em ácido acético (5 mL), ácido barbitúrico (0,04 g, 0,28 mmol) foi adicio-nado e a mistura foi aquecida a 95°C por 3 horas. O s voláteis foram removidos completamente sob vácuo, água (2 mL) foi adicionada ao resíduo e filtrada. O sólido assim obtido foi purificado adicionalmente por TLC preparativa usando mistura 9:1 de clorofórmio e metanol. Nós obtivemos este composto como uma mistura indefinida de isômeros E & Z (-3:1 é the razão). Rendimento: 0,03 g (20%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,94 (d, 3H), 1,14 (d, 3H), 2,91 (d, 1H), 3,11 (t, 1H), 3,62-3,67 (m, 2H), 3,71-3,81 (m, 1H), 3,84-3,95 (m, 4H), 4,10-4,16 (m, 2H), 4,29-4,39 (m, 1H), 5,37-5,42 & 5,73-5,75 (m, 1H), 7,30 & 7,73 (d, 1H), 7,76 (s, 1H), 11,46 (s, 1H), 11,83 (s, 1H). MS (ES) MH+: 531,2 para C23H23FN6O8. Exemplo 44 (2R,4S,4aS)-8-[(5R)-5-(azidometil)-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il]-11 -flúor- 2,4-dimetil-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3-a][1,2]- oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona

[000634] A uma solução de Intermediário 96 (0,12 g, 0,25 mmol) em ácido acético (3 mL), ácido barbitúrico (0,03 g, 0,25 mmol) foi adicio-nado e a mistura foi aquecida a 95°C por 3 horas. Voláteis foram re-movidos completamente sob vácuo, água (2 mL) foi adicionada ao re-síduo e filtrada. O resíduo foi submetido a um método de HPLC prepa-rativa usando ácido fórmico/acetonitrila para obter o composto do título puro. Rendimento: 0,03 g (22%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,88 (d, 3H), 1,13 (d, 3H), 2,90 (d, 1H), 3,14 (t, 1H), 3,63-3,70 (m, 2H), 3,74-3,86 (m, 4H), 3,93 (d, 1H), 4,10 (d, 1H), 4,18 (t, 1H), 5,00-5,06 (m, 1H), 7,75 (s, 1H), 11,44 (s, 1H), 11,81 (s, 1H). MS (ES) MH+: 529,3 para C22H21FN8O7. Exemplo 45 (2R,4S,4aS)-11-flúor-2,4-dimetil-8-((R)-4-(metiltio)metil)-2-oxoxazoli- din-3-il)-2,4,4a,6-tetra-hidro-1 H,1 'H-spiro[isoxazolo[4,5-g][ 1,4]oxazino- [4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona

[000635] A uma solução de Intermediário 101 (0,20 g, 0,43 mmol) em ácido acético (10 mL), ácido barbitúrico (0,066 g, 0,51 mmol) foi adici-onado e a mistura foi aquecida a 95°C por 3 horas. Os voláteis foram removidos completamente sob vácuo, água (2 mL) foi adicionada ao resíduo e filtrada. O sólido assim obtido foi purificado adicionalmente por método de HPLC preparativa usando acetato de amô- nio/acetonitrila. Rendimento: 0,05 g (22%). 1H RMN (400 MHz, DMSO- d6) δ: 0,87 (d, 3H), 1,13 (d, 3H), 2,04 (s, 3H), 2,9 (d, 1H), 3,01-3,07 (m, 2H), 3,10 (t, 1H), 3,62-3,68 (m, 2H), 3,75-3,79 (m, 1H), 3,92 (d, 1H), 4,09 (d, 1H), 4,37 (dd, 1H), 4,67-4,72 (m, 1H), 4,78-4,83 (m, 1H), 7,64 (s, 1H), 11,47 (s, 1H), 11,82 (s, 1H). MS (ES) MH+: 534,4 para C23H24FN5O7S. Exemplo 46 (2R,4S,4aS)-11-flúor-2,4-dimetil-8-((R)-4-(metilsulfonil)metil)-2-oxoxa- zolidin-3-il)-2,4,4a,6-tetra-hidro-1 H,1'H-spiro[isoxazolo[4,5-g][1,4]oxazi- no[4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona

[000636] Exemplo 46 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação do Exemplo 45 usando Intermediário 102 (0,20 g, 0,40 mmol). Rendimento: 0,06 (26%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,88 (d, 3H), 1,14 (d, 3H), 2,92 (d, 1H), 3,09-3,14 (m, 4H), 3,63-3,69 (m, 2H), 3,77-3,82 (m, 2H), 3,91-3,95 (m, 2H), 4,09 (d, 1H), 4,64 (dd, 1H), 4,78 (t, 1H), 5,07-5,08 (m, 1H), 7,63 (s, 1H), 11,44 (s, 1H), 11,83 (s, 1H). MS (ES) MH+: 566,2 para C23H24FN5O9S; [αfo 20=-105,76 (c=1,00; MeOH). Exemplo 47 e Exemplo 48 (2R,4S,4aS)-8-((R)-4-(azidometil)-2-oxoxazolidin-3-il)-11-flúor-2,4- dimetil-2,4,4a,6-tetra-hidro-1 H,1'H-spiro[isoxazolo[4,5-g][1,4]oxazino- [4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona e (2R,4S,4aS)-8-(S)- 4-(azidometil)-2-oxoxazolidin-3-il)-11-flúor-2,4-dimetil-2,4,4a,6-tetra- hidro-1 H,1'H-spiro[isoxazolo[4,5-g][1,4]oxazino[4,3-a]quinolina-5,5'- pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona

[000637] A uma solução de Intermediário 109 (0,25 g, 0,54 mmol) em ácido acético (10 mL), ácido barbitúrico (0,07 g, 0,54 mmol) foi adicio-nado e a mistura foi aquecida a 90°C por 16 horas. Os voláteis foram removidos completamente sob vácuo, água (2 mL) foi adicionada ao resíduo e filtrada. O sólido assim obtido foi purificado adicionalmente por cromatografia em coluna de sílica-gel usando um gradiente de me-tanol em clorofórmio. Rendimento: 0,25 g (86%).

[000638] Análise de HPLC quiral [chiralcel OD-H (250x4,6) mm, 5 μm; Fase Móvel ‘A’ hexano; Fase Móvel ‘B’: Etanol (50:50)] mostrou a presença de razão 1:1 de dois isômeros que foram separados por HPLC quiral [Coluna: chiralcel OD-H; Fase Móvel: Hexano:Etanol (50:50)].

[000639] Exemplo 47 foi o primeiro diastereômero a eluir. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,89 (d, 3H), 1,15 (d, 3H), 2,92 (d, 1H), 3,12 (t, 1H), 3,64-3,81 (m, 4H), 3,94 (d, 1H), 4,09-4,15 (m, 2H), 4,37-4,43 (m, 1H), 4,67 (t, 1H), 4,76-4,79 (m, 1H), 7,67 (s, 1H), 11,48 (s, 1H), 11,84 (s, 1H). RT=8,21min: Rendimento: 0,04 g. MS (ES) MH+: 529,3 para C22H21FN8O7.

[000640] Exemplo 48 foi o segundo diastereômero a eluir. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,89 (d, 3H), 1,15 (d, 3H), 2,92 (d, 1H), 3,11 (t, 1H), 3,63-3,79 (m, 4H), 3,94 (d, 1H), 4,09-4,16 (m, 2H), 4,39-4,41 (m, 1H), 4,67 (t, 1H), 4,74-4,76 (m, 1H), 7,64 (s, 1H), 11,48 (s, 1H), 11,84 (s, 1H). RT=11,40min: Rendimento: 0,03 g. MS (ES) MH+: 529,3 para C22H21FN8O7. Exemplo 49 (2R,4S,4aS)-8-[(4S)-4-(Etoximetil)-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il]-11 -flúor- 2,4-dimetil-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3-a][1,2]oxa- zolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona

[000641] A uma solução de Intermediário 113 (0,20 g, 0,43 mmol) em ácido acético (4 mL), ácido barbitúrico (0,06 g, 0,43 mmol) foi adicio-nado e a mistura foi aquecida a 95°C por duas horas. Voláteis foram removidos completamente sob vácuo, e o resíduo foi purificado por método de HPLC prep. de fase reversa usando acetato de amô- nio/acetonitrila. O sólido esbranquiçado assim obtido foi agitado em água (1 mL) por 10 minutos, filtrado e seco. Rendimento: 0,08 g (35%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,88 (d, 3H), 1,03 (t, 3H), 1,14 (d, 3H), 2,91 (d, 1H), 3,11 (t, 1H), 3,40-3,44 (m, 2H), 3,56-3,68 (m, 3H), 3,74-3,80 (m, 1H), 3,85 (dd, 1H), 3,93 (d, 1H), 4,09 (d, 1H), 4,41 (dd, 1H), 4,62-4,70 (m, 2H), 7,64 (s, 1H), 11,45 (s, 1H), 11,81 (s, 1H). MS (ES) MH+: 532,4 para C24H26FN5O8. Exemplo 50 (2R,4S,4aS)-11-flúor-8-{(4S)-4-[(2-metoxietóxi)metil]-2-oxo-1,3-oxazo- lidin-3-il}-2,4-dimetil-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3- a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona

[000642] Exemplo 50 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação do Exemplo 49 usando Intermediário 117 (0,15 g, com 37% produto). Purificação foi desempenhada por método de HPLC prep. de fase reversa usando acetato de amônio/metanol. Ren-dimento: 0,01 g. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,88 (d, 3H), 1,14 (d, 3H), 2,91 (d, 1H), 3,08-3,14 (m, 1H), 3,15 (s, 3H), 3,34-3,38 (m, 2H), 3,50-3,52 (m, 2H), 3,60-3,68 (m, 3H), 3,74-3,80 (m, 1H), 3,88-3,94 (m, 2H), 4,09 (d, 1H), 4,40-4,43 (m, 1H), 4,64-4,68 (m, 2H), 7,64 (s, 1H), 11,60 (br s, 2H). MS (ES) MH+: 562,4 para C22H28FN5O9. Exemplo 51 (2R,4S,4aS)-8-(R)-4-(Diflúormetil)-2-oxoxazolidin-3-il)-11-flúor-2,4- dimetil-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-spiro[isoxazolo[4,5-g][1,4]oxazi- no[4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona

[000643] Uma mistura de Intermediário 123 (90 mg, 0,13 mmol) e 17 mg de ácido barbitúrico (17 mg, 0,13 mmol) em 2-propanol (5 mL) foi aquecida a 90°C por 16 horas. Os voláteis foram removidos sob vácuo, e o resíduo foi agitado em água (5 mL) por 10 minutos e filtrado. Análise do resíduo sólido coletado mostrou a presença de mistura de dois diastereômeros. Os sólidos foram suspensos em metanol (5 mL) e aquecidos em um reator de microondas a 150°C por duas horas. Água (10 mL) foi adicionada e os sólidos foram coletados por filtração e secos em vácuo. O sólido assim obtido foi purificado adicionalmente por HPLC preparativa usando um gradiente de acetato de amônio aquoso/acetonitrila. Rendimento: 70 mg (60%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,89 (d, 3H), 1,15 (d, 3H), 2,92 (d, 1H), 3,12 (t, 1H), 3,65-3,72 (m, 2H), 3,78-3,82 (m, 1H), 3,95 (d, 1H), 4,11 (d, 1H), 4,66 (dd, 1H), 4,73 (t, 1H), 5,04-5,10 (m, 1H), 6,59 (t, 1H), 7,64 (s, 1H), 11,65 (s, 1H), 11,83 (s, 1H). 19F RMN (376,5 MHz, DMSO-d6) δ: -130,45 (d), -133,57 (d), -158,12 (s). MS (ES) MH+: 524,4 para C22H20F3N5O7. Exemplo 52 (2R,4S,4aS)-8-(S)-4-Ciclopropil-2-oxoxazolidin-3-il)-11-flúor-2,4-dime- til-2,4,4a,6-tetra-hidro-1 H,1 'H-spiro[isoxazolo[4,5-g][ 1,4]oxazino[4,3- a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona

[000644] Uma mistura de Intermediário 128 (1,0 g, 2,48 mmols), ácido barbitúrico (0,04 g, 0,29 mmol) em 2-propanol (2 mL) foi aquecida a 130°C em um forno de microondas ao longo de um período de 2 horas. Voláteis foram removidos sob vácuo e o resíduo foi agitado em água (5 mL) por 10 min. e filtrado. Este foi suspenso em metanol (2 mL) e água (5 mL) foi adicionada ao mesmo e filtrada. Rendimento: 1,0 g (79%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,28-0,30 (m, 1H), 0,42- 0,44 (m, 1H), 0,52-0,57 (m, 2H), 0,89 (d, 3H), 1,15 (d, 3H), 2,94 (d, 1H), 3,12 (t, 1H), 3,62-3,69 (m, 2H), 3,73-3,82 (m, 1H), 3,95 (d, 1H), 4,11 (d, 1H), 4,19-4,21 (m, 1H), 4,23-4,28 (m, 1H), 4,66 (t, 2H), 7,53 (s, 1H), 11,48 (s, 1H), 11,84 (s, 1H). MS (ES) MH+: 514,4 para C24H24F N5O7. Exemplos 53 e 54 (2R,4S,4aS)-11-flúor-2,4-dimetil-8-((R)-2-oxo-5-(piridin-2-il)oxazolidin- 3-il)-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-spiro[isoxazolo[4,5-g][1,4]oxazino[4,3- a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona e (2R,4S,4aS)-11-flúor- 2,4-dimetil-8-((S)-2-oxo-5-(piridin-2-il)oxazolidin-3-il)-2,4,4a,6-tetra- hidro-1H,1'H-spiro[isoxazolo[4,5-g][1,4]oxazino[4,3-a]quinolina-5,5'- pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona

[000645] Uma mistura de Intermediário 133 (1,0 g, 2,27 mmols), ácido barbitúrico (0,32 g, 2,50 mmols) em 2-propanol (10 mL) foi aquecida a 130°C em um forno de microondas ao longo de um período de 2 horas. Os voláteis foram removidos sob vácuo e o resíduo foi agitado em água (5 mL) por 10 minutos e filtrado. O resíduo foi purificado em um instrumento Combi-Flash usando um gradiente de metanol em clo-rofórmio. Rendimento: 1,0 g (80%). Análise de HPLC quiral [Coluna: Chiralpak IC (250x4,6) mm Fase Móvel: Hexano:Etanol (25:75)] mos-trou a presença de 45%+6%+5%+42% dos isômeros. Os dois princi-pais isômeros foram separados por HPLC quiral [Coluna: Chiralpak IC; Fase Móvel: Hexano:Etanol (25:75)].

[000646] Exemplo 53 foi o primeiro diastereômero a eluir. RT=8,98 min: [α]D 2525=-197,07 (c=0,123; dimetilformamida). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,88 (d, 3H), 1,13 (d, 3H), 2,92 (d, 1H), 3,11 (t, 1H), 3,63-3,70 (m, 2H), 3,76-3,81 (m, 1H), 3,93 (d, 1H), 4,10 (d, 1H), 4,26 (dd, 1H), 4,54 (t, 1H), 5,95 (dd, 1H), 7,45 (ddd, 1H), 7,62 (d, 1H), 7,78 (s, 1H), 7,91 (dt, 1H), 8,65 (d, 1H), 11,40 (s, 1H), 11,80 (s, 1H). 19F RMN (376,5 MHz, DMSO-d6) δ: -158,1 (s). Rendimento: 0,25 g. MS (ES) MH+: 551,4 para C26H23FN6O7.

[000647] Exemplo 54 foi o segundo diastereômero a eluir. RT=17,50 min: [α]D 25=-109,13 (c=0,103; dimetilformamida). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,88 (d, 3H), 1,14 (d, 3H), 2,92 (d, 1H), 3,12 (t, 1H), 3,62-3,69 (m, 2H), 3,77-3,81 (m, 1H), 3,93 (d, 1H), 4,10 (d, 1H), 4,28 (dd, 1H), 4,52 (t, 1H), 5,95 (dd, 1H), 7,45 (ddd, 1H), 7,63 (d, 1H), 7,78 (s, 1H), 7,91 (dt, 1H), 8,64 (d, 1H), 11,40 (s, 1H), 11,80 (s, 1H). 19F RMN (376,5 MHz, DMSO-d6) δ: -158,1 (s). Rendimento: 0,22 g. MS (ES) MH+: 551,4 para C26H23FN6O7 Exemplos 55 e 56 (2R,4S,4aS)-11-flúor-2,4-dimetil-8-((R)-2-oxo-4-(piridin-2-il)oxazolidin- 3-il)-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-spiro[isoxazolo[4,5-g][1,4]oxazino[4,3- a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona e (2R,4S,4aS)-11-flúor- 2,4-dimetil-8-((S)-2-oxo-4-(piridin-2-il)oxazolidin-3-il)-2,4,4a,6-tetra- hidro-1H,1'H-spiro[isoxazolo[4,5-g][1,4]oxazino[4,3-a]quinolina-5,5'- pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona

[000648] Uma mistura de Intermediário 138 (1,0 g, 2,27 mmols), ácido barbitúrico (0,32 g, 2,50 mmols) em 2-propanol (10 mL) foi aquecida a 130°C em um forno de microondas por duas horas. Os voláteis foram removidos sob vácuo e o resíduo foi agitado em água (5 mL) por 10 min. e filtrado. O resíduo foi purificado em um instrumento Combi- Flash usando um gradiente de metanol em clorofórmio. Rendimento: 0,95 g (90%). Análise de HPLC quiral [Coluna: Chiralpak IC (250x4,6) mm Fase Móvel: hexano:etanol (25:75)] mostrou a presença de 45%+6%+5%+42% dos isômeros. Os dois principais isômeros foram separados por HPLC quiral [Coluna: Chiralpak IC; Fase Móvel: Hexa- no:Etanol (25:75)].

[000649] Exemplo 55 foi o primeiro diastereômero a eluir. RT=10,22 min: [[α]D 2525=-339,4 (c=0,10; dimetilformamida). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,88 (d, 3H), 1,12 (d, 3H), 2,91 (d, 1H), 3,09 (t, 1H), 3,60-3,67 (m, 2H), 3,71-3,76 (m, 1H), 3,93 (d, 1H), 4,09 (d, 1H), 4,35-4,43 (m, 1H), 4,94 (t, 1H), 5,72 (dd, 1H), 7,33-7,37 (m, 1H), 7,51 (d, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,82 (dt, 1H), 8,54 (d, 1H), 11,48 (s, 1H), 11,83 (s, 1H). 19F RMN (376,5 MHz, DMSO-d6) δ: -158,3 (s). Rendimento: 0,20 g. MS (ES) MH+: 551,4 para C26H23FN6O7.

[000650] Exemplo 56 foi o segundo diastereômero a eluir. RT=6,67 min: [α]D25=-109,13 (c=0,112; dimetilformamida). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,89 (d, 3H), 1,12 (d, 3H), 2,92 (d, 1H), 3,08 (t, 1H), 3,643,67 (m, 2H), 3,69-3,71 (m, 1H), 3,92 (d, 1H), 4,07 (d, 1H), 4,39-4,42 (m, 1H), 4,94 (t, 1H), 5,70 (dd, 1H), 7,33-7,36 (m, 1H), 7,49 (d, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,82 (dt, 1H), 8,52 (d, 1H), 11,48 (s, 1H), 11,83 (s, 1H). 19F RMN (376,5 MHz, DMSO-d6) δ: -158,2 (s). Rendimento: 0,22 g. MS (ES) MH+: 551,4 para C26H23FN6O7. Exemplos 57 e 58 (2R,4S,4aS)-11-flúor-2,4-dimetil-8-((R)-2-oxo-4-(piridin-4-il)oxazolidin- 3-il)-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-spiro[isoxazolo[4,5-g][1,4]oxazino[4,3- a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona e (2R,4S,4aS)-11-flúor- 2,4-dimetil-8-((S)-2-oxo-4-(piridin-4-il)oxazolidin-3-il)-2,4,4a,6-tetra- hidro-1 H,1 'H-spiro[isoxazolo[4,5-g][ 1,4]oxazino[4,3-a]quinolina-5,5'- pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona

[000651] Uma mistura de Intermediário 143 (0,52 g, 1,18 mmol), ácido barbitúrico (0,17 g, 1,3 mmol) em 2-propanol (5 mL) foi aquecida a 130°C em um forno de microondas por duas horas. Os voláteis foram removidos sob vácuo e o resíduo foi agitado em água (5 mL) por 10 minutos e filtrado. O resíduo foi purificado em um instrumento Combi- Flash usando um gradiente de metanol em clorofórmio. Rendimento: 0,63 g (97%). Análise de HPLC quiral [Coluna: Chiralpak IC (250x4,6) mm Fase Móvel: Hexano:Etanol (50:50)] mostrou a presença de 41%+5%+5%+44% dos isômeros. Os dois principais isômeros foram separados por HPLC quiral [Coluna: Chiralpak IC; Fase Móvel: Hexa- no:Etanol (25:75) com dietilamina 0,1%]. 1H RMN dos compostos finais sugere que as amostras contêm uma impureza de dietilamina.

[000652] Exemplo 57 foi o primeiro diastereômero a eluir. tR=7,61 min: [α]D25=-130,1 (c=0,10; dimetilformamida). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,88 (d, 3H), 1,14 (d, 3H), 2,94 (d, 1H), 3,09 (t, 1H), 3,583,67 (m, 2H), 3,74-3,76 (m, 1H), 3,94 (d, 1H), 4,08 (d, 1H), 4,33 (dd, 1H), 4,98 (t, 1H), 5,69 (dd, 1H), 7,41 (dd, 2H), 7,71 (s, 1H), 8,57 (dd, 2H). Nota: Picos correspondentes aos prótons NH não apareceram. Rendimento: 0,81 g. MS (ES) MH+: 551,4 para C26H23FN6O7.

[000653] Exemplo 58 foi o segundo diastereômero a eluir. tR=15,38 min: [α]D25=-73,39 (c=0,112; dimetilformamida). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,89 (d, 3H), 1,13 (d, 3H), 2,92 (d, 1H), 3,08 (t, 1H), 3,62-3,66 (m, 2H), 3,67-3,69 (m, 1H), 3,93 (d, 1H), 4,06 (d, 1H), 4,32 (dd, 1H), 4,99 (t, 1H), 5,70 (dd, 1H), 7,39 (d, 2H), 7,70 (s, 1H), 8,55 (dd, 2H). Nota: Picos correspondentes aos prótons NH não apareceram. Rendimento: 0,11 g. MS (ES) MH+: 551,4 para C26H23FN6O7. Exemplo 59 (2R,4S,4aS)-11-flúor-8-((R)-4-(R)-1-metoxietil)-2-oxoxazolidin-3-il)-2,4- dimetil-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-spiro[isoxazolo[4,5-g][1,4]oxazino- [4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona

[000654] Uma mistura de Intermediário 149 (0,25 g, 0,59 mmol), ácido barbitúrico (0,08 g, 0,59 mmol) em 2-propanol (9 mL) foi aquecida em um reator de microondas a 130°C ao longo de um período de duas horas. Os voláteis foram removidos sob vácuo e o resíduo foi agitado em água (2 mL) por 10 min. e filtrado. Rendimento: 0,26 g (81%). UPLC mostrou a presença de mistura 9:1 de diastereômeros e o prin-cipal isômero foi separado por HPLC quiral usando chiralpak IC [hexa- no:etanol (70:30); tR=8,67 min] e caracterizado. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,88 (d, 3H), 1,01 (d, 3H), 1,13 (d, 3H), 2,91 (d, 1H), 3,10 (t, 1H), 3,28 (s, 3H), 3,63-3,69 (m, 2H), 3,76-3,78 (m, 1H), 3,93 (d, 1H), 3,96-3,99 (m, 1H), 4,10 (d, 1H), 4,46-4,49 (m, 1H), 4,59 (t, 1H), 4,76-4,79 (m, 1H), 7,62 (s, 1H), 11,48 (s, 1H), 11,82 (s, 1H). 19F RMN (376,5 MHz, DMSO-d6) δ: -158,11 (s). MS (ES) MH+: 532,4 para C24H26FN5O8. Exemplo 60 (2R,4S,4aS)-11-flúor-8-((R)-4-(S)-1-metoxietil)-2-oxoxazolidin-3-il)-2,4- dimetil-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-spiro[isoxazolo[4,5- g][1,4]oxazino[4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona

[000655] Uma mistura de Intermediário 156 (0,04 g, 0,1 mmol), ácido barbitúrico (0,01 g, 0,1 mmol) em 2-propanol (1 mL) foi aquecida em um reator de microondas a 130°C ao longo de um perí odo de 2 horas. Voláteis foram removidos sob vácuo e o resíduo foi agitado em água (0,5 mL) por 10 minutos e filtrado. Rendimento: 0,05 g (98%). UPLC mostrou a presença de mistura 61%+5%+18%+3% de diastereômeros e o principal isômero (61%) foi separado por HPLC quiral usando colu-na chiralpak IC [hexano:etanol (70:30); tR=8,42 min] e caracterizado. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,89 (d, 3H), 1,10 (d, 3H), 1,15 (d, 3H), 2,91 (d, 1H), 3,12 (t, 1H), 3,15 (s, 3H), 3,63-3,70 (m, 2H), 3,763,80 (m, 1H), 3,93-3,99 (m, 2H), 4,11 (d, 1H), 4,51-4,26 (m, 3H), 7,65 (s, 1H), 11,44 (s, 1H), 11,78 (s, 1H). 19F RMN (376,5 MHz, DMSO-d6) δ: -158,17 (s). MS (ES) MH+: 532,5 para C24H26FN5O8 Exemplos 61 e 62 (2R,4S,4aS)-11-flúor-2,4-dimetil-8-((R)-2-oxo-4-(pirazin-2-il)oxazolidin- 3-il)-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-spiro[isoxazolo[4,5-g][1,4]oxazino[4,3- a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona e (2R,4S,4aS)-11-flúor- 2,4-dimetil-8-((S)-2-oxo-4-(pirazin-2-il)oxazolidin-3-il)-2,4,4a,6-tetra- hidro-1H,1'H-spiro[isoxazolo[4,5-g][1,4]oxazino[4,3-a]quinolina-5,5'- pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona

[000656] Uma mistura de Intermediário 166 (0,12 g, 0,27 mmol), ácido barbitúrico (0,04 g, 0,27 mmol) em 2-propanol (1,5 mL) foi aquecida a 130°C em um forno de microondas ao longo de um pe ríodo de duas horas. Os voláteis foram removidos sob vácuo e o resíduo foi agitado em água (5 mL) por 10 min. e filtrado. Rendimento: 0,13 g (87%). Aná-lise de HPLC quiral [Coluna: Chiralpak IA (250x4,6) mm Fase Móvel: Hexano:Etanol (40:60)] mostrou a presença de 45%+6%+5%+42% dos isômeros. Os dois principais isômeros foram separados por HPLC qui-ral [Coluna: Chiralpak IA; Fase Móvel: Hexano:Etanol (40:60)].

[000657] Exemplo 61 foi o primeiro diastereômero a eluir. tR=9,43 min: [α]D 25=-310,4 (c=0,2; MeOH). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,87 (d, 3H), 1,11 (d, 3H), 2,90 (d, 1H), 3,09 (t, 1H), 3,62-3,69 (m, 2H), 3,73-3,77 (m, 1H), 3,91 (d, 1H), 4,05 (d, 1H), 4,48 (dd, 1H), 4,94 (t, 1H), 5,80 (dd, 1H), 7,71 (s, 1H), 8,61-8,62 (m, 2H), 8,81 (s, 1H), 11,46 (s, 1H), 11,83 (s, 1H). 19F RMN (376,5 MHz, DMSO-d6) δ: -158,25 (s). Rendimento: 0,04 g. MS (ES) MH+: 552,5 para C2-5H22FN7O7.

[000658] Exemplo 62 foi o segundo diastereômero a eluir. tR=18,04 min: [α]D25=-176,0 (c=0,2; MeOH). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,87 (d, 3H), 1,11 (d, 3H), 2,90 (d, 1H), 3,08 (t, 1H), 3,60-3,75 (m, 3H), 3,91 (d, 1H), 4,06 (d, 1H), 4,48 (dd, 1H), 4,95 (t, 1H), 5,81 (dd, 1H), 7,74 (s, 1H), 8,62 (s, 2H), 8,82 (s, 1H), 11,47 (br s, 1H), 11,81 (br s, 1H). 19F RMN (376,5 MHz, DMSO-d6) δ: -158,15 (s). Rendimento: 0,05 g. MS (ES) MH+: 552,5 para C26H22FN7O7 Exemplos 63 e 64 (2R,4S,4aS)-11-flúor-2,4-dimetil-8-((R)-2-oxo-4-(pirimidin-2-il)oxazoli- din-3-il)-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-spiro[isoxazolo[4,5-g][1,4]oxazino- [4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona e (2R,4S,4aS)-11- flúor-2,4-dimetil-8-((S)-2-oxo-4-(pirimidin-2-il)oxazolidin-3-il)-2,4,4a,6- tetra-hidro-1H,1'H-spiro[isoxazolo[4,5-g][1,4]oxazino[4,3-a]quinolina- 5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona

[000659] Uma mistura de Intermediário 171 (0,12 g, 0,27 mmol), ácido barbitúrico (0,04 g, 0,27 mmol) em 2-propanol (1,5 mL) foi aquecida a 130°C em um forno de microondas ao longo de um pe ríodo de 2 horas. Os voláteis foram removidos sob vácuo e o resíduo foi agitado em água (5 mL) por 10 minutos e filtrado. Rendimento: 0,13 g (87%). Análise de HPLC quiral [Coluna: Chiralpak IC (250x4,6) mm Fase Móvel: Hexano:Etanol (70:30)] mostrou a presença de 45%+6%+5%+42% dos isômeros. Os dois principais isômeros foram separados por HPLC qui-ral [Coluna: Chiralpak IC; Fase Móvel: Hexano:Etanol (70:30)].

[000660] Exemplo 63 foi o primeiro diastereômero a eluir. tR=13,09 min: [α]D25=-183,23 (c=0,31; MeOH). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,89 (d, 3H), 1,13 (d, 3H), 2,92 (d, 1H), 3,10 (t, 1H), 3,63-3,77 (m, 3H), 3,94 (d, 1H), 4,08 (d, 1H), 4,47 (dd, 1H), 5,01 (t, 1H), 5,71 (dd, 1H), 7,50 (t, 1H), 7,82 (s, 1H), 8,84 (d, 2H), 11,51 (s, 1H), 11,83 (s, 1H). 19F RMN (376,5 MHz, DMSO-d6) δ: -158,30 (s). MS (ES) MH+: 552,5 para C25H22FN7O7.

[000661] Exemplo 64 foi o segundo diastereômero a eluir. tR=30,80 min: [α]D25=-112,25 (c=0,38; MeOH). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,89 (d, 3H), 1,13 (d, 3H), 2,94 (d, 1H), 3,10 (t, 1H), 3,64-3,79 (m, 3H), 3,94 (d, 1H), 4,07 (d, 1H), 4,31 (dd, 1H), 5,01 (t, 1H), 5,68 (dd, 1H), 7,49 (t, 1H), 7,75 (s, 1H), 8,82 (d, 2H), 11,46 (br s, 1H), 11,81 (br s, 1H). 19F RMN (376,5 MHz, DMSO-d6) δ: -158,15 (s). MS (ES) MH+: 552,5 para C25H22FN7O7. Exemplo 65 (2R,4S,4aS)-8-(S)-4~Etinil-2-oxoxazolidin-3-il)-11-flúor-2,4~dimetil- 2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-spiro[isoxazolo[4,5-g][1,4]oxazino[4,3- a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona

[000662] Uma mistura de Intermediário 176 (0,08 g, 0,21 mmol), ácido barbitúrico (0,03 g, 0,21 mmol) em 2-propanol (2 mL) foi aquecida a 130°C em um forno de microondas ao longo de um período de duas horas. Os voláteis foram removidos sob vácuo e o resíduo foi agitado em água (5 mL) por 10 minutos e filtrado. Este foi suspenso em meta-nol (0,5 mL) e água (5 mL) foi adicionada a este e filtrada. Rendimento: 0,09 g (92%). Análise de HPLC de fase reversa em Phenomenex Gemini C18 (250x4,6) mm, 5 μm [Fase Móvel 'A': acetato de amônio 10 mM em água; Fase Móvel ‘B’: Acetonitrila; tR=9,72 min] mostrou a presença de mistura 7%+87% de diastereômeros e o principal isômero foi separado por HPLC de fase reversa [Phenomenex Gemini C18 (Fase Móvel ‘A’: acetato de amônio 10 mM em água; Fase Móvel ‘B’: Acetonitrila)]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,88 (d, 3H), 1,14 (d, 3H), 2,92 (d, 1H), 3,11 (t, 1H), 3,62 (d, 1H), 3,64-3,68 (m, 2H), 3,773,79 (m, 1H), 3,94 (d, 1H), 4,10 (d, 1H), 4,51 (dd, 1H), 4,80 (t, 1H), 5,35-5,39 (m, 1H), 7,59 (s, 1H), 11,45 (s, 1H), 11,82 (s, 1H). MS (ES) MH+: 498,4 para C23H20FN5O7. Exemplo 66 (2R,4S,4aS)-11-cloro-2,4-dimetil-8-((S)-4-metil-2-oxoxazolidin-3-il)- 2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-spiro[isoxazolo[4,5-g][1,4]oxazino[4,3- a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona

[000663] Exemplo 66 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação do Exemplo 2 usando Intermediário 177. O composto do título foi obtido por cromatografia em sílica-gel (Acetato de etila 50% em hexanos) para isolar o principal componente a eluir, o qual foi purificado adicionalmente por Cromatografia de Fluido Super- crítico (coluna Chiralpak IA) para isolar o principal componente a eluir. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ: 0,9 (d, 3H) 1,2 (d, 3H) 1,4 (d, 3H) 2,9-3,15 (m, 2H) 3,5-3,7 (m, 2H) 3,9-4,1 (m, 2H) 4,1-4,25 (m, 1H) 4,44,8 (m, 3H) 7,7 (s, 1H) 11,4 (s, 1H) 11,8 (s, 1H). MS (ES) MH+: 504 para C22H22ClN5O7. Exemplo 67 (2R,4S,4aS)-11-flúor-8-[(4S)-4-(metoximetil)-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il]- 2,4-dimetil-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3- a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona

[000664] Uma solução agitada de Intermediário 40 (0,67 g, 1,5 mmol) e ácido barbitúrico (0,21 g, 1,6 mmol) em ácido acético (10 mL) foi aquecida a 95°C por 4 horas. Os solventes foram eva porados e o resí-duo foi dissolvido em metanol (2 mL). Água (5 mL) foi adicionada para precipitar sólidos, que foram coletados e cromatografados por HPLC quiral [Chiralpak IC (250x4,6) mm; hexano:etanol (80:20); 1,0 mL\min] para separar o composto do título como o segundo componente a eluir. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,9 (d, 3H), 1,1 (d, 3H), 2,9 (d, 1H), 3,1 (t, 1H), 3,25 (s, 3H), 3,5 (d, 1H), 3,6-3,7 (m, 2H), 3,85 (m, 1H), 3,85-3,9 (d, 1H), 3,9 (d, 1H), 4,1 (d, 1H), 4,45-4,5 (m, 1H), 4,6-4,7 (m, 2H), 7,65 (s, 1H), 11,5 (s, 1H), 11,8 (s, 1H). MS (ES) MH+: 518,4 para C23H24FN5O8; [α]D20=—93,8 (c=1,14; MeOH), RT=20,7 min.

[000665] Também isolado na síntese do Exemplo 67 foi (2S,4R,4aR)-11 -flúor-8-[(4S)-4-(metoximetil)-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il]- 2,4-dimetil-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3- a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona (primeiro componente a eluir da purificação por HPLC quiral):

[000666] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,9 (d, 3H), 1,1 (d, 3H), 2,9 (d, 1H), 3,1 (t, 1H), 3,2 (s, 3H), 3,5 (d, 1H), 3,6-3,7 (m, 2H), 3,85 (m, 1H), 3,85-3,9 (d, 1H), 3,9 (d, 1H), 4,1 (d, 1H), 4,45-4,5 (m, 1H), 4,64,65 (m, 2H), 7,7 (s, 1H), 11,5 (s, 1H), 11,8 (s, 1H). MS (ES) MH+: 518,4 para C23H24FN5O8; [α]D20=+159,4 (c=1,04; MeOH), RT=17,8 min. Exemplo 68 (2R,4S,4aS)-11 -flúor-2,4-dimetil-8-((S)-4-(1 -metil-1 H-1,2,4-triazol-5-il)- 2-oxoxazolidin-3-il)-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-spiro[isoxazolo[4,5- g][1,4]oxazino[4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona

[000667] Exemplo 68 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação do Exemplo 2 usando Intermediário 183. O composto do título foi obtido por purificação por SFC usando uma co-luna Chiralpak OJ (250x4,6 mm) (Dióxido de carbono:Etanol (75:25); 1,0 mL/min). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 0,9 (d, 3H), 1,1 (d, 3H), 2,9 (d, 1H), 3,15 (m, 1H) 3,5-3,8 (m, 3H), 3,8-4,2 (m, 5H), 4,55 (dd, 1H), 4,8-5,1 (m, 1H), 5,0 (dd, 1H), 7,7 (s, 1H), 7,9 (s, 1H) 11,4 (s, 1H), 11,8 (s, 1H). MS (ES) MH+: 558 para C24H23FN8O7. Exemplo 69 (2R,4S,4aS)-11 -flúor-2,4-dimetil-8-((R)-4-(1 -metil-1 H-1,2,4-triazol-5-il)- 2-oxoxazolidin-3-il)-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-spiro[isoxazolo[4,5- g][1,4]oxazino[4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona

[000668] Exemplo 69 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação do Exemplo 2 usando Intermediário 189. O composto do título foi obtido por purificação por SFC usando coluna Chiralpak OJ (250x4,6 mm) (Dióxido de carbono:Etanol (75:25); 1,0 mL\min). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 0,9 (d, 3H), 1,1 (d, 3H), 2,9 (d, 1H), 3,15 (m, 1H) 3,5-3,8 (m, 3H), 3,8-4,2 (m, 5H), 4,55 (dd, 1H), 4,8-5,1 (m, 1H), 6,0 (dd, 1H), 7,7 (s, 1H), 7,9 (s, 1H) 11,4 (s, 1H), 11,8 (s, 1H). MS (ES) MH+: 558 para C24H23FN8O7. Exemplo 70 (2R,4S,4aS)-11-flúor-8-((R)-4-(S)-1-hidroxietil)-2-oxoxazolidin-3-il)-2,4- dimetil-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-spiro[isoxazolo[4,5- g][1,4]oxazino[4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona

[000669] Uma mistura de Intermediário 198 (0,12 g, 0,30 mmol) e ácido barbitúrico (0,04 g, 0,30 mmol) em 2-propanol (2 mL) foi aquecida em um reator de microondas a 130°C ao longo de um período de duas horas. Os voláteis foram removidos sob vácuo e o resíduo foi agi-tado em água (0,5 mL) por 10 min. e filtrado. Rendimento: 0,05 g (61%) 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,89 (d, 3H), 1,04 (d, 3H), 1,14 (d, 3H), 2,92 (d, 1H), 3,10 (t, 1H), 3,59-3,69 (m, 2H), 3,77-3,78 (m, 1H), 3,94 (d, 1H), 4,10 (d, 1H), 4,32 (quin, 1H), 4,45-4,49 (m, 1H), 4,53-4,55 (m, 2H), 5,29 (d, 1H), 7,73 (s, 1H), 11,83 (br s, 2H). 19F RMN (376,5 MHz, DMSO-d6) δ: -158,38 (s). MS (ES) MH+: 518,3 para C23H24FN5O8. Exemplo 71 {(4S)-3-[(2R,4S,4aS)-11-flúor-2,4-dimetil-2',4',6'-trioxo-1,1',2,3',4,4',4a,6'- octa-hidro-2'H,6H-spiro[ 1,4-oxazino[4,3-a][ 1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina- 5,5'-pirimidin]-8-il]-2-oxo-1,3-oxazolidin-4-il}acetonitrila

[000670] A uma solução agitada de Intermediário 200 (0,1 g, 0,23 mmol) em álcool isopropílico (5 mL), ácido barbitúrico (0,03 g, 0,25 mmol) foi adicionado e a mistura foi agitada a 95°C por 16 horas. Os voláteis foram removidos completamente sob vácuo e água (5 mL) foi adicionada ao resíduo e filtrada. Rendimento: 0,10 g (77%). Análise de HPLC quiral [coluna: chiralcel OD-H, eluente: hexano:etanol (50:50)] mostrou que é uma mistura de quatro isômeros na razão de 33:45:17:5. O isômero com a razão de 33% foi separado por HPLC quiral [Coluna: chiralcel OD-H, eluente: hexano:etanol (50:50)] e identificado como Exemplo 71. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,89 (d, 3H), 1,15 (d, 3H), 2,92 (d, 1H), 3,12-3,19 (m, 2H), 3,39-3,40 (m, 1H), 3,65-3,70 (m, 2H), 3,74-3,78 (m, 1H), 3,94 (d, 1H), 4,10 (d, 1H), 4,44 (dd, 1H), 4,78 (t, 1H), 4,87-4,89 (m, 1H), 7,69 (s, 1H), 11,47 (s, 1H), 11,83 (s, 1H). MS (ES) MH+: 513,2 para C23H21FN6O7. Exemplo 72 (2R,4S,4aS)-8-(R)-4-(R)-1,2-Di-hidroxietil)-2-oxoxazolidin-3-il)-11 -flúor- 2,4-dimetil-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-spiro[isoxazolo[4,5-g][1,4]oxazi- no[4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona

[000671] A uma solução agitada de Intermediário 201 (0,35 g, 0,75 mmol) em etanol (4 mL), ácido barbitúrico (0,19 g, 14,9 mmols) e ácido clorídrico 2 N (4 mL) foram adicionados e a mistura foi aquecida em um reator de microondas a 120°C por duas horas. Os voláteis foram removidos completamente sob vácuo, água (3 mL) foi adicionada e sólido foi filtrado para render o composto do título. Rendimento: 0,35 g (88%) Nota: Análise de HPLC quiral [Coluna: Chiralpak AD-H (250x4,6) mm; Fase Móvel: Hexano:Etanol (70:30)] mostrou que a mistura de reação foi 89% de. O principal isômero (Exemplo 72) foi separado por HPLC quiral [Coluna: Chiralpak AD-H; Fase Móvel: He- xano:Etanol (70:30)]. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,88 (d, 3H), 1,13 (d, 3H), 2,92 (d, 1H), 3,10 (t, 1H), 3,34-3,40 (m, 2H), 3,62-3,68 (m, 2H), 3,75-3,79 (m, 1H), 3,92 (d, 1H), 4,09 (d, 1H), 4,18 (q, 1H), 4,484,53 (m, 1H), 4,56-4,59 (m, 1H), 4,69-4,73 (m, 1H), 4,84 (t, 1H), 5,40 (q, 1H), 7,72 (s, 1H), 11,44 (s, 1H), 11,82 (s, 1H). MS (ES) MH+: 534,2 para C23H24FN5O9. Exemplo 73 (2R,4S,4aS)-8-(R)-4-(S)-1,2-Di-hidroxietil)-2-oxoxazolidin-3-il)-11 -flúor- 2,4-dimetil-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-spiro[isoxazolo[4,5-g][1,4]oxa- zino[4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona

[000672] Exemplo 73 foi sintetizado segundo o procedimento descrito para a preparação do Exemplo 72 usando Intermediário 202 (0,40 g, 0,85 mmol). O produto foi obtido após submetido a purificação por método de HPLC de fase reversa por acetato de amônio. Rendimento: 0,25 g (54%). Nota: Análise de HPLC quiral [Coluna: Chiralpak AD-H (250x4,6) mm; Fase Móvel: hexano:etanol (70:30)] mostrou que a rea-ção produziu uma mistura do composto em 58% de. Tanto o isômero principal (Exemplo 73) quanto o secundário foram separados por HPLC quiral.

[000673] O principal isômero (Exemplo 73) foi o segundo diastereô- mero a eluir: RT=9,99 min. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,88 (d, 3H), 1,13 (d, 3H), 2,92 (d, 1H), 3,10 (t, 1H), 3,32-3,44 (m, 2H), 3,643,68 (m, 2H), 3,76-3,80 (m, 1H), 3,93 (d, 1H), 4,10 (d, 1H), 4,19 (q, 1H), 4,49-4,53 (m, 1H), 4,56-4,60 (m, 1H), 4,70-4,73 (m, 1H), 4,84 (t, 1H), 5,40 (q, 1H), 7,72 (s, 1H), 11,43 (s, 1H), 11,81 (s, 1H). MS (ES) MH+: 534,2 para C23H24FN5O9. Exemplo 74 (2R,4S,4aS)-11-flúor-8-{(4S)-4-[(hidroxiimino)metil]-2-oxo-1,3-oxazoli- din-3-il}-2,4-dimetil-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3- a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona

[000674] A uma solução de Intermediário 91 (0,15 g, 0,3 mmol) em ácido acético (10 mL), ácido barbitúrico (0,05 g, 0,4 mmol) foi adicio-nado e a mistura foi aquecida a 95°C por 3 horas. O s voláteis foram removidos completamente sob vácuo, água (4 mL) foi adicionada ao resíduo e a solução foi filtrada. O sólido assim obtido foi purificado adi-cionalmente por cromatografia em coluna de sílica-gel usando um gra-diente de clorofórmio em metanol. O composto foi obtido como uma mistura indefinida de isômeros E & Z (-1:0,65 é a razão). Rendimento: 0,06 g (34%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,89 (d, 3H), 1,14 (d, 3H), 2,93 (d, 1H), 3,11 (t, 1H), 3,65-3,80 (m, 3H), 3,94 (d, 1H), 4,10 (d, 1H), 4,30-4,32 & 4,47-4,51 (m, 1H), 4,76 & 4,88 (t, 1H), 5,24-5,30 & 5,48-5,55 (m, 1H), 7,10-7,14 & 7,51-7,75 (m, 2H), 11,28 & 11,48 (s, 1H), 11,45 (s, 1H), 11,85 (s, 1H). MS (ES) MH+: 517,3 para C22H21FN6O8. Exemplos 75 e 76 (5R)-3-[(2R,4S,4aS)-11-flúor-2,4-dimetil-2',4',6'-trioxo-1,T,2,3',4,4',4a,6'-octa-hi- dro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3-a1[1,21oxazolo[4,5-g1quinolina-5,5'-pirimidin1-8- il]-2-oxo-1,3-oxazolidina-5-carbonitrila e (5S)-3-[(2R,4S,4aS)-11-flúor-2,4- dimetil-2',4',6'-trioxo-1,1',2,3',4,4',4a,6'-octa-hidro-2'H,6H-spiro[1,4-oxazino[4,3- a1[1,21oxazolo[4,5-g1quinolina-5,5'-pirimidin1-8-il1-2-oxo-1,3-oxazolidina-5- carbonitrila

[000675] A uma solução de Intermediário 203 (0,13 g, 0,3 mmol) em ácido acético (5 mL), ácido barbitúrico (0,04 g, 0,3 mmol) foi adicionado e a mistura foi aquecida a 95°C por 3 horas. Os voláteis foram re-movidos completamente sob vácuo e água (2 mL) foi adicionada ao resíduo e a solução foi filtrada. Análise por HPLC [Coluna Xbridge C18 (150 mm*4,6 mm) 3,5μ, Fase Móvel: acetato de amônio 10 mM em água e metanol] mostrou que a reação produziu uma mistura 1:1 de isômeros, os quais foram separados por HPLC de fase reversa (Xbrid-ge C18; Fase Móvel: acetato de amônio 10 mM em água e metanol). Rendimento: 0,03 g (34%).

[000676] Exemplo 75 (Isômero menos polar): 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,88 (d, 3H), 1,13 (d, 3H), 2,88 (d, 1H), 3,10 (t, 1H), 3,58-3,68 (m, 2H), 3,76-3,82 (m, 1H), 3,94 (d, 1H), 4,10 (d, 1H), 4,31-4,35 (m, 1H), 4,45 (t, 1H), 5,88 (dd, 1H), 7,67 (s, 1H), 11,60 (br s, 2H). MS (ES) MH+: 499,3 para C22H19FN6O7.

[000677] Exemplo 76 (Isômero mais polar): 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,88 (d, 3H), 1,13 (d, 3H), 2,90 (d, 1H), 3,11 (t, 1H), 3,64- 3,70 (m, 2H), 3,74-3,80 (m, 1H), 3,93 (d, 1H), 4,09 (d, 1H), 4,30-4,34 (m, 1H), 4,47 (t, 1H), 5,89 (dd, 1H), 7,67 (s, 1H), 11,44 (s, 1H), 11,81 (s, 1H). MS (ES) MH+: 499,3 para C22H19FN6O7. Exemplo 77 (2R,4S,4aS)-11-flúor-8-((R)-4~(R)-1-hidroxietil)-2-oxoxazolidin-3-il)-2,4~ dimetil-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-spiro[isoxazolo[4,5-g][1,4]oxazino- [4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona

[000678] Uma mistura de Intermediário 211 (0,07 g, 0,17 mmol) e ácido barbitúrico (0,02 g, 0,17 mmol) em 2-propanol (1 mL) foi aquecida em um reator de microondas a 130°C ao longo de um período de duas horas. Os voláteis foram removidos sob vácuo e o resíduo foi agitado em água (0,5 mL) por 10 min. e filtrado. Rendimento: 0,08 g (90%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,89 (d, 3H), 0,98 (d, 3H), 1,15 (d, 3H), 2,92 (d, 1H), 3,12 (t, 1H), 3,64-3,69 (m, 2H), 3,75-3,78 (m, 1H), 3,93 (d, 1H), 4,10 (d, 1H), 4,29 (br s, 1H), 4,52-4,60 (m, 3H), 5,27 (d, 1H), 7,64 (s, 1H), 11,49 (s, 1H), 11,83 (s, 1H). 19F RMN (376,5 MHz, DMSO-d6) δ: -158,15 (s). MS (ES) MH+: 518,4 para C23H24FN5O8. Exemplo 78 (2R,4S,4aS)-11-flúor-8-((4R,5R)-4-(fluorometil)-5-metil-2-oxoxazolidin-3-il)- 2,4-dimetil-2,4,4a,6-tetra-hidro-1 H,1'H-spiro[isoxazolo[4,5-g][1,4]oxazino[4,3- a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona

[000679] Uma mistura de Intermediário 216 (0,03 g, 0,06 mmol) e ácido barbitúrico (0,008 g, 0,06 mmol) em 2-propanol (0,5 mL) foi aquecida a 130°C em um reator de microondas ao long o de um período de 2 horas. Voláteis foram removidos sob vácuo e o resíduo foi agitado em água (1 mL) por 10 minutos e filtrado. Este foi suspenso em metanol (0,5 mL), água (1 mL) foi adicionada ao mesmo e filtrada. Rendimento: 0,03 g (81%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,89 (d, 3H), 1,15 (d, 3H), 1,51 (d, 3H), 2,93 (d, 1H), 3,12 (t, 1H), 3,65-3,70 (m, 2H), 3,77-3,78 (m, 1H), 3,95 (d, 1H), 4,11 (d, 1H), 4,35-4,58 (m, 1H), 4,71 (dd, 1H), 4,86-4,89 (m, 1H), 4,99-5,01 (m, 1H), 7,63 (s, 1H), 11,46 (s, 1H), 11,82 (s, 1H). MS (ES) MH+: 520,5 para C23H23F2N5O7. Exemplos 79 e 80 (2R,4S,4aS)-11-flúor-8-((4S,5R)-4-(metoximetil)-5-metil-2-oxoxazolidin-3-il)- 2,4-dimetil-2,4,4a,6-tetra-hidro-1 H,1'H-spiro[isoxazolo[4,5-g][1,4]oxazino[4,3- a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona e (2R,4S,4aS)-11 -flúor-8- ((4R,5R)-4-(metoximetil)-5-metil-2-oxoxazolidin-3-il)-2,4-dimetil-2,4,4a,6- tetra-hidro-1 H,1'H-spiro[isoxazolo[4,5-g][1,4]oxazino[4,3-a]quinolina-5,5'- pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona

[000680] Uma mistura de Intermediário 221 (0,28 g, 0,67 mmol), ácido barbitúrico (0,09 g, 0,67 mmol) em 2-propanol (5 mL) foi aquecida a 130°C em um forno de microondas ao longo de um período de 2 horas. Os voláteis foram removidos sob vácuo e o resíduo foi agitado em água (5 mL) por 10 minutos e filtrado. O produto foi suspenso em metanol (0,5 mL) e água (5 mL) foi adicionada ao mesmo e filtrada. Ren-dimento: 0,34 g (96%). HPLC quiral [Coluna: Chiralpak IA (250x4,6) mm, Fase Móvel: dietilamina 0,1% em Hexano:Etanol (50:50] mostrou a presença de 17%+51% de diastereômeros. Esses picos foram sepa-rados por HPLC de fase reversa [Chiralpak IA; Fase Móvel: 0,1% dieti-lamina em Hexano:Etanol (50:50)].

[000681] Exemplo 79 (primeiro diastereômero a eluir): tR=6,53 min; [α]D 25=-121,46 (c=0,22; MeOH). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,88 (d, 3H), 1,13 (d, 3H), 1,46 (d, 3H), 2,88 (d, 1H), 3,09 (t, 1H), 3,19 (s, 3H), 3,56-3,59 (m, 2H), 3,67 (t, 1H), 3,74-3,77 (m, 1H), 3,85-3,88 (m, 1H), 3,93-3,95 (m, 1H), 4,09 (d, 1H), 4,55 (s, 1H), 5,02 (t, 1H), 7,66 (s, 1H), 11,40 (br s, 2H). 19F RMN (376,5 MHz, DMSO-d6) δ: -158,49 (s). MS (ES) MH+: 532,5 para C24H26FN5O8.

[000682] Exemplo 80 (segundo diastereômero a eluir): tR=8,22 min; [α]D25=-129,17 (c=0,30; MeOH). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,89 (d, 3H), 1,14 (d, 3H), 1,45 (d, 3H), 2,90 (d, 1H), 3,12 (t, 1H), 3,22 (s, 3H), 3,55-3,62 (m, 2H), 3,66 (t, 1H), 3,77-3,78 (m, 1H), 3,82-3,86 (m, 1H), 3,92-3,94 (m, 1H), 4,10 (d, 1H), 4,23 (s, 1H), 4,76 (t, 1H), 7,61 (s, 1H), 11,18 (br s, 2H). 19F RMN (376,5 MHz, DMSO-d6) δ: -158,21 (s). MS (ES) MH+: 532,5 para C24H26FN5O8. Atividade Biológica

[000683] Compostos de Fórmula (I) inibem DNA girase bacteriana e são, portanto, de interesse por seus efeitos antibacterianos. Os com-postos são ativos contra bactérias Gram-positivas, Gram-negativas e atípicas. Essas propriedades podem ser avaliadas usando, por exem-plo, os ensaios descritos abaixo. Teste de Susceptibilidade (MIC)—Ensaio 1

[000684] Concentrações Mínimas Inibitórias (MICs) foram determi-nadas pelo método de microdiluição de caldo de acordo com as orien-tações do Instituto de Padrões Clínicos e de Laboratório (CLSI). Em suma, suspensões de organismos foram ajustadas para um padrão McFarland de 0,5 para render um inóculo final entre 3*105 e 7x105 unidades de formação de colônia (CFU)/mL. Inóculos bacteria- nos foram preparados para a maioria dos organismos em Caldo de Mueller-Hinton estéril ajustado para cátions (Beckton Dickinson). O estreptococos foram preparados como acima em Caldo de Mueller- Hinton ajustado para cátions, ao qual 2,5% de sangue de cavalo lisado (Hema Resource &Supply Inc.) foram adicionados. Um volume de inóculo de 100 μL foi adicionado a poços (usando um robô Tecan EVO) contendo 2 μL de DMSO contendo diluições em série duplas de droga. Todas as bandejas de microdiluição inoculadas foram incubadas em ar ambiente a 35°C por 18-24 horas. Após a i ncubação, a menor concentração da droga que preveniu crescimento visível conforme lido a OD600 nm e confirmado por uma leitura visual usando um espe-lho de leitura de teste foi gravada como a MIC. Desempenho do ensaio foi monitorado pelo uso de cepas de controle de qualidade de laborató-rio e compostos de controle comercialmente disponíveis com espectros MIC definidos, de acordo com orientações do CLSI. Tabela 1 provê os resultados de MIC (μM) dos Exemplos 1-77 testados no Ensaio 1. Tabela 2 provê os resultados de MIC (μg/mL) dos Exemplos 78-80 testados no Ensaio 1. TABELA 1 aStreptococcus pirgenes, cepa in vivo. bStreptococcus pneumoniae, cepa in vivo. cStreptococcus pneumoniae, cepa in vivo. dStaphilococcus aureus cepa in vivo, MSQS. eStaphilococcus aureus, cepa in vivo, MRQR. fStaphilococcus aureus, soro. TABELA 2 a Streptococcus pirogenes, cepa in vivo. b Streptococcus pneumoniae, cepa in vivo. cStreptococcus pneumoniae, ATCC 49619. dStaphilococcus aureus, cepa in vivo, ATCC 29213. eStaphilococcus aureus, cepa in vivo, MRQR. fStaphilococcus aureus, cepa in vivo, MRSA. Teste de Susceptibilidade (MIC)—Ensaio 2

[000685] Concentrações Mínimas Inibitórias (MICs) foram determi-nadas pelo método de microdiluição de caldo de acordo com as orien-tações do Instituto de Padrões Clínicos e de Laboratório (CLSI). Em suma, suspensões de organismos foram ajustadas a um padrão McFarland de 0,5 para render um inóculo final entre 3x105 e 7x105 unidades de formação de colônia (CFU)/mL. Inóculos bacteria- nos foram geralmente preparados em Caldo de Mueller-Hinton estéril ajustado para cátions (Becton Dickinson), o qual incluiu Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, e Pseudomonas aeruginosa.Inóculos bacterianos de Haemophilus influenzaeforam preparados em Caldo de Mueller-Hinton estéril ajustado para cátions (Becton Dickinson) con-tendo 0,5% de extrato de levedura (Becton Dickinson) mais 30 mL de 15 μg/mL estoque de Hematina Bovina (Sigma), e 3 mL de β- nicotinamida adenina dinucleotídeo 15 μg/mL (Sigma). Cepas de Neis-seriaforam testadas para MICs usando metodologia de diluição de ágar de acordo com orientações do CLSI. Para teste de microdiluição de caldo, um volume de inóculo de 100 μL foi adicionado aos poços (usando um robô Tecan EVO) contendo 2 μL de DMSO contendo dilui-ções em série duplas de droga. Todos os painéis de microdiluição ino-culados foram incubados em ar ambiente a 35°C por 1 8-24 horas. Após a incubação, a menor concentração da droga que preveniu cres-cimento visível conforme lido a OD600 nm e confirmado por uma leitura visual usando um espelho de leitura de teste foi gravada como a MIC. Desempenho do ensaio foi monitorado pelo uso de cepas de controle de qualidade de laboratório e compostos de controle comercialmente disponíveis com espectros MIC definidos, de acordo com orientações do CLSI. Tabela 3 provê os resultados de MIC (μM) dos Exemplos 1-77 testados no Ensaio 2. Tabela 4 provê os resultados de MIC (μg/mL) dos Exemplos 78-80 testados no Ensaio 2. TABELA 3 aHaemophilus influenzae, ATCC 51907, cepa in vivo. bEscherichia coli, K12. cKlebsiella pneumoniae, isolado clínico, mucoide. dPseudomonas aeruginosa, PAO1. a Haemophilus influenzae, ATCC 49247. b Escherichia coli, cepa in vivo, ATCC 25922. cEscherichia coli, ATCC 35218. dKlebsiella pneumoniae, isolado clínico, mucoide. eKlebsiella pneumoniae, ATCC 700603. fPseudomonoas aeruginosa, PAO1. Ensaio de Polarização de Fluorescência da Atividade de Superenove- lamento da DNA Girase

[000686] Em uma placa de ensaio de poliestireno de 384 poços preta, 30 microlitros/poço de tetrâmero A/B de DNA girase de Escherichia coli 5 nM e 130 microgramas/mL de plasmídeo topologicamente relaxado contendo a sequência de formação de triplex TTCTTCTTCTT- CTTCTTCTTCTTCTTC (SEQ ID N°: 1) em um tampão de ensaio con-sistindo em Tris-HCl 35 mM (pH 7,5), KCl 24 mM, MgCl2 4 mM, ditio- treitol 2 mM, espermidina 1,8 mM, glicerol 5% (v/v), albumina de soro bovino 200 nM, dimetilsulfóxido 0,8%, e ATP 0,3 mM foram incubados à temperatura ambiente por (tipicamente 30 minutos) na ausência ou presença de 5-10 diferentes concentrações de composto de teste. As reações de superenovelamento foram extintas pela adição de 10 mi-crolitros/poço de sonda de oligodeoxinucleotídeo 40 nM em tampão de formação de triplex 3x consistindo em NaCl 150 mM, e acetato de só-dio 150 mM em pH 3,5. A sonda de oligodeoxinucleotídeo foi TTCTT- CTTC marcada com 5'-BODIPY-FL (SEQ ID N°: 2).

[000687] Após 60 minutos, a anisotropia de fluorescência do BO- DIPY-FL foi medida em um leitor de placa Tecan Ultra, usando filtros de excitação de 485 nm e emissão de 535 nm equipados com polari- zadores. A IC50foi determinada por regressão não linear usando duas reações de controle. A primeira não continha nenhum composto de teste, mas DMSO 0,8% (100% de atividade), enquanto a segunda rea-ção de controle continha Ciprofloxacina 5 μM e DMSO 0,8% (0% de atividade).

[000688] Quando testado em um ensaio in vitro com base no ensaio de polarização de fluorescência da atividade de superenovelamento da DNA girase descrito acima, as atividades inibitórias do ensaio de IC50 do superenovelamento da DNA girase de E. coli dos Exemplos 1-77 foram determinadas, como mostrado na Tabela 5. TABELA 5 Eficácia In vivo do Exemplo 5 Contra Staphilococcus aureus em um Modelo de Coxa de Camundongo

[000689] O objetivo do estudo foi determinar a eficácia e relação farmacocinética/farmacodinâmica (PK/PD) para o Exemplo 5 contra Staphilococcus aureus(S. aureus) em modelos de infecção de coxa de camundongo.

[000690] As cepas de S. aureususadas incluíram um isolado resistente à meticilina obtido da Coleção de Cultura de Tipo Americana (ATCC33591) (MRSA). Adicionalmente, três isolados clínicos de S. aureusforam utilizados; (1) um isolado sensível à meticilina (MSSA); (2) um isolado clínico resistente à meticilina recente do genótipo USA300 (USA300) e (3) um isolado clínico resistente à meticilina recente do genótipo USA100 (USA1000).

[000691] A MIC contra cada isolado foi determinada usando o método de microdiluição de caldo segundo orientações do CLSI (Rayner et al. Clinical pharmacodynamics of linezolid in seriously ill patients treated in a compassionate use program. Clin Pharmacokinet 2003. 42:1411-23). Dez determinações individuais foram desempenhadas para cada cepa e a MIC Modal foi usada para todos os cálculos PK/PD.

[000692] Todos os procedimentos foram realizados de acordo com o protocolo aprovado do Comitê de Uso e Cuidado de Animais Instituci-onais (IACUC) 11-03-i. Camundongos tornaram-se neutropênicos com ciclofosfamida a 150 mg/kg ip no dia -4 e 100 mg/kg ip no dia -1 (Andes et al. In vivo pharmacodynamics of a new Oxazolidinone (Linezo- lid) AAC 2002, 46(11): 3484-9). Duas horas antes da infecção, camundongos receberam uma administração de 50 mg/kg de aminobenzo- triazol (ABT) oralmente para inibir a atividade do citocromo P450 (CYP450); camundongos receberam uma segunda administração de 50 mg/kg 12 h depois. Cada S. aureusisolado foi preparado de maneira semelhante. Uma placa fresca durante a noite foi usada para inocular uma cultura de 25 mL de caldo tríptico de soja (TSB). A cultura foi incubada durante a noite a 37°C com agitação a 200 rpm. A cultura durante a noite foi diluída 1:10 em TSB, a OD600 determinada, e entrou em uma calculadora de diluição específica para esse isolado. O volume calculado da cultura durante a noite foi pipetado no volume apropriado de salina para obter o nível de inóculo desejado de 5x105 CFU/coxa e uma contagem viável determinada em duplicata.

[000693] Camundongos foram então distribuídos em grupos de tratamento ou controle. A duas horas após a infecção, um grupo de 10 camundongos sofreu eutanásia para determinar a contagem viável nas coxas infectadas no começo do tratamento. Aos grupos restantes de camundongos, administrou-se (1) Exemplo 5, (2) compostos controle (levofloxacina ou linezolida) ou (3) veículo. Eficácia foi determinada 24 horas após o início do tratamento. Camundongos sofreram eutanásia por asfixia por dióxido de carbono e deslocamento cervical e a coxa infectada removida e dissecada. As coxas foram pesadas e transferidas para tubos contendo 1 mL de salina para homogenização. Tecido da coxa foi homogenizado (homogenizador Omni TH, Omni International, Warrenton, Va.) e 100 μL de homogenato diluído em série em salina e plantado em placas de ágar tríptico de soja para determinação da contagem viável. Placas foram incubadas a 37 °C durante a noite.

[000694] Inicialmente, estudos de curso de tempo de dose única fo- ram feitos para cada isolado para determinar o regime de dosagem ótima. Para o isolado de S. aureusMRSA, dosagem uma vez ao dia (uid) foi determinada como sendo o regime ótimo, para todos os outros isolados, um regime de duas vezes ao dia (bid, q12) foi determinado como sendo ótimo. Após o estudo de curso de tempo, dois estudos de resposta de dose individual foram feitos para cada isolado e os resultados foram combinados para obter as razões AUC/MIC associadas à eficácia. Os camundongos receberam doses de 2,5 a 160 mg/kg/dia dadas qd ou bid q12, o volume de administração foi de 10 mL/kg por dose de bolus intraperitoneal e a duração do tratamento foi de 24 horas.

[000695] Grupos de camundongos satélite infectados com S. au-reusforam usados para determinar concentrações plasmáticas. Dosagem começou 2 horas após a infecção e amostras de sangue total foram tomadas em pontos de tempo 0,5, 1, 2, 4, 6, 8, 12 e 24 h por san- gramento submandibular ou por punção cardíaca após asfixia por dióxido de carbono e deslocamento cervical. Sangue total foi recolhido em microtubos contendo etilenodiamina ácido tetraacético (EDTA) (Beckton Dickenson). Três camundongos por ponto de tempo foram usados. Plasma foi separado por centrifugação por cinco minutos a 13200 rpm e armazenado a -20°C até a bioanálise.

[000696] Amostras biológicas contendo Exemplo 5 foram extraídas usando precipitação de proteína. A um volume de amostra, 5 volumes de acetonitrila contendo o padrão interno (Gliburida) foram adicionados. A mistura foi então misturada e a placa foi centrifugada a 3200 rpm por 5 min. Um volume de 200 μL do sobrenadante foi seco e reconstituído em Fase Móvel e a mistura foi injetada em cromatografia líquida-espectrometria de massa (LC-MS). Um Sciex API 4000, controlado por Analyst v1,4,2, foi usado para a aquisição dos dados e a quantificação do Exemplo 5. Parâmetros de instrumento LC-MS são providos nas Tabelas 6 e 7 abaixo. TABELA 6: Condições de Cromatografia Líquida para detectar Exemplo 5 em plasma

TABELA 7: Parâmetros MS/MS para o Exemplo 5 e detecção de Gli- burida

Análise de Dados de Farmacocinética:

[000697] O perfil plasmático para cada grupo de dose foi obtido através do cálculo da concentração plasmática média de composto em cada um dos três animais por ponto de tempo. A área sob a curva de tempo de concentração plasmática de zero a infinito (AUC); concentração de droga máxima no plasma (Cmax); tempo para alcançar a concentração máxima (tmax); e meia-vida plasmática (t1/2) para cada grupo de dose foram determinados por análise não compartimental (Win- NonLin 5,2, Pharsight). O modelo não compartimental 200 foi usado na análise.

[000698] A AUC para os regimes de dose bid foi determinada através da multiplicação do valor AUC obtido após uma dose única por dois, assumindo nenhuma acumulação após uma segunda dose. Análise de Dados de Farmacodinâmica: O número de colônias bacterianas crescidas a partir da coxa de cada animal foi ajustado para contabilizar a diluição da amostra e peso do tecido para determinar a CFU por grama de tecido (CFU/g). A variabilidade em cada grupo de dose foi determinada através do cálculo do erro padrão para os animais dentro de cada grupo.

[000699] Análise Farmacocinética/Farmacodinâmica: O log da média de CFU/g obtida para o grupo pré-tratamento foi subtraído do log de CFU/g obtido para cada animal individual nos grupos de tratamento. O delta em log de CFU/g foi determinado para cada animal no grupo de eficácia e usado na análise PK/PD. Pontos estatisticamente discrepantes foram determinados usando o método interquartis e eliminados da análise.

[000700] Os parâmetros farmacocinéticos de AUC para cada grupo de dose foram relacionados à MIC do Exemplo 5 contra cada isolado de S. aureus. A razão da AUC para a MIC foi determinada para cada grupo de dose e plotada contra a CFU/g de cada animal. Uma fração murina não ligada de 22,1% foi usada para calcular concentrações plasmáticas livres. Esse valor veio da média da fração não ligada de proteína de camundongo do Exemplo 5 na faixa de 1 μM to 50 μM.

[000701] A correlação entre eficácia e a AUC total de índices PK/PD foi determinada por regressão não linear (WinNonlin 5,2, Pharsight). Os dados foram modelados usando um modelo Emaxsigmoidal mostrado abaixo, onde Emax é o máximo crescimento observado na ausência de droga; E0é a mortalidade máxima, EC50é a concentração que dá 50% de resposta, e N é o fator de Hill.

[000702] A análise PK/PD foi desempenhada nos grupos de dose combinados, assim como para os regimes de dose individuais. A goo-dness of fitfoi determinada por avaliação da variabilidade nos parâmetros calculados para o modelo, os critérios de Aikaike, e a análise dos residuais pesados.

[000703] Os parâmetros PK/PD determinados por modelagem foram usados para determinar exposições requeridas para alcançar uma resposta estática, assim como redução de 1 log nas contagens de co-lônias em comparação às contagens no começo da terapia.

[000704] Os valores de MIC dos quatro isolados de S. aureusde-terminados contra o Exemplo 5 são apresentados na Tabela 8. TABELA 8: Valores de MIC Modal contra isolados de S. aureus

[000705] As exposições plamáticas associadas com administração intraperitoneal do Exemplo 5 na presença de ABT foram determinadas em camundongos neutropênicos infectados na coxa com S. aureusMSSA, MRSA e USA300. Os dados combinados foram analisados para construir uma relação dose/exposição em consenso. A melhor relação foi associada com uma relação em potência, Y=(1,022,7)*(X1,2019), onde Y é a AUC infinita em ng h/mL e X é a dose medida em mg/kg.

[000706] Figura 1 ilustra a resposta de dose do Exemplo 5 contra S. aureusUSA100 na coxa de camundongos neutropênicos pré-tratados com ABT. Cada ponto representa a média de 5 animais As barras de erro representam o erro padrão. No começo da terapia, a carga bacte- riana foi de 5,93±0,09 CFU/g. As bactérias cresceram 3,3 log CFU/g no grupo veículo. Linezolida foi administrada intraperitonealmente em experimentos separados para comparação.

[000707] Cada S. aureusisolado cresceu pelo menos dois logaritmos no grupo controle veículo desde o começo do tratamento; com MSSA, MRSA, USA100 e USA300 crescendo 1,96±0,08, 3,2±0,12, 2,66±0,16 e 3,1±0,21 CFU/g, respectivamente. S. aureusMRSA foi administrado uma vez ao dia (uid) uma vez que nenhuma das doses testadas cresceu novamente a níveis equivalentes ao grupo controle veículo. Os outros três isolados foram testados com um regime de administração de duas doses iguais administradas com dose horas de diferença (bid, q12).

[000708] Os parâmetros PK/PD dos estudos de resposta de dose simples foram calculados. Assumiu-se que o parâmetro AUC/MIC foi o parâmetro que melhor correlacionou-se com a atividade, uma vez que esse parâmetro mostrou-se correlacionar melhor com a eficácia tanto in vitro. Para todos os estudos de resposta de dose, as soluções de dosagem foram analisadas para avaliar a dose medida e a relação de exposição em consenso foi usada para estimar as exposição plasmática.

[000709] Os parâmetros PK/PD para S. aureusMSSA no modelo de camundongo neutropênico foram gerados a partir de dois estudos de resposta de dose. Os valores de AUC para estase e uma redução de 1 log foram determinados como sendo 28 e 69 μg^h/mL, respectivamente.

[000710] Os parâmetros PK/PD para S. aureusMRSA no modelo de camundongo neutropênico foram gerados a partir dos resultados de dois estudos de resposta de dose. Os valores de AUC para estase e uma redução de 1 log foram determinados como sendo 24 e 55 μg^h/mL, respectivamente.

[000711] Os parâmetros PK/PD para S. aureusUSA300 no modelo de camundongo neutropênico foram gerados a partir dos resultados de dois estudos de resposta de dose. Os valores de AUC para estase e uma redução de 1 log foram determinados como sendo 91 e 150 μg^h/mL, respectivamente.

[000712] Os parâmetros PK/PD para S. aureusUSA100 no modelo de camundongo neutropênico foram gerados a partir dos resultados de dois estudos de resposta de dose. Os valores de AUC para estase e uma redução de 1 log foram determinados como sendo 25 e 47 μg^h/mL, respectivamente. Razões AUC/MIC Livres Calculadas para Eficácia

[000713] As magnitudes de AUC/MIC plasmáticas livres calculadas para os modelos animais de S. aureussão apresentadas na Tabela 9. TABELA 9: Magnitudes de AUC/MIC plasmáticas livres para o Exem-plo 5 versus isolados de S. aureus

aNúmero de estudos. bMediana da concentração de efeito ± Erro padrão da média (% coeficiente de variância). cEstase ± Erro padrão da média (% coeficiente de variância). dRedução de 1 log ± Erro padrão da média (% coeficiente de variância).

Sumário

[000714] Exemplo 5 mostrou farmacocinética não linear ao longo da faixa de dosagem. Absorção foi boa, com concentração máxima atin-gida a 0,5 h pós-administração. Uma relação dose/exposição foi cons-truída com base nas exposições PK plasmáticas a partir de um número de estudos de eficácia e da concentração medida das soluções de dosagem. Essa exposição em consenso foi utilizada, em conjunto com os valores de MIC modais para os isolados individuais e os níveis plasmáticos livres dos camundongos para determinar a magnitude de AUC/MIC livre associada com um efeito bacteriostático e para uma redução de 1 log no modelo.

[000715] Estudos de resposta de dose foram feitos no modelo de coxa neutropênica para determinar as magnitudes de AUC/MIC relativas livres requeridas para eficácia. A razão de AUC/MIC livre requerida para um efeito bacteriostático e para uma redução de 1 log, em relação à carga bacteriana inicial variou de 43 a 98 e 83 a 245, respectivamente. Eficácia In vivo do Exemplo 5 Contra Streptococcus pyogenesem um Modelo de Coxa de Camundongo

[000716] O objetivo do estudo foi determinar a eficácia e relação farmacocinética/farmacodinâmica (PK/PD) para o Exemplo 5 contra Streptococcus pyogenes(S. pyogenes) em modelo de infecção de coxa neutropênica de camundongo. S. pyogenesATCC12384 obtidos a partir da Coleção de Cultura de Tipo Americana foi usado neste estudo.

[000717] A MIC contra S. pyogenesATCC12384 foi determinada usando o método de microdiluição de caldo segundo orientações do CLSI. Três determinações individuais foram desempenhadas para cada cepa e a MIC Modal foi usada para todos os cálculos PK/PD. Todos os experimentos animais foram desempenhados sob UK Home Office Licensure com liberação do comitê ético local. Todos os experimentos foram desempenhados por técnicos que concluíram as partes 1, 2 e 3 do curso Home Office Personal License e possuem licenças pessoais na atualidade.

[000718] Todos os camundongos tornaram-se temporariamente neu- tropênicos por imunossupressão com ciclofosfamida (Baxter, Norfolk, UK) a 150 mg/kg 4 dias antes da infecção e 100 mg/kg um dia antes da infecção por injeção intraperitoneal (Andes et al, infra). Vinte e qua- tro horas após o segundo ciclo de imunossupressão, camundongos foram infectados com S. pyogenes, ATCC12384 por injeção intramus-cular em ambos os músculos laterais da coxa sob anestesia inalada temporária (Isoflurano 3%) usando -5*105CFU/coxa de camundongo. Buprenorfina 0,06 mg/kg foi administrada subcutaneamente (SC) a to-dos os camundongos no estudo; neste estudo, dor na coxa tipicamente causa claudicação e perda de uso do membro afetado. Buprenorfina foi readministrada em intervalos de 12 horas começando no tempo de infecção para assegurar o alívio da dor presente.

[000719] Nos estudos de eficácia, 6 camundongos foram usados no grupo pré-tratamento duas horas pós-infecção; 8 camundongos foram usados no controle veículo e grupos de tratamento terapêutico. Quinze minutos antes e doze horas após a infecção, animais a serem tratados com agentes de teste e veículo foram administrados com 50 mg/kg de 1-aminobenzotriazol por gavagem oral. Tratamentos antibac- terianos foram administrados duas horas e 14 horas pós-infecção, entregues a 10 mL/kg intraperitonealmente. O grupo comparador foi tratado com 100 mg/kg de linezolida a duas horas e 14 horas pós- infecção por entrega SC. O grupo controle foi tratado com veículo (0,2M meglumina/HPβCD 30%) somente.

[000720] Para estudos de eficácia 24 horas pós-infecção (ou antes se os camundongos tiverem atingido pontos finais predefinidos), a condição clínica de todos os animais foi avaliada antes de sofrerem eutanásia de forma humana usando overdose de pentabarbitona. Ambas as coxas foram removidas e pesadas individualmente. Amostras de tecido da coxa individuais foram homogenizadas usando um beadbeater em salina tamponada por fosfato estéril gelada. Homogenados de coxa foram então quantitativamente cultivados em ágar sangue e incubados a 37°C por 24 horas antes de serem contad os.

[000721] Grupos de camundongos-satélite infectados com S. pyoge- nes,como descrito acima, foram usados para determinar concentrações plasmáticas. A dosagem começou duas horas após a infecção e amostras de sangue total foram tomadas a 0,5, 1, 2, 4, 6, 8, 12 e 24 h. Camundongos do estudo PK satélite sofreram eutanásia por isofluora- no 5% inalado em pontos de tempo específicos pós-tratamento, ca-mundongos foram sangrados imediatamente por punção cardíaca. Amostras de sangue heparinizado foram separadas por centrifugação por cinco minutos a 13200 rpm. Amostras de plasma foram armazena-das a menos 80°C antes de serem transferidas para o cliente para análise.

[000722] Para o braço PK do estudo, 3 camundongos por ponto de tempo por dose unitária foram usados. Devido a mudanças não plane-jadas na ordem de trabalho final, administrou-se inicialmente Exemplo 5 aos grupos de dosagem de 80 e 160 mg/kg sem tratamento anterior com aminobenzotriazol. Uma vez que este foi realizado, os camundongos restantes foram redistribuídos ao longo dos grupos de dosagem e o tamanho do grupo foi reduzido a dois camundongos por ponto de tempo.

[000723] Amostras biológicas contendo Exemplo 5 foram extraídas usando precipitação de proteína. Para um volume de amostra, 5 volu-mes de acetonitrila contendo o padrão interno (Gliburida) foram adicio-nados. A mistura foi então misturada e a placa foi centrifugada a 3200 rpm por 5 min. Um volume de 200 μL do sobrenadante foi seco e re-constituído em Fase Móvel e a mistura foi injetada em cromatografia líquida-espectrometria de massa (LC-MS). Um Sciex API 4000, contro-lado por Analyst v1,4,2, foi usado para a aquisição dos dados e a quantificação do Exemplo 5. Parâmetros de instrumento LC-MS são providos nas Tabelas 6 e 7.

[000724] O perfil plasmático para cada grupo de dose foi obtido através do cálculo da média da concentração plasmática de composto em cada um dos dois a três animais por ponto de tempo. A área sob a curva de tempo de concentração plasmática de zero a infinito (AUC); concentração de droga máxima no plasma (Cmax); tempo para alcançar concentração máxima (tmax); e meia-vida plasmática (t1/2) para cada grupo de dose foram determinados por análise não compartimental (WinNonLin 5,2, Pharsight). O modelo não compartimental 200 foi usado na análise. A AUC para os regimes de dose bid foi determinada por multiplicação do valor de AUC obtido após a dose única por dois, supondo nenhuma acumulação após uma segunda dose. O número de colônias bacterianas crescidas a partir da coxa de cada animal foi ajustado para contabilizar a diluição da amostra para determinar a CFU por coxa (CFU/coxa). A variabilidade em cada grupo de dose foi determinada através do cálculo do erro padrão para os animais dentro de cada grupo.

[000725] O log CFU/g médio obtido para o grupo pré-tratamento foi subtraído do log CFU/g obtido para cada animal individual nos grupos de tratamento. O delta em log CFU/g foi determinado para cada animal no grupo de eficácia e usado na análise PK/PD. Pontos estatisticamente discrepantes foram determinados usando o método interquartis e eliminados da análise.

[000726] Os parâmetros farmacocinéticos de AUC para cada grupo de dose foram relacionados à MIC do Exemplo 5 contra S. pyogenes ATCC12384. A razão da AUC para a MIC foi determinada para cada grupo de dose e plotada contra a CFU/coxa de cada animal. Uma fração não ligada murina de 22,1% foi usada para calcular concentrações plasmáticas livres. Este valor veio da média da fração não ligada de proteína de camundongo do Exemplo 5 na faixa de 1 μM a 50 μM.

[000727] A correlação entre eficácia e a AUC total de índices PK/PD foi determinada por regressão não linear (WinNonlin 5,2, Pharsight). Os dados foram modelados usando um modelo de Emaxsigmoidal mostrado abaixo, onde Emaxé o crescimento máximo observado na ausência de droga; E0é a mortalidade máxima, EC50é a concentração que dá 50% de resposta, e N é o fator de Hill.

[000728] A análise PK/PD foi desempenhada nos grupos de dose combinados, assim como para os regimes de dose individuais. A goo-dness of fitfoi determinada avaliando-se a variabilidade nos parâmetros modelo-calculados, nos critérios de Aikaike, e na análise dos residuais pesados.

[000729] Os parâmetros PK/PD determinados por modelagem foram usados para determinar exposições requeridas para alcançar uma resposta estática e assim como uma redução de 1 log e 2 log nas con-tagens de colônias em comparação às contagens no começo da terapia.

[000730] O valor de MIC para S. pyogenesATCC12384 determinado contra o Exemplo 5 foi de 0,125 μg/mL.

[000731] As exposições plasmáticas associadas com administração intraperitoneal do Exemplo 5 na presença de ABT foram determinadas em camundongos neutropênicos infectados na coxa com S. pyoge-nesATCC12384. Os parâmetros farmacocinéticos calculados para cada PK satélite são apresentados na Tabela 10. Esses dados foram comparados a uma relação dose/exposição em consenso construída para exposições plasmáticas no modelo de coxa neutropênica por S. aureus. A relação de consenso foi definida como Y=(1,022,7)*(X1,2019), onde Y é a AUC infinita em ng h/mL e X é a dose medida em mg/kg. TABELA 10: Farmacocinética plasmática do Exemplo 5 administrado na presença de ABT em camundongos infectados por S. pyogenes.

[000732] Figura 2 ilustra a resposta de dose do Exemplo 5 contra S. pyogenesATCC12384 na coxa de camundongos neutropênicos, pré- tratados com ABT. Cada ponto representa a média de 16 coxas. No começo da terapia a carga bacteriana foi de 6,38±0,03 CFU/g. As bac-térias cresceram 2,6-log CFU/g no grupo veículo. Amoxicilina foi admi-nistrada intraperitonealmente em um experimento separado para com-paração.

[000733] Os parâmetros PK/PD do estudo de resposta de dose foram calculados. Assumiu-se que o parâmetro AUC/MIC é o parâmetro que melhor se correlaciona com a atividade, uma vez que esse parâmetro mostrou-se correlacionar melhor com a eficácia com ambos os compostos anteriores na série e foi altamente associado com eficácia in vitro. As soluções de dosagem foram analisadas para avaliar a dose medida e a relação de exposição em consenso foi usada para estimar a exposição plasmática. Valores de AUC calculados são apresentados em μg h/mL.

[000734] Os parâmetros PK/PD para S. pyogenesATCC12384 no modelo de camundongo neutropênico foram gerados a partir de um estudo de resposta a dose única. Os valores de AUC para estase, re- dução de 1 log e 2 log foram determinados como sendo 60, 76 e 95 μg^h/mL, respectivamente.

[000735] As magnitudes de AUC/MIC plasmáticas livres calculadas para o S. pyogenesATCC12384 são apresentadas na Tabela 11. TABELA 11: Magnitudes de AUC/MIC plasmáticas livres para o Exemplo 5 versus S. pyogenesATCC12384

aNúmero de estudos. bMediana da concentração de efeito ± Erro padrão da média (% coeficiente de variância).

Sumário

[000736] A farmacocinética do Exemplo 5 ao longo da faixa de dosa-gem demonstrou exposições consistentes com as exposições demons-tradas no modelo de coxa neutropênica por S. aureus. A exposição de consenso foi utilizada, em conjunto com o valor de MIC de S. pyoge-nesATC12384 e os níveis plasmáticos livre de camundongo para de-terminar a magnitude de AUC/MIC livre associada com um efeito bac-teriostático e para uma redução de 1 e 2 log no modelo.

[000737] O Exemplo 5 mostrou eficácia dependente de dose in vivo contra S. pyogenesATC12384 em camundongos neutropênicos. A ra-zão AUC/MIC livre requerida para um efeito bacteriostático e para re-duções de 1 e 2 log em relação à carga bacteriana inicial foi de 106, 135 e 168, respectivamente. Atividade Antibacteriana In vitrodo Exemplo 5

[000738] O objetivo deste estudo foi determinar a atividade antibacte- riana in vitro do Exemplo 5 contra uma coleção de isolados bacteria- nos Gram-positivos, Gram-negativos, fastidiosos, e anaeróbicos. Testes desempenhados incluíram concentração inibitória mínima (MIC), concentração bactericida mínima (MBCs), e MICs na presença de soro (camundongo e humano). Os isolados bacterianos utilizados nesses estudos consistiram primariamente em isolados clínicos diversos obtidos geograficamente recentemente, mas também incluíram cepas de referência de controle de qualidade CLSI, culturas de painel de triagem interna, e isolados com mecanismos de resistência definidos.

[000739] Valores de MIC foram determinados usando metodologia de microdiluição de caldo CLSI ou diluição de ágar (N. gonorrhoeae). Para teste de susceptibilidade de microdiluição de caldo, placas mãe de composto estoque foram preparadas e usadas para depositar alíquotas de 2 μL de diluições de droga duplas em série em colunas 1-11 de placas filhas de 96-poços. Coluna 12 não continha droga e serviu como o controle de crescimento. Um volume de inóculo de 100 μL (5x10E5CFU/mL) foi adicionado diretamente a cada poço da placa de 96 poços usando um robô de manipulação de líquido Tecan Freedom EVO ou um Perkin-Elmer MiniTrak™ MultiPosition. As Faixas de MIC, MIC50e MIC90 foram determinadas para grupos de organismos contendo ^10 isolados. A MIC50e MIC90 foram definidas como a concentração de composto que inibiu o crescimento de, respectivamente, 50% e 90% dos conjuntos combinados de isolados clínicos testados. Pelo menos um organismo de referência de controle de qualidade CLSI e composto controle foi usado para validar o teste de susceptibilidade para assegurar que não houve nenhuma variação entre datas de teste ou os compostos controle. Os valores de MIC e MBC obtidos para cada combinação de organismo/droga foram determinados segundo as Orientações do Instituto de Padrões Laboratoriais e Clínicos (Methods for dilution antimicrobial susceptibility tests for bacteria that grow aero bically; approved standard. Nona edição. Wayne, PA. Volume 32. Número 2; Methods for antimicrobial susceptibility testing of anaerobic bacteria; approved standard. Sétima edição. Wayne, PA. Volume 27 Número 2; e Methods for determining bactericidal activity of antimicrobial agents; approved guideline. Wayne, Pa. Volume 19 Número 18). Interpretações de ponto de quebra de susceptibilidade para compostos de referência juntamente com intervalos QC para cepas bacterianas de referência são descritas nos documentos CLSI Performance standards for antimicrobial susceptibility testing; vigésimo primeiro suplemento informativo. Wayne, Pa. Volume 31. Número 1, e Performance standards for antimicrobial susceptibility testing; vigésimo segundo su-plemento informativo. Wayne, Pa. Volume 32. Número 3. Teste de MIC de microdiluição de caldo foi desempenhado para todas as espécies testadas, com as exceções de anaeróbios e Neisseria gonorrhoeae, a qual utilizou diluição de ágar. MICs de microdiluição de caldo para Legionella pneumophilaforam desempenhadas em caldo de Legionella. Cepas de L. pneumophilaforam inicialmente cultivadas em placas de ágar de extrato de levedura carvão tamponadas (BCYE) por 48 horas antes da transferência.

[000740] Valores de MIC para isolados individuais foram lidos visu-almente, determinações de MIC (faixa de MIC, MIC50, MIC90) e plota- gens de inibição percentual cumulativa foram geradas usando CUM- PER (abreviação de Percentual Cumulativo); um programa de software estatístico para uso em casa.

[000741] O espectro antibacteriano do Exemplo 5 contra isolados bacterianos individuais Gram-positivos, Gram-negativos, e anaeróbi- cos é apresentado nas Tabelas 12 e 13. Em geral, o Exemplo 5 foi ativo contra os isolados de estafilococos, estreptococos, Haemophilus influenzae, Moraxella catarrhalis, Clostridium spp., Finegoldia magna, e Prevotella melaminogenicatestados. A atividade antibacteriana do Exemplo 5 e comparadores também foi avaliada contra cepas de Sta- philococcus aureus, Streptococcus pneumoniae, e S. pyogenes com mutações de girase e topoisomerase caracterizadas. Nenhuma resis-tência cruzada foi encontrada para o Exemplo 5 contra isolados clínicos bacterianos que possuem mutações frequentemente encontradas em gyrA, gyrB, ParC, ou ParE, as quais são conhecidas por causar resistência a quinolonas, novobiocina e Coumermicina A1.

[000742] O Exemplo 5 e comparadores foram avaliados em estudos de MIC90 contra uma coleção de 676 isolados clínicos bacterianos Gram-positivos e Gram-negativos fastidiosos recentemente obtidos. Contra 100 cepas de S. aureus, o Exemplo 5 (MIC900,25 μg/mL) foi o composto mais ativo testado e manteve essa atividade contra isolados resistentes a levofloxacina, linezolida e vancomicina. Esse alto grau de atividade antibacteriana e falta de resistência cruzada também foi observado contra 99 cepas de estafilococos negativos para coagulase, incluindo S. epidermidis (MIC90 0,25 μg/mL, n=37), S. haemolyticus (MIC90 0,25 μg/mL, n=21), S. lugdunensis (MIC90 0,5 μg/mL, n=11), e S. saprophyticus (MIC90 0,5 μg/mL, n=16). Contra 100 cepas de S. pneumoniae, S. pyogenes, e S. Agalactiae, o Exemplo 5 foi muito ativo com valores de MICH50 e MIC90 de 0,125 μg/mL e 0,25 μg/mL, respec-tivamente. Nenhuma resistência cruzada foi observada para o Exemplo 5 a qualquer um dos estreptococos resistentes a levofloxacina, eri- tromicina, ou amoxicilina.

[000743] Em comparação aos estafilococos e estreptococos, atividade reduzida foi observada para o Exemplo 5 contra enterococos, com E. faecalis (n=51) resultando nas menores MICs (faixa de MIC 0,125-2 μg/mL e MIC90 2 μg/mL) e MICs de E. faecium sendo aproximadamente 8 vezes maiores (MIC90 16 μg/mL). A atividade do Exemplo 5 foi medida contra 11 cepas de Bacillus subtilis e B. cereus (como substituto de B. anthracis. MIC90s contra ambas as espécies foram de 0,5 μg/mL. Teste de BSL3 do Exemplo 5 contra B. anthracisconfirmou essa atividade (faixa de MIC 0,125-1 μg/mL, e MIC900,5 μg/mL).

[000744] A atividade antibacteriana do Exemplo 5 também englobou organismos Gram-negativos fastidiosos, incluindo Haemophilus influ-enzae(n=29), Legionella pneumophila(n=11), e 17 cepas de Neisseria gonorrhoeae. Faixas de MIC versus esses grupos de organismos foram de 0,125-1 μg/mL, 0,008-0,06 μg/mL e 0,03-0,25 μg/mL, respecti-vamente. MIC90s correspondentes foram de 1 μg/mL, 0,06 μg/mL e 0,125 μg/mL, respectivamente. Nenhuma resistência cruzada ao Exemplo 5 foi observada em cepas de N. gonorrhoeae resistentes a ciprofloxacina.

[000745] Efeitos de ligação a proteínas do soro sobre valores de MIC para o Exemplo 5 foram avaliados em concentrações variáveis tanto de soro de camundongo quanto humano (0, 10, 25, e 50%). Contra as 9 cepas de S. aureustestadas, um aumento de MIC de duas a 8 vezes foi observado para o Exemplo 5 na presença de soro humano a 50% e maiores efeitos de ligação a proteínas (aumentos de MIC de 8 a 32 vezes) foram observados em soro de camundongo a 50%.

[000746] Exemplo 5 e comparadores foram avaliados para atividade bactericida contra 7 cepas de S. aureuse 1 cepa de Streptococcus pyogenes. Exemplo 5, levofloxacina, e vancomicina foram bactericidas contra todas as cepas testadas com concentrações bactericidas míni-mas (MBCs) dentro de duas vezes a MIC. A atividade bactericida do Exemplo 5 foi confirmada por estudos de tempo de mortalidade in vitro. TABELA 12: Atividade antibacteriana in vitrodo Exemplo 5 contra vários isolados bacterianos

TABELA 13: Atividade antibacteriana in vitro do Exemplo 5 contra es- pécies bacterianas anaeróbicas

Sumário

[000747] Exemplo 5 é inibidor da DNA girase/topoisomerase com atividade antibacteriana in vitrocontra espécies bacterianas Gram- positivas (S. aureus, S. epidermidis, S. haemolyticus, Streptococcus pneumoniae, S. pyogenes, e S. agalactiae), Gram-negativas fastidio-sas (Haemophilus influenzae, Legionella pneumophila, Moraxella ca- tarrhalis, Neisseria gonorrhoeae), e anaeróbicas (Clostridium difficile), incluindo isolados com resistência conhecida a fluoroquinolonas. Ne-nhuma resistência cruzada foi observada para o Exemplo 5 contra iso-lados clínicos bacterianos recentes com resistência a outras classes de drogas, incluindo macrolídeos, β-lactamas, glicopeptídeos, e oxazo- lidinonas. Emergência de Resistência em Staphilococcus aureus e Strepto-coccus pyogenescom Passagem em Série

[000748] O objetivo deste estudo foi determinar a emergência de re-sistência ao Exemplo 5 durante passagem em série em um isolado representativo de Staphilococcus aureussensível à meticilina, S. au-reusresistente à meticilina e Streptococcus pyogenes.

[000749] S. aureuscultivado fresco 516 e 2398, assim como S. pyo-genes838 foram colhidos de placas de ágar sangue (Remel, Lenexa Kans.), suspensos em 3 mL de caldo Mueller Hinton 2 ajustado para cátions (MHB2) (Sigma-Aldrich, St. Louis Mo.) e uma amostra congelada como passagem zero. Essas culturas foram diluídas a 0,5 McFarland em salina estéril (Remel), a qual foi então diluída 1:200 em caldo fresco e usada como o inóculo. Os meios e condições de incubação usados ao longo do experimento foram MHB2 e 36°C em ar ambiente para S. au-reuse MHB2 com a adição de sangue de cavalo lisado 2,5% e 36°C em CO25% (Hema Resource Inc., Aurora, Oreg.) para S. pyogenes838.

[000750] Uma série dupla de concentrações crescentes do Exemplo 5 foi feita em DMSO e 40 μL de cada concentração dispensados em poços de placas de cultura de 24 poços (Costar, Corning N.Y.). Placas foram vedadas e congeladas a -80°C e descongeladas todos os dias. Um total de 2 mL do inóculo foram adicionados a cada poço e as placas foram por 20 a 24 horas. Células bacterianas do poço contendo a maior concentração de composto de teste que permitiu crescimento bacteriano visível foram congeladas em glicerol 20% e armazenadas a -70°C e foram também diluídas de volta a 0,5 McFarl and em salina estéril (Remel) e subsequentemente diluídas em meios frescos. Essa cultura diluída, representando células de MIC 0,5X, foi então dispensada em uma placa de cultura de 24 poços fresca contendo a série de concentrações crescentes de composto de teste. Isso foi repetido por vinte dias.

[000751] As amostras congeladas então tiveram uma única colônia purificada em placas de ágar sangue na ausência de composto e tes-tadas para susceptibilidade usando um ensaio de microdiluição de caldo padrão, desempenhado de acordo com o documento M07-A8 do Instituto de Padrões de Laboratório Clínico (Methods for dilution anti- microbia susceptibility tests for bacteria that grow aerobically; approved standard. Oitava edição. Wayne, Pa. Volume 29. N°. 2. 2009). Isolados de várias passagens com um valor de MIC elevado contra o Exemplo 5 representando uma diminuição da susceptibilidade foram selecionados para investigação por análise sequencial. DNA genômico total foi preparado a partir de isolados selecionados usando um kit de prepara-ção de DNA Genômico padrão (Promega, Madison WI.). Os genes que codificam ambas as subunidades de DNA girase (gyrA e gyrB) e To-poisomerase IV (parC e parE) foram amplificados usando um PCR mix High Fidelity (Roche, Nutley, N.J.). O produto da reação em cadeia da polimerase (PCR) foi purificado usando um kit de Purificação de PCR QIAquick (Qiagen, Valencia, Calif.) e sequenciado em um Analisador Genético Applied Biosystems 3100 (ABI, Foster City, Calif.) usando os primers apropriados para S. aureus e S. pneumoniae. Se mudanças fossem observadas, um segundo produto de PCR independente era amplificado e sequenciado para confirmar se a variação foi genuína e não um resultado de um erro de incorporação durante a amplificação por PCR.

[000752] O crescimento de S. aureuse S. pyogenesao longo de vinte passagens em meio líquido contendo concentrações subinibitórias do Exemplo 5 foi feito para estudas a emergência de resistência. Após vinte passagens na presença de pressão seletiva crescente do Exemplo 5, variantes de S. aureuse S. pyogenesARC838 foram isoladas as quais exibiram diminuições da susceptibilidade de 32, 16, e 8 vezes em relação à cultura inicial. Essa perda de susceptibilidade ao Exem- plo 5 não se correlacionou a quaisquer mudanças na susceptibilidade que foi maior do que 4 vezes a linezolida, vancomicina, e levofloxaci- na. Atividade In vitro e Potência do Exemplo 5 Testadas Contra Neis-seria Gonorrheoeae

[000753] Neisseria gonorrhoeae é uma causa significativa de doença sexualmente transmissível no mundo. Penicilina foi historicamente efe-tiva no tratamento de gonorreia, mas cepas de N. gonorrhoeae produtor de penicilinase mediada por plasmídeo (PPNG) têm se espalhado ao redor do mundo, limitando o uso empírico de penicilina a certas regiões geográficas com uma baixa prevalência conhecida de PPNG, outros mecanismos de resistência à penicilina. Adicionalmente, o desenvolvimento de resistência tem ocorrido para vários dos agentes de classe antimicrobiana alternativos usados para terapia empírica de infecções gonocócicas, incluindo fluoroquinolonas (cipro- floxacina), tetraciclinas e macrolídeos (azitromicina). Uma coleção de 100 Neisseria gonorrhoeae, incluindo isolados que não foram susceptíveis a azitromicina, ciprofloxacina, penicilina, e tetraciclina, foi testada in vitropelo método de diluição de ágar de referência CLSI contra o Exemplo 5 e agentes comparadores. Os resultados indicaram que o Exemplo 5 foi altamente ativo contra todos os isolados testados (valores de MIC a ^0,25 μg/mL) e pareceu não haver nenhuma resistência cruzada com outras classes comparadoras testadas.

[000754] Um total de 100 isolados de N. gonorrhoeae clínicos de estoque e controle de qualidade ATCC da coleção nos JMI Laboratories (North Liberty, Iowa, EUA) foram testados. A coleta incluiu cepas com as seguintes características:

aA maioria dos isolados norteamericanos e poucos isolados europeus bNúmeros aproximadamente iguais de isolados norteamericanos e europeus cA maioria dos isolados norteamericanos e poucos isolados europeus dVinte e sete isolados com MIC de azitromicina a ^0,5 μg/mL (não susceptíveis) Métodos:

[000755] Valores de MIC para N. gonorrhoeaeforam determinados usando o método de diluição de ágar CLSI de referência para gonoco- cos como descrito em M07-A9 [2012].

[000756] Placas de diluição de ágar (base de ágar GC com 1% de suplemento definido) para teste de N. gonorrhoeae foram produzidas por JMI Laboratories.

[000757] Agentes comparadores foram providos por JMI Laboratories através de Sigma-Aldrich ou seu respectivo fabricante.

[000758] Intervalos de controle de qualidade (QC) e critérios de in-terpretação para os compostos comparadores foram conforme publicado em CLSI M100-S23 [2013] e EUCAST [2013]. A cepa QC foi N. gonorrhoeae ATCC 49226.

[000759] Exemplo 5 foi ativo contra todas as cepas de N. gonorrhoeae testadas exibindo uma faixa de MIC de ^0,004 a 0,25 μg/mL e uma MIC50/90a 0,06/0,125 μg/mL. Um total de 99,0% de isolados exibiram valores de MIC ^0,125 μg/mL. Houve somente um isolado com um valor de MIC a 0,25 μg/mL.

[000760] Exemplo 5 demonstrou atividade semelhante contra cepas intermediárias e resistentes à penicilina, com um valor de MIC modal a 0,06 μg/mL e valores de MIC50/90 de 0,06/0,06 μg/mL e 0,06/0,12 μg/mL [85,7% dos isolados a ^0,06 μg/mL], respectivamente.

[000761] As cepas intermediárias e resistentes à ciprofloxacina também mostraram um valor de MIC modal para o Exemplo 5 a 0,06 μg/mL com valores de MIC50/90 de 0,06/0,12 μg/mL.

[000762] O Exemplo 5 exibiu atividade semelhante contra cepas in-termediárias e resistentes à tetraciclina, com um valor de MIC modal a 0,06 μg/mL e valores de MIC50/90 de 0,06/0,06 μg/mL e 0,06/0/0,12 μg/mL [66,7% dos isolados a 0,06 μg/mL], respectivamente.

[000763] Os valores modais para os isolados intermediários e sus-ceptíveis à azitromicina foram de 0,06 μg/mL, com valores de MIC50/90 de 0,06/0,06 μg/mL e 0,06/0/0,12 μg/mL [66,7% dos isolados a 0,06 μg/mL], respectivamente.

[000764] Os valores de MIC50/90 contra todos os 100 isolados para azitromicina foram de 0,25/0,5 μg/mL; para cefixime, 0,03/0,06 μg/mL; para ceftriaxona, 0,015/0,06 μg/mL; para ciprofloxacina, 0,25/>2 μg/mL; para penicilina, 2/>2 μg/mL; e para tetraciclina, 1/2 μg/mL.

[000765] Exemplo 5 (MIC90 0,12 μg/mL) foi quatro vezes mais ativo do que azitromicina (MIC90 0,5 μg/mL), duas vezes menos ativo do que cefixime e ceftriazona (MIC900,06 μg/mL), 16 vezes mais ativo do que tetraciclina (MIC90 2 μg/mL) e >32 vezes mais ativo do que ciprofloxacina e penicilina (MIC90 2 μg/mL).

[000766] Os valores de MIC do Exemplo 5, quando testado contra a cepa QC (N. gonorrhoeae ATCC 49226), foram de 0,06, 0,12 e 0,12 μg/mL.

Sumário:

[000767] O Exemplo 5 foi altamente ativo contra isolados de N. go- norrhoeae, com 99,0% dos isolados exibindo valores de MIC de 0,125 μg/mL. O Exemplo 5 foi duas vezes menos ativo do que cefixime e ceftriaxona, e variou de 4 a 32 vezes mais ativo do que azitromicina, ciprofloxacina, penicilina e tetraciclina. O valor de MIC modal para o Exemplo 5 permaneceu o mesmo (0,06 μg/mL) para vários subconjuntos de isolados, incluindo aqueles que não foram susceptíveis a agentes comparadores. Valores de MIC90 para fenótipos susceptíveis (sus-ceptível à ciprofloxacina, susceptível à tetraciclina e susceptível à azi-tromicina) foram de 0,06 μg/mL. Para fenótipos não susceptíveis, valo-res de MIC90 foram de 0,06-0,12 μg/mL, indicando o alto nível de ativi-dade e a falta de resistência cruzada significativa do Exemplo 5 com agentes comparadores.

Claims (13)

1. Composto, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que o composto tem a estrutura da fórmula (I):

em que X é flúor ou cloro; R1é selecionado a partir do grupo que consiste em hidro-gênio, fenila, -C^N, tetra-hidropiranila, N-metil-1,2,4-triazolila, pirimi- dinila, piridinila, pirazinila, ciclopropila, -CHCH, -CH=CH2, e alquila C1-C3, alquila C1-C3 que é opcionalmente substituído por um ou mais de: -OR10, halogênio, -C^N, -N3, -SO2CH3, -SCH3, -CH=CH2, -CH=NOR11 e fenila; R2 é selecionado a partir do grupo que consiste em hidro-gênio, -C^N, piridinila, alquila C1-C3, alquila C1-C3 que é opcionalmente substituído por um ou mais de: halogênio, -OR20 e -CH=NOR21; R3 é hidrogênio ou alquila C1-C3; R10 é, para cada ocorrência, independentemente seleciona-do a partir do grupo que consiste em hidrogênio, alquila C1-C4 e -(CH2)2OCH3; e R11, R20 e R21 são, para cada ocorrência, independente-mente hidrogênio ou alquila C1-C4.

2. Composto, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que R10 é hidrogênio, metila, etila ou -(CH2)2OCH3.

3. Composto, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que R11é hidrogênio ou metila.

4. Composto, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, carac-terizado pelo fato de que R20é hidrogênio, metila ou etila.

5. Composto, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, carac-terizado pelo fato de que R21é hidrogênio ou metila.

6. Composto, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, carac-terizado pelo fato de que R1é selecionado a partir do grupo que con-siste em hidrogênio, metila, etila, fenila, -CH2-fenila, -CH2F, -CH2OCH3, -CH2CH=CH2, tetra-hidropiranila, -(CHfeOH, -(CHfeF, -(CHfeOH, -(CH2)3F, -CH=CH2, -CEN, -CH=NOCH3, -CH2SCH3, -CH2SO2CH3, -CH2N3, -CH2OCH2CH3, -CH2O(CH2)2OCH3, ciclopropila, piridinila, -CH(CH3)OCH3, pirimidinila, pirazinila, -CeCH, N-metil-1,2,4-triazolila, -CH(OH)CH3, -CH=NOH e -CH2OH.

7. Composto, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, carac-terizado pelo fato de que R2é selecionado a partir do grupo que con-siste em hidrogênio, metila, etila, -CH2F, -CH2OCH3, -CH2OH, - CH=NOH, piridinila, -CeN e -CH=NHOCH3.

8. Composto, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, carac-terizado pelo fato de que R3é hidrogênio ou metila.

9. Composto, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, carac-terizado pelo fato de que o composto é selecionado a partir do grupo que consiste em: (2R,4S,4aS)-11-flúor-2,4-dimetil-8-(2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il)- 1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-espiro[1,4-oxazino[4,3-a][1,2]oxazolo[4,5- g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-11-flúor-2,4-dimetil-8-[(4R)-4-metil-2-oxo-1,3- oxazolidin-3-il]-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-espiro[1,4-oxazino[4,3- a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-11-flúor-2,4-dimetil-8-[(5S)-5-metil-2-oxo-1,3- oxazolidin-3-il]-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-espiro[1,4-oxazino[4,3- a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-11-flúor-2,4-dimetil-8-[(5R)-5-metil-2-oxo-1,3- oxazolidin-3-il]-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-espiro[1,4-oxazino[4,3- a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-11-flúor-2,4-dimetil-8-[(4S)-4-metil-2-oxo-1,3- oxazolidin-3-il]-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-espiro[1,4-oxazino[4,3- a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-8-[(4S)-4-etil-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il]-11- flúor-2,4-dimetil-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-espiro[1,4-oxazino[4,3- a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-8-[(4R)-4-etil-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il]-11- flúor-2,4-dimetil-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-espiro[1,4-oxazino[4,3- a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona); (2R,4S,4aS)-11-flúor-2,4-dimetil-8-[(4R)-2-oxo-4-fenil-1,3- oxazolidin-3-il]-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-espiro[1,4-oxazino[4,3- a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-11-flúor-2,4-dimetil-8-[(4S)-2-oxo-4-fenil-1,3- oxazolidin-3-il]-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-espiro[1,4-oxazino[4,3- a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-8-[(4R)-4-benzil-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il]-11- flúor-2,4-dimetil-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-espiro[1,4-oxazino[4,3- a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-8-[(4S)-4-benzil-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il]-11- flúor-2,4-dimetil-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-espiro[1,4-oxazino[4,3- a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-8-(5,5-dimetil-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il)-11- flúor-2,4-dimetil-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-espiro[1,4-oxazino[4,3- a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-8-[(5S)-5-etil-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il]-11- flúor-2,4-dimetil-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-espiro[1,4-oxazino[4,3- a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-8-[(5R)-5-etil-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il]-11- flúor-2,4-dimetil-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-espiro[1,4-oxazino[4,3- a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-11-flúor-8-[(4R)-4-(fluorometil)-2-oxo-1,3- oxazolidin-3-il]-2,4-dimetil-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-espiro[1,4- oxazino[4,3-a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]- 2',4',6'(1'H,3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-11-flúor-8-[(4S)-4-(fluorometil)-2-oxo-1,3- oxazolidin-3-il]-2,4-dimetil-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-espiro[1,4- oxazino[4,3-a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]- 2',4',6'(1'H,3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-11-flúor-8-[(4S)-4-(metoximetil)-2-oxo-1,3- oxazolidin-3-il]-2,4-dimetil-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-espiro[1,4- oxazino[4,3-a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]- 2',4',6'(1'H,3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-11-flúor-8-[(4R)-4-(metoximetil)-2-oxo-1,3- oxazolidin-3-il]-2,4-dimetil-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-espiro[1,4- oxazino[4,3-a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]- 2',4',6'(1'H,3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-11-flúor-8-((S)-5-(fluorometil)-2-oxooxazolidin- 3-il)-2,4-dimetil-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-espiro[isoxazolo[4,5- g][1,4]oxazino[4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-11-cloro-8-[(5S)-4-(metoximetil)-2-oxo-1,3- oxazolidin-3-il]-2,4-dimetil-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-espiro[1,4- oxazino[4,3-a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]- 2',4',6'(1'H,3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-11-cloro-8-[(5R)-4-(metoximetil)-2-oxo-1,3- oxazolidin-3-il]-2,4-dimetil-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-espiro[1,4- oxazino[4,3-a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]- 2',4',6'(1'H,3'H)-triona; ((2R,4S,4aS)-11-cloro-2,4-dimetil-8-((R)-5-metil-2- oxooxazolidin-3-il)-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-espiro[isoxazolo[4,5- g][1,4]oxazino[4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-8-((4S,5R)-4,5-dimetil-2-oxooxazolidin-3-il)-11- flúor-2,4-dimetil-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-espiro[isoxazolo[4,5- g][1,4]oxazino[4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-8-((4R,5S)-4,5-dimetil-2-oxooxazolidin-3-il)-11- flúor-2,4-dimetil-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-espiro[isoxazolo[4,5- g][1,4]oxazino[4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-8-((S)-4-alil-2-oxooxazolidin-3-il)-11-flúor-2,4- dimetil-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-espiro[isoxazolo[4,5- g][1,4]oxazino[4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-11-flúor-8-((S)-5-(hidroximetil)-2-oxooxazolidin- 3-il)-2,4-dimetil-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-espiro[isoxazolo[4,5- g][1,4]oxazina[4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona; ((2R,4S,4aS)-11-flúor-2,4-dimetil-8-[(4R-(tetra-hidro-2H- piran-4-il) -2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il]-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H- espiro[1,4-oxazino[4,3-a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]- 2',4',6'(1'H,3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-11-flúor-2,4-dimetil-8-[(4S-(tetra-hidro-2H- piran-4-il) -2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il]-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H- espiro[1,4-oxazino[4,3-a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]- 2',4',6'(1'H,3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-11-flúor-8-((S)-4-(3-hidroxipropil)-2-oxooxazo- lidin-3-il)-2,4-dimetil-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-espiro[isoxazolo[4,5- g][1,4]oxazino[4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-11-flúor-8-((S)-4-(3-fluoropropil)-2-oxooxazo- lidin-3-il)-2,4-dimetil-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-espiro[isoxazolo[4,5- g][1,4]oxazino[4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-11-flúor-8-((S)-4-(2-hidroxietil)-2-oxooxazoli- din-3-il)-2,4-dimetil-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-espiro[isoxazolo[4,5- g][1,4]oxazino[4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-11-cloro-8-((S)-5-(fluorometil)-2-oxooxazolidin- 3-il)-2,4-dimetil-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-espiro[isoxazolo[4,5-g][1,4]- oxazino[4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-11-cloro-8-((S)-4-(3-hidroxpropil)-2-oxooxazo- lidin-3-il)-2,4-dimetil-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-espiro[isoxazolo[4,5- g][1,4]oxazino[4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-11-cloro-8-((S)-4-(3-fluoropropil)-2-oxooxazo- lidin-3-il)-2,4-dimetil-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-espiro[isoxazolo[4,5- g][1,4]oxazino[4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-11-flúor-8-[(5S)-4-(metoximetil)-2-oxo-1,3- oxazolidin-3-il]-2,4-dimetil-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-espiro[1,4- oxazino[4,3-a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]- 2',4',6'(1'H,3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-11-flúor-8-[(5R)-4-(metoximetil)-2-oxo-1,3- oxazolidin-3-il]-2,4-dimetil-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-espiro[1,4- oxazino[4,3-a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]- 2',4',6'(1'H,3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-11-flúor-8-[(5R)-5-(hidroximetil)-2-oxo-1,3- oxazolidin-3-il]-2,4-dimetil-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-espiro[1,4- oxazino[4,3-a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]- 2',4',6'(1'H,3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-11-flúor-8-[(5R)-5-(fluorometil)-2-oxo-1,3- oxazolidin-3-il]-2,4-dimetil-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-espiro[1,4- oxazino[4,3-a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]- 2',4',6'(1'H,3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-11-flúor-2,4-dimetil-8-((S)-2-oxo-4-viniloxa- zolidin-3-il)-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-espiro[isoxazolo[4,5-g][1,4]- oxazino[4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-11-flúor-8-{(5R)-5-[(hidroxiimino)metil]-2-oxo- 1,3-oxazolidin-3-il}-2,4-dimetil-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-espiro[1,4- oxazino[4,3a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]- 2',4',6'(1'H,3'H)-triona; (4S)-3-[(2R,4S,4aS)-11-flúor-2,4-dimetil-2',4',6'-trioxo- 1,1',2,3',4,4',4a,6'-octa-hidro-2'H,6H-espiro[1,4-oxazino[4,3- a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidin]-8-il]-2-oxo-1,3-oxazolidina- 4-carbonitrila; (2R,4S,4aS)-11-flúor-8-{(4S)-4-[(metoxiimino)metil]-2-oxo- 1,3-oxazolidin-3-il}-2,4-dimetil-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-espiro[1,4- oxazino[4,3-a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]- 2',4',6'(1'H,3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-11-flúor-8-{(5R)-5-(metoxiimino)metil]-2-oxo- 1,3-oxazolidin-3-il}-2,4-dimetil-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-espiro[1,4- oxazino[4,3-a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]- 2',4',6'(1'H,3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-11-flúor-2,4-dimetil-8-((R)-4-((metiltio)metil)-2- oxooxazolidin-3-il)-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-espiro[isoxazolo[4,5- g][1,4]oxazino[4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-11-flúor-2,4-dimetil-8-((R)-4-((metilsulfonil)me- til)-2-oxooxazolidin-3-il)-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-espiro[isoxazolo- [4,5-g][1,4]oxazino[4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-8-((R)-4-(azidometil)-2-oxooxazolidin-3-il)-11- flúor-2,4-dimetil-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-espiro[isoxazolo[4,5- g][1,4]oxazino[4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-8-((S)-4-(azidometil)-2-oxooxazolidin-3-il)-11- flúor-2,4-dimetil-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-espiro[isoxazolo[4,5- g][1,4]oxazino[4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-8-[(4S)-4-(etoximetil)-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il]- 11-flúor-2,4-dimetil-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-espiro[1,4-oxazino[4,3- a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-11-flúor-8-{(4S)-4-[(2-metoxietóxi)metil]-2-oxo- 1,3-oxazolidin-3-il}-2,4-dimetil-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-espiro[1,4- oxazino[4,3-a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]- 2',4',6'(1'H,3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-8-((R)-4-(diflúormetil)-2-oxooxazolidin-3-il)-11- flúor-2,4-dimetil-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-espiro[isoxazolo[4,5- g][1,4]oxazino[4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-8-((S)-4-ciclopropil-2-oxooxazolidin-3-il)-11- flúor-2,4-dimetil-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-espiro[isoxazolo[4,5- g][1,4]oxazino[4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-11-flúor-2,4-dimetil-8-((R)-2-oxo-5-(piridin-2- il)oxazolidin-3-il)-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-espiro[isoxazolo[4,5- g][1,4]oxazino[4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-11-flúor-2,4-dimetil-8-((S)-2-oxo-5-(piridin-2- il)oxazolidin-3-il)-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-espiro[isoxazolo[4,5- g][1,4]oxazino[4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-11-flúor-2,4-dimetil-8-((R)-2-oxo-4-(piridin-2- il)oxazolidin-3-il)-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-espiro[isoxazolo[4,5- g][1,4]oxazino[4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-11-flúor-2,4-dimetil-8-((S)-2-oxo-4-(piridin-2- il)oxazolidin-3-il)-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-espiro[isoxazolo[4,5- g][1,4]oxazino[4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-11-flúor-2,4-dimetil-8-((R)-2-oxo-4-(piridin-4- il)oxazolidin-3-il)-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-espiro[isoxazolo[4,5- g][1,4]oxazino[4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-11-flúor-2,4-dimetil-8-((S)-2-oxo-4-(piridin-4- il)oxazolidin-3-il)-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-espiro[isoxazolo[4,5- g][1,4]oxazino[4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-11-flúor-8-((R)-4-((R)-1-metoxietil)-2-oxooxa- zolidin-3-il)-2,4-dimetil-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-espiro[isoxazolo[4,5- g][1,4]oxazino[4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-11-flúor-8-((R)-4-((S)-1-metoxietil)-2-oxooxa- zolidin-3-il)-2,4-dimetil-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-espiro[isoxazolo[4,5- g][1,4]oxazino[4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-11-flúor-2,4-dimetil-8-((R)-2-oxo-4-(pirazin-2- il)oxazolidin-3-il)-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-espiro[isoxazolo[4,5- g][1,4]oxazino[4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-11-flúor-2,4-dimetil-8-((S)-2-oxo-4-(pirazin-2- il)oxazolidin-3-il)-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-espiro[isoxazolo[4,5- g][1,4]oxazino[4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-11-flúor-2,4-dimetil-8-((R)-2-oxo-4-(pirimidin-2- il)oxazolidin-3-il)-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-eespiro[isoxazolo[4,5- g][1,4]oxazino[4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-11-flúor-2,4-dimetil-8-((S)-2-oxo-4-(pirimidin-2- il)oxazolidin-3-il)-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-eespiro[isoxazolo[4,5- g][1,4]oxazino[4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-8-((S)-4-Etinil-2-oxooxazolidin-3-il)-11-flúor- 2,4-dimetil-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-espiro[isoxazolo[4,5-g][1,4]- oxazino[4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-11-Cloro-2,4-dimetil-8-((S)-4-metil-2- oxooxazolidin-3-il)-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-espiro[isoxazolo[4,5- g][1,4]oxazino[4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-11-flúor-8-[(4S)-4-(metoximetil)-2-oxo-1,3-oxa- zolidin-3-il]-2,4-dimetil-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-espiro[1,4-oxazino- [4,3-a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(1'H,3'H)- triona; (2R,4S,4aS)-11-flúor-2,4-dimetil-8-((S)-4-(1-metil-1H-1,2,4- triazol-5-il)-2-oxooxazolidin-3-il)-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-espiro[iso- xazolo[4,5-g][1,4]oxazino[4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)- triona; (2R,4S,4aS)-11-flúor-2,4-dimetil-8-((R)-4-(1-metil-1H-1,2,4- triazol-5-il)-2-oxooxazolidin-3-il)-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-espiro[iso- xazolo[4,5-g][1,4]oxazino[4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)- triona; (2R,4S,4aS)-11-flúor-8-((R)-4-((S)-1-hidroxietil)-2-oxooxa- zolidin-3-il)-2,4-dimetil-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-espiro[isoxazolo[4,5- g][1,4]oxazino[4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona; {(4S)-3-[(2R,4S,4aS)-11-flúor-2,4-dimetil-2',4',6'-trioxo- 1,1',2,3',4,4',4a,6'-octa-hidro-2'H,6H-espiro[1,4-oxazino[4,3-a][1,2]oxa- zolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidin]-8-il]-2-oxo-1,3-oxazolidin-4- il}acetonitrila; (2R,4S,4aS)-8-((R)-4-((R)-1,2-Di-hidroxietil)-2-oxooxazolidin- 3-il)-11-flúor-2,4-dimetil-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-espiro[isoxazolo[4,5- g][1,4]oxazino[4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-8-((R)-4-((S)-1,2-Di-hidroxietil)-2-oxooxazolidin- 3-il)-11-flúor-2,4-dimetil-2,4,4a,6-tetra-hidro-1H,1'H-espiro[isoxazolo[4,5- g][1,4]oxazino[4,3-a]quinolina-5,5'-pirimidina]-2',4',6'(3'H)-triona; (2R,4S,4aS)-11-flúor-8-{(4S)-4-[(hidroxiimino)metil]-2-oxo- 1,3-oxazolidin-3-il}-2,4-dimetil-1,2,4,4a-tetra-hidro-2'H,6H-espiro[1,4- oxazino[4,3-a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidina]- 2',4',6'(1'H,3'H)-triona; (5R)-3-[(2R,4S,4aS)-11-flúor-2,4-dimetil-2',4',6'-trioxo- 1,1',2,3',4,4',4a,6'-octa-hidro-2'H,6H-espiro[1,4-oxazino[4,3- a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidin]-8-il]-2-oxo-1,3-oxazolidina- 5-carbonitrila; e (5S)-3-[(2R,4S,4aS)-11-flúor-2,4-dimetil-2',4',6'-trioxo- 1,1',2,3',4,4',4a,6'-octa-hidro-2'H,6H-espiro[1,4-oxazino[4,3- a][1,2]oxazolo[4,5-g]quinolina-5,5'-pirimidin]-8-il]-2-oxo-1,3-oxazolidina- 5-carbonitrila, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

10. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindica-ções 1 a 8, caracterizado pelo fato de que apresenta a seguinte fórmula estrutural: ou um sal farmaceuricamente aceitável do mesmo.

11. Composição farmacêutica caracterizada pelo fato de que compreende um composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 10, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um excipiente ou diluente farmaceuticamente aceitável.

12. Uso de um composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 10, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de ser na fabricação de um medica-mento para o tratamento de uma infecção bacteriana ou para a inibição da DNA girase bacteriana.

13. Uso, de acordo com a reivindicação 12, caracterizado pelo fato de que a infecção bacteriana é causada por Neisseria gonor- rhoeae, S. aureus, S. pneumoniae, S. pyogenes, S. agalactiae, S. ha- emolyticus, staphylococci negativos para coagulase, Haemophilus in-fluenza, Legionella pneumophila,ou Burkholderia spp.

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