TW201410676A - 芳基內醯胺激酶抑制劑 - Google Patents

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TW201410676A TW102127296A TW102127296A TW201410676A TW 201410676 A TW201410676 A TW 201410676A TW 102127296 A TW102127296 A TW 102127296A TW 102127296 A TW102127296 A TW 102127296A TW 201410676 A TW201410676 A TW 201410676A
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潘森梁
羅庫瑪 雷賈曼恩
瑟斯希爾 傑森安德 那拉
瑪希斯瓦倫 希法沙賓 卡拉索魯胡
塔朗 庫瑪 梅修
強納森Ｌ 迪塔
卡洛琳 戴安 德茲爾巴
瓊安Ｊ 布朗森
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Abstract

本發明概言之係關於可抑制AAK1(銜接子相關激酶1)之化合物、包含此等化合物之組合物及抑制AAK1之方法。

Description

芳基內醯胺激酶抑制劑 相關申請案交叉參考
本申請案主張2012年7月31日提出申請之美國臨時申請案第61/677,856號之權益。
本發明概言之係關於可抑制銜接子相關激酶1(AAK1)之化合物、包含此等化合物之組合物及抑制AAK1之方法。
銜接子相關激酶1(AAK1)係絲胺酸/蘇胺酸激酶之Ark1/Prk1家族之成員。AAK1 mRNA以稱為短及長形式之兩種剪接形式存在。長形式佔優勢且在腦及心臟中高度表現(Henderson及Conner，Mol.Biol.Cell.2007,18,2698-2706)。突觸體製備物中富含AAK1且其與內吞結構共同定位於培養細胞中。AAK1調節網格蛋白包覆之內吞，一種在突觸囊泡再循環及受體介導之內吞中較為重要之過程。AAK1與AP2複合物相關，該複合物係連接受體貨物(cargo)與網格蛋白包被之異源四聚物。網格蛋白結合至AAK1刺激AAK1激酶活性(Conner等人，Traffic 2003,4,885-890；Jackson等人，J.Cell.Biol.2003,163,231-236)。AAK1將AP-2之μ-2次單位磷酸化，此促進μ-2與貨物受體上含有酪胺酸之分選基序結合(Ricotta等人，J.Cell Bio.2002,156,791-795；Conner及Schmid,J.Cell Bio.2002,156,921-929)。μ 2磷酸化並非受體攝取所需，但磷酸化提高內在化效率(Motely等人，Mol.Biol.Cell.2006,17,5298-5308)。
已將AAK1鑑別為PC12細胞中之神經調節蛋白-1/ErbB4信號傳導 抑制劑。經由RNA干擾介導之基因靜默損失AAK1表現或用激酶抑制劑K252a(其抑制AAK1激酶活性)處理可強化神經調節蛋白-1誘導之軸突增生。該等處理導致ErbB4之表現增加及質膜中或其附近累積ErbB4(Kuai等人，Chemistry and Biology 2011,18,891-906)。NRG1及ErbB4係推定之精神分裂症易感基因(Buonanno,Brain Res.Bull.2010,83,122-131)。已將兩種基因中之SNP與多種精神分裂症內在表型關聯(Greenwood等人，Am.J.Psychiatry 2011,168,930-946)。神經調節蛋白1及ErbB4 KO小鼠模型已顯示精神分裂症相關形態變化及行為表型(Jaaro-Peled等人，Schizophrenia Bulletin 2010,36,301-313；Wen等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA.2010,107,1211-1216)。另外，已將AAK1基因內含子中之單核苷酸多型性與帕金森氏病(Parkinson’s disease)之發作年齡關聯(Latourelle等人，BMC Med.Genet.2009,10,98)。該等結果表明，抑制AAK1活性可用於治療精神分裂症、精神分裂症中之認知缺陷、帕金森氏病、神經病變性疼痛、躁鬱症及阿茲海默氏病(Alzheimer’s disease)。
在第一態樣中，本發明提供式(I)化合物 或其醫藥上可接受之鹽，其中：R1係選自氫、C2-C4烯基、C1-C3烷氧基、C1-C3烷氧基C1-C3烷基、C1-C3烷基、C1-C3烷基胺基、芳基C1-C3烷基、C3-C6環烷基、C3-C6環烷基C1-C3烷基、C1-C3鹵代烷基及C1-C3羥基烷基；R2係選自氫、C1-C3烷氧基、C1-C3烷氧基羰基胺基、C1-C3烷基、C1-C3烷基胺基、C1-C3烷基羰基胺基、胺基、芳基胺基、芳基羰基胺 基、C3-C6環烷基胺基、C3-C6環烷基羰基胺基、C3-C6環烷氧基、鹵基、C1-C3鹵代烷氧基、C1-C3鹵代烷基、C2-C3鹵代烷基胺基、C2-C3鹵代烷基羰基胺基、羥基及苯基C1-C3烷基胺基，其中苯基視情況經C1-C3烷氧基取代；R3及R4係獨立地選自氫、C1-C4烷氧基、C1-C3烷氧基C1-C3烷基、C1-C3烷氧基羰基、C1-C4烷基、C1-C3烷基磺醯基、胺基羰基、氰基、C3-C6環烷基、二(C1-C3烷基)胺基羰基、鹵基、C1-C3鹵代烷氧基、C1-C3鹵代烷基、雜芳基、羥基、C1-C3羥基烷基及視情況經鹵基取代之苯基；R5係C1-C3烷基-Y或C2-C8烷基，其中C2-C8烷基視情況經一個、兩個、三個或四個獨立地選自以下之基團取代：C1-C3烷氧基、C1-C3烷基胺基、C1-C3烷氧基C2-C3烷基胺基、胺基、芳基、二(C1-C3烷基)胺基、鹵基、C1-C3鹵代烷基胺基、C1-C3鹵代烷基羰基胺基、羥基、-NRxRy及C3-C8環烷基，其中環烷基進一步視情況經一個、兩個或三個獨立地選自以下之基團取代：C1-C3烷氧基、C1-C3烷基、C1-C3烷基胺基、C1-C3烷氧基C2-C3烷基胺基、胺基、芳基、芳基C1-C3烷基、鹵基、C1-C3鹵代烷基、C1-C3鹵代烷基胺基及羥基；Rx及Ry連同其所附接之氮原子一起形成三員至六員環；且Y係選自 其中n係0、1、2或3；每一R6皆獨立地選自氫、C1-C6烷基、芳基、芳基C1-C3烷基、C3-C6環烷基、鹵基及C1-C3鹵代烷基；每一R7係獨立地選自氫、C1-C3烷氧基及羥基；且 R8係選自氫、C1-C6烷基、C3-C6環烷基及C1-C6烷基羰基。
在第一態樣之第一實施例中，本發明提供式(I)化合物，其中R5係C2-C8烷基，其中C2-C8烷基視情況經一個、兩個、三個或四個獨立地選自C1-C3烷氧基、胺基、C1-C3烷基胺基、二(C1-C3烷基)胺基、鹵基及C3-C8環烷基之基團取代；或R5係C1-C3烷基-Y，其中Y係或，其中R6、R7及R8係氫。
在第一態樣之第二實施例中，本發明提供式(I)化合物，其中R5係視情況經一個、兩個、三個或四個獨立地選自胺基及鹵基之基團取代之C2-C8烷基。
在第一態樣之第三實施例中，本發明提供式(I)化合物，其中R1係選自氫、C2-C4烯基、C1-C3烷氧基C1-C3烷基、C1-C3烷基、芳基C1-C3烷基、C3-C6環烷基C1-C3烷基、C1-C3鹵代烷基及C1-C3羥基烷基；R2係選自氫、C1-C3烷氧基、C1-C3烷基、C1-C3烷基羰基胺基、胺基、鹵基、C1-C3鹵代烷基及苯基C1-C3烷基胺基，其中苯基視情況經C1-C3烷氧基取代；R3及R4係獨立地選自氫、C1-C4烷氧基、C1-C3烷氧基C1-C3烷基、C1-C3烷氧基羰基、C1-C4烷基、C1-C3烷基磺醯基、胺基羰基、氰基、C3-C6環烷基、二(C1-C3烷基)胺基羰基、鹵基、C1-C3鹵代烷氧基、C1-C3鹵代烷基、雜芳基、羥基、C1-C3羥基烷基及視情況經鹵基取代之苯基；R5係C1-C3烷基-Y或C2-C8烷基，其中C2-C8烷基視情況經一個、兩個、三個或四個獨立地選自C1-C3烷氧基、C1-C3烷基胺基、胺基、二(C1-C3烷基)胺基、鹵基及C3-C8環烷基之基團取代；且其中Y係選自 其中R6、R7及R8係氫。
在第二態樣中，本發明提供式(II)化合物 或其醫藥上可接受之鹽，其中：R1係選自氫、C2-C4烯基、C1-C3烷氧基、C1-C3烷氧基C1-C3烷基、C1-C3烷基、C1-C3烷基胺基、芳基C1-C3烷基、C3-C6環烷基、C3-C6環烷基C1-C3烷基及C1-C3鹵代烷基；R2係選自氫、C1-C3烷氧基、C1-C3烷氧基羰基胺基、C1-C3烷基、C1-C3烷基胺基、C1-C3烷基羰基胺基、胺基、芳基胺基、芳基羰基胺基、C3-C6環烷基胺基、C3-C6環烷基羰基胺基、C3-C6環烷氧基、鹵基、C1-C3鹵代烷氧基、C1-C3鹵代烷基、C2-C3鹵代烷基胺基、C2-C3鹵代烷基羰基胺基及羥基；R3及R4係獨立地選自氫、C1-C4烷基、氰基、C3-C6環烷基、鹵基、C1-C3鹵代烷基及羥基；R5係C1-C3烷基-Y或C2-C8烷基，其中C2-C8烷基視情況經一個、兩個或三個獨立地選自以下之基團取代：C1-C3烷氧基、C1-C3烷基胺基、C1-C3烷氧基C2-C3烷基胺基、胺基、芳基、鹵基、C1-C3鹵代烷基胺基、C1-C3鹵代烷基羰基胺基、羥基、-NRxRy及C3-C8環烷基，其中環烷基進一步視情況經一個、兩個或三個獨立地選自以下之基團取代：C1-C3烷氧基、C1-C3烷基、C1-C3烷基胺基、C1-C3烷氧基C2-C3烷 基胺基、胺基、芳基、芳基C1-C3烷基、鹵基、C1-C3鹵代烷基、C1-C3鹵代烷基胺基及羥基；Rx及Ry連同其所附接之氮原子一起形成三員至六員環；且Y係選自 其中n係0、1、2或3；每一R6皆獨立地選自氫、C1-C6烷基、芳基、芳基C1-C3烷基、C3-C6環烷基、鹵基及C1-C3鹵代烷基；每一R7係獨立地選自氫、C1-C3烷氧基及羥基；且R8係選自氫、C1-C6烷基、C3-C6環烷基及C1-C6烷基羰基。
在第二態樣之第一實施例中，本發明提供式(I)化合物或其醫藥上可接受之鹽，其中R5係視情況經一個、兩個或三個獨立地選自以下之基團取代之C2-C8烷基：C1-C3烷氧基、C1-C3烷基胺基、C1-C3烷氧基C2-C3烷基胺基、胺基、芳基、鹵基、C1-C3鹵代烷基胺基、C1-C3鹵代烷基羰基胺基、羥基、-NRxRy及C3-C8環烷基，其中環烷基進一步視情況經一個、兩個或三個獨立地選自以下之基團取代：C1-C3烷氧基、C1-C3烷基、C1-C3烷基胺基、C1-C3烷氧基C2-C3烷基胺基、胺基、芳基、芳基C1-C3烷基、鹵基、C1-C3鹵代烷基、C1-C3鹵代烷基胺基及羥基。在第二態樣之第二實施例中，R5係視情況經一個、兩個或三個獨立地選自胺基及鹵基之基團取代之C2-C8烷基。
在第二態樣之第三實施例中，本發明提供式(I)化合物或其醫藥上可接受之鹽，其中R1係選自氫、C2-C4烯基、C1-C3烷氧基C1-C3烷基、C1-C3烷基、芳基C1-C3烷基及C3-C6環烷基C1-C3烷基；R2係選自氫、C1-C3烷基、C1-C3烷基羰基胺基及胺基； R3及R4係獨立地選自氫、C1-C4烷基、氰基、C3-C6環烷基、鹵基及羥基；且R5係視情況經一個、兩個或三個獨立地選自胺基及鹵基之基團取代之C2-C8烷基。
在第三態樣中，本發明提供包含醫藥上可接受之量之式(I)化合物或其醫藥上可接受之鹽及醫藥上可接受之載劑之組合物。
在第四態樣中，本發明提供抑制銜接子相關激酶1(AAK1)活性之方法，包含使AAKI與式(I)化合物或其醫藥上可接受之鹽接觸。
在第五態樣中，本發明提供治療或管控由AAK1活性介導之疾病或病症之方法，該方法包含向有需要之患者投與治療有效量之式(I)化合物或其醫藥上可接受之鹽。在第五態樣之第一實施例中，該疾病或疾病係選自阿茲海默氏病、躁鬱症、疼痛、帕金森氏病及精神分裂症。在第五態樣之第二實施例中，該疼痛係神經病變性疼痛。在第五態樣之第三實施例中，神經病變性疼痛係纖維肌痛或周圍神經病變。
本發明之其他態樣可包括本文所揭示實施例之適宜組合。
其他態樣及實施例可參見本文所提供之說明。
本發明之態樣圖解說明於圖1中，該圖顯示使用AAK1同型接合(-/-)剔除小鼠及其野生型(+/+)同窩仔自福馬林疼痛模型獲得之結果。AAK1同型接合(-/-)剔除小鼠與其野生型(+/+)同窩仔相比顯示急性及強直性(tonic)疼痛反應二者皆明顯降低。
本發明部分地基於AAK1剔除小鼠展現高耐痛性之發現。該發現促進最終導致發現AAK1抑制劑、包含其之組合物及其使用方法之研究。
本文中之本發明說明應視為與化學鍵結之法則及原理一致。在一些情況下，可能需要去除氫原子以適應任一給定位置處之取代基。
應理解，本發明所涵蓋之化合物係彼等適宜地穩定用作藥劑者。
分子中特定位置處任一取代基或變量之定義意欲獨立於該分子中其他地方之定義。例如，當n係2時，兩個R6基團中之每一者可相同或不同。
如本說明書中所用，以下術語具有所指示之含義：
本說明書中所引用之所有專利、專利申請案及文獻參考之全文皆以引用方式併入本文中。在不一致之情況下，應以本發明(包括定義)為準。
除非上下文另外明確指出，否則本文所用單數形式「一(a、an)」及「該」包括複數個指示物。
在一些情況下，任一特定基團中之碳原子數在敍述之基團之前表示。例如，術語「C1-6烷基」表示含有一個至六個碳原子之烷基。倘若該等命名存在，則其優於本文所含之所有其他定義。
本文所用術語「烯基」係指含有至少一個碳-碳雙鍵之直鏈或具支鏈基團。
本文所用術語「烷氧基」係指經由氧原子附接至母體分子部分之烷基。
本文所用術語「烷氧基烷基」係指經一個、兩個或三個烷氧基取代之烷基。
本文所用術語「烷氧基烷基胺基」係指R係烷氧基烷基之-NHR。
本文所用術語「烷氧基羰基」係指經由羰基附接至母體分子部分之烷氧基。
本文所用術語「烷氧基羰基胺基」係指R係烷氧基羰基之-NHR。
本文所用術語「烷基」係指衍生自直鏈或具支鏈飽和烴之基團。
本文所用術語「烷基胺基」係指R係烷基之-NHR。
本文所用術語「烷基羰基」係指經由羰基附接至母體分子部分之烷基。
本文所用術語「烷基羰基胺基」係指R係烷基羰基之-NHR。
本文所用術語「烷基磺醯基」係指經由磺醯基附接至母體分子部分之烷基。
本文所用術語「胺基」係指-NH2。
本文所用術語「胺基羰基」係指-C(O)NH2。
本文所用術語「芳基」係指苯基或一或兩個環係系苯基之二環稠環系統。二環稠環系統係由稠合至四員至六員芳香族或非芳香族碳環之苯基組成。本發明之芳基可經由基團中任一可取代碳原子附接至母體分子部分。芳基之代表性實例包括(但不限於)二氫茚基、茚基、萘基、苯基及四氫萘基。
本文所用術語「芳基烷基」係指經一個、兩個或三個芳基取代之烷基。
本文所用術語「芳基胺基」係指R係芳基之-NHR。
本文所用術語「芳基羰基」係指經由羰基附接至母體分子部分之芳基。
本文所用術語「芳基羰基胺基」係指R係芳基羰基之-NHR。
本文所用術語「羰基」係指-C(O)-。
本文所用術語「氰基」係指-CN。
本文所用術語「環烷基」係指具有0個雜原子之飽和單環烴環系統。環烷基之代表性實例包括(但不限於)環丙基、環戊基及環己基。
本文所用術語「(環烷基)烷基」係指經一個、兩個或三個環烷基 取代之烷基。
本文所用術語「環烷基胺基」係指R係環烷基之-NHR。
本文所用術語「環烷基羰基」係指經由羰基附接至母體分子部分之環烷基。
本文所用術語「環烷基羰基胺基」係指R係環烷基羰基之-NHR。
本文所用術語「環烷氧基」係指經由氧原子附接至母體分子部分之環烷基。
本文所用術語「二烷基胺基」係指R係烷基之-NR2。兩個R基團可相同或不同。
本文所用術語「二烷基胺基羰基」係指R係烷基之-C(O)NR2。兩個R基團可相同或不同。
本文所用術語「鹵基」係指Br、Cl、F及/或I。
本文所用術語「鹵代烷氧基」係指經由氧原子附接至母體分子部分之鹵代烷基。
本文所用術語「鹵代烷基」係指由一個、兩個、三個或四個鹵素原子取代之烷基。
本文所用術語「鹵代烷基胺基」係指R係鹵代烷基之-NHR。
本文所用術語「鹵代烷基羰基」係指經由羰基附接至母體分子部分之鹵代烷基。
本文所用術語「鹵代烷基羰基胺基」係指R係鹵代烷基羰基之-NHR。
本文所用術語「雜芳基」係指含有一或兩個獨立地選自氮、氧及硫之雜原子之五員或六員芳香族環。
本文所用術語「羥基」係指-OH。
本文所用術語「羥基烷基」係指經一個、兩個或三個羥基取代 之烷基。
本文所用術語「苯基烷基胺基」係指R係苯基烷基之-NHR。
本文所用術語「磺醯基」係指-SO2。
本發明化合物中可存在不對稱中心。應理解，本發明涵蓋具有抑制AAK1之能力的所有立體化學異構物形式或其混合物。化合物之個別立體異構物可以合成方式自含有對掌中心之市售起始材料製備，或藉由製備鏡像異構產物之混合物、之後分離製備，例如轉化成非鏡像異構物混合物、之後分離或再結晶、層析技術處理或在對掌層析柱上直接分離鏡像異構物。具有特定立體化學結構之起始化合物可自市面購得或可藉由業內已知之技術製得並拆分。
本發明之某些化合物亦可以可分離之不同穩定構象形式存在。由於圍繞不對稱單鍵旋轉受限(例如因空間位阻或環應變)所致之扭轉不對稱可允許分離不同構象異構物。本發明包括該等化合物之每一構象異構物及其混合物。
術語「本發明化合物」及等效表述意欲涵蓋式(I)化合物及其醫藥上可接受之鏡像異構物、非鏡像異構物及鹽。類似地，所提及之中間體意欲涵蓋其在上下文中所允許之鹽。
本發明意欲包括出現於本發明化合物中之原子之所有同位素。同位素包括彼等具有相同原子序數但不同質量數之原子。作為一般實例且並不限於此，氫之同位素包括氘及氚。碳之同位素包括13C及14C。同位素標記之本發明化合物通常可藉由彼等熟習此項技術者已知之習用技術來製備，或可藉由與本文中所述方法類似之方法使用適當同位素標記試劑代替原本採用之未標記試劑來製備。此等化合物可具有多種潛在應用，例如作為測定生物活性中之標準及試劑。在穩定同位素之情況下，此等化合物可具有有利地修改生物學、藥理學或藥物動力學性質之可能性。
本發明化合物可以醫藥上可接受之鹽形式存在。本文所用術語「醫藥上可接受之鹽」代表本發明化合物之鹽或兩性離子形式，其具有水或油溶性或可分散，在合理的醫學判斷範圍內適用於與患者組織接觸而無過度毒性、刺激性、過敏反應或其他問題或併發症，與合理的效益/風險比相稱且對其預期用途而言有效。該等鹽可在化合物最終分離及純化期間製備或單獨地藉由使適宜氮原子與適宜酸反應來製備。代表性酸加成鹽包括乙酸鹽、己二酸鹽、海藻酸鹽、檸檬酸鹽、天冬胺酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、丁酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、二葡萄糖酸鹽、二氫溴酸鹽、二鹽酸鹽、二氫碘酸鹽、甘油磷酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、甲酸鹽、富馬酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、2-羥基乙磺酸鹽、乳酸鹽、馬來酸鹽、均三甲苯磺酸鹽、甲磺酸鹽、菸酸鹽、伸萘基磺酸鹽(naphthylenesulfonate)、2-萘磺酸鹽、草酸鹽、雙羥萘酸鹽、果膠酸鹽、過硫酸鹽、3-苯基丙酸鹽、苦味酸鹽、新戊酸鹽、丙酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、三氯乙酸鹽、三氟乙酸鹽、磷酸鹽、麩胺酸鹽、碳酸氫鹽、對甲苯磺酸鹽及十一烷酸鹽。可用於形成醫藥上可接受之加成鹽之酸之實例包括無機酸，例如鹽酸、氫溴酸、硫酸及磷酸；及有機酸，例如草酸、馬來酸、琥珀酸及檸檬酸。
鹼加成鹽可藉由使羧基與適宜鹼(例如，金屬陽離子之氫氧化物、碳酸鹽或碳酸氫鹽)或與氨或一級、二級或三級有機胺反應在化合物之最終分離及純化期間製備。醫藥上可接受之鹽之陽離子包括鋰、鈉、鉀、鈣、鎂及鋁，以及無毒四級胺陽離子，例如銨、四甲基銨、四乙基銨、甲胺、二甲胺、三甲胺、三乙胺、二乙胺、乙胺、三丁胺、吡啶、N,N-二甲基苯胺、N-甲基六氫吡啶、N-甲基嗎啉、二環己基胺、普魯卡因(procaine)、二苄基胺、N,N-二苄基苯乙胺及N,N’-二苄基乙二胺。可用於形成鹼加成鹽之其他代表性有機胺包括 乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、六氫吡啶及六氫吡嗪。
本發明之一個實施例涵蓋在活體外及活體內抑制銜接子相關激酶1(AAK1)之方法，其包含使AAK1與式I化合物或其醫藥上可接受之鹽接觸。
當治療有效量之式(I)化合物以及其醫藥上可接受之鹽可以原料化學品形式投與用於療法中時，可以醫藥組合物形式呈現活性成份。因此，本發明進一步提供醫藥組合物，其包括治療有效量之式(I)化合物或其醫藥上可接受之鹽及一或多種醫藥上可接受之載劑、稀釋劑或賦形劑。
除非另有說明，否則化合物之「治療有效量」係足以在疾病或病況之治療或管控中提供治療益處或足以延遲或最小化一或多種與該疾病或病況相關之症狀的量。術語「治療有效量」可涵蓋改良總體療法、減少或避免疾病或病況之症狀或病因或增強另一治療藥劑之治療功效的量。
本文所用術語「治療有效量」係指一或多種化合物足以在疾病或病況之治療或管控中提供治療益處或足以延遲或最小化一或多種與該疾病或病況相關之症狀的量。化合物之「治療有效量」意指治療劑單獨或與其他療法組合在該疾病或病況之治療或管控中提供治療益處之量。術語「治療有效量」可涵蓋改良總體療法、減少或避免疾病或病況之症狀或病因或增強另一治療藥劑之治療功效的量。當應用於單獨投與之個別活性成份時，該術語係指單獨該成份。當應用於組合時，該術語係指無論組合、連續抑或同時投與，活性成份產生治療效應之組合量。式(I)化合物及其醫藥上可接受之鹽係如上文所述。載劑、稀釋劑或賦形劑必須在與調配物之其他成份相容且對其接受者無害之意義上係可接受的。根據本發明之另一態樣，亦提供製備醫藥調配物之方法，包括混合式(I)化合物或其醫藥上可接受之鹽與一或多種 醫藥上可接受之載劑、稀釋劑或賦形劑。本文所用術語「醫藥上可接受」係指彼等在合理藥學判斷範圍內適用於與患者組織接觸且無過度毒性、刺激性、過敏反應或其他問題或併發症，與合理效益/風險比率相應且對其預期用途而言有效之化合物、材料、組合物及/或劑型。
醫藥調配物可以每單位劑量含有預定量之活性成份之單位劑型呈現。本發明化合物在用於預防及治療疾病之單一療法中之典型劑量量介於約0.01毫克/千克(「mg/kg」)體重/天與約250mg/kg體重/天之間，較佳介於約0.05mg/kg體重/天與約100mg/kg體重/天之間。通常，本發明醫藥組合物應每天投與約1次至約5次，或另一選擇為，以連續輸注形式投與。此投與可用作慢性或急性療法。活性成份可與載劑材料組合以產生單一劑型之量應端視以下因素而變化：所治療病況、病況之嚴重程度、投與時間、投與途徑、所用化合物之排泄速率、治療持續時間及患者之年齡、性別、體重及身體狀況。較佳單位劑量調配物係彼等含有如上文所敍述日劑量或分次劑量或其適當分數之活性成份者。治療可以實質上小於化合物之最佳劑量之小劑量起始。此後，少量增加劑量直至達到該等狀況下之最佳效果為止。一般而言，化合物最合意地係以通常將提供有效結果而不會引起任何有害或不利之副效應之濃度量投與。
當本發明組合物包含本發明化合物與一或多種其他治療或預防劑之組合，該化合物與其他藥劑二者通常以介於約10%至150%之間之劑量量且更佳介於約10%與80%之間之劑量存在，通常以單一療法方案投與。
本發明化合物可與一或多種其他治療劑或預防劑組合投與。例如，當用於治療疼痛時，可能的其他藥劑包括免疫抑制劑、抗炎劑及/或用於治療疼痛之其他藥劑。
適用於本發明方法及組合物中之免疫抑制劑包括彼等為業內已知者。實例包括胺基喋呤、硫唑嘌呤、環孢菌素A、D-青黴胺、金鹽、羥氯喹、來氟米特(leflunomide)、胺甲喋呤、米諾環素(minocycline)、雷帕黴素(rapamycin)、柳氮磺吡啶、他羅利姆(tacrolimus)(FK506)及其醫藥上可接受之鹽。特定免疫抑制劑係胺甲喋呤。
免疫抑制劑之其他實例包括抗TNF抗體，例如阿達木單抗(adalimumab)、培化舍珠單抗(certolizumab pegol)、依那西普(etanercept)及英夫利昔單抗(infliximab)。其他包括介白素-1阻斷劑，例如阿那白滯素(anakinra)。其他包括抗B細胞(CD20)抗體，例如利妥昔單抗(rituximab)。其他包括T細胞活性阻斷劑，例如阿巴他塞(abatacept)。
其他免疫抑制劑包括肌苷單磷酸去氫酶抑制劑，例如麥考酚酸嗎乙酯(mycophenolate mofetil)(CellCept®)及麥考酚酸(Myfortic®)。
適用於本發明方法及組合物中之抗炎藥物包括彼等為業內已知者。實例包括糖皮質素及NSAID。糖皮質素之實例包括醛固酮、倍氯米松(beclometasone)、倍他米松(betamethasone)、可體松(cortisone)、去氧皮質固酮、地塞米松(dexamethasone)、氟氫可體松(fludrocortisone)、氫化可體松(hydrocortisone)、甲潑尼龍(methylprednisolone)、潑尼松龍(prednisolone)、潑尼松(prednisone)、曲安西龍(triamcinolone)及其醫藥上可接受之鹽。
NSAID之實例包括水楊酸酯(鹽)(例如，阿司匹靈(aspirin)、阿莫普林(amoxiprin)、貝諾酯(benorilate)、膽鹼水楊酸鎂、二氟尼柳(diflunisal)、芳斯拉明(faislamine)、水楊酸甲酯、水楊酸鎂、雙水楊酸酯及其醫藥上可接受之鹽)、芳基烷酸(例如，雙氯芬酸(diclofenac)、醋氯芬酸(aceclofenac)、阿西美辛(acemetacin)、溴芬酸 (bromfenac)、依託度酸(etodolac)、吲哚美辛(indometacin)、萘丁美酮(nabumetone)、舒林酸(sulindac)、托美丁(tolmetin)及其醫藥上可接受之鹽)、芳基丙酸(例如，布洛芬(ibuprofen)、卡洛芬(carprofen)、芬布芬(fenbufen)、非諾洛芬(fenoprofen)、氟比洛芬(flurbiprofen)、酮洛芬(ketoprofen)、酮咯酸(ketorolac)、洛索洛芬(loxoprofen)、萘普生(naproxen)、奧沙普秦(oxaprozin)、噻洛芬酸(tiaprofenic acid)、舒洛芬(suprofen)及其醫藥上可接受之鹽)、芳基鄰胺基苯甲酸(例如，甲氯芬那酸(meclofenamic acid)、甲芬那酸(mefenamic acid)及其醫藥上可接受之鹽)、吡唑啶衍生物(例如，阿紮丙宗(azapropazone)、安替比林甲胺甲烷(metamizole)、羥布宗(oxyphenbutazone)、保泰松(phenylbutazone)、磺吡酮及其醫藥上可接受之鹽)、昔康(oxicam)(例如，氯諾昔康(lornoxicam)、美洛昔康(meloxicam)、吡羅昔康(piroxicam)、替諾昔康(tenoxicam)及其醫藥上可接受之鹽)、COX-2抑制劑(例如，塞來考昔(celecoxib)、艾托考昔(etoricoxib)、魯米考昔(lumiracoxib)、帕瑞考昔(parecoxib)、羅非考昔(rofecoxib)、伐地考昔(valdecoxib)及其醫藥上可接受之鹽)及硫醯替苯胺(例如，尼美舒利(nimesulide)及其醫藥上可接受之鹽)。
用於治療疼痛(包括(但不限於)神經病變性疼痛及發炎性疼痛)之其他藥劑包括(但不限於)諸如以下等藥劑：普瑞巴林(pregabalin)、利多卡因(lidocaine)、度洛西汀(duloxetine)、加巴噴丁(gabapentin)、卡馬西平(carbamazepine)、辣椒辣素(capsaicin)及其他血清素/去甲腎上腺素/多巴胺再攝取抑制劑及阿片製劑(opiate)(例如奧施康定(oxycontin)、嗎啉及可待因(codeine))。
在由已知疾病或病況(例如糖尿病、感染(例如，帶狀皰疹或HIV感染)或癌症)引起之疼痛之治療中，本發明化合物可與一或多種針對潛在疾病或病況之其他治療劑或預防劑組合投與。例如，當用於治療 糖尿病性神經病變時，本發明化合物可與一或多種抗糖尿病劑、抗高血糖劑、降血脂劑/降脂劑、減肥劑、抗高血壓劑及食欲抑制劑組合投與。抗糖尿病劑之實例包括雙胍(例如，二甲雙胍(metformin)、苯乙雙胍(phenformin))、葡萄糖苷酶抑制劑(例如，阿卡波糖(acarbose)、米格列醇(miglitol))、胰島素(包括胰島素促分泌素及胰島素敏化劑)、氯茴苯酸(meglitinide)(例如，瑞格列奈(repaglinide))、磺醯脲(例如，格列美脲(glimepiride)、格列本脲(glyburide)、格列齊特(gliclazide)、氯磺丙脲(chlorpropamide)及格列吡嗪(glipizide))、雙縮胍/格列本脲組合(例如，格魯可旺斯(Glucovance))、噻唑啉二酮(例如，曲格列酮(troglitazone)、羅格列酮(rosiglitazone)及吡格列酮(pioglitazone))、PPAR-α激動劑、PPAR-γ激動劑、PPAR α/γ雙重激動劑、糖原磷酸化酶抑制劑、脂肪酸結合蛋白(aP2)抑制劑、升糖素樣肽-1(GLP-1)或其他GLP-1受體激動劑、二肽基肽酶IV(DPP4)抑制劑及鈉-葡萄糖協同轉運子2(SGLT2)抑制劑(例如，達格列淨(dapagliflozin)、坎格列淨(canagliflozin)及LX-4211)。
醫藥調配物可適於藉由任何適當途徑投與，例如藉由經口(包括頰或舌下)、直腸、鼻、局部(包括頰、舌下或經皮)、陰道或非經腸(包括皮下、皮內、肌內、關節內、滑膜內、胸骨內、鞘內、病灶內、靜脈內或皮內注射或輸注)途徑投與。此等調配物可藉由藥學領域內已知之任何方法製備，例如藉由使活性成份與載劑或賦形劑締合來製備。較佳係經口投與或藉由注射投與。
適於經口投與之醫藥調配物可以下列形式呈現：離散單元，例如膠囊或錠劑；粉末或顆粒；存於水性或非水性液體中之溶液或懸浮液；可食用發泡體或泡沫(whip)；或水包油型液體乳液或油包水型乳液。
例如，對於以錠劑或膠囊形式經口投與而言，活性藥物組份可 與經口、醫藥上可接受之無毒惰性載劑(例如乙醇、甘油、水及諸如此類)組合。藉由將化合物研磨成適宜微細大小並將其與以類似方式研磨之醫藥載劑(例如可食用碳水化合物，例如，澱粉或甘露醇)混合來製備粉末。亦可存在矯味劑、防腐劑、分散劑及著色劑。
藉由如上文所述製備粉末混合物並填充成形明膠殼來產生膠囊。在實施填充操作之前可向粉末混合物中添加助流劑及潤滑劑，例如，膠體二氧化矽、滑石粉、硬脂酸鎂、硬脂酸鈣或固體聚乙二醇。當攝入膠囊時，亦可添加崩解劑或增溶劑(例如瓊脂、碳酸鈣或碳酸鈉)以改良藥劑之可用性。
此外，當期望或需要時，亦可將適宜結合劑、潤滑劑、崩解劑及著色劑納入混合物中。適宜結合劑包括澱粉、明膠、天然糖類(例如葡萄糖或β-乳糖)、玉米甜味劑、天然及合成膠(例如阿拉伯膠、磺蓍膠或海藻酸鈉)、羧甲基纖維素、聚乙二醇及諸如此類。用於該等劑型中之潤滑劑包括油酸鈉、氯化鈉及諸如此類。崩解劑包括(但不限於)澱粉、甲基纖維素、瓊脂、膨潤土、黃原膠及諸如此類。例如，藉由製備粉末混合物，製粒或乾壓，添加潤濕劑及崩解劑並壓製成錠劑來調配錠劑。藉由混合經適宜研磨之化合物與如上文所述之稀釋劑或鹼且視情況與結合劑(例如羧甲基纖維素、海藻酸鹽、膠凝劑或聚乙烯基吡咯啶酮)、緩溶劑(solution retardant)(例如石蠟)、再吸收促進劑(例如四級鹽)及/或及吸收劑(例如膨潤土、高嶺土或磷酸二鈣)來製備粉末混合物。可藉由用結合劑(例如糖漿、澱粉膏糊、阿卡迪亞黏液(acadia mucilage)或纖維素材料或聚合材料之溶液)潤濕並迫使其經過網篩將粉末混合物製粒。作為製粒之替代，可使粉末混合物運行經過壓錠機且結果係不完全成形之破碎成顆粒之團塊(slug)。顆粒可藉助添加硬脂酸、硬脂酸鹽、滑石粉或礦物油潤滑以防止黏附至錠劑成形模具。然後將經潤滑之混合物壓縮成錠劑。本發明化合物亦可 與自由流動之惰性載劑組合並直接壓縮成錠劑，而不經歷製粒或乾壓步驟。可提供由密封蟲膠層、糖或聚合材料包衣及拋光蠟包衣組成之透明或不透明保護包衣。可將染料添加至該等包衣以區別不同的單位劑量。
諸如溶液、糖漿及酏劑等口服流體可以劑量單位形式製備，以使得給定量含有預定量之化合物。糖漿可藉由將化合物溶解於適宜矯味之水溶液中來製備，而酏劑係經由使用無毒媒劑製備。亦可添加增溶劑及乳化劑(例如異硬脂基醇及聚氧化乙烯山梨醇醚)、防腐劑、矯味添加劑(例如薄荷油或天然甜味劑或糖精或其他人造甜味劑)及諸如此類。
若適宜，可將用於經口投與之劑量單位調配物微膠囊化。調配物亦可如例如藉由將微粒材料包覆或包埋於聚合酶、蠟或諸如此類中來製備以延長或維持釋放。
式(I)化合物及其醫藥上可接受之鹽亦可以脂質體遞送系統形式投與，例如單層小囊泡、單層大囊泡及多層囊泡。脂質體可自多種磷脂(例如膽固醇、硬脂胺或磷脂醯膽鹼)形成。
式(I)化合物及其醫藥上可接受之鹽亦可藉由使用單株抗體作為與化合物分子偶合之個別載劑來遞送。該等化合物亦可與作為靶標藥物載劑之可溶性聚合物偶合。此等聚合物可包括經棕櫚醯殘基取代之聚乙烯基吡咯啶酮、吡喃共聚物、聚羥丙基甲基丙烯醯胺苯酚、聚羥乙基天冬醯胺苯酚或聚環氧乙烷聚離胺酸。此外，該等化合物可與一類可用於達成藥物受控釋放之生物可降解聚合物偶合，例如聚乳酸、聚ε己內酯、聚羥基丁酸、聚原酸酯、聚縮醛、聚二氫吡喃、聚氰基丙烯酸酯及水凝膠之交聯或兩親性嵌段共聚物。
適於經皮投與之醫藥組合物可呈現為離散貼片形式，該等離散貼片意欲與接受者之表皮保持緊密接觸以用於延長時間。例如，活性 成份可藉由離子透入自貼片遞送，如Pharmaceutical Research 1986,3(6),318中所概述。
適於局部投與之醫藥調配物可調配成軟膏、乳霜、懸浮液、洗劑、粉末、溶液、膏糊、凝膠、噴霧劑、氣溶膠或油狀物。
適於直腸投與之醫藥調配物可呈現為栓劑或灌腸劑。
載劑為固體之適於經鼻投與之醫藥調配物包括粒徑(例如)在20微米至500微米範圍內之粗粉末，其以下列方式投與：其中藉由(即)自保持靠近鼻子處之粉末容器經由鼻腔快速吸入來攝入鼻中。載劑為液體之適於作為鼻噴霧劑或鼻滴劑投與之調配物包括活性成份之水或油溶液。
適於藉由吸入投與之醫藥調配物包括微細粒子粉塵或煙霧，其可藉助各種類型之計量、劑量加壓氣溶膠、噴霧器或吸入器生成。
適於陰道投藥之醫藥調配物可呈現為子宮套、棉塞、乳霜、凝膠、膏糊、發泡體或噴霧調配物。
適於非經腸投與之醫藥調配物可包括含水及無水無菌注射溶液，其可含有抗氧化劑、緩衝液、抑菌劑及可使調配物與預期接受者之血液等滲之溶質)；以及含水及無水無菌懸浮液，其可包括懸浮劑及增稠劑。該等調配物可以單位劑量或多劑量容器(例如，密封安瓿及小瓶)呈現，且其可儲存於冷凍乾燥(凍乾)條件下且僅需在使用前立即添加無菌液體載劑(例如，注射用水)。臨時注射溶液及懸浮液可由無菌粉末、顆粒及錠劑製備。
應理解，除上文特別提及之成份外，該等調配物亦可包括業內習用於所述調配物類型之其他試劑，例如，彼等適用於經口投與者可包括矯味劑。
術語「患者」包括人類與其他哺乳動物二者。
除非另有說明，否則術語「管控(manage、managing及 management」涵蓋預防業已罹患指定疾病或病症之患者復發該疾病或病症及/或延長已罹患該疾病或病症之患者保持於緩解狀態之時間。術語涵蓋調節疾病或病症之臨限值、發展及/或持續時間或改變患者對疾病或病症作出反應之方式。
術語「治療」係指：(i)預防疾病、病症及/或病況在可能易患但尚未診斷為患有該疾病、病症及/或病況之患者中出現；(ii)抑制該疾病、病症或病況，即，阻止其發展；及(iii)減輕該疾病、病症或病況，即使該疾病、病症及/或病況消退。
當藉由合成過程或藉由代謝過程(包括彼等發生於人類或動物體內(活體內)者或發生於活體外之過程)製備時，本發明意欲涵蓋具有式(I)之化合物。
用於本申請案(尤其包括下文闡釋性反應圖及實例)中之縮寫為彼等熟習此項技術者所熟知。一些所用縮寫如下：RT或rt或r.t.表示室溫或滯留時間(上下將規定)；t R表示滯留時間；h或hr或hrs表示小時；min或mins表示分鐘；MeOH表示甲醇；EtOH表示乙醇；EtOAc或EtOAC表示乙酸乙酯；OAc表示乙酸酯；DCM表示二氯甲烷；DMA表示N,N-二甲基乙醯胺；DMF表示N,N-二甲基甲醯胺；NMP表示N-甲基吡咯啶酮；MeCN或ACN表示乙腈；AcCl表示乙醯氯；THF表示四氫呋喃；DMSO表示二甲基亞碸；MeOD表示CD3OD；m-CPBA表示間氯過氧苯甲酸；DCM表示二氯甲烷；Me表示甲基；Et表示乙基；Ac表示乙醯基；Ph表示苯基；BOC或Boc表示第三丁氧基羰基；EDC表示1-乙基-3-(3-二甲基胺基丙基)碳化二亞胺；DBU表示1,8-二氮雜二環十一-7-烯；HOBT或HOBt表示羥基苯并三唑；NCS表示N-氯琥珀醯亞胺；TEA或Et3N表示三乙胺；DIPEA、DIEA或i-Pr2NEt表示二異丙基乙胺；DEA表示二乙胺；DAST表示二乙基胺基三氟化硫；NBS表示N-溴琥珀醯亞胺；TOSMIC表示甲苯磺醯基甲基異腈； DIBAL表示二異丁基氫化鋁；LDA表示二異丙基醯胺鋰；TFA表示三氟乙酸；dppf或DPPF表示1,1’-雙(二苯基膦基)二茂鐵；dba表示二亞苄基二丙酮；n-BuLi表示正丁基鋰；LHMDS或LiHMDS表示六甲基二矽基胺基鋰；TMS表示三甲基矽烷基；且PMB-Cl表示對甲氧基苄基氯。
現在將結合某些實施例來闡述本發明，該等實施例並不意欲限制其範圍。相反，本發明涵蓋可包括在申請專利範圍內之所有替代形式、修改形式及等效形式。因此，以下實例(包括具體實施例)將闡釋本發明之一個實踐，應理解，該等實例係用於闡釋某些實施例之目的且經呈現以提供據信對其程序及概念性態樣之最有用且容易理解之說明。
本發明化合物可利用此部分中所述之反應及技術以及彼等熟習此項技術者已知之其他合成方法來製備。在適於所用試劑及材料且適於所實現轉化之溶劑中實施反應。此外，在下述合成方法之說明中，應理解，所有所提出之反應條件(包括溶劑之選擇、反應溫度、實驗持續時間及處理程序)皆應選擇為該反應之標準條件，熟習此項技術者應容易瞭解該等條件。熟習有機合成技術者應理解，分子各部分上所存在之官能基必須與所提出之試劑及反應相容。熟習此項技術者可容易地明瞭對與反應條件相容之取代基之此等限制且然後必須使用替代方法。
反應圖1：
藉由反應圖1中所概述之方法來製備式9化合物。4-氯菸酸可使用標準條件(例如用草醯氯及甲醇處理)進行酯化。如此獲得之酯2可採用諸如碳酸銫等鹼及諸如Pd(PPh3)4等觸媒在標準Suzuki條件下與諸如氟酸3等適當偶合配偶體之Suzuki交叉偶合反應，如由Zhang、Lei等人(Journal of Medicinal Chemistry,2011,54,1724-1739)所述。聯芳基酯4然後可依照程序(例如彼等由Gowrisankar等人(J.Am.Chem.Soc. 2010,132,11592-11598)所闡述者)經受鈀催化之醚合成，包括彼等熟習此項技術者所熟悉之反應條件。該等反應可使用經適當保護之外消旋或光學胺基醇實施以提供外消旋或光學純醚。由式5代表之聯芳基酯可在標準皂化條件下使用諸如氫氧化鋰等鹼在諸例如水等溶劑中水解以產生相應羧酸6，如Protective Groups in Organic Synthesis(Greene,Wuts；第3版，1999,John Wiley & Sons公司)中所述。可藉由使用諸如EDC、HOBt及氯化銨等標準偶合條件將酸6轉化成醯胺7。醯胺7在諸如THF等溶劑中在惰性氣氛中經諸如氫化鈉等氫化物來源處理後可提供結構受限制之內醯胺8。由8代表之結構受限制之內醯胺醚類似物可使用如Protective Groups in Organic Synthesis(Greene, Wuts；第3版，1999,John Wiley & Sons公司)中所述之適當條件脫除側鏈胺基之保護，以產生由式9代表之化合物。
藉由反應圖2中所概述之方法來製備由式13及14代表之化合物。如反應圖1中所述製備之聯芳基酯4可在標準皂化條件下使用諸如氫氧化鋰或氫氧化鈉等鹼在諸如水等溶劑中水解以產生相應羧酸，如Protective Groups in Organic Synthesis(Greene,Wuts；第3版，1999,John Wiley & Sons公司)中所述，該等羧酸在經諸如EDC、HOBt及氯化銨或經取代之胺等標準醯胺偶合條件處理後可轉化成醯胺10。醯胺10之環化可藉由在諸如THF等溶劑中在惰性氣氛中用諸如氫化鈉等氫化物來源處理來實現，以提供結構受限制之內醯胺氯核心11。氯核心11可依照程序(例如彼等由Gowrisankar等人(J.Am.Chem.Soc.2010,132,11592-11598)所闡述者)使用彼等熟習此項技術者所熟悉之反應條件經受鈀催化之醚合成，以提供由式12代表之化合物。該等反應可使用經適當保護之外消旋或光學純(S)或(R)-胺基醇實施以提供外消旋或光學純醚12。醚類似物可使用如Protective Groups in Organic Synthesis(Greene,Wuts；第3版，1999,John Wiley & Sons公司)中所述之適當條件脫除側鏈胺基之保護，以產生式13化合物。在R2用作保護基團之情況下，可使用如Protective Groups in Organic Synthesis (Greene,Wuts；第3版，1999,John Wiley & Sons公司)中所述之適當條件去除此基團。
藉由反應圖3中所概述之方法來製備由式17及19代表之化合物。如反應圖2中所示合成之結構受限制之內醯胺醚15可採用N-鹵基琥珀醯亞胺在諸如乙腈等極性質子惰性溶劑中在黑暗中鹵化以產生單鹵基(X=鹵基，R3=H)或二鹵基取代之(R3=X=鹵基)醚16。醚16之側鏈可使用如Protective Groups in Organic Synthesis(Greene,Wuts；第3版，1999,John Wiley & Sons公司)中所述之適當條件脫除保護基，以產生式17化合物。另一選擇為，化合物16可在標準Suzuki條件下採用諸如碳酸銫等鹼及諸如Pd(PPh3)4等觸媒與諸如三甲基硼氧環烷或環丙基酸等適當偶合配偶體之鈀偶合(例如Suzuki交叉偶合)反應(如由Zhang、Lei等人(Journal of Medicinal Chemistry,2011,54,1724-1739)所述)，或經受銅催化之氰化反應(如由Miroslav等人(Collection of Czechoslovak Chemical Communications,1983,48,1765-1773)所述)以安置由式18代表之化合物之R4。內醯胺16可使用條件(例如彼等由Punniyamurthy等人(Synthesis,2010,4268-4272)所述者)對銅催化之羥基化反應以提供R4=OH之18。醚類似物18可使用如Protective Groups in Organic Synthesis(Greene,Wuts；第3版，1999,John Wiley & Sons公司)中所述之適當條件脫除側鏈胺基之保護，以產生式19化合物。
由式29代表之化合物可如反應圖4所示製備。使用諸如LiHMDS等鹼及Boc酸酐對20實施Boc-保護產生21。定向鄰位金屬化、之後用二甲基甲醯胺處理可使用方法(例如彼等由Charles等人(J.Med.Chem.,2010,53,3330-3348)所述者)供應吡啶醛衍生物22。該醛然後可在標準Suzuki條件下採用諸如碳酸銫等鹼及諸如Pd(PPh3)4等觸媒與諸如氟酸3等適當偶合配偶體之Suzuki交叉偶合反應(如由Zhang、Lei等人(Journal of Medicinal Chemistry,2011,54,1724-1739)所述)，以得到聯芳基醛23。用甲胺處理聯芳基醛23可提供環狀氟化亞胺24，該環狀氟化亞胺在用諸如KMnO4等試劑氧化後得到內醯胺25。用三氟乙酸處理內醯胺25可提供26，26可使用如Protective Groups in Organic Synthesis(Greene,Wuts；第3版，1999,John Wiley & Sons公司)中所述之適當條件經諸如對甲氧基苄基等基團保護，提供內醯胺27。內醯 胺核心27可依照程序(例如彼等由Gowrisankar等人(J.Am.Chem.Soc.2010,132,11592-11598)所述者)使用彼等熟習此項技術者所熟悉之反應條件經受鈀催化之醚合成，以提供由式28代表之化合物。醚類似物可使用如Protective Groups in Organic Synthesis(Greene,Wuts；第3版，1999,John Wiley & Sons公司)中所述之適當條件完全脫除側鏈胺基之保護，以產生化合物29。
由式39代表之化合物可如反應圖5中所示製備。用NBS溴化30、之後用乙醯氯及吡啶醯化可供應溴化物31。在標準Suzuki條件下採用諸如碳酸鈉等鹼及諸如Pd(PPh3)4等觸媒實施溴化物31與乙烯基酸酸酐吡啶複合物之Suzuki交叉偶合(如由Zhang、Lei等人(Journal of Medicinal Chemistry,2011,54,1724-1739)所述)可供應乙烯基吡啶32。乙烯基吡啶32可使用四氧化鋨及偏高碘酸鈉氧化以產生相應醛33，然後可在標準Suzuki條件下採用諸如碳酸銫等鹼及諸如Pd(PPh3)4等觸媒與諸如氟酸3等適當偶合配偶體之Suzuki交叉偶合反應(如由Zhang、Lei等人(Journal of Medicinal Chemistry,2011,54,1724-1739)所述)，以得到聯芳基醛34。用甲胺處理聯芳基醛34可產生環狀 氟化亞胺35，35可藉由使用諸如硼氫化鈉等試劑還原成結構受限制之相應六氫吡啶36。結構受限制之六氫吡啶36在用KMnO4氧化後可得到內醯胺37。內醯胺核心37可依照程序(例如)彼等由Gowrisankar等人(J.Am.Chem.Soc.2010,132,11592-11598)所述者)使用彼等熟習此項技術者所熟悉之反應條件經受鈀催化之醚合成，以提供由式38代表之化合物。醚類似物可使用如Protective Groups in Organic Synthesis(Greene,Wuts；第3版，1999,John Wiley & Sons公司)中所述之適當條件脫除側鏈胺基之保護，以產生化合物39。
藉由反應圖6中所概述之方法製備由式42-46代表之化合物。如反應圖2中所示合成之結構受限制之內醯胺醚40可藉由採用N-鹵基琥珀醯亞胺在諸如乙腈等極性質子惰性溶劑中在黑暗中鹵化，以產生單鹵基(X=鹵基，R3=H)或二鹵基取代之(R3=X=鹵基)醚41。化合物41可在標準Suzuki條件下採用諸如碳酸銫等鹼及諸如Pd(PPh3)4等觸媒與諸如三甲基硼氧環烷、乙烯基酸或環丙基酸等適當偶合配偶體 之鈀偶合(例如Suzuki交叉偶合)反應(如由Zhang、Lei等人(Journal of Medicinal Chemistry,2011,54,1724-1739)所述)，或經受銅催化之氰化反應(如由Miroslav等人(Collection of Czechoslovak Chemical Communications,1983,48,1765-1773)所述)，以安裝由式42代表之化合物之R4。另一選擇為，內醯胺41可使用條件(例如彼等由Punniyamurthy等人(Synthesis,2010,4268-4272)所述者)對銅催化之羥基化反應以提供R4=OH之42。在R4=乙烯基之中間體42之情況下，用諸如四氧化鋨及高碘酸鈉等試劑氧化裂解乙烯基可提供醛44。醛可藉由用Deoxo-Fluor®處理轉化成二氟甲基類似物45。若R1含有受保護之胺基或另一官能基，則藉由用如Protective Groups in Organic Synthesis(Greene,Wuts；第3版，1999,John Wiley & Sons公司)中所述之適當試劑處理該受質來去除類似物42及45中之保護基團，以分別產生式43及46之化合物。
藉由反應圖7中所概述之方法製備由式47及48代表之化合物。如反應圖6中所示合成之醛44可經過TOSMIC及諸如碳酸鉀等鹼處理， 以提供噁唑47。另一選擇為，醛44可在諸如EtOH或MeOH等溶劑中用諸如硼氫化鈉或硼氫化鋰等試劑還原以產生由式48代表之化合物。若R1含有受保護之胺基或另一官能基，則藉由用如Protective Groups in Organic Synthesis(Greene,Wuts；第3版，1999,John Wiley & Sons公司)中所述之適當試劑處理該受質來去除該保護基團以提供式47及48之脫除保護基之化合物。
藉由反應圖8概述之方法製備由式52-53代表之化合物。如上文反應圖中所示合成之結構受限制之內醯胺醚49可採用N-鹵基琥珀醯亞胺在諸如乙腈等極性質子惰性溶劑中在黑暗中鹵化，以產生鹵基醚50。化合物50可在標準Suzuki條件下，採用諸如碳酸銫等鹼及諸如Pd(PPh3)4等觸媒與諸如乙烯基酸等適當偶合配偶體進行鈀偶合(例 如Suzuki交叉偶合)反應(如由Zhang、Lei等人(Journal of Medicinal Chemistry,2011,54,1724-1739)所述)，或在標準Stille條件下，採用諸如參(二亞苄基丙酮)二鈀等觸媒及諸如DPPF等配體，在升高溫度下與諸如三丁基(1-乙氧基乙烯基)錫烷之適當偶合配偶體進行Stille偶合，提供由式51代表之化合物。51之乙烯基可在碳載鈀存在下氫化，以提供由式52代表之化合物。另一選擇為，若R係烷氧基，則51可用諸如HCl等酸水溶液水解，以提供由式53代表之酮化合物。若R1含有受保護之胺基或另一官能基，則藉由用如Protective Groups in Organic Synthesis(Greene,Wuts；第3版，1999,John Wiley & Sons公司)中所述之適當試劑處理該受質，去除保護基團，以提供式52及53之脫除保護基之化合物。
藉由反應圖9中所概述之方法製備由式54代表之化合物。如反應圖8中所示合成之結構受限制之內醯胺醚53可在諸如乙醚或THF等溶劑中用Grignard試劑處理以提供由式54代表之化合物。若R1含有受保護之胺基或另一官能基，則藉由用如Protective Groups in Organic Synthesis(Greene,Wuts；第3版，1999,John Wiley & Sons公司)中所述之適當試劑處理該受質來去除保護基團以提供式54之脫除保護基之化合物。
反應圖10：
藉由反應圖10中所概述之方法製備由式56-58代表之化合物。如反應圖8中所示合成之結構受限制之內醯胺醚50可採用標準Negishi偶合使用Zn(CN)2及諸如Pd(PPh3)4等觸媒在諸如DMF等觸媒中或使用CuCN在50℃至120℃範圍中之溫度下氰化以產生由式55代表之化合物。腈化合物55可在升高溫度下用HCl水溶液水解，之後利用亞硫醯氯或草醯氯形成酯，之後用醇淬滅，以提供由式57代表之化合物。另一選擇為，腈化合物55可藉由採用諸如碳酸銫等鹼在諸如DMF等溶劑中在100-120℃範圍內之溫度下水解成醯胺以提供由式58代表之化合物。若R1含有受保護之胺基或另一官能基，則藉由用如Protective Groups in Organic Synthesis(Greene,Wuts；第3版，1999,John Wiley & Sons公司)中所述適當試劑處理該受質來去除保護基團以提供式56-58之化合物。
反應圖11：
藉由反應圖11中所概述之方法製備由式60-62代表之化合物。如反應圖8中所示反應圖合成之結構受限制之內醯胺醚50可藉由採用碘化銅(I)及三甲基(三氟甲基)矽烷在諸如NMP等溶劑中在高溫下由銅催化之三氟甲基化以提供由式59代表之化合物。另一選擇為，鹵基化合物50可採用碘化銅(I)、1H-吡唑、N1,N2-二甲基乙烷-1,2-二胺及諸如磷酸鉀等鹼在諸如DMF及1,4-二噁烷等溶劑中在高溫下由銅催化之偶合以提供由式60代表之化合物。另一選擇為，鹵基化合物50可採用碘化銅(I)、L-脯胺酸、甲醇鈉及諸如碳酸鉀等鹼在諸如DMSO等溶劑中在升高溫度下由銅催化之甲氧基化以提供由式61代表之化合物。另一選擇為，鹵基化合物50可採用碘化銅(I)、L-脯胺酸、甲烷亞磺酸鈉鹽及諸如氫氧化鈉等鹼在諸如DMSO等溶劑中在升高溫度下由銅催化之次硫酸化(sulfoxylation)以提供由式62代表之化合物。若R1含有受保護之胺基或另一官能基，則藉由用如Protective Groups in Organic Synthesis(Greene,Wuts；第3版，1999,John Wiley & Sons公司)中所述之適當試劑處理該受質來去除保護基團以提供式60-62化合物。
藉由反應圖12所概述之方法製備由式65代表之中間體。如反應圖2中所述製備之聯芳基醯胺11可在諸如DCM等溶劑中用m-CPBA氧化以提供由式63代表之化合物。中間體63可用POCl3處理、之後在甲醇中用甲醇鈉處理，以提供由式65代表之中間體。
藉由反應圖13中所概述之方法製備由式67代表之中間體。如反應圖2中所述製備之聯芳基醯胺11可在諸如AcOH等溶劑中用二氧化硒氧化以提供由式66代表之化合物。中間體66可在諸如DCM等溶劑中用雙-(2-甲氧基乙基)胺基三氟化硫處理以提供由式67代表之中間體。
反應圖14：
藉由反應圖14中所概述之方法製備由式68代表之中間體。如反應圖1中所述製備之聯芳基醯胺8可在諸如NaH或碳酸鉀等鹼存在下在諸如DMF等溶劑中用鹵代烷烷基化，或在R1=CH2CH2OH之情況下，該醯胺可在18-冠-6及諸如碳酸鉀等鹼存在下經受碳酸乙酯，以提供由式68代表之中間體。
藉由反應圖15中所概述之方法製備由式71及72代表之中間體。如反應圖2中所述製備之聯芳基醯胺11可藉由採用N-鹵基琥珀醯亞胺在諸如乙腈等極性質子惰性溶劑中在黑暗中鹵化以產生鹵化物69。化合物69可在1,10-啡啉存在下用碘化銅(I)及氫氧化鉀處理以提供由式70代表之中間體。中間體70可用2-氯-2,2-二氟乙酸鈉及諸如碳酸鉀等 鹼處理以提供由式71代表之中間體。另一選擇為，化合物70可在諸如DMF等溶劑中用諸如氫化鈉等鹼及諸如碘甲烷等烷基化試劑處理以提供由式72代表之中間體。
藉由反應圖16中所概述之方法製備由式74及75代表之化合物。如反應圖2中所述製備之中間體73可在諸如DMF等溶劑中用碘甲烷及諸如氫化鈉等鹼烷基化，之後用TFA或HCl脫除保護基，以提供式74化合物。另一選擇為，中間體73可用TFA或HCl脫除保護基，之後在甲酸中用甲醛處理以提供式75化合物。
反應圖17：
藉由反應圖17中所概述之方法製備中間體80。中間體80可藉由在諸如THF等溶劑中在低溫下用TMS-重氮甲烷處理或藉由用亞硫醯氯或草醯氯將該酸轉化成醯基氯並用諸如MeOH或EtOH等醇淬滅來酯化以提供酯77。
中間體77可在2,6-二甲基吡啶存在下在諸如1,4-二噁烷及水等溶劑中經受四氧化鋨及高碘酸鈉以提供中間體78。中間體78可用DAST處理以提供中間體79。中間體79可在諸如THF等溶劑中用諸如氫化鋰鋁或硼氫化鋰試劑還原以提供中間體80。
中間體83製備藉由反應圖18中所概述之方法。中間體81可藉由在EtOH中用HCl處理來酯化以提供酯82。中間體82可在諸如THF等溶劑中用諸如氫化鋰鋁或硼氫化鈉等試劑還原以提供中間體83。
反應圖19：
藉由反應圖19中所概述之方法製備中間體90。中間體84可藉由在MeOH中用TMSCl處理來酯化以提供酯85。中間體85可在諸如乙腈等溶劑中用Boc2O及DMAP處理以提供中間體86。中間體86可在諸如THF或乙醚等溶劑中用諸如DIBAL等試劑還原以提供中間體87。中間體87可藉由在乙腈中用LiBr處理，脫除單一保護基，提供中間體88。中間體88可在DMF中經受2-氯-2,2-二氟乙酸鈉以提供中間體89。中間體89可在THF中用LiBH4還原以提供中間體90。
使用反應圖1-19合成之各種類似物列示於表1中。所選化合物之AAK1功能效能列示為IC50範圍，其中a=<1nM；b=1-10nM；c=10.01-100nM；d=100.01-2000nM。
在以下實例中，在Bruker 400或500MHz NMR譜儀上記錄質子NMR譜。化學位移係相對於四甲基矽烷以δ值報告。在耦合至Waters Micromass ZQ之Shimadzu LC中運行LC/MS。HPLC滯留時間係使用以下方法中之至少一種獲得：
LC-MS方法：
LC/MS方法A：管柱：PUROSPHER@star RP-18(4×55mm),3μm；緩衝液：20mM存於水中之NH4OAC；M相A：緩衝液+ACN(90+10)；M相B：緩衝液+MeCN(10+90)；流速2.5mL/min
LC/MS方法B：管柱：ZORBAX SB C18(46×50mm),5μm；陽性模式M相A：10% MeOH-90% H2O-0.1% TFA；M相B：90% MeOH-10% H2O-0.1% TFA；流速5mL/min
LC/MS方法C：管柱-Ascentis Express C8(5×2.1mm),2.7μm；M相A：2%MeCN-98%H2O-10mM NH4COOH；M相B： 98%ACN-2%H2O-10mM NH4COOH；流速1mL/min
LC/MS方法D：管柱-ACQUITY UPLC BEH C18(2.1×50mm),1.7μm；M相A：0.1%存於水中之TFA；M相B：1%存於ACN中之TFA；流速1/min
LC/MS方法E：管柱-ACQUITY UPLC BEH C18(2.1×50mm),1.7μm；M相A：5mM NH4OAc：ACN(95：5)；M相B：5mM NH4OAc：ACN(5：95)；流速1/min
LC/MS方法F：管柱：X-Bridge BEH C18(50×2.1mm),2.5μm；M相A：ACN+H2O(2+98)+0.1% TFA；M相B：ACN+H2O(98+2)+0.05% TFA；流速1.2mL/min.
LC-MS方法G：管柱：Kinetex C18(50×2.1mm)、2.6um：M相A：2%ACN-98%H2O-10mM；M相B：98%ACN-2%H2O-10mM NH4COOH；流速1/min。
LC-MS方法H：管柱：BEH C18(50×3.0mm),1.7μm：M相A：5%ACN-95%H2O-10mM；M相B：95%ACN-5%H2O-10mM NH4COOH；流速1.2/min。
LC-MS方法I：管柱：Ace Excel 2 C18(50×3.0mm),2.0μm：M相A：2%ACN-98%H2O-10mM；M相B：98%ACN-2%H2O-10mM NH4COOH；流速1.2/min.
對掌性HPLC方法：
方法A：CHIRALCEL OJH(250×4.6)mm5微米
流動相：0.2%存於正己烷：乙醇(80：20)中之DEA
方法B：CHIRALPAK AD-H(250×4.6)mm5微米
流動相A：0.2%存於(70)B：乙醇(30)中之DEA
方法C：CHIRALPAK-ASH(250×4.6)mm5微米
流動相A：0.2%存於正己烷：乙醇(90：10)中之DEA
分析型HPLC方法：
方法A：Waters分析型C18 sunfire管柱(4.6×150mm,3.5μm)；流動相：
緩衝液：0.05%存於H2O中之TFA，pH=2.5，用氨調節
A=緩衝液及乙腈(95：5)，B=乙腈及緩衝液(95：5)；0-15min,0% B→50% B；15-18min,50% B→100% B；18-23min,100% B；流速=1mL/min；λ=254nm及220nm；運行時間=28min。
方法B：Waters分析型phenyl xbridge管柱(4.6×150mm,3.5μm)，流動相：緩衝液：0.05%存於H2O中之TFA，pH=2.5，用氨調節
A=緩衝液及乙腈(95：5)，B=乙腈及緩衝液(95：5)；0-15min,0% B→50% B；15-18min,50% B→100% B；18-23min,100% B；流速=1mL/min；λ=254nm及220nm；運行時間=28min。
方法C：Waters分析型C18 sunfire管柱(3.0×150mm,3.5μm)；流動相：A=10mM碳酸氫銨(pH=9.5)/95% H2O/5%甲醇，B=10mM碳酸氫銨(pH=9.5)/5% H2O/95%甲醇；0-15min,0% B→100% B；15-18min,100% B；流速=1mL/min；λ=254nm；運行時間=18min。
方法D：Waters分析型phenyl xbridge管柱(3.0×150mm,3.5μm，流動相：A=10mM碳酸氫銨(pH=9.5)/95% H2O/5%甲醇，B=10mM碳酸氫銨(pH=9.5)/5% H2O/95%甲醇；0-15min,0% B→100% B；15-18min,100% B；流速=1mL/min；λ=254nm，運行時間=18min。
實例1
(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A. 4-氯菸酸甲酯
用草醯氯(27.8mL,317mmol)逐滴處理冷卻至0℃之4-氯菸酸(20g,127mmol)存於二氯甲烷(600mL)及DMF(15mL)中之溶液。在添加後，在RT下將混合物再攪拌2h。然後將混合物冷卻回0℃並緩慢添加MeOH(30mL)。使反應升溫至RT並攪拌0.5h。用二氯甲烷(500mL)及飽和NaHCO3水溶液(100mL)稀釋混合物，然後用DCM(3×1000mL)萃取。用鹽水(2×100mL)洗滌DCM層，經硫酸鈉乾燥且在減低壓力下濃縮。將所得呈黃色油狀物之粗製產物(20g,92%產率)不進一步純化即取用於下一步驟。LC/MS(ESI)m/e 172.0[(M+H)+，計算值C7H7ClNO2：172.6]；LC/MS滯留時間(方法B)：t R=1.21min.1H NMR(400MHz,CDCl 3 )δ ppm 9.27(s,1H),8.86(bs,1H),7.98(bs,1H),4.05(s,3H)。
部分B. 4-(4-氯-2-氟苯基)菸酸甲酯
將4-氯菸酸甲酯(20g,117mmol)、(4-氯-2-氟苯基)酸(22.4g,128mmol)、Pd(Ph3P)4(9.4g,8.16mmol)及Cs2CO3(114g,350mmol)吸入1,4-二噁烷(400mL)與水(30mL)之溶劑混合物中並用氮吹掃5min且加熱至85℃。在此溫度下攪拌過夜後，用乙酸乙酯稀釋反應混 合物並經由矽藻土床(Celite®)過濾。用乙酸乙酯進一步洗滌床。用水(1×100mL)洗滌合併的濾液，乾燥(Na2SO4)且在減低壓力下濃縮，以提供粗製產物，經由combi flash(甲醇及氯仿之梯度)純化該粗製產物，以提供呈棕色固體之4-(4-氯-2-氟苯基)菸酸甲酯(13g,48.9mmol,42%，純度為77%，藉由LC/MS測定)。LC/MS(ESI)m/e 266.0[(M+H)+，計算值C13H10ClFNO2 266.1]；LC/MS滯留時間(方法B)：t R=1.69min。
部分C. (S)-4-(4-((2-((第三丁氧基羰基)胺基)-4-甲基戊基)氧基)-2-氟苯基)菸酸甲酯
用碳酸銫(92mg,0.282mmol)及N-Boc-L-白胺醇(121mg,0.565mmol)處理存於甲苯(1mL)中之(4-氯-2-氟苯基)菸酸甲酯(50mg,0.188mmol)。用氮氣將混合物吹掃5min並用二第三丁基(2',4',6'-三異丙基-[1,1'-聯苯]-2-基)膦(48.0mg,0.113mmol)處理。在用氮將混合物再吹掃5min後，添加乙酸鈀(II)(42.3mg,0.188mmol)且再使氮鼓泡經過10min。將混合物緊密地密封且在80℃下加熱12h。經由矽藻土床(Celite®)將混合物過濾並用乙酸乙酯(2×3mL)洗滌。在減低壓力下濃縮洗滌物。藉由combi flash(乙酸乙酯及石油醚)純化殘餘物以提供(S)-4-(4-((2-((第三丁氧基羰基)胺基)-4-甲基戊基)氧基)-2-氟苯基)菸酸甲酯(50mg,0.112mmol,60%產率)。LC/MS(ESI)m/e 447.2[(M+H)+，計算值C24H32FN2O5 447.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=2.17min。
部分D. (S)-4-(4-((2-((第三丁氧基羰基)胺基)-4-甲基戊基)氧基)-2-氟苯基)菸酸
將(S)-4-(4-((2-((第三丁氧基羰基)胺基)-4-甲基戊基)氧基)-2氟苯基)菸酸甲酯(50.0mg,0.112mmol)吸入四氫呋喃(1mL)、甲醇(1mL)及水(1mL)之混合物中。向該溶液中添加氫氧化鋰(8.05mg,0.336mmol)且在RT下將反應混合物攪拌2h。在減低壓力下濃縮反應混合物且用水稀釋殘餘物並使用1.5N HCl水溶液將pH調節至4。用乙酸乙酯(3×5mL)萃取來自水層之粗製產物。用鹽水(1×5mL)洗滌合併的有機層，乾燥(Na2SO4)且在減低壓力下濃縮，以提供呈灰白色固體之(S)-4-(4-((2-((第三丁氧基羰基)胺基)-4-甲基戊基)氧基)-2-氟苯基)菸酸(30mg,0.060mmol,53%產率)。LC/MS(ESI)m/e 433.2[(M+H)+，計算值C23H30FN2O5 433.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.74min。
部分E. (S)-(1-(4-(3-胺基甲醯基吡啶-4-基)-3-氟苯氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
將(S)-4-(4-((2-((第三丁氧基羰基)胺基)-4-甲基戊基)氧基)-2-氟苯基)菸酸(75mg,0.173mmol)吸入DMF(2mL)中並冷卻至0℃。向該溶液中添加EDC(49.9mg,0.260mmol)及HOBT(53.1mg,0.347mmol)。在將反應混合物攪拌5min後，添加氯化銨(55.7mg,1.040mmol)並將所得混合物攪拌5min。添加二異丙基乙胺(0.121mL,0.694mmol)且 在室溫下將混合物再攪拌12h。然後用冰淬滅混合物並將殘餘物過濾且在真空中乾燥，以提供呈淡黃色固體之(S)-(1-(4-(3-胺基甲醯基吡啶-4-基)-3-氟苯氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(50mg,0.098mmol,57%產率)。LC/MS(ESI)m/e 432.2[(M+H)+，計算值C23H31FN3O4 432.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.83min。
部分F. (S)-(4-甲基-1-((5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
將氫化鈉(5.56mg,0.232mmol,60%，存於礦物油中)吸入四氫呋喃(1mL)中並冷卻至0℃。用存於THF(1mL)中之(S)-(1-(4-(3-胺基甲醯基吡啶-4-基)-3-氟苯氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(50mg,0.116mmol)逐滴處理懸浮液且使溫度在0℃下維持30min。然後使反應混合物升溫至室溫並攪拌2h。用冰淬滅反應並用乙酸乙酯(3×5mL)萃取。用鹽水(1×5mL)洗滌合併的有機層，乾燥(Na2SO4)且在減低壓力下濃縮，以提供呈無色固體之(S)-(4-甲基-1-((5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(40mg,0.097mmol,84%產率)。LC/MS(ESI)m/e 412.2[(M+H)+，計算值C23H30N3O4 412.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.97min。
部分G. (S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮 將存於二氯甲烷(1mL)中之(S)-(4-甲基-1-((5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(10mg,0.024mmol)冷卻至0℃。向該溶液中逐滴添加氯化氫(0.886mg,0.012mL,0.024mmol,2M，存於乙醚中)。使反應混合物之溫度在0℃下維持30min且然後使反應混合物升溫至室溫並攪拌2h。然後在減低壓力下濃縮反應混合物，以提供呈淡黃色固體之(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(4mg,0.012mmol,49%產率)。LC/MS(ESI)m/e 312.2[(M+H)+，計算值C18H22N3O2 312.2]；LC/MS滯留時間(方法A)：t R=1.1min；HPLC滯留時間(方法A)：t R=6.85min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=7.51min 1H NMR(400MHz,D 2 O)δ ppm 9.30(br.s.,1H),8.77(br.s.,1H),8.36(br.s.,1H),8.07(br.s.,1H),6.95(br.s.,1H),6.72(br.s.,1H),4.41(d,J=9.03Hz,1H),4.26(br.s.,1H),3.89(br.s.,1H),3.38(s,1H),1.72-1.88(m,2H),1.05(d,J=2.51Hz,6H)。
實例2
(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A. 4-(4-氯-2-氟苯基)菸酸
向冷卻至0℃之4-(4-氯-2-氟苯基)菸酸甲酯(15g,56.5mmol)(如實例1部分B中所製備)存於甲醇(150mL)與水(150mL)之溶劑混合物中之溶液中添加氫氧化鈉(9.03g,226mmol)並使混合物升溫至室溫且 攪拌1h。在減低壓力下濃縮反應混合物且使用1.5N鹽酸將所得水溶液之pH調節至PH=4，在此期間，產物呈固體析出。過濾混合物提供呈灰白色固體之4-(4-氯-2-氟苯基)菸酸(9g,35.8mmol,63%產率)。LC/MS(ESI)m/e 252.0[(M+H)+，計算值C12H8ClFNO2 252.1]；LC/MS滯留時間(方法A)：t R=0.97min。
部分B. 4-(4-氯-2-氟苯基)-N-甲基菸醯胺
向冷卻至0℃之4-(4-氯-2-氟苯基)菸酸(2g,7.95mmol)存於二氯甲烷(40mL)中之溶液中添加草醯氯(2.09mL,23.8mmol)、之後DMF(2mL)。使反應混合物升溫至室溫並攪拌2h。在減低壓力下濃縮反應混合物且用二氯甲烷(25mL)處理。將此溶液添加至冷卻至0℃之鹽酸甲胺(5.37g,79mmol)及三乙胺(11.08mL,79mmol)存於二氯甲烷(25mL)中之混合物中。在室溫下將所得混合物攪拌3h且然後用碳酸氫鈉飽和溶液洗滌。分離有機層，乾燥(Na2SO4)且在減低壓力下濃縮，以提供呈灰白色固體之4-(4-氯-2-氟苯基)-N-甲基菸醯胺(1.3g,4.91mmol,62%)。LC/MS(ESI)m/e 265.1[(M+H)+，計算值C13H11ClFN2O 265.1]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.69min。
部分C. 8-氯-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
將氫化鈉(80mg,3.32mmol)吸入THF(1mL)中且冷卻至0℃。向懸浮液中逐滴添加存於THF(1mL)中之4-(4-氯-2-氟苯基)-N-甲基菸醯胺(440mg,1.66mmol)且使溫度在0℃下維持30min。然後使反應混合 物升溫至室溫並攪拌2h。用冰淬滅反應混合物並用乙酸乙酯(3×5mL)萃取。用鹽水(1×5mL)洗滌合併的有機層，乾燥(Na2SO4)且在減低壓力下濃縮，以提供呈淡棕色油狀物之8-氯-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(440mg,1.798mmol)。LC/MS(ESI)m/e 245.1[(M+H)+，計算值C13H10ClN2O 245.1]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.79min。
部分D. (S)-(4-甲基-1-((6-甲基-5-側氧基-5,6二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
在室溫下向8-氯-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(440mg,1.80mmol)存於甲苯(8mL)中之溶液中添加碳酸銫(879mg,2.70mmol)及二第三丁基(2',4',6'-三異丙基-[1,1'-聯苯]-2-基)膦(458mg,1.079mmol)且將混合物脫氣5min。然後用N-Boc L-白胺醇(1160mg,5.39mmol)、之後用乙酸鈀(II)(121mg,0.54mmol)處理混合物並將混合物再脫氣10min。將反應混合物密封且在80℃下加熱。在攪拌過夜後，將反應混合物冷卻至室溫且經由矽藻土(Celite®)過濾。用乙酸乙酯洗滌床且在減低壓力下濃縮合併的濾液，以提供粗製產物，藉由combi flash(乙酸乙酯及石油醚之梯度)純化該粗製產物，以提供呈灰白色固體之(S)-(4-甲基-1-((6-甲基-5-側氧基-5,6二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(190mg,0.34mmol,19%產率)。LC/MS(ESI)m/e 426.2[(M+H)+，計算值C24H32N3O4 426.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=2.10min。
部分E. (S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
在0℃下向(S)-(4-甲基-1-((6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(190mg,0.447mmol)存於二氯甲烷(4mL)中之溶液中逐滴添加存於1,4-二噁烷(4M)中之氯化氫(81mg,0.558mL,2.233mmol)且在0℃下將反應混合物攪拌30min，然後升溫至室溫且攪拌2h。在減低壓力下去除溶劑，以提供粗製產物，藉由製備型HPLC(0.1% TFA，存於水中)純化該粗製產物，以提供呈黃色固體之(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(51mg,0.157mmol,35%產率)。LC/MS(ESI)m/e 326.2[(M+H)+，計算值C19H24N3O2 326.2]；LC/MS滯留時間(方法A)：t R=1.21min；HPLC滯留時間(方法A)：t R=7.39min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=7.40min。1H NMR(400MHz,CD 3 OD)δ ppm 9.48(s,1H),8.77(d,J=5.77Hz,1H),8.43(d,J=8.78Hz,1H),8.26(d,J=5.77Hz,1H),7.09-7.16(m,2H),4.20(dd,J=9.41,3.89Hz,1H),4.02(dd,J=9.29,7.03Hz,1H),3.81(s,3H),3.35-3.39(m,1H),1.81-1.91(m,1H),1.41-1.56(m,2H),0.98-1.05(m,6H)。
實例3
(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-9-溴-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A. (S)-(1-((9-溴-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
向(S)-(4-甲基-1-((6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(0.100g,0.235mmol)(如實例2部分D中製備)存於無水乙腈(5mL)中之溶液中添加N-溴琥珀醯亞胺(0.042g,0.235mmol)且在85℃下將混合物加熱5h。用水(10mL)稀釋反應混合物，用乙酸乙酯(2×20mL)萃取。經硫酸鈉乾燥合併的有機層且在減低壓力下蒸發，以提供粗製產物，藉由製備型TLC(乙酸乙酯及石油醚之梯度)純化該粗製產物，以提供呈灰白色固體之(S)-(1-((9-溴-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(80mg,0.159mmol,68%產率)。LC/MS(ESI)m/e 504.2[(M+H)+，計算值C24H31BrN3O4 504.1]；LC/MS滯留時間(方法A)：t R=2.23min。
部分B. (S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-溴-6-甲基苯并[c][2,7] 萘啶-5(6H)-酮
在0℃下向(S)-(1-((9-溴-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(80mg,1.586mmol)存於無水甲醇(5mL)中之溶液中逐滴添加HCl存於1,4-二噁烷(2mL,8mmol)中之4M溶液。使反應混合物升溫至室溫並攪拌2h。然後在減低壓力下濃縮混合物，以提供粗製產物，藉由製備型HPLC(10mM乙酸銨，存於水：乙腈中)純化該粗製產物，以提供呈灰白色固體之(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-溴-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(20mg,0.049mmol,30%產率)。LC/MS(ESI)m/e 404.1[(M+H)+，計算值C19H23BrN3O2 404.1]；LC/MS滯留時間(方法A)：t R=1.47min；HPLC滯留時間(方法A)：t R=9.55min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=10.23min；1H NMR(400MHz,CD 3 OD)δ ppm 9.48(s,1H),8.80(d,J=5.77Hz,1H),8.67(s,1H),8.26(d,J=5.77Hz,1H),7.15(s,1H),4.37(dd,J=9.54,3.76Hz,1H),4.18(dd,J=9.66,6.40Hz,1H),3.83(s,3H),3.48-3.56(m,1H),1.89(m,1H),1.51-1.72(m,2H),1.05(t,J=6.27Hz,6H)。
實例4
(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-6,9-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A. (S)-(1-((6,9-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
在10mL圓底燒瓶中，將(S)-(1-((9-溴-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(如實例3部分A中所製備)(150mg,0.297mmol)、2,4,6-三甲基-1,3,5,2,4,6-三氧雜三硼雜環己烷(41.1mg,0.327mmol)、Cs2CO3(291mg,0.892mmol)及PdCl2(dppf)(21.76mg,0.030mmol)吸收於1,4-二噁烷(2mL)與水(0.1mL)之混合物中。用氮將反應混合物吹掃5min且在90℃下加熱15h。在減低壓力下去除1,4-二噁烷且將殘餘物溶解於乙酸乙酯(20mL)中。用水(10×2mL)洗滌乙酸乙酯層並經硫酸鈉乾燥。去除溶劑得到粗製產物(0.08g)，經由矽膠管柱(24g矽膠，MeOH-CHCl3混合物)過濾該粗製產物。分離呈灰白色固體之產物(0.05g,0.11mmol,38%產率)。LC/MS(ES-API)m/e 440.2[(M+H)+，計算值C25H34N3O4,440.3]；LC/MS滯留時間(方法B)：t R=1.95min。
部分B. (S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-6,9-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
在25mL圓底燒瓶中，將(S)-(1-((6,9-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(80mg,0.182mmol)吸入MeOH(6mL)中。將反應混合物冷卻至0℃並添加HCl存於1,4-二噁烷(3.75mL,12mmol)中之4M溶液且在RT下將混合物攪拌2h。去除MeOH且將粗製產物溶解於乙酸乙酯(20mL)中。用水(10mL)洗滌乙酸乙酯層並經硫酸鈉乾燥。去除溶劑得到粗製產物， 藉由矽膠管柱(MeOH-CHCl3混合物)純化該粗製產物，以提供呈黃色固體之(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-6,9-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(0.03g,0.09mmol,49%產率)。LC/MS(ESI)m/e 340.2[(M+H)+，計算值C20H26N3O2,340.4]；LC/MS滯留時間(方法B)：t R=1.33min。HPLC滯留時間(方法A)：t R=8.58min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=8.12min。1H NMR(400MHz,CD 3 OD)δ ppm 9.51(s,1H),8.79(d,J=6.02Hz,1H),8.40(d,J=5.77Hz,1H),8.33(s,1H),7.10(s,1H),4.50(dd,J=10.67,3.14Hz,1H),4.36(dd,J=10.67,5.90Hz,1H),3.77-3.87(m,4H),2.46(s,3H),1.79-1.92(m,2H),1.66-1.77(m,1H),1.08(dd,J=6.27,4.02Hz,6H)。
實例5
(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-6-甲基-5-側氧基-5,6二氫苯并[c][2,7]萘啶-9-甲腈
部分A. (S)-(1-((9-氰基-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
在25mL密封管中，將(S)-(1-((9-溴-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(150 mg,0.297mmol)(如實例3部分A中所製備)吸收於DMA(4mL)中。向此混合物中添加CuCN(53.3mg,0.595mmol)且在150℃下將混合物加熱24h。將反應混合物冷卻至室溫並用乙酸乙酯(20mL)稀釋且經由矽藻土(Celite®)過濾。用鹽水(10mL)及水(10mL)洗滌乙酸乙酯溶液。經硫酸鈉乾燥有機層且在減低壓力下濃縮，以提供呈膠狀固體之粗製產物，該粗製產物不進一步純化即繼續使用。LC/MS(ESI)m/e 451.2[(M+H)+，計算值C25H31N4O4,451.5]；LC/MS滯留時間(方法B)：t R=2.02min。
部分B. (S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-6-甲基-5-側氧基-5,6二氫苯并[c][2,7]萘啶-9-甲腈
在25mL圓底燒瓶中，將(S)-(1-((9-氰基-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(75mg,0.167mmol)吸收於MeOH(4mL)中並冷卻至0℃。用HCl存於1,4-二噁烷(2mL,8mmol)中之4M溶液處理混合物並在RT下攪拌2h。去除MeOH且將粗製產物溶解於EtOAc(20mL)中。用水(2×10mL)洗滌乙酸乙酯層且經硫酸鈉乾燥。去除溶劑得到粗製產物，藉由矽膠管柱(MeOH-CHCl3混合物)純化該粗製產物，獲得呈黃色固體之(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-6-甲基-5-側氧基-5,6二氫苯并[c][2,7]萘啶-9-甲腈(4mg,0.01mmol,7%產率，經2個步驟)。LC/MS(ESI)m/e 351.2.[(M+H)+，計算值C20H23N4O2,351.4]；LC/MS滯留時間(方法B)：t R=1.43min。HPLC滯留時間(方法A)：t R=9.69min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=9.31min。1H NMR(400MHz,CD 3 OD)δ ppm 9.56(bs,1H),8.93(s,2H),8.37(d,J=4.77Hz,1H),7.25(s,1H),4.63(dd,J=10.67,3.14Hz,1H),4.47(dd,J=10.79,6.02Hz,1H),3.81-3.89(m,4H),1.83-1.91(m,2H),1.72(t,J=6.53Hz,1H),1.08(d,J=5.02Hz,6H)。
實例6
(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-環丙基-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A：(S)-(1-((9-環丙基-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
用氮將(S)-(1-((9-溴-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(150mg,0.297mmol)(如實例3部分A中所製備)、環丙基酸(28.1mg,0.327mmol)、肆(三苯基膦)鈀(17.2mg,0.015mmol)及Cs2CO3(291mg,0.892mmol)存於甲苯(5mL)及水(0.43mL)混合物中之混合物吹掃5min，然後在90℃下加熱過夜(16h)。在冷卻後，在減低壓力下去除甲苯且用乙酸乙酯(20mL)萃取產物。用鹽水(2×20mL)洗滌有機相，經Na2SO4乾燥且在減低壓力下濃縮。藉由矽膠管柱層析(EtOAc-己烷)純化殘餘物，以提供呈灰白色膠狀固體之(S)-(1-((9-環丙基-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫 苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(70mg,0.150mmol,51%產率)。LC/MS(ESI)m/z 466.4[(M+H)+，計算值C27H36N3O4 466.3]；LC/MS滯留時間(方法E)：t R=1.19min。
部分B：(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-環丙基-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
在0℃下向(S)-(1-((9-環丙基-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(60mg,0.129mmol)存於MeOH(4mL)中之溶液中添加HCl存於1,4-二噁烷(2mL,8mmol)中之4M溶液。在RT下將所得溶液攪拌2h。在減低壓力下去除甲醇並用乙酸乙酯(2×5mL)萃取殘餘物。用飽和NaHCO3水溶液(2×5mL)洗滌有機相，經Na2SO4乾燥，且在減低壓力下濃縮。藉由矽膠管柱(MeOH-CHCl3)純化殘餘物，以提供呈灰白色固體之(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-環丙基-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(8mg,0.022mmol,17%產率)。LC/MS(ESI)m/z 366.2[(M+H)+，計算值C22H28N3O2 366.2]；LC/MS滯留時間(方法B)：tR=1.34min。HPLC滯留時間(方法B)：t R=4.87min且HPLC滯留時間(方法A)：t R=9.18min。1H NMR(400MHz,CDCl 3 )δ ppm 9.47(s,1H),8.75(d,J=5.7Hz,1H),8.28(d,J=5.7Hz,1H),7.96(s,1H),7.06(s,1H),4.27(m,1H),4.06-4.15(m,1H),3.84(s,3H),3.38-3.48(m,1H),2.23-2.38(m,1H),1.83-1.94(m,1H),1.56-1.67(m,1H),1.46-1.55(m,1H),1.00-1.08(m,6H),0.79-0.94(m,4H)。
實例7
(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-9-羥基-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A. (S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-9-羥基-6甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
經0.1h將(S)-(1-((9-溴-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(0.05g,0.099mmol)(如實例3部分A中所製備)、四正丁基氫氧化銨.30 H2O(0.463g,1.784mmol)及水(1.5mL)之混合物添加至碘化銅(I)(1.89mg,9.91μmol)及2-甲基8-喹啉醇(3.16mg,0.020mmol)存於DMSO(1mL)中之攪拌溶液中。將反應混合物加熱至120℃並攪拌14h。將所得混合物冷卻至室溫。藉由反相HPLC(10mM乙酸銨)純化粗製產物，以提供呈棕色固體之(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-羥基-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(0.004g,0.011mmol,12%產率)。LC/MS(ESI)m/e 342.2[(M+H)+，計算值C19H24N3O3,342.2]；HPLC滯留時間(方法F)：t R=1.62min。HPLC滯留時間(方法B)：t R=5.88min。1H NMR(400MHz,CD 3 OD)δ 9.39(s,1H),8.62(d,J=6.00Hz,1H),7.96(d,J=5.60Hz,1H),7.56(s,1H),6.73(s,1H),3.80(s,3H),3.67-3.70(m,1H),3.49-3.59(m,2H),1.81-1.85(m,1H),1.56-1.63(m,2H),1.05(d,J=6.80Hz,3H),0.98(d,J=6.80Hz,3H)。
實例8
(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-6-異丙基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A. 4-(4-氯-2-氟苯基)-N-異丙基菸醯胺
向冷卻至0℃之4-(4-氯-2-氟苯基)菸酸(400mg,1.590mmol)(如實例2部分A中所製備)存於DMF(6mL)中之溶液中添加EDC(457mg,2.384mmol)及HOBT(487mg,3.18mmol)且將混合物攪拌5min。向所得溶液中添加DIPEA(0.83mL,4.77mmol)、之後丙-2-胺(470mg,7.95mmol)且在室溫下將混合物攪拌12h。用冰處理反應混合物並用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。用鹽水(1×10mL)洗滌合併的有機層，乾燥(Na2SO4)且在減低壓力下濃縮，以提供呈灰白色固體之4-(4-氯-2-氟苯基)-N-異丙基菸醯胺(480mg,1.64mmol,100%)。LC/MS(ESI)m/e 293.2[(M+H)+，計算值C15H15ClFN2O 293.1]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.84min。
部分B. 8-氯-6-異丙基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
在0℃下經10min時間向氫化鈉(79mg,3.28mmol)存於THF(8mL)中之懸浮液中逐滴添加4-(4-氯-2-氟苯基)-N-異丙基菸醯胺(480mg,1.640mmol)存於THF(10mL)中之溶液。在0℃下將反應混合物攪 拌1h且然後升溫至室溫並再攪拌1h。然後用冰處理反應混合物並用乙酸乙酯(3×5mL)萃取。用鹽水(1×5mL)洗滌合併的有機層，乾燥(Na2SO4)且在減低壓力下濃縮，以提供粗製8-氯-6-異丙基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(250mg,0.917mmol,56%產率)。LC/MS(ESI)m/e 273.0[(M+H)+，計算值C15H14ClN2O 273.1]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.98min；1H NMR(400MHz,CDCl 3 )δ ppm 9.67(s,1H),8.70(d,J=6.0Hz,1H),8.17-8.19(d,J=8.4Hz,1H),7.92-7.94(d,J=5.6Hz,1H),7.62(d,J=1.6Hz,1H),7.26-7.31(dd,J=8.8,2.0Hz,1H),3.21-3.28(m,1H),1.71(d,J=6.8Hz,6H)。
部分C. (S)-(1-((6-異丙基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
在室溫下向8-氯-6-異丙基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(250mg,0.917mmol)存於甲苯(2mL)中之溶液中添加碳酸銫(448mg,1.375mmol)及二第三丁基(2',4',6'-三異丙基-[1,1'-聯苯]-2-基)膦(234mg,0.550mmol)並將混合物脫氣5min。然後用N-Boc-L-白胺醇(591mg,2.75mmol)、之後乙酸鈀(II)(61.7mg,0.275mmol)處理混合物並再脫氣10min。將反應混合物密封且在80℃下加熱。然後將反應混合物冷卻至室溫並經由矽藻土(Celite®)過濾。用乙酸乙酯洗滌床且在減低壓力下濃縮合併的濾液，以提供粗製產物，藉由combi flash(乙酸乙酯及石油醚之梯度)純化該粗製產物，提供呈灰白色固體之(S)-(1-((6-異丙基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(160mg,0.198mmol,21%產率)。LC/MS(ESI)m/e 454.2[(M+H)+，計算值C26H36N3O4 454.3]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=2.17min。
部分D. (S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-6-異丙基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
在0℃下向((S)-(1-((6-異丙基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(160mg,0.353mmol)存於無水二氯甲烷(4mL)中之溶液中逐滴添加HCl存於乙醚(0.88mL,1.76mmol)中之2M溶液。將反應混合物升溫至室溫並攪拌2h。然後在減低壓力下濃縮反應混合物，以提供粗製產物，藉由製備型HPLC(10mM乙酸銨，存於水：乙腈中)純化該粗製產物，以提供呈灰白色固體之(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-6-異丙基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(45mg,0.127mmol,36%產率)。LC/MS(ESI)m/e 354.2[(M+H)+，計算值C21H28N3O2 354.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.81min；HPLC滯留時間(方法A)：t R=8.85min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=9.50min。1H NMR(400MHz,CD 3 OD)δ ppm 9.43(d,J=0.75Hz,1H),8.75(d,J=5.77Hz,1H),8.42(d,J=9.04Hz,1H),8.22(d,J=5.52Hz,1H),7.30(d,J=2.26Hz,1H),7.10(dd,J=8.78,2.26Hz,1H),5.26-5.43(m,1H),4.16(dd,J=9.16,3.89Hz,1H),3.98(dd,J=9.29,7.03Hz,1H),3.27-3.31(m,1H),1.81-1.92(m,1H),1.73(d,J=7.03Hz,6H),1.41-1.51(m,2H),1.02(dd,J=9.54,6.53Hz,6H)。
實例9
(S)-6-烯丙基-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A. 4-(4-氯-2-氟苯基)-N-環丙基菸醯胺
向冷卻至0℃之4-(4-氯-2-氟苯基)菸酸(500mg,1.987mmol)(如實例2部分A中所製備)存於DMF(6mL)中之溶液中添加EDC(571mg,2.98mmol)及HOBT(609mg,3.97mmol)且將混合物攪拌5min。向所得溶液中添加DIPEA(1.04mL,5.96mmol)、之後環丙胺(567mg,9.93mmol)且在室溫下將混合物攪拌12h。用冰處理反應混合物並用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。用鹽水(1×10mL)洗滌合併的有機層，乾燥(Na2SO4)且在減低壓力下濃縮，以提供4-(4-氯-2-氟苯基)-N-環丙基菸醯胺(480mg,1.65mmol,83%產率)。LC/MS(ESI)m/e 291.0[(M+H)+，計算值C15H13ClFN2O 291.1]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.79min。
部分B. 8-氯-6-環丙基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
在0℃下經10min時間向氫化鈉(72.6mg,3.03mmol)存於THF(8mL)中之懸浮液中逐滴添加4-(4-氯-2-氟苯基)-N-環丙基菸醯胺(440mg,1.51mmol)存於THF(10mL)中之溶液。在0℃下將反應混合物攪 拌1h且然後升溫至室溫並再攪拌1h。然後用冰處理反應混合物並用乙酸乙酯(3×5mL)萃取。用鹽水(2×5mL)洗滌合併的有機層，乾燥(Na2SO4)且在減低壓力下濃縮，以提供呈灰白色固體之粗製8-氯-6-環丙基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(340mg,1.26mmol,83%產率)。LC/MS(ESI)m/e 271.0[(M+H)+，計算值C15H12ClN2O 271.1]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.89min。
部分C. (S)-(1-((6-環丙基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
在室溫下向8-氯-6-環丙基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(200mg,0.739mmol)存於甲苯(2mL)中之溶液中添加碳酸銫(361mg,1.108mmol)及二第三丁基(2',4',6'-三異丙基-[1,1'-聯苯]-2-基)膦(188mg,0.443mmol)且用氮將混合物脫氣5min。然後用N-Boc-L-白胺醇(477mg,2.216mmol)、之後乙酸鈀(II)(49.8mg,0.222mmol)處理混合物並再脫氣10min。將反應混合物密封且在80℃下加熱。在攪拌過夜後，將反應混合物冷卻至室溫並經由矽藻土(Celite®)過濾。用乙酸乙酯洗滌床且在減低壓力下濃縮合併的濾液，以提供粗製產物，藉由combi flash(乙酸乙酯及石油醚)純化該粗製產物，提供呈灰白色固體之(S)-(1-((6-環丙基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(100mg,0.195mmol,26%產率)。LC/MS(ESI)m/e 452.2[(M+H)+，計算值C26H34N3O4 452.3]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=2.11min。
部分D. (S)-6-烯丙基-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
在0℃下向(S)-(1-((6-環丙基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(100mg,0.221mmol)存於無水二氯甲烷(2mL)中之溶液中逐滴添加HCl存於乙醚(0.176mL,0.353mmol)中之2M溶液。使反應混合物升溫至室溫並攪拌2h。然後在減低壓力下濃縮反應混合物，以提供粗製產物，藉由製備型HPLC(0.1% TFA，存於水中)純化該粗製產物，以提供呈黃色固體之(S)-6-烯丙基-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(8mg,22.76mmol,10%產率)。LC/MS(ESI)m/e 352.2[(M+H)+，計算值C21H26N3O2 352.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.80min；HPLC滯留時間(方法A)：t R=8.06min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=9.21min。1H NMR(400MHz,CD 3 OD)δ ppm 9.56(s,1H),8.85(d,J=6.27Hz,1H),8.55(d,J=9.04Hz,1H),8.48(d,J=6.27Hz,1H),7.20(dd,J=8.91,2.38Hz,1H),7.14(d,J=2.26Hz,1H),6.08(dd,J=17.32,10.54Hz,1H),5.28(dd,J=10.54,1.00Hz,1H),5.18(dd,J=17.32,1.25Hz,1H),5.09-5.13(m,2H),4.44(dd,J=10.54,3.26Hz,1H),4.27(dd,J=10.42,6.40Hz,1H),3.77(dd,J=6.78,3.51Hz,1H),1.64-1.88(m,3H),1.07(dd,J=6.40,4.89Hz,6H)。
實例10
(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-7,9-二氯-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)酮
部分A. (S)-(1-((7,9-二氯-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
在氮中向(S)-(4-甲基-1-((6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(0.120g,0.282mmol)(如實例2部分D中所製備)存於無水乙腈(2mL)中之攪拌溶液中添加N-氯琥珀醯亞胺(0.045g,0.338mmol)且在85℃下將溶液加熱12h。用水(10mL)稀釋反應混合物並用乙酸乙酯(2×20mL)萃取。經硫酸鈉乾燥合併的有機層且在減低壓力下蒸發，以提供粗製產物，藉由製備型TLC(存於石油醚中之乙酸乙酯)純化該粗製產物，以提供呈黃色固體之(S)-(1-((7,9-二氯-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(120mg,0.243mmol,86%產率，純度為55%，藉由LC/MS測定)。LC/MS(ESI)m/e 494.2[(M+H)+，計算值C24H30Cl2N3O4 494.1]；LC/MS滯留時間(方法A)：t R=2.24min。
部分B. (S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-7,9-二氯-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
在0℃下向(S)-(1-((7,9-二氯-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(0.120g,0.243mmol)存於無水甲醇(5mL)中之溶液中逐滴添加HCl存於1,4-1,4-二噁烷(2mL,8mmol)中之4M溶液。將反應混合物升溫至室溫並攪拌2h。然後在減低壓力下濃縮反應混合物，以提供粗製化合物，藉由製備型HPLC(10mM乙酸銨，存於水：乙腈中)純化該粗製化合物，以提供呈黃色固體之(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-7,9-二氯-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(28mg,0.063mmol,26%產率)。LC/MS(ESI)m/e 394.2[(M+H)+，計算值C19H22Cl2N3O2 394.1]；LC/MS滯留時間(方法A)：t R=1.48min；HPLC滯留時間(方法A)：t R=5.21min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=5.73min。1H NMR(400MHz,CD 3 OD)δ ppm 9.50(d,J=0.75Hz,1H),8.87(d,J=5.52Hz,1H),8.58(s,1H),8.32(d,J=5.27Hz,1H),4.17(dd,J=9.03,4.02Hz,1H),4.05(dd,J=9.03,7.28Hz,1H),3.93(s,3H),3.37-3.43(m,1H),1.82-1.93(m,1H),1.38-1.57(m,2H),0.99-1.05(m,6H)。
實例11
(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-6-苄基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A. N-苄基-4-(4-氯-2-氟苯基)菸醯胺
(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-6-苄基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮向冷卻至0℃之4-(4-氯-2-氟苯基)菸酸(600mg,2.38mmol)(如實例2部分A中所製備)存於DMF(6mL)中之溶液中添加EDC(457mg,2.38mmol)及HOBT(365mg,2.38mmol)且將混合物攪拌5min。向所得溶液中添加DIPEA(0.416mL,2.384mmol)、之後苄基胺(307mg,2.86mmol)且在室溫下將混合物攪拌12h。用冰處理反應混合物並用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。用鹽水(1×10mL)洗滌合併的有機層，乾燥(Na2SO4)且在減低壓力下濃縮，以提供N-苄基-4-(4-氯-2-氟苯基)菸醯胺(680mg,2.00mmol,84%產率)。LC/MS(ESI)m/e 341.0[(M+H)+，計算值C19H15ClFN2O 341.1]；LC/MS滯留時間(方法A)：t R=1.73min。
部分B. 6-苄基-8-氯苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
在0℃下經10min時間向氫化鈉(96mg,3.99mmol)存於THF(13mL)中之懸浮液中逐滴添加N-苄基-4-(4-氯-2-氟苯基)菸醯胺(680mg, 1.995mmol)存於THF(10mL)中之溶液。在0℃下將反應混合物攪拌1h且然後升溫至室溫並再攪拌1h。然後用冰處理反應混合物並用乙酸乙酯(3×5mL)萃取。用鹽水(1×5mL)洗滌合併的有機層，乾燥(Na2SO4)且在減低壓力下濃縮，以提供粗製6-苄基-8-氯苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(640mg,2.00mmol,100%)。LC/MS(ESI)m/e 321.0[(M+H)+，計算值C19H14ClN2O 321.0]；LC/MS滯留時間(方法A)：t R=1.95min。
部分C. (S)-(1-((6-苄基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
在室溫下向6-苄基-8-氯苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(640mg,2.00mmol)存於甲苯(12mL)中之溶液中添加碳酸銫(975mg,2.99mmol)及N-BocL-白胺醇(1287mg,5.99mmol)且用氮將混合物脫氣5min。然後用二第三丁基(2',4',6'-三異丙基-[1,1'-聯苯]-2-基)膦(508mg,1.197mmol)、之後乙酸鈀(II)(448mg,2.00mmol)處理混合物並再脫氣10min。將反應混合物密封且在80℃下加熱。在攪拌過夜後，將反應混合物冷卻至室溫並經由矽藻土(Celite®)過濾。用乙酸乙酯洗滌床且在減低壓力下濃縮合併的濾液，以提供粗製產物，藉由combi flash(乙酸乙酯/石油醚)純化該粗製產物，提供呈灰白色固體之(S)-(1-((6-苄基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(500mg,0.738mmol,37%產率)。LC/MS(ESI)m/e 502.3[(M+H)+，計算值C30H36N3O4 502.4]；LC/MS滯留時間(方法D)： t R=1.26min。
部分D. (S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-6-苄基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
在0℃下向(S)-(1-((6-苄基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(35mg,0.070mmol)存於無水二氯甲烷(1mL)中之溶液中逐滴添加HCl存於乙醚(0.17mL,0.349mmol)中之2M溶液。將反應混合物升溫至室溫並攪拌2h。然後在減低壓力下濃縮反應混合物，以提供粗製產物，藉由製備型TLC(存於石油醚中之乙酸乙酯)純化該粗製產物，以提供呈淡黃色固體之(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-6-苄基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(10mg,0.024mmol,35%產率)。LC/MS(ESI)m/e 402.2[(M+H)+，計算值C25H28N3O2 402.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.77min；HPLC滯留時間(方法A)：t R=5.54min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=6.17min。1H NMR(400MHz CD 3 OD)δ ppm 9.61(br.s.,1H),8.87(d,J=4.52Hz,1H),8.53(d,J=9.04Hz,1H),8.47(d,J=6.02Hz,1H),7.28-7.38(m,5H),7.15(dd,J=8.91,2.38Hz,1H),7.04(d,J=2.26Hz,1H),5.72(d,J=5.77Hz,2H),4.27(dd,J=10.54,3.26Hz,1H),4.10(dd,J=10.42,6.40Hz,1H),3.69(dd,J=6.65,3.14Hz,1H),1.68-1.81(m,1H),1.57-1.67(m,2H),1.00-1.05(m,6H)。
實例12
(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-6-(2-甲氧基乙基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A. 4-(4-氯-2-氟苯基)菸醯胺
向冷卻至0℃之4-(4-氯-2-氟苯基)菸酸(1.1g,4.37mmol)(如實例2部分A中所製備)存於無水DMF(10mL)中之攪拌溶液中添加HOBT(1.339g,8.74mmol)、EDC(1.257g,6.56mmol)、DIEA(3.05mL,17.49mmol)、之後氯化銨(1.169g,21.86mmol)。將反應混合物升溫至RT並在氮氣氛中攪拌12h。用水(50mL)稀釋反應混合物並用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。經硫酸鈉乾燥合併的有機層且在減低壓力下濃縮，以提供4-(4-氯-2-氟苯基)菸醯胺(0.900g,3.59mmol,82%產率)LC/MS(ESI)m/e 251[(M+H)+，計算值C12H9ClFN2O 251]；LC/MS滯留時間(方法A)：t R=1.34min。
部分B. 8-氯苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
在0℃下向4-(4-氯-2-氟苯基)菸醯胺(0.9g,3.59mmol)存於THF(20mL)中之溶液中添加氫化鈉(0.258g,10.77mmol)並在0℃下將反應混合物攪拌1h且然後升溫至室溫並攪拌過夜(14h)。然後用冰淬滅反應混合物並用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。用鹽水(1×100mL)洗滌 合併的有機層，乾燥(Na2SO4)且在減低壓力下濃縮，以提供粗製8-氯苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(0.80g,3.47mmol,97%產率)。LC/MS(ESI)m/e 231.2[(M+H)+，計算值C12H8ClN2O 231]；LC/MS滯留時間(方法D)：t R=0.61min。
部分C. 8-氯-6-(2-甲氧基乙基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
在氮中在0℃下向8-氯苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(0.150g,0.650mmol)存於無水DMF(2mL)中之攪拌溶液中添加2-溴乙基甲基醚(0.090g,0.650mmol)。將反應混合物升溫至RT並攪拌12h。用水(10mL)稀釋反應混合物並用乙酸乙酯(2×20mL)萃取。經硫酸鈉乾燥合併的有機層且在減低壓力下濃縮，以提供8-氯-6-(2-甲氧基乙基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(150mg,0.520mmol,80%產率)。LC/MS(ESI)m/e 289.1[(M+H)+，計算值C15H13ClN2O2 289.1]；LC/MS滯留時間(方法A)：t R=1.65min。
部分D. (S)-(1-((6-(2-甲氧基乙基)-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
在室溫下向8-氯-6-環丙基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(100mg,0.346mmol)存於甲苯(5mL)中之溶液中添加碳酸銫(169mg,0.520mmol)及N-Boc-L-白胺醇(226mg,1.039mmol)且用氮將混合物脫氣5min。然後用二第三丁基(2',4',6'-三異丙基-[1,1'-聯苯]-2-基)膦(47.8 mg,0.208mmol)、之後乙酸鈀(II)(23.3mg,0.104mmol)處理混合物並再脫氣10min。將反應混合物密封且在80℃下加熱。在攪拌過夜後，將反應混合物冷卻至室溫並經由矽藻土(Celite®)過濾。用乙酸乙酯(15mL)洗滌床且在減低壓力下濃縮濾液，以提供粗製產物，藉由combi flash(乙酸乙酯及石油醚之梯度)純化該粗製產物，提供呈棕色膠狀物之(S)-(1-((6-(2-甲氧基乙基)-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(80mg,0.170mmol,49%產率)。LC/MS(ESI)m/e 470.3[(M+H)+，計算值C26H36N3O5 470.3]；LC/MS滯留時間(方法A)：t R=2.02min。
部分E. (S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-6-(2甲氧基乙基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
在0℃下向(S)-(1-((6-(2-甲氧基乙基)-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(0.080g,0.170mmol)存於無水甲醇(5mL)中之溶液中逐滴添加HCl存於1,4-二噁烷(0.21mL,0.85mmol)中之4M溶液。將反應混合物升溫至室溫並攪拌2h。在減低壓力下濃縮反應混合物，以提供粗製化合物，藉由製備型HPLC(10mM乙酸銨，存於水：乙腈中)純化該粗製化合物，以提供白色固體(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-6-(2-甲氧基乙基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(20mg,0.054mmol,32%產率)。LC/MS(ESI)m/e 370.2[(M+H)+，計算值C21H28N3O3 370.2]；LC/MS滯留時間(方法A)：t R=1.34min；HPLC滯留時間(方法A)：t R=8.36min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=8.78min。1H NMR(400MHz,CD 3 OD)δ ppm 9.45(s,1H),8.76(d,J=5.77Hz,1H),8.40(d,J=9.03Hz,1H,),8.23(d,J=6.02Hz,1H),7.29(d,J=2.26Hz,1H),7.11(d,J=8.78Hz,1H),4.61(t,J=5.65Hz,2H),4.36(s,1H),4.20(s,1H),3.81(t,J=5.77Hz,2H),3.63-3.71(m,1H),3.37(s,3H),1.86(m,1H),1.67(qt,J=14.01,7.09Hz,2H),1.06(d,J=5.77Hz,6H)。
實例13
(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-6-(環丙基甲基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A. 8-氯-6-(環丙基甲基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
在氮中在0℃下向8-氯苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(100mg,0.434mmol)(如實例12部分B中所製備)存於無水DMF(2mL)中之攪拌溶液中添加環丙基溴甲烷(0.088g,0.650mmol)。將反應混合物升溫至RT並攪拌12h。用水(10mL)稀釋反應混合物並用乙酸乙酯(2×20mL)萃取。經硫酸鈉乾燥合併的有機層且在減低壓力下濃縮得到8-氯-6-(環丙基甲基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(100mg,0.351mmol,81%產率，純度為53%，藉由LC/MS測定)。LC/MS(ESI)m/e 285.1[(M+H)+，計算值C16H14ClN2O 285.1]；LC/MS滯留時間(方法D)：t R=0.91min。
部分B. (S)-(1-((6-(環丙基甲基)-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
在室溫下向8-氯-6-(環丙基甲基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(100mg,0.351mmol)存於無水甲苯(5mL)中之溶液中添加碳酸銫(172mg,0.527mmol)及Boc-L-白胺醇(229mg,1.054mmol)且用氮將混合物脫氣5min。然後用二第三丁基(2',4',6'-三異丙基-[1,1'-聯苯]-2-基)膦(48.5mg,0.211mmol)、之後乙酸鈀(II)(23.65mg,0.105mmol)處理混合物並再脫氣10min。將反應混合物密封且在80℃下加熱。在攪拌過夜後，將反應混合物冷卻至室溫並經由矽藻土(Celite®)過濾。用乙酸乙酯(15mL)洗滌床且在減低壓力下濃縮濾液，以提供粗製化合物，藉由製備型HPLC(存於石油醚中之乙酸乙酯)純化該粗製化合物，以提供呈棕色膠狀固體之(S)-(1-((6-(環丙基甲基)-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(80mg,0.172mmol,49%產率)。LC/MS(ESI)m/e 466.3[(M+H)+，計算值C27H36N3O4 466.3]；LC/MS滯留時間(方法A)：t R=2.199min。
部分C. (S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-6(環丙基甲基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
在0℃下向(S)-(1-((6-(環丙基甲基)-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7] 萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(0.08g,0.172mmol)存於無水甲醇(5mL)中之溶液中逐滴添加HCl存於1,4-二噁烷(2mL,65.8mmol)中之4M溶液。將反應混合物升溫至室溫並攪拌2h。在減低壓力下濃縮反應混合物，以提供粗製化合物，藉由製備型HPLC(10mM乙酸銨，存於水：乙腈中)純化該粗製化合物，以提供呈黃色膠狀物之(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-6-(環丙基甲基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(22mg,0.060mmol,35%產率)。LC/MS(ESI)m/e 366.2[(M+H)+，計算值C22H28N3O2 366.2]；LC/MS滯留時間(方法A)：t R=1.47min；HPLC滯留時間(方法A)：t R=9.470min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=5.250min。1H NMR(400MHz,CD 3 OD)δ ppm 9.47(d,J=0.50Hz,1H),8.78(d,J=5.77Hz,1H),8.46(d,J=9.04Hz,1H),8.26(d,J=5.52Hz,1H),7.28(d,J=2.26Hz,1H),7.14(dd,J=9.03,2.26Hz,1H),4.39(d,J=6.78Hz,2H),4.31(dd,J=9.79,3.76Hz,1H),4.13(dd,J=9.79,6.78Hz,1H),3.53(dd,J=7.15,3.64Hz,1H),1.87(m,1H),1.59(q,J=13.72,7.03Hz,2H),1.36-1.45(m,1H),1.04(dd,J=7.28,6.78Hz,6H),0.57-0.63(m,4H)。
實例14
(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-氟-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A. 2-(4-氯-2,5-二氟苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷
向冷卻至-10℃之1-溴-4-氯-2,5-二氟苯(200mg,0.879mmol)存於THF(10mL)中之溶液中逐滴添加異丙基溴化鎂(1M in THF,1.055mL,1.055mmol)且在此溫度下將反應混合物攪拌1h。然後將反應混合物升溫至0℃並再攪拌1h。將所得混合物再次冷卻至-10℃並用2-異丙氧基-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷溶液(196mg,1.055mmol)逐滴處理。使反應混合物升溫至室溫並用氯化銨飽和溶液處理(3mL)。分離各層且用二氯甲烷(2×2mL)萃取水層。經硫酸鈉乾燥合併的有機層，過濾且在減低壓力下濃縮，以提供粗製化合物，藉由二氧化矽上管柱層析(7：3-乙酸乙酯：己烷)純化該粗製化合物，以提供呈油狀物之2-(4-氯-2,5-二氟苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷(150mg,0.546mmol,62%產率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ ppm 7.46-7.49(m,1H),7.09-7.13(m,1H),1.35(s,12H)。
部分B. 4-(4-氯-2,5-二氟苯基)菸酸甲酯
在室溫下在氮氣氛中向4-氯菸酸甲酯(100mg,0.583mmol)存於1,4-二噁烷：水(4：1,20mL)之溶劑混合物中之攪拌溶液中添加碳酸鉀(62.6mg,0.453mmol)、之後四丁基溴化銨(73.0mg,0.226mmol)。用氮將所得混合物脫氣10min且用N-(6-氯-4-(三甲基矽烷基)吡啶-2-基)乙醯胺(60.4mg,0.181mmol)、之後雙(三苯基膦)氯化鈀(II)(10.60mg,0.015mmol)處理。將混合物再次脫氣10min且在80℃下加熱8h。然後將反應混合物冷卻至室溫且用水(20mL)淬滅並用乙酸乙酯(5mL)萃取。分離有機層並用水(3×5mL)洗滌，乾燥(Na2SO4)且在減低壓力下濃縮，以提供粗製4-(4-氯-2,5-二氟苯基)菸酸甲酯(400mg, 0.592mmol,20%產率，純度為42%，藉由LC/MS測定)。將此不進一步純化即取用於下一步驟。LC/MS(ESI)m/e 284.0[(M+H)+，計算值C13H9ClF2NO2 284.02]；LC/MS滯留時間(方法A)：t R=1.82min。
部分C. 4-(4-氯-2,5-二氟苯基)菸酸
向4-(4-氯-2,5-二氟苯基)菸酸甲酯(400mg,1.41mmol)存於水：THF(1：1,8mL)中之溶液中添加LiOH(67.5mg,2.82mmol)且在室溫下將反應混合物攪拌4h。用水(5mL)淬滅反應混合物並用乙酸乙酯(2×5mL)洗滌。分離水層並用1.5N HCl酸化且在減低壓力下濃縮，以提供呈固體之4-(4-氯-2,5-二氟苯基)菸酸(180mg,0.541mmol,38%產率)。LC/MS(ESI)m/e 270[(M+H)+，計算值C12H7ClF2NO2 270]；LC/MS滯留時間(方法B)：t R=1.48min。
部分D. 4-(4-氯-2,5-二氟苯基)-N-甲基菸醯胺
將4-(4-氯-2,5-二氟苯基)菸酸(170mg,0.630mmol)吸入亞硫醯氯(0.14mL,1.89mmol)中且在65℃下加熱1h。在減低壓力下蒸發溶劑，以提供粗製油狀物，在0℃下將該粗製油狀物溶解於二氯甲烷中並逐滴添加至鹽酸甲胺(63.9mg,0.946mmol)及DIEA(0.11mL,0.63mmol)存於DCM(8mL)中之混合物。然後將反應混合物升溫至室溫並攪拌7h。用DCM(5mL)稀釋反應混合物並用水(3×5mL)、之後鹽水(1×10mL)洗滌。經硫酸鈉乾燥合併的有機萃取物且在減低壓力下濃縮，以提供粗製產物，藉由製備型薄層層析(3：2乙酸乙酯：己烷)純化該粗製產物，以提供呈白色固體之4-(4-氯-2,5-二氟苯基)-N-甲基菸 醯胺(90mg,0.264mmol,42%產率)。LC/MS(ESI)m/e 283.0[(M+H)+，計算值C13H10ClF2N2O 283.0]；LC/MS滯留時間(方法A)：t R=1.46min。
部分E. 8-氯-9-氟-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
在0℃下向氫化鈉(56.6mg,1.42mmol)存於THF(5mL)中之懸浮液中緩慢添加存於THF(5mL)中之4-(4-氯-2,5-二氟苯基)-N-甲基菸醯胺(100mg,0.354mmol)。在室溫下將所得混合物攪拌1h。然後藉由添加冷水(1mL)淬滅反應並用乙酸乙酯(2×2mL)萃取。用硫酸鈉乾燥經合併的萃取物並在減低壓力下濃縮。藉由管柱層析(1：1存於石油醚中之乙酸乙酯)純化殘餘物，以提供呈白色固體之8-氯-9-氟-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(82mg,0.297mmol,84%產率)。LC/MS(ESI)m/e 262.5[(M+H)+，計算值C13H9ClFN2O 263.0]；LC/MS滯留時間(方法D)：t R=1.79min；HPLC滯留時間(方法A)：t R=7.35min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=7.07min。
部分F. (S)-(1-((9-氟-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
向8-氯-9-氟-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(40mg,0.152mmol)、(S)-(1-羥基-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(39.7mg, 0.183mmol)、二第三丁基(2',4',6'-三異丙基-[1,1'-聯苯]-2-基)膦(38.8mg,0.091mmol)及碳酸銫(74.4mg,0.228mmol)存於甲苯(4mL)中之攪拌懸浮液中添加乙酸鈀(II)(10.26mg,0.046mmol)。使氮氣鼓泡經過混合物5min，且然後將反應混合物加熱至85℃並保持8h。將反應混合物冷卻至室溫並用乙酸乙酯(2mL)稀釋且經由矽藻土(Celite®)過濾。用水(2×2mL)及鹽水(2×2mL)洗滌濾液，經硫酸鈉乾燥且在減低壓力下濃縮。經由矽膠管柱層析(60%存於己烷中之乙酸乙酯)純化殘餘物，以提供(S)-(1-((9-氟-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(28mg,0.023mmol,15%產率)。LC/MS(ESI)m/e 444.2[(M+H)+，計算值C24H31lFN3O4 444.2]；LC/MS滯留時間(方法A)：t R=2.02min。
部分G. (S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-氟-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
在0℃下經10min向(S)-(1-((9-氟-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(25mg,0.056mmol)存於乙醚(4mL)中之攪拌溶液中逐滴添加鹽酸存於乙醚(42.5μl,0.085mmol)中之2M溶液。去除冰浴並在室溫下將反應混合物攪拌2h。去除溶劑並將粗製材料吸收於水(5mL)。用乙酸乙酯(3mL)洗滌水層並用10% NaHCO3(20mL)處理。用乙酸乙酯(3×10mL)萃取所得溶液。用水(2×10mL)洗滌合併的有機層，乾燥(硫酸鈉)，過濾且在減低壓力下濃縮，以提供粗製材料，經由製備型TLC(40%存於己烷中之乙酸乙酯)純化該粗製材料，以提供呈白色固體之(S)-8- ((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-氟-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(15mg,0.041mmol,73%產率)。LC/MS(ESI)m/e 344.2[(M+H)+，計算值C19H23FN3O2 344.2]；LC/MS滯留時間(方法A)：t R=1.35min；HPLC滯留時間(方法A)：t R=8.31min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=8.85min；1H NMR(400MHz,CD 3 OD)δ ppm 9.66-9.71(m,1 H),8.83-8.87(m,1 H),7.90-7.95(m,1 H),7.79-7.83(m,1 H),6.91-6.95(m,1 H),4.10-4.14(m,1 H),3.89-3.95(m,1 H),3.76-3.80(m,3 H),3.35-3.44(m,1 H),1.78-1.86(m,1 H),1.39(t,J=7.00Hz,2 H),0.96-1.03(m,6 H)。
實例15
8-(2-胺基-5,5,5-三氟戊氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A. 2-(二苯基亞甲基胺基)-5,5,5-三氟戊酸第三丁基酯
在氮氣氛中向冷卻至-78℃之2-((二苯基亞甲基)胺基)乙酸第三丁基酯(1g,3.39mmol)存於THF(20mL)中之攪拌溶液中逐滴添加LDA存於THF(2.54mL,5.08mmol)中之2M溶液並保持30min。然後向此混合物中添加三氟甲磺酸3,3,3-三氟丙基酯(1.083g,4.40mmol)。將反應逐漸升溫至rt並攪拌4h。在0℃下藉由添加飽和氯化銨水溶液來淬滅反應混合物。然後用乙酸乙酯(3×10mL)萃取反應混合物。用水(1×10mL)及鹽水(1×10mL)洗滌合併的有機萃取物，經硫酸鈉乾燥且 然後在減低壓力下濃縮。藉由矽膠管柱層析(2%存於己烷中之乙酸乙酯)純化粗製油狀物，以提供呈黃色油狀物之2-((二苯基亞甲基)胺基)-5,5,5-三氟戊酸第三丁基酯(800mg,2.02mmol,60%產率)。LC/MS(ESI)m/e 391.9[(M+H)+，計算值C22H25F3NO2,392.2]；LC/MS滯留時間(方法E)：t R=2.49min。
部分B. 2-胺基-5,5,5-三氟戊酸(鹽酸鹽)
在100℃下使2-((二苯基亞甲基)胺基)-5,5,5-三氟戊酸第三丁基酯(800mg,2.023mmol)存於50% HCl水溶液(0.123mL,2.023mmol)中之攪拌溶液回流8h。將反應混合物冷卻至rt且在減低壓力下濃縮，以提供呈白色固體之2-胺基-5,5,5-三氟戊酸鹽酸鹽(400mg,1.82mmol,90%產率，純度為78%，藉由LC/MS測定)。LC/MS(ESI)m/e 171.7[(M+H)+，計算值C5H7F3O2,172.1]；LC/MS滯留時間(方法E)：t R=0.80min。
部分C. 2-(第三丁氧基羰基胺基)-5,5,5-三氟戊酸
在RT下向2-胺基-5,5,5-三氟戊酸鹽酸鹽(400mg,1.503mmol,78%，藉由LC/MS測定)存於THF(8mL)及水(8mL)中之攪拌溶液中添加K2CO3(831mg,6.01mmol)且將該溶液攪拌10min。向此混合物中添加Boc2O(656mg,3.01mmol)。在rt下將反應混合物攪拌8h，然後在減低壓力下濃縮。用乙酸乙酯(3×5mL)洗滌水層。用飽和檸檬酸溶液(5mL)酸化水層並用乙酸乙酯(3×8mL)萃取。用水(3×5mL)、之後鹽水溶液(1×10mL)洗滌合併的有機層，經硫酸鈉乾燥且 在減低壓力下濃縮，以提供呈無色油狀物之2-((第三丁氧基羰基)胺基)-5,5,5-三氟戊酸(500mg,1.84mmol,100%產率)。將該材料不進一步純化即取用於下一步驟。1H NMR(400MHz,CDCl 3 )δ 5.04(s,1H),4.38(s,1H),2.15-2.28(m,2H),1.91-1.95(m,2H),1.46(s,9H)。
部分D. 5,5,5-三氟-1-羥基戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯
在氮氣氛中向冷卻至-10℃之2-((第三丁氧基羰基)胺基)-5,5,5-三氟戊酸(500mg,1.843mmol)存於THF(15mL)中之攪拌溶液中逐滴添加N-甲基嗎啉(0.223mL,2.028mmol)、之後氯甲酸異丁酯(0.266mL,2.028mmol)。然後將該溶液攪拌30min，然後過濾。將濾液添加至存於水(10mL)中之硼氫化鈉(147mg,3.87mmol)，攪拌5min並用乙酸乙酯(10mL)稀釋。分離有機層並用鹽水(2×10mL)洗滌，乾燥(Na2SO4)且在減低壓力下蒸發，以提供呈白色固體之(5,5,5-三氟-1-羥基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(400mg,1.555mmol,84%產率)，該白色固體不進一步純化即取用於下一步驟。1H NMR(400MHz,MeOD)δ 3.44-3.56(m,3H),2.16-2.26(m,2H),1.83-1.92(m,1H),1.57-1.67(m,1H),1.47(s,9H)。
部分E. 5,5,5-三氟-1-(6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯
如實例2部分D中實施反應，以產生呈白色固體之產物(5,5,5-三氟-1-((6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)戊-2-基) 胺基甲酸第三丁基酯(160mg,0.237mmol,23%產率)。LC/MS(ESI)m/e 466.31[(M+H)+，計算值C23H27F3N3O4,466.19]；LC/MS滯留時間(方法D)：t R=1.04min。
部分F. 8-(2-胺基-5,5,5-三氟戊氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
在氮氣氛中經5min時間向冷卻至0℃之(5,5,5-三氟-1-((6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(150mg,0.322mmol)存於乙醚(10mL)之溶液中緩慢添加存於1,4-二噁烷(0.098mL,0.392mmol)中之4M HCl。在0℃下將淡黃色反應混合物攪拌5min，然後升溫至室溫並攪拌12h。在減低壓力下去除溶劑。用水(3mL)稀釋殘餘黃色油狀物並用EtOAc(2×4mL)萃取。分離水層並用飽和Na2CO3溶液(3mL)處理。用EtOAc(3×5mL)萃取所得水層。分離合併的有機層並用水(2×5mL)、鹽水(1×5mL)洗滌且經硫酸鈉乾燥。在減低壓力下蒸發濾液且藉由SFC(CO2及0.5%存於甲醇中之DEA)純化，以提供呈白色固體之8-((2-胺基-5,5,5-三氟戊基)氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(102.8mg,0.278mmol,86%產率)。LC/MS(ESI)m/e 366.2[(M+H)+，計算值C18H19F3N3O2366.13]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.77min；HPLC滯留時間(方法A)：t R=7.79min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=8.20min。1H NMR(400MHz,MeOD)δ 9.48(d,J=0.80Hz,1H),8.78(d,J=5.60Hz,1H),8.44(d,J=8.80Hz,1H),8.27(d,J=5.60Hz,1H),7.17(d,J=2.40Hz,1H),7.12(dd,J=2.40,8.80Hz,1H),4.17-4.20(m,1H),4.09(dd,J =6.00,9.40Hz,1H),3.82(s,3H),3.28-3.28(m,1H),2.33-2.49(m,2H),1.92-1.99(m,1H),1.73-1.80(m,1H)。
實例16
(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A：2,4-二氯菸酸
在-78℃下向2,4-二氯吡啶(7g,47.3mmol)存於THF(70mL)中之溶液中添加LDA存於THF(28.4mL,56.8mmol)中之2M溶液並攪拌30min。用過量乾冰淬滅反應混合物並在RT下攪拌30min。在用1.5N HCl中和後，用乙酸乙酯(100mL)稀釋反應混合物並用鹽水(2×50mL)及水(100mL)洗滌。分離有機層，經Na2SO4乾燥且在減低壓力下濃縮，以提供呈棕色固體之2,4-二氯菸酸(4.5g,23.44mmol,50%產率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ ppm 8.47(d,1H),7.74(d,1H)。
部分B：2,4-二氯菸酸甲酯
向冷卻至0℃之2,4-二氯菸酸(500mg,2.60mmol)存於乙腈(10mL)中之溶液中添加DBU(0.981mL,6.51mmol)、之後碘甲烷(0.814mL,13.0mmol)。在RT下將反應混合物攪拌過夜(14h)。在反應完成後，在減低壓力下去除溶劑。將殘餘物吸入於乙酸乙酯(10mL)中並 用水(1×5mL)洗滌，經Na2SO4乾燥，且在減低壓力下濃縮。藉由矽膠管柱層析(EtOAc-己烷)純化殘餘物，以提供呈淺黃色油狀物之2,4-二氯菸酸甲酯(260mg,1.262mmol,49%產率)。LC/MS,(ESI)m/z 206.1[(M+H)+，計算值C7H6Cl2NO2 205.97]；LC/MS滯留時間(方法D)：tR=0.85min。1H NMR(300MHz,CD 3 OD)δ ppm 8.42(d,J=5.4Hz,1H),7.59(d,J=5.4Hz,1H),3.99(s,3H)。
部分C：4-氯-2-甲基菸酸甲酯
用氮將2,4-二氯菸酸甲酯(2g,9.71mmol)、三甲基硼氧環烷(1.462g,11.65mmol)、Cs2CO3(6.33g,19.42mmol)及PdCl2(dppf)(0.710g,0.971mmol)存於1,4-二噁烷(30mL)及水(2mL)中之混合物吹掃5min且在70℃下加熱16h。在減低壓力下濃縮反應物且藉由矽膠管柱層析(EtOAc-己烷混合物)純化，以提供呈紅色油狀物之4-氯-2-甲基菸酸甲酯(550mg,2.94mmol,31%產率)。1H NMR(300MHz,CD 3 OD)δ ppm 8.44(d,J=5.7Hz,1H),7.43(d,J=5.7Hz,1H),3.98(s,3H),2.54(s,3H)。
部分D：4-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基菸酸甲酯
用氮將4-氯-2-甲基菸酸酯(4g,21.55mmol)、(4-氯-2-氟苯基)酸(4.13g,23.71mmol)、三環己基膦(1.813g,6.47mmol)、Pd(OAc)2(0.484g,2.155mmol)及Cs2CO3(14.04g,43.1mmol)存於DMA(15mL)中之混合物吹掃5min且在100℃下加熱過夜(14h)。在冷卻後，經由 矽藻土(Celite®)過濾反應混合物。在減低壓力下去除DMA且用乙酸乙酯(10mL)稀釋殘餘物。在減低壓力下濃縮有機相且藉由矽膠管柱層析(EtOAc-己烷)純化，以提供呈紅色油狀物之4-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基菸酸甲酯(1g,3.58mmol,17%產率)。LC/MS,(ESI)m/z 280.1[(M+H)+，計算值C14H12ClFNO2 280.0]；LC/MS滯留時間(方法D)：tR=0.80min。
部分E：4-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基菸酸
向4-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基菸酸甲酯(40mg,0.143mmol)存於MeOH(2mL)及水(3mL)中之溶液中添加NaOH(11.44mg,0.286mmol)且在RT下將反應混合物攪拌14h。在減低壓力下濃縮反應混合物且用1.5N HCl酸化，用乙酸乙酯(5mL)萃取。用飽和NaHCO3(2×10mL)及水(10mL)洗滌有機層；經Na2SO4乾燥且在減低壓力下濃縮，以提供呈棕色固體之粗製4-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基菸酸(30mg,0.113mmol,79%產率)。將此不進一步純化即取用於下一步驟。LC/MS,(ESI)m/z 266.1[(M+H)+，計算值C13H10ClFNO2.266.0]；LC/MS滯留時間(方法D)：tR=0.64min。
部分F：4-(4-氯-2-氟苯基)-N,2-二甲基菸醯胺
在0℃下向4-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基菸酸(180mg,0.678mmol)存於DCM(5mL)及DMF(0.2mL)中之溶液中添加草醯氯(0.178mL, 2.033mmol)。在RT下將反應混合物攪拌3h，然後用DCM(5mL)稀釋並用冷卻至0℃之鹽酸甲胺(457mg,6.78mmol)存於DCM(5mL)中之溶液處理。在RT下將混合物再攪拌1h。用DCM(20mL)萃取溶液，用飽和NaHCO3(2×10mL)及水(20mL)洗滌；經Na2SO4乾燥且在減低壓力下濃縮，以提供呈棕色膠狀物之4-(4-氯-2-氟苯基)-N,2-二甲基菸醯胺(50mg,0.179mmol,27%產率)。LC/MS,(ESI)m/z 279.2[(M+H)+，計算值C14H13ClFN2O 279.1]；LC/MS滯留時間(方法D)：tR=0.62min。
部分G：8-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
向冷卻至0℃之4-(4-氯-2-氟苯基)-N,2-二甲基菸醯胺(40mg,0.144mmol)存於THF(3mL)中之溶液中添加NaH(10.33mg,0.431mmol)且將反應混合物攪拌4h。在反應完成後，用冰水淬滅反應混合物且用乙酸乙酯(20mL)萃取產物。經Na2SO4乾燥有機層且在減低壓力下濃縮，以提供呈灰白色固體之8-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(30mg,0.116mmol,81%產率)。LC/MS,(ESI)m/z 259.2[(M+H)+，計算值C14H12ClN2O 259.1]；LC/MS滯留時間(方法D)：tR=0.65min。
部分H：(S)-(1-((4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
用氮將8-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(60mg,0.232 mmol)、(S)-(1-羥基-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(101mg,0.464mmol)、Cs2CO3(113mg,0.348mmol)、Pd(OAc)2(15.6mg,0.070mmol)及2-二第三丁基膦基-2',4',6'-二-異丙基-1,1'-聯苯(5.91mg,0.014mmol)存於甲苯(5mL)中之混合物吹掃5min且在100℃下加熱過夜(14h)。在冷卻後，經由矽藻土(Celite®)過濾反應混合物，在減低壓力下濃縮並溶解於乙酸乙酯(5mL)中。用鹽水(2×10mL)及水(20mL)洗滌有機層；經Na2SO4乾燥且在減低壓力下濃縮，以提供呈膠狀固體之(S)-(1-((4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(55mg粗製物)。粗製產物不進一步純化即用於下一步驟。LC/MS,(ESI)m/z 440.4[(M+H)+，計算值C25H34N3O4,440.2]；LC/MS滯留時間(方法D)：tR=0.89min。
部分I：(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
在0℃下向(S)-(1-((4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(30mg,0.068mmol)存於MeOH(3mL)中之溶液中添加HCl(4N，存於1,4-二噁烷中，3mL，12.00mmol)。將溶液升溫至室溫並攪拌2h。然後在減低壓力下濃縮反應混合物且將殘餘物溶解於乙酸乙酯(10mL)中。用飽和NaHCO3(2×10mL)及水(20mL)洗滌有機層；經Na2SO4乾燥且在減低壓力下濃縮。藉由製備型TLC(DCM-MeOH混合物)純化殘餘物，以提供呈棕色固體之(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(8mg,0.021mmol,31%產率)。LC/MS,(ESI) m/z 340.2[(M+H)+，計算值C20H26N3O2,340.2]；LC/MS滯留時間(方法B)：tR=1.27min。HPLC滯留時間(方法A)：t R=8.30及HPLC滯留時間(方法B)：t R=8.97min。1H NMR(400MHz,CD 3 OD)δ ppm 8.53(d,J=5.77Hz,1H),8.33(d,J=9.54Hz,1H),8.08(d,J=5.77Hz,1H),7.00-7.06(m,2H),4.21(m,1H),4.02(m,1H),3.73(s,3H),3.47-3.52(m,1H),3.06(s,3H),1.82-1.93(m,1H),1.67-1.76(m,2H),1.26-1.56(m,6H)。
實例17
(S)-4-胺基-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A. (4-氯吡啶-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
在-5℃下向LHMDS(1M，存於THF，17.11mL,17.11mmol)存於THF(5mL)中之溶液中添加4-氯吡啶-2-胺(1g,7.78mmol)存於THF(5mL)中之溶液且將混合物攪拌5min。向此混合物中添加Boc2O(1.898mL,8.18mmol)存於THF(5mL)中之溶液。在0℃下將混合物攪拌2h且藉由添加NH4Cl水溶液淬滅。藉由添加1.5N HCl將溶液之pH調節至6並用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。用碳酸氫鈉(15mL)、水(15mL)及鹽水(15mL)洗滌合併的有機萃取物。經硫酸鈉乾燥經合併的萃取物並在減低壓力下濃縮。藉由矽膠管柱層析(乙酸乙酯，石油醚梯度)純化殘餘物，以產生(4-氯吡啶-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(1.435g,6.28mmol,81%產率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.10(s,1H),8.23 (d,J=5.20Hz,1H),7.88(d,J=2.00Hz,1H),7.15(dd,J=2.00,5.20Hz,1H),1.48(s,9H)。
部分B. 4-氯-3-甲醯基吡啶-2-基胺基甲酸第三丁基酯
向冷卻至-78℃之(4-氯吡啶-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(1.00g,4.37mmol)存於THF(30mL)中之攪拌溶液中逐滴添加正丁基鋰(2.55M，存於己烷中，4.1mL，10.06mmol)。在完成添加後，在-78℃下將溶液攪拌1h。逐滴添加DMF(1.591mL,20.55mmol)且在-78℃下將所得溶液再攪拌1h。然後藉由添加飽和氯化銨水溶液(20mL)淬滅反應混合物並用乙酸乙酯(2×25mL)萃取。用鹽水(1×20mL)洗滌合併的有機萃取物，經硫酸鈉乾燥，且在減低壓力下濃縮。經由中性氧化鋁層析(乙酸乙酯/己烷)純化粗製殘餘物，以產生呈黃色固體之(4-氯-3-甲醯基吡啶-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(530mg,2.06mmol,27%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl 3 )δ 10.73(s,1H),10.55(s,1H),8.52(d,J=5.3Hz,1H),7.06(d,J=5.3Hz,1H),1.56(s,9H)；LC/MS(ESI)m/e 255.2[(M-H)-，計算值C11H12ClN2O3 255.1]。LC/MS滯留時間(方法A)：t R=1.75min。
部分C. 4-(4-氯-2-氟苯基)-3-甲醯基吡啶-2-基胺基甲酸第三丁基酯
向(4-溴-3-甲醯基吡啶-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(100mg,0.332 mmol)、(4-氯-2-氟苯基)酸(57.9mg,0.332mmol)及碳酸銫(216mg,0.664mmol)存於THF(50mL)及水(8mL)中之攪拌懸浮液中添加Pd(PPh3)4(19.19mg,0.017mmol)且將反應混合物加熱至85℃過夜(14h)。將反應混合物冷卻至室溫，用水(30mL)稀釋並用乙酸乙酯(2×25mL)萃取。用鹽水(1×25mL)洗滌合併的有機萃取物，經硫酸鈉乾燥，且在減低壓力下濃縮。經由矽膠層析(乙酸乙酯/己烷)純化粗製殘餘物，以提供4-(4-氯-2-氟苯基)-3-甲醯基吡啶-2-基胺基甲酸第三丁基酯(60mg,0.17mmol,35%產率)。LC/MS(ESI)m/e 351.2[(M+H)+，計算值C17H17ClFN2O3 351.1]。LC/MS滯留時間(方法A)：t R=2.07min。
部分D. 4-((第三丁氧基羰基)胺基)-8-氯-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-6-鎓氟化物
在0℃下向(4-(4-氯-2-氟苯基)-3-甲醯基吡啶-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(700mg,1.996mmol)存於乙醇(10mL)中之攪拌溶液中添加甲胺(8M，存於EtOH中)(620mg,2.49mL,19.96mmol)且在RT下將反應攪拌5h。在耗盡起始材料後，在減低壓力下去除溶劑。用己烷(50mL)洗滌殘餘物且在真空中乾燥如此獲得之固體，以產生呈黃色固體之4-((第三丁氧基羰基)胺基)-8-氯-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-6-鎓氟化物之氟化物鹽(900mg,1.69mmol,84%產率)。LC/MS(ESI)m/e 344.2[(M)+，計算值C18H19ClN3O2 344.1]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.90min。
部分E. 8-氯-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-4-基胺基甲酸
在RT下向4-((第三丁氧基羰基)胺基)-8-氯-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-6-鎓氟化物(0.35g,0.65mmol)及NaOH(0.162g,4.06mmol)存於DCM(10mL)及水(10mL)之混合物中之攪拌溶液中添加數份KMnO4(0.642g,4.06mmol)且將反應加熱至90℃並保持1h。用水(10mL)稀釋溶液並用DCM(2×20mL)萃取。用水50mL洗滌合併的有機層，經硫酸鈉乾燥，且在減低壓力下濃縮，以產生呈黃色固體之(8-氯-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-4-基)胺基甲酸(305mg,0.422mmol,65%產率)，該固體不進一步純化即繼續使用。LC/MS(ESI)m/e 304.1[(M+H)+，計算值C14H11ClN3O3 304.04]；LC/MS滯留時間(方法D)：t R=1.01min。
部分F. 4-胺基-8-氯-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
在90℃下將(8-氯-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-4-基)胺基甲酸(300mg,0.415mmol)存於濃HCl(15mL,494mmol)中之溶液加熱2h。用飽和碳酸氫鈉溶液將反應混合物之pH調節至8並用DCM(2×30mL)萃取。用鹽水(30mL)洗滌合併的有機層，經硫酸鈉乾燥，且在減低壓力下濃縮。藉由製備型HPLC(0.1% TFA，存於 MeOH中)純化殘餘物，以產生呈單TFA鹽之4-胺基-8-氯-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(30mg,0.110mmol,27%產率)。LC/MS(ESI)m/e 260.0[(M+H)+，計算值C13H11ClN3O 260.05]；LC/MS滯留時間(方法B)：t R=1.18min；HPLC滯留時間(方法A)：t R=5.24min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=6.31min；400MHz,1H NMR(DMSO-d 6 )δ 9.95(s,1H),8.75(s,1H),8.56(d,J=8.80Hz,1H),8.23(d,J=6.80Hz,1H),7.82(dd,J=6.80,7.20Hz,2H),7.54(dd,J=2.00,8.80Hz,1H),3.72(s,3H)。
部分G. 8-氯-4-(4-甲氧基苄基胺基)-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
在0℃下向4-胺基-8-氯-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(30mg,0.059mmol)存於DMF(10mL)中之攪拌溶液中添加NaH(7.09mg,0.295mmol)且將反應攪拌5min。向此混合物中添加1-(氯甲基)-4-甲氧基苯(0.026mL,0.191mmol)且在RT下攪拌16h。藉由添加冰淬滅反應且用乙酸乙酯(2×10mL)萃取反應混合物。用水(25mL)洗滌合併的有機層，經硫酸鈉乾燥，且在減低壓力下濃縮，以產生8-氯-4-((4-甲氧基苄基)胺基)-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(29mg,0.044mmol,75%產率)。LC/MS(ESI)m/e 380.27[(M+H)+，計算值C21H19ClN3O2 380.11]；LC/MS滯留時間(方法D)：t R=0.86min。
部分H. (S)-1-(4-(4-甲氧基苄基胺基)-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯
如實例2部分D中實施反應以提供粗製產物，藉由矽膠管柱使用(乙酸乙酯及己烷)純化該粗製產物，以產生呈黃色油狀物之(S)-(1-((4-((4-甲氧基苄基)胺基)-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(0.29g,0.422mmol,61%產率)。LC/MS(ESI)m/e 561.5[(M+H)+，計算值C32H41N4O5 561.3]；LC/MS滯留時間(方法D)：t R=1.03min。
部分I. (S)-4-胺基-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
在RT下向(S)-(1-((4-((4-甲氧基苄基)胺基)-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(100mg,0.145mmol)存於DCM(10mL)中之攪拌溶液中逐滴添加TFA(4mL,51.9mmol)且在45℃下將反應加熱12h。在完成反應後，在減低壓力下蒸發揮發性有機物並藉由製備型HPLC(0.1%存於水/乙腈中 之TFA，作為流動相)純化所得殘餘物，以產生呈灰白色固體之單TFA鹽(S)-4-胺基-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(16mg,0.046mmol,32%產率)。LC/MS(ESI)m/e 341.2[(M+H)+，計算值C19H25N4O2 341.2]；LC/MS滯留時間(方法B)：t R=1.08min；HPLC滯留時間(方法A)：t R=8.02min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=8.40min；1H NMR(400MHz,MeOD)δ 8.44(d,J=8.80Hz,1H),8.00(d,J=7.20Hz,1H),7.71(d,J=7.20Hz,1H),7.24(d,J=2.40Hz,1H),7.21-7.22(m,1H),4.51(dd,J=3.20,10.80Hz,1H),4.34(dd,J=6.40,10.40Hz,1H),3.84(s,3H),3.78-3.82(m,1H),1.65-1.89(m,3H),1.08(d,J=4.40Hz,3H),1.06(d,J=4.40Hz,3H)。
實例18
(S)-N-(8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-6-甲基-5-側氧基-5,6二氫苯并[c][2,7]萘啶-2-基)乙醯胺
部分A. 4-氯吡啶-2-胺
在RT下向4-氯吡啶-2-胺(8g,62.2mmol)存於乙腈(600mL)中之攪拌溶液中添加數份N-溴琥珀醯亞胺(11.08g,62.2mmol)且將反應攪拌14h。在減低壓力下濃縮反應混合物。用水(50mL)稀釋殘餘物並用EtOAc(3×50mL)萃取。用水(100mL)、鹽水(100mL)洗滌合併的有機層並經硫酸鈉乾燥。在減低壓力下濃縮有機物，以提供呈黃色固體 之5-溴-4-氯吡啶-2-胺(13g,99%)，該黃色固體不進一步純化即使用。LC/MS(ESI)m/e 207.0[(M+H)+，計算值C5H5BrClN2 206.9]；LC/MS滯留時間(方法B)：t R=0.8min。
部分B. N-(5-溴-4-氯吡啶-2-基)乙醯胺
在0℃下向5-溴-4-氯吡啶-2-胺(11.6g,55.9mmol)存於吡啶(100mL)之攪拌溶液中添加乙醯氯(3.98mL,55.9mmol)且在RT下將反應攪拌3h。用冷水淬滅反應混合物且在減低壓力下濃縮。用水(50mL)稀釋殘餘物並用EtOAc(3×50mL)萃取。用水(100mL)、鹽水(100mL)洗滌合併的有機層並經硫酸鈉乾燥。在減低壓力下濃縮有機物，以提供呈白色固體之N-(5-溴-4-氯吡啶-2-基)乙醯胺(14.6g,55.9mmol,100%產率)，該白色固體不進一步純化即繼續使用。LC/MS(ESI)m/e 249[(M+H)+，計算值C7H7BrClN2O 248.9],LC/MS滯留時間(方法B)：t R=1.64min；1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.87(s,1H),8.58(s,1H),8.33(s,1H),2.11(s,3H)。
部分C. N-(4-氯-5-乙烯基吡啶-2-基)乙醯胺
向N-(5-溴-4-氯吡啶-2-基)乙醯胺(7g,28.1mmol)、2,4,6-三乙烯基-1,3,5,2,4,6-三氧雜三硼雜環己烷與吡啶之複合物(1：1)(8.78g,36.5mmol)、存於7mL水中之碳酸鈉(5.95g,56.1mmol)溶液及肆(三苯基膦)鈀(0.973g,0.842mmol)存於甲苯(50mL)與乙醇(8mL)之混合物中之攪拌溶液中，使氮氣鼓泡5min。在85℃下將反應混合物加熱14小時。在完成後，用EtOAc(50mL)稀釋反應物，經由矽藻土(Celite®)過 濾。用水稀釋濾液並分離有機層，用鹽水溶液洗滌，經硫酸鈉乾燥。在減低壓力下濃縮有機物並藉由快速層析管柱(comb flash column)120g使用己烷/乙酸乙酯純化所得之殘餘物。以30%存於己烷中之EtOAc溶析產物並濃縮所需流分，產生呈黃色固體之N-(4-氯-5-乙烯基吡啶-2-基)乙醯胺(5.92g,27.7mmol,99%產率)。LC/MS(ESI)m/e 197.2[(M+H)+，計算值C9H10ClN2O 197.04]LC/MS滯留時間(方法A)：t R=1.50min；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 10.79(s,1H),8.64(s,1H),8.18(d,J=6.40Hz,1H),6.88(dd,J=11.20,17.60Hz,1H),5.99(dd,J=0.80,17.60Hz,1H),5.47(dd,J=0.80,11.40Hz,1H),2.12(s,3H)。
部分D. N-(4-氯-5-甲醯基吡啶-2-基)乙醯胺
在0℃下向N-(4-氯-5-乙烯基吡啶-2-基)乙醯胺(6g,30.5mmol)及2,6-二甲基吡啶(7.11mL,61.0mmol)存於1,4-二噁烷(110mL)與水(25mL)之混合物中之攪拌溶液中添加四氧化鋨(2.5%，存於2-甲基-2-丙醇中，9.58mL,30.5mmol)，之後添加高碘酸鈉(19.58g,92mmol)且將反應攪拌4h。用水稀釋反應混合物並用EtOAc(2×100mL)萃取。用鹽水溶液洗滌合併的有機層，經硫酸鈉乾燥，在減低壓力下濃縮並藉由comb flash管柱120g二氧化矽管柱使用己烷/EtOAc作為溶析劑純化如此獲得之殘餘物。以30%存於己烷中之EtOAc分離期望產物。在減低壓力下濃縮所需流分，以產生呈灰白色固體之N-(4-氯-5-甲醯基吡啶-2-基)乙醯胺(5.8g,28.1mmol,92%產率)。LC/MS(ESI)m/e 197.0[(M)-，計算值C8H6ClN2O2 197.04]LC/MS滯留時間(方法A)：t R=1.21min；1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.20(s,1H),10.18(s,1H),8.76(s,1H),8.27(s,1H),2.16(s,3H)。
部分E. N-(4-(4-氯-2-氟苯基)-5-甲醯基吡啶-2-基)乙醯胺
向N-(4-氯-5-甲醯基吡啶-2-基)乙醯胺(3g,15.11mmol)、(4-氯-2-氟苯基)酸(2.63g,15.11mmol)、碳酸銫(9.84g,30.2mmol)存於水(8mL)與THF(25mL)之混合物中之攪拌溶液中添加肆(三苯基膦)鈀(19.19mg,0.017mmol)且將反應加熱至85℃過夜(14h)。用水(25mL)稀釋反應混合物並用EtOAc(2×25mL)萃取。用水(25mL)、鹽水(25mL)洗滌合併的有機層，經硫酸鈉乾燥，且在減低壓力下濃縮。藉由矽膠層析(己烷/EtOAc作為溶析劑)純化殘餘物，產生呈灰白色固體之N-(4-(4-氯-2-氟苯基)-5-甲醯基吡啶-2-基)乙醯胺(2.8g,9.01mmol,60%產率)。LC/MS(ESI)m/e 291.0[(M)-，計算值C14H9ClFN2O2 291.0],LC/MS滯留時間(方法A)：t R=1.69min；1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.14(s,1H),9.84(d,J=Hz,1H),8.88(s,1H),8.13(s,1H),7.61(dd,J=2.00,10.00Hz,1H),7.46-7.48(m,2H),2.11(s,3H)。
部分F. 2-乙醯胺基-8-氯-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-6-鎓氟化物
在0℃下向N-(4-(4-氯-2-氟苯基)-5-甲醯基吡啶-2-基)乙醯胺(0.39g,1.332mmol)及4Å分子篩(50mg)存於二氯甲烷(35mL)中之攪拌溶液中逐滴添加甲胺(8M，存於EtOH中，0.041g,0.166mL,1.332mmol)且在RT下將反應攪拌過夜(12h)。用DCM(40mL)稀釋反應混合物且 經由矽藻土床(Celite®)過濾。在減低壓力下濃縮濾液，以提供呈黃色固體之2-乙醯胺基-8-氯-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-6-鎓氟化物(450mg,1.24mmol,93%產率)，該黃色固體不純化即用於下一步驟。LC/MS(ESI)m/e 286.1[(M)+，計算值C15H13ClN3O 286.1]；LC/MS滯留時間(方法D)：t R=0.71min。
部分G. N-(8-氯-6-甲基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-2-基)乙醯胺
在0℃下向2-乙醯胺基-8-氯-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-6-鎓氟化物(2.1g,2.47mmol)存於THF(20mL)與MeOH(5mL)之混合物中之攪拌溶液中添加三份NaBH4(0.199g,5.27mmol)且在RT下將反應攪拌45min。在減低壓力下去除揮發性有機物；添加飽和氯化銨溶液(30mL)並萃取用乙酸乙酯(2×30mL)溶液。用鹽水(25mL)洗滌合併的有機層，經硫酸鈉乾燥，且在減低壓力下濃縮。藉由矽膠管柱層析(己烷/乙酸乙酯)純化殘餘物，以提供呈黃色固體之N-(8-氯-6-甲基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-2-基)乙醯胺(0.71g,2.29mmol,93%產率)。LC/MS(ESI)m/e 288.2[(M+H)+，計算值C15H15ClN3O 288.1]；LC/MS滯留時間(方法C)；t R=1.87min；HPLC滯留時間(方法A)：t R=12.76min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=13.07min；1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 10.46(s,1H),8.36(s,1H),8.16(d,J=0.40Hz,1H),7.63(d,J=8.40Hz,1H),6.88(dd,J=2.00,8.00Hz,1H),6.82(d,J=2.00Hz,1H),4.26(s,2H),2.89(s,3H),2.11(s,3H)。
部分H. N-(8-氯-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-2-基)乙醯胺
在RT下向N-(8-氯-6-甲基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-2-基)乙醯胺(0.6g,1.199mmol)存於DCM(20mL)中之攪拌溶液中添加三份錳酸鋇(1.536g,5.99mmol)且在45℃下將反應加熱60h。在完成反應後，用DCM(70mL)稀釋反應混合物且經過矽藻土(Celite®)。在減低壓力下濃縮濾液。藉由矽膠管柱層析(DCM/MeOH作為溶析劑)純化殘餘物，以產生呈灰白色固體之N-(8-氯-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-2-基)乙醯胺(0.4g,1.071mmol,89%產率)。LC/MS(ESI)m/e 302.1[(M+H)+，計算值C15H13ClN3O2 302.1]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.88min；HPLC滯留時間(方法A)；t R=8.82min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=7.99min；1H NMR(400MHz,DMS0-d 6 )δ 11.01(s,1H),9.24(s,1H),8.92(s,1H),8.26(d,J=8.80Hz,1H),7.69(d,J=2.00Hz,1H),7.48(dd,J=2.00,8.80Hz,1H),3.68(s,3H),2.20(s,3H)。
部分I. (S)-1-(2-乙醯胺基-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯
如實例2部分D中實施反應，以提供呈棕色油狀物之粗製(S)-1-(2-乙醯胺基-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯(160mg,0.33mmol，純度為20.5%，藉由LC/MS測定)。將此不純化即取用於下一步驟。LC/MS(ESI)m/e 483.34[(M+H)+，計算值C26H35N4O5 483.25]；LC/MS滯留時間(方法 E)：t R=1.13min。
部分J. (S)-N-(8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-2-基)乙醯胺
在0℃下向(S)-(1-((2-乙醯胺基-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(140mg,0.059mmol)存於CH2Cl2(15mL)中之攪拌溶液中添加TFA(1.2mL,15.58mmol)且在RT下將反應混合物攪拌40min。在完成反應後，在減低壓力下蒸發揮發性有機物並藉由製備型HPLC(0.1%存於水/乙腈中之TFA)純化殘餘物，以產生呈單TFA鹽之(S)-N-(8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-2-基)乙醯胺(2mg,3.93μmol,6.6%產率)。LC/MS(ESI)m/e 383.2[(M+H)+，計算值C21H27N4O3 383.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.80min；HPLC滯留時間(方法A)：t R=5.14min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=5.62min；1H NMR(400MHz,CD 3 OD)δ 9.28(s,1H),8.93(s,1H),8.35(d,J=8.80Hz,1H),7.17(s,1H),7.15(d,J=2.00Hz,1H),4.46(d,J=8.80Hz,1H),4.28(dd,J=6.40,10.80Hz,1H),3.76-3.79(m,4H),2.29(s,3H),1.65-1.88(m,3H),1.08(d,J=4.40Hz,3H),1.07(d,J=4.40Hz,3H)。
實例19
(R)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A. (R)-(1-((4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
如實例16中所述使用部分H中之(R)-(1-羥基-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯製備標題化合物，以提供呈黃色固體之(R)-(1-((4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(620mg,0.564mmol,49%產率)。LC/MS,(ESI)m/z 440.3[(M+H)+，計算值C25H34N3O4 440.3]。
部分B. (R)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
用HCl(1.160mL,4.64mmol)處理(R)-(1-((4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(102mg,0.232mmol)存於二氯甲烷(1mL)中之環境溫度溶液並攪拌1h。將所得混合物濃縮成油狀物並藉由反相高效液相層析(Phenomenex Luna C18 30×100mm 10微米；水/甲醇/0.1% TFA梯度 溶析)純化。用飽和碳酸氫鈉水溶液中和含有產物之流分且在減低壓力下濃縮。使殘餘物在乙酸乙酯與鹽水之間分配並分離各層。用乙酸乙酯將水層再萃取兩次並用鹽水將彙集之有機物洗滌一次，經硫酸鎂乾燥，過濾，並濃縮，以提供呈乳狀油狀物之(R)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(11.5mg,0.033mmol,14%產率)。LC/MS,(ESI)m/z 340.2[(M+H)+，計算值C20H26N3O2 340.2]；HPLC滯留時間(方法C)：t R=13.02min；HPLC滯留時間(方法D)：t R=13.05min；1H NMR(500MHz，甲醇-d4)δ 8.68-8.63(m,2H),8.58(d,J=9.0Hz,1H),7.22(dd,J=9.0,2.3Hz,1H),7.20(d,J=2.3Hz,1H),4.52(dd,J=10.5,3.3Hz,1H),4.34(dd,J=10.7,6.6Hz,1H),3.82(s,3H),3.80-3.75(m,1H),3.25(s,3H),1.91-1.81(m,1H),1.80-1.73(m,1H),1.72-1.64(m,1H),1.07(d,J=5.8Hz,3H),1.06(d,J=5.8Hz,3H)。
實例20
(R)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A. (R)-(1-((9-氯-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
在90℃下將如實例19部分A中所述製備之(R)-(1-((4,6-二甲基-5- 側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(248mg,0.564mmol)、NCS(151mg,1.128mmol)及乙腈(5mL)之混合物加熱1h且然後在室溫下攪拌過夜。在減低壓力下濃縮粗製材料，以提供(R)-(1-((9-氯-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(15mg,0.032mmol,6%粗製產率)。混合物不進一步純化即繼續使用。LC/MS,(ESI)m/z 474.2[(M+H)+，計算值C25H33ClN3O4 474.2]。
部分B. (R)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
用HCl(4M存於1,4-二噁烷)(0.396mL,1.58mmol)處理(R)-(1-((9-氯-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(15mg,0.032mmol)存於二氯甲烷(0.5mL)中之環境溫度溶液並攪拌1h。濃縮所得混合物並藉由反相高效液相層析(Phenomenex Luna C18 30×100mm 10微米；水/乙腈/10mM乙酸銨梯度溶析)純化殘餘物。在減低壓力下濃縮含有產物之流分，以提供呈白色固體之(R)-(1-((9-氯-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(9.0mg,0.023mmol,73%產率)。LC/MS,(ESI)m/z 373.2[(M+H)+，計算值C20H25ClN3O2 373.2]；HPLC滯留時間(方法C)：t R=14.21min；HPLC滯留時間(方法D)：t R=14.30min；1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ 8.70(d,J=5.8Hz,1H),8.21(s,1H),7.79(d,J=5.8Hz,1H),6.83(s,1H),4.18(dd,J=8.8,3.8Hz,1H),4.04-3.97(m,1H),3.76(s,3H), 3.48(qd,J=6.9,3.5Hz,1H),3.17(s,3H),1.84(dquin,J=13.7,6.7Hz,1H),1.49(t,J=7.0Hz,2H),1.03(d,J=6.5Hz,3H),1.01(d,J=6.5Hz,3H)。
實例21
(S)-8-(2-胺基-3-環丙基丙氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A：(S)-(1-環丙基-3-((4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)丙-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
如實例16中所述使用部分H中之(S)-(1-環丙基-3-羥基丙-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(0.287g,1.334mmol)製備標題化合物，以提供(呈無色油狀物之S)-(1-環丙基-3-((4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)丙-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(230mg,0.526mmol,59%產率)。LC/MS,(ESI)m/z 438.3[(M+H)+，計算值C25H32N3O4 438.2]；1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ 8.61(d,J=5.5Hz,1H),8.09(d,J=8.8Hz,1H),7.77(d,J=5.5Hz,1H),6.96-6.79(m,2H),4.92(br.s.,1H),4.35-3.98(m,3H),3.70(s,3H),3.13(s,3H),1.63(t,J=6.9Hz,2H),1.47(s,9H),0.83-0.70(m,1H),0.61-0.42(m,2H),0.21-0.04(m,2H)。
部分B：(S)-8-(2-胺基-3-環丙基丙氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
用HCl(4M，存於1,4-二噁烷中)(0.571mL,2.286mmol)處理(S)-(1-環丙基-3-((4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)丙-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(50mg,0.114mmol)(如實例16中所述使用部分H中之(S)-(1-環丙基-3-羥基丙-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(0.287g,1.334mmol)製備)存於乙醚(1mL)中之環境溫度懸浮液並攪拌1h。在減低壓力下將所得混合物濃縮成黃色固體。藉由反相高效液相層析(Phenomenex Luna C18 30×100mm 10微米；水/甲醇/TFA梯度溶析)純化粗製材料。在減低壓力下濃縮含有產物之流分。使所得殘餘物在飽和碳酸氫鈉水溶液與乙酸乙酯之間分配。分離各層且用乙酸乙酯將水層再萃取兩次。用鹽水將彙集之有機物洗滌一次，經硫酸鎂乾燥，過濾，並濃縮，以提供呈白色固體之(S)-8-(2-胺基-3-環丙基丙氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(9.0mg,0.025mmol,22%產率，對於最終步驟)。LC/MS,(ESI)m/z 338.2[(M+H)+，計算值C20H24N3O2 338.2]；HPLC滯留時間(方法C)：t R=13.05min；HPLC滯留時間(方法D)：t R=13.88min；1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ 8.65(d,J=5.8Hz,1H),8.16(d,J=8.8Hz,1H),7.83(d,J=5.5Hz,1H),6.92(dd,J=8.9,2.4Hz,1H),6.87(d,J=2.3Hz,1H),4.15(dd,J=8.9,3.9Hz,1H),3.97(dd,J=8.8,7.0Hz,1H),3.75(s,3H),3.48-3.35(m,1H),3.17(s,3H),1.59-1.42(m,2H),0.87-0.74(m,1H),0.64-0.47(m,2H),0.25-0.17(m,1H),0.16-0.10(m,1H)。
實例22
(S)-8-(2-胺基-3-環丁基丙氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A：(S)-(1-環丁基-3-((4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)丙-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
如實例16中所述使用部分H中之(S)-(1-環丁基-3-羥基丙-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(0.359g,1.566mmol)製備標題化合物，以提供呈無色油狀物之(S)-(1-環丁基-3-((4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)丙-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(400mg,0.886mmol,85%產率)。LC/MS,(ESI)m/z 452.3[(M+H)+，計算值C26H34N3O4 452.3]；1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ 8.62(d,J=5.8Hz,1H),8.11(d,J=8.8Hz,1H),7.79(d,J=5.5Hz,1H),6.94-6.79(m,2H),4.76(d,J=7.5Hz,1H),4.07(d,J=3.5Hz,2H),3.93(br.s.,1H),3.71(s,3H),3.14(s,3H),2.55-2.35(m,1H),2.15-2.05(m,2H),1.97-1.59(m,7H),1.47(s,9H)。
部分B：(S)-8-(2-胺基-3-環丁基丙氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘 啶-5(6H)-酮
用HCl(4M存於1,4-二噁烷)(0.775mL,3.10mmol)處理(S)-(1-環丁基-3-((4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)丙-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(70mg,0.155mmol)存於乙醚(1mL)中之環境溫度懸浮液並攪拌1h。在減低壓力下將所得混合物濃縮成黃色固體。藉由反相高效液相層析(Phenomenex Luna C18 30×100mm 10微米；水/甲醇/TFA梯度溶析)純化粗製材料。在減低壓力下濃縮含有產物之流分。使所得殘餘物在飽和碳酸氫鈉水溶液與乙酸乙酯之間分配。分離各層且用乙酸乙酯將水層再萃取兩次。用鹽水將彙集之有機物洗滌一次，經硫酸鎂乾燥，過濾，且在減低壓力下濃縮，以提供呈白色固體之(S)-8-(2-胺基-3-環丁基丙氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(17mg,0.046mmol,30%產率)。LC/MS,(ESI)m/z 352.3[(M+H)+，計算值C21H26N3O2 352.2]；HPLC滯留時間(方法C)：t R=14.15min；HPLC滯留時間(方法D)：t R=14.78min；1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ 8.64(d,J=5.8Hz,1H),8.15(d,J=9.0Hz,1H),7.82(d,J=5.8Hz,1H),6.89(dd,J=8.9,2.4Hz,1H),6.84(d,J=2.3Hz,1H),4.04(dd,J=8.9,3.9Hz,1H),3.86(dd,J=8.8,7.5Hz,1H),3.73(s,3H),3.23(tdd,J=7.5,5.5,3.8Hz,1H),3.16(s,3H),2.60-2.43(m,1H),2.21-2.08(m,2H),2.01-1.81(m,2H),1.80-1.55(m,4H)。
實例23
(S)-8-(2-胺基-3-環丙基丙氧基)-9-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
如實例20中所述製備標題化合物，以提供呈淡黃色固體之(S)-8-(2-胺基-3-環丙基丙氧基)-9-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(12.5mg,0.030mmol,24%產率，對於最終步驟)。LC/MS,(ESI)m/z 372.2[(M+H)+，計算值C20H23ClN3O2 372.2]；HPLC滯留時間(方法C)：t R=14.16min；HPLC滯留時間(方法D)：t R=15.03min；1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ 8.66(d,J=5.5Hz,1H),8.17(s,1H),7.74(d,J=5.8Hz,1H),6.81(s,1H),4.22(dd,J=8.7,3.9Hz,1H),4.05(dd,J=8.5,7.0Hz,1H),3.73(s,3H),3.49(qd,J=6.8,4.0Hz,1H),3.20-3.12(m,3H),1.63-1.46(m,2H),0.89-0.75(m,1H),0.67-0.45(m,2H),0.25-0.18(m,1H),0.17-0.10(m,1H)。
實例24
(S)-8-(2-胺基-3-環丁基丙氧基)-9-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
如實例20中所述製備標題化合物，以提供呈無色固體之(S)-8-(2-胺基-3-環丁基丙氧基)-9-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(10.5mg,0.027mmol,24%產率，對於最終步驟)。LC/MS,(ESI)m/z 386.2[(M+H)+，計算值C21H25ClN3O2 386.2]；HPLC滯留時間(方法C)：t R=14.92min；HPLC滯留時間(方法D)：t R=15.61min；1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ 8.68(d,J=5.5Hz,1H),8.20(s,1H),7.77(d,J=5.8Hz,1H),6.81(s,1H),4.14(dd,J=8.7,3.9Hz,1H),4.01-3.91(m,1H),3.75(s,3H),3.34(d,J=4.5Hz,1H),3.17(s,3H),2.62-2.44(m,1H),2.22-2.06(m,2H),2.01-1.82(m,2H),1.82-1.63(m,4H)。
實例25
(S)-8-(2-胺基-3-環丙基丙氧基)-4,6,9-三甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A：(S)-(1-((9-溴-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-3-環丙基丙-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
將如實例21部分A中所述製備之(S)-(1-環丙基-3-((4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)丙-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(100mg,0.229mmol)存於乙腈(5mL)中之混合物加熱至90℃並保持1h，產生均質橙色溶液。用飽和碳酸氫鈉水溶液處理該溶液並在減低壓力下濃縮。使殘餘物在鹽水與乙酸乙酯之間分配並分離各層。用乙酸乙酯將水層再萃取兩次，並用鹽水將彙集之有機物洗滌一次，經硫酸鎂乾燥，過濾，並濃縮成固體。經由矽膠層析(1%存於甲醇/二氯甲烷中之氨)純化固體，以提供呈無色油狀物之(S)-(1-((9-溴-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-3-環丙基丙-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(53mg,0.103mmol,45%產率)，該油狀物在靜置後固化。LC/MS,(ESI)m/z 516.2,518.2 Br模式[(M+H)+，計算值C25H31BrN3O4 516.2]。
部分B：(S)-(1-環丙基-3-((4,6,9-三甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)丙-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
將(S)-(1-((9-溴-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-3-環丙基丙-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(51mg,0.099mmol)、三甲基硼氧環烷(0.015mL,0.109mmol)、PdCl2(dppf)-CH2Cl2加合物(8.06mg,9.88μmol)、碳酸銫(64.4mg,0.198mmol)、1,4-二噁烷(1mL)及水(0.33mL)之環境溫度混合物裝入壓力額定小瓶中並用氮流吹掃10分鐘。將小瓶密封並在氮中在75℃下攪拌12h。將所得混合物冷卻至室溫並真空過濾。在減低壓力下濃縮濾液並使殘餘物在乙酸乙酯與鹽水之間分配。分離各層，並用乙酸乙酯將水層再萃取兩次。經硫酸鎂乾燥彙集之有機物，過濾，並濃縮成油狀物。經由矽膠層析(1% 2M存於甲醇/二氯甲烷中之氨)純化油狀物，以提供呈無色油狀物之(S)-(1-環丙基-3-((4,6,9-三甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)丙-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(41mg,0.091mmol,92%產率)。LC/MS,(ESI)m/z 452.3[(M+H)+，計算值C26H34N3O4 452.3]；1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ 8.59(d,J=5.8Hz,1H),7.90(s,1H),7.78(d,J=5.8Hz,1H),6.74(s,1H),4.91(d,J=7.3Hz,1H),4.35-4.04(m,3H),3.71(s,3H),3.14(s,3H),2.31(s,3H),1.72-1.59(m,2H),1.48(s,9H),0.86-0.70(m,1H),0.60-0.44(m,2H),0.21-0.00(m,2H)。
部分C：(S)-8-(2-胺基-3-環丙基丙氧基)-4,6,9-三甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
用HCl(4M，存於1,4-二噁烷中)(0.454mL,1.816mmol)處理(S)-(1-環丙基-3-((4,6,9-三甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)丙-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(41mg,0.091mmol)存於甲醇(0.5mL)中之環境溫度溶液並攪拌1h。在減低壓力下將所得混合物濃縮成黃色固體。藉由反相高效液相層析(Phenomenex Luna C18 30x100mm 10微米；水/甲醇/TFA梯度溶析)純化粗製材料。用飽和碳酸氫鈉水溶液中和含有產物之流分且在減低壓力下濃縮。使所得殘餘物在水與乙酸乙酯之間分配並分離各層。用乙酸乙酯將水層再萃取兩次並經硫酸鎂乾燥彙集之有機物，過濾，並濃縮，以提供呈無色固體之(S)-8-(2-胺基-3-環丙基丙氧基)-4,6,9-三甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(10.7mg,0.028mmol,93%產率)。LC/MS,(ESI)m/z 352.2[(M+H)+，計算值C21H26N3O2 352.2]；HPLC滯留時間(方法C)：t R=13.71min；HPLC滯留時間(方法D)：t R=14.29min；1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ 8.63(d,J=5.5Hz,1H),7.98(s,1H),7.84(d,J=5.8Hz,1H),6.74(s,1H),4.15(dd,J=8.8,4.0Hz,1H),4.00(dd,J=8.7,6.9Hz,1H),3.76(s,3H),3.50-3.37(m,1H),3.17(s,3H),2.37(s,3H),1.61-1.44(m,2H),1.02-0.74(m,1H),0.68-0.45(m,2H),0.30-0.06(m,2H)。
實例26
(S)-8-(2-胺基-3-環丁基丙氧基)-4,6,9-三甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
如實例25中所述自如實例22部分A中所述製備之(S)-(1-環丁基-3-((4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)丙-2-基)胺基甲酸第三丁基酯開始製備標題化合物，以提供呈模糊薄膜之(S)-8-(2-胺基-3-環丁基丙氧基)-4,6,9-三甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(18mg,0.046mmol,26%產率，對於最終步驟)。LC/MS,(ESI)m/z 366.3[(M+H)+，計算值C22H28N3O2 366.2]；HPLC滯留時間(方法C)：t R=14.65min；HPLC滯留時間(方法D)：t R=15.04min；1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ 8.62(d,J=5.8Hz,1H),7.95(s,1H),7.82(d,J=5.8Hz,1H),6.69(s,1H),4.05(dd,J=8.8,4.0Hz,1H),3.88(dd,J=8.5,7.3Hz,1H),3.74(s,3H),3.34-3.20(m,1H),3.16(s,3H),2.63-2.46(m,1H),2.36(s,3H),2.23-2.08(m,2H),2.01-1.59(m,6H)。
實例27
(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-(二氟甲基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A：8-氯-9-碘-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮 向如實例16部分G中所述製備之8-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(1g,3.87mmol)存於乙酸(30mL)中之溶液中添加H2SO4(0.021mL,0.387mmol)及高碘酸(0.881g,3.87mmol)。在80℃下將溶液加熱20min，然後添加碘(0.294g,1.160mmol)。在80℃下將混合物再攪拌3h。將溶液冷卻至室溫，然後在減低壓力下濃縮。將EtOAc添加至殘餘物且用飽和NaHCO3水溶液、之後H2O洗滌該層。經Na2SO4乾燥合併的有機層，過濾且在減低壓力下濃縮，以提供呈灰白色固體之8-氯-9-碘-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(1.2g,3.12mmol,81%粗製產率)。該材料不進一步純化即繼續使用。LC/MS(ESI)m/e 385.0[(M+H)+，計算值C14H11ClIN2O,385.0]；LC/MS滯留時間(方法B)：t R=1.09min。
部分B：8-氯-4,6-二甲基-9-乙烯基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
用氮吹掃8-氯-9-碘-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(1.2g,2.71mmol)、2,4,6-三乙烯基環三硼氧烷吡啶複合物(0.784g,3.26mmol)、肆(三苯基膦)鈀(0.157g,0.136mmol)及Na2CO3(0.575g,5.43mmol)存於甲苯(30mL)及水(0.5mL)中之溶液且在90℃下加熱16h。在冷卻至室溫後，在減低壓力下濃縮混合物。將殘餘物吸收於乙酸乙酯中並經由矽藻土(Celite®)過濾。用鹽水及水洗滌EtOAc層。經Na2SO4乾燥合併的有機層，過濾並在減低壓力下濃縮。藉由矽膠急驟層析使用EtOAc-己烷作為溶析劑純化粗製材料，以提供呈棕色膠狀固體之8-氯-4,6-二甲基-9-乙烯基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(0.6g,1.43 mmol,68%產率))。LC/MS(ESI)m/e 285.0[(M+H)+，計算值C16H14ClN2O,285.1]；LC/MS滯留時間(方法B)：tR=2.25min。
部分C：8-氯-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-9-甲醛
向冷卻至0℃之8-氯-4,6-二甲基-9-乙烯基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(600mg,2.107mmol)、四氧化鋨(2.5%，存於2-甲基-2-丙醇中)(0.794mL,0.063mmol)及2,6-二甲基吡啶(0.491mL,4.21mmol)存於1,4-二噁烷(30mL)及水(30mL)中之溶液中添加高碘酸鈉(1803mg,8.43mmol)。將混合物升溫至室溫並攪拌3h。用乙酸乙酯稀釋混合物並經由矽藻土(Celite®)過濾。在減低壓力下濃縮有機層，以提供棕色固體。用己烷(3×20mL)洗滌固體並在真空中乾燥，以提供呈膠狀棕色固體之8-氯-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-9-甲醛(0.6g,2.107mmol,84%產率)。LC/MS(ESI)m/e 287.0[(M+H)+，計算值C15H12ClN2O2,287.1]；LC/MS滯留時間(方法B)：t R=2.03min。
部分D：8-氯-9-(二氟甲基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
向8-氯-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-9-甲醛 (600mg,1.779mmol)存於DCM(15mL)中之溶液中添加雙-(2-甲氧基乙基)胺基三氟化硫(Deoxo-Fluor)(1.968g,8.89mmol)。然後在40℃下將混合物加熱3h。在冷卻至室溫後，用DCM稀釋反應混合物並用飽和NaHCO3水溶液、之後H2O洗滌DCM層，經Na2SO4乾燥，過濾並在減低壓力下濃縮。藉由矽膠急驟層析使用EtOAc-己烷作為溶析劑純化殘餘物，以提供呈灰白色固體之8-氯-9-(二氟甲基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(0.7g,1.519mmol,84%產率)。LC/MS(ESI)m/e 309.0[(M+H)+，計算值C15H12ClF2N2O,309.1]；LC/MS滯留時間(方法B)：t R=2.38min。1H NMR(400MHz，甲醇-d 4)δ ppm 8.68-8.74(m,2H),8.32(d,1H),7.78(s,1H),7.00-7.33(m,1H),3.79(s,3H),3.13(s,3H)。
部分E：(S)-(1-((9-(二氟甲基)-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
在80℃下將8-氯-9-(二氟甲基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(700mg,1.519mmol)、(S)-(1-羥基-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(660mg,3.04mmol)、2-二第三丁基膦基-2',4',6'-二-異丙基-1,1'-聯苯(387mg,0.912mmol)、PdOAc2(34.1mg,0.152mmol)及Cs2CO3(990mg,3.04mmol)存於甲苯(20mL)中之溶液加熱16h。在冷卻至室溫後，在減低壓力下濃縮混合物。將殘餘物吸收於乙酸乙酯中並經由矽藻土(Celite®)過濾。用鹽水及水洗滌有機層，經由Na2SO4乾燥，過濾並在減低壓力下濃縮。藉由矽膠急驟層析使用EtOAc-己烷作 為溶析劑純化殘餘物，以提供呈棕色膠狀固體之(S)-(1-((9-(二氟甲基)-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(0.6g,0.58mmol,54%產率)。LC/MS(ESI)m/e 490.2[(M+H)+，計算值C26H34F2N3O4,490.2]；LC/MS滯留時間(方法B)：t R=2.72min。
部分F：(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-(二氟甲基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
在0℃下向(S)-(1-((9-(二氟甲基)-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(500mg,0.480mmol)存於MeOH(10mL)中之溶液中添加存於1,4-二噁烷(20mL,80mmol)中之4N HCl。將溶液升溫至室溫並攪拌2h。然後在減低壓力下濃縮該混合物。將殘餘物吸收於EtOAc中並用飽和NaHCO3水溶液、之後H2O洗滌EtOAc層，經Na2SO4乾燥，過濾並在減低壓力下濃縮。藉由製備型HPLC純化殘餘物，以提供呈淡黃色固體之(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-(二氟甲基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(60mg,0.149mmol,31%產率)。LC/MS(ESI)m/e 390.2[(M+H)+，計算值C21H26F2N3O2，390.2]；LC/MS滯留時間(方法A)：t R=2.09min；HPLC滯留時間(方法A)：t R=10.1min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=9.18min；1H NMR(400MHz，甲醇-d 4)δ ppm 8.73(s,1H),8.66(s,2H),7.07-7.41(m,2H),4.66-4.53(m,1H),4.52-4.49(m,1H),3.78-3.89(m,4H),3.22(s,3H),1.74- 1.88(m,2H),1.63-1.71(m,1H),1.04(m,6H)。
實例28
(2,4-二甲基-1-((6-甲基-5-側氧基-5,6二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
部分A. (2,4-二甲基-1-((6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
使如實例2部分C中所述製備之8-氯-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(0.15g,0.613mmol)，及(1-羥基-2,4-二甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(0.284g,1.226mmol)經受如實例2部分D中所述之醚合成，以提供呈淡黃色固體之(2,4-二甲基-1-((6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(0.3g,28%產率)。LC/MS(ESI)m/e 440.2[(M+H)+，計算值C25H34N3O4 440.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=2.67min。
部分B. 8-((2-胺基-2,4-二甲基戊基)氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
取(2,4-二甲基-1-((6-甲基-5-側氧基-5,6二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯進一步用於如實例2部分E中所述脫除Boc之保護，以提供呈灰白色固體之8-((2-胺基-2,4-二甲基戊基)氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(30mg,12%產率)。LC/MS(ESI)m/e 340.0[(M+H)+，計算值C20H26N3O2,340.2]；LC/MS滯留時間(方法G)：t R=1.88min。1H NMR(400MHz，甲醇-d 4 )δ ppm 9.43(s,1H),8.73(d,J=6.0Hz,1H),8.35(d,J=8.5Hz,1H),8.19(d,J=6.0Hz,1H),7.12-7.01(m,2H),4.05-3.92(m,2H),3.77(s,3H),1.95-1.80(m,1H),1.58(qd,J=14.2,5.5Hz,2H),1.30(s,3H),1.04(d,J=6.5Hz,3H),1.01(d,J=6.5Hz,3H)。對掌性HPLC(方法CHIRALPAK AD-H(250×4.6)mm。5微米，流動相CO2(65%)，共溶劑0.3%存於MeOH(35%)中之DEA，回壓101)，對掌性SFC滯留時間t R1=5.44min；對掌性SFC滯留時間t R2=7.77min。
實例29
8-((2-胺基-2,4-二甲基戊基)氧基)-7-氟-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A. 4-氯-2-甲基菸酸甲酯
向2,4-二氯菸酸甲酯(10.0g,48.5mmol)存於1,4-二噁烷(400mL)與水(40mL)之溶劑混合物中之溶液中添加三甲基硼氧環烷(6.79mL,48.5mmol)、之後PdCl2(dppf)-CH2Cl2加合物(1.982g,2.427mmol)及碳酸銫(31.6g,97mmol)。用氬將反應混合物脫氣5分鐘。將反應混合物加熱至回流並保持8h。將反應混合物冷卻至室溫並經由矽藻土(Celite®)過濾。用乙酸乙酯洗滌床且在減低壓力下濃縮合併的濾液，以提供粗製產物，藉由矽膠管柱層析(乙酸乙酯及石油醚之梯度)純化該粗製產物，以提供呈黃色液體之4-氯-2-甲基菸酸甲酯(5.20g,28mmol,58%產率)。LC/MS(ESI)m/e 185.7[(M+H)+，計算值C8H8ClNO2 185.6]；LC/MS滯留時間(方法G)：t R=1.90min。
部分B. 4-碘-2-甲基菸酸甲酯
向4-氯-2-甲基菸酸甲酯(6.00g,32.3mmol)存於乙腈(80mL)中之溶液中添加乙醯氯(3.45mL,48.5mmol)、之後碘化鈉(48.5g,323mmol)。在80℃下將反應混合物加熱16hr。將反應混合物蒸發至乾燥並藉由添加飽和碳酸鉀溶液將殘餘物調節至pH 6。用二氯甲烷(250mL)萃取產物。用鹽水(2×100mL)洗滌有機相，經Na2SO4乾燥，且在減低壓力下濃縮，以提供呈無色半固體之4-碘-2-甲基菸酸甲酯(2.00g,7.22mmol,22%粗製產率)，該無色半固體不進一步純化即繼續使用。LC/MS(ESI)m/e 278.0[(M+H)+，計算值C8H9INO2 278.0]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=2.13min。
部分C. 4-(4-溴-2,3-二氟苯基)-2-甲基菸酸甲酯
在微波器皿中，在惰性氣氛中將4-碘-2-甲基菸酸甲酯(1.00g,3.61mmol)吸入1,4-二噁烷(18mL)與水(2mL)之混合物中。將(4-溴-2,3-二氟苯基)酸(1.03g,4.33mmol)及Na2CO3(765mg,7.22mmol)添加至反應混合物中並脫氣5分鐘。將Pd(Ph3P)4(83mg,0.072mmol)添加至反應混合物並在微波中在110℃下加熱90min。用水(150mL)稀釋反應混合物並用乙酸乙酯(200mL)萃取。用鹽水(2×100mL)洗滌有機相，經Na2SO4乾燥且在減低壓力下濃縮。藉由矽膠層析(乙酸乙酯及石油醚之梯度)純化殘餘物，以提供呈黃色液體之4-(4-溴-2,3-二氟苯基)-2-甲基菸酸甲酯(540mg,1.58mmol,44%產率)。LC/MS(ESI)m/e 344.0[(M+2H)+，計算值C14H12BrF2NO2 344.1]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=2.48min。
部分D. 4-(4-溴-2,3-二氟苯基)-2-甲基菸酸
向4-(4-溴-2,3-二氟苯基)-2-甲基菸酸甲酯(800mg,2.34mmol)存於MeOH(10mL)中之溶液中添加存於水(10mL)中之NaOH(935mg,23.38mmol)。在室溫下將反應混合物攪拌16hr。在減低壓力下蒸發反應混合物並藉由添加1.5N HCl溶液將所得殘餘物調節至pH約3。用二氯甲烷萃取產物並分離各層。經Na2SO4乾燥有機相，且在減低壓力 下濃縮，以提供呈灰白色固體之4-(4-溴-2,3-二氟苯基)-2-甲基菸酸(700mg,2.133mmol,91%粗製產率)，該灰白色固體不進一步純化即繼續使用。LC/MS(ESI)m/e 330.0[(M+2H)+，計算值C13H10BrF2NO2 330.1]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.34min。
部分E. 4-(4-溴-2,3-二氟苯基)-N,2-二甲基菸醯胺
在0℃下向4-(4-溴-2,3-二氟苯基)-2-甲基菸酸(700mg,2.13mmol)存於二氯甲烷(20mL)中之溶液中逐滴添加草醯氯(0.56mL,6.40mmol)、之後DMF(0.03mL,0.43mmol)。將反應混合物加熱至45℃並保持4h。將反應混合物蒸發至乾燥。在0℃下將殘餘物吸入二氯甲烷(50mL)中並將鹽酸甲胺(1.56g,23.08mmol)添加至其中，之後添加三乙胺(4.83mL,34.6mmol)。在室溫下將反應混合物攪拌2h。用水(50mL)稀釋反應混合物並用二氯甲烷(100mL)萃取。分離有機層，經Na2SO4乾燥且在減低壓力下濃縮，以提供呈黃色半固體之4-(4-溴-2,3-二氟苯基)-N,2-二甲基菸醯胺(600mg,1.76mmol,76%粗製產率)，該黃色半固體不進一步純化即繼續使用。LC/MS(ESI)m/e 343.0[(M+2H)+，計算值C14H13BrF2N2O 343.0]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.61min。
部分F. 8-溴-7-氟-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
在0℃下向4-(4-溴-2,3-二氟苯基)-N,2-二甲基菸醯胺(600mg,1.76mmol)存於四氫呋喃(20mL)中之溶液中添加NaH(176mg,4.40mmol)並使反應混合物逐漸達到室溫。在室溫下將反應混合物攪拌15h。用水(50mL)稀釋反應混合物並用乙酸乙酯(100mL)萃取。分離有機層，經Na2SO4乾燥且在減低壓力下濃縮，以提供呈黃色固體之8-溴-7-氟-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(400mg,1.24mmol,71%產率)。LC/MS(ESI)m/e 322.8[(M+2H)+，計算值C14H12BrFN2O 322.9]；LC/MS滯留時間(方法G)：t R=2.21min。
部分G. (1-((7-氟-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-2,4-二甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
向8-溴-7-氟-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(350mg,1.090mmol)及(1-羥基-2,4-二甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(504mg,2.180mmol)存於甲苯(10mL)中之攪拌溶液中添加碳酸銫(355mg,1.09mmol)及2-二第三丁基膦基-2',4',6'-二-異丙基-1,1'-聯苯(28mg,0.065mmol)。用氬將反應混合物脫氣5min且然後將乙酸鈀(7.34mg,0.033mmol)添加至其中。將反應混合物加熱至100℃並保持18h。然後，經由矽藻土(Celite®)將其過濾並蒸發濾液，以提供(1-((7-氟-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-2,4-二甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯，其不進一步純化即用於下一步驟。LC/MS(ESI)m/e 472.2[(M+H)+，計算值C26H35FN3O4 472.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=2.17min。
部分H. 8-((2-胺基-2,4-二甲基戊基)氧基)-7-氟-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
在0℃下向(1-((7-氟-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-2,4-二甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(200mg,0.424mmol)存於MeOH(6mL)中之溶液中添加存於1,4-二噁烷(3mL,99.0mmol)中之4M HCl。在0℃下將反應混合物攪拌2h。2h後，在減低壓力下濃縮反應混合物，以提供粗製產物，藉由製備型HPLC純化該粗製產物，以提供呈灰白色固體之8-((2-胺基-2,4-二甲基戊基)氧基)-7-氟-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(10mg,0.024mmol,6%產率)。LC/MS(ESI)m/e 372.0[(M+H)+，計算值C21H27FN3O2 372.2]；LC/MS滯留時間(方法G)：t R=1.99min。HPLC滯留時間(方法A)：t R=8.37min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=9.72min。1H NMR(400MHz，甲醇-d 4 )δ ppm 8.58(d,J=6Hz,1 H),8.22(dd,J=9.2Hz,J=2Hz,1 H),8.14(d,J=6Hz,1 H),7.23(m,1 H),4.31(d,J=10Hz,1 H),4.23(d,J=10.4Hz,1 H),3.88(d,J=9.2Hz,3 H),3.06(s,3 H),1.90(m,2 H),1.73(m,1 H),1.52(s,3 H),1.05(m,6 H)。
實例30及實例31
8-(((S)-2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-(1-羥基乙基)-4,6二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A. (S)-1-(4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯
如實例16部分H中所述製備。
部分A. (S)-(1-((9-溴-4,6-二甲基-5-側氧基5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
如實例16部分H中所述製備之(S)-(1-((4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯依照實例3部分A所述之條件經受溴化，以提供呈淡黃色固體之(S)-(1-((9-溴-4,6-二甲基-5-側氧基5,6二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(1.6g,2.62mmol,77%產率)。LC/MS(ESI)m/e 518.2[(M)+，計算值CH33BrN3O4 518.1]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=2.46min。
部分B. (S)-(1-((9-(1-乙氧基乙烯基)-4,6二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2基)胺基甲酸第三丁基酯
向(S)-(1-((9-溴-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(500mg,0.964mmol)存於1,4-二噁烷(5mL)、三丁基(1-乙氧基乙烯基)錫烷(697mg,1.929mmol)中之溶液中添加叁(二亞苄基丙酮)二鈀(0)(88mg,0.096mmol)及DPPF(53.5mg,0.096mmol)。在100℃下將反應混合物攪拌12h。用水稀釋反應混合物並用乙酸乙酯萃取。經硫酸鈉乾燥有機層並濃縮，提供呈棕色固體之(S)-(1-((9-(1-乙氧基乙烯基)-4,6二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(0.3g,0.33mmol,34%粗製產率)，該棕色固體不進一步純化即繼續使用。LC/MS(ESI)m/e 510.2[(M+H)+，計算值C29H40N3O5,510.3]；LC/MS滯留時間(方法=C)：t R=2.60min。
部分C. (S)-9-乙醯基-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
在0℃下用存於1,4-二噁烷(981μL,3.92mmol)中之鹽酸處理(S)-(1-((9-(1-乙氧基乙烯基)-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(200mg,0.392 mmol)。在RT下將反應混合物攪拌2h且然後蒸發至乾燥。用10% NaHCO3水溶液中和粗製材料並用乙酸乙酯萃取。經Na2SO4乾燥有機層並濃縮，提供呈棕色固體之(S)-9-乙醯基-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(0.11g,0.164mmol,42%產率)。該材料不進一步純化即繼續使用。LC/MS(ESI)m/e 382.2[(M+H)+，計算值C22H28N3O3，382.2]；LC/MS滯留時間(方法E)：t R=0.78min。
部分D. 8-(((S)-2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-(1-羥基乙基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
在0℃下向(S)-9-乙醯基-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-4,6二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(100mg,0.257mmol)存於乙醇(2mL)中之溶液中添加NaBH4(97mg,2.57mmol)。在RT下將反應混合物攪拌16h。然後，用NH4Cl淬滅，用水稀釋並在乙酸乙酯中萃取。經Na2SO4乾燥合併的有機層並濃縮。藉由製備型HPLC純化粗製反應混合物，提供呈淡黃色半固體之8-(((S)-2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-(1-羥基乙基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(0.03g,27%產率)。LC/MS(ESI)m/e 384.1[(M+H)+，計算值C22H30N3O3,384.2]；LC/MS滯留時間(方法E)：t R=0.73min。
96533-072-進行對掌性分離，提供呈灰白色固體之兩種非鏡像異構物。以滯留時間(HPLC管柱：(250×30×5μ)流動相A：0.2% DEA己烷；流動相B：乙醇)：t R=21.9min溶析非鏡像異構物-1。
96533-072-11-1H NMR(400MHz，甲醇-d 4)：ppm 1.01-1.07 (m,6H),1.55(d,J=6.46Hz,4H),1.58-1.68(m,1H),1.83-1.92(m,1H),3.09(s,3H),3.35(d,J=1.69Hz,1H),3.80(s,3H),4.13-4.19(m,1H),4.28-4.34(m,1H),5.32(d,J=6.46Hz,1H),7.04(s,1H),8.16(d,J=5.84Hz,1H),8.47(s,1H),8.58(d,J=5.77Hz,1H)。
以滯留時間(HPLC管柱：(250×30×5μ)流動相A：0.2% DEA己烷；流動相B：乙醇)t R=24.9min溶析非鏡像異構物-2。
96533-072-12-1H NMR(400MHz，甲醇-d 4)：ppm 1.03(t,J=6.84Hz,6H),1.43-1.58(m,5H),1.88(dt,J=13.73,6.97Hz,1H),3.09(s,3H),3.35(d,J=1.69Hz,1H),3.80(s,3H),4.03-4.13(m,1H),4.21-4.29(m,1H),5.31(d,J=6.40Hz,1H),7.03(s,1H),8.15(d,J=5.84Hz,1H),8.47(s,1H),8.57(d,J=5.77Hz,1H)。
實例32
8-((2-胺基-2,4-二甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A. (1-((4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-2,4-二甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
侃如實例16部分G中所述製備之8-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(0.15g,0.580mmol)及(1-羥基-2,4-二甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(0.161g,0.696mmol)經受如實例16部分H中所述之 Buchwald偶合，以提供(1-((4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-2,4-二甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(0.22g,0.199mmol,34%粗製產率)。粗製產物不進一步純化即用於下一步驟。LC/MS(ESI)m/e 454.1[(M+H)+，計算值C26H36N3O4,454.3]；LC/MS滯留時間(方法D)：t R=0.93min。
部分B. 8-((2-胺基-2,4-二甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
使(1-((4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-2,4-二甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(0.22g,0.199mmol)經受使用實例2部分E中所述程序脫除Boc基團之保護，以得到呈白色固體之8-((2-胺基-2,4-二甲基戊基)氧基)-4,6二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(8mg,0.022mmol,11%產率)。LC/MS(ESI)m/e 354.2[(M+H)+，計算值C21H28N3O2，354.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.57min。HPLC滯留時間(方法A)：t R=8.67min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=9.46min。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)。ppm δ 8.54(s,1H),8.34-8.36(bs,1H),8.10(bs,1H),7.06(s,1H),4.11-4.17(m,2H),3.73(s,3H),3.06(s,3H),1.70-1.98(m,2H),1.68(bs,1H),1.45(s,3H),1.02-1.08(m,6H)。
實例33
8-(((2S,3S)-3-胺基-5-甲基己-2-基)氧基)-4,6二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A. (S)-(4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
在0℃下向(S)-(1-羥基-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(2g,9.20mmol)存於DCM(30mL)中之溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷(Dess-Martin Periodinane)(5.86g,13.81mmol)。在RT下將反應混合物攪拌16h。用NaHCO3淬滅反應混合物，用水稀釋並用乙酸乙酯萃取。經Na2SO4乾燥有機層並濃縮，提供呈無色油狀物之(S)-(4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(1.4g,6.50mmol,71%粗製產率)。該材料不進一步純化即繼續使用。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)：δ 0.8-0.96(m,6H),1.31-1.49(m,11H),1.57-1.66(m,1H),3.81-3.89(m,1H)。7.27(d,1H),9.43(s,1H)。
部分B. ((3S)-2-羥基-5-甲基己-3-基)胺基甲酸第三丁基酯
將(S)-(4-甲基-1-側氧基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(1.3g,6.04mmol)存於乙醚(50mL)中之溶液冷卻至-78℃並用甲基溴化鎂(1.4M，存於乙醚中)(8.63mL,12.08mmol)處理。在0℃下將漿液攪拌1h且然後在RT下再攪拌1小時。用NH4Cl淬滅反應混合物。用乙醚(3×100mL)萃取反應混合物。用鹽水洗滌合併的有機層，經MgSO4乾燥，並濃縮，以提供呈無色油狀物之產物((3S)-2-羥基-5-甲基己-3-基)胺基甲酸第三丁基酯(1g,4.32mmol,72%粗製產率)。該材料不進一步純化即繼續使用。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)：δ 0.78-0.93(m,6H),0.98 (d,3H),1.11-1.41(m,2H),1.42(s,9H),1.45-1.64(m,1H),3.30-3.63(m,2H),4.37(d,1H),6.19(d,1H)。
部分C. ((3S)-2-((4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-5-甲基己-3-基)胺基甲酸第三丁基酯
將8-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(0.05g,0.193mol)、((3S)-2-羥基-5-甲基己-3-基)胺基甲酸第三丁基酯(0.067g,0.290mmol)、Cs2CO3(0.315g,0.966mol)、2-二第三丁基膦基-2',4',6'-二-異丙基-1,1'-聯苯(8.21mg,0.019mol)及Pd(OAc)2(2.60mg,0.012mol)中之混合物吸收於甲苯(2mL)中且在90℃下加熱過夜。在冷卻後，濃縮反應混合物，然後用乙酸乙酯及水稀釋。收集乙酸乙酯層，經Na2SO4乾燥，過濾並濃縮，提供呈棕色固體之((3S)-2-((4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-5-甲基己-3-基)胺基甲酸第三丁基酯、(70mg,0.154mmol,80%粗製產率)。粗製產物不進一步純化即用於下一步驟。LC/MS(ESI)m/e 454.2[(M+H)+，計算值C26H36N3O4,454.3]；LC/MS滯留時間(方法D)：t R=0.91min。
部分D. 8-(((3S)-3-胺基-5-甲基己-2-基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
使((3S)-2-((4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-5-甲基己-3-基)胺基甲酸第三丁基酯(0.16g,0.353mmol)脫除 Boc基團之保護(實例2部分E中所述之程序)，提供呈白色固體之非鏡像異構物混合物8-(((3S)-3-胺基-5-甲基己-2-基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(17mg,0.017mmol,5%產率)。LC/MS(ESI)m/e 354.2[(M+H)+，計算值C21H28N3O2,354.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.56min。HPLC滯留時間(方法A)：t R=9.40min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=9.36min。1H NMR(400MHz，甲醇-d 4 )8.57(d,J=5.5Hz,1H),8.41(d,J=9.0Hz,1H),8.15(d,J=6.0Hz,1H),7.15-7.06(m,2H),4.68(quin,J=5.9Hz,1H),3.76(s,4H),3.09(s,3H),1.88-1.50(m,3H),1.44(s,3H),1.03(d,J=6.5Hz,3H),0.98(d,J=6.5Hz,3H)。
實例34
8-((2-胺基-2,4-二甲基戊基)氧基)-9-甲氧基-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A. 9-溴-8-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
在-30℃下向8-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(0.2g,0.773mmol)存於乙腈(4mL)中之溶液中添加三氟乙酸(0.089mL,1.160mmol)及1-溴吡咯啶-2,5-二酮(0.151g,0.850mmol)。將混合物加熱至80℃過夜。濃縮反應混合物，用乙酸乙酯及過量10% NaHCO3水溶液稀釋。濃縮乙酸乙酯層。藉由製備型HPLC純化殘餘物，以提 供呈白色固體之9-溴-8-氯-4,6二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(120mg,0.351mmol,45%產率)。LC/MS(ESI)m/e 337.0[(M+H)+，計算值C14H11BrClN2O,337.0]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=2.55min；1H NMR(400MHz，甲醇-d 4)ppm 3.11(s,3H),3.75(s,3H),7.81(s,1H),8.20-8.26(m,1H),8.68(d,J=5.6Hz,1H),8.79(s,1H)。
部分B. 8-氯-9-甲氧基-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
將9-溴-8-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(0.05g,0.148mmol)、碘化銅(I)(0.031g,0.163mmol)、L-脯胺酸(0.020g,0.178mmol)、甲醇鈉(0.040g,0.741mmol)及K2CO3(0.041g,0.296mmol)之混合物於DMSO(1.5mL)中攪拌。將混合物加熱至80℃並保持16h。在冷卻後，用甲醇稀釋粗製反應混合物，經由矽藻土(Celite®)過濾且在減低壓力下濃縮，以提供呈棕色固體之8-氯-9-甲氧基-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(40mg)。LC/MS(ESI)m/e 289.0[(M)+，計算值C15H14ClN2O2,289.1]；LC/MS滯留時間(方法D)：t R=0.89min。
部分C. (1-((9-甲氧基-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-2,4-二甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
使8-氯-9-甲氧基-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(0.04g,0.139mmol)經受與(1-羥基-2,4-二甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(0.048g,0.208mmol)之Buchwald偶合(實例16部分H)，提供呈白色固 體之(1-((9-甲氧基-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-2,4-二甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(15mg,0.029mmol,21%產率)。LC/MS(ESI)m/e 484.2[(M+H)+，計算值C27H38N3O5,484.3]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=2.42min。
部分D. 8-((2-胺基-2,4-二甲基戊基)氧基)-9-甲氧基-4,6二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
使(1-((9-甲氧基-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-2,4-二甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(0.015g,0.031mmol)依照實例2部分E脫除Boc基團之保護，以提供呈黃色固體之8-((2-胺基-2,4-二甲基戊基)氧基)-9-甲氧基-4,6二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(8mg,0.02mmol,63%產率)。LC/MS(ESI)m/e 384.2[(M+H)+，計算值C22H30N3O3,384.5]；LC/MS滯留時間(方法C)，t R=6.57min。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)8.63(d,J=6.0Hz,1H),8.51(br.s.,1H),8.02(s,1H),7.23(s,1H),4.39(d,J=10.5Hz,1H),4.32-4.24(m,1H),4.10(s,3H),3.83(s,3H),3.19(s,3H),1.99-1.86(m,2H),1.73(d,J=9.0Hz,1H),1.55(s,3H),1.09(d,J=6.5Hz,3H),1.05(d,J=6.5Hz,3H)。
實例35
(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-(2-羥基丙-2-基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A. (S)-2-(1-((4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)異二氫吲哚-1,3-二酮
使8-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(1.4g,5.41mmol)及(S)-2-(1-羥基-4-甲基戊-2-基)異二氫吲哚-1,3-二酮(4.01g,16.23mmol)經受如實例16部分H中所述之Buchwald偶合，以得到呈黃色固體之(S)-2-(1-((4,6-二甲基-5-側氧基5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)異二氫吲哚-1,3-二酮(1.4g,2.62mmol,49%產率)。LC/MS(ESI)m/e 470.2[(M+H)+，計算值C28H28N3O4 470.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=2.05min。
部分B. (S)-2-(1-((9-溴-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)異二氫吲哚-1,3-二酮
向(S)-2-(1-((4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)異二氫吲哚-1,3-二酮(1g,1.917mmol)存於乙腈 (20mL)中之溶液中添加NBS(0.341g,1.917mmol)並將該溶液加熱至80℃過夜，以提供呈棕色固體之(S)-2-(1-((9-溴-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)異二氫吲哚-1,3-二酮(1.2g,1.69mmol,88%粗製產率)。該材料不進一步純化即繼續使用。LC/MS(ESI)m/e 548.0[(M+H)+，計算值C28H27BrN3O4 548.1；LC/MS滯留時間(方法D)：t R=0.76min。
部分C. (S)-2-(1-((9-(1-乙氧基乙烯基)-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)異二氫吲哚-1,3-二酮
用氮將(S)-2-(1-((9-溴-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)異二氫吲哚-1,3-二酮(100mg,0.182mmol)、三丁基(1-乙氧基乙烯基)錫烷(132mg,0.365mmol)、DPPF(20.22mg,0.036mmol)及Pd2(dba)3(16.70mg,0.018mmol)存於1,4-二噁烷(5mL)中之溶液吹掃5min，然後在100℃下加熱過夜。在冷卻至環境溫度後，在減低壓力下濃縮揮發物。將殘餘物吸收於乙酸乙酯中並經由矽藻土(Celite®)過濾。用H2O、之後鹽水洗滌有機濾液，經Na2SO4乾燥且在減低壓力下濃縮，以提供呈黑色膠狀固體之(S)-2-(1-((9-(1-乙氧基乙烯基)-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)異二氫吲哚-1,3-二酮(0.15g,0.131mmol,72%粗製產率)。該材料不進一步純化即繼續使用。LC/MS(ESI)m/e 540.3[(M+H)+，計算值C32H34N3O5 540.2；LC/MS滯留時間(方法G)：t R=1.21min。
部分D. (S)-2-(1-((9-乙醯基-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)異二氫吲哚-1,3-二酮
使(S)-2-(1-((9-(1-乙氧基乙烯基)-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)異二氫吲哚-1,3-二酮(150mg,0.278mmol)經受酸水解，以提供呈棕色固體之(S)-2-(1-((9-乙醯基-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)異二氫吲哚-1,3-二酮(0.1g,0.14mmol,51%產率)。該粗製材料不進一步純化即繼續使用。LC/MS(ESI)m/e 512.1[(M+H)+，計算值C30H30N3O5 512.2；LC/MS滯留時間(方法D)：t R=0.89min。
部分E. (S)-2-(1-((9-(2-羥基丙-2-基)-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)異二氫吲哚-1,3-二酮
在-10℃下向(S)-2-(1-((9-乙醯基-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)異二氫吲哚-1,3-二酮(220mg,0.430mmol)存於THF(6mL)中之溶液中添加甲基溴化鎂(1.4M，存於乙醚中)(0.922mL,1.290mmol)並在RT下攪拌過夜。用水將反應混合物小心地淬滅並用ErOAc稀釋。分離有機層，經硫酸鈉乾燥並在 減壓壓力下濃縮。經由矽膠層析純化殘餘物，以提供呈棕色膠狀固體之(S)-2-(1-((9-(2-羥基丙-2-基)-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)異二氫吲哚-1,3-二酮(0.2g,0.152mmol,35%產率)。LC/MS(ESI)m/e 528.2[(M+H)+，計算值C31H34N3O5 528.2；LC/MS滯留時間(方法D)：t R=0.89min。
部分F. (S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-(2-羥基丙-2-基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
在RT下向(S)-2-(1-((9-(2-羥基丙-2-基)-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)異二氫吲哚-1,3-二酮(200mg,0.152mmol)存於乙醇(5mL)中之溶液中添加肼(4.76μl,0.152mmol)，然後將混合物加熱至60℃並保持4h。過濾反應混合物，濃縮並藉由製備型HPLC純化，以提供呈白色固體之(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-(2-羥基丙-2-基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(9mg,0.021mmol,14%產率)。LC/MS(ESI)m/e 398.0[(M+H)+，計算值C23H32N3O3 398.2]；LC/MS滯留時間(方法G)：t R=1.99min。HPLC滯留時間(方法A)：t R=8.63min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=9.79min。1H NMR(400MHz，甲醇-d 4)ppm 0.94-1.10(m,6H),1.25-1.37(m,1H),1.49-1.78(m,7H),1.82-1.93(m,1H),2.96-3.19(m,2H),3.56-3.65(m,1H),3.80(s,3H),4.16-4.29(m,1H),4.34-4.49(m,1H),7.01-7.15(m,1H),8.10-8.22(m,1H),8.51-8.64(m,2H)。
實例36
(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-乙基-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶- 5(6H)-酮
部分A：(S)-(1-((4,6-二甲基-5-側氧基-9-乙烯基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
向如實例3部分A中所述製備之(S)-(1-((9-溴-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(300mg,0.579mmol)存於甲苯(10mL)、水(0.5mL)與乙醇(2mL)之溶劑混合物中之溶液中添加碳酸鈉(184mg,1.736mmol)、肆(三苯基膦)鈀(33.4mg,0.029mmol)及2,4,6-三乙烯基-1,3,5,2,4,6-三氧雜三硼雜環己烷與吡啶(1：1)(167mg,0.694mmol)。將反應混合物脫氣30min。然後在90℃下將反應混合物攪拌16h。在冷卻至室溫後，經由矽藻土(Celite®)過濾混合物，用EtOAc溶析。在減低壓力下濃縮濾液。將殘餘物吸收於EtOAc及水中。用乙酸乙酯(2×15mL)萃取溶液。用水(10mL)、鹽水(10mL)洗滌合併的有機層，經硫酸鈉乾燥，過濾且在減低壓力下濃縮。藉由矽膠管柱層析(60%存於己烷中之乙酸乙酯)純化殘餘物，以提供呈淡黃色半固體之(S)-(1-((4,6-二甲基-5-側氧基-9-乙烯基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(300mg,0.110mmol,19%產率)。LC/MS,(ESI)m/z 466.5[(M+H)+，計算值C27H36N3O4 466.3]；LC/MS滯留時間(方法 E)：t R=1.18min。
部分B：(S)-(1-((9-乙基-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
用氮將(S)-(1-((4,6-二甲基-5-側氧基-9-乙烯基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(50mg,0.107mmol)存於MeOH(3mL)中之溶液脫氣5min，然後添加碳載鈀(1.143mg,10.74μmol)。在氫氣球下將反應混合物攪拌16h。然後經由矽藻土(Celite®)過濾反應混合物並在減低壓力下濃縮濾液。藉由製備型TLC(2%存於MDC中之MeOH)純化殘餘物，以提供呈淡黃色固體之(S)-(1-((9-乙基-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(31mg,0.058mmol,54%產率)。LC/MS,(ESI)m/z 468.5[(M+H)+，計算值C27H38N3O4 468.3]；LC/MS滯留時間(方法D)：t R=1.31min。
部分C：(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-乙基-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
如實例2部分E中所述製備，以提供呈淡黃色膠狀物之標題化合物(4mg,10.62μ莫耳，33%產率)。LC/MS,(ESI)m/z 368.4[(M+H)+，計算值C22H30N3O2 368.2]；LC/MS滯留時間(方法B)：t R= 2.18min。HPLC滯留時間(方法A)：t R=8.87min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=9.53min。1H NMR(400MHz,MeOH-d 4)δ ppm 8.51(d,J=5.60Hz,1H)8.17(s,1H)8.13(d,J=5.60Hz,1H)6.97(s,1H)4.17-4.20(m,1H)4.04-4.04(m,1H)3.76(s,3H)3.31-3.38(m,1H)3.06(s,3H)2.80-2.82(m,2H)1.81-1.89(m,1H)1.53-1.58(m,1H)1.45-1.50(m,1H)1.27-1.31(m,3H),0.98-1.02(m,6H)。
實例37(鏡像異構物1)及實例38(鏡像異構物2)
(R)-8-((2-胺基-2,4-二甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮及(S)-8-((2-胺基-2,4-二甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
藉由對掌性HPLC(方法：共溶劑：0.3%存於甲醇中之DEA，管柱：Chiralpak AD H(250×21)mm 5u)來拆分實例32中所製備之8-((2-胺基-2,4-二甲基戊基)氧基)-4,6二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮，以產生兩種鏡像異構物。未測定每一鏡像異構物之絕對立體化學結構。
鏡像異構物-1：LC/MS(ESI)m/e 354.2[(M+H)+，計算值C21H28N3O2,354.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.57min。HPLC滯留時間(方法A)：t R=8.67min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=9.46min。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)ppm δ 8.54(s,1H),8.34-8.36(bs,1H),8.10(bs,1H),7.06(s,1H),4.11-4.17(m,2H),3.73(s,3H),3.06(s,3H),1.70-1.98(m,2H),1.68(bs,1H),1.45(s,3H),1.02-1.08(m,6H)；對掌性HPLC滯留時間，t R=9.36min。
鏡像異構物-2：LC/MS(ESI)m/e 354.2[(M+H)+，計算值 C21H28N3O2,354.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.57min。HPLC(方法B)滯留時間(方法A)：t R=8.67min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=9.46min。1H NMR(400MHz，甲醇-d4).ppm δ 8.54(s,1H),8.34-8.36(bs,1H),8.10(bs,1H),7.06(s,1H),4.11-4.17(m,2H),3.73(s,3H),3.06(s,3H),1.70-1.98(m,2H),1.68(bs,1H),1.45(s,3H),1.02-1.08(m,6H)；對掌性HPLC(方法B)滯留時間：t R=10.68min。
實例39
(S)-8-((2-(二甲基胺基)-4-甲基戊基)氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
在環境溫度下向(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(0.06g,0.184mmol)(實例2部分E中所述之合成)存於甲酸(0.035mL,0.922mmol)中之攪拌溶液中添加甲醛(0.025mL,0.922mmol)。然後將反應混合物加熱至回流並保持16h。在減低壓力下濃縮反應混合物。用50mL水稀釋殘餘物並用80mL二氯甲烷萃取。分離有機層，經硫酸鈉乾燥並在減壓壓力下濃縮。藉由反相HPLC(乙腈/水/10mM NH4OAc)純化殘餘物，以提供呈白色固體之(S)-8-((2-(二甲基胺基)-4-甲基戊基)氧基)-6甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(8mg,o.021mmol,11%產率)。LC/MS(ESI)m/e 354.0[(M+H)+，計算值C21H28N3O2,354.5]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.85min。HPLC滯留時間(方法A)：t R=8.02min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=9.19min。1H NMR(400MHz，甲醇-d 4)δ ppm 1.01(d,J= 6.80Hz,6H),1.50-1.61(m,2H),1.73-1.80(m,1H),2.52(s,1H),3.15-3.16(m,1H),3.73(s,3H),4.23-4.31(m,2H),7.04(d,J=8.00Hz,2H),8.15(s,1H),8.30(d,J=8.00Hz,1H),8.71(s,1H),8.39(s,1H)。
實例40
(S)-8-((2-(二甲基胺基)-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
在RT下向(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-4,6二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(0.1g,0.295mmol)(實例16部分I中所述之合成)存於甲酸(0.011mL,0.295mmol)中之漿液中添加甲醛(8.12μL,0.295mmol)。將反應混合物於密封管中加熱至100℃並保持16h。在冷卻至室溫後，在減低壓力下濃縮混合物。然後使殘餘物在水(50mL)與二氯甲烷(80mL)之間分配。分離有機層，經硫酸鈉乾燥並在減壓壓力下濃縮。藉由反相HPLC(10mM乙酸銨/AcCN)純化殘餘物，以提供呈白色固體之(S)-8-((2-(二甲基胺基)-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(30mg,0.078mmol,26%產率)。LC/MS(ESI)m/e 368.0[(M+H)+，計算值C22H30N3O2,368.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.86min。HPLC滯留時間(方法A)：t R=7.98min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=9.44min。1H NMR(400MHz，甲醇-d 4)ppm δ 1.01(d,J=6.80Hz,6H),1.61-1.95(m,3H),2.66-2.69(m,6H),3.06(s,3H),3.37-3.43(m,1H),3.74(s,3H),4.37(d,J=4.80Hz,2H),7.04-7.08(m,2H),8.10(d,J=5.60Hz,1H),8.36(d,J=8.80Hz,1H),8.53 (d,J=5.60Hz,1H)。
實例41
8-((2-胺基-2,4-二甲基戊基)氧基)-9-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
在RT下向8-((2-胺基-2,4-二甲基戊基)氧基)-4,6二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(實例32部分B中所製備)(0.08g,0.226mmol)存於乙腈(5mL)中之攪拌溶液中添加NCS(0.030g,0.226mmol))並將反應混合物攪拌2h。然後將混合物蒸發至乾燥。藉由反相HPLC(0.1%存於水/AcCN中之TFA)純化殘餘物，以提供呈灰白色固體之8-((2-胺基-2,4-二甲基戊基)氧基)-9-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(12mg,0.030mmol,13%產率)。LC/MS(ESI)m/e 388.0[(M+H)+，計算值C21H27ClN3O2,388.2]。LC/MS滯留時間(方法C)：t R=2.13min。HPLC滯留時間(方法A)：t R=8.97min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=10.16min。1H NMR(400MHz，甲醇-d 4 )δ ppm 0.99-1.02(m,6H),1.30(s,3H),1.54-1.66(m,2H),1.84-1.90(m,1H),3.05(s,1H),3.73(s,1H),4.04(q,J=23.20Hz,2H),7.03(s,1H),8.06(d,J=6.00Hz,1H),8.39(s,1H),8.54(d,J=6.00Hz,1H)。
實例42
(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-4-甲氧基-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A. 8-氯-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
如實例2部分C中所述製備。
部分A. 8-氯-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶3-氧化物
向冷卻至0℃之如實例2部分C中所述製備之8-氯-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(1.0g,4.09mmol)存於DCM(20mL)中之攪拌溶液中添加m-CPBA(1.763g,10.22mmol)。然後將反應混合物升溫至環境溫度並攪拌4h。然後用二氯甲烷(100mL)稀釋反應混合物並用飽和碳酸氫鈉溶液(200mL)、鹽水溶液(50mL)洗滌。然後經硫酸鈉乾燥有機物，過濾並濃縮，以提供呈黃色固體之8-氯-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶3-氧化物(1.0g,3.84mmol,94%粗製產率)。該材料不進一步純化即繼續使用。LC/MS(ESI)m/e 261.0,[(M+H)+，計算值C13H10ClN2O2,261.0]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.65min。
部分B. 4,8-二氯-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
將8-氯-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶3-氧化物(0.5g,1.918mmol)存於POCl3(3.58mL,38.4mmol)中之攪拌溶液加熱至回流並保持6h。在減低壓力下濃縮反應混合物。然後使殘餘物部分在二氯甲烷(100mL)與飽和碳酸氫鈉溶液(200mL)之間分配。分離有機層並再次用鹽水溶液(50mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，並濃縮，以提供4,8-二氯-6甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(0.3g,1.075mmol,56%粗製產率)。該材料不進一步純化即繼續使用。LC/MS(ESI)m/e 280.8,[(M+2H)+，計算值C13H9Cl2N2O,280.8]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=2.06min。
部分C. 8-氯-4-甲氧基-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
向4,8-二氯-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(1.0g,3.58mmol)存於MeOH(1mL)中之溶液中添加甲醇鈉(0.806mL,3.58mmol)。在80℃下將所得混合物在微波中加熱25min。然後用水(20mL)稀釋反應混合物並用乙酸乙酯(30mL)萃取。分離有機層，經硫酸鈉乾燥並蒸發至乾燥，以提供呈棕色固體之8-氯-4-甲氧基-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(0.4g,1.391mmol,39%粗製產率)。該材料不進一步純化即繼續使用。LC/MS(ESI)m/e 274.8[(M+H)+，計算值C14H12ClN2O2,275.0]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=2.06min。
部分D. (S)-(1-((4-甲氧基-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
如實例16部分H中所述製備，以提供呈半固體之標題產物(0.1g,0.135mmol,62%產率).LC/MS(ESI)m/e 456.0,[(M+H)+，計算值C25H34N3O5,456.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：tR=2.26min。
部分E. (S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-4-甲氧基-6甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
如實例2部分E中所述製備，以提供呈膠狀物之標題產物(10mg,0.027mmol,20%產率)。LC/MS(ESI)m/e 356.0,[(M+H)+，計算值C20H26N3O3,356.4]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.83min。HPLC滯留時間(方法A)：t R=8.48min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=7.61min。1H NMR(400MHz，甲醇-d 4 )δ ppm 8.24(d,J=6.0Hz,1H),8.13(d,J=9.0Hz,1H),7.62(d,J=6.0Hz,1H),6.99-6.91(m,1H),6.90(d,J=2.5Hz,1H),4.11(dd,J=9.5,4.0Hz,1H),4.06(s,3H),3.92(dd,J=9.3,7.3Hz,1H),3.65(s,3H),1.93-1.81(m,1H),1.45(td,J=7.7,6.3Hz,2H),1.03(d,J=6.5Hz,3H),1.01(d,J=6.5Hz,3H)。
實例43
(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-氯-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A. (S)-(1-((9-氯-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
使如實例19部分B中所述製備之(S)-(4-甲基-1-((6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(0.4g,0.714mmol)經受使用如實例41中所述之NCS實施之氯化，以提供呈黃色固體之(S)-(1-((9-氯-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(0.3g,0.437mmol,61%產率)。LC/MS(ESI)m/e 460.2[(M+H)+，計算值C24H31ClN3O4，460.2]；LC/MS滯留時間(方法C)t R=2.17min。
部分B. (S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-氯-6甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
使(S)-(1-((9-氯-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯如實例2部分E中所述，脫除Boc之保護，以提供呈灰白色固體之(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-氯-6甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(0.1g,0.27mmol,72%產率)。LC/MS(ESI)m/e 360.2[(M+H)+，計算值C19H23ClN3O2，360.1]；HPLC滯留時間(方法A)：t R=8.94min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=5.4min。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)ppm 9.43(d,J=0.50Hz,1H),8.76(d,J=5.52Hz,1H),8.42(s,1H),8.16-8.20(m,1H),7.10(s,1H),4.23-4.27(m,1H),4.02-4.08(m,1H),3.78(s,3H),3.34-3.40(m,1H),1.84-1.94(m,1H),1.42-1.58(m,2H),1.03(dd,J=8.66,6.65Hz,6H)。
實例44
(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-6-(2-羥基乙基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A. 8-氯-6-(2-羥基乙基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
在氮氣氛中向8-氯苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(80mg,0.347mmol)存於無水DMF(5mL)中之攪拌溶液中添加碳酸乙酯(122mg,1.387 mmol)、K2CO3(96mg,0.694mmol)及18-冠-6(18.31mg,0.069mmol)。將反應混合物加熱至80℃並保持12h。用水(10mL)稀釋反應混合物並用乙酸乙酯(2×20mL)萃取。經硫酸鈉乾燥合併的乙酸乙酯層且在減低壓力下濃縮，以提供8-氯-6-(2-羥基乙基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(80mg,0.291mmol,84%粗製產率)。該材料不進一步純化即繼續使用。LC/MS(ESI)m/e 275.0[(M+H)+，計算值C14H12ClN2O2，275.1]；1H NMR(400MHz,MeOD)δ 9.55(s,1H),8.87(d,J=5.6Hz,1H),8.50(d,J=8.8Hz,1H),8.34(d,J=5.6Hz,1H),7.88(d,J=1.6Hz,1H),7.44(dd,J=8.4,2.0Hz,1H),4.57(t,J=6.0Hz,2H),3.96(t,J=6.0Hz,2H)。
部分B. (S)-(1-((6-(2-羥基乙基)-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
如實例16部分H中所述製備，以提供呈白色油狀物之(S)-(1-((6-(2-羥基乙基)-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(60mg,0.132mmol,45%產率)，LC/MS(ESI)m/e 456.2,[(M+H)+，計算值C25H34N3O5,456.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.81min。
部分C. (S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-6-(2-羥基乙基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
如實例2部分E中所述製備，以提供呈黃色固體之(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-6-(2-羥基乙基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(6mg,0.015mmol,12%產率)。LC/MS(ESI)m/e 356.2,[(M+H)+，計算值C20H26N3O3,356.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.59min。HPLC滯留時間(方法A)：t R=7.66min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=7.99min。1H NMR(400MHz,MeOD)δ 9.50(s,1H),8.79(d,J=6.0Hz,1H),8.47(d,J=8.8Hz,1H),8.29(d,J=5.6Hz,1H),7.34(d,J=2.0Hz,1H),7.14(dd,J=8.8,2.4Hz,1H),4.59(t,J=6.4Hz,2H),4.34(dd,J=10.0,3.6Hz,1H),4.17(dd,J=10.0,6.4Hz,1H),3.98(t,J=6.0Hz,2H),3.63-3.53(m,1H),1.92-1.80(m,1H),1.66-1.59(m,2H),1.06-1.03(m,6H)。
實例45
(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-6-(2,2,2-三氟乙基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A. 4-(4-氯-2-氟苯基)-N-(2,2,2-三氟乙基)菸醯胺
在氮中向如實例2部分A中所述製備之4-(4-氯-2-氟苯基)菸酸(300mg,1.192mmol)存於無水DMF(2mL)中之攪拌溶液中添加HOBT(365mg,2.384mmol)、DIEA(0.927mL,4.77mmol)及EDC(343mg,1.788 mmol)。將反應混合物冷卻至0℃並逐滴用2,2,2-三氟乙胺(236mg,2.384mmol)處理且升溫至RT並攪拌12h。用水(20mL)稀釋反應混合物並用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。經硫酸鈉乾燥合併的有機層且在減低壓力下濃縮，以提供呈黃色固體之4-(4-氯-2-氟苯基)-N-(2,2,2-三氟乙基)菸醯胺(200mg,0.601mmol,50%粗製產率)。LC/MS(ESI)m/e 333.2,[(M+H)+，計算值C14H10ClF4N2O,333.0]；LC/MS滯留時間(方法A)：t R=1.66min。
部分B. 8-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
如實例2部分C中所述製備，以提供8-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(150mg,0.480mmol,80%產率)LC/MS(ESI)m/e 313.1,[(M+H)+，計算值C14H9ClF3N2O,313.0]；LC/MS滯留時間(方法D)：t R=0.95min。
部分C. (S)-(4-甲基-1-((5-側氧基-6-(2,2,2-三氟乙基)-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
如實例16部分H中所述製備，以提供呈棕色固體之(S)-(4-甲基-1-((5-側氧基-6-(2,2,2-三氟乙基)-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(100mg,0.203mmol,42%產率)。LC/MS(ESI)m/e 494.5,[(M+H)+，計算值C25H31F3N3O4 494.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=2.17min。
部分D. (S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-6-(2,2,2-三氟乙基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
如實例2部分E中所述製備，以提供白色固體(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-6-(2,2,2-三氟乙基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(25mg,0.061mmol,30%產率)。LC/MS(ESI)m/e 394.2,[(M+H)+，計算值C20H23F3N3O2,394.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.78min。HPLC滯留時間(方法A)：t R=5.26min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=5.60min。1H NMR(400MHz,MeOD)δ 9.49(s,1H),8.81(d,J=5.6Hz,1H),8.46(d,J=8.8Hz,1H),8.28(d,J=5.6Hz,1H),7.23(br s,1H),7.15(dd,J=8.8,2.0Hz,1H),5.32(dd,J=8.8,6.4Hz,2H),4.21(dd,J=9.2,3.6Hz,1H),4.03(dd,J=9.2,7.2Hz,1H),3.40-3.33(m,1H),1.92-1.80(quin,J=6.8,1H),1.52-1.46(m,2H),1.02(d,J=6.4Hz,3H),1.00(d,J=6.4Hz,3H)。
實例46
(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-9-乙基-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A. (S)-(4-甲基-1-((6-甲基-5-側氧基-9-乙烯基-5,6二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
用氮氣將(S)-(1-((9-溴-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(0.250g,0.496mmol)(製備如實例中所述3部分B)、2,4,6-三乙烯基環三硼氧烷吡啶複合物(0.239g,0.991mmol)、Na2CO3(0.158g,1.487mmol)及Pd(PPh3)4(0.029g,0.025mmol)存於甲苯(1mL)、水(0.1mL)及乙醇(0.3mL)中之混合物吹掃且在90℃下加熱16h。在冷卻後，將反應混合物轉移至含有水(10mL)之分液漏斗並用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。經硫酸鈉乾燥合併的有機層並在減低壓力下濃縮。藉由矽膠上管柱層析(60%乙酸乙酯：石油醚)純化殘餘物，以提供呈黃色固體之(S)-(4-甲基-1-((6-甲基-5-側氧基-9-乙烯基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(0.150g,0.166mmol,34%產率)。LC/MS(ESI)m/e 452.4,[(M+H)+，計算值C26H34N3O4,452.2]；LC/MS滯留時間(方法D)：t R=0.95min。
部分B. (S)-(1-((9-乙基-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊2-基)胺基甲酸第三丁基酯
在RT下在氫氣球下將(S)-(4-甲基-1-((6-甲基-5-側氧基-9-乙烯基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(0.15g,0.332mmol)及碳載鈀(0.075g,0.070mmol)存於MeOH(3mL)及乙酸乙酯(3mL)中之混合物攪拌24h。經由矽藻土(Celite®)過濾反應混合物並在減低壓力下濃縮濾液。藉由製備型TLC(60%乙酸乙酯 及石油醚)純化殘餘物，以提供呈黃色半固體之(S)-(1-((9-乙基-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊2-基)胺基甲酸第三丁基酯(0.11g,0.133mmol,40%產率)。LC/MS(ESI)m/e 454.4,[(M+H)+，計算值C26H36N3O4,454.3]；LC/MS滯留時間(方法D)：t R=0.96min。
部分C. (S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-乙基-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
如實例2部分E中所述製備，以提供呈黃色固體之標題化合物(55mg,0.155mmol,64%產率)。LC/MS(ESI)m/e 354.2,[(M+H)+，計算值C21H28N3O2,354.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.94min。HPLC滯留時間(方法A)：t R=8.76min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=5.19min。1H NMR(400MHz,MeOD)δ 9.52(s,1H),8.81(d,J=6.0Hz,1H),8.51(d,J=8.8Hz,1H),8.33(s,1H),7.11(s,1H),4.52(m,1H),4.36(m,1H),3.86(s,3H),3.76-3.84(m,1H),2.86-2.93(m,2H),1.81-1.90(m,2H),1.63-1.81(m,1H),1.35(m,3H),1.05(m,6H)。
實例47
(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-9-異丙基-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A. (S)-(4-甲基-1-((6-甲基-5-側氧基-9-(丙-1-烯-2-基)-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
如實例46部分A及B中所述製備，以提供呈固體之(S)-(4-甲基-1-((6-甲基-5-側氧基-9-(丙-1-烯-2-基)-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(100mg,0.215mmol,90%產率)。LC/MS(ESI)m/e 466.4,[(M+H)+，計算值C27H36N3O4,466.3]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=2.22min。
部分B.(S)-(1-((9-異丙基-6-甲基-5-側氧基-5,6二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
在RT下在氫氣球下將(S)-(4-甲基-1-((6-甲基-5-側氧基-9-(丙-1-烯-2-基)-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(0.1g,0.215mmol)及碳載鈀(0.07g,0.066mmol)存於MeOH(3mL)及乙酸乙酯(3mL)中之混合物攪拌24h。經由矽藻土(Celite®)過濾反應混合物並在減低壓力下濃縮濾液，以提供呈棕色油狀物之(S)-(1-((9-異丙基-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(0.04g,2.464mmol,1%產率)，該棕色油狀物不進一步純化即繼續使用。LC/MS(ESI)m/e 468.4,[(M+H)+，計算值C27H38N3O4,468.3]；LC/MS滯留時間(方法D)：t R=1.00min。
部分C. (S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-9-異丙基-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
如實例2部分E中所述製備，以提供呈黃色固體之標題產物(12.05mg,0.033mmol,99%(純度)。LC/MS(ESI)m/e 368.2,[(M+H)+，計算值C22H30N3O2,368.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.97min。HPLC滯留時間(方法A)：t R=7.28min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=10.15min。1H NMR(400MHz,MeOD)δ ppm 9.54(s,1H),8.82(d,J=6.0Hz,1H),8.60(d,J=8.8Hz,1H),8.36(s,1H),7.12(s,1H),4.52(m,1H),4.41(m,1H),3.86(s,3H),3.74-3.84(m,1H),3.61(m,1H),1.80-1.90(m,2H),1.64-1.81(m,1H),1.35-1.43(m,6H),1.02-1.11(m,6H)。
實例48
(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-6-甲基-9-(噁唑-5-基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A. (S)-1-(9-甲醯基-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯
將冷卻至0℃之(S)-(4-甲基-1-((6-甲基-5-側氧基-9-乙烯基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(300mg,0.664mmol)(如實例46部分A中所述製備)、四氧化鋨(2.5%，存於2-甲基-2-丙醇中)(4.17μl,0.013mmol)及2,6-二甲基吡啶(0.155mL,1.329mmol)存於1,4-二噁烷(5mL)及水(2mL)中之混合物攪拌15min。添加偏高碘酸鈉(568mg,2.66mmol)且將反應升溫至室溫並攪拌2h。經由矽藻土(Celite®)過濾反應混合物，用EtOAc溶析。用飽和NaHCO3水溶液、H2O、之後鹽水洗滌EtOAc層。經Na2SO4乾燥有機層，過濾並在減低壓力下濃縮。藉由矽膠層析(EtOAc/石油醚)純化殘餘物，以提供呈膠狀固體之(S)-(1-((9-甲醯基-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(160mg,0.353mmol,53%產率)。LC/MS(ESI)m/e 454.1,[(M+H)+，計算值C25H32N3O5,454.2]。
部分B. (S)-(4-甲基-1-((6-甲基-9-(噁唑-5-基)-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
在60℃下將(S)-(1-((9-甲醯基-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(100mg,0.220mmol)、K2CO3(33.5mg,0.243mmol)及TOSMIC(47.4mg,0.243mmol)存於MeOH(5mL)中之混合物加熱2h。在冷卻後，在減低壓力 下去除MeOH並將殘餘物吸收於乙酸乙酯中。用H2O、之後飽和NaHCO3洗滌有機層，經Na2SO4乾燥且在減低壓力下濃縮，以提供呈膠狀物之(S)-(4-甲基-1-((6-甲基-9-(噁唑-5-基)-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(50mg,0.054mmol,24%粗製產率)。該材料不進一步純化即繼續使用。LC/MS(ESI)m/e 493.4,[(M+H)+，計算值C27H33N4O5,493.6]；LC/MS滯留時間(方法E)：t R=1.08min。
部分C. (S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-6-甲基-9-(噁唑-5-基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
如實例2部分E中所述製備，以提供呈黃色固體之(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-6-甲基-9-(噁唑-5-基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(15mg,0.038mmol,29%產率)。LC/MS(ESI)m/e 393.2,[(M+H)+，計算值C22H25N4O3,393.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.70min。HPLC滯留時間(方法A)：t R=8.89min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=9.12min。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ ppm 1.07-1.13(m,6 H)1.75(d,J=6.78Hz,1 H)1.81-1.93(m,2 H)3.91(s,3 H)3.94-4.00(m,1 H)4.55(dd,J=11.04,6.53Hz,1 H)4.67(dd,J=10.92,3.39Hz,1 H)7.30(s,1 H)7.71(s,1 H)8.43(s,1 H)8.55(d,J=5.52Hz,1 H)8.90(s,2 H)9.59(s,1 H)。
實例49
(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-9-溴-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A. 4-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基菸醯胺
將4-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基菸酸(9g,33.9mmol)(先前於實例16部分E中所述)吸入DCM(50mL)中並冷卻至0℃。用草醯氯(14.83mL,169mmol)處理溶液，之後緩慢添加DMF(1mL)。在40℃下將混合物加熱3h。在冷卻後，在減低壓力下去除揮發物。將吸收於DCM(25mL)中之殘餘物冷卻至0℃，並緩慢添加TEA(22.08mL,158mmol)及氯化銨(16.94g,317mmol)。在室溫下攪拌1h後，用飽和NaHCO3水溶液(10mL)、水(10mL)及鹽水(10mL)洗滌反應混合物。分離有機層並用Na2SO4乾燥，以提供呈棕色固體之4-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基菸醯胺(3.5g,13.2mmol,42%粗製產率)。該材料不進一步純化即繼續使用。LC/MS(ESI)m/e 264.4[(M)+，計算值C13H10ClFN2O 264.0]LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.58min。
部分B. 8-氯-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
如實例2部分C中所述製備，以提供呈黃色固體之8-氯-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(800mg,3.14mmol,24%產率，96%純度)。LC/MS(ESI)m/e 245.1[(M+H)+，計算值C13H10ClN2O 245.04]LC/MS滯留時間(方法D)：t R=0.52min。
部分C. 8-氯-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
如實例17部分G中所述製備，以提供呈棕色膠狀物之8-氯-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(710mg,1.362mmol,56%產率)。LC/MS(ESI)m/e 365.1[(M+H)+，計算值C21H18ClN2O2 365.1]LC/MS滯留時間(方法D)：t R=0.8min。
部分D. (S)-1-(6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯
如實例16部分H中所述製備，以提供呈棕色膠狀物之(S)-1-(6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯(130mg,0.21mmol,31%產率，88%純度)。LC/MS(ESI)m/e 546.2[(M+H)+，計算值C32H40FN3O5 546.3]LC/MS滯留時間(方法D)：t R=0.94min。
部分E. (S)-1-(9-溴-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯
如實例3部分A中所述製備，以提供呈橙紅色固體之(S)-1-(9-溴-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧 基)-4-甲基戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯(140mg,0.146mmol,61%產率，65%純度)。LC/MS(ESI)m/e 624.2[(M+H)+，計算值C32H39BrN3O5 624.2]LC/MS滯留時間(方法D)：t R=0.98min。
部分F. (S)-1-(9-溴-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯
如Protective Groups in organic synthesis(Greene,Wuts；第3版，1999,John Wiley & Sons公司)中所述，使用硝酸鈰銨脫除PMB之保護，提供呈紅色固體之(S)-1-(9-溴-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯(60mg,0.12mmol,93%產率)。LC/MS(ESI)m/e 504.1[(M+H)+，計算值C24H31BrN3O4 504.14]LC/MS滯留時間(方法D)：t R=0.91min。
部分G. (S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-9-溴-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
如實例2部分E中所述製備，以提供呈灰白色固體之(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-9-溴-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(12mg,0.029mmol,35%產率，98%純度)。LC/MS(ESI)m/e 402.0[(M)-，計算值C19H21BrN3O2 402.1]LC/MS滯留時間(方法C)：t R=2.19min。HPLC滯留時間(方法A)：tR=8.52min及HPLC滯留時間(方法B)：tR=9.02 min。1H NMR(400MHz，甲醇-d 4 )δ ppm 8.67(s,1H),8.64(d,J=6.0Hz,1H),8.30(d,J=6.0Hz,1H),6.98(s,1H),4.85-4.43(m,1H),4.31-4.27(m,1H),3.82-3.80(m,1H),3.13(s,3H),1.88-1.80(m,2H),1.76-1.71(m,1H),1.09(d,J=6.4Hz,3H),1.07(d,J=6.4Hz,3H)。
實例50
(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-4-((4-甲氧基苄基)胺基)-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
如實例17部分H及實例2部分E中所述製備，以提供呈淡黃色固體之(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-4-((4-甲氧基苄基)胺基)-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮鹽酸鹽(19mg,0.038mmol,26%產率)。LC/MS(ESI)m/e 461[(M+H)+，計算值C27H33N4O3,461.25]；LC/MS滯留時間(方法B)：t R=1.42min。HPLC滯留時間(方法A)：t R=11.09min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=12.68min。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 10.09(br.s.1 H),8.40(d,J=8.8Hz,1H),8.24(d,J=6.0Hz,1H),8.07(s,3H),7.45(d,J=6.0Hz,1H),7.33(d,J=8.4Hz,2H),7.07-7.06(m,2H),6.95-6.91(m,2H),4.67(d,J=5.2Hz,1H),4.38(dd,J=10.4,3.2Hz,2H),4.21(dd,J=10.8,6.8Hz,1H),3.75(s,3H),3.68(s,3H),3.62(br s,1H),1.80(quin,J=6.8,1H),1.59-1.55(m,H),0.95(d,J=6.4Hz,3H),0.94(d,J=6.4Hz,3H)。
實例51
(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-(4-氟苯基)-6甲基苯并[c][2,7]萘啶- 5(6H)-酮
部分A. (S)-(1-((9-(4-氟苯基)-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
用氮氣將存於1,4-二噁烷(8mL)及水(0.4mL)中之(S)-(1-((9-溴-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(150mg,0.297mmol)(如實例3部分A中所述製備)4-氟苯基酸(49.9mg,0.357mmol)、Cs2CO3(291mg,0.892mmol)及PdCl2(dppf)-CH2Cl2加合物(12.14mg,0.015mmol)脫氣5min，然後在80℃下加熱過夜。將反應混合物冷卻至室溫並在減壓壓力下濃縮。將殘餘物吸收於二氯甲烷(10mL)及水(8mL)中。分離有機層，用硫酸鈉乾燥，過濾並在減低壓力下濃縮，以提供呈棕色膠狀物之(S)-(1-((9-(4-氟苯基)-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(0.13g,0.09mmol,31%產率)。該材料不進一步純化即繼續使用。LC/MS,(ESI)m/z 520.4[(M+H)+，計算值C30H35FN3O4 520.25]；LC/MS滯留時間(方法D)：t R=1.08min。
部分B. (S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-(4-氟苯基)-6甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
如實例2部分E中所述製備，以提供呈淡黃色固體之(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-(4-氟苯基)-6甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(19mg,0.043mmol,47%產率)。LC/MS,(ESI)m/z 420.0[(M+H)+，計算值C25H27FN3O2,420.3]；LC/MS滯留時間(方法C’)：t R=1.61min。1H NMR(400MHz，甲醇-d 4 )δ ppm 9.40(s,1H),8.69(m,1H),8.24(s,1H),8.18(m,1H),7.62(m,2H),7.22(m,2H),7.04(s,1H),4.16(m,1H),3.98(m,1H),3.78(s,3H),3.20(m,1H),1.78(m,1H),1.35(m,2H),0.90-0.98(m,6H)。
實例52
(S)-4-胺基-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-9-氟-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A. 4-(4-氯-2,5-二氟苯基)-3-甲醯基吡啶-2-基胺基甲酸第三 丁基酯
如實例17部分C中所述藉由2-(4-氯-2,5-二氟苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷)(實例14部分A中所述之製備)與4-氯-3-甲醯基吡啶-2-基胺基甲酸第三丁基酯(實例17部分B中所述之製備)之間之Suzuki偶合製備，以提供呈黃色固體之4-(4-氯-2,5-二氟苯基)-3-甲醯基吡啶-2-基胺基甲酸第三丁基酯(3.7g,8.91mmol,76%產率)。LC/MS(ESI)m/e 367.1[(M)-，計算值C17H16ClF2N2O3 367.1]LC/MS滯留時間(方法E)：t R=1.07min。
部分B：4-(第三丁氧基羰基胺基)-8-氯-9-氟-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-6-鎓
在0℃下向(4-(4-氯-2,5-二氟苯基)-3-甲醯基吡啶-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(2.6g,6.26mmol)存於DCM(10mL)中之攪拌溶液中逐滴添加甲胺(2M，存於MeOH中)(75mL,6.26mmol)且在RT下將反應混合物攪拌18小時。在減低壓力下濃縮反應混合物。將殘餘物與EtOAc/己烷一起研磨且藉由真空過濾收集所得固體，以產生呈黃色固體之4-((第三丁氧基羰基)胺基)-8-氯-9-氟-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-6-鎓(2.7g,2.399mmol,38%產率)。將試樣不進一步純化即取用於下一步驟。LC/MS(ESI)m/e 362.2[(M+H)+，計算值C18H18ClFN3O2 362.1]LC/MS滯留時間(方法E)：t R=0.66min。
部分C：8-氯-9-氟-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-4-基胺基甲酸
向4-((第三丁氧基羰基)胺基)-8-氯-9-氟-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-6-鎓(2.6g,2.310mmol)存於DCM(10mL)與水(50mL)之混合物中之攪拌溶液中添加三份NaOH(0.370g,9.24mmol)，之後添加五份KMnO4(1.461g,9.24mmol)且將反應加熱至90℃並保持5h。在冷卻後，在減低壓力下去除溶劑。將殘餘物吸收於EtOAc(50mL)及MeOH(50mL)中並攪拌10min。然後使反應混合物經過矽藻土(Celite®)，用EtOAc溶析。濃縮濾液，以產生呈黃色固體之(8-氯-9-氟-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-4-基)胺基甲酸(2.35g,2.082mmol,90%粗製產率)，該黃色固體不純化即取用於下一步驟。LC/MS(ESI)m/e 322.1[(M+H)+，計算值C14H10ClFN3O3 322.0]LC/MS滯留時間(方法E)：t R=1.05min。
部分D：8-氯-9-氟-4-(4-甲氧基苄基胺基)-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
如實例17部分F中所述製備，以得到4-胺基-8-氯-9-氟-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮，然後依照實例17部分G中所述程序用PMB保護，以提供呈黃色油狀物之標題產物(0.45g,0.755mmol,17%產率)。 LC/MS(ESI)m/e 398.2[(M+H)+，計算值C21H18ClFN3O2 398.1]LC/MS滯留時間(方法E)：t R=1.23min。
部分E：(S)-1-(9-氟-4-(4-甲氧基苄基胺基)-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯
如實例16部分H中所述製備，以提供呈黃色油狀物之標題產物(910mg,0.405mmol,54%產率)。LC/MS(ESI)m/e 579.5[(M+H)+，計算值C32H40FN4O5 579.3]LC/MS滯留時間(方法E)：t R=1.37min。
部分F：(S)-4-胺基-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-9-氟-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
如實例2部分E中所述製備，以提供呈TFA鹽形式之淡黃色固體標題產物(27mg,0.045mmol,11%產率)。LC/MS(ESI)m/e 359.2[(M+H)+，計算值C19H24FN4O2 359.2]LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.53min。HPLC滯留時間(方法A)：tR=8.01min及HPLC滯留時間(方法B)：t R=9.13min。1H NMR(400MHz，甲醇-d 4 )δ ppm 8.33(d,J=12.0Hz,1H),8.02(d,J=7.0Hz,1H),7.67(d,J=7.3Hz,1H),7.34(d,J=7.3Hz,1H),4.60(dd,J=10.7,3.1Hz,1H),4.46(dd,J=10.8,6.0Hz,1H),3.87(s,3H),3.86-3.78(m,1H),1.95-1.64(m,3H),1.08(d,J=4.3Hz,3H),1.07(d,J=4.3Hz,3H)。
實例53
(S)-8-(2-胺基-3-異丙氧基丙氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A. (S)-2-(((苄基氧基)羰基)胺基)-3-異丙氧基丙酸甲酯
如文獻Steven,M.S.等人Bioorg Med.Chem.Lett., 2009,19,981-985中所述製備。
部分B. (R)-(1-羥基-3-異丙氧基丙-2-基)胺基甲酸苄基酯
將(S)-2-(((苄基氧基)羰基)胺基)-3-異丙氧基丙酸甲酯(0.02g,0.068mmol)吸入2-丙醇(4mL)中且然後添加NaBH4(7.69mg,0.203mmol)並在50℃下將混合物攪拌過夜。在冷卻至0℃後，用1N HCl淬滅混合物且然後用乙醚(10mL)萃取。收集乙醚層且在減低壓力下濃縮，以提供呈無色油狀物之(R)-(1-羥基-3異丙氧基丙-2-基)胺基甲酸苄基酯)(14mg,0.058mmol,86%粗製產率)。該產物不進一步純化即繼續使用。1H NMR(400MHz,MeOD)δ 7.31-7.48(m,5H),5.12(s, 1H),4.81(bs,1H),3.41-3.91(m,6H),1.12-1.26(m,6H)。
部分C：(S)-(1-異丙氧基-3-((6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)丙-2-基)胺基甲酸苄基酯
如實例16部分H中所述製備，以提供呈淡黃色固體之標題產物(S)-(1-異丙氧基-3-((6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)丙-2-基)胺基甲酸苄基酯(220mg,0.130mmol,10%產率)。LC/MS(ESI)m/e 476.4,[(M+H)+，計算值C27H30N3O5,476.2]；LC/MS滯留時間(方法E)：t R=1.04min。
部分D：(S)-8-(2-胺基-3-異丙氧基丙氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
用N2將(S)-(1-異丙氧基-3-((6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)丙-2-基)胺基甲酸苄基酯(220mg,0.130mmol)存於MeOH(12mL)中之溶液脫氣5min。添加Pd/C(68.9mg,0.065mmol)且在H2氣球下將混合物攪拌12h。經由矽藻土(Celite®)過濾反應混合物，用甲醇溶析，且在減低壓力下濃縮濾液。藉由反相HPLC(10MM存於水/AcCN中之乙酸銨)純化殘餘物，以提供呈灰白色固體之(S)-8- (2-胺基-3-異丙氧基丙氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(90mg,0.108mmol,83%產率)。LC/MS(ESI)m/e 342.2,[(M+H)+，計算值C19H24N3O3,342.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.50min。HPLC滯留時間(方法A)：t R=7.20min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=8.00min。1H NMR(400MHz,MeOD)δ ppm 9.54(s,1H),8.23(d,J=4.4Hz,1H),8.52(d,J=8.8Hz,1H),8.44(d,J=6.0Hz,1H),7.20(s,1H),7.18(d,J=6.0Hz,1H),4.52(dd,J=10.4,3.6Hz,1H),4.43(dd,J=10.4,6.8Hz,1H),3.88-3.75(m,7H),1.26(d,J=6.4Hz,3H),1.25(d,J=6.4Hz,3H)。
實例54
(S)-6-甲基-8-((4-甲基-2-(甲基胺基)戊基)氧基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A. (S)-甲基(4-甲基-1-(6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
在0℃下向(S)-(4-甲基-1-((6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(200mg,0.470mmol)(實例2部分D中之製備說明)存於THF(4mL)中之溶液中添加NaH(37.6mg,0.940mmol)。在0℃下將反應攪拌30min，然後添加MeI(0.044mL,0.705mmol)。然後在0℃下將反應混合物攪拌16h。用冰冷水(50 mL)淬滅反應混合物並用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。用鹽水(1×50mL)洗滌合併的有機層，經由Na2SO4乾燥，過濾並在減低壓力下濃縮。藉由矽膠層析使用石油醚：乙酸乙酯流動相純化粗製產物，以提供呈黃色固體之(S)-甲基(4-甲基-1-(6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(180mg,0.409mmol,87%產率)。LC/MS(ESI)m/e 440.4,[(M+H)+，計算值C25H34N3O4,440.3]；LC/MS滯留時間(方法I)：t R=2.4min。
部分B：(S)-6-甲基-8-((4-甲基-2-(甲基胺基)戊基)氧基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
經1min時間向冷卻至0℃之(S)-甲基(4-甲基-1-((6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(180mg,0.078mmol)存於二氯甲烷(4mL)中之溶液中緩慢添加存於醚(4mL,4.00mmol)中之HCl。在0℃下將反應混合物攪拌5min，然後升溫至室溫並攪拌4h。然後在減低壓力下去除揮發物。經由反相HPLC(0.1% TFA存於水：乙腈)純化殘餘物，以提供呈黃色固體之(S)-6-甲基-8-((4-甲基-2-(甲基胺基)戊基)氧基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(15mg,0.025mmol,32%產率)。LC/MS(ESI)m/e 340.2,[(M+H)+，計算值C20H26N3O2,340.2]；LC/MS滯留時間(方法I)：t R=1.6min。HPLC滯留時間(方法A)：t R=7.59min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=8.08min。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ ppm 9.54(s,1H),8.83(d,J=5.8Hz,1H),8.53(d,J=8.8Hz,1H),8.46(d,J=6.0Hz,1H),7.27-7.16(m,2H),4.57(dd,J=11.3,3.0Hz,1H),4.44(dd,J=11.3,5.3Hz, 1H),3.84(s,3H),3.78-3.68(m,1H),2.84(s,3H),1.95-1.78(m,2H),1.75-1.61(m,1H),1.08(d,J=6.5Hz,6H)。
實例55
(S)-8-((2-胺基-4,4-二氟戊基)氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A：(S)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)-4-甲基戊-4-烯酸甲酯
在0℃下經5min向(S)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)-4-甲基戊-4-烯酸(550mg,2.399mmol)存於四氫呋喃(11mL)中之溶液中逐滴添加TMS-重氮甲烷(4.80mL,4.80mmol)。然後在0℃下將反應混合物攪拌15min。在逐漸升溫至室溫後，將混合物攪拌16h。將反應混合物蒸發至乾燥，以提供呈深黃色油狀物之(S)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)-4-甲基戊-4-烯酸甲酯(580mg,2.386mmol,99%粗製產率)，該深黃色油狀物不純化即取用於下一步驟。1H NMR(400MHz,CDCl 3 )：δ ppm 4.91(s,1H),4.85(s,1H),4.75(s,1H),4.38(q,J=16.00Hz,1H),3.73(s,3H),2.33-2.53(m,2H),1.71(s,3H),1.43(s,9H)。
部分B：(S)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)-4-側氧基戊酸甲酯
在0℃下向(S)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)-4-甲基戊-4-烯酸甲酯(500mg,2.055mmol)存於1,4-二噁烷(10mL)與水(2.5mL)之溶劑混合物中之溶液中添加2,6-二甲基吡啶(0.479mL,4.11mmol)及四氧化鋨 (2.5%，存於2-甲基-2-丙醇)(0.516mL,0.041mmol)、之後偏高碘酸鈉(1.758g,8.22mmol)。在0℃下將反應混合物攪拌15min並升溫至室溫且再攪拌3h。用乙酸乙酯(150mL)稀釋混合物並用10% NaHCO3水溶液洗滌。分離有機層，經硫酸鈉乾燥且在減低壓力下濃縮，以提供呈黃色液體之(S)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)-4-側氧基戊酸甲酯(500mg,2.040mmol,100%粗製產率)。該材料不進一步純化即繼續使用。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ ppm 5.48(s,1H),4.51(t,J=8.00Hz,1H),3.75(s,3H),3.23(d,J=4.00Hz,1H),3.17(d,J=4.00Hz,1H),2.18(s,3H),1.46(s,9H)。
部分C：(S)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)-4,4-二氟戊酸甲酯
在0℃下向(S)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)-4-側氧基戊酸甲酯(300mg,1.223mmol)中逐滴添加DAST(M in)(323μL,2.446mmol)。在室溫下將反應混合物攪拌84h。將反應混合物冷卻至0℃且然後用10% NaHCO3水溶液淬滅。用乙酸乙酯(3×25mL)萃取所得懸浮液。用鹽水(15mL)洗滌有機物，經由Na2SO4乾燥，過濾並在減低壓力下濃縮。藉由矽膠層析純化粗製產物，以提供呈黃色油狀物之(S)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)-4,4-二氟戊酸甲酯(70mg,0.26mmol,19%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ ppm 5.15(s,1H),4.50(s,1H),3.75(s,3H),3.23(t,J=8.00Hz,1H),2.30-2.45(m,2H),1.60(s,3H),1.44(s,9H)。
部分D：(S)-(4,4-二氟-1-羥基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
在-10℃下向(S)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)-4,4-二氟戊酸甲酯(70 mg,0.262mmol)存於四氫呋喃(4mL)中之溶液中添加氫化鋰鋁(2M，存於THF中)(0.262mL,0.524mmol)。在-10℃下將反應混合物攪拌2h，然後用氯化銨水溶液(5mL)淬滅並用乙酸乙酯(2×10mL)萃取。用鹽水(15mL)洗滌合併的有機層，經Na2SO4乾燥，過濾，且在減低壓力下濃縮，以提供呈無色油狀物之(S)-(4,4-二氟-1-羥基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(38mg,0.159mmol,61%粗製產率)。該材料不進一步純化即繼續使用。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ ppm 3.89(d,J=4.00Hz,2H),2.10-2.14(m,1H),1.61-1.66(m,2H),1.51(s,3H),1.44(s,9H)。
部分E：(S)-(4,4-二氟-1-((6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
在含有8-氯-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(30mg,0.123mmol)及(S)-(4,4-二氟-1-羥基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(35.2mg,0.147mmol)之密封管中添加甲苯(3mL)。將二第三丁基(2',4',6'-三異丙基-[1,1'-聯苯]-2-基)膦(31.2mg,0.074mmol)及碳酸銫(59.9mg,0.184mmol)添加至反應混合物，之後添加乙酸鈀(II)(8.26mg,0.037mmol)。然後在85℃下將反應混合物加熱16h。將反應混合物冷卻至室溫，用乙酸乙酯稀釋且經由矽藻土(Celite®)過濾，用乙酸乙酯溶析。在減低壓力下蒸發濾液並藉由矽膠層析純化粗製產物，以提供呈黃色固體之(S)-(4,4-二氟-1-((6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(12mg,0.027mmol,22%產率)。LC/MS(ESI)m/e 448.3[(M+H)+，計算值C23H28F2N3O4 448.2]；LC/MS滯留時間(方法E)：t R=0.96min。
部分F：(S)-8-((2-胺基-4,4-二氟戊基)氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
在0℃下經5min時間向(S)-(4,4-二氟-1-((6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(15mg,0.024mmol)存於二氯甲烷(2mL)中之溶液中逐滴添加存於乙醚(2mL,2.00mmol)中之4M HCl。在0℃下將反應混合物攪拌5min且升溫至室溫並攪拌3h。在減低壓力下去除揮發物。將殘餘物溶解於水(10mL)中並用乙酸乙酯(2×5mL)洗滌。將水層凍乾，以提供棕色黏性固體之(S)-8-((2-胺基-4,4-二氟戊基)氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮，2HCl(6mg,0.018mmol,72%產率，93%純度)。LC/MS(ESI)m/e 348.2[(M+H)+，計算值C18H20F2N3O2 348.1]；LC/MS滯留時間(方法E)：t R=0.56min。HPLC滯留時間(方法A)：t R=6.60min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=6.53min；1H NMR(400MHz，甲醇-d 4 )δ ppm 9.60(br.s.,1H),8.88(br.s.,1H),8.73(br.s.,1H),8.60(br.s.,1H),7.23(br.s.,2H),4.63-4.36(m,2H),4.13-4.06(m,1H),3.84(br.s.,3H),2.75-2.40(m,2H),1.78(t,J=18.8Hz,3H)。
實例56
8-((2-胺基-5,5,5-三氟戊基)氧基)-6-甲基-5-側氧基-5,6二氫苯并[c][2,7]萘啶-9-甲腈
部分A：(1-((9-溴-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-5,5,5三氟戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
如實例15部分E及實例3部分A中所述製備，以提供呈黃色固體之標題產物(1-((9-溴-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-5,5,5三氟戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(0.720g,0.807mmol,60%產率)。LC/MS(ESI)m/e 546.5,[(M+2H)+，計算值C23H27BrF3N3O4,546.1]；LC/MS滯留時間(方法D)：t R=0.90min。
部分B：(5,5,5-三氟-1-((6-甲基-5-側氧基-9-乙烯基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
如實例46部分B中所述製備，以提供呈黃色固體之標題產物(5,5,5-三氟-1-((6-甲基-5-側氧基-9-乙烯基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8基)氧基)戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(0.6g,0.855mmol,75%產率)。
LC/MS(ESI)m/e 492.6,[(M+H)+，計算值C25H29F3N3O4,492.2]；LC/MS滯留時間(方法D)：t R=0.90min。
部分C：(5,5,5-三氟-1-((9-甲醯基-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
如實例55部分B中所述製備，以提供呈棕色固體之標題產物(5,5,5-三氟-1-((9-甲醯基-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(0.081g,0.079mmol,62%產率)。LC/MS(ESI)m/e 494.5(M+H)+，計算值C24H27F3N3O5,494.2]；LC/MS滯留時間(方法D)：t R=0.85min。
部分D：(1-((9-氰基-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8基)氧基)-5,5,5-三氟戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
在室溫下將碘(0.047g,0.184mmol)添加至(5,5,5-三氟-1-((9-甲醯基-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(0.165g,0.167mmol)存於氨水(4mL,48.1mmol)及四氫呋喃(6mL)中之攪拌溶液。在攪拌3h後，深色溶液變成淺灰色，指示反應完成。向反應混合物中裝入Na2S2O3水溶液(25mL 5%溶液)並用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。經硫酸鈉乾燥合併的有機層且在減低壓力下濃縮，以提供呈淡黃色固體之(1-((9-氰基-6-甲基-5-側氧基-5,6二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-5,5,5-三氟戊-2-基)胺基甲酸第三丁基 酯(0.14g,0.143mmol,85%粗製產率)。該材料不進一步純化即繼續使用。LC/MS(ESI)m/e 491.5(M+H)+，計算值C24H26F3N4O4,491.2]；LC/MS滯留時間(方法D)：t R=0.87min。
部分E：8-((2-胺基-5,5,5-三氟戊基)氧基)-6-甲基-5-側氧基-5,6二氫苯并[c][2,7]萘啶-9-甲腈
如實例2部分E中所述製備，以提供呈白色固體之標題產物8-((2-胺基-5,5,5-三氟戊基)氧基)-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-9-甲腈(0.027g,0.066mmol,34%產率)。LC/MS(ESI)m/e 391.2[(M+H)+，計算值C19H18F3N4O2,391.1]LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.61min。HPLC滯留時間(方法A)：t R=8.09min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=10.36min。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ ppm 9.50(s,1H),8.87-8.78(m,2H),8.31(d,J=5.8Hz,1H),7.20(s,1H),4.42-4.30(m,1H),4.29-4.20(m,1H),3.84(s,3H),3.40-3.38(m,1H),2.58-2.31(m,2H),2.09-1.94(m,1H),1.90-1.72(m,1H)。
實例57
6-甲基-8-(六氫吡啶-2-基甲氧基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A：2-(羥基甲基)六氫吡啶-1-甲酸第三丁基酯
向六氫吡啶-2-基甲醇(1.5g,13.02mmol)存於二氯甲烷(25mL)中之攪拌溶液中添加DIPEA(6.82mL,39.1mmol)。在攪拌5min後，添加Boc2O(3.63mL,15.63mmol)且在RT下將混合物攪拌過夜。用水淬滅混合物且用DCM(50mL)稀釋。分離有機層，經Na2SO4乾燥並濃縮，以得到呈無色油狀物之2-(羥基甲基)六氫吡啶-1-甲酸第三丁基酯(2g,9.29mmol,71%粗製產率)，該無色油狀物不進一步純化即取用於下一步驟。1H NMR(400MHz,CDCl 3 )ppm δ 4.27-4.28(m,1H),3.80-3.82(m,1H),3.75-3.77(m,1H),3.56-3.58(m,1H),2.63(t,J=7.20Hz,1H),1.55-1.55(m,5H),1.43(s,9H)。
部分B：2-(((6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)甲基)六氫吡啶-1-甲酸第三丁基酯
如實例16部分H中所述製備，以提供黃色油狀物標題產物(380mg,0.332mmol,41%產率)。LC/MS(ESI)m/e 424.2,[(M+H)+，計算值C24H30N3O4,424.2]；LC/MS滯留時間(方法I)：t R=2.29min。
部分B：6-甲基-8-(六氫吡啶-2-基甲氧基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
如實例2部分E中所述製備，以提供呈淡黃色單TFA鹽之標題化合物(30mg,0.092mmol,53%產率)。LC/MS(ESI)m/e 324.2[(M+H)+，計算值C19H22N3O2 324.2]；LC/MS滯留時間(方法F)：t R=1.23min。HPLC滯留時間(方法A)：t R=5.95min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=6.87min。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ ppm 9.52(s,1H),8.82(d,J=6.0Hz,1H),8.51(d,J=9.3Hz,1H),8.42(d,J=5.8Hz,1H),7.25-7.15(m,2H),4.49(dd,J=10.5,3.5Hz,1H),4.30(dd,J=10.8,7.3Hz,1H),3.83(s,3H),3.70(td,J=7.5,3.6Hz,1H),3.56-3.45(m,1H),3.21-3.07(m,1H),2.19-1.95(m,3H),1.88-1.64(m,3H)。
實例58及實例59
(S)-(2,4-二甲基-1-((6-甲基-5-側氧基-5,6二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯及(R)-(2,4-二甲基-1-((6-甲基-5-側氧基-5,6二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
部分A：(2,4-二甲基-1-((6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
8-氯-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮之合成闡述於實例2部分C中。使8-氯-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(0.15g,0.613mmol)及(1-羥基-2,4-二甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(0.284g,1.226mmol)經受如實例16部分H中所述之醚合成，以提供呈淡黃色固體之產物(2,4-二甲基-1-((6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(0.3g,28%產率)。LC/MS(ESI)m/e 440.2[(M+H)+，計算值C25H34N3O4，440.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=2.67min。
部分B：8-((2-胺基-2,4-二甲基戊基)氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
使(2,4-二甲基-1-((6-甲基-5-側氧基-5,6二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯如實例2部分E中所述，脫除Boc 基團之保護，以提供呈灰白色固體之8-((2-胺基-2,4-二甲基戊基)氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(30mg,12%產率)。藉由對掌性HPLC(共溶劑：0.3%存於甲醇中之DEA，管柱：Chiralpak AD H(250×21)mm 5u)拆分8-((2-胺基-2,4-二甲基戊基)氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮產生兩種鏡像異構物。
鏡像異構物-1：LC/MS(ESI)m/e 340.0[(M+H)+，計算值C20H26N3O2，340.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.88min。HPLC滯留時間(方法B)：t R=9.29min；HPLC滯留時間(方法A)：t R=8.19min。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)9.43(s,1H),8.73(d,J=6.0Hz,1H),8.35(d,J=8.5Hz,1H),8.19(d,J=6.0Hz,1H),7.12-7.01(m,2H),4.05-3.92(m,2H),3.77(s,3H),1.95-1.80(m,1H),1.58(qd,J=14.2,5.5Hz,2H),1.30(s,3H),1.04(d,J=6.5Hz,3H),1.01(d,J=6.5Hz,3H)；HPLC滯留時間，t R=5.44min。
鏡像異構物-2：LC/MS(ESI)m/e 340.0[(M+H)+，計算值C20H26N3O2，340.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.88min。HPLC滯留時間(方法B)：t R=9.29min；HPLC滯留時間(方法A)：t R=8.19min。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)9.43(s,1H),8.73(d,J=6.0Hz,1H),8.35(d,J=8.5Hz,1H),8.19(d,J=6.0Hz,1H),7.12-7.01(m,2H),4.05-3.92(m,2H),3.77(s,3H),1.95-1.80(m,1H),1.58(qd,J=14.2,5.5Hz,2H),1.30(s,3H),1.04(d,J=6.5Hz,3H),1.01(d,J=6.5Hz,3H)；HPLC滯留時間：t R=7.77min。
實例60
(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-4-(二氟甲基)-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A：8-氯-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-4-甲醛
向如實例16部分G中所述製備之8-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(100mg,0.387mmol)存於AcOH(4mL)中之溶液中添加二氧化硒(51.5mg,0.464mmol)。在70℃下將反應混合物攪拌3h。在減低壓力下去除揮發物並將由此獲得之殘餘物溶解於二氯甲烷(2mL)中。經由矽藻土(Celite®)過濾混合物並在減低壓力下濃縮濾液，以提供呈淡黃色固體之標題產物(0.1g,0.202mmol,52%粗製產率)。該材料不進一步純化即繼續使用。LC/MS,(ESI)m/z 273.0[(M+H)+，計算值C14H10ClN2O2,273.0]；LC/MS滯留時間(方法H)：t R=1.89min。
部分B：8-氯-4-(二氟甲基)-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
向8-氯-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-4-甲醛(200mg,0.733mmol)存於DCM(1mL)中之溶液添加雙-(2-甲氧基乙基)胺基三氟化硫(811mg,3.67mmol)。將管密封並在50℃下將反應混合物攪拌過夜。用飽和NaHCO3水溶液(15mL)鹼化反應混合物並用乙酸乙 酯(3×10mL)萃取。經Na2SO4乾燥合併的有機層且在減低壓力下濃縮，以提供呈白色固體之8-氯-4-(二氟甲基)-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(43mg,0.092mmol,13%粗製產率)。該材料不進一步純化即繼續使用。LC/MS,(ESI)m/z 295.0[(M+H)+，計算值C14H10ClF2N2O,295.0]；LC/MS滯留時間(方法H)：t R=1.96min。
部分C：(S)-(1-((4-(二氟甲基)-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并
[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯如實例16部分H中所述製備，以提供標題化合物(15mg,0.016mmol,19%產率)。LC/MS,(ESI)m/z 476.3[(M+H)+，計算值C25H32F2N3O4 476.2]；LC/MS滯留時間(方法E)：t R=1.14min。
部分D：(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-4-(二氟甲基)-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
如實例2部分E中所述製備，以提供呈灰白色固體之標題產物(1.5mg,3.95μmol,9%產率)。LC/MS,(ESI)m/z 376.2[(M+H)+，計算值C20H24F2N3O2,376.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.63min。HPLC滯留時間(方法A)：t R=5.97min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=7.12min。1H NMR(400MHz，甲醇-d 4)δ ppm 8.81(d,J=5.52Hz,1H) 8.42-8.48(m,2H)7.97-8.26(m,1H)7.09-7.15(m,2H)4.22(dd,J=9.54,4.02Hz,1H)4.04(dd,J=9.29,7.03Hz,1H)3.79(s,3H)3.39(dt,J=3.33,1.73Hz,1H)1.81-1.92(m,1H)1.43-1.57(m,2H)1.02(dd,J=8.78,6.53Hz,6H)。19F NMR(400MHz，甲醇-d 4)δ ppm 120.45。
實例61
(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-7-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A：(S)-(1-((7或9-氯-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
向如實例16部分H中所述製備之(S)-(1-((4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(50mg,0.114mmol)存於乙腈(2mL)中之溶液中添加1-氯吡咯啶-2,5-二酮(15.19mg,0.114mmol)。在55℃下將反應混合物攪拌16h過夜。用飽和碳酸氫鈉水溶液(2mL)及水(10mL)鹼化反應混合物。用二氯甲烷(3×10mL)萃取溶液。用鹽水(10mL)洗滌合併的有機層，用硫酸鈉乾燥，過濾並在減低壓力下濃縮，以提供呈淡黃色固體之 (S)-(1-((7-氯-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯與(S)-(1-((9-氯-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯之混合物(60mg,0.037mmol,32%組合粗製產率)。該材料不進一步純化即繼續使用。LC/MS(ESI)m/e 474.4,[(M+H)+，計算值C25H33ClN3O4,474.2]；LC/MS滯留時間(方法E)：t R=1.24min。
部分B：(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-7-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
在0℃下向(S)-(1-((7-氯-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯及(S)-(1-((9-氯-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(30mg,0.063mmol)中之混合物中添加存於1,4-二噁烷(241μL,0.964mmol)中之HCl。將反應混合物攪拌2h，然後在減低壓力下濃縮。藉由反相HPLC(Symmetry C18管柱(19×250mm)7.0微米；流動相A：0.1%存於水中之TFA；流動相B：乙腈；流速：14.0mL)純化殘餘物。濃縮HPLC流分，用NaHCO3鹼化並用DCM(2×)萃取。在真空中濃縮合併的有機層，以提供呈灰白色固體之7-Cl與9-Cl最終產物之純化混合物。藉由正相HPLC(chiralpak ODH,(4.6×250mm)5.0微米；流動相A：正己烷；流動相B：乙醇)使此經受第二次純化(以拆分區域異構物(regioisomer))；在真空中濃縮HPLC流分，以提供呈淡黃色固體之7-氯-區域異構物：(S)-8-((2-胺 基-4-甲基戊基)氧基)-7-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(3mg,7.2umol,11%產率)。LC/MS,(ESI)m/z 373.8[(M+H)+，計算值C20H25ClN3O2,374.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.64min。HPLC滯留時間(方法A)：t R=8.44min；1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ ppm 8.65(d,J=5.65Hz,1 H)8.44(d,J=9.22Hz,1 H)8.20(d,J=5.58Hz,1 H)7.22(d,J=9.04Hz,1 H)4.05-4.10(m,1 H)3.98(dd,J=9.25,6.43Hz,1 H)3.73(s,3 H)3.13-3.18(m,1 H)2.99(s,3 H)1.81-1.89(m,1 H)1.28-1.42(m,2 H)0.91(dd,J=13.80,6.59Hz,2 H)。
實例62
(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
如上文所示藉由正相HPLC(chiralpak ODH,(4.6×250mm)5.0微米；流動相A：正己烷；流動相B：乙醇)純化(以拆分區域異構物)實例61部分B中製備之7-Cl與9-Cl產物之混合物；在真空中濃縮HPLC流分，以提供呈灰白色固體之9-氯-區域異構物：(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(5mg,0.013mmol,21%產率)。LC/MS,(ESI)m/z 373.8[(M+H)+，計算值C20H25ClN3O2,374.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.61min。HPLC滯留時間(方法A)：t R=8.37min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=9.14min。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ ppm 8.63(d,J=5.65Hz,1 H)8.60(s,1 H)8.26(d,J=5.71Hz,1 H)7.12(s,1 H)4.11-4.16(m, 1 H)4.00-4.06(m,1 H)3.70(s,3 H)3.13-3.16(m,1H)3.00(s,3 H)1.82-1.90(m,1 H)1.34-1.42(m,1 H)1.23-1.32(m,1 H)0.90-0.95(m,6 H)。
實例63
(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-4,6,9-三甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A：(S)-(4-甲基-1-((4,6,9-三甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
如實例3部分A及實例4部分A中所述製備，以提供呈淡黃色固體之(S)-(4-甲基-1-((4,6,9-三甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(30mg,0.038mmol,40%產率)。LC/MS,(ESI)m/z 453.9[(M+H)+，計算值C26H36N3O4 454.3]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=2.16min。
部分B：(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-4,6,9-三甲基苯并 [c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
如實例2部分E中所述製備，以提供呈灰白色固體之(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-4,6,9-三甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(15mg,0.040mmol,62%產率)。LC/MS,(ESI)m/z 353.9[(M+H)+，計算值C21H28N3O2 354.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.64min。HPLC滯留時間(方法A)：t R=8.21min。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ ppm 8.59(d,J=5.77Hz,1H)8.27(s,1H)8.15(d,J=5.60Hz,1H)6.92(s,1H)3.90-4.08(m,2H)3.68(s,3H)3.12-3.20(m,1H)2.99(s,3H)2.24(s,3H)1.85(td,J=13.68,6.53Hz,3H)1.22-1.43(m,3H)0.86-0.95(m,6H)。
實例64
(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-9-甲腈
部分A. (S)-1-(9-氰基-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯
用氮將如實例3部分A中所述製備之(S)-(1-((9-溴-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(2.4g,4.63mmol)、Pd2(dba)3(0.212g,0.231mmol)、DPPF(0.257g,0.463mmol)及氰化鋅(II)(0.544g,4.63mmol)存於DMF(20 mL)及水(1mL)中之懸浮液脫氣並加熱至130℃過夜。在冷卻至室溫後，在減低壓力下濃縮揮發物。在乙酸乙酯中重構殘餘物並經由矽藻土(Celite®)過濾。用H2O、之後鹽水洗滌有機物，經Na2SO4乾燥，並在減低壓力下濃縮。藉由矽膠管柱(石油醚及乙酸乙酯)純化粗製產物，以提供呈黃色固體之(S)-1-(9-氰基-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯(1.9g,4.09mmol,88%產率)。LC/MS(ESI)m/e 465.2[(M+H)+，計算值C26H33N4O4,465.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=2.74min。
部分B. (S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-9-甲腈
如實例2部分E中所述製備，以提供呈淡黃色固體之(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-9-甲腈(1.6g,3.89mmol,95%產率)。LC/MS(ESI)m/e 365.2[(M+H)+，計算值C21H25N4O2,365.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=2.13min。HPLC滯留時間(方法A)：t R=8.70min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=9.57min。1H NMR(400MHz,MeOD)δ ppm 9.07(s,1 H),8.75(s,2 H),7.28(s,1 H),4.69(m,1 H),4.55(m,1 H),3.87(m,4 H),3.27(s,3 H),1.87(m,2 H),1.74(m,1 H),1.08(m,6 H)。
實例65
(S)-4,6-二甲基-8-(4-甲基-2-(甲基胺基)戊氧基)-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-9-甲腈
部分A. (S)-(1-((9-氰基-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)(甲基)胺基甲酸第三丁基酯
將如實例64部分B中所述製備之(S)-(1-((9-氰基-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(60mg,0.129mmol)吸入DMF(3mL)中並冷卻至0℃。用NaH(10.33mg,0.258mmol)、之後MeI(0.016mL,0.258mmol)處理反應混合物。在0℃下攪拌10min後，將反應混合物升溫至室溫並攪拌過夜。然後用冰冷水淬滅混合物並用乙酸乙酯(2×3mL)萃取。用硫酸鈉乾燥合併的有機層且在減低壓力下濃縮，以提供呈灰白色固體之(S)-(1-((9-氰基-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)(甲基)胺基甲酸第三丁基酯(70mg,0.127mmol,99%粗製產率)。該材料不進一步純化即繼續使用。LC/MS(ESI)m/e 479.2[(M+H)+，計算值C27H35N4O4 479.3]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=2.16min。
部分B. (S)-4,6-二甲基-8-((4-甲基-2-(甲基胺基)戊基)氧基)-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-9-甲腈
如實例2部分E中所述製備，以提供呈灰白色固體之(S)-4,6-二甲基-8-((4-甲基-2-(甲基胺基)戊基)氧基)-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-9-甲腈(25mg,0.058mmol,46%產率)。LC/MS(ESI)m/e 379.0,[(M+H)+，計算值C22H27N4O2 379.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.87min。HPLC滯留時間(方法A)：t R=8.59min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=9.88min。1H-NMR(400MHz,MeOD)：δ ppm 1.03(d,J=22.80Hz,6H),1.56-1.62(m,1H),1.67-1.72(m,1H),1.84-1.87(m,1H),2.67(s,3H),3.10(s,3H),3.28-3.30(m,1H),3.81(s,3H),4.35(s,1H),4.49(s,1H),7.18(s,1H),8.20(d,J=5.60Hz,1H),8.82(s,1H)。
實例66
(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-2,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A：4-氯-6-甲基菸酸甲酯
向4,6-二氯菸酸甲酯(3.00g,14.56mmol)及三甲基硼氧環烷(1.097g,8.74mmol)存於1,4-二噁烷(70mL)及水(7mL)中之溶液中添加碳酸銫(14.23g,43.7mmol)。經5分鐘時間用氬將混合物脫氣。添加PdCl2(dppf)-CH2Cl2加合物(1.189g,1.456mmol)且將反應混合物加熱至110℃並保持16h。將反應混合物冷卻至室溫，用水(100mL)稀釋並用乙酸乙酯(200mL)萃取。用鹽水(2×100mL)洗滌有機相，經Na2SO4乾燥且在減低壓力下濃縮。藉由矽膠層析使用乙酸乙酯-石油醚混合物純化所得殘餘物，以提供呈黃色液體之4-氯-6-甲基菸酸甲酯(700mg,2.87mmol,20%產率)。LC/MS(ESI)m/e 186.0[(M+H)+，計算值C8H9ClNO2 185.6]；LC/MS滯留時間(方法I)t R=1.79min。
部分B：4-(4-氯-2-氟苯基)-6-甲基菸酸甲酯
向4-氯-6-甲基菸酸甲酯(660mg,3.56mmol)及(4-氯-2-氟苯基)酸(620mg,3.56mmol)存於1,4-二噁烷(20mL)中之溶液中添加碳酸銫(3.48g,10.67mmol)。經5min時間用氬將反應混合物脫氣。將Pd(Ph3P)4(205mg,0.178mmol)添加至反應混合物且加熱至80℃並保持16h。將混合物冷卻至室溫，用水稀釋並用乙酸乙酯(100mL)萃取。用鹽水(2×50mL)洗滌有機相，經Na2SO4乾燥並在減低壓力下濃縮。藉由矽膠層析純化所得殘餘物，以提供呈黃色液體之4-(4-氯-2-氟苯基)-6-甲基菸酸甲酯(500mg,1.53mmol,43%產率)。LC/MS(ESI)m/e 280.0[(M+H)+，計算值C14H12ClFNO2 279.6]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.87min。
部分C：4-(4-氯-2-氟苯基)-6-甲基菸酸
向4-(4-氯-2-氟苯基)-6-甲基菸酸甲酯(700mg,2.50mmol)存於MeOH(5mL)中之溶液中添加存於水(5mL)中之NaOH(200mg,7.51mmol)。在室溫下將反應混合物攪拌2h。在減低壓力下蒸發溶劑並藉由添加1.5N HCl將所得殘餘物調節至pH約3。用二氯甲烷萃取反應混合物。經Na2SO4乾燥有機相，且在減低壓力下濃縮，以提供呈白色固體之4-(4-氯-2-氟苯基)-6-甲基菸酸(500mg,1.730mmol,92%粗製產率)。該材料不進一步純化即繼續使用。LC/MS(ESI)m/e 266.0[(M+H)+，計算值C13H10ClFNO2 266.03]；LC/MS(方法I)t R=1.51min。
部分D：4-(4-氯-2-氟苯基)-N,6-二甲基菸醯胺
在0℃下向4-(4-氯-2-氟苯基)-6-甲基菸酸(500mg,1.88mmol)存於二氯甲烷(10mL)中之溶液中逐滴添加草醯氯(0.988mL,11.29mmol)、之後DMF(0.2mL)。在室溫下將反應混合物攪拌4h。將反應混合物蒸發至乾燥。將殘餘物吸收於二氯甲烷(50mL)中並冷卻至0℃。添加鹽酸甲胺(1.27g,18.82mmol)、之後三乙胺(2.62mL,18.82mmol)並在室溫下將反應混合物攪拌2h。用水(50mL)稀釋反應混合物並用二氯甲烷(100mL)萃取。分離有機層，經Na2SO4乾燥且在減低壓力下濃縮，以提供呈黃色固體之4-(4-氯-2-氟苯基)-N,6-二甲基菸醯 胺(520mg,1.43mmol,76%粗製產率)。該材料不進一步純化即繼續使用。LC/MS(ESI)m/e 279.0[(M+H)+，計算值C14H13ClFN2O 279.1]；LC/MS滯留時間((方法I)t R=1.82min。
部分E：8-氯-2,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
在0℃下向4-(4-氯-2-氟苯基)-N,6-二甲基菸醯胺(520mg,1.86mmol)存於四氫呋喃(20mL)中之溶液中添加NaH(224mg,5.60mmol)。使反應混合物逐漸達到室溫並在室溫下攪拌15h。用水(50mL)稀釋反應混合物並用乙酸乙酯(100mL)萃取。分離有機層，經Na2SO4乾燥且在減低壓力下濃縮，以提供呈磚紅色固體之8-氯-2,6二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(480mg,1.51mmol,81%產率)。LC/MS(ESI)m/e 259.0[(M+H)+，計算值C14H12ClN2O 259.05]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.91min。1H NMR(400MHz，甲醇-d 4)δ ppm 9.41(s,1 H),8.48(d,J=8.59Hz,1 H),8.23(s,1 H),7.69(d,J=1.98Hz,1 H),7.44(dd,J=8.64,1.94Hz,1 H),3.78(s,3 H),2.75(s,3 H)。
部分F：(S)-(1-((2,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
向8-氯-2,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(100mg,0.387mmol)及(1-羥基-2,4-二甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(168mg, 0.773mmol)存於甲苯(5mL)中之攪拌溶液中添加碳酸銫(189mg,0.580mmol)及2-二第三丁基膦基-2',4',6'-二-異丙基-1,1'-聯苯(9.85mg,0.023mmol)。用氬將反應混合物脫氣5分鐘並添加乙酸鈀(II)(26mg,0.116mmol)。將反應混合物加熱至100℃並保持18h。經由矽藻土(Celite®)過濾反應混合物並在減低壓力下濃縮濾液。藉由矽膠層析使用乙酸乙酯-石油醚純化殘餘物，以提供呈深黃色半固體之(S)-(1-((2,6-二甲基-5-側氧基-5,6二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(100mg,0.171mmol,44%產率)。LC/MS(ESI)m/e 440.6[(M+H+)+，計算值C25H34N3O4 440.2]；LC/MS滯留時間(方法D)：t R=0.89min。
部分G：(S)-(1-((9-溴-2,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
在室溫下向(S)-(1-((2,6-二甲基-5-側氧基-5,6二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(40mg,0.069mmol)存於乙腈(3mL)中之攪拌溶液中添加NBS(12mg,0.069mmol)。將反應混合物加熱至回流並保持2h。用水(50mL)稀釋反應混合物並用二氯甲烷(100mL)萃取。分離有機層，經Na2SO4乾燥且在減低壓力下濃縮，以提供呈黃色油狀物之(S)-(1-((9-溴-2,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(30mg,0.027mmol,40%粗製產率)。該材料不進一步純化即繼續使用。LC/MS(ESI)m/e 518.2[(M+H)+，計算值C25H33BrN3O4 518.2]；LC/MS滯留時間(方法E)：t R=1.25min。
部分H：(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-2,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
在0℃下向(S)-(1-((9-溴-2,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(30mg,0.058mmol)存於MeOH(3mL)中之溶液中添加存於1,4-二噁烷(0.362mL,1.447mmol)中之4M HCl。在0℃下將反應混合物攪拌2h。在減低壓力下濃縮反應混合物，以提供粗製產物，藉由製備型HPLC純化該粗製產物，以提供呈灰白色固體之(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-2,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(6mg,0.014mmol,24%產率)。LC/MS(ESI)m/e 418.0[(M+H)+，計算值C20H25BrN3O2418.1]；LC/MS滯留時間(方法H)：t R=1.70min；HPLC滯留時間(方法A)：t R=6.33min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=7.19min。1H NMR(400MHz，甲醇-d 4)δ ppm 9.31(s,1 H),9.28-9.33(m,1 H),8.58(s,1 H),8.08(s,1 H),7.09(s,1 H),4.42(dd,J=9.79,3.26Hz,1 H),4.25(dd,J=9.91,6.15Hz,1 H),3.78(s,3 H),3.63(br.s.,1 H),2.73(s,3 H),2.00(br.s.,4 H),1.85-1.92(m,1 H),1.71-1.80(m,1 H),1.57-1.66(m,1 H),1.06(dd,J=6.40,4.64Hz,6 H)。
實例67
(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-2,6二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A：4-氯-6-甲基菸酸甲酯
向4,6-二氯菸酸甲酯(3.00g,14.56mmol)及三甲基硼氧環烷(1.097g,8.74mmol)存於1,4-二噁烷(70mL)及水(7mL)中之溶液中添加碳酸銫(14.23g,43.7mmol)。經5min時間用氬將混合物脫氣。將PdCl2(dppf)-CH2Cl2加合物(1.189g,1.456mmol)添加至反應混合物且加熱至110℃並保持16h。將反應混合物冷卻至室溫，用水(100mL)稀釋並用乙酸乙酯(200mL)萃取。用鹽水(2×100mL)洗滌有機相，經Na2SO4乾燥，並在減低壓力下濃縮。藉由矽膠層析使用乙酸乙酯-石油醚混合物純化所得殘餘物，以提供呈黃色液體之4-氯-6-甲基菸酸甲酯(700mg,2.87mmol,20%產率)。LC/MS(ESI)m/e 186.0[(M+H)+，計算值C8H9ClNO2 186.0]；LC/MS滯留時間(方法I)：t R=1.79min。
部分B：4-(4-氯-2-氟苯基)-6-甲基菸酸甲酯
向4-氯-6-甲基菸酸甲酯(660mg,3.56mmol)及(4-氯-2-氟苯基)酸(620mg,3.56mmol)存於1,4-二噁烷(20mL)中之溶液中添加碳酸銫(3.48g,10.67mmol)。經5min時間用氬將反應混合物脫氣。將Pd(Ph3P)4(205mg,0.178mmol)添加至反應混合物且加熱至80℃並保持16h。將混合物冷卻至室溫，用水稀釋並用乙酸乙酯(100mL)萃取。用鹽水(2×50mL)洗滌有機相，經Na2SO4乾燥，並在減低壓力下濃縮。藉由矽膠層析純化所得殘餘物，以提供呈黃色液體之4-(4-氯-2-氟苯基)-6-甲基菸酸甲酯(500mg,1.53mmol,43%產率)。LC/MS(ESI)m/e 280.0[(M+H)+，計算值C14H12ClFNO2 280.0]；LC/MS滯留時 間(方法C)：t R=1.87min。
部分C：4-(4-氯-2-氟苯基)-6-甲基菸酸
向4-(4-氯-2-氟苯基)-6-甲基菸酸甲酯(700mg,2.50mmol)存於MeOH(5mL)中之溶液中添加存於水(5mL)中之NaOH(200mg,7.51mmol)。在室溫下將反應混合物攪拌2h。在減低壓力下對其實施蒸發並藉由添加1.5N HCl溶液將所得殘餘物調節至pH約3。用二氯甲烷萃取產物。經Na2SO4乾燥有機相，且在減低壓力下濃縮，以提供呈白色固體之4-(4-氯-2-氟苯基)-6-甲基菸酸(500mg,1.730mmol,69%粗製產率)。該材料不進一步純化即繼續使用。LC/MS(ESI)m/e 266.0[(M+H)+，計算值C13H10ClFNO2 266.0]；LC/MS滯留時間(方法I)：t R=1.51min。
部分D：4-(4-氯-2-氟苯基)-N,6-二甲基菸醯胺
在0℃下向4-(4-氯-2-氟苯基)-6-甲基菸酸(500mg,1.88mmol)存於二氯甲烷(10mL)中之溶液中逐滴添加草醯氯(0.988mL,11.29mmol)、之後DMF(0.2mL)。在室溫下將反應混合物攪拌4h。將反應混合物蒸發至乾燥。將殘餘物吸入二氯甲烷(50mL)中並冷卻至0℃。添加鹽酸甲胺(1.27g,18.82mmol)及三乙胺(2.62mL,18.82mmol)。在室溫下將反應混合物攪拌2h。用水(50mL)稀釋反應混合物並用二氯甲烷(100mL)萃取。分離有機層，經Na2SO4乾燥且在減低壓力下濃縮，以提供呈黃色固體之4-(4-氯-2-氟苯基)-N,6-二甲基菸醯胺(520 mg,1.43mmol,76%粗製產率)。該材料不進一步純化即繼續使用。LC/MS(ESI)m/e 279.0[(M+H)+，計算值C14H13ClFN2O 279.1]；LC/MS滯留時間(方法I)：t R=1.82min。
部分E：8-氯-2,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
在0℃下向4-(4-氯-2-氟苯基)-N,6-二甲基菸醯胺(520mg,1.86mmol)存於四氫呋喃(20mL)中之溶液中添加NaH(224mg,5.60mmol)。使反應混合物逐漸達到室溫並在室溫下攪拌15h。用水(50mL)稀釋反應混合物並用乙酸乙酯(100mL)萃取。分離有機層，經Na2SO4乾燥且在減低壓力下濃縮，以提供呈紅色固體之產物8-氯-2,6二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(480mg,1.51mmol,81%粗製產率)。該材料不進一步純化即繼續使用。LC/MS(ESI)m/e 259.0[(M+H)+，計算值C14H12ClN2O 259.0]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.74min。1H NMR(300MHz，甲醇-d 4)δ ppm 9.41(s,1 H),8.48(d,J=8.59Hz,1 H),8.23(s,1 H),7.69(d,J=1.98Hz,1 H),7.44(dd,J=8.64,1.94Hz,1 H),3.78(s,3 H),2.75(s,3 H)。
部分F：(S)-(1-((2,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
向8-氯-2,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(100mg,0.387mmol)及(1-羥基-2,4-二甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(168mg, 0.773mmol)存於甲苯(5mL)中之攪拌溶液中添加碳酸銫(189mg,0.580mmol)及2-二第三丁基膦基-2',4',6'-二-異丙基-1,1'-聯苯(9.85mg,0.023mmol)。用氬將反應混合物脫氣5min並向其中添加乙酸鈀(II)(26mg,0.116mmol)。將反應混合物加熱至100℃並保持18h。經由矽藻土(Celite®)過濾反應混合物並蒸發濾液。藉由矽膠層析使用乙酸乙酯-石油醚純化所得殘餘物，以提供呈深黃色半固體之產物(S)-(1-((2,6-二甲基-5-側氧基-5,6二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(100mg,0.171mmol,44%產率)。LC/MS(ESI)m/e 440.7[(M+H)+，計算值C25H34N3O4 440.2]；LC/MS滯留時間(方法D)：t R=0.89min。
部分G. (S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-2,6二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
使(S)-(1-((2,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(0.05g,0.114mmol)如實例2部分E中所述，脫除Boc基團之保護，以得到呈無色半固體之(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-2,6二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(13mg,0.037mmol,33%)。LC/MS(ESI)m/e 340.2[(M+H)+，計算值C20H26N3O2 340.2]；LC/MS滯留時間(方法I)：t R=1.62min。HPLC滯留時間(方法A)：t R=8.17min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=7.50min。1H NMR(400MHz，甲醇-d 4)ppm 9.33(s,1H),8.38(d,J=8.78Hz,1H),8.34-8.41(m,1H),8.10(s,1H),8.06-8.12(m,1H),7.04-7.13(m,2H),4.17(dd,J=9.29,4.02Hz,1H),3.99(dd,J=9.29,7.28Hz, 1H),3.77(s,3H),3.66(d,J=2.76Hz,1H),2.72(s,3H),1.80-1.92(m,1H),1.39-1.54(m,2H),1.01(dd,J=9.29,6.53Hz,7H)。
實例68
(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-氯-2,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A. (S)-(1-((9-氯-2,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
使如實例67部分F中所述製備之(S)-(1-((2,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(0.05g,0.114mmol)經受使用實例20部分A中所述之程序使用NCS(0.018g,0.137mmol)實施之氯化，以得到呈無色油狀物之(S)-(1-((9-氯-2,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(50mg,0.052mmol,45%產率)。LC/MS(ESI)m/e 474.7[(M+H)+，計算值C25H32ClN3O4 474.2]；LC/MS滯留時間(方法H)：t R=0.94min。
部分B. (S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-氯-2,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
使(S)-(1-((9-氯-2,6-二甲基-5-側氧基-5,6二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(0.04g,0.041mmol)如實例2部分E中所述程序，脫除Boc基團之保護，以提供呈灰白色固體之(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-氯-2,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(0.006g,0.015mmol,37%產率)。LC/MS(ESI)m/e 373.8[(M+H)+，計算值C20H25ClN3O2 374.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.55min；HPLC滯留時間(方法A)：t R=10.18min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=15.48min。1H NMR(400MHz，甲醇-d 4)ppm 9.37(s,1H),8.46-8.53(m,1H),8.14(s,1H),7.19(s,1H),4.23-4.31(m,1H),4.03-4.11(m,1H),3.78-3.88(m,3H)2.73(s,1H),2.70-2.77(m,3H),1.81-1.90(m,1H),1.44-1.58(m,2H),0.96-1.06(m,6H)。
實例69
(S)-8-(2-胺基-3-甲氧基丙氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A：(R)-2-胺基-3-甲氧基丙-1-醇
如文獻Kim,H.J.等人Bioorg Med.Chem.Lett., 2011,21,3809-3812中所述製備。
部分B：(S)-(1-甲氧基-3-((6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)丙-2-基)胺基甲酸苄基酯
如實例16部分H中所述製備，以提供黃色膠狀物標題產物(0.12g,0.145mmol,24%產率)。LC/MS,(ESI)m/z 448.6[(M+H)+，計算值C25H26N3O5,448.5]；LC/MS滯留時間(方法D)：t R=0.74min。
部分C：(S)-8-(2-胺基-3-甲氧基丙氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
如實例2部分E中所述製備，以提供呈棕色膠狀物之標題產物(14mg,0.042mmol,70%產率)。LC/MS,(ESI)m/z 314.2[(M+H)+，計算值C17H20N3O3,314.1]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.38min。HPLC滯留時間(方法A)：t R=5.29min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=5.31min。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ ppm 9.47(s,1 H)8.77(d,J=5.77Hz,1 H)8.42(d,J=8.78Hz,1 H)8.25(d,J=5.77Hz,1 H)7.04-7.17(m,2 H)4.26(dd,J=9.29,4.77Hz,1 H)4.10-4.19(m,1 H)3.81(s,3 H)3.52-3.65(m,2 H)3.44(s,3 H)3.38(dt,J=3.33,1.73Hz,1 H)。
實例70
(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-9-氟-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A. 4-(4-氯-2,5-二氟苯基)-2-甲基菸酸甲酯
如實例16部分D中所述藉由在4-氯-2-甲基菸酸甲酯(如實例14部分A中所述製備)與2-(4-氯-2,5-二氟苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷(如實例16部分A-部分C中所述製備)之間實施Suzuki偶合來製備，以提供呈棕色油狀物之4-(4-氯-2,5-二氟苯基)-2-甲基菸酸甲酯(3g,4.13mmol,24%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ ppm 8.60(d,J=5.2Hz,1 H),7.36(m,1 H),7.20(m,2 H),3.74(s,3 H),2.49(s,3 H)。
部分B. 4-(4-氯-2,5-二氟苯基)-2-甲基菸酸
如實例16部分E中所述藉由對4-(4-氯-2,5-二氟苯基)-2-甲基菸酸甲酯實施水解來製備，以提供呈白色固體之4-(4-氯-2,5-二氟苯基)-2-甲基菸酸(1.7g,4.02mmol,97%產率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ ppm 13.38(br.s.,1H),8.58(d,J=5.2Hz,1H),7.74(m,1H),7.53(m,1H),7.41(d,J=4.8Hz,1H),2.43(s,3H)。
部分C. 4-(4-氯-2,5-二氟苯基)-N,2-二甲基菸醯胺
在0℃下向4-(4-氯-2,5-二氟苯基)-2-甲基菸酸(1.7g,4.02mmol)存於DMF(0.5mL)中之攪拌溶液中添加DIEA(2.81mL,16.06mmol)、HOBT(1.230g,8.03mmol)、EDC(1.155g,6.02mmol)，之後添加鹽酸甲胺(0.488g,7.23mmol)。在攪拌10min後，去除冰浴並將反應混合物攪拌過夜。在減低壓力下濃縮反應混合物。用乙酸乙酯(10mL)稀釋殘餘物並用水(10mL)、之後鹽水(10mL)洗滌。分離有機層並經硫酸鈉乾燥，過濾，且在減低壓力下濃縮，以提供呈棕色固體之4-(4-氯-2,5-二氟苯基)-N,2-二甲基菸醯胺(1g,2.123mmol,53%粗製產率)，該棕色固體不純化即取用於下一步驟。LC/MS(ESI)m/e 297.3[(M+H)+，計算值C14H12ClF2N2O 297.1]；LC/MS滯留時間(方法B)：t R=0.76min。
部分D. 8-氯-9-氟-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
如實例16部分G中所述自4-(4-氯-2,5-二氟苯基)-2-甲基菸酸製備，以提供呈白色固體之8-氯-9-氟-4,6二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(530mg,1.532mmol,72%產率)。LC/MS(ESI)m/e 277.2[(M+H)+，計算值C14H11ClFN2O 277.04]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.83min。
部分E. (S)-1-(9-氟-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯
如實例16部分H中所述自8-氯-9-氟-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮製備，以提供呈油狀物之(S)-1-(9-氟-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯(350mg,0.367mmol,24%)。LC/MS(ESI)m/e 458.6[(M+H)+，計算值C25H33FN3O4 458.23]；LC/MS滯留時間(方法B)：t R=1.24min。
部分F. (S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-9-氟-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
如實例16部分I中所述自(S)-1-(9-氟-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯製備，以提供呈黃色油狀物之(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-9-氟-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(57.6mg,0.095mmol,91%)。LC/MS(ESI)m/e 358.2[(M+H)+，計算值C20H25FN3O2 358.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.53min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=8.16min。1H NMR(400MHz，甲醇-d 4)δ ppm 8.58(d,J=5.8Hz,1H),8.23(d,J=12.0Hz,1H),8.09(d,J=5.0Hz,1H),7.19(d,J=6.8Hz,1H),4.26(dd,J=9.5,4.0Hz,1H),4.08(t,J=8.2Hz,1H),3.79(s,3H),3.41-3.38(m,1H),3.10(s,3H),1.94-1.82(m,1H),1.58-1.39(m,2H),1.04(d, J=6.5Hz,3H),1.01(d,J=6.5Hz,3H)。
實例71
(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-9-(羥基甲基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A. (S)-1-(4,6-二甲基-5-側氧基-9-乙烯基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯
如實例64部分A及實例46部分B中所述自(S)-1-(9-溴-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯製備，以提供標題產物(1.2g,1.985mmol,64%產率)。LC/MS(ESI)m/e 466.2[(M+H)+，計算值C27H36N3O4 466.3]；LC/MS滯留時間(方法B)：t R=1.79min。
部分B. (S)-1-(9-甲醯基-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯
如實例55部分B中所述自(S)-1-(4,6-二甲基-5-側氧基-9-乙烯基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基胺基甲酸第三丁基 酯製備，以提供呈黃色膠狀物之標題產物(1.2g,0.980mmol,49%產率)。LC/MS(ESI)m/e 468.2[(M+H)+，計算值C26H34N3O5 468.2]；LC/MS滯留時間(方法B)：t R=1.66min。
部分C. (S)-1-(9-(羥基甲基)-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯
如實例31部分E中所述製備，以提供呈棕色膠狀物之標題產物(0.100g,0.160mmol,87%產率)。LC/MS(ESI)m/e 470.2[(M+H)+，計算值C26H36N3O5 470.2]；LC/MS滯留時間(方法B)：t R=1.48min。
部分D. (S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-9-(羥基甲基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
如實例2部分E中所述製備，以提供呈灰白色固體之標題產物(28mg,0.073mmol,34%產率)。LC/MS(ESI)m/e 370.2[(M+H)+，計算值C21H28N3O3 370.2]；LC/MS滯留時間(方法B)：t R=1.03min。HPLC滯留時間(方法A)：t R=7.46min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=8.13min；1H NMR(400MHz，甲醇-d 4)δ ppm 8.55(d,J=5.8Hz,1H),8.37(s,1H),8.12(d,J=5.8Hz,1H),7.01(s,1H),4.80(s,2H),4.28(dd,J=9.5,3.5Hz,1H),4.08(dd,J=9.5,7.0Hz,1H),3.78(s,3H),3.48-3.40(m,1H),3.08(s,3H),1.92-1.80(m,1H),1.64-1.41(m,2H), 1.05(d,J=6.5Hz,3H),1.03(d,J=6.8Hz,3H)。
實例72
(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-4,6-二甲基-9-(噁唑-5-基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A. (S)-1-(4,6-二甲基-9-(噁唑-5-基)-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯
如實例71部分D及實例48部分B中所述自(S)-1-(9-甲醯基-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯製備，以提供呈黃色膠狀物之標題產物(150mg,0.068mmol,56%產率)。LC/MS(ESI)m/e 507.2[(M+H)+，計算值C28H35N4O5 507.2]LC/MS滯留時間(方法B)：t R=1.64min。
部分B. (S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-4,6-二甲基-9-(噁唑-5-基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
如實例2部分E中所述自(S)-1-(9-甲醯基-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6- 二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯製備，以提供呈黃色固體之標題產物(20mg,0.045mmol,67%產率)。LC/MS(ESI)m/e 407.2[(M+H)+，計算值C23H27N4O3 407.2]LC/MS滯留時間(方法B)：t R=1.64min。HPLC滯留時間(方法A)：t R=7.46min；HPLC滯留時間(方法A)：t R=8.89min HPLC滯留時間(方法B)：t R=8.80min 1H NMR(400MHz，甲醇-d 4)δ ppm 8.66(s,1H),8.57(d,J=5.8Hz,1H),8.34(s,1H),8.15(d,J=5.8Hz,1H),7.60(s,1H),7.08(s,1H),4.38-4.26(m,1H),4.24-4.17(m,1H),3.76(s,3H),3.48(dd,J=3.3,1.8Hz,1H),3.05(s,3H),1.93-1.82(m,1H),1.65-1.44(m,2H),1.04(d,J=2.5Hz,3H),1.02(d,J=2.5Hz,3H)。
實例73
8-(2-胺基-5,5,5-三氟戊氧基)-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-9-甲腈
8-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A. 1-(4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧 基)-5,5,5-三氟戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯
如實例16部分H中所述製備，以提供呈白色固體之1-(4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-5,5,5-三氟戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯(300mg,0.416mmol,54%產率)。1H LC/MS(ESI)m/e 480.2[(M+H)+，計算值C24H29F3N3O4 480.2]LC/MS滯留時間(方法H)：t R=2.22min。
部分B. 1-(9-溴-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-5,5,5-三氟戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯
如實例3部分A中所述製備，以提供呈淡黃色固體之標題產物(50mg,0.06mmol,58%產率)。1H LC/MS(ESI)m/e 559.0[(M+2H)+，計算值C24H29BrF3N3O4 559.1]LC/MS滯留時間(方法C)：t R=2.24min。
部分C. 1-(9-氰基-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-5,5,5-三氟戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯
如實例64部分B中所述製備，以提供呈淡黃色固體之標題產物(40mg,0.079mmol,11%產率)。LC/MS(ESI)m/e 505.4[(M+H)+，計算值C25H28F3N4O4 505.2]LC/MS滯留時間(方法E)：t R=1.1min。
部分D. 8-(2-胺基-5,5,5-三氟戊氧基)-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-9-甲腈
如實例2部分E中所述製備，以提供呈灰白色固體之標題產物(50mg,0.036mmol,45%產率)。LC/MS(ESI)m/e 405.4[(M+H)+，計算值C20H20F3N4O2 405.1]；LC/MS滯留時間(方法E)：t R=0.71min。HPLC滯留時間(方法A)：t R=8.35min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=9.38min。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ ppm 8.98(s,1H),8.67(d,J=5.6Hz,1H),8.30(d,J=5.6Hz,1H),7.12(s,1H),4.19(d,J=6.0Hz,2H),3.71(s,3H),3.16-3.14(m,1H),3.00(s,3H),2.45-2.30(m,2H),1.89-1.80(m,1H),1.58-1.55(m,1H)。
實例74
(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-4,6-二甲基-9-(三氟甲基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A. (S)-1-(4,6-二甲基-5-側氧基-9-(1H-吡唑-1-基)-5,6-二氫苯 并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯
向(S)-(1-((9-溴-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(50mg,0.096mmol)及1H-吡唑(7.88mg,0.116mmol)存於1,4-二噁烷(2mL)及DMF(0.5mL)中之溶液中添加碘化銅(I)(18.37mg,0.096mmol)、N1,N2-二甲基乙烷-1,2-二胺(17.00mg,0.193mmol)及磷酸鉀(61.4mg,0.289mmol)。用氮將反應混合物脫氣5min且在微波中加熱至170℃並保持1h。將反應混合物冷卻至室溫，經由矽藻土(Celite®)過濾並在減低壓力下濃縮濾液。藉由製備型TLC(溶析劑2% MeOH：DCM)純化殘餘物，以提供呈棕色固體之(S)-1-(4,6-二甲基-5-側氧基-9-(1H-吡唑-1-基)-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯(40mg,0.028mmol,29%產率)。LC/MS(ESI)m/e 406.5[(M+H)+，計算值C23H28N5O2 406.2]LC/MS滯留時間(方法E)：t R=0.71min。
部分B. (S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-4,6-二甲基-9-(三氟甲基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
如實例2部分E中所述自(S)-1-(4,6-二甲基-5-側氧基-9-(1H-吡唑-1-基)-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯製備，以提供呈綠黃色半固體之(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-4,6-二甲基-9-(三氟甲基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(2mg,0.005mmol,24%產率)。LC/MS(ESI)m/e 406.2[(M+H)+，計算值C23H28N5O2 406.2]；HPLC滯留時間(方法A)：t R=8.37min HPLC滯留時間(方法B)：t R=9.54min；外消旋化合物之1H NMR(400MHz, DMSO-d 6)δ ppm 8.98(s,1H),8.67(d,J=5.6Hz,1H),8.30(d,J=5.6Hz,1H),7.12(s,1H),4.19(d,J=6.0Hz,2H),3.71(s,3H),3.16-3.14(m,1H),3.00(s,3H),2.45-2.30(m,2H),1.89-1.80(m,1H),1.58-1.55(m,1H)。
實例75
(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-4,6-二甲基-9-(三氟甲基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A. (S)-2-(1-(4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基)異二氫吲哚-1,3-二酮
將(S)-(1-((4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(300mg,0.683mmol)吸收於AcOH(15mL)中並用高碘酸(156mg,0.683mmol)及H2SO4(0.018mL,0.341mmol)處理。將反應混合物加熱至80℃並保持20min，此後添加碘(104mg,0.410mmol)並繼續再加熱3h。在冷卻後，蒸發揮發物。將殘餘物吸收於乙酸乙酯(25mL)中並用飽和NaHCO3水溶液(10mL)、之後鹽水(10mL)洗滌有機層，用Na2SO4乾燥，過濾並在減低壓力下濃縮，以提供呈棕色固體之(S)-2-(1-(4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二 氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基)異二氫吲哚-1,3-二酮(300mg,0.61mmol,90%粗製產率)。將此不進一步純化即取用於下一步驟。LC/MS(ESI)m/e 466.1[(M+H)+，計算值C20H25IN3O2 466.1]；LC/MS滯留時間(方法F)：t R=0.58min。
部分B. (S)-2-(1-(9-碘-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基)異二氫吲哚-1,3-二酮
向(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-碘-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(130mg,0.140mmol)存於1,4-二噁烷(3mL)中之溶液中添加N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(54.2mg,0.419mmol)及異苯并呋喃-1,3-二酮(24.83mg,0.168mmol)。使反應混合物回流16h。在冷卻後，用EtOAc(10mL)稀釋反應混合物。用水、飽和NaHCO3水溶液洗滌有機物。用乙酸乙酯(3×10mL)萃取合併的水層。經硫酸鈉乾燥合併的有機層並在減低壓力下濃縮。藉由製備型TLC板使用2%甲醇：DCM作為溶析系統來純化殘餘物，以提供呈淡黃色固體之(S)-2-(1-((9-碘-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)異二氫吲哚-1,3-二酮(85mg,0.084mmol,60%產率)。LC/MS(ESI)m/e 596.5[(M+H)+，計算值C28H27IN3O4 596.1]LC/MS滯留時間(方法E)：t R=1.3min。
部分C. (S)-2-(1-(4,6-二甲基-5-側氧基-9-(三氟甲基)-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基)異二氫吲哚-1,3-二酮
在輕輕振盪下在減低壓力(1托)下將乾燥氟化鉀(19.51mg,0.336mmol)及碘化銅(I)(64.0mg,0.336mmol)混合並加熱至200℃，直至出現淺黃綠色。在冷卻後，添加無水N-甲基-2-吡咯啶酮(1mL)、之後(S)-2-(1-((9-碘-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)異二氫吲哚-1,3-二酮(100mg,0.168mmol)及三甲基(三氟甲基)矽烷(0.075mL,0.504mmol)。在90℃下將由此獲得之棕色溶液加熱16h。在冷卻後，將氨水(10mL)添加至反應混合物。用乙酸乙酯(3×10mL)萃取反應混合物。用鹽水(1×10mL)洗滌合併的有機層，經硫酸鈉乾燥，且在減低壓力下濃縮。藉由製備型TLC(50%乙酸乙酯：石油醚作為溶析系統)純化殘餘物，以提供呈淡黃色固體之(S)-2-(1-(4,6-二甲基-5-側氧基-9-(三氟甲基)-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基)異二氫吲哚-1,3-二酮(80mg,0.033mmol,20%產率，22%純度)。LC/MS(ESI)m/e 538.6[(M+H)+，計算值C29H27F3N3O4 538.2]LC/MS滯留時間(方法E)：t R=1.27min。
部分D. (S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-4,6-二甲基-9-(三氟甲基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
向(S)-2-(1-((4,6-二甲基-5-側氧基-9-(三氟甲基)-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)異二氫吲哚-1,3-二酮(50mg,0.019mmol)存於EtOH(4mL)中之溶液中添加水合肼(6.52mg,0.130mmol)。在45℃下將反應混合物攪拌2h。在冷卻後，在減低壓力下濃縮反應混合物。藉由反相HPLC(Symmetry C-18管柱(19.0×250mm)7.0微米；流動相A：存於水中之乙酸銨；流動相B：乙腈；流速：16.0mL)純化殘餘物，以提供呈灰白色固體之(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基-9(三氟甲基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(5mg,0.012mmol,64%產率)。LC/MS(ESI)m/e 408.2[(M+H)+，計算值C21H25F3N3O2 408.2]LC/MS滯留時間(方法B)：t R=1.25min。HPLC滯留時間(方法A)：t R=10.10min HPLC滯留時間(方法B)：t R=10.69min；1H NMR(400MHz，甲醇-d 4)δ ppm 8.66(s,1H),8.63(d,J=5.6Hz,1H),8.22(d,J=5.6Hz,1H),7.19(s,1H),4.42-4.38(m,1H),4.28-4.20(m,1H),3.83(s,3H),3.58-3.49(m,1H),3.11(s,3H),1.90-1.82(m,1H),1.68-1.62(m,1H),1.58-1.53(m,1H),1.10-1.00(m,6H)。
實例76
(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-4,6-二甲基-9-(甲基磺醯基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A. (S)-2-(1-(4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基)異二氫吲哚-1,3-二酮
將(S)-(1-((4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(300mg,0.683mmol)吸收於AcOH(15mL)中並用高碘酸(156mg,0.683mmol)及H2SO4(0.018mL,0.341mmol)處理。將反應混合物加熱至80℃並維持20min，此後添加碘(104mg,0.410mmol)並在80℃下再繼續加熱3h。在冷卻後，蒸發揮發物並用乙酸乙酯(25mL)吸收殘餘物。用飽和NaHCO3水溶液(10mL)、之後鹽水(10mL)洗滌有機層，經Na2SO4乾燥，過濾並在減低壓力下濃縮，以提供呈棕色固體之(S)-2-(1-(4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基)異二氫吲哚-1,3-二酮(300mg,0.61mmol,90%粗製產率)。將該材料不進一步純化即取用於下一步驟。LC/MS(ESI)m/e 466.1[(M+H)+，計算值C20H25IN3O2 466.1]LC/MS滯留時間(方法D)：t R=0.58min。
部分B. (S)-1-(9-碘-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯
如實例15部分C中所述製備，以提供呈橙紅色固體之(S)-1-(9-碘-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯(300mg,0.531mmol,82%產率)。LC/MS(ESI) m/e 566.5[(M+H)+，計算值C25H33IN3O4 566.2]；LC/MS滯留時間(方法E)：t R=1.27min。
部分C. (S)-1-(4,6-二甲基-9-(甲基磺醯基)-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯
將(S)-(1-((9-碘-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(100mg,0.177mmol)、L-脯胺酸(20.36mg,0.177mmol)、甲烷亞磺酸鈉鹽(181mg,1.769mmol)、NaOH(11.32mg,0.283mmol)及碘化銅(I)(33.7mg,0.177mmol)吸收於DMSO(5mL)中並用氮氣吹掃5min。將所得混合物密封在微波管中並在100℃下在微波中加熱2.5h。將反應混合物冷卻至室溫，用冰冷水(5mL)處理，並用乙酸乙酯(3×5mL)萃取。經硫酸鈉乾燥合併的有機層，過濾並在減低壓力下濃縮，以提供呈黑色膠狀固體之(S)-1-(4,6-二甲基-9-(甲基磺醯基)-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯(150mg,0.07mmol,39%粗製產率，24%純度)。該材料不純化即取用於下一步驟。LC/MS(ESI)m/e 518.2[(M+H)+，計算值C26H36N3O6S 518.2]LC/MS滯留時間(方法B)：t R=1.51min。
部分D. (S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-4,6-二甲基-9-(甲基磺醯基) 苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
如實例2部分E中所製備，以提供呈灰白色固體之(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-4,6-二甲基-9-(甲基磺醯基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(4mg,0.009mmol,13%產率)。LC/MS(ESI)m/e 466.1[(M+H)+，計算值C20H25IN3O2 466.1]；LC/MS滯留時間(方法D)：t R=0.58min。HPLC滯留時間(方法)：t R=min及HPLC滯留時間(方法)：t R=min。1H NMR(400MHz,CD 3 OD)δ ppm-8.85(s 1 H),8.65(d,J=6Hz,1 H),8.25(d,J=6Hz,1 H),7.25(s,1 H),4.65(m,1 H),4.32(m,1 H),3.85(s,4 H),3.1(s,3 H),1.93(s,3 H),1.92(m,1 H),1.65(m,2 H),1.01(m,6 H)。
實例77
(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
向(S)-(1-((6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(500mg,0.192mmol)(如實例49中所述製備)存於乙腈(5mL)及水(5mL)中之溶液中添加硝酸鈰銨(527mg,0.962mmol)。在室溫下將反應混合物攪拌5h。用乙酸乙酯(5mL)及水(5mL)稀釋反應混合物。分離有機層，用硫酸鈉乾燥並在減壓壓力下濃縮。藉由矽膠層析(1：1乙酸乙酯：己烷)純化殘餘物，以提供呈灰白色固體之(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(100mg,0.154mmol,80%產率)。LC/MS(ESI)m/e 326.2[(M+H)+，計算值C19H24N3O2 326.2]LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.56min。HPLC滯留時間(方法A)：t R=6.98 min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=6.96min。1H NMR(400MHz,CD 3 OD)δ ppm 6.32(m,1 H),8.44(m,2 H),7.13(m,1 H),6.94(d,J=2.4Hz,1 H),4.4(m,1 H),4.3(m,1 H),3.75(m,1 H),3.2(s,3 H),1.75(m,3 H),1.10(m,6 H)。
實例78
(R)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-9-甲腈
部分A. (R)-1-(4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯
如實例16部分H中所述實施之Buchwald偶合，以提供呈灰白色固體之標題化合物(900mg,1.58mmol,54%產率，77%純度)。LC/MS(ESI)m/e 440.3[(M+H)+，計算值C25H34N3O4 440.2]LC/MS滯留時間(方法D)：t R=0.89min。
部分B. (R)-1-(9-溴-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯
如實例3部分A中所述製備，以提供呈橙紅色固體之標題化合物(750mg,0.94mmol,79%產率，65%純度)。LC/MS(ESI)m/e 518.2[(M+H)+，計算值C25H33BrN3O4 518.2]LC/MS滯留時間(方法D)：t R=0.92min。
部分C. (R)-1-(9-氰基-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯
如實例64部分B中所述製備，以提供呈黑色膠狀物之標題化合物(300mg,0.18mmol,47%產率，28%純度)。LC/MS(ESI)m/e 465.2[(M+H)+，計算值C26H33N4O4 465.2]LC/MS滯留時間(方法C)：t R=2.74min。
部分D. (R)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-9-甲腈
如實例2部分E中所述製備，以提供呈黃色固體之標題化合物(20mg,0.051mmol,59%產率，93%純度)。LC/MS(ESI)m/e 365.2[(M+H)+，計算值C21H25N4O2 365.2]LC/MS滯留時間(方法C)：t R=2.10min。HPLC滯留時間(方法A)：tR=8.35min及HPLC滯留時間(方法B)：tR=9.17min。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ ppm 8.98(s,1H),8.71(d,J=6.3Hz,1H),8.53(d,J=6.5Hz,1H),7.23(s,1H),4.65(dd,J=10.7,3.1Hz,1H),4.50(dd,J=10.8,6.0Hz,1H),3.85(br.s.,1H),3.84(s,3H),3.20(s,3H),1.92-1.80(m,2H),1.78-1.66(m,1H),1.09(d,J=1.8Hz,3H),1.07(d,J=1.5Hz,3H)。
實例79
(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-氯-6-(2-甲氧基乙基)-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A：4-(4-氯-2-氟苯基)-N-(2-甲氧基乙基)-2-甲基菸醯胺
在70℃下將如實例16部分E中所述製備之4-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基菸酸(2g,5.19mmol)存於亞硫醯氯(5mL,68.5mmol)中之溶液加熱2h。在冷卻後，在減低壓力下去除揮發物。在0℃下將殘餘物溶解於4mL無水DCM中並添加至2-甲氧基乙胺(0.390g,5.19mmol)及三乙胺 (3.62mL,26.0mmol)存於DCM(8mL)中之預冷卻溶液中。在RT下將所得反應混合物攪拌4h。然後添加水(30mL)並用DCM(2×20mL)萃取溶液。用鹽水(20mL)洗滌合併的有機層，經硫酸鈉乾燥，且在減低壓力下濃縮。藉由矽膠層析使用EtOAc及己烷之梯度作為溶析劑純化殘餘物，以產生呈黃色油狀物之4-(4-氯-2-氟苯基)-N-(2-甲氧基乙基)-2-甲基菸醯胺(1.3g,2.88mmol,56%產率)。LC/MS(ESI)m/e 323.1[(M+H)+，計算值C16H17ClFN2O2 323.1]；LC/MS滯留時間(方法D)：t R=0.61min。
部分B：8-氯-6-(2-甲氧基乙基)-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
使4-(4-氯-2-氟苯基)-N-(2-甲氧基乙基)-2-甲基菸醯胺經受如實例2部分C中所述之環化反應，以產生呈白色固體之8-氯-6-(2-甲氧基乙基)-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(1.12g,2.55mmol,89%產率)。LC/MS(ESI)m/e 303.2[(M+H)+，計算值C16H16ClN2O2 303.1]；LC/MS滯留時間(方法B)：t R=1.38min。
部分C：(S)-(1-((6-(2-甲氧基乙基)-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
使8-氯-6-(2-甲氧基乙基)-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮經受如實例16部分H中所述之醚合成，以提供呈白色固體之(S)-(1-((6-(2- 甲氧基乙基)-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(511mg,0.723mmol,53%產率)。LC/MS(ESI)m/e 484.6[(M+H)+，計算值C27H38N3O5 484.3]；LC/MS滯留時間(方法E)：t R=1.17min。
部分D：(S)-(1-((9-氯-6-(2-甲氧基乙基)-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
使(S)-(1-((6-(2-甲氧基乙基)-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯經受如實例41部分A中所述之氯化，以提供呈棕色固體之(S)-(1-((9-氯-6-(2-甲氧基乙基)-4-甲基-5-側氧基-5,6二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(260mg,0.227mmol,80%粗製產率)。LC/MS(ESI)m/e 518.2[(M+H)+，計算值C27H37ClN3O5 518.2]；LC/MS滯留時間(方法D)：t R=0.91min；HPLC滯留時間(方法B)：tR=1.84min。
部分E：(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-氯-6-(2-甲氧基乙基)-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
使(S)-(1-((9-氯-6-(2-甲氧基乙基)-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并 [c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯如實例2部分E中所述，脫除Boc之保護，以提供呈黃色固體之(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-氯-6-(2-甲氧基乙基)-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮2 HCl(11.23mg,0.021mmol,48%產率)。LC/MS(ESI)m/e 418.2[(M+H)+，計算值C22H29ClN3O3 418.2]；HPLC滯留時間(方法A)：tR=7.91min；HPLC滯留時間(方法B)：tR=9.29min；1H NMR(400MHz，甲醇-d 4)δ ppm 8.79-8.66(m,3H),7.51(s,1H),4.70(t,J=4.9Hz,2H),4.63-4.54(m,1H),4.45(dd,J=10.4,5.1Hz,1H),3.89-3.86(m,3H),3.38(s,3H),3.28(s,3H),1.91-1.81(m,2H),1.80-1.69(m,1H),1.11-1.08(m,3H),1.07(br.s.,3H)。
實例80
(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-6-(2-甲氧基乙基)-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
如實例2部分E中所述實施(S)-(1-((6-(2-甲氧基乙基)-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(如實例79部分C中所述製備)之Boc-去保護，以提供呈白色固體之(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-6-(2-甲氧基乙基)-4甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(31.3mg,0.081mmol,77%產率)。LC/MS(ESI)m/e 384.2[(M+H)+，計算值C22H30N3O3 384.2]；LC/MS滯留時間(方法B)：t R=1.06min；HPLC滯留時間(方法A)：tR=8.11min；HPLC滯留時間(方法B)：tR=9.29min；1H NMR(400MHz，甲醇-d 4)δ ppm 8.55(d,J=5.8Hz,1H),8.36(d,J=9.0Hz,1H),8.12(d,J=5.8Hz,1H),7.22(d,J=2.3Hz,1H),7.04(dd,J=9.0,2.5Hz,1H),4.58(t,J=5.8Hz,2H),4.18(dd,J=9.4,3.9Hz,1H),4.00(dd,J=9.3,7.0Hz,1H),3.81(t,J=5.8Hz,2H),3.39(s,3H),3.38-3.36(m,1H),3.08(s,3H),1.91-1.79(m,1H),1.57-1.40(m,2H),1.04(d,J=6.5Hz,3H),1.01(d,J=6.8Hz,3H)。
實例81
(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-7-氟-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A：(S)-1-(7-氟-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯
如實例16部分H中所述自8-溴-7-氟-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(如實例29部分F中所述製備)製備，以提供呈白色固體之(S)-1-(7-氟-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯(0.013g,0.028mmol,37%產率)。NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ ppm 8.64(d,J=7.2Hz,1H),8.36(m,1H),8.21(m,1H),7.23(m,1H),6.84(d,J=11.2Hz,1H),6.28(s,1H),4.06 (m,2 H),3.92(m,1 H),3.78(m,3 H),2.99(s,1 H),1.65(m,1H),1.38(m,11H),0.89(m,6 H)。
部分B：(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-7-氟-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
如實例2部分E中所述製備，以提供呈棕色固體之標題產物(8.5mg,0.024mmol,98%產率)。LC/MS(ESI)m/e 358.2[(M+H)+，計算值C20H25FN3O2 358.2]LC/MS滯留時間(方法B)：t R=3.58min。HPLC滯留時間(方法A)：t R =7.68min及HPLC滯留時間(方法B)：t R =8.02min。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ ppm 8.69(d,J=5.8Hz,1H),8.36(d,J=7.5Hz,1H),8.27(d,J=5.8Hz,1H),8.07(br.s.,2H),7.35-7.24(m,1H),4.38(dd,J=10.7,3.4Hz,1H),4.26(dd,J=10.8,6.0Hz,1H),3.81(d,J=9.3Hz,3H),3.67-3.60(m,1H),3.02(s,3H),1.87-1.72(m,1H),1.59(td,J=7.1,3.9Hz,2H),0.96(d,J=2.8Hz,3H),0.94(d,J=2.8Hz,3H)。
實例82
(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-7-氟-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A. 4-(4-溴-2,3-二氟苯基)-N-(4-甲氧基苄基)-2-甲基菸醯胺
如實例29部分E中所述藉由聯芳基酸(實例29部分D中所述)與PMB-胺之反應製備，以提供呈灰白色固體之4-(4-溴-2,3-二氟苯基)-N-(4-甲氧基苄基)-2-甲基菸醯胺(0.16g,0.314mmol,92%)。LC/MS(ESI)m/e 447.0[(M+H)+，計算值C21H18BrF2N2O2 447.1]；LC/MS滯留時間(方法E)：t R=0.94min。
部分B：8-溴-7-氟-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
如實例29部分F中所述製備，以提供呈灰白色固體之8-溴-7-氟-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(0.12g,0.269mmol,90%)。LC/MS(ESI)m/e 429.1[(M+2H)+，計算值C21H18BrFN2O2 429.0]；LC/MS滯留時間(方法E)：t R=1.15min。
部分C. 1-(7-氟-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-2,4-二甲基戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯
如實例16部分H中所述製備，以提供呈灰白色固體之1-(7-氟-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-2,4-二甲基戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯(46mg,0.081mmol,13%產率)。LC/MS(ESI)m/e 564.3[(M+H)+，計算值C32H39FN3O5 564.3]；LC/MS滯留時間(方法H)：t R=2.35min。
部分D. (S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-7-氟-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
如實例17部分I中所述製備，以提供呈灰白色固體之(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-7-氟-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(8mg,0.023mmol,72%產率)。LC/MS(ESI)m/e 342.2[(M)-，計算值C19H21FN3O2 342.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.99min；HPLC滯留時間(方法B)：tR=6.91min；1H NMR(400MHz，甲醇-d 4)δ ppm 8.69(d,J=6.3Hz,1H),8.44(d,J=6.3Hz,1H),8.28(dd,J=9.3,2.0Hz,1H),7.26(dd,J=9.0,7.8Hz,1H),4.51(dd,J=10.7,3.1Hz,1H),4.36(dd,J=10.7,6.1Hz,1H),3.85-3.72(m,1H),3.19(s,3H),1.92-1.63(m,3H),1.07(d,J=3.8Hz,3H),1.06(d,J=3.8Hz,3H)。
實例83
(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-4,6-二甲基-9-(噻唑-5-基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A. (S)-1-(4,6-二甲基-5-側氧基-9-(噻唑-5-基)-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯
將5-溴噻唑(0.050g,0.305mmol)及六甲基錫(0.158mL,0.762mmol)吸收於1,4-二噁烷(1mL)中並用氮吹掃10min。添加肆(三苯基膦)鈀(0.035g,0.030mmol)並在RT下將反應混合物攪拌2h。添加(S)-(1-((9-溴-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(0.158g,0.305mmol)及氯化鋰(0.013g,0.305mmol)並用N2將混合物吹掃10min。然後在90℃下將反應混合物加熱16h。在冷卻後，經由矽藻土(Celite®)過濾反應混合物並在減低壓力下濃縮。藉由製備型HPLC純化殘餘物，以提供呈黃色固體之(S)-1-(4,6-二甲基-5-側氧基-9-(噻唑-5-基)-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯(40mg,0.053mmol,18%產率)。LC/MS(ESI)m/e 23.6[(M+H)+，計算值C28H35N4O4S 523.2]；LC/MS滯留時間(方法E)：t R=1.09min。
部分B. (S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-4,6-二甲基-9-(噻唑-5-基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
如實例2部分E中所述製備，以提供呈灰白色固體之(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-4,6-二甲基-9-(噻唑-5-基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(16mg,0.037mmol,80%產率)。LC/MS(ESI)m/e 423.2[(M+H)+，計算值C23H27N4O2S 423.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=2.04min；HPLC滯留時間(方法A)：tR=9.1min；滯留時間(方法B)：tR=9.72min；1H NMR(400MHz，甲醇-d 4 )δ ppm 9.10(s,1H),8.73(s,1H),8.61(d,J=5.8Hz,1H),8.49(s,1H),8.30(d,J=5.8Hz,1H),7.16(s,1H),4.38(dd,J=9.5,4.0Hz,1H),4.25(dd,J=9.5,6.5Hz,1H),3.82(s,3H),3.59-3.51(m,1H),3.10(s,3H),1.91-1.82(m,1H),1.69-1.46(m,2H),1.04(d,J=5.5Hz,3H),1.03(d,J=5.8Hz,3H)。
實例84
(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-9-甲酸甲酯
部分A：(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-9-甲酸
向含有(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-9-甲腈(60mg,0.165mmol)(如實例64中所述製備)之燒瓶中添加濃HCl(5mL)。將所得混合物加熱至80℃並保持12h。在冷卻後，在減低壓力下去除揮發物，以提供呈黃色固體之(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-9-甲酸(40mg,0.104mmol,63%粗製產率)。該材料不進一步純化即繼續使用。LC/MS(ESI)m/e 384.1[(M+H)+，計算值C21H26N3O4 384.2]；LC/MS滯留時間(方法D)：t R=0.71min。
部分B：(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-9-甲酸甲酯
在0℃下向含有存於MeOH(3mL)中之(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基) 氧基)-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-9-甲酸(40mg,0.104mmol)之燒瓶中逐滴添加SOCl2(0.076mL,1.043mmol)。將所得溶液加熱至70℃並保持12h。在冷卻後，在減低壓力下去除揮發物。藉由製備型HPLC(使用0.1% TFA ACN：水)純化殘餘物，以提供呈淡棕色固體之(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-9-甲酸甲酯2 TFA(1.65mg,2.427μmol,2%產率)。LC/MS(ESI)m/e 398.2[(M+H)+，計算值C22H28N3O4 398.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.58min；HPLC滯留時間(方法A)：t R=9.14min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=9.58min；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ ppm 9.01(s,1H),8.68(d,J=6.0Hz,1H),8.40(d,J=6.0Hz,1H),7.23(s,1H),4.69(dd,J=10.0,3.0Hz,1H),4.36(dd,J=10.5,7.0Hz,1H),4.02(s,3H),3.88-3.81(m,4H),3.16(s,3H),1.93-1.65(m,3H),1.09(d,J=4.0Hz,3H),1.07(d,J=4.0Hz,3H)。
實例85
(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-1-氟-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A：4-氯-5-氟菸酸甲酯
向冷卻至0℃之4-氯-5-氟菸酸(1.7g,9.68mmol)存於乙腈(18mL)中之溶液中逐滴添加DBU(3.65mL,24.21mmol)。將反應混合物攪拌30min。向此混合物中逐滴添加碘甲烷(3.03mL,48.4mmol)且在RT下攪拌12h。在減低壓力下去除揮發物。經由矽膠管柱層析(己烷及乙酸乙酯)純化殘餘物，以提供呈黃色固體之4-氯-5-氟菸酸甲酯(1.2g,6.33mmol,65%產率)。LC/MS(ESI)m/e 190.0[(M+H)+，計算值C7H6ClFNO2 189.9]；LC/MS滯留時間(方法D)：t R=0.77min。
部分B：4-(4-氯-2-氟苯基)-5-氟菸酸甲酯
向4-氯-5-氟菸酸甲酯(1.2g,6.33mmol)存於1,4-二噁烷(12mL)及水(0.5mL)中之溶液中添加(4-氯-2-氟苯基)酸(1.214g,6.96mmol)。然後用氮氣將該混合物吹掃5min。添加磷酸氫二鉀(2.205g,12.66mmol)及PdCl2(dppf)(0.371g,0.506mmol)且再次用N2將混合物吹掃5min。將反應混合物加熱至80℃並保持12h。在冷卻後，添加水並用乙酸乙酯(3×25mL)萃取該混合物。用鹽水洗滌合併的有機層，經硫酸鈉乾燥，且在減低壓力下濃縮。藉由矽膠層析使用己烷及乙酸乙酯純化殘餘物，以提供呈黃色固體之4-(4-氯-2-氟苯基)-5-氟菸酸甲酯(900mg,3.17mmol,50%產率)。LC/MS(ESI)m/e 284.0[(M+H)+，計算值C13H9ClF2NO2 284.02]；LC/MS滯留時間(方法D)：t R=1.01min。
部分C：4-(4-氯-2-氟苯基)-5-氟菸酸
向4-(4-氯-2-氟苯基)-5-氟菸酸甲酯(600mg,2.115mmol)存於四氫呋喃(2.5mL)、MeOH(2.5mL)及水(2.5mL)中之溶液中添加LiOH(50.7mg,2.115mmol)且在RT下將該混合物攪拌12h。去除揮發物並用水稀釋殘餘物。用1.5N HCl將pH調節至4。用乙酸乙酯(2×5mL)萃取產物。經硫酸鈉乾燥合併的有機層且在減低壓力下濃縮，以提供淡棕色固體4-(4-氯-2-氟苯基)-5-氟菸酸(530mg,1.966mmol,93%粗製產率)。該材料不進一步純化即繼續使用。LC/MS(ESI)m/e 269.9[(M+H)+，計算值C12H7ClF2NO2 270.0]；LC/MS滯留時間(方法D)：t R=0.88min。
部分D：4-(4-氯-2-氟苯基)-5-氟-N-甲基菸醯胺
在0℃下向冷卻之4-(4-氯-2-氟苯基)-5-氟菸酸(530mg,1.966mmol)存於DMF(5mL)中之溶液中添加HOBT(602mg,3.93mmol)及EDC(565mg,2.95mmol)，然後將混合物攪拌5min。添加鹽酸甲胺(531mg,7.86mmol)及DIEA(1.030mL,5.90mmol)且在RT下將所得混合物攪拌12h。將冰冷水添加至反應且藉由真空過濾收集所得固體。用水(50mL)洗滌如此獲得之固體並風乾，以提供呈橙色油狀物之4-(4-氯-2-氟苯基)-5-氟-N-甲基菸醯胺(350mg,1.238mmol,63%產率)。LC/MS(ESI)m/e 282.9[(M+H)+，計算值C13H10ClF2N2O 283.0]；LC/MS滯留時間(方法D)：t R=0.83min。
部分E：8-氯-1-氟-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
使4-(4-氯-2-氟苯基)-5-氟-N-甲基菸醯胺經受如實例2及部分C中所述之環化，以提供呈白色固體之8-氯-1-氟-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(85mg,0.320mmol,60%產率)。LC/MS(ESI)m/e 263.0[(M+H)+，計算值C13H9ClFN2O 263.0]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.77min。
部分F：(S)-(1-((1-氟-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
使8-氯-1-氟-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮經受如實例16部分H中所述之醚合成，以提供呈灰白色固體之(S)-(1-((1-氟-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(60mg,0.135mmol,71%產率)。LC/MS(ESI)m/e 444.2[(M+H)+，計算值C24H31FN3O4 445.2]；LC/MS滯留時間(方法D)：t R=1.11min。
部分G：(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-1-氟-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
使(S)-(1-((1-氟-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基) 氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯如實例2部分E中所述，脫除Boc之保護。藉由製備型HPLC使用0.1%TFA ACN：水純化粗製產物，以提供呈黃色固體之(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-1-氟-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮TFA(42.68mg,0.091mmol,95%產率)。LC/MS(ESI)m/e 344.2[(M+H)+，計算值C19H23FN3O2 344.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=2.07min；HPLC滯留時間(方法A)：tR=5.52min；HPLC滯留時間(方法B)：tR=6.63min；1H NMR(400MHz，甲醇-d 4 )δ ppm 9.38(s,1H),8.77(d,J=5.0Hz,1H),8.67(dd,J=9.0,3.0Hz,1H),7.21(d,J=2.0Hz,1H),7.16(dq,J=9.1,1.3Hz,1H),4.48(dd,J=10.5,3.0Hz,1H),4.29(dd,J=10.5,6.0Hz,1H),3.82(s,3H),3.80-3.73(m,1H),1.94-1.82(m,1H),1.82-1.63(m,2H),1.08(d,J=4.0Hz,3H),1.07(d,J=4.0Hz,3H)。
實例86
(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基-9-(吡啶-2-基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A. (S)-(1-((4,6-二甲基-5-側氧基-9-(吡啶-2-基)-5,6-二氫苯并 [c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
向(S)-(1-((9-溴-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(100mg,0.193mmol)存於1,4-二噁烷(2mL)中之溶液中添加2-(三丁基矽烷基)吡啶(85mg,0.231mmol)及Pd(PPh3)4(11.14mg,9.64μmol)。將反應混合物脫氣30min且在微波中加熱至120℃並保持1h。將反應混合物冷卻並用水(10mL)稀釋，且用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。經硫酸鈉乾燥合併的有機層並在減低壓力下濃縮。藉由矽膠層析(3%存於氯仿中之甲醇)純化粗製產物，以提供呈淡黃色固體之(S)-(1-((4,6-二甲基-5-側氧基-9-(吡啶-2-基)-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(50mg,0.120mmol,62%產率)，該淡黃色固體不進一步純化即繼續使用。LC/MS(ESI)m/e 517.7[(M+H)+，計算值C30H37N4O4 517.3]；LC/MS滯留時間(方法E)：t R=1.19min。
部分B. (S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基-9-(吡啶-2-基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
在0℃下向(S)-(1-((4,6-二甲基-5-側氧基-9-(吡啶-2-基)-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(35mg,0.068mmol)存於甲醇(4mL)中之溶液中添加存於1,4-二噁烷(0.169mL,0.677mmol)中之HCl。然後在RT下將反應混合物攪拌2h。在減低壓力下濃縮揮發物。用飽和NaHCO3水溶液鹼化如此獲得之殘餘物，用水稀釋並用DCM(3×5mL)萃取。經Na2SO4乾燥合併的有機層 並在真空中濃縮。藉由反相製備型HPLC(Sunfire C18管柱(19.0×150mm)10.0微米；流動相A：10mM存於水中之乙酸銨；流動相B：乙腈；流速：16.0mL)純化粗製產物，以提供呈灰白色固體之(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基-9-(吡啶-2-基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(10mg,0.024mmol,35%產率)。LC/MS(ESI)m/e 417.6[(M+H)+，計算值C25H29N4O2 417.2]；LC/MS滯留時間(方法E)：t R=0.84min；HPLC滯留時間(方法A)：tR=7.61min；HPLC滯留時間(方法B)：tR=8.29min；1H NMR(400MHz，甲醇-d 4)。1H NMR(400MHz，甲醇-d 4 )δ ppm 8.70(d,J=4.3Hz,1H),8.64(s,1H),8.58(d,J=5.5Hz,1H),8.21(d,J=5.8Hz,1H),8.04-7.94(m,1H),7.93-7.86(m,1H),7.46(ddd,J=7.3,5.0,1.3Hz,1H),7.18(s,1H),4.32(dd,J=9.5,4.3Hz,1H),4.13(dd,J=9.4,6.7Hz,1H),3.84(s,3H),3.36-3.34(m,1H),3.11(s,3H),1.86-1.70(m,1H),1.53-1.32(m,2H),0.97(d,J=6.8Hz,3H),0.93(d,J=6.5Hz,3H)。
實例87及實例88
(S)-8-((2-胺基-5,5,5-三氟-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；非鏡像異構物1及2
部分A. 2-胺基-5,5,5-三氟-4-甲基戊酸乙酯鹽酸鹽
向存於燒瓶中之2-胺基-5,5,5-三氟-4-甲基戊酸(50mg,0.270mmol)中添加存於乙醇(1350μl,5.40mmol)中之鹽酸2N。在80℃下使溶液回流5h。在冷卻後，在減低壓力下去除乙醇。將殘餘物與乙醚(2×)一起研磨。將如此獲得之固體(60mg,0.240mmol)吸收於二氯甲烷(5mL)中。向冷卻至0℃之此懸浮液中添加三乙胺(0.167mL,1.202mmol)及碳酸二第三丁基酯(0.054mL,0.312mmol)。將反應混合物升溫至室溫並攪拌12h。用水(10mL)稀釋反應混合物並用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。經硫酸鈉乾燥合併的有機層且在減低壓力下濃縮，以提供呈白色固體之2-((第三丁氧基羰基)胺基)-5,5,5-三氟-4-甲基戊酸乙酯(55mg,0.176mmol,73%粗製產率)。該材料不進一步純化即繼續使用。GCMS(ESI)m/e 212[(M)-，計算值C8H13F3NO2 212]GC/MS(方法：Agilent GCMS模組-7890(GC)5975C(MSD)HP-5MS,30m×0.25mm ID×0.25u膜厚度，0.9mL/min恆定氦流速)，滯留時間t R=6.38min。
部分B. (5,5,5-三氟-1-羥基-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
在0℃下向2-((第三丁氧基羰基)胺基)-5,5,5-三氟-4-甲基戊酸乙酯(500mg,1.596mmol)存於乙醇(2mL)中之溶液中添加NaBH4(604mg,15.96mmol)。在RT下將反應混合物攪拌16h。用氨水淬滅反應混合物。經由玻璃漏斗過濾溶液並濃縮所得濾液，以提供呈無色膠狀半固體材料之(5,5,5-三氟-1-羥基-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(400mg,1.475mmol,92%粗製產率)。該材料不進一步純化即繼續使用。LC/MS(ESI)m/e 172.1[(M+H)+，計算值C6H13F3NO 172.1]LC/MS滯留時間(方法A)：t R=2.1min。
部分C：(1-((4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-5,5,5-三氟-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
使8-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮及(5,5,5-三氟-1-羥基-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯經受如實例16部分H中所述之醚合成。藉由反相HPLC(Sunfire C18(250×30mm,10μm)管柱；流動相A：10mM存於水中之乙酸銨；流動相B：乙腈；流速：25mL)純化該化合物，以提供呈灰白色固體之產物。使如此獲得之非鏡像異構物混合物經受藉由正相對掌性製備型HPLC管柱：IC(250×30mm,5μm)；流動相A：0.2% DEA：己烷；流動相B：乙醇；流速：16mL/min)實施之非鏡像異構物分離，以提供呈兩種非鏡像異構物混合物(1及2)之(1-((4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-5,5,5-三氟-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯。未測定非鏡像異構物之絕對立體化學結構。
非鏡像異構物混合物1：(30mg,0.061mmol,10%產率)，呈灰白色固體。非鏡像異構物混合物之LC/MS(ESI)m/e 494.3[(M+H)+，計算值C25H31F3N3O4 494.2]；LC/MS滯留時間(方法C)t R=2.17min。
非鏡像異構物混合物2：(80mg,0.162mmol,26%產率)，呈灰白色固體。非鏡像異構物混合物之LC/MS(ESI)m/e 494.2[(M+H)+，計算值C25H31F3N3O4 494.2]；LC/MS滯留時間(方法C)t R=2.16min。
部分D：8-((2-胺基-5,5,5-三氟-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮：(非鏡像異構物2)
使非鏡像異構物混合物1(30mg,0.061mmol)如實例2部分E中所述，脫除Boc之保護，以提供呈灰白色固體之8-((2-胺基-5,5,5-三氟-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(72.3mg,0.172mmol,99%產率)。LC/MS(ESI)m/e 394.6[(M+H)+，計算值C20H23F3N3O2 394.2]；HPLC滯留時間(方法A)：tR=8.62min；HPLC滯留時間(方法B)：tR=8.77min；1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ ppm 8.62(d,J=5.5Hz,1H),8.44(d,J=8.8Hz,1H),8.19(d,J=5.8Hz,1H),7.08-6.92(m,2H),4.11-3.90(m,2H),3.67(s,3H),3.01(s,3H),3.17-3.10(m,1H),1.96-1.82(m,1H),1.66-1.48(m,2H),1.10(d,J=6.8Hz,3H)。
使Boc-受保護之非鏡像異構物混合物2(80mg,0.162mmol)如實例2部分E中所述，脫除Boc之保護，以提供呈灰白色固體之8-((2-胺基-5,5,5-三氟-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(10mg,0.025mmol,50%產率)。LC/MS(ESI)m/e 394.6[(M+H)+，計算值C20H23F3N3O2 394.2]；HPLC滯留時間(方法A)：tR=8.75min；HPLC滯留時間(方法B)：tR=8.8min；1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 8.64(d,J=5.5Hz,1H),8.16(d,J=8.8Hz,1H),7.83(d,J=5.8Hz,1H),6.89(dd,J=8.8,2.3Hz,1H),6.85(d,J=2.3Hz,1H),4.05(dd,J=9.0,4.0Hz,1H),3.89(dd,J=8.8,6.5Hz,1H),3.73(s,3H),3.40-3.34(m,1H),3.16(s,3H),2.60-2.42(m,1H),1.98(dt,J=14.3,6.1Hz, 1H),1.50-1.40(m,1H),1.23(d,J=7.0Hz,3H)。
實例89
(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-甲氧基-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A. 8-氯-9-碘-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
向8-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(1.0g,3.87mmol)存於乙酸(25mL)中之攪拌溶液中添加H2SO4(0.206mL,3.87mmol)、之後高碘酸(0.881g,3.87mmol)。然後將混合物加熱至80℃並保持20min。然後在80℃下添加I2(0.294g,1.160mmol)並攪拌120min。在冷卻至環境溫度後，在減低壓力下去除乙酸。用70mL飽和碳酸氫鈉水溶液中和殘餘物。藉由真空過濾收集如此獲得之固體並風乾，以提供呈棕色固體之8-氯-9-碘-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(1.3g,3.21mmol,83%產率)。LC/MS(ESI)m/e 385.1[(M+H)+，計算值C14H11ClIN2O 384.9]；LC/MS滯留時間(方法E)：t R=1.09min；1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ ppm 8.96(s,1 H)8.69(d,J=5.58Hz,1 H)8.36(d,J=5.52Hz,1 H)7.76(s,1 H)3.63(s,3 H)3.00(s,3 H)。
部分B. 8-氯-9-羥基-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
在惰性氣氛中向8-氯-9-碘-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(1.0g,2.60mmol)存於DMSO(5mL)及水(5mL)中之攪拌溶液中添加碘化銅(I)(0.050g,0.260mmol)、之後1,10-啡啉(0.047g,0.260mmol)及KOH(2.188g,39.0mmol)。將反應混合物加熱至100℃並保持16h且藉由LC/MS監測。在完成後，將反應混合物冷卻並用1N HCl將pH調節至介於3至4之間。用50mL水稀釋反應混合物並用80mL二氯甲烷萃取。分離有機層，用鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥且在減低壓力下濃縮，以提供呈綠色固體之8-氯-9-羥基-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(0.6g,2.053mmol,79%粗製產率)。該材料不進一步純化即繼續使用。LC/MS(ESI)m/e 273.0[(M)-，計算值C14H10ClN2O2 273.05]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=2.06min。
部分C. 8-氯-9-甲氧基-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
向冷卻至0℃之8-氯-9-羥基-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(0.3g,1.092mmol)存於DMF(10mL)中之攪拌溶液中添加NaH(0.052g,2.184mmol)、之後碘甲烷(0.205mL,3.28mmol)。在環境溫度下將所得混合物攪拌10h。然後用水(50mL)稀釋反應混合物並萃取用乙酸 乙酯(2×80mL)萃取。分離合併的有機層，用鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥，並在減低壓力下濃縮。藉由矽膠管柱層析使用70%存於石油醚中之乙酸乙酯純化粗製產物，以提供呈半固體之8-氯-9-甲氧基-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(0.12g,0.416mmol,38%產率)。LC/MS(ESI)m/e 288.4[(M)+，計算值C15H13ClN2O2 288.1]；LC/MS滯留時間(方法A)：t R=1.9min。
部分D. (S)-(1-((9-甲氧基-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
使8-氯-9-甲氧基-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮經受如實例16部分H中所述之醚合成，以提供呈半固體之(S)-(1-((9-甲氧基-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(90mg,0.073mmol,18%產率)。LC/MS(ESI)m/e 470.3[(M+H)+，計算值C26H36N3O5 470.5]；LC/MS滯留時間(方法D)t R=0.87min。
部分E. (S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-甲氧基-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
使(S)-(1-((9-甲氧基-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘 啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯如實例2部分E中所述，脫除Boc之保護，以提供呈黃色固體之(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-甲氧基-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(6mg,0.015mmol,8%產率)。LC/MS(ESI)m/e 370.2[(M+H)+，計算值C21H28N3O3 370.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=2.03min。HPLC滯留時間(方法A)：tR=7.31min及HPLC滯留時間(方法B)：tR=8.32min；1H NMR(400MHz，甲醇-d 4 )δ ppm 8.63(d,J=6.3Hz,1H),8.50(d,J=6.3Hz,1H),8.01(s,1H),7.22(s,1H),4.49(dd,J=10.7,3.1Hz,1H),4.35(dd,J=10.9,6.4Hz,1H),4.09(s,3H),3.83(s,3H),3.81-3.75(m,1H),3.19(s,3H),1.92-1.74(m,2H),1.73-1.61(m,1H),1.07(d,J=4.0Hz,3H),1.06(d,J=4.0Hz,3H)。
實例90
(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-(二氟甲氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A：8-氯-9-(二氟甲氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
向如實例89部分B中所述製備之8-氯-9-羥基-4,6-二甲基苯并 [c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(0.5g,1.456mmol)存於乙腈(5mL)中之攪拌溶液中添加K2CO3(0.604g,4.37mmol)、之後2-氯-2,2-二氟乙酸鈉(0.444g,2.91mmol)。將混合物加熱至80℃並保持18h。在冷卻後，用水(50mL)稀釋反應混合物並用乙酸乙酯(2×80mL)萃取。用鹽水溶液洗滌有機層，經Na2SO4乾燥，過濾並在減低壓力下濃縮，以提供呈半固體之8-氯-9-(二氟甲氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(50mg,0.154mmol,11%粗製產率)。該材料不進一步純化即繼續使用。LC/MS(ESI)m/e 325.0[(M+H)+，計算值C15H12ClF2N2O2 325.04]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=2.39min。
部分B：(S)-(1-((9-(二氟甲氧基)-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
使8-氯-9-(二氟甲氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮經受如實例16部分H中所述之醚合成，以提供呈無色油狀物之(S)-(1-((9-(二氟甲氧基)-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(0.2g,0.033mmol,27%產率)。LC/MS(ESI)m/e 506.3[(M+H)+，計算值C26H34F2N3O5 506.2]；LC/MS滯留時間(方法E)：t R=1.21min。
部分C：(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-(二氟甲氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
使(S)-(1-((9-(二氟甲氧基)-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯如實例2部分E中所述，脫除Boc之保護，以提供呈綠色膠狀物之(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-(二氟甲氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(2mg,4.24μmol,13%產率)。LC/MS(ESI)m/e 406.2[(M+H)+，計算值C21H26F2N3O3 406.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.75min。HPLC滯留時間(方法B)：tR=10.11min；1H NMR(400MHz，甲醇-d 4)δ ppm 8.3(s,1 H),8.2(m,1 H),7.25(s,1 H),6.9(t,1 H),4.55(m,1 H),4.45(m,1 H),3.8(m,4 H),3.05-3.2(m,3 H),1.8-1.95(m,3 H),1.05-1.1(m,6 H)。
實例91及實例92
(S)-8-(2-胺基-4,4,4-三氟丁氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮及(R)-8-(2-胺基-4,4,4-三氟丁氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A. 依照以下文獻參考製備：Ling,F.等人，J. Org.Chem., 2003,68,7544-7547。
部分B. (1-((4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基) 氧基)-4,4,4-三氟丁-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
如實例16部分H中所述使用8-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮及(4,4,4-三氟-1-羥基丁-2-基)胺基甲酸第三丁基酯合成醚，以提供呈半固體之(1-((4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4,4,4-三氟丁-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(0.22g,0.473mmol,49%產率)。LC/MS(ESI)m/e 466.2[(M+H)+，計算值C23H27F3N3O4 466.2]；LC/MS滯留時間(方法D)：t R=0.82min。
部分C. 8-(2-胺基-4,4,4-三氟丁氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
如實例2部分E中所述製備，以提供呈灰白色固體之外消旋8-(2-胺基-4,4,4-三氟丁氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(40mg,0.066mmol,26%產率，98%純度)。藉由對掌性製備型SFC純化條件拆分外消旋產物：(CHIRALPAK IA(250×21mm)5微米流動相：60% CO2，共溶劑：40%(0.5%存於甲醇中之DEA)，流速：60g/min，回壓：100巴)，以提供兩種鏡像異構物。未測定鏡像異構物之絕對立體化學結構。
鏡像異構物1：(7mg,0.014mmol,6%產率，98%純度)，呈灰白色固體。LC/MS(ESI)m/e 366.1[(M+H)+，計算值C18H19F3N3O2 366.1]；LC/MS滯留時間(方法A)：t R=1.81min；1H NMR(400MHz，甲醇-d 4 )δ ppm 8.57(d,J=5.5Hz,1H),8.41(d,J=9.0Hz,1H),8.16(d,J=6.0Hz,1H),7.12-7.05(m,2H),4.30-4.08(m,2H),3.77(s,3H),3.62-3.58(m,1H),3.10(s,3H),2.74-2.58(m,1H),2.44(m, 1H)。對掌性HPLC滯留時間(方法B)：t R=8.08min；對掌性SFC方法(CHIRALPAK IA(250×4.6mm)5微米，流動相：65% CO2，流速：2.6g/min，共溶劑：35%(0.3%存於甲醇中之DEA)，流速：1.4g/min，回壓：100巴)，t R=3.53min。
鏡像異構物2：(7mg,0.014mmol,6%產率，98%純度)，呈灰白色固體。LC/MS(ESI)m/e 366.1[(M+H)+，計算值C18H19F3N3O2 366.1]；LC/MS滯留時間(方法A)：t R=1.81min；1H NMR(400MHz，甲醇-d 4 )δ ppm 8.57(d,J=5.5Hz,1H),8.41(d,J=9.0Hz,1H),8.16(d,J=6.0Hz,1H),7.12-7.05(m,2H),4.30-4.08(m,2H),3.77(s,3H),3.62-3.58(m,1H),3.10(s,3H),2.74-2.58(m,1H),2.44(m,1H)。對掌性HPLC滯留時間(方法B)：t R=7.93min。對掌性SFC方法(CHIRALPAK IA(250×4.6mm)5微米，流動相：65% CO2，流速：2.6g/min，共溶劑：35%(0.3%存於甲醇中之DEA)，流速：1.4g/min，回壓：100巴)，t R=4.62min。
實例93
8-(2-胺基-4,4,4-三氟丁氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A. 依照以下文獻參考製備：Ling,F.等人，J.Org.Chem., 2003,68,7544-7547。
部分B. 4,4,4-三氟-1-(6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)丁-2-基胺基甲酸第三丁基酯
如實例16部分H中所述製備，以提供呈灰白色固體之4,4,4-三氟-1-(6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)丁-2-基胺基甲酸第三丁基酯(200mg,0.221mmol,45%產率)。LC/MS(ESI)m/e 452.2[(M+H)+，計算值C22H25F3N3O4 452.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=2.01min。
部分C. 8-(2-胺基-4,4,4-三氟丁氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
如實例2部分E中所述製備，以提供呈灰白色固體之8-(2-胺基-4,4,4-三氟丁氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(35mg,0.098mmol,44%產率)。LC/MS(ESI)m/e 352.0[(M+H)+，計算值C17H17F3N3O2 352.1]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.92min；HPLC滯留時間(方法A)：tR=7.07min；HPLC滯留時間(方法B)：tR=7.44min；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ 9.46(s,1H),8.76(d,J=6.0Hz,1H),8.40(d,J=8.8Hz,1H),8.23(d,J=5.6Hz,1H),7.14(d,J=2.4Hz,1H),7.10(dd,J=8.8,2.4Hz,1H),4.22-4.13(m,2H),3.79(s,3H),3.67-3.57(m,1H),2.71-2.63(m,1H),2.49-2.40(m,1H)。
實例94
(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-9-甲醯胺
在25mL圓底燒瓶中，將(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-9-甲腈(0.1g,0.274mmol)(如實例64中所述製備)及Cs2CO3(0.358g,1.098mmol)吸收於DMF(2mL)及水(0.6mL)中。在120℃下在微波中將混合物輻照2h。在減低壓力下濃縮反應混合物，並用乙酸乙酯及水稀釋。在減低壓力下濃縮合併的有機物。藉由製備型HPLC(管柱：Xbridge Phenyl(150×4.6mm)3.5微米，SC/749，使用緩衝液：0.05%存於水中之TFA)來純化殘餘物，以提供呈灰白色固體之(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-9-甲醯胺(5mg,0.012mmol,5%產率)。LC/MS(ESI)m/e 383.2[(M+H)+，計算值C21H27N4O3 383.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.74min；HPLC滯留時間(方法A)：tR=10.51min；HPLC滯留時間(方法B)：tR=10.58min；1H NMR(400MHz，甲醇-d 4 )：δ ppm.8.64(s,1H),8.46(d,1H),8.12(d,1H),6.67(s,1H),3.72-3.79(m,1H),3.69(s,3H),3.65-3.69(m,2H),3.04(s,3H),1.84-1.88(m,1H),1.62-1.68(m,1H),1.49-1.57(m,1H),1.31(d,3H),1.29(d,3H)。
實例95
(S)-4,6-二甲基-8-(4-甲基-2-(甲基胺基)戊氧基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A：(S)-1-(4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基(甲基)胺基甲酸第三丁基酯
將如實例16部分H中所述製備之(S)-(1-((4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(0.150g,0.341mmol)吸收於DMF(1mL)中並冷卻至0℃。添加NaH(0.027g,0.683mmol)且在0℃下將反應混合物攪拌45min。然後添加碘甲烷(0.107mL,1.706mmol)且將反應混合物升溫至室溫並攪拌15min。用冰淬滅混合物並使其在乙酸乙酯(4mL)與水(2mL)之間分配。分離有機層，用鹽水(2mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並在減低壓力下濃縮，以提供粗製物，藉由製備型HPLC純化該粗製物，以提供呈淡黃色固體之(S)-(1-((4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)(甲基)胺基甲酸第三丁基酯(60mg,0.125mmol,37%產率)。LC/MS(ESI)m/e 454.4[(M+H)+，計算值C26H36N3O2 454.3]；LC/MS滯留時間(方法E)：t R=1.21min。
部分B：(S)-4,6-二甲基-8-(4-甲基-2-(甲基胺基)戊氧基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
如實例2部分E中所述製備，以提供呈淡黃色固體之標題化合物(30mg,0.070mmol,64%產率)。LC/MS(ESI)m/e 354.0[(M+H)+，計算值C21H28N3O2 354.2]LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.81min。HPLC滯留時間(方法A)：tR=8.22min及HPLC滯留時間(方法B)：tR=9.21min。1H NMR(400MHz，甲醇-d 4 )δ ppm 8.74(d,J=7.0Hz,1H),8.69-8.65(m,1H),8.62(d,J=9.0Hz,1H),7.30-7.22(m,2H),4.62(dd,J=11.0,3.0Hz,1H),4.49(dd,J=11.5,5.0Hz,1H),3.85(s,3H),3.74(dd,J=8.3,3.8Hz,1H),3.28(s,3H),2.84(s,3H),1.99-1.78(m,2H),1.76-1.63(m,1H),1.07(d,J=6.0Hz,6H)。
實例96
(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-N,N,4,6-四甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-9-甲醯胺
部分A：(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-9-甲酸
向如實例64中所述製備之(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-9-甲腈(450mg,1.235mmol)存於乙醇(5mL)及水(5mL)中之溶液中添加NaOH(494mg,12.35mmol)。將混合物加熱至80℃並保持12h。蒸發揮發物並用水稀釋殘餘物。使用1.5N HCl將pH調節至3。用乙酸乙酯(2×5mL)萃取溶液。經硫酸鈉乾燥合併的有機層，過濾並在減低壓力下濃縮，以提供呈黃色固體之(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-9-甲酸(90mg,0.235mmol,19%粗製產率)。該材料不進一步純化即繼續使用。LC/MS(ESI)m/e 384.1[(M+H)+，計算值C21H26N3O4 384.2]；LC/MS滯留時間(方法D)：t R=0.72min。
部分B：(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-N,N,4,6-四甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-9-甲醯胺
將(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-9-甲酸(90mg,0.070mmol)存於DMF(0.9mL)中之溶液冷卻至0℃。添加HOBT(21.57mg,0.141mmol)及EDC(20.25mg,0.106mmol)並將其攪拌5min。向其中添加二甲胺(0.282mL,0.563mmol)，之後添加DIPEA(0.037mL,0.211mmol)並攪拌30min。然後將反應升溫至rt並攪拌12h。藉由添加冰淬滅反應，過濾析出固體。在升溫至rt後，用過量水洗滌固體並完全乾燥，以提供橙色油狀物。藉由製備型HPLC(0.1%存於ACN：水中之TFA)純化粗製產物，以提供呈淺綠色固體之(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-N,N,4,6-四甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-9-甲醯胺2 TFA(3.36mg,4.95μmol,7%產率)。LC/MS(ESI)m/e 411.2[(M+H)+，計算值C23H31N4O3 411.2]LC/MS滯留時間(方法C)：t R=2.22min。HPLC滯留時間(方法A)：tR=10.98min及HPLC滯留時間(方法B)：tR=11.63
1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ ppm 8.44(d,J=6.0Hz,1H),8.31(d,J=6.0Hz,1H),8.25(s,1H),6.76(s,1H),3.76(s,3H),3.69(dd,J=4.8,3.3Hz,2H),3.34(s,3H),3.20-3.08(m,7H),1.84-1.78(m,1H),1.66-1.51(m,2H),1.05(d,J=7.0Hz,3H),0.99(d,J=6.5Hz,3H)。
實例97
8-(2-胺基-2,4-二甲基戊氧基)-1-氟-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A：1-(1-氟-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-2,4-二甲基戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯
如實例16部分H中所述自如實例85部分E中所述製備之8-氯-1-氟-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮製備，以提供(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-7-氟-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(35mg,0.076mmol,50%產率)。LC/MS(ESI)m/e 458.2[(M+H)+，計算值C25H33FN3O4 458.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=2.15min。
部分B：8-(2-胺基-2,4-二甲基戊氧基)-1-氟-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
如實例2部分E中所述製備，以提供呈白色固體之8-(2-胺基-2,4-二甲基戊氧基)-1-氟-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(16.5mg,0.035mmol,45%產率)。LC/MS(ESI)m/e 358.2[(M+H)+，計算值C20H25FN3O2 358.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=2.06min；HPLC 滯留時間(方法A)：tR=11.79min；HPLC滯留時間(方法B)：tR=6.66min；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ ppm 9.41(s,1H),8.79(d,J=4.8Hz,1H),8.71(dd,J=9.2,2.9Hz,1H),7.24(d,J=2.3Hz,1H),7.22-7.15(m,1H),4.36(d,J=10.3Hz,1H),4.24(d,J=10.3Hz,1H),3.84(s,3H),2.02-1.83(m,2H),1.80-1.70(m,1H),1.55(s,3H),1.11(d,J=6.5Hz,3H),1.06(d,J=6.3Hz,3H)。
實例98
(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-1-甲氧基-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A：8-氯-1-甲氧基-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
向如實例85部分E中所述製備之8-氯-1-氟-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(40mg,0.152mmol)存於MeOH(0.2mL)中之溶液中添加存於甲醇中之18-冠-6(4.03mg,0.015mmol)及甲醇鈉(32.9mg,0.152mmol)並在微波爐中在100℃下加熱30min。在完成後，用水稀釋反應混合物並用乙酸乙酯(2×5mL)萃取。用鹽水溶液洗滌合併的有機層，經硫酸鈉乾燥，過濾並在減低壓力下濃縮，以提供呈白色固體之8-氯-1-甲氧基-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(40mg,0.146mmol,96%粗製產率)。該材料不進一步純化即繼續使用。LC/MS(ESI)m/e 275.0[(M+H)+，計算值C14H12ClN2O2 275.05]；LC/MS滯留時間(方法D)：t R=0.72min。
部分B：(S)-(1-((1-甲氧基-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
向8-氯-1-甲氧基-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(40mg,0.146mmol)存於甲苯(0.5mL)中之溶液中添加碳酸銫(71.2mg,0.218mmol)及二第三丁基(2',4',6'-三異丙基-[1,1'-聯苯]-2-基)膦(6.18mg,0.015mmol)。用N2將溶液吹掃5min。向其中添加乙酸鈀(II)(1.635mg,7.28μmol)並用N2將溶液吹掃10min。在90℃下將所得混合物加熱21h。在冷卻後，經由矽藻土(Celite®)過濾反應混合物，用EtOAc溶析。在減低壓力下濃縮濾液。藉由矽膠層析使用己烷及乙酸乙酯純化粗製產物，以提供(S)-(1-((1-甲氧基-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(40mg,0.041mmol,28%產率)。LC/MS(ESI)m/e 456.2[(M+H)+，計算值C25H34N3O5 456.2]；LC/MS滯留時間(方法D)：t R=0.9min。
部分C：(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-1-甲氧基-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
向冷卻至0℃之(S)-(1-((1-甲氧基-6-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并 [c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(40mg,0.041mmol)存於DCM(0.9mL)中之溶液中逐滴添加TFA(0.2mL,2.60mmol)並攪拌5min。將反應混合物升溫至rt並攪拌3h。在減低壓力下去除揮發物。藉由製備型HPLC使用(0.1%存於ACN：水中之TFA)純化粗製產物，以提供呈白色固體之(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-1-甲氧基-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮2 TFA(17.11mg,0.028mmol,69%產率)。LC/MS(ESI)m/e 356.0[(M+H)+，計算值C20H26N3O3 356.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.82min；HPLC滯留時間(方法A)：tR=9.44min；HPLC滯留時間(方法B)：tR=9.78min；1H NMR(400MHz，甲醇-d 4 )δ ppm 9.17(s,1H),9.14(d,J=9.0Hz,1H),8.54(s,1H),7.09(d,J=2.5Hz,1H),7.02(dd,J=9.0,2.5Hz,1H),4.21(s,3H),4.19-4.15(m,1H),4.04-3.95(m,2H),3.78(s,3H),1.97-1.80(m,1H),1.51-1.42(m,2H),1.04(d,J=6.5Hz,3H),1.02(d,J=6.5Hz,3H)。
實例99
(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-7-甲氧基-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A. 3-溴-6-氯-2-氟苯酚
向冷卻至-78℃之1-溴-4-氯-2-氟苯(5g,23.87mmol)存於四氫呋 喃(40mL)中之攪拌溶液中逐滴添加LDA(14.92mL,29.8mmol)。在此溫度下將反應混合物攪拌30min。然後將其升溫至-20℃並攪拌30min。然後將反應冷卻至-78℃並逐滴添加溶解於THF(5mL)中之硼酸三甲酯(3.47mL,31.0mmol)。將反應混合物升溫至-20℃並攪拌1h。然後將反應混合物冷卻至-78℃並逐滴緩慢添加過乙酸(16mL,84mmol)。將混合物升溫至rt並攪拌12h。再次將反應混合物冷卻至0℃並用5%氯化銨淬滅。用乙酸乙酯(2×50mL)萃取溶液。用鹽水(50mL)洗滌合併的有機層，經硫酸鈉乾燥，過濾並在減低壓力下濃縮，以提供呈黃色油狀物之3-溴-6-氯-2-氟苯酚(4.99g,18.25mmol,76%粗製產率)。該材料不進一步純化即繼續使用。LC/MS(ESI)m/e 225.1[(M+H)+，計算值C6H4BrClFO 224.9]；LC/MS滯留時間(方法E)：t R=0.87min。
部分B. 1-溴-4-氯-2-氟-3-甲氧基苯
在RT下向3-溴-6-氯-2-氟苯酚(4.2g,18.63mmol)存於乙腈(35mL)中之攪拌溶液中逐滴添加碳酸鉀(5.15g,37.3mmol)、之後碘甲烷(2.330mL,37.3mmol)。將反應混合物加熱至85℃並保持3h。在冷卻後，在減低壓力下濃縮揮發物並用水(50mL)稀釋殘餘物且用乙酸乙酯(2×80mL)萃取。用鹽水(100mL)洗滌合併的有機層，經硫酸鈉乾燥，過濾並在減低壓力下濃縮，以提供呈棕色固體之1-溴-4-氯-2-氟-3-甲氧基苯(4g,16.7mmol,90%粗製產率)。該材料不進一步純化即繼續使用。1H NMR(400MHz,CDCl 3 )δ ppm 7.2(m,1 H),7.04(m,1 H),3.98(s,3 H)。
部分C. 2-(4-氯-2-氟-3-甲氧基苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷
向冷卻至-10℃之1-溴-4-氯-2-氟-3-甲氧基苯(3g,12.53mmol)存於四氫呋喃(20mL)中之攪拌溶液中逐滴添加異丙基溴化鎂(5.18mL,15.03mmol)並在-10℃下將反應混合物攪拌1h。然後將反應混合物升溫至0℃並攪拌1h。然後將反應冷卻至-10℃並逐滴緩慢添加2-異丙氧基-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷(2.56mL,12.53mmol)。將反應混合物升溫至室溫並攪拌16h。用5%氫氧化鈉水溶液淬滅反應混合物並用乙酸乙酯(2×25m)萃取。用鹽水溶液洗滌合併的有機層，經硫酸鈉乾燥，過濾並在減低壓力下濃縮，以提供呈棕色油狀物之2-(4-氯-2-氟-3-甲氧基苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷(2.3g,8.03mmol,64%粗製產率)。該材料不進一步純化即繼續使用。1H NMR(400MHz,CDCl 3 )δ ppm 7.35(m,1 H),7.15(m,1 H),3.95(s,3 H),1.33(s,6 H),1.23(s,6 H)。
部分D. 4-(4-氯-2-氟-3-甲氧基苯基)-2-甲基菸酸甲酯
用氮將4-氯-2-甲基菸酸甲酯(1.5g,8.08mmol)、2-(4-氯-2-氟-3-甲氧基苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷(2.316g,8.08mmol)、磷酸鉀鹽(3.43g,16.16mmol)及PdCl2(dppf)-CH2Cl2加合物(0.660g, 0.808mmol)存於1,4-二噁烷(25mL)及水(5mL)中之混合物吹掃5min。然後將反應加熱至100℃並保持18h。在冷卻後，用水(50mL)稀釋反應並用乙酸乙酯(2×75mL)萃取。用鹽水溶液洗滌合併的有機層，經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。藉由矽膠層析使用50%存於己烷中之乙酸乙酯純化殘餘物，以產生呈淡棕色油狀物之4-(4-氯-2-氟-3-甲氧基苯基)-2-甲基菸酸甲酯(1.2g,2.52mmol,31%產率)。LC/MS(ESI)m/e 309.9[(M+H)+，計算值C15H14ClFNO3 310.1]；LC/MS滯留時間(方法D)：t R=0.84min。
部分E. 4-(4-氯-2-氟-3-甲氧基苯基)-2-甲基菸酸
如實例16部分E中所述藉由4-(4-氯-2-氟-3-甲氧基苯基)-2-甲基菸酸甲酯之水解製備，以提供呈棕色油狀物之4-(4-氯-2-氟-3-甲氧基苯基)-2-甲基菸酸(780mg,2.137mmol,93%產率)。LC/MS(ESI)m/e 295.9[(M+H)+，計算值C14H12ClFNO3 296.04]；LC/MS滯留時間(方法D)：t R=0.61min。
部分F. 4-(4-氯-2-氟-3-甲氧基苯基)-N-(4-甲氧基苄基)-2-甲基菸醯胺
向(4-甲氧基苯基)甲胺(0.437g,3.18mmol)存於CH2Cl2(25mL)中之攪拌溶液中添加DIEA(0.556mL,3.18mmol)並在0℃下將反應混合 物攪拌15min。將4-(4-氯-2-氟-3-甲氧基苯基)-2-甲基菸醯氯(1g,3.18mmol)(藉由用亞硫醯氯處理羧酸製備)溶解於10mL DCM中，然後添加至反應混合物中，並在RT下將反應攪拌10h。藉由添加水(50mL)淬滅反應並用DCM(2×50mL)萃取溶液。用鹽水溶液(50mL)洗滌合併的有機層，經硫酸鈉乾燥，過濾且在減低壓力下濃縮。藉由矽膠層析使用存於己烷中之乙酸乙酯作為溶析劑來純化殘餘物，以產生呈棕色油狀物之4-(4-氯-2-氟-3-甲氧基苯基)-N-(4-甲氧基苄基)-2-甲基菸醯胺(800mg,1.109mmol,35%產率)。LC/MS(ESI)m/e 415.1[(M+H)+，計算值C22H21ClFN2O3 415.1]；LC/MS滯留時間(方法D)：t R=0.78min。
部分G. 8-氯-7-甲氧基-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
如實例2部分C中所述自4-(4-氯-2-氟-3-甲氧基苯基)-N-(4-甲氧基苄基)-2-甲基菸醯胺製備，以提供呈黃色固體之8-氯-7-甲氧基-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(110mg,0.245mmol,34%產率)。LC/MS(ESI)m/e 395.1[(M+H)+，計算值C22H20ClN2O3 395.1]LC/MS滯留時間(方法D)：t R=0.81min。
部分H. (S)-1-(7-甲氧基-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯 如實例16部分H中所述製備，以提供呈白色固體之標題化合物(325mg,0.119mmol,49%粗製產率)。該材料不純化即繼續使用。LC/MS(ESI)m/e 576.3[(M+H)+，計算值C33H42N3O6 576.3]；LC/MS滯留時間(方法D)：t R=0.99min。
部分I. (S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-7-甲氧基-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
如實例2部分E中所述製備，以提供呈白色固體之(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-7-甲氧基-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(12.3mg,0.033mmol,28%產率)。LC/MS(ESI)m/e 356.2[(M+H)+，計算值C20H26N3O3 356.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.49min；HPLC滯留時間(方法A)：tR=7.36min；HPLC滯留時間(方法B)：tR=8.52min；1H NMR(400MHz，甲醇-d 4 )δ ppm 8.59(d,J=5.5Hz,1H),8.14(d,J=5.5Hz,1H),8.10(d,J=9.0Hz,1H),7.11(d,J=9.0Hz,1H),4.18(dd,J=9.3,4.3Hz,1H),4.08-4.03(m,1H),4.02(s,3H),4.01-3.96(m,1H),3.10(s,3H),1.91-1.80(m,1H),1.57-1.40(m,2H),1.03(d,J=6.5Hz,3H),1.01(d,J=7.0Hz,3H)。
實例100
(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-9-溴-7-氟-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A：(S)-1-(9-溴-7-氟-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯
使用實例3部分A中所述方法自如實例82部分C中所述製備之(S)-1-(7-氟-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯製備，以提供標題化合物(120mg,0.065mmol,44%產率)。LC/MS(ESI)m/e 642.4[(M+H)+，計算值C32H38BrFN3O5 642.2]；LC/MS滯留時間(方法E)：t R=1.26min。
部分B：(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-9-溴-7-氟-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
如實例2部分E中所述製備，以提供呈灰白色固體之(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-9-溴-7-氟-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(3.5mg,8.22μmol,13%產率)。LC/MS(ESI)m/e 423.0[(M+H)+，計算值C19H22BrFN3O2 423.3]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=2.10min； HPLC滯留時間(方法A)：tR=8.58min；HPLC滯留時間(方法B)：tR=9.08min；1H NMR(400MHz，甲醇-d 4 )δ ppm 8.73(d,J=6.0Hz,1H),8.57(d,J=2.0Hz,1H),8.40(d,J=6.0Hz,1H),4.51(dd,J=10.3,2.5Hz,1H),4.38(dd,J=10.4,5.6Hz,1H),3.78-3.73(m,1H),3.17(s,3H),1.94-1.82(m,2H),1.73-1.60(m,1H),1.08(d,J=2.5Hz,3H),1.06(d,J=2.8Hz,3H)。
實例101
(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-9-氟-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A：4-(4-氯-2,5-二氟苯基)-N-(4-甲氧基苄基)-2-甲基菸醯胺
如實例82部分A中所述自4-(4-氯-2,5-二氟苯基)-2-甲基菸酸(如實例70部分D中所述製備)製備，以提供呈灰白色固體之標題化合物(440mg,1.015mmol,87%產率)。LC/MS(ESI)m/e 403.1[(M+H)+，計算值C21H18ClF2N2O2 403.1]；LC/MS滯留時間(方法E)：t R=0.93min。
部分B：8-氯-9-氟-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
如實例73部分B中所述製備，以提供呈白色固體之8-氯-9-氟-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(260g,0.669mmol,61%產率)。LC/MS(ESI)m/e 383.0[(M+H)+，計算值C21H17ClFN2O2 383.1]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=2.04min。
部分C：(S)-1-(9-氟-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯
如實例16部分H中所述製備，以提供(S)-1-(9-氟-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯(0.2g,0.244mmol,62%產率)。LC/MS(ESI)m/e 564.4[(M+H)+，計算值C32H39FN3O5 564.3]；LC/MS滯留時間(方法E)：t R=1.25min。
部分D：(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-9-氟-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
如實例2部分E中所述製備，以提供呈白色固體之標題化合物(55mg,0.158mmol,87%產率)。LC/MS(ESI)m/e 344.0[(M+H)+，計算值C19H23FN3O2 344.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.76min；HPLC 滯留時間(方法A)：tR=7.88min；HPLC滯留時間(方法B)：tR=7.92min；1H NMR(400MHz，甲醇-d 4 )δ ppm 8.60(d,J=5.8Hz,1H),8.15(d,J=12.0Hz,1H),8.08(d,J=5.8Hz,1H),6.99(d,J=7.5Hz,1H),4.22-4.12(m,1H),4.06-3.92(m,1H),3.40(br.s.,1H),3.10(s,3H),1.92-1.80(m,1H),1.59-1.41(m,2H),1.03(d,J=6.5Hz,3H),1.01(d,J=6.5Hz,3H)。
實例102
8-(2-胺基-2,4-二甲基戊氧基)-9-氟-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A. 1-(9-氟-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-2,4-二甲基戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯
依照實例16部分H中所述之程序自8-氯-9-氟-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(實例101部分C中所述之合成)之偶合製備，以提供呈棕色油狀物之標題化合物(0.130g,0.123mmol,47%產率)。LC/MS(ESI)m/e 578.5[(M+H)+，計算值C33H41FN3O5 578.3]；LC/MS滯留時間(方法E)：t R=1.28min。
部分B. 8-(2-胺基-2,4-二甲基戊氧基)-9-氟-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
如實例2部分E中所述製備，以提供呈淡黃色固體之標題化合物(10mg,0.017mmol,22%產率)。LC/MS(ESI)m/e 358.0[(M+H)+，計算值C20H25FN3O2 358.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.69min；HPLC滯留時間(方法A)：tR=7.87min；HPLC滯留時間(方法B)：tR=8.59min；1H NMR(400MHz，甲醇-d 4 )δ ppm 8.67(d,J=6.3Hz,1H),8.39(d,J=6.3Hz,1H),8.32(d,J=12.0Hz,1H),7.08(d,J=7.3Hz,1H),4.44-4.15(m,2H),3.37-3.35(m,1H),3.19(s,3H),1.97-1.83(m,2H),1.81-1.70(m,1H),1.56(s,2H),1.10(d,J=6.3Hz,3H),1.06(d,J=6.3Hz,3H)。
實例103
(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-9-氯-7-氟-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A：(S)-1-(9-氯-7-氟-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯
如實例41部分A中所述自(S)-(1-((7-氟-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(實例82部分C中所述之合成)製備，以提供呈黃色固體之標題化合物(2135mg,0.063mmol,60%粗製產率)。該材料不純化即繼續使用。LC/MS(ESI)m/e 598.3[(M+H)+，計算值C32H38ClFN3O5 598.2]；LC/MS滯留時間(方法E)：t R=1.32min。
部分B. (S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-9-氯-7-氟-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
向冷卻至0℃之(S)-(1-((9-氯-7-氟-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(.08g,0.037mmol)存於TFA(8mL)中之溶液中添加甲磺酸 (0.243μl,3.75μmol)。然後在70℃下將反應混合物加熱2h。蒸發揮發物。將殘餘物吸收於水中並用10% NaHCO3水溶液中和。用EtOAc(3×15mL)萃取溶液。用鹽水(1×15mL)洗滌合併的有機層，經Na2SO4乾燥，過濾並在減低壓力下濃縮。藉由製備型HPLC(管柱：X-Bridge(19×150mm)5μm，流速：15ml/min；溶劑A：0.01% TFA，溶劑B：ACN)純化殘餘物，以提供呈灰白色固體之(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-氯-7-氟-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮3TFA(9.5mg,0.013mmol,34.4%產率)。LC/MS(ESI)m/e 378.0[(M+H)+，計算值C19H22ClFN3O2 378.1]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=2.02min；HPLC滯留時間(方法A)：tR=7.47min；HPLC滯留時間(方法B)：tR=8.41min；1H NMR(400MHz，甲醇-d 4)δ ppm 8.70(d,J=6.0Hz,1H),8.40(d,J=2.0Hz,1H),8.35(d,J=6.3Hz,1H),4.49(dd,J=10.7,2.6Hz,1H),4.35(dd,J=10.5,5.8Hz,1H),3.75-3.69(m,1H),3.14(s,3H),1.90-1.74(m,2H),1.70-1.56(m,1H),1.04(d,J=2.3Hz,3H),1.03(d,J=2.5Hz,3H)。
實例104
(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-9-(甲氧基甲基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A. (S)-1-(9-(甲氧基甲基)-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯
如實例16部分H中所述製備，以提供標題化合物(S)-(1-((9-(甲氧基甲基)-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(100mg,0.066mmol,84%產率)。LC/MS(ESI)m/e 484.4[(M+H)+，計算值C27H38N3O5 484.3]；LC/MS滯留時間(方法B)：t R=1.65min。
部分B. (S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-9-(甲氧基甲基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
如實例2部分E中所述製備，以提供呈黃色固體之標題化合物(9 mg,0.022mmol,33%產率)。LC/MS(ESI)m/e 384.2[(M+H)+，計算值C22H30N3O3 384.2]；LC/MS滯留時間(方法C)：t R=1.66min；HPLC滯留時間(方法A)：tR=7.96min；HPLC滯留時間(方法B)：tR=9.01min；1H NMR(400MHz，甲醇-d 4)δ ppm 8.54(d,J=5.9Hz,1H),8.33(s,1H),8.11(d,J=5.8Hz,1H),7.00(s,1H),4.73-4.55(m,2H),4.33(dd,J=10.0,3.5Hz,1H),4.13(dd,J=9.9,6.8Hz,1H),3.75(s,3H),3.59-3.50(m,1H),3.47(s,3H),3.06(s,3H),1.97-1.77(m,1H),1.69-1.45(m,2H),1.04(d,J=4.7Hz,3H),1.02(d,J=4.7Hz,3H)。
實例105
8-(2-胺基-2,4-二甲基戊氧基)-7-氟-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A. 4-(4-溴-2,3-二氟苯基)-N-(4-甲氧基苄基)-2-甲基菸醯胺
如實例82部分A中所述製備，以提供呈灰白色固體之4-(4-溴-2,3-二氟苯基)-N-(4-甲氧基苄基)-2-甲基菸醯胺(0.320g,0.693mmol,97%產率)。LC/MS(ESI)m/e 447.0[(M+H)+，計算值C21H18BrF2N2O2 447.0]；LC/MS滯留時間(方法E)：t R=0.95min。
部分B. 8-溴-7-氟-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
如實例2部分C中所述製備，以提供呈灰白色固體之8-溴-7-氟-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(0.12g,0.269mmol,90%產率)。LC/MS(ESI)m/e 427.1[(M+H)+，計算值C21H17BrFN2O2 427.0]；LC/MS滯留時間(方法E)：t R=1.15min。
部分C. 1-(7-氟-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基氧基)-2,4-二甲基戊-2-基胺基甲酸第三丁基酯
如實例16部分H中所述製備，以提供(R)-(1-((7-氟-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-2,4-二甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(0.025g,0.042mmol,13%產率)。LC/MS(ESI)m/e 578.5[(M+H)+，計算值C33H41FN3O5 578.3]；LC/MS滯留時間(方法E)：t R=1.28min。
部分D. 8-(2-胺基-2,4-二甲基戊氧基)-7-氟-4-甲基苯并[c][2,7]萘 啶-5(6H)-酮
如實例17部分I中所述製備，以提供呈灰白色固體之8-(2-胺基-2,4-二甲基戊氧基)-7-氟-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(0.013g,0.030mmol,69%產率)。LC/MS(ESI)m/e 358.0[(M+H)+，計算值C20H25FN3O2 358.2]；HPLC滯留時間(方法A)：tR=7.71min；HPLC滯留時間(方法B)：tR=8.57min；1H NMR(400MHz，甲醇-d 4)δ ppm 8.75-8.70(m,1H),8.70-8.63(m,1H),8.36(dd,J=9.3,1.8Hz,1H),7.34(dd,J=9.3,7.8Hz,1H),4.47-4.39(m,1H),4.38-4.30(m,1H),3.26(s,3H),1.96-1.85(m,2H),1.81-1.70(m,1H),1.55(s,3H),1.10(d,J=6.5Hz,3H),1.06(d,J=6.0Hz,3H)。
實例106
(S)-8-((2-胺基-5,5-二氟戊-4-烯-1-基)氧基)-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-9-甲腈
部分A：(S)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)琥珀酸二甲酯
經由快速逐滴添加用三甲基氯矽烷(24.7g,228mmol)處理L-天冬胺酸(10.1g,76.0mmol)存於無水甲醇(100mL)中之0℃懸浮液。去除冷卻浴並在環境溫度下將所得溶液攪拌過夜(16h)且然後在減低壓力下濃縮。將所得油狀物吸收於二氯甲烷(100mL)中，用二碳酸二第三丁基酯(17.4g,80.1mmol)及二異丙基乙胺(26.5mL,152mmol)處理且 在環境溫度下攪拌過夜(16h)。用0.25N鹽酸水溶液(3×50mL)、0.25N氫氧化鈉水溶液(3×50mL)及鹽水(1×50mL)洗滌所得溶液；經MgSO4乾燥且在減低壓力下濃縮，以提供呈接近無色油狀物之(S)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)琥珀酸二甲酯(15.9g,60.9mmol,80%粗製產率)。粗製產物不進一步純化即用於下一步驟。1H NMR(400MHz,CDCl 3 )δ ppm 5.50(br.s.,1H),4.60(br.s.,1H),3.78(s,3H),3.71(s,3H),3.02(dd,J=16.9,4.4Hz,1H),2.84(dd,J=16.8,4.8Hz,1H),1.47(s,9H)。
部分B：(S)-2-[雙(第三丁氧基羰基)胺基]丁烷-1,4-二酸二甲酯
用二碳酸二第三丁基酯(13.9g,63.5mmol)及4-二甲基胺基吡啶(1.48g,12.1mmol)處理(S)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)琥珀酸二甲酯(15.8g,60.5mmol)存於乙腈(200mL)中之0℃溶液。去除冷卻浴且在環境溫度下將反應溶液攪拌過夜(18h)。在減低壓力下濃縮所得溶液。將殘餘物溶解於乙酸乙酯(200mL)中，用0.25N鹽酸水溶液(2×50mL)、0.25N氫氧化鈉水溶液(2×50mL)及鹽水(1×50mL)洗滌；經硫酸鎂乾燥且在減低壓力下濃縮，以提供呈淡黃色油狀物之(S)-2-[雙(第三丁氧基羰基)胺基]丁烷-1,4-二酸二甲酯(18.8g,52.0mmol,86%粗製產率)。該粗製產物不進一步純化即使用。1H NMR(400MHz,CDCl 3 )δ ppm 5.46(t,J=6.8Hz,1H),3.72(s,3H),3.74(s,3H),3.26(dd,J=16.4,7.2Hz,1H),2.75(dd,J=16.3,6.5Hz,1H),1.52(s,18H)。
部分C：(S)-2-{(第三丁氧基)-N-[(第三丁基)氧基羰基]羰基胺基}-4-側氧基丁酸甲酯
用存於二氯甲烷(37.6mL,37.6mmol)中之1M二異丁基氫化鋁逐滴處理(S)-2-[雙(第三丁氧基羰基)胺基]丁烷-1,4-二酸二甲酯(9.07g,25.1mmol)存於乙醚(100mL)中之-78℃溶液。將所得溶液攪拌15min且然後在15分鐘間隔內依序用水(3.3mL)、1N氫氧化鈉水溶液(10mL)且再次用水(3.3mL)淬滅。經由矽藻土(Celite®)過濾所得懸浮液且在減低壓力下濃縮，以提供呈無色油狀物之(S)-2-{(第三丁氧基)-N-[(第三丁基)氧基羰基]羰基胺基}-4-側氧基丁酸甲酯(8.26g,24.9mmol,99%粗製產率)。該粗製產物不進一步純化即使用。1H NMR(400MHz,CDCl 3 )δ ppm 9.81(s,1H),5.55(t,J=6.4Hz,1H),3.75,(s,3H),3.43(ddd,J=18.0,5.9,1.0Hz,1H),2.85(ddd,J=17.9,6.0,1.0Hz,1H),1.52(s,18H)。
部分D：(S)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)-4-側氧基丁酸甲酯
用鋰溴化物(11.5g,132mmol)處理(S)-2-{(第三丁氧基)-N-[(第三丁基)氧基羰基]羰基胺基}-4-側氧基丁酸甲酯(29.2g,88.0mmol)存於乙腈(300mL)中之溶液，將其加熱至回流並保持2h且然後在減低壓力下濃縮。將殘餘物溶解於乙酸乙酯(300mL)中，用水(1×50mL)及鹽水(1×50mL)洗滌；經硫酸鎂乾燥，且在減低壓力下濃縮成深琥珀色油狀物。經由SiO2(20-100%乙酸乙酯/己烷梯度溶析)純化粗製材 料，以提供呈淡琥珀色油狀物之(S)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)-4-側氧基丁酸甲酯(12.5g,54.1mmol,62%粗製產率)。1H NMR(400MHz,CDCl 3 )δ ppm 9.76(s,1H),5.41(br.s.,1H),4.62(dt,J=8.1,4.4Hz,1H),3.77(s,3H),3.19-2.94(m,2H),1.46(s,9H)。
部分E：(S)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)-5,5-二氟戊-4-烯酸甲酯
將(S)2-((第三丁氧基羰基)胺基)-4-側氧基丁酸甲酯(5.97g,25.8mmol)、2-氯-2,2-二氟乙酸鈉(11.8g,77.0mmol)、三苯基膦(20.3g,77.0mmol)及N,N-二甲基甲醯胺(50mL)之溶液裝入500mL 3頸燒瓶中且加熱至115℃並保持15min。經由矽藻土(Celite®)過濾所得混合物並在減低壓力下濃縮。經由SiO2(5-40%乙酸乙酯/己烷梯度溶析)純化粗製材料，以提供呈無色油狀物之(S)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)-5,5-二氟戊-4-烯酸甲酯(0.91g,3.43mmol,13%產率)。1H NMR(400MHz,CDCl 3 )δ ppm 5.25-5.06(br.s.,1H),4.42(br.s.,1H),4.24-4.10(m,1H),3.78(s,3H),2.59(dd,J=14.4,6.7Hz,1H),2.51-2.31(m,1H),1.47(s,9H)。
部分F：(S)-(5,5-二氟-1-羥基戊-4-烯-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
用硼氫化鋰(0.31g,14mmol)處理(S)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)-5,5-二氟戊-4-烯酸甲酯(1.91g,7.20mmol)存於四氫呋喃(25mL)中之環境溫度溶液並攪拌1h。將所得溶液冷卻至5℃，用0.1N鹽酸水溶液(50mL)淬滅，並用乙酸乙酯(3×25mL)萃取。用鹽水(1×20mL)洗滌彙集的有機萃取物，經MgSO4乾燥，且在減低壓力下濃縮。經由 SiO2(20-100%乙酸乙酯/己烷梯度溶析)純化粗製材料，以提供呈無色油狀物之(S)-(5,5-二氟-1-羥基戊-4-烯-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(1.4g,5.90mmol,82%產率)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 4.75(d,J=6.0Hz,1H),4.35-4.05(m,1H),3.82-3.51(m,3H),2.46-2.16(m,3H),1.47(s,9H)。
部分G：(S)-(1-((4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-5,5-二氟戊-4-烯-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
用氮將8-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(1.26g,4.88mmol)(如實例16部分G中所製備)、(S)-(5,5-二氟-1-羥基戊-4-烯-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(1.39g,5.86mmol)、2-二第三丁基膦基-2’,4’,6’-三異丙基聯苯(0.42g,0.98mmol)、Pd(OAc)2(0.11g,0.49mmol)、Cs2CO3(3.18g,9.76mmol)及無水甲苯(15mL)之懸浮液吹掃10分鐘並加熱至90℃過夜(15h)。在冷卻後，經由矽藻土(Celite®)過濾反應混合物，在減低壓力下濃縮並溶解於乙酸乙酯(50mL)中。用鹽水(1×100mL)及水(1×100mL)洗滌有機層；經Na2SO4乾燥且在減低壓力下濃縮，以提供琥珀色油狀物。經SiO2(存於甲醇/二氯甲烷中之1-5% 2M氨梯度溶析)純化粗製材料，以提供呈黃褐色固體之(S)-(1-((4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-5,5-二氟戊-4-烯-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(1.04g,2.26mmol,46%產率)。LC/MS,(ESI)m/z 460.0[(M+H)+，計算值C24H28F2N3O4,460.2]；1H NMR(400MHz,CDCl 3 )δ ppm 8.59(d,J=5.5Hz,1H),8.05(d,J=8.8Hz,1H),7.73(d,J=5.8Hz,1H),6.83(dd,J=8.8,1.8Hz,1H),6.79(br.s.,1H),5.13- 4.89(m,1H),4.39-4.21(m,1H),4.20-3.96(m,3H),3.66(s,3H),3.12(s,3H),2.61-2.31(m,2H),1.48(s,9H)。
部分H：(S)-(1-((9-溴-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-5,5-二氟戊-4-烯-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
用N-溴琥珀醯亞胺(0.44g,2.5mmol)處理(S)-(1-((4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-5,5-二氟戊-4-烯-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(1.03g,2.24mmol)存於乙腈(22mL)中之溶液，將其加熱至80℃並保持45min，且然後在減低壓力下濃縮。經由SiO2(存於甲醇/二氯甲烷中之1-4% 2M氨梯度溶析)純化粗製材料，以提供呈白色固體之(S)-(1-((9-溴-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-5,5-二氟戊-4-烯-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(0.81g,1.51mmol,67%產率)。LC/MS,(ESI)m/z 537.9[(M+H)+，計算值C24H27BrF2N3O4,538.1]；1H NMR(400MHz,CDCl 3 )δ ppm 8.62(d,J=5.8Hz,1H),8.22(s,1H),7.65(d,J=5.5Hz,1H),6.75(s,1H),5.01(d,J=8.3Hz,1H),4.41-4.26(m,1H),4.24-4.04(m,3H),3.67(s,3H),3.12(s,3H),2.64-2.34(m,2H),1.48(s,9H)。
部分I：(S)-(1-((9-氰基-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-5,5-二氟戊-4-烯-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
將(S)-(1-((9-溴-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-5,5-二氟戊-4-烯-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(0.48g,0.892mmol)、氰化鋅(0.115g,0.981mmol)、1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵(0.074g,0.134mmol)、Pd2(dba)3(0.041g,0.045mmol)、N,N-二甲基甲醯胺(3mL)及水(0.3mL)之懸浮液裝入20mL壓力額定小瓶中並用氮流鼓泡10分鐘。將小瓶密封，吹掃氧，並在氮中在預加熱反應塊中在115℃下攪拌過夜。在冷卻後，用乙酸乙酯(35mL)稀釋反應混合物並經由矽藻土(Celite®)過濾。用鹽水(3×50mL)洗滌濾液，經硫酸鈉乾燥並在減低壓力下濃縮。經由SiO2(存於甲醇/二氯甲烷中之0-4% 2M氨梯度溶析)純化粗製材料，以提供呈黃褐色固體之(S)-(1-((9-氰基-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-5,5-二氟戊-4-烯-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(0.15g,0.280mmol,32%產率)。LC/MS,(ESI)m/z 485.1[(M+H)+，計算值C25H27F2N4O4,485.2]；1H NMR(400MHz,CDCl 3 )δ ppm 8.75(d,J=5.5Hz,1H),8.45(s,1H),7.81(d,J=5.8Hz,1H),7.00(s,1H),4.85(d,J=10.0Hz,1H),4.40-4.21(m,3H),4.07(br.s.,1H),3.80(s,3H),3.17(s,3H),2.62-2.52(m,1H),2.49-2.38(m,1H),1.49(s,9H)。
部分J：(S)-8-((2-胺基-5,5-二氟戊-4-烯-1-基)氧基)-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-9-甲腈
用存於1,4-二噁烷(1.3mL,5.20mmol)中之4M HCl處理(S)-(1-((9-氰基-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-5,5-二氟戊-4-烯-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(60mg,0.124mmol)存於甲醇 (1mL)中之環境溫度溶液且保持過夜。在減低壓力下濃縮所得溶液。經由具有以下條件之製備型LC/MS純化粗製材料：管柱：XBridge C18,19×200mm,5-μm粒子；流動相A：5：95乙腈：水，具有10-mM乙酸銨；流動相B：95：5乙腈：水，具有10-mM乙酸銨；梯度：10-50% B經20分鐘，然後5-分鐘保持在100% B；流速：20mL/min。將含有期望物之流分合併且經由離心蒸發濃縮，以提供呈白色固體之(S)-8-((2-胺基-5,5-二氟戊-4-烯-1-基)氧基)-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-9-甲腈(7.6mg,0.020mmol,16%產率)。LC/MS,(ESI)m/z 385.3[(M+H)+，計算值C20H19F2N4O2,385.1]；1H NMR(500MHz,DMSO)δ ppm 8.82(s,1H),8.60(d,J=5.5Hz,1H),8.18(d,J=5.8Hz,1H),6.97(s,1H),4.74-4.59(m,1H),4.22-4.05(m,2H),3.62(s,3H),3.19-3.10(m,1H),2.93(s,3H),2.36-2.25(m,1H),2.19-2.08(m,1H)。
實例107
(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-氯-7-氟-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
部分A：(S)-(1-((9-氯-7-氟-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并 [c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯
使如實例29部分G中所述製備之(S)-(1-((7-氟-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(0.08g,0.175mmol)經受使用NCS之氯化，以提供呈半固體之(S)-(1-((9-氯-7-氟-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2基)胺基甲酸第三丁基酯(80mg,0.104mmol,60%粗製產率)。該材料不進一步純化即繼續使用。LC/MS(ESI)m/e 492.2[(M+H)+，計算值C25H32ClFN3O4 492.2]。
部分B：(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-氯-7-氟-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮
使(S)-(1-((9-氯-7-氟-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯(0.08g,0.104mmol))如實例2部分E中所述，脫除Boc基團之保護。經由反相HPLC(10MM存於水/AcCN中之乙酸銨)純化粗製材料，以提供呈灰白色固體之(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-氯-7-氟-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮(0.006g,0.015mmol,14%產率)。LC/MS(ESI)m/e 392.2[(M+H)+，計算值C20H24ClFN3O2 392.1]；LC/MS滯留時間(LC/MS方法C)t R=2.11min。HPLC滯留時間(方法A)：t R=8.96min；HPLC滯留時間(方法B)：t R=5.15min。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)8.62(d,J=5.8Hz,1H),8.32(d,J=2.0Hz,1H),8.12(d,J=5.8Hz,1H),4.26(ddd,J=9.3,3.8,1.0Hz,1H),4.06(dd,J=8.7,7.2Hz, 1H),3.87(d,J=9.3Hz,3H),3.67-3.64(m,1H),3.08(s,3H),1.92-1.78(m,1H),1.56-1.37(m,2H),1.02(d,J=5.3Hz,3H),1.01(d,J=5.3Hz,3H)。
方法 AAK1激酶分析
在U形底384孔板中實施分析。最終分析體積係30μl，其係自存於分析緩衝液(10mM Tris-HCL pH 7.4、10mM MgCl2、0.01% Tween-20及1.0mM DTT)中之酶及受質(螢光素化肽(5-FAM)-Aha-KEEQSQITSQVTGQIGWR-NH2及ATP)及測試化合物之15μl添加物製備。藉由以細菌方式表現之GST-Xa-hAAK1與受質及測試化合物之組合來起始反應。在室溫下將反應培育3小時且藉由向每一試樣添加60μl 35mM EDTA緩衝液來使其終止。藉由螢光受質與磷酸化產物之電泳分離在Caliper LabChip 3000(Caliper,Hopkinton,MA)上分析反應。藉由與100%抑制之EDTA淬滅對照反應及0%抑制之僅媒劑反應進行比較來計算抑制數據。分析中之試劑之最終濃度係ATP,22μM；(5-FAM)-Aha-KEEQSQITSQVTGQIGWR-NH2,1.5μM；GST-Xa-hAAK1,3.5nM；及DMSO,1.6%。生成劑量反應曲線以確定抑制50%激酶活性所需之濃度(IC50)。將化合物以10mM溶解於二甲基亞碸(DMSO)中並以11種濃度進行評估。藉由非線性回歸分析推導IC50值。
基於HEK281細胞之分析
在含有DMEM(Gibco，目錄編號11965)、10% FBS(SAFC Biosciences，目錄編號12103C)、1×GPS(麩醯胺酸、青黴素及鏈黴素)之培養基中培養HEK293F細胞。第一天，將細胞平鋪於10cm盤上，以使其在轉染時鋪滿約80%。在轉染時，10cm盤中有約1千2百萬個細胞。第二天，用48μg DNA及144μl轉脂胺(Lipofectamine)2000(Invitrogen，目錄編號11668-019)轉染每一盤。DNA包括含有3 μg AAK1/HA/pIRES(全長人類，NCBI登錄號NP_055726.2)、45μg Flag/AP2MI/pcDNA(全長人類)及1.5ml OPTI-MEM之混合物(每10cm盤)。轉脂胺2000係由含有144μl轉脂胺2000及1.5ml OPTI-MEM之混合物(每10cm盤)組成。將每一混合物轉移至個別15ml管中並在RT下培育5分鐘，且然後將兩種混合物合併並在RT下培育20分鐘。然後自各10cm板抽吸生長培養基並更換為10ml DMEM+10% FBS(無GPS)。最後，將3ml DNA/轉脂胺混合物添加至每一10cm盤中並輕輕混合，之後在37℃及5% CO2下將分析板培育過夜。
第三天，在100% DMSO中稀釋化合物至1000×最終濃度，之後進行3倍連續稀釋，總共測試5個濃度。每10cm盤測試4種化合物。然後將1μl每一化合物稀釋物移液至96孔板之深孔中，之後將500μl DMEM+0.5% FBS添加至每一孔中，使每一化合物獲得2×最終濃度。藉由簡單移液將細胞再懸浮於10cm盤中(此時HEK293細胞極易脫離分析板)，然後轉移至50ml錐形管中，並於1000rpm下離心5min使其沈澱。然後將細胞集結塊再懸浮於每10cm盤2.75ml DMEM+0.5% FBS中，且取100μl細胞懸浮液轉移至96孔TC板之每一孔中。最後，再取100μl於DMEM+0.5% FBS中稀釋之2×化合物添加至含有細胞懸浮液之孔中，獲得1×最終濃度。然後在37℃及5% CO2下將板培育3小時，之後將細胞懸浮液自每一孔轉移至12排PCR管中。將PCR排管置於吸頭架(tip rack)中，於1000rpm下旋轉5分鐘，使細胞集結，且然後藉由移液去除培養基而不擾動細胞集結塊。
為準備進行西方墨點分析(Western Blot analysis)，將細胞集結塊再懸浮於40μl 1×LDS-PAGE試樣緩衝液(Invitrogen，目錄編號NP0008)+2×Halt磷酸酶及蛋白酶抑制劑混合劑(Thermo Scientific，目錄編號1861284)中，之後各自用設定在5的微尖端音波器(microtip sonicator)音波處理8-10秒。將5μl 10×NuPage試樣還原劑(具有50 mM DTT)添加至每一試樣，之後在PCR機器上在70℃下加熱變性10min。將總共10μl之每一試樣加載至4-20% Tris-甘胺酸Criterion 26孔凝膠(Biorad，目錄編號345-0034)之每一泳道中，用於磷酸-mu2墨點，且將10μl加載於4-12% Bis-Tris(+MES緩衝液)NuPAGE 26孔凝膠(Invitrogen，目錄編號WG1403BX10)之每一泳道中，用於mu2墨點。對於對照而言，將2ng磷酸-mu2或20ng mu2/Flag蛋白加載於每一凝膠之最後一孔中。在SDS-PAGE後，使用iBlot將每一凝膠上之試樣轉移至PVDF膜上並在TBST+5%乳中將膜封阻1小時，之後用TBST洗滌3×，持續5-10min。用存於TBST+5% BSA中之兔抗磷酸-mu2(1：5000；由New England Peptide產生且於Lexicon親和純化之兔多株抗體)探測Criterion凝膠，而用存於TBST+5%乳中之小鼠抗Flag(1：500；Sigma，目錄編號F1804)探測NuPAGE凝膠，且在振盪器上將該等一級抗體在4℃下培育過夜。
第4天，用TBST將西方墨點洗滌3×，持續5-10分鐘，在RT下用存於TBST+5%乳中之抗兔-HRP(1：2000；BioRad，目錄編號170-6515)或抗小鼠-HRP(1：2000；Biorad，目錄編號170-6516)探測1小時，用TBST洗滌3×，持續10分鐘，且在Versadoc上用ECL試劑(GE Healthcare，目錄編號RPN2132)顯色。最後，設置照相機，每30秒進行拍照，持續10分鐘，並保存每一墨點不具有飽和信號之最佳影像(當信號飽和時，條帶將突出顯示為紅色)。對每一條帶實施體積分析以獲得密度值。藉由首先正規化至總Mu2表現量且然後與0%及100%對照進行比較來計算每一試樣之抑制%。然後使用Excel擬合軟體計算IC50值。
AAK1剔除小鼠
藉由以下兩種方法來製備用於破壞AAK1基因之小鼠同型接合(-/-)；基因捕獲及同源重組。
基因捕獲係使用編碼報導基因或可選標記物基因之DNA片段作為誘變原之隨機插入誘變方法。基因捕獲載體已經設計從而以允許細胞剪接機器將載體編碼之外顯子剪接至細胞mRNA之方式整合至內含子或基因內。通常，基因捕獲載體含有前面為強剪接受體序列且前面不為啟動子之可選標記物序列。因此，當此等載體整合至基因中時，細胞剪接機器將來自所捕獲基因之外顯子剪接至可選標記物序列之5'端上。通常，此等可選標記物基因僅可在編碼該基因之載體已整合至內含子中時表現。所致基因捕獲事件隨後藉由選擇可在選擇性培養中存活之細胞來鑑別。
藉由涉及將至少一部分經遺傳改造之載體序列插入所關注基因中之方法使胚胎幹細胞(源自鼠類品系A129之Lex-1細胞)突變，將經突變胚胎幹細胞顯微注射至胚胞中，隨後使用公認方法該等胚胞引入假孕雌性宿主中並使其懷孕。例如，參見「Mouse Mutagenesis」，1998,Zambrowicz等人編輯，Lexicon Press,The Woodlands,TX。所得嵌合動物隨後繁殖以產生能夠對含有所關注基因之經改造突變之等位基因進行種系傳遞(germline transmission)的後代。
亦藉由同源重組獲得AAK1-基因破壞小鼠。在此情況下，藉由業內已知方法去除鼠類AAK1基因(參見GenBank登錄號NM_177762)之第二編碼外顯子。例如，參見美國專利第5,487,992號、第5,627,059號及第5,789,215號。
結合用於破壞AAK1基因之小鼠異型接合(+/-)及野生型(+/+)同窩仔研究用於破壞AAK1基因之小鼠同型接合(-/-)。在此分析期間，使小鼠經受使用一整套醫學診斷程序進行之醫學檢查(medical work-up)，該等程序經設計以評價哺乳動物個體中主要器官系統之功能。結合異型接合(+/-)及野生型(+/+)同窩仔研究同型接合(-/-)「剔除」小鼠。藉由南方分析(Southern analysis)確認AAK1基因之破壞。藉由 RT-PCR在以下器官中檢測AAK1之鼠類同源物之表現：鼠類腦；脊髓；眼；胸腺；脾；肺；腎；肝；骨髓肌；骨；胃、小腸及結腸；心；脂肪；哮喘肺；LPS肝；血液；帶狀心(banded heart)；主動脈樹；前列腺；及乳腺(5週未交配(virgin)、成熟未交配、12 DPC、產後3天(泌乳)、離乳後3天(早期退化)及離乳後7天(晚期退化))。
使用福馬林爪測試來測試AAK1同型接合(-/-)及其野生型(+/+)同窩仔以評價其急性及強直性感受傷害之反應。對於該等測試而言，使用自動化傷害感受分析儀(Automatic Nociception Analyzer)(購自Ozaki實驗室，University of California,San Diego)。在測試前30分鐘，將金屬帶置於每只小鼠之左後爪周圍。在30分鐘適應期後，在左後爪之背側表面中經皮下注射20μl 5%福馬林。將小鼠在圓柱形室內個別地圈養45分鐘。藉由用蒸餾水稀釋甲醛(Formalde-fresh 20%，Fisher Scientific,Fair Lawn,NJ)來製備5%新鮮福馬林溶液。在福馬林注射前30分鐘投與研究性化合物。
電腦記錄經過電磁場時每分鐘之退縮，階段I(急性階段=前8分鐘)之總退縮及階段II(強直階段=介於分鐘20-40之間之時間)之總退縮。參見Yaksh TL,Ozaki G,McCumber D,Rathbun M,Svensson C,Malkmus S,Yaksh MC.An automated flinch detecting system for use in the formalin nociceptive bioassay.J Appl Physiol.,2001；90：2386-402。如圖1中所示，階段1及階段2數據係使用同型接合(-/-)雌性小鼠(n=16)、野生型雌性小鼠(n=15)、同型接合(-/-)雄性小鼠(n=9)及野生型雄性小鼠(n=18)獲得。在所有組及兩個階段中，AAK1同型接合(-/-)小鼠皆展現記錄顯著少於野生型(+/+)同窩仔之爪退縮。
AAK1剔除小鼠之研究顯示，破壞AAK1基因影響疼痛反應，如使用上述福馬林爪測試所量測。使用相同測試來確認投與AAK1抑制劑亦可影響疼痛反應。
本發明化合物在此分析中以不同劑量進行測試。使用加巴噴丁及普瑞巴林作為陽性對照。結果示於下表2中，其中200mg/kg加巴噴丁之效應視為100%反應，其他化合物之反應%係相對於200mg/kg劑量加巴噴丁而言，「sc」意指皮下投與；「po」意指經口投與。

Claims (13)

  1. 一種式(I)化合物 或其醫藥上可接受之鹽，其中：R1係選自氫、C2-C4烯基、C1-C3烷氧基、C1-C3烷氧基C1-C3烷基、C1-C3烷基、C1-C3烷基胺基、芳基C1-C3烷基、C3-C6環烷基、C3-C6環烷基C1-C3烷基、C1-C3鹵代烷基及C1-C3羥基烷基；R2係選自氫、C1-C3烷氧基、C1-C3烷氧基羰基胺基、C1-C3烷基、C1-C3烷基胺基、C1-C3烷基羰基胺基、胺基、芳基胺基、芳基羰基胺基、C3-C6環烷基胺基、C3-C6環烷基羰基胺基、C3-C6環烷氧基、鹵基、C1-C3鹵代烷氧基、C1-C3鹵代烷基、C2-C3鹵代烷基胺基、C2-C3鹵代烷基羰基胺基、羥基及苯基C1-C3烷基胺基，其中該苯基視情況經C1-C3烷氧基取代；R3及R4係獨立地選自氫、C1-C4烷氧基、C1-C3烷氧基C1-C3烷基、C1-C3烷氧基羰基、C1-C4烷基、C1-C3烷基磺醯基、胺基羰基、氰基、C3-C6環烷基、二(C1-C3烷基)胺基羰基、鹵基、C1-C3鹵代烷氧基、C1-C3鹵代烷基、雜芳基、羥基、C1-C3羥基烷基及視情況經鹵基取代之苯基；R5係C1-C3烷基-Y或C2-C8烷基，其中該C2-C8烷基視情況經一個、兩個、三個或四個獨立地選自以下之基團取代：C1-C3烷氧基、C1-C3烷基胺基、C1-C3烷氧基C2-C3烷基胺基、胺 基、芳基、二(C1-C3烷基)胺基、鹵基、C1-C3鹵代烷基胺基、C1-C3鹵代烷基羰基胺基、羥基、-NRxRy及C3-C8環烷基，其中該環烷基進一步視情況經一個、兩個或三個獨立地選自以下之基團取代：C1-C3烷氧基、C1-C3烷基、C1-C3烷基胺基、C1-C3烷氧基C2-C3烷基胺基、胺基、芳基、芳基C1-C3烷基、鹵基、C1-C3鹵代烷基、C1-C3鹵代烷基胺基及羥基；Rx及Ry連同其所附接之氮原子一起形成三員至六員環；且Y係選自 其中n係0、1、2或3；每一R6皆獨立地選自氫、C1-C6烷基、芳基、芳基C1-C3烷基、C3-C6環烷基、鹵基及C1-C3鹵代烷基；每一R7皆獨立地選自氫、C1-C3烷氧基及羥基；且R8係選自氫、C1-C6烷基、C3-C6環烷基及C1-C6烷基羰基。
  2. 如請求項1之化合物，其中R5係C2-C8烷基，其中該C2-C8烷基視情況經一個、兩個、三個或四個獨立地選自C1-C3烷氧基、胺基、C1-C3烷基胺基、二(C1-C3烷基)胺基、鹵基及C3-C8環烷基之 基團取代；或R5係C1-C3烷基-Y，其中Y係或，其中R6、R7及R8係氫。
  3. 如請求項2之化合物或其醫藥上可接受之鹽，其中R5係視情況經一個、兩個、三個或四個獨立地選自胺基及鹵基之基團取代之C2-C8烷基。
  4. 如請求項1之化合物或其醫藥上可接受之鹽，其中：R1係選自氫、C2-C4烯基、C1-C3烷氧基C1-C3烷基、C1-C3烷基、芳基C1-C3烷基、C3-C6環烷基C1-C3烷基、C1-C3鹵代烷基及C1-C3羥基烷基；R2係選自氫、C1-C3烷氧基、C1-C3烷基、C1-C3烷基羰基胺基、胺基、鹵基、C1-C3鹵代烷基及苯基C1-C3烷基胺基，其中該苯基視情況經C1-C3烷氧基取代；R3及R4係獨立地選自氫、C1-C4烷氧基、C1-C3烷氧基C1-C3烷基、C1-C3烷氧基羰基、C1-C4烷基、C1-C3烷基磺醯基、胺基羰基、氰基、C3-C6環烷基、二(C1-C3烷基)胺基羰基、鹵基、C1-C3鹵代烷氧基、C1-C3鹵代烷基、雜芳基、羥基、C1-C3羥基烷基及視情況經鹵基取代之苯基；R5係C1-C3烷基-Y或C2-C8烷基，其中該C2-C8烷基視情況經一個、兩個、三個或四個獨立地選自C1-C3烷氧基、C1-C3烷基胺基、胺基、二(C1-C3烷基)胺基、鹵基及C3-C8環烷基之基團取代；且其中Y係選自 其中R6、R7及R8係氫。
  5. 一種式(II)化合物 或其醫藥上可接受之鹽，其中： R1係選自氫、C2-C4烯基、C1-C3烷氧基、C1-C3烷氧基C1-C3烷基、C1-C3烷基、C1-C3烷基胺基、芳基C1-C3烷基、C3-C6環烷基、C3-C6環烷基C1-C3烷基及C1-C3鹵代烷基；R2係選自氫、C1-C3烷氧基、C1-C3烷氧基羰基胺基、C1-C3烷基、C1-C3烷基胺基、C1-C3烷基羰基胺基、胺基、芳基胺基、芳基羰基胺基、C3-C6環烷基胺基、C3-C6環烷基羰基胺基、C3-C6環烷氧基、鹵基、C1-C3鹵代烷氧基、C1-C3鹵代烷基、C2-C3鹵代烷基胺基、C2-C3鹵代烷基羰基胺基及羥基；R3及R4係獨立地選自氫、C1-C4烷基、氰基、C3-C6環烷基、鹵基、C1-C3鹵代烷基及羥基；R5係C1-C3烷基-Y或C2-C8烷基，其中該C2-C8烷基視情況經一個、兩個或三個獨立地選自以下之基團取代：C1-C3烷氧基、C1-C3烷基胺基、C1-C3烷氧基C2-C3烷基胺基、胺基、芳基、鹵基、C1-C3鹵代烷基胺基、C1-C3鹵代烷基羰基胺基、羥基、-NRxRy及C3-C8環烷基，其中該環烷基進一步視情況經一個、兩個或三個獨立地選自以下之基團取代：C1-C3烷氧基、C1-C3烷基、C1-C3烷基胺基、C1-C3烷氧基C2-C3烷基胺基、胺基、芳基、芳基C1-C3烷基、鹵基、C1-C3鹵代烷基、C1-C3鹵代烷基胺基及羥基；Rx及Ry連同其所附接之氮原子一起形成三員至六員環；且Y係選自 其中n係0、1、2或3；每一R6皆獨立地選自氫、C1-C6烷基、芳基、芳基C1-C3烷基、 C3-C6環烷基、鹵基及C1-C3鹵代烷基；每一R7皆獨立地選自氫、C1-C3烷氧基及羥基；且R8係選自氫、C1-C6烷基、C3-C6環烷基及C1-C6烷基羰基。
  6. 一種化合物，其係選自(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-9-溴-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-6,9-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-6-甲基-5-側氧基-5,6二氫苯并[c][2,7]萘啶-9-甲腈；(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-環丙基-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-9-羥基-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-6-異丙基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-6-烯丙基-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-7,9-二氯-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)酮；(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-6-苄基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-6-(2-甲氧基乙基)苯并[c][2,7] 萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-6-(環丙基甲基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-氟-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；8-(2-胺基-5,5,5-三氟戊氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-4-胺基-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-N-(8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-6-甲基-5-側氧基-5,6二氫苯并[c][2,7]萘啶-2-基)乙醯胺；(R)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(R)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-(2-胺基-3-環丙基丙氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-(2-胺基-3-環丁基丙氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-(2-胺基-3-環丙基丙氧基)-9-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-(2-胺基-3-環丁基丙氧基)-9-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-(2-胺基-3-環丙基丙氧基)-4,6,9-三甲基苯并[c][2,7]萘啶- 5(6H)-酮；(S)-8-(2-胺基-3-環丁基丙氧基)-4,6,9-三甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-(二氟甲基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(2,4-二甲基-1-((6-甲基-5-側氧基-5,6二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯；8-((2-胺基-2,4-二甲基戊基)氧基)-7-氟-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；8-(((S)-2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-(1-羥基乙基)-4,6二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；8-((2-胺基-2,4-二甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；8-(((2S,3S)-3-胺基-5-甲基己-2-基)氧基)-4,6二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；8-((2-胺基-2,4-二甲基戊基)氧基)-9-甲氧基-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-(2-羥基丙-2-基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-乙基-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(R)-8-((2-胺基-2,4-二甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-((2-胺基-2,4-二甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮； (S)-8-((2-(二甲基胺基)-4-甲基戊基)氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-((2-(二甲基胺基)-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；8-((2-胺基-2,4-二甲基戊基)氧基)-9-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-4-甲氧基-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-氯-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-6-(2-羥基乙基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-6-(2,2,2-三氟乙基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-9-乙基-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-9-異丙基-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-6-甲基-9-(噁唑-5-基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-9-溴-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-4-((4-甲氧基苄基)胺基)-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-(4-氟苯基)-6甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮； (S)-4-胺基-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-9-氟-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-(2-胺基-3-異丙氧基丙氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-6-甲基-8-((4-甲基-2-(甲基胺基)戊基)氧基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-((2-胺基-4,4-二氟戊基)氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；8-((2-胺基-5,5,5-三氟戊基)氧基)-6-甲基-5-側氧基-5,6二氫苯并[c][2,7]萘啶-9-甲腈；6-甲基-8-(六氫吡啶-2-基甲氧基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-(2,4-二甲基-1-((6-甲基-5-側氧基-5,6二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯；(R)-(2,4-二甲基-1-((6-甲基-5-側氧基-5,6二氫苯并[c][2,7]萘啶-8-基)氧基)戊-2-基)胺基甲酸第三丁基酯；(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-4-(二氟甲基)-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-7-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-4,6,9-三甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-9-甲腈；(S)-4,6-二甲基-8-(4-甲基-2-(甲基胺基)戊氧基)-5-側氧基-5,6- 二氫苯并[c][2,7]萘啶-9-甲腈；(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-2,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-2,6二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-氯-2,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-(2-胺基-3-甲氧基丙氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-9-氟-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-9-(羥基甲基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-4,6-二甲基-9-(噁唑-5-基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；8-(2-胺基-5,5,5-三氟戊氧基)-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-9-甲腈；(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-4,6-二甲基-9-(三氟甲基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-4,6-二甲基-9-(三氟甲基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-4,6-二甲基-9-(甲基磺醯基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(R)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯 并[c][2,7]萘啶-9-甲腈；(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-氯-6-(2-甲氧基乙基)-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-6-(2-甲氧基乙基)-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-7-氟-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-7-氟-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-4,6-二甲基-9-(噻唑-5-基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-甲基8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-9-甲酸酯；(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-1-氟-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基-9-(吡啶-2-基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-((2-胺基-5,5,5-三氟-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-甲氧基-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-(二氟甲氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-(2-胺基-4,4,4-三氟丁氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(R)-8-(2-胺基-4,4,4-三氟丁氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶- 5(6H)-酮；8-(2-胺基-4,4,4-三氟丁氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-9-甲醯胺；(S)-4,6-二甲基-8-(4-甲基-2-(甲基胺基)戊氧基)苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-N,N,4,6-四甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-9-甲醯胺；8-(2-胺基-2,4-二甲基戊氧基)-1-氟-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-1-甲氧基-6-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-7-甲氧基-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-9-溴-7-氟-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-9-氟-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；8-(2-胺基-2,4-二甲基戊氧基)-9-氟-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-9-氯-7-氟-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；(S)-8-(2-胺基-4-甲基戊氧基)-9-(甲氧基甲基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；8-(2-胺基-2,4-二甲基戊氧基)-7-氟-4-甲基苯并[c][2,7]萘啶- 5(6H)-酮；及(S)-8-((2-胺基-5,5-二氟戊-4-烯-1-基)氧基)-4,6-二甲基-5-側氧基-5,6-二氫苯并[c][2,7]萘啶-9-甲腈；(S)-8-((2-胺基-4-甲基戊基)氧基)-9-氯-7-氟-4,6-二甲基苯并[c][2,7]萘啶-5(6H)-酮；或其醫藥上可接受之鹽。
  7. 一種組合物，其包含醫藥上可接受量之如請求項1之化合物或其醫藥上可接受之鹽，及醫藥上可接受之載劑。
  8. 一種抑制銜接子相關激酶1(AAK1)活性之活體外方法，其包括使AAK1與如請求項1之化合物或其醫藥上可接受之鹽接觸。
  9. 一種如請求項1之化合物或其醫藥上可接受之鹽之用途，其用於製造用以抑制銜接子相關激酶1(AAK1)活性之藥劑。
  10. 一種如請求項1之化合物或其醫藥上可接受之鹽之用途，其用於製造用以治療或管控由AAK1活性介導之疾病或病症之藥劑。
  11. 如請求項10之用途，其中該疾病或病症係選自阿茲海默氏病(Alzheimer’s disease)、躁鬱症、疼痛、帕金森氏病(Parkinson’s disease)及精神分裂症。
  12. 如請求項11之用途，其中該疼痛係神經病變性疼痛。
  13. 如請求項12之用途，其中該神經病變性疼痛係纖維肌痛或周圍神經病變。
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