CN104507941A - 芳基内酰胺激酶抑制剂 - Google Patents

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S·潘
R·拉亚马尼
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M·S·卡拉索鲁武
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J·L·迪塔
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Abstract

本发明内容概括地涉及可抑制AAK1(连接蛋白相关激酶1)的化合物，包含该化合物的组合物及抑制AAK1的方法。

Description

芳基内酰胺激酶抑制剂
相关申请的交叉引用
本申请要求2012年7月31日提交的美国临时申请61/677,856的权益。
技术领域
本发明大体涉及可抑制连接蛋白相关激酶1(adaptor associated kinase1)(AAK1)的化合物、包含上述化合物的组合物和抑制AAK1的方法。
背景技术
连接蛋白相关激酶1(AAK1)为丝氨酸/苏氨酸激酶的Ark1/Prk1家族的成员。AAK1mRNA以被称为短形式和长形式的两种剪切形式存在。长形式占主导且在脑和心脏中高度表达(Henderson和Conner,Mol.Biol.Cell.2007,18,2698-2706)。AAK1富集在突触体制备物(synaptosomal preparation)中且在培养的细胞中与细胞内吞结构共定位。AAK1调节网格蛋白(clatherin)包覆的细胞内吞作用，其为突触小泡循环利用和受体介导的细胞内吞中重要的过程。AAK1与AP2复合物结合，该复合物为使受体运载物(cargo)与网格蛋白包覆物连接的异源四聚体。网格蛋白与AAK1的结合刺激AAK1激酶活性(Conner等人,Traffic 2003,4,885-890；Jackson等人,J.Cell.Biol.2003,163,231-236)。AAK1磷酸化AP-2的mu-2亚基，其促进mu-2与运载物受体上含酪氨酸的分选模序(sorting motif)结合(Ricotta等人,J.Cell Bio.2002,156,791-795；Conner和Schmid,J.Cell Bio.2002,156,921-929)。Mu2磷酸化对于受体摄入不是必需的，但磷酸化提高了内化的效率(Motely等人,Mol.Biol.Cell.2006,17,5298-5308)。
AAK1已被鉴定为PC12细胞中神经调节蛋白-1/ErbB4信号传导的抑制剂。经由RNA干扰介导的基因沉默或用激酶抑制剂K252a(其抑制AAK1激酶活性)处理使AAK1表达丧失导致神经调节蛋白-1诱导的神经突过度增生(outgrowth)的增强。这些处理导致ErbB4表达增加和ErbB4在质膜中或在质膜附近积累增加(Kuai等人,Chemistry and Biology 2011,18,891-906)。NRG1和ErbB4为推定的(putative)精神分裂症敏感基因(susceptibilitygene)(Buonanno,Brain Res.Bull.2010,83,122-131)。两种基因中的SNP与多种精神分裂症内表型有关(Greenwood等人,Am.J.Psychiatry 2011,168,930-946)。神经调节蛋白1和ErbB4KO小鼠模型已显示精神分裂症相关的形态变化和行为表型(Jaaro-Peled等人,Schizophrenia Bulletin 2010,36,301-313；Wen等人,Proc.Natl.Acad.Sci.USA.2010,107,1211-1216)。此外，AAK1基因的内含子中单核苷酸多态性(polymorphism)与帕金森病的发作年龄有关(Latourelle等人,BMC Med.Genet.2009,10,98)。这些结构表明抑制AAK1活性在治疗精神分裂症(schizophrenia)、精神分裂症中的认知缺陷(cognitive deficit)、帕金森病(Parkinson’s disease)、神经病理性疼痛(neuropathicpain)、双相型精神障碍(bipolar disorder)和阿尔茨海默病(Alzheimer’sdisease)。
发明内容
在第一方面中，本发明提供了式(I)化合物或其药用盐：
其中：
R1选自氢、C2-C4烯基、C1-C3烷氧基、C1-C3烷氧基C1-C3烷基、C1-C3烷基、C1-C3烷基氨基、芳基C1-C3烷基、C3-C6环烷基、C3-C6环烷基C1-C3烷基、C1-C3卤代烷基和C1-C3羟基烷基；
R2选自氢、C1-C3烷氧基、C1-C3烷氧基羰基氨基、C1-C3烷基、C1-C3烷基氨基、C1-C3烷基羰基氨基、氨基、芳基氨基、芳基羰基氨基、C3-C6环烷基氨基、C3-C6环烷基羰基氨基、C3-C6环烷基氧基、卤素、C1-C3卤代烷氧基、C1-C3卤代烷基、C2-C3卤代烷基氨基、C2-C3卤代烷基羰基氨基、羟基和苯基C1-C3烷基氨基，其中所述苯基任选地取代有C1-C3烷氧基；
R3和R4独立地选自氢、C1-C4烷氧基、C1-C3烷氧基C1-C3烷基、C1-C3烷氧基羰基、C1-C4烷基、C1-C3烷基磺酰基、氨基羰基、氰基、C3-C6环烷基、二(C1-C3烷基)氨基羰基、卤素、C1-C3卤代烷氧基、C1-C3卤代烷基、杂芳基、羟基、C1-C3羟基烷基和任选地取代有卤素的苯基；
R5为C1-C3烷基-Y或C2-C8烷基，其中所述C2-C8烷基任选地取代有一个、两个、三个或四个独立地选自以下的基团：C1-C3烷氧基、C1-C3烷基氨基、C1-C3烷氧基C2-C3烷基氨基、氨基、芳基、二(C1-C3烷基)氨基、卤素、C1-C3卤代烷基氨基、C1-C3卤代烷基羰基氨基、羟基、-NRxRy和C3-C8环烷基，其中所述环烷基还任选地取代有一个、两个或三个独立地选自以下的基团：C1-C3烷氧基、C1-C3烷基、C1-C3烷基氨基、C1-C3烷氧基C2-C3烷基氨基、氨基、芳基、芳基C1-C3烷基、卤素、C1-C3卤代烷基、C1-C3卤代烷基氨基和羟基；
Rx和Ry与它们所连接的氮原子一起形成三至六元环；且
Y选自
其中n为0、1、2或3；
每个R6独立地选自氢、C1-C6烷基、芳基、芳基C1-C3烷基、C3-C6环烷基、卤素和C1-C3卤代烷基；
每个R7独立地选自氢、C1-C3烷氧基和羟基；且
R8选自氢、C1-C6烷基、C3-C6环烷基和C1-C6烷基羰基。
在第一方面的第一实施方案中，本发明提供了式(I)化合物，其中R5为C2-C8烷基，其中所述C2-C8烷基任选地取代有一个、两个、三个或四个独立地选自以下的基团：C1-C3烷氧基、氨基、C1-C3烷基氨基、二(C1-C3烷基)氨基、卤素和C3-C8环烷基；或R5为C1-C3烷基-Y，其中Y为或其中R6、R7和R8为氢。
在第一方面的第二实施方案中，本发明提供了式(I)化合物，其中R5为C2-C8烷基，其任选地取代有一个、两个、三个或四个独立地选自以下的基团：氨基和卤素。
在第一方面的第三实施方案中，本发明提供了式(I)化合物，其中R1选自氢、C2-C4烯基、C1-C3烷氧基C1-C3烷基、C1-C3烷基、芳基C1-C3烷基、C3-C6环烷基C1-C3烷基、C1-C3卤代烷基和C1-C3羟基烷基；
R2选自氢、C1-C3烷氧基、C1-C3烷基、C1-C3烷基羰基氨基、氨基、卤素、C1-C3卤代烷基和苯基C1-C3烷基氨基，其中所述苯基任选地取代有C1-C3烷氧基；
R3和R4独立地选自氢、C1-C4烷氧基、C1-C3烷氧基C1-C3烷基、C1-C3烷氧基羰基、C1-C4烷基、C1-C3烷基磺酰基、氨基羰基、氰基、C3-C6环烷基、二(C1-C3烷基)氨基羰基、卤素、C1-C3卤代烷氧基、C1-C3卤代烷基、杂芳基、羟基、C1-C3羟基烷基和任选地取代有卤素的苯基；
R5为C1-C3烷基-Y或C2-C8烷基，其中所述C2-C8烷基任选地取代有一个、两个、三个或四个独立地选自以下的基团：C1-C3烷氧基、C1-C3烷基氨基、氨基、二(C1-C3烷基)氨基、卤素和C3-C8环烷基；且其中Y选自
其中R6、R7和R8为氢。
在第二方面中，本发明提供了式(II)化合物或其药用盐
其中：
R1选自氢、C2-C4烯基、C1-C3烷氧基、C1-C3烷氧基C1-C3烷基、C1-C3烷基、C1-C3烷基氨基、芳基C1-C3烷基、C3-C6环烷基、C3-C6环烷基C1-C3烷基和C1-C3卤代烷基；
R2选自氢、C1-C3烷氧基、C1-C3烷氧基羰基氨基、C1-C3烷基、C1-C3烷基氨基、C1-C3烷基羰基氨基、氨基、芳基氨基、芳基羰基氨基、C3-C6环烷基氨基、C3-C6环烷基羰基氨基、C3-C6环烷基氧基、卤素、C1-C3卤代烷氧基、C1-C3卤代烷基、C2-C3卤代烷基氨基、C2-C3卤代烷基羰基氨基和羟基；
R3和R4独立地选自氢、C1-C4烷基、氰基、C3-C6环烷基、卤素、C1-C3卤代烷基和羟基；
R5为C1-C3烷基-Y或C2-C8烷基，其中所述C2-C8烷基任选地取代有一个、两个或三个独立地选自以下的基团：C1-C3烷氧基、C1-C3烷基氨基、C1-C3烷氧基C2-C3烷基氨基、氨基、芳基、卤素、C1-C3卤代烷基氨基、C1-C3卤代烷基羰基氨基、羟基、-NRxRy和C3-C8环烷基，其中所述环烷基还任选地取代有一个、两个或三个独立地选自以下的基团：C1-C3烷氧基、C1-C3烷基、C1-C3烷基氨基、C1-C3烷氧基C2-C3烷基氨基、氨基、芳基、芳基C1-C3烷基、卤素、C1-C3卤代烷基、C1-C3卤代烷基氨基和羟基；
Rx和Ry与它们所连接的氮原子一起形成三至六元环；且
Y选自
其中n为0、1、2或3；
每个R6独立地选自氢、C1-C6烷基、芳基、芳基C1-C3烷基、C3-C6环烷基、卤素和C1-C3卤代烷基；
每个R7独立地选自氢、C1-C3烷氧基和羟基；且
R8选自氢、C1-C6烷基、C3-C6环烷基和C1-C6烷基羰基。
在第二方面的第一实施方案中，本发明提供了式(I)化合物或其药用盐，其中R5为C2-C8烷基，其任选地取代有一个、两个或三个独立地选自以下的基团：C1-C3烷氧基、C1-C3烷基氨基、C1-C3烷氧基C2-C3烷基氨基、氨基、芳基、卤素、C1-C3卤代烷基氨基、C1-C3卤代烷基羰基氨基、羟基、-NRxRy和C3-C8环烷基，其中所述环烷基还任选地取代有一个、两个或三个独立地选自以下的基团：C1-C3烷氧基、C1-C3烷基、C1-C3烷基氨基、C1-C3烷氧基C2-C3烷基氨基、氨基、芳基、芳基C1-C3烷基、卤素、C1-C3卤代烷基、C1-C3卤代烷基氨基和羟基。在第二方面的第二实施方案中，R5为C2-C8烷基，其任选取代有一个、两个或三个独立地选自以下的基团：氨基和卤素。
在第二方面的第三实施方案中，本发明提供了式(I)化合物或其药用盐，其中R1选自氢、C2-C4烯基、C1-C3烷氧基C1-C3烷基、C1-C3烷基、芳基C1-C3烷基和C3-C6环烷基C1-C3烷基；
R2选自氢、C1-C3烷基、C1-C3烷基羰基氨基和氨基；
R3和R4独立地选自氢、C1-C4烷基、氰基、C3-C6环烷基、卤素和羟基；且
R5为C2-C8烷基，其任选地取代有一个、两个或三个独立地选自以下的基团：氨基和卤素。
在第三方面中，本发明提供了包含药用量的式(I)化合物或其药用盐和药用载体的组合物。
在第四方面中，本发明提供了抑制连接蛋白相关激酶1(AAK1)活性的方法，其包括使AAK1与式(I)化合物或其药用盐接触。
在第五方面中，本发明提供了治疗或处置由AAK1活性介导的疾病或病症的方法，所述方法包括对有此需要的患者给药治疗有效量的式(I)化合物或其药用盐。在第五方面的第一实施方案中，所述疾病或病症选自阿尔茨海默病、双相型精神障碍、疼痛、帕金森病和精神分裂症。在第五方面的第二实施方案中，所述疼痛为神经病理性疼痛。在第五方面的第三实施方案中，所述神经病理性疼痛为纤维肌痛或外周神经病变。
本发明的其它方面可包括本申请中所披露的实施方案的合适组合。
其它方面和实施方案可见于本申请所提供的描述中。
附图说明
图1说明了本发明的多个方面，其显示了由使用AAK1纯合子(-/-)基因敲除小鼠及其野生型(+/+)同窝出生仔畜的福尔马林疼痛模型获得的结果。与其野生型(+/+)同窝出生仔畜相比，AAK1纯合子(-/-)基因敲除小鼠显示出急性疼痛和强直性疼痛应答的明显减少。
具体实施方式
本发明部分基于AAK1基因敲除小鼠对疼痛展现出高抗性的发现。该发现促成最终发现AAK1抑制剂、包含它们的组合物及其使用方法的研究。
在本申请中，本发明的描述应当理解为符合化学成键的规则和原理。在一些情况下，可能需要移除氢原子以在任何给定位置上容纳取代基。
应当理解的是，本发明所涵盖的化合物为适当地稳定而用作药剂的化合物。
规定在分子中特定位置处的任何取代基或变量的定义与其在该分子中的其它位置处的定义无关。例如，当n为2时，两个R6基团各自可相同或不同。
本说明书中所用的下列术语具有所表明的含义：
将本说明书中所引用的所有专利、专利申请和参考文献均全部引入本申请作为参考。在不一致的情况下，以本发明(包括定义)为准。
除非上下文另有明确规定，本申请所用单数形式包括复数指代。
在一些情况下，在叙述基团之前示出任何特定基团中的碳原子数。例如，术语“C1-6烷基”表示含一个至六个碳原子的烷基。若存在这些指定，则其代替本申请中所含所有其它定义。
本申请所用的“烯基”是指含至少一个碳-碳双键的直链或支链基团。
本申请所用的“烷氧基”是指经由氧原子与母体分子部分连接的烷基。
本申请所用的“烷氧基烷基”是指取代有一个、两个或三个烷氧基的烷基。
本申请所用的“烷氧基烷基氨基”是指其中R为烷氧基烷基的-NHR。
本申请所用的“烷氧基羰基”是指经由羰基与母体分子部分连接的烷氧基。
本申请所用的“烷氧基羰基氨基”是指其中R为烷氧基羰基的-NHR。
本申请所用的“烷基”是指衍生自直链或支链饱和烃的基团。
本申请所用的“烷基氨基”是指其中R为烷基的-NHR。
本申请所用的“烷基羰基”是指经由羰基与母体分子部分连接的烷基。
本申请所用的“烷基羰基氨基”是指其中R为烷基羰基的-NHR。
本申请所用的“烷基磺酰基”是指经由磺酰基与母体分子部分连接的烷基。
本申请所用的“氨基”是指-NH2。
本申请所用的“氨基羰基”是指-C(O)NH2。
本申请所用的“芳基”是指苯基或其中一个或两个环为苯基的双环稠合环系统。双环稠合环系统由与四元至六元芳族或非芳族碳环稠合的苯基构成。本发明的芳基可经由基团中任何可取代的碳原子与母体分子部分连接。芳基的代表性实例包括但不限于茚满基、茚基、萘基、苯基和四氢萘基。
本申请所用的“芳基烷基”是指取代有一个、两个或三个芳基的烷基。
本申请所用的“芳基氨基”是指其中R为芳基的-NHR。
本申请所用的“芳基羰基”是指经由羰基与母体分子部分连接的芳基。
本申请所用的“芳基羰基氨基”是指其中R为芳基羰基的-NHR。
本申请所用的“羰基”是指-C(O)-。
本申请所用的“氰基”是指-CN。
本申请所用的“环烷基”是指具有0个杂原子的饱和单环烃环系统。环烷基的代表性实例包括但不限于环丙基、环戊基和环己基。
本申请所用的“(环烷基)烷基”是指取代有一个、两个或三个环烷基的烷基。
本申请所用的“环烷基氨基”是指其中R为环烷基的-NHR。
本申请所用的“环烷基羰基”是指经由羰基与母体分子部分连接的环烷基。
本申请所用的“环烷基羰基氨基”是指其中R为环烷基羰基的-NHR。
本申请所用的“环烷基氧基”是指经由氧原子与母体分子部分连接的环烷基。
本申请所用的“二烷基氨基”是指其中R为烷基的-NR2。两个R基团可相同或不同。
本申请所用的“二烷基氨基羰基”是指其中R为烷基的-C(O)NR2。两个R基团可相同或不同。
本申请所用的“卤素”是指Br、Cl、F和/或I。
本申请所用的“卤代烷氧基”是指经由氧原子与母体分子部分连接的卤代烷基。
本申请所用的“卤代烷基”是指被一个、两个、三个或四个卤素原子所取代的烷基。
本申请所用的“卤代烷基氨基”是指其中R为卤代烷基的-NHR。
本申请所用的“卤代烷基羰基”是指经由羰基与母体分子部分连接的卤代烷基。
本申请所用的“卤代烷基羰基氨基”是指其中R为卤代烷基羰基的-NHR。
本申请所用的“杂芳基”是指含一个或两个独立地选自氮、氧和硫的杂原子的五元或六元芳族环。
本申请所用的“羟基”是指-OH。
本申请所用的“羟基烷基”是指取代有一个、两个或三个羟基的烷基。
本申请所用的“苯基烷基氨基”是指其中R为苯基烷基的-NHR。
本申请所用的“磺酰基”是指-SO2-。
本发明化合物中可存在不对称中心。应当理解的是，本发明涵盖所有立体化学异构形式或它们的混合物，其具有抑制AAK1的能力。化合物的个别立体异构体可由含手性中心的市售原料以合成方式制备，或通过制备对映异构产物的混合物然后分离(例如转化为非对映异构体的混合物然后分离或重结晶、使用色谱技术或在手性色谱柱上直接分离对映异构体)来制备。特定立体化学的起始化合物为市售的或可通过本领域已知的的技术来制备并拆分。
本发明的某些化合物还可以可分离的不同稳定构型形式存在。归因于不对称单键的限制性旋转的扭转不对称性(例如由于位阻或环张力)可允许分离不同构象异构体。本发明包括这些化合物的每种构型异构体或它们的混合物。
术语“本发明化合物”和等效表述意欲涵盖式(I)化合物及其药用对映异构体、非对映异构体和盐。类似地，若上下文允许，则提及中间体意欲涵盖它们的盐。
本发明意欲包括本发明化合物中存在的原子的所用同位素。同位素包括具有相同原子序数但具有不同质量数的那些原子。通过一般举例的方式且不加以限制，氢的同位素包括氘和氚。碳的同位素包括13C和14C。同位素标记的本发明化合物一般可通过本领域技术人员已知的常规技术或通过与本申请所述类似的方法，使用适合的同位素标记的试剂替代另外使用的未标记的试剂来制备。上述化合物可具有多种潜在的用途，例如在测定生物学活性中作为标准物和试剂。在稳定同位素的情况下，上述化合物可具有有利地修改生物学、药理学或药物动力学性质的潜能。
本发明化合物可以药用盐形式存在。本申请所用的“药用盐”表示可溶解或分散于水或油中的本发明化合物的盐或两性离子形式，其在合理的医学判断范围内适于与患者的组织接触而无过度毒性、刺激、过敏反应或其它问题或并发症，与合理的益处/风险比相符且对于其所期望的用途是有效的。所述盐可在最终分离和纯化化合物期间或分别通过使合适的氮原子与合适的酸反应来制备。代表性酸加成盐包括乙酸盐、己二酸盐、藻酸盐、枸橼酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐；二葡糖酸盐、二氢溴酸盐、二盐酸盐、二氢碘酸盐、甘油磷酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、甲酸盐、富马酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、2-羟基乙磺酸盐、乳酸盐、马来酸盐、均三甲苯磺酸盐、甲磺酸盐、萘磺酸盐、烟酸盐、2-萘磺酸盐、草酸盐、双羟萘酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、苦味酸盐、特戊酸盐、丙酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、三氯乙酸盐、三氟乙酸盐、磷酸盐、谷氨酸盐、碳酸氢盐、对甲苯磺酸盐和十一烷酸盐。可用于形成药用加成盐的酸的实例包括无机酸例如盐酸、氢溴酸、硫酸和磷酸及有机酸例如草酸、马来酸、琥珀酸和枸橼酸。
碱加成盐可在最终分离和纯化化合物期间通过使羧基与合适的碱或与氨或有机伯胺、仲胺或叔胺反应来制备，所述碱为例如金属阳离子的氢氧化物、碳酸盐或碳酸氢盐。药用盐的阳离子包括锂、钠、钾、钙、镁和铝阳离子及无毒的季铵阳离子例如铵、四甲基铵、四乙基铵、甲胺、二甲胺、三甲胺、三乙胺、二乙胺、乙胺、三丁胺、吡啶、N,N-二甲基苯胺、N-甲基哌啶、N-甲基吗啉、二环己胺、普鲁卡因、二苄胺、N,N-二苄基苯乙胺和N,N’-二苄基乙二胺。适用于形成碱加成盐的其它代表性有机胺包括乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌啶和哌嗪。
本发明的一个实施方案涵盖体外和体内抑制连接蛋白相关激酶1(AAK1)的方法，其包括使AAK1与式I化合物或其药用盐接触。
当治疗有效量的式(I)化合物及它们的药用盐可以化学原料形式给药用于治疗时，可以药物组合物形式提供活性成分。因此，本发明还提供了药物组合物，其包含治疗有效量的式(I)化合物或其药用盐和一种或多种药用载体、稀释剂或赋形剂。
除非另有说明，否则化合物的“治疗有效量”为在治疗或处置疾病或病状中足以提供治疗益处或延缓或最小化一种或多种与所述疾病或病状有关的症状的量。术语“治疗有效量”可涵盖改善总体治疗、减少或避免疾病或病状的症状或原因或增强另一种治疗剂的治疗功效的量。
本申请所用的“治疗有效量”是指在治疗或处置疾病或病状中足以提供治疗益处或延缓或最小化一种或多种与所述疾病或病状有关的症状的一种或多种化合物的量。化合物的“治疗有效量”意指单独或与其它疗法组合在治疗或处置所述疾病或病状中提供治疗益处的治疗剂的量。术语“治疗有效量”可涵盖改善总体治疗、减少或避免疾病或病状的症状或原因或增强另一种治疗剂的治疗功效的量。当应用于单独给药的个别活性成分时，所述术语仅指该成分。当应用于组合时，无论是组合、连续或同时给药，所述术语是指产生治疗效果的活性成分的组合量。式(I)化合物及其药用盐如上所述。在与制剂的其它成分相容且对其接受者无害的意义上讲，载体、稀释剂或赋形剂必须是可接受的。根据本发明的另一个方面，还提供了药物制剂的制备方法，其包括将式(I)化合物或其药用盐与一种或多种药用载体、稀释剂或赋形剂混合。本申请所用的“药用”是指所述化合物、物质、组合物和/或剂型在合理的医学判断范围内适于与患者的组织接触而无过度毒性、刺激、过敏反应或其它问题或并发症，与合理的益处/风险比相符且对于其所期望的用途是有效的。
药物制剂可以每单位剂量含预设量活性成分的单位剂型来提供。剂量水平为约0.01至约250毫克/千克("mg/kg")体重/天，优选为约0.05至约100mg/kg体重/天的本发明化合物是预防和治疗疾病的单一疗法中的典型剂量。通常，本发明的药物组合物将每天给药约1至约5次，或以连续输注方式给药。上述给药可用作长期或短期疗法。可与载体物质组合以产生单一剂型的活性成分的量将取决于所治疗的病状、病状的严重度、给药事件、给药途径、所用化合物的排泄率、治疗持续时间及患者的年龄、性别、体重和健康状况。优选的单位剂量制剂为含上述日剂量或亚剂量或它们的适当部分活性成分的制剂。可用基本上小于化合物最佳剂量的小剂量开始治疗。此后，以小增量增加剂量直至达到该情况下的最佳效果。通常，化合物最适宜以一般提供有效结果而不引起任何不利或有害副作用的浓度水平来给药。
当本发明组合物包含本发明化合物与一种或多种其它治疗性或预防性药剂的组合时，在单一疗法方案中，所述化合物与所述其它药剂通常都以通常所给药剂量的约10％至150％且优选约10％至80％的剂量水平来提供。
本发明化合物可与一种或多种其它治疗性或预防性药剂组合给药。例如，当用于治疗疼痛时，可能的其它药剂包括免疫抑制剂、抗炎剂和/或用于治疗疼痛的其它药剂。
适用于本发明的方法和组合物的免疫抑制剂包括本领域中已知的免疫抑制剂。实例包括氨基蝶呤(aminopterin)、硫唑嘌呤(azathioprine)、环孢素(cyclosporin A)、D-青霉胺(D-penicillamine)、金盐(gold salts)、羟氯喹(hydroxychloroquine)、来氟米特(leflunomide)、甲氨蝶呤(methotrexate)、米诺环素(minocycline)、雷帕霉素(rapamycin)、柳氮磺吡啶(sulfasalazine)、他克莫司(tacrolimus)(FK506)和它们的药用盐。具体的免疫抑制剂为甲氨蝶呤。
免疫抑制剂的其它实例包括抗-TNF抗体，例如阿达木单抗(adalimumab)、赛妥珠单抗(certolizumab pegol)、依那西普(etanercept)和英利昔单抗(infliximab)。其它免疫抑制剂包括白介素-1阻断剂，例如阿那白滞素(anakinra)。其它免疫制剂包括抗-B细胞(CD20)抗体，例如利妥昔单抗(rituximab)。其它免疫抑制剂包括T细胞活化阻断剂，例如阿巴西普(abatacept)。
其它免疫抑制剂包括肌苷单磷酸脱氢酶抑制剂，例如吗替麦考酚酯(mycophenolate mofetil)和霉酚酸(mycophenolic acid)
适用于本发明的方法和组合物的抗炎性药物包括本领域中已知的抗炎性药物。实例包括糖皮质激素(glucocorticoid)和NSAID。糖皮质激素的实例包括醛固酮(aldosterone)、倍氯米松(beclometasone)、倍他米松(betamethasone)、皮质酮(cortisone)、脱氧皮质酮(deoxycorticosterone)、地塞米松(dexamethasone)、氟氢可的松(fludrocortisones)、氢化可的松(hydrocortisone)、甲基泼尼松龙(methylprednisolone)、泼尼松龙(prednisolone)、泼尼松(prednisone)、曲安西龙(triamcinolone)和它们的药用盐。
NSAID的实例包括水杨酸盐类(例如阿司匹林(aspirin)、阿莫西林(amoxiprin)、贝诺酯(benorilate)、水杨酸胆碱镁(choline magnesium salicylate)、二氟尼柳(diflunisal)、法斯拉胺(faislamine)、水杨酸甲酯(methyl salicylate)、水杨酸镁(magnesium salicylate)、双水杨酸酯(salicyl salicylate)和它们的药用盐)、芳基烷酸类(例如双氯芬酸(diclofenac)、醋氯芬酸(aceclofenac)、阿西美辛(acemetacin)、溴芬酸(bromfenac)、依托度酸(etodolac)、吲哚美辛(indometacin)、萘丁美酮(nabumetone)、舒林酸(sulindac)、托美丁(tolmetin)和它们的药用盐)、芳基丙酸类(例如布洛芬(ibuprofen)、卡洛芬(carprofen)、芬布芬(fenbufen)、非诺洛芬(fenoprofen)、氟比洛芬(flurbiprofen)、酮洛芬(ketoprofen)、酮洛酸(ketorolac)、洛索洛芬(loxoprofen)、萘普生(naproxen)、奥沙普嗪(oxaprozin)、噻洛芬酸(tiaprofenic acid)、舒洛芬(suprofen)和它们的药用盐)、芳基邻氨基苯甲酸类(例如甲氯芬那酸(meclofenamic acid)、甲芬那酸(mefenamic acid)和它们的药用盐)、吡唑烷衍生物类(例如阿扎丙宗(azapropazone)、安乃近(metamizole)、羟布宗(oxyphenbutazone)、苯基丁氮酮(phenylbutazone)、磺吡酮(sulfinprazone)和它们的药用盐)、昔康类(oxicam)(例如氯诺昔康(lornoxicam)、美洛昔康(meloxicam)、吡罗昔康(piroxicam)、替诺昔康(tenoxicam)和它们的药用盐)、COX-2抑制剂类(例如塞来昔布(celecoxib)、依托考昔(etoricoxib)、鲁米考昔(lumiracoxib)、帕瑞考昔(parecoxib)、罗非昔布(rofecoxib)、伐地考昔(valdecoxib)和它们的药用盐)和磺苯胺类(sulphonanilides)(例如尼美舒利(nimesulide)及其药用盐)。
用于治疗疼痛(包括但不限于神经病理性疼痛和炎性疼痛)的其它药剂包括但不限于以下药剂，例如普瑞巴林(pregabalin)、利多卡因(lidocaine)、度洛西汀(duloxetine)、加巴喷丁(gabapentin)、卡马西平(carbamazepine)、辣椒碱(capsaicin)和其它5-羟色胺(serotonin)/去甲肾上腺素(norepinephrine)/多巴胺(dopamine)重吸收抑制剂和阿片剂(opiate)(例如奥施康定(oxycontin)、吗啡(morphine)和可待因(codeine))。
在治疗由已知疾病或病状(例如糖尿病、感染(例如带状疱疹或HIV感染)或癌症)引起的疼痛中，本发明化合物可与一种或多种针对潜在疾病或病况的其它治疗性或预防性药剂组合。例如，用于治疗糖尿病性神经病变(diabeticneuropathy)时，本发明化合物可与一种或多种抗糖尿病剂、抗高血糖剂、降血脂剂/降脂剂、减肥药、抗高血压剂和食欲抑制剂组合给药。抗糖尿病剂的实例包括双胍类(例如二甲双胍(metformin)、苯乙双胍(phenformin))、葡萄糖苷酶抑制类(例如阿卡波糖(acarbose)、米格列醇(miglitol))、胰岛素类(包括胰岛素促泌素类似物和胰岛素增敏剂)、氯茴苯酸类(meglitinides)(例如瑞格列奈(repaglinide))、磺酰脲类(例如格列美脲(glimepiride)、格列本脲(glyburide)、格列齐特(gliclazide)、氯磺丙脲(chlorpropamide)和格列吡嗪(glipizide))、双胍/格列本脲组合(例如格鲁瓦斯(Glucovance))、噻唑烷二酮类(例如曲格列酮(troglitazone)、罗格列酮(rosiglitazone)和吡格列酮(pioglitazone))、PPAR-α激动剂、PPAR-γ激动剂、PPARα/γ双重激动剂、糖原磷酸化酶抑制剂、脂肪酸结合蛋白(aP2)抑制剂、高血糖素样肽-1(GLP-1)或GLP-1受体的其它激动剂、二肽基肽酶IV(DPP4)抑制剂和钠-葡萄糖协同转运蛋白(co-transporter)2(SGLT2)抑制剂(例如(达格列净(dapagliflozin)、卡格列净(canagliflozin)和LX-4211)。
药物制剂可适于通过任何适当途径给药，例如通过口服(包括含服或舌下)、经直肠、经鼻、局部(包括含服、舌下或经皮)、经阴道或肠胃外(包括皮下、皮内、肌内、关节内、滑膜内、胸骨内、鞘内、病灶内、静脉内或皮内注射或输注)途径给药。上述制剂可通过药学领域已知的任何方法(例如使活性成分与一种或多种载体或赋形剂组合)来制备。优选口服给药或通过注射给药。
适于口服给药的药物制剂可呈离散单元形式，例如胶囊剂或片剂；粉末剂或颗粒剂；水性或非水性液体中的溶液剂或混悬剂；可食用泡沫或泡沫剂；或水包油型液体乳剂或油包水型乳剂。
例如，为了以片剂或胶囊剂形式口服给药，所述活性药物组分可与口服、无毒的药用惰性载体(例如乙醇、甘油、水等)组合。粉末是通过将化合物粉碎至合适细度并与类似地粉碎的药物载体(例如可食用碳水化合物，例如淀粉或甘露醇)混合来制备。还可包含调味剂、防腐剂、分散剂和着色剂。
胶囊剂通过如上所述制备粉末混合物并填充成型的明胶外壳来制备。在填充操作之前，可将助流剂和润滑剂例如胶体二氧化硅、滑石、硬脂酸镁、硬脂酸钙或固体聚乙二醇添加至粉末混合物中。还可添加崩解剂或增溶剂例如琼脂-琼脂、碳酸钙或碳酸钠以改善摄取胶囊剂时药物的利用度。
此外，需要时或必要时，还可将合适的粘合剂、润滑剂、崩解剂和着色剂掺入混合物中。合适的粘合剂包括淀粉、明胶、天然糖(例如葡萄糖或β-乳糖)、玉米增甜剂、天然胶和合成胶(例如阿拉伯胶、黄蓍胶或藻酸钠)、羧甲基纤维素、聚乙二醇等。用于这些剂型中的润滑剂包括油酸钠、氯化钠等。崩解剂包括但不限于淀粉、甲基纤维素、琼脂、膨润土、黄原胶等。通过以下方法配制片剂：例如制备粉末混合物、成粒或击压、加入润滑剂和崩解剂并压制成片剂。通过以下方法制备粉末混合物：将适当粉碎的混合物与上述稀释剂或碱混合并任选地与粘合剂(例如羧甲基纤维素、藻酸盐、明胶或聚乙烯基吡咯烷酮)、溶解延缓剂(例如石蜡)、再吸收加速剂(例如季铵盐)和/或吸收剂(例如膨润土、高岭土或磷酸二钙)。通过以下方法使粉末混合物成粒：用粘合剂(例如糖浆、淀粉糊、阿卡迪亚胶浆或纤维素或聚合物质的溶液)润湿并迫使其穿过筛网。作为成粒的替代方法，可使粉末穿过压片机且结果是裂解为颗粒的不完全成形的击压物。可借助于添加硬脂酸、硬脂酸盐、滑石或矿物油来润滑颗粒的以防止粘附与片剂成型模具。然后将经润滑的混合物压制成片剂。还可将本发明混合物与自由流动的惰性载体组合且不经成粒或击压步骤直接压制成片剂。可提供由虫胶的密封涂层、糖或聚合物质的涂层和蜡的抛光涂层组成的透明或不透明保护涂层。可向所述涂层中加入染料以区分不同的单位剂量。
可以单位剂型制备口服液(例如溶液剂、糖浆剂和酏剂)，从而使得给定量含有预定量的化合物。糖浆剂可通过将化合物溶于适当矫味的水溶液中来制备，而酏剂则通过使用无毒媒介物来制备。还可加入增溶剂和乳化剂(例如乙氧基化异硬脂醇和聚氧乙烯山梨醇醚)、防腐剂、矫味添加剂(例如薄荷油或天然增甜剂或糖精或其它人工增甜剂)等。
适当时，可将用于口服给药的剂量单位制剂微囊化。所述制剂还可例如通过将微粒物质涂布或包埋在聚合物、蜡等中来制备，以延长或持续释放。
式(I)化合物及其药用盐还可以脂质体递送系统例如小单室脂质体、大单室脂质体和多室脂质体的形式给药。脂质体可由多种磷脂例如胆固醇、硬脂胺或磷脂酰胆碱形成。
式(I)化合物及其药用盐还可通过使用单克隆抗体作为与化合物分子偶联的个别载体来递送。所述化合物还可与作为可靶向药物载体的可溶性聚合物偶联。上述聚合物可包括聚乙烯基吡咯烷酮、吡喃共聚物、聚羟基丙基甲基丙烯酰胺酚、聚羟基乙基天冬酰胺酚或取代有棕榈酰基残基的聚氧化乙烯聚赖氨酸。此外，所述化合物可与一类适用于实现药物控制释放的可生物降解聚合物偶联，所述聚合物例如聚乳酸、聚ε己内酯、聚羟基丁酸、聚原酸酯、聚缩醛、聚二氢吡喃、聚氰基丙烯酸酯和水凝胶的交联或两亲性嵌段共聚物。
适于经皮给药的药物制剂可作为意欲与接受者的表皮保持紧密接触较长时间的离散贴剂来提供。例如，活性成分可通过如Pharmaceutical Research1986,3(6),318中大体描述的离子电渗疗法由贴剂递送。
适于局部给药的药物制剂可配制为软膏剂、乳膏剂、混悬剂、洗剂、粉末剂、溶液剂、糊剂、凝胶剂、喷雾剂、气雾剂或油剂。
适于经直肠给药的药物制剂可作为栓剂或灌肠剂来提供。
适于经鼻给药的药物制剂(其中载体为固体)包括粒径为20至500微米的粗粉末，其以采用从鼻吸入的方式给药，即由贴近鼻的容纳粉末的容器经由鼻道快速吸入来给药。用于以经鼻喷雾剂或滴鼻剂给药的合适制剂(其中载体为液体)包括活性成分的水溶液或油溶液。
适于通过吸入给药的药物制剂包括细粒粉剂或雾状物，其可借助于各种类型的计量剂量的加压气雾剂、雾化器或吹入器而产生。
适于经阴道给药的药物制剂可作为子宫托、棉塞、乳膏剂、凝胶剂、糊剂、泡沫或喷雾剂来提供。
适于肠胃外给药的药物制剂包括可含抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂和使得制剂与预定接受者的血液等张的溶质的水性或非水性无菌注射溶液；和可包括助悬剂和增稠剂的水性和非水性混悬液。制剂可以单位剂量或多剂量容器(例如密封的安瓿和小瓶)形式来提供且可储存在冷冻干燥(冻干)条件下，仅需要在临使用前加入无菌液体载体例如注射用水。临时注射溶液和混悬液可由无菌粉末剂、颗粒剂和片剂制备。
应当理解的是，除了上述具体提及的成分之外，考虑到所述制剂的类型，所述制剂还可包括本领域中常见的其它药剂，例如适用于口服给药的制剂可包括矫味剂。
术语“患者”包括人类和其它哺乳动物。
除非另有说明，术语“处置”、“处理”和“控制”涵盖预防已患有疾病或病症的患者中所述具体疾病或病症的复发和/或延长已患有疾病或病症的患者保持缓解的时间。所述术语涵盖调节疾病或病症的阈值、发展和/或持续时间，或改变患者对疾病或病症作出响应的方式。
术语“治疗”是指：(i)在可易患某种疾病、病症和/或病状但尚未被诊断为患有所述疾病、病症和/或病状的患者中防止所述疾病、病症和/或病况的出现；(ii)抑制疾病、病症和/或病状，即使其发展停滞；和(iii)缓解疾病、病症和/或病状，即使所述疾病、病症和/或病状消退。
本发明意欲涵盖通过合成方法或通过代谢过程(包括在人类或动物体内(体内)进行的代谢过程或体外进行的代谢过程)制备时具有式(I)的化合物。
本申请中所用的缩写，具体地包括以下说明性方案和实施例中的缩写，是本领域技术人员公知的。一些缩写使用如下：RT或rt或r.t.为室温或保留时间(上下文决定)；tR为保留时间；h或hr或hrs为小时；min或mins为分钟；MeOH为甲醇；EtOH为乙醇；EtOAc或EtOAC为乙酸乙酯；OAc为乙酸酯/盐；DCM为二氯甲烷；DMA为N,N-二甲基乙酰胺；DMF为N,N-二甲基甲酰胺；NMP为N-甲基吡咯烷酮；MeCN或ACN为乙腈；AcCl为乙酰氯；THF为四氢呋喃；DMSO为二甲基亚砜；MeOD为CD3OD；m-CPBA为间氯过氧苯甲酸；DCM为二氯甲烷；Me为甲基；Et为乙基；Ac为乙酰基；Ph为苯基；BOC或Boc为叔丁氧基羰基；EDC为1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺；DBU为1,8-二氮杂双环十一碳-7-烯；HOBT或HOBt为羟基苯并三唑；NCS为N-氯代琥珀酰亚胺；TEA或Et3N为三乙胺；DIPEA、DIEA或i-Pr2Net为二异丙基乙基胺；DEA为二乙胺；DAST为二乙基氨基三氟化硫；NBS为N-溴代琥珀酰亚胺；TOSMIC为对甲基苯磺酰甲基异腈；DIBAL为二异丁基氢化铝；LDA为二异丙基氨基锂；TFA为三氟乙酸；dppf或DPPF为1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁；dba为二亚苄基二丙酮；n-BuLi为正丁基锂；LHMDS或LiHMDS为六甲基二甲硅烷基氨基锂；TMS为三甲基甲硅烷基；且PMB-Cl为对甲氧基苄基氯。
实施例
现将结合某些实施方案描述本发明，所述实施方案并非意欲限制本发明的范围。相反，本发明涵盖可包括在权利要求范围之内的所有替代方案、修改和等效形式。因此，包括具体实施方案的下列实施例将说明本发明的一种实践，应当理解的是，所述实施例是用于说明某些实施方案并以提供相信为其程序和概念性方面最有用且容易理解的描述来呈现。
本发明化合物可使用该部分中所述的反应和技术及本领域普通技术人员已知的其它合成方法来制备。所述反应在适合于所用试剂和材料且适于进行转化的溶剂中进行。此外，在下述合成方法的描述中，应当理解的是，选择提出的所有反应条件(包括所选溶剂、反应温度、实验持续时间和后处理程序)作为该反应的标准条件，这应当易于为本领域技术人员所认可。本领域技术人员应当理解的是，分子个部分上存在的官能基必须与提出的试剂和反应相容。对于反应条件相容的取代基的上述限制对本领域技术人员而言将是显而易见的且因此必须使用替代方法。
方案1：
通过概述于方案1中的方法制备式9化合物。可使用标准条件(例如用草酰氯和甲醇)处理将4-氯烟酸进行酯化。如Zhang,Lei等人所述(Journal ofMedicinal Chemistry,2011,54,1724-1739)，在使用碱(例如碳酸铯)和催化剂(例如Pd(PPh3)4)的标准Suzuki条件下，可使由此得到的酯2与适合的偶联配偶体(例如氟硼酸3)进行Suzuki交叉偶联反应。然后遵循如Gowrisankar等人所述的程序(J.Am.Chem.Soc.2010,132,11592-11598)，使联芳酯4进行钯催化的醚合成(其包括本领域技术人员熟悉的反应条件)。可使用适当保护的外消旋的或光学纯的氨基醇进行反应，得到外消旋或光学纯的醚。如Protective Groups in Organic Synthesis(Greene,Wuts；3rd ed.,1999,John Wiley&Sons,Inc.)中所述，在溶剂(例如水)中使用碱(例如氢氧化锂)的标准皂化条件下，将式5所表示的联芳酯进行水解，得到相应的羧酸6。使用标准偶联条件(例如EDC、HOBt)和氯化铵，可将酸6转化为酰胺7。在惰性气氛下，在溶剂(例如THF)中，用氢化物源(例如氢化钠)处理酰胺7，得到受限的内酰胺8。使用例如Protective Groups in Organic Synthesis(Greene,Wuts；3rd ed.,1999,John Wiley&Sons,Inc.)中所述的适合条件，可使8所表示的受限的内酰胺醚进行侧链氨基的脱保护，得到式9所表示的化合物。
方案2：
通过概述于方案2中的方法制备式13和14所表示的化合物。如Protective Groups in Organic Synthesis(Greene,Wuts；3rd ed.,1999,John Wiley&Sons,Inc.)中所述，在溶剂(例如水)中使用碱(例如氢氧化锂或氢氧化钠)的标准皂化条件下，可将如方案1中所述制备的联芳酯4进行水解，得到相应的羧酸，用标准偶联条件(例如EDC、HOBt和氯化铵或取代的胺)处理，可将其转化为酰胺10。通过在惰性气氛下，在溶剂(例如THF)中，用氢化物源(例如氢化钠)处理可进行酰胺10的环化，得到受限的内酰胺氯代核11。遵循如Gowrisankar等人所述的程序(J.Am.Chem.Soc.2010,132,11592-11598)，使用本领域技术人员熟悉的反应条件，使氯代核11进行钯催化的醚合成，得到式12所表示的化合物。可使用适当保护的外消旋或光学纯的(S)或(R)-氨基醇进行反应，得到外消旋或光学纯的醚12。使用如Protective Groups in Organic Synthesis(Greene,Wuts；3rd ed.,1999,John Wiley&Sons,Inc.)中所述的适合条件，可使醚类似物进行侧链氨基的脱保护，得到式13化合物。在R2作为保护基的情况下，使用例如Protective Groups inOrganic Synthesis(Greene,Wuts；3rd ed.,1999,John Wiley&Sons,Inc.)中所述的适合条件可除去该基团。
方案3：
通过概述于方案3中的方法制备式17和19所表示的化合物。在暗处在极性非质子溶剂(例如乙腈)中使用N-卤代琥珀酰亚胺，可使如方案2中所示合成的受限的内酰胺醚15进行卤化，得到单卤素取代的(X＝卤素,R3＝H)或二卤素取代的(R3＝X＝卤素)醚16。使用如Protective Groups in OrganicSynthesis(Greene,Wuts；3rd ed.,1999,John Wiley&Sons,Inc.)中所述的适合条件，可使醚16的侧链脱保护，得到式17化合物。可替换地，可使化合物16进行钯偶联，例如如Zhang,Lei等人所述(Journal of Medicinal Chemistry,2011,54,1724-1739)，在使用碱(例如碳酸铯)和催化剂(例如Pd(PPh3)4)的标准Suzuki条件下，与适合的偶联配偶体(例如三甲基环三硼氧烷或环丙基硼酸)进行Suzuki交叉偶联反应，或如Miroslav等人所述(Collection ofCzechoslovak Chemical Communications,1983,48,1765-1773)，进行铜催化的氰化反应，以引入式18所表示的化合物的R4。使用例如Punniyamurthy等人(Synthesis,2010,4268-4272)所述的条件，使内酰胺16进行铜催化的羟基化反应，得到其中R4＝OH的18。使用例如Protective Groups in OrganicSynthesis(Greene,Wuts；3rd ed.,1999,John Wiley&Sons,Inc.)中所述的适合条件，可使醚类似物18进行侧链氨基的脱保护，得到式19化合物。
方案4：
可如方案4中所示制备式29所表示的化合物。使用碱(例如LiHMDS)和Boc酐进行20的Boc-保护，得到21。使用例如Charles等人(J.Med.Chem.,2010,53,3330-3348)所述的方法，直接进行邻位金属化，接着用二甲基甲酰胺处理，可得到吡啶醛衍生物22。然后如Zhang,Lei(Journal of MedicinalChemistry,2011,54,1724-1739)等人所述，在使用碱(例如碳酸铯)和催化剂(例如Pd(PPh3)4)的标准Suzuki条件下，可使所述醛与适合的偶联配偶体(例如氟硼酸3)进行Suzuki交叉偶联反应，得到联芳醛23。用甲胺处理联芳醛23可得到氟化环亚胺24，将其用试剂(例如KMnO4)氧化，得到内酰胺25。用三氟乙酸处理内酰胺25可得到26，使用如Protective Groups in OrganicSynthesis(Greene,Wuts；3rd ed.,1999,John Wiley&Sons,Inc.)中所述的适合条件，用基团例如对甲氧基苄基保护26可得到内酰胺27。遵循例如Gowrisankar等人(J.Am.Chem.Soc.2010,132,11592-11598)所述的程序，使用本领域技术人员熟悉的反应条件，使内酰胺核27进行钯催化的醚合成，得到式28所表示的化合物。使用如Protective Groups in Organic Synthesis(Greene,Wuts；3rded.,1999,John Wiley&Sons,Inc.)中所述的适合条件，可将醚类似物进行侧链氨基的整体脱保护，得到化合物29。
方案5：
可如方案5中所示制备式39所表示的化合物。用NBS将30溴化，接着用乙酰氯和吡啶进行乙酰化，可得到溴化物31。如Zhang,Lei等人(Journalof Medicinal Chemistry,2011,54,1724-1739)所述，在使用碱(例如碳酸铯)和催化剂(例如Pd(PPh3)4)的标准Suzuki条件下，使溴化物31与乙烯基硼酸酐吡啶络合物进行Suzuki交叉偶联反应，可得到乙烯基吡啶32。使用四氧化锇和高碘酸钠可氧化乙烯基吡啶32，得到相应的醛33，如Zhang,Lei(Journalof Medicinal Chemistry,2011,54,1724-1739)等人所述，在使用碱(例如碳酸铯)和催化剂(例如Pd(PPh3)4)的标准Suzuki条件下，使醛33与适合的偶联配偶体(例如氟硼酸3)进行Suzuki交叉偶联反应，得到联芳醛34。用甲胺处理联芳醛34可得到氟化环亚胺35，使用试剂(例如硼氢化钠)可将其还原为相应的受限的哌啶36。用KMnO4氧化受限的哌啶36，可得到内酰胺37。遵循例如Gowrisankar等人(J.Am.Chem.Soc.2010,132,11592-11598)所述的程序，使用本领域技术人员熟悉的反应条件，使内酰胺核37进行钯催化的醚合成，得到式38所表示的化合物。使用如Protective Groups in OrganicSynthesis(Greene,Wuts；3rd ed.,1999,John Wiley&Sons,Inc.)中所述的适合条件，可将醚类似物进行侧链氨基的脱保护，得到化合物39。
方案6：
通过概述于方案6中的方法制备式42-46所表示的化合物。在暗处在极性非质子溶剂(例如乙腈)中使用N-卤代琥珀酰亚胺，可使如方案2中所示合成的受限的内酰胺醚40进行卤化，得到单卤素取代的(X＝卤素,R3＝H)或二卤素取代的(R3＝X＝卤素)醚41。可使化合物41进行钯偶联，例如如Zhang,Lei等人所述(Journal of Medicinal Chemistry,2011,54,1724-1739)，在使用碱(例如碳酸铯)和催化剂(例如Pd(PPh3)4)的标准Suzuki条件下，与适合的偶联配偶体(例如三甲基环三硼氧烷、乙烯基硼酸或环丙基硼酸)进行Suzuki交叉偶联反应，或如Miroslav等人所述(Collection of Czechoslovak ChemicalCommunications,1983,48,1765-1773)，进行铜催化的氰化反应，以引入式42所表示的化合物的R4。使用例如Punniyamurthy等人(Synthesis,2010,4268-4272)所述的条件，使内酰胺41进行铜催化的羟基化反应，得到其中R4＝OH的42。在其中R4＝乙烯基的中间体42的情况下，用试剂(四氧化锇或高碘酸钠)氧化裂解乙烯基，可得到醛44。通过用处理，可将醛转化为二氟甲基类似物45。如果R1含经保护的胺基或另一种官能团，则如Protective Groups in Organic Synthesis(Greene,Wuts；3rd ed.,1999,JohnWiley&Sons,Inc.)中所述，用适合的试剂处理底物，除去类似物42和45中的保护基，分别得到式43和46化合物。
方案7：
通过概述于方案7中的方法制备式47和48所表示的化合物。将如方案6中所示合成的醛44经受TOSMIC和碱(例如碳酸钾)，得到噁唑47。可替换地，将醛44在溶剂(例如EtOH或MeOH)中，用试剂(例如硼氢化钠或硼氢化锂)进行还原，得到式48所表示的化合物。如果R1含经保护的胺基或另一种官能团，则如Protective Groups in Organic Synthesis(Greene,Wuts；3rded.,1999,John Wiley&Sons,Inc.)中所述，用适合的试剂处理底物，除去保护基，得到式47和48化合物。
方案8：
通过概述于方案8中的方法制备式52-53所表示的化合物。在暗处在极性非质子溶剂(例如乙腈)中使用N-卤代琥珀酰亚胺，可使如上述方案中所示合成的受限的内酰胺醚49进行卤化，得到卤代醚50。可使化合物50进行钯偶联，例如如Zhang,Lei等人(Journal of Medicinal Chemistry,2011,54,1724-1739)所述，在使用碱(例如碳酸铯)和催化剂(例如Pd(PPh3)4)的标准Suzuki条件下，与适合的偶联配偶体(例如乙烯基硼酸)进行Suzuki交叉偶联反应，或在升高的温度使用催化剂(例如三(二亚苄基丙酮)二钯)和配体(例如DPPF)的标准Stille条件下，与适合的偶联配偶体(例如三丁基(1-乙氧基乙烯基)甲锡烷)进行Stille偶联，得到式51所表示的化合物。在钯/碳存在下，使51的乙烯基进行氢化，得到式52所表示的化合物。可替换地，当R为烷氧基时，使51与酸水溶液例如HCl水溶液进行水解，得到式53所表示的酮化合物。如果R1含经保护的胺基或另一种官能团，则如Protective Groups inOrganic Synthesis(Greene,Wuts；3rd ed.,1999,John Wiley&Sons,Inc.)中所述，用适合的试剂处理底物，除去保护基，得到脱保护的式52和53化合物。
方案9：
通过概述于方案9中的方法制备式54所表示的化合物。在溶剂(例如乙醚或THF)中，将如方案8中所示合成的受限的内酰胺53用Grignard试剂处理，得到式54所表示的化合物。如果R1含经保护的胺基或另一种官能团，则如Protective Groups in Organic Synthesis(Greene,Wuts；3rd ed.,1999,JohnWiley&Sons,Inc.)中所述，用适合的试剂处理底物，除去保护基，得到脱保护的式54化合物。
方案10：
通过概述于方案10中的方法制备式56-58所表示的化合物。采用标准Negishi偶联(在溶剂(例如DMF)中使用Zn(CN)2和催化剂(例如Pd(PPh3)4)或在50至120℃使用CuCN)，使如方案8中所示合成的受限的内酰胺醚50进行氰基化，得到式55所表示的化合物。在升高的温度可用HCl水溶液将腈化合物55水解，接着与亚硫酰氯或草酰氯形成酯，然后用醇淬灭，得到式57所表示的化合物。可替换地，在100-120℃的温度范围内，在溶剂(例如DMF)中，使用碱(例如碳酸铯)，可将腈化合物55水解为酰胺，得到式58所表示的化合物。如果R1含经保护的胺基或另一种官能团，则如ProtectiveGroups in Organic Synthesis(Greene,Wuts；3rd ed.,1999,John Wiley&Sons,Inc.)中所述，用适合的试剂处理底物，除去保护基，得到的式56-58化合物。
方案11：
通过概述于方案11中的方法制备式60-62所表示的化合物。在高温，在溶剂(例如NMP)中，使用碘化亚铜(I)和三甲基(三氟甲基)甲硅烷，使如方案8中所示合成的受限的内酰胺醚50进行铜催化的三氟甲基化，得到式59所表示的化合物。可替换地，在高温，在溶剂(例如DMF和1,4-二噁烷)中，使用碘化亚铜(I)、1H-吡唑、N1,N2-二甲基乙-1,2-二胺和碱(例如磷酸钾)，使卤代化合物50进行铜催化的偶联，得到式60所表示的化合物。可替换地，在升高的温度，在溶剂(例如DMSO)中，使用碘化亚铜(I)、L-脯氨酸、甲醇钠和碱(例如碳酸钾)，使卤代化合物50进行铜催化的甲氧基化，得到式61所表示的化合物。可替换地，在升高的温度，在溶剂(例如DMSO)中，使用碘化亚铜(I)、L-脯氨酸、甲烷亚磺酸钠和碱(例如氢氧化钠)，使卤代化合物50进行铜催化的次硫酸化(sulfoxylation)，得到式62所表示的化合物。如果R1含经保护的胺基或另一种官能团，则如Protective Groups in OrganicSynthesis(Greene,Wuts；3rd ed.,1999,John Wiley&Sons,Inc.)中所述，用适合的试剂处理底物，除去保护基，得到的式60-62化合物。
方案12：
通过概述于方案12中的方法制备式65所表示的中间体。在溶剂(例如DCM)中，用m-CPBA使如方案2中所述制备的联芳酰胺11进行氧化，得到式63所表示的化合物。用POCl3处理中间体63，接着用甲醇钠/甲醇处理，得到式65所表示的中间体。
方案13：
通过概述于方案13中的方法制备式67所表示的中间体。在溶剂(例如AcOH)中，用二氧化硒使如方案2中所述制备的联芳酰胺11进行氧化，得到式66所表示的化合物。在溶剂(例如DCM)中，用双-(2-甲氧基乙基)氨基三氟化硫处理中间体66，得到式67所表示的中间体。
通过概述于方案14中的方法制备式68所表示的中间体。在溶剂(例如DMF)中，在碱例如NaH或碳酸钾存在下，用烷基卤化物，使如方案1中所述制备的联芳酰胺8进行烷基化，或在R1＝CH2CH2OH的情况下，在18-冠-6和碱(例如碳酸钾)存在下，使酰胺与碳酸乙酯进行反应，得到式68所表示的中间体。
方案15：
通过概述于方案15中的方法制备式71和72所表示的中间体。在暗处，在极性非质子溶剂例如乙腈中，使用N-卤代琥珀酰亚胺，使如方案2所述制备的联芳酰胺11进行卤化，得到卤化物69。在1,10-菲咯啉存在下，用碘化亚铜(I)和氢氧化钾处理化合物69，得到式70所表示的中间体。用2-氯-2,2-二氟乙酸钠和碱例(如碳酸钾)处理中间体70，得到式71所表示的中间体。可替换地，在溶剂(例如DMF)中，用碱(例如氢化钠)和烷基化试剂(例如碘甲烷)处理化合物70，得到式72所表示的中间体。
方案16：
通过概述于方案16中的方法制备式74和75所表示的化合物。在溶剂(例如DMF)中，用碘甲烷和碱(例如氢化钠)，使如方案2中所述制备的中间体73进行烷基化，接着用TFA或HCl进行脱保护，得到式74所表示的化合物。可替换地，用TFA或HCl将中间体73脱保护，接着用甲醛/甲酸处理，得到式75化合物。
方案17：
通过概述于方案17中的方法制备中间体80。在低温，在溶剂例如THF中，可用TMS-重氮甲烷处理中间体80，或用亚硫酰氯或草酰氯将酸转化为酰氯并用醇(例如MeOH或EtOH)淬灭，得到酯77。
在溶剂(例如1,4-二噁烷和水)中，在2,6-二甲基吡啶存在下，使中间体77与四氧化锇和高碘酸钠反应，得到中间体78。可用DAST处理中间体78，得到中间体79。在溶剂(例如THF)中，可用试剂(例如氢化铝锂或硼氢化锂)还原中间体79，得到中间体80。
方案18：
通过概述于方案18中的方法制备中间体83。可用HCl/EtOH处理中间体81，得到酯82。在溶剂(例如THF)中，可用试剂(例如氢化铝锂或硼氢化钠)还原中间体82，得到中间体83。
方案19：
通过概述于方案19中的方法制备中间体90。用TMSCl/MeOH处理可将中间体84酯化，得到酯85。在溶剂(例如乙腈)中，可用Boc2O和DMAP处理中间体85，得到中间体86。在溶剂例如THF或乙醚中，可用试剂例如DIBAL还原中间体86，得到中间体87。用LiBr/乙腈处理，可将中间体87单脱保护，得到中间体88。使中间体88与2-氯-2,2-二氟乙酸钠/DMF反应，得到中间体89。在THF中可用LiBH4还原中间体89，得到中间体90。
使用方案1-19所合成的各种类似物列于表1中。所选化合物的AAK1功能性效能以如下IC50范围列出：a为<1nM；b为1-10nM；c为10.01-100nM；d为100.01-2000nM。
表1
具体实施方案的描述
在下列实施例中，在Bruker 400或500MHz NMR光谱仪上记录质子NMR谱。以相对于四甲基甲硅烷的δ值报道化学位移。在与Waters MicromassZQ偶联的Shimadzu LC上进行LC/MS。使用至少一种下列方法获得HPLC保留时间：
LC-MS方法：
LC/MS方法A：柱：PUROSPHERstar RP-18(4×55mm),3μm；缓冲液：20mM NH4OAC/水；流动相A：缓冲液+ACN(90+10)；流动相B：缓冲液+MeCN(10+90)；流速：2.5mL/min)
LC/MS方法B：柱：ZORBAX SB C18(46×50mm),5μm；正模式；流动相A：10％MeOH-90％H2O-0.1％TFA；流动相B：90％MeOH-10％H2O-0.1％TFA；流速：5mL/min)
LC/MS方法C：柱：Ascentis Express C8(5×2.1mm),2.7μm；流动相A：2％MeCN-98％H2O-10mM NH4COOH；流动相B：98％ACN-2％H2O-10mMNH4COOH；流速：1mL/min)
LC/MS方法D：柱：ACQUITY UPLC BEH C18(2.1×50mm),1.7μm；流动相A：0.1％TFA/水；流动相B：1％TFA/ACN；流速：1/min)
LC/MS方法E：柱：ACQUITY UPLC BEH C18(2.1×50mm),1.7μm；流动相A：5mM NH4OAc:ACN(95:5)；流动相B：5mM NH4OAc:ACN(5:95)；流速：1/min)
LC/MS方法F：柱：X-Bridge BEH C18(50×2.1mm),2.5μm；流动相A：ACN+H2O(2+98)+0.1％TFA；流动相B：ACN+H2O(98+2)+0.05％TFA；流速：1.2mL/min。
LC-MS方法G：柱：Kinetex C18(50×2.1mm),2.6um：流动相A：2％ACN-98％H2O-10mM；流动相B：98％ACN-2％H2O-10mM NH4COOH；流速：1/min)。
LC-MS方法H：柱：BEH C18(50×3.0mm),1.7μm：流动相A：5％ACN-95％H2O-10mM；流动相B：95％ACN-5％H2O-10mM NH4COOH；流速：1.2/min)。
LC-MS方法I：柱：Ace Excel 2C18(50×3.0mm),2.0μm：流动相A：2％ACN-98％H2O-10mM；流动相B：98％ACN-2％H2O-10mM NH4COOH；流速：1.2/min)。
手性HPLC方法：
方法A:CHIRALCEL OJH(250×4.6)mm 5微米
流动相：0.2％DEA/正己烷:乙醇(80:20)
方法B:CHIRALPAK AD-H(250×4.6)mm 5微米
流动相A：0.2％DEA/正己烷(70)B:乙醇(30)
方法C:CHIRALPAK-ASH(250×4.6)mm 5微米
流动相A：0.2％DEA/正己烷:乙醇(90:10)
分析型HPLC方法：
方法A：Waters分析型C18sunfire柱(4.6×150mm,3.5μm)；流动相：
缓冲液：0.05％TFA/H2O(用氨调节至pH＝2.5)
A＝缓冲液/乙腈(95:5)；B＝乙腈/缓冲液(95:5)；0-15min,0％B→50％B；15-18min,50％B→100％B；18-23min,100％B；流速＝1mL/min；λ＝254nm和220nm；运行时间＝28min。
方法B:Waters分析型苯基xbridge柱(4.6×150mm,3.5μm)，流动相：
缓冲液：0.05％TFA/H2O(用氨调节至pH＝2.5)
A＝缓冲液/乙腈(95:5)；B＝乙腈/缓冲液(95:5)；0-15min,0％B→50％B；15-18min,50％B→100％B；18-23min,100％B；流速＝1mL/min；λ＝254nm和220nm；运行时间＝28min。
方法C:Waters分析型C18sunfire柱(3.0×150mm,3.5μm)；流动相：A＝10mM碳酸氢铵(pH＝9.5)/95％H2O/5％甲醇；B＝10mM碳酸氢铵(pH＝9.5)/5％H2O/95％甲醇；0-15min,0％B→100％B；15-18min,100％B；流速＝1mL/min；λ＝254nm；运行时间＝18min。
方法D:Waters分析型苯基xbridge柱(3.0×150mm,3.5μm)；流动相：A＝10mM碳酸氢铵(pH＝9.5)/95％H2O/5％甲醇；B＝10mM碳酸氢铵(pH＝9.5)/5％H2O/95％甲醇；0-15min,0％B→100％B；15-18min,100％B；流速＝1mL/min；λ＝254nm；运行时间＝18min。
实施例1
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.4-氯烟酸甲酯
将4-氯烟酸(20g,127mmol)在二氯甲烷(600mL)和DMF(15mL)中的溶液冷却至0℃，逐滴用草酰氯(27.8mL,317mmol)处理。滴加后，将混合物在室温再搅拌2h。然后将混合物冷却回至0℃并慢慢加入MeOH(30mL)。将反应混合物温热至室温并搅拌0.5h。混合物用二氯甲烷(500mL)与饱和NaHCO3水溶液(100mL)稀释，然后用DCM(3×1000mL)萃取。将DCM层用盐水(2×100mL)洗涤，以硫酸镁干燥并减压浓缩。得到粗产物(20g，92％产率)，为黄色油状物，无需进一步纯化将其用于下一步。LC/MS(ESI)m/e 172.0[(M+H)+,C7H7ClNO2计算值:172.6]；LC/MS保留时间(方法B):tR＝1.21min.1HNMR(400MHz,CDCl3)δppm 9.27(s,1H),8.86(bs,1H),7.98(bs,1H),4.05(s,3H).
B部分.4-(4-氯-2-氟苯基)烟酸甲酯
4-氯烟酸甲酯(20g,117mmol)、(4-氯-2-氟苯基)硼酸(22.4g,128mmol)、Pd(Ph3P)4(9.4g,8.16mmol)和Cs2CO3(114g,350mmol)置于1,4-二噁烷(400mL)和水(30mL)的溶剂混合物中，用氮气吹扫5min并加热至85℃。在该温度搅拌过夜后，用乙酸乙酯稀释反应混合物并经硅藻土层过滤。进一步用乙酸乙酯洗涤该层。将合并的滤液用水(1×100mL)洗涤，干燥(Na2SO4)并减压浓缩，得到粗产物，经由combi flash(甲醇/氯仿的梯度)将其纯化，得到4-(4-氯-2-氟苯基)烟酸甲酯(13g,48.9mmol,42％,通过LC/MS确定纯度为77％)，为棕色固体。LC/MS(ESI)m/e 266.0[(M+H)+,C13H10ClFNO2计算值266.1]；LC/MS保留时间(方法B):tR＝1.69min.
C部分.(S)-4-(4-((2-((叔丁氧基羰基)氨基)-4-甲基戊基)氧基)-2-氟苯基)烟酸甲酯
将4-(4-氯-2-氟苯基)烟酸甲酯(50mg,0.188mmol)在甲苯(1mL)中的溶液用碳酸铯(92mg,0.282mmol)和N-Boc-L-亮氨醇(121mg,0.565mmol)处理。用氮气吹扫混合物5min并用二叔丁基(2’,4’,6’-三异丙基-[1,1’-联苯]-2-基)膦(48.0mg,0.113mmol)处理。用氮气再吹扫混合物5min后，加入二乙酸钯(II)(42.3mg,0.188mmol)并再用氮气鼓泡10min。将混合物紧紧密封并在80℃加热12h。经硅藻土层过滤混合物并用乙酸乙酯(2×3mL)洗涤。减压浓缩洗涤液。通过combi flash(乙酸乙酯/石油醚)纯化残余物，得到(S)-4-(4-((2-((叔丁氧基羰基)氨基)-4-甲基戊基)氧基)-2-氟苯基)烟酸甲酯(50mg,0.112mmol,60％产率)。LC/MS(ESI)m/e 447.2[(M+H)+,C24H32FN2O5计算值447.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝2.17min.
D部分.(S)-4-(4-((2-((叔丁氧基羰基)氨基)-4-甲基戊基)氧基)-2-氟苯基)烟酸
将(S)-4-(4-((2-((叔丁氧基羰基)氨基)-4-甲基戊基)氧基)-2-氟苯基)烟酸甲酯(50.0mg,0.112mmol)置于四氢呋喃(1mL)、甲醇(1mL)和水(1mL)的混合物中。向溶液中加入氢氧化锂(8.05mg,0.336mmol)且将反应混合物在室温搅拌2h。减压浓缩反应混合物，用水稀释残余物并使用1.5N HCl溶液将pH调至4。用乙酸乙酯(3×5mL)萃取来自水层的粗产物。将合并的有机层用盐水(1×5mL)洗涤，干燥(Na2SO4)并减压浓缩，得到(S)-4-(4-((2-((叔丁氧基羰基)氨基)-4-甲基戊基)氧基)-2-氟苯基)烟酸(30mg,0.060mmol,53％产率)，为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/e 433.2[(M+H)+,C23H30FN2O5计算值433.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.74min.
E部分.(S)-(1-(4-(3-氨甲酰基吡啶-4-基)-3-氟苯氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
将(S)-4-(4-((2-((叔丁氧基羰基)氨基)-4-甲基戊基)氧基)-2-氟苯基)烟酸(75mg,0.173mmol)置于DMF(2mL)中并冷却至0℃。向溶液中加入EDC(49.9mg,0.260mmol)和HOBT(53.1mg,0.347mmol)。搅拌反应混合物5min后，加入氯化铵(55.7mg,1.040mmol)且将所得混合物搅拌5min。加入二异丙基乙基胺(0.121mL,0.694mmol)且将混合物在室温再搅拌12h。然后用冰淬灭混合物，过滤残余物并真空干燥，得到(S)-(1-(4-(3-氨甲酰基吡啶-4-基)-3-氟苯氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(50mg,0.098mmol,57％产率)，为浅黄色固体。LC/MS(ESI)m/e 432.2[(M+H)+,C23H31FN3O4计算值432.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.83min.
F部分.(S)-(4-甲基-1-((5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
将氢化钠(5.56mg,0.232mmol,60％在矿物油中)置于四氢呋喃(1mL)中并冷却至0℃。逐滴用(S)-(1-(4-(3-氨甲酰基吡啶-4-基)-3-氟苯氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(50mg,0.116mmol)在THF(1mL)中的溶液处理混悬液且将温度在0℃保持30min。然后将反应混合物温热至室温并搅拌2h。用冰淬灭反应混合物并用乙酸乙酯(3×5mL)萃取。将合并的有机层用盐水(1×5mL)洗涤，干燥(Na2SO4)并减压浓缩，得到(S)-(4-甲基-1-((5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(40mg,0.097mmol,84％产率)，为无色固体。LC/MS(ESI)m/e 412.2[(M+H)+,C23H30N3O4计算值412.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.97min.
G部分.(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
将(S)-(4-甲基-1-((5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(10mg,0.024mmol)在二氯甲烷(1mL)中的溶液冷却至0℃。向溶液中逐滴加入氯化氢(0.886mg,0.012mL,0.024mmol,2M的乙醚溶液)。将反应混合物的温度在0℃保持30min，然后将反应混合物温热至室温并搅拌2h。然后减压浓缩反应混合物，得到(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(4mg,0.012mmol,49％产率)，为淡黄色固体。LC/MS(ESI)m/e 312.2[(M+H)+,C18H22N3O2计算值312.2]；LC/MS保留时间(方法A):tR＝1.1min；HPLC保留时间(方法A):tR＝6.85min；HPLC保留时间(方法B):tR＝7.51min 1H NMR(400MHz,D2O)δppm 9.30(br.s.,1H),8.77(br.s.,1H),8.36(br.s.,1H),8.07(br.s.,1H),6.95(br.s.,1H),6.72(br.s.,1H),4.41(d,J＝9.03Hz,1H),4.26(br.s.,1H),3.89(br.s.,1H),3.38(s,1H),1.72-1.88(m,2H),1.05(d,J＝2.51Hz,6H).
实施例2
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.4-(4-氯-2-氟苯基)烟酸
向冷却至0℃的4-(4-氯-2-氟苯基)烟酸甲酯(15g,56.5mmol)(如在实施例1的B部分中所制备)在甲醇(150mL)和水(150mL)的溶剂混合物中的溶液中加入氢氧化钠(9.03g,226mmol)，将混合物温热至室温并搅拌1h。减压浓缩反应混合物并使用1.5N盐酸将所得水溶液的pH调至pH＝4，在此期间产物作为固体析出。过滤混合物，得到4-(4-氯-2-氟苯基)烟酸(9g,35.8mmol,63％产率)，为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/e 252.0[(M+H)+,C12H8ClFNO2计算值252.1]；LC/MS保留时间(方法A):tR＝0.97min.
B部分.4-(4-氯-2-氟苯基)-N-甲基烟酰胺
向冷却至0℃的4-(4-氯-2-氟苯基)烟酸(2g,7.95mmol)在二氯甲烷(40mL)中的溶液中加入草酰氯(2.09mL,23.8mmol)，接着加入DMF(2mL)。将反应混合物温热至室温并搅拌2h。减压浓缩反应混合物并用二氯甲烷(25mL)处理。将溶液加到冷却至0℃的甲胺盐酸盐(5.37g,79mmol)和三乙胺(11.08mL,79mmol)在二氯甲烷(25mL)中的混合物中。将所得混合物在室温搅拌3h，然后用饱和碳酸氢钠溶液洗涤。分离有机层，干燥(Na2SO4)并减压浓缩，得到4-(4-氯-2-氟苯基)-N-甲基烟酰胺(1.3g,4.91mmol,62％)，为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/e 265.1[(M+H)+,C13H11ClFN2O计算值265.1]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.69min.
C部分.8-氯-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
将氢化钠(80mg,3.32mmol)置于THF(1mL)中并冷却至0℃。向混悬液中逐滴加入4-(4-氯-2-氟苯基)-N-甲基烟酰胺(440mg,1.66mmol)在THF(1mL)中的溶液且将温度在0℃保持30min。然后将反应混合物温热至室温并搅拌2h。反应混合物用冰淬灭并用乙酸乙酯(3×5mL)萃取。用盐水(1×5mL)洗涤合并的有机层，干燥(Na2SO4)并减压浓缩，得到8-氯-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(440mg,1.798mmol)，为浅棕色油状物。LC/MS(ESI)m/e245.1[(M+H)+,C13H10ClN2O计算值245.1]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.79min.
D部分.(S)-(4-甲基-1-((6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
在室温向8-氯-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(440mg,1.80mmol)在甲苯(8mL)中的溶液中加入碳酸铯(879mg,2.70mmol)和二叔丁基(2’,4’,6’-三异丙基-[1,1’-联苯]-2-基)膦(458mg,1.079mmol)且将混合物脱气5min。然后混合物先后用N-Boc-L-亮氨醇(1160mg,5.39mmol)和二乙酸钯(II)(121mg,0.54mmol)处理且将混合物再脱气10min。将反应混合物密封并在80℃加热。搅拌过夜后，将反应混合物冷却至室温并经硅藻土过滤。用乙酸乙酯洗涤该层并减压浓缩合并的滤液，得到粗产物，通过combi flash(乙酸乙酯/石油醚梯度)将其纯化，得到(S)-(4-甲基-1-((6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(190mg,0.34mmol,19％产率)，为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/e 426.2[(M+H)+,C24H32N3O4计算值426.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝2.10min.
E部分.(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
在0℃向(S)-(4-甲基-1-((6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(190mg,0.447mmol)在二氯甲烷(4mL)中的溶液中逐滴加入氯化氢(81mg,0.558mL,2.233mmol)的1,4-二噁烷溶液(4M)，将反应混合物在0℃搅拌30min，然后温热至室温并搅拌2h。减压除去溶剂，得到粗产物，通过制备型HPLC(0.1％TFA/水)将其纯化，得到(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(51mg,0.157mmol,35％产率)，为黄色固体。LC/MS(ESI)m/e 326.2[(M+H)+,C19H24N3O2计算值326.2]；LC/MS保留时间(方法A):tR＝1.21min；HPLC保留时间(方法A):tR＝7.39min；HPLC保留时间(方法B):tR＝7.40min.1H NMR(400MHz,CD3OD)δppm 9.48(s,1H),8.77(d,J＝5.77Hz,1H),8.43(d,J＝8.78Hz,1H),8.26(d,J＝5.77Hz,1H),7.09-7.16(m,2H),4.20(dd,J＝9.41,3.89Hz,1H),4.02(dd,J＝9.29,7.03Hz,1H),3.81(s,3H),3.35-3.39(m,1H),1.81-1.91(m,1H),1.41-1.56(m,2H),0.98-1.05(m,6H).
实施例3
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-9-溴-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.(S)-(1-((9-溴-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
向(S)-(4-甲基-1-((6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.100g,0.235mmol)(如在实施例2的D部分中所制备)在无水乙腈(5mL)中的溶液中加入N-溴代琥珀酰亚胺(0.042g,0.235mmol)且将混合物在85℃加热5h。用水(10mL)稀释反应混合物，用乙酸乙酯(2×20mL)萃取。用硫酸钠干燥合并的有机层并减压蒸发，得到粗产物，通过制备型TLC(乙酸乙酯/石油醚梯度)将其纯化，得到(S)-(1-((9-溴-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(80mg,0.159mmol,68％产率)，为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/e504.2[(M+H)+,C24H31BrN3O4计算值504.1]；LC/MS保留时间(方法A):tR＝2.23min.
B部分.(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-溴-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
在0℃向(S)-(1-((9-溴-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(80mg,1.586mmol)在无水甲醇(5mL)中的溶液中逐滴加入4M HCl在1,4-二噁烷中的溶液(2mL,8mmol)。将反应混合物温热至室温并搅拌2h。然后减压浓缩混合物，得到粗产物，通过制备型HPLC(10mM乙酸铵水溶液/乙腈)将其纯化，得到(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-溴-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(20mg,0.049mmol,30％产率)，为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/e 404.1[(M+H)+,C19H23BrN3O2计算值404.1]；LC/MS保留时间(方法A):tR＝1.47min；HPLC保留时间(方法A):tR＝9.55min；HPLC保留时间(方法B):tR＝10.23min；1H NMR(400MHz,CD3OD)δppm 9.48(s,1H),8.80(d,J＝5.77Hz,1H),8.67(s,1H),8.26(d,J＝5.77Hz,1H),7.15(s,1H),4.37(dd,J＝9.54,3.76Hz,1H),4.18(dd,J＝9.66,6.40Hz,1H),3.83(s,3H),3.48-3.56(m,1H),1.89(m,1H),1.51-1.72(m,2H),1.05(t,J＝6.27Hz,6H).
实施例4
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-6,9-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.(S)-(1-((6,9-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
在10mL圆底烧瓶中将(S)-(1-((9-溴-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(如在实施例3的A部分中所制备)(150mg,0.297mmol)、2,4,6-三甲基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三硼杂环己烷(41.1mg,0.327mmol)、Cs2CO3(291mg,0.892mmol)和PdCl2(dppf)(21.76mg,0.030mmol)置于1,4-二噁烷(2mL)和水(0.1mL)的混合物中。用氮气吹扫反应混合物5min并在90℃加热至15h。减压除去1,4-二噁烷且将残余物溶于乙酸乙酯(20mL)中。用水(10x2mL)洗涤乙酸乙酯层并用硫酸钠干燥。除去溶剂，得到粗产物(0.08g)，将其经硅胶柱(24g硅胶,MeOH-CHCl3混合物)过滤。分离产物，为灰白色固体(0.05g,0.11mmol,38％产率)。LC/MS(ES-API)m/e440.2[(M+H)+,C25H34N3O4计算值,440.3]；LC/MS保留时间(方法B):tR＝1.95min.
B部分.(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-6,9-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
在25mL圆底烧瓶中将(S)-(1-((6,9-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(80mg,0.182mmol)置于MeOH(6mL)中。将反应混合物冷却至0℃，加入4M HCl在1,4-二噁烷中的溶液(3.75mL,12mmol)且将混合物在室温搅拌2h。除去MeOH且将粗产物溶于乙酸乙酯(20mL)中。用水(10mL)洗涤乙酸乙酯层并用硫酸钠干燥。除去溶剂，得到粗产物，通过硅胶柱(MeOH-CHCl3混合物)将其纯化，得到(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-6,9-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(0.03g,0.09mmol,49％产率)，为黄色固体。LC/MS(ESI)m/e 340.2[(M+H)+,C20H26N3O2计算值,340.4]；LC/MS保留时间(方法B):tR＝1.33min.HPLC保留时间(方法A):tR＝8.58min；HPLC保留时间(方法B):tR＝8.12min.1H NMR(400MHz,CD3OD)δppm 9.51(s,1H),8.79(d,J＝6.02Hz,1H),8.40(d,J＝5.77Hz,1H),8.33(s,1H),7.10(s,1H),4.50(dd,J＝10.67,3.14Hz,1H),4.36(dd,J＝10.67,5.90Hz,1H),3.77-3.87(m,4H),2.46(s,3H),1.79-1.92(m,2H),1.66-1.77(m,1H),1.08(dd,J＝6.27,4.02Hz,6H).
实施例5
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-9-甲腈
A部分.(S)-(1-((9-氰基-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
在25mL密封管中将(S)-(1-((9-溴-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(150mg,0.297mmol)(如在实施例3的A部分中所制备)置于DMA(4mL)中。向该混合物中加入CuCN(53.3mg,0.595mmol)且将混合物在150℃加热24h。将反应混合物冷却至室温，用乙酸乙酯(20mL)稀释并经硅藻土过滤。用盐水(10mL)和水(10mL)洗涤乙酸乙酯溶液。将有机层用硫酸钠干燥并减压浓缩，得到粗产物，为胶状固体，无需将其进一步纯化即使用。LC/MS(ESI)m/e 451.2[(M+H)+,C25H31N4O4计算值,451.5]；LC/MS保留时间(方法B):tR＝2.02min.
B部分.(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-9-甲腈
在25mL圆底烧瓶中将(S)-(1-((9-氰基-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(75mg,0.167mmol)置于MeOH(4mL)中并冷却至0℃。混合物用4M HCl在1,4-二噁烷中的溶液(2mL,8mmol)处理并在室温搅拌2h。除去MeOH且将粗产物溶于EtOAc(20mL)中。用水(2×10mL)洗涤乙酸乙酯层并用硫酸钠干燥。除去溶剂，得到粗产物，通过硅胶柱(MeOH-CHCl3混合物)将其纯化，得到(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-9-甲腈(4mg,0.01mmol,历经2步7％产率)，为黄色固体。LC/MS(ESI)m/e351.2.[(M+H)+,C20H23N4O2计算值,351.4]；LC/MS保留时间(方法B):tR＝1.43min.HPLC保留时间(方法A):tR＝9.69min；HPLC保留时间(方法B):tR＝9.31min.1H NMR(400MHz,CD3OD)δppm 9.56(bs,1H),8.93(s,2H),8.37(d,J＝4.77Hz,1H),7.25(s,1H),4.63(dd,J＝10.67,3.14Hz,1H),4.47(dd,J＝10.79,6.02Hz,1H),3.81-3.89(m,4H),1.83-1.91(m,2H),1.72(t,J＝6.53Hz,1H),1.08(d,J＝5.02Hz,6H).
实施例6
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-环丙基-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分：(S)-(1-((9-环丙基-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
将(S)-(1-((9-溴-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(150mg,0.297mmol)(如在实施例3的A部分中所制备)、环丙基硼酸(28.1mg,0.327mmol),四(三苯基膦)钯(17.2mg,0.015mmol)和Cs2CO3(291mg,0.892mmol)在甲苯(5mL)和水(0.43mL)中的混合物用氮气吹扫5min，然后在90℃加热过夜(16h)。冷却后，减压除去甲苯并用乙酸乙酯(20mL)萃取产物。用盐水(2×20mL)洗涤有机相，用Na2SO4干燥并减压浓缩。通过硅胶柱色谱(EtOAc-己烷)纯化残余物，得到(S)-(1-((9-环丙基-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(70mg,0.150mmol,51％产率)，为灰白色胶状固体。LC/MS(ESI)m/z 466.4[(M+H)+,C27H36N3O4计算值466.3]；LC/MS保留时间(方法E):tR＝1.19min.
B部分：(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-环丙基-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
在0℃向(S)-(1-((9-环丙基-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(60mg,0.129mmol)在MeOH(4mL)中的溶液中加入4M HCl的1,4-二噁烷溶液(2mL,8mmol)。将所得溶液在室温搅拌2h。减压除去甲醇并用乙酸乙酯(2×5mL)萃取残余物。用饱和NaHCO3水溶液(2×5mL)洗涤有机相，用Na2SO4干燥并减压浓缩。通过硅胶柱(MeOH-CHCl3)纯化残余物，得到(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-环丙基-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(8mg,0.022mmol,17％产率)，为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/z 366.2[(M+H)+,C22H28N3O2计算值366.2]；LC/MS保留时间(方法B):tR＝1.34min.HPLC保留时间(方法B):tR＝4.87min和HPLC保留时间(方法A):tR＝9.18min.1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 9.47(s,1H),8.75(d,J＝5.7Hz,1H),8.28(d,J＝5.7Hz,1H),7.96(s,1H),7.06(s,1H),4.27(m,1H),4.06-4.15(m,1H),3.84(s,3H),3.38-3.48(m,1H),2.23-2.38(m,1H),1.83-1.94(m,1H),1.56-1.67(m,1H),1.46-1.55(m,1H),1.00-1.08(m,6H),0.79-0.94(m,4H).
实施例7
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-9-羟基-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-9-羟基-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
历时0.1h将(S)-(1-((9-溴-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.05g,0.099mmol)(如在实施例3的A部分中所制备)、四-N-丁基氢氧化铵/H2O(0.463g,1.784mmol)和水(1.5mL)的混合物加到搅拌的碘化亚铜(I)(1.89mg,9.91μmol)和2-甲基-8-羟基喹啉(3.16mg,0.020mmol)在DMSO(1mL)中的溶液中。将反应混合物加热至120℃并搅拌14h。将所得混合物冷却至室温。通过反相HPLC(10mM乙酸铵)纯化产物，得到(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-羟基-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(0.004g,0.011mmol,12％产率)，为棕色固体。LC/MS(ESI)m/e342.2[(M+H)+,C19H24N3O3计算值,342.2]；HPLC保留时间(方法F):tR＝1.62min.HPLC保留时间(方法B):tR＝5.88min.1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.39(s,1H),8.62(d,J＝6.00Hz,1H),7.96(d,J＝5.60Hz,1H),7.56(s,1H),6.73(s,1H),3.80(s,3H),3.67-3.70(m,1H),3.49-3.59(m,2H),1.81-1.85(m,1H),1.56-1.63(m,2H),1.05(d,J＝6.80Hz,3H),0.98(d,J＝6.80Hz,3H).
实施例8
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-6-异丙基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.4-(4-氯-2-氟苯基)-N-异丙基烟酰胺
向冷却至0℃的4-(4-氯-2-氟苯基)烟酸(400mg,1.590mmol)(如在实施例2的A部分中所制备)在DMF(6mL)中的溶液中加入EDC(457mg,2.384mmol)和HOBT(487mg,3.18mmol)且将混合物搅拌5min。向所得溶液中先后加入DIPEA(0.83mL,4.77mmol)和丙-2-胺(470mg,7.95mmol)且将混合物在室温搅拌12h。用冰处理反应混合物并用乙酸乙酯(3x10mL)萃取。用盐水(1×10mL)洗涤合并的有机层，干燥(Na2SO4)并减压浓缩，得到4-(4-氯-2-氟苯基)-N-异丙基烟酰胺(480mg,1.64mmol,100％)，为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/e293.2[(M+H)+,C15H15ClFN2O计算值293.1]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.84min.
B部分.8-氯-6-异丙基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
在0℃历时10min向氢化钠(79mg,3.28mmol)在THF(8mL)中的混悬液中逐滴加入4-(4-氯-2-氟苯基)-N-异丙基烟酰胺(480mg,1.640mmol)在THF(10mL)中的溶液。将反应混合物在0℃搅拌1h，然后温热至室温并再搅拌1h。然后用冰处理反应混合物并用乙酸乙酯(3×5mL)萃取。用盐水(1×5mL)洗涤合并的有机层，干燥(Na2SO4)并减压浓缩，得到粗制的8-氯-6-异丙基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(250mg,0.917mmol,56％产率)。LC/MS(ESI)m/e273.0[(M+H)+,C15H14ClN2O 273.1]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.98min；1HNMR(400MHz,CDCl3)δppm 9.67(s,1H),8.70(d,J＝6.0Hz,1H),8.17-8.19(d,J＝8.4Hz,1H),7.92-7.94(d,J＝5.6Hz,1H),7.62(d,J＝1.6Hz,1H),7.26-7.31(dd,J＝8.8,2.0Hz,1H),3.21-3.28(m,1H),1.71(d,J＝6.8Hz,6H).
C部分.(S)-(1-((6-异丙基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
在室温向8-氯-6-异丙基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(250mg,0.917mmol)在甲苯(2mL)中的溶液中加入碳酸铯(448mg,1.375mmol)和二叔丁基(2’,4’,6’-三异丙基-[1,1’-联苯]-2-基)膦(234mg,0.550mmol)且将混合物脱气5min。然后先后用N-Boc-L-亮氨醇(591mg,2.75mmol)和二乙酸钯(II)(61.7mg,0.275mmol)处理混合物并再脱气10min。将反应混合物密封并在80℃加热。然后将反应混合物冷却至室温并经硅藻土过滤。用乙酸乙酯洗涤该层并减压浓缩合并的滤液，得到粗产物，通过combi flash(乙酸乙酯/石油醚梯度)将其纯化，得到(S)-(1-((6-异丙基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(160mg,0.198mmol,21％产率)，为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/e 454.2[(M+H)+,C26H36N3O4计算值454.3]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝2.17min.
D部分.(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-6-异丙基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
在0℃向((S)-(1-((6-异丙基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(160mg,0.353mmol)在无水二氯甲烷(4mL)中的溶液中逐滴加入2M HCl的乙醚溶液(0.88mL,1.76mmol)。将反应混合物温热至室温并搅拌2h。然后减压浓缩反应混合物，得到粗产物，通过制备型HPLC(10mM乙酸铵水溶液/乙腈)将其纯化，得到(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-6-异丙基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(45mg,0.127mmol,36％产率)，为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/e 354.2[(M+H)+,C21H28N3O2计算值354.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.81min；HPLC保留时间(方法A):tR＝8.85min；HPLC保留时间(方法B):tR＝9.50min.1H NMR(400MHz,CD3OD)δppm 9.43(d,J＝0.75Hz,1H),8.75(d,J＝5.77Hz,1H),8.42(d,J＝9.04Hz,1H),8.22(d,J＝5.52Hz,1H),7.30(d,J＝2.26Hz,1H),7.10(dd,J＝8.78,2.26Hz,1H),5.26-5.43(m,1H),4.16(dd,J＝9.16,3.89Hz,1H),3.98(dd,J＝9.29,7.03Hz,1H),3.27-3.31(m,1H),1.81-1.92(m,1H),1.73(d,J＝7.03Hz,6H),1.41-1.51(m,2H),1.02(dd,J＝9.54,6.53Hz,6H).
实施例9
(S)-6-烯丙基-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.4-(4-氯-2-氟苯基)-N-环丙基烟酰胺
向冷却至0℃的4-(4-氯-2-氟苯基)烟酸(500mg,1.987mmol)(在实施例2的A部分中所制备)在DMF(6mL)中的溶液中加入EDC(571mg,2.98mmol)和HOBT(609mg,3.97mmol)且将混合物搅拌5min。向所得溶液中先后加入DIPEA(1.04mL,5.96mmol)和环丙胺(567mg,9.93mmol)且将混合物在室温搅拌12h。用冰处理反应混合物并用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。用盐水(1×10mL)洗涤合并的有机层，干燥(Na2SO4)并减压浓缩，得到4-(4-氯-2-氟苯基)-N-环丙基烟酰胺(480mg,1.65mmol,83％产率)。LC/MS(ESI)m/e 291.0[(M+H)+,C15H13ClFN2O计算值291.1]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.79min.
B部分.8-氯-6-环丙基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
在0℃历时10min向氢化钠(72.6mg,3.03mmol)在THF(8mL)中的混悬液中逐滴加入4-(4-氯-2-氟苯基)-N-环丙基烟酰胺(440mg,1.51mmol)在THF(10mL)中的溶液。将反应混合物在0℃搅拌1h，然后温热至室温并再搅拌1h。然后用冰处理反应混合物并用乙酸乙酯(3×5mL)萃取。用盐水(2×5mL)洗涤合并的有机层，干燥(Na2SO4)并减压浓缩，得到粗制的8-氯-6-环丙基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(340mg,1.26mmol,83％产率)，为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/e 271.0[(M+H)+,C15H12ClN2O计算值271.1]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.89min.
C部分.(S)-(1-((6-环丙基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
在室温向8-氯-6-环丙基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(200mg,0.739mmol)在甲苯(2mL)中的溶液中加入碳酸铯(361mg,1.108mmol)和二叔丁基(2’,4’,6’-三异丙基-[1,1’-联苯]-2-基)膦(188mg,0.443mmol)并用氮气将混合物脱气5min。然后先后用N-Boc-L-亮氨醇(477mg,2.216mmol)和二乙酸钯(II)(49.8mg,0.222mmol)处理混合物并再脱气10min。将反应混合物密封并在80℃加热。搅拌过夜后，将反应混合物冷却至室温并经硅藻土过滤。用乙酸乙酯洗涤该层并减压浓缩合并的滤液，得到粗产物，通过combiflash(乙酸乙酯/石油醚)将其纯化，得到(S)-(1-((6-环丙基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(100mg,0.195mmol,26％产率)，为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/e 452.2[(M+H)+,C26H34N3O4计算值452.3]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝2.11min.
D部分.(S)-6-烯丙基-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
在0℃向(S)-(1-((6-环丙基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(100mg,0.221mmol)在无水二氯甲烷(2mL)中的溶液中逐滴加入2M HCl的乙醚溶液(0.176mL,0.353mmol)。将反应混合物温热至室温并搅拌2h。然后减压浓缩反应混合物，得到粗产物，通过制备型HPLC(0.1％TFA/水)将其纯化，得到(S)-6-烯丙基-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(8mg,22.76mmol,10％产率)，为黄色固体。LC/MS(ESI)m/e 352.2[(M+H)+,C21H26N3O2计算值352.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.80min；HPLC保留时间(方法A):tR＝8.06min；HPLC保留时间(方法B):tR＝9.21min.1H NMR(400MHz,CD3OD)δppm 9.56(s,1H),8.85(d,J＝6.27Hz,1H),8.55(d,J＝9.04Hz,1H),8.48(d,J＝6.27Hz,1H),7.20(dd,J＝8.91,2.38Hz,1H),7.14(d,J＝2.26Hz,1H),6.08(dd,J＝17.32,10.54Hz,1H),5.28(dd,J＝10.54,1.00Hz,1H),5.18(dd,J＝17.32,1.25Hz,1H),5.09-5.13(m,2H),4.44(dd,J＝10.54,3.26Hz,1H),4.27(dd,J＝10.42,6.40Hz,1H),3.77(dd,J＝6.78,3.51Hz,1H),1.64-1.88(m,3H),1.07(dd,J＝6.40,4.89Hz,6H).
实施例10
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-7,9-二氯-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.(S)-(1-((7,9-二氯-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
在氮气下向搅拌的(S)-(4-甲基-1-((6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.120g,0.282mmol)(在实施例2的D部分中所制备)在无水乙腈(2mL)中的溶液中加入N-氯代琥珀酰亚胺(0.045g,0.338mmol)且将溶液在85℃加热12h。用水(10mL)稀释反应混合物并用乙酸乙酯(2×20mL)萃取。用硫酸钠干燥合并的有机层并减压蒸发，得到粗产物，通过制备型TLC(乙酸乙酯/石油醚)将其纯化，得到(S)-(1-((7,9-二氯-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(120mg,0.243mmol,86％产率,通过LC/MS确定纯度为55％)，为黄色固体。LC/MS(ESI)m/e 494.2[(M+H)+,C24H30Cl2N3O4计算值494.1]；LC/MS保留时间(方法A):tR＝2.24min.
B部分.(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-7,9-二氯-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
在0℃向(S)-(1-((7,9-二氯-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.120g,0.243mmol)在无水甲醇(5mL)中的溶液中逐滴加入4M HCl的1,4-二噁烷溶液(2mL,8mmol)。将反应混合物温热至室温并搅拌2h。然后减压浓缩反应混合物，得到粗制的化合物，通过制备型HPLC(10mM乙酸铵水溶液/乙腈)将其纯化，得到(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-7,9-二氯-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(28mg,0.063mmol,26％产率)，为黄色固体。LC/MS(ESI)m/e 394.2[(M+H)+,C19H22Cl2N3O2计算值394.1]；LC/MS保留时间(方法A):tR＝1.48min；HPLC保留时间(方法A):tR＝5.21min；HPLC保留时间(方法B):tR＝5.73min.1HNMR(400MHz,CD3OD)δppm 9.50(d,J＝0.75Hz,1H),8.87(d,J＝5.52Hz,1H),8.58(s,1H),8.32(d,J＝5.27Hz,1H),4.17(dd,J＝9.03,4.02Hz,1H),4.05(dd,J＝9.03,7.28Hz,1H),3.93(s,3H),3.37-3.43(m,1H),1.82-1.93(m,1H),1.38-1.57(m,2H),0.99-1.05(m,6H).
实施例11
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-6-苄基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.N-苄基-4-(4-氯-2-氟苯基)烟酰胺
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-6-苄基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
向冷却至0℃的4-(4-氯-2-氟苯基)烟酸(600mg,2.38mmol)(如在实施例2的A部分中所制备)在DMF(6mL)中的溶液中加入EDC(457mg,2.38mmol)和HOBT(365mg,2.38mmol)且将混合物搅拌5min。向所得溶液中先后加入DIPEA(0.416mL,2.384mmol)和苄胺(307mg,2.86mmol)且将混合物在室温搅拌12h。用冰处理反应混合物并用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。用盐水(1×10mL)洗涤合并的有机相，干燥(Na2SO4)并减压浓缩，得到N-苄基-4-(4-氯-2-氟苯基)烟酰胺(680mg,2.00mmol,84％产率)。LC/MS(ESI)m/e 341.0[(M+H)+,C19H15ClFN2O计算值341.1]；LC/MS保留时间(方法A):tR＝1.73min.
B部分.6-苄基-8-氯苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
在0℃历时10min向氢化钠(96mg,3.99mmol)在THF(13mL)中的混悬液中逐滴加入N-苄基-4-(4-氯-2-氟苯基)烟酰胺(680mg,1.995mmol)在THF(10mL)中的溶液。将反应混合物在0℃搅拌1h，然后温热至室温并再搅拌1h。然后用冰处理反应混合物并用乙酸乙酯(3×5mL)萃取。用盐水(1×5mL)洗涤合并的有机层，干燥(Na2SO4)并减压浓缩，得到粗制的6-苄基-8-氯苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(640mg,2.00mmol,100％).LC/MS(ESI)m/e321.0[(M+H)+,C19H14ClN2O计算值321.0]；LC/MS保留时间(方法A):tR＝1.95min.
C部分.(S)-(1-((6-苄基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
在室温向6-苄基-8-氯苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(640mg,2.00mmol)在甲苯(12mL)中的溶液中加入碳酸铯(975mg,2.99mmol)和N-Boc-L-亮氨醇(1287mg,5.99mmol)并用氮气将混合物脱气5min。然后先后用二叔丁基(2’,4’,6’-三异丙基-[1,1’-联苯]-2-基)膦(508mg,1.197mmol)和二乙酸钯(II)(448mg,2.00mmol)处理混合物并再脱气10min。将反应混合物密封并在80℃加热。搅拌过夜后，将反应混合物冷却至室温并经硅藻土过滤。用乙酸乙酯洗涤该层并减压浓缩合并的滤液，得到粗产物，通过combiflash(乙酸乙酯/石油醚)将其纯化，得到(S)-(1-((6-苄基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(500mg,0.738mmol,37％产率)，为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/e 502.3[(M+H)+,C30H36N3O4计算值502.4]；LC/MS保留时间(方法D):tR＝1.26min.
D部分.(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-6-苄基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
在0℃向(S)-(1-((6-苄基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(35mg,0.070mmol)在无水二氯甲烷(1mL)中的溶液中逐滴加入2M HCl的乙醚溶液(0.17mL,0.349mmol)。将反应混合物温热至室温并搅拌2h。然后减压浓缩反应混合物，得到粗产物，通过制备型TLC(乙酸乙酯/石油醚)将其纯化，得到(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-6-苄基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(10mg,0.024mmol,35％产率)，为浅黄色固体。LC/MS(ESI)m/e 402.2[(M+H)+,C25H28N3O2计算值402.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.77min；HPLC保留时间(方法A):tR＝5.54min；HPLC保留时间(方法B):tR＝6.17min.1H NMR(400MHz CD3OD)δppm 9.61(br.s.,1H),8.87(d,J＝4.52Hz,1H),8.53(d,J＝9.04Hz,1H),8.47(d,J＝6.02Hz,1H),7.28-7.38(m,5H),7.15(dd,J＝8.91,2.38Hz,1H),7.04(d,J＝2.26Hz,1H),5.72(d,J＝5.77Hz,2H),4.27(dd,J＝10.54,3.26Hz,1H),4.10(dd,J＝10.42,6.40Hz,1H),3.69(dd,J＝6.65,3.14Hz,1H),1.68-1.81(m,1H),1.57-1.67(m,2H),1.00-1.05(m,6H).
实施例12
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-6-(2-甲氧基乙基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.4-(4-氯-2-氟苯基)烟酰胺
向冷却至0℃的搅拌的4-(4-氯-2-氟苯基)烟酸(1.1g,4.37mmol)(如在实施例2的A部分中所制备)在无水DMF(10mL)中的溶液中先后加入HOBT(1.339g,8.74mmol)、EDC(1.257g,6.56mmol)、DIEA(3.05mL,17.49mmol)和氯化铵(1.169g,21.86mmol)。在氮气气氛下将反应混合物温热至室温并搅拌12h。用水(50mL)稀释反应混合物并用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。用硫酸钠干燥合并的有机层并减压浓缩，得到4-(4-氯-2-氟苯基)烟酰胺(0.900g,3.59mmol,82％产率)LC/MS(ESI)m/e 251[(M+H)+,C12H9ClFN2O计算值251]；LC/MS保留时间(方法A):tR＝1.34min.
B部分.8-氯苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
在0℃向4-(4-氯-2-氟苯基)烟酰胺(0.9g,3.59mmol)在THF(20mL)中的溶液中加入氢化钠(0.258g,10.77mmol)，将反应混合物在0℃搅拌1h，然后温热至室温并搅拌过夜(14h)。然后用冰淬灭反应混合物并用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。用盐水(1×100mL)洗涤合并的有机层，干燥(Na2SO4)并减压浓缩，得到粗制的8-氯苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(0.80g,3.47mmol,97％产率)。LC/MS(ESI)m/e 231.2[(M+H)+,C12H8ClN2O计算值231]；LC/MS保留时间(方法D):tR＝0.61min.
C部分.8-氯-6-(2-甲氧基乙基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
在0℃在氮气下向搅拌的8-氯苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(0.150g,0.650mmol)在无水DMF(2mL)中的溶液中加入2-溴乙基甲基醚(0.090g,0.650mmol)。将反应混合物温热至室温并搅拌12h。用水(10mL)稀释反应混合物并用乙酸乙酯(2×20mL)萃取。用硫酸钠干燥合并的有机层并减压浓缩，得到8-氯-6-(2-甲氧基乙基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(150mg,0.520mmol,80％产率)。LC/MS(ESI)m/e 289.1[(M+H)+,C15H13ClN2O2计算值289.1]；LC/MS保留时间(方法A):tR＝1.65min.
D部分.(S)-(1-((6-(2-甲氧基乙基)-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
在室温向8-氯-6-环丙基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(100mg,0.346mmol)在甲苯(5mL)中的溶液中加入碳酸铯(169mg,0.520mmol)和N-Boc-L-亮氨醇(226mg,1.039mmol)并用氮气将混合物脱气5min。然后先后用二叔丁基(2’,4’,6’-三异丙基-[1,1’-联苯]-2-基)膦(47.8mg,0.208mmol)和二乙酸钯(II)(23.3mg,0.104mmol)处理混合物并再脱气10min。将反应混合物密封并在80℃加热。搅拌过夜后，将反应混合物冷却至室温并经硅藻土过滤。用乙酸乙酯(15mL)洗涤该层并减压浓缩滤液，得到粗产物，通过combiflash(乙酸乙酯/石油醚梯度)将其纯化，得到(S)-(1-((6-(2-甲氧基乙基)-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(80mg,0.170mmol,49％产率)，为棕色胶状物。LC/MS(ESI)m/e 470.3[(M+H)+,C26H36N3O5计算值470.3]；LC/MS保留时间(方法A):tR＝2.02min.
E部分.(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-6-(2-甲氧基乙基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
在0℃向(S)-(1-((6-(2-甲氧基乙基)-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.080g,0.170mmol)在无水甲醇(5mL)中的溶液中逐滴加入4M HCl的1,4-二噁烷溶液(0.21mL,0.85mmol)。将反应混合物温热至室温并搅拌2h。减压浓缩反应混合物，得到粗制的化合物，通过制备型HPLC(10mM乙酸铵水溶液:乙腈)将其纯化，得到(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-6-(2-甲氧基乙基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(20mg,0.054mmol,32％产率)，为白色固体。LC/MS(ESI)m/e 370.2[(M+H)+,C21H28N3O3计算值370.2]；LC/MS保留时间(方法A):tR＝1.34min；HPLC保留时间(方法A):tR＝8.36min；HPLC保留时间(方法B):tR＝8.78min.1HNMR(400MHz,CD3OD)δppm 9.45(s,1H),8.76(d,J＝5.77Hz,1H),8.40(d,J＝9.03Hz,1H,),8.23(d,J＝6.02Hz,1H),7.29(d,J＝2.26Hz,1H),7.11(d,J＝8.78Hz,1H),4.61(t,J＝5.65Hz,2H),4.36(s,1H),4.20(s,1H),3.81(t,J＝5.77Hz,2H),3.63-3.71(m,1H),3.37(s,3H),1.86(m,1H),1.67(qt,J＝14.01,7.09Hz,2H),1.06(d,J＝5.77Hz,6H).
实施例13
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-6-(环丙基甲基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.8-氯-6-(环丙基甲基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
在0℃在氮气下向8-氯苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(100mg,0.434mmol)(如在实施例12的B部分中所制备)在无水DMF(2mL)中的溶液中加入环丙基溴甲烷(0.088g,0.650mmol)。将反应混合物温热至室温并搅拌12h。用水(10mL)稀释反应混合物并用乙酸乙酯(2×20mL)萃取。用硫酸钠干燥合并的有机层并减压浓缩，得到8-氯-6-(环丙基甲基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(100mg,0.351mmol,81％产率,通过LC/MS确定纯度为53％).LC/MS(ESI)m/e 285.1[(M+H)+,C16H14ClN2O计算值285.1]；LC/MS保留时间(方法D):tR＝0.91min.
B部分.(S)-(1-((6-(环丙基甲基)-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
在室温向8-氯-6-(环丙基甲基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(100mg,0.351mmol)在无水甲苯(5mL)中的溶液中加入碳酸铯(172mg,0.527mmol)和Boc-L-亮氨醇(229mg,1.054mmol)并用氮气将混合物脱气5min。然后先后用二叔丁基(2’,4’,6’-三异丙基-[1,1’-联苯]-2-基)膦(48.5mg,0.211mmol)和二乙酸钯(II)(23.65mg,0.105mmol)处理混合物并再脱气10min。将反应混合物密封并在80℃加热。搅拌过夜后，将反应混合物冷却至室温并经硅藻土过滤。用乙酸乙酯(15mL)洗涤该层并减压浓缩滤液，得到粗制的化合物，通过制备型HPLC(乙酸乙酯/石油醚)将其纯化，得到(S)-(1-((6-(环丙基甲基)-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(80mg,0.172mmol,49％产率)，为棕色胶状固体。LC/MS(ESI)m/e466.3[(M+H)+,C27H36N3O4计算值466.3]；LC/MS保留时间(方法A):tR＝2.199min.
C部分.(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-6(环丙基甲基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
在0℃向(S)-(1-((6-(环丙基甲基)-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.08g,0.172mmol)在无水甲醇(5mL)中的溶液中逐滴加入4M HCl的1,4-二噁烷溶液(2mL,65.8mmol)。将反应混合物温热至室温并搅拌2h。减压浓缩反应混合物，得到粗制的化合物，通过制备型HPLC(10mM乙酸铵水溶液:乙腈)将其纯化，得到(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-6-(环丙基甲基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(22mg,0.060mmol,35％产率)，为黄色胶状物。LC/MS(ESI)m/e 366.2[(M+H)+,C22H28N3O2计算值366.2]；LC/MS保留时间(方法A):tR＝1.47min；HPLC保留时间(方法A):tR＝9.470min；HPLC保留时间(方法B):tR＝5.250min.1HNMR(400MHz,CD3OD)δppm 9.47(d,J＝0.50Hz,1H),8.78(d,J＝5.77Hz,1H),8.46(d,J＝9.04Hz,1H),8.26(d,J＝5.52Hz,1H),7.28(d,J＝2.26Hz,1H),7.14(dd,J＝9.03,2.26Hz,1H),4.39(d,J＝6.78Hz,2H),4.31(dd,J＝9.79,3.76Hz,1H),4.13(dd,J＝9.79,6.78Hz,1H),3.53(dd,J＝7.15,3.64Hz,1H),1.87(m,1H),1.59(q,J＝13.72,7.03Hz,2H),1.36-1.45(m,1H),1.04(dd,J＝7.28,6.78Hz,6H),0.57-0.63(m,4H).
实施例14
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-氟-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.2-(4-氯-2,5-二氟苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷
向冷却至-10℃的1-溴-4-氯-2,5-二氟苯(200mg,0.879mmol)在THF(10mL)中的溶液中逐滴加入异丙基溴化镁(1M的THF溶液,1.055mL,1.055mmol)且将反应混合物在该温度搅拌1h。然后将反应混合物温热至0℃并再搅拌1h。将所得混合物再次冷却至-10℃并用2-异丙氧基-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(196mg,1.055mmol)的溶液逐滴处理。将反应混合物温热至室温并用饱和氯化铵溶液(3mL)处理。将两层分开并用二氯甲烷(2×2mL)萃取水层。将合并的有机层用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到粗制的化合物，通过硅胶柱色谱(7:3-乙酸乙酯:己烷)将其纯化，得到2-(4-氯-2,5-二氟苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(150mg,0.546mmol,62％产率)，为油状物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 7.46-7.49(m,1H),7.09-7.13(m,1H),1.35(s,12H).
B部分.4-(4-氯-2,5-二氟苯基)烟酸甲酯
在氮气气氛下在室温向搅拌的4-氯烟酸甲酯(100mg,0.583mmol)在1,4-二噁烷:水的溶剂混合物(4:1,20mL)中的溶液中先后加入碳酸钾(62.6mg,0.453mmol)和四丁基溴化铵(73.0mg,0.226mmol)。将所得混合物用氮气脱气10min并先后用N-(6-氯-4-(三甲基甲锡烷基)吡啶-2-基)乙酰胺(60.4mg,0.181mmol)和双(三苯基膦)二氯化钯(II)(10.60mg,0.015mmol)处理。将混合物再次脱气10min并在80℃加热8h。然后将反应混合物冷却至室温，用水(20mL)淬灭并用乙酸乙酯(5mL)萃取。分离有机层，用水(3×5mL)洗涤，干燥(Na2SO4)并减压浓缩，得到粗制的4-(4-氯-2,5-二氟苯基)烟酸甲酯(400mg,0.592mmol,20％产率,通过LC/MS确定纯度为42％)。无需进一步纯化即将其用于下一步。LC/MS(ESI)m/e 284.0[(M+H)+,C13H9ClF2NO2计算值284.02]；LC/MS保留时间(方法A):tR＝1.82min.
C部分.4-(4-氯-2,5-二氟苯基)烟酸
向4-(4-氯-2,5-二氟苯基)烟酸甲酯(400mg,1.41mmol)在水:THF(1:1,8mL)中的溶液中加入LiOH(67.5mg,2.82mmol)且将反应混合物在室温搅拌4h。反应混合物用水(5mL)淬灭并用乙酸乙酯(2×5mL)洗涤。分离水层，用1.5N HCl酸化并减压浓缩，得到4-(4-氯-2,5-二氟苯基)烟酸(180mg,0.541mmol,38％产率)，为固体。LC/MS(ESI)m/e 270[(M+H)+,C12H7ClF2NO2计算值270]；LC/MS保留时间(方法B):tR＝1.48min.
D部分.4-(4-氯-2,5-二氟苯基)-N-甲基烟酰胺
将4-(4-氯-2,5-二氟苯基)烟酸(170mg,0.630mmol)置于亚硫酰氯(0.14mL,1.89mmol)中并在65℃加热1h。减压蒸发溶剂，得到粗制的油状物，在0℃将其溶于二氯甲烷中并逐滴加到甲胺盐酸盐(63.9mg,0.946mmol)和DIEA(0.11mL,0.63mmol)在DCM(8mL)中的混合物中。然后将反应混合物温热至室温并搅拌7h。反应混合物用DCM(5mL)稀释并先后用水(3×5mL)和盐水(1×10mL)洗涤。用硫酸钠干燥合并的有机萃取物且将其减压浓缩，得到粗产物，通过制备型薄层色谱(3:2乙酸乙酯:己烷)将其纯化，得到4-(4-氯-2,5-二氟苯基)-N-甲基烟酰胺(90mg,0.264mmol,42％产率)，为白色固体。LC/MS(ESI)m/e 283.0[(M+H)+,C13H10ClF2N2O计算值283.0]；LC/MS保留时间(方法A):tR＝1.46min.
E部分.8-氯-9-氟-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
在0℃向氢化钠(56.6mg,1.42mmol)在THF(5mL)中的混悬液中慢慢加入4-(4-氯-2,5-二氟苯基)-N-甲基烟酰胺(100mg,0.354mmol)的THF(5mL)溶液。将所得混合物在室温搅拌1h。然后加入冷水(1mL)来淬灭反应并用乙酸乙酯(2×2mL)萃取。用硫酸钠干燥合并的有机萃取物并减压浓缩。通过柱色谱(1:1乙酸乙酯/石油醚)纯化残余物，得到8-氯-9-氟-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(82mg,0.297mmol,84％产率)，为白色固体。LC/MS(ESI)m/e262.5[(M+H)+,C13H9ClFN2O计算值263.0]；LC/MS保留时间(方法D):tR＝1.79min；HPLC保留时间(方法A):tR＝7.35min；HPLC保留时间(方法B):tR＝7.07min.
F部分.(S)-(1-((9-氟-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
向搅拌的8-氯-9-氟-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(40mg,0.152mmol)、(S)-(1-羟基-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(39.7mg,0.183mmol)、二叔丁基(2’,4’,6’-三异丙基-[1,1’-联苯]-2-基)膦(38.8mg,0.091mmol)和碳酸铯(74.4mg,0.228mmol)在甲苯(4mL)中的混悬液中加入二乙酸钯(II)(10.26mg,0.046mmol)。将氮气鼓泡通过混合物5min，然后将反应混合物加热至85℃且保持8h。将反应混合物冷却至室温，用乙酸乙酯(2mL)稀释并经硅藻土过滤。用水(2×2mL)和盐水(2×2mL)洗涤滤液，用硫酸钠干燥并减压浓缩。经由硅胶柱色谱(60％乙酸乙酯/己烷)纯化残余物，得到(S)-(1-((9-氟-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(28mg,0.023mmol,15％产率)。LC/MS(ESI)m/e444.2[(M+H)+,C24H31lFN3O4计算值444.2]；LC/MS保留时间(方法A):tR＝2.02min.
G部分.(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-氟-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
在0℃历时10min向搅拌的(S)-(1-((9-氟-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(25mg,0.056mmol)在乙醚(4mL)中的溶液中加入2M盐酸在乙醚中的溶液(42.5μl,0.085mmol)。移开冰浴，将反应混合物在室温搅拌2h。除去溶剂且将粗物质吸收在水(5mL)中。将水层用乙酸乙酯(3mL)洗涤并用10％NaHCO3(20mL)处理。用乙酸乙酯(3×10mL)萃取所得溶液。用水(2×10mL)洗涤合并的有机层，干燥(硫酸钠)，过滤并减压浓缩，得到粗物质，经由制备型TLC(40％乙酸乙酯/己烷)将其纯化，得到(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-氟-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(15mg,0.041mmol,73％产率)，为白色固体。LC/MS(ESI)m/e 344.2[(M+H)+,C19H23FN3O2计算值344.2]；LC/MS保留时间(方法A):tR＝1.35min；HPLC保留时间(方法A):tR＝8.31min；HPLC保留时间(方法B):tR＝8.85min；1H NMR(400MHz,CD3OD)δppm 9.66-9.71(m,1H),8.83-8.87(m,1H),7.90-7.95(m,1H),7.79-7.83(m,1H),6.91-6.95(m,1H),4.10-4.14(m,1H),3.89-3.95(m,1H),3.76-3.80(m,3H),3.35-3.44(m,1H),1.78-1.86(m,1H),1.39(t,J＝7.00Hz,2H),0.96-1.03(m,6H).
实施例15
8-(2-氨基-5,5,5-三氟戊基氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.2-(二苯基亚甲基氨基)-5,5,5-三氟戊酸叔丁酯
在氮气气氛下历时30min向搅拌的冷却至-78℃的2-((二苯基亚甲基)氨基)乙酸叔丁酯(1g,3.39mmol)在THF(20mL)中的溶液中逐滴加入2M LDA在THF中的溶液(2.54mL,5.08mmol)。然后向该混合物中加入三氟甲磺酸3,3,3-三氟丙酯(1.083g,4.40mmol)。将反应混合物逐渐温热至室温并搅拌4h。通过在0℃加入饱和氯化铵水溶液淬灭反应混合物。然后用乙酸乙酯(3×10mL)萃取反应混合物。用水(1×10mL)和盐水(1×10mL)洗涤合并的有机萃取物，用硫酸钠干燥，然后减压浓缩。通过硅胶柱色谱(2％乙酸乙酯/己烷)纯化粗制的油状物，得到2-((二苯基亚甲基)氨基)-5,5,5-三氟戊酸叔丁酯(800mg,2.02mmol,60％产率)，为黄色油状物。LC/MS(ESI)m/e 391.9[(M+H)+,C22H25F3NO2计算值,392.2]；LC/MS保留时间(方法E):tR＝2.49min.
B部分.2-氨基-5,5,5-三氟戊酸(盐酸盐)
将搅拌的2-((二苯基亚甲基)氨基)-5,5,5-三氟戊酸叔丁酯(800mg,2.023mmol)在50％HCl水溶液(0.123mL,2.023mmol)中的溶液在100℃回流8h。将反应混合物冷却至室温并减压浓缩，得到2-氨基-5,5,5-三氟戊酸盐酸盐(400mg,1.82mmol,90％产率,通过LC/MS确定纯度为78％)，为白色固体。LC/MS(ESI)m/e 171.7[(M+H)+,C5H7F3O2计算值,172.1]；LC/MS保留时间(方法E):tR＝0.80min.
C部分.2-(叔丁氧基羰基氨基)-5,5,5-三氟戊酸
在室温向搅拌的2-氨基-5,5,5-三氟戊酸盐酸盐(400mg,1.503mmol,通过LC/MS确定纯度为78％)在THF(8mL)和水(8mL)中的溶液中加入K2CO3(831mg,6.01mmol)且将溶液搅拌10min。向该混合物中加入Boc2O(656mg,3.01mmol)。将反应混合物在室温搅拌8h，然后减压浓缩。用乙酸乙酯(3×5mL)洗涤水层。将水层用饱和枸橼酸溶液(5mL)酸化并用乙酸乙酯(3×8mL)萃取。先后用水(3×5mL)和盐水溶液(1×10mL)洗涤合并的有机层，用硫酸钠干燥并减压浓缩，得到2-((叔丁氧基羰基)氨基)-5,5,5-三氟戊酸(500mg,1.84mmol,100％产率)，为无色油状物。无需进一步纯化即将其用于下一步。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ5.04(s,1H),4.38(s,1H),2.15-2.28(m,2H),1.91-1.95(m,2H),1.46(s,9H).
D部分.5,5,5-三氟-1-羟基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯
在氮气气氛下向搅拌的冷却至-10℃的2-((叔丁氧基羰基)氨基)-5,5,5-三氟戊酸(500mg,1.843mmol)在THF(15mL)中的溶液中先后逐滴加入N-甲基吗啉(0.223mL,2.028mmol)和氯甲酸异丁酯(0.266mL,2.028mmol)。然后将溶液搅拌30min，然后过滤。将滤液加到硼氢化钠(147mg,3.87mmol)在水(10mL)中的溶液中，搅拌5min并用乙酸乙酯(10mL)稀释。分离有机层，用盐水(2×10mL)洗涤，干燥(Na2SO4)并减压蒸发，得到(5,5,5-三氟-1-羟基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(400mg,1.555mmol,84％产率)，为白色固体，无需进一步纯化即将其用于下一步。1H NMR(400MHz,MeOD)δ3.44-3.56(m,3H),2.16-2.26(m,2H),1.83-1.92(m,1H),1.57-1.67(m,1H),1.47(s,9H).
E部分.5,5,5-三氟-1-(6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)戊-2-基氨基甲酸叔丁酯
如实施例2的D部分所述进行反应，得到产物(5,5,5-三氟-1-((6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(160mg,0.237mmol,23％产率)，为白色固体。LC/MS(ESI)m/e 466.31[(M+H)+,C23H27F3N3O4计算值,466.19]；LC/MS保留时间(方法D):tR＝1.04min.
F部分.8-(2-氨基-5,5,5-三氟戊基氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
在氮气气氛下历时5min向冷却至0℃的(5,5,5-三氟-1-((6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(150mg,0.322mmol)在乙醚(10mL)中的溶液中慢慢加入4M HCl的1,4-二噁烷溶液(0.098mL,0.392mmol)。将浅黄色反应混合物在0℃搅拌5min，然后温热至室温并搅拌12h。减压除去溶剂。将剩余黄色油状物用水(3mL)稀释并用EtOAc(2×4mL)萃取。分离水层并用饱和Na2CO3溶液(3mL)处理。用EtOAc(3×5mL)萃取所得水层。分离合并的有机层并用水(2×5mL)和盐水(1×5mL)洗涤并用硫酸钠干燥。减压蒸发滤液并通过SFC(CO2和0.5％DEA/甲醇)将其纯化，得到8-((2-氨基-5,5,5-三氟苯基)氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(102.8mg,0.278mmol,86％产率)，为白色固体。LC/MS(ESI)m/e 366.2[(M+H)+,C18H19F3N3O2计算值366.13]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.77min；HPLC保留时间(方法A):tR＝7.79min；HPLC保留时间(方法B):tR＝8.20min.1H NMR(400MHz,MeOD)δ9.48(d,J＝0.80Hz,1H),8.78(d,J＝5.60Hz,1H),8.44(d,J＝8.80Hz,1H),8.27(d,J＝5.60Hz,1H),7.17(d,J＝2.40Hz,1H),7.12(dd,J＝2.40,8.80Hz,1H),4.17-4.20(m,1H),4.09(dd,J＝6.00,9.40Hz,1H),3.82(s,3H),3.28-3.28(m,1H),2.33-2.49(m,2H),1.92-1.99(m,1H),1.73-1.80(m,1H).
实施例16
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分：2,4-二氯烟酸
在-78℃向2,4-二氯吡啶(7g,47.3mmol)在THF(70mL)中的溶液中加入2M LDA在THF中的溶液(28.4mL,56.8mmol)并搅拌30min。反应混合物用过量干冰淬灭并在室温搅拌30min。用1.5N HCl中和后，反应混合物用乙酸乙酯(100mL)稀释并用盐水(2×50mL)和水(100mL)洗涤。分离有机层，用Na2SO4干燥并减压浓缩，得到2,4-二氯烟酸(4.5g,23.44mmol,50％产率)，为棕色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.47(d,1H),7.74(d,1H).
B部分：2,4-二氯烟酸甲酯
向冷却至0℃的2,4-二氯烟酸(500mg,2.60mmol)在乙腈(10mL)中的溶液中先后加入DBU(0.981mL,6.51mmol)碘甲烷(0.814mL,13.0mmol)。将反应混合物在室温搅拌过夜(14h)。反应完成后，减压除去溶剂。将残余物吸收在乙酸乙酯(10mL)中，用水(1×5mL)洗涤，用Na2SO4干燥并减压浓缩。通过硅胶柱色谱(EtOAc-己烷)纯化残余物，得到2,4-二氯烟酸甲酯(260mg,1.262mmol,49％产率)，为淡黄色油状物。LC/MS,(ESI)m/z 206.1[(M+H)+,C7H6Cl2NO2计算值205.97]；LC/MS保留时间(方法D):tR＝0.85min.1H NMR(300MHz,CD3OD)δppm 8.42(d,J＝5.4Hz,1H),7.59(d,J＝5.4Hz,1H),3.99(s,3H).
C部分：4-氯-2-甲基烟酸甲酯
将2,4-二氯烟酸甲酯(2g,9.71mmol)、三甲基环三硼氧烷(1.462g,11.65mmol)、Cs2CO3(6.33g,19.42mmol)和PdCl2(dppf)(0.710g,0.971mmol)在1,4-二噁烷(30mL)和水(2mL)中的混合物用氮气吹扫5min并在70℃加热16h。减压浓缩反应混合物并通过硅胶柱色谱(EtOAc-己烷混合物)将其纯化，得到4-氯-2-甲基烟酸甲酯(550mg,2.94mmol,31％产率)，为红色油状物。1HNMR(300MHz,CD3OD)δppm 8.44(d,J＝5.7Hz,1H),7.43(d,J＝5.7Hz,1H),3.98(s,3H),2.54(s,3H).
D部分：4-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基烟酸甲酯
将4-氯-2-甲基烟酸甲酯(4g,21.55mmol)、(4-氯-2-氟苯基)硼酸(4.13g,23.71mmol)、三环己基膦(1.813g,6.47mmol)、Pd(OAc)2(0.484g,2.155mmol)和Cs2CO3(14.04g,43.1mmol)在DMA(15mL)中的混合物用氮气吹扫5min并在100℃加热过夜(14h)。冷却后，经硅藻土过滤反应混合物。减压除去DMA并用乙酸乙酯(10mL)稀释残余物。减压浓缩有机相并通过硅胶柱色谱(EtOAc-己烷)将其纯化，得到4-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基烟酸甲酯(1g,3.58mmol,17％产率)，为红色油状物。LC/MS,(ESI)m/z 280.1[(M+H)+,C14H12ClFNO2计算值280.0]；LC/MS保留时间(方法D):tR＝0.80min.
E部分：4-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基烟酸
向4-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基烟酸甲酯(40mg,0.143mmol)在MeOH(2mL)和水(3mL)中的溶液中加入NaOH(11.44mg,0.286mmol)且将反应混合物在室温搅拌14h。减压浓缩反应混合物，用1.5N HCl酸化并用乙酸乙酯(5mL)萃取。用饱和NaHCO3(2×10mL)和水(10mL)洗涤有机层，用Na2SO4干燥并减压浓缩，得到粗制的4-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基烟酸(30mg,0.113mmol,79％产率)，为棕色固体。无需进一步纯化即将其用于下一步。LC/MS,(ESI)m/z266.1[(M+H)+,C13H10ClFNO2计算值266.0]；LC/MS保留时间(方法D):tR＝0.64min.
F部分：4-(4-氯-2-氟苯基)-N,2-二甲基烟酰胺
在0℃向4-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基烟酸(180mg,0.678mmol)在DCM(5mL)和DMF(0.2mL)中的溶液中加入草酰氯(0.178mL,2.033mmol)。将反应混合物在室温搅拌3h，然后用DCM(5mL)稀释并用冷却至0℃的甲胺盐酸盐(457mg,6.78mmol)在DCM(5mL)中的溶液处理。将混合物在室温再搅拌1h。溶液用DCM(20mL)萃取，用饱和NaHCO3(2×10mL)和水(20mL)洗涤，用Na2SO4并减压浓缩，得到4-(4-氯-2-氟苯基)-N,2-二甲基烟酰胺(50mg,0.179mmol,27％产率)，为棕色胶状物。LC/MS,(ESI)m/z 279.2[(M+H)+,C14H13ClFN2O计算值279.1]；LC/MS保留时间(方法D):tR＝0.62min.
G部分：8-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
向冷却至0℃的4-(4-氯-2-氟苯基)-N,2-二甲基烟酰胺(40mg,0.144mmol)在THF(3mL)中的溶液中加入NaH(10.33mg,0.431mmol)且将反应混合物搅拌4h。反应完成后，用冰水淬灭反应混合物并用乙酸乙酯(20mL)萃取产物。将有机层用Na2SO4干燥并减压浓缩，得到8-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(30mg,0.116mmol,81％产率)，为灰白色固体。LC/MS,(ESI)m/z259.2[(M+H)+,C14H12ClN2O计算值259.1]；LC/MS保留时间(方法D):tR＝0.65min.
H部分：(S)-(1-((4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
将8-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(60mg,0.232mmol)、(S)-(1-羟基-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(101mg,0.464mmol)、Cs2CO3(113mg,0.348mmol)、Pd(OAc)2(15.6mg,0.070mmol)和2-二叔丁基膦基-2’,4’,6’-三异丙基-1,1’-联苯(5.91mg,0.014mmol)在甲苯(5mL)中的混合物用氮气吹扫5min并在100℃加热过夜(14h)。冷却后，将反应混合物经硅藻土过滤，减压浓缩并溶于乙酸乙酯(5mL)中。用盐水(2×10mL)和水(20mL)洗涤有机层，用Na2SO4干燥并减压浓缩，得到(S)-(1-((4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(55mg粗品)，为胶状固体。无需进一步纯化即将粗产物用于下一步。LC/MS,(ESI)m/z 440.4[(M+H)+,C25H34N3O4计算值,440.2]；LC/MS保留时间(方法D):tR＝0.89min.
I部分：(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
在0℃向(S)-(1-((4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(30mg,0.068mmol)在MeOH(3mL)中的溶液中加入HCl(4N的1,4-二噁烷溶液,3mL,12.00mmol)。将溶液温热至室温并搅拌2h。然后减压浓缩反应混合物且将残余物溶于乙酸乙酯(10mL)中。用饱和NaHCO3(2×10mL)和水(20mL)洗涤有机层，用Na2SO4干燥并减压浓缩。通过制备型TLC(DCM-MeOH混合物)纯化残余物，得到(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(8mg,0.021mmol,31％产率)，为棕色固体。LC/MS,(ESI)m/z 340.2[(M+H)+,C20H26N3O2计算值,340.2]；LC/MS保留时间(方法B):tR＝1.27min.HPLC保留时间(方法A):tR＝8.30和HPLC保留时间(方法B):tR＝8.97min.1H NMR(400MHz,CD3OD)δppm8.53(d,J＝5.77Hz,1H),8.33(d,J＝9.54Hz,1H),8.08(d,J＝5.77Hz,1H),7.00-7.06(m,2H),4.21(m,1H),4.02(m,1H),3.73(s,3H),3.47-3.52(m,1H),3.06(s,3H),1.82-1.93(m,1H),1.67-1.76(m,2H),1.26-1.56(m,6H).
实施例17
(S)-4-氨基-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.(4-氯吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯
在-5℃向LHMDS(1M的THF溶液,17.11mL,17.11mmol)在THF(5mL)中的溶液中加入4-氯吡啶-2-胺(1g,7.78mmol)在THF(5mL)中的溶液且将混合物搅拌5min。向该混合物中加入Boc2O(1.898mL,8.18mmol)在THF(5mL)中的溶液。将混合物在0℃搅拌2h并通过加入NH4Cl水溶液淬灭。通过加入1.5N HCl将溶液的pH调至6并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。用碳酸氢钠(15mL)、水(15mL)和盐水(15mL)洗涤合并的有机萃取物。将合并的有机萃取物用硫酸钠干燥并减压浓缩。通过硅胶柱色谱(乙酸乙酯-石油醚梯度)纯化残余物，得到(4-氯吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(1.435g,6.28mmol,81％产率)。1HNMR.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.10(s,1H),8.23(d,J＝5.20Hz,1H),7.88(d,J＝2.00Hz,1H),7.15(dd,J＝2.00,5.20Hz,1H),1.48(s,9H).
B部分.4-氯-3-甲酰基吡啶-2-基氨基甲酸叔丁酯
向搅拌的冷却至-78℃的(4-氯吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(1.00g,4.37mmol)在THF(30mL)中的溶液中逐滴加入正丁基锂(2.55M的己烷溶液,4.1mL,10.06mmol)。加完后，将溶液在-78℃搅拌1h。逐滴加入DMF(1.591mL,20.55mmol)且将所得溶液在-78℃再搅拌1h。然后通过加入饱和氯化铵水溶液(20mL)将反应混合物淬灭并用乙酸乙酯(2×25mL)萃取。用盐水(1×20mL)洗涤合并的有机萃取物，用硫酸钠干燥并减压浓缩。经由中性氧化铝色谱(乙酸乙酯/己烷)纯化粗残余物，得到(4-氯-3-甲酰基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(530mg,2.06mmol,27％产率)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.73(s,1H),10.55(s,1H),8.52(d,J＝5.3Hz,1H),7.06(d,J＝5.3Hz,1H),1.56(s,9H)；LC/MS(ESI)m/e 255.2[(M-H)-,C11H12ClN2O3计算值255.1].LC/MS保留时间(方法A):tR＝1.75min.
C部分.4-(4-氯-2-氟苯基)-3-甲酰基吡啶-2-基氨基甲酸叔丁酯
向搅拌的(4-溴-3-甲酰基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(100mg,0.332mmol)、(4-氯-2-氟苯基)硼酸(57.9mg,0.332mmol)和碳酸铯(216mg,0.664mmol)在THF(50mL)和水(8mL)中的混悬液中加入Pd(PPh3)4(19.19mg,0.017mmol)且将反应混合物加热至85℃过夜(14h)。将反应混合物冷却至室温，用水(30mL)稀释并用乙酸乙酯(2×25mL)萃取。用盐水(1×25mL)洗涤合并的有机萃取物，用硫酸钠干燥并减压浓缩。经由硅胶色谱(乙酸乙酯/己烷)纯化粗残余物，得到4-(4-氯-2-氟苯基)-3-甲酰基吡啶-2-基氨基甲酸叔丁酯(60mg,0.17mmol,35％产率)。LC/MS(ESI)m/e 351.2[(M+H)+,C17H17ClFN2O3计算值351.1].LC/MS保留时间(方法A):tR＝2.07min.
D部分.4-((叔丁氧基羰基)氨基)-8-氯-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-6-鎓氟化物
在0℃向搅拌的(4-(4-氯-2-氟苯基)-3-甲酰基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(700mg,1.996mmol)在乙醇(10mL)中的溶液中加入甲胺(8M的EtOH溶液)(620mg,2.49mL,19.96mmol)且将反应混合物在室温搅拌5h。耗尽原料后，减压除去溶剂。用己烷(50mL)洗涤残余物并真空干燥由此得到的固体，得到氟化物盐即4-((叔丁氧基羰基)氨基)-8-氯-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-6-鎓氟化物(900mg,1.69mmol,84％产率)，为黄色固体。LC/MS(ESI)m/e 344.2[(M)+,C18H19ClN3O2计算值344.1]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.90min.
E部分.8-氯-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-4-基氨基甲酸
在室温向搅拌的4-((叔丁氧基羰基)氨基)-8-氯-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-6-鎓氟化物(0.35g,0.65mmol)和NaOH(0.162g,4.06mmol)在DCM(10mL)和水(10mL)的混合物中的溶液中分份加入KMnO4(0.642g,4.06mmol)且将反应混合物加热至90℃且保持1h。溶液用水(10mL)稀释并用DCM(2×20mL)萃取。将用水(50mL)洗涤合并的有机层，用硫酸钠干燥并减压浓缩，得到(8-氯-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-4-基)氨基甲酸(305mg,0.422mmol,65％产率)，为黄色固体，无需进一步纯化即将其用于下一步。LC/MS(ESI)m/e 304.1[(M+H)+,C14H11ClN3O3计算值304.04]；LC/MS保留时间(方法D):tR＝1.01min.
F部分.4-氨基-8-氯-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
将(8-氯-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-4-基)氨基甲酸(300mg,0.415mmol)在浓HCl(15mL,494mmol)中的溶液在90℃加热2h。用饱和碳酸氢钠溶液将反应混合物的pH调至8并用DCM(2×30mL)萃取。用盐水(30mL)洗涤合并的有机层，用硫酸钠干燥并减压浓缩。通过制备型HPLC(含0.1％TFA的MeOH)纯化残余物，得到4-氨基-8-氯-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(30mg,0.110mmol,27％产率)，为单TFA盐。LC/MS(ESI)m/e 260.0[(M+H)+,C13H11ClN3O计算值260.05]；LC/MS保留时间(方法B):tR＝1.18min；HPLC保留时间(方法A):tR＝5.24min；HPLC保留时间(方法B):tR＝6.31min；400MHz,1H NMR(DMSO-d6)δ9.95(s,1H),8.75(s,1H),8.56(d,J＝8.80Hz,1H),8.23(d,J＝6.80Hz,1H),7.82(dd,J＝6.80,7.20Hz,2H),7.54(dd,J＝2.00,8.80Hz,1H),3.72(s,3H).
G部分.8-氯-4-(4-甲氧基苄基氨基)-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
在0℃向搅拌的4-氨基-8-氯-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(30mg,0.059mmol)在DMF(10mL)中的溶液中加入NaH(7.09mg,0.295mmol)且将反应混合物搅拌5min。向该混合物中加入1-(氯甲基)-4-甲氧基苯(0.026mL,0.191mmol)并在室温搅拌16h。加入冰将反应淬灭，用乙酸乙酯(2×10mL)萃取反应混合物。用水(25mL)洗涤合并的有机层，用硫酸钠干燥并减压浓缩，得到8-氯-4-((4-甲氧基苄基)氨基)-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(29mg,0.044mmol,75％产率)。LC/MS(ESI)m/e 380.27[(M+H)+,C21H19ClN3O2计算值380.11]；LC/MS保留时间(方法D):tR＝0.86min.
H部分.(S)-1-(4-(4-甲氧基苄基氨基)-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯
如实施例2的D部分中所述进行反应，得到粗产物，通过硅胶柱(使用乙酸乙酯和己烷)将其纯化，得到(S)-(1-((4-((4-甲氧基苄基)氨基)-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.29g,0.422mmol,61％产率)，为黄色油状物。LC/MS(ESI)m/e561.5[(M+H)+,C32H41N4O5计算值561.3]；LC/MS保留时间(方法D):tR＝1.03min.
I部分.(S)-4-氨基-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
在室温向搅拌的(S)-(1-((4-((4-甲氧基苄基)氨基)-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(100mg,0.145mmol)在DCM(10mL)中的溶液中逐滴加入TFA(4mL,51.9mmol)且将反应混合物在45℃加热12h。反应完成后，减压蒸发挥发性有机物并通过制备型HPLC(含0.1％TFA的水/乙腈作为流动相)纯化所得残余物，得到(S)-4-氨基-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(16mg,0.046mmol,32％产率)，为单TFA盐，为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/e341.2[(M+H)+,计算值C19H25N4O2341.2]；LC/MS保留时间(方法B):tR＝1.08min；HPLC保留时间(方法A):tR＝8.02min；HPLC保留时间(方法B):tR＝8.40min；1H NMR(400MHz,MeOD)δ8.44(d,J＝8.80Hz,1H),8.00(d,J＝7.20Hz,1H),7.71(d,J＝7.20Hz,1H),7.24(d,J＝2.40Hz,1H),7.21-7.22(m,1H),4.51(dd,J＝3.20,10.80Hz,1H),4.34(dd,J＝6.40,10.40Hz,1H),3.84(s,3H),3.78-3.82(m,1H),1.65-1.89(m,3H),1.08(d,J＝4.40Hz,3H),1.06(d,J＝4.40Hz,3H).
实施例18
(S)-N-(8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-2-基)乙酰胺
A部分.4-氯吡啶-2-胺
在室温向搅拌的4-氯吡啶-2-胺(8g,62.2mmol)于乙腈(600mL)中的溶液中分批添加N-溴代琥珀酰亚胺(11.08g,62.2mmol)且将反应混合物搅拌14h。将反应混合物减压浓缩。残余物用水(50mL)稀释并用EtOAc(3×50mL)萃取。合并的有机层用水(100mL)和盐水(100mL)洗涤并用硫酸钠干燥。有机物减压浓缩，得到5-溴-4-氯吡啶-2-胺，为黄色固体(13g,99％)，其无需进一步纯化即使用。LC/MS(ESI)m/e 207.0[(M+H)+,计算值C5H5BrClN2206.9]；LC/MS保留时间(方法B):tR＝0.8min.
B部分.N-(5-溴-4-氯吡啶-2-基)乙酰胺
在0℃向5-溴-4-氯吡啶-2-胺(11.6g,55.9mmol)于吡啶(100mL)中的搅拌溶液中添加乙酰氯(3.98mL,55.9mmol)并在室温搅拌反应混合物3h。反应混合物用冷水淬灭并减压浓缩。残余物用水(50mL)稀释并用EtOAc(3×50mL)萃取。合并的有机层用水(100mL)和盐水(100mL)洗涤并用硫酸钠干燥。将有机物减压浓缩，得到N-(5-溴-4-氯吡啶-2-基)乙酰胺(14.6g,55.9mmol,100％产率)，为白色固体，其无需进一步纯化即使用。LC/MS(ESI)m/e 249[(M+H)+,计算值C7H7BrClN2O 248.9],LC/MS保留时间(方法B):tR＝1.64min；1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.87(s,1H),8.58(s,1H),8.33(s,1H),2.11(s,3H).
C部分.N-(4-氯-5-乙烯基吡啶-2-基)乙酰胺
向N-(5-溴-4-氯吡啶-2-基)乙酰胺(7g,28.1mmol)、2,4,6-三乙烯基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三硼杂环己烷与吡啶的复合物(1:1)(8.78g,36.5mmol)、碳酸钠(5.95g,56.1mmol)于7mL水中的溶液和四(三苯基膦)钯(0.973g,0.842mmol)于甲苯(50mL)和乙醇(8mL)的混合物中的搅拌溶液中鼓泡氮气5分钟。在85℃加热反应混合物14小时。结束后，反应混合物用EtOAc(50mL)稀释，通过硅藻土过滤。滤液用水稀释且分离有机层，用盐水溶液洗涤，用硫酸钠干燥。将有机物减压浓缩且如此获得的残余物通过comb flash柱120g使用己烷/乙酸乙酯纯化。产物在30％EtOAc/己烷下洗脱并浓缩所需的级份得到N-(4-氯-5-乙烯基吡啶-2-基)乙酰胺(5.92g,27.7mmol,99％产率)，为黄色固体。LC/MS(ESI)m/e 197.2[(M+H)+,计算值C9H10ClN2O197.04]LC/MS保留时间(方法A):tR＝1.50min；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.79(s,1H),8.64(s,1H),8.18(d,J＝6.40Hz,1H),6.88(dd,J＝11.20,17.60Hz,1H),5.99(dd,J＝0.80,17.60Hz,1H),5.47(dd,J＝0.80,11.40Hz,1H),2.12(s,3H).
D部分.N-(4-氯-5-甲酰基吡啶-2-基)乙酰胺
在0℃向N-(4-氯-5-乙烯基吡啶-2-基)乙酰胺(6g,30.5mmol)和2,6-二甲基吡啶(7.11mL,61.0mmol)于1,4-二噁烷(110mL)和水(25mL)的混合物中的搅拌溶液中添加四氧化锇(2.5％于2-甲基-2-丙醇中,9.58mL,30.5mmol)，然后添加高碘酸钠(19.58g,92mmol)且将反应混合物搅拌4h。反应混合物用水稀释并用EtOAc(2×100mL)稀释。合并的有机层用盐水溶液洗涤，用硫酸钠干燥，减压浓缩且将如此获得的残余物通过comb flash柱120g硅胶柱使用己烷/EtOAc作为洗脱剂纯化。在30％EtOAc/己烷下分离所需产物。将所需的级份减压浓缩，得到N-(4-氯-5-甲酰基吡啶-2-基)乙酰胺，为灰白色固体(5.8g,28.1mmol,92％产率)。LC/MS(ESI)m/e 197.0[(M)-,计算值C8H6ClN2O2197.04]LC/MS保留时间(方法A):tR＝1.21min；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.20(s,1H),10.18(s,1H),8.76(s,1H),8.27(s,1H),2.16(s,3H).
E部分.N-(4-(4-氯-2-氟苯基)-5-甲酰基吡啶-2-基)乙酰胺
向N-(4-氯-5-甲酰基吡啶-2-基)乙酰胺(3g,15.11mmol)、(4-氯-2-氟苯基)硼酸(2.63g,15.11mmol)和碳酸铯(9.84g,30.2mmol)于水(8mL)和THF(25mL)的混合物中的搅拌溶液中添加四(三苯基膦)钯(19.19mg,0.017mmol)且将反应加热至85℃过夜(14h)。反应混合物用水(25mL)稀释并用EtOAc(2×25mL)萃取。合并的有机层用水(25mL)和盐水(25mL)洗涤，用硫酸钠干燥并减压浓缩。残余物通过硅胶色谱(己烷/EtOAc作为洗脱剂)纯化，得到N-(4-(4-氯-2-氟苯基)-5-甲酰基吡啶-2-基)乙酰胺，为灰白色固体(2.8g,9.01mmol,60％产率)。LC/MS(ESI)m/e 291.0[(M)-,计算值C14H9ClFN2O2291.0],LC/MS保留时间(方法A):tR＝1.69min；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.14(s,1H),9.84(d,J＝Hz,1H),8.88(s,1H),8.13(s,1H),7.61(dd,J＝2.00,10.00Hz,1H),7.46-7.48(m,2H),2.11(s,3H).
F部分.2-乙酰氨基-8-氯-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-6-鎓氟化物
在0℃向N-(4-(4-氯-2-氟苯基)-5-甲酰基吡啶-2-基)乙酰胺(0.39g,1.332mmol)和分子筛(50mg)于二氯甲烷(35mL)中的搅拌溶液中滴加甲基胺(8M于EtOH中,0.041g,0.166mL,1.332mmol)且将反应混合物在室温搅拌过夜(12h)。反应混合物用DCM(40mL)稀释并通过硅藻土垫过滤。将滤液减压浓缩，得到2-乙酰氨基-8-氯-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-6-鎓氟化物(450mg,1.24mmol,93％产率)，为黄色固体，其无需纯化即用于后续步骤。LC/MS(ESI)m/e 286.1[(M)+,计算值C15H13ClN3O 286.1]；LC/MS保留时间(方法D):tR＝0.71min.
G部分.N-(8-氯-6-甲基-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-2-基)乙酰胺
在0℃向2-乙酰氨基-8-氯-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-6-鎓氟化物(2.1g,2.47mmol)于THF(20mL)和MeOH(5mL)的混合物中的搅拌溶液中分三批添加NaBH4(0.199g,5.27mmol)并在室温搅拌反应混合物45min。减压除去挥发性有机物，添加饱和氯化铵溶液(30mL)且溶液用乙酸乙酯(2×30mL)萃取。合并的有机层用盐水(25mL)洗涤，用硫酸钠干燥并减压浓缩。残余物通过硅胶柱色谱(己烷/乙酸乙酯)纯化，得到N-(8-氯-6-甲基-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-2-基)乙酰胺(0.71g,2.29mmol,93％产率)，为黄色固体。LC/MS(ESI)m/e288.2[(M+H)+,计算值C15H15ClN3O 288.1]；LC/MS保留时间(方法C)；tR＝1.87min；HPLC保留时间(方法A):tR＝12.76min；HPLC保留时间(方法B):tR＝13.07min；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.46(s,1H),8.36(s,1H),8.16(d,J＝0.40Hz,1H),7.63(d,J＝8.40Hz,1H),6.88(dd,J＝2.00,8.00Hz,1H),6.82(d,J＝2.00Hz,1H),4.26(s,2H),2.89(s,3H),2.11(s,3H).
H部分.N-(8-氯-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-2-基)乙酰胺
在室温向N-(8-氯-6-甲基-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-2-基)乙酰胺(0.6g,1.199mmol)于DCM(20mL)中的搅拌溶液中分三批添加锰酸钡(1.536g,5.99mmol)且将反应混合物在45℃加热60h。反应结束后，反应混合物用DCM(70mL)稀释并通过硅藻土将滤液减压浓缩。残余物通过硅胶柱色谱(DCM/MeOH作为洗脱剂)纯化，得到N-(8-氯-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-2-基)乙酰胺(0.4g,1.071mmol,89％产率)，为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/e 302.1[(M+H)+,计算值C15H13ClN3O2302.1]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.88min；HPLC保留时间(方法A)；tR＝8.82min；HPLC保留时间(方法B):tR＝7.99min；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.01(s,1H),9.24(s,1H),8.92(s,1H),8.26(d,J＝8.80Hz,1H),7.69(d,J＝2.00Hz,1H),7.48(dd,J＝2.00,8.80Hz,1H),3.68(s,3H),2.20(s,3H).
I部分.(S)-1-(2-乙酰氨基-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯
如实施例2的D部分进行反应，得到粗(S)-1-(2-乙酰氨基-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯(160mg,0.33mmol,20.5％纯,通过LC/MS)，为棕色油状物。其无需纯化即用于后续步骤。LC/MS(ESI)m/e 483.34[(M+H)+,计算值C26H35N4O5 483.25]；LC/MS保留时间(方法E):tR＝1.13min.
J部分.(S)-N-(8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-2-基)乙酰胺
在0℃向(S)-(1-((2-乙酰氨基-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(140mg,0.059mmol)于CH2Cl2(15mL)中的搅拌溶液中添加TFA(1.2mL,15.58mmol)且将反应混合物在室温搅拌40min。反应结束后，减压蒸发挥发性有机物且残余物通过制备型HPLC(含0.1％TFA的水/乙腈)纯化，得到(S)-N-(8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-2-基)乙酰胺(2mg,3.93μmol,6.6％产率)，为单TFA盐。LC/MS(ESI)m/e 383.2[(M+H)+,计算值C21H27N4O3383.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.80min；HPLC保留时间(方法A):tR＝5.14min；HPLC保留时间(方法B):tR＝5.62min；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.28(s,1H),8.93(s,1H),8.35(d,J＝8.80Hz,1H),7.17(s,1H),7.15(d,J＝2.00Hz,1H),4.46(d,J＝8.80Hz,1H),4.28(dd,J＝6.40,10.80Hz,1H),3.76-3.79(m,4H),2.29(s,3H),1.65-1.88(m,3H),1.08(d,J＝4.40Hz,3H),1.07(d,J＝4.40Hz,3H).
实施例19
(R)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.(R)-(1-((4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
如实施例16所述使用H部分中的(R)-(1-羟基-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯制备标题化合物得到(R)-(1-((4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(620mg,0.564mmol,49％产率)，为黄色固体。LC/MS,(ESI)m/z 440.3[(M+H)+,计算值C25H34N3O4440.3].
B部分.(R)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
将(R)-(1-((4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(102mg,0.232mmol)于二氯甲烷(1mL)中的环境温度溶液用HCl(1.160mL,4.64mmol)处理并搅拌1h。将所得混合物浓缩成油状物并通过反相高效液相色谱(Phenomenex Luna C18 30×100mm 10微米；水/甲醇/0.1％TFA梯度洗脱)纯化。将含有产物的级份用饱和碳酸氢钠水溶液中和并减压浓缩。将残余物在乙酸乙酯和盐水之间分配并分离各层。水层用乙酸乙酯再萃取两次且合并的有机物用盐水洗涤一次，用硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到(R)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(11.5mg,0.033mmol,14％产率)，为乳白色油状物。LC/MS,(ESI)m/z 340.2[(M+H)+,计算值C20H26N3O2340.2]；HPLC保留时间(方法C):tR＝13.02min；HPLC保留时间(方法D):tR＝13.05min；1HNMR(500MHz,甲醇-d4)δ8.68-8.63(m,2H),8.58(d,J＝9.0Hz,1H),7.22(dd,J＝9.0,2.3Hz,1H),7.20(d,J＝2.3Hz,1H),4.52(dd,J＝10.5,3.3Hz,1H),4.34(dd,J＝10.7,6.6Hz,1H),3.82(s,3H),3.80-3.75(m,1H),3.25(s,3H),1.91-1.81(m,1H),1.80-1.73(m,1H),1.72-1.64(m,1H),1.07(d,J＝5.8Hz,3H),1.06(d,J＝5.8Hz,3H).
实施例20
(R)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.(R)-(1-((9-氯-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
将如实施例19的A部分所述制备(R)-(1-((4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(248mg,0.564mmol)、NCS(151mg,1.128mmol)和乙腈(5mL)的混合物在90℃加热1h，然后在室温搅拌过夜。将粗物质减压浓缩，得到(R)-(1-((9-氯-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(15mg,0.032mmol,6％粗产率)。混合物无需进一步纯化即使用。LC/MS,(ESI)m/z 474.2[(M+H)+,计算值C25H33ClN3O4474.2].
B部分.(R)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
将(R)-(1-((9-氯-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(15mg,0.032mmol)于二氯甲烷(0.5mL)中的环境温度溶液用HCl(4M于1,4-二噁烷中)(0.396mL,1.58mmol)处理并搅拌1h。将所得混合物浓缩且残余物通过反相高效液相色谱(Phenomenex LunaC18 30×100mm 10微米；水/乙腈/10mM乙酸铵梯度洗脱)纯化。将含有产物的级份减压浓缩，得到(R)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(9.0mg,0.023mmol,73％产率)，为白色固体。LC/MS,(ESI)m/z 373.2[(M+H)+,计算值C20H25ClN3O2373.2]；HPLC保留时间(方法C):tR＝14.21min；HPLC保留时间(方法D):tR＝14.30min；1HNMR(400MHz,CHLOROFORM-d)δ8.70(d,J＝5.8Hz,1H),8.21(s,1H),7.79(d,J＝5.8Hz,1H),6.83(s,1H),4.18(dd,J＝8.8,3.8Hz,1H),4.04-3.97(m,1H),3.76(s,3H),3.48(qd,J＝6.9,3.5Hz,1H),3.17(s,3H),1.84(dquin,J＝13.7,6.7Hz,1H),1.49(t,J＝7.0Hz,2H),1.03(d,J＝6.5Hz,3H),1.01(d,J＝6.5Hz,3H).
实施例21
(S)-8-(2-氨基-3-环丙基丙氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分：(S)-(1-环丙基-3-((4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯
如实施例16所述使用H部分中的(S)-(1-环丙基-3-羟基丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.287g,1.334mmol)制备标题化合物得到(S)-(1-环丙基-3-((4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(230mg,0.526mmol,59％产率)，为无色油状物。LC/MS,(ESI)m/z438.3[(M+H)+,计算值C25H32N3O4438.2]；1H NMR(400MHz,CHLOROFORM-d)δ8.61(d,J＝5.5Hz,1H),8.09(d,J＝8.8Hz,1H),7.77(d,J＝5.5Hz,1H),6.96-6.79(m,2H),4.92(br.s.,1H),4.35-3.98(m,3H),3.70(s,3H),3.13(s,3H),1.63(t,J＝6.9Hz,2H),1.47(s,9H),0.83-0.70(m,1H),0.61-0.42(m,2H),0.21-0.04(m,2H).
B部分：(S)-8-(2-氨基-3-环丙基丙氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
将(S)-(1-环丙基-3-((4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(50mg,0.114mmol)(如实施例16所述使用H部分中的(S)-(1-环丙基-3-羟基丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.287g,1.334mmol)制备)于乙醚(1mL)中的环境温度悬浮液用HCl(4M于1,4-二噁烷中)(0.571mL,2.286mmol)处理并搅拌1h。将所得混合物减压浓缩，得到黄色固体。粗物质通过反相高效液相色谱(Phenomenex Luna C18 30×100mm 10微米；水/甲醇/TFA梯度洗脱)纯化。将含有产物的级份减压浓缩。将所得的残余物在饱和碳酸氢钠水溶液和乙酸乙酯之间分配。分离各层且将水层用乙酸乙酯再萃取两次。合并的有机物用盐水洗涤一次，用硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到(S)-8-(2-氨基-3-环丙基丙氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(9.0mg,0.025mmol,最终步骤22％产率)，为白色固体。LC/MS,(ESI)m/z338.2[(M+H)+,计算值C20H24N3O2338.2]；HPLC保留时间(方法C):tR＝13.05min；HPLC保留时间(方法D):tR＝13.88min；1H NMR(400MHz,CHLOROFORM-d)δ8.65(d,J＝5.8Hz,1H),8.16(d,J＝8.8Hz,1H),7.83(d,J＝5.5Hz,1H),6.92(dd,J＝8.9,2.4Hz,1H),6.87(d,J＝2.3Hz,1H),4.15(dd,J＝8.9,3.9Hz,1H),3.97(dd,J＝8.8,7.0Hz,1H),3.75(s,3H),3.48-3.35(m,1H),3.17(s,3H),1.59-1.42(m,2H),0.87-0.74(m,1H),0.64-0.47(m,2H),0.25-0.17(m,1H),0.16-0.10(m,1H).
实施例22
(S)-8-(2-氨基-3-环丁基丙氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分：(S)-(1-环丁基-3-((4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯
如实施例16所述使用H部分中的(S)-(1-环丁基-3-羟基丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.359g,1.566mmol)制备标题化合物得到(S)-(1-环丁基-3-((4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(400mg,0.886mmol,85％产率)，为无色油状物。LC/MS,(ESI)m/z452.3[(M+H)+,计算值C26H34N3O4452.3]；1H NMR(400MHz,CHLOROFORM-d)δ8.62(d,J＝5.8Hz,1H),8.11(d,J＝8.8Hz,1H),7.79(d,J＝5.5Hz,1H),6.94-6.79(m,2H),4.76(d,J＝7.5Hz,1H),4.07(d,J＝3.5Hz,2H),3.93(br.s.,1H),3.71(s,3H),3.14(s,3H),2.55-2.35(m,1H),2.15-2.05(m,2H),1.97-1.59(m,7H),1.47(s,9H).
B部分：(S)-8-(2-氨基-3-环丁基丙氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
将(S)-(1-环丁基-3-((4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(70mg,0.155mmol)于乙醚(1mL)中的环境温度悬浮液用HCl(4M于1,4-二噁烷中)(0.775mL,3.10mmol)处理并搅拌1h。将所得混合物减压浓缩，得到黄色固体。粗物质通过反相高效液相色谱(Phenomenex Luna C18 30×100mm 10微米；水/甲醇/TFA梯度洗脱)纯化。将含有产物的级份减压浓缩。将所得的残余物在饱和碳酸氢钠水溶液和乙酸乙酯之间分配。分离各层且将水层用乙酸乙酯再萃取两次。合并的有机物用盐水洗涤一次，用硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩，得到(S)-8-(2-氨基-3-环丁基丙氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(17mg,0.046mmol,30％产率)，为白色固体。LC/MS,(ESI)m/z 352.3[(M+H)+,计算值C21H26N3O2352.2]；HPLC保留时间(方法C):tR＝14.15min；HPLC保留时间(方法D):tR＝14.78min；1H NMR(400MHz,CHLOROFORM-d)δ8.64(d,J＝5.8Hz,1H),8.15(d,J＝9.0Hz,1H),7.82(d,J＝5.8Hz,1H),6.89(dd,J＝8.9,2.4Hz,1H),6.84(d,J＝2.3Hz,1H),4.04(dd,J＝8.9,3.9Hz,1H),3.86(dd,J＝8.8,7.5Hz,1H),3.73(s,3H),3.23(tdd,J＝7.5,5.5,3.8Hz,1H),3.16(s,3H),2.60-2.43(m,1H),2.21-2.08(m,2H),2.01-1.81(m,2H),1.80-1.55(m,4H).
实施例23
(S)-8-(2-氨基-3-环丙基丙氧基)-9-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
如实施例20所述制备标题化合物得到(S)-8-(2-氨基-3-环丙基丙氧基)-9-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(12.5mg,0.030mmol,最终步骤24％产率)，为淡黄色固体。LC/MS,(ESI)m/z 372.2[(M+H)+,计算值C20H23ClN3O2372.2]；HPLC保留时间(方法C):tR＝14.16min；HPLC保留时间(方法D):tR＝15.03min；1H NMR(400MHz,CHLOROFORM-d)δ8.66(d,J＝5.5Hz,1H),8.17(s,1H),7.74(d,J＝5.8Hz,1H),6.81(s,1H),4.22(dd,J＝8.7,3.9Hz,1H),4.05(dd,J＝8.5,7.0Hz,1H),3.73(s,3H),3.49(qd,J＝6.8,4.0Hz,1H),3.20-3.12(m,3H),1.63-1.46(m,2H),0.89-0.75(m,1H),0.67-0.45(m,2H),0.25-0.18(m,1H),0.17-0.10(m,1H).
实施例24
(S)-8-(2-氨基-3-环丁基丙氧基)-9-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
如实施例20所述制备标题化合物得到(S)-8-(2-氨基-3-环丁基丙氧基)-9-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(10.5mg,0.027mmol,最终步骤24％产率)，为无色固体。LC/MS,(ESI)m/z 386.2[(M+H)+,计算值C21H25ClN3O2386.2]；HPLC保留时间(方法C):tR＝14.92min；HPLC保留时间(方法D):tR＝15.61min；1H NMR(400MHz,CHLOROFORM-d)δ8.68(d,J＝5.5Hz,1H),8.20(s,1H),7.77(d,J＝5.8Hz,1H),6.81(s,1H),4.14(dd,J＝8.7,3.9Hz,1H),4.01-3.91(m,1H),3.75(s,3H),3.34(d,J＝4.5Hz,1H),3.17(s,3H),2.62-2.44(m,1H),2.22-2.06(m,2H),2.01-1.82(m,2H),1.82-1.63(m,4H).
实施例25
(S)-8-(2-氨基-3-环丙基丙氧基)-4,6,9-三甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分：(S)-(1-((9-溴-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-3-环丙基丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯
将如实施例21的部分A所述制备的(S)-(1-环丙基-3-((4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(100mg,0.229mmol)于乙腈(5mL)中的混合物加热至90℃且保持1h，得到均质橙色溶液。溶液用饱和碳酸氢钠水溶液处理并减压浓缩。将残余物在盐水和乙酸乙酯之间分配并分离各层。将水层用乙酸乙酯再萃取两次且合并的有机物用盐水洗涤一次，用硫酸镁干燥，过滤并浓缩成固体。固体经由硅胶色谱(含1％氨的甲醇/二氯甲烷)纯化，得到(S)-(1-((9-溴-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-3-环丙基丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(53mg,0.103mmol,45％产率)，为无色油状物，其在静置后固化。LC/MS,(ESI)m/z516.2,518.2Br pattern[(M+H)+,计算值C25H31BrN3O4516.2].
B部分：(S)-(1-环丙基-3-((4,6,9-三甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯
将(S)-(1-((9-溴-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-3-环丙基丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(51mg,0.099mmol)、三甲基环三硼氧烷(0.015mL,0.109mmol)、PdCl2(dppf)-CH2Cl2加合物(8.06mg,9.88μmol)、碳酸铯(64.4mg,0.198mmol)、1,4-二噁烷(1mL)和水(0.33mL)的环境温度混合物加到额定压力瓶中并用氮气气流脱气10分钟。将瓶密封并在氮气下在75℃搅拌12h。将所得混合物冷却至室温并真空过滤。将滤液减压浓缩且将残余物在乙酸乙酯和盐水之间分配。分离各层且将水层用乙酸乙酯再萃取两次。合并的有机物用硫酸镁干燥，过滤并浓缩成油状物。油状物经硅胶色谱(1％含2M氨的甲醇/二氯甲烷)纯化，得到(S)-(1-环丙基-3-((4,6,9-三甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(41mg,0.091mmol,92％产率)，为无色油状物。LC/MS,(ESI)m/z 452.3[(M+H)+,计算值C26H34N3O4452.3]；1H NMR(400MHz,CHLOROFORM-d)δ8.59(d,J＝5.8Hz,1H),7.90(s,1H),7.78(d,J＝5.8Hz,1H),6.74(s,1H),4.91(d,J＝7.3Hz,1H),4.35-4.04(m,3H),3.71(s,3H),3.14(s,3H),2.31(s,3H),1.72-1.59(m,2H),1.48(s,9H),0.86-0.70(m,1H),0.60-0.44(m,2H),0.21-0.00(m,2H).
C部分：(S)-8-(2-氨基-3-环丙基丙氧基)-4,6,9-三甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
将(S)-(1-环丙基-3-((4,6,9-三甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(41mg,0.091mmol)于甲醇(0.5mL)中的环境温度溶液用HCl(4M的1,4-二噁烷溶液)(0.454mL,1.816mmol)处理并搅拌1h。将所得混合物减压浓缩成黄色固体。粗物质通过反相高效液相色谱(Phenomenex Luna C18 30×100mm 10微米；水/甲醇/TFA梯度洗脱)纯化。将含有产物的级份用饱和碳酸氢钠水溶液中和并减压浓缩。将所得的残余物在水和乙酸乙酯之间分配并分离各层。将水层用乙酸乙酯再萃取两次且将合并的有机物用硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到(S)-8-(2-氨基-3-环丙基丙氧基)-4,6,9-三甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(10.7mg,0.028mmol,93％产率)，为无色固体。LC/MS,(ESI)m/z 352.2[(M+H)+,计算值C21H26N3O2352.2]；HPLC保留时间(方法C):tR＝13.71min；HPLC保留时间(方法D):tR＝14.29min；1H NMR(400MHz,CHLOROFORM-d)δ8.63(d,J＝5.5Hz,1H),7.98(s,1H),7.84(d,J＝5.8Hz,1H),6.74(s,1H),4.15(dd,J＝8.8,4.0Hz,1H),4.00(dd,J＝8.7,6.9Hz,1H),3.76(s,3H),3.50-3.37(m,1H),3.17(s,3H),2.37(s,3H),1.61-1.44(m,2H),1.02-0.74(m,1H),0.68-0.45(m,2H),0.30-0.06(m,2H).
实施例26
(S)-8-(2-氨基-3-环丁基丙氧基)-4,6,9-三甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
如实施例25所述自实施例22的A部分中所述制备的(S)-(1-环丁基-3-((4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯起始制备标题化合物，得到(S)-8-(2-氨基-3-环丁基丙氧基)-4,6,9-三甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(18mg,0.046mmol,最终步骤26％产率)，为浑浊膜状物。LC/MS,(ESI)m/z 366.3[(M+H)+,计算值C22H28N3O2366.2]；HPLC保留时间(方法C):tR＝14.65min；HPLC保留时间(方法D):tR＝15.04min；1H NMR(400MHz,CHLOROFORM-d)δ8.62(d,J＝5.8Hz,1H),7.95(s,1H),7.82(d,J＝5.8Hz,1H),6.69(s,1H),4.05(dd,J＝8.8,4.0Hz,1H),3.88(dd,J＝8.5,7.3Hz,1H),3.74(s,3H),3.34-3.20(m,1H),3.16(s,3H),2.63-2.46(m,1H),2.36(s,3H),2.23-2.08(m,2H),2.01-1.59(m,6H).
实施例27
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-(二氟甲基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分：8-氯-9-碘-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
向如实施例16的G部分描述制备的8-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(1g,3.87mmol)于乙酸(30mL)中的溶液中添加H2SO4(0.021mL,0.387mmol)和高碘酸(0.881g,3.87mmol)。将溶液在80℃加热20min，然后添加碘(0.294g,1.160mmol)。将混合物在80℃再搅拌3h。将溶液冷却至室温，然后减压浓缩。将EtOAc添加至残余物且将该层用饱和NaHCO3水溶液洗涤，然后用H2O洗涤。合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到8-氯-9-碘-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(1.2g,3.12mmol,81％粗产率)，为灰白色固体。该物质无需进一步纯化即使用。LC/MS(ESI)m/e385.0[(M+H)+,计算值C14H11ClIN2O,385.0]；LC/MS保留时间(方法B):tR＝1.09min.
B部分：8-氯-4,6-二甲基-9-乙烯基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
将8-氯-9-碘-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(1.2g,2.71mmol)、2,4,6-三乙烯基环三硼氧烷/吡啶复合物(0.784g,3.26mmol)、四(三苯基膦)钯(0.157g,0.136mmol)和Na2CO3(0.575g,5.43mmol)于甲苯(30mL)和水(0.5mL)中的溶液用氮气脱气并在90℃加热16h。冷却至室温后，将混合物减压浓缩。将残余物溶解于乙酸乙酯中并通过硅藻土过滤。将EtOAc层用盐水和水洗涤。合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。粗物质通过硅胶快速色谱使用EtOAc-己烷作为洗脱剂纯化，得到8-氯-4,6-二甲基-9-乙烯基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(0.6g,1.43mmol,68％产率))，为棕色胶状固体。LC/MS(ESI)m/e 285.0[(M+H)+,计算值C16H14ClN2O,285.1]；LC/MS保留时间(方法B):tR＝2.25min.
C部分：8-氯-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-9-甲醛
向冷却至0℃的8-氯-4,6-二甲基-9-乙烯基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(600mg,2.107mmol)、四氧化锇(2.5％于2-甲基-2-丙醇中)(0.794mL,0.063mmol)和2,6-二甲基吡啶(0.491mL,4.21mmol)于1,4-二噁烷(30mL)和水(30mL)中的溶液中添加高碘酸钠(1803mg,8.43mmol)。将混合物温热至室温并搅拌3h。混合物用乙酸乙酯稀释并通过硅藻土过滤。将有机层减压浓缩，得到棕色固体。将固体用己烷(3×20mL)洗涤并真空干燥，得到8-氯-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-9-甲醛(0.6g,2.107mmol,84％产率)，为胶状棕色固体。LC/MS(ESI)m/e 287.0[(M+H)+,计算值C15H12ClN2O2,287.1]；LC/MS保留时间(方法B):tR＝2.03min.
D部分：8-氯-9-(二氟甲基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
向8-氯-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-9-甲醛(600mg,1.779mmol)于DCM(15mL)中的溶液中添加双-(2-甲氧基乙基)氨基三氟化硫(Deoxo-Fluor)(1.968g,8.89mmol)。然后将混合物在40℃加热3h。冷却至室温后，反应混合物用DCM稀释且将DCM层先后用饱和NaHCO3水溶液和H2O洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。残余物通过硅胶快速色谱使用EtOAc-己烷作为洗脱剂纯化，得到8-氯-9-(二氟甲基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(0.7g,1.519mmol,84％产率)，为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/e 309.0[(M+H)+,计算值C15H12ClF2N2O,309.1]；LC/MS保留时间(方法B):tR＝2.38min.1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.68-8.74(m,2H),8.32(d,1H),7.78(s,1H),7.00-7.33(m,1H),3.79(s,3H),3.13(s,3H).
E部分：(S)-(1-((9-(二氟甲基)-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
将8-氯-9-(二氟甲基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(700mg,1.519mmol)、(S)-(1-羟基-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(660mg,3.04mmol)、2-二叔丁基膦基-2’,4’,6’-三异丙基-1,1’-联苯(387mg,0.912mmol)、PdOAc2(34.1mg,0.152mmol)和Cs2CO3(990mg,3.04mmol)在甲苯(20mL)中的溶液在80℃加热16h。冷却至室温后，将混合物减压浓缩。将残余物溶解于乙酸乙酯中并通过硅藻土过滤。有机层用盐水和水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。残余物通过硅胶快速色谱使用EtOAc-己烷作为洗脱剂纯化，得到(S)-(1-((9-(二氟甲基)-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.6g,0.58mmol,54％产率)，为棕色胶状固体。LC/MS(ESI)m/e 490.2[(M+H)+,计算值C26H34F2N3O4,490.2]；LC/MS保留时间(方法B):tR＝2.72min.
F部分：(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-(二氟甲基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
在0℃向(S)-(1-((9-(二氟甲基)-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(500mg,0.480mmol)于MeOH(10mL)中的溶液中添加4N HCl的1,4-二噁烷溶液(20mL,80mmol)。将溶液温热至室温并搅拌2h。然后将混合物减压浓缩。将残余物溶解于EtOAc中且将EtOAc层先后用饱和NaHCO3水溶液和H2O洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。残余物通过制备型HPLC纯化，得到(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-(二氟甲基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(60mg,0.149mmol,31％产率)，为淡黄色固体。LC/MS(ESI)m/e 390.2[(M+H)+,计算值C21H26F2N3O2,390.2]；LC/MS保留时间(方法A):tR＝2.09min；HPLC保留时间(方法A):tR＝10.1min；HPLC保留时间(方法B):tR＝9.18min；1HNMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.73(s,1H),8.66(s,2H),7.07-7.41(m,2H),4.66-4.53(m,1H),4.52-4.49(m,1H),3.78-3.89(m,4H),3.22(s,3H),1.74-1.88(m,2H),1.63-1.71(m,1H),1.04(m,6H).
实施例28
(2,4-二甲基-1-((6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
A部分.(2,4-二甲基-1-((6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
如实施例2的C部分中所述制备的8-氯-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(0.15g,0.613mmol)和(1-羟基-2,4-二甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.284g,1.226mmol)经实施例2的D部分中所述的醚合成，得到(2,4-二甲基-1-((6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.3g,28％产率)，为淡黄色固体。LC/MS(ESI)m/e 440.2[(M+H)+,计算值C25H34N3O4440.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝2.67min.
B部分.8-((2-氨基-2,4-二甲基戊基)氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
如实施例2的E部分所述将(2,4-二甲基-1-((6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯进一步脱Boc保护，得到8-((2-氨基-2,4-二甲基戊基)氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(30mg,12％产率)，为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/e 340.0[(M+H)+,计算值C20H26N3O2,340.2]；LC/MS保留时间(方法G):tR＝1.88min.1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 9.43(s,1H),8.73(d,J＝6.0Hz,1H),8.35(d,J＝8.5Hz,1H),8.19(d,J＝6.0Hz,1H),7.12-7.01(m,2H),4.05-3.92(m,2H),3.77(s,3H),1.95-1.80(m,1H),1.58(qd,J＝14.2,5.5Hz,2H),1.30(s,3H),1.04(d,J＝6.5Hz,3H),1.01(d,J＝6.5Hz,3H).手性HPLC(CHIRALPAK AD-H(250×4.6)mm,5微米,流动相CO2(65％),共溶剂0.3％DEA的MeOH溶液(35％),背压101),手性SFC保留时间tR1,5.44min；手性SFC保留时间tR2,7.77min.
实施例29
8-((2-氨基-2,4-二甲基戊基)氧基)-7-氟-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.4-氯-2-甲基烟酸甲酯
向2,4-二氯烟酸甲酯(10.0g,48.5mmol)于1,4-二噁烷(400mL)和水(40mL)的溶剂混合物中的溶液中添加三甲基环三硼氧烷(6.79mL,48.5mmol)，然后添加PdCl2(dppf)-CH2Cl2加合物(1.982g,2.427mmol)和碳酸铯(31.6g,97mmol)。反应混合物用氩气脱气5分钟。将反应混合物加热至回流且保持8h。将反应混合物冷却至室温并通过硅藻土过滤。将滤垫用乙酸乙酯洗涤且将合并的滤液减压浓缩，得到粗产物，其通过硅胶柱色谱(乙酸乙酯/石油醚梯度)纯化，得到4-氯-2-甲基烟酸甲酯(5.20g,28mmol,58％产率)，为黄色液体。LC/MS(ESI)m/e 185.7[(M+H)+,计算值C8H8ClNO2185.6]；LC/MS保留时间(方法G):tR＝1.90min.
B部分.4-碘-2-甲基烟酸甲酯
向4-氯-2-甲基烟酸甲酯(6.00g,32.3mmol)于乙腈(80mL)中的溶液中添加乙酰氯(3.45mL,48.5mmol)，然后添加碘化钠(48.5g,323mmol)。将反应混合物在80℃加热16h。将反应混合物蒸发至干并通过添加饱和碳酸钾溶液将残余物调节至pH 6。产物经二氯甲烷(250mL)萃取。有机相用盐水(2×100mL)洗涤，用Na2SO4干燥并减压浓缩，得到4-碘-2-甲基烟酸甲酯(2.00g,7.22mmol,22％粗产率)，为无色半固体，其无需进一步纯化即使用。LC/MS(ESI)m/e278.0[(M+H)+,计算值C8H9INO2278.0]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝2.13min.
C部分.4-(4-溴-2,3-二氟苯基)-2-甲基烟酸甲酯
在微波容器中在惰性气氛下将4-碘-2-甲基烟酸甲酯(1.00g,3.61mmol)置于1,4-二噁烷(18mL)和水(2mL)的混合物中。向反应混合物中添加(4-溴-2,3-二氟苯基)硼酸(1.03g,4.33mmol)和Na2CO3(765mg,7.22mmol)并脱气5分钟。向反应混合物中添加Pd(Ph3P)4(83mg,0.072mmol)并在微波中在110℃加热90min。反应混合物用水(150mL)稀释并用乙酸乙酯(200mL)萃取。有机相用盐水(2×100mL)洗涤，用Na2SO4干燥并减压浓缩。残余物通过硅胶色谱(乙酸乙酯/石油醚梯度)纯化，得到4-(4-溴-2,3-二氟苯基)-2-甲基烟酸甲酯(540mg,1.58mmol,44％产率)，为黄色液体。LC/MS(ESI)m/e 344.0[(M+2H)+,计算值C14H12BrF2NO2344.1]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝2.48min.
D部分.4-(4-溴-2,3-二氟苯基)-2-甲基烟酸
向4-(4-溴-2,3-二氟苯基)-2-甲基烟酸甲酯(800mg,2.34mmol)于MeOH(10mL)中的溶液中添加NaOH(935mg,23.38mmol)于水(10mL)中的溶液。将反应混合物在室温搅拌16小时。将反应混合物减压蒸发并通过添加1.5N HCl溶液将获得的残余物调节至pH～3。产物经二氯甲烷萃取并分离各层。有机相用Na2SO4干燥并减压浓缩，得到4-(4-溴-2,3-二氟苯基)-2-甲基烟酸(700mg,2.133mmol,91％粗产率)，为灰白色固体，其无需进一步纯化即使用。LC/MS(ESI)m/e 330.0[(M+2H)+,计算值C13H10BrF2NO2330.1]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.34min.
E部分.4-(4-溴-2,3-二氟苯基)-N,2-二甲基烟酰胺
在0℃向4-(4-溴-2,3-二氟苯基)-2-甲基烟酸(700mg,2.13mmol)于二氯甲烷(20mL)中的溶液中滴加草酰氯(0.56mL,6.40mmol)，然后滴加DMF(0.03mL,0.43mmol)。将反应混合物加热至45℃且保持4h。将反应混合物蒸发至干。在0℃将残余物溶解于二氯甲烷(50mL)中且将甲胺盐酸盐(1.56g,23.08mmol)添加至其中，然后添加三乙胺(4.83mL,34.6mmol)。将反应混合物在室温搅拌2h。反应混合物用水(50mL)稀释并经二氯甲烷(100mL)萃取。分离有机层，用Na2SO4干燥并减压浓缩，得到4-(4-溴-2,3-二氟苯基)-N,2-二甲基烟酰胺(600mg,1.76mmol,76％粗产率)，为黄色半固体，其无需进一步纯化即使用。LC/MS(ESI)m/e 343.0[(M+2H)+,计算值C14H13BrF2N2O 343.0]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.61min.
F部分.8-溴-7-氟-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
在0℃向4-(4-溴-2,3-二氟苯基)-N,2-二甲基烟酰胺(600mg,1.76mmol)于四氢呋喃(20mL)中的溶液中添加NaH(176mg,4.40mmol)且将反应混合物逐渐升温至室温。将反应混合物在室温搅拌15h。反应混合物用水(50mL)稀释并用乙酸乙酯(100mL)萃取。分离有机层，用Na2SO4干燥并减压浓缩，得到8-溴-7-氟-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(400mg,1.24mmol,71％产率)，为黄色固体。LC/MS(ESI)m/e 322.8[(M+2H)+,计算值C14H12BrFN2O322.9]；LC/MS保留时间(方法G):tR＝2.21min.
G部分.(1-((7-氟-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-2,4-二甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
向8-溴-7-氟-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(350mg,1.090mmol)和(1-羟基-2,4-二甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(504mg,2.180mmol)在甲苯(10mL)中的搅拌溶液中添加碳酸铯(355mg,1.09mmol)和2-二叔丁基膦基-2’,4’,6’-三异丙基-1,1’-联苯(28mg,0.065mmol)。反应混合物用氩气脱气5min，然后向其中添加二乙酸钯(7.34mg,0.033mmol)。将反应混合物加热至100℃且保持18h。然后将其通过硅藻土过滤且将滤液蒸发，得到(1-((7-氟-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-2,4-二甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯，其无需进一步纯化即使用。LC/MS(ESI)m/e472.2[(M+H)+,计算值C26H35FN3O4472.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝2.17min.
H部分.8-((2-氨基-2,4-二甲基戊基)氧基)-7-氟-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
在0℃向(1-((7-氟-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-2,4-二甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(200mg,0.424mmol)于MeOH(6mL)中的溶液中添加4M HCl的1,4-二噁烷溶液(3mL,99.0mmol)。将反应混合物在0℃搅拌2h。2h后，减压浓缩反应混合物，得到粗产物，其通过制备型HPLC纯化，得到8-((2-氨基-2,4-二甲基戊基)氧基)-7-氟-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(10mg,0.024mmol,6％产率)，为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/e 372.0[(M+H)+,计算值C21H27FN3O2372.2]；LC/MS保留时间(方法G):tR＝1.99min.HPLC保留时间(方法A):tR＝8.37min；HPLC保留时间(方法B):tR＝9.72min.1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.58(d,J＝6Hz,1H),8.22(dd,J＝9.2Hz,J＝2Hz,1H),8.14(d,J＝6Hz,1H),7.23(m,1H),4.31(d,J＝10Hz,1H),4.23(d,J＝10.4Hz,1H),3.88(d,J＝9.2Hz,3H),3.06(s,3H),1.90(m,2H),1.73(m,1H),1.52(s,3H),1.05(m,6H).
实施例30和实施例31
8-(((S)-2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-(1-羟基乙基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.(S)-1-(4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯
如实施例16的H部分制备。
A部分.(S)-(1-((9-溴-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
如实施例16的H部分所述制备的(S)-(1-((4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯经实施例3的A部分中提及的条件下的溴化作用，得到(S)-(1-((9-溴-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(1.6g,2.62mmol,77％产率)，为淡黄色固体。LC/MS(ESI)m/e 518.2[(M)+,计算值CH33BrN3O4518.1]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝2.46min.
B部分.(S)-(1-((9-(1-乙氧基乙烯基)-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
向(S)-(1-((9-溴-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(500mg,0.964mmol)于1,4-二噁烷(5mL)中的溶液中添加三丁基(1-乙氧基乙烯基)甲锡烷(697mg,1.929mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(88mg,0.096mmol)和DPPF(53.5mg,0.096mmol)。将反应混合物在100℃搅拌12h。反应混合物用水稀释并在乙酸乙酯中萃取。有机层用硫酸钠干燥并浓缩，得到(S)-(1-((9-(1-乙氧基乙烯基)-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.3g,0.33mmol,34％粗产率)，为棕色固体，其无需进一步纯化即使用。LC/MS(ESI)m/e 510.2[(M+H)+,计算值C29H40N3O5,510.3]；LC/MS保留时间(方法＝C):tR＝2.60min.
C部分.(S)-9-乙酰基-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
在0℃将(S)-(1-((9-(1-乙氧基乙烯基)-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(200mg,0.392mmol)用盐酸的1,4-二噁烷溶液(981μL,3.92mmol)处理。将反应混合物在室温搅拌2h，然后蒸发至干。粗物质用10％NaHCO3水溶液中和并用乙酸乙酯萃取。有机层用Na2SO4干燥并浓缩，得到(S)-9-乙酰基-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(0.11g,0.164mmol,42％产率)，为棕色固体。该物质无需进一步纯化即使用。LC/MS(ESI)m/e382.2[(M+H)+,计算值C22H28N3O3,382.2]；LC/MS保留时间(方法E):tR＝0.78min.
D部分.8-(((S)-2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-(1-羟基乙基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
在0℃向(S)-9-乙酰基-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(100mg,0.257mmol)于乙醇(2mL)中的溶液中添加NaBH4(97mg,2.57mmol)。将反应混合物在室温搅拌16h。然后将其用NH4Cl淬灭，用水稀释并在乙酸乙酯中萃取。合并的有机层用Na2SO4干燥并浓缩。粗反应混合物通过制备型HPLC纯化，得到8-(((S)-2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-(1-羟基乙基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(0.03g,27％产率)，为淡黄色半固体。LC/MS(ESI)m/e 384.1[(M+H)+,计算值C22H30N3O3,384.2]；LC/MS保留时间(方法E):tR＝0.73min.
进行手性分离，得到两种非对映异构体，为灰白色固体。非对映异构体-1在保留时间(HPLC柱:(250×30×5μ)；流动相A:0.2％DEA/己烷；流动相B:乙醇)tR＝21.9min处洗脱。1H NMR(400MHz,甲醇-d4):ppm 1.01-1.07(m,6H),1.55(d,J＝6.46Hz,4H),1.58-1.68(m,1H),1.83-1.92(m,1H),3.09(s,3H),3.35(d,J＝1.69Hz,1H),3.80(s,3H),4.13-4.19(m,1H),4.28-4.34(m,1H),5.32(d,J＝6.46Hz,1H),7.04(s,1H),8.16(d,J＝5.84Hz,1H),8.47(s,1H),8.58(d,J＝5.77Hz,1H).
非对映异构体-2在保留时间(HPLC柱:(250×30×5μ)；流动相A:0.2％DEA/己烷；流动相B:乙醇)tR＝24.9min处洗脱。1H NMR(400MHz,甲醇-d4):ppm 1.03(t,J＝6.84Hz,6H),1.43-1.58(m,5H),1.88(dt,J＝13.73,6.97Hz,1H),3.09(s,3H),3.35(d,J＝1.69Hz,1H),3.80(s,3H),4.03-4.13(m,1H),4.21-4.29(m,1H),5.31(d,J＝6.40Hz,1H),7.03(s,1H),8.15(d,J＝5.84Hz,1H),8.47(s,1H),8.57(d,J＝5.77Hz,1H).
实施例32
8-((2-氨基-2,4-二甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.(1-((4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-2,4-二甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
如实施例16的G部分所述制备的8-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(0.15g,0.580mmol)和(1-羟基-2,4-二甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.161g,0.696mmol)经实施例16的H部分中所述的Buchwald偶联，得到(1-((4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-2,4-二甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.22g,0.199mmol,34％粗产率)。粗产物无需进一步纯化即使用。LC/MS(ESI)m/e 454.1[(M+H)+,计算值C26H36N3O4,454.3]；LC/MS保留时间(方法D):tR＝0.93min.
B部分.8-((2-氨基-2,4-二甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
使用实施例2的E部分中所述的方法将(1-((4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-2,4-二甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.22g,0.199mmol)脱Boc基团保护，得到8-((2-氨基-2,4-二甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(8mg,0.022mmol,11％产率)，为白色固体。LC/MS(ESI)m/e 354.2[(M+H)+,计算值C21H28N3O2,354.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.57min.HPLC保留时间(方法A):tR＝8.67min；HPLC保留时间(方法B):tR＝9.46min.1H NMR(400MHz,甲醇-d4)ppmδ8.54(s,1H),8.34-8.36(bs,1H),8.10(bs,1H),7.06(s,1H),4.11-4.17(m,2H),3.73(s,3H),3.06(s,3H),1.70-1.98(m,2H),1.68(bs,1H),1.45(s,3H),1.02-1.08(m,6H).
实施例33
8-(((2S,3S)-3-氨基-5-甲基己-2-基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.(S)-(4-甲基-1-氧代戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
在0℃向(S)-(1-羟基-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(2g,9.20mmol)于DCM(30mL)中的溶液中添加戴斯-马丁高碘烷(5.86g,13.81mmol)。将反应混合物在室温搅拌16h。反应混合物用NaHCO3淬灭，用水稀释并用乙酸乙酯萃取。有机层用Na2SO4干燥并浓缩，得到(S)-(4-甲基-1-氧代戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯，为无色油状物(1.4g,6.50mmol,71％粗产率)。该物质无需进一步纯化即使用。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ0.8-0.96(m,6H),1.31-1.49(m,11H),1.57-1.66(m,1H),3.81-3.89(m,1H).7.27(d,1H),9.43(s,1H).
B部分.((3S)-2-羟基-5-甲基己-3-基)氨基甲酸叔丁酯
将(S)-(4-甲基-1-氧代戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(1.3g,6.04mmol)于乙醚(50mL)中的溶液冷却至-78℃并用甲基溴化镁(1.4M于乙醚中)(8.63mL,12.08mmol)处理。将浆状物在0℃搅拌1h，然后在室温再搅拌1h。反应混合物经NH4Cl淬灭。反应混合物经乙醚(3×100mL)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用MgSO4干燥并浓缩，得到产物即((3S)-2-羟基-5-甲基己-3-基)氨基甲酸叔丁酯(1g,4.32mmol,72％粗产率)，为无色油状物。该物质无需进一步纯化即使用。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ0.78-0.93(m,6H),0.98(d,3H),1.11-1.41(m,2H),1.42(s,9H),1.45-1.64(m,1H),3.30-3.63(m,2H),4.37(d,1H),6.19(d,1H).
C部分.((3S)-2-((4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-5-甲基己-3-基)氨基甲酸叔丁酯
将8-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(0.05g,0.193mol)、((3S)-2-羟基-5-甲基己-3-基)氨基甲酸叔丁酯(0.067g,0.290mmol)、Cs2CO3(0.315g,0.966mol)、2-二叔丁基膦基-2’,4’,6’-三异丙基-1,1’-联苯(8.21mg,0.019mol)和Pd(OAc)2(2.60mg,0.012mol)的混合物溶解于甲苯(2mL)中并在90℃加热过夜。冷却后，将反应混合物浓缩，然后用乙酸乙酯和水稀释。收集乙酸乙酯层，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到((3S)-2-((4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-5-甲基己-3-基)氨基甲酸叔丁酯(70mg,0.154mmol,80％粗产率)，为棕色固体。粗产物无需进一步纯化即使用。LC/MS(ESI)m/e 454.2[(M+H)+,计算值C26H36N3O4,454.3]；LC/MS保留时间(方法D):tR＝0.91min.
D部分.8-(((3S)-3-氨基-5-甲基己-2-基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
((3S)-2-((4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-5-甲基己-3-基)氨基甲酸叔丁酯(0.16g,0.353mmol)经脱Boc基团保护(实施例2的E部分中所述的方法)得到非对映异构体混合物8-(((3S)-3-氨基-5-甲基己-2-基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(17mg,0.017mmol,5％产率)，为白色固体。LC/MS(ESI)m/e 354.2[(M+H)+,计算值C21H28N3O2,354.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.56min.HPLC保留时间(方法A):tR＝9.40min；HPLC保留时间(方法B):tR＝9.36min.1H NMR(400MHz,甲醇-d4)8.57(d,J＝5.5Hz,1H),8.41(d,J＝9.0Hz,1H),8.15(d,J＝6.0Hz,1H),7.15-7.06(m,2H),4.68(quin,J＝5.9Hz,1H),3.76(s,4H),3.09(s,3H),1.88-1.50(m,3H),1.44(s,3H),1.03(d,J＝6.5Hz,3H),0.98(d,J＝6.5Hz,3H).
实施例34
8-((2-氨基-2,4-二甲基戊基)氧基)-9-甲氧基-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.9-溴-8-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
在-30℃向8-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(0.2g,0.773mmol)于乙腈(4mL)中的溶液中添加三氟乙酸(0.089mL,1.160mmol)和1-溴吡咯烷-2,5-二酮(0.151g,0.850mmol)。将混合物加热至80℃过夜。将反应混合物浓缩，用乙酸乙酯和过量的10％NaHCO3水溶液稀释。将乙酸乙酯层浓缩。残余物通过制备型HPLC纯化，得到9-溴-8-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(120mg,0.351mmol,45％产率)，为白色固体。LC/MS(ESI)m/e 337.0[(M+H)+,计算值C14H11BrClN2O,337.0]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝2.55min；1H NMR(400MHz,甲醇-d4)ppm 3.11(s,3H),3.75(s,3H),7.81(s,1H),8.20-8.26(m,1H),8.68(d,J＝5.6Hz,1H),8.79(s,1H).
B部分.8-氯-9-甲氧基-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
将9-溴-8-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(0.05g,0.148mmol)、碘化亚铜(I)(0.031g,0.163mmol)、L-脯氨酸(0.020g,0.178mmol)、甲醇钠(0.040g,0.741mmol)和K2CO3(0.041g,0.296mmol)的混合物在DMSO(1.5mL)中搅拌。将混合物加热至80℃且保持16h。冷却后，将粗反应混合物用甲醇稀释，通过硅藻土过滤并减压浓缩，得到8-氯-9-甲氧基-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮，为棕色固体(40mg)。LC/MS(ESI)m/e 289.0[(M)+,计算值C15H14ClN2O2,289.1]；LC/MS保留时间(方法D):tR＝0.89min.
C部分.(1-((9-甲氧基-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-2,4-二甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
8-氯-9-甲氧基-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(0.04g,0.139mmol)经与(1-羟基-2,4-二甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.048g,0.208mmol)的Buchwald偶联(实施例16的H部分)得到(1-((9-甲氧基-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-2,4-二甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯，为白色固体(15mg,0.029mmol,21％产率)。LC/MS(ESI)m/e484.2[(M+H)+,计算值C27H38N3O5,484.3]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝2.42min.
D部分.8-((2-氨基-2,4-二甲基戊基)氧基)-9-甲氧基-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
(1-((9-甲氧基-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-2,4-二甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.015g,0.031mmol)根据实施例2的E部分所述经脱Boc基团保护，得到8-((2-氨基-2,4-二甲基戊基)氧基)-9-甲氧基-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(8mg,0.02mmol,63％产率)，为黄色固体。LC/MS(ESI)m/e 384.2[(M+H)+,计算值C22H30N3O3,384.5]；LC/MS保留时间(方法C),tR＝6.57min.1H NMR(400MHz,甲醇-d4)8.63(d,J＝6.0Hz,1H),8.51(br.s.,1H),8.02(s,1H),7.23(s,1H),4.39(d,J＝10.5Hz,1H),4.32-4.24(m,1H),4.10(s,3H),3.83(s,3H),3.19(s,3H),1.99-1.86(m,2H),1.73(d,J＝9.0Hz,1H),1.55(s,3H),1.09(d,J＝6.5Hz,3H),1.05(d,J＝6.5Hz,3H).
实施例35
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-(2-羟基丙-2-基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.(S)-2-(1-((4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)异二氢吲哚-1,3-二酮
8-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(1.4g,5.41mmol)和(S)-2-(1-羟基-4-甲基戊-2-基)异二氢吲哚-1,3-二酮(4.01g,16.23mmol)经实施例16的H部分中所述的Buchwald偶联，得到(S)-2-(1-((4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)异二氢吲哚-1,3-二酮，为黄色固体(1.4g,2.62mmol,49％产率)。LC/MS(ESI)m/e 470.2[(M+H)+,计算值C28H28N3O4470.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝2.05min.
B部分.(S)-2-(1-((9-溴-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)异二氢吲哚-1,3-二酮
向(S)-2-(1-((4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)异二氢吲哚-1,3-二酮(1g,1.917mmol)于乙腈(20mL)中的溶液中添加NBS(0.341g,1.917mmol)且将溶液加热至80℃过夜，得到(S)-2-(1-((9-溴-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)异二氢吲哚-1,3-二酮(1.2g,1.69mmol,88％粗产率)，为棕色固体。该物质无需进一步纯化即使用。LC/MS(ESI)m/e 548.0[(M+H)+,计算值C28H27BrN3O4548.1；LC/MS保留时间(方法D):tR＝0.76min.
C部分.(S)-2-(1-((9-(1-乙氧基乙烯基)-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)异二氢吲哚-1,3-二酮
将(S)-2-(1-((9-溴-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)异二氢吲哚-1,3-二酮(100mg,0.182mmol)、三丁基(1-乙氧基乙烯基)甲锡烷(132mg,0.365mmol)、DPPF(20.22mg,0.036mmol)和Pd2(dba)3(16.70mg,0.018mmol)于1,4-二噁烷(5mL)中的溶液用氮气脱气5min，然后在100℃加热过夜。冷却至环境温度后，将挥发物减压浓缩。将残余物溶解于乙酸乙酯中并通过硅藻土过滤。有机滤液先后经H2O和盐水洗涤，用Na2SO4干燥并减压浓缩，得到(S)-2-(1-((9-(1-乙氧基乙烯基)-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)异二氢吲哚-1,3-二酮(0.15g,0.131mmol,72％粗产率)，为黑色胶状固体。该物质无需进一步纯化即使用。LC/MS(ESI)m/e 540.3[(M+H)+,计算值C32H34N3O5540.2；LC/MS保留时间(方法G):tR＝1.21min.
D部分.(S)-2-(1-((9-乙酰基-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)异二氢吲哚-1,3-二酮
(S)-2-(1-((9-(1-乙氧基乙烯基)-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)异二氢吲哚-1,3-二酮(150mg,0.278mmol)经酸水解，得到(S)-2-(1-((9-乙酰基-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)异二氢吲哚-1,3-二酮(0.1g,0.14mmol,51％产率)，为棕色固体。粗物质无需进一步纯化即使用。LC/MS(ESI)m/e512.1[(M+H)+,计算值C30H30N3O5512.2；LC/MS保留时间(方法D):tR＝0.89min.
E部分.(S)-2-(1-((9-(2-羟基丙-2-基)-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)异二氢吲哚-1,3-二酮
在-10℃向(S)-2-(1-((9-乙酰基-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)异二氢吲哚-1,3-二酮(220mg,0.430mmol)于THF(6mL)中的溶液中添加甲基溴化镁(1.4M于乙醚中)(0.922mL,1.290mmol)并在室温搅拌过夜。将反应混合物小心用水淬灭并用EtOAc稀释。分离有机层，用硫酸钠干燥并减压浓缩。残余物通过硅胶色谱纯化，得到(S)-2-(1-((9-(2-羟基丙-2-基)-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)异二氢吲哚-1,3-二酮(0.2g,0.152mmol,35％产率)，为棕色胶状固体。LC/MS(ESI)m/e 528.2[(M+H)+,计算值C31H34N3O5528.2；LC/MS保留时间(方法D):tR＝0.89min.
F部分.(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-(2-羟基丙-2-基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
在室温向(S)-2-(1-((9-(2-羟基丙-2-基)-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)异二氢吲哚-1,3-二酮(200mg,0.152mmol)于乙醇(5mL)中的溶液中添加肼(4.76μl,0.152mmol)，然后将混合物加热至60℃且保持4h。将反应混合物过滤，浓缩并通过制备型HPLC纯化，得到(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-(2-羟基丙-2-基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮，为白色固体(9mg,0.021mmol,14％产率)。LC/MS(ESI)m/e 398.0[(M+H)+,计算值C23H32N3O3398.2]；LC/MS保留时间(方法G):tR＝1.99min.HPLC保留时间(方法A):tR＝8.63min；HPLC保留时间(方法B):tR＝9.79min.1H NMR(400MHz,甲醇-d4)ppm 0.94-1.10(m,6H),1.25-1.37(m,1H),1.49-1.78(m,7H),1.82-1.93(m,1H),2.96-3.19(m,2H),3.56-3.65(m,1H),3.80(s,3H),4.16-4.29(m,1H),4.34-4.49(m,1H),7.01-7.15(m,1H),8.10-8.22(m,1H),8.51-8.64(m,2H).
实施例36
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-乙基-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分：(S)-(1-((4,6-二甲基-5-氧代-9-乙烯基-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
向如实施例3的A部分所述制备的(S)-(1-((9-溴-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(300mg,0.579mmol)于甲苯(10mL)、水(0.5mL)和乙醇(2mL)的溶剂混合物中的溶液中添加碳酸钠(184mg,1.736mmol)、四(三苯基膦)钯(33.4mg,0.029mmol)和2,4,6-三乙烯基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三硼杂环己烷/吡啶(1:1)(167mg,0.694mmol)。将反应混合物脱气30min。然后将反应混合物在90℃搅拌16h。冷却至室温后，反应混合物通过硅藻土过滤，其中用EtOAc洗脱。将滤液减压浓缩。将残余物溶解于EtOAc和水中。溶液用乙酸乙酯(2×15mL)萃取。合并的有机层用水(10mL)和盐水(10mL)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。残余物通过硅胶柱色谱(60％乙酸乙酯/己烷)纯化，得到(S)-(1-((4,6-二甲基-5-氧代-9-乙烯基-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(300mg,0.110mmol,19％产率)，为淡黄色半固体。LC/MS,(ESI)m/z 466.5[(M+H)+,计算值C27H36N3O4466.3]；LC/MS保留时间(方法E):tR＝1.18min.
B部分：(S)-(1-((9-乙基-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
将(S)-(1-((4,6-二甲基-5-氧代-9-乙烯基-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(50mg,0.107mmol)于MeOH(3mL)中的溶液用氮气脱气5min，然后添加钯/碳(1.143mg,10.74μmol)。将反应混合物在氢气气球下搅拌16h。然后反应混合物通过硅藻土过滤且将滤液减压浓缩。残余物通过制备型TLC(2％MeOH的DCM溶液)纯化，得到(S)-(1-((9-乙基-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(31mg,0.058mmol,54％产率)，为淡黄色固体。LC/MS,(ESI)m/z 468.5[(M+H)+,计算值C27H38N3O4468.3]；LC/MS保留时间(方法D):tR＝1.31min.
C部分：(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-乙基-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
如实施例2的E部分所述制备，得到标题化合物(4mg,10.62μmol,33％产率)，为黄色胶状物。LC/MS,(ESI)m/z 368.4[(M+H)+,计算值C22H30N3O2368.2]；LC/MS保留时间(方法B):tR＝2.18min.HPLC保留时间(方法A):tR＝8.87min；HPLC保留时间(方法B):tR＝9.53min.1H NMR(400MHz,MeOH-d4)δppm 8.51(d,J＝5.60Hz,1H)8.17(s,1H)8.13(d,J＝5.60Hz,1H)6.97(s,1H)4.17-4.20(m,1H)4.04-4.04(m,1H)3.76(s,3H)3.31-3.38(m,1H)3.06(s,3H)2.80-2.82(m,2H)1.81-1.89(m,1H)1.53-1.58(m,1H)1.45-1.50(m,1H)1.27-1.31(m,3H),0.98-1.02(m,6H).
实施例37(对映异构体1)和实施例38(对映异构体2)
(R)-8-((2-氨基-2,4-二甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮和(S)-8-((2-氨基-2,4-二甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
通过手性HPLC(方法:共溶剂:0.3％DEA的甲醇溶液,柱:Chiralpak ADH(250×21)mm 5μ)拆分实施例32中制备的8-((2-氨基-2,4-二甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮，得到两种对映异构体。未确定各对映异构体的绝对立体化学。
对映异构体-1:LC/MS(ESI)m/e 354.2[(M+H)+,计算值C21H28N3O2,354.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.57min。HPLC保留时间(方法A):tR＝8.67min；HPLC保留时间(方法B):tR＝9.46min。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)ppmδ8.54(s,1H),8.34-8.36(bs,1H),8.10(bs,1H),7.06(s,1H),4.11-4.17(m,2H),3.73(s,3H),3.06(s,3H),1.70-1.98(m,2H),1.68(bs,1H),1.45(s,3H),1.02-1.08(m,6H)；手性HPLC保留时间,tR＝9.36min
对映异构体-2:LC/MS(ESI)m/e 354.2[(M+H)+,计算值C21H28N3O2,354.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.57min.HPLC(方法B)保留时间(方法A):tR＝8.67min；HPLC保留时间(方法B):tR＝9.46min.1H NMR(400MHz,甲醇-d4)ppmδ8.54(s,1H),8.34-8.36(bs,1H),8.10(bs,1H),7.06(s,1H),4.11-4.17(m,2H),3.73(s,3H),3.06(s,3H),1.70-1.98(m,2H),1.68(bs,1H),1.45(s,3H),1.02-1.08(m,6H)；手性HPLC(方法B)保留时间:tR＝10.68min.
实施例39
(S)-8-((2-(二甲基氨基)-4-甲基戊基)氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
在环境温度向(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(0.06g,0.184mmol)(实施例2的E部分中所述合成)于甲酸(0.035mL,0.922mmol)中的搅拌溶液中添加甲醛(0.025mL,0.922mmol)。然后将反应混合物加热至回流且保持16h。将反应混合物减压浓缩。残余物用50mL水稀释并用80mL二氯甲烷萃取。分离有机层，用硫酸钠干燥并减压浓缩。残余物通过反相HPLC(乙腈/水/10mM NH4OAc)纯化，得到(S)-8-((2-(二甲基氨基)-4-甲基戊基)氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(8mg,0.021mmol,11％产率)，为白色固体。LC/MS(ESI)m/e 354.0[(M+H)+,计算值C21H28N3O2,354.5]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.85min.HPLC保留时间(方法A):tR＝8.02min；HPLC保留时间(方法B):tR＝9.19min1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 1.01(d,J＝6.80Hz,6H),1.50-1.61(m,2H),1.73-1.80(m,1H),2.52(s,1H),3.15-3.16(m,1H),3.73(s,3H),4.23-4.31(m,2H),7.04(d,J＝8.00Hz,2H),8.15(s,1H),8.30(d,J＝8.00Hz,1H),8.71(s,1H),8.39(s,1H).
实施例40
(S)-8-((2-(二甲基氨基)-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
在室温向(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(0.1g,0.295mmol)(实施例16的I部分中所述合成)于甲酸(0.011mL,0.295mmol)中的浆液中添加甲醛(8.12μL,0.295mmol)。将反应混合物在密封管中加热至100℃且保持16h。冷却至室温后，将混合物减压浓缩。然后将残余物在水(50mL)和二氯甲烷(80mL)之间分配。分离有机层，用硫酸钠干燥并减压浓缩。残余物通过反相HPLC(10mM乙酸铵/AcCN)纯化，得到(S)-8-((2-(二甲基氨基)-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(30mg,0.078mmol,26％产率)，为白色固体。LC/MS(ESI)m/e368.0[(M+H)+,计算值C22H30N3O2,368.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.86min.HPLC保留时间(方法A):tR＝7.98min；HPLC保留时间(方法B):tR＝9.44min.1H NMR(400MHz,甲醇-d4)ppmδ1.01(d,J＝6.80Hz,6H),1.61-1.95(m,3H),2.66-2.69(m,6H),3.06(s,3H),3.37-3.43(m,1H),3.74(s,3H),4.37(d,J＝4.80Hz,2H),7.04-7.08(m,2H),8.10(d,J＝5.60Hz,1H),8.36(d,J＝8.80Hz,1H),8.53(d,J＝5.60Hz,1H).
实施例41
8-((2-氨基-2,4-二甲基戊基)氧基)-9-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
在室温向8-((2-氨基-2,4-二甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(实施例32的步骤B中制备)(0.08g,0.226mmol)于乙腈(5mL)中的搅拌溶液中添加NCS(0.030g,0.226mmol))且将反应混合物搅拌2h。然后将混合物蒸发至干。残余物通过反相HPLC(含0.1％TFA的水/AcCN)纯化，得到8-((2-氨基-2,4-二甲基戊基)氧基)-9-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(12mg,0.030mmol,13％产率)，其为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/e388.0[(M+H)+,计算值C21H27ClN3O2,388.2].LC/MS保留时间(方法C):tR＝2.13min.HPLC保留时间(方法A):tR＝8.97min；HPLC保留时间(方法B):tR＝10.16min.1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 0.99-1.02(m,6H),1.30(s,3H),1.54-1.66(m,2H),1.84-1.90(m,1H),3.05(s,1H),3.73(s,1H),4.04(q,J＝23.20Hz,2H),7.03(s,1H),8.06(d,J＝6.00Hz,1H),8.39(s,1H),8.54(d,J＝6.00Hz,1H).
实施例42
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-4-甲氧基-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.8-氯-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
如实施例2的C部分中所述制备。
A部分.8-氯-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-3-氧化物
向如实施例2的C部分中所述制备的8-氯-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(1.0g,4.09mmol)于DCM(20mL)中的冷却至0℃的搅拌溶液中添加m-CPBA(1.763g,10.22mmol)。然后将反应混合物温热至环境温度并搅拌4h。然后反应混合物用二氯甲烷(100mL)稀释并用饱和碳酸氢钠溶液(200mL)和盐水溶液(50mL)洗涤。然后有机物用硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到8-氯-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-3-氧化物(1.0g,3.84mmol,94％粗产率)，为黄色固体。该物质无需进一步纯化即使用。LC/MS(ESI)m/e261.0[(M+H)+,计算值C13H10ClN2O2,261.0]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.65min.
B部分.4,8-二氯-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
将8-氯-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-3-氧化物(0.5g,1.918mmol)于POCl3(3.58mL,38.4mmol)中的搅拌溶液加热至回流且保持6h。将反应混合物减压浓缩。然后将残余物在二氯甲烷(100mL)和饱和碳酸氢钠溶液(200mL)之间分配。分离有机层并用盐水溶液(50mL)再次洗涤，用硫酸钠干燥并浓缩，得到4,8-二氯-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(0.3g,1.075mmol,56％粗产率)。该物质无需进一步纯化即使用。LC/MS(ESI)m/e280.8[(M+2H)+,计算值C13H9Cl2N2O,280.8]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝2.06min.
C部分.8-氯-4-甲氧基-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
向4,8-二氯-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(1.0g,3.58mmol)于MeOH(1mL)中的溶液中添加甲醇钠(0.806mL,3.58mmol)。将所得混合物在微波中在80℃加热25min。然后反应混合物用水(20mL)稀释并用乙酸乙酯(30mL)萃取。分离有机层，用硫酸钠干燥并蒸发至干，得到8-氯-4-甲氧基-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(0.4g,1.391mmol,39％粗产率)，为棕色固体。该物质无需进一步纯化即使用。LC/MS(ESI)m/e 274.8[(M+H)+,计算值C14H12ClN2O2,275.0]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝2.06min.
D部分.(S)-(1-((4-甲氧基-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
如实施例16的H部分所述制备，得到标题产物(0.1g,0.135mmol,62％产率)，为半固体。LC/MS(ESI)m/e 456.0[(M+H)+,计算值C25H34N3O5,456.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝2.26min.
E部分.(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-4-甲氧基-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
如实施例2的E部分所述制备，得到标题产物(10mg,0.027mmol,20％产率)，为胶状物。LC/MS(ESI)m/e 356.0[(M+H)+,计算值C20H26N3O3,356.4]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.83min.HPLC保留时间(方法A):tR＝8.48min；HPLC保留时间(方法B):tR＝7.61min.1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.24(d,J＝6.0Hz,1H),8.13(d,J＝9.0Hz,1H),7.62(d,J＝6.0Hz,1H),6.99-6.91(m,1H),6.90(d,J＝2.5Hz,1H),4.11(dd,J＝9.5,4.0Hz,1H),4.06(s,3H),3.92(dd,J＝9.3,7.3Hz,1H),3.65(s,3H),1.93-1.81(m,1H),1.45(td,J＝7.7,6.3Hz,2H),1.03(d,J＝6.5Hz,3H),1.01(d,J＝6.5Hz,3H).
实施例43
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-氯-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.(S)-(1-((9-氯-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
如实施例41中所述使用NCS将如实施例19的B部分所述制备的(S)-(4-甲基-1-((6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.4g,0.714mmol)经氯化作用，得到(S)-(1-((9-氯-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.3g,0.437mmol,61％产率)，为黄色固体。LC/MS(ESI)m/e 460.2[(M+H)+,计算值C24H31ClN3O4,460.2]；LC/MS保留时间(方法C)tR＝2.17min.
B部分.(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-氯-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
如实施例2的E部分中所述将(S)-(1-((9-氯-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯经脱Boc保护，得到(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-氯-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(0.1g,0.27mmol,72％产率)，为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/e360.2[(M+H)+,计算值C19H23ClN3O2,360.1]；HPLC保留时间(方法A):tR＝8.94min；HPLC保留时间(方法B):tR＝5.4min.1H NMR(400MHz,甲醇-d4)ppm 9.43(d,J＝0.50Hz,1H),8.76(d,J＝5.52Hz,1H),8.42(s,1H),8.16-8.20(m,1H),7.10(s,1H),4.23-4.27(m,1H),4.02-4.08(m,1H),3.78(s,3H),3.34-3.40(m,1H),1.84-1.94(m,1H),1.42-1.58(m,2H),1.03(dd,J＝8.66,6.65Hz,6H).
实施例44
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-6-(2-羟基乙基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.8-氯-6-(2-羟基乙基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
在氮气下向8-氯苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(80mg,0.347mmol)在无水DMF(5mL)中的搅拌溶液中添加碳酸乙酯(122mg,1.387mmol)、K2CO3(96mg,0.694mmol)和18-冠-6(18.31mg,0.069mmol)。将反应混合物加热至80℃且保持12h。反应混合物用水(10mL)稀释并用乙酸乙酯(2×20mL)萃取。合并的乙酸乙酯层用硫酸钠干燥并减压浓缩，得到8-氯-6-(2-羟基乙基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(80mg,0.291mmol,84％粗产率)。该物质无需进一步纯化即使用。LC/MS(ESI)m/e 275.0[(M+H)+,计算值C14H12ClN2O2,275.1]；1H NMR(400MHz,MeOD)δ9.55(s,1H),8.87(d,J＝5.6Hz,1H),8.50(d,J＝8.8Hz,1H),8.34(d,J＝5.6Hz,1H),7.88(d,J＝1.6Hz,1H),7.44(dd,J＝8.4,2.0Hz,1H),4.57(t,J＝6.0Hz,2H),3.96(t,J＝6.0Hz,2H).
B部分.(S)-(1-((6-(2-羟基乙基)-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
如实施例16的H部分中所述制备，得到(S)-(1-((6-(2-羟基乙基)-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(60mg,0.132mmol,45％产率)，为白色油状物。LC/MS(ESI)m/e 456.2[(M+H)+,计算值C25H34N3O5,456.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.81min.
C部分.(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-6-(2-羟基乙基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
如实施例2的E部分中所述制备，得到(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-6-(2-羟基乙基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(6mg,0.015mmol,12％产率)，为黄色固体。LC/MS(ESI)m/e 356.2[(M+H)+,计算值C20H26N3O3,356.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.59min.HPLC保留时间(方法A):tR＝7.66min；HPLC保留时间(方法B):tR＝7.99min.1H NMR(400MHz,MeOD)δ9.50(s,1H),8.79(d,J＝6.0Hz,1H),8.47(d,J＝8.8Hz,1H),8.29(d,J＝5.6Hz,1H),7.34(d,J＝2.0Hz,1H),7.14(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),4.59(t,J＝6.4Hz,2H),4.34(dd,J＝10.0,3.6Hz,1H),4.17(dd,J＝10.0,6.4Hz,1H),3.98(t,J＝6.0Hz,2H),3.63-3.53(m,1H),1.92-1.80(m,1H),1.66-1.59(m,2H),1.06-1.03(m,6H).
实施例45
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-6-(2,2,2-三氟乙基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.4-(4-氯-2-氟苯基)-N-(2,2,2-三氟乙基)烟酰胺
在氮气下向实施例2的A部分所述制备的4-(4-氯-2-氟苯基)烟酸(300mg,1.192mmol)在无水DMF(2mL)中的搅拌溶液中添加HOBT(365mg,2.384mmol)、DIEA(0.927mL,4.77mmol)和EDC(343mg,1.788mmol)。将反应混合物冷却至0℃并用2,2,2-三氟乙胺(236mg,2.384mmol)逐滴处理，温热至室温并搅拌12h。反应混合物用水(20mL)稀释并用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。合并的有机层用硫酸钠干燥并减压浓缩，得到4-(4-氯-2-氟苯基)-N-(2,2,2-三氟乙基)烟酰胺(200mg,0.601mmol,50％粗产率)，为黄色固体。LC/MS(ESI)m/e 333.2[(M+H)+,计算值C14H10ClF4N2O,333.0]；LC/MS保留时间(方法A):tR＝1.66min.
B部分.8-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
如实施例2的C部分所述制备，得到8-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(150mg,0.480mmol,80％产率)。LC/MS(ESI)m/e313.1[(M+H)+,计算值C14H9ClF3N2O,313.0]；LC/MS保留时间(方法D):tR＝0.95min.
C部分.(S)-(4-甲基-1-((5-氧代-6-(2,2,2-三氟乙基)-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
如实施例16的H部分所述制备，得到(S)-(4-甲基-1-((5-氧代-6-(2,2,2-三氟乙基)-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(100mg,0.203mmol,42％产率)，为棕色固体。LC/MS(ESI)m/e 494.5[(M+H)+,计算值C25H31F3N3O4494.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝2.17min.
D部分.(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-6-(2,2,2-三氟乙基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
如实施例2的E部分所述制备，得到(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-6-(2,2,2-三氟乙基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(25mg,0.061mmol,30％产率)，其为白色固体。LC/MS(ESI)m/e 394.2[(M+H)+,计算值C20H23F3N3O2,394.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.78min.HPLC保留时间(方法A):tR＝5.26min；HPLC保留时间(方法B):tR＝5.60min.1H NMR(400MHz,MeOD)δ9.49(s,1H),8.81(d,J＝5.6Hz,1H),8.46(d,J＝8.8Hz,1H),8.28(d,J＝5.6Hz,1H),7.23(br s,1H),7.15(dd,J＝8.8,2.0Hz,1H),5.32(dd,J＝8.8,6.4Hz,2H),4.21(dd,J＝9.2,3.6Hz,1H),4.03(dd,J＝9.2,7.2Hz,1H),3.40-3.33(m,1H),1.92-1.80(quin,J＝6.8,1H),1.52-1.46(m,2H),1.02(d,J＝6.4Hz,3H),1.00(d,J＝6.4Hz,3H).
实施例46
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-9-乙基-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.(S)-(4-甲基-1-((6-甲基-5-氧代-9-乙烯基-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
将(S)-(1-((9-溴-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.250g,0.496mmol)(如实施例3的B部分所述制备)、2,4,6-三乙烯基环三硼氧烷/吡啶复合物(0.239g,0.991mmol)、Na2CO3(0.158g,1.487mmol)和Pd(PPh3)4(0.029g,0.025mmol)在甲苯(1mL)、水(0.1mL)和乙醇(0.3mL)中的混合物用氮气脱气并在90℃加热16h。冷却后，将反应混合物转移至含有水(10mL)的分液漏斗中并用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。合并的有机层用硫酸钠干燥并减压浓缩。残余物通过硅胶柱色谱(60％乙酸乙酯:石油醚)纯化，得到(S)-(4-甲基-1-((6-甲基-5-氧代-9-乙烯基-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.150g,0.166mmol,34％产率)，为黄色固体。LC/MS(ESI)m/e 452.4[(M+H)+,计算值C26H34N3O4,452.2]；LC/MS保留时间(方法D):tR＝0.95min.
B部分.(S)-(1-((9-乙基-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
将(S)-(4-甲基-1-((6-甲基-5-氧代-9-乙烯基-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.15g,0.332mmol)和钯/碳(0.075g,0.070mmol)在MeOH(3mL)和乙酸乙酯(3mL)中的混合物在室温在氢气气球下搅拌24h。反应混合物通过硅藻土过滤且将滤液减压浓缩。残余物通过制备型TLC(60％乙酸乙酯/石油醚)纯化，得到(S)-(1-((9-乙基-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.11g,0.133mmol,40％产率)，为黄色半固体。LC/MS(ESI)m/e454.4[(M+H)+,计算值C26H36N3O4,454.3]；LC/MS保留时间(方法D):tR＝0.96min.
C部分.(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-乙基-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
如实施例2的E部分所述制备，得到标题化合物(55mg,0.155mmol,64％产率)，为黄色固体。LC/MS(ESI)m/e 354.2[(M+H)+,计算值C21H28N3O2,354.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.94min.HPLC保留时间(方法A):tR＝8.76min；HPLC保留时间(方法B):tR＝5.19min.1H NMR(400MHz,MeOD)δ9.52(s,1H),8.81(d,J＝6.0Hz,1H),8.51(d,J＝8.8Hz,1H),8.33(s,1H),7.11(s,1H),4.52(m,1H),4.36(m,1H),3.86(s,3H),3.76-3.84(m,1H),2.86-2.93(m,2H),1.81-1.90(m,2H),1.63-1.81(m,1H),1.35(m,3H),1.05(m,6H).
实施例47
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-9-异丙基-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.(S)-(4-甲基-1-((6-甲基-5-氧代-9-(丙-1-烯-2-基)-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
如实施例46的A和B部分所述制备，得到(S)-(4-甲基-1-((6-甲基-5-氧代-9-(丙-1-烯-2-基)-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(100mg,0.215mmol,90％产率)，为固体。LC/MS(ESI)m/e466.4[(M+H)+,计算值C27H36N3O4,466.3]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝2.22min.
B部分.(S)-(1-((9-异丙基-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
将(S)-(4-甲基-1-((6-甲基-5-氧代-9-(丙-1-烯-2-基)-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.1g,0.215mmol)和钯/碳(0.07g,0.066mmol)在MeOH(3mL)和乙酸乙酯(3mL)中的混合物在室温在氢气气球下搅拌24h。反应混合物通过硅藻土过滤且将滤液减压浓缩，得到(S)-(1-((9-异丙基-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.04g,2.464mmol,1％产率)，为棕色油状物，其无需进一步纯化即使用。LC/MS(ESI)m/e 468.4[(M+H)+,计算值C27H38N3O4,468.3]；LC/MS保留时间(方法D):tR＝1.00min.
C部分.(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-9-异丙基-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
如实施例2的E部分所述制备，得到标题产物(12.05mg,0.033mmol,99％纯度)，为黄色固体。LC/MS(ESI)m/e 368.2[(M+H)+,计算值C22H30N3O2,368.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.97min.HPLC保留时间(方法A):tR＝7.28min；HPLC保留时间(方法B):tR＝10.15min.1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 9.54(s,1H),8.82(d,J＝6.0Hz,1H),8.60(d,J＝8.8Hz,1H),8.36(s,1H),7.12(s,1H),4.52(m,1H),4.41(m,1H),3.86(s,3H),3.74-3.84(m,1H),3.61(m,1H),1.80-1.90(m,2H),1.64-1.81(m,1H),1.35-1.43(m,6H),1.02-1.11(m,6H).
实施例48
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-6-甲基-9-(噁唑-5-基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.(S)-1-(9-甲酰基-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯
将(S)-(4-甲基-1-((6-甲基-5-氧代-9-乙烯基-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(300mg,0.664mmol)(如实施例46的A部分所述制备)、四氧化锇(2.5％在2-甲基-2-丙醇中)(4.17μl,0.013mmol)和2,6-二甲基吡啶(0.155mL,1.329mmol)在1,4-二噁烷(5mL)和水(2mL)中的冷却至0℃的混合物搅拌15min。添加高碘酸钠(568mg,2.66mmol)，将反应混合物温热至室温并搅拌2h。反应混合物通过硅藻土过滤，其中用EtOAc洗脱。EtOAc层先后用饱和NaHCO3水溶液、H2O和盐水洗涤。有机层用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。残余物通过硅胶色谱(EtOAc/石油醚)纯化，得到(S)-(1-((9-甲酰基-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(160mg,0.353mmol,53％产率)，为胶状固体。LC/MS(ESI)m/e 454.1[(M+H)+,计算值C25H32N3O5,454.2].
B部分.(S)-(4-甲基-1-((6-甲基-9-(噁唑-5-基)-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
将(S)-(1-((9-甲酰基-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(100mg,0.220mmol)、K2CO3(33.5mg,0.243mmol)和TOSMIC(47.4mg,0.243mmol)在MeOH(5mL)中的混合物在60℃加热2h。冷却后，将MeOH减压除去且将残余物溶解于乙酸乙酯中。有机层先后经H2O和饱和NaHCO3洗涤，用Na2SO4干燥并减压浓缩，得到(S)-(4-甲基-1-((6-甲基-9-(噁唑-5-基)-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(50mg,0.054mmol,24％粗产率)，为胶状物。该物质无需进一步纯化即使用。LC/MS(ESI)m/e 493.4[(M+H)+,计算值C27H33N4O5,493.6]；LC/MS保留时间(方法E):tR＝1.08min.
C部分.(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-6-甲基-9-(噁唑-5-基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
如实施例2的E部分所述制备，得到(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-6-甲基-9-(噁唑-5-基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(15mg,0.038mmol,29％产率)，为黄色固体。LC/MS(ESI)m/e 393.2[(M+H)+,计算值C22H25N4O3,393.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.70min.HPLC保留时间(方法A):tR＝8.89min；HPLC保留时间(方法B):tR＝9.12min.1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm1.07-1.13(m,6H)1.75(d,J＝6.78Hz,1H)1.81-1.93(m,2H)3.91(s,3H)3.94-4.00(m,1H)4.55(dd,J＝11.04,6.53Hz,1H)4.67(dd,J＝10.92,3.39Hz,1H)7.30(s,1H)7.71(s,1H)8.43(s,1H)8.55(d,J＝5.52Hz,1H)8.90(s,2H)9.59(s,1H).
实施例49
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-9-溴-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.4-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基烟酰胺
将4-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基烟酸(9g,33.9mmol)(参见以上实施例16的E部分)置于DCM(50mL)中并冷却至0℃。溶液用草酰氯(14.83mL,169mmol)处理，然后通过缓慢添加DMF(1mL)处理。将混合物在40℃加热3h。冷却后，将挥发物减压除去。将溶解于DCM(25mL)中的残余物冷却至0℃并缓慢添加TEA(22.08mL,158mmol)和氯化铵(16.94g,317mmol)。在室温搅拌1h后，反应混合物用饱和NaHCO3水溶液(10mL)、水(10mL)和盐水(10mL)洗涤。分离有机层并用Na2SO4干燥，得到4-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基烟酰胺(3.5g,13.2mmol,42％粗产率)，为棕色固体。该物质无需进一步纯化即使用。LC/MS(ESI)m/e 264.4[(M)+,计算值C13H10ClFN2O 264.0]LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.58min.
B部分.8-氯-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
如实施例2的C部分所述制备，得到8-氯-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(800mg,3.14mmol,24％产率,96％纯度)，为黄色固体。LC/MS(ESI)m/e 245.1[(M+H)+,计算值C13H10ClN2O 245.04]LC/MS保留时间(方法D):tR＝0.52min.
C部分.8-氯-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
如实施例17的G部分所述制备，得到8-氯-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(710mg,1.362mmol,56％产率)，为棕色胶状物。LC/MS(ESI)m/e 365.1[(M+H)+,计算值C21H18ClN2O2365.1]LC/MS保留时间(方法D):tR＝0.8min.
D部分.(S)-1-(6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯
如实施例16的H部分所述制备，得到(S)-1-(6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯(130mg,0.21mmol,31％产率,88％纯度)，为棕色胶状物。LC/MS(ESI)m/e546.2[(M+H)+,计算值C32H40FN3O5546.3]LC/MS保留时间(方法D):tR＝0.94min.
E部分.(S)-1-(9-溴-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯
如实施例3的A部分所述制备，得到(S)-1-(9-溴-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯(140mg,0.146mmol,61％产率,65％纯度)，为橙红色固体。LC/MS(ESI)m/e 624.2[(M+H)+,计算值C32H39BrN3O5624.2],LC/MS保留时间(方法D):tR＝0.98min.
F部分.(S)-1-(9-溴-4-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯
如Protective Groups in organic synthesis(Greene,Wuts；3rd ed.,1999,JohnWiley&Sons,Inc.)中所述使用硝酸铵铈进行PMB脱保护，得到(S)-1-(9-溴-4-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯(60mg,0.12mmol,93％产率)，为红色固体。LC/MS(ESI)m/e504.1[(M+H)+,计算值C24H31BrN3O4504.14]LC/MS保留时间(方法D):tR＝0.91min.
G部分.(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-9-溴-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
如实施例2的E部分所述制备，得到(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-9-溴-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(12mg,0.029mmol,35％产率,98％纯度)，为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/e 402.0[(M)-,计算值C19H21BrN3O2402.1]LC/MS保留时间(方法C):tR＝2.19min.HPLC保留时间(方法A):tR＝8.52min和HPLC保留时间(方法B):tR＝9.02min.1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.67(s,1H),8.64(d,J＝6.0Hz,1H),8.30(d,J＝6.0Hz,1H),6.98(s,1H),4.85-4.43(m,1H),4.31-4.27(m,1H),3.82-3.80(m,1H),3.13(s,3H),1.88-1.80(m,2H),1.76-1.71(m,1H),1.09(d,J＝6.4Hz,3H),1.07(d,J＝6.4Hz,3H).
实施例50
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-4-((4-甲氧基苄基)氨基)-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
如实施例17的H部分和实施例2的E部分所述制备，得到(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-4-((4-甲氧基苄基)氨基)-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮盐酸盐(19mg,0.038mmol,26％产率)，为淡黄色固体。LC/MS(ESI)m/e 461[(M+H)+,计算值C27H33N4O3,461.25]；LC/MS保留时间(方法B):tR＝1.42min.HPLC保留时间(方法A):tR＝11.09min；HPLC保留时间(方法B):tR＝12.68min.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.09(br.s.1H),8.40(d,J＝8.8Hz,1H),8.24(d,J＝6.0Hz,1H),8.07(s,3H),7.45(d,J＝6.0Hz,1H),7.33(d,J＝8.4Hz,2H),7.07-7.06(m,2H),6.95-6.91(m,2H),4.67(d,J＝5.2Hz,1H),4.38(dd,J＝10.4,3.2Hz,2H),4.21(dd,J＝10.8,6.8Hz,1H),3.75(s,3H),3.68(s,3H),3.62(br s,1H),1.80(quin,J＝6.8,1H),1.59-1.55(m,H),0.95(d,J＝6.4Hz,3H),0.94(d,J＝6.4Hz,3H).
实施例51
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-(4-氟苯基)-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.(S)-(1-((9-(4-氟苯基)-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
将(S)-(1-((9-溴-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(150mg,0.297mmol)(如实施例3的A部分所述制备)、4-氟苯基硼酸(49.9mg,0.357mmol)、Cs2CO3(291mg,0.892mmol)和PdCl2(dppf)-CH2Cl2加合物(12.14mg,0.015mmol)在1,4-二噁烷(8mL)和水(0.4mL)中的混合物用氮气脱气5min，然后在80℃加热过夜。将反应混合物冷却至室温并减压浓缩。将残余物溶解于二氯甲烷(10mL)和水(8mL)中。分离有机层，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到(S)-(1-((9-(4-氟苯基)-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.13g,0.09mmol,31％产率)，为棕色胶状物。该物质无需进一步纯化即使用。LC/MS,(ESI)m/z 520.4[(M+H)+,计算值C30H35FN3O4520.25]；LC/MS保留时间(方法D):tR＝1.08min.
B部分.(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-(4-氟苯基)-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
如实施例2的E部分所述制备，得到(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-(4-氟苯基)-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(19mg,0.043mmol,47％产率)，为淡黄色固体。LC/MS,(ESI)m/z 420.0[(M+H)+,计算值C25H27FN3O2,420.3]；LC/MS保留时间(方法C’):tR＝1.61min.1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 9.40(s,1H),8.69(m,1H),8.24(s,1H),8.18(m,1H),7.62(m,2H),7.22(m,2H),7.04(s,1H),4.16(m,1H),3.98(m,1H),3.78(s,3H),3.20(m,1H),1.78(m,1H),1.35(m,2H),0.90-0.98(m,6H).
实施例52
(S)-4-氨基-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-9-氟-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.4-(4-氯-2,5-二氟苯基)-3-甲酰基吡啶-2-基氨基甲酸叔丁酯
如实施例17的C部分所述通过2-(4-氯-2,5-二氟苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(如实施例14的A部分所述制备)和4-氯-3-甲酰基吡啶-2-基氨基甲酸叔丁酯(如实施例17的B部分所述制备)之间的Suzuki偶联制备，得到4-(4-氯-2,5-二氟苯基)-3-甲酰基吡啶-2-基氨基甲酸叔丁酯(3.7g,8.91mmol,76％产率)，为黄色固体。LC/MS(ESI)m/e 367.1[(M)-,计算值C17H16ClF2N2O3367.1]LC/MS保留时间(方法E):tR＝1.07min.
B部分：4-(叔丁氧基羰基氨基)-8-氯-9-氟-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-6-鎓
在0℃向(4-(4-氯-2,5-二氟苯基)-3-甲酰基吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(2.6g,6.26mmol)于DCM(10mL)中的搅拌溶液中滴加甲胺(2M于MeOH中)(75mL,6.26mmol)且将反应混合物在室温搅拌18小时。将反应混合物减压浓缩。残余物用EtOAc/己烷研磨且将获得的固体通过真空过滤收集，得到4-((叔丁氧基羰基)氨基)-8-氯-9-氟-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-6-鎓(2.7g,2.399mmol,38％产率)，为黄色固体。样品无需进一步纯化即使用。LC/MS(ESI)m/e 362.2[(M+H)+,计算值C18H18ClFN3O2362.1]LC/MS保留时间(方法E):tR＝0.66min.
C部分：8-氯-9-氟-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-4-基氨基甲酸
向4-((叔丁氧基羰基)氨基)-8-氯-9-氟-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-6-鎓(2.6g,2.310mmol)在DCM(10mL)和水(50mL)的混合物中的搅拌溶液中分三份添加NaOH(0.370g,9.24mmol)，然后分五份添加KMnO4(1.461g,9.24mmol)且将反应加热至90℃且保持5h。冷却后，将溶剂减压除去。将残余物溶解于EtOAc(50mL)和MeOH(50mL)中并搅拌10min。然后反应混合物通过硅藻土其中用EtOAc洗脱。将滤液浓缩，得到(8-氯-9-氟-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-4-基)氨基甲酸(2.35g,2.082mmol,90％粗产率)，为黄色固体，其无需纯化即用于后续步骤。LC/MS(ESI)m/e 322.1[(M+H)+,计算值C14H10ClFN3O3322.0]LC/MS保留时间(方法E):tR＝1.05min.
D部分：8-氯-9-氟-4-(4-甲氧基苄基氨基)-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
如实施例17的F部分所述制备，得到4-氨基-8-氯-9-氟-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮，然后其根据实施例17的G部分所述的方法用PMB保护，得到标题产物(0.45g,0.755mmol,17％产率)，为黄色油状物。LC/MS(ESI)m/e 398.2[(M+H)+,计算值C21H18ClFN3O2398.1]LC/MS保留时间(方法E):tR＝1.23min.
E部分：(S)-1-(9-氟-4-(4-甲氧基苄基氨基)-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯
如实施例16的H部分所述制备，得到标题产物(910mg,0.405mmol,54％产率)，为黄色油状物。LC/MS(ESI)m/e 579.5[(M+H)+,计算值C32H40FN4O5579.3]LC/MS保留时间(方法E):tR＝1.37min.
F部分：(S)-4-氨基-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-9-氟-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
如实施例2的E部分所述制备，得到标题产物(27mg,0.045mmol,11％产率)，为TFA盐形式的淡黄色固体。LC/MS(ESI)m/e 359.2[(M+H)+,计算值C19H24FN4O2359.2]。LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.53min.HPLC保留时间(方法A):tR＝8.01min和HPLC保留时间(方法B):tR＝9.13min.1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.33(d,J＝12.0Hz,1H),8.02(d,J＝7.0Hz,1H),7.67(d,J＝7.3Hz,1H),7.34(d,J＝7.3Hz,1H),4.60(dd,J＝10.7,3.1Hz,1H),4.46(dd,J＝10.8,6.0Hz,1H),3.87(s,3H),3.86-3.78(m,1H),1.95-1.64(m,3H),1.08(d,J＝4.3Hz,3H),1.07(d,J＝4.3Hz,3H).
实施例53
(S)-8-(2-氨基-3-异丙氧基丙氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.(S)-2-(((苄基氧基)羰基)氨基)-3-异丙氧基丙酸甲酯
如Steven,M.S.et.al.Bioorg Med.Chem.Lett.,2009,19,981-985中所述制备。
B部分.(R)-(1-羟基-3-异丙氧基丙-2-基)氨基甲酸苄基酯
将(S)-2-(((苄基氧基)羰基)氨基)-3-异丙氧基丙酸甲酯(0.02g,0.068mmol)置于2-丙醇(4mL)中，然后添加NaBH4(7.69mg,0.203mmol)且将混合物在50℃搅拌过夜。冷却至0℃后，混合物用1N HCl淬灭，然后用乙醚(10mL)萃取。收集乙醚层并减压浓缩，得到(R)-(1-羟基-3-异丙氧基丙-2-基)氨基甲酸苄基酯(14mg,0.058mmol,86％粗产率)，为无色油状物。产物无需进一步纯化即使用。1H NMR(400MHz,MeOD)δ7.31-7.48(m,5H),5.12(s,1H),4.81(bs,1H),3.41-3.91(m,6H),1.12-1.26(m,6H).
C部分：(S)-(1-异丙氧基-3-((6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)丙-2-基)氨基甲酸苄基酯
如实施例16的H部分所述制备，得到标题产物(S)-(1-异丙氧基-3-((6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)丙-2-基)氨基甲酸苄基酯(220mg,0.130mmol,10％产率)，为浅黄色固体。LC/MS(ESI)m/e476.4[(M+H)+,计算值C27H30N3O5,476.2]；LC/MS保留时间(方法E):tR＝1.04min.
D部分：(S)-8-(2-氨基-3-异丙氧基丙氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
将(S)-(1-异丙氧基-3-((6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)丙-2-基)氨基甲酸苄基酯(220mg,0.130mmol)于MeOH(12mL)中的溶液用N2除气5min。添加Pd/C(68.9mg,0.065mmol)且将混合物在H2气球下搅拌12h。反应混合物通过硅藻土过滤，用甲醇洗脱且将滤液减压浓缩。残余物通过反相HPLC(含10mM乙酸铵的水/AcCN)纯化，得到(S)-8-(2-氨基-3-异丙氧基丙氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(90mg,0.108mmol,83％产率)，为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/e 342.2[(M+H)+,计算值C19H24N3O3,342.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.50min.HPLC保留时间(方法A):tR＝7.20min；HPLC保留时间(方法B):tR＝8.00min.1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 9.54(s,1H),8.23(d,J＝4.4Hz,1H),8.52(d,J＝8.8Hz,1H),8.44(d,J＝6.0Hz,1H),7.20(s,1H),7.18(d,J＝6.0Hz,1H),4.52(dd,J＝10.4,3.6Hz,1H),4.43(dd,J＝10.4,6.8Hz,1H),3.88-3.75(m,7H),1.26(d,J＝6.4Hz,3H),1.25(d,J＝6.4Hz,3H).
实施例54
(S)-6-甲基-8-((4-甲基-2-(甲基氨基)戊基)氧基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.(S)-甲基(4-甲基-1-(6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
在0℃向(S)-(4-甲基-1-((6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(200mg,0.470mmol)(制备参见实施例2的D部分)于THF(4mL)中的溶液中添加NaH(37.6mg,0.940mmol)。将反应混合物在0℃搅拌30min，然后添加MeI(0.044mL,0.705mmol)。然后将反应混合物在0℃搅拌16h。反应混合物用冰冷水(50mL)淬灭并用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。合并的有机层用盐水(1×50mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。粗产物通过硅胶色谱使用石油醚:乙酸乙酯作为流动相纯化，得到(S)-甲基(4-甲基-1-(6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(180mg,0.409mmol,87％产率)，为黄色固体。LC/MS(ESI)m/e440.4[(M+H)+,计算值C25H34N3O4,440.3]；LC/MS保留时间(方法I):tR＝2.4min.
B部分：(S)-6-甲基-8-((4-甲基-2-(甲基氨基)戊基)氧基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
历时1分钟向(S)-甲基(4-甲基-1-((6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(180mg,0.078mmol)于二氯甲烷(4mL)中的冷却至0℃的溶液中缓慢添加HCl的乙醚溶液(4mL,4.00mmol)。将反应混合物在0℃搅拌5min，然后温热至室温并搅拌4h。然后将挥发物减压除去。残余物经反相HPLC(含0.1％TFA的水:乙腈)纯化，得到(S)-6-甲基-8-((4-甲基-2-(甲基氨基)戊基)氧基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(15mg,0.025mmol,32％产率)，为黄色固体。LC/MS(ESI)m/e 340.2[(M+H)+,计算值C20H26N3O2,340.2]；LC/MS保留时间(方法I):tR＝1.6min.HPLC保留时间(方法A):tR＝7.59min；HPLC保留时间(方法B):tR＝8.08min.1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 9.54(s,1H),8.83(d,J＝5.8Hz,1H),8.53(d,J＝8.8Hz,1H),8.46(d,J＝6.0Hz,1H),7.27-7.16(m,2H),4.57(dd,J＝11.3,3.0Hz,1H),4.44(dd,J＝11.3,5.3Hz,1H),3.84(s,3H),3.78-3.68(m,1H),2.84(s,3H),1.95-1.78(m,2H),1.75-1.61(m,1H),1.08(d,J＝6.5Hz,6H).
实施例55
(S)-8-((2-氨基-4,4-二氟戊基)氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分：(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-4-甲基戊-4-烯酸甲酯
在0℃历时5min向(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-4-甲基戊-4-烯酸(550mg,2.399mmol)于四氢呋喃(11mL)中的溶液中滴加TMS-重氮甲烷(4.80mL,4.80mmol)。然后将反应混合物在0℃搅拌15min。逐渐温热至室温后，将混合物搅拌16h。将反应混合物蒸发至干，得到(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-4-甲基戊-4-烯酸甲酯(580mg,2.386mmol,99％粗产率)，为深黄色油状物，其无需纯化即用于后续步骤。1H NMR(400MHz,CDCl3):δppm 4.91(s,1H),4.85(s,1H),4.75(s,1H),4.38(q,J＝16.00Hz,1H),3.73(s,3H),2.33-2.53(m,2H),1.71(s,3H),1.43(s,9H).
B部分：(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-4-氧代戊酸甲酯
在0℃向(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-4-甲基戊-4-烯酸甲酯(500mg,2.055mmol)于1,4-二噁烷(10mL)和水(2.5mL)的溶剂混合物中的溶液中添加2,6-二甲基吡啶(0.479mL,4.11mmol)和四氧化锇(2.5％于2-甲基-2-丙醇中)(0.516mL,0.041mmol)，然后添加高碘酸钠(1.758g,8.22mmol)。将反应混合物在0℃搅拌15min，温热至室温并再搅拌3h。混合物用乙酸乙酯(150mL)稀释并用10％NaHCO3水溶液洗涤。分离有机层，用硫酸钠干燥并减压浓缩，得到(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-4-氧代戊酸甲酯(500mg,2.040mmol,100％粗产率)，为黄色液体。该物质无需进一步纯化即使用。1H NMR(400MHz,CDCl3):δppm 5.48(s,1H),4.51(t,J＝8.00Hz,1H),3.75(s,3H),3.23(d,J＝4.00Hz,1H),3.17(d,J＝4.00Hz,1H),2.18(s,3H),1.46(s,9H).
C部分：(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-4,4-二氟戊酸甲酯
在0℃向(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-4-氧代戊酸甲酯(300mg,1.223mmol)中滴加DAST(323μL,2.446mmol)。将反应混合物在室温搅拌84h。将反应混合物冷却至0℃，然后用10％NaHCO3水溶液淬灭。将所得悬浮液用乙酸乙酯(3×25mL)萃取。有机层用盐水(15mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。粗产物通过硅胶色谱纯化，得到(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-4,4-二氟戊酸甲酯(70mg,0.26mmol,19％产率)，为黄色油状物。1HNMR(400MHz,CDCl3):δppm 5.15(s,1H),4.50(s,1H),3.75(s,3H),3.23(t,J＝8.00Hz,1H),2.30-2.45(m,2H),1.60(s,3H),1.44(s,9H).
D部分：(S)-(4,4-二氟-1-羟基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
在-10℃向(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-4,4-二氟戊酸甲酯(70mg,0.262mmol)于四氢呋喃(4mL)中的溶液中添加2M氢化铝锂于THF中的溶液(0.262mL,0.524mmol)。将反应混合物在-10℃搅拌2h，然后用氯化铵水溶液(5mL)淬灭并用乙酸乙酯(2×10mL)萃取。合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到(S)-(4,4-二氟-1-羟基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(38mg,0.159mmol,61％粗产率)，为无色油状物。该物质无需进一步纯化即使用。1H NMR(400MHz,CDCl3):δppm 3.89(d,J＝4.00Hz,2H),2.10-2.14(m,1H),1.61-1.66(m,2H),1.51(s,3H),1.44(s,9H).
E部分：(S)-(4,4-二氟-1-((6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
在含有8-氯-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(30mg,0.123mmol)和(S)-(4,4-二氟-1-羟基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(35.2mg,0.147mmol)的密封管中添加甲苯(3mL)。向反应混合物中添加二叔丁基(2’,4’,6’-三异丙基-[1,1’-联苯]-2-基)膦(31.2mg,0.074mmol)和碳酸铯(59.9mg,0.184mmol)，然后添加二乙酸钯(II)(8.26mg,0.037mmol)。然后将反应混合物在85℃加热16h。将反应混合物冷却至室温，用乙酸乙酯稀释并通过硅藻土过滤，其中用乙酸乙酯洗脱。将滤液减压浓缩且粗产物通过硅胶色谱纯化，得到(S)-(4,4-二氟-1-((6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(12mg,0.027mmol,22％yield)，为黄色固体。LC/MS(ESI)m/e448.3[(M+H)+,计算值C23H28F2N3O4448.2]；LC/MS保留时间(方法E):tR＝0.96min.
F部分：(S)-8-((2-氨基-4,4-二氟戊基)氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
在0℃历时5min向(S)-(4,4-二氟-1-((6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(15mg,0.024mmol)于二氯甲烷(2mL)中的溶液中滴加4M HCl的乙醚溶液(2mL,2.00mmol)。将反应混合物在0℃搅拌5min并温热至室温且搅拌3h。将挥发物减压除去。将残余物溶于水(10mL)中并用乙酸乙酯(2×5mL)洗涤。将水层冻干，得到(S)-8-((2-氨基-4,4-二氟戊基)氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮,2HCl(6mg,0.018mmol,72％产率,93％纯度)，为棕色粘性固体。LC/MS(ESI)m/e348.2[(M+H)+,计算值C18H20F2N3O2348.1]；LC/MS保留时间(方法E):tR＝0.56min.HPLC保留时间(方法A):tR＝6.60min；HPLC保留时间(方法B):tR＝6.53min；1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 9.60(br.s.,1H),8.88(br.s.,1H),8.73(br.s.,1H),8.60(br.s.,1H),7.23(br.s.,2H),4.63-4.36(m,2H),4.13-4.06(m,1H),3.84(br.s.,3H),2.75-2.40(m,2H),1.78(t,J＝18.8Hz,3H).
实施例56
8-((2-氨基-5,5,5-三氟戊基)氧基)-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-9-甲腈
A部分：(1-((9-溴-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-5,5,5-三氟戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
如实施例15的E部分和实施例3的A部分所述制备，得到标题产物(1-((9-溴-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-5,5,5-三氟戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.720g,0.807mmol,60％产率)，为黄色固体。LC/MS(ESI)m/e 546.5[(M+2H)+,计算值C23H27BrF3N3O4,546.1]；LC/MS保留时间(方法D):tR＝0.90min.
B部分：(5,5,5-三氟-1-((6-甲基-5-氧代-9-乙烯基-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
如实施例46的B部分所述制备，得到标题产物(5,5,5-三氟-1-((6-甲基-5-氧代-9-乙烯基-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.6g,0.855mmol,75％产率)，为黄色固体。LC/MS(ESI)m/e 492.6[(M+H)+,计算值C25H29F3N3O4,492.2]；LC/MS保留时间(方法D):tR＝0.90min.
C部分：(5,5,5-三氟-1-((9-甲酰基-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
如实施例55的B部分所述制备，得到标题产物(5,5,5-三氟-1-((9-甲酰基-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.081g,0.079mmol,62％产率)，为棕色固体。LC/MS(ESI)m/e494.5(M+H)+,计算值C24H27F3N3O5,494.2]；LC/MS保留时间(方法D):tR＝0.85min.
D部分：(1-((9-氰基-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-5,5,5-三氟戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
在室温向(5,5,5-三氟-1-((9-甲酰基-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.165g,0.167mmol)于氨水(4mL,48.1mmol)和四氢呋喃(6mL)中的搅拌溶液中添加碘(0.047g,0.184mmol)。搅拌3h后，深色溶液变成浅灰色，这表明反应结束。向反应混合物中加入Na2S2O3水溶液(25mL 5％溶液)并用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。合并的有机层用硫酸钠干燥并减压浓缩，得到(1-((9-氰基-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-5,5,5-三氟戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.14g,0.143mmol,85％粗产率)，为淡黄色固体。该物质无需进一步纯化即使用。LC/MS(ESI)m/e 491.5(M+H)+,计算值C24H26F3N4O4,491.2]；LC/MS保留时间(方法D):tR＝0.87min.
E部分：8-((2-氨基-5,5,5-三氟戊基)氧基)-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-9-甲腈
如实施例2的E部分所述制备，得到标题产物8-((2-氨基-5,5,5-三氟戊基)氧基)-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-9-甲腈(0.027g,0.066mmol,34％产率)，为白色固体。LC/MS(ESI)m/e 391.2[(M+H)+,计算值C19H18F3N4O2,391.1]LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.61min.HPLC保留时间(方法A):tR＝8.09min；HPLC保留时间(方法B):tR＝10.36min.1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 9.50(s,1H),8.87-8.78(m,2H),8.31(d,J＝5.8Hz,1H),7.20(s,1H),4.42-4.30(m,1H),4.29-4.20(m,1H),3.84(s,3H),3.40-3.38(m,1H),2.58-2.31(m,2H),2.09-1.94(m,1H),1.90-1.72(m,1H).
实施例57
6-甲基-8-(哌啶-2-基甲氧基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分：2-(羟基甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
向哌啶-2-基甲醇(1.5g,13.02mmol)于二氯甲烷(25mL)中的搅拌溶液中添加DIPEA(6.82mL,39.1mmol)。搅拌5min后，添加Boc2O(3.63mL,15.63mmol)且将混合物在室温搅拌过夜。混合物用水淬灭并用DCM(50mL)稀释。分离有机层，用Na2SO4干燥并浓缩，得到2-(羟基甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(2g,9.29mmol,71％粗产率)，为无色油状物，其无需进一步纯化即使用。1H NMR(400MHz,CDCl3)ppmδ4.27-4.28(m,1H),3.80-3.82(m,1H),3.75-3.77(m,1H),3.56-3.58(m,1H),2.63(t,J＝7.20Hz,1H),1.55-1.55(m,5H),1.43(s,9H).
B部分：2-(((6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
如实施例16的H部分所述制备，得到标题产物(380mg,0.332mmol,41％产率)，为黄色油状物。LC/MS(ESI)m/e 424.2[(M+H)+,计算值C24H30N3O4,424.2]；LC/MS保留时间(方法I):tR＝2.29min.
B部分：6-甲基-8-(哌啶-2-基甲氧基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
如实施例2的E部分所述制备，得到标题化合物(30mg,0.092mmol,53％产率)，为淡黄色单TFA盐。LC/MS(ESI)m/e 324.2[(M+H)+,计算值C19H22N3O2324.2]；LC/MS保留时间(方法F):tR＝1.23min.HPLC保留时间(方法A):tR＝5.95min；HPLC保留时间(方法B):tR＝6.87min.1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 9.52(s,1H),8.82(d,J＝6.0Hz,1H),8.51(d,J＝9.3Hz,1H),8.42(d,J＝5.8Hz,1H),7.25-7.15(m,2H),4.49(dd,J＝10.5,3.5Hz,1H),4.30(dd,J＝10.8,7.3Hz,1H),3.83(s,3H),3.70(td,J＝7.5,3.6Hz,1H),3.56-3.45(m,1H),3.21-3.07(m,1H),2.19-1.95(m,3H),1.88-1.64(m,3H).
实施例58和实施例59
(S)-(2,4-二甲基-1-((6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯和(R)-(2,4-二甲基-1-((6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
A部分：(2,4-二甲基-1-((6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
8-氯-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮的合成参见实施例2的C部分。8-氯-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(0.15g,0.613mmol)和(1-羟基-2,4-二甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.284g,1.226mmol)经实施例16的H部分所述的醚合成，得到产物(2,4-二甲基-1-((6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.3g,28％产率)，为淡黄色固体。LC/MS(ESI)m/e 440.2[(M+H)+,计算值C25H34N3O4,440.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝2.67min.
B部分：8-((2-氨基-2,4-二甲基戊基)氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
(2,4-二甲基-1-((6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯经如实施例2的E部分中所述的脱Boc基团保护，得到8-((2-氨基-2,4-二甲基戊基)氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(30mg,12％产率)，为灰白色固体。通过手性HPLC(共溶剂:含0.3％DEA的甲醇，柱:Chiralpak AD H(250×21)mm 5μ)拆分8-((2-氨基-2,4-二甲基戊基)氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮，得到两种对映异构体。
对映异构体-1:LC/MS(ESI)m/e 340.0[(M+H)+,计算值C20H26N3O2,340.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.88min.HPLC保留时间(方法B):tR＝9.29min；HPLC保留时间(方法A):tR＝8.19min.1H NMR(400MHz,甲醇-d4)9.43(s,1H),8.73(d,J＝6.0Hz,1H),8.35(d,J＝8.5Hz,1H),8.19(d,J＝6.0Hz,1H),7.12-7.01(m,2H),4.05-3.92(m,2H),3.77(s,3H),1.95-1.80(m,1H),1.58(qd,J＝14.2,5.5Hz,2H),1.30(s,3H),1.04(d,J＝6.5Hz,3H),1.01(d,J＝6.5Hz,3H)；HPLC保留时间,tR＝5.44min.
对映异构体-2:LC/MS(ESI)m/e 340.0[(M+H)+,计算值C20H26N3O2,340.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.88min.HPLC保留时间(方法B):tR＝9.29min；HPLC保留时间(方法A):tR＝8.19min.1H NMR(400MHz,甲醇-d4)9.43(s,1H),8.73(d,J＝6.0Hz,1H),8.35(d,J＝8.5Hz,1H),8.19(d,J＝6.0Hz,1H),7.12-7.01(m,2H),4.05-3.92(m,2H),3.77(s,3H),1.95-1.80(m,1H),1.58(qd,J＝14.2,5.5Hz,2H),1.30(s,3H),1.04(d,J＝6.5Hz,3H),1.01(d,J＝6.5Hz,3H)；HPLC保留时间:tR＝7.77min.
实施例60
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-4-(二氟甲基)-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分：8-氯-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-4-甲醛
向如实施例16的G部分所述制备的8-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(100mg,0.387mmol)于AcOH(4mL)中的溶液中添加二氧化硒(51.5mg,0.464mmol)。将反应混合物在70℃搅拌3h。将挥发物减压除去且将获得的残余物溶解于二氯甲烷(2mL)中。混合物通过硅藻土过滤且将滤液减压浓缩，得到标题产物(0.1g,0.202mmol,52％粗产率)，为淡黄色固体。该物质无需进一步纯化即使用。LC/MS,(ESI)m/z 273.0[(M+H)+,计算值C14H10ClN2O2,273.0]；LC/MS保留时间(方法H):tR＝1.89min.
B部分：8-氯-4-(二氟甲基)-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
向8-氯-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-4-甲醛(200mg,0.733mmol)于DCM(1mL)中的溶液中添加双-(2-甲氧基乙基)氨基三氟化硫(811mg,3.67mmol)。将试管密封且将反应混合物在50℃搅拌过夜。反应混合物用饱和NaHCO3水溶液(15mL)碱化并用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。合并的有机层用Na2SO4干燥并减压浓缩，得到8-氯-4-(二氟甲基)-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(43mg,0.092mmol,13％粗产率)，为白色固体。该物质无需进一步纯化即使用。LC/MS,(ESI)m/z 295.0[(M+H)+,计算值C14H10ClF2N2O,295.0]；LC/MS保留时间(方法H):tR＝1.96min.
C部分：(S)-(1-((4-(二氟甲基)-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
如实施例16的H部分所述制备，得到标题化合物(15mg,0.016mmol,19％产率)。LC/MS,(ESI)m/z 476.3[(M+H)+,计算值C25H32F2N3O4476.2]；LC/MS保留时间(方法E):tR＝1.14min.
D部分：(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-4-(二氟甲基)-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
如实施例2的E部分所述制备，得到标题产物(1.5mg,3.95μmol,9％产率)，为灰白色固体。LC/MS,(ESI)m/z 376.2[(M+H)+,计算值C20H24F2N3O2,376.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.63min.HPLC保留时间(方法A):tR＝5.97min；HPLC保留时间(方法B):tR＝7.12min.1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.81(d,J＝5.52Hz,1H)8.42-8.48(m,2H)7.97-8.26(m,1H)7.09-7.15(m,2H)4.22(dd,J＝9.54,4.02Hz,1H)4.04(dd,J＝9.29,7.03Hz,1H)3.79(s,3H)3.39(dt,J＝3.33,1.73Hz,1H)1.81-1.92(m,1H)1.43-1.57(m,2H)1.02(dd,J＝8.78,6.53Hz,6H).19F NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 120.45.
实施例61
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-7-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分：(S)-(1-((7或9-氯-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
向如实施例16的H部分所述制备的(S)-(1-((4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(50mg,0.114mmol)于乙腈(2mL)中的溶液中添加1-氯吡咯烷-2,5-二酮(15.19mg,0.114mmol)。将反应混合物在55℃搅拌16h过夜。反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液(2mL)和水(10mL)碱化。溶液用二氯甲烷(3×10mL)萃取。合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到(S)-(1-((7-氯-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯和(S)-(1-((9-氯-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯的混合物(60mg,0.037mmol,32％合并粗产率)，为淡黄色固体。该物质无需进一步纯化即使用。LC/MS(ESI)m/e 474.4[(M+H)+,计算值C25H33ClN3O4,474.2]；LC/MS保留时间(方法E):tR＝1.24min.
B部分：(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-7-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
在0℃向(S)-(1-((7-氯-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯和(S)-(1-((9-氯-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯的混合物(30mg,0.063mmol)中添加HCl的1,4-二噁烷溶液(241μL,0.964mmol)。将反应混合物搅拌2h，然后减压浓缩。残余物通过反相HPLC(Symmetry C18柱(19×250mm)7.0微米；流动相A:含0.1％TFA的水；流动相B:乙腈；流速:14.0mL)纯化。将HPLC级份浓缩，用NaHCO3碱化并用DCM(2×)萃取。将合并的有机层真空浓缩，得到7-Cl和9-Cl最终产物的纯化混合物，为灰白色固体。其通过正相HPLC(chiralpak ODH,(4.6×250mm)5.0微米；流动相A:正己烷；流动相B:乙醇)经第二次纯化(以拆分区域异构体)。将HPLC级份真空浓缩，得到7-氯-区域异构体:(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-7-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(3mg,7.2umol,11％产率)，为淡黄色固体。LC/MS,(ESI)m/z 373.8[(M+H)+,计算值C20H25ClN3O2,374.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.64min.HPLC保留时间(方法A):tR＝8.44min；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.65(d,J＝5.65Hz,1H)8.44(d,J＝9.22Hz,1H)8.20(d,J＝5.58Hz,1H)7.22(d,J＝9.04Hz,1H)4.05-4.10(m,1H)3.98(dd,J＝9.25,6.43Hz,1H)3.73(s,3H)3.13-3.18(m,1H)2.99(s,3H)1.81-1.89(m,1H)1.28-1.42(m,2H)0.91(dd,J＝13.80,6.59Hz,2H).
实施例62
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
将实施例61的B部分中制备的7-Cl和9-Cl产物的混合物如上文所述通过正相HPLC(chiralpak ODH,(4.6×250mm)5.0微米；流动相A:正己烷；流动相B:乙醇)纯化(以拆分区域异构体)。将HPLC级份真空浓缩，得到9-氯-区域异构体:(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(5mg,0.013mmol,21％产率)，为灰白色固体。LC/MS,(ESI)m/z 373.8[(M+H)+,计算值C20H25ClN3O2,374.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.61min.HPLC保留时间(方法A):tR＝8.37min；HPLC保留时间(方法B):tR＝9.14min.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.63(d,J＝5.65Hz,1H)8.60(s,1H)8.26(d,J＝5.71Hz,1H)7.12(s,1H)4.11-4.16(m,1H)4.00-4.06(m,1H)3.70(s,3H)3.13-3.16(m,1H)3.00(s,3H)1.82-1.90(m,1H)1.34-1.42(m,1H)1.23-1.32(m,1H)0.90-0.95(m,6H).
实施例63
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-4,6,9-三甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分：(S)-(4-甲基-1-((4,6,9-三甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
如实施例3的A部分和实施例4的A部分所述制备，得到(S)-(4-甲基-1-((4,6,9-三甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(30mg,0.038mmol,40％产率)，为淡黄色固体。LC/MS,(ESI)m/z453.9[(M+H)+,计算值C26H36N3O4454.3]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝2.16min.
B部分：(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-4,6,9-三甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
如实施例2的E部分所述制备，得到(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-4,6,9-三甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(15mg,0.040mmol,62％产率)，为灰白色固体。LC/MS,(ESI)m/z 353.9[(M+H)+,计算值C21H28N3O2354.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.64min.HPLC保留时间(方法A):tR＝8.21min.1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.59(d,J＝5.77Hz,1H)8.27(s,1H)8.15(d,J＝5.60Hz,1H)6.92(s,1H)3.90-4.08(m,2H)3.68(s,3H)3.12-3.20(m,1H)2.99(s,3H)2.24(s,3H)1.85(td,J＝13.68,6.53Hz,3H)1.22-1.43(m,3H)0.86-0.95(m,6H).
实施例64
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-9-甲腈
A部分.(S)-1-(9-氰基-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯
将如实施例3的A部分所述制备的(S)-(1-((9-溴-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(2.4g,4.63mmol)、Pd2(dba)3(0.212g,0.231mmol)、DPPF(0.257g,0.463mmol)和氰化锌(II)(0.544g,4.63mmol)于DMF(20mL)和水(1mL)中的悬浮液用氮气脱气并加热至130℃过夜。冷却至室温后，将挥发物减压浓缩。将残余物复溶于乙酸乙酯中并通过硅藻土过滤。有机层先后经H2O和盐水洗涤，用Na2SO4干燥并减压浓缩。粗产物通过硅胶色谱(石油醚和乙酸乙酯)纯化，得到(S)-1-(9-氰基-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯(1.9g,4.09mmol,88％产率)，为黄色固体。LC/MS(ESI)m/e 465.2[(M+H)+,计算值C26H33N4O4,465.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝2.74min.
B部分.(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-9-甲腈
如实施例2的E部分所述制备，得到(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-9-甲腈(1.6g,3.89mmol,95％产率)，为浅黄色固体。LC/MS(ESI)m/e 365.2[(M+H)+,计算值C21H25N4O2,365.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝2.13min.HPLC保留时间(方法A):tR＝8.70min；HPLC保留时间(方法B):tR＝9.57min.1H NMR(400MHz,MeOD)δppm 9.07(s,1H),8.75(s,2H),7.28(s,1H),4.69(m,1H),4.55(m,1H),3.87(m,4H),3.27(s,3H),1.87(m,2H),1.74(m,1H),1.08(m,6H).
实施例65
(S)-4,6-二甲基-8-(4-甲基-2-(甲基氨基)戊基氧基)-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-9-甲腈
A部分.(S)-(1-((9-氰基-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯
将如实施例64的B部分所述制备的(S)-(1-((9-氰基-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(60mg,0.129mmol)溶于DMF(3mL)中并冷却至0℃。反应混合物用NaH(10.33mg,0.258mmol)处理，然后用MeI(0.016mL,0.258mmol)处理。在0℃搅拌10min后，将反应混合物温热至室温并搅拌过夜。然后混合物用冰冷水淬灭并用乙酸乙酯(2×3mL)萃取。合并的有机层用硫酸钠干燥并减压浓缩，得到(S)-(1-((9-氰基-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(70mg,0.127mmol,99％粗产率)，为灰白色固体。该物质无需进一步纯化即使用。LC/MS(ESI)m/e479.2[(M+H)+,计算值C27H35N4O4479.3]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝2.16min.
B部分.(S)-4,6-二甲基-8-((4-甲基-2-(甲基氨基)戊基)氧基)-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-9-甲腈
如实施例2的E部分所述制备，得到(S)-4,6-二甲基-8-((4-甲基-2-(甲基氨基)戊基)氧基)-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-9-甲腈(25mg,0.058mmol,46％产率)，为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/e 379.0[(M+H)+,计算值C22H27N4O2379.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.87min.HPLC保留时间(方法A):tR＝8.59min；HPLC保留时间(方法B):tR＝9.88min.1H-NMR(400MHz,MeOD):δppm 1.03(d,J＝22.80Hz,6H),1.56-1.62(m,1H),1.67-1.72(m,1H),1.84-1.87(m,1H),2.67(s,3H),3.10(s,3H),3.28-3.30(m,1H),3.81(s,3H),4.35(s,1H),4.49(s,1H),7.18(s,1H),8.20(d,J＝5.60Hz,1H),8.82(s,1H).
实施例66
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-2,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分：4-氯-6-甲基烟酸甲酯
向4,6-二氯烟酸甲酯(3.00g,14.56mmol)和三甲基环三硼氧烷(1.097g,8.74mmol)于1,4-二噁烷(70mL)和水(7mL)中的溶液中添加碳酸铯(14.23g,43.7mmol)。混合物用氩气脱气5分钟。添加PdCl2(dppf)-CH2Cl2加合物(1.189g,1.456mmol)且将反应混合物加热至110℃且保持16h。将反应混合物冷却至室温，用水(100mL)稀释并用乙酸乙酯(200mL)萃取。有机相用盐水(2×100mL)洗涤，用Na2SO4干燥并减压浓缩。获得的残余物通过硅胶色谱使用乙酸乙酯-石油醚混合物纯化，得到4-氯-6-甲基烟酸甲酯(700mg,2.87mmol,20％产率)，为黄色液体。LC/MS(ESI)m/e 186.0[(M+H)+,计算值C8H9ClNO2185.6]；LC/MS保留时间(方法I)tR＝1.79min.
B部分：4-(4-氯-2-氟苯基)-6-甲基烟酸甲酯
向4-氯-6-甲基烟酸甲酯(660mg,3.56mmol)和(4-氯-2-氟苯基)硼酸(620mg,3.56mmol)于1,4-二噁烷(20mL)中的溶液中添加碳酸铯(3.48g,10.67mmol)。反应混合物用氩气脱气5分钟。向反应混合物中添加Pd(Ph3P)4(205mg,0.178mmol)并加热至80℃且保持16h。将混合物冷却至室温，用水稀释并用乙酸乙酯(100mL)萃取。有机相用盐水(2×50mL)洗涤，用Na2SO4干燥并减压浓缩。获得的残余物通过硅胶色谱纯化，得到4-(4-氯-2-氟苯基)-6-甲基烟酸甲酯(500mg,1.53mmol,43％产率)，为黄色液体。LC/MS(ESI)m/e 280.0[(M+H)+,计算值C14H12ClFNO2279.6]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.87min.
C部分：4-(4-氯-2-氟苯基)-6-甲基烟酸
向4-(4-氯-2-氟苯基)-6-甲基烟酸甲酯(700mg,2.50mmol)于MeOH(5mL)中的溶液中添加NaOH(200mg,7.51mmol)的水溶液(5mL)。将反应混合物在室温搅拌2h。将溶剂减压蒸发并通过添加1.5N HCl将获得的残余物调节至pH～3。反应混合物用二氯甲烷萃取。有机相用Na2SO4干燥并减压浓缩，得到4-(4-氯-2-氟苯基)-6-甲基烟酸(500mg,1.730mmol,92％粗产率)，为白色固体。该物质无需进一步纯化即使用。LC/MS(ESI)m/e 266.0[(M+H)+,计算值C13H10ClFNO2266.03]；LC/MS(方法I)tR＝1.51min.
D部分：4-(4-氯-2-氟苯基)-N,6-二甲基烟酰胺
在0℃向4-(4-氯-2-氟苯基)-6-甲基烟酸(500mg,1.88mmol)于二氯甲烷(10mL)中的溶液中先后滴加草酰氯(0.988mL,11.29mmol)和DMF(0.2mL)。将反应混合物在室温搅拌4h。将反应混合物蒸发至干。将残余物溶解于二氯甲烷(50mL)中并冷却至0℃。先后添加甲胺盐酸盐(1.27g,18.82mmol)和三乙胺(2.62mL,18.82mmol)且将反应混合物在室温搅拌2h。反应混合物用水(50mL)稀释并用二氯甲烷(100mL)萃取。分离有机层，用Na2SO4干燥并减压浓缩，得到4-(4-氯-2-氟苯基)-N,6-二甲基烟酰胺(520mg,1.43mmol,76％粗产率)，为黄色固体。该物质无需进一步纯化即使用。LC/MS(ESI)m/e279.0[(M+H)+,计算值C14H13ClFN2O 279.1]；LC/MS保留时间(方法I)tR＝1.82min.
E部分：8-氯-2,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
在0℃向4-(4-氯-2-氟苯基)-N,6-二甲基烟酰胺(520mg,1.86mmol)于四氢呋喃(20mL)中的溶液中添加NaH(224mg,5.60mmol)。将反应混合物逐渐升温至室温并在室温搅拌15h。反应混合物用水(50mL)稀释并用乙酸乙酯(100mL)萃取。分离有机层，用Na2SO4干燥并减压浓缩，得到8-氯-2,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(480mg,1.51mmol,81％产率)，为砖红色固体。LC/MS(ESI)m/e 259.0[(M+H)+,计算值C14H12ClN2O 259.05]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.91min.1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 9.41(s,1H),8.48(d,J＝8.59Hz,1H),8.23(s,1H),7.69(d,J＝1.98Hz,1H),7.44(dd,J＝8.64,1.94Hz,1H),3.78(s,3H),2.75(s,3H).
F部分：(S)-(1-((2,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
向8-氯-2,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(100mg,0.387mmol)和(1-羟基-2,4-二甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(168mg,0.773mmol)在甲苯(5mL)中的搅拌溶液中添加碳酸铯(189mg,0.580mmol)和2-二叔丁基膦基-2’,4’,6’-三异丙基-1,1’-联苯(9.85mg,0.023mmol)。反应混合物用氩气脱气5分钟并添加二乙酸钯(II)(26mg,0.116mmol)。将反应混合物加热至100℃且保持18h。反应混合物通过硅藻土过滤且将滤液减压浓缩。残余物通过硅胶色谱使用乙酸乙酯-石油醚纯化，得到(S)-(1-((2,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(100mg,0.171mmol,44％产率)，为深黄色半固体。LC/MS(ESI)m/e 440.6[(M+H+)+,计算值C25H34N3O4440.2]；LC/MS保留时间(方法D):tR＝0.89min.
G部分：(S)-(1-((9-溴-2,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
在室温向(S)-(1-((2,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(40mg,0.069mmol)于乙腈(3mL)中的搅拌溶液中添加NBS(12mg,0.069mmol)。将反应混合物加热至回流且保持2h。反应混合物用水(50mL)稀释并经二氯甲烷(100mL)萃取。分离有机层，用Na2SO4干燥并减压浓缩，得到(S)-(1-((9-溴-2,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(30mg,0.027mmol,40％粗产率)，为黄色油状物。该物质无需进一步纯化即使用。LC/MS(ESI)m/e 518.2[(M+H)+,计算值C25H33BrN3O4518.2]；LC/MS保留时间(方法E):tR＝1.25min.
H部分：(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-2,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
在0℃向(S)-(1-((9-溴-2,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(30mg,0.058mmol)于MeOH(3mL)中的溶液中添加4M HCl的1,4-二噁烷溶液(0.362mL,1.447mmol)。将反应混合物在0℃搅拌2h。减压浓缩反应混合物，得到粗产物，其通过制备型HPLC纯化，得到(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-2,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(6mg,0.014mmol,24％产率)，为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/e418.0[(M+H)+,计算值C20H25BrN3O2418.1]；LC/MS保留时间(方法H):tR＝1.70min；HPLC保留时间(方法A):tR＝6.33min；HPLC保留时间(方法B):tR＝7.19min.1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 9.31(s,1H),9.28-9.33(m,1H),8.58(s,1H),8.08(s,1H),7.09(s,1H),4.42(dd,J＝9.79,3.26Hz,1H),4.25(dd,J＝9.91,6.15Hz,1H),3.78(s,3H),3.63(br.s.,1H),2.73(s,3H),2.00(br.s.,4H),1.85-1.92(m,1H),1.71-1.80(m,1H),1.57-1.66(m,1H),1.06(dd,J＝6.40,4.64Hz,6H).
实施例67
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-2,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分：4-氯-6-甲基烟酸甲酯
向4,6-二氯烟酸甲酯(3.00g,14.56mmol)和三甲基环三硼氧烷(1.097g,8.74mmol)于1,4-二噁烷(70mL)和水(7mL)中的溶液中添加碳酸铯(14.23g,43.7mmol)。混合物用氩气脱气5min。向反应混合物中添加PdCl2(dppf)-CH2Cl2加合物(1.189g,1.456mmol)并加热至110℃且保持16h。将反应混合物冷却至室温，用水(100mL)稀释并用乙酸乙酯(200mL)萃取。有机相用盐水(2×100mL)洗涤，用Na2SO4干燥并减压浓缩。获得的残余物通过硅胶色谱使用乙酸乙酯-石油醚混合物纯化，得到4-氯-6-甲基烟酸甲酯(700mg,2.87mmol,20％产率)，其为黄色液体。LC/MS(ESI)m/e 186.0[(M+H)+,计算值C8H9ClNO2186.0]；LC/MS保留时间(方法I):tR＝1.79min.
B部分：4-(4-氯-2-氟苯基)-6-甲基烟酸甲酯
向4-氯-6-甲基烟酸甲酯(660mg,3.56mmol)和(4-氯-2-氟苯基)硼酸(620mg,3.56mmol)于1,4-二噁烷(20mL)中的溶液中添加碳酸铯(3.48g,10.67mmol)。反应混合物用氩气脱气5min。向反应混合物中添加Pd(Ph3P)4(205mg,0.178mmol)并加热至80℃且保持16h。将混合物冷却至室温，用水稀释并用乙酸乙酯(100mL)萃取。有机相用盐水(2×50mL)洗涤，用Na2SO4干燥并减压浓缩。获得的残余物通过硅胶色谱纯化，得到4-(4-氯-2-氟苯基)-6-甲基烟酸甲酯(500mg,1.53mmol,43％产率)，为黄色液体。LC/MS(ESI)m/e 280.0[(M+H)+,计算值C14H12ClFNO2280.0]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.87min.
C部分：4-(4-氯-2-氟苯基)-6-甲基烟酸
向4-(4-氯-2-氟苯基)-6-甲基烟酸甲酯(700mg,2.50mmol)于MeOH(5mL)中的溶液中添加NaOH(200mg,7.51mmol)的水(5mL)溶液。将反应混合物在室温搅拌2h。然后将其减压蒸发并通过添加1.5N HCl溶液将获得的残余物调节至pH～3。产物用二氯甲烷萃取。有机相用Na2SO4干燥并减压浓缩，得到4-(4-氯-2-氟苯基)-6-甲基烟酸(500mg,1.730mmol,69％粗产率)，为白色固体。该物质无需进一步纯化即使用。LC/MS(ESI)m/e 266.0[(M+H)+,计算值C13H10ClFNO2266.0]；LC/MS保留时间(方法I):tR＝1.51min.
D部分：4-(4-氯-2-氟苯基)-N,6-二甲基烟酰胺
在0℃向4-(4-氯-2-氟苯基)-6-甲基烟酸(500mg,1.88mmol)于二氯甲烷(10mL)中的溶液中先后滴加草酰氯(0.988mL,11.29mmol)和DMF(0.2mL)。将反应混合物在室温搅拌4h。将反应混合物蒸发至干。将残余物溶解于二氯甲烷(50mL)中并冷却至0℃。添加甲胺盐酸盐(1.27g,18.82mmol)和三乙胺(2.62mL,18.82mmol)。将反应混合物在室温搅拌2h。反应混合物用水(50mL)稀释并经二氯甲烷(100mL)萃取。分离有机层，用Na2SO4干燥并减压浓缩，得到4-(4-氯-2-氟苯基)-N,6-二甲基烟酰胺(520mg,1.43mmol,76％粗产率)，为黄色固体。该物质无需进一步纯化即使用。LC/MS(ESI)m/e 279.0[(M+H)+,计算值C14H13ClFN2O 279.1]；LC/MS保留时间(方法I):tR＝1.82min.
E部分：8-氯-2,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
在0℃向4-(4-氯-2-氟苯基)-N,6-二甲基烟酰胺(520mg,1.86mmol)在四氢呋喃(20mL)中的溶液中添加NaH(224mg,5.60mmol)。将反应混合物逐渐升温至室温并在室温搅拌15h。反应混合物用水(50mL)稀释并用乙酸乙酯(100mL)萃取。分离有机层，用Na2SO4干燥并减压浓缩，得到产物8-氯-2,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(480mg,1.51mmol,81％粗产率)，为红色固体。该物质无需进一步纯化即使用。LC/MS(ESI)m/e 259.0[(M+H)+,计算值C14H12ClN2O 259.0]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.74min.1H NMR(300MHz,甲醇-d4)δppm 9.41(s,1H),8.48(d,J＝8.59Hz,1H),8.23(s,1H),7.69(d,J＝1.98Hz,1H),7.44(dd,J＝8.64,1.94Hz,1H),3.78(s,3H),2.75(s,3H).
F部分：(S)-(1-((2,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
向8-氯-2,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(100mg,0.387mmol)和(1-羟基-2,4-二甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(168mg,0.773mmol)在甲苯(5mL)中的搅拌溶液中添加碳酸铯(189mg,0.580mmol)和2-二叔丁基膦基-2’,4’,6’-三异丙基-1,1’-联苯(9.85mg,0.023mmol)。反应混合物用氩气脱气5min并向其中添加二乙酸钯(II)(26mg,0.116mmol)。将反应混合物加热至100℃且保持18h。反应混合物通过硅藻土过滤且将滤液蒸发。获得的残余物通过硅胶色谱使用乙酸乙酯-石油醚纯化，得到产物(S)-(1-((2,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(100mg,0.171mmol,44％产率)，为深黄色半固体。LC/MS(ESI)m/e440.7[(M+H)+,计算值C25H34N3O4440.2]；LC/MS保留时间(方法D):tR＝0.89min.
G部分.(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-2,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
(S)-(1-((2,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.05g,0.114mmol)经实施例2的E部分中所述的脱Boc基团保护，得到(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-2,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(13mg,0.037mmol,33％)，为无色半固体。LC/MS(ESI)m/e 340.2[(M+H)+,计算值C20H26N3O2340.2]；LC/MS保留时间(方法I):tR＝1.62min.HPLC保留时间(方法A):tR＝8.17min；HPLC保留时间(方法B):tR＝7.50min.1H NMR(400MHz,甲醇-d4)ppm 9.33(s,1H),8.38(d,J＝8.78Hz,1H),8.34-8.41(m,1H),8.10(s,1H),8.06-8.12(m,1H),7.04-7.13(m,2H),4.17(dd,J＝9.29,4.02Hz,1H),3.99(dd,J＝9.29,7.28Hz,1H),3.77(s,3H),3.66(d,J＝2.76Hz,1H),2.72(s,3H),1.80-1.92(m,1H),1.39-1.54(m,2H),1.01(dd,J＝9.29,6.53Hz,7H).
实施例68
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-氯-2,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.(S)-(1-((9-氯-2,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
根据实施例20的A部分所述的方法使用NCS(0.018g,0.137mmol)将如实施例67的F部分所述制备的(S)-(1-((2,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.05g,0.114mmol)经氯化作用，得到(S)-(1-((9-氯-2,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(50mg,0.052mmol,45％产率)，为无色油状物。LC/MS(ESI)m/e 474.7[(M+H)+,计算值C25H32ClN3O4474.2]；LC/MS保留时间(方法H):tR＝0.94min.
B部分.(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-氯-2,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
使用实施例2的E部分中所述的方法将(S)-(1-((9-氯-2,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.04g,0.041mmol)经脱Boc基团保护，得到(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-氯-2,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(0.006g,0.015mmol,37％产率)，为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/e 373.8[(M+H)+,计算值C20H25ClN3O2374.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.55min；HPLC保留时间(方法A):tR＝10.18min；HPLC保留时间(方法B):tR＝15.48min.1H NMR(400MHz,甲醇-d4)ppm 9.37(s,1H),8.46-8.53(m,1H),8.14(s,1H),7.19(s,1H),4.23-4.31(m,1H),4.03-4.11(m,1H),3.78-3.88(m,3H)2.73(s,1H),2.70-2.77(m,3H),1.81-1.90(m,1H),1.44-1.58(m,2H),0.96-1.06(m,6H).
实施例69
(S)-8-(2-氨基-3-甲氧基丙氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分：(R)-2-氨基-3-甲氧基丙-1-醇
如Kim,H.J.et.al.Bioorg Med.Chem.Lett.,2011,21,3809-3812中所述制备。
B部分：(S)-(1-甲氧基-3-((6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)丙-2-基)氨基甲酸苄基酯
如实施例16的H部分所述制备，得到标题产物(0.12g,0.145mmol,24％产率)，其为黄色胶状物。LC/MS,(ESI)m/z 448.6[(M+H)+,计算值C25H26N3O5,448.5]；LC/MS保留时间(方法D):tR＝0.74min.
C部分：(S)-8-(2-氨基-3-甲氧基丙氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
如实施例2的E部分所述制备，得到标题产物(14mg,0.042mmol,70％产率)，为棕色胶状物。LC/MS,(ESI)m/z 314.2[(M+H)+,计算值C17H20N3O3,314.1]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.38min.HPLC保留时间(方法A):tR＝5.29min；HPLC保留时间(方法B):tR＝5.31min.1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 9.47(s,1H)8.77(d,J＝5.77Hz,1H)8.42(d,J＝8.78Hz,1H)8.25(d,J＝5.77Hz,1H)7.04-7.17(m,2H)4.26(dd,J＝9.29,4.77Hz,1H)4.10-4.19(m,1H)3.81(s,3H)3.52-3.65(m,2H)3.44(s,3H)3.38(dt,J＝3.33,1.73Hz,1H).
实施例70
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-9-氟-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.4-(4-氯-2,5-二氟苯基)-2-甲基烟酸甲酯
如实施例16的D部分所述制备，通过在4-氯-2-甲基烟酸甲酯(如实施例14的A部分所述制备)和2-(4-氯-2,5-二氟苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(如实施例16的A部分-C部分所述制备)之间进行Suzuki偶联，得到4-(4-氯-2,5-二氟苯基)-2-甲基烟酸甲酯(3g,4.13mmol,24％产率)，为棕色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 8.60(d,J＝5.2Hz,1H),7.36(m,1H),7.20(m,2H),3.74(s,3H),2.49(s,3H).
B部分.4-(4-氯-2,5-二氟苯基)-2-甲基烟酸
如实施例16的E部分所述制备，通过水解4-(4-氯-2,5-二氟苯基)-2-甲基烟酸甲酯，得到4-(4-氯-2,5-二氟苯基)-2-甲基烟酸(1.7g,4.02mmol,97％产率)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 13.38(br.s.,1H),8.58(d,J＝5.2Hz,1H),7.74(m,1H),7.53(m,1H),7.41(d,J＝4.8Hz,1H),2.43(s,3H).
C部分.4-(4-氯-2,5-二氟苯基)-N,2-二甲基烟酰胺
在0℃向4-(4-氯-2,5-二氟苯基)-2-甲基烟酸(1.7g,4.02mmol)于DMF(0.5mL)中的搅拌溶液中添加DIEA(2.81mL,16.06mmol)、HOBT(1.230g,8.03mmol)和EDC(1.155g,6.02mmol)，然后添加甲胺盐酸盐(0.488g,7.23mmol)。搅拌10min后，移开冰浴且将反应混合物搅拌过夜。将反应混合物减压浓缩。残余物用乙酸乙酯(10mL)稀释并用水(10mL)洗涤，然后用盐水(10mL)洗涤。分离有机层并用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到4-(4-氯-2,5-二氟苯基)-N,2-二甲基烟酰胺(1g,2.123mmol,53％粗产率)，为棕色固体，其无需纯化即用于后续步骤。LC/MS(ESI)m/e 297.3[(M+H)+,计算值C14H12ClF2N2O 297.1]；LC/MS保留时间(方法B):tR＝0.76min.
D部分.8-氯-9-氟-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
如实施例16的G部分所述自4-(4-氯-2,5-二氟苯基)-2-甲基烟酸制备，得到8-氯-9-氟-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(530mg,1.532mmol,72％产率)，为白色固体。LC/MS(ESI)m/e 277.2[(M+H)+,计算值C14H11ClFN2O277.04]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.83min.
E部分.(S)-1-(9-氟-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯
如实施例16的H部分所述自8-氯-9-氟-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮制备，得到(S)-1-(9-氟-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯(350mg,0.367mmol,24％)，为油状物。LC/MS(ESI)m/e 458.6[(M+H)+,计算值C25H33FN3O4458.23]；LC/MS保留时间(方法B):tR＝1.24min.
F部分.(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-9-氟-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
如实施例16的I部分所述自(S)-1-(9-氟-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯制备，得到(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-9-氟-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(57.6mg,0.095mmol,91％)，为黄色油状物。LC/MS(ESI)m/e 358.2[(M+H)+,计算值C20H25FN3O2358.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.53min；HPLC保留时间(方法B):tR＝8.16min.1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.58(d,J＝5.8Hz,1H),8.23(d,J＝12.0Hz,1H),8.09(d,J＝5.0Hz,1H),7.19(d,J＝6.8Hz,1H),4.26(dd,J＝9.5,4.0Hz,1H),4.08(t,J＝8.2Hz,1H),3.79(s,3H),3.41-3.38(m,1H),3.10(s,3H),1.94-1.82(m,1H),1.58-1.39(m,2H),1.04(d,J＝6.5Hz,3H),1.01(d,J＝6.5Hz,3H).
实施例71
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-9-(羟基甲基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.(S)-1-(4,6-二甲基-5-氧代-9-乙烯基-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯
如实施例64的A部分和实施例46的B部分所述自(S)-1-(9-溴-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯制备，得到标题产物(1.2g,1.985mmol,64％产率)。LC/MS(ESI)m/e466.2[(M+H)+,计算值C27H36N3O4466.3]；LC/MS保留时间(方法B):tR＝1.79min.
B部分.(S)-1-(9-甲酰基-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯
如实施例55的B部分所述自(S)-1-(4,6-二甲基-5-氧代-9-乙烯基-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯制备，得到标题产物(1.2g,0.980mmol,49％产率)，为黄色胶状物。LC/MS(ESI)m/e468.2[(M+H)+,计算值C26H34N3O5468.2]；LC/MS保留时间(方法B):tR＝1.66min.
C部分.(S)-1-(9-(羟基甲基)-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯
如实施例31的E部分所述制备，得到标题产物(0.100g,0.160mmol,87％产率)，为棕色胶状物。LC/MS(ESI)m/e 470.2[(M+H)+,计算值C26H36N3O5470.2]；LC/MS保留时间(方法B):tR＝1.48min.
D部分.(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-9-(羟基甲基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
如实施例2的E部分所述制备，得到标题产物(28mg,0.073mmol,34％产率)，为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/e 370.2[(M+H)+,计算值C21H28N3O3370.2]；LC/MS保留时间(方法B):tR＝1.03min.HPLC保留时间(方法A):tR＝7.46min；HPLC保留时间(方法B):tR＝8.13min；1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.55(d,J＝5.8Hz,1H),8.37(s,1H),8.12(d,J＝5.8Hz,1H),7.01(s,1H),4.80(s,2H),4.28(dd,J＝9.5,3.5Hz,1H),4.08(dd,J＝9.5,7.0Hz,1H),3.78(s,3H),3.48-3.40(m,1H),3.08(s,3H),1.92-1.80(m,1H),1.64-1.41(m,2H),1.05(d,J＝6.5Hz,3H),1.03(d,J＝6.8Hz,3H).
实施例72
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-4,6-二甲基-9-(噁唑-5-基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.(S)-1-(4,6-二甲基-9-(噁唑-5-基)-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯
如实施例71的D部分和实施例48的B部分所述自(S)-1-(9-甲酰基-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯制备，得到标题产物(150mg,0.068mmol,56％产率)，为黄色胶状物。LC/MS(ESI)m/e 507.2[(M+H)+,计算值C28H35N4O5507.2]LC/MS保留时间(方法B):tR＝1.64min.
B部分.(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-4,6-二甲基-9-(噁唑-5-基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
如实施例2的E部分所述自(S)-1-(9-甲酰基-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯制备，得到标题产物(20mg,0.045mmol,67％产率)，为黄色固体。LC/MS(ESI)m/e407.2[(M+H)+,计算值C23H27N4O3407.2]LC/MS保留时间(方法B):tR＝1.64min.HPLC保留时间(方法A):tR＝7.46min；HPLC保留时间(方法A):tR＝8.89minHPLC保留时间(方法B):tR＝8.80min 1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.66(s,1H),8.57(d,J＝5.8Hz,1H),8.34(s,1H),8.15(d,J＝5.8Hz,1H),7.60(s,1H),7.08(s,1H),4.38-4.26(m,1H),4.24-4.17(m,1H),3.76(s,3H),3.48(dd,J＝3.3,1.8Hz,1H),3.05(s,3H),1.93-1.82(m,1H),1.65-1.44(m,2H),1.04(d,J＝2.5Hz,3H),1.02(d,J＝2.5Hz,3H).
实施例73
8-(2-氨基-5,5,5-三氟戊基氧基)-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-9-甲腈
8-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.1-(4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-5,5,5-三氟戊-2-基氨基甲酸叔丁酯
如实施例16的H部分所述制备，得到1-(4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-5,5,5-三氟戊-2-基氨基甲酸叔丁酯(300mg,0.416mmol,54％产率)，为白色固体。1H LC/MS(ESI)m/e 480.2[(M+H)+,计算值C24H29F3N3O4480.2]LC/MS保留时间(方法H):tR＝2.22min.
B部分.1-(9-溴-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-5,5,5-三氟戊-2-基氨基甲酸叔丁酯
如实施例3的A部分所述制备，得到标题产物(50mg,0.06mmol,58％产率)，为淡黄色固体。1H LC/MS(ESI)m/e 559.0[(M+2H)+,计算值C24H29BrF3N3O4559.1]LC/MS保留时间(方法C):tR＝2.24min.
C部分.1-(9-氰基-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-5,5,5-三氟戊-2-基氨基甲酸叔丁酯
如实施例64的B部分所述制备，得到标题产物(40mg,0.079mmol,11％产率)，为淡黄色固体。LC/MS(ESI)m/e 505.4[(M+H)+,计算值C25H28F3N4O4505.2]LC/MS保留时间(方法E):tR＝1.1min.
D部分.8-(2-氨基-5,5,5-三氟戊基氧基)-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-9-甲腈
如实施例2的E部分所述制备，得到标题产物(50mg,0.036mmol,45％产率)，为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/e 405.4[(M+H)+,计算值C20H20F3N4O2405.1]；LC/MS保留时间(方法E):tR＝0.71min.HPLC保留时间(方法A):tR＝8.35min；HPLC保留时间(方法B):tR＝9.38min.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.98(s,1H),8.67(d,J＝5.6Hz,1H),8.30(d,J＝5.6Hz,1H),7.12(s,1H),4.19(d,J＝6.0Hz,2H),3.71(s,3H),3.16-3.14(m,1H),3.00(s,3H),2.45-2.30(m,2H),1.89-1.80(m,1H),1.58-1.55(m,1H).
实施例74
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-4,6-二甲基-9-(三氟甲基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.(S)-1-(4,6-二甲基-5-氧代-9-(1H-吡唑-1-基)-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯
向(S)-(1-((9-溴-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(50mg,0.096mmol)和1H-吡唑(7.88mg,0.116mmol)于1,4-二噁烷(2mL)和DMF(0.5mL)中的溶液中添加碘化亚铜(I)(18.37mg,0.096mmol)、N1,N2-二甲基乙-1,2-二胺(17.00mg,0.193mmol)和磷酸钾(61.4mg,0.289mmol)。反应混合物用氮气脱气5min并在微波中加热至170℃且保持1h。将反应混合物冷却至室温，通过硅藻土过滤且将滤液减压浓缩。残余物通过制备型TLC(洗脱剂为2％MeOH:DCM)纯化，得到(S)-1-(4,6-二甲基-5-氧代-9-(1H-吡唑-1-基)-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯(40mg,0.028mmol,29％产率)，为棕色固体。LC/MS(ESI)m/e 406.5[(M+H)+,计算值C23H28N5O2406.2]LC/MS保留时间(方法E):tR＝0.71min.
B部分.(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-4,6-二甲基-9-(三氟甲基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
如实施例2的E部分所述自(S)-1-(4,6-二甲基-5-氧代-9-(1H-吡唑-1-基)-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯制备，得到(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-4,6-二甲基-9-(三氟甲基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(2mg,0.005mmol,24％产率)，为黄绿色半固体。LC/MS(ESI)m/e 406.2[(M+H)+,计算值C23H28N5O2406.2]；HPLC保留时间(方法A):tR＝8.37min HPLC保留时间(方法B):tR＝9.54min；1H NMR of racemiccompound(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.98(s,1H),8.67(d,J＝5.6Hz,1H),8.30(d,J＝5.6Hz,1H),7.12(s,1H),4.19(d,J＝6.0Hz,2H),3.71(s,3H),3.16-3.14(m,1H),3.00(s,3H),2.45-2.30(m,2H),1.89-1.80(m,1H),1.58-1.55(m,1H).
实施例75
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-4,6-二甲基-9-(三氟甲基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.(S)-2-(1-(4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基)异二氢吲哚-1,3-二酮
将(S)-(1-((4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(300mg,0.683mmol)溶解于AcOH(15mL)中并用高碘酸(156mg,0.683mmol)和H2SO4(0.018mL,0.341mmol)处理。将反应混合物加热至80℃且保持20min，然后添加碘(104mg,0.410mmol)并再继续加热3h。冷却后，将挥发物蒸发。将残余物溶解于乙酸乙酯(25mL)中且有机层先后用饱和NaHCO3水溶液(10mL)和盐水(10mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到(S)-2-(1-(4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基)异二氢吲哚-1,3-二酮(300mg,0.61mmol,90％粗产率)，为棕色固体。其无需进一步纯化即使用。LC/MS(ESI)m/e466.1[(M+H)+,计算值C20H25IN3O2466.1]；LC/MS保留时间(方法F):tR＝0.58min.
B部分.(S)-2-(1-(9-碘-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基)异二氢吲哚-1,3-二酮
向(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-碘-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(130mg,0.140mmol)于1,4-二噁烷(3mL)中的溶液中添加N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(54.2mg,0.419mmol)和异苯并呋喃-1,3-二酮(24.83mg,0.168mmol)。将反应混合物回流16h。冷却后，反应混合物用EtOAc(10mL)稀释。有机物用水和饱和NaHCO3水溶液洗涤。合并的水层用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。合并的有机层用硫酸钠干燥并减压浓缩。残余物通过制备型TLC使用2％甲醇:DCM作为洗脱剂系统纯化，得到(S)-2-(1-((9-碘-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)异二氢吲哚-1,3-二酮(85mg,0.084mmol,60％产率)，为淡黄色固体。LC/MS(ESI)m/e596.5[(M+H)+,计算值C28H27IN3O4596.1]LC/MS保留时间(方法E):tR＝1.3min.
C部分.(S)-2-(1-(4,6-二甲基-5-氧代-9-(三氟甲基)-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基)异二氢吲哚-1,3-二酮
将无水氟化钾(19.51mg,0.336mmol)和碘化亚铜(I)(64.0mg,0.336mmol)混合并在减压(1托)下在轻轻摇晃下加热至200℃直至出现浅黄绿色。冷却后，添加无水N-甲基-2-吡咯烷酮(1mL)，然后添加(S)-2-(1-((9-碘-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)异二氢吲哚-1,3-二酮(100mg,0.168mmol)和三甲基(三氟甲基)甲硅烷(0.075mL,0.504mmol)。将由此获得的棕色溶液在90℃加热16h。冷却后，向反应混合物中添加氨水(10mL)。反应混合物用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。合并的有机层用盐水(1×10mL)洗涤，用硫酸钠干燥并减压浓缩。残余物通过制备型TLC(50％乙酸乙酯:石油醚作为洗脱剂系统)纯化，得到(S)-2-(1-(4,6-二甲基-5-氧代-9-(三氟甲基)-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基)异二氢吲哚-1,3-二酮(80mg,0.033mmol,20％产率,22％纯度)，为淡黄色固体。LC/MS(ESI)m/e 538.6[(M+H)+,计算值C29H27F3N3O4538.2]LC/MS保留时间(方法E):tR＝1.27min.
D部分.(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-4,6-二甲基-9-(三氟甲基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
向(S)-2-(1-((4,6-二甲基-5-氧代-9-(三氟甲基)-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)异二氢吲哚-1,3-二酮(50mg,0.019mmol)于EtOH(4mL)中的溶液中添加水合肼(6.52mg,0.130mmol)。将反应混合物在45℃搅拌2h。冷却后，将反应混合物减压浓缩。残余物通过反相HPLC(Symmetry C-18柱(19.0×250mm)7.0微米；流动相A:乙酸铵的水溶液；流动相B:乙腈；流速:16.0mL)纯化，得到(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基-9-(三氟甲基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(5mg,0.012mmol,64％产率)，为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/e 408.2[(M+H)+,计算值C21H25F3N3O2408.2]LC/MS保留时间(方法B):tR＝1.25min.HPLC保留时间(方法A):tR＝10.10min HPLC保留时间(方法B):tR＝10.69min；1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.66(s,1H),8.63(d,J＝5.6Hz,1H),8.22(d,J＝5.6Hz,1H),7.19(s,1H),4.42-4.38(m,1H),4.28-4.20(m,1H),3.83(s,3H),3.58-3.49(m,1H),3.11(s,3H),1.90-1.82(m,1H),1.68-1.62(m,1H),1.58-1.53(m,1H),1.10-1.00(m,6H).
实施例76
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-4,6-二甲基-9-(甲基磺酰基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.(S)-2-(1-(4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基)异二氢吲哚-1,3-二酮
将(S)-(1-((4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(300mg,0.683mmol)溶解于AcOH(15mL)中并用高碘酸(156mg,0.683mmol)和H2SO4(0.018mL,0.341mmol)处理。将反应混合物加热至80℃且保持20min，然后添加碘(104mg,0.410mmol)并再继续在80℃加热3h。冷却后，将挥发物蒸发且将残余物溶解于乙酸乙酯(25mL)中。有机层先后经饱和NaHCO3水溶液(10mL)和盐水(10mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到(S)-2-(1-(4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基)异二氢吲哚-1,3-二酮(300mg,0.61mmol,90％粗产率)，为棕色固体。该物质无需进一步纯化即使用。LC/MS(ESI)m/e466.1[(M+H)+,计算值C20H25IN3O2466.1]LC/MS保留时间(方法D):tR＝0.58min.
B部分.(S)-1-(9-碘-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯
如实施例15的C部分所述制备，得到(S)-1-(9-碘-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯(300mg,0.531mmol,82％产率)，为橙红色固体。LC/MS(ESI)m/e 566.5[(M+H)+,计算值C25H33IN3O4566.2]；LC/MS保留时间(方法E):tR＝1.27min.
C部分.(S)-1-(4,6-二甲基-9-(甲基磺酰基)-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯
将(S)-(1-((9-碘-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(100mg,0.177mmol)、L-脯氨酸(20.36mg,0.177mmol)、甲烷亚磺酸钠(181mg,1.769mmol)、NaOH(11.32mg,0.283mmol)和碘化亚铜(I)(33.7mg,0.177mmol)溶解于DMSO(5mL)中并用氮气脱气5min。将所得混合物密封于微波管中并在微波中在100℃加热2.5h。将反应混合物冷却至室温，用冰冷水(5mL)处理并用乙酸乙酯(3×5mL)萃取。合并的有机层用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到(S)-1-(4,6-二甲基-9-(甲基磺酰基)-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯(150mg,0.07mmol,39％粗产率,24％纯度)，为黑色胶状固体。该物质无需纯化即用于后续步骤。LC/MS(ESI)m/e 518.2[(M+H)+,计算值C26H36N3O6S 518.2]LC/MS保留时间(方法B):tR＝1.51min.
D部分.(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-4,6-二甲基-9-(甲基磺酰基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
如实施例2的E部分所述制备，得到(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-4,6-二甲基-9-(甲基磺酰基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(4mg,0.009mmol,13％产率)，为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/e 466.1[(M+H)+,计算值C20H25IN3O2466.1]；LC/MS保留时间(方法D):tR＝0.58min.HPLC保留时间(方法):tR＝min和HPLC保留时间(方法):tR＝min.1H NMR(400MHz,CD3OD)δppm-8.85(s 1H),8.65(d,J＝6Hz,1H),8.25(d,J＝6Hz,1H),7.25(s,1H),4.65(m,1H),4.32(m,1H),3.85(s,4H),3.1(s,3H),1.93(s,3H),1.92(m,1H),1.65(m,2H),1.01(m,6H).
实施例77
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
向(S)-(1-((6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(500mg,0.192mmol)(如实施例49所述制备)于乙腈(5mL)和水(5mL)中的溶液中添加硝酸铈铵(527mg,0.962mmol)。将反应混合物在室温搅拌5h。反应混合物用乙酸乙酯(5mL)和水(5mL)稀释。分离有机层，用硫酸钠干燥并减压浓缩。残余物通过硅胶色谱(1:1乙酸乙酯:己烷)纯化，得到(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(100mg,0.154mmol,80％产率)，为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/e 326.2[(M+H)+,计算值C19H24N3O2326.2]LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.56min.HPLC保留时间(方法A):tR＝6.98min；HPLC保留时间(方法B):tR＝6.96min.1H NMR(400MHz,CD3OD)δppm 6.32(m,1H),8.44(m,2H),7.13(m,1H),6.94(d,J＝2.4Hz,1H),4.4(m,1H),4.3(m,1H),3.75(m,1H),3.2(s,3H),1.75(m,3H),1.10(m,6H).
实施例78
(R)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-9-甲腈
A部分.(R)-1-(4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯
如实施例16的H部分所述进行Buchwald偶联，得到标题化合物(900mg,1.58mmol,54％产率,77％纯度)，为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/e 440.3[(M+H)+,计算值C25H34N3O4440.2]LC/MS保留时间(方法D):tR＝0.89min.
B部分.(R)-1-(9-溴-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯
如实施例3的A部分所述制备，得到标题化合物(750mg,0.94mmol,79％产率,65％纯度)，为橙红色固体。LC/MS(ESI)m/e 518.2[(M+H)+,计算值C25H33BrN3O4518.2]LC/MS保留时间(方法D):tR＝0.92min.
C部分.(R)-1-(9-氰基-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯
如实施例64的B部分所述制备，得到标题化合物(300mg,0.18mmol,47％产率,28％纯度)，为黑色胶状物。LC/MS(ESI)m/e 465.2[(M+H)+,计算值C26H33N4O4465.2]LC/MS保留时间(方法C):tR＝2.74min.
D部分.(R)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-9-甲腈
如实施例2的E部分所述制备，得到标题化合物(20mg,0.051mmol,59％产率,93％纯度)，为黄色固体。LC/MS(ESI)m/e 365.2[(M+H)+,计算值C21H25N4O2365.2]LC/MS保留时间(方法C):tR＝2.10min.HPLC保留时间(方法A):tR＝8.35min和HPLC保留时间(方法B):tR＝9.17min.1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.98(s,1H),8.71(d,J＝6.3Hz,1H),8.53(d,J＝6.5Hz,1H),7.23(s,1H),4.65(dd,J＝10.7,3.1Hz,1H),4.50(dd,J＝10.8,6.0Hz,1H),3.85(br.s.,1H),3.84(s,3H),3.20(s,3H),1.92-1.80(m,2H),1.78-1.66(m,1H),1.09(d,J＝1.8Hz,3H),1.07(d,J＝1.5Hz,3H).
实施例79
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-氯-6-(2-甲氧基乙基)-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分：4-(4-氯-2-氟苯基)-N-(2-甲氧基乙基)-2-甲基烟酰胺
将如实施例16的E部分所述制备的4-(4-氯-2-氟苯基)-2-甲基烟酸(2g,5.19mmol)于亚硫酰氯(5mL,68.5mmol)中的溶液在70℃加热2h。冷却后，将挥发物减压除去。将残余物溶于4mL无水DCM中并在0℃添加至2-甲氧基乙胺(0.390g,5.19mmol)和三乙胺(3.62mL,26.0mmol)在DCM(8mL)中的预冷却的溶液中。将所得的反应混合物在室温搅拌4h。然后添加水(30mL)且溶液用DCM(2×20mL)萃取。合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，用硫酸钠干燥并减压浓缩。残余物通过硅胶色谱使用EtOAc和己烷的梯度作为洗脱剂纯化，得到4-(4-氯-2-氟苯基)-N-(2-甲氧基乙基)-2-甲基烟酰胺(1.3g,2.88mmol,56％产率)，为黄色油状物。LC/MS(ESI)m/e 323.1[(M+H)+,计算值C16H17ClFN2O2323.1]；LC/MS保留时间(方法D):tR＝0.61min.
B部分：8-氯-6-(2-甲氧基乙基)-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
4-(4-氯-2-氟苯基)-N-(2-甲氧基乙基)-2-甲基烟酰胺经实施例2的C部分中所述的环化反应，得到8-氯-6-(2-甲氧基乙基)-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(1.12g,2.55mmol,89％产率)，为白色固体。LC/MS(ESI)m/e303.2[(M+H)+,计算值C16H16ClN2O2303.1]；LC/MS保留时间(方法B):tR＝1.38min.
C部分：(S)-(1-((6-(2-甲氧基乙基)-4-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
8-氯-6-(2-甲氧基乙基)-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮经实施例16的H部分所述的醚合成，得到(S)-(1-((6-(2-甲氧基乙基)-4-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(511mg,0.723mmol,53％产率)，为白色固体。LC/MS(ESI)m/e 484.6[(M+H)+,计算值C27H38N3O5484.3]；LC/MS保留时间(方法E):tR＝1.17min.
D部分：(S)-(1-((9-氯-6-(2-甲氧基乙基)-4-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
(S)-(1-((6-(2-甲氧基乙基)-4-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯经实施例41的A部分所述的氯化作用，得到(S)-(1-((9-氯-6-(2-甲氧基乙基)-4-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(260mg,0.227mmol,80％粗产率)，为棕色固体。LC/MS(ESI)m/e 518.2[(M+H)+,计算值C27H37ClN3O5518.2]；LC/MS保留时间(方法D):tR＝0.91min；HPLC保留时间(方法B):tR＝1.84min.
E部分：(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-氯-6-(2-甲氧基乙基)-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
(S)-(1-((9-氯-6-(2-甲氧基乙基)-4-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯经实施例2的E部分所述的脱Boc保护，得到(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-氯-6-(2-甲氧基乙基)-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮,2HCl(11.23mg,0.021mmol,48％产率)，为黄色固体。LC/MS(ESI)m/e 418.2[(M+H)+,计算值C22H29ClN3O3418.2]；HPLC保留时间(方法A):tR＝7.91min；HPLC保留时间(方法B):tR＝9.29min；1HNMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.79-8.66(m,3H),7.51(s,1H),4.70(t,J＝4.9Hz,2H),4.63-4.54(m,1H),4.45(dd,J＝10.4,5.1Hz,1H),3.89-3.86(m,3H),3.38(s,3H),3.28(s,3H),1.91-1.81(m,2H),1.80-1.69(m,1H),1.11-1.08(m,3H),1.07(br.s.,3H).
实施例80
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-6-(2-甲氧基乙基)-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
如实施例2的E部分所述对(S)-(1-((6-(2-甲氧基乙基)-4-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(如实施例79的C部分所述制备)进行脱保护，得到(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-6-(2-甲氧基乙基)-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(31.3mg,0.081mmol,77％产率)，为白色固体。LC/MS(ESI)m/e 384.2[(M+H)+,计算值C22H30N3O3384.2]；LC/MS保留时间(方法B):tR＝1.06min；HPLC保留时间(方法A):tR＝8.11min；HPLC保留时间(方法B):tR＝9.29min；1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.55(d,J＝5.8Hz,1H),8.36(d,J＝9.0Hz,1H),8.12(d,J＝5.8Hz,1H),7.22(d,J＝2.3Hz,1H),7.04(dd,J＝9.0,2.5Hz,1H),4.58(t,J＝5.8Hz,2H),4.18(dd,J＝9.4,3.9Hz,1H),4.00(dd,J＝9.3,7.0Hz,1H),3.81(t,J＝5.8Hz,2H),3.39(s,3H),3.38-3.36(m,1H),3.08(s,3H),1.91-1.79(m,1H),1.57-1.40(m,2H),1.04(d,J＝6.5Hz,3H),1.01(d,J＝6.8Hz,3H).
实施例81
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-7-氟-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分：(S)-1-(7-氟-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯
如实施例16的H部分所述自8-溴-7-氟-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(如实施例29的F部分所述制备)制备，得到(S)-1-(7-氟-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯(0.013g,0.028mmol,37％产率)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.64(d,J＝7.2Hz,1H),8.36(m,1H),8.21(m,1H),7.23(m,1H),6.84(d,J＝11.2Hz,1H),6.28(s,1H),4.06(m,2H),3.92(m,1H),3.78(m,3H),2.99(s,1H),1.65(m,1H),1.38(m,11H),0.89(m,6H).
B部分：(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-7-氟-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
如实施例2的E部分所述制备，得到标题产物(8.5mg,0.024mmol,98％产率)，为棕色固体。LC/MS(ESI)m/e 358.2[(M+H)+,计算值C20H25FN3O2358.2]LC/MS保留时间(方法B):tR＝3.58min.HPLC保留时间(方法A):tR＝7.68min和HPLC保留时间(方法B):tR＝8.02min.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.69(d,J＝5.8Hz,1H),8.36(d,J＝7.5Hz,1H),8.27(d,J＝5.8Hz,1H),8.07(br.s.,2H),7.35-7.24(m,1H),4.38(dd,J＝10.7,3.4Hz,1H),4.26(dd,J＝10.8,6.0Hz,1H),3.81(d,J＝9.3Hz,3H),3.67-3.60(m,1H),3.02(s,3H),1.87-1.72(m,1H),1.59(td,J＝7.1,3.9Hz,2H),0.96(d,J＝2.8Hz,3H),0.94(d,J＝2.8Hz,3H).
实施例82
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-7-氟-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.4-(4-溴-2,3-二氟苯基)-N-(4-甲氧基苄基)-2-甲基烟酰胺
如实施例29的E部分所述通过联芳酸(参见实施例29的D部分)与PMB-胺反应制备，得到4-(4-溴-2,3-二氟苯基)-N-(4-甲氧基苄基)-2-甲基烟酰胺(0.16g,0.314mmol,92％)，为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/e 447.0[(M+H)+,计算值C21H18BrF2N2O2447.1]；LC/MS保留时间(方法E):tR＝0.94min.
B部分：8-溴-7-氟-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
如实施例29的F部分所述制备，得到8-溴-7-氟-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(0.12g,0.269mmol,90％)，为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/e 429.1[(M+2H)+,计算值C21H18BrFN2O2429.0]；LC/MS保留时间(方法E):tR＝1.15min.
C部分.1-(7-氟-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-2,4-二甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯
如实施例16的H部分所述制备，得到1-(7-氟-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-2,4-二甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯(46mg,0.081mmol,13％产率)，为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/e564.3[(M+H)+,计算值C32H39FN3O5564.3]；LC/MS保留时间(方法H):tR＝2.35min.
D部分.(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-7-氟-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
如实施例17的I部分所述制备，得到(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-7-氟-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(8mg,0.023mmol,72％产率)，为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/e 342.2[(M)-,计算值C19H21FN3O2342.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.99min；HPLC保留时间(方法B):tR＝6.91min；1HNMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.69(d,J＝6.3Hz,1H),8.44(d,J＝6.3Hz,1H),8.28(dd,J＝9.3,2.0Hz,1H),7.26(dd,J＝9.0,7.8Hz,1H),4.51(dd,J＝10.7,3.1Hz,1H),4.36(dd,J＝10.7,6.1Hz,1H),3.85-3.72(m,1H),3.19(s,3H),1.92-1.63(m,3H),1.07(d,J＝3.8Hz,3H),1.06(d,J＝3.8Hz,3H).
实施例83
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-4,6-二甲基-9-(噻唑-5-基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.(S)-1-(4,6-二甲基-5-氧代-9-(噻唑-5-基)-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯
将5-溴噻唑(0.050g,0.305mmol)和六甲基锡(0.158mL,0.762mmol)溶解于1,4-二噁烷(1mL)中并用氮气脱气10min。添加四(三苯基膦)钯(0.035g,0.030mmol)且将反应混合物在室温搅拌2h。添加(S)-(1-((9-溴-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.158g,0.305mmol)和氯化锂(0.013g,0.305mmol)且混合物用N2脱气10min。然后将反应混合物在90℃加热16h。冷却后，反应混合物通过硅藻土过滤并减压浓缩。残余物通过制备型HPLC纯化，得到(S)-1-(4,6-二甲基-5-氧代-9-(噻唑-5-基)-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯(40mg,0.053mmol,18％产率)，为黄色固体。LC/MS(ESI)m/e 23.6[(M+H)+,计算值C28H35N4O4S 523.2]；LC/MS保留时间(方法E):tR＝1.09min.
B部分.(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-4,6-二甲基-9-(噻唑-5-基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
如实施例2的E部分所述制备，得到(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-4,6-二甲基-9-(噻唑-5-基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(16mg,0.037mmol,80％产率)，为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/e 423.2[(M+H)+,计算值C23H27N4O2S423.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝2.04min；HPLC保留时间(方法A):tR＝9.1min；保留时间(方法B):tR＝9.72min；1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm9.10(s,1H),8.73(s,1H),8.61(d,J＝5.8Hz,1H),8.49(s,1H),8.30(d,J＝5.8Hz,1H),7.16(s,1H),4.38(dd,J＝9.5,4.0Hz,1H),4.25(dd,J＝9.5,6.5Hz,1H),3.82(s,3H),3.59-3.51(m,1H),3.10(s,3H),1.91-1.82(m,1H),1.69-1.46(m,2H),1.04(d,J＝5.5Hz,3H),1.03(d,J＝5.8Hz,3H).
实施例84
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-9-甲酸甲酯
A部分：(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-9-甲酸
向含有(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-9-甲腈(60mg,0.165mmol)(如实施例64所述制备)的烧瓶中添加浓HCl(5mL)。将所得混合物加热至80℃且保持12h。冷却后，将挥发物减压除去，得到(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-9-甲酸(40mg,0.104mmol,63％粗产率)，为黄色固体。该物质无需进一步纯化即使用。LC/MS(ESI)m/e 384.1[(M+H)+,计算值C21H26N3O4384.2]；LC/MS保留时间(方法D):tR＝0.71min.
B部分：(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-9-甲酸甲酯
在0℃向含有(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-9-甲酸(40mg,0.104mmol)的MeOH(3mL)溶液的烧瓶中滴加SOCl2(0.076mL,1.043mmol)。将所得溶液加热至70℃且保持12h。冷却后，将挥发物减压除去。残余物通过制备型HPLC(使用0.1％TFA ACN:水)纯化，得到(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-9-甲酸甲酯,2TFA(1.65mg,2.427μmol,2％产率)，为淡棕色固体。LC/MS(ESI)m/e 398.2[(M+H)+,计算值C22H28N3O4398.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.58min；HPLC保留时间(方法A):tR＝9.14min；HPLC保留时间(方法B):tR＝9.58min；1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 9.01(s,1H),8.68(d,J＝6.0Hz,1H),8.40(d,J＝6.0Hz,1H),7.23(s,1H),4.69(dd,J＝10.0,3.0Hz,1H),4.36(dd,J＝10.5,7.0Hz,1H),4.02(s,3H),3.88-3.81(m,4H),3.16(s,3H),1.93-1.65(m,3H),1.09(d,J＝4.0Hz,3H),1.07(d,J＝4.0Hz,3H).
实施例85
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-1-氟-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分：4-氯-5-氟烟酸甲酯
向4-氯-5-氟烟酸(1.7g,9.68mmol)于乙腈(18mL)中的冷却至0℃的溶液中滴加DBU(3.65mL,24.21mmol)。将反应混合物搅拌30min。向该混合物中滴加碘甲烷(3.03mL,48.4mmol)并在室温搅拌12h。将挥发物减压除去。残余物通过硅胶色谱(己烷和乙酸乙酯)纯化，得到4-氯-5-氟烟酸甲酯(1.2g,6.33mmol,65％产率)，为黄色固体。LC/MS(ESI)m/e 190.0[(M+H)+,计算值C7H6ClFNO2189.9]；LC/MS保留时间(方法D):tR＝0.77min.
B部分：4-(4-氯-2-氟苯基)-5-氟烟酸甲酯
向4-氯-5-氟烟酸甲酯(1.2g,6.33mmol)于1,4-二噁烷(12mL)和水(0.5mL)中的溶液中添加(4-氯-2-氟苯基)硼酸(1.214g,6.96mmol)。然后混合物用氮气脱气5min。添加磷酸一氢钾(2.205g,12.66mmol)和PdCl2(dppf)(0.371g,0.506mmol)且混合物再次用N2脱气5min。将反应混合物加热至80℃且保持12h。冷却后，添加水且混合物用乙酸乙酯(3×25mL)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥并减压浓缩。残余物通过硅胶色谱使用己烷和乙酸乙酯纯化，得到4-(4-氯-2-氟苯基)-5-氟烟酸甲酯(900mg,3.17mmol,50％产率)，为黄色固体。LC/MS(ESI)m/e 284.0[(M+H)+,计算值C13H9ClF2NO2284.02]；LC/MS保留时间(方法D):tR＝1.01min.
C部分：4-(4-氯-2-氟苯基)-5-氟烟酸
向4-(4-氯-2-氟苯基)-5-氟烟酸甲酯(600mg,2.115mmol)于四氢呋喃(2.5mL)、MeOH(2.5mL)和水(2.5mL)中的溶液中添加LiOH(50.7mg,2.115mmol)且将混合物在室温搅拌12h。除去挥发物且残余物用水稀释。pH用1.5N HCl调节至4。产物用乙酸乙酯(2×5mL)萃取。合并的有机层用硫酸钠干燥并减压浓缩，得到4-(4-氯-2-氟苯基)-5-氟烟酸(530mg,1.966mmol,93％粗产率)，为淡棕色固体。该物质无需进一步纯化即使用。LC/MS(ESI)m/e269.9[(M+H)+,计算值C12H7ClF2NO2270.0]；LC/MS保留时间(方法D):tR＝0.88min.
D部分：4-(4-氯-2-氟苯基)-5-氟-N-甲基烟酰胺
在0℃向4-(4-氯-2-氟苯基)-5-氟烟酸(530mg,1.966mmol)于DMF(5mL)中的冷却的溶液中添加HOBT(602mg,3.93mmol)和EDC(565mg,2.95mmol)，然后将混合物搅拌5min。添加甲胺盐酸盐(531mg,7.86mmol)和DIEA(1.030mL,5.90mmol)且将所得混合物在室温搅拌12h。向反应混合物中添加冰冷水并通过真空过滤收集获得的固体。如此获得的固体用水(50mL)洗涤并风干，得到4-(4-氯-2-氟苯基)-5-氟-N-甲基烟酰胺(350mg,1.238mmol,63％产率)，为橙色油状物。LC/MS(ESI)m/e 282.9[(M+H)+,计算值C13H10ClF2N2O 283.0]；LC/MS保留时间(方法D):tR＝0.83min.
E部分：8-氯-1-氟-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
4-(4-氯-2-氟苯基)-5-氟-N-甲基烟酰胺经实施例2的C部分所述的环化作用，得到8-氯-1-氟-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(85mg,0.320mmol,60％产率)，为白色固体。LC/MS(ESI)m/e 263.0[(M+H)+,计算值C13H9ClFN2O263.0]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.77min.
F部分：(S)-(1-((1-氟-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
8-氯-1-氟-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮经实施例16的H部分所述的醚合成，得到(S)-(1-((1-氟-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(60mg,0.135mmol,71％产率)，为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/e 444.2[(M+H)+,计算值C24H31FN3O4445.2]；LC/MS保留时间(方法D):tR＝1.11min.
G部分：(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-1-氟-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
(S)-(1-((1-氟-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯经实施例2的E部分所述的脱Boc保护。粗产物通过制备型HPLC使用0.1％TFA ACN:水纯化，得到(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-1-氟-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮,TFA(42.68mg,0.091mmol,95％产率)，为黄色固体。LC/MS(ESI)m/e 344.2[(M+H)+,计算值C19H23FN3O2344.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝2.07min；HPLC保留时间(方法A):tR＝5.52min；HPLC保留时间(方法B):tR＝6.63min；1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 9.38(s,1H),8.77(d,J＝5.0Hz,1H),8.67(dd,J＝9.0,3.0Hz,1H),7.21(d,J＝2.0Hz,1H),7.16(dq,J＝9.1,1.3Hz,1H),4.48(dd,J＝10.5,3.0Hz,1H),4.29(dd,J＝10.5,6.0Hz,1H),3.82(s,3H),3.80-3.73(m,1H),1.94-1.82(m,1H),1.82-1.63(m,2H),1.08(d,J＝4.0Hz,3H),1.07(d,J＝4.0Hz,3H).
实施例86
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基-9-(吡啶-2-基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.(S)-(1-((4,6-二甲基-5-氧代-9-(吡啶-2-基)-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
向(S)-(1-((9-溴-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(100mg,0.193mmol)于1,4-二噁烷(2mL)中的溶液中添加2-(三丁基甲锡烷基)吡啶(85mg,0.231mmol)和Pd(PPh3)4(11.14mg,9.64μmol)。将反应混合物脱气30min并在微波中加热至120℃且保持1h。将反应混合物冷却并用水(10mL)稀释并用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。合并的有机层用硫酸钠干燥并减压浓缩。粗产物通过硅胶色谱(3％甲醇的氯仿溶液)纯化，得到(S)-(1-((4,6-二甲基-5-氧代-9-(吡啶-2-基)-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(50mg,0.120mmol,62％产率)，为淡黄色固体，其无需进一步纯化即使用。LC/MS(ESI)m/e 517.7[(M+H)+,计算值C30H37N4O4517.3]；LC/MS保留时间(方法E):tR＝1.19min.
B部分.(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基-9-(吡啶-2-基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
在0℃向(S)-(1-((4,6-二甲基-5-氧代-9-(吡啶-2-基)-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(35mg,0.068mmol)于甲醇(4mL)中的溶液中添加HCl的1,4-二噁烷溶液(0.169mL,0.677mmol)。然后将反应混合物在室温搅拌2h。将挥发物减压浓缩。如此获得的残余物用饱和NaHCO3水溶液碱化，用水稀释并用DCM(3×5mL)萃取。合并的有机层用Na2SO4干燥并真空浓缩。粗产物通过反相制备型HPLC(Sunfire C18柱(19.0×150mm)10.0微米；流动相A:10mM乙酸铵的水溶液；流动相B:乙腈；流速:16.0mL)纯化，得到(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基-9-(吡啶-2-基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(10mg,0.024mmol,35％产率)，为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/e 417.6[(M+H)+,计算值C25H29N4O2417.2]；LC/MS保留时间(方法E):tR＝0.84min；HPLC保留时间(方法A):tR＝7.61min；HPLC保留时间(方法B):tR＝8.29min；1H NMR(400MHz,甲醇-d4).1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.70(d,J＝4.3Hz,1H),8.64(s,1H),8.58(d,J＝5.5Hz,1H),8.21(d,J＝5.8Hz,1H),8.04-7.94(m,1H),7.93-7.86(m,1H),7.46(ddd,J＝7.3,5.0,1.3Hz,1H),7.18(s,1H),4.32(dd,J＝9.5,4.3Hz,1H),4.13(dd,J＝9.4,6.7Hz,1H),3.84(s,3H),3.36-3.34(m,1H),3.11(s,3H),1.86-1.70(m,1H),1.53-1.32(m,2H),0.97(d,J＝6.8Hz,3H),0.93(d,J＝6.5Hz,3H).
实施例87和实施例88
(S)-8-((2-氨基-5,5,5-三氟-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮非对映异构体1和2
A部分.2-氨基-5,5,5-三氟-4-甲基戊酸乙酯盐酸盐
在烧瓶中向2-氨基-5,5,5-三氟-4-甲基戊酸(50mg,0.270mmol)中添加2N盐酸的乙醇溶液(1350μl,5.40mmol)。将溶液在80℃回流5h。冷却后，将乙醇减压除去。残余物经乙醚(2×)研磨。将如此获得的固体(60mg,0.240mmol)溶解于二氯甲烷(5mL)中。向冷却至0℃的该悬浮液中添加三乙胺(0.167mL,1.202mmol)和一缩二碳酸二叔丁基酯(0.054mL,0.312mmol)。将反应混合物温热至室温并搅拌12h。反应混合物用水(10mL)稀释并用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。合并的有机层用硫酸钠干燥并减压浓缩，得到2-((叔丁氧基羰基)氨基)-5,5,5-三氟-4-甲基戊酸乙酯(55mg,0.176mmol,73％粗产率)，为白色固体。该物质无需进一步纯化即使用。GCMS(ESI)m/e 212[(M)-,计算值C8H13F3NO2212]GC/MS(方法:Agilent GCMS Module-7890(GC)5975C(MSD)HP-5MS,30m×0.25mm ID×0.25μ膜厚度,氦气恒定流速0.9mL/min)保留时间tR＝6.38min.
B部分.(5,5,5-三氟-1-羟基-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
在0℃向2-((叔丁氧基羰基)氨基)-5,5,5-三氟-4-甲基戊酸乙酯(500mg,1.596mmol)于乙醇(2mL)中的溶液中添加NaBH4(604mg,15.96mmol)。将反应混合物在室温搅拌16h。反应混合物用氨水淬灭。溶液通过玻璃漏斗过滤且将所得滤液浓缩，得到(5,5,5-三氟-1-羟基-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(400mg,1.475mmol,92％粗产率)，为无色胶状半固体物质。该物质无需进一步纯化即使用。LC/MS(ESI)m/e 172.1[(M+H)+,计算值C6H13F3NO172.1]LC/MS保留时间(方法A):tR＝2.1min.
C部分：(1-((4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-5,5,5-三氟-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
8-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮和(5,5,5-三氟-1-羟基-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯经实施例16的H部分所述的醚合成。化合物通过反相HPLC(Sunfire C18(250×30mm,10μm)柱；流动相A:10mM乙酸铵的水溶液；流动相B:乙腈；流速:25mL)纯化，得到灰白色固体产物。如此获得的非对映异构体混合物通过正相手性制备型HPLC(柱:IC(250×30mm,5μm)；流动相A:0.2％DEA:己烷；流动相B:乙醇；流速:16mL/min)经非对映异构体分离，得到(1-((4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-5,5,5-三氟-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯，为两种非对映异构体混合物(1和2)。未确定非对映异构体的绝对立体化学。
非对映异构体混合物1:(30mg,0.061mmol,10％产率)，为灰白色固体。非对映异构体混合物的LC/MS(ESI)m/e 494.3[(M+H)+,计算值C25H31F3N3O4494.2]；LC/MS保留时间(方法C)tR＝2.17min.
非对映异构体混合物2:(80mg,0.162mmol,26％产率)，为灰白色固体。非对映异构体混合物的LC/MS(ESI)m/e 494.2[(M+H)+,计算值C25H31F3N3O4494.2]；LC/MS保留时间(方法C)tR＝2.16min.
D部分：8-((2-氨基-5,5,5-三氟-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮:(非对映异构体2)
非对映异构体混合物1(30mg,0.061mmol)经实施例2的E部分所述的脱Boc保护，得到8-((2-氨基-5,5,5-三氟-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(72.3mg,0.172mmol,99％产率)，为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/e 394.6[(M+H)+,计算值C20H23F3N3O2394.2]；HPLC保留时间(方法A):tR＝8.62min；HPLC保留时间(方法B):tR＝8.77min；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.62(d,J＝5.5Hz,1H),8.44(d,J＝8.8Hz,1H),8.19(d,J＝5.8Hz,1H),7.08-6.92(m,2H),4.11-3.90(m,2H),3.67(s,3H),3.01(s,3H),3.17-3.10(m,1H),1.96-1.82(m,1H),1.66-1.48(m,2H),1.10(d,J＝6.8Hz,3H).
经Boc保护的非对映异构体混合物2(80mg,0.162mmol)经实施例2的E部分所述的脱Boc保护，得到8-((2-氨基-5,5,5-三氟-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(10mg,0.025mmol,50％产率)，为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/e 394.6[(M+H)+,计算值C20H23F3N3O2394.2]；HPLC保留时间(方法A):tR＝8.75min；HPLC保留时间(方法B):tR＝8.8min；1HNMR(400MHz,CHLOROFORM-d)δppm 8.64(d,J＝5.5Hz,1H),8.16(d,J＝8.8Hz,1H),7.83(d,J＝5.8Hz,1H),6.89(dd,J＝8.8,2.3Hz,1H),6.85(d,J＝2.3Hz,1H),4.05(dd,J＝9.0,4.0Hz,1H),3.89(dd,J＝8.8,6.5Hz,1H),3.73(s,3H),3.40-3.34(m,1H),3.16(s,3H),2.60-2.42(m,1H),1.98(dt,J＝14.3,6.1Hz,1H),1.50-1.40(m,1H),1.23(d,J＝7.0Hz,3H).
实施例89
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-甲氧基-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.8-氯-9-碘-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
向8-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(1.0g,3.87mmol)于乙酸(25mL)中的搅拌溶液中先后添加H2SO4(0.206mL,3.87mmol)和高碘酸(0.881g,3.87mmol)。然后将混合物加热至80℃且保持20min。然后在80℃添加I2(0.294g,1.160mmol)并搅拌120min。冷却至环境温度后，将乙酸减压除去。残余物用70mL饱和碳酸氢钠水溶液中和。如此获得的固体通过真空过滤收集并风干，得到8-氯-9-碘-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(1.3g,3.21mmol,83％产率)，为棕色固体。LC/MS(ESI)m/e 385.1[(M+H)+,计算值C14H11ClIN2O 384.9]；LC/MS保留时间(方法E):tR＝1.09min；1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.96(s,1H)8.69(d,J＝5.58Hz,1H)8.36(d,J＝5.52Hz,1H)7.76(s,1H)3.63(s,3H)3.00(s,3H).
B部分.8-氯-9-羟基-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
在惰性气氛下向8-氯-9-碘-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(1.0g,2.60mmol)于DMSO(5mL)和水(5mL)中的搅拌溶液中先后添加碘化亚铜(I)(0.050g,0.260mmol)、1,10-菲咯啉(0.047g,0.260mmol)和KOH(2.188g,39.0mmol)。将反应混合物加热至100℃且保持16h并通过LC/MS监测。结束后，将反应混合物冷却并用1N HCl将pH调节至3-4。反应混合物经50mL水稀释并经80mL二氯甲烷萃取。分离有机层，用盐水洗涤，用Na2SO4干燥并减压浓缩，得到8-氯-9-羟基-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(0.6g,2.053mmol,79％粗产率)，为绿色固体。该物质无需进一步纯化即使用。LC/MS(ESI)m/e 273.0[(M)-,计算值C14H10ClN2O2273.05]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝2.06min.
C部分.8-氯-9-甲氧基-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
向8-氯-9-羟基-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(0.3g,1.092mmol)于DMF(10mL)中的冷却至0℃的搅拌溶液中先后添加NaH(0.052g,2.184mmol)和甲基碘(0.205mL,3.28mmol)。将所得混合物在环境温度搅拌10h。然后反应混合物用水(50mL)稀释并用乙酸乙酯(2×80mL)萃取。分离合并的有机层，用盐水洗涤，用Na2SO4并减压浓缩。粗产物通过硅胶柱色谱使用70％乙酸乙酯/石油醚纯化，得到8-氯-9-甲氧基-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(0.12g,0.416mmol,38％产率)，为半固体。LC/MS(ESI)m/e 288.4[(M)+,计算值C15H13ClN2O2288.1]；LC/MS保留时间(方法A):tR＝1.9min.
D部分.(S)-(1-((9-甲氧基-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
8-氯-9-甲氧基-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮经实施例16的H部分所述的醚合成，得到(S)-(1-((9-甲氧基-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(90mg,0.073mmol,18％产率)，其为半固体。LC/MS(ESI)m/e 470.3[(M+H)+,计算值C26H36N3O5470.5]；LC/MS保留时间(方法D)tR＝0.87min.
E部分.(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-甲氧基-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
(S)-(1-((9-甲氧基-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯经实施例2的E部分所述的脱Boc保护，得到(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-甲氧基-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(6mg,0.015mmol,8％产率)，为黄色固体。LC/MS(ESI)m/e370.2[(M+H)+,计算值C21H28N3O3370.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝2.03min.HPLC保留时间(方法A):tR＝7.31min和HPLC保留时间(方法B):tR＝8.32min；1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.63(d,J＝6.3Hz,1H),8.50(d,J＝6.3Hz,1H),8.01(s,1H),7.22(s,1H),4.49(dd,J＝10.7,3.1Hz,1H),4.35(dd,J＝10.9,6.4Hz,1H),4.09(s,3H),3.83(s,3H),3.81-3.75(m,1H),3.19(s,3H),1.92-1.74(m,2H),1.73-1.61(m,1H),1.07(d,J＝4.0Hz,3H),1.06(d,J＝4.0Hz,3H).
实施例90
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-(二氟甲氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分：8-氯-9-(二氟甲氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
向如实施例89的B部分所述制备的8-氯-9-羟基-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(0.5g,1.456mmol)于乙腈(5mL)中的搅拌溶液中先后添加K2CO3(0.604g,4.37mmol)和2-氯-2,2-二氟乙酸钠(0.444g,2.91mmol)。将混合物加热至80℃且保持18h。冷却后，反应混合物用水(50mL)稀释并用乙酸乙酯(2×80mL)萃取。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到8-氯-9-(二氟甲氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(50mg,0.154mmol,11％粗产率)，为半固体。该物质无需进一步纯化即使用。LC/MS(ESI)m/e 325.0[(M+H)+,计算值C15H12ClF2N2O2325.04]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝2.39min.
B部分：(S)-(1-((9-(二氟甲氧基)-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
8-氯-9-(二氟甲氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮经实施例16的H部分中所述的醚合成，得到(S)-(1-((9-(二氟甲氧基)-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.2g,0.033mmol,27％产率)，为无色油状物。LC/MS(ESI)m/e 506.3[(M+H)+,计算值C26H34F2N3O5506.2]；LC/MS保留时间(方法E):tR＝1.21min.
C部分：(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-(二氟甲氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
(S)-(1-((9-(二氟甲氧基)-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯经实施例2的E部分中所述的脱Boc保护，得到(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-(二氟甲氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(2mg,4.24umol,13％产率)，为绿色胶状物。LC/MS(ESI)m/e 406.2[(M+H)+,计算值C21H26F2N3O3406.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.75min.HPLC保留时间(方法B):tR＝10.11min；1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.3(s,1H),8.2(m,1H),7.25(s,1H),6.9(t,1H),4.55(m,1H),4.45(m,1H),3.8(m,4H),3.05-3.2(m,3H),1.8-1.95(m,3H),1.05-1.1(m,6H).
实施例91和实施例92
(S)-8-(2-氨基-4,4,4-三氟丁氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮和(R)-8-(2-氨基-4,4,4-三氟丁氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.根据Ling,F.et.al.,J.Org.Chem.,2003,68,7544-7547制备。
B部分.(1-((4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4,4,4-三氟丁-2-基)氨基甲酸叔丁酯
将8-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮和(4,4,4-三氟-1-羟基丁-2-基)氨基甲酸叔丁酯用于实施例16的H部分中所述的醚合成，得到(1-((4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4,4,4-三氟丁-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.22g,0.473mmol,49％产率)，为半固体。LC/MS(ESI)m/e 466.2[(M+H)+,计算值C23H27F3N3O4466.2]；LC/MS保留时间(方法D):tR＝0.82min.
C部分.8-(2-氨基-4,4,4-三氟丁氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
如实施例2的E部分所述制备，得到外消旋8-(2-氨基-4,4,4-三氟丁氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(40mg,0.066mmol,26％产率,98％纯度)，为灰白色固体。外消旋产物通过手性制备型SFC拆分(纯化条件:CHIRALPAK IA(250×21mm)5微米,流动相:60％CO2,共溶剂:40％(0.5％DEA的甲醇溶液),流速:60g/min,背压:100巴)，得到两种对映异构体。未确定对映异构体的绝对立体化学。
对映异构体1:(7mg,0.014mmol,6％产率,98％纯度)，为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/e 366.1[(M+H)+,计算值C18H19F3N3O2366.1]；LC/MS保留时间(方法A):tR＝1.81min；1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.57(d,J＝5.5Hz,1H),8.41(d,J＝9.0Hz,1H),8.16(d,J＝6.0Hz,1H),7.12-7.05(m,2H),4.30-4.08(m,2H),3.77(s,3H),3.62-3.58(m,1H),3.10(s,3H),2.74-2.58(m,1H),2.44(m,1H).手性HPLC保留时间(方法B):tR＝8.08min；手性SFC方法(CHIRALPAKIA(250×4.6mm)5微米,流动相:65％CO2,流速:2.6g/min,共溶剂:35％(0.3％DEA的甲醇溶液),流速:1.4g/min,背压:100巴)tR＝3.53min.
对映异构体2:(7mg,0.014mmol,6％产率,98％纯度)，为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/e 366.1[(M+H)+,计算值C18H19F3N3O2366.1]；LC/MS保留时间(方法A):tR＝1.81min；1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.57(d,J＝5.5Hz,1H),8.41(d,J＝9.0Hz,1H),8.16(d,J＝6.0Hz,1H),7.12-7.05(m,2H),4.30-4.08(m,2H),3.77(s,3H),3.62-3.58(m,1H),3.10(s,3H),2.74-2.58(m,1H),2.44(m,1H).手性HPLC保留时间(方法B):tR＝7.93min.手性SFC方法(CHIRALPAKIA(250×4.6mm)5微米,流动相:65％CO2,流速:2.6g/min,共溶剂:35％(0.3％DEA的甲醇溶液),流速:1.4g/min,背压:100巴)tR＝4.62min.
实施例93
8-(2-氨基-4,4,4-三氟丁氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.根据Ling,F.et.al.,J.Org.Chem.,2003,68,7544-7547制备。
B部分.4,4,4-三氟-1-(6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)丁-2-基氨基甲酸叔丁酯
如实施例16的H部分所述制备，得到4,4,4-三氟-1-(6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)丁-2-基氨基甲酸叔丁酯(200mg,0.221mmol,45％产率)，为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/e 452.2[(M+H)+,计算值C22H25F3N3O4452.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝2.01min.
C部分.8-(2-氨基-4,4,4-三氟丁氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
如实施例2的E部分所述制备，得到8-(2-氨基-4,4,4-三氟丁氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(35mg,0.098mmol,44％产率)，为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/e 352.0[(M+H)+,计算值C17H17F3N3O2352.1]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.92min；HPLC保留时间(方法A):tR＝7.07min；HPLC保留时间(方法B):tR＝7.44min；1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ9.46(s,1H),8.76(d,J＝6.0Hz,1H),8.40(d,J＝8.8Hz,1H),8.23(d,J＝5.6Hz,1H),7.14(d,J＝2.4Hz,1H),7.10(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),4.22-4.13(m,2H),3.79(s,3H),3.67-3.57(m,1H),2.71-2.63(m,1H),2.49-2.40(m,1H).
实施例94
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-9-甲酰胺
在25mL圆底烧瓶中将(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-9-甲腈(0.1g,0.274mmol)(如实施例64描述制备)和Cs2CO3(0.358g,1.098mmol)溶解于DMF(2mL)和水(0.6mL)中。将混合物在微波中在120℃辐照2h。将反应混合物减压浓缩并用乙酸乙酯和水稀释。将合并的有机物减压浓缩。残余物通过制备型HPLC(柱:XbridgePhenyl(150×4.6mm)3.5微米SC/749且使用缓冲液:0.05％TFA的水溶液)纯化，得到(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-9-甲酰胺(5mg,0.012mmol,5％产率)，为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/e 383.2[(M+H)+,计算值C21H27N4O3383.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.74min；HPLC保留时间(方法A):tR＝10.51min；HPLC保留时间(方法B):tR＝10.58min；1H NMR(400MHz,甲醇-d4):δppm 8.64(s,1H),8.46(d,1H),8.12(d,1H),6.67(s,1H),3.72-3.79(m,1H),3.69(s,3H),3.65-3.69(m,2H),3.04(s,3H),1.84-1.88(m,1H),1.62-1.68(m,1H),1.49-1.57(m,1H),1.31(d,3H),1.29(d,3H).
实施例95
(S)-4,6-二甲基-8-(4-甲基-2-(甲基氨基)戊基氧基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分：(S)-1-(4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基(甲基)氨基甲酸叔丁酯
将如实施例16的H部分所述制备的(S)-(1-((4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.150g,0.341mmol)溶解于DMF(1mL)中并冷却至0℃。添加NaH(0.027g,0.683mmol)且将反应混合物在0℃搅拌45min。然后添加碘甲烷(0.107mL,1.706mmol)且将反应混合物温热至室温并搅拌15min。混合物用冰淬灭并在乙酸乙酯(4mL)和水(2mL)之间分配。分离有机层，用盐水(2mL)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到粗物质，其通过制备型HPLC纯化，得到(S)-(1-((4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(60mg,0.125mmol,37％产率)，为浅黄色固体。LC/MS(ESI)m/e 454.4[(M+H)+,计算值C26H36N3O2454.3]；LC/MS保留时间(方法E):tR＝1.21min.
B部分：(S)-4,6-二甲基-8-(4-甲基-2-(甲基氨基)戊基氧基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
如实施例2的E部分所述制备，得到标题化合物(30mg,0.070mmol,64％产率)，为淡黄色固体。LC/MS(ESI)m/e 354.0[(M+H)+,计算值C21H28N3O2354.2]LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.81min.HPLC保留时间(方法A):tR＝8.22min和HPLC保留时间(方法B):tR＝9.21min.1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.74(d,J＝7.0Hz,1H),8.69-8.65(m,1H),8.62(d,J＝9.0Hz,1H),7.30-7.22(m,2H),4.62(dd,J＝11.0,3.0Hz,1H),4.49(dd,J＝11.5,5.0Hz,1H),3.85(s,3H),3.74(dd,J＝8.3,3.8Hz,1H),3.28(s,3H),2.84(s,3H),1.99-1.78(m,2H),1.76-1.63(m,1H),1.07(d,J＝6.0Hz,6H).
实施例96
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-N,N,4,6-四甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-9-甲酰胺
A部分：(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-9-甲酸
向如实施例64所述制备的(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-9-甲腈(450mg,1.235mmol)于乙醇(5mL)和水(5mL)中的溶液中添加NaOH(494mg,12.35mmol)。将混合物加热至80℃且保持12h。蒸发挥发物且残余物用水稀释。使用1.5N HCl将pH调节至3。溶液用乙酸乙酯(2×5mL)萃取。合并的有机层用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-9-甲酸(90mg,0.235mmol,19％粗产率)，为黄色固体。该物质无需进一步纯化即使用。LC/MS(ESI)m/e 384.1[(M+H)+,计算值C21H26N3O4384.2]；LC/MS保留时间(方法D):tR＝0.72min.
B部分：(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-N,N,4,6-四甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-9-甲酰胺
将(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-9-甲酸(90mg,0.070mmol)于DMF(0.9mL)中的溶液冷却至0℃。添加HOBT(21.57mg,0.141mmol)和EDC(20.25mg,0.106mmol)并搅拌5min。向其中先后添加二甲基胺(0.282mL,0.563mmol)和DIPEA(0.037mL,0.211mmol)并搅拌30min。然后将反应混合物温热至室温并搅拌12h。反应通过添加冰淬灭，过滤析出的固体。固体用过量的水洗涤并完全干燥，在温热至室温后得到橙色油状物。粗产物通过制备型HPLC(含0.1％TFA的ACN:水)纯化，得到(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-N,N,4,6-四甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-9-甲酰胺,2TFA(3.36mg,4.95μmol,7％产率)，为浅绿色固体。LC/MS(ESI)m/e 411.2[(M+H)+,计算值C23H31N4O3411.2]LC/MS保留时间(方法C):tR＝2.22min.HPLC保留时间(方法A):tR＝10.98min和HPLC保留时间(方法B):tR＝11.63。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.44(d,J＝6.0Hz,1H),8.31(d,J＝6.0Hz,1H),8.25(s,1H),6.76(s,1H),3.76(s,3H),3.69(dd,J＝4.8,3.3Hz,2H),3.34(s,3H),3.20-3.08(m,7H),1.84-1.78(m,1H),1.66-1.51(m,2H),1.05(d,J＝7.0Hz,3H),0.99(d,J＝6.5Hz,3H).
实施例97
8-(2-氨基-2,4-二甲基戊基氧基)-1-氟-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分：1-(1-氟-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-2,4-二甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯
如实施例16的H部分所述自实施例85的E部分所述制备的8-氯-1-氟-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮制备，得到(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-7-氟-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(35mg,0.076mmol,50％产率)。LC/MS(ESI)m/e 458.2[(M+H)+,计算值C25H33FN3O4458.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝2.15min.
B部分：8-(2-氨基-2,4-二甲基戊基氧基)-1-氟-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
如实施例2的E部分所述制备，得到8-(2-氨基-2,4-二甲基戊基氧基)-1-氟-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(16.5mg,0.035mmol,45％产率)，为白色固体。LC/MS(ESI)m/e 358.2[(M+H)+,计算值C20H25FN3O2358.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝2.06min；HPLC保留时间(方法A):tR＝11.79min；HPLC保留时间(方法B):tR＝6.66min；1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 9.41(s,1H),8.79(d,J＝4.8Hz,1H),8.71(dd,J＝9.2,2.9Hz,1H),7.24(d,J＝2.3Hz,1H),7.22-7.15(m,1H),4.36(d,J＝10.3Hz,1H),4.24(d,J＝10.3Hz,1H),3.84(s,3H),2.02-1.83(m,2H),1.80-1.70(m,1H),1.55(s,3H),1.11(d,J＝6.5Hz,3H),1.06(d,J＝6.3Hz,3H).
实施例98
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-1-甲氧基-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分：8-氯-1-甲氧基-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
在微波瓶中向如实施例85的E部分所述制备的8-氯-1-氟-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(40mg,0.152mmol)于MeOH(0.2mL)中的溶液中添加18-冠-6(4.03mg,0.015mmol)和甲醇钠(32.9mg,0.152mmol)的甲醇溶液并在微波炉中在100℃加热30min。结束后，反应混合物用水稀释并用乙酸乙酯(2×5mL)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到8-氯-1-甲氧基-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(40mg,0.146mmol,96％粗产率)，为白色固体。该物质无需进一步纯化即使用。LC/MS(ESI)m/e 275.0[(M+H)+,计算值C14H12ClN2O2275.05]；LC/MS保留时间(方法D):tR＝0.72min.
B部分：(S)-(1-((1-甲氧基-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
向8-氯-1-甲氧基-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(40mg,0.146mmol)在甲苯(0.5mL)中的溶液中添加碳酸铯(71.2mg,0.218mmol)和二叔丁基(2’,4’,6’-三异丙基-[1,1’-联苯]-2-基)膦(6.18mg,0.015mmol)。溶液用N2脱气5min。向其中添加二乙酸钯(II)(1.635mg,7.28μmol)且溶液用N2脱气10min。将所得混合物在90℃加热21h。冷却后，反应混合物通过硅藻土过滤，其中用EtOAc洗脱。将滤液减压浓缩。粗产物通过硅胶色谱使用己烷和乙酸乙酯纯化，得到(S)-(1-((1-甲氧基-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(40mg,0.041mmol,28％产率)。LC/MS(ESI)m/e 456.2[(M+H)+,计算值C25H34N3O5456.2]；LC/MS保留时间(方法D):tR＝0.9min.
C部分：(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-1-甲氧基-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
向(S)-(1-((1-甲氧基-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(40mg,0.041mmol)于DCM(0.9mL)中的冷却至0℃的溶液中滴加TFA(0.2mL,2.60mmol)并搅拌5min。将反应混合物温热至室温并搅拌3h。将挥发物减压除去。粗产物通过制备型HPLC使用含0.1％TFA的ACN:水纯化，得到(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-1-甲氧基-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮,2TFA(17.11mg,0.028mmol,69％产率)，为白色固体。LC/MS(ESI)m/e 356.0[(M+H)+,计算值C20H26N3O3356.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.82min；HPLC保留时间(方法A):tR＝9.44min；HPLC保留时间(方法B):tR＝9.78min；1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 9.17(s,1H),9.14(d,J＝9.0Hz,1H),8.54(s,1H),7.09(d,J＝2.5Hz,1H),7.02(dd,J＝9.0,2.5Hz,1H),4.21(s,3H),4.19-4.15(m,1H),4.04-3.95(m,2H),3.78(s,3H),1.97-1.80(m,1H),1.51-1.42(m,2H),1.04(d,J＝6.5Hz,3H),1.02(d,J＝6.5Hz,3H).
实施例99
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-7-甲氧基-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.3-溴-6-氯-2-氟苯酚
向1-溴-4-氯-2-氟苯(5g,23.87mmol)于四氢呋喃(40mL)中的冷却至-78℃的搅拌溶液中滴加LDA(14.92mL,29.8mmol)。将反应混合物在该温度搅拌30min，然后温热至-20℃并搅拌30min。然后将反应混合物冷却至-78℃并滴加溶于THF(5mL)中的硼酸三甲基酯(3.47mL,31.0mmol)。将反应混合物温热至-20℃并搅拌1h。然后将反应混合物冷却至-78℃并缓慢滴加过氧乙酸(16mL,84mmol)。将混合物温热至室温并搅拌12h。将反应混合物再次冷却至0℃并用5％氯化铵淬灭。溶液用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到3-溴-6-氯-2-氟苯酚(4.99g,18.25mmol,76％粗产率)，为黄色油状物。该物质无需进一步纯化即使用。LC/MS(ESI)m/e 225.1[(M+H)+,计算值C6H4BrClFO 224.9]；LC/MS保留时间(方法E):tR＝0.87min.
B部分.1-溴-4-氯-2-氟-3-甲氧基苯
向3-溴-6-氯-2-氟苯酚(4.2g,18.63mmol)于乙腈(35mL)中的搅拌溶液中添加碳酸钾(5.15g,37.3mmol)，然后在室温滴加甲基碘(2.330mL,37.3mmol)。将反应混合物加热至85℃且保持3h。冷却后，将挥发物减压浓缩且残余物用水(50mL)稀释并用乙酸乙酯(2×80mL)萃取。合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到1-溴-4-氯-2-氟-3-甲氧基苯(4g,16.7mmol,90％粗产率)，为棕色固体。该物质无需进一步纯化即使用。1HNMR(400MHz,CDCl3)δppm 7.2(m,1H),7.04(m,1H),3.98(s,3H).
C部分.2-(4-氯-2-氟-3-甲氧基苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷
向1-溴-4-氯-2-氟-3-甲氧基苯(3g,12.53mmol)于四氢呋喃(20mL)中的冷却至-10℃的搅拌溶液中滴加异丙基溴化镁(5.18mL,15.03mmol)且将反应混合物在-10℃搅拌1h。然后将反应混合物温热至0℃并搅拌1h。然后将反应混合物冷却至-10℃并缓慢滴加2-异丙氧基-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(2.56mL,12.53mmol)。将反应混合物温热至室温并搅拌16h。反应混合物用5％氢氧化钠水溶液淬灭并用乙酸乙酯(2×25mL)萃取。合并的有机层用盐水溶液洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩，得到2-(4-氯-2-氟-3-甲氧基苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(2.3g,8.03mmol,64％粗产率)，为棕色油状物。该物质无需进一步纯化即使用。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 7.35(m,1H),7.15(m,1H),3.95(s,3H),1.33(s,6H),1.23(s,6H).
D部分.4-(4-氯-2-氟-3-甲氧基苯基)-2-甲基烟酸甲酯
将4-氯-2-甲基烟酸甲酯(1.5g,8.08mmol)、2-(4-氯-2-氟-3-甲氧基苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(2.316g,8.08mmol)、磷酸钾(3.43g,16.16mmol)和PdCl2(dppf)-CH2Cl2加合物(0.660g,0.808mmol)于1,4-二噁烷(25mL)和水(5mL)中的混合物用氮气脱气5min。然后将反应混合物加热至100℃且保持18h。冷却后，反应混合物用水(50mL)稀释并用乙酸乙酯(2×75mL)萃取。合并的有机层用盐水溶液洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过硅胶色谱使用50％乙酸乙酯的己烷溶液纯化，得到4-(4-氯-2-氟-3-甲氧基苯基)-2-甲基烟酸甲酯(1.2g,2.52mmol,31％产率)，其为浅棕色油状物。LC/MS(ESI)m/e 309.9[(M+H)+,计算值C15H14ClFNO3310.1]；LC/MS保留时间(方法D):tR＝0.84min.
E部分.4-(4-氯-2-氟-3-甲氧基苯基)-2-甲基烟酸
如实施例16的E部分所述通过水解4-(4-氯-2-氟-3-甲氧基苯基)-2-甲基烟酸甲酯制备，得到4-(4-氯-2-氟-3-甲氧基苯基)-2-甲基烟酸(780mg,2.137mmol,93％产率)，为棕色油状物。LC/MS(ESI)m/e 295.9[(M+H)+,计算值C14H12ClFNO3296.04]；LC/MS保留时间(方法D):tR＝0.61min.
F部分.4-(4-氯-2-氟-3-甲氧基苯基)-N-(4-甲氧基苄基)-2-甲基烟酰胺
向(4-甲氧基苯基)甲胺(0.437g,3.18mmol)于CH2Cl2(25mL)中的搅拌溶液中添加DIEA(0.556mL,3.18mmol)且将反应混合物在0℃搅拌15min。然后向反应混合物中添加溶于10mL DCM中的4-(4-氯-2-氟-3-甲氧基苯基)-2-甲基烟酰氯(1g,3.18mmol)(通过用亚硫酰氯处理羧酸制备)且将反应混合物在室温搅拌10h。通过添加水(50mL)将反应淬灭且溶液用DCM(2×50mL)萃取。合并的有机层用50mL盐水溶液洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。残余物通过硅胶色谱使用乙酸乙酯的己烷溶液作为洗脱剂纯化，得到4-(4-氯-2-氟-3-甲氧基苯基)-N-(4-甲氧基苄基)-2-甲基烟酰胺(800mg,1.109mmol,35％产率)，为棕色油状物。LC/MS(ESI)m/e 415.1[(M+H)+,计算值C22H21ClFN2O3415.1]；LC/MS保留时间(方法D):tR＝0.78min.
G部分.8-氯-7-甲氧基-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
如实施例2的C部分所述自4-(4-氯-2-氟-3-甲氧基苯基)-N-(4-甲氧基苄基)-2-甲基烟酰胺制备，得到8-氯-7-甲氧基-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(110mg,0.245mmol,34％产率)，为黄色固体。LC/MS(ESI)m/e 395.1[(M+H)+,计算值C22H20ClN2O3395.1]LC/MS保留时间(方法D):tR＝0.81min.
H部分.(S)-1-(7-甲氧基-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯
如实施例16的H部分所述制备，得到标题化合物(325mg,0.119mmol,49％粗产率)，为白色固体。该物质无需纯化即用于后续步骤。LC/MS(ESI)m/e576.3[(M+H)+,计算值C33H42N3O6576.3]；LC/MS保留时间(方法D):tR＝0.99min.
I部分.(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-7-甲氧基-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
如实施例2的E部分所述制备，得到(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-7-甲氧基-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(12.3mg,0.033mmol,28％产率)，为白色固体。LC/MS(ESI)m/e 356.2[(M+H)+,计算值C20H26N3O3356.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.49min；HPLC保留时间(方法A):tR＝7.36min；HPLC保留时间(方法B):tR＝8.52min；1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.59(d,J＝5.5Hz,1H),8.14(d,J＝5.5Hz,1H),8.10(d,J＝9.0Hz,1H),7.11(d,J＝9.0Hz,1H),4.18(dd,J＝9.3,4.3Hz,1H),4.08-4.03(m,1H),4.02(s,3H),4.01-3.96(m,1H),3.10(s,3H),1.91-1.80(m,1H),1.57-1.40(m,2H),1.03(d,J＝6.5Hz,3H),1.01(d,J＝7.0Hz,3H).
实施例100
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-9-溴-7-氟-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分：(S)-1-(9-溴-7-氟-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯
使用实施例3的A部分所述的方法自实施例82的C部分所述制备的(S)-1-(7-氟-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯制备，得到标题化合物(120mg,0.065mmol,44％产率)。LC/MS(ESI)m/e 642.4[(M+H)+,计算值C32H38BrFN3O5642.2]；LC/MS保留时间(方法E):tR＝1.26min.
B部分：(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-9-溴-7-氟-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
如实施例2的E部分所述制备，得到(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-9-溴-7-氟-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(3.5mg,8.22μmol,13％产率)，为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/e 423.0[(M+H)+,计算值C19H22BrFN3O2423.3]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝2.10min；HPLC保留时间(方法A):tR＝8.58min；HPLC保留时间(方法B):tR＝9.08min；1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.73(d,J＝6.0Hz,1H),8.57(d,J＝2.0Hz,1H),8.40(d,J＝6.0Hz,1H),4.51(dd,J＝10.3,2.5Hz,1H),4.38(dd,J＝10.4,5.6Hz,1H),3.78-3.73(m,1H),3.17(s,3H),1.94-1.82(m,2H),1.73-1.60(m,1H),1.08(d,J＝2.5Hz,3H),1.06(d,J＝2.8Hz,3H).
实施例101
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-9-氟-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分：4-(4-氯-2,5-二氟苯基)-N-(4-甲氧基苄基)-2-甲基烟酰胺
如实施例82的A部分所述自4-(4-氯-2,5-二氟苯基)-2-甲基烟酸(如实施例70的D部分所述制备)制备，得到标题化合物(440mg,1.015mmol,87％产率)，为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/e 403.1[(M+H)+,计算值C21H18ClF2N2O2403.1]；LC/MS保留时间(方法E):tR＝0.93min.
B部分：8-氯-9-氟-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
如实施例73的B部分所述制备，得到8-氯-9-氟-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(260mg,0.669mmol,61％产率)，为白色固体。LC/MS(ESI)m/e 383.0[(M+H)+,计算值C21H17ClFN2O2383.1]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝2.04min.
C部分：(S)-1-(9-氟-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯
如实施例16的H部分所述制备，得到(S)-1-(9-氟-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯(0.2g,0.244mmol,62％产率)。LC/MS(ESI)m/e 564.4[(M+H)+,计算值C32H39FN3O5564.3]；LC/MS保留时间(方法E):tR＝1.25min.
D部分：(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-9-氟-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
如实施例2的E部分所述制备，得到标题化合物(55mg,0.158mmol,87％产率)，为白色固体。LC/MS(ESI)m/e 344.0[(M+H)+,计算值C19H23FN3O2344.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.76min；HPLC保留时间(方法A):tR＝7.88min；HPLC保留时间(方法B):tR＝7.92min；1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.60(d,J＝5.8Hz,1H),8.15(d,J＝12.0Hz,1H),8.08(d,J＝5.8Hz,1H),6.99(d,J＝7.5Hz,1H),4.22-4.12(m,1H),4.06-3.92(m,1H),3.40(br.s.,1H),3.10(s,3H),1.92-1.80(m,1H),1.59-1.41(m,2H),1.03(d,J＝6.5Hz,3H),1.01(d,J＝6.5Hz,3H).
实施例102
8-(2-氨基-2,4-二甲基戊基氧基)-9-氟-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.1-(9-氟-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-2,4-二甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯
根据实施例16的H部分所述的方法自8-氯-9-氟-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(如实施例101的C部分所述合成)偶联，得到标题化合物(0.130g,0.123mmol,47％产率)，其为棕色油状物。LC/MS(ESI)m/e 578.5[(M+H)+,计算值C33H41FN3O5578.3]；LC/MS保留时间(方法E):tR＝1.28min.
B部分.8-(2-氨基-2,4-二甲基戊基氧基)-9-氟-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
如实施例2的E部分所述制备，得到标题化合物(10mg,0.017mmol,22％产率)，为淡黄色固体。LC/MS(ESI)m/e 358.0[(M+H)+,计算值C20H25FN3O2358.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.69min；HPLC保留时间(方法A):tR＝7.87min；HPLC保留时间(方法B):tR＝8.59min；1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.67(d,J＝6.3Hz,1H),8.39(d,J＝6.3Hz,1H),8.32(d,J＝12.0Hz,1H),7.08(d,J＝7.3Hz,1H),4.44-4.15(m,2H),3.37-3.35(m,1H),3.19(s,3H),1.97-1.83(m,2H),1.81-1.70(m,1H),1.56(s,2H),1.10(d,J＝6.3Hz,3H),1.06(d,J＝6.3Hz,3H).
实施例103
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-9-氯-7-氟-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分：(S)-1-(9-氯-7-氟-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯
如实施例41的A部分所述自(S)-(1-((7-氟-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(如实施例82的C部分所述合成)制备，得到标题化合物(2135mg,0.063mmol,60％粗产率)，为黄色固体。该物质无需纯化即使用。LC/MS(ESI)m/e 598.3[(M+H)+,计算值C32H38ClFN3O5598.2]；LC/MS保留时间(方法E):tR＝1.32min.
B部分.(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-9-氯-7-氟-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
向(S)-(1-((9-氯-7-氟-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(.08g,0.037mmol)于TFA(8mL)中的冷却至0℃的溶液中添加甲磺酸(0.243μl,3.75μmol)。然后将反应混合物在70℃加热2h。将挥发物蒸发。将残余物溶解于水中并用10％NaHCO3水溶液中和。溶液用EtOAc(3×15mL)萃取。合并的有机层用盐水(1×15mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。残余物通过制备型HPLC(柱:X-Bridge(19X150mm)5μm,流速:15ml/min；溶剂A:0.01％TFA,溶剂B:ACN)纯化，得到(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-氯-7-氟-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮,3TFA(9.5mg,0.013mmol,34.4％产率)，为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/e 378.0[(M+H)+,计算值C19H22ClFN3O2378.1]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝2.02min；HPLC保留时间(方法A):tR＝7.47min；HPLC保留时间(方法B):tR＝8.41min；1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.70(d,J＝6.0Hz,1H),8.40(d,J＝2.0Hz,1H),8.35(d,J＝6.3Hz,1H),4.49(dd,J＝10.7,2.6Hz,1H),4.35(dd,J＝10.5,5.8Hz,1H),3.75-3.69(m,1H),3.14(s,3H),1.90-1.74(m,2H),1.70-1.56(m,1H),1.04(d,J＝2.3Hz,3H),1.03(d,J＝2.5Hz,3H).
实施例104
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-9-(甲氧基甲基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.(S)-1-(9-(甲氧基甲基)-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-4-甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯
如实施例16的H部分所述制备，得到标题化合物(S)-(1-((9-(甲氧基甲基)-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(100mg,0.066mmol,84％产率)。LC/MS(ESI)m/e484.4[(M+H)+,计算值C27H38N3O5484.3]；LC/MS保留时间(方法B):tR＝1.65min.
B部分.(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-9-(甲氧基甲基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
如实施例2的E部分所述制备，得到标题化合物(9mg,0.022mmol,33％产率)，为黄色固体。LC/MS(ESI)m/e 384.2[(M+H)+,计算值C22H30N3O3384.2]；LC/MS保留时间(方法C):tR＝1.66min；HPLC保留时间(方法A):tR＝7.96min；HPLC保留时间(方法B):tR＝9.01min；1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.54(d,J＝5.9Hz,1H),8.33(s,1H),8.11(d,J＝5.8Hz,1H),7.00(s,1H),4.73-4.55(m,2H),4.33(dd,J＝10.0,3.5Hz,1H),4.13(dd,J＝9.9,6.8Hz,1H),3.75(s,3H),3.59-3.50(m,1H),3.47(s,3H),3.06(s,3H),1.97-1.77(m,1H),1.69-1.45(m,2H),1.04(d,J＝4.7Hz,3H),1.02(d,J＝4.7Hz,3H).
实施例105
8-(2-氨基-2,4-二甲基戊基氧基)-7-氟-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分.4-(4-溴-2,3-二氟苯基)-N-(4-甲氧基苄基)-2-甲基烟酰胺
如实施例82的A部分所述制备，得到4-(4-溴-2,3-二氟苯基)-N-(4-甲氧基苄基)-2-甲基烟酰胺(0.320g,0.693mmol,97％产率)，为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/e 447.0[(M+H)+,计算值C21H18BrF2N2O2447.0]；LC/MS保留时间(方法E):tR＝0.95min.
B部分.8-溴-7-氟-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
如实施例2的C部分所述制备，得到8-溴-7-氟-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(0.12g,0.269mmol,90％产率)，为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/e 427.1[(M+H)+,计算值C21H17BrFN2O2427.0]；LC/MS保留时间(方法E):tR＝1.15min.
C部分.1-(7-氟-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基氧基)-2,4-二甲基戊-2-基氨基甲酸叔丁酯
如实施例16的H部分所述制备，得到(R)-(1-((7-氟-6-(4-甲氧基苄基)-4-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-2,4-二甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.025g,0.042mmol,13％产率)。LC/MS(ESI)m/e 578.5[(M+H)+,计算值C33H41FN3O5578.3]；LC/MS保留时间(方法E):tR＝1.28min.
D部分.8-(2-氨基-2,4-二甲基戊基氧基)-7-氟-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
如实施例17的I部分所述制备，得到8-(2-氨基-2,4-二甲基戊基氧基)-7-氟-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(0.013g,0.030mmol,69％产率)，为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/e 358.0[(M+H)+,计算值C20H25FN3O2358.2]；HPLC保留时间(方法A):tR＝7.71min；HPLC保留时间(方法B):tR＝8.57min；1HNMR(400MHz,甲醇-d4)δppm 8.75-8.70(m,1H),8.70-8.63(m,1H),8.36(dd,J＝9.3,1.8Hz,1H),7.34(dd,J＝9.3,7.8Hz,1H),4.47-4.39(m,1H),4.38-4.30(m,1H),3.26(s,3H),1.96-1.85(m,2H),1.81-1.70(m,1H),1.55(s,3H),1.10(d,J＝6.5Hz,3H),1.06(d,J＝6.0Hz,3H).
实施例106
(S)-8-((2-氨基-5,5-二氟戊-4-烯-1-基)氧基)-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-9-甲腈
A部分：(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)琥珀酸二甲基酯
L-天冬氨酸(10.1g,76.0mmol)于无水甲醇(100mL)中的0℃悬浮液经快速滴加用三甲基甲硅烷基氯(24.7g,228mmol)处理。移开冷却浴且将所得溶液在环境温度搅拌过夜(16h)，然后减压浓缩。将所得油状物溶解于二氯甲烷(100mL)中，用一缩二碳酸二叔丁基酯(17.4g,80.1mmol)和二异丙基乙基胺(26.5mL,152mmol)处理并在环境温度搅拌过夜(16h)。所得溶液用0.25N盐酸水溶液(3×50mL)、0.25N氢氧化钠水溶液(3×50mL)和盐水(1×50mL)洗涤，用MgSO4干燥并减压浓缩，得到(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)琥珀酸二甲基酯(15.9g,60.9mmol,80％粗产率)，为近无色油状物。粗产物无需进一步纯化即使用。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 5.50(br.s.,1H),4.60(br.s.,1H),3.78(s,3H),3.71(s,3H),3.02(dd,J＝16.9,4.4Hz,1H),2.84(dd,J＝16.8,4.8Hz,1H),1.47(s,9H).
B部分：(S)-2-[双(叔丁氧基羰基)氨基]丁-1,4-二酸二甲基酯
将(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)琥珀酸二甲基酯(15.8g,60.5mmol)于乙腈(200mL)中的0℃溶液用一缩二碳酸二叔丁基酯(13.9g,63.5mmol)和4-二甲基氨基吡啶(1.48g,12.1mmol)处理。移开冷却浴且将反应溶液在环境温度搅拌过夜(18h)。将所得溶液减压浓缩。将残余物溶于乙酸乙酯(200mL)中，用0.25N盐酸水溶液(2×50mL)、0.25N氢氧化钠水溶液(2×50mL)和盐水(1×50mL)洗涤，用硫酸镁干燥并减压浓缩，得到(S)-2-[双(叔丁氧基羰基)氨基]丁-1,4-二酸二甲基酯(18.8g,52.0mmol,86％粗产率)，为淡黄色油状物。粗产物无需进一步纯化即使用。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 5.46(t,J＝6.8Hz,1H),3.72(s,3H),3.74(s,3H),3.26(dd,J＝16.4,7.2Hz,1H),2.75(dd,J＝16.3,6.5Hz,1H),1.52(s,18H).
C部分：(S)-2-{(叔丁氧基)-N-[(叔丁基)氧基羰基]羰基氨基}-4-氧代丁酸甲酯
(S)-2-[双(叔丁氧基羰基)氨基]丁-1,4-二酸二甲基酯(9.07g,25.1mmol)于乙醚(100mL)中的-78℃溶液用1M二异丁基氢化铝的二氯甲烷溶液(37.6mL,37.6mmol)逐滴处理。将所得溶液搅拌15min，然后依次以15min间隔用水(3.3mL)、1N氢氧化钠水溶液(10mL)和水(3.3mL)淬灭。所得悬浮液通过硅藻土过滤并减压浓缩，得到(S)-2-{(叔丁氧基)-N-[(叔丁基)氧基羰基]羰基氨基}-4-氧代丁酸甲酯(8.26g,24.9mmol,99％粗产率)，为无色油状物。粗产物无需进一步纯化即使用。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 9.81(s,1H),5.55(t,J＝6.4Hz,1H),3.75,(s,3H),3.43(ddd,J＝18.0,5.9,1.0Hz,1H),2.85(ddd,J＝17.9,6.0,1.0Hz,1H),1.52(s,18H).
D部分：(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-4-氧代丁酸甲酯
(S)-2-{(叔丁氧基)-N-[(叔丁基)氧基羰基]羰基氨基}-4-氧代丁酸甲酯(29.2g,88.0mmol)于乙腈(300mL)中的溶液用溴化锂(11.5g,132mmol)处理，加热至回流且保持2h，然后减压浓缩。将残余物溶于乙酸乙酯(300mL)中，用水(1×50mL)和盐水(1×50mL)洗涤，用硫酸镁干燥并减压浓缩，得到深琥珀色油状物。粗物质经SiO2(20-100％乙酸乙酯/己烷梯度洗脱)纯化，得到(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-4-氧代丁酸甲酯(12.5g,54.1mmol,62％粗产率)，为淡琥珀色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 9.76(s,1H),5.41(br.s.,1H),4.62(dt,J＝8.1,4.4Hz,1H),3.77(s,3H),3.19-2.94(m,2H),1.46(s,9H).
E部分：(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-5,5-二氟戊-4-烯酸甲酯
将(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-4-氧代丁酸甲酯(5.97g,25.8mmol)、2-氯-2,2-二氟乙酸钠(11.8g,77.0mmol)、三苯基膦(20.3g,77.0mmol)和N,N-二甲基甲酰胺(50mL)的溶液加到500mL三颈烧瓶中并加热至115℃且保持15min。所得混合物通过硅藻土过滤并减压浓缩。粗物质经SiO2(5-40％乙酸乙酯/己烷梯度洗脱)纯化，得到(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-5,5-二氟戊-4-烯酸甲酯(0.91g,3.43mmol,13％产率)，为无色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 5.25-5.06(br.s.,1H),4.42(br.s.,1H),4.24-4.10(m,1H),3.78(s,3H),2.59(dd,J＝14.4,6.7Hz,1H),2.51-2.31(m,1H),1.47(s,9H).
F部分：(S)-(5,5-二氟-1-羟基戊-4-烯-2-基)氨基甲酸叔丁酯
(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-5,5-二氟戊-4-烯酸甲酯(1.91g,7.20mmol)于四氢呋喃(25mL)中的环境温度溶液用硼氢化锂(0.31g,14mmol)处理并搅拌1h。将所得溶液冷却至5℃，用0.1N盐酸水溶液(50mL)淬灭并用乙酸乙酯(3×25mL)萃取。合并的有机萃取物用盐水(1×20mL)洗涤，用MgSO4干燥并减压浓缩。粗物质经SiO2(20-100％乙酸乙酯/己烷梯度洗脱)纯化，得到(S)-(5,5-二氟-1-羟基戊-4-烯-2-基)氨基甲酸叔丁酯(1.4g,5.90mmol,82％产率)，为无色油状物。1H NMR(400MHz,CHLOROFORM-d)δppm 4.75(d,J＝6.0Hz,1H),4.35-4.05(m,1H),3.82-3.51(m,3H),2.46-2.16(m,3H),1.47(s,9H).
G部分：(S)-(1-((4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-5,5-二氟戊-4-烯-2-基)氨基甲酸叔丁酯
8-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(1.26g,4.88mmol)(如实施例16的G部分所述制备)、(S)-(5,5-二氟-1-羟基戊-4-烯-2-基)氨基甲酸叔丁酯(1.39g,5.86mmol)、2-二叔丁基膦基-2’,4’,6’-三异丙基联苯(0.42g,0.98mmol)、Pd(OAc)2(0.11g,0.49mmol)、Cs2CO3(3.18g,9.76mmol)和无水甲苯(15mL)的悬浮液用氮气脱气10min并加热至90℃过夜(15h)。冷却后，反应混合物通过硅藻土过滤，减压浓缩并溶于乙酸乙酯(50mL)中。有机层用盐水(1×100mL)和水(1×100mL)洗涤，用Na2SO4干燥并减压浓缩，得到琥珀色油状物。粗物质经SiO2(1-5％含2M氨的甲醇/二氯甲烷梯度洗脱)纯化，得到(S)-(1-((4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-5,5-二氟戊-4-烯-2-基)氨基甲酸叔丁酯(1.04g,2.26mmol,46％产率)，为褐色固体。LC/MS,(ESI)m/z 460.0[(M+H)+,计算值C24H28F2N3O4,460.2]；1HNMR(400MHz,CDCl3)δppm 8.59(d,J＝5.5Hz,1H),8.05(d,J＝8.8Hz,1H),7.73(d,J＝5.8Hz,1H),6.83(dd,J＝8.8,1.8Hz,1H),6.79(br.s.,1H),5.13-4.89(m,1H),4.39-4.21(m,1H),4.20-3.96(m,3H),3.66(s,3H),3.12(s,3H),2.61-2.31(m,2H),1.48(s,9H).
H部分：(S)-(1-((9-溴-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-5,5-二氟戊-4-烯-2-基)氨基甲酸叔丁酯
(S)-(1-((4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-5,5-二氟戊-4-烯-2-基)氨基甲酸叔丁酯(1.03g,2.24mmol)于乙腈(22mL)中的溶液用N-溴代琥珀酰亚胺(0.44g,2.5mmol)处理，加热至80℃且保持45min，然后减压浓缩。粗物质经SiO2(1-4％含2M氨的甲醇/二氯甲烷梯度洗脱)纯化，得到(S)-(1-((9-溴-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-5,5-二氟戊-4-烯-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.81g,1.51mmol,67％产率)，为白色固体。LC/MS,(ESI)m/z 537.9[(M+H)+,计算值C24H27BrF2N3O4,538.1]；1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 8.62(d,J＝5.8Hz,1H),8.22(s,1H),7.65(d,J＝5.5Hz,1H),6.75(s,1H),5.01(d,J＝8.3Hz,1H),4.41-4.26(m,1H),4.24-4.04(m,3H),3.67(s,3H),3.12(s,3H),2.64-2.34(m,2H),1.48(s,9H).
I部分：(S)-(1-((9-氰基-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-5,5-二氟戊-4-烯-2-基)氨基甲酸叔丁酯
将(S)-(1-((9-溴-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-5,5-二氟戊-4-烯-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.48g,0.892mmol)、氰化锌(0.115g,0.981mmol),1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁(0.074g,0.134mmol)、Pd2(dba)3(0.041g,0.045mmol)、N,N-二甲基甲酰胺(3mL)和水(0.3mL)的悬浮液加到20mL压力额定瓶中并用氮气气流鼓泡10min。将瓶密封，脱除氧气并在氮气下在预加热的反应块中在115℃搅拌过夜。冷却后，反应混合物用乙酸乙酯(35mL)稀释并通过硅藻土过滤。滤液用盐水(3×50mL)洗涤，用硫酸钠干燥并减压浓缩。粗物质经SiO2(0-4％含2M氨的甲醇/二氯甲烷梯度洗脱)纯化，得到(S)-(1-((9-氰基-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-5,5-二氟戊-4-烯-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.15g,0.280mmol,32％产率)，为褐色固体。LC/MS,(ESI)m/z 485.1[(M+H)+,计算值C25H27F2N4O4,485.2]；1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 8.75(d,J＝5.5Hz,1H),8.45(s,1H),7.81(d,J＝5.8Hz,1H),7.00(s,1H),4.85(d,J＝10.0Hz,1H),4.40-4.21(m,3H),4.07(br.s.,1H),3.80(s,3H),3.17(s,3H),2.62-2.52(m,1H),2.49-2.38(m,1H),1.49(s,9H).
J部分:(S)-8-((2-氨基-5,5-二氟戊-4-烯-1-基)氧基)-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-9-甲腈
(S)-(1-((9-氰基-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-5,5-二氟戊-4-烯-2-基)氨基甲酸叔丁酯(60mg,0.124mmol)于甲醇(1mL)中的环境温度溶液用4M HCl的1,4-二噁烷溶液(1.3mL,5.20mmol)处理并保持过夜。将所得溶液减压浓缩。粗物质经制备型LC/MS使用以下条件纯化：柱:XBridge C18,19×200mm,5μm颗粒；流动相A:5:95乙腈:含10mM乙酸铵的水；流动相B:95:5乙腈:含10mM乙酸铵的水；梯度:历时20分钟10-50％B且然后在100％B保持5分钟；流速:20mL/min。将含有所需产物的级份合并，经离心蒸发浓缩，得到(S)-8-((2-氨基-5,5-二氟戊-4-烯-1-基)氧基)-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-9-甲腈(7.6mg,0.020mmol,16％产率)，为白色固体。LC/MS,(ESI)m/z 385.3[(M+H)+,计算值C20H19F2N4O2,385.1]；1HNMR(500MHz,DMSO)δppm 8.82(s,1H),8.60(d,J＝5.5Hz,1H),8.18(d,J＝5.8Hz,1H),6.97(s,1H),4.74-4.59(m,1H),4.22-4.05(m,2H),3.62(s,3H),3.19-3.10(m,1H),2.93(s,3H),2.36-2.25(m,1H),2.19-2.08(m,1H).
实施例107
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-氯-7-氟-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
A部分：(S)-(1-((9-氯-7-氟-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯
使用NCS将(S)-(1-((7-氟-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.08g,0.175mmol)(如实施例29的G部分所述制备)经氯化作用，得到(S)-(1-((9-氯-7-氟-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(80mg,0.104mmol,60％粗产率)，为半固体。该物质无需进一步纯化即使用。LC/MS(ESI)m/e 492.2[(M+H)+,计算值C25H32ClFN3O4492.2].
B部分：(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-氯-7-氟-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮
(S)-(1-((9-氯-7-氟-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)-4-甲基戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯(0.08g,0.104mmol))经实施例2的E部分所述的脱Boc基团保护。粗物质经反相HPLC(含10mM乙酸铵的水/AcCN)纯化，得到(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-氯-7-氟-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮(0.006g,0.015mmol,14％产率)，为灰白色固体。LC/MS(ESI)m/e 392.2[(M+H)+,计算值C20H24ClFN3O2392.1]；LC/MS保留时间(LC/MS方法C)tR＝2.11min.HPLC保留时间(方法A):tR＝8.96min；HPLC保留时间(方法B):tR＝5.15min.1H NMR(400MHz,甲醇-d4)8.62(d,J＝5.8Hz,1H),8.32(d,J＝2.0Hz,1H),8.12(d,J＝5.8Hz,1H),4.26(ddd,J＝9.3,3.8,1.0Hz,1H),4.06(dd,J＝8.7,7.2Hz,1H),3.87(d,J＝9.3Hz,3H),3.67-3.64(m,1H),3.08(s,3H),1.92-1.78(m,1H),1.56-1.37(m,2H),1.02(d,J＝5.3Hz,3H),1.01(d,J＝5.3Hz,3H).
方法
AAK1激酶分析
在U型底384孔板中进行分析。最终分析体积为30μl，其如下制备：在分析缓冲液(10mM Tris-HCl(pH 7.4)、10mM MgCl2、0.01％Tween-20及1.0mMDTT)中加入15μl酶和底物(荧光化肽(5-FAM)-Aha-KEEQSQITSQVTGQIGWR-NH2及ATP)及15μl测试化合物。通过组合在细菌中表达的GST-Xa-hAAK1与底物及测试化合物来引发反应。在室温孵育反应混合物3小时且通过向各样品中添加60μl35mM EDTA缓冲液来终止反应。在Caliper LabChip3000(Caliper,Hopkinton,MA)上通过电泳分离荧光底物与磷酸化产物来分析反应混合物。通过与经EDTA淬灭的对照反应(100％抑制)及仅含载体的反应(0％抑制)比较来计算抑制数据。分析中试剂的最终浓度为：ATP 22μM；(5-FAM)-Aha-KEEQSQITSQVTGQIGWR-NH21.5μM；GST-Xa-hAAKl 3.5nM；及DMSO 1.6％。得到剂量响应曲线以确定抑制50％激酶活性所需的浓度(IC50)。将化合物以10mM溶解于二甲亚砜(DMSO)中且在11个浓度进行评估。通过非线性回归分析得出IC50值。
基于HEK281细胞的分析
将HEK293F细胞培养于含有DMEM(Gibco,目录号11965)、10％FBS(SAFC Biosciences,目录号12103C)和1×GPS(谷氨酸、青霉素及链霉素)的培养基中。在第一天将细胞涂布于10cm培养皿上以使其在转染时为～80％融合。在转染时在每个10cm培养皿中有约1200万个细胞。在第二天用48μg DNA及144μl Lipofectamine 2000(Invitrogen,目录号11668-019)转染各培养皿。DNA由含有3μg AAK1/HA/pIRES(全长人类,NCBI保存号NP_055726.2)、45μg Flag/AP2MI/pcDNA(全长人类)及1.5ml OPTI-MEM的混合物构成(每10cm培养皿)。Lipofectamine 2000由含有144μl Lipofectamine2000及1.5ml OPTI-MEM的混合物构成(每10cm培养皿)。将各混合物转移至单独的15ml管中且在室温孵育5分钟，然后组合两种混合物且在室温孵育20分钟。然后从各10cm培养板中吸出生长培养基且替换为10mlDMEM+10％FBS(无GPS)。最后向各10cm培养皿中添加3mlDNA/Lipofectamine混合物且轻柔混合，然后在37℃及5％CO2下孵育培养板过夜。
在第三天用100％DMSO以1000×最终浓度稀释化合物，然后进行3倍连续稀释以获得总共5个测试浓度。每10cm培养皿测试四份化合物。然后将1μl各化合物稀释液吸移至深孔96孔板中，然后向各孔中添加500μlDMEM+0.5％FBS以获得2×最终浓度的各化合物。通过简单吸取(此时HEK293细胞易于脱离培养板)将细胞重新悬浮于10cm培养皿中，然后转移至50ml锥形管中且通过在1000rpm离心5分钟来沉降。然后将细胞团块重新悬浮于2.75ml DMEM+0.5％FBS中(每10cm培养皿)且将100μl细胞悬浮液转移至96孔TC板的各孔中。最后将100μl用DMEM+0.5％FBS稀释的2×化合物添加至含有细胞悬浮液的孔中以获得1×最终浓度。然后在37℃及5％CO2下孵育培养板3小时，然后将细胞悬浮液自各孔转移至12管PCR条中。将PCR条在吸头置放架中以1000rpm旋转5分钟以使细胞结块，然后通过吸取但不扰动细胞团块来移除培养基。
为了准备Western印迹分析，将细胞团块重新悬浮于40μl 1×LDS-PAGE样品缓冲液(Invitrogen,目录号NP0008)+2×Halt磷酸酶及蛋白酶抑制剂混合物(Thermo Scientific,目录号1861284)中，然后分别用设定在第5档的微量管音波仪进行音波处理8-10秒。向各样品中添加5μl10×NuPage样品还原剂(含50mM DTT)，然后在PCR仪上在70℃热变性10分钟。每种样品总共取10μl加载于4-20％Tris-甘氨酸Criterion 26孔凝胶(Biorad,目录号345-0034)的各泳道中以获得磷酸化mu2印迹且在4-12％Bis-Tris(+MES缓冲液)NuPAGE 26孔凝胶(Invitrogen,目录号WG1403BX10)的每泳道中加载10μl以获得mu2印迹。为了进行对照，将2ng磷酸化mu2或20ng mu2/Flag蛋白加载于各凝胶的最末孔中。SDS-PAGE后，使用iBlot将各凝胶上的样品转移至PVDF膜上且将膜在TBST+5％牛奶中阻断1小时，然后用TBST洗涤3次5-10分钟。用含兔抗磷酸化mu2(1:5000；由New England Peptide制造且在Lexicon上进行亲和性纯化的兔多株抗体)的TBST+5％BSA探测Criterion凝胶，而用含小鼠抗Flag(1:500；Sigma,目录号F1804)的TBST+5％牛奶探测NuPAGE凝胶且在4℃在振荡器上孵育这些初级抗体过夜。
在第四天用TBST洗涤Western印迹3次5-10分钟，在室温用含抗兔-HRP(1:2000；BioRad,目录号170-6515)或抗小鼠-HRP(1:2000；Biorad,目录号170-6516)的TBST+5％牛奶探测1小时，用TBST洗涤3次10分钟且用ECL试剂(GE Healthcare,目录号RPN2132)在Versadoc上显影。最后安设照相机以每30秒进行拍照持续10分钟且保存各印迹的无饱和信号的最佳影像(当信号饱和时，将以红色突显条带)。对各条带进行体积分析以获得密度值。各样品的抑制百分比如下计算：首先以总mu2表达水平进行归一化，然后与0％及100％对照比较。然后使用Excel拟合软件计算IC50值。
AAK1剔除小鼠
通过以下两种方法制备破坏AAK1基因的小鼠纯合子(-/-)：基因捕获及同源重组。
基因捕获为一种随机括入突变诱发的方法，其使用DNA中编码报导基因或可选择标记基因的片段作为诱变剂。基因捕获载体经设计而以使细胞拼接机制可将载体编码的外显子拼接于细胞mRNA的方式整合于内含子或基因中。一般而言，基因捕获载体含有可选择标记序列，其位于强拼接受体序列之前且不在启动子之前。由此，当这种载体整合于基因中时，细胞拼接机制将所捕获基因的外显子拼接于可选择标记序列的5’端上。通常，这种可选择标记基因仅可在编码该基因的载体整合于内含子中时被表达。然后，所得基因捕获事件通过选择可在选择性培养中存活的细胞来鉴别。
通过包括将经遗传工程改造的载体序列的至少一部分插入所关注基因中的方法使胚胎干细胞(来自衍生鼠类株A129的Lex-1细胞)突变，将经突变的胚胎干细胞显微注射于胚胞中，然后引入假孕雌性宿主中且使用既定方法到达产期。参见例如"Mouse Mutagenesis",1998,Zambrowicz等人编，LexiconPress,The Woodlands,TX。然后使所得嵌合动物繁殖产生能够生殖系传递所关注基因中含有经工程改造的突变的对偶基因的后代。
AAK1基因经破坏的小鼠亦通过同源重组来制备。在此情况下，通过本领域中已知的方法移除鼠类AAK1基因的第二编码外显子(参见GenBank保存号NM 177762)。参见例如美国专利5,487,992、5,627,059及5,789,215。
结合破坏AAK1基因的小鼠杂合子(+/-)及野生型(+/+)同窝出生者研究破坏AAK1基因的小鼠纯合子(-/-)。在此分析期间，使用经设计用以评定哺乳动物个体的主要器官系统的功能的一整套医疗诊断程序对小鼠进行医疗处理。结合杂合子(+/-)及野生型(+/+)同窝出生者研究纯合子(-/-)"基因剔除"小鼠。通过Southern分析证实对AAK1基因的破坏。通过RT-PCR在以下中检测AAK1的鼠类同源物的表达：鼠脑、脊髓、眼睛、胸腺、脾、肺、肾、肝、骨路肌、骨、胃、小肠及结肠、心脏、脂肪、哮喘的肺、LPS肝、血液、条带状心脏、主动脉树、前列腺及乳腺(5周龄未交配鼠、成熟未交配鼠、12DPC、分娩后3天(泌乳期)、断乳后3天(退化早期)及断乳后7天(退化晚期))。
使用福尔马林爪测试来测试AAK1纯合子(-/-)及其野生型(+/+)同窝出生者以评定其急性及强直性伤害感受性应答。在这些测试中，使用自动伤害感受分析仪(购自Ozaki实验室,University of California,San Diego)。在测试前30分钟将金属带置放在各小鼠左后爪周围。30分钟适应期后，将20μl 5％福尔马林皮下注射于左后爪的背面。将小鼠单独放置于圆柱形腔室中45分钟。通过用蒸馏水稀释甲醛(Formalde-fresh 20％,Fisher Scientific,Fair Lawn,NJ)来制备新鲜的5％福尔马林溶液。在福尔马林注射前30分钟给与研究化合物。
计算机记录由电磁场引起的每分钟的退缩情况、阶段I的总退缩情况(急性阶段＝前8分钟)及阶段II的总退缩情况(强直阶段＝20-40分钟之间的时间)。参见Yaksh TL,Ozaki G.McCumber D.Rathbun M.Svensson C.Malkmus S.Yaksh MC.An automated flinch detecting system for use in the formalinnociceptive bioassay.J Appl Physiol.,2001；90:2386-402。如图1所示，使用纯合子(-/-)雌性小鼠(n＝16)、野生型雌性小鼠(n＝15)、纯合子(-/-)雄性小鼠(n＝9)及野生型雄性小鼠(n＝18)获得阶段1及阶段2的数据。在所有群组中且在两个阶段中，AAK1纯合子(-/-)小鼠显示出所记录的缩爪现象显著少于其野生型(+/+)同窝出生者。
AAK1基因剔除小鼠的研究表明，如使用上述福尔马林爪测试所测量，破坏AAK1基因影响疼痛应答。使用相同测试证实给与AAK1抑制剂也可影响疼痛应答。
在此分析中以不同剂量测试本发明化合物。使用加巴喷丁及普瑞巴林作为阳性对照。结果示于下表2中，其中认为200mg/kg加巴喷丁的作用为100％应答，其它化合物的应答％是相对于剂量为200mg/kg的加巴喷丁，“sc”是指皮下给药；“po”是指口服给药。
表2

Claims (12)

1.式(I)化合物或其药用盐：
其中：
R1选自氢、C2-C4烯基、C1-C3烷氧基、C1-C3烷氧基C1-C3烷基、C1-C3烷基、C1-C3烷基氨基、芳基C1-C3烷基、C3-C6环烷基、C3-C6环烷基C1-C3烷基、C1-C3卤代烷基和C1-C3羟基烷基；
R2选自氢、C1-C3烷氧基、C1-C3烷氧基羰基氨基、C1-C3烷基、C1-C3烷基氨基、C1-C3烷基羰基氨基、氨基、芳基氨基、芳基羰基氨基、C3-C6环烷基氨基、C3-C6环烷基羰基氨基、C3-C6环烷基氧基、卤素、C1-C3卤代烷氧基、C1-C3卤代烷基、C2-C3卤代烷基氨基、C2-C3卤代烷基羰基氨基、羟基和苯基C1-C3烷基氨基，其中所述苯基任选地取代有C1-C3烷氧基；
R3和R4独立地选自氢、C1-C4烷氧基、C1-C3烷氧基C1-C3烷基、C1-C3烷氧基羰基、C1-C4烷基、C1-C3烷基磺酰基、氨基羰基、氰基、C3-C6环烷基、二(C1-C3烷基)氨基羰基、卤素、C1-C3卤代烷氧基、C1-C3卤代烷基、杂芳基、羟基、C1-C3羟基烷基和任选地取代有卤素的苯基；
R5为C1-C3烷基-Y或C2-C8烷基，其中所述C2-C8烷基任选地取代有一个、两个、三个或四个独立地选自以下的基团：C1-C3烷氧基、C1-C3烷基氨基、C1-C3烷氧基C2-C3烷基氨基、氨基、芳基、二(C1-C3烷基)氨基、卤素、C1-C3卤代烷基氨基、C1-C3卤代烷基羰基氨基、羟基、-NRxRy和C3-C8环烷基，其中所述环烷基还任选地取代有一个、两个或三个独立地选自以下的基团：C1-C3烷氧基、C1-C3烷基、C1-C3烷基氨基、C1-C3烷氧基C2-C3烷基氨基、氨基、芳基、芳基C1-C3烷基、卤素、C1-C3卤代烷基、C1-C3卤代烷基氨基和羟基；
Rx和Ry与它们所连接的氮原子一起形成三至六元环；且
Y选自
其中n为0、1、2或3；
每个R6独立地选自氢、C1-C6烷基、芳基、芳基C1-C3烷基、C3-C6环烷基、卤素和C1-C3卤代烷基；
每个R7独立地选自氢、C1-C3烷氧基和羟基；且
R8选自氢、C1-C6烷基、C3-C6环烷基和C1-C6烷基羰基。
2.权利要求1的化合物，其中R5为C2-C8烷基，其中所述C2-C8烷基任选地取代有一个、两个、三个或四个独立地选自以下的基团：C1-C3烷氧基、氨基、C1-C3烷基氨基、二(C1-C3烷基)氨基、卤素和C3-C8环烷基；或R5为C1-C3烷基-Y，其中Y为其中R6、R7和R8为氢。
3.权利要求2的化合物或其药用盐，其中R5为C2-C8烷基，其任选地取代有一个、两个、三个或四个独立地选自以下的基团：氨基和卤素。
4.权利要求1的化合物或其药用盐，其中：
R1选自氢、C2-C4烯基、C1-C3烷氧基C1-C3烷基、C1-C3烷基、芳基C1-C3烷基、C3-C6环烷基C1-C3烷基、C1-C3卤代烷基和C1-C3羟基烷基；
R2选自氢、C1-C3烷氧基、C1-C3烷基、C1-C3烷基羰基氨基、氨基、卤素、C1-C3卤代烷基和苯基C1-C3烷基氨基，其中所述苯基任选地取代有C1-C3烷氧基；
R3和R4独立地选自氢、C1-C4烷氧基、C1-C3烷氧基C1-C3烷基、C1-C3烷氧基羰基、C1-C4烷基、C1-C3烷基磺酰基、氨基羰基、氰基、C3-C6环烷基、二(C1-C3烷基)氨基羰基、卤素、C1-C3卤代烷氧基、C1-C3卤代烷基、杂芳基、羟基、C1-C3羟基烷基和任选地取代有卤素的苯基；
R5为C1-C3烷基-Y或C2-C8烷基，其中所述C2-C8烷基任选地取代有一个、两个、三个或四个独立地选自以下的基团：C1-C3烷氧基、C1-C3烷基氨基、氨基、二(C1-C3烷基)氨基、卤素和C3-C8环烷基；且其中Y选自
其中R6、R7和R8为氢。
5.式(II)化合物或其药用盐：
其中：
R1选自氢、C2-C4烯基、C1-C3烷氧基、C1-C3烷氧基C1-C3烷基、C1-C3烷基、C1-C3烷基氨基、芳基C1-C3烷基、C3-C6环烷基、C3-C6环烷基C1-C3烷基和C1-C3卤代烷基；
R2选自氢、C1-C3烷氧基、C1-C3烷氧基羰基氨基、C1-C3烷基、C1-C3烷基氨基、C1-C3烷基羰基氨基、氨基、芳基氨基、芳基羰基氨基、C3-C6环烷基氨基、C3-C6环烷基羰基氨基、C3-C6环烷基氧基、卤素、C1-C3卤代烷氧基、C1-C3卤代烷基、C2-C3卤代烷基氨基、C2-C3卤代烷基羰基氨基和羟基；
R3和R4独立地选自氢、C1-C4烷基、氰基、C3-C6环烷基、卤素、C1-C3卤代烷基和羟基；
R5为C1-C3烷基-Y或C2-C8烷基，其中所述C2-C8烷基任选地取代有一个、两个或三个独立地选自以下的基团：C1-C3烷氧基、C1-C3烷基氨基、C1-C3烷氧基C2-C3烷基氨基、氨基、芳基、卤素、C1-C3卤代烷基氨基、C1-C3卤代烷基羰基氨基、羟基、-NRxRy和C3-C8环烷基，其中所述环烷基还任选地取代有一个、两个或三个独立地选自以下的基团：C1-C3烷氧基、C1-C3烷基、C1-C3烷基氨基、C1-C3烷氧基C2-C3烷基氨基、氨基、芳基、芳基C1-C3烷基、卤素、C1-C3卤代烷基、C1-C3卤代烷基氨基和羟基；
Rx和Ry与它们所连接的氮原子一起形成三至六元环；且
Y选自
其中n为0、1、2或3；
每个R6独立地选自氢、C1-C6烷基、芳基、芳基C1-C3烷基、C3-C6环烷基、卤素和C1-C3卤代烷基；
每个R7独立地选自氢、C1-C3烷氧基和羟基；且
R8选自氢、C1-C6烷基、C3-C6环烷基和C1-C6烷基羰基。
6.一种化合物或其药用盐，所述化合物选自：
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-9-溴-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-6,9-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-9-甲腈；
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-环丙基-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-9-羟基-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-6-异丙基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-6-烯丙基-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-7,9-二氯-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-6-苄基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-6-(2-甲氧基乙基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-6-(环丙基甲基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-氟-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
8-(2-氨基-5,5,5-三氟戊基氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-4-氨基-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-N-(8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-2-基)乙酰胺；
(R)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(R)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-(2-氨基-3-环丙基丙氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-(2-氨基-3-环丁基丙氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-(2-氨基-3-环丙基丙氧基)-9-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-(2-氨基-3-环丁基丙氧基)-9-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-(2-氨基-3-环丙基丙氧基)-4,6,9-三甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-(2-氨基-3-环丁基丙氧基)-4,6,9-三甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-(二氟甲基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(2,4-二甲基-1-((6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯；
8-((2-氨基-2,4-二甲基戊基)氧基)-7-氟-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
8-(((S)-2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-(1-羟基乙基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
8-((2-氨基-2,4-二甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
8-(((2S,3S)-3-氨基-5-甲基己-2-基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
8-((2-氨基-2,4-二甲基戊基)氧基)-9-甲氧基-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-(2-羟基丙-2-基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-乙基-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(R)-8-((2-氨基-2,4-二甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-((2-氨基-2,4-二甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-((2-(二甲基氨基)-4-甲基戊基)氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-((2-(二甲基氨基)-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
8-((2-氨基-2,4-二甲基戊基)氧基)-9-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-4-甲氧基-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-氯-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-6-(2-羟基乙基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-6-(2,2,2-三氟乙基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-9-乙基-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-9-异丙基-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-6-甲基-9-(噁唑-5-基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-9-溴-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-4-((4-甲氧基苄基)氨基)-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-(4-氟苯基)-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-4-氨基-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-9-氟-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-(2-氨基-3-异丙氧基丙氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-6-甲基-8-((4-甲基-2-(甲基氨基)戊基)氧基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-((2-氨基-4,4-二氟戊基)氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
8-((2-氨基-5,5,5-三氟戊基)氧基)-6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-9-甲腈；
6-甲基-8-(哌啶-2-基甲氧基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-(2,4-二甲基-1-((6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯；
(R)-(2,4-二甲基-1-((6-甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-8-基)氧基)戊-2-基)氨基甲酸叔丁酯；
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-4-(二氟甲基)-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-7-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-氯-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-4,6,9-三甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-9-甲腈；
(S)-4,6-二甲基-8-(4-甲基-2-(甲基氨基)戊基氧基)-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-9-甲腈；
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-2,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-2,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-氯-2,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-(2-氨基-3-甲氧基丙氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-9-氟-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-9-(羟基甲基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-4,6-二甲基-9-(噁唑-5-基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
8-(2-氨基-5,5,5-三氟戊基氧基)-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-9-甲腈；
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-4,6-二甲基-9-(三氟甲基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-4,6-二甲基-9-(三氟甲基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-4,6-二甲基-9-(甲基磺酰基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(R)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-9-甲腈；
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-氯-6-(2-甲氧基乙基)-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-6-(2-甲氧基乙基)-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-7-氟-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-7-氟-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-4,6-二甲基-9-(噻唑-5-基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-9-甲酸甲酯；
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-1-氟-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基-9-(吡啶-2-基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-((2-氨基-5,5,5-三氟-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-甲氧基-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-(二氟甲氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-(2-氨基-4,4,4-三氟丁氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(R)-8-(2-氨基-4,4,4-三氟丁氧基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
8-(2-氨基-4,4,4-三氟丁氧基)-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-9-甲酰胺；
(S)-4,6-二甲基-8-(4-甲基-2-(甲基氨基)戊基氧基)苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-N,N,4,6-四甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-9-甲酰胺；
8-(2-氨基-2,4-二甲基戊基氧基)-1-氟-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-1-甲氧基-6-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-7-甲氧基-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-9-溴-7-氟-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-9-氟-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
8-(2-氨基-2,4-二甲基戊基氧基)-9-氟-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-9-氯-7-氟-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-(2-氨基-4-甲基戊基氧基)-9-(甲氧基甲基)-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
8-(2-氨基-2,4-二甲基戊基氧基)-7-氟-4-甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮；
(S)-8-((2-氨基-5,5-二氟戊-4-烯-1-基)氧基)-4,6-二甲基-5-氧代-5,6-二氢苯并[c][2,7]二氮杂萘-9-甲腈；和
(S)-8-((2-氨基-4-甲基戊基)氧基)-9-氯-7-氟-4,6-二甲基苯并[c][2,7]二氮杂萘-5(6H)-酮。
7.一种组合物，其包含药用量的权利要求1的化合物或其药用盐及药用载体。
8.抑制连接蛋白相关激酶1(AAK1)活性的方法，其包括使AAK1与权利要求1的化合物或其药用盐接触。
9.治疗或处置由AAK1活性介导的疾病或病症的方法，所述方法包括向有此需要的患者给予治疗有效量的权利要求1的化合物或其药用盐。
10.权利要求9的方法，其中所述疾病或病症选自阿尔茨海默病、双相型精神障碍、疼痛、帕金森病和精神分裂症。
11.权利要求10的方法，其中所述疼痛为神经病理性疼痛。
12.权利要求11的方法，其中所述神经病理性疼痛为纤维肌痛或外周神经病变。
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