TW201348260A - 抗ｐｃｓｋ９抗體及其用途 - Google Patents

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Benjamin H Dutzar
Ethan Wayne Ojala
Brian Robert Kovacevich
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Jens Billgren
Erica Ann Stewart
Corinne C Akatsuka
Patricia Dianne Mcneill
Danielle Marie Mitchell
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Abstract

本發明係有關對PCSK9具有結合特異性之抗體及其片段。本發明之另一實施例係關於包含本文所述之VH、VL及CDR多肽之序列的本文所述之抗體及其結合片段、及編碼其之聚核苷酸。本發明亦涵蓋抗PCSK9抗體及其結合片段結合於一或多個功能性或可偵測部分的結合物。本發明亦涵蓋製備該等抗PCSK9抗體及其結合片段之方法。本發明之實施例亦係關於抗PCSK9抗體及其結合片段用於診斷、評估及治療與PCSK9相關之疾病及病症的用途。

Description

抗PCSK9抗體及其用途 【相關申請案揭露內容】
本申請案主張2012年6月1日申請之美國臨時申請案第61/654,481號及2012年5月8日申請之美國臨時申請案第61/644,065號之權益，其各自據此以全文引用的方式併入本文中。
本申請案含有已經由EFS網以ASCII格式提交且據此以全文引用的方式併入本文中之序列表。2013年3月10日創建之該ASCII複本名為67858o791000.txt且大小為621,210位元組。
本發明係關於特異性結合人類前蛋白轉化酶枯草桿菌蛋白酶(Subtilisin)樣/克欣蛋白酶(Kexin)9型(下文稱為「PCSK9」)之新穎抗體及抗體片段及含有其之組合物。此外，本發明係關於編碼該等抗體及抗體片段之核酸及其在所要宿主細胞中表現該等抗體及抗體片段之用途。此外，本發明係關於此等抗體及抗體片段之治療及診斷用途。
更特定言之，本發明提供對PCSK9具有特異性之兔抗體及源於其之人類化及嵌合抗體以及對PCSK9具有特異性之抗體片段，其包括例如Fab'、F(ab')2 、Fv、scFv片段、SMIP(小分子免疫醫藥)、駱駝抗體、奈米抗體、單價抗體(諸如MetMab樣抗體)及IgNAR。
此外，本發明提供編碼主題抗PCSK9抗體且導致主題抗PCSK9抗體表現之核酸及含有其之宿主細胞，該等抗PCSK9抗體亦即兔抗體及抗體片段及其修飾形式，包括例如源於其之人類化及嵌合抗體以及抗體片段，其包括例如Fab'、F(ab')2 、Fv、scFv片段、SMIP(小分子免疫醫藥)、駱駝抗體、奈米抗體、單價抗體(諸如MetMab樣抗體)及IgNAR。
此外，本發明係關於用於製造本發明抗PCSK9抗體之表現系統，包括酵母、真菌、哺乳動物及適用於製造抗體及抗體片段之其他 細胞。
此外，本發明係關於特異性結合人類PCSK9之新穎抗體及抗體片段，其與本文示範之任何抗PCSK9抗體及抗體片段競爭及/或特異性結合PCSK9上之與本文示範之任何抗PCSK9抗體及抗體片段相同或重疊之抗原決定基。
本發明更係關於主題抗PCSK9抗體及抗體片段單獨或與其他活性藥劑或藥物聯合阻斷、抑制或中和PCSK9之活體內用途。
本發明更係關於主題抗PCSK9抗體及抗體片段單獨或與其他活性藥劑或藥物聯合阻斷或抑制PCSK9與LDLR之相互作用之活體內用途。
本發明亦特別關於藉由投與主題抗PCSK9抗體及抗體片段來治療或預防膽固醇或脂質體內恆定之病症及與其相關之病症的方法，該等病症包括例如高膽固醇血症、高脂血症、高三酸甘油酯血症、豆固醇血症(sitosterolemia)、動脈粥樣硬化、動脈硬化、冠心病、代謝症候群、急性冠脈症候群、黃瘤(xanthoma)、高血壓、絞痛症、肥胖症、糖尿病及血管發炎，其中該等主題抗體及抗體片段可單獨或與其他活性藥劑聯合使用。
本發明更特別關於藉由單獨或與其他活性藥劑組合投與該等抗體或其片段來預防或治療與PCSK9相關之疾病及病症之方法，該等疾病及病症為例如與PCSK9含量增加或降低及/或PCSK9基因中影響PCSK9蛋白質表現、一級序列及/或功能之突變相關之疾病。
本發明更提供單獨或與其他活性藥劑聯合使用主題抗體及抗體片段來改良與心臟病風險增加相關之血液膽固醇指標之方法。此等指標包括(但不限於)高總膽固醇、高LDL、高總膽固醇與HDL比率及高LDL-C與HDL比率。
本發明更提供治療或預防任何以下病狀或與其相關之併發症之方法，該等病狀或與其相關之併發症諸如高膽固醇血症、心臟病、代謝症候群、糖尿病、冠心病、中風、心血管疾病、阿茲海默氏病(Alzheimer’s disease)及通常可例如藉由總血清膽固醇升高、LDL升高、三 酸甘油酯升高、VLDL升高及/或低HDL顯現之血脂異常。可單獨或與一或多種其他藥劑組合使用本發明之抗體或抗體片段治療之原發性及繼發性血脂異常的一些非限制性實例包括代謝症候群、糖尿病、家族性組合高脂血症、家族性高三酸甘油酯血症、家族性高膽固醇血症，包括異型接合高膽固醇血症、同型接合高膽固醇血症、家族性缺陷脂蛋白元(apoplipoprotein)B-100；多基因高膽固醇血症；殘粒移除疾病(remnant removal disease)、肝脂肪酶缺乏症；繼發於以下任一者之血脂異常：膳食不慎重、甲狀腺機能減退、藥物(包括雌激素及孕酮療法、β-阻斷劑及噻嗪化物利尿劑)；腎病症候群、慢性腎衰竭、庫興氏症候群(Cushing's syndrome)、原發性膽汁性硬化、肝醣儲積症、肝細胞瘤、膽汁鬱積、肢端肥大症、胰島素瘤、單一性生長激素缺乏症及酒精誘發性高三酸甘油酯血症。
此外，本發明之抗體或抗體片段亦可適用於預防或治療動脈粥樣硬化疾病，諸如冠心病、冠狀動脈疾病、周邊動脈疾病、中風(缺血性及出血性)、心絞痛或腦血管疾病及急性冠脈症候群、心肌梗塞。在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段適用於降低以下之風險：非致命性心臟病發作、致命性及非致命性中風、某些類型之心臟手術、因心臟衰竭之住院、心臟病患者之胸痛、及/或由已有心臟病引起之心血管事件，該已有心臟病諸如先前心臟病發作、先前心臟手術及/或伴有動脈阻塞跡象之胸痛。在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段及方法可用於降低復發性心血管事件之風險。
本發明亦特別關於主題抗PCSK9抗體及抗體片段與通常用於治療上述治療適應症或病狀之其他藥物組合用於任何上述治療適應症或病狀之用途，其中抗體及其他藥物或藥劑可共投與或分開投與。可與主題抗體或抗體片段共投與或用於相同治療方案中之藥物之非限制性實例包括例如士他汀(statin)、ACE抑制劑、血管緊張素(Angiotensin)II受體阻斷劑(ARB)、抗心律不整劑、抗血小板藥物、阿斯匹靈(aspirin)、β阻斷劑、胺碘達隆(amiodarone)、地高辛(digoxin)、阿斯匹靈、抗凝劑、地高辛、利尿劑、心臟衰竭藥物、血管舒張劑、血液稀釋劑、其他抗膽固醇藥物(諸如 消膽胺(holestyramine)(考來烯胺(Questran))、吉非羅齊(gemfibrozil)(諾衡(Lopid)、吉考(Gemcor))、歐妙考(Omacor)及泛雙硫醇(pantethine))、其他抗高血壓藥、抗致糖尿藥物(諸如α-葡萄糖苷酶抑制劑、雙胍(Biguanide)、二肽基肽酶-4抑制劑、胰島素療法、氯茴苯酸(Meglitinide)、磺醯脲及噻唑啶二酮)及用於治療其中所治療個體可能具有高膽固醇之病狀之其他藥物。
本發明更係關於含有主題抗PCSK9抗體或抗體片段之組合物，尤其適於活體內投與之組合物，例如皮下、靜脈內、皮內、鼻內、經直腸、經陰道、鞘內、經口及其他可投與劑型。
本發明更係關於含有主題抗PCSK9抗體或抗體片段之組合物，尤其適於活體內投與之含有另一活性藥劑之組合物，例如皮下、靜脈內、皮內、鼻內、經直腸、經陰道、鞘內、經口及其他可投與劑型，該另一活性藥劑諸如士他汀、ACE抑制劑、血管緊張素II受體阻斷劑(ARB)、抗心律不整劑、抗血小板藥物、阿斯匹靈、β阻斷劑、胺碘達隆、地高辛、阿斯匹靈、抗凝劑、地高辛、利尿劑、心臟衰竭藥物、血管舒張劑、血液稀釋劑、其他抗膽固醇藥物(諸如消膽胺(考來烯胺)、吉非羅齊(諾衡、吉考)、歐妙考及泛雙硫醇)、其他抗高血壓藥、抗致糖尿藥物(諸如α-葡萄糖苷酶抑制劑、雙胍、二肽基肽酶-4抑制劑、胰島素療法、氯茴苯酸、磺醯脲及噻唑啶二酮)及用於治療其中所治療個體可能具有高或異常脂質或膽固醇含量之病狀之其他藥物。
本發明更係關於含有主題抗PCSK9抗體或抗體片段之儲存穩定形式，例如凍乾劑、懸浮液及經緩衝或溫度穩定組合物。
本發明亦係關於在篩檢分析中使用特異性結合PCSK9之主題抗體及抗體片段來偵測及監測血清樣品中之PCSK9之含量的方法，其潛在地用於診斷與PCSK9相關之疾病及病症或鑒別投與特異性結合PCSK9之主題抗體及抗體片段可能具有治療或防治效果之個體，或監測旨在調節或中和PCSK9或阻斷膽固醇合成之治療，例如涉及投與一種主題抗PCSK9抗體或抗體片段之治療之效果。
前蛋白轉化酶枯草桿菌蛋白酶克欣蛋白酶9型(PCSK9)為 一種參與調控低密度脂蛋白受體(LDLR)蛋白質之含量之絲胺酸蛋白酶(Horton等人，32(2)Trends Biochem.Sci. 71-77(2007)；Seidah及Prat,85(7)J.Mol.Med. 685-96 2007)。活體外實驗已顯示向HepG2細胞中添加PCSK9會降低細胞表面LDLR之含量(Benjannet等人，279J.Bio.Chem. 48865-75(2004)；Lagace等人，116(11)J.Clin.Invest. 2995-3005(2006)；Maxwell等人，102(6)Proc.Nat.Acad.Sci. 2069-74(2005)；Park等人，279J.Biol.Chem. 50630-38(2004))。(儘管此蛋白質通常稱為PCSK9，但應注意此蛋白質及相應基因在專利及非專利文獻中亦已藉由包括PSEC0052、FH3、HCHOLA3、LDLCQ1、NARC-1、NARC1、PC9在內之其他名稱加以提及)。
小鼠實驗已顯示增加PCSK9蛋白質含量會降低肝中LDLR蛋白質之含量(Benjannet等人，279J.Bio.Chem. 48865-75(2004)；Lagace等人，116(11)J.Clin.Invest. 2995-3005(2006)；Maxwell等人，102(6)Proc.Nat'l Acad.Sci. 2069-74(2005)；Park等人，279J.Biol.Chem. 50630-38(2004))，而PCSK9基因剔除小鼠之肝中之LDLR含量增加(Rashid等人，102(15)Proc.Nat'l Acad.Sci. 5374-79(2005))。另外，已鑒別出導致血漿LDL-C含量增加或降低之各種人類PCSK9突變(Kotowski等人，78(3)Am.J.Hum.Genet. 410-22(2006)；Zhao等人，79(3)Am.J.Hum.Genet. 514-23(2006))。PCSK9已顯示直接與LDLR蛋白質相互作用，連同LDLR一起經受胞飲作用，且在整個內體路徑上與LDLR一起共免疫螢光(Lagace等人，116(11)J.Clin.Invest. 2995-3005(2006))。人類PCSK9中之若干突變在人類中引起功能獲得性作用，包括高膽固醇血症、LDL-C膽固醇含量增加及冠心病之風險增加。(Garnier,11(3)Am.J.Cardiovasc.Drugs 145-52(2011))。即使較罕見之人類PCSK9突變亦誘發功能喪失，從而使得LDL-C含量降低及冠心病風險降低88%。(同前)PCSK9經由EGF域與LDLR相互作用且複合物被內化。在內體中，較低pH值導致PCSK9與LDLR之間的親和力增加且複合物被靶向在溶酶體中降解(Horton等人，四月增刊，J.Lipid Res. S172-177(2009),Sci. 928-33(2003))。
若干條證據顯示PCSK9特定言之降低肝LDLR蛋白質之 量且因此損害肝自循環移除LDL膽固醇之能力。由於肝LDLR蛋白質顯著損失，而對LDLR mRNA含量無影響，因此腺病毒介導的PCSK9在小鼠肝中之過度表現導致循環LDL-C累積；Benjannet等人，2004 J.Biol.Chem.279：48865-48875；Maxwell及Breslow,2004 PNAS 101：7100-7105；Park等人，2004 J.Biol.Chem.279：50630-50638；及Lalanne等人，2005 J.Lipid Res.46：1312-1319。PCSK9過度表現對升高小鼠體內循環LDL-C含量之影響完全依賴於LDLR之表現，從而再次指示PCSK9對LDL-C之調控係經由下調LDLR蛋白質來介導。與此等研究結果一致，缺乏PCSK9或PCSK9 mRNA已藉由反義寡核苷酸抑制劑降低之小鼠具有較高肝LDLR蛋白質含量及較大清除循環LDL-C之能力；Rashid等人，2005 PNAS 102：5374-5379；及Graham等人，2007 J.Lipid Res.48(4)：763-767。此外，藉由siRNA降低培養人類肝細胞中之PCSK9含量亦導致較高LDLR蛋白質含量及攝取LDL-C之能力增加；Benjannet等人，2004 J.Biol.Chem.279：48865-48875；及Lalanne等人，2005 J Lipid Res.46：1312-1319。總之，此等資料指示PCSK9作用會藉由降低LDLR蛋白質含量來導致LDL-C增加。
基因PCSK9中之許多突變亦已確定與體染色體顯性高膽固醇血症(「ADH」)，一種特徵在於血漿中之低密度脂蛋白(「LDL」)粒子顯著升高(此可導致過早心血管衰竭)之遺傳代謝病症相關；參見Abifadel等人，2003 Nature Genetics 34：154-156；Timms等人，2004 Hum.Genet.114：349-353；Leren,2004 Clin.Genet.65：419-422。Abifadel等人(上文)後來公佈之關於S127R突變的研究報導攜帶該種突變之患者展現血漿中之總膽固醇及apoB100較高，此係歸因於(1)諸如低密度脂蛋白(「LDL」)、極低密度脂蛋白(「VLDL」)及中等密度脂蛋白(「IDL」)之含apoB100脂蛋白之過度產生，及(2)該等脂蛋白之清除或轉化之相關降低；Ouguerram等人，2004 Arterioscler.Thromb.Vasc.Biol.24：1448-1453。
PCSK9為絲胺酸蛋白酶之枯草桿菌蛋白酶(S8)家族中之前激素-前蛋白轉化酶(Seidah等人，100(3)Proc.Nat'l Acad. Sci. 928-33(2003))。人類具有9種可在S8A與S8B次家族之間劃分之前激素-前蛋白 轉化酶(Rawlings等人，34Nucleic Acids Research D270-72(2006))。弗林蛋白酶(Furin)、PC1/PC3、PC2、PACE4、PC4、PC5/PC6及PC7/PC8/LPC/SPC7被分類在次家族S8B中。來自小鼠弗林蛋白酶及PC1之不同域之晶體及NMR結構揭示枯草桿菌蛋白酶樣前域及催化域、及直接位於催化域C端方向之P域(Henrich等人，10(7)Nature Structural Bio. 520-26(2005)；Tangrea等人，320(4)J.Mol.Bio. 801-12(2002))。基於此次家族內之胺基酸序列相似性，預測所有7個成員皆具有類似結構(Henrich 等人，345(2)J.Mol.Bio. 211-27(2005))。SKI-1/S1P及PCSK9被分類在次家族S8A中。用此等蛋白質進行之序列比較亦表明存在枯草桿菌蛋白酶樣前域及催化域(Sakai等人，2(4)Mol.Cell 505-15(1998)；Seidah等人，100(3)Proc.Nat'l Acad.Sci. 928-33(2003)；Seidah等人，96(4)Proc.Nat'l Acad.Sci. 1321-26(1999))。在此等蛋白質中，位於催化域C端方向之胺基酸序列更可變且表明不存在P域。
前激素-前蛋白轉化酶表現為酶原，且其經由多步驟過程變成熟。前域在此過程中之功能為雙重的。前域首先充當伴侶蛋白且為催化域之適當折疊所需(Ikemura等人，262 J.Biol.Chem.7859-64(1987))。一旦催化域折疊，即在前域與催化域之間發生自催化。在此初始裂解反應之後，前域仍然保持結合於催化域，此時，其接著充當催化活性之抑制劑(Fu等人，275 J.Biol.Chem.16871-78(2000))。當條件合適時，成熟以第二自催化事件在前域內之位點上繼續進行(Anderson等人，16 Nature 1508-18(1997))。在此第二裂解事件之後，發生前域與催化域解離，從而產生活性蛋白酶。
PCSK9酶原之自催化發生在Gln152與Ser153之間(VFAQ|SIP)(Naureckiene等人，420(1)Archives of Biochem.& Biophysics 55-67(2003))，且已顯示為其自細胞分泌所需(Seidah等人，100(3)Proc.Nat'l Acad.Sci. 928-33(2003))。尚未觀測到在PCSK9之前域內之位點上發生第二自催化事件。經純化PCSK9由可藉由非還原性SDS-PAGE分離之兩種物質組成；該兩種物質為17Kd之前域、及65Kd之催化域加C端域。尚未分離出不具有抑制性前域之PCSK9，且PCSK9之催化活性之量測結果 可變(Naureckiene等人，420(1)Archives of Biochem.& Biophysics 55-67(2003)；Seidah等人，100(3)Proc.Nat'lAcad.Sci. 928-33(2003))。
因此，存在實質性證據指示PCSK9在LDL之調控中起作用；PCSK9之表現或上調與血漿LDL膽固醇含量增加相關；PCSK9表現之相應抑制或缺乏與LDL膽固醇血漿含量降低相關；且LDL膽固醇含量降低與PCSK9之序列變化相關；已發現此會賦予針對冠心病之保護；Cohen,2006 N.Engl.J.Med.354：1264-1272。
在臨床試驗中，已發現LDL膽固醇含量降低直接與冠脈事件之等級相關；Law等人，2003 BMJ 326：1423-1427。此外，發現血漿LDL膽固醇含量之適度終身降低與冠脈事件發生率之實質性降低相關；Cohen等人(上文)。即使在具有較高非脂質相關性心血管風險因素盛行率之群體中，情況亦是如此；上文。因此，自對LDL膽固醇含量之管理控制會獲得巨大益處。
基於此，鑒別可用於調節膽固醇含量且阻斷或抑制或中和PCSK9之活性之其他分子將具有巨大益處。本發明藉由提供新穎PCSK9拮抗劑來推進此等益處，該等拮抗劑係用於阻斷、抑制或中和一或多種PCSK9活性及/或阻斷PCSK9與LDLR之相互作用及/或治療本文鑒別之治療病狀，尤其涉及高或異常脂質或膽固醇含量或與高或異常脂質或膽固醇含量相關者。
本發明提供特異性結合PCSK9之新穎抗體及抗體片段、以及與此等抗體或抗體片段競爭或特異性結合相同或重疊抗原決定基之抗體、或含有本文示範之新穎抗體及抗體片段之任何或全部CDR的抗體。此等抗體及抗體片段可用於活體內阻斷、抑制或中和血清PCSK9之活體內作用，且在一些實施例中特異性抑制或阻斷PCSK9/LDLR結合相互作用且藉此抑制或中和與此結合相互作用相關之一種或全部生物作用。
特定言之，本發明提供特異性結合人類PCSK9之新穎抗體及抗體片段及含有其之組合物。更特定言之，本發明提供兔抗PCSK9抗體及抗體片段以及源於其之人類化及嵌合抗體及抗體片段，諸如Fab、 Fab'、F(ab')2 、Fv、scFv片段、SMIP(小分子免疫醫藥)、駱駝抗體、奈米抗體、單價抗體(諸如MetMab樣抗體)及IgNAR。
本發明更描述主題抗PCSK9抗體及抗體片段用於治療其中阻斷、抑制或中和PCSK9之活體內作用或阻斷或抑制PCSK9與LDLR之相互作用在治療上合乎需要之任何個體的用途，其中該等主題抗PCSK9抗體或抗體片段可單獨或與其他活性藥劑或藥物聯合使用。
本發明亦描述藉由投與特異性結合PCSK9之主題抗PCSK9抗體及抗體片段來治療或預防膽固醇或脂質體內恆定之病症及可能與其相關之病症的方法，該等病症包括例如高膽固醇血症、高脂血症、高三酸甘油酯血症、豆固醇血症、動脈粥樣硬化、動脈硬化、冠心病、代謝症候群、急性冠脈症候群、血管發炎、糖尿病、肥胖症、絞痛症、高血壓及黃瘤，其中該等主題抗體及抗體片段可單獨或與其他活性藥劑聯合使用。
本發明更提供藉由單獨或與其他活性藥劑組合投與該等抗體或其片段來預防或治療與PCSK9相關之疾病及病症之方法，該等疾病及病症為例如與PCSK9含量增加或降低及/或PCSK9基因中影響PCSK9蛋白質表現、一級序列及/或功能之突變相關之疾病。
本發明廣泛涵蓋主題抗PCSK9抗體及片段用於治療患有其中調節脂質或膽固醇含量在臨床上合乎需要之病狀或處於發展其中調節脂質或膽固醇含量在臨床上合乎需要之病狀之風險中，或其中個體患有常與高脂質或膽固醇相關之病狀的任何個體之用途。
本發明亦特別提供藉由單獨或與其他活性藥劑聯合投與主題抗PCSK9抗體及抗體片段來治療或預防膽固醇或脂質體內恆定之病症及與其相關之病症及併發症的方法，該等病症及併發症為例如高膽固醇血症、高脂血症、高三酸甘油酯血症、豆固醇血症、動脈粥樣硬化、動脈硬化、冠心病、代謝症候群、急性冠脈症候群、血管發炎、黃瘤、高血壓、絞痛症及相關病狀。
本發明更提供單獨或與其他活性藥劑聯合使用主題抗體及抗體片段來改良與心臟病風險增加相關之血液膽固醇指標之方法。此等 指標包括(但不限於)高總膽固醇、高LDL、高總膽固醇與HDL比率及高LDL-C與HDL比率。
本發明亦特別關於主題抗PCSK9抗體及抗體片段與通常用於治療上述治療適應症或病狀之其他藥物組合用於任何上述治療適應症或病狀之用途，其中抗體及其他藥物或藥劑可共投與或分開投與。藥物之實例包括可與主題抗PCSK9抗體或抗體片段或在相同治療方案中共投與者，包括例如士他汀、ACE抑制劑、血管緊張素II受體阻斷劑(ARB)、抗心律不整劑、抗血小板藥物、阿斯匹靈、β阻斷劑、胺碘達隆、地高辛、阿斯匹靈、抗凝劑、地高辛、利尿劑、心臟衰竭藥物、血管舒張劑、血液稀釋劑、其他抗膽固醇藥物(諸如消膽胺(考來烯胺)、吉非羅齊(諾衡、吉考)、歐妙考及泛雙硫醇)、其他抗高血壓藥、抗致糖尿藥物(諸如α-葡萄糖苷酶抑制劑、雙胍、二肽基肽酶-4抑制劑、胰島素療法、氯茴苯酸、磺醯脲及噻唑啶二酮)及用於治療其中所治療個體可能具有高膽固醇或異常脂質含量或脂質代謝之病狀之其他藥物。
本發明更關於含有主題抗PCSK9抗體或抗體片段之組合物，尤其適於活體內投與之組合物，例如皮下、靜脈內、皮內、鼻內、鞘內、經陰道、經直腸及其他可注射或局部可投與劑型。
本發明更提供治療或預防任何以下病狀或與其相關之併發症之方法，該等病狀或與其相關之併發症諸如高膽固醇血症、心臟病、代謝症候群、糖尿病、冠心病、中風、心血管疾病、阿茲海默氏病及通常可例如藉由總血清膽固醇升高、LDL升高、三酸甘油酯升高、VLDL升高及/或低HDL顯現之血脂異常。可單獨或與一或多種其他藥劑組合使用本發明之抗體或抗體片段治療之原發性及繼發性血脂異常的一些非限制性實例包括代謝症候群、糖尿病、家族性組合高脂血症、家族性高三酸甘油酯血症、家族性高膽固醇血症，包括異型接合高膽固醇血症、同型接合高膽固醇血症、家族性缺陷脂蛋白元B-100；多基因高膽固醇血症；殘粒移除疾病、肝脂肪酶缺乏症；繼發於以下任一者之血脂異常：膳食不慎重、甲狀腺機能減退、藥物(包括雌激素及孕酮療法、β-阻斷劑及噻嗪化物利尿劑)；腎病症候群、慢性腎衰竭、庫興氏症候群、原發性膽汁性硬化、肝醣 儲積症、肝細胞瘤、膽汁鬱積、肢端肥大症、胰島素瘤、單一性生長激素缺乏症及酒精誘發性高三酸甘油酯血症。
此外，本發明更提供使用主題抗PCSK9抗體或抗體片段預防或治療動脈粥樣硬化疾病，諸如冠心病、冠狀動脈疾病、周邊動脈疾病、中風(缺血性及出血性)、心絞痛或腦血管疾病及急性冠脈症候群、心肌梗塞；降低以下之風險：非致命性心臟病發作、致命性及非致命性中風、某些類型之心臟手術、因心臟衰竭之住院、心臟病患者之胸痛、及/或由已有心臟病引起之心血管事件，該已有心臟病諸如先前心臟病發作、先前心臟手術及/或伴有動脈阻塞跡象之胸痛；及降低復發性心血管事件之風險的方法。
更特定言之，本發明提供含有至少一種主題抗PCSK9抗體或抗體片段之組合物，尤其適於活體內投與之組合物，例如皮下、靜脈內、皮內、鼻內、鞘內、經陰道、經直腸、經口及其他可注射或局部劑型，其視情況可含有另一活性藥劑，諸如士他汀、ACE抑制劑、血管緊張素II受體阻斷劑(ARB)、抗心律不整劑、抗血小板藥物、阿斯匹靈、β阻斷劑、胺碘達隆、地高辛、阿斯匹靈、抗凝劑、地高辛、利尿劑、心臟衰竭藥物、血管舒張劑、血液稀釋劑、其他抗膽固醇藥物(諸如消膽胺(考來烯胺)、吉非羅齊(諾衡、吉考)、歐妙考及泛雙硫醇)、其他抗高血壓藥、抗致糖尿藥物(諸如α-葡萄糖苷酶抑制劑、雙胍、二肽基肽酶-4抑制劑、胰島素療法、氯茴苯酸、磺醯脲及噻唑啶二酮)及用於治療其中所治療個體可能具有高膽固醇之病狀之其他藥物。本發明亦提供單獨或與另一活性藥劑聯合使用主題抗PCSK9抗體或抗體片段之新穎給藥方案，尤其皮下、經口及靜脈內給藥方案。
本發明更係關於含有主題抗PCSK9抗體或抗體片段之儲存穩定形式，例如含有主題抗PCSK9抗體或抗體片段之凍乾劑、懸浮液及緩衝或溫度穩定組合物。
本發明亦提供在篩檢分析中使用特異性結合PCSK9之主題抗體及抗體片段來偵測及監測血清樣品中之PCSK9之含量的方法，其潛在用於診斷與PCSK9相關之疾病及病症或鑒別投與特異性結合PCSK9 之主題抗體及抗體片段可具有治療或防治效果之個體，或監測旨在調節或中和PCSK9或阻斷膽固醇合成之治療，例如涉及投與一種主題或其他抗PCSK9抗體或抗體片段之治療之效果。
此外，本發明提供對PCSK9具有特定抗原決定基特異性之特定抗PCSK9抗體及其片段及含有其之診斷或醫藥組合物，且較佳為具有高親和力或親合力及/或其他所要功能性質之抗體或其片段。
此外，本發明係關於本文所述之抗體或與其競爭或具有相同或重疊抗原決定基特異性之抗體，較佳包含一種所示範抗PCSK9抗體或抗體片段之一個或全部CDR之抗體或抗體片段，或更佳包含一或多個與本文所述之任何VH、VL及CDR多肽具有至少80、90或95、96、97、98、99或100%一致性之可變或CDR序列之抗體的任何治療或診斷用途，且係關於編碼此等抗體及抗體片段之聚核苷酸及含有其之宿主細胞。本發明之一較佳實施例係有關能夠結合PCSK9且較佳抑制、阻斷或中和PCSK9之生物活性或阻斷或抑制PCSK9與LDLR之結合的嵌合或人類化抗體及其片段(諸如Fab或Fv或單價片段)。
在一些態樣中，本發明包含一種競爭結合PCSK9或與本發明之抗體或抗體片段結合PCSK9上之相同或重疊抗原決定基的經分離抗體或抗體片段。
在一些態樣中，本發明包含一種治療或預防患者之與血清膽固醇含量升高相關之病狀的方法，其包含向有需要之患者投與有效量之至少一種本發明之抗PCSK9抗體或抗體片段。
在一些態樣中，本發明包含一種抑制有需要之個體之PCSK9與LDLR之結合的方法，其包含投與有效量之至少一種本發明之抗PCSK9抗體或抗體片段。
在一些態樣中，本發明包含結合PCSK9之KD小於100nM的本發明之抗PCSK9抗體或抗體片段。
在一些態樣中，本發明包含一種治療或預防個體之與血清膽固醇含量升高相關之病狀的方法，該方法包含將有效量之至少一種本發明之抗PCSK9抗體或抗體片段與另一活性藥劑，例如降低膽固醇含量 或升高LDLR蛋白質之可用性之活性藥劑同時或依序投與有需要之個體。
在一些態樣中，本發明包含一種降低個體之血清膽固醇含量之方法，該方法包含向個體投與有效量之至少至少一種本發明之抗PCSK9抗體或抗體片段。
在一些態樣中，本發明包含一種降低個體之血清膽固醇含量之方法，該方法包含將有效量之至少一種本發明之抗PCSK9抗體或抗體片段與升高LDLR蛋白質之可用性或降低血清膽固醇之另一藥劑同時或依序投與個體。
在一些態樣中，本發明包含一種增加個體之LDLR蛋白質含量之方法，該方法包含向個體投與有效量之至少一種本發明之抗PCSK9抗體或抗體片段。
在一些態樣中，本發明包含一種增加個體之LDLR蛋白質含量之方法，該方法包含將有效量之至少一種根據本發明之至少一種抗PCSK9抗體或抗體片段與升高LDLR蛋白質之可用性之藥劑或降低血清膽固醇之藥劑同時或依序投與個體。
在一些態樣中，本發明更提供藉由與其他藥劑組合投與至少一種根據本發明之至少一種抗PCSK9抗體或抗體片段來預防或治療與PCSK9相關之疾病及病症之方法，該等疾病及病症為例如與PCSK9含量增加或降低及/或PCSK9基因中影響PCSK9蛋白質表現、一級序列及/或功能之突變相關之疾病。
在其他態樣中，本發明提供使用主題抗PCSK9抗體及抗體片段來治療或預防膽固醇或脂質體內恆定之病症及與其相關之病症及併發症的方法，該等病症及併發症為例如高膽固醇血症、高脂血症、高三酸甘油酯血症、豆固醇血症、動脈粥樣硬化、動脈硬化、冠心病、代謝症候群、急性冠脈症候群、血管發炎、黃瘤及相關病狀。
在其他特定態樣中，本發明提供治療或預防膽固醇或脂質體內恆定之病症及與其相關之病症及併發症的方法，該等病症及併發症為例如高膽固醇血症、高脂血症、高三酸甘油酯血症、豆固醇血症、動脈粥樣硬化、動脈硬化、冠心病、代謝症候群、急性冠脈症候群、血管發 炎、黃瘤及諸如肥胖症、高血壓、糖尿病之其他病狀，其中個體用主題抗PCSK9抗體及抗體片段與用於治療此等病症之其他藥物之組合治療，該等其他藥物諸如士他汀、ACE抑制劑、血管緊張素II受體阻斷劑(ARB)、抗心律不整劑、抗血小板藥物、阿斯匹靈、β阻斷劑、胺碘達隆、地高辛、阿斯匹靈、抗凝劑、地高辛、利尿劑、心臟衰竭藥物、血管舒張劑、血液稀釋劑、其他抗膽固醇藥物(諸如消膽胺(考來烯胺)、吉非羅齊(諾衡、吉考)、歐妙考及泛雙硫醇)、其他抗高血壓藥、抗致糖尿藥物(諸如α-葡萄糖苷酶抑制劑、雙胍、二肽基肽酶-4抑制劑、胰島素療法、氯茴苯酸、磺醯脲及噻唑啶二酮)及用於治療其中所治療個體可能具有高膽固醇之病狀之其他藥物。
ACE抑制劑可與主題抗PCSK9抗體及抗體片段組合使用，其中該等部分可藉由相同或不同投藥手段共同或分開投與，其包括例如：開搏通(Capoten)(卡托普利(captopril))、泛利尿(Vasotec)(依那普利(enalapril))、普尼爾(Prinivil)、捷賜瑞(Zestril)(賴諾普利(lisinopril))、洛丁新(Lotensin)(貝那普利(benazepril))、蒙諾普利(Monopril)(福辛普利(fosinopril))、阿泰斯(Altace)(雷米普利(ramipril))、阿庫普利(Accupril)(喹那普利(quinapril))、阿森(Aceon)(培哚普利(perindopril))、瑪維克(群多普利(trandolapril))、尤瓦斯克(Univasc)(莫西普利(moexipril))。
ARB可與主題抗PCSK9抗體及抗體片段組合使用，其中該等部分可藉由相同或不同投藥手段共同或分開投與，其包括例如：科紮爾(Cozaar)(洛沙坦(losartan))、代厄文(Diovan)(纈沙坦(valsartan))、安博諾(Avapro)(伊貝沙坦(irbesartan))、阿塔坎德(Atacand)(坎地沙坦(candesartan))及美壓定(Micardis)(替米沙坦(telmisartan))。
抗心律不整劑可與主題抗PCSK9抗體及抗體片段組合使用，其包括例如：坦布考(Tambocor)(氟卡胺(flecainide))、普魯卡比(Procanbid)(普魯卡因胺(procainamide))、可達龍(Cordarone)(胺碘達隆)及貝塔派斯(Betapace)(索他洛爾(sotalol))。
可與主題抗PCSK9抗體及抗體片段組合使用之抗凝劑包括：組織纖維蛋白溶酶原活化劑(Tissue plasminogen activator，TPA)、替奈 替普酶(Tenecteplase)、阿替普酶(Alteplase)、尿激酶(Urokinase)、瑞替普酶(Reteplase)及鏈激酶(Streptokinase)，其中該等部分可藉由相同或不同投藥手段共同或分開投與。
β-阻斷劑可與主題抗PCSK9抗體及抗體片段組合使用，其中該等部分可藉由相同或不同投藥手段共同或分開投與，其包括例如：塞克洛爾(Sectral)(醋丁洛爾(acebutolol))、澤貝塔(Zebeta)(比索洛爾(bisoprolol))、普萊洛克(Brevibloc)(艾司洛爾(esmolol))、心得爾(Inderal)(普萘洛爾(propranolol))、天諾敏(Tenormin)(阿替洛爾(atenolol))、樂莫丁(Normodyne)、特雷待特(Trandate)(拉貝洛爾(labetalol))、可里格(Coreg)(卡維洛爾(carvedilol))、諾普色(Lopressor)及托普洛爾-XL(Toprol-XL)(美托洛爾(metoprolol))。
可與主題抗PCSK9抗體及抗體片段組合使用之鈣通道阻斷劑包括例如：諾和克(Norvasc)(胺氯地平(amlodipine))、波依定(Plendil)(非洛地平(felodipine))、卡地贊姆(Cardizem)、卡地贊姆CD、卡地贊姆SR、代樂卡XR(Dilacor XR)、地爾替XT(Diltia XT)、地爾紮克(Tiazac)(地爾硫卓(diltiazem))、卡蘭(Calan)、卡蘭SR、科維拉-HS(Covera-HS)、異搏定(Isoptin)、異搏定SR、維爾寧(Verelan)、維爾寧PM(維拉帕米(verapamil))、艾達立特(Adalat)、艾達立特CC、普羅卡地(Procardia)、普羅卡地XL(硝苯地平(nifedipine))、卡丁(Cardene)、卡丁SR(尼卡地平(nicardipine))、蘇拉(Sular)(尼索地平(nisoldipine))、瓦斯科(Vascor)(苄普地爾(bepridil))及為士他汀膽固醇藥物與胺氯地平之組合之卡度特(Caduet)，其中該等部分可藉由相同或不同投藥手段共同或分開投與。
可與主題抗PCSK9抗體及抗體片段組合使用之利尿劑包括例如速尿(Lasix)(呋塞米(furosemide))、普麥西(Bumex)(布美他尼(bumetanide))、迪馬代克(Demadex)(托塞米(torsemide))、利尿得(Esidrix)(氫氯噻嗪(hydrochlorothiazide))、紮羅寧(Zaroxolyn)(美托拉宗(metolazone))及安體舒通(Aldactone)(螺內酯(spironolactone))，其中該等部分可藉由相同或不同投藥手段共同或分開投與。
可與主題抗PCSK9抗體及抗體片段組合使用之心臟衰竭 藥物包括例如獨步催(Dobutrex)(多巴酚丁胺(dobutamine))及普利瑪科(Primacor)(米力農(milrinone))，其中該等部分可藉由相同或不同投藥手段共同或分開投與。
可與主題抗PCSK9抗體及抗體片段組合使用之血管舒張劑包括例如代拉曲特-SR(Dilatrate-SR)、艾叟-彼得(Iso-Bid)、艾叟雷特(Isonate)、艾索彼得(Isorbid)、艾索地爾(Isordil)、艾叟曲特(Isotrate)、索比曲特(Sorbitrate)(二硝酸異山梨醇酯(isosorbide dinitrate))、依姆多(IMDUR)(單硝酸異山梨醇酯(isorbide mononitrate))及比地爾(BiDil)(含二硝酸異山梨醇酯之聯胺肼(hydralazine))，其中該等部分可藉由相同或不同投藥手段共同或分開投與。
可與主題抗PCSK9抗體及抗體片段組合使用之血液稀釋劑包括例如華法林(Warfarin)(庫馬定(coumadin))、肝素(Heparin)、洛文諾斯(Lovenox)及弗拉格敏(Fragmin)，其中該等部分可藉由相同或不同投藥手段共同或分開投與。
在其他態樣中，本發明更提供與任何上述或其他活性劑聯合使用主題抗體及抗體片段來改良與心臟病風險增加相關之血液膽固醇指標之方法，其中該等部分可藉由相同或不同投藥手段共同或分開投與。此等指標包括(但不限於)高總膽固醇、高LDL-C、高總膽固醇與HDL比率及高LDL-C與HDL比率。
在一些態樣中，本發明包含一種含有本發明之抗體蛋白質或片段及另一活性劑之醫藥組合物，該活性劑為例如一種上文鑒別之活性劑，例如升高LDLR蛋白質含量之可用性之藥劑或阻斷或抑制膽固醇合成之藥劑。在一些實施例中，阻斷膽固醇合成之藥劑包含士他汀。在一些情況下，士他汀可潛在地進一步升高LDLR含量。在一些實施例中，士他汀係選自由阿托伐他汀(atorvastatin)、西立伐他汀(cerivastatin)、氟伐他汀(fluvastatin)、洛伐他汀(lovastatin)、美伐他汀(mevastatin)、匹伐他汀(pitavastatin)、普伐他汀(pravastatin)、羅素他汀(rosuvastatin)、辛伐他汀(simvastatin)及其某一組合組成之群。在一些實施例中，士他汀進一步與菸酸(niacin)、吸收抑制劑(依折麥布(ezetimibe))、脂質調節劑或其組合進行組 合。在一些實施例中，升高LDLR蛋白質含量之可用性之藥劑包含細胞激素(諸如制瘤素M(oncostatin M))或激素(如雌激素)及/或草本部分(諸如小蘗鹼(berberine))。
在一些態樣中，本發明包含一種含有本發明之抗體蛋白質或片段或其變異體及增加高密度脂蛋白(HDL)及/或降低三酸甘油酯含量之藥劑的醫藥組合物。在一些實施例中，增加高密度脂蛋白(HDL)及/或降低三酸甘油酯含量之藥劑包含貝特(fibrate)。在一些實施例中，貝特係選自由苯紮貝特(bezafibrate)、環丙貝特(ciprofibrate)、氯貝特(clofibrate)、吉非羅齊(gemfibrozil)、非諾貝特(fenofibrate)及其某一組合組成之群。
在一些態樣中，本發明包含一種包含本發明之抗體蛋白質或片段及膽汁酸螯合劑之醫藥組合物。在一些實施例中，膽汁螯合劑係選自由消膽胺(cholestyramine)、考來維侖(colesevelam)、考來替泊(colestipol)及其某一組合組成之群。
在一些態樣中，本發明包含一種包含本發明之抗體或抗體片段及降低膽固醇在腸中之吸收之藥劑的醫藥組合物。在一些實施例中，降低膽固醇在腸中之吸收之藥劑為依折麥布。
在一些態樣中，本發明包含一種包含本發明之抗體或片段及降低膽固醇含量之藥劑的醫藥組合物。在一些實施例中，降低膽固醇含量之藥劑係選自由某些抗精神病藥劑、某些HIV蛋白酶抑制劑、膳食要素(諸如高果糖、蔗糖、膽固醇或某些脂肪酸)及某些針對RXR、RAR、LXR、FXR之核受體促效劑及拮抗劑組成之群。
在一些態樣中，本發明包含一種包含本發明之抗體或片段及PPARγ促效劑、PPARα/γ促效劑、角鯊烯(squalene)合成酶抑制劑、CETP抑制劑、抗高血壓藥、抗糖尿病藥劑(諸如磺醯脲、胰島素、GLP-1類似物、DDPIV抑制劑)、ApoB調節劑、MTP抑制劑、阻塞性動脈硬化治療劑或其組合的醫藥組合物。
在一些態樣中，本發明包含一種包含本發明之抗體或片段及增加HDL含量之藥劑的醫藥組合物。在一些實施例中，增加HDL含量之藥劑為亦稱為菸鹼酸(nicotinic acid)之菸酸。在一些實施例中，菸酸為 緩慢釋放調配物。
在一些態樣中，本發明包含一種包含本發明之抗體或片段及抑制肝三酸甘油酯產生及/或極低密度脂蛋白(VLDL)分泌之藥劑的醫藥組合物。在一些實施例中，抑制肝三酸甘油酯產生及/或極低密度脂蛋白(VLDL)分泌之藥劑為阿西莫司(acipimox)。
在一些態樣中，本發明包含一種包含本發明之抗體或片段及降低脂質在腸中之吸收之藥劑的醫藥組合物。在一些實施例中，降低脂質在腸中之吸收之藥劑係選自由奧利斯泰(orlistat)、利普司他汀(lipstatin)及其某一組合組成之群。
在一些態樣中，本發明包含一種包含本發明之抗體或片段及作為抗高血壓藥及/或治療絞痛症之藥劑的醫藥組合物。在一些實施例中，作為抗高血壓藥及/或治療絞痛症之藥劑為胺氯地平。
在一些態樣中，本發明包含一種包含本發明之抗體或片段及至少一種其他藥劑的醫藥組合物，其中該組合允許減輕至少一種其他藥劑之不合需要之副作用。在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段及至少一種其他藥劑係同時投與。在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段或其片段或變異體及至少一種其他藥劑不同時投與，其中本發明之抗體或抗體片段係在投與至少一種其他藥劑之前或之後投與。
在一些態樣中，本發明包含一種包含本發明之抗體或片段及至少一種用於治療與膽固醇異常相關之病狀或用於治療其中個體常具有高膽固醇之病狀之其他藥劑的醫藥組合物。舉例而言，本發明之抗體蛋白質或片段或其變異體可與其他藥物組合或共投與，該等藥物為諸如ACE抑制劑、血管緊張素II受體阻斷劑(ARB)、抗心律不整劑、抗血小板藥物、阿斯匹靈、β阻斷劑、胺碘達隆、地高辛、阿斯匹靈、抗凝劑、地高辛、利尿劑、心臟衰竭藥物、血管舒張劑、血液稀釋劑、其他抗膽固醇藥物(諸如消膽胺(考來烯胺)、吉非羅齊(諾衡、吉考)、歐妙考及泛雙硫醇)、其他抗高血壓藥、抗致糖尿藥物(諸如α-葡萄糖苷酶抑制劑、雙胍、二肽基肽酶-4抑制劑、胰島素療法、氯茴苯酸、磺醯脲及噻唑啶二酮)或用於治療其中所治療個體可能具有高膽固醇之病狀之其他藥物。此等藥物之實例 係在上文中鑒別。在一些實施例中，本發明之抗體或片段及至少一種其他藥劑不同時投與，其中本發明之抗體或抗體片段係在投與至少一種其他藥劑之前或之後投與。
在一些態樣中，本發明包含一種治療或預防患者之與血清膽固醇含量升高相關之病狀的方法，其包含向有需要之患者投與有效量之至少一種如本文揭露之本發明之經分離抗體或抗體片段。在一些實施例中，病狀為高膽固醇血症。
在一些態樣中，本發明之抗PCSK9抗體或片段結合PCSK9之KD小於約100nM。在一些實施例中，本發明之抗PCSK9抗體或片段結合PCSK9之KD在約10與約100nM之間。在一些實施例中，本發明之抗PCSK9抗體或片段結合PCSK9之KD小於約10nM。在一些實施例中，結合PCSK9之抗體或片段之KD在約1與約10nM之間。在一些實施例中，結合PCSK9之本發明之抗PCSK9抗體或片段的KD小於約1nM。在一些實施例中，本發明之抗PCSK9抗體或片段之KD在約0.1與約1nM之間。在一些實施例中，結合PCSK9之本發明之抗PCSK9抗體或片段的KD在約0.1與約0.5nM之間。在一些實施例中，本發明之抗PCSK9抗體或片段結合PCSK9之KD在約0.01與約0.1nM之間。在一些實施例中，本發明之抗PCSK9抗體或片段結合PCSK9之KD在約0.1與約10nM之間。在一些實施例中，本發明之抗PCSK9抗體或片段結合PCSK9之KD在0.120與約7.99nM之間。
在一些態樣中，本發明包含一種治療或預防個體之與血清膽固醇含量升高相關之病狀的方法，該方法包含將有效量之至少一種本發明之抗PCSK9抗體或片段與降低膽固醇且視情況進一步升高LDLR蛋白質之可用性之藥劑同時或依序投與有需要之個體。在一些實施例中，降低膽固醇且視情況升高LDLR蛋白質之可用性之藥劑包含士他汀。在一些實施例中，士他汀係選自由阿托伐他汀、西立伐他汀、氟伐他汀、洛伐他汀、美伐他汀、匹伐他汀、普伐他汀、羅素他汀、辛伐他汀及其某一組合組成之群。在一些實施例中，士他汀與菸酸、吸收抑制劑(依折麥布)、脂質調節劑或其組合進行組合。在一些實施例中，升高LDLR蛋白質含量之 可用性之藥劑包含某些細胞激素(如制瘤素M)、雌激素及/或某些草本成分(諸如小蘗鹼)。
在一些態樣中，本發明包含一種治療或預防個體之與血清膽固醇含量升高相關之病狀的方法，該方法包含將有效量之至少一種本發明之抗PCSK9抗體或片段與增加高密度脂蛋白(HDL)及/或降低三酸甘油酯含量之藥劑同時或依序投與有需要之個體。在一些實施例中，增加高密度脂蛋白(HDL)及/或降低三酸甘油酯含量之藥劑包含貝特。在一些實施例中，貝特係選自由苯紮貝特、環丙貝特、氯貝特、吉非羅齊、非諾貝特及其某一組合組成之群。
在一些態樣中，本發明包含一種治療或預防個體之與血清膽固醇含量升高相關之病狀的方法，該方法包含將有效量之至少一種本發明之抗PCSK9抗體或片段與膽汁酸螯合劑同時或依序投與有需要之個體。在一些實施例中，膽汁酸螯合劑係選自由消膽胺、考來維侖、考來替泊及其某一組合組成之群。
在一些態樣中，本發明包含一種治療或預防個體之與血清膽固醇含量升高相關之病狀的方法，該方法包含將有效量之至少一種本發明之經分離抗PCSK9抗體或片段與降低膽固醇在腸中之吸收之藥劑同時或依序投與有需要之個體。在一些實施例中，降低膽固醇在腸中之吸收之藥劑為依折麥布。
在一些態樣中，本發明包含一種治療或預防個體之與血清膽固醇含量升高相關之病狀的方法，該方法包含將有效量之至少一種本發明之抗PCSK9抗體或片段與降低膽固醇含量之藥劑同時或依序投與有需要之個體。在一些實施例中，降低膽固醇含量之藥劑係選自由某些抗精神病藥劑、某些HIV蛋白酶抑制劑、膳食要素(諸如高果糖、蔗糖、膽固醇或某些脂肪酸)及某些針對RXR、RAR、LXR、FXR之核受體促效劑及拮抗劑組成之群。
在一些態樣中，本發明包含一種治療或預防個體之與血清膽固醇含量升高相關之病狀的方法，該方法包含將有效量之至少一種本發明之抗PCSK9抗體或片段與增加HDL含量之藥劑同時或依序投與有需 要之個體。在一些實施例中，增加HDL含量之藥劑為亦稱為菸鹼酸之菸酸。在一些實施例中，菸酸為緩慢釋放調配物。
在一些態樣中，本發明包含一種治療或預防個體之與血清膽固醇含量升高相關之病狀的方法，該方法包含將有效量之至少一種本發明之抗PCSK9抗體或片段與抑制肝三酸甘油酯產生及/或極低密度脂蛋白(VLDL)分泌之藥劑同時或依序投與有需要之個體。在一些實施例中，抑制肝三酸甘油酯產生及/或極低密度脂蛋白(VLDL)分泌之藥劑為阿西莫司。
在一些態樣中，本發明包含一種治療或預防個體之與血清膽固醇含量升高相關之病狀的方法，該方法包含將有效量之至少一種本發明之抗PCSK9抗體或片段與降低脂質在腸中之吸收之藥劑同時或依序投與有需要之個體。在一些實施例中，降低脂質在腸中之吸收之藥劑係選自由奧利斯泰、利普司他汀及其某一組合組成之群。
在一些態樣中，本發明包含一種治療或預防個體之與血清膽固醇含量升高相關之病狀的方法，該方法包含將有效量之至少一種本發明之抗PCSK9抗體或片段與作為抗高血壓藥及/或治療絞痛症之藥劑同時或依序投與有需要之個體。在一些實施例中，作為抗高血壓藥及/或治療絞痛症之藥劑為胺氯地平。
在一些態樣中，本發明包含一種治療或預防個體之與血清膽固醇含量升高相關之病狀的方法，該方法包含將有效量之至少一種本發明之抗PCSK9抗體或片段與至少一種其他藥劑同時或依序投與有需要之個體，其中該組合允許減輕至少一種其他藥劑之不合需要之副作用。在一些實施例中，本發明之抗PCSK9抗體或片段及至少一種其他藥劑係同時投與。在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段及至少一種其他藥劑不同時投與，其中本發明之抗PCSK9抗體或片段係在投與至少一種其他藥劑之前或之後投與。
在一些態樣中，本發明包含一種降低個體之血清膽固醇含量之方法。該方法包含向個體投與有效量之至少一種本發明之抗PCSK9抗體或片段。
在一些態樣中，本發明包含一種降低個體之血清膽固醇含量之方法，其包含將有效量之至少一種本發明之抗PCSK9抗體或片段與降低膽固醇且視情況進一步升高LDLR蛋白質之可用性之藥劑同時或依序投與個體。在一些實施例中，降低膽固醇且可進一步升高LDLR蛋白質之可用性之藥劑包含士他汀。在一些實施例中，士他汀係選自由阿托伐他汀、西立伐他汀、氟伐他汀、洛伐他汀、美伐他汀、匹伐他汀、普伐他汀、羅素他汀、辛伐他汀及其某一組合組成之群。在一些實施例中，士他汀與菸酸、吸收抑制劑(依折麥布)、脂質調節劑或其組合進行組合。在一些實施例中，升高LDLR蛋白質含量之可用性之藥劑包含某些細胞激素(如制瘤素M)、雌激素及/或某些草本成分(諸如小蘗鹼)。
在一些態樣中，本發明包含一種降低個體之血清膽固醇含量之方法，其包含將有效量之至少一種本發明之抗PCSK9抗體或片段與增加高密度脂蛋白(HDL)及/或降低三酸甘油酯含量之藥劑同時或依序投與個體。在一些實施例中，增加高密度脂蛋白(HDL)及/或降低三酸甘油酯含量之藥劑包含貝特。在一些實施例中，貝特係選自由苯紮貝特、環丙貝特、氯貝特、吉非羅齊、非諾貝特及其某一組合組成之群。
在一些態樣中，本發明包含一種降低個體之血清膽固醇含量之方法，其包含將有效量之至少一種本發明之抗PCSK9抗體或片段與膽汁酸螯合劑同時或依序投與個體。在一些實施例中，膽汁酸螯合劑係選自由消膽胺、考來維侖、考來替泊及其某一組合組成之群。
在一些態樣中，本發明包含一種降低個體之血清膽固醇含量之方法，其包含將有效量之至少一種根據本發明之至少一種抗PCSK9抗體或片段與降低膽固醇在腸中之吸收之藥劑同時或依序投與個體。在一些實施例中，降低膽固醇在腸中之吸收之藥劑為依折麥布。
在一些態樣中，本發明包含一種降低個體之血清膽固醇含量之方法，其包含將有效量之至少本發明之抗PCSK9抗體或片段與降低膽固醇含量之藥劑同時或依序投與個體。在一些實施例中，降低膽固醇含量之藥劑係選自由某些抗精神病藥劑、某些HIV蛋白酶抑制劑、膳食要素(諸如高果糖、蔗糖、膽固醇或某些脂肪酸)及某些針對RXR、RAR、 LXR、FXR之核受體促效劑及拮抗劑組成之群。
在一些態樣中，本發明包含一種降低個體之血清膽固醇含量之方法，其包含將有效量之至少一種本發明之抗體或抗體片段與增加HDL含量之藥劑同時或依序投與個體。在一些實施例中，增加HDL含量之藥劑為亦稱為菸鹼酸之菸酸。在一些實施例中，菸酸為緩慢釋放調配物。
在一些態樣中，本發明包含一種降低個體之血清膽固醇含量之方法，其包含將有效量之至少一種本發明之抗PCSK9抗體或片段與抑制肝三酸甘油酯產生及/或極低密度脂蛋白(VLDL)分泌之藥劑同時或依序投與個體。在一些實施例中，抑制肝三酸甘油酯產生及/或極低密度脂蛋白(VLDL)分泌之藥劑為阿西莫司。
在一些態樣中，本發明包含一種降低個體之血清膽固醇含量之方法，其包含將有效量之至少一種本發明之抗PCSK9抗體或片段與降低脂質在腸中之吸收之藥劑同時或依序投與個體。在一些實施例中，降低脂質在腸中之吸收之藥劑係選自由奧利斯泰、利普司他汀及其某一組合或此項技術中已知之另一藥劑組成之群。
在一些態樣中，本發明包含一種降低個體之血清膽固醇含量之方法，其包含將有效量之至少一種本發明之抗PCSK9抗體或片段與作為抗高血壓藥及/或治療絞痛症之藥劑同時或依序投與個體。在一些實施例中，作為抗高血壓藥及/或治療絞痛症之藥劑為胺氯地平或另一抗高血壓藥，諸如本文揭露及此項技術中已知者。
在一些態樣中，本發明包含一種降低個體之血清膽固醇含量之方法，其包含將有效量之至少一種本發明之抗PCSK9抗體或片段與至少一種其他藥劑同時或依序投與個體，其中該組合允許減輕至少一種其他藥劑之不合需要之副作用。在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段及至少一種其他藥劑係同時投與。在一些實施例中，本發明之抗PCSK9抗體或片段及至少一種其他藥劑不同時投與，其中本發明之抗體或抗體片段係在投與至少一種其他藥劑之前或之後投與。
在一些態樣中，本發明包含一種藉由向個體投與有效量 之至少一種如本文提供之本發明之抗PCSK9抗體或片段來增加個體之LDLR蛋白質含量的方法。
在一些態樣中，本發明包含一種藉由將有效量之至少一種本發明之抗體或抗體片段與升高LDLR蛋白質之可用性之藥劑同時或依序投與個體來增加個體之LDLR蛋白質含量的方法。在一些實施例中，升高LDLR蛋白質含量之可用性之藥劑包含士他汀。在一些實施例中，士他汀係選自由阿托伐他汀、西立伐他汀、氟伐他汀、洛伐他汀、美伐他汀、匹伐他汀、普伐他汀、羅素他汀、辛伐他汀及其某一組合或此項技術中已知之另一士他汀組成之群。在一些實施例中，士他汀與菸酸、吸收抑制劑(依折麥布)、脂質調節劑或其組合進行組合。在一些實施例中，升高LDLR蛋白質含量之可用性之藥劑包含某些細胞激素(如制瘤素M)、雌激素及/或某些草本成分(諸如小蘗鹼)。
在一些態樣中，本發明包含一種藉由將有效量之至少一種本發明之抗體或抗體片段與增加高密度脂蛋白(HDL)及/或降低三酸甘油酯含量之藥劑同時或依序投與個體來增加個體之LDLR蛋白質含量的方法。在一些實施例中，增加高密度脂蛋白(HDL)及/或降低三酸甘油酯含量之藥劑包含貝特。在一些實施例中，貝特係選自由苯紮貝特、環丙貝特、氯貝特、吉非羅齊、非諾貝特及其某一組合組成之群。
在一些態樣中，本發明包含一種藉由將有效量之至少一種本發明之抗體或抗體片段與膽汁酸螯合劑同時或依序投與個體來增加個體之LDLR蛋白質含量的方法。在一些實施例中，膽汁酸螯合劑係選自由消膽胺、考來維侖、考來替泊及其某一組合組成之群。
在一些態樣中，本發明包含一種藉由將有效量之至少一種本發明之抗體或抗體片段與降低膽固醇在腸中之吸收之藥劑同時或依序投與個體來增加個體之LDLR蛋白質含量的方法。在一些實施例中，降低膽固醇在腸中之吸收之藥劑為依折麥布。
在一些態樣中，本發明包含一種藉由將有效量之至少一種本發明之抗體或抗體片段與降低膽固醇含量之藥劑同時或依序投與個體來增加個體之LDLR蛋白質含量的方法。在一些實施例中，降低膽固醇含 量之藥劑係選自由某些抗精神病藥劑、某些HIV蛋白酶抑制劑、膳食要素(諸如高果糖、蔗糖、膽固醇或某些脂肪酸)及某些針對RXR、RAR、LXR、FXR之核受體促效劑及拮抗劑組成之群。
在一些態樣中，本發明包含一種藉由將有效量之至少一種本發明之抗體或抗體片段與增加HDL含量之藥劑同時或依序投與個體來增加個體之LDLR蛋白質含量的方法。在一些實施例中，增加HDL含量之藥劑為亦稱為菸鹼酸之菸酸。在一些實施例中，菸酸為緩慢釋放調配物。
在一些態樣中，本發明包含一種藉由將有效量之至少一種本發明之抗體或抗體片段與抑制肝三酸甘油酯產生及/或極低密度脂蛋白(VLDL)分泌之藥劑同時或依序投與個體來增加個體之LDLR蛋白質含量的方法。在一些實施例中，抑制肝三酸甘油酯產生及/或極低密度脂蛋白(VLDL)分泌之藥劑為阿西莫司。
在一些態樣中，本發明包含一種藉由將有效量之至少一種本發明之抗體或抗體片段與降低脂質在腸中之吸收之藥劑同時或依序投與個體來增加個體之LDLR蛋白質含量的方法。在一些實施例中，降低脂質在腸中之吸收之藥劑係選自由奧利斯泰、利普司他汀及其某一組合組成之群。
在一些態樣中，本發明包含一種藉由將有效量之至少一種本發明之抗體或抗體片段與作為抗高血壓藥及/或治療絞痛症之藥劑同時或依序投與個體來增加個體之LDLR蛋白質含量的方法。在一些實施例中，作為抗高血壓藥及/或治療絞痛症之藥劑為胺氯地平。
在一些態樣中，本發明包含一種藉由將有效量之至少一種本發明之抗體或抗體片段與至少一種其他藥劑同時或依序投與個體來增加個體之LDLR蛋白質含量的方法，其中該組合允許減輕至少一種其他藥劑之不合需要之副作用。在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段及至少一種其他藥劑係同時投與。在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段及至少一種其他藥劑不同時投與，其中本發明之抗體或抗體片段係在投與至少一種其他藥劑之前或之後投與。
在一些態樣中，本發明包含一種結合PCSK9且降低低密度脂蛋白受體(LDLR)，從而降低PCSK9對LDLR之影響的中和抗體或抗體片段。在一些實施例中，抗體或抗體片段特異性結合PCSK9。在一些實施例中，抗體或片段結合PCSK9之催化域。
在本發明之另一實施例中，本發明抗體之人類化形式可使用本文揭露之人類化方法或其他已知人類化方法由兔抗體獲得。
特定言之，本發明涵蓋含有本文示範之抗PCSK9抗體之至少一個、兩個、三個、四個、五個或全部六個CDR之任何抗PCSK9抗體、以及含有與本文示範之任何抗PCSK9抗體或抗體片段之VH及/或VL區至少80、90、95、96、97、98或99%一致之VH及/或VL區的抗PCSK9抗體及抗體片段。此外，本發明涵蓋編碼含有本文示範之抗PCSK9抗體之至少一個、兩個、三個、四個、五個或全部六個CDR之任何抗PCSK9抗體、以及含有與本文示範之任何抗PCSK9抗體或抗體片段之VH及/或VL區至少80、90、95、96、97、98或99%一致之VH及/或VL區的抗PCSK9抗體及抗體片段之聚核苷酸及含有其之宿主細胞，該等抗體或抗體片段亦即能夠結合PCSK9及/或PCSK9/LDLR複合物之抗體或片段。
本發明亦涵蓋可結合於一或多個效應物部分(例如可偵測部分)之抗PCSK9抗體及其結合片段之結合物。本發明亦涵蓋製備抗PCSK9抗體及片段(包括(但不限於)Fab、Fab'、F(ab')2、Fv、scFv片段、SMIP(小分子免疫醫藥)、駱駝抗體、奈米抗體、單價抗體(諸如MetMab)及IgNAR)之方法。
在一些態樣中，本發明包含一種包含至少一種本發明之經分離抗體或抗體片段的醫藥或診斷組合物。在一些實施例中，醫藥或診斷組合物進一步包含醫藥學上可接受之稀釋劑、載劑、增溶劑、乳化劑、防腐劑或其混合物。在一些實施例中，醫藥或診斷組合物進一步包含至少一種用於發炎之治療劑。在某些實施例中，用於發炎之治療劑包含1型環加氧酶抑制劑、2型環加氧酶抑制劑、p38-MAPK之小分子調節劑、發炎路徑中涉及之細胞內分子之小分子調節劑或其混合物。在其他實施例中， 醫藥或診斷組合物係經凍乾。
在一些態樣中，本發明包含一種在重組宿主細胞中製備含有本文揭露之任何VH、VL或CDR胺基酸序列之任何抗體或抗體片段的方法，該宿主細胞為例如酵母、真菌、哺乳動物細胞、昆蟲細胞、細菌、禽類細胞或卵或植物細胞，且較佳為酵母、絲狀真菌或哺乳動物細胞。
此包括例如細菌、真菌、酵母、哺乳動物、昆蟲、植物及禽類細胞。較佳宿主細胞為酵母、真菌(尤其絲狀真菌)及哺乳動物細胞。酵母及絲狀真菌包括(但不限於)畢赤酵母(Pichia pastoris)、芬蘭畢赤酵母(Pichia finlandica)、喜海藻糖畢赤酵母(Pichia trehalophila)、Pichia koclamae、膜醭畢赤酵母(Pichia membranaefaciens)、微小畢赤酵母(Pichia minuta)(Ogataea minuta、林德納畢赤酵母(Pichia lindneri))、仙人掌畢赤酵母(Pichia opuntiae)、耐熱畢赤酵母(Pichia thermotolerans)、柳畢赤酵母(Pichia salictaria)、松櫟畢赤酵母(Pichia guercuum)、皮傑普畢赤酵母(Pichia pijperi)、樹幹畢赤酵母(Pichia stiptis)、甲醇畢赤酵母(Pichia methanolica)、畢赤酵母屬(Pichia sp.)、釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、酵母屬(Saccharomyces sp.)、多形漢遜酵母(Hansenula polymorpha)、克魯維酵母屬(Kluyveromyces sp.)、乳酸克魯維酵母(Kluyveromyces lactis)、白色念珠菌(Candida albicans)、構巢麯黴(Aspergillus nidulans)、黑麯黴(Aspergillus niger)、米麯黴(Aspergillusoryzae)、里氏木黴(Trichoderma reesei)、Chrysosporium lucknowense、鐮刀菌屬(Fusarium sp.)、禾穀鐮孢(Fusarium gramineum)、Fusarium venenatum、小立碗蘚(Physcomitrella patens)及粗厚神經孢子菌(Neurospora crassa)、畢赤酵母屬、任何酵母屬、多形漢遜酵母、任何克魯維酵母屬、白色念珠菌、任何麴菌屬、里氏木黴、Chrysosporium lucknowense、任何鐮刀菌屬及粗厚神經孢子菌。
無脊椎動物細胞之實例包括昆蟲細胞，諸如果蠅(Drosophila)S2及夜蛾(Spodoptera)Sf9；以及植物細胞。適用哺乳動物宿主細胞株之實例包括中國倉鼠卵巢(CHO)及COS細胞。更特定實例包括經SV40轉型之猴腎CV1細胞株(COS-7，ATCC CRL 1651)；人類胚腎細胞株 (293或經次選殖以供懸浮培養生長之293細胞，Graham等人，J.Gen Virol.,36：59(1977))；中國倉鼠卵巢細胞/-DHFR(CHO，Urlaub及Chasin,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,77：4216(1980))；小鼠賽托利細胞(sertoli cell)(TM4，Mather,Biol.Reprod.,23：243-251(1980))；人類肺細胞(W138，ATCC CCL 75)；人類肝細胞(Hep G2，HB 8065)；及小鼠乳腺腫瘤(MMT 060562，ATCC CCL51)。對適當宿主細胞之選擇視為在此項技術之技能範圍內。用於抗體表現之較佳哺乳動物細胞包括CHO細胞及COS細胞。在一示範性實施例中，重組宿主細胞為畢赤酵母屬之多倍體酵母細胞。
在一示範性實施例中，宿主細胞將包含畢赤酵母細胞，較佳為二倍體畢赤酵母細胞。在較佳實施例中，宿主細胞將以至少10-25毫克/公升之抗PCSK9抗體的濃度分泌抗PCSK9抗體或片段進入含有宿主細胞(例如畢赤酵母)之培養基中。
產生含有異源抗體編碼序列且表現並分泌功能性抗體之重組宿主細胞(例如酵母、真菌、哺乳動物細胞、昆蟲細胞、植物細胞、禽類細胞、細菌等)之方法為熟知的。在一示範性實施例中，表現本發明之抗體或片段之宿主細胞為二倍體畢赤酵母。然而，可使用其他酵母或真菌，包括單倍體形式。
若使用二倍體畢赤酵母，則此等方法通常包含藉由以下方式產生表現並分泌抗體之重組二倍體酵母或真菌細胞：(i)將至少一種含有一或多種編碼該抗體或抗體片段之可變區及視情況恆定區之異源聚核苷酸的表現載體引入宿主細胞(例如單倍體酵母或真菌細胞)中，該等序列可操作地連接於啟動子及信號序列；(ii)藉由接合或球形質體融合自該第一及/或第二單倍體酵母或真菌細胞產生多倍體酵母或真菌；(iii)選擇穩定表現該抗體之多倍體酵母或真菌細胞；及(iv)自將該抗體穩定表現至培養基中之該多倍體酵母或真菌細胞產生穩定多倍體酵母或真菌培養物。
然而，所用酵母可包括任何以下屬：阿斯黴屬(Arxiozyma)；Ascobotryozyma；固囊酵母屬(Citeromyces)；德巴利酵母屬(Debaryomyces)；德克酵母屬(Dekkera)；假囊酵母屬(Eremothecium)；伊薩酵母屬(Issatchenkia)；哈薩克酵母屬(Kazachstania)；克魯維酵母屬 (Kluyveromyces)；柯達酵母屬(Kodamaea)；路德酵母屬(Lodderomyces)；管囊酵母屬(Pachysolen)；畢赤酵母屬(Pichia)；酵母屬(Saccharomyces)；雙孢土星形酵母屬(Saturnispora)；Tetrapisispora；有抱圓酵母屬(Torulaspora)；擬威爾酵母屬(Williopsis)；或接合酵母屬(Zygosaccharomyces)。在某些實施例中，酵母屬為畢赤酵母屬。在某些實施例中，畢赤酵母屬之物種係選自畢赤酵母、甲醇畢赤酵母或多形漢遜酵母(安格斯畢赤酵母(Pichia angusta))。可用於表現主題抗體或片段之適合絲狀真菌係在上文中鑒別。
更特定言之，本發明涵蓋在重組細胞中製備含有本文揭露之任何VH、VL或CDR胺基酸序列之任何抗PCSK9抗體或片段的方法，其中該重組細胞包含編碼含有與SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：52、SEQ ID NO：92、SEQ ID NO：132、SEQ ID NO：172、SEQ ID NO：212、SEQ ID NO：252、SEQ ID NO：292、SEQ ID NO：332、SEQ ID NO：372、SEQ ID NO：412、SEQ ID NO：452、SEQ ID NO：492、SEQ ID NO：532、SEQ ID NO：572、SEQ ID NO：612、SEQ ID NO：652、SEQ ID NO：692；SEQ ID NO：732、SEQ ID NO：772、SEQ ID NO：812、SEQ ID NO：852、SEQ ID NO：892或SEQ ID NO：932中之任何VH胺基酸序列至少80、85、90、95、96、97、98或99%一致之VH胺基酸序列之抗PCSK9抗體或編碼其中至少一個構架殘基(FR殘基)或CDR殘基已改變(例如經存在於兔抗PCSK9抗體VH多肽中之相應位置上之胺基酸取代或為保守胺基酸取代)之其變異體的異源聚核苷酸。
在其他實施例中，異源聚核苷酸進一步包含編碼與SEQ ID NO：32、SEQ ID NO：72、SEQ ID NO：112、SEQ ID NO：152、SEQ ID NO：192、SEQ ID NO：232、SEQ ID NO：272、SEQ ID NO：312、SEQ ID NO：352、SEQ ID NO：392、SEQ ID NO：432、SEQ ID NO：472、SEQ ID NO：512、SEQ ID NO：542、SEQ ID NO：582、SEQ ID NO：622、SEQ ID NO：662、SEQ ID NO：702、SEQ ID NO：742、SEQ ID NO：782、SEQ ID NO：822、SEQ ID NO：862、SEQ ID NO：902或SEQ ID NO：942中之任何VL胺基酸序列至少80、85、90、95、96、97、98或99%一致之抗PCSK9 VL胺基酸序列或編碼其中至少一個構架殘基(FR殘基)或CDR殘基已改變(例如經存在於兔抗PCSK9抗體VL多肽中之相應位置上之胺基酸取代或為保守胺基酸取代)之其變異體的聚核苷酸序列。在其他實施例中，異源聚核苷酸包含編碼與SEQ ID NO：12及SEQ ID NO：32；SEQ ID NO：52及SEQ ID NO：72；SEQ ID NO：92及SEQ ID NO：112；SEQ ID NO：132及SEQ ID NO：152；SEQ ID NO：172及SEQ ID NO：192；SEQ ID NO：212及SEQ ID NO：232；SEQ ID NO：252及SEQ ID NO：272；SEQ ID NO：292及SEQ ID NO：312；SEQ ID NO：332及SEQ ID NO：352；SEQ ID NO：372及SEQ ID NO：392；SEQ ID NO：412及SEQ ID NO：432；SEQ ID NO：452及SEQ ID NO：472；SEQ ID NO：492及SEQ ID NO：512；SEQ ID NO：532及SEQ ID NO：552；SEQ ID NO：572及SEQ ID NO：592；SEQ ID NO：612及SEQ ID NO：632；SEQ ID NO：652及SEQ ID NO：672；SEQ ID NO：692及SEQ ID NO：712；SEQ ID NO：732及SEQ ID NO：752；SEQ ID NO：772及SEQ ID NO：792；SEQ ID NO：812及SEQ ID NO：832；SEQ ID NO：852及SEQ ID NO：872；SEQ ID NO：892及SEQ ID NO：912；SEQ ID NO：932及SEQ ID NO：952中所含之任何VH及VL胺基酸序列至少80、85、90、95、96、97、98或99%一致之VH及VL多肽；或與本文示範之任何VH及VL胺基酸序列至少80、85、90、95、96、97、98或99%一致之VH及VL序列之任何組合的序列。
在其他實施例中，異源聚核苷酸編碼抗PCSK9抗體或片段，其中該抗體或片段含有VL多肽中所含之CDR中之至少一個CDR、至少兩者或全部三者及/或VH多肽中所含之CDR之至少一個CDR、兩者或全部三者，其中該等VH及VL多肽序列係選自以下中之VH及VL多肽序列：SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：32；SEQ ID NO：52、SEQ ID NO：72；SEQ ID NO：92、SEQ ID NO：112；SEQ ID NO：132、SEQ ID NO：152；SEQ ID NO：172、SEQ ID NO：192；SEQ ID NO：212、SEQ ID NO：232、SEQ ID NO：252、SEQ ID NO：272；SEQ ID NO：292、SEQ ID NO：312；SEQ ID NO：332、SEQ ID NO：352；SEQ ID NO：372、SEQ ID NO：392；SEQ ID NO：412、SEQ ID NO：432；SEQ ID NO：452、SEQ ID NO： 472；SEQ ID NO：492、SEQ ID NO：512；SEQ ID NO：532；SEQ ID NO：552；SEQ ID NO：572；SEQ ID NO：592；SEQ ID NO：612；SEQ ID NO：632；SEQ ID NO：652；SEQ ID NO：672；SEQ ID NO：692；SEQ ID NO：712；SEQ ID NO：732；SEQ ID NO：752；SEQ ID NO：772；SEQ ID NO：792；SEQ ID NO：812；SEQ ID NO：832；SEQ ID NO：852；SEQ ID NO：872；SEQ ID NO：892；SEQ ID NO：912；SEQ ID NO：932；SEQ ID NO：952；或其混合物。
在一些態樣中，本發明包含一種經分離聚核苷酸，其包含編碼與SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：52、SEQ ID NO：92、SEQ ID NO：132、SEQ ID NO：172、SEQ ID NO：212、SEQ ID NO：252、SEQ ID NO：292、SEQ ID NO：332、SEQ ID NO：372、SEQ ID NO：412、SEQ ID NO：452、SEQ ID NO：492、SEQ ID NO：532、SEQ ID NO：572、SEQ ID NO：612、SEQ ID NO：652、SEQ ID NO：692、SEQ ID NO：732、SEQ ID NO：772、SEQ ID NO：812、SEQ ID NO：852、SEQ ID NO：892或SEQ ID NO：932中之VH多肽序列至少80、85、90、95、96、97、98或99%一致或相同之抗PCSK9 VH抗體胺基酸序列或編碼其中至少一個構架殘基(FR殘基)或CDR殘基已改變(例如經存在於兔抗PCSK9抗體VH多肽中之相應位置上之胺基酸取代或為保守胺基酸取代)之其變異體的聚核苷酸。在其他實施例中，本發明包含一種包含以上聚核苷酸序列之載體。在其他實施例中，本發明包含一種包含上述載體之宿主細胞。在某些實施例中，上述宿主細胞為屬於畢赤酵母屬之酵母細胞。
在一些態樣中，本發明包含一種經分離聚核苷酸，其包含編碼與SEQ ID NO：32、SEQ ID NO：72、SEQ ID NO：112、SEQ ID NO：152、SEQ ID NO：192、SEQ ID NO：232、SEQ ID NO：272、SEQ ID NO：312、SEQ ID NO：352、SEQ ID NO：392、SEQ ID NO：432、SEQ ID NO：472、SEQ ID NO：512、SEQ ID NO：552或SEQ ID NO：592、SEQ ID NO：632、SEQ ID NO：672、SEQ ID NO：712、SEQ ID NO：752、SEQ ID NO：792、SEQ ID NO：832、SEQ ID NO：872、SEQ ID NO：912或SEQ ID NO：952中之任一VL胺基酸序列至少80、85、90、95、96、97、98或99%一 致或相同之抗PCSK9 VL抗體胺基酸序列或編碼其中至少一個構架殘基(FR殘基)或CDR殘基已改變(例如經存在於兔抗PCSK9抗體VL多肽中之相應位置上之胺基酸取代或為保守胺基酸取代)之其變異體的聚核苷酸序列。在其他實施例中，本發明包含一種包含以上聚核苷酸序列之任何組合之載體。在某些實施例中，本發明包含一種宿主細胞，其包含一或多個含有上述任何聚核苷酸之載體。在某些實施例中，本發明包括一種含有任何上述聚核苷酸或含有其之載體的宿主細胞，例如酵母、真菌、昆蟲、植物、禽類、細菌或哺乳動物細胞，且在一示範性實施例中，為屬於畢赤酵母屬之酵母細胞。
在一些態樣中，本發明包含一種編碼結合PCSK9之抗體之VH或VL區的經分離核酸，其包含在嚴格條件下與SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：32；SEQ ID NO：52、SEQ ID NO：72；SEQ ID NO：92、SEQ ID NO：112；SEQ ID NO：132、SEQ ID NO：152；SEQ ID NO：172、SEQ ID NO：192；SEQ ID NO：212、SEQ ID NO：232、SEQ ID NO：252、SEQ ID NO：272；SEQ ID NO：292、SEQ ID NO：312；SEQ ID NO：332、SEQ ID NO：352；SEQ ID NO：372、SEQ ID NO：392；SEQ ID NO：412；SEQ ID NO：432；SEQ ID NO：452；SEQ ID NO：472；SEQ ID NO：492；SEQ ID NO：512；SEQ ID NO：532；SEQ ID NO：552；SEQ ID NO：572；SEQ ID NO：592；SEQ ID NO：612；SEQ ID NO：632；SEQ ID NO：652；SEQ ID NO：672；SEQ ID NO：692；SEQ ID NO：712；SEQ ID NO：732；SEQ ID NO：752；SEQ ID NO：772；SEQ ID NO：792；SEQ ID NO：812；SEQ ID NO：832；SEQ ID NO：852；SEQ ID NO：872；SEQ ID NO：892；SEQ ID NO：912；SEQ ID NO：932；SEQ ID NO：952；其密碼子簡併物；或其混合物雜交之聚核苷酸。
本發明亦係關於含有任何上述胺基酸序列及其變異體或由任何上述聚核苷酸序列及其變異體編碼之抗PCSK9抗體及其結合片段用於診斷、評估及治療本文揭露之任何疾病及病症，亦即尤其與PCSK9或其異常表現相關之病症的用途。
本發明亦涵蓋含有任何上述胺基酸序列及其變異體或由 任何上述聚核苷酸序列及其變異體編碼之抗PCSK9抗體及其結合片段之片段用於診斷、評估及治療與PCSK9或其異常表現相關之疾病及病症的用途。本發明之其他特定實施例係關於在諸如CHO、NSO或HEK 293細胞之哺乳動物細胞、或酵母細胞(例如二倍體酵母，諸如二倍體畢赤酵母)及其他酵母菌株中產生抗PCSK9抗體或其片段。
圖1A-1G提供構架區(FR)、互補決定區(CDR)及恆定區對準的抗體Ab1-Ab24之全長重鏈之多肽序列。
圖2A-2D提供構架區(FR)、互補決定區(CDR)及恆定區對準的抗體Ab1-Ab24之全長輕鏈之多肽序列。
圖3A-3S提供構架區(FR)、互補決定區(CDR)及恆定區對準的編碼抗體Ab1-Ab24之全長重鏈之聚核苷酸序列。
圖4A-4J提供構架區(FR)、互補決定區(CDR)及恆定區對準的編碼抗體Ab1-Ab24之全長輕鏈之聚核苷酸序列。
圖5提供抗體Ab1-Ab24之重鏈之可變區及互補決定區(CDR)之多肽序列坐標。
圖6提供抗體Ab1-Ab24之重鏈之恆定區及構架區(FR)之多肽序列坐標。
圖7提供抗體Ab1-Ab24之輕鏈之可變區及互補決定區(CDR)的多肽序列坐標。
圖8提供抗體Ab1-Ab24之輕鏈之恆定區及構架區(FR)的多肽序列坐標。
圖9提供抗體Ab1-Ab24之重鏈之可變區及互補決定區(CDR)的聚核苷酸序列坐標。
圖10提供抗體Ab1-Ab24之重鏈之恆定區及構架區(FR)的聚核苷酸序列坐標。
圖11提供抗體Ab1-Ab24之輕鏈之可變區及互補決定區(CDR)的聚核苷酸序列坐標。
圖12提供抗體Ab1-Ab24之輕鏈之恆定區及構架區(FR) 的聚核苷酸序列坐標。
圖13提供抗體Ab1、Ab2、Ab3及Ab4之遵循下文實例1中之方案獲得的抗PCSK9抗體與人類PCSK9之結合資料。
圖14提供抗體Ab5、Ab6、Ab8及Ab9之遵循下文實例1中之方案獲得的抗PCSK9抗體與人類PCSK9之結合資料。
圖15提供抗體Ab7、Ab10及Ab13之遵循下文實例1中之方案獲得的抗PCSK9抗體與人類PCSK9之結合資料。
圖16提供抗體Ab11及Ab12之遵循下文實例1中之方案獲得的抗PCSK9抗體與人類PCSK9之結合資料。
圖17提供抗體Ab14之遵循下文實例1中之方案獲得的抗PCSK9抗體與人類PCSK9之結合資料。
圖18提供抗體Ab15之遵循下文實例1中之方案獲得的抗PCSK9抗體與人類PCSK9之結合資料。
圖19提供抗體Ab16及Ab17之遵循下文實例1中之方案獲得的抗PCSK9抗體與人類PCSK9之結合資料。
圖20提供抗體Ab18之遵循下文實例1中之方案獲得的抗PCSK9抗體與人類PCSK9之結合資料。
圖21提供抗體Ab19之遵循下文實例1中之方案獲得的抗PCSK9抗體與人類PCSK9之結合資料。
圖22提供抗體Ab20之遵循下文實例1中之方案獲得的抗PCSK9抗體與人類PCSK9之結合資料。
圖23提供抗體Ab21之遵循下文實例1中之方案獲得的抗PCSK9抗體與人類PCSK9之結合資料。
圖24提供抗體Ab22之遵循下文實例1中之方案獲得的抗PCSK9抗體與人類PCSK9之結合資料。
圖25提供抗體Ab23之遵循下文實例1中之方案獲得的抗PCSK9抗體與人類PCSK9之結合資料。
圖26提供抗體Ab24之遵循下文實例1中之方案獲得的抗PCSK9抗體與人類PCSK9之結合資料。
圖27提供抗體Ab1之遵循下文實例1中之方案獲得的LDL-C攝取抑制資料。
圖28提供抗體Ab2之遵循下文實例1中之方案獲得的LDL-C攝取抑制資料。
圖29提供抗體Ab3之遵循下文實例1中之方案獲得的LDL-C攝取抑制資料。
圖30提供抗體Ab4之遵循下文實例1中之方案獲得的LDL-C攝取抑制資料。
圖31提供抗體Ab5之遵循下文實例1中之方案獲得的LDL-C攝取抑制資料。
圖32提供抗體Ab6及Ab7之遵循下文實例1中之方案獲得的攝取抑制資料。
圖33提供抗體Ab8之遵循下文實例1中之方案獲得的LDL-C攝取抑制資料。
圖34提供抗體Ab9之遵循下文實例1中之方案獲得的LDL-C攝取抑制資料。
圖35提供抗體Ab10、Ab11及Ab12之遵循下文實例1中之方案獲得的LDL-C攝取抑制資料。
圖36提供抗體Ab13之遵循下文實例1中之方案獲得的LDL-C攝取抑制資料。
圖37提供抗體Ab14之遵循下文實例1中之方案獲得的LDL-C攝取抑制資料。
圖38提供抗體Ab15之遵循下文實例1中之方案獲得的LDL-C攝取抑制資料。
圖39提供抗體Ab16及Ab17之遵循下文實例1中之方案獲得的LDL-C攝取抑制資料。
圖40提供抗體Ab18之遵循下文實例1中之方案獲得的LDL-C攝取抑制資料。
圖41提供抗體Ab19之遵循下文實例1中之方案獲得的 LDL-C攝取抑制資料。
圖42提供抗體Ab20之遵循下文實例1中之方案獲得的LDL-C攝取抑制資料。
圖43提供抗體Ab21之遵循下文實例1中之方案獲得的LDL-C攝取抑制資料。
圖44提供抗體Ab22之遵循下文實例1中之方案獲得的LDL-C攝取抑制資料。
圖45提供抗體Ab23之遵循下文實例1中之方案獲得的LDL-C攝取抑制資料。
圖46提供抗體Ab24之遵循下文實例1中之方案獲得的LDL-C攝取抑制資料。
圖47提供抗體Ab1、Ab2、Ab3及Ab4之遵循下文實例1中之方案獲得的抗PCSK9抗體與食蟹獼猴PCSK9之結合資料。
圖48提供抗體Ab5、Ab6、Ab7及Ab8之遵循下文實例1中之方案獲得的抗PCSK9抗體與食蟹獼猴PCSK9之結合資料。
圖49提供抗體Ab9、Ab10、Ab11及Ab12之遵循下文實例1中之方案獲得的抗PCSK9抗體與食蟹獼猴PCSK9之結合資料。
圖50提供抗體Ab13之遵循下文實例1中之方案獲得的抗PCSK9抗體與食蟹獼猴PCSK9之結合資料。
圖51提供抗體Ab14之遵循下文實例1中之方案獲得的抗PCSK9抗體與食蟹獼猴PCSK9之結合資料。
圖52提供抗體Ab15之遵循下文實例1中之方案獲得的抗PCSK9抗體與食蟹獼猴PCSK9之結合資料。
圖53提供抗體Ab16及Ab17之遵循下文實例1中之方案獲得的抗PCSK9抗體與食蟹獼猴PCSK9之結合資料。
圖54提供抗體Ab18之遵循下文實例1中之方案獲得的抗PCSK9抗體與食蟹獼猴PCSK9之結合資料。
圖55提供抗體Ab19之遵循下文實例1中之方案獲得的抗PCSK9抗體與食蟹獼猴PCSK9之結合資料。
圖56提供抗體Ab20之遵循下文實例1中之方案獲得的抗PCSK9抗體與食蟹獼猴PCSK9之結合資料。
圖57提供抗體Ab21之遵循下文實例1中之方案獲得的抗PCSK9抗體與食蟹獼猴PCSK9之結合資料。
圖58提供抗體Ab22之遵循下文實例1中之方案獲得的抗PCSK9抗體與食蟹獼猴PCSK9之結合資料。
圖59提供抗體Ab23之遵循下文實例1中之方案獲得的抗PCSK9抗體與食蟹獼猴PCSK9之結合資料。
圖60提供抗體Ab24之遵循下文實例1中之方案獲得的抗PCSK9抗體與食蟹獼猴PCSK9之結合資料。
圖61提供抗體Ab1之遵循下文實例6中之方案獲得的抗PCSK9抗體阻斷PCSK9與LDLR相互作用之抑制資料。
圖62提供抗體Ab2之遵循下文實例6中之方案獲得的抗PCSK9抗體阻斷PCSK9與LDLR相互作用之抑制資料。
圖63提供抗體Ab3之遵循下文實例6中之方案獲得的抗PCSK9抗體阻斷PCSK9與LDLR相互作用之抑制資料。
圖64提供抗體Ab4之遵循下文實例6中之方案獲得的抗PCSK9抗體阻斷PCSK9與LDLR相互作用之抑制資料。
圖65提供抗體Ab5之遵循下文實例6中之方案獲得的抗PCSK9抗體阻斷PCSK9與LDLR相互作用之抑制資料。
圖66提供抗體Ab6之遵循下文實例6中之方案獲得的抗PCSK9抗體阻斷PCSK9與LDLR相互作用之抑制資料。
圖67提供抗體Ab7之遵循下文實例6中之方案獲得的抗PCSK9抗體阻斷PCSK9與LDLR相互作用之抑制資料。
圖68提供抗體Ab8之遵循下文實例6中之方案獲得的抗PCSK9抗體阻斷PCSK9與LDLR相互作用之抑制資料。
圖69提供抗體Ab9之遵循下文實例6中之方案獲得的抗PCSK9抗體阻斷PCSK9與LDLR相互作用之抑制資料。
圖70提供抗體Ab10之遵循下文實例6中之方案獲得的 抗PCSK9抗體阻斷PCSK9與LDLR相互作用之抑制資料。
圖71提供抗體Ab11之遵循下文實例6中之方案獲得的抗PCSK9抗體阻斷PCSK9與LDLR相互作用之抑制資料。
圖72提供抗體Ab12之遵循下文實例6中之方案獲得的抗PCSK9抗體阻斷PCSK9與LDLR相互作用之抑制資料。
圖73提供抗體Ab13之遵循下文實例6中之方案獲得的抗PCSK9抗體阻斷PCSK9與LDLR相互作用之抑制資料。
圖74提供抗體Ab14之遵循下文實例6中之方案獲得的抗PCSK9抗體阻斷PCSK9與LDLR相互作用之抑制資料。
圖75提供抗體Ab15之遵循下文實例6中之方案獲得的抗PCSK9抗體阻斷PCSK9與LDLR相互作用之抑制資料。
圖76提供抗體Ab16之遵循下文實例6中之方案獲得的抗PCSK9抗體阻斷PCSK9與LDLR相互作用之抑制資料。
圖77提供抗體Ab17之遵循下文實例6中之方案獲得的抗PCSK9抗體阻斷PCSK9與LDLR相互作用之抑制資料。
圖78提供抗體Ab18之遵循下文實例6中之方案獲得的抗PCSK9抗體阻斷PCSK9與LDLR相互作用之抑制資料。
圖79提供抗體Ab19之遵循下文實例6中之方案獲得的抗PCSK9抗體阻斷PCSK9與LDLR相互作用之抑制資料。
圖80提供抗體Ab20之遵循下文實例6中之方案獲得的抗PCSK9抗體阻斷PCSK9與LDLR相互作用之抑制資料。
圖81提供抗體Ab21之遵循下文實例6中之方案獲得的抗PCSK9抗體阻斷PCSK9與LDLR相互作用之抑制資料。
圖82提供抗體Ab22之遵循下文實例6中之方案獲得的抗PCSK9抗體阻斷PCSK9與LDLR相互作用之抑制資料。
圖83提供抗體Ab23之遵循下文實例6中之方案獲得的抗PCSK9抗體阻斷PCSK9與LDLR相互作用之抑制資料。
圖84提供抗體Ab24之遵循下文實例6中之方案獲得的抗PCSK9抗體阻斷PCSK9與LDLR相互作用之抑制資料。
圖85提供顯示注射Ab18之食蟹獼猴之血清LDL-C膽固醇含量的資料。
圖86提供以自給藥前含量之變化百分比形式顯示注射Ab18之食蟹獼猴之血清總膽固醇含量的資料。
圖87提供以自給藥前含量之變化百分比形式顯示注射Ab18之食蟹獼猴之血清HDL膽固醇含量的資料。
圖88提供以自給藥前含量之變化百分比形式顯示注射Ab11之食蟹獼猴之血清LDL-C膽固醇含量的資料。
圖89提供以自給藥前含量之變化百分比形式顯示注射Ab11之食蟹獼猴之血清總膽固醇含量的資料。
圖90提供以自給藥前含量之變化百分比形式顯示注射Ab11之食蟹獼猴之血清HDL膽固醇含量的資料。
圖91提供以自給藥前含量之變化百分比形式顯示注射Ab19之食蟹獼猴之血清LDL-C膽固醇含量的資料。
圖92提供以自給藥前含量之變化百分比形式顯示注射Ab20之食蟹獼猴之血清LDL-C膽固醇含量的資料。
圖93提供以自給藥前含量之變化百分比形式顯示注射Ab22之食蟹獼猴之血清LDL-C膽固醇含量的資料。
圖94提供以自給藥前含量之變化百分比形式顯示注射Ab24之食蟹獼猴之血清LDL-C膽固醇含量的資料。
 本發明之較佳實施例
以下列出本發明之不同較佳實施例且其進一步更詳細描述於本申請案之詳細書面描述及實例章節中。
本發明之一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其與選自由以下組成之群之抗人類PCSK9抗體競爭及/或特異性結合人類PCSK9上之與選自由以下組成之群之抗人類PCSK9抗體相同或重疊之抗原決定基：Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab10、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、 Ab19、Ab20、Ab21、Ab22、Ab23及Ab24。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段特異性結合人類PCSK9上之與選自由以下組成之群之抗人類PCSK9抗體相同或重疊之抗原決定基：Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab10、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab20、Ab21、Ab22、Ab23及Ab24。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中使用偵測該抗人類PCSK9抗體與10-15聚體肽文庫中之一或多種肽之結合的結合分析鑒別出該(該等)抗原決定基，該等10-15聚體肽為人類PCSK9之對應於人類PCSK9多肽之全部或實質上全部長度的重疊肽片段。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該結合分析為西方免疫墨點分析，其藉由使用當該抗體或抗體片段與該文庫中之肽發生特異性結合時發射可偵測化學發光信號之化學發光標記來偵測該抗體或抗體片段與該文庫中該等10-15聚體肽中之一或多者的特異性結合。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段含有選自由以下組成之群之抗PCSK9抗體的至少2個互補決定區(CDR)：Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab10、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab20、Ab21、Ab22、Ab23及Ab24。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段含有選自由以下組成之群之抗PCSK9抗體的至少3個互補決定區(CDR)：Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab10、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab20、Ab21、Ab22、Ab23及Ab24。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段含有選自由以下組成之群之抗PCSK9 抗體的至少4個互補決定區(CDR)：Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab10、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab20、Ab21、Ab22、Ab23及Ab24。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段含有選自由以下組成之群之抗PCSK9抗體的至少5個互補決定區(CDR)：Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab10、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab20、Ab21、Ab22、Ab23及Ab24。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段含有選自由以下組成之群之抗PCSK9抗體的全部6個互補決定區(CDR)：Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab10、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab20、Ab21、Ab22、Ab23及Ab24。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段含有(a)可變重鏈，其包含選自由以下組成之群之CDR1序列：SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：44、SEQ ID NO：84、SEQ ID NO：124、SEQ ID NO：164、SEQ ID NO：204、SEQ ID NO：244、SEQ ID NO：284、SEQ ID NO：324、SEQ ID NO：364、SEQ ID NO：404、SEQ ID NO：444、SEQ ID NO：484、SEQ ID NO：524、SEQ ID NO：564、SEQ ID NO：604、SEQ ID NO：644、SEQ ID NO：684、SEQ ID NO：724、SEQ ID NO：764、SEQ ID NO：804、SEQ ID NO：844、SEQ ID NO：884及SEQ ID NO：924；選自由以下組成之群之CDR2序列：SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：46、SEQ ID NO：86、SEQ ID NO：126、SEQ ID NO：166、SEQ ID NO：206、SEQ ID NO：246、SEQ ID NO：286、SEQ ID NO：326、SEQ ID NO：366、SEQ ID NO：406、SEQ ID NO：446、SEQ ID NO：486、SEQ ID NO：526、SEQ ID NO：566、SEQ ID NO：606、SEQ ID NO：646、SEQ ID NO：686、SEQ ID NO：726、SEQ ID NO：766、SEQ ID NO：806、SEQ ID NO：846、SEQ ID NO：886及SEQ ID NO：926；及選自由以下組成之群之CDR3序列：SEQ ID NO：8、SEQ ID NO：48、SEQ ID NO：88、 SEQ ID NO：128、SEQ ID NO：168、SEQ ID NO：208、SEQ ID NO：248、SEQ ID NO：288、SEQ ID NO：328、SEQ ID NO：368、SEQ ID NO：408、SEQ ID NO：448、SEQ ID NO：488、SEQ ID NO：528、SEQ ID NO：568、SEQ ID NO：608、SEQ ID NO：648、SEQ ID NO：688、SEQ ID NO：728、SEQ ID NO：768、SEQ ID NO：808、SEQ ID NO：848、SEQ ID NO：888及SEQ ID NO：928；及/或(b)可變輕鏈，其包含選自由以下組成之群之CDR1序列：SEQ ID NO：24、SEQ ID NO：64、SEQ ID NO：104、SEQ ID NO：144、SEQ ID NO：184、SEQ ID NO：224、SEQ ID NO：264、SEQ ID NO：304、SEQ ID NO：344、SEQ ID NO：384、SEQ ID NO：424、SEQ ID NO：464、SEQ ID NO：504、SEQ ID NO：544、SEQ ID NO：584、SEQ ID NO：624、SEQ ID NO：664、SEQ ID NO：704、SEQ ID NO：744、SEQ ID NO：784、SEQ ID NO：824、SEQ ID NO：864、SEQ ID NO：904及SEQ ID NO：944；選自由以下組成之群之CDR2序列：SEQ ID NO：26、SEQ ID NO：66、SEQ ID NO：106、SEQ ID NO：146、SEQ ID NO：186、SEQ ID NO：226、SEQ ID NO：266、SEQ ID NO：306、SEQ ID NO：346、SEQ ID NO：386、SEQ ID NO：426、SEQ ID NO：466、SEQ ID NO：506、SEQ ID NO：546、SEQ ID NO：586、SEQ ID NO：626、SEQ ID NO：666、SEQ ID NO：706、SEQ ID NO：746、SEQ ID NO：786、SEQ ID NO：826、SEQ ID NO：866、SEQ ID NO：906及SEQ ID NO：946；及選自由以下組成之群之CDR3序列：SEQ ID NO：28、SEQ ID NO：68、SEQ ID NO：108、SEQ ID NO：148、SEQ ID NO：188、SEQ ID NO：228、SEQ ID NO：268、SEQ ID NO：308、SEQ ID NO：348、SEQ ID NO：388、SEQ ID NO：428、SEQ ID NO：468、SEQ ID NO：508、SEQ ID NO：548、SEQ ID NO：588、SEQ ID NO：628、SEQ ID NO：668、SEQ ID NO：708、SEQ ID NO：748、SEQ ID NO：788、SEQ ID NO：828、SEQ ID NO：868、SEQ ID NO：908及SEQ ID NO：948，其進一步限制條件為任何以上鑒別之CDR多肽之一或兩個殘基可經另一胺基酸取代，較佳為保守胺基酸取代。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體 或抗體片段，其中可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：4、CDR2序列SEQ ID NO：6及CDR3序列SEQ ID NO：8；及/或可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：24、CDR2序列SEQ ID NO：26及CDR3序列SEQ ID NO：28。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：44、CDR2序列SEQ ID NO：46及CDR3序列SEQ ID NO：48；及/或可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：64、CDR2序列SEQ ID NO：66及CDR3序列SEQ ID NO：68。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：84、CDR2序列SEQ ID NO：86及CDR3序列SEQ ID NO：88；及/或可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：104、CDR2序列SEQ ID NO：106及CDR3序列SEQ ID NO：108。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：124、CDR2序列SEQ ID NO：126及CDR3序列SEQ ID NO：128；及/或可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：144、CDR2序列SEQ ID NO：146及CDR3序列SEQ ID NO：148。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：164、CDR2序列SEQ ID NO：166及CDR3序列SEQ ID NO：168；且可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：184、CDR2序列SEQ ID NO：186及CDR3序列SEQ ID NO：188。
本發明之另一較佳實施例係關於一種本發明之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：204、CDR2序列SEQ ID NO：206及CDR3序列SEQ ID NO：208；且可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：224、CDR2序列SEQ ID NO：226及CDR3序列SEQ ID NO：228。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：244、CDR2序列SEQ ID NO：246及CDR3序列SEQ ID NO：248；且可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：264、CDR2序列SEQ ID NO：266及CDR3序列SEQ ID NO：268。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：284、CDR2序列SEQ ID NO：286及CDR3序列SEQ ID NO：288；且可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：304、CDR2序列SEQ ID NO：306及CDR3序列SEQ ID NO：308。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：324、CDR2序列SEQ ID NO：326及CDR3序列SEQ ID NO：328；及/或可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：344、CDR2序列SEQ ID NO：346及CDR3序列SEQ ID NO：348。
本發明之另外較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：364、CDR2序列SEQ ID NO：366及CDR3序列SEQ ID NO：368；及/或可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：384、CDR2序列SEQ ID NO：386及CDR3序列SEQ ID NO：388。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：404、CDR2序列SEQ ID NO：406及CDR3序列SEQ ID NO：408；及/或可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：424、CDR2序列SEQ ID NO：426及CDR3序列SEQ ID NO：428。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：444、CDR2序列SEQ ID NO：446及CDR3序列SEQ ID NO：448；且可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：464、CDR2序列SEQ ID NO：466及CDR3序列SEQ ID NO：468。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：484、CDR2序列SEQ ID NO：486及CDR3序列SEQ ID NO：488；及/或可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：504、CDR2序列SEQ ID NO：506及CDR3序列SEQ ID NO：508。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：524、CDR2序列SEQ ID NO：526及CDR3序列SEQ ID NO：528；及/或可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：544、CDR2序列SEQ ID NO：546及CDR3序列SEQ ID NO：548。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：564、CDR2序列SEQ ID NO：566及CDR3序列SEQ ID NO：568；及/或可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：584、CDR2序列SEQ ID NO：586及CDR3序列SEQ ID NO：588。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：604、CDR2序列SEQ ID NO：606及CDR3序列SEQ ID NO：608；及/或可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：624、CDR2序列SEQ ID NO：626及CDR3序列SEQ ID NO：628。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：644、CDR2序列SEQ ID NO：646及CDR3序列SEQ ID NO：648；及/或可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：664、CDR2序列SEQ ID NO：666及CDR3序列SEQ ID NO：668。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：684、CDR2序列SEQ ID NO：686及CDR3序列SEQ ID NO：688；及/或可變輕鏈包含CDR1 序列SEQ ID NO：704、CDR2序列SEQ ID NO：706及CDR3序列SEQ ID NO：708。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：724、CDR2序列SEQ ID NO：726及CDR3序列SEQ ID NO：728；及/或可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：744、CDR2序列SEQ ID NO：746及CDR3序列SEQ ID NO：748。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：764、CDR2序列SEQ ID NO：766及CDR3序列SEQ ID NO：768；及/或可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：784、CDR2序列SEQ ID NO：786及CDR3序列SEQ ID NO：788。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：804、CDR2序列SEQ ID NO：806及CDR3序列SEQ ID NO：808；及/或可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：824、CDR2序列SEQ ID NO：826及CDR3序列SEQ ID NO：828。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：844、CDR2序列SEQ ID NO：846及CDR3序列SEQ ID NO：848；及/或可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：864、CDR2序列SEQ ID NO：866及CDR3序列SEQ ID NO：868。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：884、CDR2序列SEQ ID NO：886及CDR3序列SEQ ID NO：888；及/或可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：904、CDR2序列SEQ ID NO：906及CDR3序列SEQ ID NO：908。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：924、CDR2序列 SEQ ID NO：926及CDR3序列SEQ ID NO：928；及/或可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：944、CDR2序列SEQ ID NO：946及CDR3序列SEQ ID NO：948。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈包含與SEQ ID NO：2至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列及/或可變輕鏈包含SEQ ID NO：22。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈及輕鏈各自與分別SEQ ID NO：2及SEQ ID NO：22中之可變重鏈及輕鏈至少90%一致。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈包含與SEQ ID NO：42至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且可變輕鏈包含與SEQ ID NO：62至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈及輕鏈各自與分別SEQ ID NO：42及SEQ ID NO：62中之可變重鏈及輕鏈至少90%一致。
本發明之另一較佳實施例係關於一種本發明之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈包含與SEQ ID NO：82至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且可變輕鏈包含與SEQ ID NO：102至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈及輕鏈各自與分別SEQ ID NO：82及SEQ ID NO：102中之可變重鏈及輕鏈至少90%一致。
本發明之另一較佳實施例係關於一種本發明之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈包含與SEQ ID NO：122至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且可變輕鏈包含與SEQ ID NO：142至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈及輕鏈各自與分別SEQ ID NO：122及SEQ ID NO：142中之可變重鏈及輕鏈至少90%一致。
本發明之另一較佳實施例係關於一種本發明之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈包含與SEQ ID NO：162至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且可變輕鏈包含與SEQ ID NO：182至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈及輕鏈各自與分別SEQ ID NO：162及SEQ ID NO：182中之可變重鏈及輕鏈至少90%一致。
本發明之另一較佳實施例係關於一種本發明之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈包含與SEQ ID NO：202至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且可變輕鏈包含與SEQ ID NO：222至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈及輕鏈各自與分別SEQ ID NO：202及SEQ ID NO：222中之可變重鏈及輕鏈至少90%一致。
本發明之另一較佳實施例係關於一種本發明之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈包含與SEQ ID NO：242至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且可變輕鏈包含與SEQ ID NO：262至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈及輕鏈各自與分別SEQ ID NO：242及SEQ ID NO：262中之可變重鏈及輕鏈至少90%一致。
本發明之另一較佳實施例係關於一種本發明之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈包含與SEQ ID NO：282至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且可變輕鏈包含與SEQ ID NO：302至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈及輕鏈各自與分別SEQ ID NO：282及SEQ ID NO：302中之可變重鏈及輕鏈至少90%一致。
本發明之另一較佳實施例係關於一種本發明之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈包含與SEQ ID NO：322至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且可變輕鏈包含與SEQ ID NO：342至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈及輕鏈各自與分別SEQ ID NO：322及SEQ ID NO：342中之可變重鏈及輕鏈至少90%一致。
本發明之另一較佳實施例係關於一種本發明之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈包含與SEQ ID NO：362至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且可變輕鏈包含與SEQ ID NO：382至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈及輕鏈各自與分別SEQ ID NO：362及SEQ ID NO：382中之可變重鏈及輕鏈至少90%一致。
本發明之另一較佳實施例係關於一種本發明之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈包含與SEQ ID NO：402至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且可變輕鏈包含與SEQ ID NO：422至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段55，其中可變重鏈及輕鏈各自與分別SEQ ID NO：402及SEQ ID NO：422中之可變重鏈及輕鏈至少90%一致。
本發明之另一較佳實施例係關於一種本發明之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈包含與SEQ ID NO：442至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且可變輕鏈包含與SEQ ID NO：462至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈及輕鏈各自與分別SEQ ID NO：442及SEQ ID NO：462中之可變重鏈及輕鏈至少90%一致。
本發明之另一較佳實施例係關於一種本發明之抗人類 PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈包含與SEQ ID NO：482至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且可變輕鏈包含與SEQ ID NO：502至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈及輕鏈各自與分別SEQ ID NO：482及SEQ ID NO：502中之可變重鏈及輕鏈至少90%一致。
本發明之另一較佳實施例係關於一種本發明之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈包含與SEQ ID NO：522至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且可變輕鏈包含與SEQ ID NO：542至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈及輕鏈各自與分別SEQ ID NO：522及SEQ ID NO：542中之可變重鏈及輕鏈至少90%一致。
本發明之另一較佳實施例係關於一種本發明之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈包含與SEQ ID NO：562至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且可變輕鏈包含與SEQ ID NO：582至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈及輕鏈各自與分別SEQ ID NO：562及SEQ ID NO：582中之可變重鏈及輕鏈至少90%一致。
本發明之另一較佳實施例係關於一種本發明之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈包含與SEQ ID NO：602至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且可變輕鏈包含與SEQ ID NO：622至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈及輕鏈各自與分別SEQ ID NO：602及SEQ ID NO：622中之可變重鏈及輕鏈至少90%一致。
本發明之另一較佳實施例係關於一種本發明之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈包含與SEQ ID NO：642至少80、 85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且可變輕鏈包含與SEQ ID NO：662至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈及輕鏈各自與分別SEQ ID NO：642及SEQ ID NO：662中之可變重鏈及輕鏈至少90%一致。
本發明之另一較佳實施例係關於一種本發明之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈包含與SEQ ID NO：682至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且可變輕鏈包含與SEQ ID NO：702至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈及輕鏈各自與分別SEQ ID NO：682及SEQ ID NO：702中之可變重鏈及輕鏈至少90%一致。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈包含與SEQ ID NO：722至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且可變輕鏈包含與SEQ ID NO：742至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈及輕鏈各自與分別SEQ ID NO：722及SEQ ID NO：742中之可變重鏈及輕鏈至少90%一致。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈包含與SEQ ID NO：762至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且可變輕鏈包含與SEQ ID NO：782至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈及輕鏈各自與分別SEQ ID NO：762及SEQ ID NO：782中之可變重鏈及輕鏈至少90%一致。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈包含與SEQ ID NO：802至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且可變輕鏈包含與SEQ ID NO： 822至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈及輕鏈各自與分別SEQ ID NO：802及SEQ ID NO：822中之可變重鏈及輕鏈至少90%一致。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈包含與SEQ ID NO：842至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且可變輕鏈包含與SEQ ID NO：862至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈及輕鏈各自與分別SEQ ID NO：842及SEQ ID NO：862中之可變重鏈及輕鏈至少90%一致。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈包含與SEQ ID NO：882至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且可變輕鏈包含與SEQ ID NO：902至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈及輕鏈各自與分別SEQ ID NO：882及SEQ ID NO：902中之可變重鏈及輕鏈至少90%一致。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈包含與SEQ ID NO：922至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且可變輕鏈包含與SEQ ID NO：942至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可變重鏈及輕鏈各自與分別SEQ ID NO：922及SEQ ID NO：942中之可變重鏈及輕鏈至少90%一致。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中重鏈包含與SEQ ID NO：1至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且輕鏈包含與SEQ ID NO：21至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中重鏈包含與SEQ ID NO：41至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且輕鏈包含與SEQ ID NO：61至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中重鏈包含與SEQ ID NO：81至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且輕鏈包含與SEQ ID NO：101至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中重鏈包含與SEQ ID NO：121至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且輕鏈包含與SEQ ID NO：141至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中重鏈包含與SEQ ID NO：161至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且輕鏈包含與SEQ ID NO：181至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中重鏈包含與SEQ ID NO：201至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且輕鏈包含與SEQ ID NO：221至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中重鏈包含與SEQ ID NO：241至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且輕鏈包含與SEQ ID NO：261至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中重鏈包含與SEQ ID NO：281至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且輕鏈包含SEQ ID NO：301。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中重鏈包含SEQ ID NO：321且輕鏈包含與SEQ ID NO： 341至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中重鏈包含與SEQ ID NO：361至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且輕鏈包含SEQ ID NO：381。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中重鏈包含SEQ ID NO：401且輕鏈包含與SEQ ID NO：421至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中重鏈包含與SEQ ID NO：441至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且輕鏈包含與SEQ ID NO：461至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中重鏈包含與SEQ ID NO：481至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且輕鏈包含與SEQ ID NO：501至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中重鏈包含與SEQ ID NO：521至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且輕鏈包含SEQ ID NO：541。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中重鏈包含SEQ ID NO：561且輕鏈包含與SEQ ID NO：581至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中重鏈包含與SEQ ID NO：601至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且輕鏈包含SEQ ID NO：621。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中重鏈包含SEQ ID NO：641且輕鏈包含與SEQ ID NO：661至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中重鏈包含與SEQ ID NO：681至少80、85、90、95、 96、97、98、99或100%一致之序列且輕鏈包含與SEQ ID NO：701至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中重鏈包含與SEQ ID NO：721至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且輕鏈包含SEQ ID NO：741。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中重鏈包含SEQ ID NO：761且輕鏈包含與SEQ ID NO：781至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中重鏈包含與SEQ ID NO：801至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且輕鏈包含與SEQ ID NO：821至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中重鏈包含與SEQ ID NO：841至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且輕鏈包含與SEQ ID NO：861至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中重鏈包含與SEQ ID NO：881至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且輕鏈包含SEQ ID NO：901。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中重鏈包含SEQ ID NO：921且輕鏈包含與SEQ ID NO：941至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段係選自由嵌合、人類化及人類抗體或抗體片段組成之群。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段係選自由scFv、駱駝抗體、奈米抗體、IgNAR、F ab 片段、F ab ’ 片段、MetMab樣抗體、單價抗體片段及F(ab ’)2 片段組成之群。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段實質上或完全缺乏N-糖基化及/或O-糖基化。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段包含人類恆定域。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體為IgG1、IgG2、IgG3或IgG4抗體。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段包含已經修飾以改變效應物功能、半衰期、蛋白水解或糖基化中之至少一者的Fc區。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中Fc區含有一或多個改變或消除N-糖基化及/或O-糖基化之突變。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段為人類化抗體或抗體片段。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段結合PCSK9之解離常數(Kd )小於或等於10-2 M、5×10-3 M、10-3 M、5×10-4 M、10-4 M、5×10-5 M、10-5 M、5×10-6 M、10-6 M、5×10-7 M、10-7 M、5×10-8 M、10-8 M、5×10-9 M、10-9 M、5×10-10 M、10-10 M、5×10-11 M、10-11 M、5×10-12 M、10-12 M、5×10-13 M或10-13 M。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段結合PCSK9之解離常數(Kd )小於或等於10-11 M、5×10-12 M或10-12 M。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其結合PCSK9之解離速率小於或等於10-4 S-1 、5×10-5 S-1 、10-5 S-1 、5×10-6 S-1 、10-6 S-1 、5×10-7 S-1 或10-7 S-1 。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段直接或間接連接於可偵測標記或治療 劑。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其在向人類個體投與時會抑制或中和至少一種由PCSK9引發之生物作用。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其在向人類個體投與時會降低血清膽固醇。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段能夠抑制PCSK9與LDLR之結合。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段結合PCSK9之KD 小於約100nM。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段結合PCSK9之KD 小於約10nM.
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段結合PCSK9之KD 小於約1nM。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段結合PCSK9之KD 在約1與約10nM之間。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段結合PCSK9之KD 在約0.1與約1nM之間。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段結合PCSK9之KD 在0.12與7.99nM之間。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段連接於至少一個效應物部分。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中效應物部分包含化學連接子。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段連接於一或多個可偵測部分。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可偵測部分包含螢光染料、酶、受質、生物發光物質、放射性物質、化學發光部分或其混合物。
本發明之另一較佳實施例係關於一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段連接於一或多個功能性部分。
產生針對本發明之抗人類PCSK9抗體或抗體片段之抗特應抗體。
一種適於治療、防治或診斷用途之組合物，其包含治療、防治或診斷有效量之至少一種本發明之抗體或抗體片段。
本發明之另一較佳實施例係關於一種適於皮下投與的組合物，其含有至少一種本發明之抗體或抗體片段。
本發明之另一較佳實施例係關於一種適於靜脈內投與的組合物，其含有至少一種本發明之抗體或抗體片段。
本發明之另一較佳實施例係關於一種適於局部投與的組合物，其含有至少一種本發明之抗體或抗體片段。
本發明之另一較佳實施例係關於一種凍乾組合物，其含有至少一種本發明之抗體或抗體片段。
本發明之另一較佳實施例係關於一種含有至少一種本發明之抗體或抗體片段之組合物，其進一步包含醫藥學上可接受之稀釋劑、載劑、增溶劑、乳化劑、防腐劑或其混合物。
本發明之另一較佳實施例係關於一種含有至少一種本發明之抗體或抗體片段之組合物，其進一步包含另一活性藥劑。
本發明之另一較佳實施例係關於一種含有至少一種本發明之抗體或抗體片段之組合物，其中另一活性藥劑係選自由以下組成之群：士他汀、ACE抑制劑、血管緊張素II受體阻斷劑(ARB)、抗心律不整劑、抗血小板藥物、阿斯匹靈、β阻斷劑、胺碘達隆、地高辛、阿斯匹靈、抗凝劑、地高辛、利尿劑、心臟衰竭藥物、血管舒張劑、血液稀釋劑、其他抗膽固醇藥物(諸如消膽胺(考來烯胺)、吉非羅齊(諾衡、吉考)、歐妙考、泛雙硫醇)、抗高血壓藥、抗致糖尿藥物、氯茴苯酸、磺醯脲及噻 唑啶二酮。
本發明之另一較佳實施例係關於一種含有至少一種本發明之抗體或抗體片段之組合物，其中ACE抑制劑係選自：開搏通(卡托普利)、泛利尿(依那普利)、普尼爾、捷賜瑞(賴諾普利)、洛丁新(貝那普利)、蒙諾普利(福辛普利)、阿泰斯(雷米普利)、阿庫普利(喹那普利)、阿森(培哚普利)、瑪維克(群多普利)、尤瓦斯克(莫西普利)。
本發明之另一較佳實施例係關於一種含有至少一種本發明之抗體或抗體片段之組合物，其中ARB係選自：科紮爾(洛沙坦)、代厄文(纈沙坦)、安博諾(伊貝沙坦)、阿塔坎德(坎地沙坦)及美壓定(替米沙坦)。
本發明之另一較佳實施例係關於一種含有至少一種本發明之抗體或抗體片段之組合物，其中抗心律不整劑係選自坦布考(氟卡胺)、普魯卡比(普魯卡因胺)、可達龍(胺碘達隆)及貝塔派斯(索他洛爾)。
本發明之另一較佳實施例係關於一種含有至少一種本發明之抗體或抗體片段之組合物，其中抗凝劑係選自可與主題抗PCSK9抗體及抗體片段組合使用之抗凝劑，其包括：組織纖維蛋白溶酶原活化劑(TPA)、替奈替普酶、阿替普酶、尿激酶、瑞替普酶及鏈激酶。
本發明之另一較佳實施例係關於一種含有至少一種本發明之抗體或抗體片段之組合物，其中β阻斷劑係選自塞克洛爾(醋丁洛爾)、澤貝塔(比索洛爾)、普萊洛克(艾司洛爾)、心得爾(普萘洛爾)、天諾敏(阿替洛爾)、樂莫丁、特雷待特(拉貝洛爾)、可里格(卡維洛爾)、諾普色及托普洛爾-XL(美托洛爾)。
本發明之另一較佳實施例係關於一種含有至少一種本發明之抗體或抗體片段之組合物，其中鈣通道阻斷劑係選自：諾和克(胺氯地平)、波依定(非洛地平)、卡地贊姆、卡地贊姆CD、卡地贊姆SR、代樂卡XR、地爾替XT、地爾紮克(地爾硫卓)、卡蘭、卡蘭SR、科維拉-HS、異搏定、異搏定SR、維爾寧、維爾寧PM(維拉帕米)、艾達立特、艾達立特CC、普羅卡地、普羅卡地XL(硝苯地平)、卡丁、卡丁SR(尼卡地平)、蘇拉(尼索地平)、瓦斯科(苄普地爾)及為士他汀膽固醇藥物與胺氯地平之組合 之卡度特。
本發明之另一較佳實施例係關於一種含有至少一種本發明之抗體或抗體片段之組合物，其中利尿劑係選自：速尿(呋塞米)、普麥西(布美他尼)、迪馬代克(托塞米)、利尿得(氫氯噻嗪)、紮羅寧(美托拉宗)及安體舒通(螺內酯)。
本發明之另一較佳實施例係關於一種含有至少一種本發明之抗體或抗體片段之組合物，其中心臟衰竭藥物係選自獨步催(多巴酚丁胺)及普利瑪科(米力農)。
本發明之另一較佳實施例係關於一種含有本發明之抗體或片段之組合物，其中血管舒張劑係選自代拉曲特-SR、艾叟-彼得、艾叟雷特、艾索彼得、艾索地爾、艾叟曲特、索比曲特(二硝酸異山梨醇酯)、依姆多(單硝酸異山梨醇酯)及比地爾(含二硝酸異山梨醇酯之聯胺肼)。
本發明之另一較佳實施例係關於一種含有至少一種本發明之抗體或抗體片段之組合物，其中血液稀釋劑係選自華法林(庫馬定)、肝素、洛文諾斯及弗拉格敏。
本發明之另一較佳實施例係關於一種含有本發明之抗體之組合物，其中該組合物進一步包含升高LDLR蛋白質之可用性之另一治療劑。
本發明之另一較佳實施例係關於一種含有至少一種本發明之抗體或抗體片段之組合物，其中該組合物進一步包含阻斷或抑制膽固醇合成之另一治療劑。
本發明之另一較佳實施例係關於一種含有至少一種本發明之抗體或抗體片段之組合物，其中該組合物進一步包含士他汀。
本發明之另一較佳實施例係關於一種含有至少一種本發明之抗體或抗體片段之組合物，其中士他汀係選自阿托伐他汀、西立伐他汀、氟伐他汀、洛伐他汀、美伐他汀、匹伐他汀、普伐他汀、羅素他汀、辛伐他汀或其混合物。
本發明之另一較佳實施例係關於一種含有至少一種本發明之抗體或抗體片段之組合物，其中該組合物進一步包含升高HDL含量 之另一治療劑或降低三酸甘油酯含量之藥劑或兩者。
本發明之另一較佳實施例係關於一種含有至少一種本發明之抗體或抗體片段之組合物，其中該組合物進一步包含貝特。
本發明之另一較佳實施例係關於一種含有至少一種本發明之抗體或抗體片段之組合物，其中貝特包含苯紮貝特、環丙貝特、氯貝特、吉非羅齊、非諾貝特或其混合物。
本發明之另一較佳實施例係關於一種含有至少一種本發明之抗體或抗體片段之組合物，其中該組合物進一步包含膽汁螯合劑。
本發明之另一較佳實施例係關於一種含有至少一種本發明之抗體或抗體片段之組合物，其中膽汁螯合劑包含消膽胺、考來維侖、考來替泊或其混合物。
本發明之另一較佳實施例係關於一種含有至少一種本發明之抗體或抗體片段之組合物，其中該組合物進一步包含降低膽固醇在腸中之吸收之藥劑。
本發明之另一較佳實施例係關於一種含有至少一種本發明之抗體或抗體片段之組合物，其中藥劑包含依折麥布。
本發明之另一較佳實施例係關於一種含有至少一種本發明之抗體或抗體片段之組合物，其中該組合物包含抑制肝三酸甘油酯產生、抑制VLDL分泌或抑制肝三酸甘油酯產生且抑制VLDL分泌之藥劑。
本發明之另一較佳實施例係關於一種含有至少一種本發明之抗體或抗體片段之組合物，其中藥劑包含阿西莫司。
本發明之另一較佳實施例係關於一種含有至少一種本發明之抗體或抗體片段之組合物，其中該組合物進一步包含降低脂質在腸中之吸收之藥劑。
本發明之另一較佳實施例係關於一種含有本發明之抗體之組合物，其中藥劑包含奧利斯泰、利普司他汀或其混合物。
本發明之另一較佳實施例係關於一種含有至少一種本發明之抗體或抗體片段之組合物，其中該組合物進一步包含作為抗高血壓藥之藥劑、治療絞痛症之藥劑或兩者。
本發明之另一較佳實施例係關於一種含有至少一種本發明之抗體或抗體片段之組合物，其中該抗高血壓或抗絞痛症藥劑係選自利尿劑、腎上腺素激導性受體拮抗劑、鈣通道阻斷劑、腎素(renin)抑制劑、ACE抑制劑、血管緊張素II受體拮抗劑、醛固酮拮抗劑、血管舒張劑或α-2促效劑。
本發明之另一較佳實施例係關於一種含有至少一種本發明之抗體或抗體片段之組合物，其中利尿劑包括布美他尼、利尿酸(thacrynic acid)、呋塞米及托塞米；噻嗪化物利尿劑，諸如依匹噻嗪(epitizide)、氫氯噻嗪或氯噻嗪或苄氟噻嗪(bendroflumethiazide)；噻嗪化物樣利尿劑，諸如吲達帕胺(indapamide)、氯噻酮(chlorthalidone)或美托拉宗(metolazone)；保鉀利尿劑，諸如阿米洛利(amiloride)、胺苯蝶啶(triamterene)或螺內酯；腎上腺素激導性受體拮抗劑包括β阻斷劑，諸如阿替洛爾、美托洛爾、納多洛爾(nadolol)、氧烯洛爾(oxprenolol)、品多洛爾(pindolol)、普萘洛爾(propranolol)或噻嗎洛爾(timolol)；α阻斷劑包括多沙唑嗪(doxazosin)、酚妥拉明(phentolamine)、吲哚哌胺(indoramin)、苯氧苄胺(phenoxybenzamine)、哌唑嗪(prazosin)、特拉唑嗪(terazosin)及妥拉唑啉(tolazoline)；混合α+β阻斷劑，諸如布新洛爾(bucindolol)、卡維洛爾(carvedilol)及拉貝洛爾(labetalol)；鈣通道阻斷劑包括二氫吡啶，諸如胺氯地平、非洛地平、依拉地平(isradipine)、樂卡地平(lercanidipine)、尼卡地平(nicardipine)、硝苯地平、尼莫地平(nimodipine)及尼群地平(nitrendipine)；非二氫吡啶，諸如地爾硫卓及維拉帕米；腎素抑制劑諸如阿利克侖(Aliskiren)；ACE抑制劑諸如卡托普利(captopril)、依那普利(enalapril)、福辛普利(fosinopril)、賴諾普利(lisinopril)、培哚普利(perindopril)、喹那普利(quinapril)、雷米普利(ramipril)、群多普利(trandolapril)及貝那普利(benazepril)；血管緊張素II受體拮抗劑諸如坎地沙坦(candesartan)、依普羅沙坦(eprosartan)、伊貝沙坦(irbesartan)、洛沙坦(losartan)、奧美沙坦(olmesartan)、替米沙坦(telmisartan)及纈沙坦(valsartan)；醛固酮拮抗劑諸如依普利酮(eplerenone)及螺內酯；血管舒張劑諸如硝普酸鈉(sodium nitroprusside)；且α-2促效劑諸如氯壓定 (Clonidine)、胍那苄(Guanabenz)、甲基多巴(Methyldopa)、莫索尼定(Moxonidine)、胍乙啶(Guanethidine)或蛇根素鹼(Reserpine)；或硝酸酯，諸如硝基甘油(三硝酸甘油酯)、新戊四醇四硝酸酯、二硝酸異山梨醇酯或單硝酸異山梨醇酯。
本發明之另一較佳實施例係關於一種含有至少一種本發明之抗體或抗體片段之組合物，其進一步包含至少一種其他藥劑，其中該組合允許減輕其中所含之至少一種其他藥劑之不合需要之副作用。
本發明之另一較佳實施例係關於一種含有至少一種本發明之抗體或抗體片段之組合物，其進一步包含至少一種用於發炎之治療劑。
本發明之另一較佳實施例係關於一種含有至少一種本發明之抗體或抗體片段之組合物，其中用於發炎之治療劑包含1型環加氧酶抑制劑、2型環加氧酶抑制劑、p38-MAPK之小分子調節劑、發炎路徑中涉及之細胞內分子之小分子調節劑或其混合物。
本發明之另一較佳實施例係關於一種含有至少一種本發明之抗體或抗體片段之組合物，其係經凍乾、穩定化及/或調配以供藉由注射進行投與。
本發明之另一較佳實施例係關於一種阻斷、抑制或中和與PCSK9相關之一或多種生物作用之方法，其包含向有需要之個體投與有效量之至少一種本發明之抗體或組合物。
本發明之另一較佳實施例係關於治療或預防患者之與血清膽固醇含量升高相關之病狀的方法，其包含向有需要之患者投與有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物。
本發明之另一較佳實施例係關於治療或預防有需要或由於現有病狀而處於發展血清膽固醇含量升高之風險中之患者之血清膽固醇含量升高的方法，其包含根據至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物之有效量向該患者投與有效量之至少一種抗體。
本發明之另一較佳實施例係關於一種方法，其中所治療病狀係選自由以下組成之群：高膽固醇血症、冠心病、高脂血症、高三酸 甘油酯血症、豆固醇血症、動脈粥樣硬化、動脈硬化代謝症候群、急性冠脈症候群、血管發炎、黃瘤、糖尿病、肥胖症、高血壓及絞痛症。
另一較佳實施例為一種治療或預防涉及膽固醇或脂質體內恆定之病症或與其相關之併發症的方法，其包含根據至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物之有效量向患者投與有效量之至少一種抗體。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的治療方法，其中所治療病狀係選自高膽固醇血症、高脂血症、高三酸甘油酯血症及豆固醇血症。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中至少一種經分離抗人類PCSK9抗體或抗體抑制PCSK9與LDLR之結合。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中至少一種經分離抗人類PCSK9抗體或抗體片段導致阻斷或抑制膽固醇合成。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中該方法進一步包含分開投與或共投與另一藥劑，該藥劑升高LDLR蛋白質之可用性或阻斷或抑制膽固醇合成。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中投藥為進一步包括投與以下至少一者之治療方案的一部分：士他汀、ACE抑制劑、血管緊張素II受體阻斷劑(ARB)、抗心律不整劑、抗血小板藥物、阿斯匹靈、β阻斷劑、胺碘達隆、地高辛、阿斯匹靈、抗凝劑、地高辛、利尿劑、心臟衰竭藥物、血管舒張劑、血液稀釋劑、其他抗膽固醇藥物(諸如消膽胺(考來烯胺)、吉非羅齊(諾衡、吉考)、歐妙考、泛雙硫 醇)、抗高血壓藥、抗致糖尿藥物、氯茴苯酸、磺醯脲及噻唑啶二酮。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中ACE抑制劑係選自：開搏通(卡托普利)、泛利尿(依那普利)、普尼爾、捷賜瑞(賴諾普利)、洛丁新(貝那普利)、蒙諾普利(福辛普利)、阿泰斯(雷米普利)、阿庫普利(喹那普利)、阿森(培哚普利)、瑪維克(群多普利)、尤瓦斯克(莫西普利)。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中ARB係選自：科紮爾(洛沙坦)、代厄文(纈沙坦)、安博諾(伊貝沙坦)、阿塔坎德(坎地沙坦)及美壓定(替米沙坦)。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中抗心律不整劑係選自：坦布考(氟卡胺)、普魯卡比(普魯卡因胺)、可達龍(胺碘達隆)及貝塔派斯(索他洛爾)。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中抗凝劑係選自：組織纖維蛋白溶酶原活化劑(TPA)、替奈替普酶、阿替普酶、尿激酶、瑞替普酶及鏈激酶。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中β-阻斷劑係選自：塞克洛爾(醋丁洛爾)、澤貝塔(比索洛爾)、普萊洛克(艾司洛爾)、心得爾(普萘洛爾)、天諾敏(阿替洛爾)、樂莫丁、特雷待特(拉貝洛爾)、可里格(卡維洛爾)、諾普色及托普洛爾-XL(美托洛爾)。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中鈣通道阻斷劑係選自：諾和克(胺氯地平)、波依定(非洛地平)、卡地贊姆、卡地贊姆CD、卡地贊姆SR、代樂卡XR、地爾替XT、地爾紮克(地爾硫卓)、卡蘭、卡蘭SR、科維拉-HS、異搏定、異搏定SR、維爾寧、維 爾寧PM(維拉帕米)、艾達立特、艾達立特CC、普羅卡地、普羅卡地XL(硝苯地平)、卡丁、卡丁SR(尼卡地平)、蘇拉(尼索地平)、瓦斯科(苄普地爾)及為士他汀膽固醇藥物與胺氯地平之組合之卡度特。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中抗利尿劑係選自：速尿(呋塞米)、普麥西(布美他尼)、迪馬代克(托塞米)、利尿得(氫氯噻嗪)、紮羅寧(美托拉宗)及安體舒通(螺內酯)。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中心臟衰竭藥物係選自獨步催(多巴酚丁胺)及普利瑪科(米力農)。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中血管舒張劑係選自：代拉曲特-SR、艾叟-彼得、艾叟雷特、艾索彼得、艾索地爾、艾叟曲特、索比曲特(二硝酸異山梨醇酯)、依姆多(單硝酸異山梨醇酯)及比地爾(含二硝酸異山梨醇酯之聯胺肼)。
本發明之另一較佳實施例係關於一種含有本發明之抗體之方法，其中血液稀釋劑係選自華法林(庫馬定)、肝素、洛文諾斯及弗拉格敏。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中升高LDLR蛋白質之可用性或阻斷或抑制膽固醇合成之藥劑係與抗體或含有其之組合物同時投與。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中相對於抗體或含有其之組合物之投與，升高LDLR蛋白質之可用性或阻斷或抑制膽固醇合成之另一藥劑係依序投與。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中阻斷或抑制膽固醇合成蛋白質之藥劑包含士他汀。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中士他汀係選自阿托伐他汀、西立伐他汀、氟伐他汀、洛伐他汀、美伐他汀、匹伐他汀、普伐他汀、羅素他汀、辛伐他汀或其混合物。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中該方法進一步包含投與升高HDL含量之藥劑、降低三酸甘油酯含量之藥劑或兩者。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中該藥劑包含貝特。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中貝特藥劑包含苯紮貝特、環丙貝特、氯貝特、吉非羅齊、非諾貝特或其混合物。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中該方法進一步包含投與膽汁螯合劑。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中膽汁螯合劑包含消膽胺、考來維侖、考來替泊或其混合物。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中該方法進一步包含投與降低膽固醇在腸中之吸收之藥劑。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中該藥劑包含依折麥布。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物174的方 法，其中該方法進一步包含投與抑制肝三酸甘油酯產生、抑制VLDL分泌或抑制肝三酸甘油酯產生且抑制VLDL分泌之藥劑。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中該藥劑包含阿西莫司。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中該方法進一步包含投與降低脂質在腸中之吸收之藥劑。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中該藥劑包含奧利斯泰、利普司他汀或其混合物。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物174的方法，其中該方法進一步包含投與作為抗高血壓藥之藥劑、治療絞痛症之藥劑或兩者。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中該抗高血壓藥或抗絞痛症藥劑係選自利尿劑、腎上腺素激導性受體拮抗劑、鈣通道阻斷劑、腎素抑制劑、ACE抑制劑、血管緊張素II受體拮抗劑、醛固酮拮抗劑、血管舒張劑或α-2促效劑。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中利尿劑包括布美他尼、利尿酸、呋塞米及托塞米；噻嗪化物利尿劑，諸如依匹噻嗪、氫氯噻嗪或氯噻嗪或苄氟噻嗪；噻嗪化物樣利尿劑，諸如吲達帕胺、氯噻酮或美托拉宗；保鉀利尿劑，諸如阿米洛利、胺苯蝶啶或螺內酯；腎上腺素激導性受體拮抗劑包括β阻斷劑，諸如阿替洛爾、美托洛爾、納多洛爾、氧烯洛爾、品多洛爾、普萘洛爾或噻嗎洛爾；α阻斷劑包括多沙唑嗪、酚妥拉明、吲哚哌胺、苯氧苄胺、哌唑嗪、特拉唑嗪及妥拉唑啉；混合α+β阻斷劑，諸如布新洛爾、卡維洛爾及拉貝洛爾；鈣通道 阻斷劑包括二氫吡啶，諸如胺氯地平、非洛地平、依拉地平、樂卡地平、尼卡地平、硝苯地平、尼莫地平及尼群地平；非二氫吡啶，諸如地爾硫卓及維拉帕米；腎素抑制劑諸如阿利克侖；ACE抑制劑諸如卡托普利、依那普利、福辛普利、賴諾普利、培哚普利、喹那普利、雷米普利、群多普利及貝那普利；血管緊張素II受體拮抗劑諸如坎地沙坦、依普羅沙坦、伊貝沙坦、洛沙坦、奧美沙坦、替米沙坦及纈沙坦；醛固酮拮抗劑諸如依普利酮及螺內酯；血管舒張劑諸如硝普酸鈉；且α-2促效劑諸如氯壓定、胍那苄、甲基多巴、莫索尼定、胍乙啶或蛇根素鹼；或硝酸酯，諸如硝基甘油(三硝酸甘油酯)、新戊四醇四硝酸酯、二硝酸異山梨醇酯或單硝酸異山梨醇酯。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中該方法進一步包含投與至少一種其他藥劑，其中該組合允許減輕至少一種其他藥劑之不合需要之副作用。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中抗體或抗體片段或含有其之組合物及至少一種其他藥劑係同時投與。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中抗體或抗體片段係在至少一種其他藥劑之前或之後投與。
一種降低個體之血清膽固醇含量之方法，包含向個體投與有效量之至少一種本發明之抗人類PCSK9抗體或抗體片段或含有其之組合物。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中投與至少一種經分離抗人類PCSK9抗體或抗體片段或組合物會抑制PCSK9與LDLR之結合。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法， 其中該方法進一步包含投與升高LDLR蛋白質之可用性或降低血清膽固醇之藥劑。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中升高LDLR蛋白質之可用性或降低膽固醇之藥劑係與抗體或含有其之組合物同時投與。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中升高LDLR蛋白質之可用性或降低血清膽固醇之藥劑係依序投與。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中降低血清膽固醇之藥劑包含士他汀。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中士他汀包含阿托伐他汀、西立伐他汀、氟伐他汀、洛伐他汀、美伐他汀、匹伐他汀、普伐他汀、羅素他汀、辛伐他汀或其組合。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中該方法進一步包含投與升高HDL含量之藥劑、降低三酸甘油酯含量之藥劑或兩者。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中該藥劑包含貝特。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中貝特包含苯紮貝特、環丙貝特、氯貝特、吉非羅齊、非諾貝特或其混合物。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法， 其中該方法進一步包含投與膽汁螯合劑。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中膽汁螯合劑包含消膽胺、考來維侖、考來替泊或其混合物。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中該方法進一步包含投與降低膽固醇在腸中之吸收之藥劑。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中該藥劑包含依折麥布。
本發明之另一較佳實施例係關於任一含有本發明之抗體之方法，其中該方法進一步包含投與抑制肝三酸甘油酯產生、抑制VLDL分泌或抑制肝三酸甘油酯產生且抑制VLDL分泌之藥劑。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中該藥劑包含阿西莫司、吉非羅齊或菸鹼酸及菸鹼酸類似物。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中該方法進一步包含投與降低脂質在腸中之吸收之藥劑。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中該藥劑包含奧利斯泰、利普司他汀或其混合物。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中抗體或抗體片段係在其他活性藥劑之前或之後投與。
另一實施例係關於一種增加個體之LDLR蛋白質含量之方法，該方法包含向個體投與有效量之至少一種如本文所述之本發明之經分離抗體或抗體片段或含有其之組合物。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少 一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中投與至少一種經分離抗人類PCSK9抗體或抗體片段會抑制PCSK9與LDLR之結合。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中該方法進一步包含投與升高LDLR蛋白質之可用性之另一藥劑或降低血清膽固醇之藥劑。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中升高LDLR蛋白質之可用性或降低血清膽固醇之藥劑係與抗體或抗體組合物同時投與。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中相對於抗體或抗體組合物，升高LDLR蛋白質之可用性或降低血清膽固醇之藥劑係依序投與。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中降低血清膽固醇蛋白質之藥劑包含士他汀。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中士他汀包含阿托伐他汀、西立伐他汀、氟伐他汀、洛伐他汀、美伐他汀、匹伐他汀、普伐他汀、羅素他汀、辛伐他汀或其組合。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中該方法進一步包含投與升高HDL含量之藥劑、降低三酸甘油酯含量之藥劑或兩者。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中另一藥劑包含貝特。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中貝特包含苯紮貝特、環丙貝特、氯貝特、吉非羅齊、非諾貝特或其混合物。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物234的方法，其中該方法進一步包含投與膽汁螯合劑。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中膽汁螯合劑包含消膽胺、考來維侖、考來替泊或其混合物。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中該方法進一步包含投與降低膽固醇在腸中之吸收之藥劑。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中該藥劑包含依折麥布。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中該方法進一步包含投與抑制肝三酸甘油酯產生、抑制VLDL分泌或抑制肝三酸甘油酯產生且抑制VLDL分泌之藥劑。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中該藥劑包含阿西莫司、吉非羅齊或菸鹼酸或菸鹼酸類似物。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中該方法進一步包含投與降低脂質在腸中之吸收之藥劑。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物250的方法，其中該藥劑包含奧利斯泰、利普司他汀或其混合物。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中該方法進一步包含投與作為抗高血壓藥、治療絞痛症或作為抗高血壓藥且治療絞痛症之藥劑。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中該藥劑包含胺氯地平、利尿劑、腎上腺素激導性受體拮抗劑、鈣通道阻斷劑、腎素抑制劑、ACE抑制劑、血管緊張素II受體拮抗劑、醛固酮拮抗劑、血管舒張劑、硝酸酯或α-2促效劑。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中利尿劑包括布美他尼、利尿酸、呋塞米及托塞米；噻嗪化物利尿劑，諸如依匹噻嗪、氫氯噻嗪或氯噻嗪或苄氟噻嗪；噻嗪化物樣利尿劑，諸如吲達帕胺、氯噻酮或美托拉宗；保鉀利尿劑，諸如阿米洛利、胺苯蝶啶或螺內酯；腎上腺素激導性受體拮抗劑包括β阻斷劑，諸如阿替洛爾、美托洛爾、納多洛爾、氧烯洛爾、品多洛爾、普萘洛爾或噻嗎洛爾；α阻斷劑包括多沙唑嗪、酚妥拉明、吲哚哌胺、苯氧苄胺、哌唑嗪、特拉唑嗪及妥拉唑啉；混合α+β阻斷劑，諸如布新洛爾、卡維洛爾及拉貝洛爾；鈣通道阻斷劑包括二氫吡啶，諸如胺氯地平、非洛地平、依拉地平、樂卡地平、尼卡地平、硝苯地平、尼莫地平及尼群地平；非二氫吡啶，諸如地爾硫卓及維拉帕米；腎素抑制劑諸如阿利克侖；ACE抑制劑諸如卡托普利、依那普利、福辛普利、賴諾普利、培哚普利、喹那普利、雷米普利、群多普利及貝那普利；血管緊張素II受體拮抗劑諸如坎地沙坦、依普羅沙坦、伊貝沙坦、洛沙坦、奧美沙坦、替米沙坦及纈沙坦；醛固酮拮抗劑諸如依普利酮及螺內酯；血管舒張劑諸如硝普酸鈉；且α-2促效劑諸如氯壓定、胍那苄、甲基多巴、莫索尼定、胍乙啶或蛇根素鹼；或硝酸酯，諸如硝基甘油(三硝酸甘油酯)、新戊四醇四硝酸酯、二硝酸異山梨醇酯或單硝酸異山梨醇酯。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少 一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中抗體或抗體片段或含有其之組合物及至少一種其他藥劑係同時投與。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中抗體或抗體片段或含有其之組合物及至少一種其他藥劑係視情況藉由不同給藥方法分開投與。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中抗體或抗體片段係在至少一種其他藥劑之前或之後投與。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中抗體或抗體片段或含有其之組合物係與抑制發炎之藥劑一起投與。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，其中用於發炎之治療劑包含1型環加氧酶抑制劑、2型環加氧酶抑制劑、p38-MAPK之小分子調節劑、發炎路徑中涉及之細胞內分子之小分子調節劑或其混合物。
另一較佳實施例係關於一種使用有效量之至少一種本發明之抗體或含有其之視情況具有另一活性藥劑之組合物的方法，該抗體或組合物係用於治療或預防選自以下之疾病、或疾病或病狀之併發症：高膽固醇血症、心臟病、代謝症候群、糖尿病、冠心病、中風、心血管疾病、阿茲海默氏病、血脂異常、總血清膽固醇升高、LDL升高、三酸甘油酯升高、VLDL升高、低HDL、代謝症候群、糖尿病、家族性組合高脂血症、家族性高三酸甘油酯血症、家族性高膽固醇血症，包括異型接合高膽固醇血症、同型接合高膽固醇血症、家族性缺陷脂蛋白元B-100；多基因高膽固醇血症；殘粒移除疾病、肝脂肪酶缺乏症；繼發於以下任一者之血脂異常：膳食不慎重、甲狀腺機能減退、藥物(包括雌激素及孕酮療法、β-阻斷劑及噻嗪化物利尿劑)；腎病症候群、慢性腎衰竭、庫興氏症候群、原發性膽汁性硬化、肝醣儲積症、肝細胞瘤、膽汁鬱積、肢端肥大症、胰島素 瘤、單一性生長激素缺乏症及酒精誘發性高三酸甘油酯血症；動脈粥樣硬化疾病，諸如冠心病、冠狀動脈疾病、周邊動脈疾病、中風(缺血性及出血性)、心絞痛、腦血管疾病及急性冠脈症候群、心肌梗塞；降低以下之風險：非致命性心臟病發作、致命性及非致命性中風、某些類型之心臟手術、因心臟衰竭之住院、心臟病患者之胸痛、及/或由已有心臟病引起之心血管事件，該已有心臟病諸如先前心臟病發作、先前心臟手術及/或伴有動脈阻塞跡象之胸痛；或降低復發性心血管事件之風險。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼抗人類PCSK9抗體或抗體片段或其可變重鏈或輕鏈且在適合宿主細胞中表現時導致表現抗人類PCSK9抗體或抗體片段或其可變重鏈或輕鏈的經分離核酸，其中由該或該等核酸編碼之該抗體或抗體片段與選自由以下組成之群之抗人類PCSK9抗體競爭及/或特異性結合人類PCSK9上之與選自由以下組成之群之抗人類PCSK9抗體相同或重疊之抗原決定基：Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab10、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab20、Ab21、Ab22、Ab23及Ab24。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種表現本發明之抗體或抗體片段之核酸，其中該所表現抗體或抗體片段特異性結合人類PCSK9上之與選自由以下組成之群之抗人類PCSK9抗體相同或重疊之抗原決定基：Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab10、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab20、Ab21、Ab22、Ab23及Ab24。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種表現本發明之抗體或抗體片段之核酸，其中可在偵測抗人類PCSK9抗體與10-15聚體肽之文庫中之一或多種肽之結合的結合分析中鑒別該(該等)抗原決定基，該等10-15聚體肽為對應於人類PCSK9多肽之全部或實質上全部長度的重疊片段。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種表現本發明之抗體或抗體片段之核酸，其中使用西方免疫墨點分析來確定藉此結合之抗 原決定基，該西方免疫墨點分析藉由使用當該抗體或抗體片段與該文庫中之肽發生特異性結合時發射可偵測化學發光信號之化學發光標記來偵測該抗體或抗體片段與該文庫中該等10-15聚體肽中之一或多者的特異性結合。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種表現本發明之抗體或抗體片段之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該所表現抗體或抗體片段含有選自由以下組成之群之抗PCSK9抗體的至少2個互補決定區(CDR)：Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab10、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab20、Ab21、Ab22、Ab23及Ab24。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種表現本發明之抗體或抗體片段之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該所表現抗人類抗PCSK9抗體或抗體片段含有選自由以下組成之群之抗PCSK9抗體的至少3個互補決定區(CDR)：Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab10、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab20、Ab21、Ab22、Ab23及Ab24。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種表現本發明之抗體或抗體片段之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該所表現抗人類PCSK9抗體或抗體片段含有選自由以下組成之群之抗PCSK9抗體的至少4個互補決定區(CDR)：Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab10、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab20、Ab21、Ab22、Ab23及Ab24。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種表現本發明之抗體或抗體片段之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該所表現抗人類PCSK9抗體或抗體片段含有選自由以下組成之群之抗PCSK9抗體的至少5個互補決定區(CDR)：Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab10、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab20、Ab21、Ab22、Ab23及Ab24。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種表現本發明之 抗體或抗體片段之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該所表現抗體或抗體片段含有選自由以下組成之群之抗PCSK9抗體的全部6個互補決定區(CDR)：Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab10、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab20、Ab21、Ab22、Ab23及Ab24。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種表現本發明之抗體或抗體片段之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該所表現抗人類PCSK9抗體或抗體片段含有(a)可變重鏈，其包含選自由以下組成之群之CDR1序列：SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：44、SEQ ID NO：84、SEQ ID NO：124、SEQ ID NO：164、SEQ ID NO：204、SEQ ID NO：244、SEQ ID NO：284、SEQ ID NO：324、SEQ ID NO：364、SEQ ID NO：404、SEQ ID NO：444、SEQ ID NO：484、SEQ ID NO：524、SEQ ID NO：564、SEQ ID NO：604、SEQ ID NO：644、SEQ ID NO：684、SEQ ID NO：724、SEQ ID NO：764、SEQ ID NO：804、SEQ ID NO：844、SEQ ID NO：884及SEQ ID NO：924；選自由以下組成之群之CDR2序列：SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：46、SEQ ID NO：86、SEQ ID NO：126、SEQ ID NO：166、SEQ ID NO：206、SEQ ID NO：246、SEQ ID NO：286、SEQ ID NO：326、SEQ ID NO：366、SEQ ID NO：406、SEQ ID NO：446、SEQ ID NO：486、SEQ ID NO：526、SEQ ID NO：566、SEQ ID NO：606、SEQ ID NO：646、SEQ ID NO：686、SEQ ID NO：726、SEQ ID NO：766、SEQ ID NO：806、SEQ ID NO：846、SEQ ID NO：886及SEQ ID NO：926；及選自由以下組成之群之CDR3序列：SEQ ID NO：8、SEQ ID NO：48、SEQ ID NO：88、SEQ ID NO：128、SEQ ID NO：168、SEQ ID NO：208、SEQ ID NO：248、SEQ ID NO：288、SEQ ID NO：328、SEQ ID NO：368、SEQ ID NO：408、SEQ ID NO：448、SEQ ID NO：488、SEQ ID NO：528、SEQ ID NO：568、SEQ ID NO：608、SEQ ID NO：648、SEQ ID NO：688、SEQ ID NO：728、SEQ ID NO：768、SEQ ID NO：808、SEQ ID NO：848、SEQ ID NO：888及SEQ ID NO：928；及/或 (b)可變輕鏈，其包含選自由以下組成之群之CDR1序列：SEQ ID NO：24、SEQ ID NO：64、SEQ ID NO：104、SEQ ID NO：144、SEQ ID NO：184、SEQ ID NO：224、SEQ ID NO：264、SEQ ID NO：304、SEQ ID NO：344、SEQ ID NO：384、SEQ ID NO：424、SEQ ID NO：464、SEQ ID NO：504、SEQ ID NO：544、SEQ ID NO：584、SEQ ID NO：624、SEQ ID NO：664、SEQ ID NO：704、SEQ ID NO：744、SEQ ID NO：784、SEQ ID NO：824、SEQ ID NO：864、SEQ ID NO：904及SEQ ID NO：944；選自由以下組成之群之CDR2序列：SEQ ID NO：26、SEQ ID NO：66、SEQ ID NO：106、SEQ ID NO：146、SEQ ID NO：186、SEQ ID NO：226、SEQ ID NO：266、SEQ ID NO：306、SEQ ID NO：346、SEQ ID NO：386、SEQ ID NO：426、SEQ ID NO：466、SEQ ID NO：506、SEQ ID NO：546、SEQ ID NO：586、SEQ ID NO：626、SEQ ID NO：666、SEQ ID NO：706、SEQ ID NO：746、SEQ ID NO：786、SEQ ID NO：826、SEQ ID NO：866、SEQ ID NO：906及SEQ ID NO：946；及選自由以下組成之群之CDR3序列：SEQ ID NO：28、SEQ ID NO：68、SEQ ID NO：108、SEQ ID NO：148、SEQ ID NO：188、SEQ ID NO：228、SEQ ID NO：268、SEQ ID NO：308、SEQ ID NO：348、SEQ ID NO：388、SEQ ID NO：428、SEQ ID NO：468、SEQ ID NO：508、SEQ ID NO：548、SEQ ID NO：588、SEQ ID NO：628、SEQ ID NO：668、SEQ ID NO：708、SEQ ID NO：748、SEQ ID NO：788、SEQ ID NO：828、SEQ ID NO：868、SEQ ID NO：908及SEQ ID NO：948，其進一步限制條件為任何以上鑒別之CDR多肽之一或兩個殘基可經另一胺基酸取代。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種表現本發明之抗體或抗體片段之核酸，其中由該或該等核酸編碼之可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：4、CDR2序列SEQ ID NO：6及CDR3序列SEQ ID NO：8；及/或可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：24、CDR2序列SEQ ID NO：26及CDR3序列SEQ ID NO：28。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種表現本發明之抗體或抗體片段之核酸，其中由該或該等核酸編碼之可變重鏈包含CDR1 序列SEQ ID NO：44、CDR2序列SEQ ID NO：46及CDR3序列SEQ ID NO：48；及/或可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：64、CDR2序列SEQ ID NO：66及CDR3序列SEQ ID NO：68。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種表現本發明之抗體或抗體片段之核酸，其中由該或該等核酸編碼之可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：84、CDR2序列SEQ ID NO：86及CDR3序列SEQ ID NO：88；及/或可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：104、CDR2序列SEQ ID NO：106及CDR3序列SEQ ID NO：108。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：124、CDR2序列SEQ ID NO：126及CDR3序列SEQ ID NO：128；及/或可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：144、CDR2序列SEQ ID NO：146及CDR3序列SEQ ID NO：148。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：164、CDR2序列SEQ ID NO：166及CDR3序列SEQ ID NO：168；且可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：184、CDR2序列SEQ ID NO：186及CDR3序列SEQ ID NO：188。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中該所表現抗人類PCSK9抗體或抗體片段含有包含CDR1序列SEQ ID NO：204、CDR2序列SEQ ID NO：206及CDR3序列SEQ ID NO：208的可變重鏈；且可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：224、CDR2序列SEQ ID NO：226及CDR3序列SEQ ID NO：228。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：244、CDR2序列SEQ ID NO：246及CDR3序列SEQ ID NO：248；且可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：264、CDR2序列SEQ ID NO：266及CDR3序列SEQ ID NO：268。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發 明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：284、CDR2序列SEQ ID NO：286及CDR3序列SEQ ID NO：288；且可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：304、CDR2序列SEQ ID NO：306及CDR3序列SEQ ID NO：308。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：324、CDR2序列SEQ ID NO：326及CDR3序列SEQ ID NO：328；及/或可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：344、CDR2序列SEQ ID NO：346及CDR3序列SEQ ID NO：348。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：364、CDR2序列SEQ ID NO：366及CDR3序列SEQ ID NO：368；及/或可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：384、CDR2序列SEQ ID NO：386及CDR3序列SEQ ID NO：388。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：404、CDR2序列SEQ ID NO：406及CDR3序列SEQ ID NO：408；及/或可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：424、CDR2序列SEQ ID NO：426及CDR3序列SEQ ID NO：428。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：444、CDR2序列SEQ ID NO：446及CDR3序列SEQ ID NO：448；且可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：464、CDR2序列SEQ ID NO：466及CDR3序列SEQ ID NO：468。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：484、CDR2序列SEQ ID NO：486及CDR3序列SEQ ID NO：488；及/或可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：504、CDR2序列SEQ ID NO：506及CDR3序列SEQ ID NO：508。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：524、CDR2序列SEQ ID NO：526及CDR3序列SEQ ID NO：528；及/或可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：544、CDR2序列SEQ ID NO：546及CDR3序列SEQ ID NO：548。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：564、CDR2序列SEQ ID NO：566及CDR3序列SEQ ID NO：568；及/或可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：584、CDR2序列SEQ ID NO：586及CDR3序列SEQ ID NO：588。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：604、CDR2序列SEQ ID NO：606及CDR3序列SEQ ID NO：608；及/或可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：624、CDR2序列SEQ ID NO：626及CDR3序列SEQ ID NO：628。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：644、CDR2序列SEQ ID NO：646及CDR3序列SEQ ID NO：648；及/或可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：664、CDR2序列SEQ ID NO：666及CDR3序列SEQ ID NO：668。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：684、CDR2序列SEQ ID NO：686及CDR3序列SEQ ID NO：688；及/或可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：704、CDR2序列SEQ ID NO：706及CDR3序列SEQ ID NO：708。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：724、CDR2序列SEQ ID NO：726及CDR3序列SEQ ID NO：728；及/或可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：744、CDR2序列SEQ ID NO：746及CDR3序列SEQ ID NO：748。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：764、CDR2序列SEQ ID NO：766及CDR3序列SEQ ID NO：768；及/或可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：784、CDR2序列SEQ ID NO：786及CDR3序列SEQ ID NO：788。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：804、CDR2序列SEQ ID NO：806及CDR3序列SEQ ID NO：808；及/或可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：824、CDR2序列SEQ ID NO：826及CDR3序列SEQ ID NO：828。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：844、CDR2序列SEQ ID NO：846及CDR3序列SEQ ID NO：848；及/或可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：864、CDR2序列SEQ ID NO：866及CDR3序列SEQ ID NO：868。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：884、CDR2序列SEQ ID NO：886及CDR3序列SEQ ID NO：888；及/或由該或該等核酸編碼之可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：904、CDR2序列SEQ ID NO：906及CDR3序列SEQ ID NO：908。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：924、CDR2序列SEQ ID NO：926及CDR3序列SEQ ID NO：928；及/或由該或該等核酸編碼之可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：944、CDR2序列SEQ ID NO：946及CDR3序列SEQ ID NO：948。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之可變重鏈包含與SEQ ID NO：2至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列及/或由該或 該等核酸編碼之可變輕鏈包含SEQ ID NO：22。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中可變重鏈及輕鏈各自與分別SEQ ID NO：2及SEQ ID NO：22中之可變重鏈及輕鏈至少90%一致。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之可變重鏈包含與SEQ ID NO：42至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之可變輕鏈包含與SEQ ID NO：62至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中可變重鏈及輕鏈各自與分別SEQ ID NO：42及SEQ ID NO：62中之可變重鏈及輕鏈至少90%一致。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之可變重鏈包含與SEQ ID NO：82至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之可變輕鏈包含與SEQ ID NO：102至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中可變重鏈及輕鏈各自與分別SEQ ID NO：82及SEQ ID NO：102中之可變重鏈及輕鏈至少90%一致。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之可變重鏈包含與SEQ ID NO：122至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之可變輕鏈包含與SEQ ID NO：142至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中可變重鏈及輕鏈各自與分別SEQ ID NO：122及SEQ ID NO：142中之可變重鏈及輕鏈至少90%一致。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發 明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之可變重鏈包含與SEQ ID NO：162至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之可變輕鏈包含與SEQ ID NO：182至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中可變重鏈及輕鏈各自與分別SEQ ID NO：162及SEQ ID NO：182中之可變重鏈及輕鏈至少90%一致。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之可變重鏈包含與SEQ ID NO：202至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之可變輕鏈包含與SEQ ID NO：222至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中可變重鏈及輕鏈各自與分別SEQ ID NO：202及SEQ ID NO：222中之可變重鏈及輕鏈至少90%一致。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之可變重鏈包含與SEQ ID NO：242至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之可變輕鏈包含與SEQ ID NO：262至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，47，其中可變重鏈及輕鏈各自與分別SEQ ID NO：242及SEQ ID NO：262中之可變重鏈及輕鏈至少90%一致。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之可變重鏈包含與SEQ ID NO：282至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之可變輕鏈包含與SEQ ID NO：302至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發 明之抗體之核酸，其中可變重鏈及輕鏈各自與分別SEQ ID NO：282及SEQ ID NO：302中之可變重鏈及輕鏈至少90%一致。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之可變重鏈包含與SEQ ID NO：322至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之可變輕鏈包含與SEQ ID NO：342至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中可變重鏈及輕鏈各自與分別SEQ ID NO：322及SEQ ID NO：342中之可變重鏈及輕鏈至少90%一致。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之可變重鏈包含與SEQ ID NO：362至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之可變輕鏈包含與SEQ ID NO：382至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中可變重鏈及輕鏈各自與分別SEQ ID NO：362及SEQ ID NO：382中之可變重鏈及輕鏈至少90%一致。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之可變重鏈包含與SEQ ID NO：402至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之可變輕鏈包含與SEQ ID NO：422至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，55，其中可變重鏈及輕鏈各自與分別SEQ ID NO：402及SEQ ID NO：422中之可變重鏈及輕鏈至少90%一致。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之可變重鏈包含與SEQ ID NO：442至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或 該等核酸編碼之可變輕鏈包含與SEQ ID NO：462至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中可變重鏈及輕鏈各自與分別SEQ ID NO：442及SEQ ID NO：462中之可變重鏈及輕鏈至少90%一致。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之可變重鏈包含與SEQ ID NO：482至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之可變輕鏈包含與SEQ ID NO：502至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中可變重鏈及輕鏈各自與分別SEQ ID NO：482及SEQ ID NO：502中之可變重鏈及輕鏈至少90%一致。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之可變重鏈包含與SEQ ID NO：522至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之可變輕鏈包含與SEQ ID NO：542至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中可變重鏈及輕鏈各自與分別SEQ ID NO：522及SEQ ID NO：542中之可變重鏈及輕鏈至少90%一致。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之可變重鏈包含與SEQ ID NO：562至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之可變輕鏈包含與SEQ ID NO：582至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中可變重鏈及輕鏈各自與分別SEQ ID NO：562及SEQ ID NO：582中之可變重鏈及輕鏈至少90%一致。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之可變重鏈包含與SEQ ID NO：602至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之可變輕鏈包含與SEQ ID NO：622至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中可變重鏈及輕鏈各自與分別SEQ ID NO：602及SEQ ID NO：622中之可變重鏈及輕鏈至少90%一致。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之可變重鏈包含與SEQ ID NO：642至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之可變輕鏈包含與SEQ ID NO：662至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中可變重鏈及輕鏈各自與分別SEQ ID NO：642及SEQ ID NO：662中之可變重鏈及輕鏈至少90%一致。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之可變重鏈包含與SEQ ID NO：682至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之可變輕鏈包含與SEQ ID NO：702至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中可變重鏈及輕鏈各自與分別SEQ ID NO：682及SEQ ID NO：702中之可變重鏈及輕鏈至少90%一致。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之可變重鏈包含與SEQ ID NO：722至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之可變輕鏈包含與SEQ ID NO：742至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中可變重鏈及輕鏈各自與分別SEQ ID NO：722及SEQ ID NO：742中之可變重鏈及輕鏈至少90%一致。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之可變重鏈包含與SEQ ID NO：762至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之可變輕鏈包含與SEQ ID NO：782至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中可變重鏈及輕鏈各自與分別SEQ ID NO：762及SEQ ID NO：782中之可變重鏈及輕鏈至少90%一致。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之可變重鏈包含與SEQ ID NO：802至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之可變輕鏈包含與SEQ ID NO：822至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中可變重鏈及輕鏈各自與分別SEQ ID NO：802及SEQ ID NO：822中之可變重鏈及輕鏈至少90%一致。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之可變重鏈包含與SEQ ID NO：842至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之可變輕鏈包含與SEQ ID NO：862至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中可變重鏈及輕鏈各自與分別SEQ ID NO：842及SEQ ID NO：862中之可變重鏈及輕鏈至少90%一致。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之可變重鏈包含與SEQ ID NO： 882至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之可變輕鏈包含與SEQ ID NO：902至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中可變重鏈及輕鏈各自與分別SEQ ID NO：882及SEQ ID NO：902中之可變重鏈及輕鏈至少90%一致。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之可變重鏈包含與SEQ ID NO：922至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之可變輕鏈包含與SEQ ID NO：942至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中可變重鏈及輕鏈各自與分別SEQ ID NO：922及SEQ ID NO：942中之可變重鏈及輕鏈至少90%一致。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之重鏈包含與SEQ ID NO：1至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之輕鏈包含與SEQ ID NO：21至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之重鏈包含與SEQ ID NO：41至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之輕鏈包含與SEQ ID NO：61至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之重鏈包含與SEQ ID NO：81至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之輕鏈包含與SEQ ID NO：101至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之重鏈包含與SEQ ID NO：121至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之輕鏈包含與SEQ ID NO：141至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之重鏈包含與SEQ ID NO：161至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之輕鏈包含與SEQ ID NO：181至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之重鏈包含與SEQ ID NO：201至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之輕鏈包含與SEQ ID NO：221至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之重鏈包含與SEQ ID NO：241至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之輕鏈包含與SEQ ID NO：261至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之重鏈包含與SEQ ID NO：281至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之輕鏈包含SEQ ID NO：301。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之重鏈包含SEQ ID NO：321且由該或該等核酸編碼之輕鏈包含與SEQ ID NO：341至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發 明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之重鏈包含與SEQ ID NO：361至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之輕鏈包含SEQ ID NO：381。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之重鏈包含SEQ ID NO：401且由該或該等核酸編碼之輕鏈包含與SEQ ID NO：421至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之重鏈包含與SEQ ID NO：441至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之輕鏈包含與SEQ ID NO：461至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之重鏈包含與SEQ ID NO：481至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之輕鏈包含與SEQ ID NO：501至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之重鏈包含與SEQ ID NO：521至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之輕鏈包含SEQ ID NO：541。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之重鏈包含SEQ ID NO：561且由該或該等核酸編碼之輕鏈包含與SEQ ID NO：581至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之重鏈包含與SEQ ID NO：601至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之輕鏈包含SEQ ID NO：621。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之重鏈包含SEQ ID NO：641且由該或該等核酸編碼之輕鏈包含與SEQ ID NO：661至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之重鏈包含與SEQ ID NO：681至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之輕鏈包含與SEQ ID NO：701至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之重鏈包含與SEQ ID NO：721至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之輕鏈包含SEQ ID NO：741。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之重鏈包含SEQ ID NO：761且由該或該等核酸編碼之輕鏈包含與SEQ ID NO：781至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之重鏈包含與SEQ ID NO：801至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之輕鏈包含與SEQ ID NO：821至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之重鏈包含與SEQ ID NO：841至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之輕鏈包含與SEQ ID NO：861至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之重鏈包含與SEQ ID NO：881 至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之輕鏈包含SEQ ID NO：901。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之重鏈包含SEQ ID NO：921且由該或該等核酸編碼之輕鏈包含與SEQ ID NO：941至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之抗體或抗體片段係選自由嵌合、人類化及人類抗體或抗體片段組成之群。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之所表現抗體或抗體片段係選自由scFv、駱駝抗體、奈米抗體、IgNAR、F ab 片段、F ab ’ 片段、MetMab、單價抗體片段及F(ab ’)2 片段組成之群。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之所表現抗體或抗體片段實質上或完全缺乏N-糖基化及/或O-糖基化。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之所表現抗體或抗體片段包含人類恆定域。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中由該或該等核酸編碼之所表現抗體為IgG1、IgG2、IgG3或IgG4抗體。
本發明之另一較佳實施例係關於一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸，其中編碼該抗體或抗體片段之該或該等核酸包含編碼與以下至少80、90、95、96、97、98、99或100%一致之VH及VL區之序列：SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：32；SEQ ID NO：52、SEQ ID NO：72；SEQ ID NO：92、SEQ ID NO：112；SEQ ID NO：132、SEQ ID NO：152；SEQ ID NO：172、SEQ ID NO：192；SEQ ID NO：212、SEQ ID NO：232、SEQ ID NO：252、SEQ ID NO：272；SEQ ID NO：292、SEQ ID NO：312； SEQ ID NO：332、SEQ ID NO：352；SEQ ID NO：372、SEQ ID NO：392；SEQ ID NO：412、SEQ ID NO：432；SEQ ID NO：452、SEQ ID NO：472；SEQ ID NO：492、SEQ ID NO：512、SEQ ID NO：532、SEQ ID NO：552、SEQ ID NO：572、SEQ ID NO：592、SEQ ID NO：612、SEQ ID NO：632、SEQ ID NO：652、SEQ ID NO：672；SEQ ID NO：692；SEQ ID NO：712；SEQ ID NO：732；SEQ ID NO：752；SEQ ID NO：772；SEQ ID NO：792；SEQ ID NO：812；SEQ ID NO：832；SEQ ID NO：852；SEQ ID NO：872；SEQ ID NO：892；SEQ ID NO：912；SEQ ID NO：932；SEQ ID NO：952；或其密碼子簡併物。
一或多種載體，其包含一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸序列。
一種宿主細胞，其包含一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸序列或一或多種含有其之載體。
本發明之另一較佳實施例係關於一種含有一或多種編碼根據本發明之抗體之核酸的宿主細胞，其中該宿主細胞為哺乳動物、細菌、真菌、酵母、禽類或昆蟲細胞。
本發明之另一較佳實施例係關於一種編碼根據本發明之抗體之宿主細胞，其包含絲狀真菌或酵母。
本發明之另一較佳實施例係關於一種編碼根據本發明之抗體之宿主細胞，其包含絲狀真菌或酵母，包括畢赤酵母、芬蘭畢赤酵母、喜海藻糖畢赤酵母、Pichia koclamae、膜醭畢赤酵母、微小畢赤酵母(Ogataea minuta、林德納畢赤酵母)、仙人掌畢赤酵母、耐熱畢赤酵母、柳畢赤酵母、松櫟畢赤酵母、皮傑普畢赤酵母、樹幹畢赤酵母、甲醇畢赤酵母、畢赤酵母屬、釀酒酵母、酵母屬、多形漢遜酵母、克魯維酵母屬、乳酸克魯維酵母、白色念珠菌、構巢麯黴、黑麯黴、米麯黴、里氏木黴、Chrysosporium lucknowense、鐮刀菌屬、禾穀鐮孢、Fusarium venenatum、小立碗蘚及粗厚神經孢子菌、畢赤酵母屬、任何酵母屬、多形漢遜酵母、任何克魯維酵母屬、白色念珠菌、任何麴菌屬、里氏木黴、Chrysosporium lucknowense、任何鐮刀菌屬及粗厚神經孢子菌。
本發明之另一較佳實施例係關於一種編碼根據本發明之抗體之宿主細胞，其中該宿主細胞為哺乳動物細胞。
本發明之另一較佳實施例係關於一種編碼根據本發明之抗體之宿主細胞，其中該宿主細胞為CHO、COS、BHK、骨髓瘤、經SV40轉型之猴腎CV1細胞株(COS-7，ATCC CRL 1651)；人類胚腎細胞株(293或經次選殖以供懸浮培養生長之293細胞)、小鼠賽托利細胞；人類肺細胞；人類肝細胞或小鼠乳腺腫瘤細胞。
本發明之另一較佳實施例係關於一種編碼根據本發明之抗體之宿主細胞，其中哺乳動物細胞為CHO細胞。
本發明之另一較佳實施例係關於一種編碼根據本發明之抗體之宿主細胞，其為屬於畢赤酵母屬之酵母細胞。
本發明之另一較佳實施例係關於一種編碼根據本發明之抗體之宿主細胞，其為畢赤酵母。
一種製備本發明之抗體或抗體片段的方法，其係藉由在重組宿主細胞中表現編碼該抗體或抗體片段之表現的核酸來達成。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用表現本發明之抗體之細胞的方法，其中宿主細胞係選自細菌、酵母、真菌、昆蟲細胞、植物細胞、禽類細胞或哺乳動物細胞。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用表現本發明之抗體之細胞的方法，其中宿主細胞為酵母或絲狀真菌，其最佳可為多倍體。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用表現本發明之抗體之細胞的方法，其中該酵母或絲狀真菌包括畢赤酵母、芬蘭畢赤酵母、喜海藻糖畢赤酵母、Pichia koclamae、膜醭畢赤酵母、微小畢赤酵母(Ogataea minuta、林德納畢赤酵母)、仙人掌畢赤酵母、耐熱畢赤酵母、柳畢赤酵母、松櫟畢赤酵母、皮傑普畢赤酵母、樹幹畢赤酵母、甲醇畢赤酵母、畢赤酵母屬、釀酒酵母、酵母屬、多形漢遜酵母、克魯維酵母屬、乳酸克魯維酵母、白色念珠菌、構巢麯黴、黑麯黴、米麯黴、里氏木黴、Chrysosporium lucknowense、鐮刀菌屬、禾穀鐮孢、Fusarium venenatum、 小立碗蘚及粗厚神經孢子菌、畢赤酵母屬、任何酵母屬、多形漢遜酵母、任何克魯維酵母屬、白色念珠菌、任何麴菌屬、里氏木黴、Chrysosporium lucknowense、任何鐮刀菌屬及粗厚神經孢子菌。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用表現本發明之抗體之細胞的方法，其中該宿主細胞為哺乳動物細胞。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用表現本發明之抗體之細胞的方法，其中該宿主細胞為CHO、COS、BHK、骨髓瘤、經SV40轉型之猴腎CV1細胞株(COS-7，ATCC CRL 1651)；人類胚腎細胞株(293或經次選殖以供懸浮培養生長之293細胞)、小鼠賽托利細胞；人類肺細胞；人類肝細胞或小鼠乳腺腫瘤細胞。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用表現本發明之抗體之細胞的方法，其中哺乳動物細胞為CHO細胞。
本發明之另一較佳實施例係關於一種方法383，其中重組宿主細胞為穩定表現該抗體或抗體片段且以至少10-25毫克/公升分泌該抗體或抗體片段進入培養基中之多倍體酵母培養物。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用表現本發明之抗體之細胞的方法，其中該細胞為藉由包含以下之方法製備之多倍體酵母：(i)將至少一種含有可操作地連接於啟動子及信號序列之一或多種編碼該抗體之異源聚核苷酸之表現載體引入單倍體酵母細胞中；(ii)藉由接合或球形質體融合自該第一及/或第二單倍體酵母產生多倍體酵母；(iii)選擇穩定表現該抗體之多倍體酵母細胞；及(iv)自將該抗體穩定表現入培養基中之該等多倍體酵母細胞產生穩定多倍體酵母培養物。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用表現本發明之抗體之酵母細胞的方法，其中該酵母為畢赤酵母屬。
另一較佳實施例係關於包含投與治療或診斷有效量之至少一種本發明之抗體或抗體片段的任何治療或診斷方法。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用本發明之抗體之方法，其中抗體或抗體片段係藉由選自以下之手段投與：經頰、上皮、硬膜外、吸入、動脈內、心臟內、腦室內、皮內、肌肉內、鼻內、眼內、腹膜內、脊柱內、鞘內、靜脈內、經口、非經腸、經由灌腸劑或栓劑之經直腸、皮下、真皮下、舌下、經皮及經黏膜。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用本發明之抗體之方法，其中抗體或抗體片段係藉由選自以下之手段投與：皮下、靜脈內、動脈內、心臟內、腦室內、肌肉內、腹膜內、脊柱內、鞘內及非經腸。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用本發明之抗體之方法，其中抗體或抗體片段係藉由皮下手段投與。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用本發明之抗體之方法，其中抗體或抗體片段係藉由靜脈內手段投與。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用本發明之抗體之方法，其中抗體或抗體片段係含於散劑、液體、凝膠劑、滴劑或其他投藥手段中。
本發明之另一較佳實施例係關於一種含有本發明之抗體或抗體片段之組合物，其適於藉由選自以下之手段投與：經頰、上皮、硬膜外、吸入、動脈內、心臟內、腦室內、皮內、肌肉內、鼻內、眼內、腹膜內、脊柱內、鞘內、靜脈內、經口、非經腸、經由灌腸劑或栓劑之經直腸、皮下、真皮下、舌下、經皮及經黏膜。
本發明之另一較佳實施例係關於一種含有本發明之抗體之組合物，其中該組合物可藉由選自以下之手段投與：皮下、靜脈內、動脈內、心臟內、腦室內、肌肉內、腹膜內、脊柱內、鞘內及非經腸。
本發明之另一較佳實施例係關於一種編碼根據本發明之抗體之組合物，其可藉由皮下手段投與。
本發明之另一較佳實施例係關於一種可藉由靜脈內手段投與之組合物。
本發明之另一較佳實施例係關於一種包含散劑、液體、 凝膠劑、滴劑、脂質體或其他劑型之組合物。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用本發明之抗體或抗體片段來分離、偵測或純化樣品中之PCSK9的方法。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用本發明之抗體或抗體片段來活體內或離體偵測PCSK9之含量的方法。
本發明之另一較佳實施例係關於一種使用主題抗體來評估患者是否應被投與抗PCSK9抗體或抗體片段或其他療法的方法。
本發明之另一較佳實施例係關於使用主題抗體來評估目的在於降低膽固醇或改變脂質含量之治療方法之功效的偵測方法。
較佳實施例之詳細描述
本文揭露結合PCSK9之抗體及其結合片段。在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段以各種方式結合PCSK9且阻止PCSK9起作用。在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段阻斷或降低PCSK9與例如LDLR之其他物質相互作用之能力。舉例而言，在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段以阻止或降低PCSK9將結合LDLR之可能性之方式結合PCSK9。在其他實施例中，本發明之抗體或抗體片段結合PCSK9但不阻斷PCSK9與LDLR相互作用之能力。在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段為人類單株抗體。
如將由熟習此項技術者所瞭解，改變PCSK9與LDLR之間的相互作用可增加可用於結合LDL之LDLR之量，此又降低個體之血清LDL-C之量，從而導致該個體之血清膽固醇含量降低。因此，本發明之抗體或抗體片段可用於供治療血清膽固醇含量升高、處於血清膽固醇含量升高之風險中或可受益於血清膽固醇含量降低之個體之各種方法及組合物中。此等病狀包括任何上述病狀。因此，本文亦描述用於降低、維持或阻止血清膽固醇增加之各種方法及技術。在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段允許PCSK9與LDLR之間的結合，但本發明之抗體或抗體片段阻止或降低PCSK9對LDLR之不利活性。在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段阻止或降低PCSK9與LDLR之結合。
為方便起見，以下章節大體概述本文所用之術語之各種 含義。在此論述之後，論述關於本發明之抗體或抗體片段之一般態樣，繼而為說明本發明之抗體或抗體片段之各種實施例之性質及其可如何使用之特定實例。
定義
應瞭解本發明不限於本身可能變化之所述特定方法、方案、細胞株、動物物種或屬類及試劑。亦應瞭解本文所用之術語係僅出於描述特定實施例之目的，且不欲限制本發明之範疇，本發明之範疇將僅由隨附申請專利範圍限定。除非上下文另外明確規定，否則如本文所用，單數形式「一」、「及/且」及「該」包括複數個指示物。因此，舉例而言，提及「一細胞」包括複數個此等細胞且提及「該蛋白質」包括提及一或多種蛋白質及其為熟習此項技術者所知之等效物等。除非另外明確指示，否則本文所用之所有技術及科學術語皆具有與由一般熟習本發明所屬技術者通常所理解相同之含義。
術語「原蛋白轉化酶枯草桿菌蛋白酶克欣蛋白酶9型」或「PCSK9」係指如SEQ ID NO：961及/或SEQ ID NO：962中所示之多肽或其片段以及相關多肽，其包括(但不限於)對偶基因變異體、拼接變異體、衍生變異體、取代變異體、缺失變異體及/或包括添加N末端甲硫胺酸之插入變異體、融合多肽及物種間同源物。在某些實施例中，PCSK9多肽包括末端殘基，諸如(但不限於)前導序列殘基、靶向殘基、胺基末端甲硫胺酸殘基、離胺酸殘基、標籤殘基及/或融合蛋白殘基。「PCSK9」亦稱為FH3、NARC1、HCHOLA3、原蛋白轉化酶枯草桿菌蛋白酶/克欣蛋白酶9型及神經細胞凋亡調控轉化酶1。PCSK9基因編碼屬於分泌性枯草桿菌酶家族之蛋白酶K次家族之原蛋白轉化酶蛋白質。術語「PCSK9」表示原蛋白(SEQ ID NO：961)與在原蛋白之自催化之後產生的產物(SEQ ID NO：962)兩者。當僅提及自催化產物(諸如對於選擇性結合經裂解PCSK9之本發明之抗體或抗體片段)時，蛋白質可稱為「成熟」、「經裂解」、「經加工」或「活性」PCSK9。當僅提及非活性形式時，蛋白質可稱為PCSK9之「非活性」形式、「前形式」或「未加工」形式。如本文所用之術語PCSK9亦包括天然存在之對偶基因，諸如突變D374Y、S127R及F216L。 術語PCSK9亦涵蓋併有PCSK9胺基酸序列之轉譯後修飾之PCSK9分子，諸如已經糖基化、聚乙二醇化之PCSK9序列、信號序列已裂解之PCSK9序列、其前域已自催化域裂解但未與催化域分離之PCSK9序列。
術語「PCSK9活性」包括PCSK9之任何生物作用。在某些實施例中，PCSK9活性包括PCSK9與受質或受體相互作用或結合受質或受體之能力。在一些實施例中，PCSK9活性表示為PCSK9結合LDL-R受體(LDLR)之能力。在一些實施例中，PCSK9結合LDLR且催化涉及LDLR之反應。在一些實施例中，PCSK9活性包括PCSK9改變(例如降低)LDLR之可用性之能力。在一些實施例中，PCSK9活性包括PCSK9增加個體之LDL-C之量之能力。在一些實施例中，PCSK9活性包括PCSK9降低可用於結合LDL之LDLR之量之能力。在一些實施例中，「PCSK9活性」包括由PCSK9信號傳導產生之任何生物活性。示範性活性包括(但不限於)PCSK9結合LDLR、PCSK9裂解LDLR或其他蛋白質之酶活性、PCSK9結合除LDLR以外之促進PCSK9作用之蛋白質、PCSK9改變APOB分泌(Sun X-M等人，「Evidence for effect of mutant PCSK9 on apoliprotein B secretion as the cause of unusually severe dominant hypercholesterolemia」,Human Molecular Genetics 14：1161-1169,2005及Ouguerram K等人，「Apolipoprotein B100 metabolism in autosomal-dominant hypercholesterolemia related to mutations in PCSK9」,Arterioscler Thromb Vasc Biol.24：1448-1453,2004)、PCSK9在肝再生及神經元細胞分化中之作用(Seidah N G等人，「The secretory proprotein convertase neural apoptosis-regulated convertase 1(NARC-1)：Liver regeneration and neuronal differentiation」PNAS 100：928-933,2003)、及PCSK9在肝葡萄糖代謝中之作用(Costet等人，「Hepatic PCSK9 expression is regulated by nutritional status via insulin and sterol regulatory element-binding protein 1c」J.Biol.Chem.281(10)：6211-18,2006)。
如本文所用之術語「高膽固醇血症」係指膽固醇含量升高至所要含量以上之病狀。在一些實施例中，此表示血清膽固醇含量升高。在一些實施例中，所要含量考慮為熟習此項技術者所知(且本文描述或 提及)之各種「風險因素」。
術語「重組細胞」或「重組宿主細胞」在本文中通常指經工程改造以表現一或多種本發明之抗體多肽的任何細胞。其包括例如細菌、真菌、酵母、哺乳動物、無脊椎動物(諸如昆蟲)、植物及禽類細胞。較佳宿主細胞為酵母、真菌(尤其絲狀真菌)及哺乳動物細胞。酵母及絲狀真菌包括(但不限於)畢赤酵母、芬蘭畢赤酵母、喜海藻糖畢赤酵母、Pichia koclamae、膜醭畢赤酵母、微小畢赤酵母(Ogataea minuta、林德納畢赤酵母)、仙人掌畢赤酵母、耐熱畢赤酵母、柳畢赤酵母、松櫟畢赤酵母、皮傑普畢赤酵母、樹幹畢赤酵母、甲醇畢赤酵母、畢赤酵母屬、釀酒酵母、酵母屬、多形漢遜酵母、克魯維酵母屬、乳酸克魯維酵母、白色念珠菌、構巢麯黴、黑麯黴、米麯黴、里氏木黴、Chrysosporium lucknowense、鐮刀菌屬、禾穀鐮孢、Fusarium venenatum、小立碗蘚及粗厚神經孢子菌、畢赤酵母屬、任何酵母屬、多形漢遜酵母、任何克魯維酵母屬、白色念珠菌、任何麴菌屬、里氏木黴、Chrysosporium lucknowense、任何鐮刀菌屬及粗厚神經孢子菌。
無脊椎動物細胞之實例包括昆蟲細胞，諸如果蠅S2及夜蛾Sf9；以及植物細胞。適用哺乳動物宿主細胞株之實例包括中國倉鼠卵巢(CHO)及COS細胞。更特定實例包括經SV40轉型之猴腎CV1細胞株(COS-7，ATCC CRL 1651)；人類胚腎細胞株(293或經次選殖以供懸浮培養生長之293細胞，Graham等人，J.Gen Virol.,36：59(1977))；中國倉鼠卵巢細胞/-DHFR(CHO，Urlaub及Chasin,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,77：4216(1980))；小鼠賽托利細胞(TM4，Mather,Biol.Reprod.,23：243-251(1980))；人類肺細胞(W138，ATCC CCL 75)；人類肝細胞(Hep G2，HB 8065)；及小鼠乳腺腫瘤(MMT 060562，ATCC CCL51)。適當宿主細胞之選擇視為在此項技術中之技能範圍內。用於抗體表現之較佳哺乳動物細胞包括CHO細胞及COS細胞。在一示範性實施例中，重組宿主細胞為畢赤酵母屬之多倍體酵母細胞。
接合勝任酵母物種 ：在本發明中，其意欲廣泛涵蓋可在培養物中生長之任何二倍體或四倍體酵母。此等酵母物種可以單倍體、二 倍體或其他多倍體形式存在。具有指定倍數性之細胞可在適當條件下以彼形式增殖無限代數。二倍體細胞亦可生成孢子以形成單倍體細胞。連續接合可經由二倍體菌株之進一步接合或融合來產生四倍體菌株。本發明涵蓋使用單倍體酵母以及例如藉由接合或球形質體融合產生之二倍體或其他多倍體酵母細胞。
接合勝任酵母包括作為 酵母菌科(Saccharomycetaceae )之成員的酵母，包括以下屬：阿斯黴屬(Arxiozyma )；Ascobotryozyma ；固囊酵母屬(Citeromyces )；德巴利酵母屬(Debaryomyces )；德克酵母屬(Dekkera )；假囊酵母屬(Eremothecium )；伊薩酵母屬(Issatchenkia )；哈薩克酵母屬(Kazachstania )；克魯維酵母屬(Kluyveromyces )；柯達酵母屬(Kodamaea )；路德酵母屬(Lodderomyces )；管囊酵母屬(Pachysolen )；畢赤酵母屬(Pichia )；酵母屬(Saccharomyces )；雙孢土星形酵母屬(Saturnispora )；Tetrapisispora ；有抱圓酵母屬(Torulaspora )；擬威爾酵母屬(Williopsis )；及接合酵母屬(Zygosaccharomyces )。潛在適用於本發明中之其他酵母類型包括耶羅威亞酵母屬(Yarrowia )；紅冬孢酵母屬(Rhodosporidium )；念珠菌屬(Candida )；漢遜酵母屬(Hansenula )；線黑粉酵母屬(Filobasium )；鎖擲孢酵母屬(Sporidiobolus )；布勒擲孢酵母屬(Bullera )；白冬孢酵母屬(Leucosporidium )及線黑粉菌屬(Filobasidella )。
在本發明之一較佳實施例中，接合勝任酵母為畢赤酵母屬之成員。在本發明之另一較佳實施例中，畢赤酵母屬之接合勝任酵母為以下物種之一：畢赤酵母、甲醇畢赤酵母及多形漢遜酵母(安格斯畢赤酵母)。在本發明之一特別較佳實施例中，畢赤酵母屬之接合勝任酵母為畢赤酵母物種。
單倍體酵母細胞 ：其正常基因組(染色體)互補序列之各基因具有單一複本之細胞。
多倍體酵母細胞 ：其正常基因組(染色體)互補序列具有一個以上複本之細胞。
二倍體酵母細胞 ：其正常基因組互補序列之基本上每個基因具有兩個複本(對偶基因)之細胞，其通常藉由兩個單倍體細胞之融合 (接合)過程形成。
四倍體酵母細胞 ：其正常基因組互補序列之基本上每個基因具有四個複本(對偶基因)之細胞，其通常藉由兩個單倍體細胞之融合(接合)過程形成。四倍體可攜帶兩個、三個、四個或四個以上不同表現卡匣。此等四倍體可在釀酒酵母(S.cerevisiae )中藉由選擇性接合同型接合異宗配合a/a及α/α二倍體來獲得及在畢赤酵母中藉由連續接合單倍體以獲得營養缺陷二倍體來獲得。舉例而言，[met his]單倍體可與[ade his]單倍體接合以獲得二倍體[his]；且[met arg]單倍體可與[ade arg]單倍體接合以獲得二倍體[arg]；接著二倍體[his]×二倍體[arg]以獲得四倍體原始營養生物。熟習此項技術者應瞭解，提及二倍體細胞之益處及使用亦可適用於四倍體細胞。
酵母接合 ：兩個單倍體酵母細胞天然融合以形成一個二倍體酵母細胞所依之過程。
減數分裂 ：二倍體酵母細胞經受減少分裂以形成四個單倍體孢子產物所依之過程。各孢子可接著發芽且形成單倍體營養生長細胞株。
可選擇標記 ：可選擇標記為一種基因或基因片段，其對如例如經由轉型事件接受彼基因之細胞賦予生長表型(物理生長特徵)。可選擇標記允許細胞在未接受彼可選擇標記基因之細胞不能生長所處之條件下在選擇性生長培養基中存活及生長。可選擇標記基因通常屬於若干類型，包括陽性可選擇標記基因，諸如賦予細胞對抗生素或其他藥物、溫度(當兩個溫度敏感性(「ts」)突變體雜交或ts突變體被轉型時)之抗性之基因；陰性可選擇標記基因，諸如一種生物合成基因，其賦予細胞在不存在為不具有彼生物合成基因之所有細胞所需之特定養分之培養基中生長之能力，或一種突變誘發生物合成基因，其對不具有野生型基因之細胞賦予細胞生長不能性；及其類似標記基因。適合標記包括(但不限於)：ZEO；G418；LYS3；MET1；MET3a；ADE1；ADE3；URA3；及其類似物。
表現載體 ：此等DNA載體含有有助於操縱以便在目標宿主細胞內表現外來蛋白質之元件。序列操縱及用於轉型之DNA之產生宜 首先在例如大腸桿菌(E.coli )之細菌宿主中進行，且載體通常將包括有助於此等操縱之序列，包括細菌複製起點及適當細菌選擇標記。選擇標記編碼在選擇性培養基中生長之經轉型宿主細胞之存活或生長所必需的蛋白質。未用含有選擇基因之載體轉型之宿主細胞在培養基中將不會存活。典型選擇基因編碼以下蛋白質：(a)賦予對抗生素或其他毒素之抗性，(b)彌補營養缺陷不足，或(c)供應不可自複合培養基獲得之關鍵養分。用於酵母轉型之示範性載體及方法例如描述於Burke,D.,Dawson,D.及Stearns,T.(2000).Methods in yeast genetics：a Cold Spring Harbor Laboratory course manual.Plainview,N.Y.：Cold Spring Harbor Laboratory Press中。
用於本發明方法中之表現載體將進一步包括酵母特異性序列，包括用於鑒別經轉型酵母菌株之可選擇營養缺陷或藥物標記。藥物標記可進一步用於擴增載體在酵母宿主細胞中之複本數。
相關多肽編碼序列可操作地連接於提供多肽在酵母細胞中表現之轉錄及轉譯調控序列。此等載體組分可包括(但不限於)以下一或多者：增強子元件、啟動子及轉錄終止序列。亦可包括用於分泌多肽之序列，例如信號序列及其類似物。酵母複製起點為視情況選用的，因為表現載體常整合至酵母基因組中。在本發明之一個實施例中，相關多肽可操作地連接或融合於提供多肽自酵母二倍體細胞之最佳分泌之序列。
核酸在置放成與另一核酸序列呈功能性關係時係「可操作地連接」的。舉例而言，若信號序列之DNA表現為參與多肽分泌之前蛋白，則其可操作地連接於多肽之DNA；若啟動子或增強子影響序列轉錄，則其可操作地連接於編碼序列。一般而言，「可操作地連接」意謂所連接之DNA序列為連續的，且在分泌性前導序列之情況下為連續的且在閱讀框中。然而，增強子不必為連續的。藉由在適宜限制位點處進行連接或者經由熟習此項技術者所熟知之PCR/重組方法(GatewayR Technology；Invitrogen,Carlsbad California)來達成連接。若此等位點不存在，則根據習知規範使用合成寡核苷酸接頭或連接子。
啟動子為位於結構基因起始密碼子上游(5')(通常在約100至1000bp內)之非轉譯序列，其控制其所可操作地連接之特定核酸序列之 轉錄及轉譯。此等啟動子屬於若干類別：誘導性啟動子、組成性啟動子及可抑制性啟動子(其回應於不存在抑制物來增加轉錄程度)。誘導性啟動子可回應於培養條件之某一變化(例如存在或不存在某一養分或溫度變化)來引發在其控制下自DNA之轉錄程度增加。
啟動子片段亦可充當表現載體同源重組及整合至宿主基因組中之相同位點中的位點；或者使用可選擇標記作為同源重組之位點。
適用於畢赤酵母中之適合啟動子之實例包括AOX1及啟動子(Cregg等人(1989)Mol.Cell.Biol.9：1316-1323)；ICL1啟動子(Menendez等人(2003)Yeast 20(13)：1097-108)；甘油醛-3-磷酸去氫酶啟動子(GAP)(Waterham等人(1997)Gene 186(1)：37-44)；及FLD1啟動子(Shen等人(1998)Gene 216(1)：93-102)。GAP 啟動子為一種強組成性啟動子且AOX及FLD1啟動子為誘導性的。
其他酵母啟動子包括ADH1、醇脫氫酶II、GAL4、PHO3、PHO5、Pyk及源於其之嵌合啟動子。另外，本發明中可使用非酵母啟動子，諸如哺乳動物、昆蟲、植物、爬行動物、兩棲動物、細菌、真菌、病毒及禽類啟動子。最通常地，啟動子將包含哺乳動物啟動子(對於所表現基因而言可能為內源性的)或將包含提供在酵母系統中高效轉錄之酵母或病毒啟動子。
相關多肽可不僅直接重組產生，而且亦產生為與異源多肽之融合多肽，該異源多肽為例如信號序列或在成熟蛋白質或多肽之N端上具有特定裂解位點之其他多肽。一般而言，信號序列可為載體之組分，或其可為插入載體中之多肽編碼序列之一部分。較佳選擇之異源信號序列為經由宿主細胞內可用之一個標準路徑識別且加工之信號序列。釀酒酵母α因子前-原信號已證明在自畢赤酵母分泌多種重組蛋白質方面有效。其他酵母信號序列包括α接合因子信號序列、轉化酶信號序列、及源於其他分泌酵母多肽之信號序列。另外，此等信號肽序列可經工程改造以提供在二倍體酵母表現系統中之增強分泌。其他相關分泌信號亦包括哺乳動物信號序列，其對於所分泌之蛋白質而言可能為異源的，或可為所分泌蛋白質之天然序列。信號序列包括前肽序列，且在一些情況下可包括原肽序列。許 多此等信號序列在此項技術中為已知的，包括見於免疫球蛋白鏈上之信號序列，例如K28前原毒素序列、PHA-E、FACE、人類MCP-1、人類血清白蛋白信號序列、人類Ig重鏈、人類Ig輕鏈及其類似物。舉例而言，參見Hashimoto等人Protein Eng 11(2)75(1998)；及Kobayashi等人Therapeutic Apheresis 2(4)257(1998)。
可藉由將轉錄活化因子序列插入載體中來增加轉錄。此等活化因子為DNA之順式作用元件，通常為約10至300bp，其作用於啟動子以增加其轉錄。轉錄增強子相對不依賴於定向及位置，已在轉錄單元之5'及3'、在內含子內以及在編碼序列自身內發現。增強子可拼接至表現載體中編碼序列之5'或3'位置上，但較佳位於啟動子之5'方向位點上。
用於真核宿主細胞中之表現載體亦可含有終止轉錄及穩定mRNA所必需之序列。此等序列通常可自轉譯終止密碼子之3'方向上、在真核或病毒DNA或cDNA之非轉譯區域中獲得。此等區域含有轉錄為mRNA之非轉譯部分中之腺苷酸化片段的核苷酸區段。
含有一或多種以上所列組分之適合載體之構築採用標準連接技術或PCR/重組方法。對經分離質體或DNA片段進行裂解、裁適且再連接為產生所需質體所要之形式或經由重組方法再連接。對於確認所構築質體中之正確序列之分析，使用連接混合物來轉型宿主細胞，且適當時根據抗生素抗性(例如胺苄青黴素(ampicillin)或博萊黴素(Zeocin))選擇成功轉型體。自轉型體製備質體，藉由限制性核酸內切酶消化進行分析及/或定序。
作為片段之限制及連接之一種替代方案，可使用基於att位點及重組酶之重組方法來將DNA序列插入載體中。此等方法例如由Landy(1989)Ann.Rev.Biochem.58 ：913-949描述；且為熟習此項技術者所知。此等方法利用由λ及大腸桿菌編碼之重組蛋白質之混合物介導的分子間DNA重組。重組發生在相互作用DNA分子上之特定連接(att )位點之間。對於att位點之描述，參見Weisberg及Landy(1983)Site-Specific Recombination in Phage Lambda，於Lambda II ,Weisberg編(Cold Spring Harbor,NY：Cold Spring Harbor Press)，第211-250頁中。轉換側接重組位點 之DNA區段，以使得在重組之後，att 位點為包含由各親本載體貢獻之序列之雜交序列。重組可發生在具有任何拓撲結構之DNA之間。
可藉由將相關序列連接至適當載體中；經由使用特定引子產生含有att B位點之PCR產物；產生選殖至含有att位點之適當載體中之cDNA文庫；及其類似手段來將Att 位點引入相關序列中。
如本文所用之折疊 係指多肽及蛋白質之三維結構，其中胺基酸殘基之間的相互作用用於使結構穩定。儘管非共價相互作用在決定結構方面為重要的，但通常相關蛋白質將具有由兩個半胱胺酸殘基形成之分子內及/或分子間共價二硫鍵。對於天然存在之蛋白質及多肽或其衍生物及變異體而言，適當折疊通常為產生最佳生物活性之排列，且可方便地藉由分析來監測活性，例如配體結合、酶活性等。
在一些情況下，例如當所要產物為合成來源時，基於生物活性之分析的意義將較小。可基於物理性質、能量考慮、模型化研究及其類似考慮因素來確定此等分子之適當折疊。
表現宿主可藉由引入編碼一或多種增強折疊及二硫鍵形成之酶(亦即折疊酶(foldase)、伴侶蛋白(chaperonin)等)之序列加以進一步修飾。可使用如此項技術中所已知之載體、標記等在酵母宿主細胞中組成性或誘導性表現此等序列。較佳經由靶向方法將足以達成所要表現型態之序列(包括轉錄調控元件)穩定整合在酵母基因組中。
舉例而言，真核PDI不僅為蛋白質半胱胺酸氧化及二硫鍵異構化之高效催化劑，而且亦展現伴侶蛋白活性。共表現PDI可有助於產生具有多個二硫鍵之活性蛋白質。亦關注BIP(免疫球蛋白重鏈結合蛋白)；親環蛋白(cyclophilin)；及其類似物之表現。在本發明之一個實施例中，各單倍體親本菌株皆表現獨特折疊酶，例如一種菌株可表現BIP，且另一菌株可表現PDI或其組合。
術語「所要蛋白質 」或「所要抗體 」可互換使用且通常指對目標(亦即PCSK9)具有特異性之親本抗體或片段或其源於其之嵌合或人類化抗體或結合部分或與本文所述之任何抗PCSK9抗體或片段含有相同CDR或抗原決定基特異性者。術語「抗體」意欲包括具有與抗原決定 基配合且識別抗原決定基之特定形狀之任何含多肽鏈分子結構，其中一或多種非共價結合相互作用使分子結構與抗原決定基之間的複合物穩定。典型抗體分子為免疫球蛋白，且來自所有來源(例如人類、齧齒動物、兔、母牛、綿羊、豬、狗、其他哺乳動物、雞、其他禽類等)之所有類型之免疫球蛋白IgG、IgM、IgA、IgE、IgD等皆視為「抗體」。用於產生適用作本發明之起始物質之抗體的一較佳來源為兔。已描述眾多抗體編碼序列；且其他可藉由此項技術中熟知之方法來產生。其實例包括嵌合抗體、人類抗體及其他非人類哺乳動物抗體、人類化抗體、單鏈抗體(諸如scFv)、駱駝抗體、奈米抗體、IgNAR(自鯊魚獲得之單鏈抗體)、小模組免疫醫藥(SMIP)及抗體片段，諸如Fab、Fab'、F(ab')2 、單價抗體片段(諸如MetMab樣分子)、IgNar及其類似物。參見Streltsov VA等人，Structure of a shark IgNAR antibody variable domain and modeling of an early-developmental isotype,Protein Sci.2005年11月；14(11)：2901-9.Epub 2005年9月30日；Greenberg AS等人，A new antigen receptor gene family that undergoes rearrangement and extensive somatic diversification in sharks,Nature.1995年3月9日；374(6518)：168-73；Nuttall SD等人，Isolation of the new antigen receptor from wobbegong sharks,and use as a scaffold for the display of protein loop libraries,Mol Immunol.2001年8月；38(4)：313-26；Hamers-Casterman C等人，Naturally occurring antibodies devoid of light chains,Nature.1993年6月3日；363(6428)：446-8；Gill DS等人，Biopharmaceutical drug discovery using novel protein scaffolds,Curr Opin Biotechnol.2006年12月；17(6)：653-8.Epub 2006年10月19日。
本發明特定言之包括結合PCSK9之類似於MetMab分子之單價抗體分子。MetMab為一種對Met具有特異性之單價抗體。(Met為一種由Park等人，Proc.Natl.Acad.Sci.84,7479--(1987)中所述之核苷酸序列編碼之蛋白質或其片段以及相關多肽，其包括(但不限於)對偶基因變異體、拼接變異體、衍生變異體、取代變異體、缺失變異體及/或插入變異體、融合多肽及物種間同源物)。MetMab抗體為一種以包括OA-5d5(Genentech)在內之不同名稱著稱之單價抗體且亦稱為單臂5d5、5d5、 MetMab、PRO143966以及其他)。抗體OA-5d5(包括其結構及性質)及其製備及使用方法描述於美國公開案第2007/0092520號中。在一個實施例中，本發明之抗PCSK9抗體可包含連接於Fc區之單一Fab區。在此實施例中，本發明之抗體可包含如本文所述之輕鏈及重鏈可變域。在該種實施例中，抗體為單價的且可包含完整Fc區。在另一此實施例中，Fc區可包含至少一個突起(鈕)及至少一個空腔(孔)，其中突起及空腔之存在增強在包含突起之Fc多肽與包含空腔之Fc多肽之間複合物的形成，例如如WO005/063816中所述。在一個實施例中，本發明抗體之Fc區可包含第一Fc多肽及第二Fc多肽，其中相對於野生型人類Fc，該第一多肽及第二多肽各自包含一或多個突變。在一個實施例中，空腔突變為T366S、L368A及/或Y407V。在另一實施例中，突起突變為T366W。在一特定實施例中，本發明之單價抗體可包含如WO2005/063816中所述合成之單臂抗體。在此實施例中，單臂抗體可包含如WO2005/063816中所述之構成「鈕」及「孔」之Fc突變。舉例而言，孔突變可為Fc多肽中之T366A、L368A及/或Y407V中之一或多者，且空腔突變可為T366W。本發明亦係有關一種與本文揭露之抗體或抗體片段結合相同PCSK9抗原決定基及/或與抗PCSK9抗體競爭結合PCSK9的抗人類PCSK9單價藥劑。
舉例而言，可藉由遺傳工程改造產生抗體或抗原結合片段。在此技術中，如同其他方法一樣，使抗體產生細胞對所要抗原或免疫原敏感。使用自抗體產生細胞分離之信使RNA作為模板以使用PCR擴增來製備cDNA。藉由將經擴增免疫球蛋白cDNA之適當區段插入表現載體中來產生各自含有保留初始抗原特異性之一個重鏈基因及一個輕鏈基因之載體的文庫。藉由組合重鏈基因文庫與輕鏈基因文庫來構築組合文庫。此產生共表現重鏈及輕鏈(類似抗體分子之Fab片段或抗原結合片段)之純系的文庫。將攜帶此等基因之載體共轉染至宿主細胞中。當在經轉染宿主中誘導抗體基因合成時，重鏈及輕鏈蛋白質自裝配(self-assemble)以產生可藉由用抗原或免疫原進行篩檢加以偵測之活性抗體。
相關抗體編碼序列包括由天然序列編碼者、以及由於遺傳密碼之簡併性而在序列方面不同於所揭露核酸之核酸及其變異體。變異 多肽可包括胺基酸(aa)取代、添加或缺失。胺基酸取代可為保守胺基酸取代或消除非必需胺基酸之取代，諸如以改變糖基化位點、或藉由取代或缺失一或多個在功能上並不必需之半胱胺酸殘基來使錯折疊減至最少。變異體可設計成保留或具有蛋白質之特定區域(例如功能域、催化胺基酸殘基等)之增強的生物活性。變異體亦包括本文揭露之多肽之片段，特定言之生物活性片段及/或對應於功能域之片段。在活體外對所選殖基因進行突變誘發之技術為已知的。本發明中亦包括已使用一般分子生物學技術修飾以改良其對蛋白水解降解之抗性或使溶解度性質最佳化或致使其更適合作為治療劑的多肽。
嵌合抗體可藉由組合自一個物種之抗體產生細胞獲得之可變輕鏈及重鏈區(VL 及VH )與來自另一物種之恆定輕鏈及重鏈區，藉由重組手段來製備。通常嵌合抗體利用齧齒動物或兔可變區及人類恆定區以產生主要具有人類域之抗體。此等嵌合抗體之產生在此項技術中為熟知的，且可藉由標準手段(如例如以全文引用的方式併入本文中之美國專利第5,624,659號中所述)達成。進一步預期本發明之嵌合抗體之人類恆定區可選自IgG1、IgG2、IgG3及IgG4恆定區。
對人類化抗體進行工程改造以含有甚至更加人類樣之免疫球蛋白域，且僅併有動物源性抗體之互補決定區。此係藉由仔細檢查單株抗體之可變區之高變環的序列，且使其與人類抗體鏈之結構配合來達成。儘管表面上複雜，但該方法在實踐中為簡明的。參見例如以引用的方式完全併入本文中之美國專利第6,187,287號。
除整個免疫球蛋白(或其重組對應物)之外，亦可合成包含抗原決定基結合位點之免疫球蛋白片段(例如Fab’、F(ab’)2 、Fab或其他片段)。可利用重組免疫球蛋白技術來設計「片段」或最小免疫球蛋白。舉例而言，用於本發明中之「Fv」免疫球蛋白可藉由合成融合可變輕鏈區及可變重鏈區來產生。亦關注抗體之組合，例如包含兩種獨特Fv特異性之微型雙功能抗體。在本發明之另一實施例中，免疫球蛋白片段涵蓋SMIP(小分子免疫醫藥)、駱駝抗體、奈米抗體及IgNAR。
免疫球蛋白及其片段可進行轉譯後修飾例如以添加效應 物部分(諸如化學連接子)、可偵測部分(諸如螢光染料、酶、毒素、受質、生物發光物質、放射性物質、化學發光部分及其類似物)、或特異性結合部分(諸如抗生蛋白鏈菌素(streptavidin)、抗生物素蛋白(avidin)或生物素(biotin))，且其類似物可用於本發明之方法及組合物中。下文提供其他效應物分子之實例。
若聚核苷酸序列根據遺傳密碼之轉譯產生多肽序列(亦即聚核苷酸序列「編碼」多肽序列)，則該聚核苷酸序列「對應」於該多肽序列，若兩個序列編碼相同多肽序列，則一個聚核苷酸序列「對應」於另一聚核苷酸序列。
DNA構築體之「異源」區域或域為較大DNA分子內之在自然界中未發現與該較大分子相關聯之可鑒別DNA區段。因此，當異源區域編碼哺乳動物基因時，該基因將通常由不側接來源生物體之基因組中之哺乳動物基因組DNA的DNA側接。異源區域之另一實例為編碼序列自身未見於自然界中之構築體(例如基因組編碼序列含有內含子之cDNA或具有不同於天然基因之密碼子之合成序列)。對偶基因變化或天然存在之突變事件不產生如本文所定義之異源DNA區域。
「編碼序列」為(基於遺傳密碼)對應於或編碼蛋白質或肽序列之密碼子之框內序列。若序列或其互補序列編碼相同胺基酸序列，則兩個編碼序列彼此對應。與適當調控序列相關聯之編碼序列可進行轉錄且轉譯成多肽。聚腺苷酸化信號及轉錄終止序列將通常位於編碼序列之3'方向。「啟動子序列」為能夠在細胞中結合RNA聚合酶且引發下游(3'方向)編碼序列轉錄之DNA調控區域。啟動子序列通常含有用於結合影響編碼序列之轉錄之調控分子(例如轉錄因子)之其他位點。當RNA聚合酶在細胞中結合啟動子序列且將編碼序列轉錄成mRNA(其接著又轉譯成由編碼序列編碼之蛋白質)時，編碼序列「在啟動子序列之控制下」或「可操作地連接」於啟動子。
載體用於將諸如DNA、RNA或蛋白質之外來物質引入生物體或宿主細胞中。典型載體包括重組病毒(用於聚核苷酸)及脂質體(用於多肽)。「DNA載體」為另一聚核苷酸區段可與之連接以便引起所連接 區段複製之複製子，諸如質體、噬菌體或黏粒。「表現載體」為含有將指導適當宿主細胞之多肽合成之調控序列之DNA載體。此通常意謂結合RNA聚合酶且引發mRNA轉錄之啟動子、以及指導mRNA轉譯成多肽之核糖體結合位點及起始信號。將聚核苷酸序列併入表現載體中之適當位點及恰當閱讀框中，隨後藉由載體轉型適當宿主細胞使得能夠產生由該聚核苷酸序列編碼之多肽。
聚核苷酸序列之「擴增」為活體外產生特定核酸序列之多個複本。所擴增序列通常呈DNA形式。用於進行此擴增之多種技術描述於Van Brunt(1990,Bio/Technol.,8(4)：291-294)之評述文章中。聚合酶鏈反應或PCR為核酸擴增之原型，且在本文中使用PCR應視為其他適合擴增技術之示範。
脊椎動物中之抗體之一般性結構目前已充分瞭解(Edelman,G.M.,Ann.N.Y.Acad.Sci.,190：5(1971))。抗體由兩個分子量為約23,000道爾頓(Dalton)之相同輕多肽鏈(「輕鏈」)及兩個分子量為53,000-70,000之相同重鏈(「重鏈」)組成。四個鏈由二硫鍵聯接成「Y」組態，其中輕鏈托住起始於「Y」組態之開口處之重鏈。「Y」組態之「分支」部分稱為Fab 區；「Y」組態之主幹部分稱為FC 區。胺基酸序列取向自位於「Y」組態之頂部之N末端行進至位於各鏈之底部之C末端。N末端具有對引發其之抗原具有特異性且長度為約100個胺基酸之可變區，其中長度在輕鏈與重鏈之間及在各抗體之間存在微小變化。
可變區在各鏈中連接於延伸該鏈之剩餘長度且在特定抗體類別內不隨抗體之特異性(亦即引發其之抗原)而變化之恆定區。存在決定免疫球蛋白分子之類別之五個已知主要恆定區類別(對應於γ、μ、α、δ及ε重鏈恆定區，為IgG、IgM、IgA、IgD及IgE)。恆定區或類別決定抗體之後續效應物功能，包括補體活化(Kabat,E.A.,Structural Concepts in Immunology and Immunochemistry，第2版，第413-436頁，Holt,Rinehart,Winston(1976))及其他細胞反應(Andrews,D.W.等人，Clinical Immunobiology，第1-18頁，W.B.Sanders(1980)；Kohl,S.等人，Immunology,48：187(1983))；而可變區決定其將與之反應之抗原。輕鏈分類為κ或λ。 各重鏈類別可與κ或λ輕鏈一起製備。當藉由融合瘤或藉由B細胞產生免疫球蛋白時，輕鏈及重鏈彼此共價鍵結，且兩個重鏈之「尾部」部分藉由共價二硫鍵彼此鍵結。
表述「可變區」或「VR」係指抗體中之各對輕鏈及重鏈內直接參與抗體結合抗原的域。各重鏈在一端具有可變域(VH )，繼而為多個恆定域。各輕鏈在一端具有可變域(VL )且在其另一端具有恆定域；輕鏈之恆定域與重鏈之第一恆定域對準，且輕鏈可變域與重鏈之可變域對準。
表述「互補決定區」、「高變區」或「CDR」係指一或多個見於抗體之輕鏈或重鏈之可變區中的高變區或互補決定區(CDR)(參見Kabat,E.A.等人，Sequences of Proteins of Immunological Interest,National Institutes of Health,Bethesda,Md.,(1987))。此等表述包括如由Kabat等人(「Sequences of Proteins of Immunological Interest,」Kabat E.等人，US Dept.of Health and Human Services,1983)定義之高變區或抗體之3維結構中之高變環(Chothia及Lesk,J Mol.Biol.196 901-917(1987))。各鏈中之CDR由構架區且與來自另一鏈之CDR保持緊密鄰近，促進形成抗原結合位點。在CDR內，存在已描述為選擇性決定區(SDR)之選擇胺基酸，其代表由CDR在抗體-抗原相互作用中使用之關鍵接觸殘基(Kashmiri,S.,Methods,36：25-34(2005))。
「抗原決定基」或「結合位點」為抗原上之由抗原結合肽(諸如抗體)所特異性結合之區域或區。蛋白質抗原決定基可包含直接參與結合之胺基酸殘基(亦稱為抗原決定基之免疫顯性組分)及不直接參與結合之其他胺基酸殘基，諸如由特異性抗原結合肽有效阻斷之胺基酸殘基(換言之，胺基酸殘基在特異性抗原結合肽之「足跡」內)。本文中之術語抗原決定基包括PCSK9中特異性結合抗PCSK9抗體之任何特定區域中的兩種類型之胺基酸結合位點。PCSK9可包含許多不同抗原決定基，其可包括(但不限於)(1)線性肽抗原決定子，(2)構形抗原決定子，其由成熟PCSK9構形中一或多個彼此鄰近定位之非連續胺基酸組成；及(3)轉譯後抗原決定子，其完全或部分由共價連接於PCSK9蛋白質之分子結構(諸如碳水化合物基團)組成。
片語第一抗體與第二抗體結合「實質上」或「至少部分」相同之抗原決定基意謂第一抗體之抗原決定基結合位點包含抗原上構成第二抗體之抗原決定基結合位點的胺基酸殘基之至少10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%或90%以上。此外，第一抗體與第二抗體結合實質上或部分相同或重疊之抗原決定基意謂如上所述，第一抗體及第二抗體競爭結合抗原。因此，術語「與某一單株抗體結合實質上相同之抗原決定基或決定子」意謂抗體與該抗體「競爭」。
片語「與相關抗體結合相同或重疊之抗原決定基或決定子」意謂抗體與該相關抗體「競爭」PCSK9上由該相關抗體所特異性結合之至少一個或全部殘基。對一或多種與本文所述之單株抗體結合實質上或基本上相同之抗原決定基之抗體的鑒別可易於使用可評估抗體競爭之多種免疫篩檢分析中之任一者來確定。許多此等分析係常規實施且在此項技術中為熟知的(參見例如1997年8月26日頒予之美國專利第5,660,827號，其以引用的方式明確併入本文中)。應瞭解實際確定本文所述之抗體所結合之抗原決定基無論如何皆不為鑒別與本文所述之單株抗體結合相同或實質上相同或重疊之抗原決定基之抗體所需。
舉例而言，當欲檢查之測試抗體係自不同來源動物獲得或甚至具有不同Ig同型時，可採用簡單競爭分析，其中將對照抗體與測試抗體混合且接著施加於含有PCSK9之樣品。基於ELISA、放射免疫分析、西方墨點及使用BIACORE分析之方案適用於此等簡單競爭研究中。
在某些實施例中，將在施加於PCSK9抗原樣品之前預混合對照抗PCSK9抗體與不同量之測試抗體(例如以約1：1、1：2、1：10或約1：100之比率)一段時期。在其他實施例中，對照及不同量之測試抗體可僅在暴露於PCSK9抗原樣品期間分別添加及混合。只要可區分結合抗體與游離抗體(例如藉由使用用以消除未結合抗體之分離或洗滌技術)及區分對照抗體與測試抗體(例如藉由使用物種特異性或同型特異性二次抗體或藉由用可偵測標記特異性標記對照抗體)，即能夠確定測試抗體是否使對照抗體與PCSK9抗原之結合降低，從而指示測試抗體與對照抗PCSK9抗體識別實質上相同之抗原決定基。(經標記)對照抗體在完全無關抗體(其不結合 PCSK9)存在下之結合可用作對照高值。對照低值可藉由將經標記對照抗體與相同但未標記對照抗體一起培育來獲得，其中將發生競爭且降低經標記抗體之結合。在一測試分析中，經標記抗體反應性在測試抗體存在下顯著降低指示測試抗體識別實質上相同之抗原決定基，亦即測試抗體與經標記對照抗體競爭。舉例而言，在與測試抗體之比率在約1：1或1：10與約1：100之間的任何比率下，使對照抗體與PCSK9之結合降低至少約50%，諸如至少約60%、或更佳至少約70%(例如約65-100%)之任何測試抗體皆視為與對照抗體結合實質上相同或重疊之抗原決定基或決定子之抗體。
較佳地，此測試抗體將使對照抗體與PCSK9抗原之結合降低在不存在測試抗體下觀測到之對照抗體之結合1的較佳至少約50%、至少約60%、至少約80%或至少約90%(例如約95%)。
或者，亦可藉由例如流動式細胞測量術測試來評估競爭。在該種測試中，可首先將攜帶PCSK9之細胞與結合PCSK9之對照抗體一起培育，且接著與用螢光染料或生物素標記之測試抗體一起培育。若在與飽和量之對照抗體一起預培育後獲得之結合為藉由未與對照抗體一起預培育之測試抗體獲得之結合(如藉助於螢光平均值所量度)的約80%、較佳約50%、約40%或40%以下(例如約30%)，則稱抗體與對照抗體競爭。或者，若使用與飽和量之測試抗體一起預培育之細胞，用經標記對照抗體(經螢光染料或生物素標記)獲得之結合為未與測試抗體一起預培育獲得之結合的約80%、較佳約50%、約40%或40%以下(例如約30%)，則稱抗體與對照抗體競爭。
亦可有利地採用測試抗體預先吸附且在飽和濃度下施用於PCSK9固定於其上之表面的簡單競爭分析。簡單競爭分析中之表面較佳為BIACORE晶片(或適於表面電漿子共振分析之其他介質)。量測結合PCSK9之對照抗體與PCSK9塗佈表面之結合。將單獨對照抗體與含PCSK9表面之結合與對照抗體在測試抗體存在下之結合進行比較。在測試抗體存在下，對照抗體與含PCSK9表面之結合顯著降低指示測試抗體與對照抗體識別實質上相同之抗原決定基，以致測試抗體與對照抗體「競爭。使對照抗體之結合降低至少約20%或20%以上、至少約40%、至少 約50%、至少約70%或70%以上之任何測試抗體皆可視為與對照抗體結合實質上相同之抗原決定基或決定子之抗體。較佳地，此測試抗體將使對照抗體與PCSK9之結合降低至少約50%(例如至少約60%、至少約70%或70%以上)。應瞭解，對照抗體及測試抗體之順序可逆轉；亦即在競爭分析中，對照抗體可首先結合於表面且接著此後使測試抗體與表面接觸。較佳地，首先使對PCSK9抗原具有較高親和力之抗體結合於含PCSK9表面，因為將預期對第二抗體(假定抗體為競爭性的)所見之結合降低將具有較大量級。此等分析之其他實例例如提供於Saunal及Regenmortel,(1995)J.Immunol.Methods 183：33-41中，該文獻之揭露內容以引用的方式併入本文中。
此外，抗體是否與另一抗體結合PCSK9上之相同或重疊抗原決定基或抗原決定基是否由測試抗體結合可特定言之使用基於西方墨點之分析來確定。在此分析中，製備對應於由抗體所結合之抗原(在本文中為PCSK9)之肽的文庫，該等肽對應於蛋白質之重疊部分，長度通常為10-25、10-20或10-15個胺基酸。合成涵蓋PCSK9序列之此等不同重疊胺基酸肽且使其共價結合於PepSpots硝酸纖維素膜(JPT Peptide technologies，Berlin,Germany)。接著根據製造商之推薦製備墨點且進行探測。
基本上，免疫墨點分析接著藉由螢光測定手段來偵測文庫中之何肽結合測試抗體且藉此可鑒別抗原(亦即PCSK9)上之何殘基與測試抗體相互作用。(參見以引用的方式併入本文中之美國專利第7,935,340號中之此技術的一實施例)。
表述「構架區」或「FR」係指抗體之輕鏈及重鏈之可變區內的一或多個構架區(參見Kabat,E.A.等人，Sequences of Proteins of Immunological Interest,National Institutes of Health,Bethesda,Md.,(1987))。此等表述包括插入在抗體之輕鏈及重鏈之可變區內的CDR之間的彼等胺基酸序列區。
對PCSK9具有結合活性之抗PCSK9抗體及其結合片段
如本發明之先前技術中所提及，原蛋白轉化酶枯草桿菌蛋白酶克欣蛋白酶9型(PCSK9)為一種調控低密度脂蛋白受體(LDLR)蛋白 質之含量中涉及之絲胺酸蛋白酶(Horton等人，32(2)Trends Biochem.Sci. 71-77(2007)；Seidah及Prat,85(7)J.Mol.Med. 685-962007)。PCSK9為絲胺酸蛋白酶之枯草桿菌蛋白酶(S8)家族中之前激素-原蛋白轉化酶，Seidah等人，100(3)Proc.Nat’l Acad.Sci. 928-33(2003)。示範性人類PCSK9胺基酸序列呈現為SEQ ID NO：961及SEQ ID NO：962。一示範性人類PCSK9編碼序列呈現為SEQ ID NO：963。如本文所述，PCSK9蛋白質亦可包括全長PCSK9蛋白質之片段。PCSK9蛋白質之結構近來已由兩個小組解析(Cunningham等人，Nature Structural & Molecular Biology,2007及Piper等人，Structure,15：1-8,2007)，該兩篇文獻之全文均以引用的方式併入本文中。PCSK9包括信號序列、N端前域、枯草桿菌蛋白酶樣催化域及C端域。
本發明提供結合包括人類PCSK9在內之PCSK9之新穎抗體或抗體片段。在較佳實施例中，本發明之抗體或抗體片段包含本文所述之抗PCSK9抗體及抗體片段之一或多個互補決定區(CDR)。
在一些實施例中，本發明之抗PCSK9抗體或抗體片段將干擾、阻斷、降低或調節PCSK9與LDLR之間的相互作用。在一些情況下，例如若本發明之抗PCSK9抗體或抗體片段完全阻止PCSK9與LDLR之相互作用，則其表示為「中和性」。在一些實施例中，抗體或抗體片段例如藉由保持結合於PCSK9來中和PCSK9。舉例而言，在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段阻止或降低PCSK9對LDLR之不利影響而不阻斷PCSK9上之LDLR結合位點。因此，在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段調節或改變PCSK9導致LDLR降解之能力，而不必阻止PCSK9與LDLR之間的結合相互作用。更特定言之，本發明之該種抗體或抗體片段可明確描述為「非競爭性中和」抗體或抗體片段。在一些實施例中，本發明之中和抗體或抗體片段以阻止PCSK9結合LDLR之定位及/或方式結合PCSK9。在一些實施例中，本發明之中和抗體或抗體片段以阻止PCSK9/LDLR複合物之胞吞作用之定位及/或方式結合PCSK9。本發明之此抗體或抗體片段可明確描述為本發明之「競爭性中和」抗體或抗體片段。在活體內投與後，所有以上中和抗體皆可導致較大量之游離LDLR存在於個體中，此導致更多LDLR結合LDL-C(藉此降低個體之LDL-C之 量)。此又導致個體中存在之血清膽固醇之量降低。
在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段能夠抑制PCSK9介導之活性(包括結合)。在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段為針對PCSK9之人類抗體，諸如完全人類抗體。
在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段結合PCSK9之催化域。在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段結合PCSK9之成熟形式。在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段結合在PCSK9之前域中。在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段選擇性結合PCSK9之成熟形式。在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段以使得PCSK9不能結合或不能有效結合LDLR之方式結合催化域。在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段不結合催化域之c末端。在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段不結合催化域之n末端。在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段不結合PCSK9蛋白質之n末端或c末端。在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段結合PCSK9之特定構形狀態以便阻止PCSK9與LDLR相互作用。在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段結合PCSK9之V域。在一些更特定實施例中，本發明之抗體或抗體片段結合PCSK9之V域且阻止(或降低)PCSK9與LDLR之結合。
如所提及，本發明之抗PCSK9抗體或抗體片段具有多種效用。舉例而言，主題抗體及片段適用於治療應用中以及在診斷上適用於結合分析中，且適用於親和純化PCSK9(特定言之人類PCSK9)或其配體及適用於篩檢分析中以鑒別PCSK9活性之其他拮抗劑。一些本發明之抗體或抗體片段適用於抑制PCSK9與LDLR之結合，或抑制PCSK9介導之活性。
本發明之抗體或抗體片段可用於多種治療應用中。舉例而言，在一些實施例中，本發明之PCSK9抗體或抗體片段適用於治療與PCSK9相關之病狀，諸如膽固醇相關病症(或「血清膽固醇相關病症」)，包括例如高膽固醇血症，如本文進一步所述。
本發明之主題抗PCSK9抗體及抗體片段特定言之可用於治療其中阻斷、抑制或中和PCSK9之活體內作用或阻斷或抑制PCSK9與 LDLR之相互作用在治療上合乎需要之任何個體，其中該等主題抗PCSK9抗體或抗體片段可單獨或與其他活性藥劑或藥物聯合使用。
本發明之主題抗PCSK9抗體及抗體片段特定言之亦可用於藉由投與特異性結合PCSK9之主題抗PCSK9抗體及抗體片段來治療或預防膽固醇或脂質體內恆定之病症及可能與其相關之病症，該等病症包括例如高膽固醇血症、高脂血症、高三酸甘油酯血症、豆固醇血症、動脈粥樣硬化、動脈硬化、冠心病、代謝症候群、急性冠脈症候群、血管發炎、糖尿病、肥胖症、絞痛症、高血壓及黃瘤，其中該等主題抗體及抗體片段可單獨或與其他活性藥劑聯合使用。
本發明之主題抗PCSK9抗體及抗體片段特定言之亦可用於藉由單獨或與其他活性藥劑組合投與該等抗體或其片段來預防或治療與PCSK9相關之疾病及病症，例如與PCSK9含量增加或降低及/或PCSK9基因中影響PCSK9蛋白質表現、一級序列及/或功能之突變相關之疾病。
本發明之主題抗PCSK9抗體及抗體片段特定言之亦可用於治療患有其中調節脂質或膽固醇含量在臨床上合乎需要之病狀或處於發展其中調節脂質或膽固醇含量在臨床上合乎需要之病狀之風險中，或其中個體患有常與高脂質或膽固醇相關之病狀的任何個體。
本發明之主題抗PCSK9抗體及抗體片段特定言之亦可用於藉由單獨或與其他活性藥劑聯合投與主題抗PCSK9抗體及抗體片段來治療或預防膽固醇或脂質體內恆定之病症及與其相關之病症及併發症，例如高膽固醇血症、高脂血症、高三酸甘油酯血症、豆固醇血症、動脈粥樣硬化、動脈硬化、冠心病、代謝症候群、急性冠脈症候群、血管發炎、黃瘤、高血壓、絞痛症及相關病狀。
本發明之主題抗PCSK9抗體及抗體片段特定言之亦可用於單獨或與其他活性藥劑聯合使用主題抗體及抗體片段來改良與心臟病風險增加相關之血液膽固醇指標。此等指標包括(但不限於)高總膽固醇、高LDL、高總膽固醇與HDL比率及高LDL-C與HDL比率。
本發明之主題抗PCSK9抗體及抗體片段特定言之亦可與通常用於治療上述治療適應症或病狀之其他藥物組合用於任何此等病症 中，其中抗體及其他藥物或藥劑可共投與或分開投與。藥物之實例包括可與主題抗PCSK9抗體或抗體片段或在相同治療方案中共投與者，包括例如士他汀、ACE抑制劑、血管緊張素II受體阻斷劑(ARB)、抗心律不整劑、抗血小板藥物、阿斯匹靈、β阻斷劑、胺碘達隆、地高辛、阿斯匹靈、抗凝劑、地高辛、利尿劑、心臟衰竭藥物、血管舒張劑、血液稀釋劑、其他抗膽固醇藥物(諸如消膽胺(考來烯胺)、吉非羅齊(諾衡、吉考)、歐妙考及泛雙硫醇)、其他抗高血壓藥、抗致糖尿藥物(諸如α-葡萄糖苷酶抑制劑、雙胍、二肽基肽酶-4抑制劑、胰島素療法、氯茴苯酸、磺醯脲及噻唑啶二酮)及用於治療其中所治療個體可能具有高膽固醇或異常脂質含量或脂質代謝之病狀之其他藥物。
本發明更係關於含有主題抗PCSK9抗體或抗體片段之組合物，尤其適於活體內投與之組合物，例如皮下、靜脈內、皮內、鼻內、鞘內、經陰道、經直腸及其他可注射或局部可投與劑型。
更特定言之，本發明提供含有主題抗PCSK9抗體或抗體片段之組合物，尤其適於活體內投與之組合物，例如皮下、靜脈內、皮內、鼻內、鞘內、經陰道、經直腸、經口及其他可注射或局部劑型，其視情況可含有另一活性藥劑，諸如士他汀、ACE抑制劑、血管緊張素II受體阻斷劑(ARB)、抗心律不整劑、抗血小板藥物、阿斯匹靈、β阻斷劑、胺碘達隆、地高辛、阿斯匹靈、抗凝劑、地高辛、利尿劑、心臟衰竭藥物、血管舒張劑、血液稀釋劑、其他抗膽固醇藥物(諸如消膽胺(考來烯胺)、吉非羅齊(諾衡、吉考)、歐妙考及泛雙硫醇)、其他抗高血壓藥、抗致糖尿藥物(諸如α-葡萄糖苷酶抑制劑、雙胍、二肽基肽酶-4抑制劑、胰島素療法、氯茴苯酸、磺醯脲及噻唑啶二酮)及用於治療其中所治療個體可能具有高膽固醇之病狀之其他藥物。本發明亦提供單獨或與另一活性劑聯合使用主題抗PCSK9抗體或抗體片段之新穎給藥方案，尤其皮下、經口及靜脈內給藥方案。
本發明之抗體或抗體片段之其他用途包括例如診斷PCSK9相關疾病或病狀及用以確定存在或不存在PCSK9之篩檢分析。本文所述之一些本發明之抗體或抗體片段適用於治療與PCSK9活性相關之 後果、症狀及/或病變。
在以下章節中鑒別本發明之示範性抗PCSK9抗體及抗體片段及其特定CDR。為讀者方便起見，各示範抗體或片段及其中所含之序列分別在藉由特定命名法鑒別所示範抗體(例如Ab1、Ab2及其類似物)之標題下加以描述。
抗體Ab1
在一個實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其具有包含下述序列之重鏈序列：(SEQ ID NO：1)。
在一個實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之可變重鏈序列： (SEQ ID NO：2)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其具有與Ab1相同之抗原決定基特異性且含有包含下述序列之恆定重鏈序列： (SEQ ID NO：10)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之輕鏈序列： (SEQ ID NO：21)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之可變輕鏈序列： (SEQ ID NO：22)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其與Ab1結合相同之抗原決定基且含有包含下述序列之恆定輕鏈序列： (SEQ ID NO：30)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有對應於重鏈序列SEQ ID NO：1之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：4；SEQ ID NO：6；及SEQ ID NO：8中之一者、兩者或三者或其含有可變重鏈序列SEQ ID NO：2，及/或其進一步含有對應於輕鏈序列SEQ ID NO：21之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：24；SEQ ID NO：26；及SEQ ID NO：28中之一者、兩者或三者或其含有可變輕鏈序列SEQ ID NO：22；或含有與其至少 80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列之組合的抗體或片段。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體或其片段包含以下或者由以下組成：上述示範可變重鏈及可變輕鏈序列、或重鏈及輕鏈序列、或與其至少90%或95%一致之序列中之一或多者的組合。
本發明進一步涵蓋包含對應於重鏈序列SEQ ID NO：1或可變重鏈序列SEQ ID NO：2之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：3；SEQ ID NO：5；SEQ ID NO：7；及SEQ ID NO：9中之一者、兩者、三者或四者；及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：21或可變輕鏈序列SEQ ID NO：22之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：23；SEQ ID NO：25；SEQ ID NO：27；及SEQ ID NO：29中之一者、兩者、三者或四者；或此等多肽序列或與其至少80%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列之組合的抗PCSK9抗體及抗體片段。
在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗體片段或其片段包含以下或者由以下組成：上述FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列、及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部、或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
在本發明之另一實施例中，本發明之抗PCSK9抗體片段包含以下或者由以下組成：多肽序列SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2或與其至少90%或95%一致之多肽。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體片段包含以下或者由以下組成：多肽序列SEQ ID NO：21或SEQ ID NO：22或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之多肽。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於重鏈序列SEQ ID NO：1或可變重鏈序列SEQ ID NO：2之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：4；SEQ ID NO：6；及SEQ ID NO：8中之一者、兩者或三者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於輕鏈序列SEQ ID NO：21或可變輕鏈序列SEQ ID NO：22之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序 列SEQ ID NO：24；SEQ ID NO：26；及SEQ ID NO：28中之一者、兩者或三者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於重鏈序列SEQ ID NO：1或可變重鏈序列SEQ ID NO：2之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：3；SEQ ID NO：5；SEQ ID NO：7；及SEQ ID NO：9中之一者、兩者、三者或四者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之主題抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於輕鏈序列SEQ ID NO：21或可變輕鏈序列SEQ ID NO：22之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：23；SEQ ID NO：25；SEQ ID NO：27；及SEQ ID NO：29中之一者、兩者、三者或四者或與其至少90%或95%一致之序列。
本發明亦涵蓋包括一或多種本文所述之抗體片段之抗體片段。在本發明之一個實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體之片段包含以下或者由以下組成：以下抗體片段中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：可變重鏈區SEQ ID NO：2；可變輕鏈區SEQ ID NO：22；可變重鏈區SEQ ID NO：2之互補決定區(SEQ ID NO：4；SEQ ID NO：6；及SEQ ID NO：8)；及可變輕鏈區SEQ ID NO：22之互補決定區(SEQ ID NO：24；SEQ ID NO：26；及SEQ ID NO：28)或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。
本發明亦涵蓋包括一或多種本文所述之抗體片段之抗體片段。在本發明之一個實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體之片段包含以下或者由以下組成：以下抗體片段中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：可變重鏈區SEQ ID NO：2；可變輕鏈區SEQ ID NO：22；可變重鏈區SEQ ID NO：2之構架區(SEQ ID NO：3；SEQ ID NO：5；SEQ ID NO：7；及SEQ ID NO：9)；及可變輕鏈區SEQ ID NO：22之構架區(SEQ ID NO：23；SEQ ID NO：25；SEQ ID NO：27；及SEQ ID NO：29)或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之一特別較佳實施例中，抗PCSK9抗體為包含 SEQ ID NO：1及SEQ ID NO：21或者由SEQ ID NO：1及SEQ ID NO：21組成之Ab1，或包含Ab1之CDR且具有至少一種本文所述生物活性的抗體或抗體片段，或為與Ab1競爭結合PCSK9之抗PCSK9抗體，較佳為含有與Ab1之序列至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列的抗體或與Ab1結合PCSK9上之相同或重疊抗原決定基之抗體。
在本發明之另一特別較佳實施例中，抗體片段包含以下或者由以下組成：對PCSK9具有結合特異性之Fab(片段抗原結合)片段。就抗體Ab1而言，Fab片段較佳包括可變重鏈序列SEQ ID NO：2及可變輕鏈序列SEQ ID NO：22或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。本發明之此實施例進一步包括含有SEQ ID NO：2及/或SEQ ID NO：22之添加、缺失及變異體且保留對PCSK9之結合特異性的Fab。
在本文(下文)所述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由酶促消化(例如木瓜蛋白酶(papain))Ab1來產生。在本發明之另一實施例中，諸如Ab1之抗PCSK9抗體或其Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞(例如單倍體或二倍體酵母，諸如單倍體或二倍體畢赤酵母)及其他酵母菌株)中表現來產生。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。
在另一實施例中，本發明更係有關編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸，該等抗體多肽包括Ab1之重鏈及/或輕鏈以及片段；變異體；上述FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列、及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
抗體Ab2
在一個實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其具有包含下述序列之重鏈序列： (SEQ ID NO：41)。
在一個實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之可變重鏈序列： (SEQ ID NO：42)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其具有與Ab2相同之抗原決定基特異性且含有包含下述序列之恆定重鏈序列： (SEQ ID NO：50)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之輕鏈序列： (SEQ ID NO：61)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性 之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之可變輕鏈序列： (SEQ ID NO：62)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其與Ab2結合相同之抗原決定基且含有包含下述序列之恆定輕鏈序列： (SEQ ID NO：70)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有對應於重鏈序列SEQ ID NO：41之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：44；SEQ ID NO：46；及SEQ ID NO：48中之一者、兩者或三者或其含有可變重鏈序列SEQ ID NO：42，及/或其進一步含有對應於輕鏈序列SEQ ID NO：61之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：64；SEQ ID NO：66；及SEQ ID NO：68中之一者、兩者或三者或其含有可變輕鏈序列SEQ ID NO：62；或含有與其至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列之組合的抗體或片段。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體或其片段包含以下或者由以下組成：上述示範可變重鏈及可變輕鏈序列、或重鏈及輕鏈序列中之一或多者、或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
本發明進一步涵蓋包含對應於重鏈序列SEQ ID NO：41或可變重鏈序列SEQ ID NO：42之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：43；SEQ ID NO：45；SEQ ID NO：47；及SEQ ID NO：49中之一者、兩者、三者或四者；及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：61或可變輕鏈序列SEQ ID NO：62之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：63；SEQ ID NO：65；SEQ ID NO：67；及SEQ ID NO：69中之一者、兩者、三者或四者；或此等多肽序列或與其至少80%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列之組合的抗PCSK9抗體及抗體片段。
在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗體片段或其片段包含以下或者由以下組成：上述FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列、及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
在本發明之另一實施例中，本發明之抗PCSK9抗體片段包含以下或者由以下組成：多肽序列SEQ ID NO：41或SEQ ID NO：42或與其至少90%或95%一致之多肽。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體片段包含以下或者由以下組成：多肽序列SEQ ID NO：61或SEQ ID NO：62或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之多肽。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於重鏈序列SEQ ID NO：41或可變重鏈序列SEQ ID NO：42之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：44；SEQ ID NO：46；及SEQ ID NO：48中之一者、兩者或三者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於輕鏈序列SEQ ID NO：61或可變輕鏈序列SEQ ID NO：62之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：64；SEQ ID NO：66；及SEQ ID NO：68中之一者、兩者或三者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於重鏈序列SEQ ID NO：41或可變重鏈序列SEQ ID NO：42之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：43；SEQ ID NO：45；SEQ ID NO：47；及SEQ ID NO：49中之一者、兩者、三者或四者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之主題抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於輕鏈序列SEQ ID NO：61或可變輕鏈序列SEQ ID NO：62之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：63；SEQ ID NO：65；SEQ ID NO：67；及SEQ ID NO：69中之一者、兩者、三者或四者或與其至少90%或95%一致之序列。
本發明亦涵蓋包括一或多種本文所述之抗體片段之抗體片段。在本發明之一個實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體之片段包含以下或者由以下組成：以下抗體片段中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：可變重鏈區SEQ ID NO：42；可變輕鏈區SEQ ID NO：62；可變重鏈區SEQ ID NO：42之互補決定區(SEQ ID NO：44；SEQ ID NO：46；及SEQ ID NO：48)；及可變輕鏈區SEQ ID NO：62之互補決定區(SEQ ID NO：64；SEQ ID NO：66；及SEQ ID NO：68)或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。
本發明亦涵蓋包括一或多種本文所述之抗體片段之抗體片段。在本發明之一個實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體之片段包含以下或者由以下組成：以下抗體片段中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：可變重鏈區SEQ ID NO：42；可變輕鏈區SEQ ID NO：62；可變重鏈區SEQ ID NO：42之構架區(SEQ ID NO：43；SEQ ID NO：45；SEQ ID NO：47；及SEQ ID NO：49)；及可變輕鏈區SEQ ID NO：62之構架區(SEQ ID NO：63；SEQ ID NO：65；SEQ ID NO：67；及SEQ ID NO：69)或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之一特別較佳實施例中，抗PCSK9抗體為包含SEQ ID NO：41及SEQ ID NO：61或者由SEQ ID NO：41及SEQ ID NO：61組成之Ab2，或包含Ab2之CDR且具有至少一種本文所述生物活性的抗體或抗體片段，或為與Ab2競爭結合PCSK9之抗PCSK9抗體，較佳為含有與Ab2之序列至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列的抗體或與Ab2結合PCSK9上之相同或重疊抗原決定基之抗體。
在本發明之另一特別較佳實施例中，抗體片段包含以下或者由以下組成：對PCSK9具有結合特異性之Fab(片段抗原結合)片段。就抗體Ab2而言，Fab片段較佳包括可變重鏈序列SEQ ID NO：42及可變輕鏈序列SEQ ID NO：62或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。本發明之此實施例進一步包括含有SEQ ID NO：42及/或SEQ ID NO：62之添加、缺失及變異體且保留對PCSK9之結合特異性的Fab。
在本文(下文)所述之本發明之一個實施例中，Fab片段可 藉由酶促消化(例如木瓜蛋白酶)Ab2來產生。在本發明之另一實施例中，諸如Ab2之抗PCSK9抗體或其Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞(例如單倍體或二倍體酵母，諸如單倍體或二倍體畢赤酵母)及其他酵母菌株)中表現來產生。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。
在另一實施例中，本發明更係有關編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸，該等抗體多肽包括Ab2之重鏈及/或輕鏈以及片段；變異體；上述FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列、及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
抗體Ab3
在一個實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其具有包含下述序列之重鏈序列：(SEQ ID NO：81)。
在一個實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之可變重鏈序列： (SEQ ID NO：82)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性 之抗體及抗體片段，其具有與Ab3相同之抗原決定基特異性且含有包含下述序列之恆定重鏈序列： (SEQ ID NO：90)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之輕鏈序列： (SEQ ID NO：101)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之可變輕鏈序列： (SEQ ID NO：102)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其與Ab3結合相同之抗原決定基且含有包含下述序列之恆定輕鏈序列： (SEQ ID NO：110)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有對應於重鏈序列SEQ ID NO：81之互補決定區 (CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：84；SEQ ID NO：86；及SEQ ID NO：88中之一者、兩者或三者或其含有可變重鏈序列SEQ ID NO：82，及/或其進一步含有對應於輕鏈序列SEQ ID NO：101之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：104；SEQ ID NO：106；及SEQ ID NO：108中之一者、兩者或三者或其含有可變輕鏈序列SEQ ID NO：102；或含有與其至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列之組合的抗體或片段。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體或其片段包含以下或者由以下組成：上述示範可變重鏈及可變輕鏈序列、或重鏈及輕鏈序列中之一或多者、或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
本發明進一步涵蓋包含對應於重鏈序列SEQ ID NO：81或可變重鏈序列SEQ ID NO：82之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：83；SEQ ID NO：85；SEQ ID NO：87；及SEQ ID NO：89中之一者、兩者、三者或四者；及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：101或可變輕鏈序列SEQ ID NO：102之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：103；SEQ ID NO：105；SEQ ID NO：107；及SEQ ID NO：109中之一者、兩者、三者或四者；或此等多肽序列或與其至少80%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列之組合的抗PCSK9抗體及抗體片段。
在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗體片段或其片段包含以下或者由以下組成：上述FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列、及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
在本發明之另一實施例中，本發明之抗PCSK9抗體片段包含以下或者由以下組成：多肽序列SEQ ID NO：81或SEQ ID NO：82或與其至少90%或95%一致之多肽。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體片段包含以下或者由以下組成：多肽序列SEQ ID NO：101或SEQ ID NO：102或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之多肽。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於重鏈序列SEQ ID NO：81或可變重鏈序列SEQ ID NO：82之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列 SEQ ID NO：84；SEQ ID NO：86；及SEQ ID NO：88中之一者、兩者或三者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於輕鏈序列SEQ ID NO：101或可變輕鏈序列SEQ ID NO：102之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：104；SEQ ID NO：106；及SEQ ID NO：108中之一者、兩者或三者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於重鏈序列SEQ ID NO：81或可變重鏈序列SEQ ID NO：82之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：83；SEQ ID NO：85；SEQ ID NO：87；及SEQ ID NO：89中之一者、兩者、三者或四者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之主題抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於輕鏈序列SEQ ID NO：101或可變輕鏈序列SEQ ID NO：102之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：103；SEQ ID NO：105；SEQ ID NO：107；及SEQ ID NO：109中之一者、兩者、三者或四者或與其至少90%或95%一致之序列。
本發明亦涵蓋包括一或多種本文所述之抗體片段之抗體片段。在本發明之一個實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體之片段包含以下或者由以下組成：以下抗體片段中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：可變重鏈區SEQ ID NO：82；可變輕鏈區SEQ ID NO：102；可變重鏈區SEQ ID NO：82之互補決定區(SEQ ID NO：84；SEQ ID NO：86；及SEQ ID NO：88)；及可變輕鏈區SEQ ID NO：102之互補決定區(SEQ ID NO：104；SEQ ID NO：106；及SEQ ID NO：108)或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。
本發明亦涵蓋包括一或多種本文所述之抗體片段之抗體片段。在本發明之一個實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體之片段包含以下或者由以下組成：以下抗體片段中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：可變重鏈區SEQ ID NO：82；可變輕鏈區SEQ ID NO：102； 可變重鏈區SEQ ID NO：82之構架區(SEQ ID NO：83；SEQ ID NO：85；SEQ ID NO：87；及SEQ ID NO：89)；及可變輕鏈區SEQ ID NO：102之構架區(SEQ ID NO：103；SEQ ID NO：105；SEQ ID NO：107；及SEQ ID NO：109)或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之一特別較佳實施例中，抗PCSK9抗體為包含SEQ ID NO：81及SEQ ID NO：101或者由SEQ ID NO：81及SEQ ID NO：101組成之Ab3，或包含Ab3之CDR且具有至少一種本文所述生物活性的抗體或抗體片段，或為與Ab3競爭結合PCSK9之抗PCSK9抗體，較佳為含有與Ab3之序列至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列的抗體，或與Ab3結合PCSK9上之相同或重疊抗原決定基之抗體。
在本發明之另一特別較佳實施例中，抗體片段包含以下或者由以下組成：對PCSK9具有結合特異性之Fab(片段抗原結合)片段。就抗體Ab3而言，Fab片段較佳包括可變重鏈序列SEQ ID NO：82及可變輕鏈序列SEQ ID NO：102或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。本發明之此實施例進一步包括含有SEQ ID NO：82及/或SEQ ID NO：102之添加、缺失及變異體且保留對PCSK9之結合特異性的Fab。
在本文(下文)所述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由酶促消化(例如木瓜蛋白酶)Ab3來產生。在本發明之另一實施例中，諸如Ab3之抗PCSK9抗體或其Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞(例如單倍體或二倍體酵母，諸如單倍體或二倍體畢赤酵母)及其他酵母菌株)中表現來產生。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。
在另一實施例中，本發明更係有關編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸，該等抗體多肽包括Ab3之重鏈及/或輕鏈以及片段；變異體；上述FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列、及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
抗體Ab4
在一個實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性 之抗體及抗體片段，其具有包含下述序列之重鏈序列：(SEQ ID NO：121)。
在一個實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之可變重鏈序列： (SEQ ID NO：122)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其具有與Ab4相同之抗原決定基特異性且含有包含下述序列之恆定重鏈序列： (SEQ ID NO：130)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之輕鏈序列： (SEQ ID NO：141)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之可變輕鏈序列： (SEQ ID NO：142)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其與Ab4結合相同之抗原決定基且含有包含下述序列之恆定輕鏈序列： (SEQ ID NO：150)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有對應於重鏈序列SEQ ID NO：121之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：124；SEQ ID NO：126；及SEQ ID NO：128中之一者、兩者或三者或其含有可變重鏈序列SEQ ID NO：122，及/或其進一步含有對應於輕鏈序列SEQ ID NO：141之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：144；SEQ ID NO：146；及SEQ ID NO：148中之一者、兩者或三者或其含有可變輕鏈序列SEQ ID NO：142；或含有與其至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列之組合的抗體或片段。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體或其片段包含以下或者由以下組成：上述示範可變重鏈及可變輕鏈序列、或重鏈及輕鏈序列中之一或多者、或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
本發明進一步涵蓋包含對應於重鏈序列SEQ ID NO：121或可變重鏈序列SEQ ID NO：122之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：123；SEQ ID NO：125；SEQ ID NO：127；及SEQ ID NO：129中之一 者、兩者、三者或四者；及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：141或可變輕鏈序列SEQ ID NO：142之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：143；SEQ ID NO：145；SEQ ID NO：147；及SEQ ID NO：149中之一者、兩者、三者或四者；或此等多肽序列或與其至少80%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列之組合的抗PCSK9抗體及抗體片段。
在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗體片段或其片段包含以下或者由以下組成：上述FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列、及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
在本發明之另一實施例中，本發明之抗PCSK9抗體片段包含以下或者由以下組成：多肽序列SEQ ID NO：121或SEQ ID NO：122或與其至少90%或95%一致之多肽。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體片段包含以下或者由以下組成：多肽序列SEQ ID NO：141或SEQ ID NO：142或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之多肽。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於重鏈序列SEQ ID NO：121或可變重鏈序列SEQ ID NO：122之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：124；SEQ ID NO：126；及SEQ ID NO：128中之一者、兩者或三者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於輕鏈序列SEQ ID NO：141或可變輕鏈序列SEQ ID NO：142之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：144；SEQ ID NO：146；及SEQ ID NO：148中之一者、兩者或三者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於重鏈序列SEQ ID NO：121或可變重鏈序列SEQ ID NO：122之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：123；SEQ ID NO：125；SEQ ID NO：127；及SEQ ID NO：129中之一者、兩者、三者或四者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之主題抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於輕鏈序列SEQ ID NO：141或可變輕鏈序列SEQ ID NO：142之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：143；SEQ ID NO：145；SEQ ID NO：147；及SEQ ID NO：149中之一者、兩者、三者或四者或與其至少90%或95%一致之序列。
本發明亦涵蓋包括一或多種本文所述之抗體片段之抗體片段。在本發明之一個實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體之片段包含以下或者由以下組成：以下抗體片段中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：可變重鏈區SEQ ID NO：122；可變輕鏈區SEQ ID NO：142；可變重鏈區SEQ ID NO：122之互補決定區(SEQ ID NO：124；SEQ ID NO：126；及SEQ ID NO：128)；及可變輕鏈區SEQ ID NO：142之互補決定區(SEQ ID NO：144；SEQ ID NO：146；及SEQ ID NO：148)或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。
本發明亦涵蓋包括一或多種本文所述之抗體片段之抗體片段。在本發明之一個實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體之片段包含以下或者由以下組成：以下抗體片段中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：可變重鏈區SEQ ID NO：122；可變輕鏈區SEQ ID NO：142；可變重鏈區SEQ ID NO：122之構架區(SEQ ID NO：123；SEQ ID NO：125；SEQ ID NO：127；及SEQ ID NO：129)；及可變輕鏈區SEQ ID NO：142之構架區(SEQ ID NO：143；SEQ ID NO：145；SEQ ID NO：147；及SEQ ID NO：149)或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之一特別較佳實施例中，抗PCSK9抗體為包含SEQ ID NO：121及SEQ ID NO：141或者由SEQ ID NO：121及SEQ ID NO：141組成之Ab4，或包含Ab4之CDR且具有至少一種本文所述生物活性的抗體或抗體片段，或為與Ab4競爭結合PCSK9之抗PCSK9抗體，較佳為含有與Ab4之序列至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列的抗體，或與Ab4結合PCSK9上之相同或重疊抗原決定基之抗體。
在本發明之另一特別較佳實施例中，抗體片段包含以下或者由以下組成：對PCSK9具有結合特異性之Fab(片段抗原結合)片段。就 抗體Ab4而言，Fab片段較佳包括可變重鏈序列SEQ ID NO：122及可變輕鏈序列SEQ ID NO：142或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。本發明之此實施例進一步包括含有SEQ ID NO：122及/或SEQ ID NO：142之添加、缺失及變異體且保留對PCSK9之結合特異性的Fab。
在本文(下文)所述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由酶促消化(例如木瓜蛋白酶)Ab4來產生。在本發明之另一實施例中，諸如Ab4之抗PCSK9抗體或其Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞(例如單倍體或二倍體酵母，諸如單倍體或二倍體畢赤酵母)及其他酵母菌株)中表現來產生。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。
在另一實施例中，本發明更係有關編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸，該等抗體多肽包括Ab4之重鏈及/或輕鏈以及片段；變異體；上述FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列、及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
抗體Ab5
在一個實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其具有包含下述序列之重鏈序列：(SEQ ID NO：161)。
在一個實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性 之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之可變重鏈序列： (SEQ ID NO：162)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其具有與Ab5相同之抗原決定基特異性且含有包含下述序列之恆定重鏈序列： (SEQ ID NO：170)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之輕鏈序列： (SEQ ID NO：181)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之可變輕鏈序列： (SEQ ID NO：182)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其與Ab5結合相同之抗原決定基且含有包含下述序列之恆定輕鏈序列： (SEQ ID NO：190)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有對應於重鏈序列SEQ ID NO：161之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：164；SEQ ID NO：166；及SEQ ID NO：168中之一者、兩者或三者或其含有可變重鏈序列SEQ ID NO：162，及/或其進一步含有對應於輕鏈序列SEQ ID NO：181之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：184；SEQ ID NO：186；及SEQ ID NO：188中之一者、兩者或三者或其含有可變輕鏈序列SEQ ID NO：182；或含有與其至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列之組合的抗體或片段。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體或其片段包含以下或者由以下組成：上述示範可變重鏈及可變輕鏈序列、或重鏈及輕鏈序列中之一或多者、或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
本發明進一步涵蓋包含對應於重鏈序列SEQ ID NO：161或可變重鏈序列SEQ ID NO：162之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：163；SEQ ID NO：165；SEQ ID NO：167；及SEQ ID NO：169中之一者、兩者、三者或四者；及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：181或可變輕鏈序列SEQ ID NO：182之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：183；SEQ ID NO：185；SEQ ID NO：187；及SEQ ID NO：189中之一者、兩者、三者或四者；或此等多肽序列或與其至少80%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列之組合的抗PCSK9抗體及抗體片段。
在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗體片段或其片段包含以下或者由以下組成：上述FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列、及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
在本發明之另一實施例中，本發明之抗PCSK9抗體片段包含以下或者由以下組成：多肽序列SEQ ID NO：161或SEQ ID NO：162或與其至少90%或95%一致之多肽。在本發明之另一實施例中，本發明之抗 體片段包含以下或者由以下組成：多肽序列SEQ ID NO：181或SEQ ID NO：182或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之多肽。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於重鏈序列SEQ ID NO：161或可變重鏈序列SEQ ID NO：162之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：164；SEQ ID NO：166；及SEQ ID NO：168中之一者、兩者或三者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於輕鏈序列SEQ ID NO：181或可變輕鏈序列SEQ ID NO：182之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：184；SEQ ID NO：186；及SEQ ID NO：188中之一者、兩者或三者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於重鏈序列SEQ ID NO：161或可變重鏈序列SEQ ID NO：162之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：163；SEQ ID NO：165；SEQ ID NO：167；及SEQ ID NO：169中之一者、兩者、三者或四者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之主題抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於輕鏈序列SEQ ID NO：181或可變輕鏈序列SEQ ID NO：182之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：183；SEQ ID NO：185；SEQ ID NO：187；及SEQ ID NO：189中之一者、兩者、三者或四者或與其至少90%或95%一致之序列。
本發明亦涵蓋包括一或多種本文所述之抗體片段之抗體片段。在本發明之一個實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體之片段包含以下或者由以下組成：以下抗體片段中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：可變重鏈區SEQ ID NO：162；可變輕鏈區SEQ ID NO：182；可變重鏈區SEQ ID NO：162之互補決定區(SEQ ID NO：164；SEQ ID NO：166；及SEQ ID NO：168)；及可變輕鏈區SEQ ID NO：182之互補決定區(SEQ ID NO：184；SEQ ID NO：186；及SEQ ID NO：188)或與其至少 90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。
本發明亦涵蓋包括一或多種本文所述之抗體片段之抗體片段。在本發明之一個實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體之片段包含以下或者由以下組成：以下抗體片段中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：可變重鏈區SEQ ID NO：162；可變輕鏈區SEQ ID NO：182；可變重鏈區SEQ ID NO：162之構架區(SEQ ID NO：163；SEQ ID NO：165；SEQ ID NO：167；及SEQ ID NO：169)；及可變輕鏈區SEQ ID NO：182之構架區(SEQ ID NO：183；SEQ ID NO：185；SEQ ID NO：187；及SEQ ID NO：189)或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之一特別較佳實施例中，抗PCSK9抗體為包含SEQ ID NO：161及SEQ ID NO：181或者由SEQ ID NO：161及SEQ ID NO：181組成之Ab5，或包含Ab5之CDR且具有至少一種本文所述生物活性的抗體或抗體片段，或為與Ab5競爭結合PCSK9之抗PCSK9抗體，較佳為含有與Ab5之序列至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列的抗體，或與Ab5結合PCSK9上之相同或重疊抗原決定基之抗體。
在本發明之另一特別較佳實施例中，抗體片段包含以下或者由以下組成：對PCSK9具有結合特異性之Fab(片段抗原結合)片段。就抗體Ab5而言，Fab片段較佳包括可變重鏈序列SEQ ID NO：162及可變輕鏈序列SEQ ID NO：182或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。本發明之此實施例進一步包括含有SEQ ID NO：162及/或SEQ ID NO：182之添加、缺失及變異體且保留對PCSK9之結合特異性的Fab。
在本文(下文)所述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由酶促消化(例如木瓜蛋白酶)Ab5來產生。在本發明之另一實施例中，諸如Ab5之抗PCSK9抗體或其Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞(例如單倍體或二倍體酵母，諸如單倍體或二倍體畢赤酵母)及其他酵母菌株)中表現來產生。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。
在另一實施例中，本發明更係有關編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸，該等抗體多肽包括Ab5之重鏈及/或輕鏈 以及片段；變異體；上述FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列、及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
抗體Ab6
在一個實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其具有包含下述序列之重鏈序列： (SEQ ID NO：201)。
在一個實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之可變重鏈序列： (SEQ ID NO：202)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其具有與Ab6相同之抗原決定基特異性且含有包含下述序列之恆定重鏈序列： (SEQ ID NO：210)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之輕鏈序列： (SEQ ID NO：221)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之可變輕鏈序列： (SEQ ID NO：222)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其與Ab6結合相同之抗原決定基且含有包含下述序列之恆定輕鏈序列： (SEQ ID NO：230)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有對應於重鏈序列SEQ ID NO：201之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：204；SEQ ID NO：206；及SEQ ID NO：208中之一者、兩者或三者或其含有可變重鏈序列SEQ ID NO：202，及/或其進一步含有對應於輕鏈序列SEQ ID NO：221之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：224；SEQ ID NO：226；及SEQ ID NO：228中之一者、兩者或三者或其含有可變輕鏈序列SEQ ID NO：222；或含有與其至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列之組合的抗體或片段。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體或其片段包含以 下或者由以下組成：上述示範可變重鏈及可變輕鏈序列、或重鏈及輕鏈序列中之一或多者、或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
本發明進一步涵蓋包含對應於重鏈序列SEQ ID NO：201或可變重鏈序列SEQ ID NO：202之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：203；SEQ ID NO：205；SEQ ID NO：207；及SEQ ID NO：209中之一者、兩者、三者或四者；及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：221或可變輕鏈序列SEQ ID NO：222之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：223；SEQ ID NO：225；SEQ ID NO：227；及SEQ ID NO：229中之一者、兩者、三者或四者；或此等多肽序列或與其至少80%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列之組合的抗PCSK9抗體及抗體片段。
在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗體片段或其片段包含以下或者由以下組成：上述FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列、及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
在本發明之另一實施例中，本發明之抗PCSK9抗體片段包含以下或者由以下組成：多肽序列SEQ ID NO：201或SEQ ID NO：202或與其至少90%或95%一致之多肽。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體片段包含以下或者由以下組成：多肽序列SEQ ID NO：221或SEQ ID NO：222或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之多肽。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於重鏈序列SEQ ID NO：201或可變重鏈序列SEQ ID NO：202之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：204；SEQ ID NO：206；及SEQ ID NO：208中之一者、兩者或三者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於輕鏈序列SEQ ID NO：221或可變輕鏈序列SEQ ID NO：222之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：224；SEQ ID NO：226；及SEQ ID NO：228中之一者、兩者或三者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於重鏈序列SEQ ID NO：201或可變重鏈序列SEQ ID NO：202之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：203；SEQ ID NO：205；SEQ ID NO：207；及SEQ ID NO：209中之一者、兩者、三者或四者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之主題抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於輕鏈序列SEQ ID NO：221或可變輕鏈序列SEQ ID NO：222之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：223；SEQ ID NO：225；SEQ ID NO：227；及SEQ ID NO：229中之一者、兩者、三者或四者或與其至少90%或95%一致之序列。
本發明亦涵蓋包括一或多種本文所述之抗體片段之抗體片段。在本發明之一個實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體之片段包含以下或者由以下組成：以下抗體片段中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：可變重鏈區SEQ ID NO：202；可變輕鏈區SEQ ID NO：222；可變重鏈區SEQ ID NO：202之互補決定區(SEQ ID NO：204；SEQ ID NO：206；及SEQ ID NO：208)；及可變輕鏈區SEQ ID NO：222之互補決定區(SEQ ID NO：224；SEQ ID NO：226；及SEQ ID NO：228)或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。
本發明亦涵蓋包括一或多種本文所述之抗體片段之抗體片段。在本發明之一個實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體之片段包含以下或者由以下組成：以下抗體片段中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：可變重鏈區SEQ ID NO：202；可變輕鏈區SEQ ID NO：222；可變重鏈區SEQ ID NO：202之構架區(SEQ ID NO：203；SEQ ID NO：205；SEQ ID NO：207；及SEQ ID NO：209)；及可變輕鏈區SEQ ID NO：222之構架區(SEQ ID NO：223；SEQ ID NO：225；SEQ ID NO：227；及SEQ ID NO：229)或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之一特別較佳實施例中，抗PCSK9抗體為包含SEQ ID NO：201及SEQ ID NO：221或者由SEQ ID NO：201及SEQ ID NO：221組成之Ab6，或包含Ab6之CDR且具有至少一種本文所述生物活性的抗 體或抗體片段，或為與Ab6競爭結合PCSK9之抗PCSK9抗體，較佳為含有與Ab6之序列至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列的抗體，或與Ab6結合PCSK9上之相同或重疊抗原決定基之抗體。
在本發明之另一特別較佳實施例中，抗體片段包含以下或者由以下組成：對PCSK9具有結合特異性之Fab(片段抗原結合)片段。就抗體Ab6而言，Fab片段較佳包括可變重鏈序列SEQ ID NO：202及可變輕鏈序列SEQ ID NO：222或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。本發明之此實施例進一步包括含有SEQ ID NO：202及/或SEQ ID NO：222之添加、缺失及變異體且保留對PCSK9之結合特異性的Fab。
在本文(下文)所述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由酶促消化(例如木瓜蛋白酶)Ab6來產生。在本發明之另一實施例中，諸如Ab6之抗PCSK9抗體或其Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞(例如單倍體或二倍體酵母，諸如單倍體或二倍體畢赤酵母)及其他酵母菌株)中表現來產生。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。
在另一實施例中，本發明更係有關編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸，該等抗體多肽包括Ab6之重鏈及/或輕鏈以及片段；變異體；上述FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列、及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
抗體Ab7
在一個實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其具有包含下述序列之重鏈序列： (SEQ ID NO：241)。
在一個實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之可變重鏈序列： (SEQ ID NO：242)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其具有與Ab7相同之抗原決定基特異性且含有包含下述序列之恆定重鏈序列： (SEQ ID NO：250)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之輕鏈序列： (SEQ ID NO：261)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之可變輕鏈序列： (SEQ ID NO：262)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其與Ab7結合相同之抗原決定基且含有包含下述序列之恆定輕鏈序列： (SEQ ID NO：270)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有對應於重鏈序列SEQ ID NO：241之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：244；SEQ ID NO：246；及SEQ ID NO：248中之一者、兩者或三者或其含有可變重鏈序列SEQ ID NO：242，及/或其進一步含有對應於輕鏈序列SEQ ID NO：261之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：264；SEQ ID NO：266；及SEQ ID NO：268中之一者、兩者或三者或其含有可變輕鏈序列SEQ ID NO：262；或含有與其至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列之組合的抗體或片段。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體或其片段包含以下或者由以下組成：上述示範可變重鏈及可變輕鏈序列、或重鏈及輕鏈序列中之一或多者、或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
本發明進一步涵蓋包含對應於重鏈序列SEQ ID NO：241或可變重鏈序列SEQ ID NO：242之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：243；SEQ ID NO：245；SEQ ID NO：247；及SEQ ID NO：249中之一者、兩者、三者或四者；及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：261或可變輕鏈序列SEQ ID NO：262之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：263；SEQ ID NO：265；SEQ ID NO：267；及SEQ ID NO：269中之一者、兩者、三者或四者；或此等多肽序列或與其至少80%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列之組合的抗PCSK9抗體及抗體片段。
在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗體片段或其片段包含以下或者由以下組成：上述FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序 列、及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
在本發明之另一實施例中，本發明之抗PCSK9抗體片段包含以下或者由以下組成：多肽序列SEQ ID NO：241或SEQ ID NO：242或與其至少90%或95%一致之多肽。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體片段包含以下或者由以下組成：多肽序列SEQ ID NO：261或SEQ ID NO：262或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之多肽。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於重鏈序列SEQ ID NO：241或可變重鏈序列SEQ ID NO：242之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：244；SEQ ID NO：246；及SEQ ID NO：248中之一者、兩者或三者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於輕鏈序列SEQ ID NO：261或可變輕鏈序列SEQ ID NO：262之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：264；SEQ ID NO：266；及SEQ ID NO：268中之一者、兩者或三者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於重鏈序列SEQ ID NO：241或可變重鏈序列SEQ ID NO：242之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：243；SEQ ID NO：245；SEQ ID NO：247；及SEQ ID NO：249中之一者、兩者、三者或四者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之主題抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於輕鏈序列SEQ ID NO：261或可變輕鏈序列SEQ ID NO：262之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：263；SEQ ID NO：265；SEQ ID NO：267；及SEQ ID NO：269中之一者、兩者、三者或四者或與其至少90%或95%一致之序列。
本發明亦涵蓋包括一或多種本文所述之抗體片段之抗體片段。在本發明之一個實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體之片段 包含以下或者由以下組成：以下抗體片段中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：可變重鏈區SEQ ID NO：242；可變輕鏈區SEQ ID NO：262；可變重鏈區SEQ ID NO：242之互補決定區(SEQ ID NO：244；SEQ ID NO：246；及SEQ ID NO：248)；及可變輕鏈區SEQ ID NO：262之互補決定區(SEQ ID NO：264；SEQ ID NO：266；及SEQ ID NO：268)或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。
本發明亦涵蓋包括一或多種本文所述之抗體片段之抗體片段。在本發明之一個實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體之片段包含以下或者由以下組成：以下抗體片段中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：可變重鏈區SEQ ID NO：242；可變輕鏈區SEQ ID NO：262；可變重鏈區SEQ ID NO：242之構架區(SEQ ID NO：243；SEQ ID NO：245；SEQ ID NO：247；及SEQ ID NO：249)；及可變輕鏈區SEQ ID NO：262之構架區(SEQ ID NO：263；SEQ ID NO：265；SEQ ID NO：267；及SEQ ID NO：269)或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之一特別較佳實施例中，抗PCSK9抗體為包含SEQ ID NO：241及SEQ ID NO：261或者由SEQ ID NO：241及SEQ ID NO：261組成之Ab7，或包含Ab7之CDR且具有至少一種本文所述生物活性的抗體或抗體片段，或為與Ab7競爭結合PCSK9之抗PCSK9抗體，較佳為含有與Ab7之序列至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列的抗體，或與Ab7結合PCSK9上之相同或重疊抗原決定基之抗體。
在本發明之另一特別較佳實施例中，抗體片段包含以下或者由以下組成：對PCSK9具有結合特異性之Fab(片段抗原結合)片段。就抗體Ab7而言，Fab片段較佳包括可變重鏈序列SEQ ID NO：242及可變輕鏈序列SEQ ID NO：262或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。本發明之此實施例進一步包括含有SEQ ID NO：242及/或SEQ ID NO：262之添加、缺失及變異體且保留對PCSK9之結合特異性的Fab。
在本文(下文)所述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由酶促消化(例如木瓜蛋白酶)Ab7來產生。在本發明之另一實施例中，諸如Ab7之抗PCSK9抗體或其Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、 NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞(例如單倍體或二倍體酵母，諸如單倍體或二倍體畢赤酵母)及其他酵母菌株)中表現來產生。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。
在另一實施例中，本發明更係有關編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸，該等抗體多肽包括Ab7之重鏈及/或輕鏈以及片段；變異體；上述FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列、及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
抗體Ab8
在一個實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其具有包含下述序列之重鏈序列： (SEQ ID NO：281)。
在一個實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之可變重鏈序列： (SEQ ID NO：282)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其具有與Ab8相同之抗原決定基特異性且含有包含下述序列之恆定重鏈序列： (SEQ ID NO：290)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之輕鏈序列： (SEQ ID NO：301)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之可變輕鏈序列： (SEQ ID NO：302)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其與Ab8結合相同之抗原決定基且含有包含下述序列之恆定輕鏈序列： (SEQ ID NO：310)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有對應於重鏈序列SEQ ID NO：281之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：284；SEQ ID NO：286；及SEQ ID NO：288中之一者、兩者或三者或其含有可變重鏈序列SEQ ID NO：282，及 /或其進一步含有對應於輕鏈序列SEQ ID NO：301之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：304；SEQ ID NO：306；及SEQ ID NO：308中之一者、兩者或三者或其含有可變輕鏈序列SEQ ID NO：302；或含有與其至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列之組合的抗體或片段。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體或其片段包含以下或者由以下組成：上述示範可變重鏈及可變輕鏈序列、或重鏈及輕鏈序列中之一或多者、或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
本發明進一步涵蓋包含對應於重鏈序列SEQ ID NO：281或可變重鏈序列SEQ ID NO：282之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：283；SEQ ID NO：285；SEQ ID NO：287；及SEQ ID NO：289中之一者、兩者、三者或四者；及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：301或可變輕鏈序列SEQ ID NO：302之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：303；SEQ ID NO：305；SEQ ID NO：307；及SEQ ID NO：309中之一者、兩者、三者或四者；或此等多肽序列或與其至少80%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列之組合的抗PCSK9抗體及抗體片段。
在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗體片段或其片段包含以下或者由以下組成：上述FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列、及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
在本發明之另一實施例中，本發明之抗PCSK9抗體片段包含以下或者由以下組成：多肽序列SEQ ID NO：281或SEQ ID NO：282或與其至少90%或95%一致之多肽。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體片段包含以下或者由以下組成：多肽序列SEQ ID NO：301或SEQ ID NO：302或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之多肽。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於重鏈序列SEQ ID NO：281或可變重鏈序列SEQ ID NO：282之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：284；SEQ ID NO：286；及SEQ ID NO：288中之一者、兩者或三者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於輕鏈序列SEQ ID NO：301或可變輕鏈序列SEQ ID NO：302之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：304；SEQ ID NO：306；及SEQ ID NO：308中之一者、兩者或三者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於重鏈序列SEQ ID NO：281或可變重鏈序列SEQ ID NO：282之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：283；SEQ ID NO：285；SEQ ID NO：287；及SEQ ID NO：289中之一者、兩者、三者或四者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之主題抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於輕鏈序列SEQ ID NO：301或可變輕鏈序列SEQ ID NO：302之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：303；SEQ ID NO：305；SEQ ID NO：307；及SEQ ID NO：309中之一者、兩者、三者或四者或與其至少90%或95%一致之序列。
本發明亦涵蓋包括一或多種本文所述之抗體片段之抗體片段。在本發明之一個實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體之片段包含以下或者由以下組成：以下抗體片段中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：可變重鏈區SEQ ID NO：282；可變輕鏈區SEQ ID NO：302；可變重鏈區SEQ ID NO：282之互補決定區(SEQ ID NO：284；SEQ ID NO：286；及SEQ ID NO：288)；及可變輕鏈區SEQ ID NO：302之互補決定區(SEQ ID NO：304；SEQ ID NO：306；及SEQ ID NO：308)或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。
本發明亦涵蓋包括一或多種本文所述之抗體片段之抗體片段。在本發明之一個實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體之片段包含以下或者由以下組成：以下抗體片段中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：可變重鏈區SEQ ID NO：282；可變輕鏈區SEQ ID NO：302；可變重鏈區SEQ ID NO：282之構架區(SEQ ID NO：283；SEQ ID NO：285；SEQ ID NO：287；及SEQ ID NO：289)；及可變輕鏈區SEQ ID NO： 302之構架區(SEQ ID NO：303；SEQ ID NO：305；SEQ ID NO：307；及SEQ ID NO：309)或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之一特別較佳實施例中，抗PCSK9抗體為包含SEQ ID NO：281及SEQ ID NO：301或者由SEQ ID NO：281及SEQ ID NO：301組成之Ab8，或包含Ab8之CDR且具有至少一種本文所述生物活性的抗體或抗體片段，或為與Ab8競爭結合PCSK9之抗PCSK9抗體，較佳為含有與Ab8之序列至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列的抗體，或與Ab8結合PCSK9上之相同或重疊抗原決定基之抗體。
在本發明之另一特別較佳實施例中，抗體片段包含以下或者由以下組成：對PCSK9具有結合特異性之Fab(片段抗原結合)片段。就抗體Ab8而言，Fab片段較佳包括可變重鏈序列SEQ ID NO：282及可變輕鏈序列SEQ ID NO：302或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。本發明之此實施例進一步包括含有SEQ ID NO：282及/或SEQ ID NO：302之添加、缺失及變異體且保留對PCSK9之結合特異性的Fab。
在本文(下文)所述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由酶促消化(例如木瓜蛋白酶)Ab8來產生。在本發明之另一實施例中，諸如Ab8之抗PCSK9抗體或其Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞(例如單倍體或二倍體酵母，諸如單倍體或二倍體畢赤酵母)及其他酵母菌株)中表現來產生。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。
在另一實施例中，本發明更係有關編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸，該等抗體多肽包括Ab8之重鏈及/或輕鏈以及片段；變異體；上述FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列、及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
抗體Ab9
在一個實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其具有包含下述序列之重鏈序列： (SEQ ID NO：321)。
在一個實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之可變重鏈序列： (SEQ ID NO：322)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其具有與Ab9相同之抗原決定基特異性且含有包含下述序列之恆定重鏈序列： (SEQ ID NO：330)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之輕鏈序列： (SEQ ID NO：341)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之可變輕鏈序列： (SEQ ID NO：342)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其與Ab9結合相同之抗原決定基且含有包含下述序列之恆定輕鏈序列： (SEQ ID NO：350)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有對應於重鏈序列SEQ ID NO：321之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：324；SEQ ID NO：326；及SEQ ID NO：328中之一者、兩者或三者或其含有可變重鏈序列SEQ ID NO：322，及/或其進一步含有對應於輕鏈序列SEQ ID NO：341之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：344；SEQ ID NO：346；及SEQ ID NO：348中之一者、兩者或三者或其含有可變輕鏈序列SEQ ID NO：342；或含有與其至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列之組合的抗體或片段。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體或其片段包含以下或者由以下組成：上述示範可變重鏈及可變輕鏈序列、或重鏈及輕鏈序列中之一或多者、或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
本發明進一步涵蓋包含對應於重鏈序列SEQ ID NO：321或可變重鏈序列SEQ ID NO：322之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：323；SEQ ID NO：325；SEQ ID NO：327；及SEQ ID NO：329中之一者、兩者、三者或四者；及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：341或可變輕鏈序列SEQ ID NO：342之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：343； SEQ ID NO：345；SEQ ID NO：347；及SEQ ID NO：349中之一者、兩者、三者或四者；或此等多肽序列或與其至少80%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列之組合的抗PCSK9抗體及抗體片段。
在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗體片段或其片段包含以下或者由以下組成：上述FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列、及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
在本發明之另一實施例中，本發明之抗PCSK9抗體片段包含以下或者由以下組成：多肽序列SEQ ID NO：321或SEQ ID NO：322或與其至少90%或95%一致之多肽。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體片段包含以下或者由以下組成：多肽序列SEQ ID NO：341或SEQ ID NO：342或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之多肽。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於重鏈序列SEQ ID NO：321或可變重鏈序列SEQ ID NO：322之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：324；SEQ ID NO：326；及SEQ ID NO：328中之一者、兩者或三者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於輕鏈序列SEQ ID NO：341或可變輕鏈序列SEQ ID NO：342之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：344；SEQ ID NO：346；及SEQ ID NO：348中之一者、兩者或三者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於重鏈序列SEQ ID NO：321或可變重鏈序列SEQ ID NO：322之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：323；SEQ ID NO：325；SEQ ID NO：327；及SEQ ID NO：329中之一者、兩者、三者或四者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之主題抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於輕鏈序列SEQ ID NO：341或可變輕鏈序列SEQ ID NO：342之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：343；SEQ ID NO：345；SEQ ID NO：347；及SEQ ID NO：349中之一者、兩者、三者或四者或與其至少90%或95%一致之序列。
本發明亦涵蓋包括一或多種本文所述之抗體片段之抗體片段。在本發明之一個實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體之片段包含以下或者由以下組成：以下抗體片段中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：可變重鏈區SEQ ID NO：322；可變輕鏈區SEQ ID NO：342；可變重鏈區SEQ ID NO：322之互補決定區(SEQ ID NO：324；SEQ ID NO：326；及SEQ ID NO：328)；及可變輕鏈區SEQ ID NO：342之互補決定區(SEQ ID NO：344；SEQ ID NO：346；及SEQ ID NO：348)或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。
本發明亦涵蓋包括一或多種本文所述之抗體片段之抗體片段。在本發明之一個實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體之片段包含以下或者由以下組成：以下抗體片段中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：可變重鏈區SEQ ID NO：322；可變輕鏈區SEQ ID NO：342；可變重鏈區SEQ ID NO：322之構架區(SEQ ID NO：323；SEQ ID NO：325；SEQ ID NO：327；及SEQ ID NO：329)；及可變輕鏈區SEQ ID NO：342之構架區(SEQ ID NO：343；SEQ ID NO：345；SEQ ID NO：347；及SEQ ID NO：349)或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之一特別較佳實施例中，抗PCSK9抗體為包含SEQ ID NO：321及SEQ ID NO：341或者由SEQ ID NO：321及SEQ ID NO：341組成之Ab9，或包含Ab9之CDR且具有至少一種本文所述生物活性的抗體或抗體片段，或為與Ab9競爭結合PCSK9之抗PCSK9抗體，較佳為含有與Ab9之序列至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列的抗體，或與Ab9結合PCSK9上之相同或重疊抗原決定基之抗體。
在本發明之另一特別較佳實施例中，抗體片段包含以下或者由以下組成：對PCSK9具有結合特異性之Fab(片段抗原結合)片段。就抗體Ab9而言，Fab片段較佳包括可變重鏈序列SEQ ID NO：322及可變輕鏈序列SEQ ID NO：342或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致 之序列。本發明之此實施例進一步包括含有SEQ ID NO：322及/或SEQ ID NO：342之添加、缺失及變異體且保留對PCSK9之結合特異性的Fab。
在本文(下文)所述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由酶促消化(例如木瓜蛋白酶)Ab9來產生。在本發明之另一實施例中，諸如Ab9之抗PCSK9抗體或其Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞(例如單倍體或二倍體酵母，諸如單倍體或二倍體畢赤酵母)及其他酵母菌株)中表現來產生。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。
在另一實施例中，本發明更係有關編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸，該等抗體多肽包括Ab9之重鏈及/或輕鏈以及片段；變異體；上述FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列、及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
抗體Ab10
在一個實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其具有包含下述序列之重鏈序列： (SEQ ID NO：361)。
在一個實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之可變重鏈序列： (SEQ ID NO：362)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其具有與Ab10相同之抗原決定基特異性且含有包含下述序列之恆定重鏈序列： (SEQ ID NO：370)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之輕鏈序列： (SEQ ID NO：381)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之可變輕鏈序列： (SEQ ID NO：382)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其與Ab10結合相同之抗原決定基且含有包含下述序列之恆定輕鏈序列： (SEQ ID NO：390)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有對應於重鏈序列SEQ ID NO：361之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：364；SEQ ID NO：366；及SEQ ID NO：368中之一者、兩者或三者或其含有可變重鏈序列SEQ ID NO：362，及/或其進一步含有對應於輕鏈序列SEQ ID NO：381之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：384；SEQ ID NO：386；及SEQ ID NO：388中之一者、兩者或三者或其含有可變輕鏈序列SEQ ID NO：382；或含有與其至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列之組合的抗體或片段。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體或其片段包含以下或者由以下組成：上述示範可變重鏈及可變輕鏈序列、或重鏈及輕鏈序列中之一或多者、或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
本發明進一步涵蓋包含對應於重鏈序列SEQ ID NO：361或可變重鏈序列SEQ ID NO：362之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：363；SEQ ID NO：365；SEQ ID NO：367；及SEQ ID NO：369中之一者、兩者、三者或四者；及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：381或可變輕鏈序列SEQ ID NO：382之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：383；SEQ ID NO：385；SEQ ID NO：387；及SEQ ID NO：389中之一者、兩者、三者或四者；或此等多肽序列或與其至少80%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列之組合的抗PCSK9抗體及抗體片段。
在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗體片段或其片段包含以下或者由以下組成：上述FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列、及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
在本發明之另一實施例中，本發明之抗PCSK9抗體片段包含以下或者由以下組成：多肽序列SEQ ID NO：361或SEQ ID NO：362或與其至少90%或95%一致之多肽。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體片段包含以下或者由以下組成：多肽序列SEQ ID NO：381或SEQ ID NO：382或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之多肽。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於重鏈序列SEQ ID NO：361或可變重鏈序列SEQ ID NO：362之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：364；SEQ ID NO：366；及SEQ ID NO：368中之一者、兩者或三者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於輕鏈序列SEQ ID NO：381或可變輕鏈序列SEQ ID NO：382之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：384；SEQ ID NO：386；及SEQ ID NO：388中之一者、兩者或三者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於重鏈序列SEQ ID NO：361或可變重鏈序列SEQ ID NO：362之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：363；SEQ ID NO：365；SEQ ID NO：367；及SEQ ID NO：369中之一者、兩者、三者或四者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之主題抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於輕鏈序列SEQ ID NO：381或可變輕鏈序列SEQ ID NO：382之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：383；SEQ ID NO：385；SEQ ID NO：387；及SEQ ID NO：389中之一者、兩者、三者或四者或與其至少90%或95%一致之序列。
本發明亦涵蓋包括一或多種本文所述之抗體片段之抗體片段。在本發明之一個實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體之片段包含以下或者由以下組成：以下抗體片段中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：可變重鏈區SEQ ID NO：362；可變輕鏈區SEQ ID NO：382；可變重鏈區SEQ ID NO：362之互補決定區(SEQ ID NO：364；SEQ ID NO：366；及SEQ ID NO：368)；及可變輕鏈區SEQ ID NO：382之互補決定區(SEQ ID NO：384；SEQ ID NO：386；及SEQ ID NO：388)或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。
本發明亦涵蓋包括一或多種本文所述之抗體片段之抗體 片段。在本發明之一個實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體之片段包含以下或者由以下組成：以下抗體片段中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：可變重鏈區SEQ ID NO：362；可變輕鏈區SEQ ID NO：382；可變重鏈區SEQ ID NO：362之構架區(SEQ ID NO：363；SEQ ID NO：365；SEQ ID NO：367；及SEQ ID NO：369)；及可變輕鏈區SEQ ID NO：382之構架區(SEQ ID NO：383；SEQ ID NO：385；SEQ ID NO：387；及SEQ ID NO：389)或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之一特別較佳實施例中，抗PCSK9抗體為包含SEQ ID NO：361及SEQ ID NO：381或者由SEQ ID NO：361及SEQ ID NO：381組成之Ab10，或包含Ab10之CDR且具有至少一種本文所述生物活性的抗體或抗體片段，或為與Ab10競爭結合PCSK9之抗PCSK9抗體，較佳為含有與Ab10之序列至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列的抗體，或與Ab10結合PCSK9上之相同或重疊抗原決定基之抗體。
在本發明之另一特別較佳實施例中，抗體片段包含以下或者由以下組成：對PCSK9具有結合特異性之Fab(片段抗原結合)片段。就抗體Ab10而言，Fab片段較佳包括可變重鏈序列SEQ ID NO：362及可變輕鏈序列SEQ ID NO：382或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。本發明之此實施例進一步包括含有SEQ ID NO：362及/或SEQ ID NO：382之添加、缺失及變異體且保留對PCSK9之結合特異性的Fab。
在本文(下文)所述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由酶促消化(例如木瓜蛋白酶)Ab10來產生。在本發明之另一實施例中，諸如Ab10之抗PCSK9抗體或其Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞(例如單倍體或二倍體酵母，諸如單倍體或二倍體畢赤酵母)及其他酵母菌株)中表現來產生。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。
在另一實施例中，本發明更係有關編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸，該等抗體多肽包括Ab10之重鏈及/或輕鏈以及片段；變異體；上述FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列、及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部或與其至少90%或95%一致之序列 的組合。
抗體Ab11
在一個實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其具有包含下述序列之重鏈序列： (SEQ ID NO：401)。
在一個實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之可變重鏈序列： (SEQ ID NO：402)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其具有與Ab11相同之抗原決定基特異性且含有包含下述序列之恆定重鏈序列： (SEQ ID NO：410)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之輕鏈序列： (SEQ ID NO：421)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之可變輕鏈序列： (SEQ ID NO：422)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其與Ab11結合相同之抗原決定基且含有包含下述序列之恆定輕鏈序列： (SEQ ID NO：430)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有對應於重鏈序列SEQ ID NO：401之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：404；SEQ ID NO：406；及SEQ ID NO：408中之一者、兩者或三者或其含有可變重鏈序列SEQ ID NO：402，及/或其進一步含有對應於輕鏈序列SEQ ID NO：421之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：424；SEQ ID NO：426；及SEQ ID NO：428中之一者、兩者或三者或其含有可變輕鏈序列SEQ ID NO：422；或含有與其至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列之組合的抗體或片段。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體或其片段包含以下或者由以下組成：上述示範可變重鏈及可變輕鏈序列、或重鏈及輕鏈序列中之一或多者、或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
本發明進一步涵蓋包含對應於重鏈序列SEQ ID NO：401或可變重鏈序列SEQ ID NO：402之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：403；SEQ ID NO：405；SEQ ID NO：407；及SEQ ID NO：409中之一者、兩者、三者或四者；及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：421或可變輕鏈序列SEQ ID NO：422之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：423；SEQ ID NO：425；SEQ ID NO：427；及SEQ ID NO：429中之一者、兩者、三者或四者；或此等多肽序列或與其至少80%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列之組合的抗PCSK9抗體及抗體片段。
在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗體片段或其片段包含以下或者由以下組成：上述FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列、及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
在本發明之另一實施例中，本發明之抗PCSK9抗體片段包含以下或者由以下組成：多肽序列SEQ ID NO：401或SEQ ID NO：402或與其至少90%或95%一致之多肽。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體片段包含以下或者由以下組成：多肽序列SEQ ID NO：421或SEQ ID NO：422或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之多肽。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於重鏈序列SEQ ID NO：401或可變重鏈序列SEQ ID NO：402之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：404；SEQ ID NO：406；及SEQ ID NO：408中之一者、兩者或三者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於輕鏈序列SEQ ID NO：421或可變輕鏈序列SEQ ID NO：422之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：424；SEQ ID NO：426；及SEQ ID NO：428中之一者、兩者或三者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於重鏈序列SEQ ID NO： 401或可變重鏈序列SEQ ID NO：402之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：403；SEQ ID NO：405；SEQ ID NO：407；及SEQ ID NO：409中之一者、兩者、三者或四者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之主題抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於輕鏈序列SEQ ID NO：421或可變輕鏈序列SEQ ID NO：422之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：423；SEQ ID NO：425；SEQ ID NO：427；及SEQ ID NO：429中之一者、兩者、三者或四者或與其至少90%或95%一致之序列。
本發明亦涵蓋包括一或多種本文所述之抗體片段之抗體片段。在本發明之一個實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體之片段包含以下或者由以下組成：以下抗體片段中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：可變重鏈區SEQ ID NO：402；可變輕鏈區SEQ ID NO：422；可變重鏈區SEQ ID NO：402之互補決定區(SEQ ID NO：404；SEQ ID NO：406；及SEQ ID NO：408)；及可變輕鏈區SEQ ID NO：422之互補決定區(SEQ ID NO：424；SEQ ID NO：426；及SEQ ID NO：428)或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。
本發明亦涵蓋包括一或多種本文所述之抗體片段之抗體片段。在本發明之一個實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體之片段包含以下或者由以下組成：以下抗體片段中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：可變重鏈區SEQ ID NO：402；可變輕鏈區SEQ ID NO：422；可變重鏈區SEQ ID NO：402之構架區(SEQ ID NO：403；SEQ ID NO：405；SEQ ID NO：407；及SEQ ID NO：409)；及可變輕鏈區SEQ ID NO：422之構架區(SEQ ID NO：423；SEQ ID NO：425；SEQ ID NO：427；及SEQ ID NO：429)或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之一特別較佳實施例中，抗PCSK9抗體為包含SEQ ID NO：401及SEQ ID NO：421或者由SEQ ID NO：401及SEQ ID NO：421組成之Ab11，或包含Ab11之CDR且具有至少一種本文所述生物活性的抗體或抗體片段，或為與Ab11競爭結合PCSK9之抗PCSK9抗體，較佳為含有與Ab11之序列至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列的抗 體，或與Ab11結合PCSK9上之相同或重疊抗原決定基之抗體。
在本發明之另一特別較佳實施例中，抗體片段包含以下或者由以下組成：對PCSK9具有結合特異性之Fab(片段抗原結合)片段。就抗體Ab11而言，Fab片段較佳包括可變重鏈序列SEQ ID NO：402及可變輕鏈序列SEQ ID NO：422或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。本發明之此實施例進一步包括含有SEQ ID NO：402及/或SEQ ID NO：422之添加、缺失及變異體且保留對PCSK9之結合特異性的Fab。
在本文(下文)所述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由酶促消化(例如木瓜蛋白酶)Ab11來產生。在本發明之另一實施例中，諸如Ab11之抗PCSK9抗體或其Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞(例如單倍體或二倍體酵母，諸如單倍體或二倍體畢赤酵母)及其他酵母菌株)中表現來產生。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。
在另一實施例中，本發明更係有關編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸，該等抗體多肽包括Ab11之重鏈及/或輕鏈以及片段；變異體；上述FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列、及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
抗體Ab12
在一個實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其具有包含下述序列之重鏈序列： (SEQ ID NO：441)。
在一個實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之可變重鏈序列： (SEQ ID NO：442)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其具有與Ab12相同之抗原決定基特異性且含有包含下述序列之恆定重鏈序列： (SEQ ID NO：450)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之輕鏈序列： (SEQ ID NO：461)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之可變輕鏈序列： (SEQ ID NO：462)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其與Ab12結合相同之抗原決定基且含有包含下述序列之恆定輕鏈序列： (SEQ ID NO：470)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有對應於重鏈序列SEQ ID NO：441之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：444；SEQ ID NO：446；及SEQ ID NO：448中之一者、兩者或三者或其含有可變重鏈序列SEQ ID NO：442，及/或其進一步含有對應於輕鏈序列SEQ ID NO：461之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：464；SEQ ID NO：466；及SEQ ID NO：468中之一者、兩者或三者或其含有可變輕鏈序列SEQ ID NO：462；或含有與其至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列之組合的抗體或片段。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體或其片段包含以下或者由以下組成：上述示範可變重鏈及可變輕鏈序列、或重鏈及輕鏈序列中之一或多者、或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
本發明進一步涵蓋包含對應於重鏈序列SEQ ID NO：441或可變重鏈序列SEQ ID NO：442之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：443；SEQ ID NO：445；SEQ ID NO：447；及SEQ ID NO：449中之一者、兩者、三者或四者；及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：461或可變輕鏈序列SEQ ID NO：462之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：463；SEQ ID NO：465；SEQ ID NO：467；及SEQ ID NO：469中之一者、兩者、三者或四者；或此等多肽序列或與其至少80%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列之組合的抗PCSK9抗體及抗體片段。
在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗體片段或其片段包含以下或者由以下組成：上述FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列、及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
在本發明之另一實施例中，本發明之抗PCSK9抗體片段包含以下或者由以下組成：多肽序列SEQ ID NO：441或SEQ ID NO：442或與其至少90%或95%一致之多肽。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體片段包含以下或者由以下組成：多肽序列SEQ ID NO：461或SEQ ID NO：462或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之多肽。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於重鏈序列SEQ ID NO：441或可變重鏈序列SEQ ID NO：442之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：444；SEQ ID NO：446；及SEQ ID NO：448中之一者、兩者或三者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於輕鏈序列SEQ ID NO：461或可變輕鏈序列SEQ ID NO：462之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：464；SEQ ID NO：466；及SEQ ID NO：468中之一者、兩者或三者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於重鏈序列SEQ ID NO：441或可變重鏈序列SEQ ID NO：442之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：443；SEQ ID NO：445；SEQ ID NO：447；及SEQ ID NO：449中之一者、兩者、三者或四者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之主題抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於輕鏈序列SEQ ID NO：461或可變輕鏈序列SEQ ID NO：462之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：463；SEQ ID NO：465；SEQ ID NO：467；及SEQ ID NO：469中之一者、兩者、三者或四者或與其至少90%或95%一致之序列。
本發明亦涵蓋包括一或多種本文所述之抗體片段之抗體片段。在本發明之一個實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體之片段包含以下或者由以下組成：以下抗體片段中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：可變重鏈區SEQ ID NO：442；可變輕鏈區SEQ ID NO： 462；可變重鏈區SEQ ID NO：442之互補決定區(SEQ ID NO：444；SEQ ID NO：446；及SEQ ID NO：448)；及可變輕鏈區SEQ ID NO：462之互補決定區(SEQ ID NO：464；SEQ ID NO：466；及SEQ ID NO：468)或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。
本發明亦涵蓋包括一或多種本文所述之抗體片段之抗體片段。在本發明之一個實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體之片段包含以下或者由以下組成：以下抗體片段中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：可變重鏈區SEQ ID NO：442；可變輕鏈區SEQ ID NO：462；可變重鏈區SEQ ID NO：442之構架區(SEQ ID NO：443；SEQ ID NO：445；SEQ ID NO：447；及SEQ ID NO：449)；及可變輕鏈區SEQ ID NO：462之構架區(SEQ ID NO：463；SEQ ID NO：465；SEQ ID NO：467；及SEQ ID NO：469)或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之一特別較佳實施例中，抗PCSK9抗體為包含SEQ ID NO：441及SEQ ID NO：461或者由SEQ ID NO：441及SEQ ID NO：461組成之Ab12，或包含Ab12之CDR且具有至少一種本文所述生物活性的抗體或抗體片段，或為與Ab12競爭結合PCSK9之抗PCSK9抗體，較佳為含有與Ab12之序列至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列的抗體，或與Ab12結合PCSK9上之相同或重疊抗原決定基之抗體。
在本發明之另一特別較佳實施例中，抗體片段包含以下或者由以下組成：對PCSK9具有結合特異性之Fab(片段抗原結合)片段。就抗體Ab12而言，Fab片段較佳包括可變重鏈序列SEQ ID NO：442及可變輕鏈序列SEQ ID NO：462或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。本發明之此實施例進一步包括含有SEQ ID NO：442及/或SEQ ID NO：462之添加、缺失及變異體且保留對PCSK9之結合特異性的Fab。
在本文(下文)所述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由酶促消化(例如木瓜蛋白酶)Ab12來產生。在本發明之另一實施例中，諸如Ab12之抗PCSK9抗體或其Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞(例如單倍 體或二倍體酵母，諸如單倍體或二倍體畢赤酵母)及其他酵母菌株)中表現來產生。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。
在另一實施例中，本發明更係有關編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸，該等抗體多肽包括Ab12之重鏈及/或輕鏈以及片段；變異體；上述FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列、及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
抗體Ab13
在一個實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其具有包含下述序列之重鏈序列： (SEQ ID NO：481)。
在一個實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之可變重鏈序列： (SEQ ID NO：482)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其具有與Ab13相同之抗原決定基特異性且含有包含下述序列之恆定重鏈序列： (SEQ ID NO：490)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之輕鏈序列： (SEQ ID NO：501)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之可變輕鏈序列： (SEQ ID NO：502)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其與Ab13結合相同之抗原決定基且含有包含下述序列之恆定輕鏈序列： (SEQ ID NO：510)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有對應於重鏈序列SEQ ID NO：481之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：484；SEQ ID NO：486；及SEQ ID NO：488中之一者、兩者或三者或其含有可變重鏈序列SEQ ID NO：482，及/或其進一步含有對應於輕鏈序列SEQ ID NO：501之互補決定區(CDR或高 變區)之多肽序列SEQ ID NO：504；SEQ ID NO：506；及SEQ ID NO：508中之一者、兩者或三者或其含有可變輕鏈序列SEQ ID NO：502；或含有與其至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列之組合的抗體或片段。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體或其片段包含以下或者由以下組成：上述示範可變重鏈及可變輕鏈序列、或重鏈及輕鏈序列中之一或多者、或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
本發明進一步涵蓋包含對應於重鏈序列SEQ ID NO：481或可變重鏈序列SEQ ID NO：482之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：483；SEQ ID NO：485；SEQ ID NO：487；及SEQ ID NO：489中之一者、兩者、三者或四者；及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：501或可變輕鏈序列SEQ ID NO：502之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：503；SEQ ID NO：505；SEQ ID NO：507；及SEQ ID NO：509中之一者、兩者、三者或四者；或此等多肽序列或與其至少80%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列之組合的抗PCSK9抗體及抗體片段。
在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗體片段或其片段包含以下或者由以下組成：上述FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列、及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
在本發明之另一實施例中，本發明之抗PCSK9抗體片段包含以下或者由以下組成：多肽序列SEQ ID NO：481或SEQ ID NO：482或與其至少90%或95%一致之多肽。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體片段包含以下或者由以下組成：多肽序列SEQ ID NO：501或SEQ ID NO：502或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之多肽。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於重鏈序列SEQ ID NO：481或可變重鏈序列SEQ ID NO：482之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：484；SEQ ID NO：486；及SEQ ID NO：488中之一者、兩者或三者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之 抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於輕鏈序列SEQ ID NO：501或可變輕鏈序列SEQ ID NO：502之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：504；SEQ ID NO：506；及SEQ ID NO：508中之一者、兩者或三者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於重鏈序列SEQ ID NO：481或可變重鏈序列SEQ ID NO：482之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：483；SEQ ID NO：485；SEQ ID NO：487；及SEQ ID NO：489中之一者、兩者、三者或四者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之主題抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於輕鏈序列SEQ ID NO：501或可變輕鏈序列SEQ ID NO：502之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：503；SEQ ID NO：505；SEQ ID NO：507；及SEQ ID NO：509中之一者、兩者、三者或四者或與其至少90%或95%一致之序列。
本發明亦涵蓋包括一或多種本文所述之抗體片段之抗體片段。在本發明之一個實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體之片段包含以下或者由以下組成：以下抗體片段中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：可變重鏈區SEQ ID NO：482；可變輕鏈區SEQ ID NO：502；可變重鏈區SEQ ID NO：482之互補決定區(SEQ ID NO：484；SEQ ID NO：486；及SEQ ID NO：488)；及可變輕鏈區SEQ ID NO：502之互補決定區(SEQ ID NO：504；SEQ ID NO：506；及SEQ ID NO：508)或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。
本發明亦涵蓋包括一或多種本文所述之抗體片段之抗體片段。在本發明之一個實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體之片段包含以下或者由以下組成：以下抗體片段中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：可變重鏈區SEQ ID NO：482；可變輕鏈區SEQ ID NO：502；可變重鏈區SEQ ID NO：482之構架區(SEQ ID NO：483；SEQ ID NO：485；SEQ ID NO：487；及SEQ ID NO：489)；及可變輕鏈區SEQ ID NO：502之構架區(SEQ ID NO：503；SEQ ID NO：505；SEQ ID NO：507；及 SEQ ID NO：509)或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之一特別較佳實施例中，抗PCSK9抗體為包含SEQ ID NO：481及SEQ ID NO：501或者由SEQ ID NO：481及SEQ ID NO：501組成之Ab13，或包含Ab13之CDR且具有至少一種本文所述生物活性的抗體或抗體片段，或為與Ab13競爭結合PCSK9之抗PCSK9抗體，較佳為含有與Ab13之序列至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列的抗體，或與Ab13結合PCSK9上之相同或重疊抗原決定基之抗體。
在本發明之另一特別較佳實施例中，抗體片段包含以下或者由以下組成：對PCSK9具有結合特異性之Fab(片段抗原結合)片段。就抗體Ab13而言，Fab片段較佳包括可變重鏈序列SEQ ID NO：482及可變輕鏈序列SEQ ID NO：502或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。本發明之此實施例進一步包括含有SEQ ID NO：482及/或SEQ ID NO：502之添加、缺失及變異體且保留對PCSK9之結合特異性的Fab。
在本文(下文)所述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由酶促消化(例如木瓜蛋白酶)Ab13來產生。在本發明之另一實施例中，諸如Ab13之抗PCSK9抗體或其Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞(例如單倍體或二倍體酵母，諸如單倍體或二倍體畢赤酵母)及其他酵母菌株)中表現來產生。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。
在另一實施例中，本發明更係有關編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸，該等抗體多肽包括Ab13之重鏈及/或輕鏈以及片段；變異體；上述FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列、及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
抗體Ab14
在一個實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其具有包含下述序列之重鏈序列： (SEQ ID NO：521)。
在一個實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之可變重鏈序列： (SEQ ID NO：522)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其具有與Ab14相同之抗原決定基特異性且含有包含下述序列之恆定重鏈序列： (SEQ ID NO：530)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之輕鏈序列： (SEQ ID NO：541)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之可變輕鏈序列： (SEQ ID NO：542)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其與Ab14結合相同之抗原決定基且含有包含下述序列之恆定輕鏈序列： (SEQ ID NO：550)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有對應於重鏈序列SEQ ID NO：521之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：524；SEQ ID NO：526；及SEQ ID NO：528中之一者、兩者或三者或其含有可變重鏈序列SEQ ID NO：522，及/或其進一步含有對應於輕鏈序列SEQ ID NO：541之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：544；SEQ ID NO：546；及SEQ ID NO：548中之一者、兩者或三者或其含有可變輕鏈序列SEQ ID NO：542；或含有與其至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列之組合的抗體或片段。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體或其片段包含以下或者由以下組成：上述示範可變重鏈及可變輕鏈序列、或重鏈及輕鏈序列中之一或多者、或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
本發明進一步涵蓋包含對應於重鏈序列SEQ ID NO：521或可變重鏈序列SEQ ID NO：522之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：523；SEQ ID NO：525；SEQ ID NO：527；及SEQ ID NO：529中之一者、兩者、三者或四者；及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：541或可變輕鏈序列SEQ ID NO：542之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：543；SEQ ID NO：545；SEQ ID NO：547；及SEQ ID NO：549中之一者、兩者、 三者或四者；或此等多肽序列或與其至少80%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列之組合的抗PCSK9抗體及抗體片段。
在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗體片段或其片段包含以下或者由以下組成：上述FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列、及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
在本發明之另一實施例中，本發明之抗PCSK9抗體片段包含以下或者由以下組成：多肽序列SEQ ID NO：521或SEQ ID NO：522或與其至少90%或95%一致之多肽。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體片段包含以下或者由以下組成：多肽序列SEQ ID NO：541或SEQ ID NO：542或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之多肽。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於重鏈序列SEQ ID NO：521或可變重鏈序列SEQ ID NO：522之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：524；SEQ ID NO：526；及SEQ ID NO：528中之一者、兩者或三者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於輕鏈序列SEQ ID NO：541或可變輕鏈序列SEQ ID NO：542之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：544；SEQ ID NO：546；及SEQ ID NO：548中之一者、兩者或三者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於重鏈序列SEQ ID NO：521或可變重鏈序列SEQ ID NO：522之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：523；SEQ ID NO：525；SEQ ID NO：527；及SEQ ID NO：529中之一者、兩者、三者或四者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之主題抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於輕鏈序列SEQ ID NO：541或可變輕鏈序列SEQ ID NO：542之構架區(FR或恆定區)之多肽序列 SEQ ID NO：543；SEQ ID NO：545；SEQ ID NO：547；及SEQ ID NO：549中之一者、兩者、三者或四者或與其至少90%或95%一致之序列。
本發明亦涵蓋包括一或多種本文所述之抗體片段之抗體片段。在本發明之一個實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體之片段包含以下或者由以下組成：以下抗體片段中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：可變重鏈區SEQ ID NO：522；可變輕鏈區SEQ ID NO：542；可變重鏈區SEQ ID NO：522之互補決定區(SEQ ID NO：524；SEQ ID NO：526；及SEQ ID NO：528)；及可變輕鏈區SEQ ID NO：542之互補決定區(SEQ ID NO：544；SEQ ID NO：546；及SEQ ID NO：548)或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。
本發明亦涵蓋包括一或多種本文所述之抗體片段之抗體片段。在本發明之一個實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體之片段包含以下或者由以下組成：以下抗體片段中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：可變重鏈區SEQ ID NO：522；可變輕鏈區SEQ ID NO：542；可變重鏈區SEQ ID NO：522之構架區(SEQ ID NO：523；SEQ ID NO：525；SEQ ID NO：527；及SEQ ID NO：529)；及可變輕鏈區SEQ ID NO：542之構架區(SEQ ID NO：543；SEQ ID NO：545；SEQ ID NO：547；及SEQ ID NO：549)或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之一特別較佳實施例中，抗PCSK9抗體為包含SEQ ID NO：521及SEQ ID NO：541或者由SEQ ID NO：521及SEQ ID NO：541組成之Ab14，或包含Ab14之CDR且具有至少一種本文所述生物活性的抗體或抗體片段，或為與Ab14競爭結合PCSK9之抗PCSK9抗體，較佳為含有與Ab14之序列至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列的抗體，或與Ab14結合PCSK9上之相同或重疊抗原決定基之抗體。
在本發明之另一特別較佳實施例中，抗體片段包含以下或者由以下組成：對PCSK9具有結合特異性之Fab(片段抗原結合)片段。就抗體Ab14而言，Fab片段較佳包括可變重鏈序列SEQ ID NO：522及可變輕鏈序列SEQ ID NO：542或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。本發明之此實施例進一步包括含有SEQ ID NO：522及/或SEQ ID NO：542之添加、缺失及變異體且保留對PCSK9之結合特異性的Fab。
在本文(下文)所述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由酶促消化(例如木瓜蛋白酶)Ab14來產生。在本發明之另一實施例中，諸如Ab14之抗PCSK9抗體或其Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞(例如單倍體或二倍體酵母，諸如單倍體或二倍體畢赤酵母)及其他酵母菌株)中表現來產生。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。
在另一實施例中，本發明更係有關編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸，該等抗體多肽包括Ab14之重鏈及/或輕鏈以及片段；變異體；上述FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列、及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
抗體Ab15
在一個實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其具有包含下述序列之重鏈序列： (SEQ ID NO：561)。
在一個實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之可變重鏈序列： (SEQ ID NO：562)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其具有與Ab15相同之抗原決定基特異性且含有包含下述序列之恆定重鏈序列： (SEQ ID NO：570)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之輕鏈序列： (SEQ ID NO：581)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之可變輕鏈序列： (SEQ ID NO：582)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其與Ab15結合相同之抗原決定基且含有包含下述序列之恆定輕鏈序列： (SEQ ID NO：590)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有對應於重鏈序列SEQ ID NO：561之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：564；SEQ ID NO：566；及SEQ ID NO：568中之一者、兩者或三者或其含有可變重鏈序列SEQ ID NO：562，及/或其進一步含有對應於輕鏈序列SEQ ID NO：581之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：584；SEQ ID NO：586；及SEQ ID NO：588中之一者、兩者或三者或其含有可變輕鏈序列SEQ ID NO：582；或含有與其至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列之組合的抗體或片段。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體或其片段包含以下或者由以下組成：上述示範可變重鏈及可變輕鏈序列、或重鏈及輕鏈序列中之一或多者、或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
本發明進一步涵蓋包含對應於重鏈序列SEQ ID NO：561或可變重鏈序列SEQ ID NO：562之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：563；SEQ ID NO：565；SEQ ID NO：567；及SEQ ID NO：569中之一者、兩者、三者或四者；及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：581或可變輕鏈序列SEQ ID NO：582之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：583；SEQ ID NO：585；SEQ ID NO：587；及SEQ ID NO：589中之一者、兩者、三者或四者；或此等多肽序列或與其至少80%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列之組合的抗PCSK9抗體及抗體片段。
在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗體片段或其片段包含以下或者由以下組成：上述FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列、及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
在本發明之另一實施例中，本發明之抗PCSK9抗體片段包含以下或者由以下組成：多肽序列SEQ ID NO：561或SEQ ID NO：562或與其至少90%或95%一致之多肽。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體片段包含以下或者由以下組成：多肽序列SEQ ID NO：581或SEQ ID NO：582或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之多肽。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之 抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於重鏈序列SEQ ID NO：561或可變重鏈序列SEQ ID NO：562之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：564；SEQ ID NO：566；及SEQ ID NO：568中之一者、兩者或三者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於輕鏈序列SEQ ID NO：581或可變輕鏈序列SEQ ID NO：582之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：584；SEQ ID NO：586；及SEQ ID NO：588中之一者、兩者或三者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於重鏈序列SEQ ID NO：561或可變重鏈序列SEQ ID NO：562之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：563；SEQ ID NO：565；SEQ ID NO：567；及SEQ ID NO：569中之一者、兩者、三者或四者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之主題抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於輕鏈序列SEQ ID NO：581或可變輕鏈序列SEQ ID NO：582之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：583；SEQ ID NO：585；SEQ ID NO：587；及SEQ ID NO：589中之一者、兩者、三者或四者或與其至少90%或95%一致之序列。
本發明亦涵蓋包括一或多種本文所述之抗體片段之抗體片段。在本發明之一個實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體之片段包含以下或者由以下組成：以下抗體片段中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：可變重鏈區SEQ ID NO：562；可變輕鏈區SEQ ID NO：582；可變重鏈區SEQ ID NO：562之互補決定區(SEQ ID NO：564；SEQ ID NO：566；及SEQ ID NO：568)；及可變輕鏈區SEQ ID NO：582之互補決定區(SEQ ID NO：584；SEQ ID NO：586；及SEQ ID NO：588)或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。
本發明亦涵蓋包括一或多種本文所述之抗體片段之抗體片段。在本發明之一個實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體之片段 包含以下或者由以下組成：以下抗體片段中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：可變重鏈區SEQ ID NO：562；可變輕鏈區SEQ ID NO：582；可變重鏈區SEQ ID NO：562之構架區(SEQ ID NO：563；SEQ ID NO：565；SEQ ID NO：567；及SEQ ID NO：569)；及可變輕鏈區SEQ ID NO：582之構架區(SEQ ID NO：583；SEQ ID NO：585；SEQ ID NO：587；及SEQ ID NO：589)或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之一特別較佳實施例中，抗PCSK9抗體為包含SEQ ID NO：561及SEQ ID NO：581或者由SEQ ID NO：561及SEQ ID NO：581組成之Ab15，或包含Ab15之CDR且具有至少一種本文所述生物活性的抗體或抗體片段，或為與Ab15競爭結合PCSK9之抗PCSK9抗體，較佳為含有與Ab15之序列至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列的抗體，或與Ab15結合PCSK9上之相同或重疊抗原決定基之抗體。
在本發明之另一特別較佳實施例中，抗體片段包含以下或者由以下組成：對PCSK9具有結合特異性之Fab(片段抗原結合)片段。就抗體Ab15而言，Fab片段較佳包括可變重鏈序列SEQ ID NO：562及可變輕鏈序列SEQ ID NO：582或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。本發明之此實施例進一步包括含有SEQ ID NO：562及/或SEQ ID NO：582之添加、缺失及變異體且保留對PCSK9之結合特異性的Fab。
在本文(下文)所述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由酶促消化(例如木瓜蛋白酶)Ab15來產生。在本發明之另一實施例中，諸如Ab15之抗PCSK9抗體或其Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞(例如單倍體或二倍體酵母，諸如單倍體或二倍體畢赤酵母)及其他酵母菌株)中表現來產生。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。
在另一實施例中，本發明更係有關編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸，該等抗體多肽包括Ab15之重鏈及/或輕鏈以及片段；變異體；上述FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列、及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
抗體Ab16
在一個實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其具有包含下述序列之重鏈序列： (SEQ ID NO：601)。
在一個實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之可變重鏈序列： (SEQ ID NO：602)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其具有與Ab16相同之抗原決定基特異性且含有包含下述序列之恆定重鏈序列： (SEQ ID NO：610)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性 之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之輕鏈序列： (SEQ ID NO：621)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之可變輕鏈序列： (SEQ ID NO：622)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其與Ab16結合相同之抗原決定基且含有包含下述序列之恆定輕鏈序列： (SEQ ID NO：630)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有對應於重鏈序列SEQ ID NO：601之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：604；SEQ ID NO：606；及SEQ ID NO：608中之一者、兩者或三者或其含有可變重鏈序列SEQ ID NO：602，及/或其進一步含有對應於輕鏈序列SEQ ID NO：621之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：624；SEQ ID NO：626；及SEQ ID NO：628中之一者、兩者或三者或其含有可變輕鏈序列SEQ ID NO：622；或含有與其至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列之組合的抗體或片段。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體或其片段包含以下或者由以下組成：上述示範可變重鏈及可變輕鏈序列、或重鏈及輕鏈序列中之一或多者、或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
本發明進一步涵蓋包含對應於重鏈序列SEQ ID NO：601 或可變重鏈序列SEQ ID NO：602之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：603；SEQ ID NO：605；SEQ ID NO：607；及SEQ ID NO：609中之一者、兩者、三者或四者；及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：621或可變輕鏈序列SEQ ID NO：622之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：623；SEQ ID NO：625；SEQ ID NO：627；及SEQ ID NO：629中之一者、兩者、三者或四者；或此等多肽序列或與其至少80%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列之組合的抗PCSK9抗體及抗體片段。
在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗體片段或其片段包含以下或者由以下組成：上述FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列、及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
在本發明之另一實施例中，本發明之抗PCSK9抗體片段包含以下或者由以下組成：多肽序列SEQ ID NO：601或SEQ ID NO：602或與其至少90%或95%一致之多肽。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體片段包含以下或者由以下組成：多肽序列SEQ ID NO：621或SEQ ID NO：622或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之多肽。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於重鏈序列SEQ ID NO：601或可變重鏈序列SEQ ID NO：602之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：604；SEQ ID NO：606；及SEQ ID NO：608中之一者、兩者或三者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於輕鏈序列SEQ ID NO：621或可變輕鏈序列SEQ ID NO：622之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：624；SEQ ID NO：626；及SEQ ID NO：628中之一者、兩者或三者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於重鏈序列SEQ ID NO：601或可變重鏈序列SEQ ID NO：602之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：603；SEQ ID NO：605；SEQ ID NO：607；及SEQ ID NO：609中之一者、兩者、三者或四者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之主題抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於輕鏈序列SEQ ID NO：621或可變輕鏈序列SEQ ID NO：622之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：623；SEQ ID NO：625；SEQ ID NO：627；及SEQ ID NO：629中之一者、兩者、三者或四者或與其至少90%或95%一致之序列。
本發明亦涵蓋包括一或多種本文所述之抗體片段之抗體片段。在本發明之一個實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體之片段包含以下或者由以下組成：以下抗體片段中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：可變重鏈區SEQ ID NO：602；可變輕鏈區SEQ ID NO：622；可變重鏈區SEQ ID NO：602之互補決定區(SEQ ID NO：604；SEQ ID NO：606；及SEQ ID NO：608)；及可變輕鏈區SEQ ID NO：622之互補決定區(SEQ ID NO：624；SEQ ID NO：626；及SEQ ID NO：628)或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。
本發明亦涵蓋包括一或多種本文所述之抗體片段之抗體片段。在本發明之一個實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體之片段包含以下或者由以下組成：以下抗體片段中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：可變重鏈區SEQ ID NO：602；可變輕鏈區SEQ ID NO：622；可變重鏈區SEQ ID NO：602之構架區(SEQ ID NO：603；SEQ ID NO：605；SEQ ID NO：607；及SEQ ID NO：609)；及可變輕鏈區SEQ ID NO：622之構架區(SEQ ID NO：623；SEQ ID NO：625；SEQ ID NO：627；及SEQ ID NO：629)或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之一特別較佳實施例中，抗PCSK9抗體為包含SEQ ID NO：601及SEQ ID NO：621或者由SEQ ID NO：601及SEQ ID NO：621組成之Ab16，或包含Ab16之CDR且具有至少一種本文所述生物活性的抗體或抗體片段，或為與Ab16競爭結合PCSK9之抗PCSK9抗體，較佳為含有與Ab16之序列至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列的抗體，或與Ab16結合PCSK9上之相同或重疊抗原決定基之抗體。
在本發明之另一特別較佳實施例中，抗體片段包含以下或者由以下組成：對PCSK9具有結合特異性之Fab(片段抗原結合)片段。就抗體Ab16而言，Fab片段較佳包括可變重鏈序列SEQ ID NO：602及可變輕鏈序列SEQ ID NO：622或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。本發明之此實施例進一步包括含有SEQ ID NO：602及/或SEQ ID NO：622之添加、缺失及變異體且保留對PCSK9之結合特異性的Fab。
在本文(下文)所述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由酶促消化(例如木瓜蛋白酶)Ab16來產生。在本發明之另一實施例中，諸如Ab16之抗PCSK9抗體或其Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞(例如單倍體或二倍體酵母，諸如單倍體或二倍體畢赤酵母)及其他酵母菌株)中表現來產生。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。
在另一實施例中，本發明更係有關編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸，該等抗體多肽包括Ab16之重鏈及/或輕鏈以及片段；變異體；上述FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列、及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
抗體Ab17
在一個實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其具有包含下述序列之重鏈序列： (SEQ ID NO：641)。
在一個實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之可變重鏈序列： (SEQ ID NO：642)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其具有與Ab17相同之抗原決定基特異性且含有包含下述序列之恆定重鏈序列： (SEQ ID NO：650)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之輕鏈序列： (SEQ ID NO：661)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之可變輕鏈序列： (SEQ ID NO：662)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性 之抗體及抗體片段，其與Ab17結合相同之抗原決定基且含有包含下述序列之恆定輕鏈序列： (SEQ ID NO：670)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有對應於重鏈序列SEQ ID NO：641之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：644；SEQ ID NO：646；及SEQ ID NO：648中之一者、兩者或三者或其含有可變重鏈序列SEQ ID NO：642，及/或其進一步含有對應於輕鏈序列SEQ ID NO：661之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：664；SEQ ID NO：666；及SEQ ID NO：668中之一者、兩者或三者或其含有可變輕鏈序列SEQ ID NO：662；或含有與其至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列之組合的抗體或片段。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體或其片段包含以下或者由以下組成：上述示範可變重鏈及可變輕鏈序列、或重鏈及輕鏈序列中之一或多者、或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
本發明進一步涵蓋包含對應於重鏈序列SEQ ID NO：641或可變重鏈序列SEQ ID NO：642之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：643；SEQ ID NO：645；SEQ ID NO：647；及SEQ ID NO：649中之一者、兩者、三者或四者；及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：661或可變輕鏈序列SEQ ID NO：662之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：663；SEQ ID NO：665；SEQ ID NO：667；及SEQ ID NO：669中之一者、兩者、三者或四者；或此等多肽序列或與其至少80%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列之組合的抗PCSK9抗體及抗體片段。
在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗體片段或其片段包含以下或者由以下組成：上述FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列、及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
在本發明之另一實施例中，本發明之抗PCSK9抗體片段 包含以下或者由以下組成：多肽序列SEQ ID NO：641或SEQ ID NO：642或與其至少90%或95%一致之多肽。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體片段包含以下或者由以下組成：多肽序列SEQ ID NO：661或SEQ ID NO：662或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之多肽。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於重鏈序列SEQ ID NO：641或可變重鏈序列SEQ ID NO：642之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：644；SEQ ID NO：646；及SEQ ID NO：648中之一者、兩者或三者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於輕鏈序列SEQ ID NO：661或可變輕鏈序列SEQ ID NO：662之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：664；SEQ ID NO：666；及SEQ ID NO：668中之一者、兩者或三者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於重鏈序列SEQ ID NO：641或可變重鏈序列SEQ ID NO：642之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：643；SEQ ID NO：645；SEQ ID NO：647；及SEQ ID NO：649中之一者、兩者、三者或四者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之主題抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於輕鏈序列SEQ ID NO：661或可變輕鏈序列SEQ ID NO：662之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：663；SEQ ID NO：665；SEQ ID NO：667；及SEQ ID NO：669中之一者、兩者、三者或四者或與其至少90%或95%一致之序列。
本發明亦涵蓋包括一或多種本文所述之抗體片段之抗體片段。在本發明之一個實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體之片段包含以下或者由以下組成：以下抗體片段中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：可變重鏈區SEQ ID NO：642；可變輕鏈區SEQ ID NO：662；可變重鏈區SEQ ID NO：642之互補決定區(SEQ ID NO：644；SEQ ID NO：646；及SEQ ID NO：648)；及可變輕鏈區SEQ ID NO：662之互補決定區(SEQ ID NO：664；SEQ ID NO：666；及SEQ ID NO：668)或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。
本發明亦涵蓋包括一或多種本文所述之抗體片段之抗體片段。在本發明之一個實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體之片段包含以下或者由以下組成：以下抗體片段中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：可變重鏈區SEQ ID NO：642；可變輕鏈區SEQ ID NO：662；可變重鏈區SEQ ID NO：642之構架區(SEQ ID NO：643；SEQ ID NO：645；SEQ ID NO：647；及SEQ ID NO：649)；及可變輕鏈區SEQ ID NO：662之構架區(SEQ ID NO：663；SEQ ID NO：665；SEQ ID NO：667；及SEQ ID NO：669)或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之一特別較佳實施例中，抗PCSK9抗體為包含SEQ ID NO：641及SEQ ID NO：661或者由SEQ ID NO：641及SEQ ID NO：661組成之Ab17，或包含Ab17之CDR且具有至少一種本文所述生物活性的抗體或抗體片段，或為與Ab17競爭結合PCSK9之抗PCSK9抗體，較佳為含有與Ab17之序列至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列的抗體，或與Ab17結合PCSK9上之相同或重疊抗原決定基之抗體。
在本發明之另一特別較佳實施例中，抗體片段包含以下或者由以下組成：對PCSK9具有結合特異性之Fab(片段抗原結合)片段。就抗體Ab17而言，Fab片段較佳包括可變重鏈序列SEQ ID NO：642及可變輕鏈序列SEQ ID NO：662或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。本發明之此實施例進一步包括含有SEQ ID NO：642及/或SEQ ID NO：662之添加、缺失及變異體且保留對PCSK9之結合特異性的Fab。
在本文(下文)所述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由酶促消化(例如木瓜蛋白酶)Ab17來產生。在本發明之另一實施例中，諸如Ab17之抗PCSK9抗體或其Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞(例如單倍體或二倍體酵母，諸如單倍體或二倍體畢赤酵母)及其他酵母菌株)中表現來產生。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。
在另一實施例中，本發明更係有關編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸，該等抗體多肽包括Ab17之重鏈及/或輕鏈以及片段；變異體；上述FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列、及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
抗體Ab18
在一個實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，0其具有包含下述序列之重鏈序列： (SEQ ID NO：681)。
在一個實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之可變重鏈序列： (SEQ ID NO：682)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其具有與Ab18相同之抗原決定基特異性且含有包含下述序列之恆定重鏈序列： (SEQ ID NO：690)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之輕鏈序列： (SEQ ID NO：701)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之可變輕鏈序列： (SEQ ID NO：702)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其與Ab18結合相同之抗原決定基且含有包含下述序列之恆定輕鏈序列： (SEQ ID NO：710)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有對應於重鏈序列SEQ ID NO：681之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：684；SEQ ID NO：686；及SEQ ID NO：688中之一者、兩者或三者或其含有可變重鏈序列SEQ ID NO：682，及/或其進一步含有對應於輕鏈序列SEQ ID NO：701之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：704；SEQ ID NO：706；及SEQ ID NO：708中之一者、兩者或三者或其含有可變輕鏈序列SEQ ID NO：702；或含有與其 至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列之組合的抗體或片段。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體或其片段包含以下或者由以下組成：上述示範可變重鏈及可變輕鏈序列、或重鏈及輕鏈序列中之一或多者、或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
本發明進一步涵蓋包含對應於重鏈序列SEQ ID NO：681或可變重鏈序列SEQ ID NO：682之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：683；SEQ ID NO：685；SEQ ID NO：687；及SEQ ID NO：689中之一者、兩者、三者或四者；及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：701或可變輕鏈序列SEQ ID NO：702之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：703；SEQ ID NO：705；SEQ ID NO：707；及SEQ ID NO：709中之一者、兩者、三者或四者；或此等多肽序列或與其至少80%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列之組合的抗PCSK9抗體及抗體片段。
在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗體片段或其片段包含以下或者由以下組成：上述FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列、及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
在本發明之另一實施例中，本發明之抗PCSK9抗體片段包含以下或者由以下組成：多肽序列SEQ ID NO：681或SEQ ID NO：682或與其至少90%或95%一致之多肽。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體片段包含以下或者由以下組成：多肽序列SEQ ID NO：701或SEQ ID NO：702或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之多肽。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於重鏈序列SEQ ID NO：681或可變重鏈序列SEQ ID NO：682之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：684；SEQ ID NO：686；及SEQ ID NO：688中之一者、兩者或三者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於輕鏈序列SEQ ID NO：701或可變輕鏈序列SEQ ID NO：702之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序 列SEQ ID NO：704；SEQ ID NO：706；及SEQ ID NO：708中之一者、兩者或三者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於重鏈序列SEQ ID NO：681或可變重鏈序列SEQ ID NO：682之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：683；SEQ ID NO：685；SEQ ID NO：687；及SEQ ID NO：689中之一者、兩者、三者或四者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之主題抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於輕鏈序列SEQ ID NO：701或可變輕鏈序列SEQ ID NO：702之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：703；SEQ ID NO：705；SEQ ID NO：707；及SEQ ID NO：709中之一者、兩者、三者或四者或與其至少90%或95%一致之序列。
本發明亦涵蓋包括一或多種本文所述之抗體片段之抗體片段。在本發明之一個實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體之片段包含以下或者由以下組成：以下抗體片段中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：可變重鏈區SEQ ID NO：682；可變輕鏈區SEQ ID NO：702；可變重鏈區SEQ ID NO：682之互補決定區(SEQ ID NO：684；SEQ ID NO：686；及SEQ ID NO：688)；及可變輕鏈區SEQ ID NO：702之互補決定區(SEQ ID NO：704；SEQ ID NO：706；及SEQ ID NO：708)或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。
本發明亦涵蓋包括一或多種本文所述之抗體片段之抗體片段。在本發明之一個實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體之片段包含以下或者由以下組成：以下抗體片段中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：可變重鏈區SEQ ID NO：682；可變輕鏈區SEQ ID NO：702；可變重鏈區SEQ ID NO：682之構架區(SEQ ID NO：683；SEQ ID NO：685；SEQ ID NO：687；及SEQ ID NO：689)；及可變輕鏈區SEQ ID NO：702之構架區(SEQ ID NO：703；SEQ ID NO：705；SEQ ID NO：707；及SEQ ID NO：709)或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之一特別較佳實施例中，抗PCSK9抗體為包含 SEQ ID NO：681及SEQ ID NO：701或者由SEQ ID NO：681及SEQ ID NO：701組成之Ab18，或包含Ab18之CDR且具有至少一種本文所述生物活性的抗體或抗體片段，或為與Ab18競爭結合PCSK9之抗PCSK9抗體，較佳為含有與Ab18之序列至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列的抗體，或與Ab18結合PCSK9上之相同或重疊抗原決定基之抗體。
在本發明之另一特別較佳實施例中，抗體片段包含以下或者由以下組成：對PCSK9具有結合特異性之Fab(片段抗原結合)片段。就抗體Ab18而言，Fab片段較佳包括可變重鏈序列SEQ ID NO：682及可變輕鏈序列SEQ ID NO：702或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。本發明之此實施例進一步包括含有SEQ ID NO：682及/或SEQ ID NO：702之添加、缺失及變異體且保留對PCSK9之結合特異性的Fab。
在本文(下文)所述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由酶促消化(例如木瓜蛋白酶)Ab18來產生。在本發明之另一實施例中，諸如Ab18之抗PCSK9抗體或其Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞(例如單倍體或二倍體酵母，諸如單倍體或二倍體畢赤酵母)及其他酵母菌株)中表現來產生。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。
在另一實施例中，本發明更係有關編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸，該等抗體多肽包括Ab18之重鏈及/或輕鏈以及片段；變異體；上述FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列、及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
抗體Ab19
在一個實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其具有包含下述序列之重鏈序列： (SEQ ID NO：721)。
在一個實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之可變重鏈序列： (SEQ ID NO：722)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其具有與Ab19相同之抗原決定基特異性且含有包含下述序列之恆定重鏈序列： (SEQ ID NO：730)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之輕鏈序列： (SEQ ID NO：741)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性 之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之可變輕鏈序列： (SEQ ID NO：742)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其與Ab19結合相同之抗原決定基且含有包含下述序列之恆定輕鏈序列： (SEQ ID NO：750)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有對應於重鏈序列SEQ ID NO：721之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：724；SEQ ID NO：726；及SEQ ID NO：728中之一者、兩者或三者或其含有可變重鏈序列SEQ ID NO：722，及/或其進一步含有對應於輕鏈序列SEQ ID NO：741之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：744；SEQ ID NO：746；及SEQ ID NO：748中之一者、兩者或三者或其含有可變輕鏈序列SEQ ID NO：742；或含有與其至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列之組合的抗體或片段。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體或其片段包含以下或者由以下組成：上述示範可變重鏈及可變輕鏈序列、或重鏈及輕鏈序列中之一或多者、或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
本發明進一步涵蓋包含對應於重鏈序列SEQ ID NO：721或可變重鏈序列SEQ ID NO：722之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：723；SEQ ID NO：725；SEQ ID NO：727；及SEQ ID NO：729中之一者、兩者、三者或四者；及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：741或可變輕鏈序列SEQ ID NO：742之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：743；SEQ ID NO：745；SEQ ID NO：747；及SEQ ID NO：749中之一者、兩者、三者或四者；或此等多肽序列或與其至少80%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列之組合的抗PCSK9抗體及抗體片段。
在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗體片段或其片段包含以下或者由以下組成：上述FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列、及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
在本發明之另一實施例中，本發明之抗PCSK9抗體片段包含以下或者由以下組成：多肽序列SEQ ID NO：721或SEQ ID NO：722或與其至少90%或95%一致之多肽。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體片段包含以下或者由以下組成：多肽序列SEQ ID NO：741或SEQ ID NO：742或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之多肽。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於重鏈序列SEQ ID NO：721或可變重鏈序列SEQ ID NO：722之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：724；SEQ ID NO：726；及SEQ ID NO：728中之一者、兩者或三者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於輕鏈序列SEQ ID NO：741或可變輕鏈序列SEQ ID NO：742之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：744；SEQ ID NO：746；及SEQ ID NO：748中之一者、兩者或三者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於重鏈序列SEQ ID NO：721或可變重鏈序列SEQ ID NO：722之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：723；SEQ ID NO：725；SEQ ID NO：727；及SEQ ID NO：729中之一者、兩者、三者或四者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之主題抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於輕鏈序列SEQ ID NO：741或可變輕鏈序列SEQ ID NO：742之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：743；SEQ ID NO：745；SEQ ID NO：747；及SEQ ID NO：749中之一者、兩者、三者或四者或與其至少90%或95%一致之序列。
本發明亦涵蓋包括一或多種本文所述之抗體片段之抗體片段。在本發明之一個實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體之片段包含以下或者由以下組成：以下抗體片段中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：可變重鏈區SEQ ID NO：722；可變輕鏈區SEQ ID NO：742；可變重鏈區SEQ ID NO：722之互補決定區(SEQ ID NO：724；SEQ ID NO：726；及SEQ ID NO：728)；及可變輕鏈區SEQ ID NO：742之互補決定區(SEQ ID NO：744；SEQ ID NO：746；及SEQ ID NO：748)或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。
本發明亦涵蓋包括一或多種本文所述之抗體片段之抗體片段。在本發明之一個實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體之片段包含以下或者由以下組成：以下抗體片段中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：可變重鏈區SEQ ID NO：722；可變輕鏈區SEQ ID NO：742；可變重鏈區SEQ ID NO：722之構架區(SEQ ID NO：723；SEQ ID NO：725；SEQ ID NO：727；及SEQ ID NO：729)；及可變輕鏈區SEQ ID NO：742之構架區(SEQ ID NO：743；SEQ ID NO：745；SEQ ID NO：747；及SEQ ID NO：749)或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之一特別較佳實施例中，抗PCSK9抗體為包含SEQ ID NO：721及SEQ ID NO：741或者由SEQ ID NO：721及SEQ ID NO：741組成之Ab19，或包含Ab19之CDR且具有至少一種本文所述生物活性的抗體或抗體片段，或為與Ab19競爭結合PCSK9之抗PCSK9抗體，較佳為含有與Ab19之序列至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列的抗體，或與Ab19結合PCSK9上之相同或重疊抗原決定基之抗體。
在本發明之另一特別較佳實施例中，抗體片段包含以下或者由以下組成：對PCSK9具有結合特異性之Fab(片段抗原結合)片段。就抗體Ab19而言，Fab片段較佳包括可變重鏈序列SEQ ID NO：722及可變輕鏈序列SEQ ID NO：742或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。本發明之此實施例進一步包括含有SEQ ID NO：722及/或SEQ ID NO：742之添加、缺失及變異體且保留對PCSK9之結合特異性的Fab。
在本文(下文)所述之本發明之一個實施例中，Fab片段可 藉由酶促消化(例如木瓜蛋白酶)Ab19來產生。在本發明之另一實施例中，諸如Ab19之抗PCSK9抗體或其Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞(例如單倍體或二倍體酵母，諸如單倍體或二倍體畢赤酵母)及其他酵母菌株)中表現來產生。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。
在另一實施例中，本發明更係有關編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸，該等抗體多肽包括Ab19之重鏈及/或輕鏈以及片段；變異體；上述FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列、及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
抗體Ab20
在一個實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其具有包含下述序列之重鏈序列： (SEQ ID NO：761)。
在一個實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之可變重鏈序列： (SEQ ID NO：762)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性 之抗體及抗體片段，其具有與Ab20相同之抗原決定基特異性且含有包含下述序列之恆定重鏈序列： (SEQ ID NO：770)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之輕鏈序列： (SEQ ID NO：781)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之可變輕鏈序列： (SEQ ID NO：782)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其與Ab20結合相同之抗原決定基且含有包含下述序列之恆定輕鏈序列： (SEQ ID NO：790)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有對應於重鏈序列SEQ ID NO：761之互補決定區 (CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：764；SEQ ID NO：766；及SEQ ID NO：768中之一者、兩者或三者或其含有可變重鏈序列SEQ ID NO：762，及/或其進一步含有對應於輕鏈序列SEQ ID NO：781之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：784；SEQ ID NO：786；及SEQ ID NO：788中之一者、兩者或三者或其含有可變輕鏈序列SEQ ID NO：782；或含有與其至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列之組合的抗體或片段。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體或其片段包含以下或者由以下組成：上述示範可變重鏈及可變輕鏈序列、或重鏈及輕鏈序列中之一或多者、或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
本發明進一步涵蓋包含對應於重鏈序列SEQ ID NO：761或可變重鏈序列SEQ ID NO：762之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：763；SEQ ID NO：765；SEQ ID NO：767；及SEQ ID NO：769中之一者、兩者、三者或四者；及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：781或可變輕鏈序列SEQ ID NO：782之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：783；SEQ ID NO：785；SEQ ID NO：787；及SEQ ID NO：789中之一者、兩者、三者或四者；或此等多肽序列或與其至少80%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列之組合的抗PCSK9抗體及抗體片段。
在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗體片段或其片段包含以下或者由以下組成：上述FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列、及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
在本發明之另一實施例中，本發明之抗PCSK9抗體片段包含以下或者由以下組成：多肽序列SEQ ID NO：761或SEQ ID NO：762或與其至少90%或95%一致之多肽。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體片段包含以下或者由以下組成：多肽序列SEQ ID NO：781或SEQ ID NO：782或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之多肽。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於重鏈序列SEQ ID NO：761或可變重鏈序列SEQ ID NO：762之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序 列SEQ ID NO：764；SEQ ID NO：766；及SEQ ID NO：768中之一者、兩者或三者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於輕鏈序列SEQ ID NO：781或可變輕鏈序列SEQ ID NO：782之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：784；SEQ ID NO：786；及SEQ ID NO：788中之一者、兩者或三者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於重鏈序列SEQ ID NO：761或可變重鏈序列SEQ ID NO：762之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：763；SEQ ID NO：765；SEQ ID NO：767；及SEQ ID NO：769中之一者、兩者、三者或四者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之主題抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於輕鏈序列SEQ ID NO：781或可變輕鏈序列SEQ ID NO：782之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：783；SEQ ID NO：785；SEQ ID NO：787；及SEQ ID NO：789中之一者、兩者、三者或四者或與其至少90%或95%一致之序列。
本發明亦涵蓋包括一或多種本文所述之抗體片段之抗體片段。在本發明之一個實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體之片段包含以下或者由以下組成：以下抗體片段中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：可變重鏈區SEQ ID NO：762；可變輕鏈區SEQ ID NO：782；可變重鏈區SEQ ID NO：762之互補決定區(SEQ ID NO：764；SEQ ID NO：766；及SEQ ID NO：768)；及可變輕鏈區SEQ ID NO：782之互補決定區(SEQ ID NO：784；SEQ ID NO：786；及SEQ ID NO：788)或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。
本發明亦涵蓋包括一或多種本文所述之抗體片段之抗體片段。在本發明之一個實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體之片段包含以下或者由以下組成：以下抗體片段中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：可變重鏈區SEQ ID NO：762；可變輕鏈區SEQ ID NO： 782；可變重鏈區SEQ ID NO：762之構架區(SEQ ID NO：763；SEQ ID NO：765；SEQ ID NO：767；及SEQ ID NO：769)；及可變輕鏈區SEQ ID NO：782之構架區(SEQ ID NO：783；SEQ ID NO：785；SEQ ID NO：787；及SEQ ID NO：789)或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之一特別較佳實施例中，抗PCSK9抗體為包含SEQ ID NO：761及SEQ ID NO：781或者由SEQ ID NO：761及SEQ ID NO：781組成之Ab20，或包含Ab20之CDR且具有至少一種本文所述生物活性的抗體或抗體片段，或為與Ab20競爭結合PCSK9之抗PCSK9抗體，較佳為含有與Ab20之序列至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列的抗體，或與Ab20結合PCSK9上之相同或重疊抗原決定基之抗體。
在本發明之另一特別較佳實施例中，抗體片段包含以下或者由以下組成：對PCSK9具有結合特異性之Fab(片段抗原結合)片段。就抗體Ab20而言，Fab片段較佳包括可變重鏈序列SEQ ID NO：762及可變輕鏈序列SEQ ID NO：782或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。本發明之此實施例進一步包括含有SEQ ID NO：762及/或SEQ ID NO：782之添加、缺失及變異體且保留對PCSK9之結合特異性的Fab。
在本文(下文)所述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由酶促消化(例如木瓜蛋白酶)Ab20來產生。在本發明之另一實施例中，諸如Ab20之抗PCSK9抗體或其Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞(例如單倍體或二倍體酵母，諸如單倍體或二倍體畢赤酵母)及其他酵母菌株)中表現來產生。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。
在另一實施例中，本發明更係有關編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸，該等抗體多肽包括Ab20之重鏈及/或輕鏈以及片段；變異體；上述FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列、及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
抗體Ab21
在一個實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性 之抗體及抗體片段，其具有包含下述序列之重鏈序列： (SEQ ID NO：801)。
在一個實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之可變重鏈序列： (SEQ ID NO：802)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其具有與Ab21相同之抗原決定基特異性且含有包含下述序列之恆定重鏈序列： (SEQ ID NO：810)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之輕鏈序列： (SEQ ID NO：821)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之可變輕鏈序列： (SEQ ID NO：822)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其與Ab21結合相同之抗原決定基且含有包含下述序列之恆定輕鏈序列： (SEQ ID NO：830)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有對應於重鏈序列SEQ ID NO：801之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：804；SEQ ID NO：806；及SEQ ID NO：808中之一者、兩者或三者或其含有可變重鏈序列SEQ ID NO：802，及/或其進一步含有對應於輕鏈序列SEQ ID NO：821之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：824；SEQ ID NO：826；及SEQ ID NO：828中之一者、兩者或三者或其含有可變輕鏈序列SEQ ID NO：822；或含有與其至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列之組合的抗體或片段。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體或其片段包含以下或者由以下組成：上述示範可變重鏈及可變輕鏈序列、或重鏈及輕鏈序列中之一或多者、或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
本發明進一步涵蓋包含對應於重鏈序列SEQ ID NO：801或可變重鏈序列SEQ ID NO：802之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：803；SEQ ID NO：805；SEQ ID NO：807；及SEQ ID NO：809中之一 者、兩者、三者或四者；及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：821或可變輕鏈序列SEQ ID NO：822之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：823；SEQ ID NO：825；SEQ ID NO：827；及SEQ ID NO：829中之一者、兩者、三者或四者；或此等多肽序列或與其至少80%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列之組合的抗PCSK9抗體及抗體片段。
在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗體片段或其片段包含以下或者由以下組成：上述FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列、及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
在本發明之另一實施例中，本發明之抗PCSK9抗體片段包含以下或者由以下組成：多肽序列SEQ ID NO：801或SEQ ID NO：802或與其至少90%或95%一致之多肽。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體片段包含以下或者由以下組成：多肽序列SEQ ID NO：821或SEQ ID NO：822或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之多肽。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於重鏈序列SEQ ID NO：801或可變重鏈序列SEQ ID NO：802之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：804；SEQ ID NO：806；及SEQ ID NO：808中之一者、兩者或三者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於輕鏈序列SEQ ID NO：821或可變輕鏈序列SEQ ID NO：822之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：824；SEQ ID NO：826；及SEQ ID NO：828中之一者、兩者或三者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於重鏈序列SEQ ID NO：801或可變重鏈序列SEQ ID NO：802之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：803；SEQ ID NO：805；SEQ ID NO：807；及SEQ ID NO：809中之一者、兩者、三者或四者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之主題抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於輕鏈序列SEQ ID NO：821或可變輕鏈序列SEQ ID NO：822之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：823；SEQ ID NO：825；SEQ ID NO：827；及SEQ ID NO：829中之一者、兩者、三者或四者或與其至少90%或95%一致之序列。
本發明亦涵蓋包括一或多種本文所述之抗體片段之抗體片段。在本發明之一個實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體之片段包含以下或者由以下組成：以下抗體片段中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：可變重鏈區SEQ ID NO：802；可變輕鏈區SEQ ID NO：822；可變重鏈區SEQ ID NO：802之互補決定區(SEQ ID NO：804；SEQ ID NO：806；及SEQ ID NO：808)；及可變輕鏈區SEQ ID NO：822之互補決定區(SEQ ID NO：824；SEQ ID NO：826；及SEQ ID NO：828)或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。
本發明亦涵蓋包括一或多種本文所述之抗體片段之抗體片段。在本發明之一個實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體之片段包含以下或者由以下組成：以下抗體片段中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：可變重鏈區SEQ ID NO：802；可變輕鏈區SEQ ID NO：822；可變重鏈區SEQ ID NO：802之構架區(SEQ ID NO：803；SEQ ID NO：805；SEQ ID NO：807；及SEQ ID NO：809)；及可變輕鏈區SEQ ID NO：822之構架區(SEQ ID NO：823；SEQ ID NO：825；SEQ ID NO：827；及SEQ ID NO：829)或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之一特別較佳實施例中，抗PCSK9抗體為包含SEQ ID NO：801及SEQ ID NO：821或者由SEQ ID NO：801及SEQ ID NO：821組成之Ab21，或包含Ab21之CDR且具有至少一種本文所述生物活性的抗體或抗體片段，或為與Ab21競爭結合PCSK9之抗PCSK9抗體，較佳為含有與Ab21之序列至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列的抗體，或與Ab21結合PCSK9上之相同或重疊抗原決定基之抗體。
在本發明之另一特別較佳實施例中，抗體片段包含以下或者由以下組成：對PCSK9具有結合特異性之Fab(片段抗原結合)片段。就 抗體Ab21而言，Fab片段較佳包括可變重鏈序列SEQ ID NO：802及可變輕鏈序列SEQ ID NO：822或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。本發明之此實施例進一步包括含有SEQ ID NO：802及/或SEQ ID NO：822之添加、缺失及變異體且保留對PCSK9之結合特異性的Fab。
在本文(下文)所述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由酶促消化(例如木瓜蛋白酶)Ab21來產生。在本發明之另一實施例中，諸如Ab21之抗PCSK9抗體或其Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞(例如單倍體或二倍體酵母，諸如單倍體或二倍體畢赤酵母)及其他酵母菌株)中表現來產生。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。
在另一實施例中，本發明更係有關編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸，該等抗體多肽包括Ab21之重鏈及/或輕鏈以及片段；變異體；上述FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列、及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
抗體Ab22
在一個實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其具有包含下述序列之重鏈序列： (SEQ ID NO：841)。
在一個實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性 之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之可變重鏈序列： (SEQ ID NO：842)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其具有與Ab22相同之抗原決定基特異性且含有包含下述序列之恆定重鏈序列： (SEQ ID NO：850)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之輕鏈序列： (SEQ ID NO：861)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之可變輕鏈序列： (SEQ ID NO：862)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其與Ab22結合相同之抗原決定基且含有包含下述序列之恆定輕鏈序列： (SEQ ID NO：870)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有對應於重鏈序列SEQ ID NO：841之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：844；SEQ ID NO：846；及SEQ ID NO：848中之一者、兩者或三者或其含有可變重鏈序列SEQ ID NO：842，及/或其進一步含有對應於輕鏈序列SEQ ID NO：861之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：864；SEQ ID NO：866；及SEQ ID NO：868中之一者、兩者或三者或其含有可變輕鏈序列SEQ ID NO：862；或含有與其至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列之組合的抗體或片段。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體或其片段包含以下或者由以下組成：上述示範可變重鏈及可變輕鏈序列、或重鏈及輕鏈序列中之一或多者、或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
本發明進一步涵蓋包含對應於重鏈序列SEQ ID NO：841或可變重鏈序列SEQ ID NO：842之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：843；SEQ ID NO：845；SEQ ID NO：847；及SEQ ID NO：849中之一者、兩者、三者或四者；及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：861或可變輕鏈序列SEQ ID NO：862之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：863；SEQ ID NO：865；SEQ ID NO：867；及SEQ ID NO：869中之一者、兩者、三者或四者；或此等多肽序列或與其至少80%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列之組合的抗PCSK9抗體及抗體片段。
在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗體片段或其片段包含以下或者由以下組成：上述FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列、及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
在本發明之另一實施例中，本發明之抗PCSK9抗體片段包含以下或者由以下組成：多肽序列SEQ ID NO：841或SEQ ID NO：842或與其至少90%或95%一致之多肽。在本發明之另一實施例中，本發明之抗 體片段包含以下或者由以下組成：多肽序列SEQ ID NO：861或SEQ ID NO：862或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之多肽。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於重鏈序列SEQ ID NO：841或可變重鏈序列SEQ ID NO：842之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：844；SEQ ID NO：846；及SEQ ID NO：848中之一者、兩者或三者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於輕鏈序列SEQ ID NO：861或可變輕鏈序列SEQ ID NO：862之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：864；SEQ ID NO：866；及SEQ ID NO：868中之一者、兩者或三者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於重鏈序列SEQ ID NO：841或可變重鏈序列SEQ ID NO：842之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：843；SEQ ID NO：845；SEQ ID NO：847；及SEQ ID NO：849中之一者、兩者、三者或四者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之主題抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於輕鏈序列SEQ ID NO：861或可變輕鏈序列SEQ ID NO：862之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：863；SEQ ID NO：865；SEQ ID NO：867；及SEQ ID NO：869中之一者、兩者、三者或四者或與其至少90%或95%一致之序列。
本發明亦涵蓋包括一或多種本文所述之抗體片段之抗體片段。在本發明之一個實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體之片段包含以下或者由以下組成：以下抗體片段中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：可變重鏈區SEQ ID NO：842；可變輕鏈區SEQ ID NO：862；可變重鏈區SEQ ID NO：842之互補決定區(SEQ ID NO：844；SEQ ID NO：846；及SEQ ID NO：848)；及可變輕鏈區SEQ ID NO：862之互補決定區(SEQ ID NO：864；SEQ ID NO：866；及SEQ ID NO：868)或與其至少 90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。
本發明亦涵蓋包括一或多種本文所述之抗體片段之抗體片段。在本發明之一個實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體之片段包含以下或者由以下組成：以下抗體片段中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：可變重鏈區SEQ ID NO：842；可變輕鏈區SEQ ID NO：862；可變重鏈區SEQ ID NO：842之構架區(SEQ ID NO：843；SEQ ID NO：845；SEQ ID NO：847；及SEQ ID NO：849)；及可變輕鏈區SEQ ID NO：862之構架區(SEQ ID NO：863；SEQ ID NO：865；SEQ ID NO：867；及SEQ ID NO：869)或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之一特別較佳實施例中，抗PCSK9抗體為包含SEQ ID NO：841及SEQ ID NO：861或者由SEQ ID NO：841及SEQ ID NO：861組成之Ab22，或包含Ab22之CDR且具有至少一種本文所述生物活性的抗體或抗體片段，或為與Ab22競爭結合PCSK9之抗PCSK9抗體，較佳為含有與Ab22之序列至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列的抗體，或與Ab22結合PCSK9上之相同或重疊抗原決定基之抗體。
在本發明之另一特別較佳實施例中，抗體片段包含以下或者由以下組成：對PCSK9具有結合特異性之Fab(片段抗原結合)片段。就抗體Ab22而言，Fab片段較佳包括可變重鏈序列SEQ ID NO：842及可變輕鏈序列SEQ ID NO：862或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。本發明之此實施例進一步包括含有SEQ ID NO：842及/或SEQ ID NO：862之添加、缺失及變異體且保留對PCSK9之結合特異性的Fab。
在本文(下文)所述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由酶促消化(例如木瓜蛋白酶)Ab22來產生。在本發明之另一實施例中，諸如Ab22之抗PCSK9抗體或其Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞(例如單倍體或二倍體酵母，諸如單倍體或二倍體畢赤酵母)及其他酵母菌株)中表現來產生。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。
在另一實施例中，本發明更係有關編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸，該等抗體多肽包括Ab22之重鏈及/或輕 鏈以及片段；變異體；上述FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列、及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
抗體Ab23
在一個實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其具有包含下述序列之重鏈序列： (SEQ ID NO：881)。
在一個實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之可變重鏈序列： (SEQ ID NO：882)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其具有與Ab23相同之抗原決定基特異性且含有包含下述序列之恆定重鏈序列： (SEQ ID NO：890)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之輕鏈序列： (SEQ ID NO：901)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之可變輕鏈序列： (SEQ ID NO：902)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其與Ab23結合相同之抗原決定基且含有包含下述序列之恆定輕鏈序列： (SEQ ID NO：910)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有對應於重鏈序列SEQ ID NO：881之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：884；SEQ ID NO：886；及SEQ ID NO：888中之一者、兩者或三者或其含有可變重鏈序列SEQ ID NO：882，及/或其進一步含有對應於輕鏈序列SEQ ID NO：901之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：904；SEQ ID NO：906；及SEQ ID NO：908中之一者、兩者或三者或其含有可變輕鏈序列SEQ ID NO：902；或含有與其至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列之組合的抗體或片段。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體或其片段包含以 下或者由以下組成：上述示範可變重鏈及可變輕鏈序列、或重鏈及輕鏈序列中之一或多者、或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
本發明進一步涵蓋包含對應於重鏈序列SEQ ID NO：881或可變重鏈序列SEQ ID NO：882之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：883；SEQ ID NO：885；SEQ ID NO：887；及SEQ ID NO：889中之一者、兩者、三者或四者；及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：901或可變輕鏈序列SEQ ID NO：902之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：903；SEQ ID NO：905；SEQ ID NO：907；及SEQ ID NO：909中之一者、兩者、三者或四者；或此等多肽序列或與其至少80%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列之組合的抗PCSK9抗體及抗體片段。
在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗體片段或其片段包含以下或者由以下組成：上述FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列、及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
在本發明之另一實施例中，本發明之抗PCSK9抗體片段包含以下或者由以下組成：多肽序列SEQ ID NO：881或SEQ ID NO：882或與其至少90%或95%一致之多肽。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體片段包含以下或者由以下組成：多肽序列SEQ ID NO：901或SEQ ID NO：902或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之多肽。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於重鏈序列SEQ ID NO：881或可變重鏈序列SEQ ID NO：882之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：884；SEQ ID NO：886；及SEQ ID NO：888中之一者、兩者或三者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於輕鏈序列SEQ ID NO：901或可變輕鏈序列SEQ ID NO：902之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：904；SEQ ID NO：906；及SEQ ID NO：908中之一者、兩者或三者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於重鏈序列SEQ ID NO：881或可變重鏈序列SEQ ID NO：882之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：883；SEQ ID NO：885；SEQ ID NO：887；及SEQ ID NO：889中之一者、兩者、三者或四者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之主題抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於輕鏈序列SEQ ID NO：901或可變輕鏈序列SEQ ID NO：902之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：903；SEQ ID NO：905；SEQ ID NO：907；及SEQ ID NO：909中之一者、兩者、三者或四者或與其至少90%或95%一致之序列。
本發明亦涵蓋包括一或多種本文所述之抗體片段之抗體片段。在本發明之一個實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體之片段包含以下或者由以下組成：以下抗體片段中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：可變重鏈區SEQ ID NO：882；可變輕鏈區SEQ ID NO：902；可變重鏈區SEQ ID NO：882之互補決定區(SEQ ID NO：884；SEQ ID NO：886；及SEQ ID NO：888)；及可變輕鏈區SEQ ID NO：902之互補決定區(SEQ ID NO：904；SEQ ID NO：906；及SEQ ID NO：908)或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。
本發明亦涵蓋包括一或多種本文所述之抗體片段之抗體片段。在本發明之一個實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體之片段包含以下或者由以下組成：以下抗體片段中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：可變重鏈區SEQ ID NO：882；可變輕鏈區SEQ ID NO：902；可變重鏈區SEQ ID NO：882之構架區(SEQ ID NO：883；SEQ ID NO：885；SEQ ID NO：887；及SEQ ID NO：889)；及可變輕鏈區SEQ ID NO：902之構架區(SEQ ID NO：903；SEQ ID NO：905；SEQ ID NO：907；及SEQ ID NO：909)或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之一特別較佳實施例中，抗PCSK9抗體為包含SEQ ID NO：881及SEQ ID NO：901或者由SEQ ID NO：881及SEQ ID NO：901組成之Ab23，或包含Ab23之CDR且具有至少一種本文所述生物活性的 抗體或抗體片段，或為與Ab23競爭結合PCSK9之抗PCSK9抗體，較佳為含有與Ab23之序列至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列的抗體，或與Ab23結合PCSK9上之相同或重疊抗原決定基之抗體。
在本發明之另一特別較佳實施例中，抗體片段包含以下或者由以下組成：對PCSK9具有結合特異性之Fab(片段抗原結合)片段。就抗體Ab23而言，Fab片段較佳包括可變重鏈序列SEQ ID NO：882及可變輕鏈序列SEQ ID NO：902或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。本發明之此實施例進一步包括含有SEQ ID NO：882及/或SEQ ID NO：902之添加、缺失及變異體且保留對PCSK9之結合特異性的Fab。
在本文(下文)所述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由酶促消化(例如木瓜蛋白酶)Ab23來產生。在本發明之另一實施例中，諸如Ab23之抗PCSK9抗體或其Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞(例如單倍體或二倍體酵母，諸如單倍體或二倍體畢赤酵母)及其他酵母菌株)中表現來產生。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。
在另一實施例中，本發明更係有關編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸，該等抗體多肽包括Ab23之重鏈及/或輕鏈以及片段；變異體；上述FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列、及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
抗體Ab24
在一個實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其具有包含下述序列之重鏈序列： (SEQ ID NO：921)。
在一個實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之可變重鏈序列： (SEQ ID NO：922)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其具有與Ab24相同之抗原決定基特異性且含有包含下述序列之恆定重鏈序列： (SEQ ID NO：930)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之輕鏈序列： (SEQ ID NO：941)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有包含下述序列之可變輕鏈序列： (SEQ ID NO：942)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其與Ab24結合相同之抗原決定基且含有包含下述序列之恆定輕鏈序列： (SEQ ID NO：950)。
在另一實施例中，本發明包括對PCSK9具有結合特異性之抗體及抗體片段，其含有對應於重鏈序列SEQ ID NO：921之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：924；SEQ ID NO：926；及SEQ ID NO：928中之一者、兩者或三者或其含有可變重鏈序列SEQ ID NO：922，及/或其進一步含有對應於輕鏈序列SEQ ID NO：941之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：944；SEQ ID NO：946；及SEQ ID NO：948中之一者、兩者或三者或其含有可變輕鏈序列SEQ ID NO：942；或含有與其至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列之組合的抗體或片段。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體或其片段包含以下或者由以下組成：上述示範可變重鏈及可變輕鏈序列、或重鏈及輕鏈序列中之一或多者、或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
本發明進一步涵蓋包含對應於重鏈序列SEQ ID NO：921或可變重鏈序列SEQ ID NO：922之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：923；SEQ ID NO：925；SEQ ID NO：927；及SEQ ID NO：929中之一者、兩者、三者或四者；及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：941或可變輕鏈序列SEQ ID NO：942之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：943；SEQ ID NO：945；SEQ ID NO：947；及SEQ ID NO：949中之一者、兩者、三者或四者；或此等多肽序列或與其至少80%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列之組合的抗PCSK9抗體及抗體片段。
在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗體片段或其片段包含以下或者由以下組成：上述FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序 列、及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
在本發明之另一實施例中，本發明之抗PCSK9抗體片段包含以下或者由以下組成：多肽序列SEQ ID NO：921或SEQ ID NO：922或與其至少90%或95%一致之多肽。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體片段包含以下或者由以下組成：多肽序列SEQ ID NO：941或SEQ ID NO：942或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之多肽。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於重鏈序列SEQ ID NO：921或可變重鏈序列SEQ ID NO：922之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：924；SEQ ID NO：926；及SEQ ID NO：928中之一者、兩者或三者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於輕鏈序列SEQ ID NO：941或可變輕鏈序列SEQ ID NO：942之互補決定區(CDR或高變區)之多肽序列SEQ ID NO：944；SEQ ID NO：946；及SEQ ID NO：948中之一者、兩者或三者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於重鏈序列SEQ ID NO：921或可變重鏈序列SEQ ID NO：922之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：923；SEQ ID NO：925；SEQ ID NO：927；及SEQ ID NO：929中之一者、兩者、三者或四者或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之主題抗體或抗體片段包含以下或者由以下組成：對應於輕鏈序列SEQ ID NO：941或可變輕鏈序列SEQ ID NO：942之構架區(FR或恆定區)之多肽序列SEQ ID NO：943；SEQ ID NO：945；SEQ ID NO：947；及SEQ ID NO：949中之一者、兩者、三者或四者或與其至少90%或95%一致之序列。
本發明亦涵蓋包括一或多種本文所述之抗體片段之抗體片段。在本發明之一個實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體之片段 包含以下或者由以下組成：以下抗體片段中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：可變重鏈區SEQ ID NO：922；可變輕鏈區SEQ ID NO：942；可變重鏈區SEQ ID NO：922之互補決定區(SEQ ID NO：924；SEQ ID NO：926；及SEQ ID NO：928)；及可變輕鏈區SEQ ID NO：942之互補決定區(SEQ ID NO：944；SEQ ID NO：946；及SEQ ID NO：948)或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。
本發明亦涵蓋包括一或多種本文所述之抗體片段之抗體片段。在本發明之一個實施例中，對PCSK9具有結合特異性之抗體之片段包含以下或者由以下組成：以下抗體片段中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：可變重鏈區SEQ ID NO：922；可變輕鏈區SEQ ID NO：942；可變重鏈區SEQ ID NO：922之構架區(SEQ ID NO：923；SEQ ID NO：925；SEQ ID NO：927；及SEQ ID NO：929)；及可變輕鏈區SEQ ID NO：942之構架區(SEQ ID NO：943；SEQ ID NO：945；SEQ ID NO：947；及SEQ ID NO：949)或與其至少90%或95%一致之序列。
在本發明之一特別較佳實施例中，抗PCSK9抗體為包含SEQ ID NO：921及SEQ ID NO：941或者由SEQ ID NO：921及SEQ ID NO：941組成之Ab24，或包含Ab24之CDR且具有至少一種本文所述生物活性的抗體或抗體片段，或為與Ab24競爭結合PCSK9之抗PCSK9抗體，較佳為含有與Ab24之序列至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列的抗體，或與Ab24結合PCSK9上之相同或重疊抗原決定基之抗體。
在本發明之另一特別較佳實施例中，抗體片段包含以下或者由以下組成：對PCSK9具有結合特異性之Fab(片段抗原結合)片段。就抗體Ab24而言，Fab片段較佳包括可變重鏈序列SEQ ID NO：922及可變輕鏈序列SEQ ID NO：942或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。本發明之此實施例進一步包括含有SEQ ID NO：922及/或SEQ ID NO：942之添加、缺失及變異體且保留對PCSK9之結合特異性的Fab。
在本文(下文)所述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由酶促消化(例如木瓜蛋白酶)Ab24來產生。在本發明之另一實施例中，諸如Ab24之抗PCSK9抗體或其Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、 NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞(例如單倍體或二倍體酵母，諸如單倍體或二倍體畢赤酵母)及其他酵母菌株)中表現來產生。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。
在另一實施例中，本發明更係有關編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸，該等抗體多肽包括Ab24之重鏈及/或輕鏈以及片段；變異體；上述FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列、及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部或與其至少90%或95%一致之序列的組合。
在另一實施例中，本發明涵蓋一種經分離抗PCSK9抗體，其包含選自以下之VH 多肽序列：SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：42、SEQ ID NO：82、SEQ ID NO：122、SEQ ID NO：162、SEQ ID NO：202、SEQ ID NO：242、SEQ ID NO：282、SEQ ID NO：322、SEQ ID NO：362、SEQ ID NO：402、SEQ ID NO：442、SEQ ID NO：482、SEQ ID NO：522、SEQ ID NO：562、SEQ ID NO：602、SEQ ID NO：642、SEQ ID NO：692、SEQ ID NO：732、SEQ ID NO：772、SEQ ID NO：812、SEQ ID NO：852、SEQ ID NO：892、SEQ ID NO：932或其變異體；且進一步包含選自以下之VL 多肽序列：SEQ ID NO：22、SEQ ID NO：62、SEQ ID NO：102、SEQ ID NO：142、SEQ ID NO：182、SEQ ID NO：222、SEQ ID NO：262、SEQ ID NO：302、SEQ ID NO：342、SEQ ID NO：382、SEQ ID NO：422、SEQ ID NO：462、SEQ ID NO：502、SEQ ID NO：542、SEQ ID NO：582、SEQ ID NO：622、SEQ ID NO：662、SEQ ID NO：702、SEQ ID NO：742、SEQ ID NO：782、SEQ ID NO：822、SEQ ID NO：862、SEQ ID NO：902、SEQ ID NO：942或其變異體，其中該VH 或VL 多肽中之一或多個構架殘基(FR殘基)及/或CDR殘基已經另一胺基酸殘基取代，從而產生特異性結合PCSK9之抗PCSK9抗體。本發明亦包括此等抗體之人類化及嵌合形式。嵌合抗體及人類化抗體可包括源於IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgG5、IgG6、IgG7、IgG8、IgG9、IgG10、IgG11、IgG12、IgG13、IgG14、IgG15、IgG16、IgG17、IgG18或IgG19恆定區之Fc。
在本發明之一個實施例中，嵌合抗體或人類化抗體或片 段或VH 或VL 多肽係來源於或源於一或多種兔抗體，例如自純系兔B細胞群體分離之兔抗體。
在一些態樣中，本發明包含一種包含編碼本發明之抗PCSK9抗體或其片段之核酸分子的載體。在一些實施例中，本發明包含一種包含編碼本發明之抗PCSK9抗體或其片段之核酸分子的宿主細胞。
在一些態樣中，本發明包含一種本發明之經分離抗體或抗體片段，其與本文揭露之本發明之抗體或抗體片段競爭結合PCSK9。
在一些態樣中，本發明包含一種編碼根據本發明之抗體或抗體片段之核酸分子。
在一些態樣中，本發明包含一種包含至少一種本發明之抗體或抗體片段的醫藥或診斷組合物。
在一些態樣中，本發明包含一種治療或預防患者之與血清膽固醇含量升高相關之病狀的方法，其包含向有需要之患者投與有效量之至少一種本發明之經分離抗體或抗體片段。
在一些態樣中，本發明包含一種在個體中抑制PCSK9與LDLR之結合之方法，其包含投與有效量之至少一種本發明之抗體或抗體片段。
在一些態樣中，本發明包含一種選擇性結合PCSK9之本發明之抗體或抗體片段，其中該本發明之抗體或抗體片段結合PCSK9之KD 小於100pM。
在一些態樣中，本發明包含一種治療或預防個體之與血清膽固醇含量升高相關之病狀的方法，該方法包含將有效量之至少一種本發明之抗體或抗體片段與另一活性藥劑，例如升高LDLR蛋白質之可用性或降低血清膽固醇之藥劑同時或依序投與有需要之個體。
在一些態樣中，本發明包含一種降低個體之血清膽固醇含量之方法，該方法包含向個體投與有效量之至少一種如本文揭露之本發明之抗體或抗體片段。
在一些態樣中，本發明係關於本文所述之抗體或與其競爭或具有相同或重疊抗原決定基特異性之抗體，較佳包含一種示範抗 PCSK9抗體或抗體片段之一個或全部CDR的抗體或抗體片段、或更佳包含一或多種與本文所述之任何VH、VL及CDR多肽具有至少80%、90%或95%一致性之可變或CDR序列的抗體之用途，且係關於編碼此等抗體及抗體片段之聚核苷酸及含有其之宿主細胞。本發明之一較佳實施例係有關能夠結合PCSK9且較佳抑制、阻斷或中和PCSK9之生物活性或阻斷或抑制PCSK9與LDLR之結合之嵌合或人類化抗體及其片段(諸如Fab或Fv或單價片段)。
在一些態樣中，本發明包含一種競爭結合PCSK9或與本發明之抗體或抗體片段結合PCSK9上之相同或重疊抗原決定基的經分離抗體或抗體片段。
在一些態樣中，本發明包含一種治療或預防患者之與血清膽固醇含量升高相關之病狀的方法，其包含向有需要之患者投與有效量之至少一種本發明之抗PCSK9抗體或抗體片段。
在一些態樣中，本發明包含一種在有需要之個體中抑制PCSK9與LDLR之結合之方法，其包含投與有效量之至少一種本發明之抗PCSK9抗體或抗體片段。
在一些態樣中，本發明包含一種本發明之抗PCSK9抗體或抗體片段，其結合PCSK9之KD小於100nM。
在一些態樣中，本發明包含一種治療或預防個體之與血清膽固醇含量升高相關之病狀的方法，該方法包含將有效量之至少一種本發明之抗PCSK9抗體或抗體片段與另一活性藥劑，例如降低膽固醇含量或升高LDLR蛋白質之可用性之藥劑同時或依序投與有需要之個體。
在一些態樣中，本發明包含一種降低個體之血清膽固醇含量之方法，該方法包含向個體投與有效量之至少至少一種本發明之抗PCSK9抗體或抗體片段。
在一些態樣中，本發明包含一種降低個體之血清膽固醇含量之方法，該方法包含將有效量之至少一種本發明之抗PCSK9抗體或抗體片段與升高LDLR蛋白質之可用性之另一藥劑同時或依序投與個體。
在一些態樣中，本發明包含一種增加個體之LDLR蛋白質含量之方法，該方法包含向個體投與有效量之至少一種本發明之抗PCSK9 抗體或抗體片段。
在一些態樣中，本發明包含一種增加個體之LDLR蛋白質含量之方法，該方法包含將有效量之至少一種根據本發明之至少一種抗PCSK9抗體或抗體片段與升高LDLR蛋白質之可用性之藥劑同時或依序投與個體。
在一些態樣中，本發明更提供藉由與其他藥劑組合投與至少一種根據本發明之至少一種抗PCSK9抗體或抗體片段來預防或治療與PCSK9相關之疾病及病症之方法，該等疾病及病症為例如與PCSK9含量增加或降低及/或PCSK9基因中影響PCSK9蛋白質表現、一級序列及/或功能之突變相關之疾病。
在其他態樣中，本發明提供使用主題抗PCSK9抗體及抗體片段來治療或預防膽固醇或脂質體內恆定之病症及與其相關之病症及併發症的方法，該等病症及併發症為例如高膽固醇血症、高脂血症、高三酸甘油酯血症、豆固醇血症、動脈粥樣硬化、動脈硬化、冠心病、代謝症候群、急性冠脈症候群、血管發炎、黃瘤及相關病狀。
在其他特定態樣中，本發明提供治療或預防膽固醇或脂質體內恆定之病症及與其相關之病症及併發症的方法，該等病症及併發症為例如高膽固醇血症、高脂血症、高三酸甘油酯血症、豆固醇血症、動脈粥樣硬化、動脈硬化、冠心病、代謝症候群、急性冠脈症候群、血管發炎、黃瘤及諸如肥胖症、高血壓、糖尿病之其他病狀，其中個體用主題抗PCSK9抗體及抗體片段與用於治療此等病症之其他藥物之組合進行治療，該等藥物諸如士他汀、ACE抑制劑、血管緊張素II受體阻斷劑(ARB)、抗心律不整劑、抗血小板藥物、阿斯匹靈、β阻斷劑、胺碘達隆、地高辛、阿斯匹靈、抗凝劑、地高辛、利尿劑、心臟衰竭藥物、血管舒張劑、血液稀釋劑、其他抗膽固醇藥物(諸如消膽胺(考來烯胺)、吉非羅齊(諾衡、吉考)、歐妙考及泛雙硫醇)、其他抗高血壓藥、抗致糖尿藥物(諸如α-葡萄糖苷酶抑制劑、雙胍、二肽基肽酶-4抑制劑、胰島素療法、氯茴苯酸、磺醯脲及噻唑啶二酮)及用於治療其中所治療個體可能具有高膽固醇之病狀之其他藥物。
ACE抑制劑可與主題抗PCSK9抗體及抗體片段組合使用，其中該等部分可藉由相同或不同投藥手段共同或分開投與，ACE抑制劑包括例如：開搏通(卡托普利)、泛利尿(依那普利)、普尼爾、捷賜瑞(賴諾普利)、洛丁新(貝那普利)、蒙諾普利(福辛普利)、阿泰斯(雷米普利)、阿庫普利(喹那普利)、阿森(培哚普利)、瑪維克(群多普利)、尤瓦斯克(莫西普利)。
ARB可與主題抗PCSK9抗體及抗體片段組合使用，其中該等部分可藉由相同或不同投藥手段共同或分開投與，ARB包括例如：科紮爾(洛沙坦)、代厄文(纈沙坦)、安博諾(伊貝沙坦)、阿塔坎德(坎地沙坦)及美壓定(替米沙坦)。
抗心律不整劑可與主題抗PCSK9抗體及抗體片段組合使用，抗心律不整劑包括例如：坦布考(氟卡胺)、普魯卡比(普魯卡因胺)、可達龍(胺碘達隆)及貝塔派斯(索他洛爾)。
可與主題抗PCSK9抗體及抗體片段組合使用之抗血小板藥物包括例如：，其中該等部分可藉由相同或不同投藥手段共同或分開投與。
可與主題抗PCSK9抗體及抗體片段組合使用之抗凝劑包括：組織纖維蛋白溶酶原活化劑(TPA)、替奈替普酶、阿替普酶、尿激酶、瑞替普酶及鏈激酶，其中該等部分可藉由相同或不同投藥手段共同或分開投與。
β-阻斷劑可與主題抗PCSK9抗體及抗體片段組合使用，其中該等部分可藉由相同或不同投藥手段共同或分開投與，β-阻斷劑包括例如：塞克洛爾(醋丁洛爾)、澤貝塔(比索洛爾)、普萊洛克(艾司洛爾)、心得爾(普萘洛爾)、天諾敏(阿替洛爾)、樂莫丁、特雷待特(拉貝洛爾)、可里格(卡維洛爾)、諾普色及托普洛爾-XL(美托洛爾)。
可與主題抗PCSK9抗體及抗體片段組合使用之鈣通道阻斷劑包括例如：諾和克(胺氯地平)、波依定(非洛地平)、卡地贊姆、卡地贊姆CD、卡地贊姆SR、代樂卡XR、地爾替XT、地爾紮克(地爾硫卓)、卡蘭、卡蘭SR、科維拉-HS、異搏定、異搏定SR、維爾寧、維爾寧PM(維拉 帕米)、艾達立特、艾達立特CC、普羅卡地、普羅卡地XL(硝苯地平)、卡丁、卡丁SR(尼卡地平)、蘇拉(尼索地平)、瓦斯科(苄普地爾)及為士他汀膽固醇藥物與胺氯地平之組合之卡度特，其中該等部分可藉由相同或不同投藥手段共同或分開投與。
可與主題抗PCSK9抗體及抗體片段組合使用之利尿劑包括：例如速尿(呋塞米)、普麥西(布美他尼)、迪馬代克(托塞米)、利尿得(氫氯噻嗪)、紮羅寧(美托拉宗)及安體舒通(螺內酯)，其中該等部分可藉由相同或不同投藥手段共同或分開投與。
可與主題抗PCSK9抗體及抗體片段組合使用之心臟衰竭藥物包括例如獨步催(多巴酚丁胺)及普利瑪科(米力農)，其中該等部分可藉由相同或不同投藥手段共同或分開投與。
可與主題抗PCSK9抗體及抗體片段組合使用之血管舒張劑包括例如代拉曲特-SR、艾叟-彼得、艾叟雷特、艾索彼得、艾索地爾、艾叟曲特、索比曲特(二硝酸異山梨醇酯)、依姆多(單硝酸異山梨醇酯)及比地爾(含二硝酸異山梨醇酯之聯胺肼)，其中該等部分可藉由相同或不同投藥手段共同或分開投與。
可與主題抗PCSK9抗體及抗體片段組合使用之血液稀釋劑包括例如華法林(庫馬定)、肝素、洛文諾斯及弗拉格敏，其中該等部分可藉由相同或不同投藥手段共同或分開投與。
在其他態樣中，本發明更提供與任何上述或其他活性劑聯合使用主題抗體及抗體片段來改良與心臟病風險增加相關之血液膽固醇指標之方法，其中該等部分可藉由相同或不同投藥手段共同或分開投與。此等指標包括(但不限於)高總膽固醇、高LDL、高總膽固醇與HDL比率及高LDL-C與HDL比率。
在一些態樣中，本發明包含一種包含本發明之抗體蛋白質或片段及另一活性劑的醫藥組合物，該活性劑為例如一種上文鑒別之活性劑，例如升高LDLR蛋白質含量之可用性之藥劑或阻斷或抑制膽固醇合成之藥劑。在一些實施例中，阻斷膽固醇合成之藥劑包含士他汀。在一些情況下，士他汀可潛在地進一步升高LDLR含量。在一些實施例中，士他 汀係選自由阿托伐他汀、西立伐他汀、氟伐他汀、洛伐他汀、美伐他汀、匹伐他汀、普伐他汀、羅素他汀、辛伐他汀及其某一組合組成之群。在一些實施例中，士他汀進一步與菸酸、吸收抑制劑(依折麥布)、脂質調節劑或其組合進行組合。在一些實施例中，升高LDLR蛋白質含量之可用性之藥劑包含細胞激素(諸如制瘤素M)或激素(如雌激素)及/或草本部分(諸如小蘗鹼)。
在一些態樣中，本發明包含一種包含本發明之抗體蛋白質或片段或其變異體及增加高密度脂蛋白(HDL)及/或降低三酸甘油酯含量之藥劑的醫藥組合物。在一些實施例中，增加高密度脂蛋白(HDL)及/或降低三酸甘油酯含量之藥劑包含貝特。在一些實施例中，貝特係選自由苯紮貝特、環丙貝特、氯貝特、吉非羅齊、非諾貝特及其某一組合組成之群。
在一些態樣中，本發明包含一種包含本發明之抗體蛋白質或片段及膽汁酸螯合劑的醫藥組合物。在一些實施例中，膽汁螯合劑係選自由消膽胺、考來維侖、考來替泊及其某一組合組成之群。
在一些態樣中，本發明包含一種包含本發明之抗體或抗體片段及降低膽固醇在腸中之吸收之藥劑的醫藥組合物。在一些實施例中，降低膽固醇在腸中之吸收之藥劑為依折麥布。
在一些態樣中，本發明包含一種包含本發明之抗體或片段及降低膽固醇含量之藥劑的醫藥組合物。在一些實施例中，降低膽固醇含量之藥劑係選自由某些抗精神病藥劑、某些HIV蛋白酶抑制劑、膳食要素(諸如高果糖、蔗糖、膽固醇或某些脂肪酸)及某些針對RXR、RAR、LXR、FXR之核受體促效劑及拮抗劑組成之群。
在一些態樣中，本發明包含一種包含本發明之抗體或片段及PPARγ促效劑、PPARα/γ促效劑、角鯊烯(squalene)合成酶抑制劑、CETP抑制劑、抗高血壓藥、抗糖尿病藥劑(諸如磺醯脲、胰島素、GLP-1類似物、DDPIV抑制劑)、ApoB調節劑、MTP抑制劑、阻塞性動脈硬化治療劑或其組合的醫藥組合物。
在一些態樣中，本發明包含一種包含本發明之抗體或片段及增加HDL含量之藥劑的醫藥組合物。在一些實施例中，增加HDL含量 之藥劑為亦稱為菸鹼酸之菸酸。在一些實施例中，菸酸為緩慢釋放調配物。
在一些態樣中，本發明包含一種包含本發明之抗體或片段及抑制肝三酸甘油酯產生及/或極低密度脂蛋白(VLDL)分泌之藥劑的醫藥組合物。在一些實施例中，抑制肝三酸甘油酯產生及/或極低密度脂蛋白(VLDL)分泌之藥劑為阿西莫司。
在一些態樣中，本發明包含一種包含本發明之抗體或片段及降低脂質在腸中之吸收之藥劑的醫藥組合物。在一些實施例中，降低脂質在腸中之吸收之藥劑係選自由奧利斯泰、利普司他汀及其某一組合組成之群。
在一些態樣中，本發明包含一種包含本發明之抗體或片段及作為抗高血壓藥及/或治療絞痛症之藥劑的醫藥組合物。在一些實施例中，作為抗高血壓藥及/或治療絞痛症之藥劑為胺氯地平。
在一些態樣中，本發明包含一種包含本發明之抗體或片段及至少一種其他藥劑的醫藥組合物，其中該組合允許減輕至少一種其他藥劑之不合需要之副作用。在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段及至少一種其他藥劑係同時投與。在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段或其片段或變異體及至少一種其他藥劑不同時投與，其中本發明之抗體或抗體片段係在投與至少一種其他藥劑之前或之後投與。
在一些態樣中，本發明包含一種包含本發明之抗體或片段及至少一種治療與膽固醇異常相關之病狀或治療其中個體常具有高膽固醇之病狀之其他藥劑的醫藥組合物。舉例而言，本發明之抗體蛋白質或片段或其變異體可與其他藥物組合或共投與，該等藥物為諸如ACE抑制劑、血管緊張素II受體阻斷劑(ARB)、抗心律不整劑、抗血小板藥物、阿斯匹靈、β阻斷劑、胺碘達隆、地高辛、阿斯匹靈、抗凝劑、地高辛、利尿劑、心臟衰竭藥物、血管舒張劑、血液稀釋劑、其他抗膽固醇藥物(諸如消膽胺(考來烯胺)、吉非羅齊(諾衡、吉考)、歐妙考及泛雙硫醇)、其他抗高血壓藥、抗致糖尿藥物(諸如α-葡萄糖苷酶抑制劑、雙胍、二肽基肽酶-4抑制劑、胰島素療法、氯茴苯酸、磺醯脲及噻唑啶二酮)或用於治療其中所治 療個體可能具有高膽固醇之病狀之其他藥物。此等藥物之實例係在上文中鑒別。在一些實施例中，本發明之抗體或片段及至少一種其他藥劑不同時投與，其中本發明之抗體或抗體片段係在投與至少一種其他藥劑之前或之後投與。
在一些態樣中，本發明包含一種治療或預防患者之與血清膽固醇含量升高相關之病狀的方法，其包含向有需要之患者投與有效量之至少一種如本文揭露之本發明之經分離抗體或抗體片段。在一些實施例中，病狀為高膽固醇血症。
在一些態樣中，本發明之抗PCSK9抗體或片段結合PCSK9之KD小於約100nM。在一些實施例中，本發明之抗PCSK9抗體或片段結合PCSK9之KD在約10與約100nM之間。在一些實施例中，本發明之抗PCSK9抗體或片段結合PCSK9之KD小於約10nM。在一些實施例中，結合PCSK9之抗體或片段之KD在約1與約10nM之間。在一些實施例中，結合PCSK9之本發明之抗PCSK9抗體或片段之KD小於約1nM。在一些實施例中，本發明之抗PCSK9抗體或片段之KD在約0.1與約1nM之間。在一些實施例中，結合PCSK9之本發明之抗PCSK9抗體或片段的KD在約0.1與約0.5nM之間。在一些實施例中，本發明之抗PCSK9抗體或片段結合PCSK9之KD在約0.01與約0.1nM之間。在一些實施例中，本發明之抗PCSK9抗體或片段結合PCSK9之KD在約0.1與約10nM之間。在一些實施例中，本發明之抗PCSK9抗體或片段結合PCSK9之KD在0.120與約7.99nM之間。
在一些態樣中，本發明包含一種治療或預防個體之與血清膽固醇含量升高相關之病狀的方法，該方法包含將有效量之至少一種本發明之抗PCSK9抗體或片段與降低膽固醇且視情況進一步升高LDLR蛋白質之可用性之藥劑同時或依序投與有需要之個體。在一些實施例中，降低膽固醇且視情況升高LDLR蛋白質之可用性之藥劑包含士他汀。在一些實施例中，士他汀係選自由阿托伐他汀、西立伐他汀、氟伐他汀、洛伐他汀、美伐他汀、匹伐他汀、普伐他汀、羅素他汀、辛伐他汀及其某一組合組成之群。在一些實施例中，士他汀與菸酸、吸收抑制劑(依折麥布)、脂 質調節劑或其組合進行組合。在一些實施例中，升高LDLR蛋白質含量之可用性之藥劑包含某些細胞激素(如制瘤素M)、雌激素及/或某些草本成分(諸如小蘗鹼)。
在一些態樣中，本發明包含一種治療或預防個體之與血清膽固醇含量升高相關之病狀的方法，該方法包含將有效量之至少一種本發明之抗PCSK9抗體或片段與增加高密度脂蛋白(HDL)及/或降低三酸甘油酯含量之藥劑同時或依序投與有需要之個體。在一些實施例中，增加高密度脂蛋白(HDL)及/或降低三酸甘油酯含量之藥劑包含貝特。在一些實施例中，貝特係選自由苯紮貝特、環丙貝特、氯貝特、吉非羅齊、非諾貝特及其某一組合組成之群。
在一些態樣中，本發明包含一種治療或預防個體之與血清膽固醇含量升高相關之病狀的方法，該方法包含將有效量之至少一種本發明之抗PCSK9抗體或片段與膽汁螯合劑同時或依序投與有需要之個體。在一些實施例中，膽汁螯合劑係選自由消膽胺、考來維侖、考來替泊及其某一組合組成之群。
在一些態樣中，本發明包含一種治療或預防個體之與血清膽固醇含量升高相關之病狀的方法，該方法包含將有效量之至少一種本發明之經分離抗PCSK9抗體或片段與降低膽固醇在腸中之吸收之藥劑同時或依序投與有需要之個體。在一些實施例中，降低膽固醇在腸中之吸收之藥劑為依折麥布。
在一些態樣中，本發明包含一種治療或預防個體之與血清膽固醇含量升高相關之病狀的方法，該方法包含將有效量之至少一種本發明之抗PCSK9抗體或片段與降低膽固醇含量之藥劑同時或依序投與有需要之個體。在一些實施例中，降低膽固醇含量之藥劑係選自由某些抗精神病藥劑、某些HIV蛋白酶抑制劑、膳食要素(諸如高果糖、蔗糖、膽固醇或某些脂肪酸)及某些針對RXR、RAR、LXR、FXR之核受體促效劑及拮抗劑組成之群。
在一些態樣中，本發明包含一種治療或預防個體之與血清膽固醇含量升高相關之病狀的方法，該方法包含將有效量之至少一種本 發明之抗PCSK9抗體或片段與增加HDL含量之藥劑同時或依序投與有需要之個體。在一些實施例中，增加HDL含量之藥劑為亦稱為菸鹼酸之菸酸。在一些實施例中，菸酸為緩慢釋放調配物。
在一些態樣中，本發明包含一種治療或預防個體之與血清膽固醇含量升高相關之病狀的方法，該方法包含將有效量之至少一種本發明之抗PCSK9抗體或片段與抑制肝三酸甘油酯產生及/或極低密度脂蛋白(VLDL)分泌之藥劑同時或依序投與有需要之個體。在一些實施例中，抑制肝三酸甘油酯產生及/或極低密度脂蛋白(VLDL)分泌之藥劑為阿西莫司。
在一些態樣中，本發明包含一種治療或預防個體之與血清膽固醇含量升高相關之病狀的方法，該方法包含將有效量之至少一種本發明之抗PCSK9抗體或片段與降低脂質在腸中之吸收之藥劑同時或依序投與有需要之個體。在一些實施例中，降低脂質在腸中之吸收之藥劑係選自由奧利斯泰、利普司他汀及其某一組合組成之群。
在一些態樣中，本發明包含一種治療或預防個體之與血清膽固醇含量升高相關之病狀的方法，該方法包含將有效量之至少一種本發明之抗PCSK9抗體或片段與作為抗高血壓藥及/或治療絞痛症之藥劑同時或依序投與有需要之個體。在一些實施例中，作為抗高血壓藥及/或治療絞痛症之藥劑為胺氯地平。
在一些態樣中，本發明包含一種治療或預防個體之與血清膽固醇含量升高相關之病狀的方法，該方法包含將有效量之至少一種本發明之抗PCSK9抗體或片段與至少一種其他藥劑同時或依序投與有需要之個體，其中該組合允許減輕至少一種其他藥劑之不合需要之副作用。在一些實施例中，本發明之抗PCSK9抗體或片段及至少一種其他藥劑係同時投與。在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段及至少一種其他藥劑不同時投與，其中本發明之抗PCSK9抗體或片段係在投與至少一種其他藥劑之前或之後投與。
在一些態樣中，本發明包含一種降低個體之血清膽固醇含量之方法。該方法包含向個體投與有效量之至少一種本發明之抗PCSK9抗體或片段。
在一些態樣中，本發明包含一種降低個體之血清膽固醇含量之方法，其包含將有效量之至少一種本發明之抗PCSK9抗體或片段與降低膽固醇且視情況進一步升高LDLR蛋白質之可用性之藥劑同時或依序投與個體。在一些實施例中，降低膽固醇且進一步視情況升高LDLR蛋白質之可用性之藥劑包含士他汀。在一些實施例中，士他汀係選自由阿托伐他汀、西立伐他汀、氟伐他汀、洛伐他汀、美伐他汀、匹伐他汀、普伐他汀、羅素他汀、辛伐他汀及其某一組合組成之群。在一些實施例中，士他汀與菸酸、吸收抑制劑(依折麥布)、脂質調節劑或其組合進行組合。在一些實施例中，升高LDLR蛋白質含量之可用性之藥劑包含某些細胞激素(如制瘤素M)、雌激素及/或某些草本成分(諸如小蘗鹼)。
在一些態樣中，本發明包含一種降低個體之血清膽固醇含量之方法，其包含將有效量之至少一種本發明之抗PCSK9抗體或片段與增加高密度脂蛋白(HDL)及/或降低三酸甘油酯含量之藥劑同時或依序投與個體。在一些實施例中，增加高密度脂蛋白(HDL)及/或降低三酸甘油酯含量之藥劑包含貝特。在一些實施例中，貝特係選自由苯紮貝特、環丙貝特、氯貝特、吉非羅齊、非諾貝特及其某一組合組成之群。
在一些態樣中，本發明包含一種降低個體之血清膽固醇含量之方法，其包含將有效量之至少一種本發明之抗PCSK9抗體或片段與膽汁酸螯合劑同時或依序投與個體。在一些實施例中，膽汁螯合劑係選自由消膽胺、考來維侖、考來替泊及其某一組合組成之群。
在一些態樣中，本發明包含一種降低個體之血清膽固醇含量之方法，其包含將有效量之至少一種根據本發明之至少一種抗PCSK9抗體或片段與降低膽固醇在腸中之吸收之藥劑同時或依序投與個體。在一些實施例中，降低膽固醇在腸中之吸收之藥劑為依折麥布。
在一些態樣中，本發明包含一種降低個體之血清膽固醇含量之方法，其包含將有效量之至少本發明之抗PCSK9抗體或片段與降低膽固醇含量之藥劑同時或依序投與個體。在一些實施例中，降低膽固醇含量之藥劑係選自由某些抗精神病藥劑、某些HIV蛋白酶抑制劑、膳食要素(諸如高果糖、蔗糖、膽固醇或某些脂肪酸)及某些針對RXR、RAR、 LXR、FXR之核受體促效劑及拮抗劑組成之群。
在一些態樣中，本發明包含一種降低個體之血清膽固醇含量之方法，其包含將有效量之至少一種本發明之抗體或抗體片段與增加HDL含量之藥劑同時或依序投與個體。在一些實施例中，增加HDL含量之藥劑為亦稱為菸鹼酸之菸酸。在一些實施例中，菸酸為緩慢釋放調配物。
在一些態樣中，本發明包含一種降低個體之血清膽固醇含量之方法，其包含將有效量之至少一種本發明之抗PCSK9抗體或片段與抑制肝三酸甘油酯產生及/或極低密度脂蛋白(VLDL)分泌之藥劑同時或依序投與個體。在一些實施例中，抑制肝三酸甘油酯產生及/或極低密度脂蛋白(VLDL)分泌之藥劑為阿西莫司。
在一些態樣中，本發明包含一種降低個體之血清膽固醇含量之方法，其包含將有效量之至少一種本發明之抗PCSK9抗體或片段與降低脂質在腸中之吸收之藥劑同時或依序投與個體。在一些實施例中，降低脂質在腸中之吸收之藥劑係選自由奧利斯泰、利普司他汀及其某一組合組成之群。
在一些態樣中，本發明包含一種降低個體之血清膽固醇含量之方法，其包含將有效量之至少一種本發明之抗PCSK9抗體或片段與作為抗高血壓藥及/或治療絞痛症之藥劑同時或依序投與個體。在一些實施例中，作為抗高血壓藥及/或治療絞痛症之藥劑為胺氯地平。
在一些態樣中，本發明包含一種降低個體之血清膽固醇含量之方法，其包含將有效量之至少一種本發明之抗PCSK9抗體或片段與至少一種其他藥劑同時或依序投與個體，其中該組合允許減輕至少一種其他藥劑之不合需要之副作用。在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段及至少一種其他藥劑係同時投與。在一些實施例中，本發明之抗PCSK9抗體或片段及至少一種其他藥劑不同時投與，其中本發明之抗體或抗體片段係在投與至少一種其他藥劑之前或之後投與。
在一些態樣中，本發明包含一種藉由向個體投與有效量之至少一種如本文提供之本發明之抗PCSK9抗體或片段來增加個體之LDLR蛋白質含量的方法。
在一些態樣中，本發明包含一種藉由將有效量之至少一種本發明之抗體或抗體片段與升高LDLR蛋白質之可用性或降低膽固醇之藥劑同時或依序投與個體來增加個體之LDLR蛋白質含量的方法。在一些實施例中，降低膽固醇之藥劑包含士他汀。在一些實施例中，士他汀係選自由阿托伐他汀、西立伐他汀、氟伐他汀、洛伐他汀、美伐他汀、匹伐他汀、普伐他汀、羅素他汀、辛伐他汀及其某一組合組成之群。在一些實施例中，士他汀與菸酸、吸收抑制劑(依折麥布)、脂質調節劑或其組合進行組合。在一些實施例中，升高LDLR蛋白質含量之可用性之藥劑包含某些細胞激素(如制瘤素M)、雌激素及/或某些草本成分(諸如小蘗鹼)。
在一些態樣中，本發明包含一種藉由將有效量之至少一種本發明之抗體或抗體片段與增加高密度脂蛋白(HDL)及/或降低三酸甘油酯含量之藥劑同時或依序投與個體來增加個體之LDLR蛋白質含量的方法。在一些實施例中，增加高密度脂蛋白(HDL)及/或降低三酸甘油酯含量之藥劑包含貝特。在一些實施例中，貝特係選自由苯紮貝特、環丙貝特、氯貝特、吉非羅齊、非諾貝特及其某一組合組成之群。
在一些態樣中，本發明包含一種藉由將有效量之至少一種本發明之抗體或抗體片段與膽汁酸螯合劑同時或依序投與個體來增加個體之LDLR蛋白質含量的方法。在一些實施例中，膽汁螯合劑係選自由消膽胺、考來維侖、考來替泊及其某一組合組成之群。
在一些態樣中，本發明包含一種藉由將有效量之至少一種本發明之抗體或抗體片段與降低膽固醇在腸中之吸收之藥劑同時或依序投與個體來增加個體之LDLR蛋白質含量的方法。在一些實施例中，降低膽固醇在腸中之吸收之藥劑為依折麥布。
在一些態樣中，本發明包含一種藉由將有效量之至少一種本發明之抗體或抗體片段與降低膽固醇含量之藥劑同時或依序投與個體來增加個體之LDLR蛋白質含量的方法。在一些實施例中，降低膽固醇含量之藥劑係選自由某些抗精神病藥劑、某些HIV蛋白酶抑制劑、膳食要素(諸如高果糖、蔗糖、膽固醇或某些脂肪酸)及某些針對RXR、RAR、LXR、FXR之核受體促效劑及拮抗劑組成之群。
在一些態樣中，本發明包含一種藉由將有效量之至少一種本發明之抗體或抗體片段與增加HDL含量之藥劑同時或依序投與個體來增加個體之LDLR蛋白質含量的方法。在一些實施例中，增加HDL含量之藥劑為亦稱為菸鹼酸之菸酸。在一些實施例中，菸酸為緩慢釋放調配物。
在一些態樣中，本發明包含一種藉由將有效量之至少一種本發明之抗體或抗體片段與抑制肝三酸甘油酯產生及/或極低密度脂蛋白(VLDL)分泌之藥劑同時或依序投與個體來增加個體之LDLR蛋白質含量的方法。在一些實施例中，抑制肝三酸甘油酯產生及/或極低密度脂蛋白(VLDL)分泌之藥劑為阿西莫司。
在一些態樣中，本發明包含一種藉由將有效量之至少一種本發明之抗體或抗體片段與降低脂質在腸中之吸收之藥劑同時或依序投與個體來增加個體之LDLR蛋白質含量的方法。在一些實施例中，降低脂質在腸中之吸收之藥劑係選自由奧利斯泰、利普司他汀及其某一組合組成之群。
在一些態樣中，本發明包含一種藉由將有效量之至少一種本發明之抗體或抗體片段與作為抗高血壓藥及/或治療絞痛症之藥劑同時或依序投與個體來增加個體之LDLR蛋白質含量的方法。在一些實施例中，作為抗高血壓藥及/或治療絞痛症之藥劑為胺氯地平。
在一些態樣中，本發明包含一種藉由將有效量之至少一種本發明之抗體或抗體片段與至少一種其他藥劑同時或依序投與個體來增加個體之LDLR蛋白質含量的方法，其中該組合允許減輕至少一種其他藥劑之不合需要之副作用。在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段及至少一種其他藥劑係同時投與。在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段及至少一種其他藥劑不同時投與，其中本發明之抗體或抗體片段係在投與至少一種其他藥劑之前或之後投與。
在一些態樣中，本發明包含一種降低個體之血清膽固醇含量之方法，該方法包含將有效量之至少一種如本文揭露之本發明之經分離抗體或抗體片段與升高LDLR蛋白質之可用性或降低血清膽固醇之另一藥劑同時或依序投與個體。
在一些態樣中，本發明包含一種增加個體之LDLR蛋白質含量之方法，該方法包含向個體投與有效量之至少一種如本文揭露之本發明之經分離抗體或抗體片段。
在一些態樣中，本發明包含一種增加個體之LDLR蛋白質含量之方法，該方法包含將有效量之至少一種如本文揭露之本發明之經分離抗體或抗體片段與升高LDLR蛋白質之可用性之藥劑同時或依序投與個體。
在一些態樣中，本發明包含一種包含如本文揭露之本發明之抗體或抗體片段及阻斷或抑制膽固醇合成或升高LDLR可用性之藥劑的醫藥或診斷組合物。在一些實施例中，阻斷或抑制膽固醇合成之藥劑包含士他汀且亦可增加LDLR之可用性。在一些實施例中，士他汀係選自由阿托伐他汀、西立伐他汀、氟伐他汀、洛伐他汀、美伐他汀、匹伐他汀、普伐他汀、羅素他汀、辛伐他汀及其某一組合組成之群。在一些實施例中，士他汀與菸酸、吸收抑制劑(依折麥布)、脂質調節劑或其組合進行組合。在一些實施例中，升高LDLR蛋白質含量之可用性之藥劑包含某些細胞激素(如制瘤素M)、雌激素及/或某些草本成分(諸如小蘗鹼)。
在一些態樣中，本發明包含一種包含如本文揭露之本發明之抗體或抗體片段及增加高密度脂蛋白(HDL)及/或降低三酸甘油酯含量之藥劑的醫藥或診斷組合物。在一些實施例中，增加高密度脂蛋白(HDL)及/或降低三酸甘油酯含量之藥劑包含貝特。在一些實施例中，貝特係選自由苯紮貝特、環丙貝特、氯貝特、吉非羅齊、非諾貝特及其某一組合組成之群。
在一些態樣中，本發明包含一種包含如本文揭露之本發明之抗體或抗體片段及膽汁酸螯合劑的醫藥或診斷組合物。在一些實施例中，膽汁螯合劑係選自由消膽胺、考來維侖、考來替泊及其某一組合組成之群。
在一些態樣中，本發明包含一種包含如本文揭露之本發明之抗體或抗體片段及降低膽固醇在腸中之吸收之藥劑的醫藥或診斷組合物。在一些實施例中，降低膽固醇在腸中之吸收之藥劑為依折麥布。
在一些態樣中，本發明包含一種包含如本文揭露之本發明之抗體或抗體片段及降低膽固醇含量之藥劑的醫藥或診斷組合物。在一些實施例中，降低膽固醇含量之藥劑係選自由某些抗精神病藥劑、某些HIV蛋白酶抑制劑、膳食要素(諸如高果糖、蔗糖、膽固醇或某些脂肪酸)及某些針對RXR、RAR、LXR、FXR之核受體促效劑及拮抗劑組成之群。
在一些態樣中，本發明包含一種包含如本文揭露之本發明之抗體或抗體片段及增加HDL含量之藥劑的醫藥或診斷組合物。在一些實施例中，增加HDL含量之藥劑為亦稱為菸鹼酸之菸酸。在一些實施例中，菸酸為緩慢釋放調配物。
在一些態樣中，本發明包含一種包含如本文揭露之本發明之抗體或抗體片段及抑制肝三酸甘油酯產生及/或極低密度脂蛋白(VLDL)分泌之藥劑的醫藥或診斷組合物。在一些實施例中，抑制肝三酸甘油酯產生及/或極低密度脂蛋白(VLDL)分泌之藥劑為阿西莫司。
在一些態樣中，本發明包含一種包含如本文揭露之本發明之抗體或抗體片段及降低脂質在腸中之吸收之藥劑的醫藥或診斷組合物。在一些實施例中，降低脂質在腸中之吸收之藥劑係選自由奧利斯泰、利普司他汀及其某一組合組成之群。
在一些態樣中，本發明包含一種包含如本文揭露之本發明之抗體或抗體片段及作為抗高血壓藥及/或治療絞痛症之藥劑的醫藥或診斷組合物。在一些實施例中，作為抗高血壓藥及/或治療絞痛症之藥劑為胺氯地平。
在一些態樣中，本發明包含一種包含如本文揭露之本發明之抗體或抗體片段及至少一種其他藥劑的醫藥或診斷組合物，其中該組合允許減輕至少一種其他藥劑之不合需要之副作用。在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段及至少一種其他藥劑係同時投與。在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段及至少一種其他藥劑不同時投與，其中本發明之抗體或抗體片段係在投與至少一種其他藥劑之前或之後投與。
在某一態樣中，本發明包含一種製備如本文所述之本發明之抗體或抗體片段的方法，其包含自分泌該本發明之抗體或抗體片段之 宿主細胞製備該本發明之抗體或抗體片段的步驟。
在某一態樣中，本發明包含一種包含至少一種如本文所述之本發明之抗體或抗體片段及醫藥學上可接受之賦形劑的醫藥或診斷組合物。在一些實施例中，醫藥或診斷組合物進一步包含另一活性藥劑。在一些實施例中，該另一活性藥劑係選自由放射性同位素、放射性核種、毒素或治療及化學治療基團組成之群。
在一些態樣中，本發明包含一種治療或預防患者之與血清膽固醇含量升高相關之病狀的方法。該方法包含向有需要之患者投與有效量之至少一種如本文揭露之本發明之經分離抗體或抗體片段。在一些實施例中，病狀為高膽固醇血症。
在一些態樣中，本發明包含一種在患者中抑制PCSK9與LDLR之結合之方法，其包含投與有效量之至少一種依據本文所述之本發明之抗體或抗體片段。
在某一態樣中，本發明包含一種結合PCSK9之KD小於100nM之本發明之抗體或抗體片段。在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段進行結合之KD小於10nM。在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段進行結合之KD小於5nM。
在一些態樣中，本發明包含一種治療或預防個體之與血清膽固醇含量升高相關之病狀的方法，該方法包含將有效量之至少一種本文所述之本發明之經分離抗體或抗體片段與升高LDLR蛋白質之可用性或阻斷或抑制膽固醇合成之藥劑同時或依序投與有需要之個體。在一些實施例中，阻斷或抑制膽固醇合成之藥劑包含士他汀。在一些實施例中，士他汀係選自由阿托伐他汀、西立伐他汀、氟伐他汀、洛伐他汀、美伐他汀、匹伐他汀、普伐他汀、羅素他汀、辛伐他汀及其某一組合組成之群。在一些實施例中，士他汀與菸酸、吸收抑制劑(依折麥布)、脂質調節劑或其組合進行組合。在一些實施例中，升高LDLR蛋白質含量之可用性之藥劑包含某些細胞激素(如制瘤素M)、雌激素及/或某些草本成分(諸如小蘗鹼)。
在一些態樣中，本發明包含一種治療或預防個體之與血清膽固醇含量升高相關之病狀的方法，該方法包含將有效量之至少一種本 文所述之本發明之經分離抗體或抗體片段與增加高密度脂蛋白(HDL)及/或降低三酸甘油酯含量之藥劑同時或依序投與有需要之個體。在一些實施例中，增加高密度脂蛋白(HDL)及/或降低三酸甘油酯含量之藥劑包含貝特。在一些實施例中，貝特係選自由苯紮貝特、環丙貝特、氯貝特、吉非羅齊、非諾貝特及其某一組合組成之群。
在一些態樣中，本發明包含一種治療或預防個體之與血清膽固醇含量升高相關之病狀的方法，該方法包含將有效量之至少一種本文所述之本發明之經分離抗體或抗體片段與膽汁酸螯合劑同時或依序投與有需要之個體。在一些實施例中，膽汁螯合劑係選自由消膽胺、考來維侖、考來替泊及其某一組合組成之群。
在一些態樣中，本發明包含一種治療或預防個體之與血清膽固醇含量升高相關之病狀的方法，該方法包含將有效量之至少一種本文所述之本發明之經分離抗體或抗體片段與降低膽固醇在腸中之吸收之藥劑同時或依序投與有需要之個體。在一些實施例中，降低膽固醇在腸中之吸收之藥劑為依折麥布。
在一些態樣中，本發明包含一種治療或預防個體之與血清膽固醇含量升高相關之病狀的方法，該方法包含將有效量之至少一種本文所述之本發明之經分離抗體或抗體片段與降低膽固醇含量之藥劑同時或依序投與有需要之個體。在一些實施例中，降低膽固醇含量之藥劑係選自由某些抗精神病藥劑、某些HIV蛋白酶抑制劑、膳食要素(諸如高果糖、蔗糖、膽固醇或某些脂肪酸)及某些針對RXR、RAR、LXR、FXR之核受體促效劑及拮抗劑組成之群。
在一些態樣中，本發明包含一種治療或預防個體之與血清膽固醇含量升高相關之病狀的方法，該方法包含將有效量之至少一種本文所述之本發明之經分離抗體或抗體片段與增加HDL含量之藥劑同時或依序投與有需要之個體。在一些實施例中，增加HDL含量之藥劑為亦稱為菸鹼酸之菸酸。在一些實施例中，菸酸為緩慢釋放調配物。
在一些態樣中，本發明包含一種治療或預防個體之與血清膽固醇含量升高相關之病狀的方法，該方法包含將有效量之至少一種本 文所述之本發明之經分離抗體或抗體片段與抑制肝三酸甘油酯產生及/或極低密度脂蛋白(VLDL)分泌之藥劑同時或依序投與有需要之個體。在一些實施例中，抑制肝三酸甘油酯產生及/或極低密度脂蛋白(VLDL)分泌之藥劑為阿西莫司。
在一些態樣中，本發明包含一種治療或預防個體之與血清膽固醇含量升高相關之病狀的方法，該方法包含將有效量之至少一種本文所述之本發明之經分離抗體或抗體片段與降低脂質在腸中之吸收之藥劑同時或依序投與有需要之個體。在一些實施例中，降低脂質在腸中之吸收之藥劑係選自由奧利斯泰、利普司他汀及其某一組合組成之群。
在一些態樣中，本發明包含一種治療或預防個體之與血清膽固醇含量升高相關之病狀的方法，該方法包含將有效量之至少一種本文所述之本發明之經分離抗體或抗體片段與作為抗高血壓藥及/或治療絞痛症之藥劑同時或依序投與有需要之個體。在一些實施例中，作為抗高血壓藥及/或治療絞痛症之藥劑為胺氯地平。
在一些態樣中，本發明包含一種治療或預防個體之與血清膽固醇含量升高相關之病狀的方法，該方法包含將有效量之至少一種本文所述之本發明之經分離抗體或抗體片段與至少一種其他藥劑同時或依序投與有需要之個體，其中該組合允許減輕至少一種其他藥劑之不合需要之副作用。在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段及至少一種其他藥劑係同時投與。在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段及至少一種其他藥劑不同時投與，其中本發明之抗體或抗體片段係在投與至少一種其他藥劑之前或之後投與。
在一些態樣中，本發明包含一種降低個體之血清膽固醇含量之方法。該方法包含向個體投與有效量之至少一種如本文所述之本發明之經分離抗體或抗體片段。
在一些態樣中，本發明包含一種降低個體之血清膽固醇含量之方法，其包含將有效量之至少一種本發明之抗體或抗體片段與升高LDLR蛋白質之可用性或阻斷或抑制膽固醇合成之藥劑同時或依序投與個體。在一些實施例中，阻斷或抑制膽固醇合成之藥劑包含士他汀。在一些 實施例中，士他汀係選自由阿托伐他汀、西立伐他汀、氟伐他汀、洛伐他汀、美伐他汀、匹伐他汀、普伐他汀、羅素他汀、辛伐他汀及其某一組合組成之群。在一些實施例中，士他汀與菸酸、吸收抑制劑(依折麥布)、脂質調節劑或其組合進行組合。在一些實施例中，升高LDLR蛋白質含量之可用性之藥劑包含某些細胞激素(如制瘤素M)、雌激素及/或某些草本成分(諸如小蘗鹼)。
在一些態樣中，本發明包含一種降低個體之血清膽固醇含量之方法，其包含將有效量之至少一種本發明之抗體或抗體片段與增加高密度脂蛋白(HDL)及/或降低三酸甘油酯含量之藥劑同時或依序投與個體。在一些實施例中，增加高密度脂蛋白(HDL)及/或降低三酸甘油酯含量之藥劑包含貝特。在一些實施例中，貝特係選自由苯紮貝特、環丙貝特、氯貝特、吉非羅齊、非諾貝特及其某一組合組成之群。
在一些態樣中，本發明包含一種降低個體之血清膽固醇含量之方法，其包含將有效量之至少一種本發明之抗體或抗體片段與膽汁酸螯合劑同時或依序投與個體。在一些實施例中，膽汁螯合劑係選自由消膽胺、考來維侖、考來替泊及其某一組合組成之群。
在一些態樣中，本發明包含一種降低個體之血清膽固醇含量之方法，其包含將有效量之至少一種本發明之抗體或抗體片段與降低膽固醇在腸中之吸收之藥劑同時或依序投與個體。在一些實施例中，降低膽固醇在腸中之吸收之藥劑為依折麥布。
在一些態樣中，本發明包含一種降低個體之血清膽固醇含量之方法，其包含將有效量之至少一種本發明之抗體或抗體片段與降低膽固醇含量之藥劑同時或依序投與個體。在一些實施例中，降低膽固醇含量之藥劑係選自由某些抗精神病藥劑、某些HIV蛋白酶抑制劑、膳食要素(諸如高果糖、蔗糖、膽固醇或某些脂肪酸)及某些針對RXR、RAR、LXR、FXR之核受體促效劑及拮抗劑組成之群。
在一些態樣中，本發明包含一種降低個體之血清膽固醇含量之方法，其包含將有效量之至少一種本發明之抗體或抗體片段與增加HDL含量之藥劑同時或依序投與個體。在一些實施例中，增加HDL含量之 藥劑為亦稱為菸鹼酸之菸酸。在一些實施例中，菸酸為緩慢釋放調配物。
在一些態樣中，本發明包含一種降低個體之血清膽固醇含量之方法，其包含將有效量之至少一種本發明之抗體或抗體片段與抑制肝三酸甘油酯產生及/或極低密度脂蛋白(VLDL)分泌之藥劑同時或依序投與個體。在一些實施例中，抑制肝三酸甘油酯產生及/或極低密度脂蛋白(VLDL)分泌之藥劑為阿西莫司。
在一些態樣中，本發明包含一種降低個體之血清膽固醇含量之方法，其包含將有效量之至少一種本發明之抗體或抗體片段與降低脂質在腸中之吸收之藥劑同時或依序投與個體。在一些實施例中，降低脂質在腸中之吸收之藥劑係選自由奧利斯泰、利普司他汀及其某一組合組成之群。
在一些態樣中，本發明包含一種降低個體之血清膽固醇含量之方法，其包含將有效量之至少一種本發明之抗體或抗體片段與作為抗高血壓藥及/或治療絞痛症之藥劑同時或依序投與個體。在一些實施例中，作為抗高血壓藥及/或治療絞痛症之藥劑為胺氯地平。
在一些態樣中，本發明包含一種降低個體之血清膽固醇含量之方法，其包含將有效量之至少一種本發明之抗體或抗體片段與至少一種其他藥劑同時或依序投與個體，其中該組合允許減輕至少一種其他藥劑之不合需要之副作用。在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段及至少一種其他藥劑係同時投與。在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段及至少一種其他藥劑不同時投與，其中本發明之抗體或抗體片段係在投與至少一種其他藥劑之前或之後投與。
在一些態樣中，本發明包含一種藉由向個體投與有效量之至少一種如本文提供之本發明之經分離抗體或抗體片段來增加個體之LDLR蛋白質含量的方法。
在一些態樣中，本發明包含一種藉由將有效量之至少一種本發明之抗體或抗體片段與升高LDLR蛋白質之可用性或阻斷或抑制膽固醇合成之藥劑同時或依序投與個體來增加個體之LDLR蛋白質含量的方法。在一些實施例中，阻斷或抑制膽固醇合成之藥劑包含士他汀。在一些 實施例中，士他汀係選自由阿托伐他汀、西立伐他汀、氟伐他汀、洛伐他汀、美伐他汀、匹伐他汀、普伐他汀、羅素他汀、辛伐他汀及其某一組合組成之群。在一些實施例中，士他汀與菸酸、吸收抑制劑(依折麥布)、脂質調節劑或其組合進行組合。在一些實施例中，升高LDLR蛋白質含量之可用性之藥劑包含某些細胞激素(如制瘤素M)、雌激素及/或某些草本成分(諸如小蘗鹼)。
在一些態樣中，本發明包含一種藉由將有效量之至少一種本發明之抗體或抗體片段與增加高密度脂蛋白(HDL)及/或降低三酸甘油酯含量之藥劑同時或依序投與個體來增加個體之LDLR蛋白質含量的方法。在一些實施例中，增加高密度脂蛋白(HDL)及/或降低三酸甘油酯含量之藥劑包含貝特。在一些實施例中，貝特係選自由苯紮貝特、環丙貝特、氯貝特、吉非羅齊、非諾貝特及其某一組合組成之群。
在一些態樣中，本發明包含一種藉由將有效量之至少一種本發明之抗體或抗體片段與膽汁酸螯合劑同時或依序投與個體來增加個體之LDLR蛋白質含量的方法。在一些實施例中，膽汁螯合劑係選自由消膽胺、考來維侖、考來替泊及其某一組合組成之群。
在一些態樣中，本發明包含一種藉由將有效量之至少一種本發明之抗體或抗體片段與降低膽固醇在腸中之吸收之藥劑同時或依序投與個體來增加個體之LDLR蛋白質含量的方法。在一些實施例中，降低膽固醇在腸中之吸收之藥劑為依折麥布。
在一些態樣中，本發明包含一種藉由將有效量之至少一種本發明之抗體或抗體片段與降低膽固醇含量之藥劑同時或依序投與個體來增加個體之LDLR蛋白質含量的方法。在一些實施例中，降低膽固醇含量之藥劑係選自由某些抗精神病藥劑、某些HIV蛋白酶抑制劑、膳食要素(諸如高果糖、蔗糖、膽固醇或某些脂肪酸)及某些針對RXR、RAR、LXR、FXR之核受體促效劑及拮抗劑組成之群。
在一些態樣中，本發明包含一種藉由將有效量之至少一種本發明之抗體或抗體片段與增加HDL含量之藥劑同時或依序投與個體來增加個體之LDLR蛋白質含量的方法。在一些實施例中，增加HDL含量之 藥劑為亦稱為菸鹼酸之菸酸。在一些實施例中，菸酸為緩慢釋放調配物。
在一些態樣中，本發明包含一種藉由將有效量之至少一種本發明之抗體或抗體片段與抑制肝三酸甘油酯產生及/或極低密度脂蛋白(VLDL)分泌之藥劑同時或依序投與個體來增加個體之LDLR蛋白質含量的方法。在一些實施例中，抑制肝三酸甘油酯產生及/或極低密度脂蛋白(VLDL)分泌之藥劑為阿西莫司。
在一些態樣中，本發明包含一種藉由將有效量之至少一種本發明之抗體或抗體片段與降低脂質在腸中之吸收之藥劑同時或依序投與個體來增加個體之LDLR蛋白質含量的方法。在一些實施例中，降低脂質在腸中之吸收之藥劑係選自由奧利斯泰、利普司他汀及其某一組合組成之群。
在一些態樣中，本發明包含一種藉由將有效量之至少一種本發明之抗體或抗體片段與作為抗高血壓藥及/或治療絞痛症之藥劑同時或依序投與個體來增加個體之LDLR蛋白質含量的方法。在一些實施例中，作為抗高血壓藥及/或治療絞痛症之藥劑為胺氯地平。
在一些態樣中，本發明包含一種藉由將有效量之至少一種本發明之抗體或抗體片段與至少一種其他藥劑同時或依序投與個體來增加個體之LDLR蛋白質含量的方法，其中該組合允許減輕至少一種其他藥劑之不合需要之副作用。在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段及至少一種其他藥劑係同時投與。在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段及至少一種其他藥劑不同時投與，其中本發明之抗體或抗體片段係在投與至少一種其他藥劑之前或之後投與。
在一些態樣中，本發明包含一種結合PCSK9且降低PCSK9對LDLR之低密度脂蛋白受體(LDLR)降低作用的中和抗體。在一些實施例中，抗體特異性結合PCSK9。在一些實施例中，抗體結合PCSK9之催化域。
在一些態樣中，本發明包含一種結合包含胺基酸序列SEQ ID NO：961之PCSK9蛋白質的本發明之經分離中和抗體或抗體片段，其中該本發明之中和抗體或抗體片段使PCSK9降低LDLR含量之能力降 低。在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段為本發明之LDLR非競爭性中和抗體或抗體片段。在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段為本發明之LDLR競爭性中和抗體或抗體片段。
在一些態樣中，本發明包含一種結合包含胺基酸序列SEQ ID NO：962之PCSK9蛋白質的本發明之經分離中和抗體或抗體片段，其中該本發明之中和抗體或抗體片段使PCSK9對LDLR之LDLR降低作用降低。在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段為本發明之LDLR非競爭性中和抗體或抗體片段。在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段為本發明之LDLR競爭性中和抗體或抗體片段。
在一些態樣中，本發明包含一種包含結晶PCSK9蛋白質及結合PCSK9之本發明之抗體或抗體片段的組合物。該組合物包含結晶PCSK9蛋白質以使PCSK9蛋白質之三維結構可在約2.2埃或更佳之解析度上加以確定。在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段為抗體或其片段。
在一些態樣中，本發明包含如本文所述之本發明之抗體或抗體片段用於製備用於降低血清膽固醇之藥劑的用途。
在一些態樣中，本發明包含如本文所述之本發明之抗體或抗體片段用於製備用於治療或預防個體之與血清膽固醇含量升高相關之病狀之藥劑的用途。
本發明抗體及其片段可經轉譯後修飾以添加效應物部分(諸如化學連接子)、可偵測部分(諸如螢光染料、酶、受質、生物發光物質、放射性物質及化學發光部分)、或功能性部分(諸如抗生蛋白鏈菌素、抗生物素蛋白、生物素、細胞毒素、細胞毒性劑及放射性物質)。
抗體或其片段亦可經化學修飾以提供其他優勢，諸如多肽之溶解度、穩定性及循環時間(活體內半衰期)增加或免疫原性降低(參見美國專利第4,179,337號)。用於衍生化之化學部分可選自水溶性聚合物，諸如聚乙二醇、乙二醇/丙二醇共聚物、羧甲基纖維素、葡聚糖、聚乙烯醇及其類似物。抗體及其片段可在分子內之隨機位置上或在分子內之預定位置上修飾且可包括一個、兩個、三個或三個以上連接之化學部分。
聚合物可具有任何分子量，且可分支或未分支。對於聚 乙二醇，較佳分子量在約1kDa與約100kDa之間(術語「約」指示在聚乙二醇之製劑中，一些分子之分子量將比所述分子量大，一些將比所述分子量小)以易於處理及製造。視所要治療概況而定(例如持續釋放之所要持續時間、對生物活性之影響(若有)、處理之容易性、抗原性程度或抗原性之缺乏及聚乙二醇對治療性蛋白質或類似物之其他已知影響)，可使用其他大小。舉例而言，聚乙二醇之平均分子量可為約200、500、1000、1500、2000、2500、3000、3500、4000、4500、5000、5500、6000、6500、7000、7500、8000、8500、9000、9500、10,000、10,500、11,000、11,500、12,000、12,500、13,000、13,500、14,000、14,500、15,000、15,500、16,000、16,500、17,000、17,500、18,000、18,500、19,000、19,500、20,000、25,000、30,000、35,000、40,000、50,000、55,000、60,000、65,000、70,000、75,000、80,000、85,000、90,000、95,000或100,000kDa。分支聚乙二醇例如描述於美國專利第5,643,575號；Morpurgo等人，Appl.Biochem.Biotechnol.56：59-72(1996)；Vorobjev等人，Nucleosides Nucleotides 18：2745-2750(1999)；及Caliceti等人，Bioconjug.Chem.10：638-646(1999)中，所述文獻各自之揭露內容以引用的方式併入本文中。
存在可為熟習此項技術者所用之許多連接方法，參見例如以引用的方式併入本文中之EP 0 401 384(使PEG偶合於G-CSF)，亦參見Malik等人，Exp.Hematol.20：1028-1035(1992)(報導使用三氟乙基磺醯氯使GM-CSF聚乙二醇化)。舉例而言，聚乙二醇可經由諸如游離胺基或羧基之反應性基團，經由胺基酸殘基進行共價結合。反應性基團為活化聚乙二醇分子可結合之基團。具有游離胺基之胺基酸殘基可包括離胺酸殘基及N末端胺基酸殘基；具有游離羧基之胺基酸殘基可包括天冬胺酸殘基、麩胺酸殘基及C末端胺基酸殘基。巰基亦可用作用於連接聚乙二醇分子之反應性基團。對於治療目的而言較佳的是在胺基上連接，諸如在N末端或離胺酸基團上連接。
如以上所表明，聚乙二醇可經由鍵聯於多種胺基酸殘基中之任一者來連接於蛋白質。舉例而言，聚乙二醇可經由與離胺酸、組胺 酸、天冬胺酸、麩胺酸或半胱胺酸殘基之共價鍵來連接於多肽。一或多種反應化學可用於將聚乙二醇連接於特定胺基酸殘基(例如離胺酸、組胺酸、天冬胺酸、麩胺酸或半胱胺酸)或一種以上類型之胺基酸殘基(例如離胺酸、組胺酸、天冬胺酸、麩胺酸、半胱胺酸及其組合)。
或者，抗體或其片段可經由與白蛋白(包括(但不限於)重組人類血清白蛋白或其片段或變異體(參見例如1999年3月2日頒予之美國專利第5,876,969號、EP專利0 413 622及1998年6月16日頒予之美國專利第5,766,883號，以全文引用的方式併入本文中))或其他循環血液蛋白質(諸如轉鐵蛋白(transferrin)或鐵蛋白(ferritin))融合而具有增加之活體內半衰期。在一較佳實施例中，本發明之多肽及/或抗體(包括其片段或變異體)與人類血清白蛋白之成熟形式(亦即如EP專利0 322 094之圖1及2中所示之人類血清白蛋白之胺基酸1-585)融合，該專利以全文引用的方式併入本文中。本發明亦涵蓋編碼本發明之融合蛋白之聚核苷酸。
關於可偵測部分，其他示範性酶包括(但不限於)辣根過氧化酶(horseradish peroxidase)、乙醯膽鹼酯酶(acetylcholinesterase)、鹼性磷酸酶、β-半乳糖苷酶(beta-galactosidase)及螢光素酶(luciferase)。其他示範性螢光物質包括(但不限於)若丹明(rhodamine)、螢光素(fluorescein)、異硫氰酸螢光素(fluorescein isothiocyanate)、傘形酮(umbelliferone)、二氯三嗪基胺、藻紅素(phycoerythrin)及丹磺醯氯(dansyl chloride)。其他示範性化學發光部分包括(但不限於)流明諾(luminol)。其他示範性生物發光物質包括(但不限於)螢光素(luciferin)及水母素(aequorin)。其他示範性放射性物質包括(但不限於)碘125(125 I)、碳14(14 C)、硫35(35 S)、氚(3 H)及磷32(32 P)。
關於功能性部分，示範性細胞毒性劑包括(但不限於)甲胺蝶呤(methotrexate)、胺基蝶呤(aminopterin)、6-巰基嘌呤(6-mercaptopurine)、6-硫鳥嘌呤(6-thioguanine)、阿糖胞苷(cytarabine)、5-氟尿嘧啶達卡巴嗪(5-fluorouracil decarbazine)；烷基化劑，諸如二氯甲基二乙胺(mechlorethamine))、塞替派苯丁酸氮芥(thioepa chlorambucil)、美法侖(melphalan)、卡莫司汀(carmustine)(BSNU)、絲裂黴素C(mitomycin C)、洛莫司汀(lomustine)(CCNU)、1-甲基亞硝基脲(1-methylnitrosourea)、環磷醯 胺(cyclothosphamide)、二氯甲基二乙胺、白消安(busulfan)、二溴甘露醇(dibromomannitol)、鏈脲佐菌素(streptozotocin)、絲裂黴素C、順二氯二胺鉑(II)(DDP)順鉑(cisplatin)及卡鉑(carboplatin)(伯爾定(paraplatin))；蒽環黴素(anthracycline)包括道諾黴素(daunorubicin)(先前稱為道諾黴素(daunomycin))、小紅莓(doxorubicin)(阿德力黴素(adriamycin))、地托比星(detorubicin)、洋紅黴素(carminomycin)、伊達比星(idarubicin)、表柔比星(epirubicin)、米托蒽醌(mitoxantrone)及比生群(bisantrene)；抗生素包括更生黴素(dactinomycin)(放線菌素D(actinomycin D))、博萊黴素(bleomycin)、卡里奇黴素(calicheamicin)、光神黴素(mithramycin)及安麯黴素(anthramycin)(AMC)；及抗有絲分裂劑，諸如長春花生物鹼(vinca alkaloid)、長春新鹼(vincristine)及長春花鹼(vinblastine)。其他細胞毒性劑包括太平洋紫杉醇(paclitaxel)(泰素(taxol))、篦麻毒素(ricin)、假單胞菌外毒素(pseudomonas exotoxin)、吉西他濱(gemcitabine)、細胞遲緩素B(cytochalasin B)、短桿菌肽D(gramicidin D)、溴化乙錠(ethidium bromide)、吐根鹼(emetine)、依託泊苷(etoposide)、替尼泊苷(tenoposide)、秋水仙鹼(colchicin)、二羥基炭疽菌素二酮(dihydroxy anthracin dione)、1-去氫睾酮(1-dehydrotestosterone)、糖皮質激素(glucocorticoid)、普魯卡因(procaine)、四卡因(tetracaine)、利多卡因(lidocaine)、普萘洛爾(propranolol)、嘌呤黴素(puromycin)、丙卡巴肼(procarbazine)、羥基脲(hydroxyurea)、天冬醯胺酶(asparaginase)、皮質類固醇(corticosteroid)、米托坦(mytotane)(O,P'-(DDD))、干擾素(interferon)及此等細胞毒性劑之混合物。
其他細胞毒性劑包括(但不限於)化學治療劑，諸如卡鉑、順鉑、太平洋紫杉醇、吉西他濱、卡里奇黴素、小紅莓、5-氟尿嘧啶、絲裂黴素C、放線菌素D、環磷醯胺、長春新鹼及博萊黴素。來自植物及細菌之毒性酶(諸如篦麻毒素、白喉毒素(diphtheria toxin)及假單胞菌毒素)可結合於人類化或嵌合抗體或其結合片段以產生細胞類型特異性殺傷試劑(Youle等人，Proc.Nat'l Acad.Sci.USA 77：5483(1980)；Gilliland等人，Proc.Nat'l Acad.Sci.USA 77：4539(1980)；Krolick等人，Proc.Nat'l Acad.Sci.USA 77：5419(1980))。
其他細胞毒性劑包括如由Goldenberg在美國專利第6,653,104號中所述之細胞毒性核糖核酸酶。本發明之實施例亦係關於放射免疫結合物，其中在使用或不使用複合物形成劑的情況下使發射α或β粒子之放射性核種穩定偶合於抗體或其結合片段。此等放射性核種包括β發射體，諸如磷-32(32 P)、鈧-47(47 Sc)、銅-67(67 Cu)、鎵-67(67 Ga)、釔-88(88 Y)、釔-90(90 Y)、碘-125(125 I)、碘-131(131 I)、釤-153(153 Sm)、鑥-177(177 Lu)、錸-186(186 Re)或錸-188(188 Re)；及α發射體，諸如砹-211(211 At)、鉛-212(212 Pb)、鉍-212(212 Bi)或鉍-213(213 Bi)或錒-225(225 Ac)。
此項技術中已知用於使抗體或其結合片段結合於可偵測部分及其類似物之方法，諸如Hunter等人，Nature 144：945(1962)；David等人，Biochemistry 13：1014(1974)；Pain等人，J.Immunol.Meth.40：219(1981)；及Nygren,J.,Histochem.and Cytochem.30：407(1982)所述之彼等方法。
本文所述之實施例進一步包括與本文所述之抗體、抗體片段、微型雙功能抗體、SMIP、駱駝抗體、奈米抗體、IgNAR、多肽、可變區及CDR實質上同源之變異體及等效物。其可含有例如保守取代突變(亦即一或多個胺基酸由類似胺基酸取代)。舉例而言，保守取代係指一個胺基酸經相同一般性類別內之另一胺基酸取代，例如一個酸性胺基酸經另一酸性胺基酸取代，一個鹼性胺基酸經另一鹼性胺基酸取代，或一個中性胺基酸經另一中性胺基酸取代。保守胺基酸取代之目的在此項技術中為熟知的。
在另一實施例中，本發明涵蓋與本文所述之抗體片段、可變區及CDR之多肽序列中之任一或多者具有至少90%或90%以上序列同源性的多肽序列。更佳地，本發明涵蓋與本文所述之抗體片段、可變區及CDR之多肽序列中之任一或多者具有至少95%或95%以上序列同源性、甚至更佳至少98%或98%以上序列同源性、且還要更佳至少99%或99%以上序列同源性的多肽序列。確定核酸及胺基酸序列之間的同源性之方法為一般技藝人士所熟知。
在另一實施例中，本發明進一步涵蓋本文所述之抗體片段、可變區及CDR之更具有抗PCSK9活性的上述多肽同源物。抗PCSK9活性之非限制性實例在本文中闡述。
在另一實施例中，本發明進一步涵蓋結合任何上述序列之抗特應抗體之產生及使用。在一示範性實施例中，該種抗特應抗體可向已接受抗PCSK9抗體之個體投與以調節、降低或中和抗PCSK9抗體之作用。此等抗特應抗體亦可適用於治療特徵在於存在抗PCSK9抗體之自體免疫性疾病。此等抗特應抗體之另一示範性用途在於偵測本發明之抗PCSK9抗體，例如以監測個體之血液或其他體液中存在之抗PCSK9抗體的含量。
本發明亦涵蓋包含被取代成本文所述之任何其他聚核苷酸序列之本文所述之任何多肽或聚核苷酸序列的抗PCSK9抗體。舉例而言且不加限制，本發明涵蓋包含本文所述之任何可變輕鏈及可變重鏈序列之組合的抗體，且進一步涵蓋由本文所述之任何其他CDR序列取代本文所述之任何CDR序列所產生的抗體。
本發明之其他示範性實施例
在另一實施例中，本發明涵蓋一或多種與選自以下之抗人類PCSK9抗體特異性結合完整人類PCSK9多肽或其片段上之相同線性或構形抗原決定基及/或與選自以下之抗人類PCSK9抗體競爭結合完整人類PCSK9多肽或其片段上之相同或重疊線性或構形抗原決定基的抗人類PCSK9抗體或其抗體片段：Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab10、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab20、Ab21、Ab22、Ab23或Ab24。在一較佳實施例中，抗人類PCSK9抗體或其片段與Ab7特異性結合完整人類PCSK9多肽或其片段上之相同線性或構形抗原決定基及/或與Ab7競爭結合完整人類PCSK9多肽或其片段上之相同線性或構形抗原決定基。
本發明之一較佳實施例係有關對PCSK9具有結合特異性且抑制由PCSK9與LDLR之結合介導之生物活性的嵌合或人類化抗體及其片段(包括Fab片段)。
在某些情況下，PCSK9活性與許多人類疾病病況相關。 舉例而言，在某些情況下，過多或過少PCSK9活性與某些病狀，諸如高膽固醇血症相關。因此，在某些情況下，調節PCSK9活性可在治療上適用。在某些實施例中，使用針對PCSK9之本發明之中和抗體或抗體片段來調節至少一種PCSK9活性(例如與LDLR之結合)。此等方法可治療及/或預防與血清膽固醇含量升高相關或其中膽固醇含量升高具有相關性之病症及/或降低該等病症之風險。
如將由熟習此項技術者所瞭解，鑒於本揭露內容，與膽固醇、LDL或LDLR含量變化相關、涉及膽固醇、LDL或LDLR含量變化或可受膽固醇、LDL或LDLR含量變化影響的病症可藉由本發明之抗體或抗體片段之各種實施例來處理。在一些實施例中，「膽固醇相關病症」(其包括「血清膽固醇相關病症」)包括以下中之任一或多者：高膽固醇血症、心臟病、代謝症候群、糖尿病、冠心病、中風、心血管疾病、阿茲海默氏病及通常可表現為例如總血清膽固醇升高、LDL升高、三酸甘油酯升高、VLDL升高及/或低HDL之血脂異常。可單獨或與一或多種其他藥劑組合使用本發明之抗體或抗體片段治療之原發性及繼發性血脂異常的一些非限制性實例包括代謝症候群、糖尿病、家族性組合高脂血症、家族性高三酸甘油酯血症、家族性高膽固醇血症，包括異型接合高膽固醇血症、同型接合高膽固醇血症、家族性缺陷脂蛋白元B-100；多基因高膽固醇血症；殘粒移除疾病、肝脂肪酶缺乏症；繼發於以下任一者之血脂異常：膳食不慎重、甲狀腺機能減退、藥物(包括雌激素及孕酮療法、β-阻斷劑及噻嗪化物利尿劑)；腎病症候群、慢性腎衰竭、庫興氏症候群、原發性膽汁性硬化、肝醣儲積症、肝細胞瘤、膽汁鬱積、肢端肥大症、胰島素瘤、單一性生長激素缺乏症及酒精誘發性高三酸甘油酯血症。本發明之抗體或抗體片段亦可適用於預防或治療動脈粥樣硬化疾病，諸如冠心病、冠狀動脈疾病、周邊動脈疾病、中風(缺血性及出血性)、心絞痛或腦血管疾病及急性冠脈症候群、心肌梗塞。在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段適用於降低以下之風險：非致命性心臟病發作、致命性及非致命性中風、某些類型之心臟手術、因心臟衰竭之住院、心臟病患者之胸痛、及/或由已有心臟病引起之心血管事件，該已有心臟病諸如先前心臟病發作、先前心臟手術及/或 伴有動脈阻塞跡象之胸痛。在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段及方法可用於降低復發性心血管事件之風險。
如將由熟習此項技術者所瞭解，通常可經由使用士他汀來解決(可治療或可預防)之疾病或病症亦可受益於應用本發明之抗體或抗體片段。此外，在一些實施例中，可受益於阻止膽固醇合成或LDLR表現增加之病症或疾病亦可藉由本發明之抗體或抗體片段之各種實施例來治療。此外，如將由熟習此項技術者所瞭解，抗PCSK9抗體之使用可尤其適用於治療糖尿病。不僅糖尿病為冠心病之風險因素，而且胰島素亦會增加PCSK9之表現。亦即，患有糖尿病之人士具有升高之血漿脂質含量(此可與高PCSK9含量相關)且可受益於降低彼等含量。此一般性地更詳細論述於Costet等人(「Hepatic PCSK9 Expression is Regulated by Nutritional Status via Insulin and Sterol Regulatory Element-binding Protein 1C」,J.Biol.Chem.,281：6211-6218,2006)中，該文獻之全文以引用的方式併入本文中。
在一些實施例中，向患有糖尿病、腹主動脈瘤、動脈粥樣硬化及/或周邊血管疾病者投與本發明之抗體或抗體片段以使其血清膽固醇含量降低至較安全範圍。在一些實施例中，向處於發展任何本文所述病症之風險中之患者投與本發明之抗體或抗體片段。在一些實施例中，向抽煙、具有高血壓或家族性早期心臟病發作病史之個體投與本發明之抗體或抗體片段。
在一些實施例中，若根據2004 NCEP治療目標，個體處於中度或較高風險中，則向其投與本發明之抗體或抗體片段。在一些實施例中，若個體之LDL-C膽固醇含量大於160mg/dL，則向該個體投與本發明之抗體或抗體片段。在一些實施例中，若個體LDL-C膽固醇含量大於130(且根據2004 NCEP治療目標，其具有中度或中高度風險)，則投與本發明之抗體或抗體片段。在一些實施例中，若個體LDL-C膽固醇含量大於100(且根據2004 NCEP治療目標，其具有高度或極高風險)，則投與本發明之抗體或抗體片段。
醫師將能夠根據特定患者之個別概況來選擇適當治療適應症及目標脂質含量。一種用於指導對高脂血症之治療之公認標準為國家 膽固醇教育計劃(NCEP)專家組關於成人高血液膽固醇之偵測、評估及治療之第三次報告(成人治療組III)最終報告(Third Report of the National Cholesterol Education Program(NCEP)Expert Panel on Detection,Evaluation,and Treatment of the High Blood Cholesterol in Adults(Adult Treatment Panel III)Final Report，國家衛生研究所(National Institutes of Health),NIH出版號02-5215(2002))，其印刷出版物據此以全文引用的方式併入本文中。
在一些實施例中，使用針對PCSK9之本發明之抗體或抗體片段來使PCSK9活性之量自異常高含量或甚至正常含量降低。在一些實施例中，使用針對PCSK9之本發明之抗體或抗體片段來治療或預防高膽固醇血症及/或製備用於高膽固醇血症及/或其他膽固醇相關病症(諸如本文所述者)之藥劑。在某些實施例中，使用針對PCSK9之本發明之抗體或抗體片段來治療或預防其中PCSK9活性正常之病狀，諸如高膽固醇血症。在此等病狀中，例如使PCSK9活性降低至正常值以下可提供治療效果。
在一些實施例中，使用一種以上針對PCSK9之本發明之抗體或抗體片段來調節PCSK9活性。
在某些實施例中，提供治療諸如高膽固醇血症之膽固醇相關病症之方法，其包含投與治療有效量之一或多種針對PCSK9之本發明之抗體或抗體片段及另一治療劑。
本發明之醫藥或診斷組合物可以組合療法，亦即與其他藥劑組合投與。在某些實施例中，組合療法包含能夠結合PCSK9之本發明之抗體或抗體片段與至少一種抗膽固醇藥劑的組合。藥劑包括(但不限於)活體外合成製備之化學組合物、抗體、抗原結合區及其組合及結合物。在某些實施例中，藥劑可充當促效劑、拮抗劑、異位調節劑或毒素。在某些實施例中，藥劑可用於抑制或刺激其目標(例如受體或酶活化或抑制)，且藉此促進LDLR之表現增加或降低血清膽固醇含量。
在某些實施例中，針對PCSK9之本發明之抗體或抗體片段可在用膽固醇降低(血清及/或總膽固醇)藥劑治療之前、同時及之後投與。在某些實施例中，針對PCSK9之本發明之抗體或抗體片段可防治性地投與以預防或緩和高膽固醇血症、心臟病、糖尿病及/或任何膽固醇相關病 症之發作。在某些實施例中，可投與針對PCSK9之本發明之抗體或抗體片段以治療現有高膽固醇血症病狀。在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段會延遲病症及/或與病症相關之症狀之發作。在一些實施例中，向缺乏任一膽固醇相關病症或其子集之任何症狀之個體提供本發明之抗體或抗體片段。
在某些實施例中，針對PCSK9之本發明之抗體或抗體片段與特定治療劑一起使用以治療各種膽固醇相關病症，諸如高膽固醇血症。在某些實施例中，鑒於病狀及所要治療程度，可投與兩種、三種或三種以上藥劑。在某些實施例中，此等藥劑可藉由包括在同一調配物中來一起提供。在某些實施例中，此(此等)藥劑及針對PCSK9之本發明之抗體或抗體片段可藉由包括在同一調配物中來一起提供。在某些實施例中，此等藥劑可分別調配且藉由包括在治療套組中來一起提供。在某些實施例中，此等藥劑及針對PCSK9之本發明之抗體或抗體片段可分別調配且藉由包括在治療套組中來一起提供。在某些實施例中，此等藥劑可分開提供。在某些實施例中，當藉由基因療法投與時，編碼蛋白質藥劑及/或針對PCSK9之本發明之抗體或抗體片段之基因可包括在同一載體中。在某些實施例中，編碼蛋白質藥劑及/或針對PCSK9之本發明之抗體或抗體片段之基因可受同一啟動子區控制。在某些實施例中，編碼蛋白質藥劑及/或針對PCSK9之本發明之抗體或抗體片段之基因可在各別載體中。
在某些實施例中，本發明提供包含針對PCSK9之本發明之抗體或抗體片段以及醫藥學上可接受之稀釋劑、載劑、增溶劑、乳化劑或防腐劑的醫藥或診斷組合物。
在某些實施例中，本發明提供包含針對PCSK9之本發明之抗體或抗體片段及治療有效量之至少一種其他治療劑以及醫藥學上可接受之稀釋劑、載劑、增溶劑、乳化劑、防腐劑及/或佐劑的醫藥或診斷組合物。
在某些實施例中，針對PCSK9之本發明之抗體或抗體片段可與至少一種用於發炎之治療劑一起使用。在某些實施例中，針對PCSK9之本發明之抗體或抗體片段可與至少一種用於免疫病症之治療劑一 起使用。用於發炎及免疫病症之示範性治療劑包括(但不限於)1型環加氧酶(COX-1)及2型環加氧酶(COX-2)抑制劑、38kDa分裂素(mitogen)活化蛋白質激酶(p38-MAPK)之小分子調節劑；發炎路徑中涉及之細胞內分子之小分子調節劑，其中此等細胞內分子包括(但不限於)jnk、IKK、NF-κB、ZAP70及lck。用於發炎之某些示範性治療劑例如描述於C.A.Dinarello及L.L.Moldawer Proinflammatory and Anti-Inflammatory Cytokines in Rheumatoid Arthritis：A Primer for Clinicians第3版(2001)Amgen公司Thousand Oaks,Calif中。
在某些實施例中，醫藥或診斷組合物將包括一種以上針對PCSK9之本發明之不同抗體或抗體片段。在某些實施例中，醫藥或診斷組合物將包括一種以上針對PCSK9之本發明之抗體或抗體片段，其中針對PCSK9之本發明之抗體或抗體片段結合一種以上抗原決定基。在一些實施例中，本發明之各種抗體或抗體片段將不彼此競爭結合PCSK9。
在某些實施例中，可接受之調配物質較佳在所用劑量及濃度下對接受者無毒。在一些實施例中，調配物質係用於皮下及/或靜脈內投與。在某些實施例中，醫藥或診斷組合物可含有用於調節、維持或保持例如組合物之pH值、容積莫耳滲透濃度、黏度、澄清度、顏色、等張性、氣味、無菌性、穩定性、溶解或釋放速率、吸收或滲透之調配物質。在某些實施例中，適合調配物質包括(但不限於)胺基酸(諸如甘胺酸、麩醯胺酸、天冬醯胺、精胺酸或離胺酸)；抗微生物劑；抗氧化劑(諸如抗壞血酸(ascorbic acid)、亞硫酸鈉或亞硫酸氫鈉)；緩衝劑(諸如硼酸鹽、碳酸氫鹽、Tris-HCl、檸檬酸鹽、磷酸鹽或其他有機酸)；增積劑(諸如甘露糖醇或甘胺酸)；螯合劑(諸如乙二胺四乙酸(EDTA))；錯合劑(諸如咖啡鹼(caffeine)、聚乙烯吡咯啶酮、β-環糊精或羥丙基-β-環糊精)；填充劑；單醣；雙醣；及其他碳水化合物(諸如葡萄糖、甘露糖或糊精)；蛋白質(諸如血清白蛋白、明膠或免疫球蛋白)；著色劑、調味劑及稀釋劑；乳化劑；親水性聚合物(諸如聚乙烯吡咯啶酮)；低分子量多肽；成鹽相對離子(諸如鈉)；防腐劑(諸如氯化苯甲烴銨、苯甲酸、水楊酸、硫柳汞(thimerosal)、苯乙醇、對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸丙酯、氯己定(chlorhexidine)、 山梨酸(sorbic acid)或過氧化氫)；溶劑(諸如甘油、丙二醇或聚乙二醇)；糖醇(諸如甘露糖醇或山梨糖醇)；懸浮劑；界面活性劑或濕潤劑(諸如普洛尼克(pluronic)、PEG、脫水山梨醇酯、聚山梨醇酯(諸如聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯80)、曲通(triton)、緩血酸胺(tromethamine)、卵磷脂(lecithin)、膽固醇、泰洛沙泊(tyloxapal))；穩定性增強劑(諸如蔗糖或山梨糖醇)；張力增強劑(諸如鹼金屬鹵化物(較佳氯化鈉或氯化鉀)、甘露糖醇山梨糖醇)；傳遞媒劑；稀釋劑；賦形劑及/或醫藥佐劑。(Remington's Pharmaceutical Sciences,第18版，A.R.Gennaro編，Mack出版公司(1995))。在一些實施例中，調配物包含PBS；20mM NaOAC(pH 5.2)、50mM NaCl；及/或10mM NAOAC(pH 5.2)、9%蔗糖。
本發明亦係有關一種與本文揭露之抗體或抗體片段結合相同PCSK9抗原決定基及/或與抗PCSK9抗體競爭結合PCSK9的抗PCSK9抗體，所述本文揭露之抗體或抗體片段包括(但不限於)選自以下之抗PCSK9抗體：Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab10、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab20、Ab21、Ab22、Ab23或Ab24。
在另一實施例中，本發明亦係有關一種經分離抗PCSK9抗體或抗體片段，其包含選自以下之VH 多肽序列中所含之一或多個CDR：SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：42、SEQ ID NO：82、SEQ ID NO：122、SEQ ID NO：162、SEQ ID NO：202、SEQ ID NO：242、SEQ ID NO：282、SEQ ID NO：322、SEQ ID NO：362、SEQ ID NO：402、SEQ ID NO：442、SEQ ID NO：482、SEQ ID NO：522、SEQ ID NO：562、SEQ ID NO：602、SEQ ID NO：642、SEQ ID NO：682、SEQ ID NO：722、SEQ ID NO：762、SEQ ID NO：802、SEQ ID NO：842、SEQ ID NO：882、SEQ ID NO：922或其變異體；及/或選自以下之VL 多肽序列中所含之一或多個CDR：SEQ ID NO：22、SEQ ID NO：62、SEQ ID NO：1O2、SEQ ID NO：142、SEQ ID NO：182、SEQ ID NO：222、SEQ ID NO：262、SEQ ID NO：302、SEQ ID NO：342、SEQ ID NO：382、SEQ ID NO：422、SEQ ID NO：462、SEQ ID NO：502、SEQ ID NO：542、SEQ ID NO：582、SEQ ID NO：622、SEQ ID NO： 662、SEQ ID NO：702、SEQ ID NO：742、SEQ ID NO：782、SEQ ID NO：822、SEQ ID NO：862、SEQ ID NO：902、SEQ ID NO：942或其變異體。
在本發明之一個實施例中，抗人類PCSK9抗體在各可變輕區及可變重區中包含至少2個與選自以下之抗人類PCSK9抗體中所含之互補決定區相同的互補決定區(CDR)：Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab10、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab20、Ab21、Ab22、Ab23或Ab24。
在一較佳實施例中，抗人類PCSK9抗體在各可變輕區及可變重區中包含至少2個與選自以下之抗人類PCSK9抗體中所含之CDR相同的互補決定區(CDR)：Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab10、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab20、Ab21、Ab22、Ab23或Ab24。在另一實施例中，抗人類PCSK9抗體之全部CDR皆與選自以下之抗人類PCSK9抗體中所含之CDR相同：Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab10、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab20、Ab21、Ab22、Ab23或Ab24。
本發明進一步預期以上論述之一或多種抗人類PCSK9抗體係經去糖基化；或缺乏或實質上缺乏N-糖基化及/或O-糖基化，例如由於Fc區編碼。此外，主題抗體可含有已經修飾以改變抗體之效應物功能、半衰期、蛋白水解或其他性質之Fc區；尤其本發明之人類、人類化或嵌合抗體可含有此等經修飾Fc區。
本發明進一步涵蓋一或多種抗人類PCSK9抗體，其中該抗體之可變輕區及可變重區中之構架區(FR)分別為未修飾或已藉由用親本兔抗體之對應FR殘基取代可變輕鏈或重鏈區中之一或多個人類FR殘基加以修飾的人類FR，且其中該等人類FR係源於人類可變重鏈及輕鏈抗體序列，該等人類可變重鏈及輕鏈抗體序列係基於其相對於人類生殖系抗體序列文庫中所含之其他人類生殖系抗體序列與對應兔可變重鏈或輕鏈區之高同源性程度而選自該文庫。
在本發明之一個實施例中，抗人類PCSK9抗體或片段特 異性結合PCSK9表現人類細胞及/或活體內循環可溶性PCSK9分子，包括在患有與表現PCSK9之細胞相關之疾病的患者之人類細胞上或由該等人類細胞表現之PCSK9。
本發明進一步涵蓋直接或間接連接於可偵測標記或治療劑之抗人類PCSK9抗體或片段。
本發明亦涵蓋一或多種導致如上所述之抗人類PCSK9抗體或抗體片段表現之核酸序列，包括包含以下或者由以下組成者：酵母或人類較佳密碼子。本發明亦涵蓋包含該(該等)核酸序列之載體(包括質體或重組病毒載體)。本發明亦涵蓋表現至少一種上述抗體之宿主細胞或重組宿主細胞，包括例如哺乳動物、酵母、真菌、細菌、植物、禽類及昆蟲細胞。在一較佳實施例中，宿主細胞為酵母或真菌或哺乳動物細胞。在另一較佳實施例中，酵母細胞為二倍體酵母細胞。在一更較佳實施例中，酵母細胞為畢赤酵母。
對PCSK9具有結合特異性之本發明之抗PCSK9抗體及其片段的抗PCSK9活性亦可藉由其對PCSK9之結合強度或其對PCSK9之親和力加以描述。在本發明之一個實施例中，對PCSK9具有結合特異性之本發明之抗PCSK9抗體及其片段結合PCSK9的解離常數(Kd )小於或等於10-2 M、5×10-3 M、10-3 M、5×10-4 M、10-4 M、5×10-5 M、10-5 M、5×10-6 M、10-6 M、5×10-7 M、10-7 M、5×10-8 M、10-8 M、5×10-9 M、10-9 M、5×10-10 M、10-10 M、5×10-11 M、10-11 M、5×10-12 M、10-12 M、5×10-13 M或10-13 M。較佳地，抗PCSK9抗體及其片段結合PCSK9之解離常數小於或等於10-11 M、5×10-12 M或10-12 M。在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之本發明之抗PCSK9抗體及其片段結合線性或構形PCSK9抗原決定基。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之本發明之抗PCSK9抗體及其片段的抗PCSK9活性結合PCSK9之解離速率小於或等於10-4 S-1 、5×10-5 S-1 、10-5 S-1 、5×10-6 S-1 、10-6 S-1 、5×10-7 S-1 或10-7 S-1 。
在本發明之另一實施例中，對PCSK9具有結合特異性之本發明之抗PCSK9抗體及其片段的抗PCSK9活性藉由預防、改善或減輕與 PCSK9相關之疾病及病症之症狀或者治療與PCSK9相關之疾病及病症來展現抗PCSK9活性。與PCSK9相關之疾病及病症之非限制性實例在本文闡述。
編碼抗PCSK9抗體多肽之聚核苷酸
抗體Ab1
在一個實施例中，本發明更係有關編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸。在本發明之一個實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼重鏈序列SEQ ID NO：1之以下聚核苷酸序列或者由編碼重鏈序列SEQ ID NO：1之以下聚核苷酸序列組成：(SEQ ID NO：11)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼 可變重鏈多肽序列SEQ ID NO：2之以下聚核苷酸序列或者由編碼可變重鏈多肽序列SEQ ID NO：2之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：12)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼恆定重鏈多肽序列SEQ ID NO：10之以下聚核苷酸序列或者由編碼恆定重鏈多肽序列SEQ ID NO：10之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：20)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼輕鏈多肽序列SEQ ID NO：21之以下聚核苷酸序列或者由編碼輕鏈多肽序列SEQ ID NO：21之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：31)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼可變輕鏈多肽序列SEQ ID NO：22之以下聚核苷酸序列或者由編碼可變輕鏈多肽序列SEQ ID NO：22之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：32)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼恆定輕鏈多肽序列SEQ ID NO：30之以下聚核苷酸序列或者由編碼恆定輕鏈多肽序列SEQ ID NO：30之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：40)。
在本發明之另一實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：對應於編碼重鏈序列SEQ ID NO：1或可變重鏈序列SEQ ID NO：2之互補決定區(CDR或高變區)之聚核苷酸的聚核苷酸序列SEQ ID NO：14；SEQ ID NO：16；及SEQ ID NO：18中之一或多者、及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：21或可變輕鏈序列SEQ ID NO：22之互補決定區(CDR或高變區)之聚核苷酸序列SEQ ID NO： 34；SEQ ID NO：36；及SEQ ID NO：38中之一或多者、或此等聚核苷酸序列之組合。在本發明之另一實施例中，編碼根據本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼上述CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部在內的聚核苷酸之組合。
在本發明之另一實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：對應於編碼重鏈序列SEQ ID NO：1或可變重鏈序列SEQ ID NO：2之構架區(FR或恆定區)之聚核苷酸的聚核苷酸序列SEQ ID NO：13；SEQ ID NO：15；SEQ ID NO：17；及SEQ ID NO：19中之一或多者、及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：21或可變輕鏈序列SEQ ID NO：22之構架區(FR或恆定區)之聚核苷酸序列SEQ ID NO：33；SEQ ID NO：35；SEQ ID NO：37；及SEQ ID NO：39中之一或多者、或此等聚核苷酸序列之組合。在本發明之另一實施例中，編碼根據本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：上述FR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部在內的組合。
本發明亦涵蓋包括編碼本文所述之抗體片段之聚核苷酸序列中之一或多者的聚核苷酸序列。在本發明之一個實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段的聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼抗體片段之以下聚核苷酸中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：編碼重鏈序列SEQ ID NO：1之聚核苷酸SEQ ID NO：11；編碼可變重鏈序列SEQ ID NO：2之聚核苷酸SEQ ID NO：12；編碼輕鏈序列SEQ ID NO：21之聚核苷酸SEQ ID NO：31；編碼可變輕鏈序列SEQ ID NO：22之聚核苷酸SEQ ID NO：32；編碼重鏈序列SEQ ID NO：1或可變重鏈序列SEQ ID NO：2之互補決定區(SEQ ID NO：14；SEQ ID NO：16；及SEQ ID NO：18)的聚核苷酸；編碼輕鏈序列SEQ ID NO：21或可變輕鏈序列SEQ ID NO：22之互補決定區(SEQ ID NO：34；SEQ ID NO：36；及SEQ ID NO：38)的聚核苷酸；編碼重鏈序列SEQ ID NO：1或可變重鏈序列SEQ ID NO：2之構架區(SEQ ID NO：13；SEQ ID NO：15；SEQ ID NO：17；及SEQ ID NO：19)的聚核苷酸；及編碼輕鏈序列SEQ ID NO：21或可變輕鏈序列SEQ ID NO：22之 構架區(SEQ ID NO：33；SEQ ID NO：35；SEQ ID NO：37；及SEQ ID NO：39)的聚核苷酸。
在本發明之一較佳實施例中，本發明之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼對PCSK9具有結合特異性之Fab(片段抗原結合)片段的聚核苷酸。就抗體Ab1而言，編碼全長Ab1抗體之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼重鏈序列SEQ ID NO：1之聚核苷酸SEQ ID NO：11及編碼輕鏈序列SEQ ID NO：21之聚核苷酸SEQ ID NO：31。
本發明之另一實施例涵蓋併入表現載體中以供在諸如CHO、NSO、HEK-293之哺乳動物細胞中或在真菌、昆蟲或微生物系統，諸如酵母細胞(諸如酵母畢赤酵母)中表現的此等聚核苷酸。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。在本文(下文)所述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由在於適合宿主中表現全長聚核苷酸之後，酶促消化(例如木瓜蛋白酶)Ab1來產生。在本發明之另一實施例中，諸如Ab1之抗PCSK9抗體或其Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞(例如二倍體酵母，諸如二倍體畢赤酵母)及其他酵母菌株)中表現Ab1聚核苷酸來產生。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。
抗體Ab2
在一個實施例中，本發明更係有關編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸。在本發明之一個實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼重鏈序列SEQ ID NO：41之以下聚核苷酸序列或者由編碼重鏈序列SEQ ID NO：41之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：51)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼可變重鏈多肽序列SEQ ID NO：42之以下聚核苷酸序列或者由編碼可變重鏈多肽序列SEQ ID NO：42之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：52)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼恆定重鏈多肽序列SEQ ID NO：50之以下聚核苷酸序列或者由編碼恆定重鏈多肽序列SEQ ID NO：50之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：60)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼輕鏈多肽序列SEQ ID NO：61之以下聚核苷酸序列或者由編碼輕鏈多肽序列SEQ ID NO：61之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：71)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼可變輕鏈多肽序列SEQ ID NO：62之以下聚核苷酸序列或者由編碼可變輕鏈多肽序列SEQ ID NO：62之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：72)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼 恆定輕鏈多肽序列SEQ ID NO：70之以下聚核苷酸序列或者由編碼恆定輕鏈多肽序列SEQ ID NO：70之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：80)。
在本發明之另一實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：對應於編碼重鏈序列SEQ ID NO：41或可變重鏈序列SEQ ID NO：42之互補決定區(CDR或高變區)之聚核苷酸的聚核苷酸序列SEQ ID NO：54；SEQ ID NO：56；及SEQ ID NO：58中之一或多者、及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：61或可變輕鏈序列SEQ ID NO：62之互補決定區(CDR或高變區)之聚核苷酸序列SEQ ID NO：74；SEQ ID NO：76；及SEQ ID NO：78中之一或多者、或此等聚核苷酸序列之組合。在本發明之另一實施例中，編碼根據本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼上述CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部在內的聚核苷酸之組合。
在本發明之另一實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：對應於編碼重鏈序列SEQ ID NO：41或可變重鏈序列SEQ ID NO：42之構架區(FR或恆定區)之聚核苷酸的聚核苷酸序列SEQ ID NO：53；SEQ ID NO：55；SEQ ID NO：57；及SEQ ID NO：59中之一或多者、及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：61或可變輕鏈序列SEQ ID NO：62之構架區(FR或恆定區)之聚核苷酸序列SEQ ID NO：73；SEQ ID NO：75；SEQ ID NO：77；及SEQ ID NO：79中之一或多者、或此等聚核苷酸序列之組合。在本發明之另一實施例中，編碼根據本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：上述FR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部在內的組合。
本發明亦涵蓋包括編碼本文所述之抗體片段之聚核苷酸序列中之一或多者的聚核苷酸序列。在本發明之一個實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段的聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼抗體片段之以下聚核苷酸中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：編碼重鏈序列SEQ ID NO：41之聚核苷酸SEQ ID NO：51；編碼可變重鏈序列SEQ ID NO：42之聚核苷酸SEQ ID NO：52；編碼輕鏈序列SEQ ID NO：61之聚核苷酸SEQ ID NO：71；編碼可變輕鏈序列SEQ ID NO：62之聚核苷酸SEQ ID NO：72；編碼重鏈序列SEQ ID NO：41或可變重鏈序列SEQ ID NO：42之互補決定區(SEQ ID NO：54；SEQ ID NO：56；及SEQ ID NO：58)的聚核苷酸；編碼輕鏈序列SEQ ID NO：61或可變輕鏈序列SEQ ID NO：62之互補決定區(SEQ ID NO：74；SEQ ID NO：76；及SEQ ID NO：78)的聚核苷酸；編碼重鏈序列SEQ ID NO：41或可變重鏈序列SEQ ID NO：42之構架區(SEQ ID NO：53；SEQ ID NO：55；SEQ ID NO：57；及SEQ ID NO：59)的聚核苷酸；及編碼輕鏈序列SEQ ID NO：61或可變輕鏈序列SEQ ID NO：62之構架區(SEQ ID NO：73；SEQ ID NO：75；SEQ ID NO：77；及SEQ ID NO：79)的聚核苷酸。
在本發明之一較佳實施例中，本發明之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼對PCSK9具有結合特異性之Fab(片段抗原結合)片段的聚核苷酸。就抗體Ab2而言，編碼全長Ab2抗體之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼重鏈序列SEQ ID NO：41之聚核苷酸SEQ ID NO：51及編碼輕鏈序列SEQ ID NO：61之聚核苷酸SEQ ID NO：71。
本發明之另一實施例涵蓋併入表現載體中以供在諸如CHO、NSO、HEK-293之哺乳動物細胞中或在真菌、昆蟲或微生物系統，諸如酵母細胞(諸如酵母畢赤酵母)中表現的此等聚核苷酸。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。在本文(下文)所述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由在於適合宿主中表現全長聚核苷酸之後，酶促消化(例如木瓜蛋白酶)Ab2來產生。在本發明之另一實施例中，諸如Ab2之抗PCSK9抗體或其Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞(例如二倍體酵母，諸 如二倍體畢赤酵母)及其他酵母菌株)中表現Ab2聚核苷酸來產生。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。
抗體Ab3
在一個實施例中，本發明更係有關編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸。在本發明之一個實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼重鏈序列SEQ ID NO：81之以下聚核苷酸序列或者由編碼重鏈序列SEQ ID NO：81之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：91)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼可變重鏈多肽序列SEQ ID NO：82之以下聚核苷酸序列或者由編碼可變重 鏈多肽序列SEQ ID NO：82之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：92)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼恆定重鏈多肽序列SEQ ID NO：90之以下聚核苷酸序列或者由編碼恆定重鏈多肽序列SEQ ID NO：90之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：100)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼輕鏈多肽序列SEQ ID NO：101之以下聚核苷酸序列或者由編碼輕鏈多肽序列SEQ ID NO：101之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：111)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼可變輕鏈多肽序列SEQ ID NO：102之以下聚核苷酸序列或者由編碼可變輕鏈多肽序列SEQ ID NO：102之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：112)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼恆定輕鏈多肽序列SEQ ID NO：110之以下聚核苷酸序列或者由編碼恆定輕鏈多肽序列SEQ ID NO：110之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：120)。
在本發明之另一實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：對應於編碼重鏈序列SEQ ID NO：81或可變重鏈序列SEQ ID NO：82之互補決定區(CDR或高變區)之聚核苷酸的聚核苷酸序列SEQ ID NO：94；SEQ ID NO：96；及SEQ ID NO：98中之一或多者、及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：101或可變輕鏈序列SEQ ID NO：102之互補決定區(CDR或高變區)之聚核苷酸序列SEQ ID NO：114；SEQ ID NO：116；及SEQ ID NO：118中之一或多者、或此等聚核 苷酸序列之組合。在本發明之另一實施例中，編碼根據本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼上述CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部在內的聚核苷酸之組合。
在本發明之另一實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：對應於編碼重鏈序列SEQ ID NO：81或可變重鏈序列SEQ ID NO：82之構架區(FR或恆定區)之聚核苷酸的聚核苷酸序列SEQ ID NO：93；SEQ ID NO：95；SEQ ID NO：97；及SEQ ID NO：99中之一或多者、及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：101或可變輕鏈序列SEQ ID NO：102之構架區(FR或恆定區)之聚核苷酸序列SEQ ID NO：113；SEQ ID NO：115；SEQ ID NO：117；及SEQ ID NO：119中之一或多者、或此等聚核苷酸序列之組合。在本發明之另一實施例中，編碼根據本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：上述FR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部在內的組合。
本發明亦涵蓋包括編碼本文所述之抗體片段之聚核苷酸序列中之一或多者的聚核苷酸序列。在本發明之一個實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段的聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼抗體片段之以下聚核苷酸中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：編碼重鏈序列SEQ ID NO：81之聚核苷酸SEQ ID NO：91；編碼可變重鏈序列SEQ ID NO：82之聚核苷酸SEQ ID NO：92；編碼輕鏈序列SEQ ID NO：101之聚核苷酸SEQ ID NO：111；編碼可變輕鏈序列SEQ ID NO：102之聚核苷酸SEQ ID NO：112；編碼重鏈序列SEQ ID NO：81或可變重鏈序列SEQ ID NO：82之互補決定區(SEQ ID NO：94；SEQ ID NO：96；及SEQ ID NO：98)的聚核苷酸；編碼輕鏈序列SEQ ID NO：101或可變輕鏈序列SEQ ID NO：102之互補決定區(SEQ ID NO：114；SEQ ID NO：116；及SEQ ID NO：118)的聚核苷酸；編碼重鏈序列SEQ ID NO：81或可變重鏈序列SEQ ID NO：82之構架區(SEQ ID NO：93；SEQ ID NO：95；SEQ ID NO：97；及SEQ ID NO：99)的聚核苷酸；及編碼輕鏈序列SEQ ID NO：101或可變輕鏈 序列SEQ ID NO：102之構架區(SEQ ID NO：113；SEQ ID NO：115；SEQ ID NO：117；及SEQ ID NO：119)的聚核苷酸。
在本發明之一較佳實施例中，本發明之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼對PCSK9具有結合特異性之Fab(片段抗原結合)片段的聚核苷酸。就抗體Ab3而言，編碼全長Ab3抗體之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼重鏈序列SEQ ID NO：81之聚核苷酸SEQ ID NO：91及編碼輕鏈序列SEQ ID NO：101之聚核苷酸SEQ ID NO：111。
本發明之另一實施例涵蓋併入表現載體中以供在諸如CHO、NSO、HEK-293之哺乳動物細胞中或在真菌、昆蟲或微生物系統，諸如酵母細胞(諸如酵母畢赤酵母)中表現的此等聚核苷酸。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。在本文(下文)所述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由在於適合宿主中表現全長聚核苷酸之後，酶促消化(例如木瓜蛋白酶)Ab3來產生。在本發明之另一實施例中，諸如Ab3之抗PCSK9抗體或其Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞(例如二倍體酵母，諸如二倍體畢赤酵母)及其他酵母菌株)中表現Ab3聚核苷酸來產生。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。
抗體Ab4
在一個實施例中，本發明更係有關編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸。在本發明之一個實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼重鏈序列SEQ ID NO：121之以下聚核苷酸序列或者由編碼重鏈序列SEQ ID NO：121之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：131)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼可變重鏈多肽序列SEQ ID NO：122之以下聚核苷酸序列或者由編碼可變重鏈多肽序列SEQ ID NO：122之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：132)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼恆定重鏈多肽序列SEQ ID NO：130之以下聚核苷酸序列或者由編碼恆定重鏈多肽序列SEQ ID NO：130之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：140)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼輕鏈多肽序列SEQ ID NO：141之以下聚核苷酸序列或者由編碼輕鏈多肽序列SEQ ID NO：141之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：151)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼可變輕鏈多肽序列SEQ ID NO：142之以下聚核苷酸序列或者由編碼可變輕鏈多肽序列SEQ ID NO：142之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：152)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼 恆定輕鏈多肽序列SEQ ID NO：150之以下聚核苷酸序列或者由編碼恆定輕鏈多肽序列SEQ ID NO：150之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：160)。
在本發明之另一實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：對應於編碼重鏈序列SEQ ID NO：121或可變重鏈序列SEQ ID NO：122之互補決定區(CDR或高變區)之聚核苷酸的聚核苷酸序列SEQ ID NO：134；SEQ ID NO：136；及SEQ ID NO：138中之一或多者、及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：141或可變輕鏈序列SEQ ID NO：142之互補決定區(CDR或高變區)之聚核苷酸序列SEQ ID NO：154；SEQ ID NO：156；及SEQ ID NO：158中之一或多者、或此等聚核苷酸序列之組合。在本發明之另一實施例中，編碼根據本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼上述CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部在內的聚核苷酸之組合。
在本發明之另一實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：對應於編碼重鏈序列SEQ ID NO：121或可變重鏈序列SEQ ID NO：122之構架區(FR或恆定區)之聚核苷酸的聚核苷酸序列SEQ ID NO：133；SEQ ID NO：135；SEQ ID NO：137；及SEQ ID NO：139中之一或多者、及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：141或可變輕鏈序列SEQ ID NO：142之構架區(FR或恆定區)之聚核苷酸序列SEQ ID NO：153；SEQ ID NO：155；SEQ ID NO：157；及SEQ ID NO：159中之一或多者、或此等聚核苷酸序列之組合。在本發明之另一實施例中，編碼根據本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：上述FR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部在內的組合。
本發明亦涵蓋包括編碼本文所述之抗體片段之聚核苷酸序列中之一或多者的聚核苷酸序列。在本發明之一個實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段的聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼抗體片段之以下聚核苷酸中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：編碼重鏈序列SEQ ID NO：121之聚核苷酸SEQ ID NO：131；編碼可變重鏈序列SEQ ID NO：122之聚核苷酸SEQ ID NO：132；編碼輕鏈序列SEQ ID NO：141之聚核苷酸SEQ ID NO：151；編碼可變輕鏈序列SEQ ID NO：142之聚核苷酸SEQ ID NO：152；編碼重鏈序列SEQ ID NO：121或可變重鏈序列SEQ ID NO：122之互補決定區(SEQ ID NO：134；SEQ ID NO：136；及SEQ ID NO：138)的聚核苷酸；編碼輕鏈序列SEQ ID NO：141或可變輕鏈序列SEQ ID NO：142之互補決定區(SEQ ID NO：154；SEQ ID NO：156；及SEQ ID NO：158)的聚核苷酸；編碼重鏈序列SEQ ID NO：121或可變重鏈序列SEQ ID NO：122之構架區(SEQ ID NO：133；SEQ ID NO：135；SEQ ID NO：137；及SEQ ID NO：139)的聚核苷酸；及編碼輕鏈序列SEQ ID NO：141或可變輕鏈序列SEQ ID NO：142之構架區(SEQ ID NO：153；SEQ ID NO：155；SEQ ID NO：157；及SEQ ID NO：159)的聚核苷酸。
在本發明之一較佳實施例中，本發明之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼對PCSK9具有結合特異性之Fab(片段抗原結合)片段的聚核苷酸。就抗體Ab4而言，編碼全長Ab4抗體之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼重鏈序列SEQ ID NO：121之聚核苷酸SEQ ID NO：131及編碼輕鏈序列SEQ ID NO：141之聚核苷酸SEQ ID NO：151。
本發明之另一實施例涵蓋併入表現載體中以供在諸如CHO、NSO、HEK-293之哺乳動物細胞中或在真菌、昆蟲或微生物系統，諸如酵母細胞(諸如酵母畢赤酵母)中表現的此等聚核苷酸。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。在本文(下文)所述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由在於適合宿主中表現全長聚核苷酸之後，酶促消化(例如木瓜蛋白酶)Ab4來產生。在本發明之另一實施例中，諸如Ab4之抗PCSK9抗體或其Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞(例如二倍體酵母，諸 如二倍體畢赤酵母)及其他酵母菌株)中表現Ab4聚核苷酸來產生。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。
抗體Ab5
在一個實施例中，本發明更係有關編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸。在本發明之一個實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼重鏈序列SEQ ID NO：161之以下聚核苷酸序列或者由編碼重鏈序列SEQ ID NO：161之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：171)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼可變重鏈多肽序列SEQ ID NO：162之以下聚核苷酸序列或者由編碼可變重鏈多肽序列SEQ ID NO：162之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：172)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼恆定重鏈多肽序列SEQ ID NO：170之以下聚核苷酸序列或者由編碼恆定重鏈多肽序列SEQ ID NO：170之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：180)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼輕鏈多肽序列SEQ ID NO：181之以下聚核苷酸序列或者由編碼輕鏈多肽序列SEQ ID NO：181之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：191)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼可變輕鏈多肽序列SEQ ID NO：182之以下聚核苷酸序列或者由編碼可變輕鏈多肽序列SEQ ID NO：182之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：192)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼恆定輕鏈多肽序列SEQ ID NO：190之以下聚核苷酸序列或者由編碼恆定輕鏈多肽序列SEQ ID NO：190之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：200)。
在本發明之另一實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：對應於編碼重鏈序列SEQ ID NO：161或可變重鏈序列SEQ ID NO：162之互補決定區(CDR或高變區)之聚核苷酸的聚核苷酸序列SEQ ID NO：174；SEQ ID NO：176；及SEQ ID NO：178中之一或多者、及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：181或可變輕鏈序列SEQ ID NO：182之互補決定區(CDR或高變區)之聚核苷酸序列SEQ ID NO：194；SEQ ID NO：196；及SEQ ID NO：198中之一或多者、或此等聚核苷酸序列之組合。在本發明之另一實施例中，編碼根據本發明之抗體 或其片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼上述CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部在內的聚核苷酸之組合。
在本發明之另一實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：對應於編碼重鏈序列SEQ ID NO：161或可變重鏈序列SEQ ID NO：162之構架區(FR或恆定區)之聚核苷酸的聚核苷酸序列SEQ ID NO：173；SEQ ID NO：175；SEQ ID NO：177；及SEQ ID NO：179中之一或多者、及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：181或可變輕鏈序列SEQ ID NO：182之構架區(FR或恆定區)之聚核苷酸序列SEQ ID NO：193；SEQ ID NO：195；SEQ ID NO：197；及SEQ ID NO：199中之一或多者、或此等聚核苷酸序列之組合。在本發明之另一實施例中，編碼根據本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：上述FR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部在內的組合。
本發明亦涵蓋包括編碼本文所述之抗體片段之聚核苷酸序列中之一或多者的聚核苷酸序列。在本發明之一個實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段的聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼抗體片段之以下聚核苷酸中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：編碼重鏈序列SEQ ID NO：161之聚核苷酸SEQ ID NO：171；編碼可變重鏈序列SEQ ID NO：162之聚核苷酸SEQ ID NO：172；編碼輕鏈序列SEQ ID NO：181之聚核苷酸SEQ ID NO：191；編碼可變輕鏈序列SEQ ID NO：182之聚核苷酸SEQ ID NO：192；編碼重鏈序列SEQ ID NO：161或可變重鏈序列SEQ ID NO：162之互補決定區(SEQ ID NO：174；SEQ ID NO：176；及SEQ ID NO：178)的聚核苷酸；編碼輕鏈序列SEQ ID NO：181或可變輕鏈序列SEQ ID NO：182之互補決定區(SEQ ID NO：194；SEQ ID NO：196；及SEQ ID NO：198)的聚核苷酸；編碼重鏈序列SEQ ID NO：161或可變重鏈序列SEQ ID NO：162之構架區(SEQ ID NO：173；SEQ ID NO：175；SEQ ID NO：177；及SEQ ID NO：179)的聚核苷酸；及編碼輕鏈序列SEQ ID NO：181或可變輕鏈序列SEQ ID NO：182之構架區(SEQ ID NO：193；SEQ ID NO：195；SEQ ID NO：197；及SEQ ID NO：199)的聚核苷酸。
在本發明之一較佳實施例中，本發明之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼對PCSK9具有結合特異性之Fab(片段抗原結合)片段的聚核苷酸。就抗體Ab5而言，編碼全長Ab5抗體之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼重鏈序列SEQ ID NO：161之聚核苷酸SEQ ID NO：171及編碼輕鏈序列SEQ ID NO：181之聚核苷酸SEQ ID NO：191。
本發明之另一實施例涵蓋併入表現載體中以供在諸如CHO、NSO、HEK-293之哺乳動物細胞中或在真菌、昆蟲或微生物系統，諸如酵母細胞(諸如酵母畢赤酵母)中表現的此等聚核苷酸。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。在本文(下文)所述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由在於適合宿主中表現全長聚核苷酸之後，酶促消化(例如木瓜蛋白酶)Ab5來產生。在本發明之另一實施例中，諸如Ab5之抗PCSK9抗體或其Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞(例如二倍體酵母，諸如二倍體畢赤酵母)及其他酵母菌株)中表現Ab5聚核苷酸來產生。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。
抗體Ab6
在一個實施例中，本發明更係有關編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸。在本發明之一個實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼重鏈序列SEQ ID NO：201之以下聚核苷酸序列或者由編碼重鏈序列SEQ ID NO：201之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：211)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼可變重鏈多肽序列SEQ ID NO：202之以下聚核苷酸序列或者由編碼可變重鏈多肽序列SEQ ID NO：202之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：212)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼恆定重鏈多肽序列SEQ ID NO：210之以下聚核苷酸序列或者由編碼恆定重鏈多肽序列SEQ ID NO：210之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：220)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼輕鏈多肽序列SEQ ID NO：221之以下聚核苷酸序列或者由編碼輕鏈多肽序列SEQ ID NO：221之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：231)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼可變輕鏈多肽序列SEQ ID NO：222之以下聚核苷酸序列或者由編碼可變輕鏈多肽序列SEQ ID NO：222之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：232)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼 恆定輕鏈多肽序列SEQ ID NO：230之以下聚核苷酸序列或者由編碼恆定輕鏈多肽序列SEQ ID NO：230之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：240)。
在本發明之另一實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：對應於編碼重鏈序列SEQ ID NO：201或可變重鏈序列SEQ ID NO：202之互補決定區(CDR或高變區)之聚核苷酸的聚核苷酸序列SEQ ID NO：214；SEQ ID NO：216；及SEQ ID NO：218中之一或多者、及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：221或可變輕鏈序列SEQ ID NO：222之互補決定區(CDR或高變區)之聚核苷酸序列SEQ ID NO：234；SEQ ID NO：236；及SEQ ID NO：238中之一或多者、或此等聚核苷酸序列之組合。在本發明之另一實施例中，編碼根據本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼上述CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部在內的聚核苷酸之組合。
在本發明之另一實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：對應於編碼重鏈序列SEQ ID NO：201或可變重鏈序列SEQ ID NO：202之構架區(FR或恆定區)之聚核苷酸的聚核苷酸序列SEQ ID NO：213；SEQ ID NO：215；SEQ ID NO：217；及SEQ ID NO：219中之一或多者、及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：221或可變輕鏈序列SEQ ID NO：222之構架區(FR或恆定區)之聚核苷酸序列SEQ ID NO：233；SEQ ID NO：235；SEQ ID NO：237；及SEQ ID NO：239中之一或多者、或此等聚核苷酸序列之組合。在本發明之另一實施例中，編碼根據本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：上述FR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部在內的組合。
本發明亦涵蓋包括編碼本文所述之抗體片段之聚核苷酸序列中之一或多者的聚核苷酸序列。在本發明之一個實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段的聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼抗體片段之以下聚核苷酸中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：編碼重鏈序列SEQ ID NO：201之聚核苷酸SEQ ID NO：211；編碼可變重鏈序列SEQ ID NO：202之聚核苷酸SEQ ID NO：212；編碼輕鏈序列SEQ ID NO：221之聚核苷酸SEQ ID NO：231；編碼可變輕鏈序列SEQ ID NO：222之聚核苷酸SEQ ID NO：232；編碼重鏈序列SEQ ID NO：201或可變重鏈序列SEQ ID NO：202之互補決定區(SEQ ID NO：214；SEQ ID NO：216；及SEQ ID NO：218)的聚核苷酸；編碼輕鏈序列SEQ ID NO：221或可變輕鏈序列SEQ ID NO：222之互補決定區(SEQ ID NO：234；SEQ ID NO：236；及SEQ ID NO：238)的聚核苷酸；編碼重鏈序列SEQ ID NO：201或可變重鏈序列SEQ ID NO：202之構架區(SEQ ID NO：213；SEQ ID NO：215；SEQ ID NO：217；及SEQ ID NO：219)的聚核苷酸；及編碼輕鏈序列SEQ ID NO：221或可變輕鏈序列SEQ ID NO：222之構架區(SEQ ID NO：233；SEQ ID NO：235；SEQ ID NO：237；及SEQ ID NO：239)的聚核苷酸。
在本發明之一較佳實施例中，本發明之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼對PCSK9具有結合特異性之Fab(片段抗原結合)片段的聚核苷酸。就抗體Ab6而言，編碼全長Ab6抗體之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼重鏈序列SEQ ID NO：201之聚核苷酸SEQ ID NO：211及編碼輕鏈序列SEQ ID NO：221之聚核苷酸SEQ ID NO：231。
本發明之另一實施例涵蓋併入表現載體中以供在諸如CHO、NSO、HEK-293之哺乳動物細胞中或在真菌、昆蟲或微生物系統，諸如酵母細胞(諸如酵母畢赤酵母)中表現的此等聚核苷酸。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。在本文(下文)所述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由在於適合宿主中表現全長聚核苷酸之後，酶促消化(例如木瓜蛋白酶)Ab6來產生。在本發明之另一實施例中，諸如Ab6之抗PCSK9抗體或其Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞(例如二倍體酵母，諸 如二倍體畢赤酵母)及其他酵母菌株)中表現Ab6聚核苷酸來產生。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。
抗體Ab7
在一個實施例中，本發明更係有關編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸。在本發明之一個實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼重鏈序列SEQ ID NO：241之以下聚核苷酸序列或者由編碼重鏈序列SEQ ID NO：241之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：251)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼可變重鏈多肽序列SEQ ID NO：242之以下聚核苷酸序列或者由編碼可變重鏈多肽序列SEQ ID NO：242之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：252)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼恆定重鏈多肽序列SEQ ID NO：250之以下聚核苷酸序列或者由編碼恆定重鏈多肽序列SEQ ID NO：250之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：260)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼輕鏈多肽序列SEQ ID NO：261之以下聚核苷酸序列或者由編碼輕鏈多肽序列SEQ ID NO：261之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：271)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼可變輕鏈多肽序列SEQ ID NO：262之以下聚核苷酸序列或者由編碼可變輕鏈多肽序列SEQ ID NO：262之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：272)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼恆定輕鏈多肽序列SEQ ID NO：270之以下聚核苷酸序列或者由編碼恆定輕鏈多肽序列SEQ ID NO：270之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：280)。
在本發明之另一實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：對應於編碼重鏈序列SEQ ID NO：241或可變重鏈序列SEQ ID NO：242之互補決定區(CDR或高變區)之聚核苷酸的聚核苷酸序列SEQ ID NO：254；SEQ ID NO：256；及SEQ ID NO：258中之一或多者、及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：261或可變輕鏈序列SEQ ID NO：262之互補決定區(CDR或高變區)之聚核苷酸序列SEQ ID NO：274；SEQ ID NO：276；及SEQ ID NO：278中之一或多者、或此等 聚核苷酸序列之組合。在本發明之另一實施例中，編碼根據本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼上述CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部在內的聚核苷酸之組合。
在本發明之另一實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：對應於編碼重鏈序列SEQ ID NO：241或可變重鏈序列SEQ ID NO：242之構架區(FR或恆定區)之聚核苷酸的聚核苷酸序列SEQ ID NO：253；SEQ ID NO：255；SEQ ID NO：257；及SEQ ID NO：259中之一或多者、及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：261或可變輕鏈序列SEQ ID NO：262之構架區(FR或恆定區)之聚核苷酸序列SEQ ID NO：273；SEQ ID NO：275；SEQ ID NO：277；及SEQ ID NO：279中之一或多者、或此等聚核苷酸序列之組合。在本發明之另一實施例中，編碼根據本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：上述FR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部在內的組合。
本發明亦涵蓋包括編碼本文所述之抗體片段之聚核苷酸序列中之一或多者的聚核苷酸序列。在本發明之一個實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段的聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼抗體片段之以下聚核苷酸中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：編碼重鏈序列SEQ ID NO：241之聚核苷酸SEQ ID NO：251；編碼可變重鏈序列SEQ ID NO：242之聚核苷酸SEQ ID NO：252；編碼輕鏈序列SEQ ID NO：261之聚核苷酸SEQ ID NO：271；編碼可變輕鏈序列SEQ ID NO：262之聚核苷酸SEQ ID NO：272；編碼重鏈序列SEQ ID NO：241或可變重鏈序列SEQ ID NO：242之互補決定區(SEQ ID NO：254；SEQ ID NO：256；及SEQ ID NO：258)的聚核苷酸；編碼輕鏈序列SEQ ID NO：261或可變輕鏈序列SEQ ID NO：262之互補決定區(SEQ ID NO：274；SEQ ID NO：276；及SEQ ID NO：278)的聚核苷酸；編碼重鏈序列SEQ ID NO：241或可變重鏈序列SEQ ID NO：242之構架區(SEQ ID NO：253；SEQ ID NO：255；SEQ ID NO：257；及SEQ ID NO：259)的聚核苷酸；及編碼輕鏈序列SEQ ID NO： 261或可變輕鏈序列SEQ ID NO：262之構架區(SEQ ID NO：273；SEQ ID NO：275；SEQ ID NO：277；及SEQ ID NO：279)的聚核苷酸。
在本發明之一較佳實施例中，本發明之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼對PCSK9具有結合特異性之Fab(片段抗原結合)片段的聚核苷酸。就抗體Ab7而言，編碼全長Ab7抗體之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼重鏈序列SEQ ID NO：241之聚核苷酸SEQ ID NO：251及編碼輕鏈序列SEQ ID NO：261之聚核苷酸SEQ ID NO：271。
本發明之另一實施例涵蓋併入表現載體中以供在諸如CHO、NSO、HEK-293之哺乳動物細胞中或在真菌、昆蟲或微生物系統，諸如酵母細胞(諸如酵母畢赤酵母)中表現的此等聚核苷酸。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。在本文(下文)所述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由在於適合宿主中表現全長聚核苷酸之後，酶促消化(例如木瓜蛋白酶)Ab7來產生。在本發明之另一實施例中，諸如Ab7之抗PCSK9抗體或其Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞(例如二倍體酵母，諸如二倍體畢赤酵母)及其他酵母菌株)中表現Ab7聚核苷酸來產生。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。
抗體Ab8
在一個實施例中，本發明更係有關編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸。在本發明之一個實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼重鏈序列SEQ ID NO：281之以下聚核苷酸序列或者由編碼重鏈序列SEQ ID NO：281之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：291)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼可變重鏈多肽序列SEQ ID NO：282之以下聚核苷酸序列或者由編碼可變重鏈多肽序列SEQ ID NO：282之以下聚核苷酸序列組成：(SEQ ID NO：292)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼恆定重鏈多肽序列SEQ ID NO：290之以下聚核苷酸序列或者由編碼恆定重鏈多肽序列SEQ ID NO：290之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：300)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼輕鏈多肽序列SEQ ID NO：301之以下聚核苷酸序列或者由編碼輕鏈多肽序列SEQ ID NO：301之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：311)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼可變輕鏈多肽序列SEQ ID NO：302之以下聚核苷酸序列或者由編碼可變輕鏈多肽序列SEQ ID NO：302之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：312)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼恆定輕鏈多肽序列SEQ ID NO：310之以下聚核苷酸序列或者由編碼恆定輕鏈多肽序列SEQ ID NO：310之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：320)。
在本發明之另一實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：對應於編碼重鏈序列SEQ ID NO：281或可變重鏈序列SEQ ID NO：282之互補決定區(CDR或高變區)之聚核苷酸的聚核苷酸序列SEQ ID NO：294；SEQ ID NO：296；及SEQ ID NO：298中之一或多者、及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：301或可變輕鏈序列SEQ ID NO：302之互補決定區(CDR或高變區)之聚核苷酸序列SEQ ID NO：314；SEQ ID NO：316；及SEQ ID NO：318中之一或多者、或此等聚核苷酸序列之組合。在本發明之另一實施例中，編碼根據本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼上述CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部在內的聚核苷酸之組合。
在本發明之另一實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：對應於編碼重鏈序列SEQ ID NO：281或可變重鏈序列SEQ ID NO：282之構架區(FR或恆定區)之聚核苷酸的聚核苷酸序列SEQ ID NO：293；SEQ ID NO：295；SEQ ID NO：297；及SEQ ID NO：299中之一或多者、及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：301或可變輕鏈序列SEQ ID NO：302之構架區(FR或恆定區)之聚核苷酸序列SEQ ID NO：313；SEQ ID NO：315；SEQ ID NO：317；及SEQ ID NO：319中之一或多者、或此等聚核苷酸序列之組合。在本發明之另一實施例中，編碼根據本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：上述FR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其 全部在內的組合。
本發明亦涵蓋包括編碼本文所述之抗體片段之聚核苷酸序列中之一或多者的聚核苷酸序列。在本發明之一個實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段的聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼抗體片段之以下聚核苷酸中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：編碼重鏈序列SEQ ID NO：281之聚核苷酸SEQ ID NO：291；編碼可變重鏈序列SEQ ID NO：282之聚核苷酸SEQ ID NO：292；編碼輕鏈序列SEQ ID NO：301之聚核苷酸SEQ ID NO：311；編碼可變輕鏈序列SEQ ID NO：302之聚核苷酸SEQ ID NO：312；編碼重鏈序列SEQ ID NO：281或可變重鏈序列SEQ ID NO：282之互補決定區(SEQ ID NO：294；SEQ ID NO：296；及SEQ ID NO：298)的聚核苷酸；編碼輕鏈序列SEQ ID NO：301或可變輕鏈序列SEQ ID NO：302之互補決定區(SEQ ID NO：314；SEQ ID NO：316；及SEQ ID NO：318)的聚核苷酸；編碼重鏈序列SEQ ID NO：281或可變重鏈序列SEQ ID NO：282之構架區(SEQ ID NO：293；SEQ ID NO：295；SEQ ID NO：297；及SEQ ID NO：299)的聚核苷酸；及編碼輕鏈序列SEQ ID NO：301或可變輕鏈序列SEQ ID NO：302之構架區(SEQ ID NO：313；SEQ ID NO：315；SEQ ID NO：317；及SEQ ID NO：319)的聚核苷酸。
在本發明之一較佳實施例中，本發明之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼對PCSK9具有結合特異性之Fab(片段抗原結合)片段的聚核苷酸。就抗體Ab8而言，編碼全長Ab8抗體之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼重鏈序列SEQ ID NO：281之聚核苷酸SEQ ID NO：291及編碼輕鏈序列SEQ ID NO：301之聚核苷酸SEQ ID NO：311。
本發明之另一實施例涵蓋併入表現載體中以供在諸如CHO、NSO、HEK-293之哺乳動物細胞中或在真菌、昆蟲或微生物系統，諸如酵母細胞(諸如酵母畢赤酵母)中表現的此等聚核苷酸。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。在本文(下文)所述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由在於適合宿主中表現全長聚核苷酸之後，酶促消化(例如木瓜蛋白酶)Ab8來產生。在本發明之另一實施例中，諸如Ab8之抗PCSK9抗體或其Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞(例如二倍體酵母，諸如二倍體畢赤酵母)及其他酵母菌株)中表現Ab8聚核苷酸來產生。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。
抗體Ab9
在一個實施例中，本發明更係有關編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸。在本發明之一個實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼重鏈序列SEQ ID NO：321之以下聚核苷酸序列或者由編碼重鏈序列SEQ ID NO：321之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：331)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼可變重鏈多肽序列SEQ ID NO：322之以下聚核苷酸序列或者由編碼可變重 鏈多肽序列SEQ ID NO：322之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：332)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼恆定重鏈多肽序列SEQ ID NO：330之以下聚核苷酸序列或者由編碼恆定重鏈多肽序列SEQ ID NO：330之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：340)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼輕鏈多肽序列SEQ ID NO：341之以下聚核苷酸序列或者由編碼輕鏈多肽序列SEQ ID NO：341之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：351)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼可變輕鏈多肽序列SEQ ID NO：342之以下聚核苷酸序列或者由編碼可變輕鏈多肽序列SEQ ID NO：342之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：352)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼恆定輕鏈多肽序列SEQ ID NO：350之以下聚核苷酸序列或者由編碼恆定輕鏈多肽序列SEQ ID NO：350之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：360)。
在本發明之另一實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：對應於編碼重鏈序列SEQ ID NO：321或可變重鏈序列SEQ ID NO：322之互補決定區(CDR或高變區)之聚核苷酸的聚核苷酸序列SEQ ID NO：334；SEQ ID NO：336；及SEQ ID NO：338中之一或多者、及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：341或可變輕鏈序列SEQ ID NO：342之互補決定區(CDR或高變區)之聚核苷酸序列SEQ ID NO：354；SEQ ID NO：356；及SEQ ID NO：358中之一或多者、或此等聚核苷酸序列之組合。在本發明之另一實施例中，編碼根據本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼上述CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部在內的聚核苷酸之組合。
在本發明之另一實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：對應於編碼重鏈序列SEQ ID NO：321或可變重鏈序列SEQ ID NO：322之構架區(FR或恆定區)之聚核苷酸的聚核苷酸序列SEQ ID NO：333；SEQ ID NO：335；SEQ ID NO：337；及SEQ ID NO：339中之一或多者、及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：341或可變輕鏈序列SEQ ID NO：342之構架區(FR或恆定區)之聚核苷酸序列SEQ ID NO：353；SEQ ID NO：355；SEQ ID NO：357；及SEQ ID NO：359中之一或多者、或此等聚核苷酸序列之組合。在本發明之另一實施例中，編碼根據本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：上述FR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部在內的組合。
本發明亦涵蓋包括編碼本文所述之抗體片段之聚核苷酸序列中之一或多者的聚核苷酸序列。在本發明之一個實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段的聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼抗體片段之以下聚核苷酸中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：編碼重鏈序列SEQ ID NO：321之聚核苷酸SEQ ID NO：331；編碼可變重鏈序列SEQ ID NO：322之聚核苷酸SEQ ID NO：332；編碼輕鏈序列SEQ ID NO：341之聚核苷酸SEQ ID NO：351；編碼可變輕鏈序列SEQ ID NO：342之聚核苷酸SEQ ID NO：352；編碼重鏈序列SEQ ID NO：321或可變重鏈序列SEQ ID NO：322之互補決定區(SEQ ID NO：334；SEQ ID NO：336；及SEQ ID NO：338)的聚核苷酸；編碼輕鏈序列SEQ ID NO：341或可變輕鏈序列SEQ ID NO：342之互補決定區(SEQ ID NO：354；SEQ ID NO：356；及SEQ ID NO：358)的聚核苷酸；編碼重鏈序列SEQ ID NO：321或可變重鏈序列SEQ ID NO：322之構架區(SEQ ID NO：333；SEQ ID NO：335；SEQ ID NO：337；及SEQ ID NO：339)的聚核苷酸；及編碼輕鏈序列SEQ ID NO：341或可變輕鏈序列SEQ ID NO：342之構架區(SEQ ID NO：353；SEQ ID NO：355；SEQ ID NO：357；及SEQ ID NO：359)的聚核苷酸。
在本發明之一較佳實施例中，本發明之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼對PCSK9具有結合特異性之Fab(片段抗原結合)片段的聚核苷酸。就抗體Ab9而言，編碼全長Ab9抗體之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼重鏈序列SEQ ID NO：321之聚核苷酸SEQ ID NO：331及編碼輕鏈序列SEQ ID NO：341之聚核苷酸SEQ ID NO：351。
本發明之另一實施例涵蓋併入表現載體中以供在諸如CHO、NSO、HEK-293之哺乳動物細胞中或在真菌、昆蟲或微生物系統，諸如酵母細胞(諸如酵母畢赤酵母)中表現的此等聚核苷酸。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。在本文(下文)所述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由在於適合宿主中表現全長聚核苷酸之後，酶促消化(例如木瓜蛋白酶)Ab9來產生。在本發明之另一實施例中，諸如Ab9之抗PCSK9抗體或其Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞(例如二倍體酵母，諸如二倍體畢赤酵母)及其他酵母菌株)中表現Ab9聚核苷酸來產生。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。
抗體Ab10
在一個實施例中，本發明更係有關編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸。在本發明之一個實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼重鏈序列SEQ ID NO：361之以下聚核苷酸序列或者由編碼重鏈序列SEQ ID NO：361之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：371)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼可變重鏈多肽序列SEQ ID NO：362之以下聚核苷酸序列或者由編碼可變重鏈多肽序列SEQ ID NO：362之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：372)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼恆定重鏈多肽序列SEQ ID NO：370之以下聚核苷酸序列或者由編碼恆定重鏈多肽序列SEQ ID NO：370之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：380)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼輕鏈多肽序列SEQ ID NO：381之以下聚核苷酸序列或者由編碼輕鏈多肽序列SEQ ID NO：381之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：391)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼可變輕鏈多肽序列SEQ ID NO：382之以下聚核苷酸序列或者由編碼可變輕鏈多肽序列SEQ ID NO：382之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：392)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼恆定輕鏈多肽序列SEQ ID NO：390之以下聚核苷酸序列或者由編碼恆定輕鏈多肽序列SEQ ID NO：390之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：400)。
在本發明之另一實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：對應於編碼重鏈序列SEQ ID NO：361或可變重鏈序列SEQ ID NO：362之互補決定區(CDR或高變區)之聚核苷酸的聚核苷酸序列SEQ ID NO：374；SEQ ID NO：376；及SEQ ID NO：378中之一或多者、及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：381或可變輕鏈序列SEQ ID NO：382之互補決定區(CDR或高變區)之聚核苷酸序列SEQ ID NO：394；SEQ ID NO：396；及SEQ ID NO：398中之一或多者、或此等聚核苷酸序列之組合。在本發明之另一實施例中，編碼根據本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼上述CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部在內的聚核苷酸之組合。
在本發明之另一實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：對應於編碼重鏈序列SEQ ID NO：361或可變重鏈序列SEQ ID NO：362之構架區(FR或恆定區)之聚核苷酸的聚核苷酸序列SEQ ID NO：373；SEQ ID NO：375；SEQ ID NO：377；及SEQ ID NO：379中之一或多者、及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：381或可變輕鏈序列SEQ ID NO：382之構架區(FR或恆定區)之聚核苷酸序列SEQ ID NO：393；SEQ ID NO：395；SEQ ID NO：397；及SEQ ID NO：399中之一或多者、或此等聚核苷酸序列之組合。在本發明之另一實施例中，編碼根據本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：上 述FR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部在內的組合。
本發明亦涵蓋包括編碼本文所述之抗體片段之聚核苷酸序列中之一或多者的聚核苷酸序列。在本發明之一個實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段的聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼抗體片段之以下聚核苷酸中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：編碼重鏈序列SEQ ID NO：361之聚核苷酸SEQ ID NO：371；編碼可變重鏈序列SEQ ID NO：362之聚核苷酸SEQ ID NO：372；編碼輕鏈序列SEQ ID NO：381之聚核苷酸SEQ ID NO：391；編碼可變輕鏈序列SEQ ID NO：382之聚核苷酸SEQ ID NO：392；編碼重鏈序列SEQ ID NO：361或可變重鏈序列SEQ ID NO：362之互補決定區(SEQ ID NO：374；SEQ ID NO：376；及SEQ ID NO：378)的聚核苷酸；編碼輕鏈序列SEQ ID NO：381或可變輕鏈序列SEQ ID NO：382之互補決定區(SEQ ID NO：394；SEQ ID NO：396；及SEQ ID NO：398)的聚核苷酸；編碼重鏈序列SEQ ID NO：361或可變重鏈序列SEQ ID NO：362之構架區(SEQ ID NO：373；SEQ ID NO：375；SEQ ID NO：377；及SEQ ID NO：379)的聚核苷酸；及編碼輕鏈序列SEQ ID NO：381或可變輕鏈序列SEQ ID NO：382之構架區(SEQ ID NO：393；SEQ ID NO：395；SEQ ID NO：397；及SEQ ID NO：399)的聚核苷酸。
在本發明之一較佳實施例中，本發明之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼對PCSK9具有結合特異性之Fab(片段抗原結合)片段的聚核苷酸。就抗體Ab10而言，編碼全長Ab10抗體之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼重鏈序列SEQ ID NO：361之聚核苷酸SEQ ID NO：371及編碼輕鏈序列SEQ ID NO：381之聚核苷酸SEQ ID NO：391。
本發明之另一實施例涵蓋併入表現載體中以供在諸如CHO、NSO、HEK-293之哺乳動物細胞中或在真菌、昆蟲或微生物系統，諸如酵母細胞(諸如酵母畢赤酵母)中表現的此等聚核苷酸。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。在本文(下文)所述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由在於適合宿主中表現全長聚核苷酸之後，酶促消化(例如木瓜蛋白酶)Ab10來產生。在本發明之另一實施例中，諸如Ab10之抗 PCSK9抗體或其Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞(例如二倍體酵母，諸如二倍體畢赤酵母)及其他酵母菌株)中表現Ab10聚核苷酸來產生。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。
抗體Ab11
在一個實施例中，本發明更係有關編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸。在本發明之一個實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼重鏈序列SEQ ID NO：401之以下聚核苷酸序列或者由編碼重鏈序列SEQ ID NO：401之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：411)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼 可變重鏈多肽序列SEQ ID NO：402之以下聚核苷酸序列或者由編碼可變重鏈多肽序列SEQ ID NO：402之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：412)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼恆定重鏈多肽序列SEQ ID NO：410之以下聚核苷酸序列或者由編碼恆定重鏈多肽序列SEQ ID NO：410之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：420)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼輕鏈多肽序列SEQ ID NO：421之以下聚核苷酸序列或者由編碼輕鏈多肽序列SEQ ID NO：421之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：431)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼可變輕鏈多肽序列SEQ ID NO：422之以下聚核苷酸序列或者由編碼可變輕鏈多肽序列SEQ ID NO：422之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：432)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼恆定輕鏈多肽序列SEQ ID NO：430之以下聚核苷酸序列或者由編碼恆定輕鏈多肽序列SEQ ID NO：430之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：440)。
在本發明之另一實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：對應於編碼重鏈序列SEQ ID NO：401或可變重鏈序列SEQ ID NO：402之互補決定區(CDR或高變區)之聚核苷酸的聚核苷酸序列SEQ ID NO：414；SEQ ID NO：416；及SEQ ID NO：418中之一或多者、及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：421或可變輕 鏈序列SEQ ID NO：422之互補決定區(CDR或高變區)之聚核苷酸序列SEQ ID NO：434；SEQ ID NO：436；及SEQ ID NO：438中之一或多者、或此等聚核苷酸序列之組合。在本發明之另一實施例中，編碼根據本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼上述CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部在內的聚核苷酸之組合。
在本發明之另一實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：對應於編碼重鏈序列SEQ ID NO：401或可變重鏈序列SEQ ID NO：402之構架區(FR或恆定區)之聚核苷酸的聚核苷酸序列SEQ ID NO：413；SEQ ID NO：415；SEQ ID NO：417；及SEQ ID NO：419中之一或多者、及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：421或可變輕鏈序列SEQ ID NO：422之構架區(FR或恆定區)之聚核苷酸序列SEQ ID NO：433；SEQ ID NO：435；SEQ ID NO：437；及SEQ ID NO：439中之一或多者、或此等聚核苷酸序列之組合。在本發明之另一實施例中，編碼根據本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：上述FR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部在內的組合。
本發明亦涵蓋包括編碼本文所述之抗體片段之聚核苷酸序列中之一或多者的聚核苷酸序列。在本發明之一個實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段的聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼抗體片段之以下聚核苷酸中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：編碼重鏈序列SEQ ID NO：401之聚核苷酸SEQ ID NO：411；編碼可變重鏈序列SEQ ID NO：402之聚核苷酸SEQ ID NO：412；編碼輕鏈序列SEQ ID NO：421之聚核苷酸SEQ ID NO：431；編碼可變輕鏈序列SEQ ID NO：422之聚核苷酸SEQ ID NO：432；編碼重鏈序列SEQ ID NO：401或可變重鏈序列SEQ ID NO：402之互補決定區(SEQ ID NO：414；SEQ ID NO：416；及SEQ ID NO：418)的聚核苷酸；編碼輕鏈序列SEQ ID NO：421或可變輕鏈序列SEQ ID NO：422之互補決定區(SEQ ID NO：434；SEQ ID NO：436；及SEQ ID NO：438)的聚核苷酸；編碼重鏈序列SEQ ID NO：401或可變重鏈序 列SEQ ID NO：402之構架區(SEQ ID NO：413；SEQ ID NO：415；SEQ ID NO：417；及SEQ ID NO：419)的聚核苷酸；及編碼輕鏈序列SEQ ID NO：421或可變輕鏈序列SEQ ID NO：422之構架區(SEQ ID NO：433；SEQ ID NO：435；SEQ ID NO：437；及SEQ ID NO：439)的聚核苷酸。
在本發明之一較佳實施例中，本發明之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼對PCSK9具有結合特異性之Fab(片段抗原結合)片段的聚核苷酸。就抗體Ab11而言，編碼全長Ab11抗體之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼重鏈序列SEQ ID NO：401之聚核苷酸SEQ ID NO：411及編碼輕鏈序列SEQ ID NO：421之聚核苷酸SEQ ID NO：431。
本發明之另一實施例涵蓋併入表現載體中以供在諸如CHO、NSO、HEK-293之哺乳動物細胞中或在真菌、昆蟲或微生物系統，諸如酵母細胞(諸如酵母畢赤酵母)中表現的此等聚核苷酸。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。在本文(下文)所述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由在於適合宿主中表現全長聚核苷酸之後，酶促消化(例如木瓜蛋白酶)Ab11來產生。在本發明之另一實施例中，諸如Ab11之抗PCSK9抗體或其Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞(例如二倍體酵母，諸如二倍體畢赤酵母)及其他酵母菌株)中表現Ab11聚核苷酸來產生。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。
抗體Ab12
在一個實施例中，本發明更係有關編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸。在本發明之一個實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼重鏈序列SEQ ID NO：441之以下聚核苷酸序列或者由編碼重鏈序列SEQ ID NO：441之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：451)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼可變重鏈多肽序列SEQ ID NO：442之以下聚核苷酸序列或者由編碼可變重鏈多肽序列SEQ ID NO：442之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：452)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼恆定重鏈多肽序列SEQ ID NO：450之以下聚核苷酸序列或者由編碼恆定重鏈多肽序列SEQ ID NO：450之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：460)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼輕鏈多肽序列SEQ ID NO：461之以下聚核苷酸序列或者由編碼輕鏈多肽序列SEQ ID NO：461之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：471)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼可變輕鏈多肽序列SEQ ID NO：462之以下聚核苷酸序列或者由編碼可變輕鏈多肽序列SEQ ID NO：462之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：472)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼恆定輕鏈多肽序列SEQ ID NO：470之以下聚核苷酸序列或者由編碼恆定輕鏈多肽序列SEQ ID NO：470之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：480)。
在本發明之另一實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：對應於編碼重鏈序列SEQ ID NO：441或可變重鏈序列SEQ ID NO：442之互補決定區(CDR或高變區)之聚核苷酸的聚核苷酸序列SEQ ID NO：454；SEQ ID NO：456；及SEQ ID NO：458中之一或多者、及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：461或可變輕鏈序列SEQ ID NO：462之互補決定區(CDR或高變區)之聚核苷酸序列SEQ ID NO：474；SEQ ID NO：476；及SEQ ID NO：478中之一或多者、或此等聚核苷酸序列之組合。在本發明之另一實施例中，編碼根據本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼上述CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部在內的聚核苷酸之組合。
在本發明之另一實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：對應於編碼重鏈序列SEQ ID NO：441或可變重鏈序列SEQ ID NO：442之構架區(FR或恆定區)之聚核苷酸的聚核苷酸序列SEQ ID NO：453；SEQ ID NO：455；SEQ ID NO：457；及SEQ ID NO：459中之一或多者、及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：461或可變輕鏈序列SEQ ID NO：462之構架區(FR或恆定區)之聚核苷酸序列SEQ ID NO：473；SEQ ID NO：475；SEQ ID NO：477；及SEQ ID NO：479中之一或多者、或此等聚核苷酸序列之組合。在本發明之另一實施例中， 編碼根據本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：上述FR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部在內的組合。
本發明亦涵蓋包括編碼本文所述之抗體片段之聚核苷酸序列中之一或多者的聚核苷酸序列。在本發明之一個實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段的聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼抗體片段之以下聚核苷酸中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：編碼重鏈序列SEQ ID NO：441之聚核苷酸SEQ ID NO：451；編碼可變重鏈序列SEQ ID NO：442之聚核苷酸SEQ ID NO：452；編碼輕鏈序列SEQ ID NO：461之聚核苷酸SEQ ID NO：471；編碼可變輕鏈序列SEQ ID NO：462之聚核苷酸SEQ ID NO：472；編碼重鏈序列SEQ ID NO：441或可變重鏈序列SEQ ID NO：442之互補決定區(SEQ ID NO：454；SEQ ID NO：456；及SEQ ID NO：458)的聚核苷酸；編碼輕鏈序列SEQ ID NO：461或可變輕鏈序列SEQ ID NO：462之互補決定區(SEQ ID NO：474；SEQ ID NO：476；及SEQ ID NO：478)的聚核苷酸；編碼重鏈序列SEQ ID NO：441或可變重鏈序列SEQ ID NO：442之構架區(SEQ ID NO：453；SEQ ID NO：455；SEQ ID NO：457；及SEQ ID NO：459)的聚核苷酸；及編碼輕鏈序列SEQ ID NO：461或可變輕鏈序列SEQ ID NO：462之構架區(SEQ ID NO：473；SEQ ID NO：475；SEQ ID NO：477；及SEQ ID NO：479)的聚核苷酸。
在本發明之一較佳實施例中，本發明之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼對PCSK9具有結合特異性之Fab(片段抗原結合)片段的聚核苷酸。就抗體Ab12而言，編碼全長Ab12抗體之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼重鏈序列SEQ ID NO：441之聚核苷酸SEQ ID NO：451及編碼輕鏈序列SEQ ID NO：461之聚核苷酸SEQ ID NO：471。
本發明之另一實施例涵蓋併入表現載體中以供在諸如CHO、NSO、HEK-293之哺乳動物細胞中或在真菌、昆蟲或微生物系統，諸如酵母細胞(諸如酵母畢赤酵母)中表現的此等聚核苷酸。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。在本文(下文)所述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由在於適合宿主中表現全長聚核苷酸之後，酶促消化(例 如木瓜蛋白酶)Ab12來產生。在本發明之另一實施例中，諸如Ab12之抗PCSK9抗體或其Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞(例如二倍體酵母，諸如二倍體畢赤酵母)及其他酵母菌株)中表現Ab12聚核苷酸來產生。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。
抗體Ab13
在一個實施例中，本發明更係有關編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸。在本發明之一個實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼重鏈序列SEQ ID NO：481之以下聚核苷酸序列或者由編碼重鏈序列SEQ ID NO：481之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：491)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼可變重鏈多肽序列SEQ ID NO：482之以下聚核苷酸序列或者由編碼可變重鏈多肽序列SEQ ID NO：482之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：492)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼恆定重鏈多肽序列SEQ ID NO：490之以下聚核苷酸序列或者由編碼恆定重鏈多肽序列SEQ ID NO：490之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：500)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼輕鏈多肽序列SEQ ID NO：501之以下聚核苷酸序列或者由編碼輕鏈多肽序列SEQ ID NO：501之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：511)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼可變輕鏈多肽序列SEQ ID NO：502之以下聚核苷酸序列或者由編碼可變輕鏈多肽序列SEQ ID NO：502之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：512)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼恆定輕鏈多肽序列SEQ ID NO：510之以下聚核苷酸序列或者由編碼恆定輕鏈多肽序列SEQ ID NO：510之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：520)。
在本發明之另一實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：對應於編碼重鏈序列SEQ ID NO：481或可變重鏈序列SEQ ID NO：482之互補決定區(CDR或高變區)之聚核苷酸的聚核苷酸序列SEQ ID NO：494；SEQ ID NO：496；及SEQ ID NO：498中之一或多者、及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：501或可變輕鏈序列SEQ ID NO：502之互補決定區(CDR或高變區)之聚核苷酸序列SEQ ID NO：514；SEQ ID NO：516；及SEQ ID NO：518中之一或多者、或此等聚核苷酸序列之組合。在本發明之另一實施例中，編碼根據本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼上述CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部在內的聚核苷酸之組合。
在本發明之另一實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：對應於編碼重鏈序列SEQ ID NO：481或可變重鏈序列SEQ ID NO：482之構架區(FR或恆定區)之聚核苷酸的聚核苷酸序列SEQ ID NO：493；SEQ ID NO：495；SEQ ID NO：497；及SEQ ID NO：499中之一或多者、及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：501或可變輕鏈序列SEQ ID NO：502之構架區(FR或恆定區)之聚核苷酸序列SEQ ID NO：513；SEQ ID NO：515；SEQ ID NO：517；及SEQ ID NO：519中之一或多者、或此等聚核苷酸序列之組合。在本發明之另一實施例中，編碼根據本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：上述FR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部在內的組合。
本發明亦涵蓋包括編碼本文所述之抗體片段之聚核苷酸序列中之一或多者的聚核苷酸序列。在本發明之一個實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段的聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼抗體片段之以下聚核苷酸中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：編碼重鏈序列SEQ ID NO：481之聚核苷酸SEQ ID NO：491；編碼可變重鏈序列SEQ ID NO：482之聚核苷酸SEQ ID NO：492；編碼輕鏈序列SEQ ID NO：501之聚核苷酸SEQ ID NO：511；編碼可變輕鏈序列SEQ ID NO：502之聚核苷酸SEQ ID NO：512；編碼重鏈序列SEQ ID NO：481或可變重鏈序列SEQ ID NO：482之互補決定區(SEQ ID NO：494；SEQ ID NO：496；及SEQ ID NO：498)的聚核苷酸；編碼輕鏈序列SEQ ID NO：501或可變輕鏈序列SEQ ID NO：502之互補決定區(SEQ ID NO：514；SEQ ID NO：516；及 SEQ ID NO：518)的聚核苷酸；編碼重鏈序列SEQ ID NO：481或可變重鏈序列SEQ ID NO：482之構架區(SEQ ID NO：493；SEQ ID NO：495；SEQ ID NO：497；及SEQ ID NO：499)的聚核苷酸；及編碼輕鏈序列SEQ ID NO：501或可變輕鏈序列SEQ ID NO：502之構架區(SEQ ID NO：513；SEQ ID NO：515；SEQ ID NO：517；及SEQ ID NO：519)的聚核苷酸。
在本發明之一較佳實施例中，本發明之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼對PCSK9具有結合特異性之Fab(片段抗原結合)片段的聚核苷酸。就抗體Ab13而言，編碼全長Ab13抗體之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼重鏈序列SEQ ID NO：481之聚核苷酸SEQ ID NO：491及編碼輕鏈序列SEQ ID NO：501之聚核苷酸SEQ ID NO：511。
本發明之另一實施例涵蓋併入表現載體中以供在諸如CHO、NSO、HEK-293之哺乳動物細胞中或在真菌、昆蟲或微生物系統，諸如酵母細胞(諸如酵母畢赤酵母)中表現的此等聚核苷酸。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。在本文(下文)所述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由在於適合宿主中表現全長聚核苷酸之後，酶促消化(例如木瓜蛋白酶)Ab13來產生。在本發明之另一實施例中，諸如Ab13之抗PCSK9抗體或其Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞(例如二倍體酵母，諸如二倍體畢赤酵母)及其他酵母菌株)中表現Ab13聚核苷酸來產生。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。
抗體Ab14
在一個實施例中，本發明更係有關編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸。在本發明之一個實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼重鏈序列SEQ ID NO：521之以下聚核苷酸序列或者由編碼重鏈序列SEQ ID NO：521之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：531)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼可變重鏈多肽序列SEQ ID NO：522之以下聚核苷酸序列或者由編碼可變重鏈多肽序列SEQ ID NO：522之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：532)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼恆定重鏈多肽序列SEQ ID NO：530之以下聚核苷酸序列或者由編碼恆定重鏈多肽序列SEQ ID NO：530之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：540)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼輕鏈多肽序列SEQ ID NO：541之以下聚核苷酸序列或者由編碼輕鏈多肽序列SEQ ID NO：541之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：551)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼可變輕鏈多肽序列SEQ ID NO：542之以下聚核苷酸序列或者由編碼可變輕鏈多肽序列SEQ ID NO：542之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：552)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼恆定輕鏈多肽序列SEQ ID NO：550之以下聚核苷酸序列或者由編碼恆定輕鏈多肽序列SEQ ID NO：550之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：560)。
在本發明之另一實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：對應於編碼重鏈序列SEQ ID NO：521或可變重鏈序列SEQ ID NO：522之互補決定區(CDR或高變區)之聚核苷酸的聚核苷酸序列SEQ ID NO：534；SEQ ID NO：536；及SEQ ID NO：538中之一或多者、及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：541或可變輕鏈序列SEQ ID NO：542之互補決定區(CDR或高變區)之聚核苷酸序列SEQ ID NO：554；SEQ ID NO：556；及SEQ ID NO：558中之一或多者、或此等聚核苷酸序列之組合。在本發明之另一實施例中，編碼根據本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼上述CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部在內的聚核苷酸之組合。
在本發明之另一實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：對應於編碼重鏈序列SEQ ID NO：521或可變重鏈序列SEQ ID NO：522之構架區(FR或恆定區)之聚核苷酸的聚核苷酸序列SEQ ID NO：533；SEQ ID NO：535；SEQ ID NO：537；及SEQ ID NO：539中之一或多者、及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：541或可變輕鏈序列SEQ ID NO：542之構架區(FR或恆定區)之聚核苷酸序列SEQ ID NO：553；SEQ ID NO：555；SEQ ID NO：557；及SEQ ID NO：559 中之一或多者、或此等聚核苷酸序列之組合。在本發明之另一實施例中，編碼根據本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：上述FR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部在內的組合。
本發明亦涵蓋包括編碼本文所述之抗體片段之聚核苷酸序列中之一或多者的聚核苷酸序列。在本發明之一個實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段的聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼抗體片段之以下聚核苷酸中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：編碼重鏈序列SEQ ID NO：521之聚核苷酸SEQ ID NO：531；編碼可變重鏈序列SEQ ID NO：522之聚核苷酸SEQ ID NO：532；編碼輕鏈序列SEQ ID NO：541之聚核苷酸SEQ ID NO：551；編碼可變輕鏈序列SEQ ID NO：542之聚核苷酸SEQ ID NO：552；編碼重鏈序列SEQ ID NO：521或可變重鏈序列SEQ ID NO：522之互補決定區(SEQ ID NO：534；SEQ ID NO：536；及SEQ ID NO：538)的聚核苷酸；編碼輕鏈序列SEQ ID NO：541或可變輕鏈序列SEQ ID NO：542之互補決定區(SEQ ID NO：554；SEQ ID NO：556；及SEQ ID NO：558)的聚核苷酸；編碼重鏈序列SEQ ID NO：521或可變重鏈序列SEQ ID NO：522之構架區(SEQ ID NO：533；SEQ ID NO：535；SEQ ID NO：537；及SEQ ID NO：539)的聚核苷酸；及編碼輕鏈序列SEQ ID NO：541或可變輕鏈序列SEQ ID NO：542之構架區(SEQ ID NO：553；SEQ ID NO：555；SEQ ID NO：557；及SEQ ID NO：559)的聚核苷酸。
在本發明之一較佳實施例中，本發明之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼對PCSK9具有結合特異性之Fab(片段抗原結合)片段的聚核苷酸。就抗體Ab14而言，編碼全長Ab14抗體之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼重鏈序列SEQ ID NO：521之聚核苷酸SEQ ID NO：531及編碼輕鏈序列SEQ ID NO：541之聚核苷酸SEQ ID NO：551。
本發明之另一實施例涵蓋併入表現載體中以供在諸如CHO、NSO、HEK-293之哺乳動物細胞中或在真菌、昆蟲或微生物系統，諸如酵母細胞(諸如酵母畢赤酵母)中表現的此等聚核苷酸。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。在本文(下文)所述之本發明之一個實施例 中，Fab片段可藉由在於適合宿主中表現全長聚核苷酸之後，酶促消化(例如木瓜蛋白酶)Ab14來產生。在本發明之另一實施例中，諸如Ab14之抗PCSK9抗體或其Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞(例如二倍體酵母，諸如二倍體畢赤酵母)及其他酵母菌株)中表現Ab14聚核苷酸來產生。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。
抗體Ab15
在一個實施例中，本發明更係有關編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸。在本發明之一個實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼重鏈序列SEQ ID NO：561之以下聚核苷酸序列或者由編碼重鏈序列SEQ ID NO：561之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：571)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼可變重鏈多肽序列SEQ ID NO：562之以下聚核苷酸序列或者由編碼可變重鏈多肽序列SEQ ID NO：562之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：572)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼恆定重鏈多肽序列SEQ ID NO：570之以下聚核苷酸序列或者由編碼恆定重鏈多肽序列SEQ ID NO：570之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：580)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼輕鏈多肽序列SEQ ID NO：581之以下聚核苷酸序列或者由編碼輕鏈多肽序 列SEQ ID NO：581之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：591)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼可變輕鏈多肽序列SEQ ID NO：582之以下聚核苷酸序列或者由編碼可變輕鏈多肽序列SEQ ID NO：582之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：592)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼恆定輕鏈多肽序列SEQ ID NO：590之以下聚核苷酸序列或者由編碼恆定輕鏈多肽序列SEQ ID NO：590之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：600)。
在本發明之另一實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：對應於編碼重鏈序列SEQ ID NO：561或可變重鏈序列SEQ ID NO：562之互補決定區(CDR或高變 區)之聚核苷酸的聚核苷酸序列SEQ ID NO：574；SEQ ID NO：576；及SEQ ID NO：578中之一或多者、及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：581或可變輕鏈序列SEQ ID NO：582之互補決定區(CDR或高變區)之聚核苷酸序列SEQ ID NO：594；SEQ ID NO：596；及SEQ ID NO：598中之一或多者、或此等聚核苷酸序列之組合。在本發明之另一實施例中，編碼根據本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼上述CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部在內的聚核苷酸之組合。
在本發明之另一實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：對應於編碼重鏈序列SEQ ID NO：561或可變重鏈序列SEQ ID NO：562之構架區(FR或恆定區)之聚核苷酸的聚核苷酸序列SEQ ID NO：573；SEQ ID NO：575；SEQ ID NO：577；及SEQ ID NO：579中之一或多者、及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：581或可變輕鏈序列SEQ ID NO：582之構架區(FR或恆定區)之聚核苷酸序列SEQ ID NO：593；SEQ ID NO：595；SEQ ID NO：597；及SEQ ID NO：599中之一或多者、或此等聚核苷酸序列之組合。在本發明之另一實施例中，編碼根據本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：上述FR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部在內的組合。
本發明亦涵蓋包括編碼本文所述之抗體片段之聚核苷酸序列中之一或多者的聚核苷酸序列。在本發明之一個實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段的聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼抗體片段之以下聚核苷酸中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：編碼重鏈序列SEQ ID NO：561之聚核苷酸SEQ ID NO：571；編碼可變重鏈序列SEQ ID NO：562之聚核苷酸SEQ ID NO：572；編碼輕鏈序列SEQ ID NO：581之聚核苷酸SEQ ID NO：591；編碼可變輕鏈序列SEQ ID NO：582之聚核苷酸SEQ ID NO：592；編碼重鏈序列SEQ ID NO：561或可變重鏈序列SEQ ID NO：562之互補決定區(SEQ ID NO：574；SEQ ID NO：576；及SEQ ID NO：578)的聚核苷酸；編碼輕鏈序列SEQ ID NO：581或可變輕鏈序 列SEQ ID NO：582之互補決定區(SEQ ID NO：594；SEQ ID NO：596；及SEQ ID NO：598)的聚核苷酸；編碼重鏈序列SEQ ID NO：561或可變重鏈序列SEQ ID NO：562之構架區(SEQ ID NO：573；SEQ ID NO：575；SEQ ID NO：577；及SEQ ID NO：579)的聚核苷酸；及編碼輕鏈序列SEQ ID NO：581或可變輕鏈序列SEQ ID NO：582之構架區(SEQ ID NO：593；SEQ ID NO：595；SEQ ID NO：597；及SEQ ID NO：599)的聚核苷酸。
在本發明之一較佳實施例中，本發明之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼對PCSK9具有結合特異性之Fab(片段抗原結合)片段的聚核苷酸。就抗體Ab15而言，編碼全長Ab15抗體之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼重鏈序列SEQ ID NO：561之聚核苷酸SEQ ID NO：571及編碼輕鏈序列SEQ ID NO：581之聚核苷酸SEQ ID NO：591。
本發明之另一實施例涵蓋併入表現載體中以供在諸如CHO、NSO、HEK-293之哺乳動物細胞中或在真菌、昆蟲或微生物系統，諸如酵母細胞(諸如酵母畢赤酵母)中表現的此等聚核苷酸。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。在本文(下文)所述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由在於適合宿主中表現全長聚核苷酸之後，酶促消化(例如木瓜蛋白酶)Ab15來產生。在本發明之另一實施例中，諸如Ab15之抗PCSK9抗體或其Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞(例如二倍體酵母，諸如二倍體畢赤酵母)及其他酵母菌株)中表現Ab15聚核苷酸來產生。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。
抗體Ab16
在一個實施例中，本發明更係有關編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸。在本發明之一個實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼重鏈序列SEQ ID NO：601之以下聚核苷酸序列或者由編碼重鏈序列SEQ ID NO：601之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：611)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼可變重鏈多肽序列SEQ ID NO：602之以下聚核苷酸序列或者由編碼可變重鏈多肽序列SEQ ID NO：602之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：612)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼恆定重鏈多肽序列SEQ ID NO：610之以下聚核苷酸序列或者由編碼恆定重鏈多肽序列SEQ ID NO：610之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：620)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼輕鏈多肽序列SEQ ID NO：621之以下聚核苷酸序列或者由編碼輕鏈多肽序列SEQ ID NO：621之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：631)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼可變輕鏈多肽序列SEQ ID NO：622之以下聚核苷酸序列或者由編碼可變輕鏈多肽序列SEQ ID NO：622之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：632)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼恆定輕鏈多肽序列SEQ ID NO：630之以下聚核苷酸序列或者由編碼恆定輕鏈多肽序列SEQ ID NO：630之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：640)。
在本發明之另一實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：對應於編碼重鏈序列SEQ ID NO：601或可變重鏈序列SEQ ID NO：602之互補決定區(CDR或高變區)之聚核苷酸的聚核苷酸序列SEQ ID NO：614；SEQ ID NO：616；及SEQ ID NO：618中之一或多者、及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：621或可變輕鏈序列SEQ ID NO：622之互補決定區(CDR或高變區)之聚核苷酸序列SEQ ID NO：634；SEQ ID NO：636；及SEQ ID NO：638中之一或多者、或此等聚核苷酸序列之組合。在本發明之另一實施例中，編碼根據本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼上述CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部在內的聚核苷酸之組合。
在本發明之另一實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：對應於編碼重鏈序列SEQ ID NO：601或可變重鏈序列SEQ ID NO：602之構架區(FR或恆定區)之聚核苷酸的聚核苷酸序列SEQ ID NO：613；SEQ ID NO：615；SEQ ID NO：617；及SEQ ID NO：619中之一或多者、及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：621或可變輕鏈序列SEQ ID NO：622之構架區(FR或恆定區)之聚核苷酸序列 SEQ ID NO：633；SEQ ID NO：635；SEQ ID NO：637；及SEQ ID NO：639中之一或多者、或此等聚核苷酸序列之組合。在本發明之另一實施例中，編碼根據本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：上述FR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部在內的組合。
本發明亦涵蓋包括編碼本文所述之抗體片段之聚核苷酸序列中之一或多者的聚核苷酸序列。在本發明之一個實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段的聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼抗體片段之以下聚核苷酸中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：編碼重鏈序列SEQ ID NO：601之聚核苷酸SEQ ID NO：611；編碼可變重鏈序列SEQ ID NO：602之聚核苷酸SEQ ID NO：612；編碼輕鏈序列SEQ ID NO：621之聚核苷酸SEQ ID NO：631；編碼可變輕鏈序列SEQ ID NO：622之聚核苷酸SEQ ID NO：632；編碼重鏈序列SEQ ID NO：601或可變重鏈序列SEQ ID NO：602之互補決定區(SEQ ID NO：614；SEQ ID NO：616；及SEQ ID NO：618)的聚核苷酸；編碼輕鏈序列SEQ ID NO：621或可變輕鏈序列SEQ ID NO：622之互補決定區(SEQ ID NO：634；SEQ ID NO：636；及SEQ ID NO：638)的聚核苷酸；編碼重鏈序列SEQ ID NO：601或可變重鏈序列SEQ ID NO：602之構架區(SEQ ID NO：613；SEQ ID NO：615；SEQ ID NO：617；及SEQ ID NO：619)的聚核苷酸；及編碼輕鏈序列SEQ ID NO：621或可變輕鏈序列SEQ ID NO：622之構架區(SEQ ID NO：633；SEQ ID NO：635；SEQ ID NO：637；及SEQ ID NO：639)的聚核苷酸。
在本發明之一較佳實施例中，本發明之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼對PCSK9具有結合特異性之Fab(片段抗原結合)片段的聚核苷酸。就抗體Ab16而言，編碼全長Ab16抗體之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼重鏈序列SEQ ID NO：601之聚核苷酸SEQ ID NO：611及編碼輕鏈序列SEQ ID NO：621之聚核苷酸SEQ ID NO：631。
本發明之另一實施例涵蓋併入表現載體中以供在諸如CHO、NSO、HEK-293之哺乳動物細胞中或在真菌、昆蟲或微生物系統，諸如酵母細胞(諸如酵母畢赤酵母)中表現的此等聚核苷酸。適合畢赤酵母 物種包括(但不限於)畢赤酵母。在本文(下文)所述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由在於適合宿主中表現全長聚核苷酸之後，酶促消化(例如木瓜蛋白酶)Ab16來產生。在本發明之另一實施例中，諸如Ab16之抗PCSK9抗體或其Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞(例如二倍體酵母，諸如二倍體畢赤酵母)及其他酵母菌株)中表現Ab16聚核苷酸來產生。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。
抗體Ab17
在一個實施例中，本發明更係有關編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸。在本發明之一個實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼重鏈序列SEQ ID NO：641之以下聚核苷酸序列或者由編碼重鏈序列SEQ ID NO：641之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：651)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼可變重鏈多肽序列SEQ ID NO：642之以下聚核苷酸序列或者由編碼可變重鏈多肽序列SEQ ID NO：642之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：652)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼恆定重鏈多肽序列SEQ ID NO：650之以下聚核苷酸序列或者由編碼恆定重鏈多肽序列SEQ ID NO：650之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：660)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼 輕鏈多肽序列SEQ ID NO：661之以下聚核苷酸序列或者由編碼輕鏈多肽序列SEQ ID NO：661之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：671)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼可變輕鏈多肽序列SEQ ID NO：662之以下聚核苷酸序列或者由編碼可變輕鏈多肽序列SEQ ID NO：662之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：672)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼恆定輕鏈多肽序列SEQ ID NO：670之以下聚核苷酸序列或者由編碼恆定輕鏈多肽序列SEQ ID NO：670之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：680)。
在本發明之另一實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：對應於編碼重鏈序列 SEQ ID NO：641或可變重鏈序列SEQ ID NO：642之互補決定區(CDR或高變區)之聚核苷酸的聚核苷酸序列SEQ ID NO：654；SEQ ID NO：656；及SEQ ID NO：658中之一或多者、及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：661或可變輕鏈序列SEQ ID NO：662之互補決定區(CDR或高變區)之聚核苷酸序列SEQ ID NO：674；SEQ ID NO：676；及SEQ ID NO：678中之一或多者、或此等聚核苷酸序列之組合。在本發明之另一實施例中，編碼根據本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼上述CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部在內的聚核苷酸之組合。
在本發明之另一實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：對應於編碼重鏈序列SEQ ID NO：641或可變重鏈序列SEQ ID NO：642之構架區(FR或恆定區)之聚核苷酸的聚核苷酸序列SEQ ID NO：653；SEQ ID NO：655；SEQ ID NO：657；及SEQ ID NO：659中之一或多者、及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：661或可變輕鏈序列SEQ ID NO：662之構架區(FR或恆定區)之聚核苷酸序列SEQ ID NO：673；SEQ ID NO：675；SEQ ID NO：677；及SEQ ID NO：679中之一或多者、或此等聚核苷酸序列之組合。在本發明之另一實施例中，編碼根據本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：上述FR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部在內的組合。
本發明亦涵蓋包括編碼本文所述之抗體片段之聚核苷酸序列中之一或多者的聚核苷酸序列。在本發明之一個實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段的聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼抗體片段之以下聚核苷酸中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：編碼重鏈序列SEQ ID NO：641之聚核苷酸SEQ ID NO：651；編碼可變重鏈序列SEQ ID NO：642之聚核苷酸SEQ ID NO：652；編碼輕鏈序列SEQ ID NO：661之聚核苷酸SEQ ID NO：671；編碼可變輕鏈序列SEQ ID NO：662之聚核苷酸SEQ ID NO：672；編碼重鏈序列SEQ ID NO：641或可變重鏈序列SEQ ID NO：642之互補決定區(SEQ ID NO：654；SEQ ID NO：656；及 SEQ ID NO：658)的聚核苷酸；編碼輕鏈序列SEQ ID NO：661或可變輕鏈序列SEQ ID NO：662之互補決定區(SEQ ID NO：674；SEQ ID NO：676；及SEQ ID NO：678)的聚核苷酸；編碼重鏈序列SEQ ID NO：641或可變重鏈序列SEQ ID NO：642之構架區(SEQ ID NO：653；SEQ ID NO：655；SEQ ID NO：657；及SEQ ID NO：659)的聚核苷酸；及編碼輕鏈序列SEQ ID NO：661或可變輕鏈序列SEQ ID NO：662之構架區(SEQ ID NO：673；SEQ ID NO：675；SEQ ID NO：677；及SEQ ID NO：679)的聚核苷酸。
在本發明之一較佳實施例中，本發明之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼對PCSK9具有結合特異性之Fab(片段抗原結合)片段的聚核苷酸。就抗體Ab17而言，編碼全長Ab17抗體之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼重鏈序列SEQ ID NO：641之聚核苷酸SEQ ID NO：651及編碼輕鏈序列SEQ ID NO：661之聚核苷酸SEQ ID NO：671。
本發明之另一實施例涵蓋併入表現載體中以供在諸如CHO、NSO、HEK-293之哺乳動物細胞中或在真菌、昆蟲或微生物系統，諸如酵母細胞(諸如酵母畢赤酵母)中表現的此等聚核苷酸。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。在本文(下文)所述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由在於適合宿主中表現全長聚核苷酸之後，酶促消化(例如木瓜蛋白酶)Ab17來產生。在本發明之另一實施例中，諸如Ab17之抗PCSK9抗體或其Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞(例如二倍體酵母，諸如二倍體畢赤酵母)及其他酵母菌株)中表現Ab17聚核苷酸來產生。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。
抗體Ab18
在一個實施例中，本發明更係有關編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸。在本發明之一個實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼重鏈序列SEQ ID NO：681之以下聚核苷酸序列或者由編碼重鏈序列SEQ ID NO：681之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：691)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼可變重鏈多肽序列SEQ ID NO：682之以下聚核苷酸序列或者由編碼可變重鏈多肽序列SEQ ID NO：682之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：692)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼恆定重鏈多肽序列SEQ ID NO：690之以下聚核苷酸序列或者由編碼恆定重鏈多肽序列SEQ ID NO：690之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：700)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼輕鏈多肽序列SEQ ID NO：701之以下聚核苷酸序列或者由編碼輕鏈多肽序列SEQ ID NO：701之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：711)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼可變輕鏈多肽序列SEQ ID NO：702之以下聚核苷酸序列或者由編碼可變輕鏈多肽序列SEQ ID NO：702之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：712)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼恆定輕鏈多肽序列SEQ ID NO：710之以下聚核苷酸序列或者由編碼恆定輕鏈多肽序列SEQ ID NO：710之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：720)。
在本發明之另一實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：對應於編碼重鏈序列SEQ ID NO：681或可變重鏈序列SEQ ID NO：682之互補決定區(CDR或高變區)之聚核苷酸的聚核苷酸序列SEQ ID NO：694；SEQ ID NO：696；及SEQ ID NO：698中之一或多者、及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：701或可變輕鏈序列SEQ ID NO：702之互補決定區(CDR或高變區)之聚核苷酸序列SEQ ID NO：714；SEQ ID NO：716；及SEQ ID NO：718中之一或多者、或此等聚核苷酸序列之組合。在本發明之另一實施例中，編碼根據本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼上述CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部在內的聚核苷酸之組合。
在本發明之另一實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：對應於編碼重鏈序列SEQ ID NO：681或可變重鏈序列SEQ ID NO：682之構架區(FR或恆定區)之聚核苷酸的聚核苷酸序列SEQ ID NO：693；SEQ ID NO：695；SEQ ID NO：697；及SEQ ID NO：699中之一或多者、及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO： 701或可變輕鏈序列SEQ ID NO：702之構架區(FR或恆定區)之聚核苷酸序列SEQ ID NO：713；SEQ ID NO：715；SEQ ID NO：717；及SEQ ID NO：719中之一或多者、或此等聚核苷酸序列之組合。在本發明之另一實施例中，編碼根據本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：上述FR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部在內的組合。
本發明亦涵蓋包括編碼本文所述之抗體片段之聚核苷酸序列中之一或多者的聚核苷酸序列。在本發明之一個實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段的聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼抗體片段之以下聚核苷酸中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：編碼重鏈序列SEQ ID NO：681之聚核苷酸SEQ ID NO：691；編碼可變重鏈序列SEQ ID NO：682之聚核苷酸SEQ ID NO：692；編碼輕鏈序列SEQ ID NO：701之聚核苷酸SEQ ID NO：711；編碼可變輕鏈序列SEQ ID NO：702之聚核苷酸SEQ ID NO：712；編碼重鏈序列SEQ ID NO：681或可變重鏈序列SEQ ID NO：682之互補決定區(SEQ ID NO：694；SEQ ID NO：696；及SEQ ID NO：698)的聚核苷酸；編碼輕鏈序列SEQ ID NO：701或可變輕鏈序列SEQ ID NO：702之互補決定區(SEQ ID NO：714；SEQ ID NO：716；及SEQ ID NO：718)的聚核苷酸；編碼重鏈序列SEQ ID NO：681或可變重鏈序列SEQ ID NO：682之構架區(SEQ ID NO：693；SEQ ID NO：695；SEQ ID NO：697；及SEQ ID NO：699)的聚核苷酸；及編碼輕鏈序列SEQ ID NO：701或可變輕鏈序列SEQ ID NO：702之構架區(SEQ ID NO：713；SEQ ID NO：715；SEQ ID NO：717；及SEQ ID NO：719)的聚核苷酸。
在本發明之一較佳實施例中，本發明之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼對PCSK9具有結合特異性之Fab(片段抗原結合)片段的聚核苷酸。就抗體Ab18而言，編碼全長Ab18抗體之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼重鏈序列SEQ ID NO：681之聚核苷酸SEQ ID NO：691及編碼輕鏈序列SEQ ID NO：701之聚核苷酸SEQ ID NO：711。
本發明之另一實施例涵蓋併入表現載體中以供在諸如CHO、NSO、HEK-293之哺乳動物細胞中或在真菌、昆蟲或微生物系統， 諸如酵母細胞(諸如酵母畢赤酵母)中表現的此等聚核苷酸。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。在本文(下文)所述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由在於適合宿主中表現全長聚核苷酸之後，酶促消化(例如木瓜蛋白酶)Ab18來產生。在本發明之另一實施例中，諸如Ab18之抗PCSK9抗體或其Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞(例如二倍體酵母，諸如二倍體畢赤酵母)及其他酵母菌株)中表現Ab18聚核苷酸來產生。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。
抗體Ab19
在一個實施例中，本發明更係有關編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸。在本發明之一個實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼重鏈序列SEQ ID NO：721之以下聚核苷酸序列或者由編碼重鏈序列SEQ ID NO：721之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：731)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼可變重鏈多肽序列SEQ ID NO：722之以下聚核苷酸序列或者由編碼可變重鏈多肽序列SEQ ID NO：722之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：732)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼恆定重鏈多肽序列SEQ ID NO：730之以下聚核苷酸序列或者由編碼恆定重鏈多肽序列SEQ ID NO：730之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：740)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼輕鏈多肽序列SEQ ID NO：741之以下聚核苷酸序列或者由編碼輕鏈多肽序列SEQ ID NO：741之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：751)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼可變輕鏈多肽序列SEQ ID NO：742之以下聚核苷酸序列或者由編碼可變輕鏈多肽序列SEQ ID NO：742之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：752)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼恆定輕鏈多肽序列SEQ ID NO：750之以下聚核苷酸序列或者由編碼恆定輕鏈多肽序列SEQ ID NO：750之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：760)。
在本發明之另一實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異 性之抗體片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：對應於編碼重鏈序列SEQ ID NO：721或可變重鏈序列SEQ ID NO：722之互補決定區(CDR或高變區)之聚核苷酸的聚核苷酸序列SEQ ID NO：734；SEQ ID NO：736；及SEQ ID NO：738中之一或多者、及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：741或可變輕鏈序列SEQ ID NO：742之互補決定區(CDR或高變區)之聚核苷酸序列SEQ ID NO：754；SEQ ID NO：756；及SEQ ID NO：758中之一或多者、或此等聚核苷酸序列之組合。在本發明之另一實施例中，編碼根據本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼上述CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部在內的聚核苷酸之組合。
在本發明之另一實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：對應於編碼重鏈序列SEQ ID NO：721或可變重鏈序列SEQ ID NO：722之構架區(FR或恆定區)之聚核苷酸的聚核苷酸序列SEQ ID NO：733；SEQ ID NO：735；SEQ ID NO：737；及SEQ ID NO：739中之一或多者、及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：741或可變輕鏈序列SEQ ID NO：742之構架區(FR或恆定區)之聚核苷酸序列SEQ ID NO：753；SEQ ID NO：755；SEQ ID NO：757；及SEQ ID NO：759中之一或多者、或此等聚核苷酸序列之組合。在本發明之另一實施例中，編碼根據本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：上述FR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部在內的組合。
本發明亦涵蓋包括編碼本文所述之抗體片段之聚核苷酸序列中之一或多者的聚核苷酸序列。在本發明之一個實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段的聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼抗體片段之以下聚核苷酸中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：編碼重鏈序列SEQ ID NO：721之聚核苷酸SEQ ID NO：731；編碼可變重鏈序列SEQ ID NO：722之聚核苷酸SEQ ID NO：732；編碼輕鏈序列SEQ ID NO：741之聚核苷酸SEQ ID NO：751；編碼可變輕鏈序列SEQ ID NO：742之聚核苷酸SEQ ID NO：752；編碼重鏈序列SEQ ID NO：721或可變重鏈 序列SEQ ID NO：722之互補決定區(SEQ ID NO：734；SEQ ID NO：736；及SEQ ID NO：738)的聚核苷酸；編碼輕鏈序列SEQ ID NO：741或可變輕鏈序列SEQ ID NO：742之互補決定區(SEQ ID NO：754；SEQ ID NO：756；及SEQ ID NO：758)的聚核苷酸；編碼重鏈序列SEQ ID NO：721或可變重鏈序列SEQ ID NO：722之構架區(SEQ ID NO：733；SEQ ID NO：735；SEQ ID NO：737；及SEQ ID NO：739)的聚核苷酸；及編碼輕鏈序列SEQ ID NO：741或可變輕鏈序列SEQ ID NO：742之構架區(SEQ ID NO：753；SEQ ID NO：755；SEQ ID NO：757；及SEQ ID NO：759)的聚核苷酸。
在本發明之一較佳實施例中，本發明之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼對PCSK9具有結合特異性之Fab(片段抗原結合)片段的聚核苷酸。就抗體Ab19而言，編碼全長Ab19抗體之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼重鏈序列SEQ ID NO：721之聚核苷酸SEQ ID NO：731及編碼輕鏈序列SEQ ID NO：741之聚核苷酸SEQ ID NO：751。
本發明之另一實施例涵蓋併入表現載體中以供在諸如CHO、NSO、HEK-293之哺乳動物細胞中或在真菌、昆蟲或微生物系統，諸如酵母細胞(諸如酵母畢赤酵母)中表現的此等聚核苷酸。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。在本文(下文)所述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由在於適合宿主中表現全長聚核苷酸之後，酶促消化(例如木瓜蛋白酶)Ab19來產生。在本發明之另一實施例中，諸如Ab19之抗PCSK9抗體或其Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞(例如二倍體酵母，諸如二倍體畢赤酵母)及其他酵母菌株)中表現Ab19聚核苷酸來產生。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。
抗體Ab20
在一個實施例中，本發明更係有關編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸。在本發明之一個實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼重鏈序列SEQ ID NO：761之以下聚核苷酸序列或者由編碼重鏈序列SEQ ID NO：761之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：771)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼可變重鏈多肽序列SEQ ID NO：762之以下聚核苷酸序列或者由編碼可變重鏈多肽序列SEQ ID NO：762之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：772)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼恆定重鏈多肽序列SEQ ID NO：770之以下聚核苷酸序列或者由編碼恆定重 鏈多肽序列SEQ ID NO：770之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：780)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼輕鏈多肽序列SEQ ID NO：781之以下聚核苷酸序列或者由編碼輕鏈多肽序列SEQ ID NO：781之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：791)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼可變輕鏈多肽序列SEQ ID NO：782之以下聚核苷酸序列或者由編碼可變輕 鏈多肽序列SEQ ID NO：782之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：792)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼恆定輕鏈多肽序列SEQ ID NO：790之以下聚核苷酸序列或者由編碼恆定輕鏈多肽序列SEQ ID NO：790之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：800)。
在本發明之另一實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：對應於編碼重鏈序列SEQ ID NO：761或可變重鏈序列SEQ ID NO：762之互補決定區(CDR或高變區)之聚核苷酸的聚核苷酸序列SEQ ID NO：774；SEQ ID NO：776；及SEQ ID NO：778中之一或多者、及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：781或可變輕鏈序列SEQ ID NO：782之互補決定區(CDR或高變區)之聚核苷酸序列SEQ ID NO：794；SEQ ID NO：796；及SEQ ID NO：798中之一或多者、或此等聚核苷酸序列之組合。在本發明之另一實施例中，編碼根據本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼上述CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部在內的聚核苷酸之組合。
在本發明之另一實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：對應於編碼重鏈序列SEQ ID NO：761或可變重鏈序列SEQ ID NO：762之構架區(FR或恆定區)之聚核苷酸的聚核苷酸序列SEQ ID NO：773；SEQ ID NO：775；SEQ ID NO： 777；及SEQ ID NO：779中之一或多者、及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：781或可變輕鏈序列SEQ ID NO：782之構架區(FR或恆定區)之聚核苷酸序列SEQ ID NO：793；SEQ ID NO：795；SEQ ID NO：797；及SEQ ID NO：799中之一或多者、或此等聚核苷酸序列之組合。在本發明之另一實施例中，編碼根據本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：上述FR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部在內的組合。
本發明亦涵蓋包括編碼本文所述之抗體片段之聚核苷酸序列中之一或多者的聚核苷酸序列。在本發明之一個實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段的聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼抗體片段之以下聚核苷酸中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：編碼重鏈序列SEQ ID NO：761之聚核苷酸SEQ ID NO：771；編碼可變重鏈序列SEQ ID NO：762之聚核苷酸SEQ ID NO：772；編碼輕鏈序列SEQ ID NO：781之聚核苷酸SEQ ID NO：791；編碼可變輕鏈序列SEQ ID NO：782之聚核苷酸SEQ ID NO：792；編碼重鏈序列SEQ ID NO：761或可變重鏈序列SEQ ID NO：762之互補決定區(SEQ ID NO：774；SEQ ID NO：776；及SEQ ID NO：778)的聚核苷酸；編碼輕鏈序列SEQ ID NO：781或可變輕鏈序列SEQ ID NO：782之互補決定區(SEQ ID NO：794；SEQ ID NO：796；及SEQ ID NO：798)的聚核苷酸；編碼重鏈序列SEQ ID NO：761或可變重鏈序列SEQ ID NO：762之構架區(SEQ ID NO：773；SEQ ID NO：775；SEQ ID NO：777；及SEQ ID NO：779)的聚核苷酸；及編碼輕鏈序列SEQ ID NO：781或可變輕鏈序列SEQ ID NO：782之構架區(SEQ ID NO：793；SEQ ID NO：795；SEQ ID NO：797；及SEQ ID NO：799)的聚核苷酸。
在本發明之一較佳實施例中，本發明之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼對PCSK9具有結合特異性之Fab(片段抗原結合)片段的聚核苷酸。就抗體Ab20而言，編碼全長Ab20抗體之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼重鏈序列SEQ ID NO：761之聚核苷酸SEQ ID NO：771及編碼輕鏈序列SEQ ID NO：781之聚核苷酸SEQ ID NO：791。
本發明之另一實施例涵蓋併入表現載體中以供在諸如 CHO、NSO、HEK-293之哺乳動物細胞中或在真菌、昆蟲或微生物系統，諸如酵母細胞(諸如酵母畢赤酵母)中表現的此等聚核苷酸。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。在本文(下文)所述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由在於適合宿主中表現全長聚核苷酸之後，酶促消化(例如木瓜蛋白酶)Ab20來產生。在本發明之另一實施例中，諸如Ab20之抗PCSK9抗體或其Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞(例如二倍體酵母，諸如二倍體畢赤酵母)及其他酵母菌株)中表現Ab20聚核苷酸來產生。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。
抗體Ab21
在一個實施例中，本發明更係有關編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸。在本發明之一個實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼重鏈序列SEQ ID NO：801之以下聚核苷酸序列或者由編碼重鏈序列SEQ ID NO：801之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：811)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼可變重鏈多肽序列SEQ ID NO：802之以下聚核苷酸序列或者由編碼可變重鏈多肽序列SEQ ID NO：802之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：812)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼恆定重鏈多肽序列SEQ ID NO：810之以下聚核苷酸序列或者由編碼恆定重鏈多肽序列SEQ ID NO：810之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：820)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼輕鏈多肽序列SEQ ID NO：821之以下聚核苷酸序列或者由編碼輕鏈多肽序列SEQ ID NO：821之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：831)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼可變輕鏈多肽序列SEQ ID NO：822之以下聚核苷酸序列或者由編碼可變輕鏈多肽序列SEQ ID NO：822之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：832)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼恆定輕鏈多肽序列SEQ ID NO：830之以下聚核苷酸序列或者由編碼恆定輕鏈多肽序列SEQ ID NO：830之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：840)。
在本發明之另一實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異 性之抗體片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：對應於編碼重鏈序列SEQ ID NO：801或可變重鏈序列SEQ ID NO：802之互補決定區(CDR或高變區)之聚核苷酸的聚核苷酸序列SEQ ID NO：814；SEQ ID NO：816；及SEQ ID NO：818中之一或多者、及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：821或可變輕鏈序列SEQ ID NO：822之互補決定區(CDR或高變區)之聚核苷酸序列SEQ ID NO：834；SEQ ID NO：836；及SEQ ID NO：838中之一或多者、或此等聚核苷酸序列之組合。在本發明之另一實施例中，編碼根據本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼上述CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部在內的聚核苷酸之組合。
在本發明之另一實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：對應於編碼重鏈序列SEQ ID NO：801或可變重鏈序列SEQ ID NO：802之構架區(FR或恆定區)之聚核苷酸的聚核苷酸序列SEQ ID NO：813；SEQ ID NO：815；SEQ ID NO：817；及SEQ ID NO：819中之一或多者、及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：821或可變輕鏈序列SEQ ID NO：822之構架區(FR或恆定區)之聚核苷酸序列SEQ ID NO：833；SEQ ID NO：835；SEQ ID NO：837；及SEQ ID NO：839中之一或多者、或此等聚核苷酸序列之組合。在本發明之另一實施例中，編碼根據本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：上述FR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部在內的組合。
本發明亦涵蓋包括編碼本文所述之抗體片段之聚核苷酸序列中之一或多者的聚核苷酸序列。在本發明之一個實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段的聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼抗體片段之以下聚核苷酸中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：編碼重鏈序列SEQ ID NO：801之聚核苷酸SEQ ID NO：811；編碼可變重鏈序列SEQ ID NO：802之聚核苷酸SEQ ID NO：812；編碼輕鏈序列SEQ ID NO：821之聚核苷酸SEQ ID NO：831；編碼可變輕鏈序列SEQ ID NO：822之聚核苷酸SEQ ID NO：832；編碼重鏈序列SEQ ID NO：801或可變重鏈 序列SEQ ID NO：802之互補決定區(SEQ ID NO：814；SEQ ID NO：816；及SEQ ID NO：818)的聚核苷酸；編碼輕鏈序列SEQ ID NO：821或可變輕鏈序列SEQ ID NO：822之互補決定區(SEQ ID NO：834；SEQ ID NO：836；及SEQ ID NO：838)的聚核苷酸；編碼重鏈序列SEQ ID NO：801或可變重鏈序列SEQ ID NO：802之構架區(SEQ ID NO：813；SEQ ID NO：815；SEQ ID NO：817；及SEQ ID NO：819)的聚核苷酸；及編碼輕鏈序列SEQ ID NO：821或可變輕鏈序列SEQ ID NO：822之構架區(SEQ ID NO：833；SEQ ID NO：835；SEQ ID NO：837；及SEQ ID NO：839)的聚核苷酸。
在本發明之一較佳實施例中，本發明之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼對PCSK9具有結合特異性之Fab(片段抗原結合)片段的聚核苷酸。就抗體Ab21而言，編碼全長Ab21抗體之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼重鏈序列SEQ ID NO：801之聚核苷酸SEQ ID NO：811及編碼輕鏈序列SEQ ID NO：821之聚核苷酸SEQ ID NO：831。
本發明之另一實施例涵蓋併入表現載體中以供在諸如CHO、NSO、HEK-293之哺乳動物細胞中或在真菌、昆蟲或微生物系統，諸如酵母細胞(諸如酵母畢赤酵母)中表現的此等聚核苷酸。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。在本文(下文)所述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由在於適合宿主中表現全長聚核苷酸之後，酶促消化(例如木瓜蛋白酶)Ab21來產生。在本發明之另一實施例中，諸如Ab21之抗PCSK9抗體或其Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞(例如二倍體酵母，諸如二倍體畢赤酵母)及其他酵母菌株)中表現Ab21聚核苷酸來產生。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。
抗體Ab22
在一個實施例中，本發明更係有關編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸。在本發明之一個實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼重鏈序列SEQ ID NO：841之以下聚核苷酸序列或者由編碼重鏈序列SEQ ID NO：841之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：851)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼可變重鏈多肽序列SEQ ID NO：842之以下聚核苷酸序列或者由編碼可變重鏈多肽序列SEQ ID NO：842之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：852)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼恆定重鏈多肽序列SEQ ID NO：850之以下聚核苷酸序列或者由編碼恆定重 鏈多肽序列SEQ ID NO：850之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：860)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼輕鏈多肽序列SEQ ID NO：861之以下聚核苷酸序列或者由編碼輕鏈多肽序列SEQ ID NO：861之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：871)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼可變輕鏈多肽序列SEQ ID NO：862之以下聚核苷酸序列或者由編碼可變輕 鏈多肽序列SEQ ID NO：862之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：872)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼恆定輕鏈多肽序列SEQ ID NO：870之以下聚核苷酸序列或者由編碼恆定輕鏈多肽序列SEQ ID NO：870之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：880)。
在本發明之另一實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：對應於編碼重鏈序列SEQ ID NO：841或可變重鏈序列SEQ ID NO：842之互補決定區(CDR或高變區)之聚核苷酸的聚核苷酸序列SEQ ID NO：854；SEQ ID NO：856；及SEQ ID NO：858中之一或多者、及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：861或可變輕鏈序列SEQ ID NO：862之互補決定區(CDR或高變區)之聚核苷酸序列SEQ ID NO：874；SEQ ID NO：876；及SEQ ID NO：878中之一或多者、或此等聚核苷酸序列之組合。在本發明之另一實施例中，編碼根據本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼上述CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部在內的聚核苷酸之組合。
在本發明之另一實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：對應於編碼重鏈序列SEQ ID NO：841或可變重鏈序列SEQ ID NO：842之構架區(FR或恆定區)之聚核苷酸的聚核苷酸序列SEQ ID NO：853；SEQ ID NO：855；SEQ ID NO： 857；及SEQ ID NO：859中之一或多者、及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：861或可變輕鏈序列SEQ ID NO：862之構架區(FR或恆定區)之聚核苷酸序列SEQ ID NO：873；SEQ ID NO：875；SEQ ID NO：877；及SEQ ID NO：879中之一或多者、或此等聚核苷酸序列之組合。在本發明之另一實施例中，編碼根據本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：上述FR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部在內的組合。
本發明亦涵蓋包括編碼本文所述之抗體片段之聚核苷酸序列中之一或多者的聚核苷酸序列。在本發明之一個實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段的聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼抗體片段之以下聚核苷酸中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：編碼重鏈序列SEQ ID NO：841之聚核苷酸SEQ ID NO：851；編碼可變重鏈序列SEQ ID NO：842之聚核苷酸SEQ ID NO：852；編碼輕鏈序列SEQ ID NO：861之聚核苷酸SEQ ID NO：871；編碼可變輕鏈序列SEQ ID NO：862之聚核苷酸SEQ ID NO：872；編碼重鏈序列SEQ ID NO：841或可變重鏈序列SEQ ID NO：842之互補決定區(SEQ ID NO：854；SEQ ID NO：856；及SEQ ID NO：858)的聚核苷酸；編碼輕鏈序列SEQ ID NO：861或可變輕鏈序列SEQ ID NO：862之互補決定區(SEQ ID NO：874；SEQ ID NO：876；及SEQ ID NO：878)的聚核苷酸；編碼重鏈序列SEQ ID NO：841或可變重鏈序列SEQ ID NO：842之構架區(SEQ ID NO：853；SEQ ID NO：855；SEQ ID NO：857；及SEQ ID NO：859)的聚核苷酸；及編碼輕鏈序列SEQ ID NO：861或可變輕鏈序列SEQ ID NO：862之構架區(SEQ ID NO：873；SEQ ID NO：875；SEQ ID NO：877；及SEQ ID NO：879)的聚核苷酸。
在本發明之一較佳實施例中，本發明之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼對PCSK9具有結合特異性之Fab(片段抗原結合)片段的聚核苷酸。就抗體Ab22而言，編碼全長Ab22抗體之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼重鏈序列SEQ ID NO：841之聚核苷酸SEQ ID NO：851及編碼輕鏈序列SEQ ID NO：861之聚核苷酸SEQ ID NO：871。
本發明之另一實施例涵蓋併入表現載體中以供在諸如 CHO、NSO、HEK-293之哺乳動物細胞中或在真菌、昆蟲或微生物系統，諸如酵母細胞(諸如酵母畢赤酵母)中表現的此等聚核苷酸。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。在本文(下文)所述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由在於適合宿主中表現全長聚核苷酸之後，酶促消化(例如木瓜蛋白酶)Ab22來產生。在本發明之另一實施例中，諸如Ab22之抗PCSK9抗體或其Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞(例如二倍體酵母，諸如二倍體畢赤酵母)及其他酵母菌株)中表現Ab22聚核苷酸來產生。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。
抗體Ab23
在一個實施例中，本發明更係有關編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸。在本發明之一個實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼重鏈序列SEQ ID NO：881之以下聚核苷酸序列或者由編碼重鏈序列SEQ ID NO：881之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：891)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼可變重鏈多肽序列SEQ ID NO：882之以下聚核苷酸序列或者由編碼可變重鏈多肽序列SEQ ID NO：882之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：892)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼恆定重鏈多肽序列SEQ ID NO：890之以下聚核苷酸序列或者由編碼恆定重鏈多肽序列SEQ ID NO：890之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：900)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼輕鏈多肽序列SEQ ID NO：901之以下聚核苷酸序列或者由編碼輕鏈多肽序列SEQ ID NO：901之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：911)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼可變輕鏈多肽序列SEQ ID NO：902之以下聚核苷酸序列或者由編碼可變輕鏈多肽序列SEQ ID NO：902之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：912)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼恆定輕鏈多肽序列SEQ ID NO：910之以下聚核苷酸序列或者由編碼恆定輕鏈多肽序列SEQ ID NO：910之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：920)。
在本發明之另一實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：對應於編碼重鏈序列SEQ ID NO：881或可變重鏈序列SEQ ID NO：882之互補決定區(CDR或高變區)之聚核苷酸的聚核苷酸序列SEQ ID NO：894；SEQ ID NO：896；及SEQ ID NO：898中之一或多者、及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：901或可變輕鏈序列SEQ ID NO：902之互補決定區(CDR或高變區)之聚核苷酸序列SEQ ID NO：914；SEQ ID NO：916；及SEQ ID NO：918中之一或多者、或此等聚核苷酸序列之組合。在本發明之另一實施例中，編碼根據本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼上述CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部在內的聚核苷酸之組合。
在本發明之另一實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：對應於編碼重鏈序列SEQ ID NO：881或可變重鏈序列SEQ ID NO：882之構架區(FR或恆定區)之聚核苷酸的聚核苷酸序列SEQ ID NO：893；SEQ ID NO：895；SEQ ID NO：897；及SEQ ID NO：899中之一或多者、及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：901或可變輕鏈序列SEQ ID NO：902之構架區(FR或恆定區)之聚核苷酸序列SEQ ID NO：913；SEQ ID NO：915；SEQ ID NO：917；及SEQ ID NO：919中之一或多者、或此等聚核苷酸序列之組合。在本發明之另一實施例中，編碼根據本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：上述FR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部在內的組合。
本發明亦涵蓋包括編碼本文所述之抗體片段之聚核苷酸序列中之一或多者的聚核苷酸序列。在本發明之一個實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段的聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼抗體片段之以下聚核苷酸中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：編碼重鏈序列SEQ ID NO：881之聚核苷酸SEQ ID NO：891；編碼可變重鏈序列SEQ ID NO：882之聚核苷酸SEQ ID NO：892；編碼輕鏈序列SEQ ID NO：901之聚核苷酸SEQ ID NO：911；編碼可變輕鏈序列SEQ ID NO： 902之聚核苷酸SEQ ID NO：912；編碼重鏈序列SEQ ID NO：881或可變重鏈序列SEQ ID NO：882之互補決定區(SEQ ID NO：894；SEQ ID NO：896；及SEQ ID NO：898)的聚核苷酸；編碼輕鏈序列SEQ ID NO：901或可變輕鏈序列SEQ ID NO：902之互補決定區(SEQ ID NO：914；SEQ ID NO：916；及SEQ ID NO：918)的聚核苷酸；編碼重鏈序列SEQ ID NO：881或可變重鏈序列SEQ ID NO：882之構架區(SEQ ID NO：893；SEQ ID NO：895；SEQ ID NO：897；及SEQ ID NO：899)的聚核苷酸；及編碼輕鏈序列SEQ ID NO：901或可變輕鏈序列SEQ ID NO：902之構架區(SEQ ID NO：913；SEQ ID NO：915；SEQ ID NO：917；及SEQ ID NO：919)的聚核苷酸。
在本發明之一較佳實施例中，本發明之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼對PCSK9具有結合特異性之Fab(片段抗原結合)片段的聚核苷酸。就抗體Ab23而言，編碼全長Ab23抗體之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼重鏈序列SEQ ID NO：881之聚核苷酸SEQ ID NO：891及編碼輕鏈序列SEQ ID NO：901之聚核苷酸SEQ ID NO：911。
本發明之另一實施例涵蓋併入表現載體中以供在諸如CHO、NSO、HEK-293之哺乳動物細胞中或在真菌、昆蟲或微生物系統，諸如酵母細胞(諸如酵母畢赤酵母)中表現的此等聚核苷酸。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。在本文(下文)所述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由在於適合宿主中表現全長聚核苷酸之後，酶促消化(例如木瓜蛋白酶)Ab23來產生。在本發明之另一實施例中，諸如Ab23之抗PCSK9抗體或其Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞(例如二倍體酵母，諸如二倍體畢赤酵母)及其他酵母菌株)中表現Ab23聚核苷酸來產生。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。
抗體Ab24
在一個實施例中，本發明更係有關編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸。在本發明之一個實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼重鏈序列SEQ ID NO：921之以下聚核苷酸序列或者由編碼重鏈序列SEQ ID NO：921之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：931)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼可變重鏈多肽序列SEQ ID NO：922之以下聚核苷酸序列或者由編碼可變重鏈多肽序列SEQ ID NO：922之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：932)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼 恆定重鏈多肽序列SEQ ID NO：930之以下聚核苷酸序列或者由編碼恆定重鏈多肽序列SEQ ID NO：930之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：940)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼輕鏈多肽序列SEQ ID NO：941之以下聚核苷酸序列或者由編碼輕鏈多肽序列SEQ ID NO：941之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：951)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼 可變輕鏈多肽序列SEQ ID NO：942之以下聚核苷酸序列或者由編碼可變輕鏈多肽序列SEQ ID NO：942之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：952)。
在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼恆定輕鏈多肽序列SEQ ID NO：950之以下聚核苷酸序列或者由編碼恆定輕鏈多肽序列SEQ ID NO：950之以下聚核苷酸序列組成： (SEQ ID NO：960)。
在本發明之另一實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：對應於編碼重鏈序列SEQ ID NO：921或可變重鏈序列SEQ ID NO：922之互補決定區(CDR或高變區)之聚核苷酸的聚核苷酸序列SEQ ID NO：934；SEQ ID NO：936；及SEQ ID NO：938中之一或多者、及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：941或可變輕鏈序列SEQ ID NO：942之互補決定區(CDR或高變區)之聚核苷酸序列SEQ ID NO：954；SEQ ID NO：956；及SEQ ID NO：958中之一或多者、或此等聚核苷酸序列之組合。在本發明之另一實施例中，編碼根據本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼上述CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部在內的聚核苷酸之組合。
在本發明之另一實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：對應於編碼重鏈序列SEQ ID NO：921或可變重鏈序列SEQ ID NO：922之構架區(FR或恆定區)之 聚核苷酸的聚核苷酸序列SEQ ID NO：933；SEQ ID NO：935；SEQ ID NO：937；及SEQ ID NO：939中之一或多者、及/或對應於輕鏈序列SEQ ID NO：941或可變輕鏈序列SEQ ID NO：942之構架區(FR或恆定區)之聚核苷酸序列SEQ ID NO：953；SEQ ID NO：955；SEQ ID NO：957；及SEQ ID NO：959中之一或多者、或此等聚核苷酸序列之組合。在本發明之另一實施例中，編碼根據本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：上述FR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者、包括其全部在內的組合。
本發明亦涵蓋包括編碼本文所述之抗體片段之聚核苷酸序列中之一或多者的聚核苷酸序列。在本發明之一個實施例中，編碼對PCSK9具有結合特異性之抗體片段的聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼抗體片段之以下聚核苷酸中之一者、兩者、三者或三者以上(包括全部)：編碼重鏈序列SEQ ID NO：921之聚核苷酸SEQ ID NO：931；編碼可變重鏈序列SEQ ID NO：922之聚核苷酸SEQ ID NO：932；編碼輕鏈序列SEQ ID NO：941之聚核苷酸SEQ ID NO：951；編碼可變輕鏈序列SEQ ID NO：942之聚核苷酸SEQ ID NO：952；編碼重鏈序列SEQ ID NO：921或可變重鏈序列SEQ ID NO：922之互補決定區(SEQ ID NO：934；SEQ ID NO：936；及SEQ ID NO：938)的聚核苷酸；編碼輕鏈序列SEQ ID NO：941或可變輕鏈序列SEQ ID NO：942之互補決定區(SEQ ID NO：954；SEQ ID NO：956；及SEQ ID NO：958)的聚核苷酸；編碼重鏈序列SEQ ID NO：921或可變重鏈序列SEQ ID NO：922之構架區(SEQ ID NO：933；SEQ ID NO：935；SEQ ID NO：937；及SEQ ID NO：939)的聚核苷酸；及編碼輕鏈序列SEQ ID NO：941或可變輕鏈序列SEQ ID NO：942之構架區(SEQ ID NO：953；SEQ ID NO：955；SEQ ID NO：957；及SEQ ID NO：959)的聚核苷酸。
在本發明之一較佳實施例中，本發明之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼對PCSK9具有結合特異性之Fab(片段抗原結合)片段的聚核苷酸。就抗體Ab24而言，編碼全長Ab24抗體之聚核苷酸包含以下或者由以下組成：編碼重鏈序列SEQ ID NO：921之聚核苷酸SEQ ID NO：931及編碼輕鏈序列SEQ ID NO：941之聚核苷酸SEQ ID NO：951。
本發明之另一實施例涵蓋併入表現載體中以供在諸如CHO、NSO、HEK-293之哺乳動物細胞中或在真菌、昆蟲或微生物系統，諸如酵母細胞(諸如酵母畢赤酵母)中表現的此等聚核苷酸。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。在本文(下文)所述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由在於適合宿主中表現全長聚核苷酸之後，酶促消化(例如木瓜蛋白酶)Ab24來產生。在本發明之另一實施例中，諸如Ab24之抗PCSK9抗體或其Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞(例如二倍體酵母，諸如二倍體畢赤酵母)及其他酵母菌株)中表現Ab24聚核苷酸來產生。適合畢赤酵母物種包括(但不限於)畢赤酵母。
在一個實施例中，本發明係有關一種經分離聚核苷酸，其包含選自SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：52、SEQ ID NO：92、SEQ ID NO：132、SEQ ID NO：172、SEQ ID NO：212、SEQ ID NO：252、SEQ ID NO：292、SEQ ID NO：332、SEQ ID NO：372、SEQ ID NO：412、SEQ ID NO：452、SEQ ID NO：492、SEQ ID NO：532、SEQ ID NO：572、SEQ ID NO：612、SEQ ID NO：652、SEQ ID NO：692、SEQ ID NO：732、SEQ ID NO：772、SEQ ID NO：812、SEQ ID NO：852、SEQ ID NO：892、SEQ ID NO：932之編碼抗PCSK9 VH 抗體胺基酸序列的聚核苷酸或編碼其中至少一個構架殘基(FR殘基)已經存在於兔抗PCSK9抗體VH多肽中之相應位置上之胺基酸取代或經保守胺基酸取代進行取代之其變異體的聚核苷酸。
在另一實施例中，本發明係有關一種經分離聚核苷酸，其包含選自SEQ ID NO：32、SEQ ID NO：72、SEQ ID NO：112、SEQ ID NO：152、SEQ ID NO：192、SEQ ID NO：232、SEQ ID NO：272、SEQ ID NO：312、SEQ ID NO：352、SEQ ID NO：392、SEQ ID NO：432、SEQ ID NO：472、SEQ ID NO：512、SEQ ID NO：552、SEQ ID NO：592、SEQ ID NO：632、SEQ ID NO：672、SEQ ID NO：712、SEQ ID NO：752、SEQ ID NO：792、SEQ ID NO：832、SEQ ID NO：872、SEQ ID NO：912、SEQ ID NO：952之編碼抗PCSK9 VL 抗體胺基酸的聚核苷酸序列或編碼其中至少一個構架殘基(FR殘基)已經存在於兔抗PCSK9抗體VL 多肽中之相應位置上之 胺基酸取代或經保守胺基酸取代進行取代之其變異體的聚核苷酸序列。
在另一實施例中，本發明係有關一或多種異源聚核苷酸，其包含編碼以下中所含之多肽之序列：SEQ ID NO：2及SEQ ID NO：22；SEQ ID NO：42及SEQ ID NO：62；SEQ ID NO：82及SEQ ID NO：102；SEQ ID NO：122及SEQ ID NO：142；SEQ ID NO：162及SEQ ID NO：182；SEQ ID NO：202及SEQ ID NO：222；SEQ ID NO：242及SEQ ID NO：262；SEQ ID NO：282及SEQ ID NO：302；SEQ ID NO：322及SEQ ID NO：342；SEQ ID NO：362及SEQ ID NO：382；SEQ ID NO：402及SEQ ID NO：422；SEQ ID NO：442及SEQ ID NO：462；SEQ ID NO：482及SEQ ID NO：502；SEQ ID NO：522及SEQ ID NO：542；SEQ ID NO：562及SEQ ID NO：582；SEQ ID NO：602及SEQ ID NO：622；SEQ ID NO：642及SEQ ID NO：662；SEQ ID NO：682及SEQ ID NO：702；SEQ ID NO：722及SEQ ID NO：742；SEQ ID NO：762及SEQ ID NO：782；SEQ ID NO：802及SEQ ID NO：822；SEQ ID NO：842及SEQ ID NO：862；SEQ ID NO：882及SEQ ID NO：902；或SEQ ID NO：922及SEQ ID NO：942。
在另一實施例中，本發明係有關一種表現含有至少一個源於抗PCSK9抗體之CDR多肽之多肽的經分離聚核苷酸，其中該所表現多肽單獨特異性結合PCSK9或在與表現含有至少一個源於抗PCSK9抗體之CDR多肽之多肽的另一聚核苷酸序列聯合表現時特異性結合PCSK9，其中該至少一個CDR係選自以下VL 或VH 多肽中所含者：SEQ ID NO：2、22、42、62、82、102、122、142、162、182、202、222、242、262、282、302、322、342、362、382、402、422、442、462、482、502、522、542、562、582、602、622、642、662、682、702、722、742、762、782、802、822、842、862、882、902、922或942。更特定言之，至少一個CDR包含SEQ ID NO：4、6、8、24、26、28、44、46、48、64、66、68、84、86、88、104、106、108、124、126、128、144、146、148、164、166、168、184、186、188、204、206、208、224、226、228、244、246、248、264、266、268、284、286、288、304、306、308、324、326、328、344、346、348、364、366、368、384、386、388、 404、406、408、424、426、428、444、446、448、464、466、468、484、486、488、504、506、508、524、526、528、544、546、548、564、566、568、584、586、588、604、606、608、624、626、628、644、646、648、664、666、668、684、686、688、704、706、708、724、726、728、744、746、748、764、766、768、784、786、788、804、806、808、824、826、828、844、846、848、864、866、884、886、888、904、906、908、924、926、928、944、946或948。
亦涵蓋包含該等聚核苷酸之宿主細胞及載體。
本發明進一步涵蓋包含編碼如本文所述之可變重鏈及輕鏈多肽序列以及個別互補決定區(CDR或高變區)之聚核苷酸序列的載體以及包含該等載體序列之宿主細胞。在本發明之一個實施例中，宿主細胞為酵母細胞。在本發明之另一實施例中，酵母宿主細胞屬於畢赤酵母屬。
B細胞篩檢及分離
在一個實施例中，本發明涵蓋製備及分離抗原特異性B細胞之純系群體，其可用於分離至少一種PCSK9抗原特異性細胞，可用於產生針對PCSK9之單株抗體，對所要PCSK9抗原或對應於該種抗體之核酸序列具有特異性。製備及分離該抗原特異性B細胞純系群體之方法例如教示於Carvalho-Jensen等人之美國專利公開案第US 2007/0269868號中，該專利公開案之揭露內容以全文引用的方式併入本文中。製備及分離該抗原特異性B細胞純系群體之方法亦在本文實例中加以教示。就數量或密度而言使細胞群體「增濃」之方法在此項技術中為已知的。參見例如美國專利5,627,052。除藉由抗原特異性使細胞群體增濃之外，亦可使用此等步驟。
使抗體人類化之方法
在另一實施例中，本發明涵蓋使抗體重鏈及輕鏈人類化之方法。可應用於抗PCSK9抗體之使抗體重鏈及輕鏈人類化之方法例如教示於Olson等人之美國專利申請公開案第US 2009/0022659號及Garcia-Martinez等人之美國專利第7,935,340號中，該等專利文獻各自之揭露內容以全文引用的方式併入本文中。
產生抗體及其片段之方法
在另一實施例中，本發明涵蓋產生抗PCSK9抗體及其片段之方法。產生自多倍體，較佳二倍體或四倍體接合勝任酵母菌株分泌之抗PCSK9抗體及其片段之方法例如教示於Olson等人之美國專利申請公開案第US 2009/0022659號及Garcia-Martinez等人之美國專利第7,935,340號中，該等專利文獻各自之揭露內容以全文引用的方式併入本文中。用於製造抗體之一較佳酵母為畢赤酵母屬，且更佳為畢赤酵母。然而，本發明之抗體潛在地可在其他酵母中製備，該其他酵母諸如酵母菌科之其他接合勝任酵母，包括以下屬：阿斯黴屬；Ascobotryozyma；固囊酵母屬；德巴利酵母屬；德克酵母屬；假囊酵母屬；伊薩酵母屬；哈薩克酵母屬；克魯維酵母屬；柯達酵母屬；路德酵母屬；管囊酵母屬；畢赤酵母屬；酵母屬；雙孢土星形酵母屬；Tetrapisispora；有抱圓酵母屬；擬威爾酵母屬；及接合酵母屬。潛在適用於製備本發明之抗體蛋白質之其他酵母類型包括耶羅威亞酵母屬；紅冬孢酵母屬；念珠菌屬；漢遜酵母屬；線黑粉酵母屬；鎖擲孢酵母屬；布勒擲孢酵母屬；白冬孢酵母屬及線黑粉菌屬。
產生抗體之其他方法為一般技藝人士所熟知。舉例而言，產生嵌合抗體之方法目前在此項技術中為熟知的(參見例如Cabilly等人之美國專利第4,816,567號；Morrison等人，P.N.A.S.USA,81：8651-55(1984)；Neuberger,M.S.等人，Nature,314：268-270(1985)；Bouliarnne,G.L.等人，Nature,312：643-46(1984)，其各自之揭露內容以全文引用的方式併入本文中)。
同樣，產生人類化抗體之其他方法目前在此項技術中為熟知的(參見例如Queen等人之美國專利第5,530,101號、第5,585,089號、第5,693,762號及第6,180,370號；Winter之美國專利第5,225,539號及第6,548,640號；Carter等人之美國專利第6,054,297號、第6,407,213號及第6,639,055號；Adair之美國專利第6,632,927號；Jones,P.T.等人，Nature,321：522-525(1986)；Reichmann,L.等人，Nature,332：323-327(1988)；Verhoeyen,M等人，Science,239：1534-36(1988)，其各自之揭露內容以全文引用的方式併入本文中)。
具有PCSK9結合特異性之本發明抗體多肽亦可藉由使用 為一般技藝人士所熟知之習知技術構築含有操縱子及編碼抗體重鏈之DNA序列之表現載體來產生，其中編碼為抗體特異性所需之CDR之DNA序列係來源於非人類細胞來源，較佳兔B細胞來源，而編碼抗體鏈之其餘部分之DNA序列係來源於人類細胞來源。
使用為一般技藝人士所熟知之相同習知手段產生第二表現載體，該表現載體含有操縱子及編碼抗體輕鏈之DNA序列，其中編碼為抗體特異性所需之CDR之DNA序列係來源於非人類細胞來源，較佳兔B細胞來源，而編碼抗體鏈之其餘部分之DNA序列係來源於人類細胞來源。
藉由為一般技藝人士所熟知之習知技術將表現載體轉染至宿主細胞中以產生轉染宿主細胞，藉由為一般技藝人士所熟知之習知技術培養該轉染宿主細胞以產生該等抗體多肽。
宿主細胞可用上述兩種表現載體共轉染，其中第一表現載體含有編碼操縱子及輕鏈來源多肽之DNA且第二載體含有編碼操縱子及重鏈來源多肽之DNA。兩種載體含有不同可選擇標記，但較佳達成重鏈及輕鏈多肽之實質上相等的表現。或者，可使用單一載體，該載體包括編碼重鏈多肽與輕鏈多肽兩者之DNA。重鏈及輕鏈之編碼序列可包含cDNA、基因組DNA或兩者。
潛在地可用於表現主題抗體多肽之宿主細胞可包括細菌細胞，諸如大腸桿菌；或真核細胞，諸如畢赤酵母、其他酵母細胞、真菌、昆蟲細胞、哺乳動物細胞及植物細胞。在本發明之一個實施例中，具有明確確定類型之哺乳動物細胞可用於此目的，諸如骨髓瘤細胞、中國倉鼠卵巢(CHO)細胞株、NSO細胞株或HEK293細胞株。
可藉以構築載體之一般方法、為產生宿主細胞所需之轉染方法及為自該等宿主細胞產生抗體多肽所需之培養方法皆包括習知技術。儘管用於產生抗體之細胞株較佳為哺乳動物細胞株，但可替代地使用任何其他適合細胞株，諸如細菌細胞株(諸如大腸桿菌來源之細菌菌株)或酵母細胞株。
類似地，一經產生，抗體多肽即可根據此項技術中之標準程序加以純化，該等程序諸如交叉流過濾、硫酸銨沈澱、親和管柱層析 及其類似程序。
本文所述之抗體多肽亦可用於設計及合成將與本發明之抗體多肽適用於相同治療應用的肽或非肽模擬物。參見例如Saragobi等人，Science,253：792-795(1991)，其內容以全文引用的方式併入本文中。
篩檢分析
本發明亦包括旨在有助於鑒別展現PCSK9相關疾病或病症之症狀之患者的與PCSK9相關之疾病及病症的篩檢分析。
在一些實施例中，抗體用作診斷工具。抗體可用於分析樣品及/或個體中存在之PCSK9之量。如將由熟習此項技術者所瞭解，此等抗體無需為中和抗體。在一些實施例中，診斷抗體不為中和抗體。在一些實施例中，診斷抗體所結合之抗原決定基與中和抗體結合之抗原決定基不同。在一些實施例中，兩種抗體不彼此競爭。
在一些實施例中，本文揭露之抗體用於或提供於用於偵測哺乳動物組織或細胞中之PCSK9以篩檢/診斷與PCSK9含量變化相關之疾病或病症的分析套組及/或方法中。套組包含結合PCSK9之抗體及用於指示抗體與PCSK9(若存在)結合及視情況PCSK9蛋白質含量之手段。可使用用於指示抗體存在之各種手段。舉例而言，螢光團、其他分子探針或酶可連接於抗體且可以多種方式觀測抗體之存在。篩檢此等病症之方法可涉及使用套組或僅使用一種揭露之抗體及確定抗體是否結合樣品中之PCSK9。如將由熟習此項技術者所瞭解，PCSK9之含量較高或升高將導致較大量之抗體結合樣品中之PCSK9。因此，抗體結合程度可用於確定樣品中有多少PCSK9。PCSK9之量大於預定量(例如未患PCSK9相關病症之人士將具有之量或範圍)之個體或樣品可表徵為患有PCSK9介導之病症。在一些實施例中，向服用士他汀之個體投與抗體以確定士他汀是否已影響該個體體內PCSK9之量。
本發明亦係有關一種偵測表現PCSK9之細胞之存在的活體內成像方法，其包含投與診斷有效量之診斷組合物。該活體內成像適用於偵測或成像例如表現PCSK9之細胞或器官，且可適用作用於設計有效癌症治療方案之計劃方案之一部分。治療方案可包括例如放射、化學療法、 細胞激素療法、基因療法及抗體療法中之一或多者以及抗PCSK9抗體或其片段。
本發明更提供一種用於偵測本發明之抗PCSK9抗體與PCSK9之結合之套組。特定言之，套組可用於偵測可與本發明之抗PCSK9抗體或其免疫反應性片段特異性反應之PCSK9之存在。套組亦可包括結合於基質之抗體、可與抗原反應之二次抗體及用於偵測該二次抗體與抗原之反應之試劑。該種套組可為ELISA套組且可包含基質、一次及二次抗體(適當時)、及例如如本文所述之任何其他必要試劑，諸如可偵測部分、酶受質及顯色試劑。診斷套組亦可呈免疫墨點套組形式。診斷套組亦可呈化學發光套組(Meso Scale Discovery,Gaithersburg,MD)形式。診斷套組亦可為基於鑭系元素之偵測套組(PerkinElmer,San Jose,CA)。
熟練臨床醫師將瞭解，生物樣品包括(但不限於)血清、血漿、尿液、唾液、黏液、胸膜液、滑液及脊髓液。
改善或減輕與PCSK9相關之疾病及病症之症狀或治療或預防與PCSK9相關之疾病及病症的方法
在本發明之另一實施例中，本文所述之抗PCSK9抗體或其片段適用於改善或減輕與PCSK9相關之疾病及病症之症狀或治療或預防與PCSK9相關之疾病及病症。本文所述之抗PCSK9抗體或其片段以及組合亦可以如以下更詳細描述之醫藥或診斷組合物形式以治療有效量向需要治療與PCSK9相關之疾病及病症之患者投與。
在本發明之另一實施例中，本文所述之抗PCSK9抗體或其片段在存在或不存在第二藥劑下適用於改善或減輕與膽固醇、LDL或LDLR含量變化相關、涉及膽固醇、LDL或LDLR含量變化或可受膽固醇、LDL或LDLR含量變化影響之病症之症狀或治療或預防該等病症。在一些實施例中，「膽固醇相關病症」(其包括「血清膽固醇相關病症」)包括以下中之任一或多者：高膽固醇血症、心臟病、代謝症候群、糖尿病、冠心病、中風、心血管疾病、阿茲海默氏病及通常可例如顯現為總血清膽固醇升高、LDL升高、三酸甘油酯升高、VLDL升高及/或低HDL之血脂異常。可單獨或與一或多種其他藥劑組合使用本發明之抗體或抗體片段治療之原 發性及繼發性血脂異常的一些非限制性實例包括代謝症候群、糖尿病、家族性組合高脂血症、家族性高三酸甘油酯血症、家族性高膽固醇血症，包括異型接合高膽固醇血症、同型接合高膽固醇血症、家族性缺陷脂蛋白元B-100；多基因高膽固醇血症；殘粒移除疾病、肝脂肪酶缺乏症；繼發於以下任一者之血脂異常：膳食不慎重、甲狀腺機能減退、藥物(包括雌激素及孕酮療法、β-阻斷劑及噻嗪化物利尿劑)；腎病症候群、慢性腎衰竭、庫興氏症候群、原發性膽汁性硬化、肝醣儲積症、肝細胞瘤、膽汁鬱積、肢端肥大症、胰島素瘤、單一性生長激素缺乏症及酒精誘發性高三酸甘油酯血症。本發明之抗體或抗體片段亦可適用於預防或治療動脈粥樣硬化疾病，諸如冠心病、冠狀動脈疾病、周邊動脈疾病、中風(缺血性及出血性)、心絞痛或腦血管疾病及急性冠脈症候群、心肌梗塞。在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段適用於降低以下之風險：非致命性心臟病發作、致命性及非致命性中風、某些類型之心臟手術、因心臟衰竭之住院、心臟病患者之胸痛、及/或由已有心臟病引起之心血管事件，該已有心臟病諸如先前心臟病發作、先前心臟手術及/或伴有動脈阻塞跡象之胸痛。在一些實施例中，本發明之抗體或抗體片段及方法可用於降低復發性心血管事件之風險。
投藥
在本發明之一個實施例中，本文所述之抗PCSK9抗體或其PCSK9結合片段以及該等抗體或抗體片段之組合係以介於每公斤接受者個體體重約0.1mg與100.0mg之間的濃度投與個體。在本發明之一較佳實施例中，本文所述之抗PCSK9抗體或其PCSK9結合片段以及該等抗體或抗體片段之組合係以每公斤接受者個體體重約0.4mg之濃度投與個體。在本發明之一較佳實施例中，本文所述之抗PCSK9抗體或其PCSK9結合片段以及該等抗體或抗體片段之組合係以每26週或小於每26週一次，諸如每16週或小於每16週一次、每8週或小於每8週一次、每4週或小於每4週一次、每2週或小於每2週一次、每週或小於每週一次、或每日或小於每日一次之頻率投與接受者個體。
Fab片段可每2週或小於每2週、每週或小於每週、每日或 小於每日一次、每日多次及/或每數小時一次投與。在本發明之一個實施例中，患者每日接受以1天1至6次之分次劑量形式或以有效獲得所要結果之持續釋放形式給與之每天0.1mg/kg至40mg/kg之Fab片段。
應瞭解向指定患者投與之抗體或Fab之濃度可大於或低於上述示範性投藥濃度。
熟習此項技術者將能夠經由例如由本文揭露內容及以下中之教示指導之常規實驗確定有效投藥劑量及頻率：Goodman,L.S.,Gilman,A.,Brunton,L.L.,Lazo,J.S.及Parker,K.L.(2006).Goodman & Gilman's the pharmacological basis of therapeutics.New York：McGraw-Hill；Howland,R.D.,Mycek,M.J.,Harvey,R.A.,Champe,P.C.及Mycek,M.J.(2006).Pharmacology.Lippincott's illustrated reviews.Philadelphia：Lippincott Williams & Wilkins；及Golan,D.E.(2008).Principles of pharmacology：the pathophysiologic basis of drug therapy.Philadelphia,Pa.，[等]：Lippincott Williams & Wilkins。
在本發明之另一實施例中，本文所述之抗PCSK9抗體或其PCSK9結合片段以及該等抗體或抗體片段之組合係以醫藥調配物形式投與個體。
「醫藥組合物」係指適於投與哺乳動物之化學或生物組合物。此等組合物可經特別調配以供經由許多途徑中之一或多者投與，該等途徑包括(但不限於)經頰、上皮、硬膜外、吸入、動脈內、心臟內、腦室內、皮內、肌肉內、鼻內、眼內、腹膜內、脊柱內、鞘內、靜脈內、經口、非經腸、經由灌腸劑或栓劑之經直腸、皮下、真皮下、舌下、經皮及經黏膜。此外，投藥可藉助於注射、散劑、液體、凝膠劑、滴劑或其他投藥手段來進行。
在本發明之一個實施例中，本文所述之抗PCSK9抗體或其PCSK9結合片段以及該等抗體或抗體片段之組合可視情況與一或多種活性藥劑組合投與。此等活性藥劑包括止痛劑、抗組胺劑、退熱劑、消炎劑、抗生素、抗病毒劑及抗細胞激素劑。活性藥劑包括TNF-α、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-12、IL-13、IL-18、IFN-α、IFN-γ、BAFF、 CXCL13、IP-10、VEGF、EPO、EGF、HRG、肝細胞生長因子(HGF)、鐵調素(Hepcidin)之促效劑、拮抗劑及調節劑，包括針對任何上述者具有反應性之抗體及針對任何其受體具有反應性之抗體。活性藥劑亦包括(但不限於)2-芳基丙酸、乙醯氯芬酸(Aceclofenac)、阿西美辛(Acemetacin)、乙醯水楊酸(Acetylsalicylic acid)(阿斯匹靈)、阿氯芬酸(Alclofenac)、阿明洛芬(Alminoprofen)、阿洛潑林(Amoxiprin)、胺基安替比林(Ampyrone)、芳基烷酸、阿紮丙酮(Azapropazone)、貝諾酯(Benorylate/Benorilate)、苯噁洛芬(Benoxaprofen)、溴芬酸(Bromfenac)、卡洛芬(Carprofen)、塞來昔布(Celecoxib)、膽鹼水楊酸鎂(Choline magnesium salicylate)、氯非宗(Clofezone)、COX-2抑制劑、右布洛芬(Dexibuprofen)、右酮洛芬(Dexketoprofen)、雙氯芬酸(Diclofenac)、二氟苯水楊酸(Diflunisal)、哚昔康(Droxicam)、乙柳醯胺(Ethenzamide)、依託度酸(Etodolac)、依託昔布(Etoricoxib)、菲斯胺(Faislamine)、滅酸(fenamic acid)、芬布芬(Fenbufen)、非諾洛芬(Fenoprofen)、氟滅酸(Flufenamic acid)、氟諾洛芬(Flunoxaprofen)、氟比洛芬(Flurbiprofen)、布洛芬(Ibuprofen)、異丁普生(Ibuproxam)、吲哚美辛(Indometacin)、吲哚洛芬(Indoprofen)、酮保泰松(Kebuzone)、酮洛芬(Ketoprofen)、酮咯酸(Ketorolac)、氯諾昔康(Lornoxicam)、氯索洛芬(Loxoprofen)、羅美昔布(Lumiracoxib)、水楊酸鎂、甲氯滅酸(Meclofenamic acid)、甲滅酸(Mefenamic acid)、美洛昔康(Meloxicam)、安乃近(Metamizole)、水楊酸甲酯、莫非保松(Mofebutazone)、萘普酮(Nabumetone)、萘普生(Naproxen)、N-芳基鄰胺苯甲酸、神經生長因子(NGF)、奧沙美辛(Oxametacin)、奧沙普秦(Oxaprozin)、氧昔康(Oxicams)、羥保泰松(Oxyphenbutazone)、帕瑞昔布(Parecoxib)、非那宗(Phenazone)、苯基丁氮酮(Phenylbutazone)、苯基丁氮酮、毗羅昔康(Piroxicam)、吡洛芬(Pirprofen)、洛芬(profens)、丙谷美辛(Proglumetacin)、吡唑啶衍生物、羅非昔布(Rofecoxib)、水楊酸水楊酯、水楊醯胺(Salicylamide)、水楊酸鹽、P物質(Substance P)、磺吡酮(Sulfinpyrazone)、舒林酸(Sulindac)、舒洛芬(Suprofen)、替諾昔康(Tenoxicam)、噻洛芬酸(Tiaprofenic acid)、托芬那酸(Tolfenamic acid)、托 美丁(Tolmetin)及伐地昔布(Valdecoxib)。
抗組胺劑可為對抗組胺之作用或其自細胞(例如肥大細胞)之釋放的任何化合物。抗組胺劑包括(但不限於)阿伐斯汀(acrivastine)、阿司咪唑(astemizole)、阿紮他定(azatadine)、氮卓斯汀(azelastine)、貝他斯汀(betatastine)、溴非尼臘明(brompheniramine)、布克立嗪(buclizine)、西替利嗪(cetirizine)、西替利嗪類似物、氯芬胺(chlorpheniramine)、氯馬斯汀(clemastine)、CS 560、賽庚啶(cyproheptadine)、地氯雷他定(desloratadine)、右氯苯那敏(dexchlorpheniramine)、苯海拉明(diphenhydramine)、依巴斯汀(ebastine)、依匹斯汀(epinastine)、非索非那定(fexofenadine)、HSR 609、羥嗪(hydroxyzine)、左卡巴斯汀(levocabastine)、氯雷他定(loratidine)、甲基東莨菪鹼(methscopolamine)、咪唑斯汀(mizolastine)、諾阿司咪唑(norastemizole)、苯茚胺(phenindamine)、異丙嗪(promethazine)、吡拉明(pyrilamine)、特非那定(terfenadine)及曲尼司特(tranilast)。
抗生素包括(但不限於)阿米卡星(Amikacin)、胺基醣苷(Aminoglycoside)、阿莫西林(Amoxicillin)、胺苄青黴素(Ampicillin)、安沙黴素(Ansamycin)、胂凡納明(Arsphenamine)、阿奇黴素(Azithromycin)、阿洛西林(Azlocillin)、胺曲南(Aztreonam)、桿菌肽(Bacitracin)、碳頭孢烯(Carbacephem)、碳青黴烯(Carbapenems)、羧苄青黴素(Carbenicillin)、頭孢克洛(Cefaclor)、頭孢羥胺苄(Cefadroxil)、頭孢立新(Cefalexin)、頭孢噻吩(Cefalothin)、先鋒黴素I(Cefalotin)、頭孢羥唑(Cefamandole)、頭孢唑啉(Cefazolin)、頭孢地尼(Cefdinir)、頭孢托侖(Cefditoren)、頭孢吡肟(Cefepime)、頭孢克肟(Cefixime)、頭孢哌酮(Cefoperazone)、頭孢噻肟(Cefotaxime)、頭孢西丁(Cefoxitin)、頭孢泊肟(Cefpodoxime)、頭孢羅齊(Cefprozil)、頭孢他啶(Ceftazidime)、頭孢布坦(Ceftibuten)、頭孢唑肟(Ceftizoxime)、頭孢吡普(Ceftobiprole)、頭孢曲松(Ceftriaxone)、頭孢呋辛(Cefuroxime)、頭孢菌素(Cephalosporin)、氯胺苯醇(Chloramphenicol)、西司他丁(Cilastatin)、環丙沙星(Ciprofloxacin)、克拉黴素(Clarithromycin)、克林達黴素(Clindamycin)、氯唑西林(Cloxacillin)、黏菌素(Colistin)、複方 磺胺甲噁唑(Co-trimoxazole)、達福普汀(Dalfopristin)、地美環素(Demeclocycline)、雙氯青黴素(Dicloxacillin)、地紅黴素(Dirithromycin)、多利培南(Doripenem)、多西環素(Doxycycline)、依諾沙星(Enoxacin)、厄他培南(Ertapenem)、紅黴素(Erythromycin)、乙胺丁醇(Ethambutol)、氟氯西林(Flucloxacillin)、磷黴素(Fosfomycin)、呋喃唑酮(Furazolidone)、梭鏈孢酸(Fusidic acid)、加替沙星(Gatifloxacin)、格爾德黴素(Geldanamycin)、慶大黴素(Gentamicin)、糖肽(Glycopeptide)、除莠黴素(Herbimycin)、亞胺培南(Imipenem)、異菸肼(Isoniazid)、康黴素(Kanamycin)、左氧氟沙星(Levofloxacin)、林肯黴素(Lincomycin)、利奈唑胺(Linezolid)、洛美沙星(Lomefloxacin)、氯拉卡比(Loracarbef)、巨環內酯(Macrolide)、磺胺米隆(Mafenide)、美羅培南(Meropenem)、甲氧西林(Meticillin)、甲硝噠唑(Metronidazole)、美洛西林(Mezlocillin)、米諾環素(Minocycline)、單環β-內醯胺(Monobactam)、莫西沙星(Moxifloxacin)、莫匹羅星(Mupirocin)、萘夫西林(Nafcillin)、新黴素(Neomycin)、奈替米星(Netilmicin)、硝呋妥因(Nitrofurantoin)、諾氟沙星(Norfloxacin)、氧氟沙星(Ofloxacin)、噁西林(Oxacillin)、氧四環素(Oxytetracycline)、巴龍黴素(Paromomycin)、青黴素(Penicillin)、青黴素類(Penicillins)、哌拉西林(Piperacillin)、平板黴素(Platensimycin)、多黏菌素B(Polymyxin B)、多肽、百浪多息(Prontosil)、吡嗪醯胺(Pyrazinamide)、喹諾酮(Quinolone)、奎奴普丁(Quinupristin)、利福平(Rifampicin)、利福平(Rifampin)、羅紅黴素(Roxithromycin)、大觀黴素(Spectinomycin)、鏈黴素(Streptomycin)、乙醯磺胺(Sulfacetamide)、磺胺甲噻二唑(Sulfamethizole)、磺胺(Sulfanilimide)、硫氮磺胺吡啶(Sulfasalazine)、磺胺異噁唑(Sulfisoxazole)、磺醯胺(Sulfonamide)、替考拉寧(Teicoplanin)、泰利黴素(Telithromycin)、四環素(Tetracycline)、四環素類(Tetracyclines)、提卡西林(Ticarcillin)、磺甲硝咪唑(Tinidazole)、妥布黴素(Tobramycin)、甲氧苄啶(Trimethoprim)、甲氧苄啶-磺胺甲噁唑、醋竹桃黴素(Troleandomycin)、曲伐沙星(Trovafloxacin)及萬古黴素(Vancomycin)。
活性藥劑亦包括醛固酮(Aldosterone)、倍氯米松(Beclometasone)、倍他米松(Betamethasone)、皮質類固醇(Corticosteroid)、 皮質醇(Cortisol)、乙酸皮質酮(Cortisone acetate)、乙酸去氧皮質酮(Deoxycorticosterone acetate)、地塞米松(Dexamethasone)、乙酸氟氫皮質酮(Fludrocortisone acetate)、糖皮質素(Glucocorticoid)、氫化皮質酮(Hydrocortisone)、甲潑尼龍(Methylprednisolone)、潑尼松龍(Prednisolone)、潑尼松(Prednisone)、類固醇及曲安奈德(Triamcinolone)。亦涵蓋此等活性藥劑之任何適合組合。
「醫藥賦形劑」或「醫藥學上可接受之賦形劑」為於其中調配活性治療劑之載劑，通常為液體。在本發明之一個實施例中，活性治療劑為本文所述之人類化抗體或其一或多種片段。賦形劑通常不對調配物提供任何藥理學活性，但其可提供化學及/或生物穩定性及釋放特徵。示範性調配物可見於例如以引用的方式併入本文中之Remington's Pharmaceutical Sciences，第19版，Grennaro,A.編，1995中。
如本文所用，「醫藥學上可接受之載劑」或「賦形劑」包括生理上相容之任何及所有溶劑、分散介質、包衣、抗細菌劑及抗真菌劑、等張劑及吸收延遲劑。在一個實施例中，載劑適於非經腸投藥。或者，載劑可適於靜脈內、腹膜內、肌肉內或舌下投藥。醫藥學上可接受之載劑包括無菌水性溶液或分散液及用於臨時製備無菌可注射溶液或分散液之無菌散劑。使用此等介質及試劑用於醫藥活性物質在此項技術中為熟知的。除非任何習知介質或試劑與活性化合物不相容，否則涵蓋其用於本發明之醫藥組合物中。補充性活性化合物亦可併入組合物中。
醫藥組合物通常在製造及儲存條件下必須無菌且穩定。本發明預期醫藥組合物以凍乾形式存在。組合物可調配成溶液、微乳液、脂質體或適於高藥物濃度之其他有序結構。載劑可為溶劑或分散介質，其含有例如水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇及液體聚乙二醇)及其適合混合物。本發明進一步預期在醫藥組合物中包括穩定劑。適當流動性可例如藉由在分散液之情況下維持所需粒度及藉由使用界面活性劑加以維持。
在許多情況下，在組合物中較佳包括等張劑，例如糖、多元醇(諸如甘露糖醇或山梨糖醇)或氯化鈉。可注射組合物之延長吸收可藉由在組合物中包括延遲吸收之試劑，例如單硬脂酸鹽及明膠來達成。此 外，鹼性多肽可以延時釋放調配物形式，例如以包括緩慢釋放聚合物之組合物形式調配。活性化合物可用將防止化合物快速釋放之載劑製備，諸如控制釋放調配物，包括植入物及微囊封傳遞系統。可使用生物可降解之生物相容性聚合物，諸如乙烯乙酸乙烯酯、聚酸酐、聚乙醇酸、膠原蛋白(collagen)、聚原酸酯、聚乳酸及聚乳酸聚乙醇酸共聚物(PLG)。製備此等調配物之許多方法為熟習此項技術者所已知。
對於各所述實施例，化合物可藉由多種劑型投與。涵蓋為一般技藝人士所已知之任何生物學上可接受之劑型及其組合。此等劑型之實例包括(但不限於)可復原散劑、酏劑、液體、溶液、懸浮液、乳液、散劑、顆粒劑、粒子、微粒、可分散顆粒劑、扁囊劑、吸入劑、氣霧劑吸入劑、貼片、粒子吸入劑、植入物、儲槽植入物、可注射劑(包括皮下、肌肉內、靜脈內及皮內)、輸注及其組合。
以上對本發明之各種所說明實施例之描述不欲為詳盡的或將本發明限於所揭露之精確形式。儘管本文出於說明目的描述了本發明之特定實施例及實例，但如熟習相關技術者所將認識到，在本發明之範疇內，各種等效修改為可能的。本文提供之本發明之教示可應用於除上述實例以外之其他目的。
可根據以上詳細描述對本發明作出此等及其他變化。一般而言，在以下申請專利範圍中，所用術語不應解釋為將本發明限於說明書及申請專利範圍中所揭露之特定實施例。因此，本發明不受揭露內容限制，而是本發明之範疇將完全由以下申請專利範圍確定。
本發明可以除上文描述及實例中特別描述之方式以外之方式實施。根據以上教示，本發明之眾多修改及變化形式為可能的，且因此在隨附申請專利範圍之範疇內。
與兔源性單株抗體之人類化及用以維持抗原結合親和力之較佳序列修飾相關之某些教示揭露於2008年5月21日申請之名稱為「Novel Rabbit Antibody Humanization Methods and Humanized Rabbit Antibodies」之對應於國際公開案第WO/2008/144757號的國際申請案第PCT/US2008/064421號中，該專利文獻之揭露內容以全文引用的方式併入 本文中。
與使用接合勝任酵母及相應方法產生抗體或其片段相關之某些教示揭露於2006年5月8日申請之美國專利申請案第11/429,053號(美國專利申請公開案第US2006/0270045號)中，該專利文獻之揭露內容以全文引用的方式併入本文中。
某些PCSK9抗體聚核苷酸及多肽揭露於隨附於本專利申請檔案之序列表中，且該序列表之揭露內容以全文引用的方式併入本文中。
在本發明之先前技術、詳細描述及實例中引用之各文件(包括專利、專利申請案、期刊文章、摘要、手冊、書籍或其他揭露內容)之全部揭露內容以全文引用的方式併入本文中。
提供以下實例以便向一般技藝人士提供如何製備及使用本發明之完全揭露及描述，且以下實例不欲限制被視為本發明物之事物之範疇。已努力確保關於所用數值(例如量、溫度、濃度等)之準確性，但應允許一些實驗誤差及偏差。除非另外指示，否則份為重量份，分子量為平均分子量，溫度係以攝氏度計；且壓力為大氣壓或接近大氣壓。
實例
實例1 製備結合PCSK9之抗體
藉由使用實質上如本文所述之抗體選擇方案，產生一組對PCSK9具有特異性之抗體。
免疫策略
用人類PCSK9(R&D及內部產生)免疫兔。免疫由以下組成：首先皮下(sc)注射含100μg抗原之完全弗氏佐劑(complete Freund’s adjuvant，CFA)(Sigma)，隨後相隔兩週進行兩次加強免疫，各自含有與含50μg之不完全弗氏佐劑(IFA)(Sigma)混合之50μg抗原。在第55天將動物放血，且藉由ELISA(抗原識別)測定血清效價。
藉由在多個部位進行反復免疫來進行另外的免疫。根據以下時程對動物給與高劑量或低劑量抗原：第1天初始劑量(400μg或100μg)以及第3、6、9及12天加強免疫(200μg或50μg)。在第13天進行組織收 集。
抗體選擇效價評估
為鑒別及表徵結合人類PCSK9之抗體，藉由ELISA測試含抗體之溶液。簡言之，將中和親和素(neutravidin)塗佈之各盤(Thermo Scientific)用於PBS中稀釋之生物素化人類PCSK9(每孔50μL，1μg/mL)在室溫下塗佈約1小時或者在4℃下塗佈隔夜。各盤接著在室溫下用ELISA緩衝液阻斷1小時且使用洗滌緩衝液(PBS，0.05%吐溫20(tween 20))洗滌。使用ELISA緩衝液(含0.5%魚皮明膠之PBS，pH 7.4)連續稀釋所測試之血清樣品。將50微升稀釋血清樣品轉移於各孔上且在室溫下培育1小時。在此培育之後，用洗滌緩衝液洗滌盤。對於顯色，將抗兔特異性Fc-HRP(於ELISA緩衝液中以1：5000稀釋)添加於各孔上且在室溫下培育45分鐘。在用洗滌溶液進行3次洗滌步驟之後，使用TMB受質在室溫下使盤顯色2分鐘且使用0.5M HCl淬滅反應。在450nm下讀取孔吸光度。
組織收集
一旦產生可接受之效價，即將兔處死。收集脾、淋巴結及全血且如下處理：藉由離解組織且用20cc注射器之柱塞將其推過70μm無菌絲網(Fisher)來將脾及淋巴結處理成單細胞懸浮液。將細胞收集於PBS中。藉由離心來將細胞洗滌兩次。在末次洗滌之後，藉由錐蟲藍(trypan blue)測定細胞密度。在1500RPM下離心細胞10分鐘；丟棄上清液。將細胞再懸浮於適當體積之含10%二甲亞碸(DMSO，Sigma)之FBS(Hyclone)中且以1毫升/小瓶分配。小瓶在-70℃下於緩慢冷凍室中儲存24小時且儲存於液氮中。
B細胞選擇、增濃及培養條件
在建立B細胞培養物當天，使PBMC、脾細胞或淋巴結小瓶解凍以供使用。將小瓶自LN2槽移除且置放在37℃水浴中直至解凍。將小瓶之內含物轉移至15mL錐形離心管(Corning)中且緩慢添加10mL上述改良RPMI至管中。在2K RPM下離心細胞5分鐘，且丟棄上清液。將細胞再懸浮於10mL新鮮培養基中。藉由錐蟲藍測定細胞密度及活力。
如下將生物素化人類PCSK9預裝載於抗生蛋白鏈菌素珠粒上。將75微升抗生蛋白鏈菌素珠粒(Milteny Biotec,Auburn CA)與N末端生物素化huPCSK9(10μg/mL最終濃度)及300μl PBF混合。在4℃下培育此混合物30分鐘且使用MACS® 分離管柱(Miltenyi Biotec)移除未結合之生物素化人類PCSK9，以1ml沖洗來移除未結合物質。接著浸出物質，隨後用於將來自以上之細胞以每1E7個細胞100μL進行再懸浮，接著在4℃下培育混合物30分鐘且用10mL PBF洗滌一次。在洗滌之後，將細胞再懸浮於500μL PBF中且擱置。將MACS® MS管柱(Miltenyi Biotec,Auburn CA)在磁性台架(Milteni)上用500mL PBF預沖洗。將細胞懸浮液經由預過濾器施加於管柱上，且收集未結合部分。管柱用2.5mL PBF緩衝液洗滌。將管柱自磁性台架移除且置放於清潔無菌1.5mL eppendorf管上。添加1mL PBF緩衝液至管柱頂部，且收集陽性選擇細胞。藉由錐蟲藍染色測定陽性細胞部分之產率及活力。陽性選擇產生平均1%之起始細胞濃度。
建立試驗性細胞篩檢(pilot cell screen)以提供關於培養物之接種量之資訊。以每孔10、25、50、100或200個增濃B細胞接種各盤。此外，各孔含有25-50K個細胞/孔之經照射EL-4.B5細胞(5,000雷得(Rad))及最終體積250微升/孔之含適當含量活化兔T細胞上清液(參見美國專利申請公開案第20070269868號)(視製劑而定，在1-5%之範圍內)的高葡萄糖改良RPMI培養基。在37℃下於4% CO2 中培育培養物5至7天。
藉由抗原識別(ELISA)進行B細胞培養物篩檢
為鑒別產生抗人類PCSK9抗體之孔，使用與對於藉由抗原識別(ELISA)測定血清樣品效價所述相同且具有以下變化之方案。簡言之，將中和親和素塗佈之各盤用生物素化人類PCSK9(每孔50μL，各自1μg/mL)塗佈。在不進行預先稀釋下即測試B細胞上清液樣品(50μL)。
使用一或多種分析鑒別B細胞上清液中之功能活性
在藉由抗原識別ELISA進行鑒別之後，使用PCSK9阻斷ELISA鑒別靶向PCSK9之功能改良抗原決定基之抗體。將生物素化PCSK9塗佈於抗生蛋白鏈菌素盤上且接著使用一組具有人類Fc區之重組功能改良抗PCSK9抗體(內部產生)來阻斷功能性抗原決定基。一旦抗原決定基被阻 斷，即將B細胞培養物上清液置於孔上且藉由抗兔Fc-HRP(Jackson ImmunoResearch)來偵測抗體結合。
來自抗原特異性B細胞之抗體序列之擴增及序列測定
在實施用以鑒別含有具有所要功能性質之抗PCSK9抗體之B細胞上清液的功能性分析之後，接著分離分泌此等抗體之抗原特異性B細胞。此後使用自單一經分離B細胞分離抗體序列之基於RT-PCR之組合方法自此等經分離B細胞回收抗體序列。設計含有限制酶識別位點之引子以便在諸如兔免疫球蛋白序列之目標免疫球蛋白基因(重及輕)之保守區及恆定區中黏接，且使用兩步巢式PCR回收來擴增抗體序列。分析來自各孔之擴增子之回收率及尺寸完整性。所得片段接著用AluI消化以獲得序列純系性指紋。相同序列在其電泳分析中顯示共同斷裂型態。接著使用PCR引子內所含之限制酶位點消化原始重鏈及輕鏈擴增子片段且選殖至表現載體中。擴增含有次選殖DNA片段之載體且純化。在表現之前對次選殖之重鏈及輕鏈之序列進行驗證。
重組產生具有所要抗原特異性及/或功能性質之單株抗體
為測定自特異性B細胞回收之抗體之抗原特異性及功能性質，將驅動所要成對重鏈及輕鏈序列表現之載體轉染至HEK-293細胞中。
藉由ELISA測定重組抗體對抗原之識別
為表徵重組表現抗體結合人類PCSK9之能力，藉由ELISA測試含抗體之溶液。所有培育皆在室溫下進行。簡言之，將中和親和素盤(Pierce)用ELISA緩衝液(PBS，0.5%魚皮明膠，0.05%吐溫-20)阻斷1小時。在阻斷之後，各盤用含生物素化PCSK9之溶液(1μg/mL於ELISA緩衝液中)塗佈1小時。PCSK9塗佈之盤接著於洗滌緩衝液(PBS，0.05%吐溫-20)中洗滌3次。在塗佈之後，各盤再次用ELISA緩衝液阻斷1小時。移除阻斷溶液且各盤接著與一系列所測試抗體之稀釋液一起培育約1小時。在此培育結束時，將盤用洗滌緩衝液洗滌3次且進一步與含二次抗體之溶液(過氧化酶結合之親和純F(ab')2片段山羊抗人類IgG，對Fc片段具有特異性[Jackson Immunoresearch])一起培育約45分鐘且洗滌3次。接著添加受質溶液(TMB過氧化酶受質，BioFx)且在黑暗中培育3至5分鐘。藉由添加0.5M HCl來停止反應且於盤讀取器中在450nm下讀取盤。
結果：圖13-26說明抗PCSK9抗體Ab1-Ab24結合且識別人類PCSK9。
藉由調節HepG2細胞對LDL-C之攝取對重組抗體進行功能表征
在細胞基分析中測試抗PCSK9抗體中和PCSK9對HepG2細胞中之LDL-C攝取之抑制的能力。將HepG2細胞接種(30,000個細胞/孔)在膠原蛋白塗佈之96孔盤中。24小時後，培養基用含有0.5%低脂質FBS之新鮮培養基替換。在室溫下將各種濃度之抗PCSK9抗體與3μg/mL PCSK9一起培育1小時且接著添加至HepG2細胞中並在37℃下培育5小時。添加BODIPY-LDL至各孔中且在37℃下培育隔夜。移除培養基且用RIPA緩衝液溶解細胞並在盤讀取器(激發485nm；發射535nm)上量測由細胞攝取之BODIPY-LDL之量。
結果：圖27-46說明抗PCSK9抗體中和PCSK9抑制LDL-C攝取之能力。
藉由ELISA測定重組抗體對食蟹獼猴(Cynomolgus monkey)抗原之識別
為表徵重組表現抗體結合食蟹獼猴PCSK9之能力，藉由ELISA測試含抗體之溶液。程序係如對於人類PCSK9 ELISA所述，例外之處為利用食蟹獼猴PCSK9。
結果：圖47-60說明抗PCSK9抗體結合且識別食蟹獼猴PCSK9。
實例2 酵母細胞表現
構築重鏈及輕鏈之畢赤酵母表現載體。
人類化輕鏈及重鏈片段係商業合成且次選殖至pGAP表現載體中。pGAP表現載體使用GAP啟動子來驅動免疫球蛋白鏈及用於輸出之分泌前導序列之表現。此外，此載體含有常用元件，諸如細菌複製起點及在畢赤酵母中賦予對抗生素G418之抗性之康黴素抗性基因的複本。G418提供一種選擇含有所要表現載體整合至基因組中之菌株的手段。
表現載體轉型至單倍體met1及lys3畢赤酵母宿主菌株中
用於轉型單倍體畢赤酵母菌株及操縱畢赤酵母生殖週期 之所有方法皆如Pichia Protocols(Methods in Molecular Biology Higgings,DR及Cregg,JM編1998.Humana Press,Totowa,NJ)中所述來進行。在轉型之前，各載體在GAP啟動子序列內線性化以引導載體整合至畢赤酵母基因組之GAP啟動子基因座中。使用電穿孔轉染單倍體菌株且在YPDS(酵母萃取物、蛋白腖右旋糖及山梨糖醇)G418瓊脂盤上選擇成功轉型體。藉由南方墨點分析測定單倍體菌株之重鏈及輕鏈基因之複本數。接著使單倍體菌株接合且針對其在不存在胺基酸標記(亦即Lys及Met)下生長之能力進行選擇。所得二倍體純系接著經受最終南方墨點以確認重鏈及輕鏈之複本數。使用用於監測表現之生物層干涉量測術蛋白質-A生物感測器(Octet,ForteBio)來選擇表現相關抗體之純系。使用美國申請案第61/525,307號中揭露之方法產生雙重基因座菌株，該申請案之內容以全文引用的方式併入本文中。
實例3 在畢赤酵母中表現Ab18
製備用於表現全長抗體之畢赤酵母菌株。對於所有全長抗體表現菌株，皆產生單倍體菌株且隨後使其接合。一種單倍體菌株表現全長輕鏈序列且另一單倍體菌株表現全長重鏈序列。使用各二倍體菌株來產生研究細胞庫且用於在生物反應器中進行表現。
首先使用包含以下養分(%w/v)之培養基利用研究細胞庫擴增接種物：酵母萃取物3%、無水右旋糖4%、YNB 1.34%、生物素0.004%及100mM磷酸鉀。為產生用於發酵槽之接種物，在振盪培育箱中在30℃及300RPM下擴增細胞庫約24小時。接著添加10%接種物至含有1L無菌生長培養基之Labfors 2.5L工作體積容器中。生長培養基包含以下養分：硫酸鉀18.2g/L、磷酸二氫銨36.4g/L、磷酸氫二鉀12.8g/L、七水硫酸鎂3.72g/L、二水合檸檬酸鈉10g/L、甘油40g/L、酵母萃取物30g/L、PTM1痕量金屬4.35mL/L及消泡劑204 1.67mL/L。PTM1痕量金屬溶液包含以下組分：五水硫酸銅6g/L、碘化鈉0.08g/L、水合硫酸錳3g/L、脫水鉬酸鈉0.2g/L、硼酸0.02g/L、氯化鈷0.5g/L、氯化鋅20g/L、七水硫酸亞鐵65g/L、生物素0.2g/L及硫酸5mL/L。
如下設置生物反應器過程控制參數：攪拌1,000RPM，空 氣流每分鐘1.35標準公升，溫度28℃且使用氫氧化銨控制pH值在6下。不提供氧氣補充。
使發酵培養物生長約12至16小時直至初始甘油耗乏，如藉由溶解氧尖峰所指示。在溶解氧尖峰之後使培養物饑餓約3小時。在此饑餓時期之後，添加團式乙醇添加物至反應器中以達到1%乙醇(w/v)。使發酵培養物平衡15至30分鐘。在乙醇團注後30分鐘啟始進料添加且設置在恆定速率1mL/min下持續40分鐘，接著藉由使用乙醇感測探針保持乙醇濃度在1%下持續剩餘操作時間之乙醇感測器(Raven Biotech)來控制進料泵。進料包含以下組分：酵母萃取物50g/L、右旋糖500g/L、七水硫酸鎂3g/L及PTM1痕量金屬12mL/L。總發酵時間為約90小時。
實例4 使抗體人類化之方法
使抗體人類化之方法先前已描述於頒予之美國專利第7935340號中，該專利之揭露內容以全文引用的方式併入本文中。在一些情況下，有必要確定其他兔構架殘基是否為維持活性所需。在一些情況下，人類化抗體仍然需要保留一些關鍵兔構架殘基以使親和力或活性之損失最小。在此等情況下，必須使人類生殖系序列之單一或多個構架胺基酸再變為原始兔胺基酸以具有所要活性。以實驗方式測定此等變化以鑒別哪些兔殘基為保持親和力及活性所必需。
實例5
抗PCSK9抗體之結合親和力
使用生物層干涉量測術(BLI)在Octet QK(ForteBio)上估計單株抗體對PCSK9之結合親和力。將生物素化抗體以不同密度固定於抗生蛋白鏈菌素(SA)生物感測器之表面。使用於自製造商(ForteBio)購買之1×動力學緩衝液(NaCl 0.0138M；KCl 0.00027M；0.1mg/mL BSA，0.002%吐溫及0.005%疊氮化鈉；pH 7.4，在25℃下)中製備之一系列人類PCSK9稀釋液來研究抗體。在吾人之所選抗原濃度(約0.25μg/mL-2μg/mL)下，締合時間15分鐘及解離時間25分鐘用於Octet分析軟體(v6.4，ForteBio)以使用1：1朗繆爾(Langmuir)結合模型全面擬合資料。此技術不允許感測器再生且測試之各抗體需要一組獨特感測器。抗體親和力之實例列於表1中。
使用SPR測定抗PCSK9抗體(Ab21-24)之結合親和力
使用表面電漿子共振(SPR)在ProteOn XPR36(Bio-Rad)上估計單株抗體對PCSK9之結合親和力。將生物素化抗體以逐漸遞增之密度固定於中和親和素(NLC)晶片之表面。使用於自Thermo Scientific購買且補充有0.2mg/mL來自Jackson ImmunoResearch之牛血清白蛋白(BSA)及0.005%來自VWR之疊氮化鈉之1×HBS-EP+緩衝液(10mM Hepes；150mM NaCl；3mM EDTA，0.05%聚山梨醇酯20；pH 7.6，在25℃下)中製備的一系列人類PCSK9稀釋液來研究抗體。在吾人之所選抗原濃度(約0.08μg/mL-6.7μg/mL)下，締合時間4分鐘及解離時間30-120分鐘用於ProteOn管理軟體(v3.1.0.6，Bio-Rad)以對資料分組且使用1：1朗繆爾結合模型擬合資料。在分析物研究之間及在使抗體結合於表面之後使用10mM甘胺酸(pH 2.0)再生表面。所有4個不同密度之資料進行平均化且計算各抗體之單一KD 及標準 誤差傳播。此等值報導於表2中。
實例6 PCSK9抗體抑制PCSK9與LDLR之相互作用
用ELISA基免疫分析評估該組抗PCSK9抗體阻斷PCSK9與LDLR之相互作用之能力。簡言之，在4℃下將LDLR(0.5μg/mL)塗佈在4HBX盤上隔夜。在室溫下用含0.5%魚皮明膠之PBS(pH 7.4)阻斷各盤1小時，隨後用PBS洗滌3次。在室溫下在連續抗PCSK9抗體稀釋液存在下培育生物素化PCSK9(0.3μg/ml)1小時且接著添加至LDLR塗佈之盤中。在室溫下培育1小時之後，洗滌各盤(用PBS洗滌3次)。對於顯色，添加抗生蛋白鏈菌素-HRP，在室溫下培育1小時，洗滌(於PBS中3次)且在室溫下添加TMB受質持續3分鐘。使用0.5M HCl淬滅反應且在450nm下讀取吸光度。
結果：圖61-84說明抗PCSK9抗體阻斷PCSK9與LDLR之相互作用。
實例7 抗PCSK9抗體降低非人類靈長類動物之血漿LDL-C含量
在年齡3-4歲且重3-4kg之未處理雄性食蟹獼猴中進行藥效學(PD)及藥物動力學(PK)研究。
對3只食蟹獼猴注射媒劑(15mM組胺酸，250mM山梨糖醇，pH 5.5)且對3只猴注射Ab18(5mg/kg)。藉由在第1天進行靜脈內團式投藥來進行注射。
藉由靜脈穿刺收集血液且處理成血清用於進行臨床化學分析。將血液收集於K3 EDTA管中且處理成血漿用於進行PK分析。在注射前、注射後24小時及接著每三天直至第30天自禁食動物收集血液樣品用於進行臨床化學分析。在注射前、5分鐘、30分鐘、1小時、2小時、4小時、8小時、12小時、18小時、24小時、36小時、48小時、96小時及接著每3天直至第30天收集血液樣品用於進行PK分析。所有樣品皆儲存在-70℃下或- 70℃以下。
臨床化學分析包括以下參數：丙胺酸轉胺酶、天冬胺酸轉胺酶、鹼性磷酸酶、γ-麩胺醯基轉移酶、乳酸去氫酶、總膽紅素、尿素氮、C反應性蛋白質、鈣、肌酸酐(creatinine)、磷、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、總蛋白質、白蛋白、球蛋白、白蛋白/球蛋白比率、葡萄糖、膽固醇、三酸甘油酯、鈉、鉀、氯化物及碳酸氫鹽。
結果：圖85說明Ab18導致LDL-C含量歷經14天時期降低多達60%。LDL-C含量隨後快速返回至給藥前含量。在第30天注射Ab18之後，觀測到LDL-C含量之類似降低。觀測到膽固醇降低20-25%(圖86)，而HDL-C含量保持不變(圖87)。
藉由ELISA測定總抗體含量。簡言之，將多陣列96孔高結合盤在4℃下用0.5μg/mL山羊抗人類IgG(猴吸附)塗佈隔夜。在室溫下用含3%阻斷劑A之PBS+0.5%吐溫20阻斷各盤1小時。洗滌(於PBS+0.5%吐溫中3次)各盤且添加樣品，隨後在室溫下培育1小時。洗滌各盤3次且用生物素化人類重鏈/輕鏈抗體及磺基-TAG抗生蛋白鏈菌素偵測Ab18。洗滌各盤3次且用MSD讀取。
結果：表3顯示3只食蟹獼猴中之總抗體含量之結果。
實例8 抗PCSK9抗體降低非人類靈長類動之血漿LDL-C含量
在年齡3-4歲且重3-4.5kg之雄性食蟹獼猴中進行藥效學(PD)研究。
對3只食蟹獼猴注射Ab11(5mg/kg)。藉由在第1天進行靜脈內團式投藥來進行注射。
藉由靜脈穿刺收集血液且處理成血清用於進行臨床化學分析。將血液收集於K3EDTA管中且處理成血漿用於進行PK分析。在注射前、注射後24小時及接著每三天自禁食動物收集血液樣品用於進行臨床化 學分析。在注射前、5分鐘、30分鐘、1小時、2小時、4小時、8小時、12小時、18小時、24小時、36小時、48小時、96小時、168小時、240小時、312小時、384小時、528小時及696小時收集血液樣品用於進行PK分析。所有樣品皆儲存在-70℃下或-70℃以下。
臨床化學分析包括以下參數：丙胺酸轉胺酶、天冬胺酸轉胺酶、鹼性磷酸酶、γ-麩胺醯基轉移酶、乳酸去氫酶、總膽紅素、尿素氮、C反應性蛋白質、鈣、肌酸酐、磷、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、總蛋白質、白蛋白、球蛋白、白蛋白/球蛋白比率、葡萄糖、膽固醇、三酸甘油酯、鈉、鉀、氯化物及碳酸氫鹽。
結果：圖88說明Ab11導致LDL-C含量歷經16天時期降低多達60%。LDL-C含量隨後返回至給藥前含量。觀測到膽固醇降低25-30%(圖89)，而HDL-C含量保持不變(圖90)。
實例9 抗PCSK9抗體降低非人類靈長類動物之血漿LDL-C含量
在年齡3-5歲且重2.8-4.0kg之雄性食蟹獼猴中進行藥效學(PD)研究。
對3只食蟹獼猴注射Ab19(5mg/kg)。藉由在第1天進行靜脈內團式投藥來進行注射。
藉由靜脈穿刺收集血液且處理成血清用於進行臨床化學分析。將血液收集於K3EDTA管中且處理成血漿用於進行PK分析。在注射前、注射後24小時、48小時及96小時及接著每三天直至第34天自禁食動物收集血液樣品用於進行臨床化學分析。在注射前、5分鐘、30分鐘、1小時、2小時、4小時、8小時、12小時、24小時、48小時、96小時及接著每三天直至第34天收集血液樣品用於進行PK分析。所有樣品皆儲存在-70℃下或-70℃以下。
臨床化學分析包括以下參數：丙胺酸轉胺酶、天冬胺酸轉胺酶、鹼性磷酸酶、γ-麩胺醯基轉移酶、乳酸去氫酶、總膽紅素、尿素氮、C反應性蛋白質、鈣、肌酸酐、磷、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、總蛋白質、白蛋白、球蛋白、白蛋白/球蛋白比率、葡萄糖、膽固醇、三酸甘油酯、鈉、鉀、氯化物及碳酸氫鹽。
結果：圖91說明Ab19導致LDL-C含量歷經19天時期降低多達65%。LDL-C含量隨後返回至給藥前含量。
實例10 抗PCSK9抗體降低非人類靈長類動物之血漿LDL-C含量
在年齡3-5歲且重2.8-4.0kg之雄性食蟹獼猴中進行藥效學(PD)研究。
對3只食蟹獼猴注射Ab20(5mg/kg)。藉由在第1天進行靜脈內團式投藥來進行注射。
藉由靜脈穿刺收集血液且處理成血清用於進行臨床化學分析。將血液收集於K3EDTA管中且處理成血漿用於進行PK分析。在注射前、注射後24小時、48小時及96小時及接著每三天直至第34天自禁食動物收集血液樣品用於進行臨床化學分析。在注射前、5分鐘、30分鐘、1小時、2小時、4小時、8小時、12小時、24小時、48小時、96小時及接著每三天直至第34天收集血液樣品用於進行PK分析。所有樣品皆儲存在-70℃下或-70℃以下。
臨床化學分析包括以下參數：丙胺酸轉胺酶、天冬胺酸轉胺酶、鹼性磷酸酶、γ-麩胺醯基轉移酶、乳酸去氫酶、總膽紅素、尿素氮、C反應性蛋白質、鈣、肌酸酐、磷、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、總蛋白質、白蛋白、球蛋白、白蛋白/球蛋白比率、葡萄糖、膽固醇、三酸甘油酯、鈉、鉀、氯化物及碳酸氫鹽。
結果：圖92說明Ab20導致LDL-C含量歷經22天時期降低多達70%。LDL-C含量隨後返回至給藥前含量。
實例11 抗PCSK9抗體降低非人類靈長類動物之血漿LDL-C含量
在年齡3-5歲且重2.8-4.0kg之雄性食蟹獼猴中進行藥效學(PD)研究。
對3只食蟹獼猴注射Ab22及Ab24(5mg/kg)。藉由在第1天進行靜脈內團式投藥來進行注射。
藉由靜脈穿刺收集血液且處理成血清用於進行臨床化學分析。將血液收集於K3EDTA管中且處理成血漿用於進行PK分析。在注射前、注射後24小時、48小時及96小時及接著每三天直至第46天(Ab22)或第 37天(Ab24)自禁食動物收集血液樣品用於進行臨床化學分析。在注射前、5分鐘、30分鐘、1小時、2小時、4小時、8小時、12小時、24小時、48小時、96小時及接著每三天直至第46天(Ab22)或第37天(Ab24)收集血液樣品用於進行PK分析。所有樣品皆儲存在-70℃下或-70℃以下。
臨床化學分析包括以下參數：丙胺酸轉胺酶、天冬胺酸轉胺酶、鹼性磷酸酶、γ-麩胺醯基轉移酶、乳酸去氫酶、總膽紅素、尿素氮、C反應性蛋白質、鈣、肌酸酐、磷、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、總蛋白質、白蛋白、球蛋白、白蛋白/球蛋白比率、葡萄糖、膽固醇、三酸甘油酯、鈉、鉀、氯化物及碳酸氫鹽。
結果：圖93說明Ab22導致LDL-C含量歷經22天時期降低多達60%。LDL-C含量隨後返回至給藥前含量。圖94說明Ab24導致LDL-C含量歷經22天時期降低多達70%。LDL-C含量隨後返回至給藥前含量。
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<223> 人類化抗體序列
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<223> 人類化抗體序列
<400> 882
<210> 883
<211> 29
<212> PRT
<213> 穴兔
<400> 883
<210> 884
<211> 6
<212> PRT
<213> 穴兔
<400> 884
<210> 885
<211> 14
<212> PRT
<213> 穴兔
<400> 885
<210> 886
<211> 18
<212> PRT
<213> 穴兔
<400> 886
<210> 887
<211> 31
<212> PRT
<213> 穴兔
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<210> 888
<211> 14
<212> PRT
<213> 穴兔
<400> 888
<210> 889
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 人類化抗體序列
<400> 889
<210> 890
<211> 330
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 人類化抗體序列
<400> 890
<210> 891
<211> 1359
<212> DNA
<213> 人工
<220>
<223> 人類化抗體序列
<400> 891
<210> 892
<211> 369
<212> DNA
<213> 人工
<220>
<223> 人類化抗體序列
<400> 892
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<211> 87
<212> DNA
<213> 穴兔
<400> 893
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<211> 18
<212> DNA
<213> 穴兔
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<212> DNA
<213> 穴兔
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<212> DNA
<213> 穴兔
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<212> DNA
<213> 穴兔
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<212> DNA
<213> 穴兔
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<211> 33
<212> DNA
<213> 人工
<220>
<223> 人類化抗體序列
<400> 899
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<211> 990
<212> DNA
<213> 人工
<220>
<223> 人類化抗體序列
<400> 900
<210> 901
<211> 217
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 人類化抗體序列
<400> 901
<210> 902
<211> 110
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 人類化抗體序列
<400> 902
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<212> PRT
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<212> PRT
<213> 穴兔
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<212> PRT
<213> 穴兔
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<212> PRT
<213> 穴兔
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<212> PRT
<213> 穴兔
<400> 908
<210> 909
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 人類化抗體序列
<400> 909
<210> 910
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 人類化抗體序列
<400> 910
<210> 911
<211> 651
<212> DNA
<213> 人工
<220>
<223> 人類化抗體序列
<400> 911
<210> 912
<211> 330
<212> DNA
<213> 人工
<220>
<223> 人類化抗體序列
<400> 912
<210> 913
<211> 69
<212> DNA
<213> 穴兔
<400> 913
<210> 914
<211> 33
<212> DNA
<213> 穴兔
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<211> 45
<212> DNA
<213> 穴兔
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<211> 21
<212> DNA
<213> 穴兔
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<211> 96
<212> DNA
<213> 穴兔
<400> 917
<210> 918
<211> 36
<212> DNA
<213> 穴兔
<400> 918
<210> 919
<211> 30
<212> DNA
<213> 人工
<220>
<223> 人類化抗體序列
<400> 919
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<211> 321
<212> DNA
<213> 人工
<220>
<223> 人類化抗體序列
<400> 920
<210> 921
<211> 453
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 人類化抗體序列
<400> 921
<210> 922
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 人類化抗體序列
<400> 922
<210> 923
<211> 29
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 人類化抗體序列
<400> 923
<210> 924
<211> 6
<212> PRT
<213> 穴兔
<400> 924
<210> 925
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 人類化抗體序列
<400> 925
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<211> 18
<212> PRT
<213> 穴兔
<400> 926
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<211> 31
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 人類化抗體序列
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<211> 14
<212> PRT
<213> 穴兔
<400> 928
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<211> 11
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 人類化抗體序列
<400> 929
<210> 930
<211> 330
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 人類化抗體序列
<400> 930
<210> 931
<211> 1359
<212> DNA
<213> 人工
<220>
<223> 人類化抗體序列
<400> 931
<210> 932
<211> 369
<212> DNA
<213> 人工
<220>
<223> 人類化抗體序列
<400> 932
<210> 933
<211> 87
<212> DNA
<213> 人工
<220>
<223> 人類化抗體序列
<400> 933
<210> 934
<211> 18
<212> DNA
<213> 穴兔
<400> 934
<210> 935
<211> 42
<212> DNA
<213> 人工
<220>
<223> 人類化抗體序列
<400> 935
<210> 936
<211> 54
<212> DNA
<213> 穴兔
<400> 936
<210> 937
<211> 93
<212> DNA
<213> 人工
<220>
<223> 人類化抗體序列
<400> 937
<210> 938
<211> 42
<212> DNA
<213> 穴兔
<400> 938
<210> 939
<211> 33
<212> DNA
<213> 人工
<220>
<223> 人類化抗體序列
<400> 939
<210> 940
<211> 990
<212> DNA
<213> 人工
<220>
<223> 人類化抗體序列
<400> 940
<210> 941
<211> 217
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 人類化抗體序列
<400> 941
<210> 942
<211> 110
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 人類化抗體序列
<400> 942
<210> 943
<211> 23
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 人類化抗體序列
<400> 943
<210> 944
<211> 11
<212> PRT
<213> 穴兔
<400> 944
<210> 945
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 人類化抗體序列
<400> 945
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<211> 7
<212> PRT
<213> 穴兔
<400> 946
<210> 947
<211> 32
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 人類化抗體序列
<400> 947
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<211> 12
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<213> 人工
<220>
<223> 人類化抗體序列
<400> 948
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<211> 10
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 人類化抗體序列
<400> 949
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<211> 107
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 人類化抗體序列
<400> 950
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<211> 651
<212> DNA
<213> 人工
<220>
<223> 人類化抗體序列
<400> 951
<210> 952
<211> 330
<212> DNA
<213> 人工
<220>
<223> 人類化抗體序列
<400> 952
<210> 953
<211> 69
<212> DNA
<213> 人工
<220>
<223> 人類化抗體序列
<400> 953
<210> 954
<211> 33
<212> DNA
<213> 穴兔
<400> 954
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<211> 45
<212> DNA
<213> 人工
<220>
<223> 人類化抗體序列
<400> 955
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<211> 21
<212> DNA
<213> 穴兔
<400> 956
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<211> 96
<212> DNA
<213> 人工
<220>
<223> 人類化抗體序列
<400> 957
<210> 958
<211> 36
<212> DNA
<213> 人工
<220>
<223> 人類化抗體序列
<400> 958
<210> 959
<211> 30
<212> DNA
<213> 人工
<220>
<223> 人類化抗體序列
<400> 959
<210> 960
<211> 321
<212> DNA
<213> 人工
<220>
<223> 人類化抗體序列
<400> 960
<210> 961
<211> 692
<212> PRT
<213> 智人
<400> 961
<210> 962
<211> 662
<212> PRT
<213> 智人
<400> 962
<210> 963
<211> 25378
<212> DNA
<213> 智人
<400> 963

Claims (407)

  1. 一種抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其與選自由以下組成之群之抗人類PCSK9抗體競爭及/或特異性結合人類PCSK9上之與選自由以下組成之群之抗人類PCSK9抗體相同或重疊之抗原決定基：Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab10、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab20、Ab21、Ab22、Ab23及Ab24。
  2. 如申請專利範圍第1項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段特異性結合人類PCSK9上之與選自由以下組成之群之抗人類PCSK9抗體相同或重疊之抗原決定基：Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab10、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab20、Ab21、Ab22、Ab23及Ab24。
  3. 如申請專利範圍第2項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該(該等)抗原決定基係使用偵測該抗人類PCSK9抗體與10-15聚體肽之文庫中之一或多種肽之結合的結合分析進行鑒別，該等10-15聚體肽為人類PCSK9之對應於人類PCSK9多肽之全部或實質上全部長度的重疊肽片段。
  4. 如申請專利範圍第3項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該結合分析為西方免疫墨點分析，其藉由使用當該抗體或抗體片段與該文庫中之肽特異性結合時發射可偵測化學發光信號之化學發光標記來偵測該抗體或抗體片段與該文庫中該等10-15聚體肽中之一或多者的特異性結合。
  5. 如申請專利範圍第1項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段含有選自由以下組成之群之抗PCSK9抗體的至少2個互補決定區(CDR)：Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab10、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab20、Ab21、Ab22、Ab23及Ab24。
  6. 如申請專利範圍第1項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段含有選自由以下組成之群之抗PCSK9抗體的至少3個 互補決定區(CDR)：Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab10、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab20、Ab21、Ab22、Ab23及Ab24。
  7. 如申請專利範圍第1項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段含有選自由以下組成之群之抗PCSK9抗體的至少4個互補決定區(CDR)：Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab10、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab20、Ab21、Ab22、Ab23及Ab24。
  8. 如申請專利範圍第1項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段含有選自由以下組成之群之抗PCSK9抗體的至少5個互補決定區(CDR)：Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab10、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab20、Ab21、Ab22、Ab23及Ab24。
  9. 如申請專利範圍第1項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段含有選自由以下組成之群之抗PCSK9抗體的全部6個互補決定區(CDR)：Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab10、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab20、Ab21、Ab22、Ab23及Ab24。
  10. 如申請專利範圍第1項至第9項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段含有(a)可變重鏈，其包含選自由以下組成之群之CDR1序列：SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：44、SEQ ID NO：84、SEQ ID NO：124、SEQ ID NO：164、SEQ ID NO：204、SEQ ID NO：244、SEQ ID NO：284、SEQ ID NO：324、SEQ ID NO：364、SEQ ID NO：404、SEQ ID NO：444、SEQ ID NO：484、SEQ ID NO：524、SEQ ID NO：564、SEQ ID NO：604、SEQ ID NO：644、SEQ ID NO：684、SEQ ID NO：724、SEQ ID NO：764、SEQ ID NO：804、SEQ ID NO：844、SEQ ID NO：884及SEQ ID NO：924；選自由以下組成之群之CDR2序列：SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：46、SEQ ID NO：86、SEQ ID NO：126、SEQ ID NO：166、SEQ ID NO：206、SEQ ID NO：246、SEQ ID NO：286、SEQ ID NO：326、SEQ ID NO：366、SEQ ID NO：406、SEQ ID NO：446、SEQ ID NO：486、SEQ ID NO：526、SEQ ID NO：566、SEQ ID NO：606、SEQ ID NO：646、SEQ ID NO：686、SEQ ID NO：726、SEQ ID NO：766、SEQ ID NO：806、SEQ ID NO：846、SEQ ID NO：886及SEQ ID NO：926；及選自由以下組成之群之CDR3序列：SEQ ID NO：8、SEQ ID NO：48、SEQ ID NO：88、SEQ ID NO：128、SEQ ID NO：168、SEQ ID NO：208、SEQ ID NO：248、SEQ ID NO：288、SEQ ID NO：328、SEQ ID NO：368、SEQ ID NO：408、SEQ ID NO：448、SEQ ID NO：488、SEQ ID NO：528、SEQ ID NO：568、SEQ ID NO：608、SEQ ID NO：648、SEQ ID NO：688、SEQ ID NO：728、SEQ ID NO：768、SEQ ID NO：808、SEQ ID NO：848、SEQ ID NO：888及SEQ ID NO：928；及/或(b)可變輕鏈，其包含選自由以下組成之群之CDR1序列：SEQ ID NO：24、SEQ ID NO：64、SEQ ID NO：104、SEQ ID NO：144、SEQ ID NO：184、SEQ ID NO：224、SEQ ID NO：264、SEQ ID NO：304、SEQ ID NO：344、SEQ ID NO：384、SEQ ID NO：424、SEQ ID NO：464、SEQ ID NO：504、SEQ ID NO：544、SEQ ID NO：584、SEQ ID NO：624、SEQ ID NO：664、SEQ ID NO：704、SEQ ID NO：744、SEQ ID NO：784、SEQ ID NO：824、SEQ ID NO：864、SEQ ID NO：904及SEQ ID NO：944；選自由以下組成之群之CDR2序列：SEQ ID NO：26、SEQ ID NO：66、SEQ ID NO：106、SEQ ID NO：146、SEQ ID NO：186、SEQ ID NO：226、SEQ ID NO：266、SEQ ID NO：306、SEQ ID NO：346、SEQ ID NO：386、SEQ ID NO：426、SEQ ID NO：466、SEQ ID NO：506、SEQ ID NO：546、SEQ ID NO：586、SEQ ID NO：626、SEQ ID NO：666、SEQ ID NO：706、SEQ ID NO：746、SEQ ID NO：786、SEQ ID NO：826、SEQ ID NO：866、SEQ ID NO：906及SEQ ID NO：946；及選自由以下組成之群之CDR3序列：SEQ ID NO：28、SEQ ID NO：68、SEQ ID NO：108、SEQ ID NO：148、SEQ ID NO：188、SEQ ID NO：228、SEQ ID NO：268、SEQ ID NO：308、SEQ ID NO：348、SEQ ID NO：388、SEQ ID NO：428、SEQ ID NO：468、SEQ ID NO：508、SEQ ID NO：548、SEQ ID NO：588、SEQ ID NO：628、SEQ ID NO：668、SEQ ID NO：708、SEQ ID NO：748、SEQ ID NO：788、SEQ ID NO：828、SEQ ID NO：868、SEQ ID NO：908及SEQ ID NO：948，其進一步限制條件為任何以上鑒別之CDR多肽之一或兩個殘基可經另一胺基酸取代，較佳為保守胺基酸取代。
  11. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：4、CDR2序列SEQ ID NO：6及CDR3序列SEQ ID NO：8；及/或該可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：24、CDR2序列SEQ ID NO：26及CDR3序列SEQ ID NO：28。
  12. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：44、CDR2序列SEQ ID NO：46及CDR3序列SEQ ID NO：48；及/或該可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：64、CDR2序列SEQ ID NO：66及CDR3序列SEQ ID NO：68。
  13. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：84、CDR2序列SEQ ID NO：86及CDR3序列SEQ ID NO：88；及/或該可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：104、CDR2序列SEQ ID NO：106及CDR3序列SEQ ID NO：108。
  14. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：124、CDR2序列SEQ ID NO：126及CDR3序列SEQ ID NO：128；及/或該可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：144、CDR2序列SEQ ID NO：146及CDR3序列SEQ ID NO：148。
  15. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：164、CDR2序列SEQ ID NO：166及CDR3序列SEQ ID NO：168；且該可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：184、CDR2序列SEQ ID NO：186及CDR3序列SEQ ID NO：188。
  16. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗 體片段，其中該可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：204、CDR2序列SEQ ID NO：206及CDR3序列SEQ ID NO：208；且該可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：224、CDR2序列SEQ ID NO：226及CDR3序列SEQ ID NO：228。
  17. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：244、CDR2序列SEQ ID NO：246及CDR3序列SEQ ID NO：248；且該可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：264、CDR2序列SEQ ID NO：266及CDR3序列SEQ ID NO：268。
  18. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：284、CDR2序列SEQ ID NO：286及CDR3序列SEQ ID NO：288；且該可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：304、CDR2序列SEQ ID NO：306及CDR3序列SEQ ID NO：308。
  19. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：324、CDR2序列SEQ ID NO：326及CDR3序列SEQ ID NO：328；及/或該可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：344、CDR2序列SEQ ID NO：346及CDR3序列SEQ ID NO：348。
  20. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：364、CDR2序列SEQ ID NO：366及CDR3序列SEQ ID NO：368；及/或該可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：384、CDR2序列SEQ ID NO：386及CDR3序列SEQ ID NO：388。
  21. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：404、CDR2序列SEQ ID NO：406及CDR3序列SEQ ID NO：408；及/或該可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：424、CDR2序列SEQ ID NO：426及CDR3序列SEQ ID NO：428。
  22. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗 體片段，其中該可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：444、CDR2序列SEQ ID NO：446及CDR3序列SEQ ID NO：448；且該可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：464、CDR2序列SEQ ID NO：466及CDR3序列SEQ ID NO：468。
  23. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：484、CDR2序列SEQ ID NO：486及CDR3序列SEQ ID NO：488；及/或該可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：504、CDR2序列SEQ ID NO：506及CDR3序列SEQ ID NO：508。
  24. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：524、CDR2序列SEQ ID NO：526及CDR3序列SEQ ID NO：528；及/或該可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：544、CDR2序列SEQ ID NO：546及CDR3序列SEQ ID NO：548。
  25. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：564、CDR2序列SEQ ID NO：566及CDR3序列SEQ ID NO：568；及/或該可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：584、CDR2序列SEQ ID NO：586及CDR3序列SEQ ID NO：588。
  26. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：604、CDR2序列SEQ ID NO：606及CDR3序列SEQ ID NO：608；及/或該可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：624、CDR2序列SEQ ID NO：626及CDR3序列SEQ ID NO：628。
  27. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：644、CDR2序列SEQ ID NO：646及CDR3序列SEQ ID NO：648；及/或該可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：664、CDR2序列SEQ ID NO：666及CDR3序列SEQ ID NO：668。
  28. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗 體片段，其中該可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：684、CDR2序列SEQ ID NO：686及CDR3序列SEQ ID NO：688；及/或該可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：704、CDR2序列SEQ ID NO：706及CDR3序列SEQ ID NO：708。
  29. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：724、CDR2序列SEQ ID NO：726及CDR3序列SEQ ID NO：728；及/或該可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：744、CDR2序列SEQ ID NO：746及CDR3序列SEQ ID NO：748。
  30. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：764、CDR2序列SEQ ID NO：766及CDR3序列SEQ ID NO：768；及/或該可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：784、CDR2序列SEQ ID NO：786及CDR3序列SEQ ID NO：788。
  31. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：804、CDR2序列SEQ ID NO：806及CDR3序列SEQ ID NO：808；及/或該可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：824、CDR2序列SEQ ID NO：826及CDR3序列SEQ ID NO：828。
  32. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：844、CDR2序列SEQ ID NO：846及CDR3序列SEQ ID NO：848；及/或該可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：864、CDR2序列SEQ ID NO：866及CDR3序列SEQ ID NO：868。
  33. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：884、CDR2序列SEQ ID NO：886及CDR3序列SEQ ID NO：888；及/或該可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：904、CDR2序列SEQ ID NO：906及CDR3序列SEQ ID NO：908。
  34. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗 體片段，其中該可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：924、CDR2序列SEQ ID NO：926及CDR3序列SEQ ID NO：928；及/或該可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：944、CDR2序列SEQ ID NO：946及CDR3序列SEQ ID NO：948。
  35. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈包含與SEQ ID NO：2至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列及/或該可變輕鏈包含SEQ ID NO：22。
  36. 如申請專利範圍第35項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈及該可變輕鏈各自與分別SEQ ID NO：2及SEQ ID NO：22中之可變重鏈及可變輕鏈至少90%一致。
  37. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈包含與SEQ ID NO：42至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且該可變輕鏈包含與SEQ ID NO：62至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  38. 如申請專利範圍第37項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈及該可變輕鏈各自與分別SEQ ID NO：42及SEQ ID NO：62中之可變重鏈及可變輕鏈至少90%一致。
  39. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈包含與SEQ ID NO：82至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且該可變輕鏈包含與SEQ ID NO：102至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  40. 如申請專利範圍第39項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈及該可變輕鏈各自與分別SEQ ID NO：82及SEQ ID NO：102中之可變重鏈及可變輕鏈至少90%一致。
  41. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈包含與SEQ ID NO：122至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且該可變輕鏈包含與SEQ ID NO：142至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序 列。
  42. 如申請專利範圍第41項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈及該可變輕鏈各自與分別SEQ ID NO：122及SEQ ID NO：142中之可變重鏈及可變輕鏈至少90%一致。
  43. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈包含與SEQ ID NO：162至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且該可變輕鏈包含與SEQ ID NO：182至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  44. 如申請專利範圍第43項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈及該可變輕鏈各自與分別SEQ ID NO：162及SEQ ID NO：182中之可變重鏈及可變輕鏈至少90%一致。
  45. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈包含與SEQ ID NO：202至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且該可變輕鏈包含與SEQ ID NO：222至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  46. 如申請專利範圍第45項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈及該可變輕鏈各自與分別SEQ ID NO：202及SEQ ID NO：222中之可變重鏈及可變輕鏈至少90%一致。
  47. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈包含與SEQ ID NO：242至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且該可變輕鏈包含與SEQ ID NO：262至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  48. 如申請專利範圍第47項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈及該可變輕鏈各自與分別SEQ ID NO：242及SEQ ID NO：262中之可變重鏈及可變輕鏈至少90%一致。
  49. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈包含與SEQ ID NO：282至少80、85、90、 95、96、97、98、99或100%一致之序列且該可變輕鏈包含與SEQ ID NO：302至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  50. 如申請專利範圍第49項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈及該可變輕鏈各自與分別SEQ ID NO：282及SEQ ID NO：302中之可變重鏈及可變輕鏈至少90%一致。
  51. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈包含與SEQ ID NO：322至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且該可變輕鏈包含與SEQ ID NO：342至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  52. 如申請專利範圍第51項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈及該可變輕鏈各自與分別SEQ ID NO：322及SEQ ID NO：342中之可變重鏈及可變輕鏈至少90%一致。
  53. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈包含與SEQ ID NO：362至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且該可變輕鏈包含與SEQ ID NO：382至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  54. 如申請專利範圍第53項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈及該可變輕鏈各自與分別SEQ ID NO：362及SEQ ID NO：382中之可變重鏈及可變輕鏈至少90%一致。
  55. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈包含與SEQ ID NO：402至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且該可變輕鏈包含與SEQ ID NO：422至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  56. 如申請專利範圍第55項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈及該可變輕鏈各自與分別SEQ ID NO：402及SEQ ID NO：422中之可變重鏈及可變輕鏈至少90%一致。
  57. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈包含與SEQ ID NO：442至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且該可變輕鏈包含與SEQ ID NO：462至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  58. 如申請專利範圍第57項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈及該可變輕鏈各自與分別SEQ ID NO：442及SEQ ID NO：462中之可變重鏈及可變輕鏈至少90%一致。
  59. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈包含與SEQ ID NO：482至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且該可變輕鏈包含與SEQ ID NO：502至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  60. 如申請專利範圍第59項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈及該可變輕鏈各自與分別SEQ ID NO：482及SEQ ID NO：502中之可變重鏈及可變輕鏈至少90%一致。
  61. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈包含與SEQ ID NO：522至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且該可變輕鏈包含與SEQ ID NO：542至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  62. 如申請專利範圍第61項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈及該可變輕鏈各自與分別SEQ ID NO：522及SEQ ID NO：542中之可變重鏈及可變輕鏈至少90%一致。
  63. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈包含與SEQ ID NO：562至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且該可變輕鏈包含與SEQ ID NO：582至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  64. 如申請專利範圍第63項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可 變重鏈及該可變輕鏈各自與分別SEQ ID NO：562及SEQ ID NO：582中之可變重鏈及可變輕鏈至少90%一致。
  65. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈包含與SEQ ID NO：602至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且該可變輕鏈包含與SEQ ID NO：622至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  66. 如申請專利範圍第65項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈及該可變輕鏈各自與分別SEQ ID NO：602及SEQ ID NO：622中之可變重鏈及可變輕鏈至少90%一致。
  67. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈包含與SEQ ID NO：642至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且該可變輕鏈包含與SEQ ID NO：662至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  68. 如申請專利範圍第67項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈及該可變輕鏈各自與分別SEQ ID NO：642及SEQ ID NO：662中之可變重鏈及可變輕鏈至少90%一致。
  69. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈包含與SEQ ID NO：682至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且該可變輕鏈包含與SEQ ID NO：702至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  70. 如申請專利範圍第69項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈及該可變輕鏈各自與分別SEQ ID NO：682及SEQ ID NO：702中之可變重鏈及可變輕鏈至少90%一致。
  71. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈包含與SEQ ID NO：722至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且該可變輕鏈包含與SEQ ID NO：742至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序 列。
  72. 如申請專利範圍第71項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈及該可變輕鏈各自與分別SEQ ID NO：722及SEQ ID NO：742中之可變重鏈及可變輕鏈至少90%一致。
  73. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈包含與SEQ ID NO：762至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且該可變輕鏈包含與SEQ ID NO：782至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  74. 如申請專利範圍第73項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈及該可變輕鏈各自與分別SEQ ID NO：762及SEQ ID NO：782中之可變重鏈及可變輕鏈至少90%一致。
  75. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈包含與SEQ ID NO：802至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且該可變輕鏈包含與SEQ ID NO：822至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  76. 如申請專利範圍第75項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈及該可變輕鏈各自與分別SEQ ID NO：802及SEQ ID NO：822中之可變重鏈及可變輕鏈至少90%一致。
  77. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈包含與SEQ ID NO：842至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且該可變輕鏈包含與SEQ ID NO：862至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  78. 如申請專利範圍第77項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈及該可變輕鏈各自與分別SEQ ID NO：842及SEQ ID NO：862中之可變重鏈及可變輕鏈至少90%一致。
  79. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈包含與SEQ ID NO：882至少80、85、90、 95、96、97、98、99或100%一致之序列且該可變輕鏈包含與SEQ ID NO：902至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  80. 如申請專利範圍第79項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈及該可變輕鏈各自與分別SEQ ID NO：882及SEQ ID NO：902中之可變重鏈及可變輕鏈至少90%一致。
  81. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈包含與SEQ ID NO：922至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且該可變輕鏈包含與SEQ ID NO：942至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  82. 如申請專利範圍第81項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該可變重鏈及該可變輕鏈各自與分別SEQ ID NO：922及SEQ ID NO：942中之可變重鏈及可變輕鏈至少90%一致。
  83. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該重鏈包含與SEQ ID NO：1至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且該輕鏈包含與SEQ ID NO：21至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  84. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該重鏈包含與SEQ ID NO：41至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且該輕鏈包含與SEQ ID NO：61至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  85. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該重鏈包含與SEQ ID NO：81至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且該輕鏈包含與SEQ ID NO：101至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  86. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該重鏈包含與SEQ ID NO：121至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且該輕鏈包含與SEQ ID NO：141至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  87. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該重鏈包含與SEQ ID NO：161至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且該輕鏈包含與SEQ ID NO：181至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  88. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該重鏈包含與SEQ ID NO：201至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且該輕鏈包含與SEQ ID NO：221至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  89. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該重鏈包含與SEQ ID NO：241至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且該輕鏈包含與SEQ ID NO：261至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  90. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該重鏈包含與SEQ ID NO：281至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且該輕鏈包含SEQ ID NO：301。
  91. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該重鏈包含SEQ ID NO：321且該輕鏈包含與SEQ ID NO：341至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  92. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該重鏈包含與SEQ ID NO：361至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且該輕鏈包含SEQ ID NO：381。
  93. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該重鏈包含SEQ ID NO：401且該輕鏈包含與SEQ ID NO：421至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  94. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該重鏈包含與SEQ ID NO：441至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且該輕鏈包含與SEQ ID NO：461至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  95. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該重鏈包含與SEQ ID NO：481至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且該輕鏈包含與SEQ ID NO：501至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  96. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該重鏈包含與SEQ ID NO：521至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且該輕鏈包含SEQ ID NO：541。
  97. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該重鏈包含SEQ ID NO：561且該輕鏈包含與SEQ ID NO：581至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  98. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該重鏈包含與SEQ ID NO：601至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且該輕鏈包含SEQ ID NO：621。
  99. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該重鏈包含SEQ ID NO：641且該輕鏈包含與SEQ ID NO：661至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  100. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該重鏈包含與SEQ ID NO：681至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且該輕鏈包含與SEQ ID NO：701至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  101. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該重鏈包含與SEQ ID NO：721至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且該輕鏈包含SEQ ID NO：741。
  102. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該重鏈包含SEQ ID NO：761且該輕鏈包含與SEQ ID NO：781至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  103. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗 體片段，其中該重鏈包含與SEQ ID NO：801至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且該輕鏈包含與SEQ ID NO：821至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  104. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該重鏈包含與SEQ ID NO：841至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且該輕鏈包含與SEQ ID NO：861至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  105. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該重鏈包含與SEQ ID NO：881至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且該輕鏈包含SEQ ID NO：901。
  106. 如申請專利範圍第1項至第10項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該重鏈包含SEQ ID NO：921且該輕鏈包含與SEQ ID NO：941至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  107. 如申請專利範圍第1項至第106項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段係選自由嵌合、人類化及人類抗體或抗體片段組成之群。
  108. 如申請專利範圍第1項至第106項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段係選自由scFv、駱駝抗體、奈米抗體、IgNAR、F ab 片段、F ab ’ 片段、MetMab樣抗體、單價抗體片段及F(ab ’)2 片段組成之群。
  109. 如申請專利範圍第1項至第108項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段實質上或完全缺乏N-糖基化及/或O-糖基化。
  110. 如申請專利範圍第1項至第109項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段包含人類恆定域。
  111. 如申請專利範圍第110項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體為IgG1、IgG2、IgG3或IgG4抗體。
  112. 如申請專利範圍第1項至第111項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段包含已經修飾以改變效應物功能、半 衰期、蛋白水解或糖基化中之至少一者的Fc區。
  113. 如申請專利範圍第112項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該Fc區含有一或多個改變或消除N-糖基化及/或O-糖基化之突變。
  114. 如申請專利範圍第1項至第108項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段為人類化抗體或抗體片段。
  115. 如申請專利範圍第1項至第114項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段結合PCSK9之解離常數(Kd )小於或等於10-2 M、5×10-3 M、10-3 M、5×10-4 M、10-4 M、5×10-5 M、10-5 M、5×10-6 M、10-6 M、5×10-7 M、10-7 M、5×10-8 M、10-8 M、5×10-9 M、10-9 M、5×10-10 M、10-10 M、5×10-11 M、10-11 M、5×10-12 M、10-12 M、5×10-13 M或10-13 M。
  116. 如申請專利範圍第1項至第115項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段結合PCSK9之解離常數(Kd )小於或等於10-11 M、5×10-12 M或10-12 M。
  117. 如申請專利範圍第1項至第116項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其結合PCSK9之解離速率小於或等於10-4 S-1 、5×10-5 S-1 、10-5 S-1 、5×10-6 S-1 、10-6 S-1 、5×10-7 S-1 或10-7 S-1 。
  118. 如申請專利範圍第1項至第117項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段直接或間接連接於可偵測標記或治療劑。
  119. 如申請專利範圍第1項至第108項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其在向人類個體投與時會抑制或中和至少一種由PCSK9引發之生物作用。
  120. 如申請專利範圍第1項至第108項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其在向人類個體投與時會降低血清膽固醇。
  121. 如申請專利範圍第1項至第118項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段能夠抑制PCSK9與LDLR之結合。
  122. 如申請專利範圍第1項至第121項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段結合PCSK9之KD 小於約100nM。
  123. 如申請專利範圍第1項至第121項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗 體片段，其中該抗體或抗體片段結合PCSK9之KD 小於約10nM。
  124. 如申請專利範圍第1項至第121項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段結合PCSK9之KD 小於約1nM。
  125. 如申請專利範圍第1項至第121項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段結合PCSK9之KD 在約1與約10nM之間。
  126. 如申請專利範圍第1項至第121項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段結合PCSK9之KD 在約0.1與約1nM之間。
  127. 如申請專利範圍第1項至第121項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段結合PCSK9之KD 在0.12與7.99nM之間。
  128. 如申請專利範圍第1項至第127項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段連接於至少一個效應物部分。
  129. 如申請專利範圍第128項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中效應物部分包含化學連接子。
  130. 如申請專利範圍第129項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段連接於一或多個可偵測部分。
  131. 如申請專利範圍第130項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中可偵測部分包含螢光染料、酶、受質、生物發光物質、放射性物質、化學發光部分或其混合物。
  132. 如申請專利範圍第1項至第132項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段，其中該抗體或抗體片段連接於一或多個功能性部分。
  133. 一種抗特應抗體，其係針對如申請專利範圍第1項至第132項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段所產生。
  134. 一種適於治療、防治或診斷用途之組合物，其包含治療、防治或診斷有效量之至少一種如申請專利範圍第1項至第133項中任一項之抗體或抗體片段。
  135. 如申請專利範圍第134項之組合物，其適於皮下投與。
  136. 如申請專利範圍第134項之組合物，其適於靜脈內投與。
  137. 如申請專利範圍第134項之組合物，其適於局部投與。
  138. 如申請專利範圍第134項之組合物，其係經凍乾。
  139. 如申請專利範圍第134項至第137項中任一項之組合物，其進一步包含醫藥學上可接受之稀釋劑、載劑、增溶劑、乳化劑、防腐劑或其混合物。
  140. 如申請專利範圍第134項至第137項中任一項之組合物，其進一步包含另一活性藥劑。
  141. 如申請專利範圍第140項之組合物，其中該另一活性藥劑係選自由以下組成之群：士他汀(statin)、ACE抑制劑、血管緊張素II受體阻斷劑(ARB)、抗心律不整劑、抗血小板藥物、阿斯匹靈(aspirin)、β阻斷劑、胺碘達隆(amiodarone)、地高辛(digoxin)、阿斯匹靈、抗凝劑、地高辛、利尿劑、心臟衰竭藥物、血管舒張劑、血液稀釋劑、其他抗膽固醇藥物諸如消膽胺(holestyramine)(考來烯胺(Questran))、吉非羅齊(gemfibrozil)(諾衡(Lopid)、吉考(Gemcor))、歐妙考(Omacor)、泛雙硫醇(pantethine)、抗高血壓藥、抗致糖尿藥物、氯茴苯酸(Meglitinide)、磺醯脲及噻唑啶二酮。
  142. 如申請專利範圍第141項之組合物，其中該ACE抑制劑係選自：開搏通(Capoten)(卡托普利(captopril))、泛利尿(Vasotec)(依那普利(enalapril))、普尼爾(Prinivil)、捷賜瑞(Zestril)(賴諾普利(lisinopril))、洛丁新(Lotensin)(貝那普利(benazepril))、蒙諾普利(Monopril)(福辛普利(fosinopril))、阿泰斯(Altace)(雷米普利(ramipril))、阿庫普利(Accupril)(喹那普利(quinapril))、阿森(Aceon)(培哚普利(perindopril))、瑪維克(Mavik)(群多普利(trandolapril))、尤瓦斯克(Univasc)(莫西普利(moexipril))。
  143. 如申請專利範圍第141項之組合物，其中該ARB係選自：科紮爾(Cozaar)(洛沙坦(losartan))、代厄文(Diovan)(纈沙坦(valsartan))、安博諾(Avapro)(伊貝沙坦(irbesartan))、阿塔坎德(Atacand)(坎地沙坦(candesartan))及美壓定(Micardis)(替米沙坦(telmisartan))。
  144. 如申請專利範圍第141項之組合物，其中該抗心律不整劑係選自坦布考(Tambocor)(氟卡胺(flecainide))、普魯卡比(Procanbid)(普魯卡因胺 (procainamide))、可達龍(Cordarone)(胺碘達隆(amiodarone))及貝塔派斯(Betapace)(索他洛爾(sotalol))。
  145. 如申請專利範圍第141項之組合物，其中該抗凝劑係選自可與該等主題抗PCSK9抗體及抗體片段組合使用的抗凝劑，包括：組織纖維蛋白溶酶原活化劑(TPA)、替奈替普酶(Tenecteplase)、阿替普酶(Alteplase)、尿激酶(Urokinase)、瑞替普酶(Reteplase)、鏈激酶(Streptokinase)、Fxl拮抗劑及抗血栓劑。
  146. 如申請專利範圍第141項之組合物，其中該β阻斷劑係選自塞克洛爾(Sectral)(醋丁洛爾(acebutolol))、澤貝塔(Zebeta)(比索洛爾(bisoprolol))、普萊洛克(Brevibloc)(艾司洛爾(esmolol))、心得爾(Inderal)(普萘洛爾(propranolol))、天諾敏(Tenormin)(阿替洛爾(atenolol))、樂莫丁(Normodyne)、特雷待特(Trandate)(拉貝洛爾(labetalol))、可里格(Coreg)(卡維洛爾(carvedilol))、諾普色(Lopressor)及托普洛爾(Toprol)-XL(美托洛爾(metoprolol))。
  147. 如申請專利範圍第141項之組合物，其中該鈣通道阻斷劑係選自：諾和克(Norvasc)(胺氯地平(amlodipine))、波依定(Plendil)(非洛地平(felodipine))、卡地贊姆(Cardizem)、卡地贊姆CD、卡地贊姆SR、代樂卡(Dilacor)XR、地爾替(Diltia)XT、地爾紮克(Tiazac)(地爾硫卓(diltiazem))、卡蘭(Calan)、卡蘭SR、科維拉(Covera)-HS、異搏定(Isoptin)、異搏定SR、維爾寧(Verelan)、維爾寧PM(維拉帕米(verapamil))、艾達立特(Adalat)、艾達立特CC、普羅卡地(Procardia)、普羅卡地XL(硝苯地平(nifedipine))、卡丁(Cardene)、卡丁SR(尼卡地平(nicardipine))、蘇拉(Sular)(尼索地平(nisoldipine))、瓦斯科(Vascor)(苄普地爾(bepridil))及為士他汀膽固醇藥物與胺氯地平之組合之卡度特(Caduet)。
  148. 如申請專利範圍第141項之組合物，其中該利尿劑係選自：速尿(Lasix)(呋塞米(furosemide))、普麥西(Bumex)(布美他尼(bumetanide))、迪馬代克(Demadex)(托塞米(torsemide))、利尿得(Esidrix)(氫氯噻嗪(hydrochlorothiazide))、紮羅寧(Zaroxolyn)(美托拉宗(metolazone))及安體舒通(Aldactone)(螺內酯(spironolactone))。
  149. 如申請專利範圍第141項之組合物，其中該心臟衰竭藥物係選自獨步催(Dobutrex)(多巴酚丁胺(dobutamine))及普利瑪科(Primacor)(米力農(milrinone))。
  150. 如申請專利範圍第141項之組合物，其中該血管舒張劑係選自代拉曲特(Dilatrate)-SR、艾叟-彼得(Iso-Bid)、艾叟雷特(Isonate)、艾索彼得(Isorbid)、艾索地爾(Isordil)、艾叟曲特(Isotrate)、索比曲特(Sorbitrate)(二硝酸異山梨醇酯)、依姆多(IMDUR)(單硝酸異山梨醇酯)及比地爾(BiDil)(含二硝酸異山梨醇酯之聯胺肼)。
  151. 如申請專利範圍第141項之組合物，其中該血液稀釋劑係選自華法林(Warfarin)(庫馬定(coumadin))、肝素、洛文諾斯(Lovenox)及弗拉格敏(Fragmin)。
  152. 如申請專利範圍第140項之組合物，其中該組合物進一步包含升高LDLR蛋白質之可用性之另一治療劑。
  153. 如申請專利範圍第140項之組合物，其中該組合物進一步包含阻斷或抑制膽固醇合成之另一治療劑。
  154. 如申請專利範圍第140項之組合物，其中該組合物進一步包含士他汀。
  155. 如申請專利範圍第154項之組合物，其中該士他汀係選自阿托伐他汀(atorvastatin)、西立伐他汀(cerivastatin)、氟伐他汀(fluvastatin)、洛伐他汀(lovastatin)、美伐他汀(mevastatin)、匹伐他汀(pitavastatin)、普伐他汀(pravastatin)、羅素他汀(rosuvastatin)、辛伐他汀(simvastatin)或其混合物。
  156. 如申請專利範圍第140項之組合物，其中該組合物進一步包含升高HDL含量之另一治療劑或降低三酸甘油酯含量之藥劑或兩者。
  157. 如申請專利範圍第140項之組合物，其中該組合物進一步包含貝特(fibrate)。
  158. 如申請專利範圍第157項之組合物，其中該貝特包含苯紮貝特(bezafibrate)、環丙貝特(ciprofibrate)、氯貝特(clofibrate)、吉非羅齊(gemfibrozil)、非諾貝特(fenofibrate)或其混合物。
  159. 如申請專利範圍第140項之組合物，其中該組合物進一步包含膽汁螯 合劑。
  160. 如申請專利範圍第159項之組合物，其中膽汁螯合劑包含消膽胺(cholestyramine)、考來維侖(colesevelam)、考來替泊(colestipol)或其混合物。
  161. 如申請專利範圍第140項之組合物，其中該組合物進一步包含降低膽固醇在腸中之吸收之藥劑。
  162. 如申請專利範圍第161項之組合物，其中該藥劑包含依折麥布(ezetimibe)。
  163. 如申請專利範圍第140項之組合物，其中該組合物包含抑制肝三酸甘油酯產生、抑制VLDL分泌或抑制肝三酸甘油酯產生且抑制VLDL分泌之藥劑。
  164. 如申請專利範圍第163項之組合物，其中該藥劑包含阿西莫司(acipimox)。
  165. 如申請專利範圍第140項之組合物，其中該組合物進一步包含降低脂質在腸中之吸收之藥劑。
  166. 如申請專利範圍第165項之組合物，其中該藥劑包含奧利斯泰(orlistat)、利普司他汀(lipstatin)或其混合物。
  167. 如申請專利範圍第140項之組合物，其中該組合物進一步包含作為抗高血壓藥之藥劑、治療絞痛症之藥劑或兩者。
  168. 如申請專利範圍第167項之組合物，其中該抗高血壓藥或抗絞痛症藥劑係選自利尿劑、腎上腺素激導性受體拮抗劑、鈣通道阻斷劑、腎素抑制劑、ACE抑制劑、血管緊張素II受體拮抗劑、醛固酮拮抗劑、血管舒張劑或α-2促效劑。
  169. 如申請專利範圍第168項之組合物，其中該等利尿劑包括布美他尼(bumetanide)、利尿酸(thacrynic acid)、呋塞米(furosemide)及托塞米(torsemide)；噻嗪化物利尿劑，諸如依匹噻嗪(epitizide)、氫氯噻嗪(hydrochlorothiazide)或氯噻嗪(chlorothiazide)或苄氟噻嗪(bendroflumethiazide)；噻嗪化物樣利尿劑，諸如吲達帕胺(indapamide)、氯噻酮(chlorthalidone)或美托拉宗(metolazone)；保鉀利尿劑，諸如阿米洛利(amiloride)、胺苯蝶啶(triamterene)或螺內酯 (spironolactone)；該等腎上腺素激導性受體拮抗劑包括β阻斷劑，諸如阿替洛爾(atenolol)、美托洛爾(metoprolol)、納多洛爾(nadolol)、氧烯洛爾(oxprenolol)、品多洛爾(pindolol)、普萘洛爾(propranolol)或噻嗎洛爾(timolol)；該等α阻斷劑包括多沙唑嗪(doxazosin)、酚妥拉明(phentolamine)、吲哚哌胺(indoramin)、苯氧苄胺(phenoxybenzamine)、哌唑嗪(prazosin)、特拉唑嗪(terazosin)及妥拉唑啉(tolazoline)；混合α+β阻斷劑，諸如布新洛爾(bucindolol)、卡維洛爾(carvedilol)及拉貝洛爾(labetalol)；該等鈣通道阻斷劑包括二氫吡啶，諸如胺氯地平(amlodipine)、非洛地平(felodipine)、依拉地平(isradipine)、樂卡地平(lercanidipine)、尼卡地平(nicardipine)、硝苯地平(nifedipine)、尼莫地平(nimodipine)及尼群地平(nitrendipine)；非二氫吡啶，諸如地爾硫卓(diltiazem)及維拉帕米(verapamil)；腎素抑制劑諸如阿利克侖(Aliskiren)；ACE抑制劑諸如卡托普利、依那普利、福辛普利、賴諾普利、培哚普利、喹那普利、雷米普利、群多普利及貝那普利；血管緊張素II受體拮抗劑諸如坎地沙坦、依普羅沙坦、伊貝沙坦、洛沙坦、奧美沙坦、替米沙坦及纈沙坦；醛固酮拮抗劑諸如依普利酮(eplerenone)及螺內酯；血管舒張劑諸如硝普酸鈉(sodium nitroprusside)；且α-2促效劑諸如氯壓定(Clonidine)、胍那苄(Guanabenz)、甲基多巴(Methyldopa)、莫索尼定(Moxonidine)、胍乙啶(Guanethidine)或蛇根素鹼(Reserpine)；或硝酸酯，諸如硝基甘油(三硝酸甘油酯)、新戊四醇四硝酸酯、二硝酸異山梨醇酯或單硝酸異山梨醇酯。
  170. 如申請專利範圍第134項至第169項中任一項之組合物，其進一步包含至少一種其他藥劑，其中該組合允許減輕其中所含之至少一種其他藥劑之不合需要之副作用。
  171. 如申請專利範圍第140項至第170項中任一項之組合物，其進一步包含至少一種用於發炎之治療劑。
  172. 如申請專利範圍第171項之組合物，其中該用於發炎之治療劑包含1型環加氧酶抑制劑、2型環加氧酶抑制劑、p38-MAPK之小分子調節劑、發炎路徑中涉及之細胞內分子之小分子調節劑或其混合物。
  173. 如申請專利範圍第140項至第172項中任一項之組合物，其係經凍乾、穩定化及/或調配用於藉由注射進行投與。
  174. 抑制或中和與PCSK9相關之一或多種生物作用之方法，其包含向有需要之個體投與有效量之至少一種如申請專利範圍第1項至第133項中任一項之抗體或如申請專利範圍第134項至第173項中任一項之組合物。
  175. 一種治療或預防患者之與血清膽固醇含量升高相關之病狀的方法，其包含向有需要之患者投與有效量之至少一種如申請專利範圍第1項至第133項中任一項之抗體或如申請專利範圍第134項至第173項中任一項之組合物。
  176. 一種治療或預防有需要或由於現有病狀而處於發展血清膽固醇含量升高之風險中之患者之血清膽固醇含量升高的方法，其包含向該患者投與有效量之至少一種如申請專利範圍第1項至第133項中任一項之抗體或如申請專利範圍第134項至第173項中任一項之組合物。
  177. 如申請專利範圍第174項、第175項或第176項之方法，其中該病狀係選自由以下組成之群：高膽固醇血症、冠心病、高脂血症、高三酸甘油酯血症、豆固醇血症、動脈粥樣硬化、動脈硬化代謝症候群、急性冠脈症候群、血管發炎、黃瘤、糖尿病、肥胖症、高血壓及絞痛症。
  178. 一種治療或預防涉及膽固醇或脂質體內恆定之病症或與其相關之併發症的方法，其包含向患者投與有效量之至少一種如申請專利範圍第1項至第133項中任一項之抗體或如申請專利範圍第134項至第173項中任一項之組合物。
  179. 如申請專利範圍第178項之方法，其中該所治療之病狀係選自高膽固醇血症、高脂血症、高三酸甘油酯血症及豆固醇血症。
  180. 如申請專利範圍第174項至第179項中任一項之方法，其中該至少一種經分離抗人類PCSK9抗體或抗體抑制PCSK9與LDLR之結合。
  181. 如申請專利範圍第174項至第180項中任一項之方法，其中該至少一種經分離抗人類PCSK9抗體或抗體片段導致膽固醇合成受到阻斷或抑制。
  182. 如申請專利範圍第174項至第182項中任一項之方法，其中該方法進一步包含分開投與或共投與另一藥劑，該藥劑升高LDLR蛋白質之可用性或阻斷或抑制膽固醇合成。
  183. 如申請專利範圍第173項至第180項中任一項之方法，其中該投藥為進一步包括投與以下至少一者之治療方案的一部分：士他汀、ACE抑制劑、血管緊張素II受體阻斷劑(ARB)、抗心律不整劑、抗血小板藥物、阿斯匹靈、β阻斷劑、胺碘達隆、地高辛、阿斯匹靈、抗凝劑、地高辛、利尿劑、心臟衰竭藥物、血管舒張劑、血液稀釋劑、其他抗膽固醇藥物諸如消膽胺(考來烯胺)、吉非羅齊(諾衡、吉考)、歐妙考、泛雙硫醇、抗高血壓藥、抗致糖尿藥物、氯茴苯酸、磺醯脲及噻唑啶二酮。
  184. 如申請專利範圍第183項之方法，其中該ACE抑制劑係選自：開搏通(卡托普利)、泛利尿(依那普利)、普尼爾、捷賜瑞(賴諾普利)、洛丁新(貝那普利)、蒙諾普利(福辛普利)、阿泰斯(雷米普利)、阿庫普利(喹那普利)、阿森(培哚普利)、瑪維克(群多普利)、尤瓦斯克(莫西普利)。
  185. 如申請專利範圍第183項之方法，其中該ARB係選自：科紮爾(洛沙坦)、代厄文(纈沙坦)、安博諾(伊貝沙坦)、阿塔坎德(坎地沙坦)及美壓定(替米沙坦)。
  186. 如申請專利範圍第183項之方法，其中該抗心律不整劑係選自：坦布考(氟卡胺)、普魯卡比(普魯卡因胺)、可達龍(胺碘達隆)及貝塔派斯(索他洛爾)。
  187. 如申請專利範圍第183項之方法，其中該抗凝劑係選自：組織纖維蛋白溶酶原活化劑(TPA)、替奈替普酶、阿替普酶、尿激酶、瑞替普酶及鏈激酶。
  188. 如申請專利範圍第183項之方法，其中該β-阻斷劑係選自：塞克洛爾(醋丁洛爾)、澤貝塔(比索洛爾)、普萊洛克(艾司洛爾)、心得爾(普萘洛爾)、天諾敏(阿替洛爾)、樂莫丁、特雷待特(拉貝洛爾)、可里格(卡維洛爾)、諾普色及托普洛爾-XL(美托洛爾)。
  189. 如申請專利範圍第183項之方法，其中該鈣通道阻斷劑係選自：諾和克(胺氯地平)、波依定(非洛地平)、卡地贊姆、卡地贊姆CD、卡地贊 姆SR、代樂卡XR、地爾替XT、地爾紮克(地爾硫卓)、卡蘭、卡蘭SR、科維拉-HS、異搏定、異搏定SR、維爾寧、維爾寧PM(維拉帕米)、艾達立特、艾達立特CC、普羅卡地、普羅卡地XL(硝苯地平)、卡丁、卡丁SR(尼卡地平)、蘇拉(尼索地平)、瓦斯科(苄普地爾)及為士他汀膽固醇藥物與胺氯地平之組合之卡度特。
  190. 如申請專利範圍第183項之方法，其中該抗利尿劑係選自：速尿(呋塞米)、普麥西(布美他尼)、迪馬代克(托塞米)、利尿得(氫氯噻嗪)、紮羅寧(美托拉宗)及安體舒通(螺內酯)。
  191. 如申請專利範圍第183項之方法，其中該心臟衰竭藥物係選自獨步催(多巴酚丁胺)及普利瑪科(米力農)。
  192. 如申請專利範圍第183項之方法，其中該血管舒張劑係選自：代拉曲特-SR、艾叟-彼得、艾叟雷特、艾索彼得、艾索地爾、艾叟曲特、索比曲特(二硝酸異山梨醇酯)、依姆多(單硝酸異山梨醇酯)及比地爾(含二硝酸異山梨醇酯之聯胺肼)。
  193. 如申請專利範圍第183項之方法，其中該血液稀釋劑係選自華法林(庫馬定)、肝素、洛文諾斯及弗拉格敏。
  194. 如申請專利範圍第182項之方法，其中升高LDLR蛋白質之可用性或阻斷或抑制膽固醇合成之該藥劑係與該抗體或含有其之組合物同時投與。
  195. 如申請專利範圍第182項之方法，其中升高LDLR蛋白質之可用性或阻斷或抑制膽固醇合成之另一藥劑係相對於該抗體或含有其之組合物之投與依序投與。
  196. 如申請專利範圍第195項之方法，其中阻斷或抑制膽固醇合成蛋白質之該藥劑包含士他汀。
  197. 如申請專利範圍第196項之方法，其中該士他汀係選自阿托伐他汀、西立伐他汀、氟伐他汀、洛伐他汀、美伐他汀、匹伐他汀、普伐他汀、羅素他汀、辛伐他汀或其混合物。
  198. 如申請專利範圍第182項之方法，其中該方法進一步包含投與升高HDL含量之藥劑、降低三酸甘油酯含量之藥劑或兩者。
  199. 如申請專利範圍第198項之方法，其中該藥劑包含貝特。
  200. 如申請專利範圍第199項之方法，其中該貝特藥劑包含苯紮貝特、環丙貝特、氯貝特、吉非羅齊、非諾貝特或其混合物。
  201. 如申請專利範圍第182項之方法，其中該方法進一步包含投與膽汁螯合劑。
  202. 如申請專利範圍第201項之方法，其中該膽汁螯合劑包含消膽胺、考來維侖、考來替泊或其混合物。
  203. 如申請專利範圍第182項之方法，其中該方法進一步包含投與降低膽固醇在腸中之吸收之藥劑。
  204. 如申請專利範圍第203項之方法，其中該藥劑包含依折麥布。
  205. 如申請專利範圍第182項之方法，其中該方法進一步包含投與抑制肝三酸甘油酯產生、抑制VLDL分泌或抑制肝三酸甘油酯產生且抑制VLDL分泌之藥劑。
  206. 如申請專利範圍第205項之方法，其中該藥劑包含阿西莫司。
  207. 如申請專利範圍第182項之方法，其中該方法進一步包含投與降低脂質在腸中之吸收之藥劑。
  208. 如申請專利範圍第207項之方法，其中該藥劑包含奧利斯泰、利普司他汀或其混合物。
  209. 如申請專利範圍第182項之方法，其中該方法進一步包含投與作為抗高血壓藥之藥劑、治療絞痛症之藥劑或兩者。
  210. 如申請專利範圍第209項之方法，其中該抗高血壓藥或抗絞痛症藥劑係選自利尿劑、腎上腺素激導性受體拮抗劑、鈣通道阻斷劑、腎素抑制劑、ACE抑制劑、血管緊張素II受體拮抗劑、醛固酮拮抗劑、血管舒張劑或α-2促效劑。
  211. 如申請專利範圍第210項之方法，其中該等利尿劑包括布美他尼、利尿酸、呋塞米及托塞米；噻嗪化物利尿劑，諸如依匹噻嗪、氫氯噻嗪或氯噻嗪或苄氟噻嗪；噻嗪化物樣利尿劑，諸如吲達帕胺、氯噻酮或美托拉宗；保鉀利尿劑，諸如阿米洛利、胺苯蝶啶或螺內酯；腎上腺素激導性受體拮抗劑包括β阻斷劑，諸如阿替洛爾、美托洛爾、納多洛爾、氧烯洛爾、品多洛爾、普萘洛爾或噻嗎洛爾；α阻斷劑包括多沙唑嗪、酚妥拉明、吲哚哌胺、苯氧苄胺、哌唑嗪、特拉唑嗪及妥拉 唑啉；混合α+β阻斷劑，諸如布新洛爾、卡維洛爾及拉貝洛爾；鈣通道阻斷劑包括二氫吡啶，諸如胺氯地平、非洛地平、依拉地平、樂卡地平、尼卡地平、硝苯地平、尼莫地平及尼群地平；非二氫吡啶，諸如地爾硫卓及維拉帕米；腎素抑制劑諸如阿利克侖；ACE抑制劑諸如卡托普利、依那普利、福辛普利、賴諾普利、培哚普利、喹那普利、雷米普利、群多普利及貝那普利；血管緊張素II受體拮抗劑諸如坎地沙坦、依普羅沙坦、伊貝沙坦、洛沙坦、奧美沙坦、替米沙坦及纈沙坦；醛固酮拮抗劑諸如依普利酮及螺內酯；血管舒張劑諸如硝普酸鈉；且α-2促效劑諸如氯壓定、胍那苄、甲基多巴、莫索尼定、胍乙啶或蛇根素鹼；或硝酸酯，諸如硝基甘油(三硝酸甘油酯)、新戊四醇四硝酸酯、二硝酸異山梨醇酯或單硝酸異山梨醇酯。
  212. 如申請專利範圍第174項至第212項中任一項之方法，其中該方法進一步包含投與至少一種其他藥劑，其中該組合允許減輕至少一種其他藥劑之不合需要之副作用。
  213. 如申請專利範圍第182項至第212項中任一項之方法，其中該抗體或抗體片段或含有其之組合物及該至少一種其他藥劑係同時投與。
  214. 如申請專利範圍第181項至第212項中任一項之方法，其中該抗體或抗體片段係在該至少一種其他藥劑之前或之後投與。
  215. 一種降低個體之血清膽固醇含量之方法，其包含向個體投與有效量之至少一種如申請專利範圍第1項至第133項中任一項之抗人類PCSK9抗體或抗體片段或如申請專利範圍第134項至第172項之組合物。
  216. 如申請專利範圍第174項至第215項中任一項之方法，其中投與該至少一種經分離抗人類PCSK9抗體或抗體片段或組合物會抑制PCSK9與LDLR之結合。
  217. 如申請專利範圍第174項至第216項中任一項之方法，其中該方法進一步包含投與升高LDLR蛋白質之可用性或降低血清膽固醇之藥劑。
  218. 如申請專利範圍第217項之方法，其中升高LDLR蛋白質之可用性或降低膽固醇之該藥劑係與該抗體或含有其之組合物同時投與。
  219. 如申請專利範圍第217項之方法，其中升高LDLR蛋白質之可用性或降低血清膽固醇之該藥劑係依序投與。
  220. 如申請專利範圍第217項之方法，其中降低血清膽固醇之該藥劑包含士他汀。
  221. 如申請專利範圍第220項之方法，其中該士他汀包含阿托伐他汀、西立伐他汀、氟伐他汀、洛伐他汀、美伐他汀、匹伐他汀、普伐他汀、羅素他汀、辛伐他汀或其組合。
  222. 如申請專利範圍第174項至第221項中任一項之方法，其中該方法進一步包含投與升高HDL含量之藥劑、降低三酸甘油酯含量之藥劑或兩者。
  223. 如申請專利範圍第222項之方法，其中該藥劑包含貝特。
  224. 如申請專利範圍第223項之方法，其中該貝特包含苯紮貝特、環丙貝特、氯貝特、吉非羅齊、非諾貝特或其混合物。
  225. 如申請專利範圍第174項至第212項中任一項之方法，其中該方法進一步包含投與膽汁螯合劑。
  226. 如申請專利範圍第225項之方法，其中該膽汁螯合劑包含消膽胺、考來維侖、考來替泊或其混合物。
  227. 如申請專利範圍第174項至第219項中任一項之方法，其中該方法進一步包含投與降低膽固醇在腸中之吸收之藥劑。
  228. 如申請專利範圍第227項之方法，其中該藥劑包含依折麥布。
  229. 如申請專利範圍第174項至第227項中任一項之方法，其中該方法進一步包含投與抑制肝三酸甘油酯產生、抑制VLDL分泌或抑制肝三酸甘油酯產生且抑制VLDL分泌之藥劑。
  230. 如申請專利範圍第229項之方法，其中該藥劑包含阿西莫司、吉非羅齊或菸鹼酸及菸鹼酸類似物。
  231. 如申請專利範圍第174項至第230項中任一項之方法，其中該方法進一步包含投與降低脂質在腸中之吸收之藥劑。
  232. 如申請專利範圍第231項之方法，其中該藥劑包含奧利斯泰、利普司他汀或其混合物。
  233. 如申請專利範圍第174項至第232項中任一項之方法，其中該抗體或抗體片段係在其他活性藥劑之前或之後投與。
  234. 一種增加個體之LDLR蛋白質含量之方法，該方法包含向個體投與有 效量之至少一種如申請專利範圍第1項至第132項中任一項之經分離抗體或抗體片段或如申請專利範圍第134項至第173項中任一項之組合物。
  235. 如申請專利範圍第234項之方法，其中投與該至少一種經分離抗人類PCSK9抗體或抗體片段會抑制PCSK9與LDLR之結合。
  236. 如申請專利範圍第235項之方法，其中該方法進一步包含投與升高LDLR蛋白質之可用性之另一藥劑或降低血清膽固醇之藥劑。
  237. 如申請專利範圍第236項之方法，其中升高LDLR蛋白質之可用性或降低血清膽固醇之該藥劑係與該抗體或抗體組合物同時投與。
  238. 如申請專利範圍第236項之方法，其中升高LDLR蛋白質之可用性或降低血清膽固醇之該藥劑係相對於該抗體或抗體組合物依序投與。
  239. 如申請專利範圍第236項之方法，其中降低血清膽固醇蛋白質之該藥劑包含士他汀。
  240. 如申請專利範圍第239項之方法，其中該士他汀包含阿托伐他汀、西立伐他汀、氟伐他汀、洛伐他汀、美伐他汀、匹伐他汀、普伐他汀、羅素他汀、辛伐他汀或其組合。
  241. 如申請專利範圍第234項之方法，其中該方法進一步包含投與升高HDL含量之藥劑、降低三酸甘油酯含量之藥劑或兩者。
  242. 如申請專利範圍第241項之方法，其中該另一藥劑包含貝特。
  243. 如申請專利範圍第242項之方法，其中該貝特包含苯紮貝特、環丙貝特、氯貝特、吉非羅齊、非諾貝特或其混合物。
  244. 如申請專利範圍第234項之方法，其中該方法進一步包含投與膽汁螯合劑。
  245. 如申請專利範圍第244項之方法，其中該膽汁螯合劑包含消膽胺、考來維侖、考來替泊或其混合物。
  246. 如申請專利範圍第234項之方法，其中該方法進一步包含投與降低膽固醇在腸中之吸收之藥劑。
  247. 如申請專利範圍第246項之方法，其中該藥劑包含依折麥布。
  248. 如申請專利範圍第234項之方法，其中該方法進一步包含投與抑制肝三酸甘油酯產生、抑制VLDL分泌或抑制肝三酸甘油酯產生且抑制 VLDL分泌之藥劑。
  249. 如申請專利範圍第246項之方法，其中該藥劑包含阿西莫司、吉非羅齊或菸鹼酸或菸鹼酸類似物。
  250. 如申請專利範圍第234項之方法，其中該方法進一步包含投與降低脂質在腸中之吸收之藥劑。
  251. 如申請專利範圍第250項之方法，其中該藥劑包含奧利斯泰、利普司他汀或其混合物。
  252. 如申請專利範圍第234項之方法，其中該方法進一步包含投與作為抗高血壓藥、治療絞痛症或作為抗高血壓藥且治療絞痛症之藥劑。
  253. 如申請專利範圍第252項之方法，其中該藥劑包含胺氯地平、利尿劑、腎上腺素激導性受體拮抗劑、鈣通道阻斷劑、腎素抑制劑、ACE抑制劑、血管緊張素II受體拮抗劑、醛固酮拮抗劑、血管舒張劑、硝酸酯或α-2促效劑。
  254. 如申請專利範圍第253項之方法，其中該等利尿劑包括布美他尼、利尿酸、呋塞米及托塞米；噻嗪化物利尿劑，諸如依匹噻嗪、氫氯噻嗪或氯噻嗪或苄氟噻嗪；噻嗪化物樣利尿劑，諸如吲達帕胺、氯噻酮或美托拉宗；保鉀利尿劑，諸如阿米洛利、胺苯蝶啶或螺內酯；該等腎上腺素激導性受體拮抗劑包括β阻斷劑，諸如阿替洛爾、美托洛爾、納多洛爾、氧烯洛爾、品多洛爾、普萘洛爾或噻嗎洛爾；該等α阻斷劑包括多沙唑嗪、酚妥拉明、吲哚哌胺、苯氧苄胺、哌唑嗪、特拉唑嗪及妥拉唑啉；混合α+β阻斷劑，諸如布新洛爾、卡維洛爾及拉貝洛爾；該等鈣通道阻斷劑包括二氫吡啶，諸如胺氯地平、非洛地平、依拉地平、樂卡地平、尼卡地平、硝苯地平、尼莫地平及尼群地平；非二氫吡啶，諸如地爾硫卓及維拉帕米；腎素抑制劑諸如阿利克侖；ACE抑制劑諸如卡托普利、依那普利、福辛普利、賴諾普利、培哚普利、喹那普利、雷米普利、群多普利及貝那普利；血管緊張素II受體拮抗劑諸如坎地沙坦、依普羅沙坦、伊貝沙坦、洛沙坦、奧美沙坦、替米沙坦及纈沙坦；醛固酮拮抗劑諸如依普利酮及螺內酯；血管舒張劑諸如硝普酸鈉；且α-2促效劑諸如氯壓定、胍那苄、甲基多巴、莫索尼定、胍乙啶或蛇根素鹼；或硝酸酯，諸如硝基甘油(三硝酸甘油 酯)、新戊四醇四硝酸酯、二硝酸異山梨醇酯或單硝酸異山梨醇酯。
  255. 如申請專利範圍第174項至第254項中任一項之方法，其中該抗體或抗體片段或含有其之組合物及至少一種其他藥劑係同時投與。
  256. 如申請專利範圍第174項至第255項中任一項之方法，其中該抗體或抗體片段或含有其之組合物及至少一種其他藥劑係視情況藉由不同給藥方法分開投與。
  257. 如申請專利範圍第256項之方法，其中該抗體或抗體片段係在該至少一種其他藥劑之前或之後投與。
  258. 如申請專利範圍第174項至第257項中任一項之方法，其中該抗體或抗體片段或含有其之組合物係與抑制發炎之藥劑一起投與。
  259. 如申請專利範圍第258項之方法，其中該用於發炎之治療劑包含1型環加氧酶抑制劑、2型環加氧酶抑制劑、p38-MAPK之小分子調節劑、發炎路徑中涉及之細胞內分子之小分子調節劑或其混合物。
  260. 如申請專利範圍第174項至第259項中任一項之方法，其係用於治療或預防選自以下之疾病、或疾病或病狀之併發症：高膽固醇血症、心臟病、代謝症候群、糖尿病、冠心病、中風、心血管疾病、阿茲海默氏病、血脂異常、總血清膽固醇升高、LDL升高、三酸甘油酯升高、VLDL升高、低HDL、代謝症候群、糖尿病、家族性組合高脂血症、家族性高三酸甘油酯血症、家族性高膽固醇血症，包括異型接合高膽固醇血症、同型接合高膽固醇血症、家族性缺陷脂蛋白元B-100；多基因高膽固醇血症；殘粒移除疾病、肝脂肪酶缺乏症；繼發於以下任一者之血脂異常：膳食不慎重、甲狀腺機能減退、藥物，包括雌激素及孕酮療法、β-阻斷劑及噻嗪化物利尿劑；腎病症候群、慢性腎衰竭、庫興氏症候群、原發性膽汁性硬化、肝醣儲積症、肝細胞瘤、膽汁鬱積、肢端肥大症、胰島素瘤、單一性生長激素缺乏症及酒精誘發性高三酸甘油酯血症；動脈粥樣硬化疾病，諸如冠心病、冠狀動脈疾病、周邊動脈疾病、中風(缺血性及出血性)、心絞痛、腦血管疾病及急性冠脈症候群、心肌梗塞；降低以下之風險：非致命性心臟病發作、致命性及非致命性中風、某些類型之心臟手術、因心臟衰竭之住院、心臟病患者之胸痛、及/或由已有心臟病引起之心血管事件，該已 有心臟病諸如先前心臟病發作、先前心臟手術及/或伴有動脈阻塞跡象之胸痛；或降低復發性心血管事件之風險。
  261. 一或多種編碼抗人類PCSK9抗體或抗體片段或其可變重鏈或輕鏈且在適合宿主細胞中表現時導致表現抗人類PCSK9抗體或抗體片段或其可變重鏈或輕鏈的經分離核酸，其中由該或該等核酸編碼之該抗體或抗體片段與選自由以下組成之群之抗人類PCSK9抗體競爭及/或特異性結合人類PCSK9上之與選自由以下組成之群之抗人類PCSK9抗體相同或重疊之抗原決定基：Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab10、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab20、Ab21、Ab22、Ab23及Ab24。
  262. 如申請專利範圍第261項之核酸，其中該所表現抗體或抗體片段特異性結合人類PCSK9上之與選自由以下組成之群之抗人類PCSK9抗體相同或重疊之抗原決定基：Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab10、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab20、Ab21、Ab22、Ab23及Ab24。
  263. 如申請專利範圍第261項之核酸，其中該(該等)抗原決定基可在偵測抗人類PCSK9抗體與10-15聚體肽之文庫中之一或多種肽之結合的結合分析中進行鑒別，該等10-15聚體肽為對應於該人類PCSK9多肽之全部或實質上全部長度的重疊片段。
  264. 如申請專利範圍第263項之核酸，其中該結合分析為西方免疫墨點分析，其藉由使用當該抗體或抗體片段與該文庫中之肽發生特異性結合時發射可偵測化學發光信號之化學發光標記來偵測該抗體或抗體片段與該文庫中之該等10-15聚體肽中之一或多者的特異性結合。
  265. 如申請專利範圍第261項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該所表現抗體或抗體片段含有選自由以下組成之群之抗PCSK9抗體的至少2個互補決定區(CDR)：Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab10、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab20、Ab21、Ab22、Ab23及Ab24。
  266. 如申請專利範圍第261項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該所表現抗人類抗PCSK9抗體或抗體片段含有選自由以下組成之群之抗 PCSK9抗體的至少3個互補決定區(CDR)：Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab10、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab20、Ab21、Ab22、Ab23及Ab24。
  267. 如申請專利範圍第261項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該所表現抗人類PCSK9抗體或抗體片段含有選自由以下組成之群之抗PCSK9抗體的至少4個互補決定區(CDR)：Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab10、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab20、Ab21、Ab22、Ab23及Ab24。
  268. 如申請專利範圍第261項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該所表現抗人類PCSK9抗體或抗體片段含有選自由以下組成之群之抗PCSK9抗體的至少5個互補決定區(CDR)：Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab10、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab20、Ab21、Ab22、Ab23及Ab24。
  269. 如申請專利範圍第261項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該所表現抗體或抗體片段含有選自由以下組成之群之抗PCSK9抗體的全部6個互補決定區(CDR)：Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab10、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab20、Ab21、Ab22、Ab23及Ab24。
  270. 如申請專利範圍第261項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該所表現抗人類PCSK9抗體或抗體片段含有(a)可變重鏈，其包含選自由以下組成之群之CDR1序列：SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：44、SEQ ID NO：84、SEQ ID NO：124、SEQ ID NO：164、SEQ ID NO：204、SEQ ID NO：244、SEQ ID NO：284、SEQ ID NO：324、SEQ ID NO：364、SEQ ID NO：404、SEQ ID NO：444、SEQ ID NO：484、SEQ ID NO：524、SEQ ID NO：564、SEQ ID NO：604、SEQ ID NO：644、SEQ ID NO：684、SEQ ID NO：724、SEQ ID NO：764、SEQ ID NO：804、SEQ ID NO：844、SEQ ID NO：884及SEQ ID NO：924；選自由以下組成之 群之CDR2序列：SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：46、SEQ ID NO：86、SEQ ID NO：126、SEQ ID NO：166、SEQ ID NO：206、SEQ ID NO：246、SEQ ID NO：286、SEQ ID NO：326、SEQ ID NO：366、SEQ ID NO：406、SEQ ID NO：446、SEQ ID NO：486、SEQ ID NO：526、SEQ ID NO：566、SEQ ID NO：606、SEQ ID NO：646、SEQ ID NO：686、SEQ ID NO：726、SEQ ID NO：766、SEQ ID NO：806、SEQ ID NO：846、SEQ ID NO：886及SEQ ID NO：926；及選自由以下組成之群之CDR3序列：SEQ ID NO：8、SEQ ID NO：48、SEQ ID NO：88、SEQ ID NO：128、SEQ ID NO：168、SEQ ID NO：208、SEQ ID NO：248、SEQ ID NO：288、SEQ ID NO：328、SEQ ID NO：368、SEQ ID NO：408、SEQ ID NO：448、SEQ ID NO：488、SEQ ID NO：528、SEQ ID NO：568、SEQ ID NO：608、SEQ ID NO：648、SEQ ID NO：688、SEQ ID NO：728、SEQ ID NO：768、SEQ ID NO：808、SEQ ID NO：848、SEQ ID NO：888及SEQ ID NO：928；及/或(b)可變輕鏈，其包含選自由以下組成之群之CDR1序列：SEQ ID NO：24、SEQ ID NO：64、SEQ ID NO：104、SEQ ID NO：144、SEQ ID NO：184、SEQ ID NO：224、SEQ ID NO：264、SEQ ID NO：304、SEQ ID NO：344、SEQ ID NO：384、SEQ ID NO：424、SEQ ID NO：464、SEQ ID NO：504、SEQ ID NO：544、SEQ ID NO：584、SEQ ID NO：624、SEQ ID NO：664、SEQ ID NO：704、SEQ ID NO：744、SEQ ID NO：784、SEQ ID NO：824、SEQ ID NO：864、SEQ ID NO：904及SEQ ID NO：944；選自由以下組成之群之CDR2序列：SEQ ID NO：26、SEQ ID NO：66、SEQ ID NO：106、SEQ ID NO：146、SEQ ID NO：186、SEQ ID NO：226、SEQ ID NO：266、SEQ ID NO：306、SEQ ID NO：346、SEQ ID NO：386、SEQ ID NO：426、SEQ ID NO：466、SEQ ID NO：506、SEQ ID NO：546、SEQ ID NO：586、SEQ ID NO：626、SEQ ID NO：666、SEQ ID NO：706、SEQ ID NO：746、SEQ ID NO：786、SEQ ID NO：826、SEQ ID NO：866、SEQ ID NO：906及SEQ ID NO：946；及選自由以下組成之群之CDR3序列：SEQ ID NO：28、SEQ ID NO：68、SEQ ID NO：108、SEQ ID NO：148、SEQ ID NO：188、SEQ ID NO：228、SEQ ID NO：268、SEQ ID NO：308、SEQ ID NO：348、SEQ ID NO：388、SEQ ID NO：428、SEQ ID NO：468、SEQ ID NO：508、SEQ ID NO：548、SEQ ID NO：588、SEQ ID NO：628、SEQ ID NO：668、SEQ ID NO：708、SEQ ID NO：748、SEQ ID NO：788、SEQ ID NO：828、SEQ ID NO：868、SEQ ID NO：908及SEQ ID NO：948，其進一步限制條件為任何以上鑒別之CDR多肽之一或兩個殘基可經另一胺基酸取代。
  271. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：4、CDR2序列SEQ ID NO：6及CDR3序列SEQ ID NO：8；及/或該可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：24、CDR2序列SEQ ID NO：26及CDR3序列SEQ ID NO：28。
  272. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：44、CDR2序列SEQ ID NO：46及CDR3序列SEQ ID NO：48；及/或該可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：64、CDR2序列SEQ ID NO：66及CDR3序列SEQ ID NO：68。
  273. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：84、CDR2序列SEQ ID NO：86及CDR3序列SEQ ID NO：88；及/或該可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：104、CDR2序列SEQ ID NO：106及CDR3序列SEQ ID NO：108。
  274. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：124、CDR2序列SEQ ID NO：126及CDR3序列SEQ ID NO：128；及/或該可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：144、CDR2序列SEQ ID NO：146及CDR3序列SEQ ID NO：148。
  275. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：164、CDR2序列SEQ ID NO：166及CDR3序列SEQ ID NO：168；且該可變輕鏈包 含CDR1序列SEQ ID NO：184、CDR2序列SEQ ID NO：186及CDR3序列SEQ ID NO：188。
  276. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中該所表現抗人類PCSK9抗體或抗體片段含有包含CDR1序列SEQ ID NO：204、CDR2序列SEQ ID NO：206及CDR3序列SEQ ID NO：208的可變重鏈；且該可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：224、CDR2序列SEQ ID NO：226及CDR3序列SEQ ID NO：228。
  277. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：244、CDR2序列SEQ ID NO：246及CDR3序列SEQ ID NO：248；且該可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：264、CDR2序列SEQ ID NO：266及CDR3序列SEQ ID NO：268。
  278. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：284、CDR2序列SEQ ID NO：286及CDR3序列SEQ ID NO：288；且該可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：304、CDR2序列SEQ ID NO：306及CDR3序列SEQ ID NO：308。
  279. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：324、CDR2序列SEQ ID NO：326及CDR3序列SEQ ID NO：328；及/或該可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：344、CDR2序列SEQ ID NO：346及CDR3序列SEQ ID NO：348。
  280. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：364、CDR2序列SEQ ID NO：366及CDR3序列SEQ ID NO：368；及/或該可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：384、CDR2序列SEQ ID NO：386及CDR3序列SEQ ID NO：388。
  281. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：404、CDR2序列SEQ ID NO：406及CDR3序列SEQ ID NO：408；及/或該可變輕鏈 包含CDR1序列SEQ ID NO：424、CDR2序列SEQ ID NO：426及CDR3序列SEQ ID NO：428。
  282. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：444、CDR2序列SEQ ID NO：446及CDR3序列SEQ ID NO：448；且該可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：464、CDR2序列SEQ ID NO：466及CDR3序列SEQ ID NO：468。
  283. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：484、CDR2序列SEQ ID NO：486及CDR3序列SEQ ID NO：488；及/或該可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：504、CDR2序列SEQ ID NO：506及CDR3序列SEQ ID NO：508。
  284. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：524、CDR2序列SEQ ID NO：526及CDR3序列SEQ ID NO：528；及/或該可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：544、CDR2序列SEQ ID NO：546及CDR3序列SEQ ID NO：548。
  285. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：564、CDR2序列SEQ ID NO：566及CDR3序列SEQ ID NO：568；及/或該可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：584、CDR2序列SEQ ID NO：586及CDR3序列SEQ ID NO：588。
  286. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：604、CDR2序列SEQ ID NO：606及CDR3序列SEQ ID NO：608；及/或該可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：624、CDR2序列SEQ ID NO：626及CDR3序列SEQ ID NO：628。
  287. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：644、CDR2序列SEQ ID NO：646及CDR3序列SEQ ID NO：648；及/或該可變輕鏈 包含CDR1序列SEQ ID NO：664、CDR2序列SEQ ID NO：666及CDR3序列SEQ ID NO：668。
  288. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：684、CDR2序列SEQ ID NO：686及CDR3序列SEQ ID NO：688；及/或該可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：704、CDR2序列SEQ ID NO：706及CDR3序列SEQ ID NO：708。
  289. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：724、CDR2序列SEQ ID NO：726及CDR3序列SEQ ID NO：728；及/或該可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：744、CDR2序列SEQ ID NO：746及CDR3序列SEQ ID NO：748。
  290. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：764、CDR2序列SEQ ID NO：766及CDR3序列SEQ ID NO：768；及/或該可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：784、CDR2序列SEQ ID NO：786及CDR3序列SEQ ID NO：788。
  291. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：804、CDR2序列SEQ ID NO：806及CDR3序列SEQ ID NO：808；及/或該可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：824、CDR2序列SEQ ID NO：826及CDR3序列SEQ ID NO：828。
  292. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：844、CDR2序列SEQ ID NO：846及CDR3序列SEQ ID NO：848；及/或該可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：864、CDR2序列SEQ ID NO：866及CDR3序列SEQ ID NO：868。
  293. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：884、CDR2序列SEQ ID NO：886及CDR3序列SEQ ID NO：888；及/或由該或該等 核酸編碼之該可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：904、CDR2序列SEQ ID NO：906及CDR3序列SEQ ID NO：908。
  294. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該可變重鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：924、CDR2序列SEQ ID NO：926及CDR3序列SEQ ID NO：928；及/或由該或該等核酸編碼之該可變輕鏈包含CDR1序列SEQ ID NO：944、CDR2序列SEQ ID NO：946及CDR3序列SEQ ID NO：948。
  295. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該可變重鏈包含與SEQ ID NO：2至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列及/或由該或該等核酸編碼之該可變輕鏈包含SEQ ID NO：22。
  296. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中該可變重鏈及該可變輕鏈各自與分別SEQ ID NO：2及SEQ ID NO：22中之可變重鏈及可變輕鏈至少90%一致。
  297. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該可變重鏈包含與SEQ ID NO：42至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之該可變輕鏈包含與SEQ ID NO：62至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  298. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中該可變重鏈及該可變輕鏈各自與分別SEQ ID NO：42及SEQ ID NO：62中之可變重鏈及可變輕鏈至少90%一致。
  299. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該可變重鏈包含與SEQ ID NO：82至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之該可變輕鏈包含與SEQ ID NO：102至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  300. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中該可變重鏈及該可變輕鏈各自與分別SEQ ID NO：82及SEQ ID NO：102中之可變重鏈及可變輕鏈至少90%一致。
  301. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該可變重鏈包含與SEQ ID NO：122至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之該可變輕鏈包含與SEQ ID NO：142至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  302. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中該可變重鏈及該可變輕鏈各自與分別SEQ ID NO：122及SEQ ID NO：142中之可變重鏈及可變輕鏈至少90%一致。
  303. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該可變重鏈包含與SEQ ID NO：162至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之該可變輕鏈包含與SEQ ID NO：182至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  304. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中該可變重鏈及該可變輕鏈各自與分別SEQ ID NO：162及SEQ ID NO：182中之可變重鏈及可變輕鏈至少90%一致。
  305. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該可變重鏈包含與SEQ ID NO：202至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之該可變輕鏈包含與SEQ ID NO：222至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  306. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中該可變重鏈及該可變輕鏈各自與分別SEQ ID NO：202及SEQ ID NO：222中之可變重鏈及可變輕鏈至少90%一致。
  307. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該可變重鏈包含與SEQ ID NO：242至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之該可變輕鏈包含與SEQ ID NO：262至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  308. 如申請專利範圍第261項至第270項、中任一項之核酸，其中該可變 重鏈及該可變輕鏈各自與分別SEQ ID NO：242及SEQ ID NO：262中之可變重鏈及可變輕鏈至少90%一致。
  309. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該可變重鏈包含與SEQ ID NO：282至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之該可變輕鏈包含與SEQ ID NO：302至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  310. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中該可變重鏈及該可變輕鏈各自與分別SEQ ID NO：282及SEQ ID NO：302中之可變重鏈及可變輕鏈至少90%一致。
  311. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該可變重鏈包含與SEQ ID NO：322至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之該可變輕鏈包含與SEQ ID NO：342至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  312. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中該可變重鏈及該可變輕鏈各自與分別SEQ ID NO：322及SEQ ID NO：342中之可變重鏈及可變輕鏈至少90%一致。
  313. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該可變重鏈包含與SEQ ID NO：362至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之該可變輕鏈包含與SEQ ID NO：382至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  314. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中該可變重鏈及該可變輕鏈各自與分別SEQ ID NO：362及SEQ ID NO：382中之可變重鏈及可變輕鏈至少90%一致。
  315. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該可變重鏈包含與SEQ ID NO：402至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之該可變輕鏈包含與SEQ ID NO：422至少80、85、90、95、96、97、 98、99或100%一致之序列。
  316. 如申請專利範圍第261項至第270項、中任一項之核酸，其中該可變重鏈及該可變輕鏈各自與分別SEQ ID NO：402及SEQ ID NO：422中之可變重鏈及可變輕鏈至少90%一致。
  317. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該可變重鏈包含與SEQ ID NO：442至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之該可變輕鏈包含與SEQ ID NO：462至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  318. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中該可變重鏈及該可變輕鏈各自與分別SEQ ID NO：442及SEQ ID NO：462中之可變重鏈及可變輕鏈至少90%一致。
  319. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該可變重鏈包含與SEQ ID NO：482至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之該可變輕鏈包含與SEQ ID NO：502至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  320. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中該可變重鏈及該可變輕鏈各自與分別SEQ ID NO：482及SEQ ID NO：502中之可變重鏈及可變輕鏈至少90%一致。
  321. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該可變重鏈包含與SEQ ID NO：522至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之該可變輕鏈包含與SEQ ID NO：542至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  322. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中該可變重鏈及該可變輕鏈各自與分別SEQ ID NO：522及SEQ ID NO：542中之可變重鏈及可變輕鏈至少90%一致。
  323. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該可變重鏈包含與SEQ ID NO：562至少80、85、90、 95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之該可變輕鏈包含與SEQ ID NO：582至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  324. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中該可變重鏈及該可變輕鏈各自與分別SEQ ID NO：562及SEQ ID NO：582中之可變重鏈及可變輕鏈至少90%一致。
  325. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該可變重鏈包含與SEQ ID NO：602至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之該可變輕鏈包含與SEQ ID NO：622至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  326. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中該可變重鏈及該可變輕鏈各自與分別SEQ ID NO：602及SEQ ID NO：622中之可變重鏈及可變輕鏈至少90%一致。
  327. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該可變重鏈包含與SEQ ID NO：642至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之該可變輕鏈包含與SEQ ID NO：662至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  328. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中該可變重鏈及該可變輕鏈各自與分別SEQ ID NO：642及SEQ ID NO：662中之可變重鏈及可變輕鏈至少90%一致。
  329. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該可變重鏈包含與SEQ ID NO：682至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之該可變輕鏈包含與SEQ ID NO：702至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  330. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中該可變重鏈及該可變輕鏈各自與分別SEQ ID NO：682及SEQ ID NO：702中之可變重鏈及可變輕鏈至少90%一致。
  331. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該可變重鏈包含與SEQ ID NO：722至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之該可變輕鏈包含與SEQ ID NO：742至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  332. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中該可變重鏈及該可變輕鏈各自與分別SEQ ID NO：722及SEQ ID NO：742中之可變重鏈及可變輕鏈至少90%一致。
  333. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該可變重鏈包含與SEQ ID NO：762至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之該可變輕鏈包含與SEQ ID NO：782至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  334. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中該可變重鏈及該可變輕鏈各自與分別SEQ ID NO：762及SEQ ID NO：782中之可變重鏈及可變輕鏈至少90%一致。
  335. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該可變重鏈包含與SEQ ID NO：802至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之該可變輕鏈包含與SEQ ID NO：822至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  336. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中該可變重鏈及該可變輕鏈各自與分別SEQ ID NO：802及SEQ ID NO：822中之可變重鏈及可變輕鏈至少90%一致。
  337. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該可變重鏈包含與SEQ ID NO：842至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之該可變輕鏈包含與SEQ ID NO：862至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  338. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中該可變重 鏈及該可變輕鏈各自與分別SEQ ID NO：842及SEQ ID NO：862中之可變重鏈及可變輕鏈至少90%一致。
  339. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該可變重鏈包含與SEQ ID NO：882至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之該可變輕鏈包含與SEQ ID NO：902至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  340. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中該可變重鏈及該可變輕鏈各自與分別SEQ ID NO：882及SEQ ID NO：902中之可變重鏈及可變輕鏈至少90%一致。
  341. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該可變重鏈包含與SEQ ID NO：922至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之該可變輕鏈包含與SEQ ID NO：942至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  342. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中該可變重鏈及該可變輕鏈各自與分別SEQ ID NO：922及SEQ ID NO：942中之可變重鏈及可變輕鏈至少90%一致。
  343. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該重鏈包含與SEQ ID NO：1至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之該輕鏈包含與SEQ ID NO：21至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  344. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該重鏈包含與SEQ ID NO：41至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之該輕鏈包含與SEQ ID NO：61至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  345. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該重鏈包含與SEQ ID NO：81至少80、85、90、95、 96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之該輕鏈包含與SEQ ID NO：101至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  346. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該重鏈包含與SEQ ID NO：121至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之該輕鏈包含與SEQ ID NO：141至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  347. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該重鏈包含與SEQ ID NO：161至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之該輕鏈包含與SEQ ID NO：181至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  348. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該重鏈包含與SEQ ID NO：201至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之該輕鏈包含與SEQ ID NO：221至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  349. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該重鏈包含與SEQ ID NO：241至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之該輕鏈包含與SEQ ID NO：261至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  350. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該重鏈包含與SEQ ID NO：281至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之該輕鏈包含SEQ ID NO：301。
  351. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該重鏈包含SEQ ID NO：321且由該或該等核酸編碼之該輕鏈包含與SEQ ID NO：341至少80、85、90、95、96、97、98、99 或100%一致之序列。
  352. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該重鏈包含與SEQ ID NO：361至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之該輕鏈包含SEQ ID NO：381。
  353. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該重鏈包含SEQ ID NO：401且由該或該等核酸編碼之該輕鏈包含與SEQ ID NO：421至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  354. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該重鏈包含與SEQ ID NO：441至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之該輕鏈包含與SEQ ID NO：461至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  355. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該重鏈包含與SEQ ID NO：481至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之該輕鏈包含與SEQ ID NO：501至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  356. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該重鏈包含與SEQ ID NO：521至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之該輕鏈包含SEQ ID NO：541。
  357. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該重鏈包含SEQ ID NO：561且由該或該等核酸編碼之該輕鏈包含與SEQ ID NO：581至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  358. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該重鏈包含與SEQ ID NO：601至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之該輕鏈 包含SEQ ID NO：621。
  359. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該重鏈包含SEQ ID NO：641且由該或該等核酸編碼之該輕鏈包含與SEQ ID NO：661至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  360. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該重鏈包含與SEQ ID NO：681至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之該輕鏈包含與SEQ ID NO：701至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  361. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該重鏈包含與SEQ ID NO：721至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之該輕鏈包含SEQ ID NO：741。
  362. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該重鏈包含SEQ ID NO：761且由該或該等核酸編碼之該輕鏈包含與SEQ ID NO：781至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  363. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該重鏈包含與SEQ ID NO：801至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之該輕鏈包含與SEQ ID NO：821至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  364. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該重鏈包含與SEQ ID NO：841至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之該輕鏈包含與SEQ ID NO：861至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  365. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該重鏈包含與SEQ ID NO：881至少80、85、90、95、 96、97、98、99或100%一致之序列且由該或該等核酸編碼之該輕鏈包含SEQ ID NO：901。
  366. 如申請專利範圍第261項至第270項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該重鏈包含SEQ ID NO：921且由該或該等核酸編碼之該輕鏈包含與SEQ ID NO：941至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%一致之序列。
  367. 如申請專利範圍第261項至第366項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該抗體或抗體片段係選自由嵌合、人類化及人類抗體或抗體片段組成之群。
  368. 如申請專利範圍第261項至第367項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該所表現抗體或抗體片段係選自由scFv、駱駝抗體、奈米抗體、IgNAR、F ab 片段、F ab ’ 片段、MetMab、單價抗體片段及F(ab ’)2 片段組成之群。
  369. 如申請專利範圍第261項至第369項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該所表現抗體或抗體片段實質上或完全缺乏N-糖基化及/或O-糖基化。
  370. 如申請專利範圍第261項至第369項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該所表現抗體或抗體片段包含人類恆定域。
  371. 如申請專利範圍第261項至第370項中任一項之核酸，其中由該或該等核酸編碼之該所表現抗體為IgG1、IgG2、IgG3或IgG4抗體。
  372. 如申請專利範圍第261項至第371項中任一項之核酸，其中編碼該抗體或抗體片段之該或該等核酸包含編碼與以下至少80、90、95、96、97、98、99或100%一致之VH及VL區之序列：SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：32；SEQ ID NO：52、SEQ ID NO：72；SEQ ID NO：92、SEQ ID NO：112；SEQ ID NO：132、SEQ ID NO：152；SEQ ID NO：172、SEQ ID NO：192；SEQ ID NO：212、SEQ ID NO：232、SEQ ID NO：252、SEQ ID NO：272；SEQ ID NO：292、SEQ ID NO：312；SEQ ID NO：332、SEQ ID NO：352；SEQ ID NO：372、SEQ ID NO：392；SEQ ID NO：412、SEQ ID NO：432；SEQ ID NO：452、SEQ ID NO：472；SEQ ID NO：492、SEQ ID NO：512、SEQ ID NO：532、SEQ ID NO：552、SEQ ID NO：572、SEQ ID NO：592、SEQ ID NO：612、SEQ ID NO：632、SEQ ID NO：652、SEQ ID NO：672；SEQ ID NO：692；SEQ ID NO：712；SEQ ID NO：732；SEQ ID NO：752；SEQ ID NO：772；SEQ ID NO：792；SEQ ID NO：812；SEQ ID NO：832；SEQ ID NO：852；SEQ ID NO：872；SEQ ID NO：892；SEQ ID NO：912；SEQ ID NO：932；SEQ ID NO：952；或其密碼子簡併物。
  373. 一或多種載體，其包含如申請專利範圍第261項至第372項中任一項之核酸序列。
  374. 一種宿主細胞，其包含如申請專利範圍第261項至第372項中任一項之核酸序列或如申請專利範圍第373項之載體。
  375. 如申請專利範圍第374項之宿主細胞，其中該宿主細胞為哺乳動物、細菌、真菌、酵母、禽類或昆蟲細胞。
  376. 如申請專利範圍第374項之宿主細胞，其包含絲狀真菌或酵母。
  377. 如申請專利範圍第376項之宿主細胞，其包含絲狀真菌或酵母，包括畢赤酵母(Pichia pastoris)、芬蘭畢赤酵母(Pichia finlandica)、喜海藻糖畢赤酵母(Pichia trehalophila)、Pichia koclamae、膜醭畢赤酵母(Pichia membranaefaciens)、微小畢赤酵母(Pichia minuta)(Ogataea minuta、林德納畢赤酵母(Pichia lindneri))、仙人掌畢赤酵母(Pichia opuntiae)、耐熱畢赤酵母(Pichia thermotolerans)、柳畢赤酵母(Pichia salictaria)、松櫟畢赤酵母(Pichia guercuum)、皮傑普畢赤酵母(Pichia pijperi)、樹幹畢赤酵母(Pichia stiptis)、甲醇畢赤酵母(Pichia methanolica)、畢赤酵母屬(Pichia sp.)、釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、酵母屬(Saccharomyces sp.)、多形漢遜酵母(Hansenula polymorpha)、克魯維酵母屬(Kluyveromyces sp.)、乳酸克魯維酵母(Kluyveromyces lactis)、白色念珠菌(Candida albicans)、構巢麯黴(Aspergillus nidulans)、黑麯黴(Aspergillus niger)、米麯黴(Aspergillus oryzae)、里氏木黴(Trichoderma reesei)、Chrysosporium lucknowense、鐮刀菌屬(Fusarium sp.)、禾穀鐮孢(Fusarium gramineum)、Fusarium venenatum、小立碗蘚(Physcomitrella patens)及粗厚神經孢子菌(Neurospora crassa)、畢赤酵母屬(Pichia sp.)、任何酵母屬(Saccharomyces sp.)、多形漢遜酵母 (Hansenula polymorpha)、任何克魯維酵母屬(Kluyveromyces sp.)、白色念珠菌(Candida albicans)、任何麴菌屬(Aspergillus sp.)、里氏木黴(Trichoderma reesei)、Chrysosporium lucknowense、任何鐮刀菌屬(Fusarium sp.)及粗厚神經孢子菌(Neurospora crassa)。
  378. 如申請專利範圍第377項之宿主細胞，其中該宿主細胞為哺乳動物細胞。
  379. 如申請專利範圍第378項之宿主細胞，其中該宿主細胞為CHO、COS、BHK、骨髓瘤、經SV40轉型之猴腎CV1細胞株(COS-7，ATCC CRL 1651)；人類胚腎細胞株(293或經次選殖以供懸浮培養生長之293細胞)、小鼠賽托利細胞；人類肺細胞；人類肝細胞或小鼠乳腺腫瘤細胞。
  380. 如申請專利範圍第379項之宿主細胞，其中該哺乳動物細胞為CHO細胞。
  381. 如申請專利範圍第374項之宿主細胞，其為屬於畢赤酵母屬之酵母細胞。
  382. 如申請專利範圍第381項之宿主細胞，其為畢赤酵母。
  383. 一種製備如申請專利範圍第1項至第132項中任一項之抗體或抗體片段之方法，其係藉由在重組宿主細胞中表現編碼該抗體或抗體片段之表現的核酸來達成。
  384. 如申請專利範圍第383項之方法，其中該宿主細胞係選自細菌、酵母、真菌、昆蟲細胞、植物細胞、禽類細胞或哺乳動物細胞。
  385. 如申請專利範圍第383項之方法，其中該宿主細胞為可最佳為多倍體之酵母或絲狀真菌。
  386. 如申請專利範圍第385項之方法，其中該酵母或絲狀真菌包括畢赤酵母、芬蘭畢赤酵母、喜海藻糖畢赤酵母、Pichia koclamae、膜醭畢赤酵母、微小畢赤酵母(Ogataea minuta、林德納畢赤酵母)、仙人掌畢赤酵母、耐熱畢赤酵母、柳畢赤酵母、松櫟畢赤酵母、皮傑普畢赤酵母、樹幹畢赤酵母、甲醇畢赤酵母、畢赤酵母屬、釀酒酵母、酵母屬、多形漢遜酵母、克魯維酵母屬、乳酸克魯維酵母、白色念珠菌、構巢麯黴、黑麯黴、米麯黴、里氏木黴、Chrysosporium lucknowense、鐮刀菌屬、禾穀鐮孢、Fusarium venenatum、小立碗蘚及粗厚神經孢子菌、畢赤酵母屬、任何酵母屬、多形漢遜酵母、任何克魯維酵母屬、白色念珠菌、任何麴菌屬、里氏木黴、Chrysosporium lucknowense、任何鐮刀菌屬及粗厚神經孢子菌。
  387. 如申請專利範圍第383項之方法，其中該宿主細胞為哺乳動物細胞。
  388. 如申請專利範圍第387項之方法，其中該宿主細胞為CHO、COS、BHK、骨髓瘤、經SV40轉型之猴腎CV1細胞株(COS-7，ATCC CRL 1651)；人類胚腎細胞株(293或經次選殖以供懸浮培養生長之293細胞)、小鼠賽托利細胞；人類肺細胞；人類肝細胞或小鼠乳腺腫瘤細胞。
  389. 如申請專利範圍第388項之方法，其中該哺乳動物細胞為CHO細胞。
  390. 如申請專利範圍第383項之方法，其中該重組宿主細胞為穩定表現該抗體或抗體片段且以至少10-25毫克/公升將該抗體或抗體片段分泌至培養基中之多倍體酵母培養物。
  391. 如申請專利範圍第390項之方法，其中該多倍體酵母係藉由包含以下之方法製備：(i)將至少一種含有一或多種編碼該抗體之異源聚核苷酸之表現載體引入單倍體酵母細胞中，該一或多種異源聚核苷酸可操作地連接於啟動子及信號序列；(ii)藉由接合或球形質體融合自該第一及/或第二單倍體酵母細胞產生多倍體酵母；(iii)選擇穩定表現該抗體之多倍體酵母細胞；及(iv)自將該抗體穩定表現至培養基中之該等多倍體酵母細胞產生穩定多倍體酵母培養物。
  392. 如申請專利範圍第391項之方法，其中該酵母屬為畢赤酵母屬。
  393. 一種治療或診斷方法，其包含投與治療或診斷有效量之至少一種如申請專利範圍第1項至第133項中任一項之抗體或抗體片段。
  394. 如申請專利範圍第393項之方法，其中該抗體或抗體片段係藉由選自以下之手段投與：經頰、上皮、硬膜外、吸入、動脈內、心臟內、腦 室內、皮內、肌肉內、鼻內、眼內、腹膜內、脊柱內、鞘內、靜脈內、經口、非經腸、經由灌腸劑或栓劑之經直腸、皮下、真皮下、舌下、經皮及經黏膜。
  395. 如申請專利範圍第394項之方法，其中該抗體或抗體片段係藉由選自以下之手段投與：皮下、靜脈內、動脈內、心臟內、腦室內、肌肉內、腹膜內、脊柱內、鞘內及非經腸。
  396. 如申請專利範圍第394項之方法，其中該抗體或抗體片段係藉由皮下手段投與。
  397. 如申請專利範圍第394項之方法，其中該抗體或抗體片段係藉由靜脈內手段投與。
  398. 如申請專利範圍第394項之方法，其中該抗體或抗體片段係含於散劑、液體、凝膠劑、滴劑或其他投藥手段中。
  399. 一種含有如申請專利範圍第1項至第133項中任一項之抗體或抗體片段之組合物，其適於藉由選自以下之手段投與：經頰、上皮、硬膜外、吸入、動脈內、心臟內、腦室內、皮內、肌肉內、鼻內、眼內、腹膜內、脊柱內、鞘內、靜脈內、經口、非經腸、經由灌腸劑或栓劑之經直腸、皮下、真皮下、舌下、經皮及經黏膜。
  400. 如申請專利範圍第399項之組合物，其中該組合物係藉由選自以下之手段投與：皮下、靜脈內、動脈內、心臟內、腦室內、肌肉內、腹膜內、脊柱內、鞘內及非經腸。
  401. 如申請專利範圍第399項之組合物，其係藉由皮下手段投與。
  402. 如申請專利範圍第399項之組合物，其係藉由靜脈內手段投與。
  403. 如申請專利範圍第399項之組合物，其包含散劑、液體、凝膠劑、滴劑、脂質體或其他劑型。
  404. 一種使用如申請專利範圍第1項至第132項中任一項之抗體或抗體片段之方法，其係用於分離、偵測或純化樣品中之PCSK9。
  405. 一種使用如申請專利範圍第1項至第132項中任一項之抗體或抗體片段之方法，其係用於活體內或離體偵測PCSK9之含量。
  406. 如申請專利範圍第405項之方法，其係用於評估患者是否應被投與抗PCSK9抗體或抗體片段或另一療法。
  407. 如申請專利範圍第405項之方法，其中該偵測方法係用於評估目的在於降低膽固醇或改變脂質含量之治療方法之功效。
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