TW201249430A - Treatment of breast cancer with 4-iodo-3-nitrobenzamide in combination with anti-tumor agents - Google Patents

Description

201249430 六、發明說明： 本申請案主張2007年11月12日申請之標題為"Treatment of Triple Negative Metastatic Breast Cancer with a Combination of an Antimetabolite, a Platinum Complex, and a PARP Inhibitor"之美國臨時申請案第60/987,333號（代理 人案號28825-742.101)、2007年12月7日申請之標題為 "Treatment of Cancer with Combinations of Topoisomerase Inhibitors and PARP Inhibitors"之美國臨時申請案第 61/012,364號（代理人案號 28825-747.101)及 2008 年 6 月 3 曰 申請之標題為"Treatment of Breast, Ovarian, and Uterine Cancer with a PARP Inhibitor”之美國臨時申請案第 61/058,528號（代理人案號28825-757.101)的權利，該等申 請案中之每一者以全文引用的方式併入本文中。 【先前技術】 癌症係以細胞生長受到異常控制為特徵的一組疾病。據 估計，僅在美國，每年癌症發病率超過130萬。雖然使用 外科手術、放射療法、化學療法及激素來治療癌症，但癌 症在美國仍為第二大死亡原因。據估計每年超過560,000 美國人死於癌症。 癌細胞同時活化正面及負面調控細胞生長及細胞死亡之 若干路徑《此特性表明調節細胞死亡及存活信號可提供新 的改良目前化學治療功效之策略。 乳癌一般用外科手術（移除癌變）與輔助療法（放射療法、 化學療法或兩者，攻擊在外科手術後可能會留下之任何癌 166146.doc 201249430 細胞）的組合來治療。可根據激素受體（HR)之存在或不存 在，將乳癌大致分類。激素受體陽性（HR+)癌症特徵為雌 性激素爻體（雌激素受體（ER)或孕酮受體中之一或兩 者的表現。ER+乳癌之輔助療法通常包括以選擇性雌激素 受體調節劑（SERM)(諸如，他莫昔芬（tam〇xifen)或雷洛昔 芬（raloxifene))進行化學療法。令人遺憾地，雖然約7〇%乳 癌為ER呈陽性，但剩餘3〇% HR呈陰性之乳癌不對SERM治 療作出反應。因此，其他輔助化學療法（諸如，以蒽環黴 素（anthracycline)治療（單獨治療或與紫杉烷（taxane)組合治 療））已試驗於ER陰性乳癌。 以蒽環黴素治療受到基於心臟毒性問題之壽命給藥限制 的限制。以吉西他賓（gemcitabine)及卡鉑（carb〇platin)治療 為一種針對轉移性乳癌患者（無論其未經紫杉烷治療抑或 經紫杉烷預先治療）建立之組合化學療法。鉑劑已證明在 基底樣局部發展之乳癌中有望具有抗腫瘤活性。DNA損傷 劑有望具有針對基底樣乳癌之抗腫瘤功效，此係因為Dna 修復路徑之缺陷為此等乳癌所固有的。 儘管可利用諸如吉西他賓之抗代謝物及諸如卡鉑之鉑錯 合劑’但對ER陰性乳癌無公認護理標準。尤其三重陰性轉 移性乳癌（亦即，ER呈陰性及/或PR呈陰性及/或人類表皮 生長因子受體2(HER2)呈陰性的乳癌）難以標準治療且完全 無法SERM化學療法《因此，對一般癌症及尤其三重陰性 轉移性乳癌之有效治療存在需要。 雖然對於癌症治療而言存在有限的治療選擇，但癌症變 166146.doc 201249430 異體（包括三重陰性乳癌）尤其為困難的，此係因為其可難 以由標準化學治療或激素治療來治療。因此，對一般癌症 及尤其癌症變異體之有效治療存在需要。 【發明内容】

k 在一些實施例中’本發明提供一種治療患者中ER、PR ; 或HER2中之至少一者呈陰性之乳癌的方法，其包含向該 患者投與至少一種PARP抑制劑。在一些實施例中，本發 明提供一種治療有需要之患者中Er、Pr或HEr2中之至少 一者呈陰性之乳癌的方法，其包含：（a)自該患者獲得樣 。口 ’（b)對樣品進行測試以確定以下每一者：癌症為er呈 陽性抑或ER呈陰性；癌症為PR呈陽性抑或pR呈陰性；癌 症為HER2呈陽性抑或HER2呈陰性；（c)若測試指示癌症的 ER、PR或HER2中之至少一者呈陰性，則用至少一種pARp 抑制劑治療患者。在一些實施例中，該方法進一步包含； 右符合以下條件中之兩者或兩者以上，則用至少一種 PARP抑制劑治療患者：（a)癌症為ER呈陰性；（b)癌症為PR 呈陰性；（c)癌症為HER2呈陰性。在一些實施例中，本發 明提供一種治療患者中ER、pR或HER2中之至少一者呈陰 陡之乳癌的方法，其包含：（a)關於PARP表現，測試來自 患者之樣品；及（b)若PARP表現超過預定含量，則向患者 投與至少一種PARP抑制劑。 在實施本文所揭示之任一標的方法時，獲得至少一種治 療效果’该至少一種治療效果為乳房腫瘤尺寸減小、轉移 減少、症狀完全緩解、症狀部分緩解、疾病穩定或病理完 166146.doc 201249430 全反應（pathologic complete response)。在一些實施例中， 如與用抗腫瘤劑治療相比，用PARP抑制劑治療獲得可比 的臨床受益率（CBR=CR+PR+SDm個月）。在一些實施例 中，如與用單獨抗腫瘤劑治療相比，臨床受益率改良為至 少約30%»在一些實施例中，pARp抑制劑為pARJM抑制 劑。在一些實施例中，PARP丨抑制劑為4_碘_3_硝基苯甲醯 胺或其代謝物。在一些實施例中，PARp抑制劑為式（11昀或 其代謝物： 〇

II 9——NH2 R5VY^Y"R1 (Ha) r3 式（Ila) 其中：⑴取代基R,、R2、r3、r4&R5中之至少—者始終 為含硫取代基，且剩餘取代基11〗、112、]13、]14及]15獨立地 選自由以下各基組成之群：氫、經基、胺基、硝基、碘 基、漠ϋ基、氣基、（Cl_C6m基、（Ci_C6m氧基、 (cvc：7)環烷基及苯基，其中五個取代基&、&、&、&及 Rs中之至少兩者始終為氫；或（2)取代基Ri、R2、R3、b& Rs中之至少一者不為含硫取代基且五個取代基r】、R2、 R3 R4及R5t之至；—者始終為峨基，且其中該峨基始終 與為硝基、亞硝基、羥基胺基、羥基或胺基之&、I、 R3、R4或R5基團相鄰；及其醫藥學上可接受之鹽、溶劑合 166146.doc -6 - 201249430 物、異構體、互變異構體、代謝物、類似物或前藥。在一 些實施例中’（2)之化合物使得換基始終與為亞确基、經基 胺基、羥基或胺基之、R2、R3、R4或R_5基團相鄰。在一 些實施例中，（2)之化合物使得碘基始終與為亞硝基、經基 胺基或胺基之R1、R2、R_3、R_4或R5基團相鄰。 在一些實施例中’乳癌為轉移性乳癌。在一些實施例 中，乳癌處於I期、II期或III期《在一些實施例中，乳癌的 ER、PR或HER2中之至少一者呈陰性。在一些實施例中， 乳癌的ER、PR或HER2中之至少一者呈陰性；且其中乳癌 的ER、PR或HER2中之至少一者呈陽性。在一些實施例 中，乳癌缺乏同源重組DNA修復《在一些實施例中，乳癌 具有功能削弱之BRCA1或BRCA2 ^在一些實施例中，治療 包含至少11天之治療週期，其中在該週期之第丨天、第4 天、第8天及第11天，患者接收約1至約1〇〇 mg/kg24碘_ 3-硝基苯曱醯胺或莫耳等量之其代謝物。在一些實施例 中’ 4-碘-3-硝基苯甲醯胺係以經口、以非經腸注射或輸注 或吸入方式投與。在一些實施例中，治療週期長約1 1天至 約30天。在一些實施例中，該方法進一步包含向患者投與 PARP抑制劑以及至少一種抗腫瘤劑。該抗腫瘤劑為抗腫 瘤烷基化劑、抗腫瘤抗代謝物、抗腫瘤抗生素、源自植物 之抗腫瘤劑、抗腫瘤翻錯合物、抗腫瘤喜樹驗衍生物、抗 腫瘤酪胺酸激酶抑制劑、單株抗體、干擾素、生物反應調 節劑、激素抗腫瘤劑、抗腫瘤病毒劑、血管生成抑制劑、 为化劑、PI3K/mTOR/AKT抑制劑、細胞週期抑制劑、細 166146.doc 201249430 胞洞亡抑制劑、hsp 90抑制劑、微管蛋白抑制劑、DNA修 復抑制劑、抗血管生成劑、受體酪胺酸激酶抑制劑、拓撲 異構酶抑制劑、紫杉烷 '靶向Her-2之藥劑、激素拮抗 劑、乾向生長因子受體之藥劑或其醫藥學上可接受之鹽。 在一些實施例中，抗腫瘤劑為他賓（citabine)、卡西他賓 (capecitabine)、瓦諾吡他賓（vai〇picitabine)或吉西他賓。 在一些貫施例中，抗腫瘤劑係選自由以下各物組成之群： 阿瓦斯；丁（Avastin)、舒尼替尼（Sutent)、多吉美 (Nexavar)、瑞可尼汀（Recentin)、abT-869、阿西替尼 (Axitimb)、伊立替康（Irin〇tecan)、拓朴替康（t〇p〇tecan)、 太平洋紫杉醇（paclitaxel)、多烯紫杉醇（docetaxei)、拉帕 替尼（lapatinib)、赫赛汀（Herceptin)、拉帕替尼、他莫昔 芬、類固醇芳香酶抑制劑、非類固醇芳香酶抑制劑、氟維 司群（Fulvestrant)、表皮生長因子受體（EGFR)抑制劑、西 妥昔單抗（Cetuximab)、帕尼土單抗（Panitumimab)、胰島素 樣生長因子1受體（iGF1r)抑制劑及CP_75187^在一些實 施例中，該方法進一步包含向患者投與pARp抑制劑以及 一種以上抗腫瘤劑。在一些實施例中，抗腫瘤劑係在 PARP抑制劑投與之前投與’與pARp抑制劑同時投與，或 在PARP抑制劑彳又與之後投與。在一些實施例中，該方法 進一步包含外科手術、放射療法、化學療法、基因療法、 DNA療法、病毒療法、RNA療法、DNA療法、輔助療法、 新辅助療法、免疫療法、奈米療法或其組合。在一些實施 例中，該方法進一步包含向患者投與pARp抑制劑以及丫照 166146.doc 201249430 射在#實施例中，樣品為組織或體液樣品。在一些實 施例中，樣品為腫瘤樣品、血液樣品、血漿樣品、腹膜液 樣。σ滲出液或滲出物。在一些實施例中，該方法進一步 包含關於雌激素受體、孕酮受體或人類表皮生長因子2受 體之表現，測試來自患者之樣品。 在一些貫施例中，本發明提供一種治療患者之乳癌的方 法，其包含向該患者投與至少一種PARP抑制劑以及至少 一種柷腫瘤劑。在一些實施例中，本發明提供一種治療有 需要之患者之乳癌的方法，其包含：（a)自該患者獲得樣 时，（b)對樣品進行測試以確定以下每一者：癌症為£尺呈 陽性抑或ER呈陰性；癌症為PR呈陽性抑或卩尺呈陰性；癌 症為HER2呈陽性抑或HER2呈陰性；（c)若測試指示癌症的 ER、PR或HER2中之至少—者里陰性，制治療劑之組合 治療患者，其中該等治療劑包括至少一種pARp抑制劑及 至少一種抗腫瘤劑。在一些實施例中，該方法進一步包 含：若符合以下條件中之兩者或兩者以上，則用治療劑之 組合治療患者，其中該等治療劑包括至少一種PARp抑制 劑及至少一種抗腫瘤劑：（a)癌症為ER呈陰性；（b)癌症為 PR里陰性；（c)癌症為HER2呈陰性。在一些實施例中，本 發明提供一種治療患者之乳癌的方法，其包含：（a)關於 PARP表現，測試來自患者之樣品；及沙）若1>八111>表現超過 預定含量’則向患者投與至少一種1>八11?抑制劑及至少一 種抗腫瘤劑。 在實施本文所揭示之任一標的方法時，在一些實施例 166146.doc 201249430 中’獲得至少-種治療效果’該至少—種治療效果為乳房 腫瘤尺寸減小、轉移減少、症狀完全緩解、症狀部分緩 解、疾病穩定或病理完全反應。在一些實施例中，士與具 獲得臨床受益 有抗腫瘤劑但無PARP抑制劑之治療相比 率改良（CBR=CR+PR+SD26個月）。在一让上音 ^ 些貫施例中，該臨 床受益率改良為至少約60%。在一此竇姑办,士 一耳施例中’ PARP抑制 劑為4-碘-3-硝基苯曱醯胺或其代謝物。在一些實施例中， PARP抑制劑為式（na)或其代謝物：

Rs

(Ila) 其中：（1)取代基Ri、R2、r3、1及1中之至少—者始線 為含硫取代基，且義取代基Ri、R2、&、獨:地 選自由以下各基組成之群：氫、經基、胺基、硝基、蛾 基、漠基、敗基、氣基、（c,_c6m基、（Ci C6)院氧基、 (Cs-C7)環烷基及苯基，其中五個取代基心、&、&、&及 W之至少兩者始終為氫’·或⑺取代基Ri R5中之至少一者不為含硫取代基且五個取代基h、 R3、m5中之至少—者始終㈣基，且其中該破基始終 與為石肖基、亞硝基1基胺基、經基或胺基之R1、R2、 R3、WR5基團相鄰；及其醫藥學上可接受之鹽、溶劑合 166146.doc 201249430 物、異構體、互變異構體、代謝物、類似物或前藥。在一 些實施例中，（2)之化合物使得碘基始終與為亞硝基、羥基 胺基、羥基或胺基之R!、R2、R3、R4或R5基團相鄰。在一 些實施例中，（2)之化合物使得碘基始終與為亞硝基、羥基 胺基或胺基之Ri、R2、R3、IU或R5基團相鄰。 在一些實施例中’抗腫瘤劑為抗腫瘤烷基化劑、抗腫瘤 抗代謝物、抗腫瘤抗生素、源自植物之抗腫瘤劑、抗腫瘤 翻錯合物、抗腫瘤喜樹驗衍生物、抗腫瘤路胺酸激酶抑制 劑、單株抗體、干擾素、生物反應調節劑、激素抗腫瘤 劑、抗腫瘤病毒劑、血管生成抑制劑、分化劑、 PI3K/mTOR/AKT抑制劑、細胞週期抑制劑、細胞凋亡抑 制劑、hsp 90抑制劑、微管蛋白抑制劑、DNA修復抑制 劑、抗血管生成劑、受體酪胺酸激酶抑制劑、拓撲異構酶 抑制劑、紫杉烷、靶向Her-2之藥劑、激素拮抗劑、靶向 生長因子受體之藥劑或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實 施例中，抗腫瘤劑為他賓、卡西他賓、瓦諾吡他賓或吉西 他賓。在一些實施例中，抗腫瘤劑係選自由以下各物組成 之群：阿瓦斯汀、舒尼替尼、多吉美、瑞可尼汀、abt_ 869、阿西替尼、伊立替康、拓朴替康、太平洋紫杉醇、 多烯紫杉醇、拉㈣尼、赫赛;了、拉㈣尼、他莫昔芬、 類固醇芳香酶抑制劑、非類固醇芳香酶抑制劑、氧維司 群：表皮生長因子受體(EGFR)抑制劑、西妥昔單抗、帕尼 土單抗、胰島素樣生長因子丨受體（IGF1R)抑制劑及π— 751871。在一些實施例中，該方法進—步包含外科手術、 166146.doc 201249430 放射療法、化學療法、基因 DNA#、，纟、M .、 、DNA療法、病毒療法、 DNA療法、輔助療法、新 法、太乎瘆法$甘+人 療法、RNA療法、免疫療 法不米療法或其組合。在一歧竇始μ & ^ ^ , . ,Λ ^ ''貫施例中，該方法進一步 包含向患者投與PARP抑制劑以及丫照射。 在一些實施例中，乳癌為轉' 得移丨生礼癌。在一些實施例 中，札癌處於1期、II期或III期。在此—* ^ ω 1 e 朋在一些貫施例中，乳癌為 HR陰性乳癌。在一些實施例 礼癌的ER、PR或HER2中 之至A 一者呈陰性。在一此管姑丨士 二貫施例中，乳癌的ER、PR或 HER2中之至少一者呈險性. ’且，、中乳癌的ER、PR或HER2 中之至J 一者呈陽性。在一此會絲>&icb < 二霄細例中’礼癌缺乏同源重 組DNA修復。在—些實施例中，乳癌具有功能削弱之 BRCA1或BRCA2。在一些實施例中，治療包含至少丨〗天之 治療週期’其中：⑷在該週期之第i天及第8天患者接收 約100-5000 mg/m2吉西他賓；（b)在該週期之第丨天及第8 天，患者接收約1〇至約400 mg/m2卡鉑；及（c)在該週期之 第1天、第4天、第8天及第μ，患者接收約i至約ι〇〇 mg/kg 4-碘-3-硝基苯甲醯胺或莫耳等量之其代謝物。在一 些實施例中，治療週期長約1丨天至約3〇天。在一些實施例 中’在週期之第1天及第8天’患者接收約100_2500 mg/m2 吉西他賓及約10至約400 mg/m2卡始；及在週期之第1天、 第4天、第8天及第11天，患者接收約1至約5〇 mg/kg 4_蛾_ 3 -硝基苯甲醯胺或莫耳等量之其代謝物。在一些實施例 中，在週期之第1天及第8天，患者接收約500-2000 mg/m2 吉西他賓及約50至約400 mg/m2卡鉑；及在週期之第1天、 166146.doc -12- 201249430 第4天、第8天及第11天’患者接收約1至約5〇 mg/kg 4-峨_ 3_硝基苯甲醯胺或莫耳等量之其代謝物。在一些實施例 中，在週期之第1天及第8天’患者接收約1〇〇〇 mg/m2吉西 他賓及約AUC 2卡鉑；及在週期之第1天、第4天、第8天 及第11天’患者接收約1、2、3、4、6、8或10、12、14、 16、18或20 mg/kg 4-碘-3-硝基苯甲醯胺。在一些實施例 中’抗腫瘤劑以非經腸注射或輸注方式投與。在一些實施 例中，PARP抑制劑為4-碘-3-硝基笨曱醯胺，其係以經口 或以非經腸注射或輸注或吸入方式投與。在一些實施例 中，該方法進一步包含藉由非經腸注射或輸注向患者投與 i杉烷。在一些實施例中，樣品為組織或體液樣品。在一 些實施例中，樣品為腫瘤樣品、血液樣品、血漿樣品、腹 膜液樣品、滲出液或滲出物。在-些實施例中，該方法進 -步包含關於雌激素受體、孕酮受體或人類表皮生長因子 2受體之表現，測試來自患者之樣品。 以引用的方式併入 本說明書中所提及之所有公開案及專射請案皆以引用 ▲气併入本文甲’其引用程度如各個別公開案或專利申 °月案經特定且單獨指示以引用的方式併入般。 【實施方式】 在隨附申請專利範圍中具體闡述本發明之新穎特徵。|| W述利用本發明之原理之例示性實施例的以下實雜 ’及附圖’將更佳地瞭解本發明之特徵及優點。 在-些實施例中，本發明提供一種治療患者恤、打 166l46.doc •13· 201249430 或HER2中之至少一者呈陰性之乳癌的方法，其包含向該 患者技與至少一種PARP抑制劑。在一些實施例中，獲得 至少一種治療效果，s亥至少一種治療效果為乳房腫瘤尺寸 減小、轉移減少、症狀完全緩解、症狀部分緩解、病理完 全反應或疾病穩定。在一些實施例中，如與用抗腫瘤劑治 療相比’用PARP抑制劑治療獲得可比的臨床受益率 (CBR=CR+PR+SDM個月）。在一些實施例中，臨床受益率 改良為至少約30¾。在一些實施例中，pARp抑制劑為 PARP- 1抑制劑。在一些實施例中，pARj^p制劑為式⑴幻 或其代謝物： L,

T r2 r3 式（Ila)

胺基、硕基 '蛾 基、溴基、氟基、氣基、（Cl_C6)烷基、烷氧基、 (CVC7)環烷基及苯基，其中五個取代基心、&、&、&及 中之至少兩者始終為氫；或（2)取代基&、R2、Rs、心及 Rs中之至少一者不為含硫取代基且五個取代基&、 R4及R5中之至少一者始終為碘基，且其中該碘基始終 166146.doc -14- 201249430 與為硝基、亞硝基、羥基胺基、羥基或胺基之Rl、r2、 R3、R4或R5基團相鄰；及其醫藥學上可接受之鹽、溶劑合 物、異構體、互變異構體、代謝物、類似物或前藥。在一 些貫施例中，（2)之化合物使得埃基始終與為亞硝基、羥基 胺基、羥基或胺基之Rl、、R3、心或心基團相鄰。在一 些實施例中，（2)之化合物使得碘基始終與為亞硝基、羥基 胺基或胺基之I、R2、R3、R4或Rs基團相鄰。在一些實施 例中’ PARP 1抑制劑為4_碘_3_硝基苯甲醯胺或其代謝物。 在一些實施例中’乳癌為轉移性乳癌。在一些實施例 中’乳癌處於I期、II期或ΠΙ期。在一些實施例中，乳癌的 ER、PR或HER2中之至少一者呈陰性。在一些實施例中， 乳癌的ER、PR或HER2中之至少一者呈陰性；且乳癌的 ER、PR或HER2中之至少一者呈陽性。在一些實施例中， 乳癌為ER陰性乳癌。在一些實施例中，乳癌為Er呈陰性 且HER2呈陽性。在一些實施例中，乳癌為er呈陰性且pr 呈陽性。在一些實施例中，乳癌為ER呈陰性且HER2與PR 兩者呈陽性。在一些實施例中，乳癌為PR陰性乳癌。在一 些實施例中’乳癌為PR呈陰性且ER呈陽性。在一些實施 例中，乳癌為PR呈陰性且HER2呈陽性。在一些實施例 中，乳癌為PR呈陰性且ER與HER2兩者呈陽性。在一些實 施例中，乳癌為HER2陰性乳癌《在一些實施例中，乳癌 為HER2呈陰性且ER呈陽性。在一些實施例中，乳癌為 HER2呈陰性且PR呈陽性。在一些實施例中，乳癌為HER2 呈陰性且ER與PR兩者呈陽性。在一些實施例中，乳癌為 166146.doc •15· 201249430 ER呈陰性且PR呈陰性。在一些實施例中，乳癌為ER呈陰 性’ PR呈陰性且HER-2呈陽性。在一些實施例中，乳癌為 ER呈陰性且HER2呈陰性◊在一些實施例中，乳癌為ER呈 陰性’ HER2呈陰性，且PR呈陽性。在一些實施例中，乳 癌為PR呈陰性且HER2呈陰性。在一些實施例中，乳癌為 PR呈陰性’ HER2呈陰性，且ER呈陽性。在一些實施例 中，乳癌為ER呈陰性，PR呈陰性，且HER2呈陰性。在一 些實施例中，乳癌缺乏同源重組DNA修復。 在一些實施例中’治療包含至少11天之治療週期，其中 在該週期之第1天、第4天、第8天及第11天，患者接收約1 至約100 mg/kg之4-碘-3-硝基苯甲醯胺或莫耳等量之其代 謝物。在一些實施例中，4-蛾-3-硝基苯曱醯胺係以經口、 以非經腸注射或輸注或吸入方式投與。在一些實施例中， 治療週期長約11天至約30天。 在一些實施例中，該方法進一步包含向患者投與pARp 抑制劑以及至少一種抗腫瘤劑》抗腫瘤劑為抗腫瘤烷基化 劑、抗腫瘤抗代謝物、抗腫瘤抗生素、源自植物之抗腫瘤 劑、抗腫瘤有機翻化合物、抗腫瘤喜樹鹼衍生物、抗腫瘤 酷胺酸激酶抑制劑、單株抗體、干擾素、生物反應調節 劑、激素抗腫瘤劑、抗腫瘤病毒劑、血管生成抑制劑、分 化劑或顯示抗腫瘤活性之其他藥劑或其醫藥學上可接受之 鹽。在一些實施例中’抗腫瘤劑為他賓、卡西他賓、瓦諾 吡他賓或吉西他賓。在一些實施例中，抗腫瘤劑為鉑錯合 物。在一些實施例中’該方法進一步包含向患者投與 166146.doc -16 - 201249430 PARP抑制劑以及一種以上抗腫瘤劑。抗腫瘤劑係在PARP 抑制劑投與之前投與’與PARP抑制劑同時投與，或在 PARP抑制劑投與之後投與。在一些實施例中，該方法進 一步包含向患者投與PARP抑制劑以及抗血管生成劑（諸 如’阿瓦斯汀）。在一些實施例中，該方法進一步包含向 患者投與PARP抑制劑以及拓撲異構酶抑制劑（諸如，伊立 替康或拓朴替康）。在一些實施例中，該方法進一步包含 向患者投與PARP抑制劑以及紫杉烷（諸如，太平洋紫杉醇 或多烯紫杉醇）。在一些實施例中，該方法進一步包含向 患者投與PARP抑制劑以及靶向Her_2之藥劑（諸如，赫賽 汀）。在一些實施例中，該方法進一步包含向患者投與 PARP抑制劑以及激素療法（諸如，激素拮抗劑他莫昔芬卜 在一些實施例中，該方法進一步包含向患者投與pARp抑 制劑以及靶向生長因子受體之藥劑，包括表皮生長因子受 體（EGFR)抑制劑及胰島素樣生長因子…即-丨）受體 (IGF 1R)抑制劑。在一些實施例中，該方法進一步包含向 患者投與PARP抑制劑以及γ照射。在一些實施例中，該方 法進一步包含外科手術、放射療法、化學療法、基因療 法、DNA療法、輔助療法、新輔助療法、RNA療法、 療法、病毒療法、免疫療法、奈米療法或其組合。 本文所述之一些實施例提供一種治療患者乳癌的方法， 其包含向該患者投與至少一種pARp抑制劑及至少—種抗 腫瘤劑。在-些實施例巾，獲得至少—種治療效果，該至 少-種治療效果為乳相瘤尺寸減小、轉移減少、症狀完 166146.doc 17 201249430 全緩解、症狀部分緩解、病理完全反應或疾病穩定。在一 些實施例中，如與具有抗代謝物及鉑錯合物 ……比，獲得臨…·率了: (CBR=CR+PR+S必個月）。在一些實施例中，臨床受益率 改良為至少約60%。在一些實施例中，pARp抑制劑為苯甲 醯胺或其代謝物。在一些實施例中，該苯甲醯胺為4_碘-% 硝基苯甲醯胺或其代謝物。在一些實施例中，鉑錯合物係 選自由順鉑（cisplatin)、卡鉑、奥沙鉑（〇xaplaUn)及奥賽力 鉑（oxaliplatin)組成之群。在一些實施例中，鉑錯合物為卡 始。在一些實施例中’抗代謝物為他賓。在一些實施例 中’抗代謝物係選自由他賓、卡西他賓、吉西他賓及瓦諾 «比他賓組成之群。在一些實施例中，抗代謝物為吉西他 賓。在一些實施例中，該方法進一步包含向患者投與紫杉 烷。在一些實施例中’紫杉烷為太平洋紫杉醇或多烯紫杉 醇。在一些實施例t，乳癌為轉移性乳癌。在一些實施例 中，礼癌處於I期、II期或III期。在一些實施例中，乳癌為 HR陰性乳癌。在一些實施例中，乳癌的Er、pr或HER2中 之至少一者呈陰性。在一些實施例中，乳癌的ER、pr或 HER2中之至少一者呈陰性；且乳癌的Er、PR或HER2中之 至少一者呈陽性。在一些實施例中，乳癌為HR陰性乳 癌。在一些實施例中’乳癌為ER陰性乳癌。在一些實施例 中，乳癌為ER呈陰性且HER2呈陽性。在一些實施例中， 乳癌為ER呈陰性且PR呈陽性《在一些實施例中，乳癌為 ER呈陰性且HER2與PR兩者呈陽性。在一些實施例中，乳 166146.doc •18· 201249430 癌為pr陰性乳癌。在一些實施例中，乳癌為PR呈陰性且 ER呈陽性。在一些實施例中’乳癌為PR呈陰性且HER2呈 陽性。在一些實施例中，乳癌為PR呈陰性且ER與HER2兩 者呈陽性。在一些實施例甲’乳癌為HER2陰性乳癌。在 一些實施例中，乳癌為HER2呈陰性且ER呈陽性。在一些 實施例中，乳癌為HER2呈陰性且PR呈陽性。在一些實施 例中，乳癌為HER2呈陰性且ER與PR兩者呈陽性。在一些 實施例中，乳癌為ER呈陰性且PR呈陰性。在一些實施例 中，乳癌為ER呈陰，Ji，PR呈陰性且HER-2呈陽性。在一些 實施例中，乳癌為ER呈陰性且HER2呈陰性。在一些實施 例中，乳癌為ER呈陰性，HER2呈陰性，且PR呈陽性。在 一些實施例中，乳癌為PR呈陰性且HER2呈陰性。在一些 實施例中，乳癌為PR呈陰性，HER2呈陰性，且ER呈陽 性。在一些實施例中，乳癌為ER呈陰性，PR呈陰性，且 HER2呈陰性《在一些實施例中，乳癌缺乏同源重組dna 修復。 在一些實施例中’該方法進一步包含投與pARP抑制劑 以及抗腫瘤劑。在一些實施例中，抗腫瘤劑為抗腫瘤烷基 化劑、抗腫瘤抗代謝物、抗腫瘤抗生素、源自植物之抗腫 瘤劑、抗腫瘤鉑錯合物、抗腫瘤喜樹鹼衍生物、抗腫瘤酪 胺酸激酶抑制劑、單株抗體、干擾素、生物反應調節劑、 激素抗腫瘤劑、血管生成抑制劑、分化劑或顯示抗腫瘤活 性之其他藥劑或其醫藥學上可接受之鹽。在一些實施例 中，鉑錯合物為順鉑、卡鉑、奥沙鉑或奧赛力鉑。在一些 166146.doc •19· 201249430 貫施例中’抗代謝物為他賓、卡西他賓、吉西他賓或瓦諾 °比他賓。在一些實施例中，該方法進一步包含向患者投與 PARP抑制劑以及—種以上抗腫瘤劑。在一些實施例中， 抗腫瘤劑係在PARP抑制劑投與之前投與，與pARp抑制劑 同時投與，或在PARP抑制劑投與之後投與。在一些實施 例中’抗腔瘤劑為抗血管生成劑，諸如阿瓦斯汀。在一些 實施例中，抗腫瘤劑為拓撲異構酶抑制劑，包括（但不限 於）伊立替康、拓朴替康或喜樹驗。在一些實施例中，抗 腫瘤劑為紫杉烷，包括（但不限於）太平洋紫杉醇或多烯紫 杉醇。在一些實施例中’抗腫瘤劑為靶向Her_2之藥劑， 例如赫赛汀。在一些實施例中，抗腫瘤劑為激素拮抗劑， 例如他莫昔芬。在一些實施例中，抗腫瘤劑為靶向生長因 子受體之藥劑《在一些實施例中，該藥劑為表皮生長因子 受體（EGFR)抑制劑或胰島素樣生長因子…仰丨）受體 (IGF1R)抑制劑。在其他實施例中，該方法進一步包含外 科手術、放射療法、化學療法、基因療法、DNA療法、辅 助療法、新輔助療法、病毒療法、RNA療法、免疫療法、 奈米療法或其組合。 在些實施例中，治療包含至少11天之治療週期，其中 在該週期之第丨天、第4天、第8天及第11天，患者接收約 10至約100 mg/kg之4-碘-3-硝基苯曱醯胺或莫耳等量之其 代謝物。在一些實施例中，治療包含至少i i天之治療週 期，其中在該週期之第4天、第8天及第nA，患者接收約 1至約50 mg/kg之4-碘硝基苯甲醯胺或莫耳等量之其代 166146.doc •20- 201249430 謝物。在一些實施例中’治療包含至少^天之治療週期， 其中在該週期之第1天、第4天、第8天及第丨丨天，患者接 收約 1、2、3、4、5、6、8或 10、12、14、16、18或 20 mg/kg之4-碘硝基苯曱醯胺。 在一些實施例中，治療包含至少丨丨天之治療週期，其 中.（a)在週期之第i天及第8天，患者接收約1〇〇_2〇〇〇 mg/m2吉西他賓；⑻在週期之第i天及第8天，患者接收約 10至約400 mg/m2卡鉑；及（c)在週期之第1天、第4天、第8 天及第11天’患者接收約1 〇至約1 〇〇 mg/kg之4-填-3 -确基 本曱醯胺或莫耳等量之其代謝物。在一些實施例中，在週 期之第1天及第8天’患者接收約ι〇〇·25〇〇 mg/m2吉西他賓 及約AUC 1-5之卡始（約1〇至約4〇〇 mg/m2卡翻）；且在週期 之第1天、第4天、第8天及第11天，患者接收約i至約5〇 mg/kg 4-蛾-3-硝基苯曱醯胺或莫耳等量之其代謝物。在一 些實施例中’在週期之第i天及第8天，患者接收約5〇〇_ 2000 mg/m2吉西他賓及約5〇至約400 mg/m2卡鉑；且在週 期之第1天、第4天、第8天及第11天，患者接收約1至約5〇 mg/kg 4_碘-3-硝基苯曱醯胺或莫耳等量之其代謝物。在一 些實施例中’在週期之第1天及第8天，患者接收約1〇〇〇 mg/m2吉西他賓及約AUC 2卡鉑；且在週期之第1天、第4 天、第8天及第11天，患者接收約丨、2、3、4、6、8或 10、12、14、16、18或 20 mg/kg 4-碘-3-硝基苯甲醯胺。 本文所述之一些實施例提供一種治療患有三重陰性乳癌 之患者乳癌的方法，其包含在21天治療週期期間，在週期 166146.doc -21- 201249430 之第1天、第4天、第8天及第11天’向患者投與約1〇至約 100 mg/kg 4-碘-3-硝基苯曱醯胺或莫耳等量之其代謝物。 在一些實施例中’ 4-碘-3-硝基苯曱醯胺係以經口方式或以 靜脈内輸液形式投與。 一些實施例提供一種治療患有三重陰性乳癌之患者乳癌 的方法，其包含在2 1天治療週期期間：（a)在週期之第丄天 及第8天’向患者投與約1 〇〇_2〇〇〇 mg/m2吉西他賓.（b)在 週期之第1天及第8天，向患者投與AUC 〇1_1〇之卡鉑（約 10至4〇0 mg/m2卡鉑）；且（c)在週期之第1天、第4天第8 天及第11天，向患者投與約10至約100 mg/kg 4峨_3硝d

苯甲醯胺或莫耳等量之其代謝物。在―些實施例中，吉S 他賓係以靜脈内輸液形式投與。在__些實施例中，卡^ 以靜脈内輸液形式投與。在一些實施例中，4_碘_3•硝基^ 甲醯胺係以經口方式或以靜脈内輸液形式投與。在一些， 施例中，吉西他賓係以靜脈内輸液形式投與。在一些實別 例中，卡料以靜脈内輸液形式投與。在_些實施例中， 4·碘〜肖基笨甲酿胺係以經口方式或以靜脈内輸液形式拍 與0 本文所述之一些實施例提供一 Λ ^ 伢種冶療患有三重陰性乳邊 之患者乳癌的方法，其包含·「 ()建立長約10天至約30天之 治療週期；（b)在週期之〗至1〇 n 之早獨天，向患者投與約: mg/lcg至約50 mg/kg 4-碘-3-硝基龙田絲糾 为基本f鏟胺或莫耳等量之其 代謝物〇在一些實施例中 士 ^、、 碼3·石为基苯f醯胺係以經口 方式或以靜脈内輸液形式投與。 166i46.doc -22· 201249430 文所述之—些實施例提供—種治療患有三重陰性乳癌 之〜、者乳癌的方法，其包含：⑷建立長㈣天至約3〇天之 治療週期；（b)在週期之m5之單獨天，藉由靜脈内輸液向 患者投與約100至約5000 mg/m2吉西他賓；⑷在週期之工至 之單獨天，藉由靜脈内輸液向患者投與auc 1至1 〇 之卡麵（例如’約10至約400 mg/m2卡翻）：且⑷在週期之i 至10之單獨天，向患者投與約1 mg/kg至約5G mg/kg 4_磁_ 3-硝基苯甲醯胺或莫耳等量之其代謝物。在一些實施例 中，吉西他賓係以靜脈内輸液形式投與。在一些實施例 中，卡鉑係以靜脈内輸液形式投與。在一些實施例中，4_ 碘-3-硝基苯曱醯胺係以經口方式或以靜脈内輸液形式投 與。 一些實施例包括一種治療需要該治療之患者乳癌的方 法，其包含：（a)自該患者獲得樣品；（b)對樣品進行測試 以確疋以下中之至少一者.⑴癌症為Er呈陽性抑或Er呈 陰性；（U)癌症為PR呈陽性抑或PR呈陰性；（Hi)癌症為 HER2呈陽性抑或HER2呈陰性；⑷若測試指示癌症為现呈 陰性、PR呈陰性或HER2呈陰性，則用治療劑之組合治療 患者，其中該等治療劑包括至少一種抗代謝物、至少一種 鉑錯合物及至少一種PARP抑制劑；及（d)若測試未指示癌 症為ER呈陰性、PR呈陰性或Her2呈陰性，則選擇不同治 療選擇。 一些實施例包括一種治療需要該治療之患者乳癌的方 法’其包含：（a)自該患者獲得樣品；（b)對樣品進行測試 166146.doc -23· 201249430 以確定以下中之至少一者：（i)癌症為ER呈陽性抑或ER呈 陰性；（ii)癌症為PR呈陽性抑或PR呈陰性；（iii)癌症為 HER2呈陽性抑或HER2呈陰性；（c)若測試指示癌症為ER呈 陰性、PR呈陰性或HER2呈陰性，則用至少一種parp抑制 劑治療患者；及（d)若測試未指示癌症為ER呈陰性、PR呈 陰性或HER2呈陰性，則選擇不同治療選擇。 在一些實施例中’獲得至少一種治療效果，該至少一種 治療效果為乳房腫瘤尺寸減小、轉移減少、症狀完全緩 解、症狀部分緩解、病理完全反應或疾病穩定。在一些實 施例中’如與無PARP抑制劑之治療相比，獲得臨床受益 率改良（CBR=CR+PR+SD>6個月）。在一些實施例中，臨床 受益率為至少約30%。在一些實施例中，如與具有抗代謝 物及鉑錯合物但無PARP抑制劑之治療相比，獲得臨床受 益率改良（CBR=CR+PR+SD26個月）。在一些實施例中，臨 床受益率為至少約6〇%。在—些實施例中，pARp抑制劑為 PARP-1抑制劑。在其他實施例中，pARp抑制劑為苯甲酿 胺或其代謝物。在一些實施例中，該苯曱醯胺為4•碘·3·硝 基苯甲醯胺或其代謝物。在—些實施例中，㈣合物係選 自由腳、卡# 1沙翻及奥赛力翻組成之群。在一些實 施：中，鉑錯合物為卡鉑。在一些實施例中，抗代謝物為 他賓。在一些實施例中，抗代謝物係選自由他賓、卡西他 賓、吉西他賓及瓦諾吼他賓組成之群。在一些實施例中， 抗代謝物為吉西他賓。在-些實施例中，該方法進一步包 含向患者投與紫㈣。在—些實施例中，紫㈣為太平洋 166146.doc •24· 201249430 紫杉醇或多烯紫杉醇。在一些實施例中，樣品為組織或體 液樣品。在·--些貫施例中’樣品為腫瘤樣品、血液樣品、 血漿樣品、腹膜液樣品、滲出液或滲出物。在一些實施例 中，乳癌為轉移性乳癌。在一些實施例中，乳癌為ER陰性 轉移性乳癌。在一些實施例中，乳癌處於I期、II期或III 期。在一些實施例中，乳癌的ER、PR或HER2中之至少一 者呈陰性。在一些實施例中，乳癌的ER、PR或HER2中之 至少一者呈陰性；且乳癌的ER、PR或HER2中之至少一者 呈陽性。在一些實施例中，乳癌為ER呈陰性且PR呈陽 性。在一些實施例中，乳癌為Er呈陰性且HER2呈陽性。 在一些實施例中，乳癌為ER呈陰性且PR與HER2兩者呈陽 性。在一些實施例中，乳癌為pR陰性轉移性乳癌。在一些 實施例中，乳癌為PR呈陰性且ER呈陽性。在一些實施例 中，乳癌為PR呈陰性且HER2呈陽性。在一些實施例中， 乳癌為PR呈陰性且ER與HER2兩者呈陽性。在一些實施例 中，乳癌為HER2陰性轉移性乳癌。在一些實施例中，乳 癌為HER2呈陰性且ER呈陽性。在一些實施例中，乳癌為 HER2呈陰性且PR呈陽性。在一些實施例中，乳癌為HER2 呈陰性且ER與PR兩者呈陽性。在一些實施例中，乳癌為 ER呈陰性且PR呈陰性。在一些實施例中，乳癌為ER呈陰 性，PR呈陰性，且HER2呈陽性。在一些實施例中，乳癌 為ER呈陰性且HER2呈陰性。在一些實施例中，乳癌為ER 呈陰性，HER2呈陰性，且PR呈陽性。在一些實施例中， 乳癌為PR呈陰性且HER2呈陰性。在一些實施例中，乳癌 166146.doc -25- 201249430 為PR呈陰性’ HER2呈陰性，且PR呈陽性^在一些實施例 中’乳癌為ER呈陰性，PR呈陰性，且HER2呈陰性。 本發明之一些實施例包括一種治療需要該治療之患者乳 癌的方法’其包含：（a)自該患者獲得樣品；（b)對樣品進 行測試以確定以下每一者：⑴癌症為呈陽性抑或呈陰 性；（Π)癌症為PR呈陽性抑或呈陰性；（Hi)癌症為HER2呈 陽性抑或呈陰性；（c)若符合以下條件中之兩者或兩者以 上，則用至少一種PARP抑制劑治療患者：⑴癌症為ER呈 陰性，（ii)癌症為PR呈陰性或（iii)癌症為HER2呈陰性；及 (d)若不符合以上條件中之至少兩者，則選擇不同治療選 擇。本發明之一些實施例包括一種治療需要該治療之患者 乳癌的方法，其包含：（a)自該患者獲得樣品；（b)對樣品 進行測試以確定以下每一者：⑴癌症為ER呈陽性抑或呈 陰性，（ii)癌症為PR呈陽性抑或呈陰性；（Ui)癌症為her2 呈陽性抑或呈陰性；（c)若符合以下條件中之兩者或兩者以 上’則用治療劑之組合治療患者，其中該等治療劑包括至 少一種抗代謝物、至少一種鉑錯合物及至少一種1>八1^>抑 制劑：⑴癌症為ER呈陰性，（u)癌症為1>11呈陰性或（Hi)癌 症為HER2呈陰性；及（d)若不符合以上條件中之至少兩 者’則選擇不同治療選擇。在—些實施例中，獲得至少一 種治療效果’該至少一種治療效果為乳房腫瘤尺寸減小、 轉移減少、症狀完全緩解、症狀部分緩解、病理完全反應 或疾病穩定。在-些實施财，如與無pARp抑制劑之治 療相比，獲得臨床受益率改良（CBR=CR+pR+sD>6個月）。 166146.doc • 26 - 201249430 在t貫施例中，臨床受益率為至少約3 0%。在一些實施 例中，如與具有抗代謝物及鉑錯合物但無PARP抑制劑之 治療相比，獲得臨床受益率改良（CBR=CR+pR+SD^6個 月）。在些實施例中，臨床受益率為至少約6〇%。在一些 貫施例中樣πα為組織或體液樣品。在一些實施例中，樣 品為腫瘤樣品、金液樣品、血聚樣品、腹膜液樣品、渗出 液或滲出物。在一些實施例中，PAR_制劑為从叫抑 制劑。在其他實施例中，pARp抑制劑為苯曱醯胺或其代 謝物。在—些實施例中，該苯曱醯胺為4务3·硝基苯曱醢 胺或其代謝物。在-些實施例中，#錯合物係選自由順 鉑卡鉑奥沙鉑及奥赛力鉑組成之群。在一些實施例 中’鉑錯合物為卡鉑。在一些實施例中，抗代謝物為他 賓。在一些實施例中，抗代謝物係選自由他賓、卡西他 賓、吉西他賓及瓦諾吡他賓組成之群。在一些實施例中， 抗代謝物為吉西他賓。在—些實施例中，該方法進一步包 含向患者投與紫杉烷。在一些實施例中，紫杉烷為太平洋 紫杉醇或㈣紫杉I在-些實施例中，乳癌為轉移性乳 癌。在一些實施例中，乳癌處於〗期、π期或⑴期。在一些 實施例中，乳癌的ER、PR或HER2中之至少一者呈陰性。 在一些實施例中，乳癌的ER、PR4HeR2中之至少一者呈 陰性；且乳癌的ER、PR或HER2中之至少一者呈陽性。在 一些實施例中，乳癌為ER陰性轉移性乳癌。在一些實施例 中’乳癌為PR陰性轉移性乳癌。在—些實施例中，乳癌為 HER2陰性轉移性乳癌。在一些實施例中，乳癌為跋呈陰 166146.doc •11· 201249430 性且PR呈陰性。在一些實施例中，乳癌為ER呈陰性且 HER2呈陰性。在一些實施例中，乳癌為1>11呈陰性且her2 呈陰性。在一些實施例中，乳癌為Er呈陰性，pR呈陰 性，且HER2呈陰性。在一些實施例中，治療包含選擇至 少11天之治療週期，且：在該週期之第丨天、第4天第 8天及第11天，患者接收約1〇至約1〇〇 mg/kg24碘_3硝基 苯甲醯胺或莫耳等量之其代謝物。在一些實施例中，4_碘_ 3-硝基苯甲醯胺係以經口方式或以靜脈内輸液形式投與。 在一些實施例中，治療包含選擇至少丨丨天之治療週期， 且.（a)在該週期之第1天及第8天，患者接收約⑽ mg/m2吉西他賓；（b)在該週期之第1天及第8天，患者接收 約10至約400 mg/m2卡鉑；且（c)在該週期之第1天第* 天、第8天及第11天，患者接收約1〇至約1〇〇 mg/kg 4碘· 硝基苯曱醯胺或莫耳等量之其代謝物。在一些實施例中， 吉西他賓係以靜脈内輸液形式投與。在一些實施例中，卡 鉑係以靜脈内輸液形式投與。在一些實施例中，4_碘_3_硝 基苯甲醯胺係以經口方式或以靜脈内輸液形式投與。 本文所揭示之一些實施例包括一種治療需要該治療之患 者乳癌的方法，其包含：（a)自該患者獲得樣品；（b)對樣 品進行測試以確定以下每一者：⑴癌症為ER呈陽性抑或 呈陰性，（ii)癌症為PR呈陽性抑或呈陰性及（iii)癌症為 HER2呈陽性抑或呈陰性；⑷若符合以下條件中之兩者或 兩者以上，則用至少一種PARp抑制劑治療患者：⑴癌症 為ER呈陰性，（ii)癌症為pRs陰性或（Hi)癌症為her2呈陰 166146.doc -28- 201249430 性；及（d)若不符合條件中之兩者或兩者以上，則 選擇不同治療選擇。 本文所述之一些貫施例提供一種治療需要該治療之患者 中ER陰性、PR陰性、HER-2陰性轉移性乳癌的方法，其包 含向該患者投與至少一種PARP抑制劑。在一些實施例 中’如與無PARP抑制劑相比’獲得臨床受益率改良 (CBR=CR+PR+SD26個月）。在一些實施例中，臨床受益率 為至少約30%。在一些實施例中，以單一劑型向患者投與 兩種或兩種以上治療化合物。在一些實施例中，1>八111>抑 制劑為PARP-1抑制劑。在其他實施例中，以111>抑制劑為 苯甲醯胺或其代謝物。在一些實施例中，該苯曱醯胺為牡 碘-3-硝基苯甲醯胺或其代謝物。在一些實施例中，乳癌為 轉移性乳癌。在一些實施例中，乳癌為ER陰性轉移性乳 癌。在一些實施例中，乳癌為PR陰性轉移性乳癌。在一些 實施例中，乳癌為HER2陰性轉移性乳癌。在一些實施例 中，乳癌為ER呈陰性且PR呈陰性。在一些實施例中，乳 癌為ER呈陰性且HER2呈陰性。在一些實施例中，乳癌為 PR呈陰性且HER2呈陰性。在一些實施例中，乳癌為£1^呈 陰性，PR呈陰性，且HER2呈陰性。在一些實施例中，治 療包含選擇至少11天之治療週期，且在該週期之第丨天、 第4天、第8天及第11天，患者接收約1〇至約1〇〇 mg/kg之4_ 碘-3-硝基苯曱醯胺或莫耳等量之其代謝物。在一些實施例 中，4-碘-3-硝基笨曱醯胺係以經口方式或以靜脈内輸液形 式投與。 166146.doc •29·

S 201249430 一些實施例提供一種治療患者乳癌的方法，其包含： 關於PARP表現，測試來自患者之樣品；及（b)若pARp表現 超過預定含量’則向患者投與至少一種PARp抑制劑。在 一些實施例中’獲得至少一種治療效果，該至少一種治療 效果為乳房腫瘤尺寸減小、轉移減少、症狀完全緩解症 狀部分緩解、病理完全反應或疾病穩定。在一些實施例 中，如與無PARP抑制劑之治療相比，獲得臨床受益率改 良（CBR=CR+PR+SD>6個月）。在一些實施例中，臨床受益 率改良為至少約30% »在一些實施例中，pARp抑制劑為 PARP-1抑制劑。在其他實施例中，PARP抑制劑為苯甲醯 胺或其代謝物。在一些實施例中，該苯曱醢胺為4-碘_3_硝 基苯甲醯胺或其代謝物。在一些實施例中，乳癌為轉移性 乳癌。 在一些實施例中，該方法進一步包含關於雌激素受體、 孕酮受體或人類表皮生長因子2受體之表現，測試來自患 者之樣品。在一些實施例中，乳癌為HR陰性乳癌。在一 些實施例中，乳癌為ER陰性乳癌❶在一些實施例中，乳癌 為PR陰性乳癌。在一些實施例中，乳癌為HER2陰性乳 癌》在一些實施例中，乳癌為ER呈陰性且PR呈陰性。在 一些實施例中，乳癌為ER呈陰性且HER2呈陰性。在一些 實施例中，乳癌為PR呈陰性且HER2呈陰性。在一些實施 例中，乳癌為ER呈陰性，PR呈陰性，且HER2呈陰性。在 一些實施例中，治療包含選擇至少11天之治療週期，且在 該週期之第1天、第4天、第8天及第11天，患者接收約10 166146.doc •30· 201249430 至約100 mg/kg之4-碘-3-硝基苯甲醯胺或莫耳等量之其代 謝物。在一些實施例中，4-碘-3-硝基苯甲醯胺係以經口方 式或以靜脈内輸液形式投與。 本文所揭示之一些實施例提供一種治療需要該治療之患 者乳癌的方法，其包含：（a)自該患者獲得樣品；（b)對樣 品進行測試以確定以下每一者：⑴癌症為ER呈陽性抑或 呈陰性’（ii)癌症為PR呈陽性抑或呈陰性，及（iii)癌症為 HER2呈陽性抑或呈陰性；（c)若符合以下條件中之兩者或 兩者以上’則用治療劑之組合治療患者，其中該等治療劑 包括至少一種抗代謝物、至少一種鉑錯合物及至少一種 PARP抑制劑：⑴癌症為ER呈陰性，（ii)癌症為？11呈陰性或 (iii)癌症為HER2呈陰性；及（d)若不符合條件（i)_(iii)中之 兩者或兩者以上’則選擇不同治療選擇。在一些實施例 中’吉西他賓係以靜脈内輸液形式投與。在一些實施例 中’卡鉑係以靜脈内輸液形式投與。在一些實施例中，4_ 峨-3-確基苯甲酿胺係以經口方式或以靜脈内輸液形式投 與。 本文所述之一些實施例提供一種治療需要該治療之患者 中ER陰性、PR陰性' Her-2陰性轉移性乳癌的方法，其包 含向該患者投與至少一種抗代謝物、至少一種鉑錯合物及 至少一種PARP抑制劑。在一些實施例中，如與具有抗代 謝物及鉑錯合物但無PARP抑制劑之治療相比，獲得臨床 受益率改良（CBr=(：R+PR+SD26個月）。在一些實施例中， 臨床受益率為至少約60%。在一些實施例中，以單一劑型 166146.doc 31 · 201249430 向患者投與兩種或兩種以上治療化合物。在一些實施例 中’ PARP抑制劑為苯曱醯胺或其代謝物。在一些實施例 中，s亥苯甲醯胺為4-碘-3-硝基苯曱酿胺或其代謝物。在一 些實施例中’舶錯合物係選自由順麵、卡舶、奥沙始及奥 赛力鉑組成之群。在一些實施例中，鉑錯合物為卡鉑。在 些實施例中，抗代謝物為他賓。在一些實施例中，抗代 謝物係選自由他賓、卡西他賓、吉西他賓及瓦諾吡他賓組 成之群。在一些實施例中，抗代謝物為吉西他賓。在一些 實施例中，該方法進一步包含向患者投與紫杉烷。在一些 實施例中’紫杉烧為太平洋紫杉醇或多烯紫杉醇。在一些 實施例中，乳癌為轉移性乳癌《在一些實施例中，乳癌處 於I期、II期或III期。在一些實施例中，乳癌的ER、PR或 HER2中之至少一者呈陰性。在一些實施例中，乳癌的 ER、PR或HER2中之至少一者呈陰性；且乳癌的ER、卩尺或 HER2中之至少一者呈陽性。在一些實施例中，乳癌為Er 陰性轉移性乳癌。在一些實施例中，乳癌為PR陰性轉移性 乳癌。在一些實施例中，乳癌為HER2陰性轉移性乳癌。 在一些實施例中’乳癌為ER呈陰性且PR呈陰性。在一些 實施例中，乳癌為ER呈陰性且HER2呈陰性。在一些實施 例中，乳癌為PR呈陰性且HER2呈陰性。在一些實施例 中，乳癌為ER呈陰性，PR呈陰性，且HER2呈陰性。在一 些實施例中，治療包含選擇至少11天之治療週期，且：（a) 在該週期之第1天及第8天，患者接收約100-2000 mg/m2吉 西他賓；（b)在該週期之第1天及第8天，患者接收約1 〇至約 166146.doc •32· 201249430 400 mg/m2卡舶；且（c)在該週期之第丨天、第*天、第8天及 第^天，患者接收約1〇至約1〇〇 mg/kg 石肖基苯甲酿 胺或莫耳等量之其代謝物。在一些實施例中，吉西他賓係 以靜脈内輸液形式投與ϋ實施财，卡耗以靜脈 内輸液形式投與。在一些實施例中，4_碘_3_硝基苯甲醯胺 係以經口方式或以靜脈内輸液形式投與。 一些實施例提供一種治療患者乳癌的方法，其包含：（勾 關於PARP表現，測試來自患者之樣品；及（b)若pARp表現 超過預定含量，則向患者投與至少一種抗代謝物、至少一 種鉑錯合物及至少一種PARP抑制劑。在一些實施例中， 獲得至少一種治療效果，該至少一種治療效果為乳房腫瘤 尺寸減小、轉移減少、症狀完全緩解、症狀部分緩解、病 理元全反應或疾病穩定。在一些實施例中，如與具有抗代 謝物及鉑錯合物但無PARP抑制劑之治療相比，獲得臨床 受益率改良（CBR=CR+PR+SD>6個月）。在一些實施例中， 床受益率改良為至少約60%。在一些實施例中，pARp抑 制劑為本甲酿胺或其代謝物。在一些實施例中，該苯甲醯 胺為4-蛾-3-硝基苯甲醯胺或其代謝物。在一些實施例中， 翻錯合物係選自由順鉑、卡鉑、奥沙鉑及奥赛力鉑組成之 群。在一些實施例中，鉑錯合物為卡鉑。在一些實施例 中’抗代謝物為他賓。在一些實施例中’抗代謝物係選自 由他賓、卡西他賓、吉西他賓及瓦諾吡他賓組成之群。在 一些實施例中’抗代謝物為吉西他賓。在一些實施例中， 該方法進一步包含向患者投與紫杉烷。在一些實施例中， 166146.doc •33· 201249430 紫杉烷為太平洋紫杉醇或多烯紫杉醇。在一些實施例中， 乳癌為轉移性乳癌。在一些實施例中，該方法進一步包含 關於雌激素受體、孕酮受體或人類表皮生長因子2受體之 表現，測試來自患者之樣品。在一些實施例中，乳癌的 ER、PR或HER2中之至少一者呈陰性。在一些實施例中， 乳癌的ER、PR或HER2中之至少一者呈陰性；且乳癌的 ER、PR或HER2中之至少一者呈陽性。在一些實施例中， 乳癌為HR陰性乳癌。在一些實施例中，乳癌為ER陰性乳 癌。在一些實施例中，乳癌為PR陰性乳癌。在一些實施例 中，乳癌為HER2陰性乳癌。在一些實施例中，乳癌為ER 呈陰性且PR呈陰性。在一些實施例中，乳癌為ER呈陰性 且HER2呈陰性。在一些實施例中，乳癌為PR呈陰性且 HER2呈陰性。在一些實施例中，乳癌為ER呈陰性，PR呈 陰性，且HER2呈陰性。在一些實施例中，治療包含選擇 至少11天之治療週期，且：（a)在該週期之第1天及第8天， 患者接收約100-2000 mg/m2吉西他賓；（b)在該週期之第1 天及第8天，患者接收約10至約400 mg/m2卡翻；且（c)在該 週期之第1天、第4天 '第8天及第11天，患者接收約10至 約100 mg/kg 4-碘-3-硝基苯曱醯胺或莫耳等量之其代謝 物。在一些實施例中，吉西他賓係以靜脈内輸液形式投 與。在一些實施例中，卡鉑係以靜脈内輸液形式投與。在 一些實施例中，4-碘-3-硝基苯曱醢胺係以經口方式或以靜 脈内輸液形式投與。 因此，本文所提供之實施例包含用至少三種化學性質不 166146.doc •34· 201249430 同物質治療患者，其中之一為抗代謝物，其中之一為含鉑 錯合物且其中之一為pARp抑制劑。在一些實施例中，一 或多種此等物質能夠以多種實體形式存在，例如游離鹼、 鹽（尤其醫藥學上可接受之鹽）、水合物、多晶型物、溶劑 合物、代謝物等。除非本文中另外限定，否則化學名稱之 使用意欲包含所命名之化學物質的所有實體形式。舉例而 言，在未進一步限定之情況下，列舉4_碘_3_硝基苯曱醯胺 意欲一般包含游離鹼以及其所有醫藥學上可接受之鹽、多 晶型物、水合物、代謝物等。在意欲將本揭示案或申請專 利範圍限於化合物之一特定實體形式的情況下，此將自出 現對該化合物之提及的段落或申請專利範圍之上下文而明 確。 在一些實施例中，本揭示案提供一種治療乳癌之方法， 其包含向該患者投與至少一種紫杉烷、至少一種鉑錯合物 及至少一種PARP抑制劑。在一些實施例中，獲得至少一 種治療效果，該至少一種治療效果為乳房腫瘤尺寸減小、 轉移減少、症狀完全緩解、症狀部分緩解、病理完全反應 或疾病穩定。在一些實施例中，PARp抑制劑為苯曱醯胺 或其代謝物。在一些實施例中，該笨曱醯胺為4_碘_3_硝基 苯甲醯胺或其代謝物。在一些實施例中，链錯合物係選： 由順鉑、卡鉑、奥沙鉑及奥賽力鉑組成之群。在一些實施 例中，鉑錯合物為卡鉑。在一些實施例中，紫杉烷為太平 洋紫杉醇或多烯紫杉醇。在一些實施例中，紫杉烷為太平 洋紫杉醇。在一些實施例中，該方法包含在至少u天之户 166146.doc -35- 201249430 療週期期間：（a)在該週期之第1天，向患者投與約10-200 mg/m2太平洋紫杉醇；（b)在該週期之第1天，向患者投與 約10-400 mg/m2卡鉑；及（c)在該週期之第1天及整個週期 中每週兩次，向患者投與約1-100 mg/kg 4-碘-3-硝基苯曱 醯胺或莫耳等量之其代謝物。 在一些實施例中’本文之揭示内容提供一種治療患者乳 癌的方法，其包含：（a)自患者獲得樣品；對樣品進行 測試以確定樣品中PARP表現程度；判定pARp表現是否 超過預定含量，且若超過，則向患者投與至少一種紫杉 烷、至少一種鉑錯合物及至少一種pARp抑制劑。在一些 實施例中，該方法進一步包含：若樣品中pARp表現未超 過預定含量’則視情況選擇不同‘療選擇。在—些實施例 中，癌症為一或多種激素受體呈陰性之乳癌。在一些實施 例中，癌症為HER2呈陰性之乳癌。在一些實施例中，癌 症為雌激素受體(ER)、孕酮受體(pR)或腿2呈陰性。在 二實施例中’癌症為至少一種激素受體或呈陽 性。在-些實施例中，舶錯合物為順翻、卡翻、奥沙翻或 奥赛力始。在一 4b實施例Φ，批h J t盏杉烷為太平洋紫杉醇。在

一些實施例中，鉑錯合物A 口扨马順鉑或卡鉑。在一些實施例 中，鉑錯合物為卡鉑。在—此 二貫施例中，PARP抑制劑為 苯甲醯胺或其代謝物。在一此 二貫施例中’ PARP抑制劑為4一 碘-3-硝基苯甲醯胺或其代謝 物。在一些實施例中，樣品為 腫瘤切片或體液。 馬 種治療患者乳癌的方法， 本文所述之一些實施例提供一 166M6.doc • 36 - 201249430 其包含在21天治療週期期間：（a)在週期之第1天向患者 投與約750 mg/m2太平洋紫杉醇；（b)在週期之第1天向患 者投與約10-400 mg/m2卡鉑；且（c)在週期之第1天及此後 每週兩次’向患者投與約U00 mg/kg 4_碘_3_硝基笨甲醢 胺。在一些實施例中，太平洋紫杉醇係以靜脈内輸液形式 投與。在一些實施例中，卡鉑係以靜脈内輸液形式投與。 在一些實施例中，4-碘-3-硝基苯曱醯胺係以經口方式或以 靜脈内輸液形式投與。 本文所述之一些實施例提供一種治療患者乳癌的方法， 其包含：（a)建立長約1〇天至約3〇天之治療週期；在該 週期之1至5之單獨天，經約1〇至約3〇〇分鐘藉由靜脈内輸 液向患者投與約1〇〇至約2〇〇〇 mg/m2太平洋紫杉醇；（c)在 該週期之1至5之單獨天，經約1〇至約3〇〇分鐘藉由靜脈内 輸液向患者投與約1〇_4〇〇 mg/m2卡鉑；且在該週期之丄 至1〇之單獨天，經約1〇至約3〇〇分鐘向患者投與約1 mg/kg 至約8 mg/kg 4-碘-3-硝基苯曱醯胺。 因此’本文所提供之實施例包含用至少三種化學性質不 同物質治療患者，其中之一為紫杉烷（例如，太平洋紫杉 醇或多烯紫杉醇），其中之一為含鉑錯合物（例如，順鉑或 卡鉑或順鉑），且其中之一為PARP抑制劑（例如，B A或其 代謝物）。在一些實施例中，一或多種此等物質能夠以多 種實體形式存在，例如游離鹼、鹽（尤其醫藥學上可接受 之鹽）、水合物、多晶型物、溶劑合物、代謝物等。除非 本文中另外限定，否則化學名稱之使用意欲包含所命名之 166l46.doc

S -37· 201249430 化學物質的所有實體形式。舉例而言，在未進一步限定之 清况下，列舉4-雄-3-琐基苯甲醯胺意欲一般包含其游離驗 以及其所有醫藥學上可接受之鹽、多晶型物、水合物及代 謝物。在意欲將本揭示案或申請專利範圍限於化合物之一 特定實體形式的情況下’此將自出現對該化合物之提及的 段落或申請專利範圍之上下文而明確。 術5吾"有效量"或"醫藥學有效量"係指足以提供所需生 物、治療及/或預防結果之藥劑量。該結果可為徵象、症 狀或病因之減少及/或減緩或生物系統之任何其他所需改 變。舉例而言，治療用途之，，有效量"為提供臨床上顯著之 疾病減少所需的如本文所揭示之硝基苯曱醯胺化合物自身 或包含本文之硝基苯甲醯胺化合物之組合物的量。任何個 體狀況下之適當有效量可藉由一般技術者使用常規實驗來 確定。 "醫藥學上可接受"或"藥理學上可接受"意謂在生物學上 或其他方面並非不當之物質，亦即可向個體投與該物質而 不會引起顯著不當之生物效應或不會以有害方式與含其之 組合物中之任何組份相互作用。 如本文所用之術語"治療"及其語法上等效物包括實現治 療益處及/或預防益處。治療益處意謂根除或改善所治療 之根本病症（underlying disorder)。舉例而言，在癌症患者 中’治療益處包括根除或改善根本癌症。儘管患者可能仍 罹患該根本病症之事實，然亦可藉由根除或改善與根本病 症有關之一或多種生理學症狀來實現治療益處，從而觀測 166146.doc -38 - 201249430 到患者之改良。關於預防益處，可對處於發展癌症危險中 之患者執行本發明之方法，或向處於發展癌症危險中之患 者或報導該等病狀之一或多種生理學上症狀之患者投與本 發明之組合物，即使可能尚未對病狀進行診斷亦如此。 抗腫瘤劑 可用於本發明之抗腫瘤劑包括（但不限於）抗腫瘤烷基化 劑、抗腫瘤抗代謝物、抗腫瘤抗生素、源自植物之抗腫瘤 劑、抗腫瘤鉑錯合物、抗腫瘤喜樹鹼衍生物、抗腫瘤酪胺 酸激酶抑制劑、單株抗體、干擾素、生物反應調節劑及其 他顯示抗腫瘤活性之藥劑或其醫藥學上可接受之鹽。 在一些實施例中，抗腫瘤劑為烷基化劑。本文中術 語"烷基化劑"一般係指在有機化合物之氫原子經烷基取代 之烷基化反應中產生烷基的藥劑。抗腫瘤烷基化劑之實例 包括（但不限於）氮芥N-氧化物（nitr〇gen mustard N_〇xide)、 環磷醯胺（cyclophosphamide)、異環磷醯胺（if〇sfamide)、 美法侖（melphalan)、白消安（busulfan)、二漠甘露酵 (mitobronitol)、卡巴酉昆（carboclu〇ne)…塞替派（thi〇tepa)、 雷諾莫司汀（ranimustine)、尼莫司汀（nimustine)、替莫唑 胺（temozolomide)或卡莫司汀（camustine)。 在一些實施例中，抗腫瘤劑為抗代謝物。本文中所用之 術語"抗代謝物"在廣義上包括由於結構或功能類似於對活 的有機體而§重要之代謝物（諸如，維生素、輔酶、胺基 酸及醣類）而干擾正常代謝之物質及抑制電子傳遞系統以 預防高能量中間物產生之物質。具有抗腫瘤活性之抗代謝 •39- 166146.doc 201249430 物之實例包括（但不限於）曱胺嗓吟（methotrexate)、6-酼基 嘌吟核苷（6-mercaptopurine riboside)、疏基嘌0令 (mercaptopurine)、5-氟尿啦咬（5-fluorouracil)、替加氟 (tegafur)、脫氧氟尿普（doxifluridine)、卡莫氟 (carmofur)、阿糖胞苷（cytarabine)、阿糖胞苷奥卡填化物 (cytarabine ocfosfate)、依諾他賓（enocitabine)、S-1、吉西 他賓、氟達拉濱（fludarabine)或培美曲塞二鈉（pemetrexed disodium)，且較佳為5-氟尿嘧啶、S-1、吉西他賓及其類 似物。 在一些實施例中，抗腫瘤劑為抗腫瘤抗生素。抗腫瘤抗 生素之實例包括（但不限於）放線菌素D(actinomycin D)、羥 道諾紅徽素（doxorubicin)、道諾徽素（daunorubicin)、新制 癌菌素（neocarzinostatin)、博萊黴素（bleomycin)、培洛黴 素（peplomycin)、絲裂黴素C(mitomycin C)、阿柔比星 (aclarubicin) 、 》比柔比星（pirarubicin)、表柔比星 (epirubicin)、淨司他丁斯酯（zinostatin stimalamer)、黃膽 素（idarubicin)、 西羅莫司（sirolimus)或伐柔比星 (valrubicin) 〇 在一些實施例中’抗腫瘤劑為源自植物之抗腫瘤劑。源 自植物之抗腫瘤劑之實例包括（但不限於）長春新鹼 (vincristine)、長春花驗（vinblastine)、長春地辛 (vindesine)、 依託泊苷（etoposide)、 索布佐生 (sobuzoxane)、多烯紫杉醇、太平洋紫杉醇及長春瑞賓 (vinorelbine)，且較佳為多烯紫杉醇及太平洋紫杉醇。 166146.doc _ 40 · 201249430 在-些實施例中，杬腫瘤劑為顯示抗腫瘤活性之喜樹鹼 衍生物。抗腫瘤喜樹鹼衍生物之實例包括（但不限於）喜樹 鹼' ίο-羥基喜樹鹼、拓朴替康、伊立替康或9_胺基喜樹 鹼，其中喜樹鹼、拓朴替康及伊立替康較佳。此外，伊立 替康在活體内代謝且顯示如同SN_38之抗腫瘤作用。咸信 吾樹驗衍生物之作用機制及活性實際上與喜樹鹼之作用機 制及活性相同（例如Nitta等人，Gan t〇 Kagaku Ry〇h〇, 14, 850-857 (1987)) ° 在些實施例中，抗腫瘤劑為具有抗腫瘤活性之有機翻 化合物或鉑配位化合物。本文中有機鉑化合物係指提供離 子形式之鉑的含鉑化合物。較佳有機鉑化合物包括（但不 限於）以下各物：順鉑；順-二胺二水合鉑（π)_離子；氣（二 伸乙基三胺）-氯化鉑（II);二氣（乙二胺）_鉑（11);二胺— 壤丁烧一甲酸根）翻（Π)(卡始）；螺始（spiro plat in);異丙麵 (iproplatin);二胺（2-乙基丙二酸根）鉑（ιι);乙二胺丙二酸 始（II)，水合（1，2 -二胺基二環己院）硫酸始（n);水合（1，2· 一 fe基一環己烧）丙二酸始（II) ; (1，2-二胺基環己烧）丙二酸 鉑（II) ; (4-羧基酞酸根）（1，2-二胺基環己烷）翻（Π) ; (L2·二 胺基環己烷）-(異檸檬酸根）翻（II) ; (1，2-二胺基環己烷）草 酸翻（II);奥馬銘（ormaplatin);四始（tetraplatin);卡紐、 奈達鉑（nedaplatin)及奥賽力鉑，且較佳為卡鉑或奥赛力 鉑。此外，本說明書中提及之其他抗腫瘤有機鉑化合物為 吾人所知且可購得，及/或可由一般技術者藉由習知技術 產生。 166146.doc -41 - 201249430 在一些實施例中，抗腫瘤劑為抗腫瘤酪胺酸激酶抑制 劑。本文中術語"酷胺酸激酶抑制劑"係指抑制將ATP之λ-磷酸酯基轉移至蛋白質中特定酪胺酸之羥基的"酪胺酸激 酶"之化學物質。抗腫瘤酪胺酸激酶抑制劑之實例包括（但 不限於）吉非替尼（gefitinib)、伊馬替尼（imatinib)、埃羅替 尼（erlotinib)、舒尼替尼、多吉美、瑞可尼汀、ABT-869及 阿西替尼。 在一些實施例令，抗腫瘤劑為顯示抗腫瘤活性之抗體或 抗體之結合部分。在一些實施例中，抗腫瘤劑為單株抗 體。其實例包括（但不限於）阿昔單抗（abciximab)、阿達木 單抗（adalimumab)、阿來組單抗（aiemtuzumab)、巴利昔單 抗（basiliximab)、貝伐單抗（bevacizumab)、西妥昔單抗、 達利珠單抗（daclizumab)、艾庫組單抗（eculizumab)、依法 利珠單抗（efalizumab)、替坦異貝莫單抗（ibritum〇mab tiuxetan)、英利昔單抗（jnfiiximab)、莫羅單抗_cd3 (mUr〇m〇nab-CD3)、那他珠單抗（nataiizumab)、奥馬佐單 抗（oma】izumab)、帕利珠單抗（pai〗vjzumab)、盤尼圖單抗 (panitumumab)、蘭尼單抗（ranibizumab)、吉妥珠單抗奥。坐 米星（gemtuzumab 〇ZOgamicin)、利妥昔單抗（rhuximab)、 托西莫單抗（tositum〇mab)、曲妥珠單抗（trastuzumab)或對 抗原具特異性之任何抗體片段。 在些貫施例中，抗腫瘤劑為干擾素。該干擾素具有抗 腫瘤活性，且其為由大多數動物細胞在病毒感染後產生且 分泌之醣蛋白。其不僅具有抑制病毒生長之作用，且亦具 J66146.doc •42- 201249430 有多種免疫效應機制，包括抑制細胞（尤其腫瘤細胞）生長 及增強天然殺傷細胞活性，因此指定其為一類細胞激素。 抗遽瘤干擾素之實例包括（但不限於）干擾素α、干擾素α_ 2a、干擾素a-2b、干擾素β、干擾素Y_la及干擾素^“。 在一些實施例中，抗腫瘤劑為生物反應調節劑。其一般 為用於改變活有機體之防禦機制或生物反應（諸如，組織 細胞之存活、生長或分化）以引導其對個體抵抗腫瘤、感 染或其他疾病有用之物質或藥物的通用術語。生物反應調 節劑之實例包括（但不限於）雲芝多糖（krestin)、香菇多糖 (lentinan)、西佐喃（siZ0firan)、皮西板尼（picibanil)及烏苯 美司（ubenimex)。 在一些實施例中，抗腫瘤劑包括（但不限於）米托蒽醌 (mitoxantrone)、左旋天冬酿胺（L-asparaginase)、丙卡巴勝 (procarbazine)、達卡巴嗪（dacarbazine)、經基脲 (hydroxycarbamide)、喷司他丁（pentostatin)、維曱酸 (tretinoin)、阿法賽特（alefacept)、阿法達貝泊汁 (darbepoetin alfa)、安美達錠（anastroz〇ie)、依西美坦 (exemestane)、比卡魯胺（bicalutamide)、亮丙瑞林 (leuprorelin)、氟他胺（flutamide)、氟維司群、哌加他尼八 鈉（pegaptanib octasodium)、地尼介白素（denileukin diftitox)、阿地白介素（aldesleukin)、促甲狀腺素 a(thyrotropin alfa)、三氧化二砷、硼替佐米（bortezomib)、 卡西他賓及戈舍瑞林（go sere lin)。 上述術語"抗腫瘤烷基化劑"、"抗腫瘤抗代謝物"、"抗腫 166146.doc -43- 201249430 瘤杬生素’’、，，源自植物之抗腫瘤劑"、”抗腫瘤鉑配位化合 物。抗腫瘤喜樹鹼衍生物”、"抗腫瘤酪胺酸激酶抑制劑"、 單株抗體、"干擾素"、"生物反應調節劑，，及"其他抗腫瘤 劑’’均為吾人所知且可購得，或由熟習此項技術者藉由自 身已知之方法或藉由熟知或習知方法產生。用於製備吉非 替尼之方法描述於（例如）美國專利第5,770,599號中；用於 製備西妥昔單抗之方法描述於（例如）w〇 96/4〇21〇中；用 於製備貝伐單抗之方法描述於（例如）w〇 94/1〇2〇2中；用 於製備奥赛力鉑之方法描述於（例如）美國專利第5,42〇,319 號及第5,959，133號中；用於製備吉西他賓之方法描述於 (例如）美國專利第5,434,254號及第5,223,608號中；及用於 製備喜樹鹼之方法描述於美國專利第5，162,532號、第 5,247,089 號、第 5，191，〇82 號、第 5,200,524 號、第 5,243,050號及第5,321，140號中；用於製備伊立替康之方法 描述於（例如）美國專利第4,604,463號中；用於製備拓朴替 康之方法描述於（例如）美國專利第5,734,056號中；用於製 備替莫唑胺之方法描述於（例如）JP_B第4-5029號中；且用 於製備利妥昔單抗之方法描述於（例如）JP-W第2-503 143號 中。 以上提及之抗腫瘤烷基化劑可購得，例示如下：氮芥N_ 氧化物以Nitrorin(商品名稱）購自Mitsubishi Pharma Corp.;環磷醯胺以Endoxan(商品名稱）購自Shionogi & C〇·，Ltd· ’異；衣璃酿胺以Ifomide(商品名稱）靖自Shionogi & Co., Ltd.;美法命以Alkeran(商品名稱）購自 166146.doc • 44- 201249430

GlaxoSmithKline Corp.;白消安以Mablin(商品名稱）構自 Takeda Pharmaceutical Co·，Ltd.;二溴甘露醇以 Myebrol (商品名稱）購自 Kyorin Pharmaceutical Co·，Ltd.;卡巴醒 以Esquinon(商品名稱）購自Sankyo Co., Ltd. ; n塞替派以 Tespamin(商品名稱）購自 Sumitomo Pharmaceutical Co.， Ltd.；雷諾莫司汀以Cymerin(商品名稱）講自Mitsubishi Pharma Corp.;尼莫司汀以Nidran(商品名稱）購自Sankyo Co.，Ltd.;替莫®坐胺以Temodar(商品名稱）購自Schering Corp.;且卡莫司ί丁以Gliadel Wafer(商品名稱）賭自 Guilford Pharmaceuticals Inc. ° 可購得以上提及之抗腫瘤抗代謝物，例示如下：曱胺喋 0令以 Methotrexate(商品名稱）購自 Takeda Pharmaceutical Co·, Ltd. ; 6-疏基σ票吟核苷以Thioinosine(商品名稱）購自 Aventis Corp.;疏基°票吟以Leukerin(商品名稱）購自Takeda Pharmaceutical Co., Ltd. ; 5-氟尿 °密咬以 5-FU(商品名稱）購 自 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd.;替加氟以Futraful(商品 名稱）購自Taiho Pharmaceutical Co.，Ltd.;脫氧氟尿普以 Furutulon(商品名稱）購自 Nippon Roche Co.，Ltd.;卡莫氣 以 Yamafur(商品名稱）購自 Yamanouchi Pharmaceutical Co.， Ltd.;阿糖胞苦以Cylocide(商品名稱）購自Nippon Shinyaku Co.，Ltd.;阿糖胞苷奥卡磷化物以Strasid(商品名稱）購自 Nippon Kayaku Co., Ltd.;依諾他賓以 Sanrabin(商品名稱） 購自 Asahi Kasei Corp. ; S -1 以 TS -1 (商品名稱）購自 Taiho Pharmaceutical Co·，Ltd·;吉西他賓以 Gemzar(商品名稱）賭 166146.doc •45- 201249430 自Eli Lilly & Co.;氟達拉濱以Fludara(商品名稱）購自 Nippon Schering Co.，Ltd.;且培美曲塞二納以 Alimta(商品 名稱）購自 Eli Lilly & Co.。 可購得以上提及之抗腫瘤抗生素，例示如下：放線菌素 D 以 Cosmegen(商品名稱）購自 Banyu Pharmaceutical Co.， Ltd.;經道諾紅黴素以adriacin(商品名稱）賭自Kyowa Hakko Kogyo Co·，Ltd.;道諾徽素以 Daunomycin購自 Meiji Seika Kaisha Ltd.;新制癌菌素以Neocarzinostatin(商品名 稱）購自 Yamanouchi Pharmaceutical Co.，Ltd.;博萊黴素以 Bleo(商品名稱）騰自Nippon Kayaku Co.，Ltd.;派洛黴素 (pepromycin)以 Pepro(商品名稱）睛自 Nippon Kayaku Co, Ltd.；絲裂黴素C以Mitomycin(商品名稱）購自Kyowa Hakko Kogyo Co.，Ltd.;阿柔比星以 Aclacinon(商品名稱） 購自 Yamanouchi Pharmaceutical Co·，Ltd. ; 0比柔比星以 Pinorubicin(商品名稱）購自 Nippon Kayaku Co.，Ltd.;表柔 比星以Pharmorubicin(商品名稱）購自Pharmacia Corp.;淨 司他丁斯δ旨以Smancs(商品名稱）賭自Yamanouchi Pharmaceutical Co.，Ltd.;黃膽素以 Idamycin(商品名稱）賭 自Pharmacia Corp.;西羅莫司以Rapamune(商品名稱）購自 Wyeth Corp.;且伐柔比星以Valstar(商品名稱）購自Anthra Pharmaceuticals Inc. 〇 可購得以上提及之源自植物之抗腫瘤劑，例示如下：長 春新驗以Oncovin(商品名稱）賭自Shionogi & Co·，Ltd.;長 春花驗以 Vinblastine(商品名稱）講自 Ky or in Pharmaceutical 166146.doc -46- 201249430

Co.，Ltd.;長春地辛以Fildesin(商品名稱）購自Shionogi & Co., Ltd.;依託泊苦以Lastet(商品名稱）賭自Nippon Kayaku Co.，Ltd.;索布佐生以Perazolin(商品名稱）購自 Zenyaku Kogyo Co.，Ltd.;多烯紫杉醇以Taxsotere(商品名 稱）購自Aventis Corp·;太平洋紫杉醇以Taxol(商品名稱）購 自 Bristol-Myers Squibb Co.;且長春瑞賓以 Navelbine(商品 名稱）購自 Kyowa Hakko Kogyo Co·，Ltd.。 可購得以上提及之抗腫瘤鉑配位化合物，例示如下：順 翻以Randa(商品名稱）購自Nippon Kayaku Co.，Ltd.;卡翻 以 Paraplatin(商品名稱）講自 Bristol-Myers Squibb Co.;奈 達鉑以Aqupla(商品名稱）購自Shionogi & Co., Ltd·;且奥 賽力舶以 Eloxatin(商品名稱）購自 Sanofi-Synthelabo Co.。 可購得以上提及之抗腫瘤喜樹驗衍生物，例示如下：伊 立替康以Campto(商品名稱）購自Yakult Honsha Co.，Ltd.; 拓朴替康以Hycamtin(商品名稱）購自GlaxoSmithKline Corp.;且喜樹驗購自 Aldrich Chemical Co.，Inc.，U.S.A。 可購得以上提及之抗腫瘤酪胺酸激酶抑制劑，例示如 下：吉非替尼以Iressa(商品名稱）購自AstraZeneca Corp.; 伊馬替尼以Gleevec(商品名稱）購自Novartis AG ;且埃羅替 尼以 Tarceva(商品名稱）購自 〇SI Pharmaceuticals Inc. 〇 可購得以上提及之單株抗體，例示如下：西妥昔單抗以 Erbitux(商品名稱）購自 Bristol-Myers Squibb Co.;貝伐單 抗以Avastin(商品名稱）購自Genentech，Inc.;利妥昔單抗 以Rituxan(商品名稱）購自Biogen Idee Inc.;阿來組單抗以 166146.doc •47· 201249430

Campath(商品名稱）購自Berlex Inc.;且曲妥珠單抗以 Herceptin(商品名稱）購自 Chugai Pharmaceutical Co.， Ltd·。 可購得以上提及之干擾素，例示如下：干擾素α以 Sumiferon(商品名稱）購自 Sumitomo Pharmaceutical Co.， Ltd·;干擾素a-2a以Canferon-A(商品名稱）購自Takeda Pharmaceutical Co.，Ltd.;干擾素a-2b 以 Intron A(商品名 稱）購自Schering-Plough Corp.;干擾素β以IFNP(商品名稱） 購自 Mochida Pharmaceutical Co., Ltd.；干擾素 γ-la 以 Imunomax-γ(商品名稱）購自 Shionogi & Co.，Ltd.;且干擾 素 γ-ηΐ 以 Ogamma(商品名稱）購自 Otsuka Pharmaceutical Co.，Ltd.。 可購得以上提及之生物反應調節劑，例示如下：雲芝多 糖以krestin(商品名稱）購自Sankyo Co., Ltd.;香益多糖以 Lentinan(商品名稱）購自Aventis Corp.;西佐喃以 SoniHran(商品名稱）購自 Kaken Seiyaku Co·，Ltd.;皮西板 尼以 Picibanil(商品名稱）購自 Chugai Pharmaceutical Co.， Ltd.;且烏苯美司以Bestatin(商品名稱）賭自Nippon Kayaku Co.，Ltd.。 可購得以上提及之其他抗腫瘤劑，例示如下：米托蒽醌 以 Novantrone(商品名稱）購自 Wyeth Lederle Japan, Ltd.; 左旋天冬醯胺以Leunase(商品名稱）購自Kyowa Hakko Kogyo Co.，Ltd.;丙卡巴肼以Natulan(商品名稱）購自 Nippon Roche Co.，Ltd.;達卡巴嗓以 Dacarbazine(商品名 166146.doc -48- 201249430 稱）購自 Kyowa Hakko Kogyo Co·，Ltd.;經基脲以 Hydrea(商品名稱）購自 Bristol-Myers Squibb Co.;喷司他 丁以 Coforin(商品名稱）鱗自 Kagaku Oyobi Kessei Ryoho Kenkyusho ;維甲酸以Vesanoid(商品名稱）購自Nippon Roche Co·，Ltd.;阿法塞特以Amevive(商品名稱）購自 Biogen Idee Inc.;阿法達貝泊汀以Aranesp(商品名稱）購自 Amgen Inc.;安美達旋以Arimidex(商品名稱）購自 AstraZeneca Corp.;依西美坦以Aromasin(商品名稱）構自 Pfizer Inc.;比卡魯胺以Casodex(商品名稱）購自 AstraZeneca Corp·;亮丙瑞林以Leuplin(商品名稱）購自 Takeda Pharmaceutical Co.，Ltd.;敦他胺以 Eulexin(商品名 稱）賭自 Schering-Plough Corp.;氣維司群以 Faslodex(商品 名稱）購自AstraZeneca Corp. ; α底加他尼八鈉以Macugen(商 品名稱）購自Gilead Sciences, Inc.;地尼介白素以Ontak(商 品名稱）購自Ligand Pharmaceuticals Inc.;阿地白介素以 Proleukin(商品名稱）購自Chiron Corp.；促甲狀腺素α以 Thyrogen(商品名稱）購自Genzyme Corp.;三氧化二钟以 Trisenox(商品名稱）|籌自 Cell Therapeutics，Inc.;棚替佐米 以 Velcade(商品名稱）賭自 Millennium Pharmaceuticals, Inc.；卡西他賓以Xeloda(商品名稱）購自Hoffmann-La Roche, Ltd·;且戈舍瑞林以Zoladex(商品名稱）購自 AstraZeneca Corp.。如本說明書中所用之術語"抗腫瘤劑” 包括上述抗腫瘤烷基化劑、抗腫瘤抗代謝物、抗腫瘤抗生 素、源自植物之抗腫瘤劑、抗腫瘤鉑配位化合物、抗腫瘤 166146.doc -49- 201249430 喜樹鹼衍生物、抗腫瘤酪胺酸激酶抑制劑、單株抗體、干 擾素、生物反應調節劑及其他抗腫瘤劑。 其他抗腫瘤劑或抗贅生性劑可與苯并吡喃酮 (benzopyrone)化合物組合使用。該等合適抗腫瘤劑或抗贅 生性劑包括（但不限於）13-順式-視黃酸、2-CdA、2-氯去氧 腺苦（2-Chlorodeoxyadenosine) 、 5-阿紮胞普（5-

Azacitidine)、5 -氟尿响咬、5-FU、6-疏基嗓吟、6-MP、6-TG、6-硫代鳥嗓吟（6-Thioguanine)、阿布昔恩 (Abraxane)、異維A酸（Accutane)、放線菌素D、阿徽素 (Adriamycin)、氣尿嘴咬（Adrucil)、阿格林（Agrylin)、Ala-Cort、阿地白介素（Aldesleukin)、阿來組單抗、力比泰 (ALIMTA)、亞利崔托率（Alitretinoin)、Alkaban-AQ、馬法 蘭（Alkeran)、全反式視黃酸（All-transretinoic Acid)、α干 擾素、六曱密胺（Altretamine)、胺曱嗓呤（Amethopterin)、 胺破汀（Amifostine)、胺魯米特（Aminoglutethimide)、阿那 格雷（Anagrelide)、尼魯米特（Anandron)、安美達旋、阿拉 伯糖胞。密咬（Arabinosylcytosine)、Ara-C、阿尼斯皮 (Aranesp)、阿可達（Aredia)、瑞寧德（Arimidex)、阿諾新 (Aromasin)、阿余恩（Arranon)、三氧化二神、天冬酿胺酶 (Asparaginase)、ATRA、阿瓦斯汀、阿紫胞苷、BCG、 BCNU、苯達莫司汀（Bendamustine)、貝伐單抗、貝瑟羅汀 (Bexarotene)、BEXXAR、比卡魯胺、BiCNU、鹽酸博萊黴 素（Blenoxane)、博來黴素、硼替佐米、白消安、白消安片 (Busulfex) 、 C225 、甲醯四氫葉酸約(Calcium 166146.doc -50- 201249430

Leucovorin)、卡姆帕斯（Campath)、 卡姆脫沙 (Camptosar)、喜樹驗-11、卡西他賓、卡拉克（Carac)、卡 翻、卡莫司ί丁、卡莫司汀植入劑（Carmustine Wafer)、康士 得（Casodex)、CC-5013、CCI-779、CCNU、CDDP、 CeeNU、鹽酸紅比黴素（Cerubidine)、西妥昔單抗、苯丁酸 氛芬（Chlorambucil)、順始、嗜燈菌因子（Citrovorum Factor)、克拉屈濱（Cladribine)、皮質酮（Cortisone)、更生 黴素（Cosmegen)、CPT-11、環碳醢胺、赛他郡 (Cytadren)、阿糖胞皆、阿糖胞苦脂質、Cytosar-U、環填 醯胺（Cytoxan)、達卡巴《秦、達克更（Dacogen)、放線菌素 D、阿法達貝泊、;τ、達沙替尼（Dasatinib)、柔紅黴素 (Daunomycin)、道諾黴素、道諾黴素鹽酸鹽、道諾黴素脂 質、柔紅黴素脂質體（DaunoXome)、地卡特隆 (Decadron)、地西他賓（Decitabine)、△-考替氟（Delta-Cortef)、地他松（Deltasone)、地尼介白素、DepoCyt™、 地塞米松（Dexamethasone)、醋酸地塞米松、地塞米松填酸 納、地沙松（Dexasone)、右雷佐生（Dexrazoxane)、 DHAD、DIC、地德昔（Diodex)、多烯紫杉酵、多昔爾 (Doxil)、羥道諾紅黴素、羥道諾紅黴素脂質、Droxia™、 DTIC、DTIC-Dome、杜拉隆（Duralone)、伊福德昔 (Efudex)、伊利格德（Eligard)、伊利恩斯（Ellence)、伊洛 沙iT (Eloxatin)、伊利斯帕（Elspar)、伊米賽特（Emcyt)、表 柔比星、阿法依伯汀（Epoetin Alfa)、艾比特思（Erbitux)、 埃羅替尼、歐文菌左旋天冬醢胺（Erwinia L- 166146.doc 51 201249430 asparagmase)、雌莫司汀、伊斯依爾（Ethy〇1)、伊托泊磷 (Etopophos)、依託泊苷、鱗酸依託泊苷伊樂克欣 (Eulexin)、伊伐斯塔（Evista)、依西美坦伐瑞斯通 (Fareston)、伐斯洛德（Fasl〇dex)、福馬拉（Femara)、非格 司帝（Filgrastim)、氮尿普（Fi〇XUI^dine)、氣達拉 (Fludara)、敦達拉凟、氟如普昔（Fiu〇r〇piex)、敗尿,β定、 氟尿定（乳膏）、氟甲睾鲷（Flu〇Xymester〇ne)、敗他胺、 亞葉酸（Folinic Acid)、FUDR、氟維司群、G-CSF、吉非替 尼、吉西他賓、吉妥珠單抗奥唑米星、健擇（Gemzar)及健 擇副作用化學療法藥物、格利維（Gleevec)、格立得植入劑 (Gliadel Wafer)、GM-CSF、戈舍瑞林、粒細胞群落刺激因 子、顆粒球巨噬細胞群落刺激因子、氟羥曱睾酮 (Halotestin)、赫赛汀、赫塞郡（Hexadr〇1)、赫塞樂恩 (Hexalen)、六甲二聚氰胺（Hexamethylmelamine)、HMM、 海卡姆汀（Hycamtin)、海郡依恩（Hydrea)、醋酸氫考特 (Hydrocort Acetate)、氫皮質酿](Hydrocortisone)、氫皮質 酮磷酸鈉、氫化可的松琥珀酸鈉（Hydrocortisone Sodium Succinate)、填酸氫化可的松、羥基脲、替伊莫單抗、替 坦異貝莫單抗、依達黴素（Idamycin)、黃膽素、依氟埃昔 (Ifex)、IFN-α、異環磷醯胺、il-11、IL-2、甲磺酸伊馬替 尼、咪唑曱醯胺、干擾素a、干擾素a_2b(PEG接合物）、介 白素-2、介白素-11、甘樂能（Intron A)(干擾素ct-2b)、依瑞 沙（Iressa)、伊立替康、異維甲酸（Isotretinoin)、新型埃坡 黴素類似物（Ixabepilone)、依昔帕拉（lxempra)、克拉斯 166146.doc •52- 201249430 (Kidrolase)、拉那考特（Lanacort)、拉帕替尼、左旋天冬醯 胺、LCR、來那度胺（Lenalidomide)、來曲 °坐（Letrozole)、 甲醯四氫葉酸（Leucovorin)、瘤可寧（Leukeran)、瘤可安 (Leukine)、 亮丙立德（Leuprolide)、 長春新驗 (Leurocristine)、克拉立平（Leustatin)、脂質 Ara-C、液體 普瑞德（Liquid Pred)、洛莫司汀（Lomustine)、L-PAM、L-沙可來新（L-Sarcolysin)、紐普隆（Lupron)、钮普隆儲槽、 曱苯肼（Matulane)、 馬昔德（Maxidex)、 氣芥 (Mechlorethamine)、鹽酸氮芬、米德拉隆（Medralone)、米 德容（Medrol)、米格斯（Megace)、曱地孕酮（Megestrol)、 乙酸甲地孕酮、美法侖、巯基嘌呤、美司鈉（Mesna)、美 司奈斯（Mesnex)、甲胺喋呤、甲胺喋呤鈉、甲潑尼龍 (Methylprednisolone)、去氫可的松（Meticorten)、絲裂黴 素、絲裂黴素C、米托蒽酸、M-普瑞尼松（M-Prednisol)、 MTC、MTX、二氣甲二乙胺（Mustargen)、氮芬（Mustine)、 突變黴素（Mutamycin)、麥裏浪（Myleran)、麥洛塞爾 (Mylocel)、麥羅塔（Mylotarg)、溫諾平（Navelbine)、奈拉 濱（Nelarabine)、奈沙爾（Neosar)、奈拉斯塔（Neulasta)、優 美佳（Neumega)、優保津（Neupogen)、多吉美、尼拉胺 (Nilandron)、尼魯胺（Nilutamide)、尼喷特（Nipent)、氮芥 (Nitrogen Mustard)、諾瓦爾德（Novaldex)、諾凡特龍 (Novantrone)、奥曲肽（Octreotide)、乙酸奥曲肽、奥克斯 帕（Oncospar)、奥科維（Oncovin)、奥他克（Ontak)、奥克沙 (Onxal)、奥普瑞福（Oprevelkin)、奥拉普德（Orapred)、奥 166146.doc •53· 201249430 拉松（Orasone)、奥赛力鉑、太平洋紫杉醇、蛋白結合之太 平洋紫杉醇 '帕米膦酸鹽、盤尼圖單抗、帕瑞汀 (Panretin)、帕拉始（Paraplatin)、皮地普德（Pediapred)、 PEG干擾素、培門冬酶（Pegaspargase)、乙二醇化非格司亭 (Pegfilgrastim)、PEG-樂能（PEG-INTRON)、PEG-左旋天冬 醯胺、培美曲塞、喷司他丁、苯基丙胺酸氮芥 (Phenylalanine Mustard)、普拉替諾（Platinol)、普拉替諾-AQ、潑尼龍（Prednisolone)、潑尼松（Prednisone)、普瑞隆 (Prelone)、丙卡巴肼（Procarbazine)、普瑞康特 (PROCRIT)、普瘤盡（Proleukin)、具有卡莫司汀植入物之 普利非斯（Prolifeprospan)20、疏基嗓。令（Purinethol)、雷洛 昔芬、瑞利米德（Revlimid)、雷麻曲昔（Rheumatrex)、美羅 華（Rituxan)、利妥昔單抗、諾芬-A(Roferon-A)(干擾素α-2a)、如布克（Rubex)、鹽酸紅比黴素（Rubidomycin hydrochloride)、善寧（Sandostatin)、善甯 LAR、沙格司亭 (Sargramostim)、舒汝固體膚（Solu-Cortef)、舒汝美卓佑 (Solu-Medrol)、索拉非尼（Sorafenib)、斯普瑞塞 (SPRYCEL)、STI-571 、键腺黴素（Streptozocin)、 SU11248、舒尼替尼（Sunitinib)、舒尼替尼、他莫昔芬、 他塞瓦（Tarceva)、他格汀（Targretin)、紫杉酚（Taxol)、紫 杉德（Taxotere)、替莫達（Temodar)、替莫唾胺 (Temozolomide)、替莫利姆（Temsirolimus)、替尼泊武 (Teniposide)、特斯帕（TESPA)、沙力度胺（Thalidomide)、 斯羅米德（Thalomid)、斯拉塞司（TheraCys)、硫鳥嘌呤 166146.doc -54· 201249430 (Thioguanine)、硫鳥嗓呤藥片（Thioguanine Tabloid)、硫填 醯胺（Thiophosphoamide)、硫平樂昔（Thioplex)、嗟替派、 TICE、拓撲殺（Toposar)、拓朴替康、托瑞米芬 (Toremifene)、托瑞塞爾（Torisel)、托西莫單抗 (Tositumomab)、曲妥珠單抗（Trastuzumab)、維曱酸 (Tretinoin)、Trexall™、三氧二石申（Trisenox)、替斯帕 (TSPA)、替克博（TYKERB)、VCR、維克替比（Vectibix)、 維斑（Velban)、維卡德（Velcade)、維帕司德（VePesid)、凡 善能（Vesanoid)、維阿杜（Viadur)、維達紮（Vidaza)、長春 花驗、硫酸長春花驗、維卡普斯（Vincasar Pfs)、長春新 鹼、長春瑞賓、酒石酸長春瑞賓、VLB、VM-26、伏立諾 他（Vorinostat)、VP-16、威猛（Vumon)、希羅達（Xeloda)、 鍵黴素（Zanosar)、澤娃靈（Zevalin)、欣卡德（Zinecard)、 諾雷德（Zoladex)、°坐來膦酸（Zoledronic acid)、β坐林紮 (Zolinza)、擇泰（Zometa)。 抗代謝物： 抗代謝物為干擾正常細胞代謝過程之藥物。因為癌細胞 會快速複製，所以干涉細胞代謝在比宿主細胞大之程度上 影響癌細胞。吉西他賓（4-胺基-l-[3,3-二氟-4-羥基-5-(羥 曱基）四氫0夫喃-2-基]-1H-嘴咬-2-酮；由Eli Lilly and Company以GEMZAR®出售）為一種藉由阻斷DNA合成來干 擾細胞分裂，從而顯然經由細胞凋亡機製造成細胞死亡之 核苷類似物。針對特定患者，可調整吉西他賓之劑量。在 成人中，當與鉑劑及PARP抑制劑組合使用時，吉西他賓 166146.doc -55- 201249430 之劑量將在約100 mg/m2至約5000 mg/m2之範圍内，在約 100 mg/m2至約2000 mg/m2之範圍内，在約750 mg/m2至約 1500 mg/m2、約 900 mg/m2至約 1400 mg/m2或約 1250 mg/m2 之範圍内。尺度mg/m2係指每單位表面積患者（平方公尺， m2)之吉西他賓（毫克’ mg)之量。吉西他賓可藉由靜脈内 (IV)輸液投與’例如經約1〇至約3〇〇分鐘、約15至約180分 鐘、約20至約60分鐘或約1 〇分鐘之時間。在此背景下術語 "約”指示約的正常用法；且在一些實施例中，其指示土 1 〇〇/〇 或±5%之容許度。 銘錯合物： 鉑錯合物為含有至少一個與至少一個有機基團錯合之鉑 中心的用以治療癌症之醫藥組合物。卡鉑（（Sp_4_2)_二胺 [1，1·環丁院二缓根基（2舶）類似於順|自及奥赛力 鉑’為一種DNA烷基化劑。卡鉑劑量係藉由熟習癌症化學 療法技術者已知之方法考慮患者之肌酐清除率（creatinine clearance rate)計算血漿濃度曲線下面積（auc)來確定。在 一些實施例中，與抗代謝物（例如，’吉西他賓）及pARP抑制 劑（例如’ 4-碘-3-硝基苯甲醯胺）一起用於組合治療之卡鉑 的劑量經计算以提供約〇 1_6 mg/ml.min、約1-3 mg/ml min、約 1.5 至約 2.5 mg/ml min、約 1.75 至約 2.25 mg/ml min或約 2 mg/ml.min之AUC。（舉例而言，AUC 2為 2 mg/mlmin的簡寫）。在一些實施例中，與紫杉烷（例如，太 平洋紫杉醇或多烯紫杉醇）及PARP抑制劑（例如，4_碘_3_硝 基笨甲醯胺）一起用於組合治療之卡鉑的劑量經計算以提 166146.doc •56· 201249430 供約 0.1-6 mg/ml min、約 1-3 mg/ml min、約 1.5 至約 2.5 mg/ml min、約175至約 2 25 mg/ml.min或約 2 mg/ml min之 AUC。（舉例而言，AUC 2為2 mg/ml.min的簡寫）。在一些 貫施例中’投與約1〇至約4〇〇 mg/m2(例如，約36〇 mg/rn2) 之合適卡鉑劑量。鉑錯合物（諸如，卡鉑）通常經約1〇至約 3〇〇分鐘、約30至約180分鐘、約45至約12〇分鐘或約60分 鐘之時間經靜脈内（IV)投與。在此背景下，術語"約"具有 其關於約之正常含義。在一些實施例中’約意謂土1〇%或 ±5%。 拓撲異構酶抑制劑 在一些實施财’纟發明《方法可包含向患有乳癌之患 者投與有效量之PARP抑制劑以及拓撲異構酶抑制劑（例 如’伊立替康或拓朴替康）。 拓撲異構酶抑制劑為經設計以干擾拓撲異構酶酶（拓撲 異構酶I及II)之作用的藥劑，拓撲異構酶為藉由催化正常 細胞週期期間DNA鏈之磷酸二酯骨架之破壞及再接合來控 制DNA結構改變的酶。拓撲異制已成為癌症化學療法治 療之通用標靶。認為拓撲異構酶抑制劑可阻斷細胞週期： 接合步驟，產生單鏈及雙_裂，從而損害基因組之完整 性。引入之此等斷裂接著會導致細胞〉周亡及細胞死亡。通 常根據拓撲異構酶抑制劑抑制之酶的類型，劃分拓撲異構 酶抑制劑。㈣異構酶！(最通常在真核生物中發現之拓撲 朴替康 '伊立替康、勒托 替康〇Ur_Can)及依沙替康（exatecan)的㈣。扭朴替康 I66146.doc

S •57- 201249430 可以商品名稱Hycamtim®自GlaxoSmithKline賭得。伊立替 康可以商品名稱Camptosar®自Pfizer購得。勒托替康可以 脂質調配物形式自Gilead Sciences Inc獲得。拓撲異構酶抑 制劑可以有效劑量投與。在一些實施例中，用於人類治療 之有效劑量將在每天約0.01至約10 mg/m2之範圍内。可基 於每天、每兩週、半週、每週或每月重複治療。在一些實 施例中’治療週期後可跟隨有一天至數天或一至數週之休 息期。與PARP-1抑制劑組合，PARP-1抑制劑及拓撲異構 酶抑制劑可在同一天給藥或可在單獨之日給藥。 乾向II型拓撲異構酶之化合物分成兩大類：乾向拓撲異 構扭-DNA錯合物之拓撲異構酶毒劑及破壞催化轉化 (catalytic turnover)之拓撲異構酶抑制劑。τ〇ρ〇 „毒劑包括 (但不限於）真核11型拓撲異構酶抑制劑（tορο II):安β丫咬 (amsacrine)、依託泊苷、磷酸依託泊苷、替尼泊甙及羥道 諾紅黴素。此等藥物為抗癌療法。拓撲異構酶抑制劑之實 例包括ICRF-193。此等抑制劑乾向t〇p〇 η之N末端ατρ酶 結構域且預防topo II轉化。結合Ατρ酶結構域之此化合物 之結構已由 Classen(Pr〇ceedings of the National Academy of Science，2004)解決，展示藥物以非競爭性方式結合且 防範ATP酶結構域之二聚。

抗血·管生成费I 在一些實施例中，本發明之方法可包含向患有乳癌之患 者投與有效量之PARP抑制劑以及抗血管生成劑。 血管生成抑制劑為抑制血管生成（新血管生長）之物質。 166146.doc -58· 201249430 每-實體腫瘤（與白a病相比）需要產生血管以在其達 -尺寸後保持其活性β腫瘤可僅在其形成新血管時生長了 除非組織修復處於積極進行中，否則通常在成年人體内其 他地方不構造企管。i答* Α、& mi ' e血s生成抑制劑内皮生長抑素 (endosutin)及相關化學物質可抑制血管之構造，防止癌症 無限生長。在患者測試中，腫瘤變成非活性且甚至在内^ 生長抑素治療結束後仍保持該方式。雖然該治療具有極少 副作用，但其似乎具有極為有限之選擇性。諸如沙力度胺 及基於天然植物之物質的其他血管生成抑制劑正處於積極 研製中。 已知之抑制劑包括藥物貝伐單抗（阿瓦斯汀），其結合血 管内皮生長因子（VEGF)，抑制血管内皮生長因子與促進血 官生成之梵體結合。其他抗血管生成劑包括（但不限於）羧 基胺咪唑（carboxyamidotriazole)、TNF-470、CM101、 IFN-α、IL-12、血小板因子·4、蘇拉明（suramin)、 SU5416、血小板反應蛋白（thromb〇Sp0ndin)、血管生成抑 制類固醇+肝素、源自軟骨之血管生成抑制因子、基質金 屬蛋白酶抑制劑、血管抑制素、内皮生長抑素、2 -甲氧雌 甾二醇（2-methoxyestradiol)、替康蘭（tecogalan)、血小板 反應蛋白、泌乳素、ανβ3抑制劑及利諾胺（linomide)。 與泠丑er-2之丧法 在一些實施例中，本發明之方法可包含向患有HER2陽 性乳癌之患者投與有效量之PARP抑制劑以及赫賽汀。 赫赛汀（曲妥珠單抗）為用於早期HER2陽性乳癌之靶向療 166146.doc •59· 201249430 法。赫赛汀經批准用於輔助治療過度表現HEr2之淋巴結 陽性或淋巴結陰性（ER/PR陰性或具有一高危特徵）乳癌。 赫赛汀可以若干不同方式使用：作為包括羥道諾紅黴素、 環填酿胺及太平洋紫杉醇或多烯紫杉醇之治療方案之部 分；與多烯紫杉醇及卡鉑一起；或在基於多形態蒽環黴素 之療法之後以單一藥劑形式。批准赫赛汀與太平洋紫杉醇 組合用於過度表現HER2之轉移性乳癌的第一線治療。呈 單藥劑形式之赫赛》丁經批准用於治療已接收一或多種針 對轉移性疾病之化學療法方案的患者中過度表現HER2之 乳癌。 拉帕替尼或二甲苯磺酸拉帕替尼為針對實體腫瘤（諸 如，乳癌）之口服活性化學療法藥物治療。在研製期間， 其被稱為小分子GW572016。符合特定適應症標準之患者 可開拉帕替尼作為針對乳癌之組合療法之部分。在藥理學 上，拉帕替尼為中斷引起癌症之細胞信號的雙重酪胺酸激 酶抑制劑。拉帕替尼用作患有HER2陽性之晚期乳癌（其係 在經其他化學治療劑（諸如，蒽環黴素、源自紫杉烷之藥 物或曲妥珠單抗（赫赛汀，Genentech))預先治療後發展）的 患者中女性乳癌之治療。 激素療法 在一些實施例中，本發明之方.法可包含向患有乳癌之患 者投與有效量之PARP抑制劑以及激素療法。 存在可附著癌細胞且可影響其繁殖能力之某些激素。激 素療法之目的係添加、阻斷或移除激素。關於乳癌，雌性 166146.doc 201249430 激素雌激素及孕酮可促進一些乳癌細胞之生長。因此在此 等患者中’給與激素療法以阻斷體内天然存在之雌激素且 對抗癌症生長。存在兩種類型針對乳癌之激素療法：抑制 雖激素及孕酮促進乳癌細胞生長之藥物及切斷激素自卵巢 產生之藥物或外科手術。 用於乳癌之通用激素療法藥物包括（但不限於）他莫昔 芬、法樂通（Fareston) '瑞寧得（Arimidex)、阿諾新 (Aromasin)、富馬樂（Femara)及諾雷德（Zoladex)。 他莫昔芬-激素拮抗劑 他莫曰芬（以諾瓦得士（Nolvadex)出售）可降低一些早期 乳癌將復發之可能性且可預防癌症在未患病之乳房中發 展。他莫昔芬亦可減慢或中止存在於體内之癌細胞的生 長。此外，他莫昔芬可為處於發展乳癌之高危險中之女性 提供觀察等待或預防性（預防）乳房切除術的替代品。他莫 昔芬為一種稱為選擇性雌激素受體調節劑（SErm)之藥 物。在乳房中，其充當抗雌激素。雌激素促進乳癌細胞之 生長且他莫昔芬阻斷雌激素附著此等細胞上之雌激素受 體。藉由此舉，咸信乳癌細胞之生長將停止。通常將他莫 昔芬與化學療法及其他乳癌治療一起給與。在以下狀況下 考慮其為一種選擇：與保留乳房之外科手術或乳房切除術 _起治療乳腺管原位癌(DCIS);輔助治療小葉原位癌 (LCIS)以降低發展更晚期乳癌之危險；輔助治療癌症為雌 激素受體呈陽性之隸及女性㈣轉移性乳癌；治療復發 性乳癌；預防處於發展乳癌之高危險中的女性之乳癌。 166 丨 46.doc • 61 - 201249430 類固醇及非類固醇芳香酶抑制劑 方香酶抑制劑（AI)S —類用於治療絕經後女性中乳癌及 癌之藥物，其阻斷芳香酶。芳香酶抑制劑可降低患有 激素受體陽性之乳癌的絕經後女性中雕激素量。在體内具 有較少雌激素之情況下，激素受體接收較少生長信號且癌 症生長可減慢或中止。 芳香酶抑制劑藥物包括瑞寧得（化學名稱：安美達旋卜 阿法新（化學名稱：依西美坦）及富馬樂（化學名稱：來曲 唾）。各自每天服用丸劑—次，歷時長達5年。但對於患有 晚期（轉移性）疾病之女性而言，持續用藥，只要其適用即 可》 AI分成兩種類型：不可逆類固醇抑制劑，諸如依西美 坦，其與芳香酶錯合物形成持久鍵；及非類固醇抑制劑 (諸如，安美達旋、來曲唾），其藉由可逆性競爭抑制該 酶。 氣維司群（亦稱為ICI 182,780及"法洛德西（Fasl〇dex)")為 -種在抗雌激素療法後疾病進展之絕經後女性中激素受體 陽性之轉移性乳癌的藥物治療。其為無促效作用之雕激素 受體拮抗劑，其藉由下調及藉由降解雌激素受體兩者來起 作用。其以每月一次注射液形式投與。 乾向療法 在一些實施例中，本發明之方法可包含向患有乳癌之患 者技與有效量之PARP抑制劑以及乾向生長因子受體（包括 (但不限於）表皮生長因子受體（EGFR)及胰島素樣生長因子 166146.doc -62- 201249430 I受體（IGF1R))之抑制劑。 EGFR在某些類型人類癌瘤（包括（但不限於）肺癌及乳癌） 之細胞中過度表現。高增殖侵襲性乳癌細胞通常表現異常 高程度之EGFR，且已知此控制細胞分裂及遷移。對EGFR 之關注藉由可利用且FDA批准特定EGFR酪胺酸激酶抑制 劑（例如，吉非替尼）而進一步增強。EGFR之抑制為一種重 要的抗癌治療。EGFR抑制劑之實例包括（但不限於）西妥昔 單抗，其為一種嵌合單株抗體，其藉由靜脈内注射來給與 以治療癌症，包括（但不限於）轉移性結腸直腸癌及頭頸 癌。帕尼土單抗為EGFR抑制劑之另一實例。其為針對 EGFR之人化單株抗體。當在患有晚期結腸癌之患者中單 獨使用時，帕尼土單抗已展示益處且比支持性護理更佳， 且經FDA批准用於此用途。 I型胰島素樣生長因子受體（IGFIR)之活化可促進多種細 胞類型之增殖且抑制細胞凋亡。表現組成活性IGFIR或 IGF-I之轉殖基因小鼠發展乳房腫瘤且在原發性乳癌中已 4貞測到 IGFIR 含量增加（Yanochko 等人，Breasi Cancer 2006)。亦已展示胰島素樣生長因子I受體（IGFIR) 及HER2顯示在乳癌中之重要信號轉導相互作用。此等受 體之一者的特定抑制劑可交叉抑制另一者之活性。乾向兩 種受體使得最大抑制其下游胞外信號調控之激酶1/2及 AKT信號轉導路徑。因此，該等藥物組合可在臨床上適用 且甚至在單一藥物無活性之腫瘤中可為有益的，如 HER2/IGFIR抑制劑組合在未過度表現HER2之MCF7細胞中 166146.doc -63- 201249430 之作用所例示（Chakraborty AK 等人，Cancer Res. 2008 Mar l;68(5):1538-45)。IGF1R 抑制劑之一實例為 CP-751871 。 CP-751871 為選擇性地與 IGF1R 結合之人類單株 抗體，其阻止IGF 1與受體結合及接著的受體自體磷酸化。 IGF 1R自體磷酸化之抑制可導致表現IGF 1R之腫瘤細胞上 受體表現減少、IGF之抗細胞凋亡作用減少及腫瘤生長受 到抑制。IGF 1R為在大部分腫瘤細胞上表現之受體酪胺酸 激酶且涉及有絲分裂發生、血管生成及腫瘤細胞存活。 PI3K/mTOR 路徑 磷脂醯肌醇-3-激酶（PI3K)路徑失調為人類癌症中之常見 事件，其係經由染色體10缺失之腫瘤抑制劑磷酸酶及張力 蛋白同系物的失活或pllO-α突變的活化而產生。此等熱點 突變引起酶之致癌活性且促進針對抗HER2抗體曲妥珠單 抗之治療抗性。因此，ΡΙ3Κ路徑為一種對癌症療法而言有 吸引力之標靶。NVP-BEZ235(—種ΡΙ3Κ及雷帕黴素之下游 哺乳動物標靶（mTOR)之雙重抑制劑）已展示抑制乳癌細胞 中下游效應子Akt、S6核糖體蛋白及4EBP1之活化。NVP-BEZ235抑制PI3K/mTOR軸且弓|起具有野生型及突變ρ110-α 之癌細胞中的抗增瘦及抗腫瘤活性（Violeta Serra等人， Cancer 68，8022-8030，2008年 10月 1 曰）〇

Hsp90抑制劑 此等藥物靶向熱休克蛋白90(hsp90)。Hsp90為一類伴侣 蛋白之一，該等伴侣蛋白之通常工作係幫助其他蛋白質獲 得及維持彼等蛋白質進行其工作所需之形狀。伴侣蛋白係 166146.doc -64- 201249430 藉由與其他蛋白質實體接觸而起作用eHsp9〇亦可使癌細 胞能夠生存且甚至旺盛生長’儘管遺傳缺陷通常會引起該 等細胞死亡。因此，尤其若阻斷伴#蛋白功能與其他策略 組合來阻斷癌細胞存活，則阻斷HSP9Q及相關伴彳&蛋白之 功能可引起癌細胞死亡。 微管蛋白抑制劑 微管蛋白為形成作為細胞骨架（結構網路）之關鍵組份之 微管的蛋白質。微管為細胞分裂（有絲分裂）、細胞結構、 輸送、信號轉導及運動所需。考慮到在有絲分裂中具有主 要作用，微管已成為抗癌藥（通常稱為抗有絲分裂藥 '微 管蛋白抑制劑及微管靶向劑）之重要標靶。此等化合物結 合微管中之微管蛋白且藉由干擾細胞分裂所需之微管形成 來阻止癌細胞增殖。此干擾可阻斷細胞週期順序，導致細 胞凋亡。 細胞凋亡抑制劑 細胞祠亡抑制劑（IAP)為最初在桿狀病毒中表徵之功能 及結構相關蛋白家族，其用作内源性細胞凋亡抑制劑。人 類IAP豕族由至少6個成員組成且已在許多生物體中鑑別 IAP同系物。10058_F4為誘發細胞週期停滯及細胞凋亡之 c-Myc抑制劑。其為特定抑制c_MyC_Max相互作用且阻止c_ My c彳示乾基因表現之轉錄活化的可透過細胞之嗟β坐咬酿^。 10058-F4以C-Myc依賴性方式在活體外與活體内抑制腫瘤 細胞生長。BI-6C9為tBid抑制劑及抗細胞凋亡劑^ GNF-2 屬於新穎Bcr-abl抑制劑類。GNF-2似乎結合肉豆蔻醯基結 166146.doc -65· 201249430 σ (遠離活性位點之別位位點）’使激酶之非活性形式穩 疋。雖然其以267 nM之ICw抑制Bcr-abl鱗酸化，但其並不 抑制63種其他激酶組，包括天然c_Abl，且展示完全缺乏 對不表現Bcr-Abl之細胞的毒性^ GNF_2展示新穎抑制劑類 別研究Bcr-abl活性及治療由Bcr-Abl癌蛋白引起之抗性慢 性骨趟性白血病（CML)的巨大潛能。介導 之細胞凋亡及P53依賴性基因轉錄（諸如，週期素G、 p21/wafl及mdm2表現）之可逆性抑制劑。pifithrin_a可增強 基因毒性壓力（genotoxic stress)(諸如，紫外線照射）及經細 胞毒性化合物（包括羥道諾紅黴素、依託泊苷、太平洋紫 杉醇及胞嘧啶β-D-阿糖呋喃糖苷）治療後細胞之存活。 Pifithrin-a保護小鼠免受致命之全身γ照射，而不增加癌症 發病率。 PARP抑制劑： 在一些實施例中，本發明提供一種藉由向有需要之個體 投與至少一種PARP抑制劑來治療ER、PR或HER2中之至少 一者呈陰性之乳癌的方法。在其他實施例中，本發明提供 一種藉由向有需要之個體投與至少一種PARP抑制劑以及 至少一種本文所述之抗腫瘤劑來治療乳癌的方法。 不欲限於任何特定作用機制，咸信本文所述之化合物由 於調節聚（ADP-核糖）聚合酶（PARP)活性而具有抗癌性質。 此作用機制與PARP抑制劑結合PARP且降低其活性之能力 有關。PARP催化β-於驗酿胺腺嘌吟二核苷酸（NAD+)轉化 成菸鹼醯胺及聚ADP-核糖（PAR)。聚（ADP-核糖）與PARP均 I66146.doc -66 - 201249430 與轉錄調控、細胞增殖、基因組穩定性及致癌作用相關聯 (Bouchard V.J.等人 » Experimental Hematology > 第 31卷， 第 6期，2003 年 6 月，第 446-454 頁（9) ; Herceg Z. ; Wang Z.-Q. Mutation Research/ Fundamental and Molecular Mechanisms of Mutagenesis » 第 477卷，第 1期，2001 年 6 月 2曰，第97-110頁（14))。聚（ADP-核糖）聚合酶l(PARPl)為 DNA單鍵斷裂（SSB)修復中之關鍵分子（de Murcia J等人， 1997, Proc Natl Acad Sci USA 94:7303-7307 ； Schreiber V, Dantzer F, Ame JC, de Murcia G (2006) Nat Rev Mol Cell Biol 7:5 17-528 ; Wang ZQ等人（1997) Genes Dev 11:2347-23 58)。藉由抑制PARP1功能來剔除SSB修復會誘發DNA雙 鏈斷裂（DSB)，DSB可引發具有缺陷性同源定向DSB修復 之癌細胞中的綜合殺傷力（Bryant HE等人（2005) Nature 434:913-917 ; Farmer Η等人（2005) Nature 434:917-921)。 BRCA1及BRCA2充當同源重組機構（HR)之必備組份 (Narod SA, Foulkes WD (2004) Nat Rev Cancer 4:665-676 ； Gudmundsdottir K, Ashworth A (2006) Oncogene 25:5864-5874) 〇 BRCA1或BRCA2缺陷性細胞在藉由基因轉換進行同源重 組（HR)之機制的雙鏈斷裂（DSB)修復中具有缺陷（Farmer Η 等人（2005) Nature 434:917-921 ; Narod SA，Foulkes WD (2004) Nat Rev Cancer 4:665-676 ; Gudmundsdottir K， Ashworth A (2006) Oncogene 25:5864-5874 ; Helleday T等 人（2008) Nat Rev Cancer 8:193-204)。乳癌易感蛋白 166146.doc -67- 201249430 BRCA1或BRCA2中之任一者缺乏都會誘發細胞對聚（ADP-核糖）聚合酶（PARP)活性抑制之深遠敏感性，導致細胞週 期停滯及細胞凋亡。已報導BRCA1及BRCA2在藉由同源重 組（HR)之雙鏈斷裂修復中的關鍵作用為此敏感性之根本原 因，且缺乏 RAD51、RAD54、DSS1、RPA1、NBS1、 ATR、ATM、CHK1、CHK2、FANCD2、FANCA 或 FANCC 會誘發該敏感性（McCabe N.等人，Deficiency in the repair of DNA damage by homologous recombination and sensitivity to poly(ADP-ribose) polymerase inhibition, Cizwcer 2006，第 66 卷，8109-8115) 〇 已提議 PARP1抑制可為一種針對或其他HR路徑組份具有 缺陷之癌症的特定療法（Helleday T等人（2008) Nat Rev Cancer 8:193-204)。三重陰性腫瘤佔全部乳癌之15%且通 常在經由同源重組（HR)之DNA雙鏈斷裂修復中具有缺陷， 諸如 BRCA1功能障礙（Rottenberg S 等人，Proc Natl Acad Sci U S Α· 2008年 11月 4 日；105(44):17079-84)。 抑制PARP分子之活性包括降低此等分子之活性。術語" 抑制"及其語法上之變形（諸如，"抑制的"）不需要PARP活 性完全降低》在一些實施例中，該降低為在缺乏抑制作用 之情況下，例如在缺乏抑制劑（諸如，本發明之硝基苯曱 醯胺化合物）之情況下分子活性之至少約50%、至少約 75%、至少約90%或至少約95%。在一些實施例中，抑制 係指可觀測或可量測之活性降低。在一些治療情況下，抑 制足以在所治療之病狀中產生治療及/或預防益處。短語 166146.doc • 68 · 201249430 "不抑制”及其語法上之變形無需完全缺乏對活性之作用。 舉例而言，其係指在抑制劑（諸如，本發明之硝基苯曱醯 胺化合物）存在下PARP活性降低少於約20%、少於約10%且 較佳少於約5 %之情況。 聚（ADP-核糖）聚合酶（PARP)為DNA修復中之必需酶，因 此在化學療法抗性中起潛在作用。潛在認為靶向PARP可 中斷DNA修復，從而增強癌細胞中紫杉烷介導、抗代謝物 介導、拓撲異構酶抑制劑介導及生長因子受體抑制劑（例 如，IGF1R抑制劑）介導及/或鉑錯合物介導之DNA複製及/ 或修復。PARP抑制劑亦可具有對抗BRCA1及BRCA2功能 削弱之乳癌或具有其他DNA修復路徑缺陷之彼等患者的高 活性。ER、PR、HER2呈陰性之原發性乳癌證明PARP之上 調。此乳癌亞型具有升高9倍之進行BRCA-1突變之危險且 可能會具有範可尼貧血DNA修復路徑（Fanconi anemia DNA repair pathway)中之其他缺陷。 4-碘-3-硝基苯曱醯胺（BA)為一種作用於腫瘤細胞而對正 常細胞不發揮毒性作用之小分子。咸信B A係藉由抑制 PARP來實現其抗贅生性作用。B A極具親脂性且快速及廣 泛分布至組織（包括腦及腦脊髓液（CSF))中。其具有對抗活 體外廣泛範圍之癌細胞、包括對抗抗藥性細胞株之活性。 熟習此項技術者將認識到BA可以任何醫藥學上可接受之 形式（例如，以醫藥學上可接受之鹽、溶劑合物或錯合物 形式）投與。此外，因為B A在溶液中能夠互變，所以術語 BA(或同義詞4-碘-3-硝基苯甲醯胺）意欲包含BA之互變異 166146.doc -69- 201249430 構形式以及鹽、溶劑合物或錯合物。在一些實施例中， BA可與環糊精（諸如，羥丙基p環糊精）組合投與。然而， 熟習此項技術者將認識到其他活性及惰性劑可與組 a，且除非另外說明，否則敍述ba包括其所有醫藥學上 可接受之形式。 基底樣乳癌具有轉移至腦之高度傾向；且已知BA穿越 血腦障壁。雖然不欲受任何特定理論束缚，但咸信BA藉 由抑制PARP功能來實現其抗贅生性作用。在一些實施例 中，BA可用於治療三重陰性轉移性乳房腫瘤。在一些實 施例中’ BA可用於治療其中ER、Pr及Her2中之至少一者 呈陰性之乳房腫瘤。在一些實施例中，B A可用於治療其 中ER、PR及Her2中之至少兩者呈陰性（例如，ERs陰性， PR呈陰性且Her-2呈陽性；或呈陽性，pR呈陰性且Her_ 2呈陰性；或ER呈陰性，pR呈陽性且1^1<_2呈陰性）之乳房 Μ瘤。 在一些實施例中，ΒΑ可與抗腫瘤劑組合用於治療乳房 腫瘤。在一些實施例中，抗腫瘤劑為抗腫瘤烷基化劑、抗 腫瘤抗代謝物、抗腫瘤抗生素、源自植物之抗腫瘤劑、抗 腫瘤鉑錯合物、抗腫瘤喜樹鹼衍生物、抗腫瘤酪胺酸激酶 抑制劑、單株抗體、干擾素、生物反應調節劑、激素抗腫 瘤劑、抗腫瘤病毒劑、血管生成抑制劑、分化劑或顯示抗 腫瘤活性之其他藥劑或其醫藥學上可接受之鹽。在其他實 施例中，ΒΑ可與抗代謝物（諸如，吉西他賓）及鉑錯合物 (諸如，卡銘）組合用於治療乳房腫瘤。在其他實施例中， 166146.doc •70· 201249430 BA可與紫杉烧（諸如，太单 双十羊紫杉醇）及鉑錯合物（諸如， 卡翻）組合用於治療轉移性乳房腫瘤。在其他實施例中， BA可與抗代謝物（諸如，吉西他賓）及始錯合物（諸如，卡 翻）.，且δ用於療乳房腫瘤。在其他實施例中，b a可與紫 杉烷（諸如，太平洋紫杉醇）及紐錯合物（諸如，卡鉑）組合 用於治療轉移性乳房腫瘤^在其他實施例巾，BA可與抗 血官生成劑組合用於治療乳房腫瘤。在其他實施例中’ BA可與拓撲異構酶抑制劑（諸如，伊立替康或拓朴替康）組 合用於治療乳房腫瘤。在其他實施例中，BA可與激素療 法組合用於治療乳房腫瘤。在其他實施例中，BA可與生 長因子受體抑制劑（包括（但不限於）EGFR* IGF1R抑制劑） 組合用於治療乳房腫瘤。在一些實施例中，乳癌為轉移性 二重陰性乳癌。在一些實施例中，乳癌的ER、卩尺或Her_2 中之至少一者呈陰性。在一些實施例中，乳癌的ER、pR 或Her-2中之至少兩種者呈陰性。在其他實施例中，乳癌 的ER、PR或Her-2中之至少一者呈陰性；且er、PR或Her-2中之至少一者呈陽性。在一些實施例中，乳癌的、PR 及Her2中之至少兩者呈陰性，例如er呈陰性，pr呈陰性 且Her-2呈陽性；或ER呈陽性，PR呈陰性且Her-2呈陰性； 或ER呈陰性，PR呈陽性且Her-2呈陰性。 PARP抑制劑之劑量可視患者年齡、身高、體重、整體 健康等而變化。在一些實施例中，BA之劑量在約1 mg/kg 至約 100 mg/kg、約 2 mg/kg至約 50 mg/kg、約 2 mg/kg、約 4 mg/kg、約 6 mg/kg、約 8 mg/kg、約 10 mg/kg、約 12 166146.doc •71- 201249430 mg/kg、約 15 mg/kg、約 20 mg/kg、約 25 mg/kg、約 30 mg/kg、約 35 mg/kg、約 40 mg/kg、約 5〇 mg/kg、約 6〇 mg/kg、約 75 mg/kg、約 9〇 mg/kg、約 i 至約 25 mg/kg、約 2 至約70 mg/kg、約4至約loo mg/kg、約4至約25 mg/kg、約 4至約 20 mg/kg、約 50 至約 1〇〇 mg/kg 或約 25 至約 75 mg/kg 之範圍内。BA可以靜脈内方式（例如）藉由靜脈内輸液經約 10至約300分鐘、約30至約180分鐘、約45至約120分鐘或 約60分鐘（亦即，約1小時）投與。或者，在一些實施例中， BA可經口投與。在此背景下，術語”約"具有其關於約之正 常含義。在一些實施例中，約意謂± 1 〇%或±5%。 BA(4-峨-3-确基苯甲酿胺）之合成描述於以全文引用的方 式併入本文中之美國專利第5,464,871號中。BA可以10 mg/mL之濃度製備且可以便利之形式包裝，例如包裝在1〇 mL小瓶中。 BA代謝物： 如本文所用之，，BA"意謂4-碘-3-硝基苯曱醯胺；"BNO"意 謂4-碘-3-亞硝基苯甲醯胺；"BNHOH"意謂4·碘_3_羥基胺 基苯甲酿胺。 可用於本發明之前驅體化合物具有式（la) 0

II c—nh2 da)

166146.doc -72- 201249430 其中取代基R〗、R2、I、I及獨立地選自由以下各某 組成之群：氫、羥基、胺基、硝基、碘基、（C^Cd烷基、 (CrC6)烷氧基、（C3_C7)環烷基及苯基，其中五個基 P 一

取代基始終為蛾基’及其醫藥學上可接受之鹽'溶劑合 物、異構體、互變異構體、代謝物、類似物或前藥。、 R2、R3、K及R5亦可為諸如氣基、氟基或溴基之_基取代 基。 較佳式la之前驅體化合物為：

4-碘-3-硝基笨甲醢胺 (BA) 可用於本發明之一些代謝物為式（Ila):

其中.（1)取代基R]、R2、R3、R4及Rs中之至少一者始終 166146.doc •73- 201249430 為含硫取代基’且剩餘取代基R〗、R2、R3、{^及R5獨立地 選自由以下各基組成之群：氫、羥基、胺基、硝基、碘 基、漠基、氟基、氣基、（CVC6)烷基、（CVC6)烷氧基' (CVC7)環烷基及苯基，其中五個取代基R丨、R2、R3、1及 Rs中之至少兩者始終為氮；或（2)取代基h、R2、R3、尺4及 Rs中之至少一者不為含硫取代基且五個取代基Ri、R2、 R·3、R·4及Rs中之至少一者始終為碘基，且其中該碘基始終 與為硝基、亞硝基、羥基胺基、經基或胺基之Ri、、 R·3、R·4或R_5基團相鄰；及其醫藥學上可接受之鹽、溶劑合 物、異構體、互變異構體、代謝物、類似物或前藥。在一 些實施例中’（2)之化合物使得碘基始終與為亞硝基、經基 胺基、羥基或胺基之R丨、R2、Rs、心或!^基團相鄰。在一 些實施例中，（2)之化合物使得碘基始終與為亞硝基、羥基 胺基或胺基之Ri、R·2、R3、R_4或Rs基團相鄰。 以下組合物為較佳代謝物化合物，各由以下化學式表 示。

166146.doc -74· 201249430

HsN

II

MS213 r6係選自由以下各基組成之群：氫、烷基(q-c,)、 烷氧基(c^-cg、異喹啉酮基、吲哚基、噻。坐1 基8、 噁唑基、4二唑基、噻吩基或苯基。

h2n. /〇 H2N. /〇 ,ο MS263 OH \ ’ \n [ [ 1 MS276 MS278

OH 166146.doc 75- 201249430

雖然不限於任一特定機制，但下文提供經由硝基還原酶 或麩胱甘肽共軛機制之MS292代謝的一實例： 硝基還原酶機制

166146.doc -76- 201249430

BA麩胱甘肽共軛及代謝如下：

分子量:342·33 本發明提供上述硝基苯曱醯胺代謝物化合物用於治療乳 癌（包括ER、PR及/或HER2中之一或多者呈陰性之乳癌）之 用途。 已報導硝基苯甲醯胺代謝物化合物對惡性癌細胞而非對 非惡性癌細胞具有選擇性細胞毒性。參見Rice等人，Proc. 166146.doc •77- 201249430

Natl. Acad. Sci. USA 89:7703-7707 (1992)，全文併入本文 中。在一實施例中，本發明之方法中所用之硝基苯甲醯胺 代謝物化合物可顯示對腫瘤細胞比對非腫瘤細胞更具選擇 性之毒性。 在一些實施例中，本發明提供一種藉由向有需要之個體 才又與至少一種PARP抑制劑來治療ER、pR或Her2中之至少 一者呈陰性之乳癌的方法。在其他實施例中，本發明提供 一種藉由向有需要之個體投與至少一種pARp抑制劑及至 少一種抗腫瘤劑來治療乳癌的方法。在一些實施例中，向 需要該治療之患者投與本發明之代謝物以及使用至少一種 抗代謝物（例如他賓之一，諸如吉西他賓）及至少一種鉑錯 合物（例如，卡鉑、順鉑等）之化學療法。在其他實施例 中’因此向需要該治療之患者投與本發明之代謝物以及除 至少一種鉑錯合物（例如，卡鉑、順鉑等）外使用至少一種 紫杉院（例如’太平洋紫杉醇或多烯紫杉醇）之化學療法。 該等代謝物之劑量範圍可在約〇 〇〇〇4至約〇 5 mmol/kg(每 公斤患者體重毫莫耳代謝物）之範圍内，該劑量以莫耳計 對應於約〇.1至約100 mg/kgiBA的範圍。代謝物之其他有 效劑量範圍為 0.0024-0.5 mmol/kg及 0.0048-0.25 mmol/kg。 該專劑量可母天、每隔一天、每週兩次、每週、雙週 '每 月或其他合適之時程投與。關於BA之代謝物，可採用基 本上相同之投藥模式，例如經口、靜脈内、腹膜内等。 紫杉烷：

紫杉炫•為來源於太平洋紫杉樹短葉紫杉（raxMS 166146.doc • 78 - 201249430 6reW/〇/ia)之枝條、針葉及樹皮的藥物。詳言之，太平洋 紫杉醇可經由已知之合成方法自1〇_脫乙醢基巴卡丁（1〇_ deacetylbaccatin)獲得。紫杉烷（諸如，太平洋紫杉醇及其 衍生物多烯紫杉醇）已證明在多種腫瘤類型中之抗腫瘤活 性。紫杉烷藉由使微管結構過度穩定來干擾微管生長之正 常功能’從而破壞細胞以正常方式使用其細胞骨架之能 力。紫杉烷特異性結合作為微管之基本組份的微管蛋白之 β次單元。所得紫杉烷/微管蛋白複合物不可拆開，此導致 異常細胞功能及最終細胞死亡。太平洋紫杉醇藉由結合細 胞凋亡抑制蛋白（稱為Bcl-2 ’ Β細胞白血病2)來誘發癌細胞 中漸進式細胞死亡（細胞凋亡）’從而防止Bci_2抑制細胞凋 亡。因此’已證明太平洋紫杉醇可有效治療各種癌症，此 係因為其藉由中斷細胞分裂期間之正常細胞骨架重排來下 調細胞分裂且其經由抗Bcl-2機制誘發細胞凋亡。 太平洋备' 杉醇之劑量可視身南、體重、身體條件、艘瘤 尺寸及進展狀況等而變化。在一些實施例中，太平洋紫杉 醇之劑量將在約100至約1500 mg/m2、約200至約1250 mg/m2、約 5〇〇 至約 1000 mg/m2、約 7〇〇 至 8〇〇 mg/m2 或約 750 mg/m2之太平洋紫杉醇的範圍内，其經長達約1〇小 時、長達約8小時或長達約6小時之時間投與在此背景下 術語"約"指示約的正常用法；且在一些實施例中，其指示 ±10%或±5%之容許度。 紫杉烷之實例包括（但不限於）多烯紫杉醇、紫杉醇 (palitaxel)及阿布昔恩。 166146.doc -79· 201249430 組合療法 在本發明之某些實施例中’本發明之方法進一步包含藉 由向個體投與具有或不具有至少—種抗腫瘤劑之pARp抑 制劑以及另一抗癌療法（包括（但$限於）外科手術、放射療 法（例如，X射線）、基因療法、免疫療法、dna療法、輔 助療法、新輔助療法、病毒療法、RNA療法或奈米療法) 來治療乳癌。 在組合療法進-步包含非藥物治療之情況下，非藥物治 療可在任何合適之時間進行，只要自治療劑與非藥物治療 之組合的共同作用獲得有益效果即可。舉例而言，在適當 狀況下，當非藥物治療暫時自治療劑投藥移開相當長時間 時仍可獲得有益效I可同時、連續或組合向患者投與接 合物及另一藥理學活性劑。應瞭解當使用本發明之組合 時，本發明之化合物及另一藥理學活性劑可處於相同醫藥 學上可接受之載劑中且因此同時投與。其可處於單獨醫藥 載劑中，諸如習知口服劑型，其可同時服用。術語„組合" 進一步指化合物以單獨劑型提供且連續投與的狀況。 放射療法 放射療法（或放射性療法）為醫學上使用電離輻射作為癌 症治療之部分以控制惡性細胞。放射性療法可用於治癒性 或輔助性癌症治療。其用作舒緩性治療（其中治癒係不可 月&的且目標係針對局部疾病控制或症狀減輕）或治療性治 療（其中療法具有存活之益處且其可為洽愈的）。放射性療 法用於治療惡性腫瘤且可用作主要療法。通常亦將放射性 166146.doc •80- 201249430 療法與外科手術'化學療法、激素療法或該三種療法中之 某些混合組合。大部分常見癌症類型可以某種方式用放射 性療法治療》準確治療意圖（治癒、輔助、新輔助、治療 或舒緩）將視腫瘤類型、位置及病期以及患者之整體健康 而定。 放射療法通常應用於癌腫瘤。若引流淋巴結臨床上或放 射學上涉及腫瘤’或若認為存在亞臨床惡性擴散之危險， 則放射區域亦可包括引流淋巴結。需要包括腫瘤周圍之正 常組織邊緣以考慮到每天的布置及内部腫瘤運動之不確定 性。 放射療法藉由破壞細胞DNA來起作用。破壞係由直接或 間接使組成DNA鏈之原子離子化之光子、電子、質子、中 子或離子束引起。間接離子化由於水離子化而發生，形成 自由基，特別是羥基，接著其破壞DNA。在最常見形式之 放射療法中，大部分放射效應係經由自由基。因為細胞具 有修復DNA損傷之機制，所以使DNA在雙鏈上斷裂經證明 係改變細胞特徵之最重要技術。因為癌細胞一般未分化且 類似幹細胞，所以其複製更多，且與最健康之分化細胞相 比，具有削弱之修復亞致死損傷之能力。腦損傷係經由 細胞分裂遺傳，累積對癌細胞之損傷，引起其死亡或更緩 慢地複製》質子放射性療法藉由發送具有不同動能之質子 以在腫瘤處準確停止來起作用。 7射線亦用以治療—些類型之癌纟，包括乳癌。在稱為γ 刀外科手術之程序中，多束集中γ射線對準生長以殺死癌 166146.doc 201249430 細胞。該等γ射線束自不同角度瞄準以將放射線集中於生 長上’而使得對周圍組織之損傷最小。 在些實施例中，γ照射用以治療三重陰性乳癌且例示 於實例9中。 基因療法藥劑 基因療法藥劑將基因複本插入一組特定患者細胞中，且 可靶向癌細胞與非癌細胞。基因療法之目標可為用功能性 土因置換改變之基因、刺激患者對癌症之免疫反應、使癌 、·田胞對化學療法更敏感、將"自殺"基因置放於癌細胞中或 s生成《可使用病毒、脂質體或其他載劑或載體將 基因傳遞至標乾細胞。此可藉由將基因-載劑組合物直接 射至患者中或離體（其中受感染細胞引回至患者中）來進 行。該等組合物適用於本發明中。 辅助療法 輔助療法為在主要治療後給與以增加治錢會之治療。 =^療法可包括化學療法、放射療法、激素療法或生物學 因為辅助療法之主要目的係殺死可能擴散之任何癌細 ^所以/〇療通常為全身性的（使用穿過血流之物質，達 影響滿身癌細胞）。針對乳癌之輔助療法包含單 組合之化學療m素療法。 ’ :助化學療法係使用藥物殺死癌細胞。研究已展示使用 化子療法作為早期乳癌之輔助療法有助於防止初始癌症恢 復辅助化學療法通常為抗癌藥物之組合，已展示其比單 I66146.doc •82· 201249430 一抗癌藥物有效。 輔助激素療法使癌細胞失去—些乳癌細 =激素雌激素。輔助激素療法最常為用藥物 = 2研究已展示當他莫昔芬用作早期乳癌之輔助療：Γ /、有助於防止初始癌症恢復且亦有助於 另， 乳房中發展。 啊尼症在另一 印巢為更年期之前雌激素之主要來源。對於患 更年期前之女性而言’輔助激素療法可包含他莫昔芬以使 癌細胞失去雌激素。抑制_巢產㈣激素之藥物在研究之 中。或者，可執行外科手術以移除卵巢。 放射療法有時用作局部輔助治療。當在乳房切除術之前 或之後給與放射療法時，認為其為輔助治療。該治療意欲 破壞已擴散至附近身體部分(諸如，胸壁或淋巴結)之乳癌 細胞。當放射療法跟隨乳房保留外科手術時，放射療法為 主要療法之部分而非輔助療法。 新辅助療法 新輔助療法係指在主要治療之前給與之治療。新輔助療 法之實例包括化學療法、放射療法及激素療法。在治療乳 癌夺新輔助療法使知患有大乳癌之患者經受乳房保留外 科手術。 溶蘑苈##法 針對癌症之病毒療法利用一種稱為溶瘤病毒之病毒類 型。溶瘤病毒為一種能夠感染且溶解癌細胞但使正常細胞 不受傷害之病毒’此使得其潛在可用於癌症療法中。溶瘤 166146.doc •83· 201249430 病毒之複製不僅促進腫痼纟的 腥屑細胞毀壞，且亦在腫瘤位點處產 生劑量擴增。其亦可右查# m 充备抗癌基因之載體，使該等抗癌基 因特定傳遞至腫瘤位點。 存在兩種用於產生腫瘤選擇性之主要方法：料及非轉 導乾向導乾向包含修飾病毒勒蛋白之特異性因此增 加進入標乾細胞中，同時減少進人非標乾細胞。非轉導乾 向包含改變病毒基因組’因此其只可在癌細胞中複製。此 可藉由以下來進行.藉由轉錄乾向，其中在腫瘤特異性啟 動子之控制下置放病毒複製必需之基因；或藉由減毒作 用，其包含將消除在癌細胞中而非在正常細胞中不必要之 功能的缺失引入病毒基因組中。亦存在其他稍微不出名之 方法® 等人⑽叫對小鼠中前列腺癌症使用CV706(一種前 列腺特異性腺病毒)以及放射性療法。組合治療引起細胞 死亡協同增加，以及病毒裂解量（burst size)顯著增加（自各 細胞溶解作用釋放之病毒粒子數目）。 ONYX-015已與化學療法一起經受試驗。雖然組合治療 產生比任一單獨治療大的反應，但結果尚未完全明確。 ONYX-O15展示有望與放射性療法結合β 靜脈内投與之病毒劑可尤其有效對抗通常尤其難以治療 之轉移性癌症。然而，血源性病毒可由抗體去活化且例如 藉由庫柏法細胞（Kupffer cell)(肝臟中極具活性之呑噬細 胞，其負責腺病毒清除）自血流快速清除。避開免疫系統 直至腫瘤被摧毀可為溶瘤病毒療法成功之最大障礙。迄今 I66146.doc -84- 201249430 為止，未有完全令人滿意之用以避開免疫系統的技術。溶 瘤病毒與習知癌症療法結合展示最有希望，此係因為組合 療法協同作用而無明顯負作用。 溶瘤病毒之特異性及靈活性意謂其具有治療廣泛範圍癌 症（包括乳癌）而副作用最小的潛能。溶瘤病毒具有解決選 擇性殺死癌細胞之問題的潛能。 奈米療法 奈米尺寸粒子具有個別分子或塊狀固體不具有之新穎光 學、電子學及結構性質。當與腫瘤靶向部分（諸如，腫瘤 特異性配位體或單株抗體）相連時，此等奈米粒子可用於 以高親和力及精確度乾向癌症特異性受體、腫瘤抗原（生 物標記）及腫瘤維管結構。關於癌症奈米療法之闡述及製 造過程揭示於專利US7179484及文章Μ. N. Khalid，P. Simard, D. Hoarau, A. Dragomir, J. Leroux, Long Circulating Poly(Ethylene Glycol)Decorated Lipid Nanocapsules Deliver Docetaxel to Solid Tumors, P/mrmacew…a/ 23(4)，2006(以全文引用的方式 併入本文中）中。 RNA療法 包括（但不限於）siRNA、shRNA、microRNA之RNA可用 以調節基因表現及治療癌症。雙鏈寡核苷酸係由兩種不同 募核苷酸序列組裝而形成’其中一條鏈之寡核苷酸序列與 第二條鏈之寡核苷酸序列互補；該等雙鏈寡核苷酸一般自 兩個獨立寡核苷酸（例如，siRNA)組裝或自本身摺疊之單 166146.doc •85- 201249430 刀子組裝’從而形成雙鍵結構（例如，shRNA或短髮夾 RNA)。此項技術中已知之此等雙鏈寡核苷酸均具有共同 特徵’該特徵在於雙鏈體之各鏈具有不同核苷酸序列，其 中僅一個核苷酸序列區（引導序列或反義序列）與標靶核酸 序列互補且另一鏈（有義序列）包含與標靶核酸序列同源之 核苷酸序列。

MicroRNA(miRNA)為長約21-23個核苷酸之單鏈RNA分 子’其調控基因表現。miRNA係由自DNA轉錄但未轉譯成 蛋白質之基因編碼（未編碼RNA);反之，其由稱為前 miRNA之初級轉錄物力〇工成稱為預之短莖環結構且 最終加工成功能性miRNA。成熟miRNA分子與一或多種訊 息RNA(mRNA)分子部分互補，且其主要功能為下調基因 表現。 某些RNA抑制劑可用以抑制與癌症表型有關之訊息 RNA( mRNA”）的表現或轉譯。適用於本文中之該等藥劑 之實例包括（但不限於）短干擾核糖核酸（”siRNA")、核糖酶 及反義寡核苷酸。適用於本文中之RNA抑制劑之特定實例 包括（但不限於）Cand5、Sirna-027、福米韋生（f〇mivirsen) 及血管酶（angiozyme) 小分子_抑制劑 某些小分子治療劑能夠乾向某些細胞受體（諸如，表皮 生長因子受體（"EGFR")或血管内皮生長因子受體 ("VEGFR"))之酪胺酸激酶酶活性或下游信號轉導信號。小 分子治療劑之該靶向可產生抗癌效應。適用於本文中之該 166l46.doc •86· 201249430 等樂劑之實例包括(但不限於)伊馬替尼、吉非替尼、埃羅 替尼拉帕替尼、卡奈替尼（canertinib)、ZD6474、索拉非 尼（bay 43-9006)、ERB_569及其類似物及衍生物。 抗轉移性劑 癌細胞自初始腫瘤位點擴散至身體周圍其他位置之過程 稱為癌轉移。某些藥劑具有抗轉移性，其經設計以抑制癌 細胞擴散。適用於本文中之該等藥劑之實例包括（但不限 於）馬立馬斯他（marimastat)、貝伐單抗、曲妥珠單抗、利 妥昔單抗、埃羅替尼、MMI_166、GRN163L、獵殺肽 (hunter-killer peptide)、金屬蛋白酶之組織抑制劑 (TIMP)、其類似物、衍生物及變異體。 化學預防劑 某些藥劑可用於防止初始癌症發生，或防止復發或轉 移。投與該等化學預防劑以及本發明之依氟鳥胺酸_ NSAID接合物（eflornithine-NSAID conjugate)可用以治療與 防止癌症復發。適用於本文中之化學預防劑之實例包括 (但不限於）他莫昔芬、雷洛昔芬、替勃龍⑴b〇1〇ne)、雙膦 酸鹽（bisphosphonate)、伊班膦酸鹽（ibandr〇nate)、雌激素 受體調節劑、芳香酶抑制劑（來曲唑、安美達錠）、促黃體 生成釋放激素促效劑、戈舍瑞林、維生素A、視黃醛 (retinal)、視黃酸、芬維A胺（fenretinide)、9·順式類視色 素酸、13 -順式-類視色素酸、全反式_視黃酸、異維甲酸、 維曱酸（tretinoid)、維生素B6、維生素B12、維生素c、維 生素D、維生素E、環加氧酶抑制劑、非類固醇消炎藥 166146.doc •87· 201249430 (NSAID)、阿司匹林（aspirin)、布洛芬（ibuprofen)、塞内昔 布（celecoxib)、多紛（polyphenol)、多盼E、綠茶提取物、 葉酸、葡糖二酸、干擾素-α、茴香腦二硫雜環戊烯硫酮 (anethole dithiolethione)、鋅、》比哆醇、非那雄安 (finasteride)、多沙 〇坐嗪（doxazosin)、砸、0弓丨0朵-3-曱醇、α-二氟曱基鳥胺酸、類胡蘿蔔素、β·胡蘿蔔素、番茄紅素、 抗氧化劑、輔酶Q1 〇、類黃酮、槲皮酮、薑黃素、兒茶 素、表沒食子兒余素沒食子酸醋（epigaii〇eatechin gallate)、N_乙醯半胱胺酸、吲哚_3_甲醇、肌醇六破酸、 異黃酮、葡萄糖酸、迷迭香、大豆、鋸棕櫚及鈣。適用於 本發明十之化學預防劑之另一實例為癌症疫苗。此等可經 由用疫苗接種過程靶向之癌細胞類型之所有或部分使患者 免疫來建立。 臨床功效： 乳癌之分期： 〇期用以描述非侵襲性乳癌，諸如DCIS及LCIS。在〇 期，無證據表明癌細胞或非癌異常細胞在其開始之乳房部 为中爆發’或傳至或侵入相鄰正常組織e I期描述侵襲性乳癌（癌細胞突破至或侵入相鄰正常組 織），其中腫瘤達至2公分，且未涉及淋巴結。 II期分成稱為ΠΑ及πβ之亞類。ΠΑ期描述侵襲性乳癌， 其中無腫瘤可在乳房中發現，但在腋淋巴結（臂下淋巴結） 中發現癌細胞’或量測腫瘤為2公分或更小且已擴散至腋 淋巴結，或腫瘤大於2公分但不超過5公分且尚未擴散至胺 166146.doc •88· 201249430 淋巴結。ΠΒ期描述侵襲性乳癌，其中：腫瘤大於2公分， 但不超過5公分且已擴散至腋淋巴結，或腫瘤大於5公分， 但尚未擴散至腋淋巴結。 期分成稱為ΙΙΙΑ、ΙΙΙΒ及IIIC之亞類。ΙΙΙΑ期描述在乳 房未發現任何腫瘤之侵襲性乳癌。在凝塊在一起或黏住其 他結構之腋淋巴結中發現癌症，或癌症可能已擴散至接近 胸骨之淋巴結，或腫瘤為5公分或更小且已擴散至凝塊在 一起或黏住其他結構之腋淋巴結，或腫瘤大於5公分且已 擴散至凝塊在一起或黏住其他結構之腋淋巴結。ΠΙΒ期描 述其中腫瘤可為任何尺寸且已擴散至胸壁及/或乳房皮膚 且可能已擴散至凝塊在一起或黏住其他結構之腋淋巴結或 癌症可能已擴散至接近胸骨之淋巴結的侵襲性乳癌。Inc 期描述侵襲性乳癌，其中在乳房中可能無癌症徵象，或若 存在腫瘤，則其可為任何尺寸且可能已擴散至胸壁及/或 乳房皮膚，且癌症已擴散至高於或低於鎖骨之淋巴結，且 癌症可能已擴散至膜淋巴結或接近胸骨之淋巴結β 臨床功效可藉由此項技術中已知之任何方法來量測。在 一些實施例中’本文所述之治療性治療之臨床功效可藉由 量測臨床受益率（CBR)來確定。藉由在療法結束後至少6個 月之時間點，測定症狀完全緩解（CR)之患者、症狀部分緩 解（PR)患者數目及疾病穩定（SD)患者數目的百分比總和， 來量測臨床受益率。此式之簡寫為CBr=cr+PR+SD26個 月。對於吉西他賓與卡鉑之組合療法而言，（：8尺為45%。 因此’抗代謝物 '鉑錯合物及PARP抑制劑之三組合療法 166146.doc -89- 201249430 的CBR(例如，吉西他賓、卡鉑及BA; CBRgcb)可與吉西他 賓與卡鉑之雙組合療法的CBR(CBRgc)相比。在一些實施 例中，CBRgcb為至少約60〇/〇。在一些實施例中，CBR為至 少約30%、至少約40%或至少約5〇%。對於太平洋紫杉醇 與卡鉑之組合療法而言，CBR為45%。因此，紫杉烷、鉑 錯合物及PARP抑制劑之三組合療法的CBR(例如，太平洋 紫杉醇、卡鉑及BA ; CBRgcb)可與太平洋紫杉醇與卡鉑之 雙組合療法的CBR(CBRgc)相比。在一些實施例中， 匸8尺(3(：8為至少約60%。 在一些實施例中，CBR為至少約30%、至少約4〇%或至 少約50%。在一些實施例中，治療效果包括乳房腫瘤尺寸 減小、轉移減少、症狀完全緩解、症狀部分緩解、疾病穩 疋或病理完全反應。 新輔助療法目前廣泛用於治療局部發展或潛在可手術之 大乳癌。隨機試驗已證明新輔助化學療法減少乳房切除術 之需要（Powles等人，1995 ; Fisher等人，1998),其總存活 率類似於輔助化學療法（Fisher等人，1998)。在化學療法 後外科手術時未獲得腫瘤之殘餘組織學證據（亦即，病理 完全反應（PCR))的女性具有顯著改良之存活期（B〇nad〇nna 等人，1998 ; Fisher等人，1998 ; Kuerer等人，1999)，且 pCR常用作治療功效之早期替代標記物。然而對於將乳 房腫瘤對新輔助化學療法之病理反應分級無標準方法，且 已提出大量不同分類系統（Chevallier等人，1993 ; Satal〇ff 等人，1995 ; Fisher等人，1997 ; Honkoop等人，1998 ; 166146.doc •90· 201249430

Kuerer等人’ 1998 ; Ogston等人，2003)。大部分但非全部 此等分級方案已包括pCR之定義中在無侵襲性疾病的情況 下無任何種類之殘餘疾病與殘餘乳腺管原位癌（DCIS)。 在本文揭示之一些實施例中，該等方法包括預先確定癌 症可藉由PARP調節劑治療.。該等方法中之一些包含確定 患者之乳癌樣品中PARP含量，判定樣品中PARP表現程度 是否大於預定值，且若PARP表現大於該預定值，則用紫 杉烷（例如’太平洋紫杉醇）、鉑錯合物（例如，卡鉑）及 PARP抑制劑（諸如，BA)之組合治療患者。在其他實施例 中，該等方法包含確定患者之乳癌樣品中PARP含量，判 定樣品中PARP表現程度是否大於預定值，且若parjp表現 大於該預定值’則用PARP抑制劑（諸如，BA)治療患者。 在其他實施例中’該等方法包括預先確定癌症可藉由 PARP調節劑治療。該等方法中之一些包含確定患者之乳 癌樣品中PARP含量，判定樣品中PARP表現程度是否大於 預定值’且若PARP表現大於該預定值，則用抗代謝物（例 如’吉西他賓）、鉑錯合物（例如，卡鉑）及PARP抑制劑（諸 如，BA)之組合治療患者。 因為腫瘤細胞已喪失修復損傷DNA之特定機制，所以遺 傳BRCA1或BRCA2基因瑕庇之女性中會出現乳房腫瘤。 BRCA1及BRCA2對於藉由同源重組修復DNA雙鏈斷裂而言 為重要的’且此等基因之突變使人易患上乳癌及其他癌 症。PARP涉及鹼基切除修復（一種DNA單鏈斷裂修復之路 徑）。BRC A1或BRC A2功能障礙使細胞對pARp酶活性之抑 166146.doc 91 201249430 制敏感，導致染色體不穩定、細胞週期停滯及隨後細胞凋 亡(Jones C, Plummer ER. PARP inhibitors and cancer therapy-early results and potential applications. Br J Radiol. 2008年 10月；81 規格號：S2-5 ; Drew Y, Calvert Η. The potential of PARP inhibitors in genetic breast and ovarian cancers. Ann N Y Acad Sci. 2008年 9月；1 138:136-45 ; Farmer H等人，Targeting the DNA repair defect in BRCA mutant cells as a therapeutic strategy. Nature. 2005 年 4 月 14 曰；434(7035):917-21)。 缺乏BRCA基因之患者可具有上調之PARP含量。PARP 上調可為缺陷性DNA修復路徑及未識別之BRCA樣遺傳缺 陷的指示物。評估PARP基因表現及削弱之DNA修復（尤其 缺陷性同源重組DNA修復）可用作腫瘤對PARP抑制劑之敏 感性的指示物。因此，在一些實施例中，乳癌之治療可不 僅藉由測定癌症之HR及/或HER2狀況來增強，且亦可藉由 量測PARP含量，鑑別缺乏BRCA及同源重組DNA修復之患 者中癌症之早期發作來增強。若PARP上調，則可鑑別 PARP抑制劑能治療之缺乏BRCA及同源重組DNA修復之患 者。此外，該等缺乏同源重組DNA修復之患者可用PARP 抑制劑治療。 在一些實施例中，樣品係採集自具有懷疑為癌性之乳房 病變或生長之患者。雖然該樣品可為任何可得生物組織， 但在大多數狀況下，無論藉由微創活組織檢查獲得抑或藉 由治療性外科手術（例如，乳房腫瘤切除術、乳房切除 166146.doc -92- 201249430 術。卩分或改良乳房切除術或根治性乳房切除術、子宮切 除或印巢切除術）獲得，樣品將為所懷疑之乳房病變之一 部分。該樣品亦可包括在治療性外科手術期間提取之一或 多個淋巴結之全部或部分。接著可分析PARP表現。在一 些實施例中，若PARP表現超過預定含量（例如，與正常組 織相比上調）’則可用PARP抑制劑以及抗代謝物及鉑劑治 療患者。在其他實施例中，若PARP表現超過預定含量（例 如，與正常組織相比上調），則可用PARP抑制劑（包括 PARP抑制劑，諸如BA)治療患者。因&，應瞭解雖然本文 所述之實施例係針對三重陰性轉移性乳癌之治療但在一些 貫施例中，乳癌無需具有此等特徵，只要滿足臨限pARp 上調即可。 在一些實施例中，藉由評估PARp表現程度來鑑別同源 重組缺陷性腫瘤。若觀測到PARp上調，則該等腫瘤可用 PARP抑制劑來治療。另__實施例為_種治療同源重組缺 陷性癌症之方法，其包含評估以处表現程度，且若觀測 到過度表現，則用PARP抑制劑治療該癌症。 樣品採集、製備及分離 生物樣品可採集自來自患者之多種來源，包括體液樣品 或組織樣品。所採集到之樣品可為人類正常及腫瘤樣品乳 突待測物（niPple aspirant)。#品可經跟蹤時間段重複採集 自個體（例如，約一天一次 週一次、一月一次、半年 一次或一年一次）。在一段時間期間自個體獲得大量樣品 可用以證實來自初_測之結果及/或鑑別由於（例如）疾病 166146.doc •93· 201249430 進展、藥物治療等而導致之生物模式之改變。 視所採集之樣品類型及/或PARP之分析而定，樣品製備 及分離可包含任何該等程序。僅舉例而言，該等程序包括 濃縮、稀釋、調整PH值、移除高含量多肽(例如，白蛋 白、γ球蛋白及轉鐵蛋白等）、添加防腐劑及校準物、添加 蛋白酶抑制劑、添加變性劑、使樣品脫鹽、濃縮樣品蛋白 質、萃取及純化脂質。 樣品製備亦可分離以非共價錯合物與其他蛋白質（例 如，載體蛋白）結合之分子。此方法可將與特異性載體蛋 (例如白蛋白）結合之彼等分子分離，或使用更通用之 方法，諸如例如使用酸經由蛋白變性自所有載體蛋白釋放 結合分子’接著移除載體蛋白。 自樣品移除不欲蛋白質（例如，高含量、無資訊或不可 偵測之蛋白質）可使用高親和力試劑、高分子量過濾器、 超速離心及/或電透析來實現。高親和力試劑包括選擇性 地結合高含量蛋白質之抗體或其他試劑（例如，適體）。樣 品製備亦可包括離子交換層析、金屬離子親和層析、凝膠 過濾、疏水性層析法、層析聚焦、吸附層析、等電點聚焦 及相關技術。分子量過濾器包括基於尺寸及分子量分離分 子之膜。該等過濾器可進一步採用逆滲透、奈米過滤 (nanofiltration)、超濾及微過濾。 超速離心為一種用於自樣品移除不欲多肽之方法。超速 離心為以約15,000-60,000 rpm離心樣品，同時用光學系統 監測粒子之沈降（或缺乏其）。電透析為一種在離子在電位 166146.doc • 94· 201249430 梯度影響下經由半制自—減輸送至另―溶液之過程中 使用電膜或半透膜的程序。因為用於電透析之膜可具有選 擇性輸送具有正電荷或負電狀離子4棄具有相反電荷 之離子或允許物質基於尺寸及電荷經由半透膜移動的能 力，所以其致使電透析可用於濃縮、移除或分離電解質。 本發明中分離及純化可包括此項技術中已知之任何程 序，諸如毛細管電泳（例如，毛細管中或晶片上）或層析法 (例如，毛細管、管柱或晶片上）。電泳為一種可用於在電 場影響下分離離子分子之方法。電泳可在凝膠、毛細管或 晶片上之微通道中進行。用於電泳之凝膠的實例包括澱 粉、丙烯醯胺、聚氧化乙烯、瓊脂糖或其組合。可藉由交 聯、添加清潔劑或變性劑、固定酶或抗體（親和力電泳）或 受質（酶譜）及併入pH梯度來改質凝膠。用於電泳之毛細管 的實例包括與電喷霧連接之毛細管。 毛細管電泳（CE)較佳用於分離複合親水性分子及帶高電 荷之溶質。CE技術亦可在微型流動晶片上實施。視所用毛 細管及緩衝液類型而定，CE可進一步分為諸如毛細管區帶 電泳（CZE)、毛細管等電聚焦（CIEF)、毛細管等速電泳 (cITP)及毛細管電層析法（CEC)之分離技術。CE技術與電 喷霧電離法結合之實施例包含使用揮發性溶液，例如含有 揮發性酸及/或驗及有機物質（諸如，醇或乙腈）之水性混合 物。 毛細管等速電泳（cITP)為一種分析物以恆定速度穿過毛 細管但根據其各別遷移率而分離的技術。毛細管區帶電泳 166146.doc -95- 201249430 (CZE)(亦稱為無溶液CE(FSCE))係基於物質電泳遷移率之 差異，而電泳遷移率由分子上之電荷及分子在遷移期間遇 到之摩擦阻力（其通常與分子尺寸成正比）決定。毛細管等 電聚焦（CIEF)允許可弱離子化兩性分子藉由電泳以pH梯度 分離。CEC為介於傳統高效液相層析法（HPLC)與CE之間 的混合技術。 本發明中所用之分離及純化技術包括此項技術中已知之 任何層析程序。層析法可基於某些分析物之微分吸附及溶 離或分析物在移動相與固定相之間的分溶。層析法之不同 實例包括（但不限於）液相層析（LC)、氣相層析（GC)、高效 液相層析法（HPLC)等。 鐘別PARP之含量 聚（ADP-核糖）聚合酶（PARP)亦稱為聚（ADP-核糖）合成酶 及聚ADP-核糖基轉移酶。PARP催化單及聚（ADP-核糖）聚 合物之形成，該等單及聚（ADP-核糖）聚合物可附著細胞蛋 白質（以及自身）且藉此改變彼等蛋白質之活性。酶在調控 轉錄、細胞增殖及染色質重塑中起作用（關於評論，參 見：D.D'amours 等人，"Poly (ADP-ribosylation reactions in the regulation of nuclear functions," Biochem. J. 342:249-268 (1999)) ° PARP包含N末端DNA結合域、自體修飾域及C末端催化 域，且各種細胞蛋白與PARP相互作用。N末端DNA結合域 含有兩個鋅指基元。轉錄增強因子-l(TEF-l)、類視色素X 受體a、DNA聚合酶α、X射線修復交叉互補因子- 166146.doc -96- 201249430 l(XRCCl)及PARP自身與PARP在此域中相互作用。自體修 飾域含有BRCT基元（蛋白質-蛋白質相互作用組件之一）。 此基元最初發現於BRCA1(乳癌易感蛋白1)之C末端中且存 在於與DNA修復、重組及細胞週期檢驗點控制相關之各種 蛋白質中。含有POU-同源域之八聚體轉錄因子-l(Oct-l)、 Yin Yang(YY)l及泛素接合酶9(ubc9)可與此BRCT基元在 PARP中相互作用。 PARP基因家族之15個以上成員存在於哺乳動物基因組 中。PARP家族蛋白質及聚（ADP-核糖）糖苷水解酶 (PARG)(其將聚（ADP-核糖）降解為ADP-核糖）可涉及多種細 胞調控功能，包括DNA損傷反應及轉錄調控，且可能會在 許多方面與致癌作用及癌症生物學相關。 已鑑別出若干PARP家族蛋白。已發現端粒酶 (Tankyrase)作為端粒調控因子l(TRF-l)之相互作用蛋白且 涉及端粒調控。穹窿PARP(VPARP)為穹窿複合物中之組 份，其充當核-細胞質轉運體。亦已鑑別出PARP-2、 PARP-3及2,3,7,8-四氣二苯并-對戴奥辛誘導性 PARP(TiPARP)。因此，聚（ADP-核糖）代謝可與多種細胞 調控功能有關。 此基因家族之一成員為PARP-1。PARP-1基因產物高程 度地表現在細胞之核中且視活化之DNA損傷而定。不受任 何理論束缚，咸信PARP-1經由胺基末端DNA結合域與 DNA單鏈或雙鏈斷裂結合。此結合可活化羧基末端催化域 且導致標靶分子上ADP-核糖聚合物的形成。由於中心定 166146.doc •97- 201249430 位之自體修飾域’所以PARP-1自身為聚ADP-核糖基化之 標靶。PARP-1之核糖基化引起PARP-1分子自DNA解離。 結合、核糖基化及解離之整個過程極為快速地發生。此已 表明PARP -1與DNA損傷位點之此瞬間結合會引起dna修 復機構募集或可用以抑制重組足夠長時間以募华修復機 構。 PARP反應之ADP-核糖來源為終驗酿胺腺普二核苷酸 (NAD)。NAD在細胞中自細胞ATP儲存合成，且因此pARp 活性之高程度活化可快速耗盡細胞能量儲存。已證明 PARP活性之誘發可引起與耗盡細胞NAD及ATP池相關聯之 細胞死亡。PARP活性在氧化壓力之許多情況下或發炎期 間受到誘發。舉例而言，在缺血性組織再灌注期間，產生 反應性氧化氛且氧化氣又產生其他反應性氧物質（包括過 氧化氫、過ΐ肖酸鹽及經基自由基）。此等後面物質可直接 損傷DNA且所得損傷誘發PARP活性之活化。通常似乎 PARP活性足夠活化使得細胞能量儲存耗盡且細胞死亡。 咸信類似機制在發炎期間運轉，此時内皮細胞及前發炎細 胞合成氧化氮’氧化氮引起周圍細胞中氧化DNA損傷且隨 後PARP活性活化。咸信由PARP活化引起之細胞死亡為由 缺血再灌注損傷或發炎引起之組織損傷區域中的主要影響 因素。 在一些實施例中，將來自患者之樣品中的pARp含量與 預疋標準樣品相比。來自患者之樣品通常來自患病組織， 諸如癌細胞或組織。標準樣品可來自同一患者或來自不同 166146.doc •98· 201249430 個體。標準樣品通常為正常之未患病樣品。然而，在—些 實施例中，諸如為將疾病分期或評估治療功效，標準樣品 來自患病組織。標準樣品可為來自若干不同個體之樣品的 組合。在一些實施例中，將來自患者之pARp含量與預定 含量相比。此預定含量通常自正常樣品獲得。僅舉例而 言，如本文所述之·'預定PARP含量"可為用以評估可選擇進 行治療之患者、評估對PARP抑制劑治療之反應、評估對 PARP抑制劑與第二治療劑治療之組合的反應及/或針對癌 症、發炎、疼痛及/或相關病狀對患者進行診斷的“奸含 量預疋PARP含量可在患有或未患有癌症之患者群體中 測定。預定PARP含量可為可同等應用於每一患者之單一 數予’或預定PARP含量可根據特定患者亞群而變化。舉 例而言’男性可能具有與女性不同之預定PArP含量；不 吸煙者可能具有與吸煙者不同之預定pARp含量。患者之 年齡、體重及身高可影響個體之預定PARp含量。此外， 預定PARP含量可為針對各患者個別測定之含量。預定 PARP含量可為任何合適之標準。舉例而言，預定pARP含 置了自正°平估患者選擇之同一人或不同人獲得。在一實施 例中，預定PARP含量可自同一患者之先前評估獲得。以 此類方式’可監測患者選擇隨時間之進展。此外，可自另 一人或多個人（例如，選定人群）之評估獲得標準。以此類 方式，可將正評估選擇之人的選擇範圍與合適之其他人 (例如處於與所關注之人類似之情況下的其他人，諸如罹 患類似或相同病狀之彼等人）比較。 166146.doc -99· 201249430 在本發明之一些實施例中，PARP自預定含量之變化為 約〇·5倍、約1.0倍、約h5倍、約2 〇倍約2 5倍约3 〇 倍、約3.5倍、約4·〇倍、約4·5倍或約5.〇倍。在—些實施例 中成倍變化小於約！、小於約5、小於約丨〇、小於約、 j於約30、小於約4〇或小於約5〇。在其他實施例中，與預 疋含量相比，PARP含量之變化超過約i、超過約5、超過 ’力10超過約20、超過約3〇、超過約4〇或超過約5〇。自預 定含里之較佳成倍變化為約〇 5、約丨〇、約〖5、約2 〇、約 2.5 及約 3. 〇。 患者中PARP含量之分析尤其有價值且提供資訊，此係 因為其允許醫師更有效地選擇最佳治療，以及基於pARp 之上調或下調含量來利用更具攻擊性之治療及療法方案。 更具攻擊性之治療或組合治療及方案可用以對抗不良患者 預後及總存活時間。具有此資訊，執業醫生可選擇提供特 疋類^之/。療，諸如用pARP抑制劑治療及/或更具攻擊性 之療法。 在監測患者PARP含量時，在可為數天、數週、數月及 在一些狀況下為數年之時間或其各時間間隔期間，患者體 液樣00 (例如’血清或血漿）可每隔一段時間（如藉由諸如醫 師或臨床醫師之執業醫生判定）採集以測定PARP含量，且 與該過程或治療或疾病期間正常個體中之含量相比較。舉 例而。根據本發明，可每月、每兩月或一個月、兩個月 或二個月時間間隔之組合獲取患者樣品且對其進行監測。 此外’隨時間獲得之患者之PARP含量可便利地彼此進行 166146.doc -100- 201249430 比較，以及與監測期間正常對照之PARP值相比較，從而 提供患者自身之PARP值，作為長期PARP監測之内部或個 人對照。 用於分析PARP之技術 PARP之分析可包括分析PARP基因表現，包括分析 DNA、RNA，分析PARP含量及/或分析PARP活性，包括單 及聚ADP-核糖基化程度。不限制本發明之範疇，此項技 術中已知之許多技術可用於分析PARP且該等技術均在本 發明之範疇内。該等偵測技術之一些實例如下，但此等實 例決不限制可用於本發明之各種偵測技術。 基因表現概況分析：基因表現概況分析方法包括基於聚 核苷酸之雜交分析的方法、基於聚核苷酸測序之多核糖核 苷酸方法、基於多核糖核苷酸及蛋白質組研究之方法》此 項技術中已知用於定量樣品中mRNA表現之最通用方法包 括北方墨點法及原位雜交法（Parker及Barnes, Methods in Molecular Biology 106:247-283 (1999)); RNA酶保護檢定 (Hod, Biotechniques 13:852-854 (1992));及基於PCR之方 法，諸如逆轉錄聚合酶鏈反應（RT-PCR)(Weis等人，Trends in Genetics 8:263-264(1992))。或者，可採用可識別特異 性雙鏈體（包括DNA雙鏈體、RNA雙鏈體及DNA-RNA雜交 雙鏈體或DNA-蛋白質雙鏈體）之抗體》進行基於測序之基 因表現分析的代表性方法包括基因表現系列分析（SAGE)及 藉由大規模平行信號測序（MPSS)、比較基因組雜交 (CGH)、染色質免疫沈澱（ChIP)、單核苷酸多態現象（SNP) 166146.doc -101 - 201249430 及SNP陣列、螢光原位雜交（FISH)、蛋白結合陣列及DNA 微陣列（通常亦稱為基因或基因組晶片、DNA晶片或基因 陣列）、RNA微陣列之基因表現分析。 逆轉錄酶PCR(RT-PCR):最靈敏及最靈活之定量基於 PCR之基因表現概況分析方法之一為RT-PCR，其可用於比 較進行或未進行藥物治療之正常及腫瘤組織中不同樣品群 體中的mRNA含量，以表徵基因表現模式、區分緊密相關 之mRNA且分析RNA結構。 第一步為自標靶樣品分離mRNA。舉例而言，起始物質 可通常為分別自人類腫瘤或腫瘤細胞株及相應正常組織或 細胞株分離之全部RNA。因此，RNA可自多種正常及患病 細胞及組織分離，例如腫瘤，包括乳房腫瘤、肺腫瘤、結 腸直腸腫瘤、前列腺腫瘤、腦腫瘤、肝腫瘤、腎腫瘤、胰 腺腫瘤、脾腫瘤、胸腺腫瘤、睾丸腫瘤、卵巢腫瘤、子宮 腫瘤等或腫瘤細胞株。若mRNA之來源為原發性腫瘤，則 mRNA可（例如）自冷凍或歸檔固定組織（例如，石蠟包埋及 固定（例如，福馬林（formalin)固定）之組織樣品）提取。提 取mRNA之通用方法在此項技術中熟知且揭示於分子生物 學之標準教科書中，包括Ausubel等人，Current Protocols of Molecular Biology，John Wiley and Sons (1997) 〇 詳言之，可根據製造商之說明，使用購自製造商之純化 套組、緩衝裝置及蛋白酶來執行RNA分離。自腫瘤製備之 RNA可（例如）藉由氣化鉋密度梯度離心來分離。因為RNA 不可用作PCR模板，所以藉由RT-PCR進行之基因表現概況 166146.doc •102· 201249430 分析中的第一步為將RNA模板逆轉錄成cDNA，接著在 PCR反應中進行指數式擴增。兩個最常用逆轉錄酶為禽類 成髓細胞性白血病病毒逆轉錄酶（AMV-RT)及莫洛尼鼠白 血病病毒逆轉錄酶（Moloney murine leukemia virus reverse transcriptase，MMLV-RT)。通常視表現概況分析之情況及 目標而定，使用特異性引子、隨機六聚物或寡dT引子，引 發逆轉錄步驟。接著可將所獲得之cDNA用作隨後PCR反 應中之模板。 為使樣品之間變化之誤差及影響最小，通常使用内標執 行RT-PCR。理想内標在不同組織間以恆定程度表現且不 受實驗治療影響。最常用以正規化基因表現模式之RNA為 看家基因甘油醛-3-磷酸-脫氫酶（GAPDH)及β-肌動蛋白之 mRNA。 RT-PCR技術之更近變體為即時定量PCR，其經由雙重標 記致螢光探針來量測PCR產物積聚。即時PCR與其中各標 靶序列之内部競爭者用於正規化之定量競爭性PCR及使用 樣品内所包含之正規化基因或RT-PCR之看家基因的定量 比較性PCR均相容。 螢光顯微鏡術：本發明之一些實施例包括螢光顯微鏡術 以分析PARP。螢光顯微鏡術經由使用具有高化學特異性 之螢光標記之探針（諸如，抗體）能夠鑑別所觀測到之結構 之分子組成。此可藉由將螢光團直接接合至蛋白質且將其 引回至細胞來進行。螢光類似物行為可如同天然蛋白質， 且因此螢光類似物可用以展示細胞中此蛋白質之分布及行 166146.doc -103- 201249430 為。與NMR、紅外光譜分析、圓二色性及其他技術一起， 蛋白質固有螢光衰變及關於螢光各向異性、碰撞淬滅及共 振能量傳遞之其相關觀測為用於蛋白質偵測之技術。天然 螢光蛋白可用作螢光探針。水母維多利亞多管水母 (aequorea victoria)產生一種天然螢光蛋白，稱為綠色螢光 蛋白（GFP)。此等螢光探針與標靶蛋白之融合能夠由螢光 顯微鏡術目測且藉由流式細胞儀定量。 僅舉例而言’一些探針為標記，諸如螢光素及其衍生 物、叛基勞光素、若丹明（rhodamine)及其衍生物、阿托標 記（atto label)、螢光紅及螢光橙（cy3/cy5替代物）、具有長 壽命之鑭系元素錯合物、長波長標記（長達8〇〇 nm)、DY花 青標記及藻膽蛋白（phycobili protein)。僅舉例而言，一些 探針為接合物，諸如異硫氰酸鹽接合物、抗生蛋白鏈菌素 接合物及生物素接合物。僅舉例而言，一些探針為酶受 質，諸如螢光受質及顯色受質。僅舉例而言，一些探針為 螢光染料，諸如FITC(綠色螢光，激發/發射=5〇6/529 nm)、若丹明b(橙色螢光，激發/發射=56〇/584 及尼羅 藍A(紅色螢光，激發/發射=636/686 。螢光奈米粒子可 用於各種類型之免疫檢定。螢光奈米粒子係基於不同材 料’諸如聚丙烯腈及聚苯乙料。勞光分子轉子為微環境 限制感應器’其在旋轉受到約束時變成營光。分子約束之 乂數實例包括增強染料（聚集）、結合抗體或截留在肌動蛋 白聚。中。IEF(等電點聚焦）為一種用於分離兩性電解質、 要為蛋白質之分析工具。使用螢光iEF標記物之江h凝 166146.doc 201249430 膠電泳的一優勢在於有可能直接觀測到梯度之形成。螢光 IEF-標記物亦可藉由28〇 ηπιτ (2〇t)紫外線吸收來偵測。 可在固體支撐物上合成肽庫，且隨後藉由使用著色受 體，可逐一選擇染色固體支撐物。若受體不可指示任何顏 色，則可將其結合抗體染色。該方法不僅可用於蛋白受體 上，且亦可用於篩檢合成人工受體之結合配位體以及篩檢 新金屬結合配位體。亦可使用HTS&FACS(螢光活化細胞 分選器）之自動化方法。FACS機器最初運行細胞穿過毛細 官且藉由偵測其螢光強度使細胞分離。 免疫檢定：本發明之一些實施例包括免疫檢定以分析 PARP。在電泳分離之蛋白質之免疫墨點法（如，西方墨點 法）中早蛋白質可藉由其抗體來鑑別。免疫檢定可為 競爭性結合免疫檢定，其中分析物與標記抗原競爭有限池 之抗體分子（例如放射免疫檢定，EMIT) ^免疫檢定可為非 競爭性的’其中抗體過量存在且經標記。隨著分析物抗原 複合物增加’標記抗體-抗原複合物之量亦可增加（例如， ELISA)。若抗體係藉由將抗原注射至實驗動物中產生，則 抗體可為多株抗體’或若藉由細胞融合及細胞培養技術產 生’則抗體可為單株抗體。在免疫檢定中，抗體可用作分 析物抗原之特異性試劑。 不限制本發明之範疇及内容，一些類型免疫檢定為（僅 舉例而s )RIA(放射免疫檢定）、酶免疫檢定（如ELISA，酶 聯免疫吸附檢定）、EMIT(酶倍增免疫檢定技術）、微粒酶 免疫檢定（MEIA)、LIA(發光免疫檢定）及FIA(螢光免疫檢 166l46.doc 201249430 定）°此等技術可用於偵測鼻樣品中生物物質。抗體（用作 初級抗體或二次抗體）可經放射性同位素（例如，1251)、螢 光染料（例如，FITC)或可催化螢光或發光反應之酶（例如， HRP或AP)標記。 生物素或維生素Η為繼承對於抗生物素蛋白及抗生蛋白 鍵菌素之特異性親和力的輔酶。此相互作用使得生物素標 記肽成為用於品質及數量測試之各種生物技術檢定中的有 用工具。為藉由使位阻最小而改良生物素/抗生蛋白鏈菌 素識別’可需要擴大生物素與肽自身之間的距離。此可藉 由在生物素與肽之間偶合間隔劑分子（例如，6_硝基己酸） 來達成》 生物素標記蛋白之生物素定量檢定為精確測定蛋白質上 生物素標記數目提供一種靈敏螢光檢定。生物素標記肽廣 泛用於多種生物醫學篩檢系統中，該等系統需要將至少一 個相互作用搭配物固定於塗佈抗生蛋白鏈菌素之珠粒、 膜、玻璃載片或微量滴定盤上。該檢定係基於經淬滅劑染 料標§己之配位體自試劑之生物素結合位點的位移。為暴露 多重標記之蛋白質中受到空間限制且試劑難接近之任何生 物素基團，可用消化蛋白質之蛋白酶處理蛋白質。 EMIT為—種避免常用分離步驟之競爭性結合免疫檢 定》蛋白質經酶標記且酶.蛋白f •抗體複合物為酶促惰性 之免疫檢定類型允許定量未標記之蛋白質。本發明之一些 實施例包括eLISA以分析PARP。EUSA係基於將選擇性： 體連接至固體支樓物結合酶反應以產生能夠偵測低含量蛋 166146.doc 201249430 白質之系統。其亦稱為酶免疫檢定或EIA。蛋白質係藉由 已對抗其之抗體（亦即’對於抗體而言，蛋白質為抗原胃)來 偵測。通常使用單株抗體。 測試可需要抗體固定於固體表面（諸如，測試管之内表 面）及製備與酶偶合之相同抗體。酶可為自無色受質產生 著色產物之酶（例如，β-半乳糖苷酶）。舉例而言，可藉由 用待檢定之抗原溶液（例如，蛋白質）填充管來執行該測 試。任何存在之抗原分子可結合固定之抗體分子。可將抗 體-酶接合物添加至反應混合物中。接合物之抗體部分與 先前結合之任何抗原分子結合，產生抗體_抗原_抗體"夾層 。在洗去任何未結合之接合物後，可添加受質溶液。在 設定的時間間隔後，使反應中止（例如，藉由添加丨Ν NaOH)且在分光光度計中量測所形成之著色產物之濃度。 顏色強度與結合抗原之濃度成正比例。 ELISA亦可適合於量測抗體濃度，在此狀況下用適當抗 原塗佈孔。可添加含有抗體之溶液（例如，血清）^在其已 結合固定抗原後’可添加由針對所測試之抗體之抗體組成 的酶接合之抗免疫球蛋白。在洗去未反應之試劑後，可添 加受質。所產生之顏色強度與所結合之酶標記抗體之量成 正比例（且因此’與所檢定之抗體濃度成正比例）。 本發明之一些實施例包括放射免疫檢定以分析PArP。 放射性同位素可用於研究少量化合物之活體内代謝、分布 及結合。體内使用丨Η、uc、Mp、及丨，之放射性同位 素’諸如Η、14C、32P、358及125J。在96孔盤中之受體固 166146.doc 201249430 定法中，受體可藉由使用抗體或化學方法固定於各孔中， 且可將放射性標記配位體添加至各孔中以引發結合。可將 未結合之配位體洗去，且接著標準可藉由定量分析結合配 位體之放射性或洗去配位體之放射性來測定。接著，添加 篩檢標靶化合物可誘發與受體之競爭性結合反應。若該等 化合物展示比標準放射性配位體高的對受體之親和力，則 大部分放射性配位體不會結合受體且可留在溶液中。因 此，藉由分析結合放射性配位體（或洗去配位體）之量，可 指示測試化合物對受體之親和力。 當受體不可固定於96孔盤時或當需要在溶液相中進行配 位體結合時，可能會需要濾膜法。換言之，在溶液中進行 配位體-受體結合反應後，若反應溶液經由硝酸纖維素德 紙過濾，則包括配位體之小分子可通過其且僅蛋白質受體 可留在紙上。僅強烈結合受體之配位體可留在滤紙上且所 添加化合物之相對親和力可藉由定量分析標準放射性配位 體來鑑別。 本發月之些實施例包括螢光免疫檢定以分析PARP。 基於螢光之免疫方法係基於標記配位體與未標記配位體在 高特異性受體位點上之競爭性結合。該螢光技術可用於基 於螢光壽命隨分析物濃度改變而改變之免疫檢定。此技術 可使用螢光可藉由能量傳遞至伊紅（受體）而淬滅之短壽命 染料（如異硫氰酸螢光素（FITC))(供體）進行。可使用大量 光致發光化合物，諸如花青、噁嗪、噻嗪、卟啉、酞菁、 螢光紅外發射多環芳族烴、藻膽蛋白、方酸及有機金屬錯 I66146.doc -108- 201249430 合物、烴及偶氮染料。 基於螢光之免疫方法可為（例如）非均相或均相。非均相 免疫檢定包含自游離之標記分析物物理分離結合之標記分 析物。分析物或抗體可連接至固體表面。該技術可為競爭 性的（對於較高選擇性）或非競爭性的（對於較高靈敏性p 偵測可為直接偵測（僅使用一種類型抗體）或間接偵測㈠吏用 第種類型抗體）。均相免疫檢定不包含物理分離。雙抗 體螢光團標記之抗原參加與針對抗原及螢光團兩者之抗體 的平衡反應。標記及未標記抗原可競爭有限數目之對抗抗 原之抗體。 一些螢光免疫檢定方法包括簡單螢光標記方法、螢光共 振能量傳遞法（FRET)、時差式螢光（TRF)及掃描探針顯微 鏡術（SPM)。簡單螢光標記方法可用於受體_配位體結合、 藉由使用相關螢光之酶活性及用作各種活體内生理變化 (諸如PH值、離子濃度及電壓）之螢光指示劑。trf為一 種在其他螢光分子發射結束後選擇性量測鋼系類元素螢光 之方法。TRF可與FRET—起使用且鑭系類元素可變成供體 或受體。在掃描探針顯微鏡術中，舉例而言，在捕獲相 中，至少一個單株抗體黏附固相且掃描探針顯微鏡用以偵 測可能存在於固相表面上之抗原/抗體複合物。使用掃描 隧道顯微鏡術免去在許多免疫檢定系統中通常用以偵測抗 原/抗體複合物之標記的需要。 蛋白質鑑別方法··僅舉例而言，蛋白質鑑別方法包括經 由埃德曼降解之低通量測序法、質譜分析技術、肽質量指 166146.doc •109- 201249430 ’·’文法重新測序法及基於抗體之檢定》蛋白質定量檢定包 括勞光染料凝膠染色、標記或化學改質方法（亦即，同位 素編碼之親和力標籤（ICATS)、聯合分數對角層析法 (COFRADIC))。純化蛋白質亦可用於測定三維晶體結構， 其可用於模型化分子間相互作用。測定三維晶體結構之常 用方法包括X射線晶體學及核磁共振光譜分析。指示蛋白 質三維結構之特徵可用質譜分析探查。藉由使用化學交聯 來偶合在空間上接近但序列相去甚遠之蛋白質部分，可推 斷出關於整體結構之資訊。藉由用來自溶劑之氘交換醯胺 質子之後，有可能探查蛋白質之各個部分的溶劑可及性。 在一實施例中，螢光活化細胞分選術（Facs)用以鑑別表 現PARP之細胞^ FACS為專業化類型流式細胞儀。其提供 一種基於各細胞之特異性光散射及螢光特徵將生物細胞之 非均相混合物分選至兩個或兩個以上容器中（一次一個細 胞）的方法。其可定量記錄來自個別細胞之螢光信號以及 物理分離尤其關注之細胞。在另一實施例中，基於微流體 裝置（microfluidic based device)用以評估 parp表現。 質譜分析亦可用以表徵來自患者樣品之PARp。用於使 全蛋白離子化之兩種方法為電喷霧離子化法（ESI)及基質辅 助雷射脫附/離子化法（MALDI)。在第一種方法中，藉由上 述兩種技術中之任一技術使完整蛋白質離子化，且接著將 蛋白質引入質量分析器中。在第二種方法中，使用諸如胰 蛋白酶或胃蛋白酶之試劑，將蛋白質酶消化成更小肽。亦 使用其他蛋白水解消化劑。接著將肽產物之集合引入質量 166146.doc 201249430 分析器中。此通常稱為蛋白質分析之”自下而上"方法β 全蛋白質量分析係使用飛行時間式（TOF)MS或傅里葉變 換離子迴旋共振（F〇urier transform ion cyclotron resonance，FT-ICR)進行。用於肽質量分析之儀器為四極 離子牌。多級式四極飛行時間及MALDI飛行時間儀器亦用 於此應用中。 兩種方法用以分級分離蛋白質或由酶消化產生之其肽產 物。第一種方法分級分離全蛋白且稱為二維凝膠電泳。第 一種方法咼效液相層析法用以分級分離酶消化後之肽。在 些清况下’可能需要將此兩種技術組合。 存在質譜分析可用於鍟別蛋白質之兩種方式。肽質量使 用蛋白水解肽之質量作為搜尋預測質量之資料庫的輸入， 該等預測質量由一列已知之蛋白質消化而產生。若參考清 單中之蛋白質序列產生大量匹配實驗值之預測質量，則存 在某些證據證明此蛋白質存在於原始樣品中。 串聯MS亦為一種鑑別蛋白質之方法。碰撞誘導之解離 用於主流應用中以自特異性肽離子產生一組片段。斷裂過 程主要產生沿肽鍵斷裂之分裂產物。 已描述大量不同演算方法自串聯質譜分析（MS/MS)、肽 重新測序法及基於序列標籤之搜尋鑑別狀及蛋白質…種 組合全面範圍之資料分析特徵的選擇為PEAKS。其他存在 之f量專門分析軟體包H片段指紋SEQUEST、

Mascot、OMSSA及 X!Tandem。 通常’將碳（C13)或氮 蛋白質亦可藉由質譜分析定量 166146.doc •111· 201249430 (N1 5)之穩定（例如’非放射性）重同位素併入一樣品中，同 時將另一樣品用相應輕同位素（例如，C12及N14)標記。在 分析之前將兩個樣品混合。來源於不同樣品之肽可因其質 量差而區分。其峰強度之比率對應於肽（及蛋白質）之相對 豐度比。用於同位素標記之方法為SILAC(在細胞培養物中 穩定同位素標記胺基酸）、胰蛋白酶催化之01 8標記、 ICAT(同位素編碼之親和力標記）、iTRAq(用於相對及絕對 定量之同位素標籤）。"半定量"質譜分析可在未標記樣品之 情況下執行。通常，此使用MALDI分析（以線性模式）進 行。此處’來自個體分子（通常蛋白質）之峰強度或峰面積 與樣品中蛋白質之量相關聯。然而，個體信號視蛋白質之 一級結構、樣品之複雜性及儀器之設置而定。 N末端測序有助於鑑別未知之蛋白質，證實重組蛋白之 一致性及保真性（閱讀框架、轉譯起點等），有助於解釋 NMR及晶體學資料，證明蛋白質之間的一致性程度，或提 供設計用於產生抗體之合成肽的資料等D N末端測序利用 埃德曼降解化學，自蛋白質之N末端連續移除胺基酸殘基 且藉由逆相HPLC鑑別其。靈敏性可在幾百飛莫耳 (femtomole)之程度，且通常可自幾十皮莫耳（pic〇m〇丨匀起 始物質獲得長序列讀數（20_40個殘基）。雖然純蛋白質 (>90%)可產生容易解釋之資料，但不夠純之蛋白質混合物 經受精確資料解釋亦可提供有用之資料。；^末端修飾（尤其 乙醯化）之蛋白質不可直接測序，此係因為缺乏游離一級 胺基阻擋埃德曼化學。然而，阻斷蛋白質之有限蛋白水解 166146.doc 201249430 (例如，使用溴化氰）可使胺基酸混合物在儀器之各週期中 產生’其可經受資料庫分析以解釋有意義之序列資訊。c 末端測序為轉譯後修飾’影響蛋白質之結構及活性。各種 疾病情況可與削弱之蛋白質加工有關且C末端測序提供用 於研究蛋白質結構及加工機制之另一工具。 實例 實例1 : IDC乳癌中PARP1表現 先前研究已展示與正常健康對照組織相比，卵巢癌、肝 細胞癌及直腸腫瘤中以及來自白血病患者之人類周圍血液 淋巴細胞中PARP活性增強（Yalcintepe l等人，Braz J Med Biol Res 2005;38:361-5, Singh N 等人，Cancer Lett 1991,58.131-5，Nomura F等人 ’ J Gastroenterol Hepatol 2000;15:529-35)。本發明使用基因表現資料庫來檢查2〇〇〇 以上原發性惡性及正常人類組織中的PARP1基因調控。雖 然PARP1表現及活性在大部分正常人類組織及器官中極低 且一致’但在所選腫瘤細胞及原發性人類惡性腫瘤中其上 調’其中在乳癌、卵巢癌 '肺癌及子宮癌中發現最顯著之 差異（圖1)。 組織樣品 採集作為正常外科手術程序之部分的樣品且將其在切除 之3 0分鐘内速凍。在進行分析之樣品上執行内科病理評述 及確認。自相鄰組織產生之蘇木精及伊紅（h&e)染色之玻 璃載片用以證實及分類診斷類別且評估贅生性細胞結構。 使用免疫組織化學及螢光原位雜交來測定、Pr及heR2 166146.doc •113· 201249430 之表現。使用樣品調查及管理資料庫（Ascenta，BioExpress 資料庫，GeneLogic，Inc.，Gaithersburg，MD)來註解此等结 果以及伴隨病理學及臨床資料。 RNA提取及表現概況分析 RNA提取及雜交如Hansel等人所述來執行。使用陣列高 通量應用（Ascenta，Bi〇express Gene L〇gic，Gaithersburg MD及Affymetrix, Santa Clara，CA)評估陣列資料品質，其 針對多個客觀標準（包括5，/3’ GAPDH比率、信雜比及背景 以及其他其他量度）來評估資料。使用Affymetrix微陣列分 析組5_0版、資料挖掘工具2 〇及微陣列資料庫軟體 (Affymetdx，Santa CIara，CA)來執行 GeneChip 分析。

GeneChip上所表示之所有基因全面正規化且換算成i〇〇之 信號強度。 微陣列資料分析 病理正常之組織樣品係用以測定pARpi mRNA之基線表 現。計算個別預測值之平均值及9〇%、燃、99%及％ 9% 信賴上限（UCL)。因為吾人正評估在良序集以外之個別樣 品在基線分布内的可能性，所以選擇預測區間而非平均值 之信賴區間來估=將來個別量測結果之預期範圍。預測區 間由下式定義，7±略^)，其中？為正常乳房樣品之平均 值，S為標準偏差，《為樣品尺寸，且」為具有ni個自由度 之學生 t分布（StUdent，s t_distributi〇n)的第 1〇〇(ι (ρ/2))百分 位。 病理正常之組織樣品係用以測定pARpi之基線表現。根 166146.doc •114· 201249430 據包括腫瘤病期、抽煙狀況、CA125狀況或年齡之特徵， 將樣品分成各種亞類。根據90%、95%、99%或99.9% UCL 評估各腫瘤樣品。使用Windows之SAS v8.2執行分析 (www.sas.com) ° 如與PARP1相比’計算11個探查集之皮爾森相關 (Pearson's correlation)。相關係基於194個樣品之全集。皮 r — Σ(χ, 一无)(乃~ 刃 爾森積矩相關由下式定義， ， 其中J為PARP1探查集之平均值，且F為與PARP1相關之探 查集之平均值。統計顯著性由下式確定，t2)1::;，其中r (1-r ) 為相關且η為樣品數目。假定所得值具有自由度為n-2之t分 布》 多重逆轉錄酶-聚合酶鏈反應（RT-PCR): 如先前所述，使用25 ng各樣品之全部RNA執行多重RT-PCR(Khan等人，20〇7)。用於此研究之多重檢定經設計以 偵測來自福馬林固定石蠟包埋（FFPE)樣品或來自冷凍組織 之RNA。使用具有Wallac Victo r2 1420多標記計數儀之 RiboGreen RNA定量套組（Invitrogen)來測定RNA濃度。按 照Agilent 2100生物分析儀之說明，在Agilent生物分析儀 上分析來自各樣品之RNA樣品。如先前所述’使用 Applied Biosystems 9700進行逆轉錄（RT)反應。使用 Applied Biosystems 9700在各cDNA上進行PCR反應。用卡 那黴素RNA使RT反應增敏以監測RT及PCR反應之效率。所 用對照包括陽性對照RNA、無模板對照及無逆轉錄酶對 166146.doc -115- 201249430 照。藉由毛細管電泳分析PCR反應。將螢光標記之PCR反 應稀釋，與基因組實驗室尺寸標準-400(Beckman-Coulter) 組合，變性，且使用CEQ 8800遺傳分析系統檢定。將相對 於同一反應内β-葡糖醛酸酶（GUSB)表現之各標靶基因表現 報導為各樣品之3次獨立評估的平均值及標準偏差。 與正常乳房組織相比，患有浸潤性導管癌（IDC)之乳癌 患者的平均PARP1表現增加1.8倍（Ρ<·00001)。重要地是， PARP1過度表現最常發生在ER、PR或HER2呈陰性之乳癌 組織中（表1)。 表1 IDC乳房組織中PARP1過度表現 IDC亞型 η PARP1過度表現之樣品重量％ 正常 68 2.9% IDC 169 30.2% ER+ 35 22.9% ER- 18 55.6% PR+ 26 23.1% PR- 20 45.0% HER2 + 24 29.2% HER2- 10 70.0% ER+/PR+ 26 23.1% ER-/PR- 8 62.5% ER+/PR- 8 25.0% PARP1過度表現由超過正常乳房組織分布中95%信賴上限 之樣品來定義。 實例2 : 4-碘-3-硝基苯甲醯胺（ΒΑ)與化學療法之組合 166146.doc -116- 201249430 細胞培養 乳癌細胞自ATCC獲得且培養於具有1 〇%胎牛血清之達爾 伯克改良伊格爾培養基（Dulbecco Modified Eagle Medium) 中。在不同濃度化合物或DMSO對照存在下，以每p 1 〇〇細 胞培養盤1 〇5個細胞或每P60細胞培養盤1 〇4個細胞來塗細 胞。在處理之後，使用庫爾特計數器（c〇ulter c〇unter)且藉 由用1 %亞甲基藍染色來量測附著細胞數目。將亞曱基藍 溶於甲醇與水之50〇/〇-50〇/〇混合物中。將細胞塗在24或96孔 板中且按計劃處理’吸出培養基，將細胞用PB s洗滌，固 定於甲醇中5-10 min，吸出甲醇且使培養板完全乾燥。將 亞曱基藍溶液添加至孔中且將培養板培育5 min。移除染 色溶液且將培養板用dl^O洗滌，直至洗滌液不再呈藍色。 在培養板完全乾燥後，將少量1N HC1添加至各孔中以萃取 亞甲基藍。在600 nm下讀出〇D且使用校正曲線來測定細 胞數目。 化合物 將化合物直接自乾粉溶解成DMSO中的1〇 mM儲備溶 液，用於各單獨實驗。使用匹配體積/濃度之媒劑（DMSO) 進灯對照實驗；在此等對照中，細胞未展示其生長或細胞 週期分布變化。 pi排除、細胞週期ATUNEL檢定 在添加藥物及培育後，將細胞胰蛋白酶化且獲取樣品之 等分試樣以用於計數及pi(碘化丙啶）排除檢定。將一部分 、、田月b離U且再懸浮於〇 5 mi含有5吨之冰冷。 166146.doc -117- 201249430 將另一部分細胞固定於冰冷70%乙醇中且儲存於冷凍機中 隔夜。為進行細胞週期分析，藉由標準程序用碘化丙啶 (PI)將細胞染色。藉由流式細胞儀使用BD LSRII FACS測 定細胞之DNA含量’且使用ModFit軟體測定Gl、S或G2/M 中之細胞百分比。 針對細胞凋亡’將細胞用"原位細胞死亡偵測套組螢光 素"（Roche Diagnostics Corporation，Roche Applied Science， Indianapolis，IN)標記。簡言之，將固定細胞離心且在含有 1%牛血清白蛋白（BSA)之磷酸鹽緩衝生理食鹽水（PBS)中 洗滌一次’接著在室溫下再懸浮於2 ml滲透緩衝液（PBS中 0.1。/〇 Triton X-100及0.1 〇/〇檸檬酸鈉）中，歷時25 min，且在 0.2 ml PBS/1% BSA中洗滌兩次。將細胞再懸浮於5〇 μι TUNEL反應混合物（TdT酶及標記溶液）中，且在恆溫箱中 37°C下在濕潤黑暗氣氛中培育60 min。將標記細胞在 PBS/1% BSA中洗滌一次，接著再懸浮於0.5 ml含有1 pg/ml 4,6-二甲脒基-2-苯基吲哚（DAPI)之冰冷PBS中，歷 時至少30 min。將所有細胞樣品用BD LSR II(BD Biosciences，San Jose, CA)進行分析。 漠脫氧尿苷（BrdU)標記檢定 添加 50 μΐ BrdU(Sigma Chemical Co.，St. Louis，MO)儲 備溶液（1 mM)以產生10 μΜ BrdU最終濃度。將細胞在37°C 下培育30 min且固定於冰冷70%乙醇中且儲存於冷室（4°C) 中隔夜。將固定細胞離心且在2 ml PBS中洗滌一次，接著 在黑暗中在37°C下再懸浮於0.7 ml變性溶液（2 N HC1中0.2 166146.doc -118· 201249430 mg/ml胃蛋白酶）中，歷時15 min，且用1.04 ml 1M Tris緩 衝液（Trizma base, Sigma Chemical Co.)懸浮且在2 ml PBS 中洗滌。接著將細胞再懸浮於在TBFP可滲透緩衝液（PBS 中0.5% Tween-20、1 %牛血清白蛋白及1%胎牛血清）中稀釋 1:100 的 100 μΐ 抗 BrdU 抗體（DakoCytomation，Carpinteria， CA)中，且在室溫下在黑暗中培育25 min且在2ml PBS中洗 滌。將初級抗體標記之細胞再懸浮於在TBFP可滲透緩衝 液中稀釋1:200的100 μΐ Alexa Fluor山羊抗小鼠IgG之 F(ab')2 片段（H+L)(2 mg/mL)(Molecular Probes，Eugene, OR)中，且在室溫下在黑暗中培育25 min且在2ml PBS中洗 滌，接著再懸浮於含有1 gg/ml 4,6-二曱脒基-2-苯基吲哚 (DAPI)之0.5 ml冰冷PBS中至少30 min。將所有細胞樣品用 BD LSR II(BD Biosciences，San Jose，CA)分析。 已在癌症之活體外及活體内模型中測試4-碘-3-硝基苯曱 醯胺（BA)與各種化學治療劑之組合。在來源於患有轉移性 三重陰性腺癌之患者的MDA-MB-468乳腺癌細胞株中評估 與吉西他賓或卡鉑併用之BA展示BA增強S及G2/M細胞週 期停滯且增強由卡鉑或吉西他賓誘導之細胞毒性效應（圖 2)。 在裸nu/nu小鼠中人類三重陰性轉移性乳癌MDA-MB-231 異種移植模型中評估與吉西他賓及卡鉑併用之BA的活 性。在投藥35天後，BA增加吉西他賓及卡鉑組合之活性 且引起4個部分反應（PR)及2個完全反應（CR)及1個無腫瘤 存活者（TFS)(表2)。BA與吉西他賓及卡鉑之組合耐受性良 166146.doc -119- 201249430 好。 表2:與吉西他賓/卡鉑併用之BA在患有三重陰性乳腺癌 之MDA-MB-231異種移植模型中的活體内活性 處理· 部分反應 完全反應 無腫瘤 存活者 對照 0 0 0 吉西他賓（15 mg/kg ;腹膜内；每3天(q3d)x4腹膜 内)+卡鉑(10mg/kg ;腹膜内；每週(qwk)x3) 4 0 0 BSI-201(50 mg/kg ;腹膜内；每兩週(biwk)+吉西他 賓(15 mg/kg ;腹膜内；每3天(q3d)x4腹膜内)+卡鉑 (10mg/kg ;腹膜内；每週(qwk)><3) 4 2 1 因此，4-碘-3-硝基苯甲醯胺（BA)可增強多種細胞毒性化 學治療劑（包括卡钻及吉西他賓）之活性。 實例3 : 4-碘-3-硝基苯甲醢胺（BA)與伊立替康之組合 乳癌細胞自ATCC獲得且培養於具有10%胎牛血清之達爾 伯克改良伊格爾培養基中。在不同濃度化合物或DMSO對 照存在下，以每P100細胞培養盤105個細胞或每P60細胞培 養盤104個細胞來塗細胞。在處理之後，使用庫爾特計數 器且藉由用1 %亞曱基藍染色來量測附著細胞數目。將亞 曱基藍溶於甲醇與水之50%-50°/〇混合物中。將細胞塗在24 或96孔板中且按計劃處理，吸出培養基，將細胞用PBS洗 滌，固定於曱醇中5-10 min，吸出曱醇且使培養板完全乾 燥。將亞甲基藍溶液添加至孔中且將培養板培育5 min。 移除染色溶液且將培養板用dH20洗滌，直至洗滌液不再呈 藍色。在培養板完全乾燥後，將少量IN HC1添加至各孔中 以萃取亞甲基藍。在600 nm下讀出OD且使用校正曲線來 166146.doc •120· 201249430 測定細胞數目。 將化合物直接自乾粉溶解成DMSO中的10 mM儲備溶 液，用於各單獨實驗。使用匹配體積/濃度之媒劑（DMSO) 進行對照實驗；在此等對照中，細胞未展示其生長或細胞 週期分布變化。 PI排除、細胞週期、TUNEL檢定及BrdU標記檢定如上文 實例2中所述執行。 在癌症之活體外模型中測試各種濃度之4-碘-3-硝基苯曱 醯胺（BA)與伊立替康之組合。在來源於患有轉移性三重陰 性腺癌之患者的MDA-MB-468三重陰性乳腺癌細胞株中評 估與伊立替康併用之BA展示BA可增強S及G2/M細胞週期 停滯且增強由伊立替康誘導之細胞毒性效應（表3)。 表3:用與伊立替康併用之4-碘-3-硝基苯甲醯胺（BA)治 療的三重陰性MDA-MB-468乳癌之細胞週期調控 G1 S G2/M 活細胞，％對照 伊立替康 伊立替康ΟμΜ+ΒΑμΜ 0 64.40 24.18 11.42 100.0 50 65.50 23.48 11.02 91.5 100 57.72 26.93 15.34 67.5 伊立替康5μΜ+ΒΑμΜ 0 38.17 33.77 28.05 48.6 50 24.94 41.85 33.21 31.6 100 9.28 51.43 39.29 23.4 因此，4-碘-3-硝基苯曱醯胺（BA)可增強多種細胞毒性化 166146.doc • 121 - 201249430 學治療劑（包括卡鉑、吉西他賓及伊立替康）之活性。 實例4 : 4-碘-3-硝基苯甲醯胺（BA)與IGF1R抑制劑鬼桕苦 素（Picropodophyllin，PPP)之组合 乳癌細胞自ATCC獲得且培養於具有1 〇%胎牛血清之達爾 伯克改良伊格爾培養基中。在不同濃度化合物或DMSO對 照存在下’以每p 1 〇〇細胞培養盤i 個細胞或每p6〇細胞培 養盤104個細胞來塗細胞。在處理之後，使用庫爾特計數 器且藉由用1 %亞甲基藍染色來量測附著細胞數目。將亞 甲基藍溶於曱醇與水之5〇〇/0·5〇〇/0混合物中。將細胞塗在24 或96孔板中且按計劃處理’吸出培養基，將細胞用p]Bs洗 務’固定於曱醇中5-10 min，吸出曱醇且使培養板完全乾 燥°將亞曱基藍溶液添加至孔中且將培養板培育5 min。 移除染色溶液且將培養板用dH2〇洗滌，直至洗滌液不再呈 藍色。在培養板完全乾燥後，將少量…HC1添加至各孔中 以萃取亞甲基藍。在600 nm下讀出OD且使用校正曲線來 測定細胞數目。 將化合物直接自乾粉溶解成DMSO中的10 mM儲備溶 液’用於各單獨實驗。使用匹配體積/濃度之媒劑（DMSO) 進行對照實驗；在此等對照中，細胞未展示其生長或細胞 週期分布變化。 PI排除、細胞週期、TUNEL檢定及BrdU標記檢定如上文 實例2中所述執行β 在癌症之活體外模型中測試各種濃度之4_碘_3_硝基苯甲 酿胺（ΒΑ)與胰島素樣生長因子1受體丨R)抑制劑鬼桕苦 166146.doc •122- 201249430 素（PPP)之組合。在來源於患有轉移性三重陰性腺癌之患 者的MDA-MB-468三重陰性乳腺癌細胞株中評估與PPP併 用之BA展示BA可增強S及G2/M細胞週期停滯且增強由PPP 誘導之細胞毒性效應（表4)。 表4 :用與IGF1R抑制劑鬼桕苦素（PPP)併用之4-碘-3-硝 基苯甲醯胺（BA)治療的三重陰性MDA-MB-468乳癌之細胞 週期調控 G1 S G2/M 活細胞，％對照 PPP 0 ηΜ+201 μΜ 0 50.96 30.37 16.04 100 50 50.20 31.34 15.21 82 100 40.63 34.52 20.16 61 PPP 200 ηΜ+201 μΜ 0 51.42 30.22 15.01 89 50 49.75 31.41 15.10 77 100 37.51 35.58 21.30 59 PPP 400 ηΜ+201 μΜ 0 37.29 25.32 20.17 60 50 32.88 28.47 22.37 42 100 23.62 31.78 29.98 32 因此，4-碘-3-硝基苯曱醯胺（BA)可增強靶向生長因子受 體抑制劑（包括鬼桕苦素（PPP))之活性。 實例5 :用BA治療三重陰性乳癌 進行一項多中心開放式隨機研究以證明使用4-碘-3-硝基 苯曱醯胺（BA)治療三重陰性轉移性乳癌的療效。 研究目標：此研究之主要目標如下： 166146.doc -123- 201249430 臨床受益率（CBR=CR+PR+SD26個月）：確定如與用吉西 他賓及卡鉑治療相·關之45% CBR相比，BA將產生30%或更 大之CBR。 •進一步研究B A之安全性及耐受性。 •此研究之次要目標如下： •總反應率（ORR) •無疾病進展存活期（PFS) •評估與各組有關之毒性。 •此研究之探索性目標如下： •表徵BA對PARP活性之抑制 •表徵歷史性腫瘤組織樣品中PARP活性 •研究三重陰性乳癌中BRCA狀況 •研究與不具有已知之BRCA突變之個體相比，具有癌 症及此等突變之個體中的反應 •將乳癌組織歸為基底或管狀。 研究設計：開放式2組隨機安全性及功效研究，其中多 達90名患者（每組45名）將隨機化至任一組中： •研究組1 :在21天週期之第1天及第8天投與吉西他賓 (1000 mg/m2 ; 30 min，靜脈内輸液）及卡鉑（AUC 2 ; 60 min，靜脈内輸液）；或 •研究組2:在各21天週期之第1天、第4天、第8天及第 11天投與4-碘-3-硝基苯甲醢胺（4 mg/kg，1小時，靜脈 内輸液）。 •隨機化至研究組2中之患者將在疾病進展時中止研 166146.doc -124· 201249430 究。 •交叉：隨機化至研究組1中之患者可交叉以在疾病進 展時接收吉西他賓/卡鉑以及4-埃-3-硝基苯甲醯胺之 持續治療。 •樣品規模：多達90名患者（每組中多達45名患者）參與 研究。多達45名之個體將隨機化於組1或組2中之每一 者中。 個體群體： •入選標準： •至少18歲》 •具有藉由RECIST標準可量測疾病之轉移性乳癌。▽期） •在轉移性環境下進行0-2個先前化學療法方案。允許先 前輔助/新辅助療法。 •組織學證明（原發性或轉移性位點）乳癌為ER呈陰性、 PR呈陰性及藉由免疫組織化學（〇、UHERd未過度表 現或藉由在原發性腫瘤或轉移性病變上執行之FISH未 擴增基因。 •先前化學療法完成至少3週後進入研究。 •患者可能已在輔助或轉移性環境中接收療法，然而若 服用雙膦酸鹽’則骨病變可能不用於進展或反應。 •放射療法必須完成至少2週後進入研究，且放射病變 不可用作可量測之疾病。 •若患者在局部療法後穩定（無進展證據）至少3個月，則 患者可能具有CNS轉移。 166146.doc -125- 201249430 • ECOG行為能力狀況〇_ 1。 •適當器官功能定義為·· ANC大於或等於^ooo/mm3, 血小板大於或等於100,000/mm3，肌酐清除率大於5〇 mL/min，ALT及AST低於2.5χ正常值上限（ULN)(或在 肝轉移狀況下低於5xULN);總膽紅素低於15 mg/dL。 •雖然不會拒絕患者參與，但推薦PARp研究可獲得之組 織塊。 •將排除孕期或哺乳期女性。具有生育可能性之女性必 須在進入研究兩週内證明妊娠測試呈陰性，且同意在 研究療法持續期間進行可接受之生育節制。 •經簽字之IRB批准之書面知情同意。 排除標準： •病變僅可由PET鑑別。 •先前進行兩種以上化學療法方案（包括輔助療法）。認 為連續方案（諸如，AC-太平洋紫杉醇）為一種方案。 •已接收吉西他賓、卡鉑、順鉑或4_碘_3_硝基苯甲酿胺 之先前治療。 •可能影響研究參與之嚴重醫學病狀（不受控制之肺、腎 或肝功能障礙、不受控制之感染p •不受控制心臟疾病之重大病史：亦即，不受控制之高 血壓、不穩定心絞痛、近期心肌梗塞（先前6個月内）、 不受控制之充血性心力衰竭及有症狀或無症狀但降低 之喷血分數低於45%的心肌病。 166146.doc •126· 201249430 •研究者感到可能會損害有效及安全參與研究的其他重 大並存病狀。 •個體加入另一藥物試驗研究裝置，或接收其他研究藥 劑。 •同時進行或先前進行（在研究（第1天）之7天内）抗凝療 法（低劑量以允許維持姿態（port maintenance))。 •指定伴隨藥物治療。 •在整個研究過程中不允許同時進行放射療法。 •不能遵守研究要求。 •篩檢測試及評估僅在自各個體獲得簽字之書面機構審 查委員會（IRB)批准之知情同意後執行。除非另作説 明，否則程序將在給藥（第1天）之14天内執行。 臨床評估：完整病史、身體檢查、ECOG狀況、身高、 體重、生命徵象及伴隨藥物治療記錄。 貫驗至研究：血液學（分類、網狀红血球計數及血小 板）’刖凝血酶時間（ρτ)及部分凝血激酶時間（PTT);综合 化學典型調查（鈉、鉀、氣化物、c〇2、肌酐、鈣 '磷、 錢、BUN、尿酸 '白蛋白、ast、ALT、鹼性磷酸酶、總 膽紅素及膽固醇、HDL及LDL)、使用顯微鏡檢查進行尿分 析、具有生育可能性之女性的PBMC、血清或尿妊娠測試 中PARP抑制。若簽署單獨知情同意，則將獲得BRCA概況 分析。此資訊亦可採集自個體之病史。臨床分期：藉由電 腦斷層攝影術（CT)或磁共振（MRI)使可量測疾病成像。 治療：合格患者將加入研究中且隨機化至組1或組2中： 166146.doc -127- 201249430 •研究組1 :在21天週期之第丨天及第8天投與吉西他賓 (1000 mg/m2 ; 30 min，靜脈内輸液）及卡鉑（AUC 2 ; 60 min，靜脈内輸液）；或 •研究組2:在各21天週期之第1天 '第4天、第8天及第 11天投與4-碘-3-硝基苯曱醯胺（4 mg/kg，1小時，靜脈 内輸液）。 •交叉.隨機化至研究組1中之患者可交叉以在疾病進 展時接收吉西他賓/卡鉑以及4-碘-3-硝基苯甲醯胺之 持續治療。 •給藥前及給藥後測試將如研究方案中概述來執行。 •兩個治療組之給藥將以21天週期重複。 個體可參與此研究，直至其經受藥物不耐性或疾病進展 或撤銷同意。實現CR之個體將接收另外4個週期。在pD之

前停止治療之個體應根據方案經受定期病期評估，直至pD 時間。一旦個體停止治療，對無疾病進展存活期及總反應 率之δ平估將以3個月之時間間隔繼續，直至疾病進展或死 亡。 可量測疾病之第一預定腫瘤反應量測將在2個週期後執 订’且接著除基線處進行之初始分期外，每隔一個療法週 期（>力母6-8週）執行》根據修改之實體腫瘤反應評估標準 (RECIST)的腫瘤反應將用以藉由ct或MRI(必須使用篩檢 期間所用之同一技術）建立疾病進展。 治療結束：所有個體應如方案中所述結束治療程序，在 最後一次給與4-碘-3-硝基苯甲醯胺後不超過3〇天結束。此 166146.doc •128- 201249430 外，若在最後一次給與4-碘·3-硝基苯甲醯胺之前3〇天内未 評估總腫瘤反應，則個體將具有經由臨床成像評估之總腫 瘤反應。 安全性評估：安全性將藉由標準臨床及實驗室測試（血 液學、血液化學及尿分析）來評估。毒性等級係由國家癌 症研究所CTCAE ν3·0定義。 藥物動力學/藥效學 用於PK及藥效學分析之血液樣品將僅自加入研究組2之 個體（此包括交又個體）獲得。 PK樣品將在第1週期期間、給藥前及在第丨天及第n天在 輸液結束時即刻採集。 藥效學或PARP樣品將在第i週期期間、在第i天、第4 天、第8天及第11天給藥前採集。給藥後樣品僅在第〗天採 集。 如規定不能執行PK或藥效學樣品採集之位點將允許參 與該研究，且方案相應地在彼等位點處進行修正。 功效·將藉由標準方法（例如，CT)在基線處及接著此後 約每6-8週在缺乏臨床上明顯疾病進展的情況下評估腫 瘤。 统計方法 研九之主要目標係評估BA組之臨床受益率（cbr)。在兩 組令之每-者t ’將評估主要功效終點（CBR)，且將計算 精確二項90%信賴區間。眩麻也 視匕间將使用早面費歇爾精確測試（onesided Fisher’s exact test、 IV 并 test) u 5 /❶顯者水準比較兩組之cbr。 166146.doc -129- 201249430 將評估無疾病進展存活期及總存活期的第二及探索性功效 終點，且將使用卡普蘭-邁耶（Kaplan_Meier)方法計算95% 仏賴區間。將使用對數秩檢驗（log-rank test)比較兩組中無 疾病進展存活期及總存活期之分布^ PARP抑制資料之分 析實際上將為探索性及敍述性的。對於主要安全性終點， 將藉由研究組、系統器官類別及描述語（preferred terms)將 AE及嚴重不利事件（SAE)列表。將關於自基線值之偏移， 概述第一週期後實驗室測試結果。 跟蹤：在最後一次給與研究藥物後第9〇天及每9〇天（士 2〇 天），將獲得跟蹤資訊。 實驗室評估-將使用標準程序製備用於血液學、血清化 學及尿分析之血液及尿樣品。實驗室典型調查定義如下： 血液學：WBC計數及分類、RBC計數、血紅蛋白、血球 比容及血小板計數。 血清化學：白蛋白、ALP、alt、AST、BUN、鈣、二 氧化碳、氯化物、肌酐、麵胺醯基轉移酶、葡萄糖、乳 I脫氫酶、磷、鉀、鈉、總膽紅素及總蛋白。 尿刀析·外觀、顏色、pH值、比重、酮、蛋白質、葡萄 糖/膽紅素、亞硝酸鹽、尿膽素原及潛血（僅在尿分析量 尺孑估之結果呈陽性時，執行沈降顯微鏡檢查）。 藥物動力學血液樣品將僅自加入研究組2之個體或交又 研九組2之個體獲得。樣品將在給藥前即刻及在第1週期 期間研究第1天及第i i天各自輸液結束時即刻採集。 生物標記係客觀量測且評定為正常生物過程、病理性過 166146.doc -130- 201249430 程或對治療干預之藥理學反應的指示物。在腫瘤學中，對 構成致癌過程基礎之分子改變尤其關注，其可鑑別癌症亞 型、將疾病分期、評估腫瘤生長之量或預測疾病進展、轉 移及對BA之反應。 將使用PARP活性檢定在周圍血液單核細胞（PBMC)中測 定BA治療之前及之後PARP的功能活性。將根據研究手冊 中詳細描述之程序，自5 mL血液樣品製備PBMC，且量測 PARP活性/抑制。 關於所有PARP樣品之詳細採集、處理及運送程序，參 考關於各位點提供之研究手冊。 乳癌（BRCA)基因測試為一種檢查幫助控制正常細胞生 長之基因（BRCA1及BRCA2)之特異性變化（突變）的血液檢 查。具有BRCA突變之女性已展示具有36%與85%之間的發 展乳癌之概率及16%與60%之間的發展卵巢癌之概率。將 PARP抑制劑投與具有BRCA突變之女性可證明為有益的。 此研究最初試圖測定BRCA狀況與對BA治療之反應之間的 任何關聯。 為達成此，應測定所有個體之BRCA狀況（若尚未已 知）。個體將需要簽署單獨知情同意表格。因為此並非研 究之入選標準，所以不同意此測試之潛在個體將不會僅因 為此原因而被拒絕參與此項研究。 在兩組中之每一者中，將評估主要功效終點（CBR)，且 將計算精確二項90%信賴區間。將使用單面費歇爾精確測 試以5%顯著水準比較兩組之CBR。將使用對數秩檢驗比較 166146.doc -131 - 201249430 兩組中之無疾病進展存活期及總存活期㈣二及探索性功 效終點》 腫瘤反應資料將敍述性地報導為安全性群體中所有個體 之清單’以it成確定BA治'療是否具有可量測之臨床效果 (例如，進展時間）且是否應在第一個8週外繼續之目的。使 用修改之RECIST將反應資料分類。 PARP抑制分析實際上將視情況而定為探索性及敍述性 的。將考慮來自BA治療之前、期間及之後獲取之樣品的 PARP抑制差異及任何藥物基因組學結果（例如，BRCA)的 統計組比較。 對於接收至少1次BA給藥之所有個體，將完成安全性分 析。 用於研究之BA將調配於於1〇 mM磷酸鹽緩衝液（pH 7.4) 中含有25%經丙基0環糊精的1〇111§/1111^濃縮物中。 實體腫瘤反應評估標準(REC1ST): 合格 僅在基線具有可量測疾病之患者應包括在客觀腫瘤反應 為主要終點之方案内。 可量測疾病-存在至少一個可量測病變》若可量測疾病 限於孤立病變，則其贅生性應由細胞學/組織學來確認。 可量測病變-可在至少一維上使用習知技術精確量測最 長直徑220 mm或使用螺旋CT掃描精確量測最長直徑210 mm的病變》 不可量測之病變-所有其他病變，包括小病變（使用習知 166146.doc -132· 201249430 技術最長直徑<2〇 mni或使用螺旋CT掃描最長直徑<10 mm) ’亦即骨病變、軟腦膜疾病、腹水、胸膜/心包積液、 發炎乳房疾病、淋巴管炎皮/肺尖（lymphangitis cutis/pulmonis)、膀胱病變以及藉由成像技術不可證實及 跟蹤之腹部腫塊。 所有量測應使用標尺或測徑規進行且以公制符號記錄。 所有基線評估應儘可能地接近於治療開始來執行，且決不 應在治療開始之前超過4週。 在基線及跟蹤期間，應使用相同評估方法及相同技術來 表徵各鑑別及報導之病變。 僅當臨床病變在表面（例如，皮膚小結及可觸淋巴結） 時’認為臨床病變可量測。對於皮膚病變之狀況，推薦藉 由彩色攝影記錄，包括標尺以評估病變尺寸。 量測方法 CT及MRI為目前量測經選擇用於反應評估之標耙病變的 最佳可用及可複現之方法。應使用切片厚度為1〇爪爪或更 小之切片連續執行習知CT及MRI。螺旋CT應使用5 mm連 續重建演算法來執行。此適用於胸、腹及骨盆之腫瘤。頭 及頸腫瘤及手足之腫瘤通常需要特定方案。 當胸部X射線上之病變由充氣肺明顯界定且圍繞時，可 接受其作為可量測病變。然而，CT較佳。 δ研究的主要終點為客觀反應評估時，不應將超音波 ^ (US)用以量測腫瘤病變。然而，其為臨床量測表面可觸淋 巴結、皮下病變及甲狀腺結節之可能替代技術eus亦可用 166146.doc -133· 201249430 以證料常藉由臨床檢查評估之表面病變完全消失。 尚未7C全及廣泛確認將内視鏡檢查及腹腔鏡檢查用於客 觀腫瘤”平估。其在此特定背景中之使用需要僅在一些中心 才可獲得之先進設備及高水平專家。因此，該等技術用於 客觀腫瘤反應應限於在專門中心中確認之目的。然而，該 等技術可用於在獲得活組織檢查時證實病理完全反應。 ★單獨腫瘤標記物不可用以評估反應。若標記物最初在正 ίϋ _L P艮以_L ’則f所有㉟變消A時該等標記物冑認為臨床 完全反應之患者而言必須正常化。 細胞學及組織學偶爾可用於區分？11與CR(例如，在治療 後區分諸如生殖細胞腫瘤之腫瘤類型中殘餘良性病變與殘 餘惡性病變）。 "標靶"及"非標靶"病變之基線記錄 每一器官最多5個病變及表示所有涉及器官總計1〇個病 變的所有可量測病變應確定為標靶病變且在基線記錄且量 測。 標乾病變應基於其尺寸（具有最長直徑之病變）及其進行 精確反覆量測（藉由成像技術或臨床上）之適合性來選擇。 將計算所有標靶病變之最長直徑（LD)之和且報導為基線 LD和《基線LD和將用作參考，藉由其表徵目標腫瘤。 所有其他病變（或疾病位點）應確定為非標靶病變且亦應 在基線記錄。雖然不需要量測此等病變，但在整個跟蹤過 程中應注意各病變之存在或不存在。 反應標準 166146.doc •134- 201249430 標靶病變之評估： •完全反應（CR):所有標靶病變消失； •部分反應（PR).以基線LD和作為參考，標靶病變之 LD和減少至少30% ; •疾病進展（PD) ·以自治療開始以來記錄之最小LD和作 為參考，標靶病變之LD和增加至少20%或出現一或多 個新病變； •疾病穩定（SD):以自治療開始以來最小LD和作為參 考，既不足以縮減至符合PR要求，亦不足以增加至符 合PD要求。 非標靶病變之評估： •完全反應（CR):所有非標靶病變消失及腫瘤標記物含 量正常化； •不完全反應/疾病穩定（SD): —或多個非標靶病變存留 或/及腫瘤標記物含量維持超過正常限度； •疾病進展（PD):出現一或多個新病變及/或已存在之非 標靶病變（1)明確進展； •雖然僅"非標靶"病變明確進展為異常的，但在該等情 況下’治療醫師之意見應佔優勢且進展狀態應稍後由 評論組（或研究權威（study chair))證實。 最隹總反應之評估 最佳總反應為自治療開始直至疾病進展/復發所記錄的 最佳反應（以自治療開始以來所記錄之最小量測值作為PD 之參考）。一般而言，患者之最佳反應分配將視量測與證 166146.doc •135- 201249430 實標準之實現而定。

標靶病變 非標靶病變 新病變 總反應 CR CR 無 CR CR 不完全反應/SD 無 PR PR 非PD 無 PR SD 非PD 無 SD PD 任一 有或無 PD 任一 PD 有或無 PD 任一 任一 有 PD 健康狀況全面惡化而需要中斷治療但在彼時無客觀證據 證明疾病進展的患者應分類為具有”症狀惡化"。應盡一切 努力來證明甚至在治療中斷後的客觀進展。 在一些情況下，可能難以區分殘餘疾病與正常組織。當 完全反應之評估取決於此判定時，建議應研究殘餘病變 (細針吸取/活組織檢查）以證實完全反應狀況。 證實 證實客觀反應之主要目標係避免過高估計所觀測到之反 應率。在反應證實不可行之狀況下，應清楚當報導該等研 究之結果時反應未經證實。 為分配PR或CR之狀況，必須藉由應在首先符合反應標 準後不少於4週執行的重複評估證實腫瘤量測值之變化。 如藉由研究方案確定之較長時間間隔亦可為適當的。 在SD狀況下，跟蹤量測必須在進入研究後在由研究方 案中所界定之最小間隔（一般不'少於6-8週）符合SD標準至 166146.doc •136· 201249430 少一次。 總反應持續時間 以自治療開始以來所記錄到之最小量測值作為pD之參 考自符合CR或PR(無論哪一種狀況首先被記錄）量測標準 之時間直至復發或PD被客觀證明之第—日#，量測總反應 持續時間。 疾病穩定持續時間 以自治療開始以來所記錄到之最小量測作為參考，自治 療開始直至符合疾病進展標準，量測SD。 SD持續時間之臨床相關性因不同腫瘤類型及等級而變 化。因此，高度建議方案指定用於測定SD之兩次量測之間 所需的最小時間間隔。此時間間隔應考慮此類狀況可使研 究下之群體恢復的預期臨床益處。 反應評論 對於反應率為主要終點之試驗，強烈建議所有反應應由 獨立於該研究之專家在研究結束時評論》同時對患者檔案 及放射性影像進行評論為最佳方法β 結果報導 必須關於對治療之反應來評估研究中所包括之所有患 者，即使存在嚴重方案治療偏差或該等患者不合格亦如 此。各患者將分配為以下種類之一 ：1}完全反應、2)部分 反應、3)疾病穩定、4)疾病進展、5)由於惡性疾病而早期 死亡、6)由於毒性而早期死亡、7)由於其他原因而早期死 亡或8)未明（不可評估，資料不足 166146.doc •137- 201249430 所有符合合格標準之患者應包括在反應率之主要分析 内》應認為反應種類4-9中之患者無法對治療作出反應^疾 病進展）。因此，不正確之治療時程或投藥不會導致排除 在反應率分析之外。種類4-9之精確定義將為方案所^ 有。 ’、、 所有結論應基於所有合格患者。 接著排除已確定嚴重偏離方案之彼等患者（例如，由於 其他原因而早期死亡、早期中斷治療、嚴重違背方案 等）’可基於患者子集執行子分析。然而，此等子分析可 能不會用作得出關於治療功效之結論的基礎，且應清楚地 報導將患者自分析排除之原因。 應提供95%信賴區間。 實例6 :用BA治療乳癌 lb期開放式劑量擴大研究可評估與化學療法（拓朴替 康、吉西他賓、替莫唑胺及卡鉑+太平洋紫杉醇）併用之 ΒΑ(2·0' 2·8、4·〇、56、8〇及 u 2 mg/kg)在患有晚期乳房 腫瘤之個體中的安全性。來自患者之pBMC的評估展示在 多次給與2.8 mg/kg或更高之BA劑量後pARp抑制顯著且延 長（圖3)。 鑑別BA與各細胞毒性療法之良好耐受組合。所觀測到 之任何毒性與各化學療法之已知及預期副作用一致。無證 據證明B A添加至任何測試細胞毒性療法會增強已知毒性 或增加其預期毒性之頻率。確定在有效臨床前血液濃度下 引起顯著及持續PARP#制之生物學相關劑量（2 8 mg/kg)。 166146.doc 201249430 約80%個體證明疾病穩定2個治療週期或更多治療週期的 證據，指示潛在臨床益處。 實例7 :在轉移性三重陰性乳癌（TNBC)中使用單獨BA或 與吉西他賓/卡鉑併用之BA的2期研究 2期開放式兩組隨機安全性及功效試驗研究與單獨標準 化學療法相比，藉由組合B A與吉西他賓/卡鉑抑制轉移性 TNBC乳癌患者中PARP活性是否可改良臨床受益率 (CBR=CR+PR+SD>6個月）。所驗證之假設為在患有TNBC 之個體中，與單獨使用吉西他賓/卡鉑所實現之45% CBR 相比，添加BA至吉西他賓/卡鉑將與60% CBR相關聯。 終點 主要终點 •臨床受益率（CBR=CR+PR+SD>6個月） • B A之安全性及财受性 次要终點 •總反應率（ORR) •無疾病進展存活期（PFS) 探索性终點 •歸檔的腫瘤組織樣品中PARP基因表現及藥物基因組 學之表徵 • BRCA狀況 •與不具有已知之BRC A突變之個體相比，具有癌症及 此等突變之個體中的反應 •將乳房組織歸類為基底或管狀 166146.doc -139· 201249430 給藥/時程 將個體以1:1比率隨機化至以下任一組中： 試驗组1:在21天週期之第1天及第8天投與吉西他賓 (1000 mg/m2 ; 30 min ’ 靜脈内輸液）+卡鉑（AUC 2 ; 60 min，靜脈内輸液） 試驗组2:在21天週期之第1天及第8天投與吉西他賓 (1000 mg/m2 ; 30 min，靜脈内輸液）+卡鉑（AUC 2 ; 60 min，靜脈内輸液）+在21天週期之第1天、第4天、第8天及 第11天投與BA(5.6 mg/kg，1 h，靜脈内輸液） 所有給藥週期每21天重複。 隨機化至試驗組2之個體在疾病進展後停止試驗。使隨 機化至試驗組1之個體交叉以在疾病進展後接收B a以及吉 西他賓/卡鉑。 關鍵合格標準 •具有藉由RECIST可量測疾病之轉移性乳癌（丨乂期） •在轉移性環境中0-2個先前化學療法方案；允許先前 輔助/新輔助療法 •組織學證明（原發性或轉移性位點）乳癌為呈陰性、 PR呈陰性及藉由免疫組織化學（0、l)HER-2未過度表現或 藉由FISH未擴增基因。 • ECOG 0-1 研究群體 迄今為止，在23個研究點已登記85名患者（表5)。 166146.doc -140· 201249430 表5 : II期研究患者人口統計狀況 A組：吉西他賓/卡鉑 B組：BSI-201+吉西他賓/卡鉑 數目 43 42 年齡(歲），中值(範圍） 51(32-80) 54(35-68) 性別 男性 女性 0(0%) 0(0%) 43(100%) 42(100%) 種族 白人 黑人 未明 29(67%) 32(76%) 8(19%) 6(14%) 6(14%) 4(10%) 新輔助療法 先前化學療法 〇 方案*編號 1 2 3 5 4 5 3 18 13 7 13 1 0 *基於可得資料 ER、PR及HER2表現概況分析 入選該研究係基於研究點之傳統組織學測試。初始活組 織檢查組織之石蠟包埋切片自加入試驗之患者獲得，且表 徵作為TNBC標記物之基因（包括ER、PR、HER2以及 PARP1、Top2A及Ki-67)之狀況。該方法係基於最佳多重 定量RT-PCR以定量評估福馬林固定及石蠟包埋（FFPE)之組 織中的基因表現。將臨床試驗樣品與代表FFPE正常及腫瘤 組織之獨立獲得之對照樣品相比。此外，自證明HER2過 度表現之患者獲得大量樣品。 組織樣品 採集作為正常外科手術程序之部分的樣品且將其在切除 166146.doc • 141 - 201249430 3 0分鐘内速凉。在進行分析之樣品上執行内科病理學評論 及證實。由相鄰組織產生之蘇木精及伊紅（Η&Ε)染色之玻 璃載片用以證實及分類診斷類別且評估贅生性細胞結構。 使用免疫組織化學及螢光原位雜交來測定ER、PR及HER2 之表現。使用樣品調查及管理資料庫（Ascenta, BioExpress databases ; GeneLogic，Inc·, Gaithersburg，MD)來註解此等 結果以及伴隨病理學及臨床資料。 RNA提取及表現概況分析 RNA提取及雜交如Hansel等人所述來執行。使用陣列高 通量應用（Ascenta，Bioexpress Gene Logic, Gaithersburg MD and Affymetrix，Santa Clara，CA)評估陣列資料品質， 其針對多個客觀標準（包括573' GAPDH比率、信雜比及背 景以及其他其他量度）來評估資料。使用Affymetrix微陣列 分析組5.0版、資料挖掘工具2.0及微陣列資料庫軟體 (Affymetrix, Santa Clara, CA)來執行 GeneChip 分析。 GeneChip上所表示之所有基因全面正規化且換算成100之 信號強度。 微陣列資料分析 病理正常之組織樣品係用以測定PARP1 mRNA之基線表 現。計算個別預測值之平均值及90%、95%、99%及99.9% 信賴上限（UCL)。因為吾人正評估在良序集以外之個別樣 品在基線分布内的可能性，所以選擇預測區間而非平均值 之信賴區間來估計將來個別量測結果之預期範圍。預測區 間由下式定義，：Ϋ士必VTTIiT^，其中又為正常乳房樣品之平均 166146.doc -142· 201249430 值，為標準偏差，《為樣品尺寸，且3為具有n-l個自由度 之學生t分布的第100(l-(p/2))百分位。 病理正常之組織樣品係用以測定PARP1之基線表現。根 據包括腫瘤病期、抽煙狀況、CA125狀況或年齡之特徵， 將樣品分成各種亞類。根據90%、95%、99%或99.9% UCL 評估各腫瘤樣品。使用Windows之SAS v8.2執行分析 (www.sas.com) ° 如與PARP 1相比，計算11個探查集之皮爾森相關。相關 係基於194個樣品之全集。皮爾森積矩相關係由下式定 r _ 歹） 義，Txy~， 其中J為PARP1探查集之平均值，且7為與PARP1相關之 (n-2)mr 探查集之平均值。統計顯著性由下式確定，（1_?"2：)1/2，其中 r為相關且η為樣品數目。假定所得值具有自由度為n-2之t 分布。 多重逆轉錄酶-聚合酶鏈反應（RT-PCR): 如先前所述（Khan等人，2007)，使用25 ng各樣品之全部 RNA執行多重RT-PCR。用於此研究之多重檢定經設計以 偵測來自福馬林固定石蠟包埋（FFPE)樣品或來自冷凍組織 之RNA。使用具有Wallac Victo r2 1420多標記計數儀之 RiboGreen RNA定量套組（Invitrogen)來測定RNA濃度。按 照Agilent 2100生物分析儀之說明，在Agilent生物分析儀 上分析來自各樣品之RNA樣品。如先前所述，使用 Applied Biosystems 9700進行逆轉錄（RT)反應。使用 166146.doc •143- 201249430

Applied Biosystems 9700在各cDNA上進行PCR反應。用卡 那黴素RNA使RT反應增敏以監測RT及PCR反應之效率。所 用對照包括陽性對照RNA、無模板對照及無逆轉錄酶對 照。藉由毛細管電泳分析PCR反應。將螢光標記之PCR反 應稀釋，與基因組實驗室尺寸標準-400(Beckman-Coulter) 組合，變性，且使用CEQ 8800遺傳分析系統檢定。將相對 於同一反應内β-葡糖醛酸酶（GUSB)表現之各標靶基因表現 報導為各樣品之3次獨立評估的平均值及標準偏差。 圖4說明加入試驗之首批50名患者之結果。雖然將患者 分類為"三重陰性"係基於使用常規臨床方法之ER、PR及 HER2之結果，但此等結果展示與正常組織相比，ER及PR 基因表現均較低。HER2表現可與正常組織相當，且不同 於過度表現PARP1基因之患者，表現顯著增強證實先前之 觀測結果。 初步結果 安全性 在劑量減少之患者百分比與減少總數方面，劑量減少在 兩組中類似（表6)。 表6 :劑量減少 Α組：吉西他賓/卡鉑 B組：BSI-201+吉西他賓/卡鉑 劑量減少之患者η/Ν(%> 15/39(38.5%) 11/39(28.2%) 總數減少 20 19 如方案中演算法所定義’減少吉西他賓/卡鉑 166146.doc -144· 201249430 在僅化學療法組中，39名個體中有15名（38.9%)劑量減 ’且在BA +化學療法組中，39名個體中有11名（28.2%)劑 量減少。總的來說，吉西他賓/卡鉑組中20個劑量減少， 且BA+吉西他賓/卡鉑組中19個劑量減少。考慮到與組A相 ’且B中、’α與之劑量數為約三倍，進一步加強證明添加 ΒΑ至吉西他賓/卡鉑申之安全性的證據。 不利影響（ΑΕ)之評估展示兩個研究組相當（比率=1〇,未 對研究中總時間進行校正；表7)。 表7不利影響

166146.doc •145- 201249430 精神病 5 2 7 4 2 6 腎及尿病症 4 2 6 4 4 生殖系統及乳房病症 2 2 1 1 呼吸、胸部及縱隔病症 13 5 2 20 4 2 6 皮膚及皮下組織病症 9 6 15 7 1 8 外科手術及醫學程序 1 1 2 2 血管病症 6 2 8 2 2 總共 107 70 29 9 215 93 39 15 4 151 危險比率 1.0 功效 研究組A(單獨吉西他賓/卡鉑）中患者似乎證明疾病進展 比隨機化至研究組B(吉西他賓/卡鉑+BA)之患者早得多。 在同一時間範圍内，與組B中少於1 5%個體疾病進展相 比，在週期2結束時，組A中約有50%個體疾病進展。 使用可用初步資料，進行正式統計分析。此分析展示與 接收單獨吉西他賓/卡鉑之患者相比，接收BA以及吉西他 賓/卡鉑之患者具有顯著較長之中值PFS(211天對67天； Ρ<·0001 ;圖 5)。 對於進行研究之患者而言，預計初步評估臨床受益率 (CBR)為120天及180天（分別為CBR-120及CBR-180)，且展 示於表8中。 表8:臨床效果之初步評估 終點 A. _ f v , 吉茜他卡鉑 B組V -.. ί· . . . V.，. ’ +- 吉西他賓/卡鉑+BSI-201 P 中值PFS 67天 211天 <.0001 CBR-1803 5/20(25%) 10/20(50%) 0.1908 CBR-120b 6/20(30%) 14/20(70%) 0.0256 166146.doc -146- 201249430 a對於首批加入之40名患者，SD(180天）+PR+CR; b對於首批加入之40名患者，SD(120天）+PR+CR; PR測定包括證實及未經證實之反應。 結果展示吉西他賓/卡始+BA組中CBR更大之趨勢。 初步研究結論 基於上文所呈現之結果，可針對2期轉移性TNBC研究得 出以下結論： •登記適當患者。使用傳統IHC與基因表現概況分析， 來自登記之開始50名患者之基因組概況分析的結果指示此 等患者實際上為ER及PR呈陰性且不過度表現HER2。 •兩個研究組中之患者群體相當。 。人口統計學資訊展示各組中中值年齡及行為能力狀況 類似。 。轉移性環境中先前化學療法治療之範圍在兩組中類 似。來自開始69名患者之資料展示在任一研究組中預治療 無顯著差別。BA組中更多患者接收2療程先前化學療法， 表明與接收單獨吉西他賓/卡鉑之個體相比，此等個體潛 在地更難由化學療法治療。 。在劑量減少之患者百分比與減少總數方面，劑量減少 在兩組中類似。在僅化學療法組中，39名個體中有15名 (38_9%)劑量減少’且在ba+化學療法組中，39名個體中有 11名（28.2%)劑量減少。總的來說，吉西他賓/卡鉑組中20 個劑量減少’且BA+吉西他賓/卡鉑組中19個劑量減少。 166146.doc • 147- 201249430 。兩組*AE率類似，支持添加BA至吉西他賓/卡鉑中不 金已知之毒性或產生任何新毒性的結論。 基於中值無疾病進展存活期之中期分析，接收B A以 及吉西他賓/卡鉑之患者展示比接收單獨吉西他賓/卡鉑之 患者顯著之臨床益處（211天對67天；P<.〇QGi)。此等結果 表不比來自其他轉移性1^1]5(：研究之pFs顯著改良。 •對登記之開始4〇名患者臨床受益率之分析展示在添加 BA至吉西他賓/卡在自後改良之趨勢。預計此效應隨著研究 成熟而變得更穩固。 實例8肖太平洋紫杉醇、卡銘及BA之組合治療乳癌 患者具有證明疾病進展之三重陰性轉移性乳癌。需要組 織學上證實初始原發性腫瘤。 所有患者將具有可量測之疾病。將可量測之疾病定義為 可在至少一維（待記錄之最長尺寸）上精確量測之至少一種 病變》^藉由習知技術（包括觸診、普通X射線、cT及 MRI)量測時各病變必須以_，或當藉由螺旋^量測時 >10 mm。 患者將具有至少-個待用以根據此方案評估反應之如 RECIST所定義之"標靶病變"(部分8.1)。除非證明進展或獲 得活組織檢查以證實在放射療法結束後存留至少9〇天否 則在先前照射區域内之腫瘤將指定為"非標靶"病變。此 外，患者必須已自近來外科手術、放射性療法或其他療法 之影響中恢復，且應不具有需要抗生素之活性感染(a* infection) ° I66146.doc •148· 201249430 針對惡性腫瘤之任何激素療法必須在登記之前至少一週 停止。允許繼續激素替代療法。 患者必須具有適當： •骨髓功能：血小板計數大於或等於100,000/微升，及 ANC計數大於或等於1，500/微升，相當於CTCAE v3.0 等級1 ; •腎功能：肌酐小於或等於1 ·5 X慣例正常值上限 (ULN)，CTCAE v3.0等級 1 ; •肝功能：膽紅素小於或等於1.5xULN(CTCAEv3.0等級 1) ; SGOT及驗性填酸酶小於或等於2.5xuln(CTCAE v3.0 等級 1); •神經功能：神經（感覺及運動）小於或等於Ctcae V3.0 等級1 ; •可能生育之患者必須在進入研究之前具有血清呈陰性 之姓娘測試，且實施有效避孕形式。 不合格患者： 已接收先前細胞毒性化學療法來處理乳癌之患者。 具有其他侵襲性惡性腫瘤歷史之患者，其中例外為若在 最後5年内存在其他惡性腫瘤之任何證據，則排除如部分 3.23及3.24中所指明之非黑色素瘤皮膚癌及其他特定惡性 腫瘤。若患者先前癌症治療禁忌此方案療法，則亦排除該 等患者。 排除在最後5年内除用於治療乳癌外腹腔或骨盆之任何 部分接收先該㈣療法之患者。料針對局部乳癌 166146.doc 201249430 及頸癌之先前放射’其限制條件為其在登記之前三年多結 束’且患者仍無復發性或轉移性疾病。 患者可接收針對局部乳癌之先前輔助化學療法其限制 條件為其在登記之前三年多結束，且患者仍無復發性或轉 移性疾病® 症狀性或未經治療之腦轉移需要同時進行治療，包括 (但不限於）外科手術、放射及皮質類固醇。 在研究第1天之6個月内心肌梗塞（MI)、不穩定心絞痛、 紐約〜臟協會（NYHA)類別II以上之充血性心力衰竭（CHF) 或不受控制之高企壓。 痛痛發作病史或目前進行抗癲癎藥物治療。 研究形態 卡銘（Paraplatin®，NSC # 241240) 調配：對於藉由靜脈内輸液投與而言，卡鉑係以無菌凍 乾粉末形式提供’其可以含有50 mg、150 mg及450 mg卡 1白之單一劑量小瓶獲得。各小瓶含有相等重量份之卡鉑及 甘露糖醇。 溶液製備：根據以下目錄，在使用之前必須即刻用無菌 注射用水（USP)、5%葡萄糖水溶液或〇 9%氣化鈉注射液 (USP)將各小瓶之内含物復水： 稀釋體積 5 ml 15 ml 45 ml 小瓶濃度 50 mg 150 mg 450 mg 166M6.doc 201249430 此荨稀釋均產生10 mg/ml之卡翻濃度。 注意：鋁與卡鉑反應，從而引起沈澱形成及效能損失。 因此，可能與藥物接觸之含有鋁部分之針或靜脈内裝置不 得用於卡鉑之製備或投藥。 儲存：當儲存在控制室溫下且避光保存時，未開口之卡 舶小瓶為穩定的，歷時包裝上指示之使用期限。 穩疋性·當根據指示製備時’卡鉑溶液在室溫下穩定8 小時。因為調配物中不含抗菌防腐劑，所以建議卡鉑溶液 在稀釋8小時後棄去。 供應商：可購自 Bristol-Myers Squibb Company。 太平洋紫杉醇（Taxol®，NSC % 673089} 調配：太平洋紫杉醇為一種來自歐洲紫杉汀狀奶 baccata)之可溶性差的植物產物。改良溶解性需要用〇 9% 氣化鈉或5%葡萄糖水溶液進一步稀釋之混合溶劑系統。 太平洋紫杉醇以於5 ml小瓶中50%聚氧乙烯化蓖麻油 (Cremophor EL)及 50。/〇脫水酒精（USP)中 6 mg/mi(每小瓶 3〇 mg)之無菌溶液濃縮物形式提供。小瓶内含物必須正好在 臨床使用之前稀釋。亦可使用1〇〇 „^及3〇〇 mg小瓶。 溶液製備：將適當劑量之太平洋紫杉醇稀釋於500“〇〇〇 ml 0.9。/。氣化鈉注射液（usp)或5%葡萄糖注射液 (USP)(D5W)中（若太平洋紫杉醇為單一藥劑，則5〇〇…為 適當的）。太平洋紫杉醇必須在玻璃或聚烯烴容器中製 備’此係因為來自聚氣乙烯（PVC)袋及靜脈管之鄰苯二曱 酸二乙基已基酯（DEHP)增塑劑會藉由溶解太平洋紫杉醇之 166146.doc -151 - 201249430

Cremophor媒劑浸出。 注意：在製備太平洋紫杉醇後已觀測到溶液中形成少量 纖維（在藉由針對LVP之USP顆粒物質測試建立的可接受限 值内）》因此，投與太平洋紫杉醇溶液，需要在線過濾（inline filtration) 。 在 線過濾 應藉由 將孔徑 不大於 〇22微米之 親水性微孔過濾器（例如：jVEm、IVEX Hp或等效物）併 入在輸液泵遠側之靜脈内流體路徑中來實現。雖然顆粒形 成並不說明藥物效能損失，但不應使用顯示過度顆粒物質 形成之溶液。 儲存：完整小瓶可在20_25<t(36_77〇F)之間的溫度範圍 下儲存於原包裝中》冷;東或冷藏不會不利地影響產品之穩 定性。 穩定性：所有太平洋紫杉醇溶液顯示與藥物濃度及製備 後流逝之時間成正比的輕微渾濁，不過當如上所述製備 時太平洋兔杉醇溶液（0.3-1.2 mg/mL)在周圍溫度（約 25°C )及室内照明條件下物理及化學性質穩定27小時。 供應商：可購自 Brist〇l_Myers Squibb c〇mpany。 才又藥.適當劑量及稀釋之太平洋紫杉醇將會以3小時連 續靜脈内輸液形式給與^經由使用非pvc管及連接器之輸 '' 聲置（泵）诸如用以輸注非經腸硝酸甘油之靜脈内 技藥裝置（聚乙稀或料烴），投與太平洋紫料^無其他 物質輸/主穿過正投與太.平洋紫杉醇之管線。參見部分 5.2。 ψΜΜ) 166146.doc -152· 201249430 BA係以BiPar Sciences之名義製造及包裝且使用則^^批 准之Bs床研九藥物分布程序來分布。BA將會以液體無菌 產物形式呈現於1〇 mL單入口小瓶中β BA係調配於25%羥 丙基β環糊精/10 mM磷酸鹽緩衝液（pH 7 4)中，其中活性成 份濃度為10 mg/mL。各小瓶含有不少於9 〇 mL之可抽出體 積。呈現於標記上關於研究藥物之資訊將遵守ICH要求及 美國食品與藥物管理局（FDA)之要求。8八之散裝小瓶將在 紙箱中運送，每紙箱1〇個小瓶，且將標記上一份標記。標 記將含有以下資訊：關於研究藥物之美國警告聲明、研究 編號、產品名稱、濃度、儲存、再測試日期及研究主辦人 姓名。 溶液製備：如下所述製備B A且將其經丨小時之時間靜脈 内投與： 藉由使用個體基線體重乘以劑量，計算給藥所需之BA 之量（4 mg/kg)。舉例而言， 個體基線體重=70 kg 劑量=4 mg/kg 需要劑量=(4 mg/kgx70 kg)=280 mg BA 將所需BA劑量除以小瓶中ba濃度（10 mg/mL)以確定投 藥所需之B A藥品之毫升數量。例如：

280mg-10 mg/mL=28 mL 計算每小瓶10 mL之BA小瓶數目以獲得需要體積。（使 用此貫例’將需要3個小瓶）。必要時可使用其他小版以獲 得B A之所需體積。 166146.doc -153- 201249430 藉由注射器自小瓶抽出適當體積之BA藥品，且將其置 於旁邊’同時如下製備靜脈内袋：

建議總共250 mL溶液應存在於靜脈内袋中且經i小時傳 遞》使用0.9。/〇 NS或D5W之靜脈内溶液。若以含有250 mL 以上溶液之靜脈内袋開始，則移除及棄去過量溶液加上待 添加至溶液中之藥品總體積。將經計算體積之Ba藥品注 射至靜脈内袋中’且確保充分混合。附接靜脈内管且將溶 液加到其中。注意：可接受使用空的靜脈内袋且注射所計 算之BA體積’且接著添加0.9% NS或5DW以達至250 mL之 總體積。此可能適用於超過5〇 mL之BA體積。 儲存：BA藥品小瓶必須儲存在2-8°C下且避光保存。保 持藥品小瓶在原紙箱中且置放於2_8〇c之溫度控制之單元 中。需要時BA可儲存在25。(：下長達24小時。若BA經測定 在此等儲存條件下尚未操作，則請立即聯繫Bipar。未經

BiPar許可不要使用未儲存在所建議之儲存條件下之小 瓶。 穩定性：在製備後8小時内投與BA。給藥溶液應保持在 周圍溫度（室溫）下，直至向研究個體投與。 供應商：BiPar Sciences Inc。 治療計截 在每21天之第！天，以3小時輸液投與175 太平洋 紫杉醇’接著經30分鐘給與卡麵至AUc = 6〇，加上在第丄 天開始，經1小時輸液之時間靜脈内投與4叫⑽BA，每 週2次（BA給藥必須相隔至少2天），直至疾病進展或不利影 166l46.doc •154· 201249430 響限制進一步療法。認為此3週之時間段為一個治療週 期°超過完全臨床反應之週期數將由治療醫師判斷。不符 合疾病進展標準（部分反應或疾病穩定）之患者應持續進行 研究治療，直至受到毒性限制。 卡鉑之給與：根據Calvert式，使用自jeiHffe式評估出之 腎小球過濾率（GFR)，計算劑量以達到目標濃度χ時間曲線 下面積（AUC)。初始劑量將為AUC=6，經30分鐘輸注。 卡翻之初始劑量必須使用GFR來計算。在不存在新的腎 梗阻或其他腎毒性大於或等於CTCAE v3.〇等級2(血清肌酐 > 1 ·5 xULN)的情況下，卡始劑量不會針對隨後週期重新計 算’但如指示將進行劑量修改。 在具有異常低血清肌酐（小於或等於〇6 mg/di)之患者 中，由於蛋白質攝取減少及/或肌肉質量低，所以肌酐清 除率應使用0.6 mg/dl之最小值進行估計。若在4週治療内 可使用更適當之基線肌酐值，則其亦可用於初始估計 GFR。

Calvert式：卡鉑劑量（rag)=目標 AUCx(gfr+25)。 為達成此方案，認為GFR等於肌酐清除率。使用下式藉 由JeUiffe方法評估肌酐清除率（Ccr) : {98_[〇 %年齡· 2〇)]}CCr=〇.9xScr，其中Ccr=評估之肌酐清除率， ml/min ;年齡=患者年齡（歲）(2〇·8〇) ; 血清肌酐， mg/dl。在不存在新的腎梗阻或血清肌酐升高超過 1.5xULN(CTCAE V3.0等級2)的情況下，卡鉑劑量不會針 對隨後週期重新計算，但如指示將針對血液學標準及其他 166146.doc -155- 201249430 事件進行劑量修改。 提出之化學療法投藥方法：可在⑽患者背景下投與該 方案。以3小時輸液投與太平洋紫杉醇，接著經3()分鐘投 與卡鉑，接著經丨小時投與ΒΑβ BA將靜脈内投與（以輸液 形式，經1小時之時間段），對於研究之持續時間而言每週 兩次。BA劑量必須相隔至少2天（例如，給藥可在星期一/ 星期四、星期-/星期五或星期^星期五進行）。推薦止嘔 療法與太平洋紫杉醇及卡翻治療—起治療&。所用止嚼 療法應基於同行評議過之共識準則。對於單獨給與之BA 劑量而言’無需預防性止嘔劑。 太平洋紫杉醇之預備方案：在此研究，太平洋紫杉醇將 以3小時輸液形式投與。對於投與太平洋紫杉醇之所有週 期而言，建議採用預備方案以降低與過敏性反應有關之危 險。此方案應包括地塞米松（靜脈内或經口）、抗組織胺 H1(諸如，苯海拉明（dlphenhydramine))及抗組織胺H2(諸 如，甲腈咪胍（cimetidine)、雷尼替丁（ranitidine)或法莫替 丁（famotidine))。 用於劑量計算之最大體表面積將為2.0 m2。 若副作用不嚴重，則在研究者之判斷下可保持患者無限 地使用研究藥劑。在治療醫師之判斷下，實現完全臨床反 應之患者可繼續額外週期》 評估標準 反應參數-RECIST標準 可量測之疾病係定義為可在至少一維（待記錄之最長尺 166146.doc •156- 201249430 寸）上精確量測之至少一種病變。當藉由習知技術（包括觸 5多、普通X射線、CT及MRI)量測時各病變必須220 mm， 或當藉由螺旋CT量測時210 mm。 "標靶”及"非標靶"病變之基線記錄 每—器官最多5個病變及代表所有涉及器官總計1〇個病 變的所有可量測病變應確定為標靶病變且將在基線記錄且 置測。標靶病變應基於其尺寸（具有最長尺寸之病變）及其 藉由種一致評估方法（藉由成像技術或臨床上）進行精確 重複量測之適合性來選擇。將計算所有標靶病變之最長尺 寸（LD)之和且報導為基線LD*。基線[〇和將用作參考以 進—步表徵疾病之可量測尺寸之客觀腫瘤反應。 所有其他病變（或疾病位點）應確定為非標靶病變且亦應 在基線記錄。無需量測且此等病變應作為,,存在”或"缺 跟縱。 、 /疾病狀況之所有基線評估㈣可能接近於治療開始來執 行且决不應在治療開始之前超過4週。 最隹反應 量測各病變尺寸之最長尺寸需要跟縱。此等尺寸和之 :提供腫瘤尺寸變化之—些評估及因此提供治療功效之 =估。所有疾病必須使用與基線相同之技術來評估。 導個別狀況下此等變化廄 現之最佳反應。b應根據自進入研究以來該狀況所」 完全以⑽)㈣非標㈣㈣失 4週之兩個㈣評估未__讀耗。 166146.doc -157· 201249430 4分反應（PR)為以基線最長尺寸（LD)和作為參考，所有 標乾可量測病變之LD和減少至少鳩。非標乾病變無明確 進展且無新病變。需要由相隔至少4週之兩個疾病評估來 a己錄》在唯H錢為藉由身體檢查所量測到之孤立盆 腔腫塊（其不可藉由放射攝影術量測）之狀況下，需要1^0減 少 50〇/〇。 增強疾病為以最小LD和作為參考，標靶病變之ld和增 加至少20%或進人研究8週内出現新病變。據^療醫師之 意見，在進入研究8週内，除在細胞學上未證明具有贅生 性來源之胸膜積液以外’認為已存在之非標靶病變的明確 進展亦為增強疾病（在此情況下，必須提供解釋）。在唯一 標靶病變為藉由身體檢查所量測到之孤立盆腔腫塊（其不 可藉由放射攝影術量測）之狀況下，需要LD增加5〇%。 症狀惡化係定義為健康狀況歸因於該疾病全面惡化，需 要改變療法而無客觀證據證明進展。 疾病穩定為不符合以上標準之任何情況。 反應不可評㈣定義為在研究療法開始後由於與疾病症 狀或徵象無關之原因而未進行重複腫瘤評估。 進展（可置測之疾病研究）係定義為以下任一者： 以自進入研究以來所記錄之最小[〇和作為參考標靶 病變LD和增加至少2〇〇/0 在唯一標靶病變為藉由身體檢查所量測到之孤立盆腔腫 塊（其不可藉由放射攝影術量測）之狀況下，以自進入研究 以來所記錄到之最小LD作為參考，需要LD增加5〇%。 166146.doc -158- 201249430 出現一或多個新病變 由於疾病而死亡，不具有進展之先前客觀記錄 健康狀況歸因於該疾病而全面惡化，需要改變療法而無 客觀s登據證明進展 據/α療邊師之意見，除在細胞學上未證明具有贅生性來 原~膜積液以外，已存在之非標纪病變明確進展（在此 情況下，必須提供解釋）。 復發（不可量測之疾病研究）係定義為自進人研究以來疾 病之臨床、放射性或組織學證據增強。 、 存活期為所觀測到之自進入研究至死亡或最後接觸曰期 的壽命長唐。 無疾病進展存活期（可量測之疾病研究）為自進入研究直 至疾病進展、死亡或最後接觸日期之時期。 無復發存活期（不可量測之疾病研究）為自進入研究直至 疾病復發、死亡或最後接觸日期之時期。 且副作用根據 主觀參數包括行為能力狀況、特定症狀， CTCAE v3.〇分級。 研究持續時間 患者將接收療法，直至疾病進展或不可耐受之毒性介 二可在任何時候拒絕研究治療。具有對療法之完全 -的患者將在治療醫師之判斷τ繼續領外週期 非不可耐受之毒性阻止進—步療法，否則具有部 刀反應或疾病穩定之患者應繼續療法。 /α療所有患者（完成所有需要之病例報告形式），直至疾 166146.doc •159- 201249430 病進展或退出研究 接下來三年中每6個 非同意退出，否則 活期，監測患者， 〇 °接著在開始兩年中每三個月且接著在 月追蹤患者（進行身體檢查及記載）。除 針對此5年時期’將關於遲發毒性及存 其中Q表格提交至GOG統計及資料中 實例9 · ^蛾-9·確基苯甲醯胺（BA)與γ照射之組合 一重陰丨生乳癌細胞MDA-MB-468係自ATCC獲得且培養 於具有10%胎牛血清之達爾伯克改良伊格爾培養基中。在 不同^度化合物或DMSO對照存在下，以每Ρ100細胞培養 盤10個細胞或每Ρ6〇細胞培養盤丨〇4個細胞來塗細胞。在 處理之後，使用庫爾特計數器且藉由用丨％亞甲基藍染色 來量測附著細胞數目。將亞甲基藍溶於甲醇與水之50%-50/〇混〇物中。將細胞塗在24或％孔板中且按計劃處理， 吸出培養基，將細胞用PBS洗滌，固定於曱醇中51〇 min，吸出f醇且使培養板完全乾燥。將亞甲基藍溶液添 加至孔中且將培養板培育5 min。移除染色溶液且將培養 板用dH2〇洗滌，直至洗滌液不再呈藍色。在培養板完全乾 燥後’將少量IN HC1添加至各孔中以萃取亞甲基藍。在 600 nm下讀出OD且使用校正曲線來測定細胞數目。 將BA化合物直接自乾粉溶解成DMSO中的10 mM儲備溶 液’用於各單獨實驗。使用匹配體積/濃度之媒劑（DMSO) 進行對照實驗；在此等對照中，細胞未展示其生長或細胞 週期分布變化。 PI排除、細胞週期、TUNEL檢定及BrdU標記檢定如上文 166146.doc •160· 201249430 實例2中所述執行。 在100 μΜ BA存在的情況下或無1〇〇 μΜ BA存在的情況 下，用3戈雷（gray)y照射治療MDA-MB-468癌細胞。如圖6 中所示，在人類三重陰性乳房MDA-MB-468癌細胞中，BA 增強S及G2/M細胞週期停滯且增強γ照射之抗增殖效應。 雖然本文中已展示且描述本發明之較佳實施例，但對於 熟習此項技術者而言該等實施例顯然僅以實例方式提供。 在不偏離本發明之情況下，熟習此項技術者現將進行多種 變化、改變及取代。應瞭解本文所述之本發明實施例之各 種替代可用於實施本發明。意欲以下申請專利範圍定義本 發明之範疇且在此等申請專利範圍範疇内之方法及結構及 其等效物涵蓋於其中。 【圖式簡單說明】 圖1展示人類原發性癌症中PARP1基因表現上調。水平 線：中值PARP1表現；盒：四分位數間距；條：標準偏 差。 圖2展示4-碘-3-硝基苯曱醯胺加上卡鉑或吉西他賓對活 體外TNBC細胞週期進程之影響。MDA-MB-463 TNBC細胞 之存活力係藉由FACS分析來定量。 圖3展示來自接收4-碘-3-硝基苯甲醢胺之患者之周圍單 核血液細胞（PMBC)中PARP受到抑制。 圖4展示來自轉移性TNBC中2期試驗之人類乳房腫瘤樣 品的PARPl、ER、PR及HER2表現概況分析。將資料正規 化為β-葡糖醛酸酶基因表現。資料表示50個臨床乳癌樣品 166146.doc -161 - 201249430 及19個正常乳房樣品之分析。垂直線表示中值基因表現， 且盒表示四分位數間距。 圖5展示接收4-碘-3-硝基苯甲醯胺加上吉西他賓/卡鉑對 比單獨吉西他賓/卡鉑之轉移性TNBC患者中PFS之卡普蘭-邁耶曲線。使用卡普蘭-邁耶法概述兩治療組中PFS之分 布。使用5%顯著水準下之雙面對數秩檢驗比較兩組。 G/C :吉西他賓/卡鉑；G/C+BA :吉西他賓/卡鉑+4-碘-3-硝基苯曱醯胺（BA)。 圖6展示4-碘-3-硝基苯曱醯胺（BA)在人類三重陰性乳房 MDA-MB-468癌細胞中增強S及G2/M細胞週期停滯且增強γ 照射之抗增殖效應。 166146.doc 162-

Claims (1)

1. 201249430 七、申請專利範園： 1. 一種4-碘-3-硝基苯甲醯胺或其代謝物或其醫藥上可接受 之鹽及伊立替康（irinotecan)之組合，其係用於治療雌激 素受體（ER)、孕酮受體（PR)及人類表皮生長因子受體 2(HER2)呈陰性之乳癌。 2. 如μ求項1之組合，該用途產生至少一種選自下列所組 成之群之治療效果：乳房腫瘤尺寸減小、轉移減少、症 狀完全緩解、症狀部分緩解、疾病穩定或病理完全反 應0 3. 4. 5. 7. 如請求項1之組合，其中相較於以該伊立替康而無施用心 碘I硝基苯甲醯胺之治療’獲得可比的臨床受益率 (CBR=CR(症狀完全緩解）+pR(症狀部分緩解）+SD(疾病穩 定）>6個月）。 如請求項3之組合，其中該臨床受益率之改善至少6〇%。 如”月求項1至4中任-項之組合，其中該乳癌處於！期、π 期或III期。 长項1之組合’其中該治療進—步包含外科手術、 放射療法、化學療法、基因療法、DNA療法、病毒療 = 療法、輔助療法、新輔助療法、免疫療法、奈 米療法或其組合。 ::求項1之組合’其中該治療進一步包含向患者投與γ 8. 9. 如請求項1 如請求項i 之組合，其中該乳癌為浸潤性導管癌。 至4、6及7中任一項之組合，其中該乳癌為轉 166146.doc 201249430 移性乳癌。 10. 如請求項丨至4、6及7中任一項之組合，其中投與有效量 之4-峨-3 -硝基苯曱醯胺或其代謝物或其醫藥上可接受之 鹽。 11. 如請求項1至4、6及7中任一項之組合，其中4_碘_3_硝基 苯曱酿胺或其代謝物或其醫藥上可接受之鹽及伊立替康 係以獨立之劑型提供並相繼投與。 12. 如請求項丨至4、6及7中任一項之組合，其中4碘·3•硝基 苯甲醯胺或其代謝物或其醫藥上可接受之鹽及伊立替康 係同時投與》 13. —種4·碘-3-硝基苯甲酿胺或其代謝物或其醫藥上可接受 之鹽及伊立替康之組合之用途’其係用於製備治療雌激 素受體（ER)、孕酮受體（PR)及人類表皮生長因子受體 2(HER2)呈陰性之乳癌之藥物。 14. 一種組合物，其係包含醫藥上可接受載劑中之4·碘·^硝 基本甲醯胺或其代謝物或其醫藥上可接受之鹽及伊立替 康。 15. —種4-碘-3-硝基苯甲醯胺或其代謝物或其醫藥上可接受 之鹽之用途，其係用於製備治療雌激素受體（ER)、孕酮 艾體（PR)及人類表皮生長因子受體2(HER2)呈陰性之乳 癌之藥物，其中該藥物係用於與伊立替康相繼或同時投 與。 166146.doc -2 ·