TW200524576A

TW200524576A - Chemical compounds

Info

Publication number: TW200524576A
Application number: TW093132865A
Authority: TW
Inventors: Magnus Polla; Petter Bjorquist; Malcolm Buchanan; Marc Campitelli; Anthony Carroll; Edward Hyde; Juliette Neve; Greg Pierens; Ron Quinn
Original assignee: Astrazeneca Ab
Priority date: 2003-10-29
Filing date: 2004-10-29
Publication date: 2005-08-01
Also published as: WO2005039617A1; AR046612A1; UA85199C2; BRPI0415964A; JP2008501622A; KR20060132596A; SA05250463B1; IS8471A; CN1897963A; CA2543630A1; IL175198A0; CO5690614A2; SE0302853D0; RU2365594C2; SA05250463A; ZA200603355B; AU2004283643A1; US20080039376A1; EP1689424A1; AU2004283643B2

Description

200524576 零 , 九、發明說明：【發明所屬之技術領域】本發明係關於新穎化合物及其醫藥上可接受之鹽，其抑制驗性羧肽酶、更且體而士鉍 ^ 而σ羧肽酶U，且因此可用於預防及治療其中抑㈣肽酶u可獲益之疾病，諸如血液及組織中之血栓症及血液凝結過快、動脈粥樣硬化、黏連、皮膚疤痕、癌症、纖維化病症、發炎疾病及受益於维持或增強體内緩激肽含量之彼等病症。在其它態樣中，本發明係關於本發明之化合物於治療中之料；製備該等新賴化合物之方法；含有至少一種本發明化合物或其醫藥上可接受之鹽作為活性成份之醫藥組合物；及該等活性化合物用於製造供上述醫學用途的藥物。【先前技術】纖維蛋白溶解係一係列酶反應導致纖維蛋白藉由纖溶酶 (plasmin)而降解之結果。纖溶酶原（p][asmin〇gen)之活化係纖維蛋白溶解中之中心步驟。裂解纖溶酶原以產生纖溶酶係藉由纖溶酶原活化劑、即組織型纖溶酶原活化劑（t_pA) 或尿激酶型纖溶酶原活化劑（U_PA)來完成的。纖維蛋白之初始纖溶酶之降解產生了充當纖溶酶原高親和力結合點之敌基末端離胺酸殘基。因為與纖維蛋白結合之纖溶酶原比游離纖溶酶原更易於活化成為纖溶酶，所以該機制提供了纖維蛋白溶解之正反饋調節。纖維蛋白溶解之内源性抑制劑之一係羧肽酶U(CPU)。 CPU亦稱作血漿羧肽酶B、活性凝血酶可活化之纖維蛋白溶 96606.doc 200524576 解抑制劑（TAFIa)、羧肽酶R及誘導性羧肽酶活性。在血液凝結及纖維蛋白溶解期間，CPU藉由諸如凝血酶、凝血酶-血栓調節蛋白複合物（thrombin-thrombomodulin complex) 或纖溶酶之蛋白水解酶的作用自其前體proCPU而形成。 CPU於纖維蛋白片段之羧基末端處裂解鹼性胺基酸。損耗羧基末端離胺酸且進而損耗纖溶酶原之離胺酸結合點然後足以抑制纖維蛋白溶解。藉由抑制纖溶酶原之離胺酸結合點之損耗且由此增加纖溶酶形成之速率，預期羧肽酶U之有效抑制劑可促進纖維蛋白溶解。據報導，2-酼基甲基-3-胍基乙硫基丙酸為羧肽酶N抑制劑。最近，該化合物顯示可抑制CPU，Hendriks, D·等人， Biochimica et Biophysica Acta，1034 (1990) 86-92 〇據報導，胍基乙基M基琥珀酸為羧肽酶N抑制劑。最近，該化合物顯示可抑制CPU，Eaton，D. L·等人，The Journal of

Biological Chemistry，266 (1991) 21833-21838。

WO 00/66550、WO 00/66557、WO 03/013526 及 WO 03/027128中揭示了 CPU抑制劑，且WO 00/66152中揭示了含有CPU抑制劑及凝血酶抑制劑之醫藥調配物。WO 01/19836中揭示了血漿羧肽酶B抑制劑。WO 02/14285、WO 03/061652及 WO 03/061653 中揭示了 TAFIa抑制劑。環狀項圈藻肽型肽類於下列文獻中揭示·· Tetrahedron Letters，第 36卷，第 9期，第 15 11-1 5 14 頁，（1995) ; J. Org· Chem. (1997) 62^ 6199-6203 ; Tetrahedron Letters，第 36卷，第 33期，第 5933-5936頁，（1995) ; J· Nat. Prod· (1996) 59 96606.doc 200524576 5 70-5 75 ; Tetrahedron Letters’ 第 38 卷，第 31 期，第 5 525-5528 頁，（1997) ; J· Nat· Prod· (1997) 6_0 139-141 ； Tetrahedron 54 (1998) 6719-6724 ； Bioorganic & Medicinal Chemistry

Letters 9 (1999) 1243-1246 ； Tetrahedron 56_ (2000) 725-733 ;J. Nat· Prod. (2000) 63. 1280-1282 ； J. Nat. Prod. (2001) 64. 第 8期 1053 ; Tetrahedron 扭（2002) 6863-6871 及 J. Nat. Prod. (2002)1187-1189。【發明内容】現在已發現式（I)之化合物：

或其醫藥上可接受之鹽或溶劑化物，或該鹽之溶劑化物為羧肽酶U抑制劑特別有效且因此適用於作為藥物供治或預防其中抑制羧肽酶U可獲益之病症，如治療或預防下 ;丙症血液及/或組織中之血栓症及/或血液凝結過快；動粥樣硬化，黏連；皮膚症痕，·癌症；纖維化病症；發炎病，受益於維持或增強哺乳動物（諸如人類）體内緩激肽含之病症；蛋白質C抗性；抗凝血酶ΠΙ、蛋白質C、蛋白^ 或肝素輔因子Π遺傳性或獲得性缺損；循環性或敗血症性 /盾裒抗月曰抗體，咼同半胱胺酸血症；肝素誘導之小板減少症；纖維蛋白溶解之缺陷；靜脈血栓症；肺检塞 96606.doc 200524576 動脈血栓症（如於心肌梗塞、不穩定心絞痛、基於血栓症之中風或末梢動脈血栓症中;)；通常在心房纖維性顫動期間源自心房或在透壁性心肌梗塞後源自左心室之系統性栓塞；預防血栓溶解後之再閉合及再狹窄（即血栓症）；經皮刺穿内介入（PTI)及冠狀動脈旁路手術；總體預防顯微外科手術及脈管外科手術後之血栓症復發；由細菌、多處創傷、中毒或其它任何機制引起之彌漫性脈管内血液凝結；血液與體内異物(如脈管移植物、脈管支架、脈管導管、機械或生物修復瓣膜（prosthetic valve)或任何其它醫學裝置）表面接觸時之纖維蛋白溶解處理；血液與體外醫學裝置接觸時（如在使用心肺機進行心血管外科手術期間或在血液透析中）之纖維蛋白溶解處理；預防經受器官移植（如腎移植）之患者中動脈粥樣硬化發展及/或移植物排斥；抑制腫瘤成熟及發展；其中纖維化為作用因素之任何病症（如囊腫性纖維化: 肺纖維化疾病如慢性阻塞性肺病（c〇pD)、成人啤吸箸迫症候群（ARDS)、纖維肌性發育不良、纖維化肺疾病或眼外科 :術期間纖維蛋白沉積於眼内）；炎症（如哮喘、關節炎、子呂内膜異位、發炎腸道疾病、牛皮癬或異位性皮炎)；神經 =化性疾病b阿兹海默氏症（Alzheim㈣及帕金森症 = lnsons);或已知受益於維持或增強緩激狀含量之病症 i :血[Ί痛、心力衰竭、肺動脈高壓、腎衰竭或器

吕农竭）。 W 因此，本發明提供式⑴化合物之用途： 96606.doc 200524576

其中： X為（CH2)mY(CH2)n ; m及η獨立地為1、2、3、4、5或6 ;其限制條件為m+11不大於6 ; Y 為一鍵、0、s(o)P、或 S-S ; R為C02R15或一種竣酸電子等排物（isostere)如S(0)20H、 S(0)2NHR15、p〇(〇R15)〇H、PO(OR15)NH2、B(OR15)2、 P0(R15)0H、P0(R15)NH2或四唾； R 、R 、R4、r5及r6獨立地為氫、Cl6烧基（視情況經鹵素、羥基、氰基、SH、S(0)3H、烷基）、0C(0)(Cb4 烧基）、CF3、C"烧氧基、0CF3、COOH、C0NH2、CONI^Ci 6 烷基）、NH2、CNH(NH2)、或 NHCNH(NH2)取代）、c3_6 環烷基（C!·4)烧基（其中環烧基環視情況經鹵素、經基、氰基、

Ci-4烷基、cf3、c]_4烷氧基、〇CF3、nh2、cnh(nh2)或 NHCNH(NH2)取代）、雜環基（Cl·4)烷基（其中雜環基環視情況經ii素、羥基、氰基、Cl_4烷基、CF3、C】-4烷氧基、〇CF3、 NH2、CNH(NH2)或 nhcnh(nh2)取代）、苯基（CN4)烧基（其中苯基環視情況經鹵素、羥基、氰基、Cl-4烷基、cf3、CN4 烧氧基、OCF3、NH2、cnh(nh2)或 NHCNH(NH2)取代）或雜 96606.doc •10- 200524576 方基（Ci_4)烧基（其中雜芳某擇^目p I視情況經ii素、經基、氰基、

Ci.4燒基、cf3、cle4燒氧其、n 乳 I 0CF3、nh2、cnh(nh2)或 nhcnh(nh2)取代）； R12及R13獨立地為H4Cl.4烷基 P及q獨立地為0、1或2 ; R7、R8、R9、R10、Rll、 R14為烷基；且， R15為H或cN4烷基；

或其醫藥上可接受之鹽或溶劑化物，或該鹽之溶劑化物； ^係用於種裝&供治療或預防其中抑制缓肽酶u可獲益的病症之藥物的方法中，例如供治療或預防下列病症：血液及/或組織中之血拴症及/或血液凝結過快；動脈粥樣硬化；黏連；皮膚症痕；癌症；纖維化病症；發炎疾病；受益於維持或增強哺乳動物(諸如人類)體内緩激肽含量之病症；蛋白質c:抗性，·抗凝血酶m、蛋白質c、蛋白fs或肝素，因子Π遺傳性或獲得性缺損；循環性或敗血症性休克；循核抗磷脂抗體；高同半胱胺酸血症；肝素誘導之血小板減少症；纖維蛋白溶解之缺陷；靜脈血栓症；肺检塞；動脈血拴症(如於心肌梗塞、不穩定心絞痛、基於血栓：之中風或末梢動脈血栓症中）；通常在心房纖維性顫動期間源自心房或在透壁性心肌梗塞後源自左心室之系統性栓塞；預 :血拴溶解後之再閉合及再狹窄(即血栓症)；經皮刺穿腔 "入（PTI)及冠狀動脈旁路手術；總體預防顯微外科手術及脈管外科手術後之血栓症復發；由細菌、多處創傷、中丁毒或任何其它機制引起之彌漫性脈管内血液凝結；血液與Z 96606.doc 200524576 内異物(如脈管移植物、脈管支架、脈管導管、機械或生物 t復瓣膜或任何其它醫學裝置）表面接觸時之纖維蛋白溶解處血液與體外醫學裝置接觸時（如在使用心肺機進行〜血Β外科手術期間或在血液透析中）之纖維蛋白溶解處理；預防經受器官移植（如腎移植）之患者中動脈粥樣硬化發展及/或移植物排斥；抑制腫瘤成熟及發展；其中纖維化為作用=素之任何病症（如囊腫性纖維化、肺纖維化疾病如慢性阻錄肺病（C〇PD)、成人呼吸箸迫症候群（ARDS)、纖維肌性毛月不良、纖維化肺疾病或眼外科手術期間纖維蛋白積於眼内）’火症（如哮喘、關節炎、子宮内膜異位、發炎腸道疾病、牛皮癖或異位性皮炎)；神經退化性疾病如阿兹 $默氏症及帕金森症；或已知受益於維持或增強緩激肽含量之病症（如高血壓、心絞痛、心力衰竭、肺動脈高麼衰竭或器官衰竭）。在本發明之情形中’除非特定指示相反含義，否則術注 "治療"包括"預防"。術語"治療性"及"治療性地，，亦應作相應理角午。在-特^態樣中，本發明提供如本文所描述之式⑴化合物以用於製造供治療或預防下列病症之藥物的方法中血 :技/或組❹之血栓症及/或血液凝結過快；動脈粥樣硬匕兮纖維化病症’ ·發炎疾病；或受益於維持或增強哺乳動物（邊如人類）體内緩激肽含量之病症。態樣中，本發明提供如本文所描述之式⑴化合物乂用於製造供治療或預防下列病症之藥物的方法令··血液 96606.doc -12- 200524576 及/或、.且織中之血栓症及/或血液凝結過快；動脈粥樣硬化；纖維化病症，或X盈於維持或增強哺乳動物（諸如人類）體内緩激肽含量之病症mm療或預防血液及/或組織中之血栓症及/或血液凝結過快之藥物。式⑴之化合物以異構體形式存在且本發明涵蓋所有該等形式及其所有比例之混合物。兩種對映異構物之純對映異，物、外消旋混合物及均等及不均等混合物皆在本發明之範圍内。亦需瞭解所有可能之非對映異構體形式均在本發明之範圍内。式⑴之化合物可為-種鹽之形式。合適之鹽類包括酸加成鹽類’ ^鹽酸鹽、二鹽酸鹽、氫㈣鹽、錢鹽、硫酸 ^乙^鹽雙乙酸鹽、反式丁烯二酸鹽、順丁烯二酸鹽、 /酉石fed柊铋酸鹽、草酸鹽、曱磺酸鹽或p-甲苯磺酸鹽。孤類亦包括金屬鹽類’如驗金屬鹽（如納或鉀鹽）或驗土金屬鹽（如鎭或約）。術語C,.道基表示鏈中具有丨至4個碳原子之直鏈或支鍵烷基。烷基實例包括甲[乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第二丁基及第三丁基。術語Cw烧氧基表示烧基_〇基團，其中烧基係直鍵或支鍵且實例包括甲氧基及乙氧基。 S素包括氟、a、溴及碘(但其係例如氟、氯或溴）。環烷基係例如環丙基、環戊基或環己基。術W雜％基表不含有碳及至少一個（如一或兩個）選自氮、氧或硫之原子的非芳族環。雜環基為（例如比哈咬基、 96606.doc -13- 200524576 哌啶基、哌嗪基或嗎啉基。

苯基烷基係例如苄基或丨_苯基乙_2_基。環烧基烧基係例如環己基甲基。雜烧基烧基係例如TJ引蜂_ 3 _基甲基。雜環基烧基係例如。辰咬_ 1 _基甲基。在另一悲樣中’本發明提供式（I)之化合物：

其中： X為（CH2)4 ; R1 為 C02R15 ; R2為於其末端處經nh2、cnh(nh2)或nhcnh(nh2)取代之直鏈 Cu烷基；經NH2、CNH(NH2)或 NHCNH(NH2)取代之 C3-6 環烧基；含有至少一個氮原子之雜環基；經NH2、cnh(nh2) 或NHCNH(NH2)取代之非含氮雜環基；經nh2、cnh(nh2) 96606.doc -14- 200524576 或NHCNH(NH2)取代之雜芳基；經NH2、CNH(NH2)或 · NHCNH(NH2)取代之苯基；經 NH2 、CNH(NH2)或 * NHCNH(NH2)取代之雜芳基（Ci.4)烷基；經 nh2、cnh(nh2) 或NHCNH(NH2)取代之苯基（Ci-4)烷基；或經nh2、cnh(nh2) 或NHCNH(NH2)取代之C3.6環烷基（Cm)烷基；以上所有環視情況進一步經一或多個下列各基取代：處素、羥基、氰基、Cb4烷基、CF3、C"烷氧基或OCF3 ; R3、R4、R5及R6之一獨立地為氫、雜芳基（Cw)烷基（其中雜鲁芳基環視情況經鹵素、羥基、氰基、Cw烷基、CF3、CN4 烷氧基、〇CF3、NH2、CNH(NH2)或 NHCNH(NH2)取代）；且其餘獨立地為氫、Cm烷基（視情況經鹵素、羥基、氰基、 SH、S(0)3H、SCCOJCu烷基）、0(:(0)((^-4烷基）、CF3、Cm 烷氧基、ocf3、cooh、conh2、conh(cN6烷基）、nh2、 CNH(NH2)或 NHCNH(NH2)取代）、C3_6 環烷基（Cm)烷基（其中環烷基環視情況經鹵素、羥基、氰基、C!_4烷基、CF3、

Cw烷氧基、0CF3、NH2、CNH(NH2)或 NHCNH(NH2)取代）、春雜環基（Chd烷基（其中雜環基環視情況經鹵素、羥基、氰基、Cw烷基、CF3、Ci-4烷氧基、ocf3、nh2、cnh(nh2) 或nhcnh(nh2)取代）、苯基（Chd烷基（其中苯基環視情況經鹵素、羥基、氰基、Cm烷基、CF3、Cw烷氧基、OCF3、 NH2、CNH(NH2)或NHCNH(NH2)取代）或雜芳基（Cw)烷基 (其中雜芳基環視情況經鹵素、羥基、氰基、CN4烷基、CF3、 ·

Cw 烷氧基、0CF3、NH2、CNH(NH2)或 NHCNH(NH2)取代）； · p及q獨立地為0、1或2 ; 96606.doc -15- 200524576 R、R8、R9、R1G、R"、R12及R13獨立地為11或(：1_4烷基； R14為Η*。】·*；!：完基；且， R15為11或（：1.4烷基；或其醫藥上可接受之鹽或溶劑化物，或該鹽之溶劑化物。在另一態樣中，本發明提供式⑴之化合物：

其中： R1 為 C02R15 ; R2為於其末端處經nh2、CNH(NH2)或NHCNH(NH2)取代之直鏈Ci_6烷基；c4烷基（如ch(ch3)ch2ch3或 CH2CH(CH3)2);或（胺基吡啶基）甲基（如（6-胺基吼咬|基）甲基）’ R及R之一為視情況經鹵基或經基取代之（π引。朵_ 3 _ 基）CH2 ;且另一為苄基（視情況經鹵基或羥基取代）或q烧基（如 CH(CH3)CH2CH3 或 CH2CH(CH3)2); 或R3及R4兩者皆為甲基； R5 及 R6獨立地為 Cw 烷基（如 CH3、CH(CH3)2、CH(CH3) ch2ch3 或 ch2ch(ch3)2); R7、R8、R9、Rn、、R13AR1、H ; R為C 1 _ 4烧基；且 R15為H或CN4烷基。 96606.doc -16- 200524576 在另-態樣巾，本發明提供具有如下所示對掌性的式⑴ 之化合物：

在本發明之一態樣中X為（ch2)4。在本發明之另一態樣中R1為C〇2Ri5，其中R!5為Η或Cl-4 烧基（如甲基）。在又一態樣中R2為於其末端處經NH2、CNH(NH2)或 NHCNH(NH2)取代之直鏈Cl·6烷基；C4烷基（如 CH(CH3)CH2CH3或CH2CH(CH3)2);或（胺基ϋ比啶基）甲基（如 (6-胺基吼啶-3-基）甲基）。在本發明之另一態樣中R2為C】-6烷基（如異丙基、籲 CH(CH3)CH2CH3或CH2CH(CH3)2)、苄基、或於其末端處經 NH2、CNH(NH2)、NHCNH(NH2)或（6-胺基吡啶-3-基）甲基取代之直鏈C!·6烷基。在另一態樣中R2為於其末端處經 NH2、CNH(NH2)、NHCNH(NH2)或（6-胺基吡啶-3-基）甲基取代之直鏈CN6烷基。仍在本發明之另一態樣中R3為CH2吲哚基（其中吲哚基視 · 情況經一或多個下列各基取代：鹵素（如氯或溴）或羥基）、 · C!·4烧基或苄基（視情況經鹵素（如溴）或經基取代）。 96606.doc -17- 200524576 在本發明之另一態樣中R4為Ο：%吲哚基（其中吲哚基視情況經一或多個下列各基取代：鹵素（如氯或溴）或羥基）、ci 6 烷基（如甲基、異丙基、ch(ch3)ch2ch3 或 ch2ch(ch3)2) 或苄基（視情況經鹵素（如溴）或羥基取代）。在本發明之另一態樣中R5及R6獨立地為C16烷基（如甲基、異丙基、ch(ch3)ch2ch3或ch2ch(ch3)2)。在本發明之另一態樣中R7、R8、、r11、r12、r13及r14 皆為H。仍在本發明之另一態樣中Ri〇為Ci-4烷基（如甲基）。仍在另一態樣中，本發明提供式⑴之化合物，其係醫藥學上可接受之鹽或其溶劑化物或其醫藥學上可接受之鹽的浴劑化物之化合物1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、 12 、 13 、 14 、 15或16 。本發明之化合物可藉由此項技術中已知或與實例3及4方法類似之方法製備。應瞭解若採取文獻或實例3及4之方法’則可需要藉由保護基來保護中間體化合物之官能基。需要保護之官能基包括經基、魏酸酯及胺基。經基之合適保護基包括三烷基甲矽烷基或二芳基烷基甲矽烷基（如第三丁基二曱基甲矽烷基、第三丁基二苯基曱矽烷基或三甲基甲矽烷基）、四氫哌喃基、第三丁基、甲氧基甲基、苄氧基曱基及4-甲氧基节基。羧酸酯之合適保護基包括烯丙基、乙基、第三丁基及节基酯類。胺基之合適保護基包括第三丁氧基羰基、2,4,6-三甲氧基苄基及苄氧基羰基。 ’Protective Groups in Organic Synthesis’，第三版，T.W. 96606.doc -18 - 200524576

Greene & P.G.M. Wutz，Wiley-Interscience (1999)中描述了保護基之使用。保護基團亦可為聚合樹脂，例如王樹脂 (chorotrityl chloride)或 2-氣三苯甲基氯（2-ch〇r〇trityl chloride)樹脂。或者，可使用實例1或2之方法自天然來源離析式⑴之化合物。本發明之化合物亦可與具有不同作用機理之任何抗血栓形成劑組合及/或共同施用，如抗血液凝結劑（例如維生素κ 拮抗劑、未分級或低分子量肝素、合成肝素片段如方達帕魯（fondaparinux)、凝血酶抑制劑、Xa因子抑制劑或其它凝結因子/酶抑制劑、重組凝結因子如重組人類活化蛋白c)或抗血小板劑（如乙醯水楊酸、雙嘧達莫（dipyridam〇le)、噻氯匹°疋（ticlopidine)、氯σ比格雷（clopidogrel)或其它ADP -受體 [如P2Y12或P2Y1]拮抗劑、凝血噁烷受體及/或合成酶抑制劑、纖維蛋白原受體拮抗劑、前列環素模擬劑（mimetic)或磷酸二酯酶抑制劑）。本發明之化合物可進一步與血栓溶解劑如組織纖溶酶原活化劑（天然、重組或經改質）、鏈激酶、尿激酶、尿激酶原、 θ香&化纖溶酶原-鏈激酶活化劑複合物（ApsAC)、動物唾液腺纖溶酶原活化劑、及其類似物組合及/或共同施用以治療血枝形成疾病，尤其心肌梗塞、缺血性中風及大塊肺拴塞。因此，在另一態樣中，本發明提供式⑴化合物{其中又為 (CH2)mY(CH2)n ; m及η獨立地為1、2、3、4、5或6 ;其限制 96606.doc -19- 200524576 條件為m+n不大於6;Y為一鍵、0、S(0)p、或S-S;R]為CO2R15 或一種羧酸電子等排物如s(o)2oh、s(o)2nhr15、 PO(OR15)OH、PO(OR15)NH2、B(OR15)2、PO(R15)OH、 PO(R15)NH24 四唑；R2、R3、R4、R5及R6獨立地為氫、Cu 烷基（視情況經鹵素、羥基、氰基、SH、S(0)3H、SCCOJCw 烷基）、OCCOKCm烷基）、CF3、CN4烷氧基、〇CF3、COOH、 CONHyCONH^Cw烷基）、NH2、CNH(NH2)、或 NHCNH(NH2) 取代）、c3_6環烷基（Ci-4)烷基（其中環烷基環視情況經鹵素、_ 羥基、氰基、Cw烷基、CF3、Cm烷氧基、〇CF3、NH2、 CNH(NH2)或nhcnh(nh2)取代）、雜環基（Cl.4)烷基（其中雜環基環視情況經_素、羥基、氰基、CK4烷基、cf3、Cl.4 烧氧基、OCF3、NH2、CNH(NH2)或 NHCNH(NH2)取代）、苯基（Cl·4) fei基（其中本基壤視情況經齒素、經基、氰基、Cl 4 烧基、CF3、Ci-4 烷氧基、〇CF3、nh2、cnh(nh2)或 NHCNH(NH2)取代）或雜芳基（Cm)烷基（其中雜芳基環視情況經鹵素、羥基、氰基、C]_4烷基、CF3、Ci 4烷氧基、〇CF3、 φ nh2、CNH(NH2)或NHCNH(NH2)取代）；pAq獨立地為〇、1 或2 ; RW、R9、R〗〇、Rn、Rl2及Rl3獨立地為心从丨·4燒基；R14為Η或Cl.4烧基；且R、^Ci4烧基}或其醫藥上可接文之鹽或溶劑化物、或該鹽之溶劑化物與如下藥劑之組合（經組合及/或共同施用）：具有不同作用機理之抗血检形成劑{如抗血液凝結劑（例如維生素κ拮抗劑、未分級或低. 分子量肝素、合成肝素片段如方達帕魯、凝血酶抑制#卜 ·

Xa因子抑制劑或重組凝結因子如重組人類活化蛋白〇或抗 96606.doc -20- 200524576 血小板劑（如乙醯水揚酸、雙嘧達莫、噻氯匹啶、氯吡格雷或其它ADP-受體[如P2Y12或P2Y1]拮抗劑、凝血噁烷受體及/或合成酶抑制劑、纖維蛋白原受體拮抗劑、前列環素模擬劑或磷酸二酯酶抑制劑）}或血栓溶解劑{如組織纖溶酶原活化劑（天然、重組或經改質）、鏈激酶、尿激酶、尿激酶原、茴香醯化纖溶酶原-鏈激酶活化劑複合物（APSΑ〇、動物唾液腺纖溶酶原活化劑}。使用下述檢定，本發明之化合物應具有對於羧肽酶U較之羧肽酶N而言>50:1(例如>ι〇〇:ι)之選擇性。本發明之化合物之抑制效果係使用下列文獻中所述之檢定以4 mM之基質濃度來估算：Dirk Hendriks，Simon

Scharpd and Marc van Sande，Clinical Chemistry，31， 1936-1939 (1985);及 Wei Wang，Dirk F. Hendriks，Simon S. ScharpS，The Journal of Biological Chemistry，269，15937- 15944 (1994)。本發明亦提供一種治療罹患或有患某種病症之虞之哺乳動物中该病症的方法，在該病症中抑制羧肽酶U可獲益，該方法包含投予該哺乳動物治療有效劑量之如上定義式⑴化合物、或其醫藥上可接受之鹽或溶劑化物、或該鹽之溶劑化物。對於上文提及之治療用途而t，所投用之劑量應隨所採用之化合物、投用模式、所需治療及指示病症而變化。式（I)化β物及其醫藥上可接受之鹽類、溶劑化物或鹽類之溶劑化物可單獨使用，但通常應以醫藥組合物形式投 96606.doc 21 200524576 用，其中式（i)化合物、鹽、溶劑化物或鹽之溶劑化物（活性_ 成份）與醫藥上可接受之佐劑、稀釋劑或載劑相結合。視投 · 用模式而定，該醫藥組合物將包含（例如）〇〇5至99 %w(重量百分比）（諸如0.05至80 %w)、例如〇·ι〇至7〇 %w(諸如〇1〇至 5 0 %w)之活性成份，所有重量百分比係以組合物總量計。因此，本發明亦提供一種包含如上定義之式⑴化合物、或其w藥上可接文之鹽或溶劑化物、或該鹽之溶劑化物與醫藥上可接受之佐劑、稀釋劑或載劑相結合之醫藥組合物。_ 本發明進一步提供一種用於製備本發明之醫藥組合物之方法，其包含將如上定義之式（I)化合物、或其醫藥上可接受之鹽或溶劑化物、或該鹽之溶劑化物與醫藥上可接受之佐劑、稀釋劑或載劑相混合。本發明亦包括具有式（I)化合物之生物功能之式⑴化合物之衍生物，如前藥。前藥為（例如）羧酸之甲基、（特戊醯氧基）甲基酯及[(乙氧羰基）氧基]甲基酯。本發明將以下列實例來闡明。鲁【實施方式】實例1 該實例描述了化合物1至1 〇之離析。通用實驗程序水係經Milli-Q過濾，而使用之所有其它溶劑為〇mnisolv 、.及將 YMC驗性 C 1 8 5 uM ’ 21.2 mmx 1 50 mm柱及 Hypersil · BDS C18 5uM，21.2x150 mm 柱用於製備 HPLC。在 Varian -Inova 600或500 MHz NMR光譜儀上記錄NMR光譜。將樣品 96606.doc -22- 200524576 溶解於d6-DMSO中且相對於溶劑峰來計算化學位移（DMSO 】Η δ 2.49且 13C 39.5 ppm)。於Fisons VG Platform II上使用正電喷霧離子化模式量測質譜。溶離劑為〇· 1 ml/分鐘下之乙腈/水50%混合物。動物原料海綿sp·)係靠近Ribbon Reef No· 5，Australia 藉由水肺潛水（SCUBA diving)收集且證據樣品（voucher sample)(G319104)寄存於 Queensland Museum, Brisbane, Australia o 萃取及離析將自偏遠North Queensland，Australia 之 Ribbon Reef No· 5收集之海綿sp之冷束乾燥研磨樣品（128 g)以甲醇（2 1)徹底萃取。蒸發溶劑以產生暗褐色殘餘物（28 g)。將該殘餘物再溶解於EtOAc(20 mL)與水（60 mL)之混合物中，且藉由液滴逆流層析法（droplet countercurrent chromatography)以水作為固定相且EtOAc至丁醇之梯度作為流動相於5 mL/分鐘下分離。收集兩分鐘之溶離份，且藉由電喷霧質譜法分析每秒溶離份。組合類似溶離份產生5 個溶離份。溶離份2(320 mg)藉由離心分溶層析法 (centrifugal partition chromatography)(Sanki CPC，遞升模式（ascending mode))使用以較低相作為固定相的三相溶劑混合物CHCl3/Me0H/H20(7:13:8)來分離。使用2 mL/分鐘之流動速率且收集兩分鐘之溶離份歷經360分鐘。藉由正電喷霧質譜法分析每秒溶離份且組合類似溶離份。組合溶離份 96606.doc •23- 200524576 91至101以產生非純（impure)化合物2(10.8 mg)且組合溶離份107至120以產生非純化合物1(12.4 mg)。化合物1及2之非純肽溶離份各自在TFA(1%)水溶液及己烷之間分溶。來自各次分溶之水層含有純化合物2(9.5 mg)及化合物1(11.5 mg)。將來自初始DCCC分離之溶離份1、3及4與來自CPC分離之剩餘溶離份組合且預吸收於C 1 8(3 g)上。預吸收溶離份進一步藉由 C18 HPLC hypersil BDS C18(5 uM，20 mmxl50 mm)使用自含1% TFA之水至含l°/〇 TFA之甲醇的水/曱醇梯度於10 mL/分鐘下經60分鐘分離。收集一分鐘溶離份且藉由電噴霧質譜法分析所有溶離份。組合類似溶離份。溶離份51至58含有與化合物1及2相關之肽類，且將其組合（溶離份A ; 65 mg)。該肽溶離份A進一步藉由RP HPLC於YMC鹼性 C18 5 uM，20 mmxl50 mm以 65%水（含有 1% TFA)及 3 5°/〇 MeCN(含有1% TFA)於10 mL/分鐘之流動速率下溶離而純化。收集十二秒之溶離份歷經36分鐘。溶離份58至60為純化合物2(11 mg)、溶離份67至69為純化合物1 (11 mg)、溶離份70至72為純化合物3(2 mg)、溶離份73至77為純化合物 7(11.2 mg)、溶離份79至82為純化合物4(7.29 mg)、溶離份 91至96為純化合物8(8.75 mg)、溶離份101至106為純化合物 9(6.02 mg)、溶離份11 8至125為純化合物5(2.08 mg)、溶離份128至138為純化合物10(5.73 mg)且溶離份140至150為純化合物 6(5.94 mg)。化合物 1 ·· MS ··(正 ESI)[M+H]+ m/z 826。及13C NMR (d6-DMSO):參見表 1。 96606.doc -24- 200524576 化合物 2 : MS :(正 ESI)[M+H]+ m/z 876、878。】H及13C NMR (d6-DMSO):參見表2。化合物 3 : MS :(正 ESI)[M+H]+ m/z 890、892。及13C NMR (d6-DMSO):參見表3。化合物 4 : MS :(正 ESI)[M+H]+ m/z 840。4及13C NMR (d6-DMSO):參見表 4。化合物 5 : MS :(正 ESI)[M+H]+ m/z 860、862。4及13C NMR (d6-DMSO):參見表 5。化合物 6 ·· MS :(正 ESI)[M+H]+ m/z 861、863。4及13C NMR (d6-DMSO):參見表 6。化合物 7 : MS :(正 ESI)[M+H]+ m/z 895、897。4 及13C NMR (d6_DMSO):參見表7。化合物 8 : MS ··(正 ESI)[M+H]+ m/z 909、911。及13C NMR (d6-DMSO):參見表 8。化合物 9 : MS :(正 ESI)[M+H]+ m/z 909、911。！H 及 13C NMR(d6-DMSO):參見表9。化合物 10 ·· MS ··(正 ESI)[M+H]+ m/z 973、975、977。！H及 13C NMR (d6-DMSO):參見表 10。在包括4、gHSQC、gHMBC、及gCOSY實驗之廣泛研究之後，化合物1至10經驗明為環肽。化合物1之絕對立體化學藉由單晶X-光繞射分析法來證實。化合物1至5 96606.doc -25- 200524576

R3a R3b R15 H H H 化合物1 OH Cl H 化合物2 OH Cl ch3 化合物3 H H ch3 化合物4 H Cl H 化合物5 表 1 化合物 1 於 d6-DMSO 中之1Η (600 MHz)、13C (125 MHz)、HMBC及 COSY NMR 資料原子序數 13C (mult)3 ]H (mult, J Hz) 2,3Jch相關性 COSY N-甲基白胺酸 1 169.3 (s) - - - 2 58.2 (d) 4.72 (dd，5.9, 8.8 Hz，1H) u，4, 7-NMe，8 H3a，H3b 3 36.6 (t) 1.22 (m，1H) 1，2,5,6 H2, H3b, H4 1.63 (m，1H) 2, 4, 5, 6 H2, H3a，H4 4 24.3 (d) 1.34 (m，1H) 2,3,5,6 H3a，H3b，H5, H6 5 22.2 (q) 0.85 (d，6.8 Hz, 3H) 3, 4, 6 H4 6 23.1 (q) 0.82 (d，6.8 Hz，3H) 3, 4, 5 H4 Nme 27.6 (q) 1.81 (s，3H) 2, 8 - 白胺酸 8 172.8 (s) - - - 9 45.7 (d) 4.77 (ddd，2.9, 4.9, 9.8 Hz， 1H) 10, 11，8 H10a，H10b，H14 10 39.8 (t) 1.66 (m，lH) - H9，H10b，Hll 1.17 (m，lH) - H9，H10a，Hll 11 24.7 (d) 1.82 (m5 1H) 10 H10a，H10b， 96606.doc -26 200524576 H12，H13 12 21.6 (q) 0.87 (d，6.8 Hz，3H) 10, 11，13 Hll 13 22.9 (q) 0.91 (d，6·8 Hz，3H) 10, 11，12 Hll 14 - 8.73 (d，4.9 Hz，1H) 10, 15, 16 H9 丙胺酸 15 174.1 (s) - - - 16 47.9(d) 4.20 (dq，7.8, 7.8 Hz, 1H) 15, 17 H17，H18 17 16.7 (q) 1.30(d，7.8Hz，3H) 15, 16 H16 18 - 7.20 (d? 4.9 Hz? 1H) 19, 20, 16, 17 H16 離胺酸 19 172.7 (s) - - - 20 54.6 (d) 3.92 (ddd，5.9, 6.8, 6.8 Hz， 1H) 19, 21，22, 40 H21?H26 21 32.5 (t) 1.65 (m，2H) - H20, H22a，H22b 22 20.3 (t) 1.40 (m，1H) - H21，H22b，H23 1.10(m，lH) - H21，H22a，H23 23 28.3 (t) 1.40 (m52H) - H22a，H22b， H24a，H24b 24 38.0 (t) 2.75 (m, 1H) 27 H23, H24b，H25 3.58 (m? 1H) 22,23 H23, H24a，H25 25 - 7.44 (dd，1.2, 7.8 Hz，1H) 27 H24a，H24b 26 - 6.45 (d, 6·8 Hz，1H) 39,20,21 H20 色胺酸 27 171.4 (s) - - - 28 53.9(d) 4.40 (ddd，2.9, 8.8, 11.7 Hz， 1H) 1,27,30 H29a，H29b，H39 29 27.9 (t) 2.88 (dd，11.7, 13.7 Hz，1H) 28, 27, 30, 31，38 H28, H29b 3.35 (dd，2.9, 13.7 Hz，1H) 28, 27, 30, 31, 38 H28? H29a 30 110.4(s) - - - 31 124.0 (d) 6.68 (bs? 1H) 29, 30, 33, 38 H32 32 - 10.80 (bs? 1H) 30, 31，33, 38 H31 33 136.5 (s) - - - 34 111.5 (d) 7.24 (d? 7.8 Hz, 1H) 36, 38 H35, H36 35 121.0(d) 7.00 (dd，7.8, 7.8 Hz，1H) 33,37 H34? H36 36 118.5 (d) 6.92 (dd，7.8, 7.8 Hz，1H) 34, 38 H35, H37 37 116.9(d) 7.20 (d? 7.8 Hz, 1H) 35,33 H36, H35 38 127.0 (s) - - - 39 - 8.62 (d，8.8 Hz，1H) 1,28,29 H28 40 精胺酸 157.5 (s) _ - 41 - 6.42 (d，7.8 Hz, 1H) 43, 42, 48, 40 H42 42 52.9 (d) 4.05 (ddd，5.9, 7.8, 7.8 Hz， 41，43, 44, 48 H41，H43a，H43b 96606.doc -27· 200524576 1H) 43 29.1 (t) 1.52 (m，1H) - H42, H44, H43b 1.69 (m5 1H) - H42, H43a，H44 44 25.1 (t) 1.40 (m，2H) - H43a，H43b，H45 45 40.0 (t) 3.06 (dt5 5.9, 5.9 Hz，2H) 43, 44, 47 H45? H46 46 - 7.64 (t，5.9 Hz，1H) 45,47 H45 47 156.9 (s) - - 48 175.1 (s) - - 麵 a自2D異核實驗測定之化學位移。表2 化合物 2於 d6-DMSO 中之1Η (600 MHz)、13C (125 MHz)、HMBC及 COSY NMR資料原子序數 13C (mult)3 !H (mult, J Hz) 2’3Jch相關性 COSY Ν·甲基白胺酸 1 169.4 (s) - - - 2 58.4(d) 4.72 (dd，5.9, 7.8 Hz, 1H) 1，3, 4, 8, 7-NMe H3a，H3b 3 36.5 (t) 1.22 (m，1H) 2,4,5,6 H2? H3b? H4 1.63 (m，1H) 2,4,5,6 H2, H3a，H4 4 23.8 (d) 1.32 (m，lH) 2, 3, 5, 6 H3a，H3b，H5, H6 5 22.1 (q) 0.86 (d, 6.8 Hz, 3H) 3,4,6 H4 6 22.8 (q) 0.83 (d? 6.8 Hz, 3H) 3, 4, 5 H4 NMe 27.7 (q) 1.80 (s，3H) 2,8 - 白胺酸 8 172.9 (s) - - - 9 47.8 (d) 4.77 (ddd，2.9,4.9， 9.8 Hz，1H) - H10a，H10b，H14 10 39.9 (t) 1.66 (m，1H) - H9，H10b，Hll 1.17 (m，1H) - H9,H10a?Hll 11 23.4 (d) 1.82 (m，1H) - H10a，H10b，H12, H13 12 22.5 (q) 0.88 (d，6·8 Hz，3H) 10,11，13 Hll 13 23.0 (q) 0.93 (d，6·8 Hz，3H) 10, 11，12 Hll 14 - 8.74 (d，5.9 Hz, 1H) 9, 10, 15 H9 丙胺酸 15 174.0 (s) 16 48.0 (d) 4.17 (dq，3.8, 6.8 Hz，1H) 15, 17 H17，H18 17 16.8 (q) 1.29 (d? 6.8 Hz? 3H) 15, 16 H16 18 離胺酸 7.16 (d? 3.9 Hz? 1H) 19, 16, 17 H16

96606.doc -28- 200524576 19 172.5 (s) - - - 20 53.9(d) 3.92 (ddd5 5.9, 6.8, 6.8 Hz，1H) 19, 21，22, 40 H21，H26 21 32.9 (t) 1.57(m，2H) - H20, H22a, H22b 22 20.1 (t) 1.40 (m? 1H) - H21，H22b，H23 1.10 (m，1H) - H21，H22a，H23 23 28.1 (t) 1.40(m，2H) - H22a? H22b? H24a，H24b 24 37.0 (t) 2.75 (m，1H) - H23, H24b，H25 3.56 (m，1H) - H23, H24a，H25 25 - 7.45 (dd5 1.2, 6.8 Hz，1H) 27, 19 H24a5 H24b 26 - 6.45 (d，6.8 Hz, 1H) - H20 色胺酸 27 170.6 (s) 28 53.7 (d) 4.38 (ddd，2.9, 8.8， 12.7 Hz，1H) - H29a，H29b，H39 29 27.9 (t) 2.83 (dd5 12.7, 12.7 28, 27, 30, 31，38 H28, H29b Hz，1H) 3.31 (dd，2.9,12.7 Hz? 1H) 28, 27, 30, 31，38 H28, H29a 30 109.3 (s) - - - 31 124.1 (d) 6.60 (bs，1H) 29, 30, 33, 38 H32 32 - 10.60 (bs? 1H) 30, 31，33, 38 H31 33 131.1 (s) - - - 34 111.1 (d) 7.20 (s，1H) 35, 36, 38 - 35 115.0 (s) - - - 36 145.9 (s) - - - 37 102.1 (d) 7.01 (s，1H) 30, 35, 33, 36 - 38 126.3 (s) - - - 39 - 8.64 (d，9,8 Hz，1H) 1 H28 40 精胺酸 157.7 (s) 睡寒 41 - 6.36 (d，5·6 Hz，1H) 41，42, 47 H42 42 52.7 (d) 4.07 (ddd. 5.6, 7.8， 7.8 Hz，1H) 43, 44, 48 H41，H43a，H43b 43 29.2 (t) 1.52 (m5 1H) - H42, H43b，H44 1.69 (m，1H) - H42, H43a，H44 44 25.3 (t) 1.46 (m，2H) - H43a，H43b, H45 45 40.7 (t) 3.06 (m，2H) 43, 44, 47 H46, H45 46 - 7.53 (m，1H) 45, 47 H45 47 157.0 (s) - - - 48 174.5 (s) - - - 自2D異核實驗測定之化學位移。

96606.doc -29- 200524576 表 3 化合物 3 於 d6-DMSO 中之1Η (600 MHz)、13C (125 MHz)、HMBC及 COSY NMR資料原子序數 13C (mult)a (mult, J Hz) 2’3Jch相關性 COSY N-曱基白胺酸 1 168.9 (s) - - 2 57.2 (d) 4.77 (dd，5.9, 8.8 Hz，1H) 8 H3a，H3b 3 35.9 (t) 1.20 (m,lH) - H2? H3b, H4 1.71 (m，1H) - H2, H3a，H4 4 24.2 (d) 1.35 (m，1H) - H3a，H3b，H5, H6 5 23.0 (q) 0.85 (d? 6.8 Hz, 3H) 3, 4, 6 H4 6 23.3 (q) 0.88 (d，6.8 Hz， 3H) 3,4,5 H4 NMe 26.9 (q) 1.87 (s，3H) 2,8 - 白胺酸 8 172.2 (s) - - - 9 47.8 (d) 4.79 (ddd，2.9, 4.9, 9.8 Hz, 1H) - H10a，H10b，H14 10 39.4 (t) 1.70 (m，1H) - H9，H10b，Hll 1.22 (m? 1H) - H9?H10a?Hll 11 24.1 (d) 1.84 (m，1H) - H10a，H10b，H12, H13 12 21.5 (q) 0.90 (d，6.8 Hz， 3H) 10, 11，13 Hll 13 23.0 (q) 0.95 (d? 6.8 Hz, 3H) 10,11，12 Hll 14 - 8.76 (d5 4.9 Hz， 1H) 15 H9 丙胺酸 15 173.6 (s) - - - 16 47.5 (d) 4.19 (dq，5.8,6.8 Hz，1H) - H17，H18 17 16.5 (q) 1.32 (d，6.8 Hz， 3H) 15,16 H16 18 - 7.22 (d, 5.9 Hz， 1H) 19 H16 離胺酸 19 171.9 (s) - - - 20 54.2 (d) 3.94 (ddd，5.9, 6.8， 6.8 Hz? 1H) 19, 21，22 H21，H26

96606.doc 30- 200524576 21 31.7(t) 1.60 (m，2H) - H20, H22a，H22b 22 20.1 (0 1.40 (m，1H) - H21, H22b? H23 1.10 (m，1H) - H21，H22a，H23 23 27.2 (t) 1.40 (m，2H) - H22a，H22b， H24a，H24b 24 38.1 (t) 2.78 (m，1H) 27 H23, H24b，H25 3.60 (m，1H) - H23, H24a，H25 25 - 7.42 (dd, 1.2,7.8 Hz? 1H) 27 H24a? H24b 26 - 6.31 (d? 6.8 Hz, 1H) 40 H20 色胺酸 27 172.8 (s) - - - 28 53.7(d) 4.39 (ddd，2.9, 8.8, 11.7 Hz, 1H) - H29a，H29b，H39 29 27.9 (t) 2.86 (dd511.7, 13.7 Hz，1H) 28, 27, 30, 31，38 H28, H29b 3.27 (dd，2.9,13.7 Hz，1H) 28, 27, 30, 31，38 H28, H29a 30 109.4 (s) - - - 31 124.5 (d) 6.62 (bs, 1H) 29, 30, 33, 38 H32 32 - 10.65 (bs，1H) 30, 31，33, 38 H31 33 130.4 (s) - - - 34 111.2(d) 7.22 (s，1H) 36, 38 - 35 115.3 (s) - - - 36 145.6 (s) - - - 37 102.5 (d) 7.00 (s，1H) 30, 35, 33 - 38 125.9 (s) - - - 39 - 8.67 (d? 8.8 Hz, 1H) H28 40 157.2 (s) - - - 精胺酸 41 - 6.50 (d，7.8 Hz， 1H) 40 H42 42 51.9(d) 4.05 (ddd，5.9, 7.8， 7.8 Hz, 1H) 47 H41，H43a，H43b 43 28.7 (t) 1.56 (m? 1H) - H42, H43b，H44 1.74 (m5 1H) - H42, H43a，H44 44 24.9 (t) 1.46 (m，2H) - H43a，H43b，H45 45 39.7 (t) 3.09 (dt，5.9, 5.9 Hz，2H) 47 H46, H45 46 - 7.42 (t，5·9 Hz，1H) 47 H45 47 156.4 (s) - - - 96606.doc -31- 200524576 48 173.1 (s) - - - 48-Me 51.8 (q) 3.62 (s? 3H) 48 - a自2D異核實驗測定之化學位移。表4化合物4於(16-0“30中之111(600 以1^)、13(：(125?^1^) 及COSY NMR資料原子序數 13C (mult)a ]H (mult5 J Hz) COSY N-甲基白胺酸 1 n.o. - - 2 57.9(d) 4.78 (dd，5.9, 8.8 Hz，1H) H3a，H3b 3 36.1 (t) 1.27 (m，1H) H2, H3b，H4 1.68 (m5 1H) H2, H3a，H4 4 24.1 (d) 1.37 (m, 1H) H3a，H3b，H5, H6 5 23.7 (q) 0.79 (d，6.8 Hz，3H) H4 6 20.9 (q) 0.83 (d5 6·8 Hz，3H) H4 NMe 27.3 ⑹ 1.81 (s，3H) - 白胺酸 8 n.o. - - 9 47.0 (d) 4.78 (ddd，2.9, 4.9, 9.8 Hz， 1H) H10a，H10b，H14 10 40.0 (t) 1.63 (m，1H) H9，H10b，Hll 1.25 (m，1H) H9，H10a，Hll 11 24.2 (d) 1.83 (m，1H) H10a，H10b，H12，H13 12 20.7 (q) 0.84 (d，6.8 Hz，3H) Hll 13 23.9 (q) 0.91 (d，6.8 Hz，1H) Hll 14 - 8.79 (d，4·9 Hz，1H) H9 丙胺酸 15 n.o. - - 16 47.3 (d) 4.19 (dq5 7.8, 7.8 Hz，1H) H17，H18 17 16.2 (q) 1.33 (d5 7.8 Hz5 3H) H16 18 - 7.29 (d5 4.9 Hz5 1H) H16 離胺酸 19 n.o. - - 20 54.3 (d) 3.87 (ddd，5.9, 6.8, 6.8 Hz， 1H) H21，H26 21 32.1 (t) 1.60 (m，2H) H205 H22a? H22b 22 21.1 (t) 1.40 (m，1H) H21，H22b，H23 1.10 (m，1H) H21，H22a，H23

96606.doc -32- 200524576 23 28.1 (t) 1.40(m，2H) H22a，H22b，H24a， H24b 24 38.1 (t) 2.75 (m，1H) H23, H24b，H25 3.59 (m，1H) H23, H24a，H25 25 - 7.41 (dd5 1.2, 7·8 Hz，1H) H24a，H24b 26 - 6.39 (d? 6.8 Hz, 1H) H20 色胺酸 27 n.o. - - 28 53.8 (d) 4.38(ddd，2.9,8.8, 11·7Ηζ， 1H) H29a，H29b，H39 29 27.6 (t) 2.81 (dd，11.7, 13.7 Hz，1H) H28, H29b 3.37 (dd，2.9, 13.7 Hz，1H) H28, H29a 30 n.o. - - 31 124.5 (d) 6.72 (bs，1H) H32 32 - 10.80 (bs，1H) H31 33 n.o. - - 34 111.2 (d) 7.37 (d5 7.8 Hz，1H) H35 35 120.2 (d) 6.89 (dd，7.8, 7.8 Hz，1H) H34, H36 36 121.0 (d) 7.00 (dd，7.8, 7·8 Hz，1H) H35, H37 37 117.8(d) 7.21 (d，7.8 Hz，1H) H365 H35 38 n.o. - - 39 - 8.64 (d，8·8 Hz，1H) H28 40 n.o. - - 精胺酸 41 - 6.49 (d，7.8 Hz，1H) H42 42 52.2 (d) 4.19 (ddd，5.9, 7.8, 7.8 Hz， 1H) H41，H43a，H43b 43 28.0 (t) 1.52 (m，1H) H425 H43b? H44 1.71 (m，1H) H425 H43a? H44 44 24.7 (t) 1.40 (m?2H) H43a，H43b，H45 45 40.1 (t) 3.07 (dt，5.9, 5.9 Hz，2H) H46, H45 46 - 7.42 (t，5.9 Hz，1H) H45 47 n.o. 48 n.o. - - 48-Me 52.1 (q) 3.58 (s? 3H) - a自2D異核實驗測定之化學位移。 η. 〇.=未觀察到 96606.doc -33- 200524576 表 5 化合物 5 於 d6-DMSO 中之1Η (600 MHz)、13C (125 MHz)、HMBC及 COSY NMR資料原子序數 13C (mult)a ]H (mult, J Hz) 2’3Jch相關性 COSY N-曱基白胺酸 1 168.9 (s) - - _ 2 57.5 (d) 4.76 (dd，5.9, 8.8 Hz， 1H) 1，3, 8, 7-NMe H3a，H3b 3 36.6 (t) 1.27 (m，1H) - H2? H3b? H4 1.65 (m，1H) - H2? H3a? H4 4 24.4 (d) 1.34 (m，lH) - H3a? H3b? H5? H6 5 23.7 (q) 0.82 (d，6·8 Hz，3H) 3,4,6 H4 6 21.2 (q) 0.84 (d，6.8 Hz，3H) 3Λ5 H4 NMe 27.5 (q) 1.77(s，3H) 2,8 - 白胺酸 8 172.6 (s) - - 9 46.8 (d) 4.77 (ddd，2.9, 4.9, 9.8 Hz? 1H) - H10a，H10b，H14 10 40.0 (t) 1.68 (m，1H) 9，11 H9，H10b，Hll 1.22 (m, 1H) - H9，H10a，Hll 11 24.5 (d) 1.82 (m，1H) - H10a，H10b，H12， H13 12 21.4 (q) 0.86 (d，6·8 Hz，3H) 10,11, 13 Hll 13 23.0 (q) 0.90 (d，6.8 Hz，3H) 10, 11，12 Hll 14 - 8.77 (d，4.9 Hz，1H) 9, 10, 15 H9 丙胺酸 15 173.8 (s) - - - 16 48.2 (d) 4.16 (dq，4.9, 7.8 Hz， 1H) 15,17 H17，H18 17 16.8 (q) 1.27 (d? 7.8Hz?3H) 15,16 H16 18 - 7.18(d，4.9Hz，1H) 19 H16 離胺酸 19 172.3 (s) - - - 20 54.1 (d) 3.91 (ddd，5.9, 6.8, 6.8 Hz，1H) 19,21,22 H21，H26 21 32.1 (t) 1.60 (m5 2H) - H20, H22a? H22b 22 20.6 (t) 1.40 (m，1H) - H21，H22b，H23 1.10 (m，1H) - H21，H22a，H23 96606.doc -34- 200524576 23 27.1 (t) 1.40 (m，2H) - H22a? H22b? H24 H24b 24 38.1 (t) 2.76 (m，1H) - H23, H24b，H25 3.53 (m，1H) - H23, H24a，H25 25 - 7.50 (dd? 1.2, 7.8 Hz, 1H) - H24a，H24b 26 - 6.36 (d，6·8 Hz，1H) 40 H20 色胺酸 27 173.5 (s) - - - 28 53.8(d) 4.41 (ddd，2.9, 9.6， 11.7Hz，1H) - H29a，H29b，H39 29 27.7 (t) 2.90 (dd5 11.7,13.7 1H) 30,31,38 H28, H29b 3.30 (dd，2.9, 13_7Hz， 1H) 30,31,38 H28, H29a 30 110.9(s) - - - 31 124.9(d) 6.78 (bs，1H) 29, 30, 33, 38 H32 32 - 11.00 (bs5 1H) 30,31，33,38 H31 33 136.7 (s) - - - 34 111.3(d) 7.30 (d，1.8 Hz，1H) 36,38 H36 35 125.8 (s) - - - 36 118.7 (d) 6.93 (dd? 7.8, 1.8 Hz, 1H) 38,34 H34, H37 37 118.3 (d) 7.42 (d，7·8 Hz，1H) 35,33 H36 38 125.5 (s) - - - 39 8.64 (d，9·6 Hz，1H) 1 H28 40 157.5 (s) - - - 精胺酸 41 - 6.37 (d，7·8 Hz，1H) 40 H42 42 52.6 (d) 4.05 (ddd，5.9, 7.8, 7.8 Hz? 1H) 43, 44, 48 H41，H43a，H43b 43 29.5 (t) 1.50 (m，1H) - H42, H43b，H44 1.67 (m，1H) - H42, H43a，H44 44 25.1 (t) 1.40 (m，1H) 1.19 (m，1H) H43a，H43b，H45 45 40.5 (t) 3.06 (m? 2H) 47 H44? H46 46 - 7.50 (m，1H) H45 47 156.8 (s) - - 48 174.3 (s) - - - 自2D異核實驗測定之化學位移。 96606.doc -35- 47 200524576 化合物6

表 6 化合物 6 於 d6-DMSO 中之1Η (600 MHz) > 13C (125 MHz)、HMBC及 COSY NMR資料原子序數 13C(mult)a lU (mult, J Hz) 2,3Jch相關性 COSY N-甲基白胺酸 1 169.4 (s) - - - 2 58.0 (d) 4.72 (dd，5.9, 8.8 Hz， 1H) 1，3, 4, 8, 7-NMe H3a，H3b 3 36.2 (t) 1.25 (m? 1H) 1，2,4 H2, H3b，H4 1.60 (m，lH) 2, 4 H2, H3a，H4 4 23.0(d) 1.93 (m? 1H) 2, 3 H3a? H3b? H5? H6 5 23.7 (q) 0.82 (d5 6.8 Hz，3H) 3,4,6 H4 6 24.0 (q) 0.82 (d? 6.8 Hz, 3H) 3, 4, 5 H4 NMe 27.0 (q) 1.90(s，3H) 2, 8 - 白胺酸 8 172.5 (s) - - - 9 47.8 (d) 4.70 (ddd，2.9, 4.9, 9.8 Hz，1H) - H10a，H10b，H14 10 39.2 (t) 1.70 (m，1H) - H9，H10b，Hll 1.22 (m? 1H) - H9，H10a，Hll 11 27.0 (d) 1.82 (m? 1H) - H10a，H10b，H12， H13 12 21.0 (q) 0.84 (d，6·8 Hz，3H) 10, 11，13 Hll 13 24.9 (q) 0.96 (d，6.8 Hz，3H) 10, 11，12 Hll 14 - 8.69 (d，4·9 Hz，1H) 9, 10, 15 H9 96606.doc -36- 200524576 纈胺酸 15 172.7 (s) - - - 16 57.8 (d) 3.92 (dd5 5.8, 7.8 Hz, 1H) - H17，H20 17 29.7(d) 1.95 (m，1H) 16, 18, 19 H16，H18，H19 18 19.4 (q) 0.85 (d，7.8 Hz，3H) 16, 17, 19 H17 19 19.0 ⑹ 1.05 (d，7.8 Hz，3H) 16, 17, 18 H17 20 - 6.80 (d，5.9 Hz，1H) 16, 17, 19 H16 離胺酸 21 172.5 (s) - - - 22 54.8(d) 3.91 (ddd，5.9, 6.8, 6.8 Hz，1H) 19, 21，22, 42 H23, H28 23 31.5(t) 1.60 (m，2H) - H22, H24a，H24b 24 20.1 (t) 1.40 (m，1H) - H23, H24b，H25 1.10 (m5 1H) - H23? H24a? H25 25 28.1 (t) 1.40 (m，2H) - H24a，H24b，H26a， H26b 26 38.1 (t) 2.80 (m，1H) 27 H25, H26b，H27 3.61 (m，1H) - H25, H26a，H27 27 - 7.40 (dd? 1.2, 7.8 Hz, 1H) 27 H26a，H26b 28 - 6.47 (d，5.9 Hz, 1H) 42, 22, 23 H22 色胺酸 29 171.6 (s) - - - 30 53.2 (d) 4.41 (ddd5 2.9, 8.8， 11.7Hz，1H) - H31a，H31b,H41 31 27.9 (t) 2.90 (dd? 11.7, 13.7 Hz, 1H) 29, 33, 32, 30 H30，H31b 3.40 (dd，2.9,13.7Hz， 1H) 30, 32, 33 H30，H31a 32 109.5 (s) - - - 33 125.5 (d) 6.65 (bs，1H) 29, 30, 35,40 H34 34 - 10.64 (bs，1H) 32, 33, 35,40 H33 35 130.4 (s) - - - 36 111.1 (d) 7.20 (s? 1H) 33, 37, 38, 40 - 37 115.0 (s) - 讎 - 38 146.3 (s) - - - 39 102.3 (d) 7.00 (s，1H) 35, 33, 32, 37, 38 - 40 126.0 (s) - - - 41 - 8.77 (d，8.8 Hz，1H) 1 H30 42 157.6 (s) - - - 96606.doc -37- 200524576 異白胺酸 43 - 6.35 (d，7.8 Hz，1H) 42 H44 44 56.9(d) 4.06 (dd? 5.9? 7.8 Hz? 1H) 42, 45, 46, 48, 49 H43, H45 45 36.8(d) 1.70 (m，1H) - H44, H46b，H46a， H48 46 24.7 (t) 1.40 (m，1H) 44, 47, 48 H46b，H47, H45 1.15 (m，1H) 44, 47, 48 H47, H45, H46a 47 Π.7 (q) 0.82 (t，6·8 Hz，3H) 45,46 H46a，H46b 48 15.4 (q) 0.84 (d，6.8 Hz，3H) 44, 45, 46 H45 49 173.7 (s) - - - 自2D異核實驗測定之化學位移。化合物7

表 7 化合物 7 於 d6-DMSO 中之1Η (600 MHz)、13C (125 MHz)、HMBC及 COSY NMR資料原子序數 13C (mult)a (mult? JHz) 2’3Jch相關性 COSY N-曱基色胺酸 1 169.8 (s) - - - 2 61.0(d) 4.66 (dd，2.6, 10.4 Hz， 1H) 1，3, 4, 14, 13-NMe H3a，H3b 3 22.3 (t) 2.73 (m，1H) 1，5, 4, 2, 12 H2? H3b 3.07 (m，lH) 2, 4, 5, 12 H2? H3a 96606.doc -38 200524576 4 108.9 (s) - - - 5 124.3 (d) 6.87 (bs，1H) 3, 4, 7, 12 H6 6 - 10.66 (bs5 1H) 4, 5, 7, 12 H5 7 130.7 (s) - - - 8 111.8(d) 7.26 (s，1H) 7,9,10, 12 - 9 115.8 (s) - - - 10 145.8 (s) - - - 11 102.7(d) 6.98 (s，1H) 4, 7, 9, 10, 12 - 12 126.8 (s) - - NMe 27.5 (q) 1.91 (s，3H) 2, 14 - 白胺酸 14 172.5 (s) - _ - 15 46.9 (d) 4.21 (ddd，2.9,4.9,9.8 Hz，1H) 16,21 H16a，H16b，H20 16 36.9 (t) -0.50 (dd? 11.7, 11.7 Hz，1H) 14, 17, 18 H15，H16b，H17 0.90 (m, 1H) - H15，H16a，H17 17 24.8 (d) 1.40 (m，1H) - H16a，H16b，H18， H19 18 19.7 (q) 0.26 (d，6·8 Hz，3H) 16, 17, 19 H17 19 22.0 (q) 0.40 (d，6.8 Hz，3H) 16, 17,18 H17 20 - 8.42 (d5 4.3 Hz，1H) 15, 16,21 Ή15 纈胺酸 21 172.2 (s) - - - 22 57.6 (d) 3.79 (dd，6.9, 7.8 Hz， 1H) 23, 24, 25 H23? H26 23 30.0 (d) 1.90 (m5 1H) 22, 24, 25 H22, H24, H25 24 18.9 (q) 0.86 (d，7,8 Hz，3H) 22, 23, 25 H23 25 18.8 (q) 0.93 (d，7·8 Hz，3H) 22,23, 24 H23 26 - 6.74 (d，6.9 Hz，1H) 22, 23, 27 H22 離胺酸 27 171.9 (s) - - - 28 53.8 (d) 3.86 (ddd，5.9, 6.9, 6.8 Hz，1H) 27,29, 30,45 H29, H34 29 31.3 (t) 1.54 (m，2H) - H28, H34 30 20.2 (t) 1.40 (m，1H) - H29，H30b，H31

96606.doc -39- 200524576 1.10 (m? 1H) - H295 H30a? H31 31 282 (t) 1.40 (m，2H) - H30a，H30b，H32a， H32b 32 37.9 (t) 2.86 (m, 1H) 35 H31，H32b，H33 3.58 (m? 1H) 30, 31，35 H3I，H32a，H33 33 - 7.40 (dd，1.2, 7.8 Hz， 1H) 32,35 H32a，H32b 34 - 6.43 (d5 6.9 Hz? 1H) 27, 29, 45 H28 苯丙胺酸 35 171.0 (s) - - - 36 54.8 (d) 4.57 (ddd，2.9, 9.5， 11.7 Hz, 1H) 1，35,37 H37a，H37b，H44 37 37.9 (t) 2.75 (dd? 11.7, 13.7 1H) 35, 36, 38, 39, 43 H36, H37b 3.40 (dd，2.9, 13.7 Hz5 1H) 36, 38, 39, 43 H36, H37a 38 138.6 (s) - - - 39 128.9(d) 7.07 (d，7.8 Hz，1H) 37, 38, 41，43 H40, H41 40 127.9(d) 7.22 (dd，7.8, 7.8 Hz， 1H) 38, 42 H39, H41 41 126.2(d) 7.15 (t5 7.8 Hz，1H) 39, 43 H40, H42 42 127.9 (d) 7.22 (dd，7.8, 7.8 Hz， 1H) 38, 40 H41，H43 43 128.29 (d) 7.07 (d，7.8 Hz, 1H) 37, 38, 39, 41 H42 44 - 8·76 (d，9.5 Hz，1H) 1,36,37 H36 45 157.3 (s) - - 異白胺酸 46 - 6.28 (d，8·7 Hz，1H) 45, 47, 52 H47 47 56.6 (d) 4.04 (dd，5.9, 7.8, 7.8 Hz, 1H) 45, 48, 49, 51，52 H46, H48 48 36.9 (d) 1.71 (m，1H) 47,49, 50, 51 H47, H49b，H51 49 24.5 (t) 1.35 (m，1H) 47, 48, 50, 51 H48, H49b，H50 1.10 (m? 1H) 47, 48, 50, 51 H48, H49a，H50 50 11.1 (q) 0,83 (t，6·8 Hz，3H) 48, 49 H49a，H49b 51 15.6 (q) 0.82 (d，6·8 Hz，3H) 47, 48? 49 H48 52 173.8 (s) - - - 自2D異核實驗測定之化學位移。

96606.doc -40- 200524576 化合物8

表8化合物8於d6-DMSO中之1H(600 MHz)、13C(125MHz) 及COSY NMR資料

原子序數 13C (mult)a lH (mult, J Hz) COSY N-甲基色胺酸 1 n.o. - - 2 60.8 (d) 4.65 (dd，2.6, 9.9 Hz，1H) H3a，H3b 3 21.9 (t) 2.73 (m, 1H) H2, H3b - 3.08 (m，1H) H2? H3a 4 n.o. - 5 124.7(d) 6.87(d5 1.9 Hz，1H) H6 6 10.66 (bs，1H) H5 7 n.o. - - 8 111.5(d) 7.23 (s，1H) - 9 n.o. - - 10 n.o. - - 11 103.4(d) 6.94 (s，1H) - 12 n.o. - - NMe 27.4 (q) 1.90(s，3H) - 白胺酸 14 n.o. - - 15 47.4 (d) 4.18 (ddd，2.9, 4.9, 9·8 Hz，1H) H16a，H16b，H20 16 37.0 (t) -0.50 (dd，9.8, 9·8 Hz，1H) H155H16b?H17 0.91 (m，1H) H15，H16a，H17 96606.doc - 41 - 200524576 17 24.9 (d) 18 19.5 (q) 19 22.3 (q) 20 - 異白胺酸 21 n.o. 22 55.8 (d) 23 37.0 (d) 24 24.2 (t) 25 12.0 (q) 26 15.7 (q) 27 - 離胺酸 28 n.o. 29 54.3 (d) 30 31.8 (t) 31 24.9 (t) 32 28.1 (t) 33 38.0 (t) 34 - 35 - 苯丙胺酸 36 n.o. 37 54.5 (d) 38 37.4 (t) 39 n.o. 40 128.3 (d) 41 128.0 (d) 42 125.9 (d) 43 128.0(d) 44 128.3 (d) 45 - 46 n.o. 異白胺酸 47 - 48 56.3 (d) 96606.doc 3.85 (ddd，5.9, 6.8, 6.8 Hz, 1H) 1.54 (m，1H) 1.72 (m，1H) 1.40 (m，1H) 1.10 (m，1H) 1.40 (m，2H) 2.80 (m，1H) 3.55 (m，1H) 7.43 (dd，1.2, 8.8 Hz，1H) 6.45 (d，6.8 Hz, 1H) 4.58 (ddd，2.9, 8.8, 11.7Hz，1H) 2.73 (dd，11.7, 11.7Hz，1H) 3.37 (dd，2.9, 11.7Hz，1H) 1.40(m，1H) 0.22 (d5 6.8 Hz，3H) 0.36 (d，6·8 Hz，3H) 8.40 (d，4.8 Hz, 1H) 3.93 (dd，7.8, 8.2 Hz，1H) 1.72 (m，1H) 1.08 (m，1H) 1.30 (m，1H) 0.82 (d，7.0 Hz，3H) 0·83 (d，7.0 Hz，3H) 6.70 (d，6.9 Hz，1H) 7.05 (d，7·8 Hz，1H) 7.19 (dd，7.8, 7.8 Hz，1H) 7.14(t，7.8Hz，1H) 7.19 (dd，7.8, 7.8 Hz，1H) 7.05 (d, 7.8 Hz, 1H) 8.68 (d，8.8 Hz，1H) 6.29 (d? 8.8 Hz? 1H) 4.01 (dd，4.9, 7.8, Hz，1H) H16a，H16b，H19，H18 H17 H17 H15 H23, H27 H22, H24a，H24b，H26 H24b? H23? H25 H24a? H23? H25 H24a5 H24b H23 H22 H30, H35 H29，H30b，H31a，H31b H29，H30a，H31a，H31b H32，H31b，H30a，H30b H32, H31a，H30a，H30b H31a，H31b，H33a，H33b H32? H33b? H34 H32? H33a, H34 H33a，H33b H29 H38a，H38b，H45 H37, H38b H37, H38a H41，H42 H40, H42 H41.H43 H42, H44 H43? H42 H37 H48 H47, H49 -42- 200524576 49 38.3(d) 1.71 (m，1H) H48, H50, H50b，H52 50 22.8 (t) 1.38 (m，H) H50b，H49，H51 1.01 (m，1H) H50a，H49，H51 51 11.4(q) 0.79 (t5 6.8 Hz5 3H) H50a，H50b 52 15.8 (q) 0.79 (d，6.8 Hz, 3H) H49 53 n.o. - - a自2D異核實驗測定之化學位移。 η. 〇.=未觀察到化合物9

表 9 化合物 9 於 d6-DMSO 中之1Η (600 MHz)、13C (125 MHz)、HMBC及 COSY NMR資料原子序數 13C (mult)3 ]H (mult, J Hz) 2,3Jch相關性 COSY N-甲基色胺酸 1 169.5 (s) - - - 2 60.8 (d) 4.69 (dd，2.6,10.4 Hz， 1H) 1 H3a，H3b 3 21.7 (t) 2.76 (m，1H) 2Λ 12 H2? H3b 3.04 (m，1H) 25 4?12 H2? H3a 96606.doc -43 200524576 4 108.9 (s) - - - 5 124.3 (d) 6.88 (bs，1H) 4, 7, 12 H6 6 10.66 (bs，1H) 4, 5, 7, 12 H5 7 130.2 (s) - - - 8 111.8(d) 7.27 (s，1H) 9, 10, 12 - 9 115.8 (s) - - - 10 145.9 (s) - - - 11 102.7(d) 6.99 (s，1H) 4, 7, 9, 10 12 126.1 (s) - - - NMe 27.4 (q) 1.91 (s，3H) 2, 14 - 白胺酸 14 172.5 (s) - - - 15 46.7 (d) 4.22 (ddd，2.9, 4.9, 9.8 Hz, 1H) - H16a，H16b，H20 16 37.4 (t) -0.49 (dd，9.8, 9.8 Hz, 1H) 18 H15，H16b，H17 0.95 (m，1H) - H15，H16a，H17 17 23.1 (d) 1.40 (m? 1H) - H16a，H16b，H19， H18 18 19.7 (q) 0.25 (d? 6.8 Hz? 3H) 16, 17, 19 H17 19 22.3 ⑹ 0.42 (d，6·8 Hz，3H) 16,17,18 H17 20 - 8.47 (d? 4.3 Hz? 1H) 21 H15 白胺酸 21 173.5 (s) - - - 22 50.7 (d) 4.03 (td，7.8, 6.9 Hz， 1H) 21,23 H23, H27 23 39.7 (t) 1.46 (m，2H) - H22, H24 24 23.3 (d) 1.67 (m，1H) 15, 16 H23, H25, H26 25 21.6 (q) 0.82 (d，7.0 Hz，3H) 23, 24, 26 H24 26 22.8 (q) 0.88 (d，7.0 Hz，3H) 23, 24, 25 H24 27 - 6.86 (d，6.9 Hz，1H) 28 H22 離胺酸 28 172.2 (s) - - H30, H35 29 54.4 (d) 3.88 (ddd，5.9, 6.8, 6.8 Hz，1H) 28,30,31 H29，H31a，H31b 30 32.1 (t) 1.54 (m，2H) - H30，H31b，H32 31 20.2 (t) 1.40 (m，1H) - H30，,H31a，H32 1.10 (m? 1H) H30? H22a? H23 32 28.1 (t) 1.42 (m，2H) - H31a，H31b，H33a

96606.doc •44- 200524576 H33b 33 38.3 (t) 2.84 (m，1H) - H32, H33b，H34 3.57 (m，1H) - H32? H33a? H34 34 - 7.38 (dd，1.2, 7.8 Hz， 1H) - H33a，H33b 35 - 6.35 (d，6.8 Hz，1H) 46 H29 苯丙胺酸 36 171.4 (s) - - - 37 54.5 (d) 4.52 (ddd? 2.9,8.8,11.7 Hz, 1H) 36 H38a5 H38b，H45 38 37.9 (t) 2.74 (dd，11.7, 13.7 Hz， 1H) 39,40,44 H37? H38b 3.55 (dd? 2.9, 13.7 Hz, 1H) 28, 27, 30, 31，38 H27, H38a 39 138.3 (s) - - - 40 128.7(d) 7.08 (d，8.0 Hz，1H) 42,44 H41，H42 41 129.2 (d) 7.23 (dd? 8.0, 8.0 Hz, 1H) 39,43 H40, H42 42 126.6(d) 7.17 (t，8.0 Hz，1H) 40,44 Η41·Η43，Η40， H44 43 129.2 (d) 7.23 (dd，8.0, 8·0 Hz， 1H) 39,41 H42, H44 44 128.7(d) 7.08 (d? 8.0 Hz5 1H) 40, 38, 42 H43, H42 45 - 8.71 (d，8.8 Hz5 1H) 1 H37 46 157.0 (s) - - 異白胺酸 47 - 6.26 (d，8.7 Hz，1H) - H48 48 56.9 (d) 4.03 (dd? 5.9, 7.8, 7.8 Hz，1H) 46, 49, 50, 52, 53 H47, H49 49 37.6 (d) 1.70 (m, 1H) - H48, H50b，H50a， H52 50 24.6 (t) 1.35 (m，1H) 48,49,51，52 H49, H50a，H50b， H51 1.10 (m，1H) 49,51,52 H49, H50a，H50b， H51 51 11.7 (q) 0.86 (t，6·8 Hz，3H) 49,50 H50a，H50b 52 15.8 ⑹ 0.85 (d5 6·8 Hz，3H) 48, 49, 50 H49 53 173.8 (s) - - - 自2D異核實驗測定之化學位移。

96606.doc -45- 200524576 化合物ίο

表 10 化合物 10於 d6-DMSO 中之1Η (600 MHz)、13C (125 MHz)、HMBC及 COSY NMR資料

原子序數 13C (mult)a lH (mult, J Hz) 2’3Jch相關性 COSY N-曱基色胺酸 1 169.8 (s) - - - 2 60.9 (d) 4.66 (dd，2.9, 10.7 Hz， 1H) 1，3,4, 14, 13-NMe H3a，H3b 3 21.9 (t) 2.77 (m，1H) 2, 4, 5 H2, H3b 3.07 (m，1H) 2, 4, 5 H2, H3a 4 109.3 (s) - - - 5 126.1 (d) 6.89 (d? 2.0 Hz? 1H) 4, 7, 12 H6 6 - 10.68 (bs，1H) 4, 5, 7, 12 H5 7 130.5 (s) - - - 8 111.8(d) 7.26 (s，1H) 7, 9, 10,12 - 9 115.8 (s) - - 10 146.2 (s) - - - 11 103.4(d) 6.98 (s，1H) 4, 7, 9 - 12 126.8 (s) - - - NMe 27.3 (q) 1.97 (s，3H) 2, 14 - 白胺酸 14 171.9 (s) - - - 15 46.8 (d) 4.21 (ddd，2.9, 4.9， 11.7 Hz, 1H) - HI6a，HI6b，H20 96606.doc -46- 200524576 16 37.2 (t) -0.48 (dd，11.7, 11.7 Hz，1H) _ H15，H16b，H17 0.95 (m，1H) - H15?H16a,H17 17 23.3 (d) 1.40(m，1H) - H16a，H16b，H19， H18 18 19.5 (q) 0.27 (d，6.8 Hz，3H) 16,17，19 H17 19 21.3 (q) 0_41 (d，6.8 Hz，3H) 16,17, 18 H17 20 - 8.42 (d，4·9 Hz，1H) 15,16, 21 H15 白胺酸 21 172.9 (s) - - - 22 57.7 (d) 3.77 (dd，6.8, 7.8 Hz， 1H) 21，23, 24, 25 H23, H26 23 29.8 (t) 1.88 (m，2H) - H22, H23, H24 24 18.9 (q) 0.84 (d? 7.0 Hz5 3H) 22, 23, 25 H23 25 18.9 (q) 0.93 (d，7.0 Hz，3H) 22,23, 24 H23 26 - 6.74 (d，6.9 Hz，1H) 23,28 H22 離胺酸 27 172.2 (s) - - 28 54.5 (d) 3.84 (ddd，5.9, 6.8, 6.8 Hz，1H) 20, 28, 29, 45 H29, H34 29 31.5 (t) 1.54(m，2H) - H28, H30a，H30b 30 20.2 (t) 1.40 (m，1H) - H29，H30b，H31 1.10 (m，1H) 讎 H29，H30a，H31 31 28.2 (t) 1.42 (m? 2H) - H30a，H30b，H32， H32b 32 38.3 (t) 2.85 (m，1H) - H31，H32b，H33 3.57 (m，1H) 30, 31 H31，H32a，H33 33 - 7.46(dd，1·2,7·0Ηζ， 1H) 35 H32a，H32b 34 - 6.41 (d? 6.8 Hz, 1H) 29, 28,45 H28 苯丙胺酸 35 170.4 (s) - - - 36 54.1 (d) 4.52 (ddd，2.9, 8.8， 11.7Hz，1H) 35 H37a，H37b，H44 37 37.2 (t) 2.72 (dd? 11.7, 13.7 1H) 36, 38, 39,43 H36, H37b 3.36 (dd，2.9,13.7 Hz， 1H) 36, 38, 39, 43 H36, H37a 38 137.9 (s) - - - 39 131.4(d) 7.01 (d，7·8 Hz，1H) 37, 41，43 H40 40 130.4(d) 7.37 (d，7·8 Hz，1H) 42, 38 H39 41 119.2 (s) - - - 42 130.4(d) 7.39 (d，7·8 Hz，1H) 40, 38 H43

96606.doc -47- 200524576 43 131.4(d) 7.08 (d，7.8 Ηζ，1Η) 37, 39, 41 H42 44 8.81 (d58.8Hz5 1H) • H36 45 異白胺酸 157.3 (s) - - 46 - 6.26 (d，8.8 Hz，1H) 45,47 H47 47 57.2 (d) 4.04 (dd，4.9, 8.8, 7.8 Hz，1H) 45, 48, 49, 51，52 H48, H46 48 37.2(d) 1.70 (m，1H) - H47, H49b，H49a 49 25.1 (t) 1.33 (m? 1H) 1.07 (m5 1H) 47, 48, 50, 51 47, 48, 50, 51 H49a，H48, H50 H49b，H48, H50 50 11.4 ⑹ 0.83 (t，6.8 Hz，3H) 48,49 H49a，H49b 51 52 15.8 (q) 174.5 (s) 0.83 (d5 6.8 Hz，3H) 47, 48, 49 H48 自2D異核實驗測定之化學位移。實例2 該實例描述了化合物丨丨之離析。通用實驗程序水係經Milli-Q過濾，而使用之所有其它溶劑為〇mnis〇lv 級。將 Hypersil BDS鹼性 C18 5uM，21.2 mmxl50 mm柱用於製備HPLC。在 Varian Inova 600 或 500 MHz NMR 光譜儀上記錄NMR光譜。將樣品溶解於d6-D]v[s〇中且相對於溶劑峰來计算化學位移（DMSOδ 2.50且13C 39.5 ppm)。於 Fisons VG Platform II上使用正電喷霧離子化模式量測質譜。溶離劑為〇·1 ml/分鐘下之乙腈/水50%混合物。動物原料六份烏狀白海綿（Candidaspongia flabellata)之海綿樣品自 Outer Gneering，Sunshine Coast，Old Reef，Fairfax Is及 Chauvel Reef，Queensland，Australia藉由水肺潛水收集且證據樣品（G3 15 106、G3 145 80、G3 14025、G3 15402、G3 18260、 96606.doc -48- 200524576 G317513)寄存於 Queensland Museum，Brisbane，Australia 〇萃取及分離研磨冷凍乾燥海綿原料（529 g)且以甲醇徹底萃取以獲得六份甲醇萃取物。使曱醇粗萃取物經受一系列分溶：MeOH/ 正己烷、H20:Me0H(4:l)/DCM、H20:Me0H(4:l)/Et0Ac。生物活性散佈於H20:Me0H(4:l)及EtOAc層中。組合所有六份生物相（biota)之H20:Me0H(4:l)與EtOAc層且然後以H20/丁醇分溶。活性在丁醇層（900 mg)中，然後使其經受逆流層析法{H20/Me0H/Et0Ac(4:l:5)}，上層為流動相。組合初期溶離份13至24(325 mg)且以正己烷：Et0Ac:Me0H:H20 (1:1:1:1)分溶。然後將生物活性之水層（150 mg)進一步藉由 {(CHCl3:Me0H:H20(7:13:8)}(下層為流動相）之逆流層析法進一步層析。組合早期活性溶離份25至32以產生85 mg原料。將其藉由HPLC(Hypersil BDS C18)使用自H20(含有1% TFA)至MeCN(含有1% TFA)之30分鐘H20/MeCN梯度而經受最終純化步驟。溶離18.2分鐘之後，產生0.4 mg化合物Π。化合物 11 : MS :(正 ESI)[M+H]+ m/z 1003.0 (100)、1004.4 (72)、1005.4 (75)、1006.3 (32)。4及13C NMR (d6-DMSO): 參見表11。包括1H、13C、gHSQC、gHMBC及gCOSY實驗之詳細研究之後，將化合物11驗明為環肽。 96606.doc -49- 200524576 化合物11

表 11 化合物 11 於 d6-DMSO 中之1Η (600 MHz)、13C (125 MHz)、HMBC及 COSY NMR 資料

原子序數 13C (mult)a lH (mult, J Hz) 2’3Jch相關性 COSY N-甲基色胺酸 1 n.o. - - 2 60.0 (d) 4.70 (bd，10·8Ηζ，1H) - H3a，H3b 3 22.4 (t) 2·71 (dd，14.5,10.8 Hz，1H) H2, H3b 3.14 (d，14.5 Hz，1H) - H3a 4 n.o. - - - 5 108.9 (s) - - - 6 11.33 (s，1H) 4, 7, 12 - 7 130.8 (s) - - - 8 111.0(d) 7.05 (bd，8.0 Hz，1H) 12, 10 H9 9 111.8(d) 6.60 (bd，8.0 Hz，1H) - H8 10 150.8 (s) - - - 11 101.8(d) 6.82 (bs，1H) 7，10 - 12 128.1 (s) - - - NMe 28.5 (q) 2.10 (s? 3H) 2 - 白胺酸 14 172.4 (s) - - - 15 46.8 (d) 4.16 (m，1H) - H16a，H16b，H20 16 36.6 (t) 0.32 (bt，11.0 Hz，1H) 15 H16b，H17 96606.doc -50- 200524576 0.96 (m，1H) - H15?H16a 17 22.4 (d) a1.42(m，1H) - - 18 19.0 (q) 0.22 (d5 6.6 Hz? 3H) 16, 17, 19 H17 19 22.1 (q) 0.41 (d5 6.6 Hz，3H) 16, 17, 18 H17 20 - 8.38 (d? 4.8 Hz? 1H) 14 H15 異白胺酸 21 171.6 (s) - - - 22 55.7 (d) 3.99 (t? 6.8 Hz, 1H) 23,26 H23, H27 23 35.7 (d) 1.76 (m? 1H) 21 H22? H24a3 H26 24 24.7 (t) 1.10 (m，1H) - H23, H24b，H25 a1.44(m，1H) - H24a，H25 25 11.2 ⑹ 0.85 (t，7·2 Hz，3H) 23,24 H24a，H24b 26 14.2 (q) 0.81 (d，6.6 Hz，3H) 22 H23 27 - 6.78 (d，6.8 Hz，1H) - H22 離胺酸 28 172.4 (s) - - - 29 54.3 (d) 3.85 (ddd5 7.0, 6.5, 5.0 Hz， 1H) 28 H30a，H30b，H35 30 31.0(t) 1.52 (m，1H) - H29，H31a 1.60 (m，1H) - H29,H31b 31 20.1 (t) 1.14 (m? 1H) - H30a 1.25 (m，1H) - H30b 32 26.6 (t) 1.38 (m? 1H) - H33b 1.41 (m，1H) - 33 37.8 (t) 2.85 (m? 1H) - H34 3.52 (m? 1H) - H34, H32a 34 - 7.35 (m，1H) - H33a，H33b 35 - 6.48(d. 7.0 Hz，1H) - H29 酪胺酸 36 n.o. - - - 37 54.7 (d) 4.50 (ddd，11.7, 9.0,4.9 Hz， 1H) - H38a，H38b，H45 38 36.5 (t) 2.62 (bt，13.0Hz，1H) 39 H37, H38b a3.23 (m，1H) 39 H37，H38a 39 130.0 (s) - - - 40 128.5 (d) 6.87 (d，7.5 Hz, 1H) 38, 39,42 H41 41 114.8(d) 6.62 (d，7.5 Hz，1H) 40, 42, 44 H40 42 156.0 (s) - - - 96606.doc - 51 - 200524576 43 114.8(d) 6.62 (d? 7.5 Hz? 1H) 40, 42, 44 H44 44 128.5 (d) 6.87 (d，7·5 Hz，1H) 38, 39, 42 H43 45 - 8.54 (d，9.0 Hz，1H) - H37 46 n.o. - - 苯丙胺酸 47 - 6.26 (d? 8.0 Hz5 1H) - H48 48 53.4 (d) 4.36 (ddd, 8.0, 7.5, 5.2 Hz， 1H) 56,49 H49a，H49b，H47 49 37.2 (t) 2.86 (dd，13.8, 7.5 Hz，1H) 56, 55, 51， 50, 48 H48 2.99 (dd，13.8, 5·2 Hz，1H) 56, 55, 51， 50, 48 H48 50 137.5 (s) - - 猶 51 129.0(d) 7.16 (d? 7.5 Hz? 1H) 53, 49 H52, H54 52 128.0 (d) 7.27 (t，7.5 Hz，1H) 50 H51，H55 53 126.2 (d) 7.20 (t，7.5 Hz，1H) 51，55 顆 54 128.0(d) 7.27 (t，7.5 Hz，1H) 50 H51?H55 55 129.0 (d) 7.16 (d，7.5 Hz，1H) 53, 49 H52, H54 56 173.8 (s) - - - OH - 8.71 (s，1H) - OH - 9.13 (s，lH) - -

a自2D NMR實驗來測算之化學位移。 η. 〇.=未觀察到實例3 · 該實例描述了化合物12之合成。通用實驗程序於配備有電噴霧介面之Micromass LCT質譜儀（LC-HRMS) 上記錄高解析度質譜。1H NMR之量測在Varian UNITY加 400、500及600光譜儀上分別以400、5 00及600 MHz之1Η頻率之操作執行。在d6-DMSO中以溶劑作為内標（internal · standard)，化學位移以ppm計來記錄NMR光譜。 96606.doc -52- 200524576 化合物12

NH

化合物12之合成根據文獻程序（Marsh and Bradley，J. 〇rg· Chem.，1997, 62，6199-6203)以下列修飾製備化合物i2:首先將Fmoc-L- Αα-Νω’ω'-(Βοο)2-ΟΗ 與樹脂 / 連接子（linker)偶合。移除 Fmoc 基團之後，將游離胺與Να-(4-硝基苯氧基羰基）-Νε-(9-芴基甲氣基幾基）-D-離胺酸嫦丙基@旨偶合。使用Fmoc-L-Ala繼之以 Fmoc-L-N_MeAla、Fmoc-L-Leu及 Fmoc-L-Ala於離胺酸殘基側鏈上繼續合成Fmoc肽。移除烯丙基酯及Fmoc，繼之以環化及自樹脂/連接子之最終裂解。藉由逆相HPLC(Ace C8柱，線性梯度5% — 950/。MeCN於0·1 M NH4OAc水溶液中）純化殘餘物產生化合物12(1.8 mg，1.3%)。 !H NMR (500 MHz，d6-DMSO) : δ 9·2 (寬 s，1H)，8.66 (d， 1Η)，8.52 (d，1Η)，7·4至 8.0 (寬訊號，4Η)，7·47 (dd，1Η)， 7·1〇 (d，1H)，6.56 (d，1H)，6.08 (d，1H)，4.77至 4.83 (m，1H)， 4.70至 4.77 (m，1H)，4.23 (qd，1H)，4·07 (qd，1H)，3.88至 3·98 (m，1H)，3·65至 3.75 (m，1H)，3.47至 3.52 (m，1H)，3.03 96606.doc -53- 200524576

(m，2H)，1.18 (雙 d，6H)，G.94 (d，3H)，0.93 (d，3H)，G.89 (d， 3H)，0.88 (d，3H) 〇 HRMS (ESI)經計算之 C32H59N10〇8 71 1.45 17 (M+H)+，實驗值 71 1.4525。實例4 該實例描述了化合物1及13至16之合成。化合物1之合成 a)中間體A之合成

中間體A

將 TFA(2 mL)添加至 BOC-D-LyS(Fm〇C)-〇烯丙基（2·86 g， 5.6毫莫耳）且靜置5分鐘。然後藉由乾燥氮氣流移除τρΑ以獲得H-D-Lys(Fm〇C)-〇烯丙基，將其於高真空管線上乾燥2 h以移除所有微量TFA。將2-氣三苯甲基樹脂（1 g，14毫莫耳）置於DCM(H) mL)中預膨脹丨h。排乾（drain)樹脂且添加 H-D-LyS(Fm〇C)-〇烯丙基（2·30 g，5·64毫莫耳）&mEA(729 mg，982 μί，5·64毫莫耳）於DCM(1〇 mL)中之溶液至該樹 96606.doc -54 - 200524576 脂，且震盪反應混合物lh。進一步添加DIEA(1.46g，1.95 mL，11.3毫莫耳）至樹脂且震盪反應混合物又1 h。添加甲醇 (1 mL)以任何未反應之樹脂進行末端封閉（end-cap)且震盪反應混合物又1 h。過濾樹脂且以DMF(2x5 mL)、DCM(2x5 mL)及DMF(2x5 mL)洗滌。使用下列條件使樹脂經受Fmoc-固相肽合成（SPPS): (i) Fmoc去保護··以20%哌啶於DMF(2xlO mL)中之溶液處理 2分鐘，繼之以DMF(4x5 mL)、DCM(4x5 mL) 及 DMF(4x5 mL)洗務。 (ii) 偶合條件：於所有偶合中添加偶合試劑之溶液至 Fmoc-胺基酸。添加該溶液至樹脂，繼之以DIEA。 (a)Fmoc_Trp(Boc)_OH(2.95 g，5.6毫莫耳）、HBTU (0·5 Μ 溶液，11.2 mL)及 DIEA(0.975 mL，5.6 毫莫耳）20分鐘。（b)Fmoc-N-Me-Leu-OH(2.06 g，5_6毫莫耳）、HBTU(0.5 Μ 溶液，11.2 mL)及 DIEA(0.975 mL， 5·6 毫莫耳）20分鐘。（c)Fmoc-Leu-OH(1.98 g，5.6 毫莫耳）、HOBt(756 mg，5.6毫莫耳）、HATU(2.13 g， 5·6 毫莫耳）及 DIEA(314 μΕ，1_8 毫莫耳）於 DMF(10 mL)中 3 h。（d)Fmoc-Ala-OH (1.74 g，5.6毫莫耳）、 HBTU(0.5 Μ 溶液，11.2 mL)及 DIEA(0.975 mL，5.6 毫莫耳）20分鐘。所有偶合之後，將樹脂過濾且以 DMF(4x5 mL)、DCM(4x5 mL)及 DMF(4x5 mL)洗滌。除了（c)之外之所有偶合使用茚三酮測試來監測，偶合（c)使用澳S分藍（bromophenol blue)測試來監 96606.doc -55· 200524576 測。所有偶合亦藉由MS來監測，其以1 〇〇% TF A裂解少量樹脂（5 mg)5分鐘，然後藉由MS分析來自樹脂之濾出液。

Pd(PPh3)4(1.62 g，1.4毫莫耳）及雙甲酮（ι·96 g，14毫莫耳）於THF:DCM(1:1，50mL)中之溶液以氮氣攪動（sparge)1(^ 鐘，添加至樹脂且震盪該混合物16 h。過濾反應混合物且以 DCM(3x5 mL)、DMF(3x5 mL)、0.5% DIEA及 0.5〇/。二乙基二硫基胺基甲酸納鹽於DMF(3x5 mL)中之溶液及DMF (3x5 mL)洗滌。以20%哌啶於DMF(2xlO mL)中之溶液處理樹脂 2分鐘，繼之以 DMF(4x5 mL)、DCM(4x5 mL)、10% 鹽酸吡錠於DCM:DMF(1:1，4x5 mL)中之溶液及DMF(4x5 mL) 洗滌。添加PyBroP(718 mg，1.54毫莫耳）及 DIEA(1 mL，5.74 毫莫耳）於DCM:DMF(l:：l，10 mL)中之溶液至樹脂且震盪該混合物3 h，此後茚三酮測試為陰性。藉由以50% TFA於DCM (20 mL)中之溶液處理1 h而自樹脂裂解環肽。過濾該樹脂、以TFA(2x5 mL)及DCM(2x5 mL)洗滌、濃縮至乾燥、再溶解於MeCN:H2O(0.1% TFA)且凍乾以獲得中間體A(435 mg， 38%) 〇 b)烯丙基-Ν2-[(9Η-苐-9-基甲氧基）羰基]-Ν5-{亞胺基 [(2，2,4,6,7-五甲基-2,3-二氮-1-苯幷咬。南-5-基）胺基]曱基} 鳥胺酸鹽將Ν2-[(9Η-苐-9-基曱氧基）羰基]-Ν5-{亞胺基[(2,2,4,6,7-五曱基-2,3 -二氫-1-苯幷吱喃-5-基）胺基]曱基}鳥胺酸鹽（1.〇 g ’ 1.54毫莫耳）溶解於DMF(5 mL)中。添加碳酸鉋（377 mg， 96606.doc -56- 200524576 1 · 16耄莫耳）且攪拌反應混合物1 h。然後添加浠丙基溴 (0.913 mL，10.8毫莫耳）且繼續攪拌又1 h得到乳狀白色溶液。添加水（25 mL)且以2M KHS04酸化該反應混合物。添加DCM(50mL)且分離該等相。以DCM(2x50mL)洗滌水相且將經組合之有機物以鹽水（50 mL)洗滌、乾燥（MgS04)、過濾且濃縮至乾燥以獲得作為無色泡沫體之烯丙基― N2-[(9H-苐-9-基甲氧基）羧基]-N5-{亞胺基[(2,2,4,6,7-五甲基-2，3-二氫-1-苯幷呋喃-5-基）胺基]甲基}鳥胺酸鹽（857 mg ， 81%)。 iHNMR (CDC13, 500 MHz) : δ 1.43 (s，6H)，1.59 (m，2H)， 1.73 (m，1H)，1.86 (m，1H)，2.09 (s，3H)，2.52 (s，3H)，2·61 (s5 3H)，2.91 (s，2H)，3·22 (m，2H)，4·17 (t，J 7Hz，1H)，4.32 (m，1H)，4.37 (m，1H)，4·59 (br d，J 4·5 Hz，2H)，5.21 (d，J 1〇·5 Hz, 1H)，5.30 (d5 J 17Hz，1H)，5.83 (m，ih)，5·88 (m， 1H)，6_26 (br s，1H)，6.35 (br s，2H)，7.26 (t，J 7·5Ηζ，2H)， 7.37 (t5 J 7·5Ηζ，2H)，7.57 (m5 2H)，7.74 (d，J 7·5Ηζ，2H)。 nCNMR (CDC13, 125 MHz) : δ 12.68, 18.22, 19.54, 25.69, 28.78, 29.93, 40.96, 43.43, 47.36, 53.72, 54.10, 66.23, 67.39, 86.63，117.78，119.12，120.19，124.93，125.40，127.34, 127.96，131·79，132.47，133·17，138.54，141.49, 143.97, 144.08, 156.63, 159.03, 171.42) ° MS ··(正 ESI)[M+H]+ m/z 689。 c)少布丙基-N5-[[(4 -乙基-2,2,6,7-四甲基-2,3_二氫-i-苯幷口夫喃-5-基）胺基](亞胺基）甲基]·νΜ(4-硝基苯氧基）羰基]鳥 96606.doc -57- 200524576 胺酸鹽將烯丙基·Ν2-[(9Η· i冬基甲氧基）羰基]_Ν5·{亞胺基 [(2?2?4?657.i f 鳥胺酸鹽（80〇11^，1.16毫莫耳）溶解於1：)]^(41111^中。添加哌啶（1 mL)且於室温下攪拌反應混合物3〇分鐘且然後濃縮。將所得殘餘物溶解於DCM(9 mL)中且添加至仁硝基苯基氯甲酸酯（370 mg，1.85毫莫耳）及吡啶（75〇 uL，9 3 μιη〇ι) 於DCM(6 mL)之懸浮液令並於冰鹽浴（ice_sah bath)中冷卻。攪拌2.5h後，添加iMKHSO4(20mL)，分離有機層且以DCM(4x20 mL)萃取水相。將經組合之有機萃取物乾燥 (MgS〇4)過濾、、》辰且猎由秒膠急驟層析法（1⑼％己烧至 7:3 EtOAc:己烷）純化該所得殘餘物以獲得烯丙基_n5_[[(4_ 乙基-2,2,6,7-四甲基-2,3-二氫-1-苯幷呋喃_5_基）胺基κ亞胺基）甲基]-N2-[(4-硝基苯氧基）羰基]鳥胺酸鹽（138 mg， 18%) 〇 HNMR (CDCI3, 500 MHz) : δ 1.42 (s，6H)，1·62 (m，2H) 1.79 (m，1H)，1.89 (m，1H)，2.04 (s，3H)，2·48 (s，3H)，2·55 (s，3H)，2.90 (s，2H)，3.20 (m，2H)，4.30 (m，1H)，4·60 (br d， J 4·5Ηζ，2H)，5.22 (d，J l〇.5Hz，1H)，5.29 (d，J 17Hz，1H)， 5.86 (m，1H)，6.25 (br s，lH)，6.33 (br s，1H)，6.50 (br d，J 6·5Ηζ，1H)，6·90 (d，J 7·5Ηζ，1H)，7·25 (d，J 8Hz，2H)，8.05 (d，J 7.5Hz，1H)，8.15 (d，J 8Hz，2H)。 13CNMR (CDC13, 125 MHz)·· δ 12.63, 18.16, 19·45, 25.74, 28.76，29.44，40.8，43·41，54.41，66.39，86·7 1，115 99 96606.doc -58- 200524576 Π7.78，119.21，122.22，124.97，125·23，126.22，131.66, 132.40，133.02，138.43，140.75，144.97，153.45，156.06, 156.67, 159.04, 163.07, 163.80, 171.6。 MS :(正 ESI)[M+H]+ m/z 632。 d)化合物1 將中間體Α(49·9 mg，〇·〇8毫莫耳）溶解於DMF(8 mL)中。添加烯丙基-N5-[[(4-乙基-2,2,6,7-四甲基-2,3·二氫-1-苯幷呋喃-5-基）胺基](亞胺基）甲基硝基苯氧基）羰基]鳥胺酸鹽（60.6 mg，0.096毫莫耳），接著添加〇比八（17 uL，0.096 宅莫耳）且於室温下攪拌反應混合物丨6 h。濃縮反應混合物以產生粗尿素。將（肆）三苯基膦鈀（8 mg，〇〇〇72毫莫耳）及雙甲酮（251叫，〇.18毫莫耳）於丁册:00^(1:1，5 1111〇中之溶液以乾燥氮氣攪動，且然後經由導管添加至尿素且於室溫下攪拌隔夜以獲得粗羧酸。將該羧酸溶解於DCM( 1 mL)，且添加p-甲酚（340 μί)及TFA(250 μΙ〇，且於室溫下攪拌反應混合物20 h以獲得粗化合物1。藉由逆相HPLC(YMC鹼性半預備柱，線性梯度65%水（1°/〇 TFA)35% MeCN(l% TFA) —100°/。MeCN(l°/〇 TFA))純化反應混合物以獲得化合物 1(11·3 mg，17%)。發現NMR及MS資料與真實樣品一致。 96606.doc -59- 200524576 化合物13

化合物13之合成使用與化合物1程序類似之程序，自中間體A&N2_[(苄氧基）羰基]-N5-(第三丁氧基羰基）鳥胺酸開始來合成化合物 13。HRMS C39H6iN9〇8 822.4280 (M+H)+，實驗值 822.4262。化合物14

化合物14之合成使用與化合物1程序類似之程序，自中間體A及第三丁基 N -(苐二丁氧基Ik基）-L_離胺酸鹽開始合成化合物μ。 !H NMR (500 MHz，CD3OD): δ 8.98 (d，1H)，8.71 (d，1H)， 7.95 (dd，1H)，7.79 (d，1H)，7.64 (d，1H)，7·31 (d，1H)，7·08 96606.doc -60- 200524576 (t，1H)，7.01 (t，1H)，6.78 (s，1H)，5.00至 4·88 (m，2H)，4.78 至 4.70 (m，1H)，4·36至 4.23 (m, 2H)，4.19至 4.13 (m，1H)， 3.88至 3·77 (m，1H)，3·55 (dd，1H)，3.04至 2.86 (m，4H)，2·〇3 至 1.88 (m，3H)，1.85 (s，3H)，1.84至 1.66 (m，6H)，1.66至 1.57 (m，3H)，1·52 (d，3H)，1.56至 1·44 (m，3H)，1.42至 1.30 (m，3H)，1·04 (雙 d，6H)，0.95 (雙 d，6H)。 HRMS (ESI)經計算之C4〇H64N908 798.4878 (M+H)+，實驗值 798.4858 ° 化合物15

化合物15之合成使用與化合物丨程序類似之程序，自中間體人及3_{6_[(第二丁氧基％基）胺基]吡啶j-基}丙胺酸（w〇〇1/〇2364)開始合成化合物 15。HRMS C42h6iNig〇8 833·4674 (M+H)+，實驗值 833.4678。 96606.doc * 6]. 200524576 化合物16

化合物16之合成 a)中間體B之合成使用與中間體A程序類似之程序合成中間體B。

中間體B

b)化合物16之合成根據化合物1之程序，自中間體B開始合成化合物1 6。 4 NMR (5 00 MHz，d6-DMSO): δ 12.70 (寬 s，1H)，10.83 (s， lH)，8.86(d，lH)，8.47(d，lH)，7.70S7.79(m，3H)，7.57(t， 1H)，7_46 (d，1H)，7·45 (dd，1H)，7.35 (d，1H)，7.28 (d，1H)， 96606.doc -62- 200524576 7.02 (dd，1H)，6.96 (dd，1Η)，6·81 (寬 s，1Η)，6·47 (d，1H)， 6.46 (d，1H)，4.82 (m，ih)，4.74至 4.75 (ddd，1H)，4.43 (ddd， 1H)，4·22至4·24 (m，1H)，4.13 (ddd，1H)，4·02 (ddd，1H)， 3.78 (dd，1H)，3.71 (dd，1H)，3.60 (m，1H)，3·35 (m，1H)， 3.11 (dt，2H)，2.86至 2.92 (m，1H)，2.78至 2.80 (m，1H)，1.83 (s，3H)，1.79至 1.83 (m，1H)，1.52至 1.56 (m，1H)，1.57至 1.60 (m，1H)，1.60至 1·64 (m，3H)，1.69至 1.70 (m，1H)，1·42至 1.48 (m，5H)，1·33 至 1.36 (m，1H)，1·22至 1.25 (m，2H)，1·18 至 1·20 (m，1Η)，0.95 (d，3Η)，0·91 (d，3Η)，0·89 (d，3Η)， 0.85 (d，3H) ° HRMS CwH^NnOp 842.4888 (M+H)+，實驗值 842.4885。實例5

以 Dirk Hendriks、Simon ScharpS及 Marc van Sande, Clinical Chemistry，31，1936-1939 (1985)中所述之檢定法使用 4 mM 之基質濃度，某些實例之活性展示於下表1中。

表I 化合物序數 IC5〇 5 0.1 μΜ 8 2.5 μΜ 12 0.2 μΜ 縮寫

EtOAc=乙酸乙酯 TFA=三氟乙酸 DCCC=液滴逆流層析法 DCM=二氣曱烷

MeOH=甲醇 MeCN=乙腈 96606.doc -63 200524576

Leu^白胺酸 Ala=丙胺酸 · DMSO=二甲亞砜 Arg=精胺酸 HPLC=高壓液相層析法 RPHPLO逆相高壓液相層析法

Boc=第三丁氧基魏基

Fmoc = (9H-苐-9-基甲氧基）幾基 gHMBC =梯度場異核多鍵相關性 gC0SY=梯度場相關譜 _ gHSQC =梯度場異核單量子聯動性 CPC =離心分溶層析法 DIEA =二異丙基乙胺 HATU=六氟磷酸0-(7-氮雜苯幷三唑-1-基-Ν,Ν,Ν'Ν’-四甲基脲鑌 HBTU=六氟磷酸0-苯幷三唑-1-基-N，N，N，，N’-四甲基脲鏽 THF=四氫吱喃 DMF=N，N-二甲基甲醯胺 ®

Trp=色胺酸 Lys =離胺酸 96606.doc 64-

Claims

200524576 十、申請專利範圍： 1 · 一種式⑴化合物或其醫藥上可接受之鹽或溶劑化物、或該鹽之溶劑化物之用途，

其中： X為（CH2)mY(CH2)n ; m及η獨立地為1、2、3、4、5或6 ;其限制條件為m+n不大於6 ; Y為一鍵、Ο、S(0)P或 S-S ; R1為C02R15或一羧酸電子等排物，諸如s(〇)2〇h、 s(o)2nhr15、PO(〇R15)〇H、po(or15)nh2、B(OR15)2、 PO(R15)OH、po(r15)nh2或四唑； R2、R3、R4、R5及R6獨立地為氫、C〗-6烷基（視情況經鹵素、羥基、氰基、SH、S(0)3H、SCCO/Cu烷基）、〇C(0)(C].4 燒基 hCFyC"烧氧基、〇CF3、COOH、CONH2、CONH(Ci-6 烷基）、nh2、cnh(nh2)或 nhcnh(nh2)取代）、C3-6環烷基（C 1 ·4 )少元基（其中5亥J衣烧基i辰視情況經鹵素、經基、氰基、（^-4烧基、CF3、氧基、〇cf3、NH2、（：Νί^Ν：Η2) 或NHCNH(NH2)取代）、雜環基（C!·4)烷基（其中該雜環基環視情況經鹵素、羥基、氰基、C,·4烷基、CF3、CN4烷氧基、 96606.doc 200524576 〇CF3、而2、CNH(NH2)或NHCNH(NH2)取代）、苯基（c】4) 烷基（其中该苯基環視情況經鹵素、羥基、氰基、Cl-4烷基、CF3、cK4 烷氧基、〇Cf3、Nh2、CN叫NH2)或 NHCNH(NH2)取代）或雜芳基（Ci·4)烧基（其中該雜芳基環視情況經i素、羥基、氰基'Cm烷基、CF3、Cw烷氧基、〇CF3、NH2、CNH(NH2)或nhcnh(nh2)取代）； p及q獨立地為ο、1或2 ; R7、R8、R9、Rl〇、Rl1、R12 及 R13 獨立地為 Η 或 c,.4 烧基； R14為H或Cl_4烷基；且， R15為11或（：1-4烷基；其係用於製造供治療或預防其中抑制羧肽酶U可獲益之病症之藥物的方法中。 2· —種式（I)之化合物，

X為（CH2)4 ; R1 為 co2r15 ; R2為於其末端處經nh2、cnh(nh2)或NHCNH(NH2)取代之直鏈CN6烷基；經NH2、cnh(nh2)或NHCNH(NH2)取代 96606.doc 200524576 之〇3_6環烷基；含有至少一個氮原子之雜環基；經NH2、 CNH(NH2)或NHCNH(NH2)取代之非含氮雜環基；經 nh2、cnh(nh2)或nhcnh(nh2)取代之雜芳基；經nh2、 cnh(nh2)或 nhcnh(nh2)取代之苯基；經nh2、cnh(nh2) 或NHCNH(NH2)取代之雜芳基（Cw)烷基；經nh2、 CNH(NH2)或NHCNH(NH2)取代之苯基（Cw)烷基；或經 NH2、CNH(NH2)或 NHCNH(NH2)取代之 C3_6 環烷基（Ci-4) 烷基；以上所有環視情況進一步經一或多個以下基團取代：鹵素、羥基、氰基、Cw烷基、CF3、Cw烷氧基或 ocf3 ； R3、R4、R5及R6之一獨立地為氫、雜芳基（Cm)烷基（其中該雜芳基環視情況經鹵素、羥基、氰基、Cw烷基、CF3、 Ci-4烷氧基、OCF3、NH2、CNH(NH2)或 NHCNH(NH2)取代）；且其餘獨立地為氫、CN6烷基（視情況經鹵素、羥基、氰基、SH、S(0)3H、烷基）、OCCOXCw 烷基）、 CF3、Ch烷氧基、OCF3、COOH、CONH2、CONHCC" 烷基）、NH2、CNH(NH2)或 NHCNH(NH2)取代）、c3.6環烷基（Ci-4)烷基（其中該環烷基環視情況經鹵素、羥基、氰基、Cm烷基、cf3、C"烷氧基、ocf3、nh2、cnh(nh2) 或nhcnh(nh2)取代）、雜環基（(^_4)烷基（其中該雜環基環視情況經鹵素、羥基、氰基、Cw烷基、CF3、Ci-4烷氧基、 OCF3、NH2、CNH(NH2)或 NHCNH(NH2)取代）、苯基（Ci-4) 烷基（其中該苯基環視情況經鹵素、羥基、氰基、Cw烷基、CF3、Cb4 烷氧基、OCF3、NH2、CNH(NH2)或 96606.doc 200524576 NHCNH(NH2)取代）或雜芳基（Ci-4)烷基（其中該雜芳基環視情況經鹵素、羥基、氰基、CN4烷基、CF3、Cw烷氧基、 OCF3、NH2、CNH(NH2)或 NHCNH(NH2)取代）； p及q獨立地為0、1或2 ; R7、R8、R9、R10、R11、R12及 R13獨立地為烷基； R14為Η或CN4烷基；且， R15 為烷基；或其醫藥上可接受之鹽或溶劑化物，或該鹽之溶劑化物。 3.如請求項2之式（I)化合物或其醫藥上可接受之鹽或溶劑化物，或該鹽之溶劑化物，其中： X為（CH2)4 ; R1 為 C02R15 ; R2為於其末端處經NH2、CNH(NH2)或NHCNH(NH2)取代之直鏈Cu烷基；經NH2、CNH(NH2)或NHCNH(NH2)取代之C3_6環烷基；含有至少一個氮原子之雜環基；經NH2、 CNH(NH2)或NHCNH(NH2)取代之非含氮雜環基；經 nh2、cnh(nh2)或nhcnh(nh2)取代之雜芳基；經nh2、 cnh(nh2)或 nhcnh(nh2)取代之苯基；經nh2、cnh(nh2) 或NHCNH(NH2)取代之雜芳基（Cm)烷基；經NH2、 CNH(NH2)或NHCNH(NH2)取代之苯基（Cm)烷基；或經 NH2、CNH(NH2)或 NHCNH(NH2)取代之 C3_6環烷基（Cb4) 烷基；以上所有環視情況進一步經一或多個以下基團取代：鹵素、羥基、氰基、Cw烷基、CF3、Cw烷氧基或 OCF3 ; 96606.doc 200524576 R、R4、R5及R6之一獨立地為氫、雜芳基（Ci4)烷基（其中該雜芳基環視情況經鹵素、羥基、氰基、Cw烷基、CF3、 C】-4烧氧基、〇CF3、nh2、cnh(nh2)或 nhcnh(nh2)取代），且其餘獨立地為氫、CN6烷基（視情況經鹵素、羥基、氛基、SH、S(〇)3H、SCO^Cu烷基）、OCCOKCm烷基）、 CF3、(^·4烧氧基、QCF3、COOH、CON：H2、烷基）、nh2、cnh(nh2)或NHCNH(NH2)取代）、C3-6環烷基（C!·4)烧基（其中該環烧基環視情況經鹵素、經基、氰基、c"烷基、CF3、C】-4烷氧基、ocf3、nh2、cnh(nh2) 或NHCNH(NH2)取代）、雜環基（Cl-4)烷基（其中該雜環基環視情況經鹵素、羥基、氰基、C!-4烷基、CF3、CN4烷氧基、 ocf3、nh2、cnh(nh2)或nhcnh(nh2)取代）、苯基（Cl.4) 烷基（其中該苯基環視情況經鹵素、羥基、氰基、CN4烷基、CF3、Cw 烷氧基、ocf3、nh2、cnh(nh2)或 NHCNH(NH2)取代）或雜芳基（Cm)烷基（其中該雜芳基環視情況經鹵素、經基、氰基、C 1 _4炫基、CF3、C 1.4烧氧基、 OCF3、NH2、CNH(NH2)或 NHCNH(NH2)取代）； p及q獨立地為0、1或2 ; R7、R8、R9、R10、R11、R12 及 R13獨立地為 Η或 CK4烷基； R14為HiCM烷基；且， R15為Η或Cw烷基；或其醫藥上可接受之鹽或溶劑化物，或該鹽之溶劑化物。 4·如請求項2或3之式（I)化合物或其醫藥上可接受之鹽或溶劑化物、或該鹽之溶劑化物，其中： 96606.doc 200524576 R1 為 C02R15 ; R2為於其末端處經NH2、CNH(NH2)或nhcnh(nh2)取代之直鏈Cu烷基；C4烷基（如CH(CH3)CH2CH3或 CH2CH(CH3)2);或（胺基吼。定基）甲基（如（6-胺基π比咬-3-基）甲基）； R3及R4之一為視情況經鹵基或羥基取代之（吲哚·3_ 基）CH2;且另一為苄基（視情況經鹵基或羥基取代）或(^4 烷基（如 CH(CH3)CH2CH3 或 CH2CH(CH3)2); 或R3及R4皆為甲基； R5及R6獨立地為Ci_6烷基（如CH3、CH(CH3)2、 CH(CH3)CH2CH3 或 CH2CH(CH3)2); R7、R8、R9、R11、R12、R13AR1、H ; 尺⑼為匕^烷基；且 R15為H或CN4烷基。 5·如請求項2至4中任一項之化合物，其中χ為（ch2)4。 6·如請求項2至5中任一項之化合物，其中R1為c〇2R15，其中R15為1^或(^_4烷基。 7 ·如請求項2至6中任一項之化合物，其中R2為於其末端處經NH2、CNH(NH2)或NHCNH(NH2)取代之直鏈Cl.6烧基； C4烷基（如 CH(CH3)CH2CH3 或 CH2CH(CH3)2);或（胺基吼啶基）曱基。 8·如請求項2至4中任一項之化合物，其中R2為Cw烷基 (CH(CH3)CH2CH3或CH2CH(CH3)2)、苄基或於其末端處經 NH2、CNH(NH2)、NHCNH(NH2)或（6-胺基吡啶-3-基）曱基 96606.doc 200524576 取代之直鏈cN6烷基。 9·如請求項2至8中任一項之化合物，其中R2為於其末端處經 NH2、CNH(NH2)、NHCNH(NH2)或(6-胺基吡啶-3-基) 甲基取代之直鏈Cb6烧基。 10·如請求項2至9中任一項之化合物，其中R3為CH2吲哚基 (其中5亥°引ϋ朵基視情況經一或多個以下基團取代：鹵素或經基）、Cw烷基或苄基（視情況經鹵素或羥基取代）。 11·如請求項2至1〇中任一項之化合物，其中R4為哚基 (其中該吲哚基視情況經一或多個以下基團取代：鹵素或經基）、Cw 烷基（ch(CH3)CH2CH3 或 CH2CH(CH3)2)或苄基 (視情況經_素或羥基取代）。 12·如請求項2至11中任一項之化合物，其中R5&R6獨立地為 C!-6烷基（如曱基、異丙基、CH(CH3)CH2CH3或 ch2ch(ch3)2) 〇 1 3 ·如請求項2至12中任一項之化合物，其中r7、、r9、ri 1、 R12、R13 及 R14皆為Η。 14. 如請求項2至4中任一項之化合物，其中r10為Cl-4烷基。 15. 如請求項2之化合物，其係如下式之化合物：

96606.doc 200524576 其中 113&為1·!、R3bgH且 R15為 Η ; 113&為〇11、R3b為 Cl且 R15為 Η ; ^^為 OH、1131)為 Cl且 R15為 CH3 ; 113&為11、11313為11且 R15為 CH3 ; R3a為 Η、R3bgCl且 R15為 Η ;

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96606.doc -11 - 200524576

或其醫藥上可接受之鹽或溶劑化物、或其醫藥上可接受之鹽之溶劑化物。 16. 17. 18. 一種如請求項2至1 5中任一項之式⑴化合物或其醫藥上可接文之鹽或溶劑化物、或該鹽之溶劑化物之用途，其係用於製造供治療或預防其中抑制羧肽酶U可獲益之病症之藥物的方法中。如明求項16之用途，其係用於製造一供治療或預防如下 ;疒之藥物·血液及/或組織中血栓症及/或血液凝結過快；動脈粥樣硬化；纖維化病症；發炎疾病；或受益於 2持或增強哺乳動物（諸如人類）體内緩激肽含量之病症、。一種醫藥調配物，其含有如請求項2至15中任-項之式⑴ 化合物或其醫藥上可接受之鹽或溶劑化物、或劑化物作為活性成份，以及醫藥上可接受之佐劑：稀釋劑或載劑。 ^稀釋 96606.doc 200524576 七、指定代表圖： (一) 本案指定代表圖為：（無） (二) 本代表圖之元件符號簡單說明：八、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式：

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