TR201809046T4 - Bir müsin etki alanlı polipeptide bağlı bir aktif protein içeren füzyon polipeptitleri. - Google Patents

Bir müsin etki alanlı polipeptide bağlı bir aktif protein içeren füzyon polipeptitleri. Download PDF

Info

Publication number
TR201809046T4
TR201809046T4 TR2018/09046T TR201809046T TR201809046T4 TR 201809046 T4 TR201809046 T4 TR 201809046T4 TR 2018/09046 T TR2018/09046 T TR 2018/09046T TR 201809046 T TR201809046 T TR 201809046T TR 201809046 T4 TR201809046 T4 TR 201809046T4
Authority
TR
Turkey
Prior art keywords
protein
fusion protein
mucin
polypeptide
fusion
Prior art date
Application number
TR2018/09046T
Other languages
English (en)
Inventor
Alvarez Juan
Chamoun Jean
Heather Losey C
Original Assignee
Alkermes Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Alkermes Inc filed Critical Alkermes Inc
Publication of TR201809046T4 publication Critical patent/TR201809046T4/tr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • C07K14/54—Interleukins [IL]
    • C07K14/55—IL-2
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A61P15/08—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for gonadal disorders or for enhancing fertility, e.g. inducers of ovulation or of spermatogenesis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A61P21/04—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system for myasthenia gravis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A61P27/06—Antiglaucoma agents or miotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/10—Drugs for disorders of the endocrine system of the posterior pituitary hormones, e.g. oxytocin, ADH
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/06—Antianaemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/10—Antioedematous agents; Diuretics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
    • C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
    • C07K14/4701—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals not used
    • C07K14/4713—Autoimmune diseases, e.g. Insulin-dependent diabetes mellitus, multiple sclerosis, rheumathoid arthritis, systemic lupus erythematosus; Autoantigens
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
    • C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
    • C07K14/4701—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals not used
    • C07K14/4727—Mucins, e.g. human intestinal mucin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/475—Growth factors; Growth regulators
    • C07K14/50—Fibroblast growth factors [FGF]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • C07K14/54—Interleukins [IL]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • C07K14/54—Interleukins [IL]
    • C07K14/5412—IL-6
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • C07K14/54—Interleukins [IL]
    • C07K14/5443—IL-15
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • C07K14/54—Interleukins [IL]
    • C07K14/545—IL-1
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/575—Hormones
    • C07K14/57563—Vasoactive intestinal peptide [VIP]; Related peptides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • C07K14/70503—Immunoglobulin superfamily
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • C07K14/71—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants for growth factors; for growth regulators
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • C07K14/715—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants for cytokines; for lymphokines; for interferons
    • C07K14/7155—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants for cytokines; for lymphokines; for interferons for interleukins [IL]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/01—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif
    • C07K2319/02—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif containing a signal sequence
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/30—Non-immunoglobulin-derived peptide or protein having an immunoglobulin constant or Fc region, or a fragment thereof, attached thereto
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/31—Fusion polypeptide fusions, other than Fc, for prolonged plasma life, e.g. albumin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/70—Fusion polypeptide containing domain for protein-protein interaction
    • C07K2319/74—Fusion polypeptide containing domain for protein-protein interaction containing a fusion for binding to a cell surface receptor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/90—Fusion polypeptide containing a motif for post-translational modification
    • C07K2319/91—Fusion polypeptide containing a motif for post-translational modification containing a motif for glycosylation

Abstract

Mevcut buluş, dairesel permütasyon ile modifiye edilen ve en az bir polipeptit füzyon partnerine kaynaştırılan polipeptit ligantları içeren füzyon polipeptitleri sağlar, burda, bu tür füzyon polipeptitleri, yeni, iyileştirilmiş ve artırılmış biyolojik fonksiyonlar ve aktivitelere sahiptir. Bu tür aktivitelere, bunlarla sınırlı olmaksızın, yüksek bağlanma afinitesi, yüksek agonist aktivitesi (süper agonist), antagonist aktivitesi, yüksek erişililebilirlik, aktif alanın yüksek esnekliği, yüksek stabilite, daha geniş ve/veya değiştirilmiş substrat özgüllüğü ve bunların kombinasyonları dahildir. ' ATCC CRL-2105 " ATCC TIB-214.

Description

TARIFNAME BIR MÜsiN ETKI ALANLI POLIPEPTIDE BAGLI BIR AKTIF PROTEIN IÇEREN FÜZYON POLIPEPTITLERI BULUSUN ALTYAPISI Protein terapötiklerinin farmakokinetigi, farmakodagilimi, çözünürlügü, stabilitesi, efektör islevinin iyilestirmesi ve reseptör baglantilari, glikosile proteinlerin karbonhidrat kISmI ile büyük ölçüde etkilenebilir. Ek olarak, biyolojik olarak aktif olan birçok peptit ve protein sinirli çözünürlüge sahiptir veya kompleks çözünürlestirme ve dogallasim prosedürleri gerektiren rekombinant üretimler sirasinda topaklanmis hale gelir. Ayrica, 60 kilodaltondan (kD) daha düsük moleküler agirliga sahip protein ve peptit terapötikleri, renal arindirma nedeniyle çogu zaman kisa yari-ömür dezavantajina sahip Protein terapötiklerinin yar-ömrünün uzatilmasina yönelik kullanilan mevcut stratejiler, iki genel kategoriye ayrilir: 1) FcRn ortamli geri dönüstürmenin kullanilmasi ve 2) hidrodinamik hacmin artirilmasi. Açiklanmis olan spesifik yaklasimlara, ilk startejiye yönelik FcRn'ye baglanan proteinlere veya etki alanlarina konjügasyon, baglanma veya füzyon dahildir, sonuncu stratejiye yönelik mültimerizasyon, polimerlere veya karbonhidratlara (PEG, Kolominik asit veya Hidroksietil nisasta gibi) kimyasal baglanma, N-glikosilasyon etki alanlari ile birlesme dahildir. Ancak, Fc-füzyon üretimi, ek imalat adimlari ve çogu zaman kompleks pürifikasyon prosedürleri gerektiren zaman harcayici, verimsiz ve masrafli bir prosestir. Ek olarak, en yaygin olarak kullanilan PEGilasyon olmak üzere kimyasal baglanti stratejileri, ek konjügasyon ve pürifikasyon adimlari ve düsük toplam verim nedeniyle üretim masrafinda önemli artislar ile bir polipeptit dizilimi araciligiyla üretilen diger rekombinant PEG mimetikleri de açiklanmistir. Bu teknolojinin ek konjügasyon adiminin üstünden gelmesine ragmen, eklenen peptit dizilimi, endojen olmamasi nedeniyle, immünojenesite potansiyeline bir XTEN polipeptidi içeren füzyon proteinlerini açiklar; bunun sayesinde XTEN polipeptitleri, aktif proteinin yari-ömrü gibi farmakokinetik özelliklerini artirir. Müsin proteinleri ve proteinlerin müsin etki alanlari, müsin etki alanlarina sahip müsin proteinleri ve diger polipeptitlerin, katilasmis düzensiz sargilar olarak hareket etmesine yapisal olarak olanak veren yüksek bir glikosilasyon derecesine sahiptir. Büyük oranda glikosile müsin etki alanlarini yapan hidrofilik olarak dallanmis hidrofilik karbonhidratlar ile kombinasyon içindeki bu katilasmis düzensiz sargili yapi, aktif proteinin hidrodinamik çapinin, ifade edilen proteinin moleküler agirligina bagli olarak beklenecek olana göre daha yüksek bir degere yükseltilmesinde belirli olarak yararlidir.
Ayrica yüksek glikosilasyon seviyesi nedeniyle, bir müsin etki alaninin eklenmesi, aktif proteinin konsantre solüsyonlarinin yükü, çözünürlügü ve viskoelektrik özellikleri gibi bir proteinin fizikokimyasal özelliklerini modifiye etme potansiyeline sahiptir.
Mevcut bulusun füzyon proteini bilesimleri ve yöntemleri, bir aktif proteinin biyolojik, farmakolojik, güvenlik ve/veya farmasötik özelliklerini gelistirir.
BULUSUN KISA AÇIKLAMASI Mevcut bulus, müsin etki alanli polipeptide bagli olmayan ayni protein ile karsilastirildiginda daha iyi özelliklere (örnegin, farmakokinetik ve/veya fizikokimyasal özellikler) sahip olan bir aktif proteine kovalent olarak bagli bir müsin etki alanli polipeptit içeren füzyon proteinleri ile ve bunun yani sira bulusun füzyon proteinlerinin yapilmasi ve kullanilmasina yönelik yöntemler ile ilgilidir.
Bir düzenlemede bulus, opsiyonel bir baglayici araciligiyla bir aktif proteine bagli olan bir müsin etki alanli polipeptit içeren bir füzyon proteini saglar, burada, müsin etki alanli polipeptit glikosiledir ve SEQ ID NO:20 veya en az %90 amino ait dizilimi benzerligi ile buna homolog olan herhangi amino asit dizilimi içerir, burada, aktif protein IL-1Ra veya eksendin-4 veya en az %90 amino ait dizilimi benzerligi ile buna homolog olan herhangi amino asit dizilimidir ve burada, füzyon proteininin yari ömrü, müsin etki alanli polipeptide kaynasmis olmayan ilgili aktif proteinin yari ömrüne göre iki kat artirilir.
Bir düzenlemede bulus, bulusun füzyon proteinlerini kodlayan nükleik asit dizilimlerinin yani sira, bulusun nükleik asitlerinin ifade edilmesine yönelik vektörler ve konak hücreler de saglar.
Bir düzenlemede bulus, bir terapötik aktif proteinin yari ömrünün uzatilmasina yönelik, asagidaki adimlari içeren yöntemler saglar: a) bir terapötik aktif proteinin saglanmasi, burada, aktif protein, lL-1Ra veya eksendin-4 veya en az %90 benzerlik ile buna benzeyen herhangi bir amino asittir; b) Bir füzyon proteininin olusturulmasina yönelik SEQ ID NO:20 içeren bir müsin etki alanli polipeptite terapötik aktif proteinin baglanmasi ve o) bir denege terapötik olarak etkili nit dozun verilmesi sonrasinda füzyon proteininin yari ömrünün ölçülmesi ve yari ömrün, kiyaslanabilir bir terapötik dozda verilmesi durumunda yalnizca ilgili terapötik protein ike karsilastirildiginda artmis oldugunun belirlenmesidir. Bir düzenlemede bulus, bulusun füzyon proteinlerini içeren farmasötik bilesimler saglar.
Bir düzenlemede, bulus, tipta kullanima yönelik bulusun farmasötik bilesimlerini saglar.
SEKILLERIN KISA AÇIKLAMASI SEKIL 1. IL1Ra müsin yapilarina ait Coomassie Mavi-izli SDS/polikrilamit jel (A) ve IEF jel (B). Oklar, ilgili proteinleri belirtir. IEF jelindeki bantlarin çesitliligi, çogunlukla N-glikosilasyondaki farkliliklar nedeniyle farkli sekilde yüklenmis olan türleri belirtir SEKIL 2. RDBl813'ün jel filtrasyon komatografisi (gri) ve moleküler boyut standartlari (siyah). Standartlarin moleküler agirliklari ve RD81813'ün belirgin moleküler agirligi, ayrisan her bir pikin üzerinde Iistelenir.
SEKIL 3. RDB1814'ün jel filtrasyon kromatografisi (gri) ve moleküler boyut standartlari (siyah). Standartlarin moleküler agirliklari ve RDB1814'ün belirgin moleküler agirligi, ayrisan her bir pikin üzerinde Iistelenir.
SEKIL 4. RDBiBZB'nin jel filtrasyon kromatografisi (gri) ve moleküler boyut standartlari (siyah). Standartlarin moleküler agirliklari ve RDB1826'nin belirgin moleküler agirligi, ayrisan her bir pikin üzerinde Iistelenir.
SEKIL 5. RDB1815'in jel filtrasyon kromatografisi (gri) ve moleküler boyut standartlari (siyah). Standartlarin moleküler agirliklari ve RDB1815'in belirgin moleküler agirligi, ayrisan her bir pikin üzerinde Iistelenir.
SEKIL 6. RDBl816'nin jel filtrasyon kromatografisi (gri) ve moleküler boyut standartlari (siyah). Standartlarin moleküler agirliklari ve RDB1816'nin belirgin moleküler agirligi, ayrisan her bir pikin üzerinde Iistelenir.
SEKIL 7. HEK-mavi tahlilinde RDB tarafindan sinyal edilen lLlß inhibisyonu. Inhibisyon yoklugunda konsantrasyonunun bir fonksiyonu olarak IL1ß ( ~~~~~~ I """" ') aktivitesi. RDB ve ölçümler iki kez yapilir. Tahmin edilen IC50 degerleri, seklin en üst sag kösesinde gösterilir.
SEKIL 8. HEK-mavi tahlilinde RDB tarafindan sinyal edilen lL1ß inhibisyonu. Inhibisyon yoklugunda konsantrasyonunun bir fonksiyonu olarak inhibisyon, 15pM IL1ß varliginda ölçülür. Tüm ölçümler iki kez yapilir. Tahmin edilen ICso degerleri, seklin en üst sag kösesinde gösterilir.
SEKIL 9. HEK-mavi tahlilinde RDB tarafindan sinyal edilen lL1ß inhibisyonu. Inhibisyon yoklugunda konsantrasyonunun bir fonksiyonu olarak IL1ß( """" i iiiii `) aktivitesi. RDB ve ölçümler iki kez yapilir. Tahmin edilen IC50 degerleri, seklin en üst sag kösesinde gösterilir.
SEKIL 10. Hareketsiz fare IL1RI reseptörüne baglanan RDB1813'ün Yüzey Plazmon Rezonans (SPR) ölçümleri. Sensörgramlar ve uydurulmus egriler, sirasiyla gri ve siyahtir. RDB1813 ve Anakinra (veri gösterilmemistir) için kinetik parametreler, inset içerisindedir.
SEKIL 11. Hareketsiz fare IL1RI reseptörüne baglanan RDB1814'ün Yüzey Plazmon Rezonans (SPR) ölçümleri. Sensörgramlar ve uydurulmus egriler, sirasiyla gri ve siyahtir. RDB1814 ve Anakinra (veri gösterilmemistir) için kinetik parametreler, inset içerisindedir.
SEKIL 12. Hareketsiz fare IL1RI reseptörüne baglanan RDB1826'nin Yüzey Plazmon Rezonans (SPR) ölçümleri. Sensörgramlar ve uydurulmus egriler, sirasiyla gri ve siyahtir. RDB1826 ve Anakinra (veri gösterilmemistir) için kinetik parametreler, inset içerisindedir.
SEKIL 13. Hareketsiz fare IL1RI reseptörüne baglanan RDB1815”in Yüzey Plazmon Rezonans (SPR) ölçümleri. Sensörgramlar ve uydurulmus egriler, sirasiyla gri ve siyahtir. RDB1815 ve Anakinra (veri gösterilmemistir) için kinetik parametreler, inset içerisindedir.
SEKIL 14. Hareketsiz fare IL1RI reseptörüne baglanan RDB1816'nin Yüzey Plazmon Rezonans (SPR) ölçümleri. Sensörgramlar ve uydurulmus egriler, sirasiyla gri ve siyahtir. RDB1816 ve Anakinra (veri gösterilmemistir) için kinetik parametreler, inset içerisindedir.
SEKIL 15. Fare CAIA modeli enflamasyonunda RDB1816 degerlendirmesine yönelik deneysel tasarim.
SEKIL 16. Fare CAIA modeli enflamasyonu içerisine tek bir 20 mg/kg RDB1816 ( ) IL1Ra (Anakinra 4?) ve tuz kontrolü (“29) enjeksiyonunun inhibitör etkileri.
Siyah oklar, monoklonal antikor kokteyli (mAb) ile ve tedavi molekülü ile birlikte enjeksiyon günlerini belirtir. Sekiz farelik bir grup her bir tedavi için kullanilir ve her bir zaman noktasi, her bir gruptan alinan ortalamayi ifade eder.
SEKIL 17. Farede RDB1815 ve RDB186inin farmakokinetik profili. Plazma konsantrasyon-zaman profilleri, RD81815 i.v. (-0-, tek bir 2.1 mg/Kg [mpk] enjeksiyon), SC enjeksiyonuna (-~-, tek bir 5.6 mpk enjeksiyonu) yönelik ve RDB1816 i.v. (ww, tek bir 2.4 mpk enjeksiyon), SC enjeksiyonuna (m, tek bir 6.4 mpk enjeksiyon) yönelik kaydedilir. Semboller, her kosul için üç farkli fareden alinan ortalamayi ifade eder. SC gruplarina yönelik farmakokinetik parametreler tabloda özetlenir.
SEKIL 18. Eksendin-4 müsin yapisi RDBZ203'ün Coomassie Mavi-lekeli SDS/poliyakrilamit jeli.
SEKIL 19. RD82203 jel filtrasyonu kromatogrami (gri) ve moleküler boyut standartlari (gri). Standartlarin moleküler agirliklari, her bir ayrisan pik üzerinde SEKIL 20. RD82203 ve eksendin-4'e yönelik GLP-1 R aktivitesi.
SEKIL 21. RDB2203'ün farmakokinetik profili.
BULUSUN DETAYLI AÇIKLAMASI Bulusun tercih edilen düzenlemelerinin bir açiklamasi asagidadir.
Tanimlar Burada kullanildigi üzere, asagidaki terimler, aksi belirtilmedikçe, asagida açiklanan anlamlara sahiptir.
Spesifikasyonlar ve istemlerde kullanildigi üzere, “bir” tekil formu, kapsam açikça aksini belirtmedikçe, çogul referanslari içerir. Örnegin, “bir hücre" terimi, bunun karisimlari dahil, birçok hücreyi içerir. polimerlerini refere etmek üzere burada birbiri ile degistirilebilir sekilde kullanilir.
Polimer, lineer veya dallanmis olabilir, modifiye edilmis amino asitler içerebilir ve amino olmayan asitler ile kesintiye ugrayabilir. Terimler ayrica, Örnegin, disülfür bagi olusumu, glikosilasyon, Iipidasyon, asetilasyon, foforilasyon veya bir etiketleme bileseni ile konjugasyon gibi herhangi bir diger manipülasyon ile modifiye edilen bir amino asit polimerini kapsar.
Burada kullanildigi üzere, “amino asit1 terimi, glisin ve hem D veya L optik izomerleri dahil ancak bunlarla sinirli olmamak üzere dogal ve/veya dogal olmayan veya sentetik amino asitleri ve amino asit analoglarina ve peptidomimetikleri refere eder. Satndart tek veya üçlü harf kodlari, amino asitleri belirtmek üzere kullanilir.
Dizilimlere yönelik ve burada kullanildigi üzere “dogal olmayan sekilde ortaya çikan” terimi, bir memelide bulunan bir yabani tip veya dogal sekilde ortaya çikan bir dizilimin benzerine sahip olmayan, bunu tamamlamayan veya bununla yüksek bir homologluk derecesine sahip olmayan polipeptit veya polinükleotit dizilimleri anlamina gelir. Örnegin, dogal olmayan sekilde ortaya çikan bir polipeptit, uygun sekilde hizalanmasi gliko-proteinler olusturmak üzere hücreler içerisindeki üretimleri sirasinda proteinlere post-translasyonel olarak baglandigi prosesi ifade etmek üzere burada birbiri ile degistirilebilir sekilde kullanilir. Protienlerin glikosilasyonu, bir post-translasyonel olaydir ve glikanlarin serin ve treonine baglanmasini ve O-bagli glikosilasyon durumunda hidroksiprolin ve hidroksilisin veya N-bagli glikosilasyon durumunda asparajinin daha küçük bir kapsamini refere eder.
Bir "fragment", terapötik ve/veya biyolojik aktivitenin en az bir kismini tutan bir natif aktif proteinin bir trunkat formudur. Bir “varyant”, aktif protein terapötik ve/veya biyolojik aktivitenin en az bir kismini tutan bir natif aktif protein ile dizilim homolojisine sahip bir proteindir. Örnegin, bir varyant protein, referans aktif protein ile en az %70, %75, %80, olabilir. Burada kullanildigi üzere, «aktif protein kismi» terimi, örnegin, bölgesel yönlendirilmis mutajenez, insersiyon ile kasten veya mutasyonlar araciligiyla kazara modifiye edilmis proteinler içerir.
Bir “konak hücre", denek vektörlere yönelik bir alici olabilen veya olmus ayri bir hücre veya hücre kültürü içerir. Konak hücreler, tek bir konak hücrenin döllerini içerir. Döl, dogal, kaza veya kasti mutasyon nedeniyle orijinal ana hücre ile tamamen özdes (morfoloji veya toplam DNA takiminin genomigi açisindan) olmayabilir. Bir konak hücre, bu bulusun bir vektörü ile in vivo sekilde transfekte edilmis hücreler içerir.
Burada açiklanna çesitli polipeptitleri açiklamak üzere kullanilmasi durumunda “izole”, belirlenen ve dogal çevresinin bir bileseninden ayrilan ve/veya geri kazanilan polipeptit anlamina gelir. Dogal çevresinin kontaminant bilesenleri, tipik olarak polipeptide yönelik diagnostik veya terapötik kullanimlara karisan materyallerdir ve enzim, hormon ve diger proteinli veya proteinli olmayan çözünenler içerebilir. Teknikte uzman kisiler tarafindan bilindigi üzere, dogal olmayan sekilde ortaya çikan bir polinükleotit, peptit, polipeptit, protein, antikor veya bunlarin fragmentleri, dogal olarak ortaya çikan benzer kismindan ayirt edilmesine yönelik “izolasyona” gerek duymaz. Ek olarak, bir "konsantre edilmis", bunlarin fragmentleri, birim hacimdeki molekül konsantrasyonu veya sayisinin dogal sekilde ortaya çikan benzer kismindan daha yüksek olmasi açisindan, dogal olarak ortaya çikan benzer kismindan ayirt edilebilir. Genelde, rekombinant araçlar ile yapilmis ve bir konak hücrede ifade edilen bir polipeptit, "izole" olarak kabul edilir.
Bir "izole" polinükleotit veya polipeptit-kodlayici nükleik asit veya diger polipeptit- kodlayici nükleik asit, belirlenen ve normal olarak polipeptit-kodlayici nükleik asidin dogal kaynagina bagli olan en az bir kontaminant nükleik asit molekülünden ayrilan bir nükelik asit molekülüdür. izole bir polipeptit-kodlayici nükleik asit molekülü, dogada bulundugu sekilden veya ayardan farklidir. Bu neden izole polipeptit-kodlayici nükleik asit molekülleri, dogal hücrelerde var olmasi nedeniyle spesifik polipeptit-kodlayici nükleik asit moleküllerinden ayirt edilir. Ancak, bir izole polipeptit-kodlayici nükleik asit molekülü, örnegin, genellikle nükleik asit molekülünün dogal hücreninkinden farkli bir kromozomal veya ekstra kromozomal Iokasyonda bulundugu polipeptidi ifade eden hücreler içinde bulunan polipeptit-kodlayici nükleik asit moleküllerini içerir. terimler, iki veya daha fazla kimyasal element veya bilesenin, kimyasal konjügasyon veya rekombinant araçlar dahil herhangi bir araçla birlesmesini refere eder. Örnegin, bir kolaylastirici veya artirici, dizilimin transkripsiyonunu etkilemesi durumunda, bir kodlama dizilimine uygulanabilir sekilde baglidir. Genel olarak, "uygulanabilir sekilde bagli", bagli olan DNAlnin komsu oldugu ve okuma fazinda veya çerçeve-içi oldugu anlamina gelir. Bir "çerçeve-içi füzyon“, iki veya daha fazla okuma çerçevesinin (ORF'Ier), orijinal ORF'Ierin dogru okuma çerçevesini saglayacagi sekilde, daha uzun sürekli bir ORF olusturmak üzere birlesmesini refere eder. Dolayisiyla, ortaya çikan rekombinant füzyon proteini, orijinal ORF'Ier (bu segmentler normalde dogada bu sekilde brlesik degildir) tarafindan kodlanan polipeptitlere karsilik gelen iki veya daha fazla segment içeren tek bir proteindir.
Polipeptitler kapsaminda, bir “lineer dizilim" veya bir "dizilim", dizilim içinde birbirinin yaninda bulunan kalintilarin, polipeptidin birincil yapisi içinde komsu oldugu bir amino asitten karboksil terminali yönündeki bir polipeptit içindeki bir amino asit sirasidir. Bir kisminin lineer bir dizilimidir. antiteden derive edilmis anlamina gelir. Örnegin, kendi natif kodlama dizilimden ayrilan ve natif dizilimden farkli bir kodlama dizilimine uygulanabilir sekilde bagli olan glisin açisindan zengin bir dizilim, glisin açisindan zengin bir heterolog dizilimdir. Bir polinükleotit, bir polipeptit için kullanilan "heterolog'l terimi, polinükleotit veya polipeptidin, karsilastirildigi antitenin geri kalanina göre genotipik olarak belirgin bir antiteden derive edildigi ankamina gelir. yerine kullanilabilir. Deoksiribonükleotitler veya ribonükleotitler veya bunlarin analoglari gibi, herhangi bir boyuttaki nükleotitlerin polimerik formlarini refere eder.
Polinükleotitler, herhangi bir üç boyutlu yapiya sahip olabilir ve bilinen veya bilinmeyen herhangi bir fonksiyonu gerçeklestirebilir. Siradakiler, polinükleotitlerin sinirlandirici olmayan örnekleridir: bir gen veya gen fragmentinin kodlayici veya kodlayici olmayan bölgeleri, baglanti analizi ile tanimlanan Ioci (Ioküs), eksonlar, intronlar, mesajci RNA (mRNA), transfer RNA'si, ribozomal RNA, ribozimler, cDNA, rekombinant polinükleotitler, dallanmis polinükleotitler, plazmitler, vektörler, herhangi bir dizilimin izole DNA`si, herhangi bir dizilimin izole RNA'si, nükleik asit problari ve primerler. Bir polinükleotit, metillenmis nükleotitler ve nükleotit analoglari gibi modifiye edilmis nükleotitler içerebilir. Mecut olmasi durumunda, nükleotit yapisina modifikasyonlar, polimerin birlesmesi öncesinde veya sonrasinda aktarilabilir. Nükleotitlerin dizilimi, nükleotit olmayan bir bilesen tarafindan bölünebilir.
Bir polinükleotit için kullanilmak üzere "rekombinant", polinükleotitin, in vitro klonlama, restriksiyon ve/veya ligasyon adimlari ve potansiyel olarak bir konak hücre içerisinde ifade edilebilecek olan bir yapi ile sonuçlanan diger prosedürlerin çesitli kombinasyonlarinin ürünü oldugu anlamina gelir. çevrildikten sonra belirli bir proteini kodlama yetenegine sahip en az bir açik okuma çerçevesi içeren bir polinükleotiti refere eder. Bir gen veya gen fragmenti, polinükleotit, tüm kodlama bölgesini veya bunun bir segmentini kaplayabilecek olan en az bir açik okuma çerçevesi içerdigi sürece genomik veya cDNA olabilir. Bir "füzyon geni", birbirine bagli olan en az iki heterolog polinükleotitten meydana gelen bir gendir. fazla polipeptit dizilimi arasindaki dizilim benzerligini veya birbirinin yerine kullanilabilirligini refere eder. Iki farkli amino asit dizilimi arasindaki dizilim özdesligi, benzerligi veya homolojisinin belirlenmesine yönelik BestFit gibi bir programin kullanilmasi durumunda, öndeger ayarlari kullanilabilir veya özdeslik, benzerlik veya homoloji skorlarinin optimize edilmesine yönelik blosum45 veya blosum80 gibi uygun bir skorlama matrisi seçilebilir. Tercihen, homolog olan polinükleotitler, burada tanimlandigi üzere zorlayici kosullar altinda melezlesenler ve bu dizilimler ile en az daha tercihen %98 ve daha da tercihen %99 dizilim benzerligine sahip olanlardir. dizilimine, diger dizilimlere göre saptanabilir sekilde daha yüksek bir dereceye (örnegin, zemin üzerinde en az 2 kat) melezlesecegi kosullara referans içerir. Genellikle, melezlesme zorlayiciligi, kismen, yikama adiminin gerçeklestirildigi sicaklik ve tuz konsantrasyonuna referans ile ifade edilir. Tipik olarak, zorlayici kosullar, tuz konsantrasyonunun pH 7.0,da yaklasik 1.5 M Na iyonu, tipik olarak yaklasik 0.01 ile 1.0 M Na iyonu konsantrasyonu (veya digertuzlar) oldugu ve sicakligin kisa polinükleotitler (örnegin, 10 ila 50 nükleotit) en az yaklasik 30°C ve uzun polinükleotitler (örnegin, 50 nükleotitten daha fazla) için en az yaklasik 60°C oldugu kosullardir, örnegin, "zorlayici O.1> 65°C, 60°C, 55°C veya 42°C kullanilabilir. SSC konsantrasyonu, yaklasik %1'de mevcut olan SDS ile birlikte, yaklasik 0.1 ila 2XSSC arasinda degisiklik gösterebilir. Bu tür yikama sicakliklari tipik olarak, belirlenmis bir iyonik güç ve pH degerindeki spesifik dizilime yönelik termal erime noktasindan daha düsük olmak üzere yaklasik 5°C ila °C olacak sekilde seçilir. Tm, hedef dizilimin %50'sinin mükemmel sekilde eslenmis bir proba melezlestigi sicakliktir (belirlenmis iyonik güç ve pH altinda). Tm ve nükleik asit melezlesmesine yönelik kosullarin hesaplanmasina yönelik bir esitlik yaygin olarak bilinir ve siradaki kaynakta bulunabilir; Sambrook, J. et al. (1989) Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2nd ed., Vol. 1-3, Cold Spring Harbor Press, Plainview N.Y.; spesifik olarak bakiniz, Cilt 2 ve Bölüm 9. Tipik olarak, bloklama belirteçleri, spesifik olmayan melezlesmenin bloke edilmesine yönelik kullanilir. Bu tür bloklama belirteçleri, örnegin, yaklasik 100-200 ug/ml keailmis ve denatüre edilmis somon spermi DNA'sini içerir. Hacimsel olarak yaklasik %35-50 konsantrasyondaki formamit gibi, organik solvent, ayrica RNA:DNA melezlesmeleri gibi belirli sartlar altinda kullanilabilir. Bu yikama kosullari üzerindeki yararli varyasyonlar, teknikte uzman kisiler tarafindan kolay sekilde anlasilaoaktir.
Polinükleotit dizilimleri için kullanildigi üzere "benzerlik yüzdesi" ve "% benzerlik" terimleri, standardize edilmis bir algoritma kullanilarak hizalandirilan en az iki polinükleotit dizilimi arasindaki kalinti eslesmelerinin yüzdesini refere eder. Bu tür bir algoritma, standardize edilmis ve yeniden üretilebilir bir yolla, iki dizilim arasindaki hizalanmanin optimize edilmesine yönelik karsilastirilan dizilimler arasinda bosluklar sokabilir ve bu sekilde iki dizilimin daha anlamli bir karsilastirmasini gerçeklestirebilir.
Yüzde benzerlik, örnegin belirli bir SEQ ID numarasi ile belirlenen, belirlenmis bütün bir polinükleotit dizilimi boyunca ölçülebilir veya örnegin, en az 45, en az 60, en az 90, en bir polinükleotitten alinan bir fragment boyunca, daha kisa bir uzunlukta ölçülebilir. Bu tür uzunluklar yalnizca örneklendiricidir ve burada, Tablolarda, Sekillerde veya Dizilim Listesinde gösterilen dizilimler tarafindan desteklenen herhangi bir fragmentin, yüzde benzerligin ölçülebilecegi bir uzunlugu açiklamak üzere kullanilabilecegi anlasilmaktadir.
Burada tanimlanan polipeptit dizilimlerine bagli olarak "yüzde (%) amino asit dizilimi benzerligi", maksimum yüzde dizilim benzerliginin saglanmasina yönelik, gerekli olmasi durumunda, dizilimlerin hizalanmasi ve bosluklarin eklenmesi ve herhangi bir koruyucu degisikligin dizilim benzerliginin bir parçasi olarak kabul edilmemesi sonrasinda, ikinci bir referans polipeptit dizilimi veya bunun bir kisminin amino asit kalintilari ile benzer olan bir sorgulama dizilimindeki amino asit kalintisi yüzdesi olarak tanimlanir. Yüzde amino asit dizilimi benzerliginin belsrlenmesine yönelik hizalama, örnegin, BLAST, BLAST-Z, ALlGN veya Megalign (DNASTAR) yazilimi gibi halka açik bilgisayar yazilimlari kullanilarak, teknikte bilinen çesitli yollarla gerçeklestirilebilir. Bu teknikte uzman kisiler, karsilastirilan dizilimlerin tam boyutu üzerinde maksimal hizalama gerçeklestirilmesine yönelik gerekli olan herhangi algoritma dahil, hizalamanin ölçülmesine yönelik uygun parametreler belirleyebilir. Yüzde benzerlik, örnegin belirli bir SEQ ID numarasi ile tanimlanan, tanimlanmis bir bütün polipeptit dizilimi boyunca veya en az 150 komsu kalintili bir fragment gibi tanimlanmis, daha genis bir polipeptit diziliminden alinmis bir fragment boyunca, daha kisa bir uzunlukta ölçülebilir. Bu tür uzunluklar yalnizca örneklendiricidir ve burada, Tablolarda, Sekillerde veya Dizilim Listesinde gösterilen dizilimler tarafindan desteklenen herhangi bir fragment uzunlugunun, yüzde benzerligin ölçülebilecegi bir uzunlugu açiklamak üzere kullanilabilecegi anlasilmaktadir.
Bir "vektör", eklenen bir nükleik asit molekülünü konak hücreler içine ve/veya arasina transfer eden, tercihen uygun bir konakta kendi kendini replike eden bir nükleik asit molekülüdür. Terim, öncelikle bir hücre içerisine DNA veya RNA'nin eklenmesine, DNA veya RNA'nin replikasyonuna yönelik islev gösteren vektörlerin replikasyonuna ve DNA veya RNA'nin transkripsiyonu ve/veya translasyonuna yönelik islev gösteren vektörlerin ifade edilmesine yönelik islev gösteren vektörleri içerir. Ayrica, yukaridaki islevlerin birden fazlasini saglayan vektörler de dahildir. Bir "ifade vektörü", uygun bir konak hücre içerisine girmesi durumunda, bir veya daha fazla polipeptite kopyalanabilen veya çevrilebilen bir polinükleotittir. Bir "ifade sistemi“ çogunlukla, istenen bir ifade ürününü vermek üzere islev gösterebilen bir ifade vektöründen olusan uygun bir konak hücreyi ifade eder.
Bir polipeptit için kullanilmak üzere "degradasyon direnci", polipeptitlerin kandaki veya bunun tipik olarak serum veya plazma içerisinde proteazlar içeren bilesenlerindeki veya bir proteine yönelik bir depolama veya dagitim araci islevindeki bir formülasyon içindeki degradasyona karsi koyma yetenegini refere eder. Degradasyon direnci, proteinin, insan (veya fare, siçan, maymun, hangisi uygun ise) kani, serumu, plazmasi veya bir edilmesi ile ölçülebilir. Numunelerdeki intakt protein akabinde standart protein miktar tayini teknikleri kullanilarak ölçülür. Proteinin %50'sinin degrade oldugu zaman noktasu, proteinin "degradasyon yari ömrüdür". gerekli olan zamani refere eder. "Yari ömür", "ti/2 , eliminasyon yari ömrü" ve "döner yari ömür" terimleri burada birbirinin yerine kullanilabilir. özelliklerinden hesaplanan görünür yariçapidir (nm biriminde Rh). Bir proteinin makromolekül jelleri içerisindeki göç etme yetenegini etkiler. Bir proteinin hidrodinamik yariçapi, bunun moleküler agirliginin yani sira sekli ve kompaktligi dahil yapisi ve hidrasyon durumu tarafindan etkilenir. Hidrodinamik yariçapin belirlenmesine yönelik DLS kullanimi ve büyüklük dislanimli kromatografi gibi yöntemler, teknikte iyi bilinmektedir. Proteinlerin birçogu, bir proteinin en küçük hidrodinamik yariçap ile sahip olabilecegi en kompakt üç boyutlu yapi olan globüler yapiya sahiptir. Bazi proteinler rastgele ve açik bir yapisal olmayan veya 'lineer' biçime sahiptir ve bunun sonucu olarak, benzer moleküler agirliga sahip tipik globüler proteinlere kiyasla çok daha genis hidrodinamik yariçapa sahip olur. kosullarini taklit eden, bir canli konak hücrenin içindeki birtakim kosullarin yani sira in vitro kosullari refere eder. In vitro kullanima yönelik fizyolojik olarak ilgili kosullarin bir konagi gerçeklestirilmistir. Genel olarak, fizyolojik bir tampon, fizyolojik bir tuz konsantrasyonu içerir ve yaklasik 6.5 ila yaklasik 7.8 arasinda ve tercihen yaklasik 7.0 ile yaklasik 7.5 arasinda degiskenlik gösteren nötr bir pH degerine ayarlanir. Birtakim fizyolojik tamponlar, Sambrook et al. (1989) içinde Iistelenir. Fizyolojik olarak ilgili sicakliklar, yaklasik 25°C ila yaklasik 38°C arasinda ve tercihen yaklasik 35°C ila yaklasik 37°C arasinda degiskenlik gösterir. ajan", bulusun bir polipeptidinin salim süresini, polipeptidin bir ajanin yoklugunda verilmesi durumundaki salim süresine bagli olarak uzatma yetenegine sahip bir ajani refere etmek üzere birbirinin yerine kullanilabilir. Mevcut bulusun farkli düzenlemeleri, farkli terapötik miktarlar ile sonuçlanan farkli salim hizlarina sahip olabilir.
Burada kullanildigi üzere "antagonist" terimi, burada açiklanan bir natif polipeptidin bir biyolojik aktivitesini kismen veya tam olarak bloke eden, inhibe eden veya nötralize eden tüm molekülleri içerir. Bir polipeptidin antagonistlerinin belirlenmesine yönelik yöntemler, bir natif polipeptidin bir aday antagonist molekül ile temas etmesini ve normal olarak natif polipeptit ile iliskili bir veya daha fazla biyolojik aktivitedeki saptanabilir degisikligin ölçülmesini içerebilir. Mevcut bulusun kapsami içerisinde, antagonistlere, proteinler, nükleik asitler, karbohidratlar, antikorlar veya bir aktif proteinin etkisini azaltan herhangi bir diger molekül dahil olabilir. bir biyolojsk aktivitesini taklit eden herhangi bir molkeülü içerir. Uyugn agonist moleküller spesifik olarak, agonist antikorlar veya antikor fragmentleri, natif polipeptilerin, prptitlerin, küçük organik moleküllerin, vb. fragmentlerini veya amino asit dizilimi varyantlarini içerir. Bir natif polipeptidin agonistlerinin belirlenmesine yönelik yöntemler, bir natif polipeptidin bir aday agonist molekül ile temas ettirilmesini ve normal olarak natif polipeptit ile iliskili olan bir veya daha fazla biyolojik aktivitedeki saptanabilirbir degisikligin ölçülmesini içerir.
Buradaki amaçlara yönelik "aktivite", ilgili natif aktif proteininki ile tutarli olan bir füzyon proteinin bir bileseninin bir aksiyonu veya etkisini refere eder, burada, “biyolojik aktivite" veya "biyoaktivite", bunlarla sinirli olmaksizin, reseptör baglanmasi, antagonist akivitesi, agonist aktivitesi veya bir hücresel veya fizyolojik tepki dahil, bir in vitro veya in vivo biyolojik fonksiyonu veya etkiyi refere eder.
Burada kullanildigi üzere, "tedavi" veya "tedavi etme." veya "hafifletme" veya olmaksizin bir terapötik yarar ve/veya bir profilaktik yarar dahil, yararli veya istenen bir sonucun elde edilmesine yönelik bir yaklasimi refere eder. Terapötik yarar deyimiyle, tedavi edilen temeldeki bozuklugun eradikasyonu veya iyilesmesi ifade edilir. Ayrica, denekte bir iyilesmenin gözlemlenecegi sekilde, temeldeki bozukluk ile iliskili bir veya daha fazla fizyolojik semptomun eradikasyonu veya iyilesmesi ile gerçeklestirilir, bununla birlikte, denek temeldeki bozukluktan hala muzdarip olabilir. Profilaktik yarara yönelik, bilesimler belirli bir hastaligin ortaya çikmasi riski ile birlikte bir hastaya veya söz konusu hastaligin bir teshisinin yapilmamis olmasina ragmen, bir hastaligin bir veya daha fazla fizyolojik semptomunu tasiyan bir denege verilebilir, Burada kullanildigi üzere bir "terapötik etki", bunlarla sinirli olmaksizin insanlarda veya diger hayvanlarda ki hastaligin tedavisi, mitigasyonu, iyilestirilmesi veya önlenmesi dahil bir fizyolojik etkiyi veya aksi durumda, ktif proteinin sahip oldugu bir antijenik epitopa karsi bir antikor üretimini baslatma yeteneginden farkli olarak bulusun bir füzyon proteini tarafindan neden olunan, insanlarin veya hayvanlarin mental veya fiziksel sagligini artirmayi refere eder. Terapötik olarak etkili bir miktarin belirlenmesi, özellikle burada saglanan detayli açiklamanin isiginda, teknikte uzman kisilerin yetenekleri arasindadir.
Burada kulanildigi üzere "terapötik olarak etkili miktar" veya "terapötik olarak etkili doz" terimleri, bir denege tek dozda veya tekrarli dozlarda verilmesi durumunda bir hastalik durumu veya kosulunun herhangi bir semptomu, açisi, ölçülen parametresi veya karakteristigi üzerinde herhangi bir saptanabilir, yararli etkiye sahip olma yetenegine sahip, yalniz basina veya bir füzyon proteini bilesiminin bir parçasi olarak, bir aktif proteinin bir miktarini refere eder. Bu tür bir etkinin yararli olabilmesine yönelik mutlak olmasi gerekmez.
Burada kullanildigi üzere "terapötik olarak etkili doz rejimi" terimi, yalniz basina veya bir füzyon proteini bilesiminin bir parçasi olarak, bir aktif proteinin ardisik olarak verilen dozlarinin bir programini refere eder, burada, dozlar, bir hastalik durumu veya kosulunun herhangi bir semptom, açisi, ölçülen parametresi veya karakteristigi üzerinde sürekli yararli etki ortaya çikarmak üzere terapötik olarak etkili miktarlarda Füzyon Proteinleri Bulus, bir aktif proteine bagli bir müsin etki alanli polipeptit içeren füzyon proteinleri ile ilgilidir. Bu tür proteinler ayrica burada "müsinlenmis" proteinler olarak refere edilir.
Burada kullanildigi üzere bulusun bir "füzyon proteini", bir aktif proteine bagli olan bir müsin etki alanli polipeptit içerir. Bir açida, müsin etki alanli polipeptit veya aktif protein normal olarak ayri proteinlerde yer alir ve füzyon proteininde bir araya getirilir veya normal olarak ayni proteinde yer alabilirler ancak füzyon proteininde yeni bir düzen içinde yerlestirilir. Bulusun bilesimleri ve yöntemleri, farmakokinetik özelliklerin, belirli olarak bir müsin etki alanli polipeptit ile kaynasmasi duurmunda bir aktif proteinin yari ömrünün artirilmasina yönelik belirli olarak yararlidir. Bir açida, burada açiklanan füzyon proteinleri, müsin etki alanli polipeptide bagli olmayan ilgili aktif proteinin biyoloijk ve/veya terapötik aktivitesinin tümünü veya bir kismini korur. Bir açida, aktif proteinin terapötik/biyolojik aktivitesi, bir füzyon proteini olusturmak üzere bir müsin etki alanli polipeptit ile kaynasmasi durumunda artirilir. Bir açida, bulus ile iliskili füzyon proteini spesifik olarak, immünoglobülin moleküllerini ve bir FC etki alani veya bunun herhangi bir fragmentini içeren herhangi bir molkeülü içermez. Bir açida, füzyon proteini veya bunun herhangi bir kismi, 01,3, galaktosiltransferaz veya [31,6- asetilglukozaminiltransferaz tarafindan glikosile olmaz. Bir açida, füzyon proteini, dGaliye özgü bir antikora baglanmaz. Bir açida, bulusun füzyon proteini, bir Gal dt, SGal'ye özgü antikora baglanmaz.
Müsin proteinleri ve proteinlerin müsin etki alanlari, müsin proteinleri ve müsin etki alanlarina sahip diger polipeptitlerin katilasmis düzensiz sargi olarak davranmasina yapisal olarak olanak veren yüksek dereceli bir glikosilasyona sahiptir. Glikosile müsin etki alanlarini gerçeklestiren hidrofilik dallanmis hidrofilik karbonhidratlar ile kombinasyon içindeki bu katilasmis düzensiz sargilar, aktif proteinin hidrodinamik yariçapini, ifade edilen proteinin moleküler agirligina bagli olarak beklenecek olana göre artirmak üzere belirli olarak yararlidir. Ayrica yüksek seviyedeki glikosilasyon nedeniyle, bir müsin etki alaninin eklenmesi ayrica, bir proteinin, aktif proteinin konsantre solüsyonlarinin yük, çözünürlük ve viskoelastik özellikleri gibi fizikokimyasal özelliklerini modifiye etme potansiyeline sahiptir. Bulusun müsinlenmis füzyon proteinleri, proteinlerin yari ömrünün uzatilmasina yönelik eski teknik stratejiler üzerinde birçok avantaja sahiptir. Bulusun füzyon proteinleri, ayri konjügasyon ve pürifikasyon adimlarina gerek duyulmadan standart ifade etme araçlari araciligiyla üretilebilir. Müsin etki alanli polipeptitler, aktif proteinin N- veya 0- terminalinin her isiki araciligiyla aktif proteine baglanabilir. Müsin etki alanli polipeptitler, daha az hacim ve biyokaktivite üzerinde daha düsük etki riskine sahip monomerik, globüler olmayan proteinler olmasi açisindan diger füzyon proteinlerine göre yapisal olarak daha az sinirlandiricidir. Müsin etki alanlarinin kullanilmasi, Fc etkili fonksiyonlar gibi endojen biyoaktivite riskini düsürür. Insan terapötiklerini hazirlamak üzere kullanilmasi durumunda, bulusun füzyon proteinleri, immünojenesite riskini azaltmak üzere yüksek glikosilasyona sahip tam insan dizilimleri içerebilir.
Ortaya çikan fonksiyonel karakteristikler veya biyolojik ve farmakolojik aktivite ve parametreler dahil, bulusun füzyon proteini bilesimlerinin aktivitesi, istenen karakteristigin ölçülmesine yönelik teknikte bilinen uygun herhangi bir görüntüleme tahlili ile belirlenebilir. Füzyon proteinlerinin aktivitesi ve yapisi, bulusun bilesimlerinin yari ömrü, çözünürlük derecesi, yapisi ve biyolojik aktivite sinirlandirmasini ortaya çikarmak üzere burada açiklanan tahliller, Örneklerdeki tahliller veya teknikte bilinen yöntemlerin yani sira, bulusun füzyon proteinleri olmayan aktif proteinler ile karsilastirilarak ölçüleblir.
Füzyon proteinin refere edilmesi durumunda, "baglanmis" veya "kaynasmis" veya polipeptitin O-bagli glikosilasyonuna olanak verecek sekilde ve aktif proteinin aktivitesini saglayacak sekilde, hücrelerde tek bir polipeptit olarak ifade edildigini belirtmek üzere kullanilir. Bir düzenlemede, müsin etki alanli polipeptit opsiyonel olarak, bir amino asit baglayicisi araciligiyla aktif proteine baglanmis olabilir. Amino asit baglayicisi ayrica opsiyonel olarak, bir denege füzyon proteininin verilmesi sonrasinda aktif proteini salmak üzere tasarlanmis olabilecek olan bir klivaj dizilimi içerebilir.
Opsiyonel olarak, müsin etki alanli polipeptit ile kaynasmis olan aktif proteini içeren füzyon proteini, aktiviteyi artirmaya ve füzyon proteinine ek aktivite kazandirmaya yönelik olan bir veya daha fazla ek kisma kaynastirilabilir. Bir açida, füzyon proteini A- M-B yapisini içerir, burada, A, bir N-terminali füzyon partneri, M, bir müsin etki alani ve B, bir C-terminali füzyon partneridir. A ve B, benzer ve benzer olmayan özellikleri içerebilir. Bu düzenlemenin bir açisinda, A ve B, bunlarla sinirli olmaksizin, agonizm, antagonizm, enzimatik aktivite, spesifik protein veya hücrelere hedeflenme, kimyasal reaktivite veya oligomerizasyona sahip olacak sekilde, bagimsiz olarak veya sinerjik olarak hareket edebilen biyoaktif kisimlardir. Diger bir açida, A ve B'nin ayni olmasi durumunda, aktivite artirimi, avidite araciligiyla saglanir.
Bulusun bir füzyon proteini, standart rekombinant DNA teknikleri ile üretilebilir. Örnegin, farkli polipeptit dizilimlerine yönelik kodlayan DNA fragmentleri, örnegin, Iigasyona yönelik kunt uçlu termini ve yumusak uçlu termini, uygun sekilde kohezif uçlarin doldurulmasi, istenmeyen baglantilarin önlenmesine yönelik alkalin fosfataz ve enzimatik Iigasyon uygulanarak, klasik tekniklere göre çerçeve-içi sekilde birlikte ligate olur. Diger bir açida, füzyon geni, otomatik DNA sentezleyicileri dahil klasik teknikler ile sentezlenebilir. Alternatif olarak, gen fragmentlerinin gen amplifikasyonu, bir kimerik gen dizilimi olusturmak üzere akabinde tavlanabilen ve yeniden güçlendirilebilen iki ardisik gen fragmenti arasinda tamamlayici sarkaçlari ortaya çikaran çapa primerleri kullanilarak gerçeklestirilebilir (bakiniz, örnegin, Ausubel et al. (eds.) Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, 1992). Birçok ifade vektörüne, füzyon kisimlarina yardimci olmak üzere ticari olarak ulasilabilir ve bunlar asagida daha detayli sekilde açiklanacaktir.
Müsin etki alanli polipeptit Bir "müsin etki alanli polipeptit", burada bir "müsin etki alani“ içeren herhangi bir protein olarak tanimlanir. Bir müsin etki alani, potansiyel glikosilasyon alanlari açisindan zengindir ve müsin etki alani içerisindeki amino asitlerin %40'indan daha fazlasini ifade edebilen yüksek bir serin ve/veya treonin ve prolin içerigine sahiptir. Bir müsin alani, büyük çogunlukla O-bagli glikanlar ile büyük ölçüde glikosile edilmistir. Bir müsin etki alanli polipeptit, kütlesinin yaklasik en az %60'i, en az %80`i veya en az %90'i glikandir. Müsin etki alanlari, her bir tandem tekrar birimi basina uzunluk olarak yaklasik 8 amino asit ila 150 amino asit arasinda degisebilen tandem amino asit tekrar birimleri (ayrica burada TR olarak da refere edilir) içerebilir. Tandem tekrar birimi sayisi, bulusun bir müsin etki alanli polipeptitinde 1 ve 25 arasinda degiskenlik gösterebilir.
Burada açiklanna müsin-etki alanli polipeptitler, bunlarla sinirli olmaksizin, müsin proteinlerini içerir. “Bunun bir kismi", müsin polipeptit baglayicisinin, bir müsin proteininin en az bir müsin etki alanini içerdigi anlamina gelir. Müsin proteinleri. bir MUC geni (yani, MUC1, MUC2, MUCSA, MUC3B, MUC4, MUC5AC, MUCSB, MUC6, MUCZO, MUCZi) ile kodlanan tüm proteinleri içerir. Bir müsin proteinin müsin etki alani tipik olarak, tekrarli olmayan amino asit bölgeleri ile her iki tarafta yaslanmis haldedir.
Bir müsin etki alanli polipeptit, bir müsin proteininin (örnegin, MUCZO) tümünü veya müsin proteininin ekstraselüler kismi, müsin proteininin sinyal dizilimi kismi, müsin proteinin transmembran etki alani ve/veya müsin proteininin sitoplazmik etki alani dahil, bir kismini içerebilir. Bir müsin etki alanli polipeptit, çözünebilir bir müsin proteininin tümünü veya bir kismini içerebilir. Tercihen, müsin etki alanli polipeptit, bir müsin proteininin ekstraselüler kismini içerir.
Bir müsin etki alanli polipeptit ayrica, bir müsin etki alani içeren ancak bir MUC geni ile kodlanmis olmayan bir proteinin tümünü vey bir kismini da içerebilir. Bir MUC geni tarafindan kodlanmamis olan ancak müsin etki alanlari içeren bu tür kendiligindne olusan proteinlere, bunlarla sinirli olmaksizin, transmembran immünoglobülin ve müsin etki alanli (TIM) familya proteinleri gibi membran-çapali proteinler, fraktalkin (nörotipin), P-selektin glikoprotein ligand 1 (PSGL-i, CD162), E-selektin, L-selektin, P-selektin, MAdCAM, kirmizi kan hücresi glikoproteinleri, glikokalsisin, glikophorin, LDL-R, ZP3, endosiyalin, bozunma hizlandirici faktör (daf, CD55), podokalksin, endoglikan, alfa- distroglikan, nörofaskin, EMR1, EMR2, EMRB, EMR4, ETL ve epiglikanin dahildir.
Bir müsin etki alanli polipeptit ayrica, terim olarak burada tanimlandigi üzere bir müsin etki alanina sahip kendilinden olusan bir polipeptit içerir. Bir açida, müsin etki alanli polipeptit, bir müsin etki alani içermek üzere de novo tasarlanir. Bir açida, bir müsin etki alanli polipeptit, Pro, Ser ve Thr açisindan zengin olan tandem amino asit tekrarlari etki alanlari içerir. Bir açida, bir müsin etki alanli polipepetit içerisindeki tandem tekrar birimi sayisi 1 ve 25 arasindadir. Tercihen, bir müsin etki alanli polipepetit içerisindeki tandem tekrar birimi sayisi 2 ve 20 arasindadir. Daha tercihen, bir müsin etki alanli polipepetit içerisindeki tandem tekrar birimi sayisi en az yaklasik 4'tür. Diger bir açida, bir müsin etki alanli polipeptit içerisindeki serin ve/veya treonin ve prolin kalintilari yüzdesi en az %10'dur. Tercihen, bir müsin etki alanli polipeptit içerisindeki serin ve/veya treonin ve prolin kalintilari yüzdesi en az %20'dir. Daha tercihen, bir müsin etki alanli polipeptit içerisindeki serin ve/veya treonin ve prolin kalintilari yüzdesi %30”dan daha yüksektir. Son bir açida, müsin etki alani içerisindeki her bir tandem amino asit tekrar birimi, en a 8 amino asitten olusur. Tercihen, her bir birim en az 16 amino asitten olusur. Daha tercihen, her bir birim en az 19 amino asitten olusur ve her bir birim uzunluk olarak yaklasik 19 amino asit ila 150 amino arasinda degiskenlik gösterir.
Bir açida müsin etki alanli polipeptit, en az %40 Serin. Treonin ve Prolin içeren en az 32 amino asit içerir. Bir açida, bir müsin etki alanli polipeptit, tandem tekrarli birim basina uzunluk olarak en az 8 amino asite sahip en az 2, 4, 8, 10 veya 12 tandem amnio asit tekrarli birim içerir. Bir tandem tekrarli birimin tercih edilen amino asit dizilimleri, bunlarla sinirli olmaksizin, Tablo 1'dekileri içerir. Müsin etki alanli polipeptit ve/veya müsin etki alanli polipeptidi kodlayan nükleik asitler, teknikte bilinen ve Gen Bank gibi kaynaklar araciligiyla halka açilan müsin etki alanliprotein kodlayan dizilimler kullanilarak yapilabilir.
Tablo I Tandem Tekrarli (TR) Amino Asit Dizilimi (# Erisim TR/MUC* sayisi Notlar of aa's) Numarasi+ MUC1'in birçok P15941 varyanti mevcuttur Majör TR; 99 Q02817 mevcuttur Dejenerat TR dizilimi; uzun serin açisindan lTTTETTSHDTPSFTSS (17) [SEQ ID NO: 20 13] Q02505 zengin ve treonin açisindan zengin dizilim de mevcuttur Dejenerat TR ATPLPVTDTSSASTGH (16) [SEQ ID NO: dizilimi, uzun 14] serin açisindan zengin ve treonin Tandem Tekrarli (TR) Amino Asit Dizilimi (# TTSTTSAP (8) [SEQ ID NO:15] ATGSTATPSSTPGTTHTPPVLTTTATTPT (29) [SEO lD NO:16] TTAAPPTPSATTQAPPSSSAPPE EESTTVHSSPGATGTALFP (19) [SEO ID SSSPTPAT:(,3TSMPTSTYSEGRTPLTSMPVSTT LVATSA I STLSTTPVI 'JTSTPVTNSTl-ZA (60) SESSASSDGPHPVITPSRA (19) [SEO ID TR/MUC* sayisi (46,17,34,58)°° 59-60 11-12 Numarasi+ P98088 Q9H084 Q6W4X9 Q8TAX7 Q9H3R2 Q8N387 Q8WXI7 Q685J3 Q725P9 Q8N307 Notlar açisindan zengin dizilim de mevcuttur Konsensus dizilim T-T-S-T- T-S-A-P (SEQ ID Dejenerat TR Dejenerat TR Konsensus dizilim E-E-S-X- (SEQ ID NO:25) Dejenerat TR P-S-A tekrarlari (SEQ ID NO:26) Fraktalkin Makrosiyalin Endosiyalin Podokaliksin Tandem Tekrarli (TR) Amino Asit Dizilimi (# TR/MUC* sayisi ATNSESSTVSSGIST (15) [SEQ ID NO:21] 28 VPTTTT (6) [SEO ID NO: 221 Müsin benzeri bölge (PTS) Müsin benzeri bölge (PTS) Pro açisindan zengin bölge Thr açisindan zengin bölge QTTQPAATEA (10) [SEQ ID NO: 23] MUC8 ve MUC9 çikarilmistir; güvenilmez veri PTS prolin/serin/treonin açisindan zengin dizilim * yaklasik; TR sayisi çogu durumda bir aralik olarak verilir *Uniprot oo TR'nin n sayisi spesifik bölgelerde farklidir NA Bildirilmemistir Notlar Numarasi+ Dejenerat TR Q588G8 E2RYF6 Dejenerat TR Q96D42 _ _ . _ Q96H15 P78423 P34810 P40200 Q9HCUO P08174 Q14246 Dejenerat TR Q14242 _ __ _ Bir açida, bir müsin etki alanli polipeptidin toplam dizilim uzunlugu 32 ila 200 arasindadir. Yükselen yari ömrün yükselen hidrodinamik yariçap ile, daha önemlisi, renal filtrasyonun önlenmesine olanak veren yaklasik 60 kD'dan daha yüksek bir moleküler agirlik ile korele olmasi nedeniyle, müsin etki alanli polipeptitin uzunlugu bir sekilde aktif kismin boyutuna baglidir. Örnegin, 5 kD”den daha düsük bir moleküler agirliga sahip bir peptit, istenen yari ömür uzatmasini gerçeklestirmek üzere 200 amino asitlik bir müsin etki alanli polipeptit gerektirebilir. Aksine, 40 kD moleküler agirliga sahip bir protein, istenen yari ömrü saglamak üzere yalnizca bir müsin etki alanli polipeptide ihtiyaç duyabilir. Ayrica, müsinlestirme, füzyon proteininin müsin etki alanli peptitindeki müsin tandem tekrar sayisinin artirilmasi veya azaltilmasiyla yari ömrün optimize edilmesine olanak verir.
Alternatif olarak, müsin etki alanli polipeptit kismi, yabani tipteki bir proteinin kendiliginden olusan müsin etki alanli diziliminde bir mutasyona sahip olan bir müsin etki alanli polipeptit varyanti olarak saglanir. Örnegin, varyant müsin etki alanli polipeptit, yabani tipteki müsin etki alanli polipeptit ile karsilastirildiginda ek O-bagli glikosilasyon alanlarina sahiptir. Alternatif olarak, varyant müsin etki alanli polipeptit, yabani tipteki müsin etki alanli polipeptit ile karsilastirildiginda, daha yüksek bir serin, treonin veya prolin kalintisi sayisi ile sonuçlanan amino asit dizilimi mutasyonlari içerir.
Alternatif olarak, varyant müsin etki alanli polipeptit dizilimleri, bunlarla sinirli olmaksizin, aspartik asit, glutamik asit, Iisin, histdin ve arjinin dahil, belirli bir pH degerinde molekülün pl'sini veya yükünü degistiren, eklenen veya çikarilan yüklenmis kalintilar içerir.
Aktif Protein ve Terapötik Aktif Protein Burada açiklanan füzyon proteini içine dahil edilmeye yönelik burada kullanildigi üzere bir "aktif protein", biyolojik, terapötik, profilaktik veya diyagnostik amaca veya fonksiyona sahip ve/veya bir biyolojik aktiviteye ortam aglama yetenegine sahip bir protein anlamina gelir. Burada kullanildigi üzere bir "terapötik aktif protein", bir denege verilmesi durumunda bir hastaligi, bozuklugu veya kosulu önleme veya iyilestirme yetenegine sahip bir proteindir.
Bir açida, bulusa göre bir aktif protein veya terapötik aktif protein, immünoglobülin moleküllerini veya bir Fc etki alani veya bunu bir fragmentini içeren herhangi bir molekülü spesifik olarak hariç tutar.
Aktif proteinler ve terapötik aktif proteinler, bir farmakokinetik parametrede artis, yüksek çözünürlük, yüksek stabilite veya bazi diger daha yüksek farmasötik özelligin aranmasi açisindan veya bu aktif proteinler, yüksek yari ömrün, etkinligi, güvenligi artirmasi veya dozlama frekansinin azalmasi ve/veya hasta uyumlulugunun artmasi ile sonuçlanmasi açisindan özellikle önemlidir. Dolayisiyla, füzyon proteinleri, örnegin, bulusun füzyon proteininin, bir denege verilmesi durumunda, müsin etki alanli polipeptite bagli olmayan bir aktif protein ile karsilastirildiginda, terapötik pencere içerisinde kaldigi veya in vivo maruz birakildigi zaman periyodunun artirilmasi gibi, terapötik aktif proteinin terapötik etkinliginin artirilmasi dahil, çesitli amaçlar ile hazirlanir.
Bir açida, bulusun bir füzyon proteini, bir müsin etki alanli polipeptide bagli olan tek bir aktif protein içerebilir (asagida daha detayli sekilde anlatilmaktadir). Diger bir açida, füzyon proteini, bir veya daha fazla müsin etki alanli polipeptit araciligiyla bagli olan iki aktif protein içeren bir füzyon proteini ile sonuçlanmak üzere, ayni aktif proteinin birinci bir aktif proteinini ve ikinci bir molekülünü içerebilir. Diger bir açida, füzyon proteini, bir veya daha fazla müsin etki alanli polipeptit araciligiyla bagli olan farkli aktivitelere sahip iki aktif protein içeren bir füzyon proteini ile sonuçlanmak üzere, birinci bir aktif protein ve ikinci bir belirgin aktif protein içerebilir.
Bir açida, bir atf protein, in vivo kullanilmasi durumunda veya bir in vitro tahlilde degerlendirilmesi durumunda verilen bir hedefe veya diger bir istenen biyolojik karakteristige yönelik bir baglanma özgüllügüne maruz kalir. Örnegin, aktif protein, bir agonist, bir reseptör, bir Iigant, bir antagonist, bir enzim veya bir hormon olabilir.
Kullanilan veya bir hastalik veya bozukluga yönelik kullanisli oldugu bilinen aktif proteinler belirli öneme sahiptir, burada, bunlarin yari ömründeki bir uzama, daha az sik dozlamaya veya daha iyi bir farmakolojik etkiye olanak verir. Ayrica, minimum etkili doz veya kan konsantrasyonu (Cmin) ve maksimum tolere edilebilir doz veya kan konsantrasyonu (Cmaks) arasinda dar bir terapötik pencereye sahip aktif proteinler de önemlidir. Bu tür durumlarda, aktif proteinin bir müsin etki alanli polipeptit içeren bir füzyon proteinine baglanmasi, bu özelliklerde bir iyilesme ile sonuçlanabilir, bunlar, bir müsin etki alanli polipeptite bagli olmayan aktif protein ile karsilastirildiginda terapötik ve önleyici ajanlar olarak daha kullanisli hale gelir.
Terapötik aktif protein olan aktif proteinler, bunlarla sinirli olmaksizin siradaki çesitli terapötik veya hastalik kategorisindeki tedavide kullanima sahip olabilir: glükoz ve insülin bozukluklari, metabolik bozukluklar, kardiyovasküler hastaliklar, koagülasyon/kanama bozukluklari, büyüme bozukluklari veya kosullari, tümörijenik kosullar, enflamatuar kosullar, otoimmün kosullar veya diger hastaliklar ve hastalik kategorileri, burada, bir müsin etki alanli polipeptide bagli olmayan bir terapötik protein veya peptit, bir alt optimal yari ömre maruz kalir veya burada, bir terapötik protein veya peptit mevcut olmaz.
Bir aktif protein, bir natif, tam uzunluklu protein olabilir veya natif aktif proteinin terapötik aktivitesinin en az bir kismini koruyan bir aktif proteinin bir fragmenti veya bir dizilim varyanti olabilir. Bir düzenlemede, bulusa göre aktif proteinler, dogada bulunan bir protein ile iliskili bir dizilime sahip bir rekombinant polipeptit olabilir. Diger bir düzenlemede, aktif proteinler, natif aktif proteinin biyolojik aktivitesinin en az bir kismini koruyan bir dogal dizilimin dizilim varyantlari, fragmentleri, homologlari ve mimetikleri olabilir.
Sinirlandirici olmayan örneklerde, aktif protein, natif aktif protein veya bir natif aktif proteinin bir varyanti ile en az yaklasik %80 dizilim benzerligi veya alternatif olarak proteinler ve peptitlere, bunlarla sinirli olmaksizin, siradakileri içerir: biyoaktif peptitler (GLP-1, eksendin-4, oksitosin, opiat peptitler), sitokinler, büyüme faktörleri, kemokinler, lenfokinler, ligantlar, reseptörler, hormonlar, enzimler, antikorlar ve antikor fragmentleri, etki alani antikorlari, nano-antikorlar, tek Zincirli antikorlar, DARP'Ier gibi tasarlanan antikorlarin 'alternatif iskeleleri', sentrinler, adnektinler ve büyüme faktörleri. Reseptör örneklerine, membran ile iliskili reseptörülerin ekstraselüler etki alani (TNFR2, VEGF reseptörleri, IL-1R1, lL-1RACP, IL-4 reseptör, hGH reseptör, CTLA-4, PD-1, IL-BRor, FGF reseptörleri gibi), transmembran etki alanlarindan ayrilmis olan çözünebilir reseptörler, 'yardimci' veya 'yalanci' reseptörler (IL-1RII, TNFRSF11B, DCR3 gibi) ve herhangi kimyasal olarak veya genetik olarak modifiye edilmis çözünebilir reseptörler dahildir. Enzim örneklerine, aktiflestirilmis protein C, faktör VII, kollajenaz; agalsidaz- beta; domaz-alfa; alteplaz; pegylated-asparajinaz; asparajinaz ve imigluseraz dahildir.
Spesifik polipeptit veya protein örneklerine, bunlarla sinirli olmaksizin, granülosit makrofaj koloni uyarici faktör (GM-GSF), granülosit koloni uyarici faktör (G-CSF), makrofaj koloni uyarici faktör (M-CSF), koloni uyarici faktör (CSF), interferon beta (IFN- ß), interferon gama (IFNy)), interferon gama indükleyici faktör l (IGIF), transforme edici büyüme faktörü beta (TGF-ß), RANTES (aktivasyon üzerine düzenlenir, normal T- hücre ifade edilir ve muhtemelen salgilanir), makrofaj inflamatuar proteinler (örnegin, MIP-1-d ve MIP-1-ß), Laysmanya uzama baslatma faktörü (LElF), trombosit kaynakli büyüme faktörü (PDGF), tümör nekroz faktörü (TNF), büyüme faktörleri, örnegin, epidermal büyüme faktörü (EGF), vasküler endotelyal büyüme faktörü (VEGF), fibroblast büyüme faktörü, (FGF), sinir büyüme faktörü (NGF), beyin kaynakli nörotrofik faktör (BDNF), nörotrofin-2 (NT-2), nörotrofin -3 (NT-3), nörotrofin-4 (NT-4), nörotrofin-5 (NT-5), glial hücre dizisi kaynakli nörotrofik faktör (GDNF), siliyer nörotrofik faktör (CNTF), TNF tip II reseptörü, eritropoietin (EPO), insülin ve çözünür glikoproteinler örnegin, gp120 ve gp160 glikoproteinleri. Gp120 glycoproteini, bir insan immün yetmezlik virüsü zarf proteinidir ve gp160 glikoproteini, gp120 glikoproteinine yönelik bilinen bir prekürsördür.
Bir açida, biyolojik olarak aktif protein GLP-1'dir. Diger bir açida, biyolojik olarak aktif polipeptit, nesiritit, insan B tipi natriüretik peptittir (hBNP). Diger bir açida, biyolojik olarak aktif polipeptit, 27 amnio asitten olusan kendiliginden olusan domuz sekretini ile ayni olan bir amino asit diziliminden olusan bir peptit hormonu olan sekretindir. Bir açida, biyolojik olarak aktif protein, HIV-1”in CD4+ hücreleri ile füzyonunun bir inhibitörü olan lineer bir 36 amino asitli sentetik polipeptit olan enfuvirtittir. Antihemofilik Faktör (AHF), aktif polipeptit olarak seçilmis olabilir. HEMOFIL MTM AHF'nin ortalama in vivo yari ömrünün 14.7±5.1 saat (n=61) oldugu bilinmektedir. Diger bir açida, eritropoietin, biyolojik olarak aktif polipeptittir. Eritropoietin, rekombinant DNA teknolojisi ile üretilen bir 165 amino asitli glikoproteindir ve endojen eritropoietin ile ayni biyolojik etkilere sahiptir. Kronik renal yetmezlige sahip yetiskin ve pediatrik hastalarda, intravenöz verilis sonrasinda modifiye edilmemil plazma eritropoietin yari ömrü eliminasyonunun, 4 ila 13 saat arasinda degistigi bilinir. Diger bir açida, biyolojik olarak aktif polipeptit Reteplazdir. Reteplaz, kringle 2 ve insan tPA'sinin proteaz etki alanlarini içeren, doku plazminojen aktivatörünün (tPA) glikosile olmayan delesyon muteinidir. Trombolitik aktivitenin ölçümüne bagli olarak, modifiye edilmemis Reteplazin yari ömür eliminasyonunun yaklasik olarak 15 dakika oldugu bilinmektedir.
Tercih edilen bir düzenlemede, aktif polipeptit, insan interlökün-1 reseptörü antagonistinin bir rekombinant, glikosile olmayan formu veya memei hücrelerinde ifade edilen glikosile formu (lL-lRa) olan Anakinradir. Bir durumda, Anakinra, 153 amino asitten olusur ve 17.3 kilodalton moleküler agirliga sahiptir. Bu, bir E. coli bakteriyel ifade sistemi kulanilarak rekombinant DNA teknolojisi ile üretilebilir. IL-1Ra'nin glikosile versiyonu, bir memeli ifade sistemi içinde üretilebilir. Modifiye edilmemis Anakinranin in vivo yari ömrünün 4 ila 6 saat arasinda degiskenlik gösterdigi bilinmektedir.
Diger bir tercih edilen düzenlemede, aktif polipeptit eksendin-4'tür. Bir durumda, eksendin-4, 39 amino asitten olusur. Bu, bir E. coli bakteriyel ifade sistemi kulanilarak rekombinant DNA teknolojisi ile üretilebilir. Modifiye edilmemis eksendin-4”ün in vivo yari ömrünün 0.5 saat oldugu bilinmektedir iv. [Ai, G., et al.; Pharmacokinetics of Bekaplermin de aktif polipeptit olarak seçilmis olabilir. Bekaplermin, topikal verilise yönelik bir rekombinant insan trombosit kaynakli büyüme faktörüdür (rhPDGF-BB).
Bekaplermin, maya susu Saccharomyces cerevisiae içerisine, trombosit kaynakli büyüme faktörünün (PDGF) B zincirine yönelik genin yerlestirilmesi ile rekombinant DNA teknolojisi ile üretilebilir. Bekaplerminin bir formu, yaklasik olarak 25 kD moleküler agirliga sahiptir ve disülfür baglari ile birbirine bagli olan iki özdes polipeptit zincirinden olusan bir homodimerdir. Aktif polipeptit, rekombinant DNA teknolojisi ile Escher/'chia coli (E. co/i') içerisinde üretilen interlökin on birin (IL-11) bir rekombinant formu olan Oprelvekin olabilir. Bir açida, seçilen biyolojik olarak aktif polipeptit, yaklasik olarak 19,000 dalton moleküler kütleye sahiptir ve glikosile degildir. Polipeptit uzunluk olarak 177 amino asittir ve natif lL-11'in 178 amino asit uzuluguna göre, yalnizca amino- terminal prolin kalintisinin eksik olmasi açisindan farklilik gösterir, bunun, in vitro veya in vi'vo olarak biyoaktivitede ölçülebilen farkliliklar ile sonuçlanmadigi bilinmektedir. Modifiye edilmemis Oprelvekinin terminal yari ömrünün yaklasik olarak 7 saat oldugu bilinmektedir. Ancak, diger bir biyolojik olarak aktif polipeptit, kan glükozunu artiran ve gastrointestinal yoldaki yumusak kaslari gevseten insan glukagonu ile özdes bir polipeptit hormone olan Glukagon olabilir. Glukagon, glukagona yönelik genin eklenmesi ile genetik olarak degistirilmis olan özel bir patojenik olmayan E. co/ibakterisi susu içinde sentezlenebilir. Belirli bir açida, glukagon, 29 amino asit kalintisi içeren ve 3,483 moleküler agirliga sahip olan tek zincirli bir polipeptittir. In vivo yari ömrün, 8 ila 18 dakika arasinda degismek üzere kisa oldugu bilinmektedir.
G-CSF de aktif polipeptit olarak seçilebilir. Rekombinant granülosit koloni uyarici faktörü veya G-CSF, beyaz kan hücrelerinin geri kazaniminin uyarmak üzere çesitli kemoterapi tedavileri izlenerek kullanilir. Rekombinant G-CSF”nin raporlanan yari ömrü 3.5 saattir.
Bir açida, biyolojik olarak aktif polipeptit, interferon alfa (IFN alfa) olabilir. Kimyasal olarak PEG-modifiye edilmis interferon-alfa 2a, hepatit C`nin tedavisi için klinik olarak valide edilmistir. Bu PEG'Iestirilmis protein, haftalik enjeksiyon gerektirir ve daha uzun yari ömürler ile yavas salimli formülasyonlar istenir.
Ek selüler proteinlere, bunlarla sinirli olmaksizin, siradakiler dahildir: VEGF, VEGF-Ri, VEGF-R2, VEGF-R3, Her-1, Her-2, Her-3, EGF-1, EGF-2, EGP-3, Alpha3, cMet, ICOS, R1,K0mplemet Reseptör 1, Osteopontin, Vitronektin, Efrin A1-A5, Efrin B1 -B3, alfa-2- makroglobülin, CCL1, CCL2, CCL3, CCL4, CCL5, CCLG, CCL7, CXCL8. CXCL9, EGFR, CD33, CD52, Digoksin, Rho (D), Varisella, Hepatit, CMV, Tetanoz, Vaksinia, Antivenom, Botulinum, Trail-R1, Trail-R2, cMet, TNF-R familyasi, örnegi LA NGF-R, BAFF-R/TNFRSF13C, TRAIL R2/TNFRSF108, TRAIL R2/TNFRSF1OB, Fas/TNFRSFS Ligant/TNFSFS, BCMA/TNFRSF17, CD30/TNFRSF8, LIGHT/TNFSF14, 4- 1BB/TNFRSF9, CD40/TNFRSF5, GlTR/TNFRSF18, Osteoprotejerin/TNFRSF1iB, RANK/TNFRSF11A, TRAIL R3/TNFRSF10C, TRAIL/TNFSF10, TRANCE/RANK L/TNFSF11, 4-1BB Ligant/TNFSFQ, TWEAK/TNFSF12, CD4O Ligant/TNTSFS, Fas Ligant/TNFSFB, RELT/TNFRSF19L, APRlL/TNFSF13, DcR3/TNFRSFSB, TNF R1/TNFRSF1A, TRAIL R1/TNFRSF1OA, TRAIL R4fI'NFRSF10D, CD30 Ligand/TNFSF8, GITR Ligant/TNFSF18, TNFSF18, TACI/TNFRSF1SB, NGF R/TNFRSF16, OX4O Ligant/TNFSF4, TRAIL R2/TNFRSF1OB, TRAIL R3/TNFRSF1OC, TWEAK R/TNFRSF12, BAFF/BLyS/TNFSF13, DRö/TNFRSF21, TNF-alfa/TNFSFlA, Pro-TNF-alfa/TNFSFlA, Lenfotoksin beta R/TNFRSF3, Lenfotoksin beta R (LTbR)/Fc Kimera, TNF R1/TNFRSF1A, TNF-beta/TNFSF1B, PGRP-S, TNF R1/TNFRSF1A, TNF RII/TNFRSF1B, EDA-A2, TNF-alpha/TNFSFlA, EDAR, XEDAR, TNF RI/TNFRSF1A LRAP/ERAPZ, A33, Aminopeptidaz N/ANPEP, Aag, Aminopeptidaz P2/XPNPEP2, ABCG2, Aminopeptidaz P1/XPNPEP1, ACE, Aminopeptidaz PlLS/ARTS1, ACE-2, Amnionless, Aktin, Amfiregulin, beta-Aktin, AMPK alfa 1/2, Aktivin A, AMPK alfa 1, Aktivin AB, AMPK. alfa 2, Aktivin B, AMPK beta 1. Aktivin C, AMPK beta 2, Aktivin RIA/ALK-2, Androjen R/NR3C4, Aktivin RIB/ALK-4, Anjiogenin, Aktivin RIIA, Anjiyopoietin-1, Aktivin RIIB, Anjiyopoietin -2, ADAMS, Anjiyopoietin -3, ADAM9, Anjiyopoietin -4, ADAM10, Anjiyopoietin -benzeri 1, ADAM12, Anjiyopoietin -benzeri 2, ADAM15, Anjiyopoietin -benzeri 3, TACE/ADAM17. Anjiyopoietin -benzeri 4, ADAM19, Anjiyopoietin -benzeri 7/CDT6, ADAM33, Anjiyostatin, ADAMTS4, Anneksin AI/Anneksin l, ADAMTSS, Anneksin A7, ADAMTS1, Anneksin A10, ADAMTSL- 1/Punktin, Anneksin V, Adiponektin/AcrpSO, ANP, AEBSF, AP alani, Aggrekan, APAF- 1, Agrin, APC, AgRP, APE, AGTR-Z, APT, AIF, APLP-1, Akt, APLP-2, Akt1, Apolipoprotein AI, Akt2, Apolipoprotein B, Akt3, APP, Serum Albumin, APRIL/TNFSF13, ALCAM, ARC, ALK-1, Artemin, ALK-7, Arilsülfataz A/ARSA, Alkalin Fosfataz, ASAH2/N-asilsfingosin Amidohidrolaz-Z, alfa 2u-Globulin, ASC, alfa-1-Asit Glikoprotein, ASGR1, alfa-Fetoprotein, ASK1, ALS, ATM, Ameloblastin, ATRIP, AMICA/JAML, Aurora A, AMlGO, Aurora B, AMlGOZ, Aksin-1, AMIGO3, Axl, Aminoasilaz/ACYl, Azurosidin/CAP37/HBP, Aminopeptidaz A/ENPEP, B4GALT1, BIM, 1/PCP, BACE-2, BMP-2, Bad, BMP-3, BAFF/TNFSF1SB, BMP-3b/GDF-10, BAFF R/TNFRSF13C, BMP-4, Bag-1, BMP-5, BAK, BMP-6, BAMBI/NMA, BMP-7, BARD1, lA/ALK-3, Bol-2 ile ilgili protein A1, BMPR-IB/ALK-B, Bc1-w, BMPR-Il, Bc1-x, BNIPSL, Bc1-xL, BOC, BCMA/TNFRSF17, BOK, BDNF, BPDE, Benzamit, Brachyury, Ortak Beta Zinciri, B-Raf, beta IG-H3, CXCL14/BRAK, Betaselülin, BRCA1, beta-Defensin 2, BRCA2, BID, BTLA, Biglikan, Bub-1, Bik-benzeri Katil Protein, 0- haziran, CDQO/Thyt, C1s, CDZOO R1, Tamamlayici Bilesen C2, CD229/SLAMF3, Komplement Bilesen CSa, CD23/Fc epsilon Rll, Komplement Bilesen C3d, CD2F-10/SLAMF9, Komplement Bilesen CSa, CDSL, Kadherin-4/R-Kadherin, CD69, Kadherin -6, CDCZ, Kadherin -8, CDC25A, Kadherin -11, CDCZSB, Kadherin -12, CDCP1, Kadherin -13, CDO, Kadherin -17, CDX4, E- Kadherin, CEACAM-1/CD66a, N- Kadherin, CEACAM-G, P- Kadherin, Serberus 1, VE- Kadherin, CFTR, Kalbindin D, CGMP, Kalsinörin A, Chem R23, Kalsinörin B, Kemerin, Kalretikulin-2, Kemokin Numune Paketleri, CaM Kinaz II, Kitinaz 3-benzeri 1, CAMP, Kitotriosidaz/CHTT1, Kannabinoid R1, Chk1, Kannabinoid R2/CBZ/CNR2, Chk2, CAR/NR113, CHL-1/L1CAM-2, Karbonik Anhidraz I, Kolin Asetiltransferaz/ChAT, Karbonik Anhidraz II, Kondrolektin, Karbonik Anhidraz III, Korrin, Karbonik Anhidraz IV, Korrin-Benzeri 1, Karbonik Anhidraz Va., K0rdin-2, Karbonik Anhidraz VB, CINC-1, Karbonik Anhidraz VI, CINC-2, Karbonik Anhidraz VIl, CINC-3, Karbonik Anhidraz VIII, Klaspin, Karbonik Anhidraz IX, KIodin-6, Karbonik Anhidraz X, CLC, Karbonik Anhidraz XII, CLEC-1, Karbonik Anhidraz XIII, CLEC-2, Karbonik Anhidraz XIV, CLECSF13/CLEC4F, Karboksimetil Lizin, CLECSF8, Karboksipeptidaz A1/CPA1, CLF-1, Karboksipeptidaz A2, CL-P1/COLEC12, Karboksipeptidaz A4, Klusterin, Karboksipeptidaz B1, Klusterin benzeri 1, Karboksipeptidaz E/CPE, CMG-2, Karboksipeptidaz X1, CMV UL146, Kardiotr 0phin-1, CMV UL147, Kamosin Dipeptidaz 1, CNP, Karonte, CNTF, CART, CNTF R alfa, Kaspaz, Pihtilasma Faktörü II/Trombin, Kaspaz-1, Pihtilasma Faktörü III/Doku Faktörü, Kaspaz-2, Koagülasyon Faktörü VII, Kaspaz-S, Koagülasyon Faktörü X, Kaspaz-4, Koagülasyon Faktörü XI, Kaspaz-ö, Koagülasyon Faktörü XIV/Protein C, Kaspaz-7, COCO, Kaspaz-8, Kohesin, Kaspaz-Q, Kollajen I, Kaspaz-lO, Kollajen II, Kaspaz-12, Kollajen IV, Kaspaz-13, Ortak gama Zincir/IL-2R gamma, Kaspaz Peptit inhibitörleri, COMP/Trombospondin-S, Katalaz, Kompleman Bileseni C1rLP, beta-Katenin, Komplement Bileseni CIqA, Katepsin 1, Komplement Bileseni C1qC, Katepsin 3, Komplement Faktörü D, Katepsin 6, Komplement Faktörü l, Katepsin A, Komplement MASPS, Katepsin B, Baglanti 43, Katepsin C/DPPI, Kontaktin-1, Katepsin D, Contactin- 2/TAG1, Katepsin E, Kontaktin-4, Katepsin F, Kontaktin-S, Katepsin H, Korin, Katepsin L, Kornulin, Katepsin O, COR826/C1qTNF, 3, Katepsin S, Siçan Kortikal Kök Hücreleri, Katepsin V, Kortizol, Katepsin X/Z/P, COUP-TF I/NR2F1, CBP, COUP-TF Protein, CCR2, Kreatin Kinaz, Kas/CK MM, CCR3, Kreatinin, CCR4, CREB, CCRS, +/CD62L +/CD44, Cryptic, CD5, CSB/ERCCG, CDG, CCL27/CTACK, CD8, CD30/TNFRSF8, CXCRS, CD3O Liganti./TNFSF8, CXCR6, CD31/PECAM-1, Siklofilin Sistatin C, CD40 Ligandi/TNFSFS, Sistatin D, CD43, Sistatin E/M, CD44, Sistatin F, CD55/DAF, Sistatin SN, CD58/LFA-3, Sitokrom c, CD59, Apositokrom c, CD68, CD84/SLAMF5, Sitonin, DG, DISP1, DAN, Dkk-1, DANCE, Dkk-2, DARPP-32, Dkk-3, DAX1/NROB1, Dkk-4, DCC, DLEC, DCIR/CLEC4A, DLL1, DCAR, DLL4, DcR3/TNFRSFGB, d-Lüsiferin, DC-SIGN, DNA Ligaz IV, DC-SIGNR/CD299, DNA Polimeraz beta, DCTRAIL R1/TNFRSF23, DNAM-1, DCTRAIL R2/TNFRSF22, DNA- PKcs, DDR1, DNER, DDR2, Dopa Dekarboksilaz/DDC, DEC-205, DPCR-1, Dekapentaplejik, DPPG, Dekorin, DPPA4, Dektin -1/CLEC7A, DPPA5/ESG1, Dektin- 2/CLECBA, DPPII/QPP/DPP?, DEP-1/CD148, DPPlV/CD26, Çöl Kirpisi, DR3/TNFRSF25, Desmin, DR6/TNFRSF21, Desmoglein-1, DSCAM, Desmoglein-2, DSCAM-L1, Desmoglein-B, DSPG3, Dishevelled -1, Dtk, Dishevelled -3, Dinamin, EphB1, Ekotin, EphBZ, EDA, EphBS, EDA-A2, EphB4, EDAR, EphBö, EDG-1, Efrin, EDG-5, Efrin -A1, EDG-8, Efrin -A2, eEF- 2, Efrin -A3, EGF, Efrin -A4, EGF R, Efrin - A5, EGR1, Efrin -B, EG-VEGF/PK1, Efrin -B1, elF2 alfa, Efrin -B2, eIF4E, Efrin -Bß, E1k- 1, Epigen, EMAP-II, Epimorfin/Sintaksin 2, EMMPRIN/CD147, Epiregulin, CXCL5/ENA, EPR-1/Xa Reseptörü, Endoksan, ErbBZ, Endoglin/CD105, ErbBS, Endoglikan, ErbB4, Endonücleaz III, ERCC1, Endonücleaz IV, ERCC3, Endonuclease V, ERK1/ERK2, Endonücleaz VIII, ERK1, Endorepellin/Perlekan, ERK2, Endostatin, ERK3, Endotelin-1, ERK5/BMK1, Engrailed-2, ERR alfa/NRSB1, EN-RAGE, ERR beta/NR3BZ, Enteropeptidaz/Enterokinaz, ERR gama/NRSBS, CCL11/Eotaxin, Eritropoietin, CCL24/E0tksin-2, Eritropoietiri R, CCL26/Eotaksin-3, ESAM, EpCAM/TROP-i, ER alfa/NR3A1, EPCR, ER beta/NR3A2, Eph, Eksonükleaz III, EphA1, Eksostosin benzeri 2/EXTL2, EphA2, Eksostosin benzeri 3/EXTL3, EphA3, R3, FABP?, FGF R4, FABP9. FGF R5, Komplement Faktörü B, Fgr, FADD, FHR5, FAMSA, Fibronektin, FAM3B, Fikolin-2, FAM3C, Ficolin-3 FAM3D, FITC, Fibroblast Aktivasyon Protein alfa/FAP, FKBP38, Fas/TNFRSFG, Flep, Fas Liganti/TNFSFB, FLIP, FATP1, FLRG, FATP4, FLRT1, FATP5, FLRT2, Fc gama R1/CDB4, FLRT3, Fc gama RIIB/CD32b, Fit-3, Fc gama RIIC/CDI32c, Fit-3 Liganti, Fc gama RIlA/CD32a, Follistatin, Fc gama RIII/CD16, Follistatin benzeri 1, FcRH1/IRTA5, FosB/GOS3, FcRH2/IRTA4, F0xD3 FcRH4/IRTA1, FoxJl, FcRH5/IRTA2, FoxP3, FC reseptör benzeri 3/CD16-2, Fpg, FEN-1, FPR1, Fetuin A, FPRL1, Fetuin B, FPRL2, FGF asidik, CX3CL1/Fraktalkin, FGF bazik, Kivrilmis-1, FGF-3, Kivrilmis-2, FGF-4, Kivrilmis-S, FGF-23, G9a/EHMT2, GFR alfa-3/GDNF R alfa-3, GABA-AR alfa 1, GFR alfa-4/GDNF R alfa-4, GABA- AR alfa 2, GITR/TNFRSF18, GABA-AR alfa 4, GITR Liganti/TNFSF18, GABA-AR alfa 5, GLI-1, GABA-AR alfa 6, GLI-2, GABA-AR beta 1, GLP/EHMT1, GABA -AR beta 2, GLP-1 R, GABA-AR beta 3, Glukagon, GABA-AR gama 2, Glukozamin (N-asetil) -G-Sulfataz/GNS, GABA-B-RZ, GIuR1, GAD1/GAD67, gama, Glut2, Galektin-1, Glut3, Galektin-2, Glut4, Galektin-S, GIutS, Galektin-3 BP, Glutaredoksin 1, Galektin-4, Glisin R, Galektin-7, Glikoforin A, Galektin-8, Glipikan 2, Galektin-9, Glipikan 3, GaINAc4S-65T, Glipikan 5, GAP-43, Glipikan 6, GAPDH, GM- CSF, Gasl, GM-CSF R alfa, Gasö, GMF-beta, GASF-iNVFIKKNRP, gp130, GASP- 2NVFIKKN, Glikojen Fosforilaz BB/GPBB, GATA-1, GPR15, GATA-2, GPR39, GATA-3, GPVI, GATA-4, GR/NR3C1, GATA-5, Gr-1/Ly-6G, GATA-6, Granülisin, GBL, Granzim A, GCNF/NR6A1, Granzim B, CXCL6/GCP-2, Granzim D, G-CSF, Granzim G, G-CSF R, Granzim H, GDF-1, GRASP, GDF-3 GRB2, GDF -5, Gremlin, GDF-6, GRO, GDF-7, CXCL1/GRO alfa, GDF-8, CXCL2/GRO beta, GDF-9, CXCL3/GRO gama, GDF-11.
Büyüme Hormonu, GDF-15, Büyüme Hormonu R, GDNF, GRPTS/HSPAQB, GFAP, GSK-3 alfa/beta, GFI-1, GSK-3 alfa, GFR alfa-1/GDNF R alfa-1, GSK-3 beta, GFR HMGB1, HAI-2A, TCF-2/HNF-1 beta, HAl-ZB. HNF-3 beta/FoxAZ, HAND1, HNF-4 alfa/NR2A1, HAPLN1, HNF-4 gama/NR2A2, Hava yolu Tripsin benzeri Proteaz/HAT, HO-1/HMOX1/HSP32, HB-EGF, HO-2/HMOX2, CCL14a/HCC-1, HPRG, HCR/CRAM-A/B, HSD-2, HDGF, HSP10/EPF, Hemoglobin, HSP27, Hepassosin, HSPGO, HES-1, HSP70, HES-4, HSP90, HGF, HTRA/Proteaz Yap, HGF Aktivatörü, HTRA1/PRSS11, HGFR, HTRA2/Omi, HIF-1 alfa, HVEM/TNFRSF14, HIF-2 alfa, alfa 1, Iduronat 2-Sulfataz/IDS, IL-13 R alfa 2, IFN, IL-15, IFN-alfa, IL-15 R alfa, IFN- 18 BPa, IFN-alfa WA, lL-18 BPc, IFN-alfa/beta RI, IL-18 BPd, lFN-alfa/beta R2, IL- lLT4/CD85d, IgY, lLT5/CD85a, IkB-beta, ILT6/CD85e, IKK alfa, Hint Kirpisi, IKK epsilon, INSRR, IKK gama, Insülin, IL-1 alfa/IL-1F1, Insülin R/CD220, IL-1 beta/IL-1 F2, Proinsülin, IL-1ra/IL-1F3, Insülinin/IDE, IL-1F5/FIL1 delta, lntegrin alfa 2/CD49b, IL- alfa M/CD11b, IL-2, Integrin alfa M beta 2, IL-2 R alfa, Integrin alfa V/CD51, IL-2 R beta, Integrin alfa V beta 5, IL -3, lntegrin alfa V beta 3, IL-3 R alfa, Integrin alfa V beta 6, IL-3 R beta, Integrin alfa X/CD11c, IL-4, Integrin beta 1/CD29, IL-4R, Integrin beta Jagged 1, JAM-4/IGSFS, Jagged 2, JNK, JAM-A, JNK1/JNK2, JAM-BNE-JAM, JNK1, JAM-C, JNK2, Kininojen, Kallikrein 3/PSA, Kininostatin, Kallikrein 4, KIR/CD158, Kallikrein 8/Nör0psin, KIR2DS4, Kallikrein 9, KIR3DL1, Plazma Kallikrein-KLKB1, KLFö, Kallikrein 14, Klotho, Kallikrein 15, Kloto beta, KC, KOR, Keapl, Kremen-1, Kell, Kremen-2, KGF/FGF-7, LAG-3, LINGO-2, LAIR1, Lipin 2, LAIR2, Lipokalin- 1, Laminin alfa 4, Lipokalin-2/NGAL, Laminin gama 1,5-Lipoksijenaz, Laminin I, LXR alfa/NR1H3, Laminin S, LXR beta/NR1H2, Laminin-1, Livin, Laminin-5, LIX, LAMBA, LMIRS/CDBOOLB, Layilin, LMIR6/CD300LE, LBP, LM02, LDL R, LOX-1/SR-E1, LECT2, LRH-1/NR5A2, LEDGF, LRIG1, Lefty, LRIG3, Lefty-1, LRP-1, Lefty-A, LRP-ö, Legumain, LSECtin/CLEC4G, Leptin, Lumikan, Leptin R, CXCL15/Lungkine, Leukotrie B4, XCL1/Lenf0ptiniin, Lökotrien B4R1, Lenfotoksin, LIF, Lenfotoksin beta/TNFSFS, LIF R alfa, Lenfotoksin beta R/TNFRSFS, LIGHT/TNFSF14, Lin, Limitin, Lip, LIMPII/SR-BZ, Lisil Oksidaz Homolog 2 LIN-28, LYVE-1, LINGO-1, alfa 2- Makroglobulin, CXCL9/MIG, MAD2L1, Mimekan, MAdCAM-1, Mindin, MafB, Mineralokortikoit R/NR3C2, MafF, CCL3L1/MIP-1 alfa Izoform LD78 beta, MafG, CCL3/MIP-1 alfa, MafK, CCL4L1/LAG-1, MAG/SigIeC-4-a, CCL4/MIP-1 beta, MANF, CCL15/MIP-1 delta, MAP2, CCL9/10/MIP- 1 gama, MAPK, MIP-2, Marapsin/Pankreas, CCL19/MIP-3 beta, MARCKS, CCL20/MlP-3 alfa, MARCO, MlP-l, Mash1, MIP-H, Matrilin-2, MlP-III, Matrilin -3, MIS/AMH, Matrilin-4, MIS R11, Matriptaz/ST14, MIXL1, 3, CCL12/MCP-5, MMP- 7, M-CSF, MMF-8, M-CSF R, MMP-9, MCV-tip II, MMF-10, MEK1, MMP-25/MT6- MMP, MEK2, MMP-26, Melusin, MMR, MEPE, MOG, Meprin alfa, CCL23/MPIF-1, Meprin beta, M-Ras/R-Rasß, Mer, Mrell, Mezotelin, MRP1 Meteorin, MSK1/MSK2, Metionin Aminopeptidaz 1, MSK1, Metionin Aminopeptidaz, MSK2, Metionin Aminopeptidaz 2, MSP, MFG-E8, MSP R/Ron, MFRP, Mug, MgcRacGAP, MULT-1, MGL2, Musasi-1, MGMT, Musasi-2, MIA, MuSK MICA, MutY DNA Glikosilaz, MIKB, MyD88, MIKL/CLEC12A, Miyeloperoksidaz, beta 2 Mikroglobulin, Miyokardin, Midrin, Miyokin, MIF, Miyoglobin, NAlP NGFl-B gama/NR4A3, Nanog, NgR2/NgRH1, CXCL7/NAP-2, NgR3/NgRH2, Nbsl, Nidojeri- 1/Entaktin, NCAM-1/CD56, Nidojen-2, NCAM-L1, Nitrik Oksit, Pektin-1, Nitrotirozin, Nektin-2/CD112, NKGZA, Nektin-3, NKGZC, Nektin-4, NKG2D, Neojen, NKp30, NKp80/KLRF1, NETOZ, NKX2.5, Netrin-1, NMDA R, NR1 Alt birimi, Netrin-Z, NMDA R, NR2A Alt birimi, Netrin-4, NMDAR, NRZB Alt birimi, NetrIn-Gla, NMDAR, NR2C Alt- birimi, Netrin-G2a, N-Me-6,7-diOH-TIQ, Nöregulin-1/NRG1, Nodal, Nöregulin -3/NRG3, Noggin, Nöritin, Nogo Reseptörü, NöroD1, Nogo-A, Nörofasin, NOMO, Nörojenin-1, Nope, Nörojenin-2, Norrin, Nörojenin -3, eNOS, Nörolisin, iNOS, Nörofizin II, nNOS, Nörturin NOV/CCNS, NFAM1, NRAGE, NF-H, NrCAM, NFkB1, NRL, NFkB2, NT-3, NF- L, NT-4, NF-M, NTB-A/SLAMFB, NGZ/MCSP, NTH1, NGF R/TNFRSF16, Nükleostem, beta-NGF, Nurr-1/NR4A2, NGFI-B alfa/NR4A1, OASZ, Oreksin B, OBCAM, OSCAR, OCAM, OSF-2/Periostin, OCIL/CLECZd, Onkostatin M/OSM, OCILRP2/CLEC21, OSM R beta, Oct-3/4, Osteoaktivin/GPNMB, OGG1, Osteoadherin, Olig 1, 2, 3, Osteokalsin, OIigI, Osteokrin, OIigZ, Osteopontin, Olig3, Osteoprotejerin/TNFRSF11B, Oligodendrosit Isaretleyici 01, Otx2, Oligodendrosit Isaretleyici 04, OV-6, OMgp, OX40/TNFRSF4, Optisin, OX4O Ligant/TNFSF4, Oreksin A, OASZ, Oreksin B, OBCAM, OSCAR, OCAM, OSF-2/Periostin, OCIL/CLECZd, Onkostatin M/OSM, OCILRP2/CLECZ1, OSM R beta, Oct-3/4, Osteoaktivin/GPNMB, OGG1, Osteoadherin, Olig 1, 2, 3, Osteokalsin, Oligl, Osteokrin, OIigZ, Osteopontin, OIigS, Osteoprotejeri n/NFRSF11B, Oligodendrosit Isaretleyici 01, Otx2, Oligodendrosit Isaretleyici 04, OV-6, OMgp, OX40/TNFRSF4, Optisin, OX4O Ligant/TNFSF4, Oreksin A, RACK1, Ret, Rad1, A, Rae-1 alfa, RGM-B, Rae-1 beta, RGM-C, Rae-1 delta, Rheb, Rae-1 epsilon, Ribozomal Protein 86, Rae-1 gamma, RIP1, Raf-1, ROBO1, RAGE, ROBOZ, Ra1A/Ra1B, R, RANK/TNFRSF11A, ROR alfa/NR1F1, CCL5/RANTES, ROR gama/NR1 F3, Rap1A/B, RTK benzeri Yeyim Reseptör 1/ROR1, RAR alfa/NR1Bi, RTK benzeri Orphan Reseptörü 2/ROR2, RAR beta/NR1BZ, RP, RBP4, RSK1/RSK2, RECK, RSK1, Reg 2/PAP, RSK2, Reg I, RSKB, Reg II, RSK4, Reg III, R-Spondin 1, Reg Ma, R-Spondin 2, Reg IV, R-Spondin 3, Relksin-1, RUNX1/CBFA2, Relaksin-2, RUNX2/CBFA1, Relaksin-S RUNX3/CBFA3, RELM alfa, RXR alfa/NRZB1, RELM beta, RXR beta/NRZB2, RELT/TNFRSF19L, RXR gama/NRZBS, Resistin, S100A10, SALL1, Smad3, delta-Sarcoglycan, Smad4, Sca-1/Ly6, SmadS, SCD-1, Smad?, SCF, Smad8, SCF R/c-kit, SMC1, SCGF, alfa-Düz Kas Aktin, SCL/Uzun, SMUG1, SCPS/SYCP3, Salyangoz, CXCL12/SDF-1, Sodyum Kalsiyum Degistirici 1, SDNSF/MCFDZ, Soggy-1, alfa-Sekretaz, Sonkc Kirpi, gama- Sekretaz, 8 veya CS1, beta- Sekretaz, 8 veya CSS, E-Selektin, Sortilin, L-Selektin, SOST, P-Selektin, SOX1, Semaforin 3A, SOX2, Semaforin 3C, SOX3, Semaforin 3E, SOX7, Semaforin 3F, Semaforin 6D, SPARC, Semaforin 7A, SPARC benzeri 1, Separaz, SP-D, Serin/Treonin Fosfataz Substrat I, Spinesin, Serpin A1, F-Spo ndin, Serpin A3, SR- AI/MSR, Serpin A4/Kallistatin, Src, Serpin A5/Pr0tein C Inhibitörü, SREC-I/SR-F1, Serpin A8/Anjiyotensin0jen, SREC-II, Serpin BS, SSEA-1, Serpin C1/Antitrombin-III, SSEA-3, Serpin D1/Heparin Kofaktör II, SSEA-4, Serpin E1/PAI-1, ST7/LRP12, Serpin E2, Stabilin-1, Serpin F1, Stabilin-2, Serpin F2, Stanniocalcin 1, Serpin G1/C1 Inhibitörü, Stanniokalsin 2, Serpin 12, STAT1, Serum Amiloit AI, START2, SF- 1/NR5A1, STAT3, SGK, STAT4, SHBG, STAT5a/b, GEMI, STAT5a, SHP/NROBZ, STAT5b, SHP-1, STAT6, SHP-2, VE-Statin, SlGIRR, Stella/Dppa3, Siglec-2/CD22, STRO-1, Siglec-S/CD33, Madde P, SigIeC-5, Sülfamidaz/SGSH, Siglec-ö, Sülfataz Modifiye Faktörü 1/SUMF1, Siglec-Y, Sülfotaz Degistirici Faktör 2/SUMF2, Siglec-Q, SUMO1, Siglec-10, SUM02/3/4, Siglec-11, SUMOS, Siglec-F, Süperoksit Dismutaz, SIGNR1/CD209, Süperoksit Dismutaz-1/Cu-Zn SOD, SIGNR4, Süperoksit Dismutaz- 2/Mn-SOD, SIRP beta 1, Süperoksit Dismutaz-ß/EC-SOD, SKI, Survivin, SLAM/CD150, Synapsin l, Uyuyan Güzel Transposazi, Sindekan-1/CD138, Slit3, Sindekan -2, SLITRK1, Sindekan -3, SLITRK2, Sindekan -4, SLITRK4, alfa/TNFSF1A, CCL17/TARC, TNF-beta/TNFSF1B, Tau, TNF R1/TNFRSF1A, T021/R- RasZ, TNF R11/TNFRSF1B, TCAM-1, TOR, TCCR/WSX-1, TP-1, TC-PTP, TRADD, Testikan 2/SPOCK2, TRAF-1, Testikan 3/SPOCK3, TRAF-2, TFPI, TRAF-3, TFPI-2, TRAF-4, TGF-alfa, TRAF-6, TGF-beta, TRAIL/TNFSF10, TGF-beta 1, TRAIL R1/TNFRSF10A, LAP (TGF-beta 1), TRAIL R2/TNFRSF1OB, Latent TGF-beta 1, TRAIL R3/TNFRSF1OC, TGF-beta 1.2, TRAIL R4/TNFRSF1OD, TGF- beta2, TRANCE/TNFSF11, TGF-beta 3, TfR (Transferin R), TGF-beta 5, Apo-Transferin, Latent TGF-beta bp1, Holo-Transferrn, Latent TGF-beta bp2, Trappin-2/Elafin, Latent TGF-beta bp4, TREM-1, TGF-beta RI/ALK-5, TREM-2, TGF-beta RII, TREM-3, TGF- beta Rllb, TREML1/TLT-1, TGF-beta RIII, TRF-1, Thermolisin, TRF-2, Tioredoksin-1, TRH-indirgeyici Ektoenzim/TRHDE, Tioredoksin-2, TRIMS, Tioredoksin-80, Tripeptidil- Peptidaz I, Tioredoksin benzeri 5/TRP14, TrkA, THOP1, TrkB, Trombomodulin/CD141, TrkC, Trombopoietin, TROP-2, Trombopoietin R, Troponin l Peptit 3, Trombospondin- 1, Troponin T, Trombospondin-Z, TROY/TNFRSF19, Trombospondin-4, Tripsin 1, Timopoietin, Tripsin 2/PR882, Timus Kemokin-l, Tripsin 3/PRSS3, Tie-1, Triptaz- /Prs32, Tie -2, Triptaz alfa/TPS1, TIM-1/KIM-1/HAVCR, Triptaz beta-1/MCPT-7, TIM- 2, Triptaz beta-2/TPSB2, TIM-3, Tryptase epsilon/BSSP-4, TIM -4, Triptaz Gama- TlMP-3, TSK, TIMP-4, TSLP, TL1A/TNFSF15, TSLP R, TLR1, TSP50, TLR2, beta-III Tubulin, TLR3, TWEAK/TNFSF12, TLR4, TWEAK R/TNFRSF12, TLRS, Tyk2, TLR6, Fosfo-Tirozin, TLR9, Tirozin Hidroksilaz, TLX/NR2E1, Tirozin Fosfataz Substrati l, Ubikuitin, UNC5H3, Ugi, UNCSH4, UGRP1, UNG, ULBP-1, uPA, ULBP-2, uPAR, ULBP-3, URB, UNCSH1, UVDE, UNC5H2, Vanilloid R1, VEGF R, VASA, VEGF R1/Flt- 1, Vasohibin, VEGF R2/KDR/FIk-1, Vasorin, VEGF R3/FIt-4, Vasostatin, Versican, Vav- 1, VGSQ, VCAM-1, VHR, VDR/NR111, Vimentin, VEGF, Vitronektin VEGF-B, VLDLR, VEGF-C, vWF-A2, VEGF-D, Sinüklein- alfa, Ku70, WASP, Wnt-7b, WlF-1, Wnt-8a Wnt-10b. Wnt-Sa, Wnt-11, Wnt-5D, wnvNSS, Wnt7a, XCR1, XPE/DDBl, XEDAR, XPE/DDB2, Xg, XPF, XIAP, XPG, XPA, XPV, XPD, XRCCl, Yes, YY1, EphA4.
Diger aktif polipeptitlere siradakiler dahildir: BOTOX, Miyoblok, Nöroblok, Disport (veya botulinum nörotoksinlerin diger serotipleri), algluosidaz alfa, daptomisin, YH-16, koriogonadotropin alfa, filgrastim, setrorelik, interlökin-2, aldeslökin, tekelökin, denilösin diftitoks, interferon alfa-n3 (enjeksiyon) interferon alfa-nl, DL-8234, interferon, Suntory (gama-1 a), interferon gama, timosin alfa 1, tasonermin, DigiFab, ViperaTAb, EchiTAb, CroFab, nesiritid, abatacept, alefasept, Rebif, eptoteminalfa, teriparatid (osteoporoz), kalsitonin enjektabl (kemik hastaligi), kalsitonin (nazal, osteoporoz), etanersept, hemoglobin glutamer 250 (sigir), drotrekojin alfa, kolajenaz, karperitid, rekombinant insan epidermal büyüme faktörü (topikal jel, yara iyilesmesi), DWP-401, darbepoetin alfa, epoetin omega, epoetin beta, epoetin alfa, desirudin, lepirudin, bivalirudin, nonacog alfa, Mononin, eptacog alfa (aktive), rekombinant Faktör VIII + VWF, rekombinat, rekombinant Faktör VIII, Faktör VIII (rekombinant), Alfanat, oktocog al fa, Faktör VIII, palifermin, Indikinaz, tenepplaz, alteplaz, pamiteplaz, reteplaz, nateplaz, monteplaz, follitropin alfa, rFSH, hpFSH, mikafungin, pegfilgrastim, tenograstim, nartograstim, sermorelin, glukagon, ekenatit, pramlintid, imiglurazraz, galsulfaz, Lökotropin, molgramostim, triptorelin asetat, histrelin (subkütanöz implant, Hidron), deslorelin, histrelin, nafarelin, Ieuprolide sürekli salim deposu (ATRIGEL), Ieuprolide implant (DUROS), goserelin, somatropin, Ötropin, KP-102 programi, somatropin, somatropin, mekasermin (büyüme basarisizligi), enfuvirtid, Org-33408, insülin glargin, insülin glulisine, insülin (inhale edilen), insülin Iispro, insülin detemir, insülin (bukal, RapidMist), mekasermin rinfabat, anakinra, selmolökin, 99 mTc-apitit enjeksiyonu, miyelopid, Betaseron, glatiramer asetat, Gepon, sargramostim, oprelvekin insan Iökosit türevli alfa interferonlar, Biliv, insülin (rekombinant), rekombinant insan insülini, insülin aspart, mekasermin, Roferon-A, interferon-alfa 2, Alfaferon, interferon alfakon-t, interferon alfa, Avoneks 'rekombinant insan Iuteinize edici hormon, dornaz alfa, trafermin, zikonotid, taltirelin, diboterminalfa, atosiban, bekaplermin, eptifibatid, Zemaira, CTC-, Nov-002 oktreotid, (topikal jel), rasburikaz, ranibizumab, Aktimmün, PEG-Intron, Trikomin, rekombinant ev tozu akari alerjisi duyarsizlastirma enjeksiyonu, rekombinant insan paratiroit hormonu (PTH) , epoetin delta, transjenik antitrombin III, Granditropin, Vitrase, rekombinant insülin, interferon-alfa (oral pastil), GEM-218, vapreotide, idursülfaz, omapatrilat, rekombinant serum albümini, sertolizumab pegol, glukarpidaz, insan rekombinant CI esteraz inhibitörü (anjiyoödem), Ianoteplaz, rekombinant insan büyüme hormonu, enfuviitid (igne içermeyen enjeksiyon, Biojector 2000), VGV-1, interferon (alfa), Iukinaktant, aviptadil (inhale, pulmoner hastalik), ikatibant, ekallantid, omiganan, Aurograb, peksiganan asetat, ADI-PEG-ZO, LDI-200, degareliks, cintredekin besudotoks, Favld, MDX-, tifakogin, desmoteplaz, amidiplaz, corifollitropin alfa, TH-9507, teduglutid, Diamid, DWP-412, büyüme hormonu (sürekli salim enjeksiyon), rekombinant G-CSF, insülin (inhalasyon, HAVA), insülin (inhalasyon, Technosfer), insülin (inhale, AERX), RGN-303, DiaPep277, interferon beta (hepatit C viral enfeksiyon (HCV)), interferon alfa-n3 (oral), belatasept, transdermal insülin yamalari, AMG-531, MBP-8298, Xerecept, opebakan, AIDSVAX, GV-1001, Lymphoscan, ranpirnaz, Lipoksisan, Iusupultid, MP52 (beta-triksitofosfat tasiyici, kemik rejenerasyonu), melanoma asisi, sipuleökel- T, CTP-37, Insegia, gearpen, insan trombin (donmus, cerrahi kanama), trombin, TranleD, alfimepraz, Puricase, terlipressin (intravenöz, hepatorenal sendrom), EUR-1008M, rekombinant duramisin (inhale edilen, kistik fibrozis), SCV-07, OPI-45, Endostatin, Anjiostatin, ABT- 510, Bowman Birk Inhibitör Konsantresi, XMP-629, 99 mTc-Hynic-Anneksin V, kahalalid F, CTCE-9908, tevereliks (genisletilmis salim), ozareliks, romidepsin, BAY- ATN-161, cilengitid, Albuferon, Biphasix, lRX-2, omega interferon, PCK-3145, CAP- Oncovax-CL, OncoVax-P, BLP-25, CerVax-16, multi-epitop peptit melanoma asisi (MART-1, gp, CGRP (inhale, astim), pegsunersept, timozin beta-4, plitidepsin, GTP-200, ramoplanin, GRASPA, OBI-1, AC-100, somon kalsitonin (oral, eligen), kalsitonin (oral, oste0poroz), depelestat, hematid, Krizalin (topikal), rNAPcZ, rekombinant Faktör Vlll (PFGile lipozomal), bFGF, PEG'Ienmis rekombinant stafilokinazlar e-varyant, V-10153, SonoLysis Prolyse, NeuroVax, CZEN-OOZ, islet hücresi neogenez tedavisi, rGLP-1, avorelin AOD-, hizli etkili insülin (enjektabl, Viadel), intranazal insülin, insülin (inhale edilen), insülin (oral, eligen), rekombinant metionil insan leptin, pitrakinra deri alti enjeksiyonu, egzama), pitrakinra rEV-131 (oftalmik), rEV-131 (solunum yolu hastaligi), oral rekombinant insan insülini interferon alfa-n13 (topikal), lRX-3, RDP-58, Tauferon, safra tuzu uyarilmis Iipaz, Merispaz, alkalin fosfataz, EP-2104R, Melanotan-Il, bremelanotid, ATL-104, PeviPRO), ALTU-135, parvovirus B 19 asisi, influenza asisi (rekombinant nöraminidaz), sitma/HBV asisi, sarbon asisi, Vacc-5q, Vacc-4 X, HIV asisi (oral), HPV asisi, Tat Toxoid, YSPSL, CHS-, Ostabolin-C, PTH analogu (topikal, psoriazis), MBR1-93.02, MTB72F asisi asisi, AG-702, OXSODro1, rBetVl, Der-p1/Der-p2/Der-p7 alerjen hedefleyici asi (toz akari alerjisi), PR1 peptit antijeni (lösemi), mutant ras asisi, HPV-16 E7 Iipopeptid asisi, diyabetik ayak ülseri), rupintrivir, retikuloz, rGRF, PIA, alfa-galaktosidaz A, ACE-011, reseptör baglanma peptitleri, 111In-hEGF, AE-37, trastuzumab-DMi, Antagonist G, IL- 12 (rekombinant), PM-, L-19 asisi (kanser), VX-OO1, AVE-, NA17.A2 peptidleri, melanoma asisi (darbeli antijen terapötik), prostat kanseri asisi, GBP-501, edilebilir), ACP-HIP, SUN-11031, peptid YY [3-36] (obezite, burun içi), FGLL, atacikept, CCR1, AT- Iipozomal krem (Novazome), duramisin (oftalmik), kuru göz), CAB-2, CTCE-0214, GlikoPEGile edilmis eritropoietin, EPO-FC, CNTO-528, AMG-114, JR-013, Faktör XIII, aminokandin, PN- rhTPO, trombopoietin reseptörü agonisti (trombositopenik bozukluklar), AL-108, AL- (Therapore), EP-1043, S. pneumoniae pediatrik asisi, sitma asisi, Nei'sseria men/'ngi'tidisGrup B asisi, neonatal grup B streptokok asisi, sarbon asisi, HCV asisi (gpE1 + gpE2 + MF-59), otitis media tedavisi, HCV asisi (çekirdek antijen + aviscumine, BIM-23190, tüberküloz asisi, çoklu epitop tirosinaz peptidi, kanser asisi, tümörler), desmopresin (bukal kontrollü salim), onersept, TP-9201. Çok sayida aktif proteinin nükleik asit ve amino asit dizilimleri teknikte iyi bilinmektedir ve açiklama ve dizilimler, Kimyasal Adlar Servis Veritabani (örnegin, CAS Kaydi), GenBank, GenPept, Entrez Nükleotit, Entrez Protein, Üniversel Protein Kaynagi (UniProt) gibi halka açik veritabanlari ve GenSeq (örnegin, Dervvent) gibi abonelik ile saglanan veri tabanlarinda mevcuttur. Polinükleotit dizilimleri, verilen bir aktif proteini (örnegin, tam uzunluk veya matür) kodlayan yabani tipteki bir polinükleotit dizilimi olabilir veya bazi durumlarda, dizilim, yabani tipteki dizilimin (örnegin, yabani tipteki aktif proteini kodlayan bir polinükleotit) bir varyanti olabilir, burada, polinükleotitin DNA dizilimi, örnegin, belirli bir türde veya bir bölgesel yönlendirilmis mutant veya allelik varyant gibi bir yabani tipteki proteini kodlayan bir polinüleotitte ifade edilmeye yönelik, optimize edilir. Teknikte bilinen ve/veya burada saglananyöntemler kullanilarak ve Örneklerde daha detayli sekilde açiklanan kilavuz ve yöntemler ile iliskili olarak, füzyon proteini yapilari olusturmak üzere, bir aktif proteinin bir yabani tip veya konsensus cDNA dizilimi veya bir kodon optimize edilmis varyantinin kullanilmasi, teknikte uzman kisinin yetenekleri içerisindedir.
Füzyon Proteinlerinin Farmakokinetik Özellikleri Bulus, bir müsin polipeptit etki alanina bagli olmayan terapötik aktif protein ile karsilastirildiginda daha fazla farmakokinetige sahip terapötik aktif proteinlerin füzyon proteinlerini saglar, bunlar, burada açilanan yöntemler ile bilesime yönelik belirlenen optimal dozda kullanilmasi durumunda, bulusa göre bir müsin etki alanli polipeptit ile bagli olmayan terapötik aktif proteinin kiyaslanabilir bir dozu ile karsilastirildiginda daha fazla farmokinetik gerçeklestirebilir. Burada kullanildigi üzere, bir "kiyaslanabilir doz, kiyaslanabilir bir sekilde bir denege verilen terapötik aktif proteine yönelik esdeger bir mol/kg degerine sahip bir doz anlamina gelir. Füzyon proteinin bir füzyon proteini dozu içerisindeki terapötik aktif protein ile esas olarak ayni mol- esdegerine sahip olacagi ve/veya terapötik aktif proteine göre yaklasik ayni molar konsantrasyona sahip olacagi anlasilacaktir.
Bir terapötik aktif proteinin, terapötik aktif proteine bir müsin polipeptit etki alaninin baglanmasi ile artirilabilecek olan farmakokinetik (PC) özelliklerine, yari ömür, egri altindaki alan (AUC), Cmaks, Tmaks, inis-çikis konsantrasyon orani ve dagilim hacmi dahildir. PK özelliklerindeki artis, artan maruz birakilma nedeniyle etkinlikte artis, dozdaki azalma ve Cmaks'taki bir sönümleme nedeniyle yan etkilerde azalma ve dozlama frekansinda bir azalmaya yol açabilir. Örneklerde daha detayli açiklandigi üzere, bulus, füzyon proteinine bagli olmayan ilgili terapötik aktif protein ile karsilastirildiginda, verilen füzyon proteinine yönelik yari ömrü, en az yaklasik iki kat daha uzun veya en az yaklasik üç kat veya en az yaklasik dört kat veya en az yaklasik bes kat veya en az yaklasik alt kat veya en az yaklasik yesi kat veya en az yaklasik sekiz kat veya en az yaklasik dokuz kat veya en az yaklasik on kat veya en az yaklasik kat veya en az yaklasik 20 kat uzatan veya füzyon proteinine bagli olmayan terapötik aktif protein ile karsilastirildiginda yari ömrü daha fazla uzatan, bir terapötik aktif proteine bagli bir müsin etki alanli polipeptit içeren füzyon proteinleri saglar.
Benzer sekilde, füzyon proteinleri, füzyon proteinine bagli olmayan ilgili terapötik aktif protein ile karsilastirildiginda AUC'de en az yaklasik %50 veya en az yaklasik %60 veya en az yaklasik %70 veya en az yaklasik %80 veya en az yaklasik %90 veya en az yaklasik %100 veya en az yaklasik %150 veya en az yaklasik %200 veya en az yaklasik %300 artisa sahip olabilir. Bir füzyon proteininin yari ömür ve AUC farmakokinetik parametreleri, ELISA, HPLC, radyotahlil veya teknikte bilinen veya burada açiklanan diger yöntemleri kullanilarak dozlama, zaman araliklarinda kan örneklerinin alinmasi ve proteinin tahlil edilmesini, akabinde, yari ömür ve diger PK parametrelerin derive edilmesine yönelik standar veri hesaplamalarini içeren standart yöntemler ile belirlenebilir.
Yari ömürdeki artislar, inis-çikis konsantrasyon oraninda azalma ile sonuçlanir, bu sekilde birden fazla dozun verilmesi durumunda konsantrasyona karsilik zaman profili yumusar. Daha devam maruz kalma, daha iyi etkinligin yani sira siklikla yüksek bir Cmaks (supraterapötik konsantrasyonlar) ile yol açilan yan etkilerde azalma ile sonuçlanir. Ayri dozlarin uzatilmis süresi, ayrica doz sikligini azaltir, bunun sonucunda, verilis ile alakali tüm yan etkilerde (enjeksiyon alani reaksiyonlari gibi) azalma, daha iyi uyumluluk ve hastaya yönelik kolaylik ortaya çikar.
Fizikokimyasal ve Farmasötik Özellikler Bir terapötigin PK özelliklerinin artirilmasina ek olarak, bir müsin etki alanli polipeptit ile füzyon, terapötik aktif peptit veya proteinin farmasötik veya fizikokimyasal özelliklerinin (aköz çözünürlük derecesi gibi) iyilestirilmesine yönelik kullanisli olabilir. Çözünürlük iyilestirmeleri, müsin üzerine yüksek derecede hidrofilik karbohidratlarin eklenmesinin yani sira, ek olarak aspartik asit, glutamik asit, histidin, lisin ve arjinin gibi iyonlasabilir kalintilari da içerebilen, uygun müsin-polipeptit diziliminin seçilmesi araciligiyla gerçeklestirilebilir. Iyaonlasabilir kalintilar, füzyon proteininin pl'sinin modülasyonu ve bu sekilde, proteinin belirli bir formülasyondaki toplam yükü ile sonuçlanir.
Füzyon proteinleri, füzyon proteinlerinin fizikokimyasal özelliklerinin istenen özellik ile sonuçlandiginin dogrulanmasina yönelik, burada açiklanan yöntemler kullanilarak, yapilandirilabilir ve tahlil edilebilir. Bir açida, müsin etki alanli polipeptit. füzyon proteinine bagli olmayan terapötik aktif protein ile karsilastirildigindai füzyon proteininin en az yaklasik %25 veya en az yaklasik %30 veya en az yaklasik %40 veya en az yaklasik %50 veya en az yaklasik %75 veya en az yaklasik %100 veya en az yaklasik daha yüksek veya füzyon proteinine bagli olmayan ilgili terapötik aktif proteine göre en az yaklasik %1000 daha yüksek aköz çözünürlüge sahip olacagi sekilde seçilir. Tercih edilen müsin etki alanli polipeptit dizilimleri, en az %80 dizilim benzerligine veya yaklasik %99 ila, Tablo 1'den seçilen müsin etki alanli polipeptit ile yaklasik %100 dizilim benzerligi sahip olabilir.
Füzyon Proteinlerinin Kullanimi Diger bir açida, spesifikasyon, terapötik aktif proteinin yol açtigi bir hastalik, bozukluk veya kosulda yararli bir etkinin gerçeklestirilmesine yönelik bir yöntem açiklar. Mevcut spesifikasyon, nispeten kisa terminal yari ömre ve/veya minimum etkili doz ve maksimum tolere edilebilir doz arasinda daha dar bir terapötik pencereye sahip terapötik aktif proteinlerin dezavantajlar ve/veya sinirlandirmalara yöneliktir.
Bir açida, spesifikasyon, bir denekte yararli bir etkinin gerçeklestirilmesine yönelik, denege terapötik olarak veya profilaktik olarak etkili miktarda füzyon proteininin verilmesi adimini içeren bir yöntemi açiklar. Etkili miktar, bir hastalik veya bozuklugun tedavi edilmesine yardimci olmada yararli bir etki üretebilir. Bazi durumlarda, yarali bir etkinin gerçeklestirilmesine yönelik yöntem, bir müsin etki alanli polipeptide bagli olmayan bir terapötik protein veya peptitin bir alt optimal yari ömre sahip oldugu hastaliklar ve hastalik kategorilerine yönelik bir denegin tedavi edilmesine yönelik bir füzyon proteini bilesiminin terapötik olarak etkili bir miktarinin verilmesini içerebilir.
Diger durumlarda, yararli bir etkinin gerçeklestirilmesine yönelik yöntem, bir terapötik protein veya peptitin mevcut olmadigi hastaliklar ve hastalik kategorilerine yönelik bir denegin tedavi edilmesine yönelik bir füzyon proteini bilesiminin terapötik olarak etkili bir miktarinin verilmesini içerebilir. Ayrica diger durumlarda, yararli bir etkinin gerçeklestirilmesine yönelik yöntem, bir terapötik protein veya peptitin sirasiyla bir agonist veya antagonist olarak bir alt optimal uyarici veya alt optimal inhibe edici etki gösterdigi hastaliklar ve hastalik kategorilerine yönelik bir denegin tedavi edilmesine yönelik bir füzyon proteini bilesiminin terapötik olarak etkili bir miktarinin verilmesini içerebilir.
Burada açiklanan bilesimlerin verilmesi ile tedavi tabi tutulan hastaliklara, kisitlama olmaksizin, enflamatuar hastaliklar, artrit, osteoporoz, özellikle hepatit enfeksiyonlari, bakteriyel enfeksiyonlar, viral enfeksiyonlar, genetik hastaliklar, pulmoner hastaliklar, tip 1 diyabet, tip 2 diyabet, hormonla iliskili hastalik, Alzheimer hastaligi, kalp hastaliklari, miyokardiyal enfarktüs, derin ven trombozu, dolasim sistemi hastaliklari, hipertansiyon, hipotansiyon, alerji, agri kesici, cücelik ve diger büyüme bozukluklari, zehirlenmeler, leke pihtilasma hastaliklari, dogustan gelen bagisiklik sistemi hastaliklari, emboli, yara iyilesmesi, yaniklarin iyilesmesi, Crohn hastaligi, astim, ülser, sepsis, glokom, serebrovasküler iskemi, solunum sikintisi sendromu, korneal ülserler, böbrek hastaligi, diyabetik ayak ülseri, anemi, faktör IX eksikligi, faktör VIII eksikligi, faktör VII eksikligi, mukozit, disfaji, trombosit bozuklugu, akciger embolisi, infertilite, hipogonadizm, Iökopeni, nötropeni, endometriozis, Gaucher hastaligi, obezite, Iizozom depolama hastaligi, AIDS, premenstrüel sendrom, Turners sendromu, kaseksi, kas distrofisi, Huntington hastaligi, kolit, SARS, Kaposi sarkomu, karaciger tümörü, meme tümörü, glioma, Non-Hodgkin Ienfoma, Kronik miyelositik lösemi; Killi hücre lösemi; Renal hücreli karsinom; Karaciger tümörü; Ienfoma; Melanom, multipl skleroz, Kaposis sarkomu, papilloma virüsü, amfizem, bronsit, periodontal hastalik, demans, dogum, küçük hücreli olmayan akciger kanseri, pankreas tümörü, prostat tümörü, akromegali, sedef hastaligi, yumurtalik tümörü, Fabry hastaligi, Iizozom depo hastaligi dahildir.
Bir açida, yöntem, bir müsin etki alanli polipeptite bagli bir terapötik aktif protein ve en az bir farmasötik olarak kabul edilebilir tasiyici içeren bir füzyon proteini içeren bir farmasötik bilesimin terapötik olarak etkili bir miktarinin, ihtiyaç içindeki bir denege verilmesini içerir, bu sekilde, kiyaslanabilir bir dozda verilen bir müsin etk alanli polipeptide bagli olmayan bir terapötik aktif protein içeren bir farmasötik bilesimin verilmesi ile ortaya çikan etki ile karsilastirildiginda, füzyon proteininin terapötik aktif proteininin yol açtigi en az bir parametre, fizyolojik kosul veya klinik çiktida daha büyük bir iyilesme ortaya çikar. Bir açida, farmasötik bilesim, terapötik olarak etkili bir dozda verilir. Diger bir açida, farmasötik bilesim, dozlama periyodunun uzunluguna yönelik terapötik oalrak etkili bir doz rejimi (burada açiklandigi üzere) kullanilarak birden fazla es zamanli veya asamali doz kullanilarak verilir.
Uzatilmis yari ömür gibi burada açiklandigi üzere, füzyon proteininin iyilestirilmil farmakokinetik parametrelerinin bir sonucu olarak, bir müsin-etki alanli polipeptite bagli terapötik aktif protein, bir müsin etki alanli polipeptide bagli olmayan ilgili terapötik aktif protein ile karsilastirildiginda, hastalik, bozukluk veya kosulun semptomlari veya klinik abnormalitelerinin önlenmesi, tedavi edilmesi, hafifletilmesi, tersine döndürülmesi veya iyilestirilmesine veya tedavi edilmekte olan denegin hayatta yasaminin uzatilmasina yönelik, dozlar arasinda daha uzun araliklar kullanilarak verilebilir.
Bir füzyon proteininin terapötik olarak etkili bir miktari, hastaligin asamasi, yas, cinsiyet ve kisinin agirligi ve antikor veya antikor kisminin kiside istene bir tepkiyi ortaya çikarma yetenegi gibi faktörlere göre degiskenlik gösterebilir. Terapötik olarak etkili bir miktar ayrica, füzyon proteininin tüm toksik veya zarar verici etkilerinin terapötik olarak yararli etkiler tarafindan bastirildigi miktardir. Profilaktik olarak etkili bir miktar, istenen profilaktik sonucu gerçeklestirmek üzere gerekli zaman periyoduna yönelik gerekli olan füzyon proteini miktarini refere eder.
Bir açida, bir tedavi yöntemi, bir füzyon proteini içeren bir farmasötik bilesimin terapötik olarak etkili bir dozunun ihtiyaç içinde olan bir denege verilmesini içerir, bu, bir füzyon polipeptidine bagli olmayan terapötik aktif proteinin kiyaslanabilir bir dozu ile karsilastirildiginda terapötik aktif proteinin yari ömründe bir artis ile sonuçlanir. Diger bir açida, spesifikasyon, posr-ekspresyon kimyasal baglanma gerektiren imalat ile ilgili yari ömür uzatma teknolojilerinin kolayliginin gelistirilmesi ve natif terapötik aktif proteinler ile karsilastirildiginda, yüksek stabilite, yüksek su çözünürlügü ve/veya formülasyon kolayligi ile sonuçlanmasina yönelik füzyon proteinlerinin yapilmasina yönelik yöntemleri açiklar. Bir açida, spesifikasyon, bir müsin etki alanli polipeptide bagli olmayan terapötik aktif protein ile karsilastirildiginda, fizyolojik kosullar altinda veya terapötik olarak kabul edilebilir formülasyon içinde, ortaya çikan füzyonun çözünebilir formunda daha yüksek konsantrasyon gerçeklestirilebilecegi sekilde seçilen bir müsin etki alanli polipeptite terapötik aktif proteinin baglanmasi adimini içeren, bir terapötik aktif proteinin aköz çözünürlügün artirilmasina yönelik bir yöntemi açiklar.
Müsin etki alanli polipeptitin özelliklerine, bir füzyon proteini ile birlestirilmesi durumunda daha yüksek suda çözünürlük kazandiran faktörlere, yüksek glikosilasyon yüzdesi, glikan tipleri ve müsin etki alanli polipeptitin amino asitleri üzerindeki yük dahildir. Bazi düzenlemelerde, yöntemler, suda çözünürlügün, natif terapötik aktif protein ile karsilastirildiginda, fizyolojik kosullar altinda veya terapötik olarak kabul edilebilir bir formülasyon içinde, en az yaklasik %50 veya en az yaklasik %60 daha yüksek en az yaklasik %70 daha yüksek veya en az yaklasik %80 daha yüksek veya en az yaklasik %90 daha yüksek veya en az yaklasik %100 daha yüksek veya en az yaklasik %150 daha yüksek veya en az yaklasik %200 daha yüksek veya en az yaklasik %400 daha yüksek veya en az yaklasik %600 daha yüksek veya en az yaklasik %800 daha yüksek veya en az yaklasik %1000 daha yüksek veya en az yaklasik %2000 daha yüksek veya en az yaklasik %4000 daha yüksek veya en az yaklasik %6000 daha yüksek oldugu birfüzyon proteini ile sonuçlanir.
Nükleik Asit Dizilimleri Mevcut bulus, bulusun füzyon proteinlerini kodlayan polinükleik asit moleküllerini tamamlayici olan füzyon proteinleri ve dizilimlerini kodlayan izole polinükleik asitler saglar. Diger bir açida, bulus, bulusun füzyon proteinlerini kodlayan polinükleik asitler ve homolog varyantlar dahil, bulusun füzyon proteinlerini tamamlayici dizilimler üretmek üzere yöntemleri kapsar. Genelde, bulus, bir füzyon proteinine yönelik kodlayan bir polinükleotit dizilimi üretmek ve ortaya çikan gen ürününün ifade edilmesi, müsin etki alanli polipeptitler ve aktif proteinlerin her birini kodlayan nükleotitleri toplamak, bilesenleri çerçeveye baglamak, ifade vektörü ile uygun bir konak hücreyi dönüstürmek ve füzyon proteininin dönüstürülen konak hücre üzerinde ifade edilmesine denek olmak, bu sekilde bulusun füzyon proteinini üretmek üzere yöntemser saglar.
Moleküler biyolojideki standart rekombinant teknikleler, mevcut bulusun polinükleotitleri ve ifade vektörlerinin yapilmasina yönelik kullanilabilir. Bulusa göre, bir füzyon proteinini kodlayan nükleik asit dizilimleri, uygun konak hücrelerdeki füzyon proteinlerinin ifadesini yönlendiren rekombinant DNA moleküllerinin olusturulmasina yönelik kullanilabilir. Birkaç klonlama stratejisi, mevcut bulusun gerçeklestirilmesine yönelik uygun oldugu öngörülmüstür, bunlarin birçogu, bir füzyon proteini veya bunun komplementine yönelij bir gen kodlamasi içere bir yapinin olusturulmasina yönelik kullanilabilir. Bir düzenlemede, klonlama stratejisi, bir aktif protein ve bir müsin etki alanli polieptit içeren bir monomerik füzyon proteinini kodlayan bir genin olusturulmasina yönelik kullanilabilir. Bu paragrafta asagida açiklanan siradaki düzenlemelerde, gen, ayrica klevaj dizilimi veya dizilimlerini de kodlayabilen, aralayici dizilimleri kodlayan nükleotitler de içerebilir.
Bir yaklasimda, bir yapi ilk olarak, bir füzyon proteinine karsilik gelen DNA dizilimini içerecek sekilde hazirlanir. Bir aktif protein ve/veya bir müsin polipeptit etki alani kodlayan DNA, bir aktif proteinin mRNA'sini tasidigina ve bunu saptanabilir bir seviyede ifade ettigine inanilan doku veya izole hücrelerden standart yöntemler kullanilarak hazirlanan bir cDNA kitaligindan elde edilebilir. Gerekli olmasi durumunda, kodlama dizilimi, cDNA'ya ters-kopyalanmis olmayabilen mRNA prekürsörleri ve islem ara maddelerinin saptanmasina yönelik, Sambrook, et al., supra içerisinde açiklanan klasik primer uzatma prosedürleri kullanilarak elde edilebilir. Bu sekilde, DNA, bu tür kaynaklardan hazirlanan bir cDNA kitapligindan klasik sekilde elde edilebilir. Kodlayici gen veya genler ayrica, bir genomik kitapliktan elde edilebilir veya halka açik veritabanlari, patentler veya literatür referanslarindan elde edilen DNA dizilimleri kullanilarak teknikte bilinen standart sentetik prosedürler (örnegin, otomatik nükleik asit sentezi) ile olusturulabilir. Bu tür prosedürler teknikte iyi bilinmektedir ve bilimsel ve patent literatüründe iyi sekilde açiklanmistir. Örnegin, dizilimler, aktif proteinin veya aktif proteinin bir fragmenti veya varyantinin veya bir müsin etki alanli polipeptidin bir amino asit dizilimini içeren, CAS Kayitlari veya GenBank veritabanindaki girdilere karsilik gelen, ncbi.nlm.nih.gov dünya çapinda ag üzerinden ulasilabilen Ulusal Biyoteknoloji Bilgi Merkezi (NCBI) web sayfasi araciligiyla elde edilebilen Kimyasal Adlar Servisi (CAS) Kayit Numaralari (Amerikan Kimya Dernegi tarafindan yayinlanmistir) ve/veya GenBank Erisim Numaralarindan elde edilebilir.
Aktif proteini kodlayan bir gen veya polinükleotit akabinde, örnegin, bir biyolojik sistemde yüksek seviyedeki protein ifadesine yönelik uygun transkripsiyon ve translasyon dizilimlerinin kontrolü altindaki bir plazmit veya diger bir vektör olabilen bir yapiya klonlanabilir. Sonraki bir adimda, müsin etki alanli polipeptide yönelik kodlayan ikinci bir gen veya polinükleotit, örnegin, aktif protein genini, aktif proteine yönelik kodlayan gen veya genler ile bitisik ve çerçeve içinde olan yapi içerisine klonlayarak, aktif protein geninin N- ve/veya C-terminalini kodlayan nükleotitlere genetik olarak kaynastirilir.
Füzyon polipeptitlerini kodlayan ortaya çikan polinükleotitler akabinde, bir ifade vektörü içerisine ayri ayri klonlanabilir. Nükleik asit dizilimi, çesitli prosedürler ile vektör içerisine yerlestirilebilir. Genelde, DNA, teknikte bilinen teknikler kullanilarak uygun bir sinirlandirma endonükleaz alani veya alanlari içerisine yerlestirilir. Vektör bilesenleri genel olarak, bunlarla sinirli olmaksizin. bir veya daha fazla dizilim, bir replikasyon orijini, bir veya daha fazla isaretleyici gen, bir artirici element, bir yardimci ve bir transkripsiyon terminasyonu dizilimi içerir. Bu bilesenlerin biri veya daha fazlasini içeren uygun vektörlerin yapilmasi, teknikte uzman kisi tarafindan bilinen standart patent Iiteratüründe iyi sekilde açiklanmaktadir.
Uygun vektörler, konaklar ve ifade sistemleri, rekombinant ifade tekniginde uzman kisiler tarafindan iyi bilinir. Çesitli vektörler halka açiktir. Vektör, örnegin, bir plazmit, kozmit, viral partikül veya faj formunda olabilir. Her iki ifade ve klonlama vektörü, vektörün bir veya daha fazla seçilmis konak hücrede tekrarlanmasina olanak veren ve ayrica, konak hücre içerisinde rekombinant proteinin ifadesi ve post-translasyonel modifikasyonuna olanak veren bir nükleik asit dizilimi içerir.
Mevcut bulus ayrica, bulusun monomerik füzyon proteini bilesimlerinin ifade edilmesine yönelik bir konak hücre saglar. Örnek uygun ökaryotik konak hücrelere, bunlarla sinirli olmaksizin, Saccharomyces cerevisiae, Pichi'a pastoris ve Hansenu/a po/ymorpha gibi maya konaklari; Sgodogtera frugigerda Sf9, Spodoptera frugi'perda Sf21 gibi böcek konaklari ve High Five hücreleri ve fare fibroblast hücreleri, (C , Çin hamster yumurtalik hücreleri (CHO-DHFR, CHO-NEOSPLA, CHO-G8)ve fare miyelom hücreleri (NSO-GS) gibi memeli konaklar dahildir.
Ifade edilen füzyon proteinleri, teknikte bilinen yöntemler veya burada açiklanan yöntemler araciligiyla saflastirilabilir. Jel filtrasyonu, tuz fraksiyonasyonu, iyon degisimi kromatografisi, büyüklük dislanimli kromatografi, hidroksiapatit adsorpsiyon kromatografisi, hidrofobik etkilesim kromatografisi ve jel elektroforezi gibi prosedürler kullanilabilir; bunlarin her biri, ilgili konak hücre tarafindan üretilen füzyon proteinini geri kazanmak ve saflastirmak üzere uygun hale getirilir. Saflastirma yöntemleri, Robert K.
Scopes, Protein Purification: Principles and Practice, Charles R. Castor (ed.), Springer- Verlag 1994 ve Sambrook, et al., supra içerisinde açiklanir. Çok adimli saflastirma Farmasötik Bilesimler Mevcut bulus, bulusun füzyon proteinlerini içeren farmasötik bilesimler saglar. Bir düzenlemede, farmasötik bilesim, füzyon proteinini ve en az bir farmasötik olarak kabul edilebilir tasiyici içerir. Mevcut bulusun füzyon proteinleri,farmasötik olarak kulanisli bilesimlerin hazirlanmasina yönelik bilinen yöntemlere göre formüle edilebilir, bu sekilde, polipeptit, aköz solüsyonlar veya taponlar, farmasötik olarak kabul edilebilir süspansiyonlar ve emülsiyonlar gibi farmasötik olarak kabul edilebilir bir tasiyici araç ile kombine edilir. Aköz olmayan solvent örneklerine, propil etilen glikol, polietilen glikol ve bitkisel yaglar dahildir. Terapötik formülasyonlar, istenen saflik derecesine sahip aktif malzemenin, Iiyofilize formülasyonlar veya aköz solüsyonlar seklindeki, Remington's Pharmaceutical Sciences 16th edition, Osol, A. Ed. (1980) içerisinde açiklandigi üzere, opsiyonel fizyolojik olarak kabul edilebilir tasiyicilar, eksipiyanlar veya stabilize ediciler ile karistirilmasiyla depolanmak üzere hazirlanir.
Farmasötik bilesimler, oral olarak, burun içi yoluyla, prenteral olarak veya inhalasyon terapisi ile verilebilir ve tablet, pastil, granül, kapsül, hap, ampul, supozituar veya aerosol formunda olabilir. Ayrica, aköz veya aköz olmayan seyreltici, surup, granülat veya toz içindeki aktif malzemenin süspansiyonu, solüsyonu ve emülsiyonu seklinde olabilir. Ek olarak, farmasötik bilesimler ayrica, diger farmasötik olarak aktif bilesikleri veya bulusun birtakim bilesiklerini de içerebilir.
Daha belirli olarak, mevcut farmasötik bilesimler, oral, rektal, nazal, topikal (transdermal, aerosol, bukal ve dil alti dahil), vajinal, parenteral (subkütanöz, subkütanöz veya infüzyon pompasi ile intratekal olarak, intramüsküler, intravenöz ve intradermal dahil), intravitreal ve pulmoner olarak dahil herhangi bir uygun yolla terapiye yönelik verilebilir. Tercih edilen yolun, terapötik ajan, alicinin kosulu ve yasi ve tedavi edilen hastaliga bagli olarak degisecegi bilinir.
Tercih edilen bir açida, bilesim, insanlara intravenöz verilise yönelik adapte edilmil bir farmasötik bilesim olarak rutin prosedürlere göre formüle edilir. Tipi olarak, intravenöz verilise yönelik bilesimler, steril izotonik aköz tampon içindeki solüsyonlardir. Bilesimin infüzyon ile verildigi durumda, steril farmasötik kalitedeki su veya salin içeren bir infüzyon sisesi ile dagitilabilir. Bilesimin enjeksiyon ile verilmesi durumunda, enjeksiyona yönelik bir steril su ampulü veya salin, verilis öncesinde malzemelerin karisabilmesine yönelik saglanabilir.
Tercih edilen diger bir açida, farmasötik bilesim, subkütanöz olarak verilir. Bu düzenlemede, bilesim, verilis öncesinde yeniden yapilandirilmak üzere bir Iiyofilize toz olarak tedarik edilebilir. Bilesim ayrica, bir hastaya direkt olarak verilebilecek olan sivi bir formda da tedarik edilebilir. Bir düzenlemede, bilesim, bir hastanin bilesimi kolay sekilde kendi kendine verebilecegi sekilde, önceden doldurulmis bir siringa içinde bir sivi olarak tedarik edilir.
Diger bir açida, mevcut bulusun bilesimleri, Iipozomlar içerisinde enkapsüle edilir, bu, yararli aktif ajanlarin uzatilmis zaman periyotlari boyunca kontrollü bir sekilde dagitilmasinda kullanim göstermistir. Lipozomlar, hapsedilmis bir aköz hacim içeren kapali çift katmanli membranlardir. Lipozomlar, her biri digerinden bir aköz katman ile ayrilan, tek bir membran çift katmani içeren tek lamelli kesecikler veya birden fazla membran çift katmani içeren çok lamelli kesecikler de olabilir. Ortaya çikan membran çift katmaninin yapisi, Iipidin hidrofobik (polar olmayan) kuyruklari çift katmanin merkezine dogru yönlenmisken hidrofilik (polar) basliklarin aköz faza dogru yönlenmis olacagi sekildedir. Bir düzenlemede, Iipozom, mononükleer fagosit sistem organlari, öncelikli olarak karaciger ve dalak tarafindan alimi önleyen esnek bir suda çözünebilir polimer ile kaplanmis olabilir. Lipozomlari çevrelemek üzere uygun hidrofilik polimerlere, kisitlama olmadan, U.S. Pat. No. polivinilpirolidon, polivinilmetileter, polimetiloksazolin, polietiloksazolin, polihidroksipropiloksazolin, polihidroksipropilmetakrilamid, polimetakrilamid, polidimetilasilamid, polihidroksipropilmetakrilat, polihidroksietilakrilat, hidroksimetilselüloz hidroksietilselüloz, polietilenglikol, poliaspartamid ve hidrofilik peptit dizilimleri dahildir.
Lipozomlar, teknikte bilinen herhangi bir Iipit veya Iipit kombinasyonundan olusabilir. Örnegin, kesecik olusturan Iipitler, fosfatidilkolin, fosfatidiletanolamin, fosfatidik asit, fosfatidilserin, fosfatidilgliserol, fosfatidilinositolgibi fosfolipitler ve U.S. Pat. No. veya sentetik lipitler olabilir. Kesecik olusturan lipitler ayrica, glikolipitler, serebrositler propil] -N, N-dimetiI-N-hidroksietilamonyum bromür (DMRIE); N- [1- (2,3-dioleyoksi) propil] -N, N-dimetiI-N-hidroksi etilamonyum bromür (DORIE); N- [1- (2,3-dioleyoksi) propil] -N, N, N-trimetilamonyum klorür (DOTMA); 3 [N- (N '. N'-dimetilaminoetan) karbamoly] kolesterol (DC-Chol) gibi katyonik Iipitler veya U.S. Pat. No. 6,056,973ite açilandigi üzere dimetildioktadesilamonyum (DDAB) da olabilir. Ayrica kolesterol de, kazandirmak üzere uygun aralik içerisinde yer alabilir.
Sivi formülasyonlara yönelik, istenen bir özellik, formülasyonun, intravenöz, igne içinden geçecek bir formda tedarik edilmesidir.
Diger açilarda bilesim, aktif ajanlarin koku alma ile ilgili geçitlerdeb CNS içerisine transferine olanak vermek ve sistemik verilisi azaltmak üzere intranazal, bukal veya dil alti yollari araciligiyla verilebilir. Bu verilis yoluna yönelik yaygin sekilde kullanilan cihazlar U.S. Pat. No. 6,715,485 içerisinde yer alir. Bu yol araciligiyla verilen bilesimler, belirli ilaçlar ile iliskili sistemik toksisite risklerini azaltarak, yüksek CNS dozlama veya düsük toplam vücut yüküne olanak verebilir. Bir farmasötik bilesimin, deri altina implante edilebilir bir cihaz içerisinde dagitima yönelik hazirlanmasi, örnegin U.S. Pat. kullanilarak gerçeklestirilebilir. ÖRNEKLER Asagidaki örnekler, örneklendirme amaciyla verilmektedir ve istemlerde belirtilen bulusu herhangi bir sekilde sinirlandirici sekilde yorumlanmamalidir. Örnek 1. Müsin Etki Alanli Füzvon Yapilarinin Tasarimi, Hazirlanmasi, ifadesi ve Saflastirilmasi 1. Müsinlestirilmis IL-1Ra füzyon proteinlerinin tasarimi etki alaninin uzunlugu, müsin tandem tekrar sayisnin degistirilmesiyle sistematik olarak artirilir. Füzyon proteinlerinin müsinlestirilmis etki alanlari, insan MUC20 proteininden tandem tekrarina (TR) baglidir. lL-1Ra'nin füzyon proteinleri, 2TR, 4TR, GTR, 8TR ve 12TR ile tasarlanir, sirasiyla, RDB], RDBi], RDB1826 [SEO ID NO: 5 (protein); SEO ID NO: 6 (DNA)], RDB; SEO ID NO: 8 (DNA)] ve RDB] olarak tasarlanir. 4 glisinden olusan bir baglayici (GGGG (SEO ID NO: 27)), IL-1Ra diziliminin C- terminali ve birinci müsin TR'si arasinda ve her bir 2 müsin RT seti arasina yerlestirilir. bir FLAG etiketi, saflastirma kolayligina yönelik RDB1826'nin C-terminaline eklenir. 2. Müsinlestirilmis eksendin-4 füzyon proteini RDBZZO3 tasarimi Insan MUC2O proteininden 8TR ile birlikte eksendin-4 füzyon proteini tasarlanir: eksendin-4 diziliminin C-terminali ve birinci müsin TR'si arasina ve her bir 2 müsin RT seti arasina yerlestirilir. Saflstirma kolayligina yönelik, nihai TR ve His-etiketi arasinda bir aralayici (GGGGS (SEO lD NO: 28)) ile birlikte, C-terminaline bir His-etiketi eklenir. 3. Gen sentezi Tasarlanan yapilarin ifadesine yönelik genlerin sentezi, standart yöntemler kullanilarak gerçeklesti rilir. 4. Sentez/enen genin bir memeli ifade vektörüne alt klonlanmasi A) pcDNAT'VI (lnvitrogen) ifade vektörünün hazirlanmasi ug pcDNA, 37°C'de iki saat boyunca BamHl ve Hindlll ile sindirilir. Dijest, 5' fosfatin uzaklastirilmasi dolayisiyla vektörün kendi üzerinde tekrar ligate olmasinin engellenmesine yönelik kalf alkalin fosfataza tabi tutulur. Tampon, kalf alkalin fosfataz reaksiyonundan tuzlarin uzaklastirilmasina yönelik degistirilir. Oiagen'in PCR temizleme kiti, üreticinin önerdigi protokol izlenerek kullanilir. DNA, 30 pl H20 içerisinde ayristirilir.
B) Ilgili genin hazirlanmasi Ilgili gen, 37°C'de iki saat boyunca BamHl ve Hindlll ile sindirilir. Sindirim reaksiyonu, gerçeklestirilir. Ilgili gene karsilik gelen fragment, jel üzerindeki ikinci sira çukurcuklardan izole edilir.
C) Genin pcDNA'ya Iigasyon reaksiyonu.
Hazirlanan pcDNA (adim A), T4 Iigaz varliginda adim B'deki DNA ile karistirilir ve 30 dakika boyunca oda sicakliginda inkübe edilir. Ligasyon sonrasinda, ürünler, TOP1O hücrelerine (lnvitrogen; E. coli'nin kimyasal olarak yetkin susu) dönüstürülür ve dogru klon tutulur ve -80 "C'de bir gliserol stogu olarak depolanir.
. Müsinlestirilmis IL-IRa ve eksendin-4 füzyon proteinlerinin ifadesi Tüm proteinler, üreticinin önerdigi protokol izlenerek FreeStyleTM MAX Belirteci (Invitrogen) kullanilarak CHO hücrelerinde ifade edilir. Kisaca, transfeksiyondan bir gün önce, hücreler 0.5x106 hücreler/mL'de ekilir ve transfeksiyon gününde, üretici tarafindan tavsiye edildigi üzere, 1x106 hücreler/mL'ye ayarlanir. 1 litre transfeksiyona yönelik, iki tüp (A ve B) ortam (OptiPROT'V', lnvitrogen) hazirlanir, her biri yaklasik 10 ml içerir. Tüp A'ya img DNA eklenir ve tüp B`ye 1 ml FreeStyleTM MAX Belirteci eklenir.
Hemen sonrasinda, her iki tüpün içerigi karistirilir ve 15 dakika boyunca oda sicakliginda inkübe edilir. Inkübasyon periyodu sonrasinda, karisim, 1 litre CHO hücresine yavasça eklenir. Transfeksiyon sonrasinda, hücreler, 6 ila 7 gün birakilir ve 6. Müsinlestirilmis IL-IRa ve eksendin-4 füzyon proteinlerinin saflastirilmasi His-etiketli ifade edilmis proteinlerin saflastirilmasi, bir nikel kolonda gerçeklestirilir. proteinin baglanmasi sonrasinda, kolon, en faz 5 kolon hacmindeki tampon A (50mM Tris pH8 ve 500mM NaCI) ile yikanir. Baglanan protein, yüksek bir imidazol konsantrasyonu (20 ile 500mM) ile ayristirilir. Saflastirilan protein, PBS,ye karsilik bir gece boyunca diyaliz edilir.
RDBiB26, bir anti-FLAG kolonda saflastirilir. Proteinin baglanmasi sonrasinda, kolon, en fazla 5 kolon hacmindeki PBS ile yikanir. Protein, pH3'te ayristirilir ve Tris tampon pH7 ile direkt olarak nötralize edilir. Saflastirilan protein, PBS'ye karsilik bir gece boyunca diyaliz edilir. Örnek 2. Müsin- IL-1Ra Yapilarinin Moleküler Agirlik ve gs'leri lL-1Ra-müsin füzyon proteinleri RDB, RDB, SDS/PAGE kullanilarak karakterize edilir (Sekil 1A). Tüm yapilarin görünen moleküler agirligi, beklenen yksek seviye glikosilasyon ile tutarli olarak, polipeptit diziliminin hesaplanan moleküler agirligindan polipeptitlerin hesaplanan molkeüler agirliklari sirasiyla 22kD, 26.2kD, 34.8kD ve 43.3kD”dir ve jel üzerindeki hareketliliklerine bagli olarak ilgili görünür moleküler agirliklari 35kD, 45kD, 65kD ve 80kD'dir (Sekil 1A; oklar).
RDB ve RDB yapilarinin izoelektrik noktalari, izoelektrik odaklama kullanilarak ölçülür (Sekil 18). Tüm yapilar, proteinin Pl'si etrafinda birden fazla bant ile birlikte yüke göre heterojendir. Proteinin Pl'lari, O-glikanlarin büyük ölçüde siyaliklesmedigi varsayilarak, polipeptit dizilimine bagli olarak hesaplanan Pl'lari ile büyük ölçüde hizalidir. Bantlarin çoklugu, büyük ölçüde N-glikosilasyondaki farkliliklar nedeniyledir.
Tüm yapilar, bir Superdex 200 kolonu (Sekiller 2-6) üzerinde analitik jel filtrasyonu ile karakterize edilir. Jel filtrasyonu, natif kosullar altinda hidrodinamik hacimlerine bagli olarak proteinleri ayirir (yani, SDS/PAGE gibi degildir, denatüre edici degildir). Ayrisma zamanlari, bilinmeyen bir globüler proteine yönelik görünür moleküler agirligin hesaplanabilecegi sekilde, globüler protein standartlari ile kalibre edilebilir. Ayrisma zamaninin, gerçek moleküler agirliktan ziyade daha direkt olarak hidrodinamik yariçapa bagli olmasi ile, hesaplanan molkeüler agirliklarina göre büyük ölçüde daha yüksek olan görünür moleküler agirliklar, globüler olmayan (yani, uzatilmis veya kablo benzeri) yapilar, yüksek glikosilasyon seviyeleri ve/veya yüksek hidrasyon seviyeleri öne sürer. 230kDidir (Sekiller 2-6). Tüm üsin yapilarinin görünür moleküler agirliklari, hem hesaplanmis moleküler agirliklarindan (yalnizca amino asit dizilimine bagli olarak) hem de SDS/PAGE üzerindeki hareketliliklerinden daha yüksektir. Bu gözlemler. yüksek glikosilasyon seviyesi ve müsin yapilarinin beklenen kablo benzeri yapilarinin her ikisi ile de tutarlidir. Örnek 3. Müsin-lL-1Ra Yawrinin Antagonist A_ktiviteleri HEK-BIueT'V' IL-1ß hücreleri (Invivogen), NF-KB/AP-1 salgilayan bir embriyonik alkalin fosfataz (SEAP) raporlayici genin lL-1ß-kaynakli ifadesi ile in vitro biyoaktif IL-1ß saptamak üzere spesifik olarak tasarlanmis insan embriyonik böbrek hücreleridir.
SEAP, SEAP saptama ortami QUANTI-BlueTM (Invivogen) kullanilmasi durumunda kolay sekilde izlenebilir. IL-1Ra, IL-1RAcP baglanmasini ve dolayisiyla tam sinyal kompleksinin toplanmasini önleyen IL-1RI baglayarak bu IL-1ß-kaynakli sinyali inhibe eder. Müsin-IL1Ra yapilari RDB, RDB, IL-1ß-kaynakli SEAP'yi inhibe etme yetenegi degerlendirilir. Kaynasmis bir müsin etki alani eksik olan HEK-BlueTM IL-1ß hücreleri içeren 100 uL ortam, 50,000 hücre/çukurcuk nihai konsantrasyonunda 96-çukurcuklu mikrotitre plakasina yerlestirilir. Müsin-IL1Ra yapilari RDB, (RDB baslangiç konsantrasyonlarinda hazirlanir ve akabinde seri olarak seyreltilir ve ikili test numunelerinde HEK-BlueTM IL-1ß hücrelerine eklenir. 0.015nM'deki IL-1ß, yalnizca SEAP. 0.117 nM IL-1ß'yi uyarmak üzere tüm test numunelerinde kullanilir ve 11.76 nM boyunca 37°C'de inhibe edilir ve QUANTI-BIueT'V'tahIili kullanilarak degerlendirilir.
Müsin-ILIRa yapilari RDB, RDB1826 (IL1Ra 6TR), RDB, kontrol (modifiye edilmemis inhibitör aktivitesi, modifiye edilmemis IL1Ra (müsinlestirilmemis) protein kontrolünün birkaç kati içerisindedir. Örnek 4. Müsin-ll_.-1Ra'nin ll=-1Rl've B_aglanma_Afinitesi bir BiacoreT'V' Sensor Chip üzerinde hareketsiz hale getirilir. Modifiye edilmemis IL-1Ra (pozitif baglanma kontolü), RDB, RDB, çip üzerinde 5 spesifik yapinin 0.24nM konsantrasyonu, çipin yüzeyi üzerindeki bagli Iigant üzerinden 180 saniye boyunca akitilit, akabinde, analitin ayrilmasina olanak verilmesine yönelik yüzey üzerinden bir bos solüsyon geçirilir. Ayni prosedür, her bir yapi için 0.74 ila 20nM arasinda yükselen bir konsantrasyon kullanilarak ek olarak dört kez tekrarlanir. Ortaya çikan sensörgramlar, yapilarin baglanma afinitelerinin hesaplanmasina yönelik natif enstrüman yazili ile analiz edilir (Sekiller 10-14).
Hücre temelli tahlilden alinan aktivite verileri ile tutarli olarak, tüm yapilar, IL-1Rl'ye yönelik potent baglanma afinitesi gösterir. RDB, RDB1814 (IL1Ra 4TR), RDB ve QOOpM'dir. Dolayisiyla, müsinlestirilmis yapilarin baglanma afiniteleri, KD degerinin 52pM oldugu belirlenen modifiye edilmemis IL-1Ra'dan , 1.2-kat (RDB daha yüksektir. IL-1Rl'ye en zayif afinite gösteren yapinin (yani, RDB1816), seriler içinde en yüksek müsin tandem tekrar sayisina (12TR) sahip olduguna dikkat edilmesi önemlidir.
RDB1816'nin afinitesindeki kayip, bu nedenle tamamen, modifiye edilmemis IL-1Ra nedeniyle, belki de, RDB1816'nin (Kd= 1.4 x 104) ayrilma hizinin (Kd) modifiye edilmemis IL-1Ra (Kd: 1.5 X 104) ile ayni olmasi nedeniyle, daha düsük bir yuvarlanma hizi nedeniyledir (Sekil 14). Örnek 5. RDB1816”nin in Vivo Etkinligi RDB1816'in (IL1Ra 12TR) etkinligi ve aksiyon süresi, fare kolajen-antikor-kaynakli- artrit (CAIA) modelinde degerlendirilir. Modifiye edilmemis lL-1Ra, 6 mg/kg/saat hizda sürekli olarak infüze edilmesi durumunda bu model içinde aktiftir, ancak, çok düsük yari ömrg nedeniyle tek bir 20 mg/kg dozda herhangi bir etkiye sahip degildir.
Fare CAIA modeline yönelik deneysel tasarim, n'in grup basina 8 fare oldugu Sekil ,te açiklanir. Kisaca, artrit, farelerde, bir anti-kolajen antikor kokteylini intavenöz (IV) olarak enjeksiyonu ile baslatilir. 3 gün sonrasinda, enflamatuar tepki, bir intraperitoneal (IP) lipopolisakkarit (LPS) enjeksiyonu ile yükseltilir, ayni zamanda, test bilesikler RDB1816 (20mg/kg) ve anakinra (modifiye edilmemis lL-1Ra, 20 mg/kg) ve bir salin kontrolü subkütanöz olarak (SC) verilir. Pati hacmi, enflamasyon derecesinin belirlenmesine yönelik birden fazla gün boyunca ölçülür.
Fare CAIA deneyinin sonuçlari Sekil 16'da gösterilir. Anakinraya tabi tutulmus grup, salin kontrole bagli olarak enflamasyonda azalma göstermez. Bu, bu modelde sürekli anakinra infüzyonunun etkili olmasi nedeniyle, düsük maruz kalma ile sonuçlanan kisa yari ömür nedeniyledir. Isaretli kontrastlarda, saline maruz tutulmus ve anakinraya maruz tutulmus gruplarin her ikisine göre, RDB1816lya maruz tutulan farelerde pati hacminde belirgin bir azalma gözlenir. Dolayisiyla, müsinilasyon, bir farmakodinamik etki ortaya çikarmak üzere IL-1Ra molekülünün maruz kalmasini yeterince artirmistir. Örnek 6. RDB1815 ve R_D_B1816,nin Farmakokinetikleri (PK) Siradaki iki IL-1Ra-müsin füzyon polipeptit yapisinin yari ömrünün belirlenmesine yönelik siçanlarda bir farmakokinetik çalisma yürütülür: RDB1815 ve RDB1816. Dozaj grubu basina n=3 siçan olmak üzere, tek bir RDB1815 dozu, subkütanöz olarak (5.6mg/Kg) veya intravenöz olarak (2.1mg/Kg) verilir ve tek bir RDB1816 dozu, subkütanöz olarak (6.4mg/Kg) veya intravenöz olarak (2.4mg/Kg) verilir. 6 gün boyunca çesitli zaman noktalarinda kan alinir ve ELISA ile IL-1Ra'ya yönelik analiz edilir. yönelik, 17.9 saat ve 13.9 saat yari ömürleri ve SC durumunda sirasiyla 11.0 saat ve 8.0 saat yari ömürleri hesaplanir. Bu, modifiye edilmemis lL-1Ra kontrolüne (Anakinra) yönelik raporlanan degerler üzerinde 10-kat ve 14-kat arasinda yari ömür uzamasini ifade eder. Dolayisiyla, RDB1815 ve RDB1816”nin her ikisinin maruz kalmasi, fare CAIA modelinde gözlemlenen etkinlik ile tutarli olarak, büyük ölçüde artar. Örnek 7. Müsin-Eksendin-4 Yapisi RDB2203'ün Moleküler Agirligi RDBZ203, bir Superdex 200 kolonu üzerinde SDS/PAGE ve analitik jel filtrasyonu kullanilara karakterize edilir. SDS/PAGE ile, RDB2203'ün görünür moleküler agirligi yaklasik 45kD, hesaplanan polipeptit moleküler agirligi olan 22.8kD'un yaklasik iki katidir, bu, yüksek bir glikosilasyon seviyesi ile tutarlidir (Sekil 18: soldaki moleküler isaretleyiciler). Analitik jel filtrasyonu ile, RDB2203`ün görünür moleküler agirligi, yüksek derecede glikosile müsin etki alaninin yol açtigi genis hidrodinamik yariçap Örnek 8. RDB2203'ün Biyoaktivitesi RD82203'ün GLP-1 reseptörünü agonize etme yetenegi, DiscoveRX PathHunter eXpress GLP-1 reseptörü CAMP tahlili kullanilarak ölçülür. Tahlil, üreticinin talimatlarina göre gerçeklestirilir. Sonuç, RDB2203'ün, modifiye edilmemis eksendin-4'e (0.07nM E050) göre yaklasik 21-kat daha az potent olan, 1.5nM degerindeki bir ECso göstererek, GLP-l reseptörünün bir potent agonisti oldugunu belirtir (Sekil 20). Örnek 9. RDB2203'ün Farmakokinetjk Profili RDBZ203, farelerde intravenöz olarak 0.65mg/kglde ve subkütanöz olarak 0.65mg/kg ve 7.0mg/kg'de dozlanir. Müsinlestirilmemis eksendin-41'e göre, RD82203, toplam maruz kalmada bir atis ile sonuçlanmak üzere, yari ömürde bir artis (2.0 saate karsilik 0.5 saat, iv) ve berraklikta azalma (74 mI/saat/kg'ye karsili gösterir RD82203 ayrica, modifiye edilmemis eksendin-4'e yönelik %65'e göre iyilesmis bir biyoelverislilik >%95 gösterir (Sekil 21 ).
Burada refere edilen patent ve bilimsel literatür, teknikte uzman kisilerin bilgisini olusturur.
Bu bulus, tercih edilen düzenlemelere referansla belirli olarak gösterilirken ve açiklanirken, teknikte uzman kisiler tarafindan, ekli istemlerde belirtilen bulusun kapsami disina çikilmadan sekil ve detaylarda çesitli degisikliklerin yapilabilecegi anlasilacaktir. Burada açiklanan düzenlemelerin karsilikli olarak münhasir olmadigi ve çesitli düzenlemelerin özelliklerinin, bulusa bagli kalinarak bütün veya kismi olarak kombine edilebilecegi anlasilmalidir.

Claims (1)

  1. ISTEMLER . Bir füzyon proteini olup. özelligi opsiyonel bir baglayici araciligiyla en az bir aktif proteine bagli olan bir müsin etki alanli polipeptit içermesidir, burada müsin etki alanli polipeptit glikosiledir ve SEO ID NO:20 veya en az %90 amino asit benzerligi ile homolog olan herhangi bir amino asit dizilimi içerir, burada aktif protein lL-1Ra veya eksendin-4 veya en az %90 amino asit benzerligi ile homolog olan herhangi bir amino asit dizilimidir; ve burada füzyon proteininin yari ömrü, müsin etki alanli polipeptit ile kaynasmamis olan ilgili aktif proteinin yari ömrü ile karsilastirildiginda iki-kat daha yüksektir. . Istem 1'deki füzyon proteini olup, özelligi müsin etki alanli polipeptidin, SEQ ID NO: 20'nin en az iki tandem tekrarini içermesidir. . Istem 1'deki füzyon proteini olup, özelligi füzyon proteininin görünür moleküler agirliginin, füzyon proteininin hesaplanan moleküler agirligindan daha yüksek olmasidir. . Istem 1'deki füzyon proteini olup, özelligi füzyon proteininin, SEQ ID NO: 1'in 4- 200 amino asitlerini içermesidir. . Istem 1'deki füzyon proteini olup, özelligi füzyon proteininin, SEQ ID NO: 3'ün 4- 245 amino asitlerini içermesidir. . Istem 1ideki füzyon proteini olup, özelligi füzyon proteininin, SEQ ID NO: 5'in 4- 283 amino asitlerini içermesidir. . Istem iideki füzyon proteini olup, özelligi füzyon proteininin, SEQ ID NO: 7'nin 4-335 amino asitlerini içermesidir. . Istem 1'deki füzyon proteini olup, özelligi füzyon proteininin, SEQ ID NO: 9'un 4- 425 amino asitlerini içermesidir. Istem 1'deki füzyon proteini olup, özelligi SEQ ID NO: 24'ün 1-224 amino asitlerini içermesidir. Istemler 1-9'dan herhangi birindeki füzyon proteinini kodlayan bir polinükleotit dizilimi içeren bir izole nükleik asittir. Istem 10'daki polinükleotit dizilimini içeren bir ifade vektörü olup, özelligi tercihen ayrica, polinükleotit dizilimine uygulanabilir bir sekilde bagli olan bir rek0mbinant düzenleyici dizilim içermesidir. istem 11”deki ifade vektörünü içeren bir konak hücredir. Bir terapötik aktif proteinin serum yari ömrünün artirilmasina yönelik bir yöntem olup, özelligi asagidaki adimlari içermesidir: a) bir terapötik aktif proteinin saglanmasi, burada aktif protein, lL-1Ra veya eksendin-4 veya en az %90 dizilim benzerligi ile buna benzeyen herhangi bir amino asittir; b) bir füzyon proteininin olusturulmasina yönelik SEQ ID NO:20 içeren bir müsin etki alanli polipeptite terapötik aktif proteinin baglanmasi; ve o) bir denege terapötik olarak etkili bir dozun verilmesi sonrasinda füzyon proteininin yari ömrünün ölçülmesi ve yari ömrün, kiyaslanabilir bir terapötik dozda verilmesi durumunda yalnizca ilgili terapötik protein ile karsilastirildiginda iki-kat artmis oldugunun belirlenmesidir. istem 13'deki yöntem olup, özelligi müsin etki alanli polipeptidin, SEQ ID NO: 20'nin en az iki tandem tekrarini içermesidir. Istem 13'deki yöntem olup, özelligi baglama adiminin, aktif proteinin bir amino asit baglayicisi araciligiyla bir müsin etki alanli polipeptide baglanmasini içermesidir. Istemler 1-9'dan herhangi birindeli füzyon proteinini ve en az bir farmasötik olarak kabul edilebilir tasiyici içeren birfarmasötik bilesimdir. 17. Tipta kullanima yönelik istem 16'ya göre birfarmasötik bilesimdir. 18.8iradakiler arasindan seçilen bir hastalik veya bozuklugun tedavi edilmesine yönelik bir yöntemde kullanilmak üzere Istem 17'nin kullanimina yönelik bir farmasötik bilesimdir: tip 2 diyabet, hemofili, nötropeni, anemi, trombositopeni, romatoid artrit, Crohn hastaligi, sedef hastaligi, psoriatik artrit, ankilozan spondilit, osteoartrit.
TR2018/09046T 2012-06-08 2013-06-06 Bir müsin etki alanlı polipeptide bağlı bir aktif protein içeren füzyon polipeptitleri. TR201809046T4 (tr)

Applications Claiming Priority (6)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201261657285P 2012-06-08 2012-06-08
US201261657264P 2012-06-08 2012-06-08
US201261657378P 2012-06-08 2012-06-08
US201261723081P 2012-11-06 2012-11-06
US201361778575P 2013-03-13 2013-03-13
US201361778812P 2013-03-13 2013-03-13

Publications (1)

Publication Number Publication Date
TR201809046T4 true TR201809046T4 (tr) 2018-07-23

Family

ID=49712642

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TR2018/08753T TR201808753T4 (tr) 2012-06-08 2013-06-06 Agonistler ve antagonistler olarak dairesel permütasyon tarafından modifiye edilmiş ligandlar.
TR2018/09046T TR201809046T4 (tr) 2012-06-08 2013-06-06 Bir müsin etki alanlı polipeptide bağlı bir aktif protein içeren füzyon polipeptitleri.

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TR2018/08753T TR201808753T4 (tr) 2012-06-08 2013-06-06 Agonistler ve antagonistler olarak dairesel permütasyon tarafından modifiye edilmiş ligandlar.

Country Status (20)

Country Link
US (8) US9156897B2 (tr)
EP (5) EP2858672B1 (tr)
JP (7) JP6322626B2 (tr)
AU (3) AU2013271545C1 (tr)
CA (3) CA2869787C (tr)
CY (2) CY1120522T1 (tr)
DK (2) DK3401402T3 (tr)
ES (4) ES2675784T3 (tr)
HK (3) HK1203969A1 (tr)
HR (2) HRP20180914T1 (tr)
HU (2) HUE037849T2 (tr)
LT (2) LT2859015T (tr)
ME (1) ME03079B (tr)
NZ (4) NZ630849A (tr)
PL (2) PL3401402T3 (tr)
PT (2) PT3401402T (tr)
RS (2) RS57369B1 (tr)
SI (2) SI3401402T1 (tr)
TR (2) TR201808753T4 (tr)
WO (3) WO2013184938A2 (tr)

Families Citing this family (71)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP6322626B2 (ja) * 2012-06-08 2018-05-09 アルカーメス，インコーポレイテッド ムチン−ドメインポリペプチドリンカーを含む融合ポリペプチド
WO2016100788A1 (en) 2014-12-19 2016-06-23 Alkermes, Inc. Single chain fc fusion proteins
US11938193B2 (en) 2016-01-08 2024-03-26 Washington University Compositions comprising chemerin and methods of use thereof
JP7084881B2 (ja) 2016-06-22 2022-06-15 アルカームス インコーポレーテッド Ｉｌ－１０の免疫刺激特性および抗炎症特性を調節するための組成物および方法
WO2018011803A1 (en) 2016-07-11 2018-01-18 The National Institute for Biotechnology in the Negev Ltd. Fusion proteins with extended serum half life
EP3600429B1 (en) * 2017-03-20 2023-10-25 Bio-Techne Corporation Il-37 fusion protein and methods of making and using same
KR101784288B1 (ko) * 2017-04-26 2017-10-11 (주)넥스젠바이오텍 피부 세포 증식 효과가 증가한 성장 분화 인자 11과 열 충격 단백질 10의 융합단백질 및 이를 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물
KR101800200B1 (ko) 2017-05-26 2017-11-23 (주)넥스젠바이오텍 항산화 활성 및 피부 세포 증식 효과가 증가한 성장 분화 인자 11과 상피세포 성장인자의 융합단백질 및 이를 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물
CN111051506B (zh) 2017-06-27 2023-11-24 科德克希思公司 青霉素g酰化酶
CN107362351B (zh) * 2017-09-04 2020-11-10 上海市儿童医院 Il-36r的拮抗剂在制备镇痛药物中的应用
JP2021506291A (ja) 2017-12-19 2021-02-22 ゼンコア インコーポレイテッド 改変されたｉｌ−２ ｆｃ融合タンパク質
JP2021511785A (ja) 2018-01-19 2021-05-13 ペプジーン インコーポレーテッドＰｅｐｇｅｎｅ Ｉｎｃ． 組換えポリペプチド生産用ｎ末端融合パートナーおよびこれを用いた組換えポリペプチドの生産方法
MX2020009975A (es) * 2018-03-28 2020-10-12 Bristol Myers Squibb Co Proteinas de fusion interleucina-2/receptor alfa de interleucina-2 y metodos de uso.
CN112041333A (zh) * 2018-04-26 2020-12-04 古德T细胞有限公司 新型融合蛋白和用于预防或治疗癌症的包含该融合蛋白的药物组合物
CN108948178A (zh) * 2018-07-20 2018-12-07 安他杰（杭州）生物医药科技有限公司 一种改良的人il-37蛋白及其应用
CN109251896A (zh) * 2018-08-13 2019-01-22 中山大学 一株高表达hKLs-his蛋白的细胞株及其制备方法和应用
US11246906B2 (en) * 2019-06-11 2022-02-15 Alkermes Pharma Ireland Limited Compositions and methods for subcutaneous administration of cancer immunotherapy
JP7355326B2 (ja) * 2019-08-05 2023-10-03 デンカ株式会社 経粘膜投与薬剤
BR112022007158A2 (pt) 2019-10-18 2022-07-05 Alkermes Pharma Ireland Ltd Agentes imunomodulatórios de il-2 em combinação com inibidores do ponto de verificação imunológico
MX2022007754A (es) 2019-12-20 2022-07-19 Regeneron Pharma Nuevos agonistas de il2 y metodos de uso de estos.
CN116925237A (zh) * 2019-12-31 2023-10-24 北京质肽生物医药科技有限公司 Glp-1和gdf15的融合蛋白以及其缀合物
IL294901A (en) * 2020-01-24 2022-09-01 Alkermes Pharma Ireland Ltd Methods for purification
EP3946612A1 (en) * 2020-03-21 2022-02-09 Larix Biosciences LLC Bispecific and trispecific functional molecules of ace2 and complement pathways and their use
IL297279A (en) * 2020-04-15 2022-12-01 Alkermes Pharma Ireland Ltd Immunostimulants in combination with blood vessel formation inhibitors
MX2022012982A (es) * 2020-04-15 2023-03-06 Alkermes Pharma Ireland Ltd Agentes inmunoestimulantes en combinación con inhibidores de la angiogénesis.
EP4139440A1 (en) 2020-04-22 2023-03-01 Iovance Biotherapeutics, Inc. Systems and methods for coordinating manufacturing of cells for patient-specific immunotherapy
EP4146794A1 (en) 2020-05-04 2023-03-15 Iovance Biotherapeutics, Inc. Processes for production of tumor infiltrating lymphocytes and uses of the same in immunotherapy
JP2023524108A (ja) 2020-05-04 2023-06-08 アイオバンス バイオセラピューティクス，インコーポレイテッド 改良された腫瘍反応性ｔ細胞の選択
AU2021270745A1 (en) * 2020-05-11 2022-12-15 Alkermes Pharma Ireland Limited IL-2 fusion polypeptide compositions and methods of making and using the same
AU2021269585A1 (en) * 2020-05-11 2022-12-15 Alkermes Pharma Ireland Limited IL-2 fusion polypeptide compositions and methods of making and using the same
CN111662973B (zh) * 2020-05-28 2023-08-25 广州医科大学附属第一医院（广州呼吸中心） 与慢性阻塞性肺疾病易感性辅助诊断相关的snp位点及其应用
CN111826400A (zh) * 2020-07-21 2020-10-27 中科宝承生物医学科技有限公司 一种双特异性抗体nk细胞制备方法及其细胞和应用
JP2023546359A (ja) 2020-10-06 2023-11-02 アイオバンス バイオセラピューティクス，インコーポレイテッド 腫瘍浸潤リンパ球療法によるｎｓｃｌｃ患者の治療
WO2022076606A1 (en) 2020-10-06 2022-04-14 Iovance Biotherapeutics, Inc. Treatment of nsclc patients with tumor infiltrating lymphocyte therapies
WO2022098954A1 (en) 2020-11-06 2022-05-12 Nektar Therapeutics Tlr agonist compounds and related cancer immunotherapy methods
WO2022099695A1 (en) * 2020-11-16 2022-05-19 Jiangsu Cell Tech Medical Research Institute Co., Ltd. Cd164 fusion and uses thereof
CA3201818A1 (en) 2020-12-11 2022-06-16 Maria Fardis Treatment of cancer patients with tumor infiltrating lymphocyte therapies in combination with braf inhibitors and/or mek inhibitors
AU2021401302A1 (en) 2020-12-17 2023-07-06 Iovance Biotherapeutics, Inc. Treatment with tumor infiltrating lymphocyte therapies in combination with ctla-4 and pd-1 inhibitors
US20240123067A1 (en) 2020-12-17 2024-04-18 Iovance Biotherapeutics, Inc. Treatment of cancers with tumor infiltrating lymphocyte therapies
TW202242085A (zh) 2020-12-31 2022-11-01 美商艾歐凡斯生物治療公司 供自動生產腫瘤浸潤淋巴球的裝置和方法
TW202241508A (zh) 2021-01-29 2022-11-01 美商艾歐凡斯生物治療公司 細胞介素相關之腫瘤浸潤性淋巴球組合物及方法
WO2022170219A1 (en) 2021-02-05 2022-08-11 Iovance Biotherapeutics, Inc. Adjuvant therapy for cancer
WO2022187741A2 (en) 2021-03-05 2022-09-09 Iovance Biotherapeutics, Inc. Tumor storage and cell culture compositions
CA3212439A1 (en) 2021-03-19 2022-09-22 Michelle SIMPSON-ABELSON Methods for tumor infiltrating lymphocyte (til) expansion related to cd39/cd69 selection and gene knockout in tils
IL306072A (en) 2021-03-25 2023-11-01 Iovance Biotherapeutics Inc Methods and preparations for T-cell coculture potency assays and use with cellular therapy products
WO2022200525A1 (en) 2021-03-26 2022-09-29 Innate Pharma Multispecific proteins comprising an nkp46-binding site, a cancer antgienge binding site fused to a cytokine for nk cell engaging
BR112023021665A2 (pt) 2021-04-19 2023-12-19 Iovance Biotherapeutics Inc Método para tratar um câncer, e, composição
WO2022245754A1 (en) 2021-05-17 2022-11-24 Iovance Biotherapeutics, Inc. Pd-1 gene-edited tumor infiltrating lymphocytes and uses of same in immunotherapy
EP4352098A1 (en) 2021-06-09 2024-04-17 Innate Pharma Multispecific proteins binding to nkp46, a cytokine receptor, a tumour antigen and cd16a
WO2022258678A1 (en) 2021-06-09 2022-12-15 Innate Pharma Multispecific proteins binding to nkp30, a cytokine receptor, a tumour antigen and cd16a
WO2022258691A1 (en) 2021-06-09 2022-12-15 Innate Pharma Multispecific proteins binding to nkg2d, a cytokine receptor, a tumour antigen and cd16a
WO2023004074A2 (en) 2021-07-22 2023-01-26 Iovance Biotherapeutics, Inc. Method for cryopreservation of solid tumor fragments
CA3226942A1 (en) 2021-07-28 2023-02-02 Iovance Biotherapeutics, Inc. Treatment of cancer patients with tumor infiltrating lymphocyte therapies in combination with kras inhibitors
CN113735980A (zh) * 2021-08-23 2021-12-03 中国医学科学院北京协和医院 一种自融合串联蛋白修饰方法及其应用
CA3231018A1 (en) 2021-09-09 2023-03-16 Iovance Biotherapeutics, Inc. Processes for generating til products using pd-1 talen knockdown
CA3232700A1 (en) 2021-09-24 2023-03-30 Rafael CUBAS Expansion processes and agents for tumor infiltrating lymphocytes
CA3235824A1 (en) 2021-10-27 2023-05-04 Frederick G. Vogt Systems and methods for coordinating manufacturing of cells for patient-specific immunotherapy
WO2023086803A1 (en) 2021-11-10 2023-05-19 Iovance Biotherapeutics, Inc. Methods of expansion treatment utilizing cd8 tumor infiltrating lymphocytes
WO2023086772A1 (en) 2021-11-12 2023-05-19 Xencor, Inc. Bispecific antibodies that bind to b7h3 and nkg2d
WO2023147486A1 (en) 2022-01-28 2023-08-03 Iovance Biotherapeutics, Inc. Tumor infiltrating lymphocytes engineered to express payloads
WO2023147488A1 (en) 2022-01-28 2023-08-03 Iovance Biotherapeutics, Inc. Cytokine associated tumor infiltrating lymphocytes compositions and methods
WO2023196877A1 (en) 2022-04-06 2023-10-12 Iovance Biotherapeutics, Inc. Treatment of nsclc patients with tumor infiltrating lymphocyte therapies
WO2023201369A1 (en) 2022-04-15 2023-10-19 Iovance Biotherapeutics, Inc. Til expansion processes using specific cytokine combinations and/or akti treatment
WO2023220608A1 (en) 2022-05-10 2023-11-16 Iovance Biotherapeutics, Inc. Treatment of cancer patients with tumor infiltrating lymphocyte therapies in combination with an il-15r agonist
WO2023235790A1 (en) * 2022-06-01 2023-12-07 University Of Miami Bifunctional il-2 and il-10 fusion proteins and uses thereof
WO2024011114A1 (en) 2022-07-06 2024-01-11 Iovance Biotherapeutics, Inc. Devices and processes for automated production of tumor infiltrating lymphocytes
CN117003852A (zh) * 2022-07-07 2023-11-07 北京大学 白细胞介素-2的拓扑改造及其作为自身免疫病药物的应用
WO2024030758A1 (en) 2022-08-01 2024-02-08 Iovance Biotherapeutics, Inc. Chimeric costimulatory receptors, chemokine receptors, and the use of same in cellular immunotherapies
WO2024055017A1 (en) 2022-09-09 2024-03-14 Iovance Biotherapeutics, Inc. Processes for generating til products using pd-1/tigit talen double knockdown
WO2024055018A1 (en) 2022-09-09 2024-03-14 Iovance Biotherapeutics, Inc. Processes for generating til products using pd-1/tigit talen double knockdown
CN117106024A (zh) * 2022-10-21 2023-11-24 南京市妇幼保健院 一种人血清多肽agdmp1及其在改善胰岛素抵抗中的应用

Family Cites Families (75)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3992518A (en) 1974-10-24 1976-11-16 G. D. Searle & Co. Method for making a microsealed delivery device
US5916588A (en) 1984-04-12 1999-06-29 The Liposome Company, Inc. Peptide-containing liposomes, immunogenic liposomes and methods of preparation and use
IE60901B1 (en) 1986-08-21 1994-08-24 Vestar Inc Improved treatment of systemic fungal infections with phospholipid particles encapsulating polyene antifungal antibiotics
US5872095A (en) 1990-05-01 1999-02-16 Chiron Corporation IL-1 receptor antagonists medicaments
US5824549A (en) 1990-10-09 1998-10-20 Chiron Corporation Transformed human T cell
US5635599A (en) 1994-04-08 1997-06-03 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Fusion proteins comprising circularly permuted ligands
IT1270662B (it) 1994-10-13 1997-05-07 Applied Research Systems Antagonista della interleuchina-1
US5837495A (en) 1994-10-13 1998-11-17 Applied Research Systems Ars Holding N.V. DNA encoding interleukin-1 antagonist
US5660848A (en) 1994-11-02 1997-08-26 The Population Council, Center For Biomedical Research Subdermally implantable device
US6518061B1 (en) 1995-03-15 2003-02-11 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services IL-13 receptor specific chimeric proteins and uses thereof
US5614191A (en) 1995-03-15 1997-03-25 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services IL-13 receptor specific chimeric proteins and uses thereof
US6096728A (en) 1996-02-09 2000-08-01 Amgen Inc. Composition and method for treating inflammatory diseases
AU714992B2 (en) 1996-08-23 2000-01-13 Alza Corporation Liposomes containing a cisplatin compound
US6056973A (en) 1996-10-11 2000-05-02 Sequus Pharmaceuticals, Inc. Therapeutic liposome composition and method of preparation
EP0932390A1 (en) 1996-10-11 1999-08-04 Sequus Pharmaceuticals, Inc. Therapeutic liposome composition and method
US5969105A (en) 1996-10-25 1999-10-19 Feng; Yiqing Stem cell factor receptor agonists
CZ130199A3 (cs) 1996-10-25 1999-07-14 G. D. Searle & Co. Cirkulárně permutovaní agonisté receptoru erythropoietinu
US6294170B1 (en) 1997-08-08 2001-09-25 Amgen Inc. Composition and method for treating inflammatory diseases
ATE338768T1 (de) 1997-10-31 2006-09-15 Biomira Inc Muc-1 derivate und deren verwendung zur behandlung von krebsassoziierter muc-1 mucin induzierter immunosuppression
US6562347B1 (en) * 1998-03-12 2003-05-13 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Chemokine-tumor antigen fusion proteins as cancer vaccines
AU3380099A (en) 1998-04-03 1999-10-25 University Of Washington Circularly permuted biotin binding proteins
ES2235836T3 (es) 1999-03-03 2005-07-16 Optinose As Dispositivo de entrega nasal.
US6808902B1 (en) * 1999-11-12 2004-10-26 Amgen Inc. Process for correction of a disulfide misfold in IL-1Ra Fc fusion molecules
JP2003514552A (ja) * 1999-11-12 2003-04-22 メルク パテント ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフトング 改善された性質を有するエリトロポエチンの形態
AU2001236475A1 (en) 2000-01-13 2001-07-24 Panorama Research, Inc. Circularly permutated, interaction-activated proteins
US6497870B1 (en) 2000-05-22 2002-12-24 Hyseq, Inc. Therapeutic uses of il-1 receptor antagonist
US7446183B2 (en) * 2000-06-16 2008-11-04 Asterion Limited Fusion protein comprising growth hormone and growth hormone receptor
PT1317273E (pt) 2000-09-14 2006-09-29 Ares Trading Sa Utilizacao de quimera il-6r/il-6 na doenca de huntington
WO2002046227A2 (en) * 2000-12-07 2002-06-13 Eli Lilly And Company Glp-1 fusion proteins
PL362412A1 (en) 2001-02-06 2004-11-02 Merck Patent Gmbh Modified interleukin-1 receptor antagonist (il-1ra) with reduced immunogenicity
US7355017B2 (en) * 2001-07-20 2008-04-08 Absorber Ab Blood group antigen fusion polypeptides and methods of use thereof
US7214660B2 (en) * 2001-10-10 2007-05-08 Neose Technologies, Inc. Erythropoietin: remodeling and glycoconjugation of erythropoietin
US7157277B2 (en) 2001-11-28 2007-01-02 Neose Technologies, Inc. Factor VIII remodeling and glycoconjugation of Factor VIII
IL147412A0 (en) 2001-12-31 2002-08-14 Yeda Res & Dev The use of il6r/il6 chimera in nerve cell regeneration
EP1499724B1 (en) * 2002-04-18 2013-05-22 Yeda Research And Development Co., Ltd. Derivatives of the il-2 receptor gamma chain, their production and use
JP2005530493A (ja) 2002-04-22 2005-10-13 レコファーマ アーベー ムチン融合ポリペプチドワクチン、組成物およびそれらの使用方法
US20080241166A1 (en) 2002-06-28 2008-10-02 Domantis Limited Ligands that bind a receptor
JP4648001B2 (ja) 2002-08-09 2011-03-09 レコファーマ アーベー ムチン−免疫グロブリン融合タンパク質
US20040175359A1 (en) 2002-11-12 2004-09-09 Desjarlais John Rudolph Novel proteins with antiviral, antineoplastic, and/or immunomodulatory activity
JP2006517191A (ja) * 2002-12-30 2006-07-20 アムジエン・インコーポレーテツド 共刺激因子を用いた併用療法
GB0315182D0 (en) * 2003-06-28 2003-08-06 Asterion Ltd Cytokine variant polypeptides
WO2005034863A2 (en) * 2003-10-03 2005-04-21 Jarikuma Corporation Countermeasures against malaria
US8129506B2 (en) * 2003-10-24 2012-03-06 Genzyme Corporation Modulation of the interaction of MUC1 with MUC1 ligands
US8454963B2 (en) * 2003-11-13 2013-06-04 Musc Foundation For Research Development Tissue targeted complement modulators
US7576183B2 (en) * 2003-12-24 2009-08-18 Los Alamos National Security, Llc Structure-based receptor MIMICS targeted against bacterial superantigen toxins
US8338138B2 (en) 2004-01-28 2012-12-25 The John Hopkins University Methods for making and using molecular switches involving circular permutation
US7619066B2 (en) 2004-04-02 2009-11-17 Amgen Inc. IL-1ra variants
WO2005021578A2 (en) 2004-08-25 2005-03-10 Amprotein Corporation A novel chimeric polypeptide and use thereof
AU2005309854A1 (en) * 2004-11-24 2006-06-01 Therakine Ltd. An implant for intraocular drug delivery
EP1851324B1 (en) 2005-02-10 2012-10-24 Emory University Novel proteins with enhanced functionality and methods of making novel proteins using circular permutation
ES2359645T3 (es) * 2005-08-12 2011-05-25 Riken Glucoproteína de tipo mucina y su uso.
EP1777294A1 (en) * 2005-10-20 2007-04-25 Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) IL-15Ralpha sushi domain as a selective and potent enhancer of IL-15 action through IL-15Rbeta/gamma, and hyperagonist (IL15Ralpha sushi -IL15) fusion proteins
US20100016547A1 (en) * 2005-11-30 2010-01-21 Takaomi Ito Glycosilated Peptide and Medicine Comprising It as an Effective Ingredient
EP1792914B1 (en) * 2005-12-02 2009-07-29 Apceth GmbH & Co. KG Chemokine-mucin fusions linked to Glycosylphosphatidylinositol (GPI)-anchors in tissue regeneration and as tumour immune adjuvants
GB0606946D0 (en) 2006-04-06 2006-05-17 Asterion Ltd Polypeptide antagonist
US20100063258A1 (en) 2006-06-28 2010-03-11 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Fusion protein constructs
EP2114999A2 (en) 2006-12-12 2009-11-11 Biorexis Pharmaceutical Corporation Transferrin fusion protein libraries
US8618324B2 (en) * 2007-03-13 2013-12-31 Board Of Regents, The University Of Texas System Composition and method for making oligo-benzamide compounds
WO2008133928A2 (en) 2007-04-27 2008-11-06 The Gi Company, Inc. Mucin glycoproteins and their use for treatment of epithelial lesions and mucin dependent disorders
CA2695374A1 (en) * 2007-08-15 2009-02-19 Amunix, Inc. Compositions and methods for modifying properties of biologically active polypeptides
DE102007049830A1 (de) 2007-10-16 2009-04-23 Henkel Ag & Co. Kgaa Neue Proteinvarianten durch zirkulare Permutation
EP2050759A1 (en) 2007-10-19 2009-04-22 CONARIS research institute AG Soluble gp 130 muteins with improved binding activity
US9687559B2 (en) 2008-03-19 2017-06-27 The Board Of Regents Of The University Of Oklahoma Heparosan polymers and methods of making and using same for the enhancement of therapeutics
EP2294208B1 (en) * 2008-05-29 2013-05-08 The Board of Trustees of The Leland Stanford Junior University Cell line, system and method for optical control of secondary messengers
RU2543157C2 (ru) * 2008-06-17 2015-02-27 Глитек,Инк. Гликозилированный пептид glp-1
GB0815216D0 (en) * 2008-08-21 2008-09-24 Asterion Ltd Interleukin
CN102348715B (zh) 2009-02-03 2017-12-08 阿穆尼克斯运营公司 延伸重组多肽和包含该延伸重组多肽的组合物
EP3165606A1 (en) * 2009-05-01 2017-05-10 Ophthotech Corporation Methods for treating or preventing ophthalmological diseases
US20130040845A1 (en) 2010-02-16 2013-02-14 Immune Disease Institute, Inc. Method for screening receptors/ligands interactions
EP2553101A4 (en) 2010-04-02 2013-09-04 Univ Rochester CYTOKINES ACTIVATED BY PROTEASES
US9119869B2 (en) 2010-04-29 2015-09-01 Ronald J. Shebuski Mucin derived polypeptides
AU2011283669A1 (en) * 2010-07-29 2013-02-07 Eleven Biotherapeutics, Inc. Chimeric IL-1 receptor type I agonists and antagonists
US9511151B2 (en) * 2010-11-12 2016-12-06 Uti Limited Partnership Compositions and methods for the prevention and treatment of cancer
WO2013170636A1 (zh) * 2012-05-18 2013-11-21 爱德迪安（北京）生物技术有限公司 用于糖尿病治疗的蛋白、蛋白缀合物及其应用
JP6322626B2 (ja) * 2012-06-08 2018-05-09 アルカーメス，インコーポレイテッド ムチン−ドメインポリペプチドリンカーを含む融合ポリペプチド

Also Published As

Publication number Publication date
HK1203969A1 (en) 2015-11-06
HK1210055A1 (en) 2016-04-15
HRP20201973T1 (hr) 2021-02-05
US9428563B2 (en) 2016-08-30
PT3401402T (pt) 2020-11-11
EP2859015A1 (en) 2015-04-15
LT2859015T (lt) 2018-07-10
HUE037849T2 (hu) 2018-09-28
DK2859015T3 (en) 2018-06-18
US20200040053A1 (en) 2020-02-06
NZ630848A (en) 2016-07-29
CY1124525T1 (el) 2022-07-22
CY1120522T1 (el) 2019-07-10
US20130336925A1 (en) 2013-12-19
US9156897B2 (en) 2015-10-13
JP7350041B2 (ja) 2023-09-25
JP7048543B2 (ja) 2022-04-05
US20140234962A1 (en) 2014-08-21
US9296801B2 (en) 2016-03-29
RS61391B1 (sr) 2021-02-26
JP6322626B2 (ja) 2018-05-09
US10023623B2 (en) 2018-07-17
NZ715099A (en) 2018-12-21
JP6234446B2 (ja) 2017-11-22
ES2675784T3 (es) 2018-07-12
WO2013184939A2 (en) 2013-12-12
US9359415B2 (en) 2016-06-07
PT2859015T (pt) 2018-06-26
US20130336924A1 (en) 2013-12-19
EP3825405A1 (en) 2021-05-26
LT3401402T (lt) 2020-12-28
JP2015525216A (ja) 2015-09-03
EP3401402A1 (en) 2018-11-14
US10183979B2 (en) 2019-01-22
US20170044228A1 (en) 2017-02-16
JP6388408B2 (ja) 2018-09-12
TR201808753T4 (tr) 2018-07-23
CA2869787C (en) 2021-11-23
ME03079B (me) 2019-01-20
AU2013271541C1 (en) 2018-01-18
EP3401402B1 (en) 2020-10-14
PL2859015T3 (pl) 2018-08-31
JP2015520193A (ja) 2015-07-16
ES2667558T3 (es) 2018-05-11
EP2859015B1 (en) 2018-03-21
AU2013271545B2 (en) 2016-03-03
HRP20180914T1 (hr) 2018-07-27
WO2013184938A2 (en) 2013-12-12
AU2013271542A1 (en) 2014-10-16
US20130338067A1 (en) 2013-12-19
JP2019195332A (ja) 2019-11-14
RS57369B1 (sr) 2018-08-31
EP2859015A4 (en) 2015-11-18
WO2013184939A3 (en) 2014-01-30
AU2013271541A1 (en) 2014-10-23
AU2013271541B2 (en) 2016-03-17
JP2015525217A (ja) 2015-09-03
DK3401402T3 (da) 2021-01-11
EP2858672A2 (en) 2015-04-15
EP2874639B1 (en) 2018-03-28
HK1203820A1 (en) 2015-11-06
AU2013271545C1 (en) 2017-09-28
SI2859015T1 (sl) 2018-12-31
JP2023109948A (ja) 2023-08-08
EP2874639A4 (en) 2016-05-11
JP2018038389A (ja) 2018-03-15
EP2874639A2 (en) 2015-05-27
PL3401402T3 (pl) 2021-05-31
US20160237132A1 (en) 2016-08-18
EP2858672B1 (en) 2018-04-04
HUE052908T2 (hu) 2021-05-28
JP6545759B2 (ja) 2019-07-17
CA2869786A1 (en) 2013-12-12
AU2013271545A1 (en) 2014-10-16
JP2022050391A (ja) 2022-03-30
AU2013271542B2 (en) 2016-07-14
NZ630849A (en) 2016-04-29
CA2869787A1 (en) 2013-12-12
EP2858672A4 (en) 2016-02-10
CA2869674A1 (en) 2013-12-12
SI3401402T1 (sl) 2021-03-31
ES2842677T3 (es) 2021-07-14
WO2013184938A3 (en) 2014-01-30
NZ630851A (en) 2016-07-29
US10407481B2 (en) 2019-09-10
WO2013184942A1 (en) 2013-12-12
ES2675568T3 (es) 2018-07-11
US20160052983A1 (en) 2016-02-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
TR201809046T4 (tr) Bir müsin etki alanlı polipeptide bağlı bir aktif protein içeren füzyon polipeptitleri.
US11203630B2 (en) Serum albumin-binding fibronectin type III domains
US20230145413A1 (en) Fast-off rate serum albumin binding fibronectin type iii domains
KR101854931B1 (ko) 혈청 알부민 결합성 분자
KR20100058541A (ko) 생물학적 활성 폴리펩티드의 특성을 변경하기 위한 조성물 및 방법