SK283556B6 - Sulfanylalkanoyl, acylsulfanylalkanoyl a ditioalkanoyllaktámové zlúčeniny s ACE a NEP inhibičnou aktivitou a farmaceutický prípravok s ich obsahom - Google Patents

Sulfanylalkanoyl, acylsulfanylalkanoyl a ditioalkanoyllaktámové zlúčeniny s ACE a NEP inhibičnou aktivitou a farmaceutický prípravok s ich obsahom Download PDF

Info

Publication number
SK283556B6
SK283556B6 SK499-93A SK49993A SK283556B6 SK 283556 B6 SK283556 B6 SK 283556B6 SK 49993 A SK49993 A SK 49993A SK 283556 B6 SK283556 B6 SK 283556B6
Authority
SK
Slovakia
Prior art keywords
oxo
hydrogen
mmol
ethyl acetate
product
Prior art date
Application number
SK499-93A
Other languages
English (en)
Other versions
SK49993A3 (en
Inventor
Donald S. Karanewsky
Joel C. Barrish
Petrillo Edward W., Jr.
Jeffrey A. Robl
Denis E. Ryono
Original Assignee
E.R.Squibb & Sons, Inc.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by E.R.Squibb & Sons, Inc. filed Critical E.R.Squibb & Sons, Inc.
Publication of SK49993A3 publication Critical patent/SK49993A3/sk
Publication of SK283556B6 publication Critical patent/SK283556B6/sk

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D223/00—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D223/14—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D223/16—Benzazepines; Hydrogenated benzazepines
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D223/00—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D223/14—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D223/18—Dibenzazepines; Hydrogenated dibenzazepines
    • C07D223/22—Dibenz [b, f] azepines; Hydrogenated dibenz [b, f] azepines
    • C07D223/24—Dibenz [b, f] azepines; Hydrogenated dibenz [b, f] azepines with hydrocarbon radicals, substituted by nitrogen atoms, attached to the ring nitrogen atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/04—Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/68—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C07D211/72—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms, with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/74—Oxygen atoms
    • C07D211/76—Oxygen atoms attached in position 2 or 6
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D223/00—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D223/02—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D223/06—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D223/08—Oxygen atoms
    • C07D223/10—Oxygen atoms attached in position 2
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D223/00—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D223/02—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D223/06—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D223/12—Nitrogen atoms not forming part of a nitro radical
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D267/00—Heterocyclic compounds containing rings of more than six members having one nitrogen atom and one oxygen atom as the only ring hetero atoms
    • C07D267/02—Seven-membered rings
    • C07D267/08—Seven-membered rings having the hetero atoms in positions 1 and 4
    • C07D267/12—Seven-membered rings having the hetero atoms in positions 1 and 4 condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D267/14—Seven-membered rings having the hetero atoms in positions 1 and 4 condensed with carbocyclic rings or ring systems condensed with one six-membered ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D281/00—Heterocyclic compounds containing rings of more than six members having one nitrogen atom and one sulfur atom as the only ring hetero atoms
    • C07D281/02—Seven-membered rings
    • C07D281/04—Seven-membered rings having the hetero atoms in positions 1 and 4
    • C07D281/08—Seven-membered rings having the hetero atoms in positions 1 and 4 condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D281/10—Seven-membered rings having the hetero atoms in positions 1 and 4 condensed with carbocyclic rings or ring systems condensed with one six-membered ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06139—Dipeptides with the first amino acid being heterocyclic
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Other In-Based Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Nitrogen- Or Sulfur-Containing Heterocyclic Ring Compounds With Rings Of Six Or More Members (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Hydrogenated Pyridines (AREA)

Abstract

Zlúčeniny všeobecného vzorca (I) a ich farmaceuticky prijateľné soli vykazujúce inhibičnú aktivitu proti angiotenzín konvertujúcemu enzýmu (ACE) a neutrálnej endopeptidáze (NEP), ktoré sú účinné kardiovaskulárne činidlá. Ďalej je opísaný farmaceutický prostriedok obsahujúci uvedené zlúčeniny vhodný na liečenie hypertenzie.ŕ

Description

Predložený vynález sa týka sulfanylalkanoyl, acylsulfanylalkanoyl a ditioalkanoyllaktámových zlúčenín, ktoré prejavujú ACE a NEP inhibičný účinok, čiže inhibujú angiotenzín konvertujúci enzým a neutrálnu endopeptidázu. Rovnako sa týka farmaceutického prípravku, obsahujúceho tieto zlúčeniny.
Doterajší stav techniky
Inhibítory angiotenzín konvertujúceho enzýmu ako captopril, enalapril a lisinopril sú známe ako antihypertenzné činidlá. Tieto zlúčeniny sú opísané v US patentoch 4105776 a 4374829.
Použitie inhibítorov neutrálnej endopeptidázy na liečenie hypertenzie je opísané v US patentoch 4749688 a 5075302 a UK patente 2207351 .
Použitie dvojitých inhibítorov enkefalinázy a angiotenzín konvertujúceho enzýmu ako antihypertenzných činidiel je opísané v EP 481522.
Podstata vynálezu
Podstatu vynálezu tvoria sulfanylalkanoyl, acylsulfanyl- alkanoyl a ditioalkanoyllaktámové zlúčenín všeobecného vzorca (I):
o
II
--- S --- (CH2)n --- C --- C --- (I) z \
R19 Rj a ich farmaceutický prijateľné soli, kde
O
II
R] je vodík, r3- c - alebo R1S- S
R2 a R19 sú nezávisle od seba vybrané zo skupiny, zahrnujúcej vodík,CbC7 alkyl, C6-Ci0aryl-(CH2)m. a heteroaryl-(CH2)m-, kde heteroaryl je monocyklický 5 alebo 6 členný heteroaryl, ktorý obsahuje jeden heteroatóm vybratý z O, N a S, n je nula alebo jeden s tou podmienkou, že n musí byť nula, keď R2 a R19 sú obidva iné než vodík, m je nula alebo celé číslo od 1 do 6, R3 je Ct.C7 alkyl alebo C6-C10 aryl-(CH2)m, Rlsje Cj_C7 alkyl,
X, má všeobecný vzorec (III)
(C),
-'—R (IX) (X) (XII) (XIII)
R6 je vybraný zo skupiny, zahrnujúcej vodík, CbC7 alkyl, hydroxysubstituovaný CbC7 alkyl, C3.C7 alkenyl, C3. .C7 cykloalkyl-(CH2)m- a C6-Ci0aryl-(CH2)m-,
R7 je vybraný zo skupiny, zahrnujúcej vodík a C|-C7 alkyl, R8 je vybraný zo skupiny zahrnujúcej vodík a C6-C10 aryl(CH2)m-,
Rio je vybraný zo skupiny zahrnujúcej vodík , CbC7 alkyl a C^-Cio aryl-(CH2)m-, b je nula alebo jeden, q je 2 alebo 3, v je jeden alebo dva, w je jeden alebo dva,
Y, je -CH2-, -CH2-CH2-, O alebo S, o
I
Y2 je -CH2-, -S- alebo - S -,
Z je O alebo dva vodíky,
R12 je vodík alebo CbC7 alkyl a
R17je C1.C7 alkyl.
Výhodné sú podľa predmetného vynálezu laktámové zlúčeniny všeobecného vzorca (T), kde
O
II
Ri je vodík, Rá- c - alebo R18-S-,
R3 je alkyl s 1 až 4 atómami uhlíka alebo fenyl,
Rjg je alkyl s 1 až 4 uhlíkmi, n je nula alebo jeden,
R2 je C6-Cio aryl-CH2-,(2-tienyl)metyl alebo priamy, alebo rozvetvený alkylový reťazec s 1 až 7 uhlíkmi a
Rig je vodík.
Rovnako sú výhodné podľa vynálezu uvedené laktámové zlúčeniny všeobecného vzorca (I), kde
Xj má všeobecný vzorec (III) a q je dve alebo tri,
R6 a R7 sú obidva vodík alebo sú obidva metyl, alebo
Rň je alkyl s 1 až 4 uhlíkmi, alkyl s 1 až 4 uhlíkmi substituovaný hydroxyskupinou alebo alkenylovú skupinu s 3 až 5 uhlíkmi, s jednou dvojitou väzbou a
R7 je vodík,
Rio je vodík alebo alkyl s 1 až 4 uhlíkmi, b j e nula alebo j eden a
R12 je vodík alebo alkyl s 1 až 4 uhlíkmi alebo
Xi má všeobecný vzorec (IV) a
R8 je vodík alebo fenyl,
R6a R7 sú obidva vodík alebo sú obidva metyl, alebo R6 je alkyl s 1 až 4 uhlíkmi, alebo fenyl a R7je vodík,
Rl0 je vodík alebo alkyl s 1 až 4 uhlíkmi, b je nula a
Ri2 je vodík alebo alkyl s 1 až 4 uhlíkmi, alebo
Xj má všeobecný vzorec (V) a
R6a R7 sú obidva vodík alebo sú obidva metyl, alebo R^ je alkyl s 1 až 4 uhlíkmi, alebo fenyl a R7 je vodík,
Rio je vodík alebo alkyl s 1 až 4 uhlíkmi, b je nula a
R12 je vodík alebo alkyl s 1 až 4 uhlíkmi, alebo
Xi má všeobecný vzorec (VI) a
Y, je O, S alebo CH2,
R6 a R7 sú obidva vodík alebo R6jc alkyl s 1 až 4 uhlíkmi a
R7je vodík,
Rlo je vodík alebo alkyl s 1 až 4 uhlíkmi, b je nula a
R12 je vodík alebo alkyl s 1 až 4 uhlíkmi, alebo
X! má vzorec (VIII) a
Rfj a R7 sú obidva vodík alebo jeden je vodík a druhý je alkyl s 1 až 4 uhlíkmi,
Rl0 jc vodík alebo alkyl s 1 až 4 uhlíkmi, b je nula a
R12 je vodík alebo alkyl s I až 4 uhlíkmi alebo
Xi má všeobecný vzorec (IX) a v je jeden, alebo dva, w jejeden, alebo dva,
Y2 je S alebo CH2,
R12 je vodík alebo alkyl s 1 až 4 uhlíkmi alebo
Xi má všeobecný vzorec (X) a
R12 je vodík alebo alkyl s 1 až 4 uhlíkmi, alebo
X! má všeobecný vzorec (XII) a
Z je O alebo dva vodíky,
Ri7 je alkyl s 1 až 4 uhlíkmi,
Rio je vodík alebo alkyl s 1 až 4 uhlíkmi, b je nula a
Ri2 je vodík alebo alkyl s 1 až 4 uhlíkmi, alebo
Xj má všeobecný vzorec (XIII) a
Rio je vodík alebo alkyl s 1 až 4 uhlíkmi, b je nula a
R12 je vodík alebo alkyl s 1 až 4 uhlíkmi.
Rovnako sú podľa vynálezu výhodné uvedené laktámové zlúčeniny všeobecného vzorca (I), kde
Rj je vodík, n je nula,
R2 je benzyl, (2-tienyl)metyl alebo priamy alebo rozvetvený alkyl s 1 až 5 uhlíkmi.
Rovnako sú podľa vynálezu výhodné uvedené laktámové zlúčeniny všeobecného vzorca (I), kde
X, má všeobecný vzorec (III) a q je dva,
R^aR-y sú obidva metyl alebo R6 je propyl, allyl alebo 2-hydroxyetyl a
R7 je vodík, b je nula,
Rlo je vodík alebo metyl a
Ri2 je vodík alebo
Xj má všeobecný vzorec (IV) a b je nula,
Rs je vodík alebo fenyl,
R6 a R7 sú obidva vodík alebo je R,, fenyl a R7 je vodík a RioaR|2 sú obidva vodík alebo
Xj má všeobecný vzorec (V) a
Rs je fenyl a R7je vodík, b je nula a
Rio a Rj2 sú obidva vodík alebo
Xi má vzorec všeobecný (VI) a
Y, jeCH2, b je nula a
Rs, R7, Rlo a R12 sú všetky vodík alebo
X i má všeobecný vzorec (IX) a v je dva, w je j eden alebo dva,
Y2 je S alebo CH2a
RJ2je vodík.
Čo sa týka konkrétnych zlúčenín, potom je možné podľa predmetného vynálezu vybrať výhodne nasledujúce laktámové zlúčeniny: kyselinu [S-(R*,R*)]-2,3,4,5-tetrahydro-3-[(2-sulfanyl-l-oxo-hexyl)amino]-2-oxo-1 H-benzazepín-1 -octovú, kyselinu [S-(R ,R*)]-2,3,4,5-tetrahydro-3-[(2-sulfanyl-l-oxo-4-metylpentyl)-amino] -2-oxo-1 H-benzazepín-1 -octovú, kyselinu [S-(R’,R’)]-2,3,4,5-tctrahydro-3-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-fenylpropyl)-amino]-2-oxo-1 H-benzazepín-1 -octovú, kyselinu [4S-[4a,7a(R*), 10afi]]-dekahydro-7-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-fenyl-propyl)-amino]-6-oxopyrido[l,2-a]-azepín-4-karboxylovú, kyselinu [3R-[3a,6a(S*),9aB]]-oktahydro-6-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-fenylpropyl)amino]-5-oxotiazolo[3,2-a]-azepín-3-karboxylovú, kyselinu [3S-[l(R*),3a(R*),7B]]-hexahydro-a-mctyl-3-[(2-sulfanyl-1 -oxo-3-fenyl-propyl)-amino]-3-oxo-7-propyl-1 H-azepín-1 -octovú, kyselinu [6(S)]-hexahydro-6-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-fenylpropyl)-amino]-2,2-dimetyl-7-oxo-1 H-azepín-1 -octovú, kyselinu [3S-[3a(R*),7B]]-hexahydro-3-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-fenyl-propyl)amino]-2-oxo-7-propyl-1 H-azepín-1 -octovú a
kyselinu [3S-[3a(R*),7B]]-hexahydro-3-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-fenyl-propyl)amino]-2-oxo-7-(2-propenyl)-lH-azepín-1 -octovú.
Do rozsahu vynálezu rovnako patrí farmaceutický prípravok vhodný na liečenie hypertenzie, ktorého podstata spočíva v tom, obsahuje farmaceutický prijateľný nosič a sulfanylalkanoyl, acylsulfanylalkanoyl alebo ditioalkanoyllaktám všeobecného vzorca (I), kde R1,R2,R19,n a X| majú význam definovaný skôr alebo jeho farmaceutický prijateľnú soľ.
V opise tohto vynálezu sú použité niektoré termíny, ktoré majú nasledujúci význam.
Výraz „alkyl“ označuje radikály s priamym alebo rozvetveným reťazcom, majúcim až sedem atómov uhlíka. Výraz „nižší alkyl“ označuje radikály s priamym alebo rozvetveným reťazcom, majúce až štyri atómy uhlíka a sú výhodnou podskupinou výrazu alkyl.
Výraz „substituovaný alkyl“ označuje radikály s priamym alebo rozvetveným reťazcom s 1 až 7 uhlíkmi, v ktorých jeden alebo viac, výhodne jeden, dva alebo tri vodíky boli nahradené hydroxy, amino, halogén, trifluórmetyl, kyano, -NH(nižší alkyl), -N(nižší alkyl)2, nižším alkoxy, nižším alkyltio alebo karboxy.
Výraz „substituovaný nižší alkyl“ označuje radikály s priamym alebo rozvetveným reťazcom s 1 až 4 uhlíkmi, v ktorých jeden vodík bol nahradený hydroxy, amino, halogén, trifluórmetyl, kyano, -NH(nižší alkyl), -N(nižší alkyl)2, nižšou alkoxy, nižšou alkyltio alebo karboxyskupinou.
Výraz „alkenyl“ sa týka radikálov s priamym alebo rozvetveným reťazcom, majúcim 3 až 7 atómov uhlíka, majúcich jednu alebo dve dvojité väzby. Výhodnými „alkenylovými“ skupinami sú radikály s priamym reťazcom, majúcim 3 až 5 atómov uhlíka, majúcich jednu dvojitú väzbu.
Výraz „substituovaný alkenyl“ sa týka radikálov s priamym alebo rozvetveným reťazcom s 3 až 7 uhlíkmi, majúcim jednu alebo dve dvojité väzby, kde vodík bol nahradený hydroxy, amino, halogén, trifluórmetyl, kyano, -NH(nižší alkyl), -N(nižší alkyl)2, nižšou alkoxy, nižšou alkyltio alebo karboxyskupinou.
Výraz „nižší alkoxy“ a „nižší alkyltio“ sa týka nižších alkylových skupín ako sú definované skôr, pripojené ku kyslíku alebo síre.
Výraz „cykloalkyl“ označuje nasýtené kruhy s 3 až 7 atómami uhlíka.
Výraz „halogén“ označuje chlór, bróm, fluór a jód.
Výraz „aiyl“ označuje fenyl, 1-nafiyl a 2-naftyl. Výraz „substituovaný aryl“ označuje fenyl, 1-naftyl a 2-naftyl, majúci substituent vybraný zo skupiny, zahrnujúcej nižší alkyl, nižší alkoxy, nižší alkyltio, halogén, hydroxy, trifluórmetyl, amino, -NH(nižší alkyl) alebo -N(nižší alkyl)2, dia tri-substituovaný fenyl, 1-naftyl alebo 2-naftyl, kde uvedené substituenty sú vybrané zo skupiny, zahrnujúcej metyl, metoxy, metyltio, halogén, hydroxy a amino.
Výraz „heteroaryl“ označuje nenasýtené kruhy s 5 alebo 6 atómami, obsahujúce jeden alebo dva O a S atómy a/alebo jeden až štyri N atómy s tou podmienkou, že celkový počet heteroatómov v kruhu je 4 alebo menej. Heteroarylový kruh je pripojený cez dostupný atóm uhlíka alebo dusíka. Výhodné heteroarylové skupiny zahŕňajú 2-, 3- alebo 4-pyridyl, 4-imidazolyI, 4-tiazolyl, 2- a 3-tienyl a 2- a 3furyl. Výraz heteroaryl tiež zahrnuje bicyklické kruhy, majúce päť alebo šesťčlenný kruh, obsahujúci O, S a N atómy, definovaný skôr, ktorý je kondenzovaný k benzéno vému alebo pyridylovému kruhu. Výhodné bicyklické kruhy sú 2- a 3-indolyl a 4- a 5-chinolinyl. Mono alebo bicyklický heteroarylový kruh môže byť tiež ďalej substituovaný na dostupnom atóme uhlíka nižším alkylom, halogénom, hydroxyskupinou, benzylom alebo cyklohexylmetylom. Tiež, ak mono alebo bicyklický kruh má dostupný N-atóm, môže taký N-atóm tiež byť substituovaný N-chrániacou skupinou ako je
-,,,-.-,,,^0) . ,
2,4-dinitrofenyl, nižší alkyl, benzyl alebo benzhydryl.
Zlúčeniny podľa predloženého vynálezu, kde R, je vodík alebo
O
II skupina ^3’ c _a Rl9je vodík, môžu byť pripravené kopuláciou acylsulfanylzlúčeniny, obsahujúcej vedľajší reťazec, majúci vzorec (XIV) i
s medziproduktom všeobecného vzorca (XV)
H - Xi(XV) za vzniku produktu všeobecného vzorca (XVI) o5
IIi ' i ’ (* kde R|2 v definícii Xj je výhodne ľahko odstrániteľná esterová chrániaca skupina ako je metyl, etyl alebo benzyl. Uvedená reakcia môže byť vykonaná v organickom rozpúšťadle ako je dimetylformamid a za prítomnosti kopulačného činidla ako je benztriazol-l-yloxytris(dimetylamino)fosfóniumhexafluorofosfát, l-etyl-3-(3-di-metylaminopropyl)karbodiimid, dicyklohexylkarbodiimid alebo karbonyldiimidazol. Alternatívne môže acylsulfanylkarboxylová kyselina vzorca (XV) byť prevedená na aktivovanú formu pred kopuláciou, ako na chlorid kyseliny, zmesový anhydrid, symetrický anhydrid, aktivovaný ester atď.
Produkt všeobecného vzorca (XVI) môže byť prevedený na merkaptánový produkt všeobecného vzorca (I), kde R, je vodík a R12 je vodík, metódami známymi v odbore z doterajšieho stavu techniky. Napríklad, ak R3 je metyl a R12 je metyl alebo etyl spracovaním s metanolickým hydroxidom sodným, za vzniku produktu, kde R, a R12 sú vodík a kde R3 je metyl a R]2je terebutyl spracovaním s trifluóroctovou kyselinou a potom s amoniakom za vzniku produktu, kde Rt a R]2je vodík.
Zlúčeniny podľa vynálezu, kde oba R2 a Rl9 sú iné než vodík a n je nula, môžu byť pripravené kopuláciou substituovanej sulfanylzlúčeniny, obsahujúcej vedľajší reťazec, všeobecného vzorca (XVII)
s medziproduktom (XV) ako je opísané skôr, za vzniku zlúčeniny všeobecného vzorca (XVIII)
Spracovanie zlúčeniny vzorca (XVIII) so silnou kyselinou ako je kyselina trifluórmetánsulfónová odstraňuje metoxybenzylovú chrániacu skupinu a poskytuje zodpovedajúci produkt vzorca (I), kde R] je vodík.
Substituované, sulfanylskupinu obsahujúce zlúčeniny vzorca (XVII) môžu byť pripravené reakciou disubstituovanej karboxylovej kyseliny vzorca (XIX) o
II (xix)
7\ ' s bis[[(4-metoxy)fenyl/metyl/disulfidom za prítomnosti lítiumdiizopropylamidu.
Zlúčeniny všeobecného vzorca (I), kde Xj obsahuje sulfoxidovú alebo sulfónovú skupinu môžu byť pripravené použitím medziproduktu vzorca (XV) ako merkaptánu, t. j. s je nula, počas kopulačnej reakcie. Výsledný produkt vzorcov (XVI) alebo (XVIII) sa potom oxiduje známym oxidačným činidlom ako je kyselina metánchlórbenzoová, kyselina peroctová alebo kyselina monoperoxyftálová - hexahydrát horečnatej soli atď. Kontrolou množstva oxidačného činidla a času reakcie sa získajú produkty, kde s je nula alebo dva.
Zlúčeniny všeobecného vzorca (I), kde R| je vodík, môžu byť acylované acylhalogenidom alebo anhydridom všeobecného vzorca (XX) o
P3- c - halogén alebo kde halogén je C1 alebo Br za vzniku ďalších zlúčenín všeobecného vzorca (I), kde R, je skupina vzorca
O
II R-,- C - .
Zlúčeniny všeobecného vzorca (I), kde R1 je -S-R|S a Ri8je alkyl, substituovaný alkyl, substituovaný cykloalkyl(CH2)m-, aryl-(CH2)ra-, substituovaný aryl-(CH2)m- alebo heteroaryl-(CH2)m- môžu byť pripravené reakciou produktov vzorca (I), kde R] je vodík, so sulfonylovou zlúčeninou všeobecného vzorca (XXI)
H3C - SO2- S - R, g (XXI) vo vodnom alkoholovom rozpúšťadle za vzniku požadovaných produktov. Zlúčeniny všeobecného vzorca (XXI) sú známe z literatúry alebo môžu byť pripravené známymi metódami napr. Smith a spol., Biochcmistry, 14, str. 766 -771 (1975).
Symetrické disulfidové produkty I môžu byť pripravené priamou oxidáciou produktu vzorca (I), kde Rj je vodík, jódom ako je napr. uvedené v práci Ondettiho a spol., US patent č. 4 105 776.
Acylmerkaptánové kyseliny všeobecného vzorca (XIV) sú opísané v literatúre. Pozri, napríklad Ondetti a spol., US patenty 4 105 776 a 4 339 600, Haslanger a spol., US patent 4 801 690 atď.
Medziprodukty všeobecného vzorca (XV) sú tiež opísané v literatúre alebo je možné ich získať modifikáciami známych postupov. Napríklad medziprodukty vzorca (XV), kde Xi má význam definovaný vo vzorci (III) sú opísané Thorsettem a spol., J. Med. Chem., 29, str. 251 - 260 (1988), Harris a spol., v US patentoch 4587080, 4587238, 4629787 a Yanagisawa-ou a spol. v US patente 4734410. Medziprodukty vzorca (XV), kde X] má význam definovaný vo vzorci (IV) sú opísané Yanagisawa-ou a spol.. J. Med. Chem. 30, str. 1984 - 1991 (1987) a 31, str. 422 - 428 (1988), Karanewským v US patente 4460579, Cheungom a spol., v US patente 4594341 a Yanagisawaou a spol. v US patente 4699905. Medziprodukty vzorca (XV), kde X] má význam definovaný vo vzorci (V) sú opísané Karanewským v US patentoch 4460579 a 4711884. Medziprodukty vzorca (XV), kde X! je definované vo vzorci (VI) a Y] je -CH2-, -(CH2)2- alebo -(CH2)3- sú opísané Wattheyom a spol., J. Med. Chem., 28, str. 1511 - 1516 (1985) a Wattheyom v US patentoch 4410520, 4470988,4473575, 4537855 a 4575503 a tiež Parsonsom a spol., Biochemical and Biophysical Research Comm., 117, str. 108 - 113 (1983) a v US patente 4873235. Medziprodukty vzorca (XV), kde X] je definovaný vo vzorci (VI) a Yi je S alebo O sú opísané Sladeom a spol. J. Med. Chem., 28, str. 1517 - 1521 (1985) a v US patente 4477464 a Itohom a spol., Chem. Pharm. Bull., 34, str. 1128 - 1147 (1986) a 34, str. 2078 - 2089 (1986) ako i Sugiharom a spol. v US patente 4548932 (Y je O) a Katakamiom a spol. v US patente 4539150 (Y je S). Medziprodukty vzorca (XV), kde X je definovaný vo vzorci (VII) môžu byť pripravené redukciou zodpovedajúcich medziproduktov, kde X, je definované vo vzorci (VI). Medziprodukty vzorca (XV), kde X, je definované vo vzorci (VII) sú opísané Flynnom a spol. v US patente 4973585. Medziprodukty vzorca (XV), kde X je definované vo vzorci (IX) a Y2je S, -SO alebo -SO2 sú opísané Harrisom a spol. a Patchettom a spol. v US patentoch 4415496 a 4617301. Medziprodukty vzorca (XV), kde X1 je definované vo vzorci (XI) sú opísané Attwoodom a spol., Federation of European Biochemical Studies, 165, str. 201 - 206 (1984) a v US patente 4512994 a Natoffom a spol., Drugs Of The Future, 12, str. 475 - 483 (1987). Medziprodukty vzorca (XV), kde X j má význam definovaný vo vzorci (XII) sú opísané Huangom a spol. v US patente 4465679. Medziprodukty vzorca (XV), kde X] má význam definovaný vo vzorci (XIII) sú opísané Bolosom a spol., v Tetrahedron, 48 str. 9567-9576(1992).
Medziprodukty všeobecného vzorca (XV), kde X, je definované vo všeobecnom vzorci (III) a q je jedna alebo dve a R7 je vodík, môžu byť pripravené nasledujúcim postupom, ktorý je takisto súčasťou spôsobu prípravy zlúčenín podľa tohto vynálezu.
N-Ftalimido-a-aminokyselina všeobecného vzorca (XXIII)
a ester aminokyseliny všeobecného vzorca (XXIV) —---ÍCS2) —cco?c / x (xxiv)
Ír 5 kde
R12 je odstrániteľná esterová chrániaca skupina ako je metyl, etyl alebo benzyl, sa kopulujú za vzniku peptidovej zlúčeniny všeobecného vzorca (XXV)
Táto kopulačná reakcia sa výhodne vykonáva za prítomnosti kopulačného činidla ako je benzotriazol-l-yloxy-tris(dimetyl-amino)-fosfóniumhexafluorofosfát alebo etyl-3-(3-dimetylamino)propylkarbodiimid.
Zlúčenina všeobecného vzorca (XXV) sa oxiduje napríklad spracovaním s oxalylchloridom a dimetylsulfoxidom alebo tetra-n-propylamóniumperutenátom a N-metylmorfolín-N-oxidom za vzniku zlúčeniny všeobecného vzorca (XXVI).
dujúcou esterifikáciou karboxylovej skupiny a nasledujúcim odstránením N-ftaloylovej chrániacej skupiny poskytne požadovaný medziprodukt.
Medziprodukty vzorca (XV), kde X! je definované vo všeobecnom vzorci (IX) alebo X, Y2 je -CH2- a v je dva, môžu byť pripravené nasledujúcim postupom, ktorý je tiež súčasťou spôsobu prípravy podľa vynálezu.
N-Ftalimido-a-aminokyselina vzorca (XXVIII)
(XXVIII) sa kopuluje s esterom α-aminokyseliny všeobecného vzorca (XXIX)
(XXIX) S;J[--------CCCňi2
Zlúčenina vzorca (XXVI) sa cyklizuje spracovaním s nevodovou kyselinou ako je kyselina trifluóroctová, trifluórmetánsulfónová, kyselina chlorovodíková atď. za vzniku zlúčeniny všeobecného vzorca (XXVII) za prítomnosti kopulačného katalyzárora, ako je opísané skôr za vzniku alkoholu vzorca (XXX)
r'4x 7 '
Alkohol všeobecného vzorca (XXX) sa oxiduje spracovaním napr. s oxalylchloridom za vzniku zodpovedajúceho aldehydu, ktorý sa potom spracuje s kyselinou ako je kyselina trifluóroctová alebo kyselina chlorovodíková za vzniku esteru karboxylovej kyseliny vzorca (XXXI)
Medziprodukt všeobecného vzorca (XV), kde X| má význam definovaný vo vzorci (III) a q je jedna alebo dve a R^, a R7 sú oba vodík, môže byť pripravený spracovaním zlúčeniny vzorca (XXVI) so silylhydridom ako je trietylsilán, difenylmetylsilán, fenylmetylsilán atď. a Lewisovou kyselinou ako katalyzátorom, ako je chlorid ciničitý, chlorid titaničitý, bromid ciničitý, bórtrifluorideterát atď. s nasledujúcou esterifikáciou karboxylovej skupiny s nasledujúcim spracovaním hydrazínhydrátom na odstránenie N-ftaloylovej chrániacej skupiny.
Medziprodukt vzorca (XV), kde Xj je definované vo vzorci (III) aq je jeden lebo dve, R7je vodík a R6 je iný než vodík, môžu byť pripravené zo zlúčeniny vzorca (XXIV). Napríklad, ak R<,je alkenyl alebo substituovaný alkenyl s 3 až 7 uhlíkmi, spracovaním zlúčeniny XXIV s alkenyl alebo substituovaným alkenyl silánom za prítomnosti Lewisovej kyseliny ako katalyzátora, ktorej príklady boli uvedené s nasledujúcou esterifikáciou karboxylovej skupiny a nasledujúcim odstránením N-ftaloylovej chrániacej skupiny ako je opísané, sa získa požadovaný medziprodukt. Alkenylová skupina môže byť hydrogenovaná za vzniku medziproduktu, kde R6je alkyl alebo substituovaný alkyl s 3 až 7 atómami uhlíka. Ak R6 je iný než alkyl alebo substituovaný alkenyl, spracovanie zlúčeniny vzorca (XXVII) so zodpovedajúcim R6 obsahujúcou zlúčeninu hliníka alebo titánu za prítomnosti Lewisovej kyseliny ako katalyzátora s nasle-
o COCKľ
Cyklizácia zlúčeniny vzorca (XXXI) so silnou kyselinou ako je trifluórmetánsulfónová kyselina s nasledujúcou reesterifikáciou bežnými spôsobmi a spracovaním s jodidom sodným sa získa zmes zlúčenín vzorcov (XXXII) a (XXXIII)
SK 283556 Β6
Odstránenie N-ftaloylovej chrániacej skupiny z medziproduktu vzorca (XXXIII) ako je opísané skôr, poskytne požadovanú zlúčeninu vzorca (XV), kde X| je definované vo vzorci (X) a Y2je -CH2-.
Spracovanie medziproduktu vzorca (XXXII) s tris(trimetylsilyl)silánom alebo tri-n-butylcínhydridom za prítomnosti katalytického množstva azobisizobutyronitrilu sa odstráni jódová skupina. N-Ftaloylová skupina sa potom odstráni ako bolo skôr opísané za vzniku požadovanej zlúčeniny vzorca (XV), kde X, je definované vo vzorci (IX), v je dva a Y2je -CH2-. Podobné postupy môžu byť použité na získanie zodpovedajúcej zlúčeniny vzorca (XV), kde X, je definované vo vzorci (IX), v je jedna a Y2je -CH2-.
Iné postupy na prípravu medziproduktov vzorca (XV) sú zrejmé z príkladov.
Zlúčeniny všeobecného vzorca (I) obsahujú jedno alebo viac asymetrických centier. Tieto zlúčeniny tak môžu existovať v diastereoizomémych formách alebo v zmesiach týchto foriem a všetky takéto formy sú v rozsahu tohto vynálezu. Opísané postupy môžu používať racemáty, enantioméry alebo diastereoméry ako východiskové materiály. Ak sa pripravia diastereoizoméme zlúčeniny, môžu tieto byť delené obvyklými chromatografickými alebo frakčnými kryštalizačnými postupmi.
Zlúčeniny vzorca (I), kde R12 je vodík, môžu byť izolované vo forme farmaceutický prijateľnej soli. Vhodné soli na tento účel sú soli alkalických kovov ako je sodík a draslík, soli alkalických zemín ako je vápnik a horčík a soli odvodené od aminokyselín ako je arginín, lyzín atď. Tieto soli sa získavajú reakciou kyslej formy zlúčeniny s ekvivalentom bázy, poskytujúcim požadovaný ión v médiu, v ktorom sa soľ zráža alebo vo vodnom médiu a potom lyofilizáciou.
Zlúčeniny vzorca (I) sú dvojfunkčnými inhibítormi majúcimi schopnosť inhibovať tak angiotenzín konvertujúci enzým, ako aj neutrálnu endopeptidázu. Zlúčeniny vzorca (I) včítane ich farmaceutický prijateľných solí sú vhodné na liečenie fyziologických stavov, v ktorých môžu byť používané buď inhibítory angiotenzín konvertujúceho enzýmu, alebo inhibítory neutrálnej endopeptidázy. Takéto stavy zahrnujú kardiovaskulárne choroby, najmä hypertenziu, kongestívne srdcové zlyhanie, renálne zlyhanie a cirhózu pečene, ako aj analgetickú aktivitu. Diuresis, natruresis a zníženie krvného tlaku sú vyvolané u cicavčieho hostiteľa podaním asi 1 mg až asi 100 mg na kg telesnej hmotnosti na deň, výhodne od asi 1 mg do asi 50 mg na kg telesnej hmotnosti na deň, jedného alebo viacerých dvojfunkčných inhibítorov vzorca (I) alebo ich farmaceutický prijateľnej soli. Dvojfunkčné inhibítory vzorca (I) sú výhodne podávané orálne, ale je tiež možné používať parenterálne spôsoby ako je subkutánne, intramuskuláme a intravenózne podanie. Denná dávka môže byť podávaná jednotlivo alebo môže byť rozdelená do dvoch až štyroch dávok podávaných počas dňa.
Dvojfunkčné inhibítory vzorca (I) môžu byť podávané v kombinácii s ANF 99-126. Takéto kombinácie budú obsahovať inhibítor vzorca (I) od asi 1 do asi 100 mg na kg telesnej hmotnosti a ľudský ANF 99-126 od asi 0,001 do asi 0,1 mg na kg telesnej hmotnosti.
Dvojfunkčné inhibítory vzorca (I) alebo ich farmaceutický prijateľná soľ a iné farmaceutický prijateľné zložky môžu byť formulované pre opísané farmaceutické použitie. Vhodné prípravky na orálne podanie zahrnujú tabletky, kapsuly a elixíry a vhodné prípravky na parenterálne podanie zahrnujú sterilné roztoky a suspenzie. Asi 10 až 500 mg aktívnej zložky sa zmieša s fyziologicky prijateľným vehikulom, nosičom, excipientom, spojivom, ochrannou látkou, stabilizátorom, príchuťou atď., do jednotkovej dávkovej formy ako je obvyklé vo farmaceutickej praxi.
Nasledujúce príklady sú mienené ako ilustratívne. Stupne teploty sú uvádzané ako stupne Celzia.
Príklady uskutočnenia vynálezu
Príklad 1 [3R(S*)[-3,4-Dihydro-3-[[2-(sulfanylmetyl)-l-oxo-3-fenyl-propyl]amino]-4-oxo-1,5-benzotiazepín-5(2H)-octová kyselina
a) (S)-2-[(Acetyltio)metyl]benzénpropánová kyselina, efedrínová soľ
Roztok (lR,2S)-(-)-efedrínu (17,3 g, 105 mmol) v dietyléteri (175 ml) sa pridá naraz do roztoku 2-[(acetyltiojmetyljbenzénpropánovej kyseliny (50,0 g, 210 mmol) v dietyléteri (175 ml). Po státí pri teplote miestnosti 16 hodín sa kryštalická efedrínová soľ odfiltruje (19,7 g), t. t. 114 -
- 125 °C, |a]D = -40,6 ° (c = 1, metanol). Ďalšie množstvo pevnej látky [8,9 g, 1.1. 121 - 126 °C, [a]D = -47,2 0 (c = 1, metanol)/ sa oddelí od filtrátu po ponechaní pri teplote miestnosti počas 20 hodín. Pevné látky sa spoja a rekryštalizujú z acetonitrilu (1500 ml). Po 16 hodinách pri teplote miestnosti sa oddelí 20,8 g pevnej látky, t. t. 125 -
- 130 °C, [a]D = -47,5 ° (c = 1, metanol). Tento materiál sa rekryštalizuje rovnakým spôsobom z acetonitrilu (300 ml), získa sa 18,74 g, t. t. 128 - 130 °C [<x]D = -48,9 ° (c = 1, metanol). Tretia rekryštalizácia z acetonitrilu (225 ml) poskytne 17,4 g pevnej efedrínovej soli (S)-2[(acetyltio)metyl]-benzénpropiónovej kyseliny, t. t. 128 - 129 °, [cc]D = = 150,1 ° (c = 1, metanol).
Elementárna analýza : pre C12HI4O3S . Cl0Hi5NO vypočítané: 65,48 % C, 7,24 % H, 3,47 % N, 7,95 % S nájdené: 65,46 % C, 7,34 % H, 3,21 % N, 8,00 % S
b) Etylester [3R(S*)]-3,4-dihydro-3-[[2-[(acetyltio)metyl]-1 -oxo-3-fenylpropyl jamino]-4-oxo-1,5-benzotiazepín-5(2H)-octovej kyseliny
Kyselina (S)-2-[(acetyltio)metyl]benzénpropánová ako efedrínová soľ (3,34 mmol, 1,01 ekv.) sa suspenduje v etylacetáte (65 ml), premyje sa zriedenou HC1 (65 ml, voda + + 4,7 ml 1,0 N kyseliny chlorovodíkovej potom 31 ml vody + 1,6 ml 1,0 N kyseliny chlorovodíkovej), soľankou (10 ml), suší sa (bezvodý síran horečnatý), filtruje a odparí do sucha. Bezfarebný sirup sa suší vo vákuu 1,0 hodiny, získa sa kvantitatívne množstvo voľnej kyseliny (836 mg).
Voľná kyselina sa rozpustí v suchom dimetylformamide (10 ml), ochladí na 0 °C (kúpeľ ľad-soľ), spracuje s hydrátom 1-hydroxybenztriazolu (470 mg, 3,48 mmol) a 1-etyl-3-(3-dimetylaminopropyl)karbodiimidom (690 mg,
3,60 mmol) a mieša sa pri 0 °C pod argónom 1,0 hodiny. Číry roztok sa spracuje s etylesterom kyseliny (R)-3,4-dihydro-3 -amino-4-oxo-1,5-benzotiazepín-5(2H)-octovej (pripravený postupom podľa Slade-a a spol., J. Med. Chem. 28, str. 1517 - 1521 (1985)) (1,2 g, 3,32 mmol) a 4-metylmorfolínom (0,37 ml, 3,32 mmol) a v miešaní sa pokračuje pri 0 °C počas 1,0 hodiny a pri teplote miestnosti počas 1,0 hodiny. Reakčná zmes sa zriedi etylacetátom (80 ml), premyje sa postupne vodou (12 ml), 5 % hydrogensíranom sodným (12 ml), vodou (12 ml), nasýteným hydrogenuhličitanom sodným (12 ml) a soľankou (12 ml), suší sa (bezvodý síran horečnatý), filtruje sa, odparí do sucha a suší vo vákuu. Surový produkt sa chromatografujc na stĺpci silikagélu (Merck), stĺpec sa eluuje zmesou etylace tát : hexány (1 : 4), získa sa 1,5 g produktu ako sirup, Rf = = 0,68 (etylacetát: hexány, 1:1).
c) Kyselina [3R(S*)]-3,4-dihydro-3-[[2-(sulfanylmetyl)-l-oxo-3-fenylpropyl]amino]-4-oxo-l,5-benzotiazepín-5(2H)-octová
Roztok etylesterového produktu z časti (a) (1,5 g, 2,996 mmol) v suchom metanole (15 ml) sa prebublá argónom počas 15 minút, ochladí sa na 0 °C (ľad-soľ kúpeľ), potom sa spracuje po kvapkách s vopred prebublaným (argón, 30 min.) roztokom 1,0 N hydroxidu sodného (12 ml, 4 ekv.) za udržovania prebublávania argónu počas pridávania a trvania reakcie. Reakčná zmes sa mieša pri 0 °C 1,0 hodiny, okyslí pri 0 °C 5 % hydrogensíranom draselným (50 ml) na pH 1,0 a potom sa extrahuje etylacetátom (2 x 100 ml). Organický extrakt sa premyje soľankou (25 ml), suší (bezvodý síran sodný), odfiltruje, odparí do sucha a suší sa vo vákuu. Surový produkt sa rozpustí v zmesi metylénchloridu (10 ml) a etyléteru (5,0 ml), potom sa spracuje po častiach s hexánom (30 ml), čo uvedie zmes do vytvorenia pevnej látky. Zrazeniny sa odfiltrujú, premyjú hexánom (50 ml) a odparia z pentánu (4 x 50 ml). Pevná látka sa potom mieša s penténom (50 ml) 48 hodín pri teplote miestnosti pod argónom, filtruje a suší vo vákuu počas 6 hodín. Získa sa 1,01 g produktu ako amorfnej pevnej látky, Rf= 0,62 (metylénchlorid : metanol : kyselina octová, 20 : 1 : 1), [a]D = -171,4 0 (c = 0,74, metanol).
1H NMR (CDClj): 2,47 - 2,90 (m, 6H), 3,84 (dd, 1H), 4,13 (d, 1H, J = 17 Hz), 4,71 (m, 1H), 4,85 (d, 1H, J = 17 Hz), 6,99 - 7,67 (m, 9H).
Elementárna analýza pre C^H^NjC^S,: vypočítané: 58,59 % C, 5,15 % H, 6,51 % N, 14,89 % S, 7,68 % SH nájdené: 58,55 % C, 5,35 % H, 6,20 % N, 14,56 % S,
7,54 % SH.
Príklad 2
Kyselina [R-(R’',S*)]-3,4-dihydro-3-[(2-(sulfanyl-l-oxo-3-fenylpropyl]amino]-4-oxo-l,5-benzotiazepín-5(2H)-octová
a) Kyselina (S)-2-(acctyltio)metylbenzénpropánová, dicyklohexylamínová soľ
Dusitan sodný (10,3 g, 280 mmol) sa pridá k roztoku D-fenylalanínu (30,0 g, 181 mmol) a bromidu draselnému (73,5 g) v kyseline sírovej (2,5 N, 365 mmol) počas jednej hodiny pri udržovaní teploty reakčnej zmesi na 0 °C. Zmes sa mieša ďalšiu hodinu pri 0 °C a potom jednu hodinu pri teplote miestnosti. Reakčný roztok sa extrahuje éterom, éter sa spätne extrahuje vodou a éterová vrstva sa suší nad síranom sodným. Éter sa odstráni vo vákuu a destiláciou olejovitého zvyšku sa získa 25,7 g kyseliny (R)-2-bróm-3-benzénpropánovej, 1.1.141 °C (0,055 MPa Hg); [ct]D = +14,5 0 (c = 2,4, chloroform).
Zmes kyseliny tioctovej (7 ml, 97,9 mmol) a hydroxidu draselného (5,48 g, 97,9 mmol) v acetonitrile (180,5 ml) sa mieša pod argónom pri teplote miestnosti 1 3/4 hodiny. Zmes sa ochladí v ľadovom kúpeli a počas desiatich minút sa pridá roztok kyseliny (R)-2-bróm-3-benzénpropánovej (20,4 g, 89 mmol) v acetonitrile (20 ml). Reakčná zmes sa mieša pod argónom pri teplote miestnosti počas 5 hodín, odfiltruje sa a acetonitril sa odstráni vo vákuu. Olejovitý zvyšok sa znova rozpustí v etylacetáte a premyje sa 10 % hydrogensíranom draselným a vodou. Odstránením etylacetátu vo vákuu s získa 19,6 g surového produktu. Surový produkt sa čistí cez svoju dicyklohexylamínovú soľ s pou žitím izopropyléteru ako rozpúšťadla pre kryštalizáciu. Analytická vzorka dicyklohexylamínovej soli kyseliny (S)-2-(acetyltio)-benzénpropánovej bola pripravená «kryštalizáciou z etylacetátu, 1.1. 146 až 147 °, [a]D = -39,6 0 (c = 1,39, chloroform).
Elementárna analýza pre C, iHi2O3S . CI2H23N: vypočítané: 68,11 % C, 8,70 % H, 3,45 % N, 7,91 % S nájdené: 67,93 % C, 8,71 % H, 3,37 % N, 7,94 % S.
b) Etylester[R-(R*,S’)]-3,4-dihydro-3-[[2-(acetyltio)metylj-l-oxo-3-fenylpropyl]amino]-4-oxo-l,5-benzotiazepín-5(2H)-octovej kyseliny
Suspenzia dicyklohexylamínovej soli kyseliny (S)-2-(acetyltio)benzénpropánovej (1,76 g, 4,34 mmol, 1,01 ekv.) sa suspenduje v etylacetáte (123 ml), premyje sa 5 % hydrogensíranom draselným (5 x 19 ml) a soľankou (25 ml), suší sa (bezvodý síran horečnatý), filtruje, odparí do sucha a suší vo vákuu.
Voľná kyselina sa rozpustí v suchom metylformamide (25 ml), ochladí na 0 0 (kúpeľ ľad-soľ), spracuje s hydrátom 1-hydroxybenztriazolu (611 mg, 4,52 mmol) a 1-etyl-3-(3-dimetylaminopropyl)karbodiimidazolu (897 mg, 4,68 mmol) a mieša sa pri 0 0 1,0 hodiny. Roztok sa spracuje s etylesterom kyseliny (R)-3,4-dihydro-3-amino-4-oxo-l,5-benzotiazepín-5(2H)-octovej (pripravený postupom podľa Slade-a a spol., J. Med. Chem. 28, str. 1517 - 1521 (1985)) (1,55 g, 4,29 mmol) a 4-metylmorfolínom (0,48 ml, 4,37 mmol) a v miešaní sa pokračuje pri 0 0 počas 1,0 hodiny a pri teplote miestnosti počas 1,0 hodiny. Reakčná zmes sa zriedi etylacetátom (104 ml), premyje sa postupne vodou (16 ml), 5 % hydrogensíranom sodným (2 x x 16 ml), nasýteným hydrogenuhličitanom sodným (16 ml) a soľankou (16 ml). Suší sa (bezvodý síran horečnatý), filtruje sa, odparí do sucha a suší vo vákuu. Surový produkt sa chromatografuje na stĺpci silikagélu (Merck), za elúcie stĺpca etylacetátom : hexánom (1 : 4). Získa sa 1,347 g produktu ako sirup. Rf= 0,80 (etylacetát: hexán, 1 : 1).
c) Kyselina [R(R*,S*)]-3,4-dihydro-3-[(2-(sulfanyl-l-oxo-3-fenylpropyl)amino]-4-oxo-l,5-benzotiazepín-5(2H)-octová
Roztok etylesterového produktu z časti (b) (1,347 g, 2,768 mmol) v metanole (14 ml) sa prebubláva argónom počas 30 minút, ochladí sa na 0 0 (ľad-soľ kúpeľ), potom sa spracuje po kvapkách s vopred prebublaným (argón, 30 min.) roztokom 1,0 N hydroxidu sodného (11 ml, 4 ekv.) za udržovania prebublávania argónom pri pridávaní a počas trvania reakcie. Reakčná zmes sa mieša pri 0 0 počas 1,0 hodiny, okyslí sa pri 0 0 5 % hydrogensíranom draselným (46 ml) na pH 2,0 a potom sa extrahuje etylacetátom (2 x 100 ml). Organické extrakty sa premyjú soľankou (25 ml), sušia (bezvodý síran sodný), odfiltrujú, odparia do sucha a sušia sa vo vákuu. Surový produkt sa rozpustí v metylénchloride (10 ml) a spracuje po častiach s hexánom (50 ml), zmes vyzráža pevné látky. Supematant sa zleje a pevné látky sa triturujú s ďalším hexánom (50 ml) a pentánom (2 x x 100 ml). Mieša sa najprv so 100 ml pentánu počas 4 hodín a s ďalšími 100 ml cez noc pod argónom. Produkt sa suší vo vákuu 12 hodín. Získa sa 1,048 g produktu ako amorfnej pevnej látky, Rf= 0,57 (metylénchlorid : metanol : : kyselina octová, 20 : 1 : 1), [a]D = -169,9 0 (c = 0, 61, metanol).
1H NMR (CDClj) : 1,99 (d, 1H), 2,75 (t, 1H, J=11 Hz), 3,10 (m, 2H), 3,54 (m, 1H), 3,76 (m, 1H), 4,10 (d, 1H, J=17 Hz), 4,65 (m, 1H), 4,86 (d, 1H, J=17 Hz), 7,12-7,68 (m, 9H).
Elementárna analýza pre C20H22N2O4S . 0,17 C5H12.0,52 H2O vypočítané: 57,15 % C, 5,30 % H, 6,40 % N, 14,64 % S, 7,55 % SH nájdené: 57,15 % C, 4,99 % H, 6,14 % N, 14,72 % S,
8,02 % SH.
Príklad 3 Kyselina (S,S)-1,3,4,5-tetrahydro-4-[[2-(sulfanylmetyl)-1 -oxo-3-fenylpropyl]amino]-3-oxo-2H-2-benzazepín-2-octová
a) Etylester N,N-(ftaloyl-L-fenylalanyl)glycínu
Hydrát hydroxybenztriazolu (1,42 g, 10,5 mmol) a hydrochlorid 1 -ctyl-3-(3-dimetylaminopropyl)karbodiimidu (2,10 g, 11,0 mmol) sa pridá k roztoku N-ftaloyl-L-fenylalanínamidu (2,95 g, 10,0 mmol) v suchom metylénchloride (30 ml) pri 0 °C pod argónom. Po miešaní pri 0 °C počas 30 minút sa výsledná zmes spracuje s hydrochloridom etylesteru glycínu (1,675 g, 12,0 mmol) a N-metylmorfolínom (1,32 ml, 12,0 mmol). Po miešaní pri 0 °C počas 1 hodiny a pri teplote miestnosti počas 3 hodín sa zmes rozdelí medzi etylacetát - 5 % hydrogensíran draselný. Organická fáza sa postupne premyje 5 % hydrogensíranom draselným, nasýteným hydrogenuhličitanom sodným a nasýteným roztokom chloridu sodného; suší sa (síran sodný) a odparí sa do sucha. Trituráciou surového produktu s etyléterom sa získa 3,542 g produktu ako bielej, kryštalickej pevnej látky; t. t. 158 až 159 °C;
Rf = 0,33 (acetón : hexán, 2 : 3), [a]D = -99,7 0 (c = 0,61, chloroform).
b) Etylester kyseliny (S)-l,3,4,5-tetrahydro-4-ftalimido-3-oxo-2H-2-benzazepín-2-octovej
Zmes oxidu fosforečného (9,6 g, 68 mmol) a 85 % kyseliny fosforečnej (6,0 ml) sa zahrieva za miešania dokiaľ všetok oxid fosforečný nie je rozpustený. Vzniknutá viskózna kvapalina sa vyberie do ľadovej kyseliny octovej (36 ml), spracuje postupne s etylesterom N-(N-ftaloyl-L-fenylalanyl)-glycidu (2,24 g, 5,90 mmol) a trioxánom (0,75 g, 8,3 mmol) a zahrieva sa na 80 °C (teplote kúpeľa) pod atmosférou argónu. Po miešaní pri 80 °C počas 6,5 hodín sa zmes spracuje s ďalším podielom trioxánu (0,75 g,
8.3 mmol). Po miešaní pri 80 °C po ďalších 16 hodinách sa reakcia preruší zmesou ľad-voda a extrahuje etylacetátom. Etylacetátový extrakt sa premyje vodou (3 x), nasýteným hydrogenuhličitanom sodným (až je premývacia kvapalina alkalická) a nasýteným roztokom chloridu sodného, suší sa (síranom sodným) a odparí sa do sucha. Surový produkt sa čistí rýchlou chromatografíou na silikagéli (Whatmann LPS-1) za elúcie etylacetátom-hexánom (35 : 65), získa sa 1,718 g produktu ako bezfarebnej peny; Rf = 0,38 (etylacetát : toluén).
c) Etylester kyseliny (S)-l,3,4,5-tetrahydro-4-[[(fenylmetoxy)-karbonyl]amino]-3-oxo-2H-2-benzazepín-2-octovej
Roztok etylesteru kyseliny (S)-l,3,4,5-tetrahydro-4-ftalimido-3-oxo-2H-2-benzazepín-2-octovej (1,67 g, 4,26 mmol) v 1,0 M hydrazínhydráte v etanole (9,0 ml, 9,0 mmol) sa mieša pri teplote miestnosti pod argónom 36 hodín. Zmes sa zriedi rovnakým objemom etylacetátu, filtruje sa a filtrát sa odparí do sucha. Zvyšok sa vyberie do toluénu a opäť sa odparí do sucha. Bezfarebný, polopevný zvyšok (1,81 g) sa vyberie do suchého metylénchloridu (20 ml), umiestni na kúpeľ obsahujúci ľad a postupne sa spracuje trietylamínom (0,80 ml, 5,8 mmol) a benzylchlórformiátom (0,77 ml,
5.4 mmol). Po miešaní pri 0 °C počas 2 hodín sa zmes rozdelí medzi etylacetát - 5 % hydrogensíran draselný. Organická fáza sa postupne premyje 5 % hydrogensíranom dra selným, nasýteným hydrogenuhličitanom sodným a nasýteným roztokom chloridu sodného, suší sa (síran sodný) a odparí sa do sucha. Čistenie surového produktu rýchlou chromatografíou na silikagéli (Whatmann LPS-1) za elúcie etylacetátom : hexánom (1 : 2) sa získa 1,0747 g produktu bezfarebnej peny, Rf = 0,52 (etylacetát : toluén, 3 : 7). Vzorka kryštalizovaná z hexánu má 1.1. 80 - 82 °C, [a]D = = +87,2 ° (c = 0,53, chloroform).
d) Etylester kyseliny (S)-l,3,4,5-tetrahydro-4-amino-3-oxo-2H-2-benzazepín-2-octovej
Katalyzátor 20 % paladičitý hydroxid / uhlie sa pridá k roztoku etylesteru kyseliny (S)-l,3,4,5-tetrahydro-4-[[(fenylmetoxy)-karbonyl]amino]-3-oxo-2H-2-benzazepín-2-octovej (1,037 g, 2,62 mmol) v absolútnom etanole (20 ml) a výsledná suspenzia sa mieša pod atmosférou vodíka (balónik) počas 2 hodín. Zmes sa odfiltruje cez Celíte a filtrát sa odparí do sucha. Polopevný zvyšok sa trituruje s hexánom, získa sa 0,63 g produktu ako bielej, kryštalickej pevnej látky, 1.1. 71 - 73 °C, Rf = 0,38 (metanol : metylénchlorid, 1 : : 9), [a]D = 77,5 ° (c = 0,59, chloroform).
e) Etylester kyseliny (S,S)-l,3,4,5-tetrahydro-4-[[2-[(acetyltio)metyl]-1 -oxo-3-fenylpropyl]amino]-3-oxo-2H-2-benzazepín-2-octovej
Kyselina (S)-2-[(2-acetyltio)metyl]benzénpropánová (získaná z efedrínovej soli ako bolo už opísané) sa nechá reagovať s časťou b) podľa postupu z príkladu 1 časť b), poskytne titulný produkt ako bezfarebnú penu, Rf = 0,30 (etylacetát: hexán, 1:1).
f) Kyselina (S,S)-l,3,4,5-tetrahydro-4-[[2-(sulfanylmetyl)-l-oxo-3-fenylpropyl]amino]-3-oxo-2H-2-benzazepín-2-octová
Roztok produktu z časti e) v metanole sa spracuje s IN hydroxidom sodným postupom podľa príkladu 1 časť c) za vzniku titulného produktu ako bielej pevnej látky, 1.1. 149 -
- 151 °C (rozklad). Rf = 0,47 (metylénchlorid : kyselina octová : metanol, 20 : 1 : 1), [a]D = + 112,2 ° (c = 0,58, metanol).
Elementárna analýza pre C22H24N2O4S vypočítané: 64,06 % C, 5,96 % H, 6,79 % N, 7,77 % S, 8,02 % SH nájdené: 64,20 % C, 6,09 % H, 6,43 % N, 7,68 % S,
8,33 % SH.
Príklad 4
Kyselina (S,S)-l,3,4,5-tetrahydro-4-[(2-sulfanyl-l -oxo-3-fenylpropyl)amino]-3-oxo-2H-2-benzazepín-2-octová
a) Etylester kyseliny (S,S)-l,3,4,5-tetrahydro-4-[[2-[(acetylti o) -1 -oxo-3 -fenylpropyl] amino]-3 -oxo-2H-2-benzazeρίη-2-octovej
Kyselina (S)-2-(2-acetyltio)benzénpropánová (získaná z dicyklohexylamínovej soli ako bolo už opísané) sa nechá reagovať s produktom z príkladu 3 časť d), postupom podľa príkladu 2 časť b). Získa sa titulný produkt ako bezfarebná pena, Rf= 0,35 (etylacetát: hexán, 1 : 1).
b) Kyselina (S,S)-l,3,4,5-tetrahydro-4-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-fenylpropyl)amino]-3-oxo-2H-2-benzazepín-2-octová
Roztok produktu z časti a) v metanole sa spracuje s IN hydroxidom sodným postupom podľa príkladu 2 časť c). Získa sa titulný produkt ako biela pevná látka, t. t. 181 -
- 183 0 (rozklad). Rf = 0,49 (metylénchlorid : kyselina octová : metanol, 20 : 1 : 1), [a]D = + 103,4 ° (c = 0,57, metanol).
Elementárna analýza pre C21H22N2O4S vypočítané: 63,30 % C, 5,56 % H, 7,03 % N, 8,05 % S, 8,30 % SH nájdené: 63,35 % C, 5,65 % H, 6,87 % N, 8,07 % S,
9,40 % SH.
Príklad 5
Kyselina [S-(R*,R’)]-2,3,4,5-tetrahydro-3-[[2-(sulfanylmetyl)-1 -oxo-3-fenylpropyl] amino] -2-oxo-1 H-benzazepín-1 -octová
a) Etylester kyseliny [S-(R*,R*)]-2,3,4,5-tetrahydro-3-[[2-[-(acetyltio)metyl] -1 -oxo-3 -fenylpropyl] amino]-2-oxo-1H-2-benzazepín-1 -octovej
Efedrínová soľ kyseliny (S)-2-[(acetyltio)metylJ-benzénpropánovej (1,547 g, 3,83 mmol, 1,01 ekv.) sa suspenduje v etylacetáte (72 ml), premyje sa zriedenou kyselinou chlorovodíkovou (72 ml vody + 5,4 ml 1,0 N kyselina chlorovodíková), soľankou (12 ml), suší sa (bezvodý síran horečnatý), filtruje sa a odparí do sucha. Bezfarebný sirup sa suší vo vákuu počas 1 hodiny. Získa sa 1,062 g kyseliny (S)-2-[(acetyltio)metyl]benzénpropánovej.
Voľná kyselina sa rozpustí v suchom dimetylforrnamide (21,8 ml), ochladí na 0 °C (kúpeľ ľad-soľ), spracuje sa s hydrátom 1-hydroxybenztriazolu (540 mg, 3,99 mmol) a 1-etyl-3-(3-dimetylaminopropyl)karbodiimidom (792 mg, 4,13 mmol) a mieša sa pri 0 °C pod argónom 1,0 hodiny. Číry roztok sa spracuje s etylesterom kyseliny (S)-2,3,4,5-tetrahydro-3-amino-2-oxo-lH-benzazepín-l-octovej (pripravený postupom podľa Watthey-a a spol., J. Med. Chem. 28, str. 1511 - 1516 (1985)) (1, 0 g, 3,81 mmol) a v miešaní sa pokračuje pri 0 °C počas 1,0 hodiny a pri teplote miestnosti počas 1,0 hodiny. Reakčná zmes sa zriedi etylacetátom (100 ml), premyje sa postupne vodou (15 ml), 5 % hydrogensíranom draselným (2x15 ml), nasýteným hydrogenuhličitanom sodným (15 ml) a soľankou (15 ml), suší sa (bezvodý síran horečnatý), filtruje sa, odparí do sucha a suší vo vákuu. Surový produkt sa chromatografúje na stĺpci silikagélu (Merck), za elúcie stĺpca etylacetátom : hexánom (1 : 4, 1 : 2). Získa sa 1,725 g produktu ako sirupu, Rf = = 0,42 (etylacetát: hexán, 1:1).
b) Kyselina [S-(R*,R’)]-2,3,4,5-tetrahydro-3-[[2-(sulfanylmetyl)-1 -oxo-3-fenylpropyl]amino]-2-oxo-111-benzazepín-1-octová
Roztok etylesterového produktu z časti a) (1,725 g, 3,574 mmol) v metanole (18 ml) sa prebubláva argónom počas 30 minút, ochladí sa na 0 0 (ľad-soľ kúpeľ) a potom sa spracuje po kvapkách s vopred prebublaným (argón, 30 min.) roztokom 1,0 N hydroxidu sodného (14,3 ml, 4 ekv.) za udržovania prebublávania argónom počas pridávania a trvania reakcie. Reakčná zmes sa mieša pri 0 0 počas 1,0 hodiny, okyslí sa pri 0 0 5 % hydrogensíranom draselným (60 ml) na pH 1,0. Potom sa extrahuje etylacetátom (2 x 120 ml). Organické extrakty sa premyjú soľankou (30 ml), sušia (bezvodý síran sodný), odfiltrujú, odparia do sucha. Surový produkt sa rozpustí v metylénchloride (10 ml) a spracuje po častiach s hexánom (50 ml), škrabaním zmes tuhne. Supematant sa zleje a pevné látky sa triturujú s ďalším hexánom (2 x 50 ml) a pentánom (2 x x 100 ml), za miešania s prvými 100 ml pentánu počas 4 hodín a s ďalšími 100 ml cez noc pod argónom. Získaný produkt sa potom suší vo vákuu 12 hodín. Získa sa 1,438 g produktu ako amorfnej pevnej látky, Rf = 0,53 (metylénchlorid : metanol : kyselina octová, 20 : 1 : 1), [a]D = = -140,4 0 (c = 0, 76, metanol).
Elementárna analýza pre C22H24N2O4S .0,1; C5H|2 vypočítané: 64,42 % C, 6,07 % H, 6,66 % N, 7,63 % S, 7,87 % SH nájdené: 64,07 % C, 6,13 % H, 6,43 % N, 7,25 % S,
7,14 %SH.
1H NMR (CDCI,) : 1,42 (t, 1H), 1,95 (m, 1H), 2,44 - 2,90 (m, 7H), 3,27 (m, 1H), 4,37 (d, 1H, >17 Hz), 4,52 (m, 1H), 4,67 (d, 1H, J=17 Hz), 6,86-8,00 (m, 9H).
Príklad 6
Kyselina [S-(R*,R*)]-2,3,4,5-tetrahydro-3-[(2-sulfanyl-1 -oxo-3-fenylpropyl]amino]-2-oxo-lH-benzazepín-l -octová
a) Etylester kyseliny [S-(R*,R*)]-2,3,4,5-tetrahydro-3-[[2-(acetyltio)-l-oxo-3-fenylpropyl]amino]-2-oxo-lH-benzazepín-1-octovej
Suspenzia dicyklohexylamínovej soli kyseliny (S)-2-(acetyltio)benzénpropánovej (1,70 g, 4,19 mmol) sa suspenduje v etylacetáte (120 ml), premyje sa 5 % hydrogensíranom draselným (5 x 20 ml) a soľankou (25 ml). Suší sa (bezvodý síran horečnatý), odparí po filtrácii až do sucha a suší vo vákuu. Získa sa 954 mg voľnej kyseliny ako sirupu.
Táto voľná kyselina sa rozpustí v suchom metylénchloride (25 ml), ochladí na 0 0 (kúpeľ ľad-soľ), spracuje sa s hydrátom 1-hydroxybenztriazolu (594 mg, 4,40 mmol) a 1-etyl-3-(3-dimetylaminopropyl)karbodiimidom (870 mg, 4,54 mmol) a mieša sa pri 0 ° 1,0 hodiny. Roztok sa spracuje s roztokom etylesterom kyseliny (S)-2,3,4,5-tetrahydro-3-amino-2-oxo-lH-benzazepín-l-octovej (pripravený podľa Wathey-a a spol., J. Med. Chem. 28, str. 1511 - 1516 (1985)) (1,0 g, 3,81 mmol) v suchom metylénchloride (10 ml) a v miešaní sa pokračuje pri 0 °C počas 1,0 hodiny a pri teplote miestnosti počas 1,5 hodiny. Reakčná zmes sa zriedi etylacetátom (100 ml), premyje sa postupne vodou (15 ml), 5 % hydrogensíranom draselným (2 x x 15 ml), nasýteným hydrogensíranom sodným (15 ml), suší sa (bezvodý síran sodný), filtruje sa, odparí do sucha a suší vo vákuu. Surový produkt sa chromatograíuje na stĺpci silikagélu (Merck), za elúcie stĺpca zmesí etylacetát : hexán (1 : 4, 1 : 2). Získa sa 1,632 g produktu ako sirupu. Ďalších 127 mg izomémej zmesi (1:1 pomer) sa tiež získa zo stĺpca, Rf = 0,50 (etylacetát: hexán, 1:1).
b) Kyselina [S-(R*,R*)]-2,3,4,5-tetrahydro-3-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-fenylpropyl)amino]-2-oxo-1 H-benzazepín-1 -octová
Roztok etylesterového produktu z časti a) (1,57 g, 3,35 mmol) v metanole (17,0 ml) sa prebubláva argónom počas 30 minút, ochladí sa na 0 0 (ľad-soľ kúpeľ) a potom sa spracuje po kvapkách s vopred prebublaným (argón, 30 min.) roztokom 1,0 N hydroxidu sodného (13,4 ml, 4,0 ekv.) za udržovania prebublávania argónom počas pridávania a trvania reakcie. Reakčná zmes sa mieša pri 0 ° počas 1,0 hodiny, okyslí sa pri 0 0 5 % hydrogensíranom draselným (60 ml) na pH 1,0 a potom sa extrahuje etylacetátom (2 x 110 ml). Organické extrakty sa premyjú soľankou (30 ml), sušia (bezvodý síran sodný), odfiltrujú, odparia sa do sucha a sušia vo vákuu. Surový produkt sa rozpustí v metylénchloride (10 ml) a spracuje po častiach s hexánom (50 ml), škrabaním zmes tvorí pevnú látku. Supernatant sa zleje a pevné látky sa triturujú s ďalším hexánom (2 x 50 ml) a pentánom (2 x 100 ml), za miešania s prvými 100 ml pentánu počas 4 hodín a s ďalšími 100 ml cez noc pod argónom. Získaný produkt sa potom suší vo vákuu 12 hodín. Získa sa 1,237 g produktu, Rf = 0,58 (metylénchlorid : metanol : kyselina octová, 20 : 1 : 1), [a]D = - 155,5 0 (c = 0,73, metanol).
Elementárna analýza pre C2|H22N2O4S . 0,1 C5H12.0,18 H2O vypočítané: 63,14 % C, 5,81 % H, 6,85 % N, 7,84 % S, 8,09 % SH nájdené: 63,14 % C, 5,85 % H, 6,58 % N, 7,50 % S,
7,05 % SH.
lH-NMR-(CDClj) : 1,88 (m, 1H), 1,97 (d, 1H), 2,62 (m, 2H), 3,07 (m, 2H), 3,25 (m, 1H), 3,51 (m, 1H), 4,39 (d, 1H, J=17 Hz), 4,45 (m, 1H), 4,64 (m, 1H, J=17 Hz), 7,07 - 7,41 (m, 9H).
Príklad 7
Kyselina [2S-[2ct,5a(R*)]]-5,6-dihydro-5-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-fenylpropyl]amino]-4-oxo-2-fenyl-2H-l,3-tiazín-3(4H)-octová
a) Etylester kyseliny (2S-cis)-5,6-dihydro-5-ftalimido-4-oxo-2-fenyI-2H-l,3-tiazín-3(4H)-octovej
Postupom podľa US patentu 4460579 príklad 1 (a) až 1 (c), sa získa 15,6 g diastereomémeho produktu ako zmesi. Zmes sa refluxuje v éteri (500 ml) počas 4 hodín, ochladí sa na ľadovom kúpeli a odfiltrovaním sa získa 5,9 g etylesteru kyseliny (2R-trans)-5,6,dihydro-5-ftalimido-4-oxo-2-fenyl-2H-l,3-tiazín-3(4H)-octovej, t. t. 166 až 168 °C, Rf = 0,40 /hexány : etylacetát, 1:1/, [a]D = -72,9 ° (c = 1, chloroform).
Elementárna analýza pre C22H22N20jS vypočítané: 62,25 % C, 4,75% H, 6,60% N, 7,77% S nájdené: 62,21 % C, 4,82 % H, 6,63 % N, 7,52 % S.
Trituráciou zostávajúcej zmesi produktu s refluxujúcim éterom (125 ml) sa získa druhá časť 0,9 g (2R-trans)-izoméru produktu. Zvyšok sa trituruje opäť s refluxujúcim éterom a získa sa 0,75 g nerozpustnej substancie (väčšinou (2R-trans)izomér) a 7,1 g materiálu obohateného (2S-cis)izomérom. 6,0 g obohateného (2S-cis)-izomérneho materiálu sa chromatografuje na dvoch spojených Waters Prep L C kolónach a eluuje hexány : etylacetátom (3 : 1). Spojením produktov obsahujúcich frakciu sa získa 4,8 g etylesteru kyseliny (2S-cis)-5,6-dihydro-5-ftalimido-4-oxo-2-fenyl-2H-l,3-tiazín-3(4H)-octovej, t. t. 66 až 68 °C, [<x]D = -101,2 °.
TLC rovnaká ako pre izomér A.
Elementárna analýza pre C22H20N2O5S . 0,2 H2O vypočítané: 61,83'% C, 4,79% H, 6,55% N, 7,50% S nájdené: 61,83 % C, 5,07 % H, 6,25 %N, 7,42 % S.
b) Etylester kyseliny (2S-cis)-5,6-dihydro-5-amino-4-oxo-2-feny 1-2H-1,3-tiazín-3(4H)-octovej
Roztok (2S-cis) izoméru produktu z časti a) (približne 85 % diastereomérne čistý, 3,03 g, 7,1 mmol v chloroforme (15 ml) sa spracuje s metylhydrazínom (850 μΐ, 736 mg, 16,0 mmol). Po miešaní pri teplote miestnosti počas 24 hodín sa zmes zriedi etylacetátom a etylesterom a filtruje sa. Filtrát sa extrahuje dvakrát 0,5 N kyselinou chlorovodíkovou a spojené vodné extrakty sa zalkalizujú IN hydroxidom sodným. Vodná zmes sa extrahuje trikrát metylénchloridom a spojené metylénchloridové extrakty sa sušia (síran sodný), filtrujú a oddestilovaním poskytnú 1,648 g produktu vo forme nažltlého oleja, Rf = 0,43 (metylénchlorid : octová kyselina : metanol, 8:1:1). NMR analýza ukazuje, že bol získaný produkt čistoty približne 84 %.
c) Etylester kyseliny [2S-[2a,5a(R*)]]-5,6-dihydro-5-[[2-(acetyltio)-l-oxo-3-fenylpropyl]amino]-4-oxo-2-fenyl-2H-1,3 -tiazín-3(4H)-octovej
Dicyklohexylamínová soľ kyseliny(S)-2-(acetyltio)-benzpropánovej (1,318 g, 3,25 mmol) sa rozdelí medzi etylacetát a 5 % hydrogensíran draselný. Etylacetátová vrst va sa premyje vodou a soľankou, potom sa suší (síran sodný), filtruje a oddestilovaním sa získa voľná kyselina ako bezfarebný olej. Zmes tejto voľnej kyseliny a (2S-cis)-produktu z časti (b) (84 % diastereomérna čistota, 960 mg, 3,26 mmol) sa rozpustí v metylénchloride (25 ml) a spracuje s hydrátom 1-hydroxybenzotriazolu (622 mg, 4,6 mmol), potom sa ochladí na -10 °C. Zmes sa postupne spracuje s 1-etyl-3-(3-dimetyl-aminopropyl)karbodiimidom (687 mg, 3,58 mmol). Po pomalom ohriatí na 0 °C počas jednej hodiny sa zmes postupne ohreje na teplotu miestnosti. Po 4 hodinách sa roztok zriedi etylacetátom a premyje sa postupne vodou, 5 % hydrogensíranom draselným, vodou, nasýteným hydrogenuhličitanom sodným a soľankou, potom sa suší (síran sodný), filtruje a oddestiluje. Zvyšok sa spracuje rýchlou chromatografiou (Merck silikagél, 1:1- etylacetát : hexán), získa sa 804 mg produktu ako bezfarebnej peny, Rf = 0,33 (50 % etylacetát v hexánoch). NMR analýza ukazuje, že materiál má 91 % diastereomému čistotu vzhľadom na acetyltiocentrum.
d) Kyselina [2S-[2a,5a(R*)[[-5,6-dihydro-5-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-fenylpropyl]amino]-4-oxo-2-fenyl-2H-l,3-tiazín-3(4H)-octová
Roztok etylesterového produktu z časti c) (500 mg, 1,0 mmol) v metanole (5 ml, zbavený kyslíka prebublávaním argónom) pri 0 °C sa spracuje s ľadovo chladným IN hydroxidom sodným (5 ml, zbavený kyslíka prebublávaním argónom) a zvyšná zmes sa mieša pri 0 °C pod argónom 30 minút. Roztok sa okyslí 10 % hydrogensíranom draselným (15 ml), zriedi vodu a extrahuje etylacetátom. Etylacetátový extrakt sa premyje vodou a soľankou, potom sa suší (síran sodný), filtruje a odparením sa získa olej[pena. Tento materiál sa spracuje rýchlou chromatografiou (Merck silikagél, 20 : 1 : 1, metylénchlorid : metanol : kyselina octová). Frakcie, obsahujúce produkt sa spoja a oddestilujú a zvyšok sa vyberie do etylacetátu a premyje sa postupne vodou, 0,5N kyselinou chlorovodíkovou a soľankou, potom sa suší (síran sodný), filtruje a opäť sa zakoncentruje. Výsledný olej sa rozpustí v malom množstve etylacetátu a etyléteru a trituruje s hexánom. Zmes sa zakoncentruje do sucha, rozmieša v hexáne, opäť zakoncentruje do sucha a suší vo vákuu. Získa sa 392 mg produktu ako bielej peny, Rf = 0,24 (metylénchlorid : metanol : kyselina octová, 20 : : 1 : 1), [a]D = -13,2 0 (c = 0,5, chloroform).
HPLC: YMC S3 ODS kolóna (6,0 x 150 mm), elúcia 44 % A: 90 % vody - 10 % metanol - 0,1 % kyselina fosforečná a 56 % B: 10 % voda - 90 % metanol - 0,2 % kyselina fosforečná, prietoková rýchlosť 1,5 ml[min. detekcia pri 220 nm, tR = 26,22 min. a tR = 24,64 min. (9,3 % 5a (S*) izomér). Elementárna analýza pre C21H22N2O5S2.0,17 H2O vypočítané: 58,18 % C, 5,19 % H, 6,46 % N, 14,79 % S, 7,63 % SH nájdené: 58,20 % C, 5,51 % H, 6,44 % N, 14,46 % S,
6,60 % SH.
Príklad 8
Kyselina [2S-[2a,5a(R*]]5,6-dihydro-5-[[(2-sulfanylmetyl)-l-oxo-3-fenylpropyl]amino]-4-oxo-2-fenyl-2H-l,3-tiazín-3(4H)-octová
a) Etylester kyseliny [2S-[2a,5a (R*)]]-5,6-dihydro-5-[[-2-[(acetyltio)metyl]-l-oxo-3-fenylpropyl]amino]-4-oxo-2-fenyl-2H-l,3-tiazín-3(4H)-octovej
Kyselina (S)-2-[(acetyltio)metyl]benzénpropánová (získaná z efedrínovej soli ako už bolo opísané skôr) sa nechá reagovať s produktom z príkladu 7 časť b) postupom podľa príkladu 1 časť b), získa sa titulná zlúčenina ako biela pena, Rf = 0,29 (50 % etylacetát v hexánoch).
NMR analýza indikuje, že produkt je diastereoméme čistý.
b) [2S-[2a,5a (R’)]]-5,6-Dihydro-5-[[2-(suIfanylmetyl)-l-oxo-3 -fenylpropyl] amino]-4-oxo-2-fenyl-2H-1,3-tiazín-3(4H)-octová kyselina
Roztok produktu z časti a) v metanole sa spracuje s 2N hydroxidom sodným podľa postupu z príkladu 1 časť c). Získa sa titulný produkt ako relatívne tvrdá biela pena. Rf = = 0,29 (metylénchlorid : metanol : octová kyselina 20 : 1 : : 1), [a]D = +42,9 0 (c = 1,0, chloroform).
HPLC: YMC S3 ODS kolóna (6,0 x 150 mm), elúcia 44 % A: 90 % vody - 10 % metanol - 0,2 % kyselina fosforečná a 56 % B: 10 % voda - 90 % metanol - 0,2 % kyselina fosforečná, prietok 1,5 ml/min. detekcia pri 220 nm, tR = = 33,45 min. (99,1 %).
Elementárna analýza pre C22H24N2O4S2 vypočítané: 59,44 % C, 5,44 % H, 6,30 % N, 14,42 % S, 7,44 % SH nájdené: 59,63 % C, 5,84 % H, 5,99 % N, 14,54 % S,
6,85 % SH.
Príklad 9 Kyselina (S,S)-hexahydro-3-[[2-(sulfanylmetyl)-l-oxo-3-fenylpropyljamino] -2-oxo-1 H-azepín-1 -octová
a) Metylester N2[-[(l,l-dimetyletoxy)karbonyl]-N6-[(fenylmetoxy)-karbonyl]-L-lyzínu
Uhličitan cezný (4,28 g, 13,1 mmol) sa pridá k zmesi N2-[( 1,1 -dimetyletoxy)karbonyl]-N6-[(fenylmetoxy)-karbonyl]-L-lyzínu (10 g, 26,3 mmol) a 20 % voda-metanolu (60 ml). Roztok sa počas 5 minút homogenizoval odtiahnutím rozpúšťadla a odstránením zostávajúcej vody azeotropicky a acetonitrilom (3x). Zvyšný olej sa suší vo vákuu, rozpustí v suchom dimetylformamide a spracuje sa s metyljodidom (3,2 ml, 2,0 ekv.). Reakčná zmes sa mieša pri teplote miestnosti 1,5 hodiny pod argónom, zriedi sa etylacetátom (200 ml) a postupne premyje vodou (2 x 25 ml), nasýteným hydrogenuhličitanom sodným (25 ml) a soľankou (25 ml). Organická fáza sa suší (bezvodý síran horečnatý), filtruje a odparí do sucha a sušením vo vákuu sa získa 10,11 g produktu ako svetložltého sirupu, Rf = 0,30 (etylacetát: hexány, 1 : 2).
b) (S)-3-[[( 1,1 -Dimetyletoxy)karbonyl]amino]-hexahydro-2H-azepín-2-on
Roztok metylesterového produktu z časti a) (8,532 g, 21,63 mol) v suchom metanole (100 ml) sa spracuje s 10 % paládiom na uhlí ako katalyzátorom (2,13 g) a hydrogenuje sa pri 350 kPa počas 2 hodín. Zmes sa zriedi metanolom (100 ml) a filtruje cez celitový stlpček v miliporovej jednotke za premytia jednotky metanolom (3 x 100 ml). Čistý filtrát sa odparí do sucha, suší sa vo vákuu a výsledný olej sa rozpustí v suchom xyléne (70 ml). Roztok sa refluxuje pod argónom 20 hodín, ochladí na teplotu miestnosti, zriedi sa etylacetátom (425 ml) a postupne sa premyje 5 % hydrogensíranom draselným (85 ml), nasýteným hydrogenuhličitanom sodným (85 ml) a soľankou (85 ml). Organická fáza sa suší (síran horečnatý), filtruje, odparí sa do sucha a suší vo vákuu. Surový produkt sa chromatografuje na stĺpci silikagélu (Merck), za elúcie stĺpca etylacetátom : hexánom (1 : 1). Získa sa 2,76 g produktu ako bielej pevnej látky, 1.1. 146 až 147 °C, Rf = 0,58 (etylacetát) [a]D = +4,5 0 (c = 1,0, metanol).
Elementárna analýza pre ΟιιΗ2οΝ203:
vypočítané: 57,87% C, 8,83% H, 12,27% N, nájdené: 58,12% C, 8,63 % H, 12,26% N.
c) Etylester kyseliny (S)-3-[[(l,l-dimetyletoxy)karbonyl]amino] -hexahydro-2-oxo-1 H-azepín-1 -octovej
Suspenzia 2H-azepín-2-onového produktu z časti b) (2,966 g, 12,99 mmol) v suchom tetrahydrofuráne (21,0 ml) sa spracuje s l,0M terc.butoxidom draselným/tetrahydrofuránom (16,9 ml, 1,3 ekv.) a zmieša sa pod argónom pri teplote miestnosti 5 minút. Číry svetlohnedý roztok sa spracuje po kvapkách s etylbrómacetátom (2, 34 ml, 1,7 ekv.), mieša pri teplote miestnosti 1,0 hodinu, potom sa zriedi etylacetátom (100 ml). Zmes sa premyje nasýteným hydrogenuhličitanom sodným (20 ml), 5 % hydrogensíranom draselným (15 ml) a soľankou (15 ml), suší sa (bezvodý síran horečnatý), filtruje, odparí do sucha a suší vo vákuu. Surový produkt sa chromatografuje na stĺpci silikagélu (Merck), za elúcie stĺpca hexánom a zmesami etylacetátu : : hexánu (1 : 16, 1 : 3). Získa sa 3,387 g produktu ako sirupu, Rf = 0,55 (etylacetát: hexán, 1:1).
d) Hydrochloridová soľ etylesteru kyseliny (S)-3-amino-hexahydro-2-oxo-l H-azepín-1 -octovej
Roztok etylesterového produktu z časti c) (3,278 g,
10,13 mmol) v suchom dioxáne (80 ml) sa spracuje so 4,0M kyselinou chlorovodíkovou/dioxánom (31 ml, 0,124 mol, 12 ekv.) a mieša sa pri teplote miestnosti pod argónom 20 hodín. Reakčná zmes sa odtiahne do sucha, odparí sa produkt niekoľkokrát z éteru, potom sa suší vo vákuu. Získa sa 2,541 g produktu ako biela kryštalická hygroskopická pevná látka, Rf = 0,32 (metylénchlorid : metanol : octová kyselina, 8:1:1).
e) Etylester kyseliny (S,S)-3-[[2-[(acetyltio)metyl]-l-oxo-3-fenyl-propyl] amino]-2-oxo-1 H-azepín-1 -octovej
Efedrínová soľ kyseliny (S)-2-[(acetyltio)metyl]-benzénpropánovej (1,625 g, 4,028 mmol, 1,01 ekv.) sa suspenduje v etylacetáte (75 ml), premyje sa zriedenou kyselinou chlorovodíkovou (72 ml vody + 5,7 ml 1,0 N kyselina chlorovodíková), potom 40 ml voda + 1,9 ml 1,ON kyselina chlorovodíková), soľankou (15 ml), suší sa (bezvodý síran sodný), filtruje a odparí do sucha. Bezfarebný sirup sa suší vo vákuu a odparí do sucha. Bezfarebný sirup sa suší vo vákuu 1 hodinu. Získa sa 1,05 g voľnej kyseliny.
Táto voľná kyselina sa rozpustí v suchom dimetylformamide (25 ml), ochladí na 0 °C (kúpeľ ľad-soľ), spracuje s hydrátom 1-hydroxybenztriazolu (567 mg, 4,20 mmol) a l-etyl-3-(3-dimetylaminopropyl)karbodiimidom (832 mg, 4,34 mmol) a mieša sa pri 0 °C pod argónom 1,0 hodinu. Číry roztok sa spracuje s roztokom hydrochloridovej soli etylesterového produktu z časti d) (1,0 g, 3,988 mmol) v suchom dimetylformamide (3,0 ml) a 4-metylmorfolínu (0,45 ml, 1,0 ekv.) a v miešaní sa pokračuje pri 0 °C 1,0 hodinu a pri teplote miestnosti 2,0 hodiny. Reakčná zmes sa zriedi etylacetátom (100 ml), premyje sa postupne vodou (15 ml), 5 % hydrogensíranom draselným (2x15 ml), nasýteným hydrogenuhličitanom sodným (15 ml) a soľankou (15 ml). Suší sa (bezvodý síran sodný), filtruje, odparí do sucha a suší vo vákuu. Surový produkt sa chromatografuje na stĺpci silikagélu (Merck), za elúcie stĺpca etylacetát: hexán (1 : 4, 1 : 2). Získa sa 1, 618 g produktu ako sirupu, Rf = 0,030 (etylacetát: hexán, 1:1).
f) (S,S)-Hexahydro-3-[[2-(sulfanylmetyl)-l-oxo-3-fenylpropyl] amino]-2-oxo-1 H-azepín-1 -octová kyselina
Roztok etylesterového produktu z časti e) (1,537 g, 3,53 mmol) v metanole (18 ml) sa prebubláva argónom 30 minút, ochladí na 0 °C (kúpeľ ľad-soľ) a potom po kvapkách spracuje s vopred prebublaným (argón, 30 minút) roztokom l,0N hydroxidom sodným (14,2 ml, 4 ekv.) za udržiavania prebublávania argónom počas pridávania a počas trvania reakcie. Reakčná zmes sa mieša pri 0 °C 1,0 hodinu, okysli pri 0 °C 5 % hydrogensíranom draselným (60 ml), na pH 2,0, potom sa extrahuje etylacetátom (2 x x 100 ml). Organické extrakty sa premyjú soľankou (25 ml), sušia (bezvodý síran sodný), filtrujú, odparia do sucha a sušia vo vákuu. Surový produkt sa rozpustí v metylénchloride (5 ml) a po častiach sa spracuje s hexánom (50 ml), poškrabaním zmes tuhne. Supematant sa dekantuje a pevné látky sa triturujú viackrát s hexánom (3 x 50 ml) a pevné látky sa odparia z pentánu (4 x 40 ml). Výsledný produkt sa suší vo vákuu 12 hodín, získa sa 1,261 g produktu ako amorfnej pevnej látky, Rf = 0,43 (metylénchlorid : metanol : kyselina octová, 20 : 1 : 1), [oc]D = +20,2 0 (c = 0,61, metanol).
1H-NMR (400 MHz, CDCIj): 1,46 (t, 3H), 1,81 (m, 6H),
2,60 (m, 2H), 2,87 (m, 3H), 3,21 (m, 1H), 3,71 (m, 1H), 4,17 (s, 2H), 4,68 (m, 1H), 7,13 - 7,27 (m, 5H), Elementárna analýza pre C18H;4N2O4S . 0,2 C5H12.0,45 H2O vypočítané: 58,96 % C, 7,11 % H, 7,24 % N, 8,28 % S, 8,54 % SH nájdené: 58,96 % C, 6,86 % H, 7,07 % N, 8,31 % S,
8,43 % SH.
Príklad 10
Kyselina (S,S)-hexahydro-3-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-fenylpropyl)amino]-2-oxo-1 H-azepín-1 -octová
a) Etylester kyseliny (S,S)-hexahydro-3-[[2-(acetyltio)-l-oxo-3-fenylpropyl]amino]-2-oxo-1 H-azepín-1 -octovej
Suspenzia dicyklohexylamínovej soli kyseliny (S)-2-(acetyltio)benzénpropánovej (2,81 g, 6,93 mmol alebo 1,01 ekv.) sa suspenduje v etylacetáte (200 ml), premyje sa 5 % hydrogenuhličitanom draselným (5 x 30 ml) a soľankou (40 ml), suší sa (bezvodý síran horečnatý), filtruje sa, odparí sa do sucha a sušením vo vákuu poskytne 1,737 g voľnej kyseliny ako číreho sirupu.
Táto voľná kyselina sa rozpustí v suchom dimetylénchloride (30 ml), ochladí na 0 °C (kúpeľ ľad-soľ), spracuje s hydrátom 1-hydroxybenztriazolu (978 mg, 7,23 mmol) a l-etyl-3-(3-dimetylaminopropyl)karbodiimidom (1,435 mg, 7,49 mmol) a mieša sa pri 0 °C 1,0 hodinu. Roztok sa spracuje s roztokom (S)-amino-hexahydro-2-oxo-lH-azepín-l-octovou kyselinou vo forme hydrochloridovej soli etylesteru (1,58 g, 6,30 mmol) v suchom metylénchloride (10 ml) a 4-metylmorfolínom (0,77 ml, 7,01 mmol) a v miešaní sa pokračuje pri 0 °C 1,0 hodinu a pri teplote miestnosti 1,5 hodiny. Reakčná zmes sa zriedi etylacetátom (170 ml), premyje sa postupne vodou (25 ml), 5 % hydrogensíranom draselným (2 x 25 ml), nasýteným hydrogenuhličitanom sodným (25 ml) a soľankou (25 ml), suší sa (bezvodý síran horečnatý), filtruje, odparí do sucha a suší vo vákuu. Surový produkt sa chromatografuje na stĺpci silikagélu (Merck), stĺpec sa eluuje etylacetátom : hexánmi (3 : 7), Získa sa 2,045 g produktu ako sirupu. Ďalších 261 mg zmesi izomérov (1:1 pomer) sa získa zo stĺpca, Rf = 0,45 (etylacetát : : hexán, 1:1).
b) Kyselina (S,S)-hexahydro-3-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-fenylpropyljamino] -2-oxo-1 H-azepín-1 -octová
Roztok etylesterového produktu z časti a) (2,044 g, 4,86 mmol) v metanole (25 ml) sa prebubláva argónom 30 minút, ochladí na 0 °C (kúpeľ ľad-soľ), potom sa po kvap kách spracuje s vopred prebublaným (argón, 30 minút) roztokom 1,ON hydroxidu sodného (19,55 ml, 4 ekv.) za udržiavania prebublávania argónom počas pridávania a počas trvania reakcie. Reakčná zmes sa mieša pri 0 °C 1,0 hodinu, okysli pri 0 °C 5% hydrogensíranom draselným (85 ml), na pH 2,0, potom sa extrahuje etylacetátom (2 x x 140 ml). Organické extrakty sa premyjú soľankou (35 ml), sušia (bezvodý síran sodný), filtrujú, odparia do sucha a sušia vo vákuu. Surový produkt sa rozpustí v metylénchloride (10 ml) a po častiach sa spracuje s hexánom (50 ml). Poškrabaním zmes tuhne. Supematant sa odleje a pevné látky sa triturujú s hexánom (2 x 50 ml) a pentánom (2 x 100 ml), a miešania s prvými 100 ml pentánu 4 hodiny a ďalšími 100 ml cez noc pod argónom. Získaný produkt sa potom suší vo vákuu 12 hodín. Získa sa 1,618 g produktu ako amorfnej pevnej látky, Rf = 0,53 (metylénchlorid : : metanol: kyselina octová, 10 : 1 : 1), [a]D = +8,04 0 (c = = 0,56, metanol).
1H-NMR (400 MHz, CDCIj): 1,71 (m, 6H), 2,02 (d, 1H), 3,16 (m, 3H), 3,61 (m, 1H), 3,70 (m, 1H), 4,17 (s, 2H), 4,65 (m, 1H), 7,18 - 7,72 (m, 5H).
Elementárna analýza pre C|7H22N2O4S: vypočítané: 58,27 % C, 6,33 % H, 7,99 % N, 9,15 % S, 9,44 % SH nájdené: 58,43 % C, 6,56 % H, 7,85 % N, 8,96 % S,
10,27%SH.
Príklad 11
Kyselina [3R-[3a,6a(S*),9aB]]-oktahydro-6-[(2-sulfanyl-1 -oxo-3-fenylpropyl)aminoj-5-oxotiazolo[3,2-a]azepín-3-karboxylová
a) N2-Ftaloyl-L-lyzín
Zmes N6-[(l,l-dimetyletoxy)karbonyI|-L-lyzínu (10,827 g, 43,9 mmol) a uhličitanu sodného (4,665 g, 44,0 mmol) sa mieša v 170 ml etanolu : vody (1 : 3) 2,5 hodiny. Etanol sa odstráni odparením na rotačnej odparke a vodný roztok sa spracuje s N-karbetoxyftalimidom (9,66 g, 44 mmol). Po miešaní pri teplote miestnosti počas 1,5 hodiny sa roztok odfiltruje, spracuje s metylénchloridom (200 ml) a vodná vrstva sa okysli 6N kyselinou chlorovodíkovou (na pH 2,8). Vrstvy sa trepú a oddelia. Vodná vrstva sa opäť extrahuje etylacetátom a spojené organické vrstvy sa sušia (síran horečnatý), filtrujú a odtiahnutím sa získa takmer bezfarebná olejjsklovitá látka (19,510 g).
Zvyšok sa ochladí na 0 °C, spracuje sa s kyselinou trifluóroctovou (150 ml) a zmes a mieša pri teplote miestnosti 3 hodiny. Kyselina trifluóroctová sa odstráni odparením na rotačnej odparke a zvyšok sa azeotropne dvakrát oddestiluje s toluénom. Surový produkt sa vyberie do vody a nanesie na Dowex AG 50-X2 (100-200 mesh, 300 ml, kyslá forma) stĺpec za elúcie postupne 1 : 1 metanolom : vodou (600 ml), vodou (500 ml) a nakoniec 5 : 95 pyridínom : vodou (1000 ml). Požadované frakcie sa spoja, oddestilujú, vyberú do vody a lyofilizáciou sa získa 7,850 g produktu ako bielej pevnej látky, Rf = 0,57 (n-butanol : voda : kyselina octová : etylacetát, 1:1:1:1).
b) Kyselina [2(S),4R]-4-(metoxykarbonyl)-a-ftalimido-2-tiazolidínpentánová
Kašovitá zmes N2-ftaloyl-L-lyzínu (7,710 g, 27,9 mmol) v suchom dimetylformamide (135 ml) sa spracuje so 4-formyl-l-metylpyridíniumbenzénsulfonátom (7,320 g,
26,2 mmol). Výsledná tmavá zmes sa postupne stane homogénna. Po miešaní pri teplote miestnosti počas 1 hodiny sa zmes spracuje s l,8-diazobicyklo[5.4.0[undec-7-enom (8,15 ml, 8,30 g, 54,5 mmol) a ďalej o 5 minút neskoršie s L-cysteínom vo forme hydrochloridu metylesteru (4,53 g,
26,3 mmol). Tmavý roztok sa mieša počas 2,5 hodiny, potom sa zriedi vodnou kyselinou chlorovodíkovou (pJ 1,7, 300 ml) a chloroformom (150 ml). Vodná vrstva sa upraví na pH 4,3 - 4,4 0,5N kyselinou chlorovodíkovou a postupne sa extrahuje päťkrát chloroformom. Spojené chloroformové extrakty sa premyjú vodou (50 ml), sušia (síran sodný), filtrujú a odparia. Zvyšok sa vyberie do etylacetátu, filtruje sa cez Celíte a zahustí. Získa sa 1,84 g surového produktu ako tmavooranžovo-červeného oleja. Rf = 0,58 pri hlavnej škvrne (kyselina octová : etylacetát, 15 : 85).
NMR ukazuje pomer izomérov 2:1.
c) Metylester kyseliny [3R-(3a,6a)]-oktahydro-6-ftalimido-5-oxotiazolo[3,2-a]azepín-3-karboxylovej
Roztok produktu z časti b) (1,84 g, 4,7 mmol) v tetrahydrofuráne (70 ml) sa spracuje s 2-etoxy-l-etoxykarbonyl-1,2-dihydrochinolínom (1,400 g, 5,67 mmol) a zmes sa mieša pri teplote miestnosti 3 dni. Tetrahydrofúrán sa odstráni na rotačnej odparke a zvyšok sa vyberie do etylacetátu a premyje sa postupne 0,5N kyselinou chlorovodíkovou (2x), 50 % nasýteným hydrogenuhličitanom sodným, vodou a soľankou, potom sa suší (síran sodný), filtruje a rýchlo oddestiluje. Výsledný olej sa spracuje rýchlou chromatografíou (Merck silikagél, 40 - 50 % etylacetát v hexánoch). Získa sa 1,126 g produktu ako zmesi 1 : 1 diastereomérov. Rf = 0,22 a 0,20 (40 % etylacetát v hexáne).
d) Metylester kyseliny [3R-(3a,6a,9aB)]-oktahydro-6-ftalimido-5-oxotiazolo[3,2-a]azepin-3-karboxylovej
Zmes metylesterového produktu z časti c) (1,110 g) a hydrátu kyseliny p-toluénsulfónovej (2,33 g) v benzéne (20 ml) sa refluxuje s odstraňovaním vody (Dean-Starkeov zberač) počas 2,5 hodiny. Ochladená zmes sa zriedi etylacetátom a premyje 50 % nasýteným hydrogensíranom sodným, vodou a soľankou, potom sa suší (síran sodný), filtruje a rýchlo oddestiluje. Zvyšok sa spracuje rýchlou chromatografíou (Merc silikagél, 10-20 % etylacetát v metylénchloride), získa sa takmer čistý produkt ako špinavobiela pena. Pena sa rozpustí v horúcom etylacetáte : hexánoch, ochladí a naočkuje. Potom sa získajú jemné biele ihličky (845 mg). Ďalších 50 mg pevného produktu sa ziska z materského luhu, celkové množstvo čistého roztoku je 895 mg, 1.1. 154 - 155 °C, [a]D = -31,8 0 (c = 0,52, chloroform), Rf = 0,22 (40 % etylacetát v hexáne).
e) Hydrochloridová soľ metylesteru kyseliny (3R-(3a,6a,9afi)]-6-amino-oktahydro-5-oxotiazolo[3,2-a]-azepín-3-karboxylovej
Kašovitá zmes metylesterového produktu z časti d) (875 mg, 2,34 mmol) v absolútnom etanole (50 ml) sa spracuje s hydrazínhydrátom (115 μΐ. 118 mg, 2,37 mmol) a roztok sa periodicky' ohrieva prvé dve hodiny s cieľom solubilizácie. Po miešaní počas 3 dni pri teplote miestnosti sa pridá ďalší hydrazínhydrát (80 μΐ, 82,6 mg, 1,65 mmol) a zmes sa mieša dlhšie než jeden deň. Reakčná zmes sa oddestiluje rýchlo do sucha a biela zostávajúca pevná látka sa mieša v studenej (0 °C) 0,5N kyseline chlorovodíkovej (60 ml) 3,5 hodiny. Pevná látka sa odstráni filtráciou a filtrát sa zalkalizuje IN hydroxidom sodným na pH 11 - 12 a extrahuje metylénchloridom (3x) a etylacetátom. Spojené organické extrakty sa sušia (síran sodný), filtrujú a oddestilujú. Získa sa takmer bezfarebný olej (približne 600 mg). Olej sa spracuje s vodou (10 ml) a l,0N kyselinou chlorovodíkovou (3,0 ml) za miešania až nie je prítomný žiadny olej a zmes sa lyofilizuje. Získa sa 674 mg produktu ako svetložltej pevnej látky, Rf = 0,64 hlavná škvrna (n-butanol: voda : kyselina octová : etylacetát, 1:1:1:1).
f) Etylester kyseliny [3R-[3a,6a(S*),9aB]]-oktahydro-6-[[2-(acetyltio)-l-oxo-3-fenylpropyl]amino]-5-oxotiazolo[3,2-a]-azepín-3-karboxylovej
Hydrochloridová soľ metylesterového produktu z časti
e) (374 mg, 1,33 mmol) sa rozdelí medzi nasýtený hydrogenuhličitan sodný a metylénchlorid. Metylénchloridový extrakt sa suší (síran sodný), filtruje a odparením sa získa voľný amín ako nažltlý olej (302 mg, 1,16 mmol). Potom sa dicyklohexylamínová soľ kyseliny (S)-2-(acetyltio)benzénpropánovej (648 mg, 1,60 mmol) rozdelí medzi etylacetát a 5 % hydrogensíran draselný. Etylacetátová vrstva sa premyje vodou a soľankou, potom sa suší (síran sodný), filtruje a oddestilovaním sa získa voľná kyselina ako bezfarebný olej. Zmes voľného amínu a voľnej kyseliny v metylénchloride (9 ml) sa spracuje s hydrátom hydroxybenztriazolu (550 mg, 4,07 mmol), ochladí sa na 0 °C a postupne sa spracuje s l-etyl-3-(3-dimetylamínopropyl)karbodiimidom (313 mg, 1,63 mmol). Zmes sa mieša pri 0 °C počas 1 hodiny, potom pri teplote miestnosti 3 hodiny. Pridá sa ďalší l-etyl-3-(3-dimetylaminopropyl)karbodiimid (100 mg) a v miešaní sa pokračuje cez noc. Roztok sa zriedi etylacetátom a premyje postupne vodou, 5 % hydrogensíranom draselným, vodou, 30 % nasýteným hydrogenuhličitanom sodným a soľankou, potom sa suší (síran sodný), filtruje a oddestiluje. Výsledný žltý olej sa rýchlo chromatografuje (Merc silikagél, 30 % acetón v hexáne), získa sa 396 mg produktu ako 87 : 13 zmes diastereomérov vedľajšieho reťazca. Táto zmes sa opäť rýchlo chromatografuje (Merck silikagél, 35 - 40 % etylacetát v hexáne). Získa sa 318 mg produktu ako bielej peny (94 - 95 % diastereomérna čistota), Rf = 0,29 hlavná a 0,26 malé škvrny, [6a(R*)izomér[, [a]D =-84,4 ° (c = 0,36, chloroform).
g) Kyselina [3R-[3a,6a(S‘),9aB]]-oktahydro-6-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-fenylpropyl)amino]-5-oxotiazolo[3,2-a]azepín-3-karboxylová
Roztok etylesterového produktu z časti f) (308 mg, 0,68 mmol) v metanole (4 ml, deoxygenovaný prebublávaním argónom) sa spracuje s IN hydroxidom sodným (3,5 ml, zbavený kyslíka prebublávaním argónom) a homogénna zmes sa mieša pod argónom 2 hodiny. Zmes sa okyslí 10 % hydrogensíranom draselným (15 ml), zriedi vodu a extrahuje etylacetátom. Etylacetátový extrakt sa premyje soľankou, suší (síran sodný), filtruje a oddestilovaním sa získa pevná látka. Táto pevná látka sa rozpustí v dimetylformamide (1 ml), zriedi sa etylacetátom a rýchlo chromatografuje (Merck silikagél, 5 % kyselina octová v etylacetáte), získa sa požadovaný produkt ako biela pevná látka, ktorá sa trituruje s etylacetátom[etyléterom, zhromaždí sa filtráciou a sušením sa získa 144 mg produktu, t. t. 217 - 220 °C, Rf = 0,52 (5 % kyselina octová v etylacetáte) [a]D = -64,3 0 (c = 0,36, dimetylformamid). NMR analýza indukuje, že produkt je 93 % diastereomérne čistý so 7 % zodpovedajúceho 6 (R )izoméru.
HPLC: YMC S3 ODS kolóna (6,0 x 150 mm), elúcia 44 % A: 90 % vody - 10 % metanol - 0,2 % kyselina fosforečná a 56 % B: 10 % voda - 90 % metanol - 0,2 % kyselina fosforečná, prietok 1,5 ml[min. za detekcie pri 220 nm, tR = = 12,27 min. indikuje čistotu > 95 % (pomocou HPLC nebola detegovaná žiadna separácia 6a(S*) a 6a(R’). Elementárna analýza pre CI8H22N2O4S2.0,4 H2O vypočítané: 53,82 % C, 5,72 % H, 6,97 % N, 15,96 % S,
8,21 % SH nájdené: 53,88 % C, 5,67 % H, 6,78 % N, 15,37 % S,
4,91 %SH.
Príklad 12
Kyselina [3R-[3a,6a(S*)-9aB ]]-oktahydro-6-[[2-(sulfanylmetyl)-1 -oxo-3-fenylpropyl]amino]-5-oxotiazolo[3,2-a]azeρίη-3-karboxylová
Postupom podľa príkladu 11, ale s použitím kyseliny (S)-2-[(acetyltio)metyl[benzénpropánovcj v časti f) sa získa titulný produkt ako biela pevná látka, t. t. 212 - 213 °C. Rf = 0,55 (5 % kyselina octová v etylacetáte), [a]D = -36,5 0 (c = 0,36 dimetylformamid).
HPLC: YMC S3 ODS kolóna (6,0 x 150 mm), elúcia 44 % A: 90 % vody - 10 % metanol - 0,2 % kyselina fosforečná a 56 % B: 10 % voda - 90 % metanol - 0,2 % kyselina fosforečná, prietok 1,5 ml[min. za detekcie pri 220 nm, tR = = 15,96 min. indikuje čistotu 99,2 %.
Elementárna analýza pre vypočítané: 55,86 % C, 5,92 % H, 6,86 % N, 15,70 % S, 8,09 % SH nájdené: 55,99 % C, 6,01 % H, 6,75 % N, 15,70 % S,
7,81 %SH.
Príklad 13 Kyselina [S-(R*,R*)-3,4,-dihydro-[2-(sulfanylmetyl)-1 -oxo-3-fenylpropyl]amino]-4-oxo-l,5-benzoxazepín-5(2H)-octová
a) N-[( 1,1 -Dimetyletoxy)karbonyl]-0-(2-nitrofenyl)-L-serín
Roztok N-[(l,l-dimetoxy)karbonyl[-L-serínu (24,3 g, 0,118 mol) v suchom dimetylformamide (25 ml) sa prikvapká počas 1,0 hodiny k ochladenej (0 °C, kúpeľ ľad-soľ) suspenzii 60 % hydroxidu sodného (10,1 g, 0,25 mol) v suchom dimetylformamide (200 ml) a v miešaní sa pokračuje pri 0 °C až do upokojenia penenia (asi 2,0 hodiny). Reakčná zmes sa spracuje po kvapkách s l-íluór-2-nitrobenzénom (14,3 ml, 0,13 mol) počas 20 minút, mieša pri 0 °C pod argónom 4,0 hodiny a potom sa naleje do zmesi ľad-voda (750 ml) a extrahuje etylacetátom (2 x 100 ml). Vodná fáza sa upraví na pH 1,0 6N kyselinou chlorovodíkovou (70 ml), extrahuje sa etylacetátom (3 x 500 ml) a spojené organické extrakty sa premyjú soľankou (100 ml), sušia (bezvodý síran sodný), filtrujú, odparia do sucha a sušia vo vákuu. Surový produkt sa chromatografuje na stĺpci silikagélu (Merck) za elúcie stĺpca metylénchloridom : : metanolom : kyselinou octovou (100 : 5 : 0,2). Získa sa 27,22 g produktu ako lepivého žltého sirupu, Rf = 0,27 metylénchlorid : metanol: kyselina octová, 100 : 5 : 0,5).
b) N-[(l,l-Dimetyletoxy)karbonyl]-0-(2-aminofenyl)-L-serín
Roztok produktu z časti a) (27,1 g, 83 mmol) v suchom metanole (500 ml) sa spracuje s 10 % paládiom na uhli ako katalyzátorom (900 mg) a hydrogenuje sa pri 280 kPa počas 2 hodín. Reakčná zmes sa odfiltruje cez stípček celitu v miliporovej jednotke, stípček sa premyje dobre metanolom (5 x 100 ml). Tmavý filtrát sa odparí do sucha a sušením vo vákuu poskytne tmavú pevnú látku. Surový produkt sa trituruje s metylénchloridom : hexánom (1 : 4) a získa sa tak 17,69 g produktu ako svetlonahnedlej pevnej látky; Rf = = 0,15 (metylénchlorid : metanol: kyselina octová, 20.1:1).
c) (S)-3-[[(Dimetyletoxy)karbonyl]amino]-2,3-dÍhydro-l,5-benzoxazepín-4(5H)-on
Roztok produktu z časti b) (16,69 g, 56,3 mmol) v suchom dimetylformamide (121 ml) sa spracuje s 1 -etyl-3-(3-dimetylaminopropyl)karbodiimidom (10,64 g, 55,5 mmol) a mieša sa pri teplote miestnosti 3,0 hodiny. Reakčná zmes sa rozdelí medzi etylacetát (2 x 492 ml) a 1.0N hydrogenuhličitan sodný (492 ml) a spojené organické extrakty sa premyjú vodou (3 x 492 ml), soľankou (492 ml), sušia sa (bezvodý síran horečnatý), filtrujú, odparia sa do sucha a sušia vo vákuu. Surový produkt sa chromatografuje na stĺpci silikagélu (Merck) a elúciou stĺpca etylacetátom : hexánom (1 : 4, 1 : 2, 1 : 1) sa získa 10,5 g produktu vo forme špinavobielych kryštálov, Rf = 0,40 (etylacetát: hexán, 1 :4).
d) Etylester kyseliny (S)-3-[[(dimetyletoxy)karbonyl]amino]-3,4-dihydro-4-oxo-1,5-bcnzoxazepín-5(2H)-octovej
Roztok produktu z časti c) (1,0 g, 3,59 mmol) v suchom tetrahydrofuráne (10 ml) sa ochladí na 0 °C (kúpeľ ľad-soľ) pod argónom, spracuje s práškovým hydroxidom draselným (259 mg, 4,6 mmol) a tetrabutylamóniumbromidom (172 mg, 0,53 mmol), mieša sa 5 minút, potom sa spracuje s etyl-2-brómacetátom (0,50 ml, 1,2 ekv.). Reakčná zmes sa mieša pri teplote miestnosti pod argónom 19,0 hodín, rozdelí sa medzi metylénchlorid (2 x 25 ml) a vodu (13 ml). Spojené organické extrakty sa premyjú vodou (2x13 ml), soľankou (10 ml), sušia sa (bezvodý síran sodný), filtrujú, odparia do sucha a sušia vo vákuu. Surový produkt sa chromatografuje na silikagéli (Merck), elúciou stĺpca zmesami etylacetátu a hexánu (1 : 9, 1 : 4) sa získa 860 mg produktu ako sirupu Rf = 0,67 (etylacetát: hexány, 1:1).
e) Hydrochloridová soľ etylesteru kyseliny (S)-3-amino-3,4-dihydro-4-oxo-l,5-benzoxazepín-5(2H)-octovej
Roztok produktu z časti d) (4,0 g, 11 mmol) v suchom díoxáne (85 ml) sa spracuje so 4,0M kyselinou chlorovodíkovou[dioxánom (33,6 ml, 0,134 mol alebo 12,2 ekv.) a mieša sa pri teplote miestnosti 20 hodín. Reakčná zmes sa odparí do sucha, vzniknutý sirup sa odparí z toluénu (2x) a etanolu (lx), potom sa suší vo vákuu a získa sa 3,466 g produktu ako do zlata sfarbeného sirupu. Rf = 0,48 (metylénchlorid : metanol, 9:1).
f) Etylester kyseliny [S-(R*,R*)]-3-[[2-[(acetyltio)metyl]-l-oxo-3-fenylpropyl]amino]-3,4-dihydro-4-oxo-l,5-benzoxazepín-5(2H)-octovej (S)-2-[(Acetyltio)metyl[benzénpropánová kyselina (získaná z efedrínovej soli ako už bolo opísané) sa nechá reagovať s produktom z časti e) postupom podľa príkladu 1 časť b). Získa sa titulný produkt ako biela sirupovitá pena. Rf=0,62 (etylacetát: hexány, 1:1).
g) Kyselina [S-(R,R,)]-3,4,-dihydro-3-[[2-(sulfanylmetyl)-1 -oxo-3-fenylpropyl]amino]-4-oxo-1,5-benzoxazepín-5(2H)-octová
Roztok produktu z časti í) v metanole sa spracuje s l,0N hydroxidom sodným postupom podľa príkladu 1 časť
c). Získa sa titulný produkt ako amorfná pevná látka. Rf = = 0,62 (metylénchlorid : metanol : kyselina octová, 20 : 1 : : 1 : l),[a]D* = -140,2° (c = 0,61, metanol).
1H NMR (400 MHz, CDClj): 1,43 (t, 1H), 2,51 - 2,90 (m, 5H), 4,17 (t, 1H, J = 10 Hz), 4,29 (d, 1H, J = 17 Hz), 4,69 (t, 1H, J = 7 Hz), 4,71 (d, 1H, J = 17 Hz), 6,76 (d, 1H), 7,05 - 7,26 (m, 9H).
Elementárna analýza pre C21H22N2O5S: vypočítané: 60,86 % C, 5,35 % H, 6,76 % N, 7,74 % S, 7,98 % SH nájdené: 60,85 % C, 5,54 % H, 6,74 % N, 7,66 % S,
6,29 % SH.
Príklad 14
Kyselina [S-(R*,R*)]-3,4,-dihydro-3-[(2-sulfanyl-l -oxo-3-fenylpropyl)amino]-4-oxo-l,5-benzoxazepin-5(2H)-octová
a) Etylester kyseliny [S-(R*,R*)]-3-[[2-(acetyltio)-l-oxo-3-fenylpropyl]amino]-3,4-dihydro-4-oxo-l,5-benzoxazepín-5(2H)-octovej
Dicyklohexylamínová soľ kyseliny (S)-2-(acetyltio)benzénpropánovej (1,35 g, 3,81 mmol) sa suspenduje v etylacetáte (120 ml), premyje 5 % hydrogensíranom draselným (5 x 20 ml) a soľankou (25 ml). Suší sa (bezvodý síran horečnatý), filtruje, odparí do sucha a suší vo vákuu. Získa sa voľná kyselina.
Táto voľná kyselina sa rozpustí v suchom metylénchloride (25 ml), ochladí na 0 °C (kúpeľ ľad-soľ), spracuje s hydrátom 1-hydroxybenztriazolu (54 mg, 4,0 mmol) a 1-etyl-3-(3-dimetylaminopropyl)karbodiimidu (792 mg,
4,13 mmol) a mieša sa pri 0 °C 1,0 hodinu pod argónom. Roztok sa spracuje s etylesterom kyseliny (S)-3-amino-3,4-dihydro-4-oxo-l,5-benzoxazepín-5(2H)-octovej (1,147 g, 3,81 mmol) a 4-metylmorfolínom (0,47 ml, 4,2 mmol) a v miešaní sa pokračuje pri 0 °C 1,0 hodinu a pri teplote miestnosti 1,0 hodinu. Reakčná zmes sa zriedi etylacetátom (100 ml), premyje sa postupne vodou (15 ml), 5 % hydrogensíranom draselným (2x15 ml), vodou (15 ml), nasýteným hydrogenuhličitanom sodným (15 ml) a soľankou (15 ml), suší sa (bezvodý síran sodný), filtruje, odparí do sucha a suší vo vákuu. Surový produkt sa chromatografuje na stĺpci silikagélu (Merck), za elúcie stĺpca etylacetátom : hexánom (1 : 4). Získa sa 1,21 g produktu ako sirupu. Ďalej sa získa ďalších 409 mg produktu (izoméma zmes 1 : 1), Rf = 0,67 (etylacetát: hexány, 1 : 4 potom 1 : 1).
b) Kyselina [S-(R*,R*)]-3,4,-dihydro-3-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-fenylpropyl)amino]-4-oxo-l,5-benzoxazepín-5(2H)-octová
Roztok etylesterového produktu z časti a) (1,81 g,
2,51 mmol) v metanole (13 ml) sa prebubláva argónom 30 minút, ochladí na 0 °C (kúpeľ ľad-soľ), potom sa po kvapkách spracuje s vopred prebublaným (argón, 30 minút) roztokom l,0N hydroxidu sodného (10 ml, 4 ekv.) za udržiavania prebublávania argónom počas pridávania a počas trvania reakcie. Reakčná zmes sa mieša pri 0 °C 1,0 hodinu, okyslí pri 0 °C 5 % hydrogensíranom draselným (45 ml), na pH 1,0 a extrahuje etylacetátom (2 x 80 ml). Spojené organické extrakty sa premyjú soľankou (20 ml), sušia (bezvodý síran sodný), filtrujú, odparia do sucha a sušia vo vákuu. Surový produkt sa rozpustí v metylénchloride (10 ml) a po častiach sa spracuje s hexánom (100 ml), poškrabaním zmes dôjde k tvorbe pevnej látky. Supematant sa dekantuje a pevné látky sa triturujú s hexánom (50 ml) a pentánom (2 x 100 ml), s prvými 100 ml pentánu sa mieša 4 hodiny a ďalšími 100 ml cez noc pod argónom. Produkt sa potom suší vo vákuu 6 hodín. Získa sa 969,7 mg amorfnej pevnej látky, Rf = 0,47 (metylénchlorid : metanol : kyselina octová, 20 : 1 : 1), [a]D = -143,3 ° (c = 0,54, metanol).
1H NMR (400 MHz, CDC13): 2,02 (d, 1H), 3,07 (m, 2H), 3,59 (m, 1H), 4,09 (t, 1H, J = 10 Hz), 4,24 (d, 1H, J = 17 Hz), 4,63 (t, 1H, J = 8 Hz), 4,73 (d, 1H, J = 17 Hz), 4,93 (m, 1H), 7,04 - 7, 26 (m, 9H), 7,42 (d, 1H).
Elementárna analýza pre C^H^N^S. 0,147 C5H12 . 0,43 H2O vypočítané: 59,46 % C, 5,44 % H, 6,69 % N, 7,65 % S, 7,89 % SH nájdené: 59,46 % C, 5,25 % H, 6,65 % N, 7,88 % S,
7,84 % SH.
Príklad 15
Kyselina [3S-[ 1 (R*),3a(R*)]-3-[(2-sulfanyl-1 -οχο-3-fenylpropyl)amino]-α-mety 1-2-oxohexahydro-1 H-azepín-1 -octová
a) Metylester kyseliny [3S-[l(R’),3a(R*)[[-3-[2-(acetyltio)-1 -oxo-3 -fenylpropyl)amino[-a-metyl-2-oxohexahydro-1H-azepín-1-octovej
Studený (0 °C) roztok mctylesteru kyseliny [S-(R*,R*)[-3 -aminohexahydro-a-mety 1-2-oxo-1 H-azepín-1 -octovej (374 mg, 1,75 mmol) (pripravený podľa Thorsetta a spol., „Peptides: Structure and Function“, Preceeding 8th Američan Peptide Symposium, str. 555 (1983)[ a (S)-2-(acetyltio)benzénpropánovej kyseliny (393 mg, 1,75 mmol) v metylénchloride (10 ml) sa spracuje s trietylamínom (245 μΐ, 178 mg, 1,76 mmol) a potom s benzotriazol-1-yloxytris(dimetylamino)fosfóniumhexafluórfosfátom (775 mg,
1.75 mmol). Číry, takmer bezfarebný roztok sa mieša pri 0 °C jednu hodinu a potom pri teplote miestnosti 3 hodiny. Zmes sa rozdelí medzi etylacetát a 0.5N kyselinu chlorovodíkovú a etylacetátový extrakt sa postupne premyje vodou, z polovice nasýteným hydrogenuhličitanom sodným a soľankou. Roztok sa suší (síran sodný), filtruje a odparí. Zvyšok sa spracuje rýchlou chromatografiou (Merck silikagél, 70 : 30 etylacetát : hexány), získa sa 590 mg čistého produktu ako bezfarebného oleja[peny, Rf= 0,43 (etylacetát : : hexány, 75 : 25).
b) Kyselina [3S-[l(R*),3a(R*)]]-3-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-fenylpropyl)amino]-a-metyl-2-oxohexahydro-1 H-azepín-1 -octová
Ľadovo studený roztok produktu z časti a) (570 mg, 1,36 mmol) v metanole (7 ml, deoxygenovaný prebublávaním argónom) sa spracuje s IN hydroxidom sodným (5,5 ml, zbavený kyslíka prebublávaním argónom). Po miešaní pri 0 °C 2,5 hodiny sa roztok okyslí IN kyselinou chlorovodíkovou (9 ml) a extrahuje sa etylacetátom. Etylacetátový extrakt sa premyje soľankou, potom sa suší (síran sodný), filtruje a odparí, získa sa olej. Materiál sa spracuje rýchlou chromatografiou (Merck silikagél, 2 % kyselina octová v etylacetáte). Produkt, obsahujúci frakcie sa spojí a oddestiluje a zvyšok sa vyberie do etylacetátu a premyje postupne vodou a soľankou, potom sa suší (síran sodný), filtruje a opäť oddestiluje. Výsledný olej [pena sa trituruje najprv s etyléterom a potom s hexánom za vzniku bieleho oleja[peny. Zmes sa oddestiluje do sucha, rozmieša v hexáne, opäť oddestiluje do sucha a suší vo vákuu. Získa sa 470 mg produktu ako bielej peny, (>98 % diastereomérna čistota podľa NMR analýzy), Rf = 0,49 (5 % kyselina octová v etylacetáte) [ct]D = -37,1 0 (c = 0,6, chloroform).
HPLC: YMC S3 ODS kolóna (6,0 x 150 mm), elúcia 44 % A: 90 % voda- 10 % metanol - 0,2 % kyselina fosforečná a 56 % B: 10 % voda - 90 % metanol - 0,2 % kyselina fosforečná, prietok 1,5 ml[min., detekcia pri 220 nm, tR = 11,02 min. (98,0 %).
Elementárna analýza pre C2|H22N2O4S2: vypočítané: 59,32 % C, 6,64 % H, 7,69 % N, 8,80 % S, 9,07 % SH nájdené: 59,27 % C, 6,92 % H, 7,37 % N, 8,36 % S,
8.75 % SH.
Príklad 16
Kyselina [6R(S*)-2,3,6,7-tetrahydro-6-[2-(sulfanylmetyl)-l-oxo-3-fenylpropyl]amino]-5-oxo-l,4-tiazepín-4(5H)-octová
a) l, 1 -Dimetyletyíester kyseliny [-2-[(metylsulfonyl)oxy]etyl]-karbamovej
Di-terc.butyldikarbonát (21,8 g, 100 mmol) sa po častiach pridá k miešanému roztoku etanolamínu (6,1 g, 100 mmol) v dichlórmetáne (100 ml) pri 0 - 5 °C. Po prídavku sa chladiaci kúpeľ odstráni a roztok sa mieša pri teplote miestnosti päť hodín. Rozpúšťadlo sa odstráni vo vákuu a výsledný materiál sa rozpustí v dichlórmetáne (100 ml) a trietylamíne (21 ml, 150 mmol), ochladí sa na -10 °C a po kvapkách počas 10 minút sa spracuje s metánsulfonylchloridom (9,25 g, 150 mmol). Zmes sa zriedi etylacetátom (200 ml) a premyje sa IN kyselinou chlorovodíkovou a vodou. Etylacetátová vrstva sa suší (síran sodný), filtruje sa a zbaví rozpúšťadla vo vákuu. Získa sa produkt ako viskózny olej, ktorý' sa použije bez čistenia.
b) Difenylmetylester S-[2-[[(l,l-dimetyletoxy)karbonyl]-amino]etyl]-N-(fenylmetoxy)karbonyl]-L-cysteínu
Roztok difenylmetylesteru N-[(fenylmetoxy)karbonyl)-L-cysteínu (12,7 g, 30,1 mmol) a produktu z časti a) (7,20 g, 30,1 mmol) v dimetylformamide (190 ml) sa spracuje s postrekom sušeným fluoridom draselným (25 g, 430 mmol) a mieša sa pod argónovou atmosférou pri 70 -
- 75 °C 20 hodín. Po ochladení sa zmes rozdelí medzi etylacetát (800 ml) a vodu (400 ml). Organická vrstva sa premyje soľankou (300 ml), suší sa (síran horečnatý), filtruje a zbaví vo vákuu rozpúšťadla, zostane olej. Tento sa chromatografuje na silikagéli (Merck, 1000 ml), za elúcie zmesami etylacetátu a hexánu (1 : 4, 1 : 3 a 1 : 2), získa sa
9,13 g produktu, Rf = 0,35 (etylacetát: hexány 1 : 2).
c) (R)-Tetrahydro-6-[[(fenylmetoxy)karbonyl]amino]-1,4-
- tiazepin-5(4H)-on
Roztok produktu z časti b) (6,13 g, 10,86 mmol) v anizole (30 ml) a kyseline trifluóroctovej (45 ml) sa mieša pri teplote miestnosti dve hodiny a potom sa zahustí vo vákuu. Zvyšný olej sa zriedi izopropyléterom (40 ml), mieša a izopropyléterová vrstva sa zleje. Tento postup sa ešte raz opakuje a zvyšok sa suší vo vákuu. Zmes tohto materiálu a difenylfosforylazidu (4,4 g, 16 mmol) v suchom dimetylformamide (75 ml) pod argónovou atmosférou sa ochladí na ľadovom kúpeli a za miešania sa prikvapká 4-metylmorfolín (4,45 g, 44 mmol). Po ukončení pridávania sa zmes nechá ohriať na teplotu miestnosti a nechá stáť 20 hodín. Zmes sa rozdelí medzi etylacetát (150 ml) a vodu (100 ml). Vrstvy sa oddelia a vodná vrstva sa znova extrahuje etylacetátom (50 ml). Spojené organické vrstvy sa premyjú nasýteným roztokom hydrogensíranu draselného (30 ml), nasýteným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (50 ml) a soľankou (50 ml), sušia sa (síran horečnatý) a zbavia sa rozpúšťadla vo vákuu. Zvyšný materiál sa trituruje s izopropyléterom za vzniku 2,45 g bieleho pevného produktu. Rf= 0,27 (etylacetát: hexány, 1:1).
d) Etylester kyseliny (R)-tetrahydro-5-oxo-6-[[(fenylmetoxy)-karbonyl] aminoj-1,4-tiazepín-4(5H)-octovej
Roztok produktu z časti c) (3,55 g, 12,68 mmol) v destilovanom tetrahydrofuráne (40 ml) pod atmosférou argónu, sa ochladí na 0 °C a spracuje s práškovým hydroxidom draselným (2,16 g, 40 mmol) a tetrabutylamóniumbromidom (420 mg, 1,3 mmol). Prikvapká sa etylbrómacetát (2,58 g, 15,43 mmol). Zmes sa dve hodiny mieša za studená a po tom sa zriedi etylacetátom (50 ml) a pridá sa bezvodý síran horečnatý. Reakčná zmes sa filtruje cez stlpček síranu horečnatého a stípček sa niekoľkokrát premyje etylacetátom. Filtrát sa spracuje a IN roztokom kyseliny chlorovodíkovej (50 ml) a vrstvy sa oddelia. Organická vrstva sa suší (síran horečnatý), filtruje a zbaví rozpúšťadla vo vákuu, zostane olej, ktorý sa čistí chromatografiou na silikagéli, elúciou 10 - 30 % etylacetátom v hexáne, získa sa 3,22 g produktu ako viskózneho oleja, Rf= 0,60 (etylacetát: hexány).
e) Hydrobromidová soľ etylesteru (R)-6-aminotetrahydro-5-oxo-l ,4-tiazepín-4(5H)-octovej kyseliny
Produkt z časti d) (3,17 g, 8,65 mmol) sa spracuje s 30 % bromovodíkom v kyseline octovej (14 ml). Zmes sa mieša pri teplote miestnosti počas jednej hodiny a potom sa pridá dietyléter. Po miešaní pri teplote miestnosti počas jednej hodiny sa vyzrážaná soľ získa filtráciou a premyje sa niekoľkokrát éterom. Ľahko gumovitý materiál sa rozpustí v horúcom etanole a rozpúšťadlo sa odstráni vo vákuu. Postup sa ešte raz opakuje. K zostávajúcemu materiálu sa pridá dietyléter a hydrobromidová soľ produktu (2,52 g) sa získa ako žltá pevná látka filtráciou.
f) Etylester kyseliny [6R(S*)]-2,3,6,7-tetrahydro-6-[[2-[(acetyltio)metyl]-1 -oxo-3-fenylpropyl]amino]-5-oxo-1,4-tiazepín-4(5H)-octovej (S)-2-[(Acetyltio)metyl[benzénpropánová kyselina (získaná z efedrínovej soli ako bolo opísané) sa nechá reagovať s produktom z časti e) postupom podľa príkladu 1 časť b), získa sa titulný produkt Rf= 0,40 (etylacetát: hexány, 1 :1).
g) [6R(S*)[-2,3,6,7-Tetrahydro-6-[[2-(sulfanylmetyl)-1 -oxo-3-fenylpropyl]amino]-5-oxo-1,4-tiazepín-4(5H)-octová kyselina
Roztok produktu z časti f) v metanole sa spracuje s IN hydroxidom sodným postupom podľa príkladu 1 časť c). Získa sa titulný produkt ako biela pevná pena, t. t. 85 až 101 °C.
Rf = 0,35 (8 % metanol v dichlórmetáne plus 2 kvapky kyseliny octovej[5 ml), [a]D = -9,5 ° (c = 0,6, metanol).
HPLC: RT = 13,2 min., 50 % vodný metanol, obsahujúci 0,2 % kyselinu fosforečnú, 1,5 ml [min., detegované pri 220 nm, YMC S-3 (ODS), 6,0 x 150 mm, 3 mikrónová kolóna uzavretá sféricky. H. I. = > 95 %.
Elementárna analýza pre Q7H22N2O4S2.0,15 H20.0,15 Cf,H ,4 vypočítané: 60,24 % C, 5,71 % H, 6,11 % N, 13,98 % S, nájdené: 60,01 % C, 5,77 % H, 5,94 % N, 13,64 % S.
Príklad 17
Kyselina [6R(S*)]-2,3,6,7-tetrahydro-6-[(2-(sulfanyl-1 -oxo-3-fenylpropyl)amino]-5-oxo-l,4-tiazepin-4(5H)-octová
a) Etylester kyseliny [6R(S*)]-2,3,6,7-tetrahydro-6-[[2-(acetyltio)-l-oxo-3-fenylpropyl]amino]-5-oxo-l,4-tiazepín-4(5H)-octovej (S)-2-[(Acetyltio)[benzénpropánová kyselina (získaná z dicyklohexylamínovej soli ako bolo opísané) sa nechá reagovať s produktom z príkladu 16 časť (e) postupom podľa príkladu 2 časť b). Získa sa titulný produkt, Rf = 0,29 (etylacetát : hexán, 1:1).
b) Kyselina [6R(S*)]-2,3,6,7-tetrahydro-6-[(2-(sulfanyl-l-oxo-3 -fény lpropy l)amino] -5-oxo-1,4-tiazepín-4(5H)-octová
Roztok z časti a) v metanole sa spracuje s l,0N hydroxidom sodným postupom podľa príkladu 2 časť c), získa sa titulný produkt ako pevná pena, 1.1. 69 až 76 °C. Rf = 0,29 (8 % metanol v dichlórmetáne plus dve kvapky kyseliny octovej [5 ml).
Elementárna analýza pre C22H24N2O4S2.0,1 C4H8O2 vypočítané: 52,21 % C, 5,56% H, 7,43% N, 17,00% S, nájdené: 52,27 % C, 5,54 % H, 7,35 % N, 16,98 % S.
Príklad 18
Kyselina [3R-[3a,6a(S*)]]-tetrahydro-6-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-fenylpropyl)amino]-5-oxo-3-fenyl-l,4-tiazepín-4(5H)-octová
a) Etylester kyseliny (3R-cis)-tetrahydro-5-oxo-3-fenyl-6-[[(fenylmetoxy)karbonyl]amino]-l,4-tiazepín-4(5H)-octovej
Roztok (3R-cis)-tetrahydro-3-fenyl-6-[[(fenylmetoxy)-karbonyl]amino]-l,4-tiazepín-5(4H)-on (1,16 g, 3,25 mmol) (pripravený ako je opísané Yanagisawaou a spol., J. Med. Chem., vol. 30, str, 1984 - 1991 (1987)[ v destilovanom tetrahydrofuráne (30 ml) pod atmosférou argónu sa ochladí na 0 °C a spracuje sa s práškovým hydroxidom draselným (540 mg, 10 mmol) a tetrabutylamóniumbromidom (97 mg, 0,3 mmol). Za miešania sa prikvapká etylbrómacetát (501 mg, 0,3 mmol). Zmes sa za studená mieša dve hodiny a potom sa pridá ďalší etylbrómacetát (501 mg, 3 mmol). Zmes sa za studená mieša ďalšie dve hodiny a potom sa zriedi etylacetátom (50 ml) a pridá sa bezvodý síran horečnatý. Reakčná zmes sa odfiltruje cez stípček síranu horečnatého a stípček sa niekoľkokrát premyje etylacetátom. Filtrát sa naleje do studeného roztoku IN kyseliny chlorovodíkovej (40 ml) a vrstvy sa oddelia. Organická vrstva sa suší (síran horečnatý), filtruje a zbaví rozpúšťadla za vákua. Zvyšný olej, ktorý sa Čistí chromatografiou na silikagéli za elúcie 10 až 30 % etylacetát v hexáne, získa sa 730 mg produktu, Rf= 0,32 (etylacetát: hexány, 1 : 2).
b) Hydrochloridová soľ etylesteru kyseliny (3R-cis)-6-aminotetrahydro-5-oxo-3-fenyl-l,4-tiazepín-4(5H)-octovej
Produkt z časti a) (1,43 g, 3,23 mmol) sa spracuje s 30 % hydrogenbromidom v kyselina octovej (5,5 ml). Zmes sa mieša pri teplote miestnosti dve hodiny a potom sa pridá dictyléter (100 ml). Po miešaní pri teplote miestnosti po 1 hodine sa vyzrážaná soľ zhromaždí filtráciou a premyje sa niekoľkokrát éterom. Získa sa 1,08 g hydrobromidovej soli ako béžovej pevnej látky.
c) Etylester kyseliny [3R-[3a,6a(S’)]]-6-[[2-(acetyltio)-l-oxo-3-fenylpropyl]amino]-tetrahydro-5-oxo-3-fenyl-1,4-tiazepín-4(5H)-octovej
Suspenzia dicyklohexylamínovej soli (S)-2-(acetyltio)-benzénpropánovej kyseliny (736 mg, 1,81 mmol) v etylacetáte (30 ml) sa premyje dvakrát 0,lN kyselinou chlorovodíkovou (40 ml, 20 ml) a jednou soľankou (20 ml), suší sa (síran horečnatý), filtruje a zbaví rozpúšťadla vo vákuu. Zostane kyselina ako olej.
Hydrobromidová soľ produktu z časti b) (640 mg, 1,65 mmol) sa rozpustí v dichlórmetáne (30 ml), premyje roztokom hydrogenuhličitanu sodného (2 x 20 ml), potom soľankou (20 ml), suší sa (síran horečnatý), filtruje a zbaví sa rozpúšťadla vo vákuu. Zostane voľný amín ako viskózny olej (495 mg). Tento produkt a voľná kyselina sa rozpustí v dichlórmetáne (20 ml) pod atmosférou argónu a ochladí sa na 0 °C. Pridá sa hydrát 1-hydroxybenzotriazolu (256 mg, 1,90 mmol) a l-etyl-3-(3-dimetylaminopropyl)karbodiimid (362, 5 mg, 1,90 mmol). Zmes sa mieša za studená tri hodiny a potom sa zriedi dichlórmetánom (30 ml). Roztok sa premyje vodou (15 ml), 5 % roztokom hydrogensíranu draselného (15 ml), roztokom hydrogenuhličitanu sodného (15 ml) a vodou (15 ml). Dichlórmetánový roztok sa suší (síran horečnatý), filtruje a zbaví rozpúšťadla vo vákuu. Zvyšný materiál sa chromatografuje na silikagéli (Merck, približne 150 ml), za elúcie 25 % etylacetátom v hexáne. Získa sa 610 mg produktu, Rf=0,53 (etylacetát: hexány, 1:1).
d) Zmes metyl a etylesteru kyseliny [3R-[[3a,6a(S’)]j-tetrahydro-6-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-fenylpropyl)amino]-5-oxo-3 -fenyl-1,4-tiazepín-4(5H)-octovej
Roztok produktu z časti c) (610 mg, 1,185 mmol) v metanole (12 ml) sa prebubláva argónom 15 minút, ochladí na kúpeli ľad-soľ za pokračovania miešania a prebublávania argónom, po kvapkách sa spracuje s IN roztokom hydroxidu sodného (4,75 ml), ktorý bol tesne pred použitím prebublaný počas 30 minút argónom. Zmes sa za studená mieša 75 minút a potom sa okyslí na pH 1 5 % roztokom hydrogensíranu draselného. Produkt sa extrahuje do etylacetátu (2 x 40 ml). Spojené organické extrakty sa premyjú soľankou, sušia (síran horečnatý), filtrujú a zbavia rozpúšťadla vo vákuu. Zostane 633 mg produktu, ktorý pomaly skryštalizuje. NMR a hmotové spektrum tohto materiálu ho hodnotí ako zmes metyl a etylesterov. Rf = 0,76 (5 % metanol v metylénchloride plus 2 kvapky kyseliny octovcj[5 ml).
e) Kyselina [3R-[3a,6a(S*)]]-tetrahydro-6-[(2-suIfanyl-l-oxo-3-fenylpropyl)amino]-5-oxo-3-fenyl-l,4-tiazepín-4(5H)-octová
Produkt z časti d) (480 mg, približne 1,03 mmol) sa pridá k metanolu (12 ml). Materiál skryštalizuje. Pridá sa destilovaný tetrahydrofurán (5 ml) a zmes sa stane čírym roztokom, ktorý sa prebublá argónom 15 minút, ochladí sa kúpeľom ľad-soľ, a za miešania a pokračovania v prebublávaní argónom sa po kvapkách spracuje s IN roztokom hydroxidu sodného (4 ml), ktorý bol tesne pred použitím prebublávaný 30 minút argónom. Zmes sa udržuje v chlade a pod argónom 27 hodín. Po tomto čase je podľa TLC hydrolýza esteru ukončená. Zmes sa okyslí na pH 1 5 % roztokom hydrogensíranu draselného. Produkt sa extrahuje do dichlórmetánu (2 x 30 ml). Spojené organické extrakty sa premyjú soľankou, odfiltrujú a zbavia sa rozpúšťadla vo vákuu. Zostane biela pevná pena. Táto sa rozpustí v dichlórmetáne a hexán sa pridá až do turbidity. Zmes sa zbaví rozpúšťadla vo vákuu, zostane pevná látka. Táto sa trituruje s 20 % hexánom v éteri. Biela pevná látka sa zhromaždí filtráciou, premyje studeným 50 % hexánom v éteri. Získa sa 350 mg produktu, t. t. 175 až 182 °C, Rf = 0,42 (5 % metanolu v metylénchloride plus 2 kvapky kyseliny octovej[5 ml), [ct]D = +26,7 0 (c = 0,8, metanol).
HPLC: RT = 8,0 min., 66,8 % vodný metanol, obsahujúci 0,2 % kyseliny fosforečnej, 1,5 ml[min„ detegované pri 220 nm, YMC S-3 (ODS), 6,0 x 150 mm, 3 mikrónová sféricky uzavretá kolóna, H. I. = > 95 %.
Elementárna analýza pre C22H24N2O4S2: vypočítané: 59,44 % C, 5,44% H, 6,30% N, 14,42% S, nájdené: 59,52% C, 5,54% H, 6,08% N, 14,14% S.
Príklad 19
Kyselina [3R-[3a,6a(S*)]]-tetrahydro-6-[[2-(sulfanylmetyl)-l-oxo-3-fenylpropyl]amino]-5-oxo-3-fenyl-l,4-tiazepín-4(5H)-octová
a) Metyl a etylestery kyseliny [3R-[3a,6a(S*)]]tetrahydro-6-[[2-[(acetyltio)metyl]-l-oxo-3-fenylpropyl]amino]-5-oxo-3-fenyl-l,4-tiazepín-4(5H)-octovej ako zmes
Suspenzia efedrínovej soli kyseliny (S)-2-[(acetyltio)-metyl[benzénpropánovej (853 mg, 2,11 mmol) v etylace táte (40 ml) sa premyje dvakrát O,1N kyselinou chlorovodíkovou (40 ml, 20 ml), jednou soľankou (20 ml), suší sa (síran horečnatý), filtruje a zbaví sa rozpúšťadla vo vákuu. Zostane voľná kyselina ako olej.
Hydrobromidová soľ zmesi metyl- a etylesterov kyseliny (3R-cis)-6-aminotetrahydro-5-oxo-3-fenyl-1,4-tiazepín-4(5H)-octovej (320 mg, etylesteru, 0,82 mmol a 410 mg metylesteru, 1,09 mmol), [pripravený ako je opísané v príklade 18b)[ sa rozpustí v dichlórmctáne (30 ml), premyje roztokom hydrogenuhličitanu sodného (2 x 20 ml), soľankou (20 ml), suší sa (síran horečnatý), filtruje a zbaví sa rozpúšťadla vo vákuu. Zostane voľná kyselina ako viskózny olej (495 mg, 98 %). Tento produkt a voľná kyselina opísaná skôr sa rozpustí v dichlórmetáne (20 ml) pod atmosférou argónu a ochladí sa na 0 °C. Pridá sa hydrát 1-hydroxybenzotriazolu (285 mg, 2,11 mmol) a l-etyl-3-(3-dimetylaminopropyl)karbodiimid (403 mg, 2,11 mmol). Zmes sa za studená mieša 3,5 hodiny a potom sa zriedi dichlórmetánom (30 ml). Roztok sa premyje vodou (15 ml), 5 % roztokom hydrogensíranu draselného (15 ml) a vodou (15 ml). Dichlórmetánový roztok sa suší (síran horečnatý), odfiltruje a zbaví sa rozpúšťadla vo vákuu. Zvyšný materiál sa chromatografuje na silikagéli (Merck, 170 ml) za elúcie 25 % etylacetátu v hexáne. Získa sa 535 mg produktu, Rf = = 0,68 a 0,63 (etylacetát: hexány, 1:1).
b) Kyselina [3R-[3a,6a(S*)]]-tetrahydro-6-[[2-(sulfanylmetyl)-l-oxo-3-fenylpropyl]amino]-5-oxo-3-fenyl-l,4-tiazepín-4(5H)-octová
Produkt z časti a) (493 mg, približne 0,98 mmol) sa rozpustí v metanole (12 ml) a prebubláva argónom 15 minút, ochladí sa na kúpeli ľad-soľ a za miešania a pokračovania v prebublávaní argónom, sa po kvapkách spracuje s IN roztokom hydroxidu sodného (4 ml), ktorý bol tesne pred použitím prebublaný argónom počas 30 minút. Zmes sa udržuje studená a pod argónom 48 hodín. Po tomto čase je podľa TLC hydrolýza esteru úplná. Zmes sa okyslí na pH 1 5 % roztokom hydrogensíranu draselného. Produkt sa extrahuje do dichlórmetánu (2 x 30 ml). Spojené organické extrakty sa premyjú soľankou (20 ml), sušia sa (síran horečnatý), filtrujú a zbavia rozpúšťadla vo vákuu. Zostane biela sklovitá pena. 2 % hexán v éteri sa pridá (20 ml) a za miešania sa vytvorí biela pevná látka. Táto sa zhromaždí filtráciou a premyje sa 50 % hexánom v éteri. Získa sa 342 mg produktu, 1.1. 170 - 174 °C, Rf= 0,43 (5 % metanol v metylénchloride plus 2 kvapky kyseliny octovej [5 ml). [a]D = +32,8 ° (c = 0,9 metanol).
HPLC: RT = 8,6 min., 66,8 % vodný metanol, obsahujúci 0,2 % kyseliny fosforečnej, 1,5 ml [min., detekcia pri 220 nm, YMC S-3 (ODS), 6,0 x 150 mm, 3 mikrónová kolóna na konci sféricky uzavretá. H. I. = > 95 %. Elementárna analýza pre C23H26N2O4S2:
vypočítané: 60,24 % C, 5,71 % H, 6,11 % N. 13,98 % S nájdené: 60,25 % C, 5,77 % H, 6,06% N, 13,85% S.
Príklad 20
Kyselina [2R-[2cc,6B(S*)]]-tetrahydro-6-[[2-(sulfanylmetyl)-1 -oxo-3-fenylpropyl]amino]-5-oxo-2-fenyl-1,4-tiazepín-4(5H)-octová
a) (2R-trans)-Tetrahydro-2-fenyl-6-[[(fenylmetoxy)karbonyl]amino]-l,4-tiazepín-4(5H)-on
Suspenzia (2R-trans)-6aminotetrahydro-1,4-tiazepín-5(4H)-onu (5,82 g) (pripraveného podľa Yanagiswa a spol., J. Med. Chem., Vol. 30, str. 1984 - 1991 (1987)[v zmesi dichlórmetánu (125 ml) a trietylamínu (11 ml) sa spracuje s di-terc.butyldikarbonátom (6 g) a mieša sa pri teplote miestnosti štyri hodiny. Zmes sa zriedi dichlórmetánom (100 ml) a premyje sa vodou. Dichlórmetánový roztok sa suší (síran horečnatý), filtruje a zbaví rozpúšťadla vo vákuu. Zostane svetložltá pevná látka. Táto sa chromatografuje na silikagéli, produkt sa eluuje etylacetátom : hexánom (1 : 1) a potom etylacetátom. Získa sa 2,01 g produktu ako bielej pevnej látky.
b) Metylester kyseliny (2R-trans)-tetrahydro-5-oxo-2-fenyl-6-[[(fenylmetoxy)karbonyl]amino]-l,4-tiazepín-4(5H)-octovej
Roztok produktu z časti a) (1,95 g, 6,05 mmol) v destilovanom tetrahydrofuráne, pod atmosférou argónu sa ochladí na 0 °C a spracuje sa s práškovým hydroxidom draselným (1,10 g, 18,15 mmol, 3 ekv.) a tetrabutylamóniumbromidom (195 mg). Počas 30 minút sa pridá etylbrómacetát (800 μΐ, 7,26 mmol, 1,2 ekv.) po kvapkách. Zmes sa za studená mieša počas dvoch hodín a potom sa zriedi dichlórmetánom (300 ml) a vodou (50 ml). Potom sa pridá zriedený roztok kyseliny chlorovodíkovej (75 ml) a vrstvy sa oddelia. Vodná vrstva sa znova extrahuje dichlórmetánom (100 ml). Spojené organické vrstvy sa sušia (síran horečnatý), filtrujú a zbavia sa rozpúšťadla vo vákuu. Zostane biela pena. Pena sa rozpustí v zmesi etylacetátu a dichlórmetánu a spracuje s prebytkom roztoku diazometánu v éteri. Výsledný metylester sa čistí chromatografiou na silikagéli, elúciou etylacetátom : hexánom (1 : 1), získa sa 2,193 g produktu, Rf = 0,49 (etylacetát: hexány, 1:1).
c) Metylester kyseliny (2R-trans)-6-aminotetrahydro-5-οχο-2-fenyl-l ,4-tiazepín-4(5H)-octovej, hydrochloridová soľ
Produkt z časti b) (2,19 g, 5,56 mmol) sa oddelí na ľadovom kúpeli a spracuje so 4N roztokom kyseliny chlorovodíkovej v dioxáne (15 ml). Zmes sa mieša za studená jednu hodinu, počas ktorej sa tvorí gél. Odstráni sa chladiaci kúpeľ a zmes sa mieša pri teplote miestnosti jednu hodinu. Rozpúšťadlo sa odstráni vo vákuu a pridá sa toluén a odparením vo vákuu sa získa 1,84 g produktu ako pevnej látky.
d) Metylester kyseliny [2R-[2a,6B(S*)]]-tetrahydro-6-[[2-[(acetyltio)metyl]-1 -oxo-3-fenylpropyl]amino]-l-oxo-2-fenyl-1,4-tiazepín-4(5H)-octovej
Kyselina (S)-2-[(acetyltio)metyl[benzénpropánová (získaná z efedrínovej soli ako bolo už opísané) sa nechá reagovať s produktom z časti c) postupom podľa príkladu 1 časť b), získa sa titulný produkt, Rt = 0,51 (etylacetát : hexány, 1:1).
e) Kyselina [2R-[2a,6B(S*)]]-tetrahydro-6-[[2-(sulfanylmetyl)-1 -oxo-3-fenylpropyl]amino]-5-oxo-2-fenyl-1,4-tiazepín-4(5H)-octová
Roztok produktu z časti d) v metanole sa spracuje s IN hydroxidom sodným postupom podľa príkladu 1 časť c). Získa sa titulný produkt, 1.1. 197 až 199 °C, Rf = 0,41 (5 % metanol plus 2 kvapky kyseliny octovej[5 ml), [a]D = = +27,1 ° (c = 0,5, metanol).
Elementárna analýza pre C23H26N2O4S2: vypočítané: 60,24 % C, 5,71 % H, 6,11 % N, 13,98 % S nájdené: 60,01 % C, 5,77%H, 5,95%N, 13,64%S.
Príklad 21
Kyselina [2R-[2a,6B(S*)]]-tetrahydro-6-[(2-sulfanyl-1 -oxo-3-fenylpropyl)amino]-5-oxo-2-fenyl-1,4-tiazepín-4(5H)-octová
a) Metylester kyseliny [2R-[2a,6B(S*)]]-tetrahydro-6-[[2-[(acetyltio)]-l-oxo-3-fenylpropyl]amino]-5-oxo-2-fenyl-
-1,4-tiazepín-4(5H)-octovej
Suspenzia dicyklohexylamínovej soli kyseliny (S)-2-(acetyltio)benzénpropánovej (1,13 g, 2,8 mmol) v etylacetáte (50 ml) sa premyje dvakrát O,1N kyselinou chlorovodíkovou (50 ml, 25 ml), jednou soľankou (25 ml) a suší (síran horeínatý, filtruje a zbaví sa rozpúšťadla vo vákuu). Získa sa voľná kyselina ako olej. Táto sa rozpustí v dichlórmetáne (15 ml) pod atmosférou argónu a ochladí sa na 0 °C. Pridá sa hydrát 1-hydroxobenzotriazolu (405 mg, 3,0 mmol) a l-etyl-3-(3-dímetylaminopropyl)karbodiimid (592 mg, 3,1 mmol). Zmes sa mieša za studená jednu hodinu pred pridaním aminhydrochloridovej soli produktu z príkladu 20 c) (920 mg, 2,79 mmol, po nej sa pridá 4-metylmorfolín (306 μ], 2,79 mmol). Zmes sa za studená mieša jednu hodinu a jednu hodinu pri teplote miestnosti, potom sa zriedi dichlórmetánom (70 ml). Roztok sa premyje vodou (15 ml), 5 % roztokom hydrogensíranu draselného (15 ml), roztokom hydrogenuhličitanu sodného (15 ml) a vodou (15 ml). Dichlórmetánový roztok sa suší (síran horečnatý), filtruje a zbaví rozpúšťadla vo vákuu. Zvyšný materiál sa chromatograíúje na silikagéli (Merck, 160 ml) za elúcie zmesami etylacetátu a hexánu (1:3, potom 1 : 2). Získa sa 880 mg produktu, Rf = 0,57 (etylacetát: : hexány 1 : 1).
b) Kyselina [2R-[2a,6B(S*)]]-tetrahydro-6-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-fenylpropyl)amino]-5-oxo-2-fenyl-1,4-tiazepín-4(5H)-octová
Roztok produktu z časti a) (880 mg, 1,75 mmol) v metanole (12 ml) sa prebubláva argónom 15 minút, ochladí sa na kúpeli ľad-soľ a za stáleho miešania a prebublávania argónom sa spracuje po kvapkách s IN roztokom hydroxidu sodného (7,0 ml), ktorý bol tesne pred použitím 30 minút prebublávaný argónom. Zmes sa za studená mieša a potom sa okyslí na pH 1 5 % roztokom hydrogensíranu draselného. Produkt sa extrahuje do etylacetáte (2 x 40 ml). Spojené organické extrakty sa premyjú soľankou, sušia (síran horečnatý), filtrujú a zbavia rozpúšťadla vo vákuu. Zostane biely čiastočne pevný materiál. Pridá sa éter a biela pevná látka sa oddelí filtráciou a premyje ďalším éterom. Získa sa 494 mg produktu, 1.1. 181 až 183 “C, Rf = 0,43 (5 % metanol v dichlórmetáne + 2 kvapky kyseliny octovej [5 ml), [a]D = +6,7 ° (c = 0,7, metanol).
HPLC: RT = 9,6 min., 66,8 % vodný metanol, obsahujúci 0,2 % kyseliny fosforečnej, 1,5 ml[min., detegované pri 220 nm, YMC S-3 (ODS), 6,0 x 150 mm, 3 mikrometrová, na konci sféricky uzavretá kolóna. H. L = 98 %. NMR ukazuje približne 0,1 M zachyteného etylacetátu.
Elementárna analýza pre C22H24N2O4S2.0,1 ϋ4Η8Ο2 vypočítané: 59,34 % C, 5,51% H, 6,18 %N, 14,14% S nájdené: 59,22 % C, 5,41 % H, 6,12 % N, 13,72 % S.
Príklad 22
Kyselina [R-(R*,S*)]-2,3,4,5-tetrahydro-3-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-fenylpropyl)amino]-2-oxo-1 H-benzazepín-1 -octová
a) Etylester kyseliny (R)-2,3,4,5-tetrahydro-3-amino-2-oxo-1 H-benzazepín-1 -octovej
2,3,4,5-Tetrahydro-3-amino-2-oxo-1 H-benzazepín-1 -octová kyselina vo forme etylesteru (pripravený podľa Watthey-e a spol., J. Med. Chem., 28, str. 1511 - 1516 (1985)[ (14,8 g, 56,4 mmol) sa rozpustí cez svoju soľ s L-vínnou kyselinou spôsobom opísaným v uvedenej citácii, získa sa S-amín (3,927 g, t. t. 105 - 107 °C, [a]D = -277 0 (c = 0,99, etanol). Zvyšok zo spojených materských lúhov (21,5 g, 52,1 mmol) sa suspenduje v etylacetáte (340 ml), premyje sa dvakrát 10 % hydroxidom amónnym (41 ml, potom 30 ml) a soľankou (25 ml), suší sa (bezvodý síran sodný), filtruje, odparí do sucha a výsledný produkt sa suší vo vákuu. Získa sa zmes amínu (7,01 g), obohatená R-izomérom. Roztok zmesi izomérov (2,285 g, 8,71 mmol) v absolútnom etanole (18 ml) sa spracuje s kyselinou D-vinnou (1,31 g, 8,73 mmol) a zahrieva na parnom kúpeli až do rozpustenia. Číry roztok sa ochladí na teplotu miestnosti, nechá sa stáť dva dni, potom sa ochladí na 0 °C (kúpeľ ľad-soľ) a poškrabaním zmes kryštalizuje. Surová soľ sa raz rekryštalizuje z absolútneho etanolu (14 ml), získa sa požadovaná soľ [2,158 g), [a]D = +154,1 0 (c = 0,6 metanol). Soľ sa potom suspenduje v etylacetáte (35 ml), premyje sa 10 % hydroxidom amónnym (2x4 ml) a soľankou (6 ml), suší (bezvodým síranom sodným), filtruje, odparí do sucha a suší vo vákuu. Získa sa 1,31 g produktu, Rf = = 0,60 (metylénchlorid : metanol, 9:1), [oc]D = +273,1 0 (c = 0,677, metanol).
b) Etylester kyseliny [R-(R*,S*)]-2,3,4,5-tetrahydro-3-[[(2-(acetyltio)-1 -oxo-3-fenylpropyl]amino]-2-oxo-1 H-benzazepín- 1 -octová (S)-2-(Acetyltio)benzénpropánová kyselina (získaná z dicyklohexylamínovej soli ako bolo už opísané) sa nechá reagovať s produktom z časti a) postupom podľa príkladu 2 časť b). Získa sa titulný produkt ako sirup, Rf = 0,57 (etylacetát : hexány, 1:1).
c) Kyselina [R-(R*,S*)]-2,3,4,5-tetrahydro-3-[(2-sulfanyl-l-oxo-3 -fenylpropy l)amino]-2-oxo-1 H-benzazepín-1 -octová
Roztok produktu z časti b) v metanole sa spracuje s IN hydroxidom sodným postupom podľa príkladu 2 časť c). Získa sa titulný produkt ako amorfná pevná látka, Rf = 0,67 (metylénchlorid : metanol : kyselina octová, 20 : 1 : 1), [a]D = +230,9 0 (c = 0,57, metanol).
Elementárna analýza pre C21H22N2O4S: vypočítané: 63,30 % C, 5,56 % H, 7,03 % N, 8,05 % S, 8,30 % SH nájdené: 63,23 % C, 5,80 % H, 6,76 % N, 7,99 % S,
7,67 % SH 'H-NMR (400 MHz, CDC13): δ 1,65 (m, 1H), 2,06 (d, 1H),
2,51 (m, 2H), 2,94 (dd, 1 H, J = 7,13 Hz), 3,17 (m, 2H), 3,40 (m, 1H), 4,39 (d, 1H, J = 17 Hz), 4,45 (m, 1H), 4,67 (d, 1H, J = 17 Hz), 7,05 - 7,31 (m, 9H).
Príklad 23
Kyselina [R-(R*,S*)]-2,3,4,5-tetrahydro-3-[[2-(sulfanylmety 1)-1 -oxo-3 -fenylpropy 1] amino]-1 H-benzazepín-1 -octová
Postupom podľa príkladu 22, ale s použitím kyseliny (S)-2-[(acetyltio)metyl[benzénpropánovej v časti b) sa získa titulný produkt ako amorfná pevná látka, Rf = 0,53 (metylénchlorid : metanol : kyselina octová, 20 : 1 : 1), [a]D= +253,9 0 (c - 0,38, metanol).
Elementárna analýza pre C22H24N2O4S: vypočítané: 64,06 % C, 5,86% H, 6,79% N, 7,77 % S nájdené: 63,83 % C, 6,08 % H, 6,40 % N, 7,75 % S.
'H-NMR (400 MHz, CDC13) : δ 1,51 (m, 2H), 2,32 - 2,52 (m, 4H), 2, 77 (m, 3H), 3,17 (m, 1H), 4,36 (d, 1H, J = 17 Hz), 4,48 (m, 1H), 4,70 (d, 1H, J = 17 Hz), 6,53 (d, 1H),
7,11 -7,30 (m, 9H).
Príklad 24
Kyselina [S-(R*,S*)]-2,3,4,5-tetrahydro-3-[(2-sulfanyl-I-oxo-3 -fenylpropy l)amino]-2-oxo-1 H-1 -benzazepín-1 -octová
a) Kyselina (S)-a-brómbenzénpropánová
Roztok L-fenylalanínu (30,0 g, 0,175 mol) a bromidu draselného (73,5 g, 0,618 mol) v 2,5N kyseline sírovej (365 ml) sa ochladí na 0 °C (kúpeľ ľad-soľ) a po častiach sa spracuje s dusitanom sodným (19,3 g, 0,28 mol) počas 1,0 hodiny. V miešaní sa pokračuje 1,0 hodiny pri 0 °C pri teplote miestnosti počas 1,0 hodinu, potom sa reakčná zmes extrahuje éterom (3 x 250 ml). Spojené organické extrakty sa premyjú vodou (100 ml) a soľankou (50 ml), sušia (bezvodý síran horečnatý), filtruje, odparí do sucha a suší vo vákuu. Získa sa 34,46 g produktu, Rf = 0,45 (toluén : kyselina octová, 95 : 5).
b) Dicyklohexylamínová soľ kyseliny (R)-a-(acetyltio)benzénpropánovej
Suspenzia tioacetátu draselného (19,25 g, 0,168 mol) v suchom acetonitrile (300 ml) sa ochladí na 0 °C (kúpeľ ľad-soľ) a spracuje sa po kvapkách s roztokom produktu z časti a) (34,462 g, 0,15 mol) v suchom acetonitrile (35 ml) počas 15 minút. Reakčná zmes sa ohreje na teplotu miestnosti, mieša 5,0 hodín pod atmosférou argónu a potom filtruje, pevné látky sa premyjú starostlivo acetonitrilom (125 ml). Číry filtrát sa odparí do sucha a suší vo vákuu. Voľná kyselina (39,717 g) sa odparí do sucha a suší vo vákuu. Voľná kyselina (39,717 g, oranžový sirup) sa rozpustí v éteri (400 ml), spracuje s dicyklohexylamínom (30,2 ml, 1 ekv.) a mieša 30 minút pri teplote miestnosti pod argónom. Biele zrazeniny sa odfiltrujú, premyjú sa starostlivo etyléterom (2 x 100 ml a sušia vo vákuu cez noc pri teplote miestnosti. Získa sa 41,0 g produktu. [a]D = +31,8 0 (c = 1,4, metanol).
c) Etylester kyseliny [S-(R*,S*)]-2,3,4,5-tetrahydro-3-[[2-(acetyltio)-l-oxo-3-fenylpropyl]amino]-2-oxo-lH-l-benzazepín-1-octovej
Suspenzia dicyklohexylamínovej soli kyseliny (R)-a-(acetyltio)benzénpropánovej (850 mg, 2,1 mmol) vetylacetáte (60 ml) sa premyje 5 % hydrogensíranom draselným (5 x 10 ml) a soľankou (10 ml), suší sa (bezvodý síran horečnatý), filtruje, odparí sa do sucha vo vákuu. Získa sa voľná kyselina ako číry sirup (497 mg) v kvantitatívnom výťažku.
Voľná kyselina sa rozpustí v suchom metylénchloride (12 ml), ochladí sa na 0 °C (kúpeľ ľad-soľ) a spracuje s hydrátom 1-hydroxybenztriazolu (297 mg, 2,20 mmol) a 1-etyi-3-(3-dimetylaminopropyl)karbodiimidom (435 mg, 2,27 mmol). Reakčná zmes sa mieša pri 0 °C pod argónom 1,0 hodinu, spracuje sa s etylesterom kyseliny (S)-2,3,4,5-tetrahy dro-3-amino-2-oxo-1 H-benzazepín-1 -octovej [pripravený ako opísal Watthey a spol., J. Med. Chem., 28, str. 1511 - 1516 (1985)[ (500 mg, 1,91 mmol) a mieša sa ďalej pri 0 °C počas 1,0 hodiny a pri teplote miestnosti 1,0 hodinu. Roztok a zriedi etylacetátom (50 ml), premyje sa postupne vodou (8,0 ml), 5 % hydrogensíranom draselným (2x8 ml), vodou (8,0 ml), nasýteným hydrogenuhličitanom sodným (8,0 ml) a soľankou (8,0 ml), suší sa (bezvodý síran sodný), filtruje, odparí do sucha a suší vo vákuu. Surový produkt sa chromatografuje na stĺpci silikagélu (Merck) za elúcie stĺpca etylacetátom : hexánmi (1 : 4), čím sa získa 714 mg produktu ako číreho sirupu, Rf = 0,62 (etylacetát: hexány, (1 : 1)).
d) Kyselina [S-(R*,S*)]-2,3,4,5-tetrahydro-3-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-ťenylpropyl)amino]-2-oxo-1 H- 1-benzazepin-1 -octová
Roztok produktu z časti c) (714 mg, 1,52 mmol) v metanole (9, 0 ml) sa prebublá argónom počas 30 minút, ochladí na 0 °C (kúpeľ ľad-soľ), potom sa po kvapkách spracuje s vopred prebublaným roztokom 1,0 N hydroxidu sodného (6,0 ml, 4 ekv.) za udržiavania bublania počas pridávania a trvania reakcie. Reakčná zmes sa mieša pri 0 °C počas 1,0 hodiny, okyslí sa na pH 2,0 5 % hydrogensíranom draselným (26 ml) a potom sa extrahuje etylacetátom (2 x 50 ml). Spojené organické extrakty sa premyjú soľankou (14 ml), sušia (bezvodý síran sodný), filtrujú, odparia do sucha a sušia vo vákuu. Surový produkt sa rozpustí v metylénchloride (5,0 ml) a po častiach sa spracuje s hexánom (50 ml), poškrabaním sa vytvorí pevná látka. Supernatant sa zleje a pevné látky sa triturujú s ďalším hexánom (50 ml) a pentánom (2 x 100 ml), miešajú sa s prvými 100 ml pentánu 4,0 hodiny a s ďalšími 100 ml cez noc pod argónom. Získaný produkt sa potom suší vo vákuu a získa sa produkt ako amorfná pevná látka, Rf = 0, 47 (metylénchlorid : metanol : kyselina octová, 20 : 1 : 1), [a]D = -228 0 (c = 0,51, metanol).
Elementárna analýza pre C21H22N2O4S . 0,26 C5H|2 . 0,176 CH2C12 vypočítané: 62,46 % C, 5,94 % H, 6,48 % N, 7,42 % S nájdené: 62,81 % C, 5,87 % H, 6,53 % N, 7,29 % S.
’H-NMR (400 MHz, CDClj): δ 1,65 (m, IH), 2,06 (d, IH),
2,51 (m, 2H), 2,95 (dd, IH, J = 7,14 Hz), 3,17 (m, 2H), 4,39 (d, IH, J = 17 Hz), 4,46 (m, IH), 4,67 (d, IH, J = 17 Hz), 7,02-7,31 (m, 9H).
Príklad 25 Kyselina [S-(R*,R*)]-hexahydro-3-[(2-sulfanyl-1 -οχο-3-fenylpropyl)amino]-2-oxo-l(2H)-azocínoctová
a) 1,1-Dimctylester kyseliny [S-(R*,R*)]-hexahydro-3-[[2-(acetyl tio)-1 -oxo-3 -fenylpropyl]amino]-2-oxo-1 (2H)-azocínoctovej
Suspenzia dicyklohexylamínovej soli kyseliny (S)-2-(acetyltio)benzénpropánovej (2,63 g, 6,6 mmol) v etylacetáte (50 ml) sa premyje dvakrát 0,lN kyselinou chlorovodíkovou (50 ml, 25 ml) a jednou soľankou (25 ml), suší sa (síran horečnatý'), filtruje a zbaví sa rozpúšťadla vo vákuu. Zostane voľná kyselina ako olej. Táto voľná kyselina a 1,1-dimetyletylester kyseliny (S)-3-aminohexahydro-2-oxo-l(2H)-azocínoctovej (pripravený postupom podľa Thorsetta a spol., J. Med. Chem., 29, 251 - 60 (1986)[(1,66 g,
6,5 mmol) sa rozpustí v dichlórmetáne (30 ml) pod atmosférou argónu a ochladí sa na 0 °C. Pridá sa hydrát 1-hydroxybenzotriazolu (891 mg, 6,6 mmol). Zmes sa za studená mieša štyri hodiny. Zmes sa zriedi dichlórmetánom (100 ml). Roztok sa premyje vodou (50 ml), 5 % roztokom hydrogensíranu draselného (50 ml), roztokom hydrogenuhličitanu sodného (50 ml) a soľankou (50 ml). Dichlórmetánový roztok sa suší (síran horečnatý), filtruje a zbaví rozpúšťadla vo vákuu. Zostávajúca pena sa chromatografuje na silikagéli (Merck, 500 ml), za elúcie 25 - 50 % etylacetátom v hexáne. Získa sa 2,252 g produktu, Rf = 0,35, (etylacetát: hexán, 1:1).
b) Kyselina [S-(R*,R*)[-hexahydro-3-[[(2-acetyltio)-l-oxo-3-fenylpropyl]amino]-2-oxo-1 (2H)-azocínoctová
Produkt z časti a) sa rozpustí v kyseline trifluóroctovej (20 ml) a mieša sa pri teplote miestnosti 1,75 hodín, pod argónovou atmosférou. Kyselina trifluóroctová sa odstráni za vákua a dvakrát sa pridá toluén a odstráni sa za vákua. Zostane kyselina ako biela pena.
c) Kyselina [S-(R*,R*)]-hexahydro-3-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-fenylpropyl)amino]-2-oxo-1 (2H)-azocínoctová
Roztok z časti b) (5,45 mmol) v metanole (30 ml) sa prebubláva argónom 15 minút, ochladí sa na kúpeli ľad-soľ a za miešania a prebublávania argónom sa po kvapkách spracuje s koncentrovaným hydroxidom amónnym (2,0 ml). Po miešaní počas 6,5 hodín za chladu sa pridá ďalší roztok hydroxidu amónneho (1,0 ml) a zmes sa uzavrie a ponechá v chladničke 18 hodín. Zmes sa okyslí na pH 2 5 % roztokom hydrogensíranu draselného. Produkt sa extrahuje do dichlórmetánu (3 x 50 ml). Spojené organické extrakty sa sušia (síran horečnatý), odfiltrujú a zbavia rozpúšťadla vo vákuu. Zostane biela pena. Éter a hexán sa pridajú ku zvyšku a suspenzia sa mieša pod atmosférou argónu 1 hodinu. Biela pevná látka sa izoluje filtráciou, premyje sa viackrát éterom a hexánom a suší sa vo vákuu. Získa sa 1,531 g produktu ako bielej peny, t. t. 71 až 90 °C, Rf = = 0,41 (10 % metánu v metylénchloride + 2 kvapky' kyseliny octovej[5 ml). [a]D = +3,5 0 (c = 0,75, metanol). Elementárna analýza pre Ci8H24N2O4S: vypočítané: 59,32 % C, 6,64% H, 7,69% N, 8,80 % S nájdené: 59,02 % C, 6,77 % H, 7,67 % N, 8,70 % S.
HPLC: RT = 6,1 min., 62 % vodný metanol, obsahujúci 0,2 % kyseliny fosforečnej, 1,5 ml [min., detegované pri 220 nm, YMC S-3 (ODS), 6,0 x 150 mm, 3 mikrometrovým sférickým koncom uzavretá kolóna. H. I. = > 95 %.
Príklad 26
Kyselina (3S)-2,3,4,5-tetrahydro-3-[[(2-sulfanyl-3-(l-naňalenyl)-1 -oxopropyl]amino]-2-oxo-1 H-benzazepín-1 -octová
a) Dietylester kyseliny (acetylamino)(l-naftalenylmetyl)-propándiovej
K roztoku etoxidu sodného (21 % v etanole, 4,613 g, 67,8 mmol) v etanole (100 ml) sa pridá dietylacetamidomalonát (14,74 g, 67,8 mmol), potom l-(brómmetyl)naftalén (10,0 g, 45,2 mmol). Roztok sa mieša pri teplote miestnosti jednu hodinu. Reakčná zmes sa potom zahustí na oranžový olej. Olej sa rozpustí v ctylacetáte a premyje sa 50 % nasýteným chloridom amónnym, vodou a soľankou, potom sa suší nad síranom sodným, filtruje a zahustením sa získa oranžová pevná látka. Táto látka sa rekryštalizuje z etylacetátu a hexánu, získajú sa béžové kryštály kontaminované malonátom. Pevná látka sa rozpustí v 50 % etylacetáte v hexáne a čistí sa rýchlou chromatografiou na Merck silikagéli v 50 % etylacetáte v hexáne. Frakcie, obsahujúce čistý produkt, sa spoja a zahustia. Získa sa 10,225 g produktu ako bielej pevnej látky, t. t. 105 až 108 °C, Rf = = 0,57 (50 % etylacetát v hexáne).
b) a-Amino-l-naftalénpropánová kyselina
Roztok produktu z časti a) (16,182 g, 47,5 mmol) sa suspenduje v 48 % bromovodíku (100 ml) a refluxuje sa pod argónom 14 hodín. Hydrobromidová soľ produktu sa odfiltruje z roztoku ako biela pevná látka, vyberie sa do horúcej (50 °C) vody (500 ml) a roztok sa neutralizuje koncentrovaným hydroxidom amónnym. Produkt sa vyzráža z roztoku ako jemná biela látka. Po filtrácii a sušení pod vysokým vákuom cez noc (18 hodín) sa získa 8,335 g produktu ako páperovitá biela látka, 1.1. 264 °C.
c) Kyselina a-bróm-l-naftalénpropánová
K roztoku produktu z časti b) (4,000 g, 18,6 mmol) a bromidu draselného (7,63 g, 63,2 mmol) v 2,5N kyseline sírovej (35 ml), udržovanému na 0 °C sa pridá dusitan sodný (1,92 g, 27,8 mmol) počas jednej hodiny. Zmes sa mieša ďalšiu hodinu pri 0 °C, potom sa ohreje na teplotu miestnosti a mieša sa 2,5 hodiny. Reakčná zmes sa potom extrahuje éterom (3x). Éterové vrstvy sa spoja a premyjú sa vodou a soľankou, potom sa sušia nad síranom sodným, filtrujú a zahustením sa získa oranžový olej. Tento olej sa čistí rýchlou chromatografiou na Merck silikagéli v 70 % etylacetáte v hexáne a 1 % kyselinou octovou pridanou na zníženie preťahovania elúcie. Frakcie, obsahujúce bromid sa spoja a zahustením sa získa slabo kontaminovaný produkt ako oranžový olej, ktorý státím ccz noc tuhne. Rf = = 0,40 (40 % etylacetát v hexáne s 1 % kyselinou octovou).
d) Kyselina a-(acetyltio)-l-naftalénpropánová
Ku kašovitej zmesi tiooctanu draselného (0,912 g, 8,00 mmol) v acetonitrile (300 ml) pri 0 °C sa pridá produkt z časti c) (2,030 g, 7,27 mmol) ako roztok v acetonitrile (3 ml). Roztok sa mieša jednu hodinu pri 0 °C, potom sa ohreje na teplotu miestnosti a mieša sa 15 hodín. Bromid draselný sa odfiltruje od reakčnej zmesi a zahustením filtrátu sa získa oranžový olej. Tento olej sa rozpustí v etylacetáte a premyje sa 10 % hydrogensíranom draselným a soľankou. Potom sa suší nad síranom sodným, filtruje a zahustí. Získa sa oranžový olej. Tento olej sa čistí rýchlou chromatografiou na Merck silikagéli v 50 % etylacetáte v hexáne s 1 % kyseliny octovej na zníženie predĺženia elúcie. Tie frakcie, ktoré obsahujú produkt, sú všetky kontaminované zlúčeninou s Rf = 0,43. Tieto frakcie sa spoja a zahustením sa získa oranžový olej. Surový produkt sa čistí cez dicyklohexylamínovú soľ rozpustením oranžového oleja v éteri a prídavkom ekvivalentu dicyklohexylamínu (18,13 g, 100 mmol) k roztoku. Dicyklohexylamínová soľ sa získa v dvoch výťažkoch hnedých kryštálov (1,450 g) ešte stále slabo kontaminovaných nečistotami. Kryštály sa suspendujú v etylacetáte a trepú s 10 % hydrogensíranom draselným (3x). Organická vrstva sa potom premyje vodou a soľankou, suší sa nad síranom sodným, filtruje a zahustením sa získa 875 mg produktu ako žltého oleja, Rf = 0,40 (40 % etylacetát v hexáne s 1 % kyselinou octovou).
e) Kyselina (3S)-2,3,4,5-tetrahydro-3-[[(acetyltio)-3-(l-naftalenyl)-1 -oxopropyljamino]-2-oxo-1 H-1 -benzazepín-1 -octová
Racemická kyselina - produkt z časti d) (338 mg, 1,23 mmol) a etylester kyseliny (S)-2,3,4,5-tetrahydro-3-amino-2-oxo-lH-l-benzazepin-l-octovej (pripravený podľa Wattheye a spol., J. Med. Chem., 28, str. 1511 - 1516 (1985) (321 mg, 1,23 mmol) sa rozpustí v metylénchloride (11 ml) pri teplote miestnosti pod argónom. Zmes sa ochladí na 0 “C a spracuje s hydrátom hydroxybenzotriazolu (166 mg, 1,23 mmol) a l-etyl-3-(3-dimetylaminopropyl)karbodiimidom (259 mg, 1,35 mmol). Po miešaní 1 hodinu sa zmes ohreje na teplotu miestnosti a mieša sa ďalšie 4 hodiny. Prchavé látky sa odparia a zvyšok sa rozpustí v ctylacetáte a premyje sa postupne IN kyselinou chlorovodíkovou, nasýteným hydrogenuhličitanom sodným a soľankou. Organická vrstva sa suší (síran sodný), filtruje a zahustí vo vákuu a zvyšok sa spracuje rýchlou chromatografiou (Merck silikagél) za elúcie 50 % etylacetátom v hexánoch. Získa sa 510 mg produktu ako oleja (1 : 1 zmes diastereomérov). Rf = 0,40 (5 % kyselina octová v etylacetáte).
f) Kyselina (3S)-2,3,4,5-tetrahydro-3-[[2-sulfanyl-3-(l-naftaleny 1)-1 -oxopropyl] amino]-2-oxo-1 H-1 -benzazepín-1 -octová
Roztok produktu z časti e) (508 mg, 0,98 mmol) v metanole (6 ml, zbavený kyslíka prebublávaním argónom) sa ochladí na 0 °C a spracuje sa s IN hydroxidom sodným (6 ml, zbavený kyslíka prebublávaním argónom). Výsledná zmes sa mieša pod argónom 1 hodinu. Roztok sa okyslí 10 % hydrogensíranom draselným a extrahuje sa etylacetátom. Organická vrstva sa premyje soľankou, suší (síran sodný), filtruje a zahustí. Získa sa číry olej. Zvyšok sa spracuje iýchlou chromatografiou (Merck silikagél) za elúcie 1 % kyselinou octovou v 1 : 1 hexánoch[etylacetáte. Frakcie, obsahujúce čistý produkt sa spoja, zahustia, azeotropne oddestilujú s etylacetátom a premyjú vodou na odstránenie kyseliny octovej. Organická vrstva sa suší (síran sodný), filtruje a zahustí. Zvyšok sa vyberie do etylacetátu a trituruje sa s etyléterom a hexánom. Rozpúšťadlo sa odstráni a zvyšok sa rozmieša v hexáne, rýchlo oddestilujc a sušením vo vákuu poskytne 327 mg produktu ako bielu práškovitú penu, Rf = 0,64 (5 % kyselina octová v etylacetáte), [a]D = 187,3 0 (c = 0,43, chloroform).
Elementárna analýza pre C25H23N2O4S . 0,42 H2O vypočítané: 65,98 % C, 5,28% H, 6,16% N, 7,05% S nájdené: 66,29 % C, 5,29 % H, 5,85 % N, 6,65 % S.
HPLC: RT = 12,3 min. (48,1 %) a 14,4 min. (51,8 %) ( = 220 nm), YMC S-3- ODS (C-18) 6,0 x 150 mm, 68 % (10 % voda - 90 % metanol, 0,2 % kyselina fosforečná)[32 % (90 % voda - 10 % metanol -0,2 % kyselina fosforečná), prietok
1,5 ml [min., izokraticky.
Príklad 27
Kyselina [S-(R*,R*)]-3-[[2-(acetyltio)-l-oxo-3-fenylpropyl]-amino]-2,3,4,5-tetrahydro-1 -oxo-lH-benzazepín-1 -octová
Produkt z príkladu 6 (799 mg, 2,0 mmol) sa pridá k roztoku hydrogenuhličitanu sodného (zbaveného kyslíka prebublávaním argónom) (378 mg, 3,8 mmol) vo vode (25 ml). Po rozpustení východiskového materiálu sa pridá acetánhydrid (1,5 ml, 1,62 g, 15,9 mmol). Získa sa mliečne biely roztok, ktorý prípadne produkuje gumu. Po miešaní štyri minúty pri teplote miestnosti sa zmes okyslí 10 % kyselinou chlorovodíkovou a extrahuje sa etylacetátom. Etylacetátový extrakt sa premyje vodou (3-krát) a soľankou, potom sa suší (síran sodný), filtruje a rýchle oddestiluje rozpúšťadlo. Zvyšok sa spracuje rýchlou chromatografiou (Merck silikagél), 1 % kyselina octová v etylacetáte) a požadovaná frakcia sa zbavia rozpúšťadla destiláciou, azeotropne sa destilujú s etylacetátom (3-krát), vyberú do malého množstva etylacetátu a triturujú s hexánom. Rozpúšťadlo sa odtiahne a zvyšok sa rozmieša a dvakrát oddestiluje od hexánu. Získa sa titulná zlúčenina ako tvrdá biela pena. TLC (4 % kyselina octová v etylacetáte) Rf = 0,41, [a]D = -190,9 0 (c = 0,68, chloroform).
Elementárna analýza pre C23H24N2O5S .0,13 C4H8O2. 0,5 H2O vypočítané: 61,28% C, 5,69% H, 6,08% N, 6,96% S nájdené: 61,18%C, 5,64%H, 5,90%N, 6,70%S.
Príklady 28 - 30
Postupom podľa príkladu 27, ale s použitím benzoylchloridu ako acylačného činidla sa získa kyselina [S-(R',R’)][3-[2-(benzoyltio)-1-oxo-3-fenylpropyl]-amino]-2,3,4,5-tetrahydro-l-oxo-lH-benzazepín-l-octová, 1.1. 170 až 171 °C, [a]D = -244 0 (c = 0,30, chloroform). TLC (hexán : etylacetát : kyselina octová, 40 : 60 : I) Rf = 0,31.
Elementárna analýza pre C28H26N2O5S . 0,1 C4H8O2 . 0,2 H2O vypočítané: 66,24 % C, 5,32% H, 5,44% N, 6,23% S nájdené: 66,28 % C, 5,23 % H, 5,40 % N, 6,18 % S.
Postupom podľa príkladu 27, ale s použitím propionánhydridu ako acylačného činidla sa získa kyselina [S-(R*,R’)[-2,3,4,5-tetrahydro-3-[[ 1 -oxo-2-[( 1 -oxopropyl )tio)-3 -fenylpropyl]-amino]-2-oxo-lH-benzazepín-l-octová t. t. 156 až 157 °C, [a]D = -210 0 (c = 0,31, chloroform). TLC (hexán : etylacetát: kyselina octová, 40 : 60 : 1). Elementárna analýza pre C24H26N2O5S . 0,07 C4H8O2: vypočítané: 63,30 % C, 5,81% H, 6,08% N, 9,96 % S nájdené: 63,32 % C, 5,77 % H, 5,90 % N, 6,96 % S.
Postupom podľa príkladu 27, ale s použitím anhydridu kyseliny trimetyloctovej ako acylačného činidla sa získa kyselina [S-(R*,R*)]-3-[[2-[(2,2-dimetyl-l-oxopropyl)tio]-l-oxo-3-fenylpropyl]amino]-2,3,4,5-tetrahydro-l-oxo-lH-benzazepín-1-octová t. t. 86 až 90 °C, [ct]D = -190 0 (c = = 3,06, chloroform). TLC (hexán : etylacetát : kyselina octová, 30 : 70 : 1) Rf=0,42.
Elementárna analýza pre C26H30N2O5S . 0,2 C6HI4 . 0,25 H2O vypočítané: 64,78 % C, 6,65 % H. 5,50 % N, 6,36 % S nájdené: 64,79% C, 6,56% H, 5,53% N, 6,30 % S.
Príklad 31
Kyselina [S-(R*,R*)]-3,4-dihydro-3-[(2-sulfanyl-1 -oxo-3-fenylpropyl)amino]-4-oxo-1,5-benzoxazepín-5(2H)-propánová
a) Etylester kyseliny (S)-3-[[(dimetyletoxy)karbonyl]amino]-3,4-dihydro-4-oxo-l,5-benzoxazepín-5(2H)-propánovej
Roztok (S)-3-[[(dimctyletoxy)karbonyl]amino]-2,3-dihydro-l,5-benzoxazepín-4(5H)-onu (pripravený ako je opísané v príklade 13c), 1,49 g, 5,35 mmol) v zmesi tetrahydrofurán : terc.butanol (2 : 1, 21 ml) sa ochladí na 0 °C a spracuje sa s etylakrylátom (0,81 ml, 7,50 mmol, 1,4 ekv.) a potom s l,0N terc.butanolom, draselnou soľou (535 μΐ, 0,1 ekv.). Reakčná zmes sa mieša pri 0 °C 15 minút a potom pri teplote miestnosti 2,5 hodiny pod argónom. Pridá sa ďalšie množstvo l,0N draselnej soli terc.butanolu[tetrahydrofuránu (270 μΐ, 0,05 ekv.) k reakčnej zmesi. Táto sa mieša pri teplote miestnosti 45 minút a potom sa zahreje na 60 °C na 2 hodiny. Reakcia sa preruší 25 % chloridom amónnym (50 ml) a extrahuje sa etylacetátom (2 x 100 ml). Spojené organické extrakty sa premyjú 25 % chloridom amónnym (50 ml), vodou (50 ml) a soľankou (50 ml), sušia sa nad síranom horečnatým, filtrujú a zahustia. Získa sa číry sirup. Zvyšok ukazuje pri TLC dve škvrny.
Reakcia sa znova naštartuje spracovaním roztoku zmesi (1,42 g, 5,10 mmol) v tetrahydrofuráne : terc.butanolu (2 : : 1, 15 ml) ochladené na 0 °C, s etylakrylátom (0,77 ml, 7,14 mmol, 1,4 ekv.) a potom 1,0 N draselnou soľou terc.butanolu[tetrahydrofuránom (510 ml, 0,1 ekv.). Reakčná zmes sa mieša pri 0 °C 15 minút a potom pri teplote miestnosti 3 hodiny. Reakcia sa preruší 25 % chloridom amónnym (50 ml) a extrahuje sa etylacetátom (2 x 100 ml). Spojené organické podiely sa premyjú 25 % chloridom amónnym (50 ml), vodou (50 ml) a soľankou (50 ml), sušia sa nad síranom horečnatým, filtrujú a zahustením sa získa žltý sirup. Zvyšok sa čistí chromatografiou na 5 x 15 cm stĺpci silikagélu za clúcie 30 % etylacetát[hexán 21). Požadované frakcie sa spoja a zahustením sa získa 1,40 g titulnej zlúčeniny ako číreho sirupu. TLC (5 % metanol[chloroform) Rf = 0,63.
b) Hydrochloridová soľ etylesteru kyseliny (S)-3-amino-3,4-dihydro-4-oxo-l,5-benzoxazepín-5(2H)-propánovej
Produkt z časti a) (1,4 g, 3,7 mmol) sa spracuje so 4,0M kyselinou chlorovodíkovou v dioxáne (20 ml, 80 mmol) a ochladí sa na 0 °C. Výsledný roztok sa mieša pri 0 °C 30 minút, potom pri teplote miestnosti 2 hodiny. Reakčná zmes sa zahusti, dvakrát odtiahne s etyléterom, azeotrópne destiluje s toluénom (trikrát) a sušia vo vákuu 4 hodiny. Získa sa 1,05 g titulnej zlúčeniny.
c) Etylester kyseliny [S-(R’,R*)[-3-[[2-(acetyltio)-l-oxo-3-fenyl-propyl]amino]-3,4-dihydro-4-oxo-l,5-benzoxazepín-5(2H)-propánovej
Bicyklohexylamínová soľ kyseliny (S)-2-(acetyltio)benzénpropánovej (1,8 g, 4,40 mmol) sa suspenduje v etylacetáte (100 ml) a premyje 5 % hydrogensíranom draselným (5 x 25 ml) a soľankou (30 ml), suší sa (bezvodý síran horečnatý), filtruje, odparí do sucha a suší vo vákuu. Získa sa voľná kyselina.
Táto voľná kyselina sa rozpustí v suchom metylénchloride (10 ml), ochladí sa na 0 °C (kúpeľ ľad-soľ) a spracuje sa s roztokom produktu z časti b) (1,05 g, 3,33 mmol) v suchom metylénchloride (25 ml), ďalej s trietylamínom (0,62 ml, 4,44 mmol, 1,3 ekv.) a benzotriazol-l-yloxytris-(dimetylaminoj-fosfóniumhexafluórfosfátom (1,96 g, 4,44 mmol,
1,3 ekv.). Reakčná zmes sa mieša pri 0 °C 1 hodinu a potom pri teplote miestnosti cez noc. Reakčná zmes sa zahustí do sucha, zriedi sa etylacetátom (150 ml) a premyje sa 5 % hydrogensíranom draselným (2 x 50 ml, vodou (2 x 50 ml) a soľankou (50 ml), suší sa (bezvodý síran horečnatý), filtruje a odparí do sucha. Surový produkt sa chromatografúje na stĺpci silikagélu (5x15 cm), za elúcie 30 % etylacetátom[hexánom. Požadované frakcie sa spoja a zahustia, získa sa 740 mg čistého produktu. TLC (10 % metanol v chloroforme Rf = 0,74.
d) Kyselina [S-(R*,R,)[-3,4-dihydro-3-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-fenylpropyl)amino[-4 -oxo-1,5-benzoxazepín-5(2H)-propánová
Roztok produktu z časti c) (740 mg, 1,53 mmol) v metanole (15 ml) sa ochladí na 0 °C (kúpeľ ľad-soľ), prebublá sa argónom počas 30 minút a potom sa spracuje po kvapkách s vopred prebublaným (argón, 30 minút) roztokom l,0N hydroxidu sodného (6,1 ml, 4 ekv.) za udržiavania prebublávania argónom počas pridávania a trvania reakcie. Reakčná zmes sa mieša pri 0 °C 1 hodinu, okyslí pri 0 °C hydrogensíranom draselným (150 ml) na pH 1,5 a potom sa extrahuje etylacetátom (3 x 100 ml). Spojené organické extrakty sa premyjú soľankou (100 ml), sušia (bezvodý síran sodný), filtrujú, odparia do sucha vo vákuu na bielu penu (612 mg). Zvyšok sa čistí stĺpcovou chromatografiou na 5 x 15 cm stĺpci silikagélu za elúcie 0,5 % kyselinou octovou v etylacetáte. Zvyšok sa rozpustí v metylénchloride (5 ml) a rýchle sa oddestiluje s hexánom (5-krát) na rotačnej odparke, poškrabaním zmesi sa tvorí biela pena[pevná látka. Pevná látka sa suší vo vákuu cez noc. Získa sa 590 mg produktu. TLC (1 % kyselina octová v etylacetáte Rf = 0,42. [a]D = -127,8 ° (c = 1,12 metanol).
Elementárna analýza pre C21H22N2O5S . 0,03 H2O vypočítané: 60,86 % C, 5,36% H, 6,75% N, 7,73% S nájdené: 61,08 % C, 5,68 % H, 6,45 % N, 7,51 % S.
Príklad 32
Kyselina [2R-[2a,3a(S*)[[-3,4-dihydro-3-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-fenylpropyl)amino[-2-metyl-4-oxo-l,5-benzoxazepín-5(2H)-octová
a) N-[(l,l-Dimetyletoxy)karbonyl[-0-(2-nitrofenyl)-L-treonín
Roztok N-[( 1,1 -dimetyletoxyjkarbonyl [-L-treonínu (5,02 g, 22,9 mmol) v suchom dimetylformamide (10 ml) sa potom po kvapkách pridá počas 30 minút k ochladenej (0 °C) suspenzii 60 % hydridu sodného (1,93 g, 48,25 mmol,
2,11 ekv.) v suchom dimetylformamide (40 ml). Reakčná zmes sa mieša pri 0 °C až do skončenia penenia (asi 3,5 hodiny). Reakčná zmes sa spracuje po kvapkách s 1-fluór-2-nitrobenzénom (2,67 ml) (25,2 mmol, 1,1 ekv.) počas 20 minút a mieša sa pri 0 °C pod argónom 2 hodiny. Reakčná zmes sa potom umiestni do chladnej miestnosti (5 °C) a mieša sa cez noc. Reakčná zmes sa naleje do ľadu-vody (500 ml) a extrahuje etyléterom (2 x 200 ml). Vodná fáza sa upraví na pH l,0N kyselinou chlorovodíkovou (200 ml) a extrahuje sa etylacetátom (3 x 300 ml). Spojené etylacetátové extrakty sa premyjú vodou (2 x 300 ml) a soľankou), sušia (bezvodý síran sodný), filtrujú, odparia sa do sucha vo vákuu. Surový zvyšok sa umiestni na celit a čistí chromatografiou na stĺpci silikagélu 10 x 20 cm. Elúcia metylénchloridom (31.), 99 : 1 metylénchloridom : metanolom (21.), 95 : 5 metylénchloridom : metanolom a 100 : 5 : 0,5 metylénchloridom : metanolom : kyselinou octovou (5 1) sa získa 6,07 g titulnej zlúčeniny. TLC (metylénchlorid : metanol : kyselina octová, 100 : 5 : 0,5) Rf= 0,16.
b) N-[( 1,1 -Dimetyletoxyjkarbonyl [-0-(2-aminofenyl)-L-treonín
Roztok produktu z časti a) (1,0 g, 2,94 mmol) v suchom metanole (20 ml) sa spracuje a 10 % paládiom na uhlí ako katalyzátorom (35 mg) a hydrogenuje sa pri 280 kPa 5,5 hodiny. Reakcia nie je úplná, takže sa pridá ďalších 50 mg 10 % paládia na uhlí ako katalyzátora a reakčná zmes sa hydrogenuje ďalšiu 1,5 hodinu. Reakčná zmes sa filtruje cez celitový stípček v miliporovej jednotke, stípček sa premyje metanolom. Tmavý filtrát sa odparí do sucha a suší vo vákuu. Získa sa 0,856 g titulnej zlúčeniny ako tmavej pevnej látky. TLC (metylénchlorid : metanol : kyselina octová 20:1: 1) Rf = 0,16.
c) (2R-cis)-3-[[(Dimetyletoxy)karbonyl]amino]-2,3-dihydro-2-metyl-1,5-benzoxazepín-4(5H)-on
Roztok produktu z časti b) (0,8 g, 2,58 mmol) v suchom dimetylformamide (6 ml) sa spracuje s l-etyl-3-(3-dimetylaminopropyljkarbodiimidom (495 mg, 2,58 mmol) a mieša sa pri teplote miestnosti 3 hodiny. Reakčná zmes sa rozdelí medzi etylacetát (50 ml) a 50 % roztok hydrogenuhličitanu sodného (50 ml). Vodná vrstva sa oddelí a extrahuje etylacetátom (2 x 50 ml). Spojené organické extrakty sa premyjú vodou (3 x 50 ml) a soľankou (50 ml), sušia sa (bezvodý síran horečnatý), filtrujú, zahustia a sušia vo vákuu. Získa sa surová žltá pevná látka. Surový produkt sa chromatografúje na stĺpci silikagélu (5x15 cm). Eluuje sa 25 % etylacctátomfhexánom. Získa sa 568 mg titulnej zlúčeniny ako špinavobielej pevnej látky. TLC (etylacetát : : hexán, 1 : 1) Rf= 0,47.
d) Etylester kyseliny (2R-cis)-3-[[(dimetyletoxy)karbonyl] amino] -3,4-dihydro-2-metyl-4-oxo-1,5-benzoxazepín-5(2H)-octovej
Roztok produktu z časti c) (319 mg, 1,90 mmol) a etylbrómacetátu (151,3 μΐ) (1,36 mmol, 1,25 ekv.) v suchom tetrahydrofúráne (3 ml) sa pridá k suspenzii 60 % hydridu sodného (53 mg, 1,32 mmol, 1,21 ekv., premyté hexánom, 3-krát) v suchom tetrahydrofúráne (2 ml) pri 0 °C počas 5 minút. Reakčná zmes sa mieša pri 0 °C počas 1 hodiny a potom pri teplote miestnosti 30 minút. Reakčná zmes sa rozruší 25 % roztokom chloridu amónneho (5 ml) a extra huje sa metylénchloridom (2 x 20 ml). Spojené organické podiely sa premyjú 25 % roztokom chloridu amónneho (5 ml) a extrahuje sa metylénchloridom (2 x 20 ml). Spojené organické podiely sa premyjú 25 % roztokom chloridu amónneho (10 ml) a soľankou (10 ml), sušia (bezvodý síran horečnatý), filtrujú, zahustia a sušia vo vákuu. Získa sa 400 mg titulného produktu. TLC (etylacetát : hexán, 1:1) Rf=O,55.
e) Hydrochloridová soľ etylesteru kyseliny (S)-3-amino-3,4-dihydro-2-metyl-4-oxo-l,5-benzoxazepín-5(2H)-octovej
0,4M kyselina chlorovodíková v dioxáne (5,5 ml, 22 mmol, 20,8 ekv.) sa pridá k produktu z časti d) (400 mg, 1,06 mmol) ochladenému na 0 °C. Výsledný roztok sa mieša pri 0 °C 30 minút, potom pri teplote miestnosti 3 hodiny. Reakčná zmes sa odstráni na rotačnej odparke, zahustí sa etyléterom (3x10 ml) a suší vo vákuu nad peletami hydroxidu sodného cez noc. Získa sa 350 mg titulného produktu: TLC (metylénchlorid : metanol, 9 : 1) Rf = 0,49.
f) Kyselina [2R-[2a,3a(S*)[[-3-[[2-(acetyltio)-l-oxo-3-fenylpropyl]amino]-2-metyl-4-oxo-1,5-benzoxazepín-5(2H)-octová
Suspenzia dicyklohexylamínovej soli (S)-2-(acetyltio)-benzénpropánovej kyseliny (495 mg, 1,22 mmol, 1,1 ekv.) v etylacetáte (30 ml) sa premyje 5 % hydrogensíranom draselným (5x5 ml) a soľankou (10 ml), suší (bezvodý síran horečnatý), filtruje sa, odparí do sucha vo vákuu. Získa sa voľná kyselina ako číry sirup (278 mg) v kvantitatívnom výťažku.
Táto voľná kyselina sa rozpustí v suchom metylénchloride (10 ml), ochladí na 0 °C (kúpeľ ľad-soľ) a spracuje sa s roztokom produktu z časti e) (350 mg, 1,11 mmol) v suchom metylénchloride (2 ml), potom s trietylamínom (163 μ], 1,17 mmol, 1,05 ekv.) a benzotriazol-l-yloxytris(dimctylaminojfosfóniumhexafluórfosfátom (515,5 mg, 1,17 mmol, 1,05 ekv.). Reakčná zmes sa mieša pri 0 °C hodinu, potom pri teplote miestnosti 3,5 hodiny. Reakcia podľa TLC nie je úplná, takže sa pridá ďalšie množstvo trietylamínu (54 μΐ, 0,389 mmol) a benzotriazol-l-yloxytris(dimetylamino)fosfóniumhexafluórfosfátu (172 mg, 0,389 mmol) a reakčná zmes sa mieša 1 hodinu. Reakčná zmes sa zahustí do sucha, premyje sa 0,5N kyselinou chlorovodíkovou (2 x 10 ml), vodou (10 ml) a soľankou (10 ml), suší sa (bezvodý síran horečnatý), filtruje a odparí sa do sucha. Surový produkt sa chromatografuje na stĺpci silikagélu (3x16 cm), za elúcie 20 % etylacetátom[hexánom. Požadované frakcie sa spoja a zahustia. Získa sa 378 mg čistého produktu. TLC (etylacetát : hexán, 1 : 1) Rf = 0,48.
g) Kyselina [2R-[2a,3a(S*)[[-3,4-dihydro-3-[(2-sulfanyl-l-oxo-3 -fenylpropyl)amino[-2-metyl-4-oxo-1,5 -benzoxazepín-5(2H)-octová
Roztok produktu z časti f) (297 mg, 0,61 mmol) v metanole (4 ml) sa prebubláva 30 minút argónom, ochladí sa na 0 °C (kúpeľ ľad-soľ) a potom po kvapkách spracuje s predom prebublaným (argón, 30 minút) roztokom l,0N hydroxidu sodného (2,45 ml, 4 ekv.) za udržiavania prebublávania argónom počas pridávania sa času trvania reakcie. Reakčná zmes sa mieša pri 0 °C 1 hodinu, okyslí pri 0 °C 5 % hydrogensíranom draselným (20 ml) na pH 1,5 a potom sa extrahuje etylacetátom (2 x 50 ml). Spojené organické extrakty sa premyjú soľankou (25 ml), sušia (bezvodý síran sodný), filtrujú, odparia do sucha a sušia vo vákuu. Získa sa sklovitý olej (351 mg). Surový zvyšok sa rozpustí v metylénchloride (5 ml) a po častiach sa spracuje s hexá nom (50 ml). Poškrabaním zmes tvorí pevnú látku. Supernatant sa zíisuje a pevné látky sa triturujú s ďalším hexánom (50 ml) a pentánom (2 x 100 ml) za miešania s prvými 100 ml pentánu po 4 hodiny a ďalšími 100 ml cez noc pod argónom. Pentán sa dekantuje a biela amorfná pevná látka sa suší pod vákuom cez noc. Získa sa 240 mg titulného produktu. TLC (2 % kyselina octová v etylacetáte) Rf = = 0,48, [a]D =-101,1 (c= 1, metanol).
Elementárna analýza pre C21H22N2O5S . 0,40 C4H8O2.0,08 H2O vypočítané: 60,36% C, 5,65% H, 6,23% N, 7,13% S nájdené: 60,17 % C, 5,57 % H, 6,16 % N, 7,45 % S.
Príklad 33
Postupom podľa príkladu 32, ale s použitím allo-L-treonínu sa získa kyselina [2S-[2a,3B(R*)[[-3,4-dihydro-3-[(2-sulfanyl-1 -oxo-3 -fenylpropyl)amino[-2-metyl-4-oxo-l,5-benzoxazepín-5(2H)-octová, [a]D = -174 0 (c = 0,89, metanol) TLC (1 % kyselina octová v etylacetáte) Rf = 0,43.
Príklad 34
Kyselina (2S)-3-[(2-sulfanyl-1 -oxo-3-fenylpropyl)amino[-3,4,5,6-tetrahydro-2-oxo-l-benzazocín-l(2H)-octová
a) Oxím 1-benzosuberónu
Roztok hydrochloridu hydroxylamínu (2,39 g, 34,33 mmol,
1.1 ekv.) vo vode (16 ml) sa pridá k roztoku 1-benzosuberónu (4,67 ml, 31,21 mmol) v pyridíne (9,0 ml) a etanole (16 ml). Reakčná zmes sarefluxuje (teplota kúpeľa 105 °C) počas 35 minút. Reakčná zmes sa ochladí, zriedi dietylacetátom (100 ml) a vodou (40 ml) a vrstvy sa oddelia. Vodná vrstva sa extrahuje etylacetátom (2 x 50 ml). Spojené organické extrakty sa premyjú IN kyselinou chlorovodíkovou (3 x 100 ml), sušia (síran horečnatý bezvodý), filtrujú a zahustením sa získa surová špinavobiela pevná látka (5,60 g). Zvyšok sa čistí chromatografiou na 10 x 20 cm stĺpci silikagélu. Elúciou hexánom (2 1) a ďalej 10 % etylacetátom[hexánom (5 1) sa získa 4,40 g titulnej zlúčeniny ako špinavobielej pevnej látky. TLC (10 % etylacetát[hexán) Rf=0,35.
b) 3,4,5,6-Tetrahydro-1 -benzazocín-2( 1 H)-on
Koncentrovaná kyselina sírová (8,8 ml) sa naraz pridá k suspenzii produktu z časti a) (4,33 g, 24,71 mmol) v ľadovej kyseline octovej (4,4 ml). Teplota sa zvýši na 83 °C a reakčná zmes sa zahrieva na 160 °C (olejový kúpeľ) počas 10 minút. Reakčná zmes sa nechá schladiť na teplotu miestnosti a potom sa naleje do ľadu-vody (100 ml). Reakčná zmes sa upraví na pH 11 1,0N roztokom hydroxidu sodného. Zmes sa zriedi etylacetátom (250 ml) a vodou (100 ml) a vrstvy sa oddelia. Vodná vrstva sa extrahuje etylacetátom (3 x 100 ml). Spojené etylacctátové extrakty sa premyjú vodou (150 ml) a soľankou (150 ml), sušia (bezvodý síran sodný), filtrujú a zahustením sa získa 2,8 g titulného produktu. TLC (etylacetát) Rf = 0,33.
c) 3,4,5,6-Tetrahydro-3-bróm-l-benzazocín-2(lH)-on
Roztok produktu z časti b) (8,31 g, 47,42 mmol) v chloroforme (115 ml) sa ochladí na 0 °C, spracuje sa s chloridom fosforečným (11,36 g, 54,53 mmol, 1,15 ekv.) s jódom (114 mg) a mieša sa 30 minút pri 0 °C pod argónom. Žltá reakčná zmes sa spracuje s brómom (2,92 ml, 56,90 mmol,
1.2 ekv.). Ohreje sa na teplotu miestnosti a refluxuje pod argónom 3,5 hodiny. Reakčná zmes sa nechá schladiť na teplotu miestnosti a pridá sa k zmesi ľad-voda (100 ml). Vrstvy sa oddelia a chloroformová vrstva sa premyje vodou (100 ml), suší nad síranom horečnatým, filtruje a zahustí.
Surový' zvyšok sa rekryštalizuje z horúceho etylacetátu. Získa sa 8,69 g titulného produktu. TLC (etylacetát : hexán: 1 : l)Rf= 0,36.
d) 3,4,5,6-Tetrahydro-3-azido-1 -benzazocín-2( 1 H)-on
Roztok produktu z časti c) (6,87 g, 27,03 mmol) a azidu sodného (2,28 g, 35,14 mmol, 1,3 ekv.) v dimetylsulfoxide (130 ml) sa mieša pri 60 °C (olejový kúpeľ) pod argónom počas 5 hodín. Reakčná zmes sa ochladí na teplotu miestnosti a naleje sa do studenej vody (400 ml) a mieša sa 15 minút. Zrazenina sa odfiltruje, premyje sa vodou (1 1) a suší sa cez noc vo vákuu nad sikatívom. Získa sa titulný produkt. TLC (etylacetát: hexán, 1:1) Rf = 0,63.
e) Etylester kyseliny 3-azido-3,4,5,6-tctrahydro-2-oxo-l-benzazocín-1 (2H)-octovej
Roztok produktu z časti d) (5,454 g, 25,22 mmol) a etylbrómacetátu (3,5 ml, 31,53 mmol, 1,25 ekv.) v suchom tetrahydrofuráne (50 ml) sa pridá k ochladenej (0 °C) suspenzii 60 % hydridu sodného (1,23 g, 30,77 mmol,
1,22 ekv., premyté hexánom (3 x 10 ml)) v suchom tetrahydrofuráne (15 ml) počas 15 minút. Zmes sa mieša pri 0 °C 1 hodinu a potom pri teplote miestnosti 30 minút. Reakcia sa preruší 25 % roztokom chloridu amónneho (100 ml) a extrahuje sa etylacetátom (2 x 250 ml). Spojené etylacetátové extrakty sa premyjú 25 roztokom chloridu amónneho (100 ml) a soľankou (100 ml), sušia sa (bezvodý síran horečnatý), filtrujú a zahustením sa získa titulná zlúčenina ako žltý olej. TLC (35 % etylacetát(hexán) Rf = = 0,35.
f) Etylester kyseliny 3-amino-3,4,5,6-tetrahydro-2-oxo-l-benzazocín-1 (2H)-octovej
Roztok produktu z časti e) (9,0 g, 20,83 mmol) v absolútnom etanole (50 ml) sa spracuje s katalyzátorom, ktorým je 10 % paládium na uhlí (900 mg) a hydrogenuje sa pri 315 kPa 5 hodín za vypustenia Parrovej nádoby dvakrát počas prvej 1,5 hodiny. Zmes sa filtruje cez miliporovú jednotku, premyje sa starostlivo etanolom. Číry filtrát sa odparí do sucha a suší sa vo vákuu. Získa sa 7,59 g titulného produktu ako lepivého žltého sirupu. TLC (10 % metanol[metylénchlorid) Rf = 0,29.
g) Etylester kyseliny (2S)-3-[[2-(acetyltio)-l-oxo-3-fenylpropyl]amino]-3,4,5,6-tetrahydro-2-oxo-l-benzazocín-l(2H)-octovej
Suspenzia dicyklohexylamínovej soli kyseliny (S)-2-(acetyltio)benzénpropánovej (2,1 g, 5,18 mmol, 1,1 ekv.) v etylacetáte (100 ml) sa premyje 5 % hydrogensíranom draselným (5 x 25 ml) a soľankou (30 ml), suší sa (bezvodý síran horečnatý), filtruje, odparí sa do sucha a suší vo vákuu. Získa sa voľná kyselina ako číry sirup (1,24 g) v kvantitatívnom výťažku.
Táto voľná kyselina sa rozpustí v metylénchloride (45 ml), ochladí na 0 °C (kúpeľ ľad-soľ) a spracuje sa s roztokom produktu z časti f) (1,3 g, 4,71 mmol) v suchom metylénchloride (10 ml), potom s trietylamínom (723 μΐ, 5,18 mmol, 1,1 ekv.) a benzotriazol-l-yloxytris(dimetylamino)fosfóniumhexafluórfosfátom (2,29 g, 5,18 mmol,
1,1 ekv.) Reakčná zmes sa mieša pri 0 °C 1 hodinu, potom cez noc pri teplote miestnosti. Reakčná zmes sa zahustí do sucha, zriedi sa etylacetátom (125 ml), premyje sa 0,5N kyselinou chlorovodíkovou (2 x 25 ml), vodou (25 ml) a soľankou (25 ml). Suší sa (bezvodý síran horečnatý), filtruje a odparí sa do sucha. Surový produkt sa chromatografuje na silikagéli (stĺpec 3 x 16 cm), eluuje 30 % etylacetátom[hexánom. Požadované frakcie sa spoja a zahustia. Zís ka sa 1,77 g čistej titulnej zlúčeniny. (1:1 zmes diastereomérov). TLC (etylacetát: hexán, 1 : 1) Rf = 0,39.
h) Kyselina (2S)-3-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-fenylpropyl)amino[-3,4,5,6-tetrahydro-2-oxo-l-benzazocín-l(2H)-octová
Roztok produktu z časti g) (1,75 g, 3,62 mmol) v metanole (25 ml) sa prebublá argónom počas 30 minút, ochladí sa na 0 °C (kúpeľ ľad-soľ) a potom sa spracuje po kvapkách s vopred prebublaným (argón, 30 minút) roztokom l,0N hydroxidu sodného (14,5 ml, 4 ekv.) za udržiavania prebublávania argónom počas pridávania a času trvania reakcie. Reakčná zmes sa mieša pri 0 °C, počas 1 hodiny, okyslí pri 0 °C 5 % hydrogensíranom draselným (200 ml) na pH 1,5 a potom sa extrahuje etylacetátom (2 x 200 ml). Spojené organické extrakty sa premyjú soľankou (200 ml), sušia (bezvodý síran sodný), filtrujú, odparia do sucha a sušia vo vákuu. Získa sa biela pena (1,67 g). Surový zvyšok sa rozpustí v metylénchloride (10 ml) a spracuje sa po častiach s hexánom (50 ml). Poškrabaním zmes tvorí pevnú látku. Supernatant sa zleje a pevné látky sa triturujú s ďalším hexánom (50 ml) a pentánom (2 x 100 ml) za miešania s prvými 100 ml pentánu počas 4 hodín a ďalšími 100 ml cez noc pod argónom. Pentán sa zleje a biela amorfná látka sa suší vo vákuu cez noc. Získa sa titulný produkt (1:1 zmes diastereomérov), t. t. 107 až 111 °C, [a]D = +28,3 ° (c = 1,0, metanol). TLC (metylénchlorid : metanol: kyselina octová, 20 : 1 : 1) Rf = 0,44.
Príklad 35
Kyselina[4S-[4a,7a(R*), 1 Oot β j J-dekahydro-7-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-fenylpropyl)amino]-6-oxopyrido[l,2-a]azepín-4-karboxylová kyselina
a) Dicyklohexylamínová soľ kyseliny (S)-2-ftalimido-4-penténovej
Homogénny roztok kyseliny (S)-2-amino-4-penténovej (2,988 g, 25,9 mmol) a uhličitanu sodného (2,600 g,
24,5 mmol) vo vode (55 ml) sa spracuje s pevným N-(karbetoxy)ftalimidom (5,677 g, 25,9 mmol). Po miešaní pri teplote miestnosti 2,5 hodiny sa zmes okyslí 10 % kyselinou chlorovodíkovou a extrahuje etylacetátom. Etylacetátový extrakt sa premyje soľankou, suší (síran sodný), filtruje a zahustí. Zvyšok sa spracuje dvakrát rýchlou chromatografiou (2 % kyselina octová v etylacetáte) a požadované produktové frakcie sa spoja, zahustia a azeotrópne oddestilujú s toluénom. Zvyšok sa rozpustí v etyléteri, spracuje s 5,3 ml dicyklohexylamínu a naočkuje. Výsledná biela zrazenina sa oddelí filtráciou, premyje etyléterom a suší vo vákuu. Získa sa 7,620 g čistého titulného produktu, t. t. 196 až 197 °C, [a]D = -13,9 0 (c = 0,7, metanol). TLC (5 % kyselina octová v etylacetáte) Rf = 0,57.
b) Metylester kyseliny [S-(R*,R*)]-2-[(2-ftalimido-l-oxo-4-pentenyl)amino]-6-hydroxyhexánovej
Suspenzia kyseliny (S)-2-amino-6-hydroxyhexánovej (2,42 g, 16,4 mmol) v suchom metanole (60 ml) sa spracuje s plynným chlorovodíkom až do začiatku varu zmesi pod spätným chladičom. Homogénny roztok sa potom mieša pri teplote miestnosti 2,5 hodiny. Rozpúšťadlo sa odstráni a zvyšok sa azeotrópne trikrát oddestiluje s toluénom. Získa sa surová hydrochloridová soľ metylesteru kyseliny (S)-2-amino-6-hydroxyhexánovej kyseliny ako olej. Tento olej sa rozpustí v dimetylformamide (20 ml) a metylénchloride (50 ml) a spracuje sa 4-metylmorfolínom (3,20 ml, 2,94 g,
29,1 mmol). Táto zmes sa ochladí na 0 °C a spracuje sa s kyselinou (S)-2-ftalimido-4-penténovou (získaná zo 7,0 g,
16,4 mmol soli produktu z časti a) rozdelením medzi 10 %
SK 283556 Β6 hydrogensíran draselný a etylacetát a metylénchloride (10 ml) a potom s pevným hydroxybenzotriazolom (2,22 g,
16,4 mmol) a hydrochloridovou soľou etyl-3-(3-dimetylamino)propylkarbodiimidu (3,458 g, 18,0 mmol). Po miešaní pri 0 °C počas 0,5 hodiny a pri teplote miestnosti počas 2 hodín sa reakčná zmes rozdelí medzi etylacetát a 0,5N kyselinu chlorovodíkovú. Etylacetátový extrakt sa postupne premyje vodou, 50 % nasýteným hydrogenuhličitanom a soľankou, potom sa suší (síran sodný), filtruje a zahustí. Zvyšok sa spracuje rýchlou chromatografiou (Merck silikagél, etylacetát). Získa sa čistá titulná zlúčenina ako olej, ktorý státím tuhne. Pevná látka sa trituruje s etyléterom a hexánom a oddelí sa filtráciou. Získa sa 5,149 g analyticky čistého titulného produktu, 1.1. 90 až 92 °C, [a]D = +25,6 ° (c = 1,1, chloroform). TLC (etylacetát) Rf = 0,36.
c) Metylester kyseliny [S-(R*,R*)]-2-[(2-ftalimido-l-oxo-4-pentenyl)amino]-6-oxohexánovej
-78 °C roztok oxalylchloridu (1,38 ml, 0,95 g, 7,5 mmol) v metylénchloride (70 ml) sa spracuje po kvapkách s roztokom suchého dimetylsulfoxidu (2,20 ml, 2,00 g, 25,6 mmol) v metylénchloride (2 ml). Po 10 minútach sa zmes spracuje s roztokom produktu z časti b) (5,04 g, 13,0 mmol) v metylénchloride (15 ml). Po ďalších 10 minútach sa pridá trietylamín (9,0 ml) a zmes sa mieša pri -78 °C 5 minút, potom sa postupne ohreje na 0 °C. Zmes sa rozdelí medzi etylacetát/etyléter a 0,5N kyselinu chlorovodíkovú. Organický extrakt sa premyje 50 % nasýteným hydrogenuhličitanom sodným a soľankou, potom sa suší (síran sodný), filtruje a oddestiluje. Zvyšok sa kryštalizuje z etylacetátu/etyléteru. Získa sa zlúčenina 4,567 g titulného produktu ako biela pevná látka. Materský lúh sa spracuje rýchlou chromatografiou (Merck silikagél, 6/4-etylacetát/hexány) a kryštalizáciou sa získa ďalších 184 mg produktu. Celkom sa získa 4,751 g, 1.1. 74 - 76 °C, [a]D = +25,2 °C (c = 1,3, chloroform). TLC (etylacetát: hexány, 6 : 4), Rf= 0,22.
d) Metylester kyseliny [S-(R*,R*)]-l,2,3,4-tetrahydro-(l-oxo-2-ftalimido-4-pentenyl)-2-pyridínkarboxylovej
Roztok produktu z časti c) (3,657 g, 9,46 mmol) a kyseliny trifluóroctovcj (190 μΐ) v metylénchloride (70 ml) sa refluxuje pod argónom 1,5 hodiny. Ochladená zmes sa premyje zriedeným vodným hydrogenuhličitanom sodným, suší sa (síran sodný), filtruje a zahustí. Zvyšok sa spracuje rýchlou chromatografiou (Merck silikagél), 1 : 1 etylacetát : hexány). Získa sa 3,417 g titulného produktu ako olej/pena. TLC /etylacetát: hexány) Rf= 0,50.
e) Metylester kyseliny [4S-(4a,7ct,10aB)]-dekahydro-9-jodo-6-oxo-7-ftalimidopyrido[l,2-a]azepín-4-karboxylovej
Roztok produktu z časti d) (1,427 g, 3,87 mmol) v metylénchloride (8,8 ml) sa po kvapkách pridá k zmesi kyseliny trifluórmetánsulfónovej-anhydridu (210 μΐ) pri teplote miestnosti. Tmavožltý roztok sa mieša počas 5,5 hodín, potom sa naleje do vody a extrahuje etylacetátom. Etylacetátový extrakt sa premyje soľankou, suší (síran sodný), filtruje a zahustí. Surový zvyšok (prevažne zmes karboxylových kyselín) sa rozpustí v metanole (3 ml) a metylénchloride (20 ml) a spracuje s prebytkom éterického diazometánu počas 25 minút. Prebytok diazometánu sa odstráni prebublávaním argónom a rozpúšťadlo sa odstráni. Zvyšok sa rozpustí v metyletylketóne (40 ml) a spracuje s jodidom sodným (2,48 g). Po miešaní pri teplote miestnosti počas 1 hodiny sa zmes rozdelí medzi etylacetát a vodu, ktorá obsahuje malé množstvo hydrogensíranu sodného. Organická vrstva sa premyje soľankou, suší (síran sodný), filtruje a zahustí. Zvyšok sa spracuje rýchlou chromatografiou (Merck silikagél, 1 : 1 etylacetát: hexány a potom 6 : 4 etylacetát: hexány). Získa sa 1,125 g titulného produktu ako bielej peny, [a]D = -17,1 0 (c = 0,7, chloroform). TLC (etylacetát: hexány, 6 : 4) Rf = 0,43.
Ďalej sa získa metylester kyseliny [4S-(4a,7a,10aB)j-1,2,3,4,6,7,8,10a-oktahydro-6-oxo-7-ftalimidopyrido[ 1,2-a]azepín-4-karboxylovej -206 mg - a trituruje sa etyléterom, získa sa biela pevná látka, t. t. 162 až 166 °C, [a]D = = -106,0 0 (c = 0,8, chloroform). TLC (etylacetát : hexány, 6:4) Rf=0,36.
f) Metylester kyseliny [4S-(4cc,7a,10aB)]-dekahydro-6-oxo-7-fialimidopyrido[l,2-a]azepín-4-karboxylovej
Roztok titulného produktu z časti e) (1,068 g, 2,15 mmol) a tris(trimetylsilyl)silánu (1,0 ml, 806 mg, 3,2 mmol) v suchom benzéne (10 ml) sa zahrieva na 50 °C a spracuje počas 30 minút s katalytickým množstvom (2-3 mg) 2,2'-azobisizobutyronitrilu. Po 3,5 hodinách sa pridá ďalší silán (400 ml) a v reakcii sa pokračuje. Po 5 hodinách sa slabo zakalený roztok ochladí na teplotu miestnosti a zahustí. Zvyšok sa trituruje s etyléterom a výsledná pevná látka sa oddelí filtráciou a premyje starostlivo etyléterom. Získa sa 522 mg v podstate čistého titulného produktu. Materský lúh sa rýchlo chromatograíuje (Merck silikagél, etylacetát: hexány, 1 : 1). Získa sa ďalších 261 mg čistého produktu, celkom sa získa 783 mg, t. t. 179 až 181 °C, [a]D = -10,6 0 (c = 0,9, chloroform). TLC (etylacetát: hexány, 1 : 1) Rf = = 0,25.
g) Metylester kyseliny [4S-/4a,7a(R*],10aíJ]|-dekahydro-7-[[2-(acetyltio)-1 -oxo-3 -fenylpropyl] amino] -6-oxopyrido[ 1,2-a]-azepín-4-karboxylovej
Produkt z časti f) (786 mg, 2,12 mmol) v metanole (10 ml) a metylénchloride (2 ml) sa spracuje s monohydrátom hydrazínu (135 μΐ, 2,8 mmol) a roztok sa mieša pri teplote miestnosti 66 hodín. Zmes sa odfiltruje a pevná látka sa premyje metanolom. Filtrát sa zahustí, trituruje s metylénchloridom a opäť filtruje. Filtrát sa premyje vodou a vodná vrstva sa spätne extrahuje metylénchloridom. Spojené metylénchloridové extrakty sa sušia (síran sodný), filtrujú a zahustia. Získa sa 479 mg surového metylesteru kyseliny /4S-/4a,7a, 10aB//-dekahydro-7-amino-6-oxopyrido/l,2-a/-azepín-4-karboxylovej ako bezfarebný olej. TLC (10 % metanol v metylénchloride) Rf = 0,18.
Studený (0 °C) roztok kyseliny (S)-2-(acctyltio)benzénpropánovej kyseliny (získanej z dicyklohexylamínovej soli ako bolo už opísané, 524 mg, 2,33 mmol), trietylamínu (295 μΐ, 214 mg, 2,11 mmol) a uvedený surový amín v metylénchloride (15 ml) sa spracuje s benzotriazol-1-yloxytris-(dimetylamino)-fosfóniumhexafluórfosfátu (940 mg,
2,12 mmol). Roztok sa mieša pri 0 °C 1 hodinu a potom pri teplote miestnosti 2 hodiny. Rozpúšťadlo sa odstráni a zvyšok sa rozdelí medzi etylacetát a IN kyselinu chlorovodíkovú. Organická vrstva sa premyje postupne vodou, 50 % nasýteným hydrogenuhličitanom sodným a soľankou, potom sa suší (síran sodný), filtruje a oddestiluje. Zvyšok sa spracuje rýchlou chromatografiou (Merck silikagél, etylacetát : hexány, 1:1). Získa sa 770 mg čistej titulnej zlúčeniny ako bielej peny, TLC (etylacetát: hexány) Rf = 0,27.
h) Kyselina [4S-[4a,7a(R*),10aB]]-dekahydro-7-[(2-sulfanyl-1 -oxo-3-fenylpropyl)amino]-6-oxopyrido[ 1,2-a]azepín-4-karboxylová
Roztok produktu (s teplotou miestnosti) z časti g) (755 mg, 1,70 mmol) v metanole (8 ml, zbavený kyslíka prebublávaním argónom) sa spracuje s IN hydroxidom sodným (10 ml, zbavený kyslíka prebublávaním argónom).
Po 3 hodinovom miešaní sa zmes okysli 10 % kyselinou chlorovodíkovou, zriedi sa vodou a extrahuje etylacetátom. Etylacetátový extrakt sa premyje soľankou, potom sa suší (síran sodný), filtruje a zahustí. Zvyšok sa spracuje rýchlou chromatografiou (Merck silikagél, 1 % kyselina octová v etylacetáte). Frakcie požadovaného produktu sa oddestilujú, azeotrópne oddestilujú trikrát s etylacetátom, vyberú do malého množstva etylacetátu a triturujú sa s hexánmi. Rozpúšťadlo sa odstráni na rotačnej odparke a zvyšok sa opäť trituruje s hexánmi, odtiahne a sušením vo vákuu sa získa 654 mg titulného produktu ako bieleho amorfného prášku, [a]D = -31,0 0 (c = 0,8, chloroform). TLC (2 % kyselina octová v etylacetáte) Rf = 0,51.
Elementárna analýza pre C20H26N2O4S .0,16 C4HgO2.0,3 H2O vypočítané: 60,46% C, 6,85% H, 6,83% N, 7,82% S nájdené: 60,57 % C, 7,07 % H, 6,57 % N, 7,63 % S.
Príklad 36
Kyselina [3S-[3a(R*),7B]]-hexahydro-3-l/(2-sulfanyl-2-oxo-3-fenylpropyl)amino]/-2-oxo-7-(2-propenyl)-lH-azeρίη-4-karboxylová
a) Etylester (S)-N-(2-ftalimido-l-oxohexyl)glycínu
Suspenzia glycínu - etylesteru-hydrochloridovej soli (2,718 g, 19,5 mmol) v dimetylformamide (36 ml) sa spracuje so 4-metylmorfolínom (2,60 ml, 2,39 g, 23,6 mmol) sa mieša pri teplote miestnosti 5 minút. Zmes sa potom spracuje s kyselinou (S)-2-ftalimido-6-hydroxyhexánovou (4,50 g,
16,2 mmol) a hydroxybenzotriazolom (2,225 g, 16,5 mmol), ochladí na 0 °C a potom sa spracuje s hydrochloridovou soľou etyl-3-(3-dimetylamino)propylkarbodiimidu (3,438 g, 17,9 mmol). Po 1 hodinovom miešaní pri 0 °C a pri teplote miestnosti počas 2 hodín sa zmes rozdelí medzi etylacetát a 0,5N kyselinu chlorovodíkovú a postupne sa extrahuje trikrát etylacetátom. Spojené etylacetátové extrakty sa premyjú postupne vodou, nasýteným hydrogenuhličitanom sodným a soľankou, potom sa sušia (síran sodný), filtrujú a odtiahnutím rozpúšťadla sa získa 5,77 g titulného produktu ako bezfarebného oleja. TLC (etylacetát) Rf= 0,34.
b) Etylester (S)-N-(2-ftalimido-l,6-dioxohexyl)glycínu
-78 °C teplý roztok oxalylchloridu (1,67 ml, 2,43 g,
19,1 mmol) v metylénchloride (50 ml) sa spracuje po kvapkách s roztokom suchého dimetylsulfoxidu (2,70 ml, 2,97 g, 38,0 mmol) v metylénchloride (2 ml). Po 15 minútach sa pridá roztokom produktu z časti a) (5,770 g, 15,9 mmol) v metylénchloride (25 ml). Po ďalších 15 minútach sa zmes spracuje s trietylamínom (10, 0 ml), mieša sa pri -78 °C 5 minút, potom sa postupne ohreje na 0 °C. Výsledná zmes sa premyje IN kyselinou chlorovodíkovou a soľankou, potom sa suší (síran sodný), filtruje a rozpúšťadlo sa odtiahne. Zvyšok sa spracuje rýchlou chromatografiou (Merck silikagél, etylacetát: hexány, 80 : 20). Získa sa 5,170 g titulnej zlúčeniny ako bezfarebného oleja.
c) (6S-trans)-Tetrahydro-6-ftalimido-oxazolo[3,2-b]azepín-2,5(3H,6H)-dion
Roztok produktu z časti b) (5,16 g, 14,3 mmol) v kyseline trifluóroctovej (40 ml) a chloroformu (160 ml) sa refluxuje pod argónom 42 hodín. Zmes sa ochladí na teplotu miestnosti a neutralizuje nasýteným vodným hydrogenuhličitanom sodným. Vrstvy sa oddelia a vodná vrstva sa extrahuje metylénchloridom. Spojené organické vrstvy sa premyjú soľankou, sušia (síran sodný) a filtrujú cez krátky stípček silikagélu, premývajú 1 : 1 etylacetátom-metylénchloridom. Filtrát sa odtiahne a získa sa pevný zvyšok.
Zvyšok sa rozmieša v metylénchloride a trituruje s etyléterom. Získa sa 3,437 g titulného produktu ako bielej pevnej látky, t. t. 234 až 240 °C. TLC (acetón : hexán, 1 : 1) Rf = = 0,51.
d) Kyselina (3S-trans)-hexahydro-3-ftalimido-2-oxo-7-(2-propenyl)-1 H-azepín-1 -octová
Roztok produktu z časti c) (2,6 g, 8,27 mmol) a allyltrimetylsilánu (10,0 ml, 7,19, 62,9 mmol)v metylénchloride (75 ml) pri teplote miestnosti sa spracuje s bromidom ciničitým (l,0M metylénchloride, 16,5 ml, 16,5 mmol). Po miešaní pri teplote miestnosti počas 9 hodín a potom pri -20 °C počas 14 hodín, sa reakcia preruší vodou a extrahuje sa etylacetátom/etyléterom. Extrakt sa premyje soľankou, suší (síran sodný), filtruje a odtiahnutím rozpúšťadla sa získa zakalený biely olej. Olej sa spracuje rýchlou chromatografiou (Merck silikagél) (2 % kyselina octová v etylacetáte), získa sa 2,810 g diastereoméme čistej titulnej zlúčeniny ako bielej peny. TLC (5 % kyselina octová v etylacetáte) Rf=0,55.
e) Metylester kyseliny (3S-trans)-hexahydro-3-ftalimido-2-oxo-7-(2-propenyl)-1 H-azepín-1 -octovej
Studený (0 °C) roztok produktu z časti d) (2,50 g, 7,0 mmol) v metanole (20 ml) a etyléteru (30 ml) sa spracuje s prebytkom éterického diazometánu - 10 minút. Prebytok diazometánu sa rozloží prídavkom kyseliny octovej a rozpúšťadlo sa odstráni na rotačnej odparke, získa sa žltý olej. Tento olej sa chromatografuje (Merck silikagél, 1 : 1 etylacetát : hexány). Získa sa produkt vo forme peny. Táto pena sa rozpustí v horúcom etyléteri, obsahujúcom malé množstvo metylénchloridu, ochladí sa a naočkovaním sa získa 2,072 g kryštalického titulného produktu. Materský lúh poskytne ďalších 262 mg produktu, celkom 2,334 g, 1.1. 107 až 109 °C. TLC (etylacetát: hexán, 1 : 1) Rf = 0,29.
f) Metylester kyseliny [3S-[3a(R*),7B]]hexahydro-3-[[(2-acetyltio)-1 -oxo-3-fenylpropyl]amino]-2-oxo-7-(2-propenyl)-1 H-azepín-1 -octovej
Kašovitá zmes kryštalického produktu z časti e) (492 mg, 1,33 mmol) v metanole (10 ml) sa spracuje s monohydrátom hydrazínu (142 μΐ, 147 mg, 2,93 mmol) a roztok sa rýchlo ohreje na rozpustenie východiskového materiálu. Po miešaní pri teplote miestnosti počas 18 hodín sa zmes zriedi metylénchloridom a filtruje. Filtrát sa odtiahne, rozmieša v metylénchloride, filtruje a opäť sa odtiahne. Získa sa surový amín (270 mg) ako bezfarebný olej. Studený (0 °C) roztok amínu a kyseliny (S)-2-(acetyltio)benzénpropánovej (získaný z dicyklohexylamínovej soli ako bolo opísané, 287 mg, 1,28 mmol) v metylénchloride (12 ml) sa spracuje s trietylamínom (172 μΐ, 125 mg,
1,23 mmol), potom s benzotriazo-l-yloxy-tris-(dimetylamino)-fosfóniumhexafluórfosfátom (547 mg, 1,24 mmol). Číry, takmer bezfarebný roztok sa mieša pri 0 °C jednu hodinu a potom pri teplote miestnosti 2 hodiny. Zmes sa odtiahne, potom sa rozdelí medzi etylacetát a IN kyselinu chlorovodíkovú. Etylacetátový extrakt sa postupne premyje vodou, 50 % nasýteným hydrogenuhličitanom sodným a soľankou. Roztok sa suší (síran sodný), filtruje a odtiahne. Zvyšok sa spracuje rýchlou chromatografiou (Merck silikagél), hexány : acetón : etylester 6:3:1). Získa sa 352 mg titulného produktu ako 84 : 16 zmes diastereomérov. Tento materiál sa spojí s podobne znečistenou vsádzkou produktu a spojený materiál sa čistí preparatívnou vysokoúčinnou kvapalinovou chromatografiou s reverznou fázou (YMC SH-365-10 S-10 120 A ODS, 30 x 400 mm kolóna, izokraticky 66 % metanol/34 % voda, 50 ml/min., detekcia pri
SK 283556 Β6
220 nm, titulný produkt lR = 22,6 min., nečistota tR = 28,7 min.). Získa sa titulný produkt ako bezfarebný olej s čistotou 98,2 %. TLC (acetón : hexány 4 : 6) Rf = 0,38.
g) Kyselina [3S-[3a(R*),7B]]-hexahydro-3-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-fenylpropyl)amino]-2-oxo-7-(2-propenyl)-1 H-azeρίη-4-karboxylová
Roztok produktu z časti f) (720 mg, 1,61 mmol) v metanole (12 ml, zbavenom kyslíka prebublávaním argónom) pri teplote miestnosti sa spracuje s IN hydroxidom sodným (10 ml, zbavený kyslíka prebublávaním argónom). Po 20 minútovom miešaní sa roztok okyslí 10 % kyselinou chlorovodíkovou (5 ml) a extrahuje sa etylacetátom. Etylacetátový extrakt sa premyje vodou a soľankou, potom sa suší (síran sodný) a filtruje a odtiahnutím rozpúšťadla sa získa olej. Tento materiál sa spracuje rýchlou chromatografiou (Merck silikagél, 2 - 5 % kyselina octová v etylacetáte). Frakcie, obsahujúce produkt, sa spoja a zahustia a zvyšok sa azeotropne destiluje trikrát s etylacetátom. Výsledný olej/pena sa rozpustí v malom množstve etylacetátu a potom sa trituruje s hexánom. Získa sa biely olej/pena. Zmes sa odtiahne do sucha, rozmieša v hexáne, odtiahne do sucha znova a sušením vo vákuu sa získa 616 mg titulného produktu ako pevnej bielej peny, [a]D = -48,5 ° (c = 0,63, chloroform). TLC (5 % kyselina octová v etylacetáte) Rf = = 0,56.
Elementárna analýza pre C20H26N2O4S . 0,2 H2O vypočítané: 60,95 % C, 6,75% H, 7,11% N, 8,14% S nájdené: 60,98 % C, 6,93 % H, 6,93 % N, 7,94 % S.
Príklad 37
Kyselina [3S-[3a(R*),7B]]-hexahydro-3-/(2-sulfanyl-2-oxo-3-fenylpropyl)amino/-2-oxo-7-propyl-lH-azepín-l-octová
a) Metylester kyseliny (3S-trans)-hexahydro-3-ftalimido-2-oxo-7-propy 1-1 H-azepín-1 -octovej
Roztok produktu z príkladu 36 e) (767 mg, 2,07 mmol) v metanole (10 ml) a etylacetátu (10 ml) sa hydrogenuje (balónik) nad paládiom (10 % na uhlí 62 mg) pri teplote miestnosti počas jednej hodiny. Zmes sa odfiltruje cez Celíte, odtiahne, znova sa rozpustí v etylacetáte, odfiltruje cez stípček silikagélu a opäť odtiahne. Získa sa 780 mg titulného produktu ako bezfarebného oleja. TLC (etylacetát : hexány, 1 : 1) Rf= 0,29.
b) Metylester kyseliny [S-[3a(R*),7B]]hexahydro-3-[[(2-acetyltio)-1 -oxo-3-fenylpropyl]]mino/-2-oxo-7-propyl-1H-azepín-1-octovej
Produkt z časti a) (774 mg, 2,07 mmol) v metanole (8 ml) sa spracuje s monohydrátom hydrazínu (222 μΐ, 229 mg, 4,58 mmol) a roztok sa mieša pri teplote miestnosti počas 23 hodín. Zmes sa zriedi 0,5N kyselinou chlorovodíkovou (20 ml) a mieša pri 0 °C počas 2 hodín. Roztok sa odfiltruje a filtrát sa premyje etylacetátom. Etylacetátový extrakt sa znova extrahuje jednou vodou a spojené vodné extrakty sa zalkalizujú IN hydroxidom sodným. Extrakciou metylénchloridom (trikrát) následným sušením (síran sodný) a odparením rozpúšťadla sa získa surový amín (354 mg) ako bezfarebný olej.
Studený (0 °C) roztok tohto surového amínu a kyseliny (S)-(acetyltio)benzénpropánovej (získanej z dicyklohcxylamínovej soli ako bolo opísané, 344 mg, 1,53 mmol) v metylénchloride (12 ml) sa spracuje s trietylamínom (214 μ], 154 mg, 1,53 mmol) a potom s benzotriazol-l-yloxytris(dimetylamino)fosfóniumhexafluórfosfátom (679 mg, 1,54 mmol). Číry, takmer bezfarebný roztok sa mieša pri 0 °C jednu hodinu a potom pri teplote miestnosti jednu ho dinu. Zmes sa zbaví rozpúšťadla, potom sa rozdelí medzi etylacetát a 0,5N kyselinu chlorovodíkovú. Etylacetátový extrakt sa postupne premyje vodou, 50 % nasýteným hydrogenuhličitanom sodným a soľankou. Roztok sa suší (síran sodný), filtruje a odtiahne sa rozpúšťadlo. Zvyšok sa spracuje rýchlou chromatografiou (Merck silikagél) (6 : 4 hexány : acetón). Získa sa 510 mg čistej titulnej zlúčeniny ako bezfarebného oleja.
TLC (acetón : hexány, 4 : 6) Rf= 0,31.
c) Kyselina [3S-[3a(R’),7B]]-hexahydro-3-[(2-sulfanyl-2-oxo-3-fenylpropyl)amino]-2-oxo-7-propyl-1 H-azepín-1 -octová
Roztok produktu z časti b) s teplotou miestnosti (502 mg,
1,12 mmol) v metanole (8 ml, zbavený kyslíka prcbublaním argónom) sa spracuje s IN NaOH (6 ml, zbavený kyslíka prebublaním argónom). Po 25 minútach miešania sa roztok okyslí 10 % kyselinou chlorovodíkovou a extrahuje etylacetátom. Etylacetátový extrakt sa premyje vodou a soľankou, polom sa suší (síran sodný), filtruje a oddestilovaním rozpúšťadla sa získa olej. Materiál sa spracuje rýchlou chromatografiou (Merck silikagél, 2 % kyselina octová v etylacetáte). Produkt obsahujúci frakcie sa spojí a odtiahne, zvyšok sa azcotropicky oddestiluje dvakrát s etylacetátom. Výsledný olej/pena sa rozpustí v malom množstve metylénchloridu a potom sa trituruje s hexánom. Získa sa biely olej/pena. Zmes sa odtiahne do sucha, rozmieša sa v hexáne, opäť odtiahne do sucha a suší vo vákuu. Získa sa 394 mg titulného produktu ako tvrdej bielej peny, [a]D = = -31,2 ° (c = 0,65, chloroform). TLC (2 % kyselina octová v etylacetáte) Rf = 0,47.
Elementárna analýza pre C20H28N2O4S . 0,2 H2O vypočítané: 60,95 % C, 6,75 % H, 7,11 % N, 8,14 % S nájdené: 60,98 % C, 6,93 % H, 6,93 % N, 7,94 % S.
Príklad 38
Kyselina [3S-[3a(R*),7B]]-7-(cyklopropylmetyl)hexahydro-3-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-fenylpropyl)amino]-2-oxo-lH-azepín-1-octová
a) Metylester kyseliny (3S-trans-7-(cyklopropylmetyl)hexahydro-3-ftalimido-2-oxo- lH-azepín-1 -octovej
K roztoku produktu z príkladu 36 e) (700 mg, 1,89 mmol) v 5 ml metylénchloridu, ochladenému na 0 °C sa pridá 75 ml časti roztoku diazometán/etyléter (pripravený podľa postupu Fieser and Fieser, vol. I, str. 192), ďalej 7 mg (0,03 mmol) octanu paladnatého. Reakčná zmes sa prebubláva a stane sa čírou. Po 10 minútovom miešaní sa pridá ďalších 25 ml roztoku diazometán/etyléter k reakčnej zmesi. Reakcia sa mieša pri 0 °C počas 50 minút, potom sa filtruje cez celit a zahustí vo vákuu. Získa sa surový olej. Tento surový olej sa spracuje rýchlou chromatografiou (Merck silikagél, 50 x 150 mm, 1 : 2 etylacetát/hexán). Získa sa 717 mg titulného produktu ako bielej peny.
b) Metylester kyseliny [3S-[3a(R*),7B]]-7-(cyklopropylmetyl)hexahydro-3-[[2-(acetyltio)-l-oxo-3-fenylpropyl]amino] -2-oxo-1 H-azepín-1 -octovej
K roztoku produktu z časti a) (697 mg, 1,81 mmol) v 8 ml metanole, miešanému pri teplote miestnosti sa prikvapká 92 μΐ (1,90 mmol) monohydrátu hydrazínu. Reakčná zmes sa mieša pri teplote miestnosti počas 48 hodín, potom sa filtráciou odstránia pevné vedľajšie produkty. Filtrát sa zahustí vo vákuu, rozpustí v metylénchloride, znova filtruje a znova sa zahustí, získa sa surový· olej. Surový olej sa suší za vákua, získa sa 441 mg surového amínu ako bielej peny. Táto surová pena sa použije na ďalšiu reakciu bez ďalšieho čistenia.
K studenému ( 0 °C) roztoku 420 mg (1,64 mmol) tohto surového amínu a 384 mg (1,81 mmol) kyseliny (S)-2-(acetyltio)-benzénpropánovej (získané z dicyklohexylamínovcj soli ako bolo opísané) v 10 ml chloroformu sa pridá 280 μΐ (1,97 mmol) trietylamínu. Reakčná zmes sa mieša 30 minút, potom sa pridá 799 mg (1,81 mmol) benzotriazol-1 -yloxytris(dimetylamino)fosfóniumhexafluórfosfátu. Reakčná zmes sa mieša pri 0 °C počas 48 hodín, potom sa pridá ďalších 399 mg (0,904 mmol) benzotriazol-l-yloxytris(dimetylamino)fosfóniumhexafluórfosfátu a 4 kvapky trietylamínu. Reakčná zmes sa mieša pri 0 °C ďalších 24 hodín, potom sa rozdelí medzi 50 ml etylacetátu/50 ml 5 % roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Vodná vrstva sa oddelí a extrahuje sa 2 x 25 ml podielmi etylacetátu. Spojené etylacetátové vrstvy sa premyjú 25 ml 5 % roztoku hydrogenuhličitanu draselného, 40 ml nasýteného hydrogenuhličitanu sodného, 40 ml soľanky, sušia sa (síran horečnatý) a zahustia sa vo vákuu, čím sa získa surový olej. Tento olej sa spracuje rýchlou chromatografíou (Merck silikagél, 50 x x 200 mm, 1 : 3 etylacetát/hexán, potom 1 : 2 etylacetát/hexán). Získa sa 678 mg titulného produktu ako bielej peny.
c) Kyselina [3S-[3a(R*),7B]]-7-(cyklopropylmetyl)hexahydro-3-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-fenylpropyl)amino]-2-oxo1 H-azepín-1-octová
Roztok 658 mg (1,43 mmol) produktu z časti b) v 10 ml metanolu sa prebubláva argónom 30 minút a ochladí na 0 °C. K tomuto roztoku sa po kvapkách pridá 6 ml IM hydroxidu sodného, tiež prebublaného počas 30 minút a ochladenému na 0 °C. Reakčná zmes sa mieša pri 0 °C 1 hodinu za kontinuálneho prebublávania argónom, potom sa okyslí na pH 1 5 % roztokom hydrogensíranu draselného. Zmes sa extrahuje 3 x 80 ml podielmi etylacetátu, spojené etylacetátové vrstvy sa sušia (síran horečnatý) a zahustením vo vákuu sa získa surový olej. Tento olej sa spracuje rýchlou chromatografíou (Merck silikagél, 50 x 150 mm, 0,2 % kyselina octová/etylacetát). Získa sa biela pena. Táto pena sa trituruje a metylénchloridom/hexánom. Získa sa 490 mg titulného produktu ako bielej tvrdej pevnej látky, [a]D = -78 0 (c = 1,0, CDC13). TLC (5 % metanol v metylénchloride plus 3 kvapky kyseliny octovej) Rf = 0,41.
Elementárna analýza pre C2iH28N2SO4.0,5 H2O vypočítané: 61,00 % C, 7,07 % H, 6,77 % N, 7,93 % S nájdené: 61,40 % C, 6,75 % H, 6,37 % N, 7,75 % S.
Príklad 39
Kyselina [3S-[3a(R*),7B]]-7-(cyklopentyl)hexahydro-3-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-fenylpropyl)amino]-2-oxo-lH-azepín-1-octová
a) Metylester kyseliny (3S-trans-7-(2-cyklopentyl)hexahydro-3 -ftalimido-2-oxo-1 H-azepín-1 -octovej
Chlorid ciničitý (5,1 ml, 5,1 mmol, IM metylénchlorid) sa prikvapká k roztoku z príkladu 36 e) (800 mg, 2,55 mmol) a (2-cyklopentenyl)trimetylsilánu (2,85 g,
20,4 mmol) v metylénchloride (60 ml). Zmes sa mieša pri teplote miestnosti 18 hodín, potom sa reakcia preruší prídavkom 100 ml vody. Zmes sa extrahuje trikrát 100 ml podielmi etylacetátu a 2-krát 100 ml podielmi etyléteru. Spojené organické vrstvy sa premyjú 100 ml soľanky, sušia (síran sodný) a zahustia sa vo vákuu. Získa sa surový olej. Tento olej sa spracuje rýchlou chromatografíou (Merck silikagél, 50 x 100 mm, 1 : 1 etylacetát/hexán potom 2 % kyselina octová/etylacetát), získa sa 788 mg kyseliny (3S
-trans)-7-(2-cyklopentyl)-hexahydro-3 -ftalimido-2-oxo-1H-azepín-1-octovej ako bielej peny.
Roztok tejto kyseliny (768 mg, 2,01 mmol) v metanole (7 ml) etyléteru (10 ml) miešaný pri teplote miestnosti sa po kvapkách spracuje s roztokom diazometánu/etyléteru (pripravený podľa postupu Fieser and Fieser, vol. I, str. 192). Roztok diazometán/etyléter sa pridáva tak dlho, až reakčná zmes zostane žltá a ustane bublanie. Zmes sa mieša 10 minút, potom sa prebytok diazometánu rozloží prikvapkaním 0,3 ml kyseliny octovej. Bezfarebný roztok sa zahustí vo vákuu. Získa sa surový olej. Olej sa spracuje rýchlou chromatografíou (Merck silikagél, 50 x 100 mm, 1 : 2 etylacetát/hexán). Získa sa 640 mg titulného produktu ako bielej peny.
b) Metylester kyseliny (3S-trans-7-(cyklopentyl)hexahydro-3 -ftalimido-2-oxo-1 H-azepín-1 -octovej
Roztok produktu z časti a) (700 mg, 1,89 mmol) v 5 ml metanolu sa prebubláva argónom 15 minút, potom sa pridá 150 mg (25 % hmotn.) 10 % paládia na uhlí. Reakčná nádoba sa evakuuje a naplní trikrát vodíkom a mieša pod vodíkom (98,06 kPa) balónik) 5 hodín. Reakčná zmes sa filtruje cez celit, filtrát sa zahustí vo vákuu. Získa sa 594 mg titulného produktu ako bielej peny.
c) Metylester kyseliny [3S-[3a(R*),7B]]-7-(cyklopentyl)hexahydro-3 -[[2-(acetyltio)-1 -oxo-3 -fenyl propyl] amino] -2-oxo-1 H-azepín-1 -octovej
Roztok produktu z časti b) v metanole sa spracuje s monohydrátom hydrazínu postupom podľa príkladu 38 časť
b). Získa sa surový metylester kyseliny (3S-trans-7-(cyklopentyl)-hexahydro-3 -amino-2-oxo-1 H-azepín-1 -octovej ako biela pena.
Táto biela pena sa spracuje s kyselinou (S)-(acetyltio)-benzénpropánovou postupom podľa príkladu 38 časť b). Získa sa titulný produkt ako číry olej.
d) Kyselina [3S-[3a(R*),7B]]-7-(cyklopentyl)hexahydro-3-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-fenylpropyl)amino]-2-oxo-lH-azepín-1-octová
Roztok produktu z časti c) v metanole sa spracuje s IM hydroxidom sodným postupom podľa príkladu 38 časť c). Získa sa titulný produkt ako biela pevná látka, [a]D = -78 ° (c = 1, CDCI3). TLC (5% metanol v metylénchloride plus 3 kvapky kyseliny octovej) Rf = 0,39.
Elementárna analýza pre C22H3ON2S04.0,03 H2O vypočítané: 63,06% C, 7,23% H, 6,69% N, 7,65% S nájdené: 63,25 % C, 7,25 % H, 6,50 % N, 7,55 % S.
Príklad 40
Kyselina [S-(R*,R*)]-hexahydro-3-[(2-sulfanyl-1 -οχο-3-fenylpropy l)amino]-2-oxo-1 H-azepín-1 -propáno vá
a) Etylester kyseliny (S)-3-[[(l,l-dimetyletoxy)karbonylJ-amino] -hexahydro-2-oxo-1 H-azepín-1 -propánovej
Roztok produktu z príkladu 9 b) (1,75 g, 7,67 mmol) v tetrahydrofuráne : terc.butanolc (2 : 1, 30 ml) sa ochladí na 0°Ca spracuje sa s etylakrylátom (1,16 ml, 10,74 mmol,
1,4 ekv.) a potom s Ι,θΝ draselnou soľou terc.butanolu (767 μΐ, 0,1 ekv.). Reakčná zmes sa mieša pri 0 °C počas 15 minút, potom pri teplote miestnosti 1 hodinu. Reakcia sa preruší 25 % chloridom amónnym (50 ml) a extrahuje etylacetátom (2 x 125 ml). Spojené organické podiely sa premyjú 25 % chloridom amónnym (50 ml), vodou (100 ml) a soľankou (100 ml), sušia sa nad síranom horečnatým, filtrujú a zahustením sa získa číry sirup. Zvyšok sa čistí chromatografíou na 5 x 15 cm silikagélovom stĺpci s 30 % zmesou etylacetát/hexán. Požadované frakcie sa spoja a zahustením sa získa 2,18 g titulného produktu ako číreho sirupu. TLC (etylacetát: hexán, 1 : 1) Rf = 0,38.
b) Etylester kyseliny [S-(R*,R*)[-hexahydro-3-]]2-(acetyltio)-1 -oxo-3-fenyl-propyl]amino]-2-oxo-1 H-azepín-1 -propánovej
Produkt z časti a) (2,15 g, 6,55 mmol) sa spracuje so 4N kyselinou chlorovodíkovou/dioxáne (30 ml, 120 mmol) pri 0 “C počas 30 minút, potom pri teplote miestnosti počas 2 hodiny. Reakčná zmes sa zahustí, oddestiluje s etyléterom (dvakrát), azeotropne oddestiluje s toluénom (3-krát) a suší sa vo vákuu počas 5 hodín. Získa sa hydrochloridová soľ etylesteru kyseliny (S)-3-amino-hexahydro-2-oxo-lH-azepín-2-propánovej.
Tento amín sa potom kopuluje s kyselinou (S)(acetyltio)-benzénpropánovou za prítomnosti trietylamínu a bezotriazol-1 -yloxytris(dimetylamino)fosfóniumhexafluórfosfátu ako je opísané v príklade 31 časť c). Získa sa titulný produkt. TLC (etylacetát: hexán, 1 : 1 Rf=0,19.
c) Kyselina [S-(R*,R*)]-hexahydro-3-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-fenylpropyl)amino]-2-oxo-1 H-azepín-1 -propánová
Produkt z časti b) v metanole sa spracuje s IN hydroxidom sodným ako je opísané v príklade 31 časť d). Získa sa titulný produkt ako biela pena, [a]D = +4,44 0 (c = 1,24, metanol). TLC (1 % kyselina octová v etylacetáte) Rf = = 0,27.
Elementárna analýza pre CirHjíNjCLS . 0,17 H2O vypočítané: 58,83 % C, 6,67 % H, 7,62 % N, 8,72 % S nájdené: 58,83 % C, 6,87 % H, 7,33 % N, 8,49 % S.
Príklad 41
Kyselina [S-(R’,R*)]-hexahydro-3-[(2-sulfanyl-l -οχο-3-fenylpropyl)amino]-2-oxo-a-(fenylmetyl)-1 H-azepín-1 -octová
a) Etylester kyseliny (R*)-N-(2-ftalimido-6-hydroxy-l-oxo-hexyl)-L-fenylalanínu
K roztoku etylesteru L-fenylalanínu (998 mg, 4,3 mmol) v dimetylformamide (10 ml) sa pridá 4-metylmorfolín (575 μΐ, 529 mg, 5,2 mmol). Po miešaní pri teplote miestnosti počas 5 minút sa roztok ochladí na 0 °C a spracuje sa postupne s kyselinou (S)-2-ftalimido-6-hydroxyhexánovou (1,002 g, 3,6 mmol), hydroxybenzotriazolom (582 mg, 4,3 mmol) a hydrochloridovou soľou etyl-3-(3-dimetylamino)propylkarbodiimidu (770 mg, 4,0 mmol). Výsledná zmes sa mieša pri 0 °C počas 0,5 hodín a pri teplote miestnosti počas 1,5 hodiny. Roztok sa rozdelí medzi etylacetát a vodu a organický extrakt sa postupne premyje 0,5N kyselinou chlorovodíkovou, vodou, 50 % nasýteným hydrogenuhličitanom sodným a soľankou, potom sa suší (síran sodný), filtruje a oddestilovaním sa získa 1,63 g v podstate čistého titulného produktu ako oleja/peny. TLC (acetón : hexány, 1 : 1) Rf = 0,30.
b) Etylester kyseliny (R’)-N-(2-ftalimido-l,6-dioxohexyl)-L-fenylalanínu
-78 °C teplý roztok oxalylchloridu (370 pl, 538 mg,
4,2 mmol) v metylénchloride (10 ml) sa po kvapkách spracuje so suchým dimetylsulfoxidom (610 μΙ, 672 mg, 8,6 mmol) v metylénchloride (1,5 ml). Po 10 minútach sa pridá roztok produktu z časti a) (1,616 g, 3,6 mmol) v metylénchloride (10 ml). Po ďalších 15 minútach sa zmes spracuje s trietylamínom (4,0 ml), mieša sa pri -78 °C 5 minút, potom sa nechá ohriať na 0 °C. Výsledná biela kašovitá zmes sa rozdelí medzi 0,5N kyselinu chlorovodíkovú a etylacetát. Organický extrakt sa premyje soľankou, potom sa suší (síran sodný), filtruje a odtiahne. Zvyšok sa spracuje rýchlou chromatografiou (Merck silikagél, 40 : 60 acetón : : hexány). Získa sa 1,474 g titulného produktu ako oleja/peny.
TLC (acetón : hexány, 1 : 1) Rf = 0,45.
c) [3S-(3a,6B,9aa)]-Tetrahydro-3-(fenylmetyl)-6-ftalimidooxazol[3,2-a]azepín-2,5(3H,6H)-dion
Zmes produktu z časti b) (6,11 g, 13,6 mmol) s trifluóroctovou kyselinou (34 ml) v chloroforme (205 ml) sa refluxuje počas 6 dní. Roztok sa ochladí na teplotu miestnosti a neutralizuje nasýteným hydrogenuhličitanom sodným. Vrstvy sa oddelia a vodná vrstva sa extrahuje metylcnchloridom. Spojené organické vrstvy sa premyjú vodou, sušia (síran sodný), filtrujú a zahustia na tmavý žltooranžový olej. Zvyšok sa spracuje rýchlou chromatografiou (Merck silikagél), 40 až 60 % etylacetátu v hexánoch). Získa sa 3,075 g titulného produktu ako bielej peny.
d) Metylester kyseliny [S-(R*,R*)]-hexahydro-2-oxo-3-ftalimido-a-(fenylmetyl)-1 H-azepín-1 -octovej
Roztok produktu z časti c) (1,40 g, 3,46 mmol) a trietylsilánu (4,4 ml, 3,20 g, 27,5 mmol) v metylénchloride (42 ml) pri teplote miestnosti sa spracuje po kvapkách s chloridom titaničitým (l,0M v metylénchloride, 7,0 ml, 7,0 mmol). Číry bezfarebný roztok zožltne po prídavku chloridu titaničitého, nevznikne žiadna zrazenina. Po 6 hodinovom miešaní sa zmes rozruší vodou a extrahuje sa etylacetátom. Etylacetátový extrakt sa premyje vodou a soľankou, suší (síran sodný), filtruje a zahustením sa získa olej. Rýchlou chromatografiou (Merck silikagél, etylacetát, potom 2 % kyselina octová v etylacetáte) získa sa 870 mg kyseliny /S-(R*,R*)/-hexahydro-3-/(2-sulfanyl-2-oxo-3-ftalimido-a-(fenylmetyl)-lH-azepín-l-octovej ako bielej peny.
Studený (0 °C) roztok tejto kyseliny (898 mg, 2,21 mmol) v metanole (8 ml) a metylénchloride (12 ml) sa spracuje s prebytkom éterického diazometánu počas 5 minút. Prebytok diazometánu sa rozruší prídavkom kyseliny octovej a rozpúšťadlo sa odstráni na rotačnej odparke. Získa sa žltý olej. Zvyšok sa spracuje rýchlou chromatografiou (Merck silikagél, 50 až 60 % etylacetátu v hexánoch), získa sa 858 mg titulného produktu ako bielej peny. TLC (etylacetát: hexány, 1 : 1) Rf = 0,30.
e) Metylester kyseliny [S-(R ,R*)]-hexahydro-3-[[2-(acetyltio)-1 -oxo-3-fenyl-propyl]amino]-2-oxo-a-(fenylmetyl)-1 H-azepín-1 -octovej
Roztok produktu z časti d) v metanole sa spracuje s monohydrátom hydrazínu postupom podľa príkladu 36 časť
f) . Získa sa metylester kyseliny /S-(R*,R )/-hexahydro-3-amino-2-oxo-a-(fenylmetyl)-lH-azepín-l-octovej ako svetložltý olej. TLC (metylénchlorid : kyselina octová : metanol, 8:1: l)Rf=0,60.
Studený (0 °C) roztok tohto amínu sa nechá reagovať s kyselinou (S)-2-(acetyltio)benzénpropánovou za prítomnosti trietylamínu a benzotriazol-l-yloxytris(dimetylaminojfosfóniumfluórfosfátom postupom podľa príkladu 36 f). Získa sa titulný produkt ako bezfarebný olej/pena. TLC (acetát: hexány, 1 : 1) Rf= 0,54.
f) Kyselina [S-(R*,R*)]-hexahydro-3-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-fenyl-propyl)amino] -2-oxo-a-(fenylmetyl)-1 H-azepín-1 -octová
Roztok produktu z časti e) v metanole sa spracuje s IN hydroxidom sodným postupom podľa príkladu 36 časť g). Získa sa titulný produkt ako relatívne tvrdá biela pena.
[a]D = -64,2 ° (c = 0,54, chloroform). TLC (5 % kyselina octová v etylacetáte) Rf = 0,60.
Elementárna analýza pre C24H28N204S . 0,31 H2O vypočítané: 64,61 % C, 6,47%II, 6,28%N, 7,19%S nájdené: 64,61 % C, 6,78 % H, 5,89 % N, 7,46 % S.
Príklad 42
Kyselina [6(S)]-hexahydro-6-[(2-suIfanyl-l-oxo-3-fenylpropyl)-amino]-2,2-dimetyl-7-oxo-lH-azepín-l-octová
a) Oxím 2,2-dimetylcyklohexanónu
Roztok 2,2-dimetylcyklohexanónu (8,960 g, 65 mmol), pyridínu (12,0 ml, 12,27 g, 155 mmol) a hydrochloridu hydroxylamínu (10,30 g, 148 mmol) v absolútnom etanole (50 ml) sa zahrieva na 85 °C počas 2 hodín. Ochladená zmes sa rozdelí medzi etyléter a vodu a éterická vrstva sa postupne premyje IN kyselinou chlorovodíkovou a soľankou, potom sa suší (síran sodný), filtruje a rozpúšťadlo sa odtiahne. Pevný zvyšok sa rozpustí v malom horúcom hexáne a ochladí na 0 °C. Získa sa 6,801 g titulného produktu ako bielych vločiek, 1.1. 91 až 93 °C (TLC - etylacetát: hexán, 4 : 6), Rt = 0,60.
b) Hexahydro-3,3-dichlór-7,7-dimetyl-2-oxo-2H-azepín
Studená (0-10 °C) kašovitá zmes chloridu fosforečného (32,50 g, 156,1 mmol) v metylénchloride (250 ml) sa spracuje s roztokom produktu z časti a) (7,355 g,
52,1 mmol) v metylénchloride (50 ml) počas 10 minút. Zmes sa ohreje na teplotu miestnosti a plynný chlór sa prebubláva roztokom 0,5 a 1,5 hodiny po prídavku oxímu. Po celkom 3 hodinách sa reakčná zmes rozloží drveným ľadom (70 ml) a potom nasýteným hydrogenuhličitanom sodným (150 ml). Nevyhnutné je občasné chladenie. Dvojfázová zmes sa intenzívne mieša pri teplote miestnosti 18 hodín, potom sa vrstvy oddelia a metylénchloridový extrakt sa premyje nasýteným hydrogenuhličitanom sodným/soľankou. Organická vrstva sa suší (síran sodný), filtruje, zahustí a spracuje sa rýchlou chromatografiou (Merck silikagél, 2/8-etylacetát/metylénchlorid). Frakcie, obsahujúce požadovaný produkt sa oddestilujú a zvyšok sa rozpustí v horúcom metylénchloride/etylacetáte a ochladením sa získa 5,152 g čistého titulného produktu. Materský lúh sa znova chromatografuje (Merck silikagél, 1/9-etylacetát/metylénchlorid). Získa sa ďalších 2,054 g čistého produktu, celkom 7,206 g, 1.1. 148 až 155 °C (široké rozmedzie). TLC (etylacetát : metylénchlorid, 1 : 9) Rf= 0,36.
c) Hexahydro-3-chlór-7,7-dimetyl-2H-azepín
Roztok produktu z časti b) (7,180 g, 34,2 mmol) v ľadovej kyseline octovej (150 ml) sa hydrogenuje (balónik) nad 10 % paládiom na uhlí ako katalyzátora (2,5 g) počas 1,75 hodiny. Zmes sa filtruje cez celit a rozpúšťadlo sa odstráni na rotačnej odparke. Zvyšok sa spracuje rýchlou chromatografiou (Merck silikagél, 3/7-etylacetát/metylénchlorid). Získa sa požadovaný znečistený produkt ako olejovitá pevná látka. Zvyšok sa spracuje s etyléterom a trituruje s hexánom. Získa sa 2,845 g čistého titulného produktu ako bielej pevnej látky. Materský lúh sa znova chromatografúje (Merck silikagél, 3/7-etylacetát/metylénchlorid). Získa sa 1,93 g ďalšieho čistého pevného produktu. Pevné látky sa spoja. Získa sa 4,775 g čistého titulného produktu, t. t. 115 až 117 °C. TLC (etylacetát: metylénchlorid, 3 : 7) Rf=0,41.
d) Hexahydro-3-azido-7,7-dimetyl-2-oxo-2H-azepín
Kašovitá zmes produktu z časti c) (4,670 g, 26,6 mmol) a azidu sodného (4,360 g, 67,0 mmol) v suchom dimetyl sulfoxide (100 ml) sa zahrieva na 80 °C 6 hodín. Roztok sa ochladí na 0 °C a spracuje sa so 175 ml ľadovej studenej vody. Výsledná snehovobiela zrazenina sa oddelí filtráciou, premyje sa vodou a sušením sa získa 2,37 g čistého titulného produktu. Filtrát sa extrahuje etylacetátom a organický extrakt sa premyje dvakrát vodou a jednou soľankou. Potom sa suší (síran sodný), filtruje a rozpúšťadlo sa odtiahne. Trituráciou zvyšku s etyléterom a hexánom sa získa 1,637 g ďalšieho produktu. Izolované pevné látky sa spoja. Získa sa 4,007 g čistého titulného produktu, t. t. 98 - 100 °C. TLC (etylacetát: hexán, 75 : 25) Rf= 0,51.
e) Hexahydro-3-[[(l, 1 -dimetylctoxy)karbonyl]amino]-7,7-dimetyl-2-oxo-2H-azepín
Roztok produktu z časti d) (3,469 g, 19,0 mmol) v metanole (80 ml) sa hydrogenuje (balónik) nad katalyzátorom 10 % paládiu na uhlí (850 mg) 1,5 hodiny. Zmes sa filtruje cez celit a rozpúšťadlo sa odstráni na rotačnej odparke. Zvyšok sa odparí raz z metylénchloridu. Získa sa surový amín ako biela pevná látka. Pevná látka sa znova rozpustí v chloroforme a postupne spracuje s trietylamínom (2,65 ml, 1,92 g, 19,0 mmol) a diterc.butyldikarbonátom (5,000 g, 22,9 mmol). Po miešaní pri teplote miestnosti počas 1 hodiny sa roztok oddestiluje a zvyšok sa trituruje s etylacetátom/etyléterom. Získa sa 2,668 titulného produktu ako bielej pevnej látky. Filtrát sa rýchlo chromatografuje (Merck silikagél, 2/8-etylacetát/metylénchlorid). Získa sa ďalší čistý produkt, ktorý sa spojí s uvedenou pevnou látkou. Získa sa celkom 4,082 g čistého titulného produktu, 1.1. 156 až 158 °C. TLC (etylacetát: metylénchlorid, 2 : 8) Rf=0,26.
f) Etylester kyseliny hexahydro-3-[[(l,l-dimetyletoxy)karbonyl]-amino]-7,7-dimetyl-2-oxo-1 H-azepín-1 -octovej
Roztok s teplotou miestnosti produktu z časti e) (3,512 g, 13,7 mmol) v suchom tetrahydrofúráne (110 ml) sa spracuje s lítiumhexametyldisilazánom (l,0M v tetrahydrofuráne, 21 ml, 21 mmol), potom s etylbrómacetátom (3,0 ml, 4,52 g, 27,0 mmol). Po 20 minútach sa pridá ďalší lítiumhexametyldisilazán (21 ml) a ďalej ďalších 1,5 ml etylbrómacetátu. Tmavooranžový roztok sa mieša pri teplote miestnosti ďalších 30 minút, potom sa rozruší prídavkom nasýteného chloridu amónneho a vody. Zmes sa extrahuje etylacetátom a organický extrakt sa premyje soľankou, suší (síran sodný), filtruje a odtiahnutím rozpúšťadla sa získa tmavý olej. Zvyšok sa spracuje rýchlou chromatografiou (Merck silikagél, 35 až 50 % etylacetát v hexáne). Získa sa 1,363 g čistého titulného produktu ako svetložltého oleja. TLC (etylacetát: hexán, 1 : 1) Rf = 0,48.
g) Etylester kyseliny [6(S)]-hexahydro-6-[[2-(acetyltio)-l-oxo-3 -fény lpropyl]]mino/-2,2-dimetyl-7-oxo-1 H-azepín-1 -octovej
Roztok produktu z časti f) (1,349 mmol) v p-dioxáne (3 ml) sa spracuje s kyselinou chlorovodíkovou (4,0 M v dioxáne, 12 ml). Zmes sa mieša pri teplote miestnosti 1,5 hodiny. Rozpúšťadlo sa odtiahne a zvyšok sa rozdelí medzi metylénchlorid a 0,lN hydroxid sodný (26 ml). Vrstvy sa oddelia a vodná vrstva sa extrahuje etyléterom/etylacetátom. Spojené organické extrakty sa sušia (síran sodný), filtrujú a rozpúšťadlo sa odtiahne. Získa sa 982 mg surového voľného amínu ako žltého oleja. TLC (metanol : metylénchlorid, 1 : 9)Rf=0,16.
Roztok kyseliny (S)-2-(acetyltio)benzénpropánovej (získané z dicyklohexylamínovej soli ako už bolo opísané (973 mg, 4,3 mmol)) a uvedeného surového amínu v metylénchloride (30 ml) sa spracuje s trietylamínom (1,15 ml, 835 mg, 8,2 mmol) a zmes sa ochladí na 0 °C. Potom sa ako pevná látka pridá benzotriazol-l-yloxy-tris(dimetylamino)-fosfóniumhexafluórfosfát (1,915 g,
4,3 mmol). Roztok sa mieša pri 0 °C 1 hodinu a potom pri teplote miestnosti 1,5 hodiny. Rozpúšťadlo sa odtiahne a zvyšok sa rozdelí medzi etylacetát a 0,5N kyselinu chlorovodíkovú. Organická vrstva sa postupne premyje vodou, 50 % nasýteným hydrogenuhličitanom sodným a soľankou. Potom sa suší (síran sodný), filtruje a rozpúšťadlo sa odtiahne. Zvyšok sa spracuje rýchlou chromatografiou (Merck silikagél, 3 : 7 acetón : hexány). Získa sa 1,564 g titulného produktu ako oleja (1 : 1 zmes diastereoizomérov). TLC (acetón : hexány, 3 : 7) Rf = 0,30.
h) Kyselina [6(S)]-hexahydro-6-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-fenylpropyl)-amino]-2,2-dimetyl-7-oxo-lH-azepín-l-octová
Pri teplote miestnosti sa roztok produktu z časti g) (1,548 g, 3,45 mmol) v metanole (20 ml, zbavený kyslíka prebublávaním argónom) sa spracuje s IN hydroxidom sodným (15 ml, zbavený kyslíka prebublávaním argónom). Po miešaní 30 minút sa pridá ďalší IN hydroxid sodný a v miešaní pod argónom sa pokračuje. Po celkom 3 hodinách sa roztok okyslí 6 N kyselinou chlorovodíkovou a extrahuje sa etylacetátom. Etylacetátový extrakt sa premyje vodou a soľankou, potom sa suší (síran sodný), filtruje sa odtiahnutím sa získa olej. Materiál sa spracuje rýchlou chromatografiou (Merck silikagél, etylacetát, potom 1,5 % kyselina octová v etylacetáte). Frakcie, obsahujúce v podstate čistý titulný produkt, sa spoja, odtiahnu a azeotrópne oddestilujú dvakrát s etylacetátom. Zmes sa rozpustí v malom množstve etylacetátu a trituruje sa s hexánom, získa sa pena. Prchavé látky sa odtiahnu, zvyšok sa rozmieša v hexáne, odtiahne sa do sucha znova a sušením vo vákuu sa získa 863 mg titulného produktu ako relatívne tvrdej bielej peny - zmes 45 : 55 diastereomérov. TLC (2 % kyselina octová v etylacetáte) Rf = 0,40.
Elementárna analýza pre Ci9H26N204S . 0,2 H2O vypočítané: 59,73 % C, 6,96 % H, 7,33 % N, 8,39 % S nájdené: 59,79% C, 7,13% H, 7,13% N, 7,99% S.
Príklad 43
Kyselina [S-(R*,S*)]-3,4-dihydro-3-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-fenylpropyl)amino]-4-oxo-l,5-bcnzotiazepín-5(2H)-propánová
a) Etylester kyseliny 2,3-dihydro-3-amíno-4-oxo-l,5-benzotiazepín-5(4H)-propánovej
2,3-Dihydro-3-[[(fenylmetoxy)karbonyl]-amino]-l,5-benzotiazepín-4(5H)-on (pripravený postupom podľa Sladea a spol., J. Med. Chem., 28 str. 1517 - 1521 (1985)) (2,04 g, 6,21 mmol) sa azeotrópne destiluje so zmesou metylénchlorid/toluén (3x) a suší vo vákuu jednu hodinu. Suspenzia tejto zlúčeniny v tetrahydrofuráne : terc.butanolu (2:1,21 ml), ochladená na 0 °C sa spracuje s etylakrylátom (1,08 ml, 9,94 mmol, 1,6 ekv.) a potom s l,0N terc.butanolom-draselnou soľou/tetrahydrofúránom (621 μΐ, 0,1 ekv.). Reakčná zmes sa mieša pri 0 °C 15 minút a potom pri teplote miestnosti počas 20 hodín pod argónom. Reakcia sa preruší 50 % chloridom amónnym (50 ml) a extrahuje etylacetátom (2 x 150 ml). Spojené organické podiely sa premyjú nasýteným chloridom amónnym (75 ml), vodou (75 ml) a soľankou (100 ml). Sušia sa nad síranom horečnatým, filtrujú a zahustením sa získa číry žltý sirup. Zvyšok sa čistí chromatografiou na 5 x 20 cm silikagélovom stĺpci za elúcie 20 % etylacetátom/hexánom (2 1). Požadované frakcie sa spoja a zahustia. Získa sa 2,33 g zmesi etylesteru 2,3-dihydro-3-[(3-etoxy-3-oxopropyl)-[(fenylme toxy)-karbonyl]amino]-4-oxo-l,5-benzotiazepín-5(2H)-propánovej a etylester kyseliny 2,3-dihydro-3-[[(fenylmetoxy)-karbonyl-]amino]-4-oxo-l,5-benzotiazepín-5(2H)-propánovej (75 %) ako číry sirup.
Uvedená zmes (698 mg, 1,32 mmol prvá z uvedených zlúčenín a 1,698 g, 3,96 mmol druhej uvedenej zlúčeniny) a 30 % roztok bromovodíka/kyseliny octovej (8,71 ml, 41,98 mmol) sa mieša pod argónom pri teplote miestnosti
1,5 hodiny. Reakčná zmes sa zriedi etyléterom (200 ml), mieša, dokiaľ sa tvorí špinavobiela zrazenina a filtruje, premyjú sa oranžové pevné látky etyléterom (4 x 50 ml). Surový zvyšok sa potom rozpustí v IN kyseline chlorovodíkovej (100 ml) a extrahuje sa etylacetátom (2 x 100 ml). Vodná fáza sa potom upraví na pH 9 IN hydroxidom sodným a extrahuje sa etylacetátom (3 x 100 ml). Spojené organické podiely sa premyjú soľankou (75 ml), sušia nad síranom horečnatým, filtrujú a zahustením sa získa 1,50 g surového žltého oleja. Zvyšok sa čistí chromatografiou na 5 x x 20 cm silikagélovom stĺpci za elúcie 1 % (2 1), 2 % (1 1) a konečne 5 % (1 1) metanoiu v metylénchloride. Požadované frakcie sa zahustia a sušia vo vákuu. Získa sa 1,163 g titulného produktu.
TLC (metylénchlorid : metanol, 9 : 1) Rf = 0,40.
b) Etylester kyseliny [S-(R*,S*)]-3,4-dihydro-3-[[2-(acetyltio)—1 -oxo-3 -fenylpropyljamino] -4-oxo-1,5-benzotiazepín-5(2H)-propánovej
Kyselina (S)-2-(acetyltio)benzénpropánová (získaná z dicyklohexylamínovej soli ako už bolo opísané) sa rozpustí v suchom metylénchloride, ochladí na 0 °C a spracuje s roztokom produktu z časti a) v suchom metylénchloride a potom s trietylamínom a benzotriazol-l-yloxy(dimetylamino)fosfóniumfluór-fosfátom ako je opísané v príklade 36 časť f). Získa sa titulný produkt. TLC (etylacetát : hexán, 1 : 1) Rf= 0,39.
c) Kyselina [S-(R’,S*)]-3,4-dihydro-3-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-fenylpropyl)amino]-4-oxo-1,5-benzotiazepín-5(2H)-propánová
Roztok produktu z časti b) v metanole sa spracuje s IN hydroxidom sodným postupom podľa príkladu 36 časť g). Získa sa titulný produkt ako biela pena, [a]D = -161,6 ° (c = = 1,16, metanol). TLC (1 % kyselina octová v etylacetáte) Rf=0,45.
Elementárna analýza pre C21H22N2O4S2.0,4 H2O vypočítané: 57,63 % C, 5,25 % H, 6,40 % N, 14,65 % S nájdené: 57,65 % C, 5,04% H, 6,38% N, 14,44 % S.
Príklad 44
Kyselina [3(S)]-2,3,4,5-tetrahydro-3-[(2-sulfanyl-1 -oxo-3-fenylpropyl)amino]-2-oxo- 1H-1 -benzazepín-1 -propánová
a) Etylester kyseliny 3-amino-2,3,4,5-tetrahydro-2-oxo-lH-1 -benzazepín-1 -propánovej
Roztok 3-azido-1,3,4,5-tetrahydro-2H-1 -benzazepín-2-onu (pripravený ako opísal Watthey a spol., J. Med. Chem., 28, str. 1511 - 1516 (1985)) v tetrahydrofuráne/terc.butanole sa ochladí na 0 °C a spracuje sa s etyléterom a IN draselnou soľou terc.butanolu/letrahydrofuránu podľa postupu z príkladu 40 časť a). Získa sa etylester kyseliny 3-azido-2,3,4,5-tetrahydro-2-oxo-1 H-1 -benzazepín-1-propánovej ako sirup. TLC (etyléter : hexán, 1 : 1) Rf = = 0,45.
Roztok tejto zlúčeniny (2,258 g, 6,94 mmol) v absolútnom etanole sa spracuje s katalyzátorom - 10 % paládium na uhlí a hydrogenuje sa pri 280 kPa počas 4 hodín za odvetrania Parrovej nádoby po prvej hodine. Zmes sa zriedi etanolom (50 ml) a filtruje cez stípček celitu, premyje sa tento stípček etanolom (2 x 50 ml). Číry filtrát sa odparí do sucha a suší vo vákuu. Získa sa 2,098 g titulného produktu ako číreho svetložltého sirupu. TLC (metylénchlorid : metanol, 9 : 1) Rf= 0,32.
b) Kyselina /3(S)-2,3,4,5-tetrahydro-3-//2-(acetyltio)-l-oxo-3-fenylpropyl/amino/-2-oxo-lH-l-benzazepín-l-propánová
Kyselina (S)-2-(acetyltio)benzénpropánová (získaná z dicyklohexylamínovej soli ako už bolo opísané) sa rozpustí v metylénchloride, ochladí na 0 °C a spracuje sa postupne s roztokom produktu z časti a) v suchom metylénchloride, trietylamíne a benzotriazol-l-yloxytris(dimetylamino)fosfóniumhcxafluórfosfáte podľa postupu z príkladu 36 časť í). Získa sa titulný produkt ako sirup. TLC (etylacetát: hexán, 1 : 1) Rf= 0,56 a 0,52.
c) Kyselina [3(S)]-2,3,4,5-tetrahydro-3-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-fenylpropyl)amino]-2-oxo-lH-1 -benzazepin-1 -propánová
Roztok produktu z časti b) v metanole sa ochladí a spracuje s IN hydroxidom sodným podľa postupu z príkladu 36 časť g). Získa sa titulný produkt ako pevná pena [ct]D = +41,8 ° (c = 0,608, metanol). TLC (metylénchlorid : : metanol: kyselina octová, 20 : 1 : 1), Rf = 0,47. Elementárna analýza pre C22H24N204S . 0,25 C5H12.0,413 H2O vypočítané: 63,76 % C, 6,21 % H, 6,40 % N, 7,32 % S nájdené: 63,76 % C, 6,18 % H, 6,38 % N, 7,45 % S.
Príklad 45
Kyselina [3(S)]-2,3,4,5-tetrahydro-3-[[2-(sulfanylmetyl)-l-oxo-3 -fenylpropyl]amino]-2-oxo-1 H-1 -benzazepin-1 -propánová
a) Kyselina [3(S)]-2,3,4,5-tetrahydro-3-[[2-(acetyltio)metyl-1 -oxo-3-fenylpropyl] amino]-2-oxo-1 H-1 -benzazepin-1 -propánová (S)-2-[(Acetyltio)metyl]benzénpropánová kyselina (získaná z efedrínovej soli ako už bolo opísané) sa rozpustí v suchom metylénchloride, ochladí na 0 °C a spracuje s hydrátom 1-hydroxybcnzotriazolu a l-etyl-3-(3-dimetylaminopropyl)-karbodiimidom a roztokom produktu z príkladu 44
a) v suchom metylénchloride postupom podľa postupu z príkladu 8 časť a). Získa sa titulný produkt ako sirup. TLC (etylacetát: hexán, 1 : 1) Rf = 0,58.
b) Kyselina [3(S)]-2,3,4,5-tetrahydro-3-[[2-(sulfanylmetyl)-1 -oxo-3-fenylpropyl]amino]-2-oxo-lH-l-benzazepín-l -propánová
Roztok produktu z časti a) v metanole sa ochladí na 0 °C a spracuje s IN hydroxidom sodným postupom podľa príkladu 8 časť b). Získa sa titulný produkt ako amorfná pevná látka, [ct]D = +46,9 0 (c = 0,608, metanol). TLC (chloroform : metanol : kyselina octová, 20 : 1 : 1), Rf = = 0,42.
Elementárna analýza pre C2jH26N2O4S . 0,233 CjH12 · 0,61 H2O vypočítané: 63,89 % C, 6,65 % H, 6.17 % N, 7,06 % S nájdené: 63,89 % C, 6,40 % H; 6,18 % N, 6,82 % S.
Príklad 46
Kyselina [IS-[la,9a(R*)]]-oktahydro-9-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-fenylpropyl)amino]-6,10-dioxo-6H-pyridazino[ 1,2-a] diazepín-1 -karboxylová
a) 1,1-Dimetylester kyseliny (lS-cis)-oktahydro-9-ftalimido-6,10-dioxo-6H-pyridazino[ 1,2-a] [ 1,2] diazepín-1 -karboxylovej
3-(l,l-Dimetyletyl)-l-(fenylmetyl)cster kyseliny 5,6-dihydro-1,3(2H,4H)-pyridazíndikarboxylovej (pripravený podľa Adamsa a spol., Synthetic Communications, 18 (18), 2225 - 2231 (1988)/ sa nechá reagovať s 5-(fenylmetyl)esterom kyseliny (S)-2-ftalimidopentándiovej podľa postupu opísaného Attwoodom a spol. (J. Chetn. Soc. Perkins Trans I, 1986, str. 1011 - 1019). Získa sa 3-(l,l-dimetyletyl)-l-(fenylmetyl)-ester kyseliny (S)-2-/2-ftalimido-l,5-dioxo-5-(fenylmetoxy)-pentyl/-5,6-dihydro-l,3(2H,4H)-pyridazíndikarboxylovej.
Roztok tohto materiálu (12,11 g, 18,5 mmol) v suchom dimetylťormamide (190 ml) sa spracuje s katalyzátorom - 10 % paládium na uhlí (372 mg) a hydrogenuje sa pri teplote miestnosti 24 hodín. Zmes sa odfiltruje cez stípček celitu, číry tmavý filtrát sa odparí do sucha a získaný sirup sa znova rozpustí v metanole (200 ml). Roztok sa filtruje cez ďalší celitový stípček na odstránenie zostávajúcich stôp katalyzátora a číry filtrát sa odparí do sucha a suší vo vákuu. Získaný produkt sa rozpustí v suchom metylénchloride (185 ml), ochladí na 0 °C (kúpeľ ľad-soľ) a spracuje sa s tionylchloridom (1,56 ml, 21,36 mmol, 1,15 ekv.). Reakčná zmes sa mieša pri teplote miestnosti počas 5 hodín pod argónom, spracuje sa s roztokom hydrogenuhličitanu draselného (3,95 g) vo vode (34 ml) a mieša sa 10 minút. Fáza sa oddelí, znova sa extrahuje vodná fáza väčším množstvom metylénchloridu (270 ml) a spojené organické extrakty sa sušia (bezvodý síran sodný). Ďalej sa filtrujú, odparia sa do sucha a sušia vo vákuu.
Zmes surového produktu sa chromatografuje na stĺpci silikagélu (Merck), za elúcie stĺpca zmesami etylacetátu : : hexánu (1 : 3, 1 : 1). Získa sa 3,053 g titulnej zlúčeniny ako pevnej látky. TLC (etylacetát: hexán, 1 : 1) Rf= 0,40.
b) 1,1-Dimetyletylester kyseliny (lS-cis)-oktahydro-9-amino-6,10-dioxo-6H-pyridazino[ 1,2-a] [ 1,2]diazepín-1 -karboxylovej
Suspenzia produktu z časti a) (1,0 g, 2,41 mmol) v absolútnom etanole sa spracuje s hydrazínhydrátom (0,26 ml, 2,2 ekv.) a mieša sa pri teplote miestnosti jednu hodinu pod argónom. Zmes sa odtiahne do sucha, odparí sa raz z toíuénu (25 ml) a získaný zvyšok sa mieša s 2,0M kyselinou octovou (10 ml) počas 24 hodín pod argónom. Pevné látky sa odfiltrujú, premyjú sa 2,0M kyselinou octovou (5,0 ml) a vodou (2 x 2,0 ml) a číry filtrát sa upraví na pH 10,0 pevným hydrogenuhličitanom sodným (1,8 g). Zmes sa extrahuje metylénchloridom (2 x 25 ml) a spojené organické extrakty sa premyjú soľankou (6,0 ml), sušia (bezvodý síran sodný) a filtrujú. Číry roztok sa odparí do sucha a suší vo vákuu. Získa sa 755 mg titulného produktu ako sirupu. TLC (metylénchlorid : metanol, 9 : 1) Rf = 0,20.
c) 1,1-Dimetyletylester kyseliny [lS-[la,9a(R“)]]-oktahydro-9-[[-2-(acetyltio)-1 -oxo-3-fenylpropyl]amino]-6,10-dioxo-6H-pyridazino[l,2-a][l,2]diazcpín-l-karboxylovej
Dicyklohexylamínová soľ kyseliny (S)-2-(acetyltio)-benzénpropánovej (1,07 g, 2,64 mmol) sa suspenduje v etylacetáte (80 ml), premyje 5 % hydrogensíranom draselným (5x12 ml) a soľankou (14 ml), suší (bezvodý síran horečnatý), filtruje, odparí do sucha a suší vo vákuu.
Voľná kyselina sa rozpustí v suchom metylénchloride (20 ml), ochladí na 0 °C (kúpeľ ľad-soľ), postupne sa spracuje s roztokom produktu z časti b) (755 mg, 2,41 mmol) v suchom metylénchloride (5,0 ml), trietylamínom (0,33 ml, 2,37 mmol) a benzotriazol-l-yloxytris(dimetylamino)-fos fóniumhexafluórfosfátom (1,08 g, 2,44 mmol). Reakčná zmes sa mieša pri 0 °C, 1 hodinu a pri teplote miestnosti 2,0 hodiny pod argónom. Reakčná zmes sa odtiahne do sucha a získaný sirup sa znova rozpustí v etylacetáte (80 ml), premyje sa 0,5N kyselinou chlorovodíkovou (2 x 14 ml), vodou (14 ml) a soľankou (14 ml). Suší sa (bezvodý síran horečnatý), filtruje a odparí sa do sucha. Surový produkt sa chromatografuje na stĺpci silikagélu (Merck) za elúcie stĺpca zmesami etylacetát: hexán (1 : 3, 1 : 1). Získa sa 747 mg titulného produktu ako číreho sirupu. TLC (etylacetát: hexán 1 : 1) Rf= 0,23.
d) Kyselina [lS-[la,9a(R*)]]-oktahydro-9-[[2-(acetyltio)-l-oxo-3-fenyl-propyl]amino]-6,10-dioxo-6H-pyridazino- [ 1,2-a] [ 1,2]diazepín-1 -karboxylová
Roztok produktu z časti c) (747 mg, 1,48 mmol) v suchom metylénchloride (10 ml) sa spracuje s anizolom (0,69 ml, 6,35 mmol), potom s kyselinou trifluóroctovou (1,04 ml, 13,5 mmol) a reakčná zmes sa mieša pri teplote miestnosti pod argónom 5,5 dňa. Číry roztok sa odtiahne do sucha, odparí z etylacetátu (2 x 100 ml) a surový produkt sa chromatografuje na stĺpci silikagélu (Merck), za elúcie stĺpca etylacetátom : hexánom (4 : 1), potom etylacetátom : : hexánom : kyselinou octovou (85 : 10 : 5). Požadované frakcie sa spoja, odtiahnu sa do sucha a odparia z toluénu (2 x 100 ml). Získaný sirup sa znova rozpustí v etylacetáte (59 ml), premyje vodou (3 x 10 ml) a soľankou (5,0 ml), suší (bezvodý síran sodný), filtruje, odparí sa do sucha a suší vo vákuu, získa sa 566 mg titulného produktu ako sirupu. TLC (etylacetát: kyselina octová, 95 : 5) Rf = 0,30.
e) Kyselina [lS-[la,9a(R*)]]-oktahydro-9-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-fenylpropyl)amino]-6,10-dioxo-6H-pyridazíno[l,2-ajdiazepín-1 -karboxylová
Roztok produktu z časti d) (556 mg, 1,24 mmol) v metanole (7,0 ml) sa ochladí na 0 °C (kúpeľ ľad-soľ), prebublá sa argónom počas 30 minút a potom sa spracuje s vopred prebublaným (argón, 30 minút) roztokom l,0N hydroxidu sodného (2,5 ml, 2,5 mmol) pričom sa prebublávanie argónom udržuje počas pridávania a času trvania reakcie. Reakčná zmes sa mieša pri 0 °C 30 minút, pH sa upraví na hodnotu 2 5 % hydrogensíranom draselným (11,0 ml) pri 0 °C, ohreje na teplotu miestnosti a extrahuje sa etylacetátom (2 x 40 ml). Spojené organické extrakty sa premyjú soľankou (11,0 ml), sušia (bezvodý síran sodný), filtrujú, odparia sa do sucha a sušia vo vákuu. Surový produkt sa rozpustí v metylénchloride (5,0 ml) a po častiach sa spracuje s hexánom (50 ml), škrabaním tuhne. Pevné látky sa triturujú s ďalším hexánom (50 ml) a pentánom (2 x 50 ml) tak, že sa pevné látky miešajú s prvými 50 ml 2,0 hodiny a ďalších 50 ml cez noc pri teplote miestnosti pod argónom. Produkt sa suší vo vákuu. Získa sa 468,5 mg titulného produktu ako pevnej peny, [a]D = -83,5 ° (c = 0,492, metanol). TLC (etylacetát: kyselina octová, 95 : 5) Rf = 0,33.
Elementárna analýza pre C19H23N303S . 0,34 H2O vypočítané: 55,45 % C, 5,80% H, 10,21 % N, 7,79% S nájdené: 55,45 % C, 5,95 % H, 9,84 % N, 7,49 % S.
Príklad 47
Kyselina [1 S-[la,9cc(R*)]]-oktahydro-9-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-fenylpropyl)amino]-l 0-oxo-6H-pyridazino[ 1,2-a] [ 1,2]diazepín-1 -karboxylová
a) 1,1-Dimetylester kyseliny (lS-cis)-oktahydro-9-ftalimido-10-oxo-6H-pyridazino[ 1,2-a][l ,2]diazepín-1 -karboxylovej
Roztok produktu z príkladu 46 a) (1,0 g, 2,35 mmol) v suchom tetrahydrofuráne (8,0 ml) sa ochladí na asi 5 °C (kúpeľ ľad-voda), spracuje sa s l,0M diboranom/tetrahydrofuránom (2,88 ml, 2,88 mmol) počas 30 minút, ohreje sa na teplotu miestnosti a mieša sa cez noc pod argónom. Reakčná zmes sa zriedi metylénchloridom (14,0 ml), spracuje s 2,ON kyselinou chlorovodíkovou (6,8 ml) a mieša sa počas 15 minút. pH zmesi sa potom upraví na hodnotu 10,0 bezvodým hydrogenuhličitanom sodným (1,92 g) a fázy sa oddelia, vodná fáza sa znova extrahuje ďalším metylénchloridom (30 ml). Spojené organické extrakty sa premyjú soľankou (5,0 ml), sušia (bezvodý síran horečnatý), filtrujú, odparia sa do sucha a sušia vo vákuu. Surový produkt sa chromatografuje na stĺpci silikagélu (Merck), za elúcie stĺpca etylacetát: hexán (1 : 3, 1 : 1). Získa sa 877 mg titulného produktu ako sirupu. TLC (etylacetát . hexán, 1:1) Rf=0,63.
b) 1,1-Dimetyletylester kyseliny (lS-cis)-oktahydro-9-amino-10-oxo-6H-pyridazino[l ,2-a] [ 1,2]diazcpín-1 -karboxylovej
Roztok produktu z časti a) (1,257 g, 3,0 mmol) v absolútnom etanole (13,0 ml) sa spracuje s hydrátom hydrazínu (0,33 ml, 2,2 ekv.) postupom podľa príkladu 46 časť b). Získa sa 704 mg titulného produktu ako sirupu. TLC (metylénchlorid : metanol 9 : 1) Rf = 0,35.
c) 1,1-Dimetyletylester kyseliny [lS-[la,9a(R*)]]-oktahydro-9-[[2-(acetyltio)-1 -oxo-3-fenylpropyl]amino]-10-oxo-6H-pyridazino[ 1,2-a][ 1,2]diazepín-1 -karboxylovej
Dicyklohexylamínová soľ kyseliny (S)-2-(acetyltio)-benzénpropánovej (1,10 g, 2,71 mmol) sa suspenduje v etylacetáte (85 ml), premyje 5 % hydrogensíranom draselným (5 x 12,4 ml) a soľankou (14,4 ml), suší (bezvodý síran horečnatý), filtruje, odparí sa do sucha a suší vo vákuu.
Voľná kyselina sa rozpustí v suchom metylénchloride (21 ml), ochladí sa na 0 °C (ľad-soľ kúpeľ), spracuje sa postupne s roztokom produktu z časti b) (704 mg, 2,48 mmol) v suchom metylénchloride (5,0 ml), trietylamínom (0,34 ml, 2,44 mmol) a benzotriazol-1 -yloxytris(dimetylaminojfosfóniumhexafluórfosfátom (1,113 g, 2,55 mmol). Reakčná zmes sa mieša pri 0 °C počas 1 hodiny a pri teplote miestnosti počas 2,5 hodiny pod argónom. Reakčná zmes sa odtiahne do sucha a získaný sirup sa znova rozpustí v etylacetáte (80 ml), premyje sa 0,5N kyselinou chlorovodíkovou (2 x 14,0 ml), vodou (14,0 ml) a soľankou (14,0 ml), suší sa (bezvodý síran horečnatý), filtruje, odparí sa do sucha a suší sa vo vákuu. Surový produkt sa chromatografuje na stĺpci silikagélu (Merck), eluuje sa etylacetát : : hexánom (1 : 3). Získa sa 1,085 g titulného produktu ako sirupu. TLC (etylacetát: hexán, 1 : 1) Rf= 0,53.
d) Kyselina [lS-[la,9a(R*)]]-oktahydro-9-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-fenylpropyl)amino]-10-oxo-6H-pyridazino[ 1,2-a] [ 1,2]diazepín-1 -karboxylová
Roztok produktu z časti c) (1,085 g, 2,216 mmol) v suchom metylénchloride (15 ml) sa spracuje s anizolom (1,03 ml, 9,5 mmol) a potom s kyselinou trifluóroctovou (1,56 ml, 20,2 mmol) a reakčná zmes sa mieša pri teplote miestnosti pod argónom 4,0 dňa. Číry roztok sa odtiahne do sucha, odparí z etylacetátu (2 x 150 ml) a surový produkt sa suspenduje v zmesi etylacetátu (10 ml) a hexánu (50 ml). Pevné látky sa odfiltrujú, dobre premyjú hexánom (50 ml), potom sa odparia z toluénu (2 x 100 ml) a sušia sa vo vákuu. Získa sa 865 mg kyseliny [lS-[la,9a(R )]]-oktahydro-9-[[2-(acetyltio)-l -oxo-3-fenylpropyl-]amino]-l 0-oxo35
-6H-pyridazino[ 1,2 - a] [ 1,2]diazepín-1 -karboxylovej ako pevnej látky.
Uvedený materiál sa suspenduje v metanole (15 ml), ochladí na 0 °C (kúpeľ ľad-soľ), prebublá sa argónom počas 30 minút a potom sa po kvapkách spracuje s vopred prebublaným roztokom 1,0N hydroxidu sodného (6,03 ml, 3 ekv.) za udržiavania prebublávania argónom počas prídavku a času trvania reakcie. Reakčná zmes sa mieša pri 0 °C 30 minút (pevné látky prešli do roztoku počas prvých 5 minút), pH sa upraví na hodnotu 2,0 5 % hydrogensíranom draselným (26,6 ml), ohreje sa na teplotu miestnosti a extrahuje sa etylacetátom (2 x 65 ml). Spojené organické extrakty sa premyjú soľankou (18 ml), sušia (bezvodý síran sodný), filtrujú, odparia sa do sucha a sušia vo vákuu. Produkt sa rozpustí v metylénchloride (7,0 ml) a po častiach sa spracuje s hexánom (70 ml). Škrabaním látka tuhne. Pevné látky sa triturujú s ďalším hexánom (100 ml) a pentánom (2 x 100 ml), za miešania pevných látok s prvými 100 ml počas 2,0 hodín a s ďalšími 100 ml cez noc pri teplote miestnosti pod argónom. Produkt sa suší vo vákuu a získa sa 790 mg titulného produktu ako pevnej peny, [a]D = -44,4 ° (c = 0,63, metanol). TLC (etylacetát : kyselina octová 95 : :5)Rf=0,67.
Elementárna analýza pre C]9H23N3O4S . 0,20 C5H]2 . 0,80 H2O vypočítané: 57,11 % C, 6,95% H, 9,99% N, 7,62 % S nájdené: 55,11 % C, 6,72 % H, 9,83 % N, 7,44 % S.
Príklad 48
Kyselina [S-(R*,R*)]-hexahydro-6-[(2-sulfanyl-1 -οχο-3-fenylpropyl)amino]-2-metyl-3,7-dioxo-lH-l,2-diazepín-l-octová
a) Etylester kyseliny [2-((1,1-dimetyletoxy)karbonyl]-hydrazino]-octovej
Trietylamín (13,94 ml, 0,1 mol) sa pridá k roztoku 1,1 -dimetyletylesteru kyseliny hydrazínkarboxylovej (13,216 g, 0,1 mol) v benzéne (100 ml) a ďalej sa pridá etylbrómacetát (11,09 ml, 0,1 mol). Reakčná zmes sa refluxuje (olejový kúpeľ, 95 - 100 °C) 14 hodín, potom sa pridá trietylamín (1,4 ml, 0,01 mol) a ďalej etylbrómacetát (1,1 ml, 0,01 mol). Po vare pod spätným chladičom po ďalších 8 hodín sa pridá trietylamín (2 ml, 0,015 ml) a etylbrómacetát (1,4 ml, 0,013 mol). Zmes sa refluxuje ďalších 14 hodín (celkom 36 hodín). Po ochladení na teplotu miestnosti sa reakčná zmes odfiltruje a pevná hydrochloridová soľ trietylamínu sa premyje etylacetátom/hexánom (1 : 1). Spojené filtráty sa zriedia etylacetátom, premyjú nasýteným roztokom hydrogenuhličitanu sodného, vodou, soľankou, sušia sa (síran sodný) a filtrujú. Filtrát sa zahustí vo vákuu, získa sa 19,38 g surového produktu ako žltého sirupu, ktorý' sa použije na ďalšiu reakciu bez čistenia.
b) Etylester kyseliny [2-[l,l-dimetyletoxy)karbonyl]-l-[(fenylmetoxy)karbonyl]hydrazino]-octovej
Trietylamín (12,4 ml, 89 mmol) sa pridá k roztoku surového produktu z časti a) (19,38 g) v benzéne (120 ml) a po kvapkách sa pridá /(fenylmetoxy)karbonyl/chlorid (13,4 ml, 89 mmol) v benzéne (30 ml) počas 30 minút. Výsledná suspenzia sa mieša pri teplote miestnosti pod argónom 20 hodín, potom sa rozdelí medzi etylacetát (500 ml) a 1M roztok hydrogensíranu draselného, premyje sa nasýteným roztokom hydrogenuhličitanu sodného, vodou, soľankou, suší sa (síran sodný) a filtruje. Filtrát sa zahustí vo vákuu a zvyšok sa kryštalizuje zo zmesi acetát/hexán. Získa sa po sušení vo vákuu nad oxidom fosforečným 15,736 g titulného produktu ako bielej kryštalickej zlúčeniny, t. t. 117 až 119 °C.
c) Etylester kyseliny [2-[[(l,l-dimetyletoxy)karbonyl]-l-[(fenylmetoxy)karbonyl]-2-metyl]hydrazino]-octovej
Uhličitan draselný (práškovaný a sušený, 11,8 g, 85,15 mmol) sa pridá k roztoku produktu z časti b) (6,0 g, 17,03 mmol) v bezvodom dimetylformamide (30 ml), potom sa pridá metyljodid (5,3 ml, 85,15 mmol). Po miešaní pri 40 °C počas 17 hodín sa pridá ďalší metyljodid (64 mmol) a reakčná zmes sa mieša pri 40 °C ďalších 28 hodín. Suspenzia sa odfiltruje a k filtrátu sa pridá 6,0 g čerstvého uhličitanu draselného (práškovaný a sušený). Potom 5,0 ml metyljodidu. Suspenzia sa mieša pri 40 °C 21 hodín, potom sa pridá 1,2 ml metyljodidu a reakčná zmes sa mieša ďalších 17 hodín dokiaľ východiskový materiál nezmizne podľa TLC. Reakčná zmes sa odfiltruje a spojené pevné látky sa premyjú etylacetátom. Filtrát sa zahustí vo vákuu na odstránenie väčšiny dimetylformamidu, potom sa zriedi 500 ml etylacetátu, premyje sa vodou, IM hydrogensíranom draselným, vodou, soľankou a suší sa (síran horečnatý). Filtrát sa zahustí a zvyšok sa suší vo vákuu. Získa sa 6,285 g surového produktu ako bezfarebného oleja.
d) Etylester kyseliny [2-[[(l,l-dimetyletoxy)karbonyl]-2-metylj-hydrazinojctovej
Suspenzia produktu z časti c) (6,285 g, 17,03 mmol) a hydroxidu paladnatého (800 mg) v etanole (75 ml) sa intenzívne mieša pod vodíkom (balón) 4 hodiny. Suspenzia sa odfiltruje s použitím jednotky Millipore filter. Filtrát sa zahustí a zvyšok sa suší vo vákuu. Získa sa 4,3 g titulného produktu ako svetložltého oleja.
e) 5-(Fenylmetyl)ester kyseliny (S)-2-ftalimido-l,5-pentadiénovej
N-(Karboxy)ftalimid (9,7 g, 44,24 mmol, 1,05 ekv.) sa pridá k suspenzii 5-(fenylmetylesteru) kyseliny L-glutamovej (10,0 g, 43,14 mmol) a hydrogenuhličitanu sodného (4,47 g, 42,14 mmol) vo vode (80 ml) a dioxánu (40 ml). Po 2 hodinách miešania sa pridá ďalší N-(karboxy)ftalimid (4,4 g, 0,1 ekv.). Zmes sa ďalšie 2 hodiny mieša. pH reakčnej zmesi sa upraví na 1-2 pevným hydrogensíranom draselným a extrahuje sa etylacetátom (3 x 150 ml). Spojené etylacetátové extrakty sa premyjú IM hydrogensíranom draselným, soľankou, sušia sa (síran sodný) a filtrujú. Filtrát sa zahustí vo vákuu. Olejovitý zvyšok sa vyberie do etylacetátu a spracuje sa s dicyklohexylamínom (8,40 ml) (42,14 mmol). Kryštalizáciou surovej soli z etylacetátu/hexánu sa získa po sušení vo vákuu 13 g titulného produktu vo forme dicyklohexylamínovej soli. Materský lúh sa premyje IM hydrogensíranom draselným (2 x), vodou, soľankou a suší sa (síran sodný). Filtrát sa zahustí vo vákuu. Olejovitý zvyšok sa chromatografuje s použitím 0,5 % kyseliny octovej v heptáne/etylacetáte (3 : 7) ako mobilná fáza. Požadované frakcie sa spoja a zahustia. Olejovitý zvyšok sa suší vo vákuu. Získa sa 9,644 g titulného produktu.
f) Fenylmetylester kyseliny (S)-4-ftalimido-5-oxo-[2-[(l,l-dimetyletoxy)karbonyl]-1 -(2-etoxy-2-oxoetyl)-2-metylhydrazinoj-pentánovej
Chlorid fosforečný (5,10 g, 24,5 mmol) sa pridá k studenému (0 °C) roztoku z časti e) (asi 17,10 mmol) v éteri (80 ml). Po miešaní pri 0 °C počas 30 minút a pri teplote miestnosti počas 30 minút sa reakčná zmes zahustí vo vákuu. Zvyšok sa odtiahne s toluénom (3x) a suší sa vo vákuu počas 2 hodín. Získa sa olej ovitá zlúčenina, ktorá sa priamo použije na nasledujúcu reakciu.
Roztok hydrogenuhličitanu sodného (4 g v 46 ml vody) sa pridá k studenému (0 °C) roztoku produktu z časti d) v toluéne (40 ml). Za intenzívneho miešania sa prikvapká kanylou pripravená zlúčenina v toluéne (30 ml). Po prídavku sa reakčná zmes mieša pri teplote miestnosti pod argónom 19 hodín. Reakčná zmes sa zriedi etylacetátom (300 ml), premyje sa vodou, 5 % hydrogensíranom draselným, vodou, soľankou a suší (síran sodný). Filtrát sa zahustí a zvyšok sa suší vo vákuu. Získa sa titulná zlúčenina ako olej.
g) Fenylmetylester kyseliny (S)-4-ftalimido-5-oxo-[l-(2-etoxy-2-oxoetyl)-2-metylhydrazino]-pentánovej
Anizol (7,4 ml) a potom kyselina trifluóroctová (13,10 ml, 170 mmol) sa prikvapkajú k studenému (-10 °C) roztoku surového produktu z časti f) v metylénchloride (55 ml). Po ukončení prisávania sa reakčná zmes mieša pri -10 °C 1 hodinu. Reakčná zmes sa potom nechá ohriať na teplotu miestnosti a v miešaní sa pokračuje 14 hodín. Po odstránení prchavých látok vo vákuu sa zvyšok vyberie do 200 ml etylacetátu, premyje sa nasýteným hydrogenuhličitanom sodným (opatrne), potom vodou, soľankou a suší sa (síran sodný). Filtrát sa zahusti vo vákuu a zvyšok sa chromatografúje s použitím 20 - 40 % etylacetátu/hexánu ako mobilnej fázy. Požadované frakcie sa oddelia a zahustia a zvyšok sa suší vo vákuu. Získa sa 7,254 g titulného produktu ako svetložltého oleja.
h) Kyselina (S)-4-ftalimido-5-oxo-5-[l-(2-etoxy-3-oxo-etyl)-2-metylhydrazino]pentánová
Hydroxid paladnatý (1,0 g) sa pridá k roztoku produktu z časti g) (6,436 g, 13,38 mmol) v teplom etanole (100 ml). Suspenzia sa intenzívne mieša pod vodíkom (balón) počas hodín. Suspenzia sa odfiltruje a katalyzátor sa premyje etanolom. Spojené filtráty sa zahustia. Zvyšok sa odtiahne s toluénom (2 x) a suší vo vákuu cez noc. Získa sa 5,86 g produktu ako bezfarebného oleja, ktorý sa používa na ďalšiu reakciu bez čistenia.
i) Etylester kyseliny (S)-hexahydro-2-metyl-3,7-dioxo-6-ftalimido-1 H-1,2-diazepín-1 -octovej
Tionylchlorid (1,1 ml) sa prikvapká k ochladenému (0 °C) roztoku produktu z časti h) (5,86 g, 13,38 mmol) v metylénchloride (120 ml). Reakčná zmes sa mieša pri 0 °C minút a potom pri teplote miestnosti 3 hodiny. Pridá sa ďalší tionylchlorid (0,3 ml na celkom 1,4 ml) a reakčná zmes sa mieša ďalšie 3 hodiny. Potom sa preruší roztokom hydrogenuhličitanu draselného (2,7 g hydrogenuhličitanu v 27 ml vody). Oddelená organická fáza sa premyje nasýteným hydrogenuhličitanom sodným. Vodná fáza sa extrahuje metylénchloridom (2 x). Spojené metylénchloridové fázy sa premyjú vodou, soľankou a sušia sa (síran horečnatý). Filtrát sa zahustí a zvyšok sa suší vo vákuu. Získa sa 4,70 g požadovaného produktu.
j) Etylester kyseliny (S)-hexahydro-2-metyl-3,7-dioxo-6-amino-1 H-1,2-diazepín-1 -octovej
Monohydrát hydrazínu (255 μΐ, 5,25 mmol) sa pridá k suspenzii produktu z časti i) (1,867 g, 5,0 mmol) v etanole (30 ml) a metylénchloride (10 ml). Po 2-hodinovom miešaní sa prchavé látky odstránia vo vákuu a zvyšok sa odtiahne s toluénom (2 x), potom sa suší vo vákuu. Zvyšok sa vyberie do 2M vodnej kyseliny octovej (20 ml) a výsledný roztok sa mieša pri teplote miestnosti 14 hodín. Suspenzia sa odfiltruje. Zhromaždený filtrát sa alkalizuje hydrogenuhličitanom sodným na pH 10 a extrahuje sa metylénchloridom (3 x). Spojené metylénchloridové fázy sa premyjú 50 % soľankou, soľankou, sušia sa (síran sodný), filtrujú a odparia.
Zvyšok sa chromatografuje s použitím 2,5 % metanolu/metylénchloridu ako mobilnej fázy. Získa sa 568 mg titulného produktu ako svetložltého oleja.
k) Etylester kyseliny [S-(R*,R*)]-hexahydro-6-[[2-(acetyltio)-l-oxo-3-fenylpropyl]amino]-2-metyI-3,7-dioxo-lH-1,2-diazepín-1 -octovej
Trietylamín (302 pl, 2,171 mmol) sa pridá k ochladenému (0 °C) roztoku kyseliny (S)-2-(acetyltio)benzépropánovej (získanej zo skôr opísanej dicyklohexylaminovej soli ako bolo opísané, 486 mg, 2,17 mmol) a ďalej s produktom z časti j) (480 mg, 1,973 mmol) v metylénchloride (3 ml) a s benzotriazol-l-yloxytris-(dimetylamino)fosfóniumhexafluórfosfátom (960 mg, 2,171 mmol). Zmes sa mieša pri 0 °C počas 1 hodiny, potom sa pri teplote miestnosti 2 hodiny. Prchavé látky sa odstránia vo vákuu. Zvyšok sa vyberie do etylacetátu (100 ml), premyje 5 % hydrogensíranom draselným, 50 % nasýteným hydrogenuhličitanom sodným, soľankou, suší sa (síran horečnatý), filtruje a odparia do sucha. Surový produkt sa spracuje rýchlou chromatografiou s použitím 50 - 70 % etylacetátu/hexánu ako mobilnej fázy. Získa sa 824 mg titulného produktu ako bielej penovitej zlúčeniny.
1. Kyselina [S-(R*,R*)]-hexahydro-6-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-fenylpropy))ammo]-2-metyl-3,7-dioxo-lH-l,2-diazepín-l-octová
Roztok produktu z časti k) (800 mg, 1,78 mmol) v metanole (9 ml) sa ochladí na 0 °C, prebublá argónom počas 30 minút, potom sa spracuje po kvapkách s vopred prebublaným IM roztokom hydroxidu sodného (7,12 m, 4,0 ekv.). Reakčná zmes sa mieša pri 0 °C za udržiavania prebublávania argónom počas 1,5 hodiny, potom sa okyslí IM hydrogensíranom draselným na pH 1 - 2 a extrahuje sa etylacetátom (3 x). Spojený etylacetátový extrakt sa premyje soľankou (2 x), suší sa (síran horečnatý), filtruje a odparí sa do sucha. Zvyšok sa spracuje rýchlou chromatografiou s použitím 2 % kyseliny octovej/etylacetátu ako mobilnej fázy. Získa sa 668 mg požadovaného produktu ako bielej penovej zlúčeniny. Chloroform sa použije pri spojení frakcií z kolóny, obsahujúcich produkt. [a]D = = -54,8 0 (c = 0,8, metanol). TLC (3 % kyselina octová/etylacetát) Rf= 0,12.
Elementárna analýza pre C17H2iN3O5S . 0,57 CHC13 vypočítané: 47,16%C, 4,86%H, 9,39%N, 7,16%S nájdené: 47,48 % C, 4,56 % H, 9,01 % N, 7,17 % S.
Príklad 49
Kyselina [S-(R*,R*)]-hexahydro-6-[(2-sulfanyl-l-οχο-3-fenylpropyl)amino]-2-metyl-7-oxo-1 H-1,2-diazepín-1 -octová
a) Etylester kyseliny (S)-hexahydro-2-metyl-7-oxo-6-ftalimido-111-1,2-diazcpín-1 -octovej
Roztok produktu z príkladu 48 i) (375 mg, 1,0 mmol) v suchom tetrahydrofúráne (2,4 ml) sa ochladí na 0 °C a po kvapkách sa spracuje s IN roztokom diboranu v tetrahydrofuráne. Po ukončení pridávania sa reakčný roztok mieša pri 0 °C 30 minút (po tomto čase sa získa gél). Chladiaci kúpeľ sa odstráni a polopevná zmes sa mieša pri teplote miestnosti ďalšiu hodinu pred tým, než sa zriedi 2 ml metylénchloridu a2 ml 2M vodnej kyseliny chlorovodíkovej. Po 15 minútovom miešaní sa zmes zriedi 20 ml metylénchloridu a premyje sa nasýteným hydrogenuhličitanom sodným. Oddelená vodná fáza sa extrahuje metylénchloridom (3 x). Spojené metylénchloridové extrakty sa premyjú 50 % soľankou, soľankou a sušia (síran sodný). Filtrát sa odparí vo vákuu do sucha. Získa sa 344 mg surového produktu ako oleja, ktorý sa použije na ďalšiu reakciu bez čistenia.
b) Etylester kyseliny (S)-hexahydro-2-metyl-7-oxo-6-amino-1 H-1,2-diazepín-1 -octovej
Roztok produktu z časti a) (344 mg, 0,958 mmol) v etanole (3 ml) sa spracuje s hydrazínmonohydrátom (54,8 μΐ, 1,13 mmol) postupom podľa príkladu 48 časť j). Získa sa 169 mg titulného produktu ako svetložltého oleja.
c) Etylester kyseliny [S-(R ,R*)]-hexahydro-6-[[2-(acetyltio)-l-oxo-3-fenylpropyl]amino]-2-metyl-7-oxo-lH-l,2-diazepín-1 -octovej
Studený (0 °C) roztok kyseliny (S)-2-(acetyltio)-benzénpropánovej (získaný z dicyklohexylamínovej soli už opísanej, 198 mg, 0,885 mmol) v metylénchloride (1 ml) sa spracuje s trietylamínom (123 μί, 0,88 mmol), produktom z časti b) (169 mg, 0,738 mmol) v metylénchloride (2 ml) a benzotriazol-1 -yloxytris(dimetylamino)-fosfóniumhexafluórťosfátom (392 mg, 0,885 mmol). Zmes sa mieša pri 0 °C 1 hodinu, potom pri teplote miestnosti 2 hodiny. Prchavé látky sa odstránia vo vákuu. Zvyšok sa vyberie do etylacetátu (50 ml), premyje 5 % hydrogensíranom draselným, nasýteným hydrogenuhličitanom sodným, 50 % soľankou, soľankou a suší sa (síran horečnatý). Filtrát sa odparí do sucha a zvyšok sa spracuje rýchlou chromatografiou s použitím 40 - 50 % etylacetátu/hexánu ako mobilnej fázy. Získa sa
260,5 mg titulného produktu ako bezfarebného oleja.
d) Kyselina [S-(R*,R*)]-hexahydro-6-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-fenylpropyl)amino]-2-metyl-7-oxo-1 H-1,2-diazepín-1 -octová
Roztok produktu z časti c) (235 mg, 0,54 mmol)v metanole (3 ml), ochladený na 0 °C sa prebubláva argónom počas 30 minút, potom sa spracuje po kvapkách s vopred prebublaným IM roztokom hydroxidu sodného (2,20 ml, 4,0 ekv.). Reakčná zmes sa mieša pri 0 °C pri udržiavaní prebublávania argónom počas 2 hodín, potom sa okyslí IN hydroxidom draselným na pH 1-2 a extrahuje etylacetátom (3 x). Spojené etylacetátové extrakty sa premyjú soľankou (2 x), sušia (síran sodný), filtrujú a odparia do sucha. Zvyšok sa spracuje rýchlou chromatografiou s použitím 2 % kyseliny octovej/etylacetátu ako mobilnej fázy. Získa sa 182,2 mg požadovaného produktu ako bielej penovitej zlúčeniny. [a]D = -9,6 ° (c = 0,3, metanol). TLC (3 % kyselina octová v etylacetáte) Rf = 0,26.
Elementárna analýza pre C|7H23N3O4S . 0,2 H2O vypočítané: 55,32 % C, 6,39 % H, 11,39 % N, 8,69 % S nájdené: 55,73 % C, 6,44 % H, 10,98 %N, 8,56 % S.
Príklad 50
Kyselina [S-(R*,R*)]-2,3,4,5-tetrahydro-3-[(2-sulfanyl-1 -oxo-3 -fenylpropyl)amino]-2-oxo-1 H-benzazepín-1 -octová
a) Kyselina (S)-2-brómhexánová
Bromid draselný (15,9 g, 133 mmol) sa pridá k miešanému roztoku D-norleucínu (5,0 g, 38 mmol) v 2,5N kyseline sírovej (77 ml) pri teplote miestnosti. Reakčná zmes sa ochladí na -10 °C a po častiach sa pridá pevný dusitan sodný (3,94 g, 57 mmol), pri udržovaní teploty medzi -10 a -5 °C. Po ukončení pridávania sa penovitá reakčná zmes mieša 1 hodinu. Reakčná zmes sa potom extrahuje dvakrát éterom, éterové extrakty sa premyjú raz vodou, sušia (síran horečnatý), filtrujú a odparením sa získa 3,3 g surového titulného produktu.
b) Dicyklohexylamínová soľ kyseliny (S)-2-(acetyltio)-hexánovej
K miešanej kašovitej suspenzii tioctanu draselného (ľ, 11 g, 18,5 mmol) v 50 ml suchého acetonitrilu pri teplote miestnosti pod argónom sa pridá roztok produktu z časti a) (3,27 g, 16,8 mmol) v 26 ml acetonitrilu. Reakčná zmes sa mieša 5 hodín. Vzniknutá kaša sa odfiltruje a odparí. Zvyšok sa znova rozpustí v etylacetáte, premyje sa raz soľankou, suší sa (síran horečnatý) a odparí. Zvyšok sa rozpustí v éteri (64 ml) a spracuje s dicyklohexylamínom (3,4 ml,
16.8 mmol). Éterický roztok sa zahustí vo vákuu a trituruje s hexánmi. Získa sa pevná biela látka, ktorá sa «kryštalizuje z etyléteru/hexánov, získa sa titulný produkt. Materský lúh sa zahustí a dvakrát rekryštalizuje. Získa sa 2,2 g titulného produktu, 1.1. 145 - 147 °C, [a]D = -33,8 ° (c = 1,08, chloroform).
c) Etylester kyseliny [S-(R*,R*)]-2,3,4,5-tetrahydro-3-[(2-sulfanyl-1 -oxohexyl)amino] -2-oxo-1 H-benzazepín-1 -octovej
Miešaná suspenzia produktu z časti b) (295 mg, 0,795 mmol) v 5 ml etylacetátu sa premyje dvakrát 5 ml podielmi 5 % roztoku hydrogensíranu draselného. Organický extrakt sa suší (síran sodný), filtruje, zahustí a sušením vo vákuu počas 20 minút sa získa olej. Vzniknutý olej sa rozpustí v 3 ml metylénchloridu a mieša sa pod argónom pri 0 °C. K tomuto roztoku sa pridá roztok etylesteru kyseliny (S)-2,3,4,5-tetrahydro-3-amino-2-oxo-1 H-benzazepín-1-octovej (pripravený podľa Watthey-a a spol., J. Med. Chem., 28, str. 1511 - 1516 /1985)) (149 mg, 0,57 mmol) v metylénchloride (3 ml), potom sa pridá trietylamín (83 μί, 0,60 mmol) a nakoniec benzotriazol-1-yloxytris(dimetylamino)-fosfónium-hexafluórfosfát (264 mg, 0,60 mmol). Po 1 hodine sa reakcia ohreje na teplotu miestnosti a mieša sa 90 minút. Výsledný roztok sa odparí pri menej než 30 °C a zvyšok sa znova rozpustí v etylacetáte. Roztok sa premyje raz IM kyselinou chlorovodíkovou, raz vodou, raz nasýteným roztokom hydrogenuhličitanu sodného a raz soľankou. Organická vrstva sa suší (síran horečnatý), filtruje a odparí. Čistením rýchlou chromatografiou (elúcia 1 : 3 etylacetát/hexány) sa získa 193 mg titulného produktu [a]D = = -284,3 0 (c = 0,21, chloroform).
d) Kyselina [S-(R*,R*)]-2,3,4,5-tetrahydro-3-[(2-sulfanyl-l-oxo-hexyl-3-fenylpropyl)amino]-2-oxo-1 H-benzazepín-1-octová
Roztok produktu z časti c) (183 mg, 0,42 mmol) v
3.8 ml metanolu sa prebubláva dusíkom 5 minút a ochladí sa na 0 °C. K tomuto roztoku sa po kvapkách pridá 3,8 ml dusíkom prebublaného IM hydroxidu sodného. Dusík sa pomaly prebubláva roztokom počas reakcie. Po jednej hodine sa reakčná zmes ohreje na teplotu miestnosti a mieša sa jednu hodinu. Reakčná zmes sa okyslí 5 % roztokom hydrogensíranu draselného a extrahuje sa etylacetátom. Extrakty sa premyjú vodou a nasýteným roztokom chloridu sodného, sušia (síran horečnatý) a odparia. Znova odparením z hexánov sa získa pevná biela látka. Táto pevná látka sa mierne zahreje v etyléteri a kryštalizuje s hexánmi. Získa sa 117 mg titulnej zlúčeniny ako bielej pevnej látky, t. t. 151 až 153 °C, [a]n = -214,1 0 (c - 0,46, chloroform). TLC (etylacetát/hexán/kyselina octová, 4 : 4 : 0,1) Rf = 0,23. Elementárna analýza pre CisH24N2O4S vypočítané: 59,32% C, 6,64% H, 7,69% N, 8,80% S nájdené: 59,10% C, 6,62% H, 7,72% N, 8,63 % S.
Príklad 51
Kyselina [3S-[3a(R*),7B]]-hexahydro-7-[(2-hydroxyetyl)-3-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-fenylpropyl)amino]-2-oxo-lH-azepín-l-octová
a) Metylester kyseliny (3S-trans)-hexahydro-3-[[(l,l-dimetyletoxy)karbonyl] amino] -2-oxo-7-(2-propenyl)-1H-azepín-1-octovej
Hydrazín monohydrát (133 μΐ, 2,70 mmol) sa po kvapkách pridá k roztoku metylesteru kyseliny (3S-trans)-hexahydro-3-ftalimido-2-oxo-7-(2-propenyl)-lH-octovej (pripravený ako bolo uvedené v príklade 36 časť e), 609 mg, 2,45 mmol). Reakčná zmes sa mieša pri teplote miestnosti 64 hodín. Potom sa odfiltrujú pevné vedľajšie produkty. Filtrát sa zahustí vo vákuu, rozpustí sa v metylénchloride, znova sa odfiltruje a znova zahustí. Získa sa surový olej. Tento surový olej sa suší pod vákuom. Získa sa 656 mg metylesteru kyseliny (3S-trans)-hexahydro-3-amino-2-oxo-7-(2-propenyl)-lH-octovej v surovom stave ako žltý olej.
K roztoku tohto surového amínu (589 mg, 2,45 mmol) v metylénchloride (10 ml), prebublaný argónom sa pridá 510 μΐ (3,68 mmol) trietylamínu. Reakčná zmes sa mieša 10 minút, potom sa pridá 642 mg (2,94 mmol) di-terc.butyldikarbonátu. Reakčná zmes sa mieša pri teplote miestnosti 16 hodín, potom sa pridá druhý diel 170 μΐ (1,23 mmol) trietylamínu a 160 mg (0,74 mmol) di-terc.butylkarbonátu. Reakčná zmes sa mieša ďalších 16 hodín pri teplote miestnosti, potom sa zriedi 20 ml metylénchloridu. Organická vrstva sa premyje 2 - 10 ml podielmi vody, suší (síran horečnatý) a zahustí vo vákuu. Získa sa surový olej. Tento olej sa spracuje rýchlou chromatografiou (Merck silikagél, 25 x 120 mm, 1 . 6 etylacetát/hexán, potom 1 : 4 etylacetát/hexán). Získa sa 651 mg titulného produktu ako číreho oleja.
b) Metylester kyseliny (3S-trans)-hexahydro-3-[[(l,l-dimetyletoxy)karbonyl]amino]-2-oxo-7-(hydroxyetyl)-lH-azepín-1-octovej
K roztoku produktu z časti a) (554 mg, 1,63 mmol) v 3 ml vody/3 ml dioxánu sa pridá 731 mg (3,42 mmol) jodistanu sodného a potom sa po 10 minútach po kvapkách pridá 400 μΐ (0,98 mmol) oxidu osmičitého. Reakčná zmes sa mieša pri teplote miestnosti 16 hodín, filtruje a premyje sa etylacetátom. Výsledný filtrát sa zahustí vo vákuu bez zahrievania a spracuje sa rýchlou chromatografiou (Merck silikagél, 25 x 120 mm, 1 : 4 etylacetát/hexán - žiadny tlak). Získa sa 309 mg metylesteru kyseliny (3S-trans)-hexahydro-3-[[(l,l-dimetyletoxy)karbonyl]-amino]-2-oxo-7-acetaldehyd-lH-azepín-l-octovej ako číry olej.
K roztoku tohto aldehydu (309 mg, 0,90 mmol) v metanole (5 ml), ochladenému na 0 °C sa po častiach pridá 68 mg (1,80 mmol) borohydridu sodného. Reakčná zmes sa mieša pri 0 °C 1,5 hodiny, potom sa preruší po kvapkách prídavkom 0,5 ml vody a ohreje na teplotu miestnosti. Zmes sa rozdelí medzi 25 ml etylacetátu/25 ml IM kyseliny chlorovodíkovej. Vodná vrstva sa extrahuje 2-20 ml podielmi etylacetátu. Spojené etylacetátové vrstvy sa premyjú 10 ml nasýteného hydrogenuhličitanu sodného a 10 ml soľanky, sušia sa (síran horečnatý) a zahustením vo vákuu sa získa surový olej. Olej sa spracuje rýchlou chromatografiou (Merck silikagél, 25 x 90 mm, 2 : 1 etylacetát/hexán, potom etylacetát. Získa sa 292 mg titulného produktu ako číreho oleja.
c) Metylester kyseliny [3S-[3a(R*),7B]]-hexahydro-7-[[2-(acetyltio)-l-oxo-3-fenylpropyl]]mino/-7-(2-hydroxyetyl)-2-oxo-1 H-azepín-1 -octovej
K roztoku produktu z časti b) (292 mg, 0,85 mmol) v dioxáne (1 ml), ochladenému na 0 °C sa po častiach pridá
2,5 ml (9,34 mmol, 4M) kyseliny chlorovodíkovej /dioxánu. Reakčná zmes sa ohreje na teplotu miestnosti a mieša sa 16 hodín, potom sa zahustí vo vákuu a azeotropne destiluje s toluénom. Získa sa 248 mg hydrochloridovej soli metylesteru kyseliny (3S-trans)-hexahydro-3-amino-2-oxo-7-(2-hydroxyetyl)-l H-azepín-1-octovej ako surového oleja.
K roztoku tohto amínu - hydrochloridovej soli (189 mg, 067 mmol) a kyseliny (S)-2-(acetyltio)-benzénpropánovej (pripravenej zo skôr opísanej dicyklohexylamínovej soli, 157 mg, 0,74 mmol) v metylénchloride (10 ml), ochladenej na 0 °C, sa pridá trietylamín (230 μΐ, 1,68 mmol). Zmes sa mieša 20 minút, potom sa pridá benzotriazol-l-yloxytris-(dimetylamino)fosfóniumhexafluórfosfatu (327 mg, 0,74 mmol). Reakčná zmes sa mieša pri 0 °C jednu hodinu, potom sa pri teplote miestnosti mieša 3 hodiny. Reakčná zmes sa rozdelí medzi 20 ml etylacetátu/20 ml 5 % roztoku hydrogensíranu draselného. Vodná vrstva sa oddelí a extrahuje 2 - 20 ml podielmi etylacetátu. Spojené etylacetátové vrstvy sa premyjú 20 ml 5 % roztoku hydrogensíranu draselného, 20 ml nasýteného hydrogenuhličitanu sodného, 2 - 20 ml podielmi soľanky, sušia sa (síran horečnatý) a zahustením vo vákuu sa získa surový olej. Tento olej sa spracuje rýchlou chromatografiou (Merck silikagél, 25 x 80 mm, 1 : 4 etylacetát/hexán). Získa sa 84 mg titulného produktu ako bielej peny.
d) Kyselina [3S-[3a(R*),7B]]-hexahydro-7-[(2-hydroxyety 1 )-3 -] (2-sulfanyl-1 -oxo-3 -fenylpropyl)amino] -2-oxo-1H-azepín-1-octová
Roztok produktu z časti c) (84 mg, 0,19 mmol) v metanole (2 ml) sa prebubláva argónom 30 minút a ochladí sa na 0 °C. K tomuto roztoku sa po kvapkách pridajú 2 ml IM hydroxidu sodného, tiež prebublávaného argónom počas 30 minút a ochladeného na 0 °C. Reakčná zmes sa mieša pri 0 °C, 1 hodinu, s kontinuálnym prebublávaním argónom. Potom sa okyslí na pH 25 % roztokom hydrogensíranu draselného. Zmes sa extrahuje 3 - 20 ml podielmi etylacetátu. Spojené etylacetátové vrstvy sa sušia (síran horečnatý) a zahustením vo vákuu sa získa surová pena. Táto pena sa spracuje rýchlou chromatografiou (Merck silikagél, 15 x x 60 mm, 0,5 : 5 : 95 kyselina octová/metanol/metylénchlorid). Získa sa biela pena, ktorá sa azeotropne spracuje s toluénom a suší vo vákuu. Získa sa 48 mg titulného produktu ako bielej peny, [a]D= -42,9 ° (c = 1,0 CDC13). TLC (kyselina octová: metanol: metylénchlorid, 1 : 10:90) Rf=0,25.
Elementárna analýza pre C19H,6N2SO5.0,5 H2O vypočítané: 56,55 % C, 6,75% H, 6,94% N, 7,94% S nájdené: 56,55 % C, 6,64 % H, 6,77 % N, 7,51 % S.
Príklad 52
Kyselina [lS-[la,9a(R*)]]-oktahydro-9-[[2-sulfanyl-l-oxo-3-(2-tienyl)propyl]amino]-10-oxo-6H-pyridazino[l ,2-a] [1,2]diazepín-1 -karboxylová
a) Kyselina (S)-a-(acetyltio)-2-tiofénpropánová
Chlorid draselný (3,0 g, 40,1 mmol) sa pridá k roztoku B-(2-tienyl)-D-alanínu (1,37 g, 8,03 mmol) v 2,5N kyseline chlorovodíkovej (25 ml) pri teplote miestnosti pod argónom. Po miešaní počas 10 minút sa výsledná zmes ochladí na 0 °C a spracuje sa s dusitanom sodným (720 mg,
10,44 mmol). Po 2,5 hodinách sa reakčná zmes ohreje na teplotu miestnosti a mieša sa 1 hodinu. Zmes sa rozdelí medzi vodu a etylacetát a organická vrstva sa suší (síran sodný), filtruje a zahustí. Zvyšok sa spracuje rýchlou chromatografiou (Merck silikagél) za elúcie 1 % kyselinou octovou v 3 : 1 hexán/etylacetát. Získa sa 760 mg kyseliny (R)-a-chloro-2-tiofénkarboxylovej ako žltého oleja.
Tiooctan cezný (2,95 g, 14,19 mmol) sa pridá k roztoku, obsahujúcemu uvedený chlorid (750 mg, 4,73 mmol) v dimetylformamide (15 ml) pri teplote miestnosti pod argónom. Po miešaní počas 2 hodín sa reakčná zmes rozdelí medzi 10 % hydrogensíran draselný a etylacetát. Organická vrstva sa premyje soľankou, suší (síran sodný), filtruje a zahustí. Zvyšok sa spracuje rýchlou chromatografiou (Merck silikagél) za elúcie 1 % kyselinou octovou v 4 : 1 hexán/etylacetát. Získa sa 500 mg titulného produktu ako oleja. TLC (2 % kyselina octová v 3 ľ 1 etylacetát/hexán).
b) Kyselina [lS-[la,9a(R*)]]-oktahydro-9-[[2-(acetyltio)-1 -oxo-3-(2-tienyl)propyl]amino]-10-oxo-6H-pyridazino[l ,2-a] [ 1,2]-diazepín-1 -karboxylová
Produkt z časti a) (246 mg, 1,07 mmol) a 1,1-dimetylester kyseliny (lS-cis)-oktahydro-9-amino-10-oxo-6H-pyridazino[l,2-a]-[l,2]-diazepín-l-karboxylovej z príkladu 47 (b) (370 mg, 1,17 mmol) sa rozpustí v metylénchloride (10 ml) pri teplote miestnosti pod argónom. Výsledná zmes sa ochladí na 0 °C a pridá sa trietylamín (0,15 ml, 1,07 mmol). Výsledná zmes sa mieša 5 minút, potom sa pridá benzotriazol-1 -yloxytris(dimetylamino)-fosfóniumhexafluórfosfát (517 mg, 1,17 mmol). Mieša sa 1 hodinu pri 0 °C, potom sa reakčná zmes ohreje na teplotu miestnosti a mieša sa 16 hodín. Prchavé látky sa odparia a zvyšok sa rozpustí v etylacetáte a premyje sa postupne IN kyselinou chlorovodíkovou, vodou, 50 % nasýteným hydrogenuhličitanom sodným a soľankou. Organická vrstva sa suší (síran sodný), filtruje a zahustí. Zvyšok sa spracuje rýchlou chromatografiou (Merck silikagél) za elúcie 3 : 2 hexánom/etylacetátom. Produkt sa znova spracuje rýchlou chromatografiou za elúcie 3 : 1 hexánom/etylacetátom. Získa sa 395 mg 1,1-dimetyletylesteru kyseliny [1 S-[la,9a(R*)]]-oktahydro-9-[[2-(acetyltio)-1 -oxo-3-(2-tienyl)propyl]aminoj-10-oxo-6H-pyridazino[l ,2-a] [1,2] -diazepín-1 -karboxylovej ako bielej peny. TLC (etylacetát : hexán 1 :1) Rf = = 0,43.
Anizol (0,38 ml, 3,52 mmol) sa pridá k roztoku uvedeného produktu (390 mg, 0,82 mmol) v metylénchloride (6 ml) pri teplote miestnosti pod argónom. Výsledná zmes sa spracuje s kyselinou trifluóroctovou (0,58 ml, 7,5 mmol) a mieša sa 36 hodín. Prchavé látky sa odstránia a zvyšok sa spracuje s toluénom a odparením za vákua sa získa 380 mg žltého oleja. Tento olej sa čistí stĺpcovou chromatografiou (Merck silikagél) za elúcie 1 % kyselinou octovou v 1 : 1 etylacetáte/hexáne a potom 1 % kyselinou octovou v 2 : 1 etylacetáte/hexáne. Získa sa 360 mg titulného produktu. TLC (1 % kyselina octová v 1 : 1 etylacetáte/hexáne) Rf=0,28.
c) Kyselina [lS-[la,9a(R*)]]-oktahydro-9-[[2-sulfanyl-l-oxo-3-(2-tienyl)propyl]amino]-10-oxo-6H-pyridazino[l ,2-a][l,2]diazepín-l-karboxylová
Roztok produktu z časti b) (328 mg, 0,75 mmol) v mctanole (5 ml, zbavenom kyslíka prebublávaním argónom) sa ochladí na 0 °C a spracuje sa s IN hydroxidom sodným (4 ml, zbavený kyslíka prebublávaním argónom). Výsledná zmes sa mieša pod argónom 1 hodinu. Zmes sa okyslí 10 % hydrogensíranom draselným a extrahuje sa etylacetátom. Organická vrstva sa postupne premyje vodou a soľankou, suší (síran sodný), filtruje a zahustením sa získa číry olej. Tento zvyšok sa spracuje rýchlou chromatografiou (Merck silikagél) za elúcie 1 % kyselinou octovou v 1 : 2 hexáne/etylacetáte. Frakcie, obsahujúce čistý požadovaný produkt sa spoja, odtiahnu, azeotrópne oddestilujú s etylacetátom a premyjú vodou na odstránenie akejkoľvek kyseliny octovej. Organická vrstva sa suší (síran sodný), filtruje a zahustí. Zvyšok sa vyberie do etylacetátu a trituruje s hexánom. Odstráni sa rozpúšťadlo a zvyšok sa rozmieša v hexáne, odtiahne a suší vo vákuu. Získa sa 165 mg titulného produktu ako bielej práškovitej peny. [a]D = 131,6 0 (c = = 0,43, metylénchlorid). TLC (1 % kyselina octová v 2 : 1 etylacetáte/hexáne) Rf= 0,36.
Elementárna analýza pre C17H23N3O4S . 0,21 H2O . 0,9 C5HM vypočítané: 51,58% C, 6,17% H, 9,99% N, 15,25% S nájdené: 51,24% C, 6,08 % H, 9,69 % N, 15,22% S.
Príklad 53
Kyselina [ 1 S-[ 1 a,8a(R’)]]-hexahydro-8-[(2-sulfanyl-1 -oxo-3-fenyl-propyl)amino]-9-oxo-lH,5H-pyrazolo[l,2-a][l,2]diazepín-1-karboxylová
a) 1,1-Dimetyletylester kyseliny l-[(fenylmetoxy)karbonyl]-3-pyrazolidín-karboxylovej
Roztok kyseliny 3-pyrazolidínkarboxylovej vo forme
I, 1-dimetylesteru (10,935 g, 63,5 mmol) v suchom acetonitrile (90 ml) sa ochladí na 0 °C (ľad-soľ kúpeľ) a spracuje so suchým pyridínom (11,0 ml) a potom s roztokom benzylchlórmravenčanu (12,54 g, 10,5 ml, 69,9 mmol) v suchom acetonitrile (25 ml). Reakčná zmes sa mieša pri 0 °C počas 3 hodín, odparí sa do sucha a získaný sirup sa znova rozpustí v etylacetáte (250 ml). Roztok sa premyje 5 % hydrogenuhličitanom sodným (2 x 25 ml) a soľankou (25 ml), suší sa (bezvodý síran sodný), filtruje, odparí do sucha a suší vo vákuu. Zmes surového produktu sa chromatografúje na stĺpci silikagélu (Merck) za elúcie stĺpca zmesami etylacetátu : hexánu (1 : 4, 1 : 2). Získa sa
II, 144 g titulného produktu ako sirupu. TLC (etylacetát : : hexán, 1 : 1) Rf = 0,25.
b) 3-(l,l-Dimetyletyl)-l-fenylmetylester kyseliny (S)-2-[2-flalimido-l,5-dioxo-5-(fenylmetoxy)pentyl]-l,3-pyrazolidínkarboxylovej
Dicyklohexylamínová soľ 5-(fenylmetyl)esteru kyseliny (S)-2-ftalimidopentándiovej (11,548 g, 21 mmol) sa suspenduje v etylacetáte (700 ml), premyje sa 5 % hydrogensíranom draselným (5 x 100 ml) a soľankou (100 ml, suší (bezvodý síran sodný), filtruje, odparí sa do sucha a suší vo vákuu.
Získaná voľná kyselina sa rozpustí v suchom éteri (100 ml), ochladí na 0 °C (kúpeľ ľad-soľ), spracuje sa s chloridom fosforečným (4,45 g, 21 mmol) a mieša sa pri 0 °C 30 minút, potom pri teplote miestnosti 15 minút. Reakčná zmes sa odparí do sucha, odparí z toluénu (2 x x 230 ml) a suší vo vákuu. Surový chlorid kyseliny sa rozpustí v toluéne (46 ml), pridá sa k ochladenému roztoku (10 °C, kúpeľ ľad-voda) produktu z časti a) (5,52 g, 18 mmol) v toluéne (35 ml)-hydrogenuhličitanu (4,77 g v 46 ml vody), ohreje sa na teplotu miestnosti a mieša sa pod argónom 20 hodín. Reakčná zmes sa zriedi etylacetátom (650 ml), premyje sa 5 % hydrogensíranom draselným (2 x x 140 ml) a soľankou (140 ml), suší (bezvodý síran sodný), filtruje, odparí sa do sucha a suší vo vákuu. Získa sa 11,587 g titulného produktu.
c) 1,1-Dimetylester kyseliny (lS-cis)-hexahydro-8-ftalimido-5,9-dioxo-lH,5H-pyrazolo[l,2-a][l,2]diazepín-l -karboxylovej
Roztok produktu z časti b) (12,653 g, 18 mmol) v suchom dimetylformamide (196 ml) sa spracuje s 10 % paládiom na uhlí ako katalyzátorom (2,19 g) a hydrogenuje (balón) pri teplote miestnosti 24 hodín. Reakčná zmes sa zriedi metanolom (200 ml) a filtruje cez celitový stípček, ktorý sa dobre premyje metanolom (2 x 200 ml). Číry filtrát sa odparí do sucha a suší sa vo vákuu. Získa sa na svetlozlato sfarbený sirup. Surový produkt sa rozpustí v suchom metylénchloride (185 ml), ochladí na 0 °C (kúpeľ ľad-soľ), spracuje s tionylchloridom (1,62 ml, 22,2 mmol), mieša sa pri 0 °C 15 minút a potom pri teplote miestnosti počas 6,0 hodín. Reakcia sa preruší roztokom hydrogenuhličilanu draselného (3,93 g) vo vode (34 ml), mieša sa 10 -15 minút a potom sa extrahuje metylénchloridom (2 x 290 ml). Spojené organické extrakty sa sušia (bezvodý síran sodný), filtrujú, odparia sa do sucha a sušia vo vákuu. Surový produkt sa chromatografúje na stĺpci silikagélu (Merck), za elúcie stĺpca zmesami etylacetátu : hexánu (1 : 3, 1 : 2). Získa sa 2,427 g titulného produktu. TLC (etylacetát : hexán 1:1) Rf=0,37.
d) 1,1-Dimetyletylester kyseliny (lS-cis)-hexahydro-8-ftalimido-9-oxo-l H,5H-pyrazolo[ 1,2-a] [ 1,2]diazepin-l -karboxylovej
Roztok produktu z časti c) (607 mg, 1,43 mmol) v suchom tetrahydrofúráne (12 ml) sa ochladí na 0 °C (kúpeľ ľad-soľ) a spracuje sa s l,0M diboranom/tetrahydrofuránom postupom podľa príkladu 47 časť a). Získa sa 538 g titulného produktu ako sirupu. TLC (etylacetát : hexán, 1 : l)Rf=O,38.
e) 1,1-Dimetylester kyseliny (lS-cis)-hexahydro-8-amino-9-oxo-1 H,5H-pyrazolo[ 1,2-a] [ 1,2]diazepín-1 -karboxylovej
Roztok produktu z časti d) (505 mg, 1,25 mmol) v absolútnom etanole (5,5 ml) sa spracuje s hydrazín hydrátom (0,14 ml, 2,2 ekv.) postupom podľa postupu v príklade 46 časť b). Získa sa 312 mg titulnej zlúčeniny ako sirupu. TLC (metylénchlorid : metanol 9 : 1) Rf= 0,63.
1) Kyselina [lS-[la,8a(R*)]]-hexahydro-8-[[2-(acetyltio)-l-oxo-3-fenylpropyl]amino]-9-oxo-lH,5H-pyrazolo[l,2-a][l,2]diazepín-l-karboxylová
Kyselina (S)-2-(acetyltio)benzénpropánová, získaná z 554 mg dicyklohexylamínovej soli (ako bolo už opísané) sa rozpusti v metylénchloride (11 ml), ochladí na 0 °C (kúpeľ ľad-soľ) a spracuje sa postupne s roztokom produktu z časti
e) (350 mg, 1,25 mmol) v suchom metylénchloride (2,5 ml), trietylamíne (1,17 ml, 1,22 mmol) a benzotriazol-1 -yloxytris(dimetylamino)fosfóniumhexafluórfosfátom (561 mg, 1,29 mmol) podľa postupu z príkladu 47 časť c). Získa sa 400 mg 1,1-dimetyletylesteru kyseliny [1S-/la,8a(R*)//-hexahydro-8-//2-(acetyltio)-l-oxo-3-fenylpropyl/-amino/-9-oxo-lH,5H-pyrazolo/l,2-a//l,2/diazepín-1-karboxylovej ako sirupu. TLC (etylacetát : hexán 1:1) Rf=0,28.
Roztok tohto materiálu v suchom metylénchloride sa spracuje s anízolom a kyselinou trifluóroctovou podľa postupu z príkladu 47 časť d). Získa sa titulný produkt ako pevná látka, [a]D = -111,5 ° (c = 0,48, metanol). TLC (etylacetát : kyselina octová 95 : 5) Rf= 0,38.
g) Kyselina [lS-[la,8a(R*)]]-hexahydro-8-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-fenyl-propyl)amino]-9-oxo-lH,5H-pyrazolo/l,2-a//l ,2/diazepín-1 -karboxylová
Roztok produktu z časti í) v suchom metanole sa spracuje s 0,lN hydroxidom sodným postupom podľa príkladu 47 časť d). Získa sa titulný produkt ako biela pevná amorfná látka, [a]D = -71 ° (c = 0,50, metanol). TLC (etylacetát : kyselina octová, 95 0,25.
Elementárna analýza pre Ci8H23N3O4S . 0,20 H20.0,13 C5H12 vypočítané: 57,36% C, 6,44% H, 10,76 %N, 8,21% S nájdené: 57,36 % C, 6,50 % H, 10,47 % N, 8,10 % S.
Príklad 54
Kyselina [lS-[lct,8a(R’)]]-hexahydro-8-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-fenyl-propyl)amino]-5,9-dioxo-1 H,5H-pyrazolo[l ,2-a][ 1,2]diazepín-1 -karboxylová
a) 1,1-Dimetylester kyseliny (lS-cis)-hexahydro-8-amino-5,9-dioxo-1 H,5H-pyrazolo[ 1,2-a] [ 1,2] diazepín-1 -karboxylovej
Roztok produktu z príkladu 53 časť c) (700 mg, 1,67 mmol) v absolútnom etanole (7,4 ml) sa spracuje s hydrazín hydrátom (0,19 ml, 2,2 ekv.) postupom podľa príkladu 53 časť e). Získa sa 436 mg titulného produktu ako bielej peny. TLC (metylénchlorid : metanol 9 : 1) Rf = 0,30.
b) Kyselina [lS-[la,8a(R*)]]-hexahydro-8-[(2-sulfanyl-l-oxo-3 -fenylpropyl)amino]-5,9-dioxo-1 H,5H-pyrazolo[ 1,2-a] [ 1,2]diazepín-1 -karboxylová
Produkt z časti a) sa nechá reagovať s kyselinou (S)-2-(acetyltio)benzcnpropánovou za prítomnosti trietylamínu a benzotriazol-1 -yloxytris(dimetylamino)fosfóniumhexafluórfosfátu postupom podľa príkladu 53 časť f). Získa sa 1,1-dimetyletylester kyseliny [ÍS-[la,8a(R )]]-hexahydro-8-[[2-(acetyltio)-l-oxo-fenyl-propyl]amino]-5,9-dioxo-lH,5H-pyrazolo[-l,2-a][l,2]diazepín-l-karboxylovcj ako sirup. TLC (etylacetát: hexán 1 : 1) Rf = 0,22.
Tento materiál sa spracuje s anizolom a potom s kyselinou trifluóroctovou podľa príkladu 53 časť f). Výsledná kyselina sa rozpustí v metanole a spracuje sa s 0,1 N hydroxidom sodným postupom podľa príkladu 53 časť g). Získa sa titulný produkt ako pevná amorfná pena, [a]D = -95,8 0 (c = 0,72, metanol). TLC (metylénchlorid : metanol : kyselina octová, 20:1:1) Rf = 0,13.
Elementárna analýza pre C18H21N3O5S . 0,07 C6H14. 1,14 H2O vypočítané: 52,89 % C, 5,83 % H, 10,06 %N, 7,67 % S nájdené: 52,89 % C, 5,80 % H, 9,18%N, 7,01 % S
Príklad 55
Kyselina [3S-[ 1 (R*),3a(R*),7fl]]-hexahydro-a-metyl-3-[(2-sulfanyl-1 -oxo-3 -fenylpropyl)amino]-2-oxo-7-propyl-1H-azepín-1-octová
a) Metylester kyseliny [3S-[l(R*),3a,7B]]-hexahydro-a-metyl-3-ftalimido-2-oxo-7-(2-propenyl)-1 H-azepín-1-octovej
Allyltrimetylsilán (1,53 ml, 9,6 mmol) sa pridá k roztoku metylesteru kyseliny [S-(R ,R )]-hexahydro-a-metyl-3-ftalimido-2-oxo-lH-azepín-l-octovej (485 mg, 1,48 mmol) v metylénchloride (20 ml) pri teplote miestnosti pod argónom. Pridá sa bromid cíničitý (l,0M v metylénchloride, 2,52 ml, 2,52 mmol), výsledná zmes sa mieša 4 hodiny. Pridá sa ďalší podiel bromidu cíničitého (1,48 ml) a v miešaní sa pokračuje 48 hodín. Reakcia sa preruší vodným chloridom amónnym a extrahuje sa etylacetátom. Organická vrstva sa premyje soľankou, suší (síran sodný), filtruje a zahustením sa získa 1,2 g žltého zvyšku. Surová kyselina sa rozpustí v metanole, ochladí na 0 °C a spracuje s diazometánom za vzniku metylesteru. Prchavé zložky sa odstránia a zvyšok sa spracuje rýchlou chromatografiou (Merck silikagél) za elúcie 1 : 3 etylacetát/hexán a potom 1 : í etylace tát/hexán. Získa sa 283 mg titulného produktu ako bielej peny, [a]D = -13,7 ° (c = 0,54, metylénchlorid). TLC (etylacetát: hexán 1 : 1) Rf= 0,50.
b) Metylester kyseliny [3S-[l(R’),3a,7B]]-hexahydro-a-metyl-3-ftalimido-2-oxo-7-propyl-1 H-azepín-1 -octovej
Roztok produktu z časti a) (463 mg, 1,24 mmol) v 1 : 1 metanole/etylacetáte (14 ml) sa hydrogenuje nad katalyzátorom - 10 % paládium na uhlí (41 mg) 3 hodiny. Zmes sa filtruje cez celit a prchavé látky sa odstránia. Získa sa 483 mg titulného produktu ako žltého oleja.
c) Metylester kyseliny [3S-[l(R*),3cc(R*),7B]]-hexahydro-a-metyl-3-[[2-(acetyltio)-1 -oxo-3-fenylpropyl]amino]2-oxo-7 -propyl-1 H-azepín-1 -octovej
Produkt z časti b) (483 mg) sa suspenduje v metanole (7 ml) pri teplote miestnosti pod argónom. Zmes sa spracuje s hydrazín-monohydrátom (0,07 ml, 1,45 mmol). Získa sa homogénna zmes a mieša sa 18 hodín. Zmes sa filtruje na odstránenie bielej zrazeniny a filtrát sa odtiahne, spracuje s metylénchloridom, filtruje a opäť zahustí. Získa sa 282 mg metylesteru kyseliny [3S-[l(R*),3a,7B]]-hexahydro-a-metyl-3-amino-2-oxo-7-propyl-lH-azepín-l -octovej ako žltý olej.
Kyselina (S)-2-(acetyltio)benzénpropánová (získaná zo 491 mg dicyklohexylamínovej soli ako bolo opísané) sa rozpustí v metylénchloride (15 ml) pri teplote miestnosti pod argónom. Potom sa pridá uvedený amín (282 mg, 1,10 mmol), zmes sa ochladí na 0 °C a spracuje sa s trietylamínom (0,17 ml, 1,21 mmol)a benzotriazol-l-yloxytris(dimetylaminojfosfóniumhexafluórfosfátom (511 mg, 1,16 ml) postupom podľa príkladu 36 časť f). Získa sa 385 mg titulného produktu ako bielej peny. TLC (etylacetát : hexán 1 : : 1) Rf=0,43.
d) Kyselina [3S-[l(R*),3a(R*),7B]]-hexahydro-a-metyl-3-/(2-sulfanyl-1 -oxo-3-fenylpropyl)amino/-2-oxo-7-propyl-
-1 H-azepín-1 -octová
Roztok produktu z časti c) (385 mg, 0,83 mmol) v metanole (10 ml) sa spracuje s IN hydroxidom sodným (8 ml) postupom podľa príkladu 36 časť g). Získa sa 142 mg titulného produktu ako bielej práškovitej peny. [a]D = -51,6 ° (c = 0,48, metylénchlorid). TLC (1 % kyselina octová v 2 : : 1 etylacetáte/hexáne) Rf = 0,60.
Elementárna analýza pre C2IH3(IN2O4.0,14 H2O vypočítané: 61,67% C, 7,46 % H, 6,85% N, 7,84% S nájdené: 61,97 % C, 7,50 % H, 6,55 % N, 7,62 % S
Príklad 56
Kyselina [S-(R*,R*)[-2,3,4,5-tetrahydro-3-](2-sulfanyl-l-oxo-3-fenylpropyl)amino]-2-oxo-1 H-pyrrolo[ 1,2-b] [1,2]-diazepin-1-octová
a) Etylester kyseliny [S-(R*,R*)]-2,3,4,5-tetrahydro-3-[[2-(acetyltio)-1 -oxo-3-fenylpropyl]amino]-2-oxo-1 H-pyrrolo- [1,2-b] [1,2] -diazepín-1 -octovej
Etylester kyseliny (S)-3-amino-2-oxo-lH-pyrrolo[l,2-b][l,2]-diazepín-l-octovej (pripravený ako opísal Bolos a spol., J. Org. Chem., 57, str. 3535 - 3539 (1992)) sa nechá reagovať s kyselinou (S)-2-(acetyltio)benzénpropánovou za prítomnosti trietylamínu a benzotriazol-l-yloxytris(dimetylaminojfosfóniumhexafluórfosfátom podľa uvedeného postupu - príklad 36 časť f). Získa sa titulný produkt ako bezfarebný olej.
b) Kyselina [S-(R*,R*)]-2,3,4,5-tetrahydro-3-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-fenylpropyľ)amino]-2-oxo-lH-pyrrolo[l,2-b][l,2]-
-diazepín-1-octová
Roztok produktu z časti a) (135 mg, 0,30 mmol) v metanole (2 ml), tetrahydrofúráne (1 ml) a vode (1 ml) sa 30 minút prefukuje argónom. K roztoku sa pridá lítiumhydroxid-monohydrid (50 mg, 1,2 mmol) pri teplote miestnosti. Reakčná zmes sa mieša 2 hodiny pod argónom, potom sa okyslí prídavkom IM vodného roztoku kyseliny chlorovodíkovej (1,4 ml), potom sa pridá voda (20 ml) a vykoná sa extrakcia etylacetátom (2x15 ml). Organické extrakty sa spoja, sušia (síran sodný) a zahustia vo vákuu. Získa sa olej. Tento surový materiál sa čistí rýchlou chromatografiou (Merck silikagél, 12 x 1,5 cm, 1 : 99 kyselina octová/etylacetát). Získa sa 115 mg titulného produktu ako bielej pevnej peny. [a]D = -67 0 (c = 0,26, metanol). TLC (kyselina octová : metanol : metylénchlorid, 1 : 10 : 90) Rf= 0,43.
Príklad 57
Kyselina [ 1 S-[ 1 a,9a(R*)]]-oktahydro-9-[[2-(metylditio)-1 -oxo-3-fenylpropyl]amino]-10-oxo-6H-pyridazino[l,2-a][l,2]diazepín-1 -karboxylová
Roztok produktu z príkladu 47 (100 mg, 0,247 mmol) rozpusteného v etanole (1,5 ml) a vode (0,15 ml) sa ochladí na 0 °C a spracuje s metylmetántiosulfátom (30,5 μΙ, 37,4 mg, 0,296 mmol). Po 2 hodinách pri 0 °C a 6 hodinách pri teplote miestnosti sa reakčná zmes zriedi vodou a extrahuje sa zmesou etylacetátu a etyléteru. Organický extrakt sa premyje vodou a soľankou, suší (síran horečnatý) a zahustí vo vákuu na 157 mg surového produktu. Spracuje sa rýchlou chromatografiou na 12 g Merck silikagélu za elúcie hexánmi, potom 1 : 1 hexánmi : etylacetátom a nakoniec 4 : : 4 : 0,05 a potom 4 : 4 : 0,1 hexánmi : etylacetátom : kyselinou octovou, získa sa čistený produkt. Trituráciou s etylacetátom : hexánmi sa získa 85,4 mg titulného produktu ako bielej peny, [a]D = -104,2 0 (c = 0,18, chloroform). TLC (hexány : etylacetát: kyselina octová 4 : 4 : 0,1) Rf = 0,16. Elementárna analýza pre C20H27N3O4S . 0,05 C4H8O2.0,01 C6H14 vypočítané: 54,95 % C, 6,27% H, 9,49% N, 14,48% S nájdené: 55,03 % C, 6,22 % H, 9,49 % N, 14,40 % S
Príklad 58
Kyselina [S-(R*,R*)[-2,3,4,5-tetrahydro-3-]]2-(metylditio)-1 -oxo-3 -fenylpropyl]amino]-2-oxo-1 H-benzazepín-1 -octová
Roztok produktu z príkladu 6 (100 mg, 0,235 mmol) rozpusteného v etanole (1,2 ml) a vode (0,112 ml) sa ochladí na 0 °C a spracuje sa s metylmetánsulfonátom (29 μΐ, 35,6 mg, 0,282 mmol). Po jednej hodine pri 0 °C sa reakčná zmes udržuje pri teplote miestnosti 8 hodín, potom sa cez noc zmrazí. Reakčná zmes sa zriedi vodou a extrahuje sa zmesou etylacetátu a etyléteru. Organický extrakt sa prepláchne vodou a soľankou, suší sa (síran horečnatý) a zahustením sa získa 123 mg (vákuum) surového produktu. Rýchlou chromatografiou na 9 g Merck silikagéli za elúcie hexánmi, potom 1 : 1 hexány : etylacetát a nakoniec 4:4: : 0,1 hexány : etylacetát: kyselina octová sa získa 103 mg produktu. Trituráciou z etylcetátom-hexánmi sa získa 97 mg titulného produktu ako bielej pevnej látky, 1.1. 83 až 95 °C, [a]D = -185,17 0 (c = 0,3, chloroform).
TLC (hexány : etylacetát: kyselina octová, 4 : 4 : 0,1) Rf = = 0,16.
Elementárna analýza pre C22H24N2O4S2 . 0,07 C4H8O2 . 0,84 H2O . 0,07 C6H14 vypočítané: 57,78%C, 5,81 %H, 5,94%N, 13,59%S nájdené: 57,70 % C, 6,13% H, 6,27% N, 13,20% S
Príklad 59
Kyselina [S-(R*,R’)]-2,3,4,5-tetrahydro-3-[(2-sulfanyl-l-oxo-4-metylpentyl)amino]-2-oxo-1 H-benzazepín-1 -octová
a) Kyselina (S)-2-bróm-4-metylpentánová
Bromid draselný (9,5 g, 80 mmol) sa pridá k miešanému roztoku D-leucínu (3,0 g, 23 mmol) v 2,5N kyseline sírovej (47 ml) pri teplote miestnosti. Reakčná zmes sa ochladí na -10 °C a po častiach sa pridá pevný dusitan sodný (2,4 g, 34 mmol) pri udržovaní teploty medzi -10 a -5 °C. Po ukončení pridávania sa reakčná zmes mieša ďalšiu hodinu. Reakčná zmes sa potom extrahuje dvakrát éterom, éterové extrakty sa premyjú raz vodou, sušia sa (síran horečnatý), filtrujú a odparením sa získa 2,7 g surového titulného produktu.
b) Dicyklohexylamínová soľ kyseliny (S)-2-(acetyltio)-4-metylpentánovej
K miešanej suspenzii tioctanu draselného (1,7 g, 15,0 mmol) v 50 ml suchého acetonitrilu pri teplote miestnosti pod argónom sa pridá roztok produktu z časti a) (2,6 g, 13 mmol) v 17 ml acetonitrilu. Reakčná zmes sa mieša 4 hodiny. Výsledná kaša sa filtruje a odparí. Zvyšok sa znova rozpustí v etyléteri, premyje sa raz 5 % roztokom hydrogensíranu draselného a raz soľankou, suší sa (síran horečnatý) a odparí. Zvyšok sa rozpustí v éteri (64 ml) a spracuje s dicyklohexylamínom (2,7 ml, 14 mmol). Ihneď sa z roztoku začne zrážať biela pevná látka. Roztok sa filtruje a biela pevná látka sa oddelí. Získa sa 2,0 g titulného produktu, t. t. 153 až 158 °C, [a]D = -54,5 °C (c = 0,61, chloroform).
c) Etylester kyseliny [S-(R*,R*)]-2,3,4,5-tetrahydro-3-[[2-(acetylti o)-1 -oxo-4-metylpentyl]amino]-2-oxo-1 H-benzazepín-1-octovej
Miešaná suspenzia produktu z časti b) (312 mg, 0,840 mmol) v 5 ml etylacetátu sa premyje dvakrát 5 ml podielmi 5 % roztoku hydrogensíranu draselného. Organický extrakt sa suší (síran sodný), filtruje, zahustí a suší 20 minút vo vákuu. Výsledný olej sa rozpustí v 2,5 ml metylénchloridu a mieša sa pod argónom pri 0 °C. K tomuto roztoku sa pridá roztok etylesteru kyseliny (S)-2,3,4,5-tetrahydro-3-amino-2-oxo-1 H-benzazepín-1 -octovej (pripravený ako opísal Watthey a spol., J. Med. Chem., 28, str. 1511 - 1516 (1985)) (142 mg, 0,54 mol) v metylénchloride (3 ml), potom trietylamín (80 μΐ, 0,57 mmol) a nakoniec benzotriazol-1 -yloxytris(dimetylamino)fosfóniumhexaíluórfosfát (251 mg, 0,57 mmol). Po 1 hodine sa reakčná zmes nechá ohriať na teplotu miestnosti a mieša sa 90 minút. Výsledný bezfarebný roztok sa odparí pri menej než 30 °C a olej ovitý zvyšok sa znova rozpustí v etylacetáte. Roztok sa raz premyje IM kyselinou chlorovodíkovou, raz vodou, raz nasýteným roztokom hydrogenuhličitanu sodného a raz soľankou. Organická vrstva sa suší (síran horečnatý), filtruje a odparí. Čistením rýchlou chromatografiou (elúcia 2 : 5 etylacetát/hexány) sa získa 223 mg titulného produktu, [a]D = -243,9 ° (c = 0,62, chloroform).
d) Kyselina [S-(R*,R*)]-2,3,4,5-tetrahydro-3-[(2-sulfanyl-l-oxo-4-metylpentyl)amino] -2-oxo-1 H-benzazepín-1 -octová
Roztok produktu z časti c) (190 mg, 0,44 mmol) v 4 ml metanolu sa prebubláva dusíkom 5 minút a ochladí na 0 °C. K tomuto roztoku sa pridá po kvapkách 4 ml dusíkom prebublaného IM hydroxidu sodného. Dusík sa pomaly prebubláva roztokom počas reakcie. Po jednej hodine sa reakčná zmes ohreje na teplotu miestnosti a mieša sa jednu hodinu. Reakčná zmes sa okyslí 5 % roztokom hydrogensí ranu draselného a extrahuje sa etylacetátom, extrakty sa premyjú vodou a nasýteným roztokom chloridu sodného, sušia (síran sodný) a odparia. Znova odparením z hexánu sa získa biela pevná látka. Táto pevná látka sa opatrne zahrieva v etyléteri, filtruje a tak sa odstráni nerozpustný olej a kryštalizuje sa z hexánov. Získa sa 117 mg titulného produktu ako bielej pevnej látky, t. t. 143 až 144 °C, [a]D = -224,3 ° (c = 0,46, chloroform). TLC (etylacetát/hexán/kyselina octová 4:4: 0,1) Rf =0,19.
Elementárna analýza pre ClsH24N2O4S . 0,02 C4H,0O vypočítané: 59,34 % C, 6,67% H, 7,66% N, 8,76% S nájdené: 58,97 % C, 6,72 % H, 7,52 % N, 8,67 % S
Príklad 60
Kyselina [R-(R*,S’)]-2,3,4,5-tetrahydro-3-[(2-sulfanyl-2-metyl-1 -oxo-3-fenylpropyl)amino] -2-oxo-1 H-benzazepín-1-octová
a) S,S'-bis(4-Metoxy-a-toluéntiol)
Roztok 4-metoxy-a-toluéntiolu (25 g, 0,16 mol) v benzéne (200 ml) sa pridá k roztoku uhličitanu draselného (44,8 g, 0,32 mol) vo vode (200 ml) a výsledná zmes sa spracuje po častiach za rýchleho miešania s jódom (23,6 g) až do pretrvania farby jódu. Reakčná zmes sa mieša 15 minút, potom sa prebytok jódu rozloží prídavkom pevného sulfitu sodného (10 g). Reakčná zmes sa zriedi benzénom (200 ml) a rozdelí, znova sa extrahuje vodná fáza ďalším benzénom (100 ml). Spojené organické extrakty sa premyjú vodou (100 ml), 5 % siričitanom sodným (100 ml) a soľankou (50 ml). Sušia sa (bezvodý síran sodný), filtrujú, odparia do sucha a sušia vo vákuu. Surový produkt sa rekryštalizuje z etylacetátu (200 ml) a filtruje. Premývaním krémovito sfarbenej zrazeniny etylacetátom (25 ml) sa získa 16,596 g titulného produktu, t. t. 99 - 100 “C. TLC (metylénchlorid : metanol 9 : 1) Rf = 0,57.
b) Kyselina -metyl-hydroškoricová
Roztok kyseliny a-metylškoricovej (10,0 g, 61,7 mmol) v suchom metanole (250 ml) sa spracuje s 10 % paládiom na uhlí a hydrogenuje (s použitím balónika) pri teplote miestnosti 16 hodín. Reakčná zmes sa zriedi metanolom (250 ml), filtruje sa cez stípček celitu v miliporovej jednotke, stípček sa dobre premyje metanolom (2 x 100 ml). Číry filtrát sa odparí do sucha, získa sa 10,225 g titulného produktu ako hustého lepivého sirupu.
c) Kyselina a-metyl-a[[(4-metoxyfenyl)metyl]-tio]hydroškoricová
Roztok diizopropylamínu (1,69 ml, 12,2 mmol) v suchom tetrahydrofuráne (9,0 ml) sa ochladí na -30 °C (kúpeľ acctonitril-ľad), spracuje sa s 2,5M butyllítiom (4,84 ml, 12,1 mmol) a mieša sa pri -30 °C 20 minút. Výsledný roztok diizopropylamidu sa potom spracuje s roztokom kyseliny a-metyl-hydroškoricovej (1,0 g, 6,1 mmol) v suchom tetrahydrofuráne (1,0 ml), ohreje sa na teplotu miestnosti a mieša sa pod argónom 1,5 hodiny. Reakčná zmes sa ochladí na 0 °C (kúpeľ ľad-soľ), spracuje sa s roztokom S,S'-bis(4-metoxy-a-toluéntiolu) (1,869 g, 6,1 mmol) v suchom tetrahydrofuráne (6,0 ml) a mieša sa 45 minút pri 0 °C pod argónom. Zmes sa potom pomaly pridá k l,0N kyseline chlorovodíkovej (19,0 ml) a vodná zmes sa extrahuje etylacetátom (2 x 50 ml). Spojené organické extrakty sa premyjú vodou (15 ml) a soľankou (15 ml), sušia (bezvodý síran horečnatý), filtrujú, odparia do sucha a sušia vo vákuu. Zmes surového produktu sa chromatografuje na silikagélovom stĺpci (Merck) za elúcie stĺpca zmesami etylacetát : hexány (1 : 4, 1 : 2) a potom etylacetát : kyselinou octovou (100 : 2). Získa sa 1,45 g titulného produktu.
d) 1,1-Dimetyletylester kyseliny [R-(R*,S*)]-2,3,4,5-tetrahydro-3-[[2-[[(4-mctoxyfenyl)metyl]tio]-2-metyl-l-oxo-3-fenyl-propyl]amino]-2-oxo-lH-benzazepín-l-octovej
1,1-Dimetyletylester kyseliny [S-(R*,R*)]-2,3,4,5-tetrahydro-3-[[2-[[(4-metoxyfenyl)metyl]tio]-2-metyl-l-oxo-3-fenyl-propyl] amino] -2-oxo-1 H-benzazepín-1 -octovej
Roztok produktu z časti c) (497 mg, 1,57 mmol) (1,09 ekv.) sa ochladí na 0 °C (kúpeľ ľad-soľ), spracuje sa s roztokom 1,1-dimetyletylesteru kyseliny (S)-2,3,4,5-tetrahydro-3-amino-2-oxo-1 H-benzazepín-1 -octovej (pripravené podľa postupu Wattheya a spol., J.Med. Chem. 28, str. 1511 - 1516 (1985)) (417 mg, 1,44 mmol) v suchom metylénchloride (2,9 ml) a potom s trietylamínom (0,2 ml, 1,45 mmol) a benzotriazol-l-yloxytris(dimetylamino)-fosfóniumhexafluórfosfátom (642 mg, 1,45 mmol). Reakčná zmes sa mieša pri 0 °C 1,0 hodinu, potom pri teplote miestnosti 2,5 hodiny a potom sa odparí do sucha. Získaný sirup sa znova rozpustí v etylacetáte (50 ml) a výsledný roztok sa premyje 0,5N kyselinou chlorovodíkovou (2 x 8,3 ml), vodou (8,3 ml) a soľankou (8,3 ml), suší sa (bezvodý síran sodný), filtruje, odparí do sucha a suší vo vákuu. Surový produkt sa chromatografuje na stĺpci silikagélu (Merck) za elúcie stĺpca etylacetátom : hexánom, získa sa 709 mg (elučné činidlo v pomere 1 : 4) zmesi izomémych produktov.
Zmes izomémych produktov sa znova chromatografuje na stĺpci silikagélu a eluuje sa etylacetátom : metylénchloridom, (1 : 99,2 : 98) získa sa 340 mg [R-(R*,S*)] titulného produktu, [a]D= -72° (c = 0,66, metanol), TLC (etylacetát: : hexán, 1 : 1) Rf = 0,70 a 316 mg /S-(R*,R*)/ titulného produktu, [a]D = -142 0 (c = 0,5, metanol), TLC (etylacetát : hexán, 1 : 1) Rf = 0,87.
e) Kyselina /R-(R*,S*)/-2,3,4,5-tetrahydro-3-/(2-sulfanyl-2-metyl-1 -oxo-3-fenylpropyl)amino/-2-oxo-1 H-benzazepín-
-1 -octová
Roztok [R-(R*,S*)] produktu z časti d) (300 mg, 0,51 mmol) v kyseline trifluóroctovej (2,5 ml) sa ochladí na 0 °C (kúpeľ ľad-soľ), spracuje sa s anizolom (0,25 ml, 2,3 mmol) a kyselinou trifluórmetánsulfónovou (0,13 ml, 1,47 mmol) a mieša sa pri 0 °C 2,5 hodiny pod argónom. Reakčná zmes sa odtiahne do sucha, odparí sa zvyšný sirup z etylacetátu (2x15 ml) a potom sa suší vo vákuu. Surový produkt sa chromatografuje na stĺpci silikagélu (Merck) za elúcie stĺpca etylacetátom a etylacetátom : kyselinou octovou (100 : 2). Prvý set požadovaných frakcií sa spojí a rozdelí medzi etylacetát a l,0N kyselinu chlorovodíkovú, získa sa 91,0 mg surového produktu. Tento sa spojí s druhým podielom frakcií, ktoré sa tiež rechromatografújú oddelene na inom silikagélovom stĺpci, získa sa celkové množstvo 301 mg, ktoré ešte obsahuje nečistoty. Rechromatografiou na treťom stĺpci silikagélu sa získa po elúcii stĺpca toluénom : kyselinou octovou (6 : 1) 156 mg čistého titulného produktu ako pevnej peny, [a]D = -248,3 ° (c = 0,73, metanol). TLC (toluén : kyselina octová, 5 : 1) Rf= 0,28. Elementárna analýza pre C22H24N2O4S . 0,21 C6H14.0,54 H2O vypočítané: 63,82 % C, 5,85 % H, 6,40 % N, 7,32 % S nájdené: 63,82 % C, 6,14 % H, 6,21 % N, 7,16 % S
Príklad 61
Kyselina [S-(R*,R*)]-2,3,4,5-tetrahydro-3-[(2-sulfanyl-2-metyl-l-oxo-3-fenylpropyl)amino]-2-oxo-lH-benzazepín-1-octová
Roztok [S-(R*,R*)] produktu z príkladu 60 časť d) (316 mg, 0,54 mmol) v kyseline trifluóroctovej (2,63 ml) sa ochladí na 0 °C a spracuje sa s anizolom (0,26 ml, 2,30 mmol) a kyselinou trifluórmetánsulfónovou (0,14 ml, 1,58 mmol) postupom podľa príkladu 60 časť e). Získa sa 209,8 mg titulnej zlúčeniny, [a]D = -123 ° (c = 0,48, metanol). TLC (toluén : kyselina octová, 5 : 1) Rf = 0,35. Elementárna analýza pre C22H24N2O4S . 0,4 C6H!4 vypočítané: 64,22 % C, 5,95% H, 6,73% N, 7,70 % S nájdené: 64,38 % C, 6,19% H, 6,27% N, 7,05 % S
Príklad 62
1-Oxid kyseliny [3R-[3a,6a(S*),9aB]]-oktahydro-6-[(2-sulfanyl-1 -oxo-3-fenylpropyl)amino]-5-oxotiazolo[3,2-a]-azepín-3-karboxylovej
a) 1-Oxid metylesteru kyseliny [3R-[3a,6a(S*),9aB]]-oktahydro-6-[[2-(acetyltio)-l-oxo-3-fenylpropyl)amino]-5-oxotiazolo-[3,2-a]-azepín-3-karboxylovej
Roztok produktu z príkladu 11 časť í) (301 mg, 0,67 mmol) v chloroforme (9,5 ml) sa ochladí na 0 - 5 °C. K tomuto roztoku sa pridá roztok metachlórperoxybenzoovej (137 mg, 0,79 mmol) v chloroforme (7 ml). Reakčná zmes sa mieša pri 0 °C pod dusíkom. Po 1 hodine TLC ukazuje neprítomnosť východiskového materiálu. Reakčná zmes sa zriedi chloroformom (66 ml), premyje sa zriedeným hydrogdnuhličitanom sodným. Filtruje sa a zahustí vo vákuu na penovitú pevnú látku. Táto penovitá pevná látka sa spracuje rýchlou chromatografiou na Merck silikagéli (30 ml) a etylacetátom : acetonitrilom (95 : 5) (400 ml). Získa sa 263 mg titulného produktu ako 55 : 45 zmesi diastereoizomérov (R,S zmes sulfoxidu). TLC (etylacetát : : acetonitril 95 : 5) Rf= 0,23.
b) 1-Oxid kyseliny [3R-[3a,6a(S*),9aB]]-oktahydro-6-[(2-sulfanyl-1 -oxo-3-fenylpropyl)amino]-5-oxotiazolo[3,2-a]-azepín-3-karboxylovej
Roztok produktu z časti a) (263 mg, 0,56 mmol) v metanole (3,4 ml, zbavený kyslíka prebublávaním argónom) sa spracuje s IN hydroxidom sodným (2,8 ml, 2,8 mmol) (zbaveným kyslíka prebublávaním argónom) a číry roztok sa mieša pod argónom pri teplote miestnosti. Po 2 hodinách TLC má neprítomnosť východiskového materiálu. Roztok sa okysli 10 % hydrogensíranom draselným (12,5 ml), zriedi sa vodou (17 ml) a extrahuje etylacetátom (3 x 60 ml). Etylacetátový extrakt sa premyje vodou (25 ml), soľankou (50 ml) a suší nad síranom sodným. Odfiltruje sa a zahustí na olejovitý zvyšok. Spracovaním tohto zvyšku s hexánom a etyléterom sa získa pevná látka (230 mg). Táto pevná látka sa rýchlo chromatografuje na Merck silikagéli (50 ml s použitím etylacetátu/acetonitrilu/kyseliny octovej 50 : 50 : : 6 až 7) (600 ml). Získa sa (142 mg) pevnej látky. Táto pevná látka (142 mg) sa rozpustí v metanole (2 ml) a zriedi sa etylacetátom (25 ml). Premyje sa 10 % hydrogensíranom draselným (13 ml) (pH = 2), zriedi sa vodou (8 ml). Organická vrstva sa oddelí. Vodná vrstva sa extrahuje etylacetátom (3x10 ml). Spojené etylacetátová extrakty sa premyjú vodou (5 ml), soľankou (5 ml), sušia sa nad síranom sodným, odfiltrujú a zahustia na olejovitý zvyšok. Trituráciou tohto zvyšku a etylacetátom/etyléterom sa získa 102 mg titulného produktu ako jediného izoméru, t. t. 129 až 132 °C (penenie), [a]D = -89,9 0 (c = 0,3, dimetylformamid). TLC (etylacetát/acetonitril/kyselina octová) Rf = = 0,26.
Elementárna analýza pre C18H22N2O5S2 . 0,12 C4H8O2. 0,56 H2O vypočítané: 51,48% C, 5,62%H, 6,49%N, 14,87 % S nájdené: 51,32% C, 5,34% H, 6,74% N, 14,50 % S
Príklad 63
1000 tabliet, kde každá obsahuje nasledujúce zložky:
Kyselina [S-(R*,R*)]-2,3,4,5-tetrahydro-3 -[(2-sulfanyl-2-metyl-1 -οχο-3-fenylpropy 1 )ai n i no] -2-oxo-1 H-benzazepín-2-octová 200 mg kukuričný škrob 100 mg želatína 20mg
Avicel (mikrokryštalická celulóza) 50mg stearát horečnatý 5mg
375 mg sa pripraví z dostatočných množstiev zmiešaním produktu z príkladu 6 a kukuričného škrobu s vodným roztokom želatíny. Zmes sa suší a melie na jemný prášok. Avicel a potom stearát horečnatý sa zmieša s granuláciou. Táto zmes sa potom zlisuje v tabletovacom lise za vzniku 1000 tabliet, kde každá obsahuje 200 mg účinnej zložky.
Podobným spôsobom môžu byť pripravené tablety, obsahujúce 200 mg produktu z každého príkladu 1 až 5 a 7 až 62.
Podobný postup môže byť použitý na prípravu tabliet alebo kapsúl, obsahujúcich 50 mg až 500 mg účinnej zložky.
Hodnoty testov
In vitro aktivita zlúčeniny z príkladov bola stanovená nasledujúcimi postupmi.
Aktivita inhibície angiotcnzín konvertujúceho enzýmu (ACE)bola stanovená podľa postupu Cushmana a spol. Biochem. Pharmacol.,sv.29, str. 1637 - 1648 (1971). Králičí pľúcny extrakt bol použitý ako zdroj ACE a rýchlosť tvorby hippurovej kyseliny zo substrátu hippuryl-L-histidyl-L-leucínu (HHL) bola sledovaná. Po 30 minútach inkubácie testovanej zlúčeniny s enzýmom a substrátom, bola reakcia ukončená HC1. Bol pridaný etylacetát. Etylacetátová vrstva bola odstránená a odparená do sucha, vytvorená kyselina hippurová bola rekonštituovaná vo vode a jej koncentrácia bola stanovená spektrofotometricky. Koncentrácia testovanej zlúčeniny, ktorá inhibuje reakciu z 50 % (IC50) bola stanovená.
Obličková neutrálna endopeptidázová aktivita (KNEP) bola stanovená oproti čistenej krysej obličkovej neutrálnej endopeptidáze pri použití fluorimetrického stanovenia. Toto stanovenie je založené na štiepení fluorescentného danyslat tripeptidu Dns-Gly-Phe-Arg za vzniku Dns-Gly. Posledný uvedený sa extrahuje z okyslenej zmesi etylacetátom a je silne fluorcscentný. Testované zlúčeniny boli preinkubované 10 minút s enzýmovým prípravkom pred iniciovaním reakcie prídavkom substrátu. Po 30 minútach inkubácie bola reakcia ukončená HC1. Dns-Gly bol extrahovaný do etylacetátu. Relatívna fluorescentná intenzita extraktu bola meraná pri použití spektrometra. Koncentrácia testovanej zlúčeniny, ktorá inhibuje reakciu z 50 % (IC50) bola stanovená.
Testovaná zlúčenina KNEP (IC50)(nM) ACE (ICjoXnM)
príklad 1 1 17
príklad 2 64 13
príklad 3 1,9 120
príklad 4 180 33
príklad 5 2,1 4,1
príklad 6 6,6 12
príklad 7 380 73
príklad 8 2,7 120
príklad 9 2 44
príklad 10 82 22
príklad 11 12 16
príklad 12 1,1 5,5
príklad 13 0,6 4,4
príklad 14 3,1 28
príklad 15 92 26
príklad 16 2,4 100
príklad 17 240 67
príklad 18 2000 29
príklad 19 40 22
príklad 20 0,9 33
príklad 21 99 40
príklad 22 560 300
príklad 23 68 310
príklad 24 14 280
príklad 25 880 24
príklad 26 8,5 35
príklad 27 prekurzor liečiva podľa príkladu 6
príklad 28 prekurzor liečiva podľa príkladu 6
príklad 29 prekurzor liečiva podľa príkladu 6
príklad 30 prekurzor liečiva podľa príkladu 6
príklad 31 1,2 31
príklad 32 120 13
príklad 33 5,2 36
príklad 34 1100 25
príklad 35 20 10
príklad 36 64 7,4
príklad 37 40 12
príklad 38 140 23
príklad 39 1600 17
príklad 40 15 400
príklad 41 32 480
príklad 42 69 16
príklad 43 2,2 14
príklad 44 2,4 36
príklad 45 1,3 36
príklad 48 66 16
príklad 49 480 16
príklad 50 36 5,4
príklad 51 32 25
príklad 55 18 5
príklad 56 14 12
príklad 58 prekurzor liečiva podľa príkladu 6
príklad 59 7,2 6,3
príklad 60 860 180
príklad 61 2000 63
príklad 62 260 10
In vivo ACE inhibičná aktivita pre určité zlúčeniny bola tiež stanovená v modifikácii postupu Rubína a spol., J. Pharmacol. Exper. Ther., Vol.204, str.271 - 280 (1978). Samcovi krýs Sprague-Dawey boli implantované katétre do abdominálnej aorty a vena caval. Za dva alebo viac týždňov neskôr bol sledovaný aortálny tlak priamo pri bdiacich krysách. Tlakové odozvy na i. v. injekcie angiotenzínu I (AI), 310 mg/kg, boli získané pred (kontrola) a v 2 až 30 minútových intervaloch až do 6 hodín po i. v. podaní testovaných zlúčenín. Inhibícia (% zmena od kontroly) AI tlakovej odozvy bola stanovená v každom intervale. Krivka dávkovej odozvy bola konštruovaná pri použití časového bodu po každej dávke, majúceho maximum inhibície. Stredná účinná dávka (ED50) bola stanovená interpoláciou.
Testovaná zlúčenina
AI tlak
i.v.EDJ0
3,96
0,143
0,517
0,020 väčšie ako 5
0,838
0,071
0,799
5,84
0,262
1,22
4,4
0,49 väčšie ako 5 menšie ako 5
0,27
1,2
0,015
2,14
0,12
0,04
0,06
0,27
0,33
1,34
13,3
0,23
0,011
0,13 (krátke trvanie)
0,06
0,08
0,12
0,28 (dobré trvanie)
0,11

Claims (7)

1. Sulfanylalkanoyl, acylsulfanylalkanoyl a ditioalkanoyllaktámové zlúčeniny všeobecného vzorca (I) o
II
Ri --- S --- (CH2)n --- C --- C --- x2 (I) / V R19 R2 a ich farmaceutický prijateľné soli, kde o
II
Ri je vodík, R3- c - alebo R1B - S
R2 a R19 sú nezávisle od seba vybrané zo skupiny, zahrnujúcej vodík,C|.C7 alkyl, C6-C10 aryl-(CH2)m a heteroaryl-(CH2)m-, kde heteroaryl je monocyklický 5 alebo 6 členný heteroaryl, ktorý obsahuje jeden heteroatóm vybratý z O,N a S, n je nula alebo jeden s tou podmienkou, že n musí byť nula, keď R2 a R19 sú obidva iné než vodík, m je nula alebo celé číslo od 1 do 6,
R3 je C].C7 alkyl alebo C6-C10 aryl-(CH2)ni,
Ris je C, C7 alkyl, X] má vzorec (VI) (VIII) (IX) (X) (XII) (XIII)
R6 je vybraný zo skupiny, zahrnujúcej vodík, C j.C- alkyl, hydroxysubstituovaný Cj.C7 alkyl, C3.C7 alkenyl, C3.C7 cykloalkyl-(CH2)m- a C6-Clo aryl-(CH2)m-,
R7 je vybraný zo skupiny, zahrnujúcej vodík a CrC7 alkyl, Rg je vybraný zo skupiny zahrnujúcej vodík a C6-C|q aryl•(CH2)m-,
Rio je vybraný zo skupiny zahrnujúcej vodík, C).C7 alkyl a C5-C|o aryl-(CH2)m-, b je nula alebo jeden, q je 2 alebo 3, v je jeden alebo dva, w je jeden alebo dva,
Y! je -CH2-, -CH2-CH2-, O alebo S,
O
I
Y2 jc-CH2-, - S - alebo S,
Z je O alebo dva vodíky,
R12 je vodík alebo Cj.C7 alkyl a
Ri? je C,.C7 alkyl.
2. Laktámová zlúčenina všeobecného vzorca (I) podľa nároku 1, kde
O
II
R! je vodík, ^3' c ' alebo R18-S-,
R3 je alkyl s 1 až 4 atómami uhlíka alebo fenyl,
RiS je alkyl s 1 až 4 uhlíkmi, n je nula alebo jeden,
R2 je C6-C|0 aryl-CH2-,(2-tienyl)metyl alebo priamy, alebo rozvetvený alkylový reťazec s 1 až 7 uhlíkmi a
Rio je vodík.
3. Laktámová zlúčenina všeobecného vzorca (I) podľa nároku 2, kde
X, má vzorec (III) a q je dve alebo tri,
R6 a R7 sú obidva vodík alebo sú obidva mety], alebo R6 je alkyl s 1 až 4 uhlíkmi, alkyl s 1 až 4 uhlíkmi substituovaný hydroxyskupinou alebo alkenylovú skupinu s 3 až 5 uhlíkmi, s jednou dvojitou väzbou a R7 je vodík,
Rio je vodík alebo alkyl s 1 až 4 uhlíkmi, b je nula alebo jeden a
R12 je vodík alebo alkyl s 1 až 4 uhlíkmi alebo
Xi má vzorec (IV) a
Rs je vodík alebo fenyl,
R6 a R7 sú obidva vodík alebo sú obidva metyl, alebo R(, je alkyl s 1 až 4 uhlíkmi, alebo fenyl a R7 je vodík,
Rio je vodík alebo alkyl s 1 až 4 uhlíkmi, b je nula a
Ruje vodík alebo alkyl s 1 až 4 uhlíkmi, alebo
X, má vzorec (V) a
R(, a R7 sú obidva vodík alebo sú obidva metyl, alebo Re je alkyl s 1 až 4 uhlíkmi, alebo fenyl a R7 je vodík,
Rio je vodík alebo alkyl s 1 až 4 uhlíkmi, b je nula a
R,2 je vodík alebo alkyl s 1 až 4 uhlíkmi, alebo
Xi má vzorec (VI) a
Y] je O, S alebo CH2,
R6 a R7 sú obidva vodík alebo R6 je alkyl s 1 až 4 uhlíkmi a R7 je vodík,
Rlo je vodík alebo alkyl s 1 až 4 uhlíkmi, b jc nula a
Ruje vodík alebo alkyl s 1 až 4 uhlíkmi, alebo
Xj má vzorec (VIII) a
Rs a R7 sú obidva vodík alebo jeden je vodík a druhý je alkyl s 1 až 4 uhlíkmi,
Rio je vodík alebo alkyl s 1 až 4 uhlíkmi, b je nula a
R12 je vodík alebo alkyl s 1 až 4 uhlíkmi alebo
X! má vzorec (IX) a v je jeden, alebo dva, w je jeden, alebo dva, Y2 je S alebo CH2, Ruje vodík alebo alkyl s 1 až 4 uhlíkmi, alebo Xj má vzorec (X) a
Ruje vodík alebo alkyl s 1 až 4 uhlíkmi, alebo Xi má vzorec (XII) a
Z je O alebo dva vodíky,
R]7 je alkyl s 1 až 4 uhlíkmi,
Rl0 je vodík alebo alkyl s 1 až 4 uhlíkmi, b je nula a
Ruje vodík alebo alkyl s 1 až 4 uhlíkmi, alebo X] má vzorec (XIII) a
Rio jc vodík alebo alkyl s 1 až 4 uhlíkmi, b je nula a
R12 je vodík alebo alkyl s 1 až 4 uhlíkmi.
4. Laktámová zlúčenina všeobecného vzorca (I) podľa nároku 3, kde
Ri je vodík, n je nula,
R2 je benzyl, (2-tienyl)metyl alebo priamy, alebo rozvetvený alkyl s 1 až 5 uhlíkmi.
5. Laktámová zlúčenina všeobecného vzorca (I) podľa nároku 4, kde
X( má vzorec (III) a q je dva,
Rí a R7 sú obidva metyl alebo R6 je propyl, allyl alebo 2-hydroxyetyl a R7 je vodík, b je nula,
Rio je vodík alebo metyl a
Rl2 je vodík alebo Xj má vzorec (IV) a b je nula,
R8 je vodík alebo fenyl,
Rs a R7 sú obidva vodík alebo je R(, fenyl a R7 je vodík a Rio a R12 sú obidva vodík alebo
X] má vzorec (V) a
R6 je fenyl a R7 je vodík, b je nula a
Rio a R12 sú obidva vodík alebo
X, má vzorec (VI) a
YiJcCH2, b je nula a R6, R7, R,o a R12 sú všetky vodík alebo Xi má vzorec (IX) a v je dva, w je jeden alebo dva, Y2 je S alebo CH2 a R]2je vodík.
6. Laktámová zlúčenina všeobecného vzorca (I) podľa nároku 1, vybraná zo skupiny zahrnujúcej kyselinu [S-(R*,R*)]-2,3,4,5-tetrahydro-3-[(2-sulfanyl-1 -oxo-hexyl)amino]-2-oxo-1 H-benzazepín-1 -octovú, kyselinu [S-(R*,R*)]-2,3,4,5-tetrahydro-3-[(2-sulfanyl-l-oxo-4-mctylpentyľ)amino] -2-oxo-1 H-benzazepín-1 -octovú, kyselinu [S-(R ,R*)]-2,3,4,5-tetrahydro-3-[(2-sulfanyl-l-oxo-3 -fény lpropyljamino] -2-oxo-1 H-benzazepín-1 -octovú, kyselinu [4S-[4a,7a(R*), 10afl]]-dekahydro-7-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-fenylpropyl)amino]-6-oxopyrido[l,2-a]-azepín-4-karboxylovú, kyselinu [3R-[3a,6a(S*),9aB]]-oktahydro-6-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-fenylpropyl)amino]-5-oxotiazolo[3,2-a]-azepín-3-karboxylovú, kyselinu [3S-[l(R*),3a(R*),7B]]-hexahydro-a-metyl-3-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-fenylpropyl)amino]-3-oxo-7-propyl-lH-azepín-1-octovú, kyselinu [6(S)]-hexahydro-6-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-fenylpropyl)-amino]-2,2-dimetyl-7-oxo-lH-azepín-l-octovú, kyselinu [3S-[3a(R*),7fi]]-hexahydro-3-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-fenylpropyl)amino]-2-oxo-7-propyl-lH-azepín-l-octovú a kyselinu [3S-[3a(R*),7B]]-hexahydro-3-[(2-sulfanyl-l-oxo-3-fenylpropyl)amino]-2-oxo-7-(2-propenyl)-1 H-azepín-1 -octovú
7. Farmaceutický prípravok, vhodný na liečenie hypertenzie, vyznačujúci sa tým, že obsahuje farmaceutický prijateľný nosič a sulfanylalkanoyl, acylsulfanylalkanoyl alebo ditioalkanoyllaktám všeobecného vzorca (I) o
II
R1 -- s -- (CH2)n — c — C -- Xj (I) / \ K19 R2 alebo jeho farmaceutický prijateľnú soľ, kde R],R2,Ri9,n a X i majú význam definovaný v nároku 1.
SK499-93A 1992-05-18 1993-05-18 Sulfanylalkanoyl, acylsulfanylalkanoyl a ditioalkanoyllaktámové zlúčeniny s ACE a NEP inhibičnou aktivitou a farmaceutický prípravok s ich obsahom SK283556B6 (sk)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US88466492A 1992-05-18 1992-05-18

Publications (2)

Publication Number Publication Date
SK49993A3 SK49993A3 (en) 1994-08-10
SK283556B6 true SK283556B6 (sk) 2003-09-11

Family

ID=25385092

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SK499-93A SK283556B6 (sk) 1992-05-18 1993-05-18 Sulfanylalkanoyl, acylsulfanylalkanoyl a ditioalkanoyllaktámové zlúčeniny s ACE a NEP inhibičnou aktivitou a farmaceutický prípravok s ich obsahom

Country Status (28)

Country Link
EP (2) EP0599444B1 (sk)
JP (1) JP3487611B2 (sk)
KR (2) KR100288722B1 (sk)
CN (1) CN1039008C (sk)
AT (1) ATE162800T1 (sk)
AU (2) AU659550B2 (sk)
BR (1) BR1101081A (sk)
CA (1) CA2096460C (sk)
CY (1) CY2093B1 (sk)
CZ (1) CZ289824B6 (sk)
DE (1) DE69316717T2 (sk)
DK (1) DK0599444T3 (sk)
ES (1) ES2111712T3 (sk)
FI (1) FI103337B (sk)
GR (1) GR3026665T3 (sk)
HK (1) HK1003597A1 (sk)
HU (1) HU217078B (sk)
IL (1) IL105729A (sk)
MX (1) MX9302876A (sk)
MY (1) MY111370A (sk)
NO (1) NO304372B1 (sk)
NZ (1) NZ247642A (sk)
PL (1) PL173036B1 (sk)
RU (1) RU2124503C1 (sk)
SG (1) SG54138A1 (sk)
SK (1) SK283556B6 (sk)
TW (1) TW290544B (sk)
ZA (1) ZA933461B (sk)

Families Citing this family (81)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5430145A (en) * 1990-10-18 1995-07-04 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. Mercaptoacetylamide derivatives useful as inhibitors of enkephalinase and ace
US5457196A (en) * 1991-09-27 1995-10-10 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. 2-substituted indane-2-carboxyalkyl derivatives useful as inhibitors of enkephalinase and ACE
US5455242A (en) * 1991-09-27 1995-10-03 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. Carboxyalkyl tricyclic derivatives useful as inhibitors of enkephalinase and ace
ZA927211B (en) * 1991-09-27 1993-03-24 Merrell Dow Pharma Novel carboxyalkyl derivatives useful as inhibitors of enkephalinase and ACE.
ATE155143T1 (de) * 1991-09-27 1997-07-15 Merrell Pharma Inc 2-substituierte indan-2-mercaptoacetylamid- verbindungen mit enkephalinase und ace- hemmwirkung
US5250679A (en) * 1991-10-18 1993-10-05 Genentech, Inc. Nonpeptidyl platelet aggregation inhibitors having specificity for the GPIIb III.sub. receptor
US5674863A (en) * 1991-10-18 1997-10-07 Genentech, Inc. Nonpeptidyl integrin inhibitors having specificity for the GPIIb IIIa receptor
CA2130116C (en) * 1992-02-14 1998-04-07 Gary A. Flynn Aminoacetylmercaptoacetylamide derivatives useful as inhibitors of enkephalinase and ace
US5552397A (en) * 1992-05-18 1996-09-03 E. R. Squibb & Sons, Inc. Substituted azepinone dual inhibitors of angiotensin converting enzyme and neutral exdopeptidase
US5420271A (en) * 1992-08-24 1995-05-30 Merrell Dow Pharmaceuticals, Inc. 2-substituted indane-2-mercaptoacetylamide tricyclic derivatives useful as inhibitors of enkephalinase
US5504080A (en) * 1992-10-28 1996-04-02 Bristol-Myers Squibb Co. Benzo-fused lactams
GB9310075D0 (en) * 1993-05-17 1993-06-30 Fujisawa Pharmaceutical Co New mercapto-amide derivatives,processes for the preparation thereof and pharmaceutical composition comprising the same
CA2140553A1 (en) * 1993-06-11 1994-12-22 Hitoshi Oinuma Amino acid derivative
ES2076096B1 (es) * 1993-07-14 1996-03-16 Squibb & Sons Inc Compuestos inhibidores de la enzima convertidora de angiotensinas y dela endopeptidasa neutra, y metodos para prepararlos.
US5525723A (en) * 1993-11-18 1996-06-11 Bristol-Myers Squibb Co. Compounds containing a fused multiple ring lactam
US5750521A (en) * 1994-02-14 1998-05-12 Hoechst Marion Roussel Inc. Mercaptoacetylamide disulfide derivatives useful as inhibitors of enkephalinase and ACE
EP0746566A1 (en) * 1994-02-14 1996-12-11 Merrell Pharmaceuticals Inc. Novel 2-substituted indane-2-mercaptoacetylamide disulfide derivatives useful as inhibitors of enkephalinase and ace
ES2168355T3 (es) * 1994-02-14 2002-06-16 Merrell Pharma Inc Derivados de bisulfuro de indano-2-mercaptoacetilamida utiles como inhibidores de la encefalinasa.
US5530013A (en) * 1994-02-14 1996-06-25 American Home Products Corporation Venlafaxine in the inducement of cognition enhancement
EP0750631B1 (en) * 1994-02-14 2000-04-05 Merrell Pharmaceuticals Inc. Novel mercaptoacetylamido 1,3,4,5-tetrahydro-benzo(c)azepin-3-one disulfide derivatives useful as inhibitors of enkephalinase and ace
US5484783A (en) * 1994-03-24 1996-01-16 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. Hypocholesterolemic, antiatherosclerotic and hypotriglyceridemic mercaptoacetylamide and benzazapine derivatives
PT751783E (pt) * 1994-03-24 2000-05-31 Merrell Pharma Inc Derivados aminoacetilmercapto hipocolesterolemicos antiateroscleroticos e hipotrigliceridemicos
CN1144482A (zh) * 1994-03-24 1997-03-05 默里尔药物公司 降低胆固醇、抗动脉粥样硬化和降低甘油三酯的巯基乙酰胺二硫化物衍生物
PT719779E (pt) * 1994-07-18 2004-04-30 Eisai Co Ltd Derivado de tiazolo¬3,2|azepina substituido
US5641880A (en) * 1994-12-21 1997-06-24 Hoechst Marion Roussel, Inc. Processes for preparing intermediates of inhibitors of enkephalinase and angiotensin converting enzyme and intermediates thereof
MX9704677A (es) * 1994-12-21 1997-09-30 Hoechst Marion Roussel Inc Procedimientos novedosos para preparar intermediarios de inhibidores de encefalinasa y enzima de conversion a angiotensina y sus intermediarios.
CN1049830C (zh) * 1995-01-13 2000-03-01 李勤 一种治疗癌痛的热力敷
US5587375A (en) * 1995-02-17 1996-12-24 Bristol-Myers Squibb Company Azepinone compounds useful in the inhibition of ACE and NEP
DE19510566A1 (de) * 1995-03-23 1996-09-26 Kali Chemie Pharma Gmbh Benzazepin-, Benzoxazepin- und Benzothiazepin-N-essigsäurederivate sowie Verfahren zu ihrer Herstellung und diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel
US5877313A (en) 1995-05-17 1999-03-02 Bristol-Myers Squibb Benzo-fused azepinone and piperidinone compounds useful in the inhibition of ACE and NEP
US5635504A (en) * 1995-06-07 1997-06-03 Bristol-Myers Squibb Co. Diazepine containing dual action inhibitors
US5650408A (en) * 1995-06-07 1997-07-22 Karanewsky; Donald S. Thiazolo benzazepine containing dual action inhibitors
WO1997017972A1 (fr) * 1995-11-13 1997-05-22 Eisai Co., Ltd. Composition abaissant le taux de cholesterol
US6777550B1 (en) 1996-04-12 2004-08-17 Bristol-Myers Squibb Company N-formyl hydroxylamine containing compounds useful as ACE inhibitors and/or NEP inhibitors
JP2000511882A (ja) * 1996-04-12 2000-09-12 ブリストル―マイヤーズ・スクイブ・カンパニー Ａｃｅ阻害剤及び／またはｎｅｐ阻害剤として有用なｎ―ホルミルヒドロキシルアミン化合物
US6117896A (en) 1997-02-10 2000-09-12 Molecumetics Ltd. Methods for regulating transcription factors
US6340752B1 (en) * 1998-01-06 2002-01-22 Bristol-Myers Squibb Co. Deprotection and recrystallization processes
AU750122C (en) 1998-06-17 2003-02-27 Bristol-Myers Squibb Company Preventing cerebral infarction through administration of ADP-receptor antiplatelet and antihypertensive drugs in combination
CA2358955A1 (en) * 1998-12-31 2000-07-13 Aventis Pharmaceuticals Inc. N-carboxymethyl substituted benzolactams as inhibitors of matrix metalloproteinase
US6770640B1 (en) 1998-12-31 2004-08-03 Aventis Pharmaceuticals Inc. 1-Carboxymethyl-2-oxo-azepan derivatives useful as selective inhibitors of MMP-12
US6262080B1 (en) 1998-12-31 2001-07-17 Avantis Pharmaceuticals Inc. 3-(thio-substitutedamido)-lactams useful as inhibitors of matrix metalloproteinase
EP1251115A4 (en) 2000-01-25 2008-05-14 Kaneka Corp METHOD FOR THE PRODUCTION OF OPTICALLY ACTIVE IN 2-POSITION OF SUBSTITUTED CARBOXYLIC ACIDS
US6509330B2 (en) 2000-02-17 2003-01-21 Bristol-Myers Squibb Company Hydroxamic acid containing compounds useful as ACE inhibitors and/or NEP inhibotors
DE10020818A1 (de) 2000-04-28 2001-10-31 Degussa 2,6-Diamino-6-methyl-heptansäure und Derivate, Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung
IL155128A0 (en) * 2000-09-29 2003-10-31 Bristol Myers Squibb Co Dynamic resolution of isomes and resolved isomers
GB0119305D0 (en) 2001-04-12 2001-10-03 Aventis Pharma Gmbh Mercaptoacetylamide derivatives,a process for their preparation and their use
WO2002094787A1 (en) * 2001-05-23 2002-11-28 Ucb, S.A. 2-oxo-piperidinyl- and 2-oxo-azepanyl alkanoic acid derivativ es for the treatment of epilepsy and other neurological disorders
AU2002348276A1 (en) 2001-11-16 2003-06-10 Bristol-Myers Squibb Company Dual inhibitors of adipocyte fatty acid binding protein and keratinocyte fatty acid binding protein
JP2005526722A (ja) 2002-02-14 2005-09-08 ミリアド・ジェネティックス・インコーポレイテッド β−シートミメティックならびにそれに関連する組成物および方法
IL163666A0 (en) 2002-02-22 2005-12-18 New River Pharmaceuticals Inc Active agent delivery systems and methods for protecting and administering active agents
US7045653B2 (en) 2002-12-23 2006-05-16 Pfizer, Inc. Pharmaceuticals
US7459474B2 (en) 2003-06-11 2008-12-02 Bristol-Myers Squibb Company Modulators of the glucocorticoid receptor and method
US7371759B2 (en) 2003-09-25 2008-05-13 Bristol-Myers Squibb Company HMG-CoA reductase inhibitors and method
US7420059B2 (en) 2003-11-20 2008-09-02 Bristol-Myers Squibb Company HMG-CoA reductase inhibitors and method
US7273881B2 (en) 2004-01-16 2007-09-25 Bristol-Myers Squibb Company Modulators of glucocorticoid receptor, AP-1, and/or NF-κB activity and use thereof
US20100190688A1 (en) * 2004-07-12 2010-07-29 Bin Chao Tetrapeptide analogs
US7888381B2 (en) 2005-06-14 2011-02-15 Bristol-Myers Squibb Company Modulators of glucocorticoid receptor, AP-1, and/or NF-κB activity, and use thereof
US7592461B2 (en) 2005-12-21 2009-09-22 Bristol-Myers Squibb Company Indane modulators of glucocorticoid receptor, AP-1, and/or NF-κB activity and use thereof
US7795291B2 (en) 2006-07-07 2010-09-14 Bristol-Myers Squibb Company Substituted acid derivatives useful as anti-atherosclerotic, anti-dyslipidemic, anti-diabetic and anti-obesity agents and method
CN101573340A (zh) 2006-11-01 2009-11-04 百时美施贵宝公司 糖皮质激素受体AP-1和/或NF-κB活性的调节剂及其用途
US7994190B2 (en) 2006-11-01 2011-08-09 Bristol-Myers Squibb Company Modulators of glucocorticoid receptor, AP-1, and/or NF-κB activity and use thereof
WO2008057862A2 (en) 2006-11-01 2008-05-15 Bristol-Myers Squibb Company MODULATORS OF GLUCOCORTICOID RECEPTOR, AP-1, AND/OR NF-&kappav;B ACTIVITY AND USE THEREOF
EA020466B1 (ru) 2007-06-04 2014-11-28 Синерджи Фармасьютикалз Инк. Агонисты гуанилатциклазы, пригодные для лечения желудочно-кишечных нарушений, воспаления, рака и других заболеваний
US8969514B2 (en) 2007-06-04 2015-03-03 Synergy Pharmaceuticals, Inc. Agonists of guanylate cyclase useful for the treatment of hypercholesterolemia, atherosclerosis, coronary heart disease, gallstone, obesity and other cardiovascular diseases
JP4718534B2 (ja) * 2007-11-09 2011-07-06 カルピス株式会社 Ｆｉｓｃｈｅｒ比低下抑制剤
EP2810951B1 (en) 2008-06-04 2017-03-15 Synergy Pharmaceuticals Inc. Agonists of guanylate cyclase useful for the treatment of gastrointestinal disorders, inflammation, cancer and other disorders
WO2009158380A1 (en) 2008-06-24 2009-12-30 Bristol-Myers Squibb Company Cyclopentathiophene modulators of the glucocorticoid receptor, ap-1, and/or nf-kappa b activity and use thereof
ES2624828T3 (es) 2008-07-16 2017-07-17 Synergy Pharmaceuticals Inc. Agonistas de la guanilato ciclasa útiles para el tratamiento de trastornos gastrointestinales, inflamación, cáncer y otros
US9468637B2 (en) 2009-05-13 2016-10-18 Intra-Cellular Therapies, Inc. Organic compounds
US9616097B2 (en) 2010-09-15 2017-04-11 Synergy Pharmaceuticals, Inc. Formulations of guanylate cyclase C agonists and methods of use
US8993631B2 (en) 2010-11-16 2015-03-31 Novartis Ag Method of treating contrast-induced nephropathy
US9801882B2 (en) 2013-02-17 2017-10-31 Intra-Cellular Therapies, Inc. Phosphodiesterase-1 inhibitors and their use in treatment of cardiovascular diseases
CA2905435A1 (en) 2013-03-15 2014-09-25 Synergy Pharmaceuticals Inc. Compositions useful for the treatment of gastrointestinal disorders
CA2905438A1 (en) 2013-03-15 2014-09-25 Synergy Pharmaceuticals Inc. Agonists of guanylate cyclase and their uses
PT3004138T (pt) 2013-06-05 2024-06-18 Bausch Health Ireland Ltd Agonistas ultrapuros de guanilato ciclase c, método de produção e utilização dos mesmos
WO2015027021A1 (en) 2013-08-22 2015-02-26 Bristol-Myers Squibb Company Imide and acylurea derivatives as modulators of the glucocorticoid receptor
WO2016022893A1 (en) 2014-08-07 2016-02-11 Intra-Cellular Therapies, Inc. Organic compounds
US10961258B2 (en) 2015-12-21 2021-03-30 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited Heterocyclic amides as kinase inhibitors
JP2019510039A (ja) 2016-03-28 2019-04-11 イントラ−セルラー・セラピーズ・インコーポレイテッドＩｎｔｒａ−Ｃｅｌｌｕｌａｒ Ｔｈｅｒａｐｉｅｓ， Ｉｎｃ． 新規組成物および方法
CN106674228B (zh) * 2016-12-09 2018-12-04 河南农业大学 多元杂环化合物及其制备方法和用途
EP3746081A4 (en) 2018-01-31 2021-10-27 Intra-Cellular Therapies, Inc. INNOVATIVE USES

Family Cites Families (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4105776A (en) 1976-06-21 1978-08-08 E. R. Squibb & Sons, Inc. Proline derivatives and related compounds
US4339600A (en) 1976-05-10 1982-07-13 E. R. Squibb & Sons, Inc. Compounds for alleviating angiotensin related hypertension
US4629787A (en) 1980-08-18 1986-12-16 Merck & Co., Inc. Substituted caprolactam derivatives as antihypertensives
US4587050A (en) 1980-08-18 1986-05-06 Merck & Co., Inc. Substituted enantholactam derivatives as antihypertensives
US4415496A (en) 1981-03-23 1983-11-15 Merck & Co., Inc. Bicyclic lactams
US4587238A (en) 1981-07-06 1986-05-06 Merck & Co., Inc. Substituted caprylolactam derivatives as anti-hypertensives
EP0094283B1 (fr) 1982-05-04 1985-11-21 Lipha, Lyonnaise Industrielle Pharmaceutique Forme médicamenteuse de théophylline à action prolongée
US4873235A (en) 1982-06-01 1989-10-10 Merck & Co., Inc. Benzofused lactams as antihypertensives
US4473575A (en) 1982-07-19 1984-09-25 Ciba-Geigy Corporation 3-Amino-(1)-benzazepin-2-one-1-alkanoic acids
US4465679A (en) 1983-01-31 1984-08-14 Usv Pharmaceutical Corporation 1,2-Diaza-3-one compounds, their use in treating hypertension and pharmaceutical compositions thereof
US4470988A (en) 1983-02-10 1984-09-11 Ciba-Geigy Corporation Benzazocinone and benzazoninone derivatives, and their pharmaceutical use
US4477464A (en) 1983-02-10 1984-10-16 Ciba-Geigy Corporation Hetero-benzazepine derivatives and their pharmaceutical use
US4711884A (en) 1983-02-28 1987-12-08 E. R. Squibb & Sons, Inc. Thiazine and thiazepine containing compounds
US4460579A (en) 1983-02-28 1984-07-17 E. R. Squibb & Sons, Inc. Thiazine and thiazepine containing compounds
US4617301A (en) * 1983-06-22 1986-10-14 Merck & Co., Inc. Sulfoxide and sulfone derivatives of bicyclic lactams as antihypertensives
US4539150A (en) 1983-06-29 1985-09-03 Mitsui Toatsu Chemicals, Inc. Benzothiazepine derivatives and their methods of preparation
IL72523A (en) 1983-08-12 1988-06-30 Takeda Chemical Industries Ltd 3-amino-4-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-1,5-benzoxazepine derivatives,their production and pharmaceutical compositions containing them
DE3402310A1 (de) 1984-01-24 1985-07-25 Bayer Ag, 5090 Leverkusen Harte, geschlossenzellige, flammfeste polyurethanschaumstoffe
US4699905A (en) 1984-04-10 1987-10-13 Sankyo Company, Limited Perhydrothiazepine derivatives, their preparation and their therapeutic use
JPH0637473B2 (ja) 1985-10-11 1994-05-18 三共株式会社 ラクタム化合物
US4801609B1 (en) 1987-03-27 1993-11-09 Mercapto-acylamino acid antihypertensives
CA2053340C (en) * 1990-10-18 2002-04-02 Timothy P. Burkholder Mercaptoacetylamide derivatives useful as inhibitors of enkephalinase and ace

Also Published As

Publication number Publication date
FI932249A0 (fi) 1993-05-18
NO931795D0 (no) 1993-05-18
DE69316717T2 (de) 1998-08-27
MX9302876A (es) 1993-12-01
CZ93693A3 (en) 1993-12-15
CA2096460C (en) 2004-03-16
CY2093B1 (en) 2002-04-05
NO304372B1 (no) 1998-12-07
EP0599444B1 (en) 1998-01-28
HU9301448D0 (en) 1993-09-28
PL173036B1 (pl) 1998-01-30
EP0783002A2 (en) 1997-07-09
AU2852595A (en) 1995-10-19
IL105729A0 (en) 1993-09-22
HUT68391A (en) 1995-06-28
JPH0656790A (ja) 1994-03-01
HK1003597A1 (en) 1998-10-30
PL298988A1 (en) 1994-01-24
DE69316717D1 (de) 1998-03-05
HU217078B (hu) 1999-11-29
KR100288722B1 (ko) 2001-05-02
EP0599444A1 (en) 1994-06-01
FI103337B1 (fi) 1999-06-15
JP3487611B2 (ja) 2004-01-19
FI103337B (fi) 1999-06-15
ES2111712T3 (es) 1998-03-16
CA2096460A1 (en) 1993-11-19
ZA933461B (en) 1993-12-14
FI932249A (fi) 1993-11-19
SK49993A3 (en) 1994-08-10
NO931795L (no) 1993-11-19
CN1084849A (zh) 1994-04-06
GR3026665T3 (en) 1998-07-31
TW290544B (sk) 1996-11-11
NZ247642A (en) 1995-09-26
CZ289824B6 (cs) 2002-04-17
ATE162800T1 (de) 1998-02-15
CN1039008C (zh) 1998-07-08
BR1101081A (pt) 2000-03-28
EP0783002A3 (en) 1997-07-30
SG54138A1 (en) 1998-11-16
MY111370A (en) 1999-12-31
IL105729A (en) 1998-01-04
DK0599444T3 (da) 1998-09-21
KR930023349A (ko) 1993-12-18
AU3862793A (en) 1993-11-25
AU659550B2 (en) 1995-05-18
RU2124503C1 (ru) 1999-01-10
KR100277453B1 (ko) 2000-12-15
AU674629B2 (en) 1997-01-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
SK283556B6 (sk) Sulfanylalkanoyl, acylsulfanylalkanoyl a ditioalkanoyllaktámové zlúčeniny s ACE a NEP inhibičnou aktivitou a farmaceutický prípravok s ich obsahom
US5859239A (en) Mercaptoalkanoylamino and acylmercaptoalkanoylamino benzoxazepines and benzothiazepines
EP0640617B1 (en) Substituted azepino (2,1-a)isoquinoline compounds
SK282529B6 (sk) Merkaptoalkanoylový a acylmerkaptoalkanoylový derivát oxazepínu, tiazínu a tiazepínu, spôsob jeho výroby, medziprodukt na jeho výrobu a farmaceutický prípravok, ktorý ho obsahuje
AU758160B2 (en) Novel amide derivatives
EP0750631B1 (en) Novel mercaptoacetylamido 1,3,4,5-tetrahydro-benzo(c)azepin-3-one disulfide derivatives useful as inhibitors of enkephalinase and ace
US5856477A (en) Azepinones useful as intermediates in the preparation of inhibitors of angiotensin converting enzyme and neutralendopeptidase
EP0728746B1 (en) Azepinone compounds useful in the inhibition of ACE and NEP
AU1551295A (en) Mercaptoacetylamide disulfide derivatives useful as inhibitors of enkephalinase and ace
HU218482B (hu) Tio- és karbonil-amino-csoportot tartalmazó oldallánccal helyettesített heterociklusos karbonsavszármazékok és az ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények
AU1401195A (en) Novel 2-substituted indane-2-mercaptoacetylamide disulfide derivatives useful as inhibitors of enkephalinase and ace
NZ278501A (en) Pyridobenzazepines and analogs with dipeptide structure; medicaments