SK282949B6

SK282949B6 - Stabilný vodný prostriedok, stabilný vodný roztok, výrobok, spôsob prípravy stabilného vodného prostriedku a sterilizovaná plniaca nádoba

Info

Publication number: SK282949B6
Application number: SK439-97A
Authority: SK
Inventors: Pui-Ho C. Yuen; Douglas F. Kline
Original assignee: Schering Corporation
Priority date: 1994-10-11
Filing date: 1995-10-10
Publication date: 2003-01-09
Also published as: FI971486A; HK1008813A1; CZ110497A3; WO1996011018A1; NZ294464A; DE69531314D1; DE69531314T2; KR970706017A; CA2201749A1; BR9509313A; ES2148568T3; EP0970703B1; EP0777495A1; NO320604B1; DE69518084D1; JP3978228B2; UA42028C2; MX9702578A; PT777495E; DE69518084T2

Abstract

Stabilný vodný prostriedok obsahuje interferón typu alfa, ako alfa-2a-interferón a alfa-2b-interferón, tlmivý roztok na udržanie pH v rozsahu od 4,5 do 7,1, polysorbát 20 alebo 80 ako stabilizátor, edetát disodný ako chelatačné činidlo, chlorid sodný ako tonizačné činidlo a m-kresol ako antibakteriálne konzervačné činidlo, ktorý si udržiava vysokú chemickú, fyzikálnu a biologickú stabilitu interferónu typu alfa počas skladovania, najmenej 24 mesiacov. Spôsob prípravy tohto prostriedku zahrnuje zmiešanie uvedených zložiek s dostatočným množstvom vody na vytvorenie vodného roztoku, kde stabilizátorom je polysorbát 20 a nie je prítomný manitol, ktorý je účinný ako napučiavacie činidlo. Vodný roztok sa pripravuje a udržiava v neprítomnosti rozpusteného kyslíka, ktorého množstvo nie je väčšie ako 0,25 ppm.ŕ

Description

Oblasť techniky

Vynález sa týka stabilného vodného prostriedku, stabilného vodného roztoku, výrobku, spôsobu prípravy stabilného vodného prostriedku a sterilizovanej plniacej nádoby. Tento prostriedok neobsahuje produkty odvodené z ľudského krvného séra a udržuje vysokú biologickú aktivitu a vysokú chemickú a vysokú fyzikálnu stabilitu interferónu typu alfa dlhý čas.

Doterajší stav techniky

US patent 4 496 537 uvádza biologicky stabilné alfainterferónové vo vode rozpustné prostriedky, obsahujúce alfa-interferón, albumín z ľudského séra a alanín alebo glycín, vodu a ústojný systém na udržanie pH na 6,5 - 8,0. Albumín z ľudského séra („HSA“) pôsobí ako stabilizátor alfa-interferónu a zabraňuje stratám alfa-interferónu z roztoku následkom tvorby povlakov alebo absorpcii alfa-interferónu na stenách z nehrdzavejúcej ocele a skla zmiešavacích nádob, výrobného zariadenia a skladovacích nádob. Prostriedky v roztoku, obsahujúce alfa-interferón a HSA, si udržiavajú chemickú a biologickú stabilitu alfa-interferónu pri skladovaní roztokov pri 2 - 8 °C dlhý čas, t. j. viac než dva roky.

Celosvetová epidémia AIDS v nedávnej minulosti mala za následok, že registračné agentúry' požadujú od výrobcov, aby produkty, ako je alfa-interferón, ktoré obsahujú produkty z ľudskej krvi, ako je HSA, boli označené varovaním.

Existuje nutnosť preformulovať alfa-interferónové rozpustené produkty, aby sa získali rozpustené prostriedky bez produktov odvodených z ľudskej krvi, ako je HSA, pričom by sa vo vode rozpusteným formuláciám zachovala počas dlhého skladovania vysoká chemická stabilita, vysoká fyzikálna stabilita a vysoká biologická alfa-interferónová aktivita.

Podstata vynálezu

Tento vynález poskytuje stabilnú, vo vode rozpustenú formuláciu, ktorá si udržiava vysokú biologickú alfa-interferónovú aktivitu a neobsahuje produkty odvodené z ľudskej krvi, ktorá obsahuje:

a) 0,1 x 10⁶ až 100 x 10⁶ m. j./ml interferónu typu alfa;

b) ústojný systém na udržanie pH v medziach 4,5 až 7,1;

c) účinné množstvo chelatačného činidla;

d) derivát sorbitan-mono-9-oktadecenoát-poly(oxy-l,2-etándiylju v množstve postačujúcom na stabilizáciu interferónu typu alfa proti stratám interferónu typu alfa;

e) účinné množstvo ionizačného činidla;

f) účinné množstvo protimikrobiálneho konzervačného činidla; a

g) vodu na injekcie, v množstve postačujúcom na prípravu roztoku z vymenovaných prísad;

Tento vynález poskytuje stabilnú, vo vode rozpustenú formuláciu s vysokou biologickou aktivitou interferónu typu alfa, neobsahujúcu produkty odvodené z ľudskej krvi, ktorá obsahuje:

a) 0,1 x 10⁶ až 100 x 10⁶ m. j./ml interferónu typu alfa;

b) ústojný systém, dostatočný na udržanie pH v medziach

4,5 až 7,1;

c) 0,1 až 1 mg/1 dihydrogénetylénamíntetraacetátu disodného;

d) 0,1 až 1 mg/1 derivátu sorbitan-mono-9-oktadecenoátpoly(oxy-1,2-etándiy l)u;

e) 1 až 9 mg/1 chloridu sodného;

f) účinné množstvo protimikrobiálneho činidla, vybraného z m-krezolu, fenolu, metylparabénu alebo zmesi z nich; a

g) vodu na aplikáciu v injekciách, v množstve postačujúcom na doplnenie do 1 ml.

Vo výhodnom uskutočnení tento vynález poskytuje stabilnú, vo vode rozpustenú formuláciu s vysokou biologickou aktivitou interferónu typu alfa, neobsahujúcu produkty odvodené z ľudskej krvi, ktorá obsahuje:

a. alfa-2-lnterferón	fiaZl 5x10« až 50X10’ n.j.
b. dihydrogenfosŕorečnan sodný bezvodý	1,8
c. nonohydrogenŕosfcrečnan sodný nonohydrát	1,3
d. dihydrogén-etylén-dlaaíntetraacetát disodný	0,1
e. polysorbát SO	0,1
f. aetylparabén	1,2
g. propylparabén	0,12
h. chlorid sodný	7,5
1. vodu na Injekcie	doplnok do 1 al
V inom výhodnom uskutočnení tento vynález ďalej poskytuje stabilnú, vo vode rozpustnú formuláciu s vysokou biologickou aktivitou interferónu typu alfa, neobsahujúcu produkty odvodené z ľudskej krvi, ktorá obsahuje:
a. alfa-2-interferón	mg/1 5x10’ až 50x10» a.j.
b. dihydrogenfosforečnan sodný bezvodý	1,8
c. aonohydrcgenfosfarečnan sodný sonohydrát	1,3
d. dlhydrogén-etylén-dlanín“ tetraacetát disodný	0,1
e. polysorbát 80	0,1
f. a-kreaol	1,5
g. chlorid sodný	7,5
h. vodu na injekcie	doplnok do 1 al
Tento vynález tiež poskytuje spôsob prípravy stabilnej, vo vode rozpustenej formulácie s vysokou biologickou alfa-interferónovou aktivitou a neobsahujúcej produkty odvodené z ľudskej krvi, obsahujúcej zmiešané účinné množstvo interferónu typu alfa a ústojného systému, schopného udržať pH v medziach 4,5 až 7,1 a chelatačné činidlo, derivát sorbitan-mono-9-oktadecenoát-poly(oxy-1,2-etándiyl)u, ionizačné činidlo, protimikrobiálne konzervačné činidlo a dostatočné množstvo vody na vytvorenie roztoku. Vo výhodnom uskutočnení prípravy podľa tohto vynálezu sa

roztok pripraví a udržiava v podstate bez rozpusteného kyslíka a s vankúšom inertnej atmosféry nad roztokom s menej než 4 % objemovými kyslíka.

Podrobný opis

Vybrali sme špecifické množstvo špecifického súboru prísad, ktoré nám umožnili vyvinúť vo vode rozpustnú alfa-interferónovú formuláciu, ktorá neobsahuje albumín z ľudského séra, udržiava si však vysokú chemickú, biologickú a fyzikálnu stabilitu interferónu typu alfa pri skladovaní pri 2 - 8 °C počas najmenej 24 mesiacov.

Termín „neobsahujúce produkty odvodené z ľudského krvného séra“, tak ako je tu použitý, sa týka formulácií podľa tohto vynálezu a znamená, že pri príprave roztoku formulácií podľa tohto vynálezu sa nepoužívajú žiadne z ľudskej krvi odvodené produkty, ako je HSA.

Termín „vysoká chemická stabilita“, tak, ako je tu použitý v odkazoch na interferón typu alfa, použitý vo formuláciách podľa tohto vynálezu, znamená zachovanie najmenej 85 %, výhodne 85 % až 100 % svojej chemickej neporušenosti pri skladovaní pri 2 až 8 °C počas najmenej 24 mesiacov. Pozri tabuľky 1 a 2. Chemická neporušenosť sa určuje meraním obsahu proteínu metódou HPLC (vysokotlaková kvapalná chromatografia), ako uvádza T. L. Nagabhusan a kol. v článku nazvanom „Characterization of Genetically Engineered ALFA-2 Interferón - Charakteristika geneticky upraveného alfa-2-interferónu“, strany 79 až 88, uverejnenom v Interferón Rcsearch Clinical Application and Regulátory Consideration - Interferónové výskumné klinické aplikačné a regulačné úvahy, Zoon a kol., vyd., Elsevier Science Publishing Co., Inc. 1984 (pozri výsledky v tabuľkách 1 až 4).

Termín „vysoká biologická stabilita“, tak, ako je tu použitý v odkazoch na interferón typu alfa, použitý vo formuláciách podľa tohto vynálezu, znamená zachovanie najmenej 75 %, výhodne 85 %, ešte výhodnejšie 90 % až 100 % svojej biologickej aktivity pri skladovaní pri 2 až 8 °C počas najmenej 24 mesiacov (pozri výsledky v tabuľkách 1 až 4), merné štandardnou metódou inhibície cytopatického efektu (CPE) vírusu, ako je metóda, uvádzaná W. P. Protzmanom a kol., v J. Clinical Microbiology, 1985, 22, 596 - 599.

Termín „vysoká fyzikálna stabilita“, tak, ako je tu použitý v odkazoch na interferón typu alfa, použitý vo formuláciách podľa tohto vynálezu znamená, že formulácia podľa vynálezu zostáva číra, t. j. nevykazuje zákal alebo viditeľné pevné častice (t. j. častice s priemerom väčším než 60 až 70 pm pri skladovaní pri 2 až 8 °C počas najmenej 24 mesiacov. Pozri tabuľky 1, 2 a 3. Výsledky uvedené v tabuľkách 1, 2 a 3 sú prekvapujúce v tom, že väčšina rozpustených formulácií obsahujúcich proteínové produkty, ako interferón typu alfa, má tendenciu vytvárať vizuálne pozorovateľné pevné častice (t. j. častice s priemerom väčším než 60 až 70 pm), pri dlhom skladovaní dokonca aj pri teplotách 2 až 8 °C. Skúšobná metóda, použitá na určenie pevných častíc v rozpustenej formulácii podľaa tohto vynálezu (pozri tabuľky 1 až 4), je opísaná v The United States Pharmacopeia (USP) - Liekopis USA /The National Formulary - Národný liekopis USP 23/NF 18, vydala United States Pharmacopeial Convention, Inc., 1995, Rockville, Maryland; pozri fyzikálny test <78> na stranách 1813 až 1816. Metóda použitá na určenie vizuálneho opisu rozpustených formulácií podľa tohto vynálezu je tiež opísaná v USP ako „Všeobecné požiadavky testov a skúšok <1> injekcií“ na stranách 1650 až 1652.

Zistili sme, že pridaním chelatačného činidla k formuláciám podľa tohto vynálezu sme schopní vyvarovať sa pevných častíc. Typické vhodné chelatačné činidlá obsahujú dihydrogén-etyléndiamín-tetraacetát disodný (EDTA alebo edetát disodný) alebo kyselinu citrónovú. Výhodné je použitie edetátu disodného. Aj keď sa nechceme zväzovať teóriou, domnievame sa, že edetát disodný tvorí účinné komplexy so stopovým množstvom kovových katiónov, ako sú Zn⁺², Fe⁺², Cu⁺² alebo AI⁺³, ktorých ióny môžu byť prítomné v excipientoch a v obalových komponentoch, napr. v gumených zátkach alebo tesneniach. Keďže edetát disodný má vyššiu afinitu k týmto kovovým katiónom, než interferóny typu alfa, nedochádza k interakcii kovových katiónov a interferónov typu alfa, ktorá má za následok tvorbu nerozpustných komplexov (vo forme napríklad viditeľných pevných častíc) a stratu aktivity. Účinné množstvo chelatačného činidla je v rozsahu 0,01 až 1 mg/ml na základe 0,1 x 10⁶ až 100 x 10⁶ medzinárodných jednotiek (m. j.) interferónu typu alfa/ml. Výhodne sa použije 0,1 mg edetátu disodného na 5 x 10⁶ až 50 x 10⁶ m. j. alfa-2-interferónu.

Ústojné systémy, vhodné na formulácie podľa tohto vynálezu, sú tie, ktoré udržiavajú pH vo vode rozpustenej formulácie v rozmedzí 4,5 až 7,1, výhodne 6,5 až 7,1 a najvýhodnejšie 6,8. Výhodné je použitie ústojného systému dihydrogenfosforečnanu sodného a monohydrogenfosforečnanu sodného. Normálne sa používa 0,005 až 0,1 molárny pufer výhodného ústojného systému mono-/dihydrogenfosforečnanu sodného na formulácie, obsahujúce 0,1 x 10⁶až 10 x 10⁶ m. j. interferónu typu alfa na ml. Iné vhodné ústojné systémy na udržanie žiadaného pH v rozpätí 4,5 až 7,1 obsahujú systémy citran sodný/kyselina citrónová a octan sodný/kyselina octová.

Tonizačné činidlo, použiteľné v tomto vynáleze, je akékoľvek činidlo, ktoré je schopné učiniť formulácie podľa tohto vynálezu izoosmotickými s ľudským sérom. Typické vhodné tonizačné činidlá zahŕňajú chlorid sodný, manitol, glycín, glukózu a sorbitol. Použitie chloridu sodného ako ionizačného činidlá je výhodne.

Množstvo použitého ionizačného činidla je v rozmedzí 1 až 10 mg/1, ak formulácia podľa tohto vynálezu obsahuje 0,1 x 10⁶ až 100 x 10⁶ m. j. alfa-interferónu/ml. Vo formuláciách podľa tohto vynálezu je výhodné použitie

7,5 mg/ml chloridu sodného pre 5 x 10⁶ až 50 x 106 m. j. alfa-interferónu na 1 ml.

Sorbitan-mono-9-oktadecenoát-poly(oxy-l,2-etándiyl)ové deriváty, ako je polysorbát 80 alebo polysorbát 20, sú použiteľné ako stabilizátor na zamedzenie absorpcie proteínov interferónu typu alfa, ako je alfa-2b-interferón na antikorové a sklenené plochy zariadenia, ktoré sa používa na prípravu uvádzaných formulácií, obsahujúcich interferón typu alfa. Množstvo polysorbátu 20 alebo 80, vhodné vo formuláciách podľa tohto vynálezu, je v rozpätí 0,01 až 1,0 mg na ml pre formulácie s obsahom 0,1 x 10⁶ až 100 x x 10⁶ m. j. interferónu typu alfa na ml. Výhodné je použitie polysorbátu 80. Ešte výhodnejšie je použitie 0,1 mg/ml polysorbátu 80 vo všetkých rozpustených formuláciách podľa tohto vynálezu. Ak je koncentrácia interferónu typu alfa, ako je alfa-2-interferón menšia než 15 x 10⁶ m. j./ml, napr. 6 x 10⁶ m. j. na ml, tak úbytok aktivity následkom absorpcie alfa-interferónu v neprítomnosti polysorbátu 80 významne zníži biologickú aktivitu formulácie. Prekvapivo sme zistili, že polysorbát 80 zabraňuje úbytku alfa-2b-interferónu a umožňuje systematicky dodávať alfa-2b-interferón bez straty biologickej aktivity. Počas vývoja formulácie podľa tohto vynálezu sme prekvapivo zistili, že polysorbát 80 dáva vynikajúcu chemickú a biologickú stabilitu alfa-2b-interferónu v porovnaní s inými neiónovými povrchovo aktívnymi činidlami, napr. s produktmi Pluronic F127 a Pluronic F-68.

Množstvo interferónu typu alfa, použiteľné vo formuláciách podľa tohto vynálezu, je v rozpätí 0,1 x 10⁶ až 100 x x 10⁶ m. j./ml, výhodne 5 x 10⁶ až 50 x 10⁶ m. j./ml.

Termín „interferón typu alfa“, tak, ako je tu použitý, znamená rodinu vysoko homologických, druhovo špecifických proteínov, ktoré inhibujú vírusovú reprodukciu a bunkovú proliferáciu a tlmia imunitnú reakciu. Typické vhodné interferóny typu alfa-2a-interferón, ako je ROFERON A alfa-2a-interferón od firmy Hoffmann-La Roche, Nutley, N. J., alfa-2b-intcrferón, ako jc INTRON A alfa-2b-interferón od firmy Schering Corporation, Kenilworth, N. J., alfa-2c-interferón ako BEROFOR alfa-2c-interferón od firmy Boehringer Ingelheim Pharmaceutical, Inc., Ridgfield, CT., alfa-nl-interferón, vyčistená zmes prírodných alfa-interferónov, ako je SUMIFERON od firmy Sumitomo, Japonsko alebo, ako je WELLFERON alfa-nl-interferón od The Wellcome Foundation Ltd., Londýn, Veľká Británia alebo konsenzuálny alfa-interferón od Amgen, Inc., Hewbury Park, Cal., alebo interferón alfa-n3, zmes prírodných interferónov, vyrábaná Interferón Sciences a na predaj u Purdue Frederick Co., Norwalk, CT., pod obchodným názvom ALFERON. Použitie alfa-2a- alebo alfa-2b-interferónu je výhodné, použitie alfa-2b-interferónu je ešte výhodnejšie.

Zistené vhodné protimikrobiálne konzervačné činidlá v tomto vynáleze zahŕňajú m-kresol, fenol, metylparabén a propylparabén a zmesi uvedených konzervačných činidiel, napr. zmesi fenol-propylparabén. Zistené vhodné účinné množstvo m-kresolu v tomto vynáleze je v rozpätí 0,5 až 2 mg/ml na formulácie s obsahom 0,1 x 10⁶ až 100 x x 10⁶ m. j./ml interferónu typu alfa. Výhodné je použitie

1,5 mg/ml m-kresolu na formulácie s obsahom 5 x 10⁶ až 50 x 10⁶ m. j./ml alfa-2b-interferónu.

Účinné množstvo fenolu, zistené ako užitočné, je v rozpätí 0,5 až 5 mg/ml na rozpustené formulácie, obsahujúce 0,1 x 10⁶ až 100 x 10⁶ m. j./ml interferónu typu alfa.

Účinné množstvo metylparabénu je v rozpätí 0,06 až 0,18 mg/ml. ak formulácia podľa tohto vynálezu obsahuje 0,1 x 10⁶ až 100 x 10⁶ m. j./ml interferónu typu alfa.

Výhodné je použitie 1,2 mg/ml metylparabénu v kombinácii s 0,12 mg/ml propylparabénu, ak formulácia podľa tohto vynálezu obsahuje 0,1 x 106 až 100 x 10⁶ m. j./ml interferónu typu alfa.

Použitie m-kresolu ako protimikrobiálneho konzervačného činidla je ešte výhodnejšie.

Voda, ktorá sa používa na prípravu formulácií podľa tohto vynálezu, je výhodne voda na injekcie.

Počas vývoja vo vode rozpustených formulácií podľa tohto vynálezu, ktoré si majú udržať vysokú biologickú aktivitu, ako aj vysokú chemickú a vysokú fyzikálnu stabilitu interferónu typu alfa počas dlhého času skladovania bez použitia HSA ako stabilizátora, sme zistili, žc množstvo sorbitan-mono-9-oktadecenoát-poly(oxy-l,2-etándiyl)ového derivátu, ako je polysorbát 80, od ktorého sa vyžaduje, aby pôsobil ako stabilizátor pre interferón typu alfa, má priamy vplyv na účinné množstvo protimikrobiálneho konzervačného činidla, ktoré by mohlo byť pridané k formulácii vo vodnom roztoku na zaistenie riadnej protimikrobiálnej ochrany pre túto formuláciu s prihliadnutím na rôzne svetové zdravotnícke registračné požiadavky, bez vyvolania nežiaducej tvorby zákalu roztoku.

Ak bol vo formuláciách podľa tohto vynálezu prítomný výhodný stabilizátor, polysorbát 80, vo výhodnom účinnom množstve 0,1 mg/ml, alebo aj ak bolo prítomné množstvo výhodného protimikrobiálneho konzervačného činidla, napr. m-kresolu, ktoré mohlo byť pridané bez vyvolania zákalu tejto formulácie, toto množstvo bolo zistené ako kritické. Napríklad, ak množstvo m-kresolu, pridaného k formulácii, ktorá obsahuje 0,1 mg/ml polysorbátu 80, ako je uvedené v príklade 3, bolo zväčšené na viac než 1,75 mg/ml, bolo pozorované zakalenie. Podobný problém zakalenia bol pozorovaný, keď množstvo polysorbátu 80 vo výslednej formulácii bolo menené od 0,01 do 1 mg/ml. Žiadne zakalenie nebolo pozorované, ak bolo pridaných 1,75 mg/ml alebo menej, výhodne 1,5 mg/ml m-kresolu k formulácii, ktorá bola pripravená v súlade s postupmi príkladu 3, a ktorá obsahovala 0,1 mg/ml polysorbátu 80. Tento kritický stav bol tiež pozorovaný s parabénmi a fenolom, ak boli použité spolu s protimikrobiálnymi konzervačnými činidlami. Na formulácie podľa tohto vynálezu, obsahujúce 0,01 až 1 mg/ml polysorbátu 80, nemá byť účinné množstvo metylparabénu väčšie než 1,2 mg/ml, ak je použitý spolu s 0,12 mg/ml propylparabénu, aby sa predišlo zakaleniu, a účinné množstvo fenolu (keď je použitý namiesto parabénov) má byť v rozmedzí 0,5 až menej než 4 mg/ml, aby sa predišlo zakaleniu.

Formulácie interferónu typu alfa, použiteľné na liečenie mnohých chorobných stavov, ako je renálny bunkový karcinóm, AIDS-príbuzný Kaposi sarkóm, chronická a akútna hepatitída B, chronická a akútna non-A a non-B/C hepatitída. Formulácie podľa tohto vynálezu sú použiteľné na liečenie týchto chorobných stavov výhodne vo forme injekcií vodných roztokov.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Nasledujúce neobmedzujúce príklady ilustrujú prípravu vodných roztokov interferónov typu alfa.

Spôsoby vymenované po príklade 5 sa používajú na prípravu formulácií podľa tohto vynálezu v príkladoch 1 až 5.

Príklad 1

aktívna substancia:	alfa-2b-lnterferón	0,1X10“ až 100x10« n.j./aľ
pufer:	fosforečnan sodný	0,005-0,1 M
chelatačné činidlo:	(aeao-dlhydrofén) edatát disodný	0.01 - 1 Bv/el
stabilizátor:	polysorbát SC	0,01 - 1 ag/nl
činidlo na nastavenie tonusu:	chlorid sodný	1-9 Bff/Bl
protlaikroblálne konzervačná činidlo:	e-kresol	0,5 - 1,75 ag/el
	alebo fenol	0,5 - <4 ag/»l
	alebo aetylparabén	0,6 - 1,2 agr/al
	propylparabén	0,06 - 0,12 ·?/β1
rozpdäfadlo;	voda na injekcie	doplnok do 1 al
') b. j. - Btdzlnárodné jednotky

Príklad 2 alfa-2b-interferón dihydrogeíifoaforečnan sodný bezvodý loaobydrogsnfosforeínan sodný aonotydrát edetát dísodný polysorbát 30 n-kresol chlorid sodný voda na injekcie doplnok do

L0x1C⁸ n.j/al

1,8 ng/el

1,3 ng/al

0,1 mg/al

0,1 ag/al

1,5 ag/al

7,5 ng/nl al

Príklad 3 al£a-2b-interferÓn dihydrogenfosforecnan sodný bezvodý nonohydrogenfoaforečnan sodný nonohydrát edetát disodný polysorbát 80 etylparabén propylparabén chlorid sodný voda na injekcie doplnok do

10x10“ a.j/al

1,8 ng/al

1,3 ag/al

0,1 mg/al

0,1 ng/nl

1,2 ng/al 0,12 bí/dL

7,5 ag/nl al

Príklad 4

Formulácia z príkladu 3 bola pripravená so 6 x 10⁶ m. j./ml alfa-2b-interferónu v súlade so spôsobom prípravy podrobne tu ďalej opísaným pri použití ošetrenia roztoku dusíkom pri dodržaní nie viac než 4 % objemových kyslíka v plynovom vankúši.

Ampulky, obsahujúce označený objem 3 ml roztoku, boli skladované pri 30 °C, 25 °C a 40 °C. Výsledky sú zhrnutú v tabuľke 3.

Príklad 5

Formulácia z príkladu 4 bola pripravená v súlade so spôsobom prípravy ďalej podrobne uvedeným s tou výnimkou, že dusík nebol preháňaný roztokom, ani nebol nad roztok zavedený a objem kyslíka v plynovom vankúši bol cca 20 % ako v okolitom vzduchu.

Ampulky, obsahujúce označený objem 3 ml roztoku, boli skladované pri 30 °C, 25 °C a 40 °C. Výsledky sú zhrnutú v tabuľke 4.

Podobné výsledky sú očakávané, ak alfa-2b-interferón v príkladoch 1 až 5 je nahradený ekvivalentným množstvom alfa-interferónu z produktov Roferon A, Wellferon alebo Sumiferon.

Tabuľka 1

Údaje o stabilite alfa-2b-interferónu z príkladu 2

čas nesiac	tepl. •c	protivír. testCCPK)	obsah proteínu	pevné častice	opis
X10’ M. j. /1	«L. S	acg/al	kpóvod.	210 μ®	>25 μ®	>50 UB
pôvodné	10,0	100	42,5	100	40	3	1	CC8'
3	4	9,0	90	42,4	100	lfi	13	11	CCS
S	4	10,0	100	41,5	98	8	3	1	ccs
9	4	10,0	100	43,3	102	52	3	0	ccs
12	4	10,0	100	44,3	104	17	4	2	ccs
18	4	9,8	98	41,5	98	δ	1	0	ccs
24	4	10,0	100	39,5	93	5	1	0	ccs

*) ccs - číry_t bezfarebný roztok v podstate bez viditeľných Častíc

Tabuľka 2

Údaje o stabilite alfa-2b-interferónu z príkladu 3

čas eesiac	tepl. •c	protivír. test(CPI)	obsah proteínu	pevné častice	opis
X10« B. j. /al	*L.S	acg/sl	tpôvod.	>10 UB	>25 μ»	>50 U9
pôvodné	10,3	103	37,9	100	63	4	3	ccs*
1	4	10,0	100	38,2	101	142	24	23
3	4	10,0	100	38,9	103	311	63	35	ccs
d	4	10,0	100	40,0	105	206	17	16	ccs
9	4	10,0	100	37,1	97,9	211	109	50	ccs
12	4	10,0	100	36,5	95,6	300	65	12	CCS
15	4	10,0	100	36,1	95,3	123	8	6	ccs

’) ccs - číry, bezfarebný roztok v podstate bez viditeľných častíc

Tabuľka 3

Údaje o stabilite alfa-2b-interferónu z príkladu 4

ías es.	tepl. •c	poloha aapulky *)	protivír. test(CPH)	obsah proteínu (test HPLC)	a-krescl test	PH
xlO· •i. /1	ax.s	ac^/al	Spdvod.	ag/al	U.S
pôvodné		6,48	108	25,7	100	1,47	98.0	6,91
1	30	uf	6,00	100	24,8	96,3	1,47	98,0	6,90
IBV	6,00	100	24,8	96,3	1,47	98,0	6,90
3	4	UP	6,00	100	23.5	91,4	1,46	97,3	6,88
rsv	6,00	L00	24,2	94,2	1,48	98,7	6,87
3	25	UP	6,00	LOQ	21,7	84,4	1,43	95,3	6,88
m	6,00	100	21,7	84,4	1,47	98,0	6.B8
6	4	UP	6,00	10O	24, β	95,7	1,46	97,3	6,84
IKV	6,00	100	24,3	94,6		96,7	6,84
6	25	UP	5,56	92,3	20,3	79,S	1,45	96,7	6,85
ISV	6,00	1O0	20,4	79,4	1.44	98,0	6,85
12	4	UP	6,00	100	23,4	91,0	1.47	98,0	6.84
IJÍV	6,00	100	23,4	91,0	1.47	97,3	6.84

*) UP - zvisle IÍV - prevrátene

Tabuľka 3 - pokračovanie

čas	tepl.	poloha ampulky	pevné Častice	opis
nes.	•c	)	210 na	>25 UB	>50 μη
pôvodné		23	2	0	ccs*
1		UP	109	61	16	ccs
	IJV	55	11	2	ccs
3		UP	29	z	0	ccs
	rirv	59	23	Z	ccs
3	25	UP	141	76	17	ccs
INV	49	16	3	CCS
6	4	UP	59	21	3	cca
IHV	68	20	4	ccs
6	25	UP	38	4	0	ccs
IJÍV	57	8	0	ccs
12	4	UP	21	2	0	ccs
1SV	18	2	0	cca

cca - číry, bezfarebný roztok v podstate bez viditeľných častíc

Tabuľka 4

Údaje o stabilite alfa-2b-interferónu z príkladu 5

c«s Β6» ,	tepl. •c	poloha ampulky ’)	protivír. test(CFE)	obsah proteínu (test HPLC)	a-krmsol test	PS
XI 0^en.j. /al	SL.S	Bcg/al	BpÔvod.	ag/nl	XL.S
pôvodné		6,00	108	25.5	100	1,47	98,0	6,85
1	30	UP	6,00	100	19.5	76,5	1 .49	99,3	6.82
IHV	6,00	100	19,5	76.5	1,50	100	6,83
3	4	UP	6,00	100	24.0	94,1	1.43	95,3	6,81
ISV	6,00	100	24.0	94.1	1,43	95.3	6.82
3	25	UP	6,00	100	20,2	79,2	1,39	92,7	6,82
IÍV	6,00	100	19,6	76,9	1,41	94,0	6,82
6	4	UP	6 ,00	100	24,6	96,5	1.47	98.0	6,82
IRV	6,00	100	24,6	96,5	1,47	98,0	6,83
6	25	UP	6,00	100	17,2	67,5	1,47	98,0	6,83
ιβν	6,00	100	16,1	63,1	1.48	98,7	6,84
12	4	UF	7,56	126	23,3	91,4	1,58	105	6,88
IHV	7,00	11?	23,2	91,0	1.41	94,0	6,88

’) UP - aviele IMV - prevrátene

Tabuľka 4 - pokračovanie

čas es.	tepl. •c	poloha aapulky ')	pevné častice	popis
>10 μη	225 μη	250 μη
pôvodné		144	4	4	ccs’
1	30	up	89	3	1	ccs
IXV	64	1	0	ccs
3	4	UP	39	1	0	ccs
IMV	77	19	6	ccs
3	25	UF	57	1	0	ccs
IMV	140	24	1	ccs
6	4	UP	65	1	0	ccs
IÍV	220	67	27	ccs
6	25	UP	92	3	0	ccs
ItfV	241	5	0	ccs
12	4	u?	53	1	0	ccs
IXV	119	5	1	ccs

*) cca - číry, bezfarebný roztok v podstate bez vídlteínýci častíc

Spôsob prípravy pre príklady 1 až 5

A. Zmesové, parabén obsahujúce, vo vode rozpustené formulácie, uvedené v príklade 2.

1. Do vhodnej duplikátorovej zmiešavacej nádoby vybavenej miešadlom sa pri teplote vyššej než 70 °C vsadí 80 % vody na injekcie

2. Oddelene sa vsadí 30 % vody na injekcie do inej vhodnej nádoby. Voda sa ochladí a udržiava sa v rozpätí teplôt 20 až 25 °C. Vodou a nad vodou, ktorá sa použije na uvedenie šarže na konečný objem, sa začne preháňať filtrovaný dusík, aby sa obsah rozpusteného kyslíka udržal na úrovni alebo dostal sa pod úroveň 0,25 ppm.

3. Do zmiešavacej nádoby z kroku 1 sa vsadí a za miešania rozpustí metylparabén, pričom sa teplota roztoku udržiava v rozmedzí 70 a 80 °C.

4. Roztok z kroku 3 sa ochladí na teplotu medzi 20 a 25 °C. Roztokom a nad roztokom sa preháňa filtrovaný dusík. Hladina rozpusteného kyslíka sa udržiava nad alebo pod 0,25 ppm.

5. Do roztoku z kroku 4 sa dávkujú a za miešania rozpúšťajú nasledujúce prísady, pričom sa pokračuje v preháňaní dusíka a udržiavaní dusíkového vankúša: dihydrogenfosforečnan sodný bezvodý monohydrogenfosforečnan sodný monohydrát edetát disodný chlorid sodný

6. Preruší sa vháňanie dusíka do roztoku z kroku 5. V zmiešavacej nádobe sa udržiava dusíkový vankúš.

7. V samostatnej nádobe sa nadávkuje a rozpustí polysorbát 80 v 50 ml vody na injekcie (na vsádzku s objemom 1 liter). Roztok polysorbátu 80 sa prenesie do roztoku a z kroku 6.

8. Skontroluje sa pH roztoku. Má byť medzi 6,6 a 7,0. Úprava pH nie je potrebná.

9. Počas miešania sa nadávkuje do roztoku z kroku 8 roztok materiálu drogy alfa-2b-interferón.

10. Pridá sa voda na injekcie, ktorou bol preháňaný dusík (z kroku 2), a šarža sa doplní na finálny objem. Roztok sa mierne mieša do dosiahnutia homogenizácie.

11. Roztok sa aseptický prefiltruje cez sterilizovaný filter, ktorý bol premytý a vyskúšaný, čo sa týka celistvosti. Sterilizovaný roztok sa zbiera do sterilizovanej náplňovej nádoby, v ktorej bol vytvorený vankúš sterilné filtrovaného dusíka. Vykonáva sa test integrity filtra a filtrácie.

12. V náplňovej nádobe z kroku 11 sa vytvorí vankúš sterilné filtrovaného dusíka a nádoba sa tesne uzavrie.

B. Zmesové, m-kresol, vo vode rozpustené formulácie, uvedené v príklade 3.

Spôsob prípravy, použitý na prípravu vodných roztokov s obsahom m-kresolu ako konzervačného činidla (ako je uvedené v príklade 3) je presne taký istý, ako bol spôsob opisovaný s tou výnimkou, že teplota roztoku v kroku 6 sa udržiava medzi 20 a 25 °C a m-kresol sa dávkuje po kroku 6.

C. Zmesové, ESA neobsahujúce, vo vode rozpustené alfa-interferónové formulácie pod atmosférou okolitého vzduchu.

Spôsob prípravy, použitý na prípravu HSA neobsahujúcich, vo vode rozpustených alfa-interferónových formulácií z príkladov 1 až 4, bol použitý na prípravu formulácií, ako je formulácia z príkladu 5, s tou výnimkou, že všetky kroky sa vykonávajú pod atmosférou okolitého vzduchu; dusík sa roztokom nepreháňal, ani z neho nebol vytvorený plynový vankúš a okolitý vzduch (s normálnym obsahom 20 % objemových kyslíka) zapĺňal priestor nad roztokom.

Na udržanie vysokej chemickej, fyzikálnej a biologickej stability je výhodné, aby voda, použitá na prípravu vodného alfa-interferónového roztoku, ako aj takto formovaný vodný alfa-interferónový roztok, boli v podstate bez rozpusteného kyslíka a aby vodný roztok bol pripravovaný a skladovaný pod vankúšom inertnej atmosféry, ako je dusík, obsahujúci nie viac než 4 % objemové kyslíka. Termínom „v podstate bez rozpusteného kyslíka“, tak, ako je tu použitý, sa myslí hladina kyslíka nie vyššia než 0,25 ppm pri teplote vody 20 - 25 °C. Normálne sa táto výhodná hladina kyslíka 0,25 ppm pohodlne dosiahne vháňaním inertnej atmosféry, napr. plynného dusíka do vody, používanej na prípravu vodných roztokov (udržiavaných na teplote 20 - 25 °C) počas dostatočne dlhého času (napr. 30 minút), aby sa rozpustený kyslík znížil na hodnotu nie väčšiu než 0,25 ppm. V preháňaní sa pokračuje počas celého času výrobnej procedúry, aby sa hladina rozpusteného kyslíka udržala na 0,25 ppm. Zistili sme, že vodné formulácie podľa tohto vynálezu, ktoré majú hladinu rozpusteného kyslíka 1 ppm a obsah kyslíka v plynnom vankúši 7 % objemových, vykazovali významne väčšiu stratu chemickej stability alfa-interferónu po 3 mesiacoch skladovania pri 25 °C v porovnaní s podobnou vodnou formuláciou, ktorá mala výhodnú hladinu rozpusteného kyslíka 0,25 ppm a obsah kyslíka v plynovom vankúši 4 % objemové pri skladovaní za rovnakých podmienok.

Vzájomné porovnanie údajov o stabilite roztokov alfa-2b-interferónu z tabuliek 3 a 4 ukazuje, že nie je podstatný rozdiel v stabilite medzi vo vode rozpustenými formuláciami podľa tohto vynálezu, ktoré boli pripravené pod dusíkovou atmosférou, alebo atmosférou s nízkym obsahom kyslíka podľa príkladu 4 a tými, ktoré boli pripravené v súlade s príkladom 5 pod atmosférou okolitého vzduchu, počas skladovania 12 mesiacov pri 4 °C. Na rozdiel od toho, porovnanie stability alfa-2b-interferónu v roztokoch z príkladov 4 a 5, skladovaných pri vyšších teplotách, napr. 25 a 30 °C, ukazuje ochranný efekt, dosiahnutý výhodným (bezpečnejším) použitím preháňania dusíka na vyvolanie nižších hladín rozpusteného kyslíka vo vodných roztokoch pri súčasnom udržaní obsahu kyslíka v plynovom vankúši na hodnote nie vyššej než 4 % objemové.

Vo vode rozpustená formulácia podľa tohto vynálezu sa môže skladovať v akýchkoľvek vhodných vymytých a sterilizovaných náplňových nádobách alebo kontajneroch, ako sú 2 ml alebo 5 ml ampulky typu I z flintového skla s uzávermi zo sivej butylovej gumy. Vo vode rozpustené formulácie podľa tohto vynálezu môžu byť tiež skladované v naplnených multidávkových injekčných striekačkách ako sú tie, ktoré sú používané na podávanie liekov, ako je inzulín. Typické vhodné injekčné striekačky zahŕňajú systémy, obsahujúce prednaplnenú ampulku, pripojenú na injekčnú striekačku ceruzkového typu, ako je výrobok Novolet Novo Pen, od firmy Novo Nordisk. Typické vhodné systémy zahŕňajú prednaplnené injekčné striekačky ceruzkového typu, ktoré umožňujú jednoduchú aplikáciu užívateľom a tiež presné a reprodukovateľné nastavenie dávok.

Vo vode rozpustené formulácie podľa tohto vynálezu, ako sú uvedené v príkladoch, môžu byť tiež lyofilizované na rekonštituovateľný prášok. Predpokladá sa, že lyofilizovaný prášok interferónu typu alfa si zachová chemickú a biologickú stabilitu pri skladovaní pri teplote 2 až 8 °C najmenej 2 roky.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Stabilný vodný prostriedok s vysokou biologickou aktivitou interferónu typu alfa, ktorý neobsahuje produkty odvodené z ľudskej krvi, vyznačujúci sa t ý m , že obsahuje:

a) 0,1 x 10 až 100 x 10⁶ IU/ml interferónu typu alfa;

b) tlmivý systém na udržanie pH v rozsahu 4,5 až 7,1;

c) účinné množstvo chelatačného činidla;

d) množstvo stabilizátora vybraného z polysorbátu 20 a polysorbátu 80 na stabilizáciu interferónu typu alfa proti stratám interefcrótiu typu alfa;

e) účinné množstvo tonizačného činidla;

f) účinné množstvo antimikrobiálneho konzervačného činidla; a

g) množstvo vody na injekcie dostatočné na prípravu roztoku uvedených zložiek, pričom v prípravku nie je prítomný manitol, ktorý je účinný ako napučiavacie činidlo, keď stabilizátorom je polysorbát 20.
2. Prostriedok podľa nároku 1, vyznačujúci sa t ý m , že tlmivýtn systémom je dihydrogenfosforečnan sodný a monohydrogenfosforečnan sodný.
3. Prostriedok podľa nároku 1, vyznačujúci sa t ý m , že chelatačným činidlom je edetát dvojsodný alebo kyselina citrónová.
4. Prostriedok podľa nároku 1, vyznačujúci sa t ý m , že tonizačným činidlom je chlorid sodný.
5. Prostriedok podľa nároku 1, vyznačuj úci sa t ý m , že konzervačné činidlo je vybrané z m-kresolu, fenolu, metylparabénu, propylparabénu alebo ich zmesí.
6. Prostriedok podľa nároku 1, vyznačujúci sa t ý m , že interferónom typu alfa je alfa-2-interferón.

7. Stabilný vodný roztok s vysokou biologickou aktivitou alfa-2-interferónu a bez prítomnosti ľudského albumínového séra, vyznačujúci sa tým, že obsahuje:

a) alfa-2-interferón 5 x 10° až 50x 10° IU b) bezvodý dihydrogenfosforeínan sodný L8 c) hydrogenfosforečnan sodný monohydrát 1,3 d) dÍhydrogenetyléndiamintetraoctan dvojsodný 0,1 e) stabilizátor - polysorbát 20 a polysorbát 80 0,1 í) metylparabén 1^ g) propylparabén 0,12 h) chlorid sodný 7,5 i) vodu na injekcie doplnok do 1 ml,

pričom v prípravku nie je prítomný manitol, ktorý jc účinný ako napučiavacie činidlo, keď stabilizátorom je polysorbát 20.

8. Stabilný vodný roztok s vysokou biologickou aktivitou alfa-2-interferónu a bez prítomnosti ľudského albumínového séra, vyznačujúci sa tým, že obsahuje:

a) alfa-2-mterferón 5 x 10* až 50 x 10* IU

b) bezvodý dihydrogenfosforečnan sodný1,8

c) hydrogenfosforečnan sodný monohydrát1,3

d) dihydrogenctyléndiamintetraoctaxidvojsíxlný0,1

e) stabilizátor vybraný z polysorbátu 20 a polysorbátu 800,1

í) m-krezol1,5

g) chlorid sodný7,5

h) voda na injekciu doplnok do 1 ml, pričom v prípravku nie je prítomný manitol, ktorý jc účinný ako napučiavacie činidlo, keď stabilizátorom je polysorbát 20.
9. Výrobok, vyznačujúci sa tým, že obsahuje obalový materiál a prostriedok podľa ktoréhokoľvek z predchádzajúcich nárokov, pričom obalovým materiálom je viacdávková ampulka.
10. Výrobok, vyznačujúci sa tým, že obsahuje vopred naplnenú injekčnú striekačku s účinným množstvom prostriedku podľa niektorého z nárokov 1 až 8.
11. Výrobok, vyznačujúci sa tým, že obsahuje obalový materiál a prostriedok podľa ktoréhokoľvek z predchádzajúcich nárokov, pričom obalovým materiálom je jednodávková sklenená ampulka.
12. Spôsob prípravy stabilného vodného prostriedku s vysokou biologickou aktivitou interferónu typu alfa a neobsahujúceho produkty odvodené od ľudských krvných derivátov, zahrnujúci zmiešanie účinného množstva interferónu typu alfa s tlmivým systémom schopným udržať pH v rozsahu od 4,5 do 7,1, chelatačným činidlom, stabilizačným činidlom vybraným z polysorbátu 20 a polysorbátu 80, tonizačným činidlom, antimikrobiálnym ochranným činidlom a dostatočným množstvom vody na vytvorenie vodného roztoku, vyznačujúci sa tým, že stabilizátorom je polysorbát 20 a nie je prítomný manitol, ktorý' je účinný ako napučiavacie činidlo.
13. Spôsob podľa nároku 12, vyznačujúci sa t ý m , že vodný roztok sa pripravuje a udržiava v podstate v neprítomnosti rozpusteného kyslíka.
14. Spôsob podľa nároku 13, vyznačujúci sa t ý m , že množstvo rozpusteného kyslíka nie je väčšie ako 0,25 ppm.
15. Spôsob podľa nároku 13 alebo 14, vyznačujúci sa tým, že priestorom nad vodným roztokom je inertná atmosféra obsahujúca do 4 % obj. kyslíka.
16. Sterilizovaná plniaca nádoba, vyznačujúca sa tým, že obsahuje prostriedok pripravený spôsobom podľa ktoréhokoľvek z nárokov 12 až 15.