SE469633B - Fysikaliska blandningar av cefalosporinsalter, kristallina sulfatsalter och ett foerfarande foer framstaellning av dessa - Google Patents

Description

10 469 653 bilitet vid förhöjd temperatur i torr pulverform.

Sammanfattning av uppfinningen Det har visat sig att vissa kristallina syraadditionssalter av 7-fiK-(2-aminotiazol-4-yl)-Q?(Z)-metoxiiminoacetamido)-3- [T1-metyl-1-pyrrolidinio)-metyl]-3-cefem-4-karboxylat i torr pulverform har utmärkt stabilitet vid rumstemperatur och har en överlägsen stabilitet vid förhöjd temperatur jämfört med zwitterjonformen. Uttrycket "torr pulverform" avser i före- liggande sammanhang en fukthalt av mindre än 5 vikt-%.

Dessa syraadditionssalter är de kristallina salter av 7-fiK- (2-aminotiazol-4-yl)-ak(Z)-metoxiiminoacetamidq]-3-[T1-me- tyl-1-pyrrolidinio)-metyl7-3-cefem-4-carboxylat som utgörs av svavelsyra-, disalpetersyra-, monoklorvätesyra- och di- klorvätesyraadditionssalterna och ortofosforsyraadditions- salterna (1,5-2 mol ortofosforsyra per mol salt, exempelvis ett intervall från seskvi- till diortofosforsyrasalterna) eller solvat därav. Uttrycket "kristallin" avser i förelig- gande sammanhang att molekylerna uppvisar åtminstone något karaktäristiskt arrangemang. Ehuru svavelsyra-, disalpeter- syra-, diklorvätesyra- och ortofosforsyraadditionssalterna framställes i klart kristallin form (såsom framgår av de- ras dubbelbrytning under ett polariserande mikroskop) med ett exakt arrangemang av molekyler, har monoklorvätesyra- additionssaltet framställts endast med viss regelbundenhet vad gäller arrangemanget av dess molekyler (såsom framgår av dess dåliga dubbelbrytning under polariserande mikro- skop) och icke ett exakt förutsägbart arrangemang och är således "lâggradigt" kristallint. Uttrycket "kristallin" omfattar således i föreliggande sammanhang icke endast de klart kristallina salterna utan även det “låggradigt" kris- tallina monoklorvätesyraadditionssaltet.

När syraadditionssalterna enligt uppfinningen beredes till vattenhaltiga injicerbara beredningar erhålles zwitterjo- 3 469 635 nen i lösning. Zwitterjonen har strukturen så s Ha/ës-Ä-É w flå°tfšg w; \o-cn, cooê Bredspektrumaktiviteten mot olika organismer hos zwitter- jonformen och således hos vattenhaltiga . beredningar framställda av salterna enligt uppfinningen visas av data i den ameri- kanska patentskriften 4 406 899.

Vattenhaltiga beredningar, som framställes av syraadditions- salterna enligt uppfinningen genom att man helt enkelt till- sätter sterilt vatten, ger sura lösningar, som framkallar en oacceptabel irritation hos kaniner vid intravenös administre- ring och en oacceptabelt smärtsam känsla vid intranmslnllär admi- nistmafing till kaniner. Svavelsyra- och disalpetersyraaddi- tionssalterna uppvisar reducerade lösligheter, vilka är o- tillräckliga för typiska injicerbara beredningar. Det har vi- sat sig att dessa ogynnsamma egenskaper kan elimineras genom att man utnyttjar salterna enligt uppfinningen i fysikalisk blandning (dvs. en blandning av fasta ämnen) med en farma- ceutiskt godtagbar, ogiftig organisk eller oorganisk bas i sådana proportioner att man erhåller ett pH av från cirka 3,5 till cirka 7 vid spädning med vatten till en zwitterjon- aktivitet av från 1 mg/ml till 400 mg/ml, normalt 250 mg/ml (bestämd medelst högprestandavätskekromatografi, i det föl- jande benämnd HPLC).

Ett föredraget salt enligt uppfinningen är det kristallina svavelsyraadditionssaltet. Det föredrages på grund av att dess låga löslighet i vatten (25 mg/ml) möjliggör utvinning i högt utbyte ur vattenhaltigt medium vid kristallisation.

Det kristallina svavelsyraadditionssaltet framställes lätt medelst ett förfarande, som innefattar de steg som innebär att man (a) bildar en vattenhaltig blandning av (i) minst en molär ekvivalent svavelsyra och (ii) zwitterjon i en så- 469 633 4 dan mängd att den i blandningen är närvarande i en koncen- tration överstigande 25 mg/ml, (b) åstadkommer kristallisa- tion av svavelsyraadditionssaltet och (c) isolerar det kris- tallina svavelsyraadditionssaltet.

Kort beskrivning av ritningarna Pig. 1 är en grafisk representation av infrarödabsorption- spektrumet för kristallint 7-[R-(2-aminotiazol-4-yl)-0%(Z)- metoxiiminoacetamidqj-3-[Y1-metyl-1-pyrrolidinio)metyl]-3- cefem-4-karboxylat-sulfatsalt, uppmätt vid KBr-spädning där- aV.

Fig. 2 är en grafisk representation av infrarödabsorption- spektrumet för det kristallina seskvifosfatsaltet av 7-[är (2-aminotiazol-4-yl)-X-(Z)-metoxy-iminoacetamidQ]-3-[K1-me- tyl-1-pyrrolidinio)-metyl7-3-cefem-4-karboxylat, uppmätt vid KBr-spädning därav.

Fig. 3 är en grafisk representation av infrarödabsorption- spektrumet av det kristallina difosfatsaltet av 7-[R-(2- aminotiazol-4-yl)-x-(Z)-metoxy-iminoacetamidq7-3-[T1-metyl- 1-pyrrolidinio)-metyl7-3-cefem-4-karboxylat, uppmätt vid KBr-spädning därav.

Detaljerad beskrivning av uppfinningen De kristallina salterna enligt uppfinningen (vilka i det följande helt enkelt betecknas som “salterna enligt upp- finningen") har utmärkt stabilitet vid rumstemperatur och en potensförlust (vid bestämning med HPLC) av mindre än 1% vid lagring under en månad vid rumstemperatur. Dessa sal- ter har även utmärkt stabilitet vid förhöjda temperaturer och har en potensförlust (vid bestämning enligt HPLC) av mindre än 15% vid lagring under en månad vid 45-56°C.

Svavelsyraadditionssaltet är ett föredraget salt enligt upp- 469 633 finningen. Det har en potensförlust av mindre än 10% vid lagring under en månad vid 45-56°C. Vad som är mycket vik- tigt är att det har låg löslighet i vatten, dvs. cirka mg/ml, och kristalliserar därför ur vatten med minsta möjliga återstodsförlust.

Disalpetersyraadditionssaltet enligt uppfinningen har även låg löslighet i vatten, dvs. cirka 60 mg/ml, och ger därför även låg âterstodsförlust vid kristallisation ur vatten.

Monoklorvätesyra-, diklorvätesyra- och seskvi- eller diorto- fosforsyraadditionssalterna har vattenlösligheter överstigan- de 200 mg/ml och kristalliseras därför företrädesvis ur or- ganiska lösningsmedel i stället för ur vatten för att man skall uppnå goda utbyten.

Nedan beskrives närmare framställningen av salterna enligt uppfinningen.

Såsom angivits ovan framställes svavelsyraadditionssaltet enligt uppfinningen medelst ett förfarande som innebär att man (a) bildar en vattenhaltig blandning av (i) minst en molär ekvivalent svavelsyra och (ii) zwitterjon motsvarande nämnda salt i en sådan mängd att den är närvarande i bland- ningen i en koncentration överstigande 25 mg/ml, (b) åstad- kommer kristallisation och (c) isolerar det kristallina svavelsyraadditionssaltet. Företrädesvis användes zwitter- jonen i steg (a) i en sådan mängd att den är närvarande i blandningen i en koncentration från cirka 100 mg/ml till cirka 200 mg/ml och steg (b) utföres i ett vattenhaltigt me- dium, som är fritt från organiskt lösningsmedel. Normalt an- vändes ej mer än två molära ekvivalenter svavelsyra i steg (a). Normalt användes zwitterjonen i steg (a) i en sådan mängd att den är närvarande i blandningen i en koncentra- tion understigande 500 mg/ml.

Steg (a) utföres lätt antingen genom att man sätter fast 469 653 e zwitterjon till svavelsyralösning (exempelvis 1N HZSO4) med snabb omröring för bildning av en lösning. Alternativt kan steg (a) utföras genom att man upplöser fast zwitter- jon i vatten och långsamt tillsätter svavelsyra under om- röring för bildning av en lösning.

Steg (b) utföres genom att man inducerar kristallisation, företrädesvis genom tillsats av groddkristaller, och där- efter bereder en uppslamning, företrädesvis under en tid av från 15 min till 2 timmar. Det är föredraget att detta kristallisationssteg utföres i vattenhaltigt medium, som är fritt från organiskt lösningsmedel, och i ett dylikt fall erhålles normalt renheter överstigande 98%. Ehuru närvaron av organiskt lösningsmedel, såsom aceton, befräm- jar kristallisation och ökar utbytet genom minskning av lösligheten av det bildade svavelsyraadditionssaltet i kristallisationsmediet kan det även befrämja utfällning av föroreningar, vilket resulterar i en minskad renhet. När zwitterjonen användes i steg (a) i en sådan mängd att det är närvarande i blandningen i en mängd understigande mg/ml måste organiskt lösningsmedel, företrädesvis ace- ton, införlivas med kristallisationsmediet för att man skall uppnå ett rimligt utbyte. Vid användning av aceton användes det lämpligen i mängder av 0,5-10 volymer per vo- lym vattenhaltigt kristallisationsmedium.

Steg (c) utföres genom att man separerar kristallerna från kristallisationsmediet, företrädesvis genom vakuumfiltre- ring, och därefter tvättar exempelvis med aceton/vatten, följt av aceton enbart eller 0,1N svavelsyra (exempelvis 1/10 volymer) följt av aceton (exempelvis 1/4 volymer), och därefter torkning, exempelvis genom vakuumtorkning vid 3o-5o°c under 4-20 timmar.

Förfarandet enligt uppfinningen för bildning av syraaddi- tionssaltet resulterar i en rening av zwitterjonformen på grund av den begränsade lösligheten hos svavelsyraadditions- 7 469 635 saltet jämfört med zwitterjonformen och kan användas för rening av zwitterjonen utan isolering därav som ett fast material. Om det är önskvärt att erhålla i huvudsak ren zwitterjon (fri bas) ur det bildade svavelsyraadditionssal- tet kan detta åstadkommas genom att man upplöser saltet i vatten, tillsätter Ba(OH)2.8H20 i en mängd av 90-100% av det teoretiska värdet vid ett pH understigande 6,5 för ut- fällning av BaSO4, filtrerar för avlägsnande av BaSO4 och utvinner filtratet, som innehåller zwitterjonen upplöst däri, och använder det som en lösning eller isolerar fast zwitterjon (fri bas) genom lyofilisering därav eller genom tillsats av aceton för att utfälla amorf zwitterjon, följt av isolering av fast zwitterjon genom vakuumfiltrering, tvättning exempelvis med aceton och vakuumtorkning. Alter- nativt omvandlas svavelsyraadditionssaltet till den fria basen under användning av jonbytarhartser, exempelvis Dowex WGR (ett svagt basanjonbytarharts) och Dowex XU-40090.01 (ett starkt syrakatjonbytarharts) med efterföljande lyofili- sering.

Framställning av det kristallina disalpetersyraadditionssal- tet enligt uppfinningen uppnås genom att man blandar (i) minst två molära ekvivalenter av salpetersyra och (ii) zwit- terjon motsvarande nämnda salt så att den är närvarande i blandningen i en koncentration överstigande 100 mg/ml och därefter inducerar kristallisation genom tillsats av grodd- kristaller eller skrapning med en glasstav, späder med 2- propanol och kyler. Det kristallina disalpetersyraadditions- _saltet utvinnes exempelvis genom filtrering, tvättning i tur och ordning med exempelvis 2-propanol-vatten (50 volym-%), 2-propanol och eter och därefter vakuumtorkning vid SOOC under 2 timmar.

Monoklorvätesyraadditionssaltet enligt uppfinningen framstäl- les genom att man upplöser zwitterjonen i ungefärligen en mo- lar ekvivalent klorvätesyra och åstadkommer kristallisation genom tillsats av aceton under omröring och fortsätter att 469 633 8 omröra blandningen, följt av isolering av kristallerna, exempelvis genom vakuumfiltrering, följt av tvättning med aceton och vakuumtorkning. Alternativt bildas monoklorväte- syraadditionssaltet ur diklorvätesyraadditionssaltet genom att man uppslammar diklorvätesyraadditionssaltet i metylen- klorid och tillsätter 1 molekvivalent trietylamin, följt av uppslamning för bildning av monoklorvätesyraadditionssal- tet, som isoleras, exempelvis genom vakuumfiltrering, och därefter tvättas med metylenklorid och vakuumtorkas.

Det kristallina diklorvätesyraadditionssaltet enligt upp- finningen framställes genom att man upplöser zwitterjonen i minst två molära ekvivalenter klorvätesyra, därefter åstadkommer kristallisation genom tillsats av aceton, iso- lerar kristallerna, exempelvis genom vakuumfiltrering, tvättar med aceton och vakuumtorkar.

Det kristallina diortofosforsyraadditionssaltet enligt upp- finningen framställes genom att man upplöser zwitterjonen i minst två molära ekvivalenter fosforsyra, åstadkommer kris- tallisation genom tillsats av aceton och isolerar kristal- lerna, exempelvis genom vakuumfiltrering, följt av tvätt- ning först med aceton och därefter med eter och slutligen vakuumtorkning. Det kristallina seskvi-ortofosforsyraaddi- tionssaltet bildas med det samma förfarande med undantag av att man använder ungefär 1,5 molära ekvivalenter fosfor- syra.

Salterna enligt uppfinningen beredes till injicerbara be- redningar genom spädning med sterilt vatten och buffring till ett pH av 3,5-7 för erhållande av en injicerbar kon- centration av 1 mg/ml upp till 400 mg/ml av zwitterjon.

Lämpliga buffertmedel innefattar exempelvis trinatriumorto- fosfat, natriumbikarbonat, natriumcitrat, N-metylglukamin, L(+)-lysin och L(+)-arginin. För intramuskulär eller intra- venös administrering till en vuxen människa är en total dos av från cirka 750 till circa 3000 mg per dag i æKæLïæ 9 469 633 normalt tillräcklig.

Salterna enligt uppfinningen beredes icke med fördel till injicerbara beredningar genom att man helt enkelt tillsät- ter sterilt vatten, eftersom svavelsyra- och disalpeter- syraadditionssalterna ej är tillräckligt lösliga för att bilda beredningar med normal koncentration för administre- ring och eftersom salterna enligt uppfinningen vid upplös- ning ger mycket låga pH-värden (1,8-2,5), vilka ger upp- hov till smärtsamma sensationer vid injicering. Såsom an- givits ovan har det visat sig enligt uppfinningen att dessa nackdelar kan elimineras genom att man bereder salterna enligt uppfinningen till en fysikalisk, dvs. fast bland- ning med farmaceutisk godtagbara, normalt fasta, ogiftiga organiska eller oorganiska baser i sådana proportioner att man erhåller ett pH-intervall av från cirka 3,5 till cirka 7, företrädesvis från cirka 4 till cirka 6, vid spädning av blandningen med vatten tilleninjicerbar koncentrationav 1 mg/ml upp till 400 mg/ml av zwitterjon, exempelvis en zwitterjonaktivitet av 250 mg/ml vid bestämning med HPLC- analys.

De exakta proportionerna av beståndsdelar i den fysikalis- ka blandningen kan variera från sats till sats av saltet eftersom saltets renhet varierar från sats till sats. Pro- portionerna av beståndsdelar fastställes för en speciell sats genom att man förtitrerar ett prov för erhållande av ett utvalt pH inom ovan nämnda intervall.

Den fysikaliska blandningen förvaras och transporteras lätt i fast form, varvid man drar fördel av stabiliteten hos salterna enligt uppfinningen, och beredes lätt till en injicerbar beredning helt enkelt genom tillsats av vatten, vilket utföres av en sköterska eller läkare, strax före användning.

Den fysikaliska blandningen beredes genom att man blandar 469 633 10 saltet och basen i en homogen blandning, exempelvis under utnyttjande av en standardblandare i torr atmosfär, och fylles företrädesvis därefter på en ampull eller annan be- hållare, hela tiden under aseptiska betingelser.

Baserna för användning i blandningen innefattar exempelvis trinatriumortofosfat, natriumbikarbonat, natriumcitrat, N- metylglukamin, L(+)-lysin och L(+)-arginin. L(+)-lysin och L(+)-arginin föredras eftersom blandningar innehållande des- sa vid rekonstituering ger injicerbara beredningar, som vid injektion ger mindre smärta hos djur än beredningar härrö- rande från blandningar innehållande andra baser. Det är mycket föredraget att använda L(+)-lysin i en sådan mängd att man erhåller ett pH av 3,5-6 vid spädning av bland- ningen med vatten för tillhandahållande av en beredning med en.zwitterjonaktivitet av 250 mg/ml (vid bestämning med HPLC-analys).

Salterna enligt uppfinningen och i huvudsak torra fysika- liska blandningar innehållande dessa kan lagras utan kyl- skåpsförvaring eller isolerande förpackning och fortfarande 1 bibehålla hög potens.

I flera av exemplen nedan användes den instabila zwitter- jonen som utgångsmaterial. Framställningen av denna beskri- ves i utföringsexemplen 1-3 i den amerikanska patentskrif- ten 4 406 899. Zwitterjonen betecknas enligt nämnda ameri- kanska patenskrift som 7-[1Z)-2-metoxiimino-2-(2-aminotia- zol-4-yl)acetamido-3-[11-metyl-1-pyrrolidinium)metyl]-3- cefem-4-karboxylat.

Uppfinningen åskådliggöres medelst följande utföringsexem- pel. 11 469 655 Exemgel I Framställning av svavelsyraadditionssaltet 1,5 g zwitterjon sättes långsamt till 10 ml kraftigt om- rörd 1N HZSO4 (1,59 molära ekvivalenter) vid 20-26°C. En lösning erhålles. Kristallisation induceras därefter genom att man försätter lösningen med groddkristaller av kris- tallint svavelsyraadditionssalt och den kristallina massan uppslammas under 0,5 timmar. Kristallerna separeras där- efter genom vakuumfiltrering, tvättas med 3 ml 50-procen- tig (volym-%) aceton/vatten och med 2 x 5 ml aceton och vakuumtorkas vid 40-5000 över natten.

Ett typiskt utbyte är 1,3 g svavelsyraadditionssalt.

Analys: Beräknat för C19H24N6O5S2.H2SO4: %C, 39,44; %H, 4,53; %N, 14,52; %S, 16,62; %H2O, inget.

Funnet: %C, 38,91; %H, 4,57; %N, 14,64; %S, 16,71; %H2O, 1,42.

Exemgel II Framställning av svavelsyraadditionssaltet 1,5 g zwitterjon upplöses i 5 ml vatten och 5 ml 1M svavel- syra sättes långsamt till denna lösning under omröring.

Kristallisation induceras därefter genom att man försätter lösningen med groddkristaller av kristallint syraadditions- salt och den kristallina massan uppslammas under 0,5 timmar.

Kristallerna separeras därefter genom vakuumfiltrering, tvättas med 3 ml 50 volymprocentig aceton/vatten och med 2 x 5 ml aceton och vakuumtorkas vid 40-SOOC över natten.

Ett typiskt utbyte är 1,3 g svavelsyraadditionssalt. 469 653 12 Exempel III Framställning av disalpetersyraadditionssaltet 300 mg zwitterjon upplöses i 0,5 ml 2N salpetersyra.

Lösningen skrapas med en glasstav, spädes med 0,4 ml 2- propanol och kyles. Den i rubriken angivna kristallina föreningen tillvaratas och tvättas därefter i tur och ord- ning med 0,4 ml av en 1:1-blandning av 2-propanol och vat- ten, 2-propanol och eter för erhållande av 127 mg av di- nitratsaltet.

Analys: Beräknat för C19H24N6O5S2.2HN03: %C, 37,62; %H, 4,32; %N, 18,47; %S, 10,57.

Funnet: %C, 36,92; %H, 4,10; %N, 18,08; %S, 10,67; (H20-halt 0,90%).

Exempel IV Framställning av monoklorvätesyraadditionssaltet 1 g zwitterjon upplöses i 2,08 ml 1N saltsyra (1 molär ekvivalent) vid 20-25°C. 30 ml aceton tillsättes under kraftig omröring under en tidsrymd av 15 min, varvid kris- taller bildas. Omröringen fortsättes under 1 timme. Kris- tallerna isoleras genom vakuumfiltrering, tvättas med 10 ml aceton och vakuumtorkas vid 50°C under 2 timmar.

Ett typiskt utbyte är 0,9 g kristallint monoklorvätesyra- salt.

Analys: Beräknat för C19H24N6O5S2.HCl: %C, 41,37; %H, 4,75; %N, 15,2; %S, 11,63; %Cl, 12,86.

%C, 39,32; %H, 4,88; %N, 13,95; %S, 11,28; %Cl, 12,44; %H2O, 4,5.

Funnet: U 469 653 %C, 41,17; %N, 14,61; %S, 11,82; %Cl, 13,03) (Korrigerat för H20: Exempel V Framställning av diklorvätesyraadditionssaltet och fram- ställning av monoklorvätesyraadditionssaltet därur 350 mg zwitterjon upplöses i 2 ml 1N saltsyra. 10 ml ace- ton sättes till den erhållna lösningen under kraftig omrö- ring och under en tidsrymd av 5 min, varvid kristaller bil- das. Omröringen fortsättes under ytterligare 5 min. Däref- ter tillsättes ytterligare 10 ml aceton och omröring utfö- res under 0,5 timmar. Kristallen avlägsnas genom vakuum- filtrering, tvättas med 2 x 5 ml aceton och vakuumtorkas vid 40-4s°c unaer 24 timmar.

Ett typiskt utbyte är 300 mg kristallint diklorvätesyra- additionssalt.

Analys: Beräknat för C19H24N6O5S2.2HCl: %C, 41,38; %H, 4,75; %N, 15,2; %S, 11,62; %Cl, 12,8.

%C, 40,78; %H, 4,98; %N, 14,7; %S, 11,25; %H2O, 1,25.

%C, 41,1; %N, 14,88; %S, 11,39; %Cl, 11,94).

Funnet: (Korrigerat för H20: 1 g diklorvätesyrasalt, som har framställts enligt ovan, uppslammas i 20 ml metylenklorid vid 20-25°C i en sluten kolv och 0,28 ml trietylamin tillsättes under en tids- rymd av 15 min. Den kristallina massan uppslammas däref- ter under 5 timmar. De erhållna monohydrokloridkristaller- na isoleras därefter genom vakuumfiltrering, tvättas med 469 633 ' 14 2 x 5 ml metylenklorid och vakuumtorkas vid 50°C under 2 timmar. Ett typiskt utbyte är 800 mg.

Exempel VI Framställning av diortofosforsyraadditionssaltet 1 g zwitterjon upplöses i 3,4 ml 144 mg/ml fosforsyra (2,2 molära ekvivalenter) vid 15°C. Den erhållna lösning- en filtreras därefter lämpligen för klarning därav. 12 ml aceton sättes till den klarade lösningen under kraftig om- röring och under en tidsrymd av 10 min, varvid kristaller bildas. Omröringen fortsättes under 10 min. Därefter till- sättes 30 ml aceton under en 10-minutersperiod och omrö- ringen fortsättes under ytterligare 15 min. Kristallerna tillvaratas genom vakuumfiltrering, tvättas med 2 x 5 ml aceton och 2 x 5 ml eter och torkas i högvakuum under 16 timmar.

Ett typiskt utbyte för denna typ av framställning var 1,1 'g kristallint diortofosforsyraadditionssalt.

Analys: Beräknat för C19H24N6O5S2.2H3P04: %C, 33,72; %H, 4,47; %N, 12,42.

Funnet: %C, 33,43; %H, 4,65; %N, 12,02; %H2O, 1,82.

(Korrigerat för H20: %C, 34,0; %N, 12,2L Seskvi-ortofosforsyraadditionssaltet bildas enligt ovan med undantag av att 1,5 molära ekvivalenter fosforsyra användes i stället för 2,2 molära ekvivalenter.

Exempel VII Stabiliteter vid förhöjda temperaturer Stabiliteterna vid förhöjd temperatur bestämdes genom att man förvarade preparaten i torra behållare vid temperatu- rer och under tidsperioder som anges i tabellen nedan och 469 635 potensförluster eller -ökningar fastställdes medelst HPLC.

En procentuell potensökning anges med ett plustecken fram- för siffran. En potensförlust understigande 10% under 2-4 veckor vid 45-56°C är vanligen en indikation på mindre än % potensförlust under 2-3 år vid rumstemperatur.

PROCENTUELL FÖRLUST 45°c 56°c 1oo°c (veckor) (veckor) (dagar) Form 1 2 4 6 1 2 4 1 Zwitterjon 37 51 71 - 57 - - 100 HZSO4-salt 2,4 till +5 3 +5 1,4 5 till +6 +3 0 till +6 0-10 (HO3)2-salt 8,8 3,4 0,68 10,3 3,7 2,4 - - Hcl-salt 4,8 2,3 6,o 6,4 6,4 - - - (HCl)2-salt 0 - 7,4 - 0 - 7,2 12,4 (H3PO4)2-salt 0 3,0 1,0 - 2,7 5,0 - - Exempel VIII Provning av fysikaliska blandningar Fysikaliska blandningar framställdes av kristallint svavel- syrasalt med (a) trinatriumortofosfat, (c) L(+)-lysin och (d) L(+)-arginin. Baserna tillsattes nat, (b) natriumbikarbo- i sådana proportioner att man erhöll nedan angivna pH-värden vid spädning av blandningen med vatten till en zwitterjonak- tivitet av 250 mg/ml (bestämd medelst HPLC-analys): trinat- 469 633 16 riumortofosfat - pH 6,0; natriumbikarbonat - pH 6,0; L(+)-lysin - pH 6,0; L(+)-arginin - pH 6,0. Injicerbara beredningar framställdes genom rekonstituering av bland- ningarna med sterilt vatten till en zwitterjonaktivitet av 250 mg/ml, bestämd medelst HPLC-analys. Det förelåg icke några löslighetsproblem. Injektioner (100 mg/kg) ut- fördes intramuskulärt på kaniner med smärta inom godtagba- ra trösklar. Den minst smärtfulla beredningen var den ar- gininhaltiga beredningen.

Liknande resultat med god löslighet och godtagbar smärta vid intramuskulär injicering erhålles vid användning av de övriga salterna enligt uppfinningen i fysikalisk blandning med ovan angivna baser.

Fig. 1 visar infrarödabsorptionspektrumet för det kristalli- na sulfatsaltet framställt enligt exemplen 1 eller 2, pel- letiserat i kristallin form med kaliumbromid.

Röntgenpulverdifraktionsmönstret för det kristallina sulfat- saltet av 7-[åk(2-aminotiazol-4-yl)-då(z)-metoxiiminoacet- amidg7-3-[X1-metyl-1-pyrrolidinio)-metylj-3-cefem-4-karboxy- lat, framställt såsom beskrivitsi exempel 1 eller 2, bestäm- des med en Rigaku-pulverdifraktometer under användning av ett koppar-röntgenrör, ett nickelfilter och provet inneslu- tet i en glasskål. Svephastigheten var 20/min inom interval- let 5-400 och i ett diagram erhölls atomatiskt de maximala difraktionsvinklarna. Med ledning av dessa beräknades d-av- stånden och de relativa intensiteterna I/IQ. Dessa värden anges nedan. 17 469 653 O d-avstånd (A) EÅEO (%)' 9,20 100 6,80 50 ,50 28 ,09 22 4,50 38 4,41 44 4,19 63 3,78 38 3,64 44 3,39 25 3,31 31 3,15 ' 47 Exempel IX Framställning av seskvifosfatsaltet 0,70 g zwitterjon upplöses under kraftig omröring i 2,2- 2,4 ml 85-procentig fosforsyra (2,1-2,2 molära ekvivalen- ter), som har spätts i volymförhållandet 1:10 med vatten.

Lösningen klaras genom filtrering genom ett membranfilter med porstorleken 0,22-0,45 mikron. 5-7 volymdelar (15-20 ml) metanol sättes till filtratet under kraftig omröring under en tidsrymd av 30-60 min. Kristaller bildas under denna operation och den kraftiga omröringen fortsättes un- der 1,5-2 timmar. Den kristallina produkten utvinnes genom vakuumfiltrering. Produkten tvättas på filtret först med 6-8 ml av en blandning av metanol och aceton i volymförhâl- landet 1:1, varvid man tillser att man bibehåller en tät- packad filterkaka, och därefter med aceton. Produkten tor- kas i vakuum vid 5000 under 2 timmar; typiskt utbyte 0,7- 0,75 g. 469 635 18 Infrarödspektrum (se fig. 2) (IR, KBr-tablett) 1 Topp-position (cm- ) Funktionell grugg zsoø-3400 NH,NH3+,karboxy1-on 1780 ß-laktam C=0 1680 karboxyl-C=O 166Û amid~C=O 1630 c=N,c=c 155Û âmid-OH 980,1040 P04- Beteende vid upphettning En exoterm visas vid 171,8°C vid mätning i differential- svepkalorimeter.

Röntgendifraktionsmönster Röntgenpulverdifraktionsmönstret för ovna angivna seskvi- fosfatsalt uppmättes med en Rigaku-pulverdifraktometer på samma sätt som beskrivits ovan med avseende på sulfatsal- tet, varvid följande resultat erhölls.

Q I/I° 11,04 - 32 9,2 - 16 7,89 - 24 7,02 - 42 6,7 - 32 ,5 - 26 4,64 - 100 4,456 - 53 4,3 - 58 3,88 - 26 3,75 - se 3,56 - 21 3,31 - 26 3 05 - 16 fi n 19 469 655 NMR-spektrum (1H 90 MHz NMR, D20-lösning) Kemisk förskjutning Tillskriven (ppm 6 vs. TSP) Beskrivning Integral gruppering 2,0-2,4 Multiplett 4 14CH2, 14'CH2 3,04 Singlett 3 12CH3 3,3-3,6 Multiplett 5 ZCH, 13CH2, 13'CH2 3,94 Dubblett 1 1 2CH 4,12 Singlett 3 ZOCH3 4,12 Dubblett 1 11CH 4,8 Dubblett 1 11CH ,42 Dubblett 1 6CH ,88 Dubblett 1 7CH 7,21 Singlett 1 18CH 469 635 Stabilitet Tid; temgeratur dag; dagar; dagar; vecka; veckor; veckor; vecka; veckor; veckor; veckor; månad; -*@ol>l\)~^sI>I\J-\\lLO-\ O 133% 7o°c ssgc ÉÉ°É 4s°c 4s°c 4s°c 45gc 37 c % förlust s \D I ua-»o-»c>c>»-A-;c>o _ å Q ä Ü fi Q I u1owu»> .><:\o Elementaranalys (vikfi-%) Funnet På torrbas Teoretiskt (seskvifosfat) ,44 36,3 36,4 4,66 4,41 4,7 12,88 13,2 13,4 2,29* - monohydrat = 2,8% HÉO 23,06 23,6 23,6 *Karl Fischer-metoden

Claims (11)

10 15 20 25 30 21 469 633 Patentkrav

1. Fysikalisk blandning av ett svavelsyra-, disalpetersyra-, monoklorvätesyra- och diklorvätesyra- eller ortofosforsyraadditionssalt innehållande 1,5-2 molära ekvivalenter fosforsyra av föreningen 7-[oz-(2-arninotiazol-4-yl)-oc-(Z)-metoxiimino- acetanndo]-3-[(l-metyl-l-pyrrolidinio)-metyl]-3-cefem-4-karboxylat med en farma- ceutiskt godtagbar, ogiftig organisk eller Oorganisk bas i sådana proportioner att man erhåller ett pH av från ca 3,5 till ca 7 vid spädníng av blandningen med vatten till injicerbar koncentration.

2. Fysikalisk blandning enligt krav 1, kännetecknad därav, att saltet och basen är närvarande i sådana proportioner att man erhåller ett pH av från ca 4 till ca 6 vid spädning av blandningen med vatten till injicerbar koncentration.

3. Fysikalisk blandning enligt krav 2, kännetecknad därav, att basen är L(+)-lysin.

4. Fysikalisk blandning enligt krav 2, kännetecknad därav, att basen är L(+)-arginin.

5. Kristallint 7-[oL-(2-aminotiazol-4-yl)-oc-(Z)-metoxiiminoaceta1nído]-3-[(1- metyl-1-pyrro1idinio)-metyl]-3-cefem-4-karboxylat-sulfatsalt med följande röntgen- pulverdiffraktionsmönster: d-avstånd (Å) I/IQ §%2 9,00 100 6,86 50 5,50 28 5,09 22 4,50 38 4,41 44 4,19 63 3,78 38 3,64 44 3,39 25 3,31 31 3,15 47 10 '15 20 25 30 469 653 22

6. Kristallint metyl-1-pyrrolidinio)-metyl]-3-cefem-4-karboxylat-fosfat med följande röntgen- 7-[oz-(2-aminotiazol-4-yD-oz-( Z)-metoxii1ninoacetamido]-3-[( 1- pulverdiiïraktionsmönster: d-avstånd (Å) I/P (76) 11,64 62 9,2 16 7,69 24 7,62 42 6,7 62 5,5 26 4,64 _ 1oo 4,456 56 4,6 56 6,66 26 6,75 69 6,56 21 6,61 26 6,05 16

7. Förfarande för framställning av det i blandningen enligt krav 1 ingående svavelsyraadditionssaltet, kännetecknat därav, att man (a) bildar en vattenhaltig blandning av (i) minst en molär ekvivalent svavel- syra och (ii) zwitterjon motsvarande nämnda salt; (b) åstadkommer kristallisation av svavelsyraadditionssaltet med det fiirbehål- g let att, när zwitterjonen är närvarande i blandningen i en koncentration av mindre än 25 mg/ml, kristallisationen utföres i närvaro av ett organiskt lösnings- medel; och (c) isolerar det kristallina svavelsyraadditionssaltet.

8. Förfarande enligt krav 7, kännetecknat därav, att steg (b) utföres i ett vattenhaltigt medium, som är fritt från organiskt lösningsmedel.

9. Förfarande enligt krav 8, kännetecknat därav, att zwitterj onen användes i steg (a) i en sådan mängd att den är närvarande i blandningen i en koncentra- 23 469 633 tion understigande 500 mg/ml.

10. Förfarande enligt krav 7, kännetecknat därav, att mängden av den i steg (a) använda zwítterjonen är sådan att den är närvarande í blandningen i en koncentration överstigande 25 mg/ml.

ll. Förfarande enligt krav 8, kännetecknat därav, att zwítterj onen användes i steg (a) i en sådan mängd att den är närvarande i blandningen i en koncentra- tion från ca 100 mg/ml till ca 200 mg/ml.