NL8601991A - Cefalosporinezouten, de bereiding daarvan alsmede injecteerbare preparaten daarvan. - Google Patents

Description

* i i VO 8302

Titeli cefalosporinezoutan, de bereiding daarvan alsmede injecteerbare preparaten daarvan.

Deze uitvinding heeft betrekking op temperatuurstabiele halfsynthetische cefalosporinezouten, waarvan de bereiding niet in de literatuur is beschreven, op de bereiding van dergelijke zouten en mengsels, die deze zouten bevatten.

5 In het Amerikaanse octrooischrift 4.406.899 wordt 7-[ct-(2-amino- thiazool-4-yl)-a-(2)-methoximinö-aceetamido]-3-[(1-methyl-l-pyrrolidinio)-methyl]-3-cefem-4-carboxylaat in de zwitterionvorm beschreven en worden overeenkomstige zuuradditiezouten vermeld (die in de zwitterionvorm in injecteerbare preparaten aanwezig zijn) en wordt aangetond dat het zwitterion 10 een breder activiteitsspectrum toont dan ceftazidime en cefotaxime.

De voornoemde cefalosporinen zijn echter alleen gedurende enkele uren als injecteerbaar preparaat stabiel en de zwitterionvorm, zelfs als een droog poeder, is bij kamertemperatuur instabiel en verliest al na 1 week 30% of meer van zijn activiteit bij opslag bij verhoogde tempera-15 tuur (b.v. 45°C en hoger) zodat speciale geïsoleerde verpakkingen en/of koeling nodig zijn hetgeen een verpakkings- en opslagnadeel is vergeleken met ceftazidime en cefotaxime.

Hoewel in het voornoemde Amerikaanse octrooischrift zuuradditie-zouten worden genoemd, wordt niet vermeld hoe men deze maakt en niet 20 vermeld of één van deze zouten in droge poedervorm een goede stabiliteit heeft. Door Kessler et al., "Comparison of a New Cephalosporin,BMY 28142, with Other Broad-Spectrum β-Lactam Antibiotics" , Antimicrobial Agents and Chemotherapy, Vol. 27, No. 2, biz. 207-216, februari 1985, wordt het sulfaatzout vermeld, maar niet hoe men dit moet bereiden of dat dit zout 25 stabiel is bij kamertemperatuur en in droge poedervorm bij verhoogde temperatuur goed stabiel is.

Er is ontdekt dat bepaalde kristallijne zuuradditiezouten van 7-[a-(2-aminothiazool-4-yl)-a-(Z)-methoxyiminoaceetamido]-3-[(1-methyl-1-pyrrolidinio)-methyl]-3-cefem-4-carboxylaat in droge poedervorm een uit-30 stekende kamertemperatuurstabiliteit bezitten en een superieure verhoogde temperatuur-stabiliteit hebben vergeleken met de zwitterionvorm.

De term "droge poedervorm" als hierin toegepast betekent een vochtgehalte van minder dan 5 gew.%. Deze zuuradditiezouten zijn de kristallijne zouten van 7-[a-(2-aminothiazool-4-yl)-a-(Z)-methoxyiminoaceetamido]- S5G?59: 4 i 5 t - 2 - -3-[ (1-methyl-l-pyrrolidinio)-methyl]-3-cefem-4-carboxylaat gekozen uit de groep bestaande uit zwavelzuur, di-salpeterzuur, mono-zoutzuur-, en di-zoutzuur-additiezouten en orthofosforzuur-additiezouten (1,5-2 mol orthofosforzuur per mol zout, b.v. een traject van de sequi- tot de 5 di-orthofosforzuurzouten) of sulfaten daarvan.

De term "kristallijn" als hierin gebruikt, betekent ten minste een bepaalde kenmerkende rangschikking van de moleculen. Hoewel hierin de zwavelzuur, di-salpeterzuur-, di-zoutzuur- en orthofosforzuur-additiezouten in heldere kristallijne vorm worden bereid (zoals blijkt door 10 dubbele breking onder een polariserende microscoop) met een nauwkeurige rangschikking van moleculen, is het mono-zoutzuur-additiezout bereid met slechts een bepaalde regelmatigheid in de rangschikking van de moleculen (zoals blijkt door een slechte dubbele breking onder een polariserende microscoop) met een niet nauwkeurig voorspelbare rangschikking en is 15 aldus "slecht" kristallijn.

De term "krista-lijn" wordt hierin toegepast om niet alleen de heldere kristallijne zouten te omvatten, maar ook de "slecht" ogende, kristallijne mono-zoutzuur-additiezouten.

De onderstaande zuuradditiezouten wanneer gevormd tot een waterig 20 injecteerbaar preparaat leveren het zwitterion in oplossing. Het zwitterion heeft de structuur volgens formule 1 van het formuleblad.

Het brede werkingsspectrum tegen verschillende organismen van de zwitterionvorm en aldus van uit de zouten gemaakte waterige preparaten wordt door de gegevens in het Amerikaanse octrooischrift 4.406.899 25 . aangetoond. *

Waterige preparaten uit de zuuradditiezouten eenvoudig door toevoeging van steriel water samengesteld, leveren zure oplossingen, die een onaanvaardbare irritatie bij intraveneuze toediening aan konijnen en een onaanvaardbare pijnlijke sensatie bij intramusculaire toediening aan 30 konijnen opwekken.

De zwavelzuur- en di-salpeterzuuradditiezouten hebben een verlaagde oplosbaarheid die onvoldoende is voor typerende, injecteerbare preparaten. Er is hierin gevonden dat deze bezwaarlijke eigenschappen worden overwonnen door de zouten hierin te gebruiken in een fysisch mengsel (dat 35 is een mengsel van vaste stoffen) met een farmaceutisch aanvaardbare 3301991 * ί - 3 - niet-giftige organische of anorganische base in hoeveelheden dat bij verdunning met water tot een zwitterionactiviteit van 1 mg/ml tot 400 mg/ml, normaal 250 mg/ml een pH van ongeveer 3,5 tot ongeveer 7 wordt geleverd (bepaald volgens hogecapaciteit-vloeistof-chromatografie, 5 hierna genoemd HPLC).

Een voorkeurszout is het kristallijne zwavelzuuradditiezout. Dit heeft de voorkeur omdat door zijn lage oplosbaarheid in water (25 mg/ml) een hoge winning uit het waterige medium bij kristallisatie mogelijk wordt. Het kristallijne zwavelzuuradditiezout wordt gemakkelijk bereid 10 volgens een werkwijze, bestaande uit de trappen van (a) het vormen van een mengsel van (i) ten minste één molair equivalent van zwavelzuur en (ii) zwitterion in een hoeveelheid, waardoor dit in het mengsel aanwezig is in een concentratie groter dan 25 mg/ml, 15 (b) het laten kristalliseren van het zwavelzuuradditiezout en (c) het isoleren van het kristallijne zwavelzuuradditiezout.

Fig. 1 is een grafische voorstelling van het infrarood absorptie-spectrum van kristallijn 7-[a-(2-aminothiazool-4-yl)-a-(Z)-methoxyiDjina-aceetamido]-3-[(1-methyl-l-pyrrolidinio)methyl] -3-cefem-4-carboxylaat 20 sulfaatzout, gemeten aan een KBr-verdunning daarvan.

Fig. 2 is een grafische voorstelling van het infraroodabsorptie-spectrum van het kristallijne sesquifosfaatzout van 7-[a-(2-aminothiazool- 4-yl)-x-(Z)-methoxyiminoaceetamido]-3-[(1-methyl-l-pyrrolidinio)-methyl]- 3- cefem-4-carboxylaat gemeten aan een KBr-verdunning daarvan.

25 Fig. 3 is een grafische voorstelling van het infraroodabsorptie- spectrum van het kristallijne difosfaatzout van 7-[a-(2-aminothiazool- 4- yl)-x-(Z)-methoxy-iminoaceetamido]-3-[(1-methyl-l-pyrrolidinio)-methyl]- 3-cefem-4-carboxylaat gemeten aan een KBr-verdunning daarvan.

De kristallijne zouten (hierna eenvoudig aangeduid als de zouten) 30 hebben bij kamertemperatuur een uitstekende stabiliteit en hebben een activiteitsverlies (zoals bepaald door HPCL) van minder dan 1% gedurende een maand opslag bij kamertemperatuur. Deze zouten hebben tevens een uitstekende stabiliteit bij verhoogde temperaturen en een activiteitsverlies (als bepaald door HPLC) van minder dan 15% bij opslag gedurende 35 een maand bij 45-46°C. Het zwavelzuuradditiezout is een voorkeurszout.

SSQ19S 1 - 4 - f >

Het heeft een activiteitsverlies van minder dan 10% gedurende een maand bij opslag bij 45-46°C. Het is zeer belangrijk dat het een lage oplosbaarheid in water heeft/ d.w.z. ongeveer 50 mg/ml, zodat het derhalve * met minimaal residuverlies uit water wordt gekristalliseerd.

5 Het di-salpeterzuuradditiezout heeft tevens een lage oplosbaarheid in water, d.w.z. ongeveer 60 mg/ml en levert derhalve tevens een laag residuverlies bij kristallisatie uit water. De mono-zoutzuur, di-zoutzuur- of sesqui- of di-orthofosforzuuradditiezouten hebben een water-oplosbaarheid groter dan 200 mg/ml en worden derhalve bij voorkeur ge-10 kristalliseerd uit organische oplosmiddelen in plaats van uit water, teneinde goede opbrengsten te verkrijgen.

Nu wordt de bereiding van de zouten besproken.

Als eerder aangeduid wordt het zwavelzuuradditiezout bereid volgens een werkwijze, bestaande uit de trappen van 15 (a) het vormen van een mengsel van (i) ten minste één molair equivalent van zwavelzuur, (ii) zwitterion, overeenkomend met genoemd zout in een zodanige hoeveelheid dat dit in het mengsel bij een concentratie van meer dan 25 mg/ml aanwezig is, 20 (b) het laten plaatsvinden van kristallisatie en (c) het isoleren van het kristallijne zwavelzuuradditiezout.

Bij voorkeur wordt het zwitterion in trap (a) in zodanige hoeveelheid toegepast, dat het in het mengsel bij een concentratie van ongeveer 100 mg/ml tot ongeveer 200 mg/ml aanwezig is, terwijl trap (b) in een 25 waterig medium vrij van organisch oplosmiddel wordt uitgevoerd. Normaal worden niet meer dan 2 molaire equivalenten zwavelzuur in trap (a) gebruikt. Normaal wordt zwitterion in trap Ca) in een zodanige hoeveelheid gebruikt dat dit in het mengsel bij een concentratie lager dan 500 mg/ml aanwezig is.

30 Trap (a) wordt gemakkelijk uitgevoerd door hetzij vast zwitterion aan de zwavelzuuroplossing (b.v. IN ^SO^) onder snel roeren toe te voegen onder vorming van een oplossing of naar keuze trap (a) uit te voeren door vast zwitterion in water op te lossen en langzaam zwavelzuur onder roeren toe te voegen onder vorming van een oplossing.

35 Trap (b) wordt uitgevoerd door kristallisatie te veroorzaken, bij ago 199 1 ·*- » Λ __ "3 voorkeur door enten en daarna bij voorkeur gedurende 15 minuten tot 2 uur te suspenderen. Het heeft de voorkeur dat deze kristallisatietrap in een waterig medium,vrij van organisch oplosmiddel,wordt uitgevoerd en in een dergelijk geval worden normaal zuiverheden groter dan 98% verkre-5 gen.

Hoewel de aanwezigheid van organisch oplosmiddel, zoals aceton, de kristallisatie bevordert en de opbrengst verhoogt door de oplosbaarheid van het gevormde zwavelzuuradditiezout in een kristallisatiemedium te verlagen, kan het tevens neerslag van onzuiverheden bevorderen hetgeen 10 tot een verlaagde zuiverheid leidt. Wanneer het zwitterion in trap (a) in een zodanige hoeveelheid wordt toegepast dat het in het mengsel in een hoeveelheid van minder dan 25 mg/ml aanwezig is, moet een organisch oplosmiddel, bij voorkeur aceton, in het kristallisatiemedium worden opgenomen om een redelijke winning te leveren. Wanneer aceton wordt toe-15 gepast wordt dit geschikt in hoeveelheden van 0,5 - 10 vol.dln per voluemedeel waterig kristallisatiemedium toegepast.

Trap (c) wordt uitgevoerd door de kristallen uit het kristallisatiemedium af te scheiden, bij voorkeur door vacuumfiltratie, daarna te wassen, b.v. met aceton/water, gevolgd door aceton alleen of Q,1N 20 zwavelzuur (b.v. 1/10 vol.dl) gevolgd door aceton (b.v. 1/1/4 volumedeel) en daarna te drogen, b.v. door vacuumdrogen bij 30-50°C gedurende 4-20 uur. De hierin vermelde methode voor het vormen van het zwavelzuuradditiezout resulteert in een zuivering van de zwitterionvorm vanwege de beperkte oplosbaarheid van het zwavelzuuradditiezout vergeleken met de zwitterion-25 vorm en dit kan worden toegepast om het zwitterion zonder dit als een vaste stof te isoleren, te zuiveren. Indien het gewenst is nagenoeg geheel zuiver zwitterion (vrije base) uit het gevormde zwavelzuuradditiezout te verkrijgen, kan dit worden uitgevoerd door het zout in water op te lossen, Ba (QH) 2.8^0 toe te voegen in een hoeveelheid van 90-100% van 30 de theoretische waarde bij een pH van minder dan 6,5 om BaSO^ te doen neerslaan, te filtreren ter verwijdering van BaSO^ en het filtraat, dat hierbij een opgelost zwitterion bevat te winnen en dit te gebruiken als een oplossing of vast zwitterion (vrije base) te isoleren door te vriesdrogen of door aceton toe te voegen om amorf zwitterion te doen neer-35 slaan, gevolgd door isolering van het vaste zwitterion door vacuumfil- 8601991 t ·? - 6 - tratie, wassen b.v. met aceton en vacuumdrogen. Naar keuze wordt het zwavelzuuradditiezout in de vrije base omgezet onder gebruik van ionen-wisselaarharsen, b.v. Dowex WGR (zwakke basische anionuitwisselaarhars) en Dowex XU-40090.01 (een sterke zure kationuitwisselaarhars) met 5 daaropvolgende vriesdroging.

Wat de bereiding van het kristallijne di-salpeterzuur-additiezout betreft; dit wordt verkregen door (i) ten minste twee molaire equivalenten salpeterzuur en (ii) zwitterion, overeenkomende met genoemd zout in zodanige hoe- 10 veelheden te mengen dat het in het mengsel bij een concentra tie van groter dan 100 mg/ml aanwezig is.

te mengen en daarna kristallisatie te veroorzaken door enten of aanwrijven met een glasstaaf, te verdunnen met 2-propanol en te koelen. Het kristallijne di-salpeterzuur-additiezout wordt gewonnen b.v. door fil-15 treren, achtereenvolgens wassen b.v. met 2-propanol-^0 (50% v/v) , 2-propanol en ether en daarna bij 50°C gedurende 2 uur onder vacuum te drogen.

Het mono-zoutzuur-additiezout wordt bereid door het zwitterion in bij benadering één molair equivalent zoutzuur op te lossen en kristalli-20 satie te laten plaatsvinden door onder roeren aceton toe te voegen en het roeren voort te zetten, gevolgd door het isoleren van kristallen, b.v. door vacuum-filtratie, en dan wassen met aceton en vacuum-drogen. Naar keuze wordt het mono-zoutzuur-additiezout gevormd uit het di-zoutzuur-additiezout door een di-zoutzuur-additiezout in methyleenchloride te 25 suspenderen en één molequivalent triethylamine toe te voegen, gevolgd door suspenderen onder vorming van het mono-zoutzuur-additiezout dat wordt geïsoleerd, b.v. door vacuum-filtratie, gevolgd door wassen met methyleenchloride en vacuum-drogen. Het kristallijne di-zoutzuur-additiezout wordt bereid door het zwitterion in ten minste twee molair 30 equivalenten zoutzuur op te lossen, daarna kristallisatiete laten plaatsvinden door toevoeging van aceton, vervolgens de kristallen te isoleren b.v. door vacuumfiltratie, te wassen met aceton en onder vacuum te drogen. Het kristallijne di-orthofosforzuur-additiezout wordt bereid door het zwitterion in ten minste twee molaire equivalent 35 fosforzuur op te lossen, kristallisatie te-:.laten~plaatsvinden. door 8601991 - 7 - toevoeging van aceton en de kristallen te isoleren door b.v. vacuum- filtratie gevolgd door eerst wassen met aceton en daarna met ether en vervolgens vacuum-drogen. Het kristallijne sesqui-orthofosforzuur- * additiezout wordt volgens eenzelfde procedure gevormd met uitzondering 5 dat ongeveer 1,5 moiaire equivalenten fosforzuur worden toégepast. De zouten worden omgezet in injecteerbare preparaten door verdunnen met steriel water en bufferen op een pH van 3,5-7 onder vorming van een in jec-teerbaar concentraat van 1 mg/ml tot 400 mg/ml zwitterion. Geschikte buffermiddelen omvatten b.v. trinatrium-orthofosfaat, natriumbicarbonaat, 10 natriumcitraat, N-methylglucamine, -lysine en L^-arginine. Voor intramusculaire of intraveneuze toediening aan een volwassen mens is een totale dosis van ongeveer 750 tot ongeveer 3000 mg/dag in verdeelde doseringen normaal voldoende.

Het is niet gewenst dat de zouten tot injecteerbare preparaten 15 worden omgevormd door eenvoudig steriel water toe te voegen omdat de zwavelzuur- en di-salpeterzuuradditiezouten niet voldoende oplosbaar zijn om preparaten met normale concentratie voor toediening te vormen en omdat de hierin genoemde zouten, wanneer opgelost, zeer lage pH-preparaten leveren (1,8-2,5) die bij injectie een pijnlijk gevoel geven. Als boven 20 aangeduid is hierin gevonden dat deze bezwaren kunnen worden overwonnen door de zouten hierin tot een fysisch, d.w.z. een vast, mengsel met farmaceutisch aanvaardbare , normaal vaste, niet-giftige organische of anorganische basen te vormen, in zodanige hoeveelheden dat een pH wordt geleverd die varieert van ongeveer 3,5 tot ongeveer 7, bij voorkeur 25 ongeveer 4 tot ongeveer 6, bij verdunning van het mengsel met water tot een injecteerbaar concentraat van 1 mg/ml tot aan 400 mg/ml zwitterion, b.v. een zwitterionactiviteit van 250 mg/ml als bepaald door HPCL-analyse. De nauwkeurige verhoudingen van de ingrediënten in het fysische mengsel variëren van partij tot partij van het zout, aangezien de zuiverheid van 30 het zout van partij tot partij varieert. De hoeveelheden ingrediënten worden voor een bepaald gebied vastgesteld door vdórfiltratie met betrekking tot een monster om een gekozen pH binnen het genoemde traject te verkrijgen. Het fysische mengsel wordt gemakkelijk opgeslagen en getransporteerd in vaste vorm, waarbij voordeel wordt getrokken uit de 35 stabiliteit van de zouten en het wordt gemakkelijk in een injecteerbaar 060 1 931 ΐ "ν - 8 - preparaat omgezet, eenvoudig door water toe te voegen, b.v. door een zuster of de dokter, juist vddr het gebruik.

Het fysische mengsel wordt bereid door het zout en de base tot een uniform mengsel te mengen, b.v. met eeh standaard-menger in een droge 5 atmosfeer, waarna dit bij voorkeur wordt afgevuld in een flesje of andere houder, alles onder aseptische omstandigheden.

De bases ten gebruike in het mengsel omvatten b.v. trinatrium-orthofosfaat, natriumbicarbonaat, natriumcitraat, N-methylglucamine,. i/"1^ -lysine en -arginine. -lysine en L ^ -arginine hebben de 10 voorkeur, aangezien mengsels hiervan kunnen worden aangemaakt tot injec-teerbare preparaten, die bij injectie minder pijn in dieren opleveren dan preparaten die zijn afgeleid van mengsels die andere bases bevatten.

(+)

Het L -lysine wordt met de meeste voorkeur gebruikt in een hoeveelheid waardoor bij verdunning van het mengsel met water een pH van 3,5-6 15 wordt geleverd, zodat men een samenstelling verkrijgt met een zwitterion-activiteit van 250 mg/ml (als bepaald volgens de HPLC-analyse).

De zouten, en de nagenoeg droog fysische mengsels die deze bevatten, kunnen zonder koeling of geïsoleerde verpakking worden opgeslagen en toch hun hoge activiteit behouden. In verschillende van.de hierin vermelde 20 preparaten wordt het instabiele zwitterion als het uitgangsmateriaal toegepast. De bereiding hiervan wordt beschreven in voorbeelden 1-3 van het Amerikaanse octrooischrift 4.406.899. Het zwitterion wordt vermeld in voornoemd Amerikaans octrooischrift als 7-[(Z)-2-methoxyimino-2-(2-aminothiazool-4-yl)aceetamido-3-[(l-methyl-l-pyrrolidinium)methyl]-3-25 cefem-4-carboxylaat.

De uitvinding wordt verder geïllustreerd door de volgende werkvoor-beelden.

VOORBEELD I

Bereiding van het zwavelzuuradditiezout.

30 1,5 g Zwitterion wordt langzaam toegevoegd aan 10 ml van snel geroerd IN ^SO^ (1,59 mol equivalenten) bij 20-26°C. Er wordt een verdunning verkregen. Kristallisatie wordt dan opgewekt door te enten met kristallijn zwavelzuuradditiezout,. waarna de kristallijne massa gedurende een half uur wordt gesuspendeerd. De kristallen worden daarna door 35 vacuum-filtratie geïsoleerd, gewassen met 3 ml van een 50%’s aceton/water )1019 31 - 9 - (v/v) en met 25 ml dln aceton en bij 40-50°C gedurende de nacht onder vacuum gedroogd. Een typerende opbrengst is 1,3 g zwavelzuur-additiezout.

Analyse: Berekend voor C19H24N6°5S2‘H2S045 %C' 39,44; %H' 4^53; %N, 14,52; %S, 16,62; %H20, geen.

5 Gevonden: %C, 38‘,91; %H, 4,57; %N, 14,64; %S, 16,71; %H20, 1,42.

VOORBEELD II

Bereiding van het zwavelzuuradditiezout.

1,5 g Zwitterion wordt opgelost in 5 ml water. 5 ml 1 M ^SO^ 10 wordt langzaam aan deze oplossing onder toeren toegevoegd. Dan wordt kristallisatie ingezet door te enten met kristallijn zuuradditiezout, waarna de kristallijne massa een half uur wordt gesuspendeerd. De kristallen worden daarna door vacuumfiltratie geïsoleerd, met 3 ml 50%’s aceton/water (v/v) en met 25 ml portie van aceton gewassen en onder 15 vacuum bij 40-50°C gedurende de nacht gedroogd.

Een typerende opbrengst is 1,3 g zwavélzuuradditiezout.

VOORBEELD III

Bereiding van het (HNO^)2 zuuradditiezout.

Er werden 300 mg zwitterion opgelost in 2N salpeterzuur (0,5 ml).

20 De oplossing wordt aangewreven met een glazen staaf, en verdund met 2-propanol (0,4 ml) en gekoeld. De kristallijne titelverbinding wordt verzameld en achtereenvolgens gewassen met 0,4 ml 2-propanol E^O (1:1), 2-propanol en daarna ether, waarbij 127 mgs van het dinitraatzout wordt geleverd.

25 Analyse: Berekend voor C._H_ N-O S_.2HNO.,: %C, 37,62; %H, 4,32; 19 24 6 5 2 3 %N, 18,47; %S, 10,57;

Gevonden: %C, 36,92; %H, 4,10; %N, 18,08; %S, 10,67; (^0 gehalte 0,90%).

VOORBEELD IV

30 Bereiding van het monohydrochloridezuur-additiezout.

1 g Zwitterion wordt opgelost in 2,08 ml in IN HG1 (1 molair equivalent) bij 20-25°C. 30 ml Aceton wordt onder snel roeren gedurende een periode van 15 minuten toegevoegd, waardoor kristallen worden gevormd.

850 1 931

Μ V

- 10 -

Het roeren wordt gedurende 1 uur voortgezet. De kristallen worden door vacuum-filtratie geïsoleerd, met 10 ml aceton gewassen en onder vacuum bij 50°C gedurende 2 uur gedroogd. Een typerende opbrengst is 0,9 g kristallijn monohydrochloridezout.

5 Analyse: Berekend voor C.X.N.O.S .HC1: %C, 41,37; %H, 4,75; 19 24 6 o 2 %N, 15,2; %S, 11,63; %Cl, 12,86

Gevonden: %C, 39,32; %H, 4,88; %N, 13,95; %S, 11,28; %C1, 12,44; %H20, 4,5.

(Gecorrigeerd voor ^0: %C, 41,17; %N, 14,61; %S, 11,82; 10 %C1, 13,03).

VOORBEELD V

Bereiding van het dihydrochloridezuuradditiezout en bereiding van het monohydrochloridezuuradditiezout daaruit.

350 mg Zwitterion wordt opgelost in 2 ml 1N-HC1. 10 ml Aceton 15 worden onder snel roeren gedurende een periode van 5 minuten aan de verkregen oplossing toegevoegd, waarbij de kristallen worden gevormd.

Het roeren wordt nog 5 extra minuten voortgezet. Daarna worden 10 extra ml aceton toegevoegd en wordt het roeren gedurende 0,5 uur uitgevoerd.

De 'kristallen worden door vacuum-filtratie verwijderd, met 25 ml porties 20 aceton gewassen en onder vacuum bij 40-45°C gedurende 24 uur gedroogd. Een typerende opbrengst is 300 mg kristallijn dihydrochloride-zuur-additiezout.

Analyse: Berekend voor: cigH24N6°5S2 .2HC1: %C, 41,38; %H, 4,75; %N, 15,2; %S, 11,62; %C1, 12,8.

25 Gevonden: %C, 40,78; %H, 4,98; %N, 14,7; %S, 11,25; %H20, 1,25.

(Gecorrigeerd voor H20: %C, 41,1; %N, 14,88; %S, 11,39; %C1, 11,94).

1 g van het dihydrochloridezout als boven bereid wordt bij 20-25°C 30 in een afgesloten kolf gesuspendeerd in 20 ml methyleenchloride en 0,28 ml triethylaminde wordt gedurende een periode van 15 minuten toegevoegd. De kristallijne massa wordt daarna 5 uur onder roeren gesuspendeerd. De verkregen monohydrochloride-kristallen worden daarna door vacuum-filtratie geïsoleerd , met 25 ml dln methyleenchloride gewassen 360 1 99 1 -3Γ- -lien gedurende 2 uur bij 50°C onder vacuum gedroogd. Typerende opbrengst is 800 mg.

VOORBEELD VI

Bereiding van het di-orthofosforzuuradditiezout.

5 1 g Zwitterion wordt opgelost in 3,4 ml 144 mg/ml H^PO^ (2,2 molair equivalenten) bij 15°C. De verkregen oplossing wordt geschikt gefiltreerd om deze helder te maken. 12 ml Aceton worden aan de gezuiverde oplossing onder snel roeren gedurende een periode van 10 minuten toegevoegd, waarbij zij kristallen vormen. Het roeren wordt gedurende 10 minuten voort-10 gezet. Daarna worden 30 ml aceton gedurende een periode van 10 minuten toegevoegd en het roeren nog een extra 15 minuten voortgezet. De kristallen worden verzameld door vacuum-ftitratie, met 25 ml dln aceton en 25 ml dln ether gewassen en onder hoogvacuum gedurende 16 uur gedroogd. Een typerende opbrengst voor dit type bereiding was 1,1 g kristallijn di-15 orthofosforzuur-additiezout.

Analyse: Berekend voor .2Η^Ρ04: %C, 33,72; %H, 4,47; %N, 12,42.

Gevonden: %C, 33,43; %H, 4,65; %N, 12,02; %H20, 1,82. (gecorrigeerd voor ^0: %C, 34,0; %N 12,2) .

20 Het sesqui-orthofosforzuur-additiezout wordt gevormd als boven, met uitzondering, dat 1,5 molaire equivalenten van H^PO^ worden toegepast in plaats van 2,2 molaire equivalenten.

VOORBEELD VII

Stabiliteit bij verhoogde temperatuur.

25 Verhoogde teraperatuurstabiliteiten werden vastgesteld door de preparaten in droge houders bij temperaturen en gedurende tijdsperioden op te slaan als hierna opgegeven, waarbij de activiteitsverliezen of vermeerderingen werden bepaald volgens HPLC. Een procent activiteitswinst wordt aangeduid door een plusteken vóór een cijfer. Een minder dan 10%*s 30 activiteitsverlies gedurende een periode van 2-4 weken bij 45-46°C is gewoonlijk een aanduiding van minder dan 10% activiteitsverlies gedurende een 2-3 jaar durende periode bij kamertemperatuur.

8601991 - 12 - -ί· V'

PERCENTAGE VERLIES

45° C - 56°C 100°C

(weken) ‘ (weken) (dagen)

Vorm 1 ' 2 4 6 1 ’ 2 ' 4 1 5 Zwitterion 37 5171 - 57 - - 100 H-SO-ZOUt 2,4 - +5i 3 +5 ; 1,4 5 - +6! +3 0 - +6: 0 - 10

2 4 ί i I

I ! i .......- ---------- ---------------- . | 1 | | -· T · - “ - t - L - - ........- - -1-----;-------- (HN03)2zout 8,8 3,4 0,68 10,3j 3,7 j 2,4 : - -^^-j-^- HC1 zout 4,8 2,3 ! 6,0 6,4 6,4 j - i i

" τ· T r"· rr' 1 ~~ - "t T I

I ! (HCl) „zout 0 - 7,4; - 0 ; - 7,2 i 12,4 __^___._i_I_ ! · i 10 (H3P04)2zout 0 3,0 1,0 - 2,7 5,0 - ;

VOORBEELD VIII

Onderzoek van fysische mengsels.

Fysische mengsels werden samengesteld uit kristallijn zwavelzuur- additiezout met (a) trinatriumorthofosfaat, (b) natriumbicarbonaat, (+) (+) 15 (c) L -lysine en (d) L -arginine.

De basen werden in zodanige hoeveelheden toegevoegd dat een pH bij verdunning van het mengsel met water tot een zwitterion-activiteit van 250 mg/ml (als bepaald volgens HPLC-analyse) als volgt werd verkregen: trinatriumorthofosfaat (om een pH van 6,0 te geven)? 20 natriumbicarbonaat (om een pH van 6,0 te geven); L^-lysine (om een pH van 6,0 te leveren); L^-arginine (om een pH van 6,0 te leveren).

Er werden injecteerbare preparaten samengesteld door met steriel water aan te maken tot een zwitterion-activiteit van 250 mg/ml als 25 bepaald volgens HPCL-analyse. Er waren geen oplósbaarheidsproblemen.

r ' ö 1 9 9 ! <r- 3* - 13 -

De injecties (10Ö mg/kg) werden intramusculair aan konijnen uitgevoérd, waarbij de pijn binnen een aanvaardbare drempel lag. De minste pijn gaf het arginine-bevattende preparaat. Soortgelijke resultaten van goede op- * losbaarheid en aanvaardbare pijn bij intramusculaire injectie werden ver-5 kregen bij toepassing van de andere vermelde zouten, fysisch, gemengd met de bovengenoemde basen.

Fig. 1 is het infrarood-absorptiespectrum van het kristallijne sulfaatzout, bereid als beschreven in voorbeelden I of IX gepelletiseerd in de kristallijne vorm met kaliumbromide. Het röntgendiffractiepatroon 10 van het kristallijne sulfaatzout van 7-[a-(2-aminothiazool-4-yl)-a-(Z)-methoxyiminoaceetamido]-3-[(1-methyl-l-pyrrolidinio)-methyl]-3-cefem-4-carboxylaat, bereid als beschreven" in voorbeelden I of II, werd bepaald met een Rigaku Poeder-diffractometer, onder toepassing van een koper-trefplaatje röntgenbuis en een nikkelfilter terwijl het monster aanwezig 15 was in een glazen schijf. De aftastsnelheid van 2°/minuut over een traject van 5° tot 40° en er werd mechanisch een grafiek geregistreerd om de hoeken van maximale diffractie te tonen. Hieruit werden de (d) afstanden en relatieve (1/1°) berekend. Zij zijn hierna samengevat.

d afstand (°&) 1/1° (%) 20 9,20 100 6,80 50 5,50 28 5,09 22 4^50 38 25 4,41 44 4,19 63- 3,78 38 3,64 44 3,39 25 30 3,31 31 3,15 47 8SÖ1991

V 'V

- 14 -

VOORBEELD IX

Bereiding van het sesquifosfaatzout.

Het zwitterion, 0,70 g, wordt onder snel roeren opgelost in 2,2-2,4 ml 85%'s fosforzuur (2,1-2,2 molaire equivalenten dat 1:10 (v/v) 5 is verdund met water. De oplossing wordt geklaard door filtratie over een 0,22-0,45 micrometer poriëngrootte-membraan filter. 5-7 vol.dln (15-20 ml) methanol worden onder snel roeren gedurende een periode van 30-60 minuten aan het filtraat toegevoegd. Gedurende deze behandeling vormen zich kristallen, waarbij het snelle roeren gedurende 1,5-2 uur 10 wordt voortgezet. Het kristallijne produkt wordt door vacuumfiltratie gewonnen.. Het produkt wordt op het filter gewassen met eerst 6-8 ml van 1:1 (v/v) methanol:aceton, waarbij men ervoor zorgt een dicht gepakte filterkoek te handhaven, en daarna met aceton. Het produkt wordt onder vacuum gedurende 2 uur bij 50°C gedroogd; een typerende opbrengst is 15 0,7-0,75 g.

Infrarood interpretatie (zie figuur 2) (IR, KBr-pellet)

Piek positie (cm"1) Functionele groep

2800-3400 NH,NH3+, carboxyl OH

20 1780 β-lactam C=0 1680 carboxyl C=0 1660 amide C=0

1630 C—N, C=C

1550 amide OH

25 980,1040 PO,= 4

Gedrag bij verhitting.

Er blijkt bij 171,8°C volgens differentiële aftastcalorimeter-grafiek een exotherm te Zijn.

Rdntgendiffractiepatroon.

30 Het Röntgenpoeder diffractiepatroon van het voornoemde sesquifos faatzout werd gemeten met een Rigaku-poederdiffractometer op dezelfde wijze als boven beschreven voor het sulfaatzout, waarvan de resultaten als volgt zijn: 860190f - 15 - d ι/ι° 11,04 - 32 9,2 - 16 7,89 - 24 5 7,02 - ' 42 6,7 - 32 5,5 26 4,64 100 4,456 53 10 4,3 - 58 3,88 - 26 3,75 - 89 3,56 21 3,31 - 26 15 3,05 16 NMR-interpretatie ( H 90 MHz NMR, D20 oplossing) zie formule 2 van het formuleblad.

Chemische verschuiving Omschrijving Totaal Toekenning 2,0-2,4 Multiplet 4 14CH2, 14'CH2 20 3,04 Singlet 3 12CH3 3,3-3,6 Multiplet 5 2CH, 13CH2, 13'CH2

3,94 Doublet 1 2CH

4.12 Singlet 3 20CH3

4.12 Doublet 1 11CH

25 4,8 Doublet 1 11CH

5,42 Doublet 1 6CH

5,88 Doublet 1 7CH

7,21 Singlet 1 18CH

)01991 - *ü' - 16 -

Stabiliteit

Tijd-temperatuur percentage verlies 1 dag ; 100°C - 10,9 - 3 dagen ; 70°C - 0 5 7 dagen ; 70°C - 1,9 1 week ; 56°C - 1,0 2 weken ; 56°C - 1,4 4 weken ; 56°C - 0 1 week ; 45°C 0 10 2 weken ; 45°C' - 1,4 4 weken ; 45°C - 0,7 8 weken ; 45°C - 1,6 1 maand ; 37°C - 2,5

Element-analyse (gewichtspercentaqe) 15 Gevonden Droge basis Theorie (Sesquifosfaat) C 35,44 36,3 36,4 H 4,66 4,41 4,7 N 12,88 13,2 13,4

H^O 2,29* - monohydraat = 2,8% H^O

20 H3P04 23,06 23,6 23,6 * Karl Fisher Methode 1601 991

Claims (2)

1. Temperatuur-stabiele, kristallijne zouten van 7-[a-(2-amino-thiazool-4-yl)-a-(Z)-methoxyiminoaceetamido]-3-[(1-methyl-l-pyrrolidinio)-methyl]-3-cefem-4-carboxylaat gekozen uit de groep bestaande uit de zwavelzuur-, di-salpeterzuur-, mono-zoutzuur- en di-zoutzuur-additie- 5 zouten en orthofosforzuur-additiezouten, die 1,5-2 molaire equivalenten H-.PO. bevatten of solvaten daarvan. 3 4

2. Kristallijne zouten volgens conclusie 1, gekozen uit de groep bestaande uit zwavelzuur-, mono-zoutzuur-, di-zoutzuur- en orthozoutzuur-additiezouten of sulfaten daarvan,

3. Fysisch mengsel van het zout vam conclusie 1, met een farma ceutisch aanvaardbare, niet-giftig organisch of anorganische base in verhoudingen, waarbij bij verdunning van het mengsel met water tot injec-teerbare concentratie een pH van ongeveer 3,5 tot ongeveer 7 wordt geleverd.

4. Fysisch mengsel volgens conclusie 3, met het kenmerk, dat het zout en de base aanwezig zijn in hoeveelheden, waarbij bij verdunning van het mengsel met water tot een injecteerbare concentratie wordt geleverd een pH van ongeveer 4 tot ongeveer 6.

5. Fysisch mengsel volgens conclusie 4, met het kenmerk, dat de 20 base L(+) lysine is.

6. Fysisch mengsel volgens conclusie 4, met het kenmerk, dat de base L(+) arginine is.

7. Werkwijze voor het maken van het zwavelzuuradditiezout, gekenmerkt door de volgende trappen: 25 (a) het vormen van een waterig mengsel van (i) ten minste een. molair equivalent zwavelzuur en (ii) zwitterion, overeenkomende met genoemd zout, (b) het laten kristalliseren van het zwavelzuur-additiezout, onder voorwaarde dat wanneer een zwitterion in het mengsel bij een concentratie 30 van kleiner dan 25 mg/ml aanwezig is, de kristallisatie in aanwezigheid van een organisch oplosmiddel wordt uitgevoerd en (c) het isoleren van het kristallijne zwavelzuur-additiezout. 860 1 991 ./ - 18 -

8. Werkwijze volgens conclusie 7, met het kenmerk, dat trap (b) in een waterig medium vrij van organisch oplosmiddel wordt uitgevoerd.

9. Werkwijze volgens conclusie ,8/ met het kenmerk, dat het Zwitterion in trap (a) in een zodanige hoeveelheid wordt toegepast, dat 5. dit in het mengsel bij een concentratie van kleiner dan 500 mg/ml aanwezig is.

10. Werkwijze volgens conclusie 7, met het kenmerk, dat de hoeveelheid van het zwitterion, toegepast in trap (a) zodanig is, dat dit in het mengsel in een concentratie groter dan 25 mg/ml aanwezig is.

11. Werkwijze volgens conclusie 8, met het kenmerk, dat het zwitterion in trap (a) in een zodanige hoeveelheid wordt toegepast, dat dit in het mengsel bij een concentratie van ongeveer 100 mg/ml tot ongeveer 200 mg/ml aanwezig is.

12. Kristallijne zwavelzuur-additiezouten volgens conclusie 1. 13. kristallijne 7-[a-(2-aminothiazool]-4-yl)-a-(Z)-methoxy- iminoaceetamido] -3-¾ (l-methyl-l-pyrrolidinio)methyl] -3-cefem-4-carbo-xylaatsulfaatzout met het volgende röntgenpoeder-diffractiepatroon: d afstand (°&) 1/1°(%) 9,20 100 20 6,86 50 5.50 28 5,09 22 4.50 38 4,41 44 25 4,19 63 3,78 38 3,64 44 3,39 25 3,31 31 30 3,15 47

14, Kristallijne orthofosforzuur-additiezout volgens conclusie 1 en de hydraten daarvan. ^:1991 - 19 -

15. Kristallijne 7-[α-(2-aminothiazool-4-yl)-ct-(Z)-methoxyimino- aceetamido]-3-[(1-methylpyrrolidinio)-methyl]-3-cefem-4-carboxylaat-fosfaat met het volgende röntgenpoeder-diffractiepatroon: d · 1/1° 5 11,04 32 9.2 16 7,89 - 24 7.02 - 42 6,7 - 32 10 5,5 - 26 4,64 - 100 4,456 53 4,3-58 3,88 - 26 15 3,75 - 89 3,56 - 21 3,31 26 3,05 - 16 860 1 991 N—ΓΓ—C-CONH—I- H k _ f/k 2 0_ch3 X© 2 M ch3 20. n/0CH3 /Kj/ix/1111 v 13 NH / 5 \®/Υ*

2. J o jy—k Yk λ 3^8 ^ γγ \Jw io CO® ,3^ 360 1 90 1