SA93130462B1 - طوافر mutants مزالة السمية مولدة للمناعة من سم الكوليرا ومن سم غير ثابت حراريا , تحضيرها واستحدامها لتحضير اللقاحات - Google Patents
طوافر mutants مزالة السمية مولدة للمناعة من سم الكوليرا ومن سم غير ثابت حراريا , تحضيرها واستحدامها لتحضير اللقاحات Download PDFInfo
- Publication number
- SA93130462B1 SA93130462B1 SA93130462A SA93130462A SA93130462B1 SA 93130462 B1 SA93130462 B1 SA 93130462B1 SA 93130462 A SA93130462 A SA 93130462A SA 93130462 A SA93130462 A SA 93130462A SA 93130462 B1 SA93130462 B1 SA 93130462B1
- Authority
- SA
- Saudi Arabia
- Prior art keywords
- sequence
- tyr
- ser
- val
- subunit
- Prior art date
Links
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 title claims abstract description 47
- 239000003053 toxin Substances 0.000 title claims abstract description 44
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 title claims abstract description 44
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 title claims abstract description 21
- 108010049048 Cholera Toxin Proteins 0.000 title claims abstract description 20
- 102000009016 Cholera Toxin Human genes 0.000 title claims abstract description 19
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 168
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims abstract description 103
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 87
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 claims abstract description 35
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 claims abstract description 11
- 230000000688 enterotoxigenic effect Effects 0.000 claims abstract description 7
- 241000607626 Vibrio cholerae Species 0.000 claims abstract description 4
- 229940118696 vibrio cholerae Drugs 0.000 claims abstract description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 58
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 23
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 claims description 14
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims description 13
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims description 12
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 7
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 6
- 101710146739 Enterotoxin Proteins 0.000 claims description 4
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 4
- 239000000147 enterotoxin Substances 0.000 claims description 4
- 231100000655 enterotoxin Toxicity 0.000 claims description 4
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 claims description 3
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims description 2
- 108010012253 E coli heat-labile enterotoxin Proteins 0.000 claims 3
- 101710188306 Protein Y Proteins 0.000 claims 3
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 claims 2
- 108010074124 Escherichia coli Proteins Proteins 0.000 claims 1
- HUDHMIUZDXZZRC-UHFFFAOYSA-N Toxin C4 Natural products N=C1N(O)C(COC(=O)NS(O)(=O)=O)C2NC(=N)NC22C(O)(O)C(OS(O)(=O)=O)CN21 HUDHMIUZDXZZRC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- VZVIFCSIGSSLRG-LJRZAWCWSA-N [(3aS,4R,9S,10aS)-2,6-diamino-10,10-dihydroxy-5-oxido-9-sulfooxy-3a,4,8,9-tetrahydro-1H-pyrrolo[1,2-c]purin-5-ium-4-yl]methoxycarbonylsulfamic acid Chemical compound NC1=N[C@H]2[C@H](COC(=O)NS(O)(=O)=O)[N+]([O-])=C(N)N3C[C@H](OS(O)(=O)=O)C(O)(O)[C@]23N1 VZVIFCSIGSSLRG-LJRZAWCWSA-N 0.000 claims 1
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 claims 1
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 abstract description 3
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 abstract description 3
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 abstract description 2
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 abstract description 2
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 96
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 75
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 72
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 59
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 59
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 59
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 56
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 56
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 55
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 47
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 46
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 44
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 38
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 34
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 30
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 27
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 26
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 26
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 25
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 25
- 241000701447 unidentified baculovirus Species 0.000 description 25
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 24
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 24
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 24
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 21
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 18
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 18
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 18
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 17
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 16
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 16
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 16
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 16
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 15
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 15
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 14
- XBGGUPMXALFZOT-UHFFFAOYSA-N glycyl-L-tyrosine hemihydrate Natural products NCC(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 XBGGUPMXALFZOT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 13
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 13
- 239000013615 primer Substances 0.000 description 13
- 102000004163 DNA-directed RNA polymerases Human genes 0.000 description 12
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 12
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 12
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 12
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 12
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 12
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 12
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 12
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 12
- 206010008631 Cholera Diseases 0.000 description 11
- 108090000626 DNA-directed RNA polymerases Proteins 0.000 description 11
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 11
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 11
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 11
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 11
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 11
- 230000005030 transcription termination Effects 0.000 description 11
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 10
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 10
- 238000011160 research Methods 0.000 description 10
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000002585 base Substances 0.000 description 9
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 9
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 9
- 239000000047 product Substances 0.000 description 9
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- JBCLFWXMTIKCCB-UHFFFAOYSA-N H-Gly-Phe-OH Natural products NCC(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 JBCLFWXMTIKCCB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 108010087924 alanylproline Proteins 0.000 description 8
- 108010044374 isoleucyl-tyrosine Proteins 0.000 description 8
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 8
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 8
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 8
- 230000005026 transcription initiation Effects 0.000 description 8
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 8
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 7
- BUDNAJYVCUHLSV-ZLUOBGJFSA-N Ala-Asp-Ser Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O BUDNAJYVCUHLSV-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 7
- KRQSPVKUISQQFS-FJXKBIBVSA-N Arg-Gly-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N KRQSPVKUISQQFS-FJXKBIBVSA-N 0.000 description 7
- YCYXHLZRUSJITQ-SRVKXCTJSA-N Arg-Pro-Pro Chemical compound NC(=N)NCCC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N1[C@H](C(O)=O)CCC1 YCYXHLZRUSJITQ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 7
- FANQWNCPNFEPGZ-WHFBIAKZSA-N Asp-Asp-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O FANQWNCPNFEPGZ-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 7
- VILLWIDTHYPSLC-PEFMBERDSA-N Asp-Glu-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O VILLWIDTHYPSLC-PEFMBERDSA-N 0.000 description 7
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 7
- JPUNZXVHHRZMNL-XIRDDKMYSA-N Glu-Pro-Trp Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(O)=O JPUNZXVHHRZMNL-XIRDDKMYSA-N 0.000 description 7
- CNAGWYQWQDMUGC-IHRRRGAJSA-N Met-Phe-Asn Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N CNAGWYQWQDMUGC-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 7
- PHKBGZKVOJCIMZ-SRVKXCTJSA-N Met-Pro-Arg Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O PHKBGZKVOJCIMZ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 7
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 7
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 7
- 108700005078 Synthetic Genes Proteins 0.000 description 7
- MICSYKFECRFCTJ-IHRRRGAJSA-N Tyr-Arg-Asp Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N)O MICSYKFECRFCTJ-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 7
- RVGVIWNHABGIFH-IHRRRGAJSA-N Tyr-Val-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O RVGVIWNHABGIFH-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 7
- AUMNPAUHKUNHHN-BYULHYEWSA-N Val-Asn-Asp Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N AUMNPAUHKUNHHN-BYULHYEWSA-N 0.000 description 7
- DEGUERSKQBRZMZ-FXQIFTODSA-N Val-Ser-Ala Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O DEGUERSKQBRZMZ-FXQIFTODSA-N 0.000 description 7
- 108010029539 arginyl-prolyl-proline Proteins 0.000 description 7
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 7
- 108010087823 glycyltyrosine Proteins 0.000 description 7
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 7
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 7
- 108010053037 kyotorphin Proteins 0.000 description 7
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 7
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 7
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 108090000848 Ubiquitin Proteins 0.000 description 6
- 102000044159 Ubiquitin Human genes 0.000 description 6
- IXKSXJFAGXLQOQ-XISFHERQSA-N WHWLQLKPGQPMY Chemical group C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C1=CNC=N1 IXKSXJFAGXLQOQ-XISFHERQSA-N 0.000 description 6
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 6
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 6
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 6
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 6
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 6
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 6
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 6
- 241001515965 unidentified phage Species 0.000 description 6
- VQAVBBCZFQAAED-FXQIFTODSA-N Ala-Pro-Asn Chemical compound C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N VQAVBBCZFQAAED-FXQIFTODSA-N 0.000 description 5
- 108091092195 Intron Proteins 0.000 description 5
- PMGDADKJMCOXHX-UHFFFAOYSA-N L-Arginyl-L-glutamin-acetat Natural products NC(=N)NCCCC(N)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(O)=O PMGDADKJMCOXHX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 5
- WNGVUZWBXZKQES-YUMQZZPRSA-N Leu-Ala-Gly Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(O)=O WNGVUZWBXZKQES-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 5
- 108700026226 TATA Box Proteins 0.000 description 5
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 108010013835 arginine glutamate Proteins 0.000 description 5
- 108010008355 arginyl-glutamine Proteins 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 5
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 5
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 5
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 5
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 5
- 108010044311 leucyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 5
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 5
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 5
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 5
- 238000010361 transduction Methods 0.000 description 5
- 230000026683 transduction Effects 0.000 description 5
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 5
- JBGSZRYCXBPWGX-BQBZGAKWSA-N Ala-Arg-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)C)CCCN=C(N)N JBGSZRYCXBPWGX-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 4
- AETQNIIFKCMVHP-UVBJJODRSA-N Ala-Trp-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O AETQNIIFKCMVHP-UVBJJODRSA-N 0.000 description 4
- DPXDVGDLWJYZBH-GUBZILKMSA-N Arg-Asn-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O DPXDVGDLWJYZBH-GUBZILKMSA-N 0.000 description 4
- CNBIWSCSSCAINS-UFYCRDLUSA-N Arg-Tyr-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O CNBIWSCSSCAINS-UFYCRDLUSA-N 0.000 description 4
- XEOXPCNONWHHSW-AVGNSLFASA-N Arg-Val-His Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N XEOXPCNONWHHSW-AVGNSLFASA-N 0.000 description 4
- MEFGKQUUYZOLHM-GMOBBJLQSA-N Asn-Arg-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O MEFGKQUUYZOLHM-GMOBBJLQSA-N 0.000 description 4
- XVVOVPFMILMHPX-ZLUOBGJFSA-N Asn-Asp-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O XVVOVPFMILMHPX-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 4
- HSWYMWGDMPLTTH-FXQIFTODSA-N Asp-Glu-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O HSWYMWGDMPLTTH-FXQIFTODSA-N 0.000 description 4
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102100034114 DnaJ homolog subfamily C member 14 Human genes 0.000 description 4
- MWERYIXRDZDXOA-QEWYBTABSA-N Gln-Ile-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O MWERYIXRDZDXOA-QEWYBTABSA-N 0.000 description 4
- MSHXWFKYXJTLEZ-CIUDSAMLSA-N Gln-Met-Asn Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N MSHXWFKYXJTLEZ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 4
- KPNWAJMEMRCLAL-GUBZILKMSA-N Gln-Ser-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N KPNWAJMEMRCLAL-GUBZILKMSA-N 0.000 description 4
- ININBLZFFVOQIO-JHEQGTHGSA-N Gln-Thr-Gly Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)NCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N)O ININBLZFFVOQIO-JHEQGTHGSA-N 0.000 description 4
- PMSDOVISAARGAV-FHWLQOOXSA-N Glu-Tyr-Phe Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 PMSDOVISAARGAV-FHWLQOOXSA-N 0.000 description 4
- XPJBQTCXPJNIFE-ZETCQYMHSA-N Gly-Gly-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)CN XPJBQTCXPJNIFE-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 4
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 4
- 101000870166 Homo sapiens DnaJ homolog subfamily C member 14 Chemical group 0.000 description 4
- XENGULNPUDGALZ-ZPFDUUQYSA-N Ile-Asn-Leu Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)O)N XENGULNPUDGALZ-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 4
- AMSYMDIIIRJRKZ-HJPIBITLSA-N Ile-His-His Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)N[C@@H](CC2=CN=CN2)C(=O)O)N AMSYMDIIIRJRKZ-HJPIBITLSA-N 0.000 description 4
- XOZOSAUOGRPCES-STECZYCISA-N Ile-Pro-Tyr Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 XOZOSAUOGRPCES-STECZYCISA-N 0.000 description 4
- LHSGPCFBGJHPCY-UHFFFAOYSA-N L-leucine-L-tyrosine Natural products CC(C)CC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 LHSGPCFBGJHPCY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- VWHGTYCRDRBSFI-ZETCQYMHSA-N Leu-Gly-Gly Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)NCC(O)=O VWHGTYCRDRBSFI-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 4
- RGUXWMDNCPMQFB-YUMQZZPRSA-N Leu-Ser-Gly Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O RGUXWMDNCPMQFB-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 4
- VUTWYNQUSJWBHO-BZSNNMDCSA-N Lys-Leu-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O VUTWYNQUSJWBHO-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 4
- LNMKRJJLEFASGA-BZSNNMDCSA-N Lys-Phe-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O LNMKRJJLEFASGA-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 4
- HNFUGJUZJRYUHN-JSGCOSHPSA-N Phe-Gly-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 HNFUGJUZJRYUHN-JSGCOSHPSA-N 0.000 description 4
- ZJPGOXWRFNKIQL-JYJNAYRXSA-N Phe-Pro-Pro Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 ZJPGOXWRFNKIQL-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 4
- 241000235648 Pichia Species 0.000 description 4
- 101710182846 Polyhedrin Proteins 0.000 description 4
- YTWNSIDWAFSEEI-RWMBFGLXSA-N Pro-His-Pro Chemical compound C1C[C@H](NC1)C(=O)N[C@@H](CC2=CN=CN2)C(=O)N3CCC[C@@H]3C(=O)O YTWNSIDWAFSEEI-RWMBFGLXSA-N 0.000 description 4
- DWUIECHTAMYEFL-XVYDVKMFSA-N Ser-Ala-His Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 DWUIECHTAMYEFL-XVYDVKMFSA-N 0.000 description 4
- YPUSXTWURJANKF-KBIXCLLPSA-N Ser-Gln-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O YPUSXTWURJANKF-KBIXCLLPSA-N 0.000 description 4
- QYSFWUIXDFJUDW-DCAQKATOSA-N Ser-Leu-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O QYSFWUIXDFJUDW-DCAQKATOSA-N 0.000 description 4
- ZKOKTQPHFMRSJP-YJRXYDGGSA-N Ser-Thr-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O ZKOKTQPHFMRSJP-YJRXYDGGSA-N 0.000 description 4
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 4
- NQQMWWVVGIXUOX-SVSWQMSJSA-N Thr-Ser-Ile Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O NQQMWWVVGIXUOX-SVSWQMSJSA-N 0.000 description 4
- 108700009124 Transcription Initiation Site Proteins 0.000 description 4
- QNJYPWZACBACER-KKUMJFAQSA-N Tyr-Asp-His Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC2=CN=CN2)C(=O)O)N)O QNJYPWZACBACER-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 4
- ULHJJQYGMWONTD-HKUYNNGSSA-N Tyr-Gly-Trp Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(O)=O ULHJJQYGMWONTD-HKUYNNGSSA-N 0.000 description 4
- YMUQBRQQCPQEQN-CXTHYWKRSA-N Tyr-Ile-Tyr Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC2=CC=C(C=C2)O)N YMUQBRQQCPQEQN-CXTHYWKRSA-N 0.000 description 4
- HNWQUBBOBKSFQV-AVGNSLFASA-N Val-Arg-His Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)N HNWQUBBOBKSFQV-AVGNSLFASA-N 0.000 description 4
- CPGJELLYDQEDRK-NAKRPEOUSA-N Val-Ile-Ala Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](NC(=O)[C@@H](N)C(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O CPGJELLYDQEDRK-NAKRPEOUSA-N 0.000 description 4
- UMPVMAYCLYMYGA-ONGXEEELSA-N Val-Leu-Gly Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(O)=O UMPVMAYCLYMYGA-ONGXEEELSA-N 0.000 description 4
- GVJUTBOZZBTBIG-AVGNSLFASA-N Val-Lys-Arg Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)N GVJUTBOZZBTBIG-AVGNSLFASA-N 0.000 description 4
- 108010069020 alanyl-prolyl-glycine Proteins 0.000 description 4
- 230000001851 biosynthetic effect Effects 0.000 description 4
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 4
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 4
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 108010026364 glycyl-glycyl-leucine Proteins 0.000 description 4
- 108010089804 glycyl-threonine Proteins 0.000 description 4
- 235000014304 histidine Nutrition 0.000 description 4
- 108010040030 histidinoalanine Proteins 0.000 description 4
- 108010092114 histidylphenylalanine Proteins 0.000 description 4
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 4
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 4
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 4
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 4
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 4
- 108010012058 leucyltyrosine Proteins 0.000 description 4
- 108010089256 lysyl-aspartyl-glutamyl-leucine Proteins 0.000 description 4
- 108010017391 lysylvaline Proteins 0.000 description 4
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 4
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 4
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 4
- 108010051242 phenylalanylserine Proteins 0.000 description 4
- 230000029279 positive regulation of transcription, DNA-dependent Effects 0.000 description 4
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 4
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 4
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 4
- 230000003362 replicative effect Effects 0.000 description 4
- 108010026333 seryl-proline Proteins 0.000 description 4
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 4
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 4
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 4
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 4
- 108010003137 tyrosyltyrosine Proteins 0.000 description 4
- CWFMWBHMIMNZLN-NAKRPEOUSA-N (2s)-1-[(2s)-2-[[(2s,3s)-2-amino-3-methylpentanoyl]amino]propanoyl]pyrrolidine-2-carboxylic acid Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O CWFMWBHMIMNZLN-NAKRPEOUSA-N 0.000 description 3
- JBFQOLHAGBKPTP-NZATWWQASA-N (2s)-2-[[(2s)-4-carboxy-2-[[3-carboxy-2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]propanoyl]amino]butanoyl]amino]-4-methylpentanoic acid Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)C(CC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN JBFQOLHAGBKPTP-NZATWWQASA-N 0.000 description 3
- YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N (6E,10E,14E,18E)-2,6,10,15,19,23-hexamethyltetracosa-2,6,10,14,18,22-hexaene Chemical compound CC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)C YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QHASENCZLDHBGX-ONGXEEELSA-N Ala-Gly-Phe Chemical compound C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 QHASENCZLDHBGX-ONGXEEELSA-N 0.000 description 3
- KMGOBAQSCKTBGD-DLOVCJGASA-N Ala-His-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)N)CC1=CN=CN1 KMGOBAQSCKTBGD-DLOVCJGASA-N 0.000 description 3
- MAZZQZWCCYJQGZ-GUBZILKMSA-N Ala-Pro-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O MAZZQZWCCYJQGZ-GUBZILKMSA-N 0.000 description 3
- QRIYOHQJRDHFKF-UWJYBYFXSA-N Ala-Tyr-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)C)CC1=CC=C(O)C=C1 QRIYOHQJRDHFKF-UWJYBYFXSA-N 0.000 description 3
- 102000007698 Alcohol dehydrogenase Human genes 0.000 description 3
- 108010021809 Alcohol dehydrogenase Proteins 0.000 description 3
- KMFPQTITXUKJOV-DCAQKATOSA-N Arg-Ser-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O KMFPQTITXUKJOV-DCAQKATOSA-N 0.000 description 3
- PSUXEQYPYZLNER-QXEWZRGKSA-N Arg-Val-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O PSUXEQYPYZLNER-QXEWZRGKSA-N 0.000 description 3
- IICZCLFBILYRCU-WHFBIAKZSA-N Asn-Gly-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O IICZCLFBILYRCU-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 3
- TZFQICWZWFNIKU-KKUMJFAQSA-N Asn-Leu-Tyr Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 TZFQICWZWFNIKU-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 3
- RRKCPMGSRIDLNC-AVGNSLFASA-N Asp-Glu-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O RRKCPMGSRIDLNC-AVGNSLFASA-N 0.000 description 3
- LDGUZSIPGSPBJP-XVYDVKMFSA-N Asp-His-Ala Chemical compound C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N LDGUZSIPGSPBJP-XVYDVKMFSA-N 0.000 description 3
- KTTCQQNRRLCIBC-GHCJXIJMSA-N Asp-Ile-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O KTTCQQNRRLCIBC-GHCJXIJMSA-N 0.000 description 3
- XAPPCWUWHNWCPQ-PBCZWWQYSA-N Asp-Thr-His Chemical compound N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)O XAPPCWUWHNWCPQ-PBCZWWQYSA-N 0.000 description 3
- OYSYWMMZGJSQRB-AVGNSLFASA-N Asp-Tyr-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O OYSYWMMZGJSQRB-AVGNSLFASA-N 0.000 description 3
- 101100230463 Caenorhabditis elegans his-44 gene Proteins 0.000 description 3
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 3
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 description 3
- 241000699802 Cricetulus griseus Species 0.000 description 3
- GSNRZJNHMVMOFV-ACZMJKKPSA-N Cys-Asp-Glu Chemical compound C(CC(=O)O)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N GSNRZJNHMVMOFV-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 3
- BSFFNUBDVYTDMV-WHFBIAKZSA-N Cys-Gly-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O BSFFNUBDVYTDMV-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 3
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 3
- JKGHMESJHRTHIC-SIUGBPQLSA-N Gln-Ile-Tyr Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N JKGHMESJHRTHIC-SIUGBPQLSA-N 0.000 description 3
- VUVKKXPCKILIBD-AVGNSLFASA-N Gln-Leu-His Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N VUVKKXPCKILIBD-AVGNSLFASA-N 0.000 description 3
- UEILCTONAMOGBR-RWRJDSDZSA-N Gln-Thr-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O UEILCTONAMOGBR-RWRJDSDZSA-N 0.000 description 3
- XHUCVVHRLNPZSZ-CIUDSAMLSA-N Glu-Gln-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O XHUCVVHRLNPZSZ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 3
- BRKUZSLQMPNVFN-SRVKXCTJSA-N Glu-His-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O BRKUZSLQMPNVFN-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 3
- QGAJQIGFFIQJJK-IHRRRGAJSA-N Glu-Tyr-Gln Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N)O QGAJQIGFFIQJJK-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 3
- GNPVTZJUUBPZKW-WDSKDSINSA-N Gly-Gln-Ser Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O GNPVTZJUUBPZKW-WDSKDSINSA-N 0.000 description 3
- XMPXVJIDADUOQB-RCOVLWMOSA-N Gly-Gly-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C([O-])=O)NC(=O)CNC(=O)C[NH3+] XMPXVJIDADUOQB-RCOVLWMOSA-N 0.000 description 3
- CQMFNTVQVLQRLT-JHEQGTHGSA-N Gly-Thr-Gln Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O CQMFNTVQVLQRLT-JHEQGTHGSA-N 0.000 description 3
- IROABALAWGJQGM-OALUTQOASA-N Gly-Trp-Tyr Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC3=CC=C(C=C3)O)C(=O)O)NC(=O)CN IROABALAWGJQGM-OALUTQOASA-N 0.000 description 3
- NWOSHVVPKDQKKT-RYUDHWBXSA-N Gly-Tyr-Gln Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O NWOSHVVPKDQKKT-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 3
- HQSKKSLNLSTONK-JTQLQIEISA-N Gly-Tyr-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)CC1=CC=C(O)C=C1 HQSKKSLNLSTONK-JTQLQIEISA-N 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KWBISLAEQZUYIC-UWJYBYFXSA-N His-His-Ala Chemical compound C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)NC(=O)[C@H](CC2=CN=CN2)N KWBISLAEQZUYIC-UWJYBYFXSA-N 0.000 description 3
- GVEODXUBBFDBPW-MGHWNKPDSA-N Ile-Tyr-Leu Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 GVEODXUBBFDBPW-MGHWNKPDSA-N 0.000 description 3
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 3
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 3
- UGTHTQWIQKEDEH-BQBZGAKWSA-N L-alanyl-L-prolylglycine zwitterion Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(O)=O UGTHTQWIQKEDEH-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 3
- UCOCBWDBHCUPQP-DCAQKATOSA-N Leu-Arg-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O UCOCBWDBHCUPQP-DCAQKATOSA-N 0.000 description 3
- ILJREDZFPHTUIE-GUBZILKMSA-N Leu-Asp-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O ILJREDZFPHTUIE-GUBZILKMSA-N 0.000 description 3
- VZBIUJURDLFFOE-IHRRRGAJSA-N Leu-His-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O VZBIUJURDLFFOE-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 3
- LJBVRCDPWOJOEK-PPCPHDFISA-N Leu-Thr-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O LJBVRCDPWOJOEK-PPCPHDFISA-N 0.000 description 3
- UCRJTSIIAYHOHE-ULQDDVLXSA-N Leu-Tyr-Arg Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)N UCRJTSIIAYHOHE-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 3
- AAKRWBIIGKPOKQ-ONGXEEELSA-N Leu-Val-Gly Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC(O)=O AAKRWBIIGKPOKQ-ONGXEEELSA-N 0.000 description 3
- NNCDAORZCMPZPX-GUBZILKMSA-N Lys-Gln-Ser Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N NNCDAORZCMPZPX-GUBZILKMSA-N 0.000 description 3
- UWHCKWNPWKTMBM-WDCWCFNPSA-N Lys-Thr-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O UWHCKWNPWKTMBM-WDCWCFNPSA-N 0.000 description 3
- QXEVZBXTDTVPCP-GMOBBJLQSA-N Met-Asn-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](CCSC)N QXEVZBXTDTVPCP-GMOBBJLQSA-N 0.000 description 3
- WUGMRIBZSVSJNP-UHFFFAOYSA-N N-L-alanyl-L-tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(NC(=O)C(N)C)C(O)=O)=CNC2=C1 WUGMRIBZSVSJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- SITLTJHOQZFJGG-UHFFFAOYSA-N N-L-alpha-glutamyl-L-valine Natural products CC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(O)=O SITLTJHOQZFJGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- DZZCICYRSZASNF-FXQIFTODSA-N Pro-Ala-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 DZZCICYRSZASNF-FXQIFTODSA-N 0.000 description 3
- VEUACYMXJKXALX-IHRRRGAJSA-N Pro-Tyr-Ser Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O VEUACYMXJKXALX-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 3
- 108020005115 Pyruvate Kinase Proteins 0.000 description 3
- 102000013009 Pyruvate Kinase Human genes 0.000 description 3
- FIDMVVBUOCMMJG-CIUDSAMLSA-N Ser-Asn-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO FIDMVVBUOCMMJG-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 3
- UGJRQLURDVGULT-LKXGYXEUSA-N Ser-Asn-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O UGJRQLURDVGULT-LKXGYXEUSA-N 0.000 description 3
- QPFJSHSJFIYDJZ-GHCJXIJMSA-N Ser-Asp-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO QPFJSHSJFIYDJZ-GHCJXIJMSA-N 0.000 description 3
- XNCUYZKGQOCOQH-YUMQZZPRSA-N Ser-Leu-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(O)=O XNCUYZKGQOCOQH-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 3
- PMCMLDNPAZUYGI-DCAQKATOSA-N Ser-Lys-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O PMCMLDNPAZUYGI-DCAQKATOSA-N 0.000 description 3
- 108091081024 Start codon Proteins 0.000 description 3
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 description 3
- BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N Tetramethylsqualene Natural products CC(=C)C(C)CCC(=C)C(C)CCC(C)=CCCC=C(C)CCC(C)C(=C)CCC(C)C(C)=C BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ZTPXSEUVYNNZRB-CDMKHQONSA-N Thr-Gly-Phe Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O ZTPXSEUVYNNZRB-CDMKHQONSA-N 0.000 description 3
- GXUWHVZYDAHFSV-FLBSBUHZSA-N Thr-Ile-Thr Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O GXUWHVZYDAHFSV-FLBSBUHZSA-N 0.000 description 3
- AHERARIZBPOMNU-KATARQTJSA-N Thr-Ser-Leu Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O AHERARIZBPOMNU-KATARQTJSA-N 0.000 description 3
- HYNAKPYFEYJMAS-XIRDDKMYSA-N Trp-Arg-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O HYNAKPYFEYJMAS-XIRDDKMYSA-N 0.000 description 3
- HVPPEXXUDXAPOM-MGHWNKPDSA-N Tyr-Ile-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 HVPPEXXUDXAPOM-MGHWNKPDSA-N 0.000 description 3
- FJBCEFPCVPHPPM-STECZYCISA-N Tyr-Ile-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O FJBCEFPCVPHPPM-STECZYCISA-N 0.000 description 3
- LMKKMCGTDANZTR-BZSNNMDCSA-N Tyr-Phe-Asp Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 LMKKMCGTDANZTR-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 3
- SYFHQHYTNCQCCN-MELADBBJSA-N Tyr-Ser-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC2=CC=C(C=C2)O)N)C(=O)O SYFHQHYTNCQCCN-MELADBBJSA-N 0.000 description 3
- WKWJJQZZZBBWKV-JYJNAYRXSA-N Val-Arg-Tyr Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](NC(=O)[C@@H](N)C(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 WKWJJQZZZBBWKV-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 3
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Chemical compound CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108091006088 activator proteins Proteins 0.000 description 3
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 3
- 108010052670 arginyl-glutamyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 3
- 108010084758 arginyl-tyrosyl-aspartic acid Proteins 0.000 description 3
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 3
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 3
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 3
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 3
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 3
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N dodecahydrosqualene Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 3
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 3
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 3
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 3
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 3
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 3
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 3
- VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N glycyl-DL-alpha-alanine Natural products OC(=O)C(C)NC(=O)CN VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010045126 glycyl-tyrosyl-glycine Proteins 0.000 description 3
- 108010010147 glycylglutamine Proteins 0.000 description 3
- 108010020688 glycylhistidine Proteins 0.000 description 3
- 108010050848 glycylleucine Proteins 0.000 description 3
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 3
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 3
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 3
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 3
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 230000037353 metabolic pathway Effects 0.000 description 3
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 3
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 3
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 3
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 3
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 3
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 3
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 3
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 3
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 3
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 3
- 229940031439 squalene Drugs 0.000 description 3
- TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N squalene Natural products CC(=CCCC(=CCCC(=CCCC=C(/C)CCC=C(/C)CC=C(C)C)C)C)C TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 108010061238 threonyl-glycine Proteins 0.000 description 3
- 230000014621 translational initiation Effects 0.000 description 3
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 3
- 239000002435 venom Substances 0.000 description 3
- 231100000611 venom Toxicity 0.000 description 3
- 210000001048 venom Anatomy 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- DRHZYJAUECRAJM-DWSYSWFDSA-N (2s,3s,4s,5r,6r)-6-[[(3s,4s,4ar,6ar,6bs,8r,8ar,12as,14ar,14br)-8a-[(2s,3r,4s,5r,6r)-3-[(2s,3r,4s,5r,6s)-5-[(2s,3r,4s,5r)-4-[(2s,3r,4r)-3,4-dihydroxy-4-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]oxy-3,5-dihydroxyoxan-2-yl]oxy-3,4-dihydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-5-[(3s,5s, Chemical compound O([C@H]1[C@H](O)[C@H](O[C@H]([C@@H]1O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1)O)O[C@H]1CC[C@]2(C)[C@H]3CC=C4[C@@H]5CC(C)(C)CC[C@@]5([C@@H](C[C@@]4(C)[C@]3(C)CC[C@H]2[C@@]1(C=O)C)O)C(=O)O[C@@H]1O[C@H](C)[C@@H]([C@@H]([C@H]1O[C@H]1[C@@H]([C@H](O)[C@@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@](O)(CO)CO3)O)[C@H](O)CO2)O)[C@H](C)O1)O)O)OC(=O)C[C@@H](O)C[C@H](OC(=O)C[C@@H](O)C[C@@H]([C@@H](C)CC)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](CO)O1)O)[C@@H](C)CC)C(O)=O)[C@@H]1OC[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O DRHZYJAUECRAJM-DWSYSWFDSA-N 0.000 description 2
- REAWNMHCBIUKLZ-ZYHUDNBSSA-N (3R,4R)-4-(hydroxymethyl)-3-(6-methylheptanoyl)oxolan-2-one Chemical compound CC(C)CCCCC(=O)[C@H]1[C@H](CO)COC1=O REAWNMHCBIUKLZ-ZYHUDNBSSA-N 0.000 description 2
- HGHOBRRUMWJWCU-FXQIFTODSA-N (4s)-4-[[(2s)-2-aminopropanoyl]amino]-5-[[(2s)-3-carboxy-1-(carboxymethylamino)-1-oxopropan-2-yl]amino]-5-oxopentanoic acid Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O HGHOBRRUMWJWCU-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KIUYPHAMDKDICO-WHFBIAKZSA-N Ala-Asp-Gly Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O KIUYPHAMDKDICO-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- WMYJZJRILUVVRG-WDSKDSINSA-N Ala-Gly-Gln Chemical compound C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O WMYJZJRILUVVRG-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- NVUIWHJLPSZZQC-CYDGBPFRSA-N Arg-Ile-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O NVUIWHJLPSZZQC-CYDGBPFRSA-N 0.000 description 2
- BDMIFVIWCNLDCT-CIUDSAMLSA-N Asn-Arg-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O BDMIFVIWCNLDCT-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- BZMWJLLUAKSIMH-FXQIFTODSA-N Asn-Glu-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O BZMWJLLUAKSIMH-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- ZMUQQMGITUJQTI-CIUDSAMLSA-N Asn-Leu-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O ZMUQQMGITUJQTI-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- IJHUZMGJRGNXIW-CIUDSAMLSA-N Asp-Glu-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O IJHUZMGJRGNXIW-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- PDECQIHABNQRHN-GUBZILKMSA-N Asp-Glu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O PDECQIHABNQRHN-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- ZBYLEBZCVKLPCY-FXQIFTODSA-N Asp-Ser-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O ZBYLEBZCVKLPCY-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- IQCJOIHDVFJQFV-LKXGYXEUSA-N Asp-Thr-Cys Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N)O IQCJOIHDVFJQFV-LKXGYXEUSA-N 0.000 description 2
- 108010077805 Bacterial Proteins Proteins 0.000 description 2
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M Bromide Chemical compound [Br-] CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 241000222120 Candida <Saccharomycetales> Species 0.000 description 2
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 2
- GUKYYUFHWYRMEU-WHFBIAKZSA-N Cys-Gly-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O GUKYYUFHWYRMEU-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 2
- 241000701959 Escherichia virus Lambda Species 0.000 description 2
- 108091029865 Exogenous DNA Proteins 0.000 description 2
- YPHPEHMXOYTEQG-LAEOZQHASA-N Glu-Val-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O YPHPEHMXOYTEQG-LAEOZQHASA-N 0.000 description 2
- NZAFOTBEULLEQB-WDSKDSINSA-N Gly-Asn-Glu Chemical compound C(CC(=O)O)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)CN NZAFOTBEULLEQB-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- ZVXMEWXHFBYJPI-LSJOCFKGSA-N Gly-Val-Ile Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O ZVXMEWXHFBYJPI-LSJOCFKGSA-N 0.000 description 2
- BAYQNCWLXIDLHX-ONGXEEELSA-N Gly-Val-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CN BAYQNCWLXIDLHX-ONGXEEELSA-N 0.000 description 2
- 229920000209 Hexadimethrine bromide Polymers 0.000 description 2
- UPGJWSUYENXOPV-HGNGGELXSA-N His-Gln-Ala Chemical compound C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)N UPGJWSUYENXOPV-HGNGGELXSA-N 0.000 description 2
- CHIAUHSHDARFBD-ULQDDVLXSA-N His-Pro-Tyr Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)C1=CN=CN1 CHIAUHSHDARFBD-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 2
- 108090000144 Human Proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000003839 Human Proteins Human genes 0.000 description 2
- 241000701044 Human gammaherpesvirus 4 Species 0.000 description 2
- LQSBBHNVAVNZSX-GHCJXIJMSA-N Ile-Ala-Asn Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N LQSBBHNVAVNZSX-GHCJXIJMSA-N 0.000 description 2
- FGBRXCZYVRFNKQ-MXAVVETBSA-N Ile-Phe-Ser Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N FGBRXCZYVRFNKQ-MXAVVETBSA-N 0.000 description 2
- HXIDVIFHRYRXLZ-NAKRPEOUSA-N Ile-Ser-Val Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)O)N HXIDVIFHRYRXLZ-NAKRPEOUSA-N 0.000 description 2
- FXJLRZFMKGHYJP-CFMVVWHZSA-N Ile-Tyr-Asn Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N FXJLRZFMKGHYJP-CFMVVWHZSA-N 0.000 description 2
- 108010060231 Insect Proteins Proteins 0.000 description 2
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- PPGBXYKMUMHFBF-KATARQTJSA-N Leu-Ser-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O PPGBXYKMUMHFBF-KATARQTJSA-N 0.000 description 2
- NTEVEUCLFMWSND-SRVKXCTJSA-N Lys-Arg-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O NTEVEUCLFMWSND-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- WALVCOOOKULCQM-ULQDDVLXSA-N Lys-Arg-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O WALVCOOOKULCQM-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 2
- 108700020354 N-acetylmuramyl-threonyl-isoglutamine Proteins 0.000 description 2
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 2
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 description 2
- 241001631646 Papillomaviridae Species 0.000 description 2
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 2
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 2
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 2
- BPCLGWHVPVTTFM-QWRGUYRKSA-N Phe-Ser-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O BPCLGWHVPVTTFM-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 2
- ZPPVJIJMIKTERM-YUMQZZPRSA-N Pro-Gln-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 ZPPVJIJMIKTERM-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- FHZJRBVMLGOHBX-GUBZILKMSA-N Pro-Pro-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@H](NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@@H]1CCCN1)C(O)=O FHZJRBVMLGOHBX-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 2
- OQPNSDWGAMFJNU-QWRGUYRKSA-N Ser-Gly-Tyr Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 OQPNSDWGAMFJNU-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 2
- KQNDIKOYWZTZIX-FXQIFTODSA-N Ser-Ser-Arg Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCNC(N)=N KQNDIKOYWZTZIX-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- JCLAFVNDBJMLBC-JBDRJPRFSA-N Ser-Ser-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O JCLAFVNDBJMLBC-JBDRJPRFSA-N 0.000 description 2
- GCXFWAZRHBRYEM-NUMRIWBASA-N Thr-Gln-Asn Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N)O GCXFWAZRHBRYEM-NUMRIWBASA-N 0.000 description 2
- ADBDQGBDNUTRDB-ULQDDVLXSA-N Tyr-Arg-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O ADBDQGBDNUTRDB-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 2
- GPLTZEMVOCZVAV-UFYCRDLUSA-N Tyr-Tyr-Arg Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 GPLTZEMVOCZVAV-UFYCRDLUSA-N 0.000 description 2
- DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N Uridine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N 0.000 description 2
- ZLFHAAGHGQBQQN-GUBZILKMSA-N Val-Ala-Pro Natural products CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O ZLFHAAGHGQBQQN-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- 241000607598 Vibrio Species 0.000 description 2
- 108700005077 Viral Genes Proteins 0.000 description 2
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- DZBUGLKDJFMEHC-UHFFFAOYSA-N acridine Chemical compound C1=CC=CC2=CC3=CC=CC=C3N=C21 DZBUGLKDJFMEHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 108060000200 adenylate cyclase Proteins 0.000 description 2
- 102000030621 adenylate cyclase Human genes 0.000 description 2
- 108010084217 alanyl-glutamyl-aspartyl-glycine Proteins 0.000 description 2
- NWMHDZMRVUOQGL-CZEIJOLGSA-N almurtide Chemical compound OC(=O)CC[C@H](C(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)CO[C@@H]([C@H](O)[C@H](O)CO)[C@@H](NC(C)=O)C=O NWMHDZMRVUOQGL-CZEIJOLGSA-N 0.000 description 2
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 2
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 2
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 2
- 108010038633 aspartylglutamate Proteins 0.000 description 2
- 210000003578 bacterial chromosome Anatomy 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 230000006696 biosynthetic metabolic pathway Effects 0.000 description 2
- 238000010804 cDNA synthesis Methods 0.000 description 2
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 2
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 230000002759 chromosomal effect Effects 0.000 description 2
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- ATDGTVJJHBUTRL-UHFFFAOYSA-N cyanogen bromide Chemical compound BrC#N ATDGTVJJHBUTRL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 210000002472 endoplasmic reticulum Anatomy 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 2
- 102000054767 gene variant Human genes 0.000 description 2
- 230000002414 glycolytic effect Effects 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000002411 histidines Chemical class 0.000 description 2
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 2
- 239000003022 immunostimulating agent Substances 0.000 description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 2
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 2
- 230000004660 morphological change Effects 0.000 description 2
- 231100000219 mutagenic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003505 mutagenic effect Effects 0.000 description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 2
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 2
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 2
- 230000007030 peptide scission Effects 0.000 description 2
- 108010018625 phenylalanylarginine Proteins 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 235000019833 protease Nutrition 0.000 description 2
- 238000001742 protein purification Methods 0.000 description 2
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 2
- ZCCUUQDIBDJBTK-UHFFFAOYSA-N psoralen Chemical compound C1=C2OC(=O)C=CC2=CC2=C1OC=C2 ZCCUUQDIBDJBTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- XETCRXVKJHBPMK-MJSODCSWSA-N trehalose 6,6'-dimycolate Chemical compound C([C@@H]1[C@H]([C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](COC(=O)C(CCCCCCCCCCC3C(C3)CCCCCCCCCCCCCCCCCC)C(O)CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC)O2)O)O1)O)OC(=O)C(C(O)CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC)CCCCCCCCCCC1CC1CCCCCCCCCCCCCCCCCC XETCRXVKJHBPMK-MJSODCSWSA-N 0.000 description 2
- 108010016264 ubiquitin-Nalpha-protein hydrolase Proteins 0.000 description 2
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 2
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 2
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 2
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 2
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 2
- XVZCXCTYGHPNEM-IHRRRGAJSA-N (2s)-1-[(2s)-2-[[(2s)-2-amino-4-methylpentanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]pyrrolidine-2-carboxylic acid Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O XVZCXCTYGHPNEM-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- PFFIDZXUXFLSSR-UHFFFAOYSA-N 1-methyl-N-[2-(4-methylpentan-2-yl)-3-thienyl]-3-(trifluoromethyl)pyrazole-4-carboxamide Chemical compound S1C=CC(NC(=O)C=2C(=NN(C)C=2)C(F)(F)F)=C1C(C)CC(C)C PFFIDZXUXFLSSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GZCWLCBFPRFLKL-UHFFFAOYSA-N 1-prop-2-ynoxypropan-2-ol Chemical compound CC(O)COCC#C GZCWLCBFPRFLKL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108020004465 16S ribosomal RNA Proteins 0.000 description 1
- OSJPPGNTCRNQQC-UWTATZPHSA-N 3-phospho-D-glyceric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)COP(O)(O)=O OSJPPGNTCRNQQC-UWTATZPHSA-N 0.000 description 1
- VXGRJERITKFWPL-UHFFFAOYSA-N 4',5'-Dihydropsoralen Natural products C1=C2OC(=O)C=CC2=CC2=C1OCC2 VXGRJERITKFWPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150044182 8 gene Proteins 0.000 description 1
- 108010049290 ADP Ribose Transferases Proteins 0.000 description 1
- 102000009062 ADP Ribose Transferases Human genes 0.000 description 1
- 230000005730 ADP ribosylation Effects 0.000 description 1
- 206010000060 Abdominal distension Diseases 0.000 description 1
- 102000013563 Acid Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108010051457 Acid Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 101100295756 Acinetobacter baumannii (strain ATCC 19606 / DSM 30007 / JCM 6841 / CCUG 19606 / CIP 70.34 / NBRC 109757 / NCIMB 12457 / NCTC 12156 / 81) omp38 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000256118 Aedes aegypti Species 0.000 description 1
- VGPWRRFOPXVGOH-BYPYZUCNSA-N Ala-Gly-Gly Chemical compound C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)NCC(O)=O VGPWRRFOPXVGOH-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- CCDFBRZVTDDJNM-GUBZILKMSA-N Ala-Leu-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O CCDFBRZVTDDJNM-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- MNZHHDPWDWQJCQ-YUMQZZPRSA-N Ala-Leu-Gly Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(O)=O MNZHHDPWDWQJCQ-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- IPZQNYYAYVRKKK-FXQIFTODSA-N Ala-Pro-Ala Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O IPZQNYYAYVRKKK-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- FEGOCLZUJUFCHP-CIUDSAMLSA-N Ala-Pro-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O FEGOCLZUJUFCHP-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- 244000144725 Amygdalus communis Species 0.000 description 1
- 240000000662 Anethum graveolens Species 0.000 description 1
- BVBKBQRPOJFCQM-DCAQKATOSA-N Arg-Asn-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O BVBKBQRPOJFCQM-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- OZNSCVPYWZRQPY-CIUDSAMLSA-N Arg-Asp-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O OZNSCVPYWZRQPY-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- FBLMOFHNVQBKRR-IHRRRGAJSA-N Arg-Asp-Tyr Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 FBLMOFHNVQBKRR-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- FEZJJKXNPSEYEV-CIUDSAMLSA-N Arg-Gln-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O FEZJJKXNPSEYEV-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- JCAISGGAOQXEHJ-ZPFDUUQYSA-N Arg-Gln-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N JCAISGGAOQXEHJ-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 1
- DJAIOAKQIOGULM-DCAQKATOSA-N Arg-Glu-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O DJAIOAKQIOGULM-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- JAYIQMNQDMOBFY-KKUMJFAQSA-N Arg-Glu-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O JAYIQMNQDMOBFY-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- YNSGXDWWPCGGQS-YUMQZZPRSA-N Arg-Gly-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O YNSGXDWWPCGGQS-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- QEHMMRSQJMOYNO-DCAQKATOSA-N Arg-His-Asn Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N QEHMMRSQJMOYNO-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- WMEVEPXNCMKNGH-IHRRRGAJSA-N Arg-Leu-His Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N WMEVEPXNCMKNGH-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- GXMSVVBIAMWMKO-BQBZGAKWSA-N Asn-Arg-Gly Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)NCC(O)=O)CCCN=C(N)N GXMSVVBIAMWMKO-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- JZRLLSOWDYUKOK-SRVKXCTJSA-N Asn-Asp-Phe Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N JZRLLSOWDYUKOK-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- NKLRWRRVYGQNIH-GHCJXIJMSA-N Asn-Ile-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O NKLRWRRVYGQNIH-GHCJXIJMSA-N 0.000 description 1
- PTSDPWIHOYMRGR-UGYAYLCHSA-N Asn-Ile-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O PTSDPWIHOYMRGR-UGYAYLCHSA-N 0.000 description 1
- BXUHCIXDSWRSBS-CIUDSAMLSA-N Asn-Leu-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O BXUHCIXDSWRSBS-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- DJIMLSXHXKWADV-CIUDSAMLSA-N Asn-Leu-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DJIMLSXHXKWADV-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- FBODFHMLALOPHP-GUBZILKMSA-N Asn-Lys-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O FBODFHMLALOPHP-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- GOPFMQJUQDLUFW-LKXGYXEUSA-N Asn-Thr-Cys Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N)O GOPFMQJUQDLUFW-LKXGYXEUSA-N 0.000 description 1
- CBHVAFXKOYAHOY-NHCYSSNCSA-N Asn-Val-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O CBHVAFXKOYAHOY-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- VPSHHQXIWLGVDD-ZLUOBGJFSA-N Asp-Asp-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O VPSHHQXIWLGVDD-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- KHBLRHKVXICFMY-GUBZILKMSA-N Asp-Glu-Lys Chemical compound N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O KHBLRHKVXICFMY-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- PGUYEUCYVNZGGV-QWRGUYRKSA-N Asp-Gly-Tyr Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 PGUYEUCYVNZGGV-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- QHHVSXGWLYEAGX-GUBZILKMSA-N Asp-His-Gln Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N QHHVSXGWLYEAGX-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- RTXQQDVBACBSCW-CFMVVWHZSA-N Asp-Ile-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O RTXQQDVBACBSCW-CFMVVWHZSA-N 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001203868 Autographa californica Species 0.000 description 1
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 description 1
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 description 1
- 108020004513 Bacterial RNA Proteins 0.000 description 1
- 102100021277 Beta-secretase 2 Human genes 0.000 description 1
- 101710150190 Beta-secretase 2 Proteins 0.000 description 1
- 108010029692 Bisphosphoglycerate mutase Proteins 0.000 description 1
- 241000255789 Bombyx mori Species 0.000 description 1
- 241000588832 Bordetella pertussis Species 0.000 description 1
- ZOXJGFHDIHLPTG-UHFFFAOYSA-N Boron Chemical compound [B] ZOXJGFHDIHLPTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101100177112 Caenorhabditis elegans his-70 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100408682 Caenorhabditis elegans pmt-2 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000589876 Campylobacter Species 0.000 description 1
- 241000222122 Candida albicans Species 0.000 description 1
- 241000238366 Cephalopoda Species 0.000 description 1
- 102100029173 Choline-phosphate cytidylyltransferase B Human genes 0.000 description 1
- 101710100756 Choline-phosphate cytidylyltransferase B Proteins 0.000 description 1
- 102000007644 Colony-Stimulating Factors Human genes 0.000 description 1
- 108010071942 Colony-Stimulating Factors Proteins 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 1
- JPVYNHNXODAKFH-UHFFFAOYSA-N Cu2+ Chemical compound [Cu+2] JPVYNHNXODAKFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KLLFLHBKSJAUMZ-ACZMJKKPSA-N Cys-Asn-Glu Chemical compound C(CC(=O)O)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](CS)N KLLFLHBKSJAUMZ-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N D-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N 0.000 description 1
- YVGGHNCTFXOJCH-UHFFFAOYSA-N DDT Chemical compound C1=CC(Cl)=CC=C1C(C(Cl)(Cl)Cl)C1=CC=C(Cl)C=C1 YVGGHNCTFXOJCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000012410 DNA Ligases Human genes 0.000 description 1
- 108010061982 DNA Ligases Proteins 0.000 description 1
- 102000016928 DNA-directed DNA polymerase Human genes 0.000 description 1
- 108010014303 DNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 241000255601 Drosophila melanogaster Species 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000588722 Escherichia Species 0.000 description 1
- 241000206602 Eukaryota Species 0.000 description 1
- 108010074860 Factor Xa Proteins 0.000 description 1
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 description 1
- 108010058643 Fungal Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000030782 GTP binding Human genes 0.000 description 1
- 108091000058 GTP-Binding Proteins 0.000 description 1
- UTPGJEROJZHISI-DFGCRIRUSA-N Gaillardin Chemical compound C1=C(C)[C@H]2[C@@H](OC(=O)C)C[C@@](C)(O)[C@@H]2C[C@@H]2C(=C)C(=O)O[C@H]21 UTPGJEROJZHISI-DFGCRIRUSA-N 0.000 description 1
- 102100039556 Galectin-4 Human genes 0.000 description 1
- 206010064571 Gene mutation Diseases 0.000 description 1
- 108700028146 Genetic Enhancer Elements Proteins 0.000 description 1
- 108700007698 Genetic Terminator Regions Proteins 0.000 description 1
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 1
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 1
- 241000948258 Gila Species 0.000 description 1
- DLOHWQXXGMEZDW-CIUDSAMLSA-N Gln-Arg-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O DLOHWQXXGMEZDW-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- MCAVASRGVBVPMX-FXQIFTODSA-N Gln-Glu-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O MCAVASRGVBVPMX-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- HYPVLWGNBIYTNA-GUBZILKMSA-N Gln-Leu-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O HYPVLWGNBIYTNA-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- UTOQQOMEJDPDMX-ACZMJKKPSA-N Gln-Ser-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O UTOQQOMEJDPDMX-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- SXFPZRRVWSUYII-KBIXCLLPSA-N Gln-Ser-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N SXFPZRRVWSUYII-KBIXCLLPSA-N 0.000 description 1
- XMVLTPMCUJTJQP-FXQIFTODSA-N Glu-Gln-Cys Chemical compound C(CC(=O)O)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N XMVLTPMCUJTJQP-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- QIQABBIDHGQXGA-ZPFDUUQYSA-N Glu-Ile-Arg Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O QIQABBIDHGQXGA-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 1
- CUPSDFQZTVVTSK-GUBZILKMSA-N Glu-Lys-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O CUPSDFQZTVVTSK-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- MWTGQXBHVRTCOR-GLLZPBPUSA-N Glu-Thr-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O MWTGQXBHVRTCOR-GLLZPBPUSA-N 0.000 description 1
- 102000030595 Glucokinase Human genes 0.000 description 1
- 108010021582 Glucokinase Proteins 0.000 description 1
- XUORRGAFUQIMLC-STQMWFEESA-N Gly-Arg-Tyr Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)CN)O XUORRGAFUQIMLC-STQMWFEESA-N 0.000 description 1
- UXJHNZODTMHWRD-WHFBIAKZSA-N Gly-Asn-Ala Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O UXJHNZODTMHWRD-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- FMNHBTKMRFVGRO-FOHZUACHSA-N Gly-Asn-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)CN FMNHBTKMRFVGRO-FOHZUACHSA-N 0.000 description 1
- FZQLXNIMCPJVJE-YUMQZZPRSA-N Gly-Asp-Leu Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O FZQLXNIMCPJVJE-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- PMNHJLASAAWELO-FOHZUACHSA-N Gly-Asp-Thr Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O PMNHJLASAAWELO-FOHZUACHSA-N 0.000 description 1
- CEXINUGNTZFNRY-BYPYZUCNSA-N Gly-Cys-Gly Chemical compound [NH3+]CC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC([O-])=O CEXINUGNTZFNRY-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- BULIVUZUDBHKKZ-WDSKDSINSA-N Gly-Gln-Asn Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O BULIVUZUDBHKKZ-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- QPCVIQJVRGXUSA-LURJTMIESA-N Gly-Gly-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)CN QPCVIQJVRGXUSA-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- AYBKPDHHVADEDA-YUMQZZPRSA-N Gly-His-Asn Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O AYBKPDHHVADEDA-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- BHPQOIPBLYJNAW-NGZCFLSTSA-N Gly-Ile-Pro Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)CN BHPQOIPBLYJNAW-NGZCFLSTSA-N 0.000 description 1
- CVFOYJJOZYYEPE-KBPBESRZSA-N Gly-Lys-Tyr Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O CVFOYJJOZYYEPE-KBPBESRZSA-N 0.000 description 1
- IEGFSKKANYKBDU-QWHCGFSZSA-N Gly-Phe-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC2=CC=CC=C2)NC(=O)CN)C(=O)O IEGFSKKANYKBDU-QWHCGFSZSA-N 0.000 description 1
- FGPLUIQCSKGLTI-WDSKDSINSA-N Gly-Ser-Glu Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O FGPLUIQCSKGLTI-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- CUVBTVWFVIIDOC-YEPSODPASA-N Gly-Thr-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)CN CUVBTVWFVIIDOC-YEPSODPASA-N 0.000 description 1
- GWNIGUKSRJBIHX-STQMWFEESA-N Gly-Tyr-Arg Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)NC(=O)CN)O GWNIGUKSRJBIHX-STQMWFEESA-N 0.000 description 1
- 102100031181 Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 102000005548 Hexokinase Human genes 0.000 description 1
- 108700040460 Hexokinases Proteins 0.000 description 1
- AWHJQEYGWRKPHE-LSJOCFKGSA-N His-Ala-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O AWHJQEYGWRKPHE-LSJOCFKGSA-N 0.000 description 1
- TVQGUFGDVODUIF-LSJOCFKGSA-N His-Arg-Ala Chemical compound C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)N TVQGUFGDVODUIF-LSJOCFKGSA-N 0.000 description 1
- QZAFGJNKLMNDEM-DCAQKATOSA-N His-Asn-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 QZAFGJNKLMNDEM-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- BXOLYFJYQQRQDJ-MXAVVETBSA-N His-Leu-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)N BXOLYFJYQQRQDJ-MXAVVETBSA-N 0.000 description 1
- BZAQOPHNBFOOJS-DCAQKATOSA-N His-Pro-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O BZAQOPHNBFOOJS-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- 101000608765 Homo sapiens Galectin-4 Proteins 0.000 description 1
- 101001071515 Homo sapiens Gastrin-releasing peptide Proteins 0.000 description 1
- 241000257303 Hymenoptera Species 0.000 description 1
- IDAHFEPYTJJZFD-PEFMBERDSA-N Ile-Asp-Glu Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)N IDAHFEPYTJJZFD-PEFMBERDSA-N 0.000 description 1
- GYAFMRQGWHXMII-IUKAMOBKSA-N Ile-Asp-Thr Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)O)N GYAFMRQGWHXMII-IUKAMOBKSA-N 0.000 description 1
- YNMQUIVKEFRCPH-QSFUFRPTSA-N Ile-Ile-Gly Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)O)N YNMQUIVKEFRCPH-QSFUFRPTSA-N 0.000 description 1
- FZWVCYCYWCLQDH-NHCYSSNCSA-N Ile-Leu-Gly Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)O)N FZWVCYCYWCLQDH-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- RMNMUUCYTMLWNA-ZPFDUUQYSA-N Ile-Lys-Asp Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N RMNMUUCYTMLWNA-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 1
- YKZAMJXNJUWFIK-JBDRJPRFSA-N Ile-Ser-Ala Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)O)N YKZAMJXNJUWFIK-JBDRJPRFSA-N 0.000 description 1
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 1
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 1
- 102000004195 Isomerases Human genes 0.000 description 1
- 108090000769 Isomerases Proteins 0.000 description 1
- 241000235649 Kluyveromyces Species 0.000 description 1
- 244000285963 Kluyveromyces fragilis Species 0.000 description 1
- 235000014663 Kluyveromyces fragilis Nutrition 0.000 description 1
- 241001138401 Kluyveromyces lactis Species 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- KFKWRHQBZQICHA-STQMWFEESA-N L-leucyl-L-phenylalanine Natural products CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 KFKWRHQBZQICHA-STQMWFEESA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 description 1
- 241001103596 Lelia Species 0.000 description 1
- POZULHZYLPGXMR-ONGXEEELSA-N Leu-Gly-Val Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O POZULHZYLPGXMR-ONGXEEELSA-N 0.000 description 1
- XVZCXCTYGHPNEM-UHFFFAOYSA-N Leu-Leu-Pro Natural products CC(C)CC(N)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)N1CCCC1C(O)=O XVZCXCTYGHPNEM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AKVBOOKXVAMKSS-GUBZILKMSA-N Leu-Ser-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O AKVBOOKXVAMKSS-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- AIQWYVFNBNNOLU-RHYQMDGZSA-N Leu-Thr-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O AIQWYVFNBNNOLU-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 1
- VJGQRELPQWNURN-JYJNAYRXSA-N Leu-Tyr-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O VJGQRELPQWNURN-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NQCJGQHHYZNUDK-DCAQKATOSA-N Lys-Arg-Ser Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O)CCCN=C(N)N NQCJGQHHYZNUDK-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- PGBPWPTUOSCNLE-JYJNAYRXSA-N Lys-Gln-Phe Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@H](CCCCN)N PGBPWPTUOSCNLE-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- SBQDRNOLGSYHQA-YUMQZZPRSA-N Lys-Ser-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O SBQDRNOLGSYHQA-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- NYTDJEZBAAFLLG-IHRRRGAJSA-N Lys-Val-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O NYTDJEZBAAFLLG-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- 241000701076 Macacine alphaherpesvirus 1 Species 0.000 description 1
- 102000007651 Macrophage Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 1
- 108010046938 Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 1
- 241000948268 Meda Species 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 108060004795 Methyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 229920000426 Microplastic Polymers 0.000 description 1
- 241000713333 Mouse mammary tumor virus Species 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- YBAFDPFAUTYYRW-UHFFFAOYSA-N N-L-alpha-glutamyl-L-leucine Natural products CC(C)CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(O)=O YBAFDPFAUTYYRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108700015872 N-acetyl-nor-muramyl-L-alanyl-D-isoglutamine Proteins 0.000 description 1
- XMBSYZWANAQXEV-UHFFFAOYSA-N N-alpha-L-glutamyl-L-phenylalanine Natural products OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 XMBSYZWANAQXEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AJHCSUXXECOXOY-UHFFFAOYSA-N N-glycyl-L-tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(NC(=O)CN)C(O)=O)=CNC2=C1 AJHCSUXXECOXOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930193140 Neomycin Natural products 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 108010020943 Nitrogenase Proteins 0.000 description 1
- 101710163270 Nuclease Proteins 0.000 description 1
- 108010036939 Occlusion Body Matrix Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000320412 Ogataea angusta Species 0.000 description 1
- 101710116435 Outer membrane protein Proteins 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 1
- 240000002390 Pandanus odoratissimus Species 0.000 description 1
- 235000005311 Pandanus odoratissimus Nutrition 0.000 description 1
- 108010081690 Pertussis Toxin Proteins 0.000 description 1
- QMMRHASQEVCJGR-UBHSHLNASA-N Phe-Ala-Pro Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 QMMRHASQEVCJGR-UBHSHLNASA-N 0.000 description 1
- DPUOLKQSMYLRDR-UBHSHLNASA-N Phe-Arg-Ala Chemical compound NC(N)=NCCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 DPUOLKQSMYLRDR-UBHSHLNASA-N 0.000 description 1
- FRPVPGRXUKFEQE-YDHLFZDLSA-N Phe-Asp-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O FRPVPGRXUKFEQE-YDHLFZDLSA-N 0.000 description 1
- FQUUYTNBMIBOHS-IHRRRGAJSA-N Phe-Met-Ser Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=CC=C1)N FQUUYTNBMIBOHS-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- BSKMOCNNLNDIMU-CDMKHQONSA-N Phe-Thr-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(O)=O BSKMOCNNLNDIMU-CDMKHQONSA-N 0.000 description 1
- 102000001105 Phosphofructokinases Human genes 0.000 description 1
- 108010069341 Phosphofructokinases Proteins 0.000 description 1
- 102000011025 Phosphoglycerate Mutase Human genes 0.000 description 1
- ABLZXFCXXLZCGV-UHFFFAOYSA-N Phosphorous acid Chemical class OP(O)=O ABLZXFCXXLZCGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 1
- UTPGJEROJZHISI-UHFFFAOYSA-N Pleniradin-acetat Natural products C1=C(C)C2C(OC(=O)C)CC(C)(O)C2CC2C(=C)C(=O)OC21 UTPGJEROJZHISI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010076039 Polyproteins Proteins 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- IWNOFCGBMSFTBC-CIUDSAMLSA-N Pro-Ala-Glu Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O IWNOFCGBMSFTBC-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- ONPFOYPPPOHMNH-UVBJJODRSA-N Pro-Ala-Trp Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)C(=O)O)NC(=O)[C@@H]3CCCN3 ONPFOYPPPOHMNH-UVBJJODRSA-N 0.000 description 1
- CYQQWUPHIZVCNY-GUBZILKMSA-N Pro-Arg-Ser Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O CYQQWUPHIZVCNY-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- AMBLXEMWFARNNQ-DCAQKATOSA-N Pro-Asn-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 AMBLXEMWFARNNQ-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- QNZLIVROMORQFH-BQBZGAKWSA-N Pro-Gly-Cys Chemical compound C1C[C@H](NC1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O QNZLIVROMORQFH-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- RFWXYTJSVDUBBZ-DCAQKATOSA-N Pro-Pro-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H]1NCCC1 RFWXYTJSVDUBBZ-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- FNGOXVQBBCMFKV-CIUDSAMLSA-N Pro-Ser-Glu Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O FNGOXVQBBCMFKV-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010001267 Protein Subunits Proteins 0.000 description 1
- 102000002067 Protein Subunits Human genes 0.000 description 1
- 101100084022 Pseudomonas aeruginosa (strain ATCC 15692 / DSM 22644 / CIP 104116 / JCM 14847 / LMG 12228 / 1C / PRS 101 / PAO1) lapA gene Proteins 0.000 description 1
- 101100408135 Pseudomonas aeruginosa (strain ATCC 15692 / DSM 22644 / CIP 104116 / JCM 14847 / LMG 12228 / 1C / PRS 101 / PAO1) phnA gene Proteins 0.000 description 1
- 239000013616 RNA primer Substances 0.000 description 1
- 108091028664 Ribonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 241000235347 Schizosaccharomyces pombe Species 0.000 description 1
- 244000082988 Secale cereale Species 0.000 description 1
- JPIDMRXXNMIVKY-VZFHVOOUSA-N Ser-Ala-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O JPIDMRXXNMIVKY-VZFHVOOUSA-N 0.000 description 1
- KAAPNMOKUUPKOE-SRVKXCTJSA-N Ser-Asn-Phe Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 KAAPNMOKUUPKOE-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- OHKFXGKHSJKKAL-NRPADANISA-N Ser-Glu-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O OHKFXGKHSJKKAL-NRPADANISA-N 0.000 description 1
- IXCHOHLPHNGFTJ-YUMQZZPRSA-N Ser-Gly-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CO)N IXCHOHLPHNGFTJ-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- RJHJPZQOMKCSTP-CIUDSAMLSA-N Ser-His-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O RJHJPZQOMKCSTP-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- VIIJCAQMJBHSJH-FXQIFTODSA-N Ser-Met-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O VIIJCAQMJBHSJH-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- XKFJENWJGHMDLI-QWRGUYRKSA-N Ser-Phe-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)NCC(O)=O XKFJENWJGHMDLI-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- XGQKSRGHEZNWIS-IHRRRGAJSA-N Ser-Pro-Tyr Chemical compound N[C@@H](CO)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](Cc1ccc(O)cc1)C(O)=O XGQKSRGHEZNWIS-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- AABIBDJHSKIMJK-FXQIFTODSA-N Ser-Ser-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O AABIBDJHSKIMJK-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- 241000700584 Simplexvirus Species 0.000 description 1
- 241000256251 Spodoptera frugiperda Species 0.000 description 1
- 241000191940 Staphylococcus Species 0.000 description 1
- 241000187398 Streptomyces lividans Species 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 102000019197 Superoxide Dismutase Human genes 0.000 description 1
- 108010012715 Superoxide dismutase Proteins 0.000 description 1
- 101710137500 T7 RNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 239000004098 Tetracycline Substances 0.000 description 1
- LIXBDERDAGNVAV-XKBZYTNZSA-N Thr-Gln-Ser Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O LIXBDERDAGNVAV-XKBZYTNZSA-N 0.000 description 1
- NDXSOKGYKCGYKT-VEVYYDQMSA-N Thr-Pro-Asp Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O NDXSOKGYKCGYKT-VEVYYDQMSA-N 0.000 description 1
- VTMGKRABARCZAX-OSUNSFLBSA-N Thr-Pro-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](N)[C@@H](C)O VTMGKRABARCZAX-OSUNSFLBSA-N 0.000 description 1
- KZTLZZQTJMCGIP-ZJDVBMNYSA-N Thr-Val-Thr Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O KZTLZZQTJMCGIP-ZJDVBMNYSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- 101710182223 Toxin B Proteins 0.000 description 1
- 241000255993 Trichoplusia ni Species 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- GSCPHMSPGQSZJT-JYBASQMISA-N Trp-Ser-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)N)O GSCPHMSPGQSZJT-JYBASQMISA-N 0.000 description 1
- UIDJDMVRDUANDL-BVSLBCMMSA-N Trp-Tyr-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O UIDJDMVRDUANDL-BVSLBCMMSA-N 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 102100040247 Tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 1
- YJQCOFNZVFGCAF-UHFFFAOYSA-N Tunicamycin II Natural products O1C(CC(O)C2C(C(O)C(O2)N2C(NC(=O)C=C2)=O)O)C(O)C(O)C(NC(=O)C=CCCCCCCCCC(C)C)C1OC1OC(CO)C(O)C(O)C1NC(C)=O YJQCOFNZVFGCAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XQYHLZNPOTXRMQ-KKUMJFAQSA-N Tyr-Glu-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O XQYHLZNPOTXRMQ-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- WAPFQMXRSDEGOE-IHRRRGAJSA-N Tyr-Glu-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O WAPFQMXRSDEGOE-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- KCPFDGNYAMKZQP-KBPBESRZSA-N Tyr-Gly-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O KCPFDGNYAMKZQP-KBPBESRZSA-N 0.000 description 1
- KRXFXDCNKLANCP-CXTHYWKRSA-N Tyr-Tyr-Ile Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC(O)=CC=1)C1=CC=C(O)C=C1 KRXFXDCNKLANCP-CXTHYWKRSA-N 0.000 description 1
- AGDDLOQMXUQPDY-BZSNNMDCSA-N Tyr-Tyr-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O AGDDLOQMXUQPDY-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- DJIJBQYBDKGDIS-JYJNAYRXSA-N Tyr-Val-Val Chemical compound CC(C)[C@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)Cc1ccc(O)cc1)C(C)C)C(O)=O DJIJBQYBDKGDIS-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- FBVUOEYVGNMRMD-NAKRPEOUSA-N Val-Cys-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](C(C)C)N FBVUOEYVGNMRMD-NAKRPEOUSA-N 0.000 description 1
- BEGDZYNDCNEGJZ-XVKPBYJWSA-N Val-Gly-Gln Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O BEGDZYNDCNEGJZ-XVKPBYJWSA-N 0.000 description 1
- PTFPUAXGIKTVNN-ONGXEEELSA-N Val-His-Gly Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)NCC(=O)O)N PTFPUAXGIKTVNN-ONGXEEELSA-N 0.000 description 1
- LGXUZJIQCGXKGZ-QXEWZRGKSA-N Val-Pro-Asn Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N LGXUZJIQCGXKGZ-QXEWZRGKSA-N 0.000 description 1
- UJMCYJKPDFQLHX-XGEHTFHBSA-N Val-Ser-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](C(C)C)N)O UJMCYJKPDFQLHX-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 1
- IECQJCJNPJVUSB-IHRRRGAJSA-N Val-Tyr-Ser Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](Cc1ccc(O)cc1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O IECQJCJNPJVUSB-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- 241000235013 Yarrowia Species 0.000 description 1
- 241000235015 Yarrowia lipolytica Species 0.000 description 1
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002535 acidifier Substances 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 208000024447 adrenal gland neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 108010008685 alanyl-glutamyl-aspartic acid Proteins 0.000 description 1
- 108010076324 alanyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010047495 alanylglycine Proteins 0.000 description 1
- 108010070944 alanylhistidine Proteins 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 108090000637 alpha-Amylases Proteins 0.000 description 1
- KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N alpha-L-glutamyl-L-glutamic acid Natural products OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N alumane Chemical class [AlH3] AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K aluminium phosphate Chemical compound O1[Al]2OP1(=O)O2 ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- DIZPMCHEQGEION-UHFFFAOYSA-H aluminium sulfate (anhydrous) Chemical compound [Al+3].[Al+3].[O-]S([O-])(=O)=O.[O-]S([O-])(=O)=O.[O-]S([O-])(=O)=O DIZPMCHEQGEION-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 101150042295 arfA gene Proteins 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 108010069205 aspartyl-phenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 1
- 108010051210 beta-Fructofuranosidase Proteins 0.000 description 1
- DRTQHJPVMGBUCF-PSQAKQOGSA-N beta-L-uridine Natural products O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-PSQAKQOGSA-N 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 1
- 208000024330 bloating Diseases 0.000 description 1
- 229910052796 boron Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 229940095731 candida albicans Drugs 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 1
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 1
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 1
- 230000007910 cell fusion Effects 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 229940030156 cell vaccine Drugs 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000013522 chelant Substances 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- 229960005091 chloramphenicol Drugs 0.000 description 1
- WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N chloramphenicol Chemical compound ClC(Cl)C(=O)N[C@H](CO)[C@H](O)C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N 0.000 description 1
- 238000011509 clonal analysis Methods 0.000 description 1
- 238000012761 co-transfection Methods 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 1
- 229910001431 copper ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000037029 cross reaction Effects 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010016616 cysteinylglycine Proteins 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 1
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 239000005547 deoxyribonucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000002637 deoxyribonucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 231100000676 disease causative agent Toxicity 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000008029 eradication Effects 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 1
- 210000002468 fat body Anatomy 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 1
- -1 for example Chemical class 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 108010006664 gamma-glutamyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- PUBCCFNQJQKCNC-XKNFJVFFSA-N gastrin-releasingpeptide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@@H](N)C(C)C)[C@@H](C)O)C(C)C)[C@@H](C)O)C(C)C)C1=CNC=N1 PUBCCFNQJQKCNC-XKNFJVFFSA-N 0.000 description 1
- 231100000025 genetic toxicology Toxicity 0.000 description 1
- 230000001738 genotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003862 glucocorticoid Substances 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010078144 glutaminyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010055341 glutamyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 108020004445 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 108010000434 glycyl-alanyl-leucine Proteins 0.000 description 1
- 108010028188 glycyl-histidyl-serine Proteins 0.000 description 1
- 108010084389 glycyltryptophan Proteins 0.000 description 1
- 108010037850 glycylvaline Proteins 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 206010073071 hepatocellular carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 231100000844 hepatocellular carcinoma Toxicity 0.000 description 1
- 108010045383 histidyl-glycyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 229930186900 holotoxin Natural products 0.000 description 1
- 238000002744 homologous recombination Methods 0.000 description 1
- 230000006801 homologous recombination Effects 0.000 description 1
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 1
- 210000001822 immobilized cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 229940047122 interleukins Drugs 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 210000002490 intestinal epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- 229960000318 kanamycin Drugs 0.000 description 1
- 229930027917 kanamycin Natural products 0.000 description 1
- SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N kanamycin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N 0.000 description 1
- 229930182823 kanamycin A Natural products 0.000 description 1
- BRHPBVXVOVMTIQ-ZLELNMGESA-N l-leucine l-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O.CC(C)C[C@H](N)C(O)=O BRHPBVXVOVMTIQ-ZLELNMGESA-N 0.000 description 1
- 101150066555 lacZ gene Proteins 0.000 description 1
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 description 1
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 1
- 231100001231 less toxic Toxicity 0.000 description 1
- 108010044056 leucyl-phenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 125000003473 lipid group Chemical group 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000006194 liquid suspension Substances 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 210000004216 mammary stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 231100000647 material safety data sheet Toxicity 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000011987 methylation Effects 0.000 description 1
- 238000007069 methylation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000000520 microinjection Methods 0.000 description 1
- 230000006740 morphological transformation Effects 0.000 description 1
- 125000001446 muramyl group Chemical group N[C@@H](C=O)[C@@H](O[C@@H](C(=O)*)C)[C@H](O)[C@H](O)CO 0.000 description 1
- 231100000299 mutagenicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000007886 mutagenicity Effects 0.000 description 1
- 229960004927 neomycin Drugs 0.000 description 1
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 description 1
- 238000007899 nucleic acid hybridization Methods 0.000 description 1
- 238000002515 oligonucleotide synthesis Methods 0.000 description 1
- 101150087557 omcB gene Proteins 0.000 description 1
- 101150115693 ompA gene Proteins 0.000 description 1
- 229940126578 oral vaccine Drugs 0.000 description 1
- 230000002611 ovarian Effects 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 210000001711 oxyntic cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000006174 pH buffer Substances 0.000 description 1
- 230000036407 pain Effects 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 108010091748 peptide A Proteins 0.000 description 1
- 239000012466 permeate Substances 0.000 description 1
- 235000020030 perry Nutrition 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010024654 phenylalanyl-prolyl-alanine Proteins 0.000 description 1
- 101150009573 phoA gene Proteins 0.000 description 1
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical group 0.000 description 1
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 1
- 239000002574 poison Substances 0.000 description 1
- 229920000747 poly(lactic acid) Polymers 0.000 description 1
- 230000008488 polyadenylation Effects 0.000 description 1
- 201000007532 polyhydramnios Diseases 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 230000004481 post-translational protein modification Effects 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 108010031719 prolyl-serine Proteins 0.000 description 1
- 108010090894 prolylleucine Proteins 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 238000000164 protein isolation Methods 0.000 description 1
- 210000001938 protoplast Anatomy 0.000 description 1
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 1
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 230000003014 reinforcing effect Effects 0.000 description 1
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 1
- 210000003660 reticulum Anatomy 0.000 description 1
- 239000002336 ribonucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000002652 ribonucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 238000009666 routine test Methods 0.000 description 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 1
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 1
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 208000026775 severe diarrhea Diseases 0.000 description 1
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 1
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 230000003068 static effect Effects 0.000 description 1
- 230000003335 steric effect Effects 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 102000055501 telomere Human genes 0.000 description 1
- 108091035539 telomere Proteins 0.000 description 1
- 229960002180 tetracycline Drugs 0.000 description 1
- 229930101283 tetracycline Natural products 0.000 description 1
- 235000019364 tetracycline Nutrition 0.000 description 1
- 150000003522 tetracyclines Chemical class 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 230000001256 tonic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 231100000167 toxic agent Toxicity 0.000 description 1
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 description 1
- 230000005945 translocation Effects 0.000 description 1
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150035767 trp gene Proteins 0.000 description 1
- 101150044170 trpE gene Proteins 0.000 description 1
- 102000003390 tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 1
- ZHSGGJXRNHWHRS-VIDYELAYSA-N tunicamycin Chemical compound O([C@H]1[C@@H]([C@H]([C@@H](O)[C@@H](CC(O)[C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O2)N2C(NC(=O)C=C2)=O)O)O1)O)NC(=O)/C=C/CC(C)C)[C@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1NC(C)=O ZHSGGJXRNHWHRS-VIDYELAYSA-N 0.000 description 1
- MEYZYGMYMLNUHJ-UHFFFAOYSA-N tunicamycin Natural products CC(C)CCCCCCCCCC=CC(=O)NC1C(O)C(O)C(CC(O)C2OC(C(O)C2O)N3C=CC(=O)NC3=O)OC1OC4OC(CO)C(O)C(O)C4NC(=O)C MEYZYGMYMLNUHJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010020532 tyrosyl-proline Proteins 0.000 description 1
- DRTQHJPVMGBUCF-UHFFFAOYSA-N uracil arabinoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940045145 uridine Drugs 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- 108010073969 valyllysine Proteins 0.000 description 1
- 210000000605 viral structure Anatomy 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
- 238000009736 wetting Methods 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/164—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/195—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
- C07K14/24—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria from Enterobacteriaceae (F), e.g. Citrobacter, Serratia, Proteus, Providencia, Morganella, Yersinia
- C07K14/245—Escherichia (G)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/195—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
- C07K14/28—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria from Vibrionaceae (F)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
الملخص: يتعلق الاختراع الراهن ببروتين مزال السمية مولد للمناعة an immunogenic detoxified protein يشتمل على تسلسل الحمض الأميني amino acid للوحدة الفرعية أ subunit A من سم الكوليرا (cholera toxin (CT-A أو الوحدة الفرعية أ من سم غير ثابت حراريا من الإشريكيةالقولونية an Escherichia coli heat labile toxin (LTA) أو قطعة منه حيث يستبدل حمض أميني واحد أو أكثر عند، أو في مواقع مطابقة ل 53-Tyr-104 ،Val-97 ،Ser-63 ،Val أو باستبدال 106-Pro بحمض أميني آخر أو بحذفه. وتشتمل أمثلة استبدالات محددة على -Val Ser-63- ،Val-53-Tyr ،Val-53-Glu ،53-Asp ،Tyr-104-Lys،Val-97-Tyr ،Val-97-Lys ،Lys Tyr-104-Ser،Tyr-104-Asp،Pro-106-Ser ويعتبر البروتين المزال السمية المولد للمناعة مفيدا بصفته لقاح ل فبريو كوليري Vibrio cholerae أو لسلالة مولدة لسم معوي enterotoxigenic strainمن بكتريا Escherichia coli وينتج عن طريق تقنيات recombinant DNA بواسطة توليد طفرة موجه نحو الموقع site-directed mutagenesis . ،
Description
طوافر مزالة السمية مولدة للمناعة من سم الكوليرا ومن سم غير ثابت حرارياً ؛ تحضيرها واستخدامها لتحضير اللقاحات الوصف الكامل خلفية الاختراع: يتعلق الاختراع الراهن ببروتينات مزالة السمية مولدة للمناعة immunogenic detoxified proteins من سموم الكوليرا (CT) أو من سموم غير ثابتة حرارياً (LT) منتجة عن طريق السلالات المولدة للسم المعوي enterotoxigenic strains من E.coli > ذات استبدالات عند حمض أميني واحد أو أكثر من الأحماض الأمينية 1-53د7؛ Ser-63 Tyr-104 «Val-97 أو Pro-106 وباستخدامها في لقاحات مفيدة للوقاية من أو معالجة الكوليرا cholera أو عدوات enterotoxigenic 15 coli ويمكن إنتاج البروتينات بشكل مناسب باستخدام تقنيات recombinant DNA عن طريق توليد طفرة موجه نحو الموقع site-directed 5 ل DNA الذي يحمل شيفرة السموم ذات النمط الشائع. ٠١ تعتبر الكوليرا cholera مرضاً معدياً منتشراآً بشكل كبير في العالم؛ بشكل خاص في العالم Cus CIE يعتبر lhe في بعض المناطق. وتبدو الاضطرابات الخطيرة التي Las في الجهاز المعوي مميتة بنسبة عالية للحالات المسجلة للمرض. العامل المسبب للكوليرا هو Gram-negative microorganism vibrio choelrae (V.cholerae) ويستعمر هذا الكائن الحي القناة المعوية لأفراد احتكوا به من خلال تناول vo طعام أو ماء ملوث؛ ويتكاثر إلى تراكيز عالية Jos ويتمثل العرض الرئيسي في إسهال pa يمكن أن يفقد المريض بسببه قدر ١5-٠١ لترآ من السوائل كل يوم عن طريق البراز. ونتيجة للجفاف الشديد وفقدان الإلكتروليتات (الاملاح) electrolytes لا يتحمل المريض الإصابة في 7760-8٠ من الحالات ؛ ويموت. ويكون الإسهال المتسبب عن طريق Cholerae .7 هو نتيجة لإفراز سم الكوليرا (CT) ؛ الذي يعمل عن طريق تحفيز Ye فعالية إنزيم adenylate cyclace بحيث يحفز الاضطرابات على مستوى الخلية. Yoo
‘ وبالرغم من أنه يمكن معالجة الكوليرا بشكل فعال عن طريق sale) التميه rehydration المكثف والمضبوط» يكون توزيع لقاح مرغوبا به لغرض إتمام السيطرة والإبادة المستقبلية للمرض. وفي الوقت الحالي؛ تتواجد هنالك تطعيمات ضد of pl KI تتضمن إعطاءآً غير معوي ٠ لبكتيريا ميتة. وبالرغم من أن بعض الدول تصر على التطعيم ضد المرض؛ هنالك شكوك جادة Lad يتعلق بفائدته الحقيقية؛ Wile أن اللقاح الخلوي الشائع يحمي من عواقب العدوى لدى 0 فقط من الحالات وأن فترة الحماية تكون محدودة للغاية بأقل من 76 شهور. ففي بنغلادش» هنالك اختبار تجريبي جار (997-19450١م) للقاح عن طريق الفم يتكون من بكتيريا ميتة مع إضافة الوحدة الفرعية "ب" من سم الكوليراء المعروف بأنه مولد << - للمناعة بشكل كبير. وينجح هذا المنتج في تحفيز الحماية Adil بدون تأثيرات جانبية iad (انظر ما جاء عن جيه. هولمجرن (Holmgren J. جيه. كليمنز «Clemens J. دي ايه. ساك .4x Sack D.A. سانشيز 4d 5 Sanchez J. إم. سفنرولم ¢Svennerholm A.M. في بحث بعنوان "Oral Immunization arainst cholera’ في مجلة مواضيع حالية في علم المناعة الحيوي الدقيق ¢Curr.
Top.
Microbiol.
Immunol مجلد ا ص لاخاح AAA ١ ام). vo ويمائل سم الكوليرا السموم غير الثابتة حرارياً heat labile toxins للسلالات المولدة للسم المعوي من بكتيريا Escherichia coli في تسلسل الحمض الأميني؛ التركيبة وطريقة العمل. وتكون عواقب العدوى ب enterotoxigenic strain of E. coli مشابهة؛ على الرغم من أنها أقل خطورة لتلك للكوليراء وتشتمل على إسهال شديد واضطرابات معوية. ' وتشتمل جميع سموم 67 و LT على وحدة فرعية مفردة أ subunit A (أو محضض أ (protomer A مسؤولة عن الفعالية الإنزيمية للسم (يشار إليها في هذا البيان ب هن أو (LT-A وخمس وحدات فرعية متطابقة ب (أو محضض ب) تسهم في ارتباط السم مع الخلايا الطلائية المعوية (يشار إليها في هذا البيان ب CT-B أو (LTB وتنفذ الوحدة الفرعية أ إلى غشاء الخلية cell membrane وتسبب تفعيل adenylate cyclase Yo عن طريق إضافة You
NAD-Dependent ADP-ribosylation of a GTP-binding protein الذي ينظم فعالية الإنزيم. ويتمثل التأثير العلاجي لهذا في إحداث فقدان مكثف للسائل إلى الأمعاء. وأجري بحث هام على سم الكوليرا والسموم غير الثابتة حرارياً من بكتيريا Escherichia coli . ° ويعتبر تسلسل CT معروفاً وقد تم وصفه (انظر ما sla عن .1.1 Mickalanos ومعاونيه في مجلة (Nature مجلد 7075 ص )00 ((pYAAY) : ويكون تسلسل LT من سلالات مولدة للسم المعوي من بكتيريا الإشريكية القولونية centerotoxigenic strains of E. coli كما ذكرء؛ Silas بنسبة CT — 78٠0 ويعرف ويوصسف أيضاً في النشرات العلمية. ويصف Spicer BK. ومعاونوه (انظر مجلة الكيمياء الحيوية؛ مجلد (YOY ص 7271-8705© (1987م)) تسلسل الحمض الأميني للوحدة الفرعية أ ل the heat labile toxin from an enterotoxigenic strain of E. coli موجودة في الخنازير. وعرفت صيغة كروموسومية بكتيرية bacterial chromosomal ل aig LT تسلسلها بواسطة Pickett CL. ومعاونيه (مجلة علم البكتيريا مجلد 114 ص 5187-8186 (YAY) yo وتتبّع كذلك تسلسل الوحدة الفرعية 1 LT من سلالة من Ecoli المعروفة بأنها تؤثر على البشر (انظر ما جاء عن Yamamoto ومعاونيه في مجلة الكيمياء الحيوية؛ مجلد 75949 ص 044-5073 (144ام). ونظراً للأهمية العلاجية الكامنة للقاح ضد الكوليرا والبكتيريا المولدة للسم المعوي هنالك اهتمام متواصل وكبير في إنتاج سم مزال السمية detoxified toxin قادر على التمنيعم ضد Y. الكوليرا والبكتيريا المولدة للسم المعوي ٠ وتسمح تقنيات الهندسة الوراثية genetic engineering بإدخال طفرات mutations محددة في الجينات التي تحمل شيفرة السموم وإنتاج السموم المطفرة mutated toxin باستخدام تقنيات تقليدية حالية للتعبير عن الجين وتنقية البروتين . وحاولت مجموعات متنوعة تمييز طفرات الجينات؛ التي تشمل مميزات فقدان السمية للبروتينات المشفرة encoded proteins وتجرى هذه الدراسات على الأغلب Lad يتعلق بالجين Yo للسم (LT من .Escherichia coli You
ويصف إس. هارفورد .5 Harford ومعاونوه (انظر مجلة الكيمياء الحيوية الأوروبية؛ مجلد VAY ص (a) AAR) 7١١ إنتاج Ase السم toxoid عن طريق توليد طفر في تجارب خارج الجسم الحي لجين LT-A من Escherichia coli الممرضة للخنازير. واشضتملت الطفرة الناجحة الناتجة على استبدال Ser-61-Phe واستبدال «Gly-79-Lys ويعتبر المذكور أولاً هو
٠ الأهم. ويقترح هارفورد Harfords ومعاونوه أنه؛ بسبب التشابهات بين جينات 17-8 في Escherichia coli الممرضة للبشر والخنازير وجين «CT-A ولأنه يعتقد أن السموم تعمل dl معروفة؛ من الممكن إنتاج مولد سم كوليرا 0 cholera كامل عن طريق إدخال طفرة Ser-61-Phe في جين .CT-A
ويصف تي. تسوجي .1 Tsuji ومعاونوه (انظر مجلة الكيمياء الحيوية؛ مجلد 765
٠ ص 77*٠١ (1990م) طفرة جين LT-A من بلازميد EWD299 لإنتاج استبدال مفرد 610-1125 يؤثر على سمية LT الطافرة التي لم تتغير بعد توليد المناعة للبروتين.
(Abstract B289 of the 92™ ومعاوتوة Grant 6.0.8. ويصف سي.سي.آر . جرانت أيار كام ١-771 (General Meeting of the American Society for Microbiology tryptophan والتربتوفان ١ عند الموقعين ££ و histidines استبدالات محافظة للهستيدينات
ve عند الموقع ١7١ في 11-8 التي تؤدي إلى انخفاضات ملموسة في الفعالية الإنزيمية.
وقد أجريت بعض البحوث على طفرات 4 (CT ويصف إتش.آر. كاسلر Caslow HR. ومعاونوه (Abstract 5291 of the 92" General Meeting of the American Society for Microbiology من 771 - + ؟ أيار 17م) تطفير Asp-9 و 1119-44 وقطع الحمض الأميني ٠ في CT-A التي تزيل جميعها الفعالية بشكل جوهري. ويعتقد أن تطفير 8:89 يخفف
A بشكل ملحوظ. ويكون لتطفير مواقع أحماض أمينية أخرى تأثيرا قليلا على السمية. ويصف دبليو .إن. برنيت Burnette W.N. ومعاونوه (انظر مجلة Inf.
And Immun. ¢ مجلد 0 العدد 61١ ص 4770-4177 (1491م) توليد طفر محددة الموقع CT-A — site-specific mutagenesis لإنتاج طفرة Arg-7-Lys مشابهة لطفرة إزالة سمية معروفة في الوحدة الفرعية أ لسم بوردتيلا الشهاق Bordetella pertussis toxin وأدت الطفرة Yo إلى إبطال كامل لفعالية إنزيم ADP-ribosyltransferase يمكن الكشف عنه. You
وتصف نشرة البراءة الدولية رقم 57/189776 (لشركة Burnette, Kaslow and Amgen (Inc. طفرات CT-A عند «His-44 ¢Arg-11 ¢<Asp-9 ¢Arg-7 1119-70 و .Glu-112 ووصفت كذلك الطفرات عند 610-110 LT) و (CT و (LT) Arg-146 في التشرات العلمية hail) ما جاء عن لوبت Lobet في مجلة. ص11 Inf. ص YAY: (1991م)؛ و ما ٠ جاء عن لاي Lai مجلة مجموعة البحوث الكيميائية الحيوية والفيزيائية الحيوية «(Biochem.
Biophys.
Res.
Comm) ص AY) ١ 9 ١م)؛ و ما جاء عن أوكاموتو Okamoto في مجلة علم البكتيريا (Bacteriol) ص AAA) YY +A لم). وحددت تركيب بلورة LT بواسطة سيكسما Sixma ومعاونيه hail) ما جاء في مجلة الطبيعة؛ مجلد FO) ص 797-7971 (أيار ١59١م) ويؤكد نتائج توليد الطفر الموصوفة مسبقآً في النشرات العلمية؛ lal go بنيوياً أهمية 610-112 و Ser-61 في فعالية الوحدة الفرعية أ مشيرآً إلى أنه يمكن أن يكون Ser-114 ¢His-44 و Arg-54 التي تكون في المنطقة المجاورة القريبة مهما للحفز أو التمييز. الوصف العام للاخترا ع: لقد اكتشف حالياً عن طريق تحليل إضافي وبتفصيل أكثر تركيب السموم أنه تكون vs أحماض أمينية إضافية معينة في تسلسلات CT-A و 17-8 في مواقع قادرة على تقليل الفعالية الإنزيمية لب CT و LT عندما تطفر بشكل مناسب؛ وحدها أو بصورة مقترنة مع طفرات أخرى. ويتمثل هدف الاختراع الراهن في تزويد بلقاح يمتح حماية كاملة من الكوليرا أو بكتيريا centerotoxigenic E. coli بواسطة منتج توليد ثان second generation product يتكون من ve مستضد antigen مفرد؛ عبارة عن toxid مشتق من CT أو LT أزيلت سميته وراثيا. وتحتفظ إزالة السمية الجينية لب CT أو LT بالخصائص المولدة للمناعة ل toxoid في حين يتم تزويد سمية مخفضة بشكل كبير ويفضل ان تكون مفقودة . Td للجانب الاول للاختراع يزود هنالك بروتين مزال السمية مولد للمناعة يشتمل على تسلسل الحمض الأميني للوحدة الفرعية أ من سم الكوليرا (CT-A) أو قطعة منه أو وحدة © فرعية أ من سم غير ثابت حرارياً من بكتيريا الإشريكية القولونية (LT-A) أو قطعة منه ؛ You v
Val- ¢Ser-63 «Val-53 أو في مواقع مناظرة لب cxic حيث يستبدل حمض أميني واحد أو أكثر بحمض أميني آخر. Pro-106 أو 177-104 7 أو 17-8 التي CT-A وتكون الأحماض الأمينية المستبدلة في مواقع في تسلسلات المتنوعة. LTs و CT تحفظ في تسلسل الحمض الأميني تراكيبيا ولذلك تكون شائعة لب
Loot sn ويتخذ البروتين المزال السمية المولد للمناعة وفقآً للاختراع نفس التركيبية للسموم الشائعة التي تتواجد طبيعياً. ويكون فعال مناعياً ويتفاعل بشكل تبادلي مع أجسام للسموم ذات النمط الشائع. antibodies مضادة التي تتواجد طبيعياً ADL متفاوتات LT و CT وفي هذا الوصف؛ تشمل الإشارة لب المتنوعة بالإضافة إلى متفاوتات أخرى تشمل تغييرات من التسلسلات الموصوفة في هذا .assembled toxiod المجمع andl البيان التي لا تؤثر على توليد المناعة لمولد - © الحمض " Val-97 " وفي هذا الوصف؛ تتضمن الإشارة لنظائر الحمض الأميني مثل أي بدون ((CT-A) الأميني عند الموقع في تسلسل الوحدة الفرعية أ لسم الكوليرا الناضج
ADV] تسلسل الإشارة (انظر الشكل وحيث يشير الوصف إلى 17-8 تشير نظائر الحمض الأميني إلى الموضع المناظر رقم: ١)؛ (تسلسل التمييز رقم: ؟)؛ Saal (تسلسل ]١[ في 01-8 كما هو مبين في الشكل vo .)4 (تسلسل التمييز رقم: 7) و (تسلسل التمييز رقم: في الوحدة الفرعية 111؛ 701-52 CT يناظر 1781-53 في Jd ولذلك؛ على سبيل في 1.71؛ وهنالك اختلاف في حمض أميني مفرد في التعداد Ser-62 CT ويناظر 58363 في تسلسل Val-93 CT في تسلسل Val-97 ويناظر LT إلى الحمض الأميني 84 من تسلسل بسبب الاختلاف في الحمض الأميني الرابع عند تلك النقطة في التسلسل. 171 “© للاختراع Lids قد يشتمل البروتين مزال السمية المولد للمناعة cell وبالإضافة إلى (His-44 Arg-11 ¢Asp-9 على طفرات أخرى؛ على سبيل المثال؛ استبدالات عند ترف أو Arg-146 «Trp-127 «Ser-114 «Glu-112 «Glu-110 ¢His-107 ¢His-70 5-61 ¢Arg-54 واحد أو أكثر. Arg-192 ويمكن أن يكون الحمض الأميني المستخدم بدلا من الحمض الأميني ذي النمط الشائع Yo معدلا أو تصنيعيا. Lind عبارة عن حمض أميني متواجد طبيعياً أو يمكن أن يكون حمضآ
You
A
ويمكن أن يشتمل الاستبدال على حذف حمض أميني بالإجمال شريطة أن تحتفظ الطافرة بالخصائص المولدة للمناعة الضرورية وتظهر سمية مخفضة جوهرياً. والألفة للماء amphotericity وتفضل بشكل عام الاستبدالات التي تغير الأمفوتيرية للحمض الأميني المستبدل steric حين يتم المحافظة على التأثير الفراغي (hydrophilicity بقدر الإمكان. ٠ «Val-53-Tyr «Val-53-Glu «Val-53-Asp وتشضمل الاستبدالات المفضلة على: «Tyr-104-Asp «Tyr-104-Lys ¢His-107-Glu ¢Val-97-Tyr «Val-97-Lys ¢Ser-63-Lys .Ser-114-Lys ¢Ser-114-Glu ¢Pro-106-Ser «Tyr-104-Ser أن التركيب detoxified وكما استخدم في هذا البيان» يقصد بالمصطلح "مزال السمية للمناعة يظهر سمية أقل جوهريا بالنسبة لنظيره من السم المتواجد طبيعياً. وينبغي أن dpa, بشكل كاف حتى يستخدم البروتين بتركيب مولد للمناعة ALE تكون السمية الأقل جوهريا ينبغي أن (JB بمقدار فعال مناعياً كلقاح بدون إحداث تأثيرات جانبية ملحوظة. فعلى سبيل يكون للبروتين مزال السمية المولد للمناعة سمية أقل من 70,09 من نظيره من السم المتواجد أو يفضل عن (CHO) طبيعباً. ويمكن قياس السمية في خلايا من مبيض فأر الهمستر الصيني "toxoid ويقصد بالمصطلح 'مولد السم YT طريق تقييم التغييرات الشكلية المحفزة في خلايا ae سم مزال السمية وراثيا. ويمكن أن يكون البروتين المولد للمناعة عبارة عن مولد السم من الوحدة الفرعية أ من
LT أو CT لكن يفضل أن يكون جزيء سم مجمع يشتمل على وحدة فرعية أ من LT أو CT ويمكن أن تكون الوحدة الفرعية ب عبارة عن وحدة (LT أو CT و © وحدات فرعية ب من فرعية متواجدة طبيعياً أو قد تكون مطفرة بحد ذاتها. - © متواجد طبيعياً LT-A أو CT-A ويفضل أن يكون البروتين المولد للمناعة عبارة عن معدل بشكل مناسب كما وصف أعلاه. إلا أنه يمكن إجراء تغييرات محافظة على الحمض الأميني لا تؤثر على توليد المناعة أو سمية البروتين المولد للمناعة ويفضل ألا تؤثر على قدرة البروتين المولد للمناعة لتشكيل سم كامل بروتين الوحدة الفرعية ب. وكذلك؛ يمكن أن dahil شريطة أن تكون LT-A أو CT-A يكون البروتين المولد للمناعة عبارة عن قطعة من ve
Yoo
١ مولدة للمناعة وغير سامة وتحتوي على منطقة محافظة واحدة على الأقل من المناطق للاختراع. Gy المحافظة التي تحتوي على أحد الطفرات لجانب ثان للاختراع؛ يزود هنالك تركيب مولد للمناعة لاستخدامه كلقاح يشتمل Gay للاختراع وحامل مقبول Gay على بروتين مزال السمية مولد للمناعة من الجانب الأول صيدلياً. ٠٠ ويمكن أن يحتوي التركيب المولد للمناعة بشكل إضافي على مادة مساعدة و/أو مخففة مقبولة صيدلياً واحدة أو أكثر. للمناعة وفقآ of go ويزود الاختراع كذلك تركيب لقاح يشتمل على بروتين مزال السمية للاختراع وحامل مقبول صيدلياً. وقد يشتمل تركيب اللقاح بشكل إضافي على Gy لجانب أول مادة مساعدة. Ve
Vibrio.cholerae ووفقاً لجانب ثالث للاختراع؛ تزود هنالك طريقة تطعيم للثديات من تتضمن إعطاء مقدار فعال مناعياً من Escherichia coli أو سلالة مولدة لسم معوي من بكتيريا بروتين مزال السمية مولد للمناعة وفقآً للجانب الأول للاختراع. للاختراع كيميائياً باستخدام Gy ويمكن تصنيع بروتينات مزالة السمية لمولدة للمناعة .recombinant DNA تقليدية؛ لكن يفضل إنتاجها بواسطة تقنية peptide ثقنيات تصنيع الببتيد يحمل شفرة بروتين مزال DNA لجانب رابع للاختراع يزود هنالك تسلسل Tidy للجانب الأول للاختراع. Gay السمية مولد للمناعة كامل LT أو CT يحمل شفرة DNA على تسلسل DNA ويفضل أن يحتوي تسلسل يحمل شفرة كلا الوحدة الفرعية أ والوحدة الفرعية ب مزالة السمية في DNA يشتمل على شفرة الوحدة DNA من ذلك؛ يمكن أن يحمل Yau وحدة عديدة السيسترونات ©76190001ا0م. x. الفرعية أ مزالة السمية فقط. وفقآً للجانب DNA يحمل vector لجانب خامس للاختراع؛ يزود هنالك ناقل Tag الرابع للاختراع. محول host cell line لجاتب سادس للاختراع؛ يزود هنالك نسل خلوي عاثل Wag للجانب الخامس للاختراع. Gy بالناقل ve
Yoo
١
ويمكن أن تكون خلية العائل أي عائل قادر على إنتاج CT أو 1-7 لكن يفضل أن يكون بكتيرياء والأنسب Escherichia coli أو شولات الكوليرا Vibrio. cholerae مهندسة بشكل مناسب لإنتاج البروتين مزال السمية المولد للمناعة المرغوب .
وفي تجسيد إضافي للجانب السادس وفقآً للاختراع؛» يمكن أن تزود خلية العائل بحد
٠ ذاتها 53 le واقيآًء على سبيل المثال» E.Coli or 7. Cholerae Strain مطفرة إلى نمط ظاهري
يفتقد إلى LT أو CT بالنمط الشائع ويحمل ويعبر عن بروتين مزال السمية مولد للمناعة من الجانب الأول Ty للاختراع.
وفي تجسيد إضافي للجانب السادس Gy للاختراع تكون Jill) Ada قادرة على التعبير عن جين 17-8 كروموسومي وفقاً للجانب الأول للاختراع. ض
Wy ١ لجانب سابع للاختراع؛ تزود هنالك عملية لإنتاج بروتين مزال السمية مولد للمناعة Gag للجانب الأول للاختراع تتضمن استرزاع culturing خلية عائل وفقاآً للجانب السادس للاختراع.
Wag لجانب ثامن للاختراع؛ تزود هنالك عملية لإنتاج és DNA للجانب الرابع للاختراع تتضمن خطوات DNA glad) يحمل شفرة CT-A أو LT-A أو قطعة منه إلى توليد
ve طفر موجه نحو الموقع.
Ty لجانب تاسع للاختراع تزود هنالك عملية لتشكيل لقاح تتضمن احضار بروتين مزال السمية مولد للمناعة وفقآ للجانب الأول للاختراع مع Jala مقبول صيدلياً وبشكل اختياري مع مادة مساعدة . إمكانية التطبيق الصناعى
5 يشكل البروتين مزال السمية المولد للمناعة Gag للاختراع المكون الفعال من تركيب لقاح مفيد للوقاية من ومعالجة عدوى الكوليرا أو العدوى بسلالات مولدة لسم معوي enterotoxigenic من Escherichia coli ولذلك يمكن استخدام التراكيب في الصناعة الصيدلية. شرح مختصر للرسوم: الشكل ]1[ : (تسلسل التمييز رقم: ١)؛ (تسلسل التمييز رقم: 7)؛ (تسلسل التمييز رقم: (F
vo و (تسلسل التمييز رقم: ؛): يبين تسلسلات الحمض الأميني للوحدة الفرعية أ
ذات النمط الشائع من:
)١ سم الكوليرا Cholera Toxin (07-انظر ما جاء عن ميكالانوس Mckalanos ومعاونيه في المرجع المشار إليه)
") سم غير ثابت حرارياً من Ecoli Strain موجودة في البشر (111- انظر ما جاء عن ياماموتو Yamamoto ومعاونيه في المرجع المشار إليه)؛
*) سم غير ثابت حرارياً من Strain 7.2017 موجودة في الخنازير (171-انظر
ما جاء عن سبايسر Spicer ومعاونيه في المرجع المشار إليه)؛ و
¢ ( سم غير ثابت حرارياً من مصدر كروموسومي a chromosomal Source (171-انظر ما جاء عن بكت Pickett ومعاونيه في المرجع المشار إليه).
ولا تبين تسلسلات الإشارة.
١ وفي الشكل [١]؛ (تسلسل التمييز رقم: ١)؛ (تسلسل التمييز رقم: 7)؛ (تسلسل التمييز رقم: (YF و (تسلسل التمييز رقم: 4؛) تستخدم شيفرة الحمض الأميني ذات الحرف المفرد التقليدية. ويشير الرمز "." إلى حمض أميني غائب ويعمل كمباعدة مطبعية typographical spacer للتأكيد بأن التسلسلات تبقى على استقامة واحدة لسهولة المقارنة. ويشير الرمز "-" إلى حمض أميني في تسلسلات 111 و 172 يكون Gildas للحمض الأميني المناظر
© في CT وتكون الأرقام مقابل كل خط عبارة عن رقم الحمض الأميني للحمض الأميني الأول على ذلك الخط.
وفي الشكل ]١[ (تسلسل التمييز رقم: ١)؛ (تسلسل التمييز رقم: oY (تسلسل التمييز رقم: ؟)؛ و (تسلسل التمييز رقم: €( تبين مواقع الطفرات Tag للاختراع الراهن بخط تحتها. الشكلان [IY] و [7ب] : (تسلسل التمييز رقم: ©)؛ (تسلسل Saal رقم: ١)؛ (تسلسل التمييز Ye رقم: 7) و (تسلسل التمييز رقم: (A عبارة عن مقارنات تسلسلات الحمض الأميني وتسلسلات DNAJ) للوحدات الفرعية | oe 1171و .CT الشكل [v] : عبارة عن خريطة حصرية لبلازميد EWD299 (انظر ما جاء عن دالاس dallas ومعاونيه)» يحمل جين LT-A vo You vy : الوصف التفصيلى سيتم تطبيق الاختراع الراهن ما لم يشر إلى غير ذلك؛ بواسطة تقنيات تقليدية في وعلم المناعة؛ التي تعرف لدى recombinant DNA الأحياء الدقيقة؛ ple الأحياء الجزيئي؛ peo المتمرس في التقنية. وتوضح هذه التقنيات بشكل واف في النشرات العلمية. انظر على سبيل وهو دليل مرشد في molecular cloning ومعاونيه في كتاب Sambrook المثال ما جاء عن (باسم (Y) و )١( المجلدان DNA cloning ¢(p) 4A4) إجراءات المختبرات؛ الطبعة الثانية ¢M.J.Gait (باسم oligonucleotide synthesis ¢ ((pY 2A) DN. glover دي. إن جلوثر ؛))م١ (باسم بي.دي. هامز وإس.جيه. هيجنز ) ا nucleic acid hybridization ؛))م١ AA¢ ) \. ؛ زراعة 6 4A¢) B.D.Hames & S.J. Higgins eds. (باسم Transcription and Translation ام))؛ 7 ) RI Freshney (باسم Animal Cell Culture خلايا الحيوان في B. Perbal (Jj ٠ ؛ ما جاء عن بي 6 AA ) «IRL Press) Immobilized Cells and Enzymes
Methods in Enzymology ام)؛ سلسلة طرق 64 ) Apracical Guide to Molecular Cloning ؛ نواقل تحويل الجين لخلايائديية (Acadimic Press, Inc) مد ‘ م ١٠ ف ) 1.11. Miller and M.P. Calos (باسم Gene Transfer Vectors For Mammalian Cells (باسم Yoo ومجلد ١٠94 مجلد Methods in Enzymology ¢ (Cold Spring Harbor Laboratory م Y4AY) Mayer and Walker عن cal على التوالي)؛ «Wu and Grossman and Wu »ماجاء عن (Acadimic Press, London) Immun Chwmical in cell and Mokcular Blology مبادئ وتطبيقات؛ الطبعة الثانية protein purification (لاخكام) في كتاب Scopes +. المجلدات <Handbook & Experimental Immunology نيويورك) ودليل «Springer - Verlag) ام)). 3 )D.M. Weir and CC. Bkacj well (باسم ؛-١ والأحماض الأمينية في هذا الوصف. nucleotides تستخدم اختصارات معيارية ل ويحال إلى جميع النشرات؛ براءات الاختراع وطلبات براءات الاختراع المذكورة في هذا البيان كمرجع. ve
Yo yr تستخدم اختصارات الأحماض الأمينية التالية: (pala وبشكل Ala A Alanine
Arg R Arginine
Asn N Asparagine
Asp D Aspartic Acid
Cys C Cysteine
Gly G Glycine
Glu E Glutamic Acid
Gln Q Glutamine
His H Histidine
Ile I Isoleucine
Leu L Leucine ~ Lys K Lysine
Met M Methionine
Phe F Phenylalanine
Pro P Proline
Ser S Serine
Thr T Threonine
Trp Ww Tryptophan
Tyr Y Tyrosine
Val Vv Valine وكما هو مذكور أعلاه تشتمل أمثلة البروتين مزال السمية المولد للمناعة التي يمكن أن باختلافات طفيفة في الحمض polypeptides تستخدم في الاختراع الراهن على عديد الببتيد الأميني عن تسلسل الحمض الأميني الطبيعي للبروتين بخلاف عند مواقع الطفرة المذكورة بشكل خاص. ٠
You
0 وتتمثل ميزة هامة لإنتاج البروتين مزال السمية المولد للمناعة عن طريق تقنيات DNA recombinant وليس عن طريق عزل وتنقية بروتين من مصادر طبيعية في أنه يمكن إنتاج كميات متساوية من البروتين باستخدام مقدار من مادة أولية بأقل مما يلزم لعزل البروتين من مصدر طبيعي. ويسمح كذلك إنتاج البروتين عن طريق تقنيات recombinant بعزل ٠ البروتين في غياب بعض جزيئات موجودة طبيعياً في الخلايا. وفي الحقيقة؛ يمكن إنتاج تراكيب بروتين خالية بالكامل من أي أثر لملوثات بروتين بشري بسهولة لأن البروتين البشري الوحيد الناتج بواسطة عائل غير بشري مأشوب recombinant non-human host هو البروتين المأشوب recombinant protein تحت البحث. ويتم كذلك تجنب عوامل فيروسية محتملة من مصادر طبيعية ومكونات فيروسية ممرضة للبشر. وكذلك؛ يكون السم مزال السمية وراثيا أقل ٠ احتمالية لأن يرجع إلى شكل سمي من سموم مزالة السمية بالطرق الكيميائية التقليدية. وتشتمل الحوامل المقبولة Glas على أي حامل لا يحفز بحد ذاته إنتاج أجسام مضادة ضارة بالفرد الذي يتلقى التركيب. وتكون الحوامل المناسبة عادة عبارة عن جزيئات ضخمة؛ تستيئض metabolized ببطء مثل البروتينات ؛ و سكريات عديدة polysaccharides ¢ و spolylactic acids و polyglycolic » و أحماض أمينية بوليمرية polymeric amino acids « وبوليمرات إسهامية من الأحماض الأمينية amino acid copolymers ¢ و مجموعات دهون (مثل قطيرات الزيت oil droplets أو أجسام دهنية (liposomes وجسيمات فيروس غير فعالة. وتعرف هذه الحوامل Tua لأولئك الملمين في التقنية. وبشكل إضافي؛ يمكن أن تعمل هذه الحوامفل كعوامل محفزة للمناعة (مواد مساعدة). وتشتمل المواد المساعدة المفضلة لتعزيز فعالية التركيب؛ على سبيل المثال لا الحصر ve على: أملاح الألمنيوم (alum) مثل aluminum sulfate <aluminum phosphate إلخ؛ تراكيب من مستحلب emulsion زيتي؛ مع أو بدون عوامل محفزة للمناعة معينة أخرى مثل ببتيدات الموراميل muramyl peptides أو مكونات الجدار الخلوي البكتيري» على سبيل المثال )١( 9 (نشرة البراءة الدولية رقم [YEATY ما يحتوي على squalene بنسبة 76 80 tween بنسبة Span® 85 + 7 ١,0 بنسبة 0 / (تحتوي بشكل اختياري على مقادير de site من MTP- - 28 (انظر ادناه) على الرغم من أنها غير مطلوبة) يشكّل في صورة submicron particles باستخدام مميع دقيق Jie microfluidizer مميع دقيق من طراز 1107 (ميكرو فلويدكس؛ نيوتن» Yo vo يحتوي على SAF (¥ ) «Microfluidics, Newton, Mass. 02164 14 ولاية ماساتشوستس معوّق ail siPlaismoic- bkicjed Polymer 1121 7 > 4 بنسبة tween 80 + ZY + بنسبة squalene (انظر ادناه) إما يميع بشكل دقيق إلى مستحلب دون thr-MDP بنسبة 75 و L121 بالبلورونيك الميكروني أو يدوم لإنتاج مستحلب ذي جسيمات بحجم أكبرء و (“) نظام مساعد من ولاية مونتانا.) يحتوي على «Ribi Immunochem Hamilton (من شركة (RAS) 2081© | ٠ (علامة مسجلة) بنسبة 70.7 ومكون واحد أو أكثر من Av بنسبة 77 توينز Squalene مكونات الجدار الخلوي البكتيري يختار من الفئة التي تتكون من (cws) »؛ وهيكل جدار الخلية (TDM) trehalose dimycolate «(MPL) A monophosphoryl lipid «(Detox ™) MPL+CWS ويفضل ‘ (thr-MDP) N-acetyl-muramyl-1-threonyl-d-isoglutamine Ve ‘ (nor-MDP) N-acetyl-normuramyl-l-alanyl-d-iso-glutamine
N-aceytyl muramyl-1-alanyl-d-isoglutaminyl-l-alanine-2-(1'-2'-dipalmitoyl-sn-glycero-3- hydroxyphosphoryloxy)-ethylamine (MTP-PE) إلخ)؛ عامل تحفيز مستعمرة خلايا البلعوم IL-2 1سلآء ) interleukins J—ie <cytokines إلخ؛ إلخ. وبشكل إضافي؛ يمكن استخدام مواد مساعدة من (TNF) عامل النخر الورمي (M-CSF) eo ستميولون (علامة تجارية) (مسن شركة كامبردج Stimulon ™ Jia «Saponin الصابونين وورسستر؛ ولاية ماساتشوستس.) أو جسيمات ناتجة منها «Camridge Bioscience بيوسينس عستتدانحست:مسس::). وعلاوة على ذلك Complexes) مثل 1500145 (متراكبات محفزة للمناعة ومادة (CFA) Incoinplete Frewnds Adjuvant. فرويندية كاملة Bac Lua ale يمكن استخدام
MF59 ويفضل و (IFA) مساعدة فرويندية غير كاملة © سبيل المثال؛ المستضد le) sale وينبغي أن تحتوي التراكيب المولدة للمناعة الماء؛ المحلول J fe الحامل المقبول صيدلياً والمادة مساعدة) على مواد مخففة؛ cantigen وبشكل إضافي؛ يمكن أن توجد مواد All cethanol الإثانول cglycerol الملحي؛ الجليسرول وما «pH الحموضة daa buffering عوامل ترطيب أو استحلاب؛ مواد منظمة Jie إضافية؛ .vehicles شابه في هذه السواغات vo
You
وعادة؛ تحضر التراكيب المولدة للمناعة كمواد قابلة للحقن؛ إما كمحاليل أو معلقات سائلة؛ ويمكن كذلك تحضير أشكال صلبة مناسبة للذوبان أو التعليق في سواغات vehicles سائلة قبل الحقن. ويمكن كذلك استحلاب أو تغليف المستحضر في أجسام دهنية لتعزيز تأثير المادة المساعدة كما هو موضح أعلاه فيما يتعلق بحوامل مقبولة صيدلياً. وتشتمل التراكيب المولدة للمناعة المستخدمة كلقاحات على مقدار فعال Lelia من عديد الببتيد المستضدة cantlgenic polypeptides بالإضافة إلى أي مكون آخر من المكونات المذكورة أعلاه؛ حسب الحاجة. ويقصد بالمصطلح "مقدار فعال Lelio "immunologically effective amount أن إعطاء ذلك المقدار لفرد ؛ إما في جرعة مفردة أو كجزء من سلسلة؛ يكون فعالا للمعالجة أو الوقاية. ويختلف هذا المقدار اعتمادا على الوضع الصحي والجسدي للفرد الذي ينبغي أن يعالج؛ المجموعة التصنيفية للفرد الذي ينبغي أن يعالج Je) سبيل المثال» رئيسيات غير بشرية؛ رئيسيات؛ إلخ)؛ قدرة جهاز المناعة لدى الفرد لتصنيع أجسام مضادة؛ درجة الحماية المرغوبة؛ تركيب اللقاح؛ تقييم الطبيب المعالج للحالة الطبية؛ وعوامل أخرى ذات صلة. ويتوقع أن المقدار سيقع في مدى واسع نسبياً يمكن أن يحدد من خلال اختبارات روتينية. 1 وتعطى التراكيب المولدة للمناعة تقليديا عن طريق غير معوي ؛ على سبيل المثال عن طريق حقن إما تحت الجلد أو داخل العضل. وتشتمل تراكيب إضافية مناسبة لطرق أخرى للإعطاء على تراكيب فموية ورئوية؛ تحاميل وعلاجات موضعية عبر الأدمة. ويمكن أن تكون المعالجة بمعايرة الجرعات عبارة عن برنامج جرعة مفردة أو برنامج جرعات متعددة. ويمكن إعطاء اللقاح Gia مع عوامل أخرى منظمة للمناعة. أ ويقصد بالمصطلح "recombinant polynucleotide’ كما استخدم في هذا البيان متعدد نوكليوتيدات من أصل «DNA «ina شبه صناعي أو صناعي الذي؛ استنادا إلى أصسله أو معالجته: )١( غير مقترن مع كل أو جزء من متعدد نوكليوتيدات يقترن به طبيعياً؛ (7) يرتبط مع متعدد نوكليوتيدات بخلاف ذلك الذي يرتبط معه طبيعياً؛ أو (YF) لا يتواجد طبيعياً. ويشير المصطلح 'متعدد نوكليوتيدات "polynucleotide كما استخدم في هذا البيان إلى vo شكل بوليمري polymeric من نوكليوتيدات بأي طول؛ إما نوكليوتيدات ريبوزية Ribonucleotides أو نوكليوتيدات ريبوزية منقوصة الأكسجين .deoxyribonucleotides ويشير
Yo
WY
و DNA هذا المصطلح إلى التركيبة الأولية فقط للجزيء. ولذلك؛ يشتمل هذا المصطلح على ثنائيي وأحاديي الشريط. ويشتمل كذلك على أنواع معروفة من التعديلات؛ على سبيل RNA استبدال نوكليوتيد متواجد طبيعيا Caps المثال» أوسام معروفة في التقنية؛ مثيلة؛ 'قلنسوات واحد أو أكثر بنظير؛ تعديلات بين النوكليوتيدات؛ على سبيل المثال؛ تلك بروابط غير مشحونة مركبات cphosphotriesters الإطاء؛ مركبات phosphonates (على سبيل المثال ¢ مركبات ٠ إلخ.) وبروابط مشحونة (على سبيل المثال» مركبات ccarbamates مركبات <phosphamidates إلخ.) » تلك التي تحتوي على شقات معلقة <phosphorodithioates 0005م مركبات cnucleases على سبيل المثال البروتينات (بما في ذلك على سبيل المثال؛ ¢pendant moieties إلخ)؛ تلك بعوامل إدخال epoly-I-lysine أجسام مضادة؛ ببتيدات إشارة؛ «toxins سموم إلخ.)؛ تلك التي تحتوي على عوامل psoralen <acridine (على سبيل المثال؛ interacalators ٠ «Tadisactine metals, Metals dala) سبيل المثال؛ فلزات؛ فلزات Je) chelators استخلاب A إلخ.)؛ تلك التي تحتوي على عوامل <Oxidature مؤكسدة Metals بورون 0000؛ فلزات إلخ.)؛ alpha anomeric nucleies acids تلك التي تحتوي على روابط معدلة (على سبيل المثال؛ بالإضافة إلى أشكال غير معدلة من نوكليوتيدات عديدة. أي عنصر جيني؛ على سبيل المثال؛ بلازميد؛ "replicon ويمثل المصطلح "المتضاعف yo لتكرر autonomous إلخ؛ يتصرف كوحدة ذاتية المنشأ cosmid كروموسوم؛ فيروس؛ كوزميد متعدد النوكليوتيدات داخل خلية؛ أي؛ قادراً على التضاعف تحت سيطرته الذاتية. وقد يشتمل يمكن اختيارها. markers هذا التكرون على واسمات متضاعف تتصل به قطعة من متعدد نوكليوتيدات "vector JIU ويمثل المصطلح أخرى؛ لكي يحدث تضاعف و/أو التعبير عن القطعة المتصلة. x تسلسلات متعددة النوكليوتيدات ضرورية (control sequences’ ويشير المصطلح عن تسلسلات التشفير التي ترتبط بها. وتختلف طبيعة تسلسلات التحكم هذه اعتماد) pl تشتمل تسلسلات التحكم هذه بشكل عام ob) sill على الكائن الحي العائل؛ في الكائنات بدائية على محفز «©000:01» موقع ارتباط ريبوسومي وتسلسل إنهاء الانتساخ؛ في الكائنات حقيقية وتسلسل إنهاء promoters النواة؛ تشتمل تسلسلات التحكم هذه بشكل عام على محضضات ve الانتساخ. ويقصد من المصطلح " تسلسلات تحكم " أن تشتمل» على الأقل؛ على جميع
Yo
0 المكونات التي يكون وجودها ضروريا للتعبير؛ وقد يشتمل كذلك على مكونات إضافية يكون وجودها (lint على سبيل المثال؛ تسلسلات قيادية leader seqvence وتسلسلات شريكة اندماجية .fusion partner sequences ويشير المصطلح "مرتبط بشكل فعال "operably linked إلى التجاور حيث تكون ٠ المكونات الموصوفة في علاقة تسمح لهم بالعمل بكيفيتهم المقصودة. ويربط تسلسل التحكم "مرتبط بشكل فعال" مع تسلسل التشفير بطريقة ينجز بها التعبير عن تسلسل التشفير في ظروف منسجمة مع تسلسلات التحكم. ويمثل المصطلح "إطار قراءة مفتوح ili "open reading frame (ORF) تسلسل متعدد النوكليوتيدات يحمل شيفرة متعدد ببتيد tpoly peptides وقد تمثل هذه المنطقة Te 3a من تسلسل التشفير أو تسلسل التشفير كلي. ويمثل المصطلح 'تسلسل تشفير "coding sequence تسلسل متعدد نوكليوتيدات Polynucleotide يترجم إلى متعدد ببتيد Poly Peptides عادة بواسطة RNA الرسول (mRNA) ¢ عندما يوضع تحت سيطرة تسلسلات منظمة ملائمة. وتحدد حدود تسلسل التشضفير بواسطة شيفرة بدء ترجمة عند النهاية-©' وشيفرة إيقاف ترجمة عند النهاية-". ويمكن أن يشتمل oe تسلسل تشفير؛ على سبيل المثال لا الحصر؛ على DNA تكميلي (cDNA) وتسلسلات متعدد نوكليوتيدات مأشوبة .recombinant Polynucleotide sequences ويشير المصطلح "(0) "polymerase chain reaction إلى تقنئية تفاعل بلمرة إنزيمية مسلسل كما وصف Lad جاء عن سايكي Saikie ومعاونيه في مجلة الطبيعة؛ مجلد ؛76: ص VY (945١م)؛ وسكارف Scharf ومعاونيه في مجلة العلم؛ alae 777: ص ٠١78-1976 © (1547م)؛ وبراءتي الاختراع الأمريكيتين رقم 0450 SAY 4 ررقم AAT XY وكما استخدم في هذا البيان ¢ x heterologous عبارة عن " متغاير " بالنسبة ل « إذا لم يكن Jie x طبيعياً مع « بالطريقة نفسها؛ أي؛ x غير مقترن مع Landay أو x غير مقتقرن مع y بالطريقة نفسها كما هو موجود طبيعياً. ويشير المصنطلح "التماثل "homology إلى درجة التشابه بين « و ey ويمكن أن يحدد ve التطابق بين شكل وآخرللتسلسل عن طريق أساليب معروفة في التقنية. فعلى سبيل المثال؛ يمكن أن يحدد التطابق بمقارنة مباشرة لمعلومات التسلسل لمتعدد النوكليوتيدات. وبدلاً من You a عن طريق تهجين متعددات النوكليوتيدات في ظروف تشكل SL ذلك يمكن أن يحدد سبيل المثال تلك التي يمكن أن تستخدم قبل هضم lo) مزدوجات ثابتة بين المناطق المتماثلة محدد أحادي الشريط» متبوعاً بتحديد حجم القطع المهضومة. nuclease :5)؛ متبوعاً بهضم إلى بوليمر "polypeptide استخدم في هذا البيان» يشير المصطلح 'متعدد ببتيد LS cpeptides من أحماض أمينية ولا يشير إلى طول محدد للمنتج؛ لذلك؛ تكون الببتيدات polymer © الببتيدات قصيرة السلسلة والبروتبنات مشمولة ضمن تعريف متعدد الببتيد. ولا يشير هذا عمليات (JO) المصطلح كذلك إلى أو يستثني تعديلات بعد التعبير لمتعدد الببتيد؛ على سبيل عمليات cacetylations ادخال سكر (تشكيل روابط مع مجموعات سكرية)؛ عمليات الأسئلة الفسفرة 5 وما شابه. ويشمل التعريف»؛ على سبيل المثال؛ متعددات ببتيد تحتوي على نظير واحد أو أكثر من نظائر حمض أميني (بما في ذلك؛ على سبيل المثال؛ أحماض أمينية غير طبيعية؛ إلخ.)؛ متعددات ببتيد ذات روابط مستبدلة؛ بالإضافة إلى تعديلات أخرى معروفة في التقنية؛ تتواجد طبيعياً وتتواجد غير طبيعياً كلاهما. تسلسل حمض "derived from ويشير تسلسل متعدد ببتيد أو حمض أميني 'مشتق من نووي معين إلى متعدد ببتيد له تسلسل حمض أميني مطابق لذلك لمتعدد ببتيد مشفر في التسلسل؛ أو جزء منه حيث يتكون الجزء من 0% أحماض أمينية على الأقل؛ والأفضل من على الأقل؛ أو Lid Laman ١5-١١ أحماض أمينية على الأقل؛ والأفضل من ذلك من ٠١-8 الذي يكون قابل للتمييز مناعياً بمتعدد ببتيد مشفر في التسلسل. ويشتمل هذا المصطلح كذلك على متعدد ببتيد يعبر عنه تسلسل حمض نووي معين. أو monoclonal ويمكن استخدام البروتين لإنتاج أجسام مضادة؛ إما أحادية النسيلة متخصصة بالبروتين. وتعرف طرق إنتاج هذه الأجسام المضادة polyclonal متعددة التسائل © في التقنية. عافل LIA" ("recombinant host cells وتشير المصطلحات "خلايا عائل مأشوبة ومصطلحات أخرى كتلك؛ على سبيل "cell cultures 'مستنبتات خلوية ("cells LIA" host cells يمكن أن تستخدم؛ أو استخدمت؛ Aud المثال؛ إلى كائنات حية دقيقة؛ خلايا حشرات وخلايا وتشتمل على نسل الخلية الأصلية التي قد حوّلت. «pal ناقل DNA كمتلقئيات لناقل مأشوب أو ve بشكل كامل في Gilde مفردة قد لا يكون بالضرورة progeny ومن المدرك أن نسل خلية أبوية
Yo
0 الشكل أو في متممة DNA المجينية أو الكلية للخلية الأبوية الأصلية؛ نتيجة لطفرة طبيعية؛ عرضية؛ أو متعمدة. وتشتمل AB خلايا عائل ثديية على خلايا مبيض الهمستر الصيني (CHO) وخلايا فيروسية معيبة من كلية قرد (COS) وبشكل (pala كما استخدم في هذا البيان؛ يشير المصطلح "نسل خلوي "cell line إلى ٠ | مجموعة من LIA قادرة على نمو وانقسام مستمر أو ممتد داخل أنبوبة الاختبار مستارة). وعادة؛ تكون الأنسال الخلوية clonal populations عبارة عن مجموعات نسيلية مشتقة من خلية سلف مفردة .a single progenitor cell ومن المعروف أيضاً في التقنية بأنه يمكن أن تحدث تغييرات تلقائية أو محفزة في النمط النووي أثناء تخزين أو نقل تلك المجموعات النسيلية. cll يمكن ألا تكون الخلايا المشتقة من النسل الخلوي المشار إليه مطابقة بشكل دقيق للخلايا أو المستنبتات dill) ويشتمل النسل الخلوي المشار ag) على تلك المتفاوتقات. ويشتمل المصطلح "أنسال خلوية "cell line كذلك على خلايا مخلدة immortalized ويفضل أن Jain الأنسال الخلوية على أنسال خلوية غير هجينة nonhybrid أو أورام هجينية hybridomas لنوعين ٠ فقط من الخلايا. وكما استخدم في هذا البيان؛ يشتمل المصطلح HI حي دقيق "microorganism على vo أنواع ميكروبية microbial بدائية النواة prokaryotic وحقيقية eukaryotic 3 sill مثل البكتيريا bacteria والفطريات ofungi ويشتمل المذكور aT 5 على خميرة وفطريات خيطية .filamentous fungi ويشير المصطلح (transformation Jy sa" كما استخدم في هذا البيان» إلى ادخال متعدد نوكليوتيدات خارجي المنشاً في خلية عائل. بغض النظر عن الطريقة المستخدمة +٠ ا للادخال» على سبيل المثال ؛» امتصاص مباشر «direct uptake و استتقال transduction و تزاوج جنسي f-mating أو تشكيل مسام كهربائي electroporation ويمكن أن يحفظ متعدد lag sll خارجي المنشاً كناقل غير مندمج؛ على سبيل المثال؛ بلازميد؛ أو بدلا من ذلك؛ يمكن أن يدمج في جينوم العائل . ويقصد بالمصطلح 'مجيني de sana "genomic أو مكتبة جزيئات DNA مشتقة من قطع ve حصرية كانت قد نسلت في نواقل. وقد يشتمل هذا المصطلح على جميع أو جزء من المادة الجينية Al حي. You
YA
تكميلي يهجّّن DNA تسلسل "complementary تكميلي DNA" ويقصد بالمصطلح تكميلية. DNA شريط J) hybridizes عند الإشارة إلى تسلسل "isolated و "معزول "purified ويقصد بالمصطلحين 'منقى أن الجزيء المشار إليه يتواجد عند الغياب الجوهري nucleotide متعدد ببتيد أو نوكليوتيد أخرى من نفس النوع. ويفضل أن يقصد macromolecules لجزيئات ضخمة بيولوجية ٠
Tae على الأقل؛ الأفضل Gs 775 المصطلح " منقى " كما استخدم في هذا البيان أنه يتواجد على الأقل؛ Ts 794 على الأقل؛ والأكثر تفضيلاً Gs 795 وزناً على الأقل؛ الأفضل كذلك من جزيئات ضخمة بيولوجية من نفس النوع (لكن يمكن أن يتواجد الماء؛ المحاليل المنظمة لدرجة الحموضة وجزيئات أخرى صغيرة؛ وبشكل خاص جزيئات ذات وزن جزيئي أقل من ٠٠ ys وحالما يُعزل تسلسل التشفير الملائم؛ يمكن أن يعبر عنه في مجموعة من أنظمة تعبير فيروسات عصوية cmammalian ثديية WA مختلفة؛ على سبيل المثال تلك المستخدمة مع .yeast وخميرة «bacteria بكتيريا ++ 5 mammalian systems أنظمة ثدبية -١ ثديي أي تسلسل promoter تعرف أنظمة التعبير الثديية في التقنية. ويكون محضض vo في الاتجاه transcription ثديي وبدء الانتساخ RNA polymerase قادرآ على ربط DNA ل عند النهاية ©" لتسلسل تشفير (على سبيل المثال جين تركيبي) إلى downstream glad) وسوف يشتمل المحضض على منطقة بدء انتساخ؛ تقع عادة قريبة من النهاية .mRNA عادة قبل موقع بدء الانتساخ بعدد من الأزواج aly «TATA box وصندوق تاتا ٠» لتسلسل التشفير يوجه TATA box زوجا قاعديا. ويعتقد أن Fo إلى YO يتراوح من base pains القاعدية > في الموقع الصحيح. وسوف يحتوي محضض ثديي RNA لبدء تصنيع RNA polymerase 1
Yoo إلى ٠٠١ لا يتجاوز La TATA box كذلك على عنصر محضض سابق؛ يقع عادة قبل زوجاً قاعدياً. ويحدد عنصر محضض سابق معذل بدء الانتساخ ويمكن أن يعمل في أي اتجاه ومعاونيه في بحث بعنوان " التعبير عن جينات منسلة sambrook [انظر ما جاء عن سامبروك في خلايا ثديية ' في كتاب التنسيل الجزيئي: دليل مرشد في إجراءات المختبرات؛ الطبعة © .])م١9445( الثائية» You
YY
"Nexpression of Cloned Senes in Mammalian Cells "In Molecular Cloning, A labaratory
Manual. 2nd ed" . بشكل كبير ولها مدى واسع من خلايا sale ويعبر عن الجينات الفيروسية الثديية تسلسلات محضض مفيدة dpa عائل؛ لذلك تزود التسلسلات التي تحمل شيفرة جينات فيروسية بشكل خاص. وتشتمل الأمثلة على المحضض المبكر للفيروس القردي (5740)»؛ محضض - ٠ لفيروس ورم ثدي الفأر؛ المحضض المتأخر الرئيمسي (LTR) dish مشتق من تكرر انتهائي ومحضض فيروس الحلا البسيط. وبالإضافة إلى ¢ (Ad MLP) adenovirus للفيروس الغدي جين Ute Aug pd ذلك؛ تزود أيضاً تسلسلات مشتقة من جينات غير تسلسلات محضض مفيدة. ويمكن أن يكون التعبير إما تركيبيا «murine metallotheionein gene glucocorticoid أو منظماً (مستحث)؛ اعتماداً على المحضض الذي يمكن أن يستحث باستخدام 0٠ hormone responsive cells مستجيبة للهرمون WIA في مققرن مع عناصسر «(enhancer وسوف يزيد عادة وجود عنصر معزز (معزز
DNA من مستويات التعبير. ويكون المعزز عبارة عن تسلسل code المحضض الموصوفة ضعف على الأكثر عندما يرتبط مع محضضات ٠٠٠١ منظم يمكن أن يحفز الانتساخ إلى المعتاد. وتعتبر المعززات فعالة RNA مماظة أو مغايرة؛ على أن يبدا التصنيع عند موقع بدء vo : كذلك عندما تقع قبل أو بعد موقع بدء الانتساخ؛ في اتجاه إما طبيعي أو مقلوب؛ أو على نوكليوتيدة [انظر ما جاء عن مانياتيس ٠٠٠١ مسافة تبعد عن المحضض بما يزيد عن ما جاء عن ألبرتس ¢(aY AAV) ١777 ومعاونيه في مجلة العلم؛ مجلد 777: ص Maniatis الأحياء الجزيئي للخلية؛ الطبعة الثانية» (9849١م)]. ويمكن أن ale ومعاونيه في كتاب Alberts لأن لديها عادة مدى أوسع (pals تكون عناصر المعزز المشتقة من الفيروسات مفيدة بشكل © [انظر ما جاء (SV40) من العائل. وتشتمل الأمثلة على معزز الجين المبكر للفيروس القردي :4 مجلد (EMBO) الأحياء الجزيئي الأوروبية plo ومعاونيه في مجلة Dijkema عن ديجكما (LTR) والمعزز/المحضضات المشتقة من التكرر الإنتهائي الطويل [(p1 440) VY ص ومعاونيه في محاضر جلسات أكاديمية Gorman [انظر ما جاء عن rous sarcoma لفيروس ب)] ومن م١٠987( TVYY ص 1:14 alas ¢(Proc. Natl. Acad. Sci) العلوم الوطنية الأمريكية ve ومعاونيه في مجلة Boshart الفيروس الضخم الخلوي البشري [انظر ما جاء عن بوشارت
You
Yr وبشكل إضافي؛ تكون بعض المعززات قابلة (a) 440) ©7١ af) مجلد (cell) الخلية مثل هرمون أو أيون فلزي [انظر ما ¢ inducer للتنظيم وتصبح فعالة فقط في وجود محرض alas «(Trends Genet) في مجلة اتجاهات في علم الوراثة Sassone-Corsi and Borelli جاء عن ص YY ومعاونيه في مجلة العلم؛ مجلد Maniatis ما جاء عن (pV AAT) 7١9 :ص IAA) 1737-٠ داخل الخلية في خلايا ثديية. ويمكن أن يربط DNA ويمكن أن يعبر عن جزيء 0 وفي هذه الحالة سيكون الحمض الأميني الأول DNA تسلسل محضض مباشرة مع جزيء مثيونين Lila recombinant protein للبروتين المأشوب N-terminus عند الطرف النتروجيني 6ه الذي يشفر بواسطة شيفرة بدء 76م. وحسب الرغبة؛ يمكن أن ينشق الطرف باستخدام in vitro النتروجيني عن البروتين عن طريق حضانة في أنبوبة الاختبار - .cyanogen bromide وبدلاً من ذلك؛ يمكن كذلك أن تفرز البروتينات الغريبة من الخلية في أوساط النمو عن يتكون من fusion protein خميرية تحمل شيفرة بروتين اندماجي DNA طريق تصنيع جزيئات تكفل إفراز البروتين الغريب في خلايا ثديية. leader sequence fragment قطعة تسلسل قيادي ويفضل أن يكون هنالك مواقع معالجة تشفر بين القطعة القيادية والجين الغريب يمكن أن تنشق ve sae (gall) في أنبوب الاختبار. وتحمل قطعة التسلسل sin virto إما داخل الجسم الحي توجه إفراز hydrophobic شيفرة الببتيد إشارة يتكون من أحماض أمينية غير محبة للماء عبارة adenovirus البروتين من الخلية. ويكون التسلسل القيادي ثلاثي الأقسام للفيروس الغدي عن مثال لتسلسل قيادي يكفل إفراز بروتين غريب في خلايا ثديبة. المعرّفة بواسطة polyadenylation وتكون عادة تسلسلات إنهاء الانتساخ وتعدد الأدئلة 0 خلايا ثديية عبارة عن مناطق منظمة تقع في الموضع بالنسبة لشيفرة إيقاف الترجمة + ولذلك؛ مع عناصر المحضض؛ تحيط بتسلسل التشفير. وتشكل النهاية translation stop الناضج بواسطة انشقاق وتعدد أدئلة 0 بعد الانتساخ نوعي الموقع [انظر mRNA ما ¢(a)4A0) Yq aif) alas «(Cel ومعاونيه في مجلة الخلية Birnstiel ما جاء عن : في بحث بعنوان " إنهاء ومعالجة عند النهاية لرنا حقيقي Proudfoot and Whitelaw جاء عن ve كتاب الانتساخ والربط "Termination and 3 end processing 58 eu Karyotic RNA 3} sill
You vg ما جاء عن ¢(a) 9AA) (B.D. Hames and D.M. Glover awl) Transcription and splicing
VE مجلد «(Trends Biochem. SCT) في مجلة اتجاهات في علم الكيمياء الحيوية 1 يمكن أن يترجم إلى متعدد ببتيد mRNA وتوجه هذه التسلسلات انتساخ .])م١٠9895( Veo ص على aay) وتشتمل أمثلة إشارات منهي الانتساخ/تعدد DNA مشفر بواسطة polypeptide ومعاونيه في بحث بعنوان " التعبير عن Sambrook عن ela تلك المشتقة من 59740 [انظر ما >
Expression of cloned genes in caltured mammalian cells جينات منسلة في خلايا ثديية مستتبثة دليل مرشد في إجراءات المختبرات :Molecular cloning في كتاب التنسيل الجزيئي . م[ ١4 ) a laboratony Manual introns ويمكن أن يعبر عن بعض الجينات بشكل أكثر فعالية عند وجود الإنترونات إلا أنه عبر عن العديد من ٠ (Inter Vening Sequences (تعرف كذلك بتسلسلات معترضة ١ التكميلي بشكل فعال من نواقل تفتقر لإشارات الربط (تعرف كذلك بمواقع DNA جزيئات في مجلة Gothing and Sambrook عن ela وصل المانح والمستقبل) [انظر على سبيل المثال ما عبارة عن تسلسلات غير مشفرة introns وتكون .])م١9481( TY الطبيعة؛ مجلد 7497: ص داخل تسلسل تشفيري تحتوي على مواقع وصسل intervening noncoding sequence معترضة متبوعة بتعدد أدنلة "splicing المانح والمستقبل. وتزال عن طريق عملية تعرف ب "الربط
Annu. Rev. ) في مجلة الكيمياء الحيوية السنوية Nevins عن sla النسخة الأولية [انظر ما في مجلة علم الوراثة السنوية Green عن ela ص )£4 (9487١م)؛ ما :0Y مجلد (Biochem. ومعاونيه في Padgett ما جاء عن ¢(a) AAT) TV) ص :٠١ مجلد (Annu. Rev. Genet.)
Krainer and عن ela ما ¢(aY AAT) 1119 مجلة الكيمياء الحيوية السنوية؛ مجلد 100 ص transcription and Jay yg مالع" في كتاب الانتساخ Splicing’ في بحث Maniatis أ لم)]. 4AA) (B.D. Hames and O.M. Glover) splicing توضع المكونات الموصوفة أعلاه؛ التي تشتمل على محضض؛ إشارة تعدد Gale me في تركيبات تعبيرية. ويمكن كذلك أن توجد Tae وتسلسل إنهاء انتساخ Aid ذات مواقع وصل مانح ومستقبل وظيفية وتسلسلات قيادية في introns انترونات cenhancers في متضاعف 1::00م©» مثل We حسب الرغبة. وتحفظ التركيبات التعبيرية cdg pad تركيبة ve قادر على محافظة ثابتة (plasmids عنصر خارج الكروموسوم (على سبيل المثال؛ بلازميدات
You
Yo في عائل؛ مثل خلايا ثديية أو بكتيريا. وتشتمل أنظمة التكرر الثديية على تلك المشضتقة من فيروسات حيوانية؛ تتطلب عوامل لإجراء تكرر. فعلى سبيل المثال؛ تتكرر بلازميدات [انظر ما 98740 Jie cpapovaviruses تحتوي على أنظمة تكرر الفيروسات البابوفية 5 أو فيروس ])م١19481( ١78 ص YY في مجلة الخلية؛ مجلد Gluzman جاء عن جلوزمان الفيروسي المناسب. 1 antigen من النسخ بوجود مستضد Tax الورم المتعدد؛ إلى عدد كبير ٠ وتشتمل أمثلة متضاعفات ثديية إضافية على تلك المشتقة من فيروسات الورم الحليمي replicon وبشكل إضافي؛ يمكن أن يكون المتضاعف (Epstein-Barr وفيروس papillomavirus نظاما تكرر؛ وبذلك يسمح بالمحافظة عليه؛ على سبيل المثال؛ في خلايا ثديية للتعبير وفي عائل بدائي النواة للتنسيل والتضخيم. وتشتمل أمثلة نواقل مترددة من بكتيريا ثديي من هذا علم الأحياء Alas ومعاونيه في Kaufman عن sla [انظر ما pMT2 القبيل على . [انظر ما جاء PHEBO و (a) 4A4) 447 مجلد 4 ص ¢(Mol. Cell. Biol) الخلوي الجزيئي مجلد 7: ص (Mol. Cell. Bioz) ومعاونيه في مجلة علم الأحياء الخلوي الجزيئي Shimizu عن (1457ام)]. ٠64 ويعتمد إجراء التحويل المستخدم على العائل الذي ينبغي أن يحول. وتعرف طرق في التقنية وتشتمل على heterologous polynueleotides إدخال متعددات نوكليوتيدات ثديية yo <"calcium phosphate precipitation’ ¢dextran-mediated transfection’ تشكيل مسام ¢"protoplast fusion "اندماج الخلايا اللاجدارية ¢"polybrene mediated transfection’ تغليف متعدد (متعددات) النوكليوتيدات داخل أجسام دهنية celectroporation كهربائي في الأنوية. DNA وحقن دقيق مباشر ل 5 ' وتعرف الأنسال الخلوية الثديبة المتوفرة كعوائل للتعبير في التقنية وتشتمل على العديد من الأنسال الخلوية المخلدة المتوفرة من مجموعة المزارع النمطية الأمريكية (ATCC) بما في ذلك على سبيل المثال لا الحصر؛ خلايا مبيض الهمستر الصيني (0110)؛ خلايا هيلا ماه خلايا كلية الهمستر الرضيع WA ((BHK) كلية القرد (605)؛ خلايا السرطانة الكبدية الخلوية البشرية (على سبيل المثال؛ 62 (Hep وعدد من أنسال خلوية أخرى.
Baculovirus Systems أنظمة الفيروسات العصوية —Y Yo
You
Ya يمكن كذلك ادخال متعدد النوكليوتيدات الذي يحمل شيفرة البروتين في ناقل تعبيري حشري مناسب؛ ويربط بشكل فعال مع عناصر التحكم داخل ذلك الناقل. ويتم بناء الناقل بواسطة أساليب معروفة في التقنية. وبشكل عام؛ تشتمل مكونات نظام التعبير على ناقل تحويل؛ عادة بلازميد بكتيري؛ قطعة مجين الفيروس العصوي؛ وموقع حصري (التحديد) مناسب لادخال JS يحتوي على ٠ التي ينبغي التعبير عنها؛ فيروس عصوي من النمط heterologous الجين أو الجينات المغايرة transfer الشائع له تسلسل مماثل للقطعة المتخصصة بالفيروس العصوي في ناقل التحويل (ويسمح هذا بالتأشيب المتماثل للجين المغاير في مجين الفيروس العصوي 8 وخلايا عائل حشرية وأوساط نمو مناسبة. ¢(baculovirus genome
١ وبعد ادخال تسلسل DNA الذي يحمل شيفرة البروتين في ناقل التحويل؛ تستنقل عدوى 40 الناقل والمجين الفيروسي ذو النمط الشائع تحويلياً في خلية عائل حشرية Cia يسمح بتأشيب recombine الناقل والمجين الفيروسي. ويعبر عن الفيروس المأشوب المتراص packaged recombinant virus وتعرف وتنقى اللويحات المأشوبة recombinant plaques وتتوفر المواد والطرق المستخدمة لأنظمة تعبير الفيروس العصوي/خلية الحشرة تجاريا على شكل
.| طقم 1 يزود؛ من جملة أطقم أخرى»؛ من شركة San Diego 10101100860 كاليفورنيا ath) من نوع '©و5»ه24). وتعرف هذه التقنيات بشكل عام لأولئك المتمرسين في التقنية وتوصف بشكل كامل في ما جاء عن «Summers and Smith في نشرة مركز البحوث التجريبية الزراعية في تكساس رقم 1000 AY) )2( (يشار إليها Lad بعد ب " ("Summer and Smith
وقبل ادخال تسلسل ال0<08 الذي يحمل شيفرة البروتين في مجين الفيروس العصوي
baculovirus genome Ye تجمع عادة المكونات الموصوفة أعلاه التي تشتمل على تسلسل محضض»؛ تسلسل قيادي (حسب الرغبة)؛ تسلسل التشفير المعني وتسلسل إنهاء الانتساخ» في تركيبة تغيير موضع متوسطة (ناقل تحويل). وقد تحتوي هذه التركيبة على جين مفرد وعناصر تنظيم مرتبطة بشكل فعال؛ جينات متعددة؛ لكل منها مجموعتها الخاصة من عناصر التنظيم المرتبطة بشكل فعال؛ أو جينات متعددة؛ منظمة بنفس مجموعة عناصر التنظيم.
© وتحفظ تركيبات تغيير الموضع المتوسطة غالبا في متضاعف creplicon مثل عنصر خارج الكروموسوم (على سبيل المثال؛ بلازميدات (plasmids قادر على المحافظة الثابتة في عاثل؛
Yoo vv نظام تكرر؛ وبذلك يسمح له بأن يحفظ في عائل مناسب replicon بكتيريا. وسيكون Jie للتنسيل والتضخيم. الأكثر استخداماً بشكل شائع transfer vector وفي الوقت الحالي؛ يعتبر ناقل التحويل معروفة bude وصممت كذلك نواقل أخرى pAC3T3 لإدخال جينات غريبة في 82021777 هو (الذي pVL9ss على (Jha لأولئك المتمرسين في التقنية. وتشتمل هذه النواقل؛ على سبيل 0٠ من 70م إلى 7م والذي يدخل موقع تنسيل polyhedrin يغير شيفرة البدء متعدد الهدرين في مجلة Luckow and Summers زوجاً قاعدياً من 171م؛ انظر ما جاء عن YY بعد 1 (a) 3A) ١ ص :١١ مجلد Virology) علم الفيروسات عادة على إشارة تعدد أدنلة متعدد الهدرين (انظر ما plasmid ويحتوي كذلك البلازميد alas (Ann. Rer. Microbrol,) الأحياء الدقيقة السنوية ple ومعاونيه في مجلة Miller جاء عن ١ ومصدر التكرر (amp) وجين مقاومة الأمبسيلين بدائي النواة (pV IAA) ١7/7 ص EY .aprocaryatic amicillin-ressitance E.coli للاختيار والتناسل في الإشريكية القولونية وتحتوي نواقل تحويل الفيروس العصوي عادة على محضض فيروس عصوي قادر DNA ويكون محضض فيروس عصوي عبارة عن أي تسلسل baculovirus promoter downstream لفيروس عصوي وبدء الانتساخ في الاتجاه المجاري RNA polymerase على ربط yo
MRNA (من النهاية 0 إلى النهاية 7( لتسلسل التشفير (على سبيل المثال جين تركيبي) في وسيكون لمحضض منطقة بدء انتساخ تقع عادة بشكل مجاور للنهاية 10 من تسلسل التشضفير. وموقع بدء انتساخ. RNA polymerase وتشتمل منطقة بدء الانتساخ هذه عادة على موقع ارتباط الذي؛ cenhancer ويمكن أن يكون لناقل تحويل فيروس عصوي كذلك حقل ثان يعرف بمعزز أو Laie عادة عن الجين البنيوي التركيبي. ويمكن أن يكون التعبير إما Tams إن وجدء يكون © تركيبيا. المنسوخة بوفرة في أوقات متأخرة في estructural genes وتزود الجينات التركيبية دورة عدوى فيروسية؛ تسلسلات محضضة مفيدة بشكل خاص. وتشتمل الأمثلة على تسلسلات مشتقة من الجين الذي يحمل شيفرة البروتين الفيروسي متعدد الهدرون؛ انظر ما جاء عن ومعاونيه في بحث بعنوان 'تنظيم التعبير عن جين الفيروس العصوي Friesen vo للفيروسات Ayal الأحياء ale في كتاب "The regulation of Baculoviruses
Yo
YA
لم)؛ 5 ) (Water Doerfler (باسم The Molecular Biology of Baculovirus العوية نشرات مكتب براءات الاختراع الأوروبي أرقام 874 177 و 4776 £100 والجين الذي ومعاونيه في مجلة علم الفيروسات Viak عن sla انظر ما p10 يحمل شيفرة البروتين .)م١ 4( 658 مجلد 14 ص ¢(J. Gen. Virol.) الوراثي من جينات DNA ويمكن اشتقاق تسلسلات الإشارة المناسبة التي تحمل شيفرة لبروتينات حشرية أو من فيروس عصوي مفرزة؛ مثل جين متعدد الهدرين للفيروس ص VY مجلد (gene) ومعاونيه في مجلة الجين carbonell العصوي (انظر ما جاء عن لأن الإشارات للتعديلات بعد الترجمة للخلية الثديية Todas من ذلك؛ Yay (pV AAA) £19 (مثل انشتقاق ببتيد إشارة؛ انتشفقاق حال للبروتين والفسفرة تبدو أنها معرفة من قبل (signal peptide cleavage, proteolytic, cleavage, and phosphorylation ve الخلايا الحشرية؛ وتبدو كذلك الإشارات المطلوبة لإفراز وتراكم نووي أنها محفوظة بين يمكن أن تستخدم كذلك التسلسلات evertebrate وخلايا الفقاريات invertebrate خلايا اللافقاريات بشريء o-interferon القيادية للمصدر غير الحشري؛ كتلك المشتقة من جينات تحمل شيفرة ؛)م١1185( 5897 ص iTV 0 انظر ما جاء عن ميدا 148608 ومعاونيه في مجلة الطبيعة؛ مجلد انظر ماجاء عن chuman gastrin-releasing peptide ببتيد مطلق لجاسترين بشري مجلد ¢molec.Cell-Biol الأحياء الخلوي الجزيئي ple ومعاونيه؛ في مجلة Lebacg-Verheyden ومعاونيه في محاضر smith بشري؛ انظر ما جاء عن 11-2 ؛)م١ AAA) 179 ص :4 (LB 11-3 ؛)م١548( »8404 جلسات أكاديمية العلوم الوطنية الأمريكية؛ مجلد 47: ص t(p) GAY) ص آلا i0A ومعاونيه في مجلة الجين؛ مجلد miyajima (انظر ما جاء عن (19 ص :١ مجلد (DNA انظر ما جاء عن مارتن ومعاونيه في مجلة ¢glucocerebrosidase أ لتزويد إفراز في الحشرات. (a) IAA) أو متعدد بروتين مأشوب polypeptide ويمكن أن يعبر عن متعدد ببتيد داخل الخلية أو؛ إذا عبر عنها باستخدام تسلسلات التنظيم المناسبة؛ recombinant polyprotein يمكن أن تفرز. ويتطلب عادة التعبير الجيد داخل الخلية لبروتينات غريبة غير مدمجة جينات مغايرة لها تسلسل قيادي قصير بشكل مثالي يحتوي على إشارات بدء ترجمة ٠10 Yo عند methionine وحسب الرغبة؛ يمكن أن يشق LATG تسبق إشارة بدء Apulia translation
You
Ya عن طريق حضانة في أنبوب الاختبار mature الطرف النتروجيني من البروتين الناضج «cyanogens bromide باستخدام in vitro من ذلك؛ يمكن أن تفرز متعددات البروتين أو البروتينات المأشوبة التي لا تفرز Yay تحمل شيفرة بروتين اندماجي chimeric DNA molecules طبيعياً من الخلية الحشرية بإيجاد يتكون من قطعة تسلسل قيادي يكفل إفراز البروتين الغريب في الحشرات. وتحمل عادة قطعة ٠ التسلسل القيادي شيفرة ببتيد إشارة يتكون من أحماض أمينية غير محبة للماء توجه انتقال .endoplasmic reticulum البروتين الى الشبكة الإتدوبلازمية
وبعد ادخال تسلسل DNA و/أو الجين الذي يحمل شيفرة 'طليعة "precursor منتج التعبير للبروتين؛ يحول عائل خلية حشرية بشكل مشترك مع DNA المغاير لناقل التحويل DNA Ve المجيني للفيروس العصوي من النمط الشائع عادة عن طريق .co-transfection وسوف يشتمل تسلسل المحضض وإنهاء الانتساخ من التركيبة على قسم ily طوله oY كيلو قاعدة من مجين الفيروس العصوي. وتعرف طرق إدخال DNA مغاير في الموقع المرغوب في الفيروس العصوي في التقنية. (انظر ما ela عن summers and smith في المرجع المذكور أعلاه؛ ما جاء عن ju ومعاونيه f(a) AAV) ما ela عن smith ومعاونيه في مجلة علم الأحياء الخلوي الجزيئي؛ مجلد iF ص 1165 AAT) ام)؛ luckow and summers (984٠م)). فعلى سبيل المثال؛ يمكن أن يكون الادخال في جين Jie جين متعدد «polyhedron gene (nuded) عن طريق تأشيب تعابري مضاعف ممائل thomologous double crossover recombinant ويمكن أن يكون الادخال كذلك في موقع إنزيم حصري restriction enzyme تمت هندسته إلى جين الفيروس العصوي المرغوب. انظر ما sla عن ميلر Miller ومعاونيه في معايرات حيوية if alas «(Bioessays) ٠ ص AY (1189١م). وعندما ينسل تسلسل DNA في موقع جين متعدد الهدرين polyhedron gene في الناقل التعبيري expression victor يحاط بتسلسلات متخصصة بمتعدد الهدرين polyhedron-specific sequerees عند النهايتين ©" و ؟' ويوضع بعد محضض
متعدد الهدرين .polyhedron promoter ويتم ترصص الناقل التعبيري للفيروس العصوي المتشكل Baas بشكل متعاقب في Yo فيروس عصوي مأشوب معدي an infectious recombinant baculovirus ويحدث alll المتماثل عند تردد قليل om) حوالي 7١ وحوالي (Zo لذلك؛ لا تزال أغلبية الفيروس الناتج
بعد استنفاد العدوى التحويلي المشترك cotransfection من الفيروس ذي bail) الشضائع. ولذلك؛ لابد من استخدام طريقة لتعيين recombinant viruses وتتمثل ميزة نظام التعبير في تقصي بصري يسمح بتمييز recombinant viruses ويتم إنتاج بروتين متعدد الهدرين «polyhedrin protein الذي يتم إنتاجه بواسطة فيروس محلي enative virus بمستويات عالية fax ٠ - في أنوية الخلايا المصابة في أوقات متأخرة بعد العدوى الفيروسية viral infection ويشكل بروتين متعدد الهدرين polyhedrin protein المتراكم أجسام انسداد occlusion تحتوي كذلك على جسيمات مطمورة particles 0560060©. وتكون أجسام الانسداد coda بحجم aly 10 ميكرومتر ض على الأكثر؛ قابلة للانكسار بشكل كبير؛ مما يمنحها مظهراً Lilia لامعآً يمكن رؤيته بسهولة تحت المجهر الضوئي. وتفتقر الخلايا المصابة بفيروسات مأشوبة لأجسام الانسداد. ولتمييز الفيروس المأشوب عن الفيروس ذي النمط الشائع؛ تشكل طبقة plagued من السائل الطافي supernatant من استنقال العدوى التحويلية transfection على طبقة أحادية monolayer من UMA حشرية عن طريق أساليب معروفة لأولئك المتمرسين في التقنية. أي؛ تقصي lag ll 40 تحت المجهر الضوئي لوجود (الدلالة على فيروس من النمط الشائع) أو غياب (الدلالة على فيروس مأشوب) أجسام انسداد. انظر كتاب " بروتوكولات حالية في علم vo الأحياء الدقيقة "current protocols in microbiology مجلد ( ¥( (باسم ausubel ومعاوتيه) عند 8و Gal) ١١ تكميلي csummers and smith ¢ (199+) (V+) في المرجع المذكور أعلاه؛ miller ومعاونوه AAR) )2( وقد طورت النواقل التعبيرية للفيروس العصوي المأشوب recombinant baculovirus expression vectors لاستنقال العدوى في WA حشرية عديدة. فعلى © - سبيل المثال؛ طورت فيروسات عصوية مأشوبة od من جملة فيروسات أخرى: «drosophila melanogaster ¢bombyx mori ¢autographa californica <aedes aegypti spodoptera frugiperda, and trichoplusia ni (انظر ما جاء في نشرة البراءة الدولية Gg لمعاهدة التعاون في مجال البراءات رقم 4765449 04/0؛ ما جاء عن carbonell ومعاونيه في مجلة ale الفيروسات؛ مجلد 07 ص VOT (988١م)؛ ما جاء عن Wright في مجلة الطبيعة؛ مجلد © ١77:ص VIA (15485م)؛ ما جاء عن Smith ومعاونيه في مجلة ale الأحياء الخلوي الجزيئي؛ مجلد oF ص 71576 $a) AY) وانظر بشكل عام ما ola عن Fraser ومعاونيه في Yoo
مجلة علم الأحياء التطوري الخلوي في أنبوب الاختبار تجارب خارج الجسم الحي .)م١٠1485( YYO (aio مجلد «(In Vitro Cell. Dev. Biol.) الخلايا وأوساط استزراع الخلايا متوفرة تجارياً سواءا التعبير المباشر والاندماجي a baculovirus/expression لمتعددات ببتيدات مغايرة في نظام فيروس عصوي/تعبيري استزراع الخلية بشكل عام لأولئك المتمرسين في التقنية. انظر على AE وتعرف system ٠ في المرجع المذكور أعلاه. Smith وسميث Sumers سبيل المثال ما جاء عن سمرز بعد ذلك في وسط مغذ modified insect cells ويمكن أن تنمو الخلايا الحشرية المعدلة مناسب؛ يسمح بالمحافظة الثابتة للبلازميد (البلازميدات) الموجودة في العائل الحشري المعدل. gle وحيثما يكون جين المنتج التعبيري تحت تحكم مستحث؛ يمكن أن ينمو العائل إلى كثافة ويستحث التعبير. وبدلا من ذلك؛ حيثما يكون التعبير تركيبياء سيعبر عن المنتج باستمرار في © الوسطء ويجب أن يدور الوسط المغذي باستمرار» بينما تتم إزالة المنتج المعني وزيادة المواد المغذية المستنفدة. ويمكن أن ينقى المنتج بواسطة تقنيات مثل الكروماتوغرافي استشراب ألفوي » (HPLC) على سبيل المثال؛ استشراب بسائل عالي الأداء «chromatography دمل exchange chromatography استقشراب بالتبادل الأيوني caffinity chromatography solvent extraction استخلاص بالمذيب ¢gradient centrifugation density ¢electrophoresis إلخ؛ vo أو ما شابه. وإذا كان مناسباء يمكن أن ينقى المنتج بشكل إضافي؛ كما هو مطلوبء لتتم إزالة جوهرياً التي تفرز كذلك في الوسط أو تنتج من تحلل insect proteins أي بروتينات حشرية (Jd) جوهرياً على الأقل من بقايا العائل. على سبيل JIA خلايا حشرية؛ ليتم تزويد منتج بروتينات؛ دهون وسكريات متعددة. وللحصول على تعبير البروتينات؛ تحضن خلايا العائل المأشوبة المشتقة من المحولات “ في ظطروف تسمح بالتعبير عن التسلسل الذي يحمل شيفرة البروتين المأشوب. transform ants وستختلف هذه الظروف؛ اعتمادآً على الخلية العائل المختارة. إلا أنه؛ من الممكن التحقق من الظروف بسهولة من قبل أولئك الملمين في التقنية؛ اعتمادآً على ما هو معروف في التقنية.
Bacterial Systems الأنظمة البكتيرية -* تعرف أساليب التعبير البكتيري في التقنية. ويكون محفز بكتيري عبارة عن أي تسلسل ro في الاتجاه المجاري عند transcription بكتيري وبدء الانتساخ RNA قادر على ربط DNA
You vy
النهاية (7”) لتسلسل تشفير (على سبيل المثال جين تركيبي) إلى MRNA وسيكون محفز منطقة بدء انتساخ تقع sale بجوار النهاية 10 لتسلسل التشفير. وتشتمل منطقة بدء الانتساخ هذه عادة على موقع ارتباط polymerase RNA وموقع بدء انتساخ. ويمكن أن يكون لمحفز بكتيري كذلك Jia ثان يعرف بمشغل operator يمكن أن يتداخل مع موقع ارتباط polymerase RNA
٠ مجاور يبدأ عنده تصنيع -RNA ويسمح المشغل بانتساخ منظم (مستحث) سلبي؛ Lay أنه يمكن أن يربط بروتين جين مثبط المشغل وبذلك يثبط انتساخ جين معين. ويمكن أن يحدث التعبير التركيبي في غياب عناصر تنظيم سلبية؛ مثل المشغل. وبالإضافة إلى ذلك يمكن إجراء تنظيم
إيجابي بواسطة تسلسل ارتباط بروتين منشط جيني؛ الذي؛ إن وجد يكون عادة مجاورا لتسلسل
ارتباط polymerase RNA عند النهاية (©'). ومن أمثلة بروتين منشط جيني بروتين منشط
.\ المقيضة «(CAP) catabolite الذي يساعد ببدء انتساخ مشغل lacoperon في Escherichia coli [انظر على سبيل JE ما جاء عن Raibaud ومعاونيه في مجلة ale الوراثة السنوية Annu. alas Rev.
Genet. 148: ص (aA) ١77 ولذلك يمكن أن يكون التعبير المنظم إما
Gila أو udu وبذلك إما يعزز أو يخفض الانتساخ.
وتزوئد التسلسلات التي تحمل شيفرة إنزيمات المسرى الاستقلابي (الايضي) metabolic
pathway ve تسلسلات محضض مفيدة بشكل خاص. وتشتمل الأمثلة على تسلسلات محضض مشتقة من إنزيمات ايض السكر؛ lactose (lac) «galactose Jie [انظر على سبيل المثال ما جاء
عن chang ومعاونيه في مجلة dap مجلد 4خ نص 5 f(a AVY) والمالتوز. وتزود كذلك أمثلة إضافية تشتمل على تسلسلات محضض مشتقة من إنزيمات تصنيعية حيوية مثل(ئرو) tryptophan [انظر على سبيل المثال ما جاء عن geoddel ومعاونيه في مجلة بحوث
© - الأحماض النووية alas ¢(Nuc.
Acids Res.) :ص 4605097 ela Lata AA) عن يلفرتون 00 ومعاونيه في مجلة بحوث الأحماض النووية؛ مجلد 9: ص VY) (9481١م)؛ براءة الاختراع الأمريكية رقم 471 VFA ؛؛ نشرات مكتب براءات الاختراع الأوروبي أرقام YY 5 و فلالا ٠ [YYY ويزود كذلك نظام محضض g-Laotamase(bla) [انظر ما
جاء عن Weissmann في بحث 'تنسيل cloning الانترفيرون interferon وأخطاء أخرى" في
interferon 3 US Yo (باسم bacteriophage Lambda PL 16 aA ) (0 Gresser [انظر ما جاء عن
\ CA re anne وأنظمة [(aY4AY) ١78 ومعاونيه في مجلة الطبيعة؛ مجلد 797: ص Shimatake [انظر براءة الاختراع الأمريكية رقم 6056 [CAR تسلسلات محضض مفيدة. وبالإضافة إلى ذلك؛ تعمل SHAS المحضضات التصنيعية synthetic promoters التي لا تتواجد في الطبيعة كمحضضات بكتيرية. فعلى سبيل JB) يمكن أن تربط تسلسلات تفعيل ٠ الانتساخ لأحد محضضات بكتيرية أو عاثية bacteriophage promoter مع تسلسلات المشغ ل aan بكتيري أو محضض i Ale أخر bacterial bacteriophage promoter مكوناً محضض هجين synthetic hybrid promoter pias [انظر براءة الاختراع الأمريكية رقم 477 00١ 4]. فعلى سبيل tac promoter «Jia عبارة عن ahybrid trp-lac promoter يتكون من tripromoter and lac operon sequences الذي ينظم 0 بواسطة مثبط اللاكتوز lac repressor [انظر ما sla عن Amann ومعاونيه في مجلة الجينء ala 8؟: ص 1697 (987١م)؛ ما sla عن de boer ومعاونيه في محاضر جلسات أكاديمية العلوم الوطنية الأمريكية؛ مجلد tA ص 7١ (947١م)]. وعلاوة على ذلك؛ يمكن أن يشتمل محضض بكتيري على محضضات تتواجد طبيعياً من مصدر غير بكتيري لها القدرة على ربط polymerase RNA البكتيري وبدء الانتساخ. ويمكن كذلك أن يقرن محضض يتواجد yo طبيعياً من مصدر غير بكتيري مع polymerase RNA متساوق لإنتاج مستويات مرتفعة من تعبير بعض الجينات في بدائيات النواة. ويعتبر Bacteriophase 17 RNA T7 RNA polymerase/promoter system لأكلات البكتريا bacteriophase مثالا لنظام محضصض مقرون coupled promoter system [انظر ما ela عن studier ومعاونيه في مجلة علم الأحياء الجزيئي alas ¢(J. Mol. Biol.) 48: ص g(a) AAT) IV ما sla عن Tabor ومعاونيه في محاضر © جلسات أكاديمية العلوم الوطنية الأمريكية؛ مجلد AY ص (a) AAC) ٠١74 وبالإضافة إلى ذلك؛ يمكن أن يتكون محضض hybrid promoter (pad كذلك من bacteriophage و E. coli (YY 851 (انظر نشرة مكتب براءات الاختراع الأوروبي رقم operator region فعال مفيدآً ribosome وبالإضافة إلى تسلسل محضض وظيفي؛ يكون موقع ارتباط يعرف موقع ارتباط Escherichia coli كذلك للتعبير عن جينات غريبة في بدائيات النواة. وفي وتسلسل من ؟- (ATG) ويشتمل على شيفرة بدء Shine-Dalgamo(SD) بتسلسل ribosome Yo [انظر ما جاء ١١-7 نوكليوتيدات طولا يقع قبل شيفرة البدء بعدد من نوكليوتيدات يتراوح من
You
rt : عن shine ومعاونيه في مجلة الطبيعة cnature مجلد 1*4: ص ٠. ])م١ا5( YE ويعتقد أن تسلسل SD يحضض ارتباط MRNA مع ribosome عن طريق ازدواج القواعد بين تسلسل SD والنهاية 16S rRNA 'Y في الإشريكية القولونية Escherichia coli [انظر ما جاء عن steitz ومعاونيه في بحث "إشارات جينية وتسلسلات نوكليتيد في mRNA في كتاب التنظيم والتطور ٠ الحيوي: التعبير عن الجين Biological Requlation and Development Gene Expressiem (باسم (rR.
F.
Goldburger ) 1749 ١م)]. وللتعبير عن الجينات حقيقية النواة والجينات بدائية النواة بموقع ارتباط ribosome ضعيف [انظر ما جاء عن sambrook ومعاونيه في بحث " التعبير عن الجينات المنسلة في الإشريكية القولونية +"expression of eloned genes in Escherichia coli في كتاب التنسيل الجزيني 48 molecular دليل مرشد في إجراءات المختبرات ٠4 ) alaboratory manual ve م . ويمكن التعبير عن جزيء DNA داخل الخلية. ويمكن أن يربط تسلسل محضض مباشرة مع جزيء DNA وفي هذه الحالة سيكون الحمض الأميني الأول عند الطرف النتروجيني دائماً عبارة عن methionine يشفر بواسطة شيفرة البدء LATG وحسب الرغبة؛ يمكن أن ينشق methionine عند الطرف النتروجيني عن البروتين بواسطة حضانة في أنبوب yo الاختبار تجارب خارج الجسم مع Cyanogen bromide أو عن Ld) Gish حضانة داخل الجسم الحي invivo أو في أنبوب الاختبار مع ببتيداز بكتيري يحتوي على عند الطرف النتروجيني a bacterial methionine N-terminal peptidase (انظر نشرة مكتب براءات الاختراع الأوروبي رقم (YY 77١ وتزود البروتينات الاندماجية fusion proteins بديلاآً عن التعبير المباشر. وعادة؛ يدمج © تسلسل DNA يحمل شيفرة الجزء عند الطرف النتروجيني لبروتين بكتيري داخلي المنشأ cendogenous bacterial protein أو بروتين مستقر آخر مع النهاية ©" من تسلسلات التشفير المغايرة Jheterologous coding sequences وعند التعبير» ستزود هذه التركيبة اندماجاً لتسلسل اميني من الاحماض الامينية. فعلى سبيل (lal) يمكن أن يريط bacteriophage lambda cell gene عند الطرف ©' لجين غريب ويعبر عنه في بكتيريا. ويفضل أن يبقي بروتين الاندماج Yo الناتج كموقع لإنزيم معالجة processing enzyme (العامل (factor Xa لشق bacteriophage عن الجين الغريب [انظر ما جاء عن nagai ومعاونيه في مجلة الطبيعة؛ مجلد tT d ص 80٠0 You vo (lacZ) ويمكن كذلك أن تشكل البروتينات الاندماجية مع تسلسلات من جينات .])م١9454( ])م١48ا( YAY ص is مجلد cgene ومعاونيه في مجلة jia [انظر ما جاء عن ‘ (5. Biotechnol.) ومعاونيه في مجلة التقنية الحيوية allen (انظر ما جاء عن (trpE) E TrpE ومعاونيه في مجلة علم الأحياء الدقيقة makoff ما جاء عن ¢(a) AAV) AT مجلد 10 ص [انظر نشرة مكتب chey ؛])م١٠9488( ١١ .1)؛ مجلد :ص Gen. Microbiol.) الوراثي ٠
DNAJ ويمكن أن يحمل أو لا يحمل تسلسل [FYE TEV براءات الاختراع الأوروبي رقم عاط16278. ويتمثفل site عند نقطة اتصال تسلسلي الحمض الأميني شيفرة موقع قابل للانشقاق ويشكل البروتين الاندماجي هذا مع ubiquitin region مثال آخر في بروتين يوبكوتين اندماجي منطقة اليوبكوتين التي يفضل أن تستبقي موقعاً لإنزيم معالجة (على سبيل المثال . لانشقاق اليوبكوتين عن البروتين الغريب (ubiquitin specific processing-protease ve the native foreign protein ومن خلال هذه الطريقة؛ يمكن أن يعزل البروتين الغريب المحلي ؛ مجلد (Bio/Technology) الأحياء/التقنية ale ومعاونيه في مجلة miller [انظر ما جاء عن ميلر .])م١14ق( TAA لأنص من ذلك؛ يمكن أن تفرز البروتينات الغريبة كذلك من الخلية عن طريق إيجاد Yas تحمل شيفرة بروتين اندماجي يتكون من قطعة تسلسل chimeric DNA خميرية DNA جزيئات vo إشارة يكفل إفراز البروتين الغريب في البكتيريا [انظر براءة الاختراع الأمريكية peptide ببتيد إشارة يتكون من peptide شيفرة ببتيد sale وتحمل قطعة تسلسل الإشارة ٠. ]4 77 77 رقم أحماض أمينية غير محبة للماء توجه إفراز البروتين من الخلية. ويفرز البروتين إما في الخلية؛ الواقع periplasmic أوساط النمو (بكتيريا موجبة الغرام) أو في حيز هلامية سيتوبلازم بين الغشاء الداخلي والخارجي للخلية (بكتيريا سلبية الغرام). ويفضل أن يكون هنالك مواقع © يمكن أن تنشق إما داخل الجسم الحي أو في خارج الجسم الحي أنبوب الاختبار dallas foreign gene والجين الغريب signal peptide fragment المشفرة بين قطعة ببتيد الإشارة الذي يحمل شيفرة تسلسلات إشارة مناسبة من جينات DNA ويمكن أن يستخلص
Escherichia coli (ompA) للبروتينات البكتيرية المفرزة؛ مثل جين بروتين الغشاء الخارجي ل ومعاونيه في بحث: المعالجة التجريبية للتعبير عن الجين masui [انظر ما جاء عن ومعاونيه في مجلة علم Ghrayeb ما جاء عن ¢experimental manipulation gene expression
You
م
الأحياء الجزيئي الأوروبية cE MBO-J مجلد AME) YEYY Gai )([ وتسلسل إشارة فسفاتاز قلوي للإشريكية القولونية coli alkaline phosphates signal sequence(phoA) .12 [انظر
ما جاء عن Oka ومعاونيه في محاضر جلسات أكاديمية العلوم الوطنية الأمريكية؛ مجلد 87: ص 4A 0) 77١١ ١م)]. وكمثال إضافي؛ يمكن استخدام تسلسل الإشارة لجين alpha-amylase
٠ .من سلالات عصوية متتوعة لإفراز بروتينات معايرة من العصية الرقيقة (various Bacillus strains) [انظر ما جاء عن palva ومعاونيه في محاضر جلسات أكاديمية
العلوم الوطنية الأمريكية؛ مجلد VA ص 0487© 4p) TAY) نشرة مكتب براءات الاختراع
الأوروبي رقم 47+ VEE
وتكون عادة تسلسلات إنهاء الانتساخ المعرفة بواسطة بكتيريا عبارة عن مناطق تنظيم
© تقع عند النهاية “” بالنسبة إلى شيفرة إيقاف الترجمة؛ ولذلك مع المحضض تحيط بتسلسل التشفير. وتوجه هذه التسلسلات انتساخ mRNA يمكن أن يترجم إلى متعدد الببتيد المشضفر بواسطة DNA وتشتمل تسلسلات إنهاء الانتساخ بشكل متكرر على تسلسلات DNA تبلغ حوالي 5٠ نوكليوتيدة nucleotides 50 قادرة على تشكيل تراكيب عروية جذعية stem loop
تساعد في إنهاء الانتساخ. وتشتمل الأمثلة على تسلسلات إنهاء انتساخ مشتقة من جينات ذات
Escherichia coli في الإشريكية القولونية trp gene جين التربتوفان Jie محضضات قوية؛ ae
بالإضافة إلى جينات حيوية تصنيعية أخرى.
وتوضع Bale المكونات الموصوفة أعلاه؛ التي تشتمل على محخضض «promoter
تسلسل إشارة signal sequence (حسب الرغبة)؛ تسلسل التشفير المعني وتسلسل إنهاء انتساخ؛
Jia creplicon في تركيبات تعبيرية. وتحفظ التركيبات التعبيرية غالبا في متضاعف Las
أ عنصر خارج الكروموسوم extrachromosomal element (على سبيل clad بلازميدات) fala على محافظة ثابتة في عائل؛ مثل البكتيريا. وسيشتمل المتضاعف 0 على نظام تكرر creplication system مما يسمح له Ob يحفظ في عائل بدائي النواة إما للتعبير أو للتنسيل والتضخم. وبالإضافة إلى ذلك؛ يمكن أن يكون المتضاعف إما بلازميد بعدد كبير أو قليل من النسخ. وسيكون لبلازميد بعدد كبير من النسخ بشكل عام عدد من النسخ يتراوح من حوالي 0
- إلى Yeo وعادة من حوالي ٠١ إلى حوالي .٠50 وسيفضل أن يحتوي ile يحتوي على بلازميد بعدد كبير من النسخ على حوالي ٠١ على الأقل؛ والأفضل حوالي Ta DU ٠١ على
Yoo rv على تأثير الناقل lie) يختار إما ناقل بعدد كبير أو قليل من النسخ؛ of الأقل. ويمكن والبروتين الغريب على العائل. من ذلك؛ يمكن أن تدمج التركيبات التعبيرية في المجين البكتيري Yau وتحتوي نواقل الدمج عادة على vector integrating باستخدام ناقل دمج bacterial genome تسلسل واحد على الأقل مماثل للكروموسوم البكتيري الذي يسمح للناقل بأن يندمج. ويبدو أن ٠ المماثل في الناقل DNA—) بين recombination عمليات الدمج تنتج من عمليات تأشيب من سلالات DNA والكروموسوم البكتيري. فعلى سبيل المثال؛ تندمج نواقل الدمج التركيبية مع عصوية متنوعة في كروموسوم العصوية (انظر نشرة مكتب براءات الاختراع الأوروبي رقم pacteriophage ويمكن أن تتكون نواقل الدمج كذلك من تسلسلات أكلات البكتريا .)١7١7 748 .transposon sequences او تسلسلات العناصر الورائية المتنقلة © وتركيبات extrachromosomal التركيبات خارج الكروموسوم ale ويمكن أن تحتوي يمكن اختيارها للسماح باختيار سلالات بكتيرية كانت markers الدمج التعبيرية على واسمات التي يمكن اختيارها في العائل البكتيري وقد markers قد حولت. ويمكن التعبير عن الواسمات «chloramphenicol ¢ampicillin تشتمل على جينات تجعل البكتيريا مقاومة للعقاقير مثل ومعاونيه في davies [انظر ما جاء عن tetracycline و kanamycin (neomycin) cerythromycin yo مجلة علم الأحياء الدقيقة السنوية؛ مجلد 77: ص £19 (978١م)]. وقد تشتمل الواسمات التي يمكن اختيارها كذلك على جينات حيوية تصنيعية؛ كتلك في المسارات الحيوينة 5 stryptophan histidine المسارات الحيوية التصنيعية ل Sia (Biosynthetic genes التصنيعية .leucine في نواقل Lae من ذلك؛ يمكن أن توضع بعض من المكونات الموصوفة أعلاه Yau 0: replicon تحويل. وتتكون نواقل التحويل عادة من واسم يمكن اختياره إما يحفظ في متضاعف كما هو موصوف أعلاه. transformation vectors أو يطور إلى ناقل دمج ولقد طورت النواقل التعبيرية ونواقل التحويل؛ إما متضاعفات خارج الكروموسوم (Jal أو نواقل دمج؛ للتحويل في عدة بكتيريا. فعلى سبيل extrachromosomal replication cla للبكتيريا التالية: العصوية الرقيقة [انظر ما co jal طورثت نواقل تعبيرية؛ من جملة نواقل ve مجلد 79: ص AS al) عن 8108؛ ومعاونيه في محاضر جلسات أكاديمية العلوم الوطنية
YA
(a) GAY) 007 نشرتي مكتب براءات الاختراع الأوروبي رقمي 704 1 و 7ه TY 64 نشرة البراءة الدولية Tip لمعاهدة التعاون في مجال البراءات رقم 4641 ./84]؛ Escherichia coli [انظر ما ela عن Shimatake ومعاونيه في مجلة هم مجلد YAY ص (pV AAV) ٠7 ما جاء عن Amann ومعاونيه في مجلة gene مجلد tf ص YAY t(p) 340) ٠ ما sla عن studier ومعاونيه في مجلة Mol. Biol. .1 علم الأحياء الجزيئي؛ مجلد VAR ص (a) GAT) VIF نشرات مكتب براءات الاختراع الأوروبي EPO publications أرقام AYA 2 FT VV حتتلي 4¢V تتلل Appl-streptococcus cremoris [انظر ما جاء عن powell ومعاونيه في مجلة las environ microbiol 2 10% ص f(a aA A) N00 streptococcus lividans [انظر ما ela عن powell ومعاونيه في «Appl-environ microbiol Alas 6 مجلد 0¢: ص 100 streptomyces lividans ؛])م١ 9 AA) [انظر براءة الاختراع الأمريكية رقم حم JE veo وتعرف طرق إدخال DNA خارجي المنشاً exogenous DNA في عوائل بكتيريا faa في التقنية؛ وتشتمل عادة إما على تحويل البكتيريا المعالجة بكلوريد الكالسيوم (CaCl) أو عوامل أخرى؛ Jie كاتيونات ثنائية التكافؤ divalent cations وكبريتوكسيد ثنائي المثيل .DMSO(DMSO) ٠ ويمكن أن يدخل DNA كذلك في خلايا بكتيرية بواسطة تشكيل المسام كهربائياً electroporation وتختلف إجراءات التحويل عادة مع اختلاف الأنواع البكتيرية التي ينبغي أن تحول. انظر على سبيل المثال؛ ما جاء عن Masson ومعاونيه في رسائل FEMS في علم الأحياء الدقيقة alas «(FEMS Microbiol. Lett.) 68: ص YVY (989٠١م)؛ ما sla عن 8 ومعاونيه في محاضر جلسات أكاديمية العلوم الوطنية الأمريكية ¢proc. Natl. acad. Sci US-A Ye مجلد :¥Y4 ص fp 1 ) 00AY نشرتي مكتب براءات الاختراع الأوروبي EPO publications رقمي ١7 Yo و 907 567 ؛ نشرة البراءة الدولية وفقآً لمعاهدة التعاون في مجال البراءات PCT-publication رقم hail] ]4/0 484١ ما جاء عن miller ومعاونيه في محاضر جلسات أكاديمية العلوم الوطنية الأمريكية Natl. acd. sci .0100 مجلد 858: ص 576 ¢(pY AAA) ما جاء عن wang ومعاونيه في مجلة Yo علم البكتيريا bacteriol .ل مجلد ؟/اانص 5495 )+29 لم) ([campylobacter [انظر ما sla عن kohen ومعاونيه في محاضر جلسات أكاديمية العلوم الوطنية الأمريكية \ CA ra
proc.
Natl. acad. sci مجلد i714 ص (pV YY) 7٠١١ ما جاء عن dower ومعاونيه في مجلة
بحوث الأحماض النووية alas cnucleic acids res )0 ص 177 ¢(aY AAA) ما جاء عن :© في بحث "طريقة محسنة لتحويل الإشريكية القولونية
an improvement method for transformation Escherichia coli باستخدام بلازميدات مشتقة من 181ه0.
٠ في كتاب الهندسة الوراثية: محاضر جلسات الندوة الدولية حول الهندسة الوراثية (باسم (H.
W. boyer and 5. nicosia ؛ ما ola عن Mandel ومعاونيه في مجلة ale الأحياء الجزيئي
mol.
Biol .ل alas 0 ص 108 ) av. ١م)؛ ما جاء عن Taketo في مجلة أكتا acta في الكيمياء الحيوية والفيزياء الحيوية (Biochim.
Biophys.
Acta) مجلد 1444 ص ف
¢(a) AAA) الإشريكية Ld «[Escherichia جاء عن تشاسي Chassy ومعاونيه في
alas «YO FEMS Microbiol.
Lett.
Ve 44: ص ¢[Lactobacillus ؛)م١ 9 AY) YVY إما sla عن :© ومعاونيه في مجلة الكيمياء الحيوية التحليلية <(Anal.
Biochem) مجلد :11١ ص FA ¢[Pseudomonas إما جاء عن Augustin ومعاونيه في رسائل فمز في علم الأحياء الدقيقة
(FEMS Microbiol.
Lett. مجلد 17: ص YoY ( 8 ١م)؛ العنقودية [Staphylococcus [ما جاء
عن Barany ومعاونيه في مجلة ale البكتيريا of. bacteriol مجلد iV EE ص AA ) NAA ١م)؛ ela Le ve عن Harlander في بحث ' تحويل ستربتوكوكس لاكتيس بواسطة تشكيل المسام كهربائياً "Transformation of Streptococcus lactis by electroporation في كتاب: علم الوراثة
Perry عن sla Lo ؛ (ed.
J.
Ferretti and R.
Curtiss III (باسم streptococcal genetics العقدية
ومعاونيه في Alaa العدوى وعلم المناعة immun .066 مجلد YY ص ١580 (181ام)؛ ما جاء عن Powell ومعاونيه في مجلة ale الأحياء الدقيقة البيئية التطبيقية
<Appl.
Environ microbiol x. مجلد 0¢: ص 58 (44١م) ؛ ما جاء عن Somkuti ومعاونيه في محاضر جلسات المؤتمر البيئي الرابع حول التقنية الحيوية «proc. 4% evr.
Cong. biotechnology
[Streptococcus ص 417 العقدية 1) alas
وتعرف كذلك أنظمة التعبير عن الخميرة لأولئك الملمين في التقنية. ويعتبر محمضض
خميرة yeast promoter أي تسلسل DNA قادر على ربط polymerase RNA الخميرة وبدء GL) في الاتجاه المجاري عند النهاية “" لتسلسل تشفير (على سبيل المثالء جين تركيبي) إلى mRNA وسيكون لمحضض منطقة بدء انتساخ تقع Bale بشكل مجاور للنهاية 10 من
You
0 تسلسل التشفير. وتشتمل منطقة بدء الانتساخ هذه عادة على موقع ارتباط polymerase RNA gaia") 3( تاتا ("TATA box وموقع بدء انتساخ. ويمكن أن يحتوي محضض خميرة كذلك على حقل ثان يعرف بتسلسل منشط سابق upstream activator sequence(UAS) » الذي؛ إن وجدء يكون عادة بعيداً عن الجين التركيبي. ويسمح UAS بالتعبير المنظم (المستحث). ويحدث ٠ التعبير التركيب Constitutive expression في غياب JUAS ويمكن أن يكون التعبير المنظم إما إيجابياً أو lula وبذلك إما يعزز أو يقلل الانتساخ transcription وتعتبر الخميرة كائن حي fementing organism eda بمسار أيضي فعال؛ لذلك تزود التسلسلات التي تحمل شيفرة الإنزيمات في المسار الأيضي تسلسلات محضض مفيدة بشكل خاص. وتشتمل الأمثلة على hail) alcohol dehydrogenase(ADH) نشرة مكتب براءات 0 الاختراع الأوروبي رقم 44 «glucose-6-phospate isomerase ¢glucokinase cenolase )744 ٠ <hexokinase:« (GAPDH 5IGAP) glyceraldehydes-3-phosphate-dehydrogenase pyruvate kinase (PyK) s 3-phosphoglycerate mutase «phosphofructokinase (انظر نشرة مكتب براءات الاختراع الأوروبي رقم 707 779). ويزود كذلك جين الخميرة (PHOS الذي يحمل شيفرة acid phosphatase تسلسلات محضض مفيدة [انظر ما ela عن > ميانوهارا . Myanohara ومعاونيه في محاضر جلسات أكاديمية العلوم الوطنية الأمريكية؛ مجلد ٠ص ١ (147ام)]. وبالإضافة إلى ذلك؛ تعمل المحضضات التصنيعية synthetic promoter التي لا تتواجد طبيعياً كمحضصضات خميرة. فعلى سبيل Jd) يمكن أن تربط تسلسلات UAS من أحد محضضات الخميرة مع منطقة تفعيل الانتساخ لمحضض خميرة Use « AT محضض هجين © - تصنيعي. وتشتمل أمثلة المحضضات الهجينة تلك على تسلسل التنظيم ADH المرتبط مع منطقة تفعيل الانتساخ GAP (انظر براءتا الاختراع الأمريكيتان رقم 0157 AY ؛ ورقم AA 4 4). وتشتمل أمثلة أخرى من محضضات هجينة على محضضات تتكون من تسلسلات تنظيم إما من جينات 80112» GALLO «GAL4 أو (PHOS مقترنة مع منطقة تفعيل الانتساخ لجين الإنزيم الجليكولي GAP Ji glycolytic enzyme أو PyK (انظر نشرة مكتب vo براءات الاختراع الأوروبي رقم 5907 (VTE وعلاوة على ذلك؛ يمكن أن يشتمل محضض خميرة على محضضات تتواجد طبيعياً من مصدر غير الخميرة لها القدرة على ربط You
RNA polymerase الخميرة وبدء الانتساخ. وتشتمل أمثلة تلك المحضضات ode من جملة محضضات أخرى [انظر ما جاء عن cohen ومعاونيه في محاضر جلسات أكاديمية العلوم الوطنية الأمريكية؛ مجلد VY ص ٠١78 (580١م)؛ ما sla عن henikoff ومعاونيه في مجلة الطبيعة؛ مجلد 748: ص f(a) AAV) AYO ما جاء عن hollenberg ومعاونيه في مجلة ٠ مواضيع حالية في علم المناعة الحيوي الدقيق «Curr. Tonics Microbiol. Immunol. مجلد 47: ص (YAM) ١١9 ؛ ما جاء عن hollenberg ومعاونيه في بحث "التعبير عن جينات مقاومة للمضاد الحيوي بكتيرية في الخميرة من نوع الفطرية السكرية الجعوية The Expression of Bacterial Antibiotic Resistance Genes(Saccharomyces cerevisiae) " في كتاب : بلازميدات ذات أهممية طبية؛بيئيةوتجارية pal Pa) plasmids of medical, environmental and commercial importance Ve (x N Timmis and A. puhler ؛ ما جاء عن mercerau-puigalon ومعاونيه في مجلة الجين cgene مجلد YY ص VAY ) م ١م ؛ ما جاء عن panthier ومعاونيه في مجلة علم الوراثة الحديث (pYAA) ٠٠١5 Ua iY مجلد courrent geretics داخل الخلية في خميرة. ويمكن أن يربط تسلسل DNA ويمكن أن يعبر عن جزيء وفي هذه الحالة سيكون الحمض الأميني الأول عند DNA محضض مباشرة مع جزيء oe المشفر بواسطة ¢methionine عبارة عن مثيونين Laila الطرف النتروجيني للبروتين المأشوب عند الطرف methionine وحسب الرغبة؛ يمكن أن ينشق المثيونين (ATG ell شيفرة النتروجيني من البروتين عن طريق حضانة في تجارب خارج الجسم الحي أنبوب الاختبار مع .cyanogens bromide بديلاً عن أنظمة تعبير الخميرة؛ Fusion proteins وتزود البروتينات الاندماجية 1 يحمل DNA بالإضافة إلى أنظمة تعبير ثديية؛ فيروس عصوي وبكتيرية. ويدمج عادة تسلسل أو بروتين ثابت cendogenous شيفرة جزء الطرف النتروجيني لبروتين خميرة داخلي المنشأ آخر ؛ مع النهاية 0 لتسلسلات تشفير مغايرة. وعند التعبير» ستزود هذه التركيبة stable protein يمكن أن يربط جين (Jil فعلى سبيل (SOD) اندماجاً لتسلسلين من الاحماض الامينية الخميري أو البشري عند النهاية 10 لجين غريب ويعبر عنه في خميرة. superoxide dismutase Yo عند نقطة اتصال سلسلتي الاحماض الامينية DNAJ ويمكن أن يحمل أو لا يحمل تسلسل
You
£y انظر على سبيل المثال ما جاء في نشرة مكتب cleavable site شيفرة موقع قابل للانشقاق ويتمثل مثال آخر في بروتين يوبكوتين اندماجي VAT +57 براءات الاختراع الأوروبي رقم ويشكل البروتين الاندماجي هذا مع منطقة اليوبكوتين .ubiguitin fusion protein التي يفضل أن تستبقي موقعاً لإنزيم معالجة (على سبيل المثال ؛» بروتياز ubiquitin region لانشقاق اليوبكوتين عن (ubiquitin-specific processing protease معالجة متخصص باليوبكوتين ٠ البروتين الغريب. ولذلك يمكن من خلال هذه الطريقة؛ أن يعزل البروتين الغريب المحلي لمعاهدة التعاون في مجال البراءات رقم Tg (انظر على سبيل المثال ما جاء في نشرة البراءة (A A YET من ذلك؛ يمكن كذلك أن تفرز بروتينات غريبة من الخلية في أوساط النمو عن Yau خميرية تحمل شيفرة بروتين اندماجي يتكون من قطعة تسلسل DNA طريق إيجاد جزيئات © قيادي يكفل إفراز البروتين الغريب في الخميرة. ويفضل؛ أن يكون هنالك مواقع معالجة مشفرة بين القطعة القيادية والجين الغريب التي يمكن أن تنشق إما داخل الجسم الحي أو في خارج الجسم الحي أنبوب الاختبار. وتحمل قطعة التسلسل القيادي عادة شيفرة ببتيد إشارة يتكون من أحماض أمينية غير محبة للماء توجه إفراز البروتين من الخلية. signal peptide المناسبة التي تحمل شيفرة signal sequences ويُمكن أن تستخلص تسلسلات الإشارة vo (انظر yeast invertase gene Jia من جينات أو بروتينات خميرة مفرزة؛ DNA 07؛ نشرة مكتب براءات الاختراع AVY نشرة مكتب براءات الاختراع الأوروبي رقم (انظر براءة الاختراع الأمريكية A-factor gene وجين العامل-ا )17 97 «AT الياباني رقم
Jie وبدلاً من ذلك؛ تتواجد تسلسلات قيادية من مصدر غير الخميرة» .)4 ©AA AE رقم يكفل كذلك الإفراز في الخميرة (انظر نشرة مكتب interferon تسلسل قيادي من الانترفيرون © rr ٠67 براءات الاختراع الأوروبي رقم وتكون فئة مفضلة من التسلسلات القيادية للإفراز هي تلك التي تستخدم قطعة من جين "pre من الخميرة؛ الذي يحتوي على كلي تسلسل إشارة "سابق alpha-factor-gene العامل- ألفا pro ومنطقة "أمامية التي يمكن أن تستخدم على alpha-factor fragments وتشتمل أنواع قطعات العامل- ألفا vo شق حمض أميني) بالإضافة AY تسلسل قيادي لعامل ألفا سابق-أمامي كامل الطول (حوالي
Yo er شق حمض 5٠ إلى حوالي Yo إلى تسلسلات قيادية مقطوعة للعامل- ألفا (عادة من حوالي نشرة tf 70 04 ؛ ورقم OFT GAY أميني) (انظر براءتا الاختراع الأمريكيتان رقم وتشتمل التسلسلات القيادية الإضافية التي (VY 4 774 مكتب براءات الاختراع الأوروبي رقم تستخدم قطعة تسلسل قيادي لعامل-ألفا الذي يكفل الإفراز على تسلسلات قيادية هجينة للعامل- ألفا مشكلة مع تسلسل سابق لأول خميرة؛ لكن منطقة أمامية من عامل ألفا لثاني خميرة (انظر ٠ لمعاهدة التعاون في مجال البراءات رقم Tag على سبيل المثال ما جاء في نشرة البراءة الدولية (A) 7 المعرفة عادة بواسطة transcription termination sequences تسلسلات إنهاء الانتساخ الخميرة عبارة عن مناطق تنظيم تقع عند النهاية #” بالنسبة لشيفرة إيقاف الترجمة؛ ولذلك مع يمكن أن يترجم إلى mRNA المحضض تحيط بتسلسل التشفير. وتوجه هذه التسلسلات انتساخ وتشتمل أمثلة تسلسل منهي الانتساخ \RNA بواسطة polypeptide encoded متعدد الببتيد المشفر وتسلسلات إنهاء معينة للخميرة أخرى, كتلك التي تحمل شيفرة إنزيمات جليكولية .glycolytic enzymes الموصوفة أعلاه؛ التي تشتمل على محضض GUS Bale وتوضع coding تسلسل قيادي (حسب الرغبة) وتسلسل التشفير المعني comprising apromoter د٠ في تركيبات las transcription termination sequence وتسلسل إنهاء انتساخ sequence of interest عنصر Jie وتحفظ التركيبات التعبيرية غالباً في متضاعف؛ Lexpreision constructs تعبيرية (على سبيل المثال؛ بلازميدات) قادر على extrachromosomal element خارج الكروموسوم two خميرة أو بكتيريا. وقد يشتمل المتضاعف على نظامي تكرر Jie محافظة ثابتة في عائل؛ في خميرة للتعبير وفي عائل (JB مما يسمح له بأن يحفظ؛ء على سبيل creplication systemes أ وتشتمل أمثلة النواقل المترددة من amplification والتضخم cloning بدائي النواة للتتسيل ومعاونيه في مجلة الجين botstein عن ola [انظر ما YEp24 الخميرة-البكتيريا هذه على ومعاونيه في brake عن ela ؟ (979٠١م)]» 1/ا0م [انظر ما ١١7 ص tA مجلد gene ص AY Alaa 00.1181. acad.
Sci.
USA محاضر جلسات أكاديمية العلوم الوطنية الأمريكية ومعاونيه في مجلة علم stinchcomb عن ela [انظر ما YRp17 و ؛)م١ #4 ) 2111-7 Yo وبالإضافة إلى ذلك يمكن .])م١987( YOY ص iV OA مجلد . mol.
Boil. al الأحياء You
أن يكون المتضاعف إما بلازميد بعدد نسخ كبير أو قليل. وسيكون للبلازميد بعدد نسخ كبير بشكل عام عدد نسخ يتراوح من حوالي © إلى حوالي ٠٠١ وعادة من حوالي ٠١ إلى حوالي Ne ويفضل أن يكون لعائل يحتوي على بلازميد بعدد كبير من النسخ حوالي ٠١ على الأقل؛ والأفضل حوالي ٠١ على الأقل. ويمكن اختيار إما ناقل بعدد نسخ كبير أو قليل؛ ٠ اعتماداً على تأثير الناقل والبروتين الغريب على العائل. انظر على سبيل المثال ما جاء عن بريك Brake ومعاونيه في المرجع المذكور أعلاه. وبدلاً من ذلك؛ يمكن أن تدمج التركيبات التعبيرية في مجين الخميرة yeast genome باستخدام ناقل دمج integrating vector وتحتوي نواقل الدمج sale على تسلسل واحد على الأقل Silas لكروموسوم خميرة يسمح للناقل Ob يندمج؛ ويفضل أن تحتوي على تسلسلين ٠ _مماثلين يحيطان بالتركيبة التعبيرية expression construct ويبدو أن عمليات الدمج تنتج من عمليات تأشيب بين DNAJ المماثل في الناقل وكروموسوم الخميرة [انظر ما جاء عن orr-weaver ومعاونيهما؛ في مجلة طرق في علم الإنتزيمات ((Methods in Enzymol) مجلد ٠1ص 749-778 (1987م)]. ويمكن أن يوجه ناقل دمج إلى موقع معين في الخميرة عن طريق اختيار التسلسل المماثل المناسب للتضمين في الناقل. انظر ما جاء عن أور-ويفر Orr-Weaver - ٠ ومعاونيهما؛ في المرجع المذكور أعلاه. ويمكن أن تدمج تركيبة تعبيرية واحدة أو أكثر تؤثر في مستويات البروتين المأشوب المنتج بشكل محتمل [انظر ما جاء عن راين Rine ومعاونيه في محاضر جلسات أكاديمية العلوم الوطنية الأمريكية؛ مجلد tA ص 750 ٠ 6 q AY) ويمكن أن توجد التسلسلات الكروموسومية the chromosomal sequences المتضمنة في الناقل إما كقطعة مفردة في الناقل ٠ تؤدي إلى دمج الناقل الكلي؛ أو قطعتين مماثلتين للقطع © - المجاورة في الكروموسوم وتحيط بالتركيبة التعبيرية في JB مما قد يؤدي إلى الدمج الثابت للتركيبة التعبيرية فقط. وقد تحتوي تركيبات خارج الكروموسوم extrachromosomal وتركيبات ze التعبيرية intergrating expression عادة على واسمات markers يمكن اختيارها للسماح باختيار سلالات خميرة كانت قد حولت. وقد تشتمل الواسمات التي يمكن اختيارها على جينات مصنعة حيويا biosynthetic gene ٠ يمكن أن يعبر عنها في عائل الخميرة» مثل TRP1 1185102 111584 (ADE2 و 7 وجين مقاومة 8 الذي يمنح المقاومة في خلايا الخميرة لغلالة الميسين You
¢o على التوالي. وبالإضافة إلى ذلك؛ يمكن أن يزود واسم يمكن اختياره «G418 و tunicamycin مثل فلز. فعلى سبيل ctoxic مناسب كذلك الخميرة بقدرة على النمو بوجود مركبات سامة butt عن بت sla بنمو الخميرة بوجود أيونات النحاس [انظر ما CUPL يسمح وجود «Jal (pY4AY) Yo) مجلد )10 ص (Microbiol Rev.) ومعاونيه في مجلة علم الأحياء الدقيقة Yay . من ذلك؛ يمكن أن توضع بعض المكونات الموصوفة أعلاه Tas في نواقل تحويل transformation vectors وتتكون نواقل التحويل Bale من واسم يمكن اختياره إما يحفظ في متضاعف أو يطور إلى ناقل دمج؛ كما وصف أعلاه. وطورت نواقل تعبير وتحويل؛ إما متضاعفات خارج الكروموسوم extrachromosomal replicons أو نواقل دمج للتحويل في خمائر عديدة. فعلى سبيل (Candida albicans) التالية: iL «all المثال» طورت نواقل تعبيرية؛ من جملة نواقل أخرى؛ y. مجلد cmel-cell-biol ومعاونيه في مجلة علم الأحياء الخلوي الجزيئي kurtz [انظر ما جاء عن ومعاونيه في kunze عن ela [انظر ما Candida maltose )م١943( VEY ص :7
VEY مجلد 75: ص (J. Basic Microbiol.) مجلة علم الأحياء الدقيقة الأساسي ومعاونيه في مجلة علم gleeson عن ola [انظر ما Hansenula polymorpha .])م١٠545( . الأحياء الدقيقة الوراثي alas oj. gen. microbiol 177: ص 74994 Loop) AAT) جاء عن roggen kamp ومعاونيه في مجلة ale وراثة الجينات الجزيثي «(Mol. Gen Genet.) مجلد 7 ص 5١" (تفقلم)ل Kluyveromyces fragilis [انظر ما جاء عن das ومعاونيه في مجلة ale البكتيريا bacteriol .ن مجلد 110A ص 1110 (44١م)]) Kluyveromyces lactis [انظر ما جاء عن de louvencourt ومعاونيه في مجلة ale البكتيريا bacteriol .» مجلد :١94 © ص 1/7 van den berg ¢(a) YAY) ومعاونيه في مجلة ale الأحياء/ التقنية cbioftechnology مجلد tA ص pichia guillerimondii ¢[(a) 39+) YO [انظر ما جاء عن kunze ومعاونيه في مجلة علم الأحياء الدقيقة الأساسي basic microbiol .ل مجلد :Y0 ص Pichia «[(») AC) ١4١ pastoris [انظر ما جاء عن عع©» ومعاونيه في مجلة ple الأحياء الخلوي الجزيئي mol. Cell. alas Boil. ©: ص ¢(p) AC) "١76 براءتي الاختراع الأمريكيتين patents 115 رقم ٠448 Yo ل 4 ورقم دعم AY عل Saccharomyces cerevisiae [انظر ما جاء عن hinnen ومعاونيه في محاضر جلسات أكاديمية العلوم الوطنية الأمريكية proc. Natl. acad. Sci. مجلد You
8 : ص tp) AYA) ٠979 ما sla عن مز ومعاونيه في مجلة علم البكتيريا j. bacteriol مجلد OF )1 ص VY (147لم) Schizosaccharomyces pombe [انظر ما sla عن beachand 6 في مجلة الطبيعة nature مجلد + +¥: ص 7056 Yarrowia lipolytica ¢[(aY AY) [انظر ما جاء عن davidow ومعاونيه في مجلة علم الوراثة الحديث courrent genetics مجلد :٠١ ص (a) AAO) YA EV) o ما جاء عن Gaillardin ومعاونيه في مجلة علم الوراثة الحديث current (pY2A2) £9 مجلد + )1 ص cgenetics عوائل خميرة جيداً في A exogenous خارجي المنشاً DNA وتعرف طرق إدخال أو خلايا خميرة spheroplasts وتشتمل عادة إما على تحويل خلايا كروية لا جدارية il وتختلف عادة إجراءات التحويل بحسب نوع alkali cations سليمة معالجة بكاتيونات قلوية ومعاونيه في مجلة kurtz] الخميرة الذي ينبغي أن تحول. انظر على سبيل المثال ما جاء عن - kunze (pV AAT) VEY (a 1 .ن مجلد mol. Cell. Boil. علم الأحياء الخلوي الجزيئي ١١ ص YO .ل مجلد basic microbiology ومعاونيه في مجلة علم الأحياء الدقيقة الأساسي الأحياء الدقيقة الوراثي ple ومعاونيه في مجلة gleeson جاء عن WL] ¢[Candida ¢(p) 440) ومعاونيه في مجلة roggenkamp ¢(p) AAT) مجلد 177: ص 494 ؟ oj. gene microbiology ؛)م٠185( YoY ص iY oY .ام مجلد Gene genetics علم وراثة الجينات الجزيئني oo :198 .ن مجلد bacteriology ومعاونيه في مجلة علم البكتيريا das عن sla إما ¢[Hansenula
Alas ¢j. bacteriology البكتيريا ole ومعاونيه في مجلة de louvencourt ¢(a) AE) ١١9 ص ومعاونيه في مجلة علم الأحياء/التقنية van den berg ¢ (pYAAY) ١139 ص 4 cregg [ما جاء عن [Kluyveromyces م)؛ 34+ ) YYo ص tA مجلد cbio/technology
Y¥Y1 مجلد 0: ص 01. Cell Boil. ومعاونيه في مجلة علم الأحياء الخلوي الجزيئي © ومعاونيه في مجلة علم الأحياء الدقيقة الأساسي kunz ما جاء عن ؛)م١985( براءتي الاختراع الأمريكيتين ؛)م١9480( ١4١ ص :76 alas cbasic microbiology ومعاونيه hinnen [ما جاء عن ¢[Pichia رقم 54 لاك 4 ورقم 00© 795 4 ؛ US patents مجلد ¢proc. National academic sciences في محاضر جلسات أكاديمية العلوم الوطنية الأمريكية .ل bacteriology عن 116 ومعاونيه في مجلة علم البكتيريا sla ما ؛)م١5ا/8( ٠5795 ص Vo Yo في beach and nurse عن ela Ls] ¢Schizosaccharomyces ¢(a) AAT) ١7 ص 11 OY مجلد
You
: مجلة الطبيعة؛ مجلد iF es ص 7١5 (9487١م)؛]؛ [ما جاء عن دفيدو ومعاونيه في مجلة علم الوراثة الحديث ccurnent genetic مجلد :٠١ ص 4؟ (1988١م)؛ ما ela عن gaillardin ومعاونيه في مجلة علم الوراثة الحديث ccurrent genetics مجلد :٠١ ص 459 (pY4A0) [Yarrowia ٠ المثال )١( LT مزال السمية Detoxified LT استخلصت قطعة من الجين لب LT من بلازميد EWD299 [انظر ما جاء عن dallas ws., gill d.m. and falkow s. في مجلة ale البكتيريا oj. bacteriology مجلد AYA ص 8/٠ (997/9١م)] عن طريق الهضم باستخدام انزيمات التحديد restriction enzymes smal © و 81ه»5؛ وأعيد تنسيلها في الناقل (Bluescript KS) المناسب لإنتاج شرائط مفردة من DNA [انظر ما جاء عن sambrook j.
Fritsch and maniatis في كتاب "التنسيل ad .[Cold Spring Harbor «"molecular cloning وحولت خلايا BW313 بواسطة النسائل clones التي حصل عليها بهذه الكيفية وسمح لها بالنمو لمدة VE ساعة في وسط استنبات يتكون من مرق لوريا Luria Broth مع إضافة ١ ميكروجم/مل من اليوريدين uridine وصنعت ألا سلسلة من نوكليوتيدات تصنيعية قصيرة السلسلة synthetic oligonucleotides (مدرجة في الجدول »))١( تحتوي على الطفرة؛ أو القواعد المرغوبة بدلا من تلك الطبيعية وتسلسل من ٠١ قواعد قبل الطفرة ذاتها وبعدها بمقدار ٠١ قواعد؛ مطابقة للطبيعية؛ كيميائياً ومن ثم تمت فسفرتها cphosphorylated وعولج 1,6 © ميكرومول منها عند درجة حرارة بلغت 7م باستخدام © وحدات من kinase وبعد إنهاء التفاعل باستخدام ٠٠١ مل مول من محلول EDTA حولت النوكليوتيدات قصيرة السلسلة للشريط المفرد الذي يحتوي على جين LT عن طريق التسخين لمدة 0 دقائق عند درجة حرارة بلغت ٠7م والتبريد ببطء لمدة تبلغ حوالي ساعة واحدة في الثلج. وعند تلك المرحلة أضيف محلول من نوكليوتيدات حرة؛ إنزيم ربط DNA Ligase vo ولإنزيم DNA polymerase إلى © ميكرولتر من هذا المحلول البارد حتى بلغ الحجم النهائي ٠ ميكرولتر. ١ ١
وضع المحلول الذي حصل عليه بهذه الكيفية لمدة خمس دقائق في الثلج؛ لمدة خمس دقائق عند درجة الحرارة المحيطة ولمدة ساعتين عند درجة حرارة بلغت TY م. وحولت الخلايا المناسبة من Escherichia coli باستخدام مزيج التفاعل؛ Lay للتقنيات المعتادة [انظر ما sla عن sambrook j.
Fritsch and maniatis في كتاب "التنسيل الجزيئشي Spring Harbor «'molecular cloning ٠٠ ل6010]» وفحص توليد الطفر الموجه نحو الموقع site-directed عن طريق تتبع تسلسل النسائل التي حصل عليها. واستخدمت قطعة 50412800181 التي تحتوي على طفرات متعددة varions mutation بدلا من Smal-EcoRI الأصلية المغروزة في البلازميد 8170299. ومن ثم تركت الشرائط التي تحمل شيفرة السم المطفر mutated toxin لتنمو في ٠١ © .مل من مرق لوريا broth هس لمدة VY ساعة عند درجة حرارة بلغت ١ م. وطردت المستزرعات cultures وأعيد تعليق الراسب الذي يحتوي على الخلايا في 0٠ مل من محلول يحتوي على سكروز بنسبة 7706 ومحلول منظم Tris بتركيز 5٠ ملي جزيئي عند درجة حموضة بلغت A وعولج الخليط لمدة ساعة واحدة عند درجة الحرارة المحيطة باستخدام ١ مجم/مل من محلول من .polymixin B yo وقد تم التحقق من وجود Age السم toxiod في السائل الطافي (الرائق) من سيتوبلازم الخلية بواسطة تنشيف ويسترن western blot وقيمت سميته عن طريق تحفيز أو فقدان تحفيز التغيرات الشكلية في خلايا 771 (انظر الجدول .))١( وتعتبر خلايا YT خلايا طلائية ورمية كظرية adrenal tumor epithelial تصبح أكثر تكورآً بشكل ملحوظ عندما تعالج بمحلول يحتوي على CT أو 17 [انظر ما جاء عن Y. ع yasamure y., buonassisi v. and sato في بحث "التحليل النسيلي للوظيفة المميزة في مستنبتات الخلايا الحيوانية clonal analysis of differentiated function in animal cell cultures في مجلة بحوث السرطان (Cancer Res.) مجلد (YN ص (p31) 0F0-0YA وتقرن سمية CT toxicity و LT مع هذا التحول الشكلي. ويخفف السائل الطافي (الرائق) من سيتوبلازم الخلية بمحلول من وسط F10 مصل الحصان horse serum بنسبة 71,5 جلوتامين glutamine vo وجنتاميسين gentamycin إلى تراكيز أقل وأقل وتحضن خلايا Youre) YI خلية/مل)
بالمحاليل الناتجة لمدة $A ساعة عند درجة حرارة تبلغ ١م في جو من ثاني أكسيد الكربون (CO) ويقيم شكل الخلايا. وفي جميع الحالات؛ بين توليد المناعة immunogenicity عن طريق التجميع الصحيح Al gal السم الكامل complete toxoid وعن طريق تفاعل تداخل لمولد السم toxoid مع جسم ٠ مضاد لب 117 ذي النمط الشائع wild type وتبين النتائج في الجدول .)١( وفي هذا الجدول (وفي الجدول (7) تمثل رموز السمية toxicity symbols الاتي : +++ سام بعد التخفيف بنسبة Yow vt) (سمية بالنمط الشائع). ++ سام حتى التخفيف بنسبة Your) على الأكثر. ,+ سام حتى التخفيف بنسبة 1:١ على الأكثر. - غير سام؛ حتى لو لم يخفف. You
)١( الجدول السمية Oligonucleotide Sequence المثال الطفرة
Toxicity Mutation - ) (تسلسل رقم 291-ACCGGCTTTGATAGATATGAT-311 Val-533-Asp LT) - )٠١ (تسلسل رقم 291-ACCGGCTTTGAAAGATATGAT-311 Val-53-Glu LT ٠ - (VY (تسلسل رقم 291-ACCGGCTTTTACAGATATGAT-311 Val-53-Tyr LT va - (VY (تسلسل رقم 322-GTTTCCACTAAGCTTAGTTTG-342 Ser-63-Lys LT ؛ - (VY (تسلسل رقم 424-ATGTTTAATAAGAATGATGTA-444 |. Val-97-Lys LT o. - (V¢ (تسلسل رقم 424-ATGTTTAATTACAATGATGTA-444 Val-97-Tyr LT 1 - (Yo (تسلسل رقم 454-TACAGCCCTGAGCCATATGAA-474 His-107-Glu 11 A - (V1 (تسلسل رقم 445-ATTAGCGTAAAGAGCCCT-462 Tyr-104-Lys 11 9 - (VY (تسلسل رقم 445-ATTAGCGTAGATAGCCCT-462 Tyr-104-Asp 11 ٠١ - (YA (تسلسل رقم 447-TAGCGTAAGTAGCCCTCA-464 Tyr-104-Ser LT ١١١ - (V8 (تسلسل رقم 453-ATACAGCAGCCACCCATA-470 Pro-106-Ser LT .) عبتي-)١( الجدول :(Ser-114-Glu) Serine طفرتان لسيرين AIS وبينت :Ser-114-Lys و ))٠١( (تسلسل رقم 477-GGAGGTGAAGCGTTAGG-494 477-GGAGGTTAAAGCGTTAGG-494 (تسلسل رقم (YY) لتظهر سمية مخفضة جوهرياً. You oy أمثلة مقارنة النمط الشائع جيه 3 LT A - ( YY (تسلسل رقم 769-ATATATCTCAACGAATATCAA-789 Arg-210-Asp LT B
NA ( YY (تسلسل رقم 113-ATATTAATTTCTATGATC-130 Leu-41-Phe LT C
NA ( ٠ (تسلسل رقم 121-01111011 11 0066-86 His-44-Phe LT D
NA ( Yo (تسلسل رقم 125-ATGATCACTATAGAGGAA-142 Ala-45-Tyr LT E ++ ( ٠١ (تسلسل رقم 152-GCTTTGTCGCGTATGATG-169 Arg-54-Ala LT F ++ ( yy (تسلسل رقم 151-GGCTTTGTCAAGTATGATGAT-171 Arg-54-Lys LT © +++ ( YA (تسلسل رقم 167-ATGACGGAATGGTTTCCA-184 Tyr-59-Met LT H
NA ( Ya (تسلسل رقم 169-GACGGATATGGATCCACTTCT-189 Val-60-Gly LT 1 ++ 0 ٠ (تسلسل رقم 193-AGTTTGAGAAAGGCTCACTTA-213 Ser-68-Lys LT J
NA ( 7١ (تسلسل رقم 193-AGTTTGAGACCAGCTCACTTA-213 Ser-68-Pro LT K
NA (v Y (تسلسل رقم 199-AGAAGTGCTCCTTTAGCAGGA-219 His-70-Pro LT K ++ ( TY (تسلسل رقم 205-GCTCACTTAAGGGGACAGTCT-225 Ala-72-Arg LT M ++ ( VE (تسلسل رقم 205-GCTCACTTACATGGACAGTCT-225 Ala-72-His LT N +++ ( Yo (تسلسل رقم 565-GATTCATCAATTACAATCACA-585 Arg-192-Asn LT 0 . (f لم يشكل أبد AB; holotoxin (تعني هلا " لم يتم تجميعه "؛ أي أن السم الكامل
You oY المثال اق
Detoxified CT مزال السمية CT مماثلاً لذلك الموصوف أعلاه. CT يكون الإجراء المتبوع في حالة جين للسم polymerase chain reaction بواسطة تقنية CT ضخمت قطعة تحتوي على الجين لب (انظر CT ومكافئاً للجين Sy من البلازميد 001322. ويعتبر بلازميد 1017م مصدرآ (PCR) ٠ ومعاونيه في محاضر جلسات أكاديمية العلوم الوطنية الأمريكية؛ مجلد pearson ما جاء عن ص 1/ا75-: 714 (187لم)). 4 التاليتان: synthetic primers واستخدم البادئتان التصنيعيتان ((¥1) (تسلسل رقم GGCAGATICTAGACCTCCTGATGAAATAAA )١
TGAAGTTTGGCGAAGCTTCTTAATTTGCCATACTAATTGCGGCAATCGCAT )١ ٠ ))©( (تسلسل رقم على التوالي (مبين تحتهما خط). artificial 1110011 والموقع Xbal يحتويان على الموقع
Las) ٠١١74 التي يبلغ طولها «Xbal-HindIIT وتحتوي القطعة المضخمة الناتجة؛ قاعدياآً؛» على شفرات الوحدتين الفرعيتين؛ أ و ب؛ لكن ليس على التسلسل الذي يحمل شيفرة وعولجت وفقآ luescript KS الببتيد القيادي للوحدة الفرعية أ. وأعيد تنسيل هذه القطعة في ناقل ١ لإجراء توليد الطفر الموجه نحو الموقع. LT A للإبجراء الموصوف أعلاه
Yoo oy (Y) الجدول Toxicity اب ACGOGATTIGACAGGOACGAT | crvaisias| | - ات css] | ممستسيع | - ات اسه | atormaacaromtoatora وتات | cocamacaoraoconocacs أمثلة مقارنة ع conrmomronroacantant| cramsess| | ++
You ot
وقد ثبت أن الطفرات التالية كذلك تبطل السمية: His—107-Asn (TACAGTCCTAACCCAGATGAA) (تسلسل رقم (YA) «Glu-110-Ser (TCATCCAGATTCGCAAGAAGT) (تسلسل رقم: (V4) Glu-112-Ala (CAGATGAACAAGCTGTTTCTG) (تسلسل رقم: (40)) و
.))49( (تسلسل رقم: Ser-114-Glu (CAAGAAGTTGAAGCTTTAGGT) ٠
وسيدرك أن الاختراع وصف أعلاه على سبيل المثال فقط وأنه يمكن إجراء تعديلات
على الوصف المفصّل ضمن نطاق ومبدأ الاختراع. Yo
00 . . - - ٠ 4 - sequence listing قائمة بيان التسلسلات معلومات عامة: ١ ) £) عدد التسلسلات: (V) :)١( معلومات عن تسلسل التمييز رقم (Y) خصائص التسلسل: ١ ) °
Amino Acid النوع: حمض امينى ( <) (ج) شكل الشريط: مفرد خطي Topology الهيئة الشكلية (2) peptide Ain نوع الجزيء: ( Y ) 0 : ( \ ) وصف التسلسل: تسلسل تمييز رقم ( ١١ )
Asn Asp Phe Phe Arg Ala Asp Ser Arg Thr Pro Asp Glu Ile Arg Gln 1 5 10 15 ١
Ala Gly Gly Leu Leu Pro Arg Gly Gln Gln Glu Ala Tyr Glu Arg Gly °
Thr Pro Ile Asn Ile Asn Leu Tyr Glu His Ala Arg Gly Thr Val Thr
Y.
Gly Asn Thr Arg His Asn Asp Gly Tyr Val Ser Thr Thr Val Thr Leu 60
Arg Gln Ala His Leu Ile Gly Gln Asn Ile Leu Gly Ser His Asn Glu 65 70 75 80 Yo
Tyr Tyr Ile Tyr Val Val Ala Pro Ala Pro Asn Leu Phe Asp Val Asn 85 90 95
Gly Val Leu Gly Arg Tyr Ser Pro Tyr Pro Ser Glu Asn Glu 22 مل 100 105 110 v
Ala Leu Gly Gly Ile Pro Leu Ser Gln Ile Ile Gly Trp Tyr Arg Val 115 120 125
Ser Phe Gly Ala Leu Glu Gly Gly Met Gln Arg Asn Arg Asp Tyr Arg Yo 130 . 135 140
Gly Asp Leu Phe Ser Gly Leu Thr Val Ala Pro Asn Ala Asp Gly Tyr 145 150 155 160
Gln Leu Ala Gly Phe Pro Ser Asn Phe Pro Ala Trp Arg Glu Met Pro t 165 . 170 175
Trp Ser Thr Phe Ala Pro Glu Gln Cys Val Pro Asn Asn Lys Glu Phe 180 185 190 . co
Lys Ser Gly Val Cys Ile Ser Ala Thr Asn Val Leu Gly Lys Tyr Asp 185 200 205
Leu Met Asn Phe Lys Lys Leu Leu Lys Arg Arg Leu Ala Leu Thr Phe 210 215 220 o.
Phe Met Ser Asp Asp Asp Phe Thr Gly Val His Gly Glu Lys Asp Glu 225 230 235 240
Leu
Yo on : ( معلومات عن تسلسل التمييز رقم ) أ (Y ) خصائصض التسلسل: ١ ) أمينياً Laas YYA الطول: (1)
Amino Acid النوع: حمض اميني ( <) شكل الشريط: مفرد (—) o خطي Topology د ) الهيئة الشكلية ( نوع الجزيء: ببتيد Y) :)7( وصف التسلسل: تسلسل تمييز رقم (VY)
Asn Asp Asp Lys Leu Tyr Arg Ala Asp Ser Arg Pro Pro Asp Glu Ile ١ 1 5 10 15
Lys Gln Phe Arg Ser Leu Met Pro Arg Gly Ser Glu Tyr Phe Asp Arg yo
Gly Thr Gln Met Asn Ile Asn Leu Tyr Asp His Ala Arg Gly Thr Gln
Thr Gly Phe Val Arg His Asp Asp Gly Tyr Val Ser Thr Ser Ile Ser 60
Ye.
Leu Arg Ser Ala His Leu Val Gly Gln Tyr Ile Leu Ser Gly His Ser 65 70 75 80
Leu Thr Ile Tyr Ile Val Ile Ala Asn Met Phe Asn Val Asn Asp Val 85 90 95 Yo
Ile Ser Ala Tyr Ser Pro His Pro Asp Glu Gln Glu Val Ser Ala Leu 100 105 110
Gly Gly Ile Pro Tyr Ser Gln Ile Tyr Gly Trp Tyr Arg Val His Phe 115 120 125 v
Gly Val Leu Asp Glu Gln Leu His Arg Asn Arg Gly Tyr Arg Asp Arg 130 135 140
Tyr Tyr Ser Asn Leu Asp Ile Ala Pro Ala Ala Asp Gly Tyr Gly Leu Yo 145 150 155 160
Ala Gly Phe Pro Pro Glu His Arg Ala Trp Arg Glu Glu Pro Trp Ile 165 170 175
His His Ala Pro Pro Gly Cys Gly Asn Ala Pro Arg Ser Ser Met Ser t 180 185 1960
Asn Thr Cys Asp Glu Lys Thr Gln Ser Leu Gly Val Lys Phe Leu Asp 195 200 205 . م Glu Tyr Gln Ser Lys Val Lys Val Lys Arg Gln Ile Phe Ser Gly Tyr 210 215 220
Gln Ser Asp Ile Asp Thr His Asn Arg Ile Lys Asp Glu Leu 225 230 235 o.
Yo oy ٠ خصائص التسلسل: ) ١( الطول : 146 حمضاً أمينياً ( } )
Amino Acid (ب ) النوع: حمض أميني (ج) شكل الشريط: مفرد خطي Topology د ) الهيئة الشكلية ( 1 نوع الجزيء: ببتيد ) 7( :)3( وصف التسلسل: تسلسل تمييز رقم (VY)
Asn Gly Asp Arg Leu Tyr Arg Ala Asp Ser Arg Pro Pro Asp Glu Ile 1 5 10 15 ١
Lys Arg Ser Gly Gly Leu Met Pro Arg Gly His Asn Glu Tyr Phe asp 30 .
Arg Gly Thr Gln Met Asn Ile Asn Leu Tyr Asp His Ala Arg Gly Thr
Vo
Gln Thr Gly Phe Val Arg Tyr Asp Asp Gly Tyr Val Ser Thr Ser Leu 60
Ser Leu Arg Ser Ala His Leu Ala Gly Gln Ser Ile Leu Ser Gly Tyr 65 70 75 80 Yo
Ser Thr Tyr Tyr Ile Tyr Val Ile Ala Thr Ala Pro Asn Met Phe Asn 85 90 95
Val Asn Asp Val Leu Gly Val Tyr Ser Pro His Pro Tyr Glu Gln Glu 100 105 110 Yo
Val Ser Ala Leu Gly Gly Ile Pro Tyr Ser Gln Ile Tyr Gly Trp Tyr 115 120 125
Arg Val Asn Phe Gly Val Ile Asp Glu Arg Leu His Arg Asn Arg Glu 130 ا 135 140 7
Tyr Arg Asp Arg Tyr Tyr Arg Asn Leu Asn Ile Ala Pro Ala Glu Asp 145 150 155 160
Gly Tyr Arg Leu Ala Gly Phe Pro Pro Asp His Gln Ala Trp Arg Glu 165 170 175 Yo
Glu Pro Trp Ile His His Ala Pro Gln Gly Cys Gly Asp Ser Ser Arg 180 185 130
Thr Ile Thr Gly Asp Thr Cys Asn Glu Glu Thr Gln Asn Leu Ser Thr : 19S 200 205 1
Ile Tyr Leu Arg Glu Tyr Gln Ser Lys Val Lys Arg Gln Ile Phe Ser 210 215 220
Asp Tyr Gln Ser Glu Val Asp Ile Tyr Asn Arg Ile Arg Asp Glu Leu 225 230 235 240 to : ( $ ) معلومات عن تسلسل التمييز رقم ( Y ) خصائص التسلسل: ١ ) أ ( الطول : 60 حمضاً أمينياً )
Amino Acid النوع: حمض امينى ( <) ..
You oA شكل الشريط: مفرد (—) خطى (Topology د ( الهيئة الشكلية ) نوع الجزيء: ببتيد ) 7( :)4( وصف التسلسل: تسلسل تمييز رقم (VY) 0
Asn Asp Asp Lys Leu Tyr Arg Ala Asp Ser Arg Pro Pro Asp Glu Ile 1 5 10 15
Lys Gln Ser Gly Gly Leu Met Pro Arg Gly Gln Ser Glu Tyr Phe Asp ١
Arg Gly Thr Gln Met Asn Ile Asn Leu Tyr Asp His Ala Arg Gly Thr
Gln Thr Gly Phe Val Arg His Asp Asp Gly Tyr Val ser Thr Ser Ile 60 vo
Ser Leu Arg Ser Ala His Leu Val Gly Gln Thr Ile Leu Ser Gly His 65 70 75 80
Ser Thr Tyr Tyr Ile Tyr Val Ile Ala Thr Ala Pro Asn Met Phe Asn 85 90 95 ve
Val Asn Asp Val Leu Gly Ala Tyr Ser Pro His Pro Asp Glu Gln Glu 100 105 110
Val Ser Ala Leu Gly Gly Ile Pro Tyr Ser Gln Ile Tyr Gly Trp Tyr Yo 115 120 125
Arg Val His Phe Gly Val Leu Asp Glu Gln Leu His Arg Asn Arg Gly 130 135 140
Tyr Arg Asp Arg Tyr Tyr Ser Asn Leu. Asp Ile Ala Pro Ala Ala Asp ve 145 150 155 160
Gly Tyr Gly Leu Ala Gly Phe Pro Pro Glu His Arg Ala Trp Arg Glu 165 170 175
Yo
Glu Pro Trp Ile His His Ala Pro Pro Gly Cys Gly Asn Ala Pro Arg 180 185 190
Ser Ser Met Ser Asn Thr Cys Asp Glu Lys Thr Gln Ser Leu Gly 1 195 200 205 0
Lys Phe Leu Asp Glu Tyr Gln Ser Lys Val Lys Arg Gln Ile Phe Ser 210 215 220
Gly Tyr Gln Ser Asp Ile Asp Thr His Asn Arg Ile Lys Asp Glu Leu 225 230 235 240 ب : (° ) معلومات عن تسلسل التمييز رقم Y ) . ءِ م . ٠ خصائصض التسلسل ( ١ ) base pairs Lac ld ألا زوجاً ٠ : الطول ( J ) nucleic acid (ب ) النوع: حمض نووي 8 شكل الشريط: مفرد (—)
You oq oo, 1 “se خطى :Topology د ( الهيئة الشكلية ) (genomis (مجيني DNA نوع الجزيء: 7 الميزة: (4)
CDS الاسم/المفتاح: (1) ٠٠١١١١ (ب ) الموقع: :)5*( وصف التسلسل: تسلسل تمييز رقم ١
AAT GGC GAC AGA TTA TAC CGT GCT GAC TCT AGA CCC CCA GAT GAA ATA 48
Asn Gly Asp Arg Leu Tyr Arg Ala Asp Ser Arg Pro Pro Asp Glu Ile 1 5 10 15 أ . AAA CGT TTC CGG AGT CTT ATG CCC AGA GGT AAT GAG TAC TTC GAT AGA 96
Lys Arg Phe Arg Ser Leu Met Pro Arg Gly Asn Glu Tyr Phe Asp Arg
GGA ACT CAA ATG AAT ATT AAT CTT TAT GAT CAC GCG AGA GGA ACA CAA 144
Gly Thr Gln Met Asn Ile Asn Leu Tyr Asp His Ala Arg Gly Thr Gln Ve
ACC GGC TTT GTC AGA TAT GAT GAC GGA TAT GTT TCC ACT TCT CTT AGT 192
Thr Gly Phe Val Arg Tyr Asp Asp Gly Tyr Val Ser Thr Ser Leu Ser 60
Y.
TTG AGA AGT GCT CAC TTA GCA GGA CAG TAT ATA TTA TCA GGA TAT TCA 240
Leu Arg Ser Ala His Leu Ala Gly Gln Tyr Ile Leu Ser Gly Tyr Ser 65 70 75 80
CTT ACT ATA TAT ATC GTT ATA GCA AAT ATG TTT AAT GTT AAT GAT GTA 288 Yo
Leu Thr Ile Tyr Ile Val Ile Ala Aen Met Phe Asn Val Asn Asp Val 85 90 95
ATT AGC GTA TAC AGC CCT CAC CCA TAT GAA CAG GAG GTT TCT GCG TTA 336
Ile Ser Val Tyr Ser Pro His Pro Tyr Glu Gln Glu Val Ser Ala Leu 100 105 110 Ye.
GGT GGA ATA CCA TAT TCT CAG ATA TAT GGA TGG TAT CGT GTT AAT TIT 384
Gly Gly Ile Pro Tyr Ser Gln Ile Tyr Gly Trp Tyr Arg Val Asn Phe 115 120 125
GGT GTG ATT GAT GAA CGA TTA CAT CGT AAC AGG GAA TAT AGA GAC CGG 432 Yo
Gly Val Ile Asp Glu Arg Leu His Arg Asn Arg Glu Tyr Arg Asp Arg 130 135 140
TAT TAC AGA AAT CTG AAT ATA GCT CCG GCA GAG GAT GGT TAC AGA TTA 480
Tyr Tyr Arg Asn Leu Asn Ile Ala Pro Ala Glu Asp Gly Tyr Arg Leu 145 150 155 160 ف GCA GGT TTC CCA CCG GAT CAC CAA GCT 166 AGA GAA GAA cee TGG ATT 528
Ala Gly Phe Pro Pro Asp His Gln Ala Trp Arg Glu Glu Pro Trp Ile 165 170 175
CAT CAT GCA CCA CAA GGT TGT GGA GAT TCA TCA AGA ACA ATC ACA GGT 576 to
His His Ala Pro Gln Gly Cys Gly Asp Ser Ser Arg Thr Ile Thr Gly 180 185 190
GAT ACT TGT AAT GAG GAG ACC CAG AAT CTG AGC ACA ATA TAT CTC AGG 624
Asp Thr Cys Asn Glu Glu Thr Gln Asn Leu Ser Thr Ile Tyr Leu Arg 195 200 205 er
GAA TAT CAA TCA AAA GTT AAG AGG CAG ATA TTT TCA GAC TAT CAG TCA 672
Glu Tyr Gln Ser Lys Val Lys Arg Gln Ile Phe Ser Asp Tyr Gln Ser 210 215 220
GAG GIT GAC ATA TAT AAC AGA ATT CGG GAT GAA TTA TGA 711 ee
Glu Val Asp Ile Tyr Asn Arg Ile Arg Asp Glu Leu * 225 230 235
Yoo
: ( T ) معلومات عن تسلسل التمييز رقم ( Y ) خصائص التسلسل: ) ١ حمضاً أمينياً ١ أ الطول: )
Amino Acid (ois) النوع: حمض ( <) خطي Topology د ) الهيئة الشكلية ( 0 protein نوع الجزيء: بروتين ( 7( (1) وصف التسلسل: تسلسل تمييز رقم (VY)
Asn Gly Asp Arg Leu Tyr Arg Ala Asp Ser Arg Pro Pro Asp Glu Ile 1 5 10 15
Lys Arg Phe Arg Ser Leu Met Pro Arg Gly Asn Glu Tyr Phe Asp Arg Vv
Gly Thr Gln Met Asn Ile Asn Leu Tyr Asp His Ala Arg Gly Thr Gln yo
Thr Gly Phe Val Arg Tyr Asp Asp Gly Tyr Val Ser Thr Ser Leu Ser 60
Leu Arg Ser Ala His Leu Ala Gly Gln Tyr Ile Leu Ser Gly Tyr Ser 65 70 75 80 ‘.
Leu Thr Ile Tyr Ile Val Ile Ala Asn Met Phe Asn Val Asn Asp Val 85 90 95
Ile Ser Val Tyr Ser Pro His Pro Tyr Glu Gln Glu Val Ser Ala Leu 100 105 110 Ye
Gly Gly Ile Pro Tyr Ser Gln Ile Tyr Gly Trp Tyr Arg Val Asn Phe 115 120 125
Gly Val Ile Asp Glu Arg Leu His Arg Asn Arg Glu Tyr Arg Asp Arg ve 130 135 140 ا Tyr Tyr Arg Asn Leu Asn Ile Ala Pro Ala Glu Asp Gly Tyr Arg Leu 145 150 155 160 vo
Ala Gly Phe Pro Pro Asp His Gln Ala Trp Arg Glu Glu Pro Trp Ile 165 170 175
His His Ala Pro Gln Gly Cys Gly Asp Ser Ser Arg Thr Ile Thr Gly 180 185 190 6.
Asp Thr Cys Asn Glu Glu Thr Gln Asn Leu Ser Thr Ile Tyr Leu Arg 195 200 205
Glu Tyr Gln Ser Lys Val Lys Arg Gln Ile Phe Ser Asp Tyr Gln Ser to 210 215 220
Glu Val Asp Ile Tyr Asn Arg Ile Arg Asp Glu Leu 225 230 235
QO
Yo
:)7( معلومات عن تسلسل التمييز رقم (Y) : خصائص التسلسل ( \ ) حمضاً أمينياً YYY : الطول ( | ) nucleic acid (ب ) النوع: حمض نووي (ج) شكل الشريط: مزدوج ° خطي Topology د ) الهيئة الشكلية ( (مجيني) DNA نوع الجزيء: ( Y ) الميزة: (4)
CDS الاسم//المفتاح: (1) ٠٠١777 (ب) الموقع: ١ : (v ) وصف التسلسل: تسلسل تمييز رقم ( ١١ )
AAT GAT GAT AAG TTA TAT CGG GCA GAT TCT AGA CCT CCT GAT GAA ATA 48
Asn Asp Asp Lys Leu Tyr Arg Ala Asp Ser Arg Pro Pro Asp Glu Ile 240 245 250 yo
AAG CAG TCA GGT GGT CTT ATG CCA AGA GGA CAG AGT GAG TAC TTT GAC 96
Lys Gln Ser Gly Gly Leu Met Pro Arg Gly Gln Ser Glu Tyr Phe Asp 255 260 265
CGA GGT ACT CAA ATG AAT ATC AAC CIT TAT GAT CAT GCA AGA GGA ACT 144 Y.
Arg Gly Thr Gln Met Asn Ile Asn Leu Tyr Asp His Ala Arg Gly Thr 270 275 280 285
CAG ACG GGA TTT GTT AGG CAC GAT GAT GGA TAT GTT TCC ACC TCA ATT 192
Gln Thr Gly Phe Val Arg His Asp Asp Gly Tyr Val Ser Thr Ser Ile 290 295 300 Yo
AGT TTG AGA AGT GCC CAC TTA GTG GGT CAA ACT ATA TTG TCT GGT CAT 240
Ser Leu Arg Ser Ala His Leu Val Gly Gln Thr Ile Leu Ser Gly His 305 310 315
TCT ACT TAT TAT ATA TAT GIT ATA GCC ACT GCA CCC AAC ATG TTT AAC 288 rv
Ser Thr Tyr Tyr Ile Tyr Val Ile Ala Thr Ala Pro Asn Met Phe Asn . 320 325 330
GTT AAT GAT GTA TTA GGG GCA TAC AGT CCT CAT CCA GAT GAA CAA GAA 336 val Asn Asp Val Leu Gly Ala Tyr Ser Pro His Pro Asp Glu Gln Glu Yo 335 340 345
GTT TCT GCT TTA GGT GGG ATT CCA TAC TCC CAA ATA TAT GGA TGG TAT 384 val Ser Ala Leu Gly Gly Ile Pro Tyr Ser Gln Ile Tyr Gly Trp Tyr 350 355 360 365 $
CGA GTT CAT TTT GGG GTG CTT GAT GAA CAA TTA CAT CGT AAT AGG GGC 432
Arg Val His Phe Gly Val Leu Asp Glu Gln Leu His Arg Asn Arg Gly 370 375 380
TAC AGA GAT AGA TAT TAC AGT AAC TTA GAT ATT GCT CCA GCA GCA GAT 480 0
Tyr Arg Asp Arg Tyr Tyr Ser Asn Leu Asp Ile Ala Pro Ala Ala Asp 385 390 395
GGT TAT GGA TTG GCA GGT TIC CCT CCG GAG CAT AGA GCT TGG AGG GAA 528
Gly Tyr Gly Leu Ala Gly Phe Pro Pro Glu His Arg Ala Trp Arg Glu 400 405 410
Yoo
أ GAG CCG TGG ATT CAT CAT GCA CCG CCG GGT TGT GGG AAT GCT CCA AGA 576 Glu Pro Trp Ile His His Ala Pro Pro Gly Cys Gly Asn Ala Pro Arg 425 420 415 TCA TCG ATC AGT AAT ACT TGC GAT GAA AAA ACC CAA AGT CTA GGT GTA 624 ° ser Ser Ile Ser Asn Thr Cys Asp Glu Lys Thr Gln Ser Leu Gly Val 445 440 435 430 AAA TTC CTT GAC GAA TAC CAA TCT AAA GTT AAA AGA CAA ATA TIT TCA 672 Lys Phe Leu Asp Glu Tyr Gln Ser Lys Val Lys Arg Gln Ile Phe Ser 460 455 450 GGC TAT CAA TCT GAT ATT GAT ACA CAT AAT AGA ATT AAG GAT GAA TTA 720 Gly Tyr Gln Ser Asp Ile Asp Thr His Asn Arg Ile Lys Asp Glu Leu 475 470 465 ‘eo TGA 723 ) أ ( معلومات عن تسلسل التمييز رقم (A) : )1( خصائص التسلسل: ) | ( الطول : 1460 حمضاً أمينياً (ب ) النوع: حمض أميني Amino Acid ( د ) الهيئة الشكلية ‘Topology خطي (7 ) نوع الجزيء: بروتين protein ١ ) ( وصف التسلسل: تسلسل تمييز رقم ) A ( : Yo Asn Asp Asp Lys Leu Tyr Arg Ala Asp Ser Arg Pro Pro Asp Glu Ile 10 5 1 Lys Gln Ser Gly Gly Leu Met Pro Arg Gly Gln Ser Glu Tyr Phe Asp ve 30 25 20 Arg Gly Thr Gln Met Asn Ile Asn Leu Tyr Asp His Ala Arg Gly Thr 40 35 Gln Thr Gly Phe Val Arg His Asp Asp Gly Tyr Val Ser Thr Ser Ile vo 60 55 50 Ser Leu Arg Ser Ala His Leu Val Gly Gln Thr Ile Leu Ser Gly His 80 75 70 65 Ser Thr Tyr Tyr Ile Tyr Val Ile Ala Thr Ala Pro Asn Met Phe Asn 5 95 90 85 Val Asn Asp Val Leu Gly Ala Tyr Ser Pro His Pro Asp Glu Gln Glu fo 110 105 100 Val Ser Ala Leu Gly Gly Ile Pro Tyr Ser Gln Ile Tyr Gly Trp Tyr 125 120 115 0 Yo
Arg Val His Phe Gly Val Leu Asp Glu Gln Leu His Arg Asn Arg Gly 130 135 140 :
Tyr Arg Asp Arg Tyr Tyr Ser Asn Leu Asp Ile Ala Pro Ala Ala Asp o 145 . 150 155 160
Gly Tyr Gly Leu Ala Gly Phe Pro Pro Glu His Arg Ala Trp Arg Glu 165 170 175
Glu Pro Trp Ile His His Ala Pro Pro Gly Cys Gly Asn Ala Pro Arg 180 185 190
Ser Ser Ile Ser Asn Thr Cys Asp Glu Lys Thr Gln Ser Leu Gly Val 195 200 205 vo
Lys Phe Leu Asp Glu Tyr Gln Ser Lys Val Lys Arg Gln Ile Phe Ser 210 215 220
Gly Tyr Gln Ser Asp Ile Asp Thr His Asn Arg Ile Lys Asp Glu Leu Ye 225 230 235 240 : ( 9 ) معلومات عن تسلسل التمييز رقم (Y ) خصائص التسلسل: ) ١(
Lise حمضآً YY أ ) الطول: ( nucleic acid النوع: حمض نووي ) <) Yo (ج) شكل الشريط: مفرد د الهيئة الشكلية رجو1هم10: خطي (مجيني) DNA نوع الجزيء: ) ( :)4( وصف التسلسل: تسلسل تمييز رقم (VY)
ACCGGCTTTG ATAGATATGA T 7 : ( Ye ) معلومات عن تسلسل التمييز رقم (Y ) خصائص التسلسل: ) ١(
Lise Lames YY الطول: (1) nucleic acid حمض نووي 1g sil (2) (ج) شكل الشريط: مفرد vo خطي Topology الهيئة الشكلية (2) (مجيني) DNA نوع الجزيء: ) 7)
You
(VY) وصف التسلسل: تسلسل تمييز رقم :)٠١( ACCGGCTTTG AAAGATATGA 1 (7) معلومات عن تسلسل التمييز رقم :)١١( ١( ) خصائص التسلسل: ( أ ) الطول: Caen YY أمينيآً (ب ) النوع: حمض نووي nucleic acid (ج) شكل الشريط: مفرد ( د ) الهيئة الشكلية Topology خطي )¥ نوع الجزيء: DNA (مجيني) (VY) 1 وصف التسلسل: تسلسل تمييز رقم (VY) ACCGGCTTTT ACAGATATGA T (7) معلومات عن تسلسل التمييز رقم (VY) ١( ) خصائص التسلسل: ( أ ) الطول: Laas YY أمينياً vo (ب ) النوع: حمض نووي nucleic acid (ج) شكل الشريط: مفرد ( د ) الهيئة الشكلية: خطي Y) ) نوع الجزيء: DNA (مجيني) (VY) وصف التسلسل: تسلسل تمييز رقم :)١"( GTTTCCACTA 001140111 © 7 (7) معلومات عن تسلسل التمييز رقم (VF) ١( ) خصائص التسلسل: )1( الطول: YY حمضاً أمينياً (ب ) النوع: حمض نووي nucleic acid ve (ج) شكل الشريط: مفرد You
( د ) الهيئة الشكلية Topology خطي ( ) نوع الجزيء: DNA (مجيني) )11( وصف التسلسل: تسلسل تمييز رقم :)١( ATGTTTAATA AGAATGATGT A (Y) ٠١ معلومات عن تسلسل التمييز رقم :)١6( ١( ) خصائص التسلسل: )1( الطول: YY حمضآً أمينياً (ب ) النوع: حمض نووي nucleic acid (ج) شكل الشريط: مفرد Ve ( د ) الهيئة الشكلية (Topology خطي )7 ) نوع الجزيء: DNA (مجيني) )١١( وصف التسلسل: تسلسل تمييز رقم :)١6( ATGTTTAATT ACAATGATGT A (Y) معلومات عن تسلسل التمييز رقم )10( ١ ) خصائص التسلسل: ( أ ) الطول: Lise Caen YY )< ) النوع: حمض نووي nucleic acid (ج) شكل الشريط: مفرد ( د ) الهيئة الشكلية Topology خطي ١١ ٠ ) نوع الجزيء: DNA (مجيني) (VY) وصف التسلسل: تسلسل تمييز رقم :)١١( TACAGCCCTG AGCCATATGA A (Y) معلومات عن تسلسل التمييز رقم )0( ١( ) خصائص التسلسل: Yo ( أ ) الطول: ied Laas VA You
(ب ( النوع: حمض نووي nucleic acid (ج) شكل الشريط: مفرد ( د ) الهيئة الشكلية Topology خطي )7 ) نوع الجزيء: DNA (مجيني) (VY) وصف التسلسل: تسلسل تمييز رقم :)١36( ATTAGCGTAA AGAGCCCT (Y) معلومات عن تسلسل التمييز رقم (VY) ١( ) خصائص التسلسل: ( أ ) الطول: Lied Caen VA 6 (ب ) النوع: حمض نووي nucleic acid (ج) شكل الشريط: مفرد ( د ) الهيئة الشكلية Topology خطي )¥ ) نوع الجزيء: DNA (مجيني) (VY) وصف التسلسل: تسلسل تمييز رقم (VY) ATTAGCGTAG ATAGCCCT vo (Y) معلومات عن تسلسل التمييز رقم (18): ١( ) خصائص التسلسل: (أ) الطول: Laas VA أمينياً (ب ) النوع: حمض نووي nucleic acid (ج) شكل الشريط: مفرد ( د ) الهيئة الشكلية Topology خطي Y) ) نوع الجزيء: DNA (مجيني) (V1) وصف التسلسل: تسلسل تمييز رقم :)١8( TAGCGTAAGT AGCCCTCA (Y) ve معلومات عن تسلسل التمييز رقم )09( You ww خصائص التسلسل: (1) أمينياً Liana VA (أ) الطول: nucleic acid (ب ) النوع: حمض نووي (ج) شكل الشريط: مفرد خطي Topology د ) الهيئة الشكلية ( ° (مجيني) DNA نوع الجزيء: ) 7) (V9) وصف التسلسل: تسلسل تمييز رقم (VY)
ATACAGCAGC CACCCATA
:)7١( معلومات عن تسلسل التمييز رقم )7( خصائص التسلسل: ) ١( ١
Lined Lana ١١7 أ ) الطول: ( nucleic acid (ب ) النوع: حمض نووي (ج) شكل الشريط: مفرد خطي Topology د ) الهيئة الشكلية ( (مجيني) DNA نوع الجزيء: ) 7( vo :)٠١( وصف التسلسل: تسلسل تمييز رقم (VY)
GGAGGTGAAG CGTTAGG
(YY) معلومات عن تسلسل التمييز رقم (Y) خصائص التسلسل: ) ١
Lined aes VA الطول: (1) Y. nucleic acid (ب ) النوع: حمض نووي (ج) شكل الشريط: مفرد خطي Topology د ) الهيئة الشكلية ( (مجيني) DNA نوع الجزيء: ) ( (YY) وصف التسلسل: تسلسل تمييز رقم )١١( vo
You
GGAGGTTAAA GCGTTAGG (7) معلومات عن تسلسل التمييز رقم (YY) ١( ) خصائص التسلسل: ( أ ) الطول: Laas ١١ أمينياً 0 (ب ) النوع: حمض نووي nucleic acid (ج) شكل الشريط: مفرد ( د ) الهيئة الشكلية «ع010م70: خطي (7 ) نوع الجزيء: DNA (مجيني) (VY) وصف التسلسل: تسلسل تمييز رقم (YY) ATATATCTCA ACGAATATCA A ve (Y) معلومات عن تسلسل التمييز رقم (17): ١( ) خصائص التسلسل: ( أ ) الطول: Lined Liman VA (ب ) النوع: حمض نووي nucleic acid vo (ج) شكل الشريط: مفرد ( د ) الهيئة الشكلية (Topology خطي (7 ) نوع الجزيء: DNA (مجيني) (VY) وصف التسلسل: تسلسل تمييز رقم (YY) ATATTAATTT CTATGATC (Y) | © معلومات عن تسلسل التمييز رقم (YE) ١( ) خصائص التسلسل: )1( الطول: Lied Caen VA : (ب ) النوع: حمض نووي nucleic acid (ج) شكل الشريط: مفرد Yo ( د ) الهيئة الشكلية Topology خطي You
)¥ ) نوع الجزيء: DNA (مجيني) (VY) وصف التسلسل: تسلسل تمييز رقم (YE) CTTTATGATT TTGCGAGA (Y) معلومات عن تسلسل التمييز رقم (Yo) ١( ) خصائص التسلسل: ( أ ) الطول: VA حمضاً Lise (ب ) النوع: حمض نووي nucleic acid (ج) شكل الشريط: مفرد ( د ) الهيئة الشكلية Topology خطي Vv. (7 ) نوع الجزيء: DNA (مجيني) (VY) وصف التسلسل: تسلسل تمييز رقم H(Y0) ATGATCACTA TAGAGGAA (Y) معلومات عن تسلسل التمييز رقم (YT) ١( ) خصائص التسلسل: vo (أ) الطول: Laas YA أمينياً )< ( النوع: حمض نووي nucleic acid (ج) شكل الشريط: مفرد ( د ) الهيئة الشكلية Topology خطي )1 ) نوع الجزيء: DNA (مجيني) (VY) Ye وصف التسلسل: تسلسل تميبز رقم (773): GCTTTGTCGC GTATGATG (7) معلومات عن تسلسل التمييز رقم (YY) ١( ) خصائص التسلسل: ( أ ) الطول: Caen YY أمينيآً Yo (ب ) النوع: حمض نووي nucleic acid Yeo
(ج) شكل الشريط: مفرد ( د ) الهيئة الشكلية Topology خطي ) ) نوع الجزيء: DNA (مجيني) (VY) وصف التسلسل: تسلسل تمييز رقم (YY) GGCTTTGTCA AGTATGATGA T 0 (Y) معلومات عن تسلسل التمييز رقم (18): )1( خصائص التسلسل: (أ) الطول: YA حمضاآً Lied (ب ) النوع: حمض نووي nucleic acid Ve (ج) شكل الشريط: مفرد ( د ) الهيئة الشكلية Topology خطي )7 ) نوع الجزيء: DNA (مجيني) (VY) وصف التسلسل: تسلسل تمييز رقم (YA) ATGACGGAAT 661110 )١( | معلومات عن تسلسل التمييز رقم (79): ١( ) خصائص التسلسل: ( أ ) الطول: YY حمضآً Lis (ب ) النوع: حمض نووي nucleic acid (ج) شكل الشريط: مفرد Ye ( د ) الهيئة الشكلية Topology خطي )7 ) نوع الجزيء: DNA (مجيني) (VY) وصف التسلسل: تسلسل تمييز رقم (9؟): GACGGATATG GATCCACTTIC T (7) معلومات عن تسلسل التمييز رقم (Ve) ١( Yo ) خصائص التسلسل: You vi حمضآً أمينيآً YY أ ) الطول: ( nucleic acid (ب ) النوع: حمض نووي (ج) شكل الشريط: مفرد خطي Topology د ) الهيئة الشكلية ( (مجيني) DNA نوع الجزيء: ) (٠٠ :)١( وصف التسلسل: تسلسل تمييز رقم (VY)
AGTTTGAGAA AGGCTCACTT A
(YY) معلومات عن تسلسل التمييز رقم (Y) خصائص التسلسل: ) ١(
Lied Caen YY الطول: (1) ve nucleic acid (ب ) النوع: حمض نووي (ج) شكل الشريط: مفرد خطي Topology الهيئة الشكلية (2) (مجيني) DNA نوع الجزيء: ) (
F(T) وصف التسلسل: تسلسل تمييز رقم (VY) ro
AGTTTGAGAC CAGCTCACTT A
(YY) معلومات عن تسلسل التمييز رقم )7( خصائص التسلسل: ) ١
Lindl Les YY الطول: (1) nucleic acid ؟ (ب ) النوع: حمض نووي (ج) شكل الشريط: مفرد خطي Topology د ) الهيئة الشكلية ( (مجيني) DNA نوع الجزيء: ¥) :)37( وصف التسلسل: تسلسل تمييز رقم (VY)
AGAAGTGCTC CTTTAGCAGG A Yo
You vy (YY) معلومات عن تسلسل التمييز رقم )7( خصائص التسلسل: ) ١( أمينيآً Caen YY الطول: (1) nucleic acid (ب ) النوع: حمض نووي (ج) شكل الشريط: مفرد خطي Topology د ) الهيئة الشكلية ( (مجيني) DNA نوع الجزيء: (7) (YY) وصف التسلسل: تسلسل تمييز رقم (VY)
GCTCACTTAA GGGGACAGTC T
(YE) معلومات عن تسلسل التمييز رقم (Y) | © خصائص التسلسل: ) ١
Lined حمضاآً YY الطول: (1) nucleic acid (ب ) النوع: حمض نووي (ج) شكل الشريط: مفرد خطي Topology الهيئة الشكلية (2) yo (مجيني) DNA نوع الجزيء: ( ¥) :) 4( وصف التسلسل: تسلسل تمييز رقم (1)
GCTCACTTAC ATGGACAGTC T
(Yo) معلومات عن تسلسل التمييز رقم )7( خصائص التسلسل: ) ١( Ye حمضاآً أمينياً YY الطول: (1) nucleic acid (ب ) النوع: حمض نووي (ج) شكل الشريط: مفرد خطي Topology د ) الهيئة الشكلية ( (مجيني) DNA نوع الجزيء: ) 7( vo
You vr (Vo) وصف التسلسل: تسلسل تمييز رقم (VY)
GATTCATCAA TTACAATCAC A
(7) معلومات عن تسلسل التمييز رقم (Y) خصائص التسلسل: ) ١(
Lied Lana YA الطول: (1) : nucleic acid (ب ) النوع: حمض نووي (ج) شكل الشريط: مفرد خطي Topology د ) الهيئة الشكلية ( (مجيني) DNA نوع الجزيء: ¥)
HT) وصف التسلسل: تسلسل تمييز رقم (11) !
GGCAGATTCT AGACCTCCTG ATGAATAA
(YY) معلومات عن تسلسل التمييز رقم (Y) خصائص التسلسل: ) ١(
Lise Laan 0) أ ) الطول: ( nucleic acid (ب ) النوع: حمض نووي vo (ج) شكل الشريط: مفرد خطي Topology د ) الهيئة الشكلية ( (مجيني) DNA نوع الجزيء: ) ( (YY) وصف التسلسل: تسلسل تمييز رقم (VY)
TGAAGTTTGG CGAAGCTTCT TAATTTGCCA TACTAATTGC GGCAATCGCAT Ye (YA) معلومات عن تسلسل التمييز رقم )7( خصائص التسلسل: ) ١( أمينيآً (aaa YY (أ) الطول: nucleic acid (ب ) النوع: حمض نووي (ج) شكل الشريط: مفرد Yo
You ve خطي ‘Topology الهيئة الشكلية ) 2) (مجيني) DNA نوع الجزيء: ¥) (FA) وصف التسلسل: تسلسل تمييز رقم (11)
TACAGTCCTA ACCCAGATGA A
(FR) معلومات عن تسلسل التمييز رقم (Y) ٠ خصائص التسلسل: ) ١( أمينياً Laan YY الطول: (1) nucleic acid (ب ) النوع: حمض نووي (ج) شكل الشريط: مفرد خطي ‘Topology د ) الهيئة الشكلية ( y (مجيني) DNA نوع الجزيء: ) ¥) :)345( وصف التسلسل: تسلسل تمييز رقم (VY)
TCATCCAGAT TCGCAAGAAG 7 :)460( معلومات عن تسلسل التمييز رقم )7( خصائص التسلسل: ) ١( " حمضآً أمينياً YY الطول: (1) nucleic acid (ب ) النوع: حمض نووي (ج) شكل الشريط: مفرد خطي ‘Topology د ) الهيئة الشكلية ( (مجيني) DNA نوع الجزيء: ) 1١ ٠ :)40( وصف التسلسل: تسلسل تمييز رقم (VY)
CAGATGAACA AGCTGTTTCT G
:)41( معلومات عن تسلسل التمييز رقم (Y) خصائص التسلسل: ) ١(
Gis حمضآً YY أ ) الطول: ( Yo
You vo nucleic acid (ب ) النوع: حمض نووي (ج) شكل الشريط: مفرد د ) الهيئة الشكلية «ع010م710: خطي ( (مجيني) DNA نوع الجزيء: Y) :)41( وصف التسلسل: تسلسل تمييز رقم (VY)
CAAGAAGTTG AAGCTTTAGG 1
You
Claims (1)
- vi عناصر الحماية يشتمل على تسلسل immunogenic detoxified protein للمناعة Al ga بروتين مزال السمية -١ ١ من سم الكوليرا subunite A للوحدة الفرعية أ amino acid sequence حمض أميني 7 أو قطعة منه أو تسلسل حمض اميني للوحدة الفرعية أ من سم غير ثابت cholera toxin v أو قطعة منه يشتمل Escherichia coli heat labile toxin حرارياً من الإشريكية القولونية واحد أو أكثر من الاستبدالات التالية عند أو في amino acid على استبدال حمض اميني ° من سم كوليرا subunit مواقع مناظرة لأحماض أمينية في تسلسل الوحدة الفرعية أ م 1 : mature colera toxin ناضج 77 «Val-97-Tyr «Val-97-Lys «Ser-63-Lys «Val-53-Tyr ¢«Val-53-Glu «Val-53-Asp A حيث تشمل القطعة (Pro-106-Ser و Tyr-104-Ser «Tyr-104-Asp «Tyr-104-Lys 4 من منطقة واحدة على الأقل amino 5 المذكورة من * إلى حوالي © أحماض أمينية Ve التي ينبغي أن amino acids من المناطق التي تحتوي على أحد الأحماض الأمينية ١١ تستبدل. VY يشتمل على بروتين مزال السمية مولد immunogenic composition للمناعة Al ge تركيب -“ ١ و ١ كما سيق في الاعلى وفقآً لمطلب الحماية immunogenic detoxified protein للمناعة Y مقبول صيدلياً. dala r subunit A | للوحدة الفرعية amino acid sequence لقاح يشتمل على تسلسل حمض أميني -Y ١ للوحدة الفرعية amino acid sequence أو تسلسل حمض أميني cholera toxin من سم كوليرا 7 Escherichia coli من سم غير ثابت حرارياً من الإشريكية القولونية subunit A أ y واحد أو أكثر من amino acid يشتمل على استبدال حمض أميني heat labile toxin ¢ في amino acid الاستبدالات التالية عند أو في المواقع المناظرة للأحماض الأمينية ° ‘mature cholera toxin من سم الكوليرا الناضج subunit A تسلسل الوحدة الفرعية أ 1 Tyr- «Val-97-Tyr «Val-97-Lys ¢Ser-63-Lys «¢Val-53-Tyr ¢Val-53-Glu «Val-53-Asp لا د vy تشمل القطعة المذكورة Cua (Pro-106-Ser و Tyr-104-Ser «Tyr-104-Asp ¢104-Lys A من إحدى المناطق على الأقل amino acids إلى حوالي 5 أحماض أمينية Y من حوالي 9 : التي ينبغي أن تستبدل. amino acids التي تحتوي على أحد الأحماض الأمينية ٠١ enterotoxigenic أو سلالة مولدة لسم معوي Vibrio cholerae طريقة لتطعيم الثديات ضد —¢ \ تتضمن إعطاء مقدار فعال مناعياً من بروتين مزال السمية Escherichia coli من strain Y .١ لمطلب الحماية 188 5 immunogenic detoxified protein مولد للمناعة v immunogenic عملية لتشكيل لقاح تتضمن اقتران بروتين مزال السمية مولد للمناعة 0 . مع حامل مقبول صيدلياً ١ وفقاً لمطلب الحماية detoxified protein Y immunogenic عملية لتشكيل لقاح تتضمن اقتران بروتين مزال السمية مولد للمناعة = ١ . adjuvant مع مادة مساعدة ١ وفقآً لمطلب الحماية detoxified protein Y يشتمل على تسلسل immunogenic detoxified protein بروتين مزال السمية مولد للمناعة -١ ١ أو cholera toxin ومن سم كوليرا subunit A للوحدة الفرعية أ amino acid حمض أميني Y من سم غير subunit A للوحدة الفرعية أ amino acid و قطعة منه أو تسلسل حمض أميني أو قطعة منه حيث Escherichia coli heat labile toxin ثابت حرارياً من الإشريكية القولونية ¢ من سم subunit A في تسلسل الوحدة الفرعية أ Ser-63 — المناظر a8 gall يستبدل ° تشمل القطعة المذكورة من Cus lysine ب mature cholera toxin الكوليرا الناضج 1 المناطق على الأقل التي (sas) من amino acids حوالي © أحماض أمينية AY حوالي 7 التي ينبغي أن تستبدل. amino acids تحتوي على أحد الأحماض الأمينية A يشتمل على تسلسل immunogenic detoxified protein بروتين مزال السمية مولد للمناعة —A ١ أو cholera toxin ومن سم الكوليرا subunit A j للوحدة الفرعية amino acid أميني Jaan Y من سم غير subunit A للوحدة الفرعية أ amino acid ؤ قطعة منه أو تسلسل حمض أمينيYouVA ¢ ثابت حرارياً من الإشريكية القولونية Escherichia coli heat labile toxin أو قطعة منه حيث ° يستبدل الموقع المناظر لب Pro-106 في تسلسل الوحدة الفرعية subunit A i من سم 4 كوليرا ناضج mature cholera toxin ب Cus serine تشمل القطعة المذكورة من حوالي 77 ؟ إلى حوالي © أحماض أمينية amino acids من إحدى المناطق على الأقل التي تحتوي A على أحد الأحماض الأمينية amino acids التي ينبغي أن تستبدل.. adjuvant لمطلب الحماية ؟ يشتمل بشكل إضافي على مادة مساعدة Gig تركيب لقاح -4 ١ You
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| ITMI913513A IT1253009B (it) | 1991-12-31 | 1991-12-31 | Mutanti immunogenici detossificati della tossina colerica e della tossina lt, loro preparazione ed uso per la preparazione di vaccini |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SA93130462B1 true SA93130462B1 (ar) | 2004-09-01 |
Family
ID=11361457
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SA93130462A SA93130462B1 (ar) | 1991-12-31 | 1993-04-14 | طوافر mutants مزالة السمية مولدة للمناعة من سم الكوليرا ومن سم غير ثابت حراريا , تحضيرها واستحدامها لتحضير اللقاحات |
Country Status (18)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6149919A (ar) |
| EP (3) | EP1484404B1 (ar) |
| JP (2) | JP3394774B2 (ar) |
| AT (3) | ATE277183T1 (ar) |
| AU (1) | AU3347693A (ar) |
| CA (1) | CA2127091C (ar) |
| DE (3) | DE69233667T2 (ar) |
| DK (3) | DK0869181T3 (ar) |
| ES (3) | ES2277195T3 (ar) |
| GR (1) | GR3029556T3 (ar) |
| IT (1) | IT1253009B (ar) |
| MX (1) | MX9207685A (ar) |
| MY (1) | MY108154A (ar) |
| PT (1) | PT1484404E (ar) |
| SA (1) | SA93130462B1 (ar) |
| SG (2) | SG48217A1 (ar) |
| TW (1) | TW239146B (ar) |
| WO (1) | WO1993013202A1 (ar) |
Families Citing this family (135)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB9513371D0 (en) | 1995-06-30 | 1995-09-06 | Biocine Spa | Immunogenic detoxified mutant toxins |
| DK0725653T3 (da) | 1993-10-05 | 2004-10-11 | Celltech Pharmaceuticals Ltd | Vaccinepræparater |
| GB9326174D0 (en) | 1993-12-22 | 1994-02-23 | Biocine Sclavo | Mucosal adjuvant |
| US5981730A (en) * | 1994-04-13 | 1999-11-09 | The General Hospital Corporation | RPS gene family, primers, probes, and detection methods |
| US6019982A (en) * | 1994-08-26 | 2000-02-01 | The Administrators Of The Tulane Educational Fund | Mutant enterotoxin effective as a non-toxic oral adjuvant |
| US6436407B1 (en) | 1994-08-26 | 2002-08-20 | The Administrators Of The Tulane Educational Fund | Mutant enterotoxin effective as a non-toxic adjuvant |
| GB9603314D0 (en) * | 1996-02-16 | 1996-04-17 | Biocine Spa | Immunogenic detoxified mutant toxins |
| GB9622660D0 (en) * | 1996-10-31 | 1997-01-08 | Biocine Spa | Immunogenic detoxified mutant toxin |
| US6797276B1 (en) | 1996-11-14 | 2004-09-28 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Army | Use of penetration enhancers and barrier disruption agents to enhance the transcutaneous immune response |
| US20060002949A1 (en) | 1996-11-14 | 2006-01-05 | Army Govt. Of The Usa, As Rep. By Secretary Of The Office Of The Command Judge Advocate, Hq Usamrmc. | Transcutaneous immunization without heterologous adjuvant |
| US6036953A (en) * | 1996-11-29 | 2000-03-14 | The General Hospital Corporation | Heterologous antigens in live cell V. cholerae strains |
| AU6044598A (en) * | 1997-01-29 | 1998-08-18 | The Administrators Of The Tulane Eductional Fund | Mutant enterotoxin effective as a non-toxic adjuvant for hiv |
| US6818222B1 (en) | 1997-03-21 | 2004-11-16 | Chiron Corporation | Detoxified mutants of bacterial ADP-ribosylating toxins as parenteral adjuvants |
| EP1486215A3 (en) * | 1997-03-21 | 2006-04-12 | Chiron Corporation | Detoxified mutants of bacterial ADP-ribosylating toxins as parenteral adjuvants |
| EP0887403A3 (en) * | 1997-06-27 | 2000-12-06 | Chiron S.P.A. | Attenuated Vibrio cholerae strains |
| AU9120898A (en) | 1997-08-27 | 1999-03-16 | Chiron Corporation | Molecular mimetics of meningococcal b epitopes |
| US6033673A (en) * | 1998-03-18 | 2000-03-07 | The Administrators Of Tulane Educational Fund | Double mutant enterotoxin for use as an adjuvant |
| AU3089599A (en) * | 1998-03-18 | 1999-10-11 | Smithkline Beecham Corporation | Production of purified mutant enterotoxin for use as an adjuvant |
| AU770498B2 (en) | 1998-06-19 | 2004-02-26 | Merieux Oravax | LT and CT in parenteral immunization methods against helicobacter infection |
| DE19851282A1 (de) * | 1998-11-06 | 2000-05-11 | Schweiz Serum & Impfinst | Zusammensetzung einer pharmazeutisch wirksamen Substanz, appliziert in einem spezifischen Delivery-System zur Prävention und Behandlung von Infektions-Krankheiten |
| EP1175144A4 (en) * | 1998-12-22 | 2002-10-30 | Thompson Boyce Plant Res | ORAL ADMINISTRATION IMMUNOGENIC BACTERIAL ENTEROTOXINS EXPRESSED IN TRANSGENIC PLANTS |
| US7935805B1 (en) | 1998-12-31 | 2011-05-03 | Novartis Vaccines & Diagnostics, Inc | Polynucleotides encoding antigenic HIV Type C polypeptides, polypeptides and uses thereof |
| CA2360347C (en) | 1998-12-31 | 2013-05-07 | Chiron Corporation | Improved expression of hiv polypeptides and production of virus-like particles |
| US8206749B1 (en) | 1999-02-26 | 2012-06-26 | Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. | Microemulsions with adsorbed macromolecules and microparticles |
| AU4673099A (en) | 1999-02-26 | 2000-09-14 | Chiron Corporation | Use of bioadhesives and adjuvants for the mucosal delivery of antigens |
| US7115730B1 (en) | 1999-04-27 | 2006-10-03 | Chiron Srl | Immunogenic detoxified mutant E. coli LT-A-toxin |
| GB9919468D0 (en) | 1999-08-17 | 1999-10-20 | Smithkline Beecham Biolog | Vaccine |
| US7722887B1 (en) * | 1999-09-15 | 2010-05-25 | Mogam Biotechnology Research Institute | Detoxified mutants of escherichia coli heat-labile enterotoxin |
| US7186560B2 (en) * | 1999-09-21 | 2007-03-06 | Rutgers, The State University Of New Jersey | High level expression of immunogenic proteins in the plastids of higher plants |
| ES2296642T3 (es) * | 1999-09-21 | 2008-05-01 | Rutgers, The State University Of New Jersey | Sistema de recombinacion especifica de sitio para manipular el genoma de plastidos de plantas superiores. |
| GB9923060D0 (en) | 1999-09-29 | 1999-12-01 | Chiron Spa | Vaccine |
| US7384640B1 (en) | 1999-09-30 | 2008-06-10 | Wyeth Holdings Corporation | Mutant cholera holotoxin as an adjuvant |
| AU2471201A (en) | 1999-10-26 | 2001-06-06 | Chiron Corporation | Plant lectins as mucosal adjuvants |
| US20020142006A1 (en) * | 2000-03-17 | 2002-10-03 | Mcghee Jerry R. | Chimeric nontoxic mutants of enterotoxins as mucosal adjuvants for cell-mediated or humoral immunity |
| US7063852B2 (en) | 2000-05-19 | 2006-06-20 | The Administrators Of The Tulane Educational Fund | Hybrid LT-A/CT-B holotoxin for use as an adjuvant |
| EP2336368A1 (en) | 2000-12-07 | 2011-06-22 | Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. | Endogenous retroviruses up-regulated in prostate cancer |
| DE60239317D1 (de) | 2001-01-12 | 2011-04-14 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Nukleinsäure mukosale immunisierung |
| WO2002074244A2 (en) | 2001-03-19 | 2002-09-26 | Iomai Corporation | Transcutaneous immunostimulation |
| AU2002252525A1 (en) * | 2001-03-29 | 2002-10-15 | Rutgers, The University Of New Jersey | Integrases for the insertion of heterologous nucleic acids into the plastid genome |
| CA3060687C (en) | 2001-05-22 | 2021-05-04 | The Government Of The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Development of mutations useful for attenuating dengue viruses and chimeric dengue viruses |
| EP1404368B1 (en) * | 2001-06-07 | 2009-12-09 | Wyeth Holdings Corporation | Mutant forms of cholera holotoxin as an adjuvant |
| KR20080078717A (ko) | 2001-06-07 | 2008-08-27 | 와이어쓰 홀딩스 코포레이션 | 보조제로서 콜레라 홀로톡신의 돌연변이체 형태 |
| US8481043B2 (en) | 2001-06-22 | 2013-07-09 | Cpex Pharmaceuticals, Inc. | Nasal immunization |
| US7211659B2 (en) | 2001-07-05 | 2007-05-01 | Chiron Corporation | Polynucleotides encoding antigenic HIV type C polypeptides, polypeptides and uses thereof |
| EP2280074A3 (en) | 2001-07-05 | 2011-06-22 | Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. | Polynucleotides encoding antigenic HIV type B and/or type C polypeptides, polypeptides and uses thereof |
| GB0118249D0 (en) | 2001-07-26 | 2001-09-19 | Chiron Spa | Histidine vaccines |
| MXPA04000653A (es) | 2001-07-27 | 2004-11-22 | Chiron Srl | Adhesinas de meningococcus nada, app y orf 40. |
| AR045702A1 (es) | 2001-10-03 | 2005-11-09 | Chiron Corp | Composiciones de adyuvantes. |
| MX339524B (es) | 2001-10-11 | 2016-05-30 | Wyeth Corp | Composiciones inmunogenicas novedosas para la prevencion y tratamiento de enfermedad meningococica. |
| CA2476626A1 (en) | 2002-02-20 | 2003-08-28 | Chiron Corporation | Microparticles with adsorbed polypeptide-containing molecules |
| MXPA04008890A (es) | 2002-03-15 | 2005-10-18 | Wyeth Corp | Mutantes de la proteina p4 de haemophilus influenzae no tipicable con actividad enzimatica reducida. |
| US8518694B2 (en) | 2002-06-13 | 2013-08-27 | Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. | Nucleic acid vector comprising a promoter and a sequence encoding a polypeptide from the endogenous retrovirus PCAV |
| AU2003274925A1 (en) * | 2002-08-27 | 2004-03-19 | Dow Agrosciences Llc | Use of escherichia coli heat labile toxin as an adjuvant in birds and poultry |
| US20080159957A1 (en) | 2002-10-01 | 2008-07-03 | W Michael Kavanaugh | Anti-Cancer and Anti-Infectious Disease Compositions and Methods for Using Same |
| DK2395073T3 (en) | 2002-11-01 | 2017-10-23 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Process for drying. |
| EP1581256A4 (en) * | 2002-11-14 | 2006-06-07 | Pfizer Prod Inc | USE OF RMLT AS MARKER ANTIGEN FOR VACCINE AND AS SYNERGISTIC ADJUVANS WITH AMPY |
| EP2263687B1 (en) | 2002-12-27 | 2015-03-25 | Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. | Immunogenic compositions containing phospholipid |
| US6743002B1 (en) * | 2003-02-03 | 2004-06-01 | Eaton Corporation | Rotary fluid pressure device and improved integral brake assembly |
| AU2003274904A1 (en) * | 2003-02-14 | 2004-09-09 | Aeras Global Tuberculosis Vaccine Foundation | Dna vaccine that expresses mutant adp-ribosyltransferase toxins which display reduced, or are devoid of, adp-ribosyltransferase activity |
| EP1606386A4 (en) * | 2003-03-03 | 2007-07-18 | Univ Rutgers | REMOVAL OF PLASTIC SEQUENCES THROUGH TRANSIENT EXPRESSED LOCATION-SPECIFIC RECOMBINATION |
| EP1603950A2 (en) * | 2003-03-17 | 2005-12-14 | Wyeth Holdings Corporation | Mutant cholera holotoxin as an adjuvant and an antigen carrier protein |
| GB0308198D0 (en) | 2003-04-09 | 2003-05-14 | Chiron Srl | ADP-ribosylating bacterial toxin |
| US7731967B2 (en) | 2003-04-30 | 2010-06-08 | Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. | Compositions for inducing immune responses |
| ES2596553T3 (es) | 2003-06-02 | 2017-01-10 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Composiciones inmunogénicas a base de micropartículas que comprenden toxoide adsorbido y un antígeno que contiene un polisacárido |
| GB0313242D0 (en) * | 2003-06-09 | 2003-07-16 | Imp College Innovations Ltd | Pulmonary immunopathology |
| WO2005021033A2 (en) | 2003-09-02 | 2005-03-10 | Glaxosmithkline Biologicals S.A. | Vaccine |
| EP1814583A2 (en) | 2004-11-01 | 2007-08-08 | Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. | Combination approaches for generating immune responses |
| GB0503337D0 (en) | 2005-02-17 | 2005-03-23 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Compositions |
| EP2425855A1 (en) | 2005-04-08 | 2012-03-07 | Wyeth LLC | Multivalent pneumococcal polysaccharide-protein conjugate composition |
| WO2007047749A1 (en) | 2005-10-18 | 2007-04-26 | Novartis Vaccines And Diagnostics Inc. | Mucosal and systemic immunizations with alphavirus replicon particles |
| WO2007121467A2 (en) * | 2006-04-18 | 2007-10-25 | Rutgers, The State University Of New Jersey | Compositions and methods for increasing transgene expression in the plastids of higher plants |
| TW200806315A (en) | 2006-04-26 | 2008-02-01 | Wyeth Corp | Novel formulations which stabilize and inhibit precipitation of immunogenic compositions |
| WO2008094188A2 (en) | 2006-07-17 | 2008-08-07 | Anza Therapeutics, Inc. | Methods and compositions using listeria for enhancing immunogenicity by prime boost |
| AU2008279550B2 (en) * | 2007-06-21 | 2012-08-09 | Angelica Therapeutics, Inc. | Modified toxins |
| US8815253B2 (en) | 2007-12-07 | 2014-08-26 | Novartis Ag | Compositions for inducing immune responses |
| EP2268297A4 (en) * | 2008-02-29 | 2011-11-16 | Angelica Therapeutics Inc | MODIFIED TOXINS |
| EP2293813A4 (en) | 2008-05-23 | 2012-07-11 | Univ Michigan | NANOEMULSION VACCINES |
| CN102316894A (zh) | 2008-06-20 | 2012-01-11 | 惠氏有限责任公司 | 来自β-溶血性链球菌菌株的ORF1358的组合物和使用方法 |
| AU2009296458A1 (en) | 2008-09-26 | 2010-04-01 | Nanobio Corporation | Nanoemulsion therapeutic compositions and methods of using the same |
| WO2010046783A2 (en) * | 2008-10-21 | 2010-04-29 | International Vaccine Institute | A1 moiety of cholera toxin a subunit as an adjuvant for mucosal and systemic vaccines |
| AU2010203223B9 (en) | 2009-01-05 | 2015-10-08 | Epitogenesis Inc. | Adjuvant compositions and methods of use |
| EP2405758B1 (en) | 2009-03-09 | 2016-04-27 | Molecular Express, Inc. | Methods and compositions for liposomal formulation of antigens and uses thereof |
| CN102596243B (zh) | 2009-06-16 | 2015-10-21 | 密执安大学评议会 | 纳米乳剂疫苗 |
| RU2531234C2 (ru) | 2009-06-22 | 2014-10-20 | ВАЙЕТ ЭлЭлСи | КОНЪЮГАТ ПОЛИСАХАРИД-БЕЛОК ДЛЯ ИНДУЦИРОВАНИЯ ИММУННОГО ОТВЕТА И ЗАЩИТЫ ПРОТИВ ИНФЕКЦИИ Staphylococcus aureus, СПОСОБЫ ПОЛУЧЕНИЯ КОНЪЮГАТА (ВАРИАНТЫ), КОМПОЗИЦИЯ, СОДЕРЖАЩАЯ КОНЪЮГАТ И СПОСОБЫ ИНДУЦИРОВАНИЯ ИММУННОГО ОТВЕТА И ПРЕДОТВРАЩЕНИЯ ИНФЕКЦИИ Staphylococcus aureus |
| TWI469789B (zh) | 2009-06-22 | 2015-01-21 | Wyeth Llc | 金黃色葡萄球菌抗原之免疫原性組合物 |
| AR077636A1 (es) | 2009-07-08 | 2011-09-14 | Abbott Biologicals Bv | Vacuna viral y uso de la misma |
| US8241608B2 (en) | 2010-03-23 | 2012-08-14 | Development Center For Biotechnology | Treating allergy with detoxified E. coli heat-labile enterotoxin |
| CN102947452A (zh) | 2010-05-23 | 2013-02-27 | 艾杜罗生物科技公司 | 使用用于癌症的辅佐治疗的李斯特菌属的方法和组合物 |
| PL2575870T3 (pl) | 2010-06-04 | 2017-05-31 | Wyeth Llc | Preparaty szczepionek |
| US8658603B2 (en) | 2010-06-16 | 2014-02-25 | The Regents Of The University Of Michigan | Compositions and methods for inducing an immune response |
| SI3246044T2 (sl) | 2010-08-23 | 2024-06-28 | Wyeth Llc | Stabilne formulacije antigenov neisseria meningitidis RLP2086 |
| ES2585328T5 (es) | 2010-09-10 | 2022-12-14 | Wyeth Llc | Variantes no lipidadas de antígenos ORF2086 de Neisseria meningitidis |
| EP2654784B1 (en) | 2010-12-22 | 2016-12-07 | Wyeth LLC | Stable immunogenic compositions of staphylococcus aureus antigens |
| KR101998431B1 (ko) | 2011-04-26 | 2019-07-09 | 몰레큘라 익스프레스 인코포레이티드 | 리포솜 제제 |
| JP6499446B2 (ja) | 2011-06-24 | 2019-04-10 | エピットジェネシス・インコーポレーテッド | 抗原特異的免疫モジュレーターとして選択担体、ビタミン、タンニンおよびフラボノイドの組み合わせを含有する医薬組成物 |
| AU2012340035A1 (en) | 2011-11-14 | 2014-04-17 | Susan W. Barnett | Immunogenic complexes of polyanionic carbomers and Env polypeptides and methods of manufacture and use thereof |
| RU2665841C2 (ru) | 2012-03-09 | 2018-09-04 | Пфайзер Инк. | Композиции neisseria meningitidis и способы их применения |
| SA115360586B1 (ar) | 2012-03-09 | 2017-04-12 | فايزر انك | تركيبات لعلاج الالتهاب السحائي البكتيري وطرق لتحضيرها |
| US9732144B2 (en) | 2012-07-05 | 2017-08-15 | Ohio State Innovation Foundation | Infectious bursal disease (IBDV) vaccine compositions |
| WO2014044690A1 (en) | 2012-09-18 | 2014-03-27 | Valneva Austria Gmbh | Improved vaccines |
| BR112015009229B1 (pt) | 2012-10-24 | 2021-07-20 | Platelet Targeted Therapeutics, Llc | Composição tendo como alvo a expressão de genes para plaquetas, uso de uma célula tronco compreendendo a referida composição para tratar hemofilia e método in vitro ou ex vivo para gerar uma célula tronco modificada |
| EP4169929A1 (en) | 2012-12-20 | 2023-04-26 | Pfizer Inc. | Immunogenic compositions comprising pn-serotype 12f |
| EP2950819B1 (en) | 2013-02-01 | 2018-03-28 | GlaxoSmithKline Biologicals SA | Intradermal delivery of immunological compositions comprising toll-like receptor agonists |
| JP6446377B2 (ja) | 2013-03-08 | 2018-12-26 | ファイザー・インク | 免疫原性融合ポリペプチド |
| JP2016519651A (ja) | 2013-03-15 | 2016-07-07 | アンジェリカ セラピューティックス，インク． | 改質された毒素 |
| EP3041502A2 (en) | 2013-09-08 | 2016-07-13 | Pfizer Inc. | Neisseria meningitidis compositions and methods thereof |
| JP6306700B2 (ja) | 2013-11-01 | 2018-04-04 | ユニバーシティ オブ オスロＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｏｓｌｏ | アルブミン改変体及びその使用 |
| CA2929126C (en) | 2013-11-13 | 2020-01-07 | University Of Oslo | Outer membrane vesicles and uses thereof |
| US11452767B2 (en) | 2013-11-15 | 2022-09-27 | Oslo Universitetssykehus Hf | CTL peptide epitopes and antigen-specific t cells, methods for their discovery, and uses thereof |
| WO2016130569A1 (en) | 2015-02-09 | 2016-08-18 | Mj Biologics, Inc. | A composition comprising pedv antigens and methods for making and using the composition |
| WO2015138455A1 (en) | 2014-03-11 | 2015-09-17 | Regents Of The University Of Minnesota | Porcine epidemic diarrhea virus vaccines and methods of use thereof |
| WO2016057921A1 (en) | 2014-10-10 | 2016-04-14 | Baker Jr James R | Nanoemulsion compositions for preventing, suppressing or eliminating allergic and inflammatory disease |
| RU2723045C2 (ru) | 2015-02-19 | 2020-06-08 | Пфайзер Инк. | Композиции neisseria meningitidis и способы их получения |
| WO2016141320A2 (en) | 2015-03-05 | 2016-09-09 | Northwestern University | Non-neuroinvasive viruses and uses thereof |
| WO2016179034A2 (en) | 2015-05-01 | 2016-11-10 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Methods and compositions for stimulating immune response using potent immunostimulatory rna motifs |
| IL297740A (en) | 2015-05-04 | 2022-12-01 | Pfizer | Protein-polysaccharide conjugates of group b streptococcus, methods for preparing the conjugates, immunogenic preparations containing conjugates and their uses |
| WO2017040387A2 (en) | 2015-08-31 | 2017-03-09 | Technovax, Inc. | Human respiratory syncytial virus (hrsv) virus-like particles (vlps) based vaccine |
| CN108431214B (zh) | 2015-10-05 | 2022-03-01 | 美国政府(由卫生和人类服务部的部长所代表) | 人轮状病毒g9p[6]毒株和作为疫苗的用途 |
| CR20180445A (es) | 2016-03-14 | 2019-02-08 | Univ Oslo | Inmunoglobulinas diseñadas por ingeniería genética con unión alterada al fcrn |
| WO2017158421A1 (en) | 2016-03-14 | 2017-09-21 | University Of Oslo | Anti-viral engineered immunoglobulins |
| US11173207B2 (en) | 2016-05-19 | 2021-11-16 | The Regents Of The University Of Michigan | Adjuvant compositions |
| WO2017210215A1 (en) | 2016-05-31 | 2017-12-07 | The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Army | Zika virus vaccine and methods of production |
| EP3471761A2 (en) | 2016-06-21 | 2019-04-24 | University Of Oslo | Hla binding vaccine moieties and uses thereof |
| GB201614799D0 (en) | 2016-09-01 | 2016-10-19 | Glaxosmithkline Biologicals Sa | Compositions |
| US10751402B2 (en) | 2016-11-09 | 2020-08-25 | Pfizer Inc. | Immunogenic compositions and uses thereof |
| WO2018096396A1 (en) | 2016-11-22 | 2018-05-31 | University Of Oslo | Albumin variants and uses thereof |
| IL267733B2 (en) | 2017-01-31 | 2023-10-01 | Pfizer | NEISSERIA MENINGITIDIS preparations and methods therefor |
| US10525119B2 (en) | 2017-03-31 | 2020-01-07 | Boston Medical Center Corporation | Methods and compositions using highly conserved pneumococcal surface proteins |
| WO2019048936A1 (en) | 2017-09-07 | 2019-03-14 | University Of Oslo | VACCINE MOLECULES |
| WO2019048928A1 (en) | 2017-09-07 | 2019-03-14 | University Of Oslo | VACCINE MOLECULES |
| NL2027383B1 (en) | 2020-01-24 | 2022-04-06 | Aim Immunotech Inc | Methods, compositions, and vaccines for treating a virus infection |
| WO2021211279A1 (en) | 2020-04-17 | 2021-10-21 | Regents Of The University Of Minnesota | SARS-CoV-2 SPIKE RECEPTOR BINDING DOMAIN AND COMPOSITIONS AND METHODS THEREOF |
| CA3192786A1 (en) | 2020-08-26 | 2022-03-03 | Pfizer Inc. | Group b streptococcus polysaccharide-protein conjugates, methods for producing conjugates, immunogenic compositions comprising conjugates, and uses thereof |
| US20240156935A1 (en) | 2021-03-31 | 2024-05-16 | Vib Vzw | Vaccine Compositions for Trypanosomatids |
| CN113788893B (zh) * | 2021-08-11 | 2022-08-09 | 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心) | 一种快速富集霍乱弧菌的偶联特异性单克隆抗体的免疫磁珠及其制备方法 |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4666837A (en) * | 1982-05-24 | 1987-05-19 | Smithkline-Rit | DNA sequences, recombinant DNA molecules and processes for producing the A and B subunits of cholera toxin and preparations containing so-obtained subunit or subunits |
| US4935364A (en) * | 1983-03-04 | 1990-06-19 | Swiss Serum And Vaccine Institute Berne | Method of isolating restriction fragment deletions in vibrio cholerae and products thereof |
| GB8333131D0 (en) * | 1983-12-12 | 1984-01-18 | Glaxo Group Ltd | Microbiological process |
| IL101715A (en) * | 1991-05-02 | 2005-06-19 | Amgen Inc | Recombinant dna-derived cholera toxin subunit analogs |
-
1991
- 1991-12-31 IT ITMI913513A patent/IT1253009B/it active IP Right Grant
-
1992
- 1992-12-30 EP EP04076971A patent/EP1484404B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1992-12-30 DE DE69233667T patent/DE69233667T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1992-12-30 DK DK98200534T patent/DK0869181T3/da active
- 1992-12-30 ES ES04076971T patent/ES2277195T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1992-12-30 ES ES93902138T patent/ES2127808T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1992-12-30 ES ES98200534T patent/ES2227762T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1992-12-30 AT AT98200534T patent/ATE277183T1/de active
- 1992-12-30 PT PT04076971T patent/PT1484404E/pt unknown
- 1992-12-30 SG SG1996008033A patent/SG48217A1/en unknown
- 1992-12-30 CA CA002127091A patent/CA2127091C/en not_active Expired - Lifetime
- 1992-12-30 WO PCT/EP1992/003016 patent/WO1993013202A1/en active IP Right Grant
- 1992-12-30 EP EP98200534A patent/EP0869181B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1992-12-30 DE DE69233417T patent/DE69233417T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1992-12-30 AT AT04076971T patent/ATE346932T1/de active
- 1992-12-30 SG SG9901947A patent/SG93200A1/en unknown
- 1992-12-30 EP EP93902138A patent/EP0620850B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1992-12-30 DK DK04076971T patent/DK1484404T3/da active
- 1992-12-30 AT AT93902138T patent/ATE177145T1/de active
- 1992-12-30 AU AU33476/93A patent/AU3347693A/en not_active Abandoned
- 1992-12-30 DK DK93902138T patent/DK0620850T3/da active
- 1992-12-30 DE DE69228563T patent/DE69228563T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1992-12-30 JP JP51144793A patent/JP3394774B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1992-12-31 MX MX9207685A patent/MX9207685A/es unknown
- 1992-12-31 MY MYPI92002409A patent/MY108154A/en unknown
-
1993
- 1993-01-18 TW TW082100298A patent/TW239146B/zh active
- 1993-04-14 SA SA93130462A patent/SA93130462B1/ar unknown
-
1997
- 1997-03-25 US US08/823,120 patent/US6149919A/en not_active Expired - Lifetime
-
1999
- 1999-03-04 GR GR990400555T patent/GR3029556T3/el unknown
-
2002
- 2002-04-22 JP JP2002119970A patent/JP3408529B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| SA93130462B1 (ar) | طوافر mutants مزالة السمية مولدة للمناعة من سم الكوليرا ومن سم غير ثابت حراريا , تحضيرها واستحدامها لتحضير اللقاحات | |
| Pavelka Jr et al. | Identification of two genes, kpsM and kpsT, in region 3 of the polysialic acid gene cluster of Escherichia coli K1 | |
| DE69734110T2 (de) | Immunogene, nichtgiftige mutante des toxins lt-a aus e.coli | |
| EP0632727B1 (en) | Conjugates formed from heat shock proteins and oligo- or polysaccharides | |
| US7115730B1 (en) | Immunogenic detoxified mutant E. coli LT-A-toxin | |
| US7872114B2 (en) | Immunogenic detoxified mutants of cholera toxin | |
| CN101595219A (zh) | 作为编码抗原和蛋白毒素的核苷酸序列的载体的微生物，其制备方法和用途 | |
| CA2413045A1 (en) | Expression system | |
| EP1756149B1 (en) | Live, oral vaccine for protection against shigella dysenteriae serotype 1 | |
| Aho et al. | Characterization of a class II pilin expression locus from Neisseria meningitidis: evidence for increased diversity among pilin genes in pathogenic Neisseria species | |
| JP2000506002A (ja) | コレラトキシンの免疫原性無毒化変異体 | |
| EP1878439A2 (en) | Actinobacillus pleuropneumoniae virulence genes | |
| WO1998059065A1 (en) | Novel method of dna transfer into cells | |
| JP2002017371A (ja) | ヘパリチナーゼｔ−ｉｖのポリペプチド及びそれをコードするｄｎａ |