SA518391045B1 - تركيبات حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة لمركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج1 (PD-L1) iRNA وطرق استخدامها - Google Patents

تركيبات حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة لمركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج1 (PD-L1) iRNA وطرق استخدامها Download PDF

Info

Publication number
SA518391045B1
SA518391045B1 SA518391045A SA518391045A SA518391045B1 SA 518391045 B1 SA518391045 B1 SA 518391045B1 SA 518391045 A SA518391045 A SA 518391045A SA 518391045 A SA518391045 A SA 518391045A SA 518391045 B1 SA518391045 B1 SA 518391045B1
Authority
SA
Saudi Arabia
Prior art keywords
nucleotide
nucleotides
ribonucleic acid
strand
dsrna
Prior art date
Application number
SA518391045A
Other languages
English (en)
Inventor
جريجورى هينكل
Original Assignee
النيلام فارماسوتيكالز إنك
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by النيلام فارماسوتيكالز إنك filed Critical النيلام فارماسوتيكالز إنك
Publication of SA518391045B1 publication Critical patent/SA518391045B1/ar

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
    • C12N15/1138—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing against receptors or cell surface proteins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
    • C12N15/1135—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing against oncogenes or tumor suppressor genes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
    • A61K31/713—Double-stranded nucleic acids or oligonucleotides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
    • A61K47/549—Sugars, nucleosides, nucleotides or nucleic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
    • C12N15/1136—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing against growth factors, growth regulators, cytokines, lymphokines or hormones
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/87—Introduction of foreign genetic material using processes not otherwise provided for, e.g. co-transformation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/10—Type of nucleic acid
    • C12N2310/14—Type of nucleic acid interfering N.A.
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/31—Chemical structure of the backbone
    • C12N2310/314—Phosphoramidates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/31—Chemical structure of the backbone
    • C12N2310/315—Phosphorothioates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/32—Chemical structure of the sugar
    • C12N2310/321—2'-O-R Modification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/32—Chemical structure of the sugar
    • C12N2310/322—2'-R Modification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/33—Chemical structure of the base
    • C12N2310/335—Modified T or U
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/35—Nature of the modification
    • C12N2310/351—Conjugate
    • C12N2310/3515—Lipophilic moiety, e.g. cholesterol
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

يتعلق الاختراع الحالي بعوامل حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة double stranded ribonucleic acid (RNAi)، مثلا، عوامل حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة مزدوجة الجديلة، تستهدف جين المركب الترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 programmed cell death 1 ligand 1 (PD-L1)، وطرق استخدام عوامل حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة هذه لتثبيط التعبير عن جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 وطرق علاج خاضعين يعانون من اضطراب مرتبط بمركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1. شكل1

Description

تركيبات حمض رببونيكلوبك ثنائي الجديلة لمركب ترابطي 1 ‎cipal‏ الخلية المبرمج 1 ‎(PD-L1)‏ ‎iRNA‏ وطرق استخدامها ‎PROGRAMMED CELL DEATH 1 LIGAND 1 double stranded ribonucleic‏ ‎acid COMPOSITIONS AND METHODS OF USE THEREOF‏ الوصف الكامل خلفية الاختراع يحتوي الطلب الحالي على قوائم المتواليات التي تم تقديمها إلكترونيا في صيغة 85011 وبتم دمجها هنا بالإشارة إليها كليا. تسمى نسخة 85011 المذكورة؛ المكونة في 29 يوليو 2016 2 ‎121301-04220_SLtxt‏ ‎dana aug‏ 108003 بايت. مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 1 ‎(PD-L1) Programmed cell death 1 ligand‏ عبارة عن 0 بروتين عبر غشائي ‎transmembrane protein‏ له 290 حمض أميني ‎amino acid‏ من النوع ‎I‏ مرمزة بواسطة جين سى دى 274 00274 على كروموسوم فأري 19 19 ‎mouse chromosome‏ وكروموسوم بشري 9 9 ‎chuman chromosome‏ يتم تضمين التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 في غزو الاستجابات المناعية ‎immune responses‏ الاستجابات المناعية التي تم تضمينها في الإصابة المزمنة ‎Dis cchronic infection‏ إصابة فيروسية مزمنة ‎chronic viral infection‏ (شاملة؛ ‎lia‏ فيروس 5 العوز المناعي البشري ‎(HIV) human immunodeficiency virus‏ فيروس التهاب الكبد ب ‎Hepatitis‏ ‎B virus‏ (11317)» التهاب الكبد الفيروسي ج كنصا © ‎(HCV) Hepatitis‏ و فيروس تي- الليمفاوي البشري ‎«(HTLV) human T-lymphotropic virus‏ من بين غيرها)» إصابة بكتيرية مزمنة ‎chronic bacterial‏ ‎infection‏ (شاملة؛ مثلاء الملوية البوابية ‎Helicobacter pylori‏ من بين غيرها)؛ والإصابة الطفيلية المزمنة ‎chronic parasitic infection‏ (شاملة؛ ‎Sia‏ البلهارسيا المنسونية ‎«(Schistosoma mansoni‏ تم الكشف عن التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 في عدد من أنواع الأنسجة ‎tissues‏ ‏والخلايا شاملة الخلايا ‎«T-cells T‏ الخلايا 5 ‎«B-cells‏ البلاعم ‎macrophages‏ الخلايا المتغضنة ‎dendritic cells‏ والخلايا غير المكونة للدم ‎nonhematopoietic cells‏ شاملة ‎WAN‏ البطانية ‎endothelial cells‏ الخلايا الكبدية ‎LIAN ¢hepatocytes‏ العضلية ‎muscle cells‏ والمشيمة ‎.placenta‏
يتم تضمين التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 أيضا في قمع النشاط المناعي المضاد للورم ‎anti-tumor immune activity‏ تقوم ‎١‏ لأورام 5 بالتعبير عن مولدات ضد ‎ls antigens‏ يمكن التعرف عليها بواسطة الخلايا العائلة ‎chost T cells T‏ ولكن تكون التصفية المناعية ‎immunologic‏ ‎ahs clearance‏ نادرة. يرجع ‎ed‏ من هذا الفشل إلى القمع المناعي ‎immune suppression‏ بواسطة البيئة الدقيقة للورم ‎tumor microenvironment‏ يمثل التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 على العديد من الأورام مكون من هذه البيئة القمعية ‎suppressive milien‏ وتعمل مجتمعة مع إشارات مناعية قمعية إشارات ‎immunosuppressive signals‏ أخرى ‎٠‏ وقد تم توضيح أن التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 في الموقع على تشكيلة واسعة من ‎١‏ لأورام الصلبة ‎solid tumors‏ شاملة الثدي ‎<breast‏ الرثة ‎ung‏ القولون ‎ccolon‏ المبيض ‎covarian‏ الميلاتوما ‎cmelanoma‏ المثانة ‎«bladder‏ الكبد ‎diver 0‏ اللعابي ‎csalivary‏ المعدة ([5]00082؛ الأورام الدبقية ممصمتاع»؛ الغدة الدرقية ‎cthyroid‏ الغدة الصعترية الظهارية ‎thymic epithelial‏ الرأس والعنق ) ‎Brown JA et al., 2003. J. Immunol.‏ ‎Dong H et al. 2002. Nat. Med. 8:793—-800; Hamanishi J, et al. 2007. Proc. Natl.‏ :170:1257-66 ‎Acad. Sci. USA 104:3360-65; Strome SE ‏اه‎ al. 2003. Cancer Res. 63:6501-5; Inman BA et ‎al. 2007. Cancer 109:1499-505; Konishi J et al. 2004. Clin. Cancer Res. 10:5094-100;
Nakanishi J et al. 2007. Cancer Immunol. Immunother. 56:1173-82; Nomi T et al. 2007. Clin. 15
Cancer Res. 13:2151-57; Thompson RH er al. 2004. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 101:17174— ‎. (79; Wu C, Zhu Y, Jiang J, Zhao J, Zhang XG, Xu N. 2006. Acta Histochem. 108:19-24 ‏علاوة على ذلك تتم زيادة التعبير عن المستقبل بالنسبة لمركب ترايطى 1 لموت الخلية المبرمج 1 بروتين موت الخلية المبرمج 1 (المعروف ‎Lea‏ بموت الخلية المبرمج 1 1 ‎Programmed cell death‏ ‏0 (0-1© و سى دى 279 ‎(CD279‏ بشكل متحكم فيه على الخلايا الليمفاوية المرتشحة بالورم ‎tumor‏ ‎lymphocytes‏ 005108008 ونساهم هذا أيضا في القمع المناعي للورم ‎tumor immunosuppression‏ ‎(Blank © er al. 2003. J. Immunol. 171:4574-81)‏ بشكل أهم؛ تبين الدراسات المرتبطة بالتعبير عن ‏مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 على الأورام إلى ناتج مرض يبين أن التعبير عن مركب ترابطي ‏1 لموت الخلية المبرمج 1 مرتبط بقوة مع الخلايا السلف غير المفضلة في سرطان الكلى ‎kidney‏ ‎Hamanishi J ef al. 2007. Proc.) pancreatic ‏والبنكرياس‎ cgastric ‏المبيضء المثانة؛ الثدي» المعدة‎ 5
Natl. Acad. Sci. USA 104:3360-65; Inman BA ‏اه‎ al. 2007. Cancer 109:1499-505; Konishi J ‎et al. 2004. Clin. Cancer Res. 10:5094-100; Nakanishi J et al. 2007. Cancer Immunol.
Immunother. 56:1173-82; Nomi T et al. 2007. Clin. Cancer Res. 13:2151-57; Thompson RH ‎et al. 2004. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 101:17174-79; Wu ‏إن‎ Zhu Y, Jiang J, Zhao J, Zhang
‎(XG, Xu N. 2006. Acta Histochem. 108:19-24‏ علاوة على ذلك؛ تشير هذه الدراسات إلى أن المستويات الأعلى من التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 على الأورام يمكن أن تسهل تقدم مرحلة الورم وغزو البنية النسيجية ‎tissue structures‏ الأعمق. يمكن أن يلعب مسار موت الخلية المبرمج 1 ‎hoy‏ في الحالات الخبيثة الدموية ‎hematologic‏ ‏5 وعاهصدصدعتاد. يتم التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 على العديد من خلايا الميلوما ‎myeloma cells‏ ولكن ليس على خلايا البلازما الطبيعية ‎Liu J er al. 2007. ) normal plasma cells‏ ‎(Blood 110:296-304‏ يتم التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 على بعض خلايا الليمفوما 7 الأولية ‎cprimary 1 cell lymphomas‏ تحديدا الخلايا الليمفاوية ‎T‏ الكشمية الكبيرة ‎anaplastic‏ ‎(Brown JA er al., 2003. J.
Immunol. 170:1257-66( large cell 1 lymphomas‏ يتم التعبير عن 10 .موت الخلية المبرمج 1 بشكل كبير على الخلايا 7 للخلايا الليمفاوية ذات الأرومات الوعائية ‎cangioimmunoblastic lymphomas‏ وبتم التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 على شبكة الخلايا المتغضنة الجريبية ‎follicular dendritic cell network‏ ذات الصلة ) ‎Dorfman DM er al.‏ ‎Am.
J.
Surg.
Pathol. 30:802-10‏ .2006( في ليمفوما هودجكين ‎Hodgkin lymphoma‏ المسيطرة ‎LIAN‏ الليمفاوية العقدية ‎cnodular lymphocyte‏ تقوم الخلايا ‎T‏ المرتبطة بالخلايا الليمفاوية ‎lymphocytic‏ ‏5 أو ‎LAY‏ النسيجية ‎(L&H) histiocytic‏ بالتعبير عن موت الخلية المبرمج 1. قام تحليل المصفوفة الدقيقة باستخدام قراءة الجينات المستحثة بواسطة ترابط موت الخلية المبرمج 1 بالإشارة إلى أن الخلايا ‎T‏ ‏المرتبطة بالورم مستجيبة لإشارات موت الخلية المبرمج 1 في الموقع في ليمفوما هودجكين ( ‎Chemnitz‏ ‎(IM er al. 2007. Blood 110:3226-33‏ يتم التعبير عن موت الخلية المبرمج 1 ومركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 على ‎WAN‏ 7 سى دى 4 604 في خلية لوكيميا ‎cell leukemia‏ وليمفوما 1 0 بالغة تتوسط فيها فيروس تي- الليمفاوي البشري-1 ( :040667121 ‎Shimauchi 1 er al. 2007. Int.
J.‏ 2585-0). هذه الخلايا الورمية ‎tumor cells‏ منخفضة الاستجابة لإشارات تى سى ‎TCR‏ ‏تبين الدراسات في النماذج الحيوانية أن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 على الأورام يقوم بتثبيط تنشيط الخلية 7 وتحليل الخلايا الورمية وفي بعض الحالات تؤدي إلى زيادة موقت الخلية 7 الانتقائية للورم )-1089 ‎Dong H et al. 2002. Nat.
Med.8:793-800; Hirano F et al. 2005. Cancer Res.65:‏ 96). يمكن أن يقوم أيه بى سى أس ‎APCs‏ المرتبط بالورم أيضا باستخدام مسار موت الخلية المبرمج 1: مركب ترابطي لموت الخلية المبرمج ‎(PD-L) Programmed cell death ligand‏ للتحكم في استجابات
الخلية ‎T‏ المضادة للورم ‎Lantitumor 1 cell responses‏ تتم زيادة التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 بشكل منتظم على مجموعة من الخلايا المتغضنة ‎(DCs) dendritic cells‏ النقوية المرتبطة بالورم بواسطة عوامل البيئة الورمية ‎Curiel TJ ef al. 2003. ( tumor environmental factors‏ ‎(Nat.
Med. 9:562-67‏ تقوم الخلايا المتغضنة البلازموية ‎Plasmacytoid dendritic cells‏ في العقدة الليمفاوية الخارجة من الورم ‎tumor-draining lymph node‏ ميلاتوما بى 16 ‎B16 melanoma B16‏ بالتعبير عن أى دى أوه ‎(IDO‏ والتي تقوم بقوة بتنشيط النشاط القامع للخلايا ‎T‏ المنظمة ‎regulatory T‏ ‎cells‏ وقد تطلب النشاط القمعي للخلايا 7 المنظمة التي تم علاجها ب 100 تلامس الخلية مع الخلايا
المتغضنة معبرة عن ‎(Sharma MD et al. 2007. J.
Clin.
Invest. 1 17:2570-82) IDO‏ . بالتالي؛ تكون هناك حاجة في المجال إلى علاجات فعالة للأمراض المرتبطة بمركب ترابطي 1 لموت
0 الخلية المبرمج 1؛ ‎Jie‏ مرض معدي ‎cinfectious disease‏ مثل مرض معدي بين خلوي مزمن ‎chronic‏ ‎Sle intracellular infectious disease‏ مرض فيروسي ‎Sie cviral disease‏ التهاب الكبد ‎hepatitis‏ ‏«مناء0 أو إصابة بكتيرية؛ ‎Sli‏ التدرن الرثئوي ‎¢tuberculosis infection‏ والسرطان»؛ ‎Sia‏ السرطان الكبدي ‎chepatic cancer‏ مثلا؛ كارسينوما ‎LIAL‏ الكبدية ‎-hepatocellular carcinoma‏ الوصف العام للاختراع
5 يقدم الاختراع الحالي تركيبات حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة ‎double stranded ribonucleic acid‏ ‎(RNA)‏ والتي تؤثر على الإسكات المستحث لمعقد ‎induced silencing complex‏ بالحمض النووي الرربوزي ‎(RNA) Ribonucleic acid‏ شق يتوسط فيه ‎(RISC)‏ لمستنسخات الحمض النووي الريبوزي لجين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1. يمكن أن يكون جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 موجود داخل خلية؛ ‎Sle‏ خلية في خاضع؛ ‎Jie‏ إنسان.
0 بالتالي» في أحد الجوانب»؛ يقدم الاختراع عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة ‎double stranded‏ ‎(RNAI) ribonucleic acid‏ لتثبيط التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1؛ حيث يتضمن حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة جديلة حسية ‎sense strand‏ وجديلة مضادة للحس ‎cantisense strand‏ حيث الجديلة الحسية يتضمن على الأقل 15 نيكلوتيد ‎nucleotides‏ متجاور تختلف بمالا يزيد عن 3 نيكلوتيدات عن متوالية النيكلوتيد لمتوالية بهوية رقم:1 وتتضمن الجديلة المضادة للحس على الأقل 15
‎assis 25‏ متجاور تختلف بمالا يزيد عن 3 نيكلوتيدات عن متوالية النيكلوتيد لمتوالية بهوية رقم:2.
في نماذج معينة؛ تتضمن الجدائل الحسية ‎sense strands‏ والجدائل المضادة ‎antisense strands (wall‏ متواليات مختارة من أي من المتواليات في الجدول 3. في نماذج أخرى؛ تتضمن الجدائل الحسية والجدائل
المضادة للحس متواليات المختارة من أي من المتواليات في الجدول 5. في أحد ‎clad)‏ يقدم الاختراع حمض رببونيكلويك ثتائي الجديلة ‎double stranded ribonucleic acid‏ ‎(dsRNA) 5‏ عامل لتثبيط التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1؛ حيث يتضمن حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة جديلة حسية وجديلة مضادة للحس؛ تتضمن الجديلة المضادة للحس منطقة تكامل ‎region of complementarity‏ والتي تتضمن على الأقل 15 نيكلوتيد متجاور تختلف بمالا يزيد عن 3 نيكلوتيدات عن أي من المتواليات المضادة للحس ‎antisense sequences‏ المذكورة في الجدول 3. في نماذج معينة؛ تتضمن الجدائل الحسية والجدائل المضادة للحس متواليات المختارة من أي من المتواليات
0 في الجدول. 5 في نماذج معينة؛ يتضمن حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة نيكلوتيد معدل ‎modified nucleotide‏ واحد على الأقل. في بعض النماذج؛ تتضمن كل من النيكلوتيدات من الجديلة الحسية وكل من نيكلوتيدات الجديلة المضادة للحس أساسا تعديل. في بعض النماذج؛ تتضمن كل من النيكلوتيدات من الجديلة الحسية وكل من نيكلوتيدات الجديلة المضادة للحس تعديل.
في أحد الجوانب» يقدم الاختراع الحالي عامل حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة لتثبيط التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1؛ حيث تتضمن عوامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة جديلة حسية وجديلة مضادة للحس؛ حيث الجديلة الحسية يتضمن على الأقل 15 نيكلوتيد متجاور تختلف بمالا يزيد عن 3 نيكلوتيدات عن أي من نيكلوتيدات 3243-3221 372-351 641-618« 639-618 619- 640« 641-620« 1115-1093 1114-1093 1115-1094ء 1188-1167« 1314-1293
1539-1518« 2124-2103 2261-2220 2241-2220 2261-2240 2680-2648 2669-2648 2679-2658 2680-2659 3164-3143 3219-3198 3242-3221 أو 3243-3222 لمتوالية النيكلوتيد لمتوالية بهوية رقم:1 وتتضمن الجديلة المضادة للحس على الأقل 15 نيكلوتيد متجاور تختلف بمالا يزيد عن 3 نيكلوتيدات عن الجزءِ المكمل ‎complementary portion‏ لمتوالية النيكلوتيد لمتوالية بهوية رقم:2؛ وحيث يتضمن عامل حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة نيكلوتيد معدل واحد
5 على الأقل.
في جانب آخرء يقدم الاختراع الحالي عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة لتثبيط التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1؛ حيث تتضمن عوامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة جديلة حسية وجديلة مضادة للحس؛ تتضمن الجديلة المضادة للحس منطقة تكامل والتي تتضمن على الأقل 15 نيكلوتيد متجاور تختلف بمالا يزيد عن 3 نيكلوتيدات عن أي من المتواليات المضادة للحس في أي من المزدوجات أيه دى-67635 67635-طه أيه دى-67637 ‎(AD-67637‏ أيه دى-67658 ‎(AD-67658‏ أيه دى - 2 67632-طه أيه دى-67629 ‎(AD-67629‏ أيه دى-67631 ‎(AD-67631‏ أيه دى-67633 ‎(AD-67633‏ أيه دى-67643 ‎(AD-67643‏ أيه دى-67653 ‎(AD-67653‏ أيه دى-67640 ‎AD-‏ ‏0م أيه دى-67650 67650-طيى أيه دى-67676 67676-صهيى أيه دى-67661 ‎«AD-67661‏ ‏أيه 52 —67667 ‎<AD-67667‏ أيه دى-67655 0-67655ه» أيه دى-67672 ‎(AD-67672‏ أيه دى - 0 67659 67659-طيى أيه دى-67673 ‎(AD-67673‏ أيه دى-67664 ‎(AD-67664‏ أيه دى -67662 0-2ه» أيه دى-67660 ‎(AD-67660‏ أيه دى-67656 ‎(AD-67656‏ أيه دى-67628 ‎AD-‏ ‏8 أيه دى-67647 67647-طه أيه دى -67626 ‎(AD-67626‏ أو أيه دى-67645 ‎AD-67645‏ ‏في أحد النماذج؛ تتضمن الجدائل الحسية والمضادة للحس متواليات النيكلوتيد المختارة من المجموعة المكونة من أي من متواليات النيكلوتيد في أي من المزدوجات 80-67635؛ ‎«AD-67658 <AD-67637‏ 5 67632-صى 67629-صد 67631-صضه ‎<AD-67633‏ 67643-طه ‎AD- (AD-67640 ¢AD-67653‏ ‎«<AD-67661 «AD-67676 «67650‏ 67667-طهى ‎«AD-67655‏ 671672-طه 67659-طه 67673-طى 4-طه 67662-طفى ‎<AD-67656 <AD-67660‏ 67628-طه ‎<AD-67626 <AD-67647‏ أو ‎AD-‏ ‏67645. ‏في أحد الجوانب؛ يقدم الاختراع عامل حمض رببونيكلوبك ثنائي الجديلة لتثبيط التعبير عن مركب ترابطي 0 1[ لموت الخلية المبرمج 1؛ حيث يحتوي عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة على جديلة حسية وجديلة مضادة للحس تكون منطقة مزدوجة الجديلة؛ حيث الجديلة الحسية يتضمن على الأقل 15 نيكلوتيد متجاور تختلف بمالا يزيد عن 3 نيكلوتيدات عن متوالية النيكلوتيد لمتوالية بهوية رقم:1 وتتضمن الجديلة المضادة للحس على الأقل 15 نيكلوتيد متجاور تختلف بمالا يزيد عن 3 نيكلوتيدات عن متوالية النيكلوتيد لمتوالية بهوية رقم:2؛ حيث كل من النيكلوتيدات من الجديلة الحسية أساسا وكل من نيكلوتيدات الجديلة المضادة 5 للحس أساسا ‎are‏ نيكلوتيدات معدلة ‎modified nucleotides‏ وحيث تترافق الجديلة الحسية مع مركب ترابطي ‎gale‏ عند الطرف 3”.
في أحد الجوانب؛ يقدم الاختراع الحالي عوامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة مزدوجة الجديلة لتثبيط التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1؛ ‎(Ally‏ تتضمن جديلة حسية وجديلة مضادة للحس تكون منطقة مزدوجة الجديلة ‎Gus double stranded region‏ الجديلة الحسية يتضمن على الأقل 15 نيكلوتيد متجاور تختلف بمالا يزيد عن 3 نيكلوتيدات عن نيكلوتيدات 3243-3221 372-351 618- 641 639-618« 640-619 641-620» 1115-1093 1114-1093« 1115-1094 1167- 8+ 1314-1293 1539-1518 2124-2103 2261-2220 2241-2220 2240- 2261 2680-2648 2669-2648 2679-2658 2680-2659 3164-3143 3198- 3242-3219¢3221( أو 3243-3222 لمتوالية النيكلوتيد لمتوالية بهوية رقم:1 وتتضمن الجديلة المضادة للحس على الأقل 15 نيكلوتيد متجاور تختلف بمالا يزيد عن 3 نيكلوتيدات عن الموضع المناظر
0 المكمل لمتوالية النيكلوتيد لمتوالية بهوية رقم:2 بحيث تكون الجديلة المضادة للحس مكملة ل 15 نيكلوتيد على الأقل متجاور تختلف بمالا يزيد عن 3 نيكلوتيدات في الجديلة الحسية. في نماذج معينة؛ الجديلة الحسية يتضمن على الأقل 15 نيكلوتيد متجاور تختلف بمالا يزيد عن 3 نيكلوتيدات عن نيكلوتيدات 3243-3221 372-351 1115-1093« 1114-1093 1094- 5+ 1188-1167ء 1314-1293 1539-1518« 2124-2103 2261-2220 2220-
5 2241 2261-2240 2680-2648 2669-2648 2679-2658 2680-2659 3143- 3164( 3219-3198( 3242-3221 أو 3243-3222 لمتوالية النيكلوتيد لمتوالية بهوية رقم:1 وتتضمن الجديلة المضادة للحس على الأقل 15 نيكلوتيد متجاور تختلف بمالا يزيد عن 3 نيكلوتيدات عن الموضع المناظر المكمل لمتوالية النيكلوتيد لمتوالية بهوية رقم:2 بحيث تكون الجديلة المضادة للحس مكملة ل 15 نيكلوتيد على الأقل متجاور تختلف بمالا يزيد عن 3 نيكلوتيدات في الجديلة الحسية.
0 في نماذج معينة؛ الجديلة الحسية يتضمن على الأقل 15 نيكلوتيد متجاور تختلف بمالا يزيد عن 3 نيكلوتيدات عن نيكلوتيدات 3243-3221( 1115-1093 1114-1093 1115-1094« 3221- 2 أو 3243-3222 لمتوالية النيكلوتيد لمتوالية ‎diggs‏ رقم:1 وتتضمن الجديلة المضادة للحس على الأقل 15 نيكلوتيد ‎slate‏ تختلف بمالا يزيد عن 3 نيكلوتيدات عن الموضع المناظر المكمل لمتوالية النيكلوتيد لمتوالية بهوية رقم:2 بحيث تكون الجديلة المضادة للحس مكملة ل 15 نيكلوتيد على الأقل متجاور
5 تختلف بمالا يزيد عن 3 نيكلوتيدات في الجديلة الحسية.
في جانب ‎AT‏ يقدم الاختراع الحالي عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة لتثبيط التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1؛ حيث تتضمن عوامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة مزدوجة الجديلة جديلة حسية وجديلة مضادة للحس تكون منطقة مزدوجة الجديلة؛ حيث الجديلة الحسية يتضمن على الأقل نيكلوتيد متجاور تختلف بمالا يزيد عن 3 نيكلوتيدات عن أي من نيكلوتيدات 3243-3221« 351- 5 372 641-618 639-618» 640-619» 641-620 1115-1093« 1114-1093« 1094- 1115« 1188-1167« 1314-1293« 1539-1518 2124-2103 2261-2220 2220— 2241 2261-2240 2680-2648 2669-2648 2679-2658 2680-2659 3143- 3164 3219-3198 3242-3221 أو 3243-3222 لمتوالية النيكلوتيد لمتوالية بهوية رقم:1 وتتضمن الجديلة المضادة للحس المذكورة على الأقل 15 نيكلوتيد متجاور تختلف بمالا يزيد عن 3 0 نيكلوتيدات عن ‎gall‏ المكمل لمتوالية النيكلوتيد لمتوالية بهوية )228( حيث ‎(ging‏ أساسا كل من نيكلوتيدات الجديلة الحسية المذكورة وكل من نيكلوتيدات الجديلة المضادة للحس أساسا المذكورة على تعديلات نيكلوتيد؛ وحيث تترافق الجديلة الحسية مع مركب ترابطي ‎Gale‏ عند الطرف 3". في نماذج معينة؛ يتم تعديل كل من النيكلوتيدات من الجديلة الحسية أساسا أو كل من نيكلوتيدات الجديلة المضادة للحس أساسا عبارة عن نيكلوتيدات معدلة؛ أو كل من ‎clas ols‏ كل من الجدائل أساسا؛ وحيث 5 تترافق الجديلة الحسية مع مركب ترابطي ‎Gale‏ عند الطرف ‎U3‏ ‏في أحد الجوانب» يقدم الاختراع الحالي عوامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة مزدوجة الجديلة لتثبيط التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1؛ والتي تتضمن جديلة حسية وجديلة مضادة للحس تكون منطقة مزدوجة الجديلة؛ حيث الجديلة الحسية يتضمن على الأقل 15 نيكلوتيد متجاور من نيكلوتيدات 3243-3221 372-351 641-618 639-618 640-619 641-620 1115-1093 1114-1093« 1115-1094« 1188-1167« 1314-1293« 1539-1518« 2124-2103 2261-2220 2241-2220 2261-2240 2680-2648 2669-2648 2679-2658 2680-2659 3164-3143 3219-3198 3242-3221 أو 3243-3222 لمتوالية النيكلوتيد لمتوالية بهوية رقم: 1 وتتضمن الجديلة المضادة للحس على الأقل 15 نيكلوتيد متجاور من الموضع المناظر المكمل لمتوالية النيكلوتيد لمتوالية بهوية رقم:2 بحيث تكون الجديلة المضادة للحس مكملة ل 15 نيكلوتيد 5 على الأقل متجاور في الجديلة الحسية.
في نماذج معينة؛ تتضمن العوامل جديلة حسية وجديلة ‎alias‏ للحس تكون منطقة مزدوجة الجديلة؛ حيث الجديلة الحسية يتضمن على الأقل 15 نيكلوتيد متجاور من نيكلوتيدات 3243-3221 372-351 1115-1093« 1114-1093ء 1115-1094ء 1188-1167 1314-1293 1539-1518« 2124-2103 2261-2220 2241-2220 2261-2240 2680-2648 2669-2648 2679-2658 2680-2659 3164-3143 3219-3198 3242-3221 أو 3243-3222 لمتوالية النيكلوتيد لمتوالية بهوية رقم:1 وتتضمن الجديلة المضادة للحس على الأقل 15 نيكلوتيد متجاور من الموضع المناظر المكمل لمتوالية النيكلوتيد لمتوالية بهوية رقم:2 بحيث تكون الجديلة المضادة للحس مكملة ل 15 نيكلوتيد على الأقل متجاور في الجديلة الحسية. في نماذج معينة؛ تتضمن العوامل جديلة حسية وجديلة ‎alias‏ للحس تكون منطقة مزدوجة الجديلة؛ حيث 0 الجديلة الحسية يتضمن على الأقل 15 نيكلوتيد متجاور من نيكلوتيدات 3243-3222 1115-1093 1114-1093« 1115-1094» 3243-3221 أو 3242-3221؛ لمتوالية النيكلوتيد لمتوالية بهوية رقم:1 وتتضمن الجديلة المضادة للحس على الأقل 15 نيكلوتيد متجاور من الموضع المناظر المكمل لمتوالية النيكلوتيد لمتوالية بهوية رقم:2 بحيث تكون الجديلة المضادة للحس مكملة ل 15 نيكلوتيد على الأقل متجاور في الجديلة الحسية. في نماذج معينة؛ كل من النيكلوتيدات من الجديلة الحسية أساسا ‎Sle‏ ‏5 عن نيكلوتيدات معدلة. في نماذج معينة؛ كل من نيكلوتيدات الجديلة المضادة للحس أساسا عبارة عن نيكلوتيدات معدلة. في نماذج معينة؛ يتم تعديل كل من نيكلوتيدات كل من الجدائل أساسا. في النماذج المفضلة؛ تترافق الجديلة الحسية مع مركب ترابطي ‎Gale‏ عند الطرف ‎U3‏ ‏في نماذج معينة؛ تتضمن الجديلة الحسية والجديلة المضادة للحس منطقة تكامل والتي تتضمن على الأقل 5 نيكلوتيد متجاور تختلف بمالا يزيد عن 3 نيكلوتيدات عن أي من المتواليات المضادة للحس المذكورة 0 في أي من الجداول 3 و5. ‎Die‏ في نموذج معين؛ تتضمن الجديلة الحسية والجديلة المضادة للحس منطقة تكامل والتي تتضمن على الأقل 15 نيكلوتيد متجاور تختلف بمالا يزيد عن 3 نيكلوتيدات عن أي من المتواليات المضادة للحس من المزدوجات 67635-م» ‎AD- ¢AD-67632 «AD-67658 «AD-67637‏ ‎«AD-67631 ¢67629‏ 67633-ميى 67643-طهى ‎«AD-67653‏ 67640-تهى 67650-ته ‎«(AD-67676‏ ‏1-طه ‎<AD-67672 <AD-67655 «AD-67667‏ 67659-طه ‎AD- (AD-67664 «AD-67673‏ ‎<AD-67626 <AD-67647 <AD-67628 <AD-67656 <AD-67660 67662 5‏ أو ‎.AD-67645‏ في نماذج
معينة؛ تتضمن الجديلة الحسية والجديلة المضادة للحس منطقة تكامل والتي تتضمن على الأقل 15 نيكلوتيد متجاور وفقا لأي من المتواليات المضادة للحس من المزدوجات السابقة. في بعض النماذج؛ كل من النيكلوتيدات من الجديلة الحسية وكل من نيكلوتيدات الجديلة المضادة للحس تعديل. في أحد النماذج؛ يتم اختيار واحد على الأقل من النيكلوتيدات المعدلة من المجموعة المكونة من نيكلوتيد ديوكسي ع80»7-0016000ل» نيكلوتيد ديوكسي -ثيمين عند الطرف 3" ‎3’-terminal deoxy-‏ ‎¢(dT) thymine‏ نيكلوتيد 0-72-ميثيل معدل ‎¢2'-O-methyl modified nucleotide‏ نيكلوتيد 2"-فلورو معدل ‎modified nucleotide‏ 2-00010» نيكلوتيد 2 -ديوكسي -معدل ‎«2'-deoxy-modified nucleotide‏ نيكلوتيد مغلق ‎cJocked nucleotide‏ نيكلوتيد غير مغلق ‎cunlocked nucleotide‏ نيكلوتيد مقيد ‎restricted‏ ‎nucleotide‏ توافقياء نيكلوتيد إيثيل مقيد ‎constrained ethyl nucleotide‏ نيكلوتيد لاخطوي ‎abasic‏ ‎cnucleotide 0‏ نيكلوتيد 2”-أمينو معدل ‎nucleotide‏ 01001560-مصنة-”2» نيكلوتيد 2:-0-أليل معدل -:2 ‎«O-allyl-modified nucleotide‏ نيكلوتيد 2:-©-ألكيل معدل ‎«2’-C-alkyl-modified nucleotide‏ نيكلوتيد 2 -هيدروكس لي معدل ‎2°-hydroxly-modified nucleotide‏ نيكلوتيد 2 -ميثوكسي إيثيل معدل ‎modified nucleotide‏ الإطاء«مطا-”2؛ نيكلوتيد 2:-0-ألكيل معدل ‎2’-O-alkyl-modified‏ ‎nucleotide‏ نيكلوتيد مورفولينو ‎nucleotide‏ 00نا00100» فوسفوراميدات 010501010010261 نيكلوتيد 5 يتضمن قاعدة غير طبيعية؛ نيكلوتيد تترا هيدرو بيران معدل ‎ctetrahydropyran modified nucleotide‏ نيكلوتيد 165-أنهيدرو هكسيتول معدل ‎¢1,5-anhydrohexitol modified nucleotide‏ نيكلوتيد سيكلو هكسينيل معدل ‎modified nucleotide‏ اسدت»عدماءن»؛ نيكلوتيد يتضمن مجموعة فوسفورو ثيوات ‎«phosphorothioate‏ نيكلوتيد يتضمن مجموعة ميثيل فوسفونات ‎cmethylphosphonate‏ نيكلوتيد يتضمن 5 -فوسفات ع101م5”7-0105؛ ونيكلوتيد يتضمن محاكي 5" -فوسفات ‎mimic‏ ع01م57-0105. في نموذج ‎OAT 20‏ تتضمن النيكلوتيدات المعدلة متوالية قصيرة من نيكلوتيدات ديوكسي -ثيمين عند الطرف 3". في نماذج معينة؛ يتم تعديل كل من النيكلوتيدات من الجديلة الحسية أساسا. في نماذج معينة؛ يتم تعديل كل من نيكلوتيدات الجديلة المضادة للحس أساسا. في نماذج معينة؛ يتم تعديل كل من النيكلوتيدات أساسا لكل من الجديلة الحسية والجديلة المضادة للحس. في نماذج معينة؛ يتضمن المزدوج جديلة مضادة للحس معدلة مقدمة في الجدول 5. في نماذج معينة؛ 5 يتضمن المزدوج جديلة حسية معدلة مقدمة في الجدول 5. في نماذج معينة؛ يتضمن المزدوج مزدوج معدل مقدمة في الجدول 5.
— 2 1 — في نماذج معينة؛ منطقة التكامل بين الجديلة المضادة للحس ويبلغ الهدف على الأقل 17 نيكلوتيدات فى الطول. مثلاء منطقة التكامل بين الجديلة المضادة للحس وببلغ الهدف 19 إلى 21 نيكلوتيد في الطول؛ مثلاء تبلغ منطقة التكامل 21 نيكلوتيد في الطول. في النماذج المفضلة؛ تبلغ كل جديلة مالا يزيد عن 30 نيكلوتيد في الطول. في بعض النماذج؛ جديلة واحدة على الأقل يتضمن ‎gx‏ معلق 3" ‎overhang‏ 3 من نيكلوتيد 1 على الأقل» ‎Ole‏ جديلة واحدة على الأقل يتضمن ‎eda‏ معلق 3" من على الأقل 2 نيكلوتيدات. في العديد من النماذج» يتضمن عامل حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة أيضا مركب ترابطي. يمكن ترافق المركب الترابطي مع الطرف 3" من الجديلة الحسية لعامل حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة. يمكن أن يكون المركب الترابطي عبارة عن مشتق 17-أسيتيل جالاكتوز أمين ‎(GalNAc) N-acetylgalactosamine‏ شاملة ولكنها غير مقيدة 2 المي ‎Ho‏ ‏ب ‎HO‏ ‎AcHN NY T‏ ‎Ho OH o‏ مله 1 1 0 2 ‎HO <٠.‏ رحد وا ا 0 0 ‎Ho OH‏ رح و يرصح م 0 ‎HO‏ ‎AcHN Mh H‏ : عامل حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة مثالي مترافق مع المركب الترابطي المبين في المخطط التالي: 9 0— ممم - < ماد > كت خخ ص ‎or‏ ‎LS‏ ‏1 الهم ‎Ho‏ ‎H H 0‏ 0 ‎H To ry NN ¢‏ ‎Ho LOH os Hh‏ ‎N‏ 4 ررحي 1 ري 1 ‎H Ronn‏ 0 رٍِ 0 0 ‎re on‏ 9 ‎Sempre‏ ‏5 وء حيث ‎X‏ عبارة عن © أو 5. في أحد النماذج؛ ‎X‏ عبارة عن 0. في نماذج معينة؛ يمكن أن يكون المركب الترابطي عبارة عن شق كوليسترول ‎cholesterol moiety‏
في نماذج معينة؛ تتضمن منطقة التكامل واحد من المتواليات المضادة للحس وفقا لأي من الجدول 3 والجدول 5. في نموذج ‎«HAT‏ تتكون منطقة التكامل من واحد من المتواليات المضادة للحس وفقا لأي من الجدول 3 والجدول 5. في جانب آخرء يقدم الاختراع عامل حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة قادر على تثبيط التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1؛ حيث يحتوي عامل حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة على جديلة حسية مكملة لجديلة مضادة للحس؛ حيث تتضمن الجديلة المضادة للحس منطقة مكملة لجز من الحمض النووي الريبوزي المرسل ‎(mRNA) messenger Ribonucleic acid‏ يرمز مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 حيث تبلغ كل جديلة حوالي 14 إلى حوالي 30 نيكلوتيد في الطول؛ حيث عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة مزدوج الجديلة | وذ ‎represented‏ بواسطة. الصيغة ‎(I)‏ ‏0 الحسية: 3 ‎Y 7 7 No 2 Z Z) Ny - ng‏ م ‎np Na «X X X)‏ 5 المضادة للحس: ‏ 5 ‎(IM) 3 op N-XXXW-No-Y'Y'Y-N-(ZZZ WN ng‏ حيث: ‎¢i‏ ز» ‎ck‏ و[ كل منها بشكل مستقل عبارة عن 0 أو 1؛ ‎q'5¢q op” p‏ كل منها بشكل مستفل عبارة عن 6-0؛ كل ‎Ny's No‏ تمثل بشكل مستقل متوالية أوليجو نيكلوتيد ‎oligonucleotide‏ يتضمن 25-0 نيكلوتيد والذي يمكن أن يكون معدل أو غير معدل أو توليفات مما سبق؛ تتضمن كل متوالية اثتين على 5 الأقل من نيكلوتيدات معدلة بشكل مختلف؛ كل ‎Ny 5 Np‏ تمثل بشكل مستقل متوالية أوليجو نيكلوتيد يتضمن 10-0 نيكلوتيدات والذي يمكن أن يكون معدل أو غير معدل أو توليفات مما سبق؛ كل ‎ng ony! Ny‏ ‎anys‏ كل منها يمكن أو يمكن ألا يكون موجوداء؛ ‎Sidi‏ بشكل مستقل نيكلوتيد معلق ‎¢overhang nucleotide‏ ‎(XXX‏ للكت 7272 ‎(XXX!‏ الالال و/2722 كل ‎Wie‏ يمثل بشكل مستقل مستحث واحد من ثلاثة تعديلات متطابقة على ثلاثة نيكلوتيدات متتابعة؛ تختلف التعديلات على ‎Np‏ عن التعديل على ‎Y‏ وتختلف 0 التعديلات على ‎Ny‏ عن التعديل على 'لا؛ وحيث تترافق الجديلة الحسية مع المركب الترابطي الواحد على الأقل. في نماذج معينة؛ 1 عبارة عن 0؛ ز ‎Ble‏ عن 0؛ ز عبارة عن 1؛ ز عبارة عن 1؛ كل من ‎joi‏ عبارة عن 0؟؛ أو كل من ‎joi‏ عبارة عن 1. في نموذج ‎k AT‏ عبارة عن 0؛ 1 عبارة عن 0؛ ‎k‏ عبارة عن 1؛ 1 عبارة عن 1؛ كل من »ا و1 عبارة عن 0؛ أو كل من ‎Lok‏ عبارة عن 1. في نموذج ‎Ble XXX « Al‏ 5 عن مكملة ل ‎YYY XXX‏ مكملة ل ‎Y'Y'Y'‏ و7227 مكملة ل /272/2. في نموذج ‎Lai «AT‏ مستحث ‎YYY‏ عند أو بالقرب من موقع ‎cleavage site Gall‏ من الجديلة الحسية. في نموذج آخرء؛ ‎Lai‏ مستحث
‎'Y'Y'Y‏ عند المواضع 11؛ 12 و13 من الجديلة المضادة للحس من الطرف 5”. في أحد النماذج؛ الطرف 7" عبارة عن 0-72-ميثيل . ‎Sia‏ يمكن تمثيل الصيغة ‎(III)‏ بواسطة الصيغة (م111): الحسية: '3 ‎-Na-Y YY -Na-ng‏ مد 5 المضادة للحس: 5 ‎ng‏ صملا ‎(Ia) 3' np-Ne- Y'Y'Y'-‏ في نموذج آخرء يتم تمثيل الصيغة (111) بواسطة الصيغة (1115): الحسية: 3 ‎-Np-ZZZ-Ng-ng‏ لا لا لتيل مد 5 المضادة للحس؛ 5 ‎(IIb) 3' np-Na- Y'Y'Y'-Nb-Z'Z'Z"- 11.- ng‏ حيث كل ‎Np‏ وا:1 تمثل بشكل مستقل متوالية أوليجو نيكلوتيد يتضمن 5-1 نيكلوتيدات معدلة. 0 بشكل بديل؛ يمكن تمثيل الصيغة ‎(IMI)‏ بواسطة الصيغة ‎(Ie)‏ ‏الحسية: 5 ‎np‏ جيل 6 ل ‎X‏ جملا ‎Bing - Nam YY Y=‏ المضادة للحس: 5 وصصيلا ‎(IIc) 3' ny-Na- XX'X'-Np- Y'Y'Y'-‏ حيث كل ‎Np‏ وا:1 تمثل بشكل مستقل متوالية أوليجو نيكلوتيد يتضمن 5-1 نيكلوتيدات معدلة. ‎clad‏ يمكن تمثيل الصيغة (111) بواسطة الصيغة (1110): 5 الحسية: 3 ود - 2727-11 و ل لا ‎-Na-X XX-Np-Y‏ مد 5 المضادة للحس: 5 ود صما ‎np-Na- XX'X'- No-Y'Y'Y'No-Z'Z'Z'-‏ '3 (1110) ‎Cus‏ كل ‎Np‏ و10 تمثل بشكل مستقل متوالية أوليجو نيكلوتيد يتضمن 5-1 نيكلوتيدات معدلة وكل ‎Na‏ ‏و10 تمثل بشكل مستقل متوالية أوليجو نيكلوتيد يتضمن 10-2 نيكلوتيدات معدلة. في نموذج معين» تبلغ المنطقة مزدوجة الجديلة 30-15 زوج نيكلوتيد في الطول. مثلاء يمكن أن تكون 0 المنطقة مزدوجة الجديلة عبارة عن 23-17 زوج نيكلوتيد في الطول. يمكن أن تكون المنطقة مزدوجة الجديلة عبارة عن 25-17 زوج نيكلوتيد في الطول. يمكن أن تكون المنطقة مزدوجة الجديلة ‎Ble‏ عن 27-3 زوج نيكلوتيد في الطول. يمكن أن تكون المنطقة مزدوجة الجديلة عبارة عن 21-19 زوج نيكلوتيد في الطول. يمكن أن تكون المنطقة مزدوجة الجديلة عبارة عن 23-21 زوج نيكلوتيد في الطول. في نماذج معينة؛ تتضمن كل جديلة 30-15 نيكلوتيد. في نماذج أخرى؛ تتضمن كل جديلة 30-19 5 تيكلوتيد.
— 5 1 — يمكن اختيار التعديلات على النيكلوتيدات من المجموعة شاملة؛ ولكنها غير مقيدة ب» أحماض نووية مغلقة ‎(LNA) locked nucleic acids‏ اتش أن أيه ‎«CeNA HNA‏ 2 -ميثوكسي ‎«2"-methoxyethyl Jbl‏ 0-2 -ألكيل ‎2'-O-alkyl‏ 0-2-أليل ‎«2"-0-allyl‏ 2*-©- أليل ‎«2'-C- allyl‏ 2'-فلورو ‎«2'-fluoro‏ ‏2 -ديوكسي ‎2'-deoxy‏ 2”-هيدروكسيل ال170:0«7-”2؛ وتوليفات مما سبق. في نموذج آخرء التعديلات على النيكلوتيدات ‎are‏ تعديلات 0-2-ميثيل الإطاع-2-0 أو 2 -فلورو ‎2'-fluoro‏ ‏في نماذج ‎cine‏ المركب الترابطي عبارة عن واحد أو أكثر من مشتقات 87-أسيتيل جالاكتوز أمين ملحقة خلال رابط أحادي التكافؤ ‎monovalent linker‏ أو رابط متفرع ‎branched linker‏ ثنائي أو ثلاثي التكافؤ. في أحد النماذج» المركب الترابطي ‎She‏ عن ‎Ho (OH‏ ‎Ko‏ رخ ‎HO ~~‏ ‎AcHN MY T‏ ‎Ho (OH o‏ ‎SoHo‏ ‎HO ~~‏ 4 رح صصح ‎pvr‏ ‏0 0 0 حت و رصح ام 0 ‎HO‏ ‎AcHN MT H H‏ 0 . يمكن أن يكون المركب الترابطي ملحق بالطرف “3 من الجديلة الحسية. تم توضيح بنية مثالية على عامل حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة مترافق مع المركب الترابطي في المخطط التالى ‎NC ٍ‏ ‎Ho (OH SIN © :‏ ‎on Ho “T° ٍ‏ ‎i ot‏ ¢ سس ريصب دوه ‎HO OH Naw 1‏ ‎oy H | :‏ بن ‎H‏ 0 ‎H ao 0 NN N_~UN ~~ 0 + N SSSA :‏ ‎horn on 0 0 ’ 0 v‏ د 0 ِ 0 يمحي 5 في نماذج معينة؛ يمكن أن يكون المركب الترابطي عبارة عن شق كوليسترول.
في نماذج ‎dime‏ يتضمن عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة ‎Lad‏ رابط نيكلوتيد بيني ‎internucleotide linkage‏ فوسفورو ثيوات ‎phosphorothioate‏ أو ميثيل فوسفونات ‎methylphosphonate‏ ‏واحد على الأقل. مثلا يمكن أن يكون رابط النيكلوتيد البيني فوسفورو ثيوات أو ميثيل فوسفونات موجود عند الطرف 3 من أحد الجدائل» أي؛ الجديلة الحسية أو الجديلة المضادة للحس؛ أو عند أطراف كل من الجدائل؛ الجديلة الحسية والجديلة المضادة للحس. في نماذج معينة؛ رابط النيكلوتيد البيني فوسفورو ثيوات أو ميثيل فوسفونات موجود عند الطرف 5" من أحد الجدائل» أي؛ الجديلة الحسية أو الجديلة المضادة للحس؛ أو عند أطراف كل من الجدائل؛ الجديلة الحسية والجديلة المضادة للحس. في نماذج معينة؛ رابط النيكلوتيد البيني فوسفورو ثيوات أو ميثيل فوسفونات موجود عند كل من الأطراف 0 5”- و3 من أحد الجدائل؛ أي؛ الجديلة الحسية أو الجديلة المضادة للحس؛ أو عند أطراف كل من الجدائل؛ الجديلة الحسية والجديلة المضادة للحس. في نماذج معينة؛ زوج القاعدة عند الموضع 1 من الطرف 5 من الجديلة المضادة للحس من المزدوج عبارة عن زوج قاعدة أيه يو ‎AU‏ ‏في نماذج معينة؛ تحتوي النيكلوتيدات 7 على تعديل 2'-فلورو. في نموذج ‎HAT‏ تحتوي نيكلوتيدات 77 5 على تعديل 0-2-ميثيل. في نموذج آخرء '0>0. في بعض النماذج؛ 'م-2. في بعض النماذج؛ 'و-0؛ ‎«O=p‏ 0-0؛ ونيكلوتيدات م” معلقة مكملة للحمض النووي الريبوزي المرسل المستهدف ‎٠‏ في بعض النماذج؛ ’¢=0 م<0؛ ‎«O=q‏ ونيكلوتيدات م" معلقة غير مكملة للحمض النووي الريبوزي المرسل المستهدف. في نماذج معينة؛ الجديلة الحسية لها إجمالي 21 نيكلوتيد والجديلة المضادة للحس لها إجمالي 23 نيكلوتيد. في نماذج معينة؛ يتم ربط واحد على الأقل ‎ny‏ بنيكلوتيد مجاور ‎Ble‏ رابط فوسفورو ثيوات ‎phosphorothioate linkage 0‏ في نماذج أخرى؛ يتم ربط كل م" بنيكلوتيدات مجاورة عبر روابط فوسفورو ثيوات ‎.phosphorothioate linkages‏ في نماذج معينة؛ يتم اختيار عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة من مجموعة من عوامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة المذكورة في أي من الجداول 3 و5. في نماذج ‎edie‏ تتضمن كل من النيكلوتيدات من الجديلة الحسية وكل من نيكلوتيدات الجديلة المضادة للحس تعديل. 5 في أحد الجوانب؛ يقدم الاختراع عامل حمض رببونيكلوبك ثنائي الجديلة قادر على تثبيط التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 في خلية؛ حيث يحتوي عامل حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة على
جديلة حسية مكملة لجديلة مضادة للحس؛ حيث تتضمن الجديلة المضادة للحس منطقة مكملة لجزءِ من الحمض النووي الريبوزي المرسل يرمز مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1؛ حيث تبلغ كل جديلة حوالي 14 إلى حوالي 30 نيكلوتيد في الطول؛ حيث يتم تمثيل عامل حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة مزدوج الجديلة بواسطة الصيغة (11): الحسية: 3 ‎YY -No«(Z Z Z);-Na- ng‏ لت ملل ‎-Na-(X X X)‏ مد 5 المضادة للحس: 5 ‎(XXX -No-Y'Y'Y'No'«(Z'Z'Z)-Na'- ng’‏ مامد 3 ‎(IT)‏ ‏حيث 6 ز» ‎tk‏ وا كل منها بشكل مستقل عبارة عن 0 أو 1؛ ‎op” op‏ 1» وو كل منها بشكل مستقل عبارة عن 6-0؛ كل ‎Nos No‏ تمثل بشكل مستقل متوالية أوليجو نيكلوتيد يتضمن 25-0 نيكلوتيد والذي يمكن أن يكون معدل أو غير معدل أو توليفات مما سبق؛ تتضمن كل متوالية اثنين على الأقل من نيكلوتيدات 0 معدلة بشكل مختلف؛ كل ‎Np‏ و:10 تمثل بشكل مستقل متوالية أوليجو نيكلوتيد يتضمن 10-0 نيكلوتيدات والذي يمكن أن يكون معدل أو غير معدل أو توليفات مما سبق؛ كل ‎eng amp’ Np‏ و'وه» كل منها يمكن أو يمكن ألا يكون موجودا ‎Jia‏ بشكل مستقل نيكلوتيد معلق؟؛ ‎XXX‏ تدلدلى 2227 لدعت ‎Y'Y'Y‏ ‏و/722 كل منها ‎Jia‏ بشكل مستقل مستحث ‎daly‏ من ثلاثة تعديلات متطابقة على ثلاثة نيكلوتيدات متتابعة؛ وحيث التعديلات عبارة عن تعديلات 0-2-ميثيل أو 2©-فلورو؛ تختلف التعديلات على ‎No‏ ‏5 عن التعديل على ا والتعديلات على ‎Ni‏ عن التعديل على '77؛ وحيث تترافق الجديلة الحسية مع المركب الترابطي الواحد على الأقل. في أحد الجوانب؛ يقدم الاختراع عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة قادر على تثبيط التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 في خلية؛ حيث يحتوي عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة على جديلة حسية مكملة لجديلة مضادة للحس؛ حيث تتضمن الجديلة المضادة للحس منطقة مكملة لجزءِ من 0 الحمض النووي الريبوزي المرسل يرمز مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 حيث تبلغ كل جديلة حوالي 14 إلى حوالي 30 نيكلوتيد في الطول؛ حيث يتم تمثيل عامل حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة بواسطة الصيغة (111): الحسية: '3 ‎np-Na-(X 7670 i-Np-Y YY -Np~(Z Z Z)j-Na- ng‏ 5 المضادة للحس: 5 ‎(XXX -No-Y'Y'Y'No'«(Z'Z'Z)-Na'- ng’‏ مامد 3 ‎(IT)‏ ‏5 حيث: ‎kj di‏ و1 كل منها بشكل مستقل عبارة عن 0 أو 1؛ كل ‎eng Np‏ و'وه» كل منها يمكن أو يمكن آلا يكون موجودا؛ تمثل بشكل مستقل نيكلوتيد معلق؛
‎4q »(‏ و'و كل منها بشكل مستقل عبارة عن 6-0؛ يتم ربط ‎"ip 5 0> "np‏ واحد على الأقل بنيكلوتيد مجاور عبارة رابط فوسفورو ثيوات؛ كل ‎Nis Ny‏ تمثل بشكل مستقل متوالية أوليجو نيكلوتيد يتضمن 25-0 نيكلوتيد والذي يمكن أن يكون معدل أو غير معدل أو توليفات مما سبق؛ تتضمن كل متوالية اثتين على الأقل من نيكلوتيدات معدلة بشكل مختلف؛ كل ‎Ny 9 Nip‏ تمثل بشكل مستقل متوالية أوليجو نيكلوتيد يتضمن 10-0 نيكلوتيدات والذي يمكن أن يكون معدل أو غير معدل أو توليفات مما سبق؛ ‎XXX‏ لال 777 ‎Y'Y'Y' XXX‏ و/272 كل ‎Wie‏ يمثل بشكل مستقل مستحث واحد من ثلاثة تعديلات متطابقة على ثلاثة نيكلوتيدات متتابعة؛ وحيث التعديلات عبارة عن تعديلات 2©-0-ميثيل أو 2"-فلورو؛ تختلف التعديلات على ‎Np‏ عن التعديل على 7 وتختلف التعديلات على ‎Np!‏ عن التعديل على 1 وحيث تترافق الجديلة الحسية مع المركب الترابطي الواحد على الأقل.
0 في أحد الجوانب؛ يقدم الاختراع عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة قادر على تثبيط التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 في خلية؛ حيث يحتوي عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة على جديلة حسية مكملة لجديلة مضادة للحس؛ حيث تتضمن الجديلة المضادة للحس منطقة مكملة لجزءِ من الحمض النووي الريبوزي المرسل يرمز مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1؛ حيث تبلغ كل جديلة حوالي 14 إلى حوالي 30 نيكلوتيد في الطول؛ حيث يتم تمثيل عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة
5 بواسطة الصيغة (111): الحسية: '3 ‎X X) i-Np-Y YY Np -)2 Z Z);j-Na- ng‏ ل)- يلال مد 5 المضادة للحس: 5 ‎(IT) 3' np"-Na'-(X'X'X No Y'Y'Y'-No'«(Z'Z'Z)-Ny'- ng’‏ ‎ck »1 Cua‏ و1 كل منها بشكل مستقل عبارة عن 0 أو 1؛ كل ‎eng’ 5 eng «Np‏ كل منها يمكن أو يمكن آلا يكون موجوداء تمثل بشكل مستقل نيكلوتيد معلق؛ (» ‎¢q‏ و'و كل منها بشكل مستقل عبارة عن 6-0؛
0 يتم ربط ‎mp‏ >0 و(" واحد على الأقل بنيكلوتيد مجاور عبارة رابط فوسفورو ثيوات؛ كل .11 ‎Nig‏ تمثل بشكل مستقل متوالية أوليجو نيكلوتيد يتضمن 25-0 نيكلوتيد والذي يمكن أن يكون معدل أو غير معدل أو توليفات مما سبق؛ تتضمن كل متوالية اثنين على الأقل من نيكلوتيدات معدلة بشكل مختلف؛ كل ‎Np‏ ‎Ny‏ تمثل بشكل مستقل متوالية أوليجو نيكلوتيد يتضمن 10-0 نيكلوتيدات والذي يمكن أن يكون معدل أو غير معدل أو توليفات مما سبق؛ ‎X'X'X' ZZZ YYY XXX‏ الالالت و/772/2 كل منها ‎Jia‏
5 بشكل مستقل مستحث واحد من ثلاثة تعديلات متطابقة على ثلاثة نيكلوتيدات متتابعة؛ وحيث التعديلات عبارة عن تعديلات 0-2-ميثيل أو 2*-فلورو؛ تختلف التعديلات على ‎Np‏ عن التعديل على 57 وتختلف
التعديلات على ‎Nb‏ عن التعديل على '/7؛ وحيث تترافق الجديلة الحسية مع المركب الترابطي الواحد على الأقل» حيث المركب الترابطي ‎le‏ عن واحد أو أكثر من مشتقات 17-أسيتيل جالاكتوز أمين ملحقة خلال رابط أحادي التكافؤ أو رابط متفرع ثنائي أو ثلاثي التكافؤ. في أحد الجوانب؛ يقدم الاختراع عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة قادر على تثبيط التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 في خلية؛ حيث يحتوي عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة على ‎dla‏ حسية مكملة لجديلة مضادة للحس؛ حيث تتضمن الجديلة المضادة للحس منطقة مكملة لجزءِ من الحمض النووي الريبوزي المرسل يرمز مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1؛ حيث تبلغ كل جديلة حوالي 14 إلى حوالي 30 نيكلوتيد في الطول؛ حيث يتم تمثيل عامل حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة بواسطة الصيغة (111): 0 الحسية: '3 ‎-Na(X X X) i-Np-Y YY Np -)2 2 Z)j-Na- ng‏ مد 5 المضادة للحس: 5 ‎(IT) 3' np"-Na'-(X'X'X No Y'Y'Y'-No'«(Z'Z'Z)-Ny'- ng’‏ ‎ck »1 Cua‏ و1 كل منها بشكل مستقل عبارة عن 0 أو 1؛ كل ‎eng’ 5 eng «Np‏ كل منها يمكن أو يمكن آلا يكون موجوداء تمثل بشكل مستقل نيكلوتيد معلق؛ (» ‎¢q‏ و'و كل منها بشكل مستقل عبارة عن 6-0؛ يتم ربط ‎np y 0> np‏ واحد على الأقل بنيكلوتيد مجاور عبارة ‎Jay‏ فوسفورو ثيوات؛ كل .11 ‎Nos‏ تمثل 5 بشكل مستقل متوالية أوليجو نيكلوتيد يتضمن 25-0 نيكلوتيد والذي يمكن أن يكون معدل أو غير معدل أو توليفات مما سبق؛ تتضمن كل متوالية اثنين على الأقل من نيكلوتيدات معدلة بشكل مختلف؛ كل ‎Np‏ ‎Ny‏ تمثل بشكل مستقل متوالية أوليجو نيكلوتيد يتضمن 10-0 نيكلوتيدات والذي يمكن أن يكون معدل أو غير معدل أو توليفات مما سبق؛ ‎X'X'X' ZZZ YYY XXX‏ الالالت و/772/2 كل منها ‎Jia‏ ‏بشكل مستقل مستحث واحد من ثلاثة تعديلات متطابقة على ثلاثة نيكلوتيدات متتابعة؛ وحيث التعديلات عبارة عن تعديلات 0-2-ميثيل أو 2 -فلورو؛ تختلف التعديلات على ‎Np‏ عن التعديل على 7 وتختلف التعديلات على ‎Np!‏ عن التعديل على '77؛ ‎Cus‏ الجديلة الحسية يتضمن واحد على الأقل رابط فوسفورو ثيوات؛ وحيث تترافق الجديلة الحسية مع المركب الترابطي الواحد على الأقل» حيث المركب الترابطي عبارة عن واحد أو أكثر من مشتقات 1“7-أسيتيل جالاكتوز أمين ملحقة خلال رابط أحادي التكافؤ أو رابط متفرع ثنائي أو ثلاثي التكافؤ. 5 في أحد الجوانب؛ يقدم الاختراع عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة قادر على تثبيط التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 في خلية؛ حيث يحتوي عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة على
جديلة حسية مكملة لجديلة مضادة للحس؛ حيث تتضمن الجديلة المضادة للحس منطقة مكملة لجزءِ من الحمض النووي الريبوزي المرسل يرمز مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1؛ حيث تبلغ كل جديلة حوالي 14 إلى حوالي 30 نيكلوتيد في الطول؛ حيث يتم ‎Jia‏ عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة بواسطة الصيغة (111): الحسية: 5 ممصلا -7 ‎YY‏ - يلا - وه 3 المضادة للحس: '5 ‎No ng‏ الا ‎(Ia) 3' ny-Na-‏ حيث كل ‎eng’ eng «Np‏ كل منها يمكن أو يمكن ألا يكون موجوداء تمثل بشكل مستقل نيكلوتيد معلق؛ ‎p‏ ‏و» وو كل منها بشكل مستقل عبارة عن 6-0؛ يتم ربط ‎"np‏ >0 وم" واحد على الأقل بنيكلوتيد مجاور عبارة رابط فوسفورو ثيوات؛ كل ‎Nis Ny‏ تمثل بشكل مستقل متوالية أوليجو نيكلوتيد يتضمن 25-0 0 تيكلوتيد والذي يمكن أن يكون معدل أو غير معدل أو توليفات مما سبق؛ تتضمن كل متوالية اثتين على الأقل من نيكلوتيدات معدلة بشكل مختلف؛ ‎YYY‏ و7777 كل منها يمثل بشكل مستقل مستحث واحد من ثلاثة تعديلات متطابقة على ثلاثة نيكلوتيدات متتابعة؛ وحيث التعديلات عبارة عن تعديلات 0-2- ميثيل أو 2*-فلورو؛ حيث الجديلة الحسية يتضمن واحد على الأقل رابط فوسفورو ثيوات؛ وحيث تترافق الجديلة الحسية مع المركب الترابطي الواحد على الأقل» حيث المركب الترابطي عبارة عن واحد أو أكثر 5 .من مشتقات 87-أسيتيل جالاكتوز أمين ملحقة خلال رابط أحادي التكافؤ أو رابط متفرع ثنائي أو ثلاثي التكافو. في أحد الجوانب؛ يقدم الاختراع عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة لتثبيط التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1؛ ‎Cua‏ يحتوي عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة على جديلة حسية وجديلة مضادة للحس تكون منطقة مزدوجة الجديلة؛ حيث الجديلة الحسية يتضمن على الأقل 15 نيكلوتيد متجاور 0 تختلف ‎Yi‏ يزيد عن 3 نيكلوتيدات عن متوالية النيكلوتيد لمتوالية بهوية رقم:1 وتتضمن الجديلة المضادة للحس على الأقل 15 نيكلوتيد متجاور تختلف بمالا يزيد عن 3 نيكلوتيدات عن متوالية النيكلوتيد لمتوالية بهوية رقم:2؛ حيث تتضمن كل من النيكلوتيدات من الجديلة الحسية أساسا تعديل مختار من تعديل 2”- 0-ميثيل وتعديل 0-2-فلوروء حيث الجديلة الحسية يتضمن اثنين من روابط نيكلوتيد فوسفورو ثيوات بينية عند الطرف 75 حيث تتضمن كل من نيكلوتيدات الجديلة المضادة للحس أساسا تعديل مختار من 5 تعديل 0-72-ميثيل وتعديل 0-2-فلورو؛ حيث تتضمن الجديلة المضادة للحس اثنين من روابط نيكلوتيد فوسفورو ثيوات بينية عند الطرف 5" واثنين من روابط نيكلوتيد فوسفورو ثيوات بينية عند الطرف ‎C3‏
وحيث تترافق الجديلة الحسية مع واحد أو أكثر من مشتقات 17-أسيتيل جالاكتوز أمين ملحقة خلال رابط أحادي التكافؤؤ أو رابط متفرع ثنائي التكافؤؤ أو ثلاثي التكافؤ عند الطرف ‎C3‏ ‏في جانب آخرء يقدم الاختراع الحالي عامل حمض رببونيكلوبك ثنائي الجديلة لتثبيط التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1؛ حيث تتضمن عوامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة مزدوجة الجديلة جديلة حسية وجديلة مضادة للحس تكون منطقة مزدوجة الجديلة؛ حيث الجديلة الحسية يتضمن على الأقل 5 نيكلوتيد متجاور تختلف بمالا يزيد عن 3 نيكلوتيدات عن نيكلوتيدات 3243-3221؛ 372-351 641-618 639-618« 640-619« 641-620 1115-1093 1114-1093« 1115-1094 1188-1167« 1314-1293« 1539-1518« 2124-2103 2261-2220 2241-2220 2261-2240 2680-2648 2669-2648 2679-2658 2680-2659 3164-3143 0 3219-3198 3242-3221 أو 3243-3222 لمتوالية النيكلوتيد لمتوالية بهوية رقم:1 وتتضمن الجديلة المضادة للحس على الأقل 15 نيكلوتيد متجاور تختلف بمالا يزيد عن 3 نيكلوتيدات عن ‎Sall‏ ‏المكمل لمتوالية النيكلوتيد لمتوالية بهوية )2:08( حيث تتضمن كل من النيكلوتيدات من الجديلة الحسية أساسا تعديل النيكلوتيد المختار من المجموعة المكونة من تعديل 2:-0-ميثيل وتعديل 0-72-فلوروء حيث الجديلة الحسية يتضمن اثنين من روابط نيكلوتيد فوسفورو ثيوات بينية عند الطرف 75 حيث تتضمن 5 كل من نيكلوتيدات الجديلة المضادة للحس أساسا تعديل النيكلوتيد المختار من المجموعة المكونة من تعديل 0-2 -ميثيل وتعديل 0-2-فلورو» حيث تتضمن الجديلة المضادة للحس اثنين من روابط نيكلوتيد فوسفورو ثيوات بينية عند الطرف 5" واثنين من روابط نيكلوتيد فوسفورو ثيوات بينية عند الطرف ‎C3‏ ‏وحيث تترافق الجديلة الحسية مع واحد أو أكثر من مشتقات 7“-أسيتيل جالاكتوز أمين ملحقة خلال رابط متفرع ثنائي التكافؤ أو ثلاثي التكافؤؤ عند الطرف 3. 0 في نماذج معينة؛ كل من النيكلوتيدات من الجديلة الحسية وكل من نيكلوتيدات الجديلة المضادة للحس عبارة عن نيكلوتيدات معدلة. في نماذج معينة؛ تتضمن كل جديلة 30-19 نيكلوتيد. في نماذج معينة؛ يتم تعديل كل من النيكلوتيدات من الجديلة الحسية أساسا. في نماذج معينة؛ يتم تعديل كل من نيكلوتيدات الجديلة المضادة للحس أساسا. في نماذج معينة؛ يتم تعديل كل من النيكلوتيدات أساسا لكل من الجديلة الحسية والجديلة المضادة للحس. 5 في أحد الجوانب؛ يقدم الاختراع تحتوي الخلية على عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة كما هو موضح ‎Lia‏
في أحد الجوانب» يقدم الاختراع موجه يرمز جديلة واحدة على الأقل لعامل حمض رببونيكلوبك ثنائي ‎dln‏ حيث يتضمن عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة منطقة تكامل مع ‎gin‏ على الأقل من الحمض النووي الريبوزي المرسل يرمز مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج ‎١1‏ حيث يبلغ حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة 30 زوج قاعدة أو أقل في الطول؛ وحيث يقوم عامل حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة بإاستهداف الحمض النووي الريبوزي المرسل للشق. في نماذج معينة؛ تبلغ منطقة التكامل على الأقل 15 نيكلوتيد في الطول. في نماذج معينة؛ تبلغ منطقة التكامل 19 إلى 23 نيكلوتيد في الطول. في أحد الجوانب؛ يقدم الاختراع خلية يتضمن موجه كما هو موضح هنا. في أحد الجوانب؛ يقدم الاختراع تركيبة صيدلانية ‎pharmaceutical composition‏ لتثبيط التعبير عن جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 يتضمن عامل حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة وفقا للاختراع. 0 في أحد النماذج؛ يتم إعطاء عامل 1م11 في محلول غير منظم ‎solution‏ 0071010:©0. في نماذج معينة؛ المحلول غير المنظم عبارة عن محلول ملحي ‎saline‏ أو ماء. في نماذج أخرى؛ يتم إعطاء عامل ‎RNAi‏ ‏في محلول منظم ‎buffered solution‏ في هذه النماذج؛ يمكن أن يتضمن المحلول المنظم أسيتات ‎cacetate‏ ‏سيترات ع01001»؛ برولامين ‎eprolamine‏ كريونات ‎ccarbonate‏ أو فوسفات ‎«phosphate‏ أي توليفة مما سبق. مثلاء يمكن أن يكون المحلول المنظم عبارة عن محلول ملحي منظم بفوسفات ‎phosphate buffered‏ ‎.(PBS) saline 5‏ في أحد الجوانب» يقدم الاختراع تركيبة صيدلانية يتضمن عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة وفقا للاختراع والصيغة الدهنية. في نماذج معينة؛ تتضمن الصيغة الدهنية جسيم دهني بحجم النانو ‎lipid‏ ‎.(LNP) nanoparticle‏ في نماذج معينة؛ تتضمن الصيغة الدهنية (1)722879+76 23)-هبتا تراي أكونتا - 1 -تترا ن-19-يل 4-زداي ميثيل أمينو )بيوتانوات ‎(67.,97.,287.,317)-heptatriaconta-‏
‎.(MC3) 6,9,28,31-tetracn-19-yl 4-(dimethylamino)butanoate ~~ 20‏ في أحد الجوانب؛ يقدم الاختراع طريقة تثبيط التعيير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 في خلية؛ تتضمن الطريقة (أ) ملامسة الخلية مع عامل حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة وفقا للاختراع أو تركيبة صيدلانية وفقا للاختراع؛ و(ب) الحفاظ على الخلية الناتجة في الخطوة (أ) لمدة كافية للحصول على تدهور مستنسخ الحمض النووي الريبوزي المرسل لجين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 بالتالي تثبيط التعبير عن جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 في الخلية. في نماذج معينة؛ الخلية موجودة في خاضع؛ ‎a Ole‏ خاضع بشري؛ مثلا إنسان أنثى أو إنسان ذكر. في النماذج المفضلة؛ يتم
تثبيط التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 بواسطة على الأقل 720 730 740 50 0 £70« 780 7290 أو 7295؛ أو إلى أقل من القيمة الحدية ‎threshold‏ للكشف عن طريقة الفحص المستخدمة. في أحد الجوانب؛ يقدم الاختراع طريقة علاج خاضع يعاني من مرض أو اضطراب والذي قد يستفيد من التقليل في التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1؛ تتضمن الطريقة إعطاء الخاضع كمية فعالة علاجيا من عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة وفقا للاختراع أو تركيبة صيدلانية وفقا للاختراع؛ بالتالي علاج الخاضع. في أحد الجوانب؛ يقدم الاختراع طريقة الوقاية من عرض واحد على الأقل في خاضع يعاني من مرض أو اضطراب والذي قد يستفيد من التقليل في التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1؛ تتضمن 0 الطريقة إعطاء الخاضع كمية فعالة وقائيا من عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة وفقا للاختراع أو تركيبة صيدلانية وفقا للاختراع؛ بالتالي الوقاية من عرض واحد على الأقل في الخاضع يعاني من ‎a‏ ‏اضطراب والذي قد يستفيد من التقليل في التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1. في نماذج معينة؛ يؤدي إعطاء حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة الخاضع إلى تقليل في مسار إشارة ‎signaling pathway‏ مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1. في نماذج معينة؛ يؤدي إعطاء حمض 5 رببونيكلويك ثنائي الجديلة إلى تقليل في مستوى مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 في الخاضع؛ ‎lia‏ مستويات مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 في المصل في الخاضع. في نماذج معينة؛ المرض المرتبط بمركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 عبارة عن مرض معدي؛ ‎die‏ ‏مرض معدي مزمن؛ بين خلوي؛ مثلاء مرض فيروسي؛ مثلاء التهاب الكبد؛ أو إصابة بكتيرية؛ مثلاء إصابة التدرن الرئوي ‎.tuberculosis infection‏ 0 في نماذج معينة؛ المرض المرتبط بمركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 عبارة عن السرطان؛ مثلا؛ السرطان الكبدي ‎chepatic cancer‏ مثلا؛ كارسينوما الخلايا الكبدية. في نماذج معينة؛ يتضمن الاختراع أيضا إعطاء عامل مضاد للفيروسات ‎anti-viral agent‏ إلى خاضع مصاب بمرض مرتبط بمركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1. في نماذج معينة؛ العامل المضاد للفيروسات عبارة عن نظير نيكلوتيد أو نيكلوسيد ‎nucleoside‏ في نماذج معينة؛ العامل المضاد للفيروسات 5 خاص بعلاج إصابة فيروس التهاب الكبد ‎Dia chepatitis virus infection‏ إصابة فيروس التهاب الكبد
‎co‏ إصابة فيروس التهاب الكبد ‎Hepatitis Delta virus tla‏ (01017. في نماذج معينة؛ العامل المضاد للفيروسات ليس عبارة عن عامل حث مناعي ‎.immune stimulatory agent‏ في نماذج معينة؛ يتضمن الاختراع ‎La‏ إعطاء عامل كيماوي علاجي ‎chemotherapeutic agent‏ إلى خاضع مصاب بمرض مرتبط بمركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1.
في نماذج معينة حيث المرض المرتبط بمركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 عبارة عن السرطان؛ أيضا يتم علاج الخاضع من السرطان. في نماذج معينة؛ يتضمن علاج السرطان جراحة. في نماذج معينة؛ يتضمن علاج السرطان الإشعاع ‎radiation‏ في نماذج ‎(dime‏ يتضمن علاج السرطان إعطاء عامل كيماوي علاجي. في العديد من النماذج؛ يتم إعطاء عامل حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة بجرعة حوالي 0.01 ملجم/كجم
0 إلى حوالي 10 ملجم/كجم أو حوالي 0.5 ملجم/كجم إلى حوالي 50 ملجم/كجم. في بعض النماذج؛ يتم إعطاء عامل حمض رببونيكلوبك ثنائي الجديلة بجرعة حوالي 10 ملجم/كجم إلى حوالي 30 ملجم/كجم. في نماذج معينة؛ يتم إعطاء عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة عند جرعة مختارة من حوالي 0.5 ملجم/كجم 1 ملجم/كجم؛ 1.5 ملجم/كجم؛ 3 ملجم/كجم؛ 5 ملجم/كجم؛ 10 ملجم/كجم» و30 ملجم/كجم. في نماذج معينة؛ يتم إعطاء عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة حوالي ‎Ba‏ أسبوعياء مرة شهريا؛ مرة
5 كل شهرين؛ أو مرة كل ريع سنة (أي؛ مرة كل ثلاثة أشهر) بجرعة حوالي 0.1 ملجم/كجم إلى حوالي 5.0 ملجم/كجم. في نماذج معينة؛ يتم إعطاء عامل حمض رببونيكلوبك ثنائي الجديلة الخاضع مرة أسبوعيا. في نماذج معينة؛ يتم إعطاء الخاضع عامل ‎RNAI‏ مرة شهريا. في نماذج معينة؛ يتم إعطاء عامل ‎RNAi‏ مرة كل ربع سنة (أي؛ كل ثلاثة أشهر).
0 في بعض النماذج؛ يتم إعطاء عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة الخاضع تحت الجلد. في العديد من ‎ez Sail‏ تتضمن طرق الاختراع أيضا قياس مستويات مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 في الخاضع. في نماذج معينة؛ يشير التقليل في مستويات التعبير عن أو نشاط مسار إشارة مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 إلى أن المرض المرتبط بمركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 يتم علاجه.
5 في العديد من النماذج» يتم قياس مرقم محيط ‎surrogate marker‏ للتعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1. ‎Ole‏ في علاج مرض معدي؛ يتم الكشف عن وجود المسبب المرضي؛ ‎Ole‏ بروتين
أو ‎(aes‏ نووي ‎nucleic acid‏ من المسبب المرضي 00010880 مثلاً؛ مولد ضد مستوى التهاب الكبد ‎B‏ ‎HB cccDNA (HBeAg «(HBsAg) heptatitis 5 s antigen‏ في نماذج معينة؛ يتم الكشف عن مؤشر للاستجابة المناعية ضد المسبب المرضي؛ ‎lia‏ الجسم المضاد ل 1136. في نماذج معينة؛ يتم الكشف عن تغير؛ بشكل مفضل تغير مرتبط سريريا في المرقم المحيط الذي يشير إلى علاج فعال للإصابة. في علاج السرطان؛ يمكن استخدام توضيح لثبات أو تقليل حمل الورم باستخدام معيار آر إى سى أى أس تى 17 كمرقم محيط لتقليل التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 أو النشاط. شرح مختصر. للرسومات الشكل 1 عبازة عن تخطيط يبين إرسال إشارة مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 بين خلية تمثل مولد الضد ‎antigen‏ وخلية 1 ‎T-cell‏ ‏0 الوصف التفصيلي: يقدم الاختراع الحالي تركيبات حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة والتي تؤثر على الإسكات المستحث بالحمض النووي الريبوزي لشق يتوسط فيه معقد لمستنسخات الحمض ‎sl)‏ الريبوزي لمركب ترابطي 1 لجين موت الخلية المبرمج 1. يمكن أن يكون الجين في خلية؛ مثلاء خلية في خاضع, مثل إنسان. يقوم استخدام هذه الأحماض أحماض رببونيكلويك مزدوجة الجديلة ‎double stranded ribonucleic acids‏ ‎(iRNAs) 5‏ بإتاحة تدهور الأحماض النووية الرببوزية المرسلة ‎(mRNAs) messenger Ribonucleic acid‏ المستهدف للجين المناظر (جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1) في الكائنات الثديية. تم إرسال إشارة أحماض ريبونيكلويك مزدوجة الجديلة وفقا للاختراع لاستهداف جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 البشري؛ شاملا أجزاء من الجين التي يتم حفظها في نظائر مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 من الأنواع الثديية الأخرى. دون الرغبة في الارتباط بنظرية؛ يعتقد أن هناك توليفة من أو توليفة 0 ثانوية من الخواص السابقة والمواقع المستهدفة المعينة أو التعديلات المعينة في عوامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة هذه التي تضفي إلى أحماض ريبونيكلويك مزدوجة الجديلة وفقا للاختراع فعالية محسنة؛ ثبات؛ قدرة؛ اعتمادية؛ وأمان. بالتالي؛ يقدم الاختراع الحالي ‎Lad‏ طرق لعلاج خاضع يعاني من اضطراب والذي قد يستفيد من تثبيط أو تقليل التعبير عن جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج ‎Sine]‏ مرض مرتبط بمركب ترابطي 1 5 للموت الخلية المبرمج ‎١1‏ مثل إصابة؛ ‎Ole‏ إصابة فيروسية؛ ‎Ollie‏ إصابة فيروس التهاب الكبد؛ أو ‎lig) man SA pla8ials En) LAL Lagl€ (tie cal (las Jie aed‏
الجديلة ‎lly‏ تؤثر على الإسكات المستحث بالحمض النووي الرببوزي لشق يتوسط فيه معقد لمستنسخات
الحمض النووي الريبوزي من جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1. يمكن أن تقوم جرعات منخفضة جدا من أحماض رببونيكلويك مزدوجة الجديلة وفقا للاختراع؛ تحديداء بالتوسط خصيصا وبفاعلية في تداخل الحمض النووي الريبوزي (حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة)؛ بما
يؤدي إلى تثبيط مميز للتعبير عن الجين المناظر (جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1). تتضمن أحماض رببونيكلويك مزدوجة الجديلة وفقا للاختراع جديلة الحمض النووي الريبوزي (الجديلة المضادة للحس) لها منطقة تبلغ حوالي 30 نيكلوتيد أو أقل في الطول؛ مثلاء 30-15 29-15 15- 8 27-15 26-15 25-15 24-15 23-15 22-15 21-15 20-15 19-15 15- 18« 17-15« 30-18 29-18 28-18 27-18 26-18 25-18 24-16 23-18 18- 0 22 21-18 20-18 30-19 29-19 28-19 27-19 26-19 25-19 24-19 19- 23 22-19 21-19 20-19 30-20 29-20« 28-20 27-20 26-20« 25-20 20- 23-2420 22-20 21-20 30-21 29-21« 28-21 27-21 26-21 25-21 24-21 23-21( أو 22-21 نيكلوتيد في الطول؛ هذه المنطقة مكملة أساسا لجزءِ على الأقل من مستنسخ الحمض النووي الريبوزي الرسول لجين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1. في نماذج معينة؛ تتضمن أحماض 5 رببونيكلويك مزدوجة الجديلة وفقا للاختراع جديلة الحمض النووي الريبوزي (الجديلة المضادة للحس) والتي يمكن أن تتضمن أطوال أطول؛ ‎Wan‏ ما يصل إلى 66 نيكلوتيد» ‎ie‏ 66-36» 36-26 36-25 31- 60« 43-22 53-27 نيكلوتيدات في الطول مع منطقة على الأقل 19 نيكلوتيد متجاور مكملة أساسا لجزء على الأقل من مستنسخ الحمض النووي الرببوزي المرسل لجين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1. تتضمن أحماض رببونيكلويك مزدوجة الجديلة ذات الجدائل الأطول المضادة للحس بشكل مفضل جديلة 0 الحمض النووي الريبوزي ثانية (الجديلة الحسية) بمقدار 60-20 نيكلوتيد في الطول حيث تشكل الجدائل الحسية والمضادة للحس مزدوج من 30-18 نيكلوتيد متجاور. يسمح استخدام أحماض رببونيكلويك مزدوجة الجديلة هذه بإتاحة تدهور الأحماض النووية الرببوزية المرسلة المستهدف للجين المناظر (جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1) في الكائنات الثديية. يمكن أن تتوسط جرعات منخفضة جدا من أحماض رببونيكلويك مزدوجة الجديلة وفقا للاختراع؛ تحديداء يمكن أن تتوسط انتقائيا ويفاعلية في تداخل 5 الحمض النووي الريبوزي (حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة)؛ بما يؤدي إلى تثبيط مميز للتعبير عن الجين المناظر (جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1). باستخدام الفحوص في المعمل وفي الكائن
الحي؛ أبدى المخترعون الحاليون أن أحماض رببونيكلوبك مزدوجة الجديلة تستهدف جين مركب ترابطي 1[
لموت الخلية المبرمج 1 يمكن أن تتوسط في حمض رببونيكلوبك ثنائي الجديلة؛ بما يؤدي إلى تثبيط مميز
للتعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1؛ بالإضافة إلى تقليل إرسال إشارة خلال مسار مركب
ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 والذي يقلل واحد أو أكثر من الأعراض المرتبطة بمرض مرتبط بمركب
ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1؛ مثل مرض معدي؛ ‎lie‏ مرض فيروسي أو إصابة بين خلوية مزمنة
‎¢chronic intracellular infection‏ أو السرطان. بالتالي» سوف تكون الطرق والتركيبات التي تتضمن هذه
‏أحماض رببونيكلويك مزدوجة الجديلة مفيدة لعلاج خاضع يعاني من مرض مرتبط بمركب ترابطي 1 لموت
‏الخلية المبرمج 1؛ ‎Jie‏ مرض معدي؛ ‎lia‏ مرض فيروسي أو إصابة بين خلوية مزمنة؛ أو السرطان.
‏الطرق والتركيبات هنا مفيدة في تقليل مستوى مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 في خاضع؛ ‎ls‏ ‏0 الكبد مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 في خاضع؛ خصوصا في خاضع مع إصابة بين خلوية
‏مزمنة؛ خصوصا إصابة كبدية مزمنة؛ أو الورم.
‏يقوم الوصف التفصيلي التالي بالكشف عن كيفية تصنيع واستخدام التركيبات التي تحتوي على أحماض
‏رببونيكلويك مزدوجة الجديلة لتثبيط التعبير عن جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 بالإضافة
‏إلى تركيبات؛ استخدامات» وطرق لعلاج خاضعين يعانون من أمراض واضطرابات والذي قد يستفيد من 5 اتتقليل للتعبير عن جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1.
‏1. التعريفات
‏لفهم الاختراع الحالي بشكل أكبر؛ يتم تحديد مصطلحات معينة أولا. علاوة على ذلك؛ يجب فهم أنه عند
‎a ‏قيمة أو نطاق قيم لمتغير» يقصد أن القيم والنطاقات تتوسط القيم المذكورة يقصد بها أن تكون‎ SD ‏من هذا الاختراع.‎ 20
‏يتم استخدام صيغ التنكير هنا للإشارة إلى واحد أو أكثر من واحد (أي؛ واحد على الأقل) من المصطلح
‏اللغوي. مثلاء "عنصر” يعني عنصر واحد أو أكثر من عنصر واحد؛ ‎Ola‏ مجموعة من العناصر.
‏يتم استخدام المصطلح "شاملا" هنا ليعني؛ ويتم استخدامه بالتبادل مع العبارة ‎ALL‏ ولكنها غير مقيدة
‏ب
يتم استخدام المصطلح "أو" هنا ليعني؛ ويتم استخدامه بالتبادل ‎cae‏ المصطلح 5 ‎"elf‏ ما لم يتضمن السياق
غير ذلك. مثلاء سوف يتم فهم أن "الجديلة الحسية أو الجديلة المضادة للحس" عبارة عن "جديلة حسية أو
جديلة مضادة للحس أو جديلة حسية وجديلة مضادة للحس."
يتم استخدام المصطلح "حوالي" هنا ليعني في النطاقات المثالية للتحمل في المجال. ‎lie‏ يمكن فهم المصطلح "حوالي" على أنه يعني حوالي 2 من الاتحرافات المعيارية ‎standard deviations‏ عن المتوسط.
في نماذج معينة؛ يكون حوالي +710. في نماذج معينة؛ يعني حوالي +75. عندما يكون المصطلح
‎"isa‏ موجودا قبل سلسلة من الأعداد أو نطاق؛ يتم فهم أن "حوالي" يمكن أن تقوم بتعديل كل الأداد
‏بشكل متسلسل أو في نطاق.
‏سوف يتم فهم أن المصطلح "على الأقل" قبل عدد أو سلسلة من الأرقام يتضمن الرقم المجاول للمصطلح
‏0 "على الأقل"؛ وكل الأرقام المجاورة أو الأرقام الصحيحة التي يمكن تضمينها بشكل منطقي؛ كما هو موضح من السياق. ‎Sle‏ يجب أن يكون عدد النيكلوتيدات في جزيء حمض نووي عبارة عن عدد صحيح. ‎lia‏ ‏يقصد بالمصطلح "على الأقل 18 نيكلوتيد من جزيء حمض نووي ذو 21 نيكلوتيد" أن ¢18 ¢19 20 أو 1 نيكلوتيد لها نفس الخاصية المشار إليها. عند وجود على الأقل سلسلة قبل أعداد أو نطاق؛ يتم فهم أن "على الأقل" يمكن أن تقوم بتعديل كل الأعداد في السلاسل أو النطاق.
‏5 حسب الاستخدام هناء يتم فهم أن "مالا يزيد عن" أو "أقل من" بالقيمة المجاورة للعبارة والقيم والأعداد الصحيحة المنطقية الأقل؛ كقيمة منطقية من السياق؛ إلى صفر. مثلاء مزدوج مع جزءِ معلق من "مالا يزيد عن 2 نيكلوتيد" له 2 1 أو 0 جزءِ نيكلوتيد معلق. عند وجود المصطلح ‎YW‏ يزيد عن" قبل سلسلة من الأرقام أو نطاق؛ يتم فهم أن "مالا يزيد عن" يمكنه تعديل كل من الأعداد في السلسلة أو النطاق. في حالة التعارض بين متوالية وموقعه المشار إليه على مستنسخ أو متوالية أخرى» تكون المرجعية لمتوالية
‏0 النيكلوتيد المذكورة في الوصف. يمكن دمج العديد من نماذج الاختراع كما هو محدد بشكل مناسب بواسطة أحد الخبراء في المجال. تم توضيح "مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1'¢ '710-11؛ أو "00274" المعروف ‎Lad‏ ب ‎B7-‏ ‎¢PDLI ¢B7HI ¢H‏ مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1؛ ‎$PDCDILI‏ 00001161 نظير ‎B7‏ ‏1. مركب ترابطي 1 ‎(PDCDI‏ ومركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج؛ ليتم التعبير بشكل جوهري على
‏25 خلايا 7و3 فأرية؛ الخلايا المتغضنة؛ ‎WIA (aed‏ جذعية لحمية متوسطية ‎«mesenchymal stem cells‏ والخلايا ‎Anal‏ المشتقة من نخاع العظم ‎.bone marrow-derived mast cells‏ يتم العثور على التعبير عن
مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 أيضا على نطاق واسع من الخلايا غير المكونة للدم وتتم زيادتها بشكل منتظم على عدد من أنواع الخلايا بعد التنشيط. عندما يكون حث ‎IFNy‏ يتم التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 على الخلايا 7 خلايا أن كيه ‎(NK‏ بلاعم؛ الخلايا المتغضنة نقوية؛ ‎B LDA‏ الخلايا الظهارية ‎cepithelial cells‏ والخلايا البطانية الوعائية ‎Flies ( vascular endothelial cells‏ ‎(DB and Chen L (2007) J Immunother. 30 (3): 251-60 5‏ يتم التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 بشكل ملحوظ على البلاعم. يتم توفير المزيد من المعلومات على مركب ترابطي 1 لموت الخلية ‎mend‏ 1؛ ‏ مثلا ‏ في قاعدة البيانات أن سى بى أى ‎NCBI Gene‏ عند ‎Allg) www.nebi.nlm.nih.gov/gene/29126‏ تم دمجها هنا بالإشارة إلى تاريخ إيداع الطلب). حسب الاستخدام هناء يتم استخدام "مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1" بشكل تبادلي مع المصطلح 0 00-117" (واختياريا أي من الأسماء الأخرى المعروفة المذكورة أعلاه) ليشير إلى الجين طبيعي ‎Lal)‏ ‏الذي يرمز بروتين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1. يمكن العثور على الحمض الأميني ومتواليات الترميز ‎coding sequences‏ الكاملة من المتوالية المرجعية لجين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 البشري في؛ مثلاً؛ رقم وصول بنك الجينات ‎GenBank‏ جى أى ‎:GI‏ 390979638 (رقم وصول ‎RefSeq‏ ‎ENM_001267706.1‏ متوالية بهوية رقم:1؛ متوالية بهوية رقم:2) ورقم وصول بنك الجينات 01: 292658763 (رقم وصول ‎RefSeq‏ 1014-014143.3؛ متوالية بهوية رقم: 9 و10). أيضا تم توفير الصور المتغيرة المتراكبة» ‎Sie‏ في 35178ه:2012:7 ‎PLoS One.‏ .اه ‎Ally Grzywnowicz et‏ تم دمجها هنا بالإشارة إليها كمرجع. يمكن العثور على النظائر الثديية لجين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 البشري 5 ¢ مثلاء 61: 755563510 (رقم وصول ‎(XM_006527249.2 RefSeq‏ فأر ؛ متوالية بهوية رقم:3 ومتوالية بهوية رقم:4)؛ 61: 672040129 (رقم وصول ‎XM_006231248.2 RefSeq‏ جرذ؛ 0 متوالية بهوية رقم:5 ومتوالية بهوية رقم:6)؛ أرقام الوصول لبنك الجينات 01: 544494555 (رقم وصول ‎<XML_O0SSSI779.1 RefSeq‏ قرد رباح؛ متوالية بهوية رقم:7 ومتوالية بهوبة رقم:8). هناك عدد من أس أن بى أس ‎SNPs‏ طبيعية المنشاً معروفة ‎(Sarg‏ العثور عليها؛ ‎lie‏ في قاعدة بيانات أس أن بى ‎SNP‏ عند ‎NCBI‏ عند ‎www.nebi.nlm.nih.gov/SNP/snp_ref.cgi?locusld=29126‏ (والتي تم دمجها هنا بالإشارة إلى تاريخ إيداع الطلب) ‎Allg‏ تسرد ‎SNPs‏ في إنسان مركب ترابطي 1 لموت الخلية 5 المبرمج 1. في النماذج المفضلة؛ يتم تضمين هذه الصور المتغيرة الطبيعية في منظور متوالية الجين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1.
هناك أمثلة إضافية متاحة من متواليات مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 الحمض النووي الريبوزي المرسل متاحة باستخدام قواعد البيانات المتاحة للعامة؛ ‎UniProt «GenBank Mie‏ و أوه ‎al‏ أى ‎al‏ ‎.OMIM‏ ‏حسب الاستخدام هناء يشير المصطلح "متوالية مستهدفة ‎"target sequence‏ إلى جزء مجاور لمتوالية النيكلوتيد لجزيء الحمض النووي الريبوزي المرسل المكون أثناء استنساخ جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1؛ شاملة الحمض النووي الرببوزي المرسل التي هي منتج لمعالجة الحمض النووي الرببوزي لمنتج انتساخ ‎transcription product‏ أولي. سوف تكون جزء الهدف للمتوالية طويلة على الأقل بما يكفي لتعمل كركيزة ‎substrate‏ لشق موجه بحمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة عند أو بالقرب من هذا ‎ond)‏ من متوالية النيكلوتيد لجزيء الحمض النووي الرببوزي المرسل المكون أثناء استنساخ جين مركب ترابطي 1 0 الموت الخلية المبرمج 1. في أحد النماذج؛ المتوالية المستهدفة موجود في منطقة ترميز البروتين ‎protein‏ ‎coding region‏ لمركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1. يمكن أن تكون المتوالية المستهدفة من حوالي 36-9 نيكلوتيدات في الطول» مثلاء حوالي 30-15 نيكلوتيد في الطول. مثلاء يمكن أن تكون المتوالية المستهدفة من حوالي 30-15 نيكلوتيد؛ 29-15 28-15 27-5 26-15 25-15 24-15 23-15 22-15 21-15 20-15 19-15« 18-15 17-15« 30-18 29-18 28-18 27-18 26-18 25-18 24-18 23-18 22-18 21-18 20-18 30-19 29-19 28-19 27-19 26-19 25-19 24-19 23-19 22-19 21-19 20-19 30-20 29-20 28-20 27-20 26-20 25-20 24-20 23-20 22-20 221-20 30-21 29-21 28-21 27-21 26-21 25-21 24-21 23-21( أو 22-21 نيكلوتيد في الطول. تتوسط النطاقات والأطوال في النطاقات والأطوال المذكورة أعلاه 0 أيضا المذكورة بأنها جزءِ من الاختراع. حسب الاستخدام هناء المصطلح "جديلة يتضمن متوالية" يشير إلى أوليجونيكلوتيد يتضمن سلسلة من نيكلوتيدات تم وصفها بواسطة المتوالية المشار إليها باستخدام تسمية النيكلوتيد المعيارية. تشير كل من ‎"US "7" A" CGT‏ بشكل عام إلى نيكلوتيد يحتوي على جوانين ‎cguanine‏ سيتوسين ‎cytosine‏ أدينين ‎cadenine‏ ثيميدين ‎thymidine‏ ويوراسيل ‎uracil‏ كقاعدة؛ على التوالي. مع ذلك؛ سوف يتم فهم أن المصطلح 'رببونيكلوتيد ‎ribonucleotide‏ أو 'نيكلوتيد" يمكن أن يشير ‎Lad‏ إلى نيكلوتيد ‎(Jame‏ ‏كما هو موضح بالتفاصيل أدناه؛ أو شق استبدال ‎replacement moiety‏ بديل (انظر؛ ‎Sie‏ الجدول 2).
يمكن استبدال الخبير في المجال على علم بأن جوانين» سيتوسين» أدينين» وبوراسيل بواسطة شقوق أخرى بدون تعديل خواص مزاوجة القاعدة لأوليجونيكلوتيد يتضمن نيكلوتيد يحمل هذا الشق البديل. مثلاء بدون ‎cad‏ يتضمن النيكلوتيد إينوسين كقاعدة له والتي يمكن أن تتزواج مع نيكلوتيدات تحتوي على أدينين؛ سيتوسين؛ أو يوراسيل. ‎(Sao JUL‏ استبدال نيكلوتيدات تحتوي على يوراسيل؛ جوانين؛ أو أدينين في متواليات النيكلوتيد من حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة موضح في الاختراع بواسطة نيكلوتيد تحتوي على؛ مثلاء إينوسين 1005106 في مثال آخرء يمكن استبدال أدينين وسيتوسين في أي مكان آخر في الأوليجونيكلوتيد مع جوانين ويوراسيل؛ على التوالي لتكوين أزواج قاعدة ‎G-U Wobble‏ مع الحمض النووي الرربوزي المرسل المستهدف. سوف تكون المتواليات التي تحتوي على شقوق الاستبدال ‎replacement‏ ‎moieties‏ هذه للتركيبات والطرق الموضحة في الاختراع.
تشير المصطلحات ‎(IRNA"‏ "عامل نظهللع؛" ‎"GRNA dale’‏ "عامل تداخل ملل" حسب الاستخدام بشكل ‎als‏ هناء إلى عامل يحتوي على الحمض النووي الريبوزي حيث يتم تحديد هذا المصطلح هناء والذي يتوسط في الشق المستهدف ‎targeted cleavage‏ لمستنسخ الحمض النووي الرببوزي عبر مسار معقد الإسكات المستحث بالحمض النووي الريبوزي. يقوم حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة بتوجيه تدهور الحمض النووي الريبوزي الرسول الانتقائي للمتوالية خلال عملية معروفة بتداخل الحمض النووي الرببوزي
5 (حمض رببونيكلويك ‎SUB‏ الجديلة). يقوم حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة بتضمين؛ ‎Sle‏ تثبيط» التعبير عن جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 في خلية؛ مثلاء خلية في خاضع؛ مثل خاضع ثديي. في أحد النماذج؛ يتضمن عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة وفقا للاختراع الحمض النووي الرببوزي أحادي الجديلة التي ‎Jolin‏ مع متوالية الحمض النووي الريبوزي مستهدفة؛ ‎Mia‏ متوالية الحمض النووي الريبوزي المرسل مستهدفة بمركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 لتوجيه شق الهدف الحمض النووي
0 الريبوزي. بدون الرغبة في الارتباط بأي نظرية يعتقد أن الحمض النووي الريبوزي الطويلة مزدوجة الجديلة قامت بإدخال في ‎LIAN‏ الحمض النووي الريبوزي أحادي الجديلة ‎single stranded ribonucleic acid‏ ‎(siRNA)‏ بواسطة نيوكلياز داخلي ‎endonuclease‏ من النوع ‎TIT‏ المعروفة ب ‎Sharp et al. )2001( ( Dicer‏ ‎٠. (Genes Dev. 15:485‏ يقوم ‎«Dicer‏ إنزيم شبيه بريبونيوكلياز 111 ‎cribonuclease-IIl-like enzyme‏ بمعالجة حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة في 23-19 زوج قاعدة قصيرة متداخلة مع الأحماض النووية
5 الريبوزية ‎(RNAS) ribonucleic acids‏ مع اثنين من القواعد المميزة للجزء المعلق 3' ( ‎Bernstein, ef al,‏ ‎Nature 409:363‏ )2001(( . بالتالي يتم دمج ا لأحماض النووية الريبوزية أحادية الجديلة ‎single stranded‏
‎(RNAS) ribonucleic acid‏ في معقد الإسكات المستحث بالحمض النووي الريبوزي حيث واحد أو أكثر من هيليكازات ‎helicases‏ غير ملفوفة في مزدوج الحمض النووي ‎(ghoul‏ أحادي الجديلة؛ ‎Aly‏ تسمح للجديلة المكملة المضادة للحس ‎complementary antisense strand‏ لتوجيه التعرف المستهدف ‎.(Nykanen, er al., (2001) Cell 107:309)‏ عند الارتباط بالحمض النووي الريبوزي المرسل المستهدف المناسب؛ ‎ask‏ واحد أو أكثر من نيوكليازات داخلية ‎endonucleases‏ في موقع شق الإسكات المستحث لمعقد بالحمض النووي الريبوزي لحث الإسكات )188 :15 ‎(Elbashir, et al., (2001) Genes Dev.‏ . بالتالي؛ في أحد الجوانب يتعلق الاختراع بالحمض النووي الريبوزي أحادي الجديلة الذي تم توليده في خلية والتي تعزز تكوين معقد الإسكات المستحث لمعقد بالحمض النووي الرببوزي للتأثير على إسكات الجين المستهدف»؛ أي؛ جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1. بالتالي؛ يتم أيضا استخدام المصطلح ‎"SIRNA 0‏ هنا للإشارة إلى حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة كما هو موضح أعلاه. في نماذج ‎dine‏ يمكن أن يكون عامل حمض رببونيكلوبك ثنائي الجديلة عبارة عن حمض رببونيكلويك أحادي الجديلة ‎(ssRNAI) single-stranded ribonucleic acid‏ التي تم إدخالها في خلية أو كائن لتثبيط الحمض النووي الرببوزي المرسل مستهدف. ترتبط عوامل حمض رببونيكلوبك ثنائي الجديلة أحادية الجديلة بنيوكلياز الإسكات المستحث لمعقد بالحمض النووي الريبوزي داخلي؛ ‎Argonaute‏ 2 والتي تقوم بعد ذلك 5 بشق الحمض النووي ‎(shoul‏ المرسل المستهدف. الأحماض النووية الريبوزية أحادية الجديلة بشكل عام تبلغ 30-15 نيكلوتيد ويتم تعديلها ميكانيكيا. تم وصف تصميم واختبار الأحماض النووية الريبوزية أحادية الجديلة في براءة الاختراع رقم 8101348 وفي 150:883-894 ‎Lima er al., (2012) Cell‏ وقد تم دمج محتوياتها هنا بالإشارة ‎Led)‏ كمرجع. يمكن استخدام أي من متواليات النيكلوتيد المضادة للحس الموضحة هنا كالحمض النووي الريبوزي أحادي الجديلة كما هو موضح هنا أو المعدلة كيماويا بواسطة الطرق 0 الموضحة في 150:883-894 ‎Lima et al., (2012) Cell‏ في نماذج معينة؛ ‎RNA‏ للاستخدام في التركيبات؛ الاستخدامات» وطرق الاختراع ‎Ble‏ عن الحمض النووي الريبوزي مزدوج الجديلة وتتم الإشارة إليها هنا ب "عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة مزدوج الجديلة؛” "جزيء الحمض النووي الرببوزي مزدوج الجديلة؛” "عامل 08818" أو ‎dsRNA"‏ يشير المصطلح 0:878"؛ إلى معقد من جزيئات حمض رببونيكلويك؛ يعانون من بنية مزدوجة تتضمن اثنين 5 .من جدائل حمض نووي مكملة المضادة للتوازي أساساء المشار إليها بأن لها توجيهات "حسية" و'مضادة للحس” نسبة إلى الحمض النووي الرببوزي مستهدف؛ أي؛ جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1.
في بعض النماذج وفقا للاختراع» يقوم الحمض النووي الريبوزي مزدوج الجديلة ببدء تدهور الحمض النووي الرربوزي مستهدف؛ مثلا؛ الحمض النووي الريبوزي المرسل؛ خلال آلية إسكات جينية ‎gene-silencing‏ ‎mechanism‏ ما بعد الاستنساخ المشار إليها هنا بتداخل الحمض النووي الريبوزي أو حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة.
بشكل ‎le‏ أغلب النيكلوتيدات لكل جديلة من جزيء حمض رببونيكلوبك ثنائي الجديلة عبارة عن رببونيكلوتيدات ‎aribonucleotides‏ ولكن كما هو موضح هنا بالتفصيل هناء يمكن أن تتضمن أي أو كل من الجدائل أيضا واحد أو أكثر من أجزاء غير رببونيكلوتيدات ‎Sie non-ribonucleotides‏ ديوكسي رببونيكلوتيد ‎deoxyribonucleotide‏ أو نيكلوتيد معدل. علاوة على ذلك؛ حسب الاستخدام في هذا الوصف؛ يمكن أن يتضمن "حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة' رببونيكلوتيدات ذات تعديلات كيماوية ‎chemical‏
‎tmodifications 0‏ يمكن أن يتضمن حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة تعديلات أساسية عند العديد من النيكلوتيدات. حسب الاستخدام هناء يشير المصطلح "نيكلوتيد معدل" إلى نيكلوتيد ‎cad‏ بشكل مستقل؛ شق سكر معدل ‎emodified sugar moiety‏ رابط نيكلوتيد بيني معدل ‎cmodified internucleotide linkage‏ أو نيكلوييز معدل ‎cmodified nucleobase‏ أو أي توليفة مما سبق. بالتالي» يتضمن المصطلح نيكلوتيد معدل استبدالات؛ إضافات أو ‎Sie lly]‏ مجموعة وظيفية ‎functional group‏ أو ذرة؛ لريط النيكلوسيد ‎clin‏
‏5 شقوق سكرء أو نيكلوبيزات ‎nucleobases‏ تتضمن التعديلات المناسبة للاستخدام في العوامل وفقا للاختراع يتم تضمين كل أنواع التعديلات المكشوف عنها هنا أو المعروفة في المجال. أي من هذه التعديلات؛ حسب الاستخدام في جزيء من نوع الحمض النووي الريبوزي أحادي الجديلة؛ بواسطة "حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة" أو "عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة" لأغراض الوصف وعناصر الحماية. يمكن أن تكون منطقة المزدوج ذات أي طول يسمح بالتدهور المعين للحمض النووي الرببوزي مستهدف
‏0 مطلوب خلال مسار الإسكات المستحث لمعقد بالحمض النووي ‎cipal‏ ويمكن أن يتفاوت النطاق من حوالي 9 إلى 36 زوج قاعدة في الطول» ‎Sie‏ حوالي 30-15 زوج قاعدة في الطول»؛ ‎Sle‏ حوالي 9؛ 0 11« 12 13< 4ل ¢15 قل لتقل 19« 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 0 31 32 33 34 35 أو 6 زوج قاعدة في الطول» مثل حوالي 30-15 29-15 28-15 27-15 26-15 25-15 24-15 23-15 22-15 21-15 20-15 19-15« 18-15
‎22-18 23-18 24-18 25-18 26-18 27-18 28-18 29-18 30-18 «17-15 25 23-19 24-19 25-19 26-19 27-19 28-19 29-19 30-19 20-18 21-18
22-19 21-19 20-19 30-20 29-20« 28-20« 27-20 26-20 25-20 2420-20- 23 22-20 21-20 30-21 29-21 28-21 27-21 26-21 25-21 24-21 21- 23 أو 22-21 زوج قاعدة في الطول. تتوسط النطاقات والأطوال في النطاقات المذكورة أعلاه ويتم ذكر الأطوال ‎Lad‏ لتكون عبارة عن جزءٍ من الاختراع.
يمكن أن يختلف الاثنين من الجدائل التي تشكل البنية المزدوجة من جزيء الحمض النووي الرببوزي ‎OST‏ ‏أو يمكن أن تكون ‎Ble‏ عن جزيء الأحماض النووية الريبوزية متفصل. حيث يكون الاثنين من الجدائل ‎Ble‏ عن جزءٍ من جزيء واحد أكبرء وبالتالي يتم توصيلها بواسطة سلسلة غير متقطعة من النيكلوتيدات بين الطرف 3" من أحد الجدائل والطرف 5” من الجديلة الأخرى المناظرة التي تكون البنية المزدوجة؛ تتم الإشارة إلى سلسلة الحمض النووي الريبوزي الموصلة ب"حلقة دبوسية ‎"hairpin 100p‏ يمكن أن تتضمن
0 الحلقة الدبوسية نيكلوتيد غير مزدوج ‎unpaired nucleotide‏ واحد على الأقل. في بعض النماذج؛ يمكن أن تتضمن الحلقة الدبوسية على الأقل 2 3( 4 5 6« 7 8 9 10؛ 20 23 أو أكثر من نيكلوتيدات غير مزدوجة ‎nucleotides‏ 1007031160 في بعض النماذج؛ يمكن أن تبلغ الحلقة الدبوسية 10 أو أقل من النيكلوتيدات. في بعض النماذج؛ يمكن أن تبلغ الحلقة الدبوسية 8 أو أقل من النيكلوتيدات غير المزدوجة. في بعض النماذج؛ يمكن أن تبلغ الحلقة الدبوسية 10-4 نيكلوتيدات غير مزدوجة. في بعض النماذج؛
5 يمكن أن تبلغ الحلقة الدبوسية 8-4 نيكلوتيدات. حيث يتم تضمين الاثنين من الجدائل المكملة أساسا من حمض رببونيكلوبك ثنائي الجديلة بواسطة جزيئات الحمض النووي الريبوزي منفصلة؛ لا تحتاج هذه الجزيئات؛ ولكن يمكن توصيلها تساهميا. حيث يتم توصيل اثنين من الجدائل تساهميا بواسطة وسيلة أخرى غير سلسلة غير متقطعة من النيكلوتيدات بين الطرف 3" من أحد الجدائل والطرف 5” من الجديلة الأخرى المناظرة التي تكون البنية المزدوجة؛ تتم الإشارة إلى البنية
0 الموصلة ‎connecting structure‏ ب 'رابط." يمكن أن تتضمن جدائل الحمض النووي الريبوزي نفس البنية أو عدد مختلف من النيكلوتيدات. العدد الأقصى من أزواج قاعدة عبارة عن عدد نيكلوتيدات في الجديلة الأقصر من حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة مطروحا منه ‎shal‏ معلقة موجودة في المزدوج. بالإضافة إلى البنية المزدوجة؛ ‎(Sa‏ أن يتضمن حمض رببونيكلوبك ثنائي الجديلة واحد أو أكثر من أجزاء نيكلوتيد معلقة ‎.nucleotide overhangs‏
في نماذج ‎dime‏ عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة وفقا للاختراع ‎Ble‏ عن حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة؛ كل جديلة ‎(Ally‏ تتضمن 23-19 نيكلوتيد» التي تتفاعل مع متوالية الحمض النووي الريبوزي
مستهدفة؛ مثلاء جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1» بدون الرغبة في الارتباط بأي نظرية؛ يتم تكسير الحمض النووي الريبوزي الطويلة مزدوجة الجديلة التي تم إدخالها في الخلايا في الحمض النووي الريبوزي أحادي الجديلة بواسطة نيوكلياز داخلي من النوع ‎IIT‏ المعروف ب ‎Sharp ef al. (2001) ) Dicer‏ ‎(Genes Dev. 15:485‏ يقوم ‎Dicer‏ إنزيم شبيه برببونيوكلياز 111 بمعالجة حمض رببونيكلوبك ثنائي الجديلة في 23-19 زوج قاعدة قصيرة متداخلة مع الأحماض النووية الرببوزية مع اثنين من أجزاء معلقة عند القاعدة 3 ‎(Bernstein, er al., (2001) Nature 409:363) base 3' overhangs‏ يتم دمج الأحماض النووية الريبوزية أحادية الجديلة بعد ذلك في معقد الإسكات المستحث بالحمض النووي الريبوزي حيث يقوم ‎where‏ واحد أو أكثر من هيليكازات بلف مزدوج الحمض النووي الرببوزي أحادي الجديلة؛ والذي يتيح للجديلة المكملة المضادة للحس لتوجيه التعرف المستهدف (107:309 ‎.(Nykanen, ef al., (2001) Cell‏ 0 عند الارتباط بالحمض النووي الريبوزي المرسل المستهدف المناسب؛ واحد أو أكثر من نيوكليازات داخلية في هدف شق الإسكات المستحث لمعقد بالحمض النووي الرببوزي لحث الإسكات ( ‎Elbashir, et al.,‏
‎Genes Dev. 15:188‏ (2001)). في بعض النماذج» حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة ‎Wy‏ للاختراع عبارة عن حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة ذو 30-24 نيكلوتيد؛ أو أطول حتى بشكل محتمل؛ ‎Sie‏ 35-25 53-27؛ أو 49-27 نيكلوتيد 5 التي تتفاعل مع متوالية الحمض النووي الريبوزي مستهدفة؛ ‎Dla‏ متوالية الحمض النووي الريبوزي المرسل مستهدفة بمركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1؛ لتوجيه شق الهدف الحمض النووي الريبوزي. بدون الرغبة في الارتباط بأي نظرية؛ يتم تكسير الحمض النووي الريبوزي الطويلة مزدوجة الجديلة الذي تم إدخاله في الخلايا في الحمض النووي الرببوزي أحادي الجديلة بواسطة نيوكلياز داخلي من النوع ‎IT‏ المعروفة ب ‎«(Sharp er al. (2001) Genes Dev. 15:485( Dicer‏ يقوم ‎Dicer‏ إنزيم شبيه بريبونيوكلياز ‎IIT‏ بمعالجة حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة ‎Jaks‏ 23-19 زوج قاعدة قصير متداخل مع الأحماض النووية الريبوزية مع اثنين من أجزاء معلقة عند القاعدة 3" (409:363 ‎(Bernstein, ef al., )2001( Nature‏ بعد ذلك يتم دمج الأحماض النووية الريبوزية أحادية الجديلة داخل معقد الإسكات المستحث بالحمض النووي الرببوزي ‎Cus‏ يقوم واحد أو أكثر من هيليكازات بفك مزدوج الحمض النووي الريبوزي أحادي الجديلة؛ الذي يسمح للجديلة المكملة المضادة للحس لتوجيه التعرف المستهدف (107:309 ‎al., )2001( Cell‏ اء ‎.(Nykanen,‏ ‏5 عند الارتباط بالحمض النووي الريبوزي الرسول المستهدف المناسب؛ واحد أو أكثر من نيوكليازات داخلية
في هدف شق الإسكات المستحث لمعقد بالحمض النووي الرببوزي لحث الإسكات ( ‎Elbashir, et al.,‏ ‎Genes Dev. 15:188‏ (2001)). حسب الاستخدام هناء يشير المصطلح ‎gia’‏ نيكلوتيد معلق ‎"nucleotide overhang‏ إلى نيكلوتيد غير مزدوج واحد على الأقل والذي يخرج من البنية المزدوجة ‎(mend‏ رببونيكلويك ثنائي الجديلة مزدوج الجديلة. ‎Die 5‏ عندما يمتد الطرف 3 من أحد جدائل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة وراء الطرف 5" من الجديلة الأخرى؛ أو العكس بالعكس؛ يوجد ‎gh‏ نيكلوتيد معلق. يمكن أن يتضمن حمض رببونيكلوبك ثنائي الجديلة ‎ein‏ معلق من واحد على الأقل نيكلوتيد؛ بشكل بديل يمكن أن يتضمن الجزء المعلق اثنين على الأقل من نيكلوتيدات» ثلاثة نيكلوتيدات على الأقل؛ أربعة نيكلوتيدات على الأقل؛ خمس نيكلوتيدات على الأقل أو أكثر. يمكن أن يتضمن ‎a‏ النيكلوتيد المعلق أو يتكون من نظير نيكلوتيد/نيكلوسيد؛ شاملة ديوكسي 0 نيكلوتيد ‎deoxynucleotide‏ / نيكلوسيد. يمكن أن يكون ‎gall‏ المعلق موجود على الجديلة الحسية؛ الجديلة المضادة للحس» أو أي توليفة مما سبق. علاوة على ذلك؛ يمكن أن يكون نيكلوتيد الجزء المعلق موجود على الطرف ‎OF‏ الطرف 03 أو كل من أطراف أي من الجديلة المضادة للحس أو الحسية لحمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة. في نماذج معينة؛ الجديلة المضادة للحس لحمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة تتضمن 10-1 نيكلوتيد؛ ‎Ole‏ ‏5 3-0 3-1 4-2 5-2 10-4 10-5 1 2» 3 4 5 6» 7 8» 9< أو 10 ‎ais‏ يمكن أن يتضمن جزءِ معلق عند الطرف 3” أو الطرف 5”. في نماذج معينة؛ ‎gall‏ المعلق على الجديلة الحسية أو الجديلة المضادة للحس» أو كل منء الأطوال الممتدة أطول من 10 نيكلوتيدات»؛ ‎lie‏ 30-1 نيكلوتيد؛ 30-2 نيكلوتيد» 30-10 نيكلوتيد؛ أو 15-10 نيكلوتيد في الطول. في نماذج معينة؛ ‎gia‏ معلق ممتد موجود على الجديلة الحسية من المزدوج. في نماذج معينة؛ الجزءِ المعلق الممتد موجود على الطرف 3 0 -من الجديلة الحسية من المزدوج. في نماذج معينة؛ الجزءِ المعلق الممتد موجود على الطرف 5" من الجديلة الحسية من المزدوج. في نماذج معينة؛ جزءِ معلق ممتد ‎is‏ على الجديلة المضادة للحس من المزدوج. في نماذج معينة؛ ‎gall‏ المعلق الممتد موجود على الطرف 3" من الجديلة المضادة للحس من المزدوج. في نماذج معينة؛ ‎gall‏ المعلق الممتد موجود على الطرف 5" من الجديلة المضادة للحس من المزدوج. في نماذج معينة؛ يتم استبدال واحد أو أكثر من النيكلوتيدات في ‎gall‏ المعلق مع نيكلوسيد ثيوفوسفات ‎.nucleoside thiophosphate 5‏
المصطلح ‎"Blunt of‏ أو "طرف مثلم 600 01004" يعني أنه لا توجد نيكلوتيدات غير مزدوجة عند هذا الطرف من عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة مزدوج الجديلة؛ أي؛ لا يوجد جزءٍ نيكلوتيد معلق. عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة مزدوج الجديلة 'ذو طرف مثلم" مزدوج الجديلة على طوله؛ أي؛ بدون ‎gia‏ نيكلوتيد معلق عند أي طرف من الجزيء. تتضمن عوامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة وفقا للاختراع عوامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة بدون ‎gia‏ نيكلوتيد معلق عند أحد الأطراف (أي؛ عوامل مع جزءٍ معلق واحد وطرف مثلم واحد) أو بدون أجزاء نيكلوتيد معلقة عند كل طرف. يشير المصطلح "جديلة مضادة للحس" أو "جديلة موجهة ‎"guide strand‏ جديلة من حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة؛ ‎lie‏ حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة؛ ‎lly‏ تتضمن منطقة مكملة أساسا لمتوالية مستهدفة؛ ‎Sle‏ مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 الحمض النووي الرببوزي المرسل. حسب 0 الاستخدام ‎cls‏ يشير المصطلح 'منطقة تكامل"” إلى المنطقة على الجديلة المضادة للحس مكملة أساسا لمتوالية؛ مثلا متوالية مستهدفة؛ مثلا؛ متوالية نيكلوتيد مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1؛ كما هو محدد هنا. حيث منطقة التكامل غير مكملة ‎LIS‏ للمتوالية المستهدفة؛ يمكن أن تكون حالات عدم التوافق في المناطق الداخلية أو الطرفية من الجزيء. بشكل عام؛ سو تكون أغلب حالات عدم التوافق الأكثر تحملا في المناطق الطرفية ‎lie cterminal regions‏ في 5 3 2 أو 1 نيكلوتيد من الطرف 5” أو 5 3 من حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة. في بعض النماذج؛ يتضمن عامل حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة مزدوج الجديلة وفقا للاختراع حالة عدم توافق نيكلوتيد في الجديلة المضادة للحس. في بعض النماذج؛ يتضمن عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة مزدوج الجديلة وفقا للاختراع ‎Ala‏ عدم توافق نيكلوتيد في الجديلة الحسية. في بعض النماذج؛ تبلغ ‎dla‏ عدم توافق النيكلوتيد ‎Ole ds‏ في 5؛ 4 3؛ 2 أو 1 نيكلوتيدات من الطرف 3" من حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة. في نموذج ‎«AT‏ حالة عدم 0 توافق النيكلوتيد؛ ‎Ole‏ موجودة في نيكلوتيد الطرف 3" من حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة. يشير المصطلح "جديلة حسية" أو "جديلة مرسلة ‎"passenger strand‏ حسب الاستخدام هناء إلى جديلة حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة التي تتضمن منطقة مكملة أساسا لمنطقة من الجديلة المضادة للحس وفقا لتحديد هذا المصطلح. حسب الاستخدام هناء يشير المصطلح 'منطقة الشق ‎"cleavage region‏ إلى منطقة موضوعة مباشرة بجوار 5 موقع الشق. موقع الشق عبارة عن الموقع على الهدف التي يتم عندها الشق. في بعض النماذج؛ تتضمن منطقة الشق ثلاثة قواعد على أي طرف من؛ ومجاورة مباشرة ل موقع الشق. في بعض النماذج؛ تتضمن
منطقة الشق اثنين من قواعد على أي من أطراف؛ ومباشرة ‎«loan‏ موقع الشق. في بعض النماذج؛ يحدث موقع الشق خصوصا عند الموقع المربوط بواسطة النيكلوتيدات 10 و11 من الجديلة المضادة للحس؛ وتتضمن منطقة الشق النيكلوتيدات 11 12 و13. حسب الاستخدام هناء وما لم تتم الإشارة إلى غير ذلك؛ يشير المصطلح "مكمل" عند الاستخدام لوصف متوالية نيكلوتيد أولى نسبة إلى متوالية نيكلوتيد ‎dul‏ إلى قدرة أوليجونيكلوتيد أو بولي نيكلوتيد ‎polynucleotide‏ يتضمن متوالية النيكلوتيد الأولى لتتهجن وتشكل بنية مزدوجة في ظروف معينة مع أوليجونيكلوتيد أو بولي نيكلوتيد يتضمن متوالية النيكلوتيد الثانية؛ كما هو مفهوم بواسطة الخبير في المجال. ‎(Sa‏ أن تكون هذه الظروف؛ ‎Ole‏ عبارة عن ظروف قاسية؛ حيث يمكن أن تتضمن الظروف القاسية: 0 مل مولار كلوريد الصوديوم ‎(NaCl) Sodium chloride‏ 40 مل مولار بى آى بى إى أس ‎PIPES‏ ‏0 بدرجة ‎Vee de 1 64 Amgen‏ ثنائي أمين الإيثيلين ‎ely‏ حمض الأسيتيك ‎(EDTA) Ethylenediaminetetraacetic acid‏ 250 أو 0م لمدة 16-12 ساعة متبوعة بالغسل (انظرء ‎“Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Sambrook, er al. (1989) Cold Spring Harbor «>is‏ ‎(Laboratory Press‏ . يمكن أن تنطبق ظروف أخرى؛ مثل الظروف المناظرة فسيولوجيا داخل الكائن. سوف يكون الخبير في المجال قادرا على تحديد مجموعة الظروف الأنسب اختبار تكامل اثنين من المتواليات 5 وفقا للتطبيق الأمثل للنيكلوتيدات المهجنة ‎hybridized nucleotides‏ تتضمن المتواليات المكملة ‎Complementary sequences‏ في حمض رببونيكلويك ‎AUS‏ الجديلة؛ متلا في حمض ريبونيكلوبك ثنائي الجديلة كما هو موضح هناء مزاوجة قاعدة من أوليجونيكلوتيد أو بولي نيكلوتيد متوالية نيكلوتيد أولى إلى أوليجونيكلوتيد أو بولي نيكلوتيد يتضمن متوالية النيكلوتيد الثانية في مقابل الطول الكامل لواحد أو كل من متواليات النيكلوتيد. يمكن الإشارة إلى هذه المتواليات ب 'مكملة ‎"US‏ نسبة إلى 0 بعضها البعض هنا. مع ذلك» حيث تتم الإشارة إلى متوالية أولى ب 'مكملة أساسا” نسبة إلى متوالية ثانية هناء يمكن أن تكون المتواليتين مكملتين كلياء أو يمكن أن تشكل واحد أو أكثر من؛ ولكن بشكل عام ما لا يزبد عن 5 4 3 أو 2 أزواج قاعدة غير متوافقة عند التهجين ‎hybridization‏ لمزدوج ما يصل إلى 30 أزواج قاعدة؛ عند الحفاظ على القدرة على التهجين تحت الظروف الأكثر ارتباط بالتطبيق المطلق؛ مثلا؛ تثبيط التعبير الجيني عبر مسار الإسكات المستحث لمعقد بالحمض النووي الرببوزي. مع ذلك؛ حيث يتم 5 تصميم اثنين من أوليجونيكلوتيدات ‎oligonucleotides‏ لتكوين؛ عند التهجين» واحد أو أكثر من الأجزاء المعلقة أحادية الجديلة؛ لن يتم اعتبار الأجزاء المعلقة على أنها حالات عدم توافق نسبة إلى تحديد التكامل.
‎Ole‏ يتضمن حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة أوليجونيكلوتيد واحد يتضمن 21 نيكلوتيد في الطول وأوليجونيكلوتيد آخر يتضمن 23 نيكلوتيد في ‎(Jalal)‏ حيث يتضمن الأوليجونيكلوتيد الأطول متوالية من 1 نيكلوتيد مكملة ‎LIS‏ للأوليجونيكلوتيد الأقصر» ويمكن الإشارة إليه ب 'مكمل كليا" للأغراض الموضحة هنا .
يمكن أن تتضمن المتواليات ‎CALS‏ حسب الاستخدام هناء أو يمكن تكوبنها ‎LIS‏ من؛ أزواج قاعدة ‎Watson-Crick‏ أو أزواج قاعدة المكونة من نيكلوتيدات غير طبيعية ومعدلة؛ طالما أنه تتم تلبية المتطلبات المذكورة أعلاه نسبة إلى قدرتها على التهجين. تتضمن أزواج قاعدة ‎Watson-Crick‏ هذه؛ ولكنها غير مقيدة ب أزواج قاعدة ‎.Hoogstein gl G:U Wobble‏ يمكن استخدام المصطلحات "مكملء" 'مكملة كليا" 5 ‎ALS‏ أساسا" هنا نسبة إلى توافق القاعدة بين الجديلة
0 الحسية والجديلة المضادة للحس لحمض ريبوثيكلويك ثنائي الجديلة؛ أو بين الجديلة المضادة للحس لعامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة مزدوج الجديلة ومتوالية مستهدفة؛ كما هو مفهوم من سياق استخدامها. حسب الاستخدام هناء يشير البولي نيكلوتيد "المكمل أساسا ‎pial‏ على الأقل من" الحمض النووي الريبوزي مرسل إلى بولي نيكلوتيد مكمل أساسا ‎sad‏ مجاور من الحمض النووي الريبوزي المرسل محل الاهتمام ‎Oli)‏ الحمض النووي الريبوزي المرسل يرمز جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1). مثلاء بولي
5 تيكلوتيد مكمل لجز على الأقل من مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 الحمض النووي الريبوزي المرسل إذا كانت المتوالية مكملة أساسا ‎sal‏ غير معاق من الحمض النووي الريبوزي المرسل يرمز جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1. ‎dull‏ في بعض النماذج؛ بولي نيكلوتيدات الجديلة الحسية ‎sense strand polynucleotides‏ وبولي نيكلوتيدات مضادة ‎antisense polynucleotides (wall‏ الموضحة هنا مكملة ‎LIS‏ لمتوالية مركب ترابطي
0 1 لموت الخلية المبرمج 1 المستهدفة. في نماذج ‎«(gal‏ البولي نيكلوتيدات المضادة للحس المكشوف عنها هنا مكملة أساسا لمتوالية مركب ترابطي لموت الخلية المبرمج 1 المستهدفة وتتضمن متوالية النيكلوتيد المجاورة والتي تكون مكملة على الأقل بمقدار 780 على طولها للمنطقة المكافئة لمتوالية النيكلوتيد وفقا لأي من متوالية بهوية رقم:1 أو شظية من أي من متوالية بهوية رقم:1؛ ‎Jie‏ على الأقل حوالي 785 786 787 288 289 حوالي 90
5 91 792 793 94 795 796 797 798 أو 799 مكمل أو 7100 مكمل.
في بعض النماذج؛ يتضمن حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة وفقا للاختراع جديلة حسية مكملة أساسا لبولي نيكلوتيد مضاد للحس والذي؛ بدوره؛ يكون مكمل ل ‎a‏ متوالية مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 المستهدفة وتتضمن متوالية النيكلوتيد المجاورة والتي تكون مكملة على الأقل بمقدار 780 على طولها للمنطقة المكافئة لمتوالية النيكلوتيد وفقا لأي من الجدائل المضادة للحس في الجدول 3 أو الجدول 5؛ أو شظية من أي من الجدائل المضادة للحس في الجدول 3 والجدول 5؛ مثل حوالي 785 786 787 8 189 390 91 92 793 94 195 196 797 298 أو 799 مكمل. أو 7100 مكمل. في بعض النماذج؛ يتضمن حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة وفقا للاختراع جديلة مضادة للحس مكملة أساسا لمتوالية مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 المستهدفة ويتضمن متوالية النيكلوتيد المجاورة 0 المكملة بمقدار 780 على الأقل على طولها للمنطقة المكافئة لمتوالية النيكلوتيد وفقا لأي من الجدائل غير الحسية في الجدول 3 أو 5؛ أو شظية من أي من الجدائل الحسية في الجدول 3 و5؛ مثل حوالي 785؛ 6 087 7/88 7/89 90 91 92 93 94 95 796 397 98 أو 799 ‎«Jaa‏ ‏أو 7100 مكمل. في أحد الجوانب وفقا للاختراع» عامل للاستخدام في الطرق وتركيبات وفقا للاختراع ‎Ble‏ عن جزيء 5 أوليجونيكلوتيد مضاد ‎antisense oligonucleotide molecule (wall‏ أحادي الجديلة الذي ‎lady‏ الحمض النووي الريبوزي المرسل مستهدف عبر آلية تثبيط مضادة ‎.antisense inhibition mechanism (wall‏ جزيء الأوليجونيكلوتيد المضاد للحس أحادي الجديلة مكمل لمتوالية في الحمض النووي الريبوزي المرسل المستهدف. يمكن أن تقوم أوليجونيكلوتيدات المضادة للحس أحادي الجديلة بتثبيط التحويل بطريقة القياس المتكافئ بواسطة مزاوجة القاعدة بالحمض النووي الريبوزي المرسل والإعاقة المادية لآلية التحويل؛ انظر ‎N. er al., (2002) Mol Cancer Ther 1:347-355 0‏ ,8هاط. يمكن أن يكون جزيء أوليجونيكلوتيد مضاد للحس أحادي الجديلة حوالي 14 إلى حوالي 30 نيكلوتيد في الطول ولها متوالية مكملة لمتوالية مستهدفة. ‎lie‏ يمكن أن يتضمن جزيء أوليجونيكلوتيد مضاد للحس أحادي الجديلة متوالية تبلغ على الأقل 14؛ 15« 16 17 18( 19( 20؛ أو أكثر من نيكلوتيد متجاور من أي من المتواليات المضادة للحس الموضحة هنا. 5 تتضمن العبارة 'ملامسة خلية مع حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة؛' ‎Jie‏ حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة؛ حسب الاستخدام هناء ملامسة خلية بواسطة أي وسيلة ممكنة. تتضمن ملامسة الخلية مع حمض
رببونيكلويك ثنائي الجديلة ملامسة خلية في المعمل مع حمض رببونيكلوبك ثنائي الجديلة أو ملامسة خلية في الكائن ‎Al)‏ مع حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة. يمكن تنفيذ الملامسة مباشرة أو بشكل غير مباشر. بالتالي؛ ‎Ole‏ يمكن وضع حمض رببونيكلوبك ثنائي الجديلة في تلامس مادي مع الخلية بواسطة طريقة التنفيذ الفردية؛ أو بشكل بديل؛ يمكن وضع حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة في ‎Alls‏ تسمح أو تجعلها تتلامس بالتالي داخليا مع الخلية.
يمكن تنفيذ ملامسة الخلية في المعمل؛ ‎Sie‏ بواسطة حضانة الخلية مع حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة. يمكن تنفيذ ملامسة الخلية في الكائن ‎Ole (all‏ بواسطة حقن حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة داخل أو بالقرب من النسيج حيث يتم وضع الخلية؛ أو بواسطة حقن حمض رببونيكلوبك ثنائي الجديلة داخل منطقة أخرى ؛ ‎Sle‏ تيار الدم ‎bloodstream‏ أو الفراغ تحت الجلدي ‎subcutaneous space‏ بحيث يصل 0 هذا العامل بالتالي إلى النسيج في الموضع حيث تتم ملامسة الخلية. ‎Ole‏ يمكن أن يحتو حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة على أو يتم اقترانه بمركب ترابطي؛ مثلاء 17-أسيتيل جالاكتوز أمين» ‎“Nl‏ ‏أسيتيل جالاكتوز أمين 3 والتي ‎dag‏ حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة إلى الموقع محل الاهتمام؛ مثلاء الكبد. من الممكن أيضا استخدام توليفات من الطرق في المعمل وفي الكائن الحي للملامسة. ‎Oe‏ يمكن أيضا ملامسة الخلية أيضا في المعمل مع ‎(mes‏ ريبونيكلويك ثنائي الجديلة وبالتالي تتم زراعتها في
5 خاضع. في نماذج ‎dime‏ تتضمن ملامسة خلية مع حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة ‎"JIA‏ أو 'توصيل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة داخل الخلية' بواسطة تسهيل أو التأثير على الاستهلاك أو الامتزاز داخل الخلية. يمكن أن يتم امتزاز أو استهلاك حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة خلال التسريب غير المدعم ‎unaided‏ ‎diffusion‏ أو العمليات الخلوية النشطة ‎cactive cellular processes‏ أو بواسطة العوامل أو الأجهزة 0 الإضافية. يمكن أن يتم إدخال حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة داخل خلية في المعمل أو في الكائن الحي. ‎lia‏ بالنسبة للإدخال في الكائن الحي؛ يمكن حقن حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة داخل موقع نسيج ‎tissue site‏ أو يتم إعطاؤه جهازيا. في الكائن الحي يمكن أن يتم التوصيل بواسطة نظام توصيل بيتا -جلوكان ‎Jie cbeta-glucan delivery system‏ تلك الموضحة في براءات الاختراع الأمريكية أرقام 1 و5607677 والمنشور الأمريكي رقم 0281781/2005< وقد تم دمج محتوياتها هنا بالكامل 5 بالإشارة إليها كمرجع. يتضمن الإدخال في المعمل داخل خلية طرق معروفة في المجال مثل التخريم
الكهربي ‎electroporation‏ والحقن الدهني ‎lipofection‏ هناك مناهج أخرى تم وصفها هنا أدناه أو معروفة في المجال. المصطلح "جسيم دهني بحجم النانو" أو "100" عبارة عن حوبصلة ‎vesicle‏ تتضمن طبقة دهنية تغلف جزيء نشط ‎a die (Waa‏ جزيء حمض نووي؛ ‎Sle‏ حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة أو بلازميد والذي يتم ‎die‏ نسخ حمض رببونيكلوبك ثنائي الجديلة. يتم ‎Chay‏ جسيمات دهنية بحجم النتانو ‎lipid‏ ‎(LNPs) nanoparticles‏ في» مثلاً؛ براءات الاختراع الأمريكية أرقام 6858225« 6815432« 8158601« 8058069« وقد تم دمج محتوباتها هنا بالكامل بالإشارة إليها كمرجع. حسب الاستخدام هناء "الخاضع” عبارة عن حيوان؛ مثل كائن تديي؛ شاملا كائن رئيسي ‎Ji)‏ إنسان؛ ‎GS‏ ‏رئيسي غير بشري؛ ‎She‏ قرد؛ وشمبانزي)؛ كائن غير رئيسي (مثل بقرة؛ ‎«pid‏ جمل؛ ‎(LY‏ حصان؛ ‎ele 10‏ أرنب؛ خروف؛ هامستر؛ خنزير غينياء قطء كلب؛ ‎Old dyn‏ حصان؛ وحوت)؛ أو طائر ‎Oia)‏ ‏بطة أو إوزة) ‎Ally‏ تعبر عن الجين المستهدف ‎dtarget gene‏ إما داخليا أو بشكل غير متجانس؛ عندما تتضمن متوالية الجين المستهدف تكامل كافي مع عامل حمض رببونيكلوبك ثنائي الجديلة لتعزيز الاستبعاد المستهدف. في نماذج معينة؛ الخاضع عبارة عن إنسان؛ مثل إنسان يتم علاجه من أو مشخص بمرض؛ اضطراب أو حالة والذي قد يستفيد من التقليل في جين التعبير عن أو تكاثر مركب ترابطي 1 لموت الخلية 5 المبرمج 1؛ إنسان معرض لمرض؛ اضطراب أو ‎Als‏ والذي قد يستفيد من التقليل في جين التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1؛ إنسان يعانون من مرض؛ اضطراب أو حالة والذي قد يستفيد من التقليل في جين التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1؛ أو إنسان يتم علاجه من مرض؛ اضطراب أو حالة والذي قد يستفيد من التقليل في جين التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج ‎WS]‏ هو موضح هنا. في بعض النماذج؛ الخاضع عبارة عن إنسان أنثى. في نماذج أخرى؛ الخاضع 0 عبارة عن إنسان ذكر. حسب الاستخدام ‎cba‏ تشير المصطلحات "علاج أو 'دواء" إلى النتيجة المفيدة أو المطلوية شاملة؛ ولكنها غير مقيدة ب تخفيف أو تهدئة واحد أو أكثر من الأعراض المرتبطة بجين التعبير عن إنتاج بروتين مركب ‎ads‏ 1 لموت الخلية المبرمج 1 أو مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1؛ ‎cilia) lie‏ خصوصا إصابة زمنية بين خلوية؛ مثلاء إصابة فيروسية مزمنة؛ أو السرطان. يمكن أن يعني "الدواء" ‎Lad‏ إطالة 5 عمر البقاء مقارنة بعمر البقاء المتوقع في غياب الدواء. يمكن أن يتضمن الدواء الوقاية من تطوير الاعتلال المشترك ‎cco-morbidities‏ مثلا؛ تلف الكبد المخفض في خاضع مع إصابة كبدية.
المصطلح 'أقل" في سياق مستوى جين التعبير عن إنتاج بروتين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 أو مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 في خاضع؛ أو مرض مرقم أو عرض يشير إلى التقليل الملحوظ إحصائيا في هذا المستوى. يمكن أن يكون التقليل» ‎Ole‏ على الأقل 720 725 730 735 0 45 50 55ل 160 65 270 1275 780 785 790 أو 795 مقارنة بعينة ضابطة مناسبة؛ أو إلى أقل من مستوى الكشف عن طريقة الكشف. في نماذج معينة؛ تتم معايرة التعبير عن الهدف؛ ‎(gl‏ المنخفض إلى مستوى مقبول كما في نطاق طبيعي لفرد بدون هذا الاضطراب. في نماذج معينة؛ تتضمن الطرق تثبيط مرتبط نسبيا للتعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1؛ مثلا كما هو مبين بواسطة ناتج مرتبط سريريا بعد علاج خاضع مع عامل لتقليل التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت
الخلية المبرمج 1.
0 حسب الاستخدام هناء المصطلح " مرض مرتبط بمركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1" أو 'مرض مرتبط ب 01-11" عبارة عن مرض أو اضطراب ناتج بواسطة. أو المرتبطة بجين التعبير عن إنتاج بروتين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 أو مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1. يتضمن المصطلح 'مرض مرتبط بمركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1" مرض؛ اضطراب أو ‎Alla‏ والذي قد يستفيد من تقليل في جين التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1؛ تكاثرء أو نشاط البروتين. تتضمن
5 الأمثلة غير المقيدة على الأمراض المرتبطة بمركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1؛ ‎Ole‏ إصابة؛ خصوصا إصابة بين خلوية مزمنة؛ ‎lie‏ إصابة فيروسية؛ ‎lia‏ التهاب الكبد؛ أو السرطان. في نماذج ‎dime‏ مرض مرتبط بمركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 عبارة عن ‎dla)‏ خصوصا إصابة زمنية بين خلوية؛ ‎Ole‏ إصابة فيروسية؛ ‎Die‏ إصابة فيروس التهاب الكبد؛ ‎Die‏ التهاب الكبد ‎B‏ ‏إصابة أو التهاب الكبد ‎D‏ إصابة. في نماذج معينة؛ الإصابة عبارة عن إصابة بكتيرية مزمنة؛ ‎lia‏ التدرن
0 الرثوي. في نماذج ‎dine‏ مرض مرتبط بمركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 ‎Ble‏ عن السرطان؛ خصوصا سرطان الكبدء ‎Dia‏ كارسينوما خلايا الكيد ‎.(HCC) heptatocellular carcinoma‏ يقصد ب ‎aS‏ فعالة علاجياء” حسب الاستخدام هناء أن يتضمن كمية حمض رببونيكلوبك ثنائي الجديلة التي؛ عند الإعطاء إلى مريض لعلاج خاضع يعاني من إصابة؛ خصوصا إصابة بين خلوية مزمنة؛ أو السرطان؛ أو مرض آخر مرتبط بمركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1؛ مناسب للتأثير على علاج
5 المرض ‎Di)‏ بواسطة تلاشي؛ تخفيف أو الحفاظ على المرض الموجود أو الواحد أو الأكثر من أعراض المرض أو الحالات المرضية المرتبطة بها). يمكن أن تختلف "الكمية الفعالة ‎"ladle‏ بشكل معتمد على
حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة؛ كيفية إعطاؤه؛ المرض وحدته وتاريخه؛ السن» الوزن التاريخ العائلي؛ التعويض الجيني؛ مرحلة العمليات المرضية التي يتوسط فيها جين التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 أنواع العلاجات السابقة أو المصاحبة؛ إن ‎ching‏ وغيرها من الخواص الفردية الأخرى للمريض المطلوب علاجه.
تتضمن "الكمية الفعالة علاجيا" ‎Lind‏ كمية من حمض ريبونيكلوبك ثنائي الجديلة التي تنتج بعض الآثار المطلوية أو الجهازية عند نسبة فائدة/خطر منطقية قابلة للتطبيق على أي دواء. ‎(Say‏ إعطاء أحماض ريبونيكلويك مزدوجة الجديلة المستخدمة في طرق الاختراع الحالي بكمية كافية لإنتاج نسبة فائدة/خطر منطقية تنطبق على هذا الدواء. تتضمن الكمية الفعالة علاجيا كمية تؤدي إلى تغير أو تثبيت مرتبط سريرياء حسب الحاجة؛ للمرض أو الحالة المشار إليها.
يتم استخدام العبارة 'مقبول صيدلانيا" هنا للإشارة إلى تلك المركبات؛ المواد؛ التركيبات؛ أو صور الجرعة والموجودة؛ في منظور الحكم الطبي المنطقي؛ للاستخدام المناسب بشكل ملامس لأنسجة خاضعين بشر وخاضعين حيوانات بدون سمية مفرطة؛ تهيج؛ استجابة حساسة؛ أو مشكلة أو عرض آخرء متوافق مع نسبة فائدة/خطر منطقية. العبارة 'مادة حاملة مقبولة صيدلانيا" حسب الاستخدام هنا تعني مادة مقبولة صيدلانياء تركيبة؛ أو ناقل؛
5 مثل مادة ملء ‎filler‏ سائلة أو ‎(dia‏ مخفف ‎cdiluent‏ سواغ ‎cexcipient‏ وسيلة مساعدة على التصنيع ‎manufacturing aid‏ (مثلا؛ مزلق ‎cJubricant‏ مغنسيوم تلك ‎magnesium‏ ع0 سيترات ‎stearate‏ كالسيوم ‎calcium‏ أو زنك أو حمض ستيريك ‎(steric acid‏ « أو مادة تغليف مذيب ‎solvent encapsulating‏ ‎cmaterial‏ المتضمنة في حمل أو نقل ‎Call‏ الحالي من عضو ‎candy‏ أو ‎gia‏ من الجسم؛ إلى عضو آخرء أو جزء من الجسم. يجب أن تكون كل مادة حاملة ‎"Agia‏ في سياق التوافق مع مكونات الصيغة
0 وليس الخاضع المصاب الذي يتم علاجه. تتضمن بعض الأمثلة على المواد التي يمكن أن تعمل كمواد حاملة ‎carriers‏ مقبولة صيدلانيا: (1) سكريات؛ مثل لاكتوز ‎clactose‏ جلوكوز ‎glucose‏ وسكروز ‎tsucrose‏ ‏)2( نشويات؛ ‎Jia‏ نشا الذرة ونشا البطاطس؛ )3( سيليلوز ©66110108؛ ومشتقاته؛ مثل صوديوم كربوكسي ميقيل سيليلوز ‎sodium carboxymethyl cellulose‏ إيقيل سيليلوز ‎ethyl cellulose‏ وسيليلوز أسيتات ‎cellulose acetate‏ (4) قتاد مسحوق ‎tpowdered tragacanth‏ )5( شعير؛ )6( جيلاتين ‎tgelatin‏ )7(
5 عوامل تزليق ‎Jie cubricating agents‏ ستيرات مغنسيوم ‎cmagnesium state‏ صوديوم لوريل سلفات ‎sodium lauryl sulfate‏ وتلك؛ )8( سواغات ‎Jia cexcipients‏ زيدة الكاكاو وشمع التحاميل ‎suppository‏
‎waxes‏ (9) الزيوت؛ ‎Jie‏ زيت الفول السوداني؛ زيت بذر القطن؛ زيت العصفر؛ زيت السمسم؛ زيت الزيتون؛ ‎cu‏ الذرة وزبت فول الصويا؛ (10) مركبات جليكول ‎cglycols‏ مثل بروبيلين جليكول ‎propylene‏ ‏1ه©17ع؛ )11( مركبات بوليول ‎cpolyols‏ مثل جليسرين ‎cglycerin‏ سوربيتول ‎sorbitol‏ مانيتول ‎mannitol‏ ‏وبولي إيثيلين جليكول ‎polyethylene glycol‏ )12( مركبات إستر ‎Jit) Jie cesters‏ أوليات ‎ethyl oleate‏ ‎dads 5‏ لورات ‎tethyl laurate‏ )13( أجار ‎tagar‏ )14( عوامل تنظيم ‎Jie cbuffering agents‏ مغنسيوم هيد روكسيد ‎magnesium hydroxide‏ وألومنيوم هيدر وكسيد ‎¢aluminum hydroxide‏ )15( حمض ألجينيك ‎talginic acid‏ (16) ماء خالي من البيروجين ‎water‏ ©©0770860-0؛ )17( محلول ملحي متساوي التوتر ‎tisotonic saline‏ (18) محلول ريتجر ‎¢Ringer's solution‏ )19( كحول إيقيل ‎tethyl alcohol‏ )20( محاليل تنظيم ‎buffered solutions‏ درجة الحموضة؛ )21( مركبات بولي إستر ‎cpolyesters‏ مركبات بولي
0 كربونات ‎polycarbonates‏ و/أو مركبات بولي ‎¢polyanhydrides jug‏ (22) عوامل إكساب قوام ‎Jie cbulking agents‏ مركبات بولي ببتيد ‎polypeptides‏ وأحماض أمينية ‎amino acids‏ )23( مكون المصل ‎(ic cserum component‏ مصل ألبومين ‎serum albumin‏ اتش دى أل ‎HDL‏ و بروتين دهني منخفض الكتثافة ‎¢(LDL) low-density lipoprotein‏ 5 )22( مواد أخرى غير سامة متوافقية مستخدمة في الصيغ الصيدلانية.
يتضمن المصطلح ‎"die‏ حسب الاستخدام هناء مجموعة من موائع مشابهة؛ ‎(DA‏ أو أنسجة معزولة من خاضع, بالإضافة إلى موائع؛ خلاياء أو أنسجة موجودة في خاضع. تتضمن الأمثلة على الموائع البيولوجية ‎biological fluids‏ الدم» المصل وموائع مصلية ‎cserosal fluids‏ بلازماء مائع دماغي نخاعي ‎«cerebrospinal fluid‏ موائع بصرية ‎cocular fluids‏ العقد الليمفاوية ‎clymph‏ البول» اللعاب ‎«saliva‏ وما شابه. يمكن أن تتضمن عينات النسيج عينات من أنسجة؛ أعضاء؛ أو مناطق موضعية ‎localized‏
0 «دمنعع:. ‎Ole‏ يمكن اشتقاق العينات من أعضاء معينة؛ أجزاء من أعضاء؛ أو موائع أو خلايا في هذه الأعضاء. في نماذج معينة؛ يمكن اشتقاق العينات من الكبد ‎Sle)‏ الكبد بالكامل أو أجزاء معينة من الكبد أو أنواع معينة من خلايا في ‎Sl‏ مثل؛ ‎DAY Ole‏ الكبدية). يمكن أن تشير 'العينة المشتقة من الخاضع” إلى الدم المسحوب من الخاضع أو بلازما المشتق منه. في نماذج معينة عند الكشف عن مستوى مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1؛ تشير "العينة" بشكل مفضل إلى مائع نسيج أو جسم من خاضع
5 حيث يمكن الكشف عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 قبل إعطاء العامل ‎Gy‏ للاختراع؛ مثلاء خزعة الكبد من خاضع مع إصابة ‎(aS‏ خزعة الورم ‎biopsy‏ «0000. في خاضعين معينين»؛ ‎Ole‏
خاضعين أصحاء؛ يمكن ألا يتم الكشف عن مستوى مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 في عدد من جسم موائع ‎body fluids‏ أنواع الخلية؛ وأنسجة. 1 أحماض رببونيكلويك مزدوجة الجديلة وفقا للاختراع يقدم الاختراع الحالي أحماض ريبونيكلويك مزدوجة الجديلة التي تثبط التعبير عن جين مركب ترابطي 1
لموت الخلية المبرمج 1. في النماذج المفضلة؛ يتضمن حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة جزيئات حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة لتثبيط التعبير عن جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 في خلية؛ مثل خلية في خاضع؛ ‎GIS Ole‏ ثديي؛ ‎Jie‏ إنسان يعانون من مرض مرتبط بمركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1؛ مثلاء إصابة مزمنة. يتضمن عامل حمض رببونيكلويك ثنائى الجديلة ‎double-stranded‏
‎(dsRNA) ribonucleic acid 0‏ جديلة مضادة للحس لها منطقة تكامل مكملة ‎glad‏ على الأقل من الحمض النووي الريبوزي المرسل المكون في التعبير عن جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1. تبلغ منطقة التكامل حوالي 0 نيكلوتيد أو أقل في الطول ‎Dig)‏ حوالي 30 29 28 27 26 25 24 23 22 21 20 19 أو 18 نيكلوتيد أو أقل في الطول). عند التلامس مع خلية معبرة عن جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج ‎١1‏ تقوم حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة بتثبيط التعبير عن جين مركب
‏5 ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 (مثلاء إنسان؛ كائن رئيسي؛ كائن غير رئيسي؛ أو طائر جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1) بواسطة على الأقل ‎Joa‏ 720؛ بشكل مفضل بواسطة على الأقل 730 كما هو مفحوص بواسطة؛ ‎Mie‏ تفاعل سلسلة بوليمراز ‎(PCR) polymerase chain reaction‏ أو طريقة قائمة على أساس حمض ‎(Sion)‏ نووي منزوع الأكسجين متفرع ‎branched deoxyribonucleic acid‏ ‎((DDNA)‏ أو بواسطة ‎dal dil‏ على أساس بروتين» ‎Jie‏ بواسطة تحليل التألق المناعي
‎dimmunofluorescence analysis 0‏ باستخدام؛ ‎Dia‏ تخطيط وسترن أو تقنيات التدفق الخلوي. في النماذج المفضلة؛ يتم تحديد تثبيط التعبير بواسطة طريقة تفاعل سلسلة بوليمراز في الوقت الفعلي ‎real time‏ ‎(qPCR) polymerase chain reaction‏ التي تم توفيرها في الأمثلة؛ ‎Oia‏ عند تركيز 10 نانومولار من المزدوج. يمكن أن يكون مستوى التقليل مقارنة ب ‎Ole‏ عينة ضابطة نسيجية مناسبة أو عينة ضابطة من مجموعة منقوعة.
‏5 يتضمن حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة اثنين من جدائل الحمض النووي الريبوزي مكمل وتتهجن لتكوين بنية مزدوجة تحت ظروف ‎Cus‏ يتم استخدام حمض رببونيكلويك ‎JUS‏ الجديلة. تتضمن جديلة من حمض
رببونيكلويك ثنائي الجديلة (الجديلة المضادة للحس) منطقة تكامل مكملة أساساء ويشكل عام مكملة ‎(LIS‏ ‏إلى متوالية مستهدفة. يمكن أن تكون المتوالية المستهدفة مشتقة من متوالية الحمض النووي الرببوزي المرسل المكونة أثناء التعبير عن جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1. تتضمن الجديلة الأخرى (الجديلة الحسية) منطقة مكملة للجديلة المضادة للحس؛ بحيث يتهجن الاثنين من الجدائل وبشكلان بنية مزدوجة عند الدمج تحت الظروف المناسبة. كما هو موضح في أي مكان آخر هنا وكما هو معروف في المجال؛ يمكن أيضا احتواء المتواليات المكملة لحمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة كمناطق ذاتية التكميل ‎self-‏ ‎complementary regions‏ لجزيء حمض نووي فردي؛ على العكس من كونها على أوليجونيكلوتيدات بشكل ‎ple‏ تبلغ البنية المزدوجة حوالي 15 إلى 30 أزواج قاعدة في الطول؛ ‎Mia‏ 29-15 28-15 027-15 26-15 25-15 24-15 23-15 22-15 21-15 20-15 19-15« 18-15 17-15« 30-18 29-18 28-18 27-18 26-18 25-18 24-18 23-18 22-18 21-18 20-18 30-19 29-19 28-19 27-19 26-19 25-19 24-19 23-19 22-19 21-19 20-19 30-20 29-20« 28-20« 27-20 26-20 25-20 24¢20-20— 23 22-20 21-20 30-21 29-21 28-21 27-21 26-21 25-21 24-21 21- 4123 22-21 أزواج قاعدة في الطول. تتوسط النطاقات والأطوال في النطاقات المذكورة أعلاه وتم ذكر الأطوال أيضا على أنها جز من الاختراع. بشكل مشابه؛ تبلغ منطقة التكامل مع المتوالية المستهدفة حوالي 15 إلى 30 نيكلوتيد في الطول؛ ‎Ole‏ ‏29-15 28-15 27-15 26-15 25-15 24-15 23-15 22-15 21-15 20-15 19-15« 18-15« 17-15« 30-18 29-18 28-18 27-18 26-18 25-18 24-18 23-18 22-18 21-18 20-18 30-19 29-19 28-19 27-19 26-19 25-19 24-19 23-19 22-19 21-19 20-19 30-20 29-20 28-20 27-20 26-20 25-20 23-24¢20-20« 22-20« 21-20 30-21 29-21 28-21 27-21 26-21 21- 24-21« 23-21 أو 22-21 نيكلوتيد في الطول. تتوسط النطاقات والأطوال في النطاقات المذكورة أعلاه والأطوال أيضا المذكورة بأنها تشكل جزء من الاختراع. 5 في بعض النماذج؛ يبلغ حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة حوالي 15 إلى 23 نيكلوتيد في الطول؛ أو حوالي 25 إلى 30 نيكلوتيد في الطول. بشكل ‎ale‏ حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة طويل بما يكفي
ليعمل كركيزة لإنزيم ‎Dicer‏ مثلاء سوف يكون معروفا جدا في المجال أن أحماض ريبونيكلويك مزدوجة الجديلة ‎(dsRNAs) double stranded ribonucleic acids‏ أطول من حوالي 23-21 نيكلوتيد في الطول يمكن أن تعمل كركائز ‎substrates‏ ل ‎Dicer‏ كما هو مفهوم بواسطة الخبير في المجال؛ غالبا ما تكون منطقة الحمض النووي ‎(ghoul‏ المستهدفة للشق عبارة عن ‎ern‏ من جزيء الحمض النووي الريبوزي ‎OS‏ ‏5 غالبا جزيء الحمض النووي الريبوزي المرسل. عند ‎(AD)‏ يسمح ‎"eda‏ من هدف الحمض النووي الريبوزي المرسل عبارة عن متوالية مجاورة من هدف الحمض النووي الريبوزي المرسل بطول مناسب للسماح له ليكون عبارة عن ركيزة لشق موجه ‎directed cleavage‏ بحمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة (أي؛ شق
خلال مسار الإسكات المستحث لمعقد بالحمض النووي الرببوزي). سوف يفهم أحد الخبراء في المجال ‎Lad‏ أن منطقة المزدوج عبارة عن ‎sa‏ وظيفي ‎functional portion‏ 0 أساسي من حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة؛ ‎Hie‏ منطقة مزدوج حوالي 9 إلى حوالي 36 أزواج قاعدة؛ ‎Oi‏ 36-10 36-11 36-12 36-13 36-14 36-15 35-9 35-10« 35-11 35-12 35-13 35-14 35-15 34-9 34-10 34-11 34-12 34-13 34-14 34-15 9- 3 33-10« 33-11 33-12 33-13 33-14 33-15 32-9 32-10 32-11 32-12 32-13 32-14 32-15 31-9 31-10 31-11 31-12 32-13 31-14 31-15 15- 15 30 29-15 28-15 27-15 26-15 25-15 24-15 23-15 22-15 21-15 15- 0 19-15« 18-15« 17-15« 30-18 29-18« 28-18 27-18 26-18 25-18 18-— 24 23-18 22-18 21-18 20-18 30-19 29-19 28-19 27-19 26-19 19- 25 24-19 23-19 22-19 21-19 20-19 30-20 29-20« 28-20 27-20 20- 26 25-20 23-2420-20 22-20 21-20« 30-21 29-21 28-21 27-21 26-21 0 25-21 24-21 23-21 أو 22-21 أزواج قاعدة. بالتالي؛ في أحد النماذج؛ بالمقدار الذي تتم معالجته إلى مزدوج وظيفي ‎Die cfunctional duplex‏ 30-15 زوج قاعدة؛ الذي يستهدف الحمض النووي ‎(gin)‏ مطلوب للشق؛ جزيء الحمض النووي الرببوزي أو معقد من جزيئات الحمض النووي الرببوزي يعانون من منطقة مزدوج ‎duplex region‏ أكبر من 30 زوج قاعدة عبارة عن حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة. بالتالي؛ سوف يفهم الخبير في المجال في أحد النماذج؛ أن حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة مرسل ‎(MIRNA) messenger double stranded ribonucleic acid‏ عبارة عن حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة. في نموذج ‎OAT‏ حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة ليس عبارة عن حمض رببونيكلويك ثنائي
الجديلة مرسل طبيعي المنشاً. في نموذج آخرء لا يتم توليد عامل حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة مفيد في استهداف جين التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 في الخلية المستهدفة بواسطة شق لحمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة أكبر. ‎(Sa‏ أن يتضمن حمض رببونيكلوبك ثنائي الجديلة كما هو موضح هنا ‎Lad‏ واحد أو أكثر من أحادي الجديلة أجزاء نيكلوتيد معلقة ‎Sic‏ 4-1 4-2 3-1 3-2 1 2 3؛ أو 4 نيكلوتيدات. يمكن أن تتضمن أحماض ريبونيكلويك مزدوجة الجديلة جزء نيكلوتيد معلق واحد على الأقل والتي لها خواص مثبطة نسبة إلى الأجزاء المقابلة المنتهية بثلم. يمكن أن يتضمن جزءٍ نيكلوتيد معلق أو مكون من نظير نيكلوتيد/ تيكلوسيد؛ شاملا ديوكسي نيكلوتيد/نيكلوسيد. يمكن أن يكون الجزه المعلق موجود على الجديلة الحسية؛ الجديلة المضادة للحس» أو أي توليفة مما سبق. علاوة على ذلك يمكن أن يكون نيكلوتيد ‎al‏ المعلق 0 موجود على الطرف 5”؛ الطرف 03 أو كل من أطراف الجديلة المضادة للحس أو الحسية ل حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة. يمكن تخليق حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة بواسطة الطرق المعيارية المعروفة في المجال كما هو مذكور أدناه أيضا ؛ مثلاء باستخدام وسيلة تخليق ‎synthesizer‏ حمض ‎(Ss)‏ نووي منزوع الأكسجين آلية؛ ‎Jie‏ أن تكون متاحة تجاريا من ‎.Biosearch, Applied Biosystems, Inc «Jie‏ يمكن تحضير مركبات حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة مزدوجة الجديلة وفقا للاختراع باستخدام إجراء ذو خطوتين. ‎ol‏ يتم تحضير الجدائل الفردية من جزيء الحمض النووي الريبوزي مزدوجة الجديلة بشكل متفصل. بعد ذلك؛ يتم تصلب جدائل المكون. يمكن تحضير الجدائل الفردية من مركب الحمض النووي الرربوزي أحادي الجديلة باستخدام تخليق طور محلول ‎solution-phase‏ أو طور صلب ‎solid-phase‏ ‏عضوي أو كلاهما. يقدم التخليق العضوي ميزة أن تتضمن ‎Jian‏ أوليجونيكلوتيد ‎oligonucleotide strands‏ التي تتضمن نيكلوتيدات غير طبيعية أو نيكلوتيدات معدلة والتي يمكن تحضيرها بسهولة. بالمثل؛ يمكن تحضير أوليجونيكلوتيدات أحادية الجديلة وفقا للاختراع باستخدام تخليق طور محلول أو طور صلب عضوي أو كلاهما. في أحد الجوانب؛ يتضمن حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة وفقا للاختراع اثنين على الأقل من متواليات النيكلوتيد» متوالية حسية ومتوالية مضادة للحس. يتم اختيار الجديلة الحسية من مجموعة من متواليات التي 5 .تم توفيرها في الجداول 3 و5؛ ويتم اختيار الجديلة المناظرة المضادة للحس من الجديلة الحسية من مجموعة من متواليات الجداول 3 و5. في هذا الجانب» واحد من المتواليتين مكملة للمتوالية الأخرى؛ مع تكميل
واحد من المتواليات أساسا لمتوالية من الحمض النووي الرببوزي المرسل تم توليدها في التعبير عن جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1. بالتالي؛ في هذا الجانب» سوف يتضمن حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة اثنين من أوليجونيكلوتيدات» حيث تم وصف أوليجونيكلوتيد واحد كجديلة حسية في الجدول 3 أو 5؛ ويتم وصف الأوليجونيكلوتيد الثاني كجديلة مناظرة مضادة للحس من الجديلة الحسية في الجدول 3 أو 5. في نماذج معينة؛ يتم احتواء المتواليات المكملة أساسا لحمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة على أوليجونيكلوتيدات منفصلة. في نماذج أخرى؛ يتم احتواء المتواليات المكملة أساسا لحمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة على أوليجونيكلوتيد فردية. سوف يتم فهم أن؛ على الرغم من أن المتواليات في الجدول 3 لم يتم وصفها بأنها متواليات معدلة أو مترافقة. يمكن أن تتضمن الحمض النووي الريبوزي من حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة وفقا للاختراع 0 مثلاء حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة وفقا للاختراع» أي من المتواليات المذكورة في الجدول 3؛ أو المتواليات وفقا للجدول 5 التي يتم تعديلها؛ أو المتواليات وفقا للجدول 5 المترافقة. أو بمعنى ‎AT‏ يتضمن الاختراع حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة وفقا للجداول 3 و5 التي كانت غير معدلة؛ غير مترافقة؛ معدلة؛ أو مترافقة؛ كما هو موضح هنا. الخبير في المجال على علم بأنه يتم تفضيل أحماض رببونيكلويك مزدوجة الجديلة التي لها بنية مزدوجة 5 بين حوالي 20 و23 أزواج قاعدة؛ مثلاء 21 أزواج قاعدة فعالة تحديدا في حث تداخل الحمض النووي الريبوزي )20:6877-6888 ,2001 ‎er al., EMBO‏ تنطفة8[0). مع ‎«ll‏ وجد الآخرون أن البنيات المزدوجة الأقصر أو الأطول يمكن أن تكون فعالة أيضا ) ‎Chu and Rana (2007) RNA 14:1714-1719; Kim er‏ ‎Fill JE (al. (2005) Nar Biotech 23:222-226‏ الموضحة أعلاه؛ بواسطة طبيعة متواليات أوليجونيكلوتيد التي تم توفيرها في أي من الجداول 3 و5؛ يمكن أن تتضمن حمض رببونيكلويك ثنائي 0 الجديلة كما هو موضح هنا جديلة واحدة على الأقل بطول على الأقل 21 نيكلوتيد. من المتوقع منطقيا أن تكون المزدوجات الأقصر التي لها واحد من المتواليات وفقا للجداول 3 و5 مأخوذا منها القليل من النيكلوتيدات على واحد أو كل من الأطراف فعالة بشكل مشابه مقارنة بحمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة كما هو موضح أعلاه. بالتالي؛ يتضمن تضمين أحماض رببونيكلويك مزدوجة الجديلة التي لها متوالية من على الأقل 15 16« 17 18 19 20 أو أكثر من نيكلوتيد متجاور مشتق من واحد من المتواليات 5 وفقا للجداول 3 و5؛ وتختلف في قدرتها على تثبيط التعبير عن جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج
1 بواسطة ما لا يزيد عن حوالي 5 10 ¢15 20؛ 25 أو 30 7 تثبيط من حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة يتضمن المتوالية الكاملة. على أنها جزء من منظور الاختراع الحالي. علاوة على ذلك؛ تقوم الأحماض النووية الريبوزية التي تم توفيرها في الجداول 3 و5 بتحديد موقع في مستنسخ مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 المعرض للشق الذي يتوسط فيه الإسكات المستحث لمعقد بالحمض النووي الرببوزي. بالتالي؛ يبين الاختراع الحالي ‎Lad‏ أحماض رببونيكلويك مزدوجة الجديلة الذي يستهدف في واحد من هذه المواقع. حسب الاستخدام هناء يقال أن حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة يقوم باستهداف في موقع جزئي من مستنسخ الحمض النووي الريبوزي إذا كان حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة يقوم بتعزيز شق المستنسخ في أي مكان آخر في هذا الموقع الجزئي. سوف يتضمن حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة هذا بشكل عام على الأقل حوالي 15 نيكلوتيد متجاور من واحد من المتواليات 0 التي تم توفيرها في الجداول 3 و5 مقترنة بمتواليات النيكلوتيد الإضافية المأخوذة من المنطقة المجاورة للمتوالية المختارة في جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1. ‎Lay‏ كانت المتوالية المستهدفة بشكل عام تبلغ حوالي 30-15 نيكلوتيد في الطول؛ هناك اختلاف واسع في ملائمة المتواليات المعينة في هذا النطاق لتوجيه شق أي الحمض النووي الريبوزي مستهدف. تقدم حزم البرمجيات المتعددة والتوجيهات المذكورة هنا توجيه بشكل يحدد المتواليات المستهدفة المثلى لأي هدف 5 جيني معين؛ ولكن يمكن أيضا أن يكون هناك منهج تجريبي مأخوذ حيث يتم وضع ‎"SM‏ أو 'قناع” بحجم معين (كمثال غير ‎cue‏ 21 نيكلوتيد) حرفيا أو مجازيا (شاملة؛ ‎lie‏ حاسوبيا) على متوالية الحمض النووي الرببوزي المستهدفة لتحديد المتواليات في نطاق الحجم الذي يمكن أن يعمل كمتواليات مستهدفة. بواسطة تحربك المتوالية "نافذة” بشكل متقدم نيكلوتيد واحد قبل أو بعد متوالية مستهدفة أولية موضع؛ يمكن تحديد المتوالية المستهدفة ‎(AIH‏ لحين تحديد المجموعة المكتملة من المتواليات المحتملة لأي حجم معين مختار. هذه العملية؛ مقترنة بالتخليق الجهازي واختبار المتواليات المحددة (باستخدام فحوص كما هو موضح هنا أو كما هو معروف في المجال أو تم توفيره هنا) لتحديد تلك المتواليات التي تعمل بشكل مثالي التي تحدد متواليات الحمض النووي الريبوزي؛ عند الاستهداف مع عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة؛ وبتوسط في أفضل تثبيط للتعبير الجيني المستهدف. بالتالي؛ مع تعريف المتواليات؛ ‎lie‏ في الجداول 3 و5 تمثل متواليات مستهدفة فعالة؛ سوف يتم ذكر أنه يتم تحقيق فعالية تحسين تثبيط بواسطة بشكل متقدم 5 ."تقل النافذة" بمقدار نيكلوتيد واحد قبل أو بعد المتواليات المحددة لتحديد متواليات مع خواص تثبيط مساوية أو أفضل.
أيضاء سوف يتم ذكر أنه بالنسبة لأي متوالية محددة؛ ‎Ollie‏ في الجداول 3 و5؛ أيضا يمكن تحقيق عملية التحسين بواسطة إضافة أو إزالة نيكلوتيدات جهازيا لتوليد متواليات أطول أو أقصر واختبار تلك المتواليات التي تم توليدها بواسطة نقل نافذة ذات حجم أطول أو أقصر بعد أو قبل الهدف الحمض النووي الرببوزي من هذه النقطة. مرة أخرى» يمكن أن يؤدي إقران هذا المنهج بتوليد أهداف مرشحة جديدة مع اختبار فعالية أحماض رببونيكلويك مزدوجة الجديلة بناء على هذه المتواليات المستهدفة في فحص تثبيط كما هو معروف في المجال أو كما هو موضح هنا أيضا إلى تحسينات في فعالية التثبيط. لا يزال أيضاء يمكن تعديل هذه المتواليات المحسنة بواسطة؛ ‎lie‏ إدخال نيكلوتيدات معدلة كما هو موضح هنا أو كما هو معروف في المجال؛ إضافة أو تغييرات في جزءِ معلق؛ أو تعديلات أخرى كما هو معروف في المجال أو كما هو مذكور هنا ‎Load‏ لتحسين الجزيء ‎sal) lie)‏ ثبات المصل أو عمر نصف ‎«pall‏ زيادة الثبات الحراري؛ 0 تحسين التوصيل عبر الغشائي ‎cransmembrane delivery‏ تستهدف موضع معين أو نوع خلية؛ زيادة التفاعل مع إنزيمات مسار الإسكات ‎silencing pathway enzymes‏ زيادة الإطلاق من الإندوسومات ‎(endosomes‏ كمثبط تعبير ‎.expression inhibitor‏ يمكن أن يحتوي حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة كما هو موضح هنا على واحد أو أكثر من حالات عدم توافق على المتوالية المستهدفة. في أحد النماذج؛ تحتوي حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة كما هو موضح 5 هنا على مالا يزيد عن 3 حالات عدم توافق. إذا كانت الجديلة المضادة للحس من حمض رببونيكلوبك ثنائي الجديلة تحتوي على حالات عدم توافق مع متوالية مستهدفة؛ يفضل أن تكون مساحة عدم التوافق غير موجودة في مركز منطقة التكامل. إذا كانت الجديلة المضادة للحس من حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة تحتوي على حالات عدم توافق مع المتوالية المستهدفة؛ يفضل أن تكون حالة التوافق مقيدة بوجودها في آخر 5 نيكلوتيدات من أي طرف 5” أو 3" من منطقة التكامل. ‎lie‏ بالنسبة لعامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة ذو 23 نيكلوتيد من جديلة مكملة لمنطقة ‎(pad‏ مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1؛ بشكل عام لا تحتوي على أي حالة عدم توافق في 13 نيكلوتيد المركزية. يمكن استخدام الطرق الموضحة هنا أو الطرق المعروفة في المجال لتحديد ما إذا كانت حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة تحتوي على عدم توافق مع متوالية مستهدفة فعالة في تثبيط التعبير عن جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1. من المهم اعتبار فعالية أحماض ريبونيكلويك مزدوجة الجديلة مع حالات عدم توافق في تثبيط التعبير عن جين 5 مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج ‎ol‏ خصوصا إذا كانت منطقة التكامل المعينة في جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 معروفة بأن لها اختلاف متوالية متعددة الشكل في المجموعة.
‎II‏ أحماض رببونيكلويك مزدوجة الجديلة معدلة وفقا للاختراع في نماذج معينة؛ تكون الحمض النووي الرببوزي من حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة وفقا للإختراع مثلاء حمض رببونيكلوبك ثنائي الجديلة؛ غير معدلة؛ ولا تتضمن؛ ‎lie‏ تعديلات كيماوية أو مترافقات معروفة في المجال وموضحة هنا. في نماذج أخرى؛ الحمض النووي الرببوزي لحمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة وفقا للإختراع؛ مثلاء حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة؛ معدلة كيماويا لتحسين الثبات أو غيره من الخواص المفيدة الأخرى. في نماذج معينة وفقا للاختراع؛ يتم تعديل أساسا كل من نيكلوتيدات حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة ‎Wy‏ للإختراع. في نماذج أخرى ‎Wy‏ للاختراع؛ يتم تعديل كل من نيكلوتيدات حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة أو أساسا كل من نيكلوتيدات حمض ريبونيكلوبك ثنائي الجديلة؛ أي؛ ما لا يزيد 0 عن 5؛ 4 3؛ 2؛ أو 1 نيكلوتيدات غير معدلة موجودة في جديلة من حمض رببونيكلوبك ثنائي الجديلة. يمكن تخليق الأحماض النووية ‎nucleic acids‏ الموضحة في الاختراع أو تعديلها بواسطة طرق محددة جدا في المجال؛ مثل تلك الموضحة في ‎“Current protocols in nucleic acid chemistry,” Beaucage, S.L.‏ ‎cet al. (Edrs.), John Wiley & Sons, Inc., New York, NY, USA‏ والتي تم دمجها هنا بالإشارة إليها كمرجع. تتضمن التعديلات؛ ‎Sie‏ التعديلات الطرفية؛ مثلا؛ التعديلات عند الطرف 5”- (المعالجة 5 بفوسفوريل ‎phosphorylation‏ الترافق» الروابط المعكوسة ‎(inverted linkages‏ أو تعديلات الطرف 3" (الترافق» نيكلوتيدات حمض رببوزي نووي منزوع الأكسجين؛ الروابط المعكوسة؛ إلخ.)؛ التعديلات الأساسية؛ ‎Ole‏ استبدال مع قواعد تثبيت ‎«stabilizing bases‏ قواعد فك ‎«destabilizing bases‏ أو قواعد تتزاوج مع سجل ‎Jas‏ من الأجزاء المشتركة؛ إزالة قواعد (نيكلوتيد لاخطويات ‎«(abasic nucleotides‏ أو القواعد المترافقة ‎tconjugated bases‏ التعديلات على السكر ‎Sie)‏ عند الموضع 2 أو 4( أو استبدال السكر؛ 0 أو التعديلات الأساسية؛ شاملة تعديل أو استبدال روابط فوسفو داي إستر ‎phosphodiester‏ تتضمن الأمثلة المعينة على مركبات حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة المفيدة في النماذج الموضحة هناء ولكنها غير مقيدة بالأحماض النووية الريبوزية تحتوي على معدلة أساسات أو لا تتضمن روابط نيكلوسيد بيني طبيعية ‎natural internucleoside linkages‏ يتضمن الأحماض النووية الريبوزية التي لها أساسات معدلة؛ من بين غيرهاء تلك التي لا تتضمن ذرة فوسفور ‎phosphorus‏ في الأساس. لأغراض الوصف؛ وكما هو مشار 5 إليه أحيانا في المجال؛ الأحماض النووية الرببوزية معدلة لا تتضمن ذرة فوسفور في أساسا نيكلوسيد بيني
والذي يمكن اعتبارها أيضا على أنها أوليجونيكلوسيدات 01:800021605088. في بعض النماذج؛ سوف تتضمن حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة معدلة ذرة فوسفور في أساس نيكلوسيد بيني منه. تتضمن أساسات الحمض النووي ‎Nia line Soul‏ مركبات فوسفورو ثيوات ‎«phosphorothioates‏ ‏مركبات فوسفورو ثيوات كيرالية ‎«chiral phosphorothioates‏ مركبات فوسفورو داي ثيوات ‎cphosphorodithioates 5‏ مركبات فوسفو تراي إستر ‎cphosphotriesters‏ مركبات أمينو ألكيل فوسفو تراي إستر ‎caminoalkylphosphotriesters‏ ميقيل ‎methyl‏ ومركبات ألكيل فوسفونات ‎alkyl phosphonates‏ ‎(gal‏ شاملة مركبات 3 ألكيلين فوسفونات ‎3-alkylene phosphonates‏ ومركبات فوسفونات كيرالية ‎phosphonates‏ لدتننء» مركبات فوسفينات ‎<phosphinates‏ مركبات فوسفوراميدات ‎phosphoramidates‏ ‏شاملة 3-أمينو فوسفوراميدات ‎3-amino phosphoramidate‏ وأمينو ألكيل مركبات فوسفوراميدات ‎caminoalkylphosphoramidates 0‏ مركبات ثيونو فوسفوراميدات ‎cthionophosphoramidates‏ مركبات ثيونو ألكيل فوسفونات ‎cthionoalkylphosphonates‏ مركبات ثيونو ألكيل فوسفو تراي إستر ‎cthionoalkylphosphotriesters‏ ومركبات بورانو فوسفات ‎boranophosphates‏ لها 5-3 روابط نظائر مربوطة ب 5-2" منهاء؛ وهؤلاء الذين يعانون من القطبية المعكوسة ‎Gus inverted polarity‏ يتم ربط الأزواج المتجاورة من وحدات النيكلوسيد ‎nucleoside units‏ 5-3 إلى 3-5 أو 5-2 إلى 2-5 . يتم أيضا تضمين العديد من الأملاح؛ الأملاح المخلوطة والصورة الخالية من الأحماض أيضا. تتضمن براءات الاختراع الأمريكية التمثيلية التي تشير إلى تحضير الروابط التي تحتوي على فوسفور أعلاه؛ ولكنها غير مقيدة ب» براءات الاختراع الأمريكية أرقام 68 4469863؛ 4476301؛ ¢5023243 5177195« 5188897؛ ¢5264423 5276019؛ ¢5278302 5286717؛ 5321131؛ 6 5405939؛ ¢5453496 5455233؛ 5466677؛ ¢5476925 5519126؛ 5536821؛ 0 5541316؛ 5550111؛ ¢5563253 5571799؛ 5587361؛ 5625050؛ 6028188؛ 6124445؛ 009 ؛ 6169170« 6172209؛ 6 239265؛ 6277603؛ 6326199؛ 6346614؛ ¢6444423 6531590« ¢6534639 6608035؛ 6683167؛ 6858715؛ 6867294؛ 6878805؛ 5 7041816؛ 7273933؛ 7321029؛ ‎seh‏ الاختراع رقم آر إى 39464؛ وقد تم دمج محتوياتها هنا بالإشارة إليها كمرجع. 5 للا تتضمن أساسات الحمض النووي الرببوزي معدلة ذرة فوسفور لها أساسات ‎lly‏ تم تكوبنها بواسطة سلسلة ألكيل ‎chain alkyl‏ قصيرة أو روابط نيكلوسيد بيني ‎cycloalkyl internucleoside SI glu‏
ذرات غير متجائسة 080/08 مخلوطة وألكيل أو روابط نيكلوسيد بيني سيكلو ألكيل؛ أو واحد أو أكثر من روابط نيكلوسيد بيني ذرية غير متجانسة ‎heteroatomic‏ أو حلقية غير متجانسة ‎heterocyclic‏ قصيرة السلسلة. وهي تتضمن تلك الروابط التي تتضمن مورفولينو ‎morpholino‏ (المكون في جزءٍ من السكر للنيكلوسيد) ؛ أساسات سيلوكسان ‎sulfide ila siloxane‏ أساسات سلفوكسيد ‎sulfoxide‏ وسلفون ‎¢sulfone 5‏ أساسات فورماسيتيل ‎formacetyl‏ وثيوفورماسيتيل ‎¢thioformacetyl‏ أساسات ميثيلين فورماسيتيل ‎methylene formacetyl‏ وثيوفورماسيتيل؛ أساسات تحتوي على ألكين ‎talkene‏ أساسات سلفامات ‎¢sulfamate‏ أساسات ميثيلين ‎methyleneimino gua‏ وميثيلين هيدرازيتى ‎¢methylenehydrazino‏ ‏أساسات سلفونات ‎sulfonate‏ وسلفوناميد ‎¢sulfonamide‏ أساسات أميد ‎amide‏ وغيرها لها أجزاء مكون
0» يي و ميفلين ‎.(CH») methylene‏
0 تتضمن براءات الاختراع الأمريكية التمثيلية التي تشير إلى تحضير الأوليجونيكلوسيدات المذكورة أعلاه؛ ولكنها غير مقيدة ‎co‏ براءات الاختراع الأمريكية أرقام 5034506؛ 5166315؛ 5185444؛ 5214134؛ ¢5216141 ¢5235033 564562؛ 5264564؛ 5405938؛ 5434257؛ 5466677؛ 5470967؛ 7 5541307؛ ¢5561225 ¢5596086 5602240؛ ¢5608046 ¢5610289 5618704؛ 0 5663312؛ 5633360؛ 5677437؛ و5677439؛ وقد تم دمج محتوياتها هنا بالإشارة
إليها كمرجع. يتم ذكر محاكيات الحمض النووي الريبوزي المناسبة للاستخدام في أحماض رببونيكلويك مزدوجة الجديلة المقدمة هناء حيث يتم استبدال كل من السكر ورابط النيكلوسيد البيني؛ أي؛ الأساس؛ لوحدات النيكلوتيد مع مجموعات جديدة. يتم الحفاظ على الوحدات الأساسية للتهجين مع مركب مستهدف لحمض نووي مناسب. تم توضيح مركب أوليجومري حيث أبدى محاكي الحمض النووي الريبوزي تتضمن خواص تهجين
0 ممتازة والتي تشير إلى أنها أنها تتضمن خواص تهجين ممتازة بببتيد حمض نووي ‎peptide nucleic acid‏ ‎(PNA)‏ مركبات بببتيد حمض نووي؛ يتم استبدال أساس السكر للحمض النووي الريبوزي مع أميد يحتوي على أساس؛ تحديدا أساس أمينو إيثيل جليسين ©810100©80718[7©:0. يتم الحصول على ‎Chasis‏ ‏ويتم ‎Leda‏ مباشرة أو بشكل غير مباشر بذرات نيتروجين ‎nitrogen‏ آزا ‎iad‏ أميد من الأساس. تتضمن براءات الاختراع الأمريكية التمثيلية التي تشير إلى تحضير مركبات بببتيد حمض نووي؛ ولكنها غير مقيدة
5 ب؛ براءات الاختراع الأمريكية أرقام 2 [571433؛ و5719262؛ وقد تم دمج محتوياتها هنا بالإشارة إليها كمرجع. تم وصف مركبات بببتيد حمض نووي الإضافية للاستخدام المناسب في أحماض
رببونيكلويك مزدوجة الجديلة وفقا للاختراع في؛ ‎lia‏ في -1497 ,254 ,1991 ‎Nielsen et al., Science,‏ 0. تتضمن بعض النماذج الموضحة في الاختراع الأحماض النووية الريبوزية مع فوسفورو ثيوات أساسات وأوليجونيكلوسيدات مع أساس ذرة غير متجانسة؛ وتحديدا ‎~-CH2--N(CH3)--O-- «--CHa--NH--CHy-‏ ‎CHa-- 5‏ [المعروفة بميثيلين ‎methylene‏ (ميثيل ‎(methylimino sia]‏ أو أساس ‎~CHp--O-- «(MMI‏ ‎«<N(CH3)--CHb--‏ تك -رتل ) ل-رتل) ا1--ت-- ولك --01--(11)01-- [حيث يتم تمثيل أساس الفوسفو داي ‎phosphodiester jiu}‏ الأصلي ب ‎[--O--P--O--CH>--‏ من براءة الاختراع المرجعية المذكورة أعلاه رقم 5489677( وأساسات أميد من براءة الاختراع المرجعية المذكورة أعلاه رقم 5602240. في بعض النماذج؛ تتضمن الأحماض النووية الرببوزية الموضحة هنا بنيات أساس مورفولينو من براءة 0 الاختراع المرجعية المذكورة أعلاه رقم 5034506. يمكن أن تحتوي الأحماض النووية الريبوزية المعدلة أيضا واحد أو أكثر من شقوق سكر مستبدلة ‎.substituted sugar moieties‏ يمكن أن تتضمن أحماض ردبوتيكلويك مزدوجة الجديلة؛ مثلاء أحماض رببونيكلويك مزدوجة الجديلة؛ الموضحة هنا واحد مما يلي عند الموضع 2: ‎OH‏ 8©؛ ‎¢=S =O‏ أو ‎-١7‏ ‎¢N-alkyl JI‏ مت ‎<—S‏ أو 77 -الكنيل ‎¢N-alkenyl‏ مت 5- أو 177-الكينيل ‎¢N-alkynyl‏ أو 0-ألكيل -0-ألكيل ‎Gua «O-alkyl-O-alkyl‏ يمكن أن تكون ألكيل؛ ألكنيل وألكينيل عبارة عن ,© إلى 010 ألكيل ‎alkyl‏ © أو ‎Ca‏ إلى ‎C10‏ ألكنيل ‎Ci alkenyl‏ وألكينيل مستبدلة أو غير مستبدلة. تتضمن التعديلات المثالية المناسبة بتكم زه.همت)]ة ‎<O(CH2).,OCH3‏ متتموهتن )اه ‎«O(CH2) «CH3‏ ‎«O(CH2),ONH2‏ وزرلت0)0]1(.017])011(.0»؛ ‎Cus‏ « ى« عبارة عن من 1 إلى حوالي 10. في نماذج ‎(gal‏ تتضمن أحماض رببونيكلويك مزدوجة الجديلة واحد مما يلي عند الموضع 2: :© إلى ‎C10‏ ‏0 ألكيل أدنى» ألكيل ‎Ji‏ مستبدل» ألكاريل ‎calkaryl‏ أرالكيل ‎«aralkyl‏ ©-ألكاريل ‎O-alkaryl‏ أو ©-أرالكيل ‎«O-aralkyl‏ أس اتش ‎«SH‏ سكانديوم تراى هيدريد ‎«(SCH3) Scandium trihydride‏ سيانات ‎cyanate‏ ‎«(OCN)‏ كلور ‎«(Cl) chlorine‏ بروم ‎bromine‏ («8)؛ ‎cyanide ilu‏ (010)»؛ تراى فلورو ميثيل ‎«OCF; «(CF3) trifluoromethyl‏ ميثيل سلفونيل ميثيل الصوديوم ‎Sodium methylsulfinylmethylide‏ ‎«((SOCH3)‏ كلوريد ميثان سلفونيل ‎«(SO2CHs) methanesulfonyl chloride‏ استر نترات ‎nitrate ester‏ ‎«(ONO2) 5‏ ثنائي أكسيد التيتروجين ‎«(NO2) Nitrogen dioxide‏ أزيد ‎«(N3) azide‏ أزانيد ‎«(NH,) azanide‏ سيكلو ألكيل غير متجانس ‎cheterocycloalkyl‏ سيكلو ألكاريل غير متجانس ‎cheterocycloalkaryl‏ أمينو
ألكيل أمينو ‎caminoalkylamino‏ بولي ألكيل ‎cpolyalkylamino sil‏ مستبدتة سيليل ‎csubstituted silyl‏ مجموعة شق ‎cleaving group‏ الحمض النووي الريبوزي» مجموعة مبلغ ‎reporter group‏ وسيلة إدخال بينية ‎cintercalator‏ مجموعة لتحسين الخواص الصيدلانية الحركية لحمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة» أو مجموعة لتحسين الخواص الصيدلانية الديناميكية لحمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة؛ والبدائل الأخرى التي 5 .لها خواص مشابهة. في بعض النماذج؛ يتضمن التعديل 2-ميثوكسي إيثوكسي ‎2"-methoxyethoxy‏ (2- 0--:011:011:0011؛ المعروف أيضا ب 0-72-(2-ميثوكسي إيثيل ) ‎2-O-(2-methoxyethyl)‏ أو 2- ‎gl (Martin er al., Helv. Chim. Acta, 1995, 78:486-504) (MOE‏ مجموعة الكوكسي ‎SoS‏ ‎.alkoxy-alkoxy group‏ يتضمن تعديل مثالي آخر 2-داي ميثيل أمينو أوكسي إيثوكسي -2 ‎«dimethylaminooxyethoxy‏ أي ¢ مجموعة :(:0)011:(:017)01؛ المعروفة أيضا ب 0118017-72 كما هو مبين في الأمثلة هنا أدناه + و -داي ميثيل أمينو ‎Sel‏ إينوكسي ‎2'-dimethylaminoethoxyethoxy‏ ‎dd peal)‏ أيضا .في ‎Jie deal‏ 0-2-داي . ميثيل أمينو إيثوكسي إيثيل -2-0 ‎dimethylaminoethoxyethyl‏ أو ‎«(DMAEOE—2‏ أي ‎.2-0--CH2-O--CH2-N(CH2)2‏ أيضا تتضمن التعديلات المثالية: نيكلوتيدات 5:-2-116:-1 ‎¢5°-Me-2’-F nucleotides‏ نيكلوتيدات 5:-116- ‎5-Me-2’-OMe nucleotides OMe—"2‏ نيكلوتيدات 5:-2-1/6-ديوكسي -5-16-2 ‎JS) «deoxynucleotides 5‏ من أيزومرات ‎R isomers‏ و5 في هذه المجموعات الثلاثة)؛ 2-الكوكسي ألكيل -(N-methylacetamide ‏و 1118-2 (11-ميثيل أسيتاميد‎ ¢2’-alkoxyalkyl 2- ‏2-أمينو برويوكسي‎ ((OCH;=2) 2-methoxy ‏تتضمن التعديلات الأخرى 2-ميثوكسي‎ ‏تنفيذ تعديلات مشابهة‎ (Say .)272( 2'-fluoro ‏و 2-فلورو‎ (OCH2CH2CH2NH2—'2) aminopropoxy ‏عند مواضع أخرى على الحمض النووي الريبوزي لحمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة؛ تحديدا الموضع‎ Lind ‏أو في أحماض رببونيكلويك مزدوجة‎ 3' terminal nucleotide ‏من السكر على النيكلوتيد 3' الطرفي‎ 3 0 ‏الجديلة المروطة عند 52 والموضع 5' من نيكلوتيد 5' الطرفي. يمكن أن يتضمن أحماض ريبونيكلويك‎
Sa ‏في موضع‎ cyclobutyl moieties ‏شقوق سيكلو بيوتيل‎ Jia ‏مزدوجة الجديلة أيضا محاكيات سكر‎ ‏تتضمن براءات الاختراع الأمريكية التمثيلية التي تشير إلى تحضير‎ .06010101700081 sugar ‏بنتوفيورانوسيل‎ ‏هذه البنيات السكرية المعدلة؛ ولكنها غير مقيدة ب براءات الاختراع الأمريكية أرقام 4981957؛‎ ‏5319080؛ ¢5359044 5393878« 5446137؛ 5466786؛ 5514785« 5519134؛‎ ¢5118800 5 ‏5576427؛ ¢5591722 ¢5597909 5610300؛ ¢5627053 5639873؛ 5646265؛‎ "11
3 5670633؛ و5700920؛ يتم امتلاك بنيات معينة منها مع الطلب الحالي. وقد تم دمج محتويات كل مما سبق هنا بالإشارة إليها كمرجع. يمكن أن تتضمن حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة أيضا تعديلات أو استبدالات نيكلوييز ‎nucleobase‏ ‏(المشار إليها غالبا في المجال ببساطة ب 'قاعدة"). حسب الاستخدام هناء تتضمن نيكلوبيزات "غير ‎Wane‏ ‏5 أو "طبيعية" قواعد بورين ‎purine bases‏ أدينين ‎(A) adenine‏ وجوانين ‎«(G) guanine‏ وقواعد بيريميدين ‎pyrimidine bases‏ ثيمين ‎thymine‏ (1)» سيتوسين ‎cytosine‏ (©)» وبوراسيل ‎uracil‏ (ن1). تتضمن نيكلوييزات ‎nucleobases‏ معدلة نيكلوييزات أخرى تخليقية وطبيعية ‎Jie‏ ديوكسي -ثيمين ‎deoxy-thymine‏ ‏(07)» 5-ميثيل سيتوسين ‎S5-methyleytosine‏ (5-ع-0)؛ 5-هيدروكسي_ ميثيل سيتوسين -5 ‎hydroxymethyl cytosine‏ زاتقين ‎«xanthine‏ هايبوزانقين ‎hypoxanthine‏ 2-أمينو أدينين -2 ‎caminoadenine 0‏ 6-ميقيل ‎6-methyl‏ وغيرها من مشتقات ألكيل من أدينين وجوانين» 2-بروييل ‎2-propyl‏ ‏ومشتقات ألكيل أخرى من أدينين وجوانين» 2- ثيوبوراسيل ‎«2-thiouracil‏ 2-ثيوثيمين ‎2-thiothymine‏ و2- ثيوسيتوسين ‎2-thiocytosine‏ 5-هالو يوراسيل ‎5-halouracil‏ وسيتوسين» 5-بروبينيل يوراسيل -5 ‎propynyl uracil‏ وسيتوسين» 6-آزو يوراسيل ‎¢6-azo uracil‏ سيتوسين وثيمين» 5-يوراسيل (شبيه يوراسيل) ‎¢5-uracil (pseudouracil)‏ 4-ثيويوراسيل لنعة«منط-4» 8-هالو ملقط8» 8-أمينو مظتئصة-8» 8-ثيول ‎8-thiol 15‏ 8-ثيوألكيل ‎8-thicalkyl‏ 8-هيدروكسيل ‎8-hydroxyl‏ انال غير مركبات 8- أدينين ‎adenines‏ ‏وجوانين مستبدلة؛ 5-هالو م1ه-5؛ تحديدا 5 -برومو ‎¢5-bromo‏ 5-تراي فلوروميثيل ‎5-trifluoromethyl‏ ‏ومركبات 5-يوراسيل مستبدلة ‎5-substituted uracils‏ وسيتوسين» 7-ميثيل جوانين ‎7-methylguanine‏ ‏و7-ميثيل أدينين ‎«7-methyladenine‏ 8-آزا جوانين ‎8-azaguanine‏ و8-آزا أدينين ‎«8-azaadenine‏ 7- دي آنا جوانين ‎7-deazaguanine‏ و7دا آزا أدينين ‎7-daazaadenine‏ و3-دي 131 جوانين ‎3-deazaguanine‏ ‏0 و3-دي آزا أدينين ع«0ذه»3-0602080. أيضا تتضمن النيكلوبيزات تلك المكشوف عنها في براءة الاختراع الأمريكية رقم 3687808؛_تلك المكشوف ‎lie‏ في ‎Modified Nucleosides in Biochemistry,‏ ‎¢Biotechnology and Medicine, Herdewijn, P. ed.
Wiley-VCH, 2008‏ تلك المكشوف عنها في ‎The‏ ‎Concise Encyclopedia Of Polymer Science And Engineering, pages 858-859, Kroschwitz, J.‏ ‎ed.
John Wiley & Sons, 1990‏ بآ تلك المكشوف ‎lie‏ بواسطة ‎Angewandte‏ .اه ‎Englisch et‏ ‎«Chemie, International Edition, 1991, 30, 613 5‏ وتلك المكشوف عنها بواسطة ‎Sanghvi, Y S.,‏ ‎Chapter 15, dsRNA Research and Applications, pages 289-302, Crooke, S.
T. and Lebleu, B.,‏ ‎LEd., CRC Press, 1993‏ هناك نيكلوبيزات معينة مفيدة تحديدا لزيادة ألفة ارتباط المركبات الأوليجومرية
‎oligomeric compounds‏ الموضحة في الاختراع. وهي تتضمن مركبات 5-بيريميدين مستبدلة -5 ‎substituted pyrimidines‏ مركبات 6- ازا بيربميدين ‎6-azapyrimidines‏ مستبدلة ومركبات 2-17 6-17 و6-0 بورين مستبدلة؛ شاملة 2-أمينو بروييل أدينين ‎2-aminopropyladenine‏ 5-بروبينيل يوراسيل -5 ‎propynyluracil‏ و5-بروبينيل سيتوسين 5-00020271(108106. أبدت استبدالات 5-ميثيل سيتوسين -5 ‎methyleytosine 5‏ أنها تقوم بزيادة ثبات الحمض النووي المزدوج بمقدار 1.2-0.6 م ‎Sanghvi, 77. S.,)‏ ‎Crooke, S. 1. and Lebleu, B., Eds., dSRNA Research and Applications, CRC Press, Boca‏ ‎(Raton, 1993, pp. 276-278‏ وهي عبارة عن استبدالات أساسية مثالية؛ بشكل أكثر تحديدا عند الدمج مع تعديلات ‎Su‏ 0-2 -ميثوكسي إيثيل ‎:2'-O-methoxyethyl‏ ‏تتضمن براءات الاختراع الأمريكية التمثيلية التي تشير إلى تحضير النيكلوبيزات المعدلة المعينة المذكورة 0 أعلاه بالإضافة إلى نيكلوييزات أخرى معدلة؛ ولكنها غير مقيدة ب» براءات الاختراع الأمريكية المذكورة أعلاه أرقام 868 4845205؛ 513030؛ 5134066؛ 5175273؛ 5367066؛ 5432272؛ ¢5457187 ¢5459255 ¢5484908 5502177؛ 5525711؛ 5552540؛ 5587469؛ 5594121 ¢5596091 5614617« 5681941؛ 5750692؛ 6015886؛ 6147200؛ 6166197؛ 6222025؛ 717 63803668؛ 6528640؛ 6639062؛ ¢6617438 70456[10؛ 7427672؛ 5 7495088< وقد تم دمج محتوباتها هنا بالإشارة إليها كمرجع. يمكن ‎Lind‏ تعديل الحمض النووي الريبوزي لحمض ريبونيكلوبك ثنائي الجديلة لتتضمن واحد أو أكثر من أحماض نووية مغلقة. حمض نووي مغلق ‎locked nucleic acid‏ عبارة عن نيكلوتيد له شق رببوز ‎ribose‏ ‎moiety‏ معدل ‎Cua‏ يتضمن شق ‎jeu‏ جسر إضافي يوصل ذرات الكريون ‎carbons‏ 2" و4". تقوم هذه البنية بفاعلية بإغلاق الريبوز في التوافق البنيوي 3” الداخلي. وقد أبدت إضافة أحماض نووية مغلقة أن 0 الأحماض النووية الريبوزية أحادية الجديلة تقوم بزيادة ثبات الحمض النووي الرببوزي أحادي الجديلة في المصل؛ ولتقليل الآثار البعيدة عن الهدف ‎Elmen, J. er al., (2005) Nucleic Acids Research)‏ ‎Mook, OR. et al., (2007) Mol Canc Ther 6(3):833-843; Grunweller, A. ef al.,‏ ;33(1):439-447 ‎Nucleic Acids Research 31(12):3185-3193‏ )2003( . في بعض النماذج؛ تتضمن حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة وفقا للاختراع واحد أو ‎AST‏ من مونومرات ‎monomers 25‏ عبارة عن نيكلوتيدات ‎UNA‏ (حمض نووي غير مغلق ‎UNA (unlocked nucleic acid‏ عبارة عن حمض نووي لاحلقي ‎acyclic nucleic acid‏ مغلق»؛ حيث تتم إزالة أي من روابط السكرء والتي تكون وحدة سكر بنائية مغلقة ‎٠‏ في أحد ‎AEN‏ تتضمن حمض نووي غير مغلق أيضا مونومر ‎MONOMET‏ مع
روابط بين 04-01 والتي تمت إزالتها (أي رابط كريون-أوكسيجين-كريون تساهمي ‎covalent carbon-‏ ‎oxygen-carbon bond‏ بين ذرات الكريون '1© و04). في مثال آخرء تمت ‎dy}‏ رابط '2©- 3 (أي رابط كريون-كربون التساهمي ‎covalent carbon-carbon bond‏ بين ذرات الكربون ‎(C35 C2"‏ من السكر (انظر ‎Nuc.
Acids Symp.
Series, 52, 133-134 (2008) and Fluiter et al., Mol.
Biosyst., 2009, 10, 1039‏ والتي تم دمجها هنا بالإشارة إليها كمرجع). يمكن ‎Lind‏ أن تكون الحمض النووي الريبوزي لحمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة أيضا معدلة لتتضمن واحد أو أكثر من شقوق سكر ثنائية الحلفقة ‎.bicyclic sugar moities‏ 'سكر ثنائي الحلقة ‎"bicyclic sugar‏ عبارة عن حلقة فيورانوسيل ‎furanosyl ring‏ معدلة بواسطة تجسير اثنين من الذرات. "نيكلوسيد ثنائي الحلقة ‎("BNA") "bicyclic nucleoside‏ عبارة عن نيكلوسيد يتضمن شق سكر يتضمن جسر يوصل اثنين من 0 ذات الكريون من حلقة السكر ع90887110» وبالتالي تكون نظام ‎AUS als‏ الحلقة ‎‘bicyclic ring system‏ في نماذج معينة؛ ‎ash‏ الجسر بتوصيل الذرات 4'-كربون ‎4'-carbon‏ و2-كربون ‎2'-carbon‏ من ‎dls‏ ‏السكر. بالتالي؛ في بعض النماذج يمكن أن يتضمن العامل وفقا للاختراع واحد أو أكثر من أحماض نووية مغلقة. حمض نووي مغلق عبارة عن نيكلوتيد يتضمن شق رببوز معدل حيث يتضمن شق الريبوز جسر إضافي يوصل ذرات الكربون 2” و4”. أو بمعنى ‎AT‏ أحماض نووية مغلقة عبارة عن نيكلوتيد يتضمن 5 شق ‎Su‏ ثنائي الحلقة يتضمن جسر ‎4-CH2-0-2'‏ تقوم هذه البنية بفاعلية بإغلاق الريبوز في التوافق البنيوي الداخلي 3”. وقد أبدت إضافة أحماض نووية مغلقة إلى الأحماض النووية الريبوزية أحادية الجديلة أنها تقوم بزيادة ثبات الحمض النووي ‎(hom‏ أحادي الجديلة في المصلء ولتقليل الآثار البعيدة عن الهدف ‎Elmen, J. et al., (2005) Nucleic Acids Research 33(1):439-447; Mook, OR. et al., (2007) Mol )‏ ‎Canc Ther 6(3):833-843; Grunweller, A. et al., (2003) Nucleic Acids Research 31(12):3185-‏ 3193( تتضمن الأمثلة على نيكلوسيد ثنائي الحلقة للاستخدام في البولي نيكلوتيدات وفقا للاختراع بدون قيد نيكلوسيدات تتضمن جسر بين ذرات رببوسيل ‎ribosyl‏ 4" و2 حلقية. في نماذج معينة؛ تتضمن العوامل البولي نيكلوتيدية المضاد للحس ‎Wy antisense polynucleotide agents‏ للاختراع واحد أو أكثر من تيكلوسيدات ثنائية الحلقة ‎bicyclic nucleosides‏ يتضمن جسر 4" إلى 2. تتضمن الأمثلة على نيكلوسيدات ثنائية الحلقة المجسرة بجسر 4" إلى 2؛ ولكنها غير مقيدة ب ‎4'-(CH2)—S- ¢4'-(CH2)—O-2' (LNA)‏ ‎4'-CH(CH3)—O0-2' ¢4'-(CH2),—0-2' (ENA) x2' 5‏ (أيضا المشار إليها ب"إيثيل المقيد ‎constrained‏ ‎‘ethyl‏ أو ‎4-CH(CH20CH3)—0-2'5 (cEt'‏ (ونظائر مما سبق؛ ‎lil‏ مثلاء براءة الاختراع رقم ‎4'-C(CH3)(CH3)—O0-2' ¢(7399845‏ (ونظائر مما سبق؛ انظر ‎Mia‏ براءة الاختراع رقم 8278283)؛
4-0117-1)001:(2 (ونظائر مما سبق؛ انظر ‎Mia‏ براءة الاختراع رقم 8278425)؛ 4-0020 ‎N(CH3)-2!‏ (انظر» مثلاء منشور براءة الاختراع الأمريكية رقم 0171570/2004)؛ ‎4-CH>—N(R)—‏ ‏'0-2؛ ‎R Gua‏ عبارة عن ‎«H‏ 012-01 ألكيل ‎«C1-C12 alkyl‏ أو مجموعة وقاية ‎protecting group‏ (اتظر؛ مثلا؛ براءة الاختراع رقم 7427672)؛ '2-(ي4-011-001()01 (انظن ‎Chattopadhyaya «Mis‏ ‎4'-CH>—C(=CH2)-2' 5 ¢(et al., J.
Org.
Chem., 2009, 74, 118-134 5‏ (ونظائر مما سبق؛ انظر؛ مثلاء
براءة الاختراع رقم 8278426( وقد تم دمج محتويات كل مما سبق هنا بالإشارة إليها كمرجع. تتضمن المنشورات براءات الاختراع الأمريكية ومنشورات براءة الاختراع الأمريكية التي تشير إلى تحضير حمض نووي مغلق نيكلوتيدات؛ ولكنها غير مقيدة ب» ما يلي: براءات الاختراع الأمريكية أرقام 6268490؛ ¢6525191 6670461« 6770748؛ 6794499؛ 6998484« 7053207؛ ¢7084125¢7034133
0 ¢7399845 ¢7427672 7569686« 7741457« 8022193« 8030467« ¢8278425 8278426« 8278283 €0039618/2008 و 00122812009 وقد تم دمج محتوباتها هنا بالإشارة إليها كمرجع. يمكن تحضير أي من النيكلوسيدات ثنائية الحلقة ‎bicyclic nucleosides‏ السابقة التي لها واحد أو أكثر من تهيئات سكر متجاسمة كيماويا شاملة ‎Mie‏ ه-1-رببوفيورانوز ‎o-L-ribofuranose‏ وم]-0-رببوفيورانوز ‎B-D-ribofuranose‏ (انظر البراءة الدولية 14226/99).
يمكن أن يكون الحمض النووي الريبوزي لحمض رببونيكلوبك ثنائي الجديلة ‎Load‏ معدلا ليتضمن واحد أو أكثر من نيكلوتيدات ‎ethyl nucleotides Jil‏ مقيدة. حسب الاستخدام ‎(Lia‏ "نيكلوتيد ‎Ji)‏ مقيد" أو ات" ‎Ble‏ عن حمض نووي مغلق يتضمن شق سكر ثنائي الحلقة يتضمن جسر '0-2-(:4-011)011. في أحد النماذج؛ نيكلوتيد إيثيل مقيد عبارة عن توافق 5 المشار إليها هنا ‎".S-cEt'‏ ‏يمكن أن تتضمن حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة وفقا للاختراع ‎Load‏ واحد أو أكثر من "نيكلوتيدات مقيدة
0 توافقية ‎("CRN") "conformationally restricted nucleotides‏ نيكلوتيدات مقيدة توافقية عبارة عن نظائر نيكلوتيد مع رابط يوصل ذرات الكربون ‎C2‏ و:4© من ربوز أو ذرات الكربون ‎C3‏ و05 من الريبوز. يقوم نيكلوتيدات مقيدة توافقية بغلق حلقة ‎ribose ring eal‏ داخل توافق مستقر ويزيد من ألفة التهجين ‎hybridization affinity‏ إلى الحمض النووي الريبوزي المرسل. يتضمن الرابط طول مناسب لوضع الأوكسيجين ‎oxygen‏ في موضع مثالي للثبات والألفة بما يؤدي إلى تجعيد أقل في حلقة الرببوز.
تتضمن المنشورات التمثيلية التي تشير إلى تحضير مركبات معينة من نيكلوتيدات مقيدة توافقية الملحوظة ‎coded‏ ولكنها غير مقيدة ب» منشور براءة الاختراع الأمريكية رقم 0190383/2013؛ ومنشور الطلب الدولى 3 وقد تم دمج محتوياتها هنا بالإشارة إليها كمرجع. في بعض النماذج؛ يتضمن حمض ‎AUS clin)‏ الجديلة وفقا للاختراع واحد أو ‎AST‏ من مونومرات عبارة عن نيكلوتيدات حمض نووي غير مغلق. ‎Ble UNA‏ عن حمض نووي مغلق لاحلقي؛ حيث تتم إزالة أي من روابط السكرء والتي تكون وحدة السكر البنائية. في أحد الأمثلة؛ تتضمن حمض نووي غير مغلق أيضا مونومر مع روابط بين 04-01 ‎ally‏ تمت إزالتها (أي رابط كربون - أوكسيجين-كربون التساهمي بين ذرات الكربون '1© و04). في مثال ‎AT‏ تمت إزالة الرابط '2©- 63 (أي رابط كربون- كريون التساهمي بين ذرات كربون '62 و63) من السكر (انظر -133 ,52 ‎Nuc.
Acids Symp.
Series,‏ ‎and Fluiter ef al., Mol.
Biosyst., 2009, 10, 1039 0‏ )2008( 134 والتي تم دمجها هنا بالإشارة إليها كمرجع). تتضمن المنشورات الأمريكية التمثيلية التي تشير إلى تحضير حمض نووي غير مغلق؛ ولكنها غير مقيدة ب براءة الاختراع رقم 8314227؛ ومنشورات براءات الاختراع الأمريكية أرقام 0096289/2013؛ 3 و0313020/2011؛ وقد تم دمج محتوياتها هنا بالإشارة إليها كمرجع. 5 يمكن أن تتضمن تعديلات التثبيت المحتملة إلى أطراف جزيئات الحمض النووي الرببوزي ‎-١7‏ (أسيتيل أمينو كابرويل)-4-هيدروكسي ‎~C6~Hyp) N- (acetylaminocaproyl)-4-hydroxyprolinol Jeg‏ ‎١7 «(NHAC‏ (كابرويل-4-هيدروكسي برولينول ‎«(C6~Hyp) N-(caproyl-4-hydroxyprolinol‏ - (أسيتيل -4-هيدروكسي برولينول ‎N-(acetyl-4-hydroxyprolinol‏ (6-11(0ه1111)؛_ثيميدين -0-2- ديوكسي ثيميدين (إيثر) ‎sud)-N «thymidine-2'-0-deoxythymidine (ether)‏ كابرويل)-4-هيدروكسي 0 برولينول ‎N-(aminocaproyl)-4-hydroxyprolinol‏ (6-11©-أمينو) + 2-دوكوسانويل- يوريدين-3"- فوسفات ‎2-docosanoyl-uridine-3"- phosphate‏ قاعدة ديوكسي -ثيمين ‎(dT)‏ معكوسة وغيرها. يمكن العثور على كشف هذا التعديل في منشور الطلب الدولى للبراءة الدولية رقم 005861/2011. تتضمن التعديلات الأخرى لنيكلوتيدات حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة وفقا للاختراع 5” فوسفات 5 ‎phosphate‏ أو محاكي 5 فوسفات ‎lie «5 phosphate mimic‏ 5”-طرفية فوسفات ‎5-terminal‏ ‎phosphate 5‏ أو محاكي فوسفات على الجديلة المضادة للحس لحمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة. يتم الكشف
عن محاكيات فوسفات ‎phosphate mimics‏ مناسبة في؛ ‎De‏ منشور براءة الاختراع ‎١‏ لأمريكية رقم 2 يتم دمج محتوياتها كاملة هنا بالإشارة إليها كمرجع. أ. أحماض ريبونيكلويك مزدوجة الجديلة معدلة تتضمن مستحثات وفقا للاختراع في جوانب معينة ‎Wy‏ للاختراع؛ تتضمن عوامل حمض رببونيكلوبك ثنائي الجديلة مزدوجة الجديلة وفقا للاختراع عوامل مع تعديلات كيماوية حسب الكشف؛ ‎Sie‏ في البراءة الدولية 075935/2013؛ تم دمج كل محتوياتها هنا بالإشارة إليها كمرجع. تقوم البراءة الدولية 075035/2013 بتقديم مستحثات ‎motifs‏ ‏من ثلاثة تعديلات متطابقة على ثلاثة نيكلوتيدات متتابعة داخل جديلة حسية أو جديلة مضادة للحس ‎Jalal‏ حمض رببونيكلويك ثنائى الجديلة؛ تحديدا عند أو بالقرب من موقع الشق. في بعض النماذج؛ يمكن 0 أن يتم تعديل الجديلة الحسية وجديلة مضادة للحس لعامل حمض رببونيكلويك ثنائى الجديلة ‎LIS‏ يقوم إدخال هذه المستحثات بإعاقة نمط التعديل» إن وجد؛ للجديلة الحسية أو المضادة للحس. يمكن ترافق عامل حمض رببونيكلويك ثنائى الجديلة اختياريا مع مركب ترابطي مشتق من 187-أسيتيل جالاكتوز أمين؛ مثلا على الجديلة الحسية. بشكل أكثر تحديداء عند تعديل الجديلة الحسية والجديلة المضادة للحس ‎Jalal‏ حمض رببونيكلوبك ثنائي 5 الجديلة مزدوج الجديلة كليا لتتضمن واحد أو أكثر من مستحثات من ثلاثة تعديلات متطابقة على ثلاثة نيكلوتيدات متتابعة عند أو بالقرب من موقع الشق جديلة واحدة على الأقل ل عامل حمض رببونيكلويك ثنائى الجديلة؛ تمت ملاحظة نشاط الإسكات الجيني لعامل حمض رببونيكلويك ثنائى الجديلة. بالتالي» يقدم الاختراع عوامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة مزدوجة الجديلة قادر على تثبيط التعبير عن جين مستهدف (أي؛ جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1) في الكائن الحي. يحتوي عامل 0 حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة على جديلة حسية وجديلة مضادة للحس. كل جديلة يمكن أن يكون عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة بطول؛ بشكل مستقل» 30-12 نيكلوتيد. مثلاء يمكن أن تكون كل جديلة بشكل مستقل بطول 30-14 نيكلوتيد» 30-17 نيكلوتيد» 30-25 نيكلوتيد» 30-27 نيكلوتيد» 23-17 نيكلوتيد» 21-17 نيكلوتيد» 19-17 نيكلوتيد» 25-19 نيكلوتيد؛ 23-19 نيكلوتيد» 21-19 نيكلوتيد؛ 25-1 نيكلوتيد؛ أو 23-21 نيكلوتيد. تشكل الجديلة الحسية والجديلة المضادة للحس بشكل مثالي مزدوج الحمض النووي الرببوزي مزدوجة الجديلة ‎("dsRNA")‏ أيضا المشار إليها هنا ب "عامل ‎"dsRNA‏ يمكن أن تكون منطقة المزدوج لعامل حمض
ريبونيكلويك ثنائى الجديلة بطول 30-12 زوج نيكلوتيد. مثلاء يمكن أن تكون منطقة المزدوج بطول 14- 0 زوج نيكلوتيد»؛ 30-17 زوج نيكلوتيد» 30-27 زوج نيكلوتيد؛ 17 - 23 زوج ‎«aig‏ 21-17 زوج نيكلوتيدء 19-17 زوج نيكلوتيد؛ 25-19 زوج نيكلوتيد. 23-19 زوج نيكلوتيد» 19- 21 زوج نيكلوتيد؛ 25-1 زوج نيكلوتيد؛ أو 23-21 زوج نيكلوتيد. في مثال آخرء يتم اختيار منطقة المزدوج بطول من 1615 17 18 19 20 21 22 23 24 25« 26 27 28 29 أو 30 نيكلوتيد. في نماذج معينة؛ يمكن أن تكون الجدائل الحسية والمضادة للحس أطول. ‎Ole‏ في نماذج معينة؛ سوف تكون الجديلة الحسية والجديلة المضادة للحس بشكل مستقل بطول 35-25 نيكلوتيد. في نماذج معينة؛ كل الجديلة الحسية والجديلة المضادة للحس بشكل مستفل بطول 53-27 نيكلوتيد في الطول؛ مثلاء 27- 9. 49-31 49-33 49-35؛ 49-37 و49-39 نيكلوتيد في الطول. 0 في نماذج معينة؛ يمكن أن يحتوي عامل حمض ريبونيكلويك ثنائى الجديلة على واحد أو أكثر من مناطق جزءِ معلق أو مجموعات تغطية ‎capping groups‏ عند الطرف 3 5 أو كل من أطراف واحد أو كل من الجدائل. يمكن أن يكون الجزءِ المعلق» بشكل مستقل؛ بطول 6-1 نيكلوتيدات» مثلا 6-2 نيكلوتيدات؛ 5-1 نيكلوتيدات» 5-2 نيكلوتيدات» 4-1 نيكلوتيدات» 4-2 نيكلوتيدات» 3-1 نيكلوتيدات» 3-2 نيكلوتيدات؛ أو 2-1 نيكلوتيدات. في نماذج معينة؛ يمكن أن تتضمن مناطق الجزء المعلق ‎overhang‏ ‎regions 5‏ مناطق جزءِ معلق ممتد ‎extended overhang regions‏ كما هو مقدم هنا. يمكن أن تكون الأجزاء المعلقة ناتجة عن أحد الجدائل الأطول من غيرها؛ أو نتيجة اثنين من جدائل لها نفس الطول التي تمايلت. يمكن أن يقوم الجزء المعلق بتشكل عدم توافق مع الحمض النووي الريبوزي المرسل المستهدف أو يمكن أن تكمل المتواليات الجينية ‎gene sequences‏ أو يمكن أن تكون عبارة عن متوالية أخرى. يمكن توصيل الجدائل الأولى والثانية أيضاء مثلاء بواسطة قواعد إضافية لتكوين ‎cag‏ أو بواسطة روابط غير قاعدية ‎.non-base linkers 0‏ في نماذج معينة؛ يمكن أن تتضمن النيكلوتيدات في منطقة الجزءِ المعلق ‎overhang region‏ لعامل حمض رببونيكلويك ثنائى الجديلة التي يمكن أن تكون بشكل مستقل عبارة عن نيكلوتيد معدل أو غير معدل شاملا؛ ولكنها غير مقيدة ب 2 سكر معدل؛ مثل؛ 2"-فلوروء 0-72-ميثيل؛ ثيميدين ‎«(T) thymidine‏ 0-2- ميثوكسي إيثيل -5-ميثيل يوريدين ‎(Teo) 2-O-methoxyethyl-5-methyluridine‏ 0-2 -ميثوكسي ‎dil 25‏ أدينوسين ‎(Aco) 2-O-methoxyethyladenosine‏ 0-2-ميثوكسي ‎Ji)‏ -5-ميثيل سيتيدين 2% ‎¢(m5Ceo0) O-methoxyethyl-5-methyleytidine‏ وأي توليفات مما سبق. مثلاء يمكن أن تكون ثيو ثريتول
‎(TT) dithiothreitol‏ عبارة عن متوالية ‎gia‏ معلق ‎overhang sequence‏ لأي طرف على أي جديلة. يمكن أن يقوم الجزءِ المعلق بتكوين عدم توافق مع الحمض النووي الرببوزي المرسل المستهدف أو يمكن أن يكون
‏مكمل للمتواليات الجينية التي يمكن استهدافها أو يمكن أن تكون عبارة عن متوالية أخرى. يمكن معالجة الأجزاء المعلقة عند الأطراف 5”- أو 3<”- عند الجديلة الحسية؛ جديلة مضادة للحس»؛ أو كل من جدائل عامل حمض رببونيكلويك ثنائى الجديلة بفوسفوريل ‎phosphorylated‏ في بعض النماذج؛ تحتوي منطقة الجزء المعلق اثنين من نيكلوتيدات تتضمن فوسفورو ثيوات بين اثنين من ‎(lai Soll‏ حيث يمكن أن يكون الاثنين من النيكلوتيدات هما نفسهما أو مختلفين. في بعض النماذج؛ ‎Hall‏ المعلق موجود عند الطرف 73 من الجديلة الحسية؛ جديلة مضادة للحس؛ أو كل من الجدائل. في بعض النماذج؛ هذا الجزء المعلق 3: موجود في الجديلة المضادة للحس. في بعض النماذج؛ هذا الجزء المعلق 3 موجود في
‏0 الجديلة الحسية. يمكن أن يحتوي عامل حمض رببونيكلويك ثنائى الجديلة فقط على جزءٍ معلق فردي؛ والتي يمكن أن تقوي نشاط تداخل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة؛ بدون التأثير على ‎ails‏ الكلي. مثلاء يمكن وضع الجزءٍ المعلق أحادي الجديلة عند الطرف 3— من الجديلة الحسية أو؛ بشكل ‎(day‏ عند الطرف 3" من الجديلة المضادة للحس. يمكن أن يتضمن حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة ‎Lad‏ طرف مثلم؛ موضوع عند الطرف
‏5 5 من الجديلة المضادة للحس (أو الطرف 73 من الجديلة الحسية) أو العكس بالعكس. بشكل عام؛ تتضمن الجديلة المضادة للحس عامل حمض رببونيكلويك ثنائى الجديلة ‎ha‏ نيكلوتيد معلق عند الطرف 3» والطرف 5” عبارة عن ثلم. بدون الرغبة في الارتباط بأي نظرية؛ يفضل الطرف المثلم غير المتناظر عند الطرف 5” من الجديلة المضادة للحس والطرف 3' ‎gia‏ معلق من الجديلة المضادة للحس تحميل الجديلة الموجهة داخل الإسكات المستحث لمعقد بالحمض النووي الريبوزي عملية.
‏0 في نماذج معينة؛ عامل حمض ريبونيكلويك ثنائى الجديلة عبارة عن عبارة عن وحدة مثلمة ثنائية الطرف ‎double ended bluntmer‏ بطول 19 نيكلوتيدات؛ حيث تحتوي الجديلة الحسية على مستحث ‎motif‏ واحد على الأقل من ثلاثة تعديلات 2'-فلورو على ‎ADS‏ نيكلوتيدات متتابعة عند المواضع 7( 8؛ 9 من الطرف 5. تحتوي الجديلة المضادة للحس على مستحث واحد على الأقل من ثلاثة تعديلات 2:-0-ميثيل على ثلاثة نيكلوتيدات متتابعة عند المواضع 11 12 13 من الطرف ‎C5‏
‏5 في نماذج ‎gal‏ عامل حمض رببونيكلوبك ثنائى الجديلة عبارة عن وحدة مثلمة ثنائية الطرف بطول 20 نيكلوتيدات» حيث تحتوي الجديلة الحسية على مستحث واحد على الأقل من ثلاثة تعديلات 2"-فلورو على
ثلاثة نيكلوتيدات متتابعة عند المواضع 8؛ 9 10 من الطرف 5.. تحتوي الجديلة المضادة للحس على مستحث واحد على الأقل من ثلاثة تعديلات 0-72-ميثيل على ثلاثة نيكلوتيدات متتابعة عند المواضع 1 )+ 13 من الطرف ‎C5‏ ‏في نماذج أخرى؛ عامل حمض رببونيكلويك ثنائى الجديلة عبارة عن وحدة مثلمة ثنائية الطرف بطول 21 نيكلوتيد. حيث تحتوي الجديلة الحسية على مستحث واحد على الأقل من ثلاثة تعديلات 2-فلورو على ثلاثة نيكلوتيدات متتابعة عند المواضع 9؛ ¢10 11 من الطرف 75 تحتوي الجديلة المضادة للحس على مستحث واحد على الأقل من ثلاثة تعديلات 0-72-ميثيل على ثلاثة نيكلوتيدات متتابعة عند المواضع 1 )+ 13 من الطرف ‎C5‏ ‏في نماذج معينة؛ يتضمن عامل حمض رببونيكلويك ثنائى الجديلة 21 نيكلوتيد جديلة حسية و23 نيكلوتيد 0 جديلة مضادة للحس؛ حيث تحتوي الجديلة الحسية على مستحث واحد على الأقل من ثلاثة تعديلات 2- فلورو على ثلاثة نيكلوتيدات متتابعة عند المواضع 9؛ ¢10 11 من الطرف ¢°5 تحتوي الجديلة المضادة للحس على مستحث واحد على الأقل من ثلاثة تعديلات 2:-0-ميثيل على ثلاثة نيكلوتيدات متتابعة عند المواضع 11 ¢12 13 من الطرف 75 حيث أحد الأطراف لعامل حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة عبارة عن ثلم؛ حيث يتضمن الطرف الآخر 2 جزءٍ نيكلوتيد معلق. بشكل ‎gia 2 cine‏ نيكلوتيد معلق موجود 5 عند الطرف 3 من الجديلة المضادة للحس. بينما يتضمن 2 جزء نيكلوتيد معلق موجود عند الطرف 3" من الجديلة المضادة للحس؛ هناك اثنين من روابط نيكلوتيد فوسفورو ثيوات بينية بين النيكلوتيدات الثلاثة الطرفية؛ حيث يكون اثنين من النيكلوتيدات الثلاثة عبارة عن النيكلوتيدات المعلقة ‎coverhang nucleotides‏ والنيكلوتيد الثالث عبارة عن نيكلوتيد مزدوج ‎paired nucleotide‏ بجوار النيكلوتيد المعلق. في أحد النماذج؛ يتضمن عامل حمض رببونيكلويك ثنائي 0 الجديلة بشكل إضافي اثنين من روابط نيكلوتيد فوسفورو ثيوات بينية بين النيكلوتيدات الثلاثة الطرفية عند كل من الطرف 75 من الجديلة الحسية وعند الطرف 5” من الجديلة المضادة للحس. في نماذج معينة؛ كل نيكلوتيد في الجديلة الحسية والجديلة المضادة للحس لعامل حمض رببونيكلويك ثنائى الجديلة؛ شاملة النيكلوتيدات التي هي ‎ga‏ من المستحثات عبارة عن نيكلوتيدات معدلة. في نماذج معينة يتم تعديل كل وحدة بنائية بشكل مستقل مع 2:-0-ميثيل أو 3”-فلورو 37-000:0؛ ‎Sle‏ في مستحث بديل. ‎lal‏ ‏5 يتضمن عامل حمض رببونيكلويك ثنائى الجديلة أيضا مركب ترابطي (بشكل مفضل 7١-أسيتيل‏ جالاكتوز أمين 3).
في نماذج معينة؛ يتضمن عامل حمض رببونيكلويك ثنائى الجديلة جديلة حسية وجديلة مضادة للحس؛ حيث تبلغ الجديلة الحسية 30-25 وحدة نيكلوتيد بنائية في الطول؛ حيث بدءا من النيكلوتيد الطرفي 5" (موضع 1) تتضمن المواضع 1 إلى 23 من الجديلة الأولى على الأقل 8 رببونيكلوتيدات؛ تبلغ الجديلة المضادة للحس 66-36 وحدة نيكلوتيد بنائية في الطول و؛ بدءا من النيكلوتيد الطرفي 3؛ ويتضمن على الأقل 8 رببونيكلوتيدات في المواضع المزدوجة مع المواضع 1- 23 للجديلة الحسية لتكوين المزدوج؛ حيث النيكلوتيد الطرفي 3 ' على الأقل من الجديلة المضادة للحس غير متزاوج مع الجديلة الحسية؛ وما يصل إلى 6 نيكلوتيدات 3' طرفية متتابعة غير متزاوجة مع جديلة حسية؛ بالتالي تشكل ‎gia‏ معلق 3 أحادي الجديلة من 6-1 نيكلوتيدات؛ حيث الطرف 5 من الجديلة المضادة للحس يتضمن من 30-10 نيكلوتيدات متتابعة غير المتزاوجة مع الجديلة الحسية؛ بالتالي تشكل ‎gia‏ معلق 5 أحادي الجديلة بطول 30-10 0 نيكلوتيد؛ حيث على الأقل نيكلوتيدات الجديلة الحسية 5' طرفية و3' طرفية متزاوجة مع نيكلوتيدات جديلة مضادة للحس عند محاذاة الجدائل الحسية والمضادة للحس من أجل أقصى تكامل؛ بالتالي يتم تكوين منطقة مزدوجة أساسا بين الجدائل الحسية والمضادة للحس؛ وبتم تكميل الجديلة المضادة للحس بشكل كافي للحمض النووي الرببوزي مستهدف على طول 19 رببونيكلوتيدات على الأقل لطول جديلة مضادة للحس لتقليل التعبير الجيني المستهدف عند إدخال الحمض النووي مزدوج الجديلة داخل خلية كائن ثديي؛ 5 وحيث تحتوي الجديلة الحسية على مستحث واحد على الأقل من ثلاثة تعديلات 2-فلورو على ثلاثة نيكلوتيدات متتابعة؛ حيث ‎Lin‏ واحد على الأقل من المستحثات عند أو بالقرب من موقع الشق. تحتوي الجديلة المضادة للحس على مستحث واحد على الأقل من ثلاثة تعديلات 0-72-ميثيل على ثلاثة
نيكلوتيدات متتابعة عند أو بالقرب من موقع الشق. في نماذج معينة؛ يتضمن عامل حمض رببونيكلويك ثنائى الجديلة الجدائل الحسية والمضادة للحس؛ حيث 0 يتضمن عامل حمض رببونيكلويك ثنائى الجديلة جديلة أولى تتضمن طول يبلغ على الأقل 25 وعلى الأكثر 29 نيكلوتيد وجديلة ثانية تتضمن طول موجود على الأكثر 30 نيكلوتيد مع مستحث واحد على الأقل من ثلاثة تعديلات 2:-0-ميثيل على ثلاثة نيكلوتيدات متتابعة عند موضع 11؛ 12؛ 13 من الطرف 5”؛ حيث يشكل الطرف 3” من الجديلة الأولى والطرف 5" من الجديلة الثانية طرف مثلم والجديلة الثانية بطول 4-1 نيكلوتيدات عند الطرف 73 بدلا من الجديلة الأولى» حيث تبلغ مساحة المنطقة مزدوج 5 25 نيكلوتيد في الطول؛ والجديلة الثانية مكمل بما يكفي إلى الحمض النووي الريبوزي المرسل مستهدف على طول على الأقل 19 نيكلوتيد من طول الجديلة الثانية لتقليل التعبير الجيني المستهدف عن عند
إدخال عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة داخل خلية ‎GAS‏ ثديي؛ وحيث يؤدي عامل شق ‎Dicer‏ ‏حمض رببونيكلويك ثنائى الجديلة بشكل مفضل إلى الحمض النووي الريبوزي أحادي الجديلة يتضمن الطرف 3” من الجديلة الثانية؛ بالتالي تقليل التعبير عن الجين المستهدف في الكائن الثديي. اختيارياء يتضمن عامل حمض ريبونيكلوبك ثنائى الجديلة أيضا مركب ترابطي. في نماذج معينة؛ تحتوي الجديلة الحسية لعامل حمض رببونيكلوبك ثنائى الجديلة على مستحث واحد على الأقل من ثلاثة تعديلات متطابقة على ثلاثة نيكلوتيدات متتابعة؛ حيث ينشاً واحد من المستحثات عند موقع الشق في الجديلة الحسية. في نماذج معينة؛ يمكن أن تحتوي الجديلة المضادة للحس لعامل حمض رببونيكلويك ثنائى الجديلة أيضا مستحث واحد على الأقل من ثلاثة تعديلات متطابقة على ثلاثة نيكلوتيدات متتابعة؛ حيث ‎Lan‏ واحد من 0 المستحثات عند أو بالقرب من موقع الشق في الجديلة المضادة للحس. بالنسبة لعامل حمض رببونيكلويك ثنائى الجديلة يتضمن منطقة مزدوج 23-17 نيكلوتيد في الطول؛ موقع الشق من الجديلة المضادة للحس بشكل مثالي موجود حول المواضع 10 11؛ و12 من الطرف 5”. بالتالي يمكن أن تنشاً مستحثات بمقدار ثلاثة تعديلات متطابقة عند المواضع 9؛ 10 11؛ المواضع 10؛ 1 12؛ المواضع ‎١11‏ 12 13؛ المواضع 12( 13( 14؛ أو المواضع 13 14؛ 15 من الجديلة 5 المضادة للحس؛ يبدء ‎all‏ من النيكلوتيد الأول من الطرف 5" من الجديلة المضادة للحس» أوء يبدا العد من النيكلوتيد المزدوج الأول في منطقة المزدوج من الطرف 5” من الجديلة المضادة للحس. يمكن أن يتغير موقع الشق في الجديلة المضادة للحس ‎Lad‏ وفقا لطول منطقة المزدوج ‎Jalal‏ حمض رببونيكلوبك ثتائى الجديلة من الطرف ‎C5‏ ‏يمكن أن تحتوي الجديلة الحسية لعامل حمض رببونيكلويك ثنائى الجديلة على مستحث واحد على الأقل 0 .من ثلاثة تعديلات متطابقة على ثلاثة نيكلوتيدات متتابعة عند موقع الشق ‎the‏ جديلة؛ ويمكن أن تتضمن الجديلة المضادة للحس مستحث واحد على الأقل من ثلاثة تعديلات متطابقة على ثلاثة نيكلوتيدات متتابعة عند أو بالقرب من موقع شق الجديلة. عندما تشكل الجديلة الحسية والجديلة المضادة للحس مزدوج حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة؛ يمكن محاذاة الجديلة الحسية والجديلة المضادة للحس ‎Cus‏ يتضمن مستحث واحد من النيكلوتيدات الثلاثة على الجديلة الحسية ومستحث واحد من النيكلوتيدات الثلاثة على الجديلة 5 المضادة للحس يتضمن واحد على الأقل نيكلوتيد» أي؛ يشكل واحد على الأقل من النيكلوتيدات الثلاثة للمستحث في الجديلة الحسية زوج قاعدة مع واحد على الأقل من النيكلوتيدات الثلاثة من المستحث في
الجديلة المضادة للحس. بشكل بديل؛ يمكن أن يتداخل اثنين على الأقل من النيكلوتيدات؛ أو يمكن أن
تتداخل كل النيكلوتيدات الثلاثة.
في بعض النماذج؛ يمكن أن تحتوي الجديلة الحسية لعامل حمض رببونيكلويك ثنائى الجديلة على أكثر
من مستحث واحد من ثلاثة تعديلات متطابقة على ثلاثة نيكلوتيدات متتابعة. يمكن أن ‎Lay‏ المستحث
الأول عند أو بالقرب من موقع شق الجديلة ويمكن أن تكون المستحثات الأخرى عبارة عن تعديل جناحي
‎wing modification‏ يشير المصطلح "تعديل ‎"alin‏ هنا إلى مستحث ‎Lay‏ عند جزء آخر من الجديلة
‏المنفصلة من المستحث عند أو بالقرب من موقع شق الجديلة نفسها. التعديل الجناحي إما مجاور للمستحث
‏الأول أو منفصل بواسطة على الأقل واحد أو أكثر من نيكلوتيدات. عندما تتجاور المستحثات مباشرة مع
‏بعضها البعض عندما تكون البنيات الكيماوية للمستحثات مميزة من بعضها ‎Nie go anal‏ فصل المستحثات 0 بواسطة واحد أو أكثر من نيكلوتيد غير البنيات الكيماوية التي يمكن أن تكون هي نفسها أو مختلفة. يمكن
‏وجود اثنين من أو أكثر من تعديلات جناحية ‎lie wing modifications‏ عند وجود اثنين من تعديلات
‏جناحية موجودة؛ يمكن أن ‎Lay‏ كل تعديل ‎alia‏ عند أحد الأطراف نسبة إلى المستحث الأول موجود عند
‏أو بالقرب من موقع شق أو على أي من جوانب المستحث الموجه ‎Jead motif‏
‏شأنها شأن الجديلة الحسية؛ ‎(Sa‏ أن ‎(gins‏ الجديلة المضادة للحس ‎Jalal‏ حمض رببونيكلويك ثنائى 5 الجديلة على أكثر من واحد من مستحثات ذات ثلاثة تعديلات متطابقة على ثلاثة نيكلوتيدات متتابعة؛ مع
‏واحد على الأقل من المستحثات التي ‎Lam‏ عند أو بالقرب من موقع شق الجديلة. يمكن أن تحتوي الجديلة
‏المضادة للحس أيضا على واحد أو أكثر من تعديلات جناحية في محاذاة مشابهة للتعديلات الجناحية التي
‏يمكن أن تكون موجودة على الجديلة الحسية.
‏في بعض النماذج؛ لا يتضمن التعديل الجناحي على الجديلة الحسية أو الجديلة المضادة للحس لعامل 0 حمض رببونيكلوبك ثنائى الجديلة بشكل مثالي أول واحد أو اثنين من نيكلوتيدات طرفية عند الطرف ‎C3‏
‏5 أو كل من أطراف الجديلة.
‏في نماذج ‎gal‏ لا يتضمن التعديل الجناحي على الجديلة الحسية أو الجديلة المضادة للحس لعامل
‏حمض رببونيكلويك ثنائى الجديلة بشكل مثالي ‎Job‏ واحد أو اثنين من مزدوجات نيكلوتيدية ‎paired‏
‎nucleotides‏ في منطقة المزدوج عند الطرف 3 75 أو كل من أطراف الجديلة.
عندما ‎(gins‏ كل من الجديلة الحسية والجديلة المضادة للحس لعامل حمض رببونيكلويك ثنائى الجديلة
على تعديل جناحي واحد على الأقل؛ ‎(Sa‏ أن تقع التعديلات الجناحية على نفس الطرف من منطقة
المزدوج؛ ‎Lely‏ تداخل بمقدار واحد؛ اثنين» أو ثلاثة نيكلوتيدات.
عندما تحتوي الجديلة الحسية والجديلة المضادة للحس لعامل حمض رببونيكلويك ثنائى الجديلة على اثنين على الأقل من التعديلات الجناحية؛ يمكن محاذاة الجديلة الحسية والجديلة المضادة للحس بحيث يقع اثنين
من تعديلات كل من الجديلة على أحد الأطراف من منطقة المزدوج؛ يتضمن تداخل واحد؛ اثنين» أو ثلاثة
نيكلوتيدات؛ تقع اثنين من تعديلات كل من الجديلة على الطرف الآخر من منطقة المزدوج؛ يتضمن التداخل
‎cal‏ اثنين من أو ثلاثة نيكلوتيدات؛ تقع اثنين من تعديلات الجديلة على كل جانب من المستحث الموجه؛
‏يتضمن تداخل ‎candy‏ اثنين من أو ثلاثة نيكلوتيدات في منطقة المزدوج.
‏0 في بعض النماذج؛ يمكن أن يكون كل نيكلوتيد في الجديلة الحسية والجديلة المضادة للحس لعامل حمض رببونيكلويك ثنائى الجديلة؛ شاملة النيكلوتيدات التي هي ‎oda‏ من المستحثات؛ معدلا. يمكن تعديل كل نيكلوتيد مع نفس التعديل أو تعديل مختلف والتي يمكن أن تتضمن واحد أو أكثر من تعديل واحد أو كل من مركبات فوسفات أوكسيجين ‎phosphate oxygens‏ غير مرتبطة أو لواحد أو أكثر من مركبات فوسفات أوكسيجين المرتبطة؛ تعديل واحد من مكونات سكر ريبوز؛ ‎le‏ من 2 -هيدروكسيل 2-1:10:0<(1 على
‏5 مكر ريبوز؛ استبدال كامل لشق فوسفات مع روابط 'ديفوسفو" ‎¢dephospho” linkers‏ تعديل أو استبدال لقاعدة طبيعية المنشاً؛ واستبدال أو تعديل أساس ربوز -فوسفات ‎.ribose-phosphate‏ ‎Cus‏ الأحماض النووية عبارة عن بوليمرات من وحدات ثانوية؛ هناك العديد من التعديلات التي ‎Lam‏ عند موضع يتم تكراره في حمض نووي؛ ‎lia‏ تعديل قاعدة؛ أو شق فوسفات؛ أو 0 غير المرتبط لشق فوسفات. في بعض الحالات يتم التعديل عند كل من المواضع الحالية في الحمض النووي ولكن في العديد من
‏0 الحالات ‎of‏ يتم تعديلها. ‎lie‏ يمكن أن يتم التعديل فقط عند الموضع الطرفي 3”- أو 5'-؛ والتي يمكن أن تنشاً فقط في منطقة طرفية ‎lie cterminal region‏ عند موضع على نيكلوتيد طرفي أو في آخر 2 3 أو 10 نيكلوتيدات من الجديلة. يمكن أن ‎Lan‏ التعديل في منطقة جديلة مزدوجة؛ منطقة جديلة فردية؛ أو في كل منها. يمكن أن يتم التعديل فقط في منطقة الجديلة المزدوجة لعامل حمض رببونيكلويك ثنائى الجديلة أو يمكن أن تنشاً فقط في منطقة جديلة فردية لعامل حمض رببونيكلويك ثنائى الجديلة. مثلا؛
‏25 يمكن أن ‎Lin‏ تعديل فوسفورو ثيوات عند موضع 0 غير مرتبط فقط عند واحد أو كل من الأطراف؛ ويمكن أن ‎Lay‏ فقط في منطقة طرفية؛ ‎Ole‏ عند موضع على نيكلوتيد طرفي؛ أو في آخر 32 ‎ed‏ 5؛ أو 10
نيكلوتيدات للجديلة؛ أو يمكن أن ‎Lin‏ في جديلة مزدوجة ومناطق جديلة فردية؛ تحديدا عند الأطراف. يمكن ‎dallas‏ الطرف 5” أو الأطراف بفوسفوريل. من الممكن؛ ‎lie‏ لتحسين الثبات؛ تضمين قواعد معينة في أجزاء معلقة؛ أو تضمين نيكلوتيدات معدلة أو نيكلوتيدات بديلة؛ في أجزاء جديلة فردية معلقة؛ ‎Oli‏ في ‎gall‏ 5”- أو 3— المعلق؛ أو في كل منها. مثلا؛ قد يكون مطلويا تضمين نيكلوتيدات بورين ‎purine nucleotides‏ في أجزاء معلقة. في بعض النماذج يمكن أن تكون كل أو بعض من القواعد في ‎ga‏ 3”- أو 5”- المعلق معدلة؛ ‎Sle‏ مع التعديل الموضح هنا. يمكن أن تتضمن التعديلات؛ ‎Ole‏ استخدام تعديلات عند الموضع 2 من سكر رببوز مع تعديلات معروفة في المجال؛ ‎lie‏ يقوم استخدام رببونيكلوتيدات ديوكسي ‎cdeoxyribonucleotides‏ 2 -ديوكسي -2”-فلورو 27-060«7-27-000:0 أو 2:-0-ميثيل معدلة بدلا من ريبوسكر للنيكلوبيز» وتعديلات في 0 مجموعة الفوسفات؛ ‎Ole‏ تعديل فوسفورو ثيواتات. تحتاج الأجزاء المعلقة إلى ألا تكون متجانسة مع المتوالية المستهدفة. في بعض النماذج؛ يتم تعديل كل وحدة بنائية من الجديلة الحسية والجديلة المضادة للحس بشكل مستقل مع أحماض نووية مغلقة؛ نيكلوتيدات مقيدة توافقية؛ إيثيل ‎call‏ حمض نووي غير مغلق؛ ‎(CeNA (HNA‏ 2-ميثوكسي إيثيل» 2*- 0-ميثيل» 2:-0-أليل؛ 2:-©- ‎(Jl‏ 2<”-ديوكسي» 2”-هيدروكسيل؛ أو 2- 5 فلورو. يمكن أن تحتوي الجدائل على أكثر من تعديل واحد. في أحد ‎oz laid)‏ يتم تعديل كل وحدة بنائية من الجديلة الحسية والجديلة المضادة للحس بشكل مستقل مع 2— 0-ميثيل أو 2”-فلورو. هناك على الأقل اثنين من التعديلات المختلفة بشكل مثالي موجودة على الجديلة الحسية والجديلة المضادة للحس. يمكن أن يتضمن هذين الاثنين من التعديلات تعديلات 2:- 0-ميثيل أو 2 -فلورو» أو غيرها. في نماذج معينة؛ تتضمن ‎Ny‏ أو ‎Np‏ تعديلات ذات نمط بديل. يشير المصطلح 'مستحث ‎"diy‏ حسب الاستخدام هنا إلى مستحث التي لها واحد أو أكثر من تعديلات؛ ‎Lan‏ كل تعديل على نيكلوتيدات متبادلة من أحد الجدائل. يمكن أن يشير النيكلوتيد البديل إلى واحد لكل نيكلوتيد آخر أو واحد لكل ثلاثة نيكلوتيدات؛ أو نمطذ مشابه. ‎Ole‏ إذا كان كل ‎B (A‏ و6 يقدم نوع تعديل إلى النيكلوتيد» يمكن أن يكون المستحث البديل عبارة عن ‎""AABAABAABAAB..." "AABBAABBAABB..." "ABABABABABAB..."‏ ‎""ABCABCABCABC..." sl ""AAABBBAAABBB..." "AAABAAABAAAB...'‏ إلخ. ‎(Sa 25‏ أن يكون نوع التعديلات التي تم تضمينها في المستحث البديل هو نفسه أو مختلف. ‎Ole‏ إذا كان كل من ‎D CB A‏ يمثل نوع تعديل واحد على النيكلوتيد. يمكن أن يكون النمط البديل؛ أي؛ تعديلات
على كل نيكلوتيد آخرء هو نفسه؛ ولكن يمكن اختيار كل من الجديلة الحسية أو الجديلة المضادة للحس من العديد من احتمالات التعديلات في المستحث ‎dll‏ مثل "...مدقم" ‎"ACACAC..."‏
'. 08080" أو ".. ‎"«CDCDCD.‏ إلخ. في بعض النماذج؛ تتم ‎dab]‏ عامل حمض رببونيكلويك ثنائى الجديلة ‎Wy‏ للاختراع يتضمن نمط التعديل للمستحث البديل على الجديلة الحسية نسبة إلى نمط التعديل للمستحث البديل على الجديلة المضادة للحس. يمكن أن تكون الإزاحة عبارة عن هذه المجموعة المعدلة من النيكلوتيدات من الجديلة الحسية التي تناظر مجموعة معدلة بشكل مختلف من نيكلوتيدات من الجديلة المضادة للحس والعكس بالعكس. مثلاً؛ الجديلة الحسية عند المزاوجة مع الجديلة المضادة للحس في مزدوج حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة. يمكن أن يبدا المستحث البديل في الجديلة الحسية مع "8881341" من 5”إلى 23 للجديلة والمستحث البديل في
0 الجديلة المضادة للحس مع 38881387" من 5”إلى 3”للجديلة في منطقة المزدوج. كمثال ‎«AT‏ يمكن أن يقوم المستحث البديل في الجديلة الحسية ببدء مع ‎"AABBAABB'‏ من 5 إلى 3: للجديلة والمستحث البديل في الجديلة المضادة للحس مع ‎"BBAABBAA'‏ من ‎W'S‏ 3 للجديلة في منطقة المزدوج؛ بحيث يمكن أن تكون هناك إزاحة جزئية أو كلية لأنماط التعديل بين الجديلة الحسية والجديلة المضادة للحس. في بعض النماذج؛ يتضمن عامل حمض رببونيكلويك ثنائى الجديلة النمط من المستحث البديل لتعديل
5 2:-0-ميثيل وتعديل 2-فلورو على الجديلة الحسية يتضمن إزاحة أولية نسبة إلى النمط من المستحث البديل لتعديل 0-72-ميثيل وتعديل 2"-فلورو على الجديلة المضادة للحس ‎(Lgl‏ أي؛ نيكلوتيد 2:-0- ميثيل معدل على أزواج قاعدة الجديلة الحسية مع نيكلوتيد 2-فلورو معدل على الجديلة المضادة للحس والعكس بالعكس. يمكن أن يبدا الموضع 1 من الجديلة الحسية مع التعديل 2-فلورو؛ ويمكن أن يبدأ الموضع 1 من الجديلة المضادة للحس مع التعديل 2:- ©0-ميثيل.
0 يقوم إدخال واحد أو أكثر من مستحثات لثلاثة تعديلات متطابقة على ثلاثة نيكلوتيدات متتابعة إلى الجديلة الحسية أو الجديلة المضادة للحس بإعاقة نمط التعديل الأولي الموجود في الجديلة الحسية أو الجديلة المضادة للحس. يمكن أن تقوم هذه الإعاقة لنمط التعديل للجديلة الحسية أو المضادة للحس بواسطة إدخال واحد أو أكثتر من مستحثات ثلاثة تعديلات متطابقة على ثلاثة نيكلوتيدات متتابعة إلى الجديلة الحسية أو المضادة للحس بتحسين نشاط الإسكات الجيني في مقابل الجين المستهدف.
5 في بعض النماذج؛ عند إدخال مستحث لثلاثة تعديلات متطابقة على ثلاثة نيكلوتيدات متتابعة إلى أي من الجدائل» يختلف تعديل النيكلوتيد بجوار المستحث عن تعديل غير التعديل من المستحث. مثلاء ‎ga‏
المتوالية الذي يحتوي على المستحث عبارة عن ‎NYY YN‏ 0" حيث يمثل ”ل7” التعديل من المستحث
لثلاثة تعديلات متطابقة على ثلاثة نيكلوتيدات متتالية؛ وتقوم ‎"N's Na"‏ بتقديم تعديل إلى النيكلوتيد بجوار المستحث 777577" المختلفة عن تعديل ‎oF‏ وحيث يمكن أن تكون ‎Noy Na‏ هي نفس التعديل أو تعديلات مختلفة. بشكل ‎ean‏ يمكن أن تكون ‎No‏ أو ‎Nb‏ موجودة أو غائبة عندما يكون هناك تعديل جناحي موجود.
يمكن أن تتضمن حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة أيضا رابط نيكلوتيد بيني فوسفورو ثيوات أو ميثيل فوسفونات واحد على الأقل. رابط النيكلوتيد البيني فوسفورو ثيوات أو ميثيل فوسفونات يمكن أن يتم التعديل
على أي نيكلوتيد من الجديلة الحسية؛ جديلة مضادة للحس؛ أو كل من الجدائل في أي موضع للجديلة.
‎lie‏ يمكن أن يتم تعديل رابط النيكلوتيد البيني على كل نيكلوتيد على الجديلة الحسية أو الجديلة المضادة للحس؛ كل رابط نيكلوتيد بيني يمكن أن يتم التعديل في نمط تبادلي على الجديلة الحسية أو الجديلة المضادة
‏0 للحس؛ أو يمكن أن تحتوي الجديلة الحسية أو الجديلة المضادة للحس على كل من تعديلات رابط نيكلوتيد بيني في نمط تبادلي. النمط البديل لتعديل رابط النيكلوتيد البيني على الجديلة الحسية هو نفسه أو مختلف
‏عن الجديلة المضادة للحس؛ ويمكن أن يتضمن النمط البديل لتعديل رابط النيكلوتيد البيني على الجديلة الحسية إزاحة نسبة إلى النمط البديل لتعديل رابط النيكلوتيد البيني على الجديلة المضادة للحس. في أحد النماذج» يتضمن عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة مزدوج الجديلة 8-6 روابط نيكلوتيد فوسفورو
‏15 ثيوات بينية. في بعض النماذج؛ تتضمن الجديلة المضادة للحس اثنين من روابط نيكلوتيد فوسفورو ثيوات بينية عند الطرف ‎TS‏ واثنين من روابط نيكلوتيد فوسفورو ثيوات بينية عند الطرف 3؛ والجديلة الحسية يتضمن اثنين على الأقل من روابط نيكلوتيد فوسفورو ثيوات بينية عند أي من الطرف 5” أو الطرف 3.
‏في بعض النماذج؛ يتضمن عامل حمض رببونيكلويك ثنائى الجديلة فوسفورو ثيوات أو ميثيل فوسفونات
‏رابط نيكلوتيد بيني تعديل في منطقة ‎hall‏ المعلق. مثلاء يمكن أن تحتوي منطقة الجزءِ المعلق على اثنين
‎Ga 0‏ نيكلوتيدات تتضمن فوسفورو ثيوات أو ميثيل فوسفونات رابط نيكلوتيد بيني بين اثنين من نيكلوتيدات. يمكن أن تكون تعديلات رابط النيكلوتيد البيني أيضا مرتبطة بالنيكلوتيدات المعلقة مع مزدوجات نيكلوتيدية الطرفية في منطقة المزدوج. ‎lie‏ على الأقل 32 4؛ أو يمكن أن تكون كل النيكلوتيدات المعلقة مربوطة
‏خلال فوسفورو ثيوات أو ميثيل فوسفونات رابط نيكلوتيد بيني؛ واختيارياء يمكن أن تكون هناك روابط فوسفورو ثيوات أو ميثيل فوسفونات نيكلوتيد بينية إضافية تربط النيكلوتيد المعلق لنيكلوتيد مزدوج موجود
‏5 بجوار النيكلوتيد المعلق. مثلاء يمكن أن يكون هناك اثنين على الأقل من روابط نيكلوتيد فوسفورو ثيوات بينية بين النيكلوتيدات الثلاثة ‎dll)‏ حيث يكون اثنين من النيكلوتيدات الثلاثة عبارة عن نيكلوتيدات
معلقة؛ والثالث عبارة عن نيكلوتيد مزدوج بجوار النيكلوتيد المعلق. يمكن أن تكون هناك ثلاثة نيكلوتيدات
طرفية موجودة عند الطرف 3 من الجديلة المضادة للحس؛ الطرف 3" من الجديلة الحسية؛ الطرف 5"
من الجديلة المضادة للحس» أو الطرف 5” من الجديلة المضادة للحس.
في بعض النماذج؛ ‎gia‏ 2-نيكلوتيد معلق موجود عند الطرف 73 من الجديلة المضادة للحس؛ وهناك اثنين _من روابط نيكلوتيد فوسفورو ثيوات بينية بين النيكلوتيدات الثلاثة الطرفية؛ حيث يكون اثنين من النيكلوتيدات
الثلاثة عبارة عن النيكلوتيدات المعلقة؛ والنيكلوتيد الثالث عبارة عن نيكلوتيد مزدوج بجوار النيكلوتيد المعلق.
اختيارياء يمكن أن يتضمن عامل حمض رببونيكلويك ثنائى الجديلة بشكل إضافي اثنين من روابط نيكلوتيد
فوسفورو ثيوات بينية بين النيكلوتيدات الثلاثة الطرفية عند كل من الطرف 5" من الجديلة الحسية وعند
الطرف 5 من الجديلة المضادة للحس.
0 في أحد النماذج؛ يتضمن عامل حمض رببونيكلويك ثنائى الجديلة عدم توافق مع الهدف»؛ في المزدوج؛ أو توليفات مما سبق. يمكن أن تنشاً حالة عدم التوافق في منطقة ‎gall‏ المعلق أو منطقة المزدوج. يمكن ترتيب زوج القاعدة على أساس شدتها لتعزيز الانفصال أو الانصهار ‎Ole)‏ على الطاقة ‎pall‏ لارتباط أو انفصال المزاوجة المحددة؛ يتم فحص المنهج الأبسط للأزواج على أساس زوج فردي؛ يمكن استخدام التحليل التالي أو المشابه أيضا). لتعزيز الانفصال: يفضل ‎UA‏ في مقابل 0:6؛ ويفضل 11:06 في مقابل
5 6:6؛ ويفضل 6:1 في مقابل ‎C:G‏ ([-إينوسين ‎(inosine‏ حالات عدم التوافق؛ ‎Sle‏ يفضل استخدام المزاوجة غير القانونية أو القانونية الأخرى (كما هو موضح في أي مكان آخر هنا) في مقابل الأزواج القانونية (1:8» ‎(CG UA‏ ويفضل استخدام الأزواج التي تتضمن قاعدة دولية في مقابل الأزواج القانونية. في نماذج معينة؛ يتضمن عامل حمض رببونيكلويك ثنائى الجديلة واحد على الأقل من أول 1؛ 2 3؛ 4؛
0 أو 5 أزواج قاعدة في مناطق المزدوج من الطرف 5” من الجديلة المضادة للحس بشكل مستقل المختارة من مجموعة من: ‎(UGA‏ 17:06 1:©؛ والأزواج عدم المتوافقة؛ ‎Ole‏ الأزواج غير القانونية أو الأخرى غير الأزواج القانونية أو الأزواج التي تتضمن القاعدة الدولية؛ لتعزيز الانفصال من الجديلة المضادة للحس عند الطرف 5" من المزدوج. في نماذج معينة؛ النيكلوتيد عند الموضع 1 في منطقة المزدوج من الطرف 5” في الجديلة المضادة للحس
5 وز المختارة من ‎«dU «dA A‏ نآ و07. بشكل ‎(diay‏ واحد على الأقل من أول 1 2 أو 3 زوج قاعدة
في منطقة المزدوج من الطرف 5” من الجديلة المضادة للحس عبارة عن زوج قاعدة ‎LAU‏ مثلاء أول زوج قاعدة في منطقة المزدوج من الطرف 5" من الجديلة المضادة للحس عبارة عن زوج قاعدة ‎AU‏ ‏في نماذج ‎(aT‏ النيكلوتيد عند الطرف 73 من الجديلة الحسية عبارة عن ديوكسي - ثيمين أو النيكلوتيد عند الطرف 73 من الجديلة المضادة للحس عبارة عن ديوكسي -ثيمين. ‎Sie‏ هناك متوالية قصيرة من نيكلوتيدات ديوكسي -ثيمين؛ مثلا؛ اثنين من ديوكسي - ثيمين نيكلوتيدات على الطرف 73 من الجديلة الحسية؛ الجديلة المضادة للحس» أو كل من الجدائل. في نماذج معينة؛ يمكن تمثيل متوالية الجديلة الحسية بواسطة الصيغة (1): '3 وول ‎)i-No-Y YY -No-(Z Z Z‏ أت ‎(I) 5 np-Na-(X X‏ حيث: وزكل منها بشكل مستقل عبارة عن 0 أو 1؛ م وي كل منها بشكل مستقل عبارة عن 6-0؛ كل ‎Ny‏ تمثل بشكل مستقل متوالية أوليجو نيكلوتيد يتضمن 25-0 نيكلوتيدات ‎(lane‏ تتضمن كل متوالية اثنين على الأقل من نيكلوتيدات معدلة بشكل مختلف؛ كل ‎Np‏ تمثل بشكل مستقل متوالية أوليجو نيكلوتيد يتضمن 10-0 نيكلوتيدات معدلة؛ 5 كل ‎Np‏ وى« بشكل مستقل تمثل نيكلوتيد معلق؛ ‎Nb Cus‏ و7 لا تتضمن نفس التعديل؛ و ‎(XXX‏ 7577 و7227 كل ‎Jia Wie‏ بشكل مستقل مستحث واحد من ثلاثة تعديلات متطابقة على ثلاثة نيكلوتيدات متتابعة. بشكل مفضل 75777 كل منها ‎Ble‏ عن نيكلوتيدات 2'-فلورو معدلة. في بعض النماذج؛ تتضمن ‎Ny‏ أو ‎Np‏ تعديلات ذو نمط تبادلي. 0 في بعض النماذج؛ ‎La‏ مستحث ‎YYY‏ عند أو بالقرب من موقع الشق من الجديلة الحسية. ‎lie‏ عندما يتضمن عامل حمض رببونيكلوبك ثنائى الجديلة منطقة مزدوج بطول 23-17 نيكلوتيد في الطول؛ يمكن أن ‎Lay‏ مستحث ‎YYY‏ عند أو بالقرب من موقع الشق (مثلا: يمكن أن ‎Lin‏ عند المواضع 6؛ 7« 8؛ 7 8« ؛ 8« 9 10؛ 9< 10 ¢11 ¢10 ¢11¢12 أو 11 ¢12 13) من الجديلة الحسية؛ يبدا العد من أول نيكلوتيد. من الطرف 5”؛ أو اختيارياء يبدا العد عند النيكلوتيد المزدوج الأول في منطقة المزدوج؛ من 5 الطرف 5”.
في أحد ‎i ital‏ عبارة عن 1 وز عبارة عن 0» أو ‎i‏ عبارة عن 0 وز عبارة عن ‎dd‏ أو كل من ز وز عبارة عن 1. يمكن تمثيل الجديلة الحسية بالتالي بواسطة الصيغ التالية: '3 ونوا-2227-م81- لالالامماامه '5 ‎¢(Ib)‏ ‏3 وتوا - ]776ل امه "5 (ع1)؛ أو ‎(Id) 5 np-Ne-XXX-No-YYY-No-ZZZ-No-ng 3 5‏ عند تمثيل الجديلة الحسية بواسطة الصيغة ‎Np ¢(Ib)‏ تمثل متوالية أوليجو نيكلوتيد يتضمن 10-0 7-0 5-0 4-0« 2-0 أو 0 نيكلوتيدات معدلة. كل ‎Nu‏ يمكن أن ‎Jia‏ بشكل مستقل متوالية أوليجو نيكلوتيد يتضمن 20-2 15-2, أو 10-2 نيكلوتيدات معدلة. عند تمثيل الجديلة الحسية بواسطة الصيغة (ع1)؛ ‎Np‏ تمثل متوالية أوليجو نيكلوتيد يتضمن 10-0 7-0 0 10-0 7-0 5-0 4-0« 2-0 أو 0 نيكلوتيدات معدلة. كل ‎No‏ يمكن أن تمثل بشكل مستقل متوالية أوليجو نيكلوتيد يتضمن 20-2 15-2 أو 10-2 نيكلوتيدات معدلة. عند تمثيل الجديلة الحسية بواسطة الصيغة (10)؛ كل ‎Np‏ تمثل بشكل مستقل متوالية أوليجو نيكلوتيد يتضمن 10-0 7-0 5-0 4-0 2-0 أو 0 نيكلوتيدات معدلة. بشكل مفضل؛ ‎Ble Np‏ عن 0؛ 1 2 3 5 أو 6 كل .10 يمكن أن تمثل بشكل مستقل متوالية أوليجو نيكلوتيد يتضمن 20-2 15-2( أو 10-2 نيكلوتيدات معدلة. كل من 76 57 و7 هو نفسه أو مختلفة عن بعضها البعض. في نماذج أخرى» ‎i‏ عبارة عن 0 وز عبارة عن 0؛ ‎(Sag‏ تمثيل الجديلة الحسية بواسطة الصيغة: ‎(Ta) 5' np-Na-YYY- Nang 3'‏ عند تمثيل الجديلة الحسية بواسطة الصيغة (ه1)؛ كل ‎No‏ يمكن أن تمثل بشكل مستقل متوالية أوليجو 0 نيكلوتيد يتضمن 20-2« 15-2« أو 10-2 نيكلوتيدات معدلة. في أحد النماذج؛ يمكن تمثيل الجديلة المضادة للحس متوالية من حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة بواسطة الصيغة ‎(II)‏ ‏'3 مت" 00776 - ولا لاما( 27722) لاود '5 )1( حيث: 5 »وا كل منها بشكل مستقل عبارة عن 0 أو 1؛ ‎p’‏ و07 كل منها بشكل مستقل عبارة عن 6-0؛
كل ‎Ni‏ تمثل بشكل مستقل متوالية أوليجو نيكلوتيد يتضمن 25-0 نيكلوتيدات معدلة؛ تتضمن كل متوالية اثنين على الأقل من نيكلوتيدات معدلة بشكل مختلف؛ كل ‎Np!‏ تمثل بشكل مستقل متوالية أوليجو نيكلوتيد يتضمن 10-0 نيكلوتيدات معدلة؛ كل ‎Sidings Np!‏ بشكل مستقل نيكلوتيد معلق؛ حيث ‎Np‏ و77 لا تتضمن نفس التعديل؛ و
‎Y'Y'Y' XXX‏ و/272 كل ‎Wie‏ يمثل بشكل مستقل مستحث واحد من ثلاثة تعديلات متطابقة على ثلاثة نيكلوتيدات متتابعة. في بعض النماذج؛ ‎No the‏ أو ‎Ny‏ يتضمن تعديلات نمط تبادلي. ‎Lay‏ مستحث 7/7777" عند أو بالقرب من موقع الشق من الجديلة المضادة للحس. ‎lie‏ عندما يتضمن
‏0 عامل ‎(mes‏ رببونيكلويك ثنائى الجديلة منطقة مزدوج بطول 23-17 نيكلوتيد في الطول؛ المستحث ‎'Y'Y'Y‏ يمكن أن ينشاً عند المواضع 9 10ء 11؛ 10» 11» 12؛ 11ء 12 13؛ 12 13 14؛ أو 3 )؛ 15 من الجديلة المضادة ‎(ual‏ مع يبدا العد من ‎Jol‏ نيكلوتيد؛ من الطرف 5”؛ أو اختيارباء يبدأ العد عند النيكلوتيد المزدوج الأول في منطقة المزدوج؛ من الطرف 5”. بشكل مفضل؛ ‎Lay‏ مستحث ‎'YY'Y‏ عند المواضع 11 12 13.
‏5 في نماذج معينة؛ مستحث 7777" كل منها عبارة عن 0146-72 نيكلوتيدات معدلة. في نماذج ‎le k dime‏ عن 1 و[ عبارة عن 0؛ أو ‎le k‏ عن 0 و1 عبارة عن ‎el‏ أو كل من »ا و1 عبارة عن 1. يمكن تمثيل الجديلة المضادة للحس بالتالي بواسطة الصيغ التالية: '3 مايا 77 2722-1-77 ياود 5 (ط11)؟
‎ng-Na“Y'Y'Y-Np'-X'X'X"-ny 3 20‏ '5 (عل1)؛ ‎or‏ ‏'3 مماملالرعر عل املا لل 272/277 الوه '5 (ه11). عند تمثيل الجديلة المضادة للحس بواسطة الصيغة ‎Nb o(TIb)‏ تمثل متوالية أوليجو نيكلوتيد يتضمن 0- 10< 7-0» 10-0 7-0 5-0 4-0« 2-0 أو 0 نيكلوتيدات معدلة. كل ,11 تمثل بشكل مستقل متوالية أوليجو نيكلوتيد يتضمن 20-2؛ 15-2 أو 10-2 نيكلوتيدات معدلة.
عند تمثيل الجديلة المضادة للحس بواسطة الصيغة ‎Ny» ole)‏ تمثل متوالية أوليجو نيكلوتيد يتضمن 0- 10« 7-0 10-0 7-0 5-0 4-0 2-0 أو 0 نيكلوتيدات معدلة. كل ,11 تمثل بشكل مستقل متوالية أوليجو نيكلوتيد يتضمن 20-2؛ 15-2 أو 10-2 نيكلوتيدات معدلة. عند تمثيل الجديلة المضادة للحس بواسطة الصيغة (110)؛ كل .10 تمثل بشكل مستقل متوالية أوليجو نيكلوتيد يتضمن 10-0 7-0 10-0 7-0 5-0 4-0 2-0 أو 0 نيكلوتيدات معدلة. كل ‎No‏ ‏تمثل بشكل مستقل متوالية أوليجو نيكلوتيد يتضمن 20-2؛ 15-2؛ أو 10-2 نيكلوتيدات معدلة. بشكل مفضل» ‎Np‏ عبارة عن 43210 5؛ أو 6. في نماذج أخرى؛ ‎k‏ عبارة عن 0 و1 عبارة عن 0 ويمكن ‎Jia‏ الجديلة المضادة للحس بواسطة الصيغة: ‎(Ta) 5' np-No-Y’Y’Y’- Nong: 3‏ عند تمثيل الجديلة المضادة للحس بواسطة الصيغة (118)؛ كل 10:7 تمثل بشكل مستقل متوالية أوليجو نيكلوتيد يتضمن 20-2« 15-2« أو 10-2 نيكلوتيدات معدلة. كل من ‎YX!‏ و/7 هو نفسه أو مختلفة عن بعضها البعض. يمكن أن يكون كل نيكلوتيد من الجديلة الحسية والجديلة المضادة للحس بشكل مستقل معدل مع أحماض نووية مغلقة؛ نيكلوتيدات مقيدة توافقية؛. حمض نووي غير مغلق؛ إيثيل المقيدء ‎(CeNA (HNA‏ 2- 5 ميثوكسي ‎Ji)‏ 2:-0-ميثيل» 2:-0-أليل» 2:-©- أليل» 2<”-هيدروكسيل» أو 2”-فلورو. مثلا ‎each‏ ‏نيكلوتيد من الجديلة الحسية والجديلة المضادة للحس وز بشكل مستقل معدلة مع 2:-0-ميثيل أو 2- فلورو. يمكن أن يمثل كل ‎ZY Xo‏ الل 377 و7 تحديداء تعديل 0-72-ميثيل أو تعديل 2:-0- فلورو. في بعض النماذج؛ يمكن أن تحتوي الجديلة الحسية لعامل حمض رببونيكلويك ثنائى الجديلة على مستحث ‎Lan YYY 0‏ عند 9< 10؛ و11 المواضع للجديلة عندما تبلغ منطقة المزدوج 21 ‎Tag‏ العد من أول نيكلوتيد من الطرف 5 أو اختيارياء يبدا العد عند النيكلوتيد المزدوج الأول في منطقة المزدوج؛ من الطرف 5"؛ ويقوم 7 بتمثيل تعديل 2-فلورو. يمكن أن تحتوي الجديلة الحسية بشكل إضافي على مستحث ‎XXX‏ أو مستحثات 777 كتعديلات جناحية عند الطرف المقابل من منطقة المزدوج؛ وكل من ‎XXX‏ و7722 تمثل بشكل مستقل تعديل 0118-2 أو تعديل 2'-فلورو. 5 في بعض النماذج يمكن أن تحتوي الجديلة المضادة للحس على مستحث 7/7777" ‎La‏ عند المواضع 11؛ 2 للجديلة؛ يبدأ العد من أول نيكلوتيد من الطرف 5”. أو اختيارياء يبدأ العد عند النيكلوتيد المزدوج
الأول في منطقة المزدوج؛ من الطرف 5؛ ولا تمثل تعديل 0-72-ميثيل. يمكن أن تحتوي الجديلة المضادة للحس بشكل إضافي على مستحث ‎XXX‏ أو مستحثات /7/277 كتعديلات جناحية عند الطرف المقابل من منطقة المزدوج؛ وكل من 27+76 و/7772 تمثل بشكل مستقل تعديل ‎OMe—"2‏ أو تعديل 2- فلورو. تشكل الجديلة الحسية الممثلة بواسطة أي من الصيغ المذكورة أعلاه (ه1)؛ (15)؛ ‎(1d) 5 ¢(Ic)‏ مزدوج مع جديلة مضادة للحس الممثلة بواسطة أي من الصيغ ‎¢(Ia)‏ (115)» (ع11)؛ و(110)؛ على التوالي. ‎(Jul‏ يمكن أن تتضمن عوامل حمض رببونيكلويك ثنائى الجديلة للاستخدام في طرق الاختراع جديلة حسية وجديلة مضادة للحس؛ كل جديلة يتضمن 14 إلى 30 نيكلوتيد. مزدوج حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة الممثل بواسطة الصيغة ([11): 0 الحسية: 3 ‎Z)j-Na-ng‏ 2 2)- و ‎-Na-(X X X)i -No- Y YY‏ مه 5 المضادة للحس :5 ‎3'np -Na -(X°X'X%-Nb -Y'Y'Y'-Np -)2/22 (0-11. -ng‏ ‎(1m)‏ ‏حيث: ‎«i‏ ز» »ا و1 كل منها بشكل مستقل عبارة عن 0 أو 1؛ ‎pp 5‏ 0 وو كل منها بشكل مستقل عبارة عن 6-0؛ كل ‎Nig Na‏ تمثل بشكل مستقل متوالية أوليجو نيكلوتيد يتضمن 25-0 نيكلوتيدات معدلة؛ تتضمن كل متوالية اثنين على الأقل من نيكلوتيدات معدلة بشكل مختلف؛ كل ‎Np‏ و10 تمثل بشكل مستقل متوالية أوليجو نيكلوتيد يتضمن 10-0 نيكلوتيدات معدلة؛ حيث كل ‎eng’ emp Np’‏ وو«» كل منها يمكن أو يمكن ألا يكون موجوداء؛ تمثل بشكل مستقل نيكلوتيد 0 معلق؛ و ‎(XXX‏ للكت 7272 ‎(XXX!‏ الالال و/2722 كل ‎Wie‏ يمثل بشكل مستقل مستحث واحد من ثلاثة تعديلات متطابقة على ثلاثة نيكلوتيدات متتابعة. في أحد النماذج» ‎i‏ عبارة عن 0 وز عبارة عن 0؛ أو : عبارة عن 1 وز عبارة عن 0؛ أو ز عبارة عن 0 وز ‎Ble‏ عن 1؛ أو كل من ‎jai‏ عبارة عن 0؛ أو كل من ؛ وز عبارة عن 1. في نموذج ‎k Al‏ عبارة عن 5 0 و1 عبارة عن 0؛ أو ‎k‏ عبارة عن 1 و١‏ عبارة عن 0؛ ‎He k‏ عن 0 و١‏ عبارة عن 1؛ أو كل من »ا و١‏ عبارة عن 0؛ أو كل من 1 و1 عبارة عن 1.
—_ 8 0 —_ ‏تتضمن التولفيفات المثالية على الجديلة الحسية والجديلة المضادة للحس تكون مزدوج حمض رببونيكلويك‎ ‏ثنائي الجديلة الصيغ أدناه:‎ 5'np-Na-Y YY -Nang 3 3'np-Na-Y'Y'Y'-Nang 5' (Ila) 5
Np -N. -Y Y Y -Np -Z 7 7 -Na-nq 3 3'np -Na-Y'Y'Y'-Np -Z'Z'Z'-Nang 5' (IIIb) 5 Np-Na- X X X -Np -Y Y Y = Na-ng 3 3'np -Na -X'X'X'-Np -Y'Y'Y'-Ni -ng 5' 10 (IIc) 5'np-Na-X XX -Np-Y YY -Nbp- ZZ Z -N,-ng 3' 3'np -Na -X'X'X'-Np -Y'Y'Y'-Np -Z'Z'Z'-Na-ng 5' (111d) عند تمثيل عامل حمض رببونيكلوبك ثنائى الجديلة بواسطة الصيغة ‎(Illa)‏ كل .11 تمثل بشكل مستقل متوالية أوليجو نيكلوتيد يتضمن 20-2 15-2( أو 10-2 نيكلوتيدات معدلة. عند تمثيل عامل حمض رببونيكلويك ثنائى الجديلة بواسطة الصيغة ‎(IIIb)‏ كل ‎Nb‏ تمثل بشكل مستقل متوالية أوليجو نيكلوتيد يتضمن 10-1 7-1 1حيق أو 4-1 نيكلوتيدات معدلة. كل ‎Jia Np‏ بشكل مستقل متوالية أوليجو نيكلوتيد يتضمن 20-2 15-2 أو 10-2 نيكلوتيدات معدلة. عند تمثيل عامل ‎aan‏ ردبوتيكلويك ثتائى الجديلة بالصيغة ‎ne‏ كل ‎«Np‏ ذا تمثل بشكل مستقل متوالية أوليجو نيكلوتيد يتضمن 10-0ء 7-0 10-0ء 7-0 5-0 4-0 2-0 أو 0 نيكلوتيدات معدلة. كل ‎Ny‏ تمثل بشكل مستقل متوالية أوليجو نيكلوتيد يتضمن 20-2؛ 15-2؛ أو 10-2 نيكلوتيدات معدلة. عند تمثيل عامل حمض رببونيكلويك ثنائى الجديلة بالصيغة (1110) كل ‎Ny Np‏ تمثل بشكل مستقل متوالية أوليجو نيكلوتيد يتضمن 0-0 7-0« 10-0« 7-0 5-0 4-0 2-0 أو 0نيكلوتيدات معدلة. كل ‎Na. «Na‏ تمثل يبشكل مستقل متوالية أوليجو نيكلوتيد يتضمن 20-2 15-2 أو 10-2 نيكلوتيدات معدلة. كل من ‎«Na‏ وال ‎Nb Np‏ يبشكل مستقل يتضمن تعديلات ‎Jaa‏ تبادلي . كل من ‎X‏ 7ا» و7 في الصيغ (111)» (ه11)» ‎(IIIb)‏ (ع111)؛ و(1110) هو نفسه أو مختلفة عن بعضها البعض.
عند تمثيل عامل حمض رببونيكلويك ثنائى الجديلة بواسطة الصيغة ‎«(IIb) ¢(IMla) «(I)‏ (ع11)؛ و(1110)»؛ يمكن أن يشكل واحد على الأقل من النيكلوتيدات ‎Y‏ زوج قاعدة مع واحد من ‎the‏ 77 نيكلوتيدات. بشكل بديل؛ يشكل اثنين على الأقل من النيكلوتيدات 7 أزواج قاعدة مع نيكلوتيدات ‎'Y‏ المناظرة؛ أو تشكل كل ثلاثة من النيكلوتيدات 7 أزواج قاعدة مع نيكلوتيدات 77" المناظرة. عند تمثيل عامل حمض رببونيكلويك ثنائى الجديلة بواسطة الصيغة ‎(IIb)‏ أو (1110)؛ يمكن أن يشكل واحد على الأقل من نيكلوتيدات 7 زوج قاعدة مع واحد من نيكلوتيدات 7'. بشكل بديل؛ يشكل اثنين على الأقل من نيكلوتيدات 7 أزواج قاعدة مع نيكلوتيدات 7" المناظرة؛ أو يشكل كل ثلاثة من نيكلوتيدات 7 أزواج قاعدة مع نيكلوتيدات 7" المناظرة. عند تمثيل عامل حمض رببونيكلويك ثنائى الجديلة بالصيغة (ع111) أو (1110)؛ يمكن أن يشكل واحد على 0 الأقل من نيكلوتيدات ‎X‏ زوج قاعدة مع واحد من النيكلوتيدات ‎LX‏ بشكل بديل؛ يشكل اثنين على الأقل من نيكلوتيدات ‎X‏ أزواج قاعدة مع نيكلوتيدات ‎'X‏ المناظرة؛ أو يشكل كل ثلاثة من نيكلوتيدات ‎X‏ أزواج قاعدة مع نيكلوتيدات ‎'X‏ المناظرة. في نماذج معينة؛ التعديل على نيكلوتيد ‎١‏ مختلف عن التعديل على نيكلوتيد ‎TY‏ التعديل على نيكلوتيد ‎Z‏ ‏مختلف عن التعديل على نيكلوتيد ‎CZ‏ و/أو التعديل على 6ل نيكلوتيد مختلف عن التعديل على النيكلوتيد ‎JX 5‏ في نماذج معينة؛ عند تمثيل عامل حمض رببونيكلويك ‎SU‏ الجديلة بواسطة الصيغة (1110)؛ تعديلات 1 عبارة عن تعديلات 0-2-ميثيل ‎of‏ -فلورو. في نماذج ‎(AT‏ عند تمثيل عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة بواسطة الصيغة (110)؛ تعديلات ‎are Ny‏ تعديلات 0-2-ميثيل أو 2"-فلورو ويتم ريط ‎ps 0> "np‏ واحد على الأقل بنيكلوتيد مجاور عبر رابط فوسفورو ثيوات. في نماذج ‎(AT‏ عند تمثيل 0 عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة بواسطة الصيغة (1110)؛ تعديلات ‎Na‏ عبارة عن تعديلات 2©- 0-ميثيل أو 2©-فلورو؛ يتم ربط مد" >0 ود" واحد على الأقل بنيكلوتيد مجاور عبر رابط فوسفورو ثيوات» وتترافق الجديلة الحسية مع واحد أو أكثر من مشتقات 17-أسيتيل جالاكتوز أمين ملحقة خلال رابط متفرع ثنائي أو ثلاثي التكافؤؤ (الموضح أدناه). في نماذج أخرى؛ عند تمثيل عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة بواسطة الصيغة (110)؛ تعديلات ‎Np‏ عبارة عن تعديلات 2“-0-ميثيل أو 2-فلورو؛ يتم 5 ربط ‎ps 0> mp‏ واحد على الأقل بنيكلوتيد مجاور عبر رابط فوسفورو ثيوات؛ الجديلة الحسية يتضمن
-7ع8-
واحد على الأقل رابط فوسفورو ثيوات؛ وتترافق الجديلة الحسية مع واحد أو أكثر من مشتقات 7١-أسيتيل‏
جالاكتوز أمين ملحقة خلال رابط متفرع ثنائي أو ثلاثي التكافؤ.
في بعض النماذج؛ عند تمثيل عامل حمض رببونيكلوبك ‎SU‏ الجديلة بواسطة الصيغة ‎(Ila)‏ تعديلات
‎are Na‏ تعديلات 0-2-ميثيل أو 2©-فلورو» يتم ربط ‎"np‏ >0 و(" واحد على الأقل بنيكلوتيد مجاور عبر رابط فوسفورو ثيوات؛ الجديلة الحسية يتضمن واحد على الأقل رابط فوسفورو ثيوات» وتترافق الجديلة
‏الحسية مع واحد أو ‎SST‏ من مشتقات 17-أسيتيل جالاكتوز أمين ملحقة خلال رابط متفرع ثنائي أو ثلاثي
‏التكافؤ.
‏في بعض النماذج؛ عامل حمض رببونيكلوبك ثنائى الجديلة عبارة عن مالتمر يحتوي على اثنين على الأقل
‏من مزدوجات ‎dias‏ بواسطة الصيغة ‎(I)‏ (ه111)» (1115)» (ع111)؛ و(1110)؛ حيث يتم توصيل المزدوجات
‏0 بواسطة رابط. يمكن أن يكون الرابط قابل للشق أو غير قابل للشق. ‎Lyla)‏ يتضمن المالتمر ‎multimer‏ ‏أيضا مركب ترابطي. يمكن أن تقوم كل من المزدوجات باستهداف نفس الجين أو اثنين من الجينات المختلفة؛ أو يمكن أن تقوم كل من المزدوجات باستهداف نفس الجين عند اثنين من المواقع المستهدفة المختلفة. في بعض النماذج؛ عامل حمض رببونيكلويك ‎A‏ الجديلة عبارة عن مالتمر يحتوي على 3 4؛ 5؛ 6؛
‏5 أو أكثر من مزدوجات ‎dias‏ بواسطة الصيغة (117)؛ ‎«(IMa)‏ (1115)» (ع111)» و(1110)» ‎Cua‏ يتم توصيل المزدوجات بواسطة رابط. يمكن أن يكون الرابط قابل للشق أو غير قابل للشق. اختيارياء يتضمن المالتمر أيضا مركب ترابطي. يمكن أن تقوم كل من المزدوجات باستهداف نفس الجين أو اثنين من الجينات المختلفة؛ أو يمكن أن تقوم كل من المزدوجات باستهداف نفس الجين عند اثنين من المواقع المستهدفة المختلفة.
‏0 في أحد النماذج؛ يتم ربط اثنين من عوامل حمض رببونيكلويك ثنائى الجديلة الممثلة بواسطة واحد على الأقل من الصيغ (121)؛ (هللا)؛ (1115)؛ (ع121)؛ و(1110) ببعضها البعض عند الطرف 5" وواحد أو كل من الأطرف 3 وتترافق اختياريا مع مركب ترابطي. يمكن أن تقوم كل من العوامل باستهداف نفس الجين أو اثنين من الجينات المختلفة؛ أو يمكن أن تقوم كل من العوامل باستهداف نفس الجين عند اثنين من المواقع المستهدفة المختلفة.
‏5 هناك العديد من المنشورات التي تصف أحماض رببونيكلويك مزدوجة الجديلة عديدة الوحدات التي يمكن استخدامها في طرق الاختراع. تتضمن هذه المنشورات براءة الاختراع رقم 7858769 البراءة الدولية
07 البراءة الدولية 141511/2010( البراءة الدولية 117686/2007» البراءة الدولية
9 وروالبراءة الدولية 031520/2011 وقد تم دمج محتوياتها هنا بالإشارة إليها كمرجع. كما هو مبين بالمزيد من التفاصيل أدناه؛ حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة التي تحتوي على ترافقات من واحد أو أكثر من شقوق كريوهيدرات ‎carbohydrate moieties‏ إلى حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة والتي يمكن أن تحصن واحد أو أكثر من الخواص من حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة. في العديد من ‎(I‏ ‏يتم إلحاق شق الكريوهيدرات ‎carbohydrate moiety‏ بوحدة ثانوية ‎dare‏ من حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة. مثلاء يمكن استبدال سكر ريبوز من واحد أو أكثر من وحدات ريبونيكلوتيد ثانوية لحمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة مع شق آخر؛ مثلاء ‎sale‏ حاملة غير كريوهيدرات ‎non-carbohydrate carrier‏ (بشكل مفضل حلقية) والتي يتم بها إلحاق مركب كربوهيدرات ترابطي ‎carbohydrate ligand‏ تمت الإشارة 0 إلى وحدة رببونيكلوتيد ثانوية ‎ribonucleotide subunit‏ حيث يتم استبدال سكر ريبوز للوحدة الثانوية المشار إليها هنا باستبدال تعديل وحدة ريبوز ثأنوية ‎ribose replacement modification subunit‏ (28115). يمكن أن تكون المادة الحاملة الحلقية ‎cyclic carrier‏ عبارة عن نظام كربيوسيكليك حلفي ‎carbocyclic ring‏ ‎system‏ أي كل الذرات الحلقية ‎ring atoms‏ عبارة عن ذرات كربون؛ أو نظام حلقي غير متجانس ‎<heterocyclic ring system‏ أي » واحد أو أكثر من الذرات الحلقية عبارة عن ذرة غير متجانسة ‎Jie‏ ‏5 التيتروجين أو الأوكسجين أو الكبريت ‎sulfur‏ يمكن أن تكون ‎salad)‏ الحاملة الحلقية عبارة عن نظام حلقي أحادي الحلقة ‎monocyclic ring system‏ أو يمكن أن يحتوي على اثنين من أو أكثر من الحلقات؛ مثلا الحلقات المدمجة ‎fused rings‏ يمكن أن تكون المادة الحاملة الحلقية ‎gle‏ عن نظام حلقي مشبع ‎LIS saturated ring system‏ أو يمكن أن تحتوي على واحد أو أكثر من روابط مزدوجة ‎.double bonds‏ يمكن إلحاق المركب الترابطي ببولي نيكلوتيد عبر مادة حاملة. تتضمن ‎Spall‏ الحاملة ‎(i)‏ واحد على الأقل 0 تنقطة إلحاق ‎attachment point‏ أساسء" بشكل مفضل اثنين من ‎Ll‏ إلحاق أساس" 5 ‎(ii)‏ واحد على الأقل 'نقطة إلحاق." يشير "نقطة إلحاق أساس" حسب الاستخدام هنا يشير إلى مجموعة وظيفية؛ مثلا مجموعة هيدروكسيل؛ أو بشكل عام؛ رابط متاح ل ؛ والمناسبة لدمج المادة الحاملة داخل الأساس؛ ‎lie‏ ‏فوسفات؛ أو معدلة فوسفات؛ ‎le‏ كبريت ‎(ging‏ على؛ أساس؛ من حمض ريبونيكلويك. "نقطة إلحاق ربط ‎(TAP) "tethering attachment point‏ في بعض النماذج يشير إلى ذرة حلقية ‎ring atom‏ مكونة للمادة 5 الحاملة الحلقية؛ ‎Ole‏ ذرة كريون أو ذرة غير متجانسة (مميزة من ذرة ‎Ally‏ توفر نقطة إلحاق أساس)؛ والتي توصل شق مختار. يمكن أن يكون ‎Mie (ill‏ كريوهيدات»؛ مثلا موتوسكاريد ‎«monosaccharide‏
‎(gla‏ سكاريد ‎«disaccharide‏ تراي سكاريد ‎«trisaccharide‏ تترا سكاريد ‎ctetrasaccharide‏ أوليجوسكاريد ‎oligosaccharide‏ أو بولي سكاريد ع0017580000:10. ‎(blast‏ يتم توصيل الشق المختار بواسطة ربط تداخل مع المادة الحاملة الحلقية. بالتالي» سوف تتضمن المادة الحاملة الحلقية غالبا مجموعة وظيفية؛ ‎lia‏ مجموعة ‎«ginal‏ بشكل عام؛ رابط المناسب لدمج أو ريط كيان كيماوي؛ ‎lis‏ مركب ترابطي مع الحلقة المكونة. يمكن أن تترافق حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة مع مركب ترابطي عبر مادة حاملة؛ حيث ميكن أن تكون المادة الحاملة عبارة عن مجموعة حلقية ‎cyclic group‏ أو مجموعة لاحلقية ‎group‏ عنارعه؛ بشكل مفضل؛ يتم اختيار المجموعة الحلقية من بيروليدينيل 0177701001 بيرازولينيل ‎epyrazolinyl‏ بيراز وليدينيل ‎¢pyrazolidinyl‏ إيميدازوتينيل ‎<imidazolinyl‏ إيميداز وليدينيل ‎<imidazolidinyl‏ بيبيردينيل ‎«piperidinyl‏
0 بيبيرازينيل ‎epiperazinyl‏ [1:3]داي أوكسولان ‎ ¢[1,3]dioxolane‏ أوكسازوليدينيل ‎coxazolidinyl‏ ‏أيزوكسازوليديتيل ‎ cisoxazolidinyl‏ مورقوليتيل ‎ «morpholingl‏ مازوليديتيل ‎cthiazolidinyl‏ ‏أيزوثيازوليدينيل ‎cisothiazolidinyl‏ كوبتوكساليتيل ‎cquinoxalinyl‏ بيريدازينونيل ‎«pyridazinonyl‏ تترا هيدرو فيوريل ‎ctetrahydrofuryl‏ وديكالين ‎tdecalin‏ بشكل مفضل» المجموعة اللاحلقية عبارة عن أساس سيربنول ‎serinol‏ أو أساس داي إيثانول أمين ‎.diethanolamine‏
5 في نماذج معينة. حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة عبارة عن عامل مختار من عوامل المذكورة في الجدول 3 والجدول 5. في أحد النماذج؛ يقوم عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة باستهداف نيكلوتيدات 3243-3221 لمتوالية بهوية رقم:1. في أحد النماذج؛ عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة عبارة عن ‎AD-67635‏ (تستهدف نيكلوتيدات 3243-3224 لمتوالية بهوية رقم:1). في نموذج آخرء عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة عبارة عن ‎AD-67637‏ (تستهدف نيكلوتيدات 3242-3223 لمتوالية بهوية
0 رقم:1). يمكن أن تتضمن هذه العوامل أيضا مركب ترابطي.
1. حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة؛ مترافق مع مركبات ترابطية يتضمن تعديل آخر للحمض النووي الريبوزي لحمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة وفقا للاختراع ربط كيماوي بحمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة واحد أو أكثر من مركبات ترابطية؛ شقوق أو مترافقات تقوم بتحسين
5 الننشاط التوزيع الخلوي؛ أو الاستهلاك الخلوي من حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة ‎Ole‏ داخل خلية. تتضمن هذه الشقوق ولكنها غير مقيدة بشقوق دهن ‎Jie‏ شق كوليسترول ( ‎Letsinger ef al., Proc.
Natl.‏
‎«(Acid.
Sci.
USA, 1989, 86: 6553-6556‏ حمض كوليك ‎Manoharan et al., Biorg. ) cholic acid‏ ‎Chem.
Let., 1994, 4:1053-1060‏ .1164). في نماذج معينة؛ يمكن أن يتضمن التعديل ثيو إيثر ‎thioether‏ ‎«Sls‏ بيريل-5-تراي تيلثيول ‎Manoharan er al., Ann.
N.Y.
Acad.
Sci., 1992, ) beryl-S-tritylthiol‏ ‎Manoharan ef al., Biorg.
Med.
Chem.
Let., 1993, 3:2765-2770‏ ;660:306-309(¢ ثيوكوليسترول ‎(Oberhauser et al., Nucl.
Acids Res., 1992, 20:533-538( thiocholesterol 5‏ » سلسلة أليفاتية ‎aliphatic‏ ‎DMs «chain‏ وحدات بنائية دوديكان داي ول ‎dodecandiol‏ أو أوندسيل ‎Saison-Behmoaras ) undecyl‏ ‎et al., EMBO J, 1991, 10:1111-1118; Kabanov et al., FEBS Lett., 1990, 259:327-330;‏ ‎«(Svinarchuk er al., Biochimie, 1993, 75:49-54‏ دهن فوسفو ‎«phospholipid‏ مثلاء داي -هكسا ديسيل ‎di-hexadecyl-rac-glycerol Js psla—rac—‏ أو تراي إيثيل -أمونيوم 12-داي -0-هكساديسيل- 0 عد:<-جليسرول-3-فوسفونات ‎triethyl-ammonium 1,2-di-O-hexadecyl-rac-glycero-3-phosphonate‏ ‎Nucl.
Acids Res., 1990, )‏ .له ‎Manoharan et al., Tetrahedron Lett., 1995, 36:3651-3654; Shea et‏ 18:3777-3)»_سلسلة_بولي أمين ‎polyamine‏ أو بولي إيثيلين جليكول ‎polyethylene glycol‏ ‎«(Manoharan et al., Nucleosides & Nucleotides, 1995, 14:969-973)‏ أو حمض أسيتيك أدمانتان ‎«(Manoharan er al., Tetrahedron Lett., 1995, 36:3651-3654) adamantane acetic acid‏ $4 بالميتيل ‎«(Mishra et al., Biochim.
Biophys.
Acta, 1995, 1264:229-237) palmityl moiety‏ أو أوكتا ديسيل أمين ‎octadecylamine‏ أو هكسيل أمينو -شق كربونيل أوكسي كوليسترول ‎hexylamino-‏ ‎.(Crooke et al., J.
Pharmacol.
Exp.
Ther., 1996, 277:923-937) carbonyloxycholesterol moiety‏ في نماذج معينة؛ يقوم مركب ترابطي بتعديل التوزيع؛ الاستهداف أو عمر عامل حمض رببونيكلوبك ثنائي الجديلة الذي يتم دمجه داخله. في النماذج المفضلة يقدم مركب ترابطي ألفة محسنة لهدف ‎Ole «lide‏ 0 نوع جزيء؛ خلية؛ ‎Ole glad‏ قطاع خلوي أو عضوي» ‎(raw‏ عضو أو منطقة من الجسم؛ مثلا» مقارنة بالأنواع الغائبة مثل المركب الترابطي. لا تشارك المركبات الترابطية المفضلة في مزاوجة مزدوج في حمض
‏نووي مزدوج ‎-duplexed nucleic acid‏ ‎(Sa‏ أن تتضمن المركبات الترابطية مادة طبيعية؛ مثل بروتين ‎ia)‏ مصل ألبومين بشري ‎human‏ ‎(HSA) serum albumin‏ بروتين دهني منخفض الكثافة» أو جلوبولين ‎«(globulin‏ كريوهيدات ‎Sle)‏ ‏5 دكستران ‎edextran‏ بولولان ‎pullulan‏ كيتين ‎chitin‏ كيتوسان ‎cchitosan‏ إينولين 0010 سيكلو دكسترين ‎«cyclodextrin‏ 17-أسيتيل جالاكتوز أمين»؛ أو حمض هيالورونيك ‎(hyaluronic acid‏ ؛ أو دهن. يمكن أن
يكون المركب الترابطي أيضا عبارة عن جزيء ناتج عودة الارتباط الجيني ‎recombinant‏ أو تخليقي؛ ‎ie‏ ‏بوليمر تخليقي ‎Sle synthetic polymer‏ تخليقي بولي حمض أميني ‎.synthetic polyamino acid‏ تتضمن الأمثلة على بولي أحماض أمينية ‎polyamino acids‏ بولي حمض أميني ‎polyamino acid‏ عبارة عن بولي ليسين ‎(PLL) polylysine‏ حمض بولي 1-أسبارتيك ‎poly L-aspartic acid‏ حمض بولي آ- جلوتاميك ‎cpoly L-glutamic acid‏ بوليمر مشترك ‎copolymer‏ من حمض ستيرين ماليك أنهيدريد ‎styrene-‏ ‎acid anhydride‏ عنعله»_بوليمر ‎ide‏ من بولي (1-لاكتيد-0-جليكوليد) ‎poly(L-lactide-co-‏ ‎yale cglycolied) copolymer‏ مشترك من داي فينيل إيثر-ماليك أنهيدريد ‎divinyl ether-maleic‏ ‎anhydride‏ بوليمر ‎ide‏ من 8-(2-هيدروكسي بروييل )ميثاكريلاميد -1-2 ‎«(HMPA) hydroxypropyl)methacrylamide‏ بوليمر مشترك من بولي إيثيلين جليكول ‎polyethylene‏ ‎(PEG) glycol 0‏ كحول بولي فينيل ‎¢(PVA) polyvinyl alcohol‏ بولي يوريثان ‎«polyurethane‏ حمض بولي (2-إيثيل أكريليك) ‎chads cpoly(2-ethylacryllic acid)‏ 17-أيزو بروبيل أكريلاميد ‎N-‏ ‎«isopropylacrylamide polymers‏ أو بولي فوسفازين ‎.polyphosphazine‏ يتضمن المثال على مركبات بولي أمين ‎(dso :polyamines‏ إيثيلين إيمين ‎¢polyethylenimine‏ بولي ليسين؛ سبيرمين ‎«spermine‏ ‏سبيرميدين ‎spermidine‏ بولي أمين ؛ ‎And‏ ببتيد-بولي أمين عصنصهر01م-0560000©01006» محاكي ببتيدي 5 بولي أمين ‎¢peptidomimetic polyamine‏ وحدة متشجرة بولي أمين ‎cdendrimer polyamine‏ أرجينين ‎arginine‏ أميدين ‎<amidine‏ بروتامين ‎«protamine‏ دهن كاتيوني ‎cationic lipid‏ كاتيوني بورفيرين ‎porphyrin‏ عندمناده» ملح ‎quaternary salt eb)‏ من بولي أمين» أو ببتيد ألفا حلزوني ‎alpha helical‏
.peptide targeting agent ‏يمكن أن تتضمن المركبات الترابطية أيضا مجموعات استهداف؛ مثلاء عامل استهداف‎ ‏دهن أو بروتين؛ مثلاء الجسم المضاد‎ cglycoprotein ‏جليكو بروتين‎ dlectin ‏لكتين‎ Sli ‏خلية أو نسيج؛‎ 0 ‏يمكن أن تكون مجموعة‎ Kidney cell ‏الذي يرتبط بنوع خلية معين مثل الخلية الكلوية‎ antibody ‏ميلانوترويين 0120000010؛ لكتين» جليكو بروتين»‎ cthyrotropin ‏الاستهداف عبارة عن ثيروترويين‎ ‏كريوهيدات 110 لاكتوز متعدد التكافؤ‎ csurfactant protein A A ‏بروتين تخفيف التوتر السطحي‎ ‏-جالاكتوز أمين‎ ليتيسأ-1١7‎ emultivalent galactose ‏جالاكتوز متعدد التكافؤ‎ cmultivalent lactose «multivalent mannose Sa ‏أحادي التكافؤ أو متعدد التكافؤء 17-أسيتيل -جولوكتوزامين مانوز متعدد‎ 5 glycosylated ‏بجليكوسيل‎ dallas ‏أحماض بولي أمينو‎ «multivalent fucose Sil ‏فوكوز متعدد‎
01700010005 جالاكتوز متعدد التكافوء ترانسفيرين ‎transferrin‏ بيسفوسفونات ‎«bisphosphonate‏ ‏بولي جلوتامات 0017810480181 بولي أسبارت ‎cpolyaspartate‏ دهن»؛ كوليسترول» منشط ‎steroid‏ حمض صفراوي ‎chile acid‏ فولات ع0126]؛ فيتامين ‎(B12‏ فيتامين ‎«A‏ بيوتين ‎«biotin‏ أو ببتيد أرجينين -جليسين- أسبارتيك ‎(RGD) arginine-glycine-aspartic acid‏ أو محاكي ببتيد ‎peptide mimetic‏ أرجينين -جليسين - أسبارتيك. في نماذج معينة؛ المركب الترابطي عبارة عن أحادي التكافؤ أو متعدد التكافؤ 7١-أسيتيل‏ -
جالاكتوز أمين. في نماذج معينة» المركب الترابطي عبارة عن كوليسترول. تتضمن ‎GAY) AEN‏ على مركبات ‎labia daly‏ عوامل خالبة بينية ‎intercalating agents‏ (مثلا مركبات ‎¢(acridines onus]‏ روابط انتقالية ‎cross-linkers‏ (مثلا بسورالين ‎epsoralene‏ ميتوميسين © ‎«(mitomycin ©‏ مركبات بورفيرين ‎porphyrins‏ (تى بى بى سى 4 ‎«TPPC4‏ تكسافيرين ‎ctexaphyrin‏ ‏0 سافيرين ‎¢(Sapphyrin‏ مركب هيدرو كريون عطري متعدد الحلقة ‎polycyclic aromatic hydrocarbons‏ ‎Dl)‏ فينازين ‎(gla phenazine‏ هيدرو فينازين ‎¢(dihydrophenazine‏ نيوكليازات داخلية صناعية ‎artificial endonucleases‏ (مثلا ثنائي أمين الإيثيلين رباعي حمض الأسيتيك)؛ جزيئات آلفة للدهون ‎Nic lipophilic molecules‏ كوليسترول» حمض كوليك ‎cholic acid‏ حمض أدمانتان أسيتيك ‎adamantane acetic acid‏ حمض 1-بيرين بيوتيريك ‎¢I-pyrene butyric acid‏ داي هيدرو تستوستيرون ‎cdihydrotestosterone 5‏ 1:3-بيس -0(هكساديسيل)جليسرول ‎¢1,3-Bis-O(hexadecyl)glycerol‏ مجموعة جيرانيل أوكسي هكسيل ‎cgeranyloxyhexyl group‏ هكسا ديسيل جليسرول ‎chexadecylglycerol‏ بورنيول ‎<borneol‏ مينثول ‎«menthol‏ 163-برويان داي ول ‎¢1,3-propanediol‏ مجموعة هبتا ديسيل ‎heptadecyl‏ ‎cgroup‏ حمض بالميتيك ‎palmitic acid‏ حمض ميريستيك ‎emyristic acid‏ حمض 03- (أوليوبل)ليثوكوليك ‎«O3-(oleoyD)lithocholic acid‏ حمض 3-(أوليويل)كولينيك ‎«O3-(oleoyl)cholenic acid‏ داي 0 ميثوكسي تراي تيل ‎«dimethoxytrityl‏ أو فينوكسيازين ‎(phenoxazine‏ ومترافقات ببتيدية ‎peptide‏ ‎conjugates‏ (مثلا»؛ ببتيد آنتينابيديا ‎cantennapedia peptide‏ ببتيد ‎(Tat‏ ؛ عوامل معالجة بألكيل ‎alkylating‏ ‎cagents‏ فوسفات؛ أمينوء ميركابتو ‎cmercapto‏ بولي إيثيلين جليكول (مثلا؛ بولي إيثيلين جليكول-40 ك ‎«(PEG-40K‏ أم بى إى >( ‎[MPEG] ¢MPEG‏ بولي أمينو؛ ألكيل؛ ألكيل مستبدلة؛ مرقمات معلمة إشعاعيا ‎radiolabeled markers‏ إنزيمات؛ مركبات هبتين ‎haptens‏ (مثلا بيوتين)؛ مواد تسهيل 5 تقل/امتصاص ‎transport/absorption facilitators‏ (مثلاء أسبيرين ‎caspirin‏ فيتامين ‎ca‏ حمض فوليك ‎«(folic acid‏ رببونيوكليازات تخليقية ‎Dis) synthetic ribonucleases‏ إيميدازول؛ بيس إيميدازول
‎¢bisimidazole‏ هستامين ‎histamine‏ مجموعات إيميدازول ‎¢imidazole clusters‏ مترافقات أكريدين- إيميدازول ‎ cacridine-imidazole conjugates‏ 803+معقدات من تترا أزا ماكرو سايكل ‎«(tetraazamacrocycles‏ داي تنيتروفيئيل ‎«dinitrophenyl‏ اتش آر بى ‎(HRP‏ أو أيه بى ‎AP‏ ‏يمكن أن تكون المركبات الترابطية عبارة عن بروتينات؛ مثلاء جليكو بروتينات ‎glycoproteins‏ أو ببتيدات ‎peptides 5‏ مثلاء جزيئات تتضمن ألفة معينة لمركب ترابطي مشترك ‎cco-ligand‏ أو الأجسام المضادة ‎Dis antibodies‏ الجسم المضاد؛ الذي يرتبط بنوع خلية معين مثل خلية كبدية ‎hepatic cell‏ يمكن أن تتضمن المركبات الترابطية أيضا هرمونات ‎hormones‏ ومستقبلات هرمونية ‎-hormone receptors‏ يمكن أن تتضمن أيضا أنواع غير ببتيدية؛ ‎Jie‏ دهون؛ مركبات لكتين ‎decting‏ مركبات كربوهيدرات ‎(carbohydrates‏ فيتامينات» عوامل مشتركة ‎«cofactors‏ لاكتوز متعدد ‎«multivalent lactose Kill‏ 0 جالاكتوز متعدد التكافؤ ‎amultivalent galactose‏ 171-أسيتيل -جالاكتوز أمين» 17-أسيتيل -جولوكوزامين ‎N-acetyl-gulucosamine‏ مانوز متعدد التكافؤء أو فوكوز متعدد التكافؤ. يمكن أن يكون المركب الترابطي عبارة عن؛ ‎Sle‏ بولي سكاريد دهني ‎dipopolysaccharide‏ منشط ‎p38 MAP‏ كيناز ‎kinase‏ أو منشط ‎.kB—NF activator‏ يمكن أن يكون المركب الترابطي عبارة عن مادة؛ مثلاء ‎«lie‏ والذي يمكن أن يزيد استهلاك عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة داخل الخلية؛ ‎Ole‏ بواسطة إعاقة خلية هيكلية؛ ‎lie‏ بواسطة إعاقة الأنابيب الدقيقة ‎microtubules‏ للخلية؛ خيوط دقيقة ‎cmicrofilaments‏ أو خيوط وسيطة ‎.intermediate filaments‏ يمكن أن يكون العقار ؛ ‎Sia‏ عبارة عن تاكسون ‎taxon‏ فينكريستين ‎cvineristine‏ فينبلاستين ‎«vinblastine‏ ‏سيتوكالاسين ‎«cytochalasin‏ نوكودازول ‎<nocodazole‏ جابلاكينوليد ‎(japlakinolide‏ لاترونكولين ‎A‏ ‎clatrunculin A‏ فالويدين ‎«phalloidin‏ سويتهوليد ‎A‏ م ‎swinholide‏ إيندانوسين ‎<indanocine‏ أو 0 ميوسيرفين ‎.myoservin‏ ‏في بعض النماذج؛ يعمل المركب الترابطي الملحق بحمض رببونيكلوبك ثنائي الجديلة كما هو موضح هنا كوسيلة تضمين صيدلاتية حركية ‎pharmacokinetic modulator‏ (وسيلة تضمين 016). تتضمن وسائل تضمين ‎modulators‏ أجزاء آلفة للدهن ‎dlipophiles‏ أحماض صفراوية ‎«bile acids‏ منشطات ‎esteroids‏ ‏نظائر دهن فوسفو ‎lain phospholipid analogues‏ عوامل ربط بروتين ‎«protein binding agents‏ 5 يولي إيثيلين ‎(Joa‏ فيتامينات إلخ. تتضمن وسائل تضمين المثالية؛ ولكنها غير مقيدة به كوليسترول؛ أحماض دهنية ‎acids‏ 07 حمض ‎(dlls‏ حمض ليثوكوليك ‎dithocholic acid‏ مركبات داي ألكيل
جليسريد ‎cdialkylglycerides‏ داي أسيل جليسريد ‎cdiacylglyceride‏ مركبات دهن فوسفو ‎«phospholipids‏ ‏دهون سفينجو 5ل110801:010م» نابروكسين ‎naproxen‏ إيبوبروفين ‎cibuprofen‏ فيتامين ‎«a‏ بيوتين إلخ. الأوليجونيكلوتيدات التي تتضمن عدد من روابط فوسفورو ثيوات معروفة أيضا للربط ببروتين المصل ‎serum protein‏ بالتالي تتضمن الأوليجونيكلوتيدات القصيرة؛ مثلاء أوليجونيكلوتيدات حوالي 5 قواعد؛ 10 قواعد؛ 15 قواعد؛ أو 20 قواعد؛ العديد من روابط فوسفورو ثيوات في الأساس أيضا ‎ALE‏ للتعديل وفقا للاختراع الحالي كمركبات ترابطية (مثلا كمركبات ترابطية تضمين ‎(modulating ligands‏ علاوة على ذلك»؛ أبتامرات ‎aptamers‏ ترتبط بمكونات المصل ‎serum components‏ (مثلا بروتينات المصل ‎serum‏
‎Lad (proteins‏ للاستخدام المناسب كمركبات ترابطية لتضمين في النماذج موضحة هنا. يمكن تخليق أحماض رببونيكلويك مزدوجة الجديلة مترافقة مع مركب ترابطي وفقا للاختراع باستخدام
‏0 أوليجونيكلوتيد والذي يحمل وظيفة تفاعلية مؤقتة؛ ‎fio‏ تلك المشتقة من إلحاق جزيء ‎linking Jal‏ ‎molecule‏ على أوليجونيكلوتيد (الموضحة أدناه) ‎٠.‏ يمكن تفاعل هذا الأوليجونيكلوتيد التفاعلي ‎reactive‏ ‎oligonucleotide‏ مباشرة مع مركبات ترابطية متاحة تجارياء المركبات الترابطية التي يتم تخليقها وهي تحمل أي من تشكيل من المجموعات الحامية؛ أو مركبات ترابطية تتضمن شق ريط ‎linking moiety‏ ملحق عليها.
‏5 يمكن صنع الأوليجونيكلوتيدات في المترافقات وفقا للاختراع الحالي بشكل تقليدي وروتيني خلال التقنية المعروفة جدا من تخليق طور صلب. يتم بيع المعدات لهذا التخليق بواسطة العديد من الباعة شاملة؛ ‎lie‏ ‎(Foster City, Calif.) Applied Biosystems‏ يمكن استخدام أي وسيلة أخرى لهذا التخليق المعروف بشكل إضافي أو بشكل بديل. من المعروف ‎Lad‏ استخدام تقنيات مشابهة لتحضير أوليجونيكلوتيدات أخرى؛ مثل مركبات فوسفورو ثيوات والمشتقات المعاتلجة بألكيل ‎.alkylated derivatives‏
‏0 في أحماض ريبونيكلويك مزدوجة الجديلة المترافقة مع المركب الترابطي ونيكلوسيدات المربوطة بمتوالية انتقائية لحمل جزئي مركب ترابطي ‎Wy‏ للاختراع الحالي؛ ‎(Kar‏ تجميع الأوليجونيكلوتيدات والأوليجونيكلوسيدات على وسيلة تخليق حمض رببوزي نووي منزوع الأكسجين مناسبة تقوم باستخدام مواد كاشفة ‎precursors‏ نيكلوتيد أو نيكلوسيد معيارية؛ أو نيكلوتيد أو مواد كاشفة لمترافق نيكلوسيد والتي تحمل فعلا شق الربط مواد كاشفة مترافقة مع مركب ترابطي-نيكلوتيد أو نيكلوسيد ‎Ally‏ تحمل جزيء المركب
‏5 الترابطي» أو كتل بناء تحمل مركب ترابطي غير نيكلوسيد.
عند استخدام مواد كاشفة مترافقة مع نيكلوتيد ‎lly‏ تحمل فعلا شق ‎ayy‏ يتم إكمال تخليق نيكلوسيدات
مرويطة انتقائية للمتوالية بشكل مثالي؛ ويعد ذلك يتم تفاعل جزيء المركب الترابطي مع شق الربط لتكوين
أوليجونيكلوتيد مترافقة مع المركب الترابطي. في بعض النماذج» يتم تخليق الأوليجونيكلوتيدات أو
النيكلوسيدات المربوطة وفقا للإختراع الحالي بواسطة وسيلة تخليق آلية باستخدام مركبات فوسفوراميديت
‎phosphoramidites 5‏ مشتقة من مترافقات مركب ترابطي-نيكلوسيد بالإضافة إلى مركبات فوسفوراميديت المعيارية ومركبات فوسفوراميديت غير معيارية متاحة تجارية ويتم استخدامها روتينيا في تخليق الأوليجونيكلوتيد. أ. مترافقات دهنية ‎Lipid Conjugates‏
‏في نماذج معينة؛ المركب الترابطي أو المترافق عبارة عن دهن أو جزيء قائم على أساس دهن ‎lipid-‏ ‎based molecule 0‏ يقوم هذا الدهن أو جزيء قائم على أساس الدهن بشكل مفضل ببروتين المصل؛ ‎lie‏
‏مصل ألبومين بشري. يسمح مركب ترابطي مرتبط بمصل ألبومين بشري بتوزيع مترافق من نسيج مستهدف
‎tissue‏ )2786 مثلا؛ نسيج مستهدف غير كلوي من الجسم . مثلاء يمكن أن يكون النسيج المستهدف عبارة
‏عن الكبد؛ شاملا خلايا متنية من الكبد ‎cells of liver‏ 1ف0رطء260م. جزيئات أخرى يمكن أن ترتبط
‏بمصل ألبومين بشري ‎lly‏ يمكن استخدامها كمركبات ترابطية. مثلاء يمكن استخدام نابروكسين أو أسبيرين. يمكن أن يقوم دهن أو مركب ترابطي قائم على أساس دهن (أ) بزيادة المقاومة لتدهور المترافق؛ (ب) زيادة
‏الاستهداف أو النقل داخل خلية مستهدفة أو غشاء خلية ‎cell membrane‏ أو (ج) يمكن استخدامه لتعديل
‏الريط ببروتين المصل؛ مثلاء مصل ألبومين بشري.
‎(Sa‏ استخدام مركب ترابطي قائم على أساس دهن ‎Sle cal‏ التحكم في ربط المترافق مع نسيج
‏مستهدف. مثلاء دهن أو مركب ترابطي قائم على أساس دهن الذي يرتبط بمصل ألبومين بشري بشكل 0 أقوى والذي يكون أقل احتمالية في الاستهداف بالكلى ويالتالي تكون هناك احتمالية أقل للتصفية من الجسم.
‏يمكن استخدام دهن أو مركب ترابطي قائم على أساس دهن يرتبط بمصل ألبومين بشري بقوة أقل لاستهداف
‏المترافق مع الكلى.
‏في نماذج معينة»؛ يرتبط المركب الترابطي القائم على أساس الدهن بمصل ألبومين بشري. بشكل مفضل؛
‏يرتبط مصل ألبومين بشري بألفة مناسبة والتي بحيث يتم توزيع المترافق المترافق بشكل مفضل على نسيج 5 غير كلوي. مع ذلك؛ يفضل أن تكون الألفة غير قوية بحيث لا يمكن عكس ارتباط مركب ترابطي مصل
‏ألبومين بشري.
في نماذج أخرى» يرتبط المركب الترابطي القائم على أساس الدهن بمصل ألبومين بشري بشكل ضعيف أو على الإطلاق؛ بحيث يتم توزيع المترافق بشكل مفضل إلى الكلى. يمكن ‎Lad‏ استخدام شقوق أخرى تستهدف الخلايا الكلوية أيضا في موضع؛ أو بالإضافة إلى؛ المركب الترابطي القائم على أساس الدهن. في جانب ‎AT‏ المركب الترابطي عبارة عن شقء ‎Se‏ فيتامين؛ والذي يتم استهلاكه بواسطة خلية مستهدفة؛ مثلا؛ خلية متكاثرة ‎proliferating cell‏ وهي مفيدة تحديدا لعلاج الاضطرابات الموضحة بواسطة تكاثر الخلية غير المطلوب؛ مثلا خلايا السرطان» من النوع الخبيث أو غير الخبيث. تتضمن الفيتامينات المثالية فيتامين ‎(Kg BE (A‏ غير الفيتامينات المثالية الأخرى فيتامين 5؛ ‎Mie‏ حمض فوليك؛ ‎(B12‏ ‏رببوفلافين ‎(ign eriboflavin‏ بيريدوكسال ‎pyridoxal‏ أو فيتامينات أخرى أو مواد مغذية ‎nutrients‏ ‏مستهلكة بواسطة الخلايا المستخدمة مثل الخلايا الكبدية ‎liver cells‏ أيضا تم تضمين مصل ألبومين 0 بشري وبروتين دهني منخفض الكثافة. ب. عوامل نفاذية ‎Cell Permeation Agents all‏ في جانب آخرء المركب الترابطي عبارة عن عامل نفاذية الخلية ‎ccell-permeation agent‏ بشكل مفضل عامل نفاذية الخلية حلزوني. بشكل مفضل؛ العامل متقابل الزمر ‎amphipathic‏ هناك عامل مثالي ‎Sle‏ ‏عن ببتيد ‎Jie‏ تات أو ‎Law gin‏ 0)0000©012. إذا كان العامل عبارة عن ببتيد؛ يمكن تعديله؛ شاملا 5 محاكي ‎chin‏ إنفيرتوميرات ‎cinvertomers‏ روابط غير ببتيدية أو شبه ببتيدية؛ واستخدام أحماض أمينية ‎.D-amino acids D‏ العامل الحلزوني ‎helical agent‏ بشكل مفضل عبارة عن عامل ألفا-حلزوني ‎alpha-‏ ‎agent‏ 611601 والتي تتضمن بشكل مفضل طور ألف للدهون وكاره للدهون. يمكن أن يكون المركب الترابطي ‎She‏ عن ببتيد أو محاكي ببتيدي. يوجد محاكي ببتيدي (أيضا المشار إليها هنا بأوليجومحاكي ببتيدي ‎(oligopeptidomimetic‏ عبارة عن جزيء قادر على طي داخل بنية محددة 0 ثلاثة الأبعاد المشابهة لببتيد طبيعي ‎٠.‏ يمكن أن يؤثر إلحاق ببتيدات ومحاكيات ببتيدية ‎peptidomimetics‏ ‏مع عوامل حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة على التوزيع الصيدلاني الحركي من حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة» مثل بواسطة تحسين التعرف الخلوي والامتصاص. يمكن أن يكون شق الببتيد أو المحاكي الببتيدي بطول حوالي 50-5 حمض أميني؛ ‎Ola‏ بطول حوالي 5< + 15 20 25« 30 35 40 45« أو 0 حمض أميني. 5 يمكن أن يكون الببتيد أو المحاكي الببتيدي؛ مثلاً؛ ببتيد نفاذية الخلية ‎«cell permeation peptide‏ ببتيد كاتيوني ‎cationic peptide‏ ببتيد متقابل الزمر ‎camphipathic peptide‏ أو ببتيد كارة الماء ‎hydrophobic‏
‎Die) peptide‏ مكون أساسا من ‎(Trp (Tyr‏ أو ‎(Phe‏ يمكن أن يكون شق الببتيد عبارة عن ببتيد وحدة متشجرة؛ ببتيد مقيد أو ببتيد مريوط تساهميا ‎peptide‏ 010551101660. في بديل آخر؛ يمكن أن يتضمن شق الببتيد متوالية انتقالية عبر غشائية ‎membrane translocation sequence‏ كارهة للماء ‎(MTS)‏ يوجد ببتيد مثالي يحتوي على متوالية انتقالية عبر غشائية كاره للماء عبارة عن آر أف جى أف 81:07 يتضمن متوالية الحمض الأميني ‎AAVALLPAVLLALLAP‏ (متوالية بهوية رقم: 14). نظير ‎RFGF‏ (مثلاء حمض أميني متوالية ‎AALLPVLLAAP‏ (متوالية بهوية رقم:15) تحتوي على متوالية انتقالية عبر غشائية كارهة للماء أيضا شق استهداف. يمكن أن يكون شق الببتيد عبارة عن ببتيد 'توصيل" ‎“delivery” peptide‏ والتي يمكن أن تحمل جزيئات القطبية ‎polar molecules‏ الكبيرة شاملة ببتيدات» أوليجونيكلوتيدات» وأغشية ‎cell membranes LIAN‏ عبر البروتين. ‎lis‏ وقد وجد أن متواليات من بروتين فيروس العوز المناعي 0 البشري ‎GRKKRRQRRRPPQ) Tat‏ (متوالية بهوية رقم:16) وبروتين دروسوفيلا آنتينابيديا ‎Drosophila‏ ‎RQIKIWFQNRRMKWKK) Antennapedia protein‏ (متوالية بهوية رقم:17) والتي وجد أنها قادرة على العمل كببتيدات توصيل ‎-delivery peptides‏ يمكن ترميز ببتيد أو محاكي ببتيدي بواسطة متوالية عشوائية من حمض ‎Siew)‏ نووي منزوع الأكسجين؛ ‎Jie‏ ببتيد محدد من مجموعة عرض بلاعم؛ أو مجموعة مركب ون-طخءنا- ون ‎(OBOC) one-bead-one-compound‏ توافقية ) ‎Lam ef al., Nature,‏ 1991 ,354:82-84). تتضمن الأمثلة على ببتيد أو محاكي ببتيدي مريوط بعامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة عبر وحدة مونومر مدمجة ‎incorporated monomer unit‏ لخلية تستهدف ‎١‏ لأغراض حمض أرجينين - جليسين = أسبارتيك ‎ arginine-glycine-aspartic acid‏ (260)-ببتيد »+ أو محاكي أرجينين- جليسين-أسبارتيك. يمكن أن يتفاوت شق الببتيد في الطول من حوالي 5 أحماض أمينية إلى حوالي 40 حمض أميني. يمكن أن تتضمن شقوق الببتيد تعديل بنيوي؛ مثل لزيادة خواص الثبات أو التوافق المباشر.
‏0 يمكن استخدام أي من تعديلات بنيوية موضحة أدناه. يمكن أن يكون يبتيد أرجينين -جليسين-أسبارتيك للاستخدام في التركيبات وطرق الاختراع خطي أو حلقي؛ ‎Sag‏ أن تكون معدلة؛ ‎Nia‏ معالجة بجليكوسيل ‎glycosylated‏ أو ميثيل؛ لتسهيل استهداف النسيج الانتقائي. يمكن أن تتضمن البيتيدات التي تحتوي على أرجينين-جليسين- أسبارتيك والمحاكيات الببتيدية 0-أحماض أمينية ‎acids‏ 0صن”ه-©؛_بالإضافة إلى محاكيات أرجينين-جليسين-أسبارتيك تخليقية. 5 بالإضافة إلى أرجينين-جليسين-أسبارتيك» يمكن أن يقوم أحدهم باستخدام شقوق أخرى تستهدف مركب
إنتجرين ترابطي ‎integrin ligand‏ تقوم المترافقات المفضلة لهذا المركب الترابطي باستهداف بى إى سى أيه 1-4 ‎PECAM-1‏ أو فى إى جى أف ‎VEGF‏ ‏هناك ‎any‏ نفاذية خلية" قادرة على نفاذية الخلية؛ ‎Ole‏ خلية ‎Jie emicrobial cell dug Sue‏ خلية بكتيرية أو فطرية؛ أو خلية كائن ثديي؛ مثل خلية بشرية. يمكن أن تكون نفاذية ببتيد الخلية الميكروبية؛ ‎Olle‏ ببتيد ‎Slama 5‏ خطي ‎linear peptide‏ لمعناعط» (مثلاء أل أل-37 11-37 أو سيروبين ‎«(Ceropin P1 P1‏ ببتيد يحتوي على ‎Lily‏ داي سلتفيد ‎disulfide bond‏ (مثلاء ‎q‏ -ديفينسين ‎«a -defensin‏ 8]-ديفينسين ‎B-‏ ‎defensin‏ أو باكتينوسين ‎¢(bactenecin‏ أو ببتيد يحتوي فقط على واحد أو اثنين من أحماض أمينية مسيطرة ‎Die)‏ بى آر-39 08-39 أو إندوليسيدين ‎(indolicidin‏ + يمكن أن يتضمن ببتيد نفاذية الخلية أيضا إشارة تموضع نووية ‎lie .)201.5( nuclear localization signal‏ يمكن أن يكون ببتيد نفاذية الخلية عبارة عن 10 ببتيد ‎gb‏ بارتيت متقابل الزمر ‎¢bipartite amphipathic peptide‏ مثل ‎al‏ بى جى ‎(MPG‏ والتي تشتق من نطاق ببتيد الدمج فيروس العوز المناعي البشري 1 41م8 و إشارة تموضع نووية من مولد ضد 1 كبير ‎.(Simeoni ef al., Nucl.
Acids Res. 31:2717-2724, 2003) SV40‏ ج. مترافقات كريوهيدات في بعض نماذج التركيبات وطرق الاختراع» تتضمن حمض رببونيكلوبك ثنائي الجديلة ‎Lal‏ كريوهيدات. كربوهيدات حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة المترافقة ‎Bude‏ للتوصيل في الكائن ‎al)‏ للأحماض النووية؛ بالإضافة إلى تركيبات مناسبة للاستخدام العلاجي في الكائن الحي؛ كما هو موضح هنا. حسب الاستخدام هناء يشير المصطلح 'كريوهيدات" إلى مركب إما عبارة عن كريوهيدات بعينها مصنوعة من واحد أو أكثر من وحدات مونوسكاريد تتضمن على الأقل 6 ذرات كربون ‎Allg)‏ يمكن أن تكون خطية أو متفرعة أو حلقية) مع أوكسيجين؛ ذرة نيتروجين أو كبريت مربوطة بكل ذرة كربون؛ أو مركب يتضمن كجزءٍ منه شق 0 كريوهيدات مصنوع من واحد أو أكثر من وحدات مونوسكاريد كل منها يتضمن على ‎J‏ 6 ذرات كريون ‎Ally)‏ يمكن أن تكون خطية أو متفرعة أو حلقية)؛ مع ذرة أوكسيجين؛ نيتروجين أو كبريت مربوطة بكل ذرة كريون. تتضمن مركبات كربوهيدرات المثالية سكريات (مونو-؛ داي-» تراي-» وأوليجوسكاريد تحتوي على من حوالي 4 5؛ 6 7 8؛ أو 9 وحدات مونوسكاريد)؛ ومركبات بولي سكاريد ‎Jie‏ النشويات؛ جليكوجين ‎cglycogen‏ لبان سيليلوز ‎dag cellulose‏ سكاريد. تتضمن مركبات مونوسكاريد المعينة فيروس 5 التهاب الكبد ب وأكثر ‎«C7 «C6 «C5 Sie)‏ أو 8©) سكريات؛ تتضمن مركبات داي- وتراي سكاريد ‎trisaccharides‏ سكريات تتضمن اثنين من أو 3 وحدات مونوسكاريد (مثلاء ‎«C7 «C6 «C5‏ أو 08).
—_ 9 4 —_ ‏في أحد النماذج؛ مترافق كريوهيدات للاستخدام في التركيبات وطرق الاختراع عبارة عن مونوسكاريد. في‎ ‏نموذج آخرء مترافق كريوهيدات للاستخدام في التركيبات ويتم اختيار طرق الاختراع من المجموعة المكونة‎ ‏من:‎ ‎Ho OH
HO ~~
AcHN MY T
OH
HO o
Ao HX of
HO ~~
Ho OH
TA
HO 0 NTTNT0 1 ‏الصيغة‎ AcHN Mu H H
HO~—_ HO
HO
Ouro ™~Ou~y 0
HO~— HO H
HO 0 ‏و-0‎ H © 0 ‏لح"‎ 1
HO
Ouro Oy 0
JIT ‏الصيغة‎ H 5
Ho oH 0
HO a ‏لمكت حم‎ on ‏با مفلل‎ to dV ‏الصيغة‎ NHAc
Ho PH
H ie O0w">0
NHAC ‏وا‎ ‎Ho 1 om o 0
HO oo!
WV ‏الصيغة‎ NHAc
HO OH
H
HO = 0 ‏طح نحا بح‎ N
Ho on NHAC 0 }
HO ao ‏محا حا بح‎ NH
VI ‏الصيغة‎ NHAC 0
HO OH
0
HO = Oe" 0
HO OH NHAC
0
HO = Oc" 0
NHAcHo OH 0
HO == 0 ‏زر‎ ‎VII ‏الصيغة‎ NHAC
BzO 082
BzO 9
BzO
BzO OBz 0 OAc
BzO “QA -Q
BzO
VIII ‏الصيغة‎ 0 On,
Ho OH 0 9 H ‏0االرمرمششلش _ ا‎
HO N 3
AcHN H 0 0 0
H
‏حا‎ N__O
HO NNN ‏حك‎ ‎AcHN N 1
Ho OH o °
Q H
0. HO
IX ‏الصيغة‎ AcHN H
Ho OH te
HO 2 ‏ده‎ Oo N 0
AcHN H
HO ‏الاح ص اصح‎ Ny —
AcHN H 0 0 ‏رح‎ 0 ‏طحخ7م الال ص حك‎
X ‏الصيغة‎ Py H 5
PO; 0 OH
HO
POs Ono Oy 0 0 OH H
HO 0 ‏نم[ 0 محص هب 0 مر‎ N ‏سل حص‎ 0 OH 6 0 ‏لم‎ ?
HO
ِ Ovo ‏الإ‎ ©
XI ‏الصيغة‎ ‎PO, ‎0 OH
HO
- 0 N No
PO; ‏رح اح صصح‎ 0 OH 0
HO -Q
HO 0 1 1 0 ~~ ~~
PO; NN hd 0 OH 0 0 0
HO
0 SN N IN ‏و"‎ ‎¢ XII ‏ا لصيغة‎ 0
HO ‏نام‎ 0 0 H
AcHN H 0
Ho ‏مم‎ ‏رفي‎ 1
HO 001 NS NO
HO (OH © ‏رت‎ 2K 1 . HO ON N Lo «XIII ‏الصيغة‎ -- AcHN HN
Ho (OH 0
Ho LOH H ‏رتح‎ 0 0
HO 0 0 NH
AcHN ~~ N ANNAN
H
XIV ‏الصيغة‎ 0
Ho ‏ام‎ ‎0 ‎Ho OH H 0 0 0
HO 0 0 NH
AcHN ~~ N AAA
H
XV ‏الصيغة‎ 0 5
— 9 7 —
Ho OH 0
Ho OH ‏مكحي‎ 0
HO 0 0 NH
AcHN 0 ‏االل_ا‎ N AAA «XVI ‏الصيغة‎ 0
OH
0
OH Hoo 0 ‏و‎ ro ‏للا‎ ‎HOO 0 0 NH
H Zz 0 ‏ممه : بال_ا‎
XVII ‏الصيغة‎ 0
OH
0 on PTR ‏للا 0 و‎
H 9 0 0 0 NH
H
0 ‏ملا‎ : AAA (XVII ‏الصيغة‎ 0
OH
0 on Fo o » 0 ‏للا‎ ‎H q 0 0 0 NH
H
0 ~~ N AAA «XIX ‏الصيغة‎ 0 +0 OH 0
H Fl
OH 0 0
HO
‏للح“ و ام‎ ‏لالممل‎ N AAA «XX ‏الصيغة‎ 0 5
HO OH
0
OH 0 0
HO
‏سكمس 0 ام‎ ‏لالممل‎ N NSA
XX ‏الصيغة‎ 0
— 8 9 — ‎HO—_ OH‏ ‎ot‏ ‎OH 0 0‏ ‎HO‏ ‏الس 0 ‎GI‏ ‏ا ‏0 الصيغة ‎XXII‏ ‏في أحد النماذج؛ مونوسكاريد عبارة عن 17-أسيتيل جالاكتوز أمين؛ ‎die‏ ‎Ho OH‏ ‎HO ~~‏ ‎AcHN MY T‏ ‎Ho OH I)‏ ‎ol 1 1 of‏ ب ‎HO‏ ‏ا ‎Ho (OH‏ ‎HO 0 NNO‏ ‎AcHN TT H H‏ الصيغة ‎I‏ ‏يتضمن مترافق كريوهيدات ‎AT‏ تمثيلى للاستخد ام فى النماذ ‎z‏ موضحة ‎Lia‏ ولكنها غير مقيدة 2( ‎(OH‏ وي ‎CR gon, 0‏ ‎AcHN Be‏ ‎HO OH 0 0‏ 0 سمح زم ‎SA roy‏ ‎A C q Oo‏ ‎Q 0 o-v‏ ‎H N‏ 1 0 لمحي امك . طم-مبث ‎AHN H NH‏ ‎OY 0‏ © 0 5 .م (الصيغة ‎(XXII‏ ‏عندما يكون واحد من ‎X‏ أو ‎Y‏ عبارة عن أوليجونيكلوتيد؛ الآخر عبارة عن هيدروجين. في نماذج معينة وفقا للاختراع؛ يتم ‎Gla)‏ مشتق 17-أسيتيل جالاكتوز أمين أو 17-أسيتيل جالاكتوز أمين بعامل حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة وفقا للاختراع عبر رابط أحادي التكافؤ. في بعض النماذج؛ يتم 0 إلحاق مشتق 87-أسيتيل جالاكتوز أمين أو 17-أسيتيل جالاكتوز أمين بعامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة وفقا للاختراع عبر رابط ثنائي التكافؤ. في نماذج أخرى وفقا للاختراع؛ يتم ‎Glad)‏ مشتق 87- أسيتيل
جالاكتوز أمين أو 187-أسيتيل جالاكتوز أمين بعامل حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة وفقا للإختراع عبر رابط ثلاثي التكافؤ. في أحد النماذج» تتضمن عوامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة مزدوجة الجديلة وفقا للاختراع مشتق -أسيتيل جالاكتوز أمين أو 17-أسيتيل جالاكتوز أمين ملحق بالعامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة. في نموذج آخرء تتضمن عوامل حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة مزدوجة الجديلة وفقا للاختراع مجموعة من (مثلاء 2 3 4؛ 5؛ أو 6) مشتقات 17-أسيتيل جالاكتوز أمين أو 7١-أسيتيل‏ جالاكتوز أمين» كل منها ملحق بشكل مستقل بمجموعة من نيكلوتيدات ‎Jalal‏ حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة مزدوج الجديلة خلال مجموعة من روابط أحادية التكافؤ ‎.monovalent linkers‏ في بعض النماذج؛ ‎lie‏ عندما يكون الاثنين من جدائل عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة ‎Gy‏ ‏0 للاختراع عبارة عن جزء من جزيء واحد أكبر متصلة بسلسلة غير متقطعة من نيكلوتيدات بين الطرف 3" من أحد الجدائل والطرف 5 من الجديلة الأخرى المناظرة التي تشكل حلقة دبوسية تتضمن؛ مجموعة من نيكلوتيدات غير مزدوجة؛ يمكن أن يتضمن كل نيكلوتيد غير مزدوج في الحلقة الدبوسية بشكل مستقل مشتق 1+7-أسيتيل جالاكتوز أمين أو 17-أسيتيل جالاكتوز أمين ملحقة عبر رابط أحادي التكافؤ. يمكن تكوين الحلقة الدبوسية ‎Load‏ بواسطة ‎gin‏ معلق ممتد في جديلة من المزدوج. 5 في بعض النماذج» يتضمن مترافق كربوهيدات أيضا واحد أو ‎AST‏ من مركبات ترابطية إضافية كما هو موضح أعلاه؛ مثل؛ ولكنها غير مقيدة ب وسيلة تضمين أو ببتيد نفاذية الخلية. تتضمن مترافقات كريوهيدات إضافية للاستخدام المناسب في الاختراع الحالي تلك الموضحة في منشورات الطلب الدولى للبراءات الدولية أرقام 179620/2014 و179627/2014؛ تم دمج كل محتوباتها هنا بالإشارة إليها كمرجع. د. روابط في بعض النماذج؛ يمكن إلحاق المترافق أو المركب الترابطي الموضح هنا بأوليجونيكلوتيد حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة مع العديد من الروابط التي يمكن أن تكون قابل للشق أو غير قابلة للشق. المصطلح "رابط" أو 'مجموعة ربط" يعني شق عضوي ‎organic moiety‏ الذي يتصل باثنين من أجزاء مركب»؛ مثلاء يلحق تساهميا اثنين من أجزاء المركب. تتضمن الروابط بشكل مثالي رابط مباشر أو ذرة مثل 5 أوكسيجين أو كبريت « وحدة مثل أن آر 8 ‎(NR8‏ أول أكسيد الكربون ‎Carbon monoxide‏ (0)؛ ‎«C(O)NH‏ أول أكسيد الكبريت ‎Sulfur monoxide‏ (50)» ثانى أكسيد الكبريت ‎Sulfur dioxide‏ (50)؛
سلفوناميد ‎sulfonamide‏ (5021011) أو سلسلة من الذرات؛ ‎(Jie‏ ولكنها غير مقيدة ب؛ ألكيل مستبدلة أو
غير مستبدلة؛ ألكنيل مستبدلة أو غير مستبدلة ؛ ألكينيل مستبدلة أو غير مستبدلة؛ أريل ألكيل ‎carylalkyl‏
أريل ألكثيل ‎carylalkenyl‏ أريل ‎carylalkynyl Joli‏ أريل ألكيل غير متجانس ‎cheteroarylalkyl‏ أريل
ألكتيل غير متجائس ‎cheteroarylalkenyl‏ أريل ‎(uu‏ غير متجانس ‎cheteroarylalkynyl‏ سيكليل ألكيل
غير متجانس ‎cheterocyclylalkyl‏ سيكليل ألكنيل غير متجانس ‎cheterocyclylalkenyl‏ سيكليل ألكينيل غير متجانس ‎cheterocyclylalkynyl‏ أريل؛ أريل غير متجانس؛ سيكليل غير متجانس ‎cheterocyclyl‏ ‏سيكلو ألكيل ‎ceycloalkyl‏ سيكلو ‎ceycloalkenyl Just‏ ألكيل أريل ألكيل ‎calkylarylalkyl‏ ألكيل ‎dol‏ calkenylarylalkyl ‏أريل ألكيل‎ Juli calkylarylalkynyl Jai ‏ألكيل أريل‎ calkylarylalkenyl ‏ألكثيل‎
‎Ja‏ أريل ‎calkenylarylalkenyl Justi‏ ألكنيل أريل ألكينيل ‎calkenylarylalkynyl‏ ألكينيل أريل ألكيل
‎calkynylarylalkyl 0‏ ألكينيل أريل ألكثيل ‎calkynylarylalkenyl‏ ألكينيل أريل ألكينيل ‎calkynylarylalkynyl‏ ‏ألكيل أريل ‎JI‏ غير متجاتس ‎calkylheteroarylalkyl‏ ألكيل أريل ‎Just‏ غير متجانس ‎calkylheteroarylalkenyl‏ ألكيل أريل ألكينيل غير متجانس ‎calkylheteroarylalkynyl‏ ألكنيل أريل ألكيل
‏غير متجانس ‎calkenylheteroarylalkyl‏ ألكنيل أريل ألكتيل غير متجاتس ‎calkenylheteroarylalkenyl‏
‏ألكتيل أريل ‎Jus‏ غير متجاتس ‎calkenylheteroarylalkynyl‏ ألكينيل أريل ألكيل غير متجانس
‎calkynylheteroarylalkyl 5‏ ألكينيل أريل ألكنيل غير متجانس ‎calkynylheteroarylalkenyl‏ ألكينيل أريل ‎Ju‏ غير متجانس ‎calkynylheteroarylalkynyl‏ ألكيل سيكليل ألكيل غير متجانس ‎JY calkylheterocyclylalkyl‏ سيكليل ألكتيل غير متجاتس ‎calkylheterocyclylalkenyl‏ ألكيل سيكليل ألكينيل غير متجاتس ‎calkylhererocyclylalkynyl‏ ألكنيل سيكليل ألكيل غير متجانس ‎calkenylheterocyclylalkyl‏ ألكنيل سيكليل ‎Juki‏ غير متجاتس ‎calkenylheterocyclylalkenyl‏ ألكنيل
‏0 سيكليل ألكينيل غير متجانس ‎calkenylheterocyclylalkynyl‏ ألكينيل سيكليل ألكيل غير متجانس ‎calkynylheterocyclylalkyl‏ ألكينيل سيكليل ‎(wl‏ غير متجاتس ‎Justi calkynylheterocyclylalkenyl‏ سيكليل ألكينيل غير متجانس ‎calkynylheterocyclylalkynyl‏ ألكيل أريل» ‎calkenylaryl Joy Joi‏ الكينيل أريل ‎calkynylaryl‏ ألكيل ‎dol‏ غير متجانس ‎calkylheteroaryl‏ ألكنيل ‎dol‏ غير متجانس ؛ ألكينيل
‏أريل غير متجاتس ‎calkenylheteroaryl‏ ويمكن أن يكون واحد أو ‎SST‏ من مركبات ميثيلين ‎methylenes‏
‏25 معاق أو منهي ب ©0؛ ‎¢S‏ 0(5)؛ ثانى أكسيد الكبريت؛ ‎Jf (N(R)‏ أكسيد الكربون؛ أريل مستبدلة أو غير مستبدلة ؛ أريل مستبدلة أو غير مستبدلة غير متجانسة؛ أو مجموعة حلقية مستبدلة أو غير مستبدلة غير
متجانسة؛ ‎RS Cua‏ عبارة عن هيدروجين» أسيل ‎acyl‏ أليفاتية ‎caliphatic‏ أو مستبدلة أليفاتية. في أحد
التماذج» يمكن أن يكون الرابط بين حوالي 24-1 ‎«ih‏ 24-2 24-3 24-4 24-5 24-6 6-
8» 18-7 18-8 17-7 17-8« 16-6» 16-7 أو 16-8 ذرة.
هناك مجموعة ريط قابلة للشق عبارة عن مجموعة مستقرة بشكل مناسب خارج الخلية؛ ولكنها عند الدخول داخل الخلية المستهدفة يتم شقها لإطلاق اثنين من أجزاء الرابط المحمولة معا. في نموذج مفضل؛ مجموعة
الريط القابلة للشق على الأقل حوالي 10 مرةء 20 830 30 مرة؛ 40 530 50 مرة؛ 60 830 70 مرة؛
0 مرة؛ 90 مرة؛ أو 100 مرة أسرع في خلية مستهدفة أو تحت حالة مرجعية أولى (والتي يمكن؛ ‎Sle‏
اختيارها لمحاكاة أو تمثيل الحالات بين الخلوية) بدلا من في دم الخاضع؛ أو تحت الحالة المرجعية الثانية
(والتي يمكن؛ ‎Sle‏ اختيارها لمحاكاة أو تمثيل الحالات الموجودة في الدم أو المصل).
0 مجموعات الربط القابلة للشق معرضة لعوامل الشق ‎cleavage agents‏ مثلاء بدرجة حموضة؛ قدرة اختزال ‎aus‏ أو وجود جزيئات متدهورة. بشكل عام»؛ سوف تكون عوامل الشق مسيطرة أو موجودة عند مستوزيات أعلى أو أنشطة داخل خلايا غير في المصل أو الدم. تتضمن الأمثلة على هذه العوامل المتدهورة: عوامل اختزال وأكسدة ‎redox agents‏ والتي يتم اختيارها لركائز معينة أو التي لا تتضمن انتقائية للركيزة؛ شاملة؛ ‎Ole‏ إنزيمات مؤكسدة أو مختزلة أو عوامل اختزالية ‎Jie reductive agents‏ مركبات ميركابتان
‎cmercaptans 5‏ موجودة في ‎(LDA‏ والتي يمكن أن تتدهور إلى مجموعة ربط للاختزال والأكسدة قابلة للشق بواسطة الاختزال؛ مركبات إستراز ‎testerases‏ إندوسومات أو عوامل يمكن أن تشكل بيئة حمضية؛ مثلاء تلك التي تؤدي إلى درجة حموضة 5 أو أقل؛ إنزيمات يمكن أن تقوم بتميه أو تدهور مجموعة ربط قابلة للشق الحمضية بواسطة العمل كحمض عام ببتيدازات ‎peptidases‏ (والتي يمكن أن تكون انتقائية للركيزة)؛ وفوسفاتازات ‎.phosphatases‏
‏0 يمكن أن تكون مجموعة الرابط قابلة للشق؛ ‎Jie‏ رابط داي سلفيد عرضة لدرجة الحموضة. تبلغ درجة حموضة المصل البشري 7.4؛ بينما كان المتوسط بين الخلوي لدرجة حموضة أقل بشكل خفيف؛ تتفاوت من حوالي 7.3-7.1. تتضمن الإندوسومات درجة حموضة ‎ol‏ في نطاق 6.0-5.5؛ وتتضمن الليسوسومات ‎lysosomes‏ درجة حموضة ‎ST‏ حامضية عند حوالي 5.0. سوف تتضمن بعض الروابط مجموعة ربط قابلة للشق والتي يتم شقها عند درجة حموضة مفضلة؛ بالتالي تطلق دهن كاتيوني ‎cationic‏
‎lipid 5‏ من المركب الترابطي داخل الخلية؛ أو داخل القطاع المطلوب من الخلية.
يمكن أن يتضمن الرابط مجموعة ربط قابلة للشق بواسطة إنزيم معين. يمكن أن يعتمد نوع مجموعة ‎Lull‏ ‏القابلة للشق المدمجة ‎dada‏ رابط على الخلية المطلوب استهدافها. ‎Ole‏ يمكن ربط مركب ترابطي يستهدف الكبد ‎liver-targeting ligand‏ بدهن كاتيوني خلال رابط يتضمن مجموعة إستر. الخلايا الكبدية ‎Lie‏ ‏بإستراز ‎Mall cesterases‏ سوف يكون الرابط قابل للشق بفاعلية أكبر في الخلايا الكبدية أكثر منها في أنواع الخلية غير الغنية بالإستراز. هناك أنواع خلية أخرى غنية بإستراز تتضمن ‎WIA‏ من ‎(A‏ القشرة الكلوية ‎cortex‏ 1هص8» والخصية ‎testis‏ ‏يمكن استخدام الروابط التي تحتوي على روابط ببتيد عند استهداف أنواع الخلية الغنية بببتيداز ‎peptidases‏ ‏مثل ‎WAY‏ الكبدية والخلايا الزليلية ‎.synoviocytes‏ ‏بشكل ‎(Sa cale‏ أن يقوم ثبات مجموعة الربط المرشحة القابلة للشق بواسطة اختبار قدرة عامل متدهور 0 (أو حالة) لشق مجموعة الربط المرشحة. سوف يكون ‎Ulla‏ أيضا اختبار مجموعة الربط المرشحة القابلة للشق للقدرة على مقاومة الشق في الدم أو عند ملامسة نسيج ‎AT‏ غير مستهدف. بالتالي؛ يمكن أن تقوم واحدة بتحديد العرضة النسبية للشق بين الحالة الأولى ‎lilly‏ حيث يتم اختيار الخلية الأولى لتشير إلى شق في خلية مستهدفة ويتم اختيار الثانية لتشير إلى شق في أنسجة أخرى أو الموائع البيولوجية؛ ‎Sle‏ ‏الدم أو المصل. يمكن تنفيذ التقييمات في أنظمة الخلية الحرة ‎ccell free systems‏ في ‎WIAD‏ في مزرعة 5 الخلية؛ في مزرعة عضو أو نسيج؛ أو في الحيوانات الكاملة. قد يكون من المفيد إجراء تقييمات أولية في حالات الخلية الحرة أو حالات المزرعة وللتأكيد أيضا بواسطة التقييمات في الحيوانات الحية. في النماذج المفضلة؛ يتم شق المركبات المرشحة المفيدة على الأقل حوالي 2 4» 10 20 30 40 50 60؛ 0 0 90< أو 100 مرة أسرع في الخلية (أو تحت الظروف في المعمل المختارة لمحاكاة الحالات بين الخلوية) مقارنة بالدم أو المصل (أو تحت الظروف في المعمل المختارة لمحاكاة الحالات خارج الخلوية). ‎i 20‏ مجموعات ‎Jal‏ القابلة ‎al‏ الخاصة بالاختزال والأكسدة في نماذج ‎dime‏ مجموعة ربط ‎ALE‏ للشق عبارة عن مجموعة ربط للاختزال والأكسدة قابلة للشق والتي يتم شقها عند الاختزال أو الأكسدة. هناك مثال على مجموعة ربط قابلة للشق بشكل اختزالي عبارة عن مجموعة ريط داي سلفيد ‎disulphide linking group‏ (-5-5-). لتحديد ما إذا كان هناك مجموعة ريط قابلة للشق مرشحة ‎do gan’‏ ربط قابلة للشق اختزالياء" مناسبة أو مثلا للاستخدام المناسب مع شق حمض 5 رببونيكلويك ثنائي الجديلة معين وعامل استهداف معين وفقا للطرق الموضحة هنا. ‎lie‏ يمكن تقييم مجموعة مرشح بواسطة الحضانة مع داي ثيو تريتول ‎٠ (DTT) dithiothreitol‏ أو عامل اختزال ‎reducing‏
1 آخر باستخدام عوامل كاشفة معروفة في المجال؛ والتي تحاكي معدل الشق الملحوظ في الخلية؛ ‎Ole‏ خلية مستهدفة. يمكن تقييم المجموعات المرشحة ‎candidates‏ أيضا تحت ظروف مختارة لمحاكاة حالات الدم أو المصل. في أحد النماذج» يتم شق المركبات المرشحة بواسطة على الأكثر حوالي 710 في الدم. في نماذج ‎gal‏ يتم تدهور المركبات المفيدة المرشحة أسرع بمقدار على الأقل حوالي 2 4؛ 10؛ 40« ¢50 60» 70< 80< 90 أو حوالي 100 مرة في الخلية ‎gf)‏ تحت الظروف في المعمل المختارة لمحاكاة الحالات بين الخلوية) مقارنة بالدم (أو تحت الظروف في المعمل المختارة لمحاكاة الحالات خارج الخلوية). يمكن تحديد معدل شق المركبات المرشحة باستخدام فحوص الخواص الحركية المعيارية للإنزيم تحت ظروف مختارة لتحاكي الأوساط بين الخلوية ‎intracellular media‏ ومقارنة بظروف مختارة لمحاكاة الأوساط خارج الخلوية. 0 نز. مجموعات الريط القائمة على أساس فوسفات القابلة للشق في نماذج ‎(ga‏ رابط قابل ‎GAN‏ يتضمن مجموعة ربط قابلة للشق قائمة على أساس فوسفات. يتم شق مجموعة ربط قابلة للشق قائمة على أساس فوسفات بواسطة عوامل تقوم بتدهور أو تميه مجموعة الفوسفات. هناك مثال على عامل يقوم بشق مجموعات الفوسفات في خلايا عبارة عن إنزيمات مثل فوسفاتاز في الخلايا. تتضمن الأمثلة على مجموعات ‎Lal)‏ القائمة على أساس فوسفات ‎«-O-P(O)(ORK)-O-‏ -0- ‎¢-S-P(0)(ORK)-S- ¢-O-P(O)(ORK)-S- ¢-S-P(O)(ORK)-O- «-O-P(S)(SRk)-O- P(S)(ORk)-O- 5‏ - ‎-S- ¢-S-P(O)(Rk)-O- ¢-O-P(S)(Rk)-O- ¢-O-P(O)(Rk)-O- ¢-S-P(S)(ORk)-O- «O-P(S)(ORK)-S-‏ ‎.-O-P(S)( RK)-S- ¢-S-P(O)(RK)-S- «P(S)(RK)-O-‏ النماذج المفضلة عبارة عن ‎¢:O-P(O)(OH)-O-‏ - ‎¢-S-P(O)(OH)-S- «-O-P(O)(OH)-S- ¢-S-P(O)(OH)-O- ¢-O-P(S)(SH)-O- «O-P(S)(OH)-O-‏ -0- ‎-S-P(S)(H)- ¢-S-P(O)(H)-O ¢-O-P(S)(H)-O- ¢-O-P(O)(H)-O- ¢-S-P(S)(OH)-O- «P(S)(OH)-S-‏ ‎.-O-P(S)(H)-S- 3 ¢-S-P(O)(H)-S- «O- 0‏ هناك نموذج مفضل عبارة عن -0-(0-0)0()01-. يمكن تقييم هذه المجموعات المرشحة باستخدام طرق مناظرة لتلك الموضحة أعلاه. ‎ii‏ مجموعات الريط الحمضية ‎ALE‏ للشق في نماذج أخرى»؛ يتضمن رابط قابل للشق مجموعة ربط حمضية ‎ALG‏ للشق. هناك مجموعة ربط حمضية قابلة للشق عبارة عن مجموعة ربط قابلة للشق تحت الحالات الحمضية. في النماذج المفضلة يتم شق 5 مجموعات ‎Ll‏ الحمضية القابلة للشق في بيئة حمضية مع درجة حموضة حوالي 6.5 أو أقل ‎Sli)‏ ‏حوالي 6.0؛ 5.5 5.0؛ أو أقل)؛ أو بواسطة عوامل ‎die‏ إنزيمات يمكنها أن تعمل كإنزيمات عامة. في
‎dala‏ عضيات ذات درجة حموضة منخفضة؛ ‎Jie‏ الإندوسومات والليسوسومات التي يمكنها توفير بيئة شق لمجموعات الريط الحمضية القابلة للشق. تتضمن الأمثلة على مجموعات الربط الحمضية القابلة للشق ولكنها غير مقيدة ب هيدرازين ‎chydrazones‏ مركبات إستر ‎cesters‏ ومركبات إستر من أحماض أمينية. يمكن أن تتضمن المجموعات الحمضية القابلة للشق الصيغة ‎«C(0)O ~C=NN-‏ أو (00)0-. يوجد نموذج مفضل حيث يكون الكربون ‎Gale‏ بالأوكسيجين من مجموعة الاستر (مجموعة ألكوكسي ‎(alkoxy‏ ‏عبارة عن مجموعة أريل» مجموعة ألكيل مستبدلة؛ أو مجموعة ألكيل رباعية ‎tertiary alkyl group‏ مثل داي ميثيل بنتيل ‎dimethyl pentyl‏ أو +-بيوتيل لزاا©. يمكن تقييم هذه المجموعات المرشحة باستخدام طرق مناظرة لتلك الموضحة أعلاه. ‎Liv‏ مجموعات الربط القائمة على أساس إستر 0 في نماذج ‎(gal‏ يتضمن الرابط القابل للشق مجموعة ربط قابلة للشق قائمة على أساس إستر. يتم شق مجموعة ربط قابلة للشق قائمة على أساس إستر بواسطة إنزيمات ‎die‏ إستراز وأميداز ‎amidases‏ في الخلايا. تتضمن الأمثلة على مجموعات ‎Jal‏ القائمة على أساس إستر القابلة للشق؛ ولكنها غير مقيدة ب مركبات إستر ألكيلين ‎of alkylene‏ #نعاوء» ألكنيلين ‎alkenylene‏ وألكينيلين ع(انرصولله. تتضمن مجموعات الربط القابلة للشق الصيغة العامة -0(0)©-؛ أو -(002)0-. يمكن تقييم هذه المجموعات 5 المرشحة باستخدام طرق مناظرة لتلك الموضحة أعلاه. ». مجموعات الشق القائمة على أساس ببتيد في نماذج ‎(ga‏ يتضمن رابط قابل ‎all‏ مجموعة ربط قائمة على أساس ‎any‏ قابلة للشق. يتم شق مجموعة ربط قائمة على أساس ببتيد قابلة للشق بواسطة إنزيمات مثل ببتيداز وبروتياز في الخلايا. مجموعات الربط القائمة على أساس ببتيد القابلة للشق عبارة عن روابط ببتيدية ‎peptide bonds‏ مكونة بين 0 أحماض أمينية لإعطاء أوليجوببتيدات ‎(gla Dla)‏ ببتيدات ‎«dipeptides‏ تراي ببتيدات ‎tripeptides‏ إلخ.) ومركبات بولي ببتيد 5ع110م©00170. لا تتضمن المجموعات القابلة للشق القائمة على أساس ببتيد مجموعة أميد ‎amide group‏ (-0(011)©-). يمكن تكوين مجموعة أميد بين أي ألكيلين» ألكنيلين أو ألكينيلين. رابط ببتيد عبارة عن نوع خاص من رابط أميد مكون بين الأحماض الأمينية لإعطاء الببتيدات والبروتينات. يتم تقييد مجموعة الشق القائمة على أساس ببتيد بشكل عام برابط ببتيد (أي؛ رابط أميد) المكون بين 5 البتيدات والبروتينات التي تعطي أحماض أمينية ولا تتضمن كل مجموعة أميد وظيفية. تتضمن مجموعات الربط القائمة على أساس ببتيد القابلة للشق الصيغة العامة - ‎“NHCHRAC(O)NHCHRBC(O)‏ (متوالية
بهوية رقم: _)؛ ‎Cus‏ آر أيه ‎RA‏ و آر بى ‎RB‏ عبارة مجموعات ‎R‏ من اثنين من الأحماض الأمينية المتجاورة. يمكن تقييم هذه المجموعات المرشحة باستخدام طرق مناظرة لتلك الموضحة أعلاه. في بعض ‎all‏ تترافق حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة وفقا للاختراع مع كريوهيدات خلال رابط. تتضمن الأمثلة غير المقيدة على مترافقات الحمض النووي الرببوزي كربوهيدات مع روابط التركيبات وتتضمن طرق ا لاختراع؛ ولكنها غير مقيدة ب ‎OH OH‏ رح ‎HO‏ ‎Ho,‏ 1 ا م ‎OH OH d oT‏ ‎H H N‏ 0 ‎HO 0 NAN 0 MAA‏ ‎bd 0‏ مإ حب ‎AcHN‏ ‏0 0 0 0 ‎OH OH‏ ‎til‏ ‎ISSN‏ حب ‎HO‏ ‎ActiN 0‏ (الصيغة ‎(XXIV‏ ‎Sets : Red‏ ارم 1 حا صر ‎re Tr‏ ‎pe‏ + مص رضن" ‎Le] TT‏ = ‎(XXV i A i) SOM TE 2‏ ‘ ‎wo OH =‏ م ل 1 ‎Sa‏ ‏صب حا ا ‎Hoon‏ 8 ل رخ ‎BO‏ ‏4 8 4 وم ‎O H HO‏ 5 ]8[ = ‎no IY N ke‏ 8 امتح ; ‎RSE hy Ty B ihe “th =‏ ‎wo OH 0 = w= 1.36‏ ا 2 جع 2 8 ‎Np Ne 0 He ¥= 118‏ متخ ‎BO‏ ‎sei &‏ - (الصيغة ‎((XXVI‏ ‎OH A‏ وبر ‎HO — A BB =‏ ‎H G XQ‏ يجو ‎Ho OH oy a‏ ‎So, i 1 0 1 No‏ ‎HO ” ; MLS Ei « 0 ~ HN -‏ مال هايمو ميااارم الحم رخص ووم ‎Ee x‏ + ب ‎Ho OH * kr‏ ‎y= 115‏ بجلا وص سس لالسلا ‎HO Hm‏ ‎AHN H‏ (الصيغة ‎(XXVII‏ ‘
HO OH
‏ترق‎ 1 ‏حي‎ Dee Ae ee ‏ا‎ i ‏حب ا‎ = ‏بو‎ B & HN 0 ‏ل ان‎ H 4 Mm dfn hn 1 : HE 88 0
HO pg ° rtf 1 +
HG 011 ١ = | © = 3-30 ‏متحت‎ 9 i 3 y = 1-18
Ho mA a ‏ا صا‎ A or ’
EH 8 (XXVIII ‏(الصيغة‎ ‎Ho ‏أن‎ 5
HO ‏مكح‎ - PE i EE ‏ناد 8 7 1 ااا‎ ‏حم 3 5 : اتن‎ 3 0 oe kb Sa H S—5 : i]
HO Te Sop ry +3
HO A od yz 0 ‏مجه‎ i z= ‘ (XXIX ‏(الصيغة‎ ‏وير‎ JOH - © ‏مم‎ ٍْ ‏رق‎ pr 1 ‏من‎ XC
SoH H oF I. v ‏ب اهمه‎ i 8 0: ‏و3 ع‎ 6 ; 0 885 0
HOEY ‏سح اس ال خض‎ Hy © 8 ‏#حواتص سس‎ ty ‏ب‎ ‎Ho OH - To 85
No, RH _.8 i
HO Son . A TN 8 ‏حج‎ 20 5 ‏و‎ 6 (XXX ‏(الصيغة‎ ‏جيم‎ OH ~
HD 90 — rm 8 ‏اس مي الع‎ i 77 iF “<< ‏يجاو‎ H 3 1 y
So ‏ا‎ ; 5 . 1 ‏ويم‎ OH 0 = ¥ = 1-30
Noo 3 1 0 ‏الم‎ TE =a ‘ (XXXI ‏(الصيغة‎ ‏عن هيدروجين.‎ Ble ‏أو 7 عبارة عن أوليجونيكلوتيد؛ يكون الآخر‎ X ‏عندما يكون واحد من‎ ‏للتركيبات وطرق الاختراع» يكون المركب الترابطي عبارة عن واحد أو أكثر من مشتقات‎ due ‏في نماذج‎ 0 ‏(10-أسيتيل جالاكتوز أمين) ملحقة خلال رابط متفرع ثنائي أو ثلاثي التكافؤ.‎ "GalNAC!
في نماذج معينة؛ يترافق حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة وفقا للاختراع مع رابط متفرع ثنائي أو ثلاثي ‎lal‏ المختارة من مجموعة من بنيات مبينة في أي من الصيغ ‎HXXXV) - (XXX)‏ الصيغة ]1)12101الصيغة ‎XXXII‏ ‎PETIA i - TEN BA‏ 4 مي فعا متخن خنع ٍ ‎EA‏ 8 3 1 ا خض 3 3 ‎oT‏ ‎[EAE NO . nL‏ 8# £2 2ج ‎BE‏ قو ‎ERE‏ + 3 سيا ‎pape RE‏ 1 ‎Spd £3 Sig JE‏ ‎Formula ) 1‏ زب ) لمحو ¢ ¢
الصيغة ‎(IV)‏ الصيغة ‎(V)‏ ‎TES y 5A )‏ مسا ا ‎PRA Kath‏ 0 ا مح & ‎in © A . a‏ = خخ 3 ‎ra . 3 44 5 i . P SE,‏ = = ~ لص قتا قتي تتن قتع ‎former]‏ ‎RASS ky ~ 8 aq SH EN‏ ‎ats‏ ا = ‎N ro os‏ ‎THE 8‏ سا 38 تنم ‎PERT SR Dope‏ - لحيل ‎x fk aq It‏ 3 ‎(VT‏ ملظ أو ‎Forms {Vil‏ الصيغة ‎(VI)‏ الصيغة ‎(VII)‏ ‏الصيغة 17)50]7الصيغة ‎XXXV‏ ‏10 ‏حيث: ‎g5C 9 q5B «q5A «q4B «q4A «q3B «q3A «2B «2A Jia‏ بشكل مستقل فى كل ‎Ala‏ 20-0 وحيث يمكن أن تكون وحدة التكرار هي نفسها أو مختلفة ¢ ‎eae «PB PIA PB PHA P38 Pp3A «p28 Pp3A‏ من ا فقن ا فك 8 فك 5 1500 5 كل منها بشكل مستقل غائبة في كل حالة؛ أول أكسيد كربون» مونوهيدريد نيتروجين ‎nitrogen‏ ‎«(NH) monohydride‏ م ‎<NHC(O) «OC(O) <S‏ ميقيلين ‎methylene‏ (1)» 0011:1111 ؛ أو فورمالد هيد ‎¢{(CH20) formaldehyde‏ فحن 28 ‎«QB «QA «Q*B QA «QB «QA‏ 05 بشكل مستقل غائبة فى كل ‎Ala‏ ألكيلين ‘ ألكيلين مستبدلة حيث يمكن إعاقة أو إنهاء واحد أو أكثر من مركبات ميثيلين بواسطة واحد أو أكثر من 0؛ 5؛ 0 (5)0؛ ثانى أكسيد ‎«C=C ((R”)C=(R’)C «(RYN cull‏ أر رمهع؛
سوف تكون كل من ‎(RB (RA‏ ذقول ‎(R* (RB‏ تفل ‎RC (ROB (RA‏ غائبة بشكل مستقل فى كل حالة؛ مونوهيدريد نيتروجين» 0؛ 5؛ ميثيلين» ورم ‎—(R*)CH-C(0)~ «C(0)(R*)NHCH ¢«C(O)NH‏ ‎Se Dh:‏ ‎oF 5 5 HT‏ 22 ‎pI 0‏ 0 اح لي“ #7 ‎Si‏ 5 صنت ‎Heh «O-N=CH «CO‏ 5-5 ‎PTT NT‏ أو غير متجانس سيكليل ؛
تفل ‎(LA‏ تقل فقل فقل ‎(LA‏ طقل ‎LOC 5 (LSB (LA‏ المركب الترابطى؛ أي كل منها بشكل مستقل في كل ‎dlls‏ مونوسكاريد (مثل 17-أسيتيل جالاكتوز ‎gh (opel‏ سكاريد؛ تراي سكاريد؛ تترا سكاريد؛ أوليجوسكاريد ¢ أو بولى سكاريد ¢ وفع عبارة عن ‎H‏ أو سلسلة جانبية لحمض أمينى ‎٠.‏ مشتقات ١-أسيتيل‏ جالاكتوز أمين مترافقة ثلاثية التكافؤ مفيدة تحديدا في الاستخدام مع عوامل حمض رببونيكلوبك ثنائي الجديلة لتثبيط التعبير عن جين مستهدف » مثل تلك الخاصة بالصيغة ‎(XXXV)‏ :
0 الصيغة ‎XXXV‏ ‎Ky) A 8 3 Foe Tig BS‏ فتح "0 ‎i : { ay‏ ‎IT‏ ا د ل ل ‎I‏ ‎Anand ١ PIPER § 3 = TREE‏ 4 . ‎THERE‏ - اتج ات 3 : > لقنا ‎i‏ ‎Formula (VID‏ : حيث تمثل +15 1,79 ‎L365‏ مونوسكاريد؛ مثل مشتق 17-أسيتيل جالاكتوز أمين. تتضمن الأمثلة على مجموعات رابط متفرعة مناسبة ثنائية وثلاثية التكافؤ ترافق مشتقات 7- أسيتيل جالاكتوز أمين ولكنها غير ‎Ble‏ ب؛ البنيات المذكورة أعلاه ‎Jia‏ الصيغ آل ‎«XT «VII‏ آل ‎XII g‏ 5 تتضمن براءات الاختراع الأمريكية التمثيلية التي تشير إلى تحضير مترافقات الحمض النووي الرببوزي؛ ولكنها غير مقيدة ب» براءات الاختراع الأمريكية أرقام 9 4948882؛ ¢5¢218¢105 5 5541313؛ 5545730؛ ‎ ¢5¢552¢538‏ 5578717« ¢5¢580¢731 4 ¢5¢109¢124 116)802ء5؛ ¢5¢138:045 5414»077؛ ¢5¢486¢603 9 ¢5:578718 5608046؛ 4587044« 4605735؛ 4667025؛ 0 4762779 4789737؛ 4824941 4835263 ¢4¢876¢335 4904582؛ 3 ؛؛ ‏ ¢5:082¢830 ¢5¢112963 ¢5¢214¢136 ‎ ¢5:082¢830‏ ¢5¢112¢963
‎ ¢5¢254¢469 ¢5:245:022 6‏ 5258506 5262536؛ 50272250؛ 3 : 5317098؛ 5371241 ‎ ¢5¢391¢723‏ 5416203 ¢5¢451¢463 ¢5¢512¢667 5514785؛ ‎ ¢5¢565¢552‏ 5567810« ¢5¢574¢142 ¢5¢585:481 ¢5¢587¢371 ¢5¢595¢726 ¢5¢597¢696 ¢5¢599¢923 ‎ ¢5:688:941¢5:599:928 5‏ 6294664 6320017 6576752 ¢6¢783¢931 7 70037646؛ 5 ¢8¢106¢022 وقد تم دمج محتوباتها هنا بالإشارة إليها كمرجع. ليس من الضروري في كل المواضع في مركب معين أن تكون معدلة بشكل متجانس»؛ وفي الحقيقة يمكن دمج أكثر من واحد من التعديلات المذكورة أعلاه في مركب واحد أو حتى عند نيكلوسيد واحد في حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة. يتضمن الاختراع الحالي ‎Lind‏ مركبات حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة والتي 0 هي عبارة عن مركبات خيمرية ‎.chimeric compounds‏ مركبات حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة "خيمرية" أو ‎"chimeras Shas’‏ في سياق هذا الاختراع؛ عبازة عن مركبات حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة؛. بشكل مفضل عوامل حمض رببونيكلويك ثنائى الجديلة؛ التي تحتوي على اثنين من أو أكثر من مناطق مميزة كيماوياء وكل منها مصنوع من ‎Bing‏ مونومر واحد على الأقل؛ أي؛ نيكلوتيد في حالة مركب حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة. يحتوي أحماض رببونيكلويك 5 مزدوجة الجديلة بشكل مثالي على منطقة واحدة على الأقل حيث يتم تعديل الحمض النووي الريبوزي لإضفاء على حمض رببونيكلويك ‎SUE‏ الجديلة مقاومة زائدة لتدهور النيوكلياز» الاستهلاك الخلوي الزائد؛ أو ألفة الريط الزائدة للحمض النووي المستهدف. يمكن أن تعمل منطقة إضافية من حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة كركيزة لإنزيمات قادرة على شق نواتج تهجين الحمض النووي الريبوزي:حمض ‎Sis‏ نووي منزوع الأكسجين أو الحمض النووي الريبوزي:الحمض النووي الرببوزي. ‎RNase H lie‏ عبارة عن نيوكلياز 0 خلوي داخلي ‎cellular endonuclease‏ والذي يقوم بشق الجديلة الحمض النووي الريبوزي لمزدوج الحمض النووي الريبوزي :حمض ‎(Sion)‏ نووي منزوع الأكسجين . يؤدي تنشيط ‎(RNase H‏ بالتالي؛ إلى شق الحمض ‎pl] Alan) U8 gi, (nen at Alek Cpt JL iagine il (gos‏ بشكل كبير. بالتالي» يمكن الحصول على النتائج المقارنة مع أحماض ريبونيكلويك مزدوجة الجديلة أقصر عند استخدام أحماض ريبونيكلويك مزدوجة الجديلة الخيمرية؛ مقارنة بفوسفورو ثيوات ديوكسي ‎phosphorothioate deoxy 5‏ أحماض رببونيكلوبك مزدوجة الجديلة التي تتهجن إلى نفس المنطقة المستهدفة.
يمكن الكشف عن شق الحمض النووي الريبوزي المستهدف روتينيا بواسطة التخريم الكهربي لجل ‎gel‏
000005 و» عند الضرورة»؛ تقنيات تهجين حمض نووي ذات الصلة المعروفة في المجال. في حالات معينة؛ يمكن تعديل الحمض النووي الرببوزي لحمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة بواسطة مجموعة غير مركب ترابطي. يترافق عدد من جزيئات غير مركب ترابطي مترافقة مع أحماض رببونيكلويك مزدوجة الجديلة لتحسين النشاطء التوزيع الخلوي أو الاستهلاك الخلوي من حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة؛ والإجراءات الخاصة بتنفيذ هذه الترافقات المتاحة في البحث العلمي. تتضمن شقوق مركب ترابطي هذه شقوق دهن ‎clipid moieties‏ مثل كوليسترول ( ‎Kubo, 1. et al., Biochem.
Biophys.
Res.
Comm.,‏ ‎Letsinger et al., Proc.
Natl.
Acad.
Sci.
USA, 1989, 86:6553‏ ;365(1):54-61 ,2007( التي يمكن استخدامها في العوامل وفقا للاختراع. تم تضمين شقوق أخرى غير مركب ترابطي شقوق دهن؛ حمض 0 كوليك (4:1053 ,1994 ‎¢(Manoharan et al., Bioorg.
Med.
Chem.
Lett.,‏ ثيو إيثر؛ ‎Ola‏ هكسيل -5- ‎(gly‏ تيلثيول ‎Manoharan ef al., Ann.
N.Y.
Acad.
Sci., 1992, 660:306;) hexyl-S-tritylthiol‏ ‎«(Manoharan er al., Bioorg.
Med.
Chem.
Let., 1993, 3:2765‏ ثيوكوليسترول ‎thiocholesterol‏ ‎«(Oberhauser et al., Nucl.
Acids Res., 1992, 20:533)‏ سلسلة أليفاتية ‎Ada caliphatic chain‏ وحدات بنائية دوديكان داي ول ‎of‏ أوندسيل ) ‎Saison-Behmoaras ef al., EMBO J., 1991, 10:111; Kabanov‏ ‎Biochimie, 1993, 75:49 5‏ .له ‎«(et al., FEBS Lett., 1990, 259:327; Svinarchuk et‏ دهن فوسفو ‎Se phospholipid‏ داي -هكساديسيل -+7-جليسرول ‎di-hexadecyl-rac-glycerol‏ أو تراي إيثيل أمونيوم 2 -داي -0-هكساديسيل-7+06-جليسرول- 11-3 -فوسفونات ‎triethylammonium 1,2-di-O-‏ ‎Manoharan et al., Tetrahedron Lett., 1995, 36:3651; ) hexadecyl-rac-glycero-3-H-phosphonate‏ ‎Nucl.
Acids Res., 1990, 18:3777‏ .له ‎(Je Alls (Shea er‏ أمين أو بولي إيثيلين جليكول ‎er al., Nucleosides & Nucleotides, 1995, 14:969) 0‏ ممتمطمصمالط) أو حمض أدمانتان أسيتيك ‎¢«(Manoharan er al., Tetrahedron Lett., 1995, 36:3651) adamantane acetic acid‏ شق بالميتيل ‎¢(Mishra er al., Biochim.
Biophys.
Acta, 1995, 1264:229) palmityl moiety‏ أو أوكتا ديسيل أمين ‎octadecylamine‏ أو هكسيل ‎sud‏ -كربونيل - أوكسي شق كوليسترول ‎hexylamino-carbonyl-‏ ‎et al., J.
Pharmacol.
Exp.
Ther., 1996, 277:923) oxycholesterol moiety‏ ع:ا000). تم ذكر براءات الاختراع الأمريكية التمثيلية التي تشير إلى تحضير هذه المترافقات الحمض النووي الرببوزي أعلاه. تتضمن بروتوكولات الترافق المثالية تخليق الأحماض النووية الريبوزية التي تحمل رابط أمينو عند واحد أو أكثر من
مواضع المتوالية. بعد ذلك يتم تفاعل مجموعة الأمينو مع الجزيء المترافق باستخدام إقران أو تنشيط العوامل الكاشفة المناسبة. يمكن تنفيذ تفاعل الترافق إما مع الحمض النووي الرببوزي التي لا تزال مربوطة بالدعم الصلب أو بعد شق الحمض النووي الريبوزي» في طور المحلول ‎phase‏ 50101100. تترافق تنقية الحمض النووي الريبوزي بواسطة كروماتوجراف ‎dle‏ عالي ‎high-performance liquid slay!‏ ‎(HPLC) chromatography 5‏ بشكل مثالي مع الترافق النقي. ‎(IV‏ توصيل حمض رببونيكلويك ‎SUS‏ الجديلة وفقا للاختراع ‎(Sa‏ تحقيق توصيل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة وفقا للاختراع إلى خلية مثلا؛ خلية في خاضع؛ ‎Jie‏ ‏خاضع بشري (مثلاء خاضع محتاج له؛ ‎Jie‏ خاضع يعاني من مرض» اضطراب؛ أو ‎Als‏ المرتبطة بجين 0 التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1) في عدد من الطرق المختلفة. ‎Sle‏ يمكن تنفيذ التوصيل بواسطة ملامسة خلية مع حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة وفقا للاختراع إما في المعمل أو في الكائن الحي. يمكن تنفيذ التوصيل في الكائن الحي ‎Lad‏ بواسطة إعطاء تركيبة تتضمن حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة؛ ‎Sle‏ حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة؛ إلى خاضع. بشكل بديل؛ يمكن تنفيذ التوصيل في الكائن الحي بشكل غير مباشر بواسطة إعطاء واحد أو أكثر من موجهات ‎vectors‏ تقوم بترميز وتوجيه التعبير عن حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة. سوف تتم مناقشة هذه البدائل أيضا أدناه. بشكل عام؛ يمكن تهيئة أي طريقة توصيل جزيء حمض نووي (في المعمل أو في الكائن الحي) للاستخدام مع حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة وفقا للاختراع (انظر ‎Akhtar 5. and Julian RL. )1992( ie‏ ‎Trends Cell.
Biol. 2(5):139-144‏ و البراءة الدولية 02595/94؛ والتي تم دمجها هنا بالإشارة إليها كمرجع كليا). للتوصيل في الكائن الحي؛ تتضمن العوامل التي يجب اعتبارها لتوصيل جزيء حمض 0 رببونيكلويك ثنائي الجديلة؛ مثلا؛ الثبات البيولوجي للجزيء الموصل ‎cdelivered molecule‏ تتضمن الوقاية من ‎HEY)‏ غير الانتقائية للمنع؛ وتراكم الجزيئات الموصلة في النسيج المستهدف. يمكن تقليل الآثار غير الانتقائية لحمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة بواسطة الإعطاء الموضعي؛ ‎Ole‏ بواسطة الحقن المباشر أو الزراعة داخل نسيج أو إعطاء موضعي للمستحضر. يقوم الإعطاء الموضعي إلى موقع الدواء بزيادة التركيز الموضعي للعامل؛ ويقيد تعرض العامل إلى الأنسجة الجهازية ‎systemic tissues‏ التي يمكن 5 الإضرار بها بواسطة العامل أو عامل التدهورء وتسمح بجرعة أقل بشكل ملحوظ من جزيء حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة المطلوب إعطاؤه. أبدت العديد من الدراسات وجود استبعاد ناجح للمنتج الجيني
عند إعطاء عامل حمض رببونيكلويك ثنائى الجديلة موضعيا. ‎lis‏ توصيل ‎VEGF‏ حمض رببونيكلويك
ثنائي الجديلة داخل العين بواسطة الحقن داخل الجسم الزجاجي في قرود الرياح ‎Tolentino, MJ, eral)‏ ‎Retina 24:132-138‏ (2004)) وعمليات الحقن تحت الشبكية في الفئران ) ‎Reich, 51., er al (2003) Mol.‏ ‎Cus (Vis. 9:210-216‏ تم توضيح منع تكون الأوعية الجديدة في النموذج الاختباري من التدهور البقعي
المرتبط بالسن. علاوة على ذلك؛ يمكن أن يقوم الحقن داخل الورمي ‎intratumoral injection‏ لحمض ربيونيكلويك ثنائي الجديلة في ‎oj) pall‏ بتقليل حجم الورم ‎(Pille, 1., et al (2005) Mol.
Ther.11:267-274)‏
ويبطيل عمر بقاء الفئران الحاملة للورم ‎Kim, WJ., et al (2006) Mol.
Ther. 14:343-350: Li, S., et al)‏ ‎٠ ((2007) Mol.
Ther. 15:515-523‏ وقد أبدى تداخل الحمض النووي الريبوزي ‎La‏ نجاح في التوصيل الموضعي إلى سى أن أس ‎CNS‏ بواسطة الحقن المباشر ) ‎Dorn, G., et al. (2004) Nucleic Acids‏
32:e49; Tan, PH., et al (2005) Gene Ther. 12:59-66; Makimura, H., et al (2002) BMC Neurosci. 10 3:18; Shishkina, GT., et al (2004) Neuroscience 129:521-528; Thakker, ER., et al (2004) Proc.
‎Natl.
Acad.
Sci.
U.S.A. 101:17270-17275; Akaneya,Y., et al (2005) J.
Neurophysiol. 93:594-‏ 602( وإلى الرئات بواسطة الإعطاء عبر الأنفي );14:476-484 ‎Howard, KA., er al (2006) Mol.
Ther.‏ ‎Zhang, X., et al (2004) J.
Biol.
Chem. 279:10677-10684; Bitko, V., et al (2005) Nat.
Med.‏ 5 11:50-55). لإعطاء حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة جهازيا لعلاج مرض؛ يمكن تعديل أو توصيل الحمض النووي الريبوزي بشكل بديل باستخدام نظام توصيل عقار ‎delivery system‏ 0:118؛ تعمل كل من
‏الطرق على منع تدهور حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة السريع بواسطة نيكلويازات داخلية وخارجية في
‏الكائن الحي. يمكن أن يسمح تعديل الحمض النووي الريبوزي أو المادة الحاملة الصيدلانية أيضا باستهداف
‏حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة إلى النسيج المستهدف وتجنب الآثار البعيدة غير المطلوية للهدف. يمكن
‏0 تعديل جزيئات حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة بواسطة الترافق الكيماوي مع مجموعات آلفة للدهون مثل كوليسترول لتحسين الاستهلاك الخلوي ومنع التدهور. مثلاء تم حقن حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة الموجه في مقابل ‎ApoB‏ مترافق مع شق كوليسترول آلف للدهون ‎lipophilic cholesterol moiety‏ جهازيا
‏داخل الفئران والتي أدت إلى استبعاد ‎apoB‏ الحمض النووي الريبوزي المرسل في كل من الكبد والمساريقا ‎.(Soutschek, J., et al (2004) Nature 432:173-178) jejunum‏ وقد أبدى ترافق حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة مع آبتامر تثبيط نمو الورم وقمع التوسط في الورم في نموذج فأر لسرطان البروستاتا ‎prostate‏ ‎(McNamara, JO, er al (2006) Nat.
Biotechnol. 24:1005-1015) cancer‏ في نموذج ‎«ha‏ يمكن
‏توصيل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة باستخدام أنظمة توصيل عقار ‎Jie‏ جسيم بحجم النانو cationic delivery ‏بوليمر؛ ليبوسوم؛ أو نظام توصيل كاتيوني‎ cdendrimer ‏وحدة متشجرة‎ cnanoparticle ‏إيجابا بتسهيل‎ charged cationic delivery systems ‏تقوم أنظمة التوصيل الكاتيونية المشحونة‎ .system ‏وأيضا يقوم بتحسين التفاعلات عند غشاء‎ (We ‏ارتباط جزيء حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة (مشحون‎ ‏سلبا للسماح بالاستهلاك الفعال لحمض رببونيكلويك ثنائي‎ charged cell membrane ‏الخلية المشحون‎ ‏وحدة متشجرة؛ أو بوليمرات إما‎ «Cationic lipids ‏الجديلة بواسطة الخلية. يمكن ربط الدهون الكاتيونية‎ 5
Kim SH, «die ‏(انظر‎ micelle ‏بحمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة؛ أو مستحثة لتكوين حويصلة أو مذيلة‎ ‏والتي تقوم بتغليف حمض رببونيكلويك‎ (er al (2008) Journal of Controlled Release 129(2):107-116 ‏تدهور حمض‎ ala ‏أيضا‎ micelles ‏أو المذيلات‎ vesicles ‏الجديلة. يقوم تكوين الحويصلات‎ Su ‏رببونيكلويك ثنائي الجديلة عند الإعطاء جهازيا. سوف يكون الخبير في المجال على علم بطرق صنع‎
Sorensen, DR, er «Jie ‏وإعطاء معقدات حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة كاتيونية في المجال (انظر‎ 0 al (2003) J. Mol. Biol 327:761-766; Verma, UN, et al (2003) Clin. Cancer Res. 9:1291-1300; ‏,اعامصتط» والتي تم دمجها هنا بالإشارة إليها كمرجع كليا).‎ AS et al (2007) J. Hypertens. 25:197-205 ‏تتضمن بعض الأمثلة غير المقيدة على أنظمة عقار توصيل مفيدة لتوصيل أحماض رببونيكلويك مزدوجة‎ (DOTAP) dioleoyltetramethylaminopropyl ‏ميثيل أمينو بروييل‎ yi ‏الجديلة جهازيا داي أوليويل‎ ‏أوليجوفكتامين‎ ٠ (Sorensen, DR., er al (2003), supra; Verma, UN, er al (2003), supra) 5
Zimmermann, TS, er al (2006) Nature ) ‏"جسيمات حمض نووي 4583 صلبة"‎ «Oligofectamine
Chien, PY, et al (2005) Cancer Gene Ther. 12:321-328,; ) cardiolipin ‏كارديوليبين‎ « (44 1:111-114
Bonnet ME, et al (2008) ) ‏بولي إيثيلين إيمين‎ «Pal, A, et al (2005) Int J. Oncol. 26:1087-1091 ¢ (Pharm. Res. Aug 16 Epub ahead of print; Aigner, A. (2006) J. Biomed. Biotechnol. 71659 ‏ومركبات بولي أميدو أمين‎ ¢(Liu, S. (2006) Mol. Pharm. 3:472-487) (RGD) Arg-Gly-Asp ‏بتيدات‎ 20
Tomalia, DA, et al (2007) Biochem. Soc. Trans. 35:61-67; Yoo, H., et al ) polyamidoamines ‏في بعض النماذج؛ يشكل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة معقد‎ .))1999( Pharm. Res. 16:1799-1804 ‏مع سيكلو دكسترين للإعطاء الجهازي. يمكن العثور على طرق للإعطاء والتركيبات الصيدلائية لأحماض‎ 7427605 ‏في براءة الاختراع رقم‎ cyclodextrins ‏رببونيكلويك مزدوجة الجديلة ومركبات سيكلو دكسترين‎ والتي تم دمجها هنا بالإشارة إليها كليا. موجهات حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة مرمزة وفقا للاختراع
يمكن التعبير عن حمض ريبونيكلوبك ثنائي الجديلة تستهدف جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 من وحدات استنساخ تم إدخالها داخل موجهات حمض ريبوزي نووي منزوع الأكسجين أو الحمض النووي ‎Sign!‏ (انظر » مقلاء ‎«Couture, A, et al., TIG. (1996), 12:5-10; Skillern, A, et al.‏ المنشور الدولي للبراءة الدولية رقم 22113700 ‎«Conrad‏ المنشور الدولي للبراءة الدولية رقم 22114/00؛ 5 ‎«Conrad‏ ‏5 براءة الاختراع رقم 6054299). يمكن أن يكون التعبير انتقاليا (بمقدار ساعات أسبوعيا) أو مستديمة (أسابيع إلى أشهر أو أطول)؛ بناء على البنية المحددة المستخدمة والنسيج المستهدف أو نوع الخلية. يمكن إدخال هذه الجينات الانتقالية كبنية خطية؛ بلازميد دائري ‎«circular plasmid‏ أو موجه فيروسي ‎viral‏ ‎vector‏ والذي يمكن أن يكون ‎Ble‏ عن موجه ‎ede‏ أو غير مدمج. يمكن أيضا تكوين الجينات الانتقالية ‎Lea transgene‏ للسماح بوراثته كبلازميد خارج كروموسومي ‎Gassmann, ) extrachromosomal plasmid‏ ‎«(et al., Proc.
Natl.
Acad.
Sci.
USA (1995) 92:1292 0‏ ‎(Sa‏ انتساخ جديلة فردية أو جدائل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة من معزز ‎promoter‏ على موجه التعبير. حيث يمكن إدخال التعبير عن اثنين من الجدائل المنفصلة لتوليد؛ ‎Sle‏ حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة؛ اثنين من موجهات التعبير المنفصلة (مثلا؛ بواسطة العدوى أو الإصابة) داخل خلية مستهدفة. بشكل بديل يمكن نسخ كل جديلة فردية من حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة بواسطة معززات ‎promoters‏ ‏5 يتم وضع كل منها على نفس بلازميد التعبير ‎plasmid‏ 01855100»©. في أحد النماذج؛ يتم التعبير عن حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة كبولي نيكلوتيدات تكرار معكوس بواسطة رابط بولي متوالية النيكلوتيد بحيث يمكن أن يتضمن حمض رببونيكلوبك ‎AUS‏ الجديلة بنية جذعية وبنية ‎structure dala‏ م100. موجهات التعبير ‎expression vectors‏ عن حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة بشكل عام عبارة عن بلازميدات حمض رببوزي نووي منزوع الأكسجين أو موجهات فيروسية ‎viral vectors‏ يمكن استخدام 0 موجهات التعبير تتوافق مع الخلايا حقيقية النواة ‎eukaryotic cells‏ بشكل مفضل تلك المتوافقة مع خلايا فقارية ‎cvertebrate cells‏ لإنتاج بنيات ناتج ‎sage‏ الارتباط الجيني للتعبير عن حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة كما هو موضح هنا. موجهات التعبير عن الخلية حقيقية النواة معروفة جيدا في المجال وهي متاحة لدى عدد من المصادر التجارية. بشكل مثالي؛ يتم توفير هذه الموجهات التي تحتوي على مواقع التقييد المناسبة لإدخال قطاع الحمض النووي المطلوب. يمكن أن يكون توصيل موجهات التعبير عن حمض (يبونيكلويك ثنائي الجديلة جهازياء مثل بواسطة الإعطاء عبر الوريدي أو العضلي, بواسطة الإعطاء إلى
الخلايا المستخدمة خارج منطقة الزراعة من المريض المتبوعة بإعادة الإدخال داخل المريضء أو بواسطة أي وسيلة أخرى تسمح بالإدخال داخل خلية مستهدفة مطلوية. تتضمن أنظمة الموجه الفيروسي ‎Viral vector systems‏ المستخدمة مع الطرق والتركيبات الموضحة هناء ولكنها غير مقيدة ب» (أ) موجهات فيروسية غدية ‎tadenovirus vectors‏ (ب) موجهات فيروسية ارتجاعية ‎«retrovirus vectors 5‏ شاملة ولكنها غير مقيدة بموجهات فيروسية بطيثة ‎clentiviral vectors‏ فيروس لوكيميا فأرية مولوني ‎moloney murine leukemia virus‏ الخ.؛ (ج) موجهات مرتبطة بفيروسات غدية ‎adeno-‏ ‎tassociated virus vectors‏ )3( موجهات فيروس ‎Mas‏ هريز ‎therpes simplex virus vectors‏ (ه) موجهات أس فى 40 40 ‎SV‏ )5( موجهات فيروس ورم متعدد ‎(J) polyoma virus vectors‏ موجهات فيروسية لورم حليمي ‎¢papilloma virus vectors‏ (ح) موجهات فيروسية بيكورناوية ‎¢picornavirus vectors‏ 0 (ط) موجهات فيروس الجدري ‎Jie pox virus vectors‏ جدري الدجاج؛ ‎lie‏ موجهات فيروسات اللقاح ‎vaccinia virus vectors‏ أو جدري الطيور»؛ مثلا جدري الكناري أو جدري الدجاج؛ و(ي) فيروس غدي ‎adenovirus‏ المعتمد على المساعد أو المختفي. يمكن أن تكون الفيروسات المعيبة للتكاثر مفيدة أيضا. سوف تكون الموجهات المختلفة أو لا تكون مدمجة داخل جينوم الخلية. يمكن أن تتضمن البنيات متواليات فيروسية للعدوى؛ عند الحاجة. بشكل بديل؛ يمكن دمج البنية داخل موجهات قادرة على تكاثر إيبيسومي ‎cepisomal replication 5‏ مثلا موجهات إى بى فى ‎EPV‏ و إى بى فى 217. سوف تتطلب بنيات ناتج عودة الارتباط الجيني التعبير عن حمض رببونيكلويك ‎SU‏ الجديلة بشكل عام عناصر منظمة ‎regulatory‏ ‎lie elements‏ معززات؛ محسنات 01000©:8©»؛ إلخ.؛ لضمان التعبير عن حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة في الخلايا المستخدمة. هناك جوانب أخرى لضمان الموجهات والبنيات في المجال. 0 #. التركيبات الصيدلانية وفقا للإختراع يتضمن الاختراع الحالي ‎Lind‏ التركيبات الصيدلانية والصيغ التي تتضمن أحماض رببونيكلويك مزدوجة الجديلة وفقا للاختراع. في أحد النماذج؛ تم هنا توفير التركيبات الصيدلانية التي تحتوي على حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة؛ كما هو موضح هناء ومادة حاملة مقبولة صيدلانيا. سوف تكون التركيبات الصيدلانية التي تحتوي على حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة مفيدة لعلاج مرض أو اضطراب مرتبطة بالتعبير عن أو نشاط جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1. تتم صياغة هذه التركيبات الصيدلانية بناء على وضع التوصيل. يتضمن أحد الأمثلة تركيبات مصاغة للإعطاء الجهازي عبر التوصيل بالحقن؛
‎Sia‏ بواسطة التوصيل تحت الجلد ‎(SC) subcutancous‏ أو عبر الوريد ‎intravenous‏ (17). يمكن إعطاء التركيبات الصيدلانية وفقا للاختراع في جرعات مناسبة لتثبيط التعبير عن جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1. يمكن إعطاء التركيبات الصيدلانية وفقا للاختراع في جرعات مناسبة لتثبيط التعبير عن جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1. بشكل عام؛ سوف تكون هناك جرعة مناسبة لحمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة وفقا للاختراع في نطاق حوالي 0.001 إلى حوالي 200.0 ملجم/كجم من وزن جسم المتلقي يوميا؛ بشكل عام في نطاق حوالي 1 إلى 50 ملجم /كجم وزن الجسم يوميا. بشكل مثالي» سوف تكون الجرعة المناسبة لحمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة وفقا للاختراع في نطاق حوالي 0.1 ملجم/كجم إلى حوالي 5.0 ملجم/كجم؛ مثلاء حوالي 0.3 ملجم/كجم وحوالي 3.0 ملجم/كجم. يمكن أن يتضمن نظام جرعة تكرار ‎repeat-dose regimine 0‏ إعطاء كمية علاجية من حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة على أساس منظم؛ ‎Jia‏ كل يوم ويوم أو مرة سنويا. في نماذج معينة؛ يتم إعطاء حمض رببونيكلوبك ثنائي الجديلة حوالي مرة شهريا إلى حوالي مزة كل ربع سنة (أي؛ حوالي مره كل ثلاثة أشهر). بعد نظام الدواء ‎١‏ لأولي ‎initial treatment regimen‏ يمكن إعطاء العلاجات على أساس أقل تكرارية. ‎Ole‏ ‏بعد الإعطاء أسبوعيا أو مرتين أسبوعيا لمدة 3 ‎pel‏ يمكن تكرار الإعطاء مرة شهرياء لمدة 6 أشهرء أو 5 سنة؛ أو أطول. يمكن إعطاء التركيبة الصيدلانية مرة يوميا أو يمكن إعطاء حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة كجرعتين؛ ثلاث؛ أو أكثر من الجرعات الثانوية عند فواصل مناسبة خلال اليوم أو حتى باستخدام التسربب أو التوصيل خلال صيغ إطلاق متحكم فيه. في هذه الحالة؛ يجب أن تكون حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة الموجودة في كل جرعة ثانوية بشكل مناظر أصغر لتحقيق الجرعة الكلية اليومية. ‎(Say‏ تركيب وحدة الجرعة ‎dosage‏ ‎Load unit 0‏ للتوصيل على مدار عدة ‎lie ald‏ باستخدام صيغة إطلاق مستديمة تقليدية والتي تقدم إطلاق مستديم من حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة على مدار عدة أيام. هناك صيغ إطلاق مستديم معروفة جيدا في المجال ومفيدة تحديدا لتوصيل عوامل عند موقع جزئي؛ مثلا يمكن استخدامها مع العوامل وفقا للاختراع الحالي. في هذا ‎cg pall‏ تحتوي وحدة الجرعة على العديد من الجرعات اليومية المناظرة. في نماذج أخرى» يمكن أن تكون الجرعة الفردية من التركيبات الصيدلانية طويلة المدى؛ بحيث يتم إعطاء 5 الجرعات التالية عند فواصل لا تزيد عن 3؛ 4؛ أو 5 أيام؛ أو عند فواصل ‎apy‏ عن ‎١1‏ 2 3؛ أو 4 أسابيع. في بعض النماذج وفقا للاختراع» يتم إعطاء جرعة فردية من التركيبات الصيدلانية وفقا للاختراع
مرة أسبوعيا. في نماذج أخرى وفقا للاختراع» يتم إعطء جرعة فردية من التركيبات الصيدلانية وفقا للاختراع مرتين شهريا. في نماذج معينة؛ يتم إعطاء حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة مرة شهريا إلى حوالي مرة كل ربع سنة (أي؛ حوالي مرة كل ثلاثة أشهر). سوف يفهم الخبير في المجال أن هناك عوامل يمكنها التأثير على الجرعة والتوقيت المطلوب لعلاج الخاضع بفاعلية؛ شاملة ولكنها غير مقيدة بحدة المرض أو الاضطراب؛ الأدوية السابقة؛ الصحة العامة أو سن الخاضع؛ وغيرها من الأمراض الحالية. علاوة على ذلك؛ يمكن أن يتضمن علاج الخاضع بكمية فعالة علاجيا من التركيبة علاج فردي أو سلسلة من الأدوية. تضمنت تقديرات الجرعات الفعالة وأعمار النصف في الكائن ‎all‏ لأحماض رببونيكلويك مزدوجة الجديلة الفردية بواسطة الاختراع تلك التي يتم تنفيذها بواسطة الطق التقليدية أو على أساس الاختبار في الكائن الحي باستخدام نموذج حيوان مناسب؛ 0 كما هو معروف في المجال. ‎lia‏ هناك نماذج حيوانية من التهاب الكبد ‎B‏ معروفة في المجال شاملة شمبانزي؛ الفأر الجبلي؛ ونموذج الفأر المتحول جينيا من فيروس التهاب الكبد ب ) ‎Wieland, 2015. Cold Spring Harb.
Perspect.
Med.,‏ ‎5:a021469, 2015; Tennant and Gerin, 2001. ILAR Journal, 42:89-102; and Moriyama et al.,‏ ‎Science, 248:361-364‏ .1990( يمكن استخدام نموذج الشمبانزي أيضا كنموج لالتهاب الكبد . هناك 5 عدد كبير من نماذج السرطان شاملة الأورام المستحثة كيماويا والمطعمة المعروفة في المجال. يمكن إعطاء التركيبات الصيدلانية وفقا للاختراع الحالي في عدد من الطرق بناء على ما إذا كان الدواء مطلويا للإعطاء الموضعي أو الجهازي وعند المساحة المطلوب علاجها. يمكن أن يكون الإعطاء موضعيا ‎lie)‏ بواسطة دفعة عبر جلدية ‎«(transdermal patch‏ رئوية؛ ‎Obie‏ بواسطة التنشق أو النفخ للمساحق أو الأيروسولات ‎cacrosols‏ شاملة بواسطة وسيلة تنشق ©1:2ن060؛ داخل الرغامى 002080601 عبر الأنف ‎cintranasal 0‏ عبر الجلد تحت الجلد؛ء الإعطاء الفمي أو بالحقن. يتضمن الإعطاء بالحقن الإعطاء عبر الوريدي ‎intravenous‏ أو عبر الشرياني ‎intraarterial‏ أو تحت الجلدي أو عبر البريتوني ‎intraperitoneal‏ ‏أو عبر العضلي ‎intramuscular‏ أو بالتسريب ‎infusion‏ تحت ‎Ole calall‏ عبر جاهز مزروع ‎¢implanted device‏ أو داخل القرنية ‎intracranial‏ مثلاء بواسطة إعطاء داخل المتن ‎intraparenchymal‏ ‏أو الجسم الزجاجي ‎intrathecal‏ أو داخل البطين ‎[intraventricular‏ ‏5 يمكن توصيل حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة بطريقة لاستهداف نسيج معين (مثلا؛ الخلايا الكبدية).
يمكن أن تتضمن التركيبات الصيدلائية والصيغ للإعطاء الموضعي أو عبر الجلدي دفعات عبر ‎Lala‏ ‎cransdermal patches‏ مراهم؛ دلوك؛ كريمات؛ جلات؛ قطرات؛ تحاميل ‎suppositories‏ رذاذء؛ سوائل ومساحيق. يمكن أن تكون المواد الحاملة التقليدية الصيدلائية ‎ALLE‏ سائل مائي أو مسحوق أو زيت أو مواد إكساب قوام ‎thickeners‏ وما شابه ضرورية ومطلوية. يمكن أن تكون الواقيات والقفازات المطلية وما شابه مفيدة أيضا. تتضمن الصيغ الموضعية المناسبة تلك حيث أحماض رببونيكلويك مزدوجة الجديلة الموضحة في الاختراع موجودة في خليط مع عامل توصيل موضعي ‎topical delivery agent‏ مثل دهون» ليبوسومات؛ أحماض دهنية؛ مركبات إستر حمضية دهنية ‎cfatty acid esters‏ منشطات؛ عوامل خالبة ‎chelating agents‏ ومواد تخفيف التوتر السطحي 90:]0010015. تتضمن الدهون والليبوسومات المناسبة عناصر محايدة (مثلاء داي أوليويل فوسفاتيديل إيثانول أمين ‎dioleoylphosphatidyl ethanolamine‏ ‎(DOPE) 0‏ داي ميريستويل فوسفاتيديل كولين ‎«(DMPC) dimyristoylphosphatidyl choline‏ داي ستيرولي فوسفاتيديل كولين ‎(distearolyphosphatidyl choline‏ سلبية ‎(gh lie)‏ ميريستويل فوسفاتيديل جليسرول ‎((DMPG) dimyristoylphosphatidyl glycerol‏ وكاتيوني ‎Sl)‏ داي أوليويل تترا ميثيل أمينو بروييل وداي أوليويل فوسفاتيديل إيثانول أمين ‎٠ ((DOTMA) dioleoylphosphatidyl ethanolamine‏ يمكن تغليف أحماض ريبونيكلويك مزدوجة الجديلة الموضحة في الاختراع في ليبوسومات أو يمكن أن تشكل 5 معقدات منهاء تحديدا ليبوسومات كاتيونية ‎cha JSG cationic liposomes‏ يمكن تعقيد أحماض رببونيكلويك مزدوجة الجديلة إلى دهون؛ تحديدا إلى دهون كاتيونية. تتضمن الأحماض الدهنية ومركبات إستر المناسبة ولكنها غير مقيدة بحمض أراكاديكوتيك ‎arachidonic acid‏ حمض أوليك ‎coleic acid‏ حمض إيكوسانويك ‎ceicosanoic acid‏ حمض لوريك ‎dauric acid‏ حمض كابربليك ‎ccaprylic acid‏ حمض كابريك ‎ccapric acid‏ حمض ميريستيك ‎emyristic acid‏ حمض بالميتيك ‎palmitic acid‏ حمض ستيريك ‎«stearic acid 0‏ حمض لينوليك ‎dinoleic acid‏ حمض لينوليتيك ‎(gla clinolenic acid‏ كاريات ‎«dicaprate‏ ‏تراي كاريات ‎sige ctricaprate‏ أولين ‎cmonoolein‏ داي لورين ‎cdilaurin‏ جليسريل 1- مونوكاريات ‎glyceryl 1-monocaprate‏ 1-دوديسيل أزا سيكلو هبتان-2-ون ‎¢1-dodecylazacycloheptan-2-one‏ ‏أسيل اكارنيتين ‎cacylcarnitine‏ أسيل كولين ‎cacylcholine‏ أو ‎Ciao‏ ألكيل إستر ‎Ciao alkyl ester‏ (مثلاء أيزو بروييل ميريستات ‎(IPM) isopropylmyristate‏ مونو جليسريد ‎cmonoglyceride‏ داي جليسريد ‎diglyceride 5‏ أو ملح مقبول صيدلانيا منها). يتم وصف الصيغ الموضعية بالتفصيل في براءة الاختراع رقم
4 والتي تم دمجها هنا بالإشارة إليها كمرجع.
أ. تجميعات جزيئية عضوية تتضمن صيغ حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة
يمكن صياغة حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة للاستخدام في التركيبات وطرق الاختراع للتوصيل في تجميعة جزيئية غشائية ‎Sie cmembranous molecular assembly‏ ليبوسوم أو مذيل. حسب الاستخدام هناء يشير المصطلح "ليبوسوم” إلى حويصلة مكونة من دهون آلفة للدهون والماء دهون مجهزة في طبقة ثائية ‎bilayer‏ واحد على الأقل» مثلاء طبقة ثنائية واحدة أو مجموعة من الطبقات الثنائية ‎bilayers‏ ‏تتضمن الليبوسومات حويصلات أحادية الرقاقة ‎unilamellar‏ ومتعددة الرقاقات ‎multilamellar‏ والتي تتضمن الغشاء المكون من ‎sale‏ آلفة للدهون ‎lipophilic material‏ ومادة داخلية مائية ‎.aqueous interior‏ يحتوي الجزء المائي ‎aqueous portion‏ على حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة. تقوم المادة الآلفة للدهون بعزل المادة الداخلية ‎dbl)‏ من ‎ga‏ خارجي ‎aqueous exterior Sle‏ والذي لا يتضمن بشكل مثالي 0 تركيبة حمض رببونيكلوبك ثنائي الجديلة» على الرغم من أنها في بعض الأمثلة؛ قد تحتوي عليها. الليبوسومات مفيدة لنقل وتوصيل المكونات النشطة إلى موقع التأثير. بسبب أن الغشاء الليبوسومي ‎liposomal membrane‏ مشابه بنيويا للأغشية البيولوجية؛ عند استخدام الليبوسومات على نسيج؛ يتم دمج الطبقة الثنائية الليبوسومي ‎liposomal bilayer‏ مع طبقة ثنائية من الأغشية الخلوية ‎.cellular membranes‏ مع تقدم ظهور الليبوسوم والخلية؛ يتم توصيل المحتويات المائية الداخلية التي تتضمن حمض ريبونيكلويك 5 ثنائي الجديلة داخل الخلية ‎dus‏ يمكن أن ترتبط حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة انتقائيا بالحمض النووي الرربوزي مستهدف ويمكن أن تتوسط في تداخل الحمض النووي الريبوزي. في بعض الحالات يتم استهداف
اللييوسومات أيضا انتقائياء مثلاء لتوجيه حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة إلى أنواع معينة من الخلية. ‎(Se‏ تحضير ليبوسوم يحتوي على عامل حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة بواسطة تشكيلة من الطرق. في أحد الأمثلة؛ يتم إذابة مكون الدهن لليبوسوم في منظم بحيث يتم تكوين المذيلات مع المكون الدهني. 0 مثلاء يمكن أن يكون المكون الدهني عبارة عن دهن كاتيوني متقابل الزمر أو دهن مترافق. يمكن أن يتضمن المنظف تركيز مذيل عالي الدقة ويمكن أن يكون غير أيوني. تتضمن المنظفات المثالية كولات ‎«cholate‏ _سى اتش أيه بى أس ‎«CHAPS‏ أوكتيل جلوكوسيد ‎coctylglucoside‏ ديوكسي كولات ‎«deoxycholate‏ ولورويل ساركوسين ‎sarcosine‏ 1ا10070. بعد ذلك تتم إضافة مستحضر العامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة إلى المذيلات التي تتضمن المكون الدهني. تتفاعل المجموعات الكاتيونية على 5 الدهن مع العامل حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة ويتم التكثيف حول عامل حمض ريبونيكلويك ثنائي
الجديلة لتكوين ليبوسوم. بعد ‎(CRIS‏ تتم ‎A)‏ المادة المنظفة؛ ‎lie‏ بواسطة الديلزة ‎dialysis‏ لإعطاء المستحضر الليبوسومي ‎Jalal‏ حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة. عند الضرورة يمكن إضافة مركب المادة الحاملة الذي يساعد في التكثيف أثناء تفاعل التكثيف ‎ccondensation reaction‏ مثلاء بواسطة الإضافة المتحكم فيها. ‎lia‏ يمكن أن يكون مركب المادة الحاملة ‎Ble 5‏ عن بوليمر غير حمض نووي ‎ia)‏ سبيرمين ‎spermine‏ أو سبيرميدين ‎(spermidine‏ يمكن تعديل درجة الحموضة أيضا لصالح التكثيف. تم ‎Lal‏ وصف طرق إنتاج نواقل توصيل بولي نيكلوتيد ‎polynucleotide delivery vehicles‏ مستقرة؛ ‎cally‏ تضمن معقد ‎Jo‏ نيكلوتيد/دهن كاتيوني كمكونات بنيوية ‎structural components‏ من ناقل التوصيل» أيضا في؛ مثلا» البراءة الدولية 37194/96؛ يتم دمج محتوياتها كاملة هنا بالإشارة إليها كمرجع. 0 يمكن أن يتضمن تكوين الليبوسوم ‎Load‏ واحد أو أكثر من جوانب الطرق المثالية الموضحة في ‎Felgner,‏ ‎er al, Proc.
Natl.
Acad.
Sci., USA 8:7413-7417, 1987‏ .آ ‎¢P.‏ براءة الاختراع رقم 4897355؛ براءة الاختراع رقم ¢5¢171¢678 ‎Bangham, et al.
M.
Mol.
Biol. 23:238, 1965; Olson, et al.
Biochim.‏ ‎Biophys.
Acta 557:9, 1979; Szoka, et al.
Proc.
Natl.
Acad.
Sci. 75: 4194, 1978; Mayhew, et al.‏ ‎Biochim.
Biophys.
Acta 775:169, 1984; Kim, et al.
Biochim.
Biophys.
Acta 728:339, 1983; and‏ ‎Fukunaga, ef al.
Endocrinol. 115:757, 1984 5‏ التقنيات المستخدمة بشكل مشترك لتحضير الرواكم الدهنية ‎lipid aggregates‏ ذات حجم مناسب كنواقل توصيل المعالجة الصوتية ‎sonication‏ والبثق ‎ull‏ ‏والتجميد ‎freeze-thaw plus extrusion‏ (ددى ‎Mayer, et al.
Biochim.
Biophys.
Acta 858:161, «Mis‏ 1986( يمكن استخدام التميه الدقيق عندما تكون هناك ‎dala‏ لرواكم صغيرة )50 إلى 200 نانومتر) ورواكم متجانسة نسبيا )1984 ,775:169 ‎ald. (Mayhew, et al.
Biochim.
Biophys.
Acta‏ تهيئة هذه 0 الطرق إلى مستحضرات لتعبئة عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة داخل الليبوسومات. تقع الليبوسومات داخل اثنين من الفئات الواسعة. يتم شحن الليبوسومات الكاتيونية ‎Cationic liposomes‏ إيجابا والتي تتفاعل مع جزيء أحماض نووية مشحون سلبا لتكوين معقد مستقر ‎stable complex‏ يرتبط معقد حمض نووي/ليبوسوم المشحون إيجابا بسطح الخلية المشحون ‎negatively charged cell surface Llu‏ ويتم إدخاله في إندوسوم. بسبب الحموضة في الإندوسوم؛ يتم تمزيق الليبوسومات؛ ويتم إطلاق محتوياتها داخل سيتويلازما الخلية ‎Wang et al., Biochem.
Biophys.
Res.
Commun., 1987, ) cell cytoplasm‏ 980-985 ,147(
تقوم الليبوسومات التي تكون حساسة لدرجة حموضة أو مشحونة سلباء باحتجاز الأحماض النووية بدلا من التعقيد معها. حيث يتم شحن كل من الحمض النووي والدهن بشكل مشابه؛ يتم التنافر بدلا من تكوين المعقد. مع ذلك؛ يتم احتجاز بعض من الحمض النووي في الجزءِ المائي الداخلي لهذه الليبوسومات. تم استخدام الليبوسومات الحساسة لدرجة الحموضة لتوصيل أحماض نووية ترمز جين ثيميدين كيناز ‎thymidine kinase gene 5‏ إلى طبقات أحادية خلوية ‎cell monolayers‏ في المزرعة. تم الكشف عن التعبير عن الجين الخارجي في الخلايا المستخدمة ( ,19 ,1992 ‎Zhou et al., Journal of Controlled Release,‏ 269-274( يتضمن نوع أساسي من التركيبة الليبوسومية ‎liposomal composition‏ مركبات دهن فوسفو غير فوسفاتيديل كولين مشتقة طبيعيا ‎phosphatidylcholine‏ 6:7760ل-زال0202. يمكن تكوين تركيبات ليبوسوم متعادلة ‎De «Neutral liposome compositions 0‏ من داي ميربستويل فوسفاتيديل كولين أو ‎(gla‏ بالميتويل فوسفاتيديل كولين ‎(DPPC) dipalmitoyl phosphatidylcholine‏ يتم تكوين تركيبات ليبوسومية أنيونية ‎Anionic liposome compositions‏ بشكل عام من داي ميريستويل فوسفاتيديل جليسرول؛ بينما يتم تكوين ‎while‏ ليبوسومات أنيونية جينية مدمجة ‎anionic fusogenic liposomes‏ أولا من داي أوليويل فوسفاتيديل إيثانول أمين. يتم تكوين نوع آخر من التركيبة الليبوسومية من فوسفاتيديل كولين ‎phosphatidylcholine‏ ‎(PC) 5‏ مثل؛ ‎Sie‏ فوسفاتيديل كولين فول الصوياء وفوسفاتيديل كولين بيض. هناك نوع آخر من من خلطات من اثنين من أو أكثر من دهن فوسفوء فوسفاتيديل كولين» وكوليسترول. تتضمن الأمثلة على طرق أخرى إدخال الليبوسومات داخل خلايا في المعمل وفي الكائن الحي براءات الاختراع الأمريكية أرقام 5283185 و5171678؛ البراءات الدولية 00569/94؛ 24640/93؛ ‎Felgner, J.
Biol.
Chem. 269:2550, 1994; Nabel, Proc.
Natl.
Acad.
Sci. 90:11307, ¢16024/91‏ ‎Nabel, Human Gene Ther. 3:649, 1992; Gershon, Biochem. 32:7143, 1993; and Strauss 0‏ ;1993 ‎EMBO J. 11:417, 1992‏ تم ‎Load‏ فحص الأنظمة الليبوسومية غير الأيونية ‎Non-ionic liposomal systems‏ لتحديد منفعتها في توصيل عقاقير إلى الجلد؛ في أنظمة محددة يتم تضمين مادة تخفيف التوتر السطحي غير الأيونية ‎non-‏ ‎jonic surfactant‏ والكوليسترول. تم استخدام الصيغ الليبوسومية غير الأيونية التي تتضمن ‎Novasome™‏ ‏5 1 (جليسريل داي لورات/ ‎dilaurate‏ 10©(1وكوليسترول/بولي أوكسي إيشلين ‎—10—polyoxyethylene‏ ‏ستيريل إيثر ‎(10-stearyl ether‏ و11 ‎Novasome™‏ (جليسريل داي ستيرات ‎glyceryl distearate‏
/كوليسترولابولي أوكسي إيثيلين-10-ستيريل إيثر) لتوصيل سيكلو ‎cyclosporin-A.
A= Cys‏ داخل ‎als ded‏ الفأر. أشارت النتائج إلى أن هذه الأنظمة الليبوسومية غير الأيونية فعالة في تسهيل موضع سيكلو سبورين ‎A‏ داخل طبقات مختلفة من الجلد )466 )4(6 ,1994 ‎(Hu etal.
S.T.P.Pharma.
Sci.,‏ . تتضمن الليبوسومات ‎Lind‏ ليبوسومات 'مثبتة تجاسميا؛ مصطلح؛ حسب الاستخدام هناء يشير إلى الليبوسومات التي تتضمن واحد أو أكثر من الدهون المخصصة؛ عند الدمج داخل الليبوسومات؛ التيتؤدي إلى أعمار محسنة في الدورة الدموية نسبة إلى الليبوسومات التي تحتاج إلى هذه الدهون المخصصة. تتضمن الأمثلة على الليبوسومات المثبتة تجاسميا ‎sterically stabilized liposomes‏ هي تلك ‎oa Cus‏ من الدهون المكونة للحويصلة من الليبوسوم (أ) يتضمن واحد أو أكثر من دهون جليكو ‎ia glycolipids‏ مونو سيالو جاتجليوسيد ‎monosialoganglioside‏ 0(01» أو (ب) مشتقة مع واحد أو أكثر من بوليمرات 0 آلفة للماء ‎Jie chydrophilic polymers‏ شق بولي إيثيلين جليكول. دون الحاجة للارتباط بأي نظرية؛ قد يعتقد في المجال ‎oof‏ على الأقل بالنسبة لليبوسومات المثبتة تجاسميا التي تحتوي على جانجليوسيد ‎cgangliosides‏ سفينوجوميلين ‎«sphingomyelin‏ دهون مشتقة من بولي إيثيلين ‎(Jolla‏ يشتق عمر نصف التدوير المحسن لهذه الليبوسومات المثبتة تجاسميا من استهلاك مخفض داخل خلايا النظام داخل الشبكي ‎Allen er al., FEBS Letters, 1987, 223, 42: Wu er al.,) (RES) reticuloendothelial system‏ ‎(Cancer Research, 1993, 53, 3765 15‏ . هناك العديد من الليبوسومات المختلفة التي تتضمن واحد أو أكثر من دهون جليكو المعروفة في المجال. وقد أشار )64 ,507 ,1987 ‎Papahadjopoulos et al. (Ann.
N.Y.
Acad.
Sci.,‏ إلى أن مونو سيالو جانجليوسيد؛ جالاكتو سيريبروسيد سلفات ‎ galactocerebroside sulfate‏ وفوسفاتيديل إينوسيتول ‎phosphatidylinositol‏ لتحسين أعمار النصف في الدم لليبوسومات. تم شرح هذه النتائج بواسطة ‎Gabizon‏ ‎wet al. (Proc.
Natl.
Acad.
Sci.
U.S.A., 1988, 85, 6949( 0‏ تقوم كل من براءة الاختراع رقم 4837028 والبراءة الدولية 04924/88< كل من ‎aisle.
Allen et al‏ عن الليبوسومات التي تتضمن (1) سفينوجوميلين ‎sphingomyelin‏ و(2) جانجليوسيد مونو سيالو جانجليوسيد أو جالاكتو سيريبروسيد سلفات إستر ‎.galactocerebroside sulfate ester‏ تقوم براءة الاختراع رقم 5543152 ‎(Webb et al)‏ بالكشف عن ليبوسومات يتضمن سفيتوجوميلين. يتم الكشف عن الليبوسومات ‎glamsn—162‏ ميريستويل فوسفاتيديل 5 كولين ‎1,2-sn-dimyristoylphosphatidylcholine‏ في البراءة الدولية 13499/97 ‎etal)‏ صسنا).
في بعض النماذج؛ يتم استخدام الليبوسومات الكاتيونية. تتضمن الليبوسومات الكاتيونية ميزة القدرة على الدمج بغشاء الخلية. الليبوسومات غير الكاتيونية ‎(Non-cationic liposomes‏ على الرغم من عدم قدرتها على الدمج بفاعلية مع غشاء البلازما ‎Allg plasma membrane‏ يتم استهلاكها بواسطة بلاعم في الكائن الحي ويمكن استخدامها لتوصيل عوامل حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة إلى البلاعم.
تتضمن المزايا الأخرى لليبوسومات: الليبوسومات التي تم الحصول عليها من مركبات دهن فوسفو طبيعية ‎ALE‏ للتوافق حيويا والتدهور حيويا؛ يمكن أن تتضمن الليبوسومات نطاق واسع من العقار القابل للذويان في ماء ودهن؛ يمكن أن تقوم الليبوسومات بحماية أحماض رببونيكلويك مزدوجة الجديلة مغلفة في قطاعاتها الداخلية من الأيض والتدهور ) ‎Rosoff, in "Pharmaceutical Dosage Forms," Lieberman,‏ 5 .م ,1 ‎(Rieger and Banker (Eds.), 1988, volume‏ الاعتبارات المهمة في تحضير الصيغ ليبوسوم
هي الشحنة السطحية ‎dipid surface charge (pall‏ حجم الحويصلة؛ والحجم المائي لليبوسومات. يمكن استخدام دهن كاتيوني تخليقي مشحون ‎elias]‏ 17-[1-(23-داي أوليل أوكسي )بروبيل ‎“NNN‏ ‏تراي ميثيل أمونيوم كلوريد ‎N-[1-(2,3-dioleyloxy)propyl]-N,N,N-trimethylammonium chloride‏ ‎(DOTMA)‏ لتكوين الليبوسومات الصغيرة التي تتفاعل آنيا مع حمض نووي لتكوين معقدات دهن-حمض نووي ‎lipid-nucleic acid complexes‏ قادرة على دمج الدهون المشحونة سلبا ‎negatively charged lipids‏ 5 ا لأغشية الخلية ‎cell membranes‏ لخلايا مزرعة النسيج ‎culture cells‏ 08906؛ ‎Lo‏ يؤدي إلى توصيل لعامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة (انظن مثا ‎Felgner, P.
L. er al., Proc.
Natl.
Acad.
Sci., USA‏ 1987 ,8:7413-7417 وبراءة الاختراع رقم 4897355 لوصف داي أوليويل فوسفاتيديل إيثانول أمين واستخدامه مع حمض ‎(Show)‏ نووي منزوع الأكسجين). يمكن استخدام داي أوليويل فوسفاتيديل إيثانول أمين مناظر» 1+2-بيس(أوليويل أوكسي )-3-(تراي ميثيل أمونيا)بروبان ‎(DOTAP) 1,2-bis(oleoyloxy)-3-(trimethylammonia)propane‏ في توليفة مع دهن فوسفو لتكوين حوبصلات تعقيد حمض رببوزي نووي منزوع الأكسجين ‎Bethesda ) Lipofectin™ ٠‏ ‎(Research Laboratories, Gaithersburg, Md.‏ عبارة عن عامل فعال لتوصيل أحماض نووية أنيونية ‎anionic nucleic acids‏ عالية داخل خلايا مزرعة النسيج ‎all‏ التي تتضمن ليبوسومات داي أوليويل فوسفاتيديل إيثانول أمين مشحونة إيجابا والتي ‎olin‏ آنيا مع بولي نيكلوتيدات مشحونة سلبا لتكوين معقدات. عند استخدام ليبوسومات كافية مشحونة إيجاباء تكون الشحنة الصافية على المعقدات الناتجة إيجابية أيضا. تلتحق المعقدات المشحونة إيجابا المحضرة بهذه الطريقة آنيا بأسطح خلية مشحونة سلباء
ودمج مع غشاء البلازماء وتوصيل الأحماض النووية الفعالة وظيفيا داخل» ‎lie‏ خلايا مزرعة نسيج. هناك دهن كاتيوني ‎AT‏ متاح تجارياء 162-بيس(أوليويل أوكسي)-33-(تراي ميثيل أمونيا)بروبان ‎(Transfectam™, Promega, Madison, Wisconsin)‏ يختلف عن داي أوليويل فوسفاتيديل إيثانول أمين في أن شقوق أوليويل ‎oleoyl moieties‏ مربوطة بواسطة ‎«jin‏ بدلا من روابط إيثر. تتضمن مركبات دهن كاتيوني ‎cationic lipid compounds‏ مشار إليها تلك التي ترافقت مع تشكيلة من شقوق شاملة؛ ‎Ole‏ كريوكسي سبيرمين ‎carboxyspermine‏ التي تترافق مترافق مع واحد من اثنين من أنواع الدهون وتتضنم مركبات ‎Jie‏ 5-كريوكسي سبيرميل ‎Cpls‏ داي أوكتا أوليويل أميد -5 ‎Transfectam™, Promega, Madison, ) (" DOGS") carboxyspermylglycine dioctaoleoylamide‏ ‎(Wisconsin‏ وداي بالميتويل فوسفاتيديل ‎deli)‏ أمين 5 كريوكسي سبيرميل -أميد ‎("DPPES'") dipalmitoylphosphatidylethanolamine 5-carboxyspermyl-amide 0‏ (انظرء مثلاء براءة الاختراع رقم 5171678). تتضمن مترافقات دهن كاتيوني أخرى اشتقاق الدهن مع كوليسترول ‎Ally )170-0:01'( cholesterol‏ تمت صياغتها ‎Jab‏ الليبوسومات في توليفة مع داي أوليويل فوسفاتيديل ‎Joi)‏ أمين (انظنء ‎Gao, X. and‏ ‎Biochim.
Biophys.
Res.
Commun. 179:280, 1991‏ ,سآ ‎(Huang,‏ تمت الإشارة إلى ليسين متعدد الدهون ‎cpolylysine 5‏ مصنوع بواسطة ترافق بولي ليسين مع داي أوليويل فوسفاتيديل إيثانول أمين؛ ليكون فعال في العدوى في وجود المصل (1991 ,1065:8 ‎(Zhou, X. er al., Biochim.
Biophys.
Acta‏ بالنسبة لسلالات خلوية ‎cell lines‏ معينة؛ تحتوي هذه الليبوسومات على الدهون الكاتيونية المترافقة؛ يقال أنها تبين سمية ‎Ji‏ وتعطي عدوى أكثر فعالية من تركيبات تحتوي على داي أوليويل فوسفاتيديل إيثانول أمين. تتضمن منتجات الدهن الكاتيوني المتاحة تجاريا دى أم آر آى إى ‎DMRIE‏ و اتش بى-دى أم آر أى إى ‎(Vical, La Jolla, California) HP-DMRIE 0‏ وليبوفكتامين ‎Life ) (DOSPA) Lipofectamine‏ ‎+(Technology, Inc., Gaithersburg, Maryland‏ تم وصف الدهون الكاتيونية الأخرى المناسبة لتوصيل أوليجونيكلوتيدات في البراءة الدولية 39359/98 و في البراءة الدولية 37194/96 تتناسب الصيغ الليبوسومية تحديدا للإعطاء الموضعيء تقدم الليبوسومات العديد من المزيا في مقابل الصيغ الأخرى. تتضمن هذه المزايا آثار جانبية منخفضة مرتبطة بالامتصاص الجهازي ‎systemic absorption‏ 5 العالي للعقار المطلوب ‎cogs)‏ التراكم الزائد للعقار الذي يتم إعطاؤه عند الهدف المطلوب؛ والقدرة على إعطاء عامل حمض رببونيكلوبك ثنائي الجديلة داخل الجلد. في بعض النماذج؛ يتم استخدام الليبوسومات
لتوصيل عامل حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة إلى ‎WIA‏ ظهارية وأيضا لتحسين اختراق عامل حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة داخل الأنسجة الجلدية ‎lie dermal tissues‏ داخل الجلد. مثلاء يمكن استخدام الليبوسومات موضعيا. تم توثيق التوصيل الموضعي للعقاقير المصاغة مثل الليبوسومات إلى الجلد (انظرء مثلدء ‎Weiner et al., Journal of Drug Targeting, 1992, vol. 2,405-410 and du Plessis ef al.,‏ ‎Antiviral Research, 18, 1992, 259-265; Mannino, R.
J. and Fould-Fogerite, S., Biotechniques 5‏ ‎Itani, 1. ef al.
Gene 56:267-276. 1987; Nicolau, C. et al.
Meth.
Enz. 149:157-‏ ;1988 ,6:682-690 ‎Straubinger, R.
M. and Papahadjopoulos, D.
Meth.
Enz. 101:512-527, 1983; Wang,‏ ;1987 ,176
‎(C.
Y. and Huang, L., Proc.
Natl.
Acad.
Sci.
USA 84:7851-7855, 1987‏ . تم أيضا فحص الليبوسومي غير الأيونية لتحديد منفعتها في توصيل عقاقير إلى الجلد؛ في أنظمة معينة
‏0 تتضمن مادة تخفيف التوتر السطحي غير الأيونية وكوليسترول. يتم استخدام الصيغ الليبوسومية غير أيونية التي تتضمن ‎Novasome™‏ 1 (جليسريل داي لورات/كوليسترول/بولي أوكسي إيثيلين -10 -ستيريل إيثر) 5 ‎Novasome™‏ ]1 (جليسريل داي ستيرات/ كوليسترول/بولي أوكسي إيثيلين -10-ستيريل إيثر) لتوصيل عقار داخل أدمة جلد ‎JU‏ هذه الصيغ مع عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة مفيدة في علاج الاضطراب الجلدي ‎.dermatological disorder‏
‏5 يمكن أن صنع الليبوسومات التي تتضمن حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة بحيث تكون قابلة للتشوه بشكل كبير. هذه القابلية للتشوه يمكن أن تسمح لليبوسومات بأن تخترق خلال المسام الأصغر من القطر المتوسط لليبوسوم. مثلا؛ ترانسفيرسومات ‎transfersomes‏ عبارة عن نوع من الليبوسومات القابلة للتحلل ‎deformable‏ ‎liposomes‏ يمكن صنع الترانسفيرسومات بواسطة إضافة منشطات سطحية ‎«surface edge activators‏ عادة مواد تخفيف التوتر السطحي» إلى التركيبة الليبوسومية المعيارية ‎standard liposomal composition‏
‏0 يمكن توصيل ترانسفيرسومات التي تتضمن أحماض رببونيكلويك مزدوجة الجديلة؛ ‎Sle‏ تحت الجلد بواسطة إصابة لتوصيل أحماض ريبونيكلويك مزدوجة الجديلة إلى خلايا الكيراتين ‎keratinocytes‏ في الجلد. لعبور جلد الكائن الثديي السليم؛ يمكن أن تمر حويصلات الدهن ‎lipid vesicles‏ خلال سلسلة من المسام الدقيقة؛ كل من له قطر أقل من 50 نانومتر» تحت تأثير تدريج عبر جلدي مناسب. علاوة على ذلك؛ بسبب خواص الدهن؛ يمكن أن تكون هذه الترانسفيرسومات ذاتية التحسين (مهيأة مع شكل المسام؛ مثلاء في
‏5 الجلد)؛ ذاتية الإصلاح؛ ويمكن أن تصل بشكل متكرر إلى أهدافها دون تكسير؛ وغالبا ما تكون ذاتية التحميل. يتم وصف الصيغ الأخرى القابلة للتعديل للاختراع الحالي في البراءة الدولية 042973/2008.
الترانسفيرسومات أيضا عبارة عن نوع آخر من الليبوسومات»؛ وتكون عبارة عن دهون عالية القابلية للتشوه والتي تتراكم تمثل مرشحات جذابة ‎attractive candidates‏ لنواقل توصيل عقار ‎.drug delivery vehicles‏ ‎(a‏ وصف ترانسفيرسومات كقطرات دهنية والتي تكون ‎Alle‏ القابلية للدهون والتي تكوتقادرة بسهولة على اختراق المسام الأصغر من القطرة. ترانسفيرسومات قابلة للتكيف مع البيئة التي يتم استخدامها فيها؛ ‎lie‏ ‏5 يمكن أن تكون ذاتية التحسين (متكيفة مع شكل مسام الجلد)؛ ذاتية الإصلاح» تصل بشكل متكرر إلى أهدافها بدون تكسيرء وغالبا ما تكون ذاتية التحميل. لعمل ترانسفيرسومات؛ من الممكن إضافة منشطات سطحية؛ عادة مواد تخفيف التوتر السطحي؛ إلى التركيبة الليبوسومية المعيارية. تم استخدام ترااسفيرسومات لتوصيل مصل ألبومين إلى الجلد. وقد أبدى التوصيل الذي يتوسط فيه تراتسفيرسوم ‎transfersome-‏ ‎mediated delivery‏ لمصل ألبومين أن يكون فعال في الحقن تحت الجلدي لمحلول يحتوي على مصل 0 ألبومين. يتم استخدام مواد تخفيف التوتر السطحي بشكل واسع في الصيغ ‎Jie‏ مستحلبات ‎emulsions‏ (شاملة مستحلبات دقيقة ‎(microemulsions‏ والليبوسومات. سوف تكون الطريقة الأكثر شيوعا للتصنيف والترتيب لخواص أنواع مواد تخفيف التوتر السطحي؛ كل منها الطبيعية والتخليقية؛ والتي تكون باستخدام التوازن الألف للماء/الدهون ‎hydrophile/lipophile balance‏ (1115). تقوم طبيعة المجموعة الآلفة ‎sll‏ ‎hydrophilic group 5‏ (المعروف أيضا ب "الرأس") بتوفير الوسيلة الأكثر فائدة لتصنيف مواد تخفيف التوتر السطحي المفيدة المستخدمة في الصيغ ) ‎Ricger, in “Pharmaceutical Dosage Forms”, Marcel‏ 5 .م ,1988 ‎.(Dekker, Inc., New York, N.Y,‏ )13 لم يتم تأين جزيء ‎sale‏ تخفيف التوتر السطحي؛ سوف يتم تصنيفه بأنه عبارة عن مادة تخفيف التوتر السطحي غير الأيونية. يتم استخدام مادة تخفيف التوتر السطحي غير الأيونية في منتجات صيدلانية 0 وتجميلية وعلى نطاق واسع من قيم درجة الحموضة. بشكل عام تتفاوت قيم التوازن الآلف للماء/الدهون من 2 إلى حوالي 18 بشكل معتمد على بنيتها. تتضمن مادة تخفيف التوتر السطحي غير الأيونية مركبات غير أيونية إستر مثل إيثيلين جليكول مركبات إستر ‎ethylene glycol esters‏ مركبات بروبيلين جليكول إستر ‎cpropylene glycol esters‏ مركبات جليسريل إستر ‎cglyceryl esters‏ مركبات بولي جليسريل إستر ‎cpolyglyceryl esters‏ مركبات سوربيتان إستر ‎esters‏ 011100؛ مركبات سكروز إستر ‎csucrose esters‏ ومركبات إستر معالجة بإيثوكسي ‎La aL ethoxylated esters‏ تضمين مركبات ألكانول أميد ‎alkanolamides‏ وإيثر غير أيونية ‎Jie‏ مركبات ‎Sel‏ من حمض كحولي ‎«fatty alcohol ethoxylates‏
كحولات معالجة ببرويبوكسي ‎alcohols‏ 01000712160 وبوليمرات كتلية ‎block polymers‏ معالجة بإيثوكسي/بروبوكسي أيضا في هذه الفئة. هناك مواد تخفيف ‎gill‏ السطحي من بولي أوكسي إيثيلين عبارة عن أعضاء معروفين من فئة مادة تخفيف التوتر السطحي غير الأيونية. إذا كان جزيء مادة تخفيف التوتر السطحي يحمل شحنة سالبة عند الحل أو التشتيت في الماء؛ يتم تصنيف مادة تخفيف التوتر السطحي بكونه أنيوني. تتضمن مواد تخفيف التوتر السطحي الأنيونية مركبات كريوكسيلات ‎Jie carboxylates‏ صابون» مركبات أسيل اكتيلات ‎cacyl lactylates‏ مركبات أسيل أميد ‎acyl amides‏ من الأحماض الأمينية؛ مركبات إستر من حمض كبربتيك ‎sulfuric acid‏ مثل مركبات ألكيل سلفات ‎alkyl sulfates‏ ومركبات ألكيل سلفات ‎dallas‏ بإيثوكسيلات ‎cethoxylated alkyl sulfates‏ مركبات سلفونات ‎Jie sulfonates‏ ألكيل بنزين سلفونات ‎calkyl benzene sulfonates‏ أسيل آيزقونات ‎acyl‏ ‎cisethionates 0‏ مركبات أسيل تورات ‎acyl taurates‏ وسلفو سكسينات ‎csulfosuccinates‏ وفوسفات. ‎Jia‏ ‏الأعضاء الأهم من مادة تخفيف التوتر السطحي الأنيونية مركبات ألكيل سلفات والمركبات الصابونية. إذا كان جزيء مادة تخفيف التوتر السطحي يحمل شحنة موجبة عند الإذابة أو التشتيت في الماء؛ يتم تصنيف مادة تخفيف التوتر السطحي على أنها كاتيونية. تتضمن مواد تخفيف التوتر السطحي الكاتيونية أملاح أمونيوم ‎quaternary ammonium salts deb)‏ ومركبات أمين معالجة بإيثوكسيلات ‎ethoxylated‏ ‏5 #عصنصه. أملاح الأمونيوم الرباعية هي الأعضاء المستخدمة من هذه الفئة. إذا كان جزيء مادة تخفيف التوتر السطحي يتضمن القدرة على حمل إما شحنة إيجابية أو سلبية؛ يتم تصنيف ‎sale‏ تخفيف التوتر السطحي بكونها ثنائي الألفة. تتضمن مواد تخفيف التوتر السطحي ثنائية الألفة ‎Amphoteric surfactants‏ مشتقات حمض أكربليك؛ مركبات ألكيل أميد مستبدلة ‎substituted‏ ‎calkylamides‏ 17-ألكيل بيتايين ‎N-alkylbetaines‏ وفوسفاتيد ‎.phosphatides‏ ‏0 استخدام مواد تخفيف التوتر السطحي في منتجات عقارية ‎drug products‏ وتمت مراجعة الصيغ في المستحلبات ) ‎Rieger, in “Pharmaceutical Dosage Forms”, Marcel Dekker, Inc., New York, N.Y,‏ ‎p. 285‏ ,1988( يمكن أيضا توفير حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة للاستخدام في طرق الاختراع كصيغ مذيلة. يتم تحديد "المذيلات" هنا كنوع معين من التجميع الجزيئي حيث يتم تجهيز الجزيئات متقابلة الزمر ‎amphipathic‏ ‎molecules 5‏ في بنية كروية بحيث تكون كل الأجزاء الكارهة تلماء ‎hydrophobic portions‏ موجهة إلى
الداخل؛ بما يترك الأجزاء الآلفة للماء بشكل ملامس للطور المائي ‎aqueous phase‏ المحيط. تتواجد التجميعة العكسية إذا كانت البيئة كارهة للماء . يمكن تحضير الصيغة المخلوطة المذيلة المناسبة للتوصيل خلال الأغشية عبر الجلدية ‎transdermal‏ ‎membranes‏ بواسطة خلط المحلول المائي ‎aqueous solution‏ من حمض رببونيكلوبك ثنائي الجديلة؛ ‎Cs‏ ‏5 إلى ‎Cn‏ ألكيل سلفات معدني قلوي ‎calkali metal Cs to Caz alkyl sulphate‏ ومركبات تكوين مذيلات. تتضمن مركبات تكوين المذيلات ليسيثين 16610 حمض هبالوروتيك ‎<hyaluronic acid‏ أملاح مقبولة صيدلانيا من حمض هيالورونيك» حمض جليكوليك ‎glycolic acid‏ حمض لاكتيك ‎dactic acid‏ مستخلص كاموميل ‎(chamomile extract‏ مستخلص خيار» حمض أوليك ‎oleic acid‏ حمض ‎acid lg}‏ 11001616 حمض لينوليتيك ‎clinolenic acid‏ مونو أولين ‎¢monoolein‏ مونو أوليات ‎cmonooleates‏ مونولورات ‎<u) cmonolaurates 0‏ بذرة لسان الثور ء ‎cu)‏ زهرة الربيع»؛ مينثول ‎cmenthol‏ تراي هيدروكسي أوكسو كولانيل جليسين ‎trihydroxy oxo cholanyl glycine‏ وأملاح مقبولة صيدلانيا منهاء جليسرين ‎cglycerin‏ بولي جليسرين ‎¢polyglycerin‏ ليسين ‎clysine‏ بولي ليسين ‎«polylysine‏ تراي أولين ‎triolein‏ مركبات بولي أوكسي إيثيلين ‎polyoxyethylene ethers yi‏ ونظائر منهاء بولي دوكانول ألكيل ‎polidocanol alkyl ju)‏ ونظائرهاء؛ كينو ديوكسي كولات ‎cchenodeoxycholate‏ ديوكسي كولات ‎«deoxycholate‏ وخلطات مما سبق. يمكن إضافة مركبات تكوين المذيلة ‎micelle forming compounds‏ في الوقت ذاته أو بعد إضافة ألكيل سلفات القلوي المعدني ‎alkali metal alkyl sulphate‏ سوف تكون المذيلات المخلوطة مع أي نوع أساسا من خلط المكونات ولكن مع الخلط القوي لتوفير مذيلات ذات حجم أصغر. في أحدى الطرق يتم تحضير تركيبة مذيلة أولى ‎lly‏ تحتوي على حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة وعلى الأقل ألكيل سلفات معدني قلوي. بعد ذلك يتم خلط التركيبة المذيلة الأولى مع على الأقل 3 مركبات تكوين 0 مذيلات لتكوين تركيبة مذيلة مخلوطة. في طريقة أخرى» يتم تحضير التركيبة المذيلة بواسطة خلط حمض رببونيكلويك ‎JUS‏ الجديلة؛ ألكيل سلفات معدني قلوي وعلى الأقل واحد من مركبات تكوين مذيلات؛ متبوعة بإضافة مركبات تكوين المذيلات المتبقية؛ مع الخلط القوي. يمكن إضافة فينول ‎Phenol‏ أو «-كرسول ‎m-cresol‏ إلى التركيبة المذيلة المخلوطة لتثبيت الصيغة وحمايتها في مقابل النمو البكتيري. بشكل بديل يمكن إضافة فينول أو «-كريسول مع مكونات تكوين 5 المذيلات. يمكن أيضا إضافة عامل صنوي ‎isotonic agent‏ مثل جليسرين أيضا بعد تكوين التركيبة المذيلة ‎micellar composition‏ المخلوطة.
لتوصيل الصيغة المذيلة ‎Sa AS‏ وضع الصيغة داخل وسيلة توزيع أيروسول ‎aerosol dispenser‏ ودتم شحن وسيلة التوزيع بمادة دافعة ‎propellant‏ المادة الدافعة؛ الموجودة تحت ضغط؛ موجودة في صورة سائلة في وسيلة التوزيع. يتم تعديل نسب المكونات بحيث تصبح الأطوار المايئة والدفاعة واحدة؛ أي؛ يكون هناك طور واحد. إذا كان هناك اثنين من الأطوار» من الضروري هز وسيلة التوزيع قبل تشتيت ‎ga‏ ‏5 من المحتويات؛ ‎ie‏ خلال قيمة مقاسة. يتم دفع الجرعة الموزعة ‎dispensed dose‏ من العامل الصيدلاني ‎pharmaceutical agent‏ من القيمة المقاسة في رذاذ دقيق. يمكن أن تتضمن المواد الدفاعة ‎Propellants‏ مركبات كلورو فلوروكريون تحتوي على هيدروجين ‎chydrogen-containing chlorofluorocarbons‏ مركبات فلوروكريون تحتوي على هيدروجين»؛ داي ميثيل إيثر ‎Ji) (shag dimethyl ether‏ إيثر ‎ether‏ 1رطاءنل. في نماذج معينة؛ يمكن استخدام 1348 ‎HFA‏ ‏0 )1¢1¢1¢2 تترا فلورو إيثان ‎tetrafluoroethane‏ 1,1,1,2). يمكن تحديد التركيزات المحددة من المكونات الضرورية بواسطة الفحص المستقيم نسبيا. للإمتصاص خلال التجاويف الفمي ‎coral cavities‏ غالبا ما يكون مطلويا زيادة؛ مثلاء على الأقل بمقدار الضعف أو الضعفين؛ الجرعة للحقن أو الإعطاء خلال المسار المعدي المعوي ‎٠88500106650001 tract‏ أ. الجسيمات الدهنية ‎Lipid particles‏ يمكن تغليف أحماض رببونيكلويك مزدوجة الجديلة؛ مثلاء عوامل حمض رببونيكلويك ثنائى الجديلة في الاختراع ‎LIS‏ في الصيغة الدهنية؛ مثلاء جسيم دهني بحجم ‎ill‏ أو جسيم حمض نووي-دهن ‎nucleic‏ ‎Al acid-lipid particle‏ . حسب الاستخدام هناء يشير المصطلح "1170 إلى جسيم حمض نووي-دهن مستقر. يحتوي جسيمات دهنية بحجم النانو بشكل مثالي على دهن كاتيوني؛ دهن غير كاتيوني» ودهن يمنع تراكم الجسيم ‎Ole)‏ ‏20 مترافق بولي إيثيلين جليكول-دهن). جسيمات دهنية بحجم النائو مفيدة جدا للإعطاء الجهازي؛ حيث تبين أعمار ممتدة داخل الدورة الدموية بعد الحقن عبر الوريدي ‎intravenous injection‏ وتتراكم عند المواقع الطرفية ‎distal sites‏ (مثلا؛ المواقع المنفصلة ماديا عن موقع الإعطاء). تتضمن جسيمات دهنية بحجم النانو ‎Allg "pSPLP‏ تتضمن معقد مكثف عامل ‎agent‏ ع00010005108-حمض نووي مغلف كما هو مذكور في المنشور الدولى للبراءة الدولية 03683/00 رقم. تتضمن الجسيمات وفقا للاختراع الحالي بشكل مثالي 5 قطر متوسط حوالي 50 نانومتر إلى حوالي 0 تانومتر؛ بشكل ‎Judd‏ حوالي 60 نانومتر إلى حوالي 130 نانومتر» بشكل أمثل حوالي 70 نانومتر إلى حوالي 110 نانومتر؛ بشكل مثالي حوالي 70 نانومتر إلى
حوالي 90 نانومتر» وهي غير سامة أساسا. علاوة على ذلك؛ الأحماض النووية عند وجودها في جسيمات الحمض النووي-الدهن وفقا للاختراع الحالي مقاومة في المحلول المائي للتدهور مع نيوكلياز. تم الكشف عن جسيمات حمض نووي-دهن وطريقة تحضيرها في»؛ ‎Ole‏ براءات الاختراع الأمريكية أرقام 7" 5981501؛ ¢6¢534¢484 ¢6¢586¢410 ¢6¢815¢432 المنشور الأمريكي رقم 0324120/2010 و في المنشور الدولى للبراءة الدولية رقم 40964/96.
في أحد النماذج؛ سوف تكون نسبة الدهن إلى العقار (نسبة كتلة/كتلة) ‎lie)‏ نسب دهن إلى حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة) في نطاق من حوالي 1:1 إلى حوالي 50:1؛ من حوالي 1:1 إلى حوالي 25:1 من حوالي 3:1 إلى حوالي 15:1؛ من حوالي 4:1 إلى حوالي 10:1؛ من حوالي 5:1 إلى حوالي 9:1؛ أو حوالي 6:1 إلى حوالي 9:1. تم أيضا ذكر النطاقات الوسيطة في النطاقات المذكورة أعلاه أيضا كجزء
من الاختراع. يمكن أن يكون الدهن الكاتيوني» مثلاء عبارة عن 11087-داي أوليل -18017-داي ميثيل أمونيوم كلوريد ‎«(DODAC) N,N-dioleyl-N,N-dimethylammonium chloride‏ 11:17-داي ستيريل -11011-داي ميثيل أمونيوم بروميد ‎N.N-distearyl-N,N-dimethylammonium bromide‏ (ضفصط) لا -(2:3-داي أوليويل أوكسي )بروبيل ‎(gli NeNN=(‏ ميثيل أمونيوم كلوريد ‎((DOTAP)‏ 17-(1 -(2:3-داي أوليل 5 أوكسي )بروبيل ‎(shi NNeN=(‏ ميثيل أمونيوم كلوريد ‎dioleoyloxy)propyl)-N,N.N-‏ -2,3)- 17-0 ‎((DOTMA) trimethylammonium chloride‏ 11:17-داي ‎ie‏ -2:3-داي أوليل أوكسي )بروبيل أمين ‎«((DODMA) N,N-dimethyl-2,3- dioleyloxy)propylamine‏ 162-داي_لينوليل أوكسي ‎SI NN-‏ ‎(ise‏ أمينو برويان ‎¢(DLinDMA) 1,2-DiLinoleyloxy-N,N-dimethylaminopropane‏ 201-داي لينولينيل أوكسي -1117-داي ميثيل أمينو برويان ‎1.2-Dilinolenyloxy-N,N-dimethylaminopropane‏ ‎((DLenDMA) 0‏ 1:2-داي _لينوليل كاريامويل أوكسي -3-داي_ ميثيل أمينو بروبان -1,2 ‎(DAP-C-DLin) Dilinoleylcarbamoyloxy-3-dimethylaminopropane‏ 102-داي لينولي أوكسي - 3-(داي ميثيل أمينو )أسيتوكسي برويان ‎1.2-Dilinoleyoxy-3-(dimethylamino)acetoxypropane‏ ‏(«نا0-0م0)؛ 1:,2-داي ‎Jed‏ أوكسي -3-مورفولينويرويان ‎1.2-Dilinoleyoxy-3-‏ ‎¢(MA-DLin) morpholinopropane‏ 1:2-داي لينوليويل -3-داي ميثيل أمينو برويان -1,2 ‎¢(DLinDAP) Dilinoleoyl-3-dimethylaminopropane 5‏ 1:2-داي_لينوليل تيو -3-داي ميثيل أمينو برويان ‎¢(S-DMA-DLin) 1,2-Dilinoleylthio-3-dimethylaminopropane‏ 1-لينوليويل -2-لينوليل
أوكسي -3-داي ميثيل أمينو ‎—DLin) 1-Linoleoyl-2-linoleyloxy-3-dimethylaminopropane (big‏ ‎((DMAP-2‏ ملح 1:2-داي لينوليل أوكسي -3-تراي ميثيل أمينو برويان كلوريد ‎1.2-Dilinoleyloxy-‏ ‎3-trimethylaminopropane chloride salt‏ (مناط-1.711©)؛ ملح 162-داي لينوليويل -3-تراي ‎Jie‏ ‏أمينو برويان كلوريد ‎«(DLin-TAP.CI) 1,2-Dilinoleoyl-3-trimethylaminopropane chloride salt‏ 2؛:1-داي لينوليل أوكسي -3-(10-ميثيل بيبيرازيتو)برويان ‎1.2-Dilinoleyloxy-3-(N-‏ ‎methylpiperazino)propane‏ (منآاط -11072) أو 3-(111-داي لينوليل أمينو -102-برويان داي ول ‎«(DLinAP) 3-(N,N-Dilinoleylamino)-1,2-propanediol‏ 3-(11:١1-داي‏ أوليل أمينو 12-4- برويان ديو ‎«(DOAP) 3-(N,N-Dioleylamino)-1,2-propanedio‏ 102-داي لينوليل أوكسو -3-(11,11-2-داي ميثيل أمينو )إيثوكسي برويان ‎1,2-Dilinoleyloxo-3-(2-N,N-dimethylamino)ethoxypropane‏
‎«(DMA-EG-DLin) 0‏ 613-142( لينولينيل أوكسي ‎Ga NN=‏ ميثيل أمينو برويان» 262-داي لينوليل -4-داي ميثيل أمينو ميثيل -[103]-داي أوكسولان ‎2,2-Dilinoleyl-4-dimethylaminomethyl-[1,3]-‏ ‎(DMA-K-DLin) dioxolane‏ أو نظائر منهاء ‎GIa-NeN—(aS6¢s5¢aR3)‏ ميثيل -2:2-داي ((21229)-أوكتا ديكا-9.12-داي ينيل)تترا هيدرو -113ه-سيكلو بنتا [13[]4]داي أوكسول -5-أمين ‎(3aR,5s,6aS)-N,N-dimethyl-2,2-di((9Z,12Z)-octadeca-9,12-dienyl)tetrahydro-3aH-‏
‎«(00ALNI1) cyclopenta[d][1,3]dioxol-5-amine 5‏ (231,22829:20)-هبتا تراي أكونتا — 1 تترا ن-19-يل 4-زداي ميثيل أمينو )بيوتانوات»؛ 161-(2-(4-(2-((2-(بيس(2- هيدروكسي دوديسيل)أمينو )إيثيل )(2-هيدروكسي دوديسيل)أمينو )إيثيل )بيبيرازين -1-يل)إيثيل آزان داي يل)داي دوديكا «-2-ول -2() ‎1,1'-(2-(4-(2-((2-(bis(2-hydroxydodecyl)amino)ethyl‏ ‎G Tech) hydroxydodecyl)amino)ethyl)piperazin-1-yl)ethylazanediyl)didodecan-2-ol‏ 1( ¢ أو
‏0 خليط مما سبق. يمكن أن يتضمن الدهن الكاتيوني من حوالي 720 بالمول إلى حوالي 750 بالمول أو حوالي 40 7 بالمول من الدهن الكلي الموجود في الجسيم. في بعض النماذج؛ يمكن استخدام مركب 2:2-داي لينوليل -4-داي ميثيل أمينو إيثيل -[163]-داي أوكسولان ‎2,2-Dilinoleyl-4-dimethylaminoethyl-[1,3]-dioxolane‏ لتحضير جسيمات دهن-الحمض النووي الريبوزي أحادي الجديلة بحجم النانو.
‏5 في بعض النماذج؛ يتضمن جسيم دهن-الحمض النووي الريبوزي أحادي الجديلة 740 2 2-داي لينوليل -4-داي ميثيل أمينو إيثيل -[163]-داي أوكسولان ‎2-Dilinoleyl-4-dimethylaminoethyl-[1,3]-‏ ,2
‎:dioxolane‏ 710 داي ‎(hg yin‏ فوسفاتيديل كولين ‎:(DSPC) distearoylphosphatidylcholine‏ 740 كوليسترول: 710 ©-بولى ايثيلين جليكول-دى أوه ‎al‏ جى ‎DOMG‏ )7 بالمول) مع حجم جسيم 63.0 + 0 نانومتر ونسبة الحمض النووي الريبوزي أحادي الجديلة/دهن تبلغ 0.027. يمكن أن يكون الدهن القابل للتأين/غير الكاتيوني عبارة عن دهن أنيوني أو دهن محايد شاملا؛ ولكنها ‎eS‏ مقيدة .ب .داي ستيرويل فوسفاتيديل كولين؛ ‏ داي أوليويل فوسفاتيديل كولين ‎gla «(DOPC) dioleoylphosphatidylcholine‏ بالميتويل فوسفاتيديل كولين» داي أوليويل فوسفاتيديل جليسرول ‎«(DOPG) dioleoylphosphatidylglycerol‏ داي بالميتويل فوسفاتيديل جليسرول ‎«(DPPG) dipalmitoylphosphatidylglycerol‏ داي أوليويل -فوسفاتيديل إيثانول أمين؛ بالميتويل أوليويل فوسفاتيديل كولين ‎«(POPC) palmitoyloleoylphosphatidylcholine‏ بالميتويل أوليويل فوسفاتيديل إيثانول 0 أمين ‎«(POPE) palmitoyloleoylphosphatidylethanolamine‏ داي أوليويل - فوسفاتيديل إيثانول أمين 4-(11-مالميدو ميثيل ) -سيكلو هكسان-1- كريوكسيلات ‎dioleoyl- phosphatidylethanolamine 4-(N-‏ ‎¢(mal-DOPE) maleimidomethyl)-cyclohexane-l- carboxylate‏ داي بالميتويل فوسفاتيديل إيثانول أمين ‎(gla ((DPPE) dipalmitoyl phosphatidyl ethanolamine‏ ميريستويل فوسفو إيثانول أمين ‎«(DMPE) dimyristoylphosphoethanolamine‏ داي ستيرويل -فوسفاتيديل-إيثانول أمين ‎distearoyl-‏ ‎(DSPE) phosphatidyl-ethanolamine 5‏ 0-16 -مونوميثيل بولي إيثيلين ‎16-O-monomethyl‏ ‎«polyethylene‏ 0-16 -داي ميثيل بولي ‎trans— 1-18 ¢16-O-dimethyl polyethylene (pli)‏ بولي ‎-trans polyethylene (pli‏ 18-1 1 -ستيرويل-2- أوليويل - فوسفاتي دي إيثانول أمين ‎-stearoyl-‏ 1 ‎(SOPE) 2-oleoyl- phosphatidyethanolamine‏ ؛ كوليسترول» أو خليط مما سبق. يمكن أن يكون الدهن غير الكاتيوني من حوالي 5 7 بالمول إلى حوالي 90 7 بالمول؛ حوالي 10 7 بالمول؛ أو حوالي 58 7# 0 بالمول إذا تم تضمين كوليسترول؛ من الدهن الكلي الموجود في الجسيم. يمكن أن يكون الدهن المترافق الذي يثبط تراكم جسيمات؛ ‎Sle‏ بولي إيثيلين جليكول-دهن شاملة؛ بدون قيد؛ بولي إيثيلين جليكول-داي أسيل جليسرول ‎(DAG) diacylglycerol‏ بولي إيثيلين جليكول -داي ألكيل أوكسي بروبيل ‎(DAA) dialkyloxypropyl‏ بولي إيثيلين جليكول-دهن فوسفو؛ بولي إيثيلين جليكول- سيراميد ‎(Cer) ceramide‏ أو خليط مما سبق. يمكن أن يكون ترافق بولي إيثيلين جليكول-داي ألكيل أوكسي بروبيل؛ مثلاء عبارة عن بولي إيثيلين جليكول-داي لوريل أوكسي بروبيل ‎dilauryloxypropyl‏ ‏(©)؛ بولي إيثيلين جليكول-داي ميريستيربل أوكسي ‎(Cis) dimyristyloxypropyl Jug‏ بولي إيثيلين
جليكول-داي بالميتيل أوكسي ‎(Cis) dipalmityloxypropyl Jug‏ » أو بولي إيثيلين جليكول-داي ستيربل أوكسي ‎distearyloxypropyl dus x‏ (©]ه). يمكن أن يبلغ الدهن المترافق الذي يمنع تراكم الجسيمات من 0 بالمول إلى حوالي 720 بالمول أو حوالي 2 # بالمول من الدهن الكلي الموجود في الجسيم. في بعض النماذج؛ يتضمن جسيم الحمض النووي-الدهن ‎Load‏ كوليسترول عند؛ ‎Die‏ حوالي 10 7 بالمول إلى حوالي 60 7 بالمول أو حوالي 48 # بالمول من الدهن الكلي الموجود في الجسيم. في أحد النماذج» يمكن استخدام )1487 ‎lipidoid 1098-4110 (MW‏ (انظر البراءة الأمريكية 3 والتي تم دمجها هنا بالإشارة إليها كمرجع)؛ كوليسترول ‎«(Aldrich=Sigma)‏ وبولي إيثيلين جليكول-سيراميد سى 16 ‎Ceramide C16 C16‏ (دهون ‎(Avanti Polar‏ لتحضير جسيمات دهن- حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة بحجم النانو ‎gl)‏ جسيمات دهنية بحجم النانو 01). يمكن تحضير 0 محاليل من كل منها في إيثانول ‎ethanol‏ كما يلي : أن دى 98 01098 133 ملجم/ملل؛ كوليسترول» 25 ملجم/ملل؛ بولي إيثيلين جليكول-سيراميد ‎«C16‏ 100 ملجم/ملل. 10098؛ كوليسترول؛ ‎Kang‏ بعد ذلك دمج محلول بولي إيثيلين جليكول-سيراميد ‎C16‏ بنسبة مولارية؛ ‎Sie‏ 42:48:10. يمكن هخلط محلول الدهن المدمج ‎combined lipid solution‏ مع حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة ‎Ole) Ale‏ في صوديوم أسيتات ‎sodium acetate‏ بدرجة حموضة 5( بحيث يكون تركيز الإيثانول النهائي حوالي 745-35 ويبلغ 5 تركيز صوديوم أسيتات النهائي حوالي 300-100 مل مولار. تشكل جسيمات دهن-حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة بحجم النانو بشكل مثالي الخلط الآني. بشكل معتمد على توزيع حجم الجسيم المطلوب؛ ‎(Sa‏ بثق الجسيم المبثوق بحجم النانو خلال غشاء بولي كريونات ‎Js) polycarbonate membrane‏ قطع 100 نانومتر) باستخدام؛ ‎Sle‏ وسيلة بثق حرارية برميلية ‎Lipex Jie cthermobarrel extruder‏ ‎(EL (Northern Lipids, Inc) Extruder‏ بعض الحالات»؛ يمكن استبعاد خطوة البثق. يمكن تحقيق إزالة 0 الإيثانول وتبديل المحلول المنظم الآنية ‎simultaneous buffer‏ بواسطة» مثلاء ‎shall‏ أو ترشيح التدفق التماسي ‎tangential flow filtration‏ يمكن مبادلة المحلول المنظم مع؛ ‎lie‏ محلول ملحي منظم بفوسفات عند حوالي بدرجة حموضة 7 ‎Ole‏ حوالي بدرجة حموضة 0.9 حوالي بدرجة حموضة 7.0 حوالي بدرجة حموضة 7.1 حوالي بدرجة حموضة 7.2 حوالي بدرجة حموضة 7.3 أو حوالي بدرجة حموضة 7.4
0 Nee
NNN J NT 1 SN 0 1 ‏رد صر“‎ ‏اك‎ den
NNN ‏مح صخ‎ 0 NSIS أيزومر 110981 الصيغة 1 تم وصف الصيغ جسيمات دهنية بحجم النانو ‎Die (OT‏ في منشور الطلب الدولي رقم 042973/2008؛ والتي تم دمجها هنا بالإشارة إليها كمرجع. تم وصف الصيغ المثالية الإضافية الدهنية حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة في الجدول 1. الجدول 1. الصيغ الدهنية المثالية دهن كاتيوني/دهن غير كاتيوني/كوليسترول/مترافق ‏ دهن بولي إيثيلين دهن قابل للتأين/كاتيوني جليكول دهن:نسبة الحمض النووي الرربوزي أحادي الجديلة 2 -داي_لينوليل أوكسي -11087-داي_ميثيل أمينو برويان/داي بالميتويل فوسفاتيديل كولين/كوليسترول/يولي . إيثيلين ‏ جليكول- ‎qnaLp.‏ 2011-داي_لينولينيل أوكسي ‎Gr NN=‏ كاريامويل-162-داي ميريستيريل أوكسي بروييل ‏1 ميثيل أمينو برويان أمين ‎carbamoyl-1,2-‏ ‎(cDMA) dimyristyloxypropylamine‏ )1.4/34.4/7.1/57.1( دهن:الحمض النووي الرببوزي أحادي الجديلة ~ 7:1 ‏2-داي لينوليل -4-داي ميثيل أمينو | 22-داي لينوليل -4-داي ميثيل أمينو إيثيل - ب إيثيل -[1:3]-داي أوكسولان -2,2 | [1:3]-داي أوكسولان/داي بالميتويل فوسفاتيديل
دهن كاتيوني/دهن غير كاتيوني/كوليسترول/مترافق دهن بولي إيثيلين دهن قابل للتأين/كاتيوني جليكول دهن:نسبة الحمض النووي الرببوزي أحادي الجديلة ‎Dilinoleyl-4-dimethylaminoethyl-‏ كولين/كوليسترول/يولي إيثيلين جليكول- ‎(XTC) [1,3]-dioxolane‏ كاربامويل-1+2-داي ميرستيريل أوكسي بروبيل أمين 1.4/34.4/7.1/57.1 دهن:الحمض النووي الرببوزي أحادي الجديلة ~ 7:1 2 -داي لينوليل -4-داي ميثيل أمينو إيثيل -
[13]-داي أوكسولان/داي ستيرويل فوسفاتيديل ‎oo‏ كولين/كوليسترول/بولي إيثيلين جليكول- داي ‎LNPO5‏ 2 داي_لينوليل ‎call‏ ميئل أمينو داي ميريستويل .| جليسرول ‎didimyristoyl‏ ‏إيثيل -[1.3]-داي أوكسولان ‎glycerol (DMG)‏ 3.5/31.5/7.5/57.5 دهن:الحمض النووي الرببوزي أحادي الجديلة ~ 6:1 2 -داي لينوليل -4-داي ميثيل أمينو إيثيل -
[13]-داي أوكسولان/داي ستيرويل فوسفاتيديل 2-داي لينوليل -4-داي ميثيل أمينو كولين/كوليسترول/بولي إيثيلين جليكول داي داي ‎١‏ | ليثيل -[13]داي أوكسولان ميريستويل جليسرول 3.5/31.5/7.5/57.5 دهن:الحمض النووي الرببوزي أحادي الجديلة ~ 11:1
دهن كاتيوني/دهن غير كاتيوني/كوليسترول/مترافق ‏ دهن بولي إيثيلين دهن قابل للتأين/كاتيوني جليكول دهن:نسبة الحمض النووي الرببوزي أحادي الجديلة 2 -داي لينوليل -4-داي ميثيل أمينو إيثيل -
[13]-داي أوكسولان/داي ستيرويل فوسفاتيديل 2-داي لينوليل -4-داي ميثيل أمينو كولين/كوليسترول/بولي إيثيلين جليكول داي داي "0 إيثيل -[3: 1]-داي أوكسولان ميريستويل جليسرول 1.5/31/7.5/60 دهن:الحمض النووي الرببوزي أحادي الجديلة ~ 6:1 2-داي لينوليل -4-داي ميثيل أمينو إيثيل -
[13]-داي أوكسولان/داي ستيرويل فوسفاتيديل 2-داي لينوليل -4-داي ميثيل أمينو كولين/كوليسترول/بولي إيثيلين جليكول داي داي ليث -[1:3] كاي أوكسولان مبريستويل جليسرول 1.5/31/7.5/60 دهن:الحمض النووي الرببوزي أحادي الجديلة ~ 11:1 2-داي لينوليل -4-داي ميثيل أمينو إيثيل -
[13]-داي أوكسولان/داي ستيرويل فوسفاتيديل 2-داي لينوليل -4-داي ميثيل أمينو كولين/كوليسترول/بولي إيثيلين جليكول داي داي ‎١‏ ا ليثيل ‎Gell‏ أوكسولان ميريستويل جليسرول 1.5/38.5/10/50 دهن:الحمض النووي الرببوزي أحادي الجديلة 10:1
دهن كاتيوني/دهن غير كاتيوني/كوليسترول/مترافق دهن بولي إيثيلين دهن قابل للتأين/كاتيوني جليكول دهن:نسبة الحمض النووي الرببوزي أحادي الجديلة (3طه؛ 5 256)-1111-داي ‎Mise‏ -262-داي ‎gla NeN—(aS6¢s5¢aR3)‏ ميثيل - } ‎i‏ ً . ((21279)- أوكتا ديكا -9:12-داي ينيل)تترا 2-داي ((212:29)-أوكتا ‎Sa‏ 7 هيدرو -113ه-سيكلو بنتا [103[]0إداي أوكسول 2 -داي ينيل)تترا هيدرو ‎—aH3—-‏ ‎die gloss‏ فوسفاتيديل سيكلو بنتا ‎S13]‏ أوكسول -5- : 0 | كولين/كوليسترول/بولي إيثيلين جليكول داي داي أمين ‎(3aR,5s,6aS)-N,N-dimethyl-‏ ) ‎2.2-di((9Z,127)-octadeca-9,12-‏ ميريستويل جليسرول ‎dienyl)tetrahydro-3aH-‏ 1.5/38.5/10/50 ‎cyclopenta[d][1,3]dioxol-5-amine‏ ] ‎(O0ALNT)‏ دهن:الحمض النووي الريبوزي أحادي الجديلة 10:1 (26 1.22879 23 -هبتا تراي أكونتا — 9*1 --تترا ن-19-يل 4-(داي_ميثيل : أميذ تانوات/داي ست فوسفات ‎ds na (231228.29.26)‏ )بيوتانوات/داي ‎de‏ فوسفاتيديل ‎uli iad oS‏ اي دا ‎Lapin‏ ]156092831 ن-وزيل 04 | كولين/كوليسترول/يولي إيثيلين جليكول <اي داي و تويل جليسرول ميثيل أمينو )بيوتانوات ميريستويل جليسروا 1.5/38.5/10/50 دهن:الحمض النووي الرببوزي أحادي الجديلة 10:1 1-(2-(4-(2-((2- (بيس(2-هيدروكسي 101-(2-(4-(2-((2- (بيس (2- : :ّ دوديسيل)أمينو | )إيثيل | )(2-هيدروكسي ‎١ 2‏ هيدروكسي دوديسيل)أمينو )إيثيل )(2- ٍِ ٍِ دوديسيل)أمينو )إيثيل )بيبيرازين-1-يل)إيثيل هيدروكسي | دوديسيل)أمينو | )ليثيل ‎١‏ . ‎Obl‏ داي يل)ديدوديكان -2-ول/داي ستيرويل
دهن كاتيوني/دهن غير كاتيوني/كوليسترول/مترافق ‏ دهن بولي إيثيلين دهن قابل للتأين/كاتيوني جليكول دهن:نسبة الحمض النووي الرببوزي أحادي الجديلة )بيبيرازين-1-يل)إيثيل . ‎oT‏ داي | فوسفاتيديل كولين/كوليسترول/بولي إيثيلين يل)ديدوديكان -2-ول جليكول داي داي ميريستويل جليسرول 1.5/38.5/10/50 دهن:الحمض النووي الرببوزي أحادي الجديلة 10:1 2-داي لينوليل -4-داي ميثيل أمينو إيثيل -
[13]-داي أوكسولان/داي ستيرويل فوسفاتيديل 2-داي لينوليل -4-داي ميثيل أمينو كولين/كوليسترول/بولي إيثيلين جليكول داي داي ‎١‏ ينيل 13 أوصولان ميريستويل جليسرول ‎1.5/38.5/10/50 ‏دهن:الحمض النووي الرببوزي أحادي الجديلة: ‎33:1 ‏(23102282926)-هبتا. ‎gly‏ أكونتا- ‏1 --تترا ن-19-يل 4-زداي_ميثيل (231:228:29:26)-هبنا ترلى أكون | أمينو . )بيوتانوات/داي _ ستيرويل ‏ فوسفاتيديل ‎np‏ | 6902831-سن ن-وزيل بوي كولين/_كوليسترول/بولي إيثيلين جليكول داي ‏ميثيل أمينو )بيوتانوات داي ميريستويل جليسرول ‎57/701570 ‏دهن:الحمض النووي الرببوزي أحادي الجديلة: ‎11:1
دهن كاتيوني/دهن غير كاتيوني/كوليسترول/مترافق دهن بولي إيثيلين دهن قابل للتأين/كاتيوني جليكول دهن:نسبة الحمض النووي الرببوزي أحادي الجديلة (23102282926)-هبتا. ‎gly‏ أكونتا- 1 -تترا ن-19-يل 4-ز(داي_ميثيل أمينو )بيوتانوات/داي ستيرويل فوسفاتيديل ‎gs aa (231228.29.76)‏ كولين/كوليسترول/بولي إيثيلين جليكول.داي |15-6:92831 ن-وزسيل بوي ‎fie]‏ جليسرول ‎JSG) distyryl glycerol‏ ميثيل أمينو )بيوتانوات ١-أسيتيل‏ جالاكتوز أمين-بولي إيثيلين جليكول- داي ستيريل جليسرول 0.5/4.5/35/10/50 دهن:الحمض النووي الرببوزي أحادي الجديلة: 11:1 (23102282926)-هبتا. ‎gly‏ أكونتا- 1 -تترا ن-19-يل 4-ز(داي_ميثيل (231:22829:26)-هبنا ‎|g‏ )ببوتانوات/داي . ستبرويل ‏ فوسفاتيديل 6 | 15-6:92831 ن-وزيل 4 9 كولين/كوليسترول/بولي إيثيلين جليكول اي داي ميثيل أمينو )بيوتانوات ميريستويل جليسرول 1.5/38.5/10/50 دهن:الحمض النووي الرببوزي أحادي الجديلة: 7:1 (2312282926)-هبتا ‎ly‏ أكونتا- | (23102282926)-هبتا. ‎gly‏ أكونتا- 17 69:28:311-تترا ن-19-يل 4-ز(داي | 6:9:28:31-تترا ن-19-يل 4-ز(داي_ميثيل ميثيل أمينو )بيوتانوات أمينو )بيوتانوات/داي ستيرويل فوسفاتيديل
دهن كاتيوني/دهن غير
كاتيوني/كوليسترول/مترافق دهن بولي إيثيلين دهن قابل للتأين/كاتيوني جليكول
دهن:نسبة الحمض النووي الرببوزي أحادي
الجديلة
كولين/كوليسترول/يولي إيثيلين جليكول داي
ستيريل جليسرول
1.5/38.5/10/50
دهن:الحمض النووي الرببوزي أحادي الجديلة:
10:1
(23102282926)-هبتا. ‎gly‏ أكونتا-
9*1 -تترا ن-19-يل 4-زداي_ميثيل ‎S| a (2312282926)‏ )بيوتانوات/داي _ ‎Goi‏ فوسفاتيديل
‎Lapis‏ | 15-6002831 ن-وزيل و | كولين/كوليسترول/بولي إيثيلين جليكول داي داي
‏ميثيل أمينو )بيوتانوات ميريستويل جليسرول
‎1.5/38.5/10/50
‏دهن:الحمض النووي الرببوزي أحادي الجديلة:
‎12:1
‏(23102282926)-هبتا. ‎gly‏ أكونتا-
‏9*1 -تترا ن-19-يل 4-زداي_ميثيل (231:22829:26)-هبنا ‎|g‏ )ببوتانوات/داي . ستبرويل ‏ فوسفاتيديل
‎LNPI9‏ | 16002831 ن-وزيل برب كولين/كوليسترول/يولي إيثيلين جليكول داي داي
‏ميثيل أمينو )بيوتانوات مبريستويل جليسرول
‎5/35/10/50
‏دهن:الحمض النووي الرببوزي أحادي الجديلة:
‎8:1
دهن كاتيوني/دهن غير كاتيوني/كوليسترول/مترافق ‏ دهن بولي إيثيلين دهن قابل للتأين/كاتيوني جليكول دهن:نسبة الحمض النووي الرببوزي أحادي الجديلة (23102282926)-هبتا. ‎gly‏ أكونتا- 1 -تترا ن-19-يل 4-(داي_ميثيل (23102282926)-هبتا تراي أكونتا- ‎sind‏ )بيوتانوات/داي ستيرويل فوسفاتيديل | 6.9:28:31-تترا 19-0 4-(داي | كولين/كوليسترول/بولي إيثيلين جليكول- 106 ميثيل أمينو )بيوتانوات 1.5/38.5/10/50 دهن:الحمض النووي الرببوزي أحادي الجديلة: 10:1 12-0 /داي ستيرويل فوسفاتيديل كولين/كوليسترول/بولي إيثيلين جليكول داي ‎C12-200 200-12 «| LNP21‏ ستيريل جليسرول 1.5/38.5/10/50 دهن:الحمض النووي الرببوزي أحادي الجديلة: 7:1 2-داي لينوليل -4-داي ميثيل أمينو إيثيل -
[13]-داي أوكسولان/داي ستيرويل فوسفاتيديل 2©-داي لينوليل -4-داي ميثيل أمينو كولين/كوليسترول/بولي إيثيلين جليكول داي اليد -[1:3] اي أوكسولان ‎ian‏ ‏1.5/38.5/10/50 ‏دهن:الحمض النووي الرببوزي أحادي الجديلة: 10:1 ‎:DSPC‏ داي ستيرو يل فوسفا تيد يل كولين
‎(gla :000©‏ بالميتويل فوسفا تيد يل كولين ‎:PEG-DMG‏ بولي إيثيلين جليكول-داي داي ميريستويل جليسرول (14©بولي إيثيلين جليكول؛ أو بولي إيثيلين جليكول14©-) (بولي إيثيلين جليكول مع متوسط وزن بالمول بمقدار 2000) ‎:PEG-DSG‏ بولي إيثيلين جليكول-داي ستيريل جليسرول (18©-بولي إيثيلين جليكول؛ أو بولي إيثيلين جليكول-018) (بولي إيثيلين جليكول مع متوسط وزن بالمول بمقدار 2000( ‎:PEG-cDMA‏ بولي إيثيلين جليكول-كاربامويل-162-داي ميربستيريل أوكسي بروبيل أمين (بولي إيثيلين جليكول مع متوسط وزن بالمول بمقدار 2000) تم وصف صيغ تتضمن ‎SNALP‏ (142-داي لينولينيل أوكسي -107081-داي ميثيل أمينو برويان) في المنشور الدولي رقم 127060/2009؛ وقد تم دمج محتوياتها بالكامل هنا بالإشارة إليها كمرجع. 0 "تم وصف الصيغ التي تتضمن 515-262( لينوليل -4-داي ميثيل أمينو إيثيل -[1:3]-داي أوكسولان؛ ‎lie‏ في المنشور الدولي رقم 088537/2010؛ وقد تم دمج محتوباتها بالكامل هنا بالإشارة ‎Led)‏ كمرجع. تم وصف الصيغ التي تتضمن (231:22829.26)-هبتا تراي أكونتا-6928:31-نترا ن-19-يل 4- (داي ميثيل أمينو )بيوتانوات» مثلاء في منشور براءة الاختراع الأمريكية رقم 0324120/2010؛ المودعة في 10 يونيوء؛ 2010 وقد تم دمج محتوياتها هنا بالإشارة إليها كمرجع. 5 "تم وصف الصيغ التي تتضمن أيه أل أن واى-100 107-100م؛_مثلاء المنشور الدولي رقم 70 وقد تم دمج محتوباتها هنا بالكامل بالإشارة إليها كمرجع. تم وصف الصيغ التي تتضمن 012-200 في المنشور الدولي رقم ¢129709/2010 وقد تم دمج محتوياتها هنا بالكامل بالإشارة إليها كمرجع. 0 14 .تخليق دهون ‎ALE‏ للتأين/كاتيونية يمكن تحضير أي من المركبات؛ ‎lie‏ الدهون الكاتيونية وما شابه؛ المستخدمة في جسيمات حمض نووي- دهن ‎Wy‏ للاختراع بواسطة تقنيات التخليق العضوية المعروفة. يمكن وصف الصيغ المحضرة بواسطة أي من الطرق المعيارية أو الخالية من ‎Full‏ بطرق مشابهة. مثلا؛ يمكن وصف الصيغ بشكل مثالي بواسطة الفحص البصري. يجب أن تكون عبارة عن محاليل شفافة مائلة 5 إلى اللون الأبيض خالية من الركام أو الرواسب. يمكن قياس حجم الجسيم وتوزيع حجم الجسيم لجسيمات دهن بحجم النانو بواسطة تشتيت الضوء باستخدام؛ مثلاء ‎«Malvern) Malvern Zetasizer Nano ZS‏
‎(USA‏ يجب أن تكون الجسيمات بحجم حوالي 300-20 نانومتر؛ ‎Jie‏ 100-40 نانومتر في الحجم. يجب أن يكون توزيع حجم الجسيم أحادي النمط. يتم تقدير تركيز حمض رببونيكلوبك ثنائي الجديلة الكلي في الصيغة؛ بالإضافة إلى ‎gall‏ المحتجز ‎centrapped fraction‏ باستخدام فحص استبعاد الصبغة. يمكن حضانة ‎die‏ حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة المصاغة مع صبغة ربط الحمض النووي الريبوزي؛ ‎die‏ ‏د ‎(Molecular Probes) Ribogreen‏ في وجود أو غياب ‎sale‏ تخفيف التوتر السطحي المعيقة ‎disrupting‏ ‎surfactant‏ للصيغة؛ ‎Triton®-X100 70.5 Die‏ يمكن تحديد حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة الكلية في الصيغة بواسطة الإشارة من العينة التي تحتوي على مادة تخفيف التوتر السطحي؛ نسبة إلى المنحنى المعياري ‎curve‏ 512000:0. يتم تحديد الجزءٍ المحتجز بواسطة استبعاد ‎(gine‏ حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة الحر (المقاس بواسطة إشارة في غياب مادة تخفيف التوتر السطحي) من محتوى حمض ريبونيكلويك
0 ثائي الجديلة الكلي. تبلغ النسبة المحتجزة من حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة بشكل مثالي >785. بالنسبة لصيغة 162-داي لينولينيل أوكسي -17087-داي ميثيل أمينو بروبان؛ يبلغ حجم الجسيم على الأقل 0 نانومتر» 40 نانومتر» 50 نانومتر» 60 نانومتر» 70 نانومتر» 80 نانومتر» 90 نانومتر» 100 ناتومتر؛ 110 نانومتر؛ أو 120 نانومتر. يبلغ النطاق المناسب بشكل مثالي 50 نانومتر إلى 110 نانومتر؛ 60 نانومتر إلى 100 نانومترء أو 80 نانومتر إلى 90 نانومتر.
تتضمن التركيبات والصيغ للإعطاء الفمي مساحيق أو حبيبات أو جسيمات دقيقة أو جسيمات بحجم النانو أو ملقات أو محاليل في ماء أو أوساط غير مائية ‎non-aqueous media‏ أو كبسولات أو كبسولات جل أو أكياس أو أقراص أو حبوب دقيقة. يمكن أن تكون هناك حاجة لمادة إكساب قوام أو عوامل تنكيه ‎flavoring‏ ‎agents‏ أو مخففات أو مستحلبات أو وسائل تشتيت ‎dispersing aids‏ أو وسائل ربط 01008:8. في بعض النماذج؛ الصيغ الفمية هي تلك حيث يتم تحديد أحماض رببونيكلويك مزدوجة الجديلة الموضحة في الاختراع
0 في ترافق مع واحد أو أكثر مواد تخفيف التوتر السطحي محسنة للاختراق ومواد خالبة. تتضمن مواد تخفيف التوتر السطحي المناسبة الأحماض الدهنية أو مركبات إستر أو أملاح منهاء الأحماض الصفراوية أو أملاح . منها.. تتضمن الأحماض الصفاوية/الأملاح ‎Abid)‏ حمض كينوديوكسي كوليك ‎(CDCA) chenodeoxycholic acid‏ و حمض أورسوديوكسي كينوديوكسي كوليك ‎(UDCA) ursodeoxychenodeoxycholic acid‏ حمض كوليك؛ حمض ديهيدرو كوليك ‎dehydrocholic‏
‎acid 5‏ حمض ديوكسي كوليك ‎cdeoxycholic acid‏ حمض جلوكوليك ‎cglycholic acid‏ حمض ‎«lla‏ ‏حمض جليكوديوكسي كوليك ‎cglycodeoxycholic acid‏ حمض توروكوليك ‎ctaurocholic acid‏ حمض
توروديوكسي كوليك ‎ctaurodeoxycholic acid‏ حمض صوديوم تورو-2425-داي هيدرو -فيوسيدات ‎sodium tauro-24,25-dihydro-fusidate‏ و حمض صوديوم جليكو داي هيدرو فيوسيدات ‎sodium‏ ‎.glycodihydrofusidate‏ تتضمن الأحماض الدهنية المناسبة حمض أراكيدونيك ‎carachidonic acid‏ حمض أونديكانويك ‎cundecanoic acid‏ حمض أوليك؛ حمض لوربك؛ حمض كابريليك؛ حمض كابربك؛
حمض ميريستيك؛ حمض ‎dill‏ حمض ستيريك» حمض لينوليك» حمض لينولينيك؛ ديكاريات ‎dicaprate‏ تراي كاريات ‎ctricaprate‏ مونو أولين ‎٠‏ داي لورين» جليسريل 1-مونو كاريات -1 ‎glyceryl‏ ‎¢monocaprate‏ 1-دوديسيل آزا سيكلو هبتان -2-ون ‎¢1-dodecylazacycloheptan-2-one‏ أسيلإكارنيتين ‎cacylcarnitine‏ أسيل كولين ‎cacylcholine‏ أو مونو جليسريد» داي جليسريد أو ملح مقبول صيدلانيا منه
«penetration enhancers ‏صوديوم). في بعض النماذج؛ يتم استخدام توليفات مواد تحسين الاختراق‎ Oli)
0 مثلاء الأحماض الدهنية/أملاح في توليفة مع الأحماض/الأملاح الصفراوية. ثمة توليفة مثالية واحدة هي ملح صوديوم من حمض لوريك» حمض كابريك و حمض أورسوديوكسي كينوديوكسي كوليك. أيضا تتضمن
مواد تحسين الاختراق بولي أوكسي إيثيلين - 9-لوريل إيثر ‎ether‏ 1لتة1606-9-1/إط0010«61» بولي أوكسي
إيثيلين -20-سيتيل ‎ether ji‏ 0(1©»-00170*7©0171606-20. يمكن توصيل أحماض رببونيكلويك مزدوجة الجديلة الموضحة في الاختراع فمياء في صورة حبيبية شاملة جسيمات مجففة ‎AIL‏ أو معقدة لتكوين
5 جسيمات بحجم المايكرو أو النانو. تتضمن عوامل ‎complexing agents Maal‏ حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة أحماض أمينية متعددة ‎¢poly-amino acids‏ مركبات بولي ‎¢polyimines (pad‏ مركبات بولي أكريلات ‎polyacrylates‏ _مركبات بولي ألكيل أكريلات 15 0171م مركبات بولي أوكسيثان 5م مركبات بولي ألكيل سيانو أكريلات ‎¢polyalkylcyanoacrylates‏ مركبات جيلاتين كاتيوني ‎ccationized gelatins‏ مركبات ألبومين ‎calbumins‏ نشويات» مركبات أكريلات ؛» مركبات بولي
0 لإيثيلين جليكول؛ ونشويات؛ مركبات بولي ألكيل سيانو أكريلات؛ مركبات بولي إيمين مشتقة من دى إى دى إى ‎(DEAE‏ مركبات بوليولان ‎epollulans‏ مركبات سيليلوز ‎ccelluloses‏ ونشويات. تتضمن عوامل
التعقيد المناسبة كيتوسان ‎chitosan‏ 17-تراي ميثيل كيتوسان ‎(N-trimethylchitosan‏ بولي -17-ليسين ‎cpoly-L-lysine‏ بولي هيستيدين ‎<polyhistidine‏ بولي أورنيثين عصنطا01700م» مركبات بولي سبيرمين ‎¢polyspermines‏ مركبات بروتامين ‎cprotamine‏ مركبات بولي فينيل ‎«polyvinylpyridine (pan‏ بولي
5 ثيو ‎gh‏ إيقبل أمينو ميثيل إيثيلين © ط ‎¢«(TDAE) polythiodiethylaminomethylethylene‏ بولي أمينو ستيرين ‎polyaminostyrene‏ (مثلاء م-أمينو ‎¢(p-amino‏ بولي ‎she di)‏ أكريلات)
‎epoly(methylcyanoacrylate)‏ بولي ‎Jal)‏ سيانو أكريلات) ‎(As poly(ethylcyanoacrylate)‏ (بيوتيل سيانو أكريلات) ‎cpoly(butyleyanoacrylate)‏ بولي (أيزو بيوتيل سيانو أكريلات) ‎«poly(isobutylcyanoacrylate)‏ بولي (أيزو هكسيل سيانو أكريلات) ‎«poly(isohexylcynaoacrylate)‏ ‏057 -ميثاكريلات ‎«methacrylate‏ 02512 -هكسيل أكريلات ‎<hexylacrylate‏ 0168 - أكربلاميد ‎«acrylamide 5‏ 2م[ -ألبومين و117/15-دكستران» بولي ميثيل أكريلات ‎«polymethylacrylate‏ بولي
هكسيل أكريلات ‎¢polyhexylacrylate‏ حمض ‎(ds:‏ (1.,0-لاكتيك) ‎«poly(D,L-lactic acid)‏ حمض بولي (1-لاكتيك-م-جليكوليك ‎«(PLGA) poly(DL-lactic-co-glycolic acid‏ ألجينات ‎calginate‏ وبولي إيثيلين جليكول. تم وصف الصيغ الفمية لأحماض ريبونيكلويك مزدوجة الجديلة وتحضيرها بالتفصيل في براءة الاختراع الأمريكية 60887906 المنشور الأمريكي رقم 20030027780« وبراءة الاختراع رقم
0 66747014؛ وقد تم دمج كل منها هنا بالإشارة إليها كمرجع. يمكن إعطاء التركيبات والصيغ الخاصة بالحقن؛ عبر المتني (داخل الدماغ)؛ داخل القراب؛ داخل البطين؛ أو داخل الكبد محاليل مائية معقمة ‎sterile aqueous solutions‏ والتي يمكن أن تحتوي أيضا على محاليل منظمة؛ مخففات» ومواد مضافة أخرى مناسبة ‎(ie‏ ولكنها غير مقيدة ب» مواد تحسين الاختراق؛ مركبات حاملة؛ ومواد حاملة مقبولة صيدلانيا أو سواغات أخرى.
تتضمن التركيبات الصيدلانية وفقا للاختراع الحالي؛ ولكنها غير مقيدة به محاليلء مستحلبات؛ وصيغ تحتوي على الليبوسوم. يمكن توليد هذه التركيبات من تشكيلة من المكونات التي تتضمن؛ ولكنها غير مقيدة ب» السوائل المنفذة ‎preformed liquids‏ المواد الصلبة ذاتية الاستحلاب ‎¢self-emulsifying solids‏ والمواد الصلبة ذاتية الاستحلاب. تتضمن الصيغ تلك التي تستهدف الكبد عند علاج الاضطرابات الكبدية ‎hepatic‏ ‎disorders‏ مثل الكارسينوما الكبدية ‎hepatic carcinoma‏
0 يمكن تحضير الصيغ الصيدلانية وفقا للاختراع الحالي؛ التي يمكن تمثيلها في صورة جرعة؛ وفقا للتقنيات التقليدية المعروفة جيدا في الصناعة الصيدلانية. تتضمن هذه التقنيات خطوة ربط المكونات النشطة مع المادة الحاملة أو السواغ المناسب. بشكل عام؛ يتم تحضير الصيغ بواسطة ربط المكونات النشطة بشكل متجانس مع مواد حاملة سائلة ‎liquid carriers‏ أو مواد حاملة صلبة مقسمة بدقة ‎finely divided solid‏ ‎of carriers‏ كل من؛ وبعد ذلك؛ عند الحاجة؛ تشكيل المنتج.
5 يمكن صياغة التركيبات وفقا للاختراع الحالي داخل أي من العديد من صور الجرعة الممكنة مثل؛ ولكنها غير مقيدة ب» الأقراص» الكبسولات» كبسولات الجل ‎cgel capsules‏ شراب سائل»؛ الجلات الرخوة ‎gels‏ امي
التحاميل» والحقن الشرجية ‎enemas‏ يمكن أيضا صياغة التركيبات وفقا للاختراع الحالي أيضا كمعلقات ‎suspensions‏ في أوساط مائية أو غير مائية أو مخلوطة. يمكن أن تحتوي المعلقات المائية أيضا مواد لها لزوجة المعلق شاملاء مثلاء صوديوم كريوكسي ميثيل سيليلوز» سوربيتول» أو دكستران. يمكن أن يحتوي المعلق أيضا مواد تثبيت ‎stabilizers‏ ‏5 ‎Zz‏ الصيغ الإضافية 1 .مستحلبات يمكن تحضير أحماض رببوتيكلويك مزدوجة الجديلة وفقا للاختراع الحالى وتتم صياغتها كمستحلبات. المستحلبات بشكل مثالي عبارة عن أنظمة غير متجانسة ‎heterogeneous systems‏ من سائل واحد مشتت 0 في صورة قطرات أخرى بقطر يتخطى 0.1 ميكرومتر (انظر ‎Ansel's Pharmaceutical Dosage «Dia‏ ‎Forms and Drug Delivery Systems, Allen, LV., Popovich NG., and Ansel HC., 2004,‏ ‎Lippincott Williams & Wilkins (8th ed.), New York, NY; Idson, in Pharmaceutical Dosage‏ ‎Forms, Lieberman, Rieger and Banker (Eds.), 1988, Marcel Dekker, Inc., New York, N.Y.,‏ ‎volume 1, p. 199; Rosoff, in Pharmaceutical Dosage Forms, Lieberman, Rieger and Banker‏ ‎Block in Pharmaceutical 15‏ ;245 .م ,1 ‎(Eds.), 1988, Marcel Dekker, Inc., New York, N.Y., Volume‏ ‎Dosage Forms, Lieberman, Rieger and Banker (Eds.), 1988, Marcel Dekker, Inc., New York,‏ ‎Higuchi et al., in Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack‏ ;335 .م ,2 ‎N.Y., volume‏ ‎(Publishing Co., Easton, Pa., 1985, p. 301‏ غالبا ما تكون المستحلبات عبارة عن أنظمة ثنائية الطور ‎ls biphasic systems‏ تتضمن اثنين من الأطوار السائلة ‎liquid phases‏ القابلة للخلط المخلوطة بدقة 0 والمشتتة مع بعضها البعض. بشكل عام؛ يمكن أن تكون مستحلبات إما عبارة عن صورة ماء -في-زبت ‎(w/o) water-in-oil‏ أو ‎oil-in-water elem cw)‏ (»/ه). عند تقسيم الطور المائي بدقة داخل والمشتتة كقطرات دقيقة داخل طور زبتي كتلي ‎cbulk oily phase‏ تتم تسمية التركيبة الناتجة مستحلب ماء -في- زبت. بشكل ‎hay‏ عندما يتم تقسيم طور زيتي بدقة داخل وتتم تشتيتها كقطرات دقيقة داخل الطور المائي الكتلى» تسمى التركيبة الناتجة مستحلب زبت-فى-ماء. يمكن أن تحتوي المستحلبات على مكونات إضافية بالإضافة إلى الطوار المشتتة ‎cdispersed phases‏ والعقار النشط ‎active drug‏ الذي يمكن أن يكون موجود كمحلول إما في الطور المائي؛ الطور الزيتي أو هو الطور نفسه كطور منفصل. يمكن أن تكون هناك سواغات صيدلانية ‎Pharmaceutical excipients‏ مثل المستحلبات؛ مواد ‎(cud‏ صباغات؛ ومضادات الأكسدة ‎anti-oxidants‏ موجودة في مستحلبات حسب الحاجة. يمكن أن تكون المستحلبات ‎Lea‏ عبارة عن مستحلبات متعددة مكونة من أكثر من طورين ‎Sle Jie‏ فى حالة مستحلبات ‎Cui Sele Ac)‏
‎oil-in-water-in-oil‏ (0/«/ه) وماء -في -زيت -في-ماء ‎water-in-oil-in-water‏ («/0/«). تقوم صيغ المعقد غالبا بتوفير مزايا لا تقدم المستحلبات ‎binary emulsions SUE‏ المستحلبات المتعددة حيث قطرات الزيت الفردية لمستحلب ماء -فى-زيت تتضمن قطرات ماء صغيرة والتى تشكل مستحلب ماء -فى-زيت- في-ماء ‎٠‏ بالمتل يقوم نظام قطرات ‎cull‏ المتشمنة في كريات ماء مثبتة في طور زبتي مستمر والتي تقدم
مستحلب زيت-في”“ماء في“ زيت.
يتم وصف مستحلبات بواسطة تبات حراري ديناميكي ‎thermodynamic stability‏ منخفض أو منعدم. ‎(We‏ ‏يتم تشتيت الطور المشتت أو غير المستمر للمستحلب جيدا داخل الطور الخارجي والمستمر والذي يتم الحفاظ عليه فى هذه الصورة خلال المستحلبات أو لزوجة الصيغة. يمكن أن تكون الأطوار إما شبه صلبة أو صلبة كما هي الحال لمواد المراهم شبه المستحلبة ‎emulsion-style ointment bases‏ والكريمات. تتضمن 0 وسيلة ‎gal‏ لتثبيت المستحلبات استخدام المستحلبات التي يمكن دمجها داخل أي طور من المستحلب. ‎(Sa‏ تصنيف المستحلبات بشكل كبير في 4 فئات: مواد تخفيف التوتر السطحي التلخيقية ‎synthetic‏ ‎surfactants‏ المستحلبات طبيعية المنشاًء قواعد الامتصاص ‎cabsorption bases‏ والمواد الصلبة الدقيقة (انظر ‎Ansel's Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, Allen, LV., «Jie‏ ‎Popovich NG., and Ansel HC., 2004, Lippincott Williams & Wilkins (8th ed.), New York, NY;‏ ‎Idson, in Pharmaceutical Dosage Forms, Lieberman, Rieger and Banker (Eds.), 1988, Marcel 15‏
199 .م ,1 ‎.(Dekker, Inc., New York, N.Y., volume‏ تم العثور على مواد تخفيف التوتر السطحي التخليقية؛ المعروفة أيضا بالعوامل السطحية النشطة ‎surface‏ ‎cactive agents‏ المستخدمة بشكل واسع في صيغة مستحلبات وتم ذكرها في البحث (انظر ‎Ansel's «Mie‏ ‎Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, Allen, LV., Popovich NG., and‏ ‎New York, NY; Rieger, in 0‏ .بك ‎Ansel HC., 2004, Lippincott Williams & Wilkins (8th‏ ‎Pharmaceutical Dosage Forms, Lieberman, Rieger and Banker (Eds.), 1988, Marcel Dekker,‏ ‎Inc., New York, N.Y., volume 1, p. 285; Idson, in Pharmaceutical Dosage Forms, Lieberman,‏ ‎٠ (Rieger and Banker (Eds.), Marcel Dekker, Inc., New York, N.Y., 1988, volume 1, p. 199‏ مواد تخفيف التوتر السطحى بشكل مثالى آلفة للدهون والماء وتتضمن أجزاء آلفة للماء وكارهة للماء. تمت 5 تسمية نسبة الطبيعة الآلفة للماء إلى الطبيعة الكارهة للماء لمادة تخفيف التوتر السطحى توازن ألف للماء /آلف للدهون ‎ag‏ عبارة عن أداة قيمة فى تصنيف واختيار مواد تخفيف التوتر السطحى فى تحضير الصيغ ‎٠.‏ يمكن تصنيف مواد تخفيف التوتر السطحى داخل الفئات المختلفة بناء على طبيعة المجموعة الآلفة للماء: غير أيونية؛ أنيونية؛ كاتيوني» ومتعدد الصيغ (انظر ‎Ansel's Pharmaceutical Dosage «Jie‏ ‎Forms and Drug Delivery Systems, Allen, LV., Popovich NG., and Ansel HC., 2004,‏
Lippincott Williams & Wilkins (8th ed.), New York, NY Rieger, in Pharmaceutical Dosage
Forms, Lieberman, Rieger and Banker (Eds.), 1988, Marcel Dekker, Inc., New York, N.Y., ‎.(volume 1, p. 285‏ تتضمن المستحلبات الطبيعية المستخدمة في صيغ المستحلب لانولين ‎lanolin‏ شمع العسل؛ مركبات فوسفاتيد ‎cphosphatides‏ لبسيثين ‎dlecithin‏ وأكاسيا منعدعه. تقوم مواد الامتصاص القاعدية بإضفاء خواص آلفة للماء بحيث يمكن أن تقوم بنقع ماء لتكوين مستحلبات زيت-في-ماء التي تحتجز حالات قوام شبه صلب؛ مثل لانولين ‎Js us anhydrous lanolin GY‏ آلف للماء ‎hydrophilic petrolatum‏ تم استخدام الصلب المقسم بدقة كمستحلبات جيدة خصوصا في توليفة مع مواد تخفيف التوتر السطحي وفي المستحضرات اللزجة. وهي تتضمن مواد صلبة قطبية غير عضوية ‎cpolar inorganic solids‏ مثل مركبات ‏0 هيدروكسيد معدنية ثقيلة ‎metal hydroxides‏ ب«مدعطل ملاطات غير منتفخة ‎Jie nonswelling clays‏ بنتونايت ‎bentonite‏ أتابولجيت ‎cattapulgite‏ هكتوريت ‎chectorite‏ كاولين ‎kaolin‏ مونتموريلونيت ‎cmontmorillonite‏ سبليكات ألومنيوم غروانية ‎colloidal aluminum silicate‏ وسيليكات مغنسيوم ألومنيوم غروانية ‎magnesium aluminum silicate‏ 001101001» صبغات ومواد صلبة غير قطبية ‎nonpolar solids‏ مثل كريون أو تراي ستيرات جليسزيل ‎tristearate‏ انهه راع. ‏5 أيضا تم تضمين تشكيلة واسعة من المواد غير المستحلبة ‎non-emulsifying materials‏ أيضا في صيغ مستحلب وتساهم في خواص المستحلبات. وهي تتضمن الدهون؛ الزيوت؛ الشمع؛ الأحماض الدهنية؛ الكحولات الدهنية ‎cfatty alcohols‏ مركبات إستر الدهنية ‎fatty esters‏ المرطبات؛ الغروانيات الآلفة للماء ‎algal) chydrophilic colloids‏ الحافظة ‎preservatives‏ ومضادات الأكسدة ( ‎Block, in Pharmaceutical‏ ‎Dosage Forms, Lieberman, Rieger and Banker (Eds.), 1988, Marcel Dekker, Inc., New York,‏ ‎N.Y., volume 1, ‏.م‎ 335; Idson, in Pharmaceutical Dosage Forms, Lieberman, Rieger and 0 . (Banker (Eds.), 1988, Marcel Dekker, Inc., New York, N.Y., volume 1, p. 199 ‏لبان طبيعي المنشاً وبوليمرات‎ hydrocolloids ‏تتضمن المواد الغروانية الآلفة للماء أو المواد الغروانية المائية‎ ‏حمض‎ «lal ‏أكاسياء‎ Js) polysaccharides ‏مثل مركبات بولي سكاريد‎ synthetic polymers ‏تخليقية‎ ‎Ola) ‏مشتقات سيليلوز‎ ¢(tragacanth ‏وقتاد‎ (LHS ‏لبان‎ «le ‏لبان‎ ccarrageenan ‏الجينيك؛ كاراجينان‎ ‏5 كربوكسي ميثيل سيليلوز وكربوكسي بروبيل سيليلوز)؛ ويوليمرات تخليقية ‎Mie)‏ كريومرات ‎ccarbomers‏ ‏مركبات سيليلوز إيثر ‎ccellulose ethers‏ و بوليمرات كربوكسي فينيل ‎+(carboxyvinyl polymers‏ وهي تتشتت أو تنتفخ في ماء لتكوين محاليل غروانية ‎colloidal solutions‏ والتي تقوم بتثبيت مستحلبات بواسطة
تكوين أغشية بينية ‎interfacial films‏ حول قطرات الطور المشتت ‎dispersed-phase‏ وبواسطة زبادة لزوجة الطور الخارجي . حيث تحتوي المستحلبات غالبا عدد من المركبات مثل مركبات كريوهيدرات» بروتينات» ستيرولات ‎sterols‏ ‏ومركبات فوسفاتيد والتي يمكن أن تدعم نمو الميكرويات؛ تتضمن هذه الصيغ غالبا مواد حافظة. تتضمن المواد الحافظة المستخدمة عموما في صيغ المستحلب ميثيل بارابين ‎dag emethyl paraben‏ بارابين ‎«propyl paraben‏ أملاح أمونيوم ‎quaternary ammonium salts deb)‏ كلوريد بنزالكونيوم ‎¢benzalkonium chloride‏ مركبات إستر من حمض (-هيدروكسي بنزوبك ‎¢«p-hydroxybenzoic acid‏ وحمض بوربك ‎boric acid‏ تتم إضافة مضادات الأكسدة أيضا إلى صيغ مستحلب لمنع تدهور الصيغة. يمكن أن تكون مضادات الأكسدة المستخدمة عبارة عن مواد كاسحة شقية حرة ‎free radical scavengers‏ 0 مثل مركبات توكوفيرول ‎«tocopherols‏ مركبات ألكيل جالات ‎alkyl gallates‏ هيدروكسي أنيسول معالجة ببيوتيلات ‎butylated hydroxyanisole‏ هيدروكسي تولوين معالجة ببيوتيلات | ‎butylated‏ ‎chydroxytoluene‏ أو عوامل اختزال ‎reducing agents‏ مثل حمض أسكورييك ‎ascorbic acid‏ وميتا باي سلفيت صوديوم ‎sodium metabisulfite‏ ومواد مؤازرة مضادة للأكسدة ‎Jie antioxidant synergists‏ حمض سيتريك» حمض طرطريك ‎acid‏ عنها:ة)؛ وليسيثين. 5 1 تم ذكر استخدام صيغ المستحلب عبر المسارات الجلدية؛ الفمية؛ ويالحقن» وطرق التصنيع في البحث (انظر ‎Ansel's Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, Allen, LV., «Jie‏ ‎Popovich NG., and Ansel HC., 2004, Lippincott Williams & Wilkins (8th ed.), New York, NY;‏ ‎Idson, in Pharmaceutical Dosage Forms, Lieberman, Rieger and Banker (Eds.), 1988, Marcel‏ ‎(Dekker, Inc., New York, N.Y., volume 1, p. 199‏ .3 استخدام صيغ مستحلب للتوصيل الفمي بشكل واسع بسبب سهولة الصياغة؛ بالإضافة إلى الفعالية من نقطة امتصاص ‎Lally‏ حيوية (انظر مثلاء ‎Ansel's Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, Allen, LV., Popovich NG.,‏ ‎and Ansel HC., 2004, Lippincott Williams & Wilkins (8th ed.), New York, NY; Rosoff, in‏ ‎Pharmaceutical Dosage Forms, Lieberman, Rieger and Banker (Eds.), 1988, Marcel Dekker,‏ ‎Inc., New York, N.Y., volume 1, p. 245; Idson, in Pharmaceutical Dosage Forms, Lieberman,‏ ‎(Rieger and Banker (Eds.), 1988, Marcel Dekker, Inc., New York, N.Y., volume 1, p. 199 25‏ . المواد المسهلة القائمة على أساس قاعدة ملح-معدن ‎<Mineral-oil base laxatives‏ فيتامينات قابلة للذويان في زبت ‎vitamins‏ 011-5010016» ومستحضرات مغذية عالية الدهون ‎high fat nutritive preparations‏ من بين المواد التي تم إعطاؤها بشكل مشترك فميا كمستحلبات ماء -في-زيت .
‎i‏ مستحلبات دقيقة فى أحد التماذ ‎lad z‏ للاختراع الحالى ¢ تتم صياغة أحماض رببوتيكلويك مزدوجة الجديلة كمستحلبات دقيقة. يمكن تحديد مستحلب دقيق كنظام ‎cole‏ زيت» ومزدوجة الألفة والتي تكون عبارة عن محلول سائل مستقر بشكل حراري ديناميكي وأيزوتروبي فردي (انظر ‎Ansel's Pharmaceutical Dosage Forms and «Jie‏ ‎Drug Delivery Systems, Allen, LV., Popovich NG., and Ansel HC., 2004, Lippincott Williams ~~ 5‏ ‎Wilkins (8th ed.), New York, NY; Rosoff, in Pharmaceutical Dosage Forms, Lieberman,‏ & ‎(Rieger and Banker (Eds.), 1988, Marcel Dekker, Inc., New York, N.Y., volume 1, p. 245‏ . ‎J‏ مثالي المستحلبات الدقيقة ‎microemulsions‏ عبارة عن أنظمة يتم تحضيرها بواسطة التشتيت ‎١‏ لأول لزنت فى مادة تخفيف التوتر السطحى مائية ويعد ذلك تتم إضافة كمية مناسبة من المكون الرابع» بشكل 0 عام كحول بطول سلسلة متوسط لتكوين نظام شفاف ‎transparent system‏ بالتالي؛ تم وصف المستحلبات الدقيقة أيضا بكونها مستقرة بشكل حراري ديناميكي؛ يتم تثبيت المشتتات الواضحة بشكل أيزوتروبي لاثنين من السوائل غير القابل للخلط المستقرة بواسطة الأغشية البينية ‎interfacial films‏ للجزيئات السطحية النشطة ‎Leung and Shah, in: Controlled Release of Drugs: Polymers ) surface-active molecules‏ ‎(and Aggregate Systems, Rosoff, M., Ed., 1989, VCH Publishers, New York, pages 185-215‏ . "تم تحضير مستحلبات دقيقة عبر توليفة من ثلاثة إلى 5 مكونات تتضمن الزيت؛ الماء؛ ‎sale‏ تخفيف التوتر السطحي؛ ‎sale‏ تخفيف التوتر السطحي المشتركة ‎cosurfactant‏ وناتج تحليل كهربي ‎.clectrolyte‏ سواء كان المستحلب الدقيق من نوع ماء -في-زبت أو ‎lem men)‏ معتمدا على خواص الزبت ومادة تخفيف التوتر السطحي المستخدمة وعلى بنية والتعبئة الهندسية لآثار رؤوس الهيدروكربون ‎hydrocarbon‏ القطبية لجزيئات ‎sale‏ تخفيف التوتر السطحي ‎Schott, in Remington's) surfactant molecules‏ ‎.(Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co., Easton, Pa., 1985, p. 271 0‏ تمت دراسة منهج الظواهر باستخدام مخططات ‎shall‏ بشكل ممتد ‎Allg‏ تؤدي إلى معرفة شاملة؛ إلى الخبير في المجال» لكيفية صياغة المستحلبات الدقيقة (انظر مثا ‎Ansel's Pharmaceutical Dosage‏ ‎Forms and Drug Delivery Systems, Allen, LV., Popovich NG., and Ansel HC., 2004,‏ ‎Lippincott Williams & Wilkins (8th ed.), New York, NY; Rosoff, in Pharmaceutical Dosage‏ ‎Forms, Lieberman, Rieger and Banker (Eds.), 1988, Marcel Dekker, Inc., New York, N.Y., 25‏ ‎volume 1, p. 245; Block, in Pharmaceutical Dosage Forms, Lieberman, Rieger and Banker‏ ‎((Eds.), 1988, Marcel Dekker, Inc., New York, N.Y, volume 1, p. 335‏ مقارنة بمستحلبات تقليدية؛
تقدم المستحلبات الدقيقة ميزة تثبيت عقاقير غير قابلة للذويان في الماء ‎water-insoluble drugs‏ في الصيغة الخاصة بالقطرات المستقرة بشكل حراري ديناميكي والتي يتم تكوينها آنيا. تتضمن مواد تخفيف التوتر السطحي المستخدمة في تحضير المستحلبات الدقيقة؛ ولكنها غير مقيدة ب مواد تخفيف التوتر السطحي الأيونية؛ مواد تخفيف التوتر السطحي غير ‎Brij® 96 «Ang‏ مركبات بولي أوكسي ‎pli)‏ أوليل ‎polyoxyethylene oleyl ethers su)‏ مركبات حمض بولي جليسرول دهنية إستر ‎fatty acid esters‏ امتعنراعنراه0م؛ تترا جليسرول مونو لورات ‎tetraglycerol monolaurate‏ ‎«(ML310)‏ تترا جليسرول مونو أوليات ‎tetraglycerol monooleate‏ (1410310)؛ هكساجليسرول مونو أوليات ‎(PO310) hexaglycerol monooleate‏ « هكساجليسرول بنتا أوليات ‎hexaglycerol pentaoleate‏ ‎¢(PO500)‏ ديكا جليسرول مونو كاريات ‎((MCAT750) decaglycerol monocaprate‏ ديكا جليسرول مونو 0 أوليات ‎decaglycerol monooleate‏ (110750) ؛ ديكا جليسرول سيكوي أوليات ‎decaglycerol sequioleate‏ ‎(SO750)‏ ؛ ديكا جليسرول ديكا أوليات ‎«(DAO750) decaglycerol decaoleate‏ منفردة أو في توليفة مع مواد تخفيف التوتر السطحي المشتركة ‎cosurfactants‏ مادة تخفيف التوتر السطحي المشتركة؛ عادة كحول قصير السلسلة ‎Jie short-chain alcohol‏ إيثانول» 1-برويانول ‎¢I-propanol‏ و 1-بيوتانول 001مان-1؛ ‎Allg‏ تعمل على زيادة التميع البين سطحي ‎interfacial fluidity‏ بواسطة الاختراق داخل غشاء مادة تخفيف 5 - التوتر السطحي ‎surfactant film‏ وبالتالي تكون غشاء مضرطب ‎disordered film‏ للفراغ الفارغ المكون بين جزيئات ‎sale‏ تخفيف التوتر السطحي ‎surfactant molecules‏ يمكن تحضير المستحلبات الدقيقة؛ مع ذلك؛ بدون استخدام مواد تخفيف التوتر السطحي المشتركة وأنظمة مستحلب دقيقة ذاتية الاستحلاب ‎self-‏ ‎emulsifying microemulsion systems‏ الخلية من الكحول معروفة في المجال. يمكن ألا يتم تقييد الطور المائي بشكل مثالي؛ ولكنها غير مقيدة ب؛ ماء؛ محلول ‎Sle‏ من العقار؛ جليسرول؛ بولي إيثيلين جليكول 0 300؛ بولي إيثيلين جليكول 400؛ مركبات بولي جليسرول ‎epolyglycerols‏ بروبيلين مركبات جليكول ‎propylene glycols‏ ومشتقات إيثيلين جليكول. يمكن أن يتضمن الطور الزيتي؛ ولكنها غير مقيدة ب المواد ‎«Captex® 300 Jie‏ 355 ©»عامم» 11014 ‎«Capmul®‏ مركبات حمض دهني إستر ‎fatty acid‏ ‎cesters‏ مونو سلسلة ‎(C12-C8)‏ متوسط» ‎«(gla‏ وتراي -جليسريد ‎ctri-glycerides‏ مركبات حمض دهني جليسريل إستر بولي أوكسي إيقيل ‎cpolyoxyethylated glyceryl fatty acid esters‏ كحولات دهنية؛ مركبات جليسريد معالجة ببولي جليكول ‎glycerides‏ 0018170011260 مركبات 010-08 جليسريد معالجة ببولي جليكول ‎epolyglycolized C8-C10 glycerides‏ زيوت النباتات؛ ‎cus‏ السيليكون ‎silicone oil‏
المستحلبات الدقيقة تحديدا موجودة محل الاهتمام من نقطة ذويان العقار ونقطة تذويب العقار والامتصاص المحسن للعقاقير. مستحلبات دقيقة قائمة على أساس الدهن ‎JS) Lipid based microemulsions‏ من ماء - في-زيت وزيت-في-ماء) والتي تم اقتراح أن تقوم بتحسين الإتاحية الحيوية الفمية للعقاقير» شاملة ببتيدات (انظر ‎Sle‏ براءات الاختراع الأمريكية أرقام 95؟؛ 7063860؛ 7070802؛ 7157099؛ ‎Constantinides ef al., Pharmaceutical Research, 1994, 11, 1385-1390; Ritschel, Meth.
Find. 5‏ ‎(Exp.
Clin.
Pharmacol., 1993, 13, 205‏ تقوم المستحلبات الدقيقة بإعطاء ‎Lhe‏ ثبات العقار المحسن وحماية العفار من التدهور المائي الإنزيمي ‎enzymatic hydrolysis‏ والتحسين الممكن للامتصاص العقار الناتج عن التعديلات في ‎sale‏ تخفيف التوتر السطحي في تميع الغشاء والذويانية؛ وسهولة التحضير وسهولة الإعطاء في مقابل صور الجرعة الصلبة؛ القدرة السريرية المحسنة؛ والسمية المنخفضة (انظر ‎Ole‏ براءات 0 الاختراع الأمريكية أرقام 6915 ؛ ¢7¢063¢860 70070802؛ ¢7¢157¢099 ‎Constantinides‏ ‎(et al., Pharmaceutical Research, 1994, 11, 1385; Ho er al., J.
Pharm.
Sci., 1996, 85, 138-143‏ . غالبا يمكن أن تتكون المستحلبات الدقيقة عند تجميع مكوناتها في درجة الحرارة المحيطة. ‎Kay‏ أن يكون هذا مفيد تحديدا عند صياغة العقارات المعلمة حرارياء الببتيدات أو أحماض رببونيكلويك مزدوجة الجديلة. المستحلبات الدقيقة فعالة أيضا في التوصيل عبر الجلدي للمكونات النشطة في كل من التطبيقات التجميلية والصيدلانية. من المتوقع أن تقوم صيغ وتركيبات المستحلب الدقيق وفقا للاختراع الحالي بتسهيل الامتصاص الجهازي الزائد لأحماض ريبونيكلويك مزدوجة الجديلة والأحماض النووية من المسار المعدي المعوي؛ بالإضافة إلى تحسين الاستهلاك الخلوي الموضعي لأحماض ريبونيكلويك مزدوجة الجديلة والأحماض النووية. يمكن أن تحتوي مستحلبات دقيقة وفقا للاختراع الحالي أيضا على مكونات إضافية ومواد مضافة مثل مونو 0 ستيرات سوربيتان ‎<Labrasol® ¢(Grill® 3( sorbitan monostearate‏ ومواد تحسين الاختراق لتحسين خواص الصيغة ولتحسين امتصاص أحماض ريبونيكلويك مزدوجة الجديلة والأحماض النووية وفقا للاختراع الحالي. يمكن تصنيف مواد تحسين الاختراق المستخدمة في المستحلبات الدقيقة وفقا للاختراع الحالي بأنها تنتمي إلى واحد من مواد تخفيف التوتر السطحي؛ الأحماض الدهنية؛ أملاح صفراوية» عوامل خالبة؛ ومواد تخفيف التوتر السطحي غير الخالبة ‎Lee ef al., Critical Reviews ) non-chelating non-surfactants‏ ‎Therapeutic 5‏ «نعقار 92 ‎(Carrier Systems, 1991, p.‏ وقد تمت مناقشة كل من هذه الفئات أعلاه. 1. الجسيمات الدقيقة
يمكن دمج حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة وفقا للاختراع داخل جسيم؛ ‎Ole‏ جسيم دقيق. ‎(Ser‏ إنتاج الجسيمات الدقيقة بواسطة التجفيف ‎(Adal‏ ويمكن ‎Lad‏ إنتاجها بواسطة طرق ‎GAT‏ شاملة التجفيف بالتجميد؛ التبخير؛ تجفيف طبقة المائع؛ التجفيف بالتفريغ؛ أو توليفة من هذه التقنيات. ‎Liv‏ مواد تحسين الاختراق في أحد النماذج؛ يستخدم الاختراع ‎Jad)‏ العديد من مواد تحسين الاختراق لتنفيذ التوصيل الفعال للأحماض النووية؛ تحديدا أحماض رببونيكلويك مزدوجة الجديلة؛ إلى جلد الحيوانات. أغلب العقاقير موجودة في محلول في كل من الصور المتأينة وغير المتأينة. مع ذلك؛ عادة ما تخترق العقاقير القابلة للذويان في الدهون أو الآلفة للدهون أغشية الخلايا. وقد تم اكتشاف أن حتى العقاقير غير الآلفة للدهون يمكنها اختراق أغشية الخلايا التي يتم علاجها مع مادة تحسين اختراق. بالإضافة إلى المساعدة على تسريب العقاقير 0 غير ‎LN)‏ للدهون ‎non-lipophilic drugs‏ عبر أغشية ‎(LIA‏ تقوم مواد تحسين الاختراق أيضا بتحسين نفاذية العقاقير الآلفة للدهون ‎Jipophilic drugs‏ يمكن تصنيف مواد تحسين الاختراق بأنها تنتمي إلى واحد من 5 فئات واسعة؛ أي؛ مواد تخفيف التوتر السطحي؛ الأحماض الدهنية؛ أملاح الصفراوية؛ العوامل الخالبة؛ ومواد تخفيف التوتر السطحي غير الخالبة ‎delivery, Informa Health Care, New York, jl&eMalmsten, M.
Surfactants and polymers in )‏ ‎Lee ef al., Critical Reviews in Therapeutic 5‏ ;2002 ,77 ا عقار ‎Carrier Systems, 1991, p.92‏ (. هذه المركبات معروفة جيدا في المجال. ». مواد حاملة تتضمن تركيبات معينة وفقا للاختراع الحالي أيضا مركبات حاملة في الصيغة. حسب الاستخدام هناء يمكن أن يشير المصطلح 'مادة حاملة للمركب" أو 'مادة حاملة" إلى حمض نووي؛ أو نظير منه؛ والذي يكون 0 خامل (أي؛ لا يضفي نشاط بيولوجي معين) ولكن يتم التعرف عليه كحمض نووي بواسطة العمليات في الكائن الحي ‎ally‏ تقلل الإتاحية الحيوية لحمض نووي يتضمن النشاط البيولوجي بواسطة؛ ‎Ole‏ تدهور الحمض النووي النشط بيولوجيا أو تعزيز إزالتها من الدورة الدموية. يمكن أن يؤدي الإعطاء المشترك للحمض النووي و مركب مادة حاملة؛ بشكل مثالي مع فائض من المادة الأخيرة؛ إلى التقليل الأساسي لكمية الحمض النووي المستخلصة في الكبد؛ الكلى أو غيرها من الخزانات الخارجية؛ والناتجة عن التنافس 5 بين مركب المادة الحاملة والحمض النووي لمستقبل مشترك. ‎Oli‏ يمكن تقليل استخلاص فوسفورو ثيوات حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة جزئيا في نسيج كبدي ‎hepatic tissue‏ عند الإعطاء المشترك مع حمض
بولي إينوسينيك ‎acid‏ 016ة100ر01م» دكستران سلفات ‎«dextran sulfate‏ حمض بولي سيتيديك ‎polyeytidic acid‏ أو حمض 4-أسيتاميدو-4" أيزو ثيوسيانو -ستيلبين-262-داي سلفونيك -4 ‎Miyao et al., DSRNA Res.
Dev., 1995, ) acetamido-4'isothiocyano-stilbene-2,2'-disulfonic acid‏ ‎Takakura et al., DSRNA & Nucl.
Acid‏ ;115-121 ,5عقار 177-183 ,6 ,1996 ‎Dev.,‏ . ‎vi 5‏ سواغات على العكس من مركب المادة الحاملة»؛ هناك 'مادة حاملة صيدلانية" أو ‎"Elon‏ عبارة عن مذيب مقبول ‎(Liana‏ عامل تعليق ‎suspending agent‏ أو أي ناقل خامل ‎inert vehicle‏ صيدلانيا لتوصيل واحد أو أكثر من الأحماض النووية إلى حيوان. يمكن أن يكون السواغ سائل أو صلب وبتم اختياره باعتبار طريقة الإعطاء» لتوفيرا لقوام المطلوب والتوافق إلخ.؛ عند الدمج مع حمض نووي والمكونات الأخرى لتركيبة 0 صيدلانية معينة. تتضمن المواد الحاملة الصيدلانية المعيئة؛ ولكنها غير مقيدة ب عوامل ربط ‎binding‏ ‎Lis lis) agents‏ الشعير المعالج سلفا بالجيلاتين ‎maize starch‏ 01686101101260 بولي فينيل بيروليدون ‎polyvinylpyrrolidone‏ أو هيدروكسي بروبيل ميثيل سيليلوز ‎chydroxypropyl methylcellulose‏ الخ.)؛ مواد ‎fillers ea‏ (مثلا » لاكتوز وسكريات أخرى؛ سيليلوز دقيق البلور ‎emicrocrystalline cellulose‏ بكتين ‎¢pectin‏ جيلاتين ‎gelatin‏ كالسيوم سلفات ‎Ji) «calcium sulfate‏ سيليلوز ‎cethyl cellulose‏ بولي 15 أكريلات ‎polyacrylates‏ أو كالسيوم هيدروجين فوسفات ‎«calcium hydrogen phosphate‏ إلخ.)؛ مزلقات ‎lis) lubricants‏ ستيرات مغنسيوم ‎stearate‏ 0880651000 تلك؛ ‎esilica Salus‏ ثاني أوكسيد السيليكون الغرواني ‎«colloidal silicon dioxide‏ حمض ستيريك»؛ ستيرات معدنية ‎emetallic stearates‏ زيوت النباتات المهدرجة ‎Wis chydrogenated vegetable oils‏ الذرة؛ بولي إيثيلين مركبات جليكول ‎polyethylene‏ ‎glycols‏ بنزوات صوديوم ‎sodium benzoate‏ صوديوم أسيتات ‎sodium acetate‏ إلخ.)؛ مواد تفكيك ‎disintegrants 0‏ (مثلا؛ النشاء جليكولات ‎Las‏ الصوديوم ‎csodium starch glycolate‏ إلخ.)؛ وعوامل الترطيب ‎wetting agents‏ (مثلاء؛ سلفات صوديوم توريل ‎<sodium lauryl sulphate‏ إلخ). يمكن استخدام السواغات العضوية أو غير العضوية المقبولة صيدلانيا المناسبة من أجل الإعطاء غير بالحقن والتي لا تتفاعل بشكل ضار مع الأحماض النووية لصياغة التركيبات وفقا للاختراع الحالي. تتضمن المواد الحاملة المقبولة صيدلانيا المناسبة؛ ولكنها غير مقيدة ب؛ ‎cole‏ محاليل ‎solutions dale‏ علدو ككحولات؛ مركبات بولي إيثيلين ‎(Jia‏ جيلاتين؛ لاكتوزء أميلوز ‎amylose‏ ستيرات مغنسيوم؛ تلك؛
حمض سيليسيك ‎silicic acid‏ بارافين لزج ‎viscous paraffin‏ هيدروكسي ميثيل سيلبلوز
‎chydroxymethylcellulose‏ بولي فينيلبيروليدون ‎¢polyvinylpyrrolidone‏ وما شابه.
‏يمكن أن تتضمن صيغ الإعطاء الموضعي للأحماض النووية محاليل مائية معقمة وغير معقمة؛ محاليل
‏غير مائية بالإضافة إلى مذيبات مشتركة مثل كحولات؛ أو محاليل من الأحماض النووية في مواد قاعدية
‏5 زبتية ‎oil bases‏ سائلة أو صلبة. يمكن أن تحتوي المحاليل أيضا على محاليل منظمة؛ مخففات وغيرها من
‏المواد المضافة الأخرى. يمكن استخدام سواغات عضوية أو غير عضوية مقبولة صيدلانيا مناسبة للإعطاء
‏بغير الحقن التي لا تتفاعل بشكل ضار مع الأحماض النووية.
‏تتضمن السواغات المناسبة المقبولة صيدلانيا؛ ولكنها غير مقيدة ب؛ ماء؛ محاليل ملحية؛ كحول؛ بولي
‏إيثيلين مركبات جليكول؛ جيلاتين» لاكتوزء أميلوز» ستيرات مغنسيوم ¢ تلك حمض سيلسيك؛ بارافين لزج؛ 0 هيدروكسي ميثيل سيليلوز؛ بولي فينيل بيروليدون؛ وما شابه.
‎vii‏ مكونات أخرى
‏يمكن أن تحتوي التركيبات وفقا للاختراع الحالي على مكونات أخرى مجاورة موجودة في التركيبات
‏الصيدلانية؛ عند مستويات الاستخدام المقبولة في المجال. ‎Sle Jab‏ يمكن أن تحتوي التركيبات على
‏مكونات إضافية متوافقة فعالة صيدلانيا ‎Ole (Jie‏ مضادات الشوائب ‎antipruritics‏ وعوامل القابضة للأوردة 5 ومواد التعقيم الموضعي ‎local anesthetics‏ ومضادات الالتهاب ‎anti- agents‏
‎inflammatory‏ ودمكن أن تحتوي على مواد مفيدة للاصيغة المادية للعديد من صور جرعة التركيبات وفقا
‏للاختراع الحالي؛ مثل الصباغات؛ عوامل التنكيه؛ المواد الحافظة؛ مضادات الأكسدة»؛ المركبات اللاإنفاذية
‎copacifiers‏ عوامل إكساب القوام ومواد التثبيت. مع ذلك؛ هذه المواد؛ عند الإضافة؛ يجب ألا تتداخل مع
‏الأنشقط البيولوجية لمكونات التركيبات وفقا للاختراع الحالي. يمكن أن تكون الصيغ معقمة و؛ عند الحاجة؛ 0 يتم خلطها مع العوامل الإضافية؛ ‎lie‏ المزلقات؛ المواد الحافظة؛ مواد التثبيت» عوامل الترطيب؛
‏المستحلبات؛ أملاح التأثير على الضغط التناضحي ‎cosmotic pressure‏ المحاليل المنظمة؛ الملونات؛
‏المنكهات و/أو المعطرات وما شابه والتي لا تتفاعل بشكل ضار مع الحمض النووي للصيغة.
‏يمكن أن تحتوي المعلقات المائية ‎Aqueous suspensions‏ على المواد التي تزيد من لزوجة المعلق شاملة؛
‎Sle‏ صوديوم كريوكسي ميثيل سيليلوز» سوربيتول» أو دكستران. يمكن أن يحتوي المعلق ‎Lad‏ على مواد 5 التثبيت.
في بعض النماذج؛ تتضمن التركيبات الصيدلانية الموضحة في الاختراع (أ) واحد أو أكثر من حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة و(ب) واحد أو أكثر من عوامل ‎Allg‏ تعمل بواسطة آلية غير حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة والتي يتم استخدامها في علاج اضطراب مرتبط بمركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1. يمكن تحدي السمية والأثر العلاجي لهذه المركبات بواسطة الإجراءات الصيدلانية المعيارية في مزارع الخلية أو الحيوانات الاختبارية؛ ‎lie‏ لتحديد 1050 (الجرعة ‎dose lethal diss‏ حتى 750 من المجموعة) و5050 (الجرعة فعالة ‎dose therapeutically effective Ladle‏ في 750 من المجموعة). نسبة الجرعة بين الآثار السمية والعلاجية هي المؤثر العلاجي ويمكن التعبير عنها بنسبة الجرعة مميتة حتى 750 من المجموعة/الجرعة فعالة علاجيا في 750 من المجموعة. يفضل استخدام المركبات التي تبين مؤشرات علاجية ‎therapeutic indices‏ عالية. 0 يمكن استخدام البيانات التي تم الحصول عليها من فحوص مزرعة الخلية والدراسات الحيوانية في صياغة نطاق جرعة للاستخدام في البشر. تقع جرعة التركيبات الموضحة هنا في الاختراع بشكل عام في نطاق تركيزات دوارة تتضمن الجرعة فعالة علاجيا في 750 من المجموعة مع نسبة سمية منخفضة أو معدومة. يمكن أن تختلف الجرعة في هذا النطاق بشكل يعتمدعلى صورة الجرعة المستخدمة ومسار الإعطاء المستخدمة. بالنسبة لأي مركب مستخدم في الطرق الموضحة في الاختراع» يمكن تقدير الكمية الفعالة ‎Ladle 5‏ أوليا من فحوص مزرعة الخلية. يمكن صياغة الجرعة في النماذج الحيوانية لتحقيق نطاق تركيز في البلازما للمركب أو؛ عند الملائمة؛ لمنتج بولي ببتيد ‎polypeptide‏ من المتوالية المستهدفة ‎lia)‏ تحقيق التركيز المنخفض من بولي ببتيد) التي تتضمن 10650 (أي؛ تركيز المركب الاختباري الذي يقوم بتحقيق نصف أقصى تثبيط ‎half-maximal inhibition‏ للأعراض) كما هو محدد في مزرعة الخلية. يمكن استخدام هذه المعلومات بحيث تقوم بتحديد الجرعات المفيدة في البشر بدقة. يمكن قياس مستويات البلازماء ‎Ole‏ ‏0 بواسطة كروماتوجراف سائل عالي الأداء. بالإضافة إلى إعطاؤهاء وفقا لما هو مذكور ‎(Sa del‏ إعطاء أحماض رببونيكلويك مزدوجة الجديلة الموضحة في الاختراع في توليفة مع عوامل أخرى معروفة فعالة في علاج العمليات المرضية التي يتوسط فيها التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1. في أي حالة؛ يمكن أن يقوم الطبيب بتعديل كمية وتوقيت إعطاء حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة على أساس النتائج الملحوظة باستخدام التدابير 5 القياسية للفعالية المعروفة في المجال أو موضحة هنا.
1 ‏طرق لتثبيط التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج‎ VI
يقدم الاختراع الحالي أيضا طرق تثبيط التعبير عن جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 في
خلية. تتضمن الطرق ملامسة خلية مع عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة؛ ‎Ole‏ عامل حمض
رببونيكلويك ثنائي الجديلة مزدوج الجديلة؛ بكمية فعالة لتثبيط التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية
المبرمج 1 في الخلية؛ بالتالي تثبيط التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 في الخلية. في
نماذج معينة وفقا للاختراع؛ يتم تثبيط مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 بشكل مفضل في الخلايا
الكبدية.
يمكن تفنيذ ملامسة خلية مع حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة؛ ‎Sle‏ عامل حمض رببونيكلوبك ثنائي
الجديلة مزدوج الجديلة؛ في المعمل أو في الكائن الحي. يمكن أيضا ملامسة خلية في الكائن الحي مع 0 يتضمن حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة ملامسة خلية أو مجموعة خلايا في خاضع؛ ‎Ole‏ خاضع
بشري؛ مع حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة. يمكن أيضا تنفيذ طرق توليفات في المعمل وفي الكائن الحي
لملامسة خلية. يمكن ملامسة خلية بشكل مشابه أو غير مشابه؛ وفقا لما هو مذكور أعلاه. علاوة على
ذلك؛ ‎(Ka‏ تحقيق ملامسة الخلية عبر استهداف مركب ترابطي؛ شاملا أي مركب ترابطي موضح هنا أو
معروف في المجال. في النماذج المفضلة؛ المركب الترابطي المستهدف عبارة عن شق كربوهيدرات؛ ‎Ole‏ ‏5 مركب ترابطي 77-أسيتيل جالاكتوز أمين 3 أو أي مركب ترابطي آخر يقوم بتوجيه عامل حمض
ريبونيكلويك ثنائي الجديلة إلى موقع محل الاهتمام.
يتم استخدام المصطلح ‎Medan‏ حسب الاستخدام هناء بشكل تبادلي مع 'تقليل؛" "الإسكات؛" "الخفض
المتحكم فيه" "القمع”؛ وغيرها من المصطلحات المشابهة؛ وتتضمن أي مستوى من التثبيط.
يقصد بالعبارة 'تثبيط التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1" أن تشير إلى تثبيط التعبير 0 عن أي جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 ‎cin)‏ مثلاء جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية
المبرمج 1 فأري» جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 ‎Dal‏ جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية
المبرمج 1 قردء أو جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 بشري) بالإضافة إلى متغيرات أو
متطفرات من جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1. ‎Jl‏ يمكن أن يكون جين مركب ترابطي
1 لموت الخلية المبرمج 1 عبارة عن جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 من النوع البري؛ جين 5 مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 متطفرء أو جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 متحور
في سياق الخلية المعدلة ‎genetically manipulated cell Lina‏ مجموعة من الخلاياء أو الكائن.
يتضمن "تثبيط التعبير عن جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1" أي مستوى من تثبيط جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج ‎Slee]‏ القمع الجزئي على الأقل للتعبير عن جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1. يمكن تقييم التعبير عن جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 بناء على مستوى؛ أو التغير في المستوى؛ لأي متغير مرتبط بجين التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 مثلاء مستوى مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 الحمض النووي الريبوزي المرسل أو مستوى بروتين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1. يمكن تقييم هذا المستوى في خلية فردية أو مجموعة من الخلايا؛ شاملة؛ ‎lie‏ عينة مشتقة من خاضع. يتم فهم أن التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 الذي يمكن أن قريب من أو تحت مستوى الكشف في خاضع طبيعي في العديد من أنواع الخلية وجسم موائع. بالتالي» يمكن أن يقوم تثبيط التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية
0 المبرمج 1 ‎Ole‏ بمقارنة مستوى مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 في كبد الخاضع المصاب بفيروس التهاب الكبد قبل ويعد الدواء مع عامل لتثبيط مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 أو في الووم قبل أو بعد دواء مع عامل لتثبيط مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1. في نماذج معينة؛ يمكن استخدام مرقمات محيطة للكشف عن تثبيط مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1. مثلاء علاج فعال لإصابة؛ مثلاء إصابة فيروس التهاب الكبد كما هو مبين بواسطة معايير التشخيص
5 والمراقبة المقبولة مع عامل لتقليل التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 والذي يمكن فهمه على أنه يبين التقليل السريري الملحوظ في مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1. يمكن فهم تثبيت أو تقليل حمل الورم ‎tumor burden‏ في خاضع مع السرطان كما هو محدد بواسطة معيار أآر إى سى آى أس تى ‎RECIST‏ بعد العلاج بعامل لتقليل مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 على أنه يبين تقليل مرتبط سريريا في مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1.
‎(Ke 0‏ تقييم التثبيط بواسطة التقليل في المستوى المطلق أو النسبي لواحد أو أكثر من المتغيرات المرتبطة بالتعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 مقارنة بمستوى العينة الضابطة. يمكن أن يكون مستوى العينة الضابطة ‎Ble‏ عن مستوى أي نوع ‎die‏ ضابطة التي يتم استخدامها في المجال؛ ‎Ole‏ ‏مستوى قاعدة أساسية ما قبل الجرعة؛ أو مستوى محدد من خاضع مشابه ‎die Ole)‏ ضابطة نسيجية)؛ خلية؛ أو عينة لم يتم علاجها أو تم علاجها بعينة ضابطة ‎Sie Jia)‏ عينة ضابطة من محلول منظم
‏5 فقط أو عامل غير نشط ‎.(inactive agent‏
في بعض نماذج طرق الاختراع؛ يتم التعبير عن جين يتم تثبيط مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 بواسطة على الأقل 20ت 25ت 30 35كت 40 45كت 50ك 5ك ‎S60‏ 65كت 70ل ‎JT5‏ ‏0 285 290؛ أو 295 أو إلى أقل من مستوى كشف الفحص. في نماذج معينة؛ تتضمن الطرق تثبيط مرتبط نسبيا للتعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1؛ مثلا كما هو مبين بواسطة ناتج مرتبط سريريا بعد علاج خاضع مع عامل لتقليل التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1. يمكن إظهار تثبيط التعبير عن جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 بواسطة التقليل في كمية الحمض النووي الرببوزي المرسل المعبر عنها بواسطة الخلية الأولى أو مجموعة من الخلايا (يمكن وجود هذه ‎Ole (WDA‏ في عينة مشتقة من خاضع) حيث يتم انتساخ الجين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 والذي يمكن علاجه ‎lie)‏ بواسطة ملامسة الخلية أو خلايا مع حمض رببونيكلويك ثنائي 0 الجديلة وفقا للاختراع؛ أو بواسطة إعطاء حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة وفقا للاختراع إلى خاضع حيث كانت أو تكون الخلايا موجودة) بحيث يتم تثبيط التعبير عن جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 مقارنة بخلية ثانية أو مجموعة من خلايا مطابقة للخلية الأولى أو مجموعة من خلايا ولكنها لام ولن يتم علاجها (خلية مقارنة غير معالجة بحمض رببونيكلوبك ثنائي الجديلة أو غير معالجة بت حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة مستهدف إلى الجين محل الاهتمام). في النماذج المفضلة؛ يتم تقييم التثبيط 5 بواسطة الطريقة التي تم توفيرها في المثال 2 في كارسينوما ‎WA‏ القولون البشري ‎human colon‏ ‎carcinoma cells‏ كيه أوه ‎RKO‏ مع 10 نانومولار حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة ومعبرة عن مستوى الحمض النووي الريبوزي المرسل في خلايا معالجة كنسبة مستوى الحمض النووي الريبوزي المرسل في خلايا ضابطة؛ باستخدام المعادلة التالية: [(الحمض النووي الريبوزي المرسل في الخلايا المقارنة) — (الحمض النووي الريبوزي المرسل في الخلايا 0 المعالجة)] / الحمض النووي الريبوزي المرسل في الخلايا المقارنة * 7100 في نماذج أخرى؛ يمكن تقييم تثبيط التعبير عن جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 من حيث تقليل متغير مرتبط وظيفيا بجين التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1؛ ‎Sle‏ يمكن تحديد بروتين التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 أو مسار إرسال إشارة مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 51. يمكن تحديد إسكات جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 في أي خلية معبرة 5 عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 إما داخليا أو بشكل غير متجانس من بنية تعبير» وبواسطة أي فحص معروف في المجال.
يمكن إظهار تثبيط التعبير عن بروتين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 بواسطة التقليل في مستوى بروتين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 المعبر عنه بواسطة خلية أو مجموعة خلايا ‎Di)‏ ‏مستوى بروتين المعبر عنه في عينة مشتقة من خاضع). كما هو موضح أعلاه؛ لتقييم قمع الحمض النووي الريبوزي المرسل؛ يمكن التعبير عن تثبيط مستوى التعبير عن البروتين في خلية معالجة ‎treated cell‏ أو مجموعة من ‎WAY‏ بشكل مشابه بنسبة مستوى بروتين في خلية ضابطة ‎control cell‏ أو مجموعة من الخلايا. تتضمن الخلية المقارنة أو مجموعة الخلايا التي يمكن استخدامها لتقييم تثبيط للتعبير عن جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 خلية أو مجموعة خلايا لم يتم تلامسها سلفا مع عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة وفقا للاختراع. ‎Ole‏ يمكن اشتقاق الخلية المقارنة أو مجموعة الخلايا من فرد خاضع (مثلا؛ 0 إنسان أو حيوان خاضع) قبل علاج الخاضع مع عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة. يمكن تحديد مستوى مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 الحمض النووي الريبوزي المرسل المعبر عنه بواسطة خلية أو مجموعة خلايا باستخدام أي طريقة معروفة في المجال لتقييم التعبير عن الحمض النووي الريبوزي المرسل. في أحد النماذج؛ يتم تحديد مستوى التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 في عينة بواسطة الكشف عن بولي نيكلوتيد منتسخ ‎ctranscribed polynucleotide‏ أو ‎gia‏ منه؛ مثلاء 5 الحمض النووي الريبوزي المرسل لجين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1. يمكن استخلاص الحمض النووي الريبوزي من ‎WIA‏ باستخدام الحمض النووي الريبوزي تقنيات الاستخلاص شاملة؛ ‎lie‏ باستخدام استخلاص حمض فينول/جوانيدين أيزو فيرو سيانات ‎RNAzol ( guanidine isothiocyanate extraction‏ ‎¢(B; Biogenesis‏ طقم تحضير ‎RNeasy™‏ الحمض النووي الريبوزي ‎(Qiagen®)‏ أى ‎PAXgene‏ ‎(PreAnalytix, Switzerland)‏ تتضمن صيغ الفحص المثالية باستخدام حمض رببونيكلويك فحوص؛» أر تى 87- تفاعل سلسلة بوليمراز» فحوص حماية ‎RNase‏ تبقيع نورثرن؛ التهجين في الموقع؛ وتحليل المصفوفة الدقيقة. يمكن الكشف عن تدوير مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 الحمض النووي الريبوزي المرسل باستخدام الطرق موضحة في منشور البراءة الدولية 177906/2012» وقد تم دمج محتوياتها هنا بالكامل بالإشارة إليها كمرجع. في بعض النماذج؛ يتم تحديد مستوى التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 باستخدام مسبار حمض نووي ‎.nucleic acid probe‏ المصطلح ‎ld‏ حسب الاستخدام هناء يشير إلى أي جزيء قادر على الارتباط انتقائيا بمركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1. يمكن تخليق المسابير ‎Probes‏
بواسطة أحد الخبراء في المجال» أو مشتقة من المستحضرات البيولوجية ‎biological preparations‏ المناسبة. يمكن تصميم المسابير ليتم تعليمها انتقائيا. يمكن استخدام الأمثلة على جزيئات كمسابير تتضمن؛ ولكنها غير مقيدة ب» الحمض النووي الرببوزي؛ حمض رببوزي نووي منزوع الأكسجين؛ بروتينات؛ الأجسام المضادة؛ وجزيئات عضوية ‎-organic molecules‏ يمكن استخدام الحمض النووي الريبوزي المرسل المعزولة في فحوص التهجين أو التكبير التي تتضمن؛ ولكنها غير مقيدة ب» تحليل ساذرن أو نورثرن»؛ تحليل تفاعل سلسلة بوليمراز ومصفوفة المسابير ‎probe‏ ‏5 . تتضمن إحدى الطرق لتحديد مستويات الحمض النووي الريبوزي المرسل ملامسة الحمض النووي الريبوزي المرسل المعزولة مع جزيء حمض نووي (مسبار) والذي يمكن أن يتهجن إلى مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 الحمض النووي الريبوزي المرسل. في أحد النماذج؛ يتم نقل الحمض النووي 0 الريبوزي المرسل على سطح صلب وتتم الملامسة مع مسبارء مثلا بواسطة تشغيل الحمض النووي الرببوزي المرسل المعزول على جل أجاروز ‎agarose gel‏ وتحويل الحمض النووي الريبوزي المرسل من الجل إلى الغشاء؛ ‎Jia‏ نيترو سيليلوز ‎.nitrocellulose‏ في نموذج ‎ebay‏ يتم نقل المسبار على سطح صلب وتتم ملامسة الحمض النووي الرببوزي المرسل مع المسبارء ‎Ole‏ في مصفوفة ‎GeneChip®‏ ختتاعترالط. يمكن للخبير في المجالأن يقوم باعتماد طرق كشف عن الحمض النووي الريبوزي المرسل للاستخدام في 5 تحديد مستوى مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 الحمض النووي الريبوزي المرسل. تتضمن طريقة بديلة لتحديد مستوى التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 في عينة عملية تكبير حمض نووي و/أو ترانسكريبتاز عكسي (لتحضير الحمض الريبوزي النووي المنزوع الأكسجين المكمل ‎Dic (cDNA) complementary deoxyribonucleic acid‏ الحمض النووي الريبوزي المرسل في العينة؛ ‎lke‏ بواسطة 7»-تفاعل سلسلة بوليمراز (النموذج الاختباري المذكور في 1987 ‎Mullis,‏ براءة الاختراع
Barany (1991) Proc. Natl. Acad. Sci.) ligase chain reaction ‏رقم 4683202)؛ تفاعل سلسلة ليجاز‎ 0
Guatelli er ) self sustained sequence replication ‏متوالية تكاثر ذاتية الاستدامة‎ «(USA 88:189-193
Kwoh ef al.) ‏نظام التكبير الانتساخي‎ ¢(al. (1990) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87:1874-1878
Lizardi er al. (1988) ) Q-Beta Replicase ¢((1989) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 86:1173-1177 ‏براءة‎ «.Lizardi et al) rolling circle replication ‏دائرة التكاثر الدوارة‎ «(Bio/Technology 6:1197 5 الاختراع رقم 58544033( أو أي طريقة تكبير حمض ‎(Gost‏ متبوعة بالكشف عن الجزيئات المكبرة ‎amplified molecules‏ باستخدام التقنيات المعروفة لذوي الخبرة في المجال. تعتبر مخططات الكشف هذه
مفيدة خصيصا في الكشف عن جزيئات الأحماض النووية إذا كانت هذه الجزيئات موجودة بأرقام منخفضة. في جوائب محددة للاختراع؛ يتم تحديد مستوى التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 بواسطة ‎Je WRT‏ سلسلة بوليمراز الفلوروجيني الكمي ‎quantitative fluorogenic‏ (أي ‎(TagManTM System‏ أو فحص ‎Dual-Glo® Luciferase‏ في المثال 2.
يمكن مراقبة التعبير عن مستويات مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 الحمض النووي الريبوزي المرسل باستخدام مخطط غشائي (مثل ذلك المستخدم في تحليل التهجين مثل نورثرن؛ ساذرن؛ دوت؛ وما شابه)؛ أو العيون الدقيقة؛ أنابيب العينة؛ الجلات؛ الكريات أو الألياف ‎fibers‏ (أو أي دعامة صلبة تتضمن أحماض نووية مربوطة ‎(bound nucleic acids‏ انظر براءات الاختراع الأمريكية أرقام 5770722 5874219« 5744305 5677195 5 5445934« والتي تم دمجها هنا بالإشارة إليها كمرجع. يمكن أن
0 يتضمن تحديد مستوى التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 أيضا استخدام مسابير حمض نووي في محلول. في النماذج المفضلة؛ يتم تقييم مستوى التعبير عن الحمض النووي الريبوزي المرسل باستخدام فحوص حمض رببوزي نووي منزوع الأكسجين متفرع أو تفاعل سلسلة بوليمراز في الوقت الفعلي. باستخدام وصف طريقة تفاعل سلسلة بوليمراز وتقديم أمثلة عليها في الأمثلة المقدمة هنا. يمكن استخدام هذه الطرق أيضا 5 للكشف عن أحماض نووية مرضية ‎Mie pathogen nucleic acids‏ أحماض نووية لفيروس التهاب الكبد ‎-hepatitis virus nucleic acids‏ يمكن تحديد مستوى بروتين التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 باستخدام أي طريقة ‎dd pe‏ في المجال لقياس مستويات البروتين. تتضمن هذه الطرق؛ء ‎Ole‏ التخريم الكهربي ‎electrophoresis‏ الانتقال الكهربي الشعري ‎ccapillary electrophoresis‏ كروماتوجراف سائل عالي ‎cela!‏ ‏0 كروماتوجراف الطبقة الرقيقة ‎¢(TLC) thin layer chromatography‏ كروماتوجراف فائق التسريب ‎chyperdiffusion chromatography‏ تفاعلات ترسيب ‎precipitin reactions‏ مائع أو ‎Ja‏ مطياف امتصاص ‎cabsorption spectroscopy‏ فحوص الكالوري ‎colorimetric assays‏ فحوص طيفية ضوئية ‎¢spectrophotometric assays‏ تدفق سمي خلوي ‎(flow cytometry‏ التسريب المناعي ‎immunodiffusion‏ ‏(الفردي أو المزدوج)؛ التخريم المناعي الكهربي ‎dmmunoelectrophoresis‏ تخطيط ‎(ying‏ الفحص 5 الإشعاعي ‎(RIA) radioimmunoassay‏ الفحوص الماصة مناعية المرتبطة بإتزيم ‎enzyme-linked‏ ‎«(ELISAs) immunosorbent assays‏ فحوصض التألق المناعي ‎dimmunofluorescent assays‏ فحوص
التألق الضوئي الكهربي الكيماوي ‎celectrochemiluminescence assays‏ وما شابه. يمكن استخدام هذه الفحوص للكشف عن بروتينات تشير إلى وجود أو تكاثر المسببات المرضية 080108808 مثلا بروتينات فيروسية ‎.viral proteins‏ في بعض النماذج؛ يتم تقييم فعالية طرق الاختراع في علاج الأمراض المرتبطة ب مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 بواسطة تقليل في مستوى مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 الحمض النووي الرربوزي المرسل (بواسطة خزعة الكبد). في بعض النماذج؛ تتم مراقبة فعالية طرق الاختراع في علاج إصابة فيروس التهاب الكبد ب بواسطة تقييم توليفات مرقمات مصلية ‎Udy serological markers‏ لما هو مذكور أدناه . يمكن مراقبة فعالية علاج خاضعين مع فيروس التهاب الكبد ب بواسطة الكشف عن مولد ضد مستوى التهاب الكبد ‎B‏ أو ‎HBeAg‏ ‏10 في الخاضع؛ حيث يشير التقليل في مستوى ‎Age‏ ضد مستوى التهاب الكبد ‎lie (HBeAg SB‏ في المصل؛ إلى علاج فعال للمرض. في النماذج المفضلة؛ يكون التقليل في مستوى مولد ضد مستوى التهاب الكبد ‎B‏ أو ‎HbeAg‏ مرتبط سريرياء مثلاء مقارن بمستوى التقليل الملحوظ مع معيار الرعاية. يمكن تحديد فعالية الدواء أيضا بواسطة التقليل الملحوظ سريريا لمستوى فيروس التهاب الكبد ب حمض ريبوزي نووي منزوع الأكسجين في الخاضع؛ مثلاء مقارنة بمستوى التقليل الملحوظ مع معيار الرعاية؛ مثلاء القمع 5 بواسطة على الأقل 4 و:عم1 وحدة مركزة/ملل» بشكل مفضل على الأقل 5 ‎logo‏ وحدة مركزة/ملل (داي ‎(enstag, Hepatology, 2009, 49:5112-1‏ . يمكن تحديد فعالية الدواء ‎Load‏ بواسطة وجود مضاد ل مولد ضد مستوى التهاب الكبد ‎B‏ الأجسام المضادة. في بعض النماذج» يمكن مراقبة فعالية الطريقة وفقا للاختراع في علاج السرطان بواسطة تقييم خاضع للحفاظ على أو بشكل مفضل تقليل حمل الورم للورم الأساسي أو الورم النقيلي أو الوقاية من التنقل. طرق 0 الكشف عن ومراقبة حمل الورم معروفة في المجال؛ ‎lie‏ معيار ‎RECIST‏ الذي تم توفيره في ‎Eisenhauer‏ ‎et al., 2009, New response evaluation criteria in solid tumours: Revised RECIST guideline‏ ‎(version 1.1). Eur.
J.
Cancer. 45:228-247‏ في بعض نماذج طرق الاختراع؛ يتم إعطاء حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة إلى خاضع بحيث يتم توصيل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة إلى موقع معين في الخاضع. يمكن تقييم تثبيط التعبير عن مركب ترابطي ‎١ 5‏ لموت الخلية المبرمج 1 باستخدام قياسات مستوى أو التغير في مستوى مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 الحمض النووي الريبوزي المرسل أو بروتين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 في عينة
مشتقة من موقع معين في الخاضع؛ ‎lhe‏ الكبد. في نماذج معينة؛ تتضمن الطرق تثبيط مرتبط نسبيا للتعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1؛ مثلا كما هو مبين بواسطة ناتج مرتبط سريريا بعد علاج خاضع مع عامل لتقليل التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1. حسب الاستخدام ‎(la‏ يتم فهم مصطلحات الكشف عن أو تحديد مستوى نتيجة التحليل بأنه يعني تنفيذ الخطوات لتحديد ما إذا كانت هناك مادة؛ مثلاء بروتين؛ الحمض النووي الريبوزي؛ موجود. حسب الاستخدام هناء تتضمن طرق الكشف عن أو تحديد الكشف عن أو تحديد مستوى ناتج تحليل ‎anlyte‏ أقل من مستوى الكشف عند استخدام الطريقة. النماذج الحيوانية للأمراض المرتبطة بمركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 معروفة جيدا في المجال. ‎Sle‏ النماذج الحيوانية لالتهاب الكبد 3[ معروفة في المجال شاملة شمبانزي؛ الفأر الجبلي؛ والتماذج الفأرية 0 المتحولة جينيا من فيروس التهاب الكبد ب ‎Wieland, 2015. Cold Spring Harb.
Perspect.
Med.,)‏ ‎5:a021469, 2015; Tennant and Gerin, 2001. ILAR Journal, 42:89-102; and Moriyama et al.,‏ ‎Science, 248:361-364‏ .1990( يمكن استخدام نموذج الشمبانزي أيضا كنموذج لالتهاب الكبد 0. النماذج المقارنة من ‎LIA‏ العقد الليمفاوية المزمنة في مقابل الحادة ‎acute lymphocytic choriomeningitis virus‏ ‎(LCMV)‏ مفيدة في دراسة الاستنفاد المناعي )68:8056-8063 ‎-(Matloubian et al., 1994, J.
Virol.‏ هناك عدد كبير من نماذج السرطان شاملة مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 معبرة عن الأورام معروفة في المجال (99:12293-12297 ‎(Iwai et al., 2002, PNAS,‏ 1. طرق علاج أو الوقاية من الأمراض المرتبطة ب مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 يقدم الاختراع الحالي أيضا طرق استخدام حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة وفقا للاختراع أو تركيبة تحتوي 0 على حمض رببونيكلوبك ثنائي الجديلة وفقا للاختراع لتقليل أو تثبيط التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 في خلية. تتضمن الطرق ملامسة الخلية مع حمض رببونيكلوبك ثنائي الجديلة وفقا للاختراع والحفاظ على الخلية لمدة كافية للحصول على تدهور مستنسخ الحمض النووي الريبوزي المرسل لجين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 01 بالتالي تثبيط التعبير عن جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 في الخلية. يمكن تقييم التقليل في التعبير الجيني عن بواسطة أي طرق معروفة في 5 المجال. مثلاء يمكن تحديد التقليل في التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 بواسطة تحديد الحمض النووي الريبوزي المرسل مستوى التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج ‎١1‏ مثلاء في
عينة الكبد؛ باستخدام طرق روتينية للخبير في المجال؛ ‎Sie‏ تخطيط نورثرن» 187-تفاعل سلسلة بوليمراز» ‎Jie Obie‏ التي تم توفيرها في المثال 2؛ بواسطة تحديد مستوى بروتين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 باستخدام طرق روتينية بالنسبة لواحد من ذوي الخبرة العادية في المجال؛ مثل تخطيط وسترن؛ التقنيات المناعية. يمكن أيضا تقييم التقليل في التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 أيضا بشكل غير مباشر بواسطة قياس تقليل في نشاط مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 البيولوجي أو قياس مستوى مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 في عينة ‎lie) dlls‏ عينة المصل). يمكن أيضا تقييم التقليل في التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 أيضا بشكل غير مباشر بواسطة قياس أو ملاحظة التغير» بشكل مفضل التغير المرتبط سريرياء في واحد على الأقل إشارة أو عرض لمرض مرتبط بمركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1. 0 في طرق الاختراع يمكن ملامسة الخلية في المعمل أو في الكائن الحي» أي؛ يمكن أن تكون الخلية موجودة في خاضع. يمكن أن تكون الخلية مناسبة لدواء باستخدام طرق الاختراع عبارة عن أي خلية تعبر عن جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1؛ بشكل مثالي خلية كبدية ‎iver cell‏ يمكن أن تكون الخلية للاستخدام المناسب في طرق الاختراع عبارة عن خلية كائن ثديي؛ مثلاء خلية كائن رئيسي (مثل خلية بشرية أو خلية 5 كائن رئيسي غير بشري» ‎Ole‏ خلية قرد أو خلية شمبانزي)؛ خلية كائن غير رئيسي (مثل خلية بقرة؛ خلية خنزير؛ خلية جمل؛ خلية ‎(LY‏ خلية حصان؛ خلية ماعزء خلية ‎en)‏ خلية خروف؛ خلية هامسترء خلية خنزير غينياء خلية قطء خلية كلب؛ خلية جرذ؛ خلية فأرء؛ خلية أسد؛ خلية نمرء خلية دب؛ أو خلية جاموس)؛ خلية طائر (مثلاء خلية بطة أو خلية إوزة)؛ أو خلية حوت؛ عندما تتضمن متوالية الجين المستهدف تكامل مع عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة لتعزيز الاستبعاد المستهدف. في أحد النماذج؛ 0 الخلية ‎ple‏ عن خلية بشرية؛ ‎le‏ خلية بشرية كبدية. يتم تثبيط التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 في الخلية بواسطة على الأقل 720 725 بشكل مفضل على ‎JV‏ 30ت 35ت 40 ‎J45‏ 50د 5ككت 60كت 65كت 70 3175 380 5 790 أو 295؛ أو إلى مستوى أقل من مستوى كشف الفحص. في نماذج معينة؛ تتضمن الطرق تثبيط مرتبط نسبيا للتعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1؛ مثلا كما هو مبين بواسطة ناتج 5 مرتبط سريريا بعد علاج خاضع مع عامل لتقليل التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1.
يمكن أن تتضمن طرق الاختراع في الكائن ‎all‏ إعطاء خاضع تركيبة تحتوي على حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة؛ حيث يتضمن حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة متوالية النيكلوتيد مكملة لجز على الأقل من مستنسخ الحمض النووي الريبوزي لجين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 للكائن الثديي المطلوب علاجه. عندما يكون الكائن المطلوب علاجه عبارة عن كائن ثديي ‎Jie‏ إنسان؛ يمكن إعطاء التركيبة بواسطة أي وسيلة معروفة في المجال شاملة؛ ولكنها غير مقيدة بالمسارات الفمية؛ عبر البريتونية ‎«intraperitoneal‏ أو مسارات الحقن ‎parenteral routes‏ شاملة داخل القحف ‎Die) intracranial‏ داخل وعاء ‎cintraventricular‏ داخل المتن الكبدي ‎cintraparenchymal‏ وداخل القراب ‎«(intrathecal‏ وربدياء عضلياء تحت الجلد؛ عبر الجلد؛ عبر المسار الهوائي (أيروسول) ‎cairway (aerosol)‏ أنفي؛ مستقيمي؛ وموضعيا (شاملة شدقيا وتحت اللسان). في نماذج معينة؛ يتم إعطاء التركيبات بواسطة التسريب أو الحقن 0 الوريدي. في نماذج معينة؛ يتم إعطاء التركيبات بواسطة الحقن تحت الجلدي ‎injection‏ 110001806005 . في بعض النماذج؛ يتم الإعطاء عبر وعاء حقن ‎depot injection‏ يمكن أن يقوم وعاء الحقن بإطلاق حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة بطريقة مستقرة عبر مدة زمنية مطولة. بالتالي؛ يمكن أن يقوم وعاء الحقن بتقليل تردد الجرعات ‎frequency of dosing‏ المطلوية للحصول على أثر مطلوب؛ مثلاء تثبيط مطلوب لمركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج ‎el‏ أو أثر علاجي. يمكن أن يقدم وعاء الحقن أيضا المزيد من 5 تركيزات مستقرة في المصل. يمكن أن تتضمن أوعية الحقن ‎Depot injections‏ عمليات الحقن تحت الجلد ‎subcutaneous injections‏ أو عبر العضل ‎intramuscular‏ في النماذج المفضلة»؛ وعاء الحقن عبارة عن حقن تحت جلدي. في بعض النماذج؛ يتم الإعطاء عبر مضخة. يمكن أن تكون المضخة ‎Ble‏ عن مضخة خارجية ‎external‏ ‎pump‏ أو مضخة مزروعة جراحيا ‎surgically implanted pump‏ في نماذج معينة؛ المضخة عبارة عن 0 مضخة تناضحية ‎osmotic pump‏ مزروعة تحت الجلد. في نماذج أخرى؛ المضخة ‎Ble‏ عن مضخة تسريب ‎(Kay infusion pump‏ استخدام مضخة التسريب للتسريب الوريدي؛ تحت الجلدي؛ الوريدي أو فوق الجافية ‎.epidural‏ في النماذج المفضلة؛ مضخة التسريب عبارة عن مضخة تسريبب تحت الجلد ‎subcutaneous infusion pump‏ في نماذج ‎GA‏ ؛ المضخة عبارة عن مضخة مزروعة جراحيا ‎Alls‏ تقوم بتوصيل حمض ريبونيكلوبك ثنائي الجديلة إلى الكبد. 5 يمكن اختيار وضع الإعطاء بناء على ما إذا كان الدواء مطلوب موضعيا أو جهازيا ويقوم على أساس المساحة المطلوب علاجها. يمكن اختيار مساحة وموقع الإعطاء لتحسين الاستهداف.
في أحد الجوانب؛ يقدم الاختراع الحالي أيضا طرق لتثبيط التعبير عن جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 في كائن ثديي. تتضمن الطرق إعطاء الكائن التديي تركيبة يتضمن حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة الذي يستهدف جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 في خلية للكائن الثديي والحفاظ على الكائن الثديي لمدة كافية للحصول على تدهور مستنسخ الحمض النووي الريبوزي المرسل لجين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1» بالتالي تثبيط التعبير عن جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 في الخلية. يمكن تقييم التقليل في التعبير الجيني بواسطة أي طرق معروفة في المجال وبواسطة طرق؛ ‎gRT Die‏ تفاعل سلسلة بوليمراز» موضحة هنا. يمكن تقييم التقليل في إنتاج البروتين بواسطة أي طرق معروفة في المجال وبواسطة طرق؛ مثلا الفحص الماص المناعي المرتبط بإنزيم ‎enzyme-linked‏ ‎(ELISA) immunosorbent assay‏ موضحة هنا. في أحد ‎oz dail‏ تعمل ‎due‏ خزعة ‎biopsy sample‏ 0 من ثقب الكبد ‎puncture liver‏ كمادة نسيج لمراقبة التقليل في جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 أو التعبير عن البروتين. في نماذج معينة؛ يتم تأكيد تثبيط للتعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 بواسطة ملاحظة النواتج السريرية الملحوظة. يقدم الاختراع الحالي أيضا طرق علاج خاضع محتاج له. تقدم طرق علاج وفقا الاختراع إعطاء حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة وفقا للاختراع إلى خاضع؛ مثلاء خاضع والذي قد يستفيد من التقليل أو تثبيط 5 التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1» في كمية فعالة علاجيا لحمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة تستهدف جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 أو تركيبة صيدلانية يتضمن حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة تستهدف جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1. يمكن إعطاء حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة وفقا للاختراع ك ‎men’‏ ريبونيكلويك ثنائي الجديلة حر." يتم إعطاء حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة حر في غياب تركيبة صيدلانية. يمكن أن يكون حمض ‎clap, 0‏ ثنائي الجديلة المجرد في صورة محلول منظم مناسب. يمكن أن يتضمن المحلول المنظم أسيتات؛ سيترات ‎ccitrate‏ برولامين ‎cprolamine‏ كربونات؛ أو فوسفات؛ أو أي توليفة مما سبق. في أحد النماذج؛ المحلول المنظم عبارة عن محلول ملحي منظم بفوسفات. يمكن تعديل درجة الحموضة وتناضح المحلول المنظم الذي يحتوي على حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة بحيث يكون مناسب للإعطاء للخاضع. بشكل بديل» يمكن إعطاء حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة وفقا للاختراع كتركيبة صيدلانية؛ مثل صيغة 5 حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة ليبوسومية.
الخاضعون الذين قد يستفيدون من التقليل أو التثبيط في جين التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية
المبرمج 1 هي تلك التي تتضمن اضطراب والتي قد تستفيد من تقليل الاستجابة المناعية؛ ‎lie‏ مريض
معدي؛ ‎Olle‏ مرض فيروسي؛ ‎lia‏ التهاب الكبد؛ أو السرطان.
‎(Ka‏ إعطاء عوامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة وغيرها من العوامل العلاجية عند نفس التوقيت أو
‏5 نفس التوليفة؛ ‎lie‏ بالحقن»؛ أو العامل العلاجي ‎therapeutic agent‏ الإضافي كجزءِ من تركيبة منفصلة
‏أو عند أوقات منفصلة أو بواسطة طريقة أخيرة معروفة في المجال أو موضحة هنا.
‏في أحد النماذج» تتضمن الطريقة إعطاء تركيبة موضحة هنا بحيث يتم تقليل التعبير عن جين مركب
‏ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 المستهدف؛ مثل بمقدار حوالي 1 2 3 4 5 6 7 8؛ 12 16؛
‏18( 24 ساعة؛ 28 32 أو حوالي 36 ساعة. في أحد النماذج؛ يتم تقليل التعبير عن جين مركب 0 ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 المستهدف لمدة مطولة؛ ‎Ole‏ على الأقل ‎Joa‏ اثنين من؛ 3؛ 4 أيام
‏أو أكثر من؛ مثلاء حوالي أسبوع؛ أسبوعين؛ 3 أسابيع؛ أو 4 أسابيع أو أطول؛ ‎lie‏ حوالي 1 ‎ed‏
‏شهرين؛ أو 3 أشهر.
‏بشكل ‎(Junie‏ أحماض رببونيكلويك مزدوجة الجديلة مفيدة للطرق والتركيبات الموضحة هنا خصوصا
‏الأحماض النووية الريبوزية مستهدفة (أساسية أو معالجة) لجين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 المستهدف. ‎(Sa‏ تحضير وتنفيذ تركيبات وطرق لتثبيط ‎pail)‏ عن هذه الجينات باستخدام أحماض
‏ريبونيكلويك مزدوجة الجديلة كما هو موضح هنا.
‏يمكن أن يؤدي إعطاء حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة وفقا لطرق الاختراع إلى تقليل في الحدة؛ الإشارات؛
‎abel‏ أو المرقمات الخاصة بهذه الأمراض أو الاضطرابات في مريض مصاب ب؛ ‎ie‏ مركب ترابطي
‏1 لموت الخلية المبرمج 1 مرتفعة أو ورم مستجيب لمركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1. بواسطة 0 "لتقليل" في هذا السياق يقصد بالتقليل الملحوظ إحصائيا في هذا المستوى؛ ‎Ole‏ مستوى مؤشر وجود
‏مسبب مرضي ‎pathogen‏ في خاضع؛ مثلاء مولد ضد مستوى التهاب الكبد ‎«B‏ عذفء18 ‎HB cccDNA sf‏
‏في المصل لخاضع مصاب بالتهاب ‎Bas‏ يمكن أن يكون التقليل» ‎Se‏ على الأقل حوالي 720؛
‏5 بشكل مفضل على الأقل 30ت 35ت 40)ن ‎S50 S45‏ 55ك 60ت 65كت 70ن ‎JTS‏
‏0 285 290 أو 295؛ أو إلى أقل من مستوى كشف الفحص المستخدم. في نموذج معين؛ تشير 5 الزيادة في مرقم؛ ‎lie‏ الجسم المضاد ل 1135 إلى تقليل حدة المرض. بالتالي؛ يمكن أن تكون هناك زيادة
‏ملحوظة في في مستوى الجسم المضاد؛ ‎Ole‏ لمستوى ‎LB‏ للكشف عنه في الخاضع.
يمكن تقييم فعالية الدواء أو الوقاية من ‎«papell‏ مثلا بواسطة قياس تقدم المرضء الإبراء من المرض؛ حدة العرض» التقليل في الألم» جودة الحياة؛ جرعة الدواء المطلوية لتحمل أثر الدواء؛ مستوى مرض المرقم؛ أو أي متغير آخر قابل للقياس لمرض معين يتم علاجه أو تم استهدافه للوقاية. سوف يكون الخبير في المجال قادر على مراقبة فعالية الدواء أو الوقاية بواسطة قياس أي من هذه المتغيرات؛ أو أي توليفات من المتغيرات. مثلا؛ فعالية دواء اضطراب والذي قد يستفيد من الاستجابة المناعية الزائدة؛. ‎Ole‏ مرض معدي؛ ‎Ole‏ ‏مرض فيروسيء ‎lia‏ التهاب الكبد؛ أو السرطان. يمكن توضيح فعالية علاج مرض معدي؛ ‎Ole‏ بواسطة تقليل في وجود العامل المعدي كما هو مبين بواسطة عدم القدرة على زراعة العامل من العينة الحالية. يمكن إظهار فعالية علاج مرض معدي بواسطة تقليل في وجود العامل المعدي ‎infectious agent‏ كما هو مبين؛ ‎Ole‏ بواسطة تقليل في بروتين» حمض 0 نووي» أو كربوهيدرات موجود في العامل المعدي. ‎(Sar‏ إظهار فعالية الدواء»؛ مثلاء بواسطة وجود الاستجابة المناعية كما هو مبين بواسطة وجود الأجسام المضادة أو الخلايا المناعية ‎immune cells‏ المستهدفة في مقابل العامل المعدي. يمكن إظهار فعالية علاج مرض معدي بواسطة تقليل في وجود العامل المعدي كما هو مبين؛ ‎lie‏ بواسطة تقليل في واحد أو أكثر من إشارات أو أعراض الإصابة؛ مثلاء الحمى ‎fever‏ ‏الألى؛ الغثيان ‎¢nausea‏ القيء ‎cvomiting‏ كيمياء الدم غير الطبيعية ‎abnormal blood chemistry‏ فقد 5 الوزن. سوف تعتمد الإشارات أو الأعراض المعينة على المسبب المرضي المعين. يمكن إظهار فعالية علاج المرض المعدي بواسطة تطوير الأجسام المضادة أو الخلايا المناعية التي تستهدف المسبب المرضي. يمكن إظهار فعالية علاج السرطان بواسطة التثبيت أو التقليل في حمل الورم كما هو مبين بواسطة تثبيت أو تقليل في حمل الورم للورم أ لأساسي » الأورام النقيلية ‎cmetastatic tumors‏ أو التأخير في الوقاية من 0 اتتقال الورم. يتم توفير طرق التشخيص والمراقبة هناء ‎lie‏ في معيار ‎RECIST‏ ‏تقوم مقارنات القراءات الأخيرة مع القراءات الأولية بتزويد إشارة إلى ما إذا كان العلاج فعالا. سوف يكون الخبير في المجال قادرا على مراقبة فعالية الدواء أو الوقاية من قياس أي من هذه المتغيرات؛ أو أي توليفة من المتغيرات. بشكل متصل بإعطاء حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة الذي يستهدف مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 أو تركيبة صيدلانية منهاء يشير المصطلح 'فعالة في مقابل" الاضطراب المرتبط 5 بمركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 بحيث يؤدي الإعطاء بطريقة مناسبة سريريا والتي تؤدي إلى أثر مفيد لجز ملحوظ إحصائيا للمرضى؛ مثل تحسين في الأعراض؛ تخفيف؛ التقليل في مرض؛ ‎Ble‏
العمرء التحسين في جودة الحياة؛ أو غيرها من الآثار بشكل عام المتعرف عليها كعينة إيجابية بواسطة الأطباء الذين هم على علم بعلاج الاضطرابات المرتبطة بمركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 التي تم توفيرها؛ ‎Ole‏ في المعايير التشخيصية لفيروس التهاب الكبد ب التي تم توفيرها هنا. هناك أثر دوائي أو وقائي عندما يكون هناك تحسين ملحوظ ‎Lilian)‏ في واحد أو أكثر من متغيرات حالة المرضء أو بواسطة الفشل في زيادة سوء أو تطور الأعراض حيث يمكن توقعها. كمثال؛ هناك تغير مفضل في على الأقل 710 في متغير قابل للقياس للمرض؛ ويشكل مفضل يمكن أن يشير على الأقل £30 740 750 أو أكثر إلى العلاج الفعال. يمكن الحكم على فعالية عقار حمض رببونيكلوبك ثنائي الجديلة معين أو صيغة هذا العقار أيضا باستخدام نموذج حيواني اختباري للمرض المحدد كما هو معروف في المجال. عند استخدام نموذج حيواني اختباري» يتم إظهار فعالية الدواء عند ملاحظة وجود 0 التقليل الملحوظ إحصائيا في مرقم أو عرض. بشكل بديل؛ يمكن قياس الفعالية بواسطة التقليل في حدة مرض كما هو محدد بواسطة الخبير في المجال للتشخيص بناء على مقياس تدريج حدة المرض المقبول سريريا. أي تغير إيجابي بما يؤدي ‎Sie‏ إلى تقليل حدة مرض مقاس باستخدام المقياس المناسب؛ والتي تمثل الدواء المناسب باستخدام حمض رببونيكلويك ثتائي الجديلة أو صيغة حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة كما هو موضح هنا. ‎(Kay 5‏ إعطاء الخاضعين كمية علاجية من حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة؛ مثل حوالي 0.01 ملجم/كجم إلى حوالي 200 ملجم/كجم. يمكن إعطاء حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة بواسطة التسريب الوريدي على مدار مدة زمنية؛ على أساس منتظم. في نماذج معينة؛ بعد نظام الدواء الأولي»؛ يمكن إعطاء العلاجات على أساس تكرارية أقل. يمكن أن يقوم إعطاء حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة بتقليل مستويات مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 0 1. مثلاء في خلية أو نسيج المريض بمقدار على الأقل حوالي 20 225 330 335 340 345 0 55 260 65 70 3175 280 785 290 أو 7295 أو تحت طريقة الكشف عن مستوى الفحص المستخدمة. في نماذج معينة؛ يؤدي الإعطاء إلى التثبيت السريري أو بشكل مفضل التقليل الملحوظ سريريا لإشارة أو عرض واحد على الأقل لاضطراب مرتبط ب مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1. 5 في نماذج ‎dime‏ يمكن إعطاء جرعة كاملة من حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة؛ يمكن إعطاء المرضى جرعة أصغر « مثل تفاعل تسريب ‎infusion reaction‏ 75 وتتم مراقبتها للآثار العكسية؛ ‎Jie‏ تفاعل حسي
‎-allergic reaction‏ في مثال آخرء يمكن مراقبة المريض ‎JE‏ المناعية غير المطلوية؛ مثل مستويات السيتوكين ‎cytokine‏ الزائدة (مثلاء تى أن أف ‎TNF-alpha W=TNF‏ أو أى أن أف ‎(W-INF‏ ‏بشكل بديل؛ يمكن إعطاء حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة تحت الجلد؛ أي؛ بواسطة الحقن تحت الجلدي. يمكن استخدام واحد أو أكثر من عمليات الحقن لتوصيل الجرعة المطلوية يوميا من حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة إلى خاضع. يمكن تكرار عمليات الحقن على مدار مدة زمنية. يمكن تكرار الإعطاء على أساس منتظم. في نماذج معينة؛ بعد نظام الدواء الأولي» يمكن إعطاء العلاجات على أساس تكرارية أقل. يمكن أن يتضمن نظام جرعة متكررة إعطاء كمية علاجية من حمض (ببونيكلويك ثنائي الجديلة على أساس منتظم؛ ‎ie‏ كل يوم ويوم أو مرة كل سنة. في نماذج معينة؛ يتم إعطاء حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة حوالي مرة شهريا إلى حوالي مرة كل ربع سنة (أي؛ حوالي مرة كل ثلاثة أشهر).
‎IX‏ معايير التشخيص والدواء بالنسبة للأمراض المرتبطة بمركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 تم توفير المعايير التشخيصية والمراقبة المثالية للأمراض المرتبطة ب مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 المختلفة أدناه. أ. التهاب ‎B asl‏ 5 التهاب الكبد عبارة عن مصطلح عام يقصد به التهاب الكبد ويمكن التسبب فيه بواسطة تشكيلة من الفيروسات المختلفة ‎Jie‏ التهاب الكبد ‎LED «CB A‏ حيث يشير التطور في اليرقان إلى خاصية ملحوظة لمرض الكبد؛ يمكن تنفيذ التشخيص الصحيح فقط بواسطة اختبار أمصال المريض لوجود مولدات ضد مضادة للفيروس ‎anti-viral antigens‏ أو الأجسام المضادة. تتضمن النتائج المرضية الحادة لإصابة فيروسات التهاب الكبد ب ‎Hepatitis B viruses‏ (018175 الدائمة تطوير قصور كبدي مزمن ‎chronic‏ ‎chepatic insufficiency 0‏ التليف الكبدي ‎ccirrhosis‏ وكارسينوما الخلايا الكبدية. علاوة على ذلك؛ يمكن أن تقوم المواد الحاملة ل فيروس التهاب الكبد ب بنقل المرض لعدة سنوات. فيروس التهاب الكبد ب عبارة عن مرض فيورسي كبير ولا يعبر المشيمة؛ مع ذلك؛ يمكن أن تقوم النساء الحوامل المصابات بفيروس التهاب الكبد ب بإرسال أمراضهن إلى أطفالهن عند الولادة. إذا لم يتم تلقحيهم عند الولادة؛ هناك العديد من هؤلاء الأطفال الذين يتسببون في نشوء إصابة فيروس التهاب الكبد ب طول 5 العمرء وهناك العديد منهم يصابون بفشل الكبد أو سرطان الكبد بعد ذلك في الحياة. بعد إصابة فيروس التهاب الكبد ب الحادة؛ يختلف خطر تطوير الإصابة المزمنة عكسيا مع التقدم في السن. تتم الإصابة
المزمنة فيروس التهاب الكبد ب بين حوالي 790 للأطفال المصابة عند ‎sl‏ 750-25 من الأطفال المصابين عند سن 5-1 سنوات وحوالي 75-1 من الأشخاص المصابين كأطفال أكبر والبالغين. الإصابة المزمنة ل فيروس التهاب الكبد ب مشترك أيضا في الأشخاص المصابين بقصور ‎Hepatitis B: ( elie‏ ‎World Health Organization.
Department of Communicable Diseases Surveillance and‏ ‎Response, available at 5‏ ‎www.who.int/csr/disease/hepatitis/HepatitisB_whocdscsrlyo2002_2.pdf?ua=1, incorporated‏
(herein by reference ‏إلى 24 أسبوع)؛ يمكن أن يشعر المرضى‎ 6) incubation phase of disease ‏حضانة المرض‎ sh ‏أثناء‎ ‏بإحساس سيء مع الغثيان؛ القيء؛ الإسهال؛ فقدان الشهية؛ والصداع المحتمل. يمكن بعد ذلك أن يصاب‎
0 المرضى باليرقان على الرغم من درجة الحمى المنخفضة ويمكن أن يكون هناك فقد في الشهية. أحيانا لا تقوم إصابة فيروس التهاب الكبد ب بإنتاج اليرقان ولا غيرها من الأعراض الواضحة. يمكن تحديد الحالات العرضية بواسطة الكشف عن التبديلات البيوكيماوية أو المصلية الانتقائية للفيروس في دمائهم. يمكن أن يكون الأفراد عديمي الأعراض عبارة عن مواد حاملة ‎LL‏ للفيروس ‎silent carriers of virus‏ وتشكل خزان ‎Jail‏ أيضا إلى غيرها.
يقوم أغلب المرضى البالغين بالشفاء كليا من إصابة فيروس التهاب الكبد ب؛ ولكن غيرهم؛ يقومون بتصفية بمقدار حوالي 5 إلى 210 الفيروس ويتقدمون إلى مواد حاملة عديمة العرض أو يقومون بتطوير التهاب الكبد المزمن بشكل محتمل بما يؤدي إلى التليف الكبدي أو سرطان الكبد. نادراء يقوم بعض المرضى بتطوير التهاب الكبد الخاطف والوفاة. إصابة فيروس التهاب الكبد ب الدائمة أو المزمنة موجودة بين الإصابات الفيروسية الأكثر شيوعا في البشر. يتم تقدير ما يزيد على 350 مليون نسمة في العالم اليوم
0 بأنهم يعانون من فيروس التهاب الكبد ب. هناك نسبة كبيرة منهم في آسيا الشرقية وإفريقيا جنوب الصحراء؛ حيث المضاعفات ذات الصلة لمرض الكبد المزمن وسرطان الكبد هي المشاكل الصحية الأهم. يمكن تحديد الاختبارات الثلاثة المعيارية للدم للتهاب الكبد 3 (مولد ضد 1185؛ الجسم المضادة ل 1185 ومولد ضد ‎(HBC‏ ما إذا كان الشخص مصاب ب فيروس التهاب الكبد ب؛ قد تم علاجهم؛ يحمل مرض مزمن؛ أو عرضة لإصابة فيروس التهاب الكبد ب.
مولد ضد | مضاد ل | مضاد ل مستوى ‎HBc HBs‏ التهاب الكبد ‎B‏ ‏1 ‏* +(- * إصابة فيروس التهاب الكبد ب حادة أو مزمنة. تمايز مع مضاد ل ‎JgM-HBc‏ تحديد مستوى الإصابة مع ‎HBeAg‏ أو فيروس التهاب الكبد ب حمض ‎Shp)‏ نووي منزوع الأكسجين. 1 1 تشير إلى إصابة فيروس التهاب الكبد ب سابقة ات + تتضمن_الاحتمالات: إصابة فيروس التهاب الكبد ب السابقة؛ ‎sole‏ حاملة فيروس التهاب الكبد ب منخفضة؛ امتداد الوقت بين غياب مولد ضد مستوى التهاب الكبد ‎B‏ وظهور مضاد ل ‎¢HBs‏ أو تفاعل إيجابي-خاطئ أو تفاعل غير انتقائي. فحص مع مضاد ل ‎IgM HB‏ و/أو التغير مع لفاح مولد ضد مستوى التهاب الكبد 3. عند الوجودء يساعد مضاد ‎HBe‏ في التحقق من تفاعلية مضاد ل ع115. عامل معدي ‎AT‏ إصابة سامة إلى الكبد؛ اضطراب المناعة؛ مرض وراثي للكبد؛ أو ‎Saye‏ ‏للمسار الصفراوي. اك تق ا
Hollinger FB, Liang TJ.
Hepatitis B Virus.
In: Knipe DM et al., eds.
Fields Virology, 4th ‏من:‎
.ed., Philadelphia, Lippincott Williams & Wilkins, 2001:2971-3036
يمكن تنفيذ اختبار مصلية أيضا لتمايز خاضعين مع فيروس التهاب الكبد ب حادة أو مزمنة؛ أو التي
يمكن أن تحملها. هناك عدد من اللقاحات ‎vaccines‏ في مقابل فيروس التهاب الكبد ب الأكثر فعالية؛
والأقل ثمنا من الدواء.
حالياء لا يوجد دواء متاح لالتهاب الكبد 33 الحاد. يمكن الإشارة إلى علاج الغثيان اللاعرضي؛ فقدان
الشهية؛ القيء» والأعراض الأخرى.
يهدف علاج التهاب الكبد 8 المزمن عند استبعاد الإصابة لمنع انتقال وانتشار فيروس التهاب الكبد بء 0 عند إعاقة تقدم مرض الكبد وتحسين الصورة السريرية والنسيجية؛ وعند الوقاية من كارسينوما خلايا الكبد
من التطورء بواسطة فقد تكاثر مرقمات فيروس التهاب الكبد ب في المصل والكبد مثل فيروس التهاب
الكبد ب حمض رببوزي نووي منزوع الأكسجين» ‎HBcAg 5 (HBeAg‏ تقوم معايرة نشاط أيه أل تى ‎(ALT‏
يقوم تصميم الالتهاب الكبدي وتحسين أعراض المريض بمصاحبة هذه التغيرات الفيروسية المرضية. مع
ذلك؛ ‎sale‏ ما تكون الأدوية المتاحة حاليا معالجة لفيروس التهاب الكبد ب. يجب أن يقوم المرضى بأخذ 5 الدواء بشكل دائم لقمع المرض ومنع النقل.
هناك اثنين من الفئات الأساسية للدواء: المضادات الفيروسية ‎‘antivirals‏ التي يهدف إلى قمع أو تدمير
فيروس التهاب الكبد ب بواسطة التداخل مع التكاثر الفيروسي؛ والمضمنات المناعية ‎immune‏
35ه0001: التي تهدف إلى مساعدة النظام المناعي البشري لتكوين دفع في مقابل الفيروس. لم تبين أي
من مركبات كورتيكوستيرويد ‎Allg corticosteroids‏ تقوم بحث التعبير المحسن عن الفيروسات ومولدات 0 الضد الفيروسية؛ وقمع وظيفة العقد ‎glial)‏ ولا أدينين أرابينوسيد ‎cadenine arabinoside‏ سيكلوفير» أو
داي ديوكسي إينوسين ‎«dideoxyinosine‏ بأنها مفيدة لعلاج التهاب الكبد ‎B‏ المزمن.
حالياء يتم علاج التهاب الكبد ‎B‏ المزمن بإنترفيرونات ‎interferons‏ لتضمين الاستجابة المناعية. تلك
الانترفيرونات المعتمدة فقط عبارة عن إنترفيرون ‎interferon-o-2a a2=a=‏ وإنترفيرون -07- 52 ‎interferon‏
0-0. تبين الإنترفيرونات تشكيلة من الخواص التي تتضمن ‎JBI‏ مضادة للفيروسات» مضمنة للمناعة؛ 5 ومضادة للتكاثر. وهي تقوم بتحسين نشاط وسيلة مساعدة خلية ‎oT‏ وتتسبب في نضج عقد الخلايا الليمفاوية
8 وتثبط وساتل قمع الخلية ‎«T-cell suppressors T‏ وتقوم بتحسين التعبير عن اتش أل أيه ‎HLA‏ من
النوع 1. لتكون مؤهلة لعلاج إنترفيرون ‎dinterferon therapy‏ يجب أن يتضمن المرضى إصابة موثقة لمدة لا تقل عن 6 أشهر» ‎cla)‏ الكبد المرتفعة ‎elevated liver enzymes‏ (أيه أس تى ‎((ALT 5 AST‏ وفيروسات منقسمة بنشاط في الدم (اختبارات ‎HBeAg‏ و/أو فيروس التهاب الكبد ب حمض ريبوزي نووي منزوع الأكسجين الإيجابية). المرضى ذوي الإصابة الحادة؛ يجب ألا يتم علاج التليف الكبدي في المرحلة النهايئة وغيرها من المشاكل الطبية الأساسية الأخرى ‎٠‏ يقوم إنترفيرون-0 ‎interferon-o‏ بإنتاج تصفية مستديمة طويلة المدة من المرض في 735 من الذي يعانون من التهاب الكبد 8 المزمن» مع معايرة إنزيمات الكبد وفقد 3 مرقمات للإصابة النشطة ‎(HBeAg)‏ فيروس التهاب الكبد ب حمض ريبوزي نووي منزوع الأكسجين؛ ومولد ضد مستوى التهاب الكبد ). يتم تحقيق الاستبعاد الكامل للفيروس في بعض
المرضى الذين تم اختيارهم بعناية.
0 يقوم علاج الإنترفيرون لمرضى التليف الكبدي المرتبط بفيروس التهاب الكبد ب بتقليل ملحوظ في معدل كارسيتوما خلايا الكبد؛ تحديدا في المرضى الذين لديهم كمية أكبر من المصل فيروس التهاب الكبد بحمض ‎(Shon)‏ نووي منزوع الأكسجين. في المرضى المصابين بالتليف الكبدي الإيجابي ل ‎(HBeAg‏ ترتبط التصفية الفيروسية والبيوكيماوية بعد العلج بإنترفيرون المرتبطة بالبقاء المحسن. في المرضى مع إصابة مزمنة فيروس التهاب الكبد ب» ترتبط تصفية ‎HBeA‏ بعد العلاج بإنترفيرون-» بالنواتج السريرية المحسنة.
5 لإتترفيرون-» (إنترون ‎«Roferon g «Plough Schering «(b2—a~ (9855) Intron A A‏ (إنترفيرون-0- ‎(Labs Roche (a2‏ هي الدواء الأساسي لالتهاب الكبد ‎B‏ المزمن. يتم اعتبار المدة المعيارية للعلاج على أنها تبلغ 16 أسبوع. المرضى الذين يبينون مستوى تكاثر فيروسي منخفض عند نهاية منفعة النظام المعياري من دواء ممتد. يتم استخدام النيكلوتيد ونظير نيكلوسيدات لعلاج فيروس التهاب الكبد ب. تتضمن المركبات المتاحة حاليا
0 الاميفدين ‎damivudine‏ اديفوفير ‎cadefovir‏ انتاففير ‎centecavir‏ تيبيفوالدين ‎ctelbivudine‏ تينوففيفير ‎tenofovir‏ امتربتيبين ‎cemtricitabine‏ كلوالدين ‎cclevudine‏ ربونافير ‎ritonavir‏ ديبيتور ‎«dipivoxil‏ ‏لوياكفير ‎cdobucavir‏ فامفير ‎famvir‏ أف تى سى ‎(FTC‏ 177-أسيتيل -سيستين ‎N-Acetyl-Cysteine‏ ‎(NAC)‏ بى سلا 1323 001323 ثيراديجم 0عن0:0-فيروس التهاب الكبد ‎co‏ ثيموسين- ألفا مطامله-27010810» وجانسيكلوفير ©8000101071. بعضها مفيد في مقابل الإصابات الفيروسية الأخرى؛ مثلاء
التهاب الكبد الفيروسي ‎cg‏ فيروس العوز المناعي البشري؛ سواء كانت فعالة بشكل محدد سلفا في علاج فيروس التهاب الكبد ب.
يقوم الفقد الدائم لفيروس التهاب الكبد بحمض ‎Shon)‏ نووي منزوع الأكسجين ‎HBeAg‏ باعتبار أهداف الدواء المضاد الفيروسي؛» حيث ترتبط هذه النتيجة بتطوير في التلف النخري الالتهابي ‎necro-‏ ‎inflammatory damage‏ والإصابة المنخفضة. ب. التهاب ‎D asl‏ فيروس التهاب الكبد دلتا ‎Ble‏ عن فيروس يمكن الكشف ‎die‏ والتي تكون معدية فقط في وجود إصابة فيروس التهاب الكبد ب نشطة. تنشاً إصابة فيروس التهاب الكبد دلتا إما كإصابة مشتركة مع فيروس التهاب الكبد ب أو فائقة لمادة فيروس التهاب الكبد ب حاملة. عادة ما تتبدد الإصابة المشتركة بشكل عام. تؤدي الإصابة ‎ABU‏ مع ذلك؛ إلى إصابة مزمنة فيروس التهاب الكبد دلتا متكررة والتهاب الكبد المزمن النشط. يمكن أن تؤدي كل من أنواع هذه الإصابات ناتجة عن التهاب الكبد الخاطف. 0 تتشابه مسارات الانتفال مع تلك الخاصة بفيروس التهاب الكبد ب. سوف تقوم الوقاية من إصابة فيروس التهاب الكبد ب الحادة والمزمنة للأشخاص المرضين للمرض بواسطة التلقيح بمنع إصابة فيروس التهاب الكبد دلتا أيضا. هناك أدوية فيروس التهاب الكبد ب فعالة أيضا في علاج فيروس التهاب الكبد دلتاء ‎Ole‏ ‏إنترفيرون-ألفا؛ مع أو بدون أدينوفير :206]071. بالإضافة إلى ‎Wye‏ مثل لاميفيودين ‎dlamivudine‏ سوف يكون مثبط تكاثر فيروس التهاب الكبد ب-حمض ريبوزي نووي منزوع الأكسجين؛ غير مفيد لعلاج التهاب 5 الكبد © المزمن. ج. التدرن الرئوي ‎(TB) Tuberculosis‏ التدرن الرئوي عبارة عن مرض ناتج بواسطة التدرن الرثوي المتغطر ‎.Mycobacterium tuberculosis‏ يرتبط التدرن الرثوي بالأعراض شاملا فقد الوزن غير المفهوم؛ فقد الشهية؛ التعرق أثناء ‎alll‏ الحمى» الإرهاق؛ السعال لمدة أطول من 3 أسابيع؛ نفث الدم ‎hemoptysis‏ (سعال الدم ‎«(coughing up blood‏ وألم الصدر 0 عندم ‎chest‏ هناك اثنين من أنواع الاختبارات المفيدة لتحديد ما إذا كان هناك شخص مصاب ببكتريا التدرن الرئوي: اختبار الجلد للسل واختبارات الدم التدرن الرئوي التي تتضمن: ‎QuantiFERON®-TB lial‏ ‎(QFT-GIT) Gold In-Tube‏ واختبار .©1-5007التدرن الرئوي (اختبار البقعة 17). مع ذلك؛ لا تشير الاختبارات إلى إصابة التدرن الرثئوي نشطة. يتضمن تشخيص إصابة التدرن الرئوي تقييم التاريخ الطبي؛ الفحص الطبي؛ التخطيط الإشعاعي للصدر؛ وفحص مزرعة الميكروبات التشخيصي شاملة تحليل لمقاومة 5 العقار. سوف يكون الخبير في المجال قادر على تقييم التغيرات المرتبطة سريريا في إشارات أو أعراض التدرن الرئوي.
د. السرطان
يشير السرطان إلى أي من الأورام الخبيثة ‎malignant neoplasms‏ المتعددة الموضحة بواسطة تكاثر الخلايا
الكشمية ‎anaplastic cells‏ التي تميل إلى غزو النسيج المحيط وتنتقل إلى مواقع جديدة من الجسم وتشير malignant neoplastic ‏إلى الحالة المرضية الموضحة بواسطة حالات النمو الورمي الخبيث‎ Lea
‎growths 5‏ يمكن أن يكون السرطان عبارة عن ورم أو ورم خبيث؛ وتتضمن على سبيل المثال لا الحصر؛
‏كل أنواع ليمفوما/لوكيميا ‎dlymphomas/leukemias‏ كارسينوما وساركوما 507000085. في نماذج معينة؛
‏يتضمن السرطان السرطان الكبدي. في نماذج معينة؛ يتضمن السرطان كارسينوما الخلايا الكبدية.
‏يتم قبول معيار التقييم السريري لمعيار ‎RECIST‏ لتوفير منهج عياري لقياس الورم الصلب ‎solid tumor‏
‏وتوفير التعريفات للتقييم المستهدف للتغير في حجم الورم للاستخدام في الاختبارات السريرية. يمكن استخدام 0 هذه المعايير ‎Lad‏ لمراقبة استجابة فرد يخضع لدواء الورم الصلب. تتم مناقشة معيار 1.1 ‎RECIST‏
‎Eisenhauer ef al., New response evaluation criteria in solid tumors: Revised ‏بالتفصيل في‎
‎«RECIST guideline (version 1.1). Eur.
J.
Cancer. 45:228-247, 2009‏ والتي تم دمجها هنا بالإشارة
‏إليها كمرجع. يتضمن معيار الاستجابة للأمراض المستهدفة:
‏الاستجابة الكاملة ‎Complete Response‏ (ع©): اختفاء كل الأمراض المستهدفة. يجب أن تتضمن أي من العقد الليمفاوية المرضية (سواء كانت مستهدفة أو غير مستهدفة) تقليل في محور قصير إلى <10 ملم.
‏الاستجابة الجزئية ‎:(PR) Partial Response‏ تقليل على الأقل بمقدار 730 في إجمالي أقطار الإصابة
‏المستهدفة؛ باعتبار أقطار الإصابة الإجمالية.
‏الأمراض المتقدمة ‎:(PD) Progressive Diseases‏ زيادة على الأقل 0 في إجمالي أقطار الإصابات
‏المستهدفة؛ باعتبار إلى أقل مجموع عند الدراسة (والتي تتضمن المجموعة الدقيقة التي تكون أصغر على 0 الدراسة). بالإضافة إلى الزيادة النسبية في 720؛ يجب أن يبين المجموع ‎Lad‏ زيادة مطلقة بمقدار على
‏الأقل 5 ملم. (لاحظ أن: يتم اختبار ظهور واحد أو أكثر من الأمراض الجديدة ‎Load‏ على أنه تقدم.)
‏المرض المستقر ‎Stable Disease‏ (50): لا يوجد انكماش ملحوظ في قياس الاستجابة الجزئية أو زيادة
‏ملحوظة في القياس بالنسبة للأمراض المتقدمة؛ بالرجوع إلى أقل مجموع أقطار أثناء الدراسة.
‏يقوم معيار 1.1 ‎Load RECIST‏ باعتبار الإصابات غير المستهدفة التي يتم تحديدها كإصابات يمكن أن 5 تكون قابلة للقياس؛ ولكنها لا تحتاج إلى القياس؛ ويجب تقييمها كميا فقط عند النقاط الزمنية المطلوية.
‏تتضمن معايير الاستجابة للإصابات غير المستهدفة:
الاستجابة الكاملة: اختفاء كل الإصابات غير المستهدفة ومعايرة مستوى مرقم الورم. يجب أن تكون كل العقد الليمفاوية غير مسبب للمرض في الحجم (<10 ملم محور قصير). غير الاستجابة الكاملة/غير الأمراض المتقدمة: استدامة واحد أو أكثر من الأمراض غير المستهدفة و/أو الحفاظ على مستوى مرقم الورم فوق الحدود الطبيعية.
المرض المتقدم ‎Progressive Disease‏ (00): التقدم الواضح في الإصابات غير المستهدفة الموجودة. يتم اعتبار ظهور واحد أو أكثر من الأمراض الجديدة أيضا على أنها تقدم. لتحقيق "التقدم الواضح” على أساس المرض غير المستهدف؛ يجب أن يكون هناك مستوى كلي أساسي من زيادة ‎pgm‏ المرض غير المستهدف بحيث؛ حتى في وجود المرض المستقر أو الاستجابة الجزئية في المرض المستهدف» يزيد حمل الورم الكلي بفاعلية لإبراز اتفصال العلاج. توجد زيادة متواضعة في حجم واحد أو أكثر من الإصابات غير المستهدفة
0 غير مناسبة لقياس ‎dlls‏ التقدم الواضح. يتغير تعيين التقدم الكلي على أساس التغير في المرض غير المستهدف في وجه المرض المستقر أو الاستجابة الجزئية في المرض المستهدف والذي سوف يكون نادرا ‎Jas‏ ‏سوف تكون المعايير المقبولة سريريا للاستجابة للدواء في اللوكيميا الحادة كما يلي: التصفية الكاملة ‎Complete remission‏ (08): يجب أن يكون المريض خالي من كل الأعراض المرتبطة 5 باللوكيميا وتتضمن عدد نيتروفيل ‎neutrophil‏ مطلق ل >_0. 1 ‎x‏ 0° 1/لترء. عدد صفيحات > 100 ‎x‏ ‏0° 1/لترء ونخاع العظم الطبيعي ‎normal bone marrow‏ مع >75 أرومات ‎Os‏ أعمدة ‎.Auer‏ ‏التصفية الكاملة مع استعادة الرقم الدموي غير الكامل ‎:(Cri) incomplete blood count recovery‏ وفقا لسى إى ‎«CE‏ ولكن مع قلة الصفيحات المتبقية (عدد الصفيحات <100 ‎x‏ 107/لتر) أو قلة العدلات المتقبقية (عدد النيتروفيلات المطلقة <1.0 ‎x‏ 107/لتر). 0 التصفية الجزئية ‎:(PR) Partial remission‏ تقليل ‎A‏ > 750 في نخاع العظم أرومات إلى 5 إلى 725 خلايا غير طبيعية في النخاع؛ أو الاستجابة الكاملة مع > 75 أرومات إذا وجدت أعمدة ‎Auer‏ ‏فشل الدواء: يفشل دواء في تحقيق الاستجابة الكاملة؛ استعادة الرقم الدموي غير الكامل؛ أو الاستجابة الجزئية. تكرارية. انتكاس ‎Relapse‏ بعد الاستجابة الكاملة المؤكد: إعادة ظهور أرومات اللوكيميا في الدم المحيط ‎peripheral‏ ‏5 50041 أو > 75 أرومات في نخاع العظم ولا تساهم في أي سبب ‎Oia) AT‏ توليد نخاع العظم بعد علاج مستديم ‎(consolidated therapy‏ أو ظهور التغيرات الجديدة في خلل التنسج.
تتضمن استخدامات التركيبات وطرق الاختراع تحقيق على الأقل المرض المستقر في خاضع مع الورم الصلب لمدة زمنية مناسبة لتلبية تحديد المرض المستقر بواسطة معيار 8150157. في نماذج معينة؛ يتضمن استخدام التركيبات وطرق الاختراع تحقيق الاستجابة الجزئية على الأقل في خاضع مع الورم الصلب لمدة مناسبة لتلبية تعريف المرض المستقر بواسطة معيار ‎RECIST‏ ‏5 تتضمن استخدامات التركيبات وطرق الاختراع تحقيق التصفية الجزئية على الأقل في خاضع مع لوكيميا
حادة ‎acute leukemia‏ لمدة زمنية كافية لتلبية تعريف المرض المستقر بواسطة معيار ‎RECIST‏ في نماذج معينة؛ يتضمن استخدام التركيبات وطرق الاختراع تحقيق التصفية الكاملة على الأقل مع استعادة الرقم الدموي غير الكامل في خاضع مصاب بلوكيميا حادة لمدة مناسبة لتلبية تحديد المرض المستقر بواسطة معيار ‎.RECIST‏
0 يتم شرح هذا الاختراع أيضا بواسطة الأمثلة التالية التي يجب فهمها على أنها مقيدة. يتم دمج محتويات كل المراجع وبراءات الاختراع ومنشورات براءات الاختراع المذكورة في هذا الطلب؛ بالإضافة إلى قوائم المتواليات؛ هنا بالإشارة إليها كمرجع.
الأمثلة الجزء 1.1 المثال 1. تخليق حمض رببونيكلوبك ثنائي الجديلة مصدر العامل الكاشف ‎reagents‏ ‎Cua‏ مصدر العامل الكاشف غير محدد هناء يمكن الحصول على هذا العامل الكاشف من أي مورد للعوامل الكاشفة للبيولوجيا الجزيئية عند معيار الجودة/النقاء للتطبيق في بيولوجيا جزيئية.
المستنسخات تصميم الحمض النووي الرببوزي أحادي الجديلة تم تصميم مجموعة من الأحماض النووية الريبوزية أحادية الجديلة تستهدف مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1/ 00274 بشري )29126 ‎¢human: NCBI refseqID NM_001267706; NCBI GeneID:‏ متوالية بهوية رقم:1)؛ بالإضافة إلى أنواع السمية لنظائر مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 (فأر:
‎XM_006527249 5‏ (متوالية بهوية رقم:3)؛ ‎XM_006231248 «a‏ (متوالية بهوية رقم:5)؛ وقرد رياح: ‎XM_005581779‏ (متوالية بهوية رقم: 7)) باستخدام نصوص ‎Python s R‏ معدلة. يتضمن مركب ترابطي
1 لموت الخلية المبرمج 1 ‎REFSEQ‏ الحمض النووي الريبوزي المرسل البشري طول 3349 قاعدة. سوف يكون تصميم منطق وطريقة مجموعة الحمض النووي الرببوزي أحادي الجديلة كما يلي: تم تحديد الفعالية المتوقعة لكل 19 وحدة محتملة من الحمض النووي الريبوزي أحادي الجديلة من موضع 109 خلال موضع 9 (منطقة الترميز ‎coding region‏ و3 ‎(UTR‏ مع نموذج ‎ad‏ مشتق من القياس المباشر لاستبعاد الحمض النووي الرببوزي المرسل من أكثر من 20000 الحمض النووي الرببوزي أحادي الجديلة مميز المصممة لتستهدف عدد كبير من الجينات الفقارية ‎genes‏ ع100721:©». تم تصميم المجموعات الثانوية من مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 الأحماض النووية الرببوزية أحادية الجديلة مع حالات توافق كاملة أو شبيهة بين الإنسان وقرد الرياح. تم ‎Lad‏ تصميم مجموعة ثانوية أيضا مع حالات توافق كاملة أو شبه كاملة مع نظائر مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 فأرية وجرذية. تم أيضا تصميم مجموعة ثانوية 0 مع حالات عدم توافق كاملة أو شبه كاملة مع نظائر مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 بشرية؛ قرد رياح فأرية؛ وجذرية. بالنسبة لكل جديلة من الحمض النووي الريبوزي أحادي الجديلة؛ تم استخدام نص 0 معدل للاستخدام في بحث قوة حيوبانية لقياس عدد ومواضع حالات عدم التوافق بين الحمض النووي الريبوزي أحادي الجديلة وكل حالات المحاذاة المحتملة في أنواع الهدف. تم إعطاء الوزن الزائد إلى حالات عدم توافق في منطقة ‎ja)‏ المحددة هنا بالمواضع 9-2 من الأوليجونيكلوتيد المضاد للحس؛ 5 بالإضافة إلى موقع شق الحمض النووي الرببوزي أحادي الجديلة؛ المحدد هنا ب المواضع 11-10 من الأوليجونيكلوتيد المضاد للحس. كان الوزن النسبي لحالات عدم التوافق 2.8؛ 1.2: 1 لبذر حالات عدم التوافق» موقع الشق؛ وغيرها من المواضع خلال الموضع المضاد للحس 19. تم تجاهل حالات عدم التوافق في الموضع الأول. تم حساب درجة الانتقائية لكل جديلة بواسطة حساب قيمة كل حالة عدم توافق مقاسة. تم تحديد التفضيل إلى الأحماض النووية الريبوزية أحادية الجديلة التي لها درجة مضادة للحس في 0 استبعاد المستنسخ مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 البشري ولقرد رياح <= 3.0 والفعالية المتوقعة ‎J70 =<‏ تم توضيح قائمة مفصلة من متواليات مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 غير معدلة لجديلة حسية وجديلة مضادة للحس في الجدول 3. تم توضيح قائمة مفصلة من متواليات مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 جديلة حسية وجديلة مضادة للحس معدلة في الجدول 5.
تخليق الحمض النووي الرببوزي أحادي الجديلة
تم تخليق متواليات مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 الحمض النووي الريبوزي أحادي الجديلة عند 1 ميكرومول على وسيلة تخليق 192 ‎(BioAutomation) Mermade‏ باستخدام كيمياء فوفوراميديت ‎phosphoramidite‏ التي يتوسط فيها الدعم الصلب. كان الدعم الصلب عبارة عن كوب مسامي متحكم فيه ‎(A 500)‏ مع مركب ترابطي ‎din N‏ جالاكتوز أمين معدل أو وسيلة دعم صلب دولية (أيه أم ‎AM‏ ‏5 بيوكيماوية). عوامل كاشفة للتخليق الإضافي» تم الحصول على 2'-فلورو و0-2-ميثيل الحمض النووى الريبوزى وديوكسي فوسفوراميديت ‎deoxy phosphoramidites‏ من ‎(WI Milwaukee) ®Thermo-Fisher‏ ‎Hongene‏ (الصين). يتم إدخال 7:2 2:-0-ميثيل» ‎GNA‏ (حمض جليكول نووي ‎glycol nucleic‏ ‎(acids‏ 5'فوسفات وتعديلات أخرى باستخدام فوسفوراميديت المناظر. تم تنفيذ تخليق الجدائل الفردية 3 7١-أسيتيل‏ جالاكتوز أمين المترافقة على وسيلة دعم 17-أسيتيل جالاكتوز أمين سى بى جى ‎CPG‏ معدلة. 10 .تم استخدام وسيلة دعم ‎CPG‏ الدولية لتخليق الجدائل الفردية المضادة للحس. ‎aly‏ وقت الإقران لكل فوسفوراميديت )100 ‎do‏ مولار في أسيتونيتريل) 5 دقائق باستخدام 5-إيثيل ثيو- 111-تترازول -5 ‎(ETT) Ethylthio-1H-tetrazole‏ كمنشط ‎activator‏ )0.6 مولار في أسيتونيتريل ‎(acetonitrile‏ .3 توليد روابط فوسفورو ثيوات باستخدام محلول 50 مل مولار من 3-((داي ميثيل أمينو -ميثيليدين) أمينو)-113- 4 داي ثيازول-3-ثيون ‎3-((Dimethylamino-methylidene) amino)-3H-1,2,4-dithiazole-3-‏ ‎(DDTT) thione 5‏ تم الحصول عليها من ‎«MA «Wilmington) Chemgenes®‏ الولايات المتحدة)) في أسيتونيتريل لا ‎acetonitrile Sle‏ 0:01 رطصة/بيربدين ‎pyridine‏ (1:1 حجم/حجم). يبلغ وقت الأكسدة 3 دقائق. تم تخليق كل المتواليات مع إزالة نهائية لمجموعة دى ‎al‏ تى ‎(‘off DMT") DMT‏ عند إكمال تخليق الطور الصلب؛ تم شق أوليجوريبونيكلوتيدات ‎oligoribonucleotides‏ من الدعم الصلب ويتم نزع الحماية في أطباق محكمة ذات 96 عين 200 ميكرولتر من عامل ميثيل أمين كاشف ‎Sle‏ ‎Aqueous Methylamine reagents 0‏ عند 2°60 لمدة 20 دقيقة. بالنسبة للمتواليات التي تحتوي على وحدة ‎su) 2‏ بنائية ‎ribo residues‏ 27 (011-72) التي تتم حمايتها مع مجموعة ترت -بيوتيل داي ميثيل سيليل ‎«(TBDMS) tert-butyl dimethyl silyl‏ يتم تنفيذ عملية نزع الحماية عن الخطوة الثانية باستخدام العامل الكاشضف 15.3117 (تراي إيثيل أمين تراي هيدرو فلوريد ‎(triethylamine trihydro fluoride‏ إلى محلول نزع الحماية ميثيل أمين ‎emethylamine deprotection solution‏ تمت حضانة 200 ميكرولتر من داي ميثيل سلفوكسيد ‎(DMSO) dimethyl sulfoxide‏ وتمت إضافة 300 ميكرولتر من العامل الكاشف تراي إيثيل أمين تراي هيدرو فلوريد وتمت حضانة المحلول لمدة 20 دقيقة إضافية عند 60"م. عند نهاية خطوة
الشق ونزع الحماية؛ تم السماح لطبق التخليق بأن يأتي إلى درجة حرارة الغرفة وبتم ترسيبها بواسطة إضافة 1 مل من خليط أسيتونيتريل: إيثانول (9:1). يتم تبريد الأطباق عند -80 م لمدة ساعتين؛ تم ترويق المادة الطافية بعناية بمساعدة أنابيب متعددة القناة ‎multi channel pipette‏ تمت ‎sale]‏ تعليق كريات الأوليجونيكلوتيد في محلول منظم 0 مل مولار أسيتات الصوديوم ‎pg (NaOAc) Sodium acetate‏ نزع الملح باستخدام عمود استبعاد ‎exclusion column‏ حجم 5 ملل ‎(Healthcare GE) HiTrap®‏ على نظام ‎AKTA®‏ منقي مجهز بوسيلة أخذ عينات ‎A905 autosampler‏ ووسيلة تجميع ‎Frac 950 collector‏ يتم جمع العينات منزوعة الملح ‎samples‏ 16581460 في أطباق ذات 96 عين. تم تحليل عينات من كل متوالية بواسطة أل سى-أم أس ‎LC-MS‏ لتأكيد الهوية؛ يو فى ‎UV‏ )260 نانومتر) لقياس ومجموعة مختارة من
عينات بواسطة كروماتوجراف ‎(of‏ إى أكس ‎TEX‏ لتحديد النقاء .
0 .تم تنفيذ تصلب مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 الجدائل الفردية على روبوت مناولة سائل ‎liquid handling robot Tecan®‏ ©1680. تم دمج الخلطات المكافئة مولاريا للجدائل الفردية الحسية ‎antisense single strands‏ والمضادة للحس وتم التصلب في أطباق ذات 96 عين. بعد دمج الجدائل الفردية المكملة ‎ccomplementary single strands‏ تم إحكام الطبق ذو 96 عين وتم التسخين في فرن عند 0م لمدة 10 دقائق وتم السماح لها بالوصول إلى درجة حرارة الغرفة ببطء عبر مدة 3-2 ساعات. تمت
5 معايرة تركيز كل مزدوج إلى 10 ميكرومولار في ‎XT‏ محلول ملحي منظم بفوسفات. المثال 2 - المراقبة في المعمل: فحص مزرعة الخلية ويلازميدات/إصابات ل ‎:Dual-Glo®‏ ‏تم نمو خلايا ‎(VA (Manassas <ATCC®) Cos7‏ إلى شبق اقتران عند 37م في جو 75 ثانى أكسيد
0 الكريون ‎(CO) carbon dioxide‏ في دى أم إى أم ‎(ATCC®) DMEM‏ مكمل ب 710 أف بى أس ‎(FBS‏ ‏قبل الإطلاق من الطبق بواسطة المعالجة بتريبسين ‎trypsinization‏ تم استنساخ المتوالية البشرية 0274© الكاملة المرجعية ‎(NM_001267706.1)‏ داخل موجه 061011201277 المزدوج باستخدام 3 بنيات مع ولائج تقريبا 750 زوج قاعدة؛ 1.4 كيلو قاعدة؛ و1.4 كيلو قاعدة في الطول (متواليات بهوية رقم: 11- 3). تمت إصابة لوسيفيراز بلازميدات مزدوجة ‎Dual-luciferase plasmids‏ بشكل مشترك مع الحمض
5 الننووي ‎Sell‏ أحادي الجديلة داخل 03*15 1 خلايا باستخدام 2000 ‎Invitrogen™) Lipofectamine™‏ ‎(cat # 11668-019 .CA Carlsbad «‏ بالنسبة لكل طبق ذو 96 عين؛ تمت إضافة 0.2 ميكرو لتر من
‎Lipofectamine™‏ إلى 10 نانوجم من بلازميد موجه ‎plasmid vector‏ والحمض النووي الرببوزي أحادي الجديلة في 14.8 ميكرولتر من ‎Opti-MEM®‏ وبتم السماح للمعقد عند درجة حرارة الغرفة لمدة 15 دقيقة. بعد ذلك تمت إضافة الخليط إلى الخلايا المعاد تعليقها في 80 ميكرولتر من الوسط الطازج كليا. تمت حضانة الخلايا لمدة 48 ساعة قبل قياس لوسيفيراز. تم تنفيذ اختبارات أحادية الجرعة عند تركيز 10 نتانومولار و0.1 نانومولار مزدوج نهائي. فحص ‎Dual-Glo®‏ لوسيفيراز بعد 48 ساعة من إصابة الأحماض النووية الريبوزية أحادية الجديلة؛ تم قياس لوسيفيراز ذبابة النار (عينة إصابة ضابطة) ودللنهم (مسربة إلى متوالية مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 مستهدفة في 3 ‎Yl (UTR‏ تمت إزالة الوسط من الخلايا. بعد ذلك تم قياس نشاط لوسيفيراز ذبابة النار بواسطة إضافة 0 75 ميكرولتر من العامل لوسيفيراز ‎Dual-Glo®‏ الكاشف بما يساوي حجم وسط المزرعة إلى كل عين والخلط. تمت حضانة الخليط عند درجة حرارة الغرفة لمدة 30 دقيقة قبل قياس التألق الضوئي (500 نانومتر) على ‎(Molecular Devices®) Spectramax®‏ للكشف عن إشارة لوسيفيراز ذبابة النار. تم قياس نشاط لوسيفيراز ‎Renilla‏ بواسطة إضافة 75 ميكرولتر من درجة حرارة الغرفة ‎®Dual-Glo® Stop & Glo‏ إلى كل عين وتمت حضانة الأطباق لمدة 15-10 دقيقة قبل التألق بمجرد القياس لتحديد إشارة لوسيفيراز ‎Renilla 5‏ يقوم العامل الكاشف ‎®Dual-Glo® Stop & Glo‏ بإخماد لوسيفيراز ذبابة النار والتألق المستديم لتفاعل لوسيفيراز ‎Renilla‏ تم تحديد نشاط الحمض النووي الريبوزي أحادي الجديلة بواسطة معايرة إشارة ‎Renilla‏ (مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1) إلى إشارة ذبابة النار (عينة ضابطة) في كل عين. بعد ذلك تم تقييم حجم نشاط الحمض النووي الرببوزي أحادي الجديلة نسبة إلى خلايا تمت إصابتها بنفس الموجه ولكنها غير معالجة بالحمض النووي الرببوزي أحادي الجديلة أو تم علاجها بالحمض النووي 0 الرببوزي أحادي الجديلة غيرمستهدف. تم تنفيذ كل الإصابات في نسخ ثلاثية. مزرعة الخلية وإصابات تفاعل سلسلة بوليمراز في الوقت الفعلي: تم نمو خلايا كارسينوما ‎RKO‏ بشرية قولونية ‎(VA «Manassas <ATCC®)‏ إلى شبه احتشاد عند 37 ‎a‏ ‏في جو 75 ثانى أكسيد الكريون في إى ‎al‏ إى ‎(ATCC®) EMEM al‏ مكمل ب 710 ‎FBS‏ قبل الإطلاق من الطبق بواسطة المعالجة بتريبسين. 5 تمت إصابة الخلايا بواسطة إضافة 4.9ميكرولتر من ‎Opti-MEM‏ بالإضافة إلى 0.1ميكرولتر من ‎Lipofectamine™ RNAiMax‏ لكل ‎.Carlsbad CA <Invitrogen™) (pe‏ 13778-150 #ئف) إلى 5
ميكرولتر من مزدوج 8118©8:» لكل عين داخل طبق ذو 384 عين وتمت الضانة عند درجة حرارة الغرفة لمدة 15 دقيقة. بعد ذلك تمت إضافة 40 ميكرولتر من ‎DMEM‏ تحتوي على -5 »103 خلية إلى خليط الحمض النووي الرببوزي أحادي الجديلة. تمت حضانة ‎WAY‏ لمدة 24 ساعة قبل تنقية الحمض النووي الرربوزي. تم تنفيذ اختبارات أحادية الجرعة عند تركيز 10 نانومولار و0.1 نانومولار نهائي. عزل الحمض النووي الريبوزي كلي باستخدام طقم ‎DYNABEADS® Jie‏ الحمض النووي الرببوزي المرسل: تم ‎Jie‏ الحمض النووي الريبوزي باستخدام بروتوكول آلي على منصة ‎BioTek-EL406‏ باستخدام ‎<Invitrogen™) DYNABEADs®‏ 01861012). بشكل مختصر؛ تمت إضافة 50 ميكرولتر من محلول منظم تحليل/ريط ‎Lysis/Binding Buffer‏ و25 ميكرولتر من محلول تحليل منظم يحتوي على 3 ميكرولتر من كريات مغناطيسية ‎magnetic beads‏ إلى الطبق مع الخلايا. تمت حضانة الأطباق على وسيلة هزازة كه ر ومغناطسية ‎electromagnetic shaker‏ لمدة 10 دقائق عند درجة حرارة الغرفة ‎dang‏ لك تم التقاط الكريات المغناطيسية وتمت إزالة المادة الطافية. بعد ذلك سيتم غسل الحمض النووي الريبوزي المريوطة ب ‎BeAD‏ ‏مرتين مع 150 ميكرولتر من محلول منظم ‎A Jud‏ ومرة مع محلول منظم ‎.Wash Buffer B 3 Jud‏ بعد ذلك تم غسل الكريات مع 150 ميكرولتر محلول منظم تصفية ‎Buffer‏ 510000؛ وتمت ‎sale]‏ الالتقاط 5 وتمت ‎Al)‏ المادة الطافية. طقم استنساخ الحمض الرببوزي النووي المنزوع الأكسجين المكمل عكسي عالي السعة باستخدام ‎ABI™‏ ‎:(Applied Biosystems®, Foster City, CA, Cat #4368813)‏ تمت إضافة 10 ميكرولتر من خليط أساسي يحتوي على [ميكرولتر 1610 محلول منظم» 0.4ميكرولتر ‎sale 10 ily Sal «dNTPs 5‏ بادثة ‎inhibitor‏ عشوائية» 0.5ميكرولتر ترانسكريبتاز عكسي ‎«Reverse Transcriptase 20‏ 0.5ميكرولتر متبط ‎RNase‏ و6.6ميكرولتر من 11:0 لكل تفاعل إلى الحمض النووي الريبوزي المعزول أعلاه. تم إحكام الأطباق؛ وتم الخلطء وتمت الحضانة على وسيلة هزازة كهرومغناطيسية لمدة 10 دقائق عند درجة حرارة الغرفة؛ متبوعة بساعتين عند 2237 بعد ذلك تمت حضانة الأطباق عند 81 لمدة 5 دقائق. تفاعل سلسلة بوليمراز في الوقت الفعلي: 5 .تمت إضافة اثنين من ميكرولتر الحمض الريبوزي النووي المنزوع الأكسجين المكمل إلى خلاط رئيسي تحتوي على 0.5ميكرولتر من ‎¢(Hs99999905) Probe GAPDH TagMan®‏ 0.5ميكرولتر_ مسبار
‎(CD274 »11501125301_01( CD274‏ وكميكرولتر خلاط مسبار 480 ‎Lighteycler®‏ رئيسي ‎Roche)‏ ‎(Cat # 04887301001‏ لكل عين في أطباق ذات 384 ‎«(Roche cat # 04887301001) cre‏ تم تنفيذ تفاعل سلسلة بوليمراز في الوقت الفعلي في نظام ‎Je lis LightCycler®480‏ سلسلة بوليمراز في الوقت الفعلي ‎(Roche)‏ باستخدام فحص ‎AACHRQ)‏ تم فحص كل مزدوج في 4 إصابات مستقلة. لحساب التغير النسبي في الطية؛ تم تحليل بيانات الوقت الفعلي باستخدام طريقة ‎AACH‏ وتمت المعايرة مع ‎Ua gall‏ المنفذة مع خلايا مصابة مع 10 نانومولار أيه دى- 1955 ‎«AD-1955‏ أو خلايا مصابة مزيفة ‎.mock transfected cells‏ الجدول 2. اختصارات مونومرات نيكلوتيد ‎nucleotide monomers‏ المستخدمة في تمثيل متوالية حمض 0 نووي. سوف يتم فهم أن هذه المونومرات؛ عند وجودها في أوليجونيكلوتيد. مرتبطة بشكل مشترك بواسطة روابط 3-5 -فوسفو داي ‎.5'-3"-phosphodiester bonds jiu)‏ أدينوسين -3”-فوسفات ‎Adenosine-3’-phosphate‏ ‎Af‏ 2 -فلوروأدينوسين-3”-فوسفات ‎2’-fluoroadenosine-3’-‏ ‎phosphate‏ ‎Als‏ 2 -فلوروأدينوسين -3”-فوسفورو ثيوات ‎2’-fluoroadenosine-3’-‏ ‎phosphorothioate‏ ‏أدينوسين - 3<-فوسفورو ثيوات ‎adenosine-3’-phosphorothioate‏ ‏سيتيدين - 3”-فوسفات ‎cytidine-3’-phosphate‏ ‏0 2 -فلوروسيتيدين- 3”-فوسفات ‎2’-fluorocytidine-3’-‏ ‎phosphate‏ ‎Cts‏ 2-فلوروسيتيدين-3”-فوسفورو ثيوات ‎2’fluorocytidine-3’-‏ ‎phosphorothioate‏ ‏سيتيدين -3'-فوسفورو ثيوات ‎cytidine-3’-phosphorothioate‏ ‏جوانوسين-3”-فوسفات ‎guanosine-3’-phosphate‏ ‎Gt‏ 2-فلوروجوانوسين-3”-فوسفات ‎2’-fluoroguanosine-3’-‏ ‎phosphate‏
2’-fluoroguanosine-3’- ‏-فلوروجوانوسين-3”-فوسفورو ثيوات‎ 2 Gis phosphorothioate
جوانوسين-3”-فوسفورو ثيوات ‎guanosine-3’-phosphorothioate‏
-methyluridine-3’- | ‏يوربدين-3”-فوسفات‎ JS T phosphate
11 2--فلورو-5-ميثيل يوريدين - 3 -فوسفات ‎2’-fluoro-5-‏ ‎methyluridine-3’-phosphate‏
2’-fluoro-5- ‏2*-فلورو-5-ميثيل يوريدين-3”-فوسفورو ثيوات‎ Tis methyluridine-3’-phosphorothioate
‘methyluridine-3’- ‏5-ميثيل يوريدين-3”-فوسفورو ثيوات‎ Ts phosphorothioate
يوريدين- 3 -فوسفات ‎Uridine-3’-phosphate‏
2 فلورويوريدين- 3" -فوسفات ‎2’-fluorouridine-3’-phosphate‏
0 2 -فلورويوريدين -3”-فوسفورو ثيوات -’3- ‎2’-fluorouridine‏ ‎phosphorothioate‏
يوريدين -3"-فوسفورو ثيوات ‎uridine -3’-phosphorothioate‏
(U ‏أو‎ 1 CA «G) nucleotide ‏أي نيكلوتيد‎ 2'-O-methyladenosine-3’- ‏-ميثيل أدينوسين -3”-فوسفات‎ 0-2 phosphate
2-0- ‏0-2-ميثيل أدينوسين-3:- فوسفورو ثيوات‎ as methyladenosine-3’- phosphorothioate
¢ 0-2-ميثيل سيتيدين -3”-فوسفات ‎2-O-methyleytidine-3’-‏ ‎phosphate‏
2-0 ‏0-2-ميثيل. سيتيدين-3- فوسفورو ثيوات‎ cs methylcytidine-3’- phosphorothioate 2'-O-methylguanosine- ‏0-2-ميثيل جوانوسين-3”-فوسفات‎ 3’-phosphate
2 0-2-ميثيل جوانوسين-3- فوسفورو ثيوات -2-0 ‎methylguanosine-3’- phosphorothioate‏
2’-O-methyl-5- ‏-ميثيل -5-ميثيل يوريبدين-3:-فوسفات‎ 0-2 t methyluridine-3’-phosphate 2°_0- ‏بقل -5- بقل يوريدين -3”-فود 3 و ثيوات‎ -0—2 ts methyl-5-methyluridine-3’-phosphorothioate 2'-O-methyluridine-3’- ‏0-2-ميثيل يوربدين-3”-فوسفات‎ 0 phosphate 2-O-methyluridine- ‏0-2-ميثيل يوريدين-3”-فوسفورو ثيوات‎ us 3’-phosphorothioate رابط فوسفورو ثيوات ‎phosphorothioate linkage‏ 6 7-[متا(ع ه6117 - ألكيل )-أميدو ديكانويل)]-4-هيدروكسي برولينول م(11-(2782له6-ألكيل ) 3 ‎[tris(GalNAc-alkyl)-‏ ‎amidodecanoyl)]-4-hydroxyprolinol Hyp-(GalNAc-alkyl)3‏ 2-deoxythymidine-3- تافسوف-3-نيديميث‎ . ‏2ديوكسي‎ 01 phosphate 2-deoxycytidine-3- تافسوف-3-نيديتيس‎ . ‏ديوكسي‎ 2 dC phosphate -2( ‏نووي منزوع الأكسجين معكوس لا خطوي‎ Glow) ‏حمض‎ Ya 2- ‏هيدرو فيوران-5-فوسفات‎ DET ‏هيدروكسي ميثيل‎ (hydroxymethyl-tetrahydrofurane- 5-phosphate
Thymidine-glycol ‏ثيميدين -<حمض جليكول نووي 5- أيزومر‎ (Ten) nucleic acid S-Isomer
Vi or a Vea VP inyl-phosphate ‏-فوسفات‎ Jind 2-0-(N- ‏أمسيتاميد)أدينوسين-3-فوسفات‎ JiwN)-0-2 (Aam) methylacetamide)adenosine-3"-phosphate
الجدول 3. متواليات جديلة حسية وجديلة مضادة للحس غير معدلة من مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 أحماض رببونيكلويك مزدوجة الجديلة ‎J‏ سم ‎J‏ سم متوا لية حسية موضع هوية ‎J‏ سم متوا لية مضادة للحس موضع هوية المزدوج | الأوليجو في المتوال | الأوليجو في المتوال الحسى هوية ية المضاد هوية ية
المتوالية: للحس المتوالية:
1 1 ‏نا امفطهذت اللغشعمطااانانا | ووم‎ A- ‏ددم‎ GAAGCUUUUCAAUGUGACC A- AD- uC 135541 AA 135540 | 67630
19 351 18 351 ‏ووم‎ | UVUGGUCACAUUGAAAAGCUUC A- ‏ددم‎ GAAGCUUUUCAAUGUGACC A- AD- uC 135561 AA 135560 | 67639
21 351 20 351 ‏ووم‎ | UVUGGUCACAUUGAAAAGCUUC A- ‏ددم‎ GAAGCUUUUCAAUGUGACC A- AD- uC 135576 AA 135560 | 67649
23 351 22 351 ‏دوم‎ | UGCUGGUCACAUUGAAAAGCU A- ~334 | AGCUUUUCAAUGUGACCAG A- AD- uC 135551 CA 135550 | 67634
353 24 353 ‏دوم‎ | UGCUGGUCACAUUGAAAAGCU A- ~334 | AGCUUUUCAAUGUGACCAG A- AD- uC 135571 CA 135570 | 4
27 353 26 353 ‏دوم‎ | UGCUGGUCACAUUGAAAAGCU A- ~334 | AGCUUUUCAAUGUGACCAG A- AD- uC 135581 CA 135570 | 67654
29 353 28 353
‎J‏ سم ‎J‏ سم متوا لية حسية موضع هوية ‎J‏ سم متوا لية مضادة للحس موضع هوية المزدوج | الأوليجو في المتوال | الأوليجو في المتوال الحسى هوية ية المضاد هوية ية المتوالية: للحس المتوالية: 1 1 ‏ووم‎ | UUGCUGGUCACAUUGAAAAGC A- —335 | GCUUUUCAAUGUGACCAGC A- AD-
UU | 135535 AA | 135534 | 67627 31 354 30 354 ‏ووم‎ | UUGCUGGUCACAUUGAAAAGC A- —335 | GCUUUUCAAUGUGACCAGC A- AD-
UU | 135555 AA | 135554 | 67636 33 354 32 354 ‏ووم‎ | UUGCUGGUCACAUUGAAAAGC A- —335 | GCUUUUCAAUGUGACCAGC A- AD-
UU | 135573 AA | 135554 | 67646 354 34 354 —351 | VUUGUGUUGAUUCUCAGUGUG A- —353 | CACACUGAGAAUCAACACA A- AD-
CU | 135591 AA | 135590 | 67658 37 372 36 372 ‏ووه‎ | VAAGUGAGUCCUUUCAUUUGG A- 471 | CCAAAUGAAAGGACUCACU A- AD-
AG | 135587 UA | 135586 | 67657 39 490 38 490 618 | UACGUCUCCUCCAAAUGUGUA A- —620 | VACACAUUUGGAGGAGACG A- AD- 100 135547 UA | 135546 | 67632 41 639 40 639
‎J‏ سم ‎J‏ سم متوا لية حسية موضع هوية ‎J‏ سم متوا لية مضادة للحس موضع هوية المزدوج | الأوليجو في المتوال | الأوليجو في المتوال الحسى هوية ية المضاد هوية ية المتوالية: للحس المتوالية: 1 1 ‏ع 1و-‎ | UACGUCUCCUCCAAAUGUGUA A- —620 | VACACAUUUGGAGGAGACG A- AD- 100 135567 UA | 135566 | 67642 43 639 42 639 618 | UACGUCUCCUCCAAAUGUGUA A- —620 | VACACAUUUGGAGGAGACG A- AD- 100 135579 UA | 135566 | 67652 639 44 639 —619 | VUACGUCUCCUCCAAAUGUGU A- ‏رجو‎ | ACACAUUUGGAGGAGACGU A- AD-
AU | 135539 AA | 135538 | 67629 47 640 46 640 —619 | VUACGUCUCCUCCAAAUGUGU A- ‏رجو‎ | ACACAUUUGGAGGAGACGU A- AD-
AU | 135559 AA | 135558 | 67638 49 640 48 640 —619 | VUACGUCUCCUCCAAAUGUGU A- ‏رجو‎ | ACACAUUUGGAGGAGACGU A- AD-
AU | 135575 AA | 135558 | 67648 51 640 50 640 —620 | AUUACGUCUCCUCCAAAUGUG A- ‏ددجو‎ | CACAUUUGGAGGAGACGUA A- AD-
UA | 135545 AU | 135544 | 67631 53 641 52 641
‎J‏ سم ‎J‏ سم متوا لية حسية موضع هوية ‎J‏ سم متوا لية مضادة للحس موضع هوية المزدوج | الأوليجو في المتوال | الأوليجو في المتوال الحسى هوية ية المضاد هوية ية المتوالية: للحس المتوالية: 1 1 —620 | AUUACGUCUCCUCCAAAUGUG A- ‏ددجو‎ | CACAUUUGGAGGAGACGUA A- AD-
UA | 135565 AU | 135564 | 67641 641 54 641 —620 | AUUACGUCUCCUCCAAAUGUG A- ‏ددجو‎ | CACAUUUGGAGGAGACGUA A- AD-
UA | 135578 AU | 135564 | 67651 57 641 56 641 —846 | AUUUGAAAGUAUCAAGGUCUC A- —848 | GAGACCUUGAUACUUUCAA A- AD- 00 135631 AU | 135630 | 67675 59 867 58 867 —97¢ | VAGGAACUGACCCUCAAAUUA A- ‏وجو‎ | VAAUUUGAGGGUCAGUUCC A- AD-
GG | 135609 UA | 135608 | 67665 61 997 997 ~1093 | VAGACUCAAAAUAAAUAGGAA A- - ‏كوو‎ | VUCCUAUUUAUUUUGAGUC A- AD-
AA | 135549 UA | 135548 | 67633 63 1114 62 1114 ~1093 | VAGACUCAAAAUAAAUAGGAA A- - ‏كوو‎ | VUCCUAUUUAUUUUGAGUC A- AD-
AA 135569 UA | 135568 | 67643 65 1114 64 1114
‎J‏ سم ‎J‏ سم متوا لية حسية موضع هوية ‎J‏ سم متوا لية مضادة للحس موضع هوية المزدوج | الأوليجو في المتوال | الأوليجو في المتوال الحسى هوية ية المضاد هوية ية المتوالية: للحس المتوالية: 1 1 ~1093 | VAGACUCAAAAUAAAUAGGAA A- - ‏كوو‎ | VUCCUAUUUAUUUUGAGUC A- AD-
AA| 135580 UA | 135568 | 67653 67 1114 1114 - ‏دوو‎ | ACAGACUCAAAAUAAAUAGGA A- ~1096 | UCCUAUUUAUUUUGAGUCU A- AD-
AA| 135563 GU | 135562 | 67640 1115 1115 - ‏دوو‎ | ACAGACUCAAAAUAAAUAGGA A- ~1096 | UCCUAUUUAUUUUGAGUCU A- AD-
AA | 7 GU | 135562 | 67650 71 1115 70 1115 - 177 | VCUACUACAAUAUAUCUUCAA A- ~1159 | VUGAAGAUAUAUUGUAGUA A- AD-
AA| 135605 GA | 135604 | 67663 73 1178 72 1178 ~1167 | AAUUGUAACAUCUACUACAAU A- ~1169 | AUUGUAGUAGAUGUUACAA A- AD-
AU | 135633 UU | 135632 | 67676 75 1188 74 1188 —1245 | UACCAAGCACCUUACAAAUAC A- ~1247 | GUAUUUGUAAGGUGCUUGG A- AD- 100 135611 UA | 135610 | 67666 77 1266 76 1266
‎J‏ سم ‎J‏ سم متوا لية حسية موضع هوية ‎J‏ سم متوا لية مضادة للحس موضع هوية المزدوج | الأوليجو في المتوال | الأوليجو في المتوال الحسى هوية ية المضاد هوية ية المتوالية: للحس المتوالية: 1 1 ~1293 | AACGGUUUGAUCUUUAUGCUU A- ~1295 | AAGCAUAAAGAUCAAACCG A- AD- 00 135597 UU | 135596 | 67661 79 1314 78 1314 ~1331 | UAUUAAUGGGUUAAAUAAAG A- ~1333 | CCUUUAUUUAACCCAUUAA A- AD-
GUG 135619 UA | 135618 | 67669 81 1352 1352 ~1518 | VACUUAAUCUGUUUGCUUCCU A- ~1520 | AGGAAGCAAACAGAUUAAG A- AD-
CA | 135613 UA | 135612 | 67667 83 1539 82 1539 ~1682 | VAUCUGUAGAUUCAAUGCCUG A- —1684 | CAGGCAUUGAAUCUACAGA A- AD-
GC 135629 UA | 135628 | 67674 85 1703 84 1703 ‏دور‎ | VAUCUUUUGAAUUUUGAAUCA A- 7105 | UGAUUCAAAAUUCAAAAGA A- AD-
UG | 135583 UA | 135582 | 67655 87 2124 2124 ‏وووم‎ | VAAAUGUAGACUAUCUUUAGA A- ‏وووم‎ | UCUAAAGAUAGUCUACAUU A- AD-
AG | 135625 UA | 135624 | 67672 2241 88 2241
‎J‏ سم ‎J‏ سم متوا لية حسية موضع هوية ‎J‏ سم متوا لية مضادة للحس موضع هوية المزدوج | الأوليجو في المتوال | الأوليجو في المتوال الحسى هوية ية المضاد هوية ية المتوالية: للحس المتوالية: 1 1 ‏مبيوجم‎ | VUGCUUUUAACAUACAUUUCC A- “2247 | GGAAAUGUAUGUUAAAAGC A- AD-
AA| 135593 AA | 135592 | 67659 91 2261 2261 7648 | VUUGACAGAAAGCAGAAAACA A- 7650 | VGUUUUCUGCUUUCUGUCA A- AD-
AA | 7 AA | 135626 | 67673 93 2669 92 2669 7658 | VAAGUUUAUACUUGACAGAAA A- 2660 | VUUCUGUCAAGUAUAAACU A- AD-
GC 135607 UA | 135606 | 67664 95 2679 94 2679 7659 | UGAAGUUUAUACUUGACAGAA A- 7661 | VUCUGUCAAGUAUAAACUU A- AD-
AG | 135599 CA | 135598 | 67662 97 2680 2680 ‏ووو‎ | AAAAUGUGAUUUUGCAAGUAC A- 7692 | GUACUUGCAAAAUCACAUU A- AD-
AG | 135623 UU | 135622 | 67671 2711 2711 ~303]1 | VCCUGUAAUUCACACAAAGAA A- ‏ودود‎ | VUCUUUGUGUGAAUUACAG A- AD-
CA | 135621 GA | 135620 | 67670 101 3052 100 3052
‎J‏ سم ‎J‏ سم متوا لية حسية موضع هوية ‎J‏ سم متوا لية مضادة للحس موضع هوية المزدوج | الأوليجو في المتوال | الأوليجو في المتوال الحسى هوية ية المضاد هوية ية المتوالية: للحس المتوالية: 1 1 ~3115 | UCUUACAAAUCCAACACCACA A- ~3117 | VGUGGUGUUGGAUUUGUAA A- AD-
AG | 135617 GA | 135616 | 67668 103 3136 102 3136 ~3143 | UGAAACAUGAGACAAAAGGGA A- ~3145 | UCCCUUUUGUCUCAUGUUU A- AD-
UA | 135595 CA | 135594 | 67660 105 3164 104 3164 ~3198 | AAAAGUGACAAUCAAAUGCAG A- ~3200 | CUGCAUUUGAUUGUCACUU A- AD-
AA| 135585 UU | 135584 | 67656 107 3219 106 3219 —3771 | UUUAUUAAAUUAAUGCAGGU A- _3773 | UACCUGCAUUAAUUUAAUA A- AD-
ACA | 135537 AA | 135536 | 67628 109 3242 108 3242 —3771 | UUUAUUAAAUUAAUGCAGGU A- _3773 | UACCUGCAUUAAUUUAAUA A- AD-
ACA | 135557 AA | 135556 | 67637 111 322 110 322 —3771 | UUUAUUAAAUUAAUGCAGGU A- _3773 | UACCUGCAUUAAUUUAAUA A- AD-
ACA | 135574 AA | 135556 | 67647 113 3242 112 3242
‎J‏ سم ‎J‏ سم متوالية حسية موضع هوية ‎J‏ سم متوالية مضادة للحس موضع هوية المزدوج | الأوليجو في المتوال | الأوليجو في المتوال الحسى هوية ية المضاد هوية ية المتوالية: للحس المتوالية: 1 1 —3779 | UUUUAUUAAAUUAAUGCAGG A- ‏روود‎ | ACCUGCAUUAAUUUAAUAA A- AD-
UAC 135533 AA | 135532 | 67626 115 3243 114 3243 —3779 | UUUUAUUAAAUUAAUGCAGG A- ‏روود‎ | ACCUGCAUUAAUUUAAUAA A- AD-
UAC 135553 AA | 135552 | 67635 117 3243 116 3243 —3779 | UUUUAUUAAAUUAAUGCAGG A- ‏روود‎ | ACCUGCAUUAAUUUAAUAA A- AD-
UAC 135572 AA | 135552 | 67645 119 3243 118 3243
الجدول 4. مزدوج 0274© ‎Glo®—‏ لوسيفيراز وبيانات تفاعل سلسلة بوليمراز في الوقت الفعلي تم التعبير عن البيانات بالنسبة المئوية المتبقية نسبة إلى التحكم غير المستهدف. بيانات تفاعل سلسلة بوليمراز في الوقت ‎dll‏ ‏بيانات فحص ‎Luc‏ فى ‎Cos7 WIA‏ ّ ّ ّ في خلايا ‎RKO‏ ‏10
0 نانومولار
نانومولار | . 0.1 0.1 10 10 0.1 0.1 .
‎so }‏ بداية هوية المزدوج | أيه . فى نانومولار | نانومولار | نانومولار | نانومولار | نانومولار | نانومولار التحول
‏جى دي لك | وم ‎aval stoev| aval stoev|‏ | بوني ا لتحوا
‏6 الى
‎STDEV ‎30 Tie] 654 69| 07] 100] 30] 12] 125] Adee 07.1 n| 98 76 40] 07 32] 659] 18] 381] Abert 19 es] 34] 23 09| 21] 23] 17] Abeer m7] ©2( 39] 60 50] 826] 60| 31| Ave
‎eee]‏ ار ل ‎’ Cos7 WA ‏فى‎ Luc ‏فحص‎ «lily ‎RKO Wha ‏في‎ ; ‏1 ناتومولار ‏نانومولار أن تي 0.1 0.1 10 10 0.1 0.1 بداية هوية المزدوج | أيه فى نانومولار | نانومولار | نانومولار | نانومولار | نانومولار | نانومولار التحول ‏جى © لك | وريم ‎stoEv|‏ | وم ‎ave| stoEv|‏ بوني ا لتحوا ‎AVG‏ الى ‎STDEV ‏اا‎ a] sw] Sa] 353] 08] 166] 0.0] 107] abn ois] 155] 200 49 259 08 0١ 03] 60 aban 0: 06 853] 49| Sad] 07 791 36 137 Aberin es] 40 753 17] 06 05] 03 59 255] avr elo] 4: ae] ‏9ل‎ 231 9 249 06 104] aban 0 ia] 89 38 185 05 114] 10] 68] Aber “| 76] sis] 59 453 ‏نا‎ 485 09] 152] aves
SiG] ‏امد مق‎ 48 aid] 42 107 Li] 185] ava i095] 361] $53] 49] ‏5ل‎ 10] 232 08] 74] Aven
‎esses]‏ ار ل بيانات فحص ‎Luc‏ فى ‎Cos7 WIA‏ ّ ّ ّ في خلايا ‎RKO‏ ‏10 ‏1 ناتومولار نانومولار أن تي 0.1 0.1 10 10 0.1 0.1 بداية هوية المزدوج | أيه فى ناتومولار | ناتومولار | تانومولار | ناتومولار | نانومولار | نانومولار التحول جى ذى لك | ونم ‎STDEV| AVG| STDEV| AVG| STDEV|‏ ‎AVG‏ الى ‎STDEV‏ ‎aves‏ 93 ]06 ]147 قا 03 47 اخ 63 ‎Dis]‏ ‎ar] 489 20] S70] 1١ 200] 06 95] Abeer‏ ا ‎Aber‏ ]57 ]03 كنا 05 ]361 ]90 005 ]26
TEI] eee] ’ ’ Cos7 WA ‏فى‎ Luc ‏فحص‎ «lily
RKO Wha ‏في‎ . 1 نانومولار نانومولار بن د ‎us| 01 01 10 0 orf or‏ هوية المزدوج | أيه فى نانومولار | نانومولار | نانومولار | نانومولار | نانومولار | نانومولار التحول جى دي ىا | ونيم ‎stoEV| ١‏ وم ‎١ ave| stoev|‏ وروي ‎١‏ التحوا ‎AVG‏ الى ‎STDEV ‎Gis] ‏اي ام‎ 14] 52] 50] W005] &1| Aven 2659] 50] 403 ‏ا‎ 286] 06 255] 09] 146] aver 00 55] 6 20] 410] 35 287 06] 96] 0
S| ‏اتا‎ ss 20 202 27 7١ 06] 45] ava
Sos] 70 360] G6] 279] 07 66] 10] 61] Abe 7 78] 55 07 269 42 246 06 88] 7 ‏اا‎ aa] as] 13] 252 41 217 06 9١ 7 ‏ا‎ oa] 265 ‏9ق‎ 201 04 77 06 73 ava
‏الجدول 5. متواليات مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 معدلة‎ ‏اسم اسم الأوليجو المضاد للحس هوية | بداية‎ | Dag ‏اسم اسم أوليجو متوالية‎ ‏المزدوج | الأوليجو المتوال | الأوليجو المتوول | التحول‎ ‏الحسي ية المضاد ية في هوية‎ ‏للحس المتوالية:‎ 1 330 UUGGUCACAUUGAAAAGCUUCUc A- Y44GAAGCUUUUCAAUGUGACC A-| AD- 13554 Aa | 135540 | 6763 a ee 330 usUfsgguCfaCfAfuugaAfaAfgcuucsusc A- gsasagcuUfuUfCfAfaugugaccaal.96 A-| AD- 13556 135560 | 6763 i ‏ال ا‎ 330 UfsUfsgguCfaCfAfuugaAfaAfgcuucsusc A- gsasagcuUfuUfCfAfaugugaccaal.96 A-| AD- 13557 135560 | 6764 ‏ل ا‎ TT 332 UGCUGGUCACAUUGAAAAGCUUc A- Y44AGCUUUUCAAUGUGACCAG A-| AD- 13555 Ca | 135550 | 6763
Cl ee 332 usGfscugGfuCfAfcauuGfaAfaagcususc A- asgscuuuUfcAfAfUfgugaccagcal.96 A-| AD- 13557 135570 | 6764 i 332 UfsGfscugGfuCfAfcauuGfaAfaagcususc A- asgscuuuUfcAfAfUfgugaccagcal.96 A-| AD-
A
131 1| 130 4
‏اسم اسم الأوليجو المضاد للحس هوية | بداية‎ | Dag ‏اسم اسم أوليجو متوالية‎ ‏المزدوج | الأوليجو المتوال | الأوليجو المتوول | التحول‎ ‏الحسي ية المضاد ية في هوية‎ ‏للحس المتوالية:‎ 1 333 UUGCUGGUCACAUUGAAAAGCUu A- Y44GCUUUUCAAUGUGACCAGC A-| AD- 13553 Aa | 135534 | 6762
J" ic 333 usUfsgcuGfgUfClfacauUfgAfaaagcsusu A- gscsuuuuCfaAfUfGfugaccagcaal. 96 A-| AD-
Te 135 51 4 6 333 UfsUfsgcuGfgUfCfacauUfgAfaaagcsusu A- gscsuuuuCfaAfUfGfugaccagcaal. 96 A-| AD- 13557 135554 | 6764 le ‏الو‎ ‎351 UUUGUGUUGAUUCUCAGUGUGCa A- CACACUGAGAAUCAACACAAa A-| AD- 13559 135590 | 6765 el ee 469 UAAGUGAGUCCUUUCAUUUGGAg A- CCAAAUGAAAGGACUCACUUa A-| AD- 13558 135586 | 6765
Le 618 UACGUCUCCUCCAAAUGUGUAUc A- Y44UACACAUUUGGAGGAGACG A-| AD- 13554 Ua | 135546 | 6763 la eae 618 usAfscguCfuCfCfuccaAfaUfguguasusc A- usascacaUfuUfGfGfaggagacgual 96 A-| AD-
LAL
145 7 4 2
‏اسم اسم الأوليجو المضاد للحس هوية | بداية‎ | Dag ‏اسم اسم أوليجو متوالية‎ ‏المزدوج | الأوليجو المتوال | الأوليجو المتوول | التحول‎ ‏ا لحسي ية المضاد ية في هوية‎ ‏للحس المتوالية:‎ 1 618 UfsAfscguCfuCfCfuccaAfaUfguguasusc A- usascacaUfuUfGfGfaggagacgual 96 A-| AD- 13557 135566 | 6765
PF i 619 UUACGUCUCCUCCAAAUGUGUAu A- Y44ACACAUUUGGAGGAGACGU A-| AD- 13553 Aa | 135538 | 6762 ‏ا‎ ee 619 usUfsacgUfcUfCfcuccAfaAfugugusasu A- ascsacauUfuGfGfAfggagacguaal.96 A-| AD- 13555 135558 | 6763
JP °F i 619 UfsUfsacgUfcUfCfcuccAfaAfugugusasu A- ascsacauUfuGfGfAfggagacguaal.96 A-| AD- 13557 135558 | 6764 a | ‏الج‎ “ 620 AUUACGUCUCCUCCAAAUGUGUa A- Y44CACAUUUGGAGGAGACGUA A-| AD- 13554 Au | 135544 | 6763 a ed 620 asUfsuacGfuCfUfccucCfaAfaugugsusa A- csascauuUfgGfAfGfgagacguaaul.96 A-| AD- 13556 135564 | 6764 a CT ee 620 AfsUfsuacGfuCfUfccucCfaAfaugugsusa A- csascauuUfgGfAfGfgagacguaaul.96 A-| AD- 13557 135564 | 6765 il PF i | “
‏بداية‎ | das ‏اسم اسم أوليجو متوالية هوية | اسم اسم الأوليجو المضاد للحس‎ ‏المزدوج | الأوليجو المتوال | الأوليجو المتوول | التحول‎ ‏الحسي ية المضاد ية في هوية‎ ‏للحس المتوالية:‎ 1 86 AUUUGAAAGUAUCAAGGUCUCCc A- GAGACCUUGAUACUUUCAAAu A-| AD- 13563 135630 | 6767 ‏ا‎ eee 976 UAGGAACUGACCCUCAAAUUAGg A- UAAUUUGAGGGUCAGUUCCUa A-| AD- 13560 135608 | 6766
PY
1093 UAGACUCAAAAUAAAUAGGAAAa A- Y44UUCCUAUUUAUUUUGAGUC A-| AD- 13554 Ua | 135548 | 6763 ‏اا‎ ue 1093 usAfsgacUfcAfAfaauaAfaUfaggaasasa A- ususccuaUfuUfAfUfuuugagucual.96 A-| AD- 13556 135568 | 6764 le ee 1093 UfsAfsgacUfcAfAfaauaAfaUfaggaasasa A- ususccuaUfuUfAfUfuuugagucual.96 A-| AD- 13558 135568 | 6765 a eee 1094 asCfsagaCfuCfAfaaauAfaAfuaggasasa A- uscscuauUfuAfUfUfuugagucugul.96 A-| AD- 13556 135562 | 6764
Fl nl 1094 AfsCfsagaCfuCfAfaaauAfaAfuaggasasa A- uscscuauUfuAfUfUfuugagucugul.96 A-| AD- 13557 135562 | 6765
J Fl | FP ‏“اا‎
‏اسم اسم الأوليجو المضاد للحس هوية | بداية‎ | Dag ‏اسم اسم أوليجو متوالية‎ ‏المزدوج | الأوليجو المتوال | الأوليجو المتوول | التحول‎ ‏ا لحسي ية المضاد ية في هوية‎ ‏للحس المتوالية:‎ 1 1157 UCUACUACAAUAUAUCUUCAAAa A- UUGAAGAUAUAUUGUAGUAGa A-| AD- 13560 135604 | 6766 a a] 1167 AAUUGUAACAUCUACUACAAUAu A- AUUGUAGUAGAUGUUACAAUu A-| AD- 13563 135632 | 6767 li ee 1245 UACCAAGCACCUUACAAAUACUc A- GUAUUUGUAAGGUGCUUGGUa A-| AD- 13561 135610 | 6766
Fn FY a 1293 AACGGUUUGAUCUUUAUGCUUCa A- AAGCAUAAAGAUCAAACCGUa A-| AD- 13559 135596 | 6766
Tl w]e 1331 UAUUAAUGGGUUAAAUAAAGGUg A- CCUUUAUUUAACCCAUUAAUa A-| AD- 13561 135618 | 6766 1" 1518 UACUUAAUCUGUUUGCUUCCUCa A- AGGAAGCAAACAGAUUAAGUa A-| AD- 13561 135612 | 6766 1 i 1682 UAUCUGUAGAUUCAAUGCCUGGc A- CAGGCAUUGAAUCUACAGAUa A-| AD- 13562 135628 | 6767 al TTT Te
‏اسم اسم الأوليجو المضاد للحس هوية | بداية‎ | Dag ‏اسم اسم أوليجو متوالية‎ ‏المزدوج | الأوليجو المتوال | الأوليجو المتوول | التحول‎ ‏ا لحسي ية المضاد ية في هوية‎ ‏للحس المتوالية:‎ 1 2103 UAUCUUUUGAAUUUUGAAUCAUg A- UGAUUCAAAAUUCAAAAGAUa A-| AD- 13558 135582 | 6765 ‏ا‎ i 2220 UAAAUGUAGACUAUCUUUAGAAg A- UCUAAAGAUAGUCUACAUUUa A-| AD- 13562 135624 | 6767 lw ee 2240 UUGCUUUUAACAUACAUUUCCAa A- GGAAAUGUAUGUUAAAAGCAa A-| AD- 13559 135592 | 6765 i eg TT 2648 UUUGACAGAAAGCAGAAAACAAa A- UGUUUUCUGCUUUCUGUCAAa A-| AD- 13562 135626 | 6767 le ee 2658 UAAGUUUAUACUUGACAGAAAGc A- UUUCUGUCAAGUAUAAACUUa A-| AD- 13560 135606 | 6766 a] a fe 2659 UGAAGUUUAUACUUGACAGAAAg A- UUCUGUCAAGUAUAAACUUCa A-| AD- 13559 135598 | 6766 le ew 2690 AAAAUGUGAUUUUGCAAGUACAg A- GUACUUGCAAAAUCACAUUUu A-| AD- ree] rem 201 31 0 1
‏اسم اسم الأوليجو المضاد للحس هوية | بداية‎ | Dag ‏اسم اسم أوليجو متوالية‎ ‏المزدوج | الأوليجو المتوال | الأوليجو المتوول | التحول‎ ‏الحسي ية المضاد ية في هوية‎ ‏للحس المتوالية:‎ 1 3031 UCCUGUAAUUCACACAAAGAACa A- UUCUUUGUGUGAAUUACAGGa A-| AD- 13562 135620 | 6767 le ‏ل ا‎ 3115 UCUUACAAAUCCAACACCACAAg A- UGUGGUGUUGGAUUUGUAAGa A-| AD- 13561 135616 | 6766 ll ee 3143 UGAAACAUGAGACAAAAGGGAUa A- UCCCUUUUGUCUCAUGUUUCa A-| AD- 13559 135594 | 6766 ll ee 3198 AAAAGUGACAAUCAAAUGCAGAa A- CUGCAUUUGAUUGUCACUUUu A-| AD- 13558 135584 | 6765 lee 3221 UUUAUUAAAUUAAUGCAGGUACa A- Y44UACCUGCAUUAAUUUAAUA A-| AD- 13553 Aa | 135536 | 6762
FF i 3221 usUfsuauUfaAfAfuuaaUfgCfagguascsa A- usasccugClaUfUfAfauuuaauaaal 96 A-| AD- 13555 135556 | 6763 a A ee 3221 UfsUfsuauUfaAfAfuuaaUfgCfagguascsa A- usasccugCfaUfUfAfauuuaauaaal 96 ‏ا حم‎ AD- i 215 41 4 7
اسم اسم أوليجو متوالية هوية | اسم اسم الأوليجو المضاد للحس ‎de‏ | بداية المزدوج | الأوليجو المتوال | الأوليجو المتوول | التحول
الحسي ية المضاد ية في هوية للحس المتوالية: 1
3222 UUUUAUUAAAUUAAUGCAGGUACc A- Y44ACCUGCAUUAAUUUAAUAA A-| AD- 13553 Aa | 135532 | 6762 217 31 6 6 3222 usUfsuuaUfuAfAfauuaAfuGfcaggusasc A- ascscugcAfulUfAfAfuuuaauaaaal 96 A-| AD- 13555 135552 | 6763 219 3| 218 5 3222 UfsUfsuuaUfuAfAfauuaAfuGfcaggusasc A- ascscugcAfulUfAfAfuuuaauaaaal 96 A-| AD- 13557 135552 | 6764 221 21 0 5
النماذج المكافئة سوف يفهم الخبراء في المجال؛ أو يكونون قادرين على التأكيد ‎(of‏ باستخدام مالا يزيد عن الاختبار الروتيني؛ هناك العديد من الصور المكافئة للنماذج والطرق المعينة الموضحة هنا. يقصد بهذه الصور المكافئة أن يتم تضمينها بواسطة منظور عناصر الحماية التالية. قائمة التتابع: ‎Apc 7‏ ب" ‎MHC‏ ‏'ج' ‎PD-L1‏ ‎PD-1 'Y 0‏ م ‎CD3‏ ‎TCR "J‏ ‎Tally‏ ‏'ح' | ‎ITAM‏ ‏5 ط' ‎ITM‏ ‏في" ‎ITSM‏ ‏'ك' ‏ 5010-2 "ل" تنشيط الخلية 1 209

Claims (3)

عناصر الحماية
1. عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة ‎(dsRNA) double stranded ribonucleic acid‏ لتثبيط التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 ‎«(PD-L1) programmed cell death ligand‏ ‎dua‏ يتضمن عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة ‎double stranded ribonucleic acid‏ ‎(dsRNAI)‏ المذكور جديلة حسية ‎sense strand‏ وجديلة مضادة للحس ‎Cus antisense strand‏ تتضمن الجديلة الحسية ‎sense strand‏ المذكورة على الأقل 15 نيكلوتيد ‎nucleotide‏ متجاور تختلف بما لا يزيد عن 3 نيكلوتيدات ‎nucleotides‏ عن أي من نيكلوتيدات ‎nucleotides‏ 3243-3221 لمتوالية النيكلوتيد ‎nucleotide‏ لمتوالية بهوية رقم: 1 والجديلة المضادة للحس ‎antisense strand‏ المذكورة تتضمن على الأقل 15 نيكلوتيد ‎nucleotide‏ متجاور تختلف بما لا يزيد عن 3 نيكلوتيدات ‎nucleotides‏ عن الجزءٍ المكمل ‎complementary portion‏ لمتوالية النيكلوتيد ‎nucleotide‏ لمتوالية 0 بهوية رقم: 2 ‎Gua‏ تتضمن كل نيكلوتيدات ‎nucleotides‏ الجديلة الحسية ‎55S sense strand‏ أو كل من نيكلوتيدات ‎nucleotides‏ الجديلة المضادة للحس ‎antisense strand‏ المذكورة تعديلات نيكلوتيد ‎‘nucleotide‏ و ‎Cua‏ تجاور الجديلة الحسية ‎sense strand‏ المذكورة لمشتق 17-أسيتيل جالاكتوز أمين ‎N-‏ ‎(GalNAc) acetylgalactosamine 5‏ مرتبط مع الطرف 3.
2. عامل حمض الرببونيكلويك ثنائي الجديلة ‎(dsRNA) double stranded ribonucleic acid‏ وفقاً لعنصر الحماية 1؛ حيث (أ) تشتمل الجديلة الحسية ‎sense strand‏ على 3- ‎ACCUGCAUUAAUUUAAUAAAA‏ -5 0 (متوالية ‎digger‏ رقم: 116) وتشتمل الجديلة المضادة للحس ‎antisense strand‏ على -5 ‎UUUUAUUAAAUUAAUGCAGGUAC -3'‏ (متوالية بهوية رقم: 117)؛ أو (ب) تشتمل الجديلة الحسية ‎sense strand‏ على 3- ‎UACCUGCAUUAAUUUAAUAAA‏ -'5 (متوالية بهوية رقم: 110) وتشتمل الجديلة المضادة ‎antisense strand (wall‏ على -5 ‎UUUAUUAAAUUAAUGCAGGUACA -3'‏ (متوالية بهوية رقم: 111).
3. عامل حمض الريبونيكلويك ثنائي الجديلة ‎(dsRNA) double stranded ribonucleic acid‏ وفقاً لعنصر الحماية 1 حيث )0( تشتمل الجديلة الحسية ‎sense strand‏ على 3- 96 ‎ascscugcAfuUfAfAfuuuaauaaaal‏ -'5 (متوالية بهوية رقم: 218) وتشتمل الجديلة المضادة ‎antisense strand (wall‏ على -5 ‎usUfsunaUfuAfAfanuaAfuGfeaggusasc -3 5‏ (متوالية بهوية رقم: 219)؛ (ب) تشتمل الجديلة الحسية ‎sense strand‏ على '3- 96 ‎ascscugcAfuUfAfAfunuaauaaaal‏ -'5 (متوالية بهوية رقم: 220( وتشتمل الجديلة المضادة للحس ‎antisense strand‏ على -5 ‎UfsUfsunaUfuAfAfanuaAfuGfeaggusasc -3'‏ (متوالية بهوية رقم: 221)؛ (ج) ‎Jails‏ الجديلة الحسية ‎sense strand‏ على '3- ‎usasccugCfaUfUfAfauuuaanaaal.96‏ -'5 0 (متوالية بهوية رقم: 212( وتشتمل الجديلة المضادة ‎antisense strand (pall‏ على -5 ‎usUFsuauUfaAfAfunaaUfgClagguascsa -3'‏ (متوالية بهوية رقم: 213)؛ أو (د) تشتمل الجديلة الحسية ‎sense strand‏ على '3- ‎usasccugCfaUfUfAfaunuaauaaal.96‏ -'5 (متوالية بهوية رقم: 14 0 وتشتمل الجديلة المضادة للحس ‎antisense strand‏ على -5 ‎UfsUfsuauUfaAfAfuuaaUfgClagguascsa -3'‏ (متوالية بهوية رقم: 215( ؛ أو حيث يي ي» ون هي 0-2- ميفيل ‎«G 0116-2 «C 0141-2 «A (2-OMe) 2-O-methyl‏ ‎«U OMe=2‏ على التوالي؛ ‎Uf «Gf «Cf (Af‏ هي 2- فلورو 2-0000 ‎«A‏ 2- فلورو -2 ‎fluoro‏ ©؛ 2— فلورو 2-0000 6؛ و2- فلورو 2-0000 ‎«U‏ على التوالي؛ 6 هي رابط فوسفورو ثيوات ‎L965 {phosphorothioate linkage‏ هي ‎JSI-GalNAc)tris]-N‏ )-أميدو ديكانويل)]-4- هيدروكسي برولينول ‎.N-[tris(GalNAc-alkyl)-amidodecanoyl)]-4-hydroxyprolinol‏ ‏20 ‏4 عامل حمض الرببونيكلويك ثنائي الجديلة ‎(dsRNA) double stranded ribonucleic acid‏ وفقاً لعنصر الحماية 1 حيث يتم اختيار واحد على الأقل من تعديلات النيكلوتيد ‎nucleotide‏ المذكورة من المجموعة المكونة من نيكلوتيد-ديوكسي ‎cdeoxy-nucleotide‏ نيكلوتيد ‎nucleotide‏ ديوكسي- ثيمين ‎(dT) deoxy-thymine‏ عند الطرف 23؛ نيكلوتيد 0-72-ميثيل معدل ‎2-O-methyl‏ ‎¢modified nucleotide 5‏ نيكلوتيد 72”-فلورو معدل ‎modified nucleotide‏ 2-10010» نيكلوتيد 2:- ديوكسي-معدل ‎<2'-deoxy-modified nucleotide‏ نيكلوتيد مغلق ‎Jocked nucleotide‏ نيكلوتيد غير
مغلق ‎cunlocked nucleotide‏ نيكلوتيد مقيد توافقيا ‎«conformationally restricted nucleotide‏ نيكلوتيد ‎Ji)‏ مقيد ‎constrained ethyl nucleotide‏ نيكلوتيد لاخطوي ‎cabasic nucleotide‏ نيكلوتيد 2-أمينو معدل ‎2’-amino-modified nucleotide‏ نيكلوتيد 2:-0-أليل معدل ‎2-O-allyl-‏ ‎¢modified nucleotide‏ نيكلوتيد 72-©-ألكيل معدل ‎¢2°-C-alkyl-modified nucleotide‏ نيكلوتيد 2”-هيدروكسيل معدل ‎«27-hydroxyl-modified nucleotide‏ نيكلوتيد 2 -ميثوكسي إيثيل معدل -:2 ‎modified nucleotide‏ الإطاع«مطاع» نيكلوتيد 2:-0-ألكيل معدل ‎2’-O-alkyl-modified‏ ‎nucleotide‏ نيكلوتيد مورفولينو ‎nucleotide‏ 0صناهم:م» فوسفوراميدات ‎«phosphoramidate‏ ‏نيكلوتيد ‎nucleotide‏ يتضمن قاعدة غير طبيعية ‎cnon-natural base‏ نيكلوتيد تترا هيدرو بيران معدل ‎ctetrahydropyran modified nucleotide‏ نيكلوتيد 1 5-آنهيدرو هكسيتول معدل -1,5 ‎canhydrohexitol modified nucleotide 0‏ نيكلوتيد سيكلىو هكسينيل معدل ‎cyclohexenyl modified‏ ‎¢nucleotide‏ نيكلوتيد ‎nucleotide‏ يتضمن مجموعة فوسفورو ثيوات ‎«phosphorothioate group‏ نيكلوتيد يتضمن مجموعة ميثيل فوسفونات ‎¢methylphosphonate group‏ نيكلوتيد ‎nucleotide‏ ‏يتضمن 5'-فوسفات ع01م57-0105»؛ ونيكلوتيد ‎nucleotide‏ يتضمن محاكي 5"-فوسفات -5 ‎phosphate mimic‏
5. عامل حمض الريبونيكلويك ثنائي الجديلة ‎(dsRNA) double stranded ribonucleic acid‏ وفقاً لعنصر الحماية 1؛ حيث تبلغ كل جديلة ‎strand‏ ما لا يزيد عن 30 نيكلوتيد ‎nucleotide‏ في الطول.
6. عامل حمض الرببونيكلويك ثنائي الجديلة ‎(dsRNA) double stranded ribonucleic acid‏ وفقاً 0 لعنصر الحماية ‎Gua]‏ تتضمن جديلة ‎strand‏ واحدة على الأقل ‎sj‏ معلق ‎overhang‏ 3: من 1 نيكلوتيد ‎nucleotide‏ على الأقل.
7. عامل حمض الريبونيكلويك ‎AUS‏ الجديلة ‎(dsRNA) double stranded ribonucleic acid‏ وفقاً لعنصر الحماية 1؛ حيث تتضمن جديلة ‎strand‏ واحدة على الأقل جزءِ معلق ‎overhang‏ 3: من 2 5 تنيكلوتيدات ‎nucleotides‏ على الأقل.
‏وفقاً‎ (dsRNA) double stranded ribonucleic acid ‏عامل حمض الرببونيكلويك ثنائي الجديلة‎ .8 N-acetylgalactosamine (pel ‏لعنصر الحماية 1 حيث يكون المشتق 17-أسيتيل جالاكتوز‎ ‏هو‎ (GalNAc) ‏وي‎ OH 0s tio HO ‏ب‎ ‎AcHN NY Q Ho OH 5 HO ~~ rn ‏مح‎ yO 0 0 0 Ho OH HO 0 ‏م رصح ام‎ . ‏ا اناعم‎ H H
‏وفقاً‎ (dsRNA) double stranded ribonucleic acid ‏عامل حمض الرببونيكلويك ثنائي الجديلة‎ .9 double stranded ribonucleic ‏لعنصر الحماية 1» يترافق عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة‎ (GalNAc) N-acetylgalactosamine ‏المشتق 7١1-أسيتيل جالاكتوز أمين‎ z= (dsRNA) acid ‏المبين فى المخطط التالى‎ 9 ٍ SC 0 Oe oF LS OH HQ Q H H 0 H To ‏ريصح‎ NAN ¢ H H HOA ‏ا ا‎ HQ (CH ’ 9 Aor 0 1 0 .5 ‏عبارة عن © أو‎ X ‏و؛ حيث‎ ‏وفقاً‎ (dsRNA) double stranded ribonucleic acid ‏عامل حمض الريبونيكلويك ثنائي الجديلة‎ .0 .0 ‏عبارة عن‎ X ‏لعنصر الحماية 9 حيث‎
1. عامل حمض الريبونيكلويك ثنائي الجديلة ‎(dsRNA) double stranded ribonucleic acid‏ وفقاً لعنصر الحماية 1؛ ‎Cus‏ تبلغ المنطقة مزدوجة الجديلة ‎double stranded region‏ 23-21 زوج نيكلوتيد ‎nucleotides‏ في الطول.
12. عامل حمض الريبونيكلويك ثنائي الجديلة ‎(dsRNA) double stranded ribonucleic acid‏ وفقاً لعنصر الحماية 1؛ حيث يتم اختيار تعديلات النيكلوتيد ‎nucleotide‏ من المجموعة المكونة من حمض نووي مغلق ‎(LNA) locked nucleic acid‏ حمض نووي هكسيتول ‎hexitol nucleic acids‏ ‎((HNA)‏ حمض 5957( سيكلى هكسنيل ‎¢(CeNA) cyclohexenylnucleic acid‏ 2 -ميثوكسي إيثيل ‎2"-0-alkyl J&I-0—*2 «2'-methoxyethyl‏ 2 -0-أليل ‎«2’-O-allyl‏ 2 -0- أليل ‎«2'-C-allyl‏ ‏0 2 -فلورو ‎2'-fluoro‏ 2 -ديوكسي ‎2'-deoxy‏ 2”-هيدروكسيل ‎27-hydroxyl‏ وتوليفات مما سبق.
3. عامل حمض الريبونيكلويك ثنائي الجديلة ‎(dsRNA) double stranded ribonucleic acid‏ وفقاً لعنصر الحماية 1؛ يتضمن العامل المذكور أيضا رابط نيكلوتيد بيني ‎internucleotide linkage‏ فوسفورو ثيوات ‎phosphorothioate‏ أو ميثيل فوسفونات ‎methylphosphonate‏ واحد على الأقل.
4. عامل حمض الريبونيكلويك ثنائي الجديلة ‎(dsRNA) double stranded ribonucleic acid‏ وفقاً لعنصر الحماية 1 حيث تحتوي كل من نيكلوتيدات ‎nucleotides‏ الجديلة الحسية ‎sense strand‏ المذكورة على تعديل نيكلوتيد ‎nucleotide‏ مختار من المجموعة المكونة من تعديل 2:-0-ميثيل ‎2°-0-methyl‏ وتعديل 9-0-2 2-0000 حيث تتضمن الجديلة الحسية ‎sense strand‏ المذكورة اثنين من روابط نيكلوتيد فوسفورو ثيوات بينية ‎phosphorothioate internucleotide linkages‏ عند الطرف 5ث حيث تحتوي كل من نيكلوتيدات ‎nucleotides‏ الجديلة المضادة للحس ‎antisense strand‏ المذكورة على تعديل نيكلوتيد ‎nucleotide‏ مختار من المجموعة المكونة من تعديل 2:-0-ميثيل -27-0 ‎methyl 25‏ وتعديل 2:-0-فلورو ‎«2-fluoro‏ و حيث تتضمن الجديلة المضادة للحس ‎antisense strand‏ المذكورة اثنين من روابط نيكلوتيد فوسفورو
ثيوات بينية ‎phosphorothioate internucleotide linkages‏ عند الطرف 5” واثنين من روابط نيكلوتيد فوسفورو ثيوات بينية ‎phosphorothioate internucleotide linkages‏ عند الطرف 3’.
5. تركيبة صيدلانية ‎pharmaceutical composition‏ لتثبيط التعبير عن جين مركب ترابطي 1 ا لموت الخلية المبرمج 1 ‎(PD-L1) programmed cell death ligand‏ يتضمن عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة ‎(dsRNA) double stranded ribonucleic acid‏ وفقا لأي من عناصر الحماية 14-1.
6. طريقة تثبيط التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج ‎programmed cell death‏ 0 1 لصدعنا ‎(PD-L1)‏ في خلية في المعمل» تتضمن الطريقة: ملامسة الخلية مع عامل حمض رببونيكلويك ثنائي الجديلة ‎double stranded ribonucleic acid‏ ‎(dSRNAI)‏ وفقا لأي من عناصر الحماية 14-1, بالتالي يتم تثبيط التعبير عن جين مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 ‎(PD-L1) programmed cell death ligand‏ في الخلية. 5 17. الطريقة وفقا لعنصر الحماية 16؛ حيث يتم تثبيط التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج 1 ‎(PD-L1) programmed cell death ligand‏ بنسبة على الأقل 20 730 40 350 0 70 0ق 90 أو 95/¢ أو إلى أقل من مستوى كشف الفحص.
8. عامل حمض الريبونيكلويك ثنائي الجديلة ‎(dsRNA) double stranded ribonucleic acid‏ وفقاً قد يستفيد من تقليل التعبير عن مركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج ‎programmed cell death‏
‎.(PD-L1) ligand 1‏
9. عامل حمض الرببونيكلويك ثنائي الجديلة ‎(dsRNA) double stranded ribonucleic acid‏ 5 للإستخدام وفقاً لعنصر الحماية 18( حيث المرض المرتبط بمركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج ‎(PD-L1) programmed cell death ligand 1‏ عبارة عن إصابة.
0. عامل حمض الرنبونيكلويك ‎A‏ الجديلة ‎(dsRNAi) double stranded ribonucleic acid‏ للاستخدام وفقاً لعنصر الحماية 19( حيث تكون الإصابة ‎Ble‏ عن إصابة بين خلوية ‎intracellular‏ ‎infection‏ مزمنة.
1. عامل حمض الرببونيكلويك ‎A‏ الجديلة ‎(dsRNAi) double stranded ribonucleic acid‏ للإستخدام وفقاً لعنصر الحماية 18( حيث المرض المرتبط بمركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج ‎(PD-LI) programmed cell death ligand 1‏ عبارة عن إصابة فيروسية ‎-viral infection‏ 0 22. عامل حمض الرنبونيكلويك ‎AU‏ الجديلة ‎(dsRNAi) double stranded ribonucleic acid‏ للإستخدام وفقاً لعنصر الحماية 18( حيث المرض المرتبط بمركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج ‎(PD-L1) programmed cell death ligand 1‏ عبارة عن إصابة فيروس التهاب الكبد ‎hepatitis‏ ‎-virus infection‏ 5 23. عامل حمض الرنبونيكلويك ‎A‏ الجديلة ‎(dsRNAi) double stranded ribonucleic acid‏ للإستخدام وفقاً لعنصر الحماية 18( حيث المرض المرتبط بمركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج ‎(PD-L1) programmed cell death ligand 1‏ عبارة عن السرطان.
4. عامل حمض الرنبونيكلويك ‎A‏ الجديلة ‎(dsRNAi) double stranded ribonucleic acid‏ للاستخدام وفقاً لعنصر الحماية 18( حيث الخاضع عبارة عن إنسان.
5. عامل حمض الرببونيكلويك ‎A‏ الجديلة ‎(dsRNA) double stranded ribonucleic acid‏ للاستخدام وفقاً لعنصر الحماية 18( حيث تتم صياغة عامل حمض الرببونيكلويك ثنائي الجديلة ‎(dsRNA) double stranded ribonucleic acid‏ للإعطاء بجرعة ‎ss‏ 0.01 ملجم/كجم إلى حوالي 5 50 ملجم/كجم.
6. عامل حمض الرببونيكلويك ثنائي الجديلة ‎(dsRNA) double stranded ribonucleic acid‏ للاستخدام وفقاً لعنصر الحماية 18( حيث تتم صياغة عامل حمض الرببونيكلويك ثنائي الجديلة ‎(dsRNA) double stranded ribonucleic acid‏ للإعطاء إلى الخاضع تحت الجلد.
3 ‏ح_ ا ا‎ # ‏نو‎ ee 0 : od i Now. ‏يو‎ ‎et LAUDE (eer 1) ‏ل و"‎ 8 a x 1 85 A Tew 0 ‏ل ا‎ ‏ب‎ y § C 3 3 ْ 0 ‏ام" ا‎ : ‏قل نا‎ 1 ‏با‎ : ‏إٍْ‎ 1 : ‏ا‎ ‎i ‏نخاد ا‎ : ‏حم‎ bel don ٠ yu Lod Ed : : W i i Wook 0 ‏إٍْ‎ = de ‏رن‎ J . $e wg La
الحاضهة الهيلة السعودية الملضية الفكرية ‎Swed Authority for intallentual Property pW‏ ‎RE‏ .¥ + \ ا 0 § ام 5 + < ‎Ne‏ ‎ge‏ ”بن اج > عي كي الج دا لي ايام ‎TEE‏ ‏ببح ةا ‎Nase eg‏ + ‎Ed - 2 -‏ 3 .++ .* وذلك بشرط تسديد المقابل المالي السنوي للبراءة وعدم بطلانها ‎of‏ سقوطها لمخالفتها ع لأي من أحكام نظام براءات الاختراع والتصميمات التخطيطية للدارات المتكاملة والأصناف ع النباتية والنماذج الصناعية أو لائحته التنفيذية. »> صادرة عن + ب ب ‎٠.‏ ب الهيئة السعودية للملكية الفكرية > > > ”+ ص ب ‎101١‏ .| لريا ‎1*١ uo‏ ؛ المملكة | لعربية | لسعودية ‎SAIP@SAIP.GOV.SA‏
SA518391045A 2015-09-02 2018-03-01 تركيبات حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة لمركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج1 (PD-L1) iRNA وطرق استخدامها SA518391045B1 (ar)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201562213224P 2015-09-02 2015-09-02
PCT/US2016/047946 WO2017040078A1 (en) 2015-09-02 2016-08-22 PROGRAMMED CELL DEATH 1 LIGAND 1 (PD-L1) iRNA COMPOSITIONS AND METHODS OF USE THEREOF

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SA518391045B1 true SA518391045B1 (ar) 2022-11-09

Family

ID=56851713

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SA518391045A SA518391045B1 (ar) 2015-09-02 2018-03-01 تركيبات حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة لمركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج1 (PD-L1) iRNA وطرق استخدامها

Country Status (13)

Country Link
US (2) US10889813B2 (ar)
EP (2) EP4393495A2 (ar)
JP (3) JP7028764B2 (ar)
KR (1) KR20180051550A (ar)
CN (2) CN108368507B (ar)
AU (1) AU2016315584B2 (ar)
CA (1) CA2996873A1 (ar)
EA (1) EA201890619A1 (ar)
HK (2) HK1255138A1 (ar)
PE (1) PE20181131A1 (ar)
SA (1) SA518391045B1 (ar)
SG (1) SG10202007937SA (ar)
WO (1) WO2017040078A1 (ar)

Families Citing this family (26)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
BRPI0923225A2 (pt) 2008-12-02 2016-10-04 Chiralgen Ltd metodo para sintese de acidos nucleicos modificados no atomo de fosforo
BR112012000828A8 (pt) 2009-07-06 2017-10-10 Ontorii Inc Novas pró-drogas de ácido nucleico e métodos de uso das mesmas
WO2012039448A1 (ja) 2010-09-24 2012-03-29 株式会社キラルジェン 不斉補助基
EP3248982A1 (en) 2011-07-19 2017-11-29 Wave Life Sciences Ltd. Thiosulfonate reagents for the synthesis of functionalized nucleic acids
RU2015104762A (ru) 2012-07-13 2018-08-31 Уэйв Лайф Сайенсес Лтд. Хиральный контроль
PT2872485T (pt) 2012-07-13 2021-03-05 Wave Life Sciences Ltd Grupo auxiliar assimétrico
KR20210158880A (ko) 2013-12-12 2021-12-31 알닐람 파마슈티칼스 인코포레이티드 보체 성분 ｉＲＮＡ 조성물 및 이의 이용 방법
JPWO2015108048A1 (ja) 2014-01-15 2017-03-23 株式会社新日本科学 抗腫瘍作用を有するキラル核酸アジュバンド及び抗腫瘍剤
EP3095461A4 (en) 2014-01-15 2017-08-23 Shin Nippon Biomedical Laboratories, Ltd. Chiral nucleic acid adjuvant having immunity induction activity, and immunity induction activator
KR20230152178A (ko) 2014-01-16 2023-11-02 웨이브 라이프 사이언시스 리미티드 키랄 디자인
CA2993201A1 (en) 2015-07-21 2017-01-26 The Children's Medical Center Corporation Pd-l1 expressing hematopoietic stem cells and uses
CN108368507B (zh) 2015-09-02 2022-03-22 阿尔尼拉姆医药品有限公司 程序性细胞死亡1配体1(PD-L1)的iRNA组合物及其使用方法
WO2018185252A1 (en) * 2017-04-05 2018-10-11 Silence Therapeutics Gmbh Nucleic acid conjugates
WO2019000149A1 (zh) * 2017-06-26 2019-01-03 深圳市博奥康生物科技有限公司 一种人程序性死亡配体 1 基因的 siRNA 及其应用
US11879137B2 (en) 2017-09-22 2024-01-23 The Children's Medical Center Corporation Treatment of type 1 diabetes and autoimmune diseases or disorders
SG11202002940QA (en) 2017-11-01 2020-04-29 Alnylam Pharmaceuticals Inc Complement component c3 irna compositions and methods of use thereof
US20200385719A1 (en) * 2017-11-16 2020-12-10 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Kisspeptin 1 (kiss1) irna compositions and methods of use thereof
CN108359667B (zh) * 2018-01-06 2021-01-05 武汉泽智生物医药有限公司 沉默程序性死亡受体-配体表达的siRNA序列及其应用
JP7476171B2 (ja) * 2018-09-07 2024-04-30 ザ ジェネラル ホスピタル コーポレイション 免疫チェックポイント阻害のための組成物および方法
US20240182900A1 (en) * 2019-11-07 2024-06-06 Yale University Microrna blockade for the treatment of disease
WO2021173811A1 (en) * 2020-02-28 2021-09-02 Aligos Therapeutics, Inc. Methods and compositions for targeting pd-l1
CN112180005B (zh) * 2020-09-01 2022-10-04 上海市疾病预防控制中心 一种预测鉴定生物样本中酰基肉碱的方法及其应用
CA3234636A1 (en) 2021-10-29 2023-05-04 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Complement factor b (cfb) irna compositions and methods of use thereof
KR20230128690A (ko) * 2022-02-28 2023-09-05 주식회사 시선테라퓨틱스 핵산 복합체를 포함하는 폐암 예방 또는 치료용 조성물
WO2023233290A1 (en) * 2022-05-31 2023-12-07 Janssen Sciences Ireland Unlimited Company Rnai agents targeting pd-l1
CN117881783A (zh) * 2023-02-17 2024-04-12 苏州时安生物技术有限公司 一种用于抑制细胞程序性死亡-配体1基因表达的siRNA、其缀合物和药物组合物及用途

Family Cites Families (267)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US564562A (en) 1896-07-21 Joseph p
US513030A (en) 1894-01-16 Machine for waxing or coating paper
US3687808A (en) 1969-08-14 1972-08-29 Univ Leland Stanford Junior Synthetic polynucleotides
US4469863A (en) 1980-11-12 1984-09-04 Ts O Paul O P Nonionic nucleic acid alkyl and aryl phosphonates and processes for manufacture and use thereof
US5023243A (en) 1981-10-23 1991-06-11 Molecular Biosystems, Inc. Oligonucleotide therapeutic agent and method of making same
US4476301A (en) 1982-04-29 1984-10-09 Centre National De La Recherche Scientifique Oligonucleotides, a process for preparing the same and their application as mediators of the action of interferon
JPS5927900A (ja) 1982-08-09 1984-02-14 Wakunaga Seiyaku Kk 固定化オリゴヌクレオチド
FR2540122B1 (fr) 1983-01-27 1985-11-29 Centre Nat Rech Scient Nouveaux composes comportant une sequence d'oligonucleotide liee a un agent d'intercalation, leur procede de synthese et leur application
US4605735A (en) 1983-02-14 1986-08-12 Wakunaga Seiyaku Kabushiki Kaisha Oligonucleotide derivatives
US4948882A (en) 1983-02-22 1990-08-14 Syngene, Inc. Single-stranded labelled oligonucleotides, reactive monomers and methods of synthesis
US4824941A (en) 1983-03-10 1989-04-25 Julian Gordon Specific antibody to the native form of 2'5'-oligonucleotides, the method of preparation and the use as reagents in immunoassays or for binding 2'5'-oligonucleotides in biological systems
US4587044A (en) 1983-09-01 1986-05-06 The Johns Hopkins University Linkage of proteins to nucleic acids
US5118802A (en) 1983-12-20 1992-06-02 California Institute Of Technology DNA-reporter conjugates linked via the 2' or 5'-primary amino group of the 5'-terminal nucleoside
US5118800A (en) 1983-12-20 1992-06-02 California Institute Of Technology Oligonucleotides possessing a primary amino group in the terminal nucleotide
US5550111A (en) 1984-07-11 1996-08-27 Temple University-Of The Commonwealth System Of Higher Education Dual action 2',5'-oligoadenylate antiviral derivatives and uses thereof
FR2567892B1 (fr) 1984-07-19 1989-02-17 Centre Nat Rech Scient Nouveaux oligonucleotides, leur procede de preparation et leurs applications comme mediateurs dans le developpement des effets des interferons
US5430136A (en) 1984-10-16 1995-07-04 Chiron Corporation Oligonucleotides having selectably cleavable and/or abasic sites
US5258506A (en) 1984-10-16 1993-11-02 Chiron Corporation Photolabile reagents for incorporation into oligonucleotide chains
US5367066A (en) 1984-10-16 1994-11-22 Chiron Corporation Oligonucleotides with selectably cleavable and/or abasic sites
US4828979A (en) 1984-11-08 1989-05-09 Life Technologies, Inc. Nucleotide analogs for nucleic acid labeling and detection
US4897355A (en) 1985-01-07 1990-01-30 Syntex (U.S.A.) Inc. N[ω,(ω-1)-dialkyloxy]- and N-[ω,(ω-1)-dialkenyloxy]-alk-1-yl-N,N,N-tetrasubstituted ammonium lipids and uses therefor
FR2575751B1 (fr) 1985-01-08 1987-04-03 Pasteur Institut Nouveaux nucleosides de derives de l'adenosine, leur preparation et leurs applications biologiques
US5235033A (en) 1985-03-15 1993-08-10 Anti-Gene Development Group Alpha-morpholino ribonucleoside derivatives and polymers thereof
US5185444A (en) 1985-03-15 1993-02-09 Anti-Gene Deveopment Group Uncharged morpolino-based polymers having phosphorous containing chiral intersubunit linkages
US5405938A (en) 1989-12-20 1995-04-11 Anti-Gene Development Group Sequence-specific binding polymers for duplex nucleic acids
US5166315A (en) 1989-12-20 1992-11-24 Anti-Gene Development Group Sequence-specific binding polymers for duplex nucleic acids
US5034506A (en) 1985-03-15 1991-07-23 Anti-Gene Development Group Uncharged morpholino-based polymers having achiral intersubunit linkages
US4683202A (en) 1985-03-28 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying nucleic acid sequences
US4762779A (en) 1985-06-13 1988-08-09 Amgen Inc. Compositions and methods for functionalizing nucleic acids
US5317098A (en) 1986-03-17 1994-05-31 Hiroaki Shizuya Non-radioisotope tagging of fragments
JPS638396A (ja) 1986-06-30 1988-01-14 Wakunaga Pharmaceut Co Ltd ポリ標識化オリゴヌクレオチド誘導体
US4837028A (en) 1986-12-24 1989-06-06 Liposome Technology, Inc. Liposomes with enhanced circulation time
US4920016A (en) 1986-12-24 1990-04-24 Linear Technology, Inc. Liposomes with enhanced circulation time
US5276019A (en) 1987-03-25 1994-01-04 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Inhibitors for replication of retroviruses and for the expression of oncogene products
US5264423A (en) 1987-03-25 1993-11-23 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Inhibitors for replication of retroviruses and for the expression of oncogene products
US4904582A (en) 1987-06-11 1990-02-27 Synthetic Genetics Novel amphiphilic nucleic acid conjugates
ATE113059T1 (de) 1987-06-24 1994-11-15 Florey Howard Inst Nukleosid-derivate.
US5585481A (en) 1987-09-21 1996-12-17 Gen-Probe Incorporated Linking reagents for nucleotide probes
US4924624A (en) 1987-10-22 1990-05-15 Temple University-Of The Commonwealth System Of Higher Education 2,',5'-phosphorothioate oligoadenylates and plant antiviral uses thereof
US5188897A (en) 1987-10-22 1993-02-23 Temple University Of The Commonwealth System Of Higher Education Encapsulated 2',5'-phosphorothioate oligoadenylates
US5525465A (en) 1987-10-28 1996-06-11 Howard Florey Institute Of Experimental Physiology And Medicine Oligonucleotide-polyamide conjugates and methods of production and applications of the same
DE3738460A1 (de) 1987-11-12 1989-05-24 Max Planck Gesellschaft Modifizierte oligonukleotide
US5082830A (en) 1988-02-26 1992-01-21 Enzo Biochem, Inc. End labeled nucleotide probe
EP0406309A4 (en) 1988-03-25 1992-08-19 The University Of Virginia Alumni Patents Foundation Oligonucleotide n-alkylphosphoramidates
US5278302A (en) 1988-05-26 1994-01-11 University Patents, Inc. Polynucleotide phosphorodithioates
US5109124A (en) 1988-06-01 1992-04-28 Biogen, Inc. Nucleic acid probe linked to a label having a terminal cysteine
US5216141A (en) 1988-06-06 1993-06-01 Benner Steven A Oligonucleotide analogs containing sulfur linkages
US5175273A (en) 1988-07-01 1992-12-29 Genentech, Inc. Nucleic acid intercalating agents
US5262536A (en) 1988-09-15 1993-11-16 E. I. Du Pont De Nemours And Company Reagents for the preparation of 5'-tagged oligonucleotides
US5512439A (en) 1988-11-21 1996-04-30 Dynal As Oligonucleotide-linked magnetic particles and uses thereof
US5457183A (en) 1989-03-06 1995-10-10 Board Of Regents, The University Of Texas System Hydroxylated texaphyrins
US5599923A (en) 1989-03-06 1997-02-04 Board Of Regents, University Of Tx Texaphyrin metal complexes having improved functionalization
FR2645866B1 (fr) 1989-04-17 1991-07-05 Centre Nat Rech Scient Nouvelles lipopolyamines, leur preparation et leur emploi
US5391723A (en) 1989-05-31 1995-02-21 Neorx Corporation Oligonucleotide conjugates
US4958013A (en) 1989-06-06 1990-09-18 Northwestern University Cholesteryl modified oligonucleotides
US5744101A (en) 1989-06-07 1998-04-28 Affymax Technologies N.V. Photolabile nucleoside protecting groups
US5143854A (en) 1989-06-07 1992-09-01 Affymax Technologies N.V. Large scale photolithographic solid phase synthesis of polypeptides and receptor binding screening thereof
US5032401A (en) 1989-06-15 1991-07-16 Alpha Beta Technology Glucan drug delivery system and adjuvant
US5451463A (en) 1989-08-28 1995-09-19 Clontech Laboratories, Inc. Non-nucleoside 1,3-diol reagents for labeling synthetic oligonucleotides
US5134066A (en) 1989-08-29 1992-07-28 Monsanto Company Improved probes using nucleosides containing 3-dezauracil analogs
US5254469A (en) 1989-09-12 1993-10-19 Eastman Kodak Company Oligonucleotide-enzyme conjugate that can be used as a probe in hybridization assays and polymerase chain reaction procedures
US5591722A (en) 1989-09-15 1997-01-07 Southern Research Institute 2'-deoxy-4'-thioribonucleosides and their antiviral activity
US5399676A (en) 1989-10-23 1995-03-21 Gilead Sciences Oligonucleotides with inverted polarity
US5264564A (en) 1989-10-24 1993-11-23 Gilead Sciences Oligonucleotide analogs with novel linkages
CA2071510C (en) 1989-10-24 2004-07-06 Chris A. Buhr 2' modified oligonucleotides
US5292873A (en) 1989-11-29 1994-03-08 The Research Foundation Of State University Of New York Nucleic acids labeled with naphthoquinone probe
US5177198A (en) 1989-11-30 1993-01-05 University Of N.C. At Chapel Hill Process for preparing oligoribonucleoside and oligodeoxyribonucleoside boranophosphates
CA2029273A1 (en) 1989-12-04 1991-06-05 Christine L. Brakel Modified nucleotide compounds
US5486603A (en) 1990-01-08 1996-01-23 Gilead Sciences, Inc. Oligonucleotide having enhanced binding affinity
US5459255A (en) 1990-01-11 1995-10-17 Isis Pharmaceuticals, Inc. N-2 substituted purines
US6783931B1 (en) 1990-01-11 2004-08-31 Isis Pharmaceuticals, Inc. Amine-derivatized nucleosides and oligonucleosides
US7037646B1 (en) 1990-01-11 2006-05-02 Isis Pharmaceuticals, Inc. Amine-derivatized nucleosides and oligonucleosides
US5587361A (en) 1991-10-15 1996-12-24 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotides having phosphorothioate linkages of high chiral purity
US5587470A (en) 1990-01-11 1996-12-24 Isis Pharmaceuticals, Inc. 3-deazapurines
US5852188A (en) 1990-01-11 1998-12-22 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotides having chiral phosphorus linkages
US5681941A (en) 1990-01-11 1997-10-28 Isis Pharmaceuticals, Inc. Substituted purines and oligonucleotide cross-linking
US5578718A (en) 1990-01-11 1996-11-26 Isis Pharmaceuticals, Inc. Thiol-derivatized nucleosides
US5670633A (en) 1990-01-11 1997-09-23 Isis Pharmaceuticals, Inc. Sugar modified oligonucleotides that detect and modulate gene expression
US5646265A (en) 1990-01-11 1997-07-08 Isis Pharmceuticals, Inc. Process for the preparation of 2'-O-alkyl purine phosphoramidites
WO1991013080A1 (en) 1990-02-20 1991-09-05 Gilead Sciences, Inc. Pseudonucleosides and pseudonucleotides and their polymers
US5214136A (en) 1990-02-20 1993-05-25 Gilead Sciences, Inc. Anthraquinone-derivatives oligonucleotides
US5321131A (en) 1990-03-08 1994-06-14 Hybridon, Inc. Site-specific functionalization of oligodeoxynucleotides for non-radioactive labelling
US5470967A (en) 1990-04-10 1995-11-28 The Dupont Merck Pharmaceutical Company Oligonucleotide analogs with sulfamate linkages
US5264618A (en) 1990-04-19 1993-11-23 Vical, Inc. Cationic lipids for intracellular delivery of biologically active molecules
GB9009980D0 (en) 1990-05-03 1990-06-27 Amersham Int Plc Phosphoramidite derivatives,their preparation and the use thereof in the incorporation of reporter groups on synthetic oligonucleotides
DK0455905T3 (da) 1990-05-11 1998-12-07 Microprobe Corp Dipsticks til nukleinsyrehybridiseringsassays og fremgangsmåde til kovalent immobilisering af oligonukleotider
US5602240A (en) 1990-07-27 1997-02-11 Ciba Geigy Ag. Backbone modified oligonucleotide analogs
US5541307A (en) 1990-07-27 1996-07-30 Isis Pharmaceuticals, Inc. Backbone modified oligonucleotide analogs and solid phase synthesis thereof
US5138045A (en) 1990-07-27 1992-08-11 Isis Pharmaceuticals Polyamine conjugated oligonucleotides
US5618704A (en) 1990-07-27 1997-04-08 Isis Pharmacueticals, Inc. Backbone-modified oligonucleotide analogs and preparation thereof through radical coupling
US5623070A (en) 1990-07-27 1997-04-22 Isis Pharmaceuticals, Inc. Heteroatomic oligonucleoside linkages
JPH0874B2 (ja) 1990-07-27 1996-01-10 アイシス・ファーマシューティカルス・インコーポレーテッド 遺伝子発現を検出および変調するヌクレアーゼ耐性、ピリミジン修飾オリゴヌクレオチド
US5688941A (en) 1990-07-27 1997-11-18 Isis Pharmaceuticals, Inc. Methods of making conjugated 4' desmethyl nucleoside analog compounds
US5218105A (en) 1990-07-27 1993-06-08 Isis Pharmaceuticals Polyamine conjugated oligonucleotides
US5489677A (en) 1990-07-27 1996-02-06 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleoside linkages containing adjacent oxygen and nitrogen atoms
US5677437A (en) 1990-07-27 1997-10-14 Isis Pharmaceuticals, Inc. Heteroatomic oligonucleoside linkages
US5608046A (en) 1990-07-27 1997-03-04 Isis Pharmaceuticals, Inc. Conjugated 4'-desmethyl nucleoside analog compounds
US5610289A (en) 1990-07-27 1997-03-11 Isis Pharmaceuticals, Inc. Backbone modified oligonucleotide analogues
US5245022A (en) 1990-08-03 1993-09-14 Sterling Drug, Inc. Exonuclease resistant terminally substituted oligonucleotides
WO1992002534A2 (en) 1990-08-03 1992-02-20 Sterling Drug, Inc. Compounds and methods for inhibiting gene expression
US5512667A (en) 1990-08-28 1996-04-30 Reed; Michael W. Trifunctional intermediates for preparing 3'-tailed oligonucleotides
US5214134A (en) 1990-09-12 1993-05-25 Sterling Winthrop Inc. Process of linking nucleosides with a siloxane bridge
US5561225A (en) 1990-09-19 1996-10-01 Southern Research Institute Polynucleotide analogs containing sulfonate and sulfonamide internucleoside linkages
WO1992005186A1 (en) 1990-09-20 1992-04-02 Gilead Sciences Modified internucleoside linkages
US5432272A (en) 1990-10-09 1995-07-11 Benner; Steven A. Method for incorporating into a DNA or RNA oligonucleotide using nucleotides bearing heterocyclic bases
ATE198598T1 (de) 1990-11-08 2001-01-15 Hybridon Inc Verbindung von mehrfachreportergruppen auf synthetischen oligonukleotiden
GB9100304D0 (en) 1991-01-08 1991-02-20 Ici Plc Compound
US7015315B1 (en) 1991-12-24 2006-03-21 Isis Pharmaceuticals, Inc. Gapped oligonucleotides
US5539082A (en) 1993-04-26 1996-07-23 Nielsen; Peter E. Peptide nucleic acids
US5719262A (en) 1993-11-22 1998-02-17 Buchardt, Deceased; Ole Peptide nucleic acids having amino acid side chains
US5714331A (en) 1991-05-24 1998-02-03 Buchardt, Deceased; Ole Peptide nucleic acids having enhanced binding affinity, sequence specificity and solubility
US5371241A (en) 1991-07-19 1994-12-06 Pharmacia P-L Biochemicals Inc. Fluorescein labelled phosphoramidites
US5571799A (en) 1991-08-12 1996-11-05 Basco, Ltd. (2'-5') oligoadenylate analogues useful as inhibitors of host-v5.-graft response
US5283185A (en) 1991-08-28 1994-02-01 University Of Tennessee Research Corporation Method for delivering nucleic acids into cells
EP0538194B1 (de) 1991-10-17 1997-06-04 Novartis AG Bicyclische Nukleoside, Oligonukleotide, Verfahren zu deren Herstellung und Zwischenprodukte
US5594121A (en) 1991-11-07 1997-01-14 Gilead Sciences, Inc. Enhanced triple-helix and double-helix formation with oligomers containing modified purines
EP1588761A3 (en) 1991-11-22 2005-11-23 Affymetrix, Inc. Method of forming arrays of polymers
US6235887B1 (en) 1991-11-26 2001-05-22 Isis Pharmaceuticals, Inc. Enhanced triple-helix and double-helix formation directed by oligonucleotides containing modified pyrimidines
US5484908A (en) 1991-11-26 1996-01-16 Gilead Sciences, Inc. Oligonucleotides containing 5-propynyl pyrimidines
US5359044A (en) 1991-12-13 1994-10-25 Isis Pharmaceuticals Cyclobutyl oligonucleotide surrogates
EP0618925B2 (en) 1991-12-24 2012-04-18 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense oligonucleotides
US6277603B1 (en) 1991-12-24 2001-08-21 Isis Pharmaceuticals, Inc. PNA-DNA-PNA chimeric macromolecules
US5595726A (en) 1992-01-21 1997-01-21 Pharmacyclics, Inc. Chromophore probe for detection of nucleic acid
US5565552A (en) 1992-01-21 1996-10-15 Pharmacyclics, Inc. Method of expanded porphyrin-oligonucleotide conjugate synthesis
FR2687679B1 (fr) 1992-02-05 1994-10-28 Centre Nat Rech Scient Oligothionucleotides.
DE4203923A1 (de) 1992-02-11 1993-08-12 Henkel Kgaa Verfahren zur herstellung von polycarboxylaten auf polysaccharid-basis
US5633360A (en) 1992-04-14 1997-05-27 Gilead Sciences, Inc. Oligonucleotide analogs capable of passive cell membrane permeation
US5434257A (en) 1992-06-01 1995-07-18 Gilead Sciences, Inc. Binding compentent oligomers containing unsaturated 3',5' and 2',5' linkages
IL105914A0 (en) 1992-06-04 1993-10-20 Univ California Methods and compositions for in vivo gene therapy
WO1994000569A1 (en) 1992-06-18 1994-01-06 Genpharm International, Inc. Methods for producing transgenic non-human animals harboring a yeast artificial chromosome
EP0577558A2 (de) 1992-07-01 1994-01-05 Ciba-Geigy Ag Carbocyclische Nukleoside mit bicyclischen Ringen, Oligonukleotide daraus, Verfahren zu deren Herstellung, deren Verwendung und Zwischenproduckte
US5272250A (en) 1992-07-10 1993-12-21 Spielvogel Bernard F Boronated phosphoramidate compounds
WO1994002595A1 (en) 1992-07-17 1994-02-03 Ribozyme Pharmaceuticals, Inc. Method and reagent for treatment of animal diseases
US6346614B1 (en) 1992-07-23 2002-02-12 Hybridon, Inc. Hybrid oligonucleotide phosphorothioates
US5574142A (en) 1992-12-15 1996-11-12 Microprobe Corporation Peptide linkers for improved oligonucleotide delivery
US5476925A (en) 1993-02-01 1995-12-19 Northwestern University Oligodeoxyribonucleotides including 3'-aminonucleoside-phosphoramidate linkages and terminal 3'-amino groups
GB9304618D0 (en) 1993-03-06 1993-04-21 Ciba Geigy Ag Chemical compounds
DK0691968T3 (da) 1993-03-30 1998-02-23 Sanofi Sa Acykliske nukleosid-analoge og oligonukleotidsekvenser indeholdende disse
EP0691977B1 (en) 1993-03-31 1997-11-26 Sanofi Oligonucleotides with amide linkages replacing phosphodiester linkages
DE4311944A1 (de) 1993-04-10 1994-10-13 Degussa Umhüllte Natriumpercarbonatpartikel, Verfahren zu deren Herstellung und sie enthaltende Wasch-, Reinigungs- und Bleichmittelzusammensetzungen
US6191105B1 (en) 1993-05-10 2001-02-20 Protein Delivery, Inc. Hydrophilic and lipophilic balanced microemulsion formulations of free-form and/or conjugation-stabilized therapeutic agents such as insulin
US5955591A (en) 1993-05-12 1999-09-21 Imbach; Jean-Louis Phosphotriester oligonucleotides, amidites and method of preparation
US6015886A (en) 1993-05-24 2000-01-18 Chemgenes Corporation Oligonucleotide phosphate esters
US6294664B1 (en) 1993-07-29 2001-09-25 Isis Pharmaceuticals, Inc. Synthesis of oligonucleotides
US5502177A (en) 1993-09-17 1996-03-26 Gilead Sciences, Inc. Pyrimidine derivatives for labeled binding partners
JPH09507836A (ja) 1993-11-16 1997-08-12 ジンタ・インコーポレイテッド 非ホスホネート・ヌクレオシジル間結合と混合したキラリティー的に純粋なホスホネート・ヌクレオシジル間結合を有する合成オリゴマー
US5457187A (en) 1993-12-08 1995-10-10 Board Of Regents University Of Nebraska Oligonucleotides containing 5-fluorouracil
US5446137B1 (en) 1993-12-09 1998-10-06 Behringwerke Ag Oligonucleotides containing 4'-substituted nucleotides
US5519134A (en) 1994-01-11 1996-05-21 Isis Pharmaceuticals, Inc. Pyrrolidine-containing monomers and oligomers
US5596091A (en) 1994-03-18 1997-01-21 The Regents Of The University Of California Antisense oligonucleotides comprising 5-aminoalkyl pyrimidine nucleotides
US5599922A (en) 1994-03-18 1997-02-04 Lynx Therapeutics, Inc. Oligonucleotide N3'-P5' phosphoramidates: hybridization and nuclease resistance properties
US5627053A (en) 1994-03-29 1997-05-06 Ribozyme Pharmaceuticals, Inc. 2'deoxy-2'-alkylnucleotide containing nucleic acid
US5625050A (en) 1994-03-31 1997-04-29 Amgen Inc. Modified oligonucleotides and intermediates useful in nucleic acid therapeutics
US6054299A (en) 1994-04-29 2000-04-25 Conrad; Charles A. Stem-loop cloning vector and method
US5525711A (en) 1994-05-18 1996-06-11 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Pteridine nucleotide analogs as fluorescent DNA probes
US5543152A (en) 1994-06-20 1996-08-06 Inex Pharmaceuticals Corporation Sphingosomes for enhanced drug delivery
US5597696A (en) 1994-07-18 1997-01-28 Becton Dickinson And Company Covalent cyanine dye oligonucleotide conjugates
US5580731A (en) 1994-08-25 1996-12-03 Chiron Corporation N-4 modified pyrimidine deoxynucleotides and oligonucleotide probes synthesized therewith
US5597909A (en) 1994-08-25 1997-01-28 Chiron Corporation Polynucleotide reagents containing modified deoxyribose moieties, and associated methods of synthesis and use
US5556752A (en) 1994-10-24 1996-09-17 Affymetrix, Inc. Surface-bound, unimolecular, double-stranded DNA
US6608035B1 (en) 1994-10-25 2003-08-19 Hybridon, Inc. Method of down-regulating gene expression
US6166197A (en) 1995-03-06 2000-12-26 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligomeric compounds having pyrimidine nucleotide (S) with 2'and 5 substitutions
EP0813539B1 (en) 1995-03-06 2006-05-24 Isis Pharmaceuticals, Inc. Improved process for the synthesis of 2'-o-substituted pyrimidines and oligomeric compounds therefrom
WO1996037194A1 (en) 1995-05-26 1996-11-28 Somatix Therapy Corporation Delivery vehicles comprising stable lipid/nucleic acid complexes
EP0832271B8 (en) 1995-06-07 2005-03-02 INEX Pharmaceuticals Corp. Lipid-nucleic acid particles prepared via a hydrophobic lipid-nucleic acid complex intermediate and use for gene transfer
US7422902B1 (en) 1995-06-07 2008-09-09 The University Of British Columbia Lipid-nucleic acid particles prepared via a hydrophobic lipid-nucleic acid complex intermediate and use for gene transfer
US5981501A (en) 1995-06-07 1999-11-09 Inex Pharmaceuticals Corp. Methods for encapsulating plasmids in lipid bilayers
US5545531A (en) 1995-06-07 1996-08-13 Affymax Technologies N.V. Methods for making a device for concurrently processing multiple biological chip assays
US5858397A (en) 1995-10-11 1999-01-12 University Of British Columbia Liposomal formulations of mitoxantrone
US6160109A (en) 1995-10-20 2000-12-12 Isis Pharmaceuticals, Inc. Preparation of phosphorothioate and boranophosphate oligomers
US5854033A (en) 1995-11-21 1998-12-29 Yale University Rolling circle replication reporter systems
US5858401A (en) 1996-01-22 1999-01-12 Sidmak Laboratories, Inc. Pharmaceutical composition for cyclosporines
US6444423B1 (en) 1996-06-07 2002-09-03 Molecular Dynamics, Inc. Nucleosides comprising polydentate ligands
US6172209B1 (en) 1997-02-14 2001-01-09 Isis Pharmaceuticals Inc. Aminooxy-modified oligonucleotides and methods for making same
US6639062B2 (en) 1997-02-14 2003-10-28 Isis Pharmaceuticals, Inc. Aminooxy-modified nucleosidic compounds and oligomeric compounds prepared therefrom
US6576752B1 (en) 1997-02-14 2003-06-10 Isis Pharmaceuticals, Inc. Aminooxy functionalized oligomers
US6034135A (en) 1997-03-06 2000-03-07 Promega Biosciences, Inc. Dimeric cationic lipids
US6770748B2 (en) 1997-03-07 2004-08-03 Takeshi Imanishi Bicyclonucleoside and oligonucleotide analogue
JP3756313B2 (ja) 1997-03-07 2006-03-15 武 今西 新規ビシクロヌクレオシド及びオリゴヌクレオチド類縁体
JP4656675B2 (ja) 1997-05-14 2011-03-23 ユニバーシティー オブ ブリティッシュ コロンビア 脂質小胞への荷電した治療剤の高率封入
US6887906B1 (en) 1997-07-01 2005-05-03 Isispharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for the delivery of oligonucleotides via the alimentary canal
US6794499B2 (en) 1997-09-12 2004-09-21 Exiqon A/S Oligonucleotide analogues
EP1557424A1 (en) 1997-09-12 2005-07-27 Exiqon A/S Bi-cyclic nucleoside, nucleotide and oligonucleoide analogues
US6528640B1 (en) 1997-11-05 2003-03-04 Ribozyme Pharmaceuticals, Incorporated Synthetic ribonucleic acids with RNAse activity
US6617438B1 (en) 1997-11-05 2003-09-09 Sirna Therapeutics, Inc. Oligoribonucleotides with enzymatic activity
US6320017B1 (en) 1997-12-23 2001-11-20 Inex Pharmaceuticals Corp. Polyamide oligomers
US6506559B1 (en) 1997-12-23 2003-01-14 Carnegie Institute Of Washington Genetic inhibition by double-stranded RNA
US7273933B1 (en) 1998-02-26 2007-09-25 Isis Pharmaceuticals, Inc. Methods for synthesis of oligonucleotides
US7045610B2 (en) 1998-04-03 2006-05-16 Epoch Biosciences, Inc. Modified oligonucleotides for mismatch discrimination
CA2325344C (en) 1998-04-08 2017-12-05 Commonwealth Scientific And Industrial Research Organisation Methods and means for obtaining modified phenotypes
US6531590B1 (en) 1998-04-24 2003-03-11 Isis Pharmaceuticals, Inc. Processes for the synthesis of oligonucleotide compounds
AR020078A1 (es) 1998-05-26 2002-04-10 Syngenta Participations Ag Metodo para alterar la expresion de un gen objetivo en una celula de planta
US6867294B1 (en) 1998-07-14 2005-03-15 Isis Pharmaceuticals, Inc. Gapped oligomers having site specific chiral phosphorothioate internucleoside linkages
JP2002520038A (ja) 1998-07-20 2002-07-09 アイネックス ファーマシューティカルズ コーポレイション リポソームカプセル化核酸複合体
CA2345936A1 (en) 1998-10-09 2000-04-20 Ingene, Inc. Production of ssdna in a cell
WO2000022113A1 (en) 1998-10-09 2000-04-20 Ingene, Inc. ENZYMATIC SYNTHESIS OF ssDNA
DE19956568A1 (de) 1999-01-30 2000-08-17 Roland Kreutzer Verfahren und Medikament zur Hemmung der Expression eines vorgegebenen Gens
US6465628B1 (en) 1999-02-04 2002-10-15 Isis Pharmaceuticals, Inc. Process for the synthesis of oligomeric compounds
WO2000050050A1 (en) 1999-02-23 2000-08-31 Isis Pharmaceuticals, Inc. Multiparticulate formulation
US7084125B2 (en) 1999-03-18 2006-08-01 Exiqon A/S Xylo-LNA analogues
NZ514348A (en) 1999-05-04 2004-05-28 Exiqon As L-ribo-LNA analogues
US6525191B1 (en) 1999-05-11 2003-02-25 Kanda S. Ramasamy Conformationally constrained L-nucleosides
US6593466B1 (en) 1999-07-07 2003-07-15 Isis Pharmaceuticals, Inc. Guanidinium functionalized nucleotides and precursors thereof
US6147200A (en) 1999-08-19 2000-11-14 Isis Pharmaceuticals, Inc. 2'-O-acetamido modified monomers and oligomers
AU2001227965A1 (en) 2000-01-21 2001-07-31 Geron Corporation 2'-arabino-fluorooligonucleotide n3'-p5'phosphoramidates: their synthesis and use
IT1318539B1 (it) 2000-05-26 2003-08-27 Italfarmaco Spa Composizioni farmaceutiche a rilascio prolungato per lasomministrazione parenterale di sostanze idrofile biologicamente
DE60119562T2 (de) 2000-10-04 2007-05-10 Santaris Pharma A/S Verbesserte synthese von purin-blockierten nukleinsäure-analoga
WO2005007855A2 (en) 2003-07-14 2005-01-27 Sirna Therapeutics, Inc. RNA INTERFERENCE MEDIATED INHIBITION OF B7-H1 GENE EXPRESSION USING SHORT INTERFERING NUCLEIC ACID (siNA)
US20060276422A1 (en) 2001-05-18 2006-12-07 Nassim Usman RNA interference mediated inhibition of B7-H1 gene expression using short interfering nucleic acid (siNA)
US7063860B2 (en) 2001-08-13 2006-06-20 University Of Pittsburgh Application of lipid vehicles and use for drug delivery
US9181551B2 (en) 2002-02-20 2015-11-10 Sirna Therapeutics, Inc. RNA interference mediated inhibition of gene expression using chemically modified short interfering nucleic acid (siNA)
WO2004007718A2 (en) 2002-07-10 2004-01-22 MAX-PLANCK-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. Rna-interference by single-stranded rna molecules
US6878805B2 (en) 2002-08-16 2005-04-12 Isis Pharmaceuticals, Inc. Peptide-conjugated oligomeric compounds
CA2504694C (en) 2002-11-05 2013-10-01 Isis Pharmaceuticals, Inc. Polycyclic sugar surrogate-containing oligomeric compounds and compositions for use in gene modulation
AU2003290596B2 (en) 2002-11-05 2011-05-12 Isis Pharmaceuticals, Inc. Sugar surrogate-containing oligomeric compounds and compositions for use in gene modulation
JP2006507841A (ja) 2002-11-14 2006-03-09 ダーマコン， インコーポレイテッド 機能的ｓｉＲＮＡおよび超機能的ｓｉＲＮＡ
US7250496B2 (en) 2002-11-14 2007-07-31 Rosetta Genomics Ltd. Bioinformatically detectable group of novel regulatory genes and uses thereof
US7897582B2 (en) 2003-05-23 2011-03-01 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotide compositions and methods for the modulation of the expression of B7 protein
EP1661905B9 (en) 2003-08-28 2012-12-19 IMANISHI, Takeshi Novel artificial nucleic acids of n-o bond crosslinkage type
EP1713915B1 (en) 2004-02-10 2009-12-16 Sirna Therapeutics, Inc. RNA INTERFERENCE MEDIATED INHIBITION OF GENE EXPRESSION USING MULTIFUNCTIONAL SHORT INTERFERING NUCLEIC ACID (MULTIFUNCTIONAL siNA)
CN101052717A (zh) 2004-05-11 2007-10-10 α基因株式会社 诱发rna干扰的多核苷酸以及使用该多核苷酸的基因表达抑制方法
US7740861B2 (en) 2004-06-16 2010-06-22 University Of Massachusetts Drug delivery product and methods
HUE039237T2 (hu) 2004-10-06 2018-12-28 Mayo Found Medical Education & Res B7-H1 és PD-1 vesesejt karcinoma kezelésében
DK1866414T3 (da) 2005-03-31 2012-04-23 Calando Pharmaceuticals Inc Inhibitorer af ribonukleotidreduktase-underenhed 2 og anvendelser deraf.
AU2012204032B2 (en) * 2005-06-08 2014-01-16 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Methods and compositions for the treatment of persistent infections and cancer by inhibiting the programmed cell death 1 (PD-1) pathway
DK1984381T3 (da) 2006-01-27 2010-11-01 Isis Pharmaceuticals Inc 6-modificerede bicycliske nukleinsyreanaloger
US7569686B1 (en) 2006-01-27 2009-08-04 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compounds and methods for synthesis of bicyclic nucleic acid analogs
EP1989307B1 (en) 2006-02-08 2012-08-08 Quark Pharmaceuticals, Inc. NOVEL TANDEM siRNAS
EP2021008B1 (en) 2006-04-07 2015-12-02 Idera Pharmaceuticals, Inc. Stabilized immune modulatory rna (simra) compounds for tlr7 and tlr8
CA2651453C (en) 2006-05-11 2014-10-14 Isis Pharmaceuticals, Inc. 5'-modified bicyclic nucleic acid analogs
WO2008011344A2 (en) 2006-07-17 2008-01-24 Nationwide Children's Hospital Inc. Disruption of programmed death-1 (pd-1) ligands to adjuvant adeno-associated virus vector vaccines
CA2927045A1 (en) 2006-10-03 2008-04-10 Muthiah Manoharan Lipid containing formulations
MX351975B (es) 2006-12-27 2017-11-06 Emory Univ Star Composiciones y metodos para el tratamiento de infecciones y tumores.
US20100105134A1 (en) 2007-03-02 2010-04-29 Mdrna, Inc. Nucleic acid compounds for inhibiting gene expression and uses thereof
MX2009012568A (es) 2007-05-22 2009-12-08 Mdrna Inc Oligonucleotidos de acido ribonucleico sustituidos con hidroximetilo y complejos de acido ribonucleico.
US8278425B2 (en) 2007-05-30 2012-10-02 Isis Pharmaceuticals, Inc. N-substituted-aminomethylene bridged bicyclic nucleic acid analogs
DK2173760T4 (en) 2007-06-08 2016-02-08 Isis Pharmaceuticals Inc Carbocyclic bicyclic nukleinsyreanaloge
US8278283B2 (en) 2007-07-05 2012-10-02 Isis Pharmaceuticals, Inc. 6-disubstituted or unsaturated bicyclic nucleic acid analogs
CN102921003B (zh) 2007-07-09 2014-11-26 艾德拉药物股份有限公司 稳定化免疫调控性rna(simra)化合物
AU2008340355B2 (en) 2007-12-04 2015-01-22 Tekmira Pharmaceuticals Corporation Targeting lipids
US20110020325A1 (en) 2008-02-29 2011-01-27 Kwon Eugene D Methods for reducing granulomatous inflammation
DK2279254T3 (en) 2008-04-15 2017-09-18 Protiva Biotherapeutics Inc PRESENT UNKNOWN LIPID FORMS FOR NUCLEIC ACID ADMINISTRATION
EP2355851B1 (en) 2008-11-10 2018-04-04 Arbutus Biopharma Corporation Novel lipids and compositions for the delivery of therapeutics
SG171879A1 (en) 2008-12-03 2011-07-28 Marina Biotech Inc Usirna complexes
EP2391343B1 (en) 2009-01-29 2017-03-01 Arbutus Biopharma Corporation Improved lipid formulation for the delivery of nucleic acids
JPWO2010101249A1 (ja) 2009-03-06 2012-09-10 国立大学法人三重大学 Ｔ細胞の機能増強方法
US8883202B2 (en) 2009-05-05 2014-11-11 Tekmira Pharmaceuticals Corporation Lipid compositions
JP5875976B2 (ja) 2009-06-01 2016-03-02 ヘイロー−バイオ アールエヌエーアイ セラピューティクス， インコーポレイテッド 多価ｒｎａ干渉のためのポリヌクレオチド、組成物およびそれらの使用方法
TR201811076T4 (tr) 2009-06-10 2018-08-27 Arbutus Biopharma Corp Geliştirilmiş lipit formulasyonu.
US8927513B2 (en) 2009-07-07 2015-01-06 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. 5′ phosphate mimics
US9512164B2 (en) 2009-07-07 2016-12-06 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotide end caps
EP2960333B1 (en) 2009-08-27 2017-10-04 Idera Pharmaceuticals, Inc. Composition for inhibiting gene expression and uses thereof
US8507663B2 (en) * 2010-04-06 2013-08-13 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibiting expression of CD274/PD-L1 gene
US20130190383A1 (en) 2010-04-26 2013-07-25 Marina Biotech, Inc. Nucleic acid compounds with conformationally restricted monomers and uses thereof
AU2012272908A1 (en) 2011-06-21 2013-12-19 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Assays and methods for determining activity of a therapeutic agent in a subject
SG11201401314PA (en) 2011-09-07 2014-09-26 Marina Biotech Inc Synthesis and uses of nucleic acid compounds with conformationally restricted monomers
SI2768524T1 (sl) * 2011-10-17 2022-09-30 Io Biotech Aps Imunoterapija na osnovi PD-L1
IL293434B2 (en) 2011-11-18 2024-05-01 Alnylam Pharmaceuticals Inc RNAI factors, preparations and methods of using them for the treatment of transthyretin-related diseases
JP6995478B2 (ja) 2013-05-01 2022-01-14 アイオーニス ファーマシューティカルズ， インコーポレーテッド Ｈｂｖおよびｔｔｒ発現を調節するための組成物および方法
WO2015036394A1 (en) * 2013-09-10 2015-03-19 Medimmune Limited Antibodies against pd-1 and uses thereof
AR097738A1 (es) * 2013-09-23 2016-04-13 Alnylam Pharmaceuticals Inc Métodos para tratar o prevenir enfermedades asociadas con la transtiretina (ttr)
WO2015048312A1 (en) * 2013-09-26 2015-04-02 Costim Pharmaceuticals Inc. Methods for treating hematologic cancers
US10934550B2 (en) * 2013-12-02 2021-03-02 Phio Pharmaceuticals Corp. Immunotherapy of cancer
WO2015106128A2 (en) 2014-01-09 2015-07-16 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. MODIFIED RNAi AGENTS
EA201691587A1 (ru) * 2014-02-11 2017-01-30 Элнилэм Фармасьютикалз, Инк. КОМПОЗИЦИИ НА ОСНОВЕ iRNA ДЛЯ КЕТОГЕКСОКИНАЗЫ (KHK) И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ
CN108368507B (zh) 2015-09-02 2022-03-22 阿尔尼拉姆医药品有限公司 程序性细胞死亡1配体1(PD-L1)的iRNA组合物及其使用方法
US10982215B2 (en) 2015-12-09 2021-04-20 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Polynucleotide agents targeting programmed cell death 1 ligand 1 (PD-L1) and methods of use thereof

Also Published As

Publication number Publication date
JP2022033857A (ja) 2022-03-02
US10889813B2 (en) 2021-01-12
US20210189391A1 (en) 2021-06-24
KR20180051550A (ko) 2018-05-16
US20180273947A1 (en) 2018-09-27
JP2023166601A (ja) 2023-11-21
EP3344769A1 (en) 2018-07-11
CA2996873A1 (en) 2017-03-09
US11685918B2 (en) 2023-06-27
JP7028764B2 (ja) 2022-03-02
SG10202007937SA (en) 2020-09-29
JP2018530529A (ja) 2018-10-18
EP4393495A2 (en) 2024-07-03
EP3344769B1 (en) 2024-04-17
WO2017040078A1 (en) 2017-03-09
PE20181131A1 (es) 2018-07-17
HK1255138A1 (zh) 2019-08-09
EA201890619A1 (ru) 2018-09-28
AU2016315584A1 (en) 2018-04-12
AU2016315584B2 (en) 2022-07-14
CN108368507A (zh) 2018-08-03
HK1256303A1 (zh) 2019-09-20
CN108368507B (zh) 2022-03-22
CN114525280A (zh) 2022-05-24

Similar Documents

Publication Publication Date Title
SA518391045B1 (ar) تركيبات حمض ريبونيكلويك ثنائي الجديلة لمركب ترابطي 1 لموت الخلية المبرمج1 (PD-L1) iRNA وطرق استخدامها
JP6947880B2 (ja) Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）ｉＲＮＡ組成物及びその使用方法
TWI727948B (zh) 第十二因子（哈格曼因子）（Ｆ１２）、激肽釋放素Ｂ、血漿（夫列契因子）１（ＫＬＫＢ１）及激肽原１（ＫＮＧ１）ｉＲＮＡ組成物及其使用方法
TWI727963B (zh) 甲狀腺素運載蛋白（ＴＴＲ）ｉＲＮＡ組成物及其治療或預防ＴＴＲ相關疾病之使用方法
JP2021073290A (ja) パタチン様ホスホリパーゼドメイン含有３（ＰＮＰＬＡ３）ｉＲＮＡ組成物およびその使用方法
KR102232287B1 (ko) 안지오포이에틴-유사 3(ANGPTL3) iRNA 조성물 및 그 사용 방법
JP2022050419A (ja) ステロール調節エレメント結合タンパク質（ＳＲＥＢＰ）シャペロン（ＳＣＡＰ）ｉＲＮＡ組成物およびその使用方法
US11208660B1 (en) Coronavirus iRNA compositions and methods of use thereof
CN105408481A (zh) SERPINA1 iRNA组合物及其使用方法
JP2023506181A (ja) ヒト第９染色体オープンリーディングフレーム７２（Ｃ９ＯＲＦ７２）ｉＲＮＡ剤組成物およびその使用方法
US20230133147A1 (en) ANGIOTENSIN-CONVERTING ENZYME 2 (ACE2) iRNA COMPOSITIONS AND METHODS OF USE THEREOF
JP2021508491A (ja) 高移動度グループボックス−１（ＨＭＧＢ１）ｉＲＮＡ組成物及びその使用方法