RU98100430A

RU98100430A - Культивирование lawsonia intracellularis, вакцины против lawsonia intracellularis и диагностические агенты

Info

Publication number: RU98100430A
Application number: RU98100430/13A
Authority: RU
Inventors: П.Книттел Джеффри; Б.Руф Майкл
Original assignee: Берингер Ингельхайм/Нобл Лаборейториз, Инк.
Priority date: 1995-06-05
Filing date: 1996-06-05
Publication date: 1999-10-27

Claims

1. Способ культивирования бактерий L.intracellularis, отличающийся тем, что включает этапы инкубации упомянутых бактерий при концентрации кислорода менее примерно 18 процентов и поддержания упомянутых бактерий в суспензии с целью культивирования упомянутых бактерий.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что упомянутые бактерии находятся в культуральных клетках, которые поддерживаются в суспензии.

3. Способ по п. 2, отличающийся тем, что включает дальнейший этап пассирования части упомянутых клеток в свежие клетки с целью увеличения выработки бактерий L.intracellularis.

4. Способ по п. 3, отличающийся тем, что включает дальнейший этап сбора, по меньшей мере, части упомянутых клеток.

5. Способ по п. 1, отличающийся тем, что упомянутые бактерии L.intracellularis получают от животных, инфицированных этими бактериями.

6. Способ по п. 5, отличающийся тем, что упомянутым животным является свинья.

7. Способ по п. 1, отличающийся тем, что упомянутая инкубация проходит при концентрации кислорода в интервале от примерно 0% до примерно 8%.

8. Способ по п. 7, отличающийся тем, что упомянутая инкубация проходит при концентрации кислорода в интервале от примерно 0% до примерно 3%.

9. Способ по п. 2, отличающийся тем, что упомянутые культуральные клетки выбираются из группы, состоящей из клеток Нер-2, McCoys и IЕС-18.

10. Способ по п. 9, отличающийся тем, что упомянутые клетки McCoys и IЕС-18 инкубируют на микроносителях.

11. Бактерии L.intracellularis, выращенные в соответствии со способом по п. 1.

12. Способ культивирования бактерий L.intracellularis, отличающийся тем, что включает этапы: (1) заражения культуральных клеток инокулятом, включающим бактерии L.intracellularis, с целью инфицирования упомянутых клеток упомянутыми бактериями; и 2) инкубации упомянутых инфицированных клеток при температуре от примерно 36°С до примерно 38°С, концентрации кислорода от примерно 0% до примерно 8% и при перемешивании упомянутых инфицированных клеток таким образом, чтобы культивировать бактерии L.intracellularis при поддержании упомянутых инфицированных клеток в суспензии.

13. Способ продуцирования аттенуированного штамма L.intracellularis, отличающийся тем, что включает получение культуральных клеток, инфицированных бактериями L.intracellularis, инкубацию упомянутых инфицированных клеток при концентрации кислорода от примерно 0% до примерно 18%, перемешивание упомянутых инфицированных клеток таким образом, чтобы культивировать упомянутые бактерии при перемешивании упомянутых инфицированных клеток в суспензии, пассирование, по меньшей мере, части упомянутых культивированных бактерий, сбор, по меньшей мере, части упомянутых культивированных бактерий и селекцию аттенуированного штамма с целью получения аттенуированных бактерий L.intracellularis.

14. Диагностический тест для определения наличия антител, которые специфически реагируют с бактериями L.intracellularis в биологическом образце, с использованием бактерий L.intracellularis, полученных в соответствии со способом по п. 1, или компонента упомянутых бактерий.

15. Способ определения наличия антител, которые специфически реагируют с бактериями L.intracellularis в биологическом образце, отличающийся тем, что включает этапы получения культуральных клеток, инфицированных бактериями L. intracellularis, инкубации упомянутых инфицированных клеток при концентрации кислорода от примерно 0% до примерно 18%, перемешивания упомянутых инфицированных клеток таким образом, чтобы культивировать упомянутые бактерии L.intracellularis при поддержании упомянутых инфицированных клеток в суспензии, сбора, по меньшей мере, части упомянутых культивированных бактерий L.intracellularis, получения биологического образца от животного, контакта упомянутого образца с собранными бактериями L.intracellularis или компонентом, полученным из них, в условиях, при которых антитело, присутствующее в упомянутом биологическом образце, реагирует с упомянутыми бактериями L.intracellularis или с упомянутым компонентом, и установления факта взаимодействия антитела с антигеном, если оно произошло, и, таким образом, определения наличия в упомянутом образце антитела к бактериям L.intracellularis.

16. Вакцина для индукции у животного иммунного ответа к бактериям L.intracellularis, включающая аттенуированный штамм L.intracellularis в фармацевтически приемлемом носителе, где упомянутый аттенуированный штамм составляет количество бактерий, способное вызвать иммунный ответ.

17. Вакцина по п. 16, где упомянутый аттенуировнный штамм продуцируется в соответствии с п. 13.

18. Вакцина для индукции у животного иммунного ответа к бактериям L.intracellularis, включающая убитые бактерии L.intracellularis в фармацевтически приемлемом носителе, где упомянутые бактерии получены в соответствии со способом по п. 1 и составляют количество, способное вызвать иммунный ответ.

19. Вакцина по п. 16 или 18, где упомянутое инфицирование бактериями L. intracellularis упомянутых культуральных клеток производится с помощью кишечного гомогената животного, инфицированного L.intracellularis.

20. Вакцина по п. 16, где упомянутый аттенуированный штамм представляет собой штамм N343NP40wk.

21. Способ индукции иммунного ответа у животных на бактерии L.intracellularis, отличающийся тем, что включает введение упомянутому животному иммунологически эффективного количества вакцины по п. 16 или 18.

22. Аттенуированный штамм, полученный в соответствии со способом по п. 13.