RU2159808C2 - Штамм бактерий brucella abortus, используемый при получении моноспецифической сыворотки для идентификации бруцелл в r-форме - Google Patents
Штамм бактерий brucella abortus, используемый при получении моноспецифической сыворотки для идентификации бруцелл в r-форме Download PDFInfo
- Publication number
- RU2159808C2 RU2159808C2 RU99103256A RU99103256A RU2159808C2 RU 2159808 C2 RU2159808 C2 RU 2159808C2 RU 99103256 A RU99103256 A RU 99103256A RU 99103256 A RU99103256 A RU 99103256A RU 2159808 C2 RU2159808 C2 RU 2159808C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- strain
- serum
- preparation
- identification
- brucellae
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Изобретение предназначено для получения медицинских иммунобиологических препаратов для идентификации бруцелл в R-форме. Штамм бактерий Brucella abortus 3143 находится в стабильной R-форме. Он хорошо растет на любой питательной среде, применяемой для выращивания бруцелл. Штамм обладает достаточной иммуногенной активностью. Для получения сыворотки достаточна однократная иммунизация продуцентов (кроликов). Изобретение позволит упростить технологию получения бруцеллезной анти-R-сыворотки.
Description
Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано в получении медицинских иммунобиологических препаратов для идентификации бруцелл в R-форме.
Как показал анализ известных источников информации, для получения таких препаратов в основном используются штаммы B.ovis, находящиеся в R-форме.
Известны референтный штамм B.ovis 63/290 и штамм B/ovic H-61, используемые как антигены для конструирования R-эритроцитарных диагностикумов и противобруцеллезных сывороток в R-форме (Joint FAO/WHO Expert Committee on Brucellosis. Sixth Report. World Health Organisation. Technical Report Series, Geneva, 1986. - 133p; Методические рекомендации по приготовлению и применению овисного антигенного эритроцитарного диагностикума, Иркутск 1988; Методические рекомендации по получению высокоактивных гипериммунных противобруцеллезных сывороток, Иркутск, 1988).
Недостатком использования этих штаммов является высокое содержание в них клеток в S-форме, что снижает специфичность получаемых медико-биологических препаратов для идентификации R-форм бруцелл.
Известен штамм B.ovis 792 (НИИЭМ г. Москва) для получения R-бруцеллезных диагностикумов (патент РФ N 205, 1963, C 12 N1/20, A 61 K 39/10, 10.01.96, Бюл. N 1).
Штамм B. ovis 792 выделен из семенников барана, является инагглютинабельным и инагглютиногенным, заражение этим штаммом подопытных животных не вызывает у них образование антител к S-клеткам бруцелл. Вирулентность штамма низкая. Антигенные свойства характеризуются образованием специфических антител при иммунизации кроликов.
Недостатком использования штамма является сложность выращивания культуры, обусловленная физиолого-биохимическими признаками штамма. Штамм растет в присутствии повышенного содержания CO2.
Штамм вида B. abortus, в частности вакцинный штамм B.abortus 19, обладает высокими агглютиногенными свойствами, вызывает у привитых животных серопозитивные реакции, которые трудно отличить от серопозитивности у зараженных животных.
Известен вакцинный штамм бактерий B.abortus ВГНКИ N 20-1-ДЕП в R-форме (А. с. СССР N 176 1796, C 21 N 1/20, 15.09.92, Бюл. N 34). Этот штамм используется для приготовления вакцин против бруцеллеза. Недостатком использования штамма является сложность его селекции, которая включает пятикратный пассаж культуры через организм стельных коров.
Целью изобретения является изыскание штамма, находящегося в стабильной R-форме и обладающего достаточной иммуногенной активностью при получении моноспецифической сыворотки для идентификации R-форм бруцелл.
Поставленная цель достигается использованием штамма B.abortus 3143 при получении моноспецифической сыворотки для идентификации бруцелл в R-форме.
Штамм Brucella abortus выделен из абортированного плода коровы и характеризуется следующими признаками.
Культурально-морфологические признаки. Клетки B.abortus 3143 представляют собой кокко-бактерии размером 0,3-0,6 мкм, при окраске по Граму - отрицательны, при окраске по Козловскому сохраняют красный цвет, при краске по Романовскому - нежно-фиолетовый цвет. Бактерии штамма хорошо растут на глюкозо-глицериновом печеночном бульоне и агаре Д, а также на других питательных средах, применяемых для выращивания бруцелл, и имеющих нейтральную или слегка щелочную реакцию (pH 6,8-7,2) в аэробных условиях при температуре 37oC. Рост на бульоне хлопьевидный с осадком и просветлением. В мазках на двухсуточной агаровой культуры клетки имеют вид шаровидной, овоидной или палочковидной формы (биполярны), неподвижны, спор и капсул не образуют.
Биохимические признаки. Культура бактерий штамма B.abortus 3143 находится в стабильной R-форме при окраске по Уайт-Вилсону реакция с трипафлавином положительная, колонии красного или фиолетового цвета, сероводород не продуцирует, растет на среде с тионином (2 мкг/мл), на среде с фуксином (1 мкг/мл), не агглютинируется моноспецифическими сыворотками анти-абортус и анти-мелитензис, агглютинируется анти-R-сывороткой в диагностическом разведении, лизируется фагом T6 в RTD-4 .
Иммуногенные признаки. При иммунизации кроликов вызывает образование специфических R-антител, при однократной иммунизации.
Возможность практического использования заявляемого штамма B.abortus 3143 иллюстрируется примерами получения диагностической агглютинирующей моноспецифической анти-R-сыворотки и серологической идентификации R-формы бруцелл.
Пример 1. Двухсуточную агаровую культуру штамма B.abortus 3143 высевают на пластинку агара Альбими или мясо - пептонно-печеночного агара (МППА) pH 6,9-7,1. Через 48 часов инкубации при 37oC отбирают колонии и отсевают их на скошенный агар Альбими или МППА в пробирки. Через 48 часов инкубации выросшую культуру проверяют на чистоту в мазке, окрашенном по Граму. Затем готовят взвесь культуры на 0,85% растворе натрия хлорида. Полученную взвесь доводят до концентрации 20 млрд. м. к. в мл. тем же раствором. Микробную взвесь концентрацией 20 млрд. м. к. вводят кроликам весом 3-3,5 кг внутривенно в объеме 1,0 мл по методу Безредко дискретно по времени. Спустя 8-9 дней после инъекции кроликов тотализируют. Полученную сыворотку используют для постановки реакции агглютинации.
Пример 2. Сывороткой к R-формам бруцелл изучают штаммы бруцелл, типичные по морфологическим, культуральным и биохимическим свойствам, но находящиеся в R-форме. Агглютинацию ставят на стекле. Наносят каплю агглютинирующей анти-R-сыворотки на стекло, а затем микробиологической петлей вносят бакмассу исследуемой культуры бруцелл и суспендируют плавным помешиванием. При образовании агглютинирующих хлопьев исследуемую культуру бруцелл определяют как культуру бруцелл, находящуюся в R-форме.
Заявляемый штамм имеет преимущества перед известными аналогами по простоте культивирования, высокой стабильности R-формы, достаточной иммуногенной активности, обеспечивающей возможность однократной иммунизации кроликов для получения анти-R сыворотки.
Claims (1)
- Штамм бактерий Brucella abortus 3143, используемый при получении моноспецифической сыворотки для идентификации бруцелл в R-форме.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU99103256A RU2159808C2 (ru) | 1999-02-16 | 1999-02-16 | Штамм бактерий brucella abortus, используемый при получении моноспецифической сыворотки для идентификации бруцелл в r-форме |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU99103256A RU2159808C2 (ru) | 1999-02-16 | 1999-02-16 | Штамм бактерий brucella abortus, используемый при получении моноспецифической сыворотки для идентификации бруцелл в r-форме |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU99103256A RU99103256A (ru) | 2000-11-20 |
RU2159808C2 true RU2159808C2 (ru) | 2000-11-27 |
Family
ID=20216114
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU99103256A RU2159808C2 (ru) | 1999-02-16 | 1999-02-16 | Штамм бактерий brucella abortus, используемый при получении моноспецифической сыворотки для идентификации бруцелл в r-форме |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2159808C2 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2509306C2 (ru) * | 2012-01-17 | 2014-03-10 | Государственное научное учреждение Прикаспийский зональный научно-исследовательский ветеринарный институт Российской академии сельскохозяйственных наук | Способ получения эритроцитарного антительного овисного диагностикума для реакции непрямой гемагглютинации (рнга) с целью индикации овисного антигена в биоматериале |
-
1999
- 1999-02-16 RU RU99103256A patent/RU2159808C2/ru active
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Какоулин Т.Е., Маловастый К.С. Диагностика бруцеллеза крупного рогатого скота с помощью R-антигенов. В: "Пути ликвидации инфекц.инваз.болезней сельскохозяйственных животных", - Новосибирск, 1985, с.25-28. * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2509306C2 (ru) * | 2012-01-17 | 2014-03-10 | Государственное научное учреждение Прикаспийский зональный научно-исследовательский ветеринарный институт Российской академии сельскохозяйственных наук | Способ получения эритроцитарного антительного овисного диагностикума для реакции непрямой гемагглютинации (рнга) с целью индикации овисного антигена в биоматериале |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP3765834B2 (ja) | ローソニア・イントラセルラリスの培養、抗−ローソニア・イントラセルラリスワクチン及び診断薬 | |
RU98100430A (ru) | Культивирование lawsonia intracellularis, вакцины против lawsonia intracellularis и диагностические агенты | |
US5714375A (en) | Ileal symbiont intracellularis propagation in suspended host cells | |
RU2159808C2 (ru) | Штамм бактерий brucella abortus, используемый при получении моноспецифической сыворотки для идентификации бруцелл в r-форме | |
JPS58183627A (ja) | 免疫生物学的調製物 | |
CN1519311B (zh) | 胞内劳森氏菌培养、抗该菌的疫苗和诊断试剂 | |
RU2361610C1 (ru) | Способ получения бруцеллезного антигена из штамма brucella abortus 19 для изготовления единого бруцеллезного антигена для ра, рск и рдск, бруцеллезного антигена для роз-бенгал пробы (рбп) и бруцеллезного антигена для кольцевой реакции (кр) с молоком, способ изготовления бруцеллезной диагностической сыворотки и диагностические наборы | |
Mustafayeva | BRIEF HISTORICAL SUMMARY OF THE CAUSANT OF LISTERIOSIS AND ITS PROPERTIES | |
RU2316345C1 (ru) | Способ изготовления вакцины ассоциированной против колибактериоза, сальмонеллеза, стрептококкоза и энтерококковой инфекции нутрий | |
RU2288002C1 (ru) | Способ изготовления вакцины против энтерококковой инфекции нутрий | |
SU1701743A1 (ru) | Штамм бактерий BRUceLLa авоRтUS, используемый дл приготовлени вакцины против бруцеллеза крупного рогатого скота | |
Hudson et al. | Pasteurella pestis detection in fleas by fluorescent antibody staining | |
Jenkins | An agglutination test for the detection of Bordetella bronchiseptica infection in swine. | |
RU2301077C1 (ru) | Способ изготовления вакцины ассоциированной против колибактериоза, сальмонеллеза и стрептококкоза нутрий | |
RU2707289C1 (ru) | Способ изготовления вакцины, ассоциированной против эшерихиоза, стрептококкоза и псевдомоноза крупного рогатого скота | |
SU1177344A1 (ru) | ШТАММ ΙιΕΚΒΙΝΙΑ РЗЕЛГЮТЦВЕКСиЬ0313 "ШОЙБУЛАКСКИЙ 82", ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ДИАГНОСТИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ. | |
Stang et al. | Monoclonal antibody production in gas-permeable flexible flasks, using serum-free media | |
RU2263142C2 (ru) | Способ получения l-субкультур штамма brucella abortus и-206 | |
RU2081917C1 (ru) | Способ идентификации бруцелл | |
RU2668805C1 (ru) | Штамм Vibrio parahaemolyticus, используемый в качестве продуцента прямого термостабильного гемолизина (TDH) | |
RU2642316C1 (ru) | Способ изготовления вакцины против бруцеллеза мелкого рогатого скота | |
RU2292914C1 (ru) | Способ изготовления вакцины ассоциированной против сальмонеллеза и энтерококковой инфекции нутрий | |
RU2149183C1 (ru) | Штамм бактерий brucella abortus, используемый для изготовления диагностических и профилактических биопрепаратов против бруцеллеза животных | |
RU2292911C1 (ru) | Способ изготовления вакцины, ассоциированной против сальмонеллеза и стрептококкоза нутрий | |
RU2163141C1 (ru) | Способ изготовления бруцеллезного антигена для роз бенгал пробы (рбп) |