SU1701743A1 - Штамм бактерий BRUceLLa авоRтUS, используемый дл приготовлени вакцины против бруцеллеза крупного рогатого скота - Google Patents
Штамм бактерий BRUceLLa авоRтUS, используемый дл приготовлени вакцины против бруцеллеза крупного рогатого скота Download PDFInfo
- Publication number
- SU1701743A1 SU1701743A1 SU884603578A SU4603578A SU1701743A1 SU 1701743 A1 SU1701743 A1 SU 1701743A1 SU 884603578 A SU884603578 A SU 884603578A SU 4603578 A SU4603578 A SU 4603578A SU 1701743 A1 SU1701743 A1 SU 1701743A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- strain
- brucella abortus
- cattle
- brucellosis
- brucella
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Изобретение относитс к ветеринарной микробиологии, в частности к получению биологических препаратов, и может быть использовано дл приготовлени вакцины против бруцеллеза крупного рогатого скота. Целью изобретени вл етс штамм бру- целла абортус, обладающий стабильными свойствами, безвредностью и высокой им- муногенностью. Штамм бактерий Brucella abortus Ns 75/79A (35) депонирован в коллекции Всесоюзного государственного научно- исследовательского института ветеринарных препаратов. Использование штамма Brucella abortus 75/79A(35) в качестве противобру- целлезной вакцины позвол ет использовать ее в комплексе мер по профилактике бруцеллеза крупного рогатого скота любого возраста, без учета периода стельности. СП с
Description
Изобретение относитс к ветеринарной микробиологии, в частности к биологическим препаратам, и может быть использова- но дл приготовлени вакцины против бруцеллеза крупного рогатого скота.
Одним из средств дл успешной профилактики бруцеллезной инфекции вл етс применение в комплексе противобруцел- лезных мер средств специфической профилактики бруцеллеза.
В насто щее врем дл изготовлени противобруцеллезной вакцины примен ютс штаммы бруцелла абортус № 19 и шт. № 82.
Штамм № 19 по культурэльным признакам вл етс стойким вариантом Brucetla abortus, хорошо растет на обычных питательных средах, умеренно продуцирует сероводород , растет на средах с основным фуксином 1:50000 и 1:100000 и не растет на средах в тех же разведени х, но с добавлением тионина, про вл ет высокую чувствительность к пенициллину. Обладает сравнительно высокой иммуногенностью (75-80%).При окраске колоний по У-Вилсону шт.№ 19 и полевых штаммов колонии в 3-6- суточном возрасте имеют фиолетовый ободок и светло-желтый центр а колонии R-штаммов - синий цвет
К недостаткам известного штамма следует отнести то, что штамм №19 Brucella abortus высокоагглютиногенен. обладает длительной приживаемостью в организме
ч
О
СА
ммунизированных животных (5-8 лет), облаает остаточной вирулентностью, абортогенно- тью. Отсутствие способа дифференциации не позвол ет примен ть его на взрослом погоовье скота в очагах инфекции и в угрожаеых по бруцеллезу стадах.
Вакцина из шт, № 82 Brucella abortus - ива , слабоагглютиногенна , обладет им- муногенностью 75-100% на морских свинках , зараженных через 5 мес после их ммунизации.
У шт. № 82 при окраске по У-Вилсону на -й сутки роста колонии мелкие и имеют иолетовый ободок и светло-желтый центр, на 4-й день у них по вл етс исчерченность и включени в центре, к 5-6-му дню колонии при окраске станов тс синими.
При на среду с агаром в чашках Петри образует колонии SR-формы, кругые , гладкие, прозрачные с голубоватым отенком .
Агглютинирует в растворах S- и R-cne- цифических бруцеллезных сывороток, дает слабую пробу в трипафлавине, термоагглютинаци слаба или не агглютинирует.
Растет на средах с фуксином 1:50000 и не растет с тионином (1 ;25000). При росте на агаре образует сероводород. Обладает слабыми йгголютиногенными и вирулентными свойствами. Однако штамм № 82 Brucella abortus в SR-форме не стабилен, абортоге- нен (10-20% абортов у стельных коров и нетелей). Культура шт. N° 82 в образцах производственных серий вакцины характеризуетс неоднородностью формы колоний, антигенные свойства субкультур генетически не закреплены, субкультуры в S-, SR- и R-формах имеют различную вирулентность. У 0,4-0,8% вакцинированных животных сохран ютс поствакцинальные реакции на длительный период.
Целью изобретени вл етс получение штамма бруцелла абортус, обладающего стабильными свойствами, безвредностью и высокой иммуногенностью.
В результате отбора и исследований был селекционирован штамм бруцелла абортус 75/79-А, отвечающий основным требовани м вакцинного штамма бруцеллеза крупного рогатого скота. Штамм Brucella abortus 75/79-А депонирован в коллекции Всесоюзного Государственного научно-исследовательского института ветеринарных препаратов под номером 75/79-А(35).
Штамм 75/79-А бруцелла абортус - диссоциированный штамм в SR-форме, выделен из высева надвым нного лимфоузла реагирующей на бруцеллез коровы в виде колоний бруцелла абортус в анаэробных услови х на 7-е сутки инкубации в термостате
Полученной из за вл емого штамма вакциной прививают крупный рогатый скот {например, стельных телок) в дозе 100 млрд микробных клеток.
Селекционированный штамм бруцелла
абортус 75/79-А имеет следующие морфологические , культурально биохимические характеристики.
Морфологические признаки. Штамм
бруцелла абортус 75/79-А - это очень мелкие микроорганизмы, в микроскопических препаратах встречаютс одновременно в кокковидных и палочковидных формах, при окраске по Козловскому окрашиваютс в
красный цвет, хорошо растет на твердых питательных средах: м сопептонном печеночном глюкозо-глицериновом агаре, печеночном глюкозо-глицериновом агаре как с добавлением перевара Хоттингера так и
без него.
Культура л ьно-биохимичес кие признаки . Штамм 75/79-А полностью (75-100%) агглютинируетс S- и R-бруцеллезными сыворотками, не агглютинируетс с физраствором , дает положительную реакцию (++++) в пробе с акрифлавином. положительную или слабоположительную реакцию тер- моагглютинации. На агаре в чашках попул ци однородна , колонии ровные.
гладкие, выпуклые, блест щие. При окраске по Уайт-Вилсону 3-4-суточные колонии культуры исходного штамма и 5-го пассажа через организм морской свинки, выращенные на кос ках агара Щелковского биокомбината , ВГНКИ и Алтайской НИВС, окрашиваютс однородно в основном (до 80%) как SR-форма (по сине-фиолетовому фону желта исчерненность по диагонали, середине, иногда по периметру колоний
ближе к краю), 5-20% колоний - как RS-фор- ма. R- и S-формы колоний в попул ции не наблюдались.
Штамм и его субкультура хорошо растет на средах с тионином и фуксином 1:50 тыс
(++), не чувствителен к зритритолу и натриевой соли бензилпенициллина в концентрации до 50 ЕД в 1 мл среды Продуцирует HsS (1-29 мм).
По морфологическим, культуральным.
агглютинабельным свойствам, реакции термоагглютинации и пробе с акрилфлавином штамм 75/79-А представл ет собой диссо- циант бруцелл, аналогичный штамму
Brucella abortus fe 82. Отличием изучаемого штамма от последнего вл етс относительна однороднсть попул ции и отсутствие в ней микробных клеток, образующих на 3-4-е сутки инкубировани колоний в S-или R-фор- ме.
П р и м е р 1. Приживаемость и возможность миграции штамма 75/79-А (5-й пассаж ) изучены в опыте на 50 морских свинках, 25 из которых были иммунизированы в дозе 1 млрд. микробных клеток исодер- жались вместе с непривитыми в течение 4 мес. Морских свинок по 5 голов из каждой группы убивали через 15,30,60,90.120 дней и проводили бактериологическое и серологическое исследовани материала на бру- целлез.
В результате проведенных исследований установлено, что штамм 75/79-А приживаетс в организме иммунизированных морских свинок в генерализованной форме в течение 60 дней.
При серологическом исследовании в РБП, РА, РСКс биофабричными антигенами и в РСК с R-антигеном КВИ сывороток крови от иммунизированных морских свинок по- ложительна реакци с биофабричным антигеном была получена только у одного животного через 60 дней в РБП и СК в титре 1:20. В РСК с R-антигеном КВИ все морские свинки положительно реагировали с 15 дн до 60 в титрах 1:5-1:80. Через 90 дней отмечена положительна РСК в титре 1:5 у двух морских свинок из п ти, через 120 дней все животные утратили серопозитивность к R- антигену. При совместном содержании в те- чение 120 дней иммунизированных морских свинок и животных контрольной группы не установлено вление миграции изучаемого штамма, что подтверждаетс результатами бактериологического и серологического ис- следований.
П р и м е р 2. Остаточна вирулентность и агглютинабельные свойства штамма 75/79-А (5 пассаж) изучали в опыте с ВГНКИ на 90 морских свинках в сравнении со штам- мами Kb 82 и вирулентным шт. Brucella abortus 54, Животных иммунизировали взвесью двухсуточных агаровых культур в дозах 10, 100, 1 тыс., 10 тыс. и 1 млрд. микробных клеток по оптическому стандарту мутности. Морских свинок убивали через 20 и 40 дней,провод бактериологическое и серологическое исследовани на бруццелез, отмеча в эти сроки видимые патолого-ана- томические изменени в лимфоузлах и орга- нах животных, вычисл индекс селезенки.
В результате проведенных исследований установлено, что штамм 75/79-А обладает низкими вирулентными свойствами, так как в указанные строки генерализовано рассел етс в организме морских свинок. привитых только в дозе 1 млрд.м.клеток,-а приживаетс а дозе от 1 тыс.м.клеток, в то врем как шт. № 82 - от 10 микробных клеток .
При серологическом исследовании в РБП, РА и РСК на бруцеллез в сыворотке крови морских свинок, привитых разными дозами культуры штамма Brucella abortus 75/79-А, отсутствовали антитела, вы вл емые антигенами биофабричного производства . В РСКс R-антигеном в первый срок убо вы влены специфические антитела у всех морских свинок, иммунизированных в дозе 1 млрд.м.клеток (титр 1:10-1:20), через 40 дней в аналогичной группе положительно реагировали все животные в высоком титре (1:40), в остальных группах - по 1-3 м.свинки в титре 1:5.
П р и м е р 3. Безвередность (абортоген- ность) штамма 75/79-А изучена на 8 беременных морских свинках, привитых 1, 2, 7 5, 10 млрд.м.клеток суспензией двухсуточной агаровой культуры исходного штамма и его пассажей. За период наблюдени в сроки 15, 20, 30, 60 сут перечисленные дозы штамма аборта не вызывали, а при послеу- бойном вскрытии из полостей маток 8 бере- менных морских свинок извлечено 26 сформировавшихс плодов.
П р и м е р 4. Абортогенность и агглюти- ноггеность штаммов 75/79-А и шт. № 82 изучены на 9 (2-3 мес. стельности) телках, иммунизированных в дозе 100 млрд.микро- бных клеток каждого штамма.
За 7 мес. опыта установили следующее.
В группе телок (4 головы), иммунизированных 100 млрд. микробных клеток двухсуточной суспензии штамма 75/79-А, аборта не отмечалось. Все телки, иммунизированные суспензией штамма 75/79-А, благополучно растелились, а из 5 телок, иммунизированных штаммом N 82 в дозе 100 млрд.м.к. биофабричной вакцины, через 2 мес после иммунизации одна телка абортировала .
Результатами серологических исследований сывороток крови животных обоих групп в сроки 12 дней, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 мес после иммунизации установлено, что у телок опытной группы все реакции с биофабричными антигенами дали отрицательные результаты исследований на бруцеллез через 2 мес после иммунизации, в РСК с R-антигеном 16/4 ИЭВСиДВ через 3 мес, тогда как из 5 телок, иммунизированных шт. № 82, у одной сохранились реакции в РСК со стандартным антигеном (в титре 1:10++++и РСК с R-16/4 антигеном ИЭВСиДВ 1:40++++).
П р и м е р 5. Иммуногенность штамма 75/79-А на морских свинках высока и колеблетс от 66,6 до 100% при заражении через 3,5 мес. после их иммунизации. В опытах при апробации штамма совместно с ВГНКИ на 94 морских свинках иммуногенность штамма 75/79-А (5 пассаж на морских свинках) в дозе 2 млрд. микробных клеток составила 88,8% при индексе инфицирован- ности (ИИ) 8,3, у штамма № 82 в той же дозе иммунитет составил 65% (ИИ 20,0), у шт. N 19 в дозе 1 млрд.м.к. иммуногенность составила 84,2% при ИИ 11,5.
Использование штамма 75/79-А(35) Brucella abortus в качестве противобруцел
лезной вакцины позволит применить ее в комплексе мер по профилактике бруцеллеза крупного рогатого скота любого возраста и без учета стельности,
Claims (1)
- Формула изобретени Штамм бактерий Brucella abortus ВГНКИ №75/79А(35), ипользуемый дл приготовлени вакцины против бруцеллеза крупного рогатого скота.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU884603578A SU1701743A1 (ru) | 1988-09-20 | 1988-09-20 | Штамм бактерий BRUceLLa авоRтUS, используемый дл приготовлени вакцины против бруцеллеза крупного рогатого скота |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU884603578A SU1701743A1 (ru) | 1988-09-20 | 1988-09-20 | Штамм бактерий BRUceLLa авоRтUS, используемый дл приготовлени вакцины против бруцеллеза крупного рогатого скота |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
SU1701743A1 true SU1701743A1 (ru) | 1991-12-30 |
Family
ID=21408582
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SU884603578A SU1701743A1 (ru) | 1988-09-20 | 1988-09-20 | Штамм бактерий BRUceLLa авоRтUS, используемый дл приготовлени вакцины против бруцеллеза крупного рогатого скота |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
SU (1) | SU1701743A1 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2491553C2 (ru) * | 2011-10-03 | 2013-08-27 | Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт бруцеллеза и туберкулеза животных Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ ВНИИБТЖ Россельхозакадемии) | Способ изготовления r-бруцеллезного эритроцитарного антигена для реакции непрямой гемагглютинации (рнга) |
-
1988
- 1988-09-20 SU SU884603578A patent/SU1701743A1/ru active
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Сборник научных трудов. Алма-Ата, изд. Восточного отделени ВАСХНИЛ, 1986, с. 105-106. Ветеринари , 1975. № 7, с.43-45. Ветеринари , 1975, №11, с.32-33. * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2491553C2 (ru) * | 2011-10-03 | 2013-08-27 | Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт бруцеллеза и туберкулеза животных Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ ВНИИБТЖ Россельхозакадемии) | Способ изготовления r-бруцеллезного эритроцитарного антигена для реакции непрямой гемагглютинации (рнга) |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Davis et al. | Mycoplasmas, Rickettsiae, and Chlamydiae: possible relation to yellows diseases and other disorders of plants and insects | |
Stoenner et al. | Antigenic variation of Borrelia hermsii. | |
RU2305707C2 (ru) | СПОСОБ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ БАКТЕРИЙ LAWSONIA INTRACELLULARIS В КЛЕТКАХ McCoy И ПРИМЕНЕНИЕ КЛЕТОК MCCOY ДЛЯ ВНУТРИКЛЕТОЧНОГО КУЛЬТИВИРОВАНИЯ БАКТЕРИЙ LAWSONIA INTRACELLULARIS | |
Edward | The pleuropneumonia group of organisms: a review, together with some new observations | |
US5192679A (en) | Growing ehrlichia species in a continuous cell line | |
McDade et al. | Virulent to avirulent conversion of Legionnaires' disease bacterium (Legionella pneumophila)—its effect on isolation techniques | |
Del Giudice et al. | Microbiological methods and fluorescent microscopy for the direct demonstration of mycoplasma infection of cell cultures | |
Shepard | T-Form colonies of pleuropneumonialike organisms | |
Shepard | Nonacid-fast bacteria and HeLa cells: their uptake and subsequent intracellular growth | |
Hessling et al. | A direct comparison of procedures for the detection of mycoplasma in tissue culture | |
Rikihisa et al. | Isolation and continuous culture of Neorickettsia helminthoeca in a macrophage cell line | |
DK0460414T3 (da) | Dyrknings- og detektionsfremgangsmåde til sterilfiltrerbare, autonomt replikerende biologiske partikler | |
Jones et al. | Taxonomic position in the genus Brucella of the causative agent of canine abortion | |
Cox et al. | Serodiagnosis of nosematosis by immunofluorescence using cell-culture-grown organisms | |
Deeb et al. | Characterization of mycoplasma pulmonis variants isolated from rabbits I. identification and properties of isolates | |
Winter et al. | Rapid Identification of Pasteurella Pestis with Fluorescent Antibody: II. Specific Identification of Pasteurella Pestis in Dried Smears | |
SU1701743A1 (ru) | Штамм бактерий BRUceLLa авоRтUS, используемый дл приготовлени вакцины против бруцеллеза крупного рогатого скота | |
Short et al. | An electron microscope study of Bacteroides nodusus: ultrastructure of organisms from primary isolates and different colony types | |
Carmichael et al. | A Fatal Septicemic Disease of Infant Puppies Caused by Gytopathogenic Organisms with Characteristics of Mycoplasma | |
Mustafayeva | BRIEF HISTORICAL SUMMARY OF THE CAUSANT OF LISTERIOSIS AND ITS PROPERTIES | |
US5902742A (en) | Complex growth supplement for maintenance of bacterial cell viability and induction of bacterial cell differentiation | |
RU2159808C2 (ru) | Штамм бактерий brucella abortus, используемый при получении моноспецифической сыворотки для идентификации бруцелл в r-форме | |
RU2316345C1 (ru) | Способ изготовления вакцины ассоциированной против колибактериоза, сальмонеллеза, стрептококкоза и энтерококковой инфекции нутрий | |
RU2085584C1 (ru) | Способ получения рекомбинантных туляремийных микроорганизмов - продуцентов факторов вирулентности, рекомбинантный штамм francisella tularensis subspecies, holarctica r5s - продуцент фактора вирулентности francisella tularensis nearctica shu, рекомбинантный штамм francisella tularensis holarctica rn4 - продуцент фактора вирулентности pseudomonas pseudomallei c 141, рекомбинантный штамм francisella tularensis subspecies holarctica r1a - продуцент фактора вирулентности francisella tularensis nearctica b 399 a cole | |
Nagoba et al. | Microbiology and Parasitology PMFU-E-BooK |