RU2729161C2 - Фармацевтические композиции, содержащие варианты пептидов, и способы их применения - Google Patents
Фармацевтические композиции, содержащие варианты пептидов, и способы их применения Download PDFInfo
- Publication number
- RU2729161C2 RU2729161C2 RU2017112738A RU2017112738A RU2729161C2 RU 2729161 C2 RU2729161 C2 RU 2729161C2 RU 2017112738 A RU2017112738 A RU 2017112738A RU 2017112738 A RU2017112738 A RU 2017112738A RU 2729161 C2 RU2729161 C2 RU 2729161C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- pharmaceutical composition
- seq
- peptide
- amino acid
- disease
- Prior art date
Links
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims abstract description 275
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 75
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims description 800
- 102100031734 Fibroblast growth factor 19 Human genes 0.000 claims abstract description 247
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 170
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims abstract description 100
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 claims abstract description 68
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 16
- 101000846394 Homo sapiens Fibroblast growth factor 19 Proteins 0.000 claims abstract description 15
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 524
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 85
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 70
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 65
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 claims description 65
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 claims description 51
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 claims description 51
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 claims description 51
- 239000003613 bile acid Substances 0.000 claims description 50
- HSINOMROUCMIEA-FGVHQWLLSA-N (2s,4r)-4-[(3r,5s,6r,7r,8s,9s,10s,13r,14s,17r)-6-ethyl-3,7-dihydroxy-10,13-dimethyl-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl]-2-methylpentanoic acid Chemical compound C([C@@]12C)C[C@@H](O)C[C@H]1[C@@H](CC)[C@@H](O)[C@@H]1[C@@H]2CC[C@]2(C)[C@@H]([C@H](C)C[C@H](C)C(O)=O)CC[C@H]21 HSINOMROUCMIEA-FGVHQWLLSA-N 0.000 claims description 46
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 43
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 41
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 claims description 41
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 claims description 41
- 230000013632 homeostatic process Effects 0.000 claims description 40
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 28
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 25
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 23
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 22
- 206010073071 hepatocellular carcinoma Diseases 0.000 claims description 21
- 231100000844 hepatocellular carcinoma Toxicity 0.000 claims description 21
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims description 20
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 19
- 208000008439 Biliary Liver Cirrhosis Diseases 0.000 claims description 18
- 208000033222 Biliary cirrhosis primary Diseases 0.000 claims description 18
- 208000012654 Primary biliary cholangitis Diseases 0.000 claims description 18
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 claims description 18
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 claims description 16
- 208000008338 non-alcoholic fatty liver disease Diseases 0.000 claims description 16
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 claims description 16
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 15
- 208000030159 metabolic disease Diseases 0.000 claims description 14
- 206010053219 non-alcoholic steatohepatitis Diseases 0.000 claims description 14
- 206010008635 Cholestasis Diseases 0.000 claims description 13
- 208000001145 Metabolic Syndrome Diseases 0.000 claims description 13
- 201000000690 abdominal obesity-metabolic syndrome Diseases 0.000 claims description 13
- 230000007870 cholestasis Effects 0.000 claims description 13
- 231100000359 cholestasis Toxicity 0.000 claims description 13
- 206010018429 Glucose tolerance impaired Diseases 0.000 claims description 12
- 230000003345 hyperglycaemic effect Effects 0.000 claims description 12
- 229940068977 polysorbate 20 Drugs 0.000 claims description 12
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 claims description 10
- 206010060378 Hyperinsulinaemia Diseases 0.000 claims description 10
- 230000003451 hyperinsulinaemic effect Effects 0.000 claims description 10
- 201000008980 hyperinsulinism Diseases 0.000 claims description 10
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 claims description 10
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 claims description 10
- 206010022489 Insulin Resistance Diseases 0.000 claims description 9
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 claims description 9
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 claims description 9
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims description 9
- 210000000013 bile duct Anatomy 0.000 claims description 8
- 208000019425 cirrhosis of liver Diseases 0.000 claims description 8
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 8
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 claims description 8
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 claims description 7
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 claims description 7
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 claims description 7
- 208000010157 sclerosing cholangitis Diseases 0.000 claims description 7
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 claims description 7
- 208000002705 Glucose Intolerance Diseases 0.000 claims description 6
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 claims description 6
- 230000004153 glucose metabolism Effects 0.000 claims description 6
- 208000001024 intrahepatic cholestasis Diseases 0.000 claims description 6
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 claims description 6
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 claims description 6
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 6
- 206010069703 Bile acid malabsorption Diseases 0.000 claims description 5
- 206010009900 Colitis ulcerative Diseases 0.000 claims description 5
- 208000011231 Crohn disease Diseases 0.000 claims description 5
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 claims description 5
- 201000006704 Ulcerative Colitis Diseases 0.000 claims description 5
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 claims description 5
- 230000007872 intrahepatic cholestasis Effects 0.000 claims description 5
- 208000007232 portal hypertension Diseases 0.000 claims description 5
- 206010008609 Cholangitis sclerosing Diseases 0.000 claims description 4
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 claims description 4
- 206010056528 Neonatal cholestasis Diseases 0.000 claims description 4
- 208000036758 Postinfectious cerebellitis Diseases 0.000 claims description 4
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 claims description 4
- 201000001883 cholelithiasis Diseases 0.000 claims description 4
- 230000007882 cirrhosis Effects 0.000 claims description 4
- 208000001130 gallstones Diseases 0.000 claims description 4
- 210000003405 ileum Anatomy 0.000 claims description 4
- 230000037356 lipid metabolism Effects 0.000 claims description 4
- 201000000742 primary sclerosing cholangitis Diseases 0.000 claims description 4
- 238000002271 resection Methods 0.000 claims description 4
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 claims description 4
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 claims description 3
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 claims description 3
- 206010067584 Type 1 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims description 3
- 229940090047 auto-injector Drugs 0.000 claims description 3
- 208000019298 familial intrahepatic cholestasis Diseases 0.000 claims description 3
- 208000004104 gestational diabetes Diseases 0.000 claims description 3
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 208000037841 lung tumor Diseases 0.000 claims description 3
- 208000023958 prostate neoplasm Diseases 0.000 claims description 3
- 206010004593 Bile duct cancer Diseases 0.000 claims 2
- 208000026900 bile duct neoplasm Diseases 0.000 claims 2
- 208000006990 cholangiocarcinoma Diseases 0.000 claims 2
- 208000036260 idiopathic disease Diseases 0.000 claims 2
- 201000002161 intrahepatic cholestasis of pregnancy Diseases 0.000 claims 2
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 claims 2
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 claims 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 38
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 13
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 abstract 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 418
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 317
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 312
- 101710153349 Fibroblast growth factor 19 Proteins 0.000 description 239
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 130
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 120
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 97
- 108090000376 Fibroblast growth factor 21 Proteins 0.000 description 76
- 102000003973 Fibroblast growth factor 21 Human genes 0.000 description 66
- 210000004897 n-terminal region Anatomy 0.000 description 62
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 54
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 52
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 48
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 48
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 46
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 45
- DPVHGFAJLZWDOC-PVXXTIHASA-N (2r,3s,4s,5r,6r)-2-(hydroxymethyl)-6-[(2r,3r,4s,5s,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyoxane-3,4,5-triol;dihydrate Chemical compound O.O.O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 DPVHGFAJLZWDOC-PVXXTIHASA-N 0.000 description 43
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 43
- 229940074409 trehalose dihydrate Drugs 0.000 description 43
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 42
- -1 but not limited to Proteins 0.000 description 38
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 38
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 37
- 108091006116 chimeric peptides Proteins 0.000 description 35
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 34
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 33
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 32
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 30
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K tripotassium phosphate Chemical compound [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 28
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 27
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 27
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 27
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 26
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 26
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 26
- 229940074410 trehalose Drugs 0.000 description 25
- 102100027844 Fibroblast growth factor receptor 4 Human genes 0.000 description 24
- 101710182387 Fibroblast growth factor receptor 4 Proteins 0.000 description 24
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 24
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 24
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 23
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 23
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 21
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 21
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 21
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 21
- 239000000047 product Substances 0.000 description 21
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 20
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 18
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 17
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 17
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 17
- DMHGKBGOUAJRHU-UHFFFAOYSA-N Ile-Arg-Pro Natural products CCC(C)C(N)C(=O)NC(CCCN=C(N)N)C(=O)N1CCCC1C(O)=O DMHGKBGOUAJRHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 16
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 16
- 230000006870 function Effects 0.000 description 15
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 15
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 15
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 14
- 229910000160 potassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 14
- 235000011009 potassium phosphates Nutrition 0.000 description 14
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 13
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 13
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 13
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 13
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 102100031132 Glucose-6-phosphate isomerase Human genes 0.000 description 12
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 12
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 12
- 230000009102 absorption Effects 0.000 description 12
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 12
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 12
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 12
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 12
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 12
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 11
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 11
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 11
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 11
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 10
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 10
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 10
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 10
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 10
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 10
- 239000000816 peptidomimetic Substances 0.000 description 10
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 10
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 10
- FSYKKLYZXJSNPZ-UHFFFAOYSA-N sarcosine Chemical compound C[NH2+]CC([O-])=O FSYKKLYZXJSNPZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 9
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 9
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 9
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 9
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 9
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 9
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 9
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 8
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 8
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 8
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 8
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 8
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 8
- 150000004665 fatty acids Chemical group 0.000 description 8
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 8
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 8
- 230000006320 pegylation Effects 0.000 description 8
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 8
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 8
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 8
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 8
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 8
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 8
- 102000015779 HDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 7
- 108010010234 HDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 7
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 7
- 201000001421 hyperglycemia Diseases 0.000 description 7
- 239000000463 material Substances 0.000 description 7
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 7
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 7
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 7
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 7
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 206010033307 Overweight Diseases 0.000 description 6
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000008859 change Effects 0.000 description 6
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 6
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 6
- 230000010030 glucose lowering effect Effects 0.000 description 6
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 6
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 6
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 6
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 6
- 201000009104 prediabetes syndrome Diseases 0.000 description 6
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 6
- 238000012384 transportation and delivery Methods 0.000 description 6
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 5
- VBICKXHEKHSIBG-UHFFFAOYSA-N 1-monostearoylglycerol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)CO VBICKXHEKHSIBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 5
- BCCRXDTUTZHDEU-VKHMYHEASA-N Gly-Ser Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O BCCRXDTUTZHDEU-VKHMYHEASA-N 0.000 description 5
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 5
- 208000001280 Prediabetic State Diseases 0.000 description 5
- 108010077895 Sarcosine Proteins 0.000 description 5
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 5
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 5
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 5
- 239000007859 condensation product Substances 0.000 description 5
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 5
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 5
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 5
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 5
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 5
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 5
- 229940043230 sarcosine Drugs 0.000 description 5
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 5
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 5
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 5
- 229960000281 trometamol Drugs 0.000 description 5
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 4
- PUPZLCDOIYMWBV-UHFFFAOYSA-N (+/-)-1,3-Butanediol Chemical compound CC(O)CCO PUPZLCDOIYMWBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- RUDATBOHQWOJDD-UHFFFAOYSA-N (3beta,5beta,7alpha)-3,7-Dihydroxycholan-24-oic acid Natural products OC1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)CC2 RUDATBOHQWOJDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- IAKHMKGGTNLKSZ-INIZCTEOSA-N (S)-colchicine Chemical compound C1([C@@H](NC(C)=O)CC2)=CC(=O)C(OC)=CC=C1C1=C2C=C(OC)C(OC)=C1OC IAKHMKGGTNLKSZ-INIZCTEOSA-N 0.000 description 4
- FUOOLUPWFVMBKG-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoisobutyric acid Chemical compound CC(C)(N)C(O)=O FUOOLUPWFVMBKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 4
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 description 4
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N Ethene Chemical compound C=C VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000005977 Ethylene Substances 0.000 description 4
- IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide Chemical compound C1CO1 IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 4
- DTHNMHAUYICORS-KTKZVXAJSA-N Glucagon-like peptide 1 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC=1N=CNC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C(C)C)C1=CC=CC=C1 DTHNMHAUYICORS-KTKZVXAJSA-N 0.000 description 4
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 4
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 4
- 108010007622 LDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 4
- 102000007330 LDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 4
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical class ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 4
- 235000019483 Peanut oil Nutrition 0.000 description 4
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 4
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 4
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 4
- SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N beta-N-Acetyl-D-neuraminic acid Natural products CC(=O)NC1C(O)CC(O)(C(O)=O)OC1C(O)C(O)CO SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229960000074 biopharmaceutical Drugs 0.000 description 4
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 4
- 238000010804 cDNA synthesis Methods 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 4
- OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N chlorobutanol Chemical compound CC(C)(O)C(Cl)(Cl)Cl OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 4
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 4
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 4
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 4
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 4
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 4
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 4
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 4
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 4
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 4
- 102000047000 human FGF19 Human genes 0.000 description 4
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 4
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 4
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 4
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 4
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 4
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 4
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 4
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 4
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 4
- 239000000312 peanut oil Substances 0.000 description 4
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 4
- 230000006267 polysialylation Effects 0.000 description 4
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 4
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 4
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 4
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 4
- 241000894007 species Species 0.000 description 4
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 4
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 4
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 4
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 4
- TVZRAEYQIKYCPH-UHFFFAOYSA-N 3-(trimethylsilyl)propane-1-sulfonic acid Chemical group C[Si](C)(C)CCCS(O)(=O)=O TVZRAEYQIKYCPH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 244000215068 Acacia senegal Species 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 3
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 3
- WHUUTDBJXJRKMK-GSVOUGTGSA-N D-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 3
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000032928 Dyslipidaemia Diseases 0.000 description 3
- 101800000224 Glucagon-like peptide 1 Proteins 0.000 description 3
- 229920000084 Gum arabic Polymers 0.000 description 3
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 3
- LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N L-norleucine Chemical compound CCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 3
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 3
- 125000000729 N-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 3
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 3
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 3
- 102100040918 Pro-glucagon Human genes 0.000 description 3
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N Succinic acid Natural products OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000010489 acacia gum Nutrition 0.000 description 3
- 239000000205 acacia gum Substances 0.000 description 3
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 3
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 3
- 230000010933 acylation Effects 0.000 description 3
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 description 3
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 3
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 3
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 3
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 description 3
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 3
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 3
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 3
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 3
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 3
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 3
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 150000001576 beta-amino acids Chemical class 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 3
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 3
- 238000005277 cation exchange chromatography Methods 0.000 description 3
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 3
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- 229940088679 drug related substance Drugs 0.000 description 3
- 208000009866 extrahepatic cholestasis Diseases 0.000 description 3
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 3
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 3
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 3
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 description 3
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 3
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 3
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 3
- 206010021654 increased appetite Diseases 0.000 description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 3
- 229940057995 liquid paraffin Drugs 0.000 description 3
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 3
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 3
- 235000010270 methyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 3
- 239000000693 micelle Substances 0.000 description 3
- 239000003094 microcapsule Substances 0.000 description 3
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 3
- 239000001788 mono and diglycerides of fatty acids Substances 0.000 description 3
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 3
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 3
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 3
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 3
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 3
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 3
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 3
- 229940124531 pharmaceutical excipient Drugs 0.000 description 3
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 3
- 201000010065 polycystic ovary syndrome Diseases 0.000 description 3
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 description 3
- 229920002689 polyvinyl acetate Polymers 0.000 description 3
- 239000011118 polyvinyl acetate Substances 0.000 description 3
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 3
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 3
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 3
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 3
- QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N propylparaben Chemical compound CCCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N sialic acid Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)OC1[C@H](O)[C@H](O)CO SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N 0.000 description 3
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 3
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 3
- UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N triformin Chemical compound O=COCC(OC=O)COC=O UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- RUDATBOHQWOJDD-UZVSRGJWSA-N ursodeoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)CC1 RUDATBOHQWOJDD-UZVSRGJWSA-N 0.000 description 3
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 3
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 3
- ZORQXIQZAOLNGE-UHFFFAOYSA-N 1,1-difluorocyclohexane Chemical compound FC1(F)CCCCC1 ZORQXIQZAOLNGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MSBLMBWXUVQCDY-UHFFFAOYSA-N 1-(4,4-dimethyl-1-piperazin-4-iumyl)ethanone Chemical compound CC(=O)N1CC[N+](C)(C)CC1 MSBLMBWXUVQCDY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PBLZLIFKVPJDCO-UHFFFAOYSA-N 12-aminododecanoic acid Chemical compound NCCCCCCCCCCCC(O)=O PBLZLIFKVPJDCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000003923 2,5-pyrrolediones Chemical class 0.000 description 2
- IZHVBANLECCAGF-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxy-3-(octadecanoyloxy)propyl octadecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC IZHVBANLECCAGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- 241000416162 Astragalus gummifer Species 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000005623 Carcinogenesis Diseases 0.000 description 2
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 150000008574 D-amino acids Chemical class 0.000 description 2
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010067722 Dipeptidyl Peptidase 4 Proteins 0.000 description 2
- 102100025012 Dipeptidyl peptidase 4 Human genes 0.000 description 2
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N Doxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 description 2
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101000988793 Homo sapiens Host cell factor C1 regulator 1 Proteins 0.000 description 2
- 101000613207 Homo sapiens Pre-B-cell leukemia transcription factor-interacting protein 1 Proteins 0.000 description 2
- 102100029105 Host cell factor C1 regulator 1 Human genes 0.000 description 2
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 2
- 102100026120 IgG receptor FcRn large subunit p51 Human genes 0.000 description 2
- 102100021711 Ileal sodium/bile acid cotransporter Human genes 0.000 description 2
- 102000036770 Islet Amyloid Polypeptide Human genes 0.000 description 2
- 108010041872 Islet Amyloid Polypeptide Proteins 0.000 description 2
- SNDPXSYFESPGGJ-BYPYZUCNSA-N L-2-aminopentanoic acid Chemical compound CCC[C@H](N)C(O)=O SNDPXSYFESPGGJ-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 2
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- RHGKLRLOHDJJDR-BYPYZUCNSA-N L-citrulline Chemical compound NC(=O)NCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O RHGKLRLOHDJJDR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- SNDPXSYFESPGGJ-UHFFFAOYSA-N L-norVal-OH Natural products CCCC(N)C(O)=O SNDPXSYFESPGGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 2
- 208000017170 Lipid metabolism disease Diseases 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 2
- 241000282553 Macaca Species 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N N-Methylpyrrolidone Chemical compound CN1CCCC1=O SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004988 N-glycosylation Effects 0.000 description 2
- RHGKLRLOHDJJDR-UHFFFAOYSA-N Ndelta-carbamoyl-DL-ornithine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=O RHGKLRLOHDJJDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100039019 Nuclear receptor subfamily 0 group B member 1 Human genes 0.000 description 2
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 2
- 229940126033 PPAR agonist Drugs 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008156 Ringer's lactate solution Substances 0.000 description 2
- 108091006614 SLC10A2 Proteins 0.000 description 2
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 108010022394 Threonine synthase Proteins 0.000 description 2
- 229920001615 Tragacanth Polymers 0.000 description 2
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 2
- DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N acetic acid;2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;sodium Chemical compound [Na].CC(O)=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 2
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 2
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 2
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 2
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 2
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 2
- 125000000613 asparagine group Chemical group N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)* 0.000 description 2
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WHGYBXFWUBPSRW-FOUAGVGXSA-N beta-cyclodextrin Chemical compound OC[C@H]([C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]2O[C@@H]([C@@H](O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O3)[C@H](O)[C@H]2O)CO)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]3O[C@@H]1CO WHGYBXFWUBPSRW-FOUAGVGXSA-N 0.000 description 2
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 2
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 2
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 2
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 2
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 2
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 2
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 2
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 2
- 230000036952 cancer formation Effects 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical group 0.000 description 2
- 150000001721 carbon Chemical group 0.000 description 2
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 2
- 231100000504 carcinogenesis Toxicity 0.000 description 2
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 2
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 2
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 2
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 2
- 229960004926 chlorobutanol Drugs 0.000 description 2
- 229960002173 citrulline Drugs 0.000 description 2
- 235000013477 citrulline Nutrition 0.000 description 2
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 2
- 239000003240 coconut oil Substances 0.000 description 2
- 235000019864 coconut oil Nutrition 0.000 description 2
- 229960001338 colchicine Drugs 0.000 description 2
- 239000008139 complexing agent Substances 0.000 description 2
- 238000007906 compression Methods 0.000 description 2
- 230000006835 compression Effects 0.000 description 2
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 2
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 2
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 description 2
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 2
- 102000004419 dihydrofolate reductase Human genes 0.000 description 2
- UGMCXQCYOVCMTB-UHFFFAOYSA-K dihydroxy(stearato)aluminium Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)O[Al](O)O UGMCXQCYOVCMTB-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 2
- 208000037765 diseases and disorders Diseases 0.000 description 2
- 230000035622 drinking Effects 0.000 description 2
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 2
- 229940011871 estrogen Drugs 0.000 description 2
- 239000000262 estrogen Substances 0.000 description 2
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 229940125753 fibrate Drugs 0.000 description 2
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 2
- BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N gamma-aminobutyric acid Chemical compound NCCCC(O)=O BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 2
- 239000007903 gelatin capsule Substances 0.000 description 2
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 2
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 2
- 229940075507 glyceryl monostearate Drugs 0.000 description 2
- 230000003862 health status Effects 0.000 description 2
- BXWNKGSJHAJOGX-UHFFFAOYSA-N hexadecan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCO BXWNKGSJHAJOGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 2
- 125000004356 hydroxy functional group Chemical group O* 0.000 description 2
- 235000010979 hydroxypropyl methyl cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 239000001866 hydroxypropyl methyl cellulose Substances 0.000 description 2
- 229920003088 hydroxypropyl methyl cellulose Polymers 0.000 description 2
- UFVKGYZPFZQRLF-UHFFFAOYSA-N hydroxypropyl methyl cellulose Chemical compound OC1C(O)C(OC)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(OC2C(C(O)C(OC3C(C(O)C(O)C(CO)O3)O)C(CO)O2)O)C(CO)O1 UFVKGYZPFZQRLF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000002883 imidazolyl group Chemical group 0.000 description 2
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 2
- 238000001114 immunoprecipitation Methods 0.000 description 2
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 2
- 238000007917 intracranial administration Methods 0.000 description 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 2
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007951 isotonicity adjuster Substances 0.000 description 2
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 2
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 2
- 239000003589 local anesthetic agent Substances 0.000 description 2
- 229960005015 local anesthetics Drugs 0.000 description 2
- 239000008176 lyophilized powder Substances 0.000 description 2
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 2
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 2
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 2
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 2
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 2
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 2
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 2
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 2
- 108091005601 modified peptides Proteins 0.000 description 2
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 2
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 2
- GHLZUHZBBNDWHW-UHFFFAOYSA-N nonanamide Chemical compound CCCCCCCCC(N)=O GHLZUHZBBNDWHW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012457 nonaqueous media Substances 0.000 description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 2
- 239000000346 nonvolatile oil Substances 0.000 description 2
- 238000007410 oral glucose tolerance test Methods 0.000 description 2
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 2
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 2
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 239000002307 peroxisome proliferator activated receptor agonist Substances 0.000 description 2
- WVDDGKGOMKODPV-ZQBYOMGUSA-N phenyl(114C)methanol Chemical compound O[14CH2]C1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-ZQBYOMGUSA-N 0.000 description 2
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 2
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 2
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 2
- 229920001308 poly(aminoacid) Polymers 0.000 description 2
- 229920001200 poly(ethylene-vinyl acetate) Polymers 0.000 description 2
- 229920003229 poly(methyl methacrylate) Polymers 0.000 description 2
- 229920000139 polyethylene terephthalate Polymers 0.000 description 2
- 239000005020 polyethylene terephthalate Substances 0.000 description 2
- 239000004926 polymethyl methacrylate Substances 0.000 description 2
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 2
- 239000000244 polyoxyethylene sorbitan monooleate Substances 0.000 description 2
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 235000010232 propyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 2
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 2
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 2
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 2
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 2
- 229920002477 rna polymer Polymers 0.000 description 2
- 102220253513 rs748402400 Human genes 0.000 description 2
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 239000003352 sequestering agent Substances 0.000 description 2
- 239000008159 sesame oil Substances 0.000 description 2
- 235000011803 sesame oil Nutrition 0.000 description 2
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 2
- 235000019812 sodium carboxymethyl cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 229920001027 sodium carboxymethylcellulose Polymers 0.000 description 2
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 235000011069 sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 2
- 239000001593 sorbitan monooleate Substances 0.000 description 2
- 229940035049 sorbitan monooleate Drugs 0.000 description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 2
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 2
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 2
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 2
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 2
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 2
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229940033663 thimerosal Drugs 0.000 description 2
- 150000003573 thiols Chemical class 0.000 description 2
- 125000000341 threoninyl group Chemical group [H]OC([H])(C([H])([H])[H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 2
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 2
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 description 2
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 2
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 2
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 2
- OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N (+/-)-DABA Natural products NCCC(N)C(O)=O OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FXYPGCIGRDZWNR-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 3-[[3-(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl)oxy-3-oxopropyl]disulfanyl]propanoate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCSSCCC(=O)ON1C(=O)CCC1=O FXYPGCIGRDZWNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JARGNLJYKBUKSJ-KGZKBUQUSA-N (2r)-2-amino-5-[[(2r)-1-(carboxymethylamino)-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-5-oxopentanoic acid;hydrobromide Chemical group Br.OC(=O)[C@H](N)CCC(=O)N[C@H](CO)C(=O)NCC(O)=O JARGNLJYKBUKSJ-KGZKBUQUSA-N 0.000 description 1
- LNAZSHAWQACDHT-XIYTZBAFSA-N (2r,3r,4s,5r,6s)-4,5-dimethoxy-2-(methoxymethyl)-3-[(2s,3r,4s,5r,6r)-3,4,5-trimethoxy-6-(methoxymethyl)oxan-2-yl]oxy-6-[(2r,3r,4s,5r,6r)-4,5,6-trimethoxy-2-(methoxymethyl)oxan-3-yl]oxyoxane Chemical compound CO[C@@H]1[C@@H](OC)[C@H](OC)[C@@H](COC)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](OC)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](OC)[C@H](OC)O[C@@H]2COC)OC)O[C@@H]1COC LNAZSHAWQACDHT-XIYTZBAFSA-N 0.000 description 1
- NMDDZEVVQDPECF-LURJTMIESA-N (2s)-2,7-diaminoheptanoic acid Chemical compound NCCCCC[C@H](N)C(O)=O NMDDZEVVQDPECF-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- LKZQHZQXROBVOO-ZETCQYMHSA-N (2s)-2-amino-2-methylhexanoic acid Chemical compound CCCC[C@](C)(N)C(O)=O LKZQHZQXROBVOO-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- PECGVEGMRUZOML-AWEZNQCLSA-N (2s)-2-amino-3,3-diphenylpropanoic acid Chemical compound C=1C=CC=CC=1C([C@H](N)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 PECGVEGMRUZOML-AWEZNQCLSA-N 0.000 description 1
- KUHSEZKIEJYEHN-BXRBKJIMSA-N (2s)-2-amino-3-hydroxypropanoic acid;(2s)-2-aminopropanoic acid Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O.OC[C@H](N)C(O)=O KUHSEZKIEJYEHN-BXRBKJIMSA-N 0.000 description 1
- LPBSHGLDBQBSPI-YFKPBYRVSA-N (2s)-2-amino-4,4-dimethylpentanoic acid Chemical compound CC(C)(C)C[C@H](N)C(O)=O LPBSHGLDBQBSPI-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N (E)-8-Octadecenoic acid Natural products CCCCCCCCCC=CCCCCCCC(O)=O WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UCTWMZQNUQWSLP-VIFPVBQESA-N (R)-adrenaline Chemical compound CNC[C@H](O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 UCTWMZQNUQWSLP-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- ICLYJLBTOGPLMC-KVVVOXFISA-N (z)-octadec-9-enoate;tris(2-hydroxyethyl)azanium Chemical compound OCCN(CCO)CCO.CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O ICLYJLBTOGPLMC-KVVVOXFISA-N 0.000 description 1
- UKAUYVFTDYCKQA-UHFFFAOYSA-N -2-Amino-4-hydroxybutanoic acid Natural products OC(=O)C(N)CCO UKAUYVFTDYCKQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PZNPLUBHRSSFHT-RRHRGVEJSA-N 1-hexadecanoyl-2-octadecanoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)O[C@@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC PZNPLUBHRSSFHT-RRHRGVEJSA-N 0.000 description 1
- IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 1-methyl-2,4-dioxo-1,3-diazinane-5-carboximidamide Chemical compound CN1CC(C(N)=N)C(=O)NC1=O IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 1
- 229940126558 11β-HSD1 inhibitor Drugs 0.000 description 1
- BLCJBICVQSYOIF-UHFFFAOYSA-N 2,2-diaminobutanoic acid Chemical compound CCC(N)(N)C(O)=O BLCJBICVQSYOIF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SKWCZPYWFRTSDD-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(azaniumyl)propanoate;chloride Chemical compound Cl.NCC(N)C(O)=O SKWCZPYWFRTSDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OFKFBEJYOHXPIA-UHFFFAOYSA-N 2,3-dihydro-1h-isoindol-2-ium-1-carboxylate Chemical compound C1=CC=C2C(C(=O)O)NCC2=C1 OFKFBEJYOHXPIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OEPOKWHJYJXUGD-UHFFFAOYSA-N 2-(3-phenylmethoxyphenyl)-1,3-thiazole-4-carbaldehyde Chemical compound O=CC1=CSC(C=2C=C(OCC=3C=CC=CC=3)C=CC=2)=N1 OEPOKWHJYJXUGD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XNWFRZJHXBZDAG-UHFFFAOYSA-N 2-METHOXYETHANOL Chemical compound COCCO XNWFRZJHXBZDAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 20:1omega9c fatty acid Natural products CCCCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BIGBDMFRWJRLGJ-UHFFFAOYSA-N 3-benzyl-1,5-didiazoniopenta-1,4-diene-2,4-diolate Chemical compound [N-]=[N+]=CC(=O)C(C(=O)C=[N+]=[N-])CC1=CC=CC=C1 BIGBDMFRWJRLGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SWLAMJPTOQZTAE-UHFFFAOYSA-N 4-[2-[(5-chloro-2-methoxybenzoyl)amino]ethyl]benzoic acid Chemical compound COC1=CC=C(Cl)C=C1C(=O)NCCC1=CC=C(C(O)=O)C=C1 SWLAMJPTOQZTAE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NLPWSMKACWGINL-UHFFFAOYSA-N 4-azido-2-hydroxybenzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=C(N=[N+]=[N-])C=C1O NLPWSMKACWGINL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SLXKOJJOQWFEFD-UHFFFAOYSA-N 6-aminohexanoic acid Chemical compound NCCCCCC(O)=O SLXKOJJOQWFEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UQXNEWQGGVUVQA-UHFFFAOYSA-N 8-aminooctanoic acid Chemical compound NCCCCCCCC(O)=O UQXNEWQGGVUVQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 9-Heptadecensaeure Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010001052 Acute respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 1
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 1
- 229940077274 Alpha glucosidase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 239000005995 Aluminium silicate Substances 0.000 description 1
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 1
- 241000024188 Andala Species 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 1
- 231100000699 Bacterial toxin Toxicity 0.000 description 1
- 229940123208 Biguanide Drugs 0.000 description 1
- XNCOSPRUTUOJCJ-UHFFFAOYSA-N Biguanide Chemical compound NC(N)=NC(N)=N XNCOSPRUTUOJCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-M Bisulfite Chemical compound OS([O-])=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102100028990 C-X-C chemokine receptor type 3 Human genes 0.000 description 1
- 102100025248 C-X-C motif chemokine 10 Human genes 0.000 description 1
- 125000001433 C-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- 101710132601 Capsid protein Proteins 0.000 description 1
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 206010007749 Cataract diabetic Diseases 0.000 description 1
- 239000004709 Chlorinated polyethylene Substances 0.000 description 1
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 1
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 1
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 1
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 1
- 241000699802 Cricetulus griseus Species 0.000 description 1
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 description 1
- PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N Cyclosporin A Chemical compound CC[C@@H]1NC(=O)[C@H]([C@H](O)[C@H](C)C\C=C\C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C1=O PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N 0.000 description 1
- 108010036949 Cyclosporine Proteins 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N D-alanine Chemical compound C[C@@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N 0.000 description 1
- 229930182847 D-glutamic acid Natural products 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-RXMQYKEDSA-N D-lysine Chemical compound NCCCC[C@@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-RXMQYKEDSA-N 0.000 description 1
- 208000016192 Demyelinating disease Diseases 0.000 description 1
- 201000004624 Dermatitis Diseases 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- 208000008960 Diabetic foot Diseases 0.000 description 1
- 206010012689 Diabetic retinopathy Diseases 0.000 description 1
- SHIBSTMRCDJXLN-UHFFFAOYSA-N Digoxigenin Natural products C1CC(C2C(C3(C)CCC(O)CC3CC2)CC2O)(O)C2(C)C1C1=CC(=O)OC1 SHIBSTMRCDJXLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N Dioxygen Chemical compound O=O MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- IMROMDMJAWUWLK-UHFFFAOYSA-N Ethenol Chemical compound OC=C IMROMDMJAWUWLK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091006020 Fc-tagged proteins Proteins 0.000 description 1
- 108010029961 Filgrastim Proteins 0.000 description 1
- 102220621888 G-protein coupled estrogen receptor 1_L18Q_mutation Human genes 0.000 description 1
- 102000001267 GSK3 Human genes 0.000 description 1
- 241000237858 Gastropoda Species 0.000 description 1
- 108010014905 Glycogen Synthase Kinase 3 Proteins 0.000 description 1
- 206010018473 Glycosuria Diseases 0.000 description 1
- 108010026389 Gramicidin Proteins 0.000 description 1
- 102100039619 Granulocyte colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 1
- 208000035895 Guillain-Barré syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010019280 Heart failures Diseases 0.000 description 1
- 101710154606 Hemagglutinin Proteins 0.000 description 1
- 241000700721 Hepatitis B virus Species 0.000 description 1
- 208000005176 Hepatitis C Diseases 0.000 description 1
- 244000043261 Hevea brasiliensis Species 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101000916050 Homo sapiens C-X-C chemokine receptor type 3 Proteins 0.000 description 1
- 101000858088 Homo sapiens C-X-C motif chemokine 10 Proteins 0.000 description 1
- 206010020710 Hyperphagia Diseases 0.000 description 1
- 108010091135 Immunoglobulin Fc Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000018071 Immunoglobulin Fc Fragments Human genes 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 229940122199 Insulin secretagogue Drugs 0.000 description 1
- QUOGESRFPZDMMT-UHFFFAOYSA-N L-Homoarginine Natural products OC(=O)C(N)CCCCNC(N)=N QUOGESRFPZDMMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZGUNAGUHMKGQNY-ZETCQYMHSA-N L-alpha-phenylglycine zwitterion Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)C1=CC=CC=C1 ZGUNAGUHMKGQNY-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- 150000008575 L-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- QUOGESRFPZDMMT-YFKPBYRVSA-N L-homoarginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCCNC(N)=N QUOGESRFPZDMMT-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- FFFHZYDWPBMWHY-VKHMYHEASA-N L-homocysteine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCS FFFHZYDWPBMWHY-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- JTTHKOPSMAVJFE-VIFPVBQESA-N L-homophenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC1=CC=CC=C1 JTTHKOPSMAVJFE-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- UKAUYVFTDYCKQA-VKHMYHEASA-N L-homoserine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCO UKAUYVFTDYCKQA-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QEFRNWWLZKMPFJ-ZXPFJRLXSA-N L-methionine (R)-S-oxide Chemical compound C[S@@](=O)CC[C@H]([NH3+])C([O-])=O QEFRNWWLZKMPFJ-ZXPFJRLXSA-N 0.000 description 1
- UCUNFLYVYCGDHP-BYPYZUCNSA-N L-methionine sulfone Chemical compound CS(=O)(=O)CC[C@H](N)C(O)=O UCUNFLYVYCGDHP-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QEFRNWWLZKMPFJ-UHFFFAOYSA-N L-methionine sulphoxide Natural products CS(=O)CCC(N)C(O)=O QEFRNWWLZKMPFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 1
- ZFOMKMMPBOQKMC-KXUCPTDWSA-N L-pyrrolysine Chemical compound C[C@@H]1CC=N[C@H]1C(=O)NCCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O ZFOMKMMPBOQKMC-KXUCPTDWSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 108090001090 Lectins Proteins 0.000 description 1
- 102000004856 Lectins Human genes 0.000 description 1
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 description 1
- 206010049567 Miller Fisher syndrome Diseases 0.000 description 1
- 229930192392 Mitomycin Natural products 0.000 description 1
- NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N Mytomycin Chemical compound C1N2C(C(C(C)=C(N)C3=O)=O)=C3[C@@H](COC(N)=O)[C@@]2(OC)[C@@H]2[C@H]1N2 NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N 0.000 description 1
- FXHOOIRPVKKKFG-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylacetamide Chemical compound CN(C)C(C)=O FXHOOIRPVKKKFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SQVRNKJHWKZAKO-PFQGKNLYSA-N N-acetyl-beta-neuraminic acid Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)O[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)CO SQVRNKJHWKZAKO-PFQGKNLYSA-N 0.000 description 1
- 208000012902 Nervous system disease Diseases 0.000 description 1
- 208000025966 Neurological disease Diseases 0.000 description 1
- 238000000636 Northern blotting Methods 0.000 description 1
- 102000011931 Nucleoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010061100 Nucleoproteins Proteins 0.000 description 1
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 1
- 230000004989 O-glycosylation Effects 0.000 description 1
- 239000005642 Oleic acid Substances 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N Oleic acid Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000031964 Other metabolic disease Diseases 0.000 description 1
- 101710093908 Outer capsid protein VP4 Proteins 0.000 description 1
- 101710135467 Outer capsid protein sigma-1 Proteins 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 229930012538 Paclitaxel Natural products 0.000 description 1
- 235000019482 Palm oil Nutrition 0.000 description 1
- 208000018737 Parkinson disease Diseases 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 229940080774 Peroxisome proliferator-activated receptor gamma agonist Drugs 0.000 description 1
- 229920012485 Plasticized Polyvinyl chloride Polymers 0.000 description 1
- 102100030655 Platelet-activating factor acetylhydrolase IB subunit beta Human genes 0.000 description 1
- 229920002732 Polyanhydride Polymers 0.000 description 1
- 239000005062 Polybutadiene Substances 0.000 description 1
- 108010020346 Polyglutamic Acid Proteins 0.000 description 1
- 229920000954 Polyglycolide Polymers 0.000 description 1
- 229920002367 Polyisobutene Polymers 0.000 description 1
- 108010039918 Polylysine Proteins 0.000 description 1
- 229920002685 Polyoxyl 35CastorOil Polymers 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 1
- HCBIBCJNVBAKAB-UHFFFAOYSA-N Procaine hydrochloride Chemical compound Cl.CCN(CC)CCOC(=O)C1=CC=C(N)C=C1 HCBIBCJNVBAKAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000007327 Protamines Human genes 0.000 description 1
- 108010007568 Protamines Proteins 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 101710176177 Protein A56 Proteins 0.000 description 1
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 1
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 1
- 208000013616 Respiratory Distress Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 229940121908 Retinoid X receptor agonist Drugs 0.000 description 1
- 208000025747 Rheumatic disease Diseases 0.000 description 1
- 108091028664 Ribonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 241000702670 Rotavirus Species 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 235000019485 Safflower oil Nutrition 0.000 description 1
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 1
- 206010049416 Short-bowel syndrome Diseases 0.000 description 1
- 108010003723 Single-Domain Antibodies Proteins 0.000 description 1
- 208000013738 Sleep Initiation and Maintenance disease Diseases 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229940123518 Sodium/glucose cotransporter 2 inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940100389 Sulfonylurea Drugs 0.000 description 1
- 108700005078 Synthetic Genes Proteins 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010043376 Tetanus Diseases 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 102000009843 Thyroglobulin Human genes 0.000 description 1
- 108010034949 Thyroglobulin Proteins 0.000 description 1
- RTAQQCXQSZGOHL-UHFFFAOYSA-N Titanium Chemical compound [Ti] RTAQQCXQSZGOHL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GYDJEQRTZSCIOI-UHFFFAOYSA-N Tranexamic acid Chemical compound NCC1CCC(C(O)=O)CC1 GYDJEQRTZSCIOI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 1
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 1
- GBOGMAARMMDZGR-UHFFFAOYSA-N UNPD149280 Natural products N1C(=O)C23OC(=O)C=CC(O)CCCC(C)CC=CC3C(O)C(=C)C(C)C2C1CC1=CC=CC=C1 GBOGMAARMMDZGR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LEHOTFFKMJEONL-UHFFFAOYSA-N Uric Acid Chemical compound N1C(=O)NC(=O)C2=C1NC(=O)N2 LEHOTFFKMJEONL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TVWHNULVHGKJHS-UHFFFAOYSA-N Uric acid Natural products N1C(=O)NC(=O)C2NC(=O)NC21 TVWHNULVHGKJHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N Vinblastine Natural products O=C(O[C@H]1[C@](O)(C(=O)OC)[C@@H]2N(C)c3c(cc(c(OC)c3)[C@]3(C(=O)OC)c4[nH]c5c(c4CCN4C[C@](O)(CC)C[C@H](C3)C4)cccc5)[C@@]32[C@H]2[C@@]1(CC)C=CCN2CC3)C JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N 0.000 description 1
- XTXRWKRVRITETP-UHFFFAOYSA-N Vinyl acetate Chemical compound CC(=O)OC=C XTXRWKRVRITETP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WERKSKAQRVDLDW-ANOHMWSOSA-N [(2s,3r,4r,5r)-2,3,4,5,6-pentahydroxyhexyl] (z)-octadec-9-enoate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO WERKSKAQRVDLDW-ANOHMWSOSA-N 0.000 description 1
- 230000003187 abdominal effect Effects 0.000 description 1
- 239000003070 absorption delaying agent Substances 0.000 description 1
- 235000011054 acetic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 description 1
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N acrylic acid group Chemical group C(C=C)(=O)O NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 239000011149 active material Substances 0.000 description 1
- 210000001789 adipocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 201000000028 adult respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 238000012867 alanine scanning Methods 0.000 description 1
- 108010062065 albumin interferon Proteins 0.000 description 1
- OFHCOWSQAMBJIW-AVJTYSNKSA-N alfacalcidol Chemical compound C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)=C\C=C1\C[C@@H](O)C[C@H](O)C1=C OFHCOWSQAMBJIW-AVJTYSNKSA-N 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 1
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000002947 alkylene group Chemical group 0.000 description 1
- 239000003888 alpha glucosidase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 150000001371 alpha-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000008206 alpha-amino acids Nutrition 0.000 description 1
- HFHDHCJBZVLPGP-RWMJIURBSA-N alpha-cyclodextrin Chemical compound OC[C@H]([C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]2O[C@@H]([C@@H](O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O3)[C@H](O)[C@H]2O)CO)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]3O[C@@H]1CO HFHDHCJBZVLPGP-RWMJIURBSA-N 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000012211 aluminium silicate Nutrition 0.000 description 1
- 230000009435 amidation Effects 0.000 description 1
- 238000007112 amidation reaction Methods 0.000 description 1
- 229960002684 aminocaproic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 208000022531 anorexia Diseases 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000000798 anti-retroviral effect Effects 0.000 description 1
- 239000003429 antifungal agent Substances 0.000 description 1
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 239000012062 aqueous buffer Substances 0.000 description 1
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 1
- 125000003710 aryl alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 1
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 1
- 229960002170 azathioprine Drugs 0.000 description 1
- LMEKQMALGUDUQG-UHFFFAOYSA-N azathioprine Chemical compound CN1C=NC([N+]([O-])=O)=C1SC1=NC=NC2=C1NC=N2 LMEKQMALGUDUQG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000688 bacterial toxin Substances 0.000 description 1
- 230000003385 bacteriostatic effect Effects 0.000 description 1
- 235000013871 bee wax Nutrition 0.000 description 1
- 239000012166 beeswax Substances 0.000 description 1
- 229960000686 benzalkonium chloride Drugs 0.000 description 1
- 229960001950 benzethonium chloride Drugs 0.000 description 1
- UREZNYTWGJKWBI-UHFFFAOYSA-M benzethonium chloride Chemical compound [Cl-].C1=CC(C(C)(C)CC(C)(C)C)=CC=C1OCCOCC[N+](C)(C)CC1=CC=CC=C1 UREZNYTWGJKWBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 125000003236 benzoyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N benzyl(dimethyl)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].C[NH+](C)CC1=CC=CC=C1 CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 description 1
- 108010064886 beta-D-galactoside alpha 2-6-sialyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 229960004853 betadex Drugs 0.000 description 1
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 1
- 229920000080 bile acid sequestrant Polymers 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000008512 biological response Effects 0.000 description 1
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 1
- 238000007413 biotinylation Methods 0.000 description 1
- 230000006287 biotinylation Effects 0.000 description 1
- JCZLABDVDPYLRZ-AWEZNQCLSA-N biphenylalanine Chemical compound C1=CC(C[C@H](N)C(O)=O)=CC=C1C1=CC=CC=C1 JCZLABDVDPYLRZ-AWEZNQCLSA-N 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- 239000004067 bulking agent Substances 0.000 description 1
- DQXBYHZEEUGOBF-UHFFFAOYSA-N but-3-enoic acid;ethene Chemical compound C=C.OC(=O)CC=C DQXBYHZEEUGOBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N butanedioic acid Chemical compound O[14C](=O)CC[14C](O)=O KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N 0.000 description 1
- 229920005549 butyl rubber Polymers 0.000 description 1
- 235000010216 calcium carbonate Nutrition 0.000 description 1
- BMLSTPRTEKLIPM-UHFFFAOYSA-I calcium;potassium;disodium;hydrogen carbonate;dichloride;dihydroxide;hydrate Chemical compound O.[OH-].[OH-].[Na+].[Na+].[Cl-].[Cl-].[K+].[Ca+2].OC([O-])=O BMLSTPRTEKLIPM-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- ZEWYCNBZMPELPF-UHFFFAOYSA-J calcium;potassium;sodium;2-hydroxypropanoic acid;sodium;tetrachloride Chemical compound [Na].[Na+].[Cl-].[Cl-].[Cl-].[Cl-].[K+].[Ca+2].CC(O)C(O)=O ZEWYCNBZMPELPF-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 1
- 230000023852 carbohydrate metabolic process Effects 0.000 description 1
- 235000021256 carbohydrate metabolism Nutrition 0.000 description 1
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 238000012219 cassette mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 239000004359 castor oil Substances 0.000 description 1
- 235000019438 castor oil Nutrition 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000005341 cation exchange Methods 0.000 description 1
- 230000022131 cell cycle Effects 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 208000026106 cerebrovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 229960000541 cetyl alcohol Drugs 0.000 description 1
- NDAYQJDHGXTBJL-MWWSRJDJSA-N chembl557217 Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C4=CC=CC=C4NC=3)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C4=CC=CC=C4NC=3)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C4=CC=CC=C4NC=3)NC(=O)[C@@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](NC(=O)CNC(=O)[C@@H](NC=O)C(C)C)CC(C)C)C(=O)NCCO)=CNC2=C1 NDAYQJDHGXTBJL-MWWSRJDJSA-N 0.000 description 1
- RUDATBOHQWOJDD-BSWAIDMHSA-N chenodeoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)CC1 RUDATBOHQWOJDD-BSWAIDMHSA-N 0.000 description 1
- 229960001091 chenodeoxycholic acid Drugs 0.000 description 1
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 1
- 108010031071 cholera toxoid Proteins 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 229960001265 ciclosporin Drugs 0.000 description 1
- 235000015165 citric acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 238000005354 coacervation Methods 0.000 description 1
- 229940110456 cocoa butter Drugs 0.000 description 1
- 235000019868 cocoa butter Nutrition 0.000 description 1
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 1
- 238000001246 colloidal dispersion Methods 0.000 description 1
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 1
- 230000009137 competitive binding Effects 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 1
- 230000001268 conjugating effect Effects 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 235000005687 corn oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000002285 corn oil Substances 0.000 description 1
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 1
- 208000029078 coronary artery disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 235000012343 cottonseed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000002385 cottonseed oil Substances 0.000 description 1
- 150000001896 cresols Chemical class 0.000 description 1
- 239000002577 cryoprotective agent Substances 0.000 description 1
- 125000004093 cyano group Chemical group *C#N 0.000 description 1
- MGNCLNQXLYJVJD-UHFFFAOYSA-N cyanuric chloride Chemical compound ClC1=NC(Cl)=NC(Cl)=N1 MGNCLNQXLYJVJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940097362 cyclodextrins Drugs 0.000 description 1
- 229930182912 cyclosporin Natural products 0.000 description 1
- GBOGMAARMMDZGR-TYHYBEHESA-N cytochalasin B Chemical compound C([C@H]1[C@@H]2[C@@H](C([C@@H](O)[C@@H]3/C=C/C[C@H](C)CCC[C@@H](O)/C=C/C(=O)O[C@@]23C(=O)N1)=C)C)C1=CC=CC=C1 GBOGMAARMMDZGR-TYHYBEHESA-N 0.000 description 1
- GBOGMAARMMDZGR-JREHFAHYSA-N cytochalasin B Natural products C[C@H]1CCC[C@@H](O)C=CC(=O)O[C@@]23[C@H](C=CC1)[C@H](O)C(=C)[C@@H](C)[C@@H]2[C@H](Cc4ccccc4)NC3=O GBOGMAARMMDZGR-JREHFAHYSA-N 0.000 description 1
- 239000002254 cytotoxic agent Substances 0.000 description 1
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 description 1
- STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N daunorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(C)=O)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N 0.000 description 1
- 230000006240 deamidation Effects 0.000 description 1
- 206010061428 decreased appetite Diseases 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000005547 deoxyribonucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000002637 deoxyribonucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 239000008355 dextrose injection Substances 0.000 description 1
- 201000007025 diabetic cataract Diseases 0.000 description 1
- 150000004985 diamines Chemical class 0.000 description 1
- 125000002576 diazepinyl group Chemical group N1N=C(C=CC=C1)* 0.000 description 1
- QONQRTHLHBTMGP-UHFFFAOYSA-N digitoxigenin Natural products CC12CCC(C3(CCC(O)CC3CC3)C)C3C11OC1CC2C1=CC(=O)OC1 QONQRTHLHBTMGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SHIBSTMRCDJXLN-KCZCNTNESA-N digoxigenin Chemical compound C1([C@@H]2[C@@]3([C@@](CC2)(O)[C@H]2[C@@H]([C@@]4(C)CC[C@H](O)C[C@H]4CC2)C[C@H]3O)C)=CC(=O)OC1 SHIBSTMRCDJXLN-KCZCNTNESA-N 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 235000013870 dimethyl polysiloxane Nutrition 0.000 description 1
- 206010013023 diphtheria Diseases 0.000 description 1
- 229960003983 diphtheria toxoid Drugs 0.000 description 1
- 208000016097 disease of metabolism Diseases 0.000 description 1
- 239000002612 dispersion medium Substances 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 229960004679 doxorubicin Drugs 0.000 description 1
- 238000009509 drug development Methods 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000003028 elevating effect Effects 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007515 enzymatic degradation Effects 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 229920005558 epichlorohydrin rubber Polymers 0.000 description 1
- 229940015979 epipen Drugs 0.000 description 1
- 201000000421 erythematosquamous dermatosis Diseases 0.000 description 1
- HQQADJVZYDDRJT-UHFFFAOYSA-N ethene;prop-1-ene Chemical group C=C.CC=C HQQADJVZYDDRJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N ethenylcyclopentane Chemical compound C=CC1CCCC1 BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005038 ethylene vinyl acetate Substances 0.000 description 1
- VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N etoposide Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@H](C)OC[C@H]4O3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N 0.000 description 1
- 229960005420 etoposide Drugs 0.000 description 1
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 231100000040 eye damage Toxicity 0.000 description 1
- 229940121360 farnesoid X receptor (fxr) agonists Drugs 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 229960004177 filgrastim Drugs 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 235000021323 fish oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 1
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 238000001215 fluorescent labelling Methods 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 1
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 1
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000001408 fungistatic effect Effects 0.000 description 1
- 229960003692 gamma aminobutyric acid Drugs 0.000 description 1
- 108010044804 gamma-glutamyl-seryl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 239000003862 glucocorticoid Substances 0.000 description 1
- 230000014101 glucose homeostasis Effects 0.000 description 1
- 238000007446 glucose tolerance test Methods 0.000 description 1
- 230000035780 glucosuria Effects 0.000 description 1
- 125000000291 glutamic acid group Chemical group N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)* 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000404 glutamine group Chemical group N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)* 0.000 description 1
- 108700026078 glutathione trisulfide Proteins 0.000 description 1
- 230000002641 glycemic effect Effects 0.000 description 1
- ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N glycerol triricinoleate Natural products CCCCCC[C@@H](O)CC=CCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](COC(=O)CCCCCCCC=CC[C@@H](O)CCCCCC)OC(=O)CCCCCCCC=CC[C@H](O)CCCCCC ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N 0.000 description 1
- 229940074045 glyceryl distearate Drugs 0.000 description 1
- 229940075529 glyceryl stearate Drugs 0.000 description 1
- 102000035122 glycosylated proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091005608 glycosylated proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 description 1
- 239000007902 hard capsule Substances 0.000 description 1
- 239000000185 hemagglutinin Substances 0.000 description 1
- 108060003552 hemocyanin Proteins 0.000 description 1
- 230000002440 hepatic effect Effects 0.000 description 1
- 125000000268 heptanoyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-UHFFFAOYSA-N hexane-1,2,3,4,5,6-hexol Chemical compound OCC(O)C(O)C(O)C(O)CO FBPFZTCFMRRESA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003104 hexanoyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000487 histidyl group Chemical group [H]N([H])C(C(=O)O*)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C([H])=N1 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 239000003906 humectant Substances 0.000 description 1
- 239000008173 hydrogenated soybean oil Substances 0.000 description 1
- 239000008172 hydrogenated vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 229920001477 hydrophilic polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 125000001165 hydrophobic group Chemical group 0.000 description 1
- WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N hydroxyacetaldehyde Natural products OCC=O WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000033444 hydroxylation Effects 0.000 description 1
- 238000005805 hydroxylation reaction Methods 0.000 description 1
- 229920003063 hydroxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 229940031574 hydroxymethyl cellulose Drugs 0.000 description 1
- 210000003016 hypothalamus Anatomy 0.000 description 1
- 150000002463 imidates Chemical class 0.000 description 1
- 239000002955 immunomodulating agent Substances 0.000 description 1
- 229940121354 immunomodulator Drugs 0.000 description 1
- 230000002584 immunomodulator Effects 0.000 description 1
- 229940051026 immunotoxin Drugs 0.000 description 1
- 230000002637 immunotoxin Effects 0.000 description 1
- 239000002596 immunotoxin Substances 0.000 description 1
- 231100000608 immunotoxin Toxicity 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- CGIGDMFJXJATDK-UHFFFAOYSA-N indomethacin Chemical group CC1=C(CC(O)=O)C2=CC(OC)=CC=C2N1C(=O)C1=CC=C(Cl)C=C1 CGIGDMFJXJATDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011261 inert gas Substances 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 229940102223 injectable solution Drugs 0.000 description 1
- 229940102213 injectable suspension Drugs 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 206010022437 insomnia Diseases 0.000 description 1
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 1
- 238000007913 intrathecal administration Methods 0.000 description 1
- 238000007915 intraurethral administration Methods 0.000 description 1
- 238000007914 intraventricular administration Methods 0.000 description 1
- QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N isooleic acid Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCCC(O)=O QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N kaolin Chemical compound O.O.O=[Al]O[Si](=O)O[Si](=O)O[Al]=O NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 208000017169 kidney disease Diseases 0.000 description 1
- 150000003951 lactams Chemical class 0.000 description 1
- 150000002596 lactones Chemical class 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 1
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 1
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 1
- 239000002523 lectin Substances 0.000 description 1
- 206010024627 liposarcoma Diseases 0.000 description 1
- 239000008297 liquid dosage form Substances 0.000 description 1
- 238000012317 liver biopsy Methods 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000007937 lozenge Substances 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 210000002751 lymph Anatomy 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000013507 mapping Methods 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 229950004994 meglitinide Drugs 0.000 description 1
- 239000001525 mentha piperita l. herb oil Substances 0.000 description 1
- QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N mercury Chemical compound [Hg] QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052753 mercury Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 125000005397 methacrylic acid ester group Chemical group 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 125000001360 methionine group Chemical group N[C@@H](CCSC)C(=O)* 0.000 description 1
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 1
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 1
- 230000011987 methylation Effects 0.000 description 1
- 238000007069 methylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 description 1
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 description 1
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229960004857 mitomycin Drugs 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 239000003068 molecular probe Substances 0.000 description 1
- ODLHGICHYURWBS-FOSILIAISA-N molport-023-220-444 Chemical compound CC(O)COC[C@@H]([C@@H]([C@H]([C@@H]1O)O)O[C@@H]2O[C@H]([C@H](O[C@@H]3O[C@@H](COCC(C)O)[C@@H]([C@H]([C@@H]3O)O)O[C@@H]3O[C@@H](COCC(C)O)[C@@H]([C@H]([C@@H]3O)O)O[C@@H]3O[C@@H](COCC(C)O)[C@@H]([C@H]([C@@H]3O)O)O[C@@H]3O[C@@H](COCC(C)O)[C@@H]([C@H]([C@@H]3O)O)O3)[C@@H](O)[C@@H]2O)COCC(O)C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]3O[C@H]1COCC(C)O ODLHGICHYURWBS-FOSILIAISA-N 0.000 description 1
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 1
- 239000002088 nanocapsule Substances 0.000 description 1
- 239000002071 nanotube Substances 0.000 description 1
- 229920003052 natural elastomer Polymers 0.000 description 1
- 229920001206 natural gum Polymers 0.000 description 1
- 229920001194 natural rubber Polymers 0.000 description 1
- 108010068617 neonatal Fc receptor Proteins 0.000 description 1
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 description 1
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 description 1
- 230000003959 neuroinflammation Effects 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 1
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 description 1
- 230000000422 nocturnal effect Effects 0.000 description 1
- 231100000344 non-irritating Toxicity 0.000 description 1
- 230000009871 nonspecific binding Effects 0.000 description 1
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 1
- GYCKQBWUSACYIF-UHFFFAOYSA-N o-hydroxybenzoic acid ethyl ester Natural products CCOC(=O)C1=CC=CC=C1O GYCKQBWUSACYIF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007764 o/w emulsion Substances 0.000 description 1
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 1
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 description 1
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 1
- QUANRIQJNFHVEU-UHFFFAOYSA-N oxirane;propane-1,2,3-triol Chemical compound C1CO1.OCC(O)CO QUANRIQJNFHVEU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 238000001139 pH measurement Methods 0.000 description 1
- 229960001592 paclitaxel Drugs 0.000 description 1
- 239000002540 palm oil Substances 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 235000019477 peppermint oil Nutrition 0.000 description 1
- LQRJAEQXMSMEDP-XCHBZYMASA-N peptide a Chemical group N([C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCCCC[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)C(\NC(=O)[C@@H](CCCCN)NC(=O)CNC(C)=O)=C/C=1C=CC=CC=1)C(N)=O)C(=O)C(\NC(=O)[C@@H](CCCCN)NC(=O)CNC(C)=O)=C\C1=CC=CC=C1 LQRJAEQXMSMEDP-XCHBZYMASA-N 0.000 description 1
- 210000001428 peripheral nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 208000027232 peripheral nervous system disease Diseases 0.000 description 1
- 208000033808 peripheral neuropathy Diseases 0.000 description 1
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- 229960003742 phenol Drugs 0.000 description 1
- 150000002989 phenols Chemical class 0.000 description 1
- UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N phenylmethyl ester of formic acid Natural products O=COCC1=CC=CC=C1 UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 235000011007 phosphoric acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- IWELDVXSEVIIGI-UHFFFAOYSA-N piperazin-2-one Chemical group O=C1CNCCN1 IWELDVXSEVIIGI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004193 piperazinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229920001490 poly(butyl methacrylate) polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920001084 poly(chloroprene) Polymers 0.000 description 1
- 229920000435 poly(dimethylsiloxane) Polymers 0.000 description 1
- 229920002857 polybutadiene Polymers 0.000 description 1
- 229920000728 polyester Polymers 0.000 description 1
- 239000008389 polyethoxylated castor oil Substances 0.000 description 1
- 229940068886 polyethylene glycol 300 Drugs 0.000 description 1
- 229940068918 polyethylene glycol 400 Drugs 0.000 description 1
- 229920002643 polyglutamic acid Polymers 0.000 description 1
- 239000004633 polyglycolic acid Substances 0.000 description 1
- 229920001195 polyisoprene Polymers 0.000 description 1
- 229920000656 polylysine Polymers 0.000 description 1
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 description 1
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 description 1
- 208000022530 polyphagia Diseases 0.000 description 1
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 150000004804 polysaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 239000013615 primer Substances 0.000 description 1
- 239000002987 primer (paints) Substances 0.000 description 1
- 229960001309 procaine hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 description 1
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 1
- 208000037821 progressive disease Diseases 0.000 description 1
- 206010036807 progressive multifocal leukoencephalopathy Diseases 0.000 description 1
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- QQONPFPTGQHPMA-UHFFFAOYSA-N propylene Natural products CC=C QQONPFPTGQHPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004805 propylene group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([*:1])C([H])([H])[*:2] 0.000 description 1
- 229950008679 protamine sulfate Drugs 0.000 description 1
- 238000001742 protein purification Methods 0.000 description 1
- 239000003801 protein tyrosine phosphatase 1B inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000003331 prothrombotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 1
- 238000002708 random mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 239000008175 ready-to-use sterile solution Substances 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 210000000664 rectum Anatomy 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 239000002336 ribonucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000002652 ribonucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 102220316816 rs777965976 Human genes 0.000 description 1
- 235000005713 safflower oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000003813 safflower oil Substances 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 238000010845 search algorithm Methods 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 125000003607 serino group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C(O[H])([H])[H] 0.000 description 1
- 229920002379 silicone rubber Polymers 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 235000010413 sodium alginate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000661 sodium alginate Substances 0.000 description 1
- 229940005550 sodium alginate Drugs 0.000 description 1
- WBHQBSYUUJJSRZ-UHFFFAOYSA-M sodium bisulfate Chemical compound [Na+].OS([O-])(=O)=O WBHQBSYUUJJSRZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229910000342 sodium bisulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910001467 sodium calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000008354 sodium chloride injection Substances 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- HRZFUMHJMZEROT-UHFFFAOYSA-L sodium disulfite Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S(=O)S([O-])(=O)=O HRZFUMHJMZEROT-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940001584 sodium metabisulfite Drugs 0.000 description 1
- 235000010262 sodium metabisulphite Nutrition 0.000 description 1
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229940121377 sodium-glucose co-transporter inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 239000007901 soft capsule Substances 0.000 description 1
- 239000007909 solid dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002195 soluble material Substances 0.000 description 1
- 235000010199 sorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004334 sorbic acid Substances 0.000 description 1
- 229940075582 sorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 1
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008347 soybean phospholipid Substances 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 1
- 239000008227 sterile water for injection Substances 0.000 description 1
- 230000004960 subcellular localization Effects 0.000 description 1
- 239000001384 succinic acid Substances 0.000 description 1
- YROXIXLRRCOBKF-UHFFFAOYSA-N sulfonylurea Chemical class OC(=N)N=S(=O)=O YROXIXLRRCOBKF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 238000007910 systemic administration Methods 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 235000012222 talc Nutrition 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N taxol Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(C[C@@H](C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3([C@H]21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N 0.000 description 1
- NRUKOCRGYNPUPR-QBPJDGROSA-N teniposide Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@@H](OC[C@H]4O3)C=3SC=CC=3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 NRUKOCRGYNPUPR-QBPJDGROSA-N 0.000 description 1
- 229960001278 teniposide Drugs 0.000 description 1
- 229920001897 terpolymer Polymers 0.000 description 1
- 229960000814 tetanus toxoid Drugs 0.000 description 1
- 150000003568 thioethers Chemical class 0.000 description 1
- 230000009974 thixotropic effect Effects 0.000 description 1
- 201000005665 thrombophilia Diseases 0.000 description 1
- 229960002175 thyroglobulin Drugs 0.000 description 1
- 239000010936 titanium Substances 0.000 description 1
- 229910052719 titanium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
- 230000008733 trauma Effects 0.000 description 1
- 229940117013 triethanolamine oleate Drugs 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229920011532 unplasticized polyvinyl chloride Polymers 0.000 description 1
- 229940116269 uric acid Drugs 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 229960003048 vinblastine Drugs 0.000 description 1
- JXLYSJRDGCGARV-XQKSVPLYSA-N vincaleukoblastine Chemical compound C([C@@H](C[C@]1(C(=O)OC)C=2C(=CC3=C([C@]45[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]6(CC)C=CCN([C@H]56)CC4)(O)C(=O)OC)N3C)C=2)OC)C[C@@](C2)(O)CC)N2CCC2=C1NC1=CC=CC=C21 JXLYSJRDGCGARV-XQKSVPLYSA-N 0.000 description 1
- OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N vincristine Chemical compound C([N@]1C[C@@H](C[C@]2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C([C@]56[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]7(CC)C=CCN([C@H]67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)C[C@@](C1)(O)CC)CC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N 0.000 description 1
- 229960004528 vincristine Drugs 0.000 description 1
- OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N vincristine Natural products C1C(CC)(O)CC(CC2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C(C56C(C(C(OC(C)=O)C7(CC)C=CCN(C67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)CN1CCC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001993 wax Substances 0.000 description 1
- 230000003313 weakening effect Effects 0.000 description 1
- 230000036642 wellbeing Effects 0.000 description 1
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 description 1
- 229940126158 β3 adrenergic receptor agonist Drugs 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/18—Growth factors; Growth regulators
- A61K38/1825—Fibroblast growth factor [FGF]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
- A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/08—Solutions
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/12—Antidiarrhoeals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/14—Prodigestives, e.g. acids, enzymes, appetite stimulants, antidyspeptics, tonics, antiflatulents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/18—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for pancreatic disorders, e.g. pancreatic enzymes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/02—Nutrients, e.g. vitamins, minerals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/06—Antihyperlipidemics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/475—Growth factors; Growth regulators
- C07K14/50—Fibroblast growth factor [FGF]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
- A61K9/19—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles lyophilised, i.e. freeze-dried, solutions or dispersions
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Obesity (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Child & Adolescent Psychology (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Reproductive Health (AREA)
- Cardiology (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области биохимии, в частности к фармацевтической композиции для контроля или лечения заболевания или нарушения, ассоциированного с FGF19. Также раскрыты способ предотвращения, лечения или контроля заболевания или нарушения, ассоциированного с FGF19, а также применение указанной фармацевтической композиции. Изобретение позволяет эффективно лечить заболевания, ассоциированные с FGF19. 6 н. и 112 з.п. ф-лы, 13 ил., 1 табл., 1 пр.
Description
ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА НА РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ
По данной заявке испрашивается приоритет на основании патентной заявки США с серийным № 62/067824, поданной 23 октября 2014 г., полное содержание которой включено в настоящий документ посредством ссылки.
1. ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ
Настоящее изобретение относится к фармацевтическим композициям, препаратам и лекарственным формам, содержащим варианты белковых и пептидных последовательностей (и пептидомиметиков) фактора роста фибробластов 19 (FGF19), а также продукты слияния FGF19, и/или варианты белковых и пептидных последовательностей (и пептидомиметиков) фактора роста фибробластов 21 (FGF21), а также варианты продуктов слияния белковых и пептидных последовательностей (и пептидомиметиков) FGF19 и/или FGF21. Настоящее изобретение также относится к способам применения фармацевтических композиций, препаратов и лекарственных форм.
2. ПРЕДПОСЫЛКИ СОЗДАНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Лекарственные субстанции, как правило, вводят в составе препарата в сочетании с одним или более другими средствами, которые выполняют различные и специализированные фармацевтические функции. Лекарственные формы разных видов могут быть получены за счет избирательного использования фармацевтических эксципиентов. Поскольку фармацевтические эксципиенты имеют разные функции, они вносят свой вклад в фармацевтические препараты множеством различных способов, например, в качестве солюбилизирующих средств, растворителей, загустителей, стабилизаторов, консервантов, красителей, ароматизаторов и так далее. Свойства, обычно учитываемые при формулировании активной лекарственной субстанции, включают биодоступность, простоту изготовления, легкость введения и стабильность лекарственной формы. Вследствие различных свойств формулируемых активных лекарственных субстанций, для достижения предпочтительных физических и фармацевтических свойств лекарственным формам, как правило, требуются фармацевтические эксципиенты, которые специально подобраны для конкретной лекарственной субстанции.
В настоящем документе предложены препараты и лекарственные формы, содержащие варианты белковых и пептидных последовательностей (и пептидомиметиков) фактора роста фибробластов 19 (FGF19), а также продуктов слияния FGF19, и/или варианты белковых и пептидных последовательностей (и пептидомиметиков) фактора роста фибробластов 21 (FGF21), а также варианты продуктов слияния белковых и пептидных последовательностей (и пептидомиметиков) FGF19 и/или FGF21. Такие белковые и пептидные последовательности полезны для лечения, предотвращения и/или контроля различных заболеваний или нарушений, включая, но не ограничиваясь ими, связанные с гомеостазом желчных кислот или сопутствующие заболевания, гипергликемические состояния, устойчивость к инсулину, гиперинсулинемию, непереносимость глюкозы, метаболический синдром и метаболические заболевания, а также некоторые формы рака. Таким образом, существует потребность в фармацевтических композициях и лекарственных формах таких белковых и пептидных последовательностей, имеющих благоприятные физические и фармацевтические свойства. Настоящее изобретение удовлетворяет эту потребность и предоставляет соответствующие преимущества.
3. СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
В одном аспекте настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей пептид или пептидную последовательность и фармацевтически приемлемый носитель. В конкретных вариантах осуществления фармацевтически приемлемый носитель включает Tris, трегалозу или полисорбат-20 (TWEEN-20), или любое их сочетание.
В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит пептид, выбранный из группы, состоящей из вариантов пептидных последовательностей FGF19, продуктов слияния пептидных последовательностей FGF19 и/или FGF21, а также вариантов продуктов слияния (химер) пептидных последовательностей FGF19 и/или FGF21, имеющий одну или более активностей, например, модулирующую гомеостаз желчных кислот активность. Такие варианты и продукты слияния (химеры) пептидных последовательностей FGF19 и/или FGF21 включают последовательности, которые используют для лечения связанного с гомеостазом желчных кислот или сопутствующего заболевания. Такие варианты и продукты слияния (химеры) пептидных последовательностей FGF19 и/или FGF21 также включают последовательности, которые существенно или значительно не увеличивают или не индуцируют образование печеночно-клеточной карциномы (HCC) или онкогенез HCC. Такие варианты и продукты слияния (химеры) пептидных последовательностей FGF19 и/или FGF21 также включают последовательности, которые не вызывают существенного повышения или возрастания липидного профиля.
В одном варианте осуществления пептид представляет собой химерный пептид, включающий: a) N-концевую область, содержащую по меньшей мере семь аминокислотных остатков, N-концевую область, имеющую первое аминокислотное положение и последнее аминокислотное положение, при этом N-концевая область содержит последовательность DSSPL (SEQ ID NO: 121) или DASPH (SEQ ID NO: 122); и b) C-концевую область, содержащую часть SEQ ID NO: 99 (FGF19), C-концевую область, имеющую первое аминокислотное положение и последнее аминокислотное положение, при этом C-концевая область содержит аминокислотные остатки 16-29 из SEQ ID NO: 99 (FGF19) (WGDPIRLRHLYTSG; SEQ ID NO: 169), причем остаток W соответствует первому аминокислотному положению в C-концевой области, для модулирования гомеостаза желчных кислот или лечения связанного с гомеостазом желчных кислот или сопутствующего заболевания.
В другом варианте осуществления пептид представляет собой химерный пептид, включающий: a) N-концевую область, содержащую часть SEQ ID NO: 100 (FGF21), N-концевую область, имеющую первое аминокислотное положение и последнее аминокислотное положение, при этом N-концевая область содержит аминокислотные остатки GQV, причем остаток V соответствует последнему аминокислотному положению в N-концевой области; и b) C-концевую область, содержащую часть SEQ ID NO: 99 (FGF19), C-концевую область, имеющую первое аминокислотное положение и последнее аминокислотное положение, при этом C-концевая область содержит аминокислотные остатки 21-29 из SEQ ID NO: 99 (FGF19), RLRHLYTSG (SEQ ID NO: 185), причем остаток R соответствует первому положению в C-концевой области, для модулирования гомеостаза желчных кислот или лечения связанного с гомеостазом желчных кислот или сопутствующего заболевания.
В следующем варианте осуществления пептид представляет собой химерный пептид, включающий: a) N-концевую область, содержащую часть SEQ ID NO: 100 (FGF21), N-концевую область, имеющую первое аминокислотное положение и последнее аминокислотное положение, при этом N-концевая область содержит по меньшей мере 5 смежных аминокислот из SEQ ID NO: 100 (FGF21), включая аминокислотные остатки GQV, причем остаток V соответствует последнему аминокислотному положению в N-концевой области; и b) C-концевую область, содержащую часть SEQ ID NO: 99 (FGF19), C-концевую область, имеющую первое аминокислотное положение и последнее аминокислотное положение, при этом C-концевая область содержит аминокислотные остатки 21-29 из SEQ ID NO: 99 (FGF19), RLRHLYTSG (SEQ ID NO: 185), причем остаток R соответствует первому положению в C-концевой области, для модулирования гомеостаза желчных кислот или лечения связанного с гомеостазом желчных кислот или сопутствующего заболевания.
В дополнительном варианте осуществления пептид содержит или состоит из любого из: a) варианта последовательности FGF19, имеющего одну или более аминокислотных замен, вставок или делеций в сравнении с эталонным, или дикого типа, FGF19; b) варианта последовательности FGF21, имеющего одну или более аминокислотных замен, вставок или делеций в сравнении с эталонным, или дикого типа, FGF21; c) части последовательности FGF19, слитой с частью последовательности FGF21; или d) части последовательности FGF19, слитой с частью последовательности FGF21, причем часть(и) последовательностей FGF19 и/или FGF21 имеют одну или более аминокислотных замен, вставок или делеций в сравнении с эталонными, или дикого типа, FGF19 и/или FGF21, для модулирования гомеостаза желчных кислот или лечения связанного с гомеостазом желчных кислот или сопутствующего заболевания.
В различных конкретных вариантах осуществления химерная пептидная последовательность имеет N-концевую область с по меньшей мере 6 смежными аминокислотами из SEQ ID NO: 100 (FGF21), включая аминокислотные остатки GQ; или имеет N-концевую область с по меньшей мере 7 смежными аминокислотами из SEQ ID NO: 100 (FGF21), включая аминокислотные остатки GQV.
В некоторых вариантах осуществления пептид включает i) вариант последовательности FGF19, имеющий одну или более аминокислотных замен, вставок или делеций в сравнении с эталонным, или дикого типа, FGF19; ii) вариант последовательности FGF21, имеющий одну или более аминокислотных замен, вставок или делеций в сравнении с эталонным, или дикого типа, FGF21; iii) часть последовательности FGF19, слитую с частью последовательности FGF21; или iv) часть последовательности FGF19, слитую с частью последовательности FGF21, причем часть(и) последовательностей FGF19 и/или FGF21 имеют одну или более аминокислотных замен, вставок или делеций в сравнении с эталонными, или дикого типа, FGF19 и/или FGF21.
В различных дополнительных вариантах осуществления пептидная последовательность имеет амино-концевые аминокислоты 1-16 из SEQ ID NO: 100 (FGF21), слитые с карбокси-концевыми аминокислотами 21-194 из SEQ ID NO: 99 (FGF19), или пептидная последовательность имеет амино-концевые аминокислоты 1-147 из SEQ ID NO: 99 (FGF19), слитые с карбокси-концевыми аминокислотами 147-181 из SEQ ID NO: 100 (FGF21) (M41), или пептидная последовательность имеет амино-концевые аминокислоты 1-20 из SEQ ID NO: 99 (FGF19), слитые с карбокси-концевыми аминокислотами 17-181 из SEQ ID NO: 100 (FGF21) (M44), или пептидная последовательность имеет амино-концевые аминокислоты 1-146 из SEQ ID NO: 100 (FGF21), слитые с карбокси-концевыми аминокислотами 148-194 из SEQ ID NO: 99 (FGF19) (M45), или пептидная последовательность имеет амино-концевые аминокислоты 1-20 из SEQ ID NO: 99 (FGF19), слитые с внутренними аминокислотами 17-146 из SEQ ID NO: 100 (FGF21) или слитые с карбокси-концевыми аминокислотами 148-194 из SEQ ID NO: 99 (FGF19) (M46).
В различных дополнительных вариантах осуществления пептидная последовательность имеет по меньшей мере одну аминокислотную замену в аминокислотных остатках 125-129 из SEQ ID NO: 99 (FGF19), EIRPD; по меньшей мере одну аминокислотную замену в аминокислотных остатках 126-128 из SEQ ID NO: 99 (FGF19), IRP; или по меньшей мере одну аминокислотную замену в аминокислотных остатках 127-128 из SEQ ID NO: 99 (FGF19), RP, или по меньшей мере одну аминокислотную замену в аминокислотных остатках 1-124 из SEQ ID NO: 99 (FGF19) и/или в аминокислотных остатках 130-194 из SEQ ID NO: 99 (FGF19). Более конкретно, например, пептидная последовательность, имеющая замену в одном из аминокислотных остатков 127-128 из SEQ ID NO: 99 (FGF19), IRP, при этом по меньшей мере одна аминокислотная замена представляет собой R127L или P128E.
Способы и варианты применения, предложенные в настоящем документе, можно осуществлять на практике с использованием любой фармацевтической композиции, содержащей пептидную или химерную последовательность, приведенную в настоящем документе. Например, последовательность, которая содержит или состоит из любой пептидной последовательности, приведенной в настоящем документе в виде M1-M98, M101-M160 или M200-M207, или SEQ ID NOs: 1-98 или 101-135, или 138-212. В других вариантах осуществления пептидная последовательность содержит или состоит из любой последовательности, приведенной в таблице 1. В других вариантах осуществления пептидная последовательность содержит или состоит из любой последовательности, приведенной в списке последовательностей настоящего документа. В конкретных вариантах осуществления аминокислотная последовательность пептида имеет по меньшей мере одну аминокислотную замену в области петли-8 из FGF19, или соответствующей ей последовательности FGF19 в варианте пептида, предложенном в настоящем документе. В конкретных вариантах осуществления аминокислотная последовательность пептида имеет одну аминокислотную замену в аминокислотной последовательности EIRPD (аминокислоты 2-6 в SEQ ID NO: 190) в области петли-8 из FGF19. В некоторых вариантах осуществления аминокислотная последовательность пептида имеет две аминокислотные замены в аминокислотной последовательности EIRPD (аминокислоты 2-6 в SEQ ID NO: 190) в области петли-8 из FGF19. В других вариантах осуществления аминокислотная последовательность пептида имеет три аминокислотные замены в аминокислотной последовательности EIRPD (аминокислоты 2-6 в SEQ ID NO: 190) в области петли-8 из FGF19. В конкретных вариантах осуществления аминокислотная последовательность пептида имеет четыре аминокислотные замены в аминокислотной последовательности EIRPD (аминокислоты 2-6 в SEQ ID NO: 190) в области петли-8 из FGF19. В некоторых вариантах осуществления аминокислотная последовательность пептида имеет пять аминокислотных замен в аминокислотной последовательности EIRPD (аминокислоты 2-6 в SEQ ID NO: 190) в области петли-8 из FGF19. В конкретных вариантах осуществления аминокислотная последовательность пептида имеет одну аминокислотную замену в аминокислотной последовательности IRP (аминокислоты 3-5 в SEQ ID NO: 190) в области петли-8 из FGF19. В некоторых вариантах осуществления аминокислотная последовательность пептида имеет две аминокислотные замены в аминокислотной последовательности IRP (аминокислоты 3-5 в SEQ ID NO: 190) в области петли-8 из FGF19. В других вариантах осуществления аминокислотная последовательность пептида имеет три аминокислотные замены в аминокислотной последовательности IRP (аминокислоты 3-5 в SEQ ID NO: 190) в области петли-8 из FGF19. В конкретных вариантах осуществления аминокислотная последовательность пептида имеет одну аминокислотную замену в аминокислотной последовательности RP (аминокислоты 4-5 в SEQ ID NO: 190) в области петли-8 из FGF19. В некоторых вариантах осуществления аминокислотная последовательность пептида имеет две аминокислотные замены в аминокислотной последовательности RP (аминокислоты 4-5 в SEQ ID NO: 190) в области петли-8 из FGF19. В конкретных вариантах осуществления аминокислотная замена в аминокислотной последовательности RP (аминокислоты 4-5 в SEQ ID NO: 190) в области петли-8 из FGF19 представляет собой замену Arg (R) на Leu (L). В других вариантах осуществления замена в аминокислотной последовательности RP (аминокислоты 4-5 в SEQ ID NO: 190) в области петли-8 из FGF19 представляет собой замену Pro (P) на Glu (E). В некоторых вариантах осуществления замена в аминокислотной последовательности RP (аминокислоты 4-5 в SEQ ID NO: 190) в области петли-8 из FGF19 представляет собой замену Arg (R) на Leu (L) и замену Pro (P) на Glu (E). В конкретных вариантах осуществления вышеуказанная замена(ы) в области петли-8 из FGF19 находится в соответствующей ей последовательности FGF19 в варианте пептиде, предложенном в настоящем документе. То есть, указанные замены в составе соответствующей последовательности FGF19 (например, EIRPD, IRP или RP) вариантного пептида, предложенного в настоящем документе, также подразумеваются.
Способы и варианты применения, предложенные в настоящем документе, можно осуществлять на практике с использованием фармацевтической композиции, содержащей пептидную или химерную последовательность любой подходящей длины. В конкретных вариантах осуществления N-концевая или C-концевая область пептидной или химерной последовательности имеет длину от примерно 20 до примерно 200 аминокислотных остатков. В других конкретных аспектах пептидная или химерная последовательность имеет 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 или более аминокислотных делеций с амино-конца, карбокси-конца или внутри последовательности. В других конкретных вариантах осуществления пептидная или химерная последовательность имеет N-концевую область или C-концевую область, которая содержит или состоит из аминокислотной последовательности из примерно 5-10, 10-20, 20-30, 30-40, 40-50, 50-60, 60-70, 70-80, 80-90, 90-100 или более аминокислот. В дополнительных более конкретных вариантах осуществления пептидная или химерная последовательность имеет часть последовательности FGF19 или часть последовательности FGF21, которая содержит или состоит из аминокислотной последовательности из примерно 5-10, 10-20, 20-30, 30-40, 40-50, 50-60, 60-70, 70-80, 80-90, 90-100 или более аминокислот из FGF19 или FGF21.
В других дополнительных вариантах осуществления пептидная последовательность или химерная пептидная последовательность имеет фрагмент последовательности WGDPI (SEQ ID NO: 170), соответствующий последовательности WGDPI (SEQ ID NO: 170) из аминокислот 16-20 в SEQ ID NO: 99 (FGF19); имеет содержащий замены, мутантный или отсутствующий фрагмент последовательности WGDPI (SEQ ID NO: 170), соответствующий последовательности WGDPI (SEQ ID NO: 170) в FGF19 из аминокислот 16-20 в FGF19; имеет последовательность WGDPI (SEQ ID NO: 170) с одной или более аминокислотными заменами, мутантную или отсутствующую. В различных других аспектах пептидная последовательность отличается от вариантной последовательности FGF19, имеющей любую из последовательностей GQV, GDI, WGPI (SEQ ID NO: 171), WGDPV (SEQ ID NO: 172), WGDI (SEQ ID NO: 173), GDPI (SEQ ID NO: 174), GPI, WGQPI (SEQ ID NO: 175), WGAPI (SEQ ID NO: 176), AGDPI (SEQ ID NO: 177), WADPI (SEQ ID NO: 178), WGDAI (SEQ ID NO: 179), WGDPA (SEQ ID NO: 180), WDPI (SEQ ID NO: 181), WGDI (SEQ ID NO: 182), WGDP (SEQ ID NO: 183) или FGDPI (SEQ ID NO: 184) вместо последовательности WGDPI (SEQ ID NO: 170) из FGF19 на участке аминокислот 16-20.
В других вариантах осуществления пептидная последовательность или химерная пептидная последовательность имеет N-концевую область, содержащую аминокислотные остатки VHYG (SEQ ID NO: 101), при этом N-концевая область содержит аминокислотные остатки DASPHVHYG (SEQ ID NO: 102) или N-концевая область содержит аминокислотные остатки DSSPLVHYG (SEQ ID NO: 103). Более конкретно, в одном аспекте G соответствует последнему положению в N-концевой области.
В различных дополнительных аспектах N-концевая область содержит аминокислотные остатки DSSPLLQ (SEQ ID NO: 104), где остаток Q соответствует последнему аминокислотному положению в N-концевой области, или содержит аминокислотные остатки DSSPLLQFGGQV (SEQ ID NO: 105), где остаток V соответствует последнему положению в N-концевой области.
В конкретных вариантах осуществления N-концевая область содержит или состоит из (или дополнительно содержит или состоит из): RHPIP (SEQ ID NO: 106), где R соответствует первому аминокислотному положению в N-концевой области; или HPIP (SEQ ID NO: 107), где H соответствует первому аминокислотному положению в N-концевой области; или RPLAF (SEQ ID NO: 108), где R соответствует первому аминокислотному положению в N-концевой области; или PLAF (SEQ ID NO: 109), где P соответствует первому аминокислотному положению в N-концевой области; или R, где R соответствует первому аминокислотному положению в N-концевой области.
В различных других аспектах пептидная или химерная последовательность имеет: аминокислотные остатки HPIP (SEQ ID NO: 107), которые представляют собой первые 4 аминокислотных остатка в N-концевой области. В различных других аспектах пептидная или химерная последовательность имеет: остаток R, занимающий первое положение в N-концевой области, или первое положение в N-концевой области занимает остаток M, или первое и второе положения в N-концевой области занимает последовательность MR, или первое и второе положения в N-концевой области занимает последовательность RM, или первое и второе положения в N-концевой области занимает последовательность RD, или первое и второе положения в N-концевой области занимает последовательность DS, или первое и второе положения в N-концевой области занимает последовательность MD, или первое и второе положения в N-концевой области занимает последовательность MS, или с первого по третье положения в N-концевой области занимает последовательность MDS, или с первого по третье положения в N-концевой области занимает последовательность RDS, или с первого по третье положения в N-концевой области занимает последовательность MSD, или с первого по третье положения в N-концевой области занимает последовательность MSS, или с первого по третье положения в N-концевой области занимает последовательность DSS, или с первого по четвертое положения в N-концевой области занимает последовательность RDSS (SEQ ID NO: 115), или с первого по четвертое положения в N-концевой области занимает последовательность MDSS (SEQ ID NO: 116), или с первого по пятое положения в N-концевой области занимает последовательность MRDSS (SEQ ID NO: 117), или с первого по пятое положения в N-концевой области занимает последовательность MSSPL (SEQ ID NO: 113), или с первого по шестое положения в N-концевой области занимает последовательность MDSSPL (SEQ ID NO: 110), или с первого по седьмое положение в N-концевой области занимает последовательность MSDSSPL (SEQ ID NO: 111).
В различных других конкретных аспектах пептидная или химерная последовательность имеет в первом аминокислотном положении N-концевой области остаток «M», остаток «R», остаток «S», остаток «H», остаток «P», остаток «L» или остаток «D». В различных альтернативных конкретных аспектах пептидная или химерная последовательность не имеет остатка «M» или остатка «R» в первом аминокислотном положении N-концевой области.
В различных других вариантах осуществления пептидная или химерная последовательность имеет N-концевую область с любой из следующих последовательностей: MDSSPL (SEQ ID NO: 110), MSDSSPL (SEQ ID NO: 111), SDSSPL (SEQ ID NO: 112), MSSPL (SEQ ID NO: 113) или SSPL (SEQ ID NO: 114).
В различных дополнительных аспектах пептидная или химерная последовательность имеет остаток в последнем положении C-концевой области, который соответствует примерно остатку 194 в SEQ ID NO: 99 (FGF19). В других вариантах осуществления пептидная последовательность или химерная пептидная последовательность имеет добавленные аминокислотные остатки 30-194 из SEQ ID NO: 99 (FGF19) на C-конце, образуя химерный полипептид, имеющий последнее положение C-концевой области, соответствующее примерно остатку 194 в SEQ ID NO: 99 (FGF19). В других вариантах осуществления химерная пептидная последовательность или пептидная последовательность содержит всю или часть последовательности FGF19 (например, SEQ ID NO: 99), расположенную на C-конце пептида, или где амино-концевой остаток «R» делетирован из пептида.
В более конкретных вариантах осуществления химерная пептидная последовательность или пептидная последовательность содержит или состоит из любой из вариантных пептидных последовательностей M1-M98, либо подпоследовательности или фрагмента любой из вариантных пептидных последовательностей M1-M98. Способы и варианты применения, предложенные в настоящем документе, также можно осуществлять на практике, используя пептидную или химерную последовательность, приведенную в настоящем документе. Например, последовательность, которая содержит или состоит из любой пептидной последовательности, приведенной в настоящем документе в виде M1-M98, M101-M160 или M200-M207, или SEQ ID NOs:1-98, 101-135, 138-212, или пептидную последовательность, которая содержит или состоит из любой последовательности, приведенной в таблице 1, или пептидную последовательность, которая содержит или состоит из любой последовательности, приведенной в списке последовательностей настоящего документа.
В различных более конкретных вариантах осуществления пептидная последовательность содержит или состоит из любой из следующих последовательностей:
RPLAFSDAGPHVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEILEDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (M3) (SEQ ID NO: 3);
RPLAFSDAGPHVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIREDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (M140) (SEQ ID NO: 194);
RPLAFSDAGPHVHYGWGDPIRQRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEILEDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (M160) (SEQ ID NO: 196);
RDSSPLVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (M69) (SEQ ID NO: 69);
RDSSPLLQWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (M52) (SEQ ID NO: 52);
RHPIPDSSPLLQFGGQVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (M5) (SEQ ID NO: 5);
HPIPDSSPLLQFGGQVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (M5-R) (SEQ ID NO: 160);
HPIPDSSPLLQFGGQVRQRYLYTDDAQQTEAHLEIREDGTVGGAADQSPESLLQLKALKPGVIQILGVKTSRFLCQRPDGALYGSLHFDPEACSFRELLLEDGYNVYQSEAHSLPLHLPGNKSPHRDPAPRGPARFLPLPGLPPALPEPPGILAPQPPDVGSSDPLSMVGPSQGRSPSYAS (M71) (SEQ ID NO: 71);
HPIPDSSPLLQFGGQVRQRYLYTDDAQQTEAHLEIREDGTVGGAADQSPESLLQLKALKPGVIQILGVKTSRFLCQRPDGALYGSLHFDPEACSFRELLLEDGYNVYQSEAHGLPLHLPGNKSPHRDPAPRGPARFLPLPGLPPAPPEPPGILAPQPPDVGSSDPLSMVGPSQGRSPSYAS (M72) (SEQ ID NO: 72);
HPIPDSSPLLQFGGQVRQRYLYTDDAQQTEAHLEIREDGTVGGAADQSPESLLQLKALKPGVIQILGVKTSRFLCQRPDGALYGSLHFDPEACSFRELLLEDGYNVYQSEAHGLPLHLPGNKSPHRDPAPRGPARFLPLPGLPPALPEPPGILAPQPPDVGSSDPLSMVVQDELQGVGGEGCHMHPENCKTLLTDIDRTHTEKPVWDGITGE (M73) (SEQ ID NO: 73);
RPLAFSDASPHVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (M1) (SEQ ID NO: 1 или 139);
RPLAFSDSSPLVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (M2) (SEQ ID NO: 2 или 140);
RDSSPLLQFGGQVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (M48) (SEQ ID NO: 48 или 6, или 148);
RPLAFSDSSPLLQFGGQVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (M49) (SEQ ID NO: 49 или 7, или 149);
RHPIPDSSPLLQFGDQVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEILEDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (M50) (SEQ ID NO: 50);
RHPIPDSSPLLQFGGNVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (M51) (SEQ ID NO: 51 или 36, или 155);
MDSSPLLQWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (M53) (SEQ ID NO: 192);
MRDSSPLVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (M70) (SEQ ID NO: 70);
RPLAFSDAGPHVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEILPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (M139) (SEQ ID NO: 193); или
RPLAFSDAGPHVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEILCDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (M141) (SEQ ID NO: 195);
RPLAFSDAGPHVHYGWGDPIRQRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEILEDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (M160) (SEQ ID NO: 196);
либо подпоследовательности или фрагмента любой из вышеприведенных пептидных последовательностей. В конкретных вариантах осуществления любой из вышеприведенных пептидных последовательностей концевой остаток R (остаток R на N-конце) делетирован.
В других вариантах осуществления пептид содержит или состоит из:
RDSSPLVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEILEDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (M200) (SEQ ID NO: 197); либо ее подпоследовательности или фрагмента. В одном варианте осуществления N-концевой остаток R делетирован.
В некоторых вариантах осуществления пептид содержит или состоит из:
RPLAFSDSSPLVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEILEDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (M201) (SEQ ID NO: 198); либо ее подпоследовательности или фрагмента. В одном варианте осуществления N-концевой остаток R делетирован.
В конкретных вариантах осуществления пептид содержит или состоит из:
RPLAFSDASPHVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEILEDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (M202) (SEQ ID NO: 199); либо ее подпоследовательности или фрагмента. В одном варианте осуществления N-концевой остаток R делетирован.
В других вариантах осуществления пептид содержит или состоит из:
RDSSPLLQWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEILEDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (M203) (SEQ ID NO: 200); либо ее подпоследовательности или фрагмента. В одном варианте осуществления N-концевой остаток R делетирован.
В некоторых вариантах осуществления пептид содержит или состоит из:
RHPIPDSSPLLQFGDQVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEILEDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (M204) (SEQ ID NO: 201); либо ее подпоследовательности или фрагмента. В одном варианте осуществления N-концевой остаток R делетирован.
В конкретных вариантах осуществления пептид содержит или состоит из:
RDSSPLLQFGGQVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEILEDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (M205) (SEQ ID NO: 202); либо ее подпоследовательности или фрагмента. В одном варианте осуществления N-концевой остаток R делетирован.
В некоторых вариантах осуществления пептид содержит или состоит из:
RHPIPDSSPLLQFGGQVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEILEDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (M206) (SEQ ID NO: 203); либо ее подпоследовательности или фрагмента. В одном варианте осуществления N-концевой остаток R делетирован.
В других вариантах осуществления пептид содержит или состоит из:
MRDSSPLVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEILEDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (M207) (SEQ ID NO: 204); либо ее подпоследовательности или фрагмента.
В некоторых вариантах осуществления пептид представляет собой вариантный пептид, обозначенный M139. В одном варианте осуществления пептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 193. В других вариантах осуществления пептид состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 193. В некоторых вариантах осуществления пептид представляет собой вариантный пептид, обозначенный M140. В одном варианте осуществления пептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 194. В других вариантах осуществления пептид состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 194. В некоторых вариантах осуществления пептид представляет собой вариантный пептид, обозначенный M141. В одном варианте осуществления пептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 195. В других вариантах осуществления пептид состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 195. В некоторых вариантах осуществления пептид представляет собой вариантный пептид, обозначенный M160. В одном варианте осуществления пептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 196. В других вариантах осуществления пептид состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 196. В некоторых вариантах осуществления пептид представляет собой вариантный пептид, обозначенный M200. В одном варианте осуществления пептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 197. В других вариантах осуществления пептид состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 197. В некоторых вариантах осуществления пептид представляет собой вариантный пептид, обозначенный M201. В одном варианте осуществления пептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 198. В других вариантах осуществления пептид состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 198. В других вариантах осуществления пептид представляет собой вариантный пептид, обозначенный M202. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 199. В других вариантах осуществления пептид состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 199. В конкретных вариантах осуществления пептид представляет собой вариантный пептид, обозначенный M203. В одном варианте осуществления пептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 200. В других вариантах осуществления пептид состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 200. В некоторых вариантах осуществления пептид представляет собой вариантный пептид, обозначенный M204. В одном варианте осуществления пептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 201. В других вариантах осуществления пептид состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 201. В другом варианте осуществления пептид представляет собой вариантный пептид, обозначенный M205. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 202. В других вариантах осуществления пептид состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 202. В других вариантах осуществления пептид представляет собой вариантный пептид, обозначенный M206. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 203. В других вариантах осуществления пептид состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 203. В других вариантах осуществления пептид представляет собой вариантный пептид, обозначенный M207. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 204. В других вариантах осуществления пептид состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 204.
В различных дополнительных конкретных аспектах N-конец пептидной последовательности содержит или состоит из любой из последовательностей:
HPIPDSSPLLQFGGQVRLRHLYTSG (M5-R) (аминокислоты 1-25 в SEQ ID NO: 160);
DSSPLLQFGGQVRLRHLYTSG (M6-R) (аминокислоты 2-22 в SEQ ID NO: 6);
RPLAFSDSSPLLQFGGQVRLRHLYTSG (M7) (аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 7);
HPIPDSSPLLQWGDPIRLRHLYTSG (M8-R) (аминокислоты 2-26 в SEQ ID NO: 8);
HPIPDSSPLLQFGWGDPIRLRHLYTSG (M9-R) (аминокислоты 2-28 в SEQ ID NO: 9);
HPIPDSSPHVHYGWGDPIRLRHLYTSG (M10-R) (аминокислоты 2-28 в SEQ ID NO: 10);
RPLAFSDAGPLLQWGDPIRLRHLYTSG (M11) (аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 11);
RPLAFSDAGPLLQFGWGDPIRLRHLYTSG (M12) (аминокислоты 1-29 в SEQ ID NO: 12);
RPLAFSDAGPLLQFGGQVRLRHLYTSG (M13) (аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 13);
HPIPDSSPHVHYGGQVRLRHLYTSG (M14-R) (аминокислоты 2-26 в SEQ ID NO: 14);
RPLAFSDAGPHVHYGGQVRLRHLYTSG (M15) (аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 15);
RPLAFSDAGPHVHWGDPIRLRHLYTSG (M16) (аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 16);
RPLAFSDAGPHVGWGDPIRLRHLYTSG (M17) (аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 17);
RPLAFSDAGPHYGWGDPIRLRHLYTSG (M18) (аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 18);
RPLAFSDAGPVYGWGDPIRLRHLYTSG (M19) (аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 19);
RPLAFSDAGPVHGWGDPIRLRHLYTSG (M20) (аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 20);
RPLAFSDAGPVHYWGDPIRLRHLYTSG (M21) (аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 21);
RPLAFSDAGPHVHGWGDPIRLRHLYTSG (M22) (аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 22);
RPLAFSDAGPHHGWGDPIRLRHLYTSG (M23) (аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 23);
RPLAFSDAGPHHYWGDPIRLRHLYTSG (M24) (аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 24);
RPLAFSDAGPHVYWGDPIRLRHLYTSG (M25) (аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 25);
RPLAFSDSSPLVHWGDPIRLRHLYTSG (M26) (аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 26);
RPLAFSDSSPHVHWGDPIRLRHLYTSG (M27) (аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 27);
RPLAFSDAGPHVWGDPIRLRHLYTSG (M28) (аминокислоты 1-26 в SEQ ID NO: 28);
RPLAFSDAGPHVHYWGDPIRLRHLYTSG (M29) (аминокислоты 1-28 в SEQ ID NO: 29);
RPLAFSDAGPHVHYAWGDPIRLRHLYTSG (M30) (аминокислоты 1-29 в SEQ ID NO: 30);
RHPIPDSSPLLQFGAQVRLRHLYTSG (M31) (аминокислоты 1-26 в SEQ ID NO: 31);
RHPIPDSSPLLQFGDQVRLRHLYTSG (M32) (аминокислоты 1-26 в SEQ ID NO: 32);
RHPIPDSSPLLQFGPQVRLRHLYTSG (M33) (аминокислоты 1-26 в SEQ ID NO: 33);
RHPIPDSSPLLQFGGAVRLRHLYTSG (M34) (аминокислоты 1-26 в SEQ ID NO: 34);
RHPIPDSSPLLQFGGEVRLRHLYTSG (M35) (аминокислоты 1-26 в SEQ ID NO: 35);
RHPIPDSSPLLQFGGNVRLRHLYTSG (M36) (аминокислоты 1-26 в SEQ ID NO: 36);
RHPIPDSSPLLQFGGQARLRHLYTSG (M37) (аминокислоты 1-26 в SEQ ID NO: 37);
RHPIPDSSPLLQFGGQIRLRHLYTSG (M38) (аминокислоты 1-26 в SEQ ID NO: 38);
RHPIPDSSPLLQFGGQTRLRHLYTSG (M39) (аминокислоты 1-26 в SEQ ID NO: 39);
RHPIPDSSPLLQFGWGQPVRLRHLYTSG (M40) (аминокислоты 1-28 в SEQ ID NO: 40);
DAGPHVHYGWGDPIRLRHLYTSG (M74-R) (аминокислоты 2-24 в SEQ ID NO: 74);
VHYGWGDPIRLRHLYTSG (M75-R) (аминокислоты 2-19 в SEQ ID NO: 75);
RLRHLYTSG (M77-R) (аминокислоты 2-10 в SEQ ID NO: 77);
RHPIPDSSPLLQFGWGDPIRLRHLYTSG (M9) (аминокислоты 1-28 в SEQ ID NO: 9);
RHPIPDSSPLLQWGDPIRLRHLYTSG (M8) (аминокислоты 1-26 в SEQ ID NO: 8);
RPLAFSDAGPLLQFGWGDPIRLRHLYTSG (M12) (аминокислоты 1-29 в SEQ ID NO: 12);
RHPIPDSSPHVHYGWGDPIRLRHLYTSG (M10) (аминокислоты 1-28 в SEQ ID NO: 10);
RPLAFSDAGPLLQFGGQVRLRHLYTSG (M13) (аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 13);
RHPIPDSSPHVHYGGQVRLRHLYTSG (M14) (аминокислоты 1-26 в SEQ ID NO: 14);
RPLAFSDAGPHVHYGGDIRLRHLYTSG (M43) аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 43); или
RDSSPLLQFGGQVRLRHLYTSG (M6) (аминокислоты 1-22 в SEQ ID NO: 6);
или любой из вышеприведенных пептидных последовательностей, в которой амино-концевой остаток R делетирован.
В конкретных вариантах осуществления пептид содержит или состоит из любой из последовательностей:
HPIPDSSPLLQFGGQVRLRHLYTSG (M5-R) (аминокислоты 1-25 в SEQ ID NO: 160);
DSSPLLQFGGQVRLRHLYTSG (M6-R) (аминокислоты 2-22 в SEQ ID NO: 6);
RPLAFSDSSPLLQFGGQVRLRHLYTSG (M7) (аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 7);
HPIPDSSPLLQWGDPIRLRHLYTSG (M8-R) (аминокислоты 2-26 в SEQ ID NO: 8);
HPIPDSSPLLQFGWGDPIRLRHLYTSG (M9-R) (аминокислоты 2-28 в SEQ ID NO: 9);
HPIPDSSPHVHYGWGDPIRLRHLYTSG (M10-R) (аминокислоты 2-28 в SEQ ID NO: 10);
RPLAFSDAGPLLQWGDPIRLRHLYTSG (M11) (аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 11);
RPLAFSDAGPLLQFGWGDPIRLRHLYTSG (M12) (аминокислоты 1-29 в SEQ ID NO: 12);
RPLAFSDAGPLLQFGGQVRLRHLYTSG (M13) (аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 13);
HPIPDSSPHVHYGGQVRLRHLYTSG (M14-R) (аминокислоты 2-26 в SEQ ID NO: 14);
RPLAFSDAGPHVHYGGQVRLRHLYTSG (M15) (аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 15);
RPLAFSDAGPHVHWGDPIRLRHLYTSG (M16) (аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 16);
RPLAFSDAGPHVGWGDPIRLRHLYTSG (M17) (аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 17);
RPLAFSDAGPHYGWGDPIRLRHLYTSG (M18) (аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 18);
RPLAFSDAGPVYGWGDPIRLRHLYTSG (M19) (аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 19);
RPLAFSDAGPVHGWGDPIRLRHLYTSG (M20) (аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 20);
RPLAFSDAGPVHYWGDPIRLRHLYTSG (M21) (аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 21);
RPLAFSDAGPHVHGWGDPIRLRHLYTSG (M22) (аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 22);
RPLAFSDAGPHHGWGDPIRLRHLYTSG (M23) (аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 23);
RPLAFSDAGPHHYWGDPIRLRHLYTSG (M24) (аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 24);
RPLAFSDAGPHVYWGDPIRLRHLYTSG (M25) (аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 25);
RPLAFSDSSPLVHWGDPIRLRHLYTSG (M26) (аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 26);
RPLAFSDSSPHVHWGDPIRLRHLYTSG (M27) (аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 27);
RPLAFSDAGPHVWGDPIRLRHLYTSG (M28) (аминокислоты 1-26 в SEQ ID NO: 28);
RPLAFSDAGPHVHYWGDPIRLRHLYTSG (M29) (аминокислоты 1-28 в SEQ ID NO: 29);
RPLAFSDAGPHVHYAWGDPIRLRHLYTSG (M30) (аминокислоты 1-29 в SEQ ID NO: 30);
RHPIPDSSPLLQFGAQVRLRHLYTSG (M31) (аминокислоты 1-26 в SEQ ID NO: 31);
RHPIPDSSPLLQFGDQVRLRHLYTSG (M32) (аминокислоты 1-26 в SEQ ID NO: 32);
RHPIPDSSPLLQFGPQVRLRHLYTSG (M33) (аминокислоты 1-26 в SEQ ID NO: 33);
RHPIPDSSPLLQFGGAVRLRHLYTSG (M34) (аминокислоты 1-26 в SEQ ID NO: 34);
RHPIPDSSPLLQFGGEVRLRHLYTSG (M35) (аминокислоты 1-26 в SEQ ID NO: 35);
RHPIPDSSPLLQFGGNVRLRHLYTSG (M36) (аминокислоты 1-26 в SEQ ID NO: 36);
RHPIPDSSPLLQFGGQARLRHLYTSG (M37) (аминокислоты 1-26 в SEQ ID NO: 37);
RHPIPDSSPLLQFGGQIRLRHLYTSG (M38) (аминокислоты 1-26 в SEQ ID NO: 38);
RHPIPDSSPLLQFGGQTRLRHLYTSG (M39) (аминокислоты 1-26 в SEQ ID NO: 39);
RHPIPDSSPLLQFGWGQPVRLRHLYTSG (M40) (аминокислоты 1-28 в SEQ ID NO: 40);
DAGPHVHYGWGDPIRLRHLYTSG (M74-R) (аминокислоты 2-24 в SEQ ID NO: 74);
VHYGWGDPIRLRHLYTSG (M75-R) (аминокислоты 2-19 в SEQ ID NO: 75);
RLRHLYTSG (M77-R) (аминокислоты 2-10 в SEQ ID NO: 77);
RHPIPDSSPLLQFGWGDPIRLRHLYTSG (M9) (аминокислоты 1-28 в SEQ ID NO: 9);
RHPIPDSSPLLQWGDPIRLRHLYTSG (M8) (аминокислоты 1-26 в SEQ ID NO: 8);
RPLAFSDAGPLLQFGWGDPIRLRHLYTSG (M12) (аминокислоты 1-29 в SEQ ID NO: 12);
RHPIPDSSPHVHYGWGDPIRLRHLYTSG (M10) (аминокислоты 1-28 в SEQ ID NO: 10);
RPLAFSDAGPLLQFGGQVRLRHLYTSG (M13) (аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 13);
RHPIPDSSPHVHYGGQVRLRHLYTSG (M14) (аминокислоты 1-26 в SEQ ID NO: 14);
RPLAFSDAGPHVHYGGDIRLRHLYTSG (M43) аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 43); или
RDSSPLLQFGGQVRLRHLYTSG (M6) (аминокислоты 1-22 в SEQ ID NO: 6). В некоторых вариантах осуществления пептид содержит одну из вышеприведенных последовательностей. В другом варианте осуществления пептид состоит из одной из вышеприведенных последовательностей. В некоторых вариантах осуществления пептид содержит C-концевую область, содержащую часть SEQ ID NO: 99 (FGF19), C-концевую область, имеющую первое аминокислотное положение и последнее аминокислотное положение,
при этом C-концевая область содержит аминокислотные остатки 16-29 из SEQ ID NO: 99 (FGF19), WGDPIRLRHLYTSG (SEQ ID NO: 169), причем остаток W соответствует первому аминокислотному положению в C-концевой области.
В различных других конкретных аспектах пептидная последовательность содержит или состоит из:
HPIPDSSPLLQFGGQVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (SEQ ID NO: 160);
DSSPLLQFGGQVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (SEQ ID NO: 138 или 161);
RPLAFSDASPHVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (SEQ ID NO: 1 или 139);
RPLAFSDSSPLVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (SEQ ID NO: 2 или 140); или
DSSPLVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (SEQ ID NO: 141);
либо подпоследовательности или фрагмента любой из вышеприведенных пептидных последовательностей. В конкретных вариантах осуществления любой из вышеприведенных пептидных последовательностей концевой остаток R делетирован.
В следующих вариантах осуществления пептидная последовательность содержит или состоит из:
MRDSSPLVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (M70) (SEQ ID NO: 70), либо ее подпоследовательности или фрагмента.
В следующих вариантах осуществления пептидная последовательность содержит или состоит из:
RDSSPLVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (M69) (SEQ ID NO: 69), либо ее подпоследовательности или фрагмента.
В конкретных вариантах осуществления пептидная последовательность имеет добавленные аминокислотные остатки 30-194 из SEQ ID NO: 99 (FGF19) на C-конце, образуя химерный полипептид. В некоторых вариантах осуществления пептидная последовательность имеет по меньшей мере одну аминокислотную замену в аминокислотных остатках 125-129 из SEQ ID NO: 99 (FGF19), EIRPD. В других вариантах осуществления пептидная последовательность имеет по меньшей мере одну аминокислотную замену в аминокислотных остатках 126-128 из SEQ ID NO: 99 (FGF19), IRP. В других вариантах осуществления пептидная последовательность имеет по меньшей мере одну аминокислотную замену в аминокислотных остатках 127-128 из SEQ ID NO: 99 (FGF19), RP. В других вариантах осуществления пептидная последовательность имеет по меньшей мере одну аминокислотную замену в аминокислотных остатках 1-124 из SEQ ID NO: 99 (FGF19) и/или в аминокислотных остатках 130-194 из SEQ ID NO: 99 (FGF19). Например, в конкретных вариантах осуществления пептидная последовательность имеет замену в одном из аминокислотных остатков 127-128 из SEQ ID NO: 99 (FGF19), RP, причем по меньшей мере одна аминокислотная замена представляет собой R127L или P128E. Указанные замены в составе соответствующей последовательности FGF19 (например, EIRPD, IRP или RP) вариантного пептида, предложенного в настоящем документе, также подразумеваются. В конкретных вариантах осуществления пептид имеет как R127L, так и P128E замену в аминокислотных остатках 127-128 из SEQ ID NO: 99 (FGF19), RP, или соответствующей им последовательности FGF19 в вариантном пептиде, предложенном в настоящем документе. В конкретных вариантах осуществления аминокислотная последовательность пептида имеет по меньшей мере одну аминокислотную замену в области петли-8 из FGF19 или соответствующей ей последовательности FGF19 в вариантном пептиде, предложенном в настоящем документе. В конкретных вариантах осуществления аминокислотная последовательность пептида имеет одну аминокислотную замену в аминокислотной последовательности EIRPD (аминокислоты 2-6 в SEQ ID NO: 190) в области петли-8 из FGF19. В некоторых вариантах осуществления аминокислотная последовательность пептида имеет две аминокислотные замены в аминокислотной последовательности EIRPD (аминокислоты 2-6 в SEQ ID NO: 190) в области петли-8 из FGF19. В других вариантах осуществления аминокислотная последовательность пептида имеет три аминокислотные замены в аминокислотной последовательности EIRPD (аминокислоты 2-6 в SEQ ID NO: 190) в области петли-8 из FGF19. В конкретных вариантах осуществления аминокислотная последовательность пептида имеет четыре аминокислотные замены в аминокислотной последовательности EIRPD (аминокислоты 2-6 в SEQ ID NO: 190) в области петли-8 из FGF19. В некоторых вариантах осуществления аминокислотная последовательность пептида имеет пять аминокислотных замен в аминокислотной последовательности EIRPD (аминокислоты 2-6 в SEQ ID NO: 190) в области петли-8 из FGF19. В конкретных вариантах осуществления аминокислотная последовательность пептида имеет одну аминокислотную замену в аминокислотной последовательности IRP (аминокислоты 3-5 в SEQ ID NO: 190) в области петли-8 из FGF19. В некоторых вариантах осуществления аминокислотная последовательность пептида имеет две аминокислотные замены в аминокислотной последовательности IRP (аминокислоты 3-5 в SEQ ID NO: 190) в области петли-8 из FGF19. В других вариантах осуществления аминокислотная последовательность пептида имеет три аминокислотные замены в аминокислотной последовательности IRP (аминокислоты 3-5 в SEQ ID NO: 190) в области петли-8 из FGF19. В конкретных вариантах осуществления аминокислотная последовательность пептида имеет одну аминокислотную замену в аминокислотной последовательности RP (аминокислоты 4-5 в SEQ ID NO: 190) в области петли-8 из FGF19. В некоторых вариантах осуществления аминокислотная последовательность пептида имеет две аминокислотные замены в аминокислотной последовательности RP (аминокислоты 4-5 в SEQ ID NO: 190) в области петли-8 из FGF19. В конкретных вариантах осуществления аминокислотная замена в аминокислотной последовательности RP (аминокислоты 4-5 в SEQ ID NO: 190) в области петли-8 из FGF19 представляет собой замену Arg (R) на Leu (L). В других вариантах осуществления замена в аминокислотной последовательности RP (аминокислоты 4-5 в SEQ ID NO: 190) в области петли-8 из FGF19 представляет собой замену Pro (P) на Glu (E). В некоторых вариантах осуществления замена в аминокислотной последовательности RP (аминокислоты 4-5 в SEQ ID NO: 190) в области петли-8 из FGF19 представляет собой замену Arg (R) на Leu (L) и замену Pro (P) на Glu (E). В конкретных вариантах осуществления вышеуказанная замена(ы) в области петли-8 из FGF19 находится в соответствующей ей последовательности FGF19 в вариантном пептиде, предложенном в настоящем документе. То есть, указанные замены в составе соответствующей последовательности FGF19 (например, EIRPD, IRP или RP) вариантного пептида, предложенного в настоящем документе, также подразумеваются.
Пептидные или химерные последовательности, предложенные в настоящем документе, могут быть любой подходящей длины. В конкретных вариантах осуществления N-концевая или C-концевая область пептидной или химерной последовательности имеет длину от примерно 20 до примерно 200 аминокислотных остатков. В других конкретных вариантах осуществления химерная пептидная последовательность или пептидная последовательность имеет по меньшей мере одну аминокислотную делецию. В других конкретных аспектах пептидная или химерная последовательность имеет 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 или более аминокислотных делеций с амино-конца, карбокси-конца или внутри последовательности. В одном варианте осуществления аминокислотная замена или делеция имеет место в любом из аминокислотных положений 8-20 в FGF19 (AGPHVHYGWGDPI) (SEQ ID NO: 187). В других конкретных вариантах осуществления пептидная или химерная последовательность имеет N-концевую область или C-концевую область, которая содержит или состоит из аминокислотной последовательности из примерно 5-10, 10-20, 20-30, 30-40, 40-50, 50-60, 60-70, 70-80, 80-90, 90-100 или более аминокислот. В дополнительных более конкретных вариантах осуществления пептидная или химерная последовательность имеет часть последовательности FGF19 или часть последовательности FGF21, которая содержит или состоит из аминокислотной последовательности из примерно 5-10, 10-20, 20-30, 30-40, 40-50, 50-60, 60-70, 70-80, 80-90, 90-100 или более аминокислот из FGF19 или FGF21.
В различных других вариантах осуществления пептидная или химерная последовательность имеет аминокислотную замену, добавление, вставку, или представляет собой подпоследовательность, в которой по меньшей мере одна аминокислота делетирована. Такие аминокислотные замены, добавления, вставки и делеции в пептидной последовательности могут составлять 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или более аминокислотных остатков (10-20, 20-30, 30-40, 40-50 и так далее), например, на N- или C-конце, или внутри последовательности. Например, подпоследовательность, которая имеет 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 или более аминокислотных делеций с амино-конца, карбокси-конца или внутри последовательности. В конкретном аспекте аминокислотная замена или делеция имеет место в любом из аминокислотных положений 8-20 в FGF19 (AGPHVHYGWGDPI) (SEQ ID NO: 187).
В различных более конкретных вариантах осуществления пептидная или химерная последовательность содержит всю или часть последовательности FGF19, приведенную далее:
PHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (SEQ ID NO: 188), расположенную на C-конце пептида, или амино-концевой остаток «R» делетирован из последовательности.
В различных вариантах осуществления пептидная или химерная последовательность имеет функцию или активность, которая больше или меньше, чем у последовательности сравнения. В других конкретных вариантах осуществления химерные пептидные последовательности и пептидные последовательности имеют конкретные функции или активности. В одном аспекте химерная пептидная последовательность или пептидная последовательность имеет сохраненную или повышенную активность, опосредованную рецептором 4 фактора роста фибробластов (FGFR4). В дополнительных аспектах химерная пептидная последовательность или пептидная последовательность связывается с FGFR4 или активирует FGFR4, или заметно не связывается с FGFR4 или не активирует FGFR4, или связывается с FGFR4 с аффинностью, меньшей, сопоставимой или большей, чем аффинность связывания FGF19 для FGFR4, или активирует FGFR4 до степени или величины, меньшей, сопоставимой или большей, чем в случае, когда FGF19 активирует FGFR4. В некоторых вариантах осуществления химерная пептидная последовательность или пептидная последовательность, предложенная в настоящем документе, активирует FGFR4 до степени или величины, меньшей, чем степень или величина в случае, когда FGF19 активирует FGFR4. В одном варианте осуществления химерная пептидная последовательность или пептидная последовательность, предложенная в настоящем документе, активирует FGFR4 до степени или величины, сопоставимой со степенью или величиной в случае, когда FGF19 активирует FGFR4. В одном варианте осуществления химерная пептидная последовательность или пептидная последовательность, предложенная в настоящем документе, активирует FGFR4 до степени или величины, большей, чем степень или величина в случае, когда FGF19 активирует FGFR4.
В одном варианте осуществления химерная пептидная последовательность или пептидная последовательность, предложенная в настоящем документе, имеет сохраненную опосредованную FGFR4 активность. В одном варианте осуществления химерная пептидная последовательность или пептидная последовательность, предложенная в настоящем документе, имеет повышенную опосредованную FGFR4 активность. В некоторых вариантах осуществления химерная пептидная последовательность или пептидная последовательность, предложенная в настоящем документе, связывается с FGFR4 с аффинностью, меньшей, чем аффинность связывания FGF19 для FGFR4. В одном варианте осуществления химерная пептидная последовательность или пептидная последовательность, предложенная в настоящем документе, связывается с FGFR4 с аффинностью, сопоставимой с аффинностью связывания FGF19 для FGFR4. В некоторых вариантах осуществления химерная пептидная последовательность или пептидная последовательность, предложенная в настоящем документе, связывается с FGFR4 с аффинностью, большей, чем аффинность связывания FGF19 для FGFR4. В одном варианте осуществления химерная пептидная последовательность или пептидная последовательность, предложенная в настоящем документе, заметно не связывается с FGFR4.
В следующих аспектах химерная пептидная последовательность или пептидная последовательность обладает пониженной способностью вызывать образование HCC по сравнению с FGF19 или вариантной последовательностью FGF19, имеющей любую из последовательностей GQV, GDI, WGPI (SEQ ID NO: 171), WGDPV (SEQ ID NO: 172), WGDI (SEQ ID NO: 173), GDPI (SEQ ID NO: 174), GPI, WGQPI (SEQ ID NO: 175), WGAPI (SEQ ID NO: 176), AGDPI (SEQ ID NO: 177), WADPI (SEQ ID NO: 178), WGDAI (SEQ ID NO: 179), WGDPA (SEQ ID NO: 180), WDPI (SEQ ID NO: 181), WGDI (SEQ ID NO: 182), WGDP (SEQ ID NO: 183) или FGDPI (SEQ ID NO: 184) вместо последовательности WGDPI (SEQ ID NO: 170) в аминокислотах 16-20 из FGF19; или обладает повышенной снижающей уровень глюкозы активностью по сравнению с FGF19 или вариантной последовательностью FGF19, имеющей любую из последовательностей GQV, GDI, WGPI (SEQ ID NO: 171), WGDPV (SEQ ID NO: 172), WGDI (SEQ ID NO: 173), GDPI (SEQ ID NO: 174), GPI, WGQPI (SEQ ID NO: 175), WGAPI (SEQ ID NO: 176), AGDPI (SEQ ID NO: 177), WADPI (SEQ ID NO: 178), WGDAI (SEQ ID NO: 179), WGDPA (SEQ ID NO: 180), WDPI (SEQ ID NO: 181), WGDI (SEQ ID NO: 182), WGDP (SEQ ID NO: 183) или FGDPI (SEQ ID NO: 184) вместо последовательности WGDPI (SEQ ID NO: 170) в аминокислотах 16-20 из FGF19; обладает меньшей повышающей уровень липидов активностью по сравнению с FGF19 или вариантной последовательностью FGF19, имеющей любую из последовательностей GQV, GDI, WGPI (SEQ ID NO: 171), WGDPV (SEQ ID NO: 172), WGDI (SEQ ID NO: 173), GDPI (SEQ ID NO: 174), GPI, WGQPI (SEQ ID NO: 175), WGAPI (SEQ ID NO: 176), AGDPI (SEQ ID NO: 177), WADPI (SEQ ID NO: 178), WGDAI (SEQ ID NO: 179), WGDPA (SEQ ID NO: 180), WDPI (SEQ ID NO: 181), WGDI (SEQ ID NO: 182), WGDP (SEQ ID NO: 183) или FGDPI (SEQ ID NO: 184) вместо последовательности WGDPI (SEQ ID NO: 170) в аминокислотах 16-20 из FGF19; или обладает меньшей повышающей уровень триглицеридов, холестерина, не-ЛВП, или большей повышающей уровень ЛВП активностью по сравнению с FGF19 или вариантной последовательностью FGF19, имеющей любую из последовательностей GQV, GDI, WGPI (SEQ ID NO: 171), WGDPV (SEQ ID NO: 172), WGDI (SEQ ID NO: 173), GDPI (SEQ ID NO: 174), GPI, WGQPI (SEQ ID NO: 175), WGAPI (SEQ ID NO: 176), AGDPI (SEQ ID NO: 177), WADPI (SEQ ID NO: 178), WGDAI (SEQ ID NO: 179), WGDPA (SEQ ID NO: 180), WDPI (SEQ ID NO: 181), WGDI (SEQ ID NO: 182), WGDP (SEQ ID NO: 183) или FGDPI (SEQ ID NO: 184) вместо последовательности WGDPI (SEQ ID NO: 170) в аминокислотах 16-20 из FGF19; или пептидная последовательность обладает меньшей снижающей безжировую массу тела активностью по сравнению с FGF21. Такие функции и активности можно определять in vitro или in vivo, например, на мышах db/db.
В одном варианте осуществления пептидная или химерная последовательность обладает функцией или активностью, большей или меньшей, чем у последовательности сравнения. В некоторых вариантах осуществления последовательность сравнения представляет собой FGF19. В другом варианте осуществления последовательность сравнения представляет собой вариантную последовательность FGF19, имеющую любую из замен GQV, GDI, WGPI (SEQ ID NO: 171), WGDPV (SEQ ID NO: 172), WGDI (SEQ ID NO: 173), GDPI (SEQ ID NO: 174), GPI, WGQPI (SEQ ID NO: 175), WGAPI (SEQ ID NO: 176), AGDPI (SEQ ID NO: 177), WADPI (SEQ ID NO: 178), WGDAI (SEQ ID NO: 179), WGDPA (SEQ ID NO: 180), WDPI (SEQ ID NO: 181), WGDI (SEQ ID NO: 182), WGDP (SEQ ID NO: 183) или FGDPI (SEQ ID NO: 184) вместо последовательности WGDPI (SEQ ID NO: 170) в аминокислотах 16-20 из FGF19. В одном варианте осуществления пептидная или химерная пептидная последовательность, предложенная в настоящем документе, обладает большей снижающей уровень глюкозы активностью по сравнению с последовательностью сравнения. В другом варианте осуществления пептидная или химерная пептидная последовательность, предложенная в настоящем документе, обладает меньшей повышающей уровень липидов активностью по сравнению с последовательностью сравнения. В другом варианте осуществления пептидная или химерная пептидная последовательность, предложенная в настоящем документе, обладает меньшей повышающей уровень липидов (например, триглицеридов, холестерина, не-ЛВП) активностью по сравнению с последовательностью сравнения. В других вариантах осуществления пептидная или химерная пептидная последовательность, предложенная в настоящем документе, обладает большей повышающей уровень ЛВП активностью по сравнению с последовательностью сравнения. В другом варианте осуществления пептидная или химерная пептидная последовательность, предложенная в настоящем документе, обладает меньшей снижающей безжировую массу тела активностью по сравнению с последовательностью сравнения или FGF21.
В различных других дополнительных вариантах осуществления пептидная или химерная последовательность содержит одну или более L-аминокислот, D-аминокислот, неприродных аминокислот, либо миметиков, производных или аналогов аминокислот. В различных других вариантах осуществления пептидная или химерная последовательность имеет N-концевую область или C-концевую область, или часть последовательности FGF19, или часть последовательности FGF21, связанные через линкер или спейсер.
В конкретных вариантах осуществления фармацевтическая композиция, предложенная в настоящем документе, находится в жидкой лекарственной форме. В некоторых вариантах осуществления пептид присутствует в концентрации от 1 до 10 мг/мл. В одном варианте осуществления пептид присутствует в концентрации 1 мг/мл. В другом варианте осуществления пептид присутствует в концентрации 5 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления пептид присутствует в концентрации 10 мг/мл. В одном варианте осуществления пептид содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 70. В некоторых вариантах осуществления пептид состоит из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 70. В одном варианте осуществления пептид содержит или состоит из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 204.
В некоторых вариантах осуществления фармацевтических композиций, предложенных в настоящем документе, Tris присутствует в диапазоне концентраций 5-50 мМ, 15-40 мМ, 20-35 мМ, 20-30 мМ или 20-25 мМ. В одном варианте осуществления Tris присутствует в концентрации 20 мМ. В некоторых вариантах осуществления препарат объемом 1000 мл содержит 2,0, 2,1, 2,2, 2,3, 2,4, 2,5, 2,6, 2,7, 2,8, 2,9 или 3,0 г Tris, или любое значение в этом диапазоне. В одном варианте осуществления препарат объемом 1000 мл содержит 2,4-2,5 г Tris.
В некоторых вариантах осуществления различных фармацевтических композиций, предложенных в настоящем документе, трегалоза присутствует в диапазоне концентраций 1-20%, 2-15%, 3-10%, 4-9,5%, 5-9,25%, 6-9%, 7-8,5%, 8-8,4% или 8,1-8,3%. В одном варианте осуществления трегалоза присутствует в концентрации 8,2%, 8,3% или 8,4%. В некоторых вариантах осуществления препарат объемом 1000 мл содержит 92,0, 92,1, 92,2, 92,3, 92,4, 92,5, 92,6, 92,7, 92,8, 92,9 или 93,0 г трегалозы дигидрата. В одном варианте осуществления препарат объемом 1000 мл содержит 92,4-92,5 г трегалозы дигидрата. В некоторых вариантах осуществления молярность трегалозы дигидрата составляет 240-300 мМ, 240-290 мМ, 250-290 мМ, 260-290 мМ, 270-290 мМ или 244-245 мМ. В одном варианте осуществления молярность трегалозы дигидрата составляет примерно 280 мМ.
В некоторых вариантах осуществления различных фармацевтических композиций, предложенных в настоящем документе, концентрация TWEEN-20 находится в диапазоне 0,001-0,1% (по объему), 0,0025-0,075% (по объему), 0,005-0,05% (по объему) или 0,0075-0,025% (по объему). В одном варианте осуществления концентрация TWEEN-20 составляет 0,01% (по объему).
В некоторых вариантах осуществления различных фармацевтических композиций, предложенных в настоящем документе, фармацевтическая композиция имеет значение pH в диапазоне 6,5-9,5, 6,8-9,3, 7,0-9,0, 7,3-8,7, 7,5-8,5 или 7,7-8,2. В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция имеет значение pH 7,3, 7,5, 8,0 или 8,5. В некоторых вариантах осуществления значение pH измеряют при температуре 4°C. В одном варианте осуществления значение pH измеряют при температуре 25°C.
В некоторых вариантах осуществления различных фармацевтических композиций, предложенных в настоящем документе, композиции содержат 20 мМ Tris, 8,37% (масс/об) трегалозы и 0,01% TWEEN-20. В одном варианте осуществления различных фармацевтических композиций, предложенных в настоящем документе, композиции содержат 20 мМ Tris, 8,3% (масс/об) трегалозы и 0,01% TWEEN-20. В одном варианте осуществления различных фармацевтических композиций, предложенных в настоящем документе, композиции содержат 20 мМ Tris, 8,2% (масс/об) трегалозы и 0,01% TWEEN-20. В некоторых вариантах осуществления различных фармацевтических композиций, предложенных в настоящем документе, композиции содержат 20 мМ Tris, 280 мМ трегалозы и 0,01% TWEEN-20. В одном варианте осуществления значение pH составляет 8,0 при температуре 25°C. В некоторых вариантах осуществления полипептид содержит SEQ ID NO: 70. В других вариантах осуществления полипептид состоит из SEQ ID NO: 70. В некоторых вариантах осуществления полипептид содержит SEQ ID NO: 69. В других вариантах осуществления полипептид состоит из SEQ ID NO: 69. В некоторых вариантах осуществления полипептид слит с Fc-фрагментом антитела человека.
В настоящем документе также предложена фармацевтическая композиция, содержащая: (A) пептид, содержащий или состоящий из SEQ ID NO: 70, и (B) фармацевтически приемлемый носитель, содержащий: (i) 20 мМ Tris, (ii) от 8,2% до 8,4% (масс/об) трегалозы и (iii) 0,01% TWEEN-20. В настоящем документе также предложена фармацевтическая композиция, содержащая: (A) пептид, содержащий или состоящий из SEQ ID NO: 69, и (B) фармацевтически приемлемый носитель, содержащий: (i) 20 мМ Tris, (ii) от 8,2% до 8,4% (масс/об) трегалозы и (iii) 0,01% TWEEN-20. В настоящем документе также предложена фармацевтическая композиция, содержащая: (A) пептид, содержащий или состоящий из SEQ ID NO: 70, и (B) фармацевтически приемлемый носитель, содержащий: (i) 20 мМ Tris, (ii) от 8,37% (масс/об) трегалозы и (iii) 0,01% TWEEN-20. В настоящем документе также предложена фармацевтическая композиция, содержащая: (A) пептид, содержащий или состоящий из SEQ ID NO: 69, и (B) фармацевтически приемлемый носитель, содержащий: (i) 20 мМ Tris, (ii) от 8,37% (масс/об) трегалозы и (iii) 0,01% TWEEN-20. В настоящем документе также предложена фармацевтическая композиция, содержащая: (A) пептид, содержащий или состоящий из SEQ ID NO: 70, и (B) фармацевтически приемлемый носитель, содержащий: (i) 20 мМ Tris, (ii) от 8,3% (масс/об) трегалозы и (iii) 0,01% TWEEN-20. В настоящем документе также предложена фармацевтическая композиция, содержащая: (A) пептид, содержащий или состоящий из SEQ ID NO: 69, и (B) фармацевтически приемлемый носитель, содержащий: (i) 20 мМ Tris, (ii) от 8,3% (масс/об) трегалозы и (iii) 0,01% TWEEN-20. В настоящем документе также предложена фармацевтическая композиция, содержащая: (A) пептид, содержащий или состоящий из SEQ ID NO: 70, и (B) фармацевтически приемлемый носитель, содержащий: (i) 20 мМ Tris, (ii) от 8,2% (масс/об) трегалозы и (iii) 0,01% TWEEN-20. В настоящем документе также предложена фармацевтическая композиция, содержащая: (A) пептид, содержащий или состоящий из SEQ ID NO: 69, и (B) фармацевтически приемлемый носитель, содержащий: (i) 20 мМ Tris, (ii) от 8,2% (масс/об) трегалозы и (iii) 0,01% TWEEN-20. В некоторых вариантах осуществления полипептид содержит SEQ ID NO: 70. В других вариантах осуществления полипептид состоит из SEQ ID NO: 70. В некоторых вариантах осуществления полипептид содержит SEQ ID NO: 69. В других вариантах осуществления полипептид состоит из SEQ ID NO: 69. В некоторых вариантах осуществления полипептид слит с Fc-фрагментом антитела человека.
В настоящем документе также предложена фармацевтическая композиция, содержащая: (A) пептид, содержащий или состоящий из SEQ ID NO: 70, и (B) фармацевтически приемлемый носитель, содержащий: (i) 20 мМ Tris, (ii) от 8,2% до 8,4% (масс/об) трегалозы и (iii) 0,01% TWEEN-20; при этом значение pH составляет 8,0 при температуре 25°C. В настоящем документе также предложена фармацевтическая композиция, содержащая: (A) пептид, содержащий или состоящий из SEQ ID NO: 69, и (B) фармацевтически приемлемый носитель, содержащий: (i) 20 мМ Tris, (ii) от 8,2% до 8,4% (масс/об) трегалозы и (iii) 0,01% TWEEN-20; при этом значение pH составляет 8,0 при температуре 25°C. В настоящем документе также предложена фармацевтическая композиция, содержащая: (A) пептид, содержащий или состоящий из SEQ ID NO: 70, и (B) фармацевтически приемлемый носитель, содержащий: (i) 20 мМ Tris, (ii) от 8,37% (масс/об) трегалозы и (iii) 0,01% TWEEN-20; при этом значение pH составляет 8,0 при температуре 25°C. В настоящем документе также предложена фармацевтическая композиция, содержащая: (A) пептид, содержащий или состоящий из SEQ ID NO: 69, и (B) фармацевтически приемлемый носитель, содержащий: (i) 20 мМ Tris, (ii) от 8,37% (масс/об) трегалозы и (iii) 0,01% TWEEN-20; при этом значение pH составляет 8,0 при температуре 25°C. В настоящем документе также предложена фармацевтическая композиция, содержащая: (A) пептид, содержащий или состоящий из SEQ ID NO: 70, и (B) фармацевтически приемлемый носитель, содержащий: (i) 20 мМ Tris, (ii) от 8,3% (масс/об) трегалозы и (iii) 0,01% TWEEN-20; при этом значение pH составляет 8,0 при температуре 25°C. В настоящем документе также предложена фармацевтическая композиция, содержащая: (A) пептид, содержащий или состоящий из SEQ ID NO: 69, и (B) фармацевтически приемлемый носитель, содержащий: (i) 20 мМ Tris, (ii) от 8,3% (масс/об) трегалозы и (iii) 0,01% TWEEN-20; при этом значение pH составляет 8,0 при температуре 25°C. В настоящем документе также предложена фармацевтическая композиция, содержащая: (A) пептид, содержащий или состоящий из SEQ ID NO: 70, и (B) фармацевтически приемлемый носитель, содержащий: (i) 20 мМ Tris, (ii) от 8,2% (масс/об) трегалозы и (iii) 0,01% TWEEN-20; при этом значение pH составляет 8,0 при температуре 25°C. В настоящем документе также предложена фармацевтическая композиция, содержащая: (A) пептид, содержащий или состоящий из SEQ ID NO: 69, и (B) фармацевтически приемлемый носитель, содержащий: (i) 20 мМ Tris, (ii) от 8,2% (масс/об) трегалозы и (iii) 0,01% TWEEN-20; при этом значение pH составляет 8,0 при температуре 25°C.
В некоторых вариантах осуществления полипептид содержит SEQ ID NO: 70. В других вариантах осуществления полипептид состоит из SEQ ID NO: 70. В некоторых вариантах осуществления полипептид содержит SEQ ID NO: 69. В других вариантах осуществления полипептид состоит из SEQ ID NO: 69. В некоторых вариантах осуществления полипептид слит с Fc-фрагментом антитела человека.
В некоторых вариантах осуществления различных фармацевтических композиций, предложенных в настоящем документе, фармацевтическая композиция не содержит соль. В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция не содержит NaCl.
В некоторых вариантах осуществления различных фармацевтических композиций, предложенных в настоящем документе, фармацевтическая композиция находится в жидкой форме. В конкретных вариантах осуществления фармацевтическая композиция является лиофилизированной.
В одном варианте осуществления различных фармацевтических композиций, предложенных в настоящем документе, композиции содержат менее 20%, менее 15%, менее 10%, менее 5% или менее 2% пептидных агрегатов после некоторого периода времени. В некоторых вариантах осуществления агрегаты количественно определяют с использованием анализа, предложенного в настоящем документе (например, в «Экспериментальном разделе»). В одном варианте осуществления композиция содержит менее 20% пептидных агрегатов после некоторого периода времени. В одном варианте осуществления композиция содержит менее 15% пептидных агрегатов после некоторого периода времени. В одном варианте осуществления композиция содержит менее 10% пептидных агрегатов после некоторого периода времени. В одном варианте осуществления композиция содержит менее 5% пептидных агрегатов после некоторого периода времени. В одном варианте осуществления композиция содержит менее 2% пептидных агрегатов после некоторого периода времени. В одном варианте осуществления различных фармацевтических композиций, предложенных в настоящем документе, композиции содержат менее 20%, менее 15%, менее 10%, менее 5% или менее 2% пептидных преципитатов после некоторого периода времени. В некоторых вариантах осуществления преципитаты количественно определяют с использованием анализа, предложенного в настоящем документе (например, в «Экспериментальном разделе»). В одном варианте осуществления композиция содержит менее 20% пептидных преципитатов после некоторого периода времени. В одном варианте осуществления композиция содержит менее 15% пептидных преципитатов после некоторого периода времени. В одном варианте осуществления композиция содержит менее 10% пептидных преципитатов после некоторого периода времени. В одном варианте осуществления композиция содержит менее 5% пептидных преципитатов после некоторого периода времени. В одном варианте осуществления композиция содержит менее 2% пептидных преципитатов после некоторого периода времени. В конкретных вариантах осуществления период времени составляет 1 день, 7 дней, 14 дней, 28 дней, 2 месяца, 3 месяца, 4 месяца, 5 месяцев, 6 месяцев, 7 месяцев, 8 месяцев, 9 месяцев, 10 месяцев, 11 месяцев, 12 месяцев, 18 месяцев, 24 месяца или более. В одном варианте осуществления период времени составляет 1 день. В одном варианте осуществления период времени составляет 7 дней. В одном варианте осуществления период времени составляет 14 дней. В одном варианте осуществления период времени составляет 21 день. В одном варианте осуществления период времени составляет 1 месяц. В одном варианте осуществления период времени составляет 2 месяца. В одном варианте осуществления период времени составляет 3 месяца. В одном варианте осуществления период времени составляет 4 месяца. В одном варианте осуществления период времени составляет 5 месяцев. В одном варианте осуществления период времени составляет 6 месяцев. В одном варианте осуществления период времени составляет 7 месяцев. В одном варианте осуществления период времени составляет 8 месяцев. В одном варианте осуществления период времени составляет 9 месяцев. В одном варианте осуществления период времени составляет 10 месяцев. В одном варианте осуществления период времени составляет 11 месяцев. В одном варианте осуществления период времени составляет 12 месяцев. В одном варианте осуществления период времени составляет 18 месяцев. В одном варианте осуществления период времени составляет 24 месяца. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическую композицию хранят при температуре -80°C. В одном варианте осуществления фармацевтическую композицию хранят при температуре 4°C. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическую композицию хранят при температуре 25°C. В одном варианте осуществления фармацевтическую композицию хранят при температуре 37°C.
В конкретных вариантах осуществления фармацевтическая композиция, предложенная в настоящем документе, имеет срок хранения по меньшей мере примерно 12 месяцев, по меньшей мере примерно 24 месяца или по меньшей мере примерно 36 месяцев. В конкретных вариантах осуществления фармацевтическая композиция, предложенная в настоящем документе, имеет срок хранения по меньшей мере примерно 12 месяцев. В конкретных вариантах осуществления фармацевтическая композиция, предложенная в настоящем документе, имеет срок хранения по меньшей мере примерно 24 месяца. В конкретных вариантах осуществления фармацевтическая композиция, предложенная в настоящем документе, имеет срок хранения по меньшей мере примерно 36 месяцев. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическую композицию хранят при температуре -80°C. В одном варианте осуществления фармацевтическую композицию хранят при температуре 4°C. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическую композицию хранят при температуре 25°C. В одном варианте осуществления фармацевтическую композицию хранят при температуре 37°C.
В дополнительных вариантах осуществления химерная пептидная или пептидная последовательность включена в фармацевтическую композицию, которая, в свою очередь, может быть использована для осуществления на практике способов и вариантом применения, предложенных в настоящем документе. Такие композиции включают сочетания неактивных или других активных ингредиентов. В одном варианте осуществления композиция, такая как фармацевтическая композиция, содержит химерную пептидную последовательность или пептидную последовательность и средство, например, которое способствует улучшению гомеостаза желчных кислот.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу предотвращения заболевания или нарушения у субъекта, который имеет, или рискует иметь, заболевание или нарушение, предотвращаемое с помощью пептидной последовательности, предложенной в настоящем документе, включающему введение субъекту фармацевтической композиции, содержащей пептид, предложенный в настоящем документе, в количестве, эффективном для предотвращения заболевания или нарушения. В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения заболевания или нарушения у субъекта, который имеет, или рискует иметь, заболевание или нарушение, поддающееся лечению с помощью пептидной последовательности, предложенной в настоящем документе, включающему введение субъекту фармацевтической композиции, содержащей пептид, предложенный в настоящем документе, в количестве, эффективном для лечения заболевания или нарушения. В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу контроля заболевания или нарушения у субъекта, который имеет, или рискует иметь, заболевание или нарушение, поддающееся контролю с помощью пептидной последовательности, предложенной в настоящем документе, включающему введение субъекту фармацевтической композиции, содержащей пептид, предложенный в настоящем документе, в количестве, эффективном для контроля заболевания или нарушения. В одном варианте осуществления заболевание или нарушение представляет собой связанное с гомеостазом желчных кислот или сопутствующее заболевание. В другом варианте осуществления заболевание или нарушение представляет собой метаболическое заболевание или нарушение. В других вариантах осуществления заболевание или нарушение представляет собой рак или опухоль.
Неограничивающие иллюстративные связанные с гомеостазом желчных кислот или сопутствующие заболевания, предотвращаемые, поддающиеся лечению или поддающиеся контролю в соответствии со способами и вариантами применения, предложенными в настоящем документе, включают: холестаз, включая, например, заболевания внутрипеченочного холестаза (например, первичный билиарный цирроз (PBC), первичный семейный внутрипеченочный холестаз (PFIC) (например, прогрессирующий PFIC), первичный склерозирующий холангит (PSC), внутрипеченочный холестаз беременных (PIC), неонатальный холестаз и медикаментозный холестаз (вызванный, например, эстрогеном)), а также заболевания внепеченочного холестаза (например, сжатие желчных протоков из-за опухоли, блокирование желчных протоков желчными камнями); синдром недостаточности всасывания желчных кислот и другие заболевания с вовлечением дистального отдела тонкого кишечника, включая резекцию подвздошной кишки, воспалительные заболевания кишечника (например, болезнь Крона и язвенный колит), синдром короткой кишки, нарушения, приводящие к уменьшению всасывания желчных кислот, иначе не характеризуемые (идиопатические), ведущие к диарее (например, хологенной диарее (BAD)) и ЖК симптомам, а также формы рака ЖК тракта, печени и/или желчных протоков (например, рак толстого кишечника и печеночно-клеточный рак); и/или аномалии синтеза желчных кислот, такие как те, которые вносят вклад в развитие неалкогольного стеатогепатита (NASH), цирроза и портальной гипертензии; например, у млекопитающих, таких как люди. Дополнительные связанные с гомеостазом желчных кислот или сопутствующие заболевания включают метаболический синдром; нарушения метаболизма липидов или глюкозы; нарушения метаболизма холестерина или триглицеридов; диабет 2 типа. В одном конкретном варианте осуществления связанное с гомеостазом желчных кислот или сопутствующее заболевание представляет собой синдром недостаточности всасывания желчных кислот. В другом конкретном варианте осуществления связанное с гомеостазом желчных кислот или сопутствующее заболевание представляет собой диарею. В другом конкретном варианте осуществления связанное с гомеостазом желчных кислот или сопутствующее заболевание представляет собой холестаз (например, внутрипеченочный или внепеченочный холестаз). В другом конкретном варианте осуществления связанное с гомеостазом желчных кислот или сопутствующее заболевание представляет собой первичный билиарный цирроз (PBC). В других конкретных вариантах осуществления связанное с гомеостазом желчных кислот или сопутствующее заболевание представляет собой первичный склерозирующий холангит. В другом варианте осуществления связанное с гомеостазом желчных кислот или сопутствующее заболевание представляет собой PFIC (например, прогрессирующий PFIC). В другом варианте осуществления связанное с гомеостазом желчных кислот или сопутствующее заболевание представляет собой NASH. В другом варианте осуществления связанное с гомеостазом желчных кислот или сопутствующее заболевание представляет собой гипергликемическое состояние. В конкретном варианте осуществления связанное с гомеостазом желчных кислот или сопутствующее заболевание представляет собой диабет 2 типа.
В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция также содержит по меньшей мере одно дополнительное средство, эффективное для модулирования гомеостаза желчных кислот или лечения связанного с гомеостазом желчных кислот или сопутствующего заболевания, при этом дополнительное средство представляет собой: глюкокортикоид; CDCA; UDCA; инсулин, секретагоги инсулина, миметик инсулина, сульфонилмочевину и меглитинид; бигуанид; ингибиторы альфа-глюкозидазы; ингибитор DPP-IV, GLP-1, агонисты GLP-1 и аналог GLP-1; DPP-IV-устойчивый аналог; агонист PPAR-гамма, агонист PPAR двойного действия, агонист PPAR общего действия; ингибитор PTP1B; ингибитор SGLT; агонист RXR; ингибитор гликоген синтазы киназы-3; иммуномодулятор; агонист бета-3 адренергических рецепторов; ингибитор 11бета-HSD1; амилин и аналог амилина; секвестрант желчных кислот или ингибитор SGLT-2. В конкретных вариантах осуществления по меньшей мере одно дополнительное средство, эффективное для модулирования PBC, представляет собой UDCA, агонист FXR, OCA, ингибитор ASBT, средство против аутоиммунного заболевания, анти-IL-12 средство, анти-CD80 средство, анти-CD20 средство, CXCL10-нейтрализующее антитело, лиганд для CXCR3, фибрат, рыбий жир, колхицин, метотрексат, азатиоприн, циклоспорин или антиретровирусное терапевтическое средство. В конкретных вариантах осуществления по меньшей мере одно дополнительное средство, эффективное для модулирования PBC, представляет собой UDCA, OCA, ингибитор ASBT, анти-IL-12 средство, анти-CD20 средство или фибрат.
Неограничивающие иллюстративные заболевания или состояния, предотвращаемые, поддающиеся лечению или поддающиеся контролю с помощью пептидных препаратов, способов и вариантов их применения, предложенных в настоящем документе, включают метаболические заболевания и нарушения. Неограничивающие примеры заболеваний и нарушений включают: метаболический синдром; нарушение метаболизма липидов или глюкозы; нарушение метаболизма холестерина или триглицеридов; диабет 2 типа; холестаз, включая, например, заболевания внутрипеченочного холестаза (например, PBC, PFIC, PSC, PIC, неонатальный холестаз и медикаментозный холестаз (вызванный, например, эстрогеном)) и заболевания внепеченочного холестаза (например, сжатие желчных протоков из-за опухоли, блокирование желчных протоков желчными камнями); синдром недостаточности всасывания желчных кислот и другие заболевания с вовлечением дистального отдела тонкого кишечника, включая резекцию подвздошной кишки, воспалительные заболевания кишечника (например, болезнь Крона и язвенный колит), нарушения, приводящие к уменьшению всасывания желчных кислот, иначе не характеризуемые (идиопатические), ведущие к диарее (например, BAD) и ЖК симптомам, а также формы рака ЖК тракта, печени и/или желчных протоков (например, рак толстого кишечника и печеночно-клеточный рак); и/или аномалии синтеза желчных кислот, такие как те, которые вносят вклад в развитие NASH, цирроза и портальной гипертензии. Для лечения, пептид, предложенный в настоящем документе, можно вводить субъектам, которые нуждаются в модулировании гомеостаза желчных кислот или имеют связанное с гомеостазом желчных кислот или сопутствующее заболевание. Пептиды, предложенные в настоящем документе, также могут быть полезны в случае других заболеваний, связанных с гипергликемией, включая поражение почек (например, поражение почечных канальцев или нефропатию), дегенерацию печени, поражение глаз (например, диабетическую ретинопатию или катаракту), а также состояние «диабетической стопы»; дислипидемии и их последствия, например, атеросклероз, болезнь коронарных артерий, цереброваскулярные нарушения и тому подобное.
Другие состояния, которые могут быть ассоциированы с метаболическим синдромом, включают ожирение и избыточную массу тела (включая их сопутствующие патологические состояния, такие как, но без ограничения, болезнь неалкогольной жировой инфильтрации печени (NAFLD), неалкогольный стеатогепатит (NASH) и синдром поликистоза яичников (PCOS)), и также включают тромбозы, гиперкоагуляционные и протромботические состояния (артериальные и венозные), гипертензию (включая портальную гипертензию (когда градиент печеночного венозного давления (HVPG) превышает 5 мм ртутного столба), сердечно-сосудистое заболевание, инсульт и сердечную недостаточность; заболевания или состояния, в которые вовлечены воспалительные реакции, включая атеросклероз, хронические воспалительные заболевания кишечника (например, болезнь Крона и язвенный колит), астму, системную красную волчанку, артрит или другие воспалительные ревматические заболевания; нарушения клеточного цикла или процессов клеточной дифференцировки, такие как опухоли из жировых клеток, липоматозные карциномы, включая, например, липосаркомы, солидные опухоли и новообразования; нейродегенеративные заболевания и/или демиелинизирующие заболевания центральной и периферической нервных систем и/или неврологические заболевания с вовлечением нейровоспалительных процессов, и/или другие периферические невропатии, включая болезнь Альцгеймера, рассеянный склероз, болезнь Паркинсона, прогрессирующую мультифокальную лейкоэнцефалопатию и синдром Гийена-Барре; кожные и дерматологические заболевания и/или нарушения процессов заживления ран, включая эритемато-сквамозный дерматоз; а также другие заболевания, такие как синдром X, остеоартрит и острый респираторный дистресс-синдром.
В некоторых вариантах осуществления заболевание или нарушение представляет собой рак или опухоль. В конкретных вариантах осуществления рак или опухоль представляет собой FGF19-зависимый рак или опухоль. В одном варианте осуществления FGF19-зависимый рак или опухоль представляет собой печеночно-клеточную карциному. В некоторых вариантах осуществления FGF19-зависимый рак или опухоль представляет собой не печеночно-клеточную карциному. В одном варианте осуществления рак или опухоль представляет собой рак или опухоль толстого кишечника. В некоторых вариантах осуществления рак или опухоль представляет собой рак или опухоль предстательной железы. В одном варианте осуществления рак или опухоль представляет собой рак или опухоль легкого. В некоторых вариантах осуществления способ приводит к уменьшению числа опухолей, размера опухолей или массы опухолей.
В одном варианте осуществления различных способов, предложенных в настоящем документе, субъект является человеком. В конкретных вариантах осуществления субъект является субъектом, который нуждается в лечении.
В некоторых вариантах осуществления химерная пептидная последовательность или пептидная последовательность, описанная в настоящем документе, либо отдельно, либо в сочетании с по меньшей мере одним дополнительным лекарственным средством или методом лечения, проходит оценку для гарантии того, что она не вызывает неблагоприятные эффекты у субъекта. В конкретном аспекте сочетание химерной пептидной последовательности или пептидной последовательности, описанной в настоящем документе, и по меньшей мере одного дополнительного лекарственного средства или метода лечения проходит оценку для гарантии того, что оно не вызывает образование HCC у субъекта. Такие оценки можно проводить до начала терапии (например, в исследовании с эскалацией дозы), во время терапии (например, оценивая маркеры, коррелирующие с активностью HCC) или после завершения терапии (например, проводя биопсию печени). В некоторых аспектах оценку проводят в соответствующей тест-системе (например, с использованием валидированной животной модели). Специалисты в данной области знакомы с дополнительными способами, позволяющими убедиться в том, что комбинированная терапия, описанная в настоящем документе, подходит для конкретного субъекта, или популяции субъектов, репрезентативной для конкретного субъекта, с учетом всех релевантных факторов, включая, например, степень тяжести связанного с гомеостазом желчных кислот или сопутствующего заболевания (например, PBC) у субъекта, а также другие лекарственные средства, принимаемые субъектом.
4. ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ
На ФИГ. 1 представлены результаты визуальной оценки десяти различных буферов препарата в следующих условиях: концентрация активного ингредиента 1 мг/мл; температура 37°C; через 4 недели. Образцы ресуспендировали перед проведением визуальной оценки в баллах и фотографированием. Система оценки в баллах: 0 - прозрачный; 1 - слегка помутневший; 2 - слегка мутный; 3 - мутный; 4 - очень мутный; 5 - чрезвычайно мутный.
На ФИГ. 2 представлены результаты визуальной оценки десяти различных буферов препарата в следующих условиях: концентрация активного ингредиента 10 мг/мл; температура 37°C; через 4 недели. Образцы ресуспендировали перед проведением визуальной оценки в баллах и фотографированием. Система оценки в баллах: 0 - прозрачный; 1 - слегка помутневший; 2 - слегка мутный; 3 - мутный; 4 - очень мутный; 5 - чрезвычайно мутный.
На ФИГ. 3 представлены результаты ВЭЖХ анализа, основанного на определении методом ЭХ AUC поглощения при A210 образцов с концентрацией 1 мг/мл, показывающие процентную долю (%) мономера в каждый момент времени.
На ФИГ. 4 представлены результаты ВЭЖХ анализа, основанного на определении методом ЭХ AUC поглощения при A210 образцов с концентрацией 1 мг/мл в буфере 7.
На ФИГ. 5 представлены результаты ВЭЖХ анализа, основанного на определении методом ЭХ AUC поглощения при A210 образцов с концентрацией 10 мг/мл, показывающие процентную долю (%) мономера в каждый момент времени.
На ФИГ. 6 представлены результаты ВЭЖХ анализа, основанного на определении методом ЭХ AUC поглощения при A210 образцов с концентрацией 10 мг/мл в буфере 7 препарата.
На ФИГ. 7A-7B представлены результаты SDS-ПААГ электрофореза препарата (A) в буфере 7 через 4 недели в случае концентрации (A) 1 мг/мл и (B) 10 мг/мл.
На ФИГ. 8 представлены результаты ИО-ВЭЖХ для препарата с концентрацией 1 мг/мл в буфере 7 при 37°C, в момент времени t=0 недель, 1 неделя, 2 недели и 4 недели.
На ФИГ. 9 представлены результаты ИО-ВЭЖХ для препарата с концентрацией 10 мг/мл в буфере 7 при 37°C, в момент времени t=0 недель, 1 неделя, 2 недели и 4 недели.
На ФИГ. 10 представлены результаты ОФ-ВЭЖХ для препарата с концентрацией 1 мг/мл в буфере 7 при 37°C, в момент времени t=0 недель, 1 неделя, 2 недели и 4 недели.
На ФИГ. 11 представлены результаты ОФ-ВЭЖХ для препарата с концентрацией 10 мг/мл в буфере 7 при 37°C, в момент времени t=0 недель, 1 неделя, 2 недели и 4 недели.
На ФИГ. 12 представлены данные по стабильности после циклов замораживания/размораживания препарата M70, содержащего 20 мМ Tris, pH 8,0 (25°C), 8,3% (масс/об) трегалозы, 0,01% полисорбата-20 (TWEEN-20) («буфер TTP»).
5. ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Перед тем, как настоящее изобретение будет описано более подробно, следует отметить, что данное изобретение не ограничено конкретными вариантами осуществления, изложенными в настоящем документе, и также следует понимать, что терминология, используемая в настоящем документе, служит исключительно для целей описания конкретных вариантов осуществления и не должна быть ограничивающей.
5.1 Определения
Термины «пациент» или «субъект» используют взаимозаменяемо для обозначения человека или животного, отличного от человека (например, млекопитающего).
Термины «лечить», «лечение», «терапия», и тому подобное, означают последовательность действий (таких как введение полипептида или фармацевтической композиции, содержащей полипептид), инициированную после того, как заболевание, нарушение или состояние, либо его симптом, было диагностировано, обнаружено, и тому подобное, с целью устранения, уменьшения, подавления, ослабления или облегчения, либо временно, либо постоянно, по меньшей мере одной из основополагающих причин заболевания, нарушения или состояния, поражающего субъекта, или по меньшей мере одного из симптомов, ассоциированных с заболеванием, нарушением, состоянием, поражающим субъекта. Таким образом, лечение включает ингибирование активного заболевания (то есть, задержку развития или дальнейшего развития заболевания, нарушения или состояния, либо клинических симптомов, ассоциированных с ним).
Используемый в настоящем документе термин «нуждающийся в лечении» означает, что врач или другой медицинский работник принял решение о том, что субъект нуждается в лечении или получит пользу от лечения.
Термины «предотвращать», «профилактика», «предотвращение», и тому подобное, означают последовательность действий (таких как введение полипептида или фармацевтической композиции, содержащей полипептид), инициированную заранее (например, до начала заболевания, нарушения, состояния или его симптома) с целью предотвращения, подавления, ингибирования или уменьшения, либо временно, либо постоянно, для субъекта риска развития заболевания, нарушения, состояния, или тому подобного (что определяют, например, по отсутствию клинических симптомов), или для задержки начала его развития, как правило, в контексте субъекта, предрасположенного к развитию конкретного заболевания, нарушения или состояния. В некоторых случаях термины также означают замедление прогрессирования заболевания, нарушения или состояния, либо ингибирование его прогрессирования до опасного или иным образом нежелательного состояния.
Используемый в настоящем документе термин «нуждающийся в предотвращении» означает, что врач или другой медицинский работник принял решение о том, что субъект нуждается или получит пользу от превентивных мер.
Выражение «терапевтически эффективное количество» относится к введению субъекту средства, либо отдельно, либо в виде части фармацевтической композиции, и либо одной дозой, либо в виде части серии доз, в количестве, которое при введении пациенту способно оказывать какой-либо поддающийся обнаружению положительный эффект на какой-либо симптом, аспект или характеристику заболевания, нарушения или состояния. Терапевтически эффективное количество можно определять путем измерения релевантных физиологических эффектов. Например, в случае гипергликемического состояния снижение или уменьшение уровня глюкозы в крови, или улучшение результатов теста на толерантность к глюкозе можно использовать для определения того, является ли количество средства эффективным для лечения гипергликемического состояния. Например, терапевтически эффективное количество представляет собой количество, достаточное для уменьшения или снижения какого-либо уровня (например, исходного уровня) глюкозы в плазме крови натощак (FPG), при этом, например, количество является достаточным для снижения уровня FPG, превышающего 200 мг/дл, до уровня менее 200 мг/дл, при этом количество является достаточным для снижения уровня FPG, составляющего от 175 мг/дл до 200 мг/дл, до уровня ниже начального уровня, при этом количество является достаточным для снижения уровня FPG, составляющего от 150 мг/дл до 175 мг/дл, до уровня ниже начального уровня, при этом количество является достаточным для снижения уровня FPG, составляющего от 125 мг/дл до 150 мг/дл, до уровня ниже начального уровня, и так далее (например, для снижения уровней FPG до уровней ниже 125 мг/дл, ниже 120 мг/дл, ниже 115 мг/дл, ниже 110 мг/дл и так далее). Кроме того, в случае уровней HbAIc эффективное количество представляет собой количество, достаточное для уменьшения или снижения уровней на более чем примерно с 10% до 9%, на более чем примерно с 9% до 8%, на более чем примерно с 8% до 7%, на более чем примерно с 7% до 6%, на более чем примерно с 6% до 5%, и так далее. Более конкретно, по настоящему изобретению предусмотрено уменьшение или снижение уровней HbAIc на примерно 0,1%, 0,25%, 0,4%, 0,5%, 0,6%, 0,7%, 0,8%, 0,9%, 1%, 1,5%, 2%, 3%, 4%, 5%, 10%, 20%, 30%, 33%, 35%, 40%, 45%, 50% или более. Терапевтически эффективное количество можно корректировать в зависимости от режима дозирования, диагностического анализа состояния здоровья субъекта, и тому подобного.
Выражение «в количестве, достаточном, чтобы вызвать изменение» означает, что существует поддающаяся обнаружению разница между уровнем индикатора, измеренным до (например, исходным уровнем) и после введения конкретного терапевтического средства. Индикаторы включают любой объективный параметр (например, уровень глюкозы или инсулина) или субъективный параметр (например, самочувствие субъекта).
Используемый в настоящем документе термин «толерантность к глюкозе» означает способность организма субъекта контролировать уровень глюкозы в плазме и/или инсулина в плазме при изменении потребления глюкозы. Например, термин «толерантность к глюкозе» означает способность организма субъекта снижать, в пределах примерно 120 минут, уровень глюкозы в плазме вновь до уровня, определяемого перед потреблением глюкозы.
В широком смысле термины «диабет» и «диабетический» означают прогрессирующее заболевание углеводного метаболизма, при котором имеет место недостаточное продуцирование или утилизация инсулина, и которое часто характеризуется гипергликемией и глюкозурией. Термины «предиабет» и «предиабетический» означают состояние, когда у субъекта отсутствуют характеристики, симптомы и тому подобное, как правило, наблюдаемые при диабете, однако присутствуют характеристики, симптомы и тому подобное, которые в отсутствие лечения могут прогрессировать до диабета. Наличие таких состояний можно определять с использованием, например, либо теста на уровень глюкозы в плазме натощак (FPG), либо перорального теста на толерантность к глюкозе (OGTT). В обоих случаях, как правило, необходимо, чтобы субъект голодал по меньшей мере 8 часов до начала теста. В тесте FPG уровень глюкозы в крови у субъекта измеряют после завершения периода голодания; как правило, субъект голодает в течение ночи и уровень глюкозы в крови измеряют утром до приема пищи субъектом. У здорового субъекта, как правило, концентрация FPG составляет от примерно 90 до примерно 100 мг/дл, у субъекта с «предиабетом» концентрация FPG, как правило, составляет от примерно 100 до примерно 125 мг/дл, и у субъекта с «диабетом», как правило, уровень FPG превышает примерно 126 мг/дл. В тесте OGTT уровень глюкозы в крови у субъекта измеряют после голодания и вновь через два часа после употребления напитка с высоким содержанием глюкозы. Через два часа после употребления напитка с высоким содержанием глюкозы у здорового субъекта концентрация глюкозы в крови, как правило, составляет менее примерно 140 мг/дл, у субъекта с предиабетом концентрация глюкозы в крови, как правило, составляет от примерно 140 до примерно 199 мг/дл, и у субъекта с диабетом концентрация глюкозы в крови, как правило, составляет примерно 200 мг/дл или выше. Хотя вышеуказанные гликемические показатели характерны для субъектов-людей, нормогликемия, умеренная гипергликемия и явная гипергликемия имеют другую шкалу оценки в случае субъектов-мышей. У здоровой мыши после четырехчасового голодания концентрация FPG как правило, будет составлять от примерно 100 до примерно 150 мг/дл, у мыши с «предиабетом» концентрация FPG как правило, будет составлять от примерно 175 до примерно 250 мг/дл, и у мыши с «диабетом» концентрация FPG как правило, будет превышать примерно 250 мг/дл.
Используемый в настоящем документе термин «устойчивость к инсулину» означает состояние, при котором нормальное количество инсулина неспособно вызывать нормальный физиологический или молекулярный ответ. В некоторых случаях гиперфизиологическое количество инсулина, либо продуцируемое эндогенно, либо введенное экзогенно, способно преодолевать устойчивость к инсулину, полностью или частично, и вызывать биологический ответ.
Термин «метаболический синдром» относится к связанному кластеру признаков, который включает, но не ограничивается ими, гиперинсулинемию, аномальную толерантность к глюкозе, ожирение, перераспределение жира в брюшной или верхний отдел тела, гипертензию, дисфибринолиз и дислипидемию, характеризующуюся высоким уровнем триглицеридов, низким уровнем холестерина липопротеинов высокой плотности (ЛВП) и высоким уровнем небольших плотных частиц липопротеинов низкой плотности (ЛНП). Субъекты с метаболическим синдромом имеют риск развития диабета 2 типа и/или других заболеваний (например, атеросклероза).
Термин «нарушение метаболизма глюкозы» охватывает любое нарушение, характеризующееся клиническим симптомом или сочетанием клинических симптомов, которые ассоциированы с повышенным уровнем глюкозы и/или повышенным уровнем инсулина у субъекта по сравнению со здоровым человеком. Повышенные уровни глюкозы и/или инсулина могут проявляться в заболеваниях, нарушениях и состояниях, перечисленных далее: гипергликемия, диабет II типа, гестационный диабет, диабет I типа, устойчивость к инсулину, нарушенная толерантность к глюкозе, гиперинсулинемия, нарушенный метаболизм глюкозы, предиабет, другие метаболические нарушения (такие как метаболический синдром, который также называют синдромом X), а также ожирение, в числе прочих. Полипептиды по настоящему изобретению и их композиции могут быть использованы, например, для достижения и/или поддержания нормального гомеостаза глюкозы, например, для снижения уровня глюкозы в крови и/или для снижения уровня инсулина до диапазона значений, характерных для здорового субъекта.
Используемый в настоящем документе термин «гипергликемия» означает состояние, при котором в плазме крови субъекта циркулирует повышенное, по сравнению со здоровым человеком, количество глюкозы. Гипергликемию можно диагностировать способами, известными в данной области, включая измерение уровней глюкозы в крови натощак, как описано в настоящем документе.
Используемый в настоящем документе термин «гиперинсулинемия» означает состояние, при котором имеют место повышенные уровни циркулирующего инсулина, причем в то же время уровни глюкозы в крови являются либо повышенными, либо нормальными. Гиперинсулинемия может быть вызвана устойчивостью к инсулину, которая связана с дислипидемией, например, высоким уровнем триглицеридов, высоким уровнем холестерина, высоким уровнем липопротеинов низкой плотности (ЛНП) и низким уровнем липопротеинов высокой плотности (ЛВП); высокими уровнями мочевых кислот; синдромом поликистоза яичников; диабетом II типа и ожирением. Гиперинсулинемию можно диагностировать по наличию уровня инсулина в плазме, превышающего примерно 2 мкЕд/мл.
Используемый в настоящем документе термин «заболевание избыточной массы тела» и аналогичные термины относятся к состояниям, ассоциированным с избыточной массой тела и/или повышенным аппетитом. Различные параметры используют для определения того, имеет ли субъект избыточную массу тела по сравнению с эталонным здоровым человеком, с учетом возраста, роста, пола и состояния здоровья субъекта. Например, можно определять, имеет ли субъект избыточную массу тела или ожирение, путем оценки индекса массы тела (ИМТ) субъекта, который рассчитывают путем деления величины массы тела субъекта в килограммах на возведенную в квадрат величину роста субъекта в метрах. Взрослый человек, имеющий ИМТ в диапазоне от ~18,5 до ~24,9 кг/м2, считается имеющим нормальную массу тела; взрослый человек, имеющий ИМТ в диапазоне от ~25 до ~29,9 кг/м2, может считаться имеющим избыточную массу тела (предожирение); и взрослый человек, имеющий ИМТ ~30 кг/м2 или выше, может считаться тучным. Повышенный аппетит часто способствует набиранию избыточной массы тела. Существует несколько состояний, ассоциированных с повышенным аппетитом, включая, например, синдром ночного питания, который характеризуется утренней анорексией и вечерней полифагией, часто сопровождающейся бессонницей, что может быть связано с травмой гипоталамуса.
Термины «полипептид», «пептид» и «белок», используемые в настоящем документе взаимозаменяемо, означают полимерную форму аминокислот любой длины, которая может включать генетически кодируемые и не кодируемые генетически аминокислоты, химически или биохимически модифицированные, или дериватизированные аминокислоты, а также полипептиды, имеющие модифицированные полипептидные каркасы. Термины охватывают слитые белки, в том числе, но без ограничения, слитые белки с гетерологичной аминокислотной последовательностью, слитые белки с гетерологичными и гомологичными лидерными последовательностями, имеющие или не имеющие N-концевые остатки метионина, иммунологически маркированные белки, и тому подобное. Следует понимать, что в тексте данного описания делаются ссылки на аминокислоты в соответствии с однобуквенным и трехбуквенным кодами.
Используемый в настоящем документе термин «вариант» охватывает природные варианты (например, гомологи и аллельные варианты) и неприродные варианты (например, мутеины). Природные варианты включают гомологи, то есть, нуклеиновые кислоты и полипептиды, которые отличаются по нуклеотидной или аминокислотной последовательности, соответственно, у разных видов. Природные варианты включают аллельные варианты, то есть, нуклеиновые кислоты и полипептиды, которые отличаются по нуклеотидной или аминокислотной последовательности, соответственно, у разных индивидуумов, относящихся к одному виду. Неприродные варианты включают нуклеиновые кислоты и полипептиды, которые имеют изменения в нуклеотидной или аминокислотной последовательности, соответственно, при этом изменение в последовательность введено искусственно, например, изменение создано в лаборатории или другой организации в результате вмешательства человека («рукой человека»).
Термин «нативный» применительно к FGF19 означает биологически активный природный FGF19, включая биологически активные природные варианты FGF19. Термин включает зрелую 194-аминокислотную последовательность FGF19 человека.
Термины «метка», «мечение», и тому подобное, при использовании в контексте полипептида или нуклеиновой кислоты (или антитела, в зависимости от ситуации) по настоящему изобретению должны означать, в широком смысле, любые средства, полезные, например, для очистки, идентификации, выделения и синтеза полипептида. Метки, как правило, ковалентно связаны с интересующим полипептидом и могут быть введены любым методом, известным в данной области, включая присоединение к зрелому полипептиду (обычно на N- или C-конце), включение в процессе твердофазного пептидного синтеза или рекомбинантными методами. Примеры включают, но не ограничиваются ими, введение флуоресцентных меток, биотинилирование и включение радиоактивных изотопов. Молекулы полипептидов и нуклеиновых кислот можно метить как in vitro, так и in vivo методами. Реагенты и наборы для мечения можно приобретать из различных коммерческих источников (например, Thermo Fischer Scientific, Rockford, IL; и Molecular Probes/Life Technologies; Grand Island, NY).
Используемый в настоящем документе термин «мутеины» означает, в широком смысле, мутантные рекомбинантные белки, то есть, полипептиды, имеющие искусственно внесенное изменение в аминокислотной последовательности, например, изменение в аминокислотной последовательности, созданное в лаборатории или другой организации в результате вмешательства человека («рукой человека»). Эти белки, как правило, имеют одну или несколько аминокислотных замен и часто бывают получены из клонированных генов, которые были подвергнуты сайт-направленному или случайному мутагенезу, или из полностью синтетических генов.
При использовании в настоящем документе применительно к нативному FGF19 человека или мутеину FGF19 термины «модифицированный», «модификация», и тому подобное, означают внесение одного или более изменений, которые приводят к усилению желательного свойства человеческого FGF19, природного варианта FGF19 или мутеина FGF19, при этом изменение(я) не затрагивает первичную аминокислотную последовательность FGF19. Такие желательные свойства включают, например, повышенную растворимость, более длительный период полувыведения в системе циркуляции, повышенную стабильность, уменьшенный клиренс, измененную иммуногенность или аллергенность, улучшенные технологические аспекты (например, затраты и эффективность), а также способность вызывать продуцирование конкретных антител (например, за счет введения особых эпитопов) для использования в анализах обнаружения. Изменения в человеческом FGF19, природном варианте FGF19 или мутеине FGF19, которые можно осуществлять, включают, но не ограничиваются ими, пегилирование (ковалентное присоединение одной или более молекул полиэтиленгликоля (ПЭГ), или его производных); гликозилирование (например, N-гликозилирование), полисиалирование и гесилирование (HESylation); слияние с альбумином; связывание с альбумином, например, через конъюгированную цепь жирной кислоты (ацилирование); слияние с Fc-областью; а также слияние с миметиком ПЭГ. Некоторые конкретные варианты осуществления включают модификации с использованием полиэтиленгликоля, другие конкретные варианты осуществления включают модификации с использованием альбумина и другие конкретные варианты осуществления включают модификации с использованием гликозилирования.
Термины «ДНК», «нуклеиновая кислота», «молекула нуклеиновой кислоты», «полинуклеотид», и тому подобное, в настоящем документе используют взаимозаменяемо для обозначения полимерной формы нуклеотидов любой длины, либо дезоксирибонуклеотидов, либо рибонуклеотидов, либо их аналогов. Неограничивающие примеры полинуклеотидов включают линейные и кольцевые нуклеиновые кислоты, матричные РНК (мРНК), комплементарные ДНК (кДНК), рекомбинантные полинуклеотиды, векторы, зонды, праймеры и тому подобное.
Термин «зонд» означает фрагмент ДНК или РНК, соответствующий интересующему гену или последовательности, при этом фрагмент является меченым радиоактивным изотопом (например, за счет введения 32P или 35S) или какой-либо другой поддающейся обнаружению молекулой, такой как биотин, дигоксигенин или флуоресцеин. Поскольку участки ДНК или РНК будут гибридизоваться с комплементарными последовательностями, зонд можно использовать, например, для мечения вирусных бляшек, бактериальных колоний или полос в геле, которые содержат интересующий ген. Зонд может представлять собой клонированную ДНК или он может представлять собой синтетическую нить ДНК; последнюю можно использовать для получения кДНК или геномного клона из выделенного белка, например, путем микросеквенирования части белка, выведения нуклеотидной последовательности, кодирующей белок, синтезирования олигонуклеотида, несущего эту последовательность, радиоактивного мечения этой последовательности и использования ее в качестве зонда для скрининга кДНК библиотеки или геномной библиотеки.
Термин «гетерологичные» относится к двум компонентам, которые содержат структуры, полученные из других источников. Например, в контексте полипептида «гетерологичный» полипептид может содержать функционально связанные аминокислотные последовательности, которые происходят из других полипептидов. Аналогично, в контексте полинуклеотида, кодирующего химерный полипептид, «гетерологичный» полинуклеотид может содержать функционально связанные нуклеотидные последовательности, которые могут быть получены из других генов. Иллюстративные «гетерологичные» нуклеиновые кислоты включают экспрессионные конструкты, в которых нуклеиновая кислота, содержащая кодирующую последовательность, функционально связана с регуляторным элементом (например, промотором), который имеет генетическое происхождение, отличное от такового у кодирующей последовательности (например, для обеспечения экспрессии в интересующей клетке-хозяине, которая может иметь иное генетическое происхождение, чем промотор, кодирующая последовательность, или и то, и другое). В контексте рекомбинантных клеток «гетерологичные» может означать присутствие нуклеиновой кислоты (или продукта гена, такого как полипептид), которая имеет иное генетическое происхождение, чем клетка-хозяин, в которой она присутствует.
Термин «функционально связанные» означает наличие связи между молекулами, обеспечивающей нужную функцию. Например, «функционально связанные» в контексте нуклеиновых кислот означает наличие функциональной связи между нуклеотидными последовательностями. В качестве примера, последовательность контроля экспрессии нуклеиновой кислоты (такая как промотор, сигнальная последовательность или группа сайтов связывания факторов транскрипции) может быть функционально связана со вторым полинуклеотидом, при этом последовательность контроля экспрессии влияет на транскрипцию и/или трансляцию второго полинуклеотида. В контексте полипептида «функционально связанные» означает наличие функциональной связи между аминокислотными последовательностями (например, разными доменами) для обеспечения описанной активности полипептида.
При использовании в настоящем документе в контексте структуры полипептида термины «N-конец» (или «амино-конец») и «C-конец» (или «карбокси-конец») относятся к крайним амино- и карбоксильному концам полипептида, соответственно, в то время как термины «N-концевой» и «C-концевой» относятся к относительным положениям в аминокислотной последовательности полипептида около N-конца и C-конца, соответственно, и могут включать остатки на N-конце и C-конце, соответственно. Термины «непосредственно N-концевой» или «непосредственно C-концевой» относятся к положению первого аминокислотного остатка относительно второго аминокислотного остатка, когда первый и второй аминокислотные остатки ковалентно связаны для обеспечения непрерывной аминокислотной последовательности.
Выражение «полученная из» в контексте аминокислотной последовательности или полинуклеотидной последовательности (например, аминокислотная последовательность, «полученная из» полипептида FGF19), должно означать, что полипептид или нуклеиновая кислота имеет последовательность, основанную на последовательности эталонного полипептида или нуклеиновой кислоты (например, природного полипептида FGF19 или кодирующей FGF19 нуклеиновой кислоты), и не должно быть ограничивающим в отношении источника или способа, которые были использованы для получения белка или нуклеиновой кислоты. В качестве примера, термин «полученная из» охватывает гомологи или варианты эталонных аминокислотных или ДНК последовательностей.
В контексте полипептида термин «выделенный» относится к интересующему полипептиду, который, если является природным, находится в окружении, отличном от того, в котором он находится в природе. Термин «выделенный» должен включать полипептиды, находящиеся в образцах, которые в значительной степени обогащены интересующим полипептидом, и/или в которых интересующий полипептид является частично или по существу очищенным. Если полипептид не является природным, термин «выделенный» указывает на то, что полипептид был выделен из окружения, в котором он был получен либо синтетическим, либо рекомбинантным способом.
Термин «обогащенный» означает, что образец был искусственно подвергнут манипуляциям (например, ученым или клиницистом) таким образом, что интересующий полипептид стал присутствовать a) в большей концентрации (например, по меньшей мере в 3 раза большей, по меньшей мере в 4 раза большей, по меньшей мере в 8 раз большей, по меньшей мере в 64 раза большей, или более), чем концентрация полипептида в исходном образце, например, биологическом образце (например, образце, в котором полипептид присутствует естественным образом или в котором он присутствует после введения), или b) в большей концентрации, чем концентрация в среде, в которой полипептид был получен (например, в бактериальной клетке).
Выражение «по существу чистый» указывает на то, что компонент (например, полипептид) составляет более чем примерно 50% от общего состава композиции и, как правило, более чем примерно 60% от общего содержания полипептидов. Более конкретно, выражение «по существу чистый» используют в случае композиций, в которых интересующий компонент составляет по меньшей мере 75%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90% или более от общего состава композиции. В некоторых случаях полипептид будет составлять более чем примерно 90% или более чем примерно 95% от общего состава композиции.
Термины «измерение» или «тестирование» и их грамматические варианты в настоящем документе используются взаимозаменяемо и означают либо качественные, либо количественные определения, или и качественные, и количественные определения. Если термины используют применительно к обнаружению, предусмотрены любые способы оценки относительного количества, включая различные способы, изложенные в настоящем документе и известные в данной области. Например, экспрессию гена можно тестировать или измерять методом нозерн-блоттинга, вестерн-блоттинга, в анализе иммунопреципитации или путем измерения активности, функции или количества экспрессированного белка.
Термины «антитела» (Ат) и «иммуноглобулины» (Ig) относятся к гликопротеинам, имеющим одинаковые структурные характеристики. В то время как антитела обладают специфичностью связывания в отношении конкретного антигена, иммуноглобулины включают как антитела, так и другие антитело-подобные молекулы, у которых отсутствует антигенная специфичность.
Термин «моноклональное антитело» означает антитело, полученное из популяции по существу однородных антител, то есть, отдельные антитела, составляющие популяцию, являются идентичными, за исключением возможных естественных мутаций, которые могут присутствовать в незначительных количествах. Моноклональные антитела являются высокоспецифичными, будучи направленными против одного антигенного сайта. В отличие от препаратов поликлональных антител, которые содержат разные антитела, направленные против разных детерминант (эпитопов), каждое моноклональное антитело направлено против одной детерминанты на антигене.
В контексте антитела термин «выделенное» означает антитело, которое было выделено и/или извлечено из примесных компонентов его природного окружения; такие примесные компоненты включают материалы, которые могут препятствовать диагностическому или терапевтическому применению антитела, и могут включать ферменты, гормоны и другие белковые или небелковые растворенные вещества.
В настоящем документе термин «FGF19-зависимое» и аналогичные термины, используемые в контексте заболевания, нарушения или состояния, означают заболевание, нарушение или иное состояние, которое полностью или частично вызвано экспрессией FGF19. В конкретных вариантах осуществления экспрессия FGF19 повышена по сравнению с контролем. В некоторых вариантах осуществления экспрессия FGF19 повышена на 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% или более, или на любое численное значение в этом диапазоне. В некоторых вариантах осуществления повышенная экспрессия FGF19 непосредственно приводит к заболеванию, нарушению или состоянию, либо его симптому. В других вариантах осуществления повышенная экспрессия FGF19 опосредованно приводит к заболеванию, нарушению или состоянию, либо его симптому.
5.2 Фармацевтические композиции
В одном аспекте настоящее изобретение относится к «фармацевтическим композициям», которые содержат пептидную последовательность (или последовательности), предложенные в настоящем документе, включая подпоследовательности, варианты и модифицированные формы иллюстративных пептидных последовательностей (например, последовательностей, приведенных в списке последовательностей или таблице 1), и один или более фармацевтически приемлемых или физиологически приемлемых разбавителей, носителей или эксципиентов. В конкретных вариантах осуществления пептидные последовательности предоставлены в сочетании с одним или более дополнительными средствами, либо отдельно. Также предложена композиция, содержащая такие одно или более дополнительных средств и один или более фармацевтически приемлемых или физиологически приемлемых разбавителей, носителей или эксципиентов. В конкретных вариантах осуществления пептидная последовательность или последовательности и дополнительное средство(а) присутствуют в терапевтически приемлемом количестве. Фармацевтические композиции могут быть использованы в соответствии со способами и вариантами применения, предложенными в настоящем документе. Так, например, фармацевтические композиции могут быть введены ex vivo или in vivo субъекту с целью осуществления на практике способов лечения и вариантов применения, предложенных в настоящем документе. Фармацевтические композиции, предложенные в настоящем документе, могут быть сформулированы для совместимости с запланированным способом или путем введения; иллюстративные пути введения описаны в настоящем документе.
В одном варианте осуществления предложены фармацевтические композиции и лекарственные формы химерной и пептидной последовательностей, которые модулируют гомеостаз желчных кислот и способны лечить связанное с гомеостазом желчных кислот или сопутствующее заболевание. В другом варианте осуществления предложены фармацевтические композиции и лекарственные формы химерной и пептидной последовательностей, которые модулируют гипергликемическое состояние, устойчивость к инсулину, гиперинсулинемию, непереносимость глюкозы, метаболический синдром или сопутствующие заболевания. В другом варианте осуществления предложены фармацевтические композиции и лекарственные формы химерной и пептидной последовательностей, которые модулируют рак или опухоль.
В некоторых аспектах фармацевтические композиции могут дополнительно содержать другие терапевтически активные средства или соединения, раскрытые в настоящем документе или известные квалифицированному специалисту, которые могут быть использованы для лечения или предотвращения различных заболеваний и нарушений, описанных в настоящем документе. Как указано выше, дополнительные терапевтически активные средства или соединения могут присутствовать в отдельной фармацевтической композиции(ях). Иллюстративные параметры и режимы дозирования описаны в настоящем документе.
Фармацевтические композиции, как правило, содержат терапевтически эффективное количество по меньшей мере одной из пептидных последовательностей, предложенных в настоящем документе, включая подпоследовательности, варианты и модифицированные формы иллюстративных пептидных последовательностей (например, последовательностей, приведенных в списке последовательностей или таблице 1), и один или более фармацевтически и физиологически приемлемых вспомогательных компонентов препарата. В конкретных вариантах осуществления фармацевтическая композиция дополнительно содержит одно или более дополнительных средств, описанных в настоящем документе.
В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция содержит пептид, предложенный в настоящем документе. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит терапевтически эффективное количество пептида, предложенного в настоящем документе. В конкретных вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит фармацевтически приемлемый или физиологически приемлемый разбавитель, носитель или эксципиент. В конкретном варианте осуществления пептид содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 70. В другом варианте осуществления пептид состоит из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 70. В конкретном варианте осуществления пептид содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 204. В другом варианте осуществления пептид состоит из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 204. В конкретных вариантах осуществления фармацевтическая композиция дополнительно содержит одно или более дополнительных средств, описанных в настоящем документе.
В конкретных вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит пептид в концентрации 0,1-100 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит пептид в концентрации 1-10 мг/мл. В конкретных вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит пептид в концентрации 1 мг/мл. В другом варианте осуществления пептид присутствует в концентрации 5 мг/мл. В конкретных вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит пептид в концентрации 10 мг/мл.
Соответствующие фармацевтически приемлемые или физиологически приемлемые разбавители, носители или эксципиенты включают, но не ограничиваются ими, антиоксиданты (например, аскорбиновую кислоту и натрия бисульфат), консерванты (например, бензиловый спирт, метилпарабены, этил- или н-пропил-п-гидроксибензоат), эмульгаторы, суспендирующие средства, диспергирующие средства, растворители, наполнители, объемообразующие средства, буферы, среды, разбавители и/или адъюванты. Например, подходящей средой может быть физиологический солевой раствор или цитратно-буферный солевой раствор, возможно, с добавлением других материалов, обычно используемых в фармацевтических композициях, предназначенных для парентерального введения. Нейтральный буферный солевой раствор или солевой раствор, смешанный с сывороточным альбумином, являются дополнительными иллюстративными средами. Специалисты в данной области знают множество буферов, которые можно использовать в фармацевтических композициях и лекарственных формах, описанных в настоящем документе. Типичные буферы включают, но не ограничиваются ими, фармацевтически приемлемые слабые кислоты, слабые основания или их смеси. Компоненты буфера также включают водорастворимые материалы, такие как фосфорная кислота, виннокаменная кислота, молочная кислота, янтарная кислота, лимонная кислота, уксусная кислота, аскорбиновая кислота, аспарагиновая кислота, глутаминовая кислота, а также их соли.
В конкретном варианте осуществления фармацевтическая композиция содержит фосфат калия. В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция содержит хлорид натрия. В другом варианте осуществления фармацевтическая композиция содержит трометамин (Tris). В других вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит трегалозы дигидрат. В другом варианте осуществления фармацевтическая композиция содержит TWEEN-20 (полисорбат 20). В другом варианте осуществления фармацевтическая композиция содержит соляную кислоту. В конкретном варианте осуществления фармацевтическая композиция содержит воду. Также предусмотрено использование любого сочетания из двух, трех, четырех, пяти, шести или всех семи вышеперечисленных компонентов.
Таким образом, в одном варианте осуществления фармацевтическая композиция содержит фосфат калия, хлорид натрия, трометамин (Tris), трегалозы дигидрат, TWEEN-20, соляную кислоту, воду или любое их сочетание. В конкретном варианте осуществления фармацевтическая композиция содержит фосфат калия, хлорид натрия, трометамин (Tris), трегалозы дигидрат, TWEEN-20, соляную кислоту и воду.
В одном варианте осуществления молярность Tris, используемая в фармацевтических композициях, предложенных в настоящем документе, находится в диапазоне 5-50 мМ. В другом варианте осуществления молярность Tris находится в диапазоне 10-45 мМ. В другом варианте осуществления молярность Tris находится в диапазоне 15-40 мМ. В другом варианте осуществления молярность Tris находится в диапазоне 20-35 мМ. В другом варианте осуществления молярность Tris находится в диапазоне 20-30 мМ. В другом варианте осуществления молярность Tris находится в диапазоне 20-25 мМ. В одном конкретном варианте осуществления молярность Tris составляет 20 мМ. В конкретных вариантах осуществления препарат объемом 1000 мл содержит от 2 до 3 г Tris. В некоторых вариантах осуществления препарат объемом 1000 мл содержит 2,1, 2,2, 2,3, 2,4, 2,5, 2,6, 2,7, 2,8, 2,9 или 3,0 г Tris. В некоторых вариантах осуществления препарат объемом 1000 мл содержит 2,1 г Tris. В некоторых вариантах осуществления препарат объемом 1000 мл содержит 2,2 г Tris. В некоторых вариантах осуществления препарат объемом 1000 мл содержит 2,3 г Tris. В некоторых вариантах осуществления препарат объемом 1000 мл содержит 2,4 г Tris. В некоторых вариантах осуществления препарат объемом 1000 мл содержит 2,5 г Tris. В некоторых вариантах осуществления препарат объемом 1000 мл содержит 2,6 г Tris. В некоторых вариантах осуществления препарат объемом 1000 мл содержит 2,7 г Tris. В некоторых вариантах осуществления препарат объемом 1000 мл содержит 2,8 г Tris. В некоторых вариантах осуществления препарат объемом 1000 мл содержит 2,9 г Tris. В некоторых вариантах осуществления препарат объемом 1000 мл содержит 3,0 г Tris. В некоторых вариантах осуществления препарат объемом 1000 мл содержит 2,4-2,5 г Tris.
В одном варианте осуществления концентрация трегалозы дигидрата, используемая в фармацевтических композициях, предложенных в настоящем документе, находится в диапазоне от 1% до 20% (масс/об). В другом варианте осуществления концентрация трегалозы дигидрата находится в диапазоне от 2% до 15% (масс/об). В одном варианте осуществления концентрация трегалозы дигидрата находится в диапазоне от 3% до 10% (масс/об). В другом варианте осуществления концентрация трегалозы дигидрата находится в диапазоне от 4% до 9,5% (масс/об). В одном варианте осуществления концентрация трегалозы дигидрата находится в диапазоне от 5% до 9,25% (масс/об). В другом варианте осуществления концентрация трегалозы дигидрата находится в диапазоне от 6% до 9% (масс/об). В одном варианте осуществления концентрация трегалозы дигидрата находится в диапазоне от 7% до 8,5% (масс/об). В другом варианте осуществления концентрация трегалозы дигидрата находится в диапазоне от 8% до 8,4% (масс/об). В одном варианте осуществления концентрация трегалозы дигидрата находится в диапазоне 8,1-8,3% (масс/об). В одном конкретном варианте осуществления концентрация трегалозы дигидрата составляет 8,2%. В одном конкретном варианте осуществления концентрация трегалозы дигидрата составляет 8,3% (масс/об). В конкретных вариантах осуществления препарат объемом 1000 мл содержит 92-93 г трегалозы дигидрата. В некоторых вариантах осуществления препарат объемом 1000 мл содержит 92,0, 92,1, 92,2, 92,3, 92,4, 92,5, 92,6, 92,7, 92,8, 92,9 или 93,0 г трегалозы дигидрата. В некоторых вариантах осуществления препарат объемом 1000 мл содержит 92,0 г трегалозы дигидрата. В некоторых вариантах осуществления препарат объемом 1000 мл содержит 92,1 г трегалозы дигидрата. В некоторых вариантах осуществления препарат объемом 1000 мл содержит 92,2 г трегалозы дигидрата. В некоторых вариантах осуществления препарат объемом 1000 мл содержит 92,3 г трегалозы дигидрата. В некоторых вариантах осуществления препарат объемом 1000 мл содержит 92,4 г трегалозы дигидрата. В некоторых вариантах осуществления препарат объемом 1000 мл содержит 92,5 г трегалозы дигидрата. В некоторых вариантах осуществления препарат объемом 1000 мл содержит 92,6 г трегалозы дигидрата. В некоторых вариантах осуществления препарат объемом 1000 мл содержит 92,7 г трегалозы дигидрата. В некоторых вариантах осуществления препарат объемом 1000 мл содержит 92,8 г трегалозы дигидрата. В некоторых вариантах осуществления препарат объемом 1000 мл содержит 92,9 г трегалозы дигидрата. В некоторых вариантах осуществления препарат объемом 1000 мл содержит 93,0 г трегалозы дигидрата. В некоторых вариантах осуществления препарат объемом 1000 мл содержит 92,4-92,5 г трегалозы дигидрата. В конкретных вариантах осуществления молярность трегалозы дигидрата составляет 240-300 мМ. В других вариантах осуществления молярность трегалозы дигидрата составляет 240-290 мМ. В некоторых вариантах осуществления молярность трегалозы дигидрата составляет 250-290 мМ. В других вариантах осуществления молярность трегалозы дигидрата составляет 260-290 мМ. В некоторых вариантах осуществления молярность трегалозы дигидрата составляет 270-290 мМ. В конкретных вариантах осуществления молярность трегалозы дигидрата составляет 244-245 мМ. В других вариантах осуществления молярность трегалозы дигидрата составляет примерно 280 мМ.
В одном варианте осуществления концентрация соляной кислоты, используемая в фармацевтических композициях, предложенных в настоящем документе, находится в диапазоне 0,01-1% (по объему). В другом варианте осуществления концентрация соляной кислоты находится в диапазоне 0,025-0,75% (по объему). В другом варианте осуществления концентрация соляной кислоты находится в диапазоне 0,05-0,5% (по объему). В другом варианте осуществления концентрация соляной кислоты находится в диапазоне 0,075-0,25% (по объему). В одном конкретном варианте осуществления концентрация соляной кислоты составляет 0,1% (по объему). В конкретных вариантах осуществления препарат объемом 1000 мл содержит 0,8-1,1 мл соляной кислоты. В конкретном варианте осуществления препарат объемом 1000 мл содержит 0,9-1,0 мл соляной кислоты. В конкретных вариантах осуществления препарат объемом 1000 мл содержит 0,90, 0,91, 0,92, 0,93, 0,94, 0,95, 0,96, 0,97, 0,98, 0,99 или 1,00 мл соляной кислоты. В конкретных вариантах осуществления препарат объемом 1000 мл содержит 0,90 мл соляной кислоты. В конкретных вариантах осуществления препарат объемом 1000 мл содержит 0,91 мл соляной кислоты. В конкретных вариантах осуществления препарат объемом 1000 мл содержит 0,92 мл соляной кислоты. В конкретных вариантах осуществления препарат объемом 1000 мл содержит 0,93 мл соляной кислоты. В конкретных вариантах осуществления препарат объемом 1000 мл содержит 0,94 мл соляной кислоты. В конкретных вариантах осуществления препарат объемом 1000 мл содержит 0,95 мл соляной кислоты. В конкретных вариантах осуществления препарат объемом 1000 мл содержит 0,96 мл соляной кислоты. В конкретных вариантах осуществления препарат объемом 1000 мл содержит 0,97 мл соляной кислоты. В конкретных вариантах осуществления препарат объемом 1000 мл содержит 0,98 мл соляной кислоты. В конкретных вариантах осуществления препарат объемом 1000 мл содержит 0,99 мл соляной кислоты. В конкретных вариантах осуществления препарат объемом 1000 мл содержит 1,00 мл соляной кислоты.
В одном варианте осуществления концентрация TWEEN-20, используемая в фармацевтических композициях, предложенных в настоящем документе, находится в диапазоне 0,001-0,1% (по объему). В другом варианте осуществления концентрация TWEEN-20 находится в диапазоне 0,0025-0,075% (по объему). В одном варианте осуществления концентрация TWEEN-20 находится в диапазоне 0,005-0,05% (по объему). В другом варианте осуществления концентрация TWEEN-20 находится в диапазоне 0,0075-0,025% (по объему). В одном конкретном варианте осуществления концентрация TWEEN-20 составляет 0,01% (по объему). В конкретных вариантах осуществления, препарат объемом 1000 мл содержит 0,1 мл TWEEN-20.
В одном варианте осуществления молярность фосфата калия, используемая в фармацевтических композициях, предложенных в настоящем документе, находится в диапазоне 5-50 мМ. В одном варианте осуществления молярность фосфата калия находится в диапазоне 10-40 мМ. В другом варианте осуществления молярность фосфата калия находится в диапазоне 10-35 мМ. В одном варианте осуществления молярность фосфата калия находится в диапазоне 10-30 мМ. В другом варианте осуществления молярность фосфата калия находится в диапазоне 10-25 мМ. В одном варианте осуществления молярность фосфата калия находится в диапазоне 10-20 мМ. В одном конкретном варианте осуществления молярность фосфата калия составляет 10 мМ. В одном конкретном варианте осуществления молярность фосфата калия составляет 20 мМ.
В конкретных вариантах осуществления фармацевтическая композиция не содержит фосфат калия.
В одном варианте осуществления молярность хлорида натрия, используемая в фармацевтических композициях, предложенных в настоящем документе, находится в диапазоне 50-250 мМ. В другом варианте осуществления молярность хлорида натрия находится в диапазоне 75-225 мМ. В одном варианте осуществления молярность хлорида натрия находится в диапазоне 100-200 мМ. В другом варианте осуществления молярность хлорида натрия находится в диапазоне 125-175 мМ. В одном варианте осуществления молярность хлорида натрия находится в диапазоне 130-160 мМ. В другом варианте осуществления молярность хлорида натрия находится в диапазоне 140-150 мМ. В одном конкретном варианте осуществления молярность хлорида натрия составляет 125 мМ. В одном конкретном варианте осуществления молярность хлорида натрия составляет 140 мМ. В одном конкретном варианте осуществления молярность хлорида натрия составляет 150 мМ.
В конкретных вариантах осуществления фармацевтическая композиция не содержит соль. В других конкретных вариантах осуществления фармацевтическая композиция не содержит хлорид натрия.
В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция имеет значение pH в диапазоне 6,5-9,5. В другом варианте осуществления фармацевтическая композиция имеет значение pH в диапазоне 6,8-9,3. В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция имеет значение pH в диапазоне 7,0-9,0. В другом варианте осуществления фармацевтическая композиция имеет значение pH в диапазоне 7,3-8,7. В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция имеет значение pH в диапазоне 7,5-8,5. В другом варианте осуществления фармацевтическая композиция имеет значение pH в диапазоне 7,7-8,2. В одном конкретном варианте осуществления значение pH фармацевтической композиции составляет 7,3. В одном конкретном варианте осуществления значение pH фармацевтической композиции составляет 7,5. В одном конкретном варианте осуществления значение pH фармацевтической композиции составляет 8,0. В одном конкретном варианте осуществления значение pH фармацевтической композиции составляет 8,5. Измерение pH можно выполнять при температуре 4°C.
В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция, предложенная в настоящем документе, содержит 20 мМ Tris (например, 2,423 г в 1000 мл раствора). В другом варианте осуществления фармацевтическая композиция, предложенная в настоящем документе, содержит 8,2% (масс/об) трегалозы дигидрата (например, 92,55 г в 1000 мл раствора). В другом варианте осуществления фармацевтическая композиция, предложенная в настоящем документе, содержит 0,01% (по объему) TWEEN-20 (например, 0,1 мл в 1000 мл раствора). В другом варианте осуществления фармацевтическая композиция, предложенная в настоящем документе, содержит соляную кислоту, N.F. (например, 0,94 мл в 1000 мл раствора) и, в конкретных вариантах осуществления, дополнительно содержит воду категории «для инъекций» (добавленную до 999 мл). Также предусмотрено любое сочетание из двух, трех, четырех, пяти или всех шести из вышеперечисленных компонентов. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция, предложенная в настоящем документе, имеет значение pH 7,7-8,2, например, выше 7,7, выше 7,8, выше 7,9, выше 8,0 или выше 8,1, измеренное при температуре 25°C. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция, предложенная в настоящем документе, имеет значение pH выше 7,7, измеренное при температуре 25°C. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция, предложенная в настоящем документе, имеет значение pH выше 7,8, измеренное при температуре 25°C. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция, предложенная в настоящем документе, имеет значение pH выше 7,9, измеренное при температуре 25°C. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция, предложенная в настоящем документе, имеет значение pH выше 8,0, измеренное при температуре 25°C. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция, предложенная в настоящем документе, имеет значение pH выше 8,1, измеренное при температуре 25°C. В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция, предложенная в настоящем документе, имеет значение pH 7,9-8,1, например, измеренное при температуре 25°C. В конкретных вариантах осуществления фармацевтическая композиция, предложенная в настоящем документе, имеет значение pH 8,0, например, измеренное при температуре 25°C. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция, предложенная в настоящем документе, имеет значение pH 8,5, например, измеренное при температуре 4°C.
Таким образом, в одном варианте осуществления фармацевтическая композиция содержит фосфат калия, хлорид натрия, трометамин (Tris), трегалозы дигидрат, TWEEN-20, соляную кислоту, воду или любое их сочетание. В конкретном варианте осуществления фармацевтическая композиция содержит фосфат калия, хлорид натрия, трометамин (Tris), трегалозы дигидрат, TWEEN-20, соляную кислоту и воду.
В конкретном варианте осуществления фармацевтическая композиция, предложенная в настоящем документе, содержит 20 мМ Tris (2,423 г в 1000 мл раствора), 8,2% (масс/об) трегалозы дигидрата (92,55 г в 1000 мл раствора), 0,01% (по объему) TWEEN-20 (0,1 мл в 1000 мл раствора), соляную кислоту, N.F. (0,94 мл в 1000 мл раствора) и воду категории «для инъекций» (добавленную до 999 мл), и имеет значение pH 8,5 (измеренное при температуре 4°C).
В конкретных вариантах осуществления фармацевтическая композиция, предложенная в настоящем документе, не содержит соль. В конкретных вариантах осуществления фармацевтическая композиция, предложенная в настоящем документе, содержит сахар, такой как трегалоза. В конкретных вариантах осуществления фармацевтическая композиция, предложенная в настоящем документе, содержит сахар, но не содержит соль. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция, предложенная в настоящем документе, имеет значение pH 7,7-8,2, измеренное при температуре 25°C.
В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция имеет осмоляльность 250-350 осмоль/л. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция имеет осмоляльность 275-325 осмоль/л. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция имеет осмоляльность 295-305 осмоль/л. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция имеет осмоляльность 295 осмоль/л. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция имеет осмоляльность 296 осмоль/л. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция имеет осмоляльность 297 осмоль/л. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция имеет осмоляльность 298 осмоль/л. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция имеет осмоляльность 299 осмоль/л. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция имеет осмоляльность 300 осмоль/л. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция имеет осмоляльность 301 осмоль/л. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция имеет осмоляльность 302 осмоль/л. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция имеет осмоляльность 303 осмоль/л. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция имеет осмоляльность 304 осмоль/л. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция имеет осмоляльность 305 осмоль/л.
Хотя приведены конкретные числа (и диапазоны чисел), понятно, что в конкретных вариантах осуществления численные значения в пределах, например, 2%, 5%, 10%, 15% или 20%, от указанных чисел (или диапазонов чисел) также предусмотрены. Другие иллюстративные фармацевтические композиции приведены в «Экспериментальном разделе», ниже.
Основной растворитель в среде может быть либо водным, либо неводным по своей природе. Кроме того, среда может содержать другие фармацевтически приемлемые эксципиенты для модификации или поддержания значения pH, осмолярности, вязкости, стерильности или стабильности фармацевтической композиции. В конкретных вариантах осуществления фармацевтически приемлемая среда представляет собой водный буфер. В других вариантах осуществления среда содержит, например, хлорид натрия и/или цитрат натрия.
Фармацевтические композиции, предложенные в настоящем документе, могут дополнительно содержать другие фармацевтически приемлемые компоненты препарата для модификации или поддержания скорости высвобождения пептида и/или дополнительного средства, описанного в настоящем документе. Такие компоненты препарата включают вещества, которые специалисты в данной области используют для получения препаратов с замедленным высвобождением. Для получения дополнительной информации относительно фармацевтически и физиологически приемлемых компонентов препарата, смотри, например, сборники Remington's Pharmaceutical Sciences, 18е издание (1990, Mack Publishing Co., Easton, Pa. 18042) страницы 1435-1712, The Merck Index, 12е издание (1996, Merck Publishing Group, Whitehouse, NJ); и Pharmaceutical Principles of Solid Dosage Forms (1993, Technonic Publishing Co., Inc., Lancaster, Pa). Дополнительные фармацевтические композиции, подходящие для введения, известны в данной области и могут быть использованы в способах и композициях, предложенных в настоящем документе.
Фармацевтическую композицию можно хранить в стерильном флаконе в виде раствора, суспензии, геля, эмульсии, твердого вещества, либо высушенного или лиофилизированного порошка. Такие композиции можно хранить либо в готовой к употреблению форме, лиофилизированной форме, нуждающейся в восстановлении перед использованием, жидкой форме, нуждающейся в разбавлении перед использованием, либо в другой приемлемой форме. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическую композицию предоставляют в одноразовом контейнере (например, одноразовом флаконе, ампуле, шприце или автоинъекторе (аналогичном, например, устройству EpiPen®)), в то время как в других вариантах осуществления предоставляют многоразовый контейнер (например, многоразовый флакон). Любое устройство для доставки лекарственных средств можно использовать для доставки пептидов и других средств, описанных в настоящем документе, включая имплантаты (например, имплантируемые насосы) и системы катетеров; оба вида устройств известны специалистам в данной области. Инъекцию веществ замедленной абсорбции, которую обычно вводят подкожно или внутримышечно, также можно использовать с целью высвобождения пептидов и/или других средств, описанных в настоящем документе, на протяжении определенного периода времени. Инъекции веществ замедленной абсорбции, как правило, имеют твердую или масляную основу и обычно содержат по меньшей мере один из компонентов препарата, описанных в настоящем документе. Специалисту в данной области знакомы возможные препараты и способы применения инъекций веществ замедленной абсорбции. В конкретных вариантах осуществления предусмотрено использование технологии доставки инъекции веществ замедленной абсорбции от компании Nano Precision Medical (Nano Precision Medical; Emeryville, CA). По данной технологии используют мембрану из титановых нанотрубок, которая обеспечивает скорости высвобождения нулевого порядка для макромолекул, таких как белковые и пептидные терапевтические препараты. Биосовместимую мембрану помещают в небольшой подкожный имплантат, который обеспечивает долгосрочную (например, до одного года) доставку терапевтических макромолекул с постоянной скоростью. В настоящее время данная технология проходит оценку, например, для доставки агонистов GLP-1 для лечения диабета II типа.
Фармацевтическая композиция может быть сформулирована для совместимости с запланированным для нее путем введения. Следовательно, фармацевтические композиции содержат носители, разбавители или эксципиенты, подходящие для введения различными путями введения, включая парентеральный (например, подкожный (п/к), внутривенный, внутримышечный или внутрибрюшинный), внутрикожный, пероральный (например, прием внутрь), ингаляцию, введение в полости тела, интракраниальный и чрескожный (топический) пути введения. Другие иллюстративные пути введения описаны в настоящем документе.
Фармацевтические композиции могут находиться в форме стерильной инъекционной водной или масляной суспензии. Такая суспензия может быть сформулирована с использованием соответствующих диспергирующих или увлажняющих средств, а также суспендирующих средств, раскрытых в настоящем документе или известных квалифицированному специалисту. Стерильный инъекционный препарат также может представлять собой стерильный инъекционный раствор или суспензию в нетоксичном, приемлемом для парентерального введения разбавителе или растворителе, например, раствор в 1,3-бутандиоле. Приемлемые разбавители, растворители и дисперсионные среды, которые можно использовать, включают воду, раствор Рингера, изотонический раствор хлорида натрия, кремофор EL™ (BASF, Parsippany, NJ) или фосфатно-солевой буфер (PBS), этанол, полиол (например, глицерин, пропиленгликоль и жидкий полиэтиленгликоль), а также соответствующие их смеси. Кроме того, в качестве растворителя или суспензионной среды обычно используют стерильные нелетучие масла. Для этой цели можно использовать любое легкое нелетучее масло, включая синтетические моно- или диглицериды. Кроме того, для получения инъекционных препаратов используют жирные кислоты, такие как олеиновая кислота. Пролонгированной абсорбции конкретных инъекционных препаратов можно добиваться за счет включения средства, замедляющего абсорбцию (например, алюминия моностеарата или желатина).
В одном варианте осуществления фармацевтические композиции, предложенные в настоящем документе, можно вводить парентерально путем инъекции, инфузии или имплантации, для локального или системного введения. Используемый в настоящем документе термин «парентеральное введение» включает внутривенное, внутриартериальное, внутрибрюшинное, интратекальное, интравентрикулярное, интрауретральное, интрастернальное, интракраниальное, внутримышечное, внутрисуставное и подкожное введение.
В одном варианте осуществления фармацевтические композиции, предложенные в настоящем документе, могут быть сформулированы в любые лекарственные формы, которые подходят для парентерального введения, включая растворы, суспензии, эмульсии, мицеллы, липосомы, микросферы, наносистемы и твердые формы, подходящие для растворения или суспендирования в жидкости перед инъекцией. Такие лекарственные формы могут быть получены общепринятыми методами, известными специалистам в области фармацевтической науки (смотри, например, Remington, The Science и Practice of Pharmacy, выше).
В одном варианте осуществления фармацевтические композиции, предназначенные для парентерального введения, могут содержать один или более фармацевтически приемлемых носителей и эксципиентов, включая, но без ограничения, водные среды, смешивающиеся с водой среды, неводные среды, противомикробные средства или консерванты, препятствующие росту микроорганизмов, стабилизаторы, средства, повышающие растворимость, изотонические средства, буферные средства, антиоксиданты, местные анестетики, суспендирующие и диспергирующие средства, увлажнители или эмульгаторы, комплексообразователи, секвестрирующие или хелатирующие средства, криопротекторы, лиопротекторы, загустители, регуляторы pH и инертные газы.
В одном варианте осуществления соответствующие водные среды включают, но не ограничиваются ими, воду, солевой раствор, физиологический солевой раствор или фосфатно-солевой буфер (PBS), инъекционный хлорид натрия, инъекционный раствор Рингера, изотонический инъекционный раствор декстрозы, стерильную воду для инъекций, инъекционный раствор Рингера с декстрозой и инъекционный раствор Рингера лактат. Неводные среды включают, но не ограничиваются ими, нелетучие растительные масла, касторовое масло, кукурузное масло, хлопковое масло, оливковое масло, арахисовое масло, масло мяты перечной, сафлоровое масло, кунжутное масло, соевое масло, гидрогенизированные растительные масла, гидрогенизированное соевое масло и триглицериды средней цепи из кокосового масла, а также пальмовое масло. Смешивающиеся с водой среды включают, но не ограничиваются ими, этанол, 1,3-бутандиол, жидкий полиэтиленгликоль (например, полиэтиленгликоль 300 и полиэтиленгликоль 400), пропиленгликоль, глицерин, N-метил-2-пирролидон, N,N-диметилацетамид и диметилсульфоксид.
В одном варианте осуществления соответствующие противомикробные средства или консерванты включают, но не ограничиваются ими, фенолы, крезолы, ртутные препараты, бензиловый спирт, хлорбутанол, метил- и пропил-п-гидроксибензоаты, тимеросал, бензалконий хлорид (например, бензэтоний хлорид), метил- и пропилпарабены, а также сорбиновую кислоту. Соответствующие изотонические средства включают, но не ограничиваются ими, хлорид натрия, глицерин и декстрозу. Соответствующие буферные средства включают, но не ограничиваются ими, фосфат и цитрат. Соответствующие антиоксиданты являются такими, как описано в настоящем документе, включая бисульфит и метaбисульфит натрия. Соответствующие местные анестетики включают, но не ограничиваются им, прокаин гидрохлорид. Соответствующие суспендирующие и диспергирующие средства являются такими, как описано в настоящем документе, включая натрий-карбоксиметилцеллюлозу, гидроксипропилметилцеллюлозу и поливинилпирролидон. Соответствующие эмульгаторы включают те, которые описаны в настоящем документе, включая полиоксиэтилен сорбитан монолаурат, моноолеат полиоксиэтиленсорбитана 80 и триэтаноламин олеат. Соответствующие секвестрирующие или хелатирующие средства включают, но не ограничиваются ими, ЭДТА. Соответствующие регуляторы pH включают, но не ограничиваются ими, гидроксид натрия, соляную кислоту, лимонную кислоту и молочную кислоту. Соответствующие комплексообразователи включают, но не ограничиваются ими, циклодекстрины, в том числе a-циклодекстрин, b-циклодекстрин, гидроксипропил-b-циклодекстрин, сульфобутилэфир-b-циклодекстрин и сульфобутилэфир-7-b-циклодекстрин (CAPTISOL®, CyDex, Lenexa, KS).
В одном варианте осуществления фармацевтические композиции, предложенные в настоящем документе, могут быть сформулированы для введения одной дозой или несколькими дозами. Препараты для введения одной дозой помещают в ампулу, флакон или шприц. Парентеральные препараты для введения несколькими дозами могут содержать противомикробные средства в бактериостатических или фунгистатических концентрациях. Все парентеральные препараты должны быть стерильными, как известно и принято в данной области.
В одном варианте осуществления фармацевтические композиции предоставляют в виде готовых для использования стерильных растворов. В другом варианте осуществления фармацевтические композиции предоставляют в виде стерильных сухих растворимых препаратов, включая лиофилизированные порошки и гиподермальные таблетки, которые восстанавливают в среде перед использованием. В другом варианте осуществления фармацевтические композиции предоставляют в виде готовых для использования стерильных суспензий. В другом варианте осуществления фармацевтические композиции предоставляют в виде стерильных сухих нерастворимых препаратов, которые восстанавливают в среде перед использованием. В другом варианте осуществления фармацевтические композиции предоставляют в виде готовых для использования стерильных эмульсий.
В одном варианте осуществления фармацевтические композиции, предложенные в настоящем документе, могут быть сформулированы в виде лекарственных форм с немедленным или модифицированным высвобождением, включая формы с отсроченным, замедленным, импульсным, контролируемым, направленным и программируемым высвобождением.
В одном варианте осуществления фармацевтические композиции могут быть сформулированы в виде суспензии, твердого, полутвердого препарата или тиксотропной жидкости для введения в виде имплантированного депо. В одном варианте осуществления фармацевтические композиции, предложенные в настоящем документе, диспергированы в твердой внутренней матрице, окруженной наружной полимерной мембраной, которая нерастворима в жидкостях тела, но позволяет активному ингредиенту в фармацевтических композициях диффундировать через нее.
В одном варианте осуществления материалы соответствующих внутренних матриц включают полиметилметакрилат, полибутилметакрилат, пластифицированный или непластифицированный поливинилхлорид, пластифицированный нейлон, пластифицированный полиэтилентерефталат, природный каучук, полиизопрен, полиизобутилен, полибутадиен, полиэтилен, этиленвинилацетатные сополимеры, силиконовые каучуки, полидиметилсилоксаны, сополимеры с кремний-углеродной связью, гидрофильные полимеры, такие как гидрогели сложных эфиров акриловой и метакриловой кислот, коллаген, сшитый поливиниловый спирт и сшитый частично гидролизованный поливинилацетат.
В одном варианте осуществления материалы соответствующих наружных полимерных мембран включают полиэтилен, полипропилен, сополимеры этилена/пропилена, сополимеры этилена/этилакрилата, сополимеры этилена/винилацетата, силиконовые каучуки, полидиметилсилоксаны, неопреновый каучук, хлорированный полиэтилен, поливинилхлорид, сополимеры винилхлорида с винилацетатом, винилиденхлоридом, этиленом и пропиленом, ионосодержащий полиэтилентерефталат, бутиловые каучуки, эпихлорогидриновые каучуки, сополимер этилена/винилового спирта, сополимер этилена/винилоксиэтанола и терполимер этилена/винилацетата/винилового спирта.
Фармацевтические композиции могут находиться в форме, подходящей для перорального применения, например, в виде таблеток, капсул, лепешек, пастилок, водных или масляных суспензий, диспергируемых порошков или гранул, эмульсий, твердых или мягких капсул, либо сиропов, растворов, микрогранул или эликсиров. Фармацевтические композиции, предназначенные для перорального применения, могут быть изготовлены любым из способов, известных в области производства фармацевтических композиций. Такие композиции могут содержать одно или более таких средств, как подсластители, ароматизаторы, красители и консерванты, для создания фармацевтических препаратов изящной формы и с приятным вкусом. Содержащийся в таблетках пептид, предложенный в настоящем документе, может находиться в смеси с нетоксичными фармацевтически приемлемыми эксципиентами, подходящими для производства таблеток. Эти эксципиенты включают, например, разбавители, такие как карбонат кальция, карбонат натрия, лактоза, фосфат кальция или фосфат натрия; гранулирующие и дезинтегрирующие средства, например, кукурузный крахмал или альгиновую кислоту; связывающие вещества, например, крахмал, желатин или гуммиарабик, и смазывающие вещества, например, стеарат магния, стеариновую кислоту или тальк.
Таблетки, капсулы, и тому подобное, которые подходят для перорального введения, могут не иметь покрытия или они могут иметь нанесенное известными методами покрытие для задержки распада и абсорбции в желудочно-кишечном тракте, и, тем самым, обеспечения замедленного высвобождения на протяжении более длительного периода времени. Например, можно использовать материал, замедляющий высвобождение, такой как глицерил моностеарат или глицерил дистеарат. На них также может быть нанесено покрытие с использованием методов, известных в данной области, для создания осмотических терапевтических таблеток с контролируемым высвобождением. Дополнительные средства включают биоразлагаемые или биосовместимые частицы, или полимерное вещество, такое как полиэфиры, полиаминокислоты, гидрогель, поливинилпирролидон, полиангидриды, полигликолевая кислота, этиленвинилацетат, метилцеллюлоза, карбоксиметилцеллюлоза, протамина сульфат, либо сополимеры лактида/гликолида, сополимеры полилактида/гликолида или этиленвинилацетатные сополимеры, для обеспечения контролируемой доставки введенной композиции. Например, пероральное средство может быть заключено в микрокапсулы, полученные методом коацервации или межповерхностной полимеризации, с использованием микрокапсул из гидроксиметилцеллюлозы или желатина, или поли(метилметакрилатных) микрокапсул, соответственно, или может находиться в коллоидной системе доставки лекарственного средства. Коллоидные дисперсные системы включают макромолекулярные комплексы, нанокапсулы, микросферы, микрогранулы и системы на основе липидов, включая эмульсии типа масло-в-воде, мицеллы, смешанные мицеллы и липосомы. Способы получения липосом описаны, например, в патентах США №№ 4235871, 4501728 и 4837028. Способы получения вышеуказанных препаратов будут очевидны для специалистов в данной области.
Препараты для перорального применения также могут быть предоставлены в виде твердых желатиновых капсул, в которых активный ингредиент смешан с инертным твердым разбавителем, например, карбонатом кальция, фосфатом кальция, каолином или микрокристаллической целлюлозой, или в виде мягких желатиновых капсул, в которых активный ингредиент смешан с водной или масляной средой, например, арахисовым маслом, вазелиновым маслом или оливковым маслом.
Водные суспензии содержат активные материалы в смеси с эксципиентами, подходящими для их производства. Такие эксципиенты представляют собой суспендирующие средства, например, натрий-карбоксиметилцеллюлозу, метилцеллюлозу, гидроксипропилметилцеллюлозу, натрия альгинат, поливинилпирролидон, трагакантовую камедь и гуммиарабик; диспергирующие или увлажняющее средства могут представлять собой природный фосфатид, например, лецитин, или продукты конденсации алкиленоксида с жирными кислотами, например, полиоксиэтилен стеарат, или продукты конденсации этиленоксида с длинноцепочечными алифатическими спиртами, например, гептадекаэтиленоксицетанол, или продукты конденсации этиленоксида с частичными сложными эфирами, полученными из жирных кислот и гексита, например, полиоксиэтилен сорбит моноолеат, или продукты конденсации этиленоксида с частичными сложными эфирами, полученными из жирных кислот и ангидридов гексита, например, моноолеат полиэтиленсорбитана. Водные суспензии также могут содержать один или более консервантов.
Масляные суспензии можно формулировать путем суспендирования активного ингредиента в растительном масле, например, арахисовом масле, оливковом масле, кунжутном масле или кокосовом масле, либо в минеральном масле, таком как вазелиновое масло. Масляные суспензии могут содержать загуститель, например, пчелиный воск, твердый парафин или цетиловый спирт. Для создания приятного на вкус перорального препарата можно добавлять подсластители, такие как те, которые указаны выше, и ароматизаторы.
Диспергируемые порошки и гранулы, подходящие для получения водной суспензии путем добавления воды, содержат активный ингредиент в смеси с диспергирующим или увлажняющим средством, суспендирующим средством и одним или более консервантами. Соответствующие диспергирующие или увлажняющие средства и суспендирующие средства описаны в настоящем документе.
Фармацевтические композиции, предложенные в настоящем документе, также могут находиться в форме эмульсии типа масло-в-воде. Масляная фаза может представлять собой растительное масло, например, оливковое масло или арахисовое масло, или минеральное масло, например, вазелиновое масло, либо их смеси. Соответствующие эмульгаторы могут представлять собой природные камеди, например, гуммиарабик или трагакантовую камедь; природные фосфатиды, например, лецитин сои, а также сложные эфиры или частичные сложные эфиры, полученные из жирных кислот и ангидридов гексита, например, сорбитан моноолеат; и продукты конденсации частичных сложных эфиров с этиленоксидом, например, моноолеат полиоксиэтиленсорбитана.
Фармацевтические композиции также могут содержать носители для защиты композиции от быстрого распада или выведения из организма, например, препараты с контролируемым высвобождением, включая имплантаты, липосомы, гидрогели, пролекарства и микроинкапсулированные системы доставки. Например, можно использовать замедляющий высвобождение материал, такой как глицерил моностеарат или глицерил стеарат, отдельно или в сочетании с воском. Пролонгированной абсорбции инъекционных фармацевтических композиций можно добиваться путем включения средства, которое замедляет абсорбцию, например, алюминия моностеарата или желатина. Защиту от микроорганизмов можно обеспечивать за счет использования различных антибактериальных и противогрибковых средств, например, парабенов, хлорбутанола, фенола, аскорбиновой кислоты, тимеросала и тому подобного.
В настоящем документе также предложены пептиды и/или одно или более дополнительных средств, описанных в настоящем документе, в форме суппозиториев для ректального введения. Суппозитории можно изготавливать путем смешивания пептида и/или одного или более дополнительных средств, описанных в настоящем документе, с соответствующим нераздражающим эксципиентом, который является твердым при обычных температурах, но жидким при ректальной температуре и, следовательно, будет плавиться в прямой кишке, высвобождая лекарственное средство. Такие материалы включают, но не ограничиваются ими, масло какао и полиэтиленгликоли.
5.3 Пептиды
В конкретных вариантах осуществления фармацевтические композиции, препараты и лекарственные формы, предложенные в настоящем документе, содержат один или более пептидов, или пептидных последовательностей, предложенных в настоящем документе. В конкретных вариантах осуществления фармацевтические композиции, препараты и лекарственные формы, предложенные в настоящем документе, содержат один или более вариантов пептидных последовательностей FGF19, продуктов слияния пептидных последовательностей FGF19 и/или FGF21, а также вариантов продуктов слияния (химер) пептидных последовательностей FGF19 и/или FGF21, которые имеют одну или более активностей, имеющих отношение к лечению и/или предотвращению связанного с гомеостазом желчных кислот или сопутствующего заболевания (например, PBC), метаболического нарушения, либо рака или опухоли. В конкретных вариантах осуществления активность представляет собой снижающую уровень глюкозы активность. Такие варианты и продукты слияния (химеры) пептидных последовательностей FGF19 и/или FGF21 включают последовательности, которые существенно не увеличивают или не индуцируют образование HCC или онкогенез HCC, и/или не вызывают существенного повышения или возрастания липидного профиля.
В одном варианте осуществления химерная пептидная последовательность включает или состоит из N-концевой области, содержащей по меньшей мере семь аминокислотных остатков, N-концевой области, имеющей первое аминокислотное положение и последнее аминокислотное положение, при этом N-концевая область содержит последовательность DSSPL (SEQ ID NO: 121) или DASPH (SEQ ID NO: 122); и C-концевой области, содержащей часть FGF19, C-концевой области, имеющей первое аминокислотное положение и последнее аминокислотное положение, при этом C-концевая область содержит аминокислотные остатки 16-29 из FGF19 (WGDPIRLRHLYTSG; SEQ ID NO: 169) и остаток W соответствует первому аминокислотному положению в C-концевой области. В конкретных вариантах осуществления, вариант представляет собой M70:
MRDSSPLVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDS16MDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (SEQ ID NO: 70).
В конкретных вариантах осуществления вариант представляет собой M69:
DSSPLVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (M69) (SEQ ID NO: 69).
В другом варианте осуществления химерная пептидная последовательность включает или состоит из N-концевой области, содержащей часть FGF21, N-концевой области, имеющей первое аминокислотное положение и последнее аминокислотное положение, при этом N-концевая область содержит последовательность GQV и остаток V соответствует последнему аминокислотному положению в N-концевой области; и C-концевой области, содержащей часть FGF19, C-концевой области, имеющей первое аминокислотное положение и последнее аминокислотное положение, при этом C-концевая область содержит аминокислотные остатки 21-29 из FGF19 (RLRHLYTSG; SEQ ID NO: 185) и остаток R соответствует первому аминокислотному положению в C-концевой области.
В конкретных аспектах настоящего изобретения раскрыты модификации области петли-8 в FGF19, которые приводят к обладанию благоприятными метаболическими параметрами без существенного проявления онкогенности. В настоящем документе остатки 127-129 в FGF19 определяют, как составляющие область петли-8, хотя в литературе область петли-8 иногда определяют, как включающую или состоящую из других остатков (например, остатков 125-129). Определенные сочетания замен R127L и P128E в каркасе FGF19 неожиданно оказали положительный эффект на образование HCC. Даже более удивительно, сочетание замен R127L и P128E и замены Gln (Q) на Leu (L) в центральной области FGF19 привело к еще более существенному эффекту на предотвращение образования HCC.
Соответственно, варианты области петли-8 в FGF19 включены в изобретение, поскольку они способны приводить к уменьшению или устранению существенного, поддающегося измерению или обнаружению образования HCC. Более того, эффект уменьшения образования HCC может быть усилен за счет модификаций аминокислотных остатков за пределами области петли-8 (например, замен аминокислотных остатков в центральной области, такой как область, соответствующая аминокислотам 21-29 в SEQ ID NO: 99). В некоторых вариантах осуществления вариант с модифицированной петлей-8 имеет замену в области петли-8 из FGF19, соответствующей аминокислотам 127-129 в SEQ ID NO: 99. В конкретных вариантах осуществления вариант с модифицированной петлей-8 имеет замену в области петли-8 из FGF19, соответствующую (i) замене R127L, (ii) замене P128E или (iii) замене R127L и замене P128E. В некоторых вариантах осуществления вариант FGF19 имеет или дополнительно имеет замену в центральной области, соответствующей аминокислотам 21-29 в SEQ ID NO: 99. В конкретных вариантах осуществления вариант FGF19 имеет или дополнительно имеет замену в центральной области, соответствующую замене L22Q. В конкретных вариантах осуществления аминокислотная последовательность пептида имеет одну аминокислотную замену в аминокислотной последовательности EIRPD (аминокислоты 2-6 в SEQ ID NO: 190) в области петли-8 из FGF19. В некоторых вариантах осуществления аминокислотная последовательность пептида имеет две аминокислотные замены в аминокислотной последовательности EIRPD (аминокислоты 2-6 в SEQ ID NO: 190) в области петли-8 из FGF19. В других вариантах осуществления аминокислотная последовательность пептида имеет три аминокислотные замены в аминокислотной последовательности EIRPD (аминокислоты 2-6 в SEQ ID NO: 190) в области петли-8 из FGF19. В конкретных вариантах осуществления аминокислотная последовательность пептида имеет четыре аминокислотные замены в аминокислотной последовательности EIRPD (аминокислоты 2-6 в SEQ ID NO: 190) в области петли-8 из FGF19. В некоторых вариантах осуществления аминокислотная последовательность пептида имеет пять аминокислотных замен в аминокислотной последовательности EIRPD (аминокислоты 2-6 в SEQ ID NO: 190) в области петли-8 из FGF19. В конкретных вариантах осуществления аминокислотная последовательность пептида имеет одну аминокислотную замену в аминокислотной последовательности IRP (аминокислоты 3-5 в SEQ ID NO: 190) в области петли-8 из FGF19. В некоторых вариантах осуществления аминокислотная последовательность пептида имеет две аминокислотные замены в аминокислотной последовательности IRP (аминокислоты 3-5 в SEQ ID NO: 190) в области петли-8 из FGF19. В других вариантах осуществления аминокислотная последовательность пептида имеет три аминокислотные замены в аминокислотной последовательности IRP (аминокислоты 3-5 в SEQ ID NO: 190) в области петли-8 из FGF19. В конкретных вариантах осуществления аминокислотная последовательность пептида имеет одну аминокислотную замену в аминокислотной последовательности RP (аминокислоты 4-5 в SEQ ID NO: 190) в области петли-8 из FGF19. В некоторых вариантах осуществления аминокислотная последовательность пептида имеет две аминокислотные замены в аминокислотной последовательности RP (аминокислоты 4-5 в SEQ ID NO: 190) в области петли-8 из FGF19. В конкретных вариантах осуществления аминокислотная замена в аминокислотной последовательности RP (аминокислоты 4-5 в SEQ ID NO: 190) в области петли-8 из FGF19 представляет собой замену Arg (R) на Leu (L). В других вариантах осуществления замена в аминокислотной последовательности RP (аминокислоты 4-5 в SEQ ID NO: 190) в области петли-8 из FGF19 представляет собой замену Pro (P) на Glu (E). В некоторых вариантах осуществления замена в аминокислотной последовательности RP (аминокислоты 4-5 в SEQ ID NO: 190) в области петли-8 из FGF19 представляет собой замену Arg (R) на Leu (L) и замену Pro (P) на Glu (E). В конкретных вариантах осуществления вышеуказанная замена(ы) в области петли-8 из FGF19 находится в соответствующей ей последовательности FGF19 в вариантном пептиде, предложенном в настоящем документе. То есть, указанные замены в составе соответствующей последовательности FGF19 (например, EIRPD, IRP или RP) вариантного пептида, предложенного в настоящем документе, также подразумеваются.
В некоторых вариантах осуществления вариант с модифицированной петлей-8 представляет собой M70:
MRDSSPLVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDS16MDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (SEQ ID NO: 70) с заменой в области петли-8 из FGF19 (подчеркнуто). В конкретных вариантах осуществления вариант M70 с модифицированной петлей-8 имеет замену в области петли-8 из FGF19 (подчеркнуто), соответствующую (i) замене R127L, (ii) замене P128E или (iii) замене R127L и замене P128E (SEQ ID NO: 204). В конкретных вариантах осуществления вариант M70 с модифицированной петлей-8 имеет или дополнительно имеет замену в центральной области FGF19. В некоторых вариантах осуществления вариант M70 с модифицированной петлей-8 имеет замену L18Q.
В некоторых вариантах осуществления, вариант с модифицированной петлей-8 представляет собой M69:
RDSSPLVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (M69) (SEQ ID NO: 69) с заменой в области петли-8 из FGF19 (подчеркнуто). В конкретных вариантах осуществления вариант M69 с модифицированной петлей-8 имеет замену в области петли-8 из FGF19 (подчеркнуто), соответствующую (i) замене R100L, (ii) замене P101E или (iii) замене R100L и замене P101E. В конкретных вариантах осуществления вариант M69 с модифицированной петлей-8 имеет или дополнительно имеет замену в центральной области FGF19. В некоторых вариантах осуществления вариант M69 с модифицированной петлей-8 имеет замену L17Q.
В некоторых вариантах осуществления вариант с модифицированной петлей-8 имеет замену в области петли-8 из FGF19, соответствующей аминокислотам 127-129 в SEQ ID NO: 3. В конкретных вариантах осуществления вариант с модифицированной петлей-8 имеет замену в области петли-8 из FGF19, соответствующую (i) замене R127L, (ii) замене P128E или (iii) замене R127L и замене P128E. В некоторых вариантах осуществления вариант FGF19 имеет или дополнительно имеет замену в центральной области, соответствующей аминокислотам 21-29 в SEQ ID NO: 3. В конкретных вариантах осуществления вариант FGF19 имеет или дополнительно имеет замену в центральной области, соответствующую замене L22Q.
В следующих вариантах осуществления пептидная последовательность включает или состоит из варианта FGF19, имеющего одну или более аминокислотных замен, вставок или делеций в сравнении с эталонным, или дикого типа, FGF19. В дополнительных вариантах осуществления пептидная последовательность включает или состоит из вариантной последовательности FGF21, имеющей одну или более аминокислотных замен, вставок или делеций в сравнении с эталонным, или дикого типа, FGF21. В дополнительных вариантах осуществления пептидная последовательность включает или состоит из части последовательности FGF19, слитой с частью последовательности FGF21. В дополнительных вариантах осуществления пептидная последовательность включает или состоит из части последовательности FGF19, слитой с частью последовательности FGF21, при этом часть(и) последовательности FGF19 и/или FGF21 имеет одну или более аминокислотных замен, вставок или делеций в сравнении с эталонным, или дикого типа, FGF19 и/или FGF21. Примеры таких последовательностей раскрыты в PCT публикации № WO 2013/006486 и публикации патентной заявки США № 2013/0023474, а также в PCT публикации № WO 2014/085365, опубликованной 5 июня 2014 г. В таблице 1 и списке последовательностей также приведены репрезентативные последовательности, которые могут быть использованы в способах, предложенных в настоящем документе.
В некоторых вариантах осуществления терапевтические пептиды, предложенные в настоящем документе, включают варианты и продукты слияния пептидных последовательностей FGF19 и/или FGF21. В одном варианте осуществления терапевтические пептиды включают один или более вариантов, либо продуктов слияния пептида FGF19 и/или FGF21. В других вариантах осуществления способы, предложенные в настоящем документе, включают создание контакта с, или введение субъекту одной или более молекул нуклеиновой кислоты, кодирующих вариант или продукт слияния пептидной последовательности FGF19 и/или FGF21 (например, элемент контроля экспрессии, функционально связанный с нуклеиновой кислотой, кодирующей пептидную последовательность, необязательно, включая вектор), в количестве, эффективном для лечения связанного с гомеостазом желчных кислот или сопутствующего заболевания.
Репрезентативная эталонная, или дикого типа, последовательность FGF19 приведена далее:
RPLAFSDAGPHVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (SEQ ID NO: 99).
Репрезентативная эталонная, или дикого типа, последовательность FGF21 приведена далее:
HPIPDSSPLLQFGGQVRQRYLYTDDAQQTEAHLEIREDGTVGGAADQSPESLLQLKALKPGVIQILGVKTSRFLCQRPDGALYGSLHFDPEACSFRELLLEDGYNVYQSEAHGLPLHLPGNKSPHRDPAPRGPARFLPLPGLPPALPEPPGILAPQPPDVGSSDPLSMVGPSQGRSPSYAS (SEQ ID NO: 100). Аллельные варианты FGF21 включают, например, M70, M71 и M72.
Термины «пептидная» «белковая» и «полипептидная» последовательность используют в настоящем документе взаимозаменяемо для обозначения двух или более аминокислот, или «остатков», включая химические модификации и производные аминокислот, ковалентно связанных амидной, или эквивалентной, связью. Аминокислоты, образующие весь или часть пептида, могут быть из числа известных 21 природных аминокислот, которые обозначают как однобуквенным сокращением, так и обычным трехбуквенным сокращением. В пептидных последовательностях, предложенных в настоящем документе, обычные аминокислотные остатки имеют их обычное обозначение. Таким образом, «Leu» означает лейцин, «Ile» означает изолейцин, «Nle» означает норлейцин, и так далее.
В различных конкретных аспектах пептидная или химерная последовательность, предложенная в настоящем документе, имеет в первом аминокислотном положении N-концевой области остаток «M», остаток «R», остаток «S», остаток «H», остаток «P», остаток «L» или остаток «D». В различных альтернативных конкретных аспектах пептидная или химерная пептидная последовательность не имеет остатка «M» или остатка «R» в первом аминокислотном положении N-концевой области.
В настоящем документе также предложены подпоследовательности, варианты и модифицированные формы иллюстративных пептидных последовательностей (включая варианты и подпоследовательности FGF19 и FGF21, приведенные в списке последовательностей или таблице 1), при условии, что вышеуказанные последовательности сохраняют по меньшей мере поддающуюся обнаружению или измерению активность, либо функцию. Кроме того, некоторые иллюстративные вариантные пептиды, например, те, которые содержат всю или часть последовательности FGF21 на амино-конце, имеют остаток «R», расположенный на N-конце, который может отсутствовать. Аналогично, некоторые иллюстративные вариантные пептиды содержат остаток «M», расположенный на N-конце, который может быть добавлен или заменять отсутствующий остаток, такой как остаток «R». Более конкретно, в различных вариантах осуществления пептидные последовательности на N-конце содержат любую из последовательностей: RDSS (SEQ ID NO: 115), DSS, MDSS (SEQ ID NO: 116) или MRDSS (SEQ ID NO: 117). Кроме того, если остаток «M» находится рядом с остатком «S», остаток «M» может быть отщеплен так, что остаток «M» делетируется из пептидной последовательности, в то время как если остаток «M» находится рядом с остатком «D», остаток «M» не может быть отщеплен. Таким образом, в качестве примера, в различных вариантах осуществления пептидные последовательности включают последовательности со следующими остатками на N-конце: MDSSPL (SEQ ID NO: 119), MSDSSPL (SEQ ID NO: 120) (расщеплен до SDSSPL (SEQ ID NO: 112)) и MSSPL (SEQ ID NO: 113) (расщеплен до SSPL (SEQ ID NO: 114)).
В настоящем документе приведены иллюстративные пептидные последовательности, отличные от эталонных полипептидов FGF19 и FGF21, приведенных в настоящем документе, которые модулируют гомеостаз желчных кислот, гипергликемические состояния, устойчивость к инсулину, гиперинсулинемию, непереносимость глюкозы, метаболический синдром или сопутствующие заболевания in vivo (например, таблица 1 и список последовательностей). Неограничивающими конкретными примерами являются пептидная последовательность с амино-концевыми аминокислотами 1-16 из FGF21, слитыми с карбокси-концевыми аминокислотами 21-194 из FGF19; пептидная последовательность с амино-концевыми аминокислотами 1-147 из FGF19, слитыми с карбокси-концевыми аминокислотами 147-181 из FGF21; пептидная последовательность с амино-концевыми аминокислотами 1-20 из FGF19, слитыми с карбокси-концевыми аминокислотами 17-181 из FGF21; пептидная последовательность с амино-концевыми аминокислотами 1-146 из FGF21, слитыми с карбокси-концевыми аминокислотами 148-194 из FGF19, и пептидная последовательность с амино-концевыми аминокислотами 1-20 из FGF19, слитыми с внутренними аминокислотами 17-146 из FGF21, слитыми с карбокси-концевыми аминокислотами 148-194 из FGF19.
Дополнительные конкретные пептидные последовательности содержат фрагмент последовательности WGDPI (SEQ ID NO: 170), соответствующий последовательности WGDPI аминокислот 16-20 в FGF19 (SEQ ID NO: 99); лишены фрагмента последовательности WGDPI (SEQ ID NO: 170), соответствующего последовательности WGDPI аминокислот 16-20 в FGF19 (SEQ ID NO: 99), или содержат имеющий замены (то есть, мутантный) фрагмент последовательности WGDPI (SEQ ID NO: 170), соответствующий последовательности WGDPI аминокислот 16-20 в FGF19 (SEQ ID NO: 99).
Конкретные пептидные последовательности, предложенные в настоящем документе, также включают последовательности, отличающиеся от FGF19 и FGF21 (например, приведенных в настоящем документе), и вариантных последовательностей FGF19, имеющих любую из последовательностей GQV, GDI, WGPI (SEQ ID NO: 171), WGDPV (SEQ ID NO: 172), WGDI (SEQ ID NO: 173), GDPI (SEQ ID NO: 174), GPI, WGQPI (SEQ ID NO: 175), WGAPI (SEQ ID NO: 176), AGDPI (SEQ ID NO: 177), WADPI (SEQ ID NO: 178), WGDAI (SEQ ID NO: 179), WGDPA (SEQ ID NO: 180), WDPI (SEQ ID NO: 181), WGDI (SEQ ID NO: 182), WGDP (SEQ ID NO: 183) или FGDPI (SEQ ID NO: 184) вместо последовательности WGDPI (SEQ ID NO: 170) из FGF19 на участке аминокислот 16-20. Соответственно, последовательности дикого типа FGF19 и FGF21 (например, приведенные в настоящем документе в виде SEQ ID NOS: 99 и 100, соответственно) могут быть исключенными последовательностями, и последовательность FGF19, имеющая любую из последовательностей GQV, GDI, WGPI (SEQ ID NO: 171), WGDPV (SEQ ID NO: 172), WGDI (SEQ ID NO: 173), GDPI (SEQ ID NO: 174), GPI, WGQPI (SEQ ID NO: 175), WGAPI (SEQ ID NO: 176), AGDPI (SEQ ID NO: 177), WADPI (SEQ ID NO: 178), WGDAI (SEQ ID NO: 179), WGDPA (SEQ ID NO: 180), WDPI (SEQ ID NO: 181), WGDI (SEQ ID NO: 182), WGDP (SEQ ID NO: 183) или FGDPI (SEQ ID NO: 184) вместо последовательности WGDPI (SEQ ID NO: 170) на участке аминокислот 16-20 в FGF19, также может быть исключена. Такое исключение, однако, не применимо, когда последовательность имеет, например, 3 остатка FGF21, слитые с последовательностью FGF19, имеющей, например, любую из последовательностей GQV, GQV, GDI, или GPI, либо 2 остатка FGF21, слитые с любой из последовательностей WGPI (SEQ ID NO: 171), WGDI (SEQ ID NO: 173), GDPI (SEQ ID NO: 174), WDPI (SEQ ID NO: 181), WGDI (SEQ ID NO: 182) или WGDP (SEQ ID NO: 183).
Конкретные неограничивающие примеры пептидных последовательностей содержат или состоят из всех или части вариантных последовательностей, обозначенных в настоящем документе M1-M98 (SEQ ID NOs: 1-52, 192 и 54-98, соответственно). Более конкретные неограничивающие примеры пептидных последовательностей содержат или состоят из всех или части последовательностей, приведенных далее:
HPIPDSSPLLQFGGQVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (M5-R) (SEQ ID NO: 160) (последовательности FGF21 также могут иметь остаток «R» на амино-конце);
DSSPLLQFGGQVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (SEQ ID NO: 138 и 161);
RPLAFSDASPHVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (M1) (SEQ ID NO: 1 или 139);
RPLAFSDSSPLVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (M2) (SEQ ID NO: 2 или 140);
DSSPLVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (SEQ ID NO: 141);
RDSSPLVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (M69) (SEQ ID NO: 69);
RDSSPLLQWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (M52) (SEQ ID NO: 52);
HPIPDSSPLLQFGGQVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (M5-R) (SEQ ID NO: 160);
HPIPDSSPLLQFGGQVRQRYLYTDDAQQTEAHLEIREDGTVGGAADQSPESLLQLKALKPGVIQILGVKTSRFLCQRPDGALYGSLHFDPEACSFRELLLEDGYNVYQSEAHSLPLHLPGNKSPHRDPAPRGPARFLPLPGLPPALPEPPGILAPQPPDVGSSDPLSMVGPSQGRSPSYAS (M71) (SEQ ID NO: 71);
HPIPDSSPLLQFGGQVRQRYLYTDDAQQTEAHLEIREDGTVGGAADQSPESLLQLKALKPGVIQILGVKTSRFLCQRPDGALYGSLHFDPEACSFRELLLEDGYNVYQSEAHGLPLHLPGNKSPHRDPAPRGPARFLPLPGLPPAPPEPPGILAPQPPDVGSSDPLSMVGPSQGRSPSYAS (M72) (SEQ ID NO: 72);
HPIPDSSPLLQFGGQVRQRYLYTDDAQQTEAHLEIREDGTVGGAADQSPESLLQLKALKPGVIQILGVKTSRFLCQRPDGALYGSLHFDPEACSFRELLLEDGYNVYQSEAHGLPLHLPGNKSPHRDPAPRGPARFLPLPGLPPALPEPPGILAPQPPDVGSSDPLSMVVQDELQGVGGEGCHMHPENCKTLLTDIDRTHTEKPVWDGITGE (M73) (SEQ ID NO: 73);
RPLAFSDAGPHVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEILEDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (M3) (SEQ ID NO: 3);
RDSSPLLQFGGQVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (M48) (SEQ ID NO: 48, 6 или 148);
RPLAFSDSSPLLQFGGQVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (M49) (SEQ ID NO: 49, 7 или 149);
RHPIPDSSPLLQFGDQVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEILEDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (M50) (SEQ ID NO: 50);
RHPIPDSSPLLQFGGNVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (M51) (SEQ ID NO: 51, 36 или 155);
MDSSPLLQWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (M53) (SEQ ID NO: 192);
MRDSSPLVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (M70) (SEQ ID NO: 70);
RPLAFSDAGPHVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEILPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (M139) (SEQ ID NO: 193);
RPLAFSDAGPHVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIREDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (M140) (SEQ ID NO: 194);
RPLAFSDAGPHVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEILCDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (M141) (SEQ ID NO: 195); или
RPLAFSDAGPHVHYGWGDPIRQRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEILEDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (M160) (SEQ ID NO: 196);
либо подпоследовательности или фрагмента любой из вышеприведенных пептидных последовательностей. В конкретных вариантах осуществления любой из вышеприведенных пептидных последовательностей концевой остаток R делетирован.
Дополнительные конкретные неограничивающие примеры пептидных последовательностей, имеющих на N-конце пептидную последовательность, содержащую или состоящую из всех или части любой из последовательностей:
HPIPDSSPLLQFGGQVRLRHLYTSG (M5-R) (аминокислоты 1-25 в SEQ ID NO: 160);
DSSPLLQFGGQVRLRHLYTSG (M6) (M6-R) (аминокислоты 2-22 в SEQ ID NO: 6);
RPLAFSDSSPLLQFGGQVRLRHLYTSG (M7) (аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 7);
HPIPDSSPLLQWGDPIRLRHLYTSG (M8-R) (аминокислоты 2-26 в SEQ ID NO: 8);
HPIPDSSPLLQFGWGDPIRLRHLYTSG (M9-R) (аминокислоты 2-28 в SEQ ID NO: 9);
HPIPDSSPHVHYGWGDPIRLRHLYTSG (M10-R) (аминокислоты 2-28 в SEQ ID NO: 10);
RPLAFSDAGPLLQWGDPIRLRHLYTSG (M11) (аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 11);
RPLAFSDAGPLLQFGWGDPIRLRHLYTSG (M12) (аминокислоты 1-29 в SEQ ID NO: 12);
RPLAFSDAGPLLQFGGQVRLRHLYTSG (M13) (аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 13);
HPIPDSSPHVHYGGQVRLRHLYTSG (M14-R) (аминокислоты 2-26 в SEQ ID NO: 14);
RPLAFSDAGPHVHYGGQVRLRHLYTSG (M15) (аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 15);
RPLAFSDAGPHVHWGDPIRLRHLYTSG (M16) (аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 16);
RPLAFSDAGPHVGWGDPIRLRHLYTSG (M17) (аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 17);
RPLAFSDAGPHYGWGDPIRLRHLYTSG (M18) (аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 18);
RPLAFSDAGPVYGWGDPIRLRHLYTSG (M19) (аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 19);
RPLAFSDAGPVHGWGDPIRLRHLYTSG (M20) (аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 20);
RPLAFSDAGPVHYWGDPIRLRHLYTSG (M21) (аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 21);
RPLAFSDAGPHVHGWGDPIRLRHLYTSG (M22) (аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 22);
RPLAFSDAGPHHGWGDPIRLRHLYTSG (M23) (аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 23);
RPLAFSDAGPHHYWGDPIRLRHLYTSG (M24) (аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 24);
RPLAFSDAGPHVYWGDPIRLRHLYTSG (M25) (аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 25);
RPLAFSDSSPLVHWGDPIRLRHLYTSG (M26) (аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 26);
RPLAFSDSSPHVHWGDPIRLRHLYTSG (M27) (аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 27);
RPLAFSDAGPHVWGDPIRLRHLYTSG (M28) (аминокислоты 1-26 в SEQ ID NO: 28);
RPLAFSDAGPHVHYWGDPIRLRHLYTSG (M29) (аминокислоты 1-28 в SEQ ID NO: 29);
RPLAFSDAGPHVHYAWGDPIRLRHLYTSG (M30) (аминокислоты 1-29 в SEQ ID NO: 30);
RHPIPDSSPLLQFGAQVRLRHLYTSG (M31) (аминокислоты 1-26 в SEQ ID NO: 31);
RHPIPDSSPLLQFGDQVRLRHLYTSG (M32) (аминокислоты 1-26 в SEQ ID NO: 32);
RHPIPDSSPLLQFGPQVRLRHLYTSG (M33) (аминокислоты 1-26 в SEQ ID NO: 33);
RHPIPDSSPLLQFGGAVRLRHLYTSG (M34) (аминокислоты 1-26 в SEQ ID NO: 34);
RHPIPDSSPLLQFGGEVRLRHLYTSG (M35) (аминокислоты 1-26 в SEQ ID NO: 35);
RHPIPDSSPLLQFGGNVRLRHLYTSG (M36) (аминокислоты 1-26 в SEQ ID NO: 36);
RHPIPDSSPLLQFGGQARLRHLYTSG (M37) (аминокислоты 1-26 в SEQ ID NO: 37);
RHPIPDSSPLLQFGGQIRLRHLYTSG (M38) (аминокислоты 1-26 в SEQ ID NO: 38);
RHPIPDSSPLLQFGGQTRLRHLYTSG (M39) (аминокислоты 1-26 в SEQ ID NO: 39);
RHPIPDSSPLLQFGWGQPVRLRHLYTSG (M40) (аминокислоты 1-28 в SEQ ID NO: 40);
DAGPHVHYGWGDPIRLRHLYTSG (M74-R) (аминокислоты 2-24 в SEQ ID NO: 74);
VHYGWGDPIRLRHLYTSG (M75-R) (аминокислоты 2-19 в SEQ ID NO: 75);
RLRHLYTSG (M77-R) (аминокислоты 2-10 в SEQ ID NO: 77);
RHPIPDSSPLLQFGWGDPIRLRHLYTSG (M9) (аминокислоты 1-28 в SEQ ID NO: 9);
RHPIPDSSPLLQWGDPIRLRHLYTSG (M8) (аминокислоты 1-26 в SEQ ID NO: 8);
RPLAFSDAGPLLQFGWGDPIRLRHLYTSG (M12) (аминокислоты 1-29 в SEQ ID NO: 12);
RHPIPDSSPHVHYGWGDPIRLRHLYTSG (M10) (аминокислоты 1-28 в SEQ ID NO: 10);
RPLAFSDAGPLLQFGGQVRLRHLYTSG (M13) (аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 13);
RHPIPDSSPHVHYGGQVRLRHLYTSG (M14) (аминокислоты 1-26 в SEQ ID NO: 14);
RPLAFSDAGPHVHYGGDIRLRHLYTSG (M43) аминокислоты 1-27 в SEQ ID NO: 43); или
RDSSPLLQFGGQVRLRHLYTSG (M6) (аминокислоты 1-22 в SEQ ID NO: 6);
и в любой из вышеперечисленных пептидных последовательностей амино-концевой остаток R может быть делетирован.
Пептидные последовательности, предложенные в настоящем документе, дополнительно включают последовательности с пониженной или отсутствующей способностью к индукции образования HCC по сравнению с последовательностью FGF19 или вариантной последовательностью FGF19, имеющей любую из последовательностей GQV, GDI, WGPI (SEQ ID NO: 171), WGDPV (SEQ ID NO: 172), WGDI (SEQ ID NO: 173), GDPI (SEQ ID NO: 174), GPI, WGQPI (SEQ ID NO: 175), WGAPI (SEQ ID NO: 176), AGDPI (SEQ ID NO: 177), WADPI (SEQ ID NO: 178), WGDAI (SEQ ID NO: 179), WGDPA (SEQ ID NO: 180), WDPI (SEQ ID NO: 181), WGDI (SEQ ID NO: 182), WGDP (SEQ ID NO: 183) или FGDPI (SEQ ID NO: 184) вместо последовательности WGDPI (SEQ ID NO: 170) на участке аминокислот 16-20 в FGF19. Пептидные последовательности, предложенные в настоящем документе, также включают последовательности с большей снижающей уровень глюкозы активностью по сравнению с последовательностью FGF19 или вариантной последовательностью FGF19, имеющей любую из последовательностей GQV, GDI, WGPI (SEQ ID NO: 171), WGDPV (SEQ ID NO: 172), WGDI (SEQ ID NO: 173), GDPI (SEQ ID NO: 174), GPI, WGQPI (SEQ ID NO: 175), WGAPI (SEQ ID NO: 176), AGDPI (SEQ ID NO: 177), WADPI (SEQ ID NO: 178), WGDAI (SEQ ID NO: 179), WGDPA (SEQ ID NO: 180), WDPI (SEQ ID NO: 181), WGDI (SEQ ID NO: 182), WGDP (SEQ ID NO: 183) или FGDPI (SEQ ID NO: 184) вместо последовательности WGDPI (SEQ ID NO: 170) на участке аминокислот 16-20 в FGF19. Пептидные последовательности, предложенные в настоящем документе, также включают последовательности с меньшей повышающей уровень липидов (например, триглицеридов, холестерина, не-ЛВП) или большей повышающей уровень ЛВП активностью по сравнению с последовательностью FGF19 или вариантной последовательностью FGF19, имеющей любую из последовательностей GQV, GDI, WGPI (SEQ ID NO: 171), WGDPV (SEQ ID NO: 172), WGDI (SEQ ID NO: 173), GDPI (SEQ ID NO: 174), GPI, WGQPI (SEQ ID NO: 175), WGAPI (SEQ ID NO: 176), AGDPI (SEQ ID NO: 177), WADPI (SEQ ID NO: 178), WGDAI (SEQ ID NO: 179), WGDPA (SEQ ID NO: 180), WDPI (SEQ ID NO: 181), WGDI (SEQ ID NO: 182), WGDP (SEQ ID NO: 183) или FGDPI (SEQ ID NO: 184) вместо последовательности WGDPI (SEQ ID NO: 170) на участке аминокислот 16-20 в FGF19.
Как правило, число аминокислот или остатков в пептидной последовательности, предложенной в настоящем документе, в совокупности будет составлять менее примерно 250 (например, аминокислот или их миметиков). В различных конкретных вариантах осуществления число остатков составляет от примерно 20 до примерно 200 остатков (например, аминокислот или их миметиков). В дополнительных вариантах осуществления число остатков составляет от примерно 50 до примерно 200 остатков (например, аминокислот или их миметиков). В следующих вариантах осуществления число остатков составляет от примерно 100 до примерно 195 остатков (например, аминокислот или их миметиков) в длину.
Аминокислоты или остатки могут быть связаны амидной, либо неприродными и не амидными химическими связями, включая, например, те, которые образованы с глутаральдегидом, N-гидроксисукцинимидными сложными эфирами, бифункциональными малеинимидами или N,N'-дициклогексилкарбодиимидом (DCC). Не амидные связи включают, например, кетометиленовую, аминометиленовую, олефиновую, эфирную, тиоэфирную связи, и тому подобное (смотри, например, Spatola в «Chemistry and Biochemistry of Amino Acids, Peptides and Proteins», Vol. 7, pp. 267-357 (1983), «Peptide and Backbone Modifications», Marcel Decker, NY). Таким образом, когда пептид, предложенный в настоящем документе, содержит часть последовательности FGF19 и часть последовательности FGF21, две части необязательно должны быть связаны друг с другом амидной связью, но могут быть связаны с помощью любого другого химического фрагмента или конъюгированы через фрагмент линкера.
В некоторых вариантах осуществления терапевтические пептиды, предложенные в настоящем документе, также включают подпоследовательности, варианты и модифицированные формы иллюстративных пептидных последовательностей (включая варианты и подпоследовательности FGF19 и FGF21, приведенные в таблице 1 и списке последовательностей), при условии, что вышеуказанные последовательности сохраняют по меньшей мере поддающуюся обнаружению или измерению активность, либо функцию. Например, некоторые иллюстративные вариантные пептиды содержат C-концевую последовательность FGF19,
PHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK (SEQ ID NO: 188) в C-концевой части, например, после аминокислотных остатков «TSG» варианта.
Кроме того, некоторые иллюстративные вариантные пептиды, например, те, которые содержат всю или часть последовательности FGF21 на амино-конце, имеют остаток «R», расположенный на N-конце, который может отсутствовать. Аналогично, некоторые иллюстративные вариантные пептиды содержат остаток «M» на N-конце, который может быть добавлен или заменять отсутствующий остаток, такой как остаток «R». Более конкретно, в различных вариантах осуществления пептидные последовательности на N-конце содержат любую из последовательностей: RDSS (SEQ ID NO: 115), DSS, MDSS (SEQ ID NO: 116) или MRDSS (SEQ ID NO: 117). Кроме того, если остаток «M» находится рядом с остатком «S», остаток «M» может быть отщеплен так, что остаток «M» делетируется из пептидной последовательности, в то время как если остаток «M» находится рядом с остатком «D», остаток «M» не может быть отщеплен. Таким образом, в качестве примера, в различных вариантах осуществления пептидные последовательности включают последовательности со следующими остатками на N-конце: MDSSPL (SEQ ID NO: 119), MSDSSPL (SEQ ID NO: 120) (расщеплен до SDSSPL (SEQ ID NO: 112)) и MSSPL (SEQ ID NO: 113) (расщеплен до SSPL (SEQ ID NO: 114)).
Соответственно, в некоторых вариантах осуществления «пептидные», «полипептидные» и «белковые» последовательности, предложенные в настоящем документе, включают подпоследовательности, варианты и модифицированные формы вариантов и подпоследовательностей FGF19 и FGF21, приведенных в таблице 1 и списке последовательностей, а также продуктов слияния и химер FGF19/FGF21, приведенных в таблице 1 и списке последовательностей, при условии, что подпоследовательность, вариант или модифицированная форма (например, продукт слияния или химера) сохраняет по меньшей мере поддающуюся обнаружению активность или функцию, например, снижающую уровень глюкозы активность и/или модулирующую гомеостаз желчных кислот активность.
Используемый в настоящем документе термин «модифицировать», а также его грамматические варианты, означает, что композиция имеет отличия от эталонной композиции, например, пептидной последовательности. Такие модифицированные пептидные последовательности, нуклеиновые кислоты и другие композиции могут иметь большую или меньшую активность, либо функцию, или имеют отличающуюся функцию или активность по сравнению с эталонной не модифицированной пептидной последовательностью, нуклеиновой кислотой или другой композицией, или могут иметь свойство, желательное для белка, созданного для терапии (например, период полувыведения в сыворотке), для инициирования выработки антитела, используемого в анализе обнаружения, и/или для очистки белка. Например, пептидная последовательность, предложенная в настоящем документе, может быть модифицирована для увеличения периода полувыведения в сыворотке, для повышения стабильности белка in vitro и/или in vivo, и так далее.
Конкретные примеры таких подпоследовательностей, вариантов и модифицированных форм пептидных последовательностей, приведенных в настоящем документе (например, пептидных последовательностей, приведенных в списке последовательностей или таблице 1), имеют замены, делеции и/или вставки/добавления одной или более аминокислот, имеющие место на амино-конце, карбокси-конце или внутри последовательности. Одним примером является замена аминокислотного остатка на другой аминокислотный остаток в пептидной последовательности. Другим примером является делеция одного или более аминокислотных остатков из пептидной последовательности, либо вставка или добавление одного или более аминокислотных остатков в пептидную последовательность.
Число остатков, замененных, делетированных или вставленных/добавленных, составляет одну или более аминокислот (например, 1-3, 3-5, 5-10, 10-20, 20-30, 30-40, 40-50, 50-60, 60-70, 70-80, 80-90, 90-100, 100-110, 110-120, 120-130, 130-140, 140-150, 150-160, 160-170, 170-180, 180-190, 190-200, 200-225, 225-250 или более) пептидной последовательности. Таким образом, последовательность FGF19 или FGF21 может иметь несколько или множество аминокислот, которые заменены, делетированы или вставлены/добавлены (например, 1-3, 3-5, 5-10, 10-20, 20-30, 30-40, 40-50, 50-60, 60-70, 70-80, 80-90, 90-100, 100-110, 110-120, 120-130, 130-140, 140-150, 150-160, 160-170, 170-180, 180-190, 190-200, 200-225, 225-250 или более). Кроме того, аминокислотная последовательность FGF19 может содержать или состоять из аминокислотной последовательности длиной примерно 1-3, 3-5, 5-10, 10-20, 20-30, 30-40, 40-50, 50-60, 60-70, 70-80, 80-90, 90-100, 100-110, 110-120, 120-130, 130-140, 140-150, 150-160, 160-170, 170-180, 180-190, 190-200, 200-225, 225-250 или более аминокислот из FGF21; или аминокислотная последовательность FGF21 может содержать или состоять из аминокислотной последовательности длиной примерно 1-3, 3-5, 5-10, 10-20, 20-30, 30-40, 40-50, 50-60, 60-70, 70-80, 80-90, 90-100, 100-110, 110-120, 120-130, 130-140, 140-150, 150-160, 160-170, 170-180, 180-190, 190-200, 200-225, 225-250 или более аминокислот из FGF19.
Конкретные примеры замен включают замену D-остатка на L-остаток. Соответственно, хотя остатки приведены в L-изомерной конфигурации, D-аминокислоты в любом конкретном или во всех положениях пептидных последовательностей, предложенных в настоящем документе, также включены в изобретение, если только D-изомер не приводит к образованию последовательности, которая не имеет поддающуюся обнаружению или измерению функцию.
Дополнительными конкретными примерами являются не консервативные и консервативные замены. «Консервативная замена» представляет собой замену одной аминокислоты биологически, химически или структурно сходным остатком. «Биологическое сходство» означает, что замена совместима с биологической активностью, например, активностью, которая приводит к облегчению PBC и/или его проявлений. «Структурное сходство» означает, что аминокислоты имеют боковые цепи сходной длины, например, аланин, глицин и серин, или имеют сходный размер, или структура первой, второй или дополнительной пептидной последовательности сохраняется. «Химическое сходство» означает, что остатки имеют одинаковый заряд или оба являются гидрофильными и гидрофобными. Конкретные примеры включают замену одного гидрофобного остатка, такого как изолейцин, валин, лейцин или метионин, на другой, или замену одного полярного остатка на другой, например, замену аргинина на лизин, глутаминовой кислоты на аспарагиновую кислоту или глутамина на аспарагин, серина на треонин, и так далее. Можно использовать рутинные анализы для определения того, имеет ли подпоследовательность, вариант или модифицированная форма активность, например, активность, которая приводит к облегчению PBC и/или его проявлений.
Конкретные примеры подпоследовательностей, вариантов и модифицированных форм пептидных последовательностей, приведенных в настоящем документе, имеют 50%-60%, 60%-70%, 70%-75%, 75%-80%, 80%-85%, 85%-90%, 90%-95%, или 96%, 97%, 98% или 99% идентичности с эталонной пептидной последовательностью. Термины «идентичность» и «гомология», а также их грамматические варианты, означают, что две или более упоминаемые единицы являются одинаковыми. Таким образом, если две аминокислотные последовательности идентичны, они имеют идентичные аминокислотные последовательности. «Области, участки или домены идентичности» означает, что части в двух или более упоминаемых единицах являются одинаковыми. Таким образом, если две аминокислотные последовательности идентичны или гомологичны на протяжении одной или более областей последовательности, они идентичны в этих областях.
Степень идентичности между двумя последовательностями можно устанавливать с использованием компьютерных программ и математических алгоритмов, известных в данной области. Такие алгоритмы, которые рассчитывают процент идентичности (гомологии) последовательностей, как правило, учитывают делеции и несовпадения в последовательностях на протяжении сравниваемых областей. Например, алгоритм поиска BLAST (например, BLAST 2.0) (смотри, например, Altschul et al., J. Mol. Biol. 215: 403 (1990), общедоступный через NCBI) имеет следующие иллюстративные параметры поиска: несовпадение -2; штраф за открытие делеции 5; штраф за продолжение делеции 2. При сравнении пептидных последовательностей алгоритм BLASTP, как правило, используют в сочетании с матрицей замен, такой как PAM100, PAM 250, BLOSUM 62 или BLOSUM 50. Программы сравнения последовательностей FASTA (например, FASTA2 и FASTA3) и SSEARCH также используют для количественной оценки степени идентичности (Pearson et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85: 2444 (1988); Pearson, Methods Mol Biol. 132: 185 (2000); и Smith et al., J. Mol. Biol. 147: 195 (1981)). Также разработаны программы для количественной оценки структурного сходства белков с использованием топологического картирования Делоне (Bostick et al., Biochem Biophys Res Commun. 304: 320 (2003)).
В пептидных последовательностях, включая подпоследовательности, варианты и модифицированные формы пептидных последовательностей, приведенных в настоящем документе, термин «аминокислота» или «остаток» включает обычные альфа-аминокислоты, а также бета-аминокислоты, альфа,альфа двузамещенные аминокислоты и N-замещенные аминокислоты, в которых по меньшей мере одна боковая цепь представляет собой фрагмент аминокислотной боковой цепи, как определено в настоящем документе. Термин «аминокислота» также включает N-алкил-альфа-аминокислоты, в которых N-концевая аминогруппа имеет C1-C6 линейный или разветвленный алкильный заместитель. Таким образом, термин «аминокислота» включает стереоизомеры и модификации природных белковых аминокислот, небелковые аминокислоты, посттрансляционно модифицированные аминокислоты (например, путем гликозилирования, фосфорилирования, расщепления сложноэфирной или амидной связи и так далее), ферментативно модифицированные или синтезированные аминокислоты, дериватизированные аминокислоты, конструкции или структуры, разработанные для имитации аминокислот, аминокислоты с фрагментом боковой цепи, модифицированным, дериватизированным относительно природных фрагментов, или синтетические, или не существующие в природе, и так далее. Модифицированные и необычные аминокислоты включены в пептидные последовательности, предложенные в настоящем документе (смотри, например, в «Synthetic Peptides: A User's Guide»; Hruby et al., Biochem. J. 268: 249 (1990); и Toniolo C., Int. J. Peptide Protein Res. 35: 287 (1990)).
Кроме того, включены также защитные и модифицирующие группы аминокислот. Используемый в настоящем документе термин «фрагмент боковой цепи аминокислоты» включает любую боковую цепь любой аминокислоты, определение термину «аминокислота» дано в настоящем документе. Таким образом, он включает фрагмент боковой цепи в природных аминокислотах. Он также включает фрагменты боковой цепи в модифицированных природных аминокислотах, описанных в настоящем документе и известных специалистам в данной области, например, фрагменты боковой цепи в стереоизомерах и модификациях природных белковых аминокислот, небелковых аминокислотах, посттрансляционно модифицированных аминокислотах, ферментативно модифицированных или синтезированных аминокислотах, дериватизированных аминокислотах, конструкциях и структурах, разработанных для имитации аминокислот, и так далее. Например, фрагмент боковой цепи любой аминокислоты, раскрытой в настоящем документе или известной специалисту в данной области, охвачен данным определением.
Термин «производное фрагмента боковой цепи аминокислоты» входит в определение фрагмента боковой цепи аминокислоты. Неограничивающие примеры дериватизированных фрагментов боковой цепи аминокислоты включают, например: (a) добавление одного или более насыщенных или ненасыщенных атомов углерода к существующей алкильной, арильной или аралкильной цепи; (b) замену атома углерода в боковой цепи другим атомом, таким как атом кислорода или азота; (c) добавление концевой группы к атому углерода боковой цепи, включая метил (--CH3), метокси (--OCH3), нитро (--NO2), гидроксил (--OH) или циано (--C=N); (d) в случае фрагментов боковой цепи, содержащих гидрокси, тиоловые или аминогруппы, добавление соответствующей защитной группы для гидрокси, тиоловой или аминогруппы; или (e) в случае фрагментов боковой цепи, содержащих кольцевую структуру, добавление одного или более кольцевых заместителей, включая гидроксильные, галогеновые, алкильные или арильные группы, присоединенные напрямую или через, например, эфирную связь. Соответствующие защитные группы для аминогрупп известны квалифицированному специалисту. Условием является то, чтобы дериватизация обеспечивала желательную активность в конечной пептидной последовательности (например, активность, которая способствует ослаблению PBC и/или его проявлений).
Термин «фрагмент боковой цепи аминокислоты» охватывает все такие дериватизации, и конкретные неограничивающие примеры включают: гамма-аминомасляную кислоту, 12-аминододекановую кислоту, альфа-аминоизомасляную кислоту, 6-аминогексановую кислоту, 4-(аминометил)циклогексанкарбоновую кислоту, 8-аминооктановую кислоту, бифенилаланин, Boc--трет-бутоксикарбонил, бензил, бензоил, цитруллин, диаминомасляную кислоту, пирролизин, диаминопропионовую кислоту, 3,3-дифенилаланин, ортонин, цитруллин, 1,3-дигидро-2H-изоиндолкарбоновую кислоту, этил, Fmoc-флуоренилметоксикарбонил, гептаноил (CH3--(CH2)5--C(=O)--), гексаноил (CH3--(CH2)4--C(=O)--), гомоаргинин, гомоцистеин, гомолизин, гомофенилаланин, гомосерин, метил, метионин сульфоксид, метионин сульфон, норвалин (NVA), фенилглицин, пропил, изопропил, саркозин (SAR), трет-бутилаланин и бензилоксикарбонил.
Отдельная аминокислота, включая стереоизомеры и модификации природных белковых аминокислот, небелковые аминокислоты, посттрансляционно модифицированные аминокислоты, ферментативно синтезированные аминокислоты, неприродные аминокислоты, включая дериватизированные аминокислоты, альфа,альфа двузамещенную аминокислоту, полученную из любой из перечисленных выше (то есть, альфа,альфа двузамещенную аминокислоту, в которой по меньшей мере одна боковая цепь является такой же, как боковая цепь остатка, из которого она была получена), бета-аминокислоту, полученную из любой из перечисленных выше (то есть, бета-аминокислоту, которая, не считая наличия бета-углеродного атома, является такой же, как остаток, из которого она была получена), и так далее, включая все из перечисленных выше, в настоящем документе могут быть названы «остатком». Соответствующие заместители, в дополнение к фрагменту боковой цепи альфа-аминокислоты, включают C1-C6 линейный или разветвленный алкил. Aib является примером альфа,альфа двузамещенной аминокислоты. При том, что альфа,альфа двузамещенные аминокислоты можно называть с использованием общепринятый терминологии для L- и D-изомеров, следует понимать, что такая терминология предназначена для удобства, и что если заместители в альфа-положении являются разными, такая аминокислота взаимозаменяемо может быть названа альфа,альфа двузамещенной аминокислотой, полученной из L- или D-изомера, в зависимости от ситуации, остатка с указанным фрагментом боковой цепи аминокислоты. Таким образом, (S)-2-амино-2-метилгексановая кислота может быть названа либо альфа,альфа двузамещенной аминокислотой, полученной из L-Nle (норлейцина), либо альфа,альфа двузамещенной аминокислотой, полученной из D-Ala. Аналогично, Aib можно называть альфа,альфа двузамещенной аминокислотой, полученной из Ala. Каждый раз при упоминании альфа,альфа двузамещенной аминокислоты следует понимать, что она включает все ее (R) и (S) конфигурации.
«N-замещенная аминокислота» включает любую аминокислоту, в которой фрагмент боковой цепи аминокислоты ковалентно связан с каркасной аминогруппой, необязательно, при этом нет других заместителей, кроме H, в альфа-углеродном положении. Саркозин является примером N-замещенный аминокислоты. В качестве примера, саркозин может быть назван N-замещенным аминокислотным производным Ala, за счет того, что фрагмент боковой цепи аминокислоты саркозина и Ala является одним и тем же, то есть, метилом.
В конкретных вариантах осуществления предложены ковалентные модификации пептидных последовательностей, включая подпоследовательности, варианты и модифицированные формы пептидных последовательностей, приведенных в настоящем документе. Иллюстративный вид ковалентной модификации включает реакцию целевых аминокислотных остатков с органическим дериватизирующим реагентом, который способен к реакции с избранными боковыми цепями, либо N- или C-концевыми остатками пептида. Дериватизацию бифункциональными реагентами можно использовать, например, для перекрестной сшивки пептида с нерастворимой в воде матрицей-подложкой или поверхностью, используемой в методе очистки антител против пептида, и наоборот. Обычно используемые перекрестно сшивающие реагенты включают, например, 1,1-бис(диазоацетил)-2-фенилэтан, глутаральдегид, N-гидроксисукцинимидные сложные эфиры, например, эфиры с 4-азидосалициловой кислотой, гомобифункциональные имидоэфиры, включая дисукцинимидиловые сложные эфиры, такие как 3,3'-дитиобис(сукцинимидилпропионат), бифункциональные малеинимиды, такие как бис-N-малеимидо-1,8-октан, и такие реагенты, как метил-3-[(п-азидофенил)дитио]пропиоимидат.
Другие модификации включают дезамидирование остатков глутаминила и аспарагинила до соответствующих остатков глутамила и аспартила, соответственно, гидроксилирование остатков пролина и лизина, фосфорилирование гидроксильных групп остатков серила или треонила, метилирование альфа-аминогрупп боковых цепей лизина, аргинина и гистидина (T.E. Creighton, Proteins: Structure and Molecular Properties, W.H. Freeman & Co., San Francisco, pp. 79-86 (1983)), ацетилирование N-концевых аминогрупп, амидирование любых C-концевых карбоксильных групп, и так далее.
Иллюстративные пептидные последовательности, а также подпоследовательности, варианты и модифицированные формы пептидных последовательностей, приведенных в настоящем документе, также могут включать последовательности с изменениями в каркасе для придания стабильности, производные и пептидомиметики. Термин «пептидомиметик» означает молекулу, которая имитирует остаток (называемую «миметиком»), включая, но без ограничения, молекулы пиперазинового ядра, молекулы кето-пиперазинового ядра и молекулы диазепинового ядра. Если не указано иначе, аминокислотный миметик пептидной последовательности, предложенной в настоящем документе, включает как карбоксильную группу, так и аминогруппу, а также группу, соответствующую боковой цепи аминокислоты, или, в случае миметика глицина, никакую боковую цепь, кроме атома водорода.
В качестве примера, сюда будут относиться соединения, имитирующие пространственные свойства, поверхностное распределение заряда, полярность, и так далее, природных аминокислот, но не обязательно являющиеся аминокислотами, которые будут придавать стабильность биологической системе. Например, пролин может быть заменен другими лактамами или лактонами соответствующего размера и подходящими для замены; лейцин может быть заменен алкилкетоном, N-замещенным амидом, а также путем изменения длины боковой цепи аминокислоты с использованием алкила, алкенила или других заместителей, другие варианты будут очевидны для квалифицированного специалиста. Существенным элементом выполнения таких замен является использование молекулы примерно такого же размера, с таким же зарядом и конфигурацией, что и остаток, используемый для конструирования молекулы. Усовершенствование таких модификаций будет проведено путем тестирования соединений в функциональном (например, на снижение уровня глюкозы) или другом анализе и сравнения соотношения структуры-активности. Такие способы находятся в пределах компетенции квалифицированного специалиста, работающего в области медицинской химии и разработки лекарственных средств.
Термин «связывать» или «связывание» при использовании применительно к пептидной последовательности означает, что пептидная последовательность взаимодействует на молекулярном уровне. Специфическое и избирательное связывание можно отличать от неспецифического связывания с помощью анализов, известных в данной области (например, конкурентного связывания, иммунопреципитации, ELISA, проточной цитометрии, вестерн-блоттинга).
Пептиды и пептидомиметики можно получать и выделять с использованием методов, известных в данной области. Пептиды можно синтезировать, полностью или частично, химическими методами (смотри, например, Caruthers (1980), Nucleic Acids Res. Symp. Ser. 215; Horn (1980); и Banga, A.K., Therapeutic Peptides and Proteins, Formulation, Processing and Delivery Systems (1995) Technomic Publishing Co., Lancaster, PA). Пептидный синтез можно выполнять с использованием различных методик твердофазного синтеза (смотри, например, Roberge Science 269: 202 (1995); Merrifield, Methods Enzymol. 289: 3 (1997)), и автоматизированный синтез можно выполнять, например, с использованием пептидного синтезатора ABI 431A (Perkin Elmer) в соответствии с инструкциями производителя. Пептиды и пептидомиметики также можно синтезировать с использованием методологий комбинаторной химии. Синтетические остатки и полипептиды, содержащие миметики, можно синтезировать с использованием различных методов и технологий, известных в данной области (смотри, например, Organic Syntheses Collective Volumes, Gilman, et al. (Eds) John Wiley & Sons, Inc., NY). Модифицированные пептиды можно получать методами химической модификации (смотри, например, Belousov, Nucleic Acids Res. 25: 3440 (1997); Frenkel, Free Radic. Biol. Med. 19: 373 (1995); и Blommers, Biochemistry 33: 7886 (1994)). Вариации, производные, замены и модификации пептидных последовательностей также можно осуществлять такими методами, как олигонуклеотид-опосредованный (сайт-направленный) мутагенез, сканирование аланином и ПЦР-опосредованный мутагенез. Сайт-направленный мутагенез (Carter et al., Nucl. Acids Res., 13: 4331 (1986); Zoller et al., Nucl. Acids Res. 10: 6487 (1987)), кассетный мутагенез (Wells et al., Gene 34: 315 (1985)), мутагенез с выбором сайтов рестрикции (Wells et al., Philos. Trans. R. Soc. London SerA 317: 415 (1986)) и другие методы можно использовать применительно к клонированной ДНК для получения пептидных последовательностей, вариантов, продуктов слияния и химер, предложенных в настоящем документе, а также их вариаций, производных, замен и модификаций.
«Синтезированная» или «изготовленная» пептидная последовательность представляет собой пептид, полученный любым методом, включающим манипуляции, произведенные рукой человека. Такие методы включают, но не ограничиваются ими, вышеупомянутые методы, такие как химический синтез, технология рекомбинантной ДНК, биохимическая или ферментативная фрагментация более крупных молекул, а также сочетания вышеперечисленных методов.
Пептидные последовательности, предложенные в настоящем документе, включая подпоследовательности, варианты последовательностей и модифицированные формы приведенных пептидных последовательностей (например, последовательностей, приведенных в списке последовательностей или таблице 1), также можно модифицировать для получения химерной молекулы. В конкретных вариантах осуществления настоящего изобретения предложены пептидные последовательности, содержащие гетерологичный домен. Такие домены могут быть добавлены на амино-конце или на карбоксильном конце пептидной последовательности. Гетерологичные домены также могут быть помещены внутри пептидной последовательности и/или, альтернативно, быть фланкированы аминокислотными последовательностями, полученными из FGF19 и/или FGF21.
Термин «пептид» также охватывает димеры или мультимеры (олигомеры) пептидов. В конкретных вариантах осуществления настоящего изобретения предложены димеры или мультимеры (олигомеры) приведенных пептидных последовательностей, а также подпоследовательностей, вариантов и модифицированных форм приведенных пептидных последовательностей, включая последовательности, приведенные в списке последовательностей или таблице 1.
В конкретных вариантах осуществления пептидная последовательность, предложенная в настоящем документе, содержит аминокислотную последовательность, приведенную в таблице 1. В других вариантах осуществления последовательность, предложенная в настоящем документе, состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в таблице 1.
Таблица 1
SEQ ID NO. | Аминокислотная последовательность |
1. | RPLAFSDASPHVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
2. | RPLAFSDSSPLVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
3. | RPLAFSDAGPHVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEILEDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
4. | RPLAFSDAGPHVHYAWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
5. | RHPIPDSSPLLQFGGQVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
6. | RDSSPLLQFGGQVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
7. | RPLAFSDSSPLLQFGGQVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
8. | RHPIPDSSPLLQWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
9. | RHPIPDSSPLLQFGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
10. | RHPIPDSSPHVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
11. | RPLAFSDAGPLLQWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
12. | RPLAFSDAGPLLQFGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
13. | RPLAFSDAGPLLQFGGQVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
14. | RHPIPDSSPHVHYGGQVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
15. | RPLAFSDAGPHVHYGGQVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
16. | RPLAFSDAGPHVHWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
17. | RPLAFSDAGPHVGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
18. | RPLAFSDAGPHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
19. | RPLAFSDAGPVYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
20. | RPLAFSDAGPVHGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
21. | RPLAFSDAGPVHYWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
22. | RPLAFSDAGPHVHGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
23. | RPLAFSDAGPHHGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
24. | RPLAFSDAGPHHYWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
25. | RPLAFSDAGPHVYWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
26. | RPLAFSDSSPLVHWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
27. | RPLAFSDSSPHVHWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
28. | RPLAFSDAGPHVWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
29. | RPLAFSDAGPHVHYWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
30. | RPLAFSDAGPHVHYAWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
31. | RHPIPDSSPLLQFGAQVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
32. | RHPIPDSSPLLQFGDQVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
33. | RHPIPDSSPLLQFGPQVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
34. | RHPIPDSSPLLQFGGAVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
35. | RHPIPDSSPLLQFGGEVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
36. | RHPIPDSSPLLQFGGNVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
37. | RHPIPDSSPLLQFGGQARLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
38. | RHPIPDSSPLLQFGGQIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
39. | RHPIPDSSPLLQFGGQTRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
40. | RHPIPDSSPLLQFGWGQPVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
41. | RPLAFSDAGPHVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPEPPGILAPQPPDVGSSDPLSMVGPSQGRSPSYAS |
42. | HPIPDSSPLLQFGGQVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPEPPGILAPQPPDVGSSDPLSMVGPSQGRSPSYAS |
43. | RPLAFSDAGPHVHYGGDIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
44. | RPLAFSDAGPHVHYGWGDPIRQRYLYTDDAQQTEAHLEIREDGTVGGAADQSPESLLQLKALKPGVIQILGVKTSRFLCQRPDGALYGSLHFDPEACSFRELLLEDGYNVYQSEAHGLPLHLPGNKSPHRDPAPRGPARFLPLPGLPPALPEPPGILAPQPPDVGSSDPLSMVGPSQGRSPSYAS |
45. | HPIPDSSPLLQFGGQVRQRYLYTDDAQQTEAHLEIREDGTVGGAADQSPESLLQLKALKPGVIQILGVKTSRFLCQRPDGALYGSLHFDPEACSFRELLLEDGYNVYQSEAHGLPLHLPGNKSPHRDPAPRGPARFLPLPGLPPALPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
46. | RPLAFSDAGPHVHYGWGDPIRQRYLYTDDAQQTEAHLEIREDGTVGGAADQSPESLLQLKALKPGVIQILGVKTSRFLCQRPDGALYGSLHFDPEACSFRELLLEDGYNVYQSEAHGLPLHLPGNKSPHRDPAPRGPARFLPLPGLPPALPEPPGILAPQPPDVGSSDPLSMVGPSQGRSPSYASPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
47. | HPIPDSSPLLQWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
48. | RDSSPLLQFGGQVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
49. | RPLAFSDSSPLLQFGGQVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
50. | RHPIPDSSPLLQFGDQVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEILEDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
51. | RHPIPDSSPLLQFGGNVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
52. | RDSSPLLQWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
53. | MDSSPLVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
54. | RPLAFSDAGPLLQWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
55. | RPLAFSDAGPHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
56. | RPLAFSDAGPVYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
57. | RPLAFSDAGPVHGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
58. | RPLAFSDAGPVHYWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
59. | RPLAFSDAGPHHGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
60. | RPLAFSDAGPHHYWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
61. | RPLAFSDAGPHVGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
62. | RPLAFSDAGPHVYWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
63. | RPLAFSDAGPHVHWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
64. | RPLAFSDSSPLVHWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
65. | RPLAFSDSSPHVHWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
66. | RPLAFSDAGPHLQWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
67. | RPLAFSDAGPHVWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
68. | RPLAFSDAGPHVHYWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
69. | RDSSPLVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
70. | MRDSSPLVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
71. | HPIPDSSPLLQFGGQVRQRYLYTDDAQQTEAHLEIREDGTVGGAADQSPESLLQLKALKPGVIQILGVKTSRFLCQRPDGALYGSLHFDPEACSFRELLLEDGYNVYQSEAHSLPLHLPGNKSPHRDPAPRGPARFLPLPGLPPALPEPPGILAPQPPDVGSSDPLSMVGPSQGRSPSYAS |
72. | HPIPDSSPLLQFGGQVRQRYLYTDDAQQTEAHLEIREDGTVGGAADQSPESLLQLKALKPGVIQILGVKTSRFLCQRPDGALYGSLHFDPEACSFRELLLEDGYNVYQSEAHGLPLHLPGNKSPHRDPAPRGPARFLPLPGLPPAPPEPPGILAPQPPDVGSSDPLSMVGPSQGRSPSYAS |
73. | HPIPDSSPLLQFGGQVRQRYLYTDDAQQTEAHLEIREDGTVGGAADQSPESLLQLKALKPGVIQILGVKTSRFLCQRPDGALYGSLHFDPEACSFRELLLEDGYNVYQSEAHGLPLHLPGNKSPHRDPAPRGPARFLPLPGLPPALPEPPGILAPQPPDVGSSDPLSMVVQDELQGVGGEGCHMHPENCKTLLTDIDRTHTEKPVWDGITGE |
74. | RDAGPHVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
75. | RVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
76. | RGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
77. | RRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
78. | RAGPHVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
79. | RGPHVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
80. | RPHVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
81. | RHVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
82. | RPLAFSAAGPHVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
83. | RPLAFSDAAPHVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
84. | RPLAFSDAGAHVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
85. | RPLAFSDAGPHVHYGAGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
86. | RPLAFSDAGPHVHYGWGAPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
87. | RPLAFSDAGPHVHYGWGDAICARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
88. | RPLAFSDAGPHVHYGWGDPIRLRHLYTSGPAGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLAHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
89. | RPLAFSDAGPHVHYGWGDPIRLRHLYTSGPAGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSAFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
90. | RPLAFSDAGPHVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAAQAQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
91. | RPLAFSDAGPHVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAAQRQLYKNRGFLPLAHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
92. | RPLAFSDAGPHVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAAQRQLYKNRGFLPLSAFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
93. | RPLAFSDAGPHVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQAQLYKNRGFLPLAHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
94. | RPLAFSDAGPHVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLAAFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
95. | RPLAFSDAGPHVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAAQRQLYKNRGFLPLSAFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
96. | RPLAFSDAGPHVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAAQAQLYKNRGFLPLAHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
97. | RPLAFSDAGPHVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAAQAQLYKNRGFLPLSAFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
98. | RPLAFSDAGPHVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAAQAQLYKNRGFLPLAAFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
138. | DSSPLLQFGGQVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
139. | RPLAFSDASPHVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
140. | RPLAFSDSSPLVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
141. | DSSPLVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
142. | RHPIPDSSPLLQFGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
143. | RHPIPDSSPLLQWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
144. | RPLAFSDAGPLLQFGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
145. | RHPIPDSSPHVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
146. | RPLAFSDAGPLLQFGGQVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
147. | RHPIPDSSPHVHYGGQVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
148. | RDSSPLLQFGGQVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
149. | RPLAFSDSSPLLQFGGQVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
150. | RHPIPDSSPLLQFGAQVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
151. | RHPIPDSSPLLQFGDQVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
152. | RHPIPDSSPLLQFGPQVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
153. | RHPIPDSSPLLQFGGAVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
154. | RHPIPDSSPLLQFGGEVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
155. | RHPIPDSSPLLQFGGNVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
156. | RHPIPDSSPLLQFGGQARLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
157. | RHPIPDSSPLLQFGGQIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
158. | RHPIPDSSPLLQFGGQTRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
159. | RHPIPDSSPLLQFGWGQPVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
160. | HPIPDSSPLLQFGGQVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
161. | DSSPLLQFGGQVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
162. | HPIPDSSPLLQWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
163. | HPIPDSSPLLQFGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
164. | HPIPDSSPHVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
165. | HPIPDSSPHVHYGGQVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
166. | DAGPHVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
167. | VHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
168. | RLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
188. | PHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
192. | MDSSPLLQWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIRPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
193. | RPLAFSDAGPHVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEILPDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
194. | RPLAFSDAGPHVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEIREDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
195. | RPLAFSDAGPHVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEILCDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
196. | RPLAFSDAGPHVHYGWGDPIRQRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEILEDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
197. | RDSSPLVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEILEDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
198. | RPLAFSDSSPLVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEILEDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
199. | RPLAFSDASPHVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEILEDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
200. | RDSSPLLQWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEILEDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
201. | RHPIPDSSPLLQFGDQVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEILEDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
202. | RDSSPLLQFGGQVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEILEDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
203. | RHPIPDSSPLLQFGGQVRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEILEDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
204. | MRDSSPLVHYGWGDPIRLRHLYTSGPHGLSSCFLRIRADGVVDCARGQSAHSLLEIKAVALRTVAIKGVHSVRYLCMGADGKMQGLLQYSEEDCAFEEEILEDGYNVYRSEKHRLPVSLSSAKQRQLYKNRGFLPLSHFLPMLPMVPEEPEDLRGHLESDMFSSPLETDSMDPFGLVTGLEAVRSPSFEK |
В одном варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1. В другом варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 2. В других вариантах осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3. В одном варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 4. В другом варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 5. В других вариантах осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 6. В одном варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 7. В другом варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 8. В других вариантах осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 9. В одном варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 10. В другом варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 11. В других вариантах осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 12. В одном варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13. В другом варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14. В других вариантах осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15. В одном варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16. В другом варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В других вариантах осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В одном варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 19. В другом варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 20. В других вариантах осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 21. В одном варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 22. В другом варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 23. В других вариантах осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 24. В одном варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 25. В другом варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 26. В других вариантах осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 27. В одном варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 28. В другом варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 29. В других вариантах осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 30. В одном варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 31. В другом варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 32. В других вариантах осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 33. В одном варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 34. В другом варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 35. В других вариантах осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 36. В одном варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 37. В другом варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 38. В других вариантах осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 39. В одном варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 40. В другом варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 41. В других вариантах осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 42. В одном варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 43. В другом варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 44. В других вариантах осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 45. В одном варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 46. В другом варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 47. В других вариантах осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 48. В одном варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 49. В другом варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 50. В других вариантах осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 51. В одном варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 52. В другом варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 53. В других вариантах осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 54. В одном варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В другом варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 56. В других вариантах осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 57. В одном варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 58. В другом варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 59. В других вариантах осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 60. В одном варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 61. В другом варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 62. В других вариантах осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 63. В одном варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 64. В другом варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 65. В других вариантах осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 66. В одном варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 67. В другом варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 68. В других вариантах осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 69. В одном варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 70. В другом варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 71. В других вариантах осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 72. В одном варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 73. В другом варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 74. В других вариантах осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 75. В одном варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 76. В другом варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 77. В других вариантах осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 78. В одном варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 79. В другом варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 80. В других вариантах осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 81. В одном варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 82. В другом варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 83. В других вариантах осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 84. В одном варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 85. В другом варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 86. В других вариантах осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 87. В одном варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 88. В другом варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 89. В других вариантах осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 90. В одном варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 91. В другом варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 92. В других вариантах осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 93. В одном варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 94. В другом варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 95. В других вариантах осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 96. В одном варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 97. В другом варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 98. В других вариантах осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 138. В одном варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 139. В другом варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 140. В других вариантах осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 141. В одном варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 142. В другом варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 143. В других вариантах осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 144. В одном варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 145. В другом варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 146. В других вариантах осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 147. В одном варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 148. В другом варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 149. В других вариантах осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 150. В одном варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 151. В другом варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 152. В других вариантах осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 153. В одном варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 154. В другом варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 155. В других вариантах осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 156. В одном варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 157. В другом варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 158. В других вариантах осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 159. В одном варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 160. В другом варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 161. В других вариантах осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 162. В одном варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 163. В другом варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 164. В других вариантах осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 165. В одном варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 166. В другом варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 167. В других вариантах осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 168. В другом варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 192. В других вариантах осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 193. В одном варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 194. В другом варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 195. В других вариантах осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 196. В одном варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 197. В другом варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 198. В других вариантах осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 199. В одном варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 200. В другом варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 201. В других вариантах осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 202. В одном варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 203. В другом варианте осуществления пептидная последовательность содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 204. В конкретных вариантах осуществления различных пептидных последовательностей, предложенных в настоящем документе, остаток R на N-конце делетирован.
В других вариантах осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 1. В другом варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 2. В других вариантах осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 3. В одном варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 4. В другом варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 5. В других вариантах осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 6. В одном варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 7. В другом варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 8. В других вариантах осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 9. В одном варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 10. В другом варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 11. В других вариантах осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 12. В одном варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 13. В другом варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 14. В других вариантах осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 15. В одном варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 16. В другом варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 17. В других вариантах осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 18. В одном варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 19. В другом варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 20. В других вариантах осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 21. В одном варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 22. В другом варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 23. В других вариантах осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 24. В одном варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 25. В другом варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 26. В других вариантах осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 27. В одном варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 28. В другом варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 29. В других вариантах осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 30. В одном варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 31. В другом варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 32. В других вариантах осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 33. В одном варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 34. В другом варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 35. В других вариантах осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 36. В одном варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 37. В другом варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 38. В других вариантах осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 39. В одном варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 40. В другом варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 41. В других вариантах осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 42. В одном варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 43. В другом варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 44. В других вариантах осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 45. В одном варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 46. В другом варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 47. В других вариантах осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 48. В одном варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 49. В другом варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 50. В других вариантах осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 51. В одном варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 52. В другом варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 53. В других вариантах осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 54. В одном варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 55. В другом варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 56. В других вариантах осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 57. В одном варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 58. В другом варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 59. В других вариантах осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 60. В одном варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 61. В другом варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 62. В других вариантах осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 63. В одном варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 64. В другом варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 65. В других вариантах осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 66. В одном варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 67. В другом варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 68. В других вариантах осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 69. В одном варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 70. В другом варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 71. В других вариантах осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 72. В одном варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 73. В другом варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 74. В других вариантах осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 75. В одном варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 76. В другом варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 77. В других вариантах осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 78. В одном варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 79. В другом варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 80. В других вариантах осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 81. В одном варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 82. В другом варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 83. В других вариантах осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 84. В одном варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 85. В другом варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 86. В других вариантах осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 87. В одном варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 88. В другом варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 89. В других вариантах осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 90. В одном варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 91. В другом варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 92. В других вариантах осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 93. В одном варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 94. В другом варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 95. В других вариантах осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 96. В одном варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 97. В другом варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 98. В других вариантах осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 138. В одном варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 139. В другом варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 140. В других вариантах осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 141. В одном варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 142. В другом варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 143. В других вариантах осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 144. В одном варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 145. В другом варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 146. В других вариантах осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 147. В одном варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 148. В другом варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 149. В других вариантах осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 150. В одном варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 151. В другом варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 152. В других вариантах осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 153. В одном варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 154. В другом варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 155. В других вариантах осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 156. В одном варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 157. В другом варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 158. В других вариантах осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 159. В одном варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 160. В другом варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 161. В других вариантах осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 162. В одном варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 163. В другом варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 164. В других вариантах осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 165. В одном варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 166. В другом варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 167. В других вариантах осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 168. В другом варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 192. В других вариантах осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 193. В одном варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 194. В другом варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 195. В других вариантах осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 196. В одном варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 197. В другом варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 198. В других вариантах осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 199. В одном варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 200. В другом варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 201. В других вариантах осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 202. В одном варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 203. В другом варианте осуществления пептидная последовательность состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 204. В конкретных вариантах осуществления различных пептидных последовательностей, предложенных в настоящем документе, остаток R на N-конце делетирован.
5.4 Конкретные модификации для усиления функции пептидов
Часто бывает полезно, а иногда необходимо, усовершенствовать одно или более физических свойств терапевтических средств, раскрытых в настоящем документе, и/или способ, которым их вводят. Усовершенствования физических свойств включают, например, модулирование иммуногенности; увеличение растворимости, биодоступности, периода полувыведения в сыворотке и/или терапевтического периода полувыведения; и/или модулирование биологической активности. Определенные модификации также могут быть полезны, например, для стимуляции продуцирования антител, используемых в анализах обнаружения (например, эпитопных маркеров), и для облегчения очистки белка. Такие усовершенствования, как правило, должны быть осуществлены без отрицательного влияния на биологическую активность терапевтического средства и/или без повышения его иммуногенности.
Пегилирование представляет собой одну конкретную модификацию, предусмотренную в настоящем документе, в то время как другие модификации включают, но не ограничиваются ими, гликозилирование (N- и O-связанное); полисиалирование; слитые с альбумином молекулы, содержащие сывороточный альбумин (например, человеческий сывороточный альбумин (ЧСА), сывороточный альбумин макаки или бычий сывороточный альбумин (БСА)); при этом альбумин связан, например, через конъюгированную цепь жирных кислот (ацилирование); а также Fc-слитые белки.
5.4.1 Пегилирование
Клиническая эффективность белковых терапевтических препаратов часто ограничена из-за короткого периода полувыведения в плазме крови и подверженности расщеплению протеазами. Исследования различных терапевтических белков (например, филграстима) показали, что такие сложности можно преодолевать, например, за счет конъюгации или связывания белка с любым из множества небелковых полимеров, например, полиэтиленгликолем (ПЭГ), полипропиленгликолем или полиоксиалкиленами. Это часто осуществляют с помощью связывающего фрагмента, ковалентно связанного как с белком, так и с небелковым полимером, например, ПЭГ. Показано, что такие конъюгированные с ПЭГ биологические молекулы обладают клинически полезными свойствами, включая повышенную физическую и температурную стабильность, защиту от подверженности ферментативному расщеплению, повышенную растворимость, более продолжительный период полувыведения в системе циркуляции in vivo, а также более низкий клиренс, меньшую иммуногенность и антигенность, и пониженную токсичность. В дополнение к благоприятным эффектам пегилирования на фармакокинетические параметры, пегилирование само по себе способно повышать активность.
ПЭГ, подходящие для конъюгации с полипептидной последовательностью, как правило, растворимы в воде при комнатной температуре и имеют общую формулу R(O-CH2-CH2)nO-R, где R представляет собой атом водорода или защитную группу, такую как алкильная или алканоловая группа, и где n равно целому числу от 1 до 1000. Если R представляет собой защитную группу, она, как правило, содержит от 1 до 8 атомов углерода. ПЭГ, конъюгированный с полипептидной последовательностью, может быть линейным или разветвленным. Разветвленные производные ПЭГ, «звездчатые ПЭГ» и многолучевые ПЭГ предусмотрены для использования по настоящему изобретению. Молекулярная масса ПЭГ, используемого в вариантах осуществления, предложенных в настоящем документе, не ограничена каким-либо конкретным диапазоном, и примеры приведены в других разделах настоящего документа; в качестве примера, в конкретных вариантах осуществления молекулярная масса составляет от 5 кДа до 20 кДа, в то время как в других вариантах осуществления молекулярная масса составляет от 4 кДа до 10 кДа.
В других вариантах осуществления настоящего изобретения предложены композиции из конъюгатов, в которых молекулы ПЭГ имеют другие значения n и, таким образом, различные ПЭГ присутствуют в определенных соотношениях. Например, некоторые композиции содержат смесь конъюгатов, где n=1, 2, 3 и 4. В некоторых композициях процентная доля конъюгатов, где n=1, составляет 18-25%, процентная доля конъюгатов, где n=2, составляет 50-66%, процентная доля конъюгатов, где n=3, составляет 12-16% и процентная доля конъюгатов, где n=4, составляет до 5%. Такие композиции можно получать с использованием условий реакции и методов очистки, известных в данной области. Для разделения конъюгатов можно использовать катионообменную хроматографию, с последующим определением фракции, которая содержит конъюгат, имеющий, например, нужное число присоединенных молекул ПЭГ, и очисткой ее от не модифицированных белковых последовательностей и от конъюгатов, содержащих другое количество присоединенных молекул ПЭГ.
Пегилирование наиболее часто происходит на альфа-аминогруппе в N-конце полипептида, эпсилон-аминогруппе на боковой цепи остатков лизина и имидазольной группе на боковой цепи остатков гистидина. Поскольку большинство рекомбинантных полипептидов имеют одну альфа и ряд эписилон-аминогрупп и имидазольных групп, можно создавать различные позиционные изомеры в зависимости от химии линкера.
В настоящем изобретении могут быть использованы общие стратегии пегилирования, известные в данной области. ПЭГ может быть связан с полипептидом, предложенным в настоящем документе, через концевую реакционноспособную группу («спейсер» или «линкер»), которая опосредует связывание между свободной амино или карбоксильной группой одной или более из полипептидных последовательностей и полиэтиленгликолем. ПЭГ, имеющий спейсер, который может быть связан со свободной аминогруппой, включает N-гидроксисукцинимид полиэтиленгликоль, который может быть получен путем активации сложного эфира янтарной кислоты и полиэтиленгликоля N-гидроксисукцинимидом. Другим активированным полиэтиленгликолем, который может быть связан со свободной аминогруппой, является 2,4-бис(O-метоксиполиэтиленгликоль)-6-хлор-втор-триазин, который может быть получен путем реакции монометилового эфира полиэтиленгликоля с цианурхлоридом. Активированный полиэтиленгликоль, который связывается со свободной карбоксильной группой, включает полиоксиэтилендиамин.
Одну или более из полипептидных последовательностей, предложенных в настоящем документе, можно конъюгировать с ПЭГ, имеющим спейсер, различными общепринятыми методами. Например, реакцию конъюгации можно проводить в растворе при значении pH 5-10, при температуре от 4°C до комнатной температуры, в течение периода времени от 30 минут до 20 часов, используя молярное соотношение реагента и белка, составляющее от 4:1 до 30:1. Условия реакции можно выбирать так, чтобы направлять реакцию в сторону преимущественного получения желательной степени замещения. Как правило, низкая температура, низкое значение pH (например, pH=5) и короткое время реакции приводят к уменьшению числа присоединенных молекул ПЭГ, в то время как высокая температура, нейтральное или высокое значение pH (например, pH≥7) и более продолжительное время реакции приводят к увеличению числа присоединенных молекул ПЭГ. Для остановки реакции можно использовать различные способы, известные в данной области. В некоторых вариантах осуществления реакцию останавливают, подкисляя реакционную смесь и замораживая, например, при температуре -20°C. Пегилирование различных молекул описано, например, в патентах США №№ 5252714, 5643575, 5919455, 5932462 и 5985263.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения также предложено использование миметиков ПЭГ. Разработаны рекомбинантные миметики ПЭГ, которые сохраняют свойства ПЭГ (например, продлевают период полувыведения в сыворотке), и в то же время придают некоторые дополнительные полезные свойства. В качестве примера, простые полипептидные цепи (содержащие, например, Ala, Glu, Gly, Pro, Ser и Thr), способные образовывать вытянутую конформацию аналогично ПЭГ, можно получать рекомбинантными методами уже слитыми с интересующим пептидным или белковым лекарственным средством (например, технология XTEN; Amunix; Mountain View, CA). Это устраняет необходимость в дополнительной стадии конъюгации в производственном процессе. Кроме того, разработанные методы молекулярной биологии позволяют контролировать состав боковых цепей полипептидных цепей, делая возможной оптимизацию иммуногенности и технологических свойств.
5.4.2. Гликозилирование
Используемый в настоящем документе термин «гликозилирование» в широком смысле означает ферментативный процесс присоединения гликанов к белкам, липидам или другим органическим молекулам. В настоящем документе термин «гликозилирование» должен означать присоединение, или удаление, одного или более углеводных фрагментов (либо путем удаления основного сайта гликозилирования, либо путем устранения гликозилирования химическими и/или ферментативными методами), и/или добавление одного или более сайтов гликозилирования, которые могут присутствовать или не присутствовать в нативной последовательности. Кроме того, термин охватывает качественные изменения в гликозилировании нативных белков, включающие изменение в природе и пропорциях различных присутствующих углеводных фрагментов.
Гликозилирование может существенно влиять на физические свойства (например, растворимость) полипептидов и также может быть важным для стабильности, секреции и субклеточной локализации белков. Гликозилированные полипептиды также могут обладать повышенной стабильностью или могут иметь усовершенствованные одно или более фармакокинетических свойств, таких как период полувыведения. Кроме того, повышение растворимости может, например, позволять создавать препараты, более подходящие для фармацевтического введения, чем препараты, содержащие не гликозилированный полипептид.
Добавление сайтов гликозилирования можно осуществлять путем изменения аминокислотной последовательности. Изменения в полипептид можно вносить, например, путем добавления, или замены на один или более остатков серина или треонина (для O-связанных сайтов гликозилирования) или остатков аспарагина (для N-связанных сайтов гликозилирования). Структуры N-связанных и O-связанных олигосахаридов и сахарных остатков, встречающихся в каждом виде, могут быть разными. Один вид сахара, который обычно встречается в обоих случаях, представляет собой N-ацетилнейраминовую кислоту (далее в настоящем документе называемую сиаловой кислотой). Сиаловая кислота, как правило, является концевым остатком как в N-связанных, так и в O-связанных олигосахаридах и, в силу своего отрицательного заряда, может придавать кислотные свойства гликопротеину. Конкретный вариант осуществления включает получение и использование N-гликозилированных вариантов.
Полипептидные последовательности, предложенные в настоящем документе, необязательно, могут быть изменены путем изменений на уровне нуклеиновой кислоты, в частности, за счет мутаций нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид, в заранее выбранных основаниях таким образом, что получаются кодоны, которые будут транслироваться в нужные аминокислоты.
Можно использовать различные линии клеток для продуцирования гликозилированных белков. Одним неограничивающим примером являются клетки яичника китайского хомячка (CHO), дефицитные по дигидрофолатредуктазе (DHFR), которые представляют собой обычно используемую клетку-хозяина для продуцирования рекомбинантных гликопротеинов. В этих клетках не экспрессируется фермент бета-галактозид-альфа-2,6-сиалилтрансфераза и, следовательно, не происходит добавления сиаловой кислоты в альфа-2,6 связь N-связанных олигосахаридов гликопротеинов, продуцируемых в этих клетках.
5.4.3 Полисиалилирование
В конкретных вариантах осуществления настоящего изобретения также предложено использование полисиалилирования, конъюгации полипептидов с природной, биоразлагаемой α-(2→8)-связанной полисиаловой кислотой («ПСК») с целью улучшения стабильности и in vivo фармакокинетики полипептидов.
Слияние с альбумином: дополнительные подходящие компоненты и молекулы для конъюгации включают альбумины, такие как человеческий сывороточный альбумин (ЧСА), сывороточный альбумин макаки и бычий сывороточный альбумин (БСА).
В некоторых вариантах осуществления альбумин конъюгирован с молекулой лекарственного средства (например, полипептидом, описанным в настоящем документе) на карбоксильном конце, амино-конце, как карбоксильном, так и амино-конце, а также внутри последовательности (смотри, например, патенты США №№ 5876969 и 7056701).
В вариантах осуществления конъюгатов ЧСА-лекарственное средство, предложенных в настоящем документе, можно использовать различные формы альбумина, такие как секретируемые предпоследовательности альбумина и их варианты, фрагменты альбумина и их варианты, а также варианты ЧСА. Такие формы, как правило, обладают одной или более желательными активностями альбумина. В дополнительных вариантах осуществления настоящего изобретения предложены слитые белки, содержащие молекулу полипептидного лекарственного средства, слитого напрямую или опосредованно с альбумином, фрагментом альбумина, вариантом альбумина, и так далее, при этом слитый белок имеет более высокую стабильность в плазме крови, чем не слитая молекула лекарственного средства, и/или слитый белок сохраняет терапевтическую активность не слитой молекулы лекарственного средства. В некоторых вариантах осуществления непрямое слияние опосредовано линкером, таким как пептидный линкер или его модифицированный вариант.
Как упоминалось выше, слияние альбумина с одним или более полипептидами, предложенными в настоящем документе, можно, например, осуществлять путем генетической манипуляции так, что нуклеиновая кислота, кодирующая ЧСА или его фрагмент, соединяется с нуклеиновой кислотой, кодирующей одну или более полипептидных последовательностей.
5.4.4 Альтернативные стратегии связывания альбумина
Несколько стратегий связывания альбумина были разработаны в качестве альтернативы прямому слиянию и могут быть использованы со средствами, описанными в настоящем документе. В качестве примера, в конкретных вариантах осуществления настоящего изобретения предложено связывание альбумина через конъюгированную цепь жирной кислоты (ацилирование), а также слитые белки, которые содержат полипептидную последовательность альбумин-связывающего домена (АСД) и последовательность одного или более из полипептидов, описанных в настоящем документе.
Продукт слияния альбумина с пептидной последовательностью можно, например, получать путем генетической манипуляции так, что ДНК, кодирующая ЧСА (человеческий сывороточный альбумин) или его фрагмент, соединяется с ДНК, кодирующей пептидную последовательность. Затем в соответствующего хозяина можно вводить трансформацией или трансфекцией слитую нуклеотидную последовательность в форме, например, соответствующей плазмиды, для экспрессии слитого полипептида. Экспрессию можно осуществлять in vitro, например, в прокариотических или эукариотических клетках, или in vivo, например, в трансгенном организме. В некоторых вариантах осуществления экспрессию слитого белка осуществляют в линии клеток млекопитающих, например, линии клеток CHO.
Дополнительные способы генетического слияния целевых белков или пептидов с альбумином включают технологию, известную как Albufuse® (Novozymes Biopharma A/S; Denmark), и конъюгированные терапевтические пептидные последовательности часто становятся гораздо более эффективными с лучшим усвоением в организме. Данная технология была коммерчески использована для производства альбуферона® (Human Genome Sciences), сочетания альбумина и интерферона α-2B, используемого для лечения инфекции гепатита C.
Другой вариант осуществления включает использование одного или более человеческих однодоменных антител (дАт). дАт представляют собой наименьшие функциональные связывающие единицы человеческих антител (IgG) и обладают благоприятными характеристиками стабильности и растворимости. Технология предполагает использование дАт, конъюгированных с ЧСА (таким образом, образующих «альбудАт»; смотри, например, EP1517921B, WO 2005/118642 и WO 2006/051288) и интересующей молекулой (например, пептидной последовательностью, предложенной в настоящем документе). АльбудАт часто имеют меньший размер и их легче производить в микробных экспрессионных системах, таких как бактерии или дрожжи, по сравнению с современными технологиями, используемыми для продления периода полувыведения пептидов в сыворотке. Поскольку ЧСА имеет период полувыведения примерно три недели, полученная конъюгированная молекула имеет более продолжительный период полувыведения. Использование технологии дАт также может приводить к повышению эффективности интересующей молекулы.
5.4.5 Конъюгация с другими молекулами
Дополнительные подходящие компоненты и молекулы для конъюгации включают, например, тиреоглобулин; токсоид столбняка; дифтерийный токсоид; полиаминокислоты, такие как поли(D-лизин:D-глутаминовая кислота); VP6 полипептиды ротавирусов; гемагглютинин вируса гриппа, нуклеопротеин вируса гриппа; гемоцианин лимфы улитки (KLH), а также коровый белок и поверхностный антиген вируса гепатита B; или любое сочетание перечисленных выше.
Таким образом, в конкретных вариантах осуществления также предусмотрена конъюгация на N- и/или C-конце полипептидной последовательности одного или более дополнительных компонентов или молекул, таких как другой полипептид (например, полипептид, имеющий аминокислотную последовательность, гетерологичную указанному полипептиду) или молекула носителя. Таким образом, иллюстративная полипептидная последовательность может быть предоставлена в виде конъюгата с другим компонентом или молекулой.
Полипептид также может быть конъюгирован с крупными, медленно метаболизируемыми молекулами, такими как белки; полисахаридами, например, сефарозой, агарозой, целлюлозой или целлюлозными гранулами; полимерными аминокислотами, например, полиглутаминовой кислотой или полилизином; аминокислотными сополимерами; инактивированными вирусными частицами; инактивированными бактериальными токсинами, такими как молекулы токсоида дифтерии, столбняка, холеры или лейкотоксины; инактивированными бактериями и дендритными клетками. Такие конъюгированные формы при необходимости можно использовать для получения антител против полипептида, предложенного в настоящем документе.
5.4.6 Fc-слитые молекулы
В конкретных вариантах осуществления амино- или карбоксильный конец полипептидной последовательности, предложенной в настоящем документе, слит с Fc-областью иммуноглобулина, образуя слитый конъюгат (или слитую молекулу). В конкретном варианте осуществления Fc-область иммуноглобулина представляет собой Fc-область иммуноглобулина человека. Показано, что слитые конъюгаты увеличивают системный период полувыведения биофармацевтических препаратов, и, таким образом, необходимая частота введения биофармацевтического препарата может быть уменьшена. В конкретных вариантах осуществления период полувыведения продлен по сравнению с тем же самым полипептидом, не слитым с Fc-областью иммуноглобулина.
Fc-область связывается с неонатальным Fc-рецептором (FcRn) в эндотелиальных клетках, которые выстилают кровеносные сосуды, и после связывания слитая с Fc-областью молекула становится защищенной от расщепления и вновь высвобождается в кровоток, что приводит к более продолжительному нахождению молекулы в кровотоке. Считают, что это связывание Fc-области является механизмом, за счет которого эндогенные IgG имеют длительный период полувыведения в плазме крови. Более современная технология слияния с Fc-областью позволяет связывать одну копию биофармацевтического препарата с Fc-областью антитела для оптимизации фармакокинетических и фармакодинамических свойств биофармацевтического препарата по сравнению с традиционными Fc-слитыми конъюгатами.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения предложено слияние M70 с Fc-фрагментом человеческого антитела. В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения предложено слияние M69 с Fc-фрагментом человеческого антитела. Такие продукты слияния могут быть полезны для лечения заболеваний, связанных с гомеостазом желчных кислот, и других метаболических заболеваний, описанных в настоящем документе. В некоторых вариантах осуществления Fc-слитый M70 имеет более продолжительный период полувыведения. В конкретных вариантах осуществления Fc-слитый M70 имеет более продолжительный период полувыведения по сравнению с M70, который не слит с Fc-областью. В некоторых вариантах осуществления Fc-слитый M69 имеет более продолжительный период полувыведения. В конкретных вариантах осуществления Fc-слитый M69 имеет более продолжительный период полувыведения по сравнению с M69, который не слит с Fc-областью. Такой продолжительный период полувыведения делает возможным дозирование этих слитых продуктов один раз в неделю или реже.
В некоторых вариантах осуществления Fc-слитый продукт содержит линкер. Иллюстративные гибкие линкеры включают глициновые полимеры (G)n, глицин-сериновые полимеры, глицин-аланиновые полимеры, аланин-сериновые полимеры и другие гибкие линкеры. В конкретных вариантах осуществления линкер представляет собой (G)4S. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой ((G)4S)n, где n представляет собой целое число, равное по меньшей мере единице. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой ((G)4S)2. Глициновые и глицин-сериновые полимеры являются относительно неструктурированными и, вследствие этого, могут служить в качестве нейтрального связующего звена между компонентами. В некоторых вариантах осуществления глицин-сериновый полимер представляет собой (GS)n, где n представляет собой целое число, равное по меньшей мере единице. В некоторых вариантах осуществления глицин-сериновый полимер представляет собой GSGGSn (SEQ ID NO: 129), где n представляет собой целое число, равное по меньшей мере единице. В некоторых вариантах осуществления глицин-сериновый полимер представляет собой GGGSn (SEQ ID NO: 130), где n представляет собой целое число, равное по меньшей мере единице. В конкретных вариантах осуществления линкер содержит дополнительный остаток G на N'-конце SEQ ID NO: 130. В одном варианте осуществления линкер представляет собой GGSG (SEQ ID NO: 131). В одном варианте осуществления линкер представляет собой GGSGG (SEQ ID NO: 132). В одном варианте осуществления линкер представляет собой GSGSG (SEQ ID NO: 133). В одном варианте осуществления линкер представляет собой GSGGG (SEQ ID NO: 134). В одном варианте осуществления линкер представляет собой GGGSG (SEQ ID NO: 189). В одном варианте осуществления линкер представляет собой GSSSG (SEQ ID NO: 135).
5.4.7 Очистка
Дополнительные подходящие компоненты и молекулы для конъюгации включают те, которые подходят для выделения или очистки. Конкретные неограничивающие примеры включают связывающие молекулы, такие как биотин (специфически связывающаяся пара биотин-авидин), антитело, рецептор, лиганд, лектин, либо молекулы, образующие твердую подложку, включая, например, пластиковые или полистирольные гранулы, планшеты или гранулы, магнитные гранулы, тест-полоски и мембраны.
Такие методы очистки, как катионообменная хроматография, можно использовать для разделения конъюгатов на основании различия в зарядах, что позволяет эффективно разделять конъюгаты по молекулярной массе. Например, катионообменную колонку можно нагружать, затем промывать ~20 мМ раствором ацетата натрия, pH ~4, и затем элюировать линейным (0 M - 0,5 M) градиентом NaCl, забуференным при pH 3-5,5, например, при pH ~4,5. Содержание фракций, полученных при катионообменной хроматографии, можно определять по молекулярной массе с использованием общепринятых методов, например, масс-спектроскопии, SDS-ПААГ или других известных способов разделения видов молекул по их молекулярной массе. Затем определяют фракцию, которая содержит конъюгат, имеющий нужное число присоединенных молекул ПЭГ, очищают его от не модифицированных белковых последовательностей и от конъюгатов, имеющих другое число присоединенных молекул ПЭГ.
5.4.8 Другие модификации
В конкретных вариантах осуществления настоящего изобретения также предложено использование других модификаций, известных в настоящее время или разработанных в будущем, для усовершенствования одного или более свойств. Примеры включают гесилирование, различные аспекты которого описаны, например, в патентных заявках США №№ 2007/0134197 и 2006/0258607, а также слитые молекулы, содержащие SUMO в качестве слитого маркера (LifeSensors, Inc.; Malvern, PA).
В других вариантах осуществления пептидная последовательность, предложенная в настоящем документе, связана с химическим средством (например, иммунотоксином или химиотерапевтическим средством), включая, но не ограничиваясь ими, цитотоксическое средство, в том числе таксол, цитохалазин B, грамицидин D, митомицин, этопозид, тенопозид, винкристин, винбластин, колхицин, доксорубицин, даунорубицин, а также их аналоги или гомологи. Другие химические средства включают, например, антиметаболиты (например, метотрексат, 6-меркаптопурин, 6-тиогуанин, цитарабин, 5-фторурацил декарбазин); алкилирующие средства (например, мехлорэтамин, кармустин и ломустин, циклофосфамид, бусульфан, дибромманнит, стрептозотоцин, митомицин C и цисплатин); антибиотики (например, блеомицин) и антимитотические средства (например, винкристин и винбластин). Цитотоксины можно конъюгировать с пептидом, предложенным в настоящем документе, с использованием технологии линкеров, известной в данной области и описанной в настоящем документе.
Другие подходящие для конъюгации компоненты и молекулы включают те, которые подходят для обнаружения в анализах. Конкретные неограничивающие примеры включают детектируемые метки, такие как радиоактивный изотоп (например, 125I, 35S, 32P, 33P), фермент, который катализирует образование поддающегося обнаружению продукта (например, люцифераза, β-галактозидаза, пероксидаза хрена и щелочная фосфатаза), флуоресцентный белок, хромогенный белок, краситель (например, флуоресцеин изотиоцианат), флуоресцирующие металлы (например, 152Eu), хемилюминесцентные соединения (например, люминол и соли акридиния), биолюминесцентные соединения (например, люциферин) и флуоресцентные белки. Непрямые метки включают меченые или детектируемые антитела, которые связываются с пептидной последовательностью, при этом антитело может быть обнаружено.
В конкретных вариантах осуществления пептидная последовательность, предложенная в настоящем документе, конъюгирована с радиоактивным изотопом для получения цитотоксического радиофармацевтического средства (радиоиммуноконъюгата), полезного в качестве диагностического или терапевтического средства. Примеры таких радиоактивных изотопов включают, но не ограничиваются ими, йод131, индий111, иттрий90 и лютеций177. Методы получения радиоиммуноконъюгатов известны квалифицированному специалисту. Примеры коммерчески доступных радиоиммуноконъюгатов включают ибритумомаб тиуксетан и тозитумомаб.
5.4.9 Линкеры
Линкеры и их применение описаны выше. Любой из вышеперечисленных компонентов и молекул, используемых для модифицирования полипептидных последовательностей, предложенных в настоящем документе, может, необязательно, быть связан через линкер. Подходящие линкеры включают «гибкие линкеры», которые, как правило, имеют достаточную длину, чтобы допускать некоторое движение между модифицированными полипептидными последовательностями и связанными компонентами или молекулами. Молекулы линкера, как правило, имеют длину примерно 6-50 атомов. Молекулы линкера также могут представлять собой, например, арилацетилен, олигомеры этиленгликоля, содержащие 2-10 мономерных единиц, диамины, дикислоты, аминокислоты или их сочетания. Подходящие линкеры могут быть с легкостью выбраны и могут иметь любую подходящую длину, такую как 1 аминокислота (например, Gly), 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 10-20, 20-30, 30-50 или более 50 аминокислот.
Иллюстративные гибкие линкеры включают глициновые полимеры (G)n, глицин-сериновые полимеры (например, (GS)n, GSGGSn (SEQ ID NO: 129) и GGGSn (SEQ ID NO: 130), где n представляет собой целое число, равное по меньшей мере единице), глицин-аланиновые полимеры, аланин-сериновые полимеры и другие гибкие линкеры. Глициновые и глицин-сериновые полимеры являются относительно неструктурированными и, вследствие этого, могут служить в качестве нейтрального связующего звена между компонентами. Иллюстративные гибкие линкеры включают, но не ограничиваются ими, GGSG (SEQ ID NO: 131), GGSGG (SEQ ID NO: 132), GSGSG (SEQ ID NO: 133), GSGGG (SEQ ID NO: 134), GGGSG (SEQ ID NO: 189) и GSSSG (SEQ ID NO: 135). В конкретных вариантах осуществления линкер представляет собой (G)4S. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой ((G)4S)n), где n представляет собой целое число, равное по меньшей мере единице. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой ((G)4S)2). В некоторых вариантах осуществления глицин-сериновый полимер представляет собой (GS)n, где n представляет собой целое число, равное по меньшей мере единице. В некоторых вариантах осуществления глицин-сериновый полимер представляет собой GSGGSn (SEQ ID NO: 129), где n представляет собой целое число, равное по меньшей мере единице. В некоторых вариантах осуществления глицин-сериновый полимер представляет собой GGGSn (SEQ ID NO: 130), где n представляет собой целое число, равное по меньшей мере единице. В конкретных вариантах осуществления линкер содержит дополнительный остаток G на N'-конце SEQ ID NO: 130. В одном варианте осуществления линкер представляет собой GGSG (SEQ ID NO: 131). В одном варианте осуществления линкер представляет собой GGSGG (SEQ ID NO: 132). В одном варианте осуществления линкер представляет собой GSGSG (SEQ ID NO: 133). В одном варианте осуществления линкер представляет собой GSGGG (SEQ ID NO: 134). В одном варианте осуществления линкер представляет собой GGGSG (SEQ ID NO: 189). В одном варианте осуществления линкер представляет собой GSSSG (SEQ ID NO: 135).
Пептидные последовательности, предложенные в настоящем документе, включая варианты и подпоследовательности FGF19 и FGF21, а также продукты слияния и химеры FGF19/FGF21, приведенные в таблице 1 и списке последовательностей, а также подпоследовательности, варианты последовательностей и модифицированные формы последовательностей, приведенных в таблице 1 и списке последовательностей, имеют одну или более активностей, описанных в настоящем документе. Одним примером активности является модулирование гомеостаза желчных кислот. Другим примером активности является пониженная стимуляция образования HCC, например, по сравнению с FGF19. Дополнительным примером активности является более низкая или уменьшенная повышающая уровень липидов (например, триглицеридов, холестерина, не-ЛВП) активность или более высокая повышающая уровень ЛВП активность, например, по сравнению с FGF21. Другим примером активности является более низкая или уменьшенная снижающая безжировую массу тела активность, например, по сравнению с FGF21. Другим примером активности является связывание с FGFR4 или активация FGFR4, например, пептидные последовательности, которые связываются с FGFR4 с аффинностью, сопоставимой или большей, чем аффинность связывания FGF19 для FGFR4; и пептидные последовательности, которые активируют FGFR4 до степени или величины, сопоставимой или большей, чем в случае, когда FGF19 активирует FGFR4. Дополнительные примеры активностей включают лечение связанного с гомеостазом желчных кислот или сопутствующего заболевания. Определение таких активностей, как, например, модуляция гомеостаза желчных кислот, снижающая уровень глюкозы активность; анализ связанного с гомеостазом желчных кислот или сопутствующего заболевания, образования или онкогенеза HCC, повышающей уровень липидов активности или уменьшающей безжировую массу тела активности можно проводить в экспериментах на животных, таких как мыши db/db. Связывание с FGFR4 или активацию FGFR4 можно количественно определять анализами, описанными в настоящем документе или известными квалифицированному специалисту.
Для скрининга или диагностики HCC можно использовать различные методологии, хорошо известные квалифицированному специалисту. Индикаторы HCC включают обнаружение опухолевого маркера, такого как повышенные уровни альфа-фетопротеина (AFP) или дез-гамма-карбоксипротромбина (DCP). Также полезны различные методы сканирования и визуализации, включая ультразвуковое сканирование, КТ сканирование и МРТ. В конкретных вариантах осуществления оценку того, проявляет ли пептид (например, пептид-кандидат) признаки индукции HCC, можно проводить in vivo, например, подсчитывая количество образовавшихся узлов HCC в животной модели, такой как мыши db/db, которым был введен пептид, по сравнению с количеством образовавшихся узлов HCC в случае FGF19 дикого типа. Макроскопически рак печени может иметь форму узлов, при этом опухолевые узлы (которые являются округлыми или овальными, серого или зеленого цвета, четко очерченными, но не инкапсулированными) представлены либо одной большой массой, либо несколькими массами меньшего размера. Альтернативно, HCC может присутствовать в виде инфильтративной опухоли, которая является диффузной и плохо очерченной, и часто инфильтрирует воротную вену. Патологоанатомическую оценку образцов печеночной ткани, как правило, проводят после того, как результаты одного или более из вышеуказанных методов указывают на вероятное наличие HCC. Таким образом, способы, предложенные в настоящем документе, могут дополнительно включать оценку образца печеночной ткани от животного в in vivo модели (например, мыши db/db), используемой в исследованиях HCC, с целью определения того, проявляет ли пептидная последовательность признаки индукции HCC. При микроскопической оценке патологоанатом может определять, имеет ли место HCC одного из четырех общих архитектурных и цитологических типов (паттернов) (то есть, фиброламеллярная, псевдогландулярная (аденоидная), плеоморфная (гигантоклеточная) и прозрачноклеточная).
Более конкретно, пептидные последовательности, предложенные в настоящем документе, включая варианты и подпоследовательности FGF19 и FGF21, продукты слияния и химеры FGF19/FGF21, приведенные в таблице 1 и списке последовательностей, а также подпоследовательности, варианты и модифицированные формы последовательностей, приведенных в таблице 1 и списке последовательностей, включают те, которые обладают следующими активностями: пептидные последовательности, модулирующие гомеостаз желчных кислот или способные лечить связанное с гомеостазом желчных кислот или сопутствующее заболевание, и в то же время имеющие пониженную способность стимулировать образование HCC по сравнению с FGF19 или вариантной последовательностью FGF19, имеющей любую из замен GQV, GDI, WGPI (SEQ ID NO: 171), WGDPV (SEQ ID NO: 172), WGDI (SEQ ID NO: 173), GDPI (SEQ ID NO: 174), GPI, WGQPI (SEQ ID NO: 175), WGAPI (SEQ ID NO: 176), AGDPI (SEQ ID NO: 177), WADPI (SEQ ID NO: 178), WGDAI (SEQ ID NO: 179), WGDPA (SEQ ID NO: 180), WDPI (SEQ ID NO: 181), WGDI (SEQ ID NO: 182), WGDP (SEQ ID NO: 183) или FGDPI (SEQ ID NO: 184) вместо последовательности WGDPI (SEQ ID NO: 170) в аминокислотах 16-20 из FGF19; пептидные последовательности, обладающие большей модулирующей гомеостаз желчных кислот активностью по сравнению с FGF19 или вариантной последовательностью FGF19, имеющей любую из замен GQV, GDI, WGPI (SEQ ID NO: 171), WGDPV (SEQ ID NO: 172), WGDI (SEQ ID NO: 173), GDPI (SEQ ID NO: 174), GPI, WGQPI (SEQ ID NO: 175), WGAPI (SEQ ID NO: 176), AGDPI (SEQ ID NO: 177), WADPI (SEQ ID NO: 178), WGDAI (SEQ ID NO: 179), WGDPA (SEQ ID NO: 180), WDPI (SEQ ID NO: 181), WGDI (SEQ ID NO: 182), WGDP (SEQ ID NO: 183) или FGDPI (SEQ ID NO: 184) вместо последовательности WGDPI (SEQ ID NO: 170) в аминокислотах 16-20 из FGF19; пептидные последовательности, обладающие меньшей повышающей уровень липидов (например, меньшей повышающей уровень триглицеридов, холестерина, не-ЛВП) активностью или большей повышающей уровень ЛВП активностью по сравнению с FGF19 или вариантной последовательностью FGF19, имеющей любую из последовательностей GQV, GDI, WGPI (SEQ ID NO: 171), WGDPV (SEQ ID NO: 172), WGDI (SEQ ID NO: 173), GDPI (SEQ ID NO: 174), GPI, WGQPI (SEQ ID NO: 175), WGAPI (SEQ ID NO: 176), AGDPI (SEQ ID NO: 177), WADPI (SEQ ID NO: 178), WGDAI (SEQ ID NO: 179), WGDPA (SEQ ID NO: 180), WDPI (SEQ ID NO: 181), WGDI (SEQ ID NO: 182), WGDP (SEQ ID NO: 183) или FGDPI (SEQ ID NO: 184) вместо последовательности WGDPI (SEQ ID NO: 170) в аминокислотах 16-20 из FGF19; и пептидные последовательности, обладающие меньшей снижающей безжировую массу тела активностью по сравнению с FGF21.
Более конкретно, пептидные последовательности, предложенные в настоящем документе, включая варианты и подпоследовательности FGF19 и FGF21, продукты слияния и химеры FGF19/FGF21, приведенные в таблице 1 и списке последовательностей, а также подпоследовательности, варианты и модифицированные формы последовательностей, приведенных в таблице 1 и списке последовательностей, включают те, которые обладают следующими активностями: пептидные последовательности, которые модулируют гомеостаз желчных кислот; пептидные последовательности, которые лечат связанное с гомеостазом желчных кислот или сопутствующее заболевание; пептидные последовательности, которые связываются с FGFR4 или активируют FGFR4, например, пептидные последовательности, которые связываются с FGFR4 с аффинностью, сопоставимой или большей, чем аффинность связывания FGF19 для FGFR4; пептидные последовательности, которые активируют FGFR4 до степени или величины, которая сопоставима или больше, чем в случае, когда FGF19 активирует FGFR4; пептидные последовательности, которые понижающе регулируют или уменьшают экспрессию гена альдо-кето-редуктазы, например, по сравнению с FGF19; и пептидные последовательности, которые повышающе регулируют или увеличивают экспрессию гена члена 2 семейства переносчиков растворенных веществ 1 (Slc1a2) по сравнению с FGF21.
Как описано в настоящем документе, варианты включают различные имеющие N-концевые модификации и/или укороченные варианты FGF19, включая варианты, в которых имеется замена одной или нескольких N-концевых аминокислот FGF19 аминокислотами из FGF21. Такие варианты включают варианты, обладающие снижающей уровень глюкозы активностью, а также благоприятно влияющие на липидный профиль, и при этом не имеющие измеримой или заметной онкогенной активности.
5.5 Дозирование и введение
Пептидные последовательности, предложенные в настоящем документе, включая подпоследовательности, варианты последовательностей и модифицированные формы приведенных пептидных последовательностей (например, последовательностей, приведенных в списке последовательностей или таблице 1), могут быть сформулированы в единичной дозе или стандартной лекарственной форме. В конкретном варианте осуществления пептидная последовательность присутствует в количестве, эффективном для лечения субъекта, который нуждается в лечении, например, вследствие аномального или аберрантного гомеостаза желчных кислот, такого как метаболический синдром; заболевания, связанного с метаболизмом липидов или глюкозы; нарушения метаболизма холестерина или триглицеридов; диабета 2 типа; холестаза, включая, например, заболевания внутрипеченочного холестаза (например, PBC, PFIC, PSC, PIC, неонатальный холестаз и медикаментозный холестаз (вызванный, например, эстрогеном)), и заболевания внепеченочного холестаза (например, сжатие желчных протоков из-за опухоли, блокирование желчных протоков желчными камнями); синдрома недостаточности всасывания желчных кислот и других заболеваний с вовлечением дистального отдела тонкого кишечника, включая резекцию подвздошной кишки, воспалительные заболевания кишечника (например, болезнь Крона и язвенный колит), нарушений, приводящих к уменьшению всасывания желчных кислот, иначе не характеризуемых (идиопатических), ведущих к диарее (например, BAD) и ЖК симптомам, а также форм рака ЖК тракта, печени и/или желчных протоков (например, рака толстого кишечника и печеночно-клеточного рака); и/или аномалий синтеза желчных кислот, таких как те, которые вносят вклад в развитие NASH, цирроза и портальной гипертензии. Иллюстративный диапазон единичных доз составляет примерно 25-250, 250-500, 500-1000, 1000-2500 или 2500-5000, 5000-25000, 25000-50000 нг; примерно 25-250, 250-500, 500-1000, 1000-2500 или 2500-5000, 5000-25000, 25000-50000 мкг; и примерно 25-250, 250-500, 500-1000, 1000-2500 или 2500-5000, 5000-25000, 25000-50000 мг.
Пептидные последовательности, предложенные в настоящем документе, включая подпоследовательности, варианты последовательностей и модифицированные формы приведенных пептидных последовательностей (например, последовательностей, приведенных в списке последовательностей или таблице 1), для обеспечения намеченного эффекта можно вводить одной дозой или несколькими дозами, например, в эффективном или достаточном количестве. Иллюстративные дозы находятся в диапазоне примерно 25-250, 250-500, 500-1000, 1000-2500 или 2500-5000, 5000-25000, 25000-50000 пг/кг; примерно 50-500, 500-5000, 5000-25000 или 25000-50000 нг/кг и примерно 25-250, 250-500, 500-1000, 1000-2500 или 2500-5000, 5000-25000, 25000-50000 мкг/кг. Можно вводить одну или несколько доз, например, несколько раз в сутки, ежедневно, через день, еженедельно или периодически (например, два раза в неделю, один раз каждые 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 или 8 недель, или один раз каждые 2, 3, 4, 5 или 6 месяцев).
Пептидные последовательности, предложенные в настоящем документе, включая подпоследовательности, варианты и модифицированные формы приведенных пептидных последовательностей (например, последовательностей, приведенных в списке последовательностей или таблице 1), можно вводить, и способы можно практиковать, системно, регионально или локально, любыми путями введения. Например, пептидную последовательность можно вводить парентерально (например, подкожно, внутривенно, внутримышечно или внутрибрюшинно), перорально (например, приемом внутрь, трансбуккальным или подъязычным введением), ингаляцией, внутрикожно, в полость тела, интракраниально, чрескожно (топически), трансмукозально или ректально. Пептидные последовательности, предложенные в настоящем документе, включая подпоследовательности, варианты и модифицированные формы приведенных пептидных последовательностей (например, последовательностей, приведенных в списке последовательностей или таблице 1), в том числе предложенные в настоящем документе фармацевтические композиции, можно вводить с помощью (микро)инкапсулированной системы доставки или помещенными в имплантат для введения.
Конкретные неограничивающие примеры парентерального (например, подкожного) введения включают использование системы подкожной доставки от компании Intarcia (Intarcia Therapeutics, Inc.; Hayward, CA). Система включает миниатюрный осмотический насос, который доставляет унифицированное количество лекарственного средства на протяжении нужного количества времени. Помимо поддержания уровней лекарственного средства в соответствующем терапевтическом диапазоне, систему можно использовать с препаратами, которые поддерживают стабильность белковых терапевтических средств при температуре тела человека в течение продолжительных периодов времени.
Другой неограничивающий пример парентерального введения включает использование имплантируемых осмотических насосов DUROS®-типа (например, от компании DURECT Corp.). Систему DUROS® можно использовать для методов лечения, требующих системного или сайт-специфического введения лекарственного средства. Для системной доставки лекарственных средств систему DUROS® помещают непосредственно под кожу, например, в плечо, амбулаторной процедурой, которая длится всего несколько минут, и с использованием местного анестетика. Для доставки лекарственного средства в определенную зону можно использовать технологию миниатюрных катетеров. Катетер можно присоединять к системе DUROS® для прямой доставки лекарственного средства в целевой орган, ткань или синтетическую медицинскую структуру, такую как имплантат. Сайт-специфическая доставка позволяет вводить лекарственное средство в терапевтической концентрации в целевую зону, не подвергая весь организм воздействию аналогичной концентрации. Точность, размер и технологические характеристики системы DUROS® позволяют производить непрерывную сайт-специфическую доставку в различные точно определенные участки тела.
Другой неограничивающий пример парентерального введения включает использование нательных систем доставки (например, набор для доставки Neulasta® от компании Amgen). Эта нательная система доставки включает нательный инъектор, который имеет небольшие размеры, малый вес, инъекционную систему устанавливают непосредственно в день посещения врача (например, в день проведения химиотерапии). Она разработана для доставки дозы терапевтического средства на следующий день или в ближайшие дни после посещения врача, так что для пациента нет необходимости возвращаться в кабинет врача для получения инъекции.
5.6 Способы предотвращения, лечения и контроля заболеваний и нарушений
В одном варианте осуществления настоящего изобретения предложен способ предотвращения заболевания или нарушения у субъекта, который имеет или рискует иметь заболевание или нарушение, предотвращаемое с помощью пептидной последовательности, предложенной в настоящем документе, включающий введение субъекту фармацевтической композиции, содержащей пептид, предложенный в настоящем документе, в количестве, эффективном для предотвращения заболевания или нарушения. В другом варианте осуществления настоящего изобретения предложен способ лечения заболевания или нарушения у субъекта, который имеет или рискует иметь заболевание или нарушение, поддающееся лечению с помощью пептидной последовательности, предложенной в настоящем документе, включающий введение субъекту фармацевтической композиции, содержащей пептид, предложенный в настоящем документе, в количестве, эффективном для лечения заболевания или нарушения. В другом варианте осуществления настоящего изобретения предложен способ контроля заболевания или нарушения у субъекта, который имеет или рискует иметь заболевание или нарушение, поддающееся контролю с помощью пептидной последовательности, предложенной в настоящем документе, включающий введение субъекту фармацевтической композиции, содержащей пептид, предложенный в настоящем документе, в количестве, эффективном для контроля заболевания или нарушения. В одном варианте осуществления заболевание или нарушение представляет собой связанное с гомеостазом желчных кислот или сопутствующее заболевание. В другом варианте осуществления заболевание или нарушение представляет собой метаболическое заболевание или нарушение. В других вариантах осуществления заболевание или нарушение представляет собой рак или опухоль.
Введение различных вариантных и слитых пептидных последовательностей FGF19 и/или FGF21 мышам приводит к успешной модуляции гомеостаза желчных кислот и гипергликемии (данные не представлены). Кроме того, в отличие от FGF19, конкретные пептидные последовательности не стимулируют и не индуцируют образование или онкогенез HCC у мышей (данные не представлены). Таким образом, введение пептидов, предложенных в настоящем документе, включая подпоследовательности, варианты и модифицированные формы приведенных пептидных последовательностей (в то числе варианты и подпоследовательности FGF19 и FGF21, приведенные в таблице 1 и списке последовательностей, а также продукты слияния и химеры FGF19/FGF21, приведенные в таблице 1 и списке последовательностей), животному, либо непосредственно, либо опосредованно in vivo или ex vivo способами (например, введением вариантного или слитого пептида, нуклеиновой кислоты, кодирующей вариантный или слитый пептид, либо трансформированной клетки или генно-терапевтического вектора, экспрессирующего вариантный или слитый пептид) можно использовать для лечения различных заболеваний, например, связанных с гомеостазом желчных кислот или сопутствующих заболеваний, а также метаболических заболеваний, таких как заболевания, связанные с высокими уровнями сахара в крови, гипергликемические состояния, устойчивость к инсулину, гиперинсулинемия, непереносимость глюкозы, метаболический синдром, либо родственных заболеваний, указанных в настоящем документе.
5.6.1 Способы предотвращения, лечения и контроля связанных с гомеостазом желчных кислот или сопутствующих заболеваний
В настоящем документе выражения «связанное с гомеостазом желчных кислот заболевание», «связанное с гомеостазом желчных кислот или сопутствующее заболевание», и тому подобное, при использовании применительно к состоянию субъекта означают нарушение гомеостаза желчных кислот, которое может проявляться, например, в виде острого, временного или хронического аномального уровня одной или более желчных кислот. Данное состояние может быть вызвано подавлением, уменьшением или задержкой синтеза, метаболизма или всасывания желчных кислот, так что у субъекта наблюдается уровень желчных кислот, которого как правило, не бывает у здоровых субъектов.
Кроме того, в настоящем документе предложены in vitro, ex vivo и in vivo (например, на теле или в теле субъекта) способы и варианты применения. Такие способы и варианты применения можно осуществлять на практике с любой из пептидных последовательностей, приведенных в настоящем документе. В различных вариантах осуществления способы включают введение пептидной последовательности, такой как вариант, продукт слияния или химера FGF19 или FGF21, раскрытые в настоящем документе (например, в списке последовательностей или таблице 1), либо подпоследовательность, вариант или модифицированная форма варианта, продукта слияния или химеры FGF19 или FGF21, раскрытых в настоящем документе (например, в списке последовательностей или таблице 1), субъекту в количестве, эффективном для лечения связанного с гомеостазом желчных кислот или сопутствующего заболевания.
В конкретных вариантах осуществления пептид вводят в сочетании с дополнительным терапевтическим средством(ами) и/или методами лечения (например, средством, полезным для лечения и/или предотвращения PBC). Дополнительное терапевтическое средство(а) можно вводить до, совместно или после введения пептидов, описанных в настоящем документе.
Кроме того, в настоящем документе предложены способы предотвращения (например, у субъектов, предрасположенных к развитию конкретного заболевания(й) в сравнении с субъектами сопоставимого возраста, пола, расы и так далее), задержки, замедления или ингибирования прогрессирования, начала развития, либо лечения (например, ослабления) связанного с гомеостазом желчных кислот или сопутствующего заболевания. Таким образом, в различных вариантах осуществления настоящего изобретения предложен способ, например, модуляции гомеостаза желчных кислот или лечения связанного с гомеостазом желчных кислот или сопутствующего заболевания, включающий создание контакта с, или введение одного или более пептидов, предложенных в настоящем документе (например, варианта или продукта слияния FGF19 и/или FGF21, приведенных в списке последовательностей или таблице 1), в количестве, эффективном для модуляции гомеостаза желчных кислот или лечения связанного с гомеостазом желчных кислот или сопутствующего заболевания. В конкретных вариантах осуществления способ дополнительно включает создание контакта с, или введение по меньшей мере одного дополнительного терапевтического средства или применение метода лечения, полезного для лечения или предотвращения связанного с гомеостазом желчных кислот или сопутствующего заболевания (например, PBC).
Термин «субъект» относится к животному. Как правило, животное является млекопитающим, которое получило бы пользу от лечения пептидной последовательностью, предложенной в настоящем документе. Конкретные примеры включают приматов (например, людей), собак, кошек, лошадей, коров, свиней и овец.
Субъекты включают тех, которые имеют заболевание, например, связанное с гомеостазом желчных кислот или сопутствующее заболевание, такое как холестаз, включая, например, заболевания внутрипеченочного холестаза (например, PBC, PFIC, PSC, PIC, неонатальный холестаз и медикаментозный холестаз (вызванный, например, эстрогеном)) и заболевания внепеченочного холестаза (например, сжатие желчных протоков из-за опухоли, блокирование желчных протоков желчными камнями); синдром недостаточности всасывания желчных кислот и другие заболевания с вовлечением дистального отдела тонкого кишечника, включая резекцию подвздошной кишки, воспалительные заболевания кишечника (например, болезнь Крона и язвенный колит), синдром короткой кишки, нарушения, приводящие к уменьшению всасывания желчных кислот, иначе не характеризуемые (идиопатические), ведущие к диарее (например, BAD) и ЖК симптомам, а также формы рака ЖК тракта, печени и/или желчных протоков (например, рак толстого кишечника и печеночно-клеточный рак); и/или аномалии синтеза желчных кислот, такие как те, которые вносят вклад в развитие NASH, цирроза и портальной гипертензии; или субъектов, которые не имеют заболевания, но могут иметь риск развития заболевания.
Неограничивающие иллюстративные связанные с гомеостазом желчных кислот или сопутствующие заболевания, предотвращаемые, поддающиеся лечению или поддающиеся контролю в соответствии со способами и вариантами применения, предложенными в настоящем документе, включают: холестаз, включая, например, заболевания внутрипеченочного холестаза (например, первичный билиарный цирроз (PBC), первичный семейный внутрипеченочный холестаз (PFIC) (например, прогрессирующий PFIC), первичный склерозирующий холангит (PSC), внутрипеченочный холестаз беременных (PIC), неонатальный холестаз и медикаментозный холестаз (вызванный, например, эстрогеном)), а также заболевания внепеченочного холестаза (например, сжатие желчных протоков из-за опухоли, блокирование желчных протоков желчными камнями); синдром недостаточности всасывания желчных кислот и другие заболевания с вовлечением дистального отдела тонкого кишечника, включая резекцию подвздошной кишки, воспалительные заболевания кишечника (например, болезнь Крона и язвенный колит), синдром короткой кишки, нарушения, приводящие к уменьшению всасывания желчных кислот, иначе не характеризуемые (идиопатические), ведущие к диарее (например, хологенной диарее (BAD)) и ЖК симптомам, а также формы рака ЖК тракта, печени и/или желчных протоков (например, рак толстого кишечника и печеночно-клеточный рак); и/или аномалии синтеза желчных кислот, такие как те, которые вносят вклад в развитие неалкогольного стеатогепатита (NASH), цирроза и портальной гипертензии; например, у млекопитающих, таких как люди. Дополнительные связанные с гомеостазом желчных кислот или сопутствующие заболевания включают метаболический синдром; нарушения метаболизма липидов или глюкозы; нарушения метаболизма холестерина или триглицеридов; диабет 2 типа. В одном конкретном варианте осуществления связанное с гомеостазом желчных кислот или сопутствующее заболевание представляет собой синдром недостаточности всасывания желчных кислот. В другом конкретном варианте осуществления связанное с гомеостазом желчных кислот или сопутствующее заболевание представляет собой диарею. В другом конкретном варианте осуществления связанное с гомеостазом желчных кислот или сопутствующее заболевание представляет собой холестаз (например, внутрипеченочный или внепеченочный холестаз). В другом конкретном варианте осуществления связанное с гомеостазом желчных кислот или сопутствующее заболевание представляет собой первичный билиарный цирроз (PBC). В других конкретных вариантах осуществления связанное с гомеостазом желчных кислот или сопутствующее заболевание представляет собой первичный склерозирующий холангит. В другом варианте осуществления связанное с гомеостазом желчных кислот или сопутствующее заболевание представляет собой PFIC (например, прогрессирующий PFIC). В другом варианте осуществления связанное с гомеостазом желчных кислот или сопутствующее заболевание представляет собой NASH. В другом варианте осуществления связанное с гомеостазом желчных кислот или сопутствующее заболевание представляет собой гипергликемическое состояние. В конкретном варианте осуществления связанное с гомеостазом желчных кислот или сопутствующее заболевание представляет собой диабет 2 типа.
В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция также содержит по меньшей мере одно дополнительное средство, эффективное для модулирования гомеостаза желчных кислот или лечения связанного с гомеостазом желчных кислот или сопутствующего заболевания, при этом дополнительное средство представляет собой: глюкокортикоид; CDCA; UDCA; инсулин, секретагоги инсулина, миметик инсулина, сульфонилмочевину и меглитинид; бигуанид; ингибиторы альфа-глюкозидазы; ингибитор DPP-IV, GLP-1, агонисты GLP-1 и аналог GLP-1; DPP-IV-устойчивый аналог; агонист PPAR-гамма, агонист PPAR двойного действия, агонист PPAR общего действия; ингибитор PTP1B; ингибитор SGLT; агонист RXR; ингибитор гликоген синтазы киназы-3; иммуномодулятор; агонист бета-3 адренергических рецепторов; ингибитор 11бета-HSD1; амилин и аналог амилина; секвестрант желчных кислот или ингибитор SGLT-2. В конкретных вариантах осуществления по меньшей мере одно дополнительное средство, эффективное для модулирования PBC, представляет собой UDCA, агонист FXR, OCA, ингибитор ASBT, средство против аутоиммунного заболевания, анти-IL-12 средство, анти-CD80 средство, анти-CD20 средство, CXCL10-нейтрализующее антитело, лиганд для CXCR3, фибрат, рыбий жир, колхицин, метотрексат, азатиоприн, циклоспорин или антиретровирусное терапевтическое средство. В конкретных вариантах осуществления по меньшей мере одно дополнительное средство, эффективное для модулирования PBC, представляет собой UDCA, OCA, ингибитор ASBT, анти-IL-12 средство, анти-CD20 средство или фибрат.
Дополнительные связанные с гомеостазом желчных кислот или сопутствующие заболевания, которые можно лечить или предотвращать с помощью пептидных последовательностей, предложенных в настоящем документе, включают метаболический синдром; нарушения метаболизма липидов или глюкозы; нарушения метаболизма холестерина или триглицеридов; диабет (например, диабет 2 типа), другие заболевания, связанные с гипергликемией, включая поражение почек (например, поражение почечных канальцев или нефропатию), дегенерацию печени, поражение глаз (например, диабетическую ретинопатию или катаракту), а также состояние «диабетической стопы»; дислипидемии и их последствия, например, атеросклероз, болезнь коронарных артерий, цереброваскулярные нарушения и тому подобное.
Другие состояния, которые могут быть ассоциированы с метаболическим синдромом, включают ожирение и избыточную массу тела (включая их сопутствующие патологические состояния, такие как, но без ограничения, болезнь неалкогольной жировой инфильтрации печени (NAFLD), неалкогольный стеатогепатит (NASH), и синдром поликистоза яичников (PCOS)), также включают тромбозы, гиперкоагуляционные и протромботические состояния (артериальные и венозные), гипертензию (включая портальную гипертензию (когда градиент печеночного венозного давления (HVPG) превышает 5 мм ртутного столба)), сердечно-сосудистое заболевание, инсульт и сердечную недостаточность; заболевания или состояния, в которые вовлечены воспалительные реакции, включая атеросклероз, хронические воспалительные заболевания кишечника (например, болезнь Крона и язвенный колит), астму, системную красную волчанку, артрит или другие воспалительные ревматические заболевания; нарушения клеточного цикла или процессов клеточной дифференцировки, такие как опухоли из жировых клеток, липоматозные карциномы, включая, например, липосаркомы, солидные опухоли и новообразования; нейродегенеративные заболевания и/или демиелинизирующие заболевания центральной и периферической нервных систем, и/или неврологические заболевания с вовлечением нейровоспалительных процессов, и/или другие периферические невропатии, включая болезнь Альцгеймера, рассеянный склероз, болезнь Паркинсона, прогрессирующую мультифокальную лейкоэнцефалопатию и синдром Гийена-Барре; кожные и дерматологические заболевания и/или нарушение процессов заживления ран, включая эритемато-сквамозный дерматоз; а также другие заболевания, такие как синдром X, остеоартрит и острый респираторный дистресс-синдром.
Лечение связанного с гомеостазом желчных кислот или сопутствующего заболевания (например, NASH) может быть полезным для облегчения или устранения заболевания, которое является по отношению к нему вторичным. В качестве примера, субъект, страдающий NASH, также может иметь депрессию или тревожность вследствие NASH; таким образом, лечение NASH у субъекта также может опосредованно лечить депрессию или тревожность. В конкретных вариантах осуществления также подразумевается применение терапевтических средств, раскрытых в настоящем документе, для лечения вторичных заболеваний.
В конкретных вариантах осуществления субъект имеет, или имеет риск развития, PBC. В других конкретных вариантах осуществления субъект имеет, или имеет риск развития, NASH.
Субъекты, имеющие риск развития связанного с гомеостазом желчных кислот или сопутствующего заболевания (такого, как заболевания, описанные выше), включают, например, тех, которые могут иметь заболевание в семейном анамнезе или генетическую предрасположенность к развитию такого заболевания, а также тех, диета которых может вносить вклад в развитие таких заболеваний.
Как описано в настоящем документе, способы лечения включают создание контакта с, или введение пептида, приведенного в настоящем документе (например, варианта или продукта слияния FGF19 и/или FGF21, приведенного в списке последовательностей или таблице 1) в количестве, эффективном для достижения желательного исхода или результата у субъекта. Желательный исход или результат лечения включает уменьшение, снижение или предотвращение тяжести, либо частоты одного или более симптомов состояния у субъекта, например, улучшение состояния здоровья субъекта, либо «благоприятный эффект» или «терапевтический эффект». Таким образом, лечение может приводить к уменьшению или снижению, либо предотвращению тяжести или частоты одного или более симптомов заболевания, стабилизации, либо ингибированию прогрессирования или усугубления заболевания, и в некоторых случаях обращению вспять заболевания, на короткое время (например, на 1-6, 6-12 или 12-24 часов), на период времени средней продолжительности (например, 1-6, 6-12, 12-24 или 24-48 дней) или продолжительный период времени (например, на 1-6, 6-12, 12-24, 24-48 недель или более чем 24-48 недель). Таким образом, в случае связанного с гомеостазом желчных кислот или сопутствующего заболевания лечение может приводить к ослаблению или уменьшению проявления одного или более симптомов, либо эффектов связанного с гомеостазом желчных кислот или сопутствующего заболевания, описанного выше.
В конкретных вариантах осуществления различные способы, предложенные в настоящем документе, дополнительно включают создание контакта с, или введение одного или более дополнительных средств, либо применение методов лечения, полезных для лечения или предотвращения связанного с гомеостазом желчных кислот или сопутствующего заболевания, например, средств или методов лечения, описанных в настоящем документе, в количестве, эффективном для достижения желательного исхода или результата у субъекта.
Используемый в настоящем документе термин «эффективное количество» или «достаточное количество» для использования и/или для лечения субъекта означает количество, которое обеспечивает, в одной или нескольких дозах, отдельно, либо в сочетании с одним или более другими средствами, терапевтическими препаратами, протоколами или режимами лечения, поддающийся обнаружению ответ, сохраняющийся в течение разного периода времени (кратковременный, средней продолжительности или долговременный), желательный результат, приносящий либо объективную, либо субъективную пользу субъекту в любой поддающейся измерению или обнаружению степени, или на любой период времени (например, несколько часов, дней, месяцев, лет) приводящий к ремиссии или исцелению. Такие количества, как правило, эффективны для облегчения заболевания, либо одного, нескольких или всех неблагоприятных симптомов, последствий или осложнений заболевания, в измеримой степени, хотя уменьшение, либо ингибирование прогрессирования или усугубления заболевания считают удовлетворительным исходом.
Используемый в настоящем документе термин «облегчать» означает улучшение состояния здоровья субъекта, уменьшение степени тяжести заболевания, либо ингибирование прогрессирования или усугубления заболевания (например, стабилизацию заболевания). В случае связанного с гомеостазом желчных кислот или сопутствующего заболевания, такого как те, которые описаны выше, включая холестаз (например, PBC), нарушения, приводящие к уменьшению всасывания желчных кислот, ведущие к диарее (например, BAD), и аномалии синтеза желчных кислот (например, NASH), улучшение состояния здоровья может представлять собой ослабление или уменьшение проявления одного или более симптомов, либо эффектов заболевания.
Вследствие этого, терапевтическая польза или улучшение состояния здоровья не обязательно должно представлять собой полное устранение любого одного, большинства или всех симптомов, осложнений, последствий или основополагающих причин, связанных с нарушением или заболеванием. Таким образом, удовлетворительный конечный результат достигается, когда имеет место временное, средней продолжительности или долговременное постепенное улучшение состояния здоровья субъекта, либо частичное уменьшение проявления, частоты, степени тяжести, прогрессирования или длительности, либо ингибирование или обращение вспять одного или более ассоциированных неблагоприятных симптомов или осложнений, или последствий, или основополагающих причин, ухудшения или прогрессирования (например, стабилизация одного или более симптомов или осложнений состояния, нарушения или заболевания) нарушения или заболевания в течение некоторого периода времени (часов, дней, недель, месяцев и так далее).
Таким образом, в случае заболевания, поддающегося лечению пептидной последовательностью, предложенной в настоящем документе, либо отдельно, либо в сочетании с дополнительным средством, количество пептида (и, необязательно, дополнительного средства), достаточное для облегчения заболевания, будет зависеть от вида, тяжести или стадии, или продолжительности заболевания, желаемого терапевтического эффекта или исхода, и может быть легко определено специалистом в данной области. Соответствующие количества также будут зависеть от конкретного субъекта (например, биодоступности в организме, пола, возраста субъекта и так далее). Например, в случае временного или частичного восстановления нормального гомеостаза желчных кислот у субъекта можно уменьшать количество или частоту дозирования пептидов и средств, описанных в настоящем документе, для лечения связанных с гомеостазом желчных кислот или сопутствующих заболеваний, описанных ранее, хотя полностью лечение не будет прекращено. Эффективное количество можно определять, например, путем измерения одного или более релевантных физиологических эффектов.
Способы и варианты применения, предложенные в настоящем документе для лечения субъекта, применимы для профилактики с целью предотвращения или снижения вероятности развития у субъекта заболевания, такого как связанное с гомеостазом желчных кислот или сопутствующее заболевание. Соответственно, способы и варианты применения, предложенные в настоящем документе для лечения субъекта, имеющего, или имеющего риск развития связанного с гомеостазом желчных кислот или сопутствующего заболевания, можно применять на практике до, практически одновременно, или после введения или применения другого средства, полезного для лечения или предотвращения связанного с гомеостазом желчных кислот или сопутствующего заболевания, и/или их можно сопровождать другими видами терапии. Дополнительные виды терапии включают использование других средств, снижающих уровень глюкозы в крови, таких как инсулин, усилитель чувствительности к инсулину и другие терапевтические препараты, изменение диеты (употребление меньше сахара, жиров и так далее), хирургическую операцию для снижения массы тела (уменьшение объема желудка за счет желудочного шунтирования, гастрэктомии), желудочный бандаж, внутрижелудочный баллон, желудочный рукав и так далее. Например, способ или вариант применения, предложенный в настоящем документе для лечения гипергликемического заболевания или устойчивости к инсулину, можно использовать в сочетании с лекарственными средствами или другими фармацевтическими композициями, снижающими уровень глюкозы в крови или повышающими чувствительность к инсулину у субъекта.
В одном варианте осуществления способ или вариант применения включает создание контакта с, или введение субъекту одного или более вариантов, или продуктов слияния пептидных последовательностей FGF19 и/или FGF21 в количестве, эффективном для предотвращения связанного с гомеостазом желчных кислот или сопутствующего заболевания. В одном варианте осуществления способ или вариант применения включает создание контакта с, или введение субъекту одного или более вариантов, или продуктов слияния пептидных последовательностей FGF19 и/или FGF21 в количестве, эффективном для лечения связанного с гомеостазом желчных кислот или сопутствующего заболевания. В одном варианте осуществления способ или вариант применения включает создание контакта с, или введение субъекту одного или более вариантов, или продуктов слияния пептидных последовательностей FGF19 и/или FGF21 в количестве, эффективном для контроля связанного с гомеостазом желчных кислот или сопутствующего заболевания.
5.6.1.1 PBC и лечение средствами, эффективными для его лечения и предотвращения
Первичный билиарный цирроз (PBC), наиболее распространенное холестатическое заболевание печени, представляет собой прогрессирующее заболевание печени, которое в основном возникает в результате аутоиммунного разрушения желчных протоков, выводящих желчные кислоты из печени. По мере прогрессирования заболевания постоянное токсическое накопление желчных кислот вызывает прогрессирующее поражение печени, характеризующееся хроническим воспалением и фиброзом. В связи с тем, что пациенты с PBC имеют повышенный риск развития HCC, терапия с использованием вариантов пептидных последовательностей FGF19, продуктов слияния пептидных последовательностей FGF19 и/или FGF21 и вариантов продуктов слияния (химер) пептидных последовательностей FGF19 и/или FGF21, описанных в настоящем документе, имеет особую важность, поскольку такие последовательности не индуцируют, или по существу не приводят к увеличению образования HCC или онкогенеза HCC.
Хотя пациенты с PBC часто не имеют симптомов во время первоначальной постановки диагноза, у большинства из них наблюдаются или впоследствии развиваются, одно или более из перечисленного далее: зуд, утомляемость; желтуха; ксантома; заболевания, ассоциированные с внепеченочным аутоиммунным заболеванием (например, синдром Шегрена и ревматоидный артрит); а также осложнения, являющиеся результатом цирроза или портальной гипертензии (например, асциты, варикозное расширение вен пищевода и печеночная энцефалопатия).
Хотя точная причина развития PBC не известна, результаты большинства исследований указывают на то, что это аутоиммунное заболевание. По-видимому, существует генетическая предрасположенность, и генетические исследования показали, что часть сигнального каскада IL-12, включая полиморфизмы IL-12A и I-12RB2, играет важную роль в этиологии заболевания.
Не существует исчерпывающего метода диагностирования PBC; как правило, требуется оценка ряда факторов. Кроме того, для диагностирования PBC необходимо исключить другие состояния с аналогичными симптомами (например, аутоиммунный гепатит и первичный склерозирующий холангит); в качестве примера, обычно проводят ультразвуковое или КТ сканирование брюшной полости, чтобы исключить блокаду желчных протоков.
Диагностические анализы крови включают тесты на аномалию печеночной функции (гамма-глутамилтрансфераза и щелочная фосфатаза) и на присутствие определенных антител (антимитохондриальное антитело (AMA), антиядерное антитело (ANA)). Считают, что антиядерные антитела являются прогностическими индикаторами PBC. Когда другие результаты тестов и методов указывают на PBC, часто проводят биопсию печени для подтверждения диагноза заболевания. Для подтверждения диагноза заболевания также можно использовать эндоскопическую ретроградную холангиопанкреатографию (ЭРХПГ), эндоскопическую оценку желчных протоков.
В зависимости от прогрессирования заболевания различают четыре стадии PBC. Стадия 1 (портальная стадия) характеризуется портальным воспалением и умеренным поражением желчных протоков; стадия 2 (перипортальная стадия) характеризуется увеличением триад, перипортальным фиброзом или воспалением; стадия 3 (септальная стадия) характеризуется наличием активных и/или пассивных фиброзных септ и стадия 4 (билиарный цирроз) характеризуется наличием печеночных узлов. Для определения стадии заболевания требуется проведение биопсии печени.
Сывороточный билирубин является индикатором прогрессирования и прогноза PBC. Для пациентов с сывороточным уровнем билирубина 2-6 мг/дл среднее время выживания составляет 4,1 года, для пациентов с сывороточным уровнем билирубина 6-10 мг/дл среднее время выживания составляет 2,1 года и для пациентов с сывороточным уровнем билирубина выше 10 мг/дл среднее время выживания составляет 1,4 года. Трансплантация печения является одним из вариантов лечения на поздних стадиях PBC, хотя частота рецидивов может достигать 18% через 5 лет, и до 30% через 10 лет.
Хотя прогрессирование заболевания может быть замедлено, фармацевтическое вмешательство с применением современных методов лечения не является ни целебным, ни эффективным для всех групп пациентов. С целью улучшения результатов лечения фармакологическими препаратами, один аспект изобретения относится к применению одного или более современных терапевтических препаратов в сочетании с вариантами пептидных последовательностей FGF19, продуктами слияния пептидных последовательностей FGF19 и/или FGF21 и вариантами продуктов слияния (химер) пептидных последовательностей FGF19 и/или FGF21, имеющими одну или более активностей, связанных с лечением и/или предотвращением PBC, а также сопутствующих заболеваний, нарушений и состояний. Наиболее часто используемые и/или подающие надежды средства для комбинированной терапии приведены далее в настоящем документе, хотя следует понимать, что эти средства являются иллюстративными, а не исключительными.
Лечение PBC наиболее часто включает использование желчной кислоты, урсодезоксихолевой кислоты (урсодиол, UDCA). Терапию UDCA используют для уменьшения холестаза и улучшения печеночной функции у пациентов с PBC; однако она явно не улучшает симптомы и ее влияние на прогноз вызывает сомнения. Показано, что UDCA приводит к снижению смертности, частоты неблагоприятных явлений и необходимости в трансплантации печени при PBC. Хотя лечение UDCA считается терапией первой линии, примерно одна треть пациентов могут быть невосприимчивыми, по-прежнему иметь риск прогрессирования заболевания печени и являться кандидатами на получение альтернативной или дополнительной терапии.
Существует несколько альтернативных и вспомогательных видов терапии, в настоящее время находящихся на стадии клинической разработки, которые могут быть использованы в сочетании с вариантами пептидных последовательностей FGF19, продуктами слияния пептидных последовательностей FGF19 и/или FGF21 и вариантами продуктов слияния (химер) пептидных последовательностей FGF19 и/или FGF21, предложенными в настоящем документе и имеющими одну или более активностей, связанных с лечением и/или предотвращением PBC, а также сопутствующих заболеваний, нарушений и состояний.
Агонисты фарнезоид-X рецептора (FXR) представляют собой многообещающий класс средств, которые могут быть использованы в комбинированной терапии. Одной из основных функций агонистов FXR, ядерного рецептора, экспрессируемого на высоком уровне в печени и кишечнике, является подавление холестерин-7α гидроксилазы-1 (CYP7A1), скорость-лимитирующего фермента в синтезе желчных кислот из холестерина. Обетихолевая кислота (OCA; Intercept Pharmaceuticals, NY) является аналогом желчной кислоты и агонистом FXR, ее получают из первичной желчной кислоты человека, хенодезоксихолевой кислоты, или CDCA. OCA в настоящее время проходит оценку для лечения пациентов, которые проявляют недостаточный терапевтический ответ на урсодиол или которые неспособны переносить урсодиол.
Ингибиторы апикального натрий-зависимого переносчика желчных кислот (ASBT) являются представителями другого класса средств, которые могут быть использованы в сочетании с вариантами пептидных последовательностей FGF19, продуктами слияния пептидных последовательностей FGF19 и/или FGF21 и вариантами продуктов слияния (химер) пептидных последовательностей FGF19 и/или FGF21, описанными в настоящем документе, для лечения и/или предотвращения PBC и сопутствующих заболеваний. ASBT, член семейства совместных переносчиков натрия/солей желчных кислот, кодируемый геном SLC10A2, в настоящее время считается основным участником механизма повторного всасывания желчных кислот в кишечнике. Примеры ингибиторов ABST включают LUM001 и SC-435, оба из которых были разработаны компанией Lumena Pharmaceuticals (San Diego, CA).
Секвестранты желчных кислот также находят применение в лечении PBC. Холестирамин и колестипол являются наиболее известными секвестрантами желчных кислот. Однако их использование иногда бывает ограничено, поскольку они доступны только в порошковой форме и часто не переносятся многими пациентами из-за плохой текстуры и вкуса порошкообразной смолы. Секвестрант желчных кислот колесевилам доступен в форме таблеток и часто лучше переносится пациентами. Все секвестранты желчных кислот способны связывать другие соединения, включая жирорастворимые витамины A, D, E и K, и при недостаточности этих витаминов может требоваться их дополнительный прием. Важно отметить, что пациенты с PBC от природы имеют плохую зависимую от жиров абсорбцию витаминов A, D, E и K, следовательно, пациенты, принимающие секвестранты желчных кислот, имеют особый риск развития недостаточности этих витаминов.
Средства, связанные с иммунной и воспалительной функцией, являются кандидатами для использования в комбинированной терапии с вариантами пептидных последовательностей FGF19, продуктами слияния пептидных последовательностей FGF19 и/или FGF21 и вариантами продуктов слияния (химер) пептидных последовательностей FGF19 и/или FGF21, имеющими одну или более активностей, связанных с лечением и/или предотвращением PBC, а также сопутствующих заболеваний, нарушений и состояний.
Интерлейкин IL-12 связан с аутоиммунными реакциями. Данные указывают на то, что сигнальный путь IL-12 играет ключевую роль в эффекторных механизмах, приводящих к поражениям желчных путей. Показано, что таргетирование p40 субъединицы IL-12 приводит к облегчению экспериментальной иммуноопосредованной холангиопатии. Таким образом, средства против IL-12 (например, ингибирующие моноклональные Ат) являются перспективным терапевтическим средством. Кроме того, поскольку показано, что полиморфизмы CD80 придают повышенную предрасположенность к PBC, блокирование костимуляции между T-клетками и антигенпредставляющими клетками через CD80 за счет использования анти-CD80 средства может являться важным терапевтическим подходом к лечению PBC. Кроме того, улучшение титра IgM и увеличение числа внутрипеченочных регуляторных T-клеток с помощью анти-CD20 антитела ритуксимаба (ритуксана) также является многообещающим.
Опосредованное иммунной системой разрушение мелких желчных протоков при PBC преимущественно является клеточно-опосредованным, с вовлечением Th1-клеток, CD8+ T-клеток, NK-клеток и NKT-клеток, которые экспрессируют CXCR3. Таким образом, использование нейтрализующих антител к CXCL10, лиганду для CXCR3, может создавать возможность для препятствования одному из ключевых воспалительных процессов, вносящему вклад в опосредованное иммунной системой разрушение желчных путей при PBC. Аналогично, блокирование костимулирующих сигналов между T-клетками, экспрессирующими CD28, и антигенпредставляющими клетками, экспрессирующими CD80 (например, холангиоцитами, антитело-секретирующими B-клетками), может являться важным подходом к лечению аутоиммунных заболеваний.
Варианты пептидных последовательностей FGF19, продукты слияния пептидных последовательностей FGF19 и/или FGF21 и варианты продуктов слияния (химер) пептидных последовательностей FGF19 и/или FGF21, описанные в настоящем документе, можно использовать отдельно или в сочетании с другими средствами для лечения и/или предотвращения тех связанных с гомеостазом желчных кислот или сопутствующих заболеваний, описанных в настоящем документе, которые имеют иммунный и/или воспалительный компонент, включая, но без ограничения, PBC и сопутствующие заболевания, нарушения и состояния. Примеры таких других средств включают, например, нестероидные противовоспалительные лекарственные средства (NSAID); стероиды; цитокин-подавляющие противовоспалительные лекарственные средства (CSAID); антитела к, или антагонисты других человеческих цитокинов или факторов роста (например, IL-2, IL-6 или PDGF); антагонисты TNF (например, такие средства, как ремикейд, p75TNFRIgG (энбрел) или p55TNFR1gG (ленерцепт)); интерферон-β1a (авонекс); интерферон-β1b (бетасерон) и ингибиторы иммунных контрольных точек, включая PD1 (сопутствующие средства включают антитела ниволумаб и ламбролизумаб), PDL1, BTLA, CTLA4 (сопутствующие средства включают полностью гуманизированное моноклональное антитело к CTLA4 ипилимумаб (ервой), TIM3, LAG3 и A2aR.
Показано, что фибраты улучшают многие показатели при PBC, включая результаты тестов на функцию печени, как в виде монотерапии, так и в сочетании, у невосприимчивых к UDCA пациентов. В конкретных вариантах осуществления фибрат выбирают из группы, включающей безафибрат (безалип), ципрофибрат (модалим), гемфиброзил (лопид), клофибрат и фенофибрат (трикор). Рыбий жир имеет аналогичные полезные свойства.
У пациентов с PBC, имеющих определенные признаки гепатита при биопсии, кортикостероиды, такие как будезонид, могут приводить к улучшению гистологических и биохимических показателей печени, особенно при использовании в сочетании с UDCA. Колхицин, как показано, способствует улучшению результатов тестов на функцию печени (например, AST и ALP) и представляет собой другой альтернативный метод лечения PBC.
Другие перспективные лекарственные средства включают метотрексат в качестве иммуномодулирующего средства, азатиоприн, циклоспорин и некоторые средства, используемые в антиретровирусной терапии (например, комбивир), хотя список ими не исчерпывается.
Различные методы лечения существуют для осложнений, связанных с PBC. Например, зуд можно облегчать при помощи секвестранта желчных кислот холестирамина или, альтернативно, налтрексона и рифампицина. Утомляемость вследствие PBC можно эффективно лечить модафинилом (провигил; Teva (бывший цефалон)), не повреждая печень. Поскольку пациенты с PBC имеют повышенный риск развития остеопороза и варикозного расширения вен пищевода по сравнению с общей популяцией (и другими людьми с заболеваниями печени), скрининг и лечение этих осложнений является важной частью контроля PBC. Варианты пептидных последовательностей FGF19, продукты слияния пептидных последовательностей FGF19 и/или FGF21 и варианты продуктов слияния (химер) пептидных последовательностей FGF19 и/или FGF21, имеющие одну или более активностей, связанных с лечением и/или предотвращением PBC, а также сопутствующих заболеваний, нарушений и состояний, предложенные в настоящем документе, либо отдельно, либо в сочетании с другими средствами, представляют собой новые многообещающие альтернативы для контроля таких осложнений.
5.6.1.2 NASH и NAFLD, и лечение средствами, эффективными для их лечения и предотвращения
Неалкогольный стеатогепатит (NASH), считающийся частью спектра заболеваний неалкогольной жировой инфильтрации печени (NAFLD), вызывает воспаление и скопление жира и фиброзной ткани в печени. Хотя точная причина развития NASH неизвестна, факторы риска включают центральное ожирение, сахарный диабет 2 типа, устойчивость к инсулину (IR) и дислипидемию; сочетание вышеперечисленных нарушений часто называют метаболическим синдромом. Кроме того, показано, что употребление некоторых лекарственных средств имеет связь с NASH, в том числе тамоксифена, амиодарона и стероидов (например, преднизона и гидрокортизона). Заболевание неалкогольной жировой инфильтрации печени является наиболее распространенной причиной хронического заболевания печени в США, и по оценкам, распространенность NAFLD составляет 20-30%, а для NASH распространенность оценивают в 3,5-5%. (Смотри, например, Abrams, G.A., et al., Hepatology, 2004. 40(2): 475-83; Moreira, R.K., Arch Pathol Lab Med, 2007, 131(11): 1728-34).
NASH часто не имеет явных симптомов, что осложняет его диагностирование. Процесс диагностирования, как правило, начинают с тестов на функцию печени, при этом уровни AST (аспартат аминотрансферазы) и ALT (аланин аминотрансферазы) бывают повышены примерно у 90% индивидуумов с NASH. Часто используют другие анализы крови, чтобы исключить другие причины заболевания печени, например, гепатит. Анализы визуализации (например, ультразвуковое, КТ сканирование или МРТ) могут выявлять скопление жира в печени, но часто не позволяют отличать NASH от других причин заболевания печени, которые проявляются похожим образом. Для подтверждения диагноза NASH необходима биопсия печени.
Исход для индивидуумов, страдающих NASH, трудно прогнозировать, хотя результаты биопсии печени могут быть полезны. Наиболее серьезным осложнением NASH является цирроз, который случается, когда печень в значительной степени покрывается рубцами. Сообщалось, что у 8-26 процентов индивидуумов с NASH развивается цирроз, и прогнозируют, что NASH станет лидирующим показанием для трансплантации печени к 2020 году.
В настоящее время лечение NASH направлено главным образом на фармакологический и не фармакологический контроль тех медицинских состояний, которые ассоциированы с этим заболеванием, включая гиперлипидемию, диабет и ожирение. Фармакологическое вмешательство в случае NASH, хотя само по себе и не является исцеляющим, включает лечение витамином E, пиоглитазоном, метформином, статинами, омега-3 жирными кислотами и урсодезоксихолевой кислотой (UDCA (урсодиол)). Другие средства, проходящие оценку, которые в настоящее время одобрены для лечения других состояний, включают лозартан и телисартан, эксенатид, агонисты GLP-1, ингибиторы DPP-IV и карбамазепин.
Ввиду недостатков вышеуказанных современных методов лечения, терапия средствами, имеющими четкие механизмы действия, является многообещающим новым подходом к лечению и предотвращению NASH и NAFLD. Устранение указанных недостатков подразумевается, например, за счет использования вариантов пептидных последовательностей FGF19, продуктов слияния пептидных последовательностей FGF19 и/или FGF21 и вариантов продуктов слияния (химер) пептидных последовательностей FGF19 и/или FGF21, описанных в настоящем документе. В конкретных вариантах осуществления пептиды используют в сочетании с другими терапевтическими средствами и/или методами лечения. В настоящем документе также предложено профилактическое и/или терапевтическое применение этих вариантов пептидных последовательностей FGF19, продуктов слияния пептидных последовательностей FGF19 и/или FGF21 и вариантов продуктов слияния (химер) пептидных последовательностей FGF19 и/или FGF21, либо отдельно, либо в сочетании с методами лечения, которые будут разработаны в будущем, для лечения или предотвращения NASH и NAFLD.
5.6.1.3 Терапевтические методы для лечения или предотвращения других заболеваний, связанных с гомеостазом желчных кислот, а также сопутствующих заболеваний, нарушений и состояний
В настоящем документе также предложено применение вариантов пептидных последовательностей FGF19, продуктов слияния пептидных последовательностей FGF19 и/или FGF21 и вариантов продуктов слияния (химер) пептидных последовательностей FGF19 и/или FGF21, имеющих одну или более активностей, связанных с лечением и/или предотвращением других заболеваний, связанных с гомеостазом желчных кислот, а также сопутствующих заболеваний, нарушений и состояний, помимо PBC. В конкретных вариантах осуществления пептиды используют в сочетании с другими терапевтическими средствами и/или методами лечения.
В качестве примера, пациентам с хологенной диареей, вторичной по отношению к илеиту Крона, будет помогать лечение глюкокортикоидами. В случае микроскопического колита также будет помогать прием стероидов. Показано, что у пациентов с синдромом короткой кишки (в проксимальном отделе кишечника имеет место недостаток желчных кислот, что приводит к нарушению солюбилизации мицелл) холилсаркозин (холил-N-метилглицин), синтетический аналог желчной кислоты, способствует повышению всасывания липидов.
Показано, что введение первичной желчной кислоты, хенодезоксихолевой кислоты (CDCA), приводит к уменьшению секреции холестерина желчи и постепенному растворению камней в желчном пузыре. Поскольку CDCA обладает небольшой гепатотоксичностью, ее постепенно заменяют на UDCA. Несмотря на эффективность и безопасность введения UDCA с целью растворения холестериновых желчных камней, ее нечасто используют в настоящее время из-за успехов, достигнутых в лапароскопической холецистэктомии, которая обеспечивает быстрое избавление от симптоматического заболевания. Медикаментозная терапия, напротив, требует лечения в течение нескольких месяцев, не всегда обеспечивает растворение камней и у некоторых пациентов со временем случаются рецидивы.
Замену желчных кислот используют при врожденных нарушениях биосинтеза желчных кислот, как правило, в виде смеси CDCA или UDCA и холевой кислоты, для подавления синтеза цитотоксических предшественников желчных кислот и восстановления поступления первичных желчных кислот в энтерогепатическую циркуляцию.
В дополнение к средствам и методам лечения, описанным выше, предусмотрена также комбинированная терапия многочисленными дополнительными средствами (и классами средств), включая, но без ограничения, 1) инсулин, например, болюсные и базальные аналоги, миметики инсулина и средства, стимулирующие секрецию инсулина, включая сульфонилмочевины (например, хлорпропамид, толазамид, ацетогексамид, толбутамид, глибурид, глимепирид, глипизид) и меглитиниды (например, репаглинид (прандин) и натеглинид (старликс)); 2) бигуаниды (например, метформин (глюкофаж)) и другие средства, действие которых заключается в стимуляции утилизации глюкозы, уменьшении производства глюкозы в печени и/или уменьшении выхода глюкозы из кишечника; 3) ингибиторы альфа-глюкозидазы (например, акарбоза и миглитол) и другие средства, замедляющие расщепление и последующее всасывание из кишечника углеводов и уменьшающие постпрандиальную гипергликемию; 4) тиазолидиндионы (например, росиглитазон (авандиа), троглитазон (резулин), пиоглитазон (актос), глипизид, балаглитазон, ривоглитазон, нетоглитазон, троглитазон, энглитазон, циглитазон, адаглитазон, дарглитазон), усиливающие действие инсулина (например, за счет сенсибилизации к инсулину), тем самым стимулирующие утилизацию глюкозы в периферических тканях; 5) глюкагон-подобные пептиды, включая ингибиторы DPP-IV (например, вилдаглиптин (галвус) и ситаглиптин (янувия)) и глюкагон-подобный пептид-1 (GLP-1), а также агонисты и аналоги GLP-1 (например, эксенатид (баетта) и ITCA 650 (осмотический насос, вводимый подкожно, который доставляет аналог эксенатида в течение 12-месячного периода; Intarcia, Boston, MA)) и 6) DPP-IV-устойчивые аналоги (миметики инкретина), агонисты PPAR-гамма, агонисты PPAR двойного действия, агонисты PPAR общего действия; ингибиторы PTP1B; ингибиторы SGLT; секретагоги инсулина, агонисты RXR, ингибиторы гликоген синтазы киназы-3, иммуномодуляторы, агонисты бета-3 адренергических рецепторов, ингибиторы 11бета-HSD1 и аналоги амилина.
Другие иллюстративные средства, которые в конкретных вариантах осуществления могут быть использованы в сочетании с пептидами и способами, предложенными в настоящем документе, включают ингибиторы дипептидил пептидазы-4 (DPP-4), препараты бромкриптина, секвестранты желчных кислот (например, колесевилам) и ингибиторы SGLT-2. Лекарственные средства, снижающие аппетит, также хорошо известны и могут быть использованы в сочетании с композициями и способами, предложенными в настоящем документе. Дополнительные терапевтические средства можно вводить до, одновременно или после использования способов и вариантов применения, предложенных в настоящем документе.
5.6.2 Способы предотвращения, лечения и контроля метаболических заболеваний
В настоящем документе также предложены in vitro, ex vivo и in vivo (например, на теле или в теле субъекта) способы и варианты применения. Такие способы и варианты применения можно осуществлять на практике с любой из пептидных последовательностей, приведенных в настоящем документе. В различных вариантах осуществления способы включают введение пептидной последовательности, такой как вариант, продукт слияния или химера FGF19 или FGF21, раскрытые в настоящем документе (например, в списке последовательностей или таблице 1), или подпоследовательность, вариант или модифицированная форма варианта, продукта слияния или химеры FGF19 или FGF21, раскрытых в настоящем документе (например, в списке последовательностей или таблице 1), субъекту в количестве, эффективном для лечения метаболического или сопутствующего заболевания.
В конкретных вариантах осуществления пептид вводят в сочетании с дополнительным терапевтическим средством(ами) и/или методами лечения (например, средством, полезным для лечения и/или предотвращения PBC). Дополнительное терапевтическое средство(а) можно вводить до, совместно или после введения пептидов, описанных в настоящем документе.
Кроме того, в настоящем документе предложены способы предотвращения (например, у субъектов, предрасположенных к развитию конкретного заболевания(й) в сравнении с субъектами сопоставимого возраста, пола, расы и так далее), задержки, замедления или ингибирования прогрессирования, начала развития, либо лечения (например, ослабления) метаболического или сопутствующего заболевания. Таким образом, в различных вариантах осуществления способ, предложенный в настоящем документе, например, для модуляции гомеостаза желчных кислот, либо лечения метаболического или сопутствующего заболевания, включает создание контакта с, или введение одного или более пептидов, предложенных в настоящем документе (например, варианта или продукта слияния FGF19 и/или FGF21, приведенного в списке последовательностей или таблице 1) в количестве, эффективном для модуляции гомеостаза желчных кислот, либо лечения метаболического или сопутствующего заболевания. В конкретных вариантах осуществления способ дополнительно включает создание контакта с, или введение по меньшей мере одного дополнительного терапевтического средства или применение метода лечения, полезного для лечения, либо предотвращения метаболического или сопутствующего заболевания (например, PBC).
Термин «субъект» относится к животному. Как правило, животное является млекопитающим, которое получило бы пользу от лечения пептидной последовательностью, предложенной в настоящем документе. Конкретные примеры включают приматов (например, людей), собак, кошек, лошадей, коров, свиней и овец.
Субъекты включают тех, которые имеют заболевание, например, метаболическое или сопутствующее заболевание, или субъектов, которые не имеют заболевания, но могут иметь риск развития заболевания.
Неограничивающие иллюстративные заболевания или состояния, предотвращаемые, поддающиеся лечению или поддающиеся контролю с помощью пептидных препаратов, способов и вариантов применения, предложенных в настоящем документе, включают метаболические заболевания и нарушения. Неограничивающие примеры заболеваний и нарушения включают: метаболический синдром; нарушение метаболизма липидов или глюкозы; нарушение метаболизма холестерина или триглицеридов; диабет 2 типа; холестаз, включая, например, заболевания внутрипеченочного холестаза (например, PBC, PFIC, PSC, PIC, неонатальный холестаз и медикаментозный холестаз (вызванный, например, эстрогеном)) и заболевания внепеченочного холестаза (например, сжатие желчных протоков из-за опухоли, блокирование желчных протоков желчными камнями); синдром недостаточности всасывания желчных кислот и другие заболевания с вовлечением дистального отдела тонкого кишечника, включая резекцию подвздошной кишки, воспалительные заболевания кишечника (например, болезнь Крона и язвенный колит), нарушения, приводящие к уменьшению всасывания желчных кислот, иначе не характеризуемые (идиопатические), ведущие к диарее (например, BAD) и ЖК симптомам, а также формы рака ЖК тракта, печени и/или желчных протоков (например, рак толстого кишечника и печеночно-клеточный рак); и/или аномалии синтеза желчных кислот, такие как те, которые вносят вклад в развитие NASH, цирроза и портальной гипертензии. Для лечения, пептидные последовательности, предложенные в настоящем документе, можно вводить субъектам, которые нуждаются в модулировании гомеостаза желчных кислот или имеют связанное с гомеостазом желчных кислот или сопутствующее заболевание. Пептидные последовательности, предложенные в настоящем документе, также могут быть полезны в случае других заболеваний, связанных с гипергликемией, включая поражение почек (например, поражение почечных канальцев или нефропатию), дегенерацию печени, поражение глаз (например, диабетическую ретинопатию или катаракту), а также состояние «диабетической стопы»; дислипидемии и их последствия, например, атеросклероз, болезнь коронарных артерий, цереброваскулярные нарушения и тому подобное.
Другие состояния, которые могут быть ассоциированы с метаболическим синдромом, включают ожирение и избыточную массу тела (включая их сопутствующие патологические состояния, такие как, но без ограничения, болезнь неалкогольной жировой инфильтрации печени (NAFLD), неалкогольный стеатогепатит (NASH), и синдром поликистоза яичников (PCOS)), также включают тромбозы, гиперкоагуляционные и протромботические состояния (артериальные и венозные), гипертензию (включая портальную гипертензию (когда градиент печеночного венозного давления (HVPG) превышает 5 мм ртутного столба)), сердечно-сосудистое заболевание, инсульт и сердечную недостаточность; заболевания или состояния, в которые вовлечены воспалительные реакции, включая атеросклероз, хронические воспалительные заболевания кишечника (например, болезнь Крона и язвенный колит), астму, системную красную волчанку, артрит или другие воспалительные ревматические заболевания; нарушения клеточного цикла или процессов клеточной дифференцировки, такие как опухоли из жировых клеток, липоматозные карциномы, включая, например, липосаркомы, солидные опухоли и новообразования; нейродегенеративные заболевания и/или демиелинизирующие заболевания центральной и периферической нервных систем, и/или неврологические заболевания с вовлечением нейровоспалительных процессов, и/или другие периферические невропатии, включая болезнь Альцгеймера, рассеянный склероз, болезнь Паркинсона, прогрессирующую мультифокальную лейкоэнцефалопатию и синдром Гийена-Барре; кожные и дерматологические заболевания и/или нарушение процессов заживления ран, включая эритемато-сквамозный дерматоз; а также другие заболевания, такие как синдром X, остеоартрит и острый респираторный дистресс-синдром.
В одном варианте осуществления субъект имеет гипергликемическое состояние (например, диабет, такой как инсулинозависимый диабет (I типа), диабет II типа или гестационный диабет), устойчивость к инсулину, гиперинсулинемию, непереносимость глюкозы или метаболический синдром, является тучным и/или имеет избыточную массу тела.
В конкретных аспектах способов и вариантов применения пептидную последовательность или химерную пептидную последовательность, предложенную в настоящем документе, вводят субъекту в количестве, эффективном для улучшения метаболизма глюкозы у субъекта. В более конкретных аспектах субъект до введения имеет уровень глюкозы в плазме крови натощак, превышающий 100 мг/дл, или имеет уровень гемоглобина A1c (HbA1c) выше 6%.
В следующих вариантах осуществления вариант применения или способ лечения субъекта имеет целью или приводит к снижению уровней глюкозы, повышению чувствительности к инсулину, уменьшению устойчивости к инсулину, снижению уровней глюкагона, улучшению переносимости глюкозы, либо метаболизма или гомеостаза глюкозы, улучшению функции поджелудочной железы, либо снижению уровней триглицеридов, холестерина, ЛПП, ЛНП или ЛОНП, либо снижению кровяного давления, уменьшению утолщения интимы кровеносных сосудов, либо снижению массы тела или уменьшению прибавления массы тела.
Лечение метаболического или сопутствующего заболевания (например, гипергликемии) может быть полезным для облегчения или устранения заболевания, которое является по отношению к нему вторичным. В качестве примера, субъект, страдающий гипергликемией, также может иметь депрессию или тревожность вследствие гипергликемии; таким образом, лечение гипергликемии у субъекта также может опосредованно лечить депрессию или тревожность. В конкретных вариантах осуществления также подразумевается применение терапевтических средств, раскрытых в настоящем документе, для лечения вторичных заболеваний.
В конкретных вариантах осуществления субъект имеет, или имеет риск развития гипергликемии. В других конкретных вариантах осуществления субъект имеет, или имеет риск развития диабета, например, диабета 2 типа.
Субъекты, имеющие риск развития метаболического или сопутствующего заболевания (такого, как заболевания, описанные выше), включают, например, тех, которые могут иметь заболевание в семейном анамнезе или генетическую предрасположенность к развитию такого заболевания, а также тех, диета которых может вносить вклад в развитие таких заболеваний.
Как описано в настоящем документе, способы лечения включают создание контакта с, или введение пептида, приведенного в настоящем документе (например, варианта или продукта слияния FGF19 и/или FGF21, приведенного в списке последовательностей или таблице 1) в количестве, эффективном для достижения желательного исхода или результата у субъекта. Желательный исход или результат лечения включает уменьшение, снижение или предотвращение тяжести, либо частоты одного или более симптомов состояния у субъекта, например, улучшение состояния здоровья субъекта, либо «благоприятный эффект» или «терапевтический эффект». Таким образом, лечение может приводить к уменьшению или снижению, или предотвращению тяжести, либо частоты одного или более симптомов заболевания, стабилизации, либо ингибированию прогрессирования или усугубления заболевания, и в некоторых случаях, обращению вспять заболевания, на короткое время (например, на 1-6, 6-12 или 12-24 часов), на период времени средней продолжительности (например, 1-6, 6-12, 12-24 или 24-48 дней) или продолжительный период времени (например, на 1-6, 6-12, 12-24, 24-48 недель или более чем 24-48 недель). Таким образом, в случае метаболического или сопутствующего заболевания лечение может приводить к ослаблению или уменьшению проявления одного или более симптомов, либо эффектов метаболических или сопутствующих заболеваний, описанных выше.
В конкретных вариантах осуществления различные способы, предложенные в настоящем документе, дополнительно включают создание контакта с, или введение одного или более дополнительных средств, либо применение методов лечения, полезных для лечения, либо предотвращения метаболического или сопутствующего заболевания, например, средств или методов лечения, описанных в настоящем документе, в количестве, эффективном для достижения желательного исхода или результата у субъекта.
Используемый в настоящем документе термин «эффективное количество» или «достаточное количество» для использования и/или для лечения субъекта означает количество, которое обеспечивает, в одной или нескольких дозах, отдельно, либо в сочетании с одним или более другими средствами, терапевтическими препаратами, протоколами или режимами лечения, поддающийся обнаружению ответ, сохраняющийся в течение разного периода времени (кратковременный, средней продолжительности или долговременный), желательный результат, приносящий либо объективную, либо субъективную пользу субъекту в любой поддающейся измерению или обнаружению степени, или на любой период времени (например, несколько часов, дней, месяцев, лет) приводящий к ремиссии или исцелению. Такие количества, как правило, эффективны для облегчения заболевания, либо одного, нескольких или всех неблагоприятных симптомов, последствий или осложнений заболевания, в измеримой степени, хотя уменьшение, либо ингибирование прогрессирования или усугубления заболевания считают удовлетворительным исходом.
Используемый в настоящем документе термин «облегчать» означает улучшение состояния здоровья субъекта, уменьшение степени тяжести заболевания, либо ингибирование прогрессирования или усугубления заболевания (например, стабилизацию заболевания). В случае метаболического или сопутствующего заболевания, такого как те, которые описаны выше, улучшение состояния здоровья может представлять собой ослабление или уменьшение проявления одного или более симптомов, либо эффектов заболевания.
Вследствие этого, терапевтическая польза или улучшение состояния здоровья не обязательно должно представлять собой полное устранение любого одного, большинства или всех симптомов, осложнений, последствий или основополагающих причин, связанных с нарушением или заболеванием. Таким образом, удовлетворительный конечный результат достигается, когда имеет место временное, средней продолжительности или долговременное постепенное улучшение состояния здоровья субъекта, либо частичное уменьшение проявления, частоты, степени тяжести, прогрессирования или длительности, либо ингибирование или обращение вспять одного или более ассоциированных неблагоприятных симптомов или осложнений, или последствий, или основополагающих причин, ухудшения или прогрессирования (например, стабилизация одного или более симптомов или осложнений состояния, нарушения или заболевания) нарушения или заболевания в течение некоторого периода времени (часов, дней, недель, месяцев и так далее).
Таким образом, в случае заболевания, поддающегося лечению пептидной последовательностью, предложенной в настоящем документе, либо отдельно, либо в сочетании с дополнительным средством, количество пептида (и, необязательно, дополнительного средства), достаточное для облегчения заболевания, будет зависеть от вида, тяжести или стадии, или продолжительности заболевания, желаемого терапевтического эффекта или исхода, и может быть легко определено специалистом в данной области. Соответствующие количества также будут зависеть от конкретного субъекта (например, биодоступности в организме, пола, возраста субъекта и так далее). Например, в случае временного или частичного восстановления нормального гомеостаза желчных кислот у субъекта можно уменьшать количество или частоту дозирования пептидов и средств, описанных в настоящем документе, для лечения метаболических или сопутствующих заболеваний, описанных выше, хотя полностью лечение не будет прекращено. Эффективное количество можно определять, например, путем измерения одного или более релевантных физиологических эффектов.
Способы и варианты применения, предложенные в настоящем документе для лечения субъекта, применимы для профилактики с целью предотвращения или снижения вероятности развития у субъекта заболевания, такого как метаболическое или сопутствующее заболевание. Соответственно, способы и варианты применения, предложенные в настоящем документе для лечения субъекта, имеющего, или имеющего риск развития метаболического или сопутствующего заболевания, можно применять на практике до, практически одновременно, или после введения или применения другого средства, полезного для лечения, либо предотвращения метаболического или сопутствующего заболевания, и/или их можно сопровождать другими видами терапии. Дополнительные виды терапии включают использование других средств, снижающих уровень глюкозы в крови, таких как инсулин, усилитель чувствительности к инсулину и другие терапевтические препараты, изменение диеты (употребление меньше сахара, жиров и так далее), хирургическую операцию для снижения массы тела (уменьшение объема желудка за счет желудочного шунтирования, гастрэктомии), желудочный бандаж, внутрижелудочный баллон, желудочный рукав и так далее. Например, способ или вариант применения, предложенный в настоящем документе для лечения гипергликемии или устойчивости к инсулину, можно использовать в сочетании с лекарственными средствами или другими фармацевтическими композициями, которые приводят к снижению уровня глюкозы в крови или повышению чувствительности к инсулину у субъекта.
В одном варианте осуществления способ или вариант применения включает создание контакта с, или введение субъекту одного или более вариантов, или продуктов слияния пептидных последовательностей FGF19 и/или FGF21 в количестве, эффективном для предотвращения метаболического или сопутствующего заболевания. В одном варианте осуществления способ или вариант применения включает создание контакта с, или введение субъекту одного или более вариантов, или продуктов слияния пептидных последовательностей FGF19 и/или FGF21 в количестве, эффективном для лечения метаболического или сопутствующего заболевания. В одном варианте осуществления способ или вариант применения включает создание контакта с, или введение субъекту одного или более вариантов, или продуктов слияния пептидных последовательностей FGF19 и/или FGF21 в количестве, эффективном для контроля метаболического или сопутствующего заболевания.
5.6.3 Способы предотвращения, лечения или контроля рака
В настоящем документе также предложены in vitro, ex vivo и in vivo (например, на теле или в теле субъекта) способы и варианты применения. Такие способы и варианты применения можно осуществлять на практике с любой из пептидных последовательностей, приведенных в настоящем документе. В различных вариантах осуществления способы включают введение пептидной последовательности, такой как вариант, продукт слияния или химера FGF19 или FGF21, раскрытые в настоящем документе (например, в списке последовательностей или таблице 1), или подпоследовательность, вариант или модифицированная форма варианта, продукта слияния или химеры FGF19 или FGF21, раскрытых в настоящем документе (например, в списке последовательностей или таблице 1), субъекту в количестве, эффективном для лечения рака, опухоли или сопутствующего заболевания.
В конкретных вариантах осуществления пептид вводят в сочетании с дополнительным терапевтическим средством(ами) и/или методами лечения (например, средством, полезным для лечения и/или предотвращения PBC). Дополнительное терапевтическое средство(а) можно вводить до, совместно или после введения пептидов, описанных в настоящем документе.
Кроме того, в настоящем документе также предложены способы предотвращения (например, у субъектов, предрасположенных к развитию конкретного заболевания(й) в сравнении с субъектами сопоставимого возраста, пола, расы и так далее), задержки, замедления или ингибирования прогрессирования, начала развития, либо лечения (например, ослабления) рака, опухоли или сопутствующего заболевания. Таким образом, в различных вариантах осуществления способ, предложенный в настоящем документе, например, для предотвращения или лечения рака, опухоли или сопутствующего заболевания, включает создание контакта с, или введение одного или более пептидов, предложенных в настоящем документе (например, варианта или продукта слияния FGF19 и/или FGF21, приведенного в списке последовательностей или таблице 1) в количестве, эффективном для предотвращения или лечения рака, опухоли или сопутствующего заболевания. В конкретных вариантах осуществления способ дополнительно включает создание контакта с, или введение по меньшей мере одного дополнительного терапевтического средства или применение метода лечения, полезного для лечения, либо предотвращения рака, опухоли или сопутствующего заболевания (например, PBC).
Термин «субъект» относится к животному. Как правило, животное является млекопитающим, которое получило бы пользу от лечения пептидной последовательностью, предложенной в настоящем документе. Конкретные примеры включают приматов (например, людей), собак, кошек, лошадей, коров, свиней и овец.
Субъекты включают тех, которые имеют заболевание, например, рак, опухоль или сопутствующее заболевание; или субъектов, которые не имеют заболевания, но могут иметь риск развития заболевания.
Неограничивающие иллюстративные заболевания или состояния, предотвращаемые, поддающиеся лечению или поддающиеся контролю с помощью пептидных препаратов, способов и вариантов применения, предложенных в настоящем документе, включают рак, опухоли и сопутствующие заболевания и нарушения.
В конкретных вариантах осуществления рак или опухоль представляет собой опухоль толстого кишечника или опухоль печени.
Лечение рака, опухоли или сопутствующего заболевания может быть полезным для облегчения или устранения заболевания, которое является по отношению к нему вторичным. В качестве примера, субъект, имеющий рак или опухоль, также может иметь депрессию или тревожность вследствие рака или опухоли; таким образом, лечение рака или опухоли у субъекта также может опосредованно лечить депрессию или тревожность. В конкретных вариантах осуществления также подразумевается применение терапевтических средств, раскрытых в настоящем документе, для лечения вторичных заболеваний.
Субъекты, имеющие риск развития рака, опухоли или сопутствующего заболевания (такого как заболевания, описанные выше), включают, например, тех, которые могут иметь заболевание в семейном анамнезе или генетическую предрасположенность к развитию такого заболевания, а также тех, диета которых может вносить вклад в развитие таких заболеваний.
В некоторых вариантах осуществления рак или опухоль представляет собой рак или опухоль печени, толстого кишечника, предстательной железы или легкого. В некоторых вариантах осуществления опухоль является доброкачественной. В других вариантах осуществления опухоль является злокачественной.
В конкретных вариантах осуществления субъект имеет, или имеет риск развития FGF19-зависимого заболевания, нарушения или состояния. В некоторых вариантах осуществления FGF19-зависимое заболевание, нарушение или состояние представляет собой печеночное (печеночно-клеточное) заболевание, нарушение или состояние, такое как цирроз или холестаз. В некоторых вариантах осуществления печеночное заболевание или нарушение представляет собой хроническое печеночное заболевание или нарушение. В некоторых вариантах осуществления FGF19-зависимое заболевание, нарушение или состояние представляет собой рак или опухоль, например, HCC. В других вариантах осуществления FGF19-зависимое заболевание, нарушение или состояние не является печеночным заболеванием, нарушением или состоянием, таким как цирроз или холестаз. В некоторых вариантах осуществления FGF19-зависимое заболевание, нарушение или состояние не является раком или опухолью, например, HCC. В некоторых вариантах осуществления FGF19-зависимое заболевание, нарушение или состояние представляет собой рак или опухоль толстого кишечника. В конкретных вариантах осуществления рак или опухоль толстого кишечника представляет собой аденокарциному толстого кишечника. В некоторых вариантах осуществления FGF19-зависимое заболевание, нарушение или состояние представляет собой рак или опухоль предстательной железы. В других вариантах осуществления FGF19-зависимое заболевание, нарушение или состояние представляет собой рак или опухоль легкого. В конкретных вариантах осуществления рак или опухоль легкого представляет собой плоскоклеточную карциному легкого. В некоторых вариантах осуществления FGF19 экспрессируется в первичных или метастатических клетках рака или опухоли. В конкретных вариантах осуществления FGF19-зависимое заболевание, нарушение или состояние представляет собой предраковое состояние. Например, цирроз и холестаз иногда приводят к раку печени, такому как HCC, и способы лечения или предотвращения таких печеночных заболеваний и нарушений подразумеваются. В конкретных вариантах осуществления субъект является субъектом, который нуждается в их предотвращении или лечении. В некоторых вариантах осуществления введение варианта FGF19 поддерживает гомеостаз желчных кислот у субъекта.
В настоящем документе также предложен способ лечения рака или опухоли, например, FGF19-зависимых рака или опухоли, либо их симптома, у субъекта, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества варианта FGF19. В конкретных вариантах осуществления введение приводит к уменьшению рака или опухоли, либо их симптома, у субъекта. В некоторых вариантах осуществления способ приводит к уменьшению числа опухолей, размера опухолей или массы опухолей. В настоящем документе также предложен способ предотвращения рака или опухоли, например, FGF19-зависимых рака или опухоли, либо их симптома, у субъекта, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества варианта FGF19. В некоторых вариантах осуществления введение приводит к предотвращению рака или опухоли, либо их симптома, у субъекта. В некоторых вариантах осуществления способ приводит к уменьшению числа опухолей, размера опухолей или массы опухолей. В конкретном варианте осуществления рак или опухоль представляет собой FGF19-зависимый рак или опухоль. В конкретных вариантах осуществления рак или опухоль представляет собой печеночно-клеточную карциному. В некоторых вариантах осуществления рак или опухоль представляет собой не печеночно-клеточную карциному. В одном варианте осуществления рак или опухоль представляет собой рак или опухоль толстого кишечника. В некоторых вариантах осуществления рак или опухоль представляет собой рак или опухоль предстательной железы. В конкретных вариантах осуществления рак или опухоль представляет собой рак или опухоль легкого. В конкретных вариантах осуществления вариант FGF19 представляет собой полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в ID NO: 70. В некоторых вариантах осуществления вариант FGF19 представляет собой полипептид, состоящий из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 70. В конкретных вариантах осуществления субъект является субъектом, который нуждается в лечении.
Как описано в настоящем документе, способы лечения включают создание контакта с, или введение пептида, приведенного в настоящем документе (например, варианта или продукта слияния FGF19 и/или FGF21, приведенного в списке последовательностей или таблице 1) в количестве, эффективном для достижения желательного исхода или результата у субъекта. Желательный исход или результат лечения включает уменьшение, снижение или предотвращение тяжести, либо частоты одного или более симптомов состояния у субъекта, например, улучшение состояния здоровья субъекта, либо «благоприятный эффект» или «терапевтический эффект». Таким образом, лечение может приводить к уменьшению или снижению, или предотвращению тяжести, либо частоты одного или более симптомов заболевания, стабилизации, либо ингибированию прогрессирования или усугубления заболевания, и в некоторых случаях, обращению вспять заболевания, на короткое время (например, на 1-6, 6-12 или 12-24 часов), на период времени средней продолжительности (например, 1-6, 6-12, 12-24 или 24-48 дней) или продолжительный период времени (например, на 1-6, 6-12, 12-24, 24-48 недель или более чем 24-48 недель). Таким образом, в случае рака, опухоли или сопутствующего заболевания лечение может приводить к ослаблению, либо уменьшению одного или более симптомов, или эффектов рака, опухоли или сопутствующих заболеваний, описанных выше.
В конкретных вариантах осуществления различные способы, предложенные в настоящем документе, дополнительно включают создание контакта с, или введение одного или более дополнительных средств, либо применение методов лечения, полезных для лечения, либо предотвращения рака, опухоли или сопутствующего заболевания, например, средств или методов лечения, описанных в настоящем документе, в количестве, эффективном для достижения желательного исхода или результата у субъекта.
Используемый в настоящем документе термин «эффективное количество» или «достаточное количество» для использования и/или для лечения субъекта означает количество, которое обеспечивает, в одной или нескольких дозах, отдельно, либо в сочетании с одним или более другими средствами, терапевтическими препаратами, протоколами или режимами лечения, поддающийся обнаружению ответ, сохраняющийся в течение разного периода времени (кратковременный, средней продолжительности или долговременный), желательный результат, приносящий либо объективную, либо субъективную пользу субъекту в любой поддающейся измерению или обнаружению степени, или на любой период времени (например, несколько часов, дней, месяцев, лет) приводящий к ремиссии или исцелению. Такие количества, как правило, эффективны для облегчения заболевания, либо одного, нескольких или всех неблагоприятных симптомов, последствий или осложнений заболевания, в измеримой степени, хотя уменьшение, либо ингибирование прогрессирования или усугубления заболевания считают удовлетворительным исходом.
Используемый в настоящем документе термин «облегчать» означает улучшение состояния здоровья субъекта, уменьшение степени тяжести заболевания, либо ингибирование прогрессирования или усугубления заболевания (например, стабилизацию заболевания). В случае рака, опухоли или сопутствующего заболевания, такого как те, которые описаны выше, улучшение состояния здоровья может представлять собой ослабление или уменьшение проявления одного или более симптомов, либо эффектов заболевания.
Вследствие этого, терапевтическая польза или улучшение состояния здоровья не обязательно должно представлять собой полное устранение любого одного, большинства или всех симптомов, осложнений, последствий или основополагающих причин, связанных с нарушением или заболеванием. Таким образом, удовлетворительный конечный результат достигается, когда имеет место временное, средней продолжительности или долговременное постепенное улучшение состояния здоровья субъекта, либо частичное уменьшение проявления, частоты, степени тяжести, прогрессирования или длительности, либо ингибирование или обращение вспять одного или более ассоциированных неблагоприятных симптомов или осложнений, или последствий, или основополагающих причин, ухудшения или прогрессирования (например, стабилизация одного или более симптомов или осложнений состояния, нарушения или заболевания) нарушения или заболевания в течение некоторого периода времени (часов, дней, недель, месяцев и так далее).
Таким образом, в случае заболевания, поддающегося лечению пептидной последовательностью, предложенной в настоящем документе, либо отдельно, либо в сочетании с дополнительным средством, количество пептида (и, необязательно, дополнительного средства), достаточное для облегчения заболевания, будет зависеть от вида, тяжести или стадии, или продолжительности заболевания, желаемого терапевтического эффекта или исхода, и может быть легко определено специалистом в данной области. Соответствующие количества также будут зависеть от конкретного субъекта (например, биодоступности в организме, пола, возраста субъекта и так далее). Например, в случае временного или частичного восстановления нормального гомеостаза желчных кислот у субъекта можно уменьшать количество или частоту дозирования пептидов и средств, описанных в настоящем документе, для лечения рака, опухоли или сопутствующих заболеваний, описанных выше, хотя полностью лечение не будет прекращено. Эффективное количество можно определять, например, путем измерения одного или более релевантных физиологических эффектов.
Способы и варианты применения, предложенные в настоящем документе для лечения субъекта, применимы для профилактики с целью предотвращения или снижения вероятности развития у субъекта заболевания, такого как рак, опухоль или сопутствующее заболевание. Соответственно, способы и варианты применения, предложенные в настоящем документе для лечения субъекта, имеющего, или имеющего риск развития рака, опухоли или сопутствующего заболевания, можно применять на практике до, практически одновременно, или после введения или применения другого средства, полезного для лечения, либо предотвращения рака, опухоли или сопутствующего заболевания, и/или их можно сопровождать другими видами терапии. Дополнительные виды терапии включают использование других средств, снижающих уровень глюкозы в крови, таких как инсулин, усилитель чувствительности к инсулину и другие терапевтические препараты, изменение диеты (употребление меньше сахара, жиров и так далее), хирургическую операцию для снижения массы тела (уменьшение объема желудка за счет желудочного шунтирования, гастрэктомии), желудочный бандаж, внутрижелудочный баллон, желудочный рукав и так далее. Например, способ или вариант применения, предложенный в настоящем документе для лечения гипергликемии или устойчивости к инсулину, можно использовать в сочетании с лекарственными средствами или другими фармацевтическими композициями, которые приводят к снижению уровня глюкозы в крови или повышению чувствительности к инсулину у субъекта.
В одном варианте осуществления способ или вариант применения включает создание контакта с, или введение субъекту одного или более вариантов, или продуктов слияния пептидных последовательностей FGF19 и/или FGF21 в количестве, эффективном для предотвращения рака, опухоли или сопутствующего заболевания. В одном варианте осуществления способ или вариант применения включает создание контакта с, или введение субъекту одного или более вариантов, или продуктов слияния пептидных последовательностей FGF19 и/или FGF21 в количестве, эффективном для лечения рака, опухоли или сопутствующего заболевания. В одном варианте осуществления способ или вариант применения включает создание контакта с, или введение субъекту одного или более вариантов, или продуктов слияния пептидных последовательностей FGF19 и/или FGF21 в количестве, эффективном для контроля рака, опухоли или сопутствующего заболевания.
5.7 Молекулы нуклеиновой кислоты
Также предложены молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующие пептидные последовательности, предложенные в настоящем документе, включая подпоследовательности, варианты последовательностей и модифицированные формы последовательностей, приведенных в списке последовательностей (и в PCT публикации № WO 2013/006486, и патентной публикации США № 2013/0023474, а также PCT публикации № WO 2014/085365) или таблице 1, и векторы, содержащие нуклеиновую кислоту, кодирующую пептиды, используемые в способах, описанных в настоящем документе. Соответственно, термин «нуклеиновые кислоты» включает те, которые кодируют иллюстративные пептидные последовательности, раскрытые в настоящей документе, а также те, которые кодируют функциональные подпоследовательности, варианты последовательностей и модифицированные формы иллюстративных пептидных последовательностей, при условии, что вышеперечисленные последовательности сохраняют по меньшей мере поддающуюся обнаружению или измерению активность, либо функцию, полезную для лечения или предотвращения связанного с гомеостазом желчных кислот или сопутствующего заболевания (например, PBC).
«Нуклеиновая кислота», которая в настоящем документе также может быть названа геном, полинуклеотидом, нуклеотидной последовательностью, праймером, олигонуклеотидом или зондом, означает природные или модифицированные пурин- и пиримидин-содержащие полимеры любой длины, либо полирибонуклеотиды, либо полидезоксирибонуклеотиды, или смешанные полирибо-полидезоксирибонуклеотиды и их α-аномерные формы. Два или более пурин- и пиримидин-содержащих полимеров, как правило, связаны фосфоэфирной или аналогичной связью. Термины можно использовать взаимозаменяемо для обозначения всех форм нуклеиновой кислоты, включая дезоксирибонуклеиновую кислоту (ДНК) и рибонуклеиновую кислоту (РНК). Нуклеиновые кислоты могут быть одноцепочечными, дуплексными или триплексными, линейными или кольцевыми. Нуклеиновые кислоты включают геномную ДНК и кДНК. РНК может быть сплайсированной или не сплайсированной мРНК, рРНК, тРНК или антисмысловой РНК. Нуклеиновые кислоты включают природные, синтетические нуклеотиды, а также нуклеотидные аналоги и производные.
В результате вырожденности генетического кода молекулы нуклеиновой кислоты, предложенные в настоящем документе, включают последовательности, вырожденные относительно молекул нуклеиновой кислоты, кодирующих пептидные последовательности, используемые в способах, предложенных в настоящем документе. Таким образом, предложены также вырожденные нуклеотидные последовательности, кодирующие пептидные последовательности, включая подпоследовательности, варианты и модифицированные формы пептидных последовательностей, приведенных в настоящем документе (например, в списке последовательностей или таблице 1). Термин «комплементарные» при использовании применительно к нуклеотидным последовательностям означает, что указанные области являются на 100% комплементарными, то есть, характеризуются 100% спариванием оснований, без несовпадений.
Нуклеиновая кислота может быть получена с использованием любого из множества стандартных методов клонирования и химического синтеза, и может быть намеренно изменена путем сайт-направленного мутагенеза или других рекомбинантных методов, известных специалисту в данной области. Чистоту полинуклеотидов можно определять, например, методами секвенирования, электрофореза в геле и УФ-спектрометрии.
Нуклеиновые кислоты можно вставлять в нуклеотидный конструкт, называемый в настоящем документе «экспрессионной кассетой», в котором экспрессия нуклеиновой кислоты находится под влиянием или регулируется «элементом контроля экспрессии». Термин «элемент контроля экспрессии» означает один или более элементов нуклеотидной последовательности, которые регулируют или влияют на экспрессию нуклеотидной последовательности, с которой они функционально связаны. Элемент контроля экспрессии может включать, в соответствующих случаях, промоторы, энхансеры, терминаторы транскрипции, сайленсеры генов, инициирующий кодон (например, ATG) перед кодирующим белок геном, и так далее.
Элемент контроля экспрессии, функционально связанный с нуклеотидной последовательностью, контролирует транскрипцию и, в соответствующих случаях, трансляцию нуклеотидной последовательности. Термин «функционально связанные» означает смежное расположение, при котором указанные компоненты находятся во взаимосвязи, позволяющей им функционировать предназначенным для них образом. Как правило, элементы контроля экспрессии располагаются рядом с 5' или 3'-концами генов, но также могут быть интронными.
Элементы контроля экспрессии включают элементы, которые активируют транскрипцию конститутивно, которые являются индуцируемыми (то есть, нуждаются во внешнем сигнале или стимулах для активации), либо подавляемыми (то есть, нуждаются в сигнале для выключения транскрипции; когда сигнал больше не присутствует, транскрипция активируется или «дерепрессируется»). В экспрессионные кассеты, предложенные в настоящем документе, также включены элементы контроля, достаточные для придания экспрессии гена контролируемости в клетках или тканях определенных типов (то есть, тканеспецифические элементы контроля). Как правило, такие элементы расположены выше или ниже по ходу транскрипции (то есть, в 5' или 3' направлении) от кодирующей последовательности. Промоторы, как правило, расположены в 5'-положении относительно кодирующей последовательности. Для обеспечения транскрипции полинуклеотидов, предложенных в настоящем документе, можно использовать промоторы, полученные методами рекомбинантной ДНК или методами синтеза. «Промотор», как правило, означает минимальный элемент последовательности, достаточный для управления транскрипцией.
Нуклеиновые кислоты можно вставлять в плазмиду для введения трансформацией в клетку-хозяина и для последующей экспрессии и/или генетической манипуляции. Плазмида представляет собой нуклеиновую кислоту, которая может быть стабильно размножена в клетке-хозяине; плазмиды могут, необязательно, содержать элементы контроля экспрессии для управления экспрессией нуклеиновой кислоты. Используемый в настоящем документе термин «вектор» является синонимом термину «плазмида». Плазмиды и векторы, как правило, содержат по меньшей мере точку начала репликации для размножения в клетке и промотор. Плазмиды и векторы также могут содержать элемент контроля экспрессии для экспрессии в клетке-хозяине и, вследствие этого, являются полезными для экспрессии и/или генетической манипуляции нуклеиновых кислот, кодирующих пептидные последовательности, экспрессирующих пептидные последовательности в клетках-хозяевах и организмах, или продуцирующих пептидные последовательности, например.
Используемый в настоящем документе термин «трансген» означает полинуклеотид, который был введен в клетку или организм искусственным образом. Например, в клетку, содержащую трансген, трансген был введен генетической манипуляцией или «трансформацией» клетки. Клетку, в которую был введен трансген, или ее потомство, называют «трансформированной клеткой» или «трансформантом». Как правило, трансген включается в потомство трансформанта или становится частью организма, который развивается из клетки. Трансгены могут встраиваться в хромосомную ДНК или сохраняться в виде самореплицирующейся плазмиды, YAC, минихромосомы или тому подобного.
Промоторы для бактериальной системы включают промоторы T7 и индуцируемые промоторы, такие как pL из бактериофага λ, plac, ptrp, ptac (гибридный промотор ptrp-lac), а также тетрациклин-чувствительные промоторы. Промоторы для систем клеток насекомых включают конститутивные или индуцируемые промоторы (например, экдизон). Конститутивные промоторы для клеток млекопитающих включают промоторы вирусов SV40, RSV, бычьего папилломавируса (BPV) и другие вирусные промоторы или индуцируемые промоторы, получаемые из генома клеток млекопитающих (например, промотор металлотионеина IIA; промотор генов белков теплового шока) или из вирусов млекопитающих (например, поздний промотор аденовируса; индуцируемый длинный концевой повтор вируса опухоли молочной железы мыши). Альтернативно, ретровирусный геном может быть генетически модифицирован для введения и управления экспрессией пептидной последовательности в соответствующих клетках-хозяевах.
Поскольку способы и варианты применения, предложенные в настоящем документе, включают in vivo доставку, экспрессионные системы дополнительно включают векторы, разработанные для in vivo применения. Конкретные неограничивающие примеры включают аденовирусные векторы (патенты США № 5700470 и 5731172), аденоассоциированные вирусные векторы (патент США № 5604090), векторы на основе вируса простого герпеса (патент США № 5501979), ретровирусные векторы (патенты США №№ 5624820, 5693508 и 5674703), BPV векторы (патент США № 5719054), CMV векторы (патент США № 5561063), а также векторы на основе парвовируса, ротавируса, вируса Норуолк и лентивируса (смотри, например, патент США № 6013516). Векторы включают векторы, которые доставляют гены в клетки кишечного тракта, в том числе стволовые клетки (Croyle et al., Gene Ther. 5: 645 (1998); S.J. Henning, Adv. Drug Deliv. Rev. 17: 341 (1997), патенты США №№ 5821235 и 6110456). Многие из этих векторов были одобрены для исследований с участием людей.
Дрожжевые векторы содержат конститутивные и индуцируемые промоторы (смотри, например, Ausubel et al., в: Current Protocols in Molecular Biology, Vol. 2, Ch. 13, ed., Greene Publish. Assoc. & Wiley Interscience, 1988; Grant et al. Methods in Enzymology, 153: 516 (1987), eds. Wu & Grossman; Bitter Methods in Enzymology, 152: 673 (1987), eds. Berger & Kimmel, Acad. Press, N.Y.; и Strathern et al., The Molecular Biology of the Yeast Saccharomyces (1982) eds. Cold Spring Harbor Press, Vols. I и II). Можно использовать конститутивный дрожжевой промотор, такой как ADH или LEU2, или индуцируемый промотор, такой как GAL (R. Rothstein, в: DNA Cloning, A Practical Approach, Vol. 11, Ch. 3, ed. D.M. Glover, IRL Press, Wash., D.C., 1986). Векторы, которые способствуют интеграции чужеродных нуклеотидных последовательностей в дрожжевую хромосому, например, за счет гомологичной рекомбинации, известны в данной области. Искусственные хромосомы дрожжей (YAC), как правило, используют, когда вставляемые полинуклеотиды слишком велики для обычных векторов (например, более примерно 12 т.н.).
Экспрессионные векторы также могут содержать селективный маркер, придающий устойчивость к давлению селекции, или идентифицируемый маркер (например, бета-галактозидазу), что позволяет клеткам, содержащим вектор, быть отобранными, расти и размножаться. Альтернативно, селективный маркер может находиться на втором векторе, который трансфицирован в клетку-хозяина совместно с первым вектором, содержащим нуклеиновую кислоту, кодирующую пептидную последовательность. Селекционные системы включают, но не ограничиваются ими, ген тимидинкиназы вируса простого герпеса (Wigler et al., Cell 11: 223 (1977)), ген гипоксантин-гуанин фосфорибозилтрансферазы (Szybalska et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 48: 2026 (1962)) и ген аденин фосфорибозилтрансферазы (Lowy et al., Cell 22: 817 (1980)), которые могут быть использованы в tk-, hgprt- или aprt- клетках, соответственно. Кроме того, устойчивость к антиметаболитам может быть использована в качестве основы селекции на ген dhfr, который придает устойчивость к метотрексату (O'Hare et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 78: 1527 (1981)); ген gpt, который придает устойчивость к микофеноловой кислоте (Mulligan et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 78: 2072 (1981)); ген неомицина, который придает устойчивость к аминогликозиду G-418 (Colberre-Garapin et al., J. Mol. Biol. 150: 1(1981)), пуромицину; и ген, который придает устойчивость к гигромицину (Santerre et al., Gene 30: 147 (1984)). Дополнительные гены селективных маркеров включают trpB, который позволяет клеткам использовать индол вместо триптофана, hisD, который позволяет клеткам использовать гистинол вместо гистидина (Hartman et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85: 8047 (1988)), и ген ODC (орнитин-декарбоксилазы), который придает устойчивость к ингибитору орнитин-декарбоксилазы, 2-(дифторметил)-DL-орнитину, DFMO (McConlogue (1987), в: Current Communications in Molecular Biology, Cold Spring Harbor Laboratory).
Линии клеток и животные модели
В конкретных вариантах осуществления также предложена трансформированная клетка(и) (in vitro, ex vivo и in vivo) и клетки-хозяева, которые продуцируют вариант или продукт слияния FGF19 и/или FGF21, приведенный в настоящем документе, в случае, когда экспрессия варианта или продукта слияния FGF19 и/или FGF21 обусловлена введенной нуклеиновой кислотой, кодирующей вариант или продукт слияния FGF19 и/или FGF21. Используемый в настоящем документе термин «трансформированная» клетка или клетка-«хозяин» означает клетку, в которую введена нуклеиновая кислота, способная размножаться и/или транскрибироваться для экспрессии закодированной пептидной последовательности. Термин также относится к любому потомству или субклонам клетки-хозяина. Трансформированные клетки и клетки-хозяева, экспрессирующие пептидные последовательности, предложенные в настоящем документе, как правило, содержат нуклеиновую кислоту, которая кодирует пептидную последовательность. В одном варианте осуществления трансформированная клетка или клетка-хозяин представляет собой прокариотическую клетку. В другом варианте осуществления трансформированная клетка или клетка-хозяин представляет собой эукариотическую клетку. В различных аспектах эукариотическая клетка представляет собой клетку дрожжей или млекопитающих (например, человека, примата и так далее).
Трансформированные клетки и клетки-хозяева включают, но не ограничиваются ими, микроорганизмы, такие как бактерии и дрожжи; а также клетки растений, насекомых и млекопитающих. Например, бактерии, трансформированные экспрессионными векторами на основе нуклеиновой кислоты рекомбинантного бактериофага, нуклеиновой кислоты плазмиды или нуклеиновой кислоты космиды; дрожжи, трансформированные рекомбинантными дрожжевыми экспрессионными векторами; системы растительных клеток, инфицированных рекомбинантными вирусными экспрессионными векторами (например, вирусом мозаики цветной капусты, CaMV; вирусом табачной мозаики, TMV) или трансформированных рекомбинантными плазмидными экспрессионными векторами (например, Ti плазмидой); системы клеток насекомых, инфицированных рекомбинантными вирусными экспрессионными векторами (например, бакуловирусом), и системы животных клеток, инфицированных рекомбинантными вирусными экспрессионными векторами (например, ретровирусами, аденовирусами, вирусом осповакцины), либо системы трансформированных животных клеток, сконструированных для временного или стабильного размножения или экспрессии.
Для генно-терапевтических вариантов применения и способов трансформированная клетка может находиться в организме субъекта. Клетку в организме субъекта можно трансформировать нуклеиновой кислотой, кодирующей пептидную последовательность, приведенную в настоящем документе, in vivo. Альтернативно, клетку можно трансформировать in vitro трансгеном или полинуклеотидом, а затем трансплантировать в ткань субъекта с целью лечения. Альтернативно, изолят первичных клеток или стабильную линию клеток можно трансформировать трансгеном или полинуклеотидом, кодирующим вариант FGF19 и/или FGF21, либо их продукт слияния/химерную последовательность (или вариант), например, химерную пептидную последовательность, содержащую весь или часть FGF19, либо содержащую весь или часть FGF21, а затем, необязательно, трансплантировать в ткань субъекта.
Неограничивающие примеры целевых клеток для экспрессии пептидных последовательностей, в частности, для экспрессии in vivo, включают клетки поджелудочной железы (островковые клетки), мышечные клетки, клетки слизистых оболочек и эндокринные клетки. Такие эндокринные клетки могут обеспечивать индуцируемое продуцирование (секрецию) варианта FGF19 и/или FGF21, либо их продукта слияния/химерной последовательности (или варианта), например, химерной пептидной последовательности, содержащей весь или часть FGF19, либо содержащей весь или часть FGF21. Дополнительные клетки, которые можно трансформировать, включают стволовые клетки или другие мультипотентные или плюрипотентные клетки, например, клетки-предшественники, которые дифференцируются в различные клетки поджелудочной железы (островковые клетки), мышечные клетки, клетки слизистых оболочек и эндокринные клетки. Использование стволовых клеток в качестве целевых клеток обеспечивает долгосрочную экспрессию пептидных последовательностей, предложенных в настоящем документе.
Используемый в настоящем документе термин «культивированная» применительно к клетке означает, что клетка выращена in vitro. Конкретным примером такой клетки является клетка, выделенная из организма субъекта и растущая или адаптированная для роста в тканевой культуре. Другим примером является клетка, подвергнутая генетической манипуляции in vitro и трансплантированная обратно в организм того же самого или другого субъекта.
Термин «выделенная» при использовании применительно к клетке означает клетку, которая отделена от ее естественного окружения in vivo. «Культивированные» и «выделенные» клетки могут быть изменены рукой человека, например, генетически трансформированы. Эти термины относятся к любому потомству клеток, включая клетки-потомки, которые могут не быть идентичными исходной клетке вследствие мутаций, имеющих место в процессе деления клетки. Термины не включают целый человеческий организм.
Нуклеиновые кислоты, кодирующие пептидные последовательности, предложенные в настоящем документе, можно вводить для стабильной экспрессии в клетки целого организма. Такие организмы, включая отличных от человека трансгенных животных, полезны для изучения эффекта экспрессии пептидов в целом организме животного и терапевтической пользы. Например, как описанное в настоящем документе продуцирование в организме мышей варианта FGF19 и/или FGF21, либо их продукта слияния/химерной последовательности (или варианта), например, химерной пептидной последовательности, содержащей весь или часть FGF19, либо содержащей весь или часть FGF21, приведенной в настоящем документе.
Мыши определенных линий, у которых развивается, или которые подвержены развитию конкретного заболевания (например, диабета, дегенеративных заболеваний, рака и так далее) также полезны для введения терапевтических белков, описанных в настоящем документе, с целью изучения эффекта экспрессии терапевтического белка у предрасположенных к заболеванию мышей. Трансгенные и генетические мышиные модели, отличающиеся предрасположенностью к конкретному заболеванию или физиологическим состояниям, например, мыши с индуцированным стрептозотоцином (STZ) диабетом, (STZ) мыши, являются подходящим объектом для экспрессии вариантов FGF19 и/или FGF21, их продуктов слияния/химерных последовательностей (или вариантов), например, химерной пептидной последовательности, содержащей весь или часть FGF19, либо содержащей весь или часть FGF21, приведенной в настоящем документе. Таким образом, в конкретных вариантах осуществления предложены отличные от человека трансгенные животные, продуцирующие вариант FGF19 и/или FGF21, либо их продукт слияния/химерную последовательность (или вариант), например, химерную пептидную последовательность, содержащую весь или часть FGF19, либо содержащую весь или часть FGF21, для которых такое продуцирование не является естественным, но обусловлено трансгеном, присутствующим в соматических или половых клетках животного.
Термин «трансгенное животное» означает животное, чьи соматические клетки или клетки зародышевой линии содержат генетическую информацию, полученную, прямо или косвенно, за счет преднамеренной генетической манипуляции на субклеточном уровне, такой как микроинъекция или инфицирование рекомбинантным вирусом. Термин «трансгенные» дополнительно охватывает клетки или ткани (то есть, «трансгенная клетка», «трансгенная ткань»), полученные от трансгенного животного, подвергнутого генетической манипуляции, как описано в настоящем документе. В контексте настоящего изобретения термин «трансгенное животное» не охватывает животных, получаемых классическими методами скрещивания или in vitro оплодотворения, но означает животных, одна или более клеток которого получили молекулу нуклеиновой кислоты. Трансгенные животные, предложенные в настоящем документе, могут быть либо гетерозиготными, либо гомозиготными в отношении трансгена. Способы получения трансгенных животных, включая мышей, овец, свиней и лягушек, хорошо известны в данной области (смотри, например, патенты США №№ 5721367, 5695977, 5650298 и 5614396), содержание которых включено в настоящий документ.
Пептидные последовательности, нуклеиновые кислоты, кодирующие пептидные последовательности, векторы и трансформированные клетки-хозяева, экспрессирующие пептидные последовательности, включают выделенные и очищенные формы. Термин «выделенная» при использовании применительно к композиции, предложенной в настоящем документе, означает, что композиция отделена, в значительной степени, полностью или по меньшей мере частично, от одного или более компонентов ее окружения. В целом, композиции, существующие в природе, которые являются выделенными, по существу свободны от одного или более материалов, с которыми они обычно связаны в природе, например, одного или более белков, нуклеиновых кислот, липидов, углеводов или клеточных мембран. Термин «выделенная» не исключает альтернативные физические формы композиции, такие как варианты, модификации или дериватизированные формы, продукты слияния и химеры, мультимеры/олигомеры и так далее, или формы, экспрессируемые в клетках-хозяевах. Термин «выделенная» также не исключает формы (например, фармацевтические композиции, комбинированные композиции и так далее), в которых имеют место сочетания, любое из которых создано рукой человека. «Выделенная» композиция также может быть «очищенной», когда она свободна от некоторых, значительного числа, либо большинства или всех из одного или более материалов, таких как примесь, либо нежелательное вещество или материал.
В настоящем документе термин «рекомбинантные» при использовании применительно к пептидным последовательностям, нуклеиновым кислотам, кодирующим пептидные последовательности, и так далее, означает, что композиции были подвергнуты манипуляции (то есть, генетически изменены) таким образом, который не существует в природе (например, in vitro). Конкретным примером рекомбинантного пептида была бы пептидная последовательность, предложенная в настоящем документе, которая экспрессируется клеткой, трансфицированной нуклеиновой кислотой, кодирующей пептидную последовательность. Конкретным примером рекомбинантной нуклеиновой кислоты была бы нуклеиновая кислота (например, геномная или кДНК), кодирующая пептидную последовательность, клонированная в плазмиду, с наличием или отсутствием 5', 3'-концов или областей интронов, так что ген, как правило, находится в составе генома организма. Другим примером рекомбинантного пептида или нуклеиновой кислоты является гибридная или слитая последовательность, такая как химерная пептидная последовательность, содержащая часть FGF19 и часть FGF21.
В соответствии со способами, предложенными в настоящем документе, предложены композиции и смеси пептидных последовательностей, предложенных в настоящем документе, включая подпоследовательности, варианты и модифицированные формы иллюстративных пептидных последовательностей (включая варианты и подпоследовательности FGF19 и FGF21, приведенные в таблице 1 и списке последовательностей, а также продукты слияния и химеры FGF19/FGF21, приведенные в таблице 1 и списке последовательностей). В одном варианте осуществления смесь содержит одну или более пептидных последовательностей и фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент. В другом варианте осуществления смесь содержит одну или более пептидных последовательностей и дополнительное лекарственное средство или терапевтический препарат, например, модулирующее гомеостаз желчных кислот или антидиабетическое, или снижающее уровень глюкозы лекарственное средство или терапевтический препарат. Сочетания, например, одной или более пептидных последовательностей в фармацевтически приемлемом носителе или эксципиенте с одним или более модулирующим гомеостаз желчных кислот средством, либо терапевтическим препаратом для лечения связанного с гомеостазом желчных кислот или сопутствующего заболевания, либо антидиабетическим или снижающим уровень глюкозы лекарственным средством или терапевтическим препаратом, также предложены в настоящем документе. Такие сочетания пептидной последовательности, предложенной в настоящем документе, с другим лекарственным средством или веществом, например, модулирующим гомеостаз желчных кислот или лечащим заболевание, связанное с гомеостазом желчных кислот, или снижающим уровень глюкозы лекарственным средством или терапевтическим препаратом, например, могут быть использованы со способами и вариантами применения, предложенными в настоящем документе, например, для лечения субъекта.
Сочетания также включают заключение пептидных последовательностей или нуклеиновых кислот, предложенных в настоящем документе, в частицы или полимерные вещества, такие как полиэфиры, углеводы, полиаминокислоты, гидрогель, поливинилпирролидон, этиленвинилацетат, метилцеллюлоза, карбоксиметилцеллюлоза, протамина сульфат, либо сополимеры лактида/гликолида, сополимеры полилактида/гликолида или этиленвинилацетатные сополимеры; заключение в микрокапсулы, полученные методом коацервации или межповерхностной полимеризации, например, с использованием микрокапсул из гидроксиметилцеллюлозы или желатина, или поли(метилметакрилатных) микрокапсул, соответственно, включение в коллоидные и дисперсионные системы доставки лекарственного средства, такие как макромолекулярные комплексы, нанокапсулы, микросферы, гранулы и системы на основе липидов (например, жирных N-ацильных групп, таких как N-лауроил, N-олеоил, жирных аминов, таких как додециламин, олеоиламин и так далее, смотри патент США № 6638513), включая эмульсии типа масло-в-воде, мицеллы, смешанные мицеллы и липосомы, например.
Пептиды, предложенные в настоящем документе, включая подпоследовательности, варианты и модифицированные формы иллюстративных пептидных последовательностей (включая варианты и подпоследовательности FGF19 и FGF21, приведенные в таблице 1 и списке последовательностей, а также продукты слияния и химеры FGF19/FGF21, приведенные в таблице 1 и списке последовательностей), приведенные в настоящем документе, могут быть использованы для модуляции метаболизма глюкозы и облегчения транспорта глюкозы из крови в ключевые для метаболизма органы, такие как мышцы, печень и жир. Такие пептидные последовательности могут быть получены в количествах, достаточных или эффективных для восстановления толерантности к глюкозе и/или для улучшения или поддержания нормального гомеостаза глюкозы.
5.9 Наборы
В настоящем документе также предложены наборы, включающие, но без ограничения, пептидные последовательности, предложенные в настоящем документе, и/или одно или более дополнительных средств для лечения заболевания, нарушения или состояния, либо композицию, содержащую вышеперечисленные компоненты и один или более фармацевтически приемлемых или физиологически приемлемых разбавителей, носителей или эксципиентов, необязательно, в дополнительном сочетании с одним или более лекарственными средствами, отличными от тех, которые описаны выше, их композициями и фармацевтическими композициями, упакованные в соответствующий упаковочный материал. Набор может дополнительно включать этикетку или вкладыш в упаковку, содержащие описание компонентов или инструкции по применению in vitro, in vivo или ex vivo компонентов набора. Иллюстративные инструкции включают инструкции для лечения и/или предотвращения заболевания или нарушения. В одном варианте осуществления заболевание или нарушение представляет собой связанное с гомеостазом желчных кислот или сопутствующее заболевание, описанное в настоящем документе. В другом варианте осуществления заболевание или нарушение представляет собой метаболическое заболевание или сопутствующее состояние. В другом варианте осуществления заболевание или нарушение представляет собой рак или опухоль.
Термин «упаковочный материал» относится к физической конструкции, заключающей в себе компоненты набора. Упаковочный материал может сохранять компоненты стерильными и может быть выполнен из материала, обычно используемого для таких целей (примерами являются бумага, гофрированное волокно, стекло, пластик, фольга, ампулы, флаконы, пробирки и так далее).
Наборы, предложенные в настоящем документе, могут включать этикетки или вкладыши. Этикетки или вкладыши включают «печатные материалы», например, бумагу или картон, находящиеся отдельно или закрепленные на компоненте, наборе или упаковочном материале (например, коробке), либо наклеенные, например, на ампулу, пробирку или флакон, содержащие компонент набора. Этикетки или вкладыши могут дополнительно включать машиночитаемый носитель, такой как диск (например, жесткий диск, карта, внешний жесткий диск), оптический диск, такой как CD- или DVD-ROM/RAM, DVD, MP3, магнитная пленка, или электрическое запоминающее устройство, такое как RAM и ROM, или гибриды вышеперечисленных, например, магнитный/оптический носитель, FLASH-карта или карты памяти. В некоторых вариантах осуществления в инструкции описан способ, предложенный в настоящем документе.
Этикетки или вкладыши могут содержать, в числе прочего, идентификационную информацию для одного или более компонентов набора, параметры дозирования и/или информацию по клинической фармакологии активного ингредиента(ов), включая механизм действия, фармакокинетику и фармакодинамику. Этикетки или вкладыши могут содержать информацию о производителе, номера лотов, адрес производителя и дату производства.
Этикетки или вкладыши могут содержать информацию о состоянии, нарушении, заболевании или симптоме, для лечения которого может быть использован компонент набора. Этикетки или вкладыши могут содержать инструкции для клинициста или для субъекта по использованию одного или более компонентов набора в способе, протоколе лечения или режиме лечения. Инструкции могут содержать информацию о количестве доз, частоте или продолжительности дозирования, а также инструкции для осуществления на практике способов, протоколов лечения или режимов лечения, описанных в настоящем документе. Иллюстративные инструкции включают инструкции для лечения или применения пептидной последовательности, приведенной в настоящем документе, и/или применения дополнительного средства или терапевтического метода, полезного для лечения связанного с гомеостазом желчных кислот или сопутствующего заболевания, либо нарушения гомеостаза желчных кислот. Таким образом, наборы, предложенные в настоящем документе, могут дополнительно включать этикетки или инструкции для осуществления на практике любого из способов и вариантов применения, предложенных в настоящем документе, включая способы и варианты лечения.
Этикетки или вкладыши могут содержать информацию о какой-либо пользе, которую может приносить компонент, например, профилактической или терапевтической пользе. Этикетки или вкладыши могут содержать информацию о потенциальных неблагоприятных побочных эффектах, например, предостережение для субъекта или клинициста в отношении ситуаций, в которых не следует применять конкретную композицию. Неблагоприятные эффекты также могут иметь место, если субъект принимал, будет принимать или в настоящее время принимает один или более других препаратов, которые могут быть несовместимыми с композицией, или субъект применял, будет применять или в настоящее время применяет другой протокол лечения или режим лечения, который был бы несовместим с композицией, и, таким образом, инструкции могут содержать информацию о такой несовместимости.
Наборы, предложенные в настоящем документе, могут дополнительно содержать другие компоненты. Каждый компонент набора может быть заключен в отдельный контейнер, и все эти разные контейнеры могут находиться в одной упаковке. В конкретных вариантах осуществления наборы предназначены для хранения при низкой температуре. Наборы, предложенные в настоящем документе, дополнительно могут быть сконструированы для содержания пептидных последовательностей, предложенных в настоящем документе, или для содержания нуклеиновых кислот, кодирующих пептидные последовательности. Наборы, предложенные в настоящем документе, также могут быть сконструированы для содержания, либо отдельно, либо в сочетании с пептидными последовательностями, предложенными в настоящем документе, одного или более дополнительных средств, полезных для лечения, либо предотвращения заболевания или нарушения, описанного в настоящем документе. Любые клетки в наборе могут сохраняться в соответствующих условиях хранения до их использования.
Если не указано иначе, все технические и научные термины, используемые в настоящем документе, имеют то же значение, которое им обычно придают специалисты в области, к которой относится изобретение. Хотя способы и материалы, аналогичные или эквивалентные тем, которые описаны в настоящем документе, могут быть использованы на практике или при тестировании изобретения, подходящие способы и материалы описаны в настоящем документе.
В случае конфликта спецификация, включая определения, будет иметь преимущественную силу. При использовании в настоящем документе и в прилагаемой формуле изобретения форма единственного числа существительных включает соответствующую форму множественного числа, если из контекста явно не следует иное. Таким образом, например, при упоминании «пептидной последовательности» или «варианта лечения»» подразумевают множество таких последовательностей, вариантов лечения, и так далее. Следует также отметить, что формула изобретения может быть составлена таким образом, чтобы исключить любой необязательный элемент. Как таковое, данное заявление предназначено для использования в качестве упомянутого ранее основания для использования исключительной терминологии, такой как «исключительно», «только» и тому подобной, в связи с перечислением элементов формулы изобретения или использования «отрицательного» ограничения.
Если использован диапазон значений, понятно, что каждое промежуточное значение, до десятой доли единицы нижнего предела, если из контекста явно не следует иное, между верхним и нижним пределом этого диапазона, а также любое заявленное или промежуточное значение в этом указанном диапазоне, входит в объем изобретения. Верхние и нижние пределы этих меньших диапазонов могут быть независимо включены в меньшие диапазоны, и также входят в объем изобретения, с учетом любого специально исключенного предела в указанном диапазоне. Если указанный диапазон включает один или оба предела, диапазоны, исключающие любой или оба из этих включенных пределов, также входят в объем изобретения.
При использовании в настоящем документе числовые значения часто представлены в формате диапазона во всем тексте данного документа. Использование формата диапазона служит исключительно для удобства и краткости и не должно быть истолковано, как негибкое ограничение объема изобретения, если из контекста явно не следует иное. Соответственно, используемый диапазон специально включает все возможные поддиапазоны, все отдельные числовые значения в пределах этого диапазона, а также все числовые значения или числовые диапазоны, включая целые числа в таких диапазонах, а также доли значений или целых чисел в пределах диапазонов, если из контекста явно не следует иное. Это утверждение применимо независимо от широты диапазона, и во всех контекстах данного патентного документа. Таким образом, например, упоминание диапазона 90-100% включает 91-99%, 92-98%, 93-95%, 91-98%, 91-97%, 91-96%, 91-95%, 91-94%, 91-93% и так далее. Упоминание диапазона 90-100% также включает 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97% и так далее, а также 91,1%, 91,2%, 91,3%, 91,4%, 91,5% и так далее, 92,1%, 92,2%, 92,3%, 92,4%, 92,5% и так далее, и так далее. Кроме того, упоминание диапазона 1-3, 3-5, 5-10, 10-20, 20-30, 30-40, 40-50, 50-60, 60-70, 70-80, 80-90, 90-100, 100-110, 110-120, 120-130, 130-140, 140-150, 150-160, 160-170, 170-180, 180-190, 190-200, 200-225, 225-250 включает 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 и так далее. В следующем примере упоминание диапазона 25-250, 250-500, 500-1000, 1000-2500, 2500-5000, 5000-25000 или 5000-50000 включает любое числовое значение или диапазон в пределах или включая такие значения, например, 25, 26, 27, 28, 29…250, 251, 252, 253, 254…500, 501, 502, 503, 504… и так далее. Использование ряда диапазонов включает комбинации верхнего и нижнего диапазонов для создания другого диапазона. Это утверждение применимо независимо от широты диапазона, и во всех контекстах данного патентного документа. Таким образом, например, упоминание ряда диапазонов, например, 5-10, 10-20, 20-30, 30-40, 40-50, 50-75, 75-100, 100-150, подразумевает такие диапазоны, как 5-20, 5-30, 5-40, 5-50, 5-75, 5-100, 5-150 и 10-30, 10-40, 10-50, 10-75, 10-100, 10-150, и 20-40, 20-50, 20-75, 20-100, 20-150, и так далее.
В настоящем документе для краткости использованы определенные сокращения. Одним примером является однобуквенное сокращение для обозначения аминокислотных остатков. Аминокислоты и соответствующие им трехбуквенные и однобуквенные сокращения приведены далее:
аланин | Ala | (A) |
аргинин | Arg | (R) |
аспарагин | Asn | (N) |
аспарагиновая кислота | Asp | (D) |
цистеин | Cys | (C) |
глутаминовая кислота | Glu | (E) |
глутамин | Gln | (Q) |
глицин | Gly | (G) |
гистидин | His | (H) |
изолейцин | Ile | (I) |
лейцин | Leu | (L) |
лизин | Lys | (K) |
метионин | Met | (M) |
фенилаланин | Phe | (F) |
пролин | Pro | (P) |
серин | Ser | (S) |
треонин | Thr | (T) |
триптофан | Trp | (W) |
тирозин | Tyr | (Y) |
валин | Val | (V) |
Изобретение в общих чертах раскрыто в настоящем документе с использованием аффирмативной речи для описания многочисленных вариантов осуществления. В изобретение также специально включены варианты осуществления, в которых конкретный объект исключен, полностью или частично, например, вещества или материалы, этапы и условия способа, протоколы, методы, тесты или анализы. Таким образом, даже если изобретение, в целом, не описано в настоящем документе с точки зрения того, что не входит в данное изобретение, аспекты, которые прямо не включены в изобретение, тем не менее раскрыты в настоящем документе.
В настоящем документе описаны конкретные варианты осуществления данного изобретения, включая наилучший известный авторам изобретения способ осуществления данного изобретения. После прочтения описания, приведенного выше, вариации раскрытых вариантов осуществления могут стать очевидными для специалистов в данной области, и ожидается, что эти квалифицированные специалисты смогут использовать такие вариации в зависимости от обстоятельств. Соответственно, предусмотрено, что изобретение будет осуществляться на практике иначе, чем это конкретно описано в настоящем документе, и что изобретение включает все модификации и эквиваленты объекта, изложенного в прилагаемой формуле изобретения, в соответствии с действующим законодательством. Более того, любое сочетание вышеописанных элементов во всех возможных его вариациях входит в объем изобретения, если нет иных указаний в настоящем документе или это иным образом явно не противоречит контексту.
Все публикации, патентные заявки, регистрационные номера и другие литературные источники, упомянутые в данной спецификации, включены в настоящий документ посредством ссылки в полном объеме, как если бы было специально и индивидуально указано, что каждая отдельная публикация или патентная заявка включена посредством ссылки. Публикации, обсуждаемые в настоящем документе, приведены исключительно с целью их раскрытия до даты подачи настоящей заявки. Ничто в настоящем документе не должно быть истолковано, как признание того, что настоящее изобретение неправомочно датировать такую публикацию задним числом в силу более раннего изобретения. Кроме того, приведенные даты публикации могут отличаться от фактических дат публикации, которые должны быть подтверждены независимо.
Описан целый ряд вариантов осуществления изобретения. Тем не менее, следует понимать, что различные модификации могут быть использованы без отклонения от сущности и объема изобретения. Соответственно, описания в «Экспериментальном разделе» предназначены для иллюстрации, но не для ограничения объема изобретения, определяемого формулой изобретения.
6. Экспериментальный раздел
Далее следует описание различных методов и материалов, использованных в исследовании, приведенное с целью предоставить специалистам в данной области полное раскрытие и описание того, как настоящее изобретение может быть осуществлено на практике и использовано, и оно не предназначено для ограничения объема того, что авторы настоящего документа считают своим изобретением, и также не должно восприниматься как указание на то, что проведенные эксперименты, описанные ниже, представляют собой все эксперименты, которые могут быть проведены. Следует понимать, что иллюстративные эксперименты, описанные в настоящем времени, не обязательно были проведены, но скорее, что они могут быть проведены для получения данных, и тому подобного, связанных с идеями настоящего изобретения. Были предприняты усилия для обеспечения точности в отношении используемых числовых значений (например, количеств, температур и так далее), но следует учитывать некоторые экспериментальные ошибки и отклонения.
Если нет иных указаний, части представляют собой части по массе, молекулярная масса представляет собой средневесовую молекулярную массу, температура указана в градусах Цельсия (°C) и давление соответствует атмосферному или примерно атмосферному давлению. Использованы стандартные сокращения, включая следующие: п.н.=пара(ы) нуклеотидов; т.н.=тысяча(и) нуклеотидов; с или сек=секунда(ы); мин=минута(ы); ч или час=час(ы); ак=аминокислота(ы); т.н.=тысяча(и) нуклеотидов; нт=нуклеотид(ы); пг=пикограмм; нг=нанограмм; мкг=микрограмм; мг=миллиграмм; г=грамм; кг=килограмм; пл или пЛ=пиколитр(ы); дл или дЛ=децилитр; мкл или мкЛ=микролитр; мл или мЛ=миллилитр; л или Л=литр; мкМ=микромолярный; мМ=миллимолярный; M=молярный; кДа=килодальтон; в/м=внутримышечное(но); в/б=внутрибрюшинное(но); п/к=подкожное(но); QD=ежедневно; BID=два раза в сутки; QW=еженедельно; TIW=три раза в неделю; QM=ежемесячно; ВЭЖХ=высокоэффективная жидкостная хроматография; МТ=масса тела; Ед=единица; н/з=не является статистически значимым; PBS=фосфатно-солевой буфер; ПЦР=полимеразная цепная реакция; NHS=N-гидроксисукцинимид; ЧСА=человеческий сывороточный альбумин; БСА=бычий сывороточный альбумин; DMEM=модифицированная по способу Дульбекко среда Игла; гк=геномная копия; ЭДТА=этилендиаминтетрауксусная кислота.
6.1 Пример 1 - Жидкий препарат M70
Ниже приведен состав жидкого препарата.
Компонент | Трометамин USP |
Трегалозы дигидрат |
Вода, категории «для инъекций» | Соляная кислота, N.F. | TWEEN-20, особо чистый | pH (25°C) | Осмоляльность (осмоль/л) |
Поставщик | JT Baker, Avantor | Pfanstiehl Inc. | Corning | JT Baker, Avantor | EMD | ||
Каталожный № | 4102-01 | 6138-23-4 | 25-055-CM | 9544-02 | 9480 | ||
GMP нескольких Фармакопей | Да | Да | Нет | Нет | |||
Целевое количество на 1000 мл раствора | 2,423 г | 92,55 г | Доводить до 999 мл | 0,94 мл | 0,1 мл | 8,000 | 300 |
Целевая молярность | 20 мМ | 244,8 мМ | |||||
Проба 1 | 2,47 г | 92,48 г | Доводить до 999 мл | 0,97 мл | 0,1 мл | 8,023 | 299 |
Проба 2 | 2,43 г | 92,84 г | Доводить до 999 мл | 0,94 мл | 0,1 мл | 7,95 | 303 |
Проба 3 | 2,42 г | 92,43 г | Доводить до 999 мл | 0,94 мл | 0,1 мл | 7,983 | 301 |
6.2 Пример 2 - Дизайн исследования стабильности препарата
Все исследования стабильности выполняли, используя концентрации белка 1 мг/мл и 10 мг/мл с осмоляльностью 300 осмоль/л, на протяжении 0-24 недель.
Объем содержимого флаконов составлял 0,5-1 мл/флакон при температуре -80°C; 2-8°C и 37°C в моменты времени 0 недель, 1 неделя, 2 недели, 4 недели, 3 месяца и 6 месяцев.
M70 концентрировали до 10+ мг/мл на основании значений A280 (ММ=21320, E=16180). Концентрированный маточный раствор разбавляли до концентрации 1 мг/мл или 10 мг/мл 1x раствором PBS и добавляли TWEEN-20 (0,01% по объему) перед этапом диализа.
Буфер | Состав | pH (4°C) по спецификации |
pH (4°C) фактически |
1 | 10 мМ K-фос., 150 мМ NaCl, 0,01% TWEEN-20 | 7,3 | 7,252 |
2 | 20 мМ K-фос., 125 мМ NaCl, 0,01% TWEEN-20 | 7,3 | 7,261 |
3 | 20 мМ K-фос., 125 мМ NaCl, 0,01% TWEEN-20 | 7,5 | 7,540 |
4 | 20 мМ K-фос., 125 мМ NaCl, 0,01% TWEEN-20 | 8,0 | 8,120 |
5 | 20 мМ Tris, 8,2% трегалозы, 0,01% TWEEN-20 | 7,5 | 7,586 |
6 | 20 мМ Tris, 8,2% трегалозы, 0,01% TWEEN-20 | 8 | 8,053 |
7 | 20 мМ Tris, 8,2% трегалозы, 0,01% TWEEN-20 | 8,5 | 8,562 |
8 | 20 мМ Tris, 140 мМ NaCl, 0,01% TWEEN-20 | 7,5 | 7,499 |
9 | 20 мМ Tris, 140 мМ NaCl, 0,01% TWEEN-20 | 8 | 8,075 |
10 | 20 мМ Tris, 140 мМ NaCl, 0,01% TWEEN-20 | 8,5 | 8,507 |
В данных исследованиях использовали трегалозу с каталожным № BP26871 (Fisher).
Также отмечали зависимость значения pH от температуры для Tris:
5°C | 25°C | 37°C | |
pH | 7,50 | 6,92 | 6,72 |
pH | 8,00 | 7,42 | 7,15 |
pH | 8,50 | 7,92 | 7,64 |
Образцы диализовали в течение ночи в каждом буфере с использованием кассеты Slide-A-Lyzer® с 10K НОММ. Все флаконы продували воздухом для удаления пыли, а затем автоклавировали в сухом цикле в течение 2 часов при температуре 121°C для обеспечения стерильности. Образцы стерильно фильтровали через 0,22-мкм фильтр в вытяжном шкафу. Заполнение флаконов выполняли в ламинарном шкафу для обеспечения стабильности.
В общей сложности тестировали 60 вариантов на каждую временную точку. Нумерацию флаконов использовали во всех примерах, приведенных в настоящем документе.
Флакон # | Буфер | Температура | Концентрация | Объем впрыска |
1 | 1 | -80°C | 1 мг/мл | 20 |
2 | 1 | 4°C | 1 мг/мл | 20 |
3 | 1 | 37°C | 1 мг/мл | 20 |
4 | 1 | -80°C | 10 мг/мл | 2 |
5 | 1 | 4°C | 10 мг/мл | 2 |
6 | 1 | 37°C | 10 мг/мл | 2 |
7 | 2 | -80°C | 1 мг/мл | 20 |
8 | 2 | 4°C | 1 мг/мл | 20 |
9 | 2 | 37°C | 1 мг/мл | 20 |
10 | 2 | -80°C | 10 мг/мл | 2 |
11 | 2 | 4°C | 10 мг/мл | 2 |
12 | 2 | 37°C | 10 мг/мл | 2 |
13 | 3 | -80°C | 1 мг/мл | 20 |
14 | 3 | 4°C | 1 мг/мл | 20 |
15 | 3 | 37°C | 1 мг/мл | 20 |
16 | 3 | -80°C | 10 мг/мл | 2 |
17 | 3 | 4°C | 10 мг/мл | 2 |
18 | 3 | 37°C | 10 мг/мл | 2 |
19 | 4 | -80°C | 1 мг/мл | 20 |
20 | 4 | 4°C | 1 мг/мл | 20 |
21 | 4 | 37°C | 1 мг/мл | 20 |
22 | 4 | -80°C | 10 мг/мл | 2 |
23 | 4 | 4°C | 10 мг/мл | 2 |
24 | 4 | 37°C | 10 мг/мл | 2 |
25 | 5 | -80°C | 1 мг/мл | 20 |
26 | 5 | 4°C | 1 мг/мл | 20 |
27 | 5 | 37°C | 1 мг/мл | 20 |
28 | 5 | -80°C | 10 мг/мл | 2 |
29 | 5 | 4°C | 10 мг/мл | 2 |
30 | 5 | 37°C | 10 мг/мл | 2 |
31 | 6 | -80°C | 1 мг/мл | 20 |
32 | 6 | 4°C | 1 мг/мл | 20 |
33 | 6 | 37°C | 1 мг/мл | 20 |
34 | 6 | -80°C | 10 мг/мл | 2 |
35 | 6 | 4°C | 10 мг/мл | 2 |
36 | 6 | 37°C | 10 мг/мл | 2 |
37 | 7 | -80°C | 1 мг/мл | 20 |
38 | 7 | 4°C | 1 мг/мл | 20 |
39 | 7 | 37°C | 1 мг/мл | 20 |
40 | 7 | -80°C | 10 мг/мл | 2 |
41 | 7 | 4°C | 10 мг/мл | 2 |
42 | 7 | 37°C | 10 мг/мл | 2 |
43 | 8 | -80°C | 1 мг/мл | 20 |
44 | 8 | 4°C | 1 мг/мл | 20 |
45 | 8 | 37°C | 1 мг/мл | 20 |
46 | 8 | -80°C | 10 мг/мл | 2 |
47 | 8 | 4°C | 10 мг/мл | 2 |
48 | 8 | 37°C | 10 мг/мл | 2 |
49 | 9 | -80°C | 1 мг/мл | 20 |
50 | 9 | 4°C | 1 мг/мл | 20 |
51 | 9 | 37°C | 1 мг/мл | 20 |
52 | 9 | -80°C | 10 мг/мл | 2 |
53 | 9 | 4°C | 10 мг/мл | 2 |
54 | 9 | 37°C | 10 мг/мл | 2 |
55 | 10 | -80°C | 1 мг/мл | 20 |
56 | 10 | 4°C | 1 мг/мл | 20 |
57 | 10 | 37°C | 1 мг/мл | 20 |
58 | 10 | -80°C | 10 мг/мл | 2 |
59 | 10 | 4°C | 10 мг/мл | 2 |
60 | 10 | 37°C | 10 мг/мл | 2 |
Также определяли осмометрические значения для буферов в присутствии и в отсутствие M70 на приборе Advanced Instruments 3300, с номинальным объемом впрыска 20 мкл:
Буфер | Состав | Буфер без белка (мОсм) | 1 мг/мл M70 в буфере (мОсм) | 10 мг/мл M70 в буфере (мОсм) |
Стандарт | 100 ммоль/кг | 98/97 | - | - |
Стандарт | 290 ммоль/кг | 284/284 | - | - |
Стандарт | 1000 ммоль/кг | 987/986 | - | - |
1 | 10 мМ K-фос., 150 мМ NaCl, 0,01% TWEEN-20 | 314 | 316 | 314 |
2 | 20 мМ K-фос., 125 мМ NaCl, 0,01% TWEEN-20 | 284 | 287 | 293 |
3 | 20 мМ K-фос., 125 мМ NaCl, 0,01% TWEEN-20 | 285 | 288 | 289 |
4 | 20 мМ K-фос., 125 мМ NaCl, 0,01% TWEEN-20 | 258 | 253 | 254 |
5 | 20 мМ Tris, 8,2% трегалозы, 0,01% TWEEN-20 | 352 | 360 | 362 |
6 | 20 мМ Tris, 8,2% трегалозы, 0,01% TWEEN-20 | 350 | 351 | 350 |
7 | 20 мМ Tris, 8,2% трегалозы, 0,01% TWEEN-20 | 348 | 342 | 349 |
8 | 20 мМ Tris, 140 мМ NaCl, 0,01% TWEEN-20 | 302 | 301 | 303 |
9 | 20 мМ Tris, 140 мМ NaCl, 0,01% TWEEN-20 | 297 | 302 | 302 |
10 | 20 мМ Tris, 140 мМ NaCl, 0,01% TWEEN-20 | 166 | 162 | 160 |
Визуальную оценку мутности проводили для всех образцов через 0, 1, 2, 4 недель. Образцы перемешивали на вихревой мешалке для ресуспендирования любых осадков на дне пробирки. Использовали следующую систему оценки в баллах: 0 - прозрачный; 1 - слегка помутневший; 2 - слегка мутный; 3 - мутный; 4 - очень мутный; 5 - чрезвычайно мутный.
Измерения показателей A340/A280 выполняли через 4 недели (Nanodrop; длина пути 1 мм), и для каждого образца использовали пустую пробу из соответствующего буфера препарата.
Анализ визуальной мутности выполняли для образцов через 4 недели при температуре 37°C. Результаты визуальной оценки образцов с концентрацией белка 1 мг/мл приведены на ФИГ. 1. Результаты визуальной оценки образцов с концентрацией белка 10 мг/мл приведены на ФИГ. 2.
Исследования показали полное отсутствие визуальных осадков или агрегатов для любого варианта образцов, хранящихся при температуре -80°C и 4°C, и в любой временной точке. В образцах, хранящихся при температуре 37°C, была зарегистрирована различная степень агрегации (данные не представлены), которая зависела от величины pH и концентрации белка.
Было отмечено, что трегалоза была лучшим модификатором тоничности, чем NaCl, в Tris-содержащих буферах. Действительно, наблюдали значительные различия в степени агрегации при температуре 37°C между 20 мМ Tris (pH 8,5), содержащим 8,2% трегалозы (буфер 7), и содержащим 140 мМ NaCl (буфер 10).
Буфер 7 (20 мМ Tris, 8,2% трегалозы, 0,01% TWEEN-20) был единственным буфером препарата без каких-либо признаков визуальных осадков при любых условиях, концентрациях или временных точках и, таким образом, был выбран для дальнейших исследований.
6.3 Пример 3. ЭХ-ВЭЖХ анализ
ВЭЖХ анализ проводили для образов без признаков наличия осадка на основании показателей A280/A340 (отношение ≤0,07) и визуального осмотра (без видимых осадков) в следующих условиях:
Прибор - ВЭЖХ серии 1200
Подвижная фаза - 1x раствор PBS с 5% этанола (по объему)
Скорость потока - 1 мл/мин
Время прогона образца - 15 мин/прогон
Колонка - Tosoh TSKgel3000
Температура - 25°C
Объем(ы) впрыска - 20 мкл для образца с концентрацией 1 мг/мл (нагрузка 20 мкг); или 2 мкл для образца с концентрацией 10 мг/мл (нагрузка 20 мкг).
Прогон пустой пробы (PBS) выполняли перед каждым впрыском для обеспечения минимального переноса образцов в последующие впрыски. Также определяли процент (%) выхода, исходя из общей AUC в момент времени=0 для каждой временной точки (t=1, 2 и 4 недели).
Результаты ВЭЖХ анализа, основанного на определении методом ЭХ AUC поглощения при A210 для образцов с концентрацией 1 мг/мл в разных буферах приведены на ФИГ. 3; и на ФИГ. 4 представлены результаты ВЭЖХ анализа, основанного на определении методом ЭХ AUC поглощения при A210 для образца с концентрацией 1 мг/мл в буфере 7. Аналогичные данные для образцов с концентрацией 10 мг/мл приведены на ФИГ. 5 и ФИГ. 6, соответственно.
Результаты показали, что процент (%) выхода, исходя из общей AUC, был выше 92% для все проанализированных образцов, что впоследствии было подтверждено ортогональным методом (AUCSV) (данные не представлены). В случае буфера 7 также наблюдали зависимое от времени возрастание, в процентах, образования димеров/агрегатов при температуре 37°C. Общие тенденции свидетельствуют о том, что чем выше значение pH, тем выше склонность к образованию димеров и высокомолекулярных агрегатов с течением времени в жидком препарате. Кроме того, увеличение концентрации M70 имело лишь минимальный эффект на склонность к образованию димеров и высокомолекулярных агрегатов с течением времени при температуре 4°C в жидком препарате.
6.4 Пример 4. Анализ методом электрофореза в SDS-ПААГ
Анализ методом электрофореза в SDS-ПААГ выполняли для образцов без признаков наличия осадка на основании показателей A280/A340 и визуального осмотра (буферы 1-10) в следующих условиях:
Прибор - Novex 4-20% гель в Tris-глициновом буфере
Буфер для обработки образцов - Lamelli 3x электродный буфер ± 100 мМ ДТТ.
Образцы разбавляли до концентрации 0,1 мкг/мкл в 1x электродном буфере Lamelli. Образцы центрифугировали при температуре 95°C в течение 5 мин, а затем наносили по 10 мкл/дорожку (всего 1 мкг) в геле. Также использовали эталонный стандарт для времени t=0. После завершения гель фиксировали в 1% растворе уксусной кислоты (по объему) в течение 30 мин, промывали водой Milli-Q™ в течение 15 минут, окрашивали кумасси Bio-Safe™ в течение 1 часа, а затем краситель удаляли в течение ночи в воде Milli-Q™.
Фотографии SDS-ПАА гелей в случае буфера 7 (слева) и буфера 8 (справа) с белком в концентрации как 1 мг/мл, так и 10 мг/мл, приведены на ФИГ. 7A и ФИГ. 7B, соответственно (другие буферы; данные не представлены). Результаты показали, что минимальное уменьшение интенсивности основного пика M70 имело место во всех протестированных образцах. В буфере 7 присутствовала полоса димера, связанного не дисульфидными связями, которая не исчезала в восстанавливающих условиях и соответствовала примерно 5% от интенсивности полосы всего белка через 4 недели при температуре 37°C и концентрации 10 мг/мл. В случае образца с концентрацией 10 мг/мл через 4 недели при температуре 4°C не наблюдали значительного увеличения полосы димера по сравнению с эталонным стандартом для t=0. Кроме того, во всех протестированных образцах отсутствовали признаки высокомолекулярных агрегатов в лунках геля.
На основании данных, полученных в этом и предыдущих экспериментах, были выбраны лучшие 3 буфера для дальнейшего анализа. Ранжирование буферов было основано на следующих анализах в моменты времени t=0, 1, 2 и 4 недели:
- визуальный осмотр (Пример 2)
- мутность при A340/A280 (Пример 2)
- ЭХ-ВЭЖХ (Пример 3)
- электрофорез в SDS-ПААГ (Пример 4).
Что касается критериев выбора, основное внимание было уделено анализу образца с концентрацией 10 мг/мл, чтобы снизить риск для препаратов с высокой концентрацией (до 10 мг/мл), предназначенных для клинического применения. Исследования также были сфокусированы на образцах, хранящихся при температуре 4°C, что могло послужить основой для условий хранения жидкого препарата.
С учетом вышеуказанных критериев для дальнейшего анализа были выбраны буферы 1, 7 и 10. Буфер 1 в случае образца с концентрацией белка 10 мг/мл отличался 100% выходом (4 недели при температуре 4°C) и содержанием мономера 98,9% при анализе в запланированных временных точках. Более того, другими методами анализа было показано минимальное содержание связанного не дисульфидными ковалентными связями димера в момент времени t=4 недели, и была отмечена долгосрочная стабильность при температуре 4°C (данные не представлены). В буфере 7 с белком в концентрации 10 мг/мл отсутствовал осадок при температуре 37°C в момент времени t=4 недели; и для белка в концентрации 10 мг/мл наблюдали минимальную деградацию за 4 недели при температуре 4°C (98,9% мономера). Буфер 10 был по существу эквивалентным буферу 7; но содержал NaCl для тоничности (данные не представлены) и добавлял разнообразие в диапазон эксципиентов.
6.5 Пример 5. Анализ методом ионообменной-высокоэффективной жидкостной хроматографии (ИО-ВЭЖХ)
ИО-ВЭЖХ анализ буфера 7 выполняли в следующих условиях:
Прибор: ВЭЖХ серии 1200
Подвижная фаза: (A) 20 мМ Tris-HCl; pH 8,5; 20% ацетонитрила
(B) 20 мМ Tris-HCl; pH 8,5; 20% ацетонитрила; 500 мМ NaCl
Скорость потока: 0,5 мл/мин с возрастающим линейным градиентом %B
Колонка: анионообменная колонка Tosoh TSKgel Q-5PW, 7,5 мм x 75 мм (PN 18257)
Объем впрыска: 20 мкл для образца с концентрацией 1 мг/мл
2 мкл для образца с концентрацией 10 мг/мл.
Анализ временных точек для образцов: буфер 7 с белком в концентрациях 1 мг/мл и 10 мг/мл в моменты времени t=0, 1, 2 и 4 недели; Эталонный стандарт против подвергнутых тепловому стрессу при температуре 37°C образцов в моменты времени t=0, 1, 2 и 4 недели.
На ФИГ. 8 представлены результаты ИО-ВЭЖХ для буфера 7 с белком в концентрации 1 мг/мл при температуре 37°C в моменты времени t=0 недель, 1 неделя, 2 недели и 4 недели. На ФИГ. 9 представлены результаты ИО-ВЭЖХ для буфера 7 с белком в концентрации 10 мг/мл при температуре 37°C в моменты времени t=0 недель, 1 неделя, 2 недели и 4 недели.
6.6 Пример 6. Анализ методом обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии (ОФ-ВЭЖХ)
ОФ-ВЭЖХ анализ выполняли для образцов без признаков наличия осадка на основании показателей A280/A340 и визуального осмотра в следующих условиях:
Прибор: ВЭЖХ серии 1200
Подвижная фаза: (A) 0,1 ТФУ
(B) 0,1 ТФУ, 90% CAN
Скорость потока: 0,4 мл/мин
Колонка: Phenomenox™ C4-Jupiter
Объем впрыска: 20 мкл для образца с концентрацией 1 мг/мл
2 мкл для образца с концентрацией 10 мг/мл.
Анализ временных точек для образцов: буфер 7 с белком в концентрациях 1 мг/мл и 10 мг/мл в моменты времени t=0, 1, 2 и 4 недели; Эталонный стандарт против подвергнутых тепловому стрессу при температуре 37°C образцов в моменты времени t=0, 1, 2 и 4 недели.
На ФИГ. 10 представлены результаты ОФ-ВЭЖХ для буфера 7 с белком в концентрации 1 мг/мл при температуре 37°C в моменты времени t=0 недель, 1 неделя, 2 недели и 4 недели. На ФИГ. 11 представлены результаты ОФ-ВЭЖХ для буфера 7 с белком в концентрации 10 мг/мл при температуре 37°C в моменты времени t=0 недель, 1 неделя, 2 недели и 4 недели.
6.7 Пример 7 - Анализ методом замораживания-размораживания
Данный анализ проводили для изучения эффекта нескольких циклов замораживания/размораживания на препараты M70.
M70 использовали в концентрации 10 мг/мл, и целевой показатель осмоль/л составлял 300 осмоль/л. Использовали буфер следующего состава (аналогичный буферу 7): 20 мМ Tris pH 8,0 (25°C), 8,3% (масс/об) трегалозы, 0,01% TWEEN-20. Объем заполнения во флаконах составлял 1,0 мл/флакон, и 6 аликвот разливали в стеклянные флаконы, которые были использованы в экспериментах по изучению стабильности, описанных выше.
Использовали следующие условия замораживания/размораживания:
Число циклов замораживания/размораживания: 1, 3, 5
Условия замораживания: нахождение при температуре -80°C в течение 30 мин.
Условия размораживания: (A) комнатная температура до оттаивания (1 час)
(B) 4°C до оттаивания (1 час)
Затем проводили оценку стабильности с использованием одного или более из методов ОФ-ВЭЖХ, ЭХ-ВЭЖХ или АО-ВЭЖХ.
На ФИГ. 12 представлены данные по стабильности препарата M70 после нескольких циклов замораживания/размораживания. Циклы замораживания/размораживания не влияли на стабильность препарата в буфере. Препарат M70 в 20 мМ Tris pH 8,0 (25°C), 8,3% трегалозы (масс/об), 0,01% полисорбата-20 (буфер «TTP») является стабильным при циклическом замораживании/размораживании от температуры -80°C до комнатной температуры. Отсутствовали заметные различия по сравнению с исходным препаратом (эталонным стандартом) при любых условиях образцов или методах анализа. Более того, отсутствовали признаки обратимого образования олигомеров при анализе методом ЭХ-ВЭЖХ с использованием TTP в качестве подвижной фазы.
Список последовательностей
Настоящая спецификация подана совместно с копией списка последовательностей в машиночитаемой форме (CRF). CRF под названием 13370-018-228_SEQLIST.txt, которая была создана 14 октября 2015 г. и имеет размер 255604 байтов, идентична бумажной копии списка последовательностей и включена в настоящий документ посредством ссылки в полном объеме.
--->
СПИСОК ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ
<110> NGM Biopharmaceuticals, Inc.
LINDHOUT, Darrin Anthony
OLSON, Charles
<120> Фармацевтические композиции, содержащие варианты пептидов, и способы их применения
<130> 13370-018-228
<140>
<141>
<150> 62/067,824
<151> 2014-10-23
<160> 205
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 194
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 1
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Ser Pro His Val His Tyr Gly Trp
1 5 10 15
Gly Asp Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly
20 25 30
Leu Ser Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys
35 40 45
Ala Arg Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala
50 55 60
Leu Arg Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys
65 70 75 80
Met Gly Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu
85 90 95
Asp Cys Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr
100 105 110
Arg Ser Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln
115 120 125
Arg Gln Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu
130 135 140
Pro Met Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His
145 150 155 160
Leu Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp
165 170 175
Pro Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe
180 185 190
Glu Lys
<210> 2
<211> 194
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 2
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ser Ser Pro Leu Val His Tyr Gly Trp
1 5 10 15
Gly Asp Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly
20 25 30
Leu Ser Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys
35 40 45
Ala Arg Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala
50 55 60
Leu Arg Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys
65 70 75 80
Met Gly Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu
85 90 95
Asp Cys Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr
100 105 110
Arg Ser Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln
115 120 125
Arg Gln Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu
130 135 140
Pro Met Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His
145 150 155 160
Leu Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp
165 170 175
Pro Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe
180 185 190
Glu Lys
<210> 3
<211> 194
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 3
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro His Val His Tyr Gly Trp
1 5 10 15
Gly Asp Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly
20 25 30
Leu Ser Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys
35 40 45
Ala Arg Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala
50 55 60
Leu Arg Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys
65 70 75 80
Met Gly Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu
85 90 95
Asp Cys Ala Phe Glu Glu Glu Ile Leu Glu Asp Gly Tyr Asn Val Tyr
100 105 110
Arg Ser Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln
115 120 125
Arg Gln Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu
130 135 140
Pro Met Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His
145 150 155 160
Leu Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp
165 170 175
Pro Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe
180 185 190
Glu Lys
<210> 4
<211> 194
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 4
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro His Val His Tyr Ala Trp
1 5 10 15
Gly Asp Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly
20 25 30
Leu Ser Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys
35 40 45
Ala Arg Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala
50 55 60
Leu Arg Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys
65 70 75 80
Met Gly Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu
85 90 95
Asp Cys Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr
100 105 110
Arg Ser Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln
115 120 125
Arg Gln Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu
130 135 140
Pro Met Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His
145 150 155 160
Leu Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp
165 170 175
Pro Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe
180 185 190
Glu Lys
<210> 5
<211> 191
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 5
Arg His Pro Ile Pro Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Phe Gly Gly Gln
1 5 10 15
Val Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser
20 25 30
Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly
35 40 45
Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr
50 55 60
Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala
65 70 75 80
Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala
85 90 95
Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu
100 105 110
Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu
115 120 125
Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu
130 135 140
Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser
145 150 155 160
Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly
165 170 175
Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 6
<211> 187
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 6
Arg Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Phe Gly Gly Gln Val Arg Leu Arg
1 5 10 15
His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser Cys Phe Leu Arg
20 25 30
Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly Gln Ser Ala His
35 40 45
Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr Val Ala Ile Lys
50 55 60
Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala Asp Gly Lys Met
65 70 75 80
Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala Phe Glu Glu Glu
85 90 95
Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu Lys His Arg Leu
100 105 110
Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu Tyr Lys Asn Arg
115 120 125
Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu Pro Met Val Pro
130 135 140
Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser Asp Met Phe Ser
145 150 155 160
Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly Leu Val Thr Gly
165 170 175
Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185
<210> 7
<211> 192
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 7
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Phe Gly Gly
1 5 10 15
Gln Val Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser
20 25 30
Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg
35 40 45
Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg
50 55 60
Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly
65 70 75 80
Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys
85 90 95
Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser
100 105 110
Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln
115 120 125
Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met
130 135 140
Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu
145 150 155 160
Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe
165 170 175
Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 8
<211> 191
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 8
Arg His Pro Ile Pro Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Trp Gly Asp Pro
1 5 10 15
Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser
20 25 30
Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly
35 40 45
Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr
50 55 60
Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala
65 70 75 80
Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala
85 90 95
Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu
100 105 110
Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu
115 120 125
Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu
130 135 140
Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser
145 150 155 160
Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly
165 170 175
Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 9
<211> 193
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 9
Arg His Pro Ile Pro Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Phe Gly Trp Gly
1 5 10 15
Asp Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu
20 25 30
Ser Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala
35 40 45
Arg Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu
50 55 60
Arg Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met
65 70 75 80
Gly Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp
85 90 95
Cys Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg
100 105 110
Ser Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg
115 120 125
Gln Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro
130 135 140
Met Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu
145 150 155 160
Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro
165 170 175
Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu
180 185 190
Lys
<210> 10
<211> 193
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 10
Arg His Pro Ile Pro Asp Ser Ser Pro His Val His Tyr Gly Trp Gly
1 5 10 15
Asp Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu
20 25 30
Ser Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala
35 40 45
Arg Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu
50 55 60
Arg Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met
65 70 75 80
Gly Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp
85 90 95
Cys Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg
100 105 110
Ser Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg
115 120 125
Gln Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro
130 135 140
Met Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu
145 150 155 160
Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro
165 170 175
Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu
180 185 190
Lys
<210> 11
<211> 192
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 11
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro Leu Leu Gln Trp Gly Asp
1 5 10 15
Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser
20 25 30
Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg
35 40 45
Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg
50 55 60
Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly
65 70 75 80
Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys
85 90 95
Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser
100 105 110
Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln
115 120 125
Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met
130 135 140
Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu
145 150 155 160
Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe
165 170 175
Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 12
<211> 194
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 12
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro Leu Leu Gln Phe Gly Trp
1 5 10 15
Gly Asp Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly
20 25 30
Leu Ser Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys
35 40 45
Ala Arg Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala
50 55 60
Leu Arg Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys
65 70 75 80
Met Gly Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu
85 90 95
Asp Cys Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr
100 105 110
Arg Ser Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln
115 120 125
Arg Gln Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu
130 135 140
Pro Met Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His
145 150 155 160
Leu Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp
165 170 175
Pro Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe
180 185 190
Glu Lys
<210> 13
<211> 192
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 13
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro Leu Leu Gln Phe Gly Gly
1 5 10 15
Gln Val Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser
20 25 30
Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg
35 40 45
Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg
50 55 60
Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly
65 70 75 80
Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys
85 90 95
Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser
100 105 110
Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln
115 120 125
Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met
130 135 140
Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu
145 150 155 160
Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe
165 170 175
Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 14
<211> 191
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 14
Arg His Pro Ile Pro Asp Ser Ser Pro His Val His Tyr Gly Gly Gln
1 5 10 15
Val Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser
20 25 30
Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly
35 40 45
Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr
50 55 60
Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala
65 70 75 80
Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala
85 90 95
Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu
100 105 110
Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu
115 120 125
Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu
130 135 140
Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser
145 150 155 160
Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly
165 170 175
Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 15
<211> 192
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 15
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro His Val His Tyr Gly Gly
1 5 10 15
Gln Val Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser
20 25 30
Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg
35 40 45
Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg
50 55 60
Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly
65 70 75 80
Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys
85 90 95
Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser
100 105 110
Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln
115 120 125
Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met
130 135 140
Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu
145 150 155 160
Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe
165 170 175
Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 16
<211> 192
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 16
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro His Val His Trp Gly Asp
1 5 10 15
Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser
20 25 30
Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg
35 40 45
Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg
50 55 60
Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly
65 70 75 80
Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys
85 90 95
Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser
100 105 110
Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln
115 120 125
Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met
130 135 140
Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu
145 150 155 160
Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe
165 170 175
Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 17
<211> 192
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 17
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro His Val Gly Trp Gly Asp
1 5 10 15
Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser
20 25 30
Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg
35 40 45
Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg
50 55 60
Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly
65 70 75 80
Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys
85 90 95
Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser
100 105 110
Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln
115 120 125
Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met
130 135 140
Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu
145 150 155 160
Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe
165 170 175
Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 18
<211> 192
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 18
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro His Tyr Gly Trp Gly Asp
1 5 10 15
Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser
20 25 30
Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg
35 40 45
Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg
50 55 60
Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly
65 70 75 80
Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys
85 90 95
Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser
100 105 110
Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln
115 120 125
Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met
130 135 140
Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu
145 150 155 160
Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe
165 170 175
Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 19
<211> 192
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 19
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro Val Tyr Gly Trp Gly Asp
1 5 10 15
Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser
20 25 30
Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg
35 40 45
Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg
50 55 60
Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly
65 70 75 80
Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys
85 90 95
Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser
100 105 110
Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln
115 120 125
Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met
130 135 140
Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu
145 150 155 160
Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe
165 170 175
Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 20
<211> 192
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 20
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro Val His Gly Trp Gly Asp
1 5 10 15
Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser
20 25 30
Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg
35 40 45
Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg
50 55 60
Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly
65 70 75 80
Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys
85 90 95
Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser
100 105 110
Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln
115 120 125
Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met
130 135 140
Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu
145 150 155 160
Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe
165 170 175
Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 21
<211> 192
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 21
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro Val His Tyr Trp Gly Asp
1 5 10 15
Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser
20 25 30
Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg
35 40 45
Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg
50 55 60
Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly
65 70 75 80
Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys
85 90 95
Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser
100 105 110
Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln
115 120 125
Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met
130 135 140
Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu
145 150 155 160
Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe
165 170 175
Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 22
<211> 193
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 22
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro His Val His Gly Trp Gly
1 5 10 15
Asp Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu
20 25 30
Ser Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala
35 40 45
Arg Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu
50 55 60
Arg Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met
65 70 75 80
Gly Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp
85 90 95
Cys Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg
100 105 110
Ser Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg
115 120 125
Gln Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro
130 135 140
Met Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu
145 150 155 160
Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro
165 170 175
Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu
180 185 190
Lys
<210> 23
<211> 192
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 23
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro His His Gly Trp Gly Asp
1 5 10 15
Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser
20 25 30
Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg
35 40 45
Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg
50 55 60
Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly
65 70 75 80
Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys
85 90 95
Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser
100 105 110
Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln
115 120 125
Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met
130 135 140
Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu
145 150 155 160
Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe
165 170 175
Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 24
<211> 192
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 24
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro His His Tyr Trp Gly Asp
1 5 10 15
Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser
20 25 30
Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg
35 40 45
Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg
50 55 60
Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly
65 70 75 80
Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys
85 90 95
Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser
100 105 110
Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln
115 120 125
Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met
130 135 140
Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu
145 150 155 160
Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe
165 170 175
Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 25
<211> 192
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 25
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro His Val Tyr Trp Gly Asp
1 5 10 15
Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser
20 25 30
Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg
35 40 45
Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg
50 55 60
Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly
65 70 75 80
Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys
85 90 95
Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser
100 105 110
Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln
115 120 125
Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met
130 135 140
Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu
145 150 155 160
Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe
165 170 175
Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 26
<211> 192
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 26
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ser Ser Pro Leu Val His Trp Gly Asp
1 5 10 15
Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser
20 25 30
Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg
35 40 45
Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg
50 55 60
Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly
65 70 75 80
Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys
85 90 95
Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser
100 105 110
Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln
115 120 125
Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met
130 135 140
Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu
145 150 155 160
Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe
165 170 175
Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 27
<211> 192
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 27
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ser Ser Pro His Val His Trp Gly Asp
1 5 10 15
Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser
20 25 30
Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg
35 40 45
Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg
50 55 60
Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly
65 70 75 80
Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys
85 90 95
Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser
100 105 110
Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln
115 120 125
Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met
130 135 140
Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu
145 150 155 160
Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe
165 170 175
Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 28
<211> 191
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 28
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro His Val Trp Gly Asp Pro
1 5 10 15
Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser
20 25 30
Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly
35 40 45
Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr
50 55 60
Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala
65 70 75 80
Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala
85 90 95
Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu
100 105 110
Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu
115 120 125
Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu
130 135 140
Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser
145 150 155 160
Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly
165 170 175
Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 29
<211> 193
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 29
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro His Val His Tyr Trp Gly
1 5 10 15
Asp Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu
20 25 30
Ser Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala
35 40 45
Arg Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu
50 55 60
Arg Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met
65 70 75 80
Gly Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp
85 90 95
Cys Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg
100 105 110
Ser Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg
115 120 125
Gln Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro
130 135 140
Met Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu
145 150 155 160
Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro
165 170 175
Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu
180 185 190
Lys
<210> 30
<211> 194
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 30
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro His Val His Tyr Ala Trp
1 5 10 15
Gly Asp Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly
20 25 30
Leu Ser Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys
35 40 45
Ala Arg Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala
50 55 60
Leu Arg Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys
65 70 75 80
Met Gly Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu
85 90 95
Asp Cys Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr
100 105 110
Arg Ser Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln
115 120 125
Arg Gln Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu
130 135 140
Pro Met Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His
145 150 155 160
Leu Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp
165 170 175
Pro Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe
180 185 190
Glu Lys
<210> 31
<211> 191
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 31
Arg His Pro Ile Pro Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Phe Gly Ala Gln
1 5 10 15
Val Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser
20 25 30
Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly
35 40 45
Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr
50 55 60
Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala
65 70 75 80
Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala
85 90 95
Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu
100 105 110
Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu
115 120 125
Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu
130 135 140
Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser
145 150 155 160
Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly
165 170 175
Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 32
<211> 191
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 32
Arg His Pro Ile Pro Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Phe Gly Asp Gln
1 5 10 15
Val Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser
20 25 30
Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly
35 40 45
Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr
50 55 60
Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala
65 70 75 80
Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala
85 90 95
Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu
100 105 110
Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu
115 120 125
Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu
130 135 140
Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser
145 150 155 160
Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly
165 170 175
Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 33
<211> 191
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 33
Arg His Pro Ile Pro Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Phe Gly Pro Gln
1 5 10 15
Val Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser
20 25 30
Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly
35 40 45
Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr
50 55 60
Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala
65 70 75 80
Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala
85 90 95
Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu
100 105 110
Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu
115 120 125
Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu
130 135 140
Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser
145 150 155 160
Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly
165 170 175
Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 34
<211> 191
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 34
Arg His Pro Ile Pro Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Phe Gly Gly Ala
1 5 10 15
Val Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser
20 25 30
Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly
35 40 45
Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr
50 55 60
Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala
65 70 75 80
Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala
85 90 95
Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu
100 105 110
Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu
115 120 125
Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu
130 135 140
Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser
145 150 155 160
Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly
165 170 175
Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 35
<211> 191
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 35
Arg His Pro Ile Pro Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Phe Gly Gly Glu
1 5 10 15
Val Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser
20 25 30
Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly
35 40 45
Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr
50 55 60
Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala
65 70 75 80
Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala
85 90 95
Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu
100 105 110
Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu
115 120 125
Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu
130 135 140
Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser
145 150 155 160
Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly
165 170 175
Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 36
<211> 191
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 36
Arg His Pro Ile Pro Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Phe Gly Gly Asn
1 5 10 15
Val Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser
20 25 30
Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly
35 40 45
Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr
50 55 60
Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala
65 70 75 80
Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala
85 90 95
Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu
100 105 110
Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu
115 120 125
Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu
130 135 140
Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser
145 150 155 160
Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly
165 170 175
Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 37
<211> 191
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 37
Arg His Pro Ile Pro Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Phe Gly Gly Gln
1 5 10 15
Ala Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser
20 25 30
Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly
35 40 45
Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr
50 55 60
Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala
65 70 75 80
Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala
85 90 95
Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu
100 105 110
Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu
115 120 125
Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu
130 135 140
Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser
145 150 155 160
Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly
165 170 175
Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 38
<211> 191
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 38
Arg His Pro Ile Pro Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Phe Gly Gly Gln
1 5 10 15
Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser
20 25 30
Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly
35 40 45
Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr
50 55 60
Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala
65 70 75 80
Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala
85 90 95
Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu
100 105 110
Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu
115 120 125
Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu
130 135 140
Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser
145 150 155 160
Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly
165 170 175
Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 39
<211> 191
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 39
Arg His Pro Ile Pro Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Phe Gly Gly Gln
1 5 10 15
Thr Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser
20 25 30
Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly
35 40 45
Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr
50 55 60
Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala
65 70 75 80
Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala
85 90 95
Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu
100 105 110
Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu
115 120 125
Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu
130 135 140
Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser
145 150 155 160
Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly
165 170 175
Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 40
<211> 193
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 40
Arg His Pro Ile Pro Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Phe Gly Trp Gly
1 5 10 15
Gln Pro Val Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu
20 25 30
Ser Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala
35 40 45
Arg Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu
50 55 60
Arg Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met
65 70 75 80
Gly Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp
85 90 95
Cys Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg
100 105 110
Ser Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg
115 120 125
Gln Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro
130 135 140
Met Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu
145 150 155 160
Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro
165 170 175
Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu
180 185 190
Lys
<210> 41
<211> 182
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 41
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro His Val His Tyr Gly Trp
1 5 10 15
Gly Asp Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly
20 25 30
Leu Ser Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys
35 40 45
Ala Arg Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala
50 55 60
Leu Arg Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys
65 70 75 80
Met Gly Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu
85 90 95
Asp Cys Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr
100 105 110
Arg Ser Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln
115 120 125
Arg Gln Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu
130 135 140
Pro Met Leu Pro Glu Pro Pro Gly Ile Leu Ala Pro Gln Pro Pro Asp
145 150 155 160
Val Gly Ser Ser Asp Pro Leu Ser Met Val Gly Pro Ser Gln Gly Arg
165 170 175
Ser Pro Ser Tyr Ala Ser
180
<210> 42
<211> 178
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 42
His Pro Ile Pro Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Phe Gly Gly Gln Val
1 5 10 15
Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser Cys
20 25 30
Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly Gln
35 40 45
Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr Val
50 55 60
Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala Asp
65 70 75 80
Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala Phe
85 90 95
Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu Lys
100 105 110
His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu Tyr
115 120 125
Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu Pro
130 135 140
Glu Pro Pro Gly Ile Leu Ala Pro Gln Pro Pro Asp Val Gly Ser Ser
145 150 155 160
Asp Pro Leu Ser Met Val Gly Pro Ser Gln Gly Arg Ser Pro Ser Tyr
165 170 175
Ala Ser
<210> 43
<211> 192
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 43
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro His Val His Tyr Gly Gly
1 5 10 15
Asp Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser
20 25 30
Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg
35 40 45
Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg
50 55 60
Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly
65 70 75 80
Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys
85 90 95
Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser
100 105 110
Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln
115 120 125
Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met
130 135 140
Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu
145 150 155 160
Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe
165 170 175
Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 44
<211> 185
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 44
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro His Val His Tyr Gly Trp
1 5 10 15
Gly Asp Pro Ile Arg Gln Arg Tyr Leu Tyr Thr Asp Asp Ala Gln Gln
20 25 30
Thr Glu Ala His Leu Glu Ile Arg Glu Asp Gly Thr Val Gly Gly Ala
35 40 45
Ala Asp Gln Ser Pro Glu Ser Leu Leu Gln Leu Lys Ala Leu Lys Pro
50 55 60
Gly Val Ile Gln Ile Leu Gly Val Lys Thr Ser Arg Phe Leu Cys Gln
65 70 75 80
Arg Pro Asp Gly Ala Leu Tyr Gly Ser Leu His Phe Asp Pro Glu Ala
85 90 95
Cys Ser Phe Arg Glu Leu Leu Leu Glu Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Gln
100 105 110
Ser Glu Ala His Gly Leu Pro Leu His Leu Pro Gly Asn Lys Ser Pro
115 120 125
His Arg Asp Pro Ala Pro Arg Gly Pro Ala Arg Phe Leu Pro Leu Pro
130 135 140
Gly Leu Pro Pro Ala Leu Pro Glu Pro Pro Gly Ile Leu Ala Pro Gln
145 150 155 160
Pro Pro Asp Val Gly Ser Ser Asp Pro Leu Ser Met Val Gly Pro Ser
165 170 175
Gln Gly Arg Ser Pro Ser Tyr Ala Ser
180 185
<210> 45
<211> 193
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 45
His Pro Ile Pro Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Phe Gly Gly Gln Val
1 5 10 15
Arg Gln Arg Tyr Leu Tyr Thr Asp Asp Ala Gln Gln Thr Glu Ala His
20 25 30
Leu Glu Ile Arg Glu Asp Gly Thr Val Gly Gly Ala Ala Asp Gln Ser
35 40 45
Pro Glu Ser Leu Leu Gln Leu Lys Ala Leu Lys Pro Gly Val Ile Gln
50 55 60
Ile Leu Gly Val Lys Thr Ser Arg Phe Leu Cys Gln Arg Pro Asp Gly
65 70 75 80
Ala Leu Tyr Gly Ser Leu His Phe Asp Pro Glu Ala Cys Ser Phe Arg
85 90 95
Glu Leu Leu Leu Glu Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Gln Ser Glu Ala His
100 105 110
Gly Leu Pro Leu His Leu Pro Gly Asn Lys Ser Pro His Arg Asp Pro
115 120 125
Ala Pro Arg Gly Pro Ala Arg Phe Leu Pro Leu Pro Gly Leu Pro Pro
130 135 140
Ala Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu
145 150 155 160
Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro
165 170 175
Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu
180 185 190
Lys
<210> 46
<211> 232
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 46
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro His Val His Tyr Gly Trp
1 5 10 15
Gly Asp Pro Ile Arg Gln Arg Tyr Leu Tyr Thr Asp Asp Ala Gln Gln
20 25 30
Thr Glu Ala His Leu Glu Ile Arg Glu Asp Gly Thr Val Gly Gly Ala
35 40 45
Ala Asp Gln Ser Pro Glu Ser Leu Leu Gln Leu Lys Ala Leu Lys Pro
50 55 60
Gly Val Ile Gln Ile Leu Gly Val Lys Thr Ser Arg Phe Leu Cys Gln
65 70 75 80
Arg Pro Asp Gly Ala Leu Tyr Gly Ser Leu His Phe Asp Pro Glu Ala
85 90 95
Cys Ser Phe Arg Glu Leu Leu Leu Glu Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Gln
100 105 110
Ser Glu Ala His Gly Leu Pro Leu His Leu Pro Gly Asn Lys Ser Pro
115 120 125
His Arg Asp Pro Ala Pro Arg Gly Pro Ala Arg Phe Leu Pro Leu Pro
130 135 140
Gly Leu Pro Pro Ala Leu Pro Glu Pro Pro Gly Ile Leu Ala Pro Gln
145 150 155 160
Pro Pro Asp Val Gly Ser Ser Asp Pro Leu Ser Met Val Gly Pro Ser
165 170 175
Gln Gly Arg Ser Pro Ser Tyr Ala Ser Pro Met Val Pro Glu Glu Pro
180 185 190
Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu
195 200 205
Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala
210 215 220
Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
225 230
<210> 47
<211> 190
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 47
His Pro Ile Pro Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Trp Gly Asp Pro Ile
1 5 10 15
Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser Cys
20 25 30
Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly Gln
35 40 45
Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr Val
50 55 60
Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala Asp
65 70 75 80
Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala Phe
85 90 95
Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu Lys
100 105 110
His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu Tyr
115 120 125
Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu Pro
130 135 140
Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser Asp
145 150 155 160
Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly Leu
165 170 175
Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 48
<211> 187
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 48
Arg Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Phe Gly Gly Gln Val Arg Leu Arg
1 5 10 15
His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser Cys Phe Leu Arg
20 25 30
Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly Gln Ser Ala His
35 40 45
Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr Val Ala Ile Lys
50 55 60
Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala Asp Gly Lys Met
65 70 75 80
Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala Phe Glu Glu Glu
85 90 95
Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu Lys His Arg Leu
100 105 110
Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu Tyr Lys Asn Arg
115 120 125
Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu Pro Met Val Pro
130 135 140
Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser Asp Met Phe Ser
145 150 155 160
Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly Leu Val Thr Gly
165 170 175
Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185
<210> 49
<211> 192
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 49
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Phe Gly Gly
1 5 10 15
Gln Val Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser
20 25 30
Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg
35 40 45
Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg
50 55 60
Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly
65 70 75 80
Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys
85 90 95
Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser
100 105 110
Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln
115 120 125
Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met
130 135 140
Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu
145 150 155 160
Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe
165 170 175
Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 50
<211> 191
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 50
Arg His Pro Ile Pro Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Phe Gly Asp Gln
1 5 10 15
Val Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser
20 25 30
Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly
35 40 45
Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr
50 55 60
Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala
65 70 75 80
Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala
85 90 95
Phe Glu Glu Glu Ile Leu Glu Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu
100 105 110
Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu
115 120 125
Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu
130 135 140
Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser
145 150 155 160
Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly
165 170 175
Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 51
<211> 191
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 51
Arg His Pro Ile Pro Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Phe Gly Gly Asn
1 5 10 15
Val Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser
20 25 30
Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly
35 40 45
Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr
50 55 60
Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala
65 70 75 80
Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala
85 90 95
Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu
100 105 110
Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu
115 120 125
Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu
130 135 140
Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser
145 150 155 160
Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly
165 170 175
Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 52
<211> 187
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 52
Arg Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Trp Gly Asp Pro Ile Arg Leu Arg
1 5 10 15
His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser Cys Phe Leu Arg
20 25 30
Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly Gln Ser Ala His
35 40 45
Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr Val Ala Ile Lys
50 55 60
Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala Asp Gly Lys Met
65 70 75 80
Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala Phe Glu Glu Glu
85 90 95
Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu Lys His Arg Leu
100 105 110
Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu Tyr Lys Asn Arg
115 120 125
Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu Pro Met Val Pro
130 135 140
Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser Asp Met Phe Ser
145 150 155 160
Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly Leu Val Thr Gly
165 170 175
Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185
<210> 53
<211> 189
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 53
Met Asp Ser Ser Pro Leu Val His Tyr Gly Trp Gly Asp Pro Ile Arg
1 5 10 15
Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser Cys Phe
20 25 30
Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly Gln Ser
35 40 45
Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr Val Ala
50 55 60
Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala Asp Gly
65 70 75 80
Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala Phe Glu
85 90 95
Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu Lys His
100 105 110
Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu Tyr Lys
115 120 125
Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu Pro Met
130 135 140
Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser Asp Met
145 150 155 160
Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly Leu Val
165 170 175
Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185
<210> 54
<211> 192
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 54
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro Leu Leu Gln Trp Gly Asp
1 5 10 15
Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser
20 25 30
Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg
35 40 45
Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg
50 55 60
Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly
65 70 75 80
Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys
85 90 95
Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser
100 105 110
Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln
115 120 125
Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met
130 135 140
Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu
145 150 155 160
Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe
165 170 175
Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 55
<211> 192
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 55
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro His Tyr Gly Trp Gly Asp
1 5 10 15
Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser
20 25 30
Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg
35 40 45
Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg
50 55 60
Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly
65 70 75 80
Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys
85 90 95
Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser
100 105 110
Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln
115 120 125
Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met
130 135 140
Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu
145 150 155 160
Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe
165 170 175
Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 56
<211> 192
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 56
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro Val Tyr Gly Trp Gly Asp
1 5 10 15
Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser
20 25 30
Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg
35 40 45
Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg
50 55 60
Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly
65 70 75 80
Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys
85 90 95
Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser
100 105 110
Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln
115 120 125
Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met
130 135 140
Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu
145 150 155 160
Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe
165 170 175
Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 57
<211> 192
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 57
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro Val His Gly Trp Gly Asp
1 5 10 15
Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser
20 25 30
Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg
35 40 45
Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg
50 55 60
Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly
65 70 75 80
Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys
85 90 95
Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser
100 105 110
Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln
115 120 125
Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met
130 135 140
Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu
145 150 155 160
Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe
165 170 175
Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 58
<211> 192
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 58
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro Val His Tyr Trp Gly Asp
1 5 10 15
Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser
20 25 30
Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg
35 40 45
Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg
50 55 60
Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly
65 70 75 80
Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys
85 90 95
Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser
100 105 110
Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln
115 120 125
Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met
130 135 140
Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu
145 150 155 160
Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe
165 170 175
Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 59
<211> 192
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 59
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro His His Gly Trp Gly Asp
1 5 10 15
Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser
20 25 30
Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg
35 40 45
Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg
50 55 60
Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly
65 70 75 80
Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys
85 90 95
Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser
100 105 110
Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln
115 120 125
Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met
130 135 140
Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu
145 150 155 160
Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe
165 170 175
Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 60
<211> 192
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 60
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro His His Tyr Trp Gly Asp
1 5 10 15
Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser
20 25 30
Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg
35 40 45
Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg
50 55 60
Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly
65 70 75 80
Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys
85 90 95
Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser
100 105 110
Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln
115 120 125
Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met
130 135 140
Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu
145 150 155 160
Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe
165 170 175
Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 61
<211> 192
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 61
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro His Val Gly Trp Gly Asp
1 5 10 15
Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser
20 25 30
Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg
35 40 45
Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg
50 55 60
Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly
65 70 75 80
Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys
85 90 95
Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser
100 105 110
Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln
115 120 125
Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met
130 135 140
Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu
145 150 155 160
Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe
165 170 175
Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 62
<211> 192
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 62
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro His Val Tyr Trp Gly Asp
1 5 10 15
Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser
20 25 30
Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg
35 40 45
Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg
50 55 60
Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly
65 70 75 80
Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys
85 90 95
Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser
100 105 110
Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln
115 120 125
Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met
130 135 140
Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu
145 150 155 160
Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe
165 170 175
Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 63
<211> 192
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 63
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro His Val His Trp Gly Asp
1 5 10 15
Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser
20 25 30
Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg
35 40 45
Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg
50 55 60
Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly
65 70 75 80
Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys
85 90 95
Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser
100 105 110
Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln
115 120 125
Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met
130 135 140
Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu
145 150 155 160
Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe
165 170 175
Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 64
<211> 192
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 64
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ser Ser Pro Leu Val His Trp Gly Asp
1 5 10 15
Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser
20 25 30
Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg
35 40 45
Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg
50 55 60
Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly
65 70 75 80
Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys
85 90 95
Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser
100 105 110
Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln
115 120 125
Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met
130 135 140
Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu
145 150 155 160
Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe
165 170 175
Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 65
<211> 192
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 65
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ser Ser Pro His Val His Trp Gly Asp
1 5 10 15
Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser
20 25 30
Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg
35 40 45
Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg
50 55 60
Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly
65 70 75 80
Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys
85 90 95
Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser
100 105 110
Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln
115 120 125
Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met
130 135 140
Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu
145 150 155 160
Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe
165 170 175
Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 66
<211> 192
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 66
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro His Leu Gln Trp Gly Asp
1 5 10 15
Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser
20 25 30
Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg
35 40 45
Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg
50 55 60
Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly
65 70 75 80
Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys
85 90 95
Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser
100 105 110
Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln
115 120 125
Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met
130 135 140
Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu
145 150 155 160
Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe
165 170 175
Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 67
<211> 191
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 67
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro His Val Trp Gly Asp Pro
1 5 10 15
Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser
20 25 30
Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly
35 40 45
Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr
50 55 60
Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala
65 70 75 80
Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala
85 90 95
Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu
100 105 110
Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu
115 120 125
Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu
130 135 140
Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser
145 150 155 160
Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly
165 170 175
Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 68
<211> 193
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 68
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro His Val His Tyr Trp Gly
1 5 10 15
Asp Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu
20 25 30
Ser Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala
35 40 45
Arg Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu
50 55 60
Arg Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met
65 70 75 80
Gly Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp
85 90 95
Cys Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg
100 105 110
Ser Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg
115 120 125
Gln Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro
130 135 140
Met Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu
145 150 155 160
Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro
165 170 175
Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu
180 185 190
Lys
<210> 69
<211> 189
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 69
Arg Asp Ser Ser Pro Leu Val His Tyr Gly Trp Gly Asp Pro Ile Arg
1 5 10 15
Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser Cys Phe
20 25 30
Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly Gln Ser
35 40 45
Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr Val Ala
50 55 60
Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala Asp Gly
65 70 75 80
Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala Phe Glu
85 90 95
Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu Lys His
100 105 110
Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu Tyr Lys
115 120 125
Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu Pro Met
130 135 140
Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser Asp Met
145 150 155 160
Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly Leu Val
165 170 175
Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185
<210> 70
<211> 190
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 70
Met Arg Asp Ser Ser Pro Leu Val His Tyr Gly Trp Gly Asp Pro Ile
1 5 10 15
Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser Cys
20 25 30
Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly Gln
35 40 45
Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr Val
50 55 60
Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala Asp
65 70 75 80
Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala Phe
85 90 95
Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu Lys
100 105 110
His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu Tyr
115 120 125
Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu Pro
130 135 140
Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser Asp
145 150 155 160
Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly Leu
165 170 175
Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 71
<211> 181
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 71
His Pro Ile Pro Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Phe Gly Gly Gln Val
1 5 10 15
Arg Gln Arg Tyr Leu Tyr Thr Asp Asp Ala Gln Gln Thr Glu Ala His
20 25 30
Leu Glu Ile Arg Glu Asp Gly Thr Val Gly Gly Ala Ala Asp Gln Ser
35 40 45
Pro Glu Ser Leu Leu Gln Leu Lys Ala Leu Lys Pro Gly Val Ile Gln
50 55 60
Ile Leu Gly Val Lys Thr Ser Arg Phe Leu Cys Gln Arg Pro Asp Gly
65 70 75 80
Ala Leu Tyr Gly Ser Leu His Phe Asp Pro Glu Ala Cys Ser Phe Arg
85 90 95
Glu Leu Leu Leu Glu Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Gln Ser Glu Ala His
100 105 110
Ser Leu Pro Leu His Leu Pro Gly Asn Lys Ser Pro His Arg Asp Pro
115 120 125
Ala Pro Arg Gly Pro Ala Arg Phe Leu Pro Leu Pro Gly Leu Pro Pro
130 135 140
Ala Leu Pro Glu Pro Pro Gly Ile Leu Ala Pro Gln Pro Pro Asp Val
145 150 155 160
Gly Ser Ser Asp Pro Leu Ser Met Val Gly Pro Ser Gln Gly Arg Ser
165 170 175
Pro Ser Tyr Ala Ser
180
<210> 72
<211> 181
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 72
His Pro Ile Pro Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Phe Gly Gly Gln Val
1 5 10 15
Arg Gln Arg Tyr Leu Tyr Thr Asp Asp Ala Gln Gln Thr Glu Ala His
20 25 30
Leu Glu Ile Arg Glu Asp Gly Thr Val Gly Gly Ala Ala Asp Gln Ser
35 40 45
Pro Glu Ser Leu Leu Gln Leu Lys Ala Leu Lys Pro Gly Val Ile Gln
50 55 60
Ile Leu Gly Val Lys Thr Ser Arg Phe Leu Cys Gln Arg Pro Asp Gly
65 70 75 80
Ala Leu Tyr Gly Ser Leu His Phe Asp Pro Glu Ala Cys Ser Phe Arg
85 90 95
Glu Leu Leu Leu Glu Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Gln Ser Glu Ala His
100 105 110
Gly Leu Pro Leu His Leu Pro Gly Asn Lys Ser Pro His Arg Asp Pro
115 120 125
Ala Pro Arg Gly Pro Ala Arg Phe Leu Pro Leu Pro Gly Leu Pro Pro
130 135 140
Ala Pro Pro Glu Pro Pro Gly Ile Leu Ala Pro Gln Pro Pro Asp Val
145 150 155 160
Gly Ser Ser Asp Pro Leu Ser Met Val Gly Pro Ser Gln Gly Arg Ser
165 170 175
Pro Ser Tyr Ala Ser
180
<210> 73
<211> 212
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 73
His Pro Ile Pro Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Phe Gly Gly Gln Val
1 5 10 15
Arg Gln Arg Tyr Leu Tyr Thr Asp Asp Ala Gln Gln Thr Glu Ala His
20 25 30
Leu Glu Ile Arg Glu Asp Gly Thr Val Gly Gly Ala Ala Asp Gln Ser
35 40 45
Pro Glu Ser Leu Leu Gln Leu Lys Ala Leu Lys Pro Gly Val Ile Gln
50 55 60
Ile Leu Gly Val Lys Thr Ser Arg Phe Leu Cys Gln Arg Pro Asp Gly
65 70 75 80
Ala Leu Tyr Gly Ser Leu His Phe Asp Pro Glu Ala Cys Ser Phe Arg
85 90 95
Glu Leu Leu Leu Glu Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Gln Ser Glu Ala His
100 105 110
Gly Leu Pro Leu His Leu Pro Gly Asn Lys Ser Pro His Arg Asp Pro
115 120 125
Ala Pro Arg Gly Pro Ala Arg Phe Leu Pro Leu Pro Gly Leu Pro Pro
130 135 140
Ala Leu Pro Glu Pro Pro Gly Ile Leu Ala Pro Gln Pro Pro Asp Val
145 150 155 160
Gly Ser Ser Asp Pro Leu Ser Met Val Val Gln Asp Glu Leu Gln Gly
165 170 175
Val Gly Gly Glu Gly Cys His Met His Pro Glu Asn Cys Lys Thr Leu
180 185 190
Leu Thr Asp Ile Asp Arg Thr His Thr Glu Lys Pro Val Trp Asp Gly
195 200 205
Ile Thr Gly Glu
210
<210> 74
<211> 189
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 74
Arg Asp Ala Gly Pro His Val His Tyr Gly Trp Gly Asp Pro Ile Arg
1 5 10 15
Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser Cys Phe
20 25 30
Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly Gln Ser
35 40 45
Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr Val Ala
50 55 60
Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala Asp Gly
65 70 75 80
Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala Phe Glu
85 90 95
Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu Lys His
100 105 110
Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu Tyr Lys
115 120 125
Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu Pro Met
130 135 140
Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser Asp Met
145 150 155 160
Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly Leu Val
165 170 175
Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185
<210> 75
<211> 184
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 75
Arg Val His Tyr Gly Trp Gly Asp Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr
1 5 10 15
Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala
20 25 30
Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu
35 40 45
Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His
50 55 60
Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu
65 70 75 80
Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro
85 90 95
Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser
100 105 110
Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu
115 120 125
Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro
130 135 140
Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu
145 150 155 160
Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala
165 170 175
Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180
<210> 76
<211> 179
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 76
Arg Gly Asp Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His
1 5 10 15
Gly Leu Ser Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp
20 25 30
Cys Ala Arg Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val
35 40 45
Ala Leu Arg Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu
50 55 60
Cys Met Gly Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu
65 70 75 80
Glu Asp Cys Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val
85 90 95
Tyr Arg Ser Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys
100 105 110
Gln Arg Gln Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe
115 120 125
Leu Pro Met Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly
130 135 140
His Leu Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met
145 150 155 160
Asp Pro Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser
165 170 175
Phe Glu Lys
<210> 77
<211> 175
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 77
Arg Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser
1 5 10 15
Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly
20 25 30
Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr
35 40 45
Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala
50 55 60
Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala
65 70 75 80
Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu
85 90 95
Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu
100 105 110
Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu
115 120 125
Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser
130 135 140
Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly
145 150 155 160
Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
165 170 175
<210> 78
<211> 188
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 78
Arg Ala Gly Pro His Val His Tyr Gly Trp Gly Asp Pro Ile Arg Leu
1 5 10 15
Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser Cys Phe Leu
20 25 30
Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly Gln Ser Ala
35 40 45
His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr Val Ala Ile
50 55 60
Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala Asp Gly Lys
65 70 75 80
Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala Phe Glu Glu
85 90 95
Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu Lys His Arg
100 105 110
Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu Tyr Lys Asn
115 120 125
Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu Pro Met Val
130 135 140
Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser Asp Met Phe
145 150 155 160
Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly Leu Val Thr
165 170 175
Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185
<210> 79
<211> 187
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 79
Arg Gly Pro His Val His Tyr Gly Trp Gly Asp Pro Ile Arg Leu Arg
1 5 10 15
His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser Cys Phe Leu Arg
20 25 30
Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly Gln Ser Ala His
35 40 45
Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr Val Ala Ile Lys
50 55 60
Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala Asp Gly Lys Met
65 70 75 80
Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala Phe Glu Glu Glu
85 90 95
Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu Lys His Arg Leu
100 105 110
Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu Tyr Lys Asn Arg
115 120 125
Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu Pro Met Val Pro
130 135 140
Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser Asp Met Phe Ser
145 150 155 160
Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly Leu Val Thr Gly
165 170 175
Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185
<210> 80
<211> 186
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 80
Arg Pro His Val His Tyr Gly Trp Gly Asp Pro Ile Arg Leu Arg His
1 5 10 15
Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser Cys Phe Leu Arg Ile
20 25 30
Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly Gln Ser Ala His Ser
35 40 45
Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr Val Ala Ile Lys Gly
50 55 60
Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala Asp Gly Lys Met Gln
65 70 75 80
Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala Phe Glu Glu Glu Ile
85 90 95
Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu Lys His Arg Leu Pro
100 105 110
Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu Tyr Lys Asn Arg Gly
115 120 125
Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu Pro Met Val Pro Glu
130 135 140
Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser
145 150 155 160
Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu
165 170 175
Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185
<210> 81
<211> 185
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 81
Arg His Val His Tyr Gly Trp Gly Asp Pro Ile Arg Leu Arg His Leu
1 5 10 15
Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg
20 25 30
Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly Gln Ser Ala His Ser Leu
35 40 45
Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr Val Ala Ile Lys Gly Val
50 55 60
His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly
65 70 75 80
Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg
85 90 95
Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu Lys His Arg Leu Pro Val
100 105 110
Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe
115 120 125
Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu Pro Met Val Pro Glu Glu
130 135 140
Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro
145 150 155 160
Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu
165 170 175
Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185
<210> 82
<211> 194
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 82
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Ala Ala Gly Pro His Val His Tyr Gly Trp
1 5 10 15
Gly Asp Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly
20 25 30
Leu Ser Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys
35 40 45
Ala Arg Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala
50 55 60
Leu Arg Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys
65 70 75 80
Met Gly Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu
85 90 95
Asp Cys Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr
100 105 110
Arg Ser Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln
115 120 125
Arg Gln Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu
130 135 140
Pro Met Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His
145 150 155 160
Leu Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp
165 170 175
Pro Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe
180 185 190
Glu Lys
<210> 83
<211> 194
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 83
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Ala Pro His Val His Tyr Gly Trp
1 5 10 15
Gly Asp Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly
20 25 30
Leu Ser Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys
35 40 45
Ala Arg Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala
50 55 60
Leu Arg Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys
65 70 75 80
Met Gly Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu
85 90 95
Asp Cys Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr
100 105 110
Arg Ser Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln
115 120 125
Arg Gln Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu
130 135 140
Pro Met Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His
145 150 155 160
Leu Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp
165 170 175
Pro Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe
180 185 190
Glu Lys
<210> 84
<211> 194
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 84
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Ala His Val His Tyr Gly Trp
1 5 10 15
Gly Asp Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly
20 25 30
Leu Ser Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys
35 40 45
Ala Arg Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala
50 55 60
Leu Arg Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys
65 70 75 80
Met Gly Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu
85 90 95
Asp Cys Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr
100 105 110
Arg Ser Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln
115 120 125
Arg Gln Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu
130 135 140
Pro Met Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His
145 150 155 160
Leu Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp
165 170 175
Pro Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe
180 185 190
Glu Lys
<210> 85
<211> 194
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 85
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro His Val His Tyr Gly Ala
1 5 10 15
Gly Asp Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly
20 25 30
Leu Ser Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys
35 40 45
Ala Arg Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala
50 55 60
Leu Arg Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys
65 70 75 80
Met Gly Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu
85 90 95
Asp Cys Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr
100 105 110
Arg Ser Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln
115 120 125
Arg Gln Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu
130 135 140
Pro Met Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His
145 150 155 160
Leu Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp
165 170 175
Pro Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe
180 185 190
Glu Lys
<210> 86
<211> 194
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 86
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro His Val His Tyr Gly Trp
1 5 10 15
Gly Ala Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly
20 25 30
Leu Ser Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys
35 40 45
Ala Arg Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala
50 55 60
Leu Arg Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys
65 70 75 80
Met Gly Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu
85 90 95
Asp Cys Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr
100 105 110
Arg Ser Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln
115 120 125
Arg Gln Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu
130 135 140
Pro Met Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His
145 150 155 160
Leu Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp
165 170 175
Pro Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe
180 185 190
Glu Lys
<210> 87
<211> 167
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 87
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro His Val His Tyr Gly Trp
1 5 10 15
Gly Asp Ala Ile Cys Ala Arg Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu
20 25 30
Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser
35 40 45
Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu
50 55 60
Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp
65 70 75 80
Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu
85 90 95
Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro
100 105 110
Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu
115 120 125
Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu
130 135 140
Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val
145 150 155 160
Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
165
<210> 88
<211> 194
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 88
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro His Val His Tyr Gly Trp
1 5 10 15
Gly Asp Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro Ala Gly
20 25 30
Leu Ser Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys
35 40 45
Ala Arg Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala
50 55 60
Leu Arg Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys
65 70 75 80
Met Gly Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu
85 90 95
Asp Cys Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr
100 105 110
Arg Ser Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln
115 120 125
Arg Gln Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ala His Phe Leu
130 135 140
Pro Met Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His
145 150 155 160
Leu Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp
165 170 175
Pro Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe
180 185 190
Glu Lys
<210> 89
<211> 194
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 89
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro His Val His Tyr Gly Trp
1 5 10 15
Gly Asp Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro Ala Gly
20 25 30
Leu Ser Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys
35 40 45
Ala Arg Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala
50 55 60
Leu Arg Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys
65 70 75 80
Met Gly Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu
85 90 95
Asp Cys Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr
100 105 110
Arg Ser Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln
115 120 125
Arg Gln Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser Ala Phe Leu
130 135 140
Pro Met Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His
145 150 155 160
Leu Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp
165 170 175
Pro Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe
180 185 190
Glu Lys
<210> 90
<211> 194
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 90
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro His Val His Tyr Gly Trp
1 5 10 15
Gly Asp Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly
20 25 30
Leu Ser Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys
35 40 45
Ala Arg Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala
50 55 60
Leu Arg Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys
65 70 75 80
Met Gly Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu
85 90 95
Asp Cys Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr
100 105 110
Arg Ser Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Ala Gln
115 120 125
Ala Gln Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu
130 135 140
Pro Met Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His
145 150 155 160
Leu Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp
165 170 175
Pro Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe
180 185 190
Glu Lys
<210> 91
<211> 194
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 91
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro His Val His Tyr Gly Trp
1 5 10 15
Gly Asp Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly
20 25 30
Leu Ser Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys
35 40 45
Ala Arg Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala
50 55 60
Leu Arg Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys
65 70 75 80
Met Gly Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu
85 90 95
Asp Cys Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr
100 105 110
Arg Ser Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Ala Gln
115 120 125
Arg Gln Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ala His Phe Leu
130 135 140
Pro Met Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His
145 150 155 160
Leu Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp
165 170 175
Pro Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe
180 185 190
Glu Lys
<210> 92
<211> 194
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 92
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro His Val His Tyr Gly Trp
1 5 10 15
Gly Asp Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly
20 25 30
Leu Ser Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys
35 40 45
Ala Arg Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala
50 55 60
Leu Arg Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys
65 70 75 80
Met Gly Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu
85 90 95
Asp Cys Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr
100 105 110
Arg Ser Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Ala Gln
115 120 125
Arg Gln Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser Ala Phe Leu
130 135 140
Pro Met Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His
145 150 155 160
Leu Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp
165 170 175
Pro Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe
180 185 190
Glu Lys
<210> 93
<211> 194
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 93
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro His Val His Tyr Gly Trp
1 5 10 15
Gly Asp Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly
20 25 30
Leu Ser Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys
35 40 45
Ala Arg Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala
50 55 60
Leu Arg Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys
65 70 75 80
Met Gly Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu
85 90 95
Asp Cys Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr
100 105 110
Arg Ser Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln
115 120 125
Ala Gln Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ala His Phe Leu
130 135 140
Pro Met Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His
145 150 155 160
Leu Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp
165 170 175
Pro Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe
180 185 190
Glu Lys
<210> 94
<211> 194
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 94
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro His Val His Tyr Gly Trp
1 5 10 15
Gly Asp Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly
20 25 30
Leu Ser Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys
35 40 45
Ala Arg Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala
50 55 60
Leu Arg Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys
65 70 75 80
Met Gly Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu
85 90 95
Asp Cys Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr
100 105 110
Arg Ser Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln
115 120 125
Arg Gln Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ala Ala Phe Leu
130 135 140
Pro Met Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His
145 150 155 160
Leu Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp
165 170 175
Pro Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe
180 185 190
Glu Lys
<210> 95
<211> 194
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 95
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro His Val His Tyr Gly Trp
1 5 10 15
Gly Asp Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly
20 25 30
Leu Ser Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys
35 40 45
Ala Arg Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala
50 55 60
Leu Arg Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys
65 70 75 80
Met Gly Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu
85 90 95
Asp Cys Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr
100 105 110
Arg Ser Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Ala Gln
115 120 125
Arg Gln Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser Ala Phe Leu
130 135 140
Pro Met Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His
145 150 155 160
Leu Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp
165 170 175
Pro Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe
180 185 190
Glu Lys
<210> 96
<211> 194
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 96
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro His Val His Tyr Gly Trp
1 5 10 15
Gly Asp Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly
20 25 30
Leu Ser Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys
35 40 45
Ala Arg Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala
50 55 60
Leu Arg Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys
65 70 75 80
Met Gly Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu
85 90 95
Asp Cys Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr
100 105 110
Arg Ser Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Ala Gln
115 120 125
Ala Gln Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ala His Phe Leu
130 135 140
Pro Met Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His
145 150 155 160
Leu Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp
165 170 175
Pro Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe
180 185 190
Glu Lys
<210> 97
<211> 194
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 97
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro His Val His Tyr Gly Trp
1 5 10 15
Gly Asp Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly
20 25 30
Leu Ser Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys
35 40 45
Ala Arg Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala
50 55 60
Leu Arg Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys
65 70 75 80
Met Gly Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu
85 90 95
Asp Cys Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr
100 105 110
Arg Ser Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Ala Gln
115 120 125
Ala Gln Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser Ala Phe Leu
130 135 140
Pro Met Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His
145 150 155 160
Leu Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp
165 170 175
Pro Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe
180 185 190
Glu Lys
<210> 98
<211> 194
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 98
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro His Val His Tyr Gly Trp
1 5 10 15
Gly Asp Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly
20 25 30
Leu Ser Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys
35 40 45
Ala Arg Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala
50 55 60
Leu Arg Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys
65 70 75 80
Met Gly Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu
85 90 95
Asp Cys Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr
100 105 110
Arg Ser Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Ala Gln
115 120 125
Ala Gln Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ala Ala Phe Leu
130 135 140
Pro Met Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His
145 150 155 160
Leu Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp
165 170 175
Pro Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe
180 185 190
Glu Lys
<210> 99
<211> 194
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 99
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro His Val His Tyr Gly Trp
1 5 10 15
Gly Asp Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly
20 25 30
Leu Ser Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys
35 40 45
Ala Arg Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala
50 55 60
Leu Arg Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys
65 70 75 80
Met Gly Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu
85 90 95
Asp Cys Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr
100 105 110
Arg Ser Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln
115 120 125
Arg Gln Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu
130 135 140
Pro Met Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His
145 150 155 160
Leu Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp
165 170 175
Pro Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe
180 185 190
Glu Lys
<210> 100
<211> 181
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 100
His Pro Ile Pro Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Phe Gly Gly Gln Val
1 5 10 15
Arg Gln Arg Tyr Leu Tyr Thr Asp Asp Ala Gln Gln Thr Glu Ala His
20 25 30
Leu Glu Ile Arg Glu Asp Gly Thr Val Gly Gly Ala Ala Asp Gln Ser
35 40 45
Pro Glu Ser Leu Leu Gln Leu Lys Ala Leu Lys Pro Gly Val Ile Gln
50 55 60
Ile Leu Gly Val Lys Thr Ser Arg Phe Leu Cys Gln Arg Pro Asp Gly
65 70 75 80
Ala Leu Tyr Gly Ser Leu His Phe Asp Pro Glu Ala Cys Ser Phe Arg
85 90 95
Glu Leu Leu Leu Glu Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Gln Ser Glu Ala His
100 105 110
Gly Leu Pro Leu His Leu Pro Gly Asn Lys Ser Pro His Arg Asp Pro
115 120 125
Ala Pro Arg Gly Pro Ala Arg Phe Leu Pro Leu Pro Gly Leu Pro Pro
130 135 140
Ala Leu Pro Glu Pro Pro Gly Ile Leu Ala Pro Gln Pro Pro Asp Val
145 150 155 160
Gly Ser Ser Asp Pro Leu Ser Met Val Gly Pro Ser Gln Gly Arg Ser
165 170 175
Pro Ser Tyr Ala Ser
180
<210> 101
<211> 4
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 101
Val His Tyr Gly
1
<210> 102
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 102
Asp Ala Ser Pro His Val His Tyr Gly
1 5
<210> 103
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 103
Asp Ser Ser Pro Leu Val His Tyr Gly
1 5
<210> 104
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 104
Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln
1 5
<210> 105
<211> 12
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 105
Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Phe Gly Gly Gln Val
1 5 10
<210> 106
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 106
Arg His Pro Ile Pro
1 5
<210> 107
<211> 4
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 107
His Pro Ile Pro
1
<210> 108
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 108
Arg Pro Leu Ala Phe
1 5
<210> 109
<211> 4
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 109
Pro Leu Ala Phe
1
<210> 110
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 110
Met Asp Ser Ser Pro Leu
1 5
<210> 111
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 111
Met Ser Asp Ser Ser Pro Leu
1 5
<210> 112
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 112
Ser Asp Ser Ser Pro Leu
1 5
<210> 113
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 113
Met Ser Ser Pro Leu
1 5
<210> 114
<211> 4
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 114
Ser Ser Pro Leu
1
<210> 115
<211> 4
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 115
Arg Asp Ser Ser
1
<210> 116
<211> 4
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 116
Met Asp Ser Ser
1
<210> 117
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 117
Met Arg Asp Ser Ser
1 5
<210> 118
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 118
Met Ser Ser Pro Leu
1 5
<210> 119
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 119
Met Asp Ser Ser Pro Leu
1 5
<210> 120
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 120
Met Ser Asp Ser Ser Pro Leu
1 5
<210> 121
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 121
Asp Ser Ser Pro Leu
1 5
<210> 122
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 122
Asp Ala Ser Pro His
1 5
<210> 123
<211> 4
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 123
Arg Asp Ser Ser
1
<210> 124
<211> 4
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 124
Met Asp Ser Ser
1
<210> 125
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 125
Met Arg Asp Ser Ser
1 5
<210> 126
<211> 6
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 126
Met Asp Ser Ser Pro Leu
1 5
<210> 127
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 127
Met Ser Asp Ser Ser Pro Leu
1 5
<210> 128
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 128
Met Ser Ser Pro Leu
1 5
<210> 129
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Описание искусственной последовательности: последовательность линкера
<400> 129
Gly Ser Gly Gly Ser
1 5
<210> 130
<211> 4
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Описание искусственной последовательности: последовательность линкера
<400> 130
Gly Gly Gly Ser
1
<210> 131
<211> 4
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Описание искусственной последовательности: последовательность линкера
<400> 131
Gly Gly Ser Gly
1
<210> 132
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Описание искусственной последовательности: последовательность линкера
<400> 132
Gly Gly Ser Gly Gly
1 5
<210> 133
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Описание искусственной последовательности: последовательность линкера
<400> 133
Gly Ser Gly Ser Gly
1 5
<210> 134
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Описание искусственной последовательности: последовательность линкера
<400> 134
Gly Ser Gly Gly Gly
1 5
<210> 135
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Описание искусственной последовательности: последовательность линкера
<400> 135
Gly Ser Ser Ser Gly
1 5
<210> 136
<211> 32
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Описание искусственной последовательности: прямой праймер
<400> 136
ccgactagtc accatgcgga gcgggtgtgt gg 32
<210> 137
<211> 41
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Описание искусственной последовательности: обратный праймер
<400> 137
ataagaatgc ggccgcttac ttctcaaagc tgggactcct c 41
<210> 138
<211> 186
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 138
Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Phe Gly Gly Gln Val Arg Leu Arg His
1 5 10 15
Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser Cys Phe Leu Arg Ile
20 25 30
Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly Gln Ser Ala His Ser
35 40 45
Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr Val Ala Ile Lys Gly
50 55 60
Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala Asp Gly Lys Met Gln
65 70 75 80
Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala Phe Glu Glu Glu Ile
85 90 95
Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu Lys His Arg Leu Pro
100 105 110
Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu Tyr Lys Asn Arg Gly
115 120 125
Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu Pro Met Val Pro Glu
130 135 140
Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser
145 150 155 160
Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu
165 170 175
Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185
<210> 139
<211> 194
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 139
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Ser Pro His Val His Tyr Gly Trp
1 5 10 15
Gly Asp Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly
20 25 30
Leu Ser Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys
35 40 45
Ala Arg Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala
50 55 60
Leu Arg Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys
65 70 75 80
Met Gly Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu
85 90 95
Asp Cys Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr
100 105 110
Arg Ser Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln
115 120 125
Arg Gln Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu
130 135 140
Pro Met Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His
145 150 155 160
Leu Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp
165 170 175
Pro Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe
180 185 190
Glu Lys
<210> 140
<211> 194
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 140
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ser Ser Pro Leu Val His Tyr Gly Trp
1 5 10 15
Gly Asp Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly
20 25 30
Leu Ser Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys
35 40 45
Ala Arg Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala
50 55 60
Leu Arg Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys
65 70 75 80
Met Gly Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu
85 90 95
Asp Cys Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr
100 105 110
Arg Ser Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln
115 120 125
Arg Gln Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu
130 135 140
Pro Met Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His
145 150 155 160
Leu Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp
165 170 175
Pro Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe
180 185 190
Glu Lys
<210> 141
<211> 188
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 141
Asp Ser Ser Pro Leu Val His Tyr Gly Trp Gly Asp Pro Ile Arg Leu
1 5 10 15
Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser Cys Phe Leu
20 25 30
Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly Gln Ser Ala
35 40 45
His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr Val Ala Ile
50 55 60
Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala Asp Gly Lys
65 70 75 80
Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala Phe Glu Glu
85 90 95
Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu Lys His Arg
100 105 110
Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu Tyr Lys Asn
115 120 125
Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu Pro Met Val
130 135 140
Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser Asp Met Phe
145 150 155 160
Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly Leu Val Thr
165 170 175
Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185
<210> 142
<211> 193
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 142
Arg His Pro Ile Pro Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Phe Gly Trp Gly
1 5 10 15
Asp Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu
20 25 30
Ser Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala
35 40 45
Arg Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu
50 55 60
Arg Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met
65 70 75 80
Gly Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp
85 90 95
Cys Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg
100 105 110
Ser Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg
115 120 125
Gln Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro
130 135 140
Met Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu
145 150 155 160
Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro
165 170 175
Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu
180 185 190
Lys
<210> 143
<211> 191
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 143
Arg His Pro Ile Pro Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Trp Gly Asp Pro
1 5 10 15
Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser
20 25 30
Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly
35 40 45
Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr
50 55 60
Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala
65 70 75 80
Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala
85 90 95
Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu
100 105 110
Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu
115 120 125
Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu
130 135 140
Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser
145 150 155 160
Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly
165 170 175
Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 144
<211> 194
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 144
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro Leu Leu Gln Phe Gly Trp
1 5 10 15
Gly Asp Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly
20 25 30
Leu Ser Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys
35 40 45
Ala Arg Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala
50 55 60
Leu Arg Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys
65 70 75 80
Met Gly Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu
85 90 95
Asp Cys Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr
100 105 110
Arg Ser Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln
115 120 125
Arg Gln Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu
130 135 140
Pro Met Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His
145 150 155 160
Leu Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp
165 170 175
Pro Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe
180 185 190
Glu Lys
<210> 145
<211> 193
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 145
Arg His Pro Ile Pro Asp Ser Ser Pro His Val His Tyr Gly Trp Gly
1 5 10 15
Asp Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu
20 25 30
Ser Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala
35 40 45
Arg Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu
50 55 60
Arg Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met
65 70 75 80
Gly Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp
85 90 95
Cys Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg
100 105 110
Ser Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg
115 120 125
Gln Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro
130 135 140
Met Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu
145 150 155 160
Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro
165 170 175
Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu
180 185 190
Lys
<210> 146
<211> 192
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 146
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro Leu Leu Gln Phe Gly Gly
1 5 10 15
Gln Val Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser
20 25 30
Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg
35 40 45
Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg
50 55 60
Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly
65 70 75 80
Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys
85 90 95
Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser
100 105 110
Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln
115 120 125
Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met
130 135 140
Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu
145 150 155 160
Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe
165 170 175
Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 147
<211> 191
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 147
Arg His Pro Ile Pro Asp Ser Ser Pro His Val His Tyr Gly Gly Gln
1 5 10 15
Val Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser
20 25 30
Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly
35 40 45
Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr
50 55 60
Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala
65 70 75 80
Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala
85 90 95
Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu
100 105 110
Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu
115 120 125
Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu
130 135 140
Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser
145 150 155 160
Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly
165 170 175
Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 148
<211> 187
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 148
Arg Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Phe Gly Gly Gln Val Arg Leu Arg
1 5 10 15
His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser Cys Phe Leu Arg
20 25 30
Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly Gln Ser Ala His
35 40 45
Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr Val Ala Ile Lys
50 55 60
Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala Asp Gly Lys Met
65 70 75 80
Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala Phe Glu Glu Glu
85 90 95
Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu Lys His Arg Leu
100 105 110
Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu Tyr Lys Asn Arg
115 120 125
Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu Pro Met Val Pro
130 135 140
Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser Asp Met Phe Ser
145 150 155 160
Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly Leu Val Thr Gly
165 170 175
Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185
<210> 149
<211> 192
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 149
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Phe Gly Gly
1 5 10 15
Gln Val Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser
20 25 30
Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg
35 40 45
Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg
50 55 60
Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly
65 70 75 80
Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys
85 90 95
Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser
100 105 110
Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln
115 120 125
Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met
130 135 140
Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu
145 150 155 160
Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe
165 170 175
Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 150
<211> 191
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 150
Arg His Pro Ile Pro Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Phe Gly Ala Gln
1 5 10 15
Val Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser
20 25 30
Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly
35 40 45
Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr
50 55 60
Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala
65 70 75 80
Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala
85 90 95
Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu
100 105 110
Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu
115 120 125
Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu
130 135 140
Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser
145 150 155 160
Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly
165 170 175
Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 151
<211> 191
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 151
Arg His Pro Ile Pro Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Phe Gly Asp Gln
1 5 10 15
Val Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser
20 25 30
Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly
35 40 45
Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr
50 55 60
Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala
65 70 75 80
Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala
85 90 95
Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu
100 105 110
Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu
115 120 125
Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu
130 135 140
Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser
145 150 155 160
Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly
165 170 175
Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 152
<211> 191
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 152
Arg His Pro Ile Pro Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Phe Gly Pro Gln
1 5 10 15
Val Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser
20 25 30
Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly
35 40 45
Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr
50 55 60
Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala
65 70 75 80
Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala
85 90 95
Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu
100 105 110
Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu
115 120 125
Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu
130 135 140
Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser
145 150 155 160
Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly
165 170 175
Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 153
<211> 191
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 153
Arg His Pro Ile Pro Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Phe Gly Gly Ala
1 5 10 15
Val Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser
20 25 30
Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly
35 40 45
Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr
50 55 60
Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala
65 70 75 80
Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala
85 90 95
Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu
100 105 110
Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu
115 120 125
Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu
130 135 140
Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser
145 150 155 160
Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly
165 170 175
Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 154
<211> 191
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 154
Arg His Pro Ile Pro Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Phe Gly Gly Glu
1 5 10 15
Val Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser
20 25 30
Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly
35 40 45
Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr
50 55 60
Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala
65 70 75 80
Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala
85 90 95
Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu
100 105 110
Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu
115 120 125
Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu
130 135 140
Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser
145 150 155 160
Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly
165 170 175
Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 155
<211> 191
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 155
Arg His Pro Ile Pro Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Phe Gly Gly Asn
1 5 10 15
Val Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser
20 25 30
Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly
35 40 45
Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr
50 55 60
Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala
65 70 75 80
Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala
85 90 95
Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu
100 105 110
Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu
115 120 125
Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu
130 135 140
Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser
145 150 155 160
Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly
165 170 175
Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 156
<211> 191
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 156
Arg His Pro Ile Pro Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Phe Gly Gly Gln
1 5 10 15
Ala Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser
20 25 30
Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly
35 40 45
Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr
50 55 60
Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala
65 70 75 80
Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala
85 90 95
Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu
100 105 110
Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu
115 120 125
Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu
130 135 140
Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser
145 150 155 160
Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly
165 170 175
Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 157
<211> 191
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 157
Arg His Pro Ile Pro Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Phe Gly Gly Gln
1 5 10 15
Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser
20 25 30
Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly
35 40 45
Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr
50 55 60
Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala
65 70 75 80
Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala
85 90 95
Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu
100 105 110
Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu
115 120 125
Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu
130 135 140
Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser
145 150 155 160
Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly
165 170 175
Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 158
<211> 191
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 158
Arg His Pro Ile Pro Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Phe Gly Gly Gln
1 5 10 15
Thr Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser
20 25 30
Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly
35 40 45
Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr
50 55 60
Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala
65 70 75 80
Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala
85 90 95
Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu
100 105 110
Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu
115 120 125
Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu
130 135 140
Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser
145 150 155 160
Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly
165 170 175
Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 159
<211> 193
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 159
Arg His Pro Ile Pro Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Phe Gly Trp Gly
1 5 10 15
Gln Pro Val Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu
20 25 30
Ser Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala
35 40 45
Arg Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu
50 55 60
Arg Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met
65 70 75 80
Gly Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp
85 90 95
Cys Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg
100 105 110
Ser Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg
115 120 125
Gln Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro
130 135 140
Met Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu
145 150 155 160
Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro
165 170 175
Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu
180 185 190
Lys
<210> 160
<211> 190
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 160
His Pro Ile Pro Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Phe Gly Gly Gln Val
1 5 10 15
Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser Cys
20 25 30
Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly Gln
35 40 45
Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr Val
50 55 60
Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala Asp
65 70 75 80
Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala Phe
85 90 95
Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu Lys
100 105 110
His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu Tyr
115 120 125
Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu Pro
130 135 140
Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser Asp
145 150 155 160
Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly Leu
165 170 175
Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 161
<211> 186
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 161
Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Phe Gly Gly Gln Val Arg Leu Arg His
1 5 10 15
Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser Cys Phe Leu Arg Ile
20 25 30
Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly Gln Ser Ala His Ser
35 40 45
Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr Val Ala Ile Lys Gly
50 55 60
Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala Asp Gly Lys Met Gln
65 70 75 80
Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala Phe Glu Glu Glu Ile
85 90 95
Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu Lys His Arg Leu Pro
100 105 110
Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu Tyr Lys Asn Arg Gly
115 120 125
Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu Pro Met Val Pro Glu
130 135 140
Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser
145 150 155 160
Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu
165 170 175
Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185
<210> 162
<211> 190
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 162
His Pro Ile Pro Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Trp Gly Asp Pro Ile
1 5 10 15
Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser Cys
20 25 30
Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly Gln
35 40 45
Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr Val
50 55 60
Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala Asp
65 70 75 80
Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala Phe
85 90 95
Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu Lys
100 105 110
His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu Tyr
115 120 125
Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu Pro
130 135 140
Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser Asp
145 150 155 160
Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly Leu
165 170 175
Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 163
<211> 192
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 163
His Pro Ile Pro Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Phe Gly Trp Gly Asp
1 5 10 15
Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser
20 25 30
Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg
35 40 45
Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg
50 55 60
Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly
65 70 75 80
Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys
85 90 95
Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser
100 105 110
Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln
115 120 125
Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met
130 135 140
Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu
145 150 155 160
Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe
165 170 175
Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 164
<211> 192
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 164
His Pro Ile Pro Asp Ser Ser Pro His Val His Tyr Gly Trp Gly Asp
1 5 10 15
Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser
20 25 30
Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg
35 40 45
Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg
50 55 60
Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly
65 70 75 80
Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys
85 90 95
Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser
100 105 110
Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln
115 120 125
Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met
130 135 140
Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu
145 150 155 160
Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe
165 170 175
Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 165
<211> 190
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 165
His Pro Ile Pro Asp Ser Ser Pro His Val His Tyr Gly Gly Gln Val
1 5 10 15
Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser Cys
20 25 30
Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly Gln
35 40 45
Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr Val
50 55 60
Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala Asp
65 70 75 80
Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala Phe
85 90 95
Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu Lys
100 105 110
His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu Tyr
115 120 125
Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu Pro
130 135 140
Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser Asp
145 150 155 160
Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly Leu
165 170 175
Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 166
<211> 188
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 166
Asp Ala Gly Pro His Val His Tyr Gly Trp Gly Asp Pro Ile Arg Leu
1 5 10 15
Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser Cys Phe Leu
20 25 30
Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly Gln Ser Ala
35 40 45
His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr Val Ala Ile
50 55 60
Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala Asp Gly Lys
65 70 75 80
Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala Phe Glu Glu
85 90 95
Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu Lys His Arg
100 105 110
Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu Tyr Lys Asn
115 120 125
Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu Pro Met Val
130 135 140
Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser Asp Met Phe
145 150 155 160
Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly Leu Val Thr
165 170 175
Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185
<210> 167
<211> 183
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 167
Val His Tyr Gly Trp Gly Asp Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr
1 5 10 15
Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp
20 25 30
Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu
35 40 45
Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser
50 55 60
Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu
65 70 75 80
Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp
85 90 95
Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu
100 105 110
Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro
115 120 125
Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu
130 135 140
Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu
145 150 155 160
Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val
165 170 175
Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180
<210> 168
<211> 174
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 168
Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser Cys
1 5 10 15
Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly Gln
20 25 30
Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr Val
35 40 45
Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala Asp
50 55 60
Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala Phe
65 70 75 80
Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu Lys
85 90 95
His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu Tyr
100 105 110
Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu Pro
115 120 125
Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser Asp
130 135 140
Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly Leu
145 150 155 160
Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
165 170
<210> 169
<211> 14
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический пептид
<400> 169
Trp Gly Asp Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly
1 5 10
<210> 170
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический пептид
<400> 170
Trp Gly Asp Pro Ile
1 5
<210> 171
<211> 4
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический пептид
<400> 171
Trp Gly Pro Ile
1
<210> 172
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический пептид
<400> 172
Trp Gly Asp Pro Val
1 5
<210> 173
<211> 4
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический пептид
<400> 173
Trp Gly Asp Ile
1
<210> 174
<211> 4
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический пептид
<400> 174
Gly Asp Pro Ile
1
<210> 175
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический пептид
<400> 175
Trp Gly Gln Pro Ile
1 5
<210> 176
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический пептид
<400> 176
Trp Gly Ala Pro Ile
1 5
<210> 177
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический пептид
<400> 177
Ala Gly Asp Pro Ile
1 5
<210> 178
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический пептид
<400> 178
Trp Ala Asp Pro Ile
1 5
<210> 179
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический пептид
<400> 179
Trp Gly Asp Ala Ile
1 5
<210> 180
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический пептид
<400> 180
Trp Gly Asp Pro Ala
1 5
<210> 181
<211> 4
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический пептид
<400> 181
Trp Asp Pro Ile
1
<210> 182
<211> 4
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический пептид
<400> 182
Trp Gly Asp Ile
1
<210> 183
<211> 4
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический пептид
<400> 183
Trp Gly Asp Pro
1
<210> 184
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический пептид
<400> 184
Phe Gly Asp Pro Ile
1 5
<210> 185
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический пептид
<400> 185
Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly
1 5
<210> 186
<211> 9
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> коровая последовательность
<400> 186
Arg Gln Arg Tyr Leu Tyr Thr Asp Asp
1 5
<210> 187
<211> 13
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетический пептид
<400> 187
Ala Gly Pro His Val His Tyr Gly Trp Gly Asp Pro Ile
1 5 10
<210> 188
<211> 165
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<220>
<223> C-концевая последовательность FGF19
<400> 188
Pro His Gly Leu Ser Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val
1 5 10 15
Val Asp Cys Ala Arg Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys
20 25 30
Ala Val Ala Leu Arg Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg
35 40 45
Tyr Leu Cys Met Gly Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr
50 55 60
Ser Glu Glu Asp Cys Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr
65 70 75 80
Asn Val Tyr Arg Ser Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser
85 90 95
Ala Lys Gln Arg Gln Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser
100 105 110
His Phe Leu Pro Met Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu
115 120 125
Arg Gly His Leu Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp
130 135 140
Ser Met Asp Pro Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser
145 150 155 160
Pro Ser Phe Glu Lys
165
<210> 189
<211> 5
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Последовательность линкера
<400> 189
Gly Gly Gly Ser Gly
1 5
<210> 190
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<220>
<223> Область лист-8/петля-8/лист-9 в FGF19
<400> 190
Glu Glu Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr
1 5 10
<210> 191
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<220>
<223> Область лист-8/петля-8/лист-9 в FGF21
<400> 191
Glu Leu Leu Leu Glu Asp Gly Tyr Asn Val Tyr
1 5 10
<210> 192
<211> 187
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Последовательность M53
<400> 192
Met Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Trp Gly Asp Pro Ile Arg Leu Arg
1 5 10 15
His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser Cys Phe Leu Arg
20 25 30
Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly Gln Ser Ala His
35 40 45
Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr Val Ala Ile Lys
50 55 60
Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala Asp Gly Lys Met
65 70 75 80
Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala Phe Glu Glu Glu
85 90 95
Ile Arg Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu Lys His Arg Leu
100 105 110
Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu Tyr Lys Asn Arg
115 120 125
Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu Pro Met Val Pro
130 135 140
Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser Asp Met Phe Ser
145 150 155 160
Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly Leu Val Thr Gly
165 170 175
Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185
<210> 193
<211> 194
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Последовательность M139
<400> 193
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro His Val His Tyr Gly Trp
1 5 10 15
Gly Asp Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly
20 25 30
Leu Ser Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys
35 40 45
Ala Arg Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala
50 55 60
Leu Arg Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys
65 70 75 80
Met Gly Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu
85 90 95
Asp Cys Ala Phe Glu Glu Glu Ile Leu Pro Asp Gly Tyr Asn Val Tyr
100 105 110
Arg Ser Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln
115 120 125
Arg Gln Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu
130 135 140
Pro Met Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His
145 150 155 160
Leu Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp
165 170 175
Pro Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe
180 185 190
Glu Lys
<210> 194
<211> 194
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Последовательность M140
<400> 194
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro His Val His Tyr Gly Trp
1 5 10 15
Gly Asp Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly
20 25 30
Leu Ser Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys
35 40 45
Ala Arg Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala
50 55 60
Leu Arg Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys
65 70 75 80
Met Gly Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu
85 90 95
Asp Cys Ala Phe Glu Glu Glu Ile Arg Glu Asp Gly Tyr Asn Val Tyr
100 105 110
Arg Ser Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln
115 120 125
Arg Gln Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu
130 135 140
Pro Met Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His
145 150 155 160
Leu Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp
165 170 175
Pro Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe
180 185 190
Glu Lys
<210> 195
<211> 194
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Последовательность M141
<400> 195
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro His Val His Tyr Gly Trp
1 5 10 15
Gly Asp Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly
20 25 30
Leu Ser Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys
35 40 45
Ala Arg Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala
50 55 60
Leu Arg Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys
65 70 75 80
Met Gly Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu
85 90 95
Asp Cys Ala Phe Glu Glu Glu Ile Leu Cys Asp Gly Tyr Asn Val Tyr
100 105 110
Arg Ser Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln
115 120 125
Arg Gln Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu
130 135 140
Pro Met Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His
145 150 155 160
Leu Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp
165 170 175
Pro Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe
180 185 190
Glu Lys
<210> 196
<211> 194
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Последовательность M160
<400> 196
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Gly Pro His Val His Tyr Gly Trp
1 5 10 15
Gly Asp Pro Ile Arg Gln Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly
20 25 30
Leu Ser Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys
35 40 45
Ala Arg Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala
50 55 60
Leu Arg Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys
65 70 75 80
Met Gly Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu
85 90 95
Asp Cys Ala Phe Glu Glu Glu Ile Leu Glu Asp Gly Tyr Asn Val Tyr
100 105 110
Arg Ser Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln
115 120 125
Arg Gln Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu
130 135 140
Pro Met Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His
145 150 155 160
Leu Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp
165 170 175
Pro Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe
180 185 190
Glu Lys
<210> 197
<211> 189
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Последовательность M200
<400> 197
Arg Asp Ser Ser Pro Leu Val His Tyr Gly Trp Gly Asp Pro Ile Arg
1 5 10 15
Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser Cys Phe
20 25 30
Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly Gln Ser
35 40 45
Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr Val Ala
50 55 60
Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala Asp Gly
65 70 75 80
Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala Phe Glu
85 90 95
Glu Glu Ile Leu Glu Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu Lys His
100 105 110
Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu Tyr Lys
115 120 125
Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu Pro Met
130 135 140
Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser Asp Met
145 150 155 160
Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly Leu Val
165 170 175
Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185
<210> 198
<211> 194
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Последовательность M201
<400> 198
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ser Ser Pro Leu Val His Tyr Gly Trp
1 5 10 15
Gly Asp Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly
20 25 30
Leu Ser Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys
35 40 45
Ala Arg Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala
50 55 60
Leu Arg Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys
65 70 75 80
Met Gly Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu
85 90 95
Asp Cys Ala Phe Glu Glu Glu Ile Leu Glu Asp Gly Tyr Asn Val Tyr
100 105 110
Arg Ser Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln
115 120 125
Arg Gln Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu
130 135 140
Pro Met Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His
145 150 155 160
Leu Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp
165 170 175
Pro Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe
180 185 190
Glu Lys
<210> 199
<211> 194
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Последовательность M202
<400> 199
Arg Pro Leu Ala Phe Ser Asp Ala Ser Pro His Val His Tyr Gly Trp
1 5 10 15
Gly Asp Pro Ile Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly
20 25 30
Leu Ser Ser Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys
35 40 45
Ala Arg Gly Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala
50 55 60
Leu Arg Thr Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys
65 70 75 80
Met Gly Ala Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu
85 90 95
Asp Cys Ala Phe Glu Glu Glu Ile Leu Glu Asp Gly Tyr Asn Val Tyr
100 105 110
Arg Ser Glu Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln
115 120 125
Arg Gln Leu Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu
130 135 140
Pro Met Leu Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His
145 150 155 160
Leu Glu Ser Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp
165 170 175
Pro Phe Gly Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe
180 185 190
Glu Lys
<210> 200
<211> 187
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Последовательность M203
<400> 200
Arg Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Trp Gly Asp Pro Ile Arg Leu Arg
1 5 10 15
His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser Cys Phe Leu Arg
20 25 30
Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly Gln Ser Ala His
35 40 45
Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr Val Ala Ile Lys
50 55 60
Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala Asp Gly Lys Met
65 70 75 80
Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala Phe Glu Glu Glu
85 90 95
Ile Leu Glu Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu Lys His Arg Leu
100 105 110
Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu Tyr Lys Asn Arg
115 120 125
Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu Pro Met Val Pro
130 135 140
Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser Asp Met Phe Ser
145 150 155 160
Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly Leu Val Thr Gly
165 170 175
Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185
<210> 201
<211> 191
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Последовательность M204
<400> 201
Arg His Pro Ile Pro Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Phe Gly Asp Gln
1 5 10 15
Val Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser
20 25 30
Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly
35 40 45
Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr
50 55 60
Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala
65 70 75 80
Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala
85 90 95
Phe Glu Glu Glu Ile Leu Glu Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu
100 105 110
Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu
115 120 125
Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu
130 135 140
Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser
145 150 155 160
Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly
165 170 175
Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 202
<211> 187
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Последовательность M205
<400> 202
Arg Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Phe Gly Gly Gln Val Arg Leu Arg
1 5 10 15
His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser Cys Phe Leu Arg
20 25 30
Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly Gln Ser Ala His
35 40 45
Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr Val Ala Ile Lys
50 55 60
Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala Asp Gly Lys Met
65 70 75 80
Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala Phe Glu Glu Glu
85 90 95
Ile Leu Glu Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu Lys His Arg Leu
100 105 110
Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu Tyr Lys Asn Arg
115 120 125
Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu Pro Met Val Pro
130 135 140
Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser Asp Met Phe Ser
145 150 155 160
Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly Leu Val Thr Gly
165 170 175
Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185
<210> 203
<211> 191
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Последовательность M206
<400> 203
Arg His Pro Ile Pro Asp Ser Ser Pro Leu Leu Gln Phe Gly Gly Gln
1 5 10 15
Val Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser
20 25 30
Cys Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly
35 40 45
Gln Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr
50 55 60
Val Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala
65 70 75 80
Asp Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala
85 90 95
Phe Glu Glu Glu Ile Leu Glu Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu
100 105 110
Lys His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu
115 120 125
Tyr Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu
130 135 140
Pro Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser
145 150 155 160
Asp Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly
165 170 175
Leu Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 204
<211> 190
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Последовательность M207
<400> 204
Met Arg Asp Ser Ser Pro Leu Val His Tyr Gly Trp Gly Asp Pro Ile
1 5 10 15
Arg Leu Arg His Leu Tyr Thr Ser Gly Pro His Gly Leu Ser Ser Cys
20 25 30
Phe Leu Arg Ile Arg Ala Asp Gly Val Val Asp Cys Ala Arg Gly Gln
35 40 45
Ser Ala His Ser Leu Leu Glu Ile Lys Ala Val Ala Leu Arg Thr Val
50 55 60
Ala Ile Lys Gly Val His Ser Val Arg Tyr Leu Cys Met Gly Ala Asp
65 70 75 80
Gly Lys Met Gln Gly Leu Leu Gln Tyr Ser Glu Glu Asp Cys Ala Phe
85 90 95
Glu Glu Glu Ile Leu Glu Asp Gly Tyr Asn Val Tyr Arg Ser Glu Lys
100 105 110
His Arg Leu Pro Val Ser Leu Ser Ser Ala Lys Gln Arg Gln Leu Tyr
115 120 125
Lys Asn Arg Gly Phe Leu Pro Leu Ser His Phe Leu Pro Met Leu Pro
130 135 140
Met Val Pro Glu Glu Pro Glu Asp Leu Arg Gly His Leu Glu Ser Asp
145 150 155 160
Met Phe Ser Ser Pro Leu Glu Thr Asp Ser Met Asp Pro Phe Gly Leu
165 170 175
Val Thr Gly Leu Glu Ala Val Arg Ser Pro Ser Phe Glu Lys
180 185 190
<210> 205
<211> 11
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Модифицированная область лист-8/петля-8/лист-9 в FGF19
<400> 205
Glu Glu Ile Leu Glu Asp Gly Tyr Asn Val Tyr
1 5 10
<---
Claims (140)
1. Фармацевтическая композиция для контроля или лечения заболевания или нарушения, ассоциированного с FGF19, у субъекта, где композиция содержит:
a. пептид имеющий аминокислотную последовательность, включающую или состоящую из SEQ ID NO: 70, в концентрации от 1 до 10 мг/мл; и
b. фармацевтически приемлемый носитель, содержащий:
i. Tris, который присутствует в диапазоне 5-50 мМ Tris,
ii. трегалозу, которая присутствует в диапазоне 1-20% (масс/об), и
iii. полисорбат-20 (TWEEN-20), который присутствует в диапазоне 0,001-0,1%.
2. Фармацевтическая композиция по п.1, где пептид имеет аминокислотную последовательность, содержащую SEQ ID NO: 70.
3. Фармацевтическая композиция по п.1, где пептид имеет аминокислотную последовательность, состоящую из SEQ ID NO: 70.
4. Фармацевтическая композиция по п.1, содержащая пептид в концентрации 1 мг/мл.
5. Фармацевтическая композиция по п.1, содержащая пептид в концентрации 5 мг/мл.
6. Фармацевтическая композиция по п.1, содержащая пептид в концентрации 10 мг/мл.
7. Фармацевтическая композиция по п.1, где Tris присутствует в диапазоне от 10 до 45 мМ.
8. Фармацевтическая композиция по п.1, где Tris присутствует в диапазоне от 10 до 20 мМ.
9. Фармацевтическая композиция по п.1, где Tris присутствует в диапазоне от 15 до 40 мМ.
10. Фармацевтическая композиция по п.1, где Tris присутствует в диапазоне от 20 до 35 мМ.
11. Фармацевтическая композиция по п.1, где Tris присутствует в диапазоне от 20 до 30 мМ.
12. Фармацевтическая композиция по п.1, где Tris присутствует в диапазоне от 20 до 25 мМ.
13. Фармацевтическая композиция по п.1, где Tris присутствует в концентрации 20 мМ.
14. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой трегалоза присутствует в диапазоне от 2 до 15%.
15. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой трегалоза присутствует в диапазоне от 3 до 10%.
16. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой трегалоза присутствует в диапазоне от 4 до 9,5%.
17. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой трегалоза присутствует в диапазоне от 5 до 9,25%.
18. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой трегалоза присутствует в диапазоне от 6 до 9%.
19. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой трегалоза присутствует в диапазоне от 7 до 8,5%.
20. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой трегалоза присутствует в диапазоне от 8 до 8,4%.
21. Фармацевтическая композиция по п.1, где трегалоза присутствует в количестве 8,2%.
22. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой трегалоза присутствует в количестве 8,3%.
23. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой трегалоза присутствует в количестве 8,4%.
24. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой трегалоза присутствует в диапазоне от 9,2% до 9,3%.
25. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой трегалоза присутствует в количестве 9,3%.
26. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой концентрация полисорбата-20 находится в диапазоне от 0,0025 до 0,075% (об./об.).
27. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой концентрация полисорбата-20 находится в диапазоне от 0,005 до 0,05% (об./об.).
28. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой концентрация полисорбата-20 находится в диапазоне от 0,0075 до 0,025% (об./об.).
29. Фармацевтическая композиция по п.1, где концентрация полисорбата-20 составляет 0,01% (об./об.).
30. Фармацевтическая композиция по п.1, в которой концентрация полисорбата-20 составляет 0,02% (об./об.).
31. Фармацевтическая композиция по п.1, отличающаяся тем, что фармацевтическая композиция имеет рН в диапазоне 7,0-9,0 при 4°С или 25°С.
32. Фармацевтическая композиция по п.1, отличающаяся тем, что фармацевтическая композиция имеет рН в диапазоне 7,5-8,5 при 4°С или 25°С.
33. Фармацевтическая композиция по п.1, отличающаяся тем, что фармацевтическая композиция имеет рН 8,0 при 4°С.
34. Фармацевтическая композиция по п.1, отличающаяся тем, что фармацевтическая композиция имеет рН 8,0 при 25°С.
35. Фармацевтическая композиция для контроля или лечения заболевания или нарушения, ассоциированного с FGF19, у субъекта, где композиция содержит:
a. пептид, имеющий аминокислотную последовательность, состоящую из SEQ ID NO: 70, находящийся в концентрации от 1 до 10 мг/мл, и
b. фармацевтически приемлемый носитель, содержащий:
i. 20 мМ Tris,
ii. от 8,2% до 8,4% (масс./об.) трегалозы, и
iii. 0,01% (об./об.) полисорбата-20, и,
где фармацевтическая композиция имеет pH 8,0 при 25°C.
36. Фармацевтическая композиция по п.35, в которой пептид присутствует в концентрации 1 мг/мл.
37. Фармацевтическая композиция по п.35, в которой пептид присутствует в концентрации 5 мг/мл.
38. Фармацевтическая композиция по п.35, в которой пептид присутствует в концентрации 10 мг/мл.
39. Фармацевтическая композиция для контроля или лечения заболевания или нарушения, ассоциированного с FGF19, у субъекта, где композиция содержит:
a. пептид, имеющий аминокислотную последовательность, состоящую из SEQ ID NO: 70, находящийся в концентрации от 1 до 10 мг/мл, и
b. фармацевтически приемлемый носитель, содержащий:
i. 20 мМ Tris,
ii. от 9,2% до 9,3% трегалозы, и
iii. 0,01% (об./об.) полисорбата-20, и,
где фармацевтическая композиция имеет pH 8,0 при 25°C.
40. Фармацевтическая композиция по п.39, в которой пептид присутствует в концентрации 1 мг/мл.
41. Фармацевтическая композиция по п.39, в которой пептид присутствует в концентрации 5 мг/мл.
42. Фармацевтическая композиция по п.39, в которой пептид присутствует в концентрации 10 мг/мл.
43. Фармацевтическая композиция для контроля или лечения заболевания или нарушения, ассоциированного с FGF19, у субъекта, где композиция содержит:
a. пептид, имеющий аминокислотную последовательность, состоящую из SEQ ID NO: 70, находящийся в концентрации от 1 до 10 мг/мл, и
b. фармацевтически приемлемый носитель, содержащий:
i. Tris, который присутствует в диапазоне 10-20 мМ;
ii. от 9,2% до 9,3% (масс./об.) трегалозы, и
iii. полисорбат-20, который присутствует в диапазоне от 0,0075 до 0,25% (об./об.).
44. Фармацевтическая композиция по п.43, в которой пептид присутствует в концентрации 1 мг/мл.
45. Фармацевтическая композиция по п.43, а которой пептид присутствует в концентрации 5 мг/мл.
46. Фармацевтическая композиция по п.43, в которой пептид присутствует в концентрации 10 мг/мл.
47. Фармацевтическая композиция по п.43, отличающаяся тем, что фармацевтическая композиция имеет рН в диапазоне 7,0-9,0 при 4°С или 25°С.
48. Фармацевтическая композиция по п.43, отличающаяся тем, что фармацевтическая композиция имеет рН в диапазоне от 7,5 до 8,5 при 4°С или 25°С.
49. Фармацевтическая композиция по п.43, отличающаяся тем, что фармацевтическая композиция имеет рН 8,0 при 4°С.
50. Фармацевтическая композиция по п.43, отличающаяся тем, что фармацевтическая композиция имеет рН 8,0 при 25°С.
51. Фармацевтическая композиция по любому из пп.1-50, в которой пептид слит с Fc-областью иммуноглобулина.
52. Фармацевтическая композиция по любому из пп.1-50, отличающаяся тем, что фармацевтическая композиция не содержит соль.
53. Фармацевтическая композиция по любому из пп.1-50, отличающаяся тем, что фармацевтическая композиция не содержит NaCl.
54. Фармацевтическая композиция по любому из пп.1-50, в которой менее 10% пептидных агрегатов образуется через определенный промежуток времени при хранении при 4 или 37°С.
55. Фармацевтическая композиция по п.54, в которой период времени составляет 4 недели при 4°С.
56. Фармацевтическая композиция по п.54, в которой период времени составляет 4 недели при 37°С.
57. Фармацевтическая композиция по любому из пп.1-50, в которой менее 5% пептидных агрегатов образуется через определенный период времени при хранении при 4 или 37°С.
58. Фармацевтическая композиция по п.57, в которой период времени составляет 4 недели при 4°С.
59. Фармацевтическая композиция по п.57, в которой период времени составляет 4 недели при 37°С.
60. Фармацевтическая композиция по любому из пп.1-50, в которой менее 2% пептидных агрегатов образуется через определенный период времени при хранении при 4 или 37°С.
61. Фармацевтическая композиция по п.60, в которой период времени составляет 4 недели при 4°С.
62. Фармацевтическая композиция по п.60, в которой период времени составляет 4 недели при 37°С.
63. Фармацевтическая композиция по любому из пп.1-50, отличающаяся тем, что фармацевтическая композиция находится в жидкой форме.
64. Фармацевтическая композиция по п.63, в которой менее чем 10% пептидных агрегатов образуется через определенный период времени при хранении при 4 или 37°С.
65. Фармацевтическая композиция по п.64, в которой период времени составляет 4 недели при 4°С.
66. Фармацевтическая композиция по п.64, в которой период времени составляет 4 недели при 37°С.
67. Фармацевтическая композиция по п.63, в которой менее 5% пептидных агрегатов образуется через определенный период времени при хранении при 4 или 37°С.
68. Фармацевтическая композиция по п.67, в которой период времени составляет 4 недели при 4°С.
69. Фармацевтическая композиция по п.67, в которой период времени составляет 4 недели при 37°С.
70. Фармацевтическая композиция по п.63, в которой менее 2% пептидных агрегатов образуется через определенный период времени при хранении при 4 или 37°С.
71. Фармацевтическая композиция по п.70, в которой период времени составляет 4 недели при 4°С.
72. Фармацевтическая композиция по п.70, в которой период времени составляет 4 недели при 37°С.
73. Фармацевтическая композиция по любому из пп.1-50, отличающаяся тем, что композиция представлена в одноразовом контейнере.
74. Фармацевтическая композиция по любому из пп.1-50, отличающаяся тем, что композиция предоставляется в шприце или автоинъекторе.
75. Фармацевтическая композиция по любому из пп.1-50, отличающаяся тем, что композиция представлена в многоразовом контейнере.
76. Фармацевтическая композиция по п.63, отличающаяся тем, что композиция представлена в одноразовом контейнере.
77. Фармацевтическая композиция по п.63, отличающаяся тем, что композиция предоставляется в виде шприца или автоинъектора.
78. Фармацевтическая композиция по п.63, отличающаяся тем, что композиция представлена в многоразовом контейнере.
79. Способ предотвращения, лечения или контроля заболевания или нарушения, ассоциированного с FGF19, у субъекта, включающий введение субъекту эффективного количества фармацевтической композиции по любому из пп.1-50.
80. Способ по п.79, в котором заболевание или нарушение включает нарушение гомеостаза желчных кислот, либо связанное с гомеостазом желчных кислот или сопутствующее заболевание.
81. Способ по п.79, в котором заболевание или нарушение представляет собой заболевание или нарушение, выбранное из группы, состоящей из метаболического синдрома; нарушения метаболизма липидов или глюкозы; нарушения метаболизма холестерина или триглицеридов; диабета 2 типа; холестаза, внутрипеченочного холестаза, первичного билиарного цирроза (PBC), первичного семейного внутрипеченочного холестаза (PFIC), прогрессирующего PFIC, первичного склерозирующего холангита (PSC), внутрипеченочного холестаза беременных (PIC), неонатального холестаза и медикаментозного холестаза, заболеваний внепеченочного холестаза, сжатия желчных протоков из-за опухоли, блокирования желчных протоков желчными камнями, синдрома недостаточности всасывания желчных кислот и других заболеваний с вовлечением дистального отдела тонкого кишечника, резекции подвздошной кишки, воспалительных заболеваний кишечника, болезни Крона, язвенного колита, идиопатических нарушений, приводящих к уменьшению всасывания желчных кислот, диареи, хологенной диареи (BAD), ЖК симптомов, рака ЖК тракта, рака печени, рака желчных протоков, рака толстого кишечника, печеночно-клеточного рака, аномалий синтеза желчных кислот, неалкогольного стеатогепатита (NASH), цирроза и портальной гипертензии, а также их сочетаний.
82. Способ по п.81, в котором заболевание или нарушение представляет собой синдром недостаточности всасывания желчных кислот или диарею.
83. Способ по п.81, в котором заболевание или нарушение представляет собой холестаз или первичный билиарный цирроз.
84. Способ по п.81, в котором заболевание или нарушение представляет собой первичный склерозирующий холангит.
85. Способ по п.81, а котором заболевание или нарушение представляет собой PFIC или прогрессирующий PFIC.
86. Способ по п.81, в котором заболевание или нарушение представляет собой неалкогольный стеатогепатит (NASH).
87. Способ по п.79, в котором заболевание или нарушение представляет собой фиброз печени.
88. Способ по п.79, в котором заболевание или нарушение представляет собой цирроз печени.
89. Способ по п.79, в котором заболевание или нарушение включает метаболическое нарушение.
90. Способ по п.89, в котором метаболическое нарушение представляет собой гипергликемическое состояние, устойчивость к инсулину, гиперинсулинемию, непереносимость глюкозы или метаболический синдром.
91. Способ по п.90, в котором гипергликемическое состояние представляет собой диабет.
92. Способ по п.90, в котором гипергликемическое состояние представляет собой инсулинозависимый диабет (I типа), диабет II типа или гестационный диабет.
93. Способ по п.81, в котором заболевание или нарушение представляет собой рак или опухоль.
94. Способ по п.93, в котором рак или опухоль представляет собой FGF19-зависимый рак или опухоль.
95. Способ по п.94, в котором рак или опухоль представляет собой печеночно-клеточную карциному.
96. Способ по п.94, в котором рак или опухоль представляет собой рак или опухоль толстого кишечника.
97. Способ по п.94, в котором рак или опухоль представляет собой рак или опухоль предстательной железы.
98. Способ по п.94, в котором рак или опухоль представляет собой рак или опухоль легкого.
99. Применение фармацевтической композиции по любому из пп. 1-50 для предотвращения, лечения или контроля заболевания или нарушения, ассоциированного с FGF19, у субъекта.
100. Применение по п.99, в котором заболевание или нарушение включает нарушение гомеостаза желчных кислот или связанное с гомеостазом желчных кислот или сопутствующее заболевание.
101. Применение по п.99, в котором заболевание или нарушение представляет собой заболевание или нарушение, выбранное из группы, состоящей из метаболического синдрома; нарушения метаболизма липидов или глюкозы; нарушения метаболизма холестерина или триглицеридов; диабета 2 типа; холестаза, внутрипеченочного холестаза, первичного билиарного цирроза (PBC), первичного семейного внутрипеченочного холестаза (PFIC), прогрессирующего PFIC, первичного склерозирующего холангита (PSC), внутрипеченочного холестаза беременных (PIC), неонатального холестаза и медикаментозного холестаза, заболеваний внепеченочного холестаза, сжатия желчных протоков из-за опухоли, блокирования желчных протоков желчными камнями, синдрома недостаточности всасывания желчных кислот и других заболеваний с вовлечением дистального отдела тонкого кишечника, резекции подвздошной кишки, воспалительных заболеваний кишечника, болезни Крона, язвенного колита, идиопатических нарушений, приводящих к уменьшению всасывания желчных кислот, диареи, хологенной диареи (BAD), ЖК симптомов, рака ЖК тракта, рака печени, рака желчных протоков, рака толстого кишечника, печеночно-клеточного рака, аномалий синтеза желчных кислот, неалкогольного стеатогепатита (NASH), цирроза и портальной гипертензии, а также их сочетаний.
102. Применение по п.101, в котором заболевание или нарушение представляет собой синдром недостаточности всасывания желчных кислот или диарею.
103. Применение по п.101, в котором заболевание или нарушение представляет собой холестаз или первичный билиарный цирроз.
104. Применение по п.101, в котором заболевание или нарушение представляет собой первичный склерозирующий холангит.
105. Применение по п.101, в котором заболевание или нарушение представляет собой PFIC или прогрессирующий PFIC.
106. Применение по п.101, в котором заболевание или нарушение представляет собой неалкогольный стеатогепатит (NASH).
107. Применение по п.99, в котором заболевание или нарушение представляет собой фиброз печени.
108. Применение по п.99, в котором заболевание или нарушение представляет собой цирроз печени.
109. Применение по п.99, в котором заболевание или нарушение включает метаболическое нарушение.
110. Применение по п.99, в котором метаболическое нарушение представляет собой гипергликемическое состояние, устойчивость к инсулину, гиперинсулинемию, непереносимость глюкозы или метаболический синдром.
111. Применение по п.110, в котором гипергликемическое состояние представляет собой диабет.
112. Применение по п.110, в котором гипергликемическое состояние представляет собой инсулинозависимый диабет (I типа), диабет II типа или гестационный диабет.
113. Применение по п.99, в котором заболевание или нарушение представляет собой рак или опухоль.
114. Применение по п.113, в котором рак или опухоль представляет собой FGF19-зависимый рак или опухоль.
115. Применение по п.114, в котором рак или опухоль представляет собой печеночно-клеточную карциному.
116. Применение по п.114, в котором рак или опухоль представляет собой рак или опухоль толстого кишечника.
117. Применение по п.114, в котором рак или опухоль представляет собой рак или опухоль предстательной железы.
118. Применение по п.114, в котором рак или опухоль представляет собой рак или опухоль легкого.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201462067824P | 2014-10-23 | 2014-10-23 | |
US62/067,824 | 2014-10-23 | ||
PCT/US2015/056830 WO2016065106A1 (en) | 2014-10-23 | 2015-10-22 | Pharmaceutical compositions comprising peptide variants and methods of use thereof |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2017112738A RU2017112738A (ru) | 2018-11-26 |
RU2017112738A3 RU2017112738A3 (ru) | 2019-10-15 |
RU2729161C2 true RU2729161C2 (ru) | 2020-08-04 |
Family
ID=55761522
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2017112738A RU2729161C2 (ru) | 2014-10-23 | 2015-10-22 | Фармацевтические композиции, содержащие варианты пептидов, и способы их применения |
Country Status (14)
Country | Link |
---|---|
US (3) | US10517929B2 (ru) |
EP (1) | EP3209681A4 (ru) |
JP (2) | JP6949711B2 (ru) |
KR (1) | KR102569907B1 (ru) |
CN (2) | CN107108711B (ru) |
AU (1) | AU2015335844B2 (ru) |
BR (1) | BR112017007816A2 (ru) |
CA (1) | CA2964782A1 (ru) |
IL (1) | IL251834B2 (ru) |
MX (1) | MX2017004488A (ru) |
RU (1) | RU2729161C2 (ru) |
SG (1) | SG11201702757YA (ru) |
UA (1) | UA123763C2 (ru) |
WO (1) | WO2016065106A1 (ru) |
Families Citing this family (24)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
MY163674A (en) | 2011-07-01 | 2017-10-13 | Ngm Biopharmaceuticals Inc | Compositions, uses and method for treatment of metabolic disorders and diseases |
US9290557B2 (en) | 2012-11-28 | 2016-03-22 | Ngm Biopharmaceuticals, Inc. | Compositions comprising variants and fusions of FGF19 polypeptides |
AU2013352363B2 (en) | 2012-11-28 | 2018-04-12 | Ngm Biopharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for treatment of metabolic disorders and diseases |
DK2938740T3 (da) | 2012-12-27 | 2022-06-20 | Ngm Biopharmaceuticals Inc | Kimære fgf19-peptider til anvendelse til behandling af galdesyrelidelser |
US9273107B2 (en) | 2012-12-27 | 2016-03-01 | Ngm Biopharmaceuticals, Inc. | Uses and methods for modulating bile acid homeostasis and treatment of bile acid disorders and diseases |
SG11201602870YA (en) | 2013-10-28 | 2016-05-30 | Ngm Biopharmaceuticals Inc | Cancer models and associated methods |
UA119863C2 (uk) | 2014-01-24 | 2019-08-27 | Нгм Біофармасьютікалс, Інк. | Антитіло або його фрагмент, що зв'язується з бета-клото |
WO2015183890A2 (en) | 2014-05-28 | 2015-12-03 | Ngm Biopharmaceuticals, Inc. | Methods and compositions for the treatment of metabolic disorders and diseases |
AU2015277438B2 (en) | 2014-06-16 | 2020-02-27 | Ngm Biopharmaceuticals, Inc. | Methods and uses for modulating bile acid homeostasis and treatment of bile acid disorders and diseases |
CN107108711B (zh) | 2014-10-23 | 2021-11-23 | 恩格姆生物制药公司 | 包含肽变异体的药物组合物及其使用方法 |
US10434144B2 (en) | 2014-11-07 | 2019-10-08 | Ngm Biopharmaceuticals, Inc. | Methods for treatment of bile acid-related disorders and prediction of clinical sensitivity to treatment of bile acid-related disorders |
US10800843B2 (en) | 2015-07-29 | 2020-10-13 | Ngm Biopharmaceuticals, Inc. | Beta klotho-binding proteins |
JP6728352B2 (ja) | 2015-11-09 | 2020-07-22 | エヌジーエム バイオファーマシューティカルス,インコーポレーテッド | 胆汁酸に関係した障害の治療方法 |
US11318186B2 (en) | 2016-05-25 | 2022-05-03 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Use of FGF21 in methods of increasing exocrine pancreatic secretion |
AU2017315459B2 (en) | 2016-08-26 | 2023-06-29 | Ngm Biopharmaceuticals, Inc. | Methods of treating fibroblast growth factor 19-mediated cancers and tumors |
CA3034435A1 (en) * | 2016-08-29 | 2018-03-08 | Lei Ling | Methods for treatment of bile acid-related disorders |
US11524029B2 (en) | 2018-08-13 | 2022-12-13 | Viscera Labs, Inc. | Therapeutic composition and methods |
US11590161B2 (en) | 2018-08-13 | 2023-02-28 | Viscera Labs, Inc. | Therapeutic composition and methods |
CN112386575B (zh) * | 2019-08-19 | 2023-03-21 | 鲁南制药集团股份有限公司 | 一种代谢调节融合蛋白的冻干制剂 |
CN111420030B (zh) * | 2020-05-12 | 2021-01-29 | 江南大学 | Fgf21在制备用于治疗结直肠癌药物中的应用 |
CN117120070A (zh) * | 2021-03-11 | 2023-11-24 | 89生物公司 | 包含突变型fgf-21肽peg化缀合物的液体制剂 |
US11596669B2 (en) * | 2021-03-11 | 2023-03-07 | 89Bio, Inc. | Liquid formulations comprising mutant FGF-21 peptide pegylated conjugates |
CN112851791B (zh) * | 2021-03-12 | 2021-10-22 | 江南大学 | 一种新型抗代谢紊乱的fgf类似物及其应用 |
CN113105561B (zh) * | 2021-04-30 | 2021-12-03 | 江南大学 | 一种双靶点融合蛋白的制备方法和应用 |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2365382C2 (ru) * | 2004-04-14 | 2009-08-27 | Дженентек, Инк. | Композиции и способы для регуляции развития сосудов |
US8293241B2 (en) * | 2006-02-10 | 2012-10-23 | Genentech, Inc. | Anti-FGF19 antibodies and methods using same |
WO2013154206A1 (ja) * | 2012-04-09 | 2013-10-17 | 第一三共株式会社 | 抗fgfr2抗体 |
WO2014105849A1 (en) * | 2012-12-28 | 2014-07-03 | Xoma (Us) Llc | Antibodies specific for fgfr4 and methods of use |
Family Cites Families (199)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3881A (en) * | 1845-01-10 | Apparatus por drying the sizing on cotton | ||
US4235871A (en) | 1978-02-24 | 1980-11-25 | Papahadjopoulos Demetrios P | Method of encapsulating biologically active materials in lipid vesicles |
US4501728A (en) | 1983-01-06 | 1985-02-26 | Technology Unlimited, Inc. | Masking of liposomes from RES recognition |
US4837028A (en) | 1986-12-24 | 1989-06-06 | Liposome Technology, Inc. | Liposomes with enhanced circulation time |
US5273876A (en) | 1987-06-26 | 1993-12-28 | Syntro Corporation | Recombinant human cytomegalovirus containing foreign gene |
WO1990009441A1 (en) | 1989-02-01 | 1990-08-23 | The General Hospital Corporation | Herpes simplex virus type i expression vector |
US5614396A (en) | 1990-06-14 | 1997-03-25 | Baylor College Of Medicine | Methods for the genetic modification of endogenous genes in animal cells by homologous recombination |
WO1992003917A1 (en) | 1990-08-29 | 1992-03-19 | Genpharm International | Homologous recombination in mammalian cells |
US5252714A (en) | 1990-11-28 | 1993-10-12 | The University Of Alabama In Huntsville | Preparation and use of polyethylene glycol propionaldehyde |
GB9105383D0 (en) | 1991-03-14 | 1991-05-01 | Immunology Ltd | An immunotherapeutic for cervical cancer |
FR2686899B1 (fr) | 1992-01-31 | 1995-09-01 | Rhone Poulenc Rorer Sa | Nouveaux polypeptides biologiquement actifs, leur preparation et compositions pharmaceutiques les contenant. |
AU3972893A (en) | 1992-04-03 | 1993-11-08 | Baylor College Of Medicine | Gene therapy using the intestine |
US5674703A (en) | 1992-12-02 | 1997-10-07 | Woo; Savio L. C. | Episomal vector systems and related methods |
AU684524B2 (en) | 1993-06-14 | 1997-12-18 | Tet Systems Holding Gmbh & Co. Kg | Tight control of gene expression in eucaryotic cells by tetracycline-responsive promoters |
US5919455A (en) | 1993-10-27 | 1999-07-06 | Enzon, Inc. | Non-antigenic branched polymer conjugates |
US5643575A (en) | 1993-10-27 | 1997-07-01 | Enzon, Inc. | Non-antigenic branched polymer conjugates |
EP0728202A4 (en) | 1993-11-12 | 1997-04-23 | Univ Case Western Reserve | EPISOMIC EXPRESSION VECTOR FOR HUMAN GENE THERAPY |
US5731172A (en) | 1994-03-09 | 1998-03-24 | Sumitomo Pharmaceuticals Company, Ltd. | Recombinant adenovirus and process for producing the same |
US5604090A (en) | 1994-06-06 | 1997-02-18 | Fred Hutchinson Cancer Research Center | Method for increasing transduction of cells by adeno-associated virus vectors |
US5693508A (en) | 1994-11-08 | 1997-12-02 | Chang; Lung-Ji | Retroviral expression vectors containing MoMLV/CMV-IE/HIV-TAR chimeric long terminal repeats |
US5932462A (en) | 1995-01-10 | 1999-08-03 | Shearwater Polymers, Inc. | Multiarmed, monofunctional, polymer for coupling to molecules and surfaces |
JP3770333B2 (ja) | 1995-03-15 | 2006-04-26 | 大日本住友製薬株式会社 | 組換えdnaウイルスおよびその製造方法 |
US6110456A (en) | 1995-06-07 | 2000-08-29 | Yale University | Oral delivery or adeno-associated viral vectors |
US5695977A (en) | 1995-08-31 | 1997-12-09 | Genetic Information Research Institute | Site directed recombination |
US6013516A (en) | 1995-10-06 | 2000-01-11 | The Salk Institute For Biological Studies | Vector and method of use for nucleic acid delivery to non-dividing cells |
DE69708318T3 (de) | 1996-08-27 | 2006-11-16 | Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc., Emeryville | Neisseria meningitidis serogruppe b glykokonjugate und verfahren zu deren verwendung |
US20060246540A1 (en) | 1997-08-26 | 2006-11-02 | Ashkenazi Avi J | Secreted and transmembrane polypeptides and nucleic acids encoding the same |
US20020042367A1 (en) | 1997-11-25 | 2002-04-11 | Genentech, Inc. | Fibroblast growth factor-19 (FGF-19) nucleic acids and polypeptides and methods of use for the treatment of obesity and related disorders |
US20020012961A1 (en) | 1999-04-15 | 2002-01-31 | Genentech, Inc. | Fibroblast growth factor- 19 |
US6806352B2 (en) | 1997-09-17 | 2004-10-19 | Genentech, Inc. | Secreted and transmembrane polypeptides and nucleic acids encoding the same |
US20030113718A1 (en) | 1997-09-17 | 2003-06-19 | Genentech, Inc. | Secreted and transmembrane polypeptides and nucleic acids encoding the same |
CA2303834A1 (en) | 1997-09-17 | 1999-03-25 | Genentech, Inc. | Secreted and transmembrane polypeptides and nucleic acids encoding the same |
US20030077654A1 (en) | 1997-09-17 | 2003-04-24 | Genentech, Inc. | Secreted and transmembrane polypeptides and nucleic acids encoding the same |
US20050026832A1 (en) | 1997-11-25 | 2005-02-03 | Genentech, Inc. | Fibroblast growth factor-19 (FGF-19) nucleic acids and polypeptides and methods of use for the treatment of obesity and related disorders |
US20020155543A1 (en) | 1997-11-25 | 2002-10-24 | Genentech, Inc. | Fibroblast growth factor-19 (FGF-19) nucleic acids and polypeptides and methods of use for the treatment of obesity and related disorders |
US20040126852A1 (en) | 1997-11-25 | 2004-07-01 | Genentech, Inc. | Fibroblast growth factor-19 (FGF-19) nucleic acids and polypeptides and methods of use for the treatment of obesity |
US5985263A (en) | 1997-12-19 | 1999-11-16 | Enzon, Inc. | Substantially pure histidine-linked protein polymer conjugates |
CZ307715B6 (cs) * | 1999-02-22 | 2019-03-06 | University Of Connecticut | Způsob lyofilizace vodné farmaceutické formulace faktoru VIII prosté albuminu |
AU3924300A (en) | 1999-04-02 | 2000-10-23 | Millennium Pharmaceuticals, Inc. | Fibroblast growth factor-20 |
US7390879B2 (en) | 1999-06-15 | 2008-06-24 | Genentech, Inc. | Secreted and transmembrane polypeptides and nucleic acids encoding the same |
US7129072B1 (en) | 1999-08-30 | 2006-10-31 | New York University | Crystal of fibroblast growth factor receptor 1 in complex with fibroblast growth factor |
US7459540B1 (en) | 1999-09-07 | 2008-12-02 | Amgen Inc. | Fibroblast growth factor-like polypeptides |
WO2001018209A1 (en) | 1999-09-10 | 2001-03-15 | Curagen Corporation | Fibroblast growth factor polypeptide and nucleic acids encoding same |
US6797695B1 (en) | 1999-10-22 | 2004-09-28 | Kyoto University | Human FGF-20 gene and gene expression products |
US6716626B1 (en) | 1999-11-18 | 2004-04-06 | Chiron Corporation | Human FGF-21 nucleic acids |
ATE446365T1 (de) | 1999-11-18 | 2009-11-15 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Menschliches fgf-21 gen und genexpressionsprodukte |
DE10160151A1 (de) | 2001-01-09 | 2003-06-26 | Ribopharma Ag | Verfahren zur Hemmung der Expression eines vorgegebenen Zielgens |
WO2001049740A1 (en) | 2000-01-05 | 2001-07-12 | Zymogenetics, Inc. | Novel fgf homolog zfgf12 |
US20020081663A1 (en) | 2000-01-05 | 2002-06-27 | Conklin Darrell C. | Novel FGF homolog ZFGF11 |
US20010044525A1 (en) | 2000-01-05 | 2001-11-22 | Conklin Darrell C. | Novel FGF Homolog zFGF12 |
AU2631001A (en) | 2000-01-05 | 2001-07-16 | Zymogenetics Inc. | Novel fgf homolog zfgf11 |
EP1257645A2 (en) | 2000-02-15 | 2002-11-20 | Amgen Inc. | Fibroblast growth factor-23 molecules and uses thereof |
US20060160181A1 (en) | 2000-02-15 | 2006-07-20 | Amgen Inc. | Fibroblast Growth Factor-23 molecules and uses thereof |
US20030211576A1 (en) | 2000-02-22 | 2003-11-13 | Genentech, Inc. | Secreted and transmembrane polypeptides and nucleic acids encoding the same |
WO2001066596A2 (en) | 2000-03-08 | 2001-09-13 | Chiron Corporation | Human fgf-23 gene and gene expression products |
US20020082205A1 (en) | 2000-03-08 | 2002-06-27 | Nobuyuki Itoh | Human FGF-23 gene and gene expression products |
WO2001072957A2 (en) | 2000-03-31 | 2001-10-04 | Nobuyuki Itoh | Fibroblast growth factor-like molecules and uses thereof |
US20030065140A1 (en) | 2000-04-03 | 2003-04-03 | Vernet Corine A.M. | Novel proteins and nucleic acids encoding same |
JP2002112772A (ja) | 2000-07-10 | 2002-04-16 | Takeda Chem Ind Ltd | 新規ポリペプチドおよびそのdna |
AU7332301A (en) | 2000-07-19 | 2002-02-05 | Advanced Res & Tech Inst | Novel fibroblast growth factor (FGF23) and methods for use |
JP2004516013A (ja) | 2000-07-20 | 2004-06-03 | ジェネンテック・インコーポレーテッド | 血管形成に関連する障害を診断及び治療するための組成物と方法 |
US6812339B1 (en) | 2000-09-08 | 2004-11-02 | Applera Corporation | Polymorphisms in known genes associated with human disease, methods of detection and uses thereof |
US20070037165A1 (en) | 2000-09-08 | 2007-02-15 | Applera Corporation | Polymorphisms in known genes associated with human disease, methods of detection and uses thereof |
US7265210B2 (en) | 2000-09-15 | 2007-09-04 | Genentech, Inc. | Anti-PRO9821 antibodies |
IL139380A0 (en) | 2000-10-31 | 2001-11-25 | Prochon Biotech Ltd | Active variants of fibroblast growth factor |
US20030045489A1 (en) | 2000-11-22 | 2003-03-06 | Murphy John E. | Methods for modulating angiogenesis |
US20020151496A1 (en) | 2000-12-08 | 2002-10-17 | Bringmann Peter W. | Novel fibroblast growth factors |
DE10100587C1 (de) | 2001-01-09 | 2002-11-21 | Ribopharma Ag | Verfahren zur Hemmung der Expression eines Zielgens |
DE10100588A1 (de) | 2001-01-09 | 2002-07-18 | Ribopharma Ag | Verfahren zur Hemmung der Expression eines Zielgens |
US7250495B2 (en) | 2001-06-20 | 2007-07-31 | Genentech, Inc. | PRO20044 polypeptides |
AU2003225903A1 (en) | 2002-03-21 | 2003-10-08 | Curagen Corporation | Methods of using farnesoid x receptor (fxr) agonists |
US6987121B2 (en) | 2002-04-25 | 2006-01-17 | Smithkline Beecham Corporation | Compositions and methods for hepatoprotection and treatment of cholestasis |
AU2003243400B2 (en) | 2002-06-07 | 2009-10-29 | Genentech, Inc. | Compositions and methods for the diagnosis and treatment of tumor |
DE10227232A1 (de) * | 2002-06-18 | 2004-01-15 | Aventis Pharma Deutschland Gmbh | Saure Insulinzubereitungen mit verbesserter Stabilität |
EP2366718A3 (en) | 2002-06-28 | 2012-05-02 | Domantis Limited | Ligand |
AU2003268116A1 (en) | 2002-09-18 | 2004-04-08 | Eli Lilly And Company | Method for reducing morbidity and mortality in critically ill patients |
WO2004063355A2 (en) | 2003-01-10 | 2004-07-29 | Protein Design Labs, Inc. | Novel methods of diagnosis of metastatic cancer, compositions and methods of screening for modulators of matastatic cancer |
WO2004110472A2 (en) | 2003-06-12 | 2004-12-23 | Eli Lilly And Company | Fusion proteins |
PL1648998T3 (pl) | 2003-07-18 | 2015-03-31 | Amgen Inc | Specyficzne czynniki wiążące czynnik wzrostu hepatocytów |
BRPI0416683A (pt) | 2003-12-10 | 2007-01-30 | Lilly Co Eli | muteìna de fator de crescimento de fibroblasto de humano 21 (fgf-21), ou um seu peptìdeo biologicamente ativo, polinucleotìdeo, vetor de expressão, célula hospedeira, processo para produzir um polipeptìdeo, composição farmacêutica, método para tratar um paciente, e, uso da muteìna fgf-21 |
WO2005092928A1 (en) | 2004-03-11 | 2005-10-06 | Fresenius Kabi Deutschland Gmbh | Conjugates of hydroxyalkyl starch and a protein, prepared by reductive amination |
WO2005113606A2 (en) | 2004-05-13 | 2005-12-01 | Eli Lilly And Company | Fgf-21 fusion proteins |
KR20120133403A (ko) | 2004-06-01 | 2012-12-10 | 도만티스 리미티드 | 증강된 혈청 반감기를 가지는 이특이성 융합 항체 |
JP2006016323A (ja) | 2004-06-30 | 2006-01-19 | Hiroshima Industrial Promotion Organization | 生理活性バイオマテリアル |
EP1789443A1 (en) | 2004-09-02 | 2007-05-30 | Eli Lilly And Company | Muteins of fibroblast growth factor 21 |
EP2161281A1 (en) | 2004-09-02 | 2010-03-10 | Eli Lilly & Company | Muteins of fibroblast growth factor 21 |
KR20070084069A (ko) | 2004-10-08 | 2007-08-24 | 도만티스 리미티드 | Tnfr1에 대한 단일 도메인 항체 및 이의 사용 방법 |
WO2006049854A2 (en) | 2004-10-29 | 2006-05-11 | Genentech, Inc. | Disruptions of genes encoding secreted proteins, compositions and methods relating thereto |
NZ554895A (en) | 2004-11-03 | 2009-06-26 | Almac Diagnostics Ltd | Transcriptome microarray technology and methods of using the same |
US7655627B2 (en) | 2004-12-14 | 2010-02-02 | Eli Lilly And Company | Muteins of fibroblast growth factor 21 |
US20060275794A1 (en) | 2005-03-07 | 2006-12-07 | Invitrogen Corporation | Collections of matched biological reagents and methods for identifying matched reagents |
AR052741A1 (es) | 2005-04-08 | 2007-03-28 | Noxxon Pharma Ag | Acidos nucleicos de union a ghrelin |
EP2083081A1 (en) | 2005-07-22 | 2009-07-29 | Five Prime Therapeutics, Inc. | Compositions and methods of treating disease with FGFR fusion proteins |
US20090081658A1 (en) | 2005-08-24 | 2009-03-26 | Abdelmajid Belouchi | Genemap of the human genes associated with crohn's disease |
CA2637216A1 (en) | 2006-02-10 | 2007-08-16 | Dermagen Ab | Novel antimicrobial peptides and use thereof |
WO2007130673A2 (en) | 2006-05-05 | 2007-11-15 | Beth Israel Deaconess Medical Center | Methods for the diagnosis and treatment of female infertility using molecular markers |
US8168169B2 (en) | 2006-08-09 | 2012-05-01 | Mclean Hospital Corporation | Methods and compositions for the treatment of medical disorders |
EP2069768A4 (en) | 2006-09-01 | 2010-01-20 | American Type Culture Collecti | COMPOSITIONS AND METHODS FOR DIAGNOSIS AND TREATMENT OF TYPE-2 DIABETES |
EP2094733A1 (en) | 2006-11-03 | 2009-09-02 | U3 Pharma GmbH | Fgfr4 antibodies |
EP2457996B1 (en) | 2007-01-03 | 2016-08-31 | NeoStem Oncology, LLC | Stem cell growth media and methods of making and using same |
EP2068909B1 (en) | 2007-03-30 | 2012-04-25 | Ambrx, Inc. | Modified fgf-21 polypeptides and their uses |
AU2008275559B2 (en) | 2007-04-02 | 2014-04-10 | Genentech, Inc. | Klotho-beta for use in treating cancer, liver disorders, gallstones, wasting syndrome and obesity-related diseases |
EP2036539A1 (en) | 2007-09-11 | 2009-03-18 | Novo Nordisk A/S | Stable formulations of amylin and its analogues |
US20090104210A1 (en) * | 2007-10-17 | 2009-04-23 | Tota Michael R | Peptide compounds for treating obesity and insulin resistance |
US20120142546A1 (en) | 2007-12-10 | 2012-06-07 | The Johns Hopkins University | Hypomethylated genes in cancer |
EP2080812A1 (en) | 2008-01-18 | 2009-07-22 | Transmedi SA | Compositions and methods of detecting post-stop peptides |
TW200936156A (en) | 2008-01-28 | 2009-09-01 | Novartis Ag | Methods and compositions using Klotho-FGF fusion polypeptides |
US8420088B2 (en) | 2008-01-28 | 2013-04-16 | Novartis Ag | Methods and compositions using FGF23 fusion polypeptides |
US20090226459A1 (en) | 2008-01-29 | 2009-09-10 | Cold Spring Harbor Laboratory | Role of fgf-19 in cancer diagnosis and treatment |
NZ579566A (en) | 2008-03-19 | 2013-01-25 | Ambrx Inc | Modified fgf-21 polypeptides and their uses |
US20110015345A1 (en) | 2008-03-19 | 2011-01-20 | Ambrx, Inc. | Modified FGF-23 Polypeptides and Their Uses |
AU2009226246A1 (en) | 2008-03-21 | 2009-09-24 | Podiceps B.V. | Diagnostic of pre-symptomatic metabolic syndrome |
CN101591653B (zh) | 2008-05-27 | 2013-07-31 | 中国人民解放军军事医学科学院野战输血研究所 | 低表达cyp7a1的肝细胞及其构建方法 |
JOP20190083A1 (ar) | 2008-06-04 | 2017-06-16 | Amgen Inc | بولي ببتيدات اندماجية طافرة لـfgf21 واستخداماتها |
US8363365B2 (en) | 2008-06-17 | 2013-01-29 | Semiconductor Energy Laboratory Co., Ltd. | Semiconductor device |
JP2011525241A (ja) | 2008-06-18 | 2011-09-15 | アボット・ラボラトリーズ | PlGF−1コンパニオン診断方法および製品 |
FR2933702A1 (fr) | 2008-07-08 | 2010-01-15 | Sanofi Aventis | Antagonistes specifiques du recepteur fgf-r4 |
WO2010006214A1 (en) | 2008-07-09 | 2010-01-14 | Ambrx, Inc. | Fgf-21 neutralizing antibodies and their uses |
WO2010017198A2 (en) | 2008-08-04 | 2010-02-11 | Five Prime Therapeutics, Inc. | Fgfr extracellular domain acidic region muteins |
EA201990619A1 (ru) | 2008-10-10 | 2019-07-31 | Амген Инк. | Fgf21 мутанты и их применение |
WO2010065439A1 (en) | 2008-12-05 | 2010-06-10 | Eli Lilly And Company | Variants of fibroblast growth factor 21 |
US20120035105A1 (en) | 2009-01-09 | 2012-02-09 | Sdg, Inc. | Insulin Therapies for the Treatment of Diabetes, Diabetes Related Ailments, and/or Diseases or Conditions Other Than Diabetes or Diabetes Related Ailments |
EP2385826A4 (en) | 2009-01-09 | 2012-04-04 | Mayo Foundation | METHODS AND MATERIALS FOR ADMINISTERING BILIARY ACIDS |
US20100274362A1 (en) | 2009-01-15 | 2010-10-28 | Avner Yayon | Cartilage particle tissue mixtures optionally combined with a cancellous construct |
WO2010091122A1 (en) | 2009-02-03 | 2010-08-12 | Amunix, Inc. | Extended recombinant polypeptides and compositions comprising same |
AU2010246038A1 (en) | 2009-05-05 | 2011-12-01 | Amgen Inc. | FGF21 mutants and uses thereof |
US8188040B2 (en) | 2009-05-05 | 2012-05-29 | Amgen Inc. | FGF21 mutants and uses thereof |
US8461111B2 (en) | 2009-05-20 | 2013-06-11 | Florida State University Research Foundation | Fibroblast growth factor mutants having improved functional half-life and methods of their use |
US10241093B2 (en) | 2009-05-28 | 2019-03-26 | The Cleveland Clinic Foundation | Trimethylamine-containing compounds for diagnosis and prediction of disease |
EP2437775A1 (en) | 2009-06-04 | 2012-04-11 | Novartis AG | Fgf-21 for treating cancers |
CN102802657A (zh) | 2009-06-11 | 2012-11-28 | 诺沃-诺迪斯克有限公司 | 用于治疗2型糖尿病的glp-1和fgf21组合 |
AU2010262927A1 (en) | 2009-06-17 | 2012-01-19 | Amgen Inc. | Chimeric FGF19 polypeptides and uses thereof |
CN101993485B (zh) | 2009-08-20 | 2013-04-17 | 重庆富进生物医药有限公司 | 促胰岛素分泌肽类似物同源二聚体及其用途 |
JP6016636B2 (ja) | 2009-10-15 | 2016-10-26 | ジェネンテック, インコーポレイテッド | 改変したレセプター特異性を持つキメラ線維芽細胞増殖因子 |
US8889621B2 (en) | 2009-10-30 | 2014-11-18 | New York University | Inhibiting binding of FGF23 to the binary FGFR-Klotho complex for the treatment of hypophosphatemia |
UA109888C2 (uk) | 2009-12-07 | 2015-10-26 | ІЗОЛЬОВАНЕ АНТИТІЛО АБО ЙОГО ФРАГМЕНТ, ЩО ЗВ'ЯЗУЄТЬСЯ З β-КЛОТО, РЕЦЕПТОРАМИ FGF І ЇХНІМИ КОМПЛЕКСАМИ | |
US20110312881A1 (en) | 2009-12-21 | 2011-12-22 | Amunix, Inc. | Bifunctional polypeptide compositions and methods for treatment of metabolic and cardiovascular diseases |
EP2460527A1 (en) | 2010-01-21 | 2012-06-06 | Sanofi | Pharmaceutical composition for treating a metabolic syndrome |
US20110195077A1 (en) | 2010-01-29 | 2011-08-11 | Novartis Ag | Methods and compositions using fgf23 fusion ppolypeptides |
CA2796055A1 (en) | 2010-04-15 | 2011-10-20 | Amgen Inc. | Human fgf receptor and .beta.-klotho binding proteins |
AU2011239386B2 (en) | 2010-04-16 | 2015-03-19 | Salk Institute For Biological Studies | Methods for treating metabolic disorders using FGF |
JP2013533227A (ja) | 2010-06-08 | 2013-08-22 | ノヴォ ノルディスク アー/エス | Fgf21類似体および誘導体 |
US9655974B2 (en) | 2010-07-20 | 2017-05-23 | Novo Nordisk A/S | N-terminal modified FGF21 compounds |
US20130216608A1 (en) | 2010-09-09 | 2013-08-22 | Trifoilium Aps | Airway Administration of Angiogenesis Inhibitors |
EP2725034B1 (en) * | 2010-09-22 | 2019-04-03 | Amgen Inc. | Carrier immunoglobulins with no specificity for human tissues and uses thereof |
CN102464712A (zh) | 2010-11-11 | 2012-05-23 | 重庆富进生物医药有限公司 | 缺失型人成纤维细胞生长因子21变异体及其偶联物 |
US9023791B2 (en) | 2010-11-19 | 2015-05-05 | Novartis Ag | Fibroblast growth factor 21 mutations |
JP5613547B2 (ja) | 2010-12-14 | 2014-10-22 | 株式会社スクウェア・エニックス | タスクベースの並列プログラミング言語 |
AR084558A1 (es) | 2010-12-22 | 2013-05-22 | Marcadia Biotech | Metodos para tratar trastornos metabolicos y obesidad con peptidos basados en glucagon activos para el receptor de peptido insulinotropico dependiente de glucosa (gip)/peptido-1 similar al glucagon (glp-1) |
JP5850435B2 (ja) | 2010-12-24 | 2016-02-03 | 国立研究開発法人産業技術総合研究所 | ヒトfgf19活性の正確で高感度な測定方法ならびにヒトfgf19活性の制御剤 |
US10752664B2 (en) | 2011-04-08 | 2020-08-25 | Amgen Inc. | Method of treating or ameliorating metabolic disorders using growth differentiation factor 15 (GDF-15) |
WO2012140650A2 (en) | 2011-04-12 | 2012-10-18 | Hepacore Ltd. | Conjugates of carboxy polysaccharides with fibroblast growth factors and variants thereof |
MX2013013044A (es) | 2011-05-10 | 2014-02-20 | Amgen Inc | METODO PARA IDENTIFICAR COMPUESTOS QUE ESPECIFICAMENTE MODULAN LA INTERACCION DE FGFR1 Y ß-KLOTHO. |
MY175338A (en) | 2011-05-16 | 2020-06-19 | Genentech Inc | Fgfr1 agonists and methods of use |
US9574002B2 (en) | 2011-06-06 | 2017-02-21 | Amgen Inc. | Human antigen binding proteins that bind to a complex comprising β-Klotho and an FGF receptor |
JP2014524735A (ja) | 2011-06-08 | 2014-09-25 | デノボ バイオファーマ (ハンジョウ) リミテッド カンパニー | レチノイドxレセプターの調節因子の活性を予測する方法および組成物 |
WO2012177481A2 (en) | 2011-06-24 | 2012-12-27 | University Of Miami | Fibroblast growth factor receptor inhibition for the treatment of disease |
MY163674A (en) | 2011-07-01 | 2017-10-13 | Ngm Biopharmaceuticals Inc | Compositions, uses and method for treatment of metabolic disorders and diseases |
EP2548570A1 (en) | 2011-07-19 | 2013-01-23 | Sanofi | Pharmaceutical composition for treating a metabolic syndrome |
SG10201606218WA (en) * | 2011-07-29 | 2016-09-29 | Eleven Biotherapeutics Inc | Purified Proteins |
WO2013027191A1 (en) | 2011-08-25 | 2013-02-28 | Novartis Ag | Methods and compositions using fgf23 fusion polypeptides |
JP2014526441A (ja) | 2011-08-31 | 2014-10-06 | アムジエン・インコーポレーテツド | 1型糖尿病の治療における使用のためのfgf21 |
TW201315742A (zh) | 2011-09-26 | 2013-04-16 | Novartis Ag | 治療代謝病症之雙功能蛋白質 |
TWI593708B (zh) * | 2011-09-26 | 2017-08-01 | 諾華公司 | 治療代謝病症之融合蛋白質 |
AR087973A1 (es) | 2011-10-04 | 2014-04-30 | Lilly Co Eli | Variantes del factor 21 del crecimiento de fibroblastos |
CN103127503B (zh) | 2011-11-23 | 2017-11-10 | 上海医学生命科学研究中心有限公司 | 拮抗和/或阻断IL‑6/IL‑6R/gp130信号通路在抗肝癌治疗中的用途 |
WO2013109856A2 (en) | 2012-01-18 | 2013-07-25 | Genentech, Inc. | Methods of using fgf19 modulators |
US9475856B2 (en) | 2012-03-02 | 2016-10-25 | New York University | Chimeric FGF21 proteins with enhanced binding affinity for β-klotho for the treatment of type II diabetes, obesity, and related metabolic disorders |
JP2013194049A (ja) | 2012-03-23 | 2013-09-30 | Kazuo Todokoro | ヒト造血幹細胞を増幅させるための組成物及び方法 |
AU2013243951A1 (en) | 2012-04-02 | 2014-10-30 | Moderna Therapeutics, Inc. | Modified polynucleotides for the production of secreted proteins |
WO2013156920A1 (en) | 2012-04-16 | 2013-10-24 | Tel Hashomer Medical Research Infrastructure And Services Ltd. | Klotho variant polypeptides and uses thereof in therapy |
US20150141335A1 (en) | 2012-05-15 | 2015-05-21 | Eli Lilly And Company | Therapeutic uses of fibroblast growth factor 21 proteins |
US9464126B2 (en) | 2012-06-07 | 2016-10-11 | New York University | Chimeric fibroblast growth factor 21 proteins and methods of use |
US9474785B2 (en) | 2012-06-07 | 2016-10-25 | New York University | Chimeric fibroblast growth factor 19 proteins and methods of use |
US9657075B2 (en) | 2012-06-07 | 2017-05-23 | New York University | Chimeric fibroblast growth factor 23 proteins and methods of use |
TWI513705B (zh) | 2012-06-11 | 2015-12-21 | Lilly Co Eli | 纖維母細胞生長因子21蛋白質 |
WO2013188182A1 (en) | 2012-06-11 | 2013-12-19 | Eli Lilly And Company | Fibroblast growth factor 21 variants |
PT2872491T (pt) | 2012-07-11 | 2021-08-05 | Blueprint Medicines Corp | Inibidores do recetor do fator de crescimento de fibroblastos |
TW201420606A (zh) | 2012-08-22 | 2014-06-01 | Lilly Co Eli | 同源二聚體蛋白 |
AU2013311777B2 (en) | 2012-09-07 | 2018-02-01 | Sanofi | Fusion proteins for treating a metabolic syndrome |
AU2013352363B2 (en) | 2012-11-28 | 2018-04-12 | Ngm Biopharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for treatment of metabolic disorders and diseases |
US9290557B2 (en) | 2012-11-28 | 2016-03-22 | Ngm Biopharmaceuticals, Inc. | Compositions comprising variants and fusions of FGF19 polypeptides |
US9273107B2 (en) | 2012-12-27 | 2016-03-01 | Ngm Biopharmaceuticals, Inc. | Uses and methods for modulating bile acid homeostasis and treatment of bile acid disorders and diseases |
DK2938740T3 (da) | 2012-12-27 | 2022-06-20 | Ngm Biopharmaceuticals Inc | Kimære fgf19-peptider til anvendelse til behandling af galdesyrelidelser |
US9550820B2 (en) | 2013-02-22 | 2017-01-24 | New York University | Chimeric fibroblast growth factor 23/fibroblast growth factor 19 proteins and methods of use |
WO2014152090A1 (en) | 2013-03-14 | 2014-09-25 | Georgetown University | Compositions and treatments of metabolic disorders using fgf binding protein 3 and fgf 19 |
WO2014152089A1 (en) | 2013-03-14 | 2014-09-25 | Georgetown University | Compositions and treatments of metabolic disorders using fgf binding protein 3 |
WO2014149699A1 (en) | 2013-03-15 | 2014-09-25 | Eli Lilly And Company | Bifunctional protein |
MX2016005101A (es) | 2013-10-21 | 2017-01-09 | Salk Inst For Biological Studi | Factor de crecimiento de fibroblastos (fgf) 1 mutado y procedimientos de uso. |
SG11201602870YA (en) | 2013-10-28 | 2016-05-30 | Ngm Biopharmaceuticals Inc | Cancer models and associated methods |
UA119863C2 (uk) | 2014-01-24 | 2019-08-27 | Нгм Біофармасьютікалс, Інк. | Антитіло або його фрагмент, що зв'язується з бета-клото |
WO2015183890A2 (en) | 2014-05-28 | 2015-12-03 | Ngm Biopharmaceuticals, Inc. | Methods and compositions for the treatment of metabolic disorders and diseases |
AU2015277438B2 (en) | 2014-06-16 | 2020-02-27 | Ngm Biopharmaceuticals, Inc. | Methods and uses for modulating bile acid homeostasis and treatment of bile acid disorders and diseases |
WO2016048995A2 (en) | 2014-09-23 | 2016-03-31 | Salk Institute For Biological Studies | Fgf19 truncations and mutants and uses thereof |
CN107108711B (zh) | 2014-10-23 | 2021-11-23 | 恩格姆生物制药公司 | 包含肽变异体的药物组合物及其使用方法 |
US10434144B2 (en) | 2014-11-07 | 2019-10-08 | Ngm Biopharmaceuticals, Inc. | Methods for treatment of bile acid-related disorders and prediction of clinical sensitivity to treatment of bile acid-related disorders |
JP6728352B2 (ja) | 2015-11-09 | 2020-07-22 | エヌジーエム バイオファーマシューティカルス,インコーポレーテッド | 胆汁酸に関係した障害の治療方法 |
AU2017315459B2 (en) | 2016-08-26 | 2023-06-29 | Ngm Biopharmaceuticals, Inc. | Methods of treating fibroblast growth factor 19-mediated cancers and tumors |
CA3034435A1 (en) | 2016-08-29 | 2018-03-08 | Lei Ling | Methods for treatment of bile acid-related disorders |
-
2015
- 2015-10-22 CN CN201580070309.0A patent/CN107108711B/zh active Active
- 2015-10-22 CN CN202111301507.7A patent/CN114129709A/zh active Pending
- 2015-10-22 BR BR112017007816A patent/BR112017007816A2/pt active Search and Examination
- 2015-10-22 AU AU2015335844A patent/AU2015335844B2/en active Active
- 2015-10-22 KR KR1020177013879A patent/KR102569907B1/ko active IP Right Grant
- 2015-10-22 SG SG11201702757YA patent/SG11201702757YA/en unknown
- 2015-10-22 CA CA2964782A patent/CA2964782A1/en active Pending
- 2015-10-22 EP EP15853394.3A patent/EP3209681A4/en active Pending
- 2015-10-22 JP JP2017519922A patent/JP6949711B2/ja active Active
- 2015-10-22 WO PCT/US2015/056830 patent/WO2016065106A1/en active Application Filing
- 2015-10-22 US US15/519,289 patent/US10517929B2/en active Active
- 2015-10-22 RU RU2017112738A patent/RU2729161C2/ru active
- 2015-10-22 UA UAA201703593A patent/UA123763C2/uk unknown
- 2015-10-22 IL IL251834A patent/IL251834B2/en unknown
- 2015-10-22 MX MX2017004488A patent/MX2017004488A/es unknown
-
2019
- 2019-12-18 US US16/719,448 patent/US20200197490A1/en not_active Abandoned
-
2021
- 2021-05-24 JP JP2021087034A patent/JP2021152020A/ja active Pending
- 2021-06-22 US US17/355,002 patent/US20220047675A1/en not_active Abandoned
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2365382C2 (ru) * | 2004-04-14 | 2009-08-27 | Дженентек, Инк. | Композиции и способы для регуляции развития сосудов |
US8293241B2 (en) * | 2006-02-10 | 2012-10-23 | Genentech, Inc. | Anti-FGF19 antibodies and methods using same |
WO2013154206A1 (ja) * | 2012-04-09 | 2013-10-17 | 第一三共株式会社 | 抗fgfr2抗体 |
WO2014105849A1 (en) * | 2012-12-28 | 2014-07-03 | Xoma (Us) Llc | Antibodies specific for fgfr4 and methods of use |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
RU2017112738A3 (ru) | 2019-10-15 |
BR112017007816A2 (pt) | 2017-12-19 |
IL251834B2 (en) | 2023-09-01 |
KR102569907B1 (ko) | 2023-08-24 |
MX2017004488A (es) | 2017-07-17 |
AU2015335844B2 (en) | 2020-09-03 |
JP2017533194A (ja) | 2017-11-09 |
RU2017112738A (ru) | 2018-11-26 |
WO2016065106A1 (en) | 2016-04-28 |
JP2021152020A (ja) | 2021-09-30 |
IL251834B1 (en) | 2023-05-01 |
US20200197490A1 (en) | 2020-06-25 |
AU2015335844A1 (en) | 2017-04-27 |
UA123763C2 (uk) | 2021-06-02 |
IL251834A0 (en) | 2017-06-29 |
JP6949711B2 (ja) | 2021-10-20 |
EP3209681A4 (en) | 2018-10-31 |
CN107108711B (zh) | 2021-11-23 |
CA2964782A1 (en) | 2016-04-28 |
US10517929B2 (en) | 2019-12-31 |
CN107108711A (zh) | 2017-08-29 |
CN114129709A (zh) | 2022-03-04 |
NZ730752A (en) | 2023-11-24 |
KR20170075761A (ko) | 2017-07-03 |
SG11201702757YA (en) | 2017-05-30 |
US20220047675A1 (en) | 2022-02-17 |
US20170232067A1 (en) | 2017-08-17 |
EP3209681A1 (en) | 2017-08-30 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2729161C2 (ru) | Фармацевтические композиции, содержащие варианты пептидов, и способы их применения | |
US20220088140A1 (en) | Methods of Using Compositions Comprising Variants and Fusions of FGF19 Polypeptides for Treatment of Metabolic Disorders and Diseases | |
US11141460B2 (en) | Methods for treatment of bile acid-related disorders and prediction of clinical sensitivity to treatment of bile acid-related disorders | |
US20200390859A1 (en) | Methods for treatment of bile acid-related disorders | |
RU2675514C2 (ru) | Способы модуляции гомеостаза желчных кислот и лечение расстройств и заболеваний, ассоциированных с желчными кислотами | |
US9963494B2 (en) | Methods of using compositions comprising variants and fusions of FGF19 polypeptides for reducing glucose levels in a subject | |
US9290557B2 (en) | Compositions comprising variants and fusions of FGF19 polypeptides |