RU2639520C2 - Растения сои, устойчивой к гербицидам, и способы их идентификации - Google Patents

Растения сои, устойчивой к гербицидам, и способы их идентификации Download PDF

Info

Publication number
RU2639520C2
RU2639520C2 RU2012125961A RU2012125961A RU2639520C2 RU 2639520 C2 RU2639520 C2 RU 2639520C2 RU 2012125961 A RU2012125961 A RU 2012125961A RU 2012125961 A RU2012125961 A RU 2012125961A RU 2639520 C2 RU2639520 C2 RU 2639520C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
nucleotide
seq
sequence
transgenic event
nucleotide sequence
Prior art date
Application number
RU2012125961A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2012125961A (ru
Inventor
Джастин Томас МЕЙСОН
Лесли Джеймс ЛЕТТОУ
Марк Алан ЭБИ
Уилльям Х. ЭБИ
Гюнтер ВЕЛЬЦ
Стивен ВЕРХАГЕ
БЕККЕЛЕР Марк ДЕ
Верле Хабекс
Жан-Марк ФЕРЮЛЛО
Original Assignee
Байер Кропсайенс Н.В.
ЭмЭс ТЕКНОЛОДЖИЗ ЭлЭлСи
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Байер Кропсайенс Н.В., ЭмЭс ТЕКНОЛОДЖИЗ ЭлЭлСи filed Critical Байер Кропсайенс Н.В.
Publication of RU2012125961A publication Critical patent/RU2012125961A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2639520C2 publication Critical patent/RU2639520C2/ru

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
    • C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
    • C12N15/8261—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
    • C12N15/8271—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance
    • C12N15/8274—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for herbicide resistance
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
    • C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
    • C12N15/8261—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
    • C12N15/8271—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance
    • C12N15/8274—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for herbicide resistance
    • C12N15/8275—Glyphosate
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H5/00—Angiosperms, i.e. flowering plants, characterised by their plant parts; Angiosperms characterised otherwise than by their botanic taxonomy
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H6/00—Angiosperms, i.e. flowering plants, characterised by their botanic taxonomy
    • A01H6/54—Leguminosae or Fabaceae, e.g. soybean, alfalfa or peanut
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H21/00—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids
    • C07H21/04—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids with deoxyribosyl as saccharide radical
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
    • C12Q1/6888—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms
    • C12Q1/6895—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms for plants, fungi or algae
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/13—Plant traits
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/158—Expression markers

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Pretreatment Of Seeds And Plants (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Abstract

Изобретение относится к области биохимии, в частности к трансгенному растению сои, обладающему устойчивостью к глюфосинату, глифосату и изоксафлютолу. Также раскрыты трансгенное семя, трансгенная клетка указанного растения, наборы, пара праймеров и пара специфичных зондов для идентификации одновременного присутствия генов устойчивости к указанным гербицидам. Раскрыты способ получения соевого продукта из указанного семени, способы борьбы с сорняками на поле, где растение сои устойчивы к глюфосинату, глифосату и изоксафлютолу, способ получения указанного растения сои, способы идентификации одновременного присутствия генов устойчивости к указанным гербицидам, способ скрининга присутствия в семенах сои одновременно генов устойчивости к указанным гербицидам, способ обнаружения присутствия одновременно генов устойчивости к указанным гербицидам. Изобретение позволяет придать устойчивость растению сои к глюфосинату, глифосату и изоксафлютолу. 19 н. и 7 з.п. ф-лы, 6 ил., 2 табл., 9 пр.

Description

Перекрестные ссылки на родственные заявки
Настоящая заявка претендует на приоритет согласно предварительной заявке на патент США No 61/367251, поданной 23 июля 2010 г.; предварительной заявке на патент США No 61/263707, поданной 23 ноября 2009 г.; и предварительной заявке на европейский патент No EP 09014565.7, поданной 23 ноября 2009 г., содержание каждой из которых полностью включено в настоящий документ посредством ссылки.
Область техники
Настоящее изобретение относится к трансгенным растениям, растительному материалу и семенам сои, характеризующимся содержанием по меньшей мере двух специфических трансформационных событий, в частности, присутствием по меньшей мере двух наборов генов, кодирующих белки, придающие устойчивость к гербицидам, каждый из которых характеризуется специфическим положением в геноме сои. Растения сои, согласно изобретению, объединяют фенотип устойчивости к гербицидам с агрономической продуктивностью, генетической стабильностью и функциональностью в различном генетическом окружении, эквивалентными нетрансформированной линии сои при отсутствии гербицида(ов). Кроме того, настоящее изобретение представляет способы и наборы для идентификации присутствия растительного материала, включающего специализированные трансформационные события EE-GM3 и EE-GM2 или EE-GM1, в биологических образцах.
Уровень техники
Фенотипическая экспрессия трансгена в растениях определяется как структурой гена или генов самих по себе, так и его или их положением в геноме растения. В то же время присутствие трансгенов или "чужеродной ДНК" по различным положениям в пределах генома различными путями влияет на общий фенотип растения. Агрономически или промышленно успешное внедрение путем генетической манипуляции в организм растения признака, представляющего интерес с коммерческой точки зрения, в зависимости от различных факторов, может представлять собой продолжительную процедуру. Фактическая трансформация и регенерация генетически трансформированного растения является лишь первым этапом селекции, которая включает расширенное исследование генетических характеристик, скрещивание и полевые испытания, в конечном итоге приводящие к селекции элитного события.
Важность однозначной идентификации элитного события возрастает в свете обсуждения новых пищевых продуктов/кормов, разделения продуктов на основе генетически модифицированных и немодифицированных организмов и идентификации патентованных материалов. В идеале такой способ идентификации является как быстрым, так и простым, не требующим масштабного лабораторного оборудования. Кроме того, этот способ должен обеспечивать результаты, позволяющие однозначно определить элитное событие без экспертной интерпретации, однако, при необходимости, выдерживающие экспертную оценку. Специализированные инструменты для идентификации элитных событий EE-GM3 и EE-GM1 или EE-GM2 в биологических образцах описаны в настоящей заявке.
В настоящем изобретении EE-GM3 идентифицировали как элитное событие из популяции трансгенных растений сои при разработке сои культурной (Glycine max), устойчивой к гербицидам, включающей ген, кодирующий устойчивость к глифосату, в комбинации с геном, придающим устойчивость к ингибиторам 4-гидроксифенилпируватдиоксигеназы (HPPD), каждый из которых находится под контролем промотора, обеспечивающего экспрессию в растительной клетке.
EE-GM1 и EE-GM2 ранее идентифицировали как элитные события из популяции трансгенных растений сои при разработке сои культурной (Glycine max), устойчивой к гербицидам, включающей ген, кодирующий устойчивость к глюфосинату, находящийся под контролем промотора, обеспечивающего экспрессию в растительной клетке, и описали в заявках W02006/108674 и W02006/108675 (обе публикации включены в настоящий документ посредством ссылки).
В литературе описаны растения сои, содержащие ген устойчивости к гербицидам. Однако, ни одна из известных публикаций не сообщает о настоящем изобретении.
В данной области техники известно, что получение коммерческого элитного трансформационного события устойчивых к гербицидам растений сои, обладающих приемлемой агрономической продуктивностью без ухудшения урожайности и достаточной устойчивостью к гербицидам трех различных классов, является далеко не простой задачей.
В действительности, сообщалось, что первое событие сои (событие 40-3-2), поступившее на рынок как устойчивое к гербицидам, характеризовалось значительным ухудшением урожайности по сравнению с изогенными или приблизительно изогенными линиями (Elmore et al. (2001) Agron. J. 93:408-412).
Кроме того, была выведена соя Optimum™GAT™ (событие 356043), объединявшая свойства устойчивости к глифосату с устойчивостью к гербицидам, действующим на ацетолактатсинтазу, однако, сообщалось, что эта соя сама по себе не соответствовала стандартам устойчивости к глифосату (вне комбинации с другим событием устойчивости сои к глифосату (например, событием 40-3-2) (см., например, www.bloomberg.com/apps/news?pid=newsarchive&sid=ad4L0hH9MKWE)).
Сущность изобретения
Настоящее изобретение относится к трансгенным растениям сои или их семенам, клеткам и тканям, содержащим стабильно интегрированную в их геном экспрессионную кассету, включающую ген устойчивости к гербициду, включающий кодирующую последовательность гена 2mEPSPS, и еще один ген устойчивости к гербициду, включающий кодирующую последовательность HPPD-PF W336 (в соответствии с описанием в Примере 1.1 настоящей заявки и как представлено в SEQ ID No 1), а также вторую экспрессионную кассету, включающую ген устойчивости к гербициду, содержащий кодирующую последовательность фосфинотрицинацетилтрансферазы согласно описанию в Примере 1 настоящей заявки и как представлено в SEQ ID No 11. Трансгенные растения сои или их семена, клетки или ткани устойчивы к гербицидам на основе глифосата, глюфосината и гербициду-ингибитору HPPD, например, изоксафлютолу, а при отсутствии гербицидов - обладают агрономической продуктивностью, в значительной степени эквивалентной продуктивности нетрансгенной изогенной линии. После применения одного или более гербицидов, к которым растение обладает устойчивостью, оно демонстрирует агрономический фенотип, превосходящий фенотип нетрансгенного растения.
Согласно настоящему изобретению растения сои или их семена, клетки или ткани содержат элитное событие EE-GM3 и EE-GM1 или EE-GM3 и EE-GM2.
В частности, настоящее изобретение относится к трансгенным растениям сои, их семенам, клеткам или тканям, геномная ДНК которых характеризуется тем, что ее анализ, согласно протоколу ПЦР-идентификации, как описано здесь, с использованием двух праймеров к 5’- или 3’-фланкирующей области EE-GM3 и чужеродной ДНК, включающей гены устойчивости к гербицидам в EE-GM-3, соответственно, обнаруживает фрагмент, специфический для EE-GM3, и, кроме того, анализ, согласно протоколу ПЦР-идентификации, как описано здесь, с использованием двух праймеров к 5’- или 3’-фланкирующей области EE-GM1 или EE-GM2 и чужеродной ДНК, включающей гены устойчивости к глюфосинату, соответственно, обнаруживает фрагмент, специфический для EE-GM1 или EE-GM2. Мишенью праймеров для обнаружения EE-GM3 могут являться 5’-фланкирующая область в пределах SEQ ID No: 2 и чужеродная ДНК, включающая гены устойчивости к гербицидам, соответственно. Мишенью праймеров для обнаружения EE-GM3, например, праймеров, включающих или состоящих (главным образом) из нуклеотидной последовательности SEQ ID No: 5 и SEQ ID No: 4 или SEQ ID No: 7, соответственно, также могут являться 3’-фланкирующая область в пределах SEQ ID No: 3 и чужеродная ДНК, включающая гены устойчивости к гербицидам, соответственно, и праймеры обнаруживают фрагмент ДНК размером от 100 до 800 п.о., например, фрагмент размером приблизительно 263 п.о. или приблизительно 706 п.о. Мишенью праймеров для обнаружения EE-GM1 могут являться 5’-фланкирующая область в пределах SEQ ID No: 12 и чужеродная ДНК, включающая гены устойчивости к гербицидам, соответственно. Мишенью праймеров для обнаружения EE-GM1, например, праймеров, включающих или состоящих (главным образом) из нуклеотидной последовательности SEQ ID No: 16 и SEQ ID No: 17, соответственно, также могут являться 3’-фланкирующая область в пределах SEQ ID No: 13 и чужеродная ДНК, включающая гены устойчивости к гербицидам, соответственно, и праймеры обнаруживают фрагмент ДНК размером от 100 до 500 п.о., например, фрагмент размером приблизительно 183 п.о. Мишенью праймеров для обнаружения EE-GM2 могут являться 5’-фланкирующая область в пределах SEQ ID No: 14 и чужеродная ДНК, включающая гены устойчивости к гербицидам, соответственно. Мишенью праймеров для обнаружения EE-GM2, например, праймеров, включающих или состоящих (главным образом) из нуклеотидной последовательности SEQ ID No: 18 и SEQ ID No: 19, соответственно, также могут являться 3’-фланкирующая область в пределах SEQ ID No: 15 и чужеродная ДНК, включающая гены устойчивости к гербицидам, соответственно, при этом праймеры обнаруживают фрагмент ДНК размером от 100 до 500 п.о., например, фрагмент размером приблизительно 151 п.о.
Эталонные семена, содержащие элитное событие EE-GM3, согласно изобретению, депонированы в NCIMB под номером доступа NCIMB 41659. Эталонные семена, содержащие элитное событие EE-GM1, согласно изобретению, депонированы в NCIMB под номером доступа NCIMB 41658. Эталонные семена, содержащие элитное событие EE-GM2, согласно изобретению, депонированы в NCIMB под номером доступа NCIMB 41660. Эталонные семена, содержащие элитное событие EE-GM3 и EE-GM1, были депонированы в АТСС под номером доступа РТА-11041. Эталонные семена, содержащие элитное событие EE-GM3 и EE-GM2, были депонированы в АТСС под номером доступа РТА-11042.
Один из вариантов воплощения изобретения представляет собой семена, содержащие элитное событие EE-GM3 (эталонные семена, содержащие указанное событие и депонированные в NCIMB под номером доступа NCIMB 41659), и, кроме того, содержащие элитное событие EE-GM1 (эталонные семена, содержащие указанное событие и депонированные в NCIMB под номером доступа NCIMB 41658), или семена, содержащие событие EE-GM3 и EE-GM1 (эталонные семена, содержащие указанные события и депонированные в АТСС под номером доступа РТА-11041), которые вырастают в растения сои, устойчивые по меньшей мере к трем гербицидам, в частности, устойчивые к глифосату и/или ингибиторам HPPD, например, изоксафлютолу и/или ингибиторам глутаминсинтазы, например, глюфосинату.
Еще один из вариантов воплощения изобретения представляет собой семена, содержащие элитное событие EE-GM3 (эталонные семена, содержащие указанное событие и депонированные в NCIMB под номером доступа NCIMB 41659), и, кроме того, содержащие элитное событие EE-GM2 (эталонные семена, содержащие указанное событие и депонированные в NCIMB под номером доступа NCIMB 41660), или семена, содержащие событие EE-GM3 и EE-GM2 (эталонные семена, содержащие указанные события и депонированные в АТСС под номером доступа РТА-11042), которые вырастают в растения сои, устойчивые по меньшей мере к трем гербицидам, в частности, устойчивые к глифосату и/или ингибиторам HPPD, например, изоксафлютолу и/или ингибиторам глутаминсинтазы, например, глюфосинату.
Семена, депонированные в NCIMB под номером доступа NCIMB 41659, представляют собой партию семян, состоящую по меньшей мере приблизительно на 95% из трансгенных семян, содержащих элитное событие EE-GM3, которые вырастают в растения, устойчивые к гербицидам, причем эти растения являются устойчивыми к глифосату и/или изоксафлютолу. Семена или потомство семян, получаемые или полученные из депонированных семян (например, после скрещивания с другими растениями сои с другим генетическим окружением), можно высеять и обработать растущие растения глифосатом или ингибиторами HPPD, например, изоксафлютолом, как описано здесь, получая растения, устойчивые к глифосату или изоксафлютолу, содержащие элитное событие EE-GM3. Семена, депонированные в NCIMB под номером доступа NCIMB 41658 и NCIMB 41660, представляют собой партии семян, состоящие по меньшей мере приблизительно на 95% из трансгенных семян, содержащих элитные события EE-GM1 или EE-GM2, соответственно, которые вырастают в растения, устойчивые к гербицидам, причем эти растения являются устойчивыми к глтофосинату. Эти семена можно высеять и обработать растущие растения глюфосинатом, получая растения, устойчивые к глюфосинату, содержащие элитные события EE-GM1 или EE-GM2.
Семена, депонированные в АТСС под номером доступа РТА-11041, представляют собой партию семян, состоящую по меньшей мере приблизительно на 95% из трансгенных семян, содержащих элитное событие EE-GM3 и элитное событие EE-GM1 в гомозиготной форме, которые вырастают в растения, устойчивые к гербицидам, причем эти растения являются устойчивыми к глифосату, глюфосинату и/или изоксафлютолу. Семена или потомство семян, получаемые или полученные из депонированных семян (например, после скрещивания с другими растениями сои с другим генетическим окружением), можно высеять и обработать растущие растения глифосатом, глюфосинатом или ингибиторами HPPD, например, изоксафлютолом, как описано здесь, получая растения, устойчивые к глифосату, глюфосинату или изоксафлютолу, содержащие элитное событие EE-GM3 и EE-GM1.
Семена, депонированные в АТСС под номером доступа РТА-11042, представляют собой партию семян, состоящую по меньшей мере приблизительно на 95% из трансгенных семян, содержащих элитное событие EE-GM3 и элитное событие EE-GM2 в гомозиготной форме, которые вырастают в растения, устойчивые к гербицидам, причем эти растения являются устойчивыми к глифосату, глюфосинату и/или изоксафлютолу. Семена или потомство семян, получаемые или полученные из депонированных семян (например, после скрещивания с другими растениями сои с другим генетическим окружением), можно высеять и обработать растущие растения глифосатом, глюфосинатом или ингибиторами HPPD, например, изоксафлютолом, как описано здесь, получая растения, устойчивые к глифосату, глюфосинату или изоксафлютолу, содержащие элитное событие EE-GM3 и EE-GM2.
Настоящее изобретение, кроме того, относится к клеткам, тканям и потомству растения, содержащего элитное событие EE-GM3 и, кроме того, содержащего элитное событие EE-GM1, которые можно получить путем выращивания растения, содержащего элитное событие EE-GM3 и EE-GM1, депонированного в АТСС как РТА-11041, или выращивания растения, содержащего элитное событие EE-GM3, из семени, депонированного в NCIMB под номером доступа NCIMB 41659, и скрещивания указанного растения с растением, содержащим элитное событие EE-GM1, выращенным из семени, депонированного в NCIMB под номером доступа NCIMB 41658. Настоящее изобретение также относится к клеткам, тканям и потомству растения, содержащего элитное событие EE-GM3 и, кроме того, содержащего элитное событие EE-GM2, которые можно получить путем выращивания растения, содержащего элитное событие EE-GM3 и EE-GM2, депонированного в АТСС как РТА-11042, или выращивания растения, содержащего элитное событие EE-GM3, из семени, депонированного в NCIMB под номером доступа NCIMB 41659, и скрещивания указанного растения с растением, содержащим элитное событие EE-GM2, выращенным из семени, депонированного в NCIMB под номером доступа NCIMB 41660. Настоящее изобретение, кроме того, относится к растениям, которые можно получить из (например, путем размножения и/или скрещивания с) растения или семени сои согласно описанию непосредственно перед этим. Настоящее изобретение также относится к растениям сои, содержащим элитное событие EE-GM3 и EE-GM1 или EE-GM3 и EE-GM2.
Настоящее изобретение, кроме того, относится к способу идентификации трансгенного растения или его клеток, или тканей, содержащих элитное событие EE-GM3 и EE-GM1 или EE-GM3 и EE-GM2, основанному на идентификации присутствия характерных последовательностей ДНК или аминокислотных последовательностей, кодируемых такими последовательностями ДНК трансгенного растения, клеток или тканей. Согласно предпочтительному варианту воплощения настоящего изобретения такие характерные последовательности ДНК представляют собой последовательности длиной по меньшей мере 15 п.о., 15 п.о., по меньшей мере 20 п.о., 20 п.о. или 30 п.о., или более, содержащие сайты инсерции события, т.е. как фрагмент вставленной чужеродной ДНК, содержащей гены устойчивости к гербицидам, так и фрагмент генома сои (5’- или 3’-фланкирующую область), состыкованные друг с другом, что дает возможность специфической идентификации элитного события.
Настоящее изобретение, кроме того, относится к способам идентификации элитных событий EE-GM3 и EE-GM 1 или элитных событий EE-GM3 и EE-GM2 в биологических образцах, способам, основанным на использовании праймеров или зондов, специфически распознающих 5’- и/или 3’-фланкирующую последовательность чужеродной ДНК в EE-GM3 и EE-GM1 или EE-GM3 и EE-GM2, включающей гены устойчивости к гербицидам.
В частности, настоящее изобретение относится к способу, включающему амплификацию двух нуклеотидных последовательностей, присутствующих в биологических образцах, с помощью двух полимеразных цепных реакций и по меньшей мере четырех праймеров, причем первый праймер распознает 5'- или 3'-фланкирующую область чужеродной ДНК в EE-GM3, включающей гены устойчивости к гербицидам, второй праймер распознает последовательность в пределах чужеродной ДНК в EE-GM3, включающей гены устойчивости к гербицидам, третий праймер распознает 5’- или 3’-фланкирующую область чужеродной ДНК в EE-GM1 или EE-GM2, включающей гены устойчивости к гербицидам, а четвертый праймер распознает последовательность в пределах чужеродной ДНК в EE-GM1 или EE-GM2, включающей гены устойчивости к гербицидам, предпочтительно для получения двух фрагментов ДНК размером между 100 и 800 п.о. Праймеры для идентификации EE-GM3 могут распознавать последовательность в пределах 5’-фланкирующей области EE-GM3 (SEQ ID No 2, от положения 1 до положения 1451) или в пределах 3’-фланкирующей области EE-GM3 (комплементарную SEQ ID No 3 от положения 241 до положения 1408) и последовательность в пределах чужеродной ДНК, включающей гены устойчивости к гербицидам (комплементарную SEQ ID No 2 от положения 1452 до 1843 или SEQ ID No 3 от положения 1 до положения 240, или SEQ ID No 20 от положения 1452 до положения 16638, или ее комплементарную цепь), соответственно. Праймер, распознающий 3’-фланкирующую область, может включать нуклеотиднуто последовательность SEQ ID No 5, а праймер, распознающий последовательность в пределах чужеродной ДНК, включающей гены устойчивости к гербицидам, может включать нуклеотидную последовательность SEQ ID No 4 или SEQ ID No: 7, описанные здесь. Праймеры для идентификации EE-GM1 могут распознавать последовательность в пределах 5’-фланкирующей области EE-GM1 (SEQ ID No 12, от положения 1 до положения 209) или в пределах 3’-фланкирующей области EE-GM1 (комплементарную SEQ ID No 13 от положения 569 до положения 1000) и последовательность в пределах чужеродной ДНК, включающей ген устойчивости к гербициду EE-GM1 (комплементарную SEQ ID No 12 от положения 210 до положения 720 или SEQ ID No 13 от положения 1 до положения 568), соответственно. Праймер, распознающий 5’-фланкирующую область EE-GM1, может включать нуклеотидную последовательность SEQ ID No 16, а праймер, распознающий последовательность в пределах чужеродной ДНК EE-GM1, может включать нуклеотидную последовательность SEQ ID No: 17, описанную здесь. Праймеры для идентификации EE-GM2 могут распознавать последовательность в пределах 5’-фланкирующей области EE-GM2 (SEQ ID No 14, от положения 1 до положения 311) или в пределах 3’-фланкирующей области EE-GM2 (комплементарную SEQ ID No 15 от положения 508 до положения 1880) и последовательность в пределах чужеродной ДНК, включающей ген устойчивости к гербициду EE-GM1 (комплементарную SEQ ID No 14 от положения 312 до положения 810 или SEQ ID No 15 от положения 1 до положения 507), соответственно. Праймер, распознающий 3’-фланкирующую область EE-GM2, может включать нуклеотидную последовательность SEQ ID No 18, а праймер, распознающий последовательность в пределах чужеродной ДНК EE-GM2, может включать нуклеотидную последовательность SEQ ID No 19, описанную здесь. ПЦР-амплификацию можно выполнять одновременно или последовательно.
В частности, настоящее изобретение относится к способу идентификации элитного события EE-GM3 и EE-GM1 в биологических образцах, причем этот способ включает амплификацию по меньшей мере двух нуклеотидных последовательностей, присутствующих в биологическом образце, с помощью полимеразной цепной реакции, использующей два праймера, включающие или состоящие (главным образом) из нуклеотидной последовательности SEQ ID No 4 и SEQ ID No 5, соответственно, и приводящей к получению фрагмента ДНК длиной приблизительно 263 п.о., либо два праймера, включающие или состоящие (главным образом) из нуклеотидной последовательности SEQ ID No 5 и SEQ ID No 7, соответственно, и приводящей к получению фрагмента ДНК длиной приблизительно 706 п.о., и полимеразной цепной реакции, использующей два праймера, включающие или состоящие (главным образом) из нуклеотидной последовательности SEQ ID No 16 и SEQ ID No 17, соответственно, и приводящей к получению фрагмента ДНК длиной приблизительно 183 п.о. Эти две полимеразные цепные реакции можно осуществлять одновременно или последовательно.
В частности, настоящее изобретение относится к способу идентификации элитного события EE-GM3 и EE-GM2 в биологических образцах, причем этот способ включает амплификацию по меньшей мере двух нуклеотидных последовательностей, присутствующих в биологическом образце, с помощью полимеразной цепной реакции, использующей два праймера, включающие или состоящие (главным образом) из нуклеотидной последовательности SEQ ID No 4 и SEQ ID No 5, соответственно, и приводящей к получению фрагмента ДНК длиной приблизительно 263 п.о., либо два праймера, включающие или состоящие (главным образом) из нуклеотидной последовательности SEQ ID No 5 и SEQ ID No 7, соответственно, и приводящей к получению фрагмента ДНК длиной приблизительно 706 п.о., и полимеразной цепной реакции, использующей два праймера, включающие или состоящие (главным образом) из нуклеотидной последовательности SEQ ID No 18 и SEQ ID No 19, соответственно, и приводящей к получению фрагмента ДНК длиной приблизительно 151 п.о. Эти две полимеразные цепные реакции можно осуществлять одновременно или последовательно.
Настоящее изобретение, кроме того, относится к специфическим фланкирующим последовательностям EE-GM3, описанным здесь, в комбинации со специфическими фланкирующими последовательностями EE-GM1, которые можно использовать для разработки специфических способов идентификации одновременного присутствия EE-GM3 и EE-GM1 в биологических образцах. Такие комбинированные специфические фланкирующие последовательности также можно использовать в качестве эталонного контрольного материала при анализах идентификации. В частности, настоящее изобретение относится к 5’- и/или 3’-фланкирующим областям EE-GM3 в комбинации с 5’- и/или 3’-фланкирующими областями EE-GM1, которые можно использовать для разработки специфических праймеров и зондов, как описано далее здесь. Кроме того, в качестве эталонного материала можно использовать молекулы нуклеиновых кислот, предпочтительно, длиной приблизительно 150-850 п.о., включающие последовательность, которую можно амплифицировать с помощью праймеров, включающих или состоящих (главным образом) из нуклеотидной последовательности SEQ ID No 7 и SEQ ID No 5 или SEQ ID No 4 и SEQ ID No 5, в комбинации с молекулами нуклеиновых кислот, включающими последовательность, которую можно амплифицировать с помощью праймеров, включающих или состоящих (главным образом) из нуклеотидной последовательности SEQ ID No 16 и SEQ ID No 17; в частности, такие молекулы нуклеиновых кислот получают при использовании таких праймеров в материале, включающем EE-GM3 и EE-GM1.
Настоящее изобретение, кроме того, также относится к специфическим фланкирующим последовательностям EE-GM3, описанным здесь, в комбинации со специфической фланкирующей последовательностью EE-GM2, которые можно использовать для разработки специфических способов идентификации одновременного присутствия EE-GM3 и EE-GM2 в биологических образцах. Такие комбинированные специфические фланкирующие последовательности также можно использовать в качестве эталонного контрольного материала при анализах идентификации. А именно, настоящее изобретение относится к 5’- и/или 3’-фланкирующим областям EE-GM3 в комбинации с 5’- и/или 3’-фланкирующими областями EE-GM2, которые можно использовать для разработки специфических праймеров и зондов согласно дальнейшему описанию здесь. Кроме того, в качестве эталонного материала можно использовать молекулы нуклеиновых кислот, предпочтительно, длиной приблизительно 150-850 п.о., включающие последовательность, которую можно амплифицировать с помощью праймеров, включающих или состоящих (главным образом) из нуклеотидной последовательности SEQ ID No 7 и SEQ ID No 5 или SEQ ID No 4 и SEQ ID No 5, в комбинации с молекулами нуклеиновых кислот, включающими последовательность, которую можно амплифицировать с помощью праймеров, включающих или состоящих (главным образом) из нуклеотидной последовательности SEQ ID No 18 и SEQ ID No 19; в частности, такие молекулы нуклеиновых кислот получают при использовании таких праймеров в материале, включающем EE-GM3 и EE-GM2.
Настоящее изобретение, кроме того, относится к способам идентификации одновременного присутствия EE-GM3 и EE-GM1 в биологических образцах, основанным на использовании таких специфических праймеров или зондов. Праймеры для обнаружения EE-GM3 могут включать, состоять из или главным образом состоять из нуклеотидной последовательности длиной от 17 до приблизительно 200 последовательных нуклеотидов, выбираемых из нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2, от нуклеотида 1 до нуклеотида 1451, или комплементарной цепи нуклеотидной последовательности SEQ ID 3, от нуклеотида 241 до нуклеотида 1408, в комбинации с праймерами, включающими, состоящими из или главным образом состоящими из нуклеотидной последовательности длиной от 17 до приблизительно 200 последовательных нуклеотидов, выбираемых из нуклеотидной последовательности SEQ ID No 1, например, нуклеотидной последовательности длиной от 17 до приблизительно 200 последовательных нуклеотидов, выбираемых из комплементарной цепи нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2, от нуклеотида 1452 до нуклеотида 1843, или нуклеотидной последовательности SEQ ID No 3, от нуклеотида 1 до нуклеотида 240. Праймеры для обнаружения EE-GM1 могут включать, состоять из или главным образом состоять из нуклеотидной последовательности длиной от 17 до приблизительно 200 последовательных нуклеотидов, выбираемых из нуклеотидной последовательности SEQ ID No 12, от нуклеотида 1 до нуклеотида 209, или комплементарной цепи нуклеотидной последовательности SEQ ID 13, от нуклеотида 569 до нуклеотида 1000, в комбинации с праймерами, включающими, состоящими из или главным образом состоящими из нуклеотидной последовательности длиной от 17 до приблизительно 200 последовательных нуклеотидов, выбираемых из нуклеотидной последовательности SEQ ID No 11, например, нуклеотидной последовательности длиной от 17 до приблизительно 200 последовательных нуклеотидов, выбираемых из комплементарной цепи нуклеотидной последовательности SEQ ID No 12, от нуклеотида 219 до нуклеотида 720, или нуклеотидной последовательности SEQ ID No 13, от нуклеотида 1 до нуклеотида 568. Праймеры также могут включать указанные нуклеотидные последовательности, расположенные непосредственно на их 3’-конце, и, кроме того, включать неродственные последовательности или последовательности, являющиеся производными упомянутых нуклеотидных последовательностей, но содержащие несоответствия.
Настоящее изобретение, кроме того, относится к способам идентификации одновременного присутствия EE-GM3 и EE-GM2 в биологических образцах, основанным на использовании таких специфических праймеров или зондов. Праймеры для обнаружения EE-GM3 могут включать, состоять из или главным образом состоять из нуклеотидной последовательности длиной от 17 до приблизительно 200 последовательных нуклеотидов согласно описанию в предыдущем абзаце. Праймеры для обнаружения EE-GM2 могут включать, состоять из или главным образом состоять из нуклеотидной последовательности длиной от 17 до приблизительно 200 последовательных нуклеотидов, выбираемых из нуклеотидной последовательности SEQ ID No 14, от нуклеотида 1 до нуклеотида 311, или комплементарной цепи нуклеотидной последовательности SEQ ID No 15, от нуклеотида 508 до нуклеотида 1880, в комбинации с праймерами, включающими, состоящими из или главным образом состоящими из нуклеотидной последовательности длиной от 17 до приблизительно 200 последовательных нуклеотидов, выбираемых из нуклеотидной последовательности SEQ ID No 11, например, нуклеотидной последовательности длиной от 17 до приблизительно 200 последовательных нуклеотидов, выбираемых из комплементарной цепи нуклеотидной последовательности SEQ ID No 14, от нуклеотида 312 до нуклеотида 810, или нуклеотидной последовательности SEQ ID No 15, от нуклеотида 1 до нуклеотида 507. Праймеры также могут включать указанные нуклеотидные последовательности, расположенные непосредственно на их 3’-конце, и, кроме того, включать неродственные последовательности или последовательности, являющиеся производными упомянутых нуклеотидных последовательностей, но содержащие несоответствия.
Настоящее изобретение, кроме того, относится к наборам для идентификации элитных событий EE-GM3 и EE-GM1 в биологических образцах, включающим по меньшей мере один праймер или зонд, специфически распознающий 5’- и/или 3’-фланкирующую последовательность чужеродной ДНК в EE-GM3, включающей гены устойчивости к гербицидам, и по меньшей мере один праймер или зонд, специфически распознающий 5’- и/или 3’-фланкирующую последовательность чужеродной ДНК в EE-GM1, включающей гены устойчивости к гербицидам.
Настоящее изобретение, кроме того, относится к наборам для идентификации элитных событий EE-GM3 и EE-GM2 в биологических образцах, включающим по меньшей мере один праймер или зонд, специфически распознающий 5’- и/или 3’-фланкирующую последовательность чужеродной ДНК в ЕЕ-GM3, включающей гены устойчивости к гербицидам, и по меньшей мере один праймер или зонд, специфически распознающий 5’- и/или 3’-фланкирующую последовательность чужеродной ДНК в ЕЕ-GM2, включающей ген устойчивости к гербициду.
Наборы, согласно изобретению, могут включать, кроме праймера, специфически распознающего 5’- или 3’-фланкирующую последовательность EE-GM3 и 5’- или 3’-фланкирующую последовательность ЕЕ-GM1, дополнительный праймер, специфически распознающий 5’- и/или 3’-фланкирующую последовательность чужеродной ДНК в EE-GM3, включающей гены устойчивости к гербицидам, и дополнительный праймер, специфически распознающий последовательность в пределах чужеродной ДНК в EE-GM1, включающей гены устойчивости к гербицидам, для использования согласно протоколу ПЦР-идентификации.
Наборы, согласно изобретению, могут также включать, кроме праймера, специфически распознающего 5’- или 3’-фланкирующую последовательность EE-GM3 и 5’- или 3’-фланкирующую последовательность EE-GM2, дополнительный праймер, специфически распознающий 5’- и/или 3’-фланкирующую последовательность чужеродной ДНК в EE-GM3, включающей гены устойчивости к гербицидам, и дополнительный праймер, специфически распознающий последовательность в пределах чужеродной ДНК в EE-GM2, включающей гены устойчивости к гербицидам, для использования согласно протоколу ПЦР-идентификации.
Праймер, распознающий 3’-фланкирующую область EE-GM3, может включать нуклеотидную последовательность SEQ ID No 5, а праймер, распознающий трансгены чужеродной ДНК в EE-GM3, включающей гены устойчивости к гербицидам, может включать нуклеотидную последовательность SEQ ID No 4 или 7, либо любой другой праймер или комбинация праймеров для обнаружения EE-GM3, как описано здесь, в комбинации с праймером, распознающим 5’-фланкирующую область EE-GM1, который может включать нуклеотидную последовательность SEQ ID No 16, и праймером, распознающим трансгены чужеродной ДНК в EE-GM1, включающей гены устойчивости к гербицидам, может включать нуклеотидную последовательность SEQ ID No 17.
Праймер, распознающий 3’-фланкирующую область EE-GM3, может включать нуклеотидную последовательность SEQ ID No 5, а праймер, распознающий трансгены чужеродной ДНК в EE-GM3, включающей гены устойчивости к гербицидам, может включать нуклеотидную последовательность SEQ ID No 4 или 7, либо любой другой праймер или комбинация праймеров для обнаружения EE-GM3, как описано здесь, в комбинации с праймером, распознающим 5’-фланкирующую область в EE-GM2, который может включать нуклеотидную последовательность SEQ ID No 18, и праймером, распознающим трансгены чужеродной ДНК в EE-GM2, включающей гены устойчивости к гербицидам, может включать нуклеотидную последовательность SEQ ID No 19.
Настоящее изобретение, кроме того, относится к набору для идентификации элитных событий EE-GM3 и EE-GM1 в биологических образцах, включающим праймеры для ПЦР, включающие или состоящие (главным образом) из нуклеотидной последовательности SEQ ID No 5 и SEQ ID No 4, и праймеры для ПЦР, включающие или состоящие (главным образом) из нуклеотидной последовательности SEQ ID No 16 и SEQ ID No 17, для использования при идентификации EE-GM3/EE-GM1 на основе ПЦР.
Настоящее изобретение, кроме того, относится к набору для идентификации элитных событий EE-GM3 и EE-GM2 в биологических образцах, включающим праймеры для ПЦР, включающие или состоящие (главным образом) из нуклеотидной последовательности SEQ ID No 5 и SEQ ID No 4, и праймеры для ПЦР, включающие или состоящие (главным образом) из нуклеотидной последовательности SEQ ID No 18 и SEQ ID No 19, для использования при идентификации EE-GM3/EE-GM2 на основе ПЦР.
Настоящее изобретение также относится к набору для идентификации элитного события EE-GM3 и EE-GM1 в биологических образцах, включающему два специфических зонда, первый из которых включает или состоит (главным образом) из последовательности, соответствующей (или комплементарной) последовательности, обладающей от 80% до 100% идентичности со специфической областью EE-GM3, а второй включает или состоит (главным образом) из последовательности, соответствующей (или комплементарной) последовательности, обладающей от 80% до 100% идентичности со специфической областью EE-GM1. В предпочтительном случае последовательность первого зонда соответствует специфической области, включающей часть 5’- или 3’-фланкирующей области EE-GM3, а второй зонд соответствует специфической области, включающей часть 5’- или 3’-фланкирующей области EE-GM1. В наиболее предпочтительном случае ЕЕ-СМ3-специфичный зонд включает или состоит (главным образом) из (или комплементарен) последовательности, обладающей от 80% до 100% идентичности с последовательностью, расположенной между нуклеотидами 1441-1462 SEQ ID No 2, или последовательности, обладающей от 80% до 100% идентичности с последовательностью, расположенной между нуклеотидами 220-260 ID No 3, a EE-GM1-специфичный зонд включает или состоит (главным образом) из (или комплементарен) последовательности, обладающей от 80% до 100% идентичности с последовательностью, расположенной между нуклеотидами 199-220 SEQ ID No 12, или последовательности, обладающей от 80% до 100% идентичности с последовательностью, расположенной между нуклеотидами 558-579 SEQ ID No 13.
Настоящее изобретение также относится к набору для идентификации элитного события EE-GM3 и EE-GM2 в биологических образцах, включающему два специфических зонда, первый из которых включает или состоит (главным образом) из последовательности, соответствующей (или комплементарной) последовательности, обладающей от 80% до 100% идентичности со специфической областью EE-GM3, а второй включает или состоит (главным образом) из последовательности, соответствующей (или комплементарной) последовательности, обладающей от 80% до 100% идентичности со специфической областью EE-GM2. В предпочтительном случае последовательность первого зонда соответствует специфической области, включающей часть 5’- или 3’-фланкирующей области EE-GM3, а второй зонд соответствует специфической области, включающей часть 5’- или 3’-фланкирующей области EE-GM2. В наиболее предпочтительном случае ЕЕ-ОМ3-специфичный зонд включает или состоит (главным образом) из (или комплементарен) последовательности, обладающей от 80% до 100% идентичности с последовательностью, расположенной между нуклеотидами 1441-1462 SEQ ID No 2, или последовательности, обладающей от 80% до 100% идентичности с последовательностью, расположенной между нуклеотидами 220-260 ID No 3, а ЕЕ-СМ2-специфичный зонд включает или состоит (главным образом) из (или комплементарен) последовательности, обладающей от 80% до 100% идентичности с последовательностью, расположенной между нуклеотидами 301-322 SEQ ID No 14, или последовательности, обладающей от 80% до 100% идентичности с последовательностью, расположенной между нуклеотидами 497-518 SEQ ID No 15.
Согласно другому аспекту настоящего изобретения описанные последовательности ДНК включают сайт соединения события и полинкулеотиды достаточной длины, относящиеся как к геному сои, так и к чужеродной ДНК, включающей гены устойчивости к гербицидам (трансгену), для каждого события, что обеспечивает возможность их использования в качестве праймера или зонда для обнаружения EE-GM3 и EE-GM 1. Такие последовательности могут включать по меньшей мере 9 нуклеотидов геномной ДНК сои и аналогичное количество нуклеотидов чужеродной ДНК, включающей гены устойчивости к гербицидам (трансгена) EE-GM3 или EE-GM1, с каждой стороны сайта соединения, соответственно. В наиболее предпочтительном случае такие последовательности ДНК включают по меньшей мере 9 нуклеотидов геномной ДНК сои и аналогичное количество нуклеотидов чужеродной ДНК, включающей гены устойчивости к гербицидам (трансгена), примыкающие к сайту соединения в SEQ ID No: 2 или SEQ ID No: 3, и по меньшей мере 9 нуклеотидов геномной ДНК сои и аналогичное количество нуклеотидов чужеродной ДНК, включающей гены устойчивости к гербицидам (трансгена), примыкающие к сайту соединения в SEQ ID No: 12 или SEQ ID No: 13.
Согласно еще одному аспекту настоящего изобретения описанные последовательности ДНК включают сайт соединения события и полинкулеотиды достаточной длины, относящиеся как к геному сои, так и к чужеродной ДНК, включающей гены устойчивости к гербицидам (трансгену), для каждого события, что обеспечивает возможность их использования в качестве праймера или зонда для обнаружения EE-GM3 и EE-GM2. Такие последовательности могут включать по меньшей мере 9 нуклеотидов геномной ДНК сои и аналогичное количество нуклеотидов чужеродной ДНК, включающей гены устойчивости к гербицидам (трансгена), для EE-GM3 или EE-GM2 с каждой стороны сайта инсерции, соответственно. В наиболее предпочтительном случае такие последовательности ДНК включают по меньшей мере 9 нуклеотидов геномной ДНК сои и аналогичное количество нуклеотидов чужеродной ДНК, включающей гены устойчивости к гербицидам (трансгена), примыкающие к сайту соединения в SEQ ID No: 2 или SEQ ID No: 3, и по меньшей мере 9 нуклеотидов геномной ДНК сои и аналогичное количество нуклеотидов чужеродной ДНК, включающей гены устойчивости к гербицидам (трансгена), примыкающие к сайту соединения в SEQ ID No: 14 или SEQ ID No: 15.
Способы и наборы, охваченные настоящим изобретением, можно использовать для различных целей, например, не ограничиваясь этим: идентификации присутствия или определения (нижнего) порогового значения EE-GM3 и EE-GM1 или EE-GM3 и EE-GM2 в растениях, растительном материале или продуктах, например, не ограничиваясь этим, в пищевых продуктах или кормах (свежих или обработанных), включающих или происходящих из растительного материала; дополнительно или альтернативно способы и наборы настоящего изобретения можно использовать для идентификации трансгенного растительного материала в целях разделения трансгенных и нетрансгенных материалов;
дополнительно или альтернативно способы и наборы настоящего изобретения можно использовать для определения качества (т.е. процентного содержания чистого материала) растительного материала, включающего EE-GM3 и EE-GM1 или EE-GM3 и EE-GM1.
Настоящее изобретение, кроме того, относится к 5’- и/или 3’-фланкирующим областям EE-GM3 GM3 в комбинации со специфическими праймерами и зондами, разработанными на основе 5’- и/или 3’-фланкирующих последовательностей EE-GM1 или EE-GM2, а также к специфическим праймерам и зондам, разработанным на основе 5’- и/или 3’-фланкирующих последовательностей EE-GM3 в комбинации со специфическими праймерами и зондами, разработанными на основе 5’- и/или 3’-фланкирующих последовательностей EE-GM1 или EE-GM2.
Настоящее изобретение также относится к геномной ДНК, полученной из растений сои, содержащих элитные события EE-GM3 и EE-GM1, или растений, содержащих элитные события EE-GM3 и EE-GM2. Такую геномную ДНК можно использовать в качестве эталонного контрольного материала при анализах идентификации, описанных здесь.
Кроме того, здесь представлены растения или клетки, части, семена или потомство трансгенной сои, устойчивой к гербицидам, каждое из которых содержит по меньшей мере два элитных события, причем первое из указанных элитных событий включает чужеродную ДНК, включающую:
i) первый химерный ген, включающий модифицированный ген epsps из Zea mays, кодирующий фермент EPSPS, устойчивый к глифосату, под контролем промотора, обеспечивающего экспрессию в растительной клетке, и
ii) второй химерный ген, включающий модифицированный ген hppd из Pseudomonas fluorescens, кодирующий фермент, устойчивый к гербицидам-ингибиторам HPPD, под контролем промотора, обеспечивающего экспрессию в растительной клетке, а второе из указанных элитных событий включает (третий) химерный ген, включающий модифицированный ген устойчивости к глюфосинату из Streptomyces viridochromogenes, кодирующий фермент глюфосинат- (или фосфинотрицин-) ацетилтрансферазу под контролем промотора, обеспечивающего экспрессию в растительной клетке.
В одном из вариантов воплощения первое из указанных элитных событий включает нуклеотиды с 1 по 1451 из SEQ ID No 2, примыкающие к указанной чужеродной ДНК непосредственно сверху, и нуклеотиды с 241 по 1408 из SEQ ID No 3, примыкающие к указанной чужеродной ДНК непосредственно снизу, а второе из указанных элитных событий включает нуклеотиды с 1 по 209 из SEQ ID No 12, примыкающие к указанной чужеродной ДНК непосредственно сверху, и нуклеотиды с 569 по 1000 из SEQ ID No 13, примыкающие к указанной чужеродной ДНК непосредственно снизу, либо второе из указанных элитных событий включает нуклеотиды с 1 по 311 из SEQ ID No 14, примыкающие к указанной чужеродной ДНК непосредственно сверху, и нуклеотиды с 508 по 1880 из SEQ ID No 15, примыкающие к указанной чужеродной ДНК непосредственно снизу.
В другом варианте воплощения указанное элитное событие можно получить путем скрещивания с растением сои, выросшим из эталонного семени, содержащего указанные события и депонированного в АТСС под номером доступа РТА-11041 или РТА-11042, или можно получить из эталонного семени, содержащего первое из указанных событий и депонированного в NCIMB под номером доступа NCIMB 41659, а также из эталонного семени, содержащего второе из указанных событий и депонированного в NCIMB под номером доступа NCIMB 41658 или в NCIMB под номером доступа NCIMB 41660.
В еще одном варианте воплощения анализ геномной ДНК указанного растения сои или его клетки, части, семена или потомства с помощью протокола идентификации первого из указанных элитных событий с использованием двух праймеров, включающих нуклеотидные последовательности SEQ ID No 4 и SEQ ID No 5, соответственно, приводит к получению фрагмента ДНК длиной 263 п.о. или приблизительно 263 п.о., а анализ с помощью протокола идентификации второго из указанных элитных событий с использованием двух праймеров, включающих нуклеотидные последовательности SEQ ID No 16 и SEQ ID No 17, соответственно, приводит к получению фрагмента ДНК длиной 183 п.о. или приблизительно 183 п.о., а при использовании двух праймеров, включающих нуклеотидные последовательности SEQ ID No 18 и SEQ ID No 19, соответственно, приводит к получению фрагмента ДНК длиной 151 п.о. или приблизительно 151 п.о.
Кроме того, здесь представлен способ идентификации трансгенного растения сои или его клеток, частей, семян или потомства, содержащих 2 элитных события, в биологических образцах, в котором указанное растение, клетки, семена или потомство устойчивы к глифосату, глюфосинату и гербициду-ингибитору HPPD (например, изоксафлютолу), причем указанный способ включает амплификацию фрагмента ДНК длиной между 100 и 500 п.о. из нуклеиновой кислоты первого из указанных событий, присутствующего в биологическом образце, с помощью полимеразной цепной реакции, использующей по меньшей мере два праймера, один из которых распознает 5’-фланкирующую область первого из вышеуказанных элитных событий, причем указанная 5’-фланкирующая область включает нуклеотидную последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1 до нуклеотида 1451 или 3’-фланкирующую область первого из указанных элитных событий, причем указанная 3’-фланкирующая область включает нуклеотидную последовательность комплементарной цепи SEQ ID No 3 от нуклеотида 241 до нуклеотида 1408, а другой из указанных праймеров распознает последовательность в пределах чужеродной ДНК первого из указанных событий, включающей нуклеотиднуто последовательность комплементарной цепи SEQ ID No 2 от нуклеотида 1452 до нуклеотида 1843 или нуклеотидную последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 1 до нуклеотида 240, и включает амплификацию фрагмента ДНК длиной между 50 и 1000 п.о. или между 100 и 500 п.о. из нуклеиновой кислоты второго из указанных событий, присутствующего в биологическом образце, с помощью полимеразной цепной реакции, использующей по меньшей мере два праймера, один из которых распознает 5’-фланкирующую область второго из вышеуказанных элитных событий, причем указанная 5’-фланкирующая область включает нуклеотидную последовательность SEQ ID No 12 от нуклеотида 1 до 209 или 3’-фланкирующую область второго из указанных элитных событий, причем указанная 3’-фланкирующая область включает нуклеотиднуто последовательность комплементарной цепи SEQ ID No 13 от нуклеотида 569 до 1000, а другой из указанных праймеров распознает последовательность в пределах чужеродной ДНК второго из указанных событий, включающей нуклеотидную последовательность SEQ ID No 12 от нуклеотида 210 до нуклеотида 720 или нуклеотидную последовательность SEQ ID No 13 от нуклеотида 1 до нуклеотида 568.
Кроме того, в настоящем документе представлен способ идентификации трансгенного растения сои или его клеток, частей, семян или потомства, содержащих 2 элитных события, в биологических образцах, в котором указанное растение, клетки, семена или потомство устойчивы к глифосату, глюфосинату и/или гербициду-ингибитору HPPD (например, изоксафлютолу), причем указанный способ включает амплификацию фрагмента ДНК длиной между 50 и 1000 или между 100 и 500 п.о. из нуклеиновой кислоты первого из указанных событий, присутствующего в биологическом образце, с помощью полимеразной цепной реакции, использующей по меньшей мере два праймера, один из которых распознает 5’-фланкирующую область первого из вышеуказанных элитных событий, причем указанная 5’-фланкирующая область включает нуклеотидную последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1 до нуклеотида 1451 или 3’-фланкирующую область первого из указанных элитных событий, причем указанная 3’-фланкирующая область включает нуклеотидную последовательность комплементарной цепи SEQ ID No 3 от нуклеотида 241 до нуклеотида 1408, а другой из указанных праймеров распознает последовательность в пределах чужеродной ДНК первого из указанных событий, включающей нуклеотидную последовательность комплементарной цепи SEQ ID No 2 от нуклеотида 1452 до нуклеотида 1843 или нуклеотидную последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 1 до нуклеотида 240, и включает амплификацию фрагмента ДНК длиной между 50 и 1000 п.о. или между 100 и 500 п.о. из нуклеиновой кислоты второго из указанных событий, присутствующего в биологическом образце, с помощью полимеразной цепной реакции, использующей по меньшей мере два праймера, один из которых распознает 5’-фланкирующую область второго из вышеуказанных элитных событий, причем указанная 5’-фланкирующая область включает нуклеотидную последовательность SEQ ID No 14 от нуклеотида 1 до 311 или 3’-фланкирующую область второго из указанных элитных событий, причем указанная 3’-фланкирующая область включает нуклеотидную последовательность комплементарной цепи SEQ ID No 15 от нуклеотида 508 до 1880, а другой из указанных праймеров распознает последовательность в пределах чужеродной ДНК второго из указанных событий, включающей нуклеотидную последовательность SEQ ID No 14 от нуклеотида 312 до нуклеотида 810 или нуклеотидную последовательность SEQ ID No 15 от нуклеотида 1 до нуклеотида 507.
Кроме того, здесь представлен набор для идентификации трансгенного растения сои или его клеток, частей, семян или потомства, содержащих 2 элитных события и устойчивых к глифосату, глюфосинату и гербициду-ингибитору HPPD (например, изоксафлютолу), в биологических образцах, причем указанный набор включает праймер, распознающий 5’-фланкирующую область первого из вышеуказанных элитных событий, причем указанная 5’-фланкирующая область включает нуклеотидную последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1 до нуклеотида 1451, или праймер, распознающий 3’-фланкирующуто область первого из указанных элитных событий, причем указанная 3’-фланкирующая область включает нуклеотидную последовательность комплементарной цепи SEQ ID No 3 от нуклеотида 241 до нуклеотида 1408, и праймер, распознающий последовательность в пределах чужеродной ДНК первого из указанных событий, причем указанная чужеродная ДНК включает нуклеотидную последовательность комплементарной цепи SEQ ID No 2 от нуклеотида 1452 до нуклеотида 1843 или нуклеотидную последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 1 до нуклеотида 240, а также указанный набор включает праймер, распознающий 5’-фланкирующую область второго из вышеуказанных элитных событий, причем указанная 5’-фланкирующая область включает нуклеотидную последовательность SEQ ID No 12 от нуклеотида 1 до 209, или праймер, распознающий 3’-фланкирующую область второго из указанных элитных событий, причем указанная 3’-фланкирующая область включает нуклеотидную последовательность комплементарной цепи SEQ ID No 13 от нуклеотида 569 до 1000, а другой из указанных праймеров распознает последовательность в пределах чужеродной ДНК второго из указанных событий, включающую нуклеотидную последовательность SEQ ID No 12 от нуклеотида 210 до нуклеотида 720 или нуклеотидную последовательность SEQ ID No 13 от нуклеотида 1 до нуклеотида 568.
Кроме того, здесь представлен набор для идентификации трансгенного растения сои или его клеток, частей, семян или потомства, содержащих 2 элитных события и устойчивых к глифосату, глюфосинату и гербициду-ингибитору HPPD (например, изоксафлютолу), в биологических образцах, причем указанный набор включает праймер, распознающий 5’-фланкирующую область первого из вышеуказанных элитных событий, причем указанная 5’-фланкирующая область включает нуклеотидную последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1 до нуклеотида 1451, или праймер, распознающий 3’-фланкирующую область первого из указанных элитных событий, причем указанная 3’-фланкирующая область включает нуклеотидную последовательность комплементарной цепи SEQ ID No 3 от нуклеотида 241 до нуклеотида 1408, и праймер, распознающий последовательность в пределах чужеродной ДНК первого из указанных событий, причем указанная чужеродная ДНК включает нуклеотидную последовательность комплементарной цепи SEQ ID No 2 от нуклеотида 1452 до нуклеотида 1843 или нуклеотидную последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 1 до нуклеотида 240, а также указанный набор включает праймер, распознающий 5’-фланкирующую область второго из вышеуказанных элитных событий, причем указанная 5’-фланкирующая область включает нуклеотидную последовательность SEQ ID No 14 от нуклеотида 1 до 311, или 3’-фланкирующую область второго из указанных элитных событий, причем указанная 3’-фланкирующая область включает нуклеотидную последовательность комплементарной цепи SEQ ID No 15 от нуклеотида 508 до 1880, а другой из указанных праймеров распознает последовательность в пределах чужеродной ДНК второго из указанных событий, включающую нуклеотидную последовательность SEQ ID No 14 от нуклеотида 312 до нуклеотида 810 или нуклеотидную последовательность SEQ ID No 15 от нуклеотида 1 до нуклеотида 507.
Также здесь представлены растение сои, клетка, ткань или семя растения, содержащие в своем геноме молекулу нуклеиновой кислоты, включающую нуклеотидную последовательность, по меньшей мере на 97, 98 или по меньшей мере на 99% или 99,5% идентичную нуклеотидной последовательности SEQ ID No 20 от положения 1452 до положения 16638, нуклеотидной последовательности SEQ ID No 20 от положения 2257 до положения 16601 или их комплементарным цепям, или нуклеотидную последовательность, по меньшей мере на 97, 98 или по меньшей мере на 99% или 99,5% идентичную SEQ ID No 20 или ее комплементарной цепи, и содержащие в своем геноме молекулу нуклеиновой кислоты, включающую нуклеотидную последовательность, по меньшей мере на 97, 98 или по меньшей мере на 99% или 99,5% идентичную нуклеотидной последовательности EE-GM1 или EE-GM2 или их комплементарным цепям, причем эталонные семена, содержащие EE-GM1, депонированы под номером доступа NCIMB 41658, а эталонные семена, содержащие EE-GM2, депонированы под номером доступа NCIMB 41660. В одном из вариантов воплощения настоящего изобретения нуклеотидная последовательность EE-GM1 или EE-GM2 в указанном растении, клетке, ткани или семени растения представляет собой последовательность ДНК (например, чужеродную последовательность ДНК) в SEQ ID No 12 или 13 или последовательность ДНК (например, чужеродную последовательность ДНК) в SEQ ID No 14 или 15, или последовательность ДНК в составе генома растения (например, в депонированных семенах, содержащих EE-GM1 или EE-GM2 согласно изобретению), содержащую SEQ ID No 12 и 13 между первым нуклеотидом последовательности SEQ ID No 12 и последним нуклеотидом последовательности SEQ ID No 13, или последовательность ДНК в составе генома растения, содержащую SEQ ID No 14 и 15 между первым нуклеотидом последовательности SEQ ID No 14 и последним нуклеотидом последовательности SEQ ID No 15.
В одном из вариантов воплощения настоящего изобретения представлены растение сои, клетка, ткань или семя растения, содержащие в своем геноме молекулу нуклеиновой кислоты, гибридизующуюся с нуклеотидной последовательностью SEQ ID No 1 или ее комплементарной цепью или гибридизующуюся с нуклеотидной последовательностью SEQ ID No 20 от положения 1452 до положения 16638 или ее комплементарной цепью, или гибридизующуюся с нуклеотидной последовательностью SEQ ID No 20 или ее комплементарной цепью, и содержащие в своем геноме молекулу нуклеиновой кислоты, гибридизующуюся с нуклеотидной последовательностью EE-GM1 или EE-GM2 или их комплементарными цепями, причем эталонные семена, содержащие EE-GM1, депонированы под номером доступа NCIMB 41658, а эталонные семена, содержащие EE-GM2, депонированы под номером доступа NCIMB 41660. В одном из вариантов воплощения настоящего изобретения нуклеотидная последовательность EE-GM1 или EE-GM2 в указанном растении, клетке, ткани или семени растения представляет собой чужеродную последовательность ДНК в SEQ ID No 12 или 13 или чужеродную последовательность ДНК в SEQ ID No 14 или 15, или чужеродную последовательность ДНК в составе генома растения (например, в депонированных семенах, содержащих EE-GM1 или EE-GM2 согласно изобретению), содержащую SEQ ID No 12 и 13 между первым нуклеотидом последовательности SEQ ID No 12 и последним нуклеотидом последовательности SEQ ID No 13, или чужеродную последовательность ДНК в составе генома растения, содержащую SEQ ID No 14 и 15 между первым нуклеотидом последовательности SEQ ID No 14 и последним нуклеотидом последовательности SEQ ID No 15.
Краткое описание чертежей
Приведенные далее Примеры, не предназначенные для ограничения настоящего изобретения в рамках конкретных описанных вариантов воплощения, можно осмысливать в сочетании с прилагаемыми Фигурами, включенными в настоящий документ посредством ссылок, на которых:
Фиг.1: Схематическое представление взаимодействия между упомянутыми нуклеотидными последовательностями и праймерами для элитного события EE-GM3. черный прямоугольник: чужеродная ДНК; заштрихованный прямоугольник: ДНК растительного происхождения; стрелка с клетчатой заливкой (а): химерный ген, кодирующий HPPD PF W366 (композицию химерного гена см. в Таблице 1); заштрихованная стрелка (б): химерный ген, кодирующий 2mEPSPS (композицию химерного гена см. в Таблице 1); черные стрелки: олигонуклеотидные праймеры, фигуры под прямоугольниками означают положения нуклеотидов; (в) относится к комплементарной цепи указанной нуклеотидной последовательности; Примечание: схема приведена без учета масштаба.
Фиг.2: Результаты, полученные с помощью протокола ПЦР-идентификации, разработанного для EE-GM3. Последовательность загрузки геля: Дорожка 1: Маркер молекулярной массы (лэддер 100 п.о.); дорожки 2 и 3: образцы ДНК из растений сои, содержащих трансгенное событие EE-GM3; дорожки 4-7: образцы ДНК из трансгенных растений сои, не содержащих элитное событие EE-GM3, но содержащих те же гены устойчивости к гербицидам (другие трансформационные события); дорожка 8: образец ДНК из сои дикого типа; дорожка 9: контроль матрицы ДНК отсутствует; дорожка 10: маркер молекулярной массы.
Фиг.3: Схематическое представление взаимодействия между упомянутыми нуклеотидными последовательностями и праймерами для элитного события EE-GM1. черный прямоугольник: чужеродная ДНК; заштрихованный прямоугольник: ДНК растительного происхождения; стрелка с горизонтальной штриховкой (г): химерный ген, кодирующий фосфинотрицинацетилтрансферазу (композицию химерного гена см. в SEQ ID No 11); черные стрелки: олигонуклеотидные праймеры, фигуры под прямоугольниками означают положения нуклеотидов; (в) относится к комплементарной цепи указанной нуклеотидной последовательности; Примечание: схема приведена без учета масштаба.
Фиг.4: Схематическое представление взаимодействия между упомянутыми нуклеотидными последовательностями и праймерами для элитного события EE-GM2. черный прямоугольник: чужеродная ДНК; заштрихованный прямоугольник: ДНК растительного происхождения; стрелка с горизонтальной штриховкой (г): химерный ген, кодирующий фосфинотрицинацетилтрансферазу (композицию химерного гена см. в SEQ ID No 11); черные стрелки: олигонуклеотидные праймеры, фигуры под прямоугольниками означают положения нуклеотидов; (в) относится к комплементарной цепи указанной нуклеотидной последовательности; НП: не применимо. Примечание: схема приведена без учета масштаба.
Фиг.5: Протокол ПЦР-идентификации, разработанный для EE-GM1. Последовательность загрузки геля: Дорожка 1: образцы ДНК из растений сои, содержащих трансгенное событие EE-GM1; дорожка 2: образцы ДНК из трансгенных растений сои, не содержащих элитное событие EE-GM1; дорожка 3: контрольные образцы ДНК из растений сои дикого типа; дорожка 4: контроль матрицы ДНК отсутствует; дорожка 5: маркер молекулярной массы.
Фиг.6: Протокол ПЦР-идентификации, разработанный для EE-GM2. Последовательность загрузки геля: Дорожка 1: образцы ДНК из растений сои, содержащих трансгенное событие EE-GM2; дорожка 2: образцы ДНК из трансгенных растений сои, не содержащих элитное событие EE-GM2; дорожка 3: контрольные образцы ДНК из растений сои дикого типа; дорожка 4: контроль матрицы ДНК отсутствует; дорожка 5: маркер молекулярной массы.
Подробное описание предпочтительных вариантов воплощения изобретения
Включение молекулы рекомбинантной ДНК в геном растения обычно является результатом трансформации клетки или ткани. Конкретный сайт встраивания обычно обусловлен случайным встраиванием.
ДНК, включенную в геном растения в результате трансформации растительной клетки или ткани рекомбинантной ДНК, или "трансформирующей ДНК" и происходящую из такой трансформирующей ДНК, здесь и далее называют "чужеродной ДНК", включающей один или более "трансгенов". Трансгены EE-GM3 представляют собой гены устойчивости к глифосату и гербициду-ингибитору HPPD. "Растительная ДНК" в контексте настоящего изобретения относится к ДНК, происходящей из трансформированного растения. Растительная ДНК обычно находится в том же генетическом локусе соответствующего растения дикого типа. Чужеродную ДНК можно характеризовать по положению и конфигурации в сайте встраивания молекулы рекомбинантной ДНК в геном растения. Сайт генома растения, куда встраивают рекомбинантную ДНК, также называют "сайтом инсерции" или "сайтом-мишенью". Инсерция рекомбинантной ДНК в область генома растения, называемую "прединсерционная растительная ДНК", может быть связана с делецией растительной ДНК, называемой "делецией сайта-мишени". "Фланкирующая область" или "фланкирующая последовательность" здесь относится к последовательности длиной по меньшей мере 20 п.о., предпочтительно по меньшей мере 50 п.о., и до 5000 п.о. ДНК, отличающейся от внедренной ДНК, предпочтительно ДНК генома растения, примыкающей к чужеродной ДНК непосредственно сверху или примыкающей к чужеродной ДНК непосредственно снизу. Результатом процедур трансформации, приводящих к случайному встраиванию чужеродной ДНК, является получение трансформантов с различными фланкирующими областями, характерными и уникальными для каждого трансформанта. Если рекомбинантную ДНК внедряют в геном растения путем традиционного скрещивания, сайт ее инсурции в геноме растения или ее фланкирующие области в общем случае не изменяются.
"Выделенная нуклеиновая кислота (последовательность)" или "выделенная ДНК (последовательность)" здесь относится к нуклеиновой кислоте или ДНК (последовательности), которая более не находится в природном окружении, из которого ее выделили, например, нуклеотидной последовательности в геноме растения или другой бактерии-хозяина, или нуклеотидной кислоте или ДНК в составе гибрида с ДНК или нуклеиновой кислотой из другого источника, например, в составе химерного гена под контролем промотора, обеспечивающего экспрессию в растительной клетке.
Событием называют (искусственный) генетический локус, который в результате генно-инженерных манипуляций несет чужеродную ДНК или трансген, включающий по меньшей мере одну копию интересующего исследователя гена или генов. Типичные аллельные состояния события представляют собой наличие или отсутствие чужеродной ДНК. Событие описывают фенотипически по экспрессии трансгена. На генетическом уровне событие является частью генетической композиции растения. На молекулярном уровне событие можно описывать по рестриктазной карте (например, в соответствии с определением с помощью саузерн-блоттинга), отличающийся тем, что сверху или снизу фланкирующим последовательностям трансгена, положению молекулярных маркеров и/или молекулярной конфигурации трансгена. Обычно трансформация растения трансформирующей ДНК, включающей по меньшей мере один интересующий исследователя ген, приводит к получению популяции трансфорамнтов, содержащей совокупность отдельных событий, каждое из которых является уникальным. Событие описывают по чужеродной ДНК и по меньшей мере одной из фланкирующих последовательностей.
Элитное событие в настоящем описании представляет собой событие, выбираемое из группы событий, полученных путем трансформации одной и той же трансформирующей ДНК, на основании экспрессии и стабильности трансгена(ов) и его совместимости с оптимальными агрономическими характеристиками растения, содержащего это событие. Таким образом, критерии селекции элитного события представляют собой один или более, предпочтительно два или более, наиболее предпочтительно - все критерии из следующего списка:
а. присутствие чужеродной ДНК не ставит под угрозу другие желательные характеристики растения, например, характеристики, относящиеся к агрономической производительности или коммерческой ценности;
б. событие описывается четко определенной молекулярной конфигурацией, которая стабильно наследуется и для которой можно разработать подходящие инструменты контроля идентичности;
в. ген(ы), интересующий(е) исследователя, демонстрирует(ют) корректную, адекватную и стабильную пространственную и временную фенотипическую экспрессию как в гетерозиготном (или гемизиготном), так и в гомозиготном состоянии события на коммерчески приемлемом уровне в диапазоне условий окружающей среды, при которых возможно нормальное агрономическое использование растений, несущих указанное событие.
В предпочтительном случае чужеродная ДНК ассоциирована с положением в геноме растения, позволяющим легко внедрять чужеродные последовательности в коммерчески желательное генетическое окружение.
Элитный статус события подтверждают интрогрессией элитного события в различные варианты генетического окружения, имеющие отношение к рассматриваемому вопросу, и наблюдением соответствия одному, двум или всем вышеприведенным критериям, например, а., б. и в..
Таким образом, "элитное событие" относится к генетическому локусу, содержащему чужеродную ДНК и соответствующему вышеописанным критериям. Растение, растительный материал или потомство, например, семена, могут содержать одно или более элитных событий в составе своего генома.
Разработанные инструменты для идентификации элитного события либо растения, либо растительного материала, содержащего элитное событие, либо продукта, включающего растительный материал, содержащий элитное событие, основаны на специфических геномных характеристиках элитного события, например, специфической рестриктазной карте области генома, содержащей чужеродную ДНК, молекулярных маркерах или последовательности фланкирующей(и) области(ей) чужеродной ДНК.
После секвенирования одной или обеих фланкирующих областей чужеродной ДНК можно разработать праймеры и зонды, специфически распознающие эту (эти) последовательность(и) в нуклеиновой кислоте (ДНК или РНК) образца с помощью молекулярно-биологических методик. Например, можно разработать ПЦР-методику идентификации элитного события в биологических образцах (например, образцах растений, растительного материала или продуктов, содержащих растительный материал). Такая ПЦР основана по меньшей мере на двух специфических "праймерах", один из которых распознает последовательность в пределах 5’- или 3’-фланкирующей области элитного события, а второй распознает последовательность в пределах чужеродной ДНК. В предпочтительном случае праймеры обладают последовательностью длиной от 15 до 35 нуклеотидов, которая при оптимизированных для ПЦР условиях "специфически распознает" последовательность в пределах 5’- или 3’-фланкирующей области элитного события или чужеродной ДНК элитного события, соответственно, что приводит к амплификации специфического фрагмента ("интегрированного фрагмента" или отличительного ампликона) из образца нуклеиновой кислоты, содержащего элитное событие. Это означает, что при оптимизированных для ПЦР условиях происходит амплификация только интегрированного фрагмента-мишени и никакой другой последовательности, входящей в состав генома растения или чужеродной ДНК.
ПЦР-праймеры, подходящие для идентификации EE-GM3, могут представлять собой:
- олигонуклеотиды длиной от 17 до приблизительно 200 нуклеотидов, включающие на своем 3’-конце нуклеотидную последовательность длиной по меньшей мере 17 последовательных нуклеотидов, предпочтительно 20 последовательных нуклеотидов, выбираемых из ДНК растения в составе 5’-фланкирующей последовательности (SEQ ID No 2 от нуклеотида 1 до нуклеотида 1451) (праймеры, распознающие 5’-фланкирующие последовательности); или
- олигонуклеотиды длиной от 17 до приблизительно 200 нуклеотидов, включающие на своем 3’-конце нуклеотидную последовательность длиной по меньшей мере 17 последовательных нуклеотидов, предпочтительно 20 последовательных нуклеотидов, выбираемых из ДНК растения в составе 3’-фланкирующей последовательности (комплементарной цепи SEQ ID No 3 от нуклеотида 241 до нуклеотида 1408) (праймеры, распознающие 3’-фланкирующие последовательности); или
- олигонуклеотиды длиной от 17 до приблизительно 200 нуклеотидов, включающие на своем 3’-конце нуклеотидную последовательность длиной по меньшей мере 17 последовательных нуклеотидов, предпочтительно 20 последовательных нуклеотидов, выбираемых из внедренных последовательностей ДНК (комплементарной цепи SEQ ID No 2 от нуклеотида 1452 до нуклеотида 1843) (праймеры, распознающие чужеродную ДНК); или
- олигонуклеотиды длиной от 17 до приблизительно 200 нуклеотидов, включающие нуклеотидную последовательность длиной по меньшей мере 17 последовательных нуклеотидов, предпочтительно 20 последовательных нуклеотидов, выбираемых из внедренных последовательностей ДНК (SEQ ID No 3 от нуклеотида 1 до нуклеотида 240); или
- подходящие олигонуклеотиды длиной от 17 до приблизительно 200 нуклеотидов, включающие нуклеотидную последовательность длиной по меньшей мере 17 последовательных нуклеотидов, предпочтительно 20 последовательных нуклеотидов, выбираемых из нуклеотидной последовательности фрагмента внедренной ДНК или ее комплементарной цепи (SEQ ID No 1 или SEQ ID No 20 от нуклеотида 1452 до нуклеотида 16638).
Разумеется, длина праймеров может быть более упомянутых 17 последовательных нуклеотидов и может, например, составлять 20, 21, 30, 35, 50, 75, 100, 150, 200 нуклеотидов и даже более. Праймеры могут полностью состоять из нуклеотидной последовательности, выбираемой из упомянутых нуклеотидных последовательностей фланкирующих последовательностей и чужеродных последовательностей ДНК. В то же время, нуклеотидная последовательность 5’-конца праймеров (т.е. вне 17 последовательных нуклеотидов, расположенных на 3’-конце является менее критичной. Так, 5’-последовательность праймеров может включать или состоять из нуклеотидной последовательности, выбираемой из фланкирующих последовательностей или чужеродной ДНК, если это необходимо, но может содержать несколько (например, 1, 2, 5 или 10) несовпадений. 5’-последовательность праймеров может даже полностью являться нуклеотидной последовательностью, не имеющей отношения к фланкирующим последовательностям или чужеродной ДНК, например, нуклеотидной последовательностью, представляющей собой один или несколько сайтов распознавания ферментов рестрикции. Такие неродственные последовательности или фланкирующие последовательности ДНК с несвопадениями в предпочтительном случае не должны превышать 100, а в более предпочтительном случае - 50 или даже 25 нуклеотидов в длину.
Кроме того, подходящие праймеры могут содержать, состоять из или в основном состоять из нуклеотидной последовательности на их 3’-конце, перекрывающей область соединения последовательностей растительной ДНК и последовательностей чужеродной ДНК (расположенной в положении 1451-1452 в SEQ ID No 2 и 240- 241 в SEQ ID No 3 для EE-GM3), что делает упомянутые 17 последовательных нуклеотидов, расположенных на 3’-конце, производными как чужеродной ДНК, так и последовательностей растительного происхождения SEQ ID No 2 или 3.
Для специалиста будет очевидно, что правильно выбранная пара праймеров для ПЦР, кроме того, не должна содержать последовательностей, комплементарных друг другу.
Для целей настоящего изобретения "комплементарная цепь нуклеотидной последовательности, представленной в SEQ ID No: X", представляет собой нуклеотидную последовательность, являющуюся производной представленной нуклеотидной последовательности путем замещения нуклеотидов их комплементарными нуклеотидами согласно правилам Чаргаффа (А⇔Т; G⇔C) и чтения последовательности в направлении от 5’ к 3’, т.е. противоположно представленной нуклеотидной последовательности.
Примеры подходящих праймеров для EE-GM3 представляют собой последовательности олигонуклеотидов SEQ ID No 5 (праймер, распознающий 3’-фланкирующую последовательность), SEQ ID No 4 (праймер, распознающий чужеродную ДНК для использования с праймерами, распознающими 3’-фланкирующую последовательность) или SEQ ID No 7 (праймер, распознающий чужеродную ДНК для использования с праймерами, распознающими 3’-фланкирующую последовательность).
Другие примеры подходящих олигонуклеотидных праймеров для EE-GM3 содержат на 3’-конце следующие последовательности или состоят (главным образом) из таких последовательностей:
а. праймеры, распознающие 5’-фланкирующую последовательность:
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 264 до нуклеотида 283
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 266 до нуклеотида 285
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1240 до нуклеотида 1259
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 265 до нуклеотида 285
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 265 до нуклеотида 283
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1239 до нуклеотида 1259
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1241 до нуклеотида 1259
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1244 до нуклеотида 1263
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1248 до нуклеотида 1267
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1250 до нуклеотида 1269
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 262 до нуклеотида 279
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 263 до нуклеотида 279
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 264 до нуклеотида 285
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 266 до нуклеотида 283
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1238 до нуклеотида 1259
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1242 до нуклеотида 1259
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1243 до нуклеотида 1263
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1245 до нуклеотида 1263
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1247 до нуклеотида 1267
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1249 до нуклеотида 1269
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1249 до нуклеотида 1267
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 263 до нуклеотида 285
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 267 до нуклеотида 283
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1242 до нуклеотида 1263
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1243 до нуклеотида 1259
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1246 до нуклеотида 1267
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1246 до нуклеотида 1263
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1248 до нуклеотида 1269
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1250 до нуклеотида 1271
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1250 до нуклеотида 1267
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1241 до нуклеотида 1263
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1245 до нуклеотида 1267
- нуклеотидная последовательность SEQ Ю No 2 от нуклеотида 1247 до нуклеотида 1269
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1247 до нуклеотида 1263
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1249 до нуклеотида 1271
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1242 до нуклеотида 1261
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1241 до нуклеотида 1261
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1243 до нуклеотида 1261
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1240 до нуклеотида 1261
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1244 до нуклеотида 1261
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1239 до нуклеотида 1261
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1245 до нуклеотида 1261
b. праймеры, распознающие чужеродную ДНК, для использования с праймерами, распознающими 5’-фланкирующую последовательность:
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1732 до нуклеотида 1751
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1735 до нуклеотида 1754
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1731 до нуклеотида 1750
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1732 до нуклеотида 1750
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1732 до нуклеотида 1752
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1731 до нуклеотида 1749
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1732 до нуклеотида 1749
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1731 до нуклеотида 1751
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1732 до нуклеотида 1753
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1731 до нуклеотида 1748
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1732 до нуклеотида 1748
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1735 до нуклеотида 1751
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1731 до нуклеотида 1752
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1732 до нуклеотида 1754
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1731 до нуклеотида 1747
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1731 до нуклеотида 1753
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1727 до нуклеотида 1746
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1727 до нуклеотида 1745
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1727 до нуклеотида 1747
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1727 до нуклеотида 1744
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1727 до нуклеотида 1748
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1727 до нуклеотида 1749
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1726 до нуклеотида 1745
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1726 до нуклеотида 1744
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1726 до нуклеотида 1746
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1726 до нуклеотида 1747
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1726 до нуклеотида 1748
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1724 до нуклеотида 1744
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1724 до нуклеотида 1745
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1724 до нуклеотида 1746
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1461 до нуклеотида 1478
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1670 до нуклеотида 1686
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1469 до нуклеотида 1486
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1508 до нуклеотида 1527
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1667 до нуклеотида 1686
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1670 до нуклеотида 1687
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1673 до нуклеотида 1689
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1688 до нуклеотида 1704
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1688 до нуклеотида 1705
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1692 до нуклеотида 1709
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1467 до нуклеотида 1486
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1481 до нуклеотида 1497
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1481 до нуклеотида 1498
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1491 до нуклеотида 1507
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1491 до нуклеотида 1508
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1672 до нуклеотида 1688
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1673 до нуклеотида 1690
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1673 до нуклеотида 1691
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1688 до нуклеотида 1706
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1691 до нуклеотида 1707
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1691 до нуклеотида 1708
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1469 до нуклеотида 1487
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1481 до нуклеотида 1499
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1489 до нуклеотида 1505
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1489 до нуклеотида 1506
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1489 до нуклеотида 1507
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1489 до нуклеотида 1508
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1666 до нуклеотида 1686
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1667 до нуклеотида 1687
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1670 до нуклеотида 1688
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1672 до нуклеотида 1689
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1688 до нуклеотида 1707
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1691 до нуклеотида 1709
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1692 до нуклеотида 1710
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1481 до нуклеотида 1500
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1491 до нуклеотида 1509
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1670 до нуклеотида 1689
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1672 до нуклеотида 1690
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1672 до нуклеотида 1691
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1687 до нуклеотида 1705
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1687 до нуклеотида 1706
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1691 до нуклеотида 1710
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1472 до нуклеотида 1488
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1488 до нуклеотида 1507
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1491 до нуклеотида 1510
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1495 до нуклеотида 1512
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1495 до нуклеотида 1513
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1495 до нуклеотида 1514
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1673 до нуклеотида 1692
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1678 до нуклеотида 1694
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1678 до нуклеотида 1695
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1678 до нуклеотида 1696
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1687 до нуклеотида 1703
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1687 до нуклеотида 1704
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1692 до нуклеотида 1711
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1469 до нуклеотида 1488
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1488 до нуклеотида 1506
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1491 до нуклеотида 1511
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1670 до нуклеотида 1690
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1678 до нуклеотида 1697
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1688 до нуклеотида 1709
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1467 до нуклеотида 1487
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1488 до нуклеотида 1508
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1495 до нуклеотида 1511
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1491 до нуклеотида 1512
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1666 до нуклеотида 1687
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1667 до нуклеотида 1688
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1672 до нуклеотида 1692
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1673 до нуклеотида 1693
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1687 до нуклеотида 1707
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1472 до нуклеотида 1490
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1472 до нуклеотида 1491
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1481 до нуклеотида 1501
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1489 до нуклеотида 1509
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1495 до нуклеотида 1515
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1670 до нуклеотида 1691
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1673 до нуклеотида 1694
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1678 до нуклеотида 1698
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1469 до нуклеотида 1489
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1667 до нуклеотида 1689
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1687 до нуклеотида 1708
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1688 до нуклеотида 1710
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1691 до нуклеотида 1711
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1472 до нуклеотида 1492
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1489 до нуклеотида 1510
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1666 до нуклеотида 1688
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1687 до нуклеотида 1709
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1692 до нуклеотида 1712
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1467 до нуклеотида 1488
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1469 до нуклеотида 1490
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1488 до нуклеотида 1509
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1489 до нуклеотида 1511
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1678 до нуклеотида 1699
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1472 до нуклеотида 1493
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1472 до нуклеотида 1494
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1481 до нуклеотида 1502
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1670 до нуклеотида 1692
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1469 до нуклеотида 1491
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1488 до нуклеотида 1510
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1691 до нуклеотида 1712
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1692 до нуклеотида 1713
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1692 до нуклеотида 1714
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1467 до нуклеотида 1489
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1678 до нуклеотида 1700
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1481 до нуклеотида 1503
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2 от нуклеотида 1691 до нуклеотида 1713
с. праймеры, распознающие 3’-фланкирующую последовательность:
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 3 от нуклеотида 828 до нуклеотида 847
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 3 от нуклеотида 830 до нуклеотида 849
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 3 от нуклеотида 828 до нуклеотида 846
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 3 от нуклеотида 828 до нуклеотида 848
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 3 от нуклеотида 830 до нуклеотида 848
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 3 от нуклеотида 830 до нуклеотида 850
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 3 от нуклеотида 828 до нуклеотида 845
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 3 от нуклеотида 830 до нуклеотида 847
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 3 от нуклеотида 828 до нуклеотида 849
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 3 от нуклеотида 830 до нуклеотида 851
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 3 от нуклеотида 828 до нуклеотида 844
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 3 от нуклеотида 830 до нуклеотида 846
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 3 от нуклеотида 828 до нуклеотида 850
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 3 от нуклеотида 830 до нуклеотида 852
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 3 от нуклеотида 992 до нуклеотида 1009
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 3 от нуклеотида 731 до нуклеотида 752
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 3 от нуклеотида 776 до нуклеотида 795
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 3 от нуклеотида 731 до нуклеотида 753
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 3 от нуклеотида 776 до нуклеотида 794
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 3 от нуклеотида 776 до нуклеотида 796
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 3 от нуклеотида 776 до нуклеотида 793
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 3 от нуклеотида 776 до нуклеотида 797
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 3 от нуклеотида 776 до нуклеотида 792
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 3 от нуклеотида 776 до нуклеотида 798
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 3 от нуклеотида 733 до нуклеотида 752
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 3 от нуклеотида 733 до нуклеотида 753
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 3 от нуклеотида 733 до нуклеотида 754
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 3 от нуклеотида 733 до нуклеотида 755
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 3 от нуклеотида 838 до нуклеотида 854
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 3 от нуклеотида 246 до нуклеотида 263
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 3 от нуклеотида 838 до нуклеотида 855
- комплементарная цепь нуклеотидной последовательности SEQ ID No 3 от нуклеотида 245 до нуклеотида 264
d. праймеры, распознающие чужеродную ДНК, для использования с праймерами, распознающими 3’-фланкирующую последовательность:
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 173 до нуклеотида 192
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 22 до нуклеотида 41
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 172 до нуклеотида 192
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 174 до нуклеотида 192
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 191 до нуклеотида 210
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 171 до нуклеотида 192
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 175 до нуклеотида 192
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 190 до нуклеотида 210
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 192 до нуклеотида 210
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 176 до нуклеотида 192
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 189 до нуклеотида 210
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 193 до нуклеотида 210
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 188 до нуклеотида 210
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 194 до нуклеотида 210
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 199 до нуклеотида 218
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 200 до нуклеотида 218
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 197 до нуклеотида 218
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 201 до нуклеотида 218
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 201 до нуклеотида 220
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 200 до нуклеотида 220
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 199 до нуклеотида 220
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 200 до нуклеотида 221
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 199 до нуклеотида 221
- нуклеотидная последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 150 до нуклеотида 172
ПЦР-праймеры, подходящие для идентификации EE-GM1, описаны в заявке WO 2006/108674, в частности, со страницы 8 строки 4 до страницы 26 строки 7 (включенной в настоящий документ посредством ссылки).
ПЦР-праймеры, подходящие для идентификации EE-GM2, описаны в заявке WO 2006/108675, в частности, со страницы 8 строки 4 до страницы 33 строки 4 (включенной в настоящий документ посредством ссылки).
В настоящем описании "нуклеотидная последовательность SEQ ID No Z от положения Х до положения Y" означает нуклеотидную последовательность, включающую оба конечных нуклеотида.
В предпочтительном случае амплифицированный фрагмент обладает длиной между 50 и 500 нуклеотидами, например, между 100 и 350 нуклеотидами. Специфические праймеры могут обладать последовательностью, на 80-100% идентичной последовательности в пределах 5’- или 3’-фланкирующей области элитного события или чужеродной ДНК элитного события, соответственно, при условии, что несовпадения позволяют осуществлять специфическую идентификацию элитного события при использовании этих праймеров в условиях, оптимизированных для ПЦР. В то же время диапазон допустимых несовпадений легко определить экспериментально, и эти диапазоны известны специалистам.
Обнаружение интегрированных фрагментов можно осуществлять разными способами, например, за счет оценки размера фрагментов после анализа в геле. Интегрированные фрагменты также можно непосредственно секвенировать. Кроме того, известны другие способы обнаружения амплифицированных фрагментов ДНК, специфические по отношению к последовательностям.
Поскольку последовательность праймеров и их относительное расположение в геноме уникальны для элитного события, амплификация интегрированного фрагмента происходит только в биологических образцах, содержащих нуклеиновую кислоту элитного события. В предпочтительном случае при выполнении ПНР для идентификации присутствия элитных событий EE-GM3 и EE-GM1 или элитных событий EE-GM3 и EE-GM2 в неизвестных образцах включают контроль с набором праймеров, при использовании которых можно амплифицировать фрагмент в пределах "гена домашнего хозяйства" вида растения, содержащего указанное событие. Гены домашнего хозяйства представляют собой гены, экспрессирующиеся в большинстве типов клеток и связанные с метаболической активностью, общей для всех клеток. В предпочтительном случае размер фрагмента, амплифицированного из гена домашнего хозяйства, превышает размер амплифицированного интегрированного фрагмента. В зависимости от анализируемых образцов можно включать другие контроли.
Стандартные протоколы ПЦР описаны, например, в "PCR Applications Manual" (Roche Molecular Biochemicals, 2nd Edition, 1999) и других источниках. Оптимальные условия для ПЦР, включая последовательность специфических праймеров, указаны в "Протоколе ПЦР-идентификации (или идентификации с помощью полимеразной цепной реакции)" для каждого элитного события. Вместе с тем, следует понимать, что может возникнуть необходимость коррекции ряда параметров протокола ПЦР-идентификации к условиям, специфическим для лаборатории, и их незначительной модификации для получения аналогичных результатов. Например, при использовании различных способов подготовки ДНК может требоваться коррекция, например, используемого количества праймеров, полимеразы и условий отжига. Аналогично выбор других праймеров может диктовать другие оптимальные условия протокола ПЦР-идентификации. Вместе с тем, эти варианты коррекции очевидны для специалистов и, более того, подробно описаны в современных руководствах по применению ПЦР, например, в указанном выше руководстве.
В качестве альтернативы для амплификации интегрированных фрагментов, которые можно использовать в качестве "специфических зондов" для идентификации EE-GM3 и EE-GM1 или EE-GM3 и EE-GM2 в биологических образцах, можно использовать специфические праймеры. Взаимодействие нуклеиновой кислоты биологического образца с зондами в условиях, при которых возможна гибридизация зонда с соответствующими фрагментами нуклеиновой кислоты образца, приводит к образованию гибридов нуклеиновая кислота/зонд. Образование этих гибридов можно обнаружить (например, за счет мечения нуклеиновой кислоты или зонда), в соответствии с чем образование этих гибридов указывает на присутствие EE-GM3 и EE-GM1 или EE-GM3 и EE-GM2. Такие способы идентификации, которые основаны на гибридизации со специфическим зондом (на твердофазном носителе или в растворе), описаны в специальной литературе. Специфический зонд в предпочтительном случае представляет собой последовательность, которая при оптимизированных условиях специфически гибридизуется с областью в пределах 5’- или 3’-фланкирующей области элитного события, а также предпочтительно содержит непрерывный с этой областью фрагмент чужеродной ДНК (здесь и далее называемой "специфической областью"). В предпочтительном случае специфический зонд включает последовательность длиной от 50 до 500 п.о., предпочтительно от 100 до 350 п.о., которая по меньшей мере на 80%, предпочтительно на 80-85%, более предпочтительно на 85-90%, особенно предпочтительно на 90-95%, наиболее предпочтительно на 95%-100%, идентична (или комплементарна) нуклеотидной последовательности специфической области. В предпочтительном случае специфический зонд включает последовательность длиной от приблизительно 15 до приблизительно 100 непрерывных нуклеотидов, идентичную (или комплементарную) специфической области элитного события.
Кроме того, используя представленную в настоящем документе специфическую информацию о последовательности элитного события, можно разработать специфические способы обнаружения элитных событий EE-GM3 и EE-GM1 или элитных событий EE-GM3 и EE-GM2, отличающиеся от способов амплификации на основе ПЦР. Такие альтернативные способы обнаружения включают способы обнаружения усиления линейного сигнала на основе инвазивного расщепления конкретных нуклеотидных структур, также известного как технология InvaderTM (согласно описанию, например, в патентах США 5985557 "Invasive Cleavage of Nucleic Acids", 6001567 "Detection of Nucleic Acid sequences by Invader Directed Cleavage", включенных в настоящий документ в качестве ссылок). Для обнаружения EE-GM3 с помощью этого способа последовательность-мишень можно гибридизировать с меченным первым олигонуклеотидом, включающим нуклеотидную последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1452 до нуклеотида 1469 или ее комплементарную цепь, или указанным нуклеотидным зондом, включающим нуклеотидную последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 223 до нуклеотида 240 или ее комплементарную цепь, а затем гибридизировать со вторым олигонуклеотидом, включающим нуклеотидную последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1434 до нуклеотида 1451 или ее комплементарную цепь, или указанным нуклеотидным зондом, включающим нуклеотидную последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 241 до нуклеотида 258 или ее комплементарную цепь, причем первый и второй олигонуклеотид перекрываются по меньшей мере на один нуклеотид. Двойная или тройная структура, образующаяся при этой гибридизации, дает возможность селективного расщепления зонда ферментом (Cleavase®) при сохранении последовательности-мишени. После этого выполняют обнаружение расщепленного меченного зонда, возможно, через промежуточный этап, приводящий к дальнейшему усилению сигнала. Для обнаружения EE-GM1 с помощью этого способа последовательность-мишень можно гибридизировать с меченным первым олигонуклеотидом, включающим нуклеотидную последовательность SEQ ID No 12 от нуклеотида 210 до нуклеотида 227 или ее комплементарную цепь, или указанным нуклеотидным зондом, включающим нуклеотидную последовательность SEQ ID No 13 от нуклеотида 561 до нуклеотида 568 или ее комплементарную цепь, а затем гибридизировать со вторым олигонуклеотидом, включающим нуклеотидную последовательность SEQ ID No 12 от нуклеотида 192 до нуклеотида 209 или ее комплементарную цепь, или указанным нуклеотидным зондом, включающим нуклеотидную последовательность SEQ ID No 13 от нуклеотида 569 до нуклеотида 586 или ее комплементарную цепь, причем первый и второй олигонуклеотид перекрываются по меньшей мере на один нуклеотид. Двойная или тройная структура, образующаяся при этой гибридизации, дает возможность селективного расщепления зонда ферментом (Cleavase®) при сохранении последовательности-мишени. После этого выполняют обнаружение расщепленного меченного зонда, возможно, через промежуточный этап, приводящий к дальнейшему усилению сигнала. Для обнаружения EE-GM2 с помощью этого способа последовательность-мишень можно гибридизировать с меченным первым олигонуклеотидом, включающим нуклеотидную последовательность SEQ ID No 14 от нуклеотида 312 до нуклеотида 329 или ее комплементарную цепь, или указанным нуклеотидным зондом, включающим нуклеотидную последовательность SEQ ID No 15 от нуклеотида 490 до нуклеотида 507 или ее комплементарную цепь, а затем гибридизировать со вторым олигонуклеотидом, включающим нуклеотидную последовательность SEQ ID No 14 от нуклеотида 294 до нуклеотида 311 или ее комплементарную цепь, или указанным нуклеотидным зондом, включающим нуклеотидную последовательность SEQ ID No 15 от нуклеотида 508 до нуклеотида 525 или ее комплементарную цепь, причем первый и второй олигонуклеотид перекрываются по меньшей мере на один нуклеотид. Двойная или тройная структура, образующаяся при этой гибридизации, дает возможность селективного расщепления зонда ферментом (Cleavase®) при сохранении последовательности-мишени. После этого выполняют обнаружение расщепленного меченного зонда, возможно, через промежуточный этап, приводящий к дальнейшему усилению сигнала.
Термин "набор", как используется здесь, относится к набору реактивов для осуществления способа согласно изобретению, в частности, идентификации элитного события EE-GM3 в биологических образцах или определения статуса зиготности растительного материала, содержащего EE-GM3. В частности, предпочтительный вариант воплощения набора, согласно изобретению, включает по меньшей мере один или два специфических праймера, согласно вышеприведенному описанию для идентификации элитного события, или три специфических праймера для определения статуса зиготности. Необязательно набор может еще включать любой другой реактив, описанный здесь в Протоколе ПЦР-идентификации. В альтернативном случае, согласно еще одному варианту воплощения настоящего изобретения, набор может включать специфический зонд, согласно вышеприведенному описанию, специфически гибридизующийся с нуклеиновой кислотой биологических образцов, для идентификации присутствия EE-GM3 в них. Необязательно набор может еще включать любой другой реактив (включая буфер для гибридизации, метку, но не ограничиваясь ими) для идентификации EE-GM3 в биологических образцах с использованием специфического зонда.
Набор, согласно изобретению, может быть использован, а его компоненты могут быть специфически адаптированы для целей контроля качества (например, чистоты партий семян), обнаружения присутствия или отсутствия элитного события в растительном материале, включающем растительный материал или являющимся его производным, например, не ограничиваясь этим, в пищевых продуктах или кормах.
Как используется здесь, "идентичность последовательности" по отношению к нуклеотидным последовательностям (ДНК или РНК) относится к количеству положений, содержащих идентичные нуклеотиды, разделенному на количество нуклеотидов в более короткой из двух последовательностей. Выравнивание двух нуклеотидных последовательностей осуществляют согласно алгоритму Уилбера и Липманна (Wilbur and Lipmann, 1983, Proc. Nat. Acad. Sci. USA 80:726), используя размер окна, равный 20 нуклеотидам, длину слова, равную 4 нуклеотидам, и штраф за пропуск, равный 4. Компьютерный анализ и интерпретацию данных о последовательности, включая выравнивание последовательностей согласно вышеприведенному описанию, можно выполнить, например, с помощью программного пакета анализа последовательностей Genetics Computer Group (GCG, биотехнологический центр Висконсинского университета). Последовательности называют "существенно сходными", если такие последовательности обладают идентичностью, составляющей по меньшей мере приблизительно 75%, в частности, по меньшей мере приблизительно 80%, более конкретно - по меньшей мере приблизительно 85%, еще конкретнее - по меньшей мере приблизительно 90%, в особенности - по меньшей мере приблизительно 95%, в наибольшей степени - по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99%. Очевидно, что если о последовательностях РНК говорят как о существенно сходных или обладающих некоторой степенью идентичности с последовательностями ДНК, то тимидин (Т) в последовательности ДНК приравнивают к урацилу (U) в последовательности РНК. Кроме того, очевидно, что со временем в последовательностях ДНК могут возникать небольшие различия или мутации и что некоторые несовпадения могут быть допустимы для специфических для события праймеров или зондов согласно изобретению, поэтому любая последовательность ДНК, указанная здесь в любом варианте воплощения настоящего изобретения для любой 3’- или 5’-фланкирующей ДНК, или для любой внедренной или чужеродной ДНК, или любого праймера, или зонда согласно изобретению, также включает последовательности, существенно сходные с последовательностями, представленными здесь, например, последовательности, гибридизующиеся с или обладающие по меньшей мере 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или по меньшей мере 99% идентичностью с последовательностями, приведенными для любой 3’- или 5’-фланкирующей ДНК, для любого праймера или зонда, или для любой внедренной или чужеродной ДНК согласно настоящему изобретению.
Термин "праймер", как используется здесь, включает любую нуклеиновую кислоту, способную являться затравкой синтеза образующейся нуклеиновой кислоты в процессе матричного синтеза, например, ПЦР. Обычно праймеры представляют собой олигонуклеотиды длиной от 10 до 30 нуклеотидов, однако, можно использовать и более длинные последовательности. Праймеры могут быть представлены в двуцепочечной форме, хотя предпочтительной является одноцепочечная форма. Зонды можно использовать в качестве праймеров, однако, они предназначены для связывания с ДНК или РНК-мишенями и не требуются в процессе амплификации.
Термин "распознавание", как используется здесь в отношении специфических праймеров, относится к тому, что специфические праймеры специфически гибридизируются с последовательностью ДНК элитного события в условиях, установленных согласно способу (например, в условиях согласно Протоколу ПЦР-идентификации), причем специфичность определяют с помощью положительных и отрицательных контролей.
Термин "гибридизирующийся", как используется здесь в отношении специфических зондов, относится к тому, что зонд связывается со специфической областью нуклеотидной последовательности элитного события в условиях стандартной жесткости. Условия стандартной жесткости, как используется здесь, относятся к условиям гибридизации, описанным здесь, или к стандартным условиям гибридизации согласно описанию в Sambrook et al., 1989 (Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Second Edition, Cold Spring Harbor Laboratory Press, NY), которая, например, может включать следующие этапы: 1) иммобилизацию фрагментов геномной ДНК растения на фильтре, 2) предварительную гибридизацию фильтра в течение 1-2 часов при 42ºС в 50% формамиде, 5 Х стандартном фосфатно-солевом буфере с ЭДТА (SSPE), 2 Х реактиве Денхардта и 0.1% ДСН или в течение 1 -2 часов при 68ºС в 6 Х стандартном цитратно-солевом буфере (SSC), 2 Х реактиве Денхардта и 0.1% ДСН, 3) внесение меченного гибридизационного зонда, 4) инкубирование в течение 16-24 часов, 5) промывку фильтра в течение 20 мин при комнатной температуре в 1 Х SSC, 0.1% ДСН, 6) трехкратную промывку фильтра в течение 20 мин, каждый раз при 68ºС в 0.2 Х SSC, 0.1% ДСН, и 7) экспонирование фильтра в течение 24-48 часов на рентгеновскую пленку при -70°С с усиливающим экраном.
Как используется здесь, биологический образец представляет собой образец растения, растительного материала или продуктов, содержащих растительный материал. Термин "растение" включает ткани растения сои культурной (Glycine max) на любой стадии развития, а также любые клетки, ткани или органы, собранные или происходящие от такого растения, включая любые семена, листья, стебли, цветки, корни, отдельные клетки, гаметы, культуры клеток, культуры тканей или протопласты, но не ограничивается ими. "Растительный материал", как используется здесь, относится к материалу, полученному или происходящему от растения. Продукты, включающие растительный материал, относятся к продуктам питания, кормам или другим продуктам, изготовленным с использованием растительного материала, или, возможно, загрязненным растительным материалом. Следует понимать, что в контексте настоящего изобретения такие биологические образцы проверяют на присутствие нуклеиновых кислот, специфических для EE-GM3, EE-GM1 и EE-GM2, предполагая присутствие нуклеиновых кислот в этих образцах. Таким образом, способы в настоящей заявке для идентификации элитного события EE-GM3 и EE-GM2 или EE-GM3 и EE-GM1 в биологических образцах относятся к идентификации нуклеиновых кислот, включающих указанное элитное событие, в биологических образцах.
Как используется здесь, термин "включающий" следует понимать как обозначение наличия указанных свойств, единиц, этапов, реагентов или компонентов, к которым относится термин, не исключающее наличия или добавления одного или нескольких свойств, единиц, этапов, компонентов или их групп. Так, например, нуклеиновая кислота или белок, включающие нуклеотидную или аминокислотную последовательность, могут включать, кроме фактически указанных, дополнительные нуклеотиды или аминокислоты, т.е. являться частью более крупной нуклеиновой кислоты или белка. Химерный ген, включающий функционально или структурно определенную последовательность ДНК, может включать дополнительные последовательности ДНК, например, последовательности промотора и терминатора транскрипции.
Настоящее изобретение также относится к разработке комбинации элитного события EE-GM3 и элитного события EE-GM1 или комбинации элитного события EE-GM3 и элитного события EE-GM2 в сое, к растениям, включающим комбинацию этих событий, к потомству, полученному от этих растений, и к растительным клеткам или растительному материалу, происходящему от растений, включающих указанные комбинации. Растения, включающие элитные события EE-GM3 и EE-GM1 или EE-GM3 и EE-GM2, можно получить согласно описанию в примере 1. Комбинации получают путем скрещивания растений, содержащих отдельные события, с помощью общепринятых способов скрещивания и идентификации их потомства, содержащего два различных события.
Растения сои или растительный материал, содержащий EE-GM3 и EE-GM1, можно идентифицировать согласно Протоколу ПЦР-идентификации, описанному для EE-GM3 и EE-GM1 в Примере 2. Вкратце геномную ДНК сои, присутствующую в биологическом образце, подвергают ПЦР-амплификации, используя праймер, специфически распознающий последовательность в пределах 5’- или 3’-фланкирующей последовательности EE-GM3, например, праймер с последовательностью SEQ ID No: 5, и праймер, распознающий последовательность чужеродной ДНК, например, праймер с последовательностью SEQ ID No: 4, а также используя праймер, специфически распознающий последовательность в пределах 5’- или 3’-фланкирующей последовательности EE-GM1, например, праймер с последовательностью SEQ ID No: 16, и праймер, распознающий последовательность чужеродной ДНК, например, праймер с последовательностью SEQ ID No: 17.
Растения сои или растительный материал, содержащий EE-GM3 и EE-GM2, можно идентифицировать согласно Протоколу ПЦР-идентификации, описанному для EE-GM3 и EE-GM2 в Примере 2. Вкратце геномную ДНК сои, присутствующую в биологическом образце, подвергают ПЦР-амплификации, используя праймер, специфически распознающий последовательность в пределах 5’- или 3’-фланкирующей последовательности EE-GM3, например, праймер с последовательностью SEQ ID No: 5, и праймер, распознающий последовательность чужеродной ДНК, например, праймер с последовательностью SEQ ID No: 4, а также используя праймер, специфически распознающий последовательность в пределах 5’- или 3’-фланкирующей последовательности EE-GM2, например, праймер с последовательностью SEQ ID No: 18, и праймер, распознающий последовательность чужеродной ДНК, например, праймер с последовательностью SEQ ID No: 19.
ДНК-праймеры, амплифицирующие часть эндогенной последовательности сои, используют в качестве положительного контроля ПЦР-амплификации. Если при ПЦР-амплификации из материала получают фрагменты ожидаемого размера, этот материал содержит растительный материал из растения сои, несущего элитное событие EE-GM3 и EE-GM1, или из растения сои, несущего элитное событие EE-GM3 и ЕЕ- GM2.
Растения, несущие EE-GM3 и EE-GM1 или EE-GM3 и EE-GM2, характеризуются устойчивостью к глифосату, а также к ингибиторам HPPD, например, изоксафлутолу, а также устойчивостью к глюфосинату. Растения, несущие комбинации событий, при отсутствии применения гербицидов также характеризуются агрономическими характеристиками, сопоставимыми с доступными для приобретения сортами сои. Обнаружено, что присутствие чужеродной ДНК в областях инсерции генома растения сои, описанных здесь, придает растениям, содержащим это событие, особенно интересные фенотипические и молекулярные характеристики.
Один из вариантов воплощения настоящего изобретения представляет комбинацию элитных событий EE-GM3 и EE-GM1 и/или EE-GM2 в растениях сои, которую можно получить путем инсерции трансгенов по специфическим положениям в геноме сои, причем эти элитные события придают таким растениям сои устойчивость к глифосату, глюфосинату и гербицидам-ингибиторам HPPD, например, изоксафлутолу, и не оказывают действия на агрономическую производительность такой сои, отрицательно влияя на урожайность таких растений сои по сравнению с изогенными линиями (как используется здесь, "изогенные линии" или "почти изогенные линии" представляют собой линии сои, обладающие таким же генетическим окружением, но не содержащие трансгенов, например, растения с генетическим окружением, аналогичным генетическому окружению растения, используемого для трансформации, или отделяющиеся сестринские линии, потерявшие трансгены). В частности, настоящее изобретение представляет комбинацию элитных событий EE-GM3 и EE-GM1 и/или EE-GM2 в растениях сои, причем инсерция или наличие указанного элитного события в геноме таких растений сои не вызывает повышенной подверженности к заболеваниям, потери урожайности или усиления полегания таких растений сои по сравнению с изогенными линиями. Следовательно, настоящее изобретение представляет комбинацию элитных событий в растениях сои, обозначаемых как EE-GM3 и EE-GM1 и/или EE-GM2, приводящую к получению растений сои, устойчивых к применению глифосата, глюфосината и гербицидов-ингибиторов HPPD (одновременно или по отдельности), и не оказывающую отрицательного влияния на указанные растения сои по сравнению с изогенными линиями, причем указанные растения сои не обладают статистическими различиями, касающимися подверженности заболеваниям или полегания, по сравнению с изогенными растениями сои. Указанные характеристики делают данную комбинацию элитных событий очень интересной для контроля устойчивых к глифосату сорных растений на полях сои, а также могут использоваться в подходах для предотвращения или задержки дальнейшего развития устойчивости к глифосату на полях сои (например, путем применения глифосата и изоксафлутола, и/или глюфосината, или изоксафлутола и глифосата, и/или глюфосината, или глюфосината и глифосата, и/или изоксафлутола, обеспечивая применение гербицидов, обладающих по меньшей мере 2 или даже 3 различными механизмами действия).
Здесь также представлены растение сои или его фрагменты, содержащие событие EE-GM3 и элитное событие EE-GM1 или EE-GM2, причем образцы семян сои, содержащих событие EE-GM3, депонированы в NCIMB под номером доступа 41659, образцы семян сои, содержащих событие EE-GM1, депонированы в NCIMB под номером доступа NCIMB 41658, образцы семян сои, содержащих событие EE-GM2, депонированы в NCIMB под номером доступа NCIMB 41660, образцы семян сои, содержащих событие EE-GM3 и EE-GM1, депонированы в АТСС под номером доступа РТА-11041, а образцы семян сои, содержащих событие EE-GM3 и EE-GM2, депонированы в АТСС под номером доступа РТА-11042.
Растения сои или их фрагменты, содержащие EE-GM3 и EE-GM1 или EE-GM3 и EE-GM2, можно получить путем объединения соответствующих элитных событий, которые можно найти в соответствующих депонированных семенах, с помощью любых способов, известных в данной области, включая скрещивание растений, полученных из депонированных семян, сбор их потомства и идентификацию среди этого потомства растений, содержащих соответствующую комбинацию элитных событий. Кроме того, здесь представлены семена таких растений, содержащие такие события, а также соевые продукты, изготовленные из таких семян, содержащие событие EE-GM3 и EE-GM1 или EE-GM2. Такие соевые продукты могут представлять собой или содержать крупу, молотые семена, муку, хлопья и т.д. В частности, такой соевый продукт содержит нуклеиновую кислоту, образующую ампликоны, характерные для события EE-GM3 и элитного события EE-GM 1 или EE-GM2, включающие SEQ ID No 2 или 3, SEQ ID No 14 или 15, и/или SEQ ID No 12 или 13. Кроме того, здесь представлен способ получения соевого продукта, включающий получение семян сои, содержащих событие EE-GM3 и элитное событие EE-GM1 или EE-GM2, и изготовления из них такого соевого продукта.
Кроме того, здесь представлено растение сои, представляющее собой потомство любого из вышеописанных растений сои и содержащее событие EE-GM3 и EE-GM1 или EE-GM2.
Кроме того, здесь представлен способ получения растения сои, устойчивого к гербицидам глифосату и/или глюфосинату и/или изоксафлутолу, включающий внедрение в геном такого растения события EE-GM3 и события EE-GM1 или EE-GM2, в частности, путем скрещивания первого растения сои, содержащего событие EE-GM3, с растением сои, содержащим EE-GM1 и/или EE-GM2, и путем селекции потомства, устойчивого к глифосату и/или глюфосинату, и/или изоксафлутолу.
Кроме того, здесь представлено растение, устойчивое к глифосату и глюфосинату, и/или изоксафлутолу без потери урожайности, обладающее приемлемыми агрономическими характеристиками, содержащее 2mEPSPS, HPPD и белок PAT, и способное образовывать ампликон, характерный для событий EE-GM3 и EE-GM1 или EE-GM3 и EE-GM2.
Кроме того, здесь представлен способ контроля сорных растений на поле сои, содержащей события ЕЕ-GM3 и EE-GM1 или EE-GM3 и EE-GM2, или на поле, предназначенном для посадки таких растений сои, включающий обработку поля эффективным количеством гербицида на основе изоксафлутола, глифосата и/или глюфосината, причем такие растения обладают устойчивостью к такому(им) гербициду(ам).
Кроме того, здесь представлены растение, ткань или семя сои, содержащие EE-GM3 и EE-GM1, характеризующиеся содержанием в геноме нуклеотидной последовательности, обладающей по меньшей мере 80%, 90%, 95% или 100% идентичности с SEQ ID No 2 от нуклеотида 1431 до нуклеотида 1472, и нуклеотидной последовательности, обладающей по меньшей мере 80%, 90%, 95% или 100% идентичности с SEQ ID No 3 от нуклеотида 220 до нуклеотида 261, или комплементарных цепей таких последовательностей, а также нуклеотидной последовательности, обладающей по меньшей мере 80%, 90%, 95% или 100% идентичности с SEQ ID No 12 от нуклеотида 199 до нуклеотида 220, и нуклеотидной последовательности, обладающей по меньшей мере 80%, 90%, 95% или 100% идентичности с SEQ ID No 13 от нуклеотида 558 до нуклеотида 579, или комплементарных цепей таких последовательностей.
Кроме того, здесь представлены растение, ткань или семя сои, содержащие EE-GM3 и EE-GM2, характеризующиеся содержанием в геноме нуклеотидной последовательности, обладающей по меньшей мере 80%, 90%, 95% или 100% идентичности с SEQ ID No 2 от нуклеотида 1431 до нуклеотида 1472, и нуклеотидной последовательности, обладающей по меньшей мере 80%, 90%, 95% или 100% идентичности с SEQ ID No 3 от нуклеотида 220 до нуклеотида 261, или комплементарных цепей таких последовательностей, а также нуклеотидной последовательности, обладающей по меньшей мере 80%, 90%, 95% или 100% идентичности с SEQ ID No 14 от нуклеотида 301 до нуклеотида 322, и нуклеотидной последовательности, обладающей по меньшей мере 80%, 90%, 95% или 100% идентичности с SEQ ID No 15 от нуклеотида 497 до нуклеотида 518, или комплементарных цепей таких последовательностей.
Как используется здесь, термин "изоксафлутол" относится к гербициду изоксафлутолу т.е. [(5-циклопропил-4-изоксазолил)[2-(метилсульфонил)-4-(трифторметил)фенил]метанону], его активному метаболиту, дикетонитрилу и любым смесям растворов, содержащих указанные соединения. Гербициды, ингибирующие HPPD, пригодные для обработки растений, содержащих события в соответствии с настоящим изобретением, представляют собой дикетонитрилы, например, 2-циан-3-циклопропил-1-(2-метилсульфонил-4-трифторметилфенил)пропан-1,3-дион и 2-циан-1-[4-(метилсульфонил)-2-трифторметилфенил]-3-(1-метилциклопропил)пропан-1,3-дион; другие изоксазолы и пиразолинаты, например, топрамезон т.е.[3-(4,5-дигидро-3-изоксазолил)-2-метил-4-(метилсульфонил)фенил](5-гидрокси-1-метил-1Н-пиразол-4-ил)метанон] и пирасульфотол [(5-гидрокси-1,3-диметилпиразол-4-ил(2-метилсульфонил-4-трифторметилфенил)метанон] или пиразофен [2-[4-(2,4-дихлорбензоил)-1,3-диметилпиразол-5-илокси]ацетофенон].
В одном из вариантов воплощения настоящего изобретения поле, предназначенное для посадки растений сои, содержащих событие EE-GM3, можно обработать гербицидом-ингибитором HPPD, например, изоксафлутолом (’IFT’), до посадки растений сои или посева семян, что очищает поле от сорных растений, уничтожаемых ингибитором HPPD, и дает возможность нулевой обработки почвы с посадкой или посевом сои на этом предварительно обработанном поле впоследствии (выжигающее применение гербицида-ингибитора HPPD). Остаточная активность IFT также защищает всходы и растущие растения сои от конкуренции с сорными растениями на ранних стадиях роста. После достижения растениями сои определенного размера и начала повторного появления сорных растений можно применять глифосат или смесь ингибитор HPPD-глифосат в качестве послевсходового гербицида над верхушками растений.
В еще одном варианте воплощения настоящего изобретения поле, на котором посеяны семена, содержащие событие EE-GM3, можно обработать гербицидом-ингибитором HPPD, например, IFT, до появления всходов растений сои, но после посева семян (поле можно очистить от сорных растений до посева другими средствами, обычно, с помощью общепринятых приемов обработки почвы, например, вспашки, культиваторной обработки или подготовки посевных мест), причем остаточная активность будет поддерживать поле свободным от сорных растений, уничтожаемых гербицидом, обеспечивая отсутствие конкуренции всходам и растущим растениям со стороны сорных растений (довсходовое применение гербицида-ингибитора HPPD). После достижения растениями сои определенного размера и начала повторного появления сорных растений можно применять глифосат или смесь ингибитор HPPD-глифосат в качестве послевсходового гербицида над верхушками растений.
В другом варианте воплощения настоящего изобретения растения, содержащие событие EE-GM3, можно обработать гербицидом-ингибитором HPPD, например, IFT, над верхушками растений сои (взошедших из посеянных семян), что очищает поле от сорных растений, уничтожаемых ингибитором HPPD, причем это применение можно осуществлять совместно с (например, в результате смешивания в опрыскивателе), до или после обработки глифосатом в качестве послевсходового гербицида над верхушками растений (послевсходовое применение гербицида-ингибитора HPPD (с глифосатом или без него)).
Кроме того, в соответствии с настоящим изобретением, растения сои, несущие EE-GM3 и EE-GM1 или EE-GM2, можно обработать следующими инсектицидами, гербицидами или фунгицидами, либо семена сои, несущие EE-GM3 и EE-GM1 или EE-GM2, можно покрыть путем дражирования оболочкой, содержащей следующие инсектициды, гербициды или фунгициды:
Гербициды для сои:
алахлор, бентазон, трифторалин, хлоримурон-этил, хлорансулам-метил, феноксапроп, фомесафен, флуазифоп, глифосат, имазамокс, имазахин, имазетапир, (S-)метолахлор, метрибузин, пендиметалин, тепралоксидим, изоксафлутол, глюфосинат.
Инсектициды для сои:
лямбда-цигалотрин, метомил, паратион, тиокарб, имидаклоприд, клотианидин, тиаметоксан, тиаклоприд, ацетамиприд, динотефуран, флубендиамид, ринаксипир, циазипир, спиносад, спиноторам, эмамектин бензоат, фипронил, этипрол, дельтаметрин, β-цифлутрин, гамма- и лямбда-цигалотрин, 4-[[(6-хлорпиридин-3-ил)метил](2,2-дифторэтил)амино]фуран-2(5Н)-он, спиротетрамат, спиродиклофен, трифлумурон, флоникамид, тиодикарб, бета-цифлутрин.
Фунгициды для сои:
азоксистробин, ципроконазол, эпоксиконазол, флутриафол, пираклостробин, тебуконазол, трифлоксистробин, протиоконазол, тетраконазол.
В следующих примерах описана идентификация элитных событий EE-GM3, EE-GM1 и EE-GM2, и растений, содержащих комбинацию события EE-GM3 с EE-GM1 или EE-GM3 с EE-GM2, и разработка инструментов для специфической идентификации элитного события EE-GM3, EE-GM1 или EE-GM2 и их комбинаций в биологических образцах.
Если в Примерах не указано иное, все рекомбинантные методики осуществляли в соответствии со стандартными протоколами согласно описанию в "Sambrook J and Russell DW (eds.) (2001) Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 3rd Edition, Cold Spring Harbor Laboratory Press, New York" и в "Ausubel FA, Brent R, Kingston RE, Moore DD, Seidman JG, Smith JA and Struhl К (eds.) (2006) Current Protocols in Molecular Biology. John Wiley & Sons, New York".
Стандартные материалы и ссылки описаны в "Croy RDD (ed.) (1993) Plant Molecular Biology LabFax, BIOS Scientific Publishers Ltd., Oxford and Blackwell Scientific Publications, Oxford" и в "Brown ТА, (1998) Molecular Biology LabFax, 2nd Edition, Academic Press, San Diego". Стандартные материалы и методики полимеразных цепных реакций (ПЦР) содержатся в "McPherson MJ and Moller SG (2000) PCR (The Basics), BIOS Scientific Publishers Ltd., Oxford" и в "PCR Applications Manual, 3rd Edition (2006), Roche Diagnostics GmbH, Mannheim или www.roche-applied-science.com".
Следует понимать, что может возникнуть необходимость коррекции ряда параметров любого лабораторного протокола, например, протоколов ПЦР-идентификации в нижеприведенных Примерах, к условиям, специфическим для лаборатории, и их незначительной модификации для получения аналогичных результатов. Например, при использовании различных способов подготовки ДНК или выборе других праймеров могут потребоваться другие оптимальные условия для протокола ПЦР. Вместе с тем, эти варианты коррекции очевидны для специалистов и, более того, подробно описаны в современных руководствах по применению ПЦР.
В описании и примерах приведены ссылки на следующие последовательности:
SEQ ID No 1: фрагмент Sail нуклеотидной последовательности вектора pSF10.
SEQ ID No 2: нуклеотидная последовательность, включающая 5’-область, фланкирующую чужеродную ДНК, включающую гены устойчивости к гербицидам в EE-GM3.
SEQ ID No 3: нуклеотидная последовательность, включающая 3’-область, фланкирующую чужеродную ДНК, включающую гены устойчивости к гербицидам в EE-GM3.
SEQ ID No 4: праймер SOY028
SEQ ID No 5: праймер SOY029
SEQ ID No 6: праймер SMP187
SEQ ID No 7: праймер STV019
SEQ ID No 8: нуклеотидная последовательность ампликона
SEQ ID No 9: праймер 1 для амплификации контрольного фрагмента (SOY01)
SEQ ID No 10: праймер 2 для амплификации контрольного фрагмента (SOY02)
SEQ ID No 11: нуклеотидная последовательность pB2/P35SAcK
EQ ID No 12: нуклеотидная последовательность, включающая 5’-область, фланкирующую чужеродную ДНК в EE-GM1
SEQ ID No 13: нуклеотидная последовательность, включающая 3'-область, фланкирующую чужеродную ДНК в EE-GM1
SEQ ID No 14: нуклеотидная последовательность, включающая 5’-область, фланкирующую чужеродную ДНК в EE-GM2
SEQ ID No 15: нуклеотидная последовательность, включающая 3’-область, фланкирующую чужеродную ДНК в EE-GM2
SEQ ID No 16: праймер SOY06
SEQ ID No 17: праймер SOY07
SEQ ID No 18: праймер SOY09
SEQ ID No 19: праймер SOY010
SEQ ID No 20: нуклеотидная последовательность чужеродной ДНК и растительных фланкирующих последовательностей в EE-GM3
SEQ ID No 21: праймер SHA130
SEQ ID No 22: праймер SHA178
Примеры
1. Трансформация Glycine max генами устойчивости к гербицидам.
1.1. Описание чужеродной DNA, включающей химерные гены ZmEPSPS и HPPD-Pf-W336
Плазмида pSF10 представляет собой вектор клонирования, производный от pUC19, содержащий химерный ген 2mepsps и химерный ген hppd-Pf-W336, расположенные во фрагменте Sail размером приблизительно 7.3 т.п.о. Полное описание ДНК, содержащихся между двумя сайтами рестрикции SalI, приведено ниже в Таблице 1. Нуклеотидная последовательность представлена в SEQ ID No: 1.
Таблица 1
Положения нуклеотидов в ДНК, содержащейся между сайтами рестрикции Sail в pSFlO (SEQ ID No 1)
Положения нуклеотидов Ориентация Описание и ссылки
188-479 комплементарная цепь 3’nos: последовательность, включающая 3’-нетранслируемую область гена нопалинсинтазы из Т-ДНК pTiT37 Agrobacterium tumefaciens (Depicker et al., 1982, Journal of Molecular and Applied Genetics, 1, 561-573)
480-1556 комплементарная цепь hppdPf W336: кодирующая последовательность 4-гидроксифенилпируватдиоксигеназы штамма Pseudomonas fluorescens A32, модифицированная заменой аминокислоты глицин-336 триптофаном, согласно описанию в Boudec et al. (2001), патент США US 6245968B1
1557-1928 комплементарная цепь TPotp Y: кодирующая последовательность оптимизированного производного переходного пептида (замена на тирозин по положению 55), содержащая последовательность генов малой субъединицы рибулозо-1,5-бифосфаткарбоксилазы/оксигеназы Zea mays (кукурузы) и Helianthus annuus (подсолнечника), согласно описанию в Lebrun et al.(1996) US 5510471
1929-2069 комплементарная цепь 5’tev: последовательность, включающая лидирующую последовательность вируса гравировки табака согласно описанию в Carrington and Freed (1990) Journal of Virology, 64,1590-1597
2070-3359 комплементарная цепь Ph4a748 ABBC: последовательность, включающая промоторную область гена гистона Н4 Arabidopsis thaliana, включающую внутреннюю дупликацию (Chaboute et al., 1987) Plant Molecular Biology, 8, 179-191.
3360-4374 Ph4a748: последовательность, включающая промоторную область гена гистона Н4 Arabidopsis thaliana (Chaboute et al., 1987) Plant Molecular Biology, 8, 179-191.
4375-4855 introni h3At: первый интрон гена 11 варианта гистона ИЗ.Ill Arabidopsis thaliana (Chaubet et al., 1992) Journal of Molecular Biology, 225, 569-574.
4856-5227 TPotp С: кодирующая последовательность оптимизированного переходного пептида, содержащая последовательность генов малой субъединицы рибулозо-1,5-бифосфаткарбоксилазы/оксигеназы Zea mays (кукурузы) и Helianthus annuus (подсолнечник), согласно описанию в Lebrun etal.(1996) US 5510471
5228-6565 2mepsps: кодирующая последовательность двойного мутантного гена 5-енолпирувилшикимат-3-фосфатсинтазыгеа mays (кукурузы) (Lebrun et al., 1997) W09704103-A1
6566-7252 3’histonAt: последовательность, включающая 3’-нетранслируемую область гена гистона Н4 Arabidopsis thaliana (Chaboute et al., 1987) Plant Molecular Biology, 8, 179-191.
1.2. Событие EE-GM3
Очищенный с помощью ВЭЖХ выровненный по Sail фрагмент pSFlO размером приблизительно 7,3 т.п.о. (содержащий ген устойчивости к глифосату 2mEPSPS и ген устойчивости к ингибиторам HPPD HPPD-Pf-W336) использовали для получения трансформированных растений сои путем прямого переноса генов в клетки сои типа Jack (Nickell, С.D., G. R. Noel, D. J. Thomas, and R. Waller. Registration of ’Jack’ soybean. Crop Sci 1365. 30.1990) с последующей регенерацией трансформированных растительных клеток в трансгенные фертильные растения сои.
1.2.1. Идентификация элитного события EE-GM3
Селекцию элитного события EE-GM3 выполняли, основываясь на масштабной процедуре селекции на основе высокого уровня экспрессии и стабильности генов устойчивости к гербицидам, и была оценена его совместимость с оптимальными агрономическими характеристиками, например, высотой растения, высотой до узла, устойчивостью к полеганию, ростом, урожайностью. Селекцию растений, содержавших это событие, осуществляли из широкого диапазона различных трансформационных событий, полученных с использованием одних и тех же химерных генов. Параметры, использованные при селекции этого события, представляли собой: а) приемлемую устойчивость к применению гербицида изоксафлутола при полевых испытаниях, б) приемлемую устойчивость к применению гербицида глифосата при полевых испытаниях, в) приемлемую устойчивость к комбинированному применению гербицидов изоксафлутола и глифосата при полевых испытаниях, г) внедрение трансгенов устойчивости к гербицидам в одиночный локус генома растения сои при отсутствии последовательности вектора, д) сходство общих агрономических характеристик с исходными растениями, использованными при трансформации (созревания, полегания, подверженности заболеваниям и т.д.), и е) отсутствие значительной потери урожайности вследствие инсерции трансформирующей ДНК (по сравнению с изогенной линией, не содержащей события, например, линией растений, использованной для трансформации, выращенной при тех же условиях).
Из поколения Т3 выделили гомозиготную линию сои по трансформационному событию EE-GM3 для получения семян. В областях адаптации исходного сорта Jack провели многорайонные полевые исследования в нескольких повторах. Полевые испытания включали устойчивость к гербицидам и агрономическую производительность. Обнаружено, что агрономическая производительность растений, содержащих EE-GM3, была сопоставима с сортом Jack (при отсутствии применения гербицидов).
Полевые испытания также показали, что растения, несущие EE-GM3, обладали:
- аналогичной сорту Jack морфологией растения и характеристиками семян,
- отсутствием изменений реакции на заболевания сои по сравнению с сортом Jack и
- отсутствием изменений проращивания или покоя семян по сравнению с сортом Jack.
Семена (поколения Т1 или S1), собранные с исходного трансформанта (Т0) (растения, трансформированного конструктом с целью получения события EE-GM3) в вегетационном домике, высаживали на поле. Три участка засеяли и обработали глифосатом в количестве 0,2 или 4 кг/га. Семена собирали с растений, демонстрировавших желательный уровень устойчивости к гербициду, глифосату.
Семена (поколение Т2), собранные с самоопыленных растений Т1, выращенных на поле, сеяли из расчета "растение на гряду". Анализ расщепления данных в грядах (полностью или частично устойчивых) и отдельных растений в грядах (устойчивых или чувствительных) с использованием критерия хи-квадрат продемонстрировал ожидаемое менделевское наследование одиночной инсерции в EE-GM3.
Селекцию и накопление семян продолжали до определения гомозиготности линии по трансформационному событию EE-GM3 и его отбора для получения семян в четвертом поколении. Далее семена поколения Т5 использовали в качестве кандидата для разработки различных сортов. Растения шестого поколения (поколения Т6) скрещивали со стандартными линиями сои для скрещивания согласно программе интрогрессии, предназначенной для переноса события на расширенную основу зародышевой плазмы коммерческой сои. Гибридные растения F1 (линии EE-GM3×стандартные линии) выращивали до созревания и высаживали семена F2. Образцы листьев 901 растения F2 анализировали, используя ПЦР-праймеры, предназначенные для определения зиготности инсерции EE-GM3. Наблюдали ожидаемое, согласно законам Менделя, соотношение расщепления одиночной инсерции 1:2:1.
Выбранное событие EE-GM3 внедряли в различные коммерческие генетические окружения и сравнивали результаты полевых испытаний в различных районах. Устойчивость растений к гербициду глифосату и/или гербициду изоксафлутолу оценивали при различных вариантах обработки. Растения демонстрировали хорошую устойчивость к гербицидам. Наследование изучали, используя сотни различных сортов сои, содержащих событие EE-GM3, и применяя гербициды. Выделенные в результате этих испытаний линии затем размножали на поле и также обрабатывали гербицидом. В результате этих испытаний размножили 50 выделенных линий и обработали их гербицидом. Показатели фитотоксичности для последних линий, опрысканных изоксафлутолом и глифосатом, показали некоторую вариабельность ответа, однако, диапазон ответов среди линий отражал вариабельность, аналогичную наблюдавшейся среди 4 повторов события EE-GM3 в исходном окружении Jack, выращенного при таком же режиме обработки и условиях окружающей среды. Таким образом, у растений, содержащих EE-GM3, наблюдали устойчивость к релевантным гербицидам среди широкого диапазона зародышевой плазмы.
Кроме того, растения, содержавшие событие EE-GM3, обладали нормальной морфологией листьев, цветков и бобов, превосходной фертильностью и не проявляли аномальной подверженности заболеваниям или насекомым в различных вариантах генетического окружения. Во время интрогрессии в различные варианты генетического окружения не обнаружили проблем с нарушениями или аномалиями.
В один из сезонов выполнили исследование в 10 районах, предназначенное для сравнения агрономической производительности сои, содержавшей трансформационное событие EE-GM3 и характеризовавшейся двойной устойчивостью к гербицидам, с различными исходными трансформируемыми сортами - сортом Jack и некоторыми нетрансгенными сортами сои. Растения EE-GM3 выращивали на повторяющихся участках, используя случайное расположение делянок и либо стандартные меры борьбы с сорным растениями, либо предназначенные для использования гербициды - глифосат и изоксафлутол. Участки с растениями сои, содержащими трансформационное событие EE-GM3, опрыскивали гербицидом изоксафлутолом при запланированном расходе 70 граммов активного компонента/га и гербицидом глифосатом - при запланированном расходе 1060 граммов активного компонента/га. Применение гербицида на указанные растения осуществляли в виде листового аэрозоля приблизительно на стадии роста растения V4-V5. Агрономические наблюдения осуществляли вначале, середине и конце сезона. Густота растительного покрова (параметр: количество прямостоячих растений) для участка с сортом Jack и нетрансгенными сортами превышала густоту на участках с событием EE-GM3 на величину, равную одному стандартному отклонению. Раннее различие количества прямостоячих растений являлось результатом качества партии семян, поскольку семена для посадки растений, содержащих EE-GM3, получили в инкубаторе в течение противоположного сезона, в то время как семена нетрансгенных сортов получили в течение непрерывного нормального вегетационного периода в условиях США. В то же время количество дней до достижения 50% всхожести и показателей мощности растений были одинаковы, что указывало на сопоставимость партий семян по этим параметрам производительности. При подсчете прямостоячих растений в конце сезона сохранялось различие сорта Jack и нетрансгенных сортов от растений с EE-GM3 на величину одного стандартного отклонения. Урожай растений с событием EE-GM3 с участка также был ниже, чем урожай сорта Jack, на величину одного стандартного отклонения, возможно, в результате меньшей густоты растений на участках с растениями, содержавшими событие EE-GM3. Урожай нетрансгенных сортов был выше, чем у сорта Jack, что можно было ожидать ввиду усовершенствований потенциала урожайности в современных сортах.
В ходе одного из испытаний показатели жизнестойкости растений оценивали на трех стадиях роста: V4-5, R1 и полной зрелости. Первую оценку осуществляли вскоре после запланированного применения гербицидов. Во время последней оценки жизнестойкости растения, содержавшие EE-GM3, опрысканные обоими гербицидами, обладали теми же показателями, что и необработанные растения сорта Jack или необработанные растения, содержавшие EE-GM3. По оценкам, сделанным агрономами, на стадиях роста V4-5 и R1 растения, опрысканные гербицидами, получили оценку жизнестойкости, равную 3-4 (умеренное повреждение). Неопрысканные растения (нетрансформированные растения сорта Jack или растения сои, содержавшие EE-GM3) получили оценку, равную 4,6-4,8 (оценка, равная 5, означает отсутствие повреждений). При последней оценке жизнестойкости растений все участки получили одинаковые оценки, равные 5 (отсутствие повреждений).
Один из испытательных сезонов отличался особенно большим количеством осадков, и влияние предназначенных для обработки гербицидов на посевы, содержащие EE-GM3, было более очевидным, чем в другие сезоны. Полевые испытания также включали мониторинг характеристик приспосабливаемости (размножения, устойчивости к заболеваниям, фертильности, разлета семян, периода покоя, выживаемости). Воспроизводимые характеристики - количество дней до появления всходов, количество дней до 50% цветения и количество дней до 90% созревания бобов - у растений, содержавших EE-GM3, и растений сорта Jack не различались. Различий в реакции на природное заражение заболеваниями растений и насекомыми-вредителями не отмечено. Несмотря на то, что EE-GM3 давали меньший урожай, чем сорт Jack, различий в фертильности (масса 100 семян) не обнаружено. Оценка параметров разброса семян (разрушения бобов и полегания растений) показала, что растения EE-GM3 и Jack обладают одинаковым показателем разрушения бобов, однако, растения EE-GM3 обладали меньшей склонностью к полеганию. Оценка семян, собранных с 10 районов, не обнаружила проблем, связанных с оценкой проращивания или покоя семян.
В ходе испытаний во время сезона с особенно большим количеством осадков конечный урожай растений с событием EE-GM3, независимо от способа борьбы с сорными растениями, был ниже, чем урожай сорта Jack, на величину одного стандартного отклонения (возможно, в результате меньшей густоты растений на участках с растениями, содержавшими событие EE-GM3). В течение особенно влажного сезона описывали повреждение посевов (выгорало до 10-30% площади посевов) на участках с растениями EE-GM3 в течение шести недель после обработки листьев гербицидами глифосатом и изоксафлутолом. Однако, после созревания всем участкам присвоили оценку жизнестойкости растений "отсутствие повреждений". Ожидалось, что повторные многорайонные полевые испытания растений с EE-GM3, внедренным в окружение элитного сорта сои, по сравнению с почти изогенными сестринскими линиями, не содержавшими трансгена, не покажут различий урожайности между растениями, содержавшими событие EE-GM3, и почти изогенными линиями (при отсутствии обработки гербицидами).
Кроме того, при повторных полевых испытаниях обнаружили значительную устойчивость посевов (выгорание менее 10%) растений сои, содержавших EE-GM3, при до- или послевсходовой обработке IFT (70 г активного компонента/га с 0,5% NIS, Agridex), а также значительную устойчивость посевов (выгорание менее 10%) растений сои, содержавших EE-GM3, при послевсходовой обработке пирасульфотолом (35 г активного компонента/га с 0,5% NIS, Agridex) - еще одним гербицидом-ингибитором HPPD.
1.2.2. Идентификация фланкирующих областей и чужеродной ДНК элитного события EE-GM3
Последовательность областей, фланкирующих чужеродную ДНК, включающую гены устойчивости к гербицидам в элитном событии EE-GM3, определяли следующим образом:
1.2.2.1. Правая (5’) фланкирующая область
Фрагмент, идентифицированный как содержащий 5’-фланкирующую область, секвенировали; его нуклеотидная последовательность представлена в SEQ ID No 2. Последовательность между нуклеотидами 1 и 1451 соответствовала ДНК растения, в то время как последовательность между нуклеотидами 1452 и 1843 соответствовала чужеродной ДНК.
1.2.2.2. Левая (3’) фланкирующая область
Фрагмент, идентифицированный как содержащий 3’-фланкирующую область, секвенировали; его нуклеотидная последовательность представлена в SEQ ID No 3. Последовательность между нуклеотидами 1 и 240 соответствовала чужеродной ДНК, в то время как последовательность между нуклеотидами 241 и 1408 соответствовала ДНК растения.
1.2.2.3. Чужеродная ДНК, содержащая гены устойчивости к гербицидам EE-GM3
С помощью различных молекулярных методик определили, что чужеродная ДНК элитного события EE-GM3, включавшая гены устойчивости к гербицидам, содержала две частичных 3’-последовательности histonAt в ориентации "голова-голова", а затем две почти полные копии Sail-фрагмента pSF10 в ориентации "голова-хвост" (см. Фигуру 1).
Чужеродная ДНК, содержащая гены устойчивости к гербицидам EE-GM3, таким образом, содержала следующие последовательности по порядку:
- от нуклеотида 1 до нуклеотида 199: нуклеотидная последовательность, соответствовавшая комплементарной цепи нуклеотидной последовательности SEQ ID No 1 от нуклеотида 6760 до нуклеотида 6958;
- от нуклеотида 200 до нуклеотида 624: нуклеотидная последовательность, соответствовавшая нуклеотидной последовательности SEQ ID No 1 от нуклеотида 6874 до нуклеотида 7298;
- от нуклеотида 625 до нуклеотида 7909: нуклеотидная последовательность, соответствовавшая нуклеотидной последовательности SEQ ID No 1 от нуклеотида 7 до нуклеотида 7291;
- от нуклеотида 7910 до нуклеотида 15163: нуклеотидная последовательность, соответствовавшая нуклеотидной последовательности SEQ ID No 1 от нуклеотида 12 до нуклеотида 7265;и
- от нуклеотида 15164 до нуклеотида 15187: нуклеотидная последовательность, соответствовавшая нуклеотидной последовательности SEQ ID No 3 от нуклеотида 217 до нуклеотида 240 (эта последовательность не соответствует ни плазмидной ДНК pSF10, ни ДНК растения дикого типа и поэтому называется филлер-ДНК).
Непосредственно сверху этой чужеродной ДНК предшествовала непрерывная с ней 5’-фланкирующая последовательность SEQ ID No 2, от нуклеотида 1 до 1451, а непосредственно снизу от этой чужеродной ДНК располагалась непрерывная с ней 3’-фланкирующая последовательность SEQ ID No 3, от нуклеотида241 до нуклеотида 1408.
Подтвержденное полное секвенирование чужеродной ДНК и фланкирующих последовательностей ДНК в EE-GM3 позволило получить последовательность, представленную в SEQ ID No 20. В этой последовательности внедренная ДНК располагалась от положения 1452 до положения 16638, а две почти полные копии pSF10 располагались в ориентации "голова-хвост" от положения 2257 до положения 16601. 5’-фланкирующая последовательность ДНК в SEQ ID No 20 представляла собой последовательность от положения 1 до положения 1451 в SEQ ID No 20, а 3’-фланкирующая последовательность ДНК в SEQ ID No 20 представляла собой последовательность от положения 16639 до положения 17806 в SEQ ID No 20.
1.3. Описание чужеродной ДНК, включающей химерные гены фосфинотрицинацетилтрансферазы
Плазмида pB2/P35SAcK представляла собой вектор клонирования на основе pUC19, содержавший химерный ген pat. Описание вектора приведено ниже в Таблице 2. Его нуклеотидная последовательность представлена в SEQ ID No 11.
Таблица 2
Положения нуклеотидов компонентов pB2/P35SAcK (SEQ ID No 11)
Положения нуклеотидов Описание и ссылки
461-1003 355-промотор вируса мозаики цветной капусты
1004-1011 Последовательности на основе синтетического полилинкера
1012-1563 Синтетический ген pat (аминокислотная последовательность из Streptomyces viridochromogenes)
1564-1581 Последовательности на основе синтетического полилинкера
1582-1784 358-терминатор вируса мозаики цветной капусты
1.4. Событие ЕЕ-GM1 1.4.1. Идентификация ЕЕ-GM1
Сою, устойчивую к гербицидам, разработали путем трансформации сои вектором pB2/P35SAcK с помощью прямого переноса гена.
Селекцию элитного события EE-GM1 выполняли, основываясь на масштабной процедуре селекции на основе высокого уровня экспрессии и стабильности гена устойчивости к гербицидам, а также его совместимости с оптимальными агрономическими характеристиками.
1.4.2. Идентификация фланкирующих областей и чужеродной ДНК элитного события EE-GM1
1.4.2.1. Правая (5’) фланкирующая область
Фрагмент, идентифицированный как содержащий 5’-фланкирующую область, секвенировали; его нуклеотидная последовательность представлена в SEQ ID No 12. Последовательность между нуклеотидами 1 и 209 соответствовала ДНК растения, в то время как последовательность между нуклеотидами 210 и 720 соответствовала чужеродной ДНК.
1.4.2.2. Левая (3’) фланкирующая область
Фрагмент, идентифицированный как содержащий 3’-фланкирующую область, секвенировали; его нуклеотидная последовательность представлена в SEQ ID No 13. Последовательность между нуклеотидами 1 и 568 соответствовала чужеродной ДНК, в то время как последовательность между нуклеотидами 569 и 1000 соответствовала ДНК растения.
1.4.2.3. Чужеродная ДНК, содержащая гены устойчивости к гербицидам EE-GM1
С помощью различных молекулярных методик определили, что чужеродная ДНК элитного события EE-GM1, включавшая ген устойчивости к гербицидам, содержала две копии химерного гена pat в виде прямого повтора (см. Фигуру 3).
Чужеродная ДНК, содержащая гены устойчивости к гербицидам EE-GM1, таким образом, содержала следующие последовательности по порядку:
- от нуклеотида 1 до нуклеотида 3122: нуклеотидная последовательность, соответствовавшая нуклеотидной последовательности SEQ ID No 11 от нуклеотида 340 до нуклеотида 3461;
- от нуклеотида 3123 до нуклеотида 3458: нуклеотидная последовательность, соответствовавшая комплементарной цепи нуклеотидной последовательности SEQ ID No 11 от нуклеотида 1 до нуклеотида 336;
- от нуклеотида 3459 до нуклеотида 4073: нуклеотидная последовательность, соответствовавшая комплементарной цепи нуклеотидной последовательности SEQ ID No 11 от нуклеотида 3462 до нуклеотида 4076; и
- от нуклеотида 4074 до нуклеотида 6780: нуклеотидная последовательность, соответствовавшая нуклеотидной последовательности SEQ ID No 11 от нуклеотида 337 до нуклеотида 3043; и
- от нуклеотида 6781 до нуклеотида 6790: нуклеотидная последовательность, соответствовавшая нуклеотидной последовательности SEQ ID No 13 от нуклеотида 559 до нуклеотида 568 (эта последовательность не соответствует ни плазмидной ДНК, ни ДНК растения дикого типа и поэтому называется филлер-ДНК).
Непосредственно сверху этой чужеродной ДНК EE-GM1 предшествовала непрерывная с ней 5’-фланкирующая последовательность SEQ ID No 12, от нуклеотида 1 до 209, а непосредственно снизу от этой чужеродной ДНК располагалась непрерывная с ней 3’-фланкирующая последовательность SEQ ID No 13 от нуклеотида 569 до нуклеотида 1000.
1.5. Событие EE-GM2
Сою, устойчивую к гербицидам, разработали путем трансформации сои вектором pB2/P35SAcK с помощью прямого переноса гена.
Селекцию элитного события EE-GM2 выполняли, основываясь на масштабной процедуре селекции на основе высокого уровня экспрессии и стабильности гена устойчивости к гербицидам, а также его совместимости с оптимальными агрономическими характеристиками.
1.5.1. Идентификация фланкирующих областей и чужеродной ДНК элитного события EE-GM2
1.5.1.1. Правая (5’) фланкирующая область
Фрагмент, идентифицированный как содержащий 5’-фланкирующую область, секвенировали; его нуклеотидная последовательность представлена в SEQ ID No 14. Последовательность между нуклеотидами 1 и 311 соответствовала ДНК растения, в то время как последовательность между нуклеотидами 312 и 810 соответствовала чужеродной ДНК.
1.5.1.2. Левая (3’) фланкирующая область
Фрагмент, идентифицированный как содержащий 3’-фланкирующую область, секвенировали; его нуклеотидная последовательность представлена в SEQ ID No 15. Последовательность между нуклеотидами 1 и 507 соответствовала чужеродной ДНК, в то время как последовательность между нуклеотидами 569 и 1880 соответствовала ДНК растения.
1.5.1.3. Чужеродная ДНК, содержащая гены устойчивости к гербицидам EE-GM2
С помощью различных молекулярных методик определили, что чужеродная ДНК элитного события EE-GM2, включавшая ген устойчивости к гербицидам, содержала одну копию химерного гена pat (см. Фигуру 4).
Чужеродная ДНК, содержащая гены устойчивости к гербицидам EE-GM2, таким образом, содержала следующие последовательности по порядку:
- от нуклеотида 1 до нуклеотида 391: нуклеотидная последовательность, соответствовавшая нуклеотидной последовательности SEQ ID No 11 от нуклеотида 3458 до нуклеотида 3848; и
- от нуклеотида 392 до нуклеотида 3436: нуклеотидная последовательность, соответствовавшая нуклеотидной последовательности SEQ ID No 11 от нуклеотида 413 до нуклеотида 3457.
Непосредственно сверху этой чужеродной ДНК EE-GM2 предшествовала непрерывная с ней 5’-фланкирующая последовательность SEQ ID No 14, от нуклеотида 1 до 311, а непосредственно снизу от этой чужеродной ДНК располагалась непрерывная с ней 3’-фланкирующая последовательность SEQ ID No 15 от нуклеотида, 508 до нуклеотида 1880.
2. Разработка протокола ПЦР-идентификации для EE-GM3.
2.1. Праймеры
Разработаны специфические праймеры, распознающие последовательности в пределах элитного события.
Разработан праймер, распознающий последовательность в пределах 3’-фланкирующей области EE-GM3. Второй праймер выбран в пределах последовательности чужеродной ДНК, так, что праймеры перекрывали последовательность размером приблизительно 263 нуклеотида. Обнаружили, что следующие праймеры позволяли получить наиболее ясные и воспроизводимые результаты в ходе ПЦР с ДНК EE-GM3:
SOY028: 5’-ATC.gCT.TTA.ACg.TCC.CTC.Ag-3 (SEQ ID No: 4)
(мишень: внедренная ДНК)
SOY029: 5’-CAA.ggC.CTC.gAg.ATT.ATC-3’ (SEQ ID No: 5)
(мишень: ДНК растения)
Праймеры, мишенью которых являлась эндогенная последовательность, предпочтительно включали в смесь для ПЦР. Эти праймеры служили внутренним контролем для неизвестных образцов и положительного контроля ДНК. Положительный результат, полученный при использовании пары эндогенных праймеров (присутствие ПЦР-амплифицированного фрагмента размером 413 п.о.), продемонстрировал, что из препарата геномной ДНК можно получить достаточное количество продукта ПЦР - ДНК надлежащего качества. Выбрали эндогенные праймеры, распознававшие эндогенный ген актина сои:
SOY01 5’-gTC.AgC.CAC.ACA.gTg.CCT.AT-3’ (SEQ ID No: 9)
SOY02 5’-gTT.ACC.gTA.CAg.gTC.TTT.CC-3’ (SEQ ID No:10)
2.2. Амплифицированные фрагменты
Ожидаемые амплифицированные фрагменты при ПЦР представляли собой:
Для пары праймеров SOY01-SOY02: 413 п.о. (эндогенный контроль)
Для пары праймеров SOY028-SOY029: 263 п.о. (элитное событие EE-GM3)
2.3. Матричная ДНК
Матричную ДНК выделяли из фрагмента листа, полученного компостированием, согласно Edwards et al. (Nucleic Acid Research, 19, pi 349, 1991). Если использовали ДНК, выделенную другими способами, следовало выполнить тестовый прогон с использованием различных количеств матрицы. Обычно наилучшие результаты получали при использовании 50 нг геномной матричной ДНК.
2.4. Назначенные положительный и отрицательный контроли
Во избежание ложных положительных или отрицательных результатов определили, что в ПЦР-прогон следовало включить следующие положительный и отрицательный контроли:
Контроль мастер-микса (отрицательный контроль ДНК). Это - ПЦР, в ходе которой в реакционную смесь не вносили ДНК. Если получали ожидаемый результат - отсутствие продукта ПЦР, - это означало, что смесь для ПЦР не загрязнена ДНК-мишенью.
Положительный контроль ДНК (образец геномной ДНК, заведомо содержавший трансгенные последовательности). Успешная амплификация положительного контроля демонстрировала, что ПЦР проходила при условиях, обеспечивавших амплификацию последовательностей-мишеней.
Контроль ДНК дикого типа. Это - ПЦР, в ходе которой матрица ДНК представляла собой геномную ДНК, выделенную из нетрансгенного растения. Если получали ожидаемый результат - отсутствие амплификации трансгенного продукта ПЦР при амплификации эндогенного продукта ПЦР, - это означало, что в образце геномной ДНК не происходило обнаруживаемой фоновой амплификации трансгена.
2.5. Условия ПЦР
Оптимальные результаты получали при следующих условиях (Подразумевается, что при описании различных условий для оптимальных результатов представлены примеры таких условий. Ясно, что специалист может изменять условия, реагенты и параметры, например, использовать другие Taq-полимеразы, и достигать желаемых результатов):
- смесь ПЦР для объема реакционной смеси 25 мкл содержала:
20 нг матричной ДНК
2,5 мкл 10х буфера для амплификации (поставлялся производителем с Taq-полимеразой)
0,5 мкл 10 мМ dNTP
0,4 мкл SOY01 (10 пмоль/мкл)
0,4 мкл SOY02 (10 пмоль/мкл)
0,7 мкл SOY028 (10 пмоль/мкл)
0,7 мкл SOY029 (10 пмоль/мкл)
0,1 мкл Taq-ДНК-полимеразы (5 единиц/мкл)
воду до объема 25 мкл
- профиль термоциклирования, позволявший получить оптимальные результаты, выглядел следующим образом:
4 мин при 95ºС
Затем: 1 мин при 95ºС
1 мин при 57ºС
2 мин при 72ºС
В течение 5 циклов
Затем: 30 с при 92ºС
30 с при 57ºС
1 мин при 72ºС
В течение 25 циклов
Затем: 10 минут при 72ºС
2.6. Анализ в агарозном геле
Для оптимальной визуализации результатов ПЦР определили, что от 10 до 20 мкл образцов ПЦР следовало нанести на 1,5% агарозный гель (трис-боратный буфер) с соответствующим маркером молекулярной массы (например, лэддером 100 п.о. Pharmacia).
2.7. Подтверждение результатов
Определили, что данные, полученные из образцов ДНК трансгенных растений с использованием одного прогона ПЦР и одной смеси ПЦР, не должны считаться приемлемыми, если 1) положительный контроль ДНК не позволял получить ожидаемых продуктов ПЦР (трансгенных и эндогенных фрагментов), 2) отрицательный контроль ДНК не являлся отрицательным при ПЦР-амплификации (не подтверждается отсутствие фрагментов) и 3) контроль ДНК дикого типа не позволял получить ожидаемых результатов (амплификации эндогенного фрагмента).
При соблюдении Протокола ПНР-идентификации для EE-GM3, согласно вышеприведенному описанию, видимые количества трансгенных и эндогенных продуктов ПЦР ожидаемого размера в дорожках указывали на то, что соответствующее растение, из которого выделили геномную матричную ДНК, унаследовало элитное событие EE-GM3. Если в дорожках отсутствовало видимое количество трансгенных продуктов ПЦР и присутствовали видимые количества эндогенных продуктов ПЦР, это указывало на то, что соответствующее растение, из которого выделили геномную матричную ДНК, не содержало указанного элитного события. Если в дорожках отсутствовало видимое количество эндогенных и трансгенных продуктов ПНР, это указывало на то, что качество и/или количество геномной ДНК не позволяло получить продукт ПЦР. Расчет оценок для этих растений был невозможен. Следовало повторить выделение геномной ДНК и выполнить новый прогон ПЦР с соответствующими контролями.
2.8. Использование дифференциального протокола ПЦР для идентификации EE-GM3
Перед попыткой скрининга неизвестных образцов выполняли тестовый прогон с соответствующими контролями. Для разработанного протокола могла требоваться оптимизация компонентов, которая могла различаться в разных лабораториях (выделение матричной ДНК, Taq-ДНК-полимераза, качество праймеров, dNTP, термоциклера и т.д.).
В этом протоколе ключевую роль играла амплификация эндогенной последовательности. Было необходимо достичь условий ПЦР и термоциклирования, в ходе которых возможна амплификация эквимолярных количеств как эндогенной, так и трансгенной последовательностей известной трансгенной матричной геномной ДНК. Во всех случаях, когда не происходила амплификация эндогенного фрагмента-мишени или когда не происходила амплификация последовательностей-мишеней, согласно электрофорезу в агарозном геле при одинаковой интенсивности окрашивания этидий-бромидом, могла требоваться оптимизация условий ПЦР.
Согласно вышеописанному протоколу тестировали материал листьев ряда растений сои, некоторые из которых содержали EE-GM3. Образцы элитного события EE-GM3 и сои дикого типа использовали в качестве положительного и отрицательного контролей, соответственно.
На Фигуре 2 показан результат, полученный при использовании Протокола ПЦР-амплификации элитного события EE-GM3 и ряда образцов растений сои. Обнаружено, что образцы в дорожках 2 и 3 содержали элитное событие EE-GM3, поскольку была обнаружена полоса, соответствовавшая 263 п.о., в то время как образцы в дорожках 4-8 не содержали EE-GM3. Дорожки 6 и 7 содержали образцы других трансформационных событий сои, полученных при использовании этих же химерных генов устойчивости к гербицидам; дорожка 8 содержала ДИК растений сои дикого типа, а дорожка 9 представляла собой образец отрицательного контроля (воды), дорожки 1 и 10 представляли собой маркер молекулярной массы (лэддер 100 п.о.).
2.9. Обнаружение EE-GM3 с помощью дПЦР-анализа в насыпной партии семян
Дифференциальный ПЦР-анализ (дПЦР) настроили на обнаружение низкого уровня EE-GM3 в насыпной партии семян. При воспроизводимых условиях минимальный успешно обнаруживаемый уровень трансгенных семян в насыпной партии нетрансгенных семян составлял 0,4% (массы/массу). Таким образом, определили, что предел обнаружения составлял 0,4% (массы/массу).
При целевой ПЦР использовали следующие праймеры:
Прямой праймер, мишенью которого являлась Т-ДНК последовательность:
SHA130 5’-CTA.TAT.TCT.ggT.TCC.AAT.TTA.TC-3’ (SED ID No 12)
Обратный праймер, мишенью которого являлась 3’-фланкирующая последовательность:
SMP178 5’-TgA.ggC.ACg.TAT.TgA.TgA.CC-3’ (SEQ ID No 13)
Размер ожидаемого амплифицированного фрагмента при ПЦР с использованием этих праймеров составлял 115 п.о.
Целевую ПЦР выполняли, используя приблизительно 200 нг матричной ДНК, выделенной из семян, насыпанных на грунт, согласно инструкции модифицированного набора для выделения и очистки ДНК Centra Puregene DNA purification extraction kit (Qiagen). Если использовали ДНК, выделенную другими способами, следовало выполнить тестовый прогон с использованием известных относительных уровней EE-GM3.
Валидированную ПЦР с эталонной системой, мишенью которой являлась эндогенная последовательность, в идеале следовало выполнять в виде отдельного прогона ПЦР для подтверждения пригодности образца ДНК для ПЦР-анализа во избежание ложных отрицательных результатов. При использовании неизвестных тестируемых образцов ПЦР-эксперимент в идеале должен был включать соответствующие образцы положительных и отрицательных контролей, т.е.:
- Контроль мастер-микса (отрицательный контроль ДНК). Это - ПЦР, в ходе которой в реакционную смесь не вносили ДНК. Если получали ожидаемый результат (отсутствие продукта ПЦР) как для целевой, так и для эталонной систем, это означало, что смесь для ПЦР не загрязнена ДНК-мишенью.
- Положительный контроль ДНК (образец геномной ДНК, заведомо содержавший трансгенные последовательности). Успешная амплификация положительного контроля демонстрировала, что ПЦР проходила при условиях, обеспечивавших амплификацию последовательностей-мишеней.
- Также в эту ПЦР можно было вносить контроль ДНК дикого типа. Это - ПЦР, в ходе которой матрица ДНК представляла собой геномную ДНК, выделенную из нетрансгенного растения. Если получали ожидаемый результат - отсутствие амплификации трансгенного продукта ПЦР при амплификации эндогенного продукта ПЦР, - это означало, что в образце геномной ДНК не происходило обнаруживаемой фоновой амплификации трансгена.
Оптимальные результаты получали при следующих условиях:
- смесь ПЦР для объема реакционной смеси 25 мкл содержала:
200 нг матричной ДНК
5 мкл 5х рабочего буферного раствора
0,25 мкл 20 мМ dNTP
0,7 мкл SHA130 (10 пмоль/л)
0,4 мкл SHA178 (10 пмоль/л)
0,1 мкл GO-Taq-ДНК-полимеразы (5 единиц/л)
воду до объема 25 мкл
профиль термоциклирования, позволявший получить оптимальные результаты, выглядел следующим образом:
4 мин при 95ºС
Затем: 1 мин при 95ºС
1 мин при 57ºС
2 мин при 72ºС
В течение 5 циклов
Затем: 30 с при 92ºС
30 с при 57ºС
1 мин при 72ºС
В течение 30 циклов
Затем: 10 минут при 72ºС
Для оптимальной визуализации результатов ПЦР определили, что 25 мкл продукта ПЦР следовало нанести на 1,5% агарозный гель (трис-боратный буфер) с соответствующим маркером молекулярной массы (например, лэддером 50 п.о.).
При соблюдении способа ПЦР, согласно вышеприведенному описанию, видимые количества продуктов ПЦР целевой и эталонной систем ожидаемого размера в дорожках указывали на то, что тестируемый образец, из которого выделили геномную матричную ДНК, содержал уровень элитного события ЕЕ-GM3, превышавший предел обнаружения целевой реакции.
Если в дорожках отсутствовало видимое количество целевых продуктов ПЦР и присутствовали видимые количества продуктов ПЦР эталонной системы, это указывало на то, что тестируемый образец, из которого выделили геномную матричную ДНК, содержал уровень элитного события EE-GM3, составлявший величину ниже предела обнаружения целевой реакции.
Если в дорожках отсутствовало видимое количество эндогенных и трансгенных продуктов ПЦР, это указывало на то, что качество и/или количество геномной ДНК не позволяло получить продукт ПЦР.
Для этих растений оценки не выполняли. Следовало повторить выделение геномной ДНК и выполнить новый прогон ПЦР с соответствующими контролями.
3. Использование специфического интегрированного фрагмента в качестве зонда для обнаружения материала, включавшего EE-GM3.
Специфический интегрированный фрагмент EE-GM3 получали путем ПЦР-амплификации при использовании специфических праймеров SOY028 (SEQ ID No 4) и SOY029 (SEQ ID No 5), позволявших получить ампликон с нуклеотидной последовательностью SEQ ID No 8, или путем химического синтеза, и метили. Этот интегрированный фрагмент использовали в качестве специфического зонда для обнаружения EE-GM3 в биологических образцах. Нуклеиновую кислоту выделяли из образцов согласно стандартным процедурам. Затем эту нуклеиновую кислоту приводили в контакт со специфическим зондом при условиях гибридизации, оптимизированных для образования гибрида. Обнаружение образования гибрида указывало на присутствие нуклеиновой кислоты EE-GM3 в образце. Необязательно нуклеиновую кислоту в образцах амплифицировали до контакта со специфическим зондом, используя специфические праймеры. В качестве альтернативы вместо интегрированного фрагмента метили нуклеиновую кислоту до контакта со специфическим зондом.
Необязательно специфический зонд прикрепляли к твердому носителю (например, не ограничиваясь этим, к фильтру, стрипу или гранулам) до контакта с образцами.
4. Протокол ПЦР-идентификации для EE-GM1.
4.1. Праймеры
Разработали специфические праймеры, распознающие последовательности в пределах элитного события. В частности, разработали праймер, распознающий последовательность в пределах 5'-фланкирующей области EE-GM1. Второй праймер выбрали в пределах последовательности чужеродной ДНК, так, что праймеры перекрывали последовательность размером приблизительно 183 нуклеотида. Обнаружили, что следующие праймеры позволяли получить наиболее ясные и воспроизводимые результаты в ходе ПЦР с ДНК EE-GM1:
SOY06: 5’-ggC.gTT.CgT.AgT.gAC.TgA.gg-3’ (SEQ ID No: 16)
(мишень: ДНК растения)
SOY07: 5’-gTT.TTA.CAA.CgT.CgT.gAC.Tgg-3’ (SEQ ID No: 17)
(мишень: внедренная ДНК)
Праймеры, мишенью которых являлась эндогенная последовательность, предпочтительно включали в смесь для ПЦР. Эти праймеры служили внутренним контролем для неизвестных образцов и положительного контроля ДНК. Положительный результат, полученный при использовании пары эндогенных праймеров, демонстрировал, что из препарата геномной ДНК можно получить достаточное количество продукта ПЦР - ДНК надлежащего качества. Выбрали эндогенные праймеры, распознававшие ген домашнего хозяйства в Glycine max:
SOY01: 5’-gTC.AgC.CAC.ACA.gTg.CCT.AT-3’ (SEQ ID No: 9)
(расположен в гене актина 1 Glycine max (Номер доступа J01298))
SOY02: 5’-gTT.ACC.gTA.CAg.gTC.TTT.CC-3’ (SEQ ID No: 10)
(расположен в гене актина 1 Glycine max (Номер доступа J01298))
4.2. Амплифицированные фрагменты
Ожидаемые амплифицированные фрагменты при ПЦР представляли собой:
Для пары праймеров SOY01-SOY02: 413 п.о. (эндогенный контроль)
Для пары праймеров SOY06-SOY07: 183 п.о. (элитное событие EE-GM1)
4.3. Матричная ДНК
Матричную ДНК выделяли из фрагмента листа, полученного компостированием, согласно Edwards et al. (Nucleic Acid Research, 19, p1349, 1991). Если использовали ДНК, выделенную другими способами, следовало выполнить тестовый прогон с использованием различных количеств матрицы. Обычно наилучшие результаты получали при использовании 50 нг геномной матричной ДНК.
4.4. Назначенные положительный и отрицательный контроли
Во избежание ложных положительных или отрицательных результатов определили, что в ПЦР-прогон следовало включить следующие положительный и отрицательный контроли:
- Контроль мастер-микса (отрицательный контроль ДНК). Это - ПЦР, в ходе которой в реакционную смесь не вносили ДНК. Если получали ожидаемый результат - отсутствие продуктов ПЦР, - это означало, что смесь для ПЦР не загрязнена ДНК-мишенью.
- Положительный контроль ДНК (образец геномной ДНК, заведомо содержавший трансгенные последовательности). Успешная амплификация положительного контроля демонстрировала, что ПЦР проходила при условиях, обеспечивавших амплификацию последовательностей-мишеней.
Контроль ДНК дикого типа. Это - ПЦР, в ходе которой матрица ДНК представляла собой геномную ДНК, выделенную из нетрансгенного растения. Если получали ожидаемый результат - отсутствие амплификации трансгенного продукта ПЦР при амплификации эндогенного продукта ПЦР, - это означало, что в образце геномной ДНК не происходило обнаруживаемой фоновой амплификации трансгена.
4.5. Условия ПЦР
Оптимальные результаты получали при следующих условиях:
- смесь ПЦР для объема реакционной смеси 25 мкл содержала:
2,5 мкл матричной ДНК
2,5 мкл 10х буфера для амплификации (поставлялся с Taq-полимеразой)
0,5 мкл 10 мМ dNTP
0,5 мкл SOY06 (10 пмоль/мкл)
0,5 мкл SOY07 (10 пмоль/мкл)
0,25 мкл SOY01 (10 пмоль/мкл)
0,25 мкл SOY02 (10 пмоль/мкл)
0,1 мкл Taq-ДНК-полимеразы (5 единиц/мкл)
воду до объема 25 мкл
- профиль термоциклирования, позволявший получить оптимальные результаты, выглядел следующим образом:
4 мин при 95ºС
Затем: 1 мин при 95ºС
1 мин при 57ºС
2 мин при 72ºС
В течение 5 циклов
Затем: 30 с при 92ºС
30 с при 57ºС
1 мин при 72ºС
В течение 25 циклов
Затем: 5 минут при 72ºС
4.6. Анализ в агарозном геле
Для оптимальной визуализации результатов ПЦР определили, что от 10 до 20 мкл образцов ПЦР следовало нанести на 1,5% агарозный гель (трис-боратный буфер) с соответствующим маркером молекулярной массы (например, лэддером 100 п.о. Pharmacia).
4.7. Подтверждение результатов
Определили, что данные, полученные из образцов ДНК трансгенных растений с использованием одного прогона ПЦР и одной смеси ПЦР, не должны считаться приемлемыми, если 1) положительный контроль ДНК не позволял получить ожидаемых продуктов ПЦР (трансгенных и эндогенных фрагментов), 2) отрицательный контроль ДНК не являлся отрицательным при ПЦР-амплификации (не подтверждается отсутствие фрагментов) и 3) контроль ДНК дикого типа не позволял получить ожидаемых результатов (амплификации эндогенного фрагмента).
При соблюдении Протокола ПЦР-идентификации для EE-GM1, согласно вышеприведенному описанию, видимые количества трансгенных и эндогенных продуктов ПНР ожидаемого размера в дорожках указывали на то, что соответствующее растение, из которого выделили геномную матричную ДНК, унаследовало элитное событие EE-GM1. Если в дорожках отсутствовали видимые количества трансгенных продуктов ПЦР и присутствовали видимые количества эндогенных продуктов ПЦР, это указывало на то, что соответствующее растение, из которого выделили геномную матричную ДНК, не содержало указанного элитного события. Если в дорожках отсутствовали видимые количества эндогенных и трансгенных продуктов ПЦР, это указывало на то, что качество и/или количество геномной ДНК не позволяло получить продукт ПЦР. Для этих растений оценки не выполняли. Следовало повторить выделение геномной ДНК и выполнить новый прогон ПЦР с соответствующими контролями.
4.8. Использование дифференциального протокола ПЦР для идентификации EE-GM1
Перед попыткой скрининга неизвестных образцов следовало выполнить тестовый прогон с соответствующими контролями. Для разработанного протокола могла требоваться оптимизация компонентов, которая могла различаться в разных лабораториях (выделение матричной ДНК, Taq-ДНК-полимераза, качество праймеров, dNTP, термоциклера и т.д.).
В этом протоколе ключевую роль играла амплификация эндогенной последовательности. Было необходимо достичь условий ПЦР и термоциклирования, в ходе которых возможна амплификация эквимолярных количеств как эндогенной, так и трансгенной последовательностей известной трансгенной матричной геномной ДНК. Во всех случаях, когда не происходила амплификация эндогенного фрагмента-мишени или когда не происходила амплификация последовательностей-мишеней, согласно электрофорезу в агарозном геле при одинаковой интенсивности окрашивания этидий-бромидом, могла требоваться оптимизация условий ПЦР.
Согласно вышеописанному протоколу тестировали материал листьев ряда растений Glycine max, некоторые из которых содержали EE-GM1. Образцы элитного события EE-GM1 и Glycine max дикого типа использовали в качестве положительного и отрицательного контролей, соответственно.
На Фигуре 5 показан результат, полученный при использовании Протокола ПЦР-амплификации элитного события EE-GM1 и ряда образцов растений сои (дорожки 1-14). Обнаружено, что образцы в дорожке 1 содержали элитное событие, поскольку была обнаружена полоса, соответствовавшая 185 п.о., в то время как образцы в дорожках 2, 3 и 4 не содержали EE-GM1. Дорожка 2 содержала другое элитное событие сои, дорожка 3 представляла контроль нетрансгенной Glycine max, дорожка 4 представляла собой образец отрицательного контроля (воды), а дорожка 5 представляла собой маркер молекулярной массы (лэддер 100 п.о.).
5. Использование специфического интегрированного фрагмента в качестве зонда для обнаружения материала, включавшего EE-GM1.
Специфический интегрированный фрагмент EE-GM1 получали путем ПЦР-амплификации при использовании специфических праймеров SOY06 (SEQ ID No 16) и SOY07 (SEQ ID No 17) или путем химического синтеза, и метили. Этот интегрированный фрагмент использовали в качестве специфического зонда для обнаружения EE-GM1 в биологических образцах. Нуклеиновую кислоту выделяли из образцов согласно стандартным процедурам. Затем эту нуклеиновую кислоту приводили в контакт со специфическим зондом при условиях гибридизации, оптимизированных для образования гибрида. Обнаружение образования гибрида указывало на присутствие нуклеиновой кислоты EE-GM1 в образце. Необязательно нуклеиновую кислоту в образцах амплифицировали до контакта со специфическим зондом, используя специфические праймеры. В качестве альтернативы вместо интегрированного фрагмента метили нуклеиновую кислоту до контакта со специфическим зондом. При желании необязательно специфический зонд прикрепляли к твердому носителю (например, не ограничиваясь этим, к фильтру, стрипу или гранулам) до контакта с образцами.
6. Протокол ПЦР-идентификации для EE-GM2.
6.1. Праймеры
Разработали специфические праймеры, распознающие последовательности в пределах элитного события. В частности, разработали праймер, распознающий последовательность в пределах 3’-фланкирующей области EE-GM2. Второй праймер выбрали в пределах последовательности чужеродной ДНК, так, что праймеры перекрывали последовательность размером приблизительно 150 нуклеотидов. Обнаружили, что следующие праймеры позволяли получить наиболее ясные и воспроизводимые результаты в ходе ПЦР с ДНК EE-GM2:
SOY09: 5’-TgT.ggT.TAT.ggC.ggT.gCC.ATC-3’ (SEQ ID No: 18)
(мишень: ДНК растения)
SOY010: 5’-TgC.TAC.Agg.CAT.CgT.ggT.gTC-3’ (SEQ ID No: 19)
(мишень: внедренная ДНК)
Праймеры, мишенью которых являлась эндогенная последовательность, предпочтительно включали в смесь для ПЦР. Эти праймеры служили внутренним контролем для неизвестных образцов и положительного контроля ДНК. Положительный результат, полученный при использовании пары эндогенных праймеров, демонстрировал, что из препарата геномной ДНК можно получить достаточное количество продукта ПЦР - ДНК надлежащего качества. Выбрали эндогенные праймеры, распознававшие ген домашнего хозяйства в Glycine max:
SOY01: 5’-gTC.AgC.CAC.ACA.gTg.CCT.AT-3’ (SEQ ID No: 9)
(расположен в гене актина 1 Glycine тек (Номер доступа J01298))
SOY02: 5’-gTT.ACC.gTA.CAg.gTC.TTT.CC-3’ (SEQ ID No: 10)
(расположен в гене актина 1 Glycine max (Номер доступа J01298))
6.2. Амплифицированные фрагменты
Ожидаемые амплифицированные фрагменты при ПЦР представляли собой:
Для пары праймеров SOY01 -SOY02: 413 п.о. (эндогенный контроль)
Для пары праймеров SOY09-SOY010: 151 п.о. (элитное событие EE-GM2)
6.3. Матричная ДНК
Матричную ДНК выделяли из фрагмента листа, полученного компостированием, согласно Edwards et al. (Nucleic Acid Research, 19, p1349, 1991). Если использовали ДНК, выделенную другими способами, следовало выполнить тестовый прогон с использованием различных количеств матрицы. Обычно наилучшие результаты получали при использовании 50 нг геномной матричной ДНК.
6.4. Назначенные положительный и отрицательный контроли
Во избежание ложных положительных или отрицательных результатов определили, что в ПЦР-прогон следовало включить следующие положительный и отрицательный контроли:
Контроль мастер-микса (отрицательный контроль ДНК). Это - ПЦР, в ходе которой в реакционную смесь не вносили ДНК. Если получали ожидаемый результат - отсутствие продукта ПЦР, - это означало, что смесь для ПЦР не загрязнена ДНК-мишенью.
Положительный контроль ДНК (образец геномной ДНК, заведомо содержавший трансгенные последовательности). Успешная амплификация положительного контроля демонстрировала, что ПЦР проходила при условиях, обеспечивавших амплификацию последовательностей-мишеней.
Контроль ДНК дикого типа. Это - ПЦР, в ходе которой матрица ДНК представляла собой геномную ДНК, выделенную из нетрансгенного растения. Если получали ожидаемый результат - отсутствие амплификации трансгенного продукта ПЦР при амплификации эндогенного продукта ПЦР, - это означало, что в образце геномной ДНК не происходило обнаруживаемой фоновой амплификации трансгена.
6.5. Условия ПЦР
Оптимальные результаты получали при следующих условиях:
- смесь ПЦР для объема реакционной смеси 25 мкл содержала:
2,5 мкл матричной ДНК
2,5 мкл 10x буфера для амплификации (поставлялся с Taq-полимеразой)
0,5 мкл 10 мМ dNTP
0,5 мкл SOY09 (10 пмоль/мкл)
0,5 мкл SOY010 (10 пмоль/мкл)
0,25 мкл SOY01 (10 пмоль/мкл)
0,25 мкл SOY02 (10 пмоль/мкл)
0,1 мкл Taq-ДНК-полимеразы (5 единиц/мкл)
воду до объема 25 мкл
- профиль термоциклирования, позволявший получить оптимальные результаты, выглядел следующим образом:
4 мин при 95ºС
Затем: 1 мин при 95ºС
1 мин при 57ºС
2 мин при 72ºС
В течение 5 циклов
Затем: 30 с при 92ºС
30 с при 57ºС
1 мин при 72ºС
В течение 25 циклов
Затем: 5 минут при 72ºС
6.6. Анализ в агарозном геле
Для оптимальной визуализации результатов ПЦР определили, что от 10 до 20 мкл образцов ПЦР следовало нанести на 1,5% агарозный гель (трис-боратный буфер) с соответствующим маркером молекулярной массы (например, лэддером 100 п.о. от Pharmacia).
6.7. Подтверждение результатов
Определили, что данные, полученные из образцов ДНК трансгенных растений с использованием одного прогона ПЦР и одной смеси ГЩР, не должны считаться приемлемыми, если 1) положительный контроль ДНК не позволял получить ожидаемых продуктов ПЦР (трансгенных и эндогенных фрагментов), 2) отрицательный контроль ДНК не являлся отрицательным при ПЦР-амплификации (не подтверждается отсутствие фрагментов) и 3) контроль ДНК дикого типа не позволял получить ожидаемых результатов (амплификации эндогенного фрагмента).
При соблюдении Протокола ПЦР-идентификации для EE-GM2, согласно вышеприведенному описанию, видимые количества трансгенных и эндогенных продуктов ПЦР ожидаемого размера в дорожках указывали на то, что соответствующее растение, из которого выделили геномную матричную ДНК, унаследовало элитное событие EE-GM2. Если в дорожках отсутствовали видимые количества трансгенных продуктов ПЦР и присутствовали видимые количества эндогенных продуктов ПЦР, это указывало на то, что соответствующее растение, из которого выделили геномную матричную ДНК, не содержало указанного элитного события. Если в дорожках отсутствовали видимые количества эндогенных и трансгенных продуктов ПЦР, это указывало на то, что качество и/или количество геномной ДНК не позволяло получить продукт ПЦР. Для этих растений оценки не выполняли. Следовало повторить выделение геномной ДНК и выполнить новый прогон ПЦР с соответствующими контролями.
6.8. Использование дифференциального протокола ПЦР для идентификации EE-GM2
Перед попыткой скрининга неизвестных образцов следовало выполнить тестовый прогон с соответствующими контролями. Для разработанного протокола могла требоваться оптимизация компонентов, которая могла различаться в разных лабораториях (выделение матричной ДНК, Taq-ДНК-полимераза, качество праймеров, dNTP, термоциклера и т.д.).
В этом протоколе ключевую роль играла амплификация эндогенной последовательности. Было необходимо достичь условий ПЦР и термоциклирования, в ходе которых возможна амплификация эквимолярных количеств как эндогенной, так и трансгенной последовательностей известной трансгенной матричной геномной ДНК. Во всех случаях, когда не происходила амплификация эндогенного фрагмента-мишени или когда не происходила амплификация последовательностей-мишеней, согласно электрофорезу в агарозном геле при одинаковой интенсивности окрашивания этидий-бромидом, могла требоваться оптимизация условий ПЦР.
Согласно вышеописанному протоколу тестировали материал листьев ряда растений Glycine max, некоторые из которых содержали EE-GM2. Образцы элитного события EE-GM2 и Glycine max дикого типа использовали в качестве положительного и отрицательного контролей, соответственно.
На Фигуре 6 показан результат, полученный при использовании Протокола ПЦР-амплификации элитного события EE-GM2 для ряда образцов растений сои (дорожки 1-14). Обнаружено, что образцы в дорожке 1 содержали элитное событие, поскольку была обнаружена полоса, соответствовавшая 185 п.о., в то время как образцы в дорожках 2, 3 и 4 не содержали EE-GM2. Дорожка 2 содержала другое элитное событие сои, дорожка 3 представляла контроль нетрансгенной Glycine max; дорожка 4 представляла собой образец отрицательного контроля (воды), а дорожка 5 представляла собой маркер молекулярной массы (лэддер 100 п.о.).
7. Использование специфического интегрированного фрагмента в качестве зонда для обнаружения материала, включавшего EE-GM2.
Специфический интегрированный фрагмент EE-GM2 получали путем ПЦР-амплификации при использовании специфических праймеров SOY09 (SEQ ID No 18) и SOY010 (SEQ ID No 19) или путем химического синтеза, и метили. Этот интегрированный фрагмент использовали в качестве специфического зонда для обнаружения EE-GM2 в биологических образцах. Нуклеиновую кислоту выделяли из образцов согласно стандартным процедурам.
Затем эту нуклеиновую кислоту приводили в контакт со специфическим зондом при условиях гибридизации, оптимизированных для образования гибрида. Обнаружение образования гибрида указывало на присутствие нуклеиновой кислоты EE-GM2 в образце. Необязательно нуклеиновую кислоту в образцах амплифицировали до контакта со специфическим зондом, используя специфические праймеры. В качестве альтернативы вместо интегрированного фрагмента метили нуклеиновую кислоту до контакта со специфическим зондом. Необязательно специфический зонд прикрепляли к твердому носителю (например, не ограничиваясь этим, к фильтру, стрипу или гранулам) до контакта с образцами.
8. Получение растений сои, включающих элитные события EE-GM3 и EE-GM1 или EE-GM3 и EE-GM2, и оценка агрономической производительности таких растений.
Растение сои, содержащее комбинацию элитных событий EE-GM3 и EE-GM1, получали путем традиционного скрещивания исходного растения сои, содержавшего EE-GM3, и исходного растения сои, содержавшего EE-GM1. Потомство растений, содержавшее оба события, идентифицировали, используя Протоколы ПЦР-идентификации EE-GM1 и EE-GM3, как описано здесь. В частности, скрещивали растения, содержавшие EE-GM3, и несколько линий EE-GM1. Полученные растения F1 выращивали и опрыскивали глифосатом и глюфосинатом. Семена F2 собирали с растений F1 и высаживали (растения F2 не опрыскивали). Одиночные растения F2 уничтожали. Гряды с растениями F2:F3 выращивали и опрыскивали глифосатом и глюфосинатом. Гряды, гомозиготные как по EE-GM3, так и по EE-GM1 идентифицировали и впоследствии собирали с них урожай. Данные по расщеплению, полученные в ходе этих испытаний, показали ожидаемое менделевское расщепление событий.
Растение сои, содержащее комбинацию элитных событий EE-GM3 и EE-GM2, получали путем традиционного скрещивания исходного растения сои, содержавшего EE-GM3, и исходного растения сои, содержавшего EE-GM2. Потомство растений, содержавшее оба события, идентифицировали, используя Протоколы ПЦР-идентификации EE-GM2 и EE-GM3, как описано здесь. В частности, скрещивали растения, содержавшие EE-GM3, и растения, содержавшие EE-GM2. Полученные растения F1 скрещивали с 4 традиционными линиями. Растения F1, полученные в результате этих скрещиваний, выращивали на поле и опрыскивали глифосатом и глюфосинатом. Семена F2, собранные с растений F1, устойчивых к обоим гербицидам, впоследствии высаживали. Растения F2 опрыскивали как глифосатом, так и глюфосинатом. В ходе полевых испытаний собрали и высадили девятьсот растений, устойчивых к обоим гербицидам. В данном испытании получили данные, соответствующие ожидаемому менделевскому расщеплению. Для агрономического однообразия в дальнейших исследованиях выбрали приблизительно 40 линий, гомозиготных по устойчивости к обоим гербицидам. Эти линии обладали хорошей устойчивостью к обоим гербицидам и хорошими агрономическими характеристиками.
Полевые испытания таких растений сои, содержавших комбинированные события в различных типах коммерческой зародышевой плазмы, выполняли в различных районах, оценивая различные агрономические параметры растений, включая высоту растения, высоту до узла, устойчивость к полеганию, рост, урожайность и уровень устойчивости к глифосату, изоксафлутолу и глюфосинату.
9. Интрогрессия EE-GM3 и EE-GM1 или EE-GM2 в предпочтительные сорта.
Элитное событие EE-GM3 и элитное событие EE-GM1 и EE-GM2 путем возвратного скрещивания внедряли в коммерческие сорта сои, например, неограничиваясь этим, в сорт сои 7631014 (US 2009252860); сорт сои 7431014 (US 2009252859); сорт сои 7925084 (US 2009252858); сорт сои 7311153 (US 2009252857); сорт сои S070159 (US 2009252856); сорт сои 7535357 (US 2009246353); сорт сои S070160 (US 2009246352); сорт сои 26074414 (US 2009249508); сорт сои 7509171 (US 2009249507); сорт сои S070158 (US 2009246351); сорт сои 7511119 (US2 009249506); сорт сои 7113111 (US 2009238945); сорт сои S06-02RMO 18047 (US 7592518); сорт сои 7013345 (US 2009232957); сорт сои 7041461 (US 2009235376); сорт сои 7549450 (US 2009232956); сорт сои 7317090 (US 2009232955); сорт сои 2N2V58015 (US 2009226597); сорт сои 7243182 (US 2009226596); сорт сои 7143182 (US 2009226595); сорт сои 7043182 (US 2009220673); сорт сои S070157 (US 2009222950); сорт сои 306924721 (US 2009220672); сорт сои 7614385 (US 2009220671); сорт сои 7925118 (US 2009214750); сорт сои 7821295 (US 2009214749); сорт сои 7811336 (US 2009214748); сорт сои S070150 (US 2009214747); сорт сои 6214260 (US 2009214746); сорт сои S070152 (US 2009214745); сорт сои 7429331 (US 2009214751); сорт сои 26034631 (US 2009208634); сорт сои S07-03JR108674 (US 7560621); сорт сои S07-03KL016279 (US 7560620); сорт сои S06-CL959411 (US 7554017); сорт сои SG3870NRR (US 2009158453); сорт сои HFPR-G (CA2645702); сорт сои S06-02JR423016 (US 7521606); сорт сои S06-01JR119814 (US 7518039); сорт сои S06-01JR119448 (US 7518038); сорт сои 6540220 (US 2009055960); сорт сои S060292 (US 2009055959); сорт сои S050228 (US 2009055958); сорт сои S06-02JR423003 (US 7491873); сорт сои S06-02JR423005 (US 7491872); сорт сои S06-02JR409114 (US 7485782); сорт сои S06-SJ144056 (US 7473823); сорт сои (US 7470835); сорт сои 6910450 (US 2008282369); сорт сои 6223012 (US 7446246); сорт сои 6549250 (US 7446245); сорт сои 17731225 (US 2008271204); сорт сои 6928285 (US 2008271203); сорт сои 6736054 (US 2008271169); сорт сои S060299 (US 2008271199); сорт сои S060294 (US 2008271202); сорт сои 6943322 (US 2008271201); сорт сои 5343260 (US 2008263719); сорт сои 6439359 (US 2008263704); сорт сои 6238359 (US 2008263703); сорт сои 6547272 (US 2008263702); сорт сои 6929431 (US 2008263701); сорт сои 6703392 (US 2008263700); сорт сои 6044483 (US 2008263699); сорт сои S050224 (US 2008263698); сорт сои 6719022 (US 2008263697); сорт сои 5826056 (US 2008263696); сорт сои 6265047 (US 2008263724); сорт сои 6928331 (US 2008263695); сорт сои 6719331 (US 2008263694); сорт сои 6636454 (US 2008263693); сорт сои 6226454 (US 2008263718); сорт сои Q0073801 (US 2008256657); сорт сои 6326393 (US 2008256652); сорт сои 6408448 (US 2008256651); сорт сои 6449315 (US 2008250524); сорт сои S060296 (US 2008250523); сорт сои 6012078 (US 2008250522); сорт сои 6342078 (US 2008250521); сорт сои 6419156 (US 2008250520); сорт сои 5723264 (US 2008250519); сорт сои S050225 (US 2008250518); сорт сои S060298 (US 2008244783); сорт сои 6935331 (US 2008244782); сорт сои 6819456 (US 2008244787); сорт сои S060297 (US 2008244781); сорт сои 6135319 (US 2008244786); сорт сои 6819331 (US 2008244780); сорт сои 6137445 (US 2008244779); сорт сои 6917445 (US 2008244778); сорт сои 6111333 (US 2008244777); сорт сои S050229 (US 2008244776); сорт сои 6114011 (US 2008244775); сорт сои 6900358 (US 2008244784); сорт сои 6345184 (US 2008244774); сорт сои 6836085 (US 2008244773); сорт сои 6635047 (US 2008244772); сорт сои 6139105 (US 2008244771); сорт сои 6434385 (US 2008244770); сорт сои S060295 (US 2008244769); сорт сои 6035184 (US 2008244768); сорт сои S060293 (US 2008209590); сорт сои 6733322 (US 2008209594); сорт сои 6421326 (US 2008209593); сорт сои S060077 (US 2008209589); сорт сои 6600375 (US 2008209592); сорт сои S06-CL821457 (US 7420104); сорт сои S07-02KG294306 (US 7414178); сорт сои S06-BA046119 (US 7414175); сорт сои S07-02KG294307 (US 7411114); сорт сои SG3865N (US 2008189802); сорт сои 6701475 (US 7408097); сорт сои 1335025 (US 2008178316); сорт сои 1686017 (US 2008178315); сорт сои 2388028 (US 2008178314); сорт сои 2387029 (US 2008178313); сорт сои S06-WW152330 (US 7388129); сорт сои 6424090 (US 7385118); сорт сои 6723322 (US 7385115); сорт сои SG4377NRR (US 7385114); сорт сои S06-02JR111334 (US 7381864); сорт сои 6141287 (US 7378577); сорт сои МТ110501 (US 7378576); сорт сои (US 7378575); сорт сои S06-WW169267 (US 7375261); сорт сои 6223392 (US 7371939); сорт сои S06-CL968413 (US 7371937); сорт сои S06-CL951107 (US 7368636); сорт сои S06-MT9152077 (US 7361810); сорт сои 4211676 (US 2008092253); сорт сои S06-M059029 (US 7355101); сорт сои 6548193 (US 7345228); сорт сои6440261 (US 7345227); сорт сои S060291 (US 7342151); сорт сои S06-MT9206166 (US 7339094); сорт сои S06-WW013107 (US 7339093); сорт сои S06-M03256 (US 7335820); сорт сои 6134466 (US 7332656); сорт сои S06-01JR123373 (US 7329800); сорт сои S06-MT9211059 (US 7326831); сорт сои 26170838 (US 2008016590); сорт сои 306612412 (US 2008016588); сорт сои 26660135 (US 2008016587); сорт сои 306734323 (US 2008016586); сорт сои S06-01JR122235 (US 7317144); сорт сои 5900450 (US 7314986); сорт сои S06-MT116260 (US 7314984); сорт сои S06-SJ143606 (US 7312381); сорт сои S06-98181-G01-35167 (US 7309819); сорт сои 26082635 (US7304219); сорт сои ВА922834 (US 7304217); сорт сои 01JR123480 (US 7304216); сорт сои М061422 (US 7304215); сорт сои 17082821 (US 2007277262); сорт сои 17621620 (US 2007277261); сорт сои 00977706 (US 2007277260); сорт сои S060182 (US 2007277259); сорт сои 26312034 (US 7301078); сорт сои 26143837 (US 7301077); сорт сои 435.TCS (US 2007271626); сорт сои 495.RC (US 2007271625); сорт сои 5306230 (US 7297845); сорт сои S06-WW167686 (US 7291772); сорт сои 6141145 (US 2007245426); сорт сои S050232 (US 2007226829); сорт сои 5333301 (US 2007226828); сорт сои 5050215 (US 2007226827); сорт сои 3235020 (US 2007226826); сорт сои 5720482 (US 2007226825); сорт сои 5050216 (US 2007226824); сорт сои 5512112 (US 2007226823); сорт сои 3233021 (US 2007226822); сорт сои 1336024 (US 2007226821); сорт сои 5348287 (US 2007226820); сорт сои 5204220 (US 2007226819); сорт сои 6188027 (US 2007226818); сорт сои 4183026 (US 2007226817); сорт сои S06-WW157958 (US 7271325); сорт сои 5733056 (US 2007209091); сорт сои 90501911 (US 2007209090); сорт сои S050221 (US 2007204361); сорт сои 5802205 (US 2007204360); сорт сои 1000642 (US 2007204359); сорт сои 5420128 (US 2007204358); сорт сои S050222 (US 2007199094); сорт сои S050217 (US 2007199093); сорт сои S050223 (US 2007199092); сорт сои S050218 (US 2007199091); сорт сои 5419227 (US 2007199089); сорт сои 5319227 (US 2007199088); сорт сои 5723045 (US 2007199087); сорт сои 5051007 (US 2007199086); сорт сои 5826175 (US 2007192893); сорт сои S050231 (US 2007192892); сорт сои 5826376 (US 2007192891); сорт сои 5628386 (US 2007192890); сорт сои 5138236 (US 2007186307); сорт сои 5608398 (US 2007186306); сорт сои S050230 (US 2007186305); сорт сои 5624126 (US 2007180561); сорт сои 5019225 (US 2007180560); сорт сои 5549483 (US 2007180559); сорт сои 4189010 (US 2007180551); сорт сои 1486018 (US 2007180550); сорт сои S050235 (US 2007180549); сорт сои 5023230 (US 2007180548); сорт сои S050238 (US 2007174930); сорт сои 5830261 (US 2007174928); сорт сои S050226 (US 7247772); сорт сои 5806063 (US 7247771); сорт сои S050233 (US 7244881); сорт сои 5726085 (US 7241939); сорт сои МТ000792 (US 7238867); сорт сои 5521161 (US 7235718); сорт сои WW109447 (US 7235717); сорт сои ВА947474 (US 7220898); сорт сои 5939002 (US 7217870); сорт сои 5726175 (US 7217869); сорт сои 5432082 (US 7217868); сорт сои SG0850RR (US 7211715); сорт сои SG1750NRR (US 7208658); сорт сои МТО 17827 (US 7208657); сорт сои 4N2V74028 (US 7205458); сорт сои CL431203 (US 7202400); сорт сои 4NOS63222 (US 7199288); сорт сои 5520279 (US 7196253); сорт сои 5834401 (US 7196252); сорт сои 5621161 (US 7196251); сорт сои CL722114 (US 7196250); сорт сои 5741081 (US 7193140); сорт сои CL727422 (US 7186895); сорт сои 4N2V55022 (US 7183468); сорт сои 5083011 (US 7173169); сорт сои 5626085 (US 7169976); сорт сои S050051 (US 7169974); сорт сои 4506816 (US 2006294626); сорт сои WW152201 (US 7132594); сорт сои CL727636 (US 7132593); сорт сои М08851 (US 7126047); сорт сои 4324401 (US 7105728); сорт сои S050164 (US 7105727); сорт сои 4136015 (US 2006195931); сорт сои 3133014 (US 2006195930); сорт сои S040132 (US 2006195929); сорт сои 4328386 (US 2006195928); сорт сои 1339013 (US 2006195927); сорт сои 4423183 (US 2006195925); сорт сои S040131 (US 2006195924); сорт сои 4929388 (US 2006195923); сорт сои 4817034 (US 2006195922); сорт сои 4916816 (US 7098385); сорт сои 4713487 (US 200619103 2); сорт сои 4348019 (US 2006191031); сорт сои S040122 (US 2006191030); сорт сои S040133 (US 2006185031); сорт сои CL821418 (US 7091404); сорт сои 4441080 (US 7091403); сорт сои 4805442 (US 2006179509); сорт сои 4921237 (US 2006179508); сорт сои 4417380 (US 2006174369); сорт сои 4405070 (US 2006174368); сорт сои 4417779 (US 7084328); сорт сои S040125 (US 2006168678); сорт сои 4909380 (US 7081572); сорт сои S050162 (US 7081571); сорт сои 6084016 (US 7081570); сорт сои S050163 (US 7078600); сорт сои S040135 (US 7078598); сорт сои S040117 (US 7078597); сорт сои М03393 (US 7071391); сорт сои 4145306 (US 7064253); сорт сои 900213 (US 2006117405); сорт сои 1000126 (US 2006117404); сорт сои 901023 (US 2006117403); сорт сои S040130 (US 7053280); сорт сои 4706198 (US 7053279); сорт сои S040118 (US 7053278); сорт сои S040119 (US 7053277); сорт сои S040123 (US 7053276); сорт сои 4442112 (US 7049497); сорт сои 917013 (US 7045689); сорт сои S040124 (US 7045691); сорт сои 4238491 (US 7045690); сорт сои SO 10136 (US 7041882); сорт сои 900613 (US 7030297); сорт сои 4337175 (US 7030301); сорт сои S040121 (US7030300); сорт сои 4216033 (US 7030299); сорт сои S040128 (US7022901); сорт сои S040120 (US 7022900); сорт сои S040127 (US7019199); сорт сои S040134 (US 7015378); сорт сои S040129 (US7015377); сорт сои 4513420 (US 7005564); сорт сои 943013 (US 2006031958); сорт сои S030136 (US 2006021081); сорт сои 927013 (US 2006021080); сорт сои 1000109 (US 2006015962); сорт сои 90046112 (US 2006010530); сорт сои 90897327 (US 2006010529); сорт сои 90362421 (US 2006010528); сорт сои 03022253 (US 2006010527); сорт сои 02022433 (US 2006010526); сорт сои 02022323 (US 2006010525); сорт сои 02912951 (US 2006010524); сорт сои 0102115 (US 2006010523); сорт сои 915034 (US 2006010522); сорт сои 0509255 (US 2006010521); сорт сои 4803070 (US 6982368); сорт сои 4704310 (US 6979762); сорт сои SJ919784 (US 2005268362); сорт сои CL615261 (US 2005268361); новый сорт сои (US 2004199964); сорт сои 0509214 (US 2005210542); сорт сои 70826751 (US 2005193442); сорт сои 0509243 (US 2005193441); сорт сои 0509246 (US 2005193440); сорт сои 0509253 (US 2005193439); сорт сои 0509247 (US 2005193438); сорт сои 0509252 (US 2005193437); сорт сои 0509241 (US 2005193436); сорт сои 0509249 (US 6884927); сорт сои 0509244 (US 200518315 8); сорт сои 0509240 (US 2005183157); сорт сои 0509239 (US 2005183156); сорт сои 0509254 (US 2005183155); сорт сои 0509245 (US 2005183154); сорт сои 0509251 (US 2005183153); сорт сои 4283008 (US 6888050); сорт сои 2386009 (US 2005183152); сорт сои 3282002 (US 6870080); сорт сои 0509248 (US 2005183151); сорт сои 5091007 (US 6906249); сорт сои 0509236 (US 2005166281); сорт сои 0509235 (US 2005166280); сорт сои 0509237 (US 2005166279); сорт сои SG5322NRR (US 2005164390); сорт сои SG5030NRR (US 2005166278); сорт сои SG4911NRR (US 2005166277); сорт сои S030153 (US 2005160504); сорт сои S030158 (US 2005144680); сорт сои S030160 (US 2005144679); сорт сои S030161 (US 2005144678); сорт сои S030157 (US 2005144677); сорт сои S030155 (US 2005144676); сорт сои S030156 (US 2005144675); сорт сои S030159 (US 2005144674); сорт сои S030154 (US 6900376); сорт сои S020030 (US 2005114929); сорт сои S030010 (US 2005114928); сорт сои SG1431RR (US 2005097629); сорт сои SG1330NRR (US 2005097642); сорт сои S030150 (US 2005071900); сорт сои S022209 (US 2005050601); сорт сои S022217 (US 2005050600); сорт сои S022219 (US 2005050599); сорт сои S030151 (US 2005050598); сорт сои 0491735 (US 2005022272); сорт сои S022218 (US 2005022271); сорт сои 6190006 (US 2004268447); сорт сои SG1120RR (US 2004250316); сорт сои 0487681 (US 2004237153); сорт сои 0491717 (US 2004237152); сорт сои S022220 (US 2004237151); сорт сои 0491715 (US 2004237150); сорт сои 0491712 (US 2004237149); сорт сои 0491718 (US 2004237148); сорт сои 99271316 (US 2004221344); сорт сои S022212 (US 2004221343); сорт сои 0491737 (US 2004221342); сорт сои S022211 (US 2004221341); сорт сои S022210 (US 2004221340); сорт сои S022213 (US 2004221339); сорт сои 0491725 (US 2004221346); сорт сои 03129016 (US 2004221329); сорт сои S022208 (US 2004221328); сорт сои S022207 (US 2004221345); сорт сои 02932 (US 2004210968); сорт сои 94137321 (US 2004205862); сорт сои 94106224 (US 2004205861); сорт сои 94143901 (US 2004205859); сорт сои 0487685 (US 2004205858); сорт сои 92440927 (US 2004205857); сорт сои 0487686 (US 2004205856); сорт сои S022215 (US 2004205855); сорт сои S022214 (US 2004205854); сорт сои 0491726 (US 2004205849); сорт сои 92478609 (US 2004205853); сорт сои 922013 (US 6781040); сорт сои 0491727 (US 2004205852); сорт сои 0491728 (US 2004205851); сорт сои 1465003 (US 2004098766); сорт сои 3186004 (US 2004019936); сорт сои 7085005 (US 2004205850); сорт сои S022204 (US 2004199958); сорт сои S022206 (US 2004199957); сорт сои 0491731 (US 2004199956); сорт сои 0491733 (US 2004199955); сорт сои 0491738 (US 2004199954); сорт сои 0491732 (US 2004199953); сорт сои 0491729 (US 2004199952); сорт сои S020011 (US 2004199951); сорт сои 0491739 (US 2004199950); сорт сои 0491730 (US 2004199949); сорт сои 13873 (US 2004199948); сорт сои 954011 (US 2004181822); сорт сои 010022 (US 2004181831); сорт сои 4181001 (US 2003229926); сорт сои 0491721 (US 2004168228); сорт сои 0491723 (US 6911581); сорт сои 0491716 (US 2004168226); сорт сои 0491713 (US 2004168225); сорт сои 0491711 (US 2004168224); сорт сои 0491722 (US 2004168223); сорт сои 0491724 (US 2004168222); сорт сои 0491720 (US 2004168221); сорт сои 0487682 (US 2004168220); сорт сои 0491714 (US 2004168219); сорт сои 0491719 (US 2004168218); сорт сои DP 5634 RR (US 2003177540); сорт сои S56-D7 (US 2004098765); сорт сои 926877 (US 2004064859); сорт сои SE73753 (US 2004055059); сорт сои SN83594 (US 2004055058); сорт сои SE71112 (US 2004055056); сорт сои SE73090 (US 2004055054); сорт сои SN79526 (US 2004055053); сорт сои SW90702 (US 2004055052); сорт сои SN79525 (US 2004055051); сорт сои SE90345 (US 2004055050); сорт сои 0149928 (US 2004055049); сорт сои SN83780 (US 2004055048); сорт сои 0053840 (US 2004055047); сорт сои 924001 (US 2004055046); сорт сои 0004747 (US 2004055057); сорт сои 0037357 (US 2004055045); сорт сои SN83366 (US 2004055044); сорт сои SN76208 (US 2004055043); сорт сои 0037370 (US 2004055042); сорт сои SX95512 (US 2004049821); сорт сои 0096008 (US 2004049820); сорт сои SN83544 (US 2004049819); сорт сои 0088401 (US 2004049818); сорт сои SN64195 (US 2004049817); сорт сои 0034754 (US 2004049816); сорт сои SN71173 (US 2004049815); сорт сои SN83211 (US 2004049814); сорт сои 92422749 (US 2004045058); сорт сои 0120311 (US 2004045057); сорт сои SO 10344 (US 2004003438); сорт сои 70876922 (US 2004003437); сорт сои 924496 (US 2004003436); сорт сои 19705120 (US2003237116); сорт сои 19704220 (US2003235914); сорт сои 19704280 (US 2003237115); сорт сои 19704210 (US 2003237114); сорт сои S37-N4 (US 2003237113); сорт сои 19602310 (US 2003233685); сорт сои 19704120 (US 2003233684); сорт сои 19704230 (US 2003233683); сорт сои 1000126 (US 2003233682); сорт сои 93831526 (US 2003221226); сорт сои 0322581 (US 2003221225); сорт сои 0332149 (US 2003213028); сорт сои 0332144 (US 2003213027); сорт сои 924788 (US 2003213026); сорт сои 924861 (US 2003213025); сорт сои 928070 (US 2003213024); сорт сои S010354 (US 2003213023); сорт сои SO 10360 (US 2003213022); сорт сои SO 10361 (US 2003213021); сорт сои SO 10363 (US 2003213020); сорт сои S010364 (US 2003213019); сорт сои 0332148 (US 2003208805); сорт сои 0332147 (US 2003208804); сорт сои 0332146 (US 2003208803); сорт сои 0332135 (US 2003208802); сорт сои 1000144 (US 2003208801); сорт сои 0332143 (US 2003208800); сорт сои 0332145 (US 2003208799); сорт сои SO 10345 (US 2003204884); сорт сои 0332131 (US 2003204883); сорт сои 0332130 (US 2003204882); сорт сои 0332129 (US 2003204881); сорт сои 0332122 (US 2003204880); сорт сои S010350 (US 2003204879); сорт сои S010355 (US 2003204878); сорт сои 031766 (US 2003204877); сорт сои SO 10353 (US 2003204876); сорт сои 0322580 (US 2003200579); сорт сои 0322579 (US 2003200578); сорт сои S010347 (US 2003 200577); сорт сои SO 10349 (US 2003200576); сорт сои 0332141 (US 2003200575); сорт сои 0332142 (US 2003200574); сорт сои 0332133 (US 2003200573); сорт сои 0332134 (US 2003200572); сорт сои 0332139 (US 2003200571); сорт сои 0332137 (US 2003200570); разновидность сои XB33U08 (US7598435); разновидность сои XB27D08 (US 7592519); разновидность сои ХВ41М08 (US 7589261); разновидность сои XB05J08 (US 7589260); разновидность сои ХВЗЗТ08 (US 7589259); разновидность сои XB30Y08 (US 7586025); разновидность сои XB40U08 (US 7582813); разновидность сои ХВ29М08 (US 7582811); разновидность сои 93Y10 (US 2009144843); разновидность сои D4325666 (US 2009055957); разновидность сои D4125 897 (US 2009055956); разновидность сои D4698573 (US 2009055955); разновидность сои D4356652 (US 2009019592); разновидность сои D4456885 (US 2009019591); разновидность сои D4698013 (US 2009019590); разновидность сои D4637114 (US 2009019589); разновидность сои D4102367 (US 2009019595); разновидность сои D4266582 (US 2009019594); разновидность сои D4422801 (US 2009019593); разновидность сои D4520980 (US 2009019588); разновидность сои D4521369 (US 2009019587); разновидность сои D4223057 (US 2009019586); разновидность сои D4682156 (US 2009019585); разновидность сои D4233569 (US 2009019584); разновидность сои D4925614 (US 2009019583); разновидность сои D4203144 (US 2009019604); разновидность сои D4102536 (US 2009019582); разновидность сои D4865324 (US 2009019581); разновидность сои D4825495 (US 2009019580); разновидность сои D4659251 (US 2009019579); разновидность сои D4258962 (US2009019578); разновидность сои D4253969 (US 2009019577); разновидность сои D4696658 (US 2009019603); разновидность сои D4256925 (US 2009019576); разновидность сои D4253681 (US 2009019575); разновидность сои D4789254 (US2009019574); разновидность сои D4713125 (US2009019573); разновидность сои D4526223 (US2009019572); разновидность сои D4556201 (US 2009019571); разновидность сои D4012368 (US 2009019570); разновидность сои D4452019 (US 2009019569); разновидность сои D4201483 (US 2009019568); разновидность сои D4463892 (US 2009019567); разновидность сои D4159630 (US 2009019566); разновидность сои D4470236 (US 2009019565); разновидность сои D4063284 (US 2009019564); разновидность сои D4021792 (US 2009013429); разновидность сои D4902530 (US 2009013428); разновидность сои D4367012 (US 2009013427); разновидность сои D4923560 (US 2009013426); разновидность сои D4253854 (US 2009013425); разновидность сои D4210110 (US 2009007290); разновидность сои D4523081 (US 2009007289); разновидность сои D4328762 (US 2009007288); разновидность сои D4483789 (US 2009007287); разновидность сои D4311702 (US 2009007286); разновидность сои D4127789 (US 2008313765); разновидность сои D4361423 (US 2008313764); разновидность сои D4208814 (US 2008313763); разновидность сои D4201139 (US 2008313762); разновидность сои D4120384 (US 2008313761); разновидность сои D4572906 (US 2008313760); разновидность сои D4301279 (US 2008313759); разновидность сои D4422957 (US 2008313758); разновидность сои D4256958 (US 2008313757); разновидность сои 4074328 (US 2008282366); разновидность сои XB47Q06 (US 2008244767); разновидность сои XB26R06 (US 2008244766); разновидность сои 4991629 (US 2008216190); разновидность сои 4158090 (US 2008216189); разновидность сои ХВ40К07 (US 2008209582); разновидность сои D0069201 (US 2008178345); разновидность сои D0064801 (US 2008178320); разновидность сои D0063801 (US 2008178344); разновидность сои D0061501 (US 2008178343); разновидность сои 4938051 (US 2008178319); разновидность сои 4880500 (US 2008178318); разновидность сои 4835953 (US 2008178317); разновидность сои 4684181 (US 2008178342); разновидность сои 4427363 (US 2008178340); разновидность сои 4676311 (US 2008178339); разновидность сои 4953710 (US 2008178337); разновидность сои 4857548 (US 2008178336); разновидность сои 4551757 (US 200817833 5); разновидность сои 4027271 (US 2008178334); разновидность сои 4274171 (US 2008178333); разновидность сои 0341931 (US 2008178332); разновидность сои 4282159 (US 2008178331); разновидность сои 4852004 (US 2008178330); разновидность сои 4688589 (US 2008178329); разновидность сои 4614131 (US 2008178327); разновидность сои 4201823 (US 2008178326); разновидность сои 92М22 (US 2008178350); разновидность сои 4174206 (US 2008178322); разновидность сои 4305498 (US 2008178321); разновидность сои 4423586 (US 2008172761); разновидность сои 4568207 (US 2008172756); разновидность сои 4840308 (US 2008172755); разновидность сои 4256323 (US 2008172754); разновидность сои 4789516 (US7399907); разновидность сои 90Y40 (US 2008168581); разновидность сои 4959932 (US 7396983); разновидность сои 4062885 (US 7394000); разновидность сои 4858197 (US 7390940); разновидность сои 4092390 (US 7390939); разновидность сои 4735486 (US 7390938); разновидность сои 4219527 (US 7388132); разновидность сои 4599695 (US 7388131); разновидность сои 4554257 (US 7388130); разновидность сои 4896902 (US 7385113); разновидность сои 4367308 (US 7385112); разновидность сои 4589609 (US 7385111); разновидность сои 4640250 (US 7385110); разновидность сои 4540394 (US 7385109); разновидность сои 4297661 (US 7385108); разновидность сои 4958786 (US 7381866); разновидность сои 4440685 (US 7375262); разновидность сои 4008211 (US7371938); разновидность сои 4778469 (US 7368637); разновидность сои 4766295 (US 7355103); разновидность сои 4436909 (US 7355102); разновидность сои 4812469 (US 7351886); разновидность сои 4761767 (US 7351885); разновидность сои 4142393 (US 7329801); разновидность сои 4502135 (US 7326832); разновидность сои 4353363 (US 7321082); разновидность сои 91 В42 (US 7317143); разновидность сои 0330739 (US 2007271622); разновидность сои 0384279 (US 7294768); разновидность сои 4175567 (US 2007256187); разновидность сои 4336643 (US2007256186); разновидность сои 4671685 (US 2007256185); разновидность сои 4309194 (US 2007256190); разновидность сои 0330738 (US 2007256184); разновидность сои 0045477 (US 2007256183); разновидность сои 0437973 (US 2007256182); разновидность сои 0457028 (US 2007256181); разновидность сои 0367478 (US 2007256180); разновидность сои 0358232 (US 2007256179); разновидность сои 0417158 (US 2007256178); разновидность сои 4559809 (US 2007256177); разновидность сои 0196172 (US 2007256176); разновидность сои 4785923 (US 2007256175); разновидность сои 4587513 (US 2007256174); разновидность сои 0409670 (US 2007256173); разновидность сои 4010165 (US 2007256172); разновидность сои 421133 (US 2007256171); разновидность сои 0240187 (US 2007256170); разновидность сои 0387907 (US 2007256169); разновидность сои 0232405 (US 2007256168); разновидность сои 0146529 (US 2007256167); разновидность сои 4788561 (US 2007256166); разновидность сои 457114 (US 2007256165); разновидность сои 0149217 (US 2007256164); разновидность сои 4247825 (US 2007254366); разновидность сои 0212938 (US 2007256163); разновидность сои 146565 (US 2007256162); разновидность сои 4647672 (US 2007256161); разновидность сои 0215818 (US 2007256160); разновидность сои 0384531 (US 2007256159); разновидность сои 4878185 (US 2007254365); разновидность сои 4498438 (US 2007256158); разновидность сои 0436052 (US 2007256157); разновидность сои 4782157 (US 2007256156); разновидность сои 0385457 (US 2007256155); разновидность сои 0385240 (US 2007256154); разновидность сои 4735316 (US 2007256153); разновидность сои 0277524 (US 2007256152); разновидность сои 0276951 (US 2007256151); разновидность сои XB37L07 (US 2007245429); разновидность сои ХВ35Х07 (US 2007226837); разновидность сои XB35S07 (US 2007226836); разновидность сои XB35F07 (US 2007226835); разновидность сои XB34R07 (US 2007226834); разновидность сои XB34L07 (US 2007226833); разновидность сои XB34D07 (US 2007226832); разновидность сои XB33G07 (US 2007226831); разновидность сои 98Y11 (US 2007169220); разновидность сои 0137335 (US 7241941); разновидность сои ХВ15Е07 (US 2007150980); разновидность сои 92М52 (US 2007150979); разновидность сои XB47R07 (US 2007136888); разновидность сои XB46V07 (US 2007136887); разновидность сои ХВ57Е07 (US 2007136886); разновидность сои ХВ54Х07 (US 2007136885); разновидность сои XB54V07 (US 2007136884); разновидность сои XB52Q07 (US 2007136883); разновидность сои ХВ37М07 (US 2007136882); разновидность сои XB37J07 (US 2007136881); разновидность сои XB34Q07 (US 2007136880); разновидность сои XB32S07 (US 2007136879); разновидность сои XB32J07 (US 2007136878); разновидность сои XB31R07 (US 2007136877); разновидность сои XB31J07 (US 2007136876); разновидность сои ХВ29К07 (US 2007136875); разновидность сои ХВ31Н07 (US 2007136874); разновидность сои XB30G07 (US 2007136873); разновидность сои ХВЗОЕ07 (US 2007136872); разновидность сои ХВ25Е07 (US 2007136871); разновидность сои ХВ26Х07 (US 2007136870); разновидность сои XB23L07 (US 2007136869); разновидность сои XB19Z07 (US 2007136868); разновидность сои ХВ19Е07 (US 2007136867); разновидность сои ХВ18М07 (US 2007136866); разновидность сои ХВ18К07 (US 2007136865); разновидность сои XB18J07 (US 2007136864); разновидность сои XB17W07 (US 2007136863); разновидность сои XB17U07 (US 2007136862); разновидность сои ХВ15 В07 (US 2007136861); разновидность сои XB12R07 (US 2007136860); разновидность сои XB11J07 (US 2007136859); разновидность сои ХВ04Е07 (US 2007136858); разновидность сои ХВ02К07 (US 2007136857); разновидность сои XB49V07 (US 2007136856); разновидность сои ХВ48Х07 (US 2007136855); разновидность сои 92М75 (US 2007136854); разновидность сои XB48W07 (US 2007136853); разновидность сои XB44G07 (US 2007136852); разновидность сои ХВ42К07 (US 2007136851); разновидность сои ХВ42Н07 (US 2007136850); разновидность сои XB41J07 (US 2007136849); разновидность сои XB40Y07 (US 2007136848); разновидность сои ХВ40Х07 (US 2007136847); разновидность сои ХВ39Е07 (US 2007136846); разновидность сои XB38W07 (US 2007136845); разновидность сои XB38S07 (US 2007136844); разновидность сои XB23V07 (US 2007136843); разновидность сои ХВ31М07 (US 2007130652); разновидность сои ХВ28Е07 (US 2007130651); разновидность сои XB25S07 (US 2007130650); разновидность сои XB21N07 (US 2007130649); разновидность сои XB03Q07 (US 2007130648); разновидность сои XB49Q07 (US 2007130647); разновидность сои ХВ06М07 (US 2007130646); разновидность сои S04-97130-15-02 (US 7196249); разновидность сои S04-97026-N99-42648-01 (US 7189896); разновидность сои S05-97016-G99-21212 (US7186894); разновидность сои S05-99048-19 (US 7164064); разновидность сои 92В14 (US 7161065); разновидность сои 98R31 (US 2007006350); разновидность сои S05-97177-NOO-22972 (US 7132592); разновидность сои XB25G06 (US 2006225160); разновидность сои 91М70 (US 2006174381); разновидность сои XB24R06 (US 2006162029); разновидность сои S03- 95368-N98-52902 (US 7078594); разновидность сои S05-97130-51 (US 7078599); разновидность сои XB11L06 (US 2006130187); разновидность сои 94В13 (US 7064251); разновидность сои 94 В74 (US 7064250); разновидность сои XB27J06 (US 2006112462); разновидность сои XB29N06 (US 2006112460); разновидность сои ХВ28Т06 (US 2006112459); разновидность сои XB16W06 (US 200611245 8); разновидность сои ХВ18С06 (US 2006112456); разновидность сои ХВ10М06 (US 2006107391); разновидность сои ХВ06К06 (US 2006107390); разновидность сои XB28V06 (US 2006107389); разновидность сои ХВ004А06 (US 20061073 88); разновидность сои XB12L06 (US 2006107387); разновидность сои ХВ005А06 (US 2006107386); разновидность сои ХВ25Н06 (US 20061073 85); разновидность сои XB39W06 (US 2006107384); разновидность сои ХВ27К06 (US 2006107383); разновидность сои XB29R06 (US 20061073 82); разновидность сои XB16S06 (US 20061073 81); разновидность сои XB36V06 (US 2006107380); разновидность сои XB07N06 (US 2006107379); разновидность сои ХВ23Н06 (US 2006107378); разновидность сои ХВ35С06 (US 2006107377); разновидность сои XB32L06 (US 2006107376); разновидность сои ХВ58Р06 (US 2006107375); разновидность сои ХВ36М06 (US 2006107374); разновидность сои XB22G06 (US 2006107373); разновидность сои XB36Q06 (US 20061073 72); разновидность сои 91М61 (US 2006107371); разновидность сои ХВ32А06 (US 20061073 70); разновидность сои XB19V06 (US 2006107369); разновидность сои ХВ43С06 (US 2006107368); разновидность сои XB22N06 (US 2006107367); разновидность сои ХВ38Е06 (US 2006107366); разновидность сои XB37U06 (US 2006107365); разновидность сои XB37Q06 (US 2006107364); разновидность сои XBOOD06 (US 2006107363); разновидность сои XB14N06 (US 2006107362); разновидность сои ХВ31Н06 (US 2006107361); разновидность сои XB21Z06 (US 2006107360); разновидность сои ХВ005 В06 (US 2006107359); разновидность сои XB15W06 (US 2006107358); разновидность сои XB33N06 (US 2006107357); разновидность сои ХВ 18W06 (US 2006107356); разновидность сои ХВ32М06 (US 2006107355); разновидность сои XB19F06 (US 2006107354); разновидность сои S03-95021-55-138-AB (US 7026531); разновидность сои 94М41 (US 7002061); разновидность сои 91М50 (US 6998518); разновидность сои 92В13 (US 6989475); разновидность сои 93В68 (US 6989474); разновидность сои 93B09 (US 6979759); разновидность сои 92М00 (US 6972352); разновидность сои ХВ08Р05 (US 2005120433); разновидность сои XB26V05 (US 2005150023); разновидность сои XB21R05 (US 2005108795); разновидность сои ХВ28Е05 (US 2005114942); разновидность сои ХВ58К05 (US 2005114941); разновидность сои ХВ27 В05 (US 2005114940); разновидность сои XB21S05 (US 2005150022); разновидность сои XB26U05 (US 200513 8695); разновидность сои ХВ35К05 (US 2005150021); разновидность сои XB18S05 (US 2005120436); разновидность сои ХВ25С05 (US 200512043 5); разновидность сои 90М01 (US 2005120434); разновидность сои ХВ22Н05 (US 2005150020); разновидность сои ХВ22К05 (US 2005114939); разновидность сои XB58G05 (US 2005114938); разновидность сои XB57U05 (US 2005120432); разновидность сои ХВ49М05 (US 2005120431); разновидность сои XB20D05 (US 2005144683); разновидность сои ХВ41В05 (US 2005150019); разновидность сои ХВ38Т05 (US 2005120430); разновидность сои ХВ13Т05 (US 2005120429); разновидность сои XB19Y05 (US 2005120428); разновидность сои XB43D05 (US 2005120427); разновидность сои ХВ40Е05 (US 2005120426); разновидность сои XB39N05 (US 2005120425); разновидность сои 93М01 (US 2005120424); разновидность сои XB31W05 (US 2005223439); разновидность сои ХВ32С05 (US 2005114937); разновидность сои XB40D05 (US 2005120423); разновидность сои 92М61 (US 2005120422); разновидность сои 91М91 (US 2005114936); разновидность сои XB33Y05 (US2005120421); разновидность сои ХВ34А05 (US 2005120420); разновидность сои XB13U05 (US 2005114935); разновидность сои ХВ12К05 (US 2005114934); разновидность сои ХВЗОР05 (US 2005120419); разновидность сои ХВ57Т05 (US 2005114933); разновидность сои XB17S05 (US 2005114932); разновидность сои XB25Y05 (US 2005114930); разновидность сои XB25S05 (US 2005150017); разновидность сои XB43W04 (US 2004177420); разновидность сои XB44W04 (US 2004177419); разновидность сои XB53J04 (US 2004199960); разновидность сои XB43V04 (US2004216192); разновидность сои ХВ49К04 (US 2004172668); разновидность сои ХВ27Р04 (US 2004205864); разновидность сои XB29L04 (US 2004177418); разновидность сои ХВ29К04 (US 2004177417); разновидность сои XB41U04 (US 2004231017); разновидность сои XB34D04 (US 2004177416); разновидность сои XB09J04 (US 2004172711); разновидность сои XB32Y04 (US 2004194169); разновидность сои XB44D04 (US 2004172710); разновидность сои ХВ44С04 (US 2004172709); разновидность сои XB10L04 (US 2004172708); разновидность сои XB19U04 (US 2004172707); разновидность сои XB02F04 (US 2004172706); разновидность сои ХВ25Х04 (US 2004172705); разновидность сои XB26L04 (US 2004172704); разновидность сои XB11F04 (US 2004172703); разновидность сои XB40Z04 (US 2004177415); разновидность сои XB40Y04 (US 2004181833); разновидность сои ХВ007С04 (US 200418183 2); разновидность сои 96М20 (US 2004172702); разновидность сои XB39J04 (US 2004172701); разновидность сои ХВ29А04 (US 2004172700); разновидность сои ХВ35Р04 (US 2004172699); разновидность сои XB58Z04 (US 2004177414); разновидность сои XB43R04 (US 2004172698); разновидность сои XB35L04 (US 2004172697); разновидность сои ХВ06Н04 (US 2004172696); разновидность сои XB59U04 (US 2004172695); разновидность сои ХВ64С04 (US 2004172694); разновидность сои 95М80 (US 2004172693); разновидность сои XB35Q04 (US 2004177413); разновидность сои XB04D04 (US 2004177412); разновидность сои XB08L04 (US 2004177411); разновидность сои XB18Q04 (US 2004177410); разновидность сои XB16Q04 (US 2004177409); разновидность сои ХВ55К04 (US 2004172692); разновидность сои ХВ57М04 (US 2004172691); разновидность сои XB25L04 (US 2004205863); разновидность сои ХВ48Т04 (US 2004194168); разновидность сои ХВ42Х04 (US 2004199959); разновидность сои ХВ31Т04 (US 2004177408); разновидность сои XB31U04 (US 2004194167); разновидность сои ХВ30Е04 (US 2004177407); разновидность сои XB31R04 (US 2004177406); разновидность сои S03-95341-А98-60618 (US 6909033); разновидность сои SN97-6946 (US 2004168227); разновидность сои 94М70 (US 6864408); разновидность сои 92М70 (US 6797866); разновидность сои 92М71 (US 6858782); разновидность сои 91М40 (US 6828490); разновидность сои 93М80 (US6849789); разновидность сои XB39N03 (US 6864407); разновидность сои 93М90 (US 6846975); разновидность сои 90М90 (US 6852913); разновидность сои 92М72 (US 6960708); разновидность сои 91М90 (US6849788); разновидность сои 92М50 (US 6855876); разновидность сои 92М30 (US 6951974); разновидность сои 93М60 (US 6797865); разновидность сои 93М40 (US 6791016); разновидность сои 93М41 (US 6835875); разновидность сои ХВ15Р03 (US 6797864); разновидность сои ХВ24Н03 (US 6936752); разновидность сои ХВ05А03 (US 6815585); разновидность сои 92М80 (US 6849787); разновидность сои XB33S03 (US 6855875); разновидность сои ХВ48Р03 (US 6797863); разновидность сои ХВ29Х03 (US 6806406); разновидность сои ХВ02СО03(US 6800795); разновидность сои XB29W03 (US 6858781); разновидность сои 91M10 (US 6958437); разновидность сои 92М10 (US 6916975); разновидность сои XB10G03 (US6806405); разновидность сои 92М31 (US 6846974); разновидность сои XB38D03 (US 6806404); разновидность сои XB34N03 (US 6803508); разновидность сои XB30W03 (US 6809236); разновидность сои XB37J03 (US6844488); разновидность сои SE72581 (US 2004148665); разновидность сои SE90076 (US 2004148664); разновидность сои SD82997 (US 2004148663); разновидность сои 0037393 (US 2004148662); разновидность сои 0088414 (US 2004148661); разновидность сои 0149926 (US 2004148660); разновидность сои 0037209 (US 2004148659); разновидность сои 93 В36 (US 6833498); разновидность сои 90В74 (US 6812384); разновидность сои 90В51 (US 6818809); разновидность сои 91В03 (US 6815584); разновидность сои 95В43 (US6818808); разновидность сои 95 В42 (US 6815583); разновидность сои 92В47 (US 6812383); разновидность сои SE90346 (US 2004055055); разновидность сои 0007583 (US 2004010824); разновидность сои 0008079 (US 2004010823); разновидность сои S02-AP98041-2-333-01 (US 2003121076); разновидность сои S02-98041-2-251-01 (US 2003182694); разновидность сои S02-AP98041-2-262-02 (US 2003196220); разновидность сои S02-95021-55-240-BA (US 2003188348); разновидность сои АРА94-31572 (US 2003061641); разновидность сои АР98041-1-203 (US 2003056251); разновидность сои АРА95-15294 (US 2003061640); разновидность сои АР98041-4-117 (US 2003056250); разновидность сои 91В33 (US 6580018); разновидность сои 93В85 (US 6605762); разновидность сои 92В76 (US 6610911); разновидность сои 92В38 (US 6605761); разновидность сои 94В24 (US 6613967); разновидность сои 94В73 (US6605760); разновидность сои 93В86 (US 6610910); разновидность сои 91В12 (US 6583343); разновидность сои 95В34 (US 6605759); разновидность сои 94В23 (US 6605758); разновидность сои 90В11 (US 6583342); разновидность сои 91В92 (US 6586659); разновидность сои 95В96 (US 6605757); разновидность сои 93В72 (US 6566589); разновидность сои 95В97 (US 6613966); разновидность сои 92В95 (US 6608243); разновидность сои 93В47 (US 6583341); разновидность сои 97В52 (US 6605756); разновидность сои 93В15 (US 6617499); разновидность сои 94В54 (US 6613965); разновидность сои 93В67 (US 6573433); разновидность сои 93 В87 (US 6727410); разновидность сои 96В51 (US 6613964); разновидность сои 92В84 (US 6730829); разновидность сои 92В12 (US 6605755); разновидность сои 90А07 (US 6320105); разновидность сои 93В26 (US 6342659); разновидность сои 96В21 (US 6369301); разновидность сои 92В63 (US 6326529); разновидность сои 93В46 (US 6323402); разновидность сои 92В75 (US 6362400); разновидность сои 93В08 (US 6323401); разновидность сои 97В62 (US 6323400); разновидность сои 92В37 (US 6323399); разновидность сои 92В56 (US 6339186); разновидность сои 93В66 (US 6307131); разновидность сои 92 В62 (US 6346657); разновидность сои 92В36 (US 6369300); разновидность сои 90В73 (US 6316700); разновидность сои 95В95 (US 6323398); разновидность сои 93В65 (US 6229074); разновидность сои 92 В24 (US 6284950); разновидность сои 94В53 (US 6235976); разновидность сои 94В22 (US 6140557); разновидность сои 93В84 (US 6143956); разновидность сои 95В32 (US 6229073); разновидность сои 95 В53 (US 6147283); разновидность сои 93В35 (US 6153816); разновидность сои 93В07 (US 6143955); разновидность сои 92В74 (US 6124526); разновидность сои 92В35 (US 6166296); разновидность сои 94В45 (US 6162968); разновидность сои 96В01 (US 6143954); разновидность сои 93В53 (US 6335197).
Обнаружено, что интрогрессия элитных событий в указанные сорта не оказывала существенного влияния на любую из желательных фенотипических или агрономических характеристик этих сортов (без потери урожайности), в то время как экспрессия трансгена, согласно устойчивости к глифосату и/или изоксафлутолу или глюфосинату, соответствовала коммерчески приемлемому уровню.
Указанные комбинации можно в дальнейшем объединить с одним или несколькими другими событиями сои, доступными на рынке, включая другие события устойчивости к гербицидам, например, события, описанные в заявлениях Службы инспекции здоровья животных и растений Министерства сельского хозяйства США: 09-349-01p, 09-201-01p, 09-183-01p, 09-082-01p, 09-015-01p, 06-354-01p, 06-271-01p, 06-178-01p, 98-238-01p, 98-014-01p, 97-008-01p, 96-068-01p, 95-335-01p, 93-258-01p, (см., например, www.aphis.usda.gov/brs/not_reg.htmU или событие MON89788 (устойчивость к глифосату), описанное в US 2006-282915, событие DP-305423-1 (высокое содержание олеиновой кислоты/устойчивость к ингибиторам ацетолактатсинтазы), описанное в WO 2008/054747, MON87701, описанное в US 2009130071, событие 3560.4.3.5, описанное в US 2009036308, или событие DP-305423-1, описанное в US2008312082, или событие BPS-CV 127-9 (Событие 127) согласно заявке WO 2010/080829.
В нижеприведенной формуле изобретения, если не указано иное, термин "растение" включает ткани растения на любой стадии развития, а также любые клетки, ткани или органы, собранные или происходящие от такого растения, включая любые семена, листья, стебли, цветки, корни, отдельные клетки, гаметы, культуры клеток, культуры тканей или протопласты, не ограничиваясь ими.
Эталонные семена, содержащие элитное событие EE-GM3, депонированы как 32-RRMM-0531 в NCIMB (Ferguson Building, Craibstone Estate, Баксберн, Абердин AB9YA, Шотландия) 12 октября 2009 г. под номером доступа NCIMB 41659, и подтверждена их жизнеспособность. Альтернативное название EE-GM3 - событие FG-072 или MST-FG∅72-3.
Эталонные семена, содержащие элитное событие EE-GM1, депонированы как 32RRMM0368 в NCIMB (Ferguson Building, Craibstone Estate, Баксберн, Абердин AB9YA, Шотландия) 12 октября 2009 г. под номером доступа NCIMB 41658, и подтверждена их жизнеспособность. Альтернативное название EE-GM1 - LL27, А2704-12 или ACS-GM∅∅5-3.
Эталонные семена, содержащие элитное событие EE-GM2, депонированы как 32CON0688 в NCIMB (Ferguson Building, Craibstone Estate, Баксберн, Абердин AB9YA, Шотландия) 12 октября 2009 г. под номером доступа NCIMB 41660, и подтверждена их жизнеспособность. Альтернативное название EE-GM2 - LL55, А5547-127 или ACS-GM∅∅6-4.
Эталонные семена, содержащие элитное событие EE-GM3 и EE-GM1, депонированы как соя 111606 в АТСС (Американская коллекция типовых культур, 10801, University Blvd., Манассас, штат Виргиния, 20110-2209, США) 11 июня 2010 г. под номером доступа АТСС РТА-11041
Эталонные семена, содержащие элитное событие EE-GM3 и EE-GM2, депонированы как соя 05SHX2XEB в АТСС (Американская коллекция типовых культур, 10801, University Blvd., Манассас, штат Виргиния, 20110-2209, США) 11 июня 2010 г. под номером доступа АТСС РТА-11042
Вышеприведенное описание изобретения должно рассматриваться в качестве иллюстративного, а не ограничивающего.
Специалисты могут осуществить различные изменения или модификации описанных вариантов воплощения. Эти модификации можно осуществить без отклонения от основных аспектов изобретения.

Claims (86)

1. Трансгенное растение сои, обладающее устойчивостью к глифосату, глюфосинату и изоксафлютолу, содержащее в своем геноме первое трансгенное событие и второе трансгенное событие, где первое трансгенное событие представляет собой чужеродную ДНК в определенном локусе, как это содержится в эталонном семени, депонированном в NCIMB под номером доступа NCIMB 41659, и второе трансгенное событие представляет собой другую чужеродную ДНК в другом определенном локусе, как это содержится в эталонном семени, депонированном в NCIMB под номером доступа NCIMB 41660, где эталонное семя, геном которого содержит первое трансгенное событие и второе трансгенное событие, депонировано в АТСС под номером доступа РТА-11042, и где указанная чужеродная ДНК в первом трансгенном событии содержит химерный ген, кодирующий HPPD PF W336, и химерный ген, кодирующий 2mEPSPS, и где указанное первое трансгенное событие также включает нуклеотидную последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1441 до нуклеотида 1462 и нуклеотидную последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 230 до нуклеотида 251, и где указанная чужеродная ДНК во втором трансгенном событии содержит химерный ген, кодирующий фосфинотрицинацетилтрансферазу, и где указанное второе трансгенное событие также включает нуклеотидную последовательность SEQ ID No 14 от нуклеотида 301 до нуклеотида 322 и нуклеотидную последовательность SEQ ID No 15 от нуклеотида 497 до нуклеотида 518.
2. Трансгенное растение сои по п. 1, геномная ДНК которого при анализе с помощью ПЦР для первого трансгенного события с использованием двух праймеров, включающих на самом конце со своего 3'-конца нуклеотидные последовательности SEQ ID No 4 и SEQ ID No 5 соответственно, позволяет получить фрагмент ДНК длиной приблизительно 263 п.о. и геномная ДНК которых при анализе с помощью ПЦР для второго трансгенного события с использованием двух праймеров, включающих на самом конце со своего 3'-конца нуклеотидные последовательности SEQ ID No 18 и SEQ ID No 19 соответственно, приводит к получению фрагмента ДНК длиной приблизительно 151 п.о.
3. Трансгенное растение сои по п. 1, где указанное первое трансгенное событие также содержит нуклеотидную последовательность от нуклеотида 1 до нуклеотида 1451 SEQ ID No 2, находящуюся непосредственно выше или смежную с указанной чужеродной ДНК, и нуклеотидную последовательность от нуклеотида 241 до нуклеотида 1408 SEQ ID No 3, находящуюся непосредственно ниже или смежную с указанной чужеродной ДНК, и где указанное второе трансгенное событие содержит нуклеотидную последовательность от нуклеотида 1 до нуклеотида 311 SEQ ID No 14, находящуюся непосредственно выше или смежную с указанной чужеродной ДНК, и нуклеотидную последовательность от нуклеотида 508 до нуклеотида 1880 SEQ ID No 15, находящуюся непосредственно ниже или смежную с указанной чужеродной ДНК.
4. Трансгенное растение сои по п. 1, где указанное первое трансгенное событие также характеризуется 5'- и 3'-фланкирующими ДНК и последовательностями в чужеродной ДНК, смежными с ними, где 5'-фланкирующая ДНК и чужеродная ДНК, смежная с ней, содержат нуклеотидную последовательность SEQ ID No 2, и указанная 3'-фланкирующая ДНК и чужеродная ДНК, смежная с ней, содержат нуклеотидную последовательность SEQ ID No 3, где указанная включенная чужеродная ДНК присутствует в событии сои, депонированном под номером доступа NCIMB 41659, и где указанное второе трансгенное событие также характеризуется 5'- и 3'-фланкирующими ДНК и последовательностями в чужеродной ДНК, смежными с ними, где 5'-фланкирующая ДНК и чужеродная ДНК, смежная с ней, во втором трансгенном событии содержат нуклеотидную последовательность SEQ ID No 14, и указанная 3'-фланкирующая ДНК и чужеродная ДНК, смежная с ней, во втором трансгенном событии содержат нуклеотидную последовательность SEQ ID No 15, где указанная включенная чужеродная ДНК во втором трансгенном событии присутствует в событии сои, депонированном под номером доступа NCIMB 41660.
5. Трансгенное растение сои по п. 1, содержащее в своем геноме следующие нуклеотидные последовательности по порядку:
а) нуклеотидная последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1 до нуклеотида 1451;
b) нуклеотидная последовательность комплементарной цепи нуклеотидной последовательности SEQ ID No 1 от нуклеотида 6760 до нуклеотида 6958;
c) нуклеотидная последовательность SEQ ID No 1 от нуклеотида 6874 до нуклеотида 7298;
d) нуклеотидная последовательность SEQ ID No 1 от нуклеотида 7 до нуклеотида 7291;
e) нуклеотидная последовательность SEQ ID No 1 от нуклеотида 12 до нуклеотида 7265;
f) нуклеотидная последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 217 до нуклеотида 240; и
д) нуклеотидная последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 241 до нуклеотида 1408; и, кроме того, включает следующие последовательности по порядку:
h) нуклеотидная последовательность SEQ ID No 14 от нуклеотида 1 до нуклеотида 311;
i) нуклеотидная последовательность SEQ ID No 11 от нуклеотида 3458 до нуклеотида 3848;
j) нуклеотидная последовательность SEQ ID No 11 от нуклеотида 413 до нуклеотида 3457;
k) нуклеотидная последовательность SEQ ID No 15 от нуклеотида 508 до нуклеотида 1880.
6. Трансгенное семя сои для получения растения, обладающего устойчивостью к глифосату, глюфосинату и изоксафлютолу, где указанное семя содержит в своем геноме первое трансгенное событие и второе трансгенное событие, где указанное первое трансгенное событие представляет собой чужеродную ДНК в определенном локусе, как это содержится в эталонном семени, депонированном в NCIMB под номером доступа NCIMB 41659, и указанное второе трансгенное событие представляет собой другую чужеродную ДНК в другом определенном локусе, как это содержится в эталонном семени, депонированном в NCIMB под номером доступа NCIMB 41660, где эталонное семя, геном которого содержит первое трансгенное событие и второе трансгенное событие, депонировано в АТСС под номером доступа РТА-11042, и где указанная чужеродная ДНК в первом трансгенном событии содержит химерный ген, кодирующий HPPD PF W336, и химерный ген, кодирующий 2mEPSPS, и где указанное первое трансгенное событие также включает нуклеотидную последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1441 до нуклеотида 1462 и нуклеотидную последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 230 до нуклеотида 251, и где указанная чужеродная ДНК во втором трансгенном событии содержит химерный ген, кодирующий фосфинотрицинацетилтрансферазу, и где указанное второе трансгенное событие также включает нуклеотидную последовательность SEQ ID No 14 от нуклеотида 301 до нуклеотида 322 и нуклеотидную последовательность SEQ ID No 15 от нуклеотида 497 до нуклеотида 518.
7. Трансгенная клетка сои, обладающая устойчивостью к глифосату, глюфосинату и изоксафлютолу, содержащая в своем геноме первое трансгенное событие и второе трансгенное событие, где указанное первое трансгенное событие представляет собой чужеродную ДНК в определенном локусе, как это содержится в эталонном семени, депонированном в NCIMB под номером доступа NCIMB 41659, и указанное второе трансгенное событие представляет собой другую чужеродную ДНК в другом определенном локусе, как это содержится в эталонном семени, депонированном в NCIMB под номером доступа NCIMB 41660, где эталонное семя, геном которого содержит первое трансгенное событие и второе трансгенное событие, депонировано в АТСС под номером доступа РТА-11042, и где указанная чужеродная ДНК в первом трансгенном событии содержит химерный ген, кодирующий HPPD PF W336, и химерный ген, кодирующий 2mEPSPS, и где указанное первое трансгенное событие также включает нуклеотидную последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1441 до нуклеотида 1462 и нуклеотидную последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 230 до нуклеотида 251, и где указанная чужеродная ДНК во втором трансгенном событии содержит химерный ген, кодирующий фосфинотрицинацетилтрансферазу, и где указанное второе трансгенное событие также включает нуклеотидную последовательность SEQ ID No 14 от нуклеотида 301 до нуклеотида 322 и нуклеотидную последовательность SEQ ID No 15 от нуклеотида 497 до нуклеотида 518.
8. Соевый продукт для приготовления пищевых или кормовых продуктов, полученный из семени по п. 6, содержащего первое и второе трансгенные события, где указанный соевый продукт представляет собой или содержит крупу, молотые семена, муку, хлопья из сои и где указанный соевый продукт содержит указанные первое и второе трансгенные события.
9. Способ получения соевого продукта, включающий получение семени сои, содержащего первое и второе трансгенные события, по п. 6 и получение такого соевого продукта из него, где указанный соевый продукт содержит указанные первое и второе трансгенные события.
10. Способ борьбы с сорняками на поле с растениями сои по любому из пп. 1-5, включающий обработку поля эффективным количеством гербицида на основе ингибитора HPPD, и/или глифосата, и/или глюфосината, где указанные растения являются устойчивыми к указанному гербициду на основе ингибитора HPPD, и/или глифосата, и/или глюфосината.
11. Способ борьбы с сорняками на поле, которое должно быть засеяно растениями сои по любому из пп. 1-5, включающий обработку поля эффективным количеством гербицида на основе ингибитора HPPD, и/или глифосата, и/или глюфосината перед тем, как соевые растения посажены или семена посеяны, с последующими посадкой указанных растений сои или посевом указанных семян сои на указанном предварительно обработанном поле, где указанные семена и указанные растения являются устойчивыми к указанному гербициду на основе ингибитора HPPD, и/или глифосата, и/или глюфосината.
12. Способ борьбы с сорняками, включающий обработку поля, на котором посеяны семена по п. 6, гербицидом на основе ингибитора HPPD, и/или глифосата, и/или глюфосината необязательно с последующим применением гербицида на основе ингибитора HPPD, и/или глифосата, и/или глюфосината в качестве послевсходового гербицида поверх растений, где указанные семена и указанные растения являются устойчивыми к указанному гербициду на основе ингибитора HPPD, и/или глифосата, и/или глюфосината.
13. Способ борьбы с сорняками, включающий обработку растений сои по любому из пп. 1-5 гербицидом на основе ингибитора HPPD, таким как изоксафлутол, поверх растений, применяемых вместе, с последующей или предварительной обработкой глифосатом и/или глюфосинатом, применяемого(ых) в качестве послевсходового гербицида поверх растений, где указанные семена и указанные растения являются устойчивыми к указанному гербициду на основе ингибитора HPPD, и/или глифосата, и/или глюфосината.
14. Способ получения растения сои, устойчивого к гербицидам глифосату, глюфосинату и изоксафлутолу, включающий введение в геном растения сои первого трансгенного события и второго трансгенного события, где указанное первое трансгенное событие представляет собой чужеродную ДНК в определенном локусе, как это содержится в эталонном семени, депонированном в NCIMB под номером доступа NCIMB 41659, и указанное второе трансгенное событие представляет собой другую чужеродную ДНК в другом определенном локусе, как это содержится в эталонном семени, депонированном в NCIMB под номером доступа NCIMB 41660, где эталонное семя, геном которого содержит первое трансгенное событие и второе трансгенное событие, депонировано в АТСС под номером доступа РТА-11042, и где указанная чужеродная ДНК в первом трансгенном событии содержит химерный ген, кодирующий HPPD PF W336, и химерный ген, кодирующий 2mEPSPS, и где указанное первое трансгенное событие также включает нуклеотидную последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1441 до нуклеотида 1462 и нуклеотидную последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 230 до нуклеотида 251, и где указанная чужеродная ДНК во втором трансгенном событии содержит химерный ген, кодирующий фосфинотрицинацетилтрансферазу, и где указанное второе трансгенное событие также включает нуклеотидную последовательность SEQ ID No 14 от нуклеотида 301 до нуклеотида 322 и нуклеотидную последовательность SEQ ID No 15 от нуклеотида 497 до нуклеотида 518.
15. Способ идентификации одновременного присутствия первого и второго трансгенных событий в биологических образцах, включающий
обнаружение области, специфичной для указанного первого трансгенного события, с помощью по меньшей мере двух специфичных праймеров, один из которых специфично распознает последовательность в пределах 5'- или 3'-фланкирующей области чужеродной ДНК, включающей гены устойчивости к гербицидам, в указанном первом трансгенном событии, а другой специфично распознает последовательность в пределах чужеродной ДНК, смежной с указанной 5'- или 3'-фланкирующей областью первого трансгенного события, и
обнаружение области, специфичной для указанного второго трансгенного события, с помощью по меньшей мере двух специфичных праймеров, один из которых специфично распознает последовательность в пределах 5'- или 3'-фланкирующей области чужеродной ДНК, включающей гены устойчивости к гербицидам, в указанном втором трансгенном событии, а другой специфично распознает последовательность в пределах чужеродной ДНК, смежной с указанной 5'- или 3'-фланкирующей областью второго трансгенного события,
где указанная 5'-фланкирующая область первого трансгенного события содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1 до нуклеотида 1451, где указанная 3'-фланкирующая область первого трансгенного события содержит нуклеотидную последовательность комплемента SEQ ID No 3 от нуклеотида 241 до нуклеотида 1408, где указанная чужеродная ДНК первого трансгенного события, смежная с указанной 5'-фланкирующей областью, содержит нуклеотидную последовательность комплемента SEQ ID No 2 от нуклеотида 1452 до нуклеотида 1843 и указанная чужеродная ДНК первого трансгенного события, смежная с указанной 3'-фланкирующей областью, содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 1 до нуклеотида 240 или где указанная чужеродная ДНК первого трансгенного события, смежная с указанной 5'- или 3'-фланкирующей областью, содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID No 20 от нуклеотидного положения 1452 до нуклеотидного положения 16638 или ее комплемент, и
где указанная 5'-фланкирующая область второго трансгенного события содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID No 14 от нуклеотида 1 до нуклеотида 311, где указанная 3'-фланкирующая область второго трансгенного события содержит нуклеотидную последовательность комплемента SEQ ID No 15 от нуклеотида 508 до нуклеотида 1880, где указанная чужеродная ДНК второго трансгенного события, смежная с указанной 5'-фланкирующей областью, содержит нуклеотидную последовательность комплемента SEQ ID No 14 от нуклеотида 312 до нуклеотида 810, и где указанная чужеродная ДНК второго трансгенного события, смежная с указанной 3'-фланкирующей областью, содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID No 15 от нуклеотида 1 до нуклеотида 507 или указанная чужеродная ДНК второго трансгенного события, смежная с указанной 5'- или 3'-фланкирующей областью, содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID No 11 от нуклеотида 3458 до нуклеотида 3848 и нуклеотидную последовательность SEQ ID No 11 от нуклеотида 413 до нуклеотида 3457 или их комплемент,
и где указанное первое трансгенное событие представляет собой чужеродную ДНК в определенном локусе, как это содержится в эталонном семени, депонированном в NCIMB под номером доступа NCIMB 41659, и указанное второе трансгенное событие представляет собой другую чужеродную ДНК в другом определенном локусе, как это содержится в эталонном семени, депонированном в NCIMB под номером доступа NCIMB 41660, где эталонное семя, геном которого содержит первое трансгенное событие и второе трансгенное событие, депонировано в АТСС под номером доступа РТА-11042, и где указанная чужеродная ДНК в первом трансгенном событии содержит химерный ген, кодирующий HPPD PF W336, и химерный ген, кодирующий 2mEPSPS, и где указанное первое трансгенное событие также включает нуклеотидную последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1441 до нуклеотида 1462 и нуклеотидную последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 230 до нуклеотида 251, и где указанная чужеродная ДНК во втором трансгенном событии содержит химерный ген, кодирующий фосфинотрицинацетилтрансферазу, и где указанное второе трансгенное событие также включает нуклеотидную последовательность SEQ ID No 14 от нуклеотида 301 до нуклеотида 322 и нуклеотидную последовательность SEQ ID No 15 от нуклеотида 497 до нуклеотида 518.
16. Способ по п. 15, где способ включает амплификацию двух фрагментов ДНК длиной между 50 и 1000 п.о. из нуклеиновой кислоты, присутствующей в указанном биологическом образце, с помощью первой полимеразной цепной реакции, использующей по меньшей мере два праймера, один из которых распознает 5'- или 3'-фланкирующую область чужеродной ДНК, содержащей гены устойчивости к гербицидам, в первом трансгенном событии, а другой из которых распознает последовательность в пределах чужеродной ДНК первого трансгенного события, смежной с указанной 5'- или 3'-фланкирующей областью, и с помощью второй полимеразной цепной реакции, использующей по меньшей мере два праймера, один из которых распознает 5'- или 3'-фланкирующую область чужеродной ДНК, содержащей гены устойчивости к гербицидам, во втором трансгенном событии, а другой из которых распознает последовательность в пределах чужеродной ДНК второго трансгенного события, смежной с указанной 5'- или 3'-фланкирующей областью, причем указанные первая и вторая полимеразные реакции могут быть последовательными или одновременными.
17. Способ по п. 15, где указанный праймер, распознающий 5'-фланкирующую область первого трансгенного события, включает непосредственно на своем 3'-конце нуклеотидную последовательность размером по меньшей мере 17 последовательных нуклеотидов, выбранных из нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2, от нуклеотида 1 до нуклеотида 1451, или указанный праймер, распознающий 3'-фланкирующую область первого трансгенного события, включает непосредственно на своем 3'-конце нуклеотидную последовательность размером по меньшей мере 17 последовательных нуклеотидов, выбранных из нуклеотидной последовательности комплементарной цепи SEQ ID No 3, от нуклеотида 241 до нуклеотида 1408, а указанный праймер, распознающий последовательность в пределах чужеродной ДНК первого трансгенного события, включает непосредственно на своем 3'-конце нуклеотидную последовательность размером по меньшей мере 17 последовательных нуклеотидов, выбранных из нуклеотидной последовательности комплементарной цепи SEQ ID No 2, от нуклеотида 1452 до нуклеотида 1843, или нуклеотидной последовательности SEQ ID No 3, от нуклеотида 1 до нуклеотида 240, или нуклеотидной последовательности SEQ ID No 20 от нуклеотида 1452 до нуклеотида 16638 или ее комплементарной цепи, а указанный праймер, распознающий 5'-фланкирующую область второго трансгенного события, включает непосредственно на своем 3'-конце нуклеотидную последовательность размером по меньшей мере 17 последовательных нуклеотидов, выбранных из нуклеотидной последовательности SEQ ID No 14, от нуклеотида 1 до нуклеотида 311, или указанный праймер, распознающий 3'-фланкирующую область второго трансгенного события, включает непосредственно на своем 3'-конце нуклеотидную последовательность размером по меньшей мере 17 последовательных нуклеотидов, выбранных из нуклеотидной последовательности комплементарной цепи SEQ ID No 15, от нуклеотида 508 до нуклеотида 1880, а указанный праймер, распознающий последовательность в пределах чужеродной ДНК второго трансгенного события, включает непосредственно на своем 3'-конце нуклеотидную последовательность размером по меньшей мере 17 последовательных нуклеотидов, выбранных из нуклеотидной последовательности SEQ ID No 14, от нуклеотида 312 до нуклеотида 810, или нуклеотидной последовательности SEQ ID No 15, от нуклеотида 1 до нуклеотида 507, или нуклеотидной последовательности SEQ ID No: 11 от нуклеотида 3458 до нуклеотида 3848 и нуклеотидной последовательности SEQ ID No 11 от нуклеотида 413 до нуклеотида 3457 или их комплементарной цепи, в частности, где указанные праймеры, специфические к первому трансгенному событию, содержат последовательность SEQ ID No 5 и SEQ ID No 4 соответственно, или последовательность SEQ ID No 7 и SEQ ID No 5 соответственно, указанные праймеры, специфические ко второму трансгенному событию, содержат последовательность SEQ ID No 18 и SEQ ID No 19 соответственно.
18. Набор для идентификации одновременного присутствия первого трансгенного события и второго трансгенного события в биологических образцах, включающий один праймер, распознающий 5'-фланкирующую область чужеродной ДНК, включающей гены устойчивости к гербицидам, в первом трансгенном событии, или один праймер, распознающий 3'-фланкирующую область чужеродной ДНК, включающей гены устойчивости к гербицидам, в первом трансгенном событии, и один праймер, распознающий последовательность в пределах чужеродной ДНК, смежной с указанной 5'-или 3'-фланкирующей областью в первом трансгенном событии, где указанный набор дополнительно включает один праймер, распознающий 5'-фланкирующую область чужеродной ДНК во втором трансгенном событии, или один праймер, распознающий 3'-фланкирующую область чужеродной ДНК во втором трансгенном событии, и один праймер, распознающий последовательность в пределах чужеродной ДНК, смежной с указанной 5'- или 3'-фланкирующей областью во втором трансгенном событии,
где указанное первое трансгенное событие представляет собой чужеродную ДНК в определенном локусе, как это содержится в эталонном семени, депонированном в NCIMB под номером доступа NCIMB 41659, и указанное второе трансгенное событие представляет собой другую чужеродную ДНК в другом определенном локусе, как это содержится в эталонном семени, депонированном в NCIMB под номером доступа NCIMB 41660, где эталонное семя, геном которого содержит первое трансгенное событие и второе трансгенное событие, депонировано в АТСС под номером доступа РТА-11042, и где указанная чужеродная ДНК в первом трансгенном событии содержит химерный ген, кодирующий HPPD PF W336, и химерный ген, кодирующий 2mEPSPS, и где указанное первое трансгенное событие также включает нуклеотидную последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1441 до нуклеотида 1462 и нуклеотидную последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 230 до нуклеотида 251, и где указанная чужеродная ДНК во втором трансгенном событии содержит химерный ген, кодирующий фосфинотрицинацетилтрансферазу, и где указанное второе трансгенное событие также включает нуклеотидную последовательность SEQ ID No 14 от нуклеотида 301 до нуклеотида 322 и нуклеотидную последовательность SEQ ID No 15 от нуклеотида 4 97 до нуклеотида 518,
и где указанная 5'-фланкирующая область первого трансгенного события содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1 до нуклеотида 1451, где указанная 3'-фланкирующая область первого трансгенного события содержит нуклеотидную последовательность комплемента SEQ ID No 3 от нуклеотида 241 до нуклеотида 1408, где указанная чужеродная ДНК первого трансгенного события, смежная с указанной 5'-фланкирующей областью, содержит нуклеотидную последовательность комплемента SEQ ID No 2 от нуклеотида 1452 до нуклеотида 1843, и указанная чужеродная ДНК первого трансгенного события, смежная с указанной 3'-фланкирующей областью, содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 1 до нуклеотида 240, или где указанная чужеродная ДНК первого трансгенного события, смежная с указанной 5'- или 3'-фланкирующей областью, содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID No 20 от нуклеотидного положения 1452 до нуклеотидного положения 16638 или ее комплемент, и
где указанная 5'-фланкирующая область второго трансгенного события содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID No 14 от нуклеотида 1 до нуклеотида 311, где указанная 3'-фланкирующая область второго трансгенного события содержит нуклеотидную последовательность комплемента SEQ ID No 15 от нуклеотида 508 до нуклеотида 1880, где указанная чужеродная ДНК второго трансгенного события, смежная с указанной 5'-фланкирующей областью, содержит нуклеотидную последовательность комплемента SEQ ID No 14 от нуклеотида 312 до нуклеотида 810, и где указанная чужеродная ДНК второго трансгенного события, смежная с указанной 3'-фланкирующей областью, содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID No 15 от нуклеотида 1 до нуклеотида 507, или указанная чужеродная ДНК второго трансгенного события, смежная с указанной 5'- или 3'-фланкирующей областью, содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID No 11 от нуклеотида 3458 до нуклеотида 3848 и нуклеотидную последовательность SEQ ID No 11 от нуклеотида 413 до нуклеотида 3457 или их комплемент.
19. Пара праймеров, пригодных для специфического обнаружения первого трансгенного события и второго трансгенного события, в которой указанный первый праймер включает последовательность, которая распознает последовательность в пределах 5'- или 3'-фланкирующей области чужеродной ДНК, включающей гены устойчивости к гербицидам, в первом трансгенном событии, а указанный второй праймер включает последовательность, которая распознает последовательность в пределах последовательности чужеродной ДНК, смежной с указанной 5'- или 3'-фланкирующей областью в первом трансгенном событии, причем указанный третий праймер включает последовательность, которая распознает последовательность в пределах 5'- или 3'-фланкирующей области чужеродной ДНК во втором трансгенном событии, и указанный четвертый праймер включает последовательность, которая распознает последовательность в пределах последовательности чужеродной ДНК, смежной с указанной 5'- или 3'-фланкирующей областью во втором трансгенном событии, где
указанное первое трансгенное событие представляет собой чужеродную ДНК в определенном локусе, как это содержится в эталонном семени, депонированном в NCIMB под номером доступа NCIMB 41659, и указанное второе трансгенное событие представляет собой другую чужеродную ДНК в другом определенном локусе, как это содержится в эталонном семени, депонированном в NCIMB под номером доступа NCIMB 41660, где эталонное семя, геном которого содержит первое трансгенное событие и второе трансгенное событие, депонировано в АТСС под номером доступа РТА-11042, и где указанная чужеродная ДНК в первом трансгенном событии содержит химерный ген, кодирующий HPPD PF W336, и химерный ген, кодирующий 2mEPSPS, и где указанное первое трансгенное событие также включает нуклеотидную последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1441 до нуклеотида 1462 и нуклеотидную последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 230 до нуклеотида 251, и где указанная чужеродная ДНК во втором трансгенном событии содержит химерный ген, кодирующий фосфинотрицинацетилтрансферазу, и где указанное второе трансгенное событие также включает нуклеотидную последовательность SEQ ID No 14 от нуклеотида 301 до нуклеотида 322 и нуклеотидную последовательность SEQ ID No 15 от нуклеотида 497 до нуклеотида 518,
и где указанная 5'-фланкирующая область первого трансгенного события содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1 до нуклеотида 1451, где указанная 3'-фланкирующая область первого трансгенного события содержит нуклеотидную последовательность комплемента SEQ ID No 3 от нуклеотида 241 до нуклеотида 1408, где указанная чужеродная ДНК первого трансгенного события, смежная с указанной 5'-фланкирующей областью, содержит нуклеотидную последовательность комплемента SEQ ID No 2 от нуклеотида 1452 до нуклеотида 1843, и указанная чужеродная ДНК первого трансгенного события, смежная с указанной 3'-фланкирующей областью, содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 1 до нуклеотида 240, или где указанная чужеродная ДНК первого трансгенного события, смежная с указанной 5'- или 3'-фланкирующей областью, содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID No 20 от нуклеотидного положения 1452 до нуклеотидного положения 16638 или ее комплемент, и
где указанная 5'-фланкирующая область второго трансгенного события содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID No 14 от нуклеотида 1 до нуклеотида 311, где указанная 3'-фланкирующая область второго трансгенного события содержит нуклеотидную последовательность комплемента SEQ ID No 15 от нуклеотида 508 до нуклеотида 1880, где указанная чужеродная ДНК второго трансгенного события, смежная с указанной 5'-фланкирующей областью, содержит нуклеотидную последовательность комплемента SEQ ID No 14 от нуклеотида 312 до нуклеотида 810, и где указанная чужеродная ДНК второго трансгенного события, смежная с указанной 3'-фланкирующей областью, содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID No 15 от нуклеотида 1 до нуклеотида 507, или указанная чужеродная ДНК второго трансгенного события, смежная с указанной 5'- или 3'-фланкирующей областью, содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID No 11 от нуклеотида 3458 до нуклеотида 3848 и нуклеотидную последовательность SEQ ID No 11 от нуклеотида 413 до нуклеотида 3457 или их комплемент.
20. Пара праймеров по п. 19, где указанный первый праймер включает непосредственно на своем 3'-конце нуклеотидную последовательность размером по меньшей мере 17 последовательных нуклеотидов, выбранных из нуклеотидной последовательности SEQ ID No 2, от нуклеотида 1 до нуклеотида 1451, или нуклеотидную последовательность размером по меньшей мере 17 последовательных нуклеотидов, выбранных из нуклеотидной последовательности комплементарной цепи SEQ ID No 3, от нуклеотида 241 до нуклеотида 1408, а указанный второй праймер включает непосредственно на своем 3'-конце нуклеотидную последовательность размером по меньшей мере 17 последовательных нуклеотидов, выбранную из нуклеотидной последовательности комплементарной цепи SEQ ID No 2, от нуклеотида 1452 до нуклеотида 1843, или нуклеотидную последовательность размером по меньшей мере 17 последовательных нуклеотидов, выбранную из нуклеотидной последовательности SEQ ID No 3, от нуклеотида 1 до нуклеотида 240, где указанный третий праймер включает непосредственно на своем 3'-конце нуклеотидную последовательность размером по меньшей мере 17 последовательных нуклеотидов, выбранную из нуклеотидной последовательности SEQ ID No 14, от нуклеотида 1 до нуклеотида 311, нуклеотидную последовательность размером по меньшей мере 17 последовательных нуклеотидов, выбранную из нуклеотидной последовательности комплементарной цепи SEQ ID No 15, от нуклеотида 508 до нуклеотида 1880, и где четвертый праймер включает непосредственно на своем 3'-конце нуклеотидную последовательность размером по меньшей мере 17 последовательных нуклеотидов, выбранную из нуклеотидной последовательности SEQ ID No 14, от нуклеотида 312 до нуклеотида 810, или нуклеотидной последовательности SEQ ID No 15, от нуклеотида 1 до нуклеотида 507.
21. Набор, пригодный для применения в специфическом обнаружении первого трансгенного события или второго трансгенного события, включающий четыре праймера:
первый праймер, содержащий непосредственно на своем 3'-конце последовательность SEQ ID No 5;
второй праймер, содержащий непосредственно на своем 3'-конце последовательность SEQ ID No 4;
третий праймер, содержащий непосредственно на своем 3'-конце последовательность SEQ ID No 18; и
четвертый праймер, содержащий непосредственно на своем 3'-конце последовательность SEQ ID No 19,
где указанное первое трансгенное событие представляет собой чужеродную ДНК в определенном локусе, как это содержится в эталонном семени, депонированном в NCIMB под номером доступа NCIMB 41659, и указанное второе трансгенное событие представляет собой другую чужеродную ДНК в другом определенном локусе, как это содержится в эталонном семени, депонированном в NCIMB под номером доступа NCIMB 41660, где эталонное семя, геном которого содержит первое трансгенное событие и второе трансгенное событие, депонировано в АТСС под номером доступа РТА-11042, и где указанная чужеродная ДНК в первом трансгенном событии содержит химерный ген, кодирующий HPPD PF W336, и химерный ген, кодирующий 2mEPSPS, и где указанное первое трансгенное событие также включает нуклеотидную последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1441 до нуклеотида 1462 и нуклеотидную последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 230 до нуклеотида 251, и где указанная чужеродная ДНК во втором трансгенном событии содержит химерный ген, кодирующий фосфинотрицинацетилтрансферазу, и где указанное второе трансгенное событие также включает нуклеотидную последовательность SEQ ID No 14 от нуклеотида 301 до нуклеотида 322 и нуклеотидную последовательность SEQ ID No 15 от нуклеотида 497 до нуклеотида 518.
22. Способ идентификации одновременного присутствия первого и второго трансгенных событий в биологическом образце, где способ включает гибридизацию нуклеиновой кислоты биологического образца с
первым специфическим зондом для указанного первого трансгенного события, который специфично гибридизуется с областью, содержащей часть 5'- или 3'-фланкирующей области первого трансгенного события и часть чужеродной ДНК, смежной с ней, и
вторым специфическим зондом для указанного второго трансгенного события, который специфично гибридизуется с областью, содержащей часть 5'- или 3'-фланкирующей области второго трансгенного события и часть чужеродной ДНК, смежной с ней,
где последовательность указанного первого специфического зонда по меньшей мере на 80% идентична последовательности, содержащей часть 5'- или 3'-фланкирующей последовательности первого трансгенного события и часть последовательности чужеродной ДНК, непрерывной с ней, а последовательность указанного второго специфического зонда по меньшей мере на 80% идентична последовательности, содержащей часть 5'- или 3'-фланкирующей последовательности второго трансгенного события и часть последовательности чужеродной ДНК, непрерывной с ней, в частности, где последовательность указанного первого специфического зонда по меньшей мере на 80% идентична SEQ ID No 2, от нуклеотида 1431 до нуклеотида 1472, или SEQ ID No 3, от нуклеотида 220 до нуклеотида 261, или комплементарным цепям указанных последовательностей, а последовательность указанного второго специфического зонда по меньшей мере на 80% идентична SEQ ID No 14, от нуклеотида 301 до нуклеотида 322, или SEQ ID No 15, от нуклеотида 497 до нуклеотида 518, или комплементарным цепям указанных последовательностей,
и где указанное первое трансгенное событие представляет собой чужеродную ДНК в определенном локусе, как это содержится в эталонном семени, депонированном в NCIMB под номером доступа NCIMB 41659, и указанное второе трансгенное событие представляет собой другую чужеродную ДНК в другом определенном локусе, как это содержится в эталонном семени, депонированном в NCIMB под номером доступа NCIMB 41660, где эталонное семя, геном которого содержит первое трансгенное событие и второе трансгенное событие, депонировано в АТСС под номером доступа РТА-11042, и где указанная чужеродная ДНК в первом трансгенном событии содержит химерный ген, кодирующий HPPD PF W336, и химерный ген, кодирующий 2mEPSPS, и где указанное первое трансгенное событие также включает нуклеотидную последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1441 до нуклеотида 1462 и нуклеотидную последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 230 до нуклеотида 251, и где указанная чужеродная ДНК во втором трансгенном событии содержит химерный ген, кодирующий фосфинотрицинацетилтрансферазу, и где указанное второе трансгенное событие также включает нуклеотидную последовательность SEQ ID No 14 от нуклеотида 301 до нуклеотида 322 и нуклеотидную последовательность SEQ ID No 15 от нуклеотида 497 до нуклеотида 518,
и где указанная 5'-фланкирующая область первого трансгенного события содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1 до нуклеотида 1451, где указанная 3'-фланкирующая область первого трансгенного события содержит нуклеотидную последовательность комплемента SEQ ID No 3 от нуклеотида 241 до нуклеотида 1408, где указанная чужеродная ДНК первого трансгенного события, смежная с указанной 5'-фланкирующей областью, содержит нуклеотидную последовательность комплемента SEQ ID No 2 от нуклеотида 1452 до нуклеотида 1843, и указанная чужеродная ДНК первого трансгенного события, смежная с указанной 3'-фланкирующей областью, содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 1 до нуклеотида 240, или где указанная чужеродная ДНК первого трансгенного события, смежная с указанной 5'- или 3'-фланкирующей областью, содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID No 20 от нуклеотидного положения 1452 до нуклеотидного положения 16638 или ее комплемент, и
где указанная 5'-фланкирующая область второго трансгенного события содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID No 14 от нуклеотида 1 до нуклеотида 311, где указанная 3'-фланкирующая область второго трансгенного события содержит нуклеотидную последовательность комплемента SEQ ID No 15 от нуклеотида 508 до нуклеотида 1880, где указанная чужеродная ДНК второго трансгенного события, смежная с указанной 5'-фланкирующей областью, содержит нуклеотидную последовательность комплемента SEQ ID No 14 от нуклеотида 312 до нуклеотида 810, и где указанная чужеродная ДНК второго трансгенного события, смежная с указанной 3'-фланкирующей областью, содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID No 15 от нуклеотида 1 до нуклеотида 507, или указанная чужеродная ДНК второго трансгенного события, смежная с указанной 5'- или 3'-фланкирующей областью, содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID No 11 от нуклеотида 3458 до нуклеотида 3848 и нуклеотидную последовательность SEQ ID No 11 от нуклеотида 413 до нуклеотида 3457 или их комплемент,
или их комплементами.
23. Набор для идентификации одновременного присутствия первого трансгенного события и второго трансгенного события в биологических образцах, содержащий
первый специфический зонд, способный к специфической гибридизации со специфической областью указанного первого трансгенного события, и
второй специфический зонд, способный к специфической гибридизации со специфической областью указанного второго трансгенного события,
где последовательность указанного первого специфического зонда по меньшей мере на 80% идентична последовательности, содержащей часть 5'-фланкирующей последовательности или 3'-фланкирующей последовательности чужеродной ДНК в первом трансгенном событии, включающей гены устойчивости к гербицидам, и последовательности, включающей часть чужеродной ДНК, непрерывной с ней, а последовательность указанного второго специфического зонда по меньшей мере на 80% идентична последовательности, содержащей часть 5'-фланкирующей последовательности или 3'-фланкирующей последовательности чужеродной ДНК во втором трансгенном событии, включающей гены устойчивости к гербицидам, и последовательности, включающей часть чужеродной ДНК, непрерывной с ней, в частности, где последовательность указанного первого специфического зонда включает нуклеотидную последовательность, по меньшей мере на 80% идентичную SEQ ID No 2, от нуклеотида 1441 до нуклеотида 1462, или SEQ ID No 3, от нуклеотида 230 до нуклеотида 251, или комплементарным цепям указанных последовательностей, а последовательность указанного второго специфического зонда по меньшей мере на 80% идентична SEQ ID No 14, от нуклеотида 301 до нуклеотида 322, или SEQ ID No 15, от нуклеотида 497 до нуклеотида 518, или комплементарным цепям указанных последовательностей,
где указанное первое трансгенное событие представляет собой чужеродную ДНК в определенном локусе, как это содержится в эталонном семени, депонированном в NCIMB под номером доступа NCIMB 41659, и указанное второе трансгенное событие представляет собой другую чужеродную ДНК в другом определенном локусе, как это содержится в эталонном семени, депонированном в NCIMB под номером доступа NCIMB 41660, где эталонное семя, геном которого содержит первое трансгенное событие и второе трансгенное событие, депонировано в АТСС под номером доступа РТА-11042, и где указанная чужеродная ДНК в первом трансгенном событии содержит химерный ген, кодирующий HPPD PF W336, и химерный ген, кодирующий 2mEPSPS, и где указанное первое трансгенное событие также включает нуклеотидную последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1441 до нуклеотида 1462 и нуклеотидную последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 230 до нуклеотида 251, и где указанная чужеродная ДНК во втором трансгенном событии содержит химерный ген, кодирующий фосфинотрицинацетилтрансферазу, и где указанное второе трансгенное событие также включает нуклеотидную последовательность SEQ ID No 14 от нуклеотида 301 до нуклеотида 322 и нуклеотидную последовательность SEQ ID No 15 от нуклеотида 497 до нуклеотида 518,
и где указанная 5'-фланкирующая область первого трансгенного события содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1 до нуклеотида 1451, где указанная 3'-фланкирующая область первого трансгенного события содержит нуклеотидную последовательность комплемента SEQ ID No 3 от нуклеотида 241 до нуклеотида 1408, где указанная чужеродная ДНК первого трансгенного события, смежная с указанной 5'-фланкирующей областью, содержит нуклеотидную последовательность комплемента SEQ ID No 2 от нуклеотида 1452 до нуклеотида 1843, и указанная чужеродная ДНК первого трансгенного события, смежная с указанной 3'-фланкирующей областью, содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 1 до нуклеотида 240, или где указанная чужеродная ДНК первого трансгенного события, смежная с указанной 5'- или 3'-фланкирующей областью, содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID No 20 от нуклеотидного положения 1452 до нуклеотидного положения 16638 или ее комплемент, и
где указанная 5'-фланкирующая область второго трансгенного события содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID No 14 от нуклеотида 1 до нуклеотида 311, где указанная 3'-фланкирующая область второго трансгенного события содержит нуклеотидную последовательность комплемента SEQ ID No 15 от нуклеотида 508 до нуклеотида 1880, где указанная чужеродная ДНК второго трансгенного события, смежная с указанной 5'-фланкирующей областью, содержит нуклеотидную последовательность комплемента SEQ ID No 14 от нуклеотида 312 до нуклеотида 810, и где указанная чужеродная ДНК второго трансгенного события, смежная с указанной 3'-фланкирующей областью, содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID No 15 от нуклеотида 1 до нуклеотида 507, или указанная чужеродная ДНК второго трансгенного события, смежная с указанной 5'- или 3'-фланкирующей областью, содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID No 11 от нуклеотида 3458 до нуклеотида 3848 и нуклеотидную последовательность SEQ ID No 11 от нуклеотида 413 до нуклеотида 3457 или их комплемент,
или их комплементы.
24. Пара специфичных зондов для идентификации одновременного присутствия первого трансгенного события и второго трансгенного события в биологических образцах, которая включает
первый зонд, имеющий нуклеотидную последовательность, по меньшей мере на 80% идентичную последовательности, содержащей часть 5'-фланкирующей последовательности или 3'-фланкирующей последовательности чужеродной ДНК в указанном первом трансгенном событии, включающей гены устойчивости к гербицидам, и последовательности, включающей часть чужеродной ДНК, непрерывной с ней, или ее комплементарной цепи, и
второй зонд, имеющий нуклеотидную последовательность, по меньшей мере на 80% идентичную последовательности, содержащей часть 5'-фланкирующей последовательности или 3'-фланкирующей последовательности чужеродной ДНК в указанном втором трансгенном событии, включающей гены устойчивости к гербицидам, и последовательности, включающей часть чужеродной ДНК, непрерывной с ней, или ее комплементарной цепи, в частности,
где последовательность указанного первого зонда по меньшей мере на 80% идентична SEQ ID No 2, от нуклеотида 1441 до нуклеотида 1462, или SEQ ID No 3, от нуклеотида 230 до нуклеотида 251, или комплементарным цепям указанных последовательностей, а указанный второй зонд по меньшей мере на 80% идентичен SEQ ID No 14, от нуклеотида 301 до нуклеотида 322, или SEQ ID No 15, от нуклеотида 497 до нуклеотида 518, или комплементарным цепям указанных последовательностей,
где указанное первое трансгенное событие представляет собой чужеродную ДНК в определенном локусе, как это содержится в эталонном семени, депонированном в NCIMB под номером доступа NCIMB 41659, и указанное второе трансгенное событие представляет собой другую чужеродную ДНК в другом определенном локусе, как это содержится в эталонном семени, депонированном в NCIMB под номером доступа NCIMB 41660, где эталонное семя, геном которого содержит первое трансгенное событие и второе трансгенное событие, депонировано в АТСС под номером доступа РТА-11042, и где указанная чужеродная ДНК в первом трансгенном событии содержит химерный ген, кодирующий HPPD PF W336, и химерный ген, кодирующий 2mEPSPS, и где указанное первое трансгенное событие также включает нуклеотидную последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1441 до нуклеотида 1462 и нуклеотидную последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 230 до нуклеотида 251, и где указанная чужеродная ДНК во втором трансгенном событии содержит химерный ген, кодирующий фосфинотрицинацетилтрансферазу, и где указанное второе трансгенное событие также включает нуклеотидную последовательность SEQ ID No 14 от нуклеотида 301 до нуклеотида 322 и нуклеотидную последовательность SEQ ID No 15 от нуклеотида 497 до нуклеотида 518,
и где указанная 5'-фланкирующая область первого трансгенного события содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1 до нуклеотида 1451, где указанная 3'-фланкирующая область первого трансгенного события содержит нуклеотидную последовательность комплемента SEQ ID No 3 от нуклеотида 241 до нуклеотида 1408, где указанная чужеродная ДНК первого трансгенного события, смежная с указанной 5'-фланкирующей областью, содержит нуклеотидную последовательность комплемента SEQ ID No 2 от нуклеотида 1452 до нуклеотида 1843, и указанная чужеродная ДНК первого трансгенного события, смежная с указанной 3'-фланкирующей областью, содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 1 до нуклеотида 240, или где указанная чужеродная ДНК первого трансгенного события, смежная с указанной 5'- или 3'-фланкирующей областью, содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID No 20 от нуклеотидного положения 1452 до нуклеотидного положения 16638 или ее комплемент, и
где указанная 5'-фланкирующая область второго трансгенного события содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID No 14 от нуклеотида 1 до нуклеотида 311, где указанная 3'-фланкирующая область второго трансгенного события содержит нуклеотидную последовательность комплемента SEQ ID No 15 от нуклеотида 508 до нуклеотида 1880, где указанная чужеродная ДНК второго трансгенного события, смежная с указанной 5'-фланкирующей областью, содержит нуклеотидную последовательность комплемента SEQ ID No 14 от нуклеотида 312 до нуклеотида 810, и где указанная чужеродная ДНК второго трансгенного события, смежная с указанной 3'-фланкирующей областью, содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID No 15 от нуклеотида 1 до нуклеотида 507, или указанная чужеродная ДНК второго трансгенного события, смежная с указанной 5'- или 3'-фланкирующей областью, содержит нуклеотидную последовательность SEQ ID No 11 от нуклеотида 3458 до нуклеотида 3848 и нуклеотидную последовательность SEQ ID No 11 от нуклеотида 413 до нуклеотида 3457 или их комплемент,
или их комплементы.
25. Способ скрининга присутствия в семенах первого и второго трансгенных событий, включающий обнаружение области, специфичной для указанного первого трансгенного события, с помощью двух пар специфичных праймеров или пары специфичных зондов, специфично распознающих 5'- или 3'-фланкирующую последовательность чужеродной ДНК, включающей гены устойчивости к гербицидам, в указанном первом трансгенном событии, и чужеродную ДНК, смежную с ней, и обнаружение области, специфичной для указанного второго трансгенного события, с помощью двух пар специфичных праймеров или пары специфичных зондов, специфически распознающего 5'- или 3'-фланкирующую последовательность чужеродной ДНК, включающей гены устойчивости к гербицидам, в указанном втором трансгенном событии, и чужеродную ДНК, смежную с ней, в образцах семян, где указанные пары специфичных праймеров описаны в п. 19, а указанная пара специфичных зондов описана в п. 24, и где указанное первое трансгенное событие представляет собой чужеродную ДНК в определенном локусе, как это содержится в эталонном семени, депонированном в NCIMB под номером доступа NCIMB 41659, и указанное второе трансгенное событие представляет собой другую чужеродную ДНК в другом определенном локусе, как это содержится в эталонном семени, депонированном в NCIMB под номером доступа NCIMB 41660, где эталонное семя, геном которого содержит первое трансгенное событие и второе трансгенное событие, депонировано в АТСС под номером доступа РТА-11042, и где указанная чужеродная ДНК в первом трансгенном событии содержит химерный ген, кодирующий HPPD PF W336, и химерный ген, кодирующий 2mEPSPS, и где указанное первое трансгенное событие также включает нуклеотидную последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1441 до нуклеотида 1462 и нуклеотидную последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 230 до нуклеотида 251, и где указанная чужеродная ДНК во втором трансгенном событии содержит химерный ген, кодирующий фосфинотрицинацетилтрансферазу, и где указанное второе трансгенное событие также включает нуклеотидную последовательность SEQ ID No 14 от нуклеотида 301 до нуклеотида 322 и нуклеотидную последовательность SEQ ID No 15 от нуклеотида 497 до нуклеотида 518.
26. Способ обнаружения присутствия первого и второго трансгенных событий в биологических образцах, содержащих нуклеотидную последовательность-мишень, подлежащую тестированию на предмет присутствия указанных первого и второго трансгенных событий, путем гибридизации с по существу комплементарным меченным нуклеотидным зондом, согласно которому соотношение нуклеиновых кислот зонд:мишень увеличивается путем повторного использования нуклеотидной последовательности-мишени, включающий:
a) гибридизацию указанной нуклеотидной последовательности-мишени с первым олигонуклеотидом, включающим нуклеотидную последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1452 до нуклеотида 1469 или ее комплементарную цепь, или с указанным первым олигонуклеотидом, включающим нуклеотидную последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 223 до нуклеотида 240 или ее комплементарную цепь;
b) гибридизацию указанной нуклеотидной последовательности-мишени со вторым олигонуклеотидом, включающим нуклеотидную последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1434 до нуклеотида 1451 или ее комплементарную цепь, или с указанным меченным нуклеотидным зондом, включающим нуклеотидную последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 241 до нуклеотида 258 или ее комплементарную цепь, где указанный первый или указанный второй олигонуклеотид перекрываются по меньшей мере на один нуклеотид и указанный первый или указанный второй олигонуклеотид являются меченными, образуя указанный меченный нуклеотидный зонд;
c) расщепление только меченной пробы в составе двуцепочечной нуклеотидной последовательности зонд:мишень ферментом, вызывающим селективное расщепление пробы, приводящее к диссоциации двуцепочечной последовательности, и не повреждающим последовательность-мишень;
d) повторное использование нуклеотидной последовательности-мишени путем повторения этапов (а) - (с); и
e) обнаружение расщепленного меченного зонда и за счет этого определение присутствия указанной нуклеотидной последовательности-мишени, и обнаружение присутствия указанного первого трансгенного события в указанных образцах, и
f) гибридизацию указанной нуклеотидной последовательности-мишени с третьим олигонуклеотидом, содержащим нуклеотидную последовательность SEQ ID No 14 от нуклеотида 312 до нуклеотида 329 или ее комплементарную цепь, или указанным третьим олигонуклеотидом, содержащим нуклеотидную последовательность SEQ ID No 15 от нуклеотида 490 до нуклеотида 507 или ее комплементарную цепь;
д) гибридизацию указанной нуклеотидной последовательности-мишени с четвертым олигонуклеотидом, содержащим нуклеотидную последовательность SEQ ID No 14 от нуклеотида 294 до нуклеотида 311 или ее комплементарную цепь, или указанным меченным нуклеотидным зондом, имеющим нуклеотидную последовательность SEQ ID No 15 от нуклеотида 508 до нуклеотида 525 или ее комплементарную цепь, где указанный третий и указанный четвертый олигонуклеотид перекрываются по меньшей мере на один нуклеотид, и указанный третий или указанный четвертый олигонуклеотид являются меченными, представляя собой указанный меченный нуклеотидный зонд;
h) расщепление только меченной пробы в составе двуцепочечной нуклеотидной последовательности зонд:мишень ферментом, вызывающим селективное расщепление пробы, приводящее к диссоциации двуцепочечной последовательности, и не повреждающим последовательность-мишень;
i) повторное использование нуклеотидной последовательности-мишени путем повторения этапов (f) - (h); и
j) обнаружение расщепленного меченного зонда и за счет этого определение присутствия указанной нуклеотидной последовательности-мишени, и обнаружение присутствия указанного второго трансгенного события в указанных образцах,
так, что обнаруживают оба указанных трансгенных события в указанных образцах,
и где первое трансгенное событие представляет собой чужеродную ДНК в определенном локусе, как это содержится в эталонном семени, депонированном в NCIMB под номером доступа NCIMB 41659, и второе трансгенное событие представляет собой другую чужеродную ДНК в определенном локусе, как это содержится в эталонном семени, депонированном в NCIMB под номером доступа NCIMB 41660, где эталонное семя, геном которого содержит первое трансгенное событие и второе трансгенное событие, депонировано в АТСС под номером доступа РТА-11042, и где указанная чужеродная ДНК в первом трансгенном событии содержит химерный ген, кодирующий HPPD PF W336, и химерный ген, кодирующий 2mEPSPS, и где указанное первое трансгенное событие также включает нуклеотидную последовательность SEQ ID No 2 от нуклеотида 1441 до нуклеотида 1462 и нуклеотидную последовательность SEQ ID No 3 от нуклеотида 230 до нуклеотида 251, и где указанная чужеродная ДНК во втором трансгенном событии содержит химерный ген, кодирующий фосфинотрицинацетилтрансферазу, и где указанное второе трансгенное событие также включает нуклеотидную последовательность SEQ ID No 14 от нуклеотида 301 до нуклеотида 322 и нуклеотидную последовательность SEQ ID No 15 от нуклеотида 497 до нуклеотида 518.
RU2012125961A 2009-11-23 2010-11-23 Растения сои, устойчивой к гербицидам, и способы их идентификации RU2639520C2 (ru)

Applications Claiming Priority (7)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US26370709P 2009-11-23 2009-11-23
EP09014565 2009-11-23
EP09014565.7 2009-11-23
US61/263,707 2009-11-23
US36725110P 2010-07-23 2010-07-23
US61/367,251 2010-07-23
PCT/US2010/057886 WO2011063413A2 (en) 2009-11-23 2010-11-23 Herbicide tolerant soybean plants and methods for identifying same

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2012125961A RU2012125961A (ru) 2013-12-27
RU2639520C2 true RU2639520C2 (ru) 2017-12-21

Family

ID=44060419

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2012125961A RU2639520C2 (ru) 2009-11-23 2010-11-23 Растения сои, устойчивой к гербицидам, и способы их идентификации

Country Status (20)

Country Link
US (2) US9683242B2 (ru)
EP (1) EP2503873B1 (ru)
JP (2) JP2013511294A (ru)
KR (1) KR101992494B1 (ru)
CN (2) CN103003443B (ru)
AR (2) AR080566A1 (ru)
AU (1) AU2010321586C1 (ru)
CA (1) CA2781598C (ru)
ES (1) ES2623923T3 (ru)
HR (1) HRP20170670T1 (ru)
HU (1) HUE032718T2 (ru)
MX (1) MX2012005932A (ru)
NZ (1) NZ600375A (ru)
PL (1) PL2503873T3 (ru)
PT (1) PT2503873T (ru)
RS (1) RS55883B1 (ru)
RU (1) RU2639520C2 (ru)
SI (1) SI2503873T1 (ru)
UY (1) UY33051A (ru)
WO (1) WO2011063413A2 (ru)

Families Citing this family (528)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2503873B1 (en) 2009-11-23 2017-02-08 Bayer CropScience NV Herbicide tolerant soybean plants and methods for identifying same
SI2504454T1 (sl) 2009-11-23 2020-06-30 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC Elitni dogodek EE-GM3 in metode in kompleti za identifikacijo takega dogodka v bioloških vzorcih
RU2608650C2 (ru) * 2010-12-03 2017-01-23 ДАУ АГРОСАЙЕНСИЗ ЭлЭлСи Пакетированное событие 8264.44.06.1 с устойчивостью к гербицидам, связанные трансгенные линии сои и их детектирование
WO2012075429A1 (en) * 2010-12-03 2012-06-07 Dow Agrosciences Llc Stacked herbicide tolerance event 8291.45.36.2, related transgenic soybean lines, and detection thereof
TW201231655A (en) * 2010-12-15 2012-08-01 Syngenta Participations Ag Soybean event SYHT04R and compositions and methods for detection thereof
TWI667347B (zh) * 2010-12-15 2019-08-01 瑞士商先正達合夥公司 大豆品種ｓｙｈｔ０ｈ２及偵測其之組合物及方法
UA114716C2 (uk) * 2011-07-13 2017-07-25 Дау Аґросаєнсиз Елелсі Трасгенна рослина сої, стійка до гербіцидів
EP2782920B1 (en) 2011-11-21 2016-12-21 Bayer Intellectual Property GmbH Fungicide n-[(trisubstitutedsilyl)methyl]-carboxamide derivatives
CN105906567B (zh) 2011-11-30 2019-01-22 拜耳知识产权有限责任公司 杀真菌的n-二环烷基和n-三环烷基(硫代)羧酰胺衍生物
KR102028903B1 (ko) 2011-12-29 2019-10-07 바이엘 인텔렉쳐 프로퍼티 게엠베하 살진균 3-[(피리딘-2-일메톡시이미노)(페닐)메틸]-2-치환-1,2,4-옥사디아졸-5(2h)-온 유도체
CN104039769B (zh) 2011-12-29 2016-10-19 拜耳知识产权有限责任公司 杀真菌的3-[(1,3-噻唑-4-基甲氧基亚氨基)(苯基)甲基]-2-取代的-1,2,4-噁二唑-5(2h)-酮衍生物
EP2806739A1 (en) 2012-01-25 2014-12-03 Bayer Intellectual Property GmbH Active compound combinations containing fluopyram and biological control agent
MX354787B (es) * 2012-06-25 2018-03-21 Dow Agrosciences Llc Evento de soja pdab9582.816.15.1 resistente a insectos y tolerante a herbicidas.
BR112015005674B1 (pt) 2012-09-14 2022-09-06 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC Polipeptídeos recombinantes para conferir tolerância à herbicidas
JP6153619B2 (ja) 2012-10-19 2017-06-28 バイエル・クロップサイエンス・アクチェンゲゼルシャフト カルボキサミド誘導体を含む活性化合物の組み合わせ
MX2015004773A (es) 2012-10-19 2015-08-14 Bayer Cropscience Ag Metodo de promocion de crecimiento de planta usando derivados de carboxamida.
MX2015004778A (es) 2012-10-19 2015-08-14 Bayer Cropscience Ag Metodo para mejorar la tolerancia al estres abiotico en plantas usando derivados de carboxamida o tiocarboxamida.
MX363731B (es) 2012-10-19 2019-04-01 Bayer Cropscience Ag Metodo para tratar plantas frente a hongos resistentes a fungicidas usando derivados de carboxamida o tiocarboxamida.
AR093909A1 (es) 2012-12-12 2015-06-24 Bayer Cropscience Ag Uso de ingredientes activos para controlar nematodos en cultivos resistentes a nematodos
DK2964767T3 (da) 2013-03-07 2020-03-23 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC Toksingener og fremgangsmåder til anvendelse deraf
CA2909725A1 (en) 2013-04-19 2014-10-23 Bayer Cropscience Aktiengesellschaft Method for improved utilization of the production potential of transgenic plants
WO2014177514A1 (en) 2013-04-30 2014-11-06 Bayer Cropscience Ag Nematicidal n-substituted phenethylcarboxamides
TW201507722A (zh) 2013-04-30 2015-03-01 Bayer Cropscience Ag 做為殺線蟲劑及殺體內寄生蟲劑的ｎ－（２－鹵素－２－苯乙基）－羧醯胺類
BR112016020889B1 (pt) 2014-03-11 2022-10-04 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC Molécula de ácido nucleico recombinante, célula hospedeira bacteriana, proteína hppd recombinante, uso do ácido nucleico recombinante e produto de base
EP3097782A1 (en) 2015-05-29 2016-11-30 Bayer CropScience Aktiengesellschaft Methods for controlling phytopathogenic nematodes by combination of fluopyram and biological control agents
JP6873979B2 (ja) 2015-09-11 2021-05-19 バイエル・クロップサイエンス・アクチェンゲゼルシャフト Ｈｐｐｄ変異体および使用方法
JP6728657B2 (ja) * 2015-12-04 2020-07-22 東洋紡株式会社 核酸増幅法
WO2017182420A1 (en) * 2016-04-20 2017-10-26 Bayer Cropscience Nv Elite event ee-gh7 and methods and kits for identifying such event in biological samples
CN110267975B (zh) 2016-11-23 2024-04-19 巴斯夫农业种子解决方案美国有限责任公司 Axmi669和axmi991毒素基因及其使用方法
KR20190095411A (ko) 2016-12-22 2019-08-14 바스프 아그리컬쳐럴 솔루션즈 시드 유에스 엘엘씨 선충 해충의 방제를 위한 ｃｒｙ１４의 용도
US11555202B2 (en) 2016-12-22 2023-01-17 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC Elite event EE-GM5 and methods and kits for identifying such event in biological samples
CA3046232A1 (en) * 2016-12-22 2018-06-28 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC Elite event ee-gm4 and methods and kits for identifying such event in biological samples
UY37570A (es) 2017-01-18 2018-08-31 Bayer Cropscience Lp Uso de bp005 para el control de patógenos de planta
CA3049775A1 (en) 2017-01-18 2018-07-26 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC Bp005 toxin gene and methods for its use
US11708565B2 (en) 2017-03-07 2023-07-25 BASF Agricultural Solutions Seesi US LLC HPPD variants and methods of use
BR112019021938A2 (pt) 2017-04-21 2020-05-05 Bayer Cropscience Lp método de melhoria de segurança de cultivos
US10201140B1 (en) 2017-08-25 2019-02-12 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170006
US10188060B1 (en) 2017-08-25 2019-01-29 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170005
US10182541B1 (en) 2017-08-25 2019-01-22 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170000
US10212897B1 (en) 2017-08-25 2019-02-26 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170001
US10292349B2 (en) 2017-08-25 2019-05-21 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170011
US10244712B2 (en) 2017-08-25 2019-04-02 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170022
US10111399B1 (en) 2017-08-25 2018-10-30 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170021
US10201135B1 (en) 2017-08-25 2019-02-12 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170013
US10178840B1 (en) 2017-08-25 2019-01-15 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170018
US10244709B2 (en) 2017-08-25 2019-04-02 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170008
US10285349B2 (en) 2017-08-25 2019-05-14 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170019
US10285350B2 (en) 2017-08-25 2019-05-14 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170020
US10244713B2 (en) 2017-08-25 2019-04-02 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170017
US10182540B1 (en) 2017-08-25 2019-01-22 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170012
US10111398B1 (en) 2017-08-25 2018-10-30 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170015
US10244711B2 (en) 2017-08-25 2019-04-02 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170024
US10201141B1 (en) 2017-08-25 2019-02-12 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170014
US10238060B2 (en) 2017-08-25 2019-03-26 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170002
US10244710B2 (en) 2017-08-25 2019-04-02 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170003
US10178839B1 (en) 2017-08-25 2019-01-15 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170010
US10292350B2 (en) 2017-09-21 2019-05-21 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170026
US10194619B1 (en) 2017-09-21 2019-02-05 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170025
US10231410B1 (en) 2017-09-21 2019-03-19 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170028
US10285351B2 (en) 2017-09-21 2019-05-14 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170023
US10258009B2 (en) 2017-09-21 2019-04-16 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170034
US10258008B2 (en) 2017-09-21 2019-04-16 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170029
US10182542B1 (en) 2017-09-21 2019-01-22 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170031
US10231427B1 (en) 2017-09-21 2019-03-19 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170030
US10231411B1 (en) 2017-09-21 2019-03-19 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170027
US10165746B1 (en) 2017-09-22 2019-01-01 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170033
US10194620B1 (en) 2017-09-22 2019-02-05 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170035
US10188062B1 (en) 2017-09-22 2019-01-29 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170037
US10165745B1 (en) 2017-09-22 2019-01-01 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170032
US10182543B1 (en) 2017-09-22 2019-01-22 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170036
US20210032651A1 (en) 2017-10-24 2021-02-04 Basf Se Improvement of herbicide tolerance to hppd inhibitors by down-regulation of putative 4-hydroxyphenylpyruvate reductases in soybean
WO2019083810A1 (en) 2017-10-24 2019-05-02 Basf Se IMPROVING HERBICIDE TOLERANCE FOR 4-HYDROXYPHENYLPYRUVATE DIOXYGENASE (HPPD) INHIBITORS BY NEGATIVE REGULATION OF HPPD EXPRESSION IN SOYBEANS
US20210323950A1 (en) 2018-06-04 2021-10-21 Bayer Aktiengesellschaft Herbicidally active bicyclic benzoylpyrazoles
US10499599B1 (en) 2018-08-06 2019-12-10 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 78020134
US10542697B1 (en) 2018-08-06 2020-01-28 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170114
US10455797B1 (en) 2018-08-06 2019-10-29 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170108
US10588283B2 (en) 2018-08-06 2020-03-17 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170076
US10506785B1 (en) 2018-08-06 2019-12-17 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170122
US10455798B1 (en) 2018-08-06 2019-10-29 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170052
US10542695B1 (en) 2018-08-06 2020-01-28 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 75163252
US10499600B1 (en) 2018-08-06 2019-12-10 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170068
US10440929B1 (en) 2018-08-06 2019-10-15 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170077
US10542696B1 (en) 2018-08-06 2020-01-28 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170106
US10548272B1 (en) 2018-08-06 2020-02-04 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170070
US10412922B1 (en) 2018-08-07 2019-09-17 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170113
US10555471B1 (en) 2018-08-07 2020-02-11 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170082
US10492449B1 (en) 2018-08-07 2019-12-03 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170048
US10687488B2 (en) 2018-08-07 2020-06-23 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170041
US10531623B1 (en) 2018-08-07 2020-01-14 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170079
US10602688B2 (en) 2018-08-07 2020-03-31 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170062
US10548281B1 (en) 2018-08-07 2020-02-04 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170061
US10687487B2 (en) 2018-08-07 2020-06-23 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170121
US10542718B1 (en) 2018-08-07 2020-01-28 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170042
US10631498B2 (en) 2018-08-07 2020-04-28 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170111
US10455799B1 (en) 2018-08-07 2019-10-29 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170074
US10492446B1 (en) 2018-08-07 2019-12-03 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170067
US10512230B1 (en) 2018-08-07 2019-12-24 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170055
US10531624B1 (en) 2018-08-07 2020-01-14 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170115
US10542717B1 (en) 2018-08-07 2020-01-28 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170038
US10492447B1 (en) 2018-08-07 2019-12-03 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170105
US10368523B1 (en) 2018-08-07 2019-08-06 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170119
US10390513B1 (en) 2018-08-07 2019-08-27 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170107
US10412923B1 (en) 2018-08-07 2019-09-17 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170047
US10548280B1 (en) 2018-08-07 2020-02-04 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170059
US10455800B1 (en) 2018-08-07 2019-10-29 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170109
US10375921B1 (en) 2018-08-07 2019-08-13 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170053
US10687489B2 (en) 2018-08-07 2020-06-23 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170065
US10798906B2 (en) 2018-08-07 2020-10-13 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170112
US10477820B1 (en) 2018-08-07 2019-11-19 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170120
US10687486B2 (en) 2018-08-07 2020-06-23 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170116
US10492448B1 (en) 2018-08-07 2019-12-03 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170104
US10531622B1 (en) 2018-08-07 2020-01-14 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170072
US10375920B1 (en) 2018-08-07 2019-08-13 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170117
US10595485B2 (en) 2018-08-07 2020-03-24 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170044
US10433508B1 (en) 2018-08-07 2019-10-08 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170110
US10368522B1 (en) 2018-08-07 2019-08-06 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170118
US10433520B1 (en) 2018-08-07 2019-10-08 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170049
US10368524B1 (en) 2018-08-07 2019-08-06 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170057
US10973201B2 (en) 2018-08-22 2021-04-13 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01072339
US11096363B2 (en) 2018-08-22 2021-08-24 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01072331
US10973200B2 (en) 2018-08-22 2021-04-13 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01072342
US11109553B2 (en) 2018-08-22 2021-09-07 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01072328
US10973199B2 (en) 2018-08-22 2021-04-13 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01072341
US10993404B2 (en) 2018-08-22 2021-05-04 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01072356
US10897870B2 (en) 2018-08-22 2021-01-26 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01072322
US10897868B2 (en) 2018-08-22 2021-01-26 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01072327
US11044876B2 (en) 2018-08-22 2021-06-29 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01072345
US10939652B2 (en) 2018-08-22 2021-03-09 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01072350
US10973198B2 (en) 2018-08-22 2021-04-13 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01072340
US11109552B2 (en) 2018-08-22 2021-09-07 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01072332
US10918065B2 (en) 2018-08-22 2021-02-16 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01072343
US10897869B2 (en) 2018-08-22 2021-01-26 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01072333
US10999998B2 (en) 2018-08-22 2021-05-11 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01072346
US10905081B2 (en) 2018-08-22 2021-02-02 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01072329
US11013197B2 (en) 2018-08-22 2021-05-25 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01072368
US11026389B2 (en) 2018-08-22 2021-06-08 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01072367
US10905080B2 (en) 2018-08-22 2021-02-02 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01072355
US11206791B2 (en) 2018-08-22 2021-12-28 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01072337
US10765082B1 (en) 2019-06-19 2020-09-08 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 83261548
US10631490B1 (en) 2019-06-19 2020-04-28 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 82410316
US10694695B1 (en) 2019-06-19 2020-06-30 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 84420047
US10757878B1 (en) 2019-06-19 2020-09-01 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 85162129
US10609884B1 (en) 2019-06-19 2020-04-07 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 85380644
US10631488B1 (en) 2019-06-19 2020-04-28 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 86172129
US10694705B1 (en) 2019-06-19 2020-06-30 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 83410047
US10631489B1 (en) 2019-06-19 2020-04-28 M.S. Technologyies, L.L.C. Soybean cultivar 80142922
US10765077B1 (en) 2019-06-19 2020-09-08 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 81142227
US10743506B1 (en) 2019-06-20 2020-08-18 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 85321341
US10694709B1 (en) 2019-06-20 2020-06-30 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 80260801
US10694710B1 (en) 2019-06-20 2020-06-30 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 81290801
US10869451B1 (en) 2019-06-20 2020-12-22 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 89081933
US10863687B1 (en) 2019-06-20 2020-12-15 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 80191933
US10842115B1 (en) 2019-06-20 2020-11-24 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 83090832
US10694711B1 (en) 2019-06-20 2020-06-30 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 82201801
US10694708B1 (en) 2019-06-20 2020-06-30 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 81162507
US10694706B1 (en) 2019-06-20 2020-06-30 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 82092934
US10785931B1 (en) 2019-06-20 2020-09-29 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 83070909
US10869439B1 (en) 2019-06-20 2020-12-22 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 84080909
US10694707B1 (en) 2019-06-20 2020-06-30 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 80361712
US10863686B1 (en) 2019-06-20 2020-12-15 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 88061933
US10869450B1 (en) 2019-06-20 2020-12-22 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 86372839
MX2022000950A (es) 2019-07-22 2022-02-14 Bayer Ag 5-amino pirazoles y triazoles como plaguicidas.
CA3148216A1 (en) 2019-07-23 2021-01-28 Bayer Aktiengesellschaft Novel heteroaryl-triazole compounds as pesticides
BR112022000942A2 (pt) 2019-07-23 2022-05-17 Bayer Ag Compostos de heteroaril-triazol como pesticidas
CA3149206A1 (en) 2019-08-01 2021-02-04 Bayer Cropscience Lp Method of improving cold stress tolerance and crop safety
US10897865B1 (en) 2019-08-06 2021-01-26 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 85021070
US11083158B2 (en) 2019-08-06 2021-08-10 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 80361023
US10918058B1 (en) 2019-08-06 2021-02-16 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 81092033
US11044864B2 (en) 2019-08-06 2021-06-29 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 84370213
US11116164B2 (en) 2019-08-06 2021-09-14 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 85260926
US10918057B1 (en) 2019-08-06 2021-02-16 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 89370134
US10918059B1 (en) 2019-08-06 2021-02-16 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 83303830
US10980201B2 (en) 2019-08-06 2021-04-20 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 87370220
US10980202B2 (en) 2019-08-06 2021-04-20 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 83162926
US10905076B1 (en) 2019-08-06 2021-02-02 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 87463802
US11140844B2 (en) 2019-08-06 2021-10-12 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 87140321
US11058088B2 (en) 2019-08-06 2021-07-13 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 85120426
US11058087B2 (en) 2019-08-06 2021-07-13 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 84110426
US10912272B1 (en) 2019-08-07 2021-02-09 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 81382112
US10918062B1 (en) 2019-08-07 2021-02-16 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 88001207
US10881075B1 (en) 2019-08-07 2021-01-05 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 86111722
US10905077B1 (en) 2019-08-07 2021-02-02 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 80560821
US10918061B1 (en) 2019-08-07 2021-02-16 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 82161323
US11096358B2 (en) 2019-08-07 2021-08-24 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 88340813
US10925243B1 (en) 2019-08-07 2021-02-23 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 87112125
US10925242B1 (en) 2019-08-07 2021-02-23 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 88161514
US10918060B1 (en) 2019-08-07 2021-02-16 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 81171313
US10918063B1 (en) 2019-08-07 2021-02-16 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 82230226
US10918041B1 (en) 2019-08-07 2021-02-16 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 81252901
US10925244B1 (en) 2019-08-08 2021-02-23 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 88212722
US10939634B2 (en) 2019-08-08 2021-03-09 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 83082600
US11076553B2 (en) 2019-08-08 2021-08-03 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 86270804
EP3701796A1 (en) 2019-08-08 2020-09-02 Bayer AG Active compound combinations
US10912274B1 (en) 2019-08-08 2021-02-09 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 86171246
US10912275B1 (en) 2019-08-08 2021-02-09 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 89242728
US10939649B2 (en) 2019-08-08 2021-03-09 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 84372449
US10842118B1 (en) 2019-08-08 2020-11-24 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 84252433
US10905078B1 (en) 2019-08-08 2021-02-02 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 85161246
US10939650B2 (en) 2019-08-08 2021-03-09 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 82072600
US11266110B2 (en) 2019-09-16 2022-03-08 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01077337
US11266106B2 (en) 2019-09-16 2022-03-08 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01081407
US11337400B2 (en) 2019-09-16 2022-05-24 Monsanto Technology, Llc Soybean variety 01077373
US11266109B2 (en) 2019-09-16 2022-03-08 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01077385
US20210076615A1 (en) * 2019-09-16 2021-03-18 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01077333
US11350595B2 (en) 2019-09-16 2022-06-07 Monsanto Technology, Llc Soybean variety 01077372
US11259493B2 (en) 2019-09-16 2022-03-01 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01077341
US11185044B2 (en) 2019-09-16 2021-11-30 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01077343
US11185043B2 (en) 2019-09-16 2021-11-30 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01077334
US11229182B2 (en) 2019-09-16 2022-01-25 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01077387
US11284587B2 (en) 2019-09-16 2022-03-29 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01077381
US11259494B2 (en) 2019-09-16 2022-03-01 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01077345
US11178841B2 (en) 2019-09-16 2021-11-23 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01077386
US11266105B2 (en) 2019-09-16 2022-03-08 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01077338
US11266107B2 (en) 2019-09-16 2022-03-08 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01081408
US11266111B2 (en) 2019-09-17 2022-03-08 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01077383
US11297792B2 (en) 2019-09-17 2022-04-12 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01077344
US11266108B2 (en) 2019-09-17 2022-03-08 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01081409
US11576340B2 (en) 2019-09-17 2023-02-14 Monsanto Technology, Llc Soybean variety 01081414
US11576341B2 (en) 2019-09-17 2023-02-14 Monsanto Technology, Llc Soybean variety 01072361
EP4034656A1 (en) 2019-09-26 2022-08-03 Bayer Aktiengesellschaft Rnai-mediated pest control
WO2021064075A1 (en) 2019-10-02 2021-04-08 Bayer Aktiengesellschaft Active compound combinations comprising fatty acids
CN114728928A (zh) 2019-10-09 2022-07-08 拜耳公司 作为农药的新的杂芳基三唑化合物
BR112022006791A2 (pt) 2019-10-09 2022-06-28 Bayer Ag Novos compostos heteroaril-triazol como pesticidas
US11330777B2 (en) 2019-10-18 2022-05-17 Monsanto Technology, Llc Soybean variety 01077390
US11330783B2 (en) 2019-10-18 2022-05-17 Monsanto Technology, Llc Soybean variety 01077336
US11252921B2 (en) 2019-10-18 2022-02-22 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01077393
US11272679B2 (en) 2019-10-18 2022-03-15 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01077330
US11252922B2 (en) 2019-10-18 2022-02-22 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01077391
US11324181B2 (en) 2019-10-18 2022-05-10 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01077335
JP2023501978A (ja) 2019-11-07 2023-01-20 バイエル・アクチエンゲゼルシヤフト 動物害虫駆除用の置換スルホニルアミド
WO2021097162A1 (en) 2019-11-13 2021-05-20 Bayer Cropscience Lp Beneficial combinations with paenibacillus
EP4061131A1 (en) 2019-11-18 2022-09-28 Bayer Aktiengesellschaft Active compound combinations comprising fatty acids
TW202134226A (zh) 2019-11-18 2021-09-16 德商拜耳廠股份有限公司 作為殺蟲劑之新穎雜芳基-三唑化合物
TW202136248A (zh) 2019-11-25 2021-10-01 德商拜耳廠股份有限公司 作為殺蟲劑之新穎雜芳基-三唑化合物
CN111118193A (zh) * 2020-01-07 2020-05-08 山西农业大学 一种适用于18种转基因大豆转化体及其衍生物特异性检测的质粒dna
US11959072B2 (en) 2020-01-31 2024-04-16 Pairwise Plants Services, Inc. Suppression of shade avoidance response in plants
EP4107151A1 (en) 2020-02-18 2022-12-28 Bayer Aktiengesellschaft Heteroaryl-triazole compounds as pesticides
EP3708565A1 (en) 2020-03-04 2020-09-16 Bayer AG Pyrimidinyloxyphenylamidines and the use thereof as fungicides
CA3180157A1 (en) 2020-04-16 2021-10-21 Pairwise Plants Services, Inc. Methods for controlling meristem size for crop improvement
WO2021209490A1 (en) 2020-04-16 2021-10-21 Bayer Aktiengesellschaft Cyclaminephenylaminoquinolines as fungicides
AU2021260029A1 (en) 2020-04-21 2022-11-24 Bayer Aktiengesellschaft 2-(het)aryl-substituted condensed heterocyclic derivatives as pest control agents
TW202208347A (zh) 2020-05-06 2022-03-01 德商拜耳廠股份有限公司 作為殺蟲劑之新穎雜芳基三唑化合物
US20230348392A1 (en) 2020-05-06 2023-11-02 Bayer Aktiengesellschaft Pyridine (thio)amides as fungicidal compounds
JP2023525349A (ja) 2020-05-12 2023-06-15 バイエル、アクチエンゲゼルシャフト 殺真菌性化合物としてのトリアジンおよびピリミジン（チオ）アミド化合物
CN115803317A (zh) 2020-05-19 2023-03-14 拜耳作物科学股份公司 作为杀真菌化合物的氮杂双环(硫代)酰胺
EP4156909A1 (en) 2020-06-02 2023-04-05 Pairwise Plants Services, Inc. Methods for controlling meristem size for crop improvement
JP2023528891A (ja) 2020-06-04 2023-07-06 バイエル、アクチエンゲゼルシャフト 新規殺真菌剤としてのヘテロシクリルピリミジンおよびトリアジン
BR112022024413A2 (pt) 2020-06-10 2023-02-07 Bayer Ag Heterociclos substituídos com azabiciclila como fungicidas inovadores
MX2022015896A (es) 2020-06-17 2023-02-22 Pairwise Plants Services Inc Métodos para el control del tamaño del meristemo para la mejora de cultivos.
JP2023532224A (ja) 2020-06-18 2023-07-27 バイエル、アクチエンゲゼルシャフト 新規殺菌剤としてのオキサジアジニルピリダジン
CA3187291A1 (en) 2020-06-18 2021-12-23 Bayer Aktiengesellschaft Composition for use in agriculture
WO2021255089A1 (en) 2020-06-19 2021-12-23 Bayer Aktiengesellschaft 1,3,4-oxadiazole pyrimidines and 1,3,4-oxadiazole pyridines as fungicides
UY39275A (es) 2020-06-19 2022-01-31 Bayer Ag 1,3,4-oxadiazol pirimidinas como fungicidas, procesos e intermediarios para su preparación, métodos de uso y usos de los mismos
BR112022025692A2 (pt) 2020-06-19 2023-02-28 Bayer Ag 1,3,4-oxadiazóis e seus derivados como fungicidas
UY39276A (es) 2020-06-19 2022-01-31 Bayer Ag Uso de compuestos de 1,3,4–oxadiazol–2–ilpirimidina para controlar microorganismos fitopatógenos, métodos de uso y composiciones.
EP3929189A1 (en) 2020-06-25 2021-12-29 Bayer Animal Health GmbH Novel heteroaryl-substituted pyrazine derivatives as pesticides
EP4175961A1 (de) 2020-07-02 2023-05-10 Bayer Aktiengesellschaft Heterocyclen-derivate als schädlingsbekämpfungsmittel
WO2022033991A1 (de) 2020-08-13 2022-02-17 Bayer Aktiengesellschaft 5-amino substituierte triazole als schädlingsbekämpfungsmittel
US11337398B2 (en) 2020-08-18 2022-05-24 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 99050353
US11178839B1 (en) 2020-08-18 2021-11-23 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 97250443
US11229181B1 (en) 2020-08-18 2022-01-25 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 90110353
US11234403B1 (en) 2020-08-18 2022-02-01 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 92181128
US11357199B2 (en) 2020-08-18 2022-06-14 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 94150027
US11252916B1 (en) 2020-08-18 2022-02-22 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 95110118
US11252920B1 (en) 2020-08-18 2022-02-22 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 95482129
US11425877B2 (en) 2020-08-18 2022-08-30 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 95130328
US11234404B1 (en) 2020-08-18 2022-02-01 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 98010233
US11252917B1 (en) 2020-08-18 2022-02-22 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 92130046
US11252918B1 (en) 2020-08-18 2022-02-22 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 97150620
US11432510B2 (en) 2020-08-18 2022-09-06 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 97330971
US11252919B1 (en) 2020-08-18 2022-02-22 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 93040644
US11185042B1 (en) 2020-08-18 2021-11-30 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 94020016
US11229180B1 (en) 2020-08-18 2022-01-25 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 95230842
US11337399B2 (en) 2020-08-18 2022-05-24 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 98250971
US11425878B2 (en) 2020-08-18 2022-08-30 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 96140971
US11277994B2 (en) 2020-08-18 2022-03-22 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 93421515
US11259492B1 (en) 2020-08-18 2022-03-01 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 94041029
US11178840B1 (en) 2020-08-18 2021-11-23 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 95130648
US20220071154A1 (en) * 2020-09-09 2022-03-10 Monsanto Technology Llc Soybean cultivar 92001528
US20220071140A1 (en) * 2020-09-09 2022-03-10 Monsanto Technology Llc Soybean cultivar 96030818
US11206797B1 (en) 2020-09-09 2021-12-28 Monsanto Technology Llc Soybean cultivar 97320218
US20220071136A1 (en) * 2020-09-09 2022-03-10 Monsanto Technology Llc Soybean cultivar 99002218
US11234406B1 (en) 2020-09-09 2022-02-01 Monsanto Technology Llc Soybean cultivar 98010818
US11252923B1 (en) 2020-09-09 2022-02-22 Monsanto Technology Llc Soybean cultivar 99003018
US20220071137A1 (en) * 2020-09-09 2022-03-10 Monsanto Technology Llc Soybean cultivar 90112218
US11259495B1 (en) 2020-09-09 2022-03-01 Monsanto Technology Llc Soybean cultivar 90381408
US20220071143A1 (en) * 2020-09-09 2022-03-10 Monsanto Technology Llc Soybean cultivar 94260428
WO2022053453A1 (de) 2020-09-09 2022-03-17 Bayer Aktiengesellschaft Azolcarboxamide als schädlingsbekämpfungsmittel
US20220071138A1 (en) * 2020-09-09 2022-03-10 Monsanto Technology Llc Soybean cultivar 91132218
US11234405B1 (en) 2020-09-09 2022-02-01 Monsanto Technology Llc Soybean cultivar 90110208
US11330784B2 (en) 2020-09-11 2022-05-17 Monsanto Technology, Llc Soybean cultivar 95322700
US11439111B2 (en) 2020-09-11 2022-09-13 Monsanto Technology Llc Soybean cultivar 99354100
US11310988B2 (en) 2020-09-11 2022-04-26 Monsanto Technology Llc Soybean cultivar 92340030
US11357200B2 (en) 2020-09-11 2022-06-14 Monsanto Technology, Llc Soybean cultivar 92131600
US11317587B2 (en) 2020-09-11 2022-05-03 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 96030600
US11317588B2 (en) 2020-09-11 2022-05-03 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 97080600
US11277996B1 (en) 2020-09-11 2022-03-22 Monsanto Technology Llc Soybean cultivar 97051600
US11229183B1 (en) 2020-09-11 2022-01-25 Monsanto Technology Llc Soybean cultivar 93070703
US11284592B1 (en) 2020-09-11 2022-03-29 Monsanto Technology Llc Soybean cultivar 91030603
US11350596B2 (en) 2020-09-11 2022-06-07 Monsanto Technology, Llc Soybean cultivar 96050600
US11606926B2 (en) 2020-09-15 2023-03-21 Monsanto Technology Llc Soybean cultivar 94030201
US11744211B2 (en) 2020-09-15 2023-09-05 Monsanto Technology, Llc Soybean cultivar 92310017
US11324184B2 (en) 2020-09-15 2022-05-10 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 97061850
US11399496B2 (en) 2020-09-15 2022-08-02 Monsanto Technology, Llc Soybean cultivar 90116100
US11399497B2 (en) 2020-09-15 2022-08-02 Monsanto Technology, Llc Soybean cultivar 93333110
US11419299B2 (en) 2020-09-15 2022-08-23 Monsanto Technology Llc Soybean cultivar 91361201
US11343988B2 (en) 2020-09-15 2022-05-31 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 91041800
US11425879B2 (en) 2020-09-15 2022-08-30 Monsanto Technology, Llc Soybean cultivar 93054930
US11350597B2 (en) 2020-09-15 2022-06-07 Monsanto Technology, Llc Soybean cultivar 94111580
US11324182B2 (en) 2020-09-15 2022-05-10 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 95060020
US11363779B2 (en) 2020-09-15 2022-06-21 Monsanto Technology Llc Soybean cultivar 90301201
US11337401B2 (en) 2020-09-15 2022-05-24 Monsanto Technology, Llc Soybean cultivar 90370640
US11363778B2 (en) 2020-09-15 2022-06-21 Monsanto Technology Llc Soybean cultivar 90221620
US11317589B2 (en) 2020-09-15 2022-05-03 Monsanto Technology Llc Soybean cultivar 95430820
US11324183B2 (en) 2020-09-15 2022-05-10 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 90250820
US11369074B2 (en) 2020-09-15 2022-06-28 Monsanto Technology Llc Soybean cultivar 99122620
US11357201B2 (en) 2020-09-15 2022-06-14 Monsanto Technology, Llc Soybean cultivar 94411660
WO2022058327A1 (en) 2020-09-15 2022-03-24 Bayer Aktiengesellschaft Substituted ureas and derivatives as new antifungal agents
US11412692B2 (en) 2020-09-15 2022-08-16 Monsanto Technology Llc Soybean cultivar 90290600
US11343987B2 (en) 2020-09-15 2022-05-31 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 90401320
US11310989B2 (en) 2020-09-15 2022-04-26 Monsanto Technology Llc Soybean cultivar 94071660
US11363788B2 (en) 2020-09-22 2022-06-21 M.S. Technologies, L.L.C Soybean cultivar 94120010
US11357203B2 (en) 2020-09-22 2022-06-14 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 93250796
US11445687B2 (en) 2020-09-22 2022-09-20 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 98240804
US11357204B2 (en) 2020-09-22 2022-06-14 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 98110801
US11363784B2 (en) 2020-09-22 2022-06-21 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 93050528
US11363781B2 (en) 2020-09-22 2022-06-21 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 94220186
US11363786B2 (en) 2020-09-22 2022-06-21 M. S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 98220823
US11439112B2 (en) 2020-09-22 2022-09-13 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 91110044
US11363783B2 (en) 2020-09-22 2022-06-21 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 96050446
US11432511B2 (en) 2020-09-22 2022-09-06 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 91410186
US11425880B2 (en) 2020-09-22 2022-08-30 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 98020803
US11382300B2 (en) 2020-09-22 2022-07-12 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 98020446
US11432512B2 (en) 2020-09-22 2022-09-06 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 90210769
US11350598B2 (en) 2020-09-22 2022-06-07 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 97220468
US11363787B2 (en) 2020-09-22 2022-06-21 M.S. Technologies, L.L.C Soybean cultivar 99250985
US11350599B2 (en) 2020-09-22 2022-06-07 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 93410924
US11357202B2 (en) 2020-09-22 2022-06-14 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 92440084
US11363782B2 (en) 2020-09-22 2022-06-21 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 98310446
US11445686B2 (en) 2020-09-22 2022-09-20 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 95040446
US11363785B2 (en) 2020-09-22 2022-06-21 M.S. Technologies, L.L.C Soybean cultivar 94040525
EP3974414A1 (de) 2020-09-25 2022-03-30 Bayer AG 5-amino substituierte pyrazole und triazole als schädlingsbekämpfungsmittel
US11477960B2 (en) 2020-11-02 2022-10-25 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01077912
US20220132778A1 (en) * 2020-11-02 2022-05-05 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01083668
US11510382B2 (en) 2020-11-02 2022-11-29 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01078845
US11612128B2 (en) 2020-11-02 2023-03-28 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01083666
US11547075B2 (en) 2020-11-02 2023-01-10 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01078822
US11284593B1 (en) 2020-11-05 2022-03-29 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01083687
US11343993B2 (en) 2020-11-05 2022-05-31 Monsanto Technology, Llc Soybean variety 01083650
US20220132790A1 (en) * 2020-11-05 2022-05-05 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01083698
US20220132791A1 (en) * 2020-11-05 2022-05-05 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01083697
US11357205B2 (en) 2020-11-05 2022-06-14 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01083631
US11350600B2 (en) 2020-11-05 2022-06-07 Monsanto Technology, Llc Soybean variety 01083699
US11445690B2 (en) 2020-11-06 2022-09-20 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01083639
US11547077B2 (en) 2020-11-06 2023-01-10 Monsanto Technology, Llc Soybean variety 01083688
US11533884B2 (en) 2020-11-06 2022-12-27 Monsanto Technology, Llc Soybean variety 01083660
US20220142079A1 (en) * 2020-11-06 2022-05-12 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01083633
US11457600B2 (en) 2020-11-06 2022-10-04 Monsanto Technology, Llc Soybean variety 01083646
US11464195B2 (en) 2020-11-06 2022-10-11 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01083654
US11528879B2 (en) 2020-11-06 2022-12-20 Monsanto Technology, Llc Soybean variety 01083659
US11553671B2 (en) 2020-11-06 2023-01-17 Monsanto Technology, Llc Soybean variety 01083653
US20220142102A1 (en) * 2020-11-06 2022-05-12 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01083640
US20220142099A1 (en) * 2020-11-06 2022-05-12 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01083652
US11343994B1 (en) 2020-11-06 2022-05-31 Monsanto Technology, Llc Soybean variety 01083655
US20220142078A1 (en) * 2020-11-06 2022-05-12 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01083645
US11343995B1 (en) 2020-11-06 2022-05-31 Monsanto Technology, Llc Soybean variety 01083647
US11457601B2 (en) 2020-11-06 2022-10-04 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01083638
US11484000B2 (en) 2020-11-06 2022-11-01 Monsanto Technology, Llc Soybean variety 01083661
EP3915971A1 (en) 2020-12-16 2021-12-01 Bayer Aktiengesellschaft Phenyl-s(o)n-phenylamidines and the use thereof as fungicides
WO2022129190A1 (en) 2020-12-18 2022-06-23 Bayer Aktiengesellschaft (hetero)aryl substituted 1,2,4-oxadiazoles as fungicides
KR20230121792A (ko) 2020-12-18 2023-08-21 바이엘 악티엔게젤샤프트 작물에서 저항성 식물병원성 진균을 방제하기 위한dhodh 억제제의 용도
WO2022129188A1 (en) 2020-12-18 2022-06-23 Bayer Aktiengesellschaft 1,2,4-oxadiazol-3-yl pyrimidines as fungicides
WO2022129196A1 (en) 2020-12-18 2022-06-23 Bayer Aktiengesellschaft Heterobicycle substituted 1,2,4-oxadiazoles as fungicides
EP4036083A1 (de) 2021-02-02 2022-08-03 Bayer Aktiengesellschaft 5-oxy substituierte hetereozyklen, als schädlingsbekämpfungsmittel
BR112023015909A2 (pt) 2021-02-11 2023-11-21 Monsanto Technology Llc Métodos e composições para modificar níveis de citocinina oxidase em plantas
EP4298118A1 (en) 2021-02-25 2024-01-03 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for modifying root architecture in plants
BR112023019400A2 (pt) 2021-03-30 2023-12-05 Bayer Ag 3-(hetero)aril-5-clorodifluorometil-1,2,4-oxadiazol como fungicida
BR112023019788A2 (pt) 2021-03-30 2023-11-07 Bayer Ag 3-(hetero)aril-5-clorodifluorometil-1,2,4-oxadiazol como fungicida
JP2024516278A (ja) 2021-05-06 2024-04-12 バイエル・アクチエンゲゼルシヤフト アルキルアミド置換環付加イミダゾール類及び殺虫剤としてのそれらの使用
TW202311258A (zh) 2021-05-12 2023-03-16 德商拜耳廠股份有限公司 作為除蟲劑之經2-(雜)芳基取代之稠合雜環衍生物
CN117897050A (zh) 2021-06-17 2024-04-16 成对植物服务股份有限公司 大豆中生长调节因子家族转录因子的修饰
UY39827A (es) 2021-06-24 2023-01-31 Pairwise Plants Services Inc Modificación de genes de ubiquitina ligasa e3 hect para mejorar los rasgos de rendimiento
WO2023278651A1 (en) 2021-07-01 2023-01-05 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for enhancing root system development
JP2024522911A (ja) 2021-07-09 2024-06-21 シンジェンタ クロップ プロテクション アクチェンゲゼルシャフト 除草剤組成物
CN117615651A (zh) 2021-07-09 2024-02-27 先正达农作物保护股份公司 除草组合物
JP2024522913A (ja) 2021-07-09 2024-06-21 シンジェンタ クロップ プロテクション アクチェンゲゼルシャフト 除草剤組成物
EP4366530A1 (en) 2021-07-09 2024-05-15 Syngenta Crop Protection AG Herbicidal compositions
US11771038B2 (en) 2021-08-10 2023-10-03 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 05140125
US11696551B2 (en) 2021-08-10 2023-07-11 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 05320408
US11690343B2 (en) 2021-08-10 2023-07-04 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 02050022
US11771037B2 (en) 2021-08-10 2023-10-03 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 08130343
US11696550B2 (en) 2021-08-10 2023-07-11 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 06130011
US11647717B2 (en) 2021-08-10 2023-05-16 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 03420647
US11696553B2 (en) 2021-08-10 2023-07-11 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 02420133
US11771036B2 (en) 2021-08-10 2023-10-03 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 02050106
US11617332B2 (en) 2021-08-10 2023-04-04 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 03070412
US11690344B2 (en) 2021-08-10 2023-07-04 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 00250653
US11666030B2 (en) 2021-08-10 2023-06-06 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 08320812
US11632930B2 (en) 2021-08-10 2023-04-25 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 04290138
US11612129B2 (en) 2021-08-10 2023-03-28 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 06310200
US11659805B2 (en) 2021-08-10 2023-05-30 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 01160658
US11672228B2 (en) 2021-08-10 2023-06-13 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 05150826
US11678633B2 (en) 2021-08-10 2023-06-20 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 05330031
US11696552B2 (en) 2021-08-10 2023-07-11 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 06040447
US11696554B2 (en) 2021-08-10 2023-07-11 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 04190907
US11627715B2 (en) 2021-08-11 2023-04-18 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 04040309
US11553681B1 (en) 2021-08-11 2023-01-17 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 07040726
US11627716B2 (en) 2021-08-11 2023-04-18 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 04040632
US11612130B2 (en) 2021-08-11 2023-03-28 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 02430132
US11707041B2 (en) 2021-08-11 2023-07-25 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 09110424
US11559027B1 (en) 2021-08-11 2023-01-24 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 07030206
US11553680B1 (en) 2021-08-11 2023-01-17 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 00220803
US11553679B1 (en) 2021-08-11 2023-01-17 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 06330352
US20230078990A1 (en) 2021-08-12 2023-03-16 Pairwise Plants Services, Inc. Modification of brassinosteroid receptor genes to improve yield traits
CN118102874A (zh) 2021-08-13 2024-05-28 拜耳公司 活性化合物组合以及包含它们的杀真菌剂组合物
AR126798A1 (es) 2021-08-17 2023-11-15 Pairwise Plants Services Inc Métodos y composiciones para modificar genes de histidina quinasa receptores de citoquinina en plantas
US20230074808A1 (en) * 2021-08-24 2023-03-09 Monsanto Technology Llc Soybean cultivar 04120326
US11647720B2 (en) 2021-08-24 2023-05-16 Monsanto Technology Llc Soybean cultivar 01130157
US20230076460A1 (en) * 2021-08-24 2023-03-09 Monsanto Technology Llc Soybean cultivar 00180217
US11641837B2 (en) 2021-08-24 2023-05-09 Monsanto Technology Llc Soybean cultivar 02340134
US11647723B2 (en) 2021-08-24 2023-05-16 Monsanto Technology Llc Soybean cultivar 07060434
US11647722B2 (en) 2021-08-24 2023-05-16 Monsanto Technology Llc Soybean cultivar 02140434
US11641838B2 (en) 2021-08-24 2023-05-09 Monsanto Technology Llc Soybean cultivar 04130514
US11696556B2 (en) 2021-08-24 2023-07-11 Monsanto Technology, Llc Soybean cultivar 07080746
US11647724B2 (en) 2021-08-24 2023-05-16 Monsanto Technology Llc Soybean cultivar 03230124
US11678636B2 (en) 2021-08-24 2023-06-20 Monsanto Technology, Llc Soybean cultivar 04070428
US20230060246A1 (en) * 2021-08-24 2023-03-02 Monsanto Technology Llc Soybean cultivar 01150116
US11647721B2 (en) 2021-08-24 2023-05-16 Monsanto Technology Llc Soybean cultivar 02330517
US11666031B2 (en) 2021-08-24 2023-06-06 Monsanto Technology Llc Soybean cultivar 05140102
US20230074253A1 (en) * 2021-08-24 2023-03-09 Monsanto Technology Llc Soybean cultivar 05170307
US11678635B2 (en) 2021-08-24 2023-06-20 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 01160922
EP4392419A1 (en) 2021-08-25 2024-07-03 Bayer Aktiengesellschaft Novel pyrazinyl-triazole compounds as pesticides
US20230074699A1 (en) 2021-08-30 2023-03-09 Pairwise Plants Services, Inc. Modification of ubiquitin binding peptidase genes in plants for yield trait improvement
US11716947B2 (en) 2021-08-31 2023-08-08 Monsanto Technology, Llc Soybean cultivar 07030013
US11647726B2 (en) 2021-08-31 2023-05-16 Monsanto Technology Llc Soybean cultivar 04070902
US11800847B2 (en) 2021-08-31 2023-10-31 Monsanto Technology, Llc Soybean cultivar 05050112
US11856914B2 (en) 2021-08-31 2024-01-02 Monsanto Technology, Llc Soybean cultivar 01140108
US11696557B2 (en) 2021-08-31 2023-07-11 Monsanto Technology, Llc Soybean cultivar 04060955
US11696558B2 (en) 2021-08-31 2023-07-11 Monsanto Technology, Llc Soybean cultivar 02021411
US11647727B2 (en) 2021-08-31 2023-05-16 Monsanto Technology Llc Soybean cultivar 04120446
US11647725B2 (en) 2021-08-31 2023-05-16 Monsanto Technology Llc Soybean cultivar 07160416
US11672230B2 (en) 2021-08-31 2023-06-13 Monsanto Technology, Llc Soybean cultivar 03260108
US11700826B2 (en) 2021-08-31 2023-07-18 Monsanto Technology, Llc Soybean cultivar 02410315
US11700827B2 (en) 2021-08-31 2023-07-18 Monsanto Technology, Llc Soybean cultivar 07220837
US11672229B2 (en) 2021-08-31 2023-06-13 Monsanto Technology, Llc Soybean cultivar 08180710
US11700825B2 (en) 2021-08-31 2023-07-18 Monsanto Technology, Llc Soybean cultivar 06170324
EP4144739A1 (de) 2021-09-02 2023-03-08 Bayer Aktiengesellschaft Anellierte pyrazole als schädlingsbekämpfungsmittel
AR126938A1 (es) 2021-09-02 2023-11-29 Pairwise Plants Services Inc Métodos y composiciones para mejorar la arquitectura de las plantas y los rasgos de rendimiento
AU2022352997A1 (en) 2021-09-21 2024-04-04 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for reducing pod shatter in canola
US20230094862A1 (en) * 2021-09-28 2023-03-30 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01083679
US20230102442A1 (en) * 2021-09-28 2023-03-30 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01091553
US11985949B2 (en) 2021-09-28 2024-05-21 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01091555
US20230093898A1 (en) * 2021-09-28 2023-03-30 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01091554
US20230102917A1 (en) * 2021-09-28 2023-03-30 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01083685
US11917968B2 (en) 2021-09-28 2024-03-05 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01083684
US11917971B2 (en) 2021-09-29 2024-03-05 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01091703
US11744216B2 (en) 2021-09-29 2023-09-05 Monsanto Technology, Llc Soybean variety 01091693
US11917970B2 (en) 2021-09-29 2024-03-05 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01091697
US20230099185A1 (en) * 2021-09-29 2023-03-30 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01091713
US20230116212A1 (en) * 2021-09-29 2023-04-13 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01091606
US11925161B2 (en) 2021-09-29 2024-03-12 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01091628
US11839192B2 (en) 2021-09-29 2023-12-12 Monsanto Technology, Llc Soybean variety 01091705
US11758869B2 (en) 2021-09-29 2023-09-19 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean variety 01091607
US11716958B2 (en) 2021-09-29 2023-08-08 Monsanto Technology, Llc Soybean variety 01091691
US20230101351A1 (en) * 2021-09-29 2023-03-30 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01091573
US20230098816A1 (en) * 2021-09-29 2023-03-30 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01091694
US20230094314A1 (en) * 2021-09-29 2023-03-30 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01091605
US11716957B2 (en) 2021-09-29 2023-08-08 Monsanto Technology, Llc Soybean variety 01091574
US11930768B2 (en) 2021-09-29 2024-03-19 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01091702
US20230100011A1 (en) * 2021-09-29 2023-03-30 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01091695
US11744217B2 (en) 2021-09-29 2023-09-05 Monsanto Technology, Llc Soybean variety 01091711
US20230101458A1 (en) * 2021-09-30 2023-03-30 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01091744
US11751529B2 (en) 2021-09-30 2023-09-12 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean variety 01091734
US11930769B2 (en) 2021-09-30 2024-03-19 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01091763
US12004475B2 (en) 2021-09-30 2024-06-11 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01091767
US20230121295A1 (en) * 2021-09-30 2023-04-20 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01091756
US11744218B2 (en) 2021-09-30 2023-09-05 Monsanto Technology, Llc Soybean variety 01091749
US12004474B2 (en) 2021-09-30 2024-06-11 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01091721
US20230105612A1 (en) * 2021-10-01 2023-04-06 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01091790
US11917973B2 (en) 2021-10-01 2024-03-05 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01091785
US11917972B2 (en) 2021-10-01 2024-03-05 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01091777
US20230103672A1 (en) * 2021-10-01 2023-04-06 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01091739
US11963509B2 (en) 2021-10-01 2024-04-23 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01091775
US20230108697A1 (en) * 2021-10-01 2023-04-06 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01091782
US11930770B2 (en) 2021-10-01 2024-03-19 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01091765
US11917974B2 (en) 2021-10-04 2024-03-05 Monsanto Technology, Llc Soybean variety 01091792
US20230107232A1 (en) * 2021-10-04 2023-04-06 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01091804
US20230124096A1 (en) * 2021-10-04 2023-04-20 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01091800
US11839193B2 (en) 2021-10-04 2023-12-12 Monsanto Technology, Llc Soybean variety 01091798
US20230108968A1 (en) 2021-10-04 2023-04-06 Pairwise Plants Services, Inc. Methods for improving floret fertility and seed yield
US20230107224A1 (en) * 2021-10-04 2023-04-06 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01091811
US11903358B2 (en) 2021-10-04 2024-02-20 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01091805
US20230103934A1 (en) * 2021-10-04 2023-04-06 Monsanto Technology Llc Soybean variety 01091799
US11832578B2 (en) 2021-10-04 2023-12-05 Monsanto Technology, Llc Soybean variety 01091795
US20230116819A1 (en) 2021-10-07 2023-04-13 Pairwise Plants Services, Inc. Methods for improving floret fertility and seed yield
WO2023078915A1 (en) 2021-11-03 2023-05-11 Bayer Aktiengesellschaft Bis(hetero)aryl thioether (thio)amides as fungicidal compounds
US12010971B2 (en) 2021-11-19 2024-06-18 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 05170605
WO2023099445A1 (en) 2021-11-30 2023-06-08 Bayer Aktiengesellschaft Bis(hetero)aryl thioether oxadiazines as fungicidal compounds
AR127904A1 (es) 2021-12-09 2024-03-06 Pairwise Plants Services Inc Métodos para mejorar la fertilidad de floretes y el rendimiento de semillas
AR128372A1 (es) 2022-01-31 2024-04-24 Pairwise Plants Services Inc Supresión de la respuesta de evitación de la sombra en las plantas
WO2023148036A1 (en) 2022-02-01 2023-08-10 Globachem Nv Methods and compositions for controlling pests in soybean
WO2023148028A1 (en) 2022-02-01 2023-08-10 Globachem Nv Methods and compositions for controlling pests
WO2023168217A1 (en) 2022-03-02 2023-09-07 Pairwise Plants Services, Inc. Modification of brassinosteroid receptor genes to improve yield traits
WO2023192838A1 (en) 2022-03-31 2023-10-05 Pairwise Plants Services, Inc. Early flowering rosaceae plants with improved characteristics
US20230357789A1 (en) 2022-04-07 2023-11-09 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for improving resistance to fusarium head blight
WO2023205714A1 (en) 2022-04-21 2023-10-26 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for improving yield traits
WO2023215704A1 (en) 2022-05-02 2023-11-09 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for enhancing yield and disease resistance
WO2023213626A1 (en) 2022-05-03 2023-11-09 Bayer Aktiengesellschaft Use of (5s)-3-[3-(3-chloro-2-fluorophenoxy)-6-methylpyridazin-4-yl]-5-(2-chloro-4-methylbenzyl)-5,6-dihydro-4h-1,2,4-oxadiazine for controlling unwanted microorganisms
WO2023213670A1 (en) 2022-05-03 2023-11-09 Bayer Aktiengesellschaft Crystalline forms of (5s)-3-[3-(3-chloro-2-fluorophenoxy)-6-methylpyridazin-4-yl]-5-(2-chloro-4-methylbenzyl)-5,6-dihydro-4h-1,2,4-oxadiazine
WO2023215809A1 (en) 2022-05-05 2023-11-09 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for modifying root architecture and/or improving plant yield traits
US20230416771A1 (en) 2022-06-27 2023-12-28 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for modifying shade avoidance in plants
WO2024006791A1 (en) 2022-06-29 2024-01-04 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for controlling meristem size for crop improvement
WO2024006792A1 (en) 2022-06-29 2024-01-04 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for controlling meristem size for crop improvement
WO2024018016A1 (en) 2022-07-21 2024-01-25 Syngenta Crop Protection Ag Crystalline forms of 1,2,4-oxadiazole fungicides
US20240043857A1 (en) 2022-08-04 2024-02-08 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for improving yield traits
US20240060081A1 (en) 2022-08-11 2024-02-22 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for controlling meristem size for crop improvement
WO2024033374A1 (en) 2022-08-11 2024-02-15 Syngenta Crop Protection Ag Novel arylcarboxamide or arylthioamide compounds
US20240090466A1 (en) 2022-09-08 2024-03-21 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for improving yield characteristics in plants
WO2024068518A1 (en) 2022-09-28 2024-04-04 Bayer Aktiengesellschaft 3-heteroaryl-5-chlorodifluoromethyl-1,2,4-oxadiazole as fungicide
GB202214203D0 (en) 2022-09-28 2022-11-09 Syngenta Crop Protection Ag Fungicidal compositions
EP4295688A1 (en) 2022-09-28 2023-12-27 Bayer Aktiengesellschaft Active compound combination
GB202214202D0 (en) 2022-09-28 2022-11-09 Syngenta Crop Protection Ag Agricultural methods
WO2024068517A1 (en) 2022-09-28 2024-04-04 Bayer Aktiengesellschaft 3-(hetero)aryl-5-chlorodifluoromethyl-1,2,4-oxadiazole as fungicide
WO2024068519A1 (en) 2022-09-28 2024-04-04 Bayer Aktiengesellschaft 3-(hetero)aryl-5-chlorodifluoromethyl-1,2,4-oxadiazole as fungicide
WO2024068520A1 (en) 2022-09-28 2024-04-04 Bayer Aktiengesellschaft 3-(hetero)aryl-5-chlorodifluoromethyl-1,2,4-oxadiazole as fungicide
WO2024100069A1 (en) 2022-11-08 2024-05-16 Syngenta Crop Protection Ag Microbiocidal pyridine derivatives
EP4385326A1 (en) 2022-12-15 2024-06-19 Kimitec Biogorup Biopesticide composition and method for controlling and treating broad spectrum of pests and diseases in plants
CN116640880B (zh) * 2023-07-24 2023-09-22 捷康生物科技(海南)有限公司 转基因大豆事件jk1001-1及其检测方法

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2110929C1 (ru) * 1995-09-20 1998-05-20 Научно-Производственная Ассоциация "Одесская Биотехнология" Способ переработки соевых бобов в пищевой продукт
RU2002116229A (ru) * 1999-11-18 2004-01-20 Байер Акциенгезелльшафт (De) Синергетически гербицидные комбинации активных веществ
US20060282915A1 (en) * 2005-05-27 2006-12-14 Monsanto Technology Llc Soybean event MON89788 and methods for detection thereof
US20080119361A1 (en) * 2006-06-06 2008-05-22 Feng Paul C C Methods for weed control
US20090208634A1 (en) * 2008-02-20 2009-08-20 Schultze Dennis L Soybean Cultivar 26034631

Family Cites Families (1029)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2673643B1 (fr) * 1991-03-05 1993-05-21 Rhone Poulenc Agrochimie Peptide de transit pour l'insertion d'un gene etranger dans un gene vegetal et plantes transformees en utilisant ce peptide.
US5846717A (en) 1996-01-24 1998-12-08 Third Wave Technologies, Inc. Detection of nucleic acid sequences by invader-directed cleavage
KR100388121B1 (ko) 1993-06-25 2003-12-06 바이엘 크롭사이언스 소시에떼아노님 식물의형질전환에사용될수있는키메라유전자내의터미네이터부위로서작용할수있는분리된dna서열
FR2736926B1 (fr) * 1995-07-19 1997-08-22 Rhone Poulenc Agrochimie 5-enol pyruvylshikimate-3-phosphate synthase mutee, gene codant pour cette proteine et plantes transformees contenant ce gene
US5985557A (en) 1996-01-24 1999-11-16 Third Wave Technologies, Inc. Invasive cleavage of nucleic acids
US5786144A (en) 1996-05-13 1998-07-28 American Museum Of Natural History Method and compositions for identification of species origin of caviar
FR2751347B1 (fr) 1996-07-16 2001-12-07 Rhone Poulenc Agrochimie Gene chimere a plusieurs genes de tolerance herbicide, cellule vegetale et plante tolerantes a plusieurs herbicides
US6376754B1 (en) 1997-03-07 2002-04-23 Asgrow Seed Company Plants having resistance to multiple herbicides and its use
US6245968B1 (en) * 1997-11-07 2001-06-12 Aventis Cropscience S.A. Mutated hydroxyphenylpyruvate dioxygenase, DNA sequence and isolation of plants which contain such a gene and which are tolerant to herbicides
FR2770854B1 (fr) 1997-11-07 2001-11-30 Rhone Poulenc Agrochimie Sequence adn d'un gene de l'hydroxy-phenyl pyruvate dioxygenase et obtention de plantes contenant un tel gene, tolerantes aux herbicides
US20090093620A1 (en) * 2000-09-05 2009-04-09 David Kovalic Annotated Plant Genes
US6235976B1 (en) 1999-01-29 2001-05-22 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 94B53
US6143955A (en) 1999-01-29 2000-11-07 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 93B07
US6229074B1 (en) 1999-01-29 2001-05-08 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 93B65
US6229073B1 (en) 1999-01-29 2001-05-08 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 95B32
US6124526A (en) 1999-01-29 2000-09-26 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92B74
US6147283A (en) 1999-01-29 2000-11-14 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 95B53
US6284950B1 (en) 1999-01-29 2001-09-04 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92B24
US6140557A (en) 1999-01-29 2000-10-31 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 94B22
US6143956A (en) 1999-01-29 2000-11-07 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 93B84
US6153816A (en) 1999-01-29 2000-11-28 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 93B35
US20090087878A9 (en) * 1999-05-06 2009-04-02 La Rosa Thomas J Nucleic acid molecules associated with plants
US7365185B2 (en) 2000-07-19 2008-04-29 Monsanto Technology Llc Genomic plant sequences and uses thereof
DE60022665T2 (de) 1999-09-25 2006-06-22 Coley Pharmaceutical Gmbh Immunstimulierende nukeinsäuren
US6323401B1 (en) 2000-02-09 2001-11-27 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 93B08
US6316700B1 (en) 2000-02-09 2001-11-13 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 90B73
US6369301B1 (en) 2000-02-09 2002-04-09 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 96B21
US6326529B1 (en) 2000-02-09 2001-12-04 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92B63
US6323402B1 (en) 2000-02-09 2001-11-27 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 93B46
US6362400B1 (en) 2000-02-09 2002-03-26 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92B75
US6307131B1 (en) 2000-02-09 2001-10-23 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 93B66
US6323398B1 (en) 2000-02-09 2001-11-27 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 95B95
US6323400B1 (en) 2000-02-09 2001-11-27 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 97B62
US6323399B1 (en) 2000-02-09 2001-11-27 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92B37
US6320105B1 (en) 2000-02-09 2001-11-20 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 90A07
US6339186B1 (en) 2000-02-09 2002-01-15 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92B56
US6346657B1 (en) 2000-02-09 2002-02-12 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92B62
US6369300B1 (en) 2000-02-09 2002-04-09 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92B36
US6342659B1 (en) 2000-02-09 2002-01-29 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 93B26
US20040181830A1 (en) * 2001-05-07 2004-09-16 Kovalic David K. Nucleic acid molecules and other molecules associated with plants and uses thereof for plant improvement
NZ539223A (en) 2000-05-16 2006-10-27 Childrens Mercy Hospital Single copy genomic hybridization probes and method of generating same
FR2812883B1 (fr) 2000-08-11 2002-10-18 Aventis Cropscience Sa Utilisation d'inhibiteurs d'hppd comme agents de selection dans la transformation de plantes
FR2815969B1 (fr) 2000-10-30 2004-12-10 Aventis Cropscience Sa Plantes tolerantes aux herbicides par contournement de voie metabolique
US6583342B1 (en) 2000-12-22 2003-06-24 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 90B11
US6586659B1 (en) 2000-12-22 2003-07-01 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 91B92
US6605757B1 (en) 2000-12-22 2003-08-12 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 95B96
US6605761B1 (en) 2000-12-22 2003-08-12 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92B38
US6613967B1 (en) 2000-12-22 2003-09-02 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 94B24
US6583343B1 (en) 2000-12-22 2003-06-24 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 91B12
US6613966B1 (en) 2000-12-22 2003-09-02 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 95B97
US6608243B1 (en) 2000-12-22 2003-08-19 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92B95
US6605759B1 (en) 2000-12-22 2003-08-12 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 95B34
US6566589B1 (en) 2000-12-22 2003-05-20 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 93B72
US6573433B1 (en) 2000-12-22 2003-06-03 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 93B67
US6583341B1 (en) 2000-12-22 2003-06-24 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 93B47
US6730829B1 (en) 2000-12-22 2004-05-04 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92B84
US6605756B1 (en) 2000-12-22 2003-08-12 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 97B52
US6613964B1 (en) 2000-12-22 2003-09-02 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 96B51
US6605760B1 (en) 2000-12-22 2003-08-12 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 94B73
US6580018B1 (en) 2000-12-22 2003-06-17 Pioneer Hi-Bred International, Inc Soybean variety 91B33
US6610910B1 (en) 2000-12-22 2003-08-26 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 93B86
US6613965B1 (en) 2000-12-22 2003-09-02 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 94B54
US6605755B1 (en) 2000-12-22 2003-08-12 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92B12
US6605758B1 (en) 2000-12-22 2003-08-12 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 94B23
US6610911B1 (en) 2000-12-22 2003-08-26 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92B76
US6605762B1 (en) 2000-12-22 2003-08-12 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 93B85
US6617499B1 (en) 2000-12-22 2003-09-09 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 93B15
US6727410B1 (en) 2000-12-22 2004-04-27 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 93B87
US6803504B2 (en) 2001-03-23 2004-10-12 Advanta U.S.A., Inc. Soybean variety S02-AP98041-2-333-01
US6632985B2 (en) 2001-03-29 2003-10-14 Advanta Usa, Inc. Soybean variety APA94-31572
US6630620B2 (en) 2001-03-29 2003-10-07 Advanta U.S.A., Inc. Soybean variety AP98041-4-117
US6831209B2 (en) 2001-03-29 2004-12-14 Advanta Usa, Inc. Soybean variety APA95-15294
US20030056251A1 (en) 2001-03-29 2003-03-20 Keith Bilyeu Soybean variety AP98041-1-203
US7189897B2 (en) 2001-03-30 2007-03-13 Dairyland Seed Co., Inc. Soybean cultivar 13946
US20040142325A1 (en) 2001-09-14 2004-07-22 Liat Mintz Methods and systems for annotating biomolecular sequences
US6812384B1 (en) 2002-01-29 2004-11-02 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 90B74
US6818808B1 (en) 2002-01-29 2004-11-16 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 95B43
US6812383B1 (en) 2002-01-29 2004-11-02 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92B47
US6833498B1 (en) 2002-01-29 2004-12-21 Pioneer Ni-Bred International, Inc. Soybean variety 93B36
US6818809B1 (en) 2002-01-29 2004-11-16 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 90B51
US6989475B1 (en) 2002-01-29 2006-01-24 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92B13
US7064250B1 (en) 2002-01-29 2006-06-20 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 94B74
US6815583B1 (en) 2002-01-29 2004-11-09 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 95B42
US6979759B1 (en) 2002-01-29 2005-12-27 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 93B09
US6815584B1 (en) 2002-01-29 2004-11-09 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 91B03
US6989474B1 (en) 2002-01-29 2006-01-24 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 93B68
US6855874B1 (en) 2002-01-29 2005-02-15 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 91B42
US7064251B1 (en) 2002-01-29 2006-06-20 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 94B13
US7314974B2 (en) * 2002-02-21 2008-01-01 Monsanto Technology, Llc Expression of microbial proteins in plants for production of plants with improved properties
US20030182694A1 (en) 2002-03-13 2003-09-25 Keith Bilyeu Soybean variety S02-98041-2-251-01
US20030188348A1 (en) 2002-03-13 2003-10-02 Keith Bilyeu Soybean variety S02-95021-55-240-BA
US6803503B2 (en) 2002-03-13 2004-10-12 Advanta U.S.A., Inc. Soybean variety S02-AP98041-2-262-02
US6762350B2 (en) 2002-04-18 2004-07-13 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0332139
US6723899B2 (en) 2002-04-18 2004-04-20 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0332134
US6762349B2 (en) 2002-04-18 2004-07-13 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0332137
US6720482B2 (en) 2002-04-18 2004-04-13 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0332133
US6730830B2 (en) 2002-04-19 2004-05-04 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0332142
US6730831B2 (en) 2002-04-19 2004-05-04 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S010349
US6720483B2 (en) 2002-04-19 2004-04-13 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0332141
US6849784B2 (en) 2002-04-19 2005-02-01 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S010347
US6777593B2 (en) 2002-04-23 2004-08-17 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0322579
US6919496B2 (en) 2002-04-23 2005-07-19 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0322580
US6774286B2 (en) 2002-04-26 2004-08-10 Stine Seed Farm Inc. Soybean cultivar 031766
US6765131B2 (en) 2002-04-26 2004-07-20 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S010355
US6815582B2 (en) 2002-04-26 2004-11-09 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S010353
US6777595B2 (en) 2002-04-30 2004-08-17 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0332129
US6777594B2 (en) 2002-04-30 2004-08-17 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S010350
US6806402B2 (en) 2002-04-30 2004-10-19 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S010345
US6838598B2 (en) 2002-04-30 2005-01-04 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0332131
US6844487B2 (en) 2002-04-30 2005-01-18 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0332130
US6797862B2 (en) 2002-04-30 2004-09-28 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0332122
US6781037B2 (en) 2002-05-01 2004-08-24 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0332145
US6794562B2 (en) 2002-05-01 2004-09-21 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0332143
US6803505B2 (en) 2002-05-02 2004-10-12 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0332148
US7022898B2 (en) 2002-05-02 2006-04-04 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0332146
US6781038B2 (en) 2002-05-02 2004-08-24 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 1000144
US6774287B2 (en) 2002-05-02 2004-08-10 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0332147
US6924417B2 (en) 2002-05-02 2005-08-02 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0332135
US6960707B2 (en) 2002-05-07 2005-11-01 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S010364
US6803506B2 (en) 2002-05-07 2004-10-12 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S010361
US6781039B2 (en) 2002-05-07 2004-08-24 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S010360
US6806403B2 (en) 2002-05-07 2004-10-19 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S010354
US6903250B2 (en) 2002-05-07 2005-06-07 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S010363
US6803507B2 (en) 2002-05-09 2004-10-12 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 928070
US6835873B2 (en) 2002-05-09 2004-12-28 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0332144
US20030213025A1 (en) 2002-05-09 2003-11-13 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 924861
US6894207B2 (en) 2002-05-09 2005-05-17 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0332149
US20030213026A1 (en) 2002-05-09 2003-11-13 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 924788
US6852912B2 (en) 2002-05-21 2005-02-08 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0322581
US6849785B2 (en) 2002-05-21 2005-02-01 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 93831526
US20030233682A1 (en) 2002-06-13 2003-12-18 Schultze Dennis L. Soybean cultivar 1000126
US6828487B2 (en) 2002-06-13 2004-12-07 Mertec Llc Soybean cultivar 19602310
US6878862B2 (en) 2002-06-13 2005-04-12 Mertec Llc Soybean cultivar 19704120
US6828486B2 (en) 2002-06-13 2004-12-07 Mertec Llc Soybean cultivar 19704230
US6750383B2 (en) 2002-06-20 2004-06-15 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S37-N4
US6838599B2 (en) 2002-06-25 2005-01-04 Mertec Llc Soybean cultivar 19704280
US6870078B2 (en) 2002-06-25 2005-03-22 Mertec Llc Soybean cultivar 19704220
US6828488B2 (en) 2002-06-25 2004-12-07 Mertec Llc Soybean cultivar 19705120
US6831213B2 (en) 2002-06-25 2004-12-14 Mertec Llc Soybean cultivar 19704210
US6974897B2 (en) 2002-06-26 2005-12-13 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 70876922
US6835874B2 (en) 2002-06-26 2004-12-28 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S010344
US6858780B2 (en) 2002-06-26 2005-02-22 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 924496
US7053272B2 (en) 2002-07-11 2006-05-30 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean variety 0007583
US7138570B2 (en) 2002-07-11 2006-11-21 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean variety 0008079
US7241941B1 (en) 2002-07-11 2007-07-10 Monsanto Technology Llc Soybean variety 0137335
US6846973B2 (en) 2002-09-04 2005-01-25 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 92422749
US6849786B2 (en) 2002-09-04 2005-02-01 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0120311
US6914172B2 (en) 2002-09-10 2005-07-05 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean cultivar 0088401
US7276648B2 (en) 2002-09-10 2007-10-02 Monsanto Technology Llc Soybean cultivar SN64195
US6900372B2 (en) 2002-09-10 2005-05-31 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean cultivar SN71173
US20040049814A1 (en) 2002-09-10 2004-03-11 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean cultivar SN83211
US6919497B2 (en) 2002-09-10 2005-07-19 First Line Seeds Ltd. Soybean cultivar SN83544
US6903251B2 (en) 2002-09-10 2005-06-07 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean cultivar 0096008
US6884924B2 (en) 2002-09-10 2005-04-26 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean cultivar SX95512
US6884923B2 (en) 2002-09-10 2005-04-26 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean cultivar 0034754
US6924418B2 (en) 2002-09-12 2005-08-02 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean cultivar SN83366
US6911579B2 (en) 2002-09-12 2005-06-28 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean cultivar 0004747
US7005563B2 (en) 2002-09-12 2006-02-28 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean cultivar SN76208
US6953876B2 (en) 2002-09-12 2005-10-11 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean cultivar 0037357
US6906246B2 (en) 2002-09-12 2005-06-14 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean cultivar 0037370
US6967263B2 (en) 2002-09-13 2005-11-22 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean cultivar SN79525
US6958436B2 (en) 2002-09-13 2005-10-25 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean variety SE90346
US6828489B2 (en) 2002-09-13 2004-12-07 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 924001
US6933423B2 (en) 2002-09-13 2005-08-23 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean cultivar SE73090
US6884925B2 (en) 2002-09-13 2005-04-26 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean cultivar 0053840
US6881879B2 (en) 2002-09-13 2005-04-19 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean cultivar SW90702
US6888048B2 (en) 2002-09-13 2005-05-03 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean cultivar 0149928
US7071388B2 (en) 2002-09-13 2006-07-04 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean cultivar SE71112
US7067723B2 (en) 2002-09-13 2006-06-27 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean cultivar SE73753
US6951973B2 (en) 2002-09-13 2005-10-04 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean cultivar SE90345
US6911578B2 (en) 2002-09-13 2005-06-28 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean cultivar SN79526
US6900373B2 (en) 2002-09-13 2005-05-31 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean cultivar SN83594
US7071387B2 (en) 2002-09-13 2006-07-04 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean cultivar SN83780
US6875908B2 (en) 2002-09-27 2005-04-05 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 926877
US7161065B1 (en) 2002-10-15 2007-01-09 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92B14
US6982365B2 (en) 2002-11-18 2006-01-03 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S56-D7
US7294763B2 (en) 2003-01-23 2007-11-13 Monsanto Technology Llc Soybean variety 0037393
US6927324B2 (en) 2003-01-23 2005-08-09 First Line Seeds, Ltd. Soybean variety 0088414
US7193137B2 (en) 2003-01-23 2007-03-20 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean variety 0037209
US20040148660A1 (en) 2003-01-23 2004-07-29 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean variety 0149926
US7294765B2 (en) 2003-01-27 2007-11-13 Monsanto Technology Llc Soybean variety SE72581
US7189900B2 (en) 2003-01-27 2007-03-13 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean variety SE90076
US7294764B2 (en) 2003-01-27 2007-11-13 Monsanto Technology Llc Soybean variety SD82997
US6835875B1 (en) 2003-01-31 2004-12-28 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 93M41
US6858781B1 (en) 2003-01-31 2005-02-22 Pioneer Hi-Bred International Inc. Soybean variety XB29W03
US6806406B1 (en) 2003-01-31 2004-10-19 Pioneer Hi-Bred International Inc. Soybean variety XB29X03
US6849787B1 (en) 2003-01-31 2005-02-01 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92M80
US6852913B1 (en) 2003-01-31 2005-02-08 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 90M90
US6972352B1 (en) 2003-01-31 2005-12-06 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92M00
US6797866B1 (en) 2003-01-31 2004-09-28 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92M70
US6791016B1 (en) 2003-01-31 2004-09-14 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 93M40
US6797865B1 (en) 2003-01-31 2004-09-28 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 93M60
US6800795B1 (en) 2003-01-31 2004-10-05 Pioneer Hi-Bred International Inc. Soybean variety XB02C03
US6916975B1 (en) 2003-01-31 2005-07-12 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92M10
US6828490B1 (en) 2003-01-31 2004-12-07 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 91M40
US6936752B1 (en) 2003-01-31 2005-08-30 Pioneer Hi-Bred International Inc. Soybean variety XB24H03
US6855876B1 (en) 2003-01-31 2005-02-15 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92M50
US6864408B1 (en) 2003-01-31 2005-03-08 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 94M70
US6864407B1 (en) 2003-01-31 2005-03-08 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB39N03
US6849788B1 (en) 2003-01-31 2005-02-01 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 91M90
US6855875B1 (en) 2003-01-31 2005-02-15 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB33S03
US6797864B1 (en) 2003-01-31 2004-09-28 Pioneer Hi-Bred International, Inc Soybean variety XB15P03
US6844488B1 (en) 2003-01-31 2005-01-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB37J03
US6960708B1 (en) 2003-01-31 2005-11-01 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92M72
US6809236B1 (en) 2003-01-31 2004-10-26 Pioneer Hi-Bred International Inc. Soybean variety XB30W03
US7002061B1 (en) 2003-01-31 2006-02-21 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 94M41
US6806404B1 (en) 2003-01-31 2004-10-19 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB38D03
US6951974B1 (en) 2003-01-31 2005-10-04 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92M30
US6803508B1 (en) 2003-01-31 2004-10-12 Pioneer Hi-Bred International Inc. Soybean variety XB34N03
US6797863B1 (en) 2003-01-31 2004-09-28 Pioneer Hi-Bred International Inc. Soybean variety XB48P03
US6846974B1 (en) 2003-01-31 2005-01-25 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92M31
US6958437B1 (en) 2003-01-31 2005-10-25 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 91M10
US6849789B1 (en) 2003-01-31 2005-02-01 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 93M80
US6815585B1 (en) 2003-01-31 2004-11-09 Pioneer Hi-Bred International Inc. Soybean variety XB05A03
US6806405B1 (en) 2003-01-31 2004-10-19 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB10G03
US6846975B1 (en) 2003-01-31 2005-01-25 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 93M90
US6998518B1 (en) 2003-01-31 2006-02-14 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 91M50
US6858782B1 (en) 2003-01-31 2005-02-22 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92M71
US7193138B2 (en) 2003-02-15 2007-03-20 D&Pl Technology Holding Corporation Soybean cultivar DP 5634 RR
US7880061B2 (en) 2003-02-25 2011-02-01 The Curators Of The University Of Missouri Soybean variety SN97-6946
US6911581B1 (en) 2003-02-26 2005-06-28 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0491723
US6919498B2 (en) 2003-02-26 2005-07-19 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0491720
US6914173B2 (en) 2003-02-26 2005-07-05 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0491721
US7057094B2 (en) 2003-02-26 2006-06-06 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0491722
US7038114B2 (en) 2003-02-26 2006-05-02 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0491716
US7057092B2 (en) 2003-02-26 2006-06-06 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0491714
US7057093B2 (en) 2003-02-26 2006-06-06 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0491724
US7060877B2 (en) 2003-02-26 2006-06-13 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0491713
US6861579B2 (en) 2003-02-26 2005-03-01 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0491711
US6911580B2 (en) 2003-02-26 2005-06-28 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0491719
US6936753B2 (en) 2003-02-26 2005-08-30 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0487682
US6965061B2 (en) 2003-02-28 2005-11-15 D&Pl Technology Holding Company, Llc Soybean cultivar 4181001
US7078594B1 (en) 2003-03-03 2006-07-18 Garst Seed Company Soybean variety S03-95368-N98-52902
US6909033B1 (en) 2003-03-03 2005-06-21 Advanta U.S.A., Inc. Soybean variety S03-95341-A98-60618
US7026531B1 (en) 2003-03-03 2006-04-11 Garst Seed Company Soybean variety S03-95021-55-138-AB
US6909034B2 (en) 2003-03-14 2005-06-21 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 954011
US7038115B2 (en) 2003-03-14 2006-05-02 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 010022
US6984775B2 (en) 2003-04-02 2006-01-10 Schillinger Seed, Inc. Soybean cultivar 13873
US7135628B2 (en) 2003-04-07 2006-11-14 Mertec Llc Soybean cultivar SO20011
US7041878B2 (en) 2003-04-07 2006-05-09 Mertec Llc Soybean cultivar 0491732
US6933424B2 (en) 2003-04-07 2005-08-23 Mertec Llc Soybean cultivar 0491738
US7109398B2 (en) 2003-04-07 2006-09-19 Mertec Llc Soybean cultivar 0491730
US6909035B2 (en) 2003-04-07 2005-06-21 Mertec Llc Soybean cultivar SO22204
US6911582B2 (en) 2003-04-07 2005-06-28 Mertec Llc Soybean cultivar 0491733
US6977326B2 (en) 2003-04-07 2005-12-20 Mertec Llc Soybean cultivar SO22206
US7166773B2 (en) 2003-04-07 2007-01-23 Mertec Llc Soybean cultivar 0491729
US6911583B2 (en) 2003-04-07 2005-06-28 Mertec Llc Soybean cultivar 0491731
US6900374B2 (en) 2003-04-07 2005-05-31 Mertec Llc Soybean cultivar 0491739
US6891087B2 (en) 2003-04-10 2005-05-10 D&Pl Technology Holding Corporation Soybean cultivar 1465003
US6903252B2 (en) 2003-04-10 2005-06-07 D&Pl Technology Holding Company, Llc Soybean cultivar 3186004
US7161066B2 (en) 2003-04-10 2007-01-09 D&Pl Technology Holding Company Soybean cultivar 7085005
US6884926B2 (en) 2003-04-14 2005-04-26 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0487686
US6906247B2 (en) 2003-04-14 2005-06-14 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 94106224
US6781040B1 (en) 2003-04-14 2004-08-24 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 922013
US6815587B2 (en) 2003-04-14 2004-11-09 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0491726
US6815588B2 (en) 2003-04-14 2004-11-09 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 92440927
US6809237B1 (en) 2003-04-14 2004-10-26 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0491728
US6815589B2 (en) 2003-04-14 2004-11-09 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0487685
US7041879B2 (en) 2003-04-14 2006-05-09 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar SO22215
US6815586B2 (en) 2003-04-14 2004-11-09 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 92478609
US7074988B2 (en) 2003-04-14 2006-07-11 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 94137321
US6903253B2 (en) 2003-04-14 2005-06-07 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 94143901
US6870079B2 (en) 2003-04-14 2005-03-22 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar SO22214
US6858783B2 (en) 2003-04-14 2005-02-22 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0491727
US6911584B2 (en) 2003-04-19 2005-06-28 Schillinger Seed, Inc. Soybean cultivar 02932
US7045686B2 (en) 2003-04-30 2006-05-16 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 907012
US6914174B2 (en) 2003-04-30 2005-07-05 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar SO22208
US7060878B2 (en) 2003-04-30 2006-06-13 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar SO22207
US6936754B2 (en) 2003-04-30 2005-08-30 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0491725
US6972353B2 (en) 2003-05-01 2005-12-06 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0491737
US6911585B2 (en) 2003-05-01 2005-06-28 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar SO22212
US6906248B2 (en) 2003-05-01 2005-06-14 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar SO22211
US7074989B2 (en) 2003-05-01 2006-07-11 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar SO22210
US6858784B2 (en) 2003-05-01 2005-02-22 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 99271316
US7057095B2 (en) 2003-05-01 2006-06-06 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar SO22213
US7034209B2 (en) 2003-05-20 2006-04-25 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0491718
US7034210B2 (en) 2003-05-20 2006-04-25 Stine Seed Farms, Inc. Soybean cultivar SO22220
US7049494B2 (en) 2003-05-20 2006-05-23 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0491717
US7041880B2 (en) 2003-05-20 2006-05-09 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0491712
US7057096B2 (en) 2003-05-20 2006-06-06 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0487681
US7126046B2 (en) 2003-05-20 2006-10-24 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0491715
US7081569B2 (en) 2003-06-06 2006-07-25 Soygenetics, Llc Soybean cultivar SG1120RR
US7161067B2 (en) 2003-06-26 2007-01-09 D&Pl Technology Holding Company Soybean cultivar 6190006
US7176357B2 (en) 2004-07-08 2007-02-13 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 90362421
DE20310818U1 (de) 2003-07-15 2003-09-18 Wanzl Metallwarenfabrik Kg Schwenktüre zum Verschließen eines Personendurchganges
US7109399B2 (en) 2003-07-22 2006-09-19 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0491735
US7119258B2 (en) 2003-07-22 2006-10-10 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar SO22218
US7071389B2 (en) 2003-08-29 2006-07-04 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S030151
US7071390B2 (en) 2003-08-29 2006-07-04 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S022219
US6888049B2 (en) 2003-08-29 2005-05-03 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S022209
US7119259B2 (en) 2003-08-29 2006-10-10 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S022217
US7041881B2 (en) 2003-09-26 2006-05-09 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S030150
US6900375B2 (en) 2003-11-01 2005-05-31 Soygenetics, Llc Soybean cultivar SG1330NRR
US7157622B2 (en) 2003-11-01 2007-01-02 Soygenetics, Llc Soybean cultivar SG1431RR
US6979760B2 (en) 2003-11-24 2005-12-27 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S030010
US7102061B2 (en) 2003-11-24 2006-09-05 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S020030
US7078595B2 (en) 2003-12-31 2006-07-18 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S030156
US7129399B2 (en) 2003-12-31 2006-10-31 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S030158
US7084324B2 (en) 2003-12-31 2006-08-01 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S030155
US7087815B2 (en) 2003-12-31 2006-08-08 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S030157
US6900376B1 (en) 2003-12-31 2005-05-31 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S030154
US7098384B2 (en) 2003-12-31 2006-08-29 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S030161
US6979761B2 (en) 2003-12-31 2005-12-27 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S030159
US6969787B2 (en) 2003-12-31 2005-11-29 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S030160
US7173167B2 (en) 2004-01-20 2007-02-06 Mertec Llc Soybean cultivar S030153
US7164060B2 (en) 2004-01-23 2007-01-16 Soygenetics, Llc Soybean cultivar SG5030NRR
US7196248B2 (en) 2004-01-23 2007-03-27 Soygenetics, Llc Soybean cultivar SG5322NRR
US7202399B2 (en) 2004-01-23 2007-04-10 Soygenetics, Llc Soybean cultivar SG4911NRR
US7015374B2 (en) 2004-01-27 2006-03-21 Mertec Llc Soybean cultivar 0509237
US7053274B2 (en) 2004-01-27 2006-05-30 Mertec Llc Soybean cultivar 0509236
US7053273B2 (en) 2004-01-27 2006-05-30 Mertec Llc Soybean cultivar 0509235
US20040199959A1 (en) 2004-01-30 2004-10-07 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB42X04
US7176356B2 (en) 2004-01-30 2007-02-13 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB19U04
US20040181832A1 (en) 2004-01-30 2004-09-16 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB007C04
US20040172700A1 (en) 2004-01-30 2004-09-02 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB29A04
US20040172668A1 (en) 2004-01-30 2004-09-02 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB49K04
US20040177417A1 (en) 2004-01-30 2004-09-09 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB29K04
US20040216192A1 (en) 2004-01-30 2004-10-28 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB43V04
US7211714B2 (en) 2004-01-30 2007-05-01 Pioneer Hi-Bred International, Inc Soybean variety 96M20
US7034211B2 (en) 2004-01-30 2006-04-25 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB34D04
US7276649B2 (en) 2004-01-30 2007-10-02 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB44D04
US7022899B2 (en) 2004-01-30 2006-04-04 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB53J04
US7164062B2 (en) 2004-01-30 2007-01-16 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB09J04
US20040177406A1 (en) 2004-01-30 2004-09-09 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB31R04
US20040231017A1 (en) 2004-01-30 2004-11-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB41U04
US6992238B2 (en) 2004-01-30 2006-01-31 Pioneer Hi-Bred International Inc. Soybean variety XB11F04
US20040172706A1 (en) 2004-01-30 2004-09-02 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB02F04
US20040177418A1 (en) 2004-01-30 2004-09-09 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB29L04
US20040177411A1 (en) 2004-01-30 2004-09-09 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB08L04
US20040205864A1 (en) 2004-01-30 2004-10-14 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB27P04
US7019198B2 (en) 2004-01-30 2006-03-28 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB35L04
US20040177413A1 (en) 2004-01-30 2004-09-09 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB35Q04
US7271319B2 (en) 2004-01-30 2007-09-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB39J04
US7053275B2 (en) 2004-01-30 2006-05-30 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB10L04
US20040177408A1 (en) 2004-01-30 2004-09-09 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB31T04
US20040172699A1 (en) 2004-01-30 2004-09-02 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB35P04
US7183460B2 (en) 2004-01-30 2007-02-27 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB16Q04
US20040177415A1 (en) 2004-01-30 2004-09-09 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB40Z04
US6967264B2 (en) 2004-01-30 2005-11-22 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB32Y04
US20040177420A1 (en) 2004-01-30 2004-09-09 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB43W04
US20040177410A1 (en) 2004-01-30 2004-09-09 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB18Q04
US6953877B2 (en) 2004-01-30 2005-10-11 Pioneer Hi-Bred International Inc. Soybean variety XB04D04
US20040181833A1 (en) 2004-01-30 2004-09-16 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB40Y04
US7151207B2 (en) 2004-01-30 2006-12-19 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB43R04
US20040177419A1 (en) 2004-01-30 2004-09-09 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB44W04
US20040205863A1 (en) 2004-01-30 2004-10-14 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB25L04
US7015376B2 (en) 2004-01-30 2006-03-21 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 95M80
US20040172704A1 (en) 2004-01-30 2004-09-02 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB26L04
US20040172705A1 (en) 2004-01-30 2004-09-02 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB25X04
US20050144681A9 (en) 2004-01-30 2005-06-30 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety xb57m04
US20040172695A1 (en) 2004-01-30 2004-09-02 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB59U04
US20040172709A1 (en) 2004-01-30 2004-09-02 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB44C04
US6953878B2 (en) 2004-01-30 2005-10-11 Pioneer Hi-Bred International Inc. Soybean variety XB58Z04
US7164061B2 (en) 2004-01-30 2007-01-16 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB48T04
US7230169B2 (en) 2004-01-30 2007-06-12 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB06H04
US7015375B2 (en) 2004-01-30 2006-03-21 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB31U04
US7049495B2 (en) 2004-01-30 2006-05-23 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB64C04
US6977327B2 (en) 2004-01-30 2005-12-20 Pioneer Hi-Bred International Inc. Soybean variety XB55K04
US20040177407A1 (en) 2004-01-30 2004-09-09 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB30E04
US6982366B2 (en) 2004-02-12 2006-01-03 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0509239
US7002062B2 (en) 2004-02-12 2006-02-21 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0509254
US7049496B2 (en) 2004-02-12 2006-05-23 D&Pl Technology Holding Company, Llc Soybean cultivar 2386009
US6888050B1 (en) 2004-02-12 2005-05-03 D&Pl Technology Holding Company, Llc Soybean cultivar 4283008
US6884927B1 (en) 2004-02-12 2005-04-26 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0509249
US6972354B2 (en) 2004-02-12 2005-12-06 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0509245
US6906249B1 (en) 2004-02-12 2005-06-14 D&Pl Technology Holding Company, Llc Soybean cultivar 5091007
US7045687B2 (en) 2004-02-12 2006-05-16 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0509251
US6982367B2 (en) 2004-02-12 2006-01-03 Stine Seed Farm, Inc Soybean cultivar 0509244
US6870080B1 (en) 2004-02-12 2005-03-22 D&Pl Technology Holding Corporation Soybean cultivar 3282002
US7012174B2 (en) 2004-02-12 2006-03-14 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0509248
US6972355B2 (en) 2004-02-12 2005-12-06 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0509240
US7196249B1 (en) 2004-02-27 2007-03-27 Garst Seed Company Soybean variety S04-97130-15-02
US7189896B1 (en) 2004-02-27 2007-03-13 Garst Seed Company Soybean variety S04-97026-N99-42648-01
US7084326B2 (en) 2004-03-01 2006-08-01 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 70826751
US7119260B2 (en) 2004-03-01 2006-10-10 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0509246
US7132591B2 (en) 2004-03-01 2006-11-07 Stine Seed Farm, Inc. “Soybean cultivar 0509241”
US7148408B2 (en) 2004-03-01 2006-12-12 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0509252
US7115801B2 (en) 2004-03-01 2006-10-03 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0509243
US7084325B2 (en) 2004-03-01 2006-08-01 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0509253
US7105726B2 (en) 2004-03-01 2006-09-12 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0509247
US7045688B2 (en) 2004-03-18 2006-05-16 Mertec Llc Soybean cultivar 0509214
US20050268362A1 (en) 2004-05-27 2005-12-01 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar SJ919784
US7071392B2 (en) 2004-05-27 2006-07-04 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar CL615261
US7183464B2 (en) 2004-07-08 2007-02-27 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 02022433
US7166774B2 (en) 2004-07-08 2007-01-23 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0509255
FR2872715B1 (fr) * 2004-07-08 2006-11-17 Commissariat Energie Atomique Microreacteur goutte
US7183462B2 (en) 2004-07-08 2007-02-27 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 02912951
US7189898B2 (en) 2004-07-08 2007-03-13 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0102115
US7183465B2 (en) 2004-07-08 2007-02-27 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 03022253
US7176358B2 (en) 2004-07-08 2007-02-13 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 90897327
US7183463B2 (en) 2004-07-08 2007-02-27 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 02022323
US7183461B2 (en) 2004-07-08 2007-02-27 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 915034
US7176359B2 (en) 2004-07-08 2007-02-13 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 90046112
US7183466B2 (en) 2004-07-19 2007-02-27 Mertec Llc Soybean cultivar 1000109
US7193139B2 (en) 2004-07-23 2007-03-20 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 927013
US7183467B2 (en) 2004-07-23 2007-02-27 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S030136
US7368635B2 (en) 2004-08-03 2008-05-06 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 943013
US20060135758A1 (en) * 2004-08-31 2006-06-22 Kunsheng Wu Soybean polymorphisms and methods of genotyping
US8053636B2 (en) * 2004-10-29 2011-11-08 Bayer Bioscience N.V. Stress tolerant cotton plants
US7271320B2 (en) 2004-11-30 2007-09-18 Mertec Llc Soybean cultivar 901023
US7271321B2 (en) 2004-11-30 2007-09-18 Mertec Llc Soybean cultivar 1000126
US7030297B1 (en) 2004-11-30 2006-04-18 Mertec Llc Soybean cultivar 900613
US7045689B1 (en) 2004-11-30 2006-05-16 Mertec Llc Soybean cultivar 917013
US7271322B2 (en) 2004-11-30 2007-09-18 Mertec Llc Soybean cultivar 900213
US6979762B1 (en) 2005-01-24 2005-12-27 Mertec Llc Soybean cultivar 4704310
US7053276B1 (en) 2005-01-25 2006-05-30 Mertec Llc Soybean cultivar S040123
US7301072B2 (en) 2005-01-25 2007-11-27 Mertec Llc Soybean cultivar S040125
US7053278B1 (en) 2005-01-26 2006-05-30 Mertec Llc Soybean cultivar S040118
US7005564B1 (en) 2005-01-26 2006-02-28 Mertec Llc Soybean cultivar 4513420
US7053277B1 (en) 2005-01-26 2006-05-30 Mertec Llc Soybean cultivar S040119
US7015377B1 (en) 2005-01-27 2006-03-21 Mertec Llc Soybean cultivar S040129
US6982368B1 (en) 2005-01-27 2006-01-03 Mertec Llc Soybean cultivar 4803070
US7022900B1 (en) 2005-01-27 2006-04-04 Mertec Llc Soybean cultivar S040120
US7015378B1 (en) 2005-01-27 2006-03-21 Mertec Llc Soybean cultivar S040134
US7022901B1 (en) 2005-01-27 2006-04-04 Mertec Llc Soybean cultivar S040128
US7045690B1 (en) 2005-01-29 2006-05-16 Mertec Llc Soybean cultivar 4238491
US7301073B2 (en) 2005-01-29 2007-11-27 Mertec Llc Soybean cultivar 4405070
US7273969B2 (en) 2005-01-29 2007-09-25 Mertec Llc Soybean cultivar 4417380
US7049497B1 (en) 2005-01-29 2006-05-23 Mertec Llc Soybean cultivar 4442112
US20050150018A1 (en) 2005-01-31 2005-07-07 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 91M70
US20050150017A1 (en) 2005-01-31 2005-07-07 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB25S05
US7078596B2 (en) 2005-01-31 2006-07-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc, Soybean variety XB33Y05
US7169973B2 (en) 2005-01-31 2007-01-30 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB26U05
US7015381B2 (en) 2005-01-31 2006-03-21 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB25C05
US7164063B2 (en) 2005-01-31 2007-01-16 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB39N05
US20050114940A1 (en) 2005-01-31 2005-05-26 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB27B05
US20070150979A1 (en) 2005-01-31 2007-06-28 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean Variety 92M52
US7326830B2 (en) 2005-01-31 2008-02-05 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB26V05
US7304212B2 (en) 2005-01-31 2007-12-04 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB21S05
US7064252B2 (en) 2005-01-31 2006-06-20 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 93M01
US20050120419A1 (en) 2005-01-31 2005-06-02 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB30P05
US6995303B2 (en) 2005-01-31 2006-02-07 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB34A05
US6992239B2 (en) 2005-01-31 2006-01-31 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92M61
US20050114942A1 (en) 2005-01-31 2005-05-26 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB28E05
US20050120436A1 (en) 2005-01-31 2005-06-02 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB18S05
US20050114937A1 (en) 2005-01-31 2005-05-26 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB32C05
US7282627B2 (en) 2005-01-31 2007-10-16 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB20D05
US7015380B2 (en) 2005-01-31 2006-03-21 Pioneer Hi-Bred International, Inc Soybean variety XB58G05
US7030298B2 (en) 2005-01-31 2006-04-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean Variety XB43D05
US7189899B2 (en) 2005-01-31 2007-03-13 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB38T05
US20050114932A1 (en) 2005-01-31 2005-05-26 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB17S05
US7271323B2 (en) 2005-01-31 2007-09-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 90M01
US20050150019A1 (en) 2005-01-31 2005-07-07 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB41B05
US6992240B2 (en) 2005-01-31 2006-01-31 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB31W05
US7297841B2 (en) 2005-01-31 2007-11-20 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB22H05
US20050114935A1 (en) 2005-01-31 2005-05-26 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB13U05
US7304211B2 (en) 2005-01-31 2007-12-04 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB35K05
US7022902B2 (en) 2005-01-31 2006-04-04 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB58K05
US20050114930A1 (en) 2005-01-31 2005-05-26 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB25Y05
US20050120432A1 (en) 2005-01-31 2005-06-02 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB57U05
US20050108795A1 (en) 2005-01-31 2005-05-19 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB21R05
US6956150B2 (en) 2005-01-31 2005-10-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 91M91
US20050114934A1 (en) 2005-01-31 2005-05-26 Pioneer Hi-Bred International , Inc. Soybean variety XB12K05
US20050120431A1 (en) 2005-01-31 2005-06-02 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB49M05
US7294766B2 (en) 2005-01-31 2007-11-13 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB28F05
US7005565B2 (en) 2005-01-31 2006-02-28 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB40E05
US7015379B2 (en) 2005-01-31 2006-03-21 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB57T05
US7060879B2 (en) 2005-01-31 2006-06-13 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB13T05
US20050120428A1 (en) 2005-01-31 2005-06-02 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB19Y05
US7084327B2 (en) 2005-01-31 2006-08-01 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB22K05
US7282626B2 (en) 2005-01-31 2007-10-16 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB40D05
US20050120433A1 (en) 2005-02-01 2005-06-02 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB08P05
US7030299B1 (en) 2005-02-07 2006-04-18 Mertec Llc Soybean cultivar 4216033
US7335819B2 (en) 2005-02-07 2008-02-26 Mertec Llc Soybean cultivar 4805442
US7279620B2 (en) 2005-02-07 2007-10-09 Mertec Llc Soybean cultivar 4921237
US7279621B2 (en) 2005-02-11 2007-10-09 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S040133
US7078597B1 (en) 2005-02-11 2006-07-18 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S040117
US7064253B1 (en) 2005-02-11 2006-06-20 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 4145306
US7078598B1 (en) 2005-02-16 2006-07-18 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S040135
US7030300B1 (en) 2005-02-16 2006-04-18 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S040121
US7019199B1 (en) 2005-02-16 2006-03-28 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S040127
US7030301B1 (en) 2005-02-24 2006-04-18 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 4337175
US7314981B2 (en) 2005-02-24 2008-01-01 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 4713487
US7314980B2 (en) 2005-02-24 2008-01-01 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S040122
US7291769B2 (en) 2005-02-24 2007-11-06 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 4348019
US7045691B1 (en) 2005-02-24 2006-05-16 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S040124
US7304213B2 (en) 2005-02-25 2007-12-04 Stine Seed Farm, Inc. Soybean Cultivar 4929388
US7053280B1 (en) 2005-02-25 2006-05-30 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S040130
US7358420B2 (en) 2005-02-25 2008-04-15 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S040131
US7053279B1 (en) 2005-02-25 2006-05-30 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 4706198
US7041882B1 (en) 2005-02-25 2006-05-09 Hornbeck Seed Co., Inc. Soybean cultivar S010136
US7314982B2 (en) 2005-02-25 2008-01-01 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 4817034
US7091403B1 (en) 2005-02-28 2006-08-15 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 4441080
US7081570B1 (en) 2005-02-28 2006-07-25 D&Pl Technology Holding Company, Llc Soybean cultivar 6084016
US7102062B1 (en) 2005-02-28 2006-09-05 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 4423183
US7358422B2 (en) 2005-02-28 2008-04-15 D&Pl Technology Holding Company, Llc Soybean cultivar 4136015
US7358421B2 (en) 2005-02-28 2008-04-15 D&Pl Technology Holding Company, Llc Soybean cultivar 3133014
US7491870B2 (en) 2005-02-28 2009-02-17 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S040132
US7304214B2 (en) 2005-02-28 2007-12-04 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 4328386
US7291770B2 (en) 2005-02-28 2007-11-06 D&Pl Technology Holding Company, Llc Soybean cultivar 1339013
US7132592B1 (en) 2005-03-01 2006-11-07 Garst Seed Company Soybean variety S05-97177-N00-22972
US7078599B1 (en) 2005-03-01 2006-07-18 Garst Seed Company Soybean variety S05-97130-51
US7186894B1 (en) 2005-03-01 2007-03-06 Garst Seed Company Soybean variety S05-97016-G99-21212
US7164064B1 (en) 2005-03-01 2007-01-16 Garst Seed Company Soybean variety S05-99048-19
US7126047B1 (en) 2005-03-04 2006-10-24 Sungenta Participations Ag Soybean cultivar M08851
US7186895B1 (en) 2005-03-04 2007-03-06 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar CL727422
US7132593B1 (en) 2005-03-04 2006-11-07 Syngente Participations Ag Soybean cultivar CL727636
US7235717B1 (en) 2005-03-04 2007-06-26 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar WW109447
US7304215B1 (en) 2005-03-04 2007-12-04 Syngenta Participatians Ag Soybean cultivar M061422
US7091404B1 (en) 2005-03-04 2006-08-15 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar CL821418
US7071391B1 (en) 2005-03-04 2006-07-04 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar M03393
US7132594B1 (en) 2005-03-04 2006-11-07 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar WW152201
US7304216B1 (en) 2005-03-04 2007-12-04 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar 01JR123480
US7196250B1 (en) 2005-03-04 2007-03-27 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar CL722114
US7202400B1 (en) 2005-03-04 2007-04-10 Syngenta Participations (Ag) Soybean cultivar CL431203
US7208657B1 (en) 2005-03-08 2007-04-24 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar MT017827
US7238867B1 (en) 2005-03-08 2007-07-03 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar MT000792
US7220898B1 (en) 2005-03-15 2007-05-22 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar BA947474
US7304217B1 (en) 2005-03-15 2007-12-04 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar BA922834
JP5256020B2 (ja) * 2005-04-08 2013-08-07 バイエル・クロップサイエンス・エヌ・ヴェー エリートイベントａ２７０４−１２、ならびに生物サンプル中の該イベントを同定するための方法およびキット
MX2007012561A (es) * 2005-04-11 2008-02-22 Bayer Bioscience Nv Evento elite a5547-127, y metodos y equipos para identificar dicho evento en muestras biologicas.
US7078600B1 (en) 2005-05-25 2006-07-18 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S050163
US7105727B1 (en) 2005-05-25 2006-09-12 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S050164
US7081571B1 (en) 2005-06-03 2006-07-25 Mertec Llc Soybean cultivar S050162
US7084328B1 (en) 2005-06-27 2006-08-01 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 4417779
US7105728B1 (en) 2005-06-27 2006-09-12 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 4324401
US7173168B2 (en) 2005-06-27 2007-02-06 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 4506816
US7098385B1 (en) 2005-06-27 2006-08-29 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 4916816
US7081572B1 (en) 2005-06-27 2006-07-25 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 4909380
US7169974B1 (en) 2005-07-26 2007-01-30 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S050051
MX2008001839A (es) * 2005-08-08 2008-04-09 Bayer Bioscience Nv Plantas de algodon con tolerancia a herbicidas y metodos para identificar las mismas.
US7294768B1 (en) 2005-09-27 2007-11-13 Monsanto Technology Llc Soybean variety 0384279
US7173169B1 (en) 2006-01-09 2007-02-06 D&Pl Technology Holding Company, Llc Soybean cultivar 5083011
US7208658B1 (en) 2006-01-11 2007-04-24 Soygenetics, Llc Soybean cultivar SG1750NRR
US7211715B1 (en) 2006-01-11 2007-05-01 Soygenetics, Llc Soybean cultivar SG0850RR
US7183468B1 (en) 2006-01-19 2007-02-27 Nidera Semillas S.A. Soybean cultivar 4N2V55022
US7205458B1 (en) 2006-01-19 2007-04-17 Nidera Semillas S.A. Soybean cultivar 4N2V74028
US7199288B1 (en) 2006-01-19 2007-04-03 Nidera Semillas S.A. Soybean cultivar 4N0S63222
US7217868B1 (en) 2006-01-24 2007-05-15 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5432082
US7169976B1 (en) 2006-01-24 2007-01-30 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5626085
US7217869B1 (en) 2006-01-24 2007-05-15 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5726175
US7196251B1 (en) 2006-01-25 2007-03-27 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5621161
US7196252B1 (en) 2006-01-25 2007-03-27 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5834401
US7196253B1 (en) 2006-01-25 2007-03-27 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5520279
US7193140B1 (en) 2006-01-25 2007-03-20 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5741081
US7285704B2 (en) 2006-01-26 2007-10-23 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5830261
US7265270B2 (en) 2006-01-26 2007-09-04 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S050238
US7217870B1 (en) 2006-01-26 2007-05-15 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5939002
US7241939B1 (en) 2006-01-26 2007-07-10 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5726085
US7247771B1 (en) 2006-01-30 2007-07-24 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5806063
US7282628B2 (en) 2006-01-30 2007-10-16 D&Pl Technology Holding Company, Llc Soybean cultivar 1486018
US7265272B2 (en) 2006-01-30 2007-09-04 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S050235
US7253344B1 (en) 2006-01-30 2007-08-07 D&Pl Technology Holding Company, Llc Soybean cultivar 4189010
US7265271B2 (en) 2006-01-30 2007-09-04 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5023230
US7235718B1 (en) 2006-01-30 2007-06-26 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5521161
US20060112461A1 (en) 2006-01-31 2006-05-25 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB26R06
US7288699B2 (en) 2006-01-31 2007-10-30 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB24R06
US7482513B2 (en) 2006-01-31 2009-01-27 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB11L06
US20060112462A1 (en) 2006-01-31 2006-05-25 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB27J06
US20060107356A1 (en) 2006-01-31 2006-05-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB18W06
US7227060B2 (en) 2006-01-31 2007-06-05 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB16S06
US20060107369A1 (en) 2006-01-31 2006-05-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB19V06
US20060112457A1 (en) 2006-01-31 2006-05-25 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB47Q06
US7183469B2 (en) 2006-01-31 2007-02-27 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB21Z06
US7301075B2 (en) 2006-01-31 2007-11-27 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB28T06
US20060107388A1 (en) 2006-01-31 2006-05-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB004A06
US20060112460A1 (en) 2006-01-31 2006-05-25 Pioneer Hi-Bred International , Inc. Soybean variety XB29N06
US7169979B2 (en) 2006-01-31 2007-01-30 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB35C06
US7371936B2 (en) 2006-01-31 2008-05-13 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB005A06
US7265274B2 (en) 2006-01-31 2007-09-04 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5624126
US20060107364A1 (en) 2006-01-31 2006-05-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB37Q06
US20060107385A1 (en) 2006-01-31 2006-05-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB25H06
US7388128B2 (en) 2006-01-31 2008-06-17 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB36M06
US20060107365A1 (en) 2006-01-31 2006-05-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB37U06
US7227059B2 (en) 2006-01-31 2007-06-05 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 91M61
US7241940B2 (en) 2006-01-31 2007-07-10 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB005B06
US7169978B2 (en) 2006-01-31 2007-01-30 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB38E06
US7265273B2 (en) 2006-01-31 2007-09-04 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5019225
US7169980B2 (en) 2006-01-31 2007-01-30 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB16W06
US20060107390A1 (en) 2006-01-31 2006-05-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB06K06
US7161068B2 (en) 2006-01-31 2007-01-09 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB32A06
US7439421B2 (en) 2006-01-31 2008-10-21 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB22N06
US20060107384A1 (en) 2006-01-31 2006-05-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB39W06
US20060107378A1 (en) 2006-01-31 2006-05-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB23H06
US20060107355A1 (en) 2006-01-31 2006-05-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB32M06
US7399906B2 (en) 2006-01-31 2008-07-15 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB 10M06
US20060107389A1 (en) 2006-01-31 2006-05-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB28V06
US20060107368A1 (en) 2006-01-31 2006-05-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB43C06
US20060107376A1 (en) 2006-01-31 2006-05-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB32L06
US20060107354A1 (en) 2006-01-31 2006-05-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB19F06
US7259298B1 (en) 2006-01-31 2007-08-21 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5549483
US7179968B2 (en) 2006-01-31 2007-02-20 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB36Q06
US7169977B2 (en) 2006-01-31 2007-01-30 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB00D06
US7186896B2 (en) 2006-01-31 2007-03-06 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB29R06
US7179967B2 (en) 2006-01-31 2007-02-20 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB15W06
US7294769B2 (en) 2006-01-31 2007-11-13 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB18C06
US20060107373A1 (en) 2006-01-31 2006-05-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB22G06
US7193141B2 (en) 2006-01-31 2007-03-20 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB31H06
US20060107380A1 (en) 2006-01-31 2006-05-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB36V06
US7381863B2 (en) 2006-01-31 2008-06-03 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB27K06
US20060107387A1 (en) 2006-01-31 2006-05-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB12L06
US7378574B2 (en) 2006-01-31 2008-05-27 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB07N06
US7176360B2 (en) 2006-01-31 2007-02-13 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB14N06
US7227058B2 (en) 2006-01-31 2007-06-05 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB33N06
US20060225160A1 (en) 2006-01-31 2006-10-05 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB25G06
US20060107375A1 (en) 2006-01-31 2006-05-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB58P06
US7314983B2 (en) 2006-02-06 2008-01-01 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5608398
US7244881B1 (en) 2006-02-06 2007-07-17 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S050233
US7256330B1 (en) 2006-02-06 2007-08-14 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S050230
US7247772B1 (en) 2006-02-06 2007-07-24 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S050226
US7345224B2 (en) 2006-02-06 2008-03-18 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5138236
US7294770B2 (en) 2006-02-16 2007-11-13 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5826175
US7301076B2 (en) 2006-02-16 2007-11-27 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S050231
US7265275B1 (en) 2006-02-16 2007-09-04 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5826376
US7259299B1 (en) 2006-02-16 2007-08-21 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5628386
US7332655B2 (en) 2006-02-21 2008-02-19 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5419227
US7271324B2 (en) 2006-02-21 2007-09-18 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5051007
US7291771B2 (en) 2006-02-21 2007-11-06 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5723045
US7297843B2 (en) 2006-02-21 2007-11-20 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5319227
US7345225B2 (en) 2006-02-23 2008-03-18 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S050218
US7388129B1 (en) 2006-02-23 2008-06-17 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S06-WW152330
US7339093B1 (en) 2006-02-23 2008-03-04 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S06-WW013107
US7314984B1 (en) 2006-02-23 2008-01-01 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S06-MT116260
US7355101B1 (en) 2006-02-23 2008-04-08 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S06-M059029
US7309818B2 (en) 2006-02-23 2007-12-18 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S050222
US7339094B1 (en) 2006-02-23 2008-03-04 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S06-MT9206166
US7271325B1 (en) 2006-02-23 2007-09-18 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S06-WW157958
US7375261B1 (en) 2006-02-23 2008-05-20 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S06-WW169267
US7291772B1 (en) 2006-02-23 2007-11-06 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S06-WW167686
US7265276B1 (en) 2006-02-23 2007-09-04 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S050223
US7378576B1 (en) 2006-02-23 2008-05-27 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar MT110501
US7312380B2 (en) 2006-02-23 2007-12-25 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S050217
US7326831B1 (en) 2006-02-23 2008-02-05 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S06-MT9211059
US7335820B1 (en) 2006-02-23 2008-02-26 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S06-M03256
US7378575B1 (en) 2006-02-23 2008-05-27 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar
US7414175B1 (en) 2006-02-24 2008-08-19 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S06-BA046119
US7329800B1 (en) 2006-02-24 2008-02-12 Sygenta Participations Ag Soybean cultivar S06-01JR123373
US7312381B1 (en) 2006-02-24 2007-12-25 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S06-SJ143606
US7361810B1 (en) 2006-02-24 2008-04-22 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S06-MT9152077
US7309819B1 (en) 2006-02-24 2007-12-18 Garst Seed Company Soybean cultivar S06-98181-G01-35167
US7317144B1 (en) 2006-02-24 2008-01-08 Syngenta Participations Soybean cultivar S06-01JR122235
US7381864B1 (en) 2006-02-24 2008-06-03 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S06-02JR111334
US7304218B2 (en) 2006-02-28 2007-12-04 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5420128
US7312382B2 (en) 2006-02-28 2007-12-25 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S050221
US7265277B1 (en) 2006-02-28 2007-09-04 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5802205
US7371937B1 (en) 2006-02-28 2008-05-13 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S06-CL968413
US7420104B1 (en) 2006-02-28 2008-09-02 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S06-CL821457
US7368636B1 (en) 2006-02-28 2008-05-06 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S06-CL951107
US7405348B2 (en) 2006-02-28 2008-07-29 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 1000642
US7307201B2 (en) 2006-03-02 2007-12-11 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 90501911
US7321079B2 (en) 2006-03-02 2008-01-22 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5733056
US7335821B2 (en) 2006-03-23 2008-02-26 D&Pl Technology Holding Company, Llc Soybean cultivar 6188027
US7365243B2 (en) 2006-03-23 2008-04-29 Mertec Llc Soybean cultivar 5204220
US7321080B2 (en) 2006-03-23 2008-01-22 D&Pl Technology Holding Company, Llc Soybean cultivar 4183026
US7365244B2 (en) 2006-03-23 2008-04-29 Mertec Llc Soybean cultivar 5348287
US7442857B2 (en) 2006-03-23 2008-10-28 Mertec Llc Soybean cultivar S050216
US7321081B2 (en) 2006-03-23 2008-01-22 D&Pl Technology Holding Company, Llc Soybean cultivar 3233021
US7442856B2 (en) 2006-03-23 2008-10-28 Mertec Llc Soybean cultivar 5512112
US7279622B1 (en) 2006-03-23 2007-10-09 D&Pl Technology Holding Company, Llc Soybean cultivar 1336024
US7396982B2 (en) 2006-03-27 2008-07-08 Mertec Llc Soybean cultivar S050232
US7279623B1 (en) 2006-03-27 2007-10-09 Mertec Llc Soybean cultivar S050215
US7309820B2 (en) 2006-03-27 2007-12-18 Mertec Llc Soybean cultivar 5720482
US7297844B2 (en) 2006-03-27 2007-11-20 D & Pl Technology Holding Company, Llc Soybean cultivar 3235020
US7396981B2 (en) 2006-03-27 2008-07-08 Mertec Llc Soybean cultivar 5333301
US7579523B2 (en) 2006-03-31 2009-08-25 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6141145
US7482516B2 (en) 2006-04-27 2009-01-27 Monsanto Technology Llc Soybean variety 0387907
US7498489B2 (en) 2006-04-27 2009-03-03 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4498438
US7504565B2 (en) 2006-04-27 2009-03-17 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4878185
US7381867B2 (en) 2006-04-27 2008-06-03 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4782157
US20070256157A1 (en) 2006-04-27 2007-11-01 Jonathan Jenkinson Soybean variety 0436052
US20070256152A1 (en) 2006-04-27 2007-11-01 Jonathan Jenkinson Soybean variety 0277524
US20070254366A1 (en) 2006-04-27 2007-11-01 Christopher Goblirsch Soybean variety 4247825
US20070256163A1 (en) 2006-04-27 2007-11-01 Christopher Goblirsch Soybean variety 0212938
US7390942B2 (en) 2006-04-27 2008-06-24 Monsanto Technology Llc Soybean variety 0385457
US7390941B2 (en) 2006-04-27 2008-06-24 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4735316
US7659452B2 (en) 2006-04-27 2010-02-09 Monsanto Technology Llc Soybean variety 457114
US20070256160A1 (en) 2006-04-27 2007-11-01 Christopher Goblirsch Soybean variety 0215818
US20070256151A1 (en) 2006-04-27 2007-11-01 Jonathan Jenkinson Soybean variety 0276951
US7399909B2 (en) 2006-04-27 2008-07-15 Monsanto Technology Llc Soybean variety 0385240
US7872174B2 (en) 2006-04-27 2011-01-18 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4647672
US8115066B2 (en) 2006-04-27 2012-02-14 Monsanto Technology Llc Soybean variety 0384531
US7385117B2 (en) 2006-04-28 2008-06-10 Monsanto Technology Llc Soybean variety 0367478
US7569750B2 (en) 2006-04-28 2009-08-04 Monsanto Technology Llc Soybean Variety 4559809
US7488867B2 (en) 2006-04-28 2009-02-10 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4587513
US20070256176A1 (en) 2006-04-28 2007-11-01 Nancy Sebern Soybean variety 0196172
US7592511B2 (en) 2006-04-28 2009-09-22 Monsanto Technology Llc Soybean variety 0457028
US7378578B2 (en) 2006-04-28 2008-05-27 Monsanto Technology Llc Soybean variety 0358232
US20070256166A1 (en) 2006-04-28 2007-11-01 Charlotte Sartell Soybean variety 4788561
US7557270B2 (en) 2006-04-28 2009-07-07 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4074328
US7626086B2 (en) 2006-04-28 2009-12-01 Monsanto Technology Llc Soybean variety 0045477
US7485781B2 (en) 2006-04-28 2009-02-03 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4175567
US7498490B2 (en) 2006-04-28 2009-03-03 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4010165
US7479583B2 (en) 2006-04-28 2009-01-20 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4336643
US7501563B2 (en) 2006-04-28 2009-03-10 Monsanto Technology Llc Soybean variety 0409670
US7678962B2 (en) 2006-04-28 2010-03-16 Monsanto Technology Llc Soybean variety 0330739
US20070256162A1 (en) 2006-04-28 2007-11-01 Roger Lussenden Soybean variety 0146565
US20070256164A1 (en) 2006-04-28 2007-11-01 Roger Lussenden Soybean variety 0149217
US20070256167A1 (en) 2006-04-28 2007-11-01 Roger Lussenden Soybean variety 0146529
US7615687B2 (en) 2006-04-28 2009-11-10 Monsanto Technology Llc Soybean variety 0232405
US7642407B2 (en) 2006-04-28 2010-01-05 Monsanto Technology Llc Soybean variety 0330738
US7385116B2 (en) 2006-04-28 2008-06-10 Monsanto Technology Llc Soybean variety 0240187
US7479582B2 (en) 2006-04-28 2009-01-20 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4671685
US7554014B2 (en) 2006-04-28 2009-06-30 Monsanto Technology Llc Soybean variety 0437973
US7592512B2 (en) 2006-04-28 2009-09-22 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4309194
US7498491B2 (en) 2006-04-28 2009-03-03 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4785923
US7501562B2 (en) 2006-04-28 2009-03-10 Monsanto Technology Llc Soybean variety 0421133
US20070256178A1 (en) 2006-04-28 2007-11-01 Floyd Thomas L Soybean variety 0417158
US7365246B2 (en) 2006-05-18 2008-04-29 Scillinger Seed Inc. Soybean cultivar 435.TCS
US7365245B2 (en) 2006-05-18 2008-04-29 Schillinger Seed Inc. Soybean cultivar 495.RC
US7345226B2 (en) 2006-05-24 2008-03-18 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S060182
US7423199B2 (en) 2006-05-24 2008-09-09 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 17621620
US7342150B2 (en) 2006-05-24 2008-03-11 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 00977706
US7423200B2 (en) 2006-05-24 2008-09-09 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 17082821
US7304219B1 (en) 2006-06-26 2007-12-04 Mertec Llc Soybean cultivar 26082635
US7301077B1 (en) 2006-06-26 2007-11-27 Mertec Llc Soybean cultivar 26143837
US7297845B1 (en) 2006-06-27 2007-11-20 Mertec Llc Soybean cultivar 5306230
US7301078B1 (en) 2006-06-27 2007-11-27 Mertec Llc Soybean cultivar 26312034
US7968770B2 (en) * 2006-06-28 2011-06-28 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Methods for improving yield using soybean event 3560.4.3.5
US7951995B2 (en) 2006-06-28 2011-05-31 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean event 3560.4.3.5 and compositions and methods for the identification and detection thereof
US7442859B2 (en) 2006-07-12 2008-10-28 Mertec Llc Soybean cultivar 306612412
US7314986B1 (en) 2006-07-12 2008-01-01 Mertec Llc Soybean cultivar 5900450
US7459608B2 (en) 2006-07-12 2008-12-02 Mertec Llc Soybean cultivar 26170838
US7423201B2 (en) 2006-07-12 2008-09-09 Mertec Llc Soybean cultivar 306734323
US7442858B2 (en) 2006-07-12 2008-10-28 Mertec Llc Soybean cultivar 26660135
US7554017B1 (en) 2006-07-28 2009-06-30 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S06-CL959411
US7491872B1 (en) 2006-07-28 2009-02-17 Syngenta Participation Ag Soybean cultivar S06-02JR423005
US7521606B1 (en) 2006-07-28 2009-04-21 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S06-02JR423016
US7470835B1 (en) 2006-07-28 2008-12-30 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar
US7485782B1 (en) 2006-07-28 2009-02-03 Syngenta Participation Ag Soybean cultivar S06-02JR409114
US7518039B1 (en) 2006-07-28 2009-04-14 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S06-01JR119814
US7592518B1 (en) 2006-07-28 2009-09-22 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S06-02RM018047
US7518038B1 (en) 2006-07-28 2009-04-14 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S06-01JR119448
US7491873B1 (en) 2006-07-28 2009-02-17 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S06-02JR423003
US7473823B1 (en) 2006-08-24 2009-01-06 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S06-SJ144056
US7381865B2 (en) 2006-09-06 2008-06-03 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean Variety 98R31
US7456341B2 (en) 2006-10-17 2008-11-25 Hornbeck Seed Company Soybean cultivar 4211676
PT2078089T (pt) * 2006-10-31 2016-08-05 Du Pont Evento de soja dp-305423-1 e composições e métodos para a identificação e/ou deteção deste
US7598434B2 (en) 2007-01-17 2009-10-06 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4840308
US7385109B1 (en) 2007-01-17 2008-06-10 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4540394
US7414176B2 (en) 2007-01-17 2008-08-19 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4423586
US7880062B2 (en) 2007-01-17 2011-02-01 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4568207
US7385108B1 (en) 2007-01-17 2008-06-10 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4297661
US7388130B1 (en) 2007-01-17 2008-06-17 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4554257
US7388131B1 (en) 2007-01-17 2008-06-17 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4599695
US7498484B2 (en) 2007-01-17 2009-03-03 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4256323
US7554013B2 (en) 2007-01-18 2009-06-30 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4201823
US7351886B1 (en) 2007-01-18 2008-04-01 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4812469
US7399907B1 (en) 2007-01-18 2008-07-15 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4789516
US7385110B1 (en) 2007-01-18 2008-06-10 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4640250
US7381866B1 (en) 2007-01-18 2008-06-03 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4958786
US7388132B1 (en) 2007-01-18 2008-06-17 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4219527
US7355102B1 (en) 2007-01-18 2008-04-08 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4436909
US7521608B2 (en) 2007-01-18 2009-04-21 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4688589
US7351885B1 (en) 2007-01-18 2008-04-01 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4761767
US7525017B2 (en) 2007-01-18 2009-04-28 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4614131
US7501560B2 (en) 2007-01-19 2009-03-10 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4852004
US7629510B2 (en) 2007-01-19 2009-12-08 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4174206
US7557269B2 (en) 2007-01-19 2009-07-07 D&Pl Technology Holding Company, Llc Soybean cultivar 1335025
US7482514B2 (en) 2007-01-19 2009-01-27 D&Pl Technology Holding Company, Llc Soybean cultivar 1686017
US7649129B2 (en) 2007-01-19 2010-01-19 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4305498
US7629509B2 (en) 2007-01-19 2009-12-08 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4158090
US7601896B2 (en) 2007-01-19 2009-10-13 D&Pl Technology Holding Company, Llc Soybean cultivar 2387029
US7525028B2 (en) 2007-01-19 2009-04-28 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4274171
US7605305B2 (en) 2007-01-19 2009-10-20 D&Pl Technology Holding Company, Llc Soybean cultivar 2388028
US7632987B2 (en) 2007-01-19 2009-12-15 Monsanto Technology Llc Soybean variety 0341931
US7414177B2 (en) 2007-01-19 2008-08-19 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4551757
US7528306B2 (en) 2007-01-19 2009-05-05 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4282159
US7518036B2 (en) 2007-01-19 2009-04-14 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4027271
US7700844B2 (en) 2007-01-19 2010-04-20 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4991629
US7385111B1 (en) 2007-01-20 2008-06-10 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4589609
US7622642B2 (en) 2007-01-20 2009-11-24 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4857548
US7595435B2 (en) 2007-01-20 2009-09-29 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4953710
US7385112B1 (en) 2007-01-20 2008-06-10 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4367308
US7390938B1 (en) 2007-01-20 2008-06-24 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4735486
US7355103B1 (en) 2007-01-22 2008-04-08 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4766295
US7390939B1 (en) 2007-01-22 2008-06-24 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4092390
US7394000B1 (en) 2007-01-22 2008-07-01 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4062885
US7396983B1 (en) 2007-01-22 2008-07-08 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4959932
US7321082B1 (en) 2007-01-22 2008-01-22 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4353363
US7468474B2 (en) 2007-01-22 2008-12-23 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4427363
US7405349B1 (en) 2007-01-22 2008-07-29 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4684181
US7326832B1 (en) 2007-01-22 2008-02-05 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4502135
US7498485B2 (en) 2007-01-22 2009-03-03 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4676311
US7385113B1 (en) 2007-01-22 2008-06-10 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4896902
US20080178343A1 (en) 2007-01-23 2008-07-24 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean variety d0061501
US7375262B1 (en) 2007-01-23 2008-05-20 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4440685
US7368637B1 (en) 2007-01-23 2008-05-06 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4778469
US7371938B1 (en) 2007-01-23 2008-05-13 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4008211
US7504564B2 (en) 2007-01-23 2009-03-17 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4835953
US7498486B2 (en) 2007-01-23 2009-03-03 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4880500
US7390940B1 (en) 2007-01-23 2008-06-24 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4858197
US7329801B1 (en) 2007-01-23 2008-02-12 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4142393
US7531719B2 (en) 2007-01-23 2009-05-12 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4938051
US20080178344A1 (en) 2007-01-24 2008-07-24 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean variety d0063801
US20080178320A1 (en) 2007-01-24 2008-07-24 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean variety d0064801
US20080178345A1 (en) 2007-01-24 2008-07-24 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean variety d0069201
US7385114B1 (en) 2007-02-02 2008-06-10 Soygenetics, Llc Soybean cultivar SG4377NRR
US7692069B2 (en) 2007-02-02 2010-04-06 M.S. Technologies Llc Soybean cultivar SG3865N
US7442860B2 (en) 2007-02-27 2008-10-28 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6421326
US7439422B2 (en) 2007-02-27 2008-10-21 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6600375
US7525019B2 (en) 2007-02-27 2009-04-28 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S060293
US7453028B2 (en) 2007-02-27 2008-11-18 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S060077
US7414178B1 (en) 2007-02-27 2008-08-19 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S07-02KG294306
US7560621B1 (en) 2007-02-27 2009-07-14 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S07-03JR108674
US7411114B1 (en) 2007-02-27 2008-08-12 Bowers Glenn R Soybean cultivar S07-02KG294307
US7525018B2 (en) 2007-02-27 2009-04-28 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6733322
US7378577B1 (en) 2007-02-27 2008-05-27 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6141287
US7560620B1 (en) 2007-02-27 2009-07-14 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S07-03KL016279
US7385115B1 (en) 2007-02-27 2008-06-10 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6723322
US20070136856A1 (en) 2007-02-28 2007-06-14 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean Variety XB49V07
US20070136882A1 (en) 2007-02-28 2007-06-14 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean Variety XB37M07
US7485778B2 (en) 2007-02-28 2009-02-03 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB28E07
US7435879B2 (en) 2007-02-28 2008-10-14 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB40Y07
US7528299B2 (en) 2007-02-28 2009-05-05 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB35X07
US7388133B2 (en) 2007-02-28 2008-06-17 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB42H07
US7511195B2 (en) 2007-02-28 2009-03-31 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB54V07
US7521601B2 (en) 2007-02-28 2009-04-21 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB23V07
US7521602B2 (en) 2007-02-28 2009-04-21 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB38W07
US7579522B2 (en) 2007-02-28 2009-08-25 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB44G07
US7632988B2 (en) 2007-02-28 2009-12-15 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB04E07
US20070136880A1 (en) 2007-02-28 2007-06-14 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean Variety XB34Q07
US7525023B2 (en) 2007-02-28 2009-04-28 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB28K07
US7432422B2 (en) 2007-02-28 2008-10-07 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB30G07
US7525020B2 (en) 2007-02-28 2009-04-28 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB12R07
US7432423B2 (en) 2007-02-28 2008-10-07 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB31H07
US7544864B2 (en) 2007-02-28 2009-06-09 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB31J07
US7525022B2 (en) 2007-02-28 2009-04-28 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB21N07
US7470833B2 (en) 2007-02-28 2008-12-30 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB23L07
US7528300B2 (en) 2007-02-28 2009-05-05 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB52Q07
US7498487B2 (en) 2007-02-28 2009-03-03 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB54X07
US7501561B2 (en) 2007-02-28 2009-03-10 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB40X07
US20070136863A1 (en) 2007-02-28 2007-06-14 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean Variety XB17W07
US20070136844A1 (en) 2007-02-28 2007-06-14 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean Variety XB38S07
US20070136865A1 (en) 2007-02-28 2007-06-14 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean Variety XB18K07
US7632989B2 (en) 2007-02-28 2009-12-15 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB34R07
US20070226832A1 (en) 2007-02-28 2007-09-27 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean Variety XB34D07
US7442861B2 (en) 2007-02-28 2008-10-28 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB42K07
US7432421B2 (en) 2007-02-28 2008-10-07 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB30E07
US7518037B2 (en) 2007-02-28 2009-04-14 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB02K07
US7525021B2 (en) 2007-02-28 2009-04-28 Pioneer Hi-Bred Internaitonal, Inc. Soybean variety XB17U07
US7566819B2 (en) 2007-02-28 2009-07-28 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 98Y11
US20070226833A1 (en) 2007-02-28 2007-09-27 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean Variety XB34L07
US7485779B2 (en) 2007-02-28 2009-02-03 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB31R07
US7521603B2 (en) 2007-02-28 2009-04-21 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB03Q07
US20070130652A1 (en) 2007-02-28 2007-06-07 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean Variety XB31M07
US7514601B2 (en) 2007-02-28 2009-04-07 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB19E07
US7629505B2 (en) 2007-02-28 2009-12-08 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB49Q07
US7601897B2 (en) 2007-02-28 2009-10-13 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB48X07
US7547822B2 (en) 2007-02-28 2009-06-16 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB41J07
US7399908B2 (en) 2007-02-28 2008-07-15 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB37J07
US7572955B2 (en) 2007-02-28 2009-08-11 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB11J07
US7495154B2 (en) 2007-02-28 2009-02-24 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean Variety XB32J07
US7521604B2 (en) 2007-02-28 2009-04-21 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB35S07
US20070136853A1 (en) 2007-02-28 2007-06-14 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean Variety XB48W07
US20070245429A1 (en) 2007-02-28 2007-10-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean Variety XB37L07
US7470834B2 (en) 2007-02-28 2008-12-30 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB26X07
US20070130650A1 (en) 2007-02-28 2007-06-07 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean Variety XB25S07
US7511194B2 (en) 2007-02-28 2009-03-31 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB25E07
US7423202B2 (en) 2007-02-28 2008-09-09 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB39E07
US7511193B2 (en) 2007-02-28 2009-03-31 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB15E07
US20070136879A1 (en) 2007-02-28 2007-06-14 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean Variety XB32S07
US7482515B2 (en) 2007-02-28 2009-01-27 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB19Z07
US7511196B2 (en) 2007-02-28 2009-03-31 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB57E07
US7511192B2 (en) 2007-02-28 2009-03-31 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB15B07
US7435880B2 (en) 2007-02-28 2008-10-14 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB18J07
US7435881B2 (en) 2007-02-28 2008-10-14 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB18M07
US7479581B2 (en) 2007-02-28 2009-01-20 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB40K07
US7432424B2 (en) 2007-02-28 2008-10-07 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB33G07
US20070130646A1 (en) 2007-02-28 2007-06-07 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean Variety XB06M07
US7525024B2 (en) 2007-02-28 2009-04-28 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB35F07
US7569749B2 (en) 2007-03-01 2009-08-04 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB46V07
US7498488B2 (en) 2007-03-01 2009-03-03 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB47R07
US7345228B1 (en) 2007-03-26 2008-03-18 Stine Seed Farm, Inc. Soybean Cultivar 6548193
US7514602B2 (en) 2007-03-26 2009-04-07 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6635047
US7563953B2 (en) 2007-03-26 2009-07-21 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6836085
US7442863B2 (en) 2007-03-26 2008-10-28 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6434385
US7572956B2 (en) 2007-03-26 2009-08-11 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6139105
US7459609B2 (en) 2007-03-26 2008-12-02 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6035184
US7332656B1 (en) 2007-03-26 2008-02-19 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6134466
US7442862B2 (en) 2007-03-26 2008-10-28 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S060295
US8134048B2 (en) 2007-03-26 2012-03-13 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6114011
US7777103B2 (en) 2007-03-26 2010-08-17 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6900358
US7342151B1 (en) 2007-03-26 2008-03-11 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S060291
US7345227B1 (en) 2007-03-26 2008-03-18 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6440261
US7485780B2 (en) 2007-03-26 2009-02-03 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6345184
US7563954B2 (en) 2007-03-28 2009-07-21 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S050229
US7557271B2 (en) 2007-04-02 2009-07-07 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S060297
US7592513B2 (en) 2007-04-02 2009-09-22 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6935331
US7649126B2 (en) 2007-04-02 2010-01-19 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6111333
US7514603B2 (en) 2007-04-02 2009-04-07 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6917445
US7649127B2 (en) 2007-04-02 2010-01-19 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6135319
US7605306B2 (en) 2007-04-02 2009-10-20 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S060298
US7834252B2 (en) 2007-04-02 2010-11-16 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6137445
US7786357B2 (en) 2007-04-02 2010-08-31 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6819331
US7579524B2 (en) 2007-04-02 2009-08-25 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6819456
US7582810B2 (en) 2007-04-06 2009-09-01 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S060296
US7560616B2 (en) 2007-04-06 2009-07-14 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6012078
US7579525B2 (en) 2007-04-06 2009-08-25 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6449315
US7592514B2 (en) 2007-04-06 2009-09-22 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S050225
US7880063B2 (en) 2007-04-06 2011-02-01 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6342078
US7728196B2 (en) 2007-04-06 2010-06-01 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6419156
US7453029B2 (en) 2007-04-06 2008-11-18 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5723264
US7488868B2 (en) 2007-04-13 2009-02-10 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar Q0073801
US7408097B1 (en) 2007-04-13 2008-08-05 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6701475
US7442864B1 (en) 2007-04-13 2008-10-28 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6326393
US7446244B1 (en) 2007-04-13 2008-11-04 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6408448
US7465854B2 (en) 2007-04-20 2008-12-16 Mertec Llc Soybean cultivar 6703392
US7371939B1 (en) 2007-04-20 2008-05-13 Mertec Llc Soybean cultivar 6223392
US7803994B2 (en) 2007-04-20 2010-09-28 Mertec Llc Soybean cultivar 6547272
US7884266B2 (en) 2007-04-20 2011-02-08 Mertec Llc Soybean cultivar 6238359
US7622643B2 (en) 2007-04-20 2009-11-24 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6265047
US7385118B1 (en) 2007-04-20 2008-06-10 Mertec Llc Soybean cultivar 6424090
US7528301B2 (en) 2007-04-20 2009-05-05 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5826056
US7557272B2 (en) 2007-04-20 2009-07-07 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6719022
US7579527B2 (en) 2007-04-20 2009-08-25 Mertec Llc Soybean cultivar 5343260
US7572957B2 (en) 2007-04-20 2009-08-11 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6928331
US7531721B2 (en) 2007-04-20 2009-05-12 Stine Steel Farm, Inc. Soybean cultivar 6044483
US7531720B2 (en) 2007-04-20 2009-05-12 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S050224
US7579526B2 (en) 2007-04-20 2009-08-25 Mertec Llc Soybean cultivar 6439359
US7528302B2 (en) 2007-04-20 2009-05-05 Mertec Llc Soybean cultivar 6929431
US7563955B2 (en) 2007-04-20 2009-07-21 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6719331
US7507877B2 (en) 2007-04-20 2009-03-24 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6636454
US7488869B2 (en) 2007-04-20 2009-02-10 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6226454
US7642408B2 (en) 2007-04-25 2010-01-05 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6928285
US7626087B2 (en) 2007-04-25 2009-12-01 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S060294
US7626088B2 (en) 2007-04-25 2009-12-01 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 17731225
US7557273B2 (en) 2007-04-25 2009-07-07 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6943322
US7491871B2 (en) 2007-04-25 2009-02-17 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S060299
US7507878B2 (en) 2007-04-25 2009-03-24 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6736054
US7446246B1 (en) 2007-05-09 2008-11-04 Mertec Llc Soybean cultivar 6223012
US7446245B1 (en) 2007-05-09 2008-11-04 Mertec Llc Soybean cultivar 6549250
US7592515B2 (en) 2007-05-09 2009-09-22 Mertec Llc Soybean cultivar 6910450
MX2009012120A (es) 2007-05-09 2010-02-12 Dow Agrosciences Llc Genes novedosos con resistencia a herbicidas.
US7619139B2 (en) 2007-06-12 2009-11-17 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4572906
US7629506B2 (en) 2007-06-12 2009-12-08 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4422957
US7557274B2 (en) 2007-06-12 2009-07-07 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4301279
US7566820B2 (en) 2007-06-12 2009-07-28 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4208814
US7612259B2 (en) 2007-06-12 2009-11-03 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4127789
US7642409B2 (en) 2007-06-12 2010-01-05 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4120384
US7622644B2 (en) 2007-06-12 2009-11-24 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4201139
US20080313757A1 (en) 2007-06-12 2008-12-18 Monsanto Technology Llc Soybean variety d4256958
US7572958B2 (en) 2007-06-12 2009-08-11 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4361423
US7569751B2 (en) 2007-06-28 2009-08-04 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4523081
US7592516B2 (en) 2007-06-28 2009-09-22 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4328762
US7626089B2 (en) 2007-06-28 2009-12-01 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4311702
US7554015B2 (en) 2007-06-28 2009-06-30 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4483789
US7557275B2 (en) 2007-06-28 2009-07-07 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4210110
US7560617B2 (en) 2007-07-03 2009-07-14 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4253854
US7554016B2 (en) 2007-07-03 2009-06-30 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4923560
US7550653B2 (en) 2007-07-03 2009-06-23 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4367012
US7700843B2 (en) 2007-07-03 2010-04-20 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4021792
US7569752B2 (en) 2007-07-03 2009-08-04 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4902530
US7642410B2 (en) 2007-07-10 2010-01-05 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4452019
US7592517B2 (en) 2007-07-10 2009-09-22 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4463892
US7557277B2 (en) 2007-07-10 2009-07-07 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4526223
US7557276B2 (en) 2007-07-10 2009-07-07 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4556201
US7622645B2 (en) 2007-07-10 2009-11-24 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4063284
US7615688B2 (en) 2007-07-10 2009-11-10 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4713125
US7626090B2 (en) 2007-07-10 2009-12-01 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4470236
US7629507B2 (en) 2007-07-10 2009-12-08 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4201483
US7626091B2 (en) 2007-07-10 2009-12-01 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4159630
US7629508B2 (en) 2007-07-10 2009-12-08 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4012368
US20090019581A1 (en) 2007-07-12 2009-01-15 Monsanto Technology Llc Soybean variety d4865324
US7619142B2 (en) 2007-07-12 2009-11-17 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4102536
US7514607B2 (en) 2007-07-12 2009-04-07 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4253969
US7514606B2 (en) 2007-07-12 2009-04-07 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4696658
US7521605B2 (en) 2007-07-12 2009-04-21 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4258962
US7619140B2 (en) 2007-07-12 2009-11-17 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4659251
US7619143B2 (en) 2007-07-12 2009-11-17 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4223057
US7652197B2 (en) 2007-07-12 2010-01-26 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4233569
US7525025B2 (en) 2007-07-12 2009-04-28 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4253681
US7622646B2 (en) 2007-07-12 2009-11-24 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4203144
US7619141B2 (en) 2007-07-12 2009-11-17 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4825495
US7655839B2 (en) 2007-07-12 2010-02-02 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4682156
US7642411B2 (en) 2007-07-12 2010-01-05 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4925614
US7514605B2 (en) 2007-07-12 2009-04-07 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4256925
US7514604B2 (en) 2007-07-12 2009-04-07 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4789254
US7560618B2 (en) 2007-07-13 2009-07-14 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4520980
US7560619B2 (en) 2007-07-13 2009-07-14 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4102367
US7531722B2 (en) 2007-07-13 2009-05-12 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4266582
US7652198B2 (en) 2007-07-13 2010-01-26 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4698013
US7649128B2 (en) 2007-07-13 2010-01-19 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4521369
US7652199B2 (en) 2007-07-13 2010-01-26 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4456885
US7659453B2 (en) 2007-07-13 2010-02-09 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4356652
US7566821B2 (en) 2007-07-13 2009-07-28 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4422801
US7572960B2 (en) 2007-07-13 2009-08-11 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4637114
US20090055957A1 (en) 2007-08-20 2009-02-26 Monsanto Technology Llc Soybean variety d4325666
US20090055955A1 (en) 2007-08-20 2009-02-26 Monsanto Technology Llc Soybean variety d4698573
US7692070B2 (en) 2007-08-20 2010-04-06 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4125897
US7939723B2 (en) 2007-08-22 2011-05-10 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S050228
US7880064B2 (en) 2007-08-22 2011-02-01 Stine Seed Farm, Inc. Soybean Cultivar 6540220
US8809636B2 (en) 2007-08-22 2014-08-19 Monsanto Technology Llc Soybean cultivar S060292
AU2008321220A1 (en) * 2007-11-15 2009-05-22 Monsanto Technology Llc Soybean plant and seed corresponding to transgenic event MON87701 and methods for detection thereof
US7557278B1 (en) 2007-12-12 2009-07-07 Mertec, Llc Soybean cultivar SG3870NRR
US8044268B2 (en) 2008-02-07 2011-10-25 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 93Y10
AU2009214710B2 (en) * 2008-02-15 2014-03-06 Monsanto Technology Llc Soybean plant and seed corresponding to transgenic event MON87769 and methods for detection thereof
US7759551B2 (en) 2008-02-20 2010-07-20 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 7429331
US7759553B2 (en) 2008-02-21 2010-07-20 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S070152
US7906711B2 (en) 2008-02-21 2011-03-15 Mertec Llc Soybean cultivar 6214260
US7728198B2 (en) 2008-02-22 2010-06-01 Mertec Llc Soybean cultivar 7811336
US7880065B2 (en) 2008-02-22 2011-02-01 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S070150
US7728199B2 (en) 2008-02-27 2010-06-01 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 7821295
US7728200B2 (en) 2008-02-27 2010-06-01 Mertec Llc Soybean cultivar 7925118
US7728201B2 (en) 2008-02-28 2010-06-01 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 7614385
US7692071B2 (en) 2008-02-28 2010-04-06 Mertec Llc Soybean cultivar 306924721
US7642412B2 (en) 2008-02-29 2010-01-05 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S070157
US7705207B2 (en) 2008-03-03 2010-04-27 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 7043182
US7705208B2 (en) 2008-03-04 2010-04-27 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 7143182
US7642413B2 (en) 2008-03-05 2010-01-05 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 7243182
US20090226597A1 (en) 2008-03-10 2009-09-10 Rodolfo Luis Rossi Soybean Cultivar 2N2V58015
US7642414B2 (en) 2008-03-11 2010-01-05 Mertec Llc Soybean cultivar 7317090
US7642415B2 (en) 2008-03-12 2010-01-05 Mertec Llc Soybean cultivar 7549450
US7732671B2 (en) 2008-03-13 2010-06-08 Mertec Llc Soybean cultivar 7041461
US7642416B2 (en) 2008-03-14 2010-01-05 Mertec Llc Soybean cultivar 7013345
US8629331B2 (en) 2008-03-24 2014-01-14 Monsanto Technology Llc Soybean cultivar 7113111
US7589261B1 (en) 2008-03-25 2009-09-15 Pioneer Hi-Bred International, Inc Soybean variety XB41M08
US7592519B1 (en) 2008-03-25 2009-09-22 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB27D08
US7586025B1 (en) 2008-03-25 2009-09-08 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB30Y08
US7582813B1 (en) 2008-03-25 2009-09-01 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB40U08
US7589259B1 (en) 2008-03-25 2009-09-15 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB33T08
US7582812B2 (en) 2008-03-25 2009-09-01 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 90Y40
US7642420B2 (en) 2008-03-25 2010-01-05 Pioneer Hi-Bred Internaitonal, Inc. Soybean variety 92M22
US7598435B1 (en) 2008-03-25 2009-10-06 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB33U08
US7582811B1 (en) 2008-03-25 2009-09-01 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB29M08
US7838734B2 (en) 2008-03-25 2010-11-23 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 7511119
US7589260B1 (en) 2008-03-25 2009-09-15 Pioneer Hi-Bred International, Inc Soybean variety XB05J08
US7728202B2 (en) 2008-03-26 2010-06-01 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S070158
US8003857B2 (en) 2008-03-27 2011-08-23 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 7509171
US7799973B2 (en) 2008-03-28 2010-09-21 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 26074414
US8729345B2 (en) 2008-03-31 2014-05-20 Monsanto Technology Llc Soybean cultivar S070160
US8742210B2 (en) 2008-04-01 2014-06-03 Monsanto Technology Llc Soybean cultivar 7535357
US7943824B2 (en) 2008-04-02 2011-05-17 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S070159
US7939725B2 (en) 2008-04-03 2011-05-10 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 7311153
US7943826B2 (en) 2008-04-04 2011-05-17 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 7925084
US7989680B2 (en) 2008-04-07 2011-08-02 Mertec Llc Soybean cultivar 7631014
US7939726B2 (en) 2008-04-07 2011-05-10 Mertec Llc Soybean cultivar 7431014
AU2010203708B2 (en) 2009-01-07 2015-06-25 Basf Agrochemical Products B.V. Soybean event 127 and methods related thereto
SI2504454T1 (sl) 2009-11-23 2020-06-30 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC Elitni dogodek EE-GM3 in metode in kompleti za identifikacijo takega dogodka v bioloških vzorcih
EP2503873B1 (en) 2009-11-23 2017-02-08 Bayer CropScience NV Herbicide tolerant soybean plants and methods for identifying same

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2110929C1 (ru) * 1995-09-20 1998-05-20 Научно-Производственная Ассоциация "Одесская Биотехнология" Способ переработки соевых бобов в пищевой продукт
RU2002116229A (ru) * 1999-11-18 2004-01-20 Байер Акциенгезелльшафт (De) Синергетически гербицидные комбинации активных веществ
US20060282915A1 (en) * 2005-05-27 2006-12-14 Monsanto Technology Llc Soybean event MON89788 and methods for detection thereof
US20080119361A1 (en) * 2006-06-06 2008-05-22 Feng Paul C C Methods for weed control
US20090208634A1 (en) * 2008-02-20 2009-08-20 Schultze Dennis L Soybean Cultivar 26034631

Also Published As

Publication number Publication date
US20120304331A1 (en) 2012-11-29
RS55883B1 (sr) 2017-08-31
UY33051A (es) 2011-06-30
EP2503873A2 (en) 2012-10-03
CN103003443A (zh) 2013-03-27
AU2010321586B2 (en) 2016-06-16
PL2503873T3 (pl) 2017-09-29
EP2503873B1 (en) 2017-02-08
HUE032718T2 (en) 2017-10-30
SI2503873T1 (sl) 2017-07-31
AR080566A1 (es) 2012-04-18
US9683242B2 (en) 2017-06-20
US20110239321A1 (en) 2011-09-29
CA2781598A1 (en) 2011-05-26
AU2010321586C1 (en) 2016-07-14
KR101992494B1 (ko) 2019-06-24
EP2503873A4 (en) 2013-05-29
ES2623923T3 (es) 2017-07-12
RU2012125961A (ru) 2013-12-27
MX2012005932A (es) 2012-09-12
PT2503873T (pt) 2017-05-18
KR20120107479A (ko) 2012-10-02
CN103003443B (zh) 2016-09-21
WO2011063413A2 (en) 2011-05-26
AR124132A2 (es) 2023-02-15
JP2016187343A (ja) 2016-11-04
NZ600375A (en) 2014-10-31
HRP20170670T1 (hr) 2017-07-14
CN106399482B (zh) 2021-04-27
CA2781598C (en) 2020-06-02
AU2010321586A1 (en) 2012-06-14
WO2011063413A3 (en) 2011-08-18
JP2013511294A (ja) 2013-04-04
JP6470705B2 (ja) 2019-02-13
CN106399482A (zh) 2017-02-15
US9062324B2 (en) 2015-06-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2639520C2 (ru) Растения сои, устойчивой к гербицидам, и способы их идентификации
RU2639530C2 (ru) Элитное событие ее-gm3 и способы и наборы для идентификации такого события в биологических образцах
US10428345B2 (en) Corn plant event MON87460 and compositions and methods for detection thereof
ES2712773T3 (es) Evento Elite EE-GM3 y métodos y kits para identificar dicho evento en muestras biológicas