RU2237492C2 - Иммуногенная композиция, вызывающая иммунный ответ против парвовируса и цирковируса свиньи, вакцина против многосистемного синдрома истощения свиней (pmws) (варианты), набор для вакцинации и способ ее осуществления - Google Patents
Иммуногенная композиция, вызывающая иммунный ответ против парвовируса и цирковируса свиньи, вакцина против многосистемного синдрома истощения свиней (pmws) (варианты), набор для вакцинации и способ ее осуществления Download PDFInfo
- Publication number
- RU2237492C2 RU2237492C2 RU2001103135A RU2001103135A RU2237492C2 RU 2237492 C2 RU2237492 C2 RU 2237492C2 RU 2001103135 A RU2001103135 A RU 2001103135A RU 2001103135 A RU2001103135 A RU 2001103135A RU 2237492 C2 RU2237492 C2 RU 2237492C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- pig
- antigen
- circovirus
- vaccine
- parvovirus
- Prior art date
Links
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 title claims abstract description 93
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 48
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 title claims abstract description 30
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 25
- 241000702619 Porcine parvovirus Species 0.000 title claims abstract description 22
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 title claims abstract description 18
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 title claims description 32
- 230000028993 immune response Effects 0.000 title claims 3
- 230000003313 weakening effect Effects 0.000 title abstract 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 title 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 92
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 92
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 92
- 241000282887 Suidae Species 0.000 claims abstract description 34
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 claims description 137
- 241001533384 Circovirus Species 0.000 claims description 104
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 57
- 241000125945 Protoparvovirus Species 0.000 claims description 35
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 claims description 33
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims description 28
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 20
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 20
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 20
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 claims description 19
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 claims description 19
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims description 16
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 claims description 15
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 claims description 15
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 claims description 14
- 244000052769 pathogen Species 0.000 claims description 11
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 claims description 6
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 claims description 6
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 6
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 5
- 201000010740 swine influenza Diseases 0.000 claims description 5
- 241000606748 Actinobacillus pleuropneumoniae Species 0.000 claims description 4
- 201000008283 Atrophic Rhinitis Diseases 0.000 claims description 4
- 241000204045 Mycoplasma hyopneumoniae Species 0.000 claims description 4
- 206010039088 Rhinitis atrophic Diseases 0.000 claims description 4
- 241000701093 Suid alphaherpesvirus 1 Species 0.000 claims description 4
- 208000009305 pseudorabies Diseases 0.000 claims description 4
- 241000178270 Canarypox virus Species 0.000 claims description 3
- 241000188845 Porcine adenovirus Species 0.000 claims description 3
- 241000700618 Vaccinia virus Species 0.000 claims description 3
- 241000700647 Variola virus Species 0.000 claims description 3
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 claims description 3
- 241001529453 unidentified herpesvirus Species 0.000 claims description 3
- 208000005342 Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Diseases 0.000 claims 6
- 229940124856 vaccine component Drugs 0.000 claims 5
- 101000666833 Autographa californica nuclear polyhedrosis virus Uncharacterized 20.8 kDa protein in FGF-VUBI intergenic region Proteins 0.000 claims 2
- 101000977027 Azospirillum brasilense Uncharacterized protein in nodG 5'region Proteins 0.000 claims 2
- 101000962005 Bacillus thuringiensis Uncharacterized 23.6 kDa protein Proteins 0.000 claims 2
- 101000785191 Drosophila melanogaster Uncharacterized 50 kDa protein in type I retrotransposable element R1DM Proteins 0.000 claims 2
- 101000747704 Enterobacteria phage N4 Uncharacterized protein Gp1 Proteins 0.000 claims 2
- 101000861206 Enterococcus faecalis (strain ATCC 700802 / V583) Uncharacterized protein EF_A0048 Proteins 0.000 claims 2
- 101000769180 Escherichia coli Uncharacterized 11.1 kDa protein Proteins 0.000 claims 2
- 101000976301 Leptospira interrogans Uncharacterized 35 kDa protein in sph 3'region Proteins 0.000 claims 2
- 101000658690 Neisseria meningitidis serogroup B Transposase for insertion sequence element IS1106 Proteins 0.000 claims 2
- 101000748660 Pseudomonas savastanoi Uncharacterized 21 kDa protein in iaaL 5'region Proteins 0.000 claims 2
- 101000584469 Rice tungro bacilliform virus (isolate Philippines) Protein P1 Proteins 0.000 claims 2
- 101000818096 Spirochaeta aurantia Uncharacterized 15.5 kDa protein in trpE 3'region Proteins 0.000 claims 2
- 101000766081 Streptomyces ambofaciens Uncharacterized HTH-type transcriptional regulator in unstable DNA locus Proteins 0.000 claims 2
- 101000804403 Synechococcus elongatus (strain PCC 7942 / FACHB-805) Uncharacterized HIT-like protein Synpcc7942_1390 Proteins 0.000 claims 2
- 101000750910 Synechococcus elongatus (strain PCC 7942 / FACHB-805) Uncharacterized HTH-type transcriptional regulator Synpcc7942_2319 Proteins 0.000 claims 2
- 101000644897 Synechococcus sp. (strain ATCC 27264 / PCC 7002 / PR-6) Uncharacterized protein SYNPCC7002_B0001 Proteins 0.000 claims 2
- 101000916336 Xenopus laevis Transposon TX1 uncharacterized 82 kDa protein Proteins 0.000 claims 2
- 101001000760 Zea mays Putative Pol polyprotein from transposon element Bs1 Proteins 0.000 claims 2
- 101000678262 Zymomonas mobilis subsp. mobilis (strain ATCC 10988 / DSM 424 / LMG 404 / NCIMB 8938 / NRRL B-806 / ZM1) 65 kDa protein Proteins 0.000 claims 2
- 101000787133 Acidithiobacillus ferridurans Uncharacterized 12.3 kDa protein in mobL 3'region Proteins 0.000 claims 1
- 101000827603 Bacillus phage SPP1 Uncharacterized 10.2 kDa protein in GP2-GP6 intergenic region Proteins 0.000 claims 1
- 101000977786 Lymantria dispar multicapsid nuclear polyhedrosis virus Uncharacterized 9.7 kDa protein in PE 3'region Proteins 0.000 claims 1
- 206010037742 Rabies Diseases 0.000 claims 1
- 101001113905 Rice tungro bacilliform virus (isolate Philippines) Protein P4 Proteins 0.000 claims 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 claims 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 claims 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 abstract description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 41
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 21
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 20
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 19
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 15
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 14
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 14
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 14
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 13
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 12
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 11
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 11
- 230000003362 replicative effect Effects 0.000 description 11
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 10
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 9
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 9
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 8
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 8
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 8
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 8
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 8
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 8
- 238000007901 in situ hybridization Methods 0.000 description 7
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 7
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 7
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 7
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 7
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 7
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 7
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 102100031725 Cortactin-binding protein 2 Human genes 0.000 description 6
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 101710197985 Probable protein Rev Proteins 0.000 description 6
- 238000013461 design Methods 0.000 description 6
- -1 n Species 0.000 description 6
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 6
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 6
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 101000748061 Acholeplasma phage L2 Uncharacterized 16.1 kDa protein Proteins 0.000 description 5
- 101000818108 Acholeplasma phage L2 Uncharacterized 81.3 kDa protein Proteins 0.000 description 5
- 101000947615 Clostridium perfringens Uncharacterized 38.4 kDa protein Proteins 0.000 description 5
- 101000964391 Enterococcus faecalis UPF0145 protein Proteins 0.000 description 5
- 101000912350 Haemophilus phage HP1 (strain HP1c1) DNA N-6-adenine-methyltransferase Proteins 0.000 description 5
- 101000748063 Haemophilus phage HP1 (strain HP1c1) Uncharacterized 11.1 kDa protein in rep-hol intergenic region Proteins 0.000 description 5
- 101000790844 Klebsiella pneumoniae Uncharacterized 24.8 kDa protein in cps region Proteins 0.000 description 5
- 101000790840 Klebsiella pneumoniae Uncharacterized 49.5 kDa protein in cps region Proteins 0.000 description 5
- 241000202347 Porcine circovirus Species 0.000 description 5
- 101710110895 Uncharacterized 7.3 kDa protein in cox-rep intergenic region Proteins 0.000 description 5
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 5
- 238000011888 autopsy Methods 0.000 description 5
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 5
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 5
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 5
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 5
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 5
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 5
- 101000768957 Acholeplasma phage L2 Uncharacterized 37.2 kDa protein Proteins 0.000 description 4
- 101000823746 Acidianus ambivalens Uncharacterized 17.7 kDa protein in bps2 3'region Proteins 0.000 description 4
- 101000916369 Acidianus ambivalens Uncharacterized protein in sor 5'region Proteins 0.000 description 4
- 101000769342 Acinetobacter guillouiae Uncharacterized protein in rpoN-murA intergenic region Proteins 0.000 description 4
- 101000823696 Actinobacillus pleuropneumoniae Uncharacterized glycosyltransferase in aroQ 3'region Proteins 0.000 description 4
- 101000786513 Agrobacterium tumefaciens (strain 15955) Uncharacterized protein outside the virF region Proteins 0.000 description 4
- 101000618005 Alkalihalobacillus pseudofirmus (strain ATCC BAA-2126 / JCM 17055 / OF4) Uncharacterized protein BpOF4_00885 Proteins 0.000 description 4
- 102100020724 Ankyrin repeat, SAM and basic leucine zipper domain-containing protein 1 Human genes 0.000 description 4
- 101000967489 Azorhizobium caulinodans (strain ATCC 43989 / DSM 5975 / JCM 20966 / LMG 6465 / NBRC 14845 / NCIMB 13405 / ORS 571) Uncharacterized protein AZC_3924 Proteins 0.000 description 4
- 101000823761 Bacillus licheniformis Uncharacterized 9.4 kDa protein in flaL 3'region Proteins 0.000 description 4
- 101000819719 Bacillus methanolicus Uncharacterized N-acetyltransferase in lysA 3'region Proteins 0.000 description 4
- 101000789586 Bacillus subtilis (strain 168) UPF0702 transmembrane protein YkjA Proteins 0.000 description 4
- 101000792624 Bacillus subtilis (strain 168) Uncharacterized protein YbxH Proteins 0.000 description 4
- 101000790792 Bacillus subtilis (strain 168) Uncharacterized protein YckC Proteins 0.000 description 4
- 101000819705 Bacillus subtilis (strain 168) Uncharacterized protein YlxR Proteins 0.000 description 4
- 101000948218 Bacillus subtilis (strain 168) Uncharacterized protein YtxJ Proteins 0.000 description 4
- 101000718627 Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki Putative RNA polymerase sigma-G factor Proteins 0.000 description 4
- 101000641200 Bombyx mori densovirus Putative non-structural protein Proteins 0.000 description 4
- 101000947633 Claviceps purpurea Uncharacterized 13.8 kDa protein Proteins 0.000 description 4
- 101000948901 Enterobacteria phage T4 Uncharacterized 16.0 kDa protein in segB-ipI intergenic region Proteins 0.000 description 4
- 101000805958 Equine herpesvirus 4 (strain 1942) Virion protein US10 homolog Proteins 0.000 description 4
- 101000790442 Escherichia coli Insertion element IS2 uncharacterized 11.1 kDa protein Proteins 0.000 description 4
- 101000788354 Escherichia phage P2 Uncharacterized 8.2 kDa protein in gpA 5'region Proteins 0.000 description 4
- 101000770304 Frankia alni UPF0460 protein in nifX-nifW intergenic region Proteins 0.000 description 4
- 101000797344 Geobacillus stearothermophilus Putative tRNA (cytidine(34)-2'-O)-methyltransferase Proteins 0.000 description 4
- 101000748410 Geobacillus stearothermophilus Uncharacterized protein in fumA 3'region Proteins 0.000 description 4
- 101000772675 Haemophilus influenzae (strain ATCC 51907 / DSM 11121 / KW20 / Rd) UPF0438 protein HI_0847 Proteins 0.000 description 4
- 101000631019 Haemophilus influenzae (strain ATCC 51907 / DSM 11121 / KW20 / Rd) Uncharacterized protein HI_0350 Proteins 0.000 description 4
- 101000768938 Haemophilus phage HP1 (strain HP1c1) Uncharacterized 8.9 kDa protein in int-C1 intergenic region Proteins 0.000 description 4
- 101000785414 Homo sapiens Ankyrin repeat, SAM and basic leucine zipper domain-containing protein 1 Proteins 0.000 description 4
- 101000782488 Junonia coenia densovirus (isolate pBRJ/1990) Putative non-structural protein NS2 Proteins 0.000 description 4
- 101000811523 Klebsiella pneumoniae Uncharacterized 55.8 kDa protein in cps region Proteins 0.000 description 4
- 101000818409 Lactococcus lactis subsp. lactis Uncharacterized HTH-type transcriptional regulator in lacX 3'region Proteins 0.000 description 4
- 101000878851 Leptolyngbya boryana Putative Fe(2+) transport protein A Proteins 0.000 description 4
- 101000758828 Methanosarcina barkeri (strain Fusaro / DSM 804) Uncharacterized protein Mbar_A1602 Proteins 0.000 description 4
- 101001122401 Middle East respiratory syndrome-related coronavirus (isolate United Kingdom/H123990006/2012) Non-structural protein ORF3 Proteins 0.000 description 4
- 101001055788 Mycolicibacterium smegmatis (strain ATCC 700084 / mc(2)155) Pentapeptide repeat protein MfpA Proteins 0.000 description 4
- 101000740670 Orgyia pseudotsugata multicapsid polyhedrosis virus Protein C42 Proteins 0.000 description 4
- 101000769182 Photorhabdus luminescens Uncharacterized protein in pnp 3'region Proteins 0.000 description 4
- 101000961392 Pseudescherichia vulneris Uncharacterized 29.9 kDa protein in crtE 3'region Proteins 0.000 description 4
- 101000731030 Pseudomonas oleovorans Poly(3-hydroxyalkanoate) polymerase 2 Proteins 0.000 description 4
- 101001065485 Pseudomonas putida Probable fatty acid methyltransferase Proteins 0.000 description 4
- 101000711023 Rhizobium leguminosarum bv. trifolii Uncharacterized protein in tfuA 3'region Proteins 0.000 description 4
- 101000948156 Rhodococcus erythropolis Uncharacterized 47.3 kDa protein in thcA 5'region Proteins 0.000 description 4
- 101000917565 Rhodococcus fascians Uncharacterized 33.6 kDa protein in fasciation locus Proteins 0.000 description 4
- 101000790284 Saimiriine herpesvirus 2 (strain 488) Uncharacterized 9.5 kDa protein in DHFR 3'region Proteins 0.000 description 4
- 101000936719 Streptococcus gordonii Accessory Sec system protein Asp3 Proteins 0.000 description 4
- 101000788499 Streptomyces coelicolor Uncharacterized oxidoreductase in mprA 5'region Proteins 0.000 description 4
- 101001102841 Streptomyces griseus Purine nucleoside phosphorylase ORF3 Proteins 0.000 description 4
- 101000708557 Streptomyces lincolnensis Uncharacterized 17.2 kDa protein in melC2-rnhH intergenic region Proteins 0.000 description 4
- 101000649826 Thermotoga neapolitana Putative anti-sigma factor antagonist TM1081 homolog Proteins 0.000 description 4
- 101000827562 Vibrio alginolyticus Uncharacterized protein in proC 3'region Proteins 0.000 description 4
- 101000778915 Vibrio parahaemolyticus serotype O3:K6 (strain RIMD 2210633) Uncharacterized membrane protein VP2115 Proteins 0.000 description 4
- 208000007502 anemia Diseases 0.000 description 4
- MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N beta-D-galactosamine Natural products NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 4
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 4
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 4
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 4
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 4
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 4
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 4
- 241000701447 unidentified baculovirus Species 0.000 description 4
- MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 2-amino-2-deoxy-D-glucopyranose Chemical compound N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 0.000 description 3
- NOWKCMXCCJGMRR-UHFFFAOYSA-N Aziridine Chemical compound C1CN1 NOWKCMXCCJGMRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 3
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 3
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 108010008038 Synthetic Vaccines Proteins 0.000 description 3
- VEZXCJBBBCKRPI-UHFFFAOYSA-N beta-propiolactone Chemical compound O=C1CCO1 VEZXCJBBBCKRPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 3
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 3
- 229960002442 glucosamine Drugs 0.000 description 3
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 3
- 206010020718 hyperplasia Diseases 0.000 description 3
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 3
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 3
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 3
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 3
- 229960000380 propiolactone Drugs 0.000 description 3
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 3
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 3
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 3
- YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N (6E,10E,14E,18E)-2,6,10,15,19,23-hexamethyltetracosa-2,6,10,14,18,22-hexaene Chemical compound CC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)C YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 2
- 241000725585 Chicken anemia virus Species 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 2
- 101000833492 Homo sapiens Jouberin Proteins 0.000 description 2
- 101000651236 Homo sapiens NCK-interacting protein with SH3 domain Proteins 0.000 description 2
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 2
- 102100024407 Jouberin Human genes 0.000 description 2
- 206010028851 Necrosis Diseases 0.000 description 2
- 241000710778 Pestivirus Species 0.000 description 2
- 241000276427 Poecilia reticulata Species 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101710172711 Structural protein Proteins 0.000 description 2
- BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N Tetramethylsqualene Natural products CC(=C)C(C)CCC(=C)C(C)CCC(C)=CCCC=C(C)CCC(C)C(=C)CCC(C)C(C)=C BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108020005202 Viral DNA Proteins 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 2
- WXNRAKRZUCLRBP-UHFFFAOYSA-N avridine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCN(CCCN(CCO)CCO)CCCCCCCCCCCCCCCCCC WXNRAKRZUCLRBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229950010555 avridine Drugs 0.000 description 2
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 2
- 239000013043 chemical agent Substances 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 230000000120 cytopathologic effect Effects 0.000 description 2
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N dodecahydrosqualene Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 2
- 206010019692 hepatic necrosis Diseases 0.000 description 2
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 2
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 2
- 230000000521 hyperimmunizing effect Effects 0.000 description 2
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 2
- 229940031551 inactivated vaccine Drugs 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 2
- 231100000149 liver necrosis Toxicity 0.000 description 2
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000000527 lymphocytic effect Effects 0.000 description 2
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 2
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 2
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 2
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 2
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 2
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 2
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 229940031439 squalene Drugs 0.000 description 2
- TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N squalene Natural products CC(=CCCC(=CCCC(=CCCC=C(/C)CCC=C(/C)CC=C(C)C)C)C)C TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 2
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 2
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 2
- PIGTXFOGKFOFTO-FVFWYJKVSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[[(3S,4S,4aR,6aR,6bS,8R,8aR,12aS,14aR,14bR)-8a-carboxy-4-formyl-8-hydroxy-4,6a,6b,11,11,14b-hexamethyl-1,2,3,4a,5,6,7,8,9,10,12,12a,14,14a-tetradecahydropicen-3-yl]oxy]-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound O([C@H]1CC[C@]2(C)[C@H]3CC=C4[C@@]([C@@]3(CC[C@H]2[C@@]1(C=O)C)C)(C)C[C@@H](O)[C@]1(CCC(C[C@H]14)(C)C)C(O)=O)[C@@H]1O[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O PIGTXFOGKFOFTO-FVFWYJKVSA-N 0.000 description 1
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000787132 Acidithiobacillus ferridurans Uncharacterized 8.2 kDa protein in mobL 3'region Proteins 0.000 description 1
- 101000827262 Acidithiobacillus ferrooxidans Uncharacterized 18.9 kDa protein in mobE 3'region Proteins 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 101000811747 Antithamnion sp. UPF0051 protein in atpA 3'region Proteins 0.000 description 1
- 241001203868 Autographa californica Species 0.000 description 1
- 101000827607 Bacillus phage SPP1 Uncharacterized 8.5 kDa protein in GP2-GP6 intergenic region Proteins 0.000 description 1
- 101000961975 Bacillus thuringiensis Uncharacterized 13.4 kDa protein Proteins 0.000 description 1
- 241000725138 Banana bunchy top virus Species 0.000 description 1
- 241001302800 Beak and feather disease virus Species 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 101000964407 Caldicellulosiruptor saccharolyticus Uncharacterized 10.7 kDa protein in xynB 3'region Proteins 0.000 description 1
- 206010008631 Cholera Diseases 0.000 description 1
- 241001533399 Circoviridae Species 0.000 description 1
- 108020004638 Circular DNA Proteins 0.000 description 1
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 1
- 208000003322 Coinfection Diseases 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- 108020003215 DNA Probes Proteins 0.000 description 1
- 108010041986 DNA Vaccines Proteins 0.000 description 1
- 239000003298 DNA probe Substances 0.000 description 1
- 229940021995 DNA vaccine Drugs 0.000 description 1
- 102000016928 DNA-directed DNA polymerase Human genes 0.000 description 1
- 108010014303 DNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 238000009007 Diagnostic Kit Methods 0.000 description 1
- SHIBSTMRCDJXLN-UHFFFAOYSA-N Digoxigenin Natural products C1CC(C2C(C3(C)CCC(O)CC3CC2)CC2O)(O)C2(C)C1C1=CC(=O)OC1 SHIBSTMRCDJXLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000000059 Dyspnea Diseases 0.000 description 1
- 206010013975 Dyspnoeas Diseases 0.000 description 1
- 239000006145 Eagle's minimal essential medium Substances 0.000 description 1
- 108010067770 Endopeptidase K Proteins 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 101000768777 Haloferax lucentense (strain DSM 14919 / JCM 9276 / NCIMB 13854 / Aa 2.2) Uncharacterized 50.6 kDa protein in the 5'region of gyrA and gyrB Proteins 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 101000607404 Infectious laryngotracheitis virus (strain Thorne V882) Protein UL24 homolog Proteins 0.000 description 1
- 206010023126 Jaundice Diseases 0.000 description 1
- 101000735632 Klebsiella pneumoniae Uncharacterized 8.8 kDa protein in aacA4 3'region Proteins 0.000 description 1
- 208000008771 Lymphadenopathy Diseases 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 208000009525 Myocarditis Diseases 0.000 description 1
- 201000002481 Myositis Diseases 0.000 description 1
- 101710163270 Nuclease Proteins 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 101710159752 Poly(3-hydroxyalkanoate) polymerase subunit PhaE Proteins 0.000 description 1
- 241001505332 Polyomavirus sp. Species 0.000 description 1
- 101710130262 Probable Vpr-like protein Proteins 0.000 description 1
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Propanedioic acid Natural products OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000287530 Psittaciformes Species 0.000 description 1
- 206010037423 Pulmonary oedema Diseases 0.000 description 1
- 241000235070 Saccharomyces Species 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 101000818100 Spirochaeta aurantia Uncharacterized 12.7 kDa protein in trpE 5'region Proteins 0.000 description 1
- 241000256251 Spodoptera frugiperda Species 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 208000007107 Stomach Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 101001037658 Streptomyces coelicolor (strain ATCC BAA-471 / A3(2) / M145) Glucokinase Proteins 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- UZQJVUCHXGYFLQ-AYDHOLPZSA-N [(2s,3r,4s,5r,6r)-4-[(2s,3r,4s,5r,6r)-4-[(2r,3r,4s,5r,6r)-4-[(2s,3r,4s,5r,6r)-3,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)-4-[(2s,3r,4s,5s,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyoxan-2-yl]oxy-3,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-3,5-dihydroxy-6-(hy Chemical compound O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]1O)O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]1O)O[C@H]1CC[C@]2(C)[C@H]3CC=C4[C@@]([C@@]3(CC[C@H]2[C@@]1(C=O)C)C)(C)CC(O)[C@]1(CCC(CC14)(C)C)C(=O)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O[C@H]4[C@@H]([C@@H](O[C@H]5[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O5)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O UZQJVUCHXGYFLQ-AYDHOLPZSA-N 0.000 description 1
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000316 alkaline earth metal phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 210000002565 arteriole Anatomy 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 1
- 229940031567 attenuated vaccine Drugs 0.000 description 1
- 210000003323 beak Anatomy 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- MSWZFWKMSRAUBD-QZABAPFNSA-N beta-D-glucosamine Chemical compound N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-QZABAPFNSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 229940031416 bivalent vaccine Drugs 0.000 description 1
- 210000000621 bronchi Anatomy 0.000 description 1
- 210000003123 bronchiole Anatomy 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 230000001054 cortical effect Effects 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 239000005546 dideoxynucleotide Substances 0.000 description 1
- QONQRTHLHBTMGP-UHFFFAOYSA-N digitoxigenin Natural products CC12CCC(C3(CCC(O)CC3CC3)C)C3C11OC1CC2C1=CC(=O)OC1 QONQRTHLHBTMGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SHIBSTMRCDJXLN-KCZCNTNESA-N digoxigenin Chemical compound C1([C@@H]2[C@@]3([C@@](CC2)(O)[C@H]2[C@@H]([C@@]4(C)CC[C@H](O)C[C@H]4CC2)C[C@H]3O)C)=CC(=O)OC1 SHIBSTMRCDJXLN-KCZCNTNESA-N 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- PSLWZOIUBRXAQW-UHFFFAOYSA-M dimethyl(dioctadecyl)azanium;bromide Chemical compound [Br-].CCCCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)CCCCCCCCCCCCCCCCCC PSLWZOIUBRXAQW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000009433 disease-worsening effect Effects 0.000 description 1
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 210000003979 eosinophil Anatomy 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N ethidium bromide Chemical compound [Br-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CC)=C1C1=CC=CC=C1 ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005542 ethidium bromide Drugs 0.000 description 1
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 1
- 210000003746 feather Anatomy 0.000 description 1
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003325 follicular Effects 0.000 description 1
- 201000005917 gastric ulcer Diseases 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 1
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000010562 histological examination Methods 0.000 description 1
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000008105 immune reaction Effects 0.000 description 1
- 238000003365 immunocytochemistry Methods 0.000 description 1
- 238000010185 immunofluorescence analysis Methods 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 201000006334 interstitial nephritis Diseases 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 210000001739 intranuclear inclusion body Anatomy 0.000 description 1
- FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N isomaltotriose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O)O1 FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N 0.000 description 1
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 208000018555 lymphatic system disease Diseases 0.000 description 1
- 210000001365 lymphatic vessel Anatomy 0.000 description 1
- 210000003563 lymphoid tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 108010026228 mRNA guanylyltransferase Proteins 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 239000011976 maleic acid Substances 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N methanone Chemical compound O=[14CH2] WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000004570 mortar (masonry) Substances 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 210000004897 n-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 201000008383 nephritis Diseases 0.000 description 1
- 244000309711 non-enveloped viruses Species 0.000 description 1
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 102000013415 peroxidase activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 210000003281 pleural cavity Anatomy 0.000 description 1
- 210000004043 pneumocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229920002627 poly(phosphazenes) Polymers 0.000 description 1
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 1
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 1
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000001902 propagating effect Effects 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 208000005333 pulmonary edema Diseases 0.000 description 1
- 238000000163 radioactive labelling Methods 0.000 description 1
- 229940124551 recombinant vaccine Drugs 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000004576 sand Substances 0.000 description 1
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 1
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 1
- 235000017709 saponins Nutrition 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 208000018655 severe necrosis Diseases 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 235000010356 sorbitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 208000008203 tachypnea Diseases 0.000 description 1
- 206010043089 tachypnoea Diseases 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 1
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 1
- 241000701366 unidentified nuclear polyhedrosis viruses Species 0.000 description 1
- 210000000264 venule Anatomy 0.000 description 1
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
- A61P31/22—Antivirals for DNA viruses for herpes viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/525—Virus
- A61K2039/5252—Virus inactivated (killed)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/55—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the host/recipient, e.g. newborn with maternal antibodies
- A61K2039/552—Veterinary vaccine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55566—Emulsions, e.g. Freund's adjuvant, MF59
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/70—Multivalent vaccine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
- C12N2750/00011—Details
- C12N2750/10011—Circoviridae
- C12N2750/10022—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
- C12N2750/00011—Details
- C12N2750/10011—Circoviridae
- C12N2750/10034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
- C12N2750/00011—Details
- C12N2750/14011—Parvoviridae
- C12N2750/14311—Parvovirus, e.g. minute virus of mice
- C12N2750/14322—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
- C12N2750/00011—Details
- C12N2750/14011—Parvoviridae
- C12N2750/14311—Parvovirus, e.g. minute virus of mice
- C12N2750/14334—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S424/00—Drug, bio-affecting and body treating compositions
- Y10S424/815—Viral vaccine for porcine species, e.g. swine
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/81—Packaged device or kit
Abstract
Изобретение относится к области вирусологии. Предложена иммуногенная композиция, вызывающая иммунный ответ против парвовируса и цирковируса свиньи. Композиция включает в себя по меньшей мере один антиген цирковируса свиньи и по меньшей мере один антиген парвовируса свиньи. Также предложена вакцина (варианты) против многосистемного синдрома истощения свиней (PMWS). Вакцина содержит меньшей мере один антиген цирковируса свиньи и по меньшей мере один антиген парвовируса свиньи. Кроме того, предложен набор для вакцинации и способ ее проведения против PMWS. Предложенная группа изобретений позволяет получать композиции и вакцины против PMWS и проводить эффективную вакцинацию свиней против данного заболевания. Изобретение может быть использовано в ветеринарии для вакцинации свиней против многосистемного синдрома истощения свиней. 6 н. и 36 з.п. ф-лы, 5 ил., 8 табл.
Description
Настоящее изобретение касается вакцины против синдрома МСИС (многосистемного синдрома истощения свиней, также именуемого многосистемным синдромом истощения после отлучения).
В нижеследующем тексте цитируются различные документы, в которых также цитируются или содержатся ссылки на различные документы. Это не означает, что любой из этих документов в самом деле представляет собой предшествующий уровень техники относительно настоящего изобретения. Все документы, цитируемые в настоящем изобретении, как и те, что процитированы или содержатся в качестве ссылок в этих документах, тем самым включаются в настоящее изобретение в виде ссылок.
PCV (от porcine circovirus, что значит цирковирус свиней) первоначально был обнаружен как нецитопатогенная примесь в линии почечных клеток свиней РК/15. Этот вирус был причислен к Circoviridae вместе с вирусом анемии цыплят (CAV, от chicken anaemia virus) и вирусом PBFDV (от psittacine beak and feather disease virus, вирус заболевания клюва и перьев попугаев). Это небольшой безоболочечный вирус (15-24 нм), общей характеристикой которого является геном в виде кольцевой однонитчатой ДНК размером от 1,76 до 2,31 кБ. Сначала полагали, что этот геном кодирует полипептид примерно в 30 кД (Todd et al., Arch. Virol. 1991, 117: 129-135). Однако в недавней работе показано, что транскрипция более сложная (Meehan et al., 1997, 78: 221-227). Более того, не обнаружено значительной гомологии в нуклеотидной последовательности или в общих антигенных детерминантах между тремя типами известных цирковирусов.
PCV из клеток РК/15 не считается патогенным. Его последовательность известна (Meehan et al., J.Gen. Virol. 1997, 78: 221-227). Лишь совсем недавно некоторые авторы стали полагать, что штаммы PCV могут быть патогенными в связи с синдромом МСИС (Gupi P.S. Nayar et al., Can. Vet. J. 1997, 38: 385-387 и Clark E.G., Proc. Am. Assoc. Swine Prac. 1997: 499-501). Nayar et al. обнаружили ДНК PCV у свиней с синдромом МСИС методом ПЦР.
Синдром МСИС, обнаруженный в Канаде, США и Франции, клинически характеризуется постепенной потерей веса и такими проявлениями, как тахипнея, диспнея и желтуха. С точки зрения патологии, его проявления включают лимфоцитическую и грануломатозную инфильтрацию, лимфаденопатию и, реже, гепатит и лимфоцитический и грануломатозный нефрит (Clark E.G., Proc. Am. Assoc. Swine Prac. 1997: 499-501; La Semaine No. 26, supplement to La Semaine 1996, 834; La Semaine 1997, 857: 54; Gupi P.S. Nayar et al., Can. Vet. J. 1997, 38: 385-387).
Подателям заявки удалось выделить новые штаммы PCV из образцов ткани легких и лимфатических узлов, полученных на фермах, расположенных в Канаде, США (Калифорния) и Франции (Бретань). Эти вирусы обнаружены в поврежденных тканях свиней с синдромом МСИС, но они отсутствовали у здоровых свиней.
Кроме того, податели заявки просеквенировали геномы 4 из этих штаммов, а именно штаммов, полученных из Канады и США, а также 2 штаммов из Франции. Штаммы проявляют очень сильную гомологию друг с другом на нуклеотидном уровне, превышающую 96%, и более слабую со штаммом РК/15, около 76%. Таким образом, новые штаммы можно рассматривать как представителей нового типа цирковируса свиней, который в дальнейшем именуется тип II, тогда как тип I представлен РК/15.
Очищенные препараты 5 штаммов были депонированы согласно Будапештскому Договору в ЕСАСС (Европейская коллекция клеточных культур, Центр прикладной микробиологии и иcследований, Porton Down, Salisbury, Wiltshire SP4 0JG, Великобритания) в четверг 2 октября 1997 года:
- за номером V97100219 (в дальнейшем именуется Imp. 1008PCV),
- за номером V97100218 (в дальнейшем именуется Imp. 1010PCV),
- за номером V97100217 (в дальнейшем именуется Imp. 999PCV), и в пятницу 16 января 1998 года:
- за номером V98011608 (в дальнейшем именуется Imp. 1011-48285),
- за номером V98011609 (в дальнейшем именуется Imp. 1011-48121).
Податели заявки в опытах по экспериментальному воспроизведению многосистемного синдрома истощения свиней наблюдали, что парвовирус свиней в сочетании с цирковирусом свиней может вызывать ухудшение заболевания.
Поэтому предметом настоящего изобретения является вакцинация свиней с помощью вакцины против цирковируса свиней, в частности типа I или II, предпочтительно типа II, в сочетании с вакциной против парвовируса свиней. При этом подразумевается вакцинация либо с помощью двухвалентной вакцины, либо применение одновременно вакцины против цирковируса свиней и вакцины против парвовируса свиней.
Контрольным штаммом парвовируса является штамм NADL-2, который можно получить из коллекции АТСС за номером VR-742. Вакцинация против парвовируса свиней хорошо известна специалистам в этой области, и вакцины против парвовируса свиней имеются в продаже. В качестве примера можно отметить Parvovax® (инактивированная вакцина против парвовируса свиней, которую поставляет MERIAL). Также, к примеру, смотрите Р.Vannier et A.Laval, Point Vet 1993, 25(151): 53-60; G.Florent et al., Proceedings of the Ninth Congress of Pig Veterinary Society, July 15-18, 1986, Barcelona, Spain. Что касается ДНК-вакцин, можно порекомендовать, к примеру, WO-A-9803658.
Предметом настоящего изобретения, следовательно, является антигенный препарат против синдрома МСИС, включающий по меньшей мере один антиген цирковируса свиней (предпочтительно цирковируса типа II) и по меньшей мере один антиген парвовируса свиней. В соответствии с изобретением, антиген цирковируса свиней (предпочтительно цирковируса типа II) и антиген парвовируса свиней выбирают, независимо друг от друга, из группы, состоящей из ослабленных цельных живых антигенов, инактивированных цельных антигенов, субъединичных антигенов, рекомбинантных живых векторов и ДНК-векторов. Подразумевается, что в эти комбинации согласно изобретению могут входить любые подходящие антигены или разновидности антигенных препаратов, и что вовсе не обязательно применять одинаковые разновидности для данной комбинации. Кроме того, антигенный препарат может содержать, как это обычно бывает, растворитель или наполнитель, приемлемый с ветеринарной точки зрения, а также, но необязательно, адъювант, приемлемый с ветеринарной точки зрения.
Предметом настоящего изобретения также является иммуногенная композиция или вакцина против синдрома МСИС, включающая эффективное количество антигенного препарата против цирковируса и парвовируса, как описано выше, в растворителе или наполнителе, приемлемом с ветеринарной точки зрения, а также, но необязательно, адъювант, приемлемый с ветеринарной точки зрения. Иммуногенная композиция вызывает иммунологическую реакцию, которая может иметь профилактическое действие, хотя и не обязательно. Соответственно, термин "иммуногенная композиция" включает "вакцинные композиции" (поскольку первый термин может означать профилактическую композицию).
Предметом изобретения также является иммунологический набор или набор для вакцинации, содержащий, в отдельных упаковках, антигенный препарат, иммуногенную композицию или вакцину против цирковируса свиней, и антигенный препарат, иммуногенную композицию или вакцину против парвовируса свиней. Этот набор может обладать различными характеристиками, изложенными выше в отношении антигенных препаратов, иммуногенных композиций и вакцин.
Предметом изобретения также является способ иммунизации или вакцинации против синдрома МСИС, включающий введение иммуногенной композиции или вакцины против цирковируса свиней и иммуногенной композиции или вакцины против парвовируса свиней, или введение двухвалентной иммуногенной композиции или вакцины, включающей, в одном и том же составе, антигенные препараты, специфичные для каждого вируса. В этом способе иммунизации или вакцинации применяются те же вакцины, что определены выше.
Предметом изобретения также является применение антигенного препарата или иммуногенной композиции или вакцины против парвовируса, в частности, как определено выше, для получения фармацевтической композиции, предназначенной для применения в плане профилактики синдрома МСИС, в сочетании с антигенным препаратом или иммуногенной композицией или вакциной против цирковируса свиней.
Для приготовления антигенных препаратов цирковирусы можно получить после культивирования в клетках, особенно в клеточных линиях, например, клетках РК/15. Супернатанты или экстракты культуры, необязательно очищенные стандартными методами, могут применяться в качестве антигенного препарата.
В плане ослабленных антигенных препаратов и ослабленных иммуногенных композиций или вакцин, ослабление может проводиться общепринятыми способами, например, культивированием в клетках, предпочтительно в клетках свиней, особенно клеточных линий, таких как РК/15 (например, 50-150 пересевов, предпочтительно порядка 100). Эти иммуногенные композиции и вакцины в общем случае включают растворитель или разбавитель, приемлемый с ветеринарной точки зрения, необязательно адъювант, приемлемый с ветеринарной точки зрения, а также, но необязательно стабилизатор для лиофилизации.
Эти антигенные препараты, иммуногенные композиции и вакцины, предпочтительно должны содержать от 103 до 107 TCID50 данного ослабленного вируса.
Они могут представлять собой антигенные препараты, иммуногенные композиции и вакцины на основе инактивированного цельного антигена. Инактивированные иммуногенные композиции и вакцины, кроме того включают растворитель или разбавитель, приемлемый с ветеринарной точи зрения, а также, но необязательно, адъювант, приемлемый с ветеринарной точи зрения.
Цирковирусы настоящего изобретения, с теми фракциями, которые могут в них присутствовать, инактивируют способами, известными специалистам в этой области. Инактивация предпочтительно проводится химическим путем, например, обработкой антигена химическим средством, таким как формальдегид (формалин), параформальдегид, β-пропиолактон или этиленимин или его производные. Предпочтительным способом инактивации в настоящем изобретении является обработка химическим агентом, в частности, этиленимином или β-пропиолактоном.
Предпочтительно, инактивированные антигенные препараты и инактивированные иммуногенные композиции и вакцины настоящего изобретения также могут содержать адъювант, предпочтительно введенный в виде эмульсии, например, вода-в-масле или масло-в-воде, согласно методам, хорошо известным специалистам в этой области. Адъювантный компонент может также происходить путем инкорпорации общепринятого адъювантного соединения в активный ингредиент.
В числе адъювантов, которые можно использовать, в качестве примера можно упомянуть гидроокись алюминия, сапонины (например, сапонин Quillaja или Quil A; смотри Vaccine Design, The Subunit and Adjuvant Approach, 1995, edited by Michael F. Powel and Mark J. Newman, Plenum Press, New York and London, p.210), Avridine® (Vaccine Design, p.148), DDA (диметилдиоктадециламмоний бромид, Vaccine Design, p.157), полифосфазен (Vaccine Design, p.204), или же эмульсии масло-в-воде на основе минерального масла, сквалена (например, эмульсия SPT, Vaccine Design, p.147), сквалена (например, MF59, Vaccine Design, p.183), или эмульсий вода-в-масле на основе метаболизируемого масла (предпочтительно согласно WO-A-9420071), а также эмульсий, описанных в US-A-5422109. Можно также выбрать комбинации адъювантов, например, Avridine® или DDA в сочетании с эмульсией.
Эти антигенные препараты, иммуногенные композиции и вакцины предпочтительно должны содержать от 105 до 108 ТСID50 данного инактивированного цельного вируса.
Адъюванты для живых вакцин, описанных выше, можно выбрать из числа тех, что приведены для инактивированных вакцин. Предпочтительны эмульсии. К тем, что указаны для инактивированных вакцин, можно добавить те, которые описаны в WO-A-9416681.
Что касается стабилизаторов для лиофилизации, то в качестве примера можно упомянуть SPGA (Bovarnik et al., J Bacteriol 59, 509, 950), такие углеводы, как сорбитол, маннитол, крахмал, сахароза, декстран или глюкоза, такие белки, как альбумин или казеин, производные этих соединений, или буферы типа фосфатов щелочноземельных металлов.
Антигенные препараты, иммуногенные композиции и вакцины согласно изобретению могут содержать один или несколько активных ингредиентов (антигенов) из одного или нескольких цирковирусов и/или парвовирусов настоящего изобретения.
Податели заявки, кроме того, получили геномы 4 изолятов цирковируса свиней типа II, которые обозначены как SEQ ID No. 1-4. Последовательность штамма РК/15 обозначена как SEQ ID No. 5. Разумеется, изобретение автоматически распространяется на эквивалентные последовательности, то есть последовательности, не изменяющие функциональность или штаммоспецифичность описанной последовательности или полипептидов, кодируемых этой последовательностью. Конечно, сюда относятся и последовательности, отличающиеся вследствие вырожденности кода.
Изобретение также распространяется на те эквивалентные последовательности, что способны гибридизироваться с указанной выше последовательностью в условиях высокой строгости или имеют высокую степень гомологии со штаммами изобретения.
Эти последовательности и их фрагменты можно с пользой применять для экспрессии полипептидов in vitro или in vivo с помощью соответствующих векторов.
В частности, в геномных последовательностях цирковирусов типа II были идентифицированы открытые рамки считывания (ORF 1-13), образующие фрагменты ДНК настоящего изобретения, которые можно применять для этой цели. Изобретение охватывает любые полипептиды, содержащие по меньшей мере одну из этих открытых рамок считывания (соответствующие аминокислотные последовательности). Предпочтительно, изобретение охватывает белки, в основном состоящие из ORF4, ORF7, ORF10 или ORF13.
Для экспрессии субъединиц in vitro в качестве средства экспрессии предпочтительно применяются Е.coli или бакуловирусы (US-A-4745051). Кодирующие последовательности или их фрагменты можно интегрировать в геном бакуловируса (например, бакуловируса Autographa californica, иначе Nuclear polyhedrosis virus, или AcNPV) и размножить этот бакуловирус в клетках насекомых, к примеру, Spodoptera frugiperda Sf9 (депозит CRL 1711 в АТТС). Субъединицы также можно продуцировать в таких эукариотических клетках, как дрожжи (например, Saccharomyces cerevisae), или клетках млекопитающих (например, СНО, ВНК).
Предметом изобретения также является применение в качестве субъединиц тех полипептидов, что продуцируются in vitro с помощью этих средств экспрессии, а затем, но необязательно, очищенных общепринятыми методами. Субъединичные иммуногенные композиции и вакцины содержат по меньшей мере один полипептид, полученный таким способом, или фрагмент, в растворителе или разбавителе, приемлемом с ветеринарной точки зрения, а также, но необязательно, адъювант, приемлемый с ветеринарной точки зрения.
Для экспрессии in vivo в целях получения иммуногенных композиций и вакцин, рекомбинантных живых или на основе ДНК, кодирующие последовательности или их фрагменты вставляют в соответствующий экспрессионный вектор в условиях, позволяющих экспрессию полипептида. В качестве живых векторов можно предпочтительно использовать живые вирусы, предпочтительно способные размножаться в свиньях, непатогенные для свиней (природно непатогенные или сделанные такими), согласно методам, хорошо известным специалистам в этой области. В частности, можно использовать герпесвирусы свиней типа вируса болезни Aujeszky, аденовирусы свиней, поксвирусы, особенно вирус коровьей оспы, вирусы оспы птиц, вирус оспы канареек, вирус оспы свиней. Также можно использовать в качестве векторов ДНК-векторы (WO-А-9011092, WO-A-9319813, WO-A-9421797, WO-A-9520660).
Предметом изобретения, следовательно, также являются векторы и иммуногенные композиции или вакцины, рекомбинантные живые или на основе ДНК (полинуклеотида), полученные таким способом, их получение и их применение, а также иммуногенные композиции и вакцины, дополнительно включающие растворитель или разбавитель, приемлемый с ветеринарной точки зрения.
По определению, иммуногенная композиция или вакцина на основе ДНК включает ДНК-вектор, являющийся кольцевой вакцинной плазмидой, суперскрученной или нет, или линейной молекулой ДНК, несущей и экспрессирующей in vivo нуклеотидную последовательность, кодирующую антигенный полипептид.
Иммуногенные композиции и вакцины, рекомбинантные и на основе ДНК, могут содержать адъювант.
В плане программ комбинированной иммунизации или вакцинации можно также комбинировать иммунизацию или вакцинацию против цирковируса свиней и парвовируса свиней с иммунизацией или вакцинацией против других патогенов свиней, в частности тех, что могут быть связаны с синдромом МСИС. Иммуногенная композиция или вакцина, согласно изобретению, следовательно, может содержать другую валентность, соответствующую другому патогену свиней, в число которых входят PRRS (репродуктивный и респираторный синдром свиней), и/или Мусорlasma hyopneumoniae, E.coli, и/или атрофический ринит, и/или вирус псевдобешенства (болезнь Aujeszky), и/или свиной грипп, и/или Actinobacillus pleuropneumoniae, и/или холера свиней и их комбинации. Предпочтительно, в программах иммунизации или вакцинации и в вакцинах согласно изобретению комбинируют иммунизацию или вакцинацию против цирковируса и парвовируса, а также против PRRS (WO-A-93/07898, WO-A-94/18311, FR-A-2709966; С. Charreyre et al., Proceedings of the 15th IPVS Congress, Birmingam, England, 5-9 July 1998, p.139) и/или Mycoplasma hyopneumoniae (EP-A-597852, EP-A-550477, EP-A-571648; О.Martion et al., p.157, 284, 285 и G.Reynaud et al., p.150 в указанных выше Proceedings of the 15th IPVS Congress) и/или гриппа свиней. Таким образом, можно использовать любые подходящие виды иммуногенных композиций или вакцин, в частности, любые коммерческие вакцины, комбинируя их с иммуногенной композицией или вакциной против цирковируса свиней и парвовируса свиней, описанной в настоящем изобретении.
Предметом настоящего изобретения, следовательно, также являются мультивалентные иммуногенные композиции и вакцины, мультивакцинные наборы, и способы комбинированной иммунизации или вакцинации, дающие возможность применять такие программы комбинированной иммунизации или вакцинации.
Далее изобретение и его воплощения будут раскрыты в неограничивающих примерах, со ссылками на соответствующие чертежи.
ПЕРЕЧЕНЬ ФИГУР
Фигура 1. Последовательность геномной ДНК штамма Imp.1011-48121.
Фигура 2. Последовательность геномной ДНК штамма Imp.1011-48285.
Фигура 3. Последовательность геномной ДНК штамма Imp.999.
Фигура 4. Последовательность геномной ДНК штамма Imp.1010.
Фигура 5. Сопоставление 4 последовательностей, соответствующих Фигурам 1-4, с последовательностью штамма РК/15 PCV.
ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ
SEQ ID No. 1. Последовательность геномной ДНК штамма Imp.1011-48121.
SEQ ID No. 2. Последовательность геномной ДНК штамма Imp.1011-48285.
SEQ ID No. 3. Последовательность геномной ДНК штамма Imp.999.
SEQ ID No. 4. Последовательность геномной ДНК штамма Imp.1010.
SEQ ID No. 5. Последовательность геномной ДНК штамма РК/15.
ПРИМЕРЫ
Пример 1. Культурирование и выделение штаммов цирковируса свиней
Образцы тканей из легких и лимфатических узлов поросят собирали во Франции, Канаде и США. Эти поросята проявляли клинические симптомы, типичные для многосистемного синдрома истощения после отлучения. Для облегчения выделения вируса образцы тканей замораживали при -70°С сразу после аутопсии.
Для выделения вируса готовили суспензии, содержащие примерно 15% образца ткани, в минимальной среде, содержащей соли Эрла (ЕМЕМ, BioWhittaker UK Ltd., Wokingham, UK), пенициллин (100 Ед/мл) и стрептомицин (100 мкг/мл) (среда МЕМ-SA), путем растирания ткани стерильным песком с помощью стерильной ступки с пестиком. Этот протертый препарат затем суспендировали в MEM-SA, а затем центрифугировали 30 минут при 3000×g при +4°С и собирали супернатант.
Перед инокуляцией клеточных культур добавляли 100 мкл хлороформа к 2 мл каждого супернатанта и перемешивали непрерывно 10 минут при комнатной температуре. Эту смесь затем переносили в микроцентрифужную пробирку, центрифугировали 10 минут при 3000×g и собирали супернатант. Затем этот супернатант использовали в качестве инокулума в опытах по выделению вируса.
Во всех опытах по выделению вируса использовали культуры клеток РК/15, которые, как известно, не заражены цирковирусом свиней (PCV), пестивирусами, аденовирусами свиней и парвовирусами свиней (Allan G. et al., Pathogenesis of porcine circovirus experimental infections of colostrums-deprived piglets and examination of pig foetal material. Vet. Microbiol. 1995, 44: 49-64).
Выделение цирковирусов свиней проводили по следующей методике.
Монослои клеток РК/15 диссоциировали трипсинизацией (с помощью смеси трипсин-версен, версен = ЭДТА) конфлуэнтных культур и суспендировали в среде MEM-SA, содержащей 15% эмбриональной телячьей сыворотки, не зараженной пестивирусом (= среда MEM-G), до конечной концентрации примерно 400000 клеток/мл. Порции по 10 мл этой клеточной суспензии смешивали с 2 мл различных инокулумов, описанных выше, затем эти смеси разделяли по 6 мл в две колбы Falcon на 25 см2. Эти культуры инкубировали при 37°С в течение 18 часов в атмосфере, содержащей 10% СO2.
После инкубации культуральную среду полуконфлуэнтных монослоев обрабатывали 300 мМ D-глюкозамина (Сat. # G48175, Sigma-Aldrich Company Limited, Poole, UK) (Tischr I. et al., Arch. Virol., 1987, 96: 39-57) и продолжали инкубацию еще 48-72 часа при 37°С. После этой последней инкубации одну из двух колб Falcon каждого инокулума подвергали 3 циклам замораживания/оттаивания подряд. Клетки РК/15 в оставшейся колбе Falcon обрабатывали раствором трипсин-версена, ресуспендировали в 20 мл среды MEM-G и инокулировали в колбы Falcon на 75 см2 при концентрации 400000 клеток/мл, свежеинокулированные колбы сразу же "суперинфицировали" добавлением 5 мл соответствующего лизата, полученного после замораживания-оттаивания.
Пример 2. Подготовка образцов клеточной культуры для обнаружения цирковирусов свиней по иммунофлуоресценции и гибридизации in situ
Отбирали 5 мл "суперинфицированной" культуры и инокулировали в чашку Петри диаметром 55 мм, содержащую стерильное и обезжиренное покровное стекло. Культуры в колбах и на покровных стеклах инкубировали при 37°С и обрабатывали глюкозамином, как описано в Примере 1. Культуры на покровных стеклах вынимали через 24-48 часов после обработки глюкозамином и фиксировали либо ацетоном в течение 10 минут при комнатной температуре, либо 10% формальдегидом в буфере в течение 4 часов. После фиксации все покровные стекла хранили при -70°С на силикагеле до употребления в опытах по гибридизации in situ и иммуноцитохимии с меткой.
Пример 3. Обнаружение последовательностей PCV методом гибридизации in situ
Гибридизацию in situ проводили в фиксированных формальдегидом образцах тканей больных свиней, а также в препаратах клеточных культур, инокулированных для выделения вируса (см. Пример 2) и фиксированных на покровных стеклах.
Использовали полные геномные зонды, соответствующие цирковирусу свиней (PCV) PK/15 и вирусу инфекционной анемии цыплят (CAV). В качестве специфического источника ДНК вируса PCV использовали плазмиду pPCV1, содержащую репликативную форму генома PCV, клонированную в виде одной вставки в 1,7 тысяч пар оснований (т.п.о., или кБ) (Meehan В. et al. Sequence of porcine circovirus DNA: affinities with plant circoviruses, J.Gen. Virol. 1997, 78: 221-227). Аналогичную плазмиду pCAA1, содержащую репликативную форму цирковируса птиц CAV в 2,3 кБ, использовали в качестве отрицательного контроля. Соответствующие концентраты обоих плазмид в глицерине использовали для получения и очистки плазмид методом щелочного лизиса (Sambrook J. et al. Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2nd Edition, Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, New York, 1989), которые затем применяли в качестве матриц для приготовления зондов. Цирковирусные зонды, представляющие полные геномы PCV и CAV, получали из очищенных плазмид, описанных выше (по 1 мкг для каждого зонда), и гексануклеотидных случайных праймеров с помощью коммерческого набора для нерадиоактивного мечения ("DIG DNA labelling kit", Boehringer Mannheim, Lewes, UK) согласно рекомендациям поставщика.
Меченные дигоксигенином зонды суспендировали в 50-100 мкл стерильной воды перед употреблением для гибридизации in situ.
Образцы тканей больных свиней, залитые в парафин и фиксированные формальдегидом, а также препараты инфицированных клеточных культур, фиксированные формальдегидом, подготавливали для обнаружения нуклеиновых кислот PCV следующим образом.
Срезы толщиной 5 мкм нарезали из залитых парафином образцов тканей, удаляли парафин, а затем регидратировали в растворах спирта с последовательно снижающейся концентрацией. Тканевые срезы и клеточные культуры, фиксированные формальдегидом, инкубировали по 15 и по 5 минут, соответственно, при 37°С в 0,5% растворе протеиназы К в 0,05 М трис-НСl буфере, содержащем 5 мМ ЭДТА (рН 7,6). Затем препараты помещали в 1% раствор глицина в автоклавированной дистиллированной воде на 30 секунд, промывали дважды 0,01 М буфером PBS (фосфатный буфер в физрастворе) (рН 7,2), наконец, промывали в течение 5 минут в стерильной дистиллированной воде. Наконец, их высушивали на открытом воздухе и покрывали растворами зондов.
Каждый препарат ткани/зонда накрывали чистым и обезжиренным покровным стеклом и помещали на 10 минут в печь при 90°С, а затем помещали на кусок льда на 1 минуту, и наконец инкубировали 18 часов при 37°С. Препараты затем окунали в 2Х солевой буферный раствор цитрата натрия (SSC) (рН 7,0) для того, чтобы снять защитные покровные стекла, затем промывали дважды по 5 минут 2Х буфером SSC и наконец промывали дважды по 5 минут буфером PBS.
После этих промывок препараты погружали в раствор 0,1 М малеиновой кислоты, 0,15 М NaCl (рН 7,5) (малеиновый буфер) на 10 минут, а затем инкубировали в 1% растворе блокирующего реактива (Cat. # 1096176, Boehringer Mannheim UK, Lewis, East Sussex, UK) в малеиновом буфере 20 минут при 37°С.
Затем препараты инкубировали с моноклональным антителом против дигоксигенина (Boehringer Mannheim), разведенным 1:250 в блокирующем буфере, в течение 1 часа при 37°С, промывали PBS, а затем инкубировали с биотинилированным антителом против мышиного иммуноглобулина 10 минут при 37°С. Препараты промывали PBS и блокировали эндогенную пероксидазную активность обработкой 0,5% раствором перекиси водорода в PBS в течение 20 минут при комнатной температуре. Препараты опять промывали PBS и обрабатывали субстратом, 3-амино-9-диэтилкарбазолом (АВС) (Cambridge Bioscience, Cambridge, UK), который готовили непосредственно перед употреблением.
После последней промывки водопроводной водой препараты окрашивали гематоксилином, отмывали водопроводной водой и фиксировали на покровных стеклах для микроскопии с помощью фиксирующего раствора (GVA Mount, Cambridge Bioscience, Cambridge, UK). Экспериментальные контроли заключались в применении неродственного отрицательного зонда (CAV) и положительного зонда (PCV) для образцов, полученных из больных свиней и не болевших свиней.
Пример 4. Обнаружение PCV с помощью иммунофлуоресценции
Начальное скринирование всех препаратов клеточных культур, фиксированных ацетоном, проводили методом непрямой иммунофлуоресценции (НИФ), используя разведение 1:100 смешанной сыворотки взрослых свиней. Эта смешанная сыворотка содержит сыворотки 25 взрослых свиноматок из Северной Ирландии и, как известно, содержит антитела против целого ряда вирусов свиней, включая PCV: парвовируса свиней, аденовируса свиней и вируса PRRS. НИФ проводили, покрывая сывороткой (разведенной PBS) клеточные культуры в течение 1 часа при 37С, а затем промывали дважды PBS. После этого клеточные культуры окрашивали разведенным 1:80 в PBS кроличьим антителом против иммуноглобулина свиней, конъюгированного с флуоресцеин изотиоцианатом, в течение 1 часа, а затем промывали PBS и фиксировали в глицериновом буфере для микроскопии в ультрафиолетовом свете.
Пример 5. Результаты гибридизации in situ в тканях больных свиней
Гибридизация in situ с помощью геномного зонда PCV на препаратах тканей поросят с многосистемным истощением из Франции, Канады и Калифорнии, фиксированных формальдегидом, выявила присутствие нуклеиновых кислот PCV в поврежденных тканях в ряде исследованных тканей. Сигнала не наблюдалось, когда геномный зонд PCV применяли на тканях не болевших свиней, или когда применяли зонд CAV на тканях больных свиней. Присутствие нуклеиновых кислот PCV отмечалось в цитоплазме и ядрах многочисленных одноядерных клеток, инфильтрирующих поврежденные ткани легких у калифорнийских поросят. Присутствие нуклеиновых кислот PCV было также установлено в пневмоцитах, эпителиальных клетках бронхов и бронхиол, и в эндотелиальных клетках артериол, венул и лимфатических сосудов.
У больных французских свиней присутствие нуклеиновых кислот PCV обнаружено в цитоплазме многочисленных фолликулярных лимфоцитов и одноядерных клеток внутри синусов лимфатических узлов. Нуклеиновые кислоты PCV также обнаруживались в некоторых синцитиях. На основе этих результатов были взяты образцы легких у калифорнийских свиней, брыжеечных лимфатических узлов у французских свиней и органов канадских свиней в целях выделения новых штаммов цирковируса свиней.
Пример 6. Результаты клеточной культуры новых штаммов цирковируса свиней и обнаружение по иммунофлуоресценции
Не наблюдалось никаких цитопатических эффектов в клеточных культурах, инокулированных образцами, взятыми у французских поросят (штамм Imp. 1008), калифорнийских поросят (штамм Imp. 999) и канадских поросят (штамм Imp.1010), проявлявших клинические симптомы многосистемного синдрома истощения. Однако иммуномечение препаратов, полученных из инокулированных клеточных культур, фиксированных ацетоном и обработанных смешанной поликлональной сывороткой свиней, показало флуоресценцию в ядрах многочисленных клеток из культур, инокулированных образцами легких калифорнийских поросят (штамм Imp. 999), брыжеечных лимфатических узлов французских поросят (штамм Imp. 1008) и органов канадских поросят (штамм Imp. 1010).
Пример 7. Экстракция геномной ДНК цирковирусов свиней
Репликативные формы новых штаммов цирковируса свиней (PCV) получали из инфицированных культур клеток РК/15 (см. Пример 1) (10 колб Falcon на 75 см2), которые собирали после 72-76 часов инкубации и обрабатывали глюкозамином, как описано для клонирования репликативной формы CAV (Todd D. et al. Dot blot hybridization assay for chicken anaemia agent using a cloned DNA probe, J.Clin. Microbiol. 1991, 29: 933-939). Двунитевую ДНК этих репликативных форм экстрагировали модифицированным методом Хирта (Hirt, В. Selective extraction of polyoma virus DNA from infected cell cultures, J.Mol. Biol. 1967, 36: 365-369), как описано y Molitor (Molitor T.W. et al. Porcine parvovirus DNA: characterization of the genomic and replicative form DNA of two virus isolates. Virology, 1984, 137: 241-254.
Пример 8. Рестрикционная карта репликативной формы генома штамма Imp. 999 цирковируса свиней
ДНК (1-5 мкг), экстрагированную методом Хирта, обрабатывали нуклеазой S1 (Amersham) согласно рекомендациям поставщика, после чего расщепляли различными рестрикционными ферментами (Boehringer Mannheim, Lewis, East Sussex, UK) и продукты рестрикции разделяли методом электрофореза в 1,5% агарозном геле в присутствии этидийбромида, как описано у Todd et al. (Purification and biochemical characterization of chicken anemia agent. J.Gen. Virol. 1990, 71: 819-823). ДНК, экстрагированная из культур штамма Imp. 999, обладает уникальным сайтом EcoRI, двумя сайтами SacI и не обладает сайтом PstI. Тем самым этот рестрикционный профиль отличается от рестрикционного профиля PCV штамма РК/15 (Meehan В. et al. Sequence of porcine circovirus DNA; affinities with plant circoviruses, 1997, 78: 221-227), который, наоборот, обладает сайтом PstI и не обладает сайтом EcoRI.
Пример 9. Клонирование генома цирковируса свиней штамма Imp. 999
Рестрикционный фрагмент размером около 1,8 кБ, полученный при расщеплении двунитевой репликативной формы PCV штамма Imp. 999 рестрикционным ферментом EcoRI, выделяли после электрофореза в 1,5% агарозном геле (см. Пример 3) с помощью коммерческого набора фирмы Qiagen (QUIAEXII Gel Extraction Kit, Cat. # 20021, QIAGEN Ltd., Crawley, West Sussex, UK). Затем этот рестрикционный фрагмент EcoRI-EcoRI лигировали с вектором pGEM-7 (Promega, Medical Supply Company, Dublin, Ireland), который предварительно расщепляли тем же рестрикционным ферментом (EcoRI) и дефосфорилировали, согласно стандартным методам клонирования (Sambrook J. et al. Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2nd Edition, Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, New York, 1989). Полученные плазмиды вводили в штамм хозяина Escherichia coli JM109 (Stratagen, La Jolla, USA) путем трансформации стандартными методами. Рестрикционный фрагмент EcoRI-EcoRI штамма Imp. 999 также клонировали в сайт EcoRI вектора pBlueScript SK+ (Stratagen Inc., La Jolla, USA). Из клонов, полученных в каждом штамме хозяина, отбирали не менее 2 клонов, содержащих фрагменты ожидаемого размера. Полученные клоны затем культурировали и выделяли плазмиды, содержащие полный геном штамма Imp. 999, в небольшом объеме (2 мл) или в большом объеме (250 мл) стандартными методами получения и очистки плазмид.
Пример 10. Секвенирование геномной ДНК (двунитевой репликативной формы) PCV штамма Imp. 999
Нуклеотидную последовательность двух EcoRI-клонов Imp. 999 (клоны pGEM-7/2 и pGEM-7/8) определяли дидезоксинуклеотидным методом Сангера с помощью набора для секвенирования "AmpliTaq DNA polymerase FS" (Cat. # 402079 РЕ Applied Biosystems, Warrington, UK) и автоматического секвенатора АВ1373А фирмы Applied Biosystems согласно рекомендациям поставщика. Начальные реакции секвенирования проводили с помощью "прямого" и "обратного" универсальных праймеров М13. Последующие реакции секвенирования проводили методом "продвижения по ДНК". Олигонуклеотиды для этих последующих реакций секвенирования были синтезированы фирмой Life Technologies (Inchinnan Business Park, Paisley, UK).
Полученные последовательности собирали вместе и анализировали с помощью программы MacDNASIS версии 3.2 (Cat. # 22020101, Appligene, Durham, UK). Различные открытые рамки считывания анализировали с помощью алгоритма BLAST через сервер Национального Центра Биотехнологической Информации (NCBI, Bethesda, MD, USA).
Полная последовательность (фрагмент EcoRI-EcoRI) представлена в SEQ ID No. 3 (Фигура 3). Она представляет общую последовательность этого штамма, за начало которой было принято начало сайта EcoRI, то есть G в качестве первого нуклеотида.
Такая же процедура проводилась для получения последовательностей других 3 изолятов настоящего изобретения (см. SEQ ID No. 1, 2 и 4 и Фигуры 1, 2 и 4).
Размеры генома этих 4 штаммов составляют:
Imp. 1011-48121 1767 нуклеотидов
Imp. 1011-48285 1767 нуклеотидов
Imp. 999 1768 нуклеотидов
Imp. 1010 1768 нуклеотидов
Пример 11. Анализ последовательности PCV штамма Imp. 999
Когда последовательность штамма Imp. 999 проверили на гомологию к последовательностям, содержащимся в базе данных GenBank, была обнаружена только одна существенная гомология примерно в 76% (на уровне нуклеиновой кислоты) к последовательности штамма РК/15 (инвентарные номера Y09921 и U49186) (см. Фигуру 5).
На аминокислотном уровне проверка на гомологию продуктов трансляции в 6 фазах в базах данных (алгоритм BLAST X на сервере NABI) выявила гомологию в 94% к открытой рамке считывания, которая теоретически соответствует репликазе вируса BBTV, близкого цирковирусам растений (идентификационный номер 1841515 в GenBank), и кодируется последовательностью U49186 в базе данных GenBank.
Никакие другие последовательности, содержащиеся в базах данных, не проявляли существенной гомологии к последовательности, полученной из PCV штамма Imp. 999.
Анализ последовательностей, полученных из культур штамма Imp. 999, происходящих из поврежденных тканей калифорнийских поросят с клиническими симптомами многосистемного синдрома истощения, четко показывает, что этот изолят вируса является новым штаммом цирковируса свиней.
Пример 12. Сравнительный анализ последовательностей
Проводили сопоставление нуклеотидных последовательностей 4 новых штаммов PCV с последовательностью PCV РК/15 штамма (Фигура 5). Была составлена матрица гомологии между 4 новыми штаммами и штаммом РК/15 со следующими результатами:
1=Imp. 1011-48121
2=Imp. 1011-48285
3=Imp. 999
4=Imp. 1010
5=РК/15 (см. табл.1).
Гомология между двумя французскими штаммами Imp. 1011-48121 и Imp. 1011-48285 составляет более 99% (0,9977).
Гомология между двумя североамериканскими штаммами Imp. 999 и Imp. 1010 также составляет более 99% (0,9949). Гомология между французскими штаммами и североамериканскими штаммами слегка превышает 96%.
Гомология между всеми этими штаммами и РК/15 попадает между 75 и 76%.
Отсюда можно заключить, что штаммы настоящего изобретения представляют собой новый тип цирковируса свиней, отличный от типа, представленного штаммом РК/15. Этот новый тип, выделенный из свиней, проявляющих синдром МСИС, назван типом II цирковируса свиней, тогда как РК/15 представляет тип I. Штаммы, принадлежащие к типу II, проявляют заметную гомогенность по нуклеотидной последовательности, несмотря на то, что они выделены из регионов, географически сильно удаленных друг от друга.
Пример 13. Анализ белков, кодируемых геномом новых штаммов PCV
Нуклеотидная последовательность изолята Imp. 1010 была признана репрезентативной для остальных штаммов цирковируса, имеющих отношение к многосистемному синдрому истощения. Эту последовательность подробно анализировали с помощью алгоритма BLASTX (Altschul et al., J. Mol. Biol. 1990, 215: 403-410) и комбинации программ из набора MacVector 6.0 (Oxford Molecular Group, Oxford ОХ4 4GA, UK). В этой последовательности (кольцевом геноме) оказалось 13 открытых рамок считывания (ORF) размером более, чем 20 аминокислот. Эти 13 ORF приводятся в табл.2.
Положения начала и конца каждого ORF относятся к последовательности, представленной на Фигуре 4 (SEQ ID No. 4), из генома штамма 1010. Границы ORF 1-13 идентичны и для штамма 999. Они также идентичны для штаммов 1011-48121 и 1011-48285, за исключением ORF 3 и 13:
ORF3 1432-1539, смысловая, 108 нуклеотидов, 35 аминокислот
ORF13 314-1377, антисмысловая, 705 нуклеотидов, 35 аминокислот.
Четыре из этих 13 ORF имеют значительную гомологию с аналогичными ORF в геноме клонированного вируса PCV РК/15. Проанализировали каждую из открытых рамок считывания, присутствующих в геноме всех изолятов цирковируса, имеющих отношение к многосистемному синдрому истощения. Эти 4 ORF приводятся в табл.3.
Положения начала и конца каждого ORF относятся к последовательности, представленной на Фигуре 4 (SEQ ID No. 4). Размер ORF (в нуклеотидах) включает стоп-кодон.
Сравнение организации генома изолятов PCV Imp. 1010 и РК/15 позволило выявить 4 консервативные ORF в геноме этих двух вирусов. В табл.4 представлены их степени гомологии:
Наибольшая идентичность наблюдается между последовательностями ORF4 Imp. 1010 и ORF1 PK/15 (гомология 86%). Это и ожидалось, так как этот белок, вероятно, участвует в репликации вирусной ДНК и абсолютно необходим для размножения вируса (Meehan et al., J.Gen. Virol. 1997, 78: 221-227; Mankertz et al., J. Gen. Virol. 1998, 79: 381-384).
Идентичность последовательности между ORF13 Imp. 1010 и ORF2 PK/15 менее сильная (гомология 66,4%), однако каждая из них проявляет сильно консервативный N-концевой основный участок, идентичный N-концевому участку основного структурного белка цирковируса птиц CAV (Meehan et al., Arch. Virol. 1992, 124: 301-319). Кроме того, наблюдаются большие отличия между ORF7 Imp. 1010 и ORF3 PK/15 и между ORF10 Imp. 1010 ORF4 PK/15. В каждом случае имеется делеция С-концевого участка в ORF7 и ORF10 изолята Imp. 1010 при сравнении с ORF3 и ORF4 PCV штамма PK/15. Наибольшая гомология последовательности наблюдается на уровне N-концевых участков ORF7/ORF3 (гомология 61,5% в перекрывающемся участке) и ORF10/ORF4 (гомология 85% в перекрывающемся участке).
По-видимому, геном цирковируса свиней имеет весьма сложную организацию вследствие его чрезвычайной компактности. Основной структурный белок, вероятно, образуется посредством сплайсинга в нескольких рамках считывания, расположенных на одной и той же нити генома цирковируса свиней. Следовательно, можно полагать, что любая из открытых рамок считывания (от ORF1 до ORF13), описанных в таблице выше, может представлять собой весь или часть антигенного белка, кодируемого цирковирусом свиней типа II, и поэтому может служить в качестве антигена для специфического диагноза и/или вакцинации. Изобретение поэтому касается любого из белков, состоящих в основном из ORF4, ORF7, ORF10 или ORF13.
Пример 14. Инфекционная природа генома PCV, клонированного из новых штаммов
Плазмиду pGEM-7/8, содержащую полный геном (репликативную форму) изолята Imp. 999, вводили в клетки РК/15 путем трансфекции по методу, описанному Meehan В. et al. (characterization of viral DNAs from cells infected with chicken anemia agent: sequence analysis of the cloned replicative form and transfection capabilities of cloned genome fragments. Arch. Virol. 1992, 124: 301-319). Иммунофлуоресцентный анализ (см. Пример 4) первого пересева после трансфекции незараженных клеток РК/15 показал, что плазмида pGEM-7/8 способна индуцировать образование инфекционного вируса PCV. Наличие клона, содержащего инфекционный генетический материал PCV, позволяет проводить любые полезные изменения в геноме вируса с целью получения модифицированных вирусов PCV (либо ослабленных в свиньях, либо дефектных), которые можно использовать для продукции ослабленных или рекомбинантных вакцин, или для продукции антигена для диагностических наборов.
Пример 15. Продукция антигенов PCV в культуре in vitro
Культивирование незараженных клеток РК/15 и размножение вируса проводили теми же методами, что в Примере 1. Инфицированные клетки собирали после трипсинизации после 4 дней инкубации при 37°С и подсчитывали. При следующем пересеве их инокулировали из расчета 400000 инфицированных клеток на 1 мл.
Пример 16. Инактивация вирусных антигенов
По окончании культивирования вируса собирали инфицированные клетки и лизировали с помощью ультразвука (Branson Sonifier) или с помощью измельчителя типа ротор-статор (UltraTurrax, IKA). Эту суспензию затем центрифугировали 30 минут при 3700×g. Вирусную суспензию инактивировали 0,1% этиленимином в течение 18 часов при 37°С или 0,5% β-пропиолактоном в течение 24 часов при 28°С. Если титр вируса перед инактивацией недостаточен, вирусную суспензию концентрировали ультрафильтрацией с помощью мембраны, имеющей предел исключения 300 кД (Millipore PTMK300). Суспензию инактивированного вируса хранили при +5°С.
Пример 17. Приготовление вакцины в виде эмульсии на основе минерального масла
Вакцину готовили согласно следующей формуле:
- суспензия инактивированного цирковируса свиней 250 мл
- Montanide® ISA 70 (SEPPIC) 750 мл
Водную фазу и масляную фазу по отдельности стерилизовали фильтрованием. Эмульсию получали путем смешивания и гомогенизации ингредиентов с помощью турбинного эмульгатора Silverson.
Одна доза вакцины содержит около 107,5 ТСID50. Объем одной дозы вакцины составляет 0,5 мл для внутрикожного введения и 2 мл для внутримышечного введения.
Эта вакцина применяется в программе вакцинации против многосистемного синдрома истощения в сочетании с вакциной Parvovax®.
Пример 18. Приготовление вакцины в виде эмульсии на основе метаболизируемого масла
Вакцину готовили согласно следующей формуле:
- суспензия инактивированного цирковируса свиней 200 мл
- Dehymuls HRE 7 (Henkel) 60 мл
- Radia 7204 (Oleofina) 740 мл
Водную фазу и масляную фазу по отдельности стерилизовали фильтрованием.
Эмульсию получали путем смешивания и гомогенизации ингредиентов с помощью турбинного эмульгатора Silverson.
Одна доза вакцины содержит около 107,5 ТСID50. Объем одной дозы вакцины составляет 2 мл для внутримышечного введения.
Эта вакцина применяется в программе вакцинации против многосистемного синдрома истощения в сочетании с вакциной Parvovax®.
Пример 19. Результаты непрямой иммунофлуоресценции в отношении штаммов вируса PCV из США и Франции и загрязнения в РК/15 с помощью гипериммунной сыворотки (PCV-T) и серии моноклональных антител F99, полученных из РК/15, и гипериммунной сыворотки, полученной из канадского штамма (PCV-C) (табл.5).
Пример 20. Экспериментальная выработка многосистемного синдрома истощения свиней - Протокол 1
Трехдневных гнотобиотических поросят, полученных кесаревым сечением и содержащихся в изоляторе, инокулировали раствором вируса PCV. Применялись вирусы PCV типа II, а именно - изолят Imp. 1010 и вирус, полученный из гомогенатов лимфатических узлов больных свиней.
Было образовано 5 групп. Всех поросят инокулировали в возрасте 3 дней, вводя ороназально 1,5 мл вирусного раствора согласно табл.6.
Результаты экспериментальной обработки
За время 5-недельного наблюдения у поросят не появилось клинических симптомов, кроме одного в группе В, проявлявшего существенное истощение. При аутопсии поросята в группах А, В и С проявляли гиперплазию лимфатических узлов (их размеры в 2-10 раз больше, чем у животных в группах D и Е), в частности, подчелюстных, бронхиальных, брыжеечных, подвздошных и бедренных узлов. Эта гиперплазия сопровождалась значительной экспансией корковых зон за счет инфильтрации моноцитов и макрофагов. Поросята в группах А, В и С также проявляли гиперплазию бронхиальной лимфоидной ткани.
В каждой из групп А, В и С было по одному поросенку с пневмонией.
У поросенка в группе В, проявлявшего существенное истощение, и у одного поросенка в группе А была язва желудка. Кроме того, у всех животных в группах А, В и С был миозит в мышечной стенке желудка и кишечника.
У большинства животных в группах А, В и С был миокардит, многоочаговый гепатит с инфильтрацией лимфоцитов, макрофагов и эозинофилов, а также интерстициальный нефрит коркового и мозгового слоя почек.
У одного поросенка в группе С была увеличена печень, имевшая рассеянные светлые очаги на поверхности.
Не наблюдалось никаких повреждений у поросят в группах D и Е.
Цирковирус выделяли из органов поросят в группах А, В и С.
Пример 21. Экспериментальное воспроизведение многосистемного синдрома истощения свиней - Протоколы 2 и 3
Обычных поросят, лишь изолированных от своих матерей с момента рождения, инокулировали вирусными растворами PCV типа II, парвовируса свиней или смесью из обоих вирусов.
В качестве вирусов PCV типа II использовали изоляты Imp. 1010 и Imp. 1011 (штамм 48121). В качестве вируса PPV использовали изолят канадского происхождения Imp. 1005. Последовательность этого вируса (секвенировано 1/3 генома) идентична последовательности других известных штаммов парвовируса свиней (штаммов NADL-2 и Kresse).
Применяли два экспериментальных протокола.
Протокол 2
Было образовано 3 группы из 3-дневных поросят. Всех поросят инокулировали, вводя ороназально 1 мл вирусного раствора согласно табл.7.
Результаты экспериментальной обработки
Группа А. 2 поросенка умерли через 21 день после инокуляции и 1 поросенок был забит гуманным образом через 24 дня после инокуляции.
Группа В. 1 поросенок умер через 23 дня после инокуляции и 1 поросенок был забит гуманным образом через 24 дня после инокуляции.
Аутопсия поросят, умерших после заражения, показала наличие существенных макроскопических повреждений: наличие жидкости в плевральной полости, легочная эдема, кровоизлияния в почках, беловатые повреждения в виде булавочной головки в почках, некроз печени. Эти повреждения идентичны тем, что наблюдаются при полевых случаях.
Аутопсия забитых поросят не показала наличия макроскопических повреждений.
Гистологическое исследование органов, взятых у поросят из групп А и В, умерших после заражения, а также забитых поросят из этих 2 групп, показало полную картину повреждений, типичную для многосистемного синдрома истощения свиней, которая наблюдается у животных в полевых условиях: некроз печени, некроз лимфатических узлов, очаговый некроз и сильные кровоизлияния в почках, наличие синцитиев в легких, сильный некроз гепатоцитов с ядерными включениями.
Следует отметить, что во всех этих повреждениях (умерших или забитых поросят) наблюдалось массивное количество антигена PCV, тогда как антиген PPV не был обнаружен в тех же повреждениях.
Не обнаружено никаких повреждений у контрольных поросят в группе С.
Протокол 3
Было образовано 4 группы из 4-недельных поросят. Всех поросят инокулировали, вводя ороназально 1 мл вирусного раствора согласно табл.8.
Результаты экспериментальной обработки
Одного контрольного поросенка и по 2 поросенка в каждой экспериментальной группе (В, С и D) забивали гуманным способом и подвергали аутопсии через 2 недели после инокуляции. Наблюдались значительные иммуногистологические повреждения у двух поросят в группе D (совместное заражение PCV + PPV). Следует отметить, что в этих повреждениях не обнаруживалось присутствие парвовируса свиней, хотя и наблюдалась сероконверсия к парвовирусу свиней у всех поросят в группе D.
Не наблюдалось никаких макроскопических или гистологических повреждений у контрольного поросенка и у поросят в остальных группах.
Следовательно, кажется вероятным, что комбинация PCV + PPV дает возможность воспроизводить гистологические повреждения, типичные для многосистемного синдрома истощения свиней. При этих двух экспериментальных протоколах отмечается, что инокуляция одним PCV, также как смесью PCV + PPV, ведет к более или менее полному воспроизведению многосистемного синдрома истощения свиней, однако в поврежденных тканях обнаруживается только цирковирус свиней. Напротив, экспериментальное заражение одним PPV (группа В протокола 3) не вызывает появления макроскопических или гистологических повреждений, однако в присутствии PCV повреждения появляются у 4-недельных поросят (группа D протокола 3).
Claims (42)
1. Иммуногенная композиция, вызывающая иммунный ответ против парвовируса и цирковируса свиньи, включающая в себя (i) по меньшей мере один антиген цирковируса свиньи или вектор, содержащий и экспрессирующий in vivo по меньшей мере одну молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую антиген цирковируса свиньи, и (ii) по меньшей мере один антиген парвовируса свиньи или вектор, содержащий и экспрессирующий in vivo по меньшей мере одну молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую антиген парвовируса свиньи, и (iii) ветеринарно приемлемый носитель или эксципинт.
2. Композиция по п.1, которая содержит по меньшей мере один антиген цирковируса II типа свиньи.
3. Композиция по п.2, в которой антиген цирковируса II типа свиньи выбран из группы, состоящей из депонированных в ЕСАСС цирковирусов со следующими номерами доступа: N: V97100219, N: V97100218, N: V97100217, N: V98011608, N: V98011609.
4. Композиция по любому из пп.1-3, которая содержит (i) вакцинный компонент парвовируса свиньи, выбранный из группы, состоящей из ослабленного (аттенуированного) парвовируса свиньи, инактивированного парвовируса свиньи, субъединицы парвовируса свиньи, вектора, содержащего и экспрессирующего in vivo молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую антиген парвовируса свиньи; и (ii) вакцинный компонент цирковируса свиньи, выбранный из группы, состоящей из аттенуированного цирковируса свиньи, инактивированного цирковируса свиньи, субъединицы цирковируса свиньи, вектора, содержащего и экспрессирующего in vivo молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую антиген цирковируса свиньи.
5. Композиция по любому из пп.1-4, дополнительно содержащая ветеринарно приемлемый адьювант.
6. Композиция по любому из пп.1-5, дополнительно содержащая дополнительный антиген иного патогена свиньи.
7. Композиция по п.6, в которой указанный дополнительный антиген иного патогена свиньи выбирают из группы, состоящей из антигена вируса PRRS, антигена Mycoplasma hyopneumoniae, антигена Actinobacillus pleuropneumoniae, антигена Е. coli, антигена атрофического ринита, антигена вируса псевдобешенства, антигена холеры свиньи, антигена свиного гриппа и их комбинаций.
8. Композиция по п.6, в которой дополнительный антиген иного патогена свиньи представляет собой антиген вируса PRRS.
9. Вакцина против многосистемного синдрома истощения свиней (PMWS), содержащая (i) по меньшей мере один антиген парвовируса свиньи, (ii) по меньшей мере один антиген цирковируса свиньи, и (iii) ветеринарно приемлемый носитель или эксципиент.
10. Вакцина по п.9, в которой указанный антиген цирковируса свиньи содержит по меньшей мере один антиген цирковируса II типа.
11. Вакцина по п.10, в которой антиген цирковируса II типа свиньи выбран из группы, состоящей из депонированных в ЕСАСС цирковирусов со следующими номерами доступа: N: V97100219, N: V97100218, N: V97100217, N: V98011608, N: V98011609.
12. Вакцина по п.10 или 11, в которой указанный антиген цирковируса II типа представляет собой аттенуированный цирковирус II типа свиньи.
13. Вакцина по п.12, дополнительно содержащая ветеринарно приемлемый адьювант.
14. Вакцина по п.12 или 13, дополнительно содержащая стабилизатор, высушенный замораживанием.
15. Вакцина по п.10 или 11, в которой указанный антиген цирковируса II типа представляет собой инактивированный цирковирус II типа свиньи.
16. Вакцина по п.15, дополнительно содержащая ветеринарно приемлемый адьювант.
17. Вакцина по любому из пп.9-16, дополнительно содержащая дополнительный антиген иного патогена свиньи.
18. Вакцина по п.17, в которой указанный дополнительный антиген иного патогена свиньи выбирают из группы, состоящей из антигена вируса PRRS, антигена Mycoplasma hyopneumoniae, антигена Actinobacillus pleuropneumoniae, антигена Е. coli, антигена атрофического ринита, антигена вируса псевдобешенства, антигена холеры свиней, антигена свиного гриппа и их комбинаций.
19. Вакцина по п.17, в которой дополнительный антиген иного патогена свиньи представляет собой антиген вируса PRRS.
20. Вакцина по п.10 или 11, в которой антиген цирковируса II типа свиньи содержит антиген, кодируемый открытой рамкой считывания (ORF) цирковируса II типа свиньи, выбранной из группы, состоящей из ORF 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 и 13.
21. Вакцина по п.10 или 11, включающая антиген цирковируса II типа свиньи, кодированный открытой рамкой считывания цирковируса II типа свиньи, выбранной из группы, состоящей из ORF 4,7, 10 и 13.
22. Вакцина против многосистемного синдрома истощения свиней (PMWS), содержащая (i) вакцинный компонент парвовируса свиньи, выбранный из группы, состоящей из аттенуированного парвовируса свиньи, инактивированного парвовируса свиньи, субъединицы парвовируса свиньи, вектора, содержащего и экспрессирующего in vivo молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующей антиген парвовируса свиньи; и (ii) вакцинный компонент цирковируса свиньи, выбранный из группы, состоящей из аттенуированного цирковируса свиньи, инактивированного цирковируса свиньи, субъединицы цирковируса свиньи, вектора, содержащего и экспрессирующего in vivo молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую антиген цирковируса свиньи и (iii) ветеринарно приемлемый носитель или эксципиент.
23. Вакцина по п.22, включающая в себя вектор, содержащий и экспрессирующий in vivo ORF цирковируса II типа свиньи, выбранную из группы ORF 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 и 13.
24. Вакцина по п.22, включающая в себя вектор, содержащий и экспрессирующий in vivo ORF цирковируса II типа свиньи, выбранную из группы ORF 4, 7, 10 и 13.
25. Вакцина по п.22 или 23, в которой указанный антиген цирковируса II типа свиньи выбран из группы, состоящей из депонированных в ЕСАСС цирковирусов со следующими номерами доступа: N: V97100219, N: V97100218, N: V97100217, N: V98011608, N:V98011609.
26. Вакцина по любому из пп.22-25, в которой указанный вектор выбран из группы, состоящей из кольцевой ДНК плазмиды, молекулы линейной ДНК и рекомбинантного вируса.
27. Вакцина по п.26, в которой указанный рекомбинантный вирус выбран из группы, состоящей из герпесвируса свиньи, аденовируса свиньи и поксвируса.
28. Вакцина по п.27, в которой указанный рекомбинантный вирус выбран из группы, состоящей из вируса болезни Ауезка (Aujeszky), вируса коровьей оспы, вируса оспы птиц, вируса оспы канареек и вируса оспы свиней.
29. Вакцина, вызывающая иммунный ответ против парвовируса и цирковируса свиньи, включающая в себя (i) вакцинный компонент парвовируса свиньи, выбранный из группы, состоящей из аттенуированного парвовируса свиньи, инактивированного парвовируса свиньи, субъединицы парвовируса свиньи, вектора, содержащего и экспрессирующего in vivo молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую антиген парвовируса свиньи; (ii) вакцинный компонент цирковируса свиньи, выбранный из группы, состоящей из аттенуированного цирковируса свиньи, инактивированного цирковируса свиньи, субъединицы цирковируса свиньи, вектора, содержащего и экспрессирующего in vivo молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующей антиген цирковируса свиньи, и (iii) ветеринарно приемлемый носитель или эксципиент.
30. Вакцина по п.29, в которой вектор, содержащий и экспрессирующий in vivo молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующей антиген парвовируса свиньи, выбирают из группы, состоящей из кольцевой ДНК плазмиды, молекулы линейной ДНК и рекомбинантного вируса; а вектор, содержащий и экспрессирующий in vivo молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующей антиген цирковируса свиньи, выбирают из группы, состоящей из кольцевой ДНК плазмиды, молекулы линейной ДНК и рекомбинантного вируса.
31. Вакцина по любому из пп.22-30, дополнительно содержащая дополнительный антиген иного патогена свиньи.
32. Вакцина по п.31, в которой указанный дополнительный антиген иного патогена свиньи выбирают из группы, состоящей из антигена вируса PRRS, антигена Mycoplasma hyopneumoniae, антигена Actinobacillus pleuropneumoniae, антигена Е. coli, антигена атрофического ринита, антигена вируса псевдобешенства, антигена холеры свиньи, антигена свиного гриппа и их комбинаций.
33. Вакцина по п.31, в которой дополнительный антиген, иного патогена свиньи представляет собой антиген вируса PRRS.
34. Вакцина или иммуногенная композиция по любому из пп.1-33, в которой указанный антиген цирковируса свиньи содержит антигены множества цирковирусов свиньи.
35. Набор для вакцинации, включающий, в отдельных упаковках, (i) вакцинный компонент, содержащий по меньшей мере антиген парвовируса свиньи или вектор, содержащий и экспрессирующий in vivo молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующей антиген парвовируса свиньи, и (ii) вакцинный компонент по меньшей мере одного антигена цирковируса свиней или вектор, содержащий и экспрессирующий in vivo молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующей антиген цирковируса II типа свиньи.
36. Способ вакцинации против PMWS, включающий введение животному вакцины против цирковируса II типа свиньи, содержащей по меньшей мере один антиген цирковируса II типа свиньи или вектор, содержащий и экспрессирующий in vivo молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующей антиген цирковируса II типа свиньи, и вакцины против парвовируса свиньи, содержащей по меньшей мере один антиген парвовируса свиньи или вектор, содержащий и экспрессирующий in vivo молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующей антиген парвовируса свиньи.
37. Способ по п.36, в котором вакцина против цирковируса II типа свиньи содержит вектор, выбираемый из группы, состоящей из кольцевой ДНК плазмиды, линейной молекулы ДНК и рекомбинантного вируса.
38. Способ по п.37, в котором указанный рекомбинантный вирус выбран из группы, состоящей из герпесвируса свиньи, аденовируса свиньи и поксвируса.
39. Способ по п.38, в котором указанный рекомбинантный вирус выбран из группы, состоящей из вируса болезни Ауезка (Aujeszky), вируса коровьей оспы, вируса оспы птиц, вируса оспы канареек и вируса оспы свиньи.
40. Способ по п.36, в котором вакцина против цирковируса II типа свиньи содержит антиген, выбранный из группы, состоящей из аттенуированного цирковируса свиньи, инактивированного цирковируса свиньи и субъединицы цирковируса свиньи.
41. Способ по любому из пп.36-40, в котором указанный антиген цирковируса II типа свиньи выбран из группы, состоящей из депонированных в ЕСАСС цирковирусов со следующими номерами доступа: N: V97100219, N: V97100218, N: V97100217, N: V98011608, N: V98011609.
42. Способ по любому из пп.36-41, в котором вакцина против парвовируса свиньи содержит антиген, выбранный из группы, состоящей из аттенуированного парвовируса свиньи, инактивированного парвовируса свиньи и субъединицы парвовируса свиньи.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
FR98/08777 | 1998-07-06 | ||
FR9808777A FR2781159B1 (fr) | 1998-07-06 | 1998-07-06 | Vaccin circovirus et parvovirus porcin |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2001103135A RU2001103135A (ru) | 2003-06-20 |
RU2237492C2 true RU2237492C2 (ru) | 2004-10-10 |
Family
ID=9528441
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2001103135A RU2237492C2 (ru) | 1998-07-06 | 1999-06-28 | Иммуногенная композиция, вызывающая иммунный ответ против парвовируса и цирковируса свиньи, вакцина против многосистемного синдрома истощения свиней (pmws) (варианты), набор для вакцинации и способ ее осуществления |
Country Status (22)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US6217883B1 (ru) |
EP (1) | EP1094837B1 (ru) |
JP (2) | JP4749547B2 (ru) |
KR (1) | KR100730336B1 (ru) |
CN (1) | CN1168502C (ru) |
AT (1) | ATE452653T1 (ru) |
AU (1) | AU746234B2 (ru) |
BR (1) | BRPI9911870B8 (ru) |
CA (1) | CA2332627C (ru) |
CY (1) | CY1110290T1 (ru) |
DE (1) | DE69941843D1 (ru) |
DK (1) | DK1094837T3 (ru) |
ES (1) | ES2338616T3 (ru) |
FR (1) | FR2781159B1 (ru) |
HU (1) | HU227805B1 (ru) |
MX (1) | MXPA00012785A (ru) |
PL (1) | PL205299B1 (ru) |
PT (1) | PT1094837E (ru) |
RU (1) | RU2237492C2 (ru) |
TW (1) | TWI221774B (ru) |
UA (1) | UA72891C2 (ru) |
WO (1) | WO2000001409A2 (ru) |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2488407C2 (ru) * | 2005-12-29 | 2013-07-27 | Берингер Ингельхайм Ветмедика, Инк. | Поливалентные иммуногенные композиции pcv2 и способы получения таких композиций |
RU2493254C2 (ru) * | 2007-12-21 | 2013-09-20 | ВАЙЕТ ЭлЭлСи | Способы и композиции для иммунизации свиней против свиного цирковируса |
RU2577127C9 (ru) * | 2005-12-29 | 2016-06-27 | Бёрингер Ингельхайм Ветмедика, Инк. | Поливалентные иммунногенные композиции pcv2 и способы получения таких композиций |
Families Citing this family (80)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US7192594B2 (en) | 1997-10-03 | 2007-03-20 | Merial Limited | Postweaning multisystemic wasting syndrome and porcine circovirus from pigs |
US6391314B1 (en) * | 1997-10-03 | 2002-05-21 | Merial | Porcine circoviruses vaccines diagnostic reagents |
UA78180C2 (ru) * | 1997-10-03 | 2007-03-15 | Меріаль | Кольцевой вирус свиньи, вакцины и диагностические реагенты |
US6517843B1 (en) | 1999-08-31 | 2003-02-11 | Merial | Reduction of porcine circovirus-2 viral load with inactivated PCV-2 |
US7211379B2 (en) * | 1997-10-03 | 2007-05-01 | Merial Sas | Prevention of myocarditis, abortion and intrauterine infection associated with porcine circovirus-2 |
FR2781159B1 (fr) * | 1998-07-06 | 2000-10-06 | Merial Sas | Vaccin circovirus et parvovirus porcin |
US20040062775A1 (en) * | 1997-12-05 | 2004-04-01 | Agence Francaise De Securite Sanitaire Des Aliments | Circovirus sequences associated with piglet weight loss disease (PWD) |
FR2772047B1 (fr) * | 1997-12-05 | 2004-04-09 | Ct Nat D Etudes Veterinaires E | Sequence genomique et polypeptides de circovirus associe a la maladie de l'amaigrissement du porcelet (map), applications au diagnostic et a la prevention et/ou au traitement de l'infection |
DE07008633T1 (de) * | 1997-12-11 | 2008-12-18 | Merial | Virus des multisystemischen Kümmersyndroms bei Absatzferkeln |
US6943152B1 (en) * | 1999-06-10 | 2005-09-13 | Merial | DNA vaccine-PCV |
ES2170622B1 (es) * | 1999-12-03 | 2004-05-16 | Consejo Superior De Investigaciones Cientificas | Clones y vectores infectivos derivados de coronavirus y sus aplicaciones. |
DE10044648A1 (de) * | 2000-09-08 | 2002-03-21 | Aventis Behring Gmbh | Verfahren zur Vermehrung oder zur Entfernung von Cirocoviren aus biologischem Material |
PT1379671E (pt) * | 2001-03-27 | 2009-07-20 | Univ Saskatchewan | Métodos de cultura de circovírus |
US20030096377A1 (en) * | 2001-06-28 | 2003-05-22 | Virginia Tech Intellectual Properties, Inc. | Differential PCR-RFLP assay for detecting and distinguishing between nonpathogenic PCV-1 and pathogenic PCV-2 |
US7279166B2 (en) | 2001-12-12 | 2007-10-09 | Virginia Tech Intellectual Properties, Inc. | Chimeric infectious DNA clones, chimeric porcine circoviruses and uses thereof |
US7276353B2 (en) * | 2001-12-12 | 2007-10-02 | Virginia Tech Intellectual Properties, Inc. | Chimeric infectious DNA clones, chimeric porcine circoviruses and uses thereof |
US7906311B2 (en) | 2002-03-20 | 2011-03-15 | Merial Limited | Cotton rat lung cells for virus culture |
EP2390352A1 (en) | 2003-03-18 | 2011-11-30 | Quantum Genetics Ireland Limited | Systems and methods for improving protein and milk production of dairy herds |
US7468273B2 (en) | 2003-05-01 | 2008-12-23 | Meial Limited | Canine GHRH gene, polypeptides and methods of use |
US20040258700A1 (en) * | 2003-06-23 | 2004-12-23 | Frimann Tine Holland | Vaccine formulation with a preservative |
CA2545886A1 (en) | 2003-11-13 | 2005-06-02 | University Of Georgia Research Foundation, Inc. | Methods of characterizing infectious bursal disease virus |
AU2005244673B2 (en) | 2004-02-19 | 2009-12-10 | The Governors Of The University Of Alberta | Leptin promoter polymorphisms and uses thereof |
UA95602C2 (ru) | 2004-12-30 | 2011-08-25 | Берингер Ингельхейм Ветмедика, Инк. | Иммуногенная композиция цвс2 и способы приготовления такой композиции |
US7833707B2 (en) * | 2004-12-30 | 2010-11-16 | Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. | Methods of overexpression and recovery of porcine circovirus type 2 ORF2 |
ES2629679T3 (es) * | 2004-12-30 | 2017-08-14 | Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. | Composiciones inmunogénicas para PCV2 y métodos para producir composiciones de este tipo |
US7700285B1 (en) | 2005-12-29 | 2010-04-20 | Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. | PCV2 immunogenic compositions and methods of producing such compositions |
US8834891B2 (en) | 2005-03-14 | 2014-09-16 | Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. | Immunogenic compositions comprising Lawsonia intracellularis |
WO2006115843A2 (en) | 2005-04-25 | 2006-11-02 | Merial Limited | Nipah virus vaccines |
WO2006132598A1 (en) * | 2005-06-07 | 2006-12-14 | Temasek Life Sciences Laboratory Limited | Porcine circovirus type 2 vaccines |
US20080241184A1 (en) | 2005-08-25 | 2008-10-02 | Jules Maarten Minke | Canine influenza vaccines |
KR100693077B1 (ko) * | 2005-11-03 | 2007-03-12 | 채찬희 | 돼지 복합 호흡기 질환 예방 및 치료용 생물학적 조성물 |
US7771995B2 (en) | 2005-11-14 | 2010-08-10 | Merial Limited | Plasmid encoding human BMP-7 |
EP1951751B1 (en) | 2005-11-14 | 2017-11-01 | Merial, Inc. | Gene therapy for renal failure |
HUE025994T2 (en) | 2005-12-29 | 2016-05-30 | Boehringer Ingelheim Vetmedica Inc | Use of PCV2 immunogenic composition to reduce clinical symptoms in piglets |
US7862821B2 (en) | 2006-06-01 | 2011-01-04 | Merial Limited | Recombinant vaccine against bluetongue virus |
EP2076284A4 (en) * | 2006-10-05 | 2010-03-31 | Cerebus Biolog Inc | METHODS OF TREATING, PREVENTING AND DIAGNOSING TTV INFECTION IN PORK |
WO2008064299A2 (en) * | 2006-11-22 | 2008-05-29 | Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. | Methods of reducing porcine circovirus-associated disease outbreaks |
US20100129397A1 (en) * | 2006-12-11 | 2010-05-27 | Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. | Effective method of treatment of porcine circovirus and lawsonia intracellularis infections |
TWI466682B (zh) * | 2006-12-15 | 2015-01-01 | Boehringer Ingelheim Vetmed | 以豬第二型環狀病毒(pcv2)抗原治療豬 |
EP1941903A1 (en) | 2007-01-03 | 2008-07-09 | Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh | Prophylaxis and treatment of PRDC |
EP1958644A1 (en) | 2007-02-13 | 2008-08-20 | Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh | Prevention and treatment of sub-clinical pcvd |
CN101294224B (zh) * | 2007-05-08 | 2011-04-06 | 深圳太太基因工程有限公司 | 一种用于检测猪细小病毒核苷酸片段的引物和探针序列 |
EP2148928A2 (en) * | 2007-05-30 | 2010-02-03 | Wyeth LLC | Raccoon poxvirus expressing genes of porcine virus |
US20090017064A1 (en) * | 2007-07-10 | 2009-01-15 | Wyeth | Methods and Compositions for Immunizing Pigs Against Porcine Circovirus |
US7829274B2 (en) * | 2007-09-04 | 2010-11-09 | Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. | Reduction of concomitant infections in pigs by the use of PCV2 antigen |
WO2009088950A2 (en) * | 2007-12-31 | 2009-07-16 | Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. | Pcv2 orf2 virus like particle with foreign amino acid insertion |
US20090317423A1 (en) * | 2008-01-23 | 2009-12-24 | Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. | Pcv2 mycoplasma hyopneumoniae immunogenic compositions and methods of producing such compositions |
WO2009103037A1 (en) * | 2008-02-15 | 2009-08-20 | Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. | Methods and compositions for reducing the impact of enteric diseases |
US7927586B2 (en) * | 2008-07-08 | 2011-04-19 | South Dakota State University | Vaccine for porcine post-weaning diarrhea caused by enterotoxigenic Escherichia coli |
EP2414386B1 (en) | 2009-04-03 | 2016-01-27 | Merial Limited | Newcastle disease virus vectored avian vaccines |
TWI627281B (zh) | 2009-09-02 | 2018-06-21 | 百靈佳殷格翰家畜藥品公司 | 降低pcv-2組合物殺病毒活性之方法及具有改良免疫原性之pcv-2組合物 |
BR112013007486B1 (pt) | 2010-08-31 | 2020-01-28 | Merial Ltd | composição, vetor recombinante de ndv e uso da referida composição |
CN101947318B (zh) * | 2010-09-09 | 2012-09-05 | 扬州优邦生物制药有限公司 | 一种猪细小病毒灭活疫苗的制备方法 |
TWI508974B (zh) | 2010-12-22 | 2015-11-21 | Sbc Virbac Ltd | 豬第二型環狀病毒(Porcine Circovirus Type 2)、含彼之免疫組合物、檢測套組及其應用 |
WO2012090073A2 (en) | 2010-12-30 | 2012-07-05 | The Netherlands Cancer Institute | Methods and compositions for predicting chemotherapy sensitivity |
AU2012240246A1 (en) | 2011-04-04 | 2013-05-09 | Netherlands Cancer Institute | Methods and compositions for predicting resistance to anticancer treatment with protein kinase inhibitors |
US20140296248A1 (en) | 2011-04-04 | 2014-10-02 | Stichting het Nederlands Kanker Instiuut-Antoni van Leeuwenhoek ziekenhuis | Methods and compositions for predicting resistance to anticancer treatment |
AU2012245395A1 (en) | 2011-04-20 | 2013-11-14 | Merial, Inc. | Adjuvanted rabies vaccine with improved viscosity profile |
AP2013007180A0 (en) | 2011-04-25 | 2013-10-31 | Advanced Bioscience Lab Inc | Truncated HIV envelope proteins (ENV), methods andcompositions related thereto |
CA2837375C (en) | 2011-06-01 | 2019-07-16 | Merial Limited | Needle-free administration of prrsv vaccines |
JP6041361B2 (ja) | 2011-08-12 | 2016-12-07 | メリアル インコーポレイテッド | 生物学的製品、特にはワクチンの真空保存 |
UA113192C2 (xx) | 2011-12-06 | 2016-12-26 | Імуногенна композиція проти цирковірусу свиней типу 2 (pcv2) | |
WO2013093629A2 (en) | 2011-12-20 | 2013-06-27 | Netherlands Cancer Institute | Modular vaccines, methods and compositions related thereto |
CN102961742A (zh) * | 2012-01-13 | 2013-03-13 | 普莱柯生物工程股份有限公司 | 猪圆环病毒2型与猪细小病毒二联灭活疫苗及其制备方法 |
CN105749273A (zh) * | 2012-01-13 | 2016-07-13 | 普莱柯生物工程股份有限公司 | 猪圆环病毒2型与猪细小病毒二联灭活疫苗及其制备方法 |
WO2013138776A1 (en) | 2012-03-16 | 2013-09-19 | Merial Limited | Novel methods for providing long-term protective immunity against rabies in animals, based upon administration of replication-deficient flavivirus expressing rabies g |
CN102719407B (zh) * | 2012-05-25 | 2013-09-04 | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 | 猪细小病毒bq-c株及其在制备猪细小病毒灭活疫苗中的应用 |
WO2014164697A1 (en) | 2013-03-12 | 2014-10-09 | Merial Limited | Reverse genetics schmallenberg virus vaccine compositions, and methods of use thereof |
DK2994162T3 (en) | 2013-05-08 | 2021-06-21 | Pharmgate Biologics Inc | Vaccine for pcv2 og mycoplasma |
EP4091629A1 (en) * | 2013-09-25 | 2022-11-23 | Zoetis Services LLC | Pcv2b divergent vaccine composition and methods of use |
KR20220083861A (ko) | 2013-10-02 | 2022-06-20 | 베링거 인겔하임 애니멀 헬스 유에스에이 인크. | Pcv2 orf2 단백질 변이체 및 이로 이루어진 바이러스 유사 입자 |
CN110354258A (zh) | 2013-12-03 | 2019-10-22 | 英特维特国际股份有限公司 | 抗猪圆环病毒2型的疫苗 |
CN104250640A (zh) | 2014-08-22 | 2014-12-31 | 普莱柯生物工程股份有限公司 | 猪伪狂犬病病毒基因缺失株、疫苗组合物及其制备方法和应用 |
EP3215188A1 (en) | 2014-11-03 | 2017-09-13 | Merial, Inc. | Methods of using microneedle vaccine formulations to elicit in animals protective immunity against rabies virus |
CN111560355A (zh) * | 2015-03-20 | 2020-08-21 | 普莱柯生物工程股份有限公司 | 一种猪伪狂犬病病毒致弱方法、及其致弱的病毒株、疫苗组合物和应用 |
MX2017014414A (es) | 2015-05-14 | 2018-03-16 | Merial Inc | Metodo para la produccion de circovirus porcino y vacunas pcv2. |
AU2016282772B2 (en) | 2015-06-23 | 2019-09-05 | Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc. | PRRSV minor protein-containing recombinant viral vectors and methods of making and use thereof |
CN108883169A (zh) * | 2016-03-23 | 2018-11-23 | 英特维特国际股份有限公司 | 针对pcv2和prrs病毒感染的皮内应用疫苗 |
CN106435016B (zh) * | 2016-08-30 | 2019-07-26 | 中国农业科学院兰州兽医研究所 | 一种快速显色一步法检测猪圆环病毒2型的lamp试剂盒 |
TWI788309B (zh) | 2016-11-03 | 2023-01-01 | 德商百靈佳殷格翰維美迪加股份有限公司 | 抗豬小病毒及豬生殖與呼吸道症候群病毒之疫苗及其製造方法 |
Family Cites Families (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
SU1538305A1 (ru) | 1987-07-21 | 1994-12-15 | Всесоюзный государственный научно-контрольный институт ветеринарных препаратов Госагропрома СССР | Ассоциированная вакцина против лептоспироза и парвовирусной инфекции свиней |
US5811103A (en) * | 1989-03-19 | 1998-09-22 | Akzo Nobel N.V. | Hog cholera virus vaccine and diagnostic |
ES2026827A6 (es) | 1991-03-26 | 1992-05-01 | Ercros Sa | Procedimiento para la produccion de una vacuna subunidad contra el parvovirus porcino. |
FR2751224B1 (fr) * | 1996-07-19 | 1998-11-20 | Rhone Merieux | Formule de vaccin polynucleotidique contre les pathologies respiratoires et de reproduction des porcs |
US6391314B1 (en) * | 1997-10-03 | 2002-05-21 | Merial | Porcine circoviruses vaccines diagnostic reagents |
UA78180C2 (ru) * | 1997-10-03 | 2007-03-15 | Меріаль | Кольцевой вирус свиньи, вакцины и диагностические реагенты |
US6517843B1 (en) * | 1999-08-31 | 2003-02-11 | Merial | Reduction of porcine circovirus-2 viral load with inactivated PCV-2 |
FR2781159B1 (fr) * | 1998-07-06 | 2000-10-06 | Merial Sas | Vaccin circovirus et parvovirus porcin |
-
1998
- 1998-07-06 FR FR9808777A patent/FR2781159B1/fr not_active Expired - Lifetime
-
1999
- 1999-06-28 PL PL345948A patent/PL205299B1/pl unknown
- 1999-06-28 PT PT99932831T patent/PT1094837E/pt unknown
- 1999-06-28 JP JP2000557855A patent/JP4749547B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1999-06-28 AU AU49077/99A patent/AU746234B2/en not_active Expired
- 1999-06-28 HU HU0102770A patent/HU227805B1/hu unknown
- 1999-06-28 KR KR1020017000182A patent/KR100730336B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1999-06-28 AT AT99932831T patent/ATE452653T1/de active
- 1999-06-28 CA CA2332627A patent/CA2332627C/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-06-28 UA UA2001020808A patent/UA72891C2/xx unknown
- 1999-06-28 WO PCT/EP1999/004698 patent/WO2000001409A2/en active IP Right Grant
- 1999-06-28 BR BRPI9911870A patent/BRPI9911870B8/pt not_active IP Right Cessation
- 1999-06-28 EP EP99932831A patent/EP1094837B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-06-28 ES ES99932831T patent/ES2338616T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1999-06-28 CN CNB998091316A patent/CN1168502C/zh not_active Expired - Lifetime
- 1999-06-28 DE DE69941843T patent/DE69941843D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1999-06-28 DK DK99932831.3T patent/DK1094837T3/da active
- 1999-06-28 RU RU2001103135A patent/RU2237492C2/ru active
- 1999-06-28 MX MXPA00012785A patent/MXPA00012785A/es unknown
- 1999-07-01 US US09/347,594 patent/US6217883B1/en not_active Expired - Lifetime
-
2000
- 2000-04-10 TW TW088111464A patent/TWI221774B/zh not_active IP Right Cessation
-
2001
- 2001-02-16 US US09/784,962 patent/US6953581B2/en not_active Expired - Lifetime
-
2010
- 2010-02-25 CY CY20101100181T patent/CY1110290T1/el unknown
- 2010-04-23 JP JP2010100018A patent/JP2010222359A/ja active Pending
Cited By (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2488407C2 (ru) * | 2005-12-29 | 2013-07-27 | Берингер Ингельхайм Ветмедика, Инк. | Поливалентные иммуногенные композиции pcv2 и способы получения таких композиций |
RU2577129C2 (ru) * | 2005-12-29 | 2016-03-10 | Бёрингер Ингельхайм Ветмедика, Инк. | Поливалентные иммуногенные композиции pcv2 и способы получения таких композиций |
RU2577127C2 (ru) * | 2005-12-29 | 2016-03-10 | Бёрингер Ингельхайм Ветмедика, Инк. | Поливалентные иммунногенные композиции pcv2 и способы получения таких композиций |
RU2577127C9 (ru) * | 2005-12-29 | 2016-06-27 | Бёрингер Ингельхайм Ветмедика, Инк. | Поливалентные иммунногенные композиции pcv2 и способы получения таких композиций |
RU2493254C2 (ru) * | 2007-12-21 | 2013-09-20 | ВАЙЕТ ЭлЭлСи | Способы и композиции для иммунизации свиней против свиного цирковируса |
RU2493254C9 (ru) * | 2007-12-21 | 2013-12-20 | ВАЙЕТ ЭлЭлСи | Способы и композиции для иммунизации свиней против свиного цирковируса |
RU2817872C2 (ru) * | 2014-04-17 | 2024-04-22 | Интервет Интернэшнл Б.В. | Парвовирус свиней |
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2237492C2 (ru) | Иммуногенная композиция, вызывающая иммунный ответ против парвовируса и цирковируса свиньи, вакцина против многосистемного синдрома истощения свиней (pmws) (варианты), набор для вакцинации и способ ее осуществления | |
JP5869658B2 (ja) | ブタサーコウイルス、ワクチンおよび診断試薬 | |
US7122192B2 (en) | Porcine circoviruses, vaccines and diagnostic reagents | |
RU2283862C2 (ru) | Цирковирус свиней типа ii и его применение | |
AU2002302120B2 (en) | Porcine circoviruses, vaccines and diagnostic reagents | |
MXPA00003263A (en) | Porcine circoviruses, vaccines and diagnostic reagents |