CN108883169A - 针对pcv2和prrs病毒感染的皮内应用疫苗 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及包含组合的猪圆环病毒2型的非复制性免疫原和减毒活PRRS病毒的疫苗，其用于通过将该疫苗施用于动物的真皮中，针对猪圆环病毒2型(PCV2)感染和PRRS病毒感染预防性治疗动物。

Description

针对PCV2和PRRS病毒感染的皮内应用疫苗
本发明的一般领域
本发明一般地涉及猪健康领域。猪易于受到很多致病微生物感染。通常通过猪圈和饲料管理、使用药物如抗病毒药和抗生素进行治疗，或者使用疫苗进行预防性治疗，来进行感染的控制。具体地，本发明涉及针对猪圆环病毒2型(PCV-2)和PRRS(猪繁殖与呼吸综合征)病毒的疫苗，并且涉及使用该疫苗针对所述感染保护动物的方法。
背景技术
PCV2和PRRS病毒是两种导致猪工业中的显著经济损失的病毒。PCV-2与在幼猪中观察到的断奶后多系统衰竭综合征（PMWS）相关。这种疾病于1991年在加拿大第一次遇到。临床体征和病理发表于1996年，并且包括进行性消瘦、呼吸困难，呼吸急促，以及偶尔黄疸（icterus）和黄疸（jaundice）。 Nayar 等人，Can. Vet. J. 38卷,1997年6月检测了在具有PMWS的临床症状的猪内的猪圆环病毒并且得出以下结论：除公认作为PK-15细胞的天然栖息者的已知PCV之外的PCV可以与PMWS相关。后来的出版物（Hamel等人，J. Virol.，72（6），5262-5267，1998；Meehan等人，J. gen. Virol.，79，2171-2179，1998）证实了这些发现，并且提议（Meehan等人，同上）将该新的致病性PCV称作PCV-2，而最初的PK-15细胞培养分离物（Tischer等人，Nature 295，64-66，1982），应该称作PCV-1。 PCV-2是一种含有环状单链DNA基因组的小的（17-22 nm）二十面体无包膜病毒。PCV-2基因组的长度是约1768 bp。源自世界不同地区的PCV-2分离物似乎是彼此密切相关的并且显示出95%至99%的核苷酸序列同一性（Fenaux等人，J. Clin. Micorbiol.，38（7），2494-2503，2000）。 PCV的ORF-2编码病毒的衣壳蛋白。PCV2的ORF 2编码约233个氨基酸的蛋白。所有PCV-2分离物的ORF 2共有91-100%的核苷酸序列同一性和90%-100%推导的氨基酸序列同一性。
PRRS病毒于1987年在北美和中欧首次报道。PRRS病毒是一种小的有包膜RNA病毒。它包含一个单链的正义RNA基因组，大小约为15千碱基。该基因组包含九个可读框。该病毒是套式病毒目(order Nidovirales)、动脉炎病毒科(family Arteriviridae)、动脉炎病毒属（genus Arterivirus）的成员。PRRSV的两种原型株是北美株VR-2332和欧洲株Lelystad病毒（LV）。欧洲和北美PRRSV株引起相似的临床症状。在21世纪初，中国出现了一种北美基因型的高致病性株。该株，即HP-PRRSV，比所有其它株毒性更大，并且在全世界的亚洲国家造成巨大损失。对于任何PRRS病毒，亚临床感染是常见的，临床体征仅偶尔发生在畜群中。临床体征包括母猪的繁殖失败，如流产和生下死胎或木乃伊化胎儿，以及耳和外阴紫绀。在新生猪中，该疾病引起呼吸窘迫，伴有对呼吸道感染如革拉瑟氏病(Glasser's disease)的易感性增加。
针对上述鉴定的病原体的疫苗是众所周知的。用于针对PCV 2感染预防性治疗动物，特别是猪的常规疫苗可以基于作为（非复制性）免疫原的完整的灭活PCV-2病毒。另外，在本领域中已经显示ORF2编码的衣壳蛋白（例如当重组表达时）适合作为用于适当疫苗的猪圆环病毒2型的亚单位免疫原。这可以理解，因为这种亚单位在循环系统中显示与病毒自身相同的途径，本质上不同之处在于以下事实：DNA和非结构蛋白不存在于衣壳内。在本领域中，几种针对PCV2的疫苗是商购可得的。Porcilis®PCV（可从MSD Animal Health，Boxmeer，荷兰获得）是一种用于针对猪圆环病毒2型保护猪的疫苗，用于3周及更大的猪。当作为两次注射(two-shot)（两剂）疫苗给予时，免疫持续时间（DOI）为22周，几乎完全覆盖了猪的育肥期。Ingelvac CicroFlex®（可从Boehringer Ingelheim，Ingelheim获得）是一种用于针对猪圆环病毒2型保护猪的疫苗，用于两周及更大的猪。它仅作为一次注射(one-shot)（一剂）疫苗注册。Circovac®（可从Merial，Lyon，法国获得）是一种用于针对猪圆环病毒2型保护猪的疫苗，用于3周及更大的猪。Suvaxyn®PCV（可从Zoeitis，Capelle a/dIJssel，荷兰获得）是一种用于针对猪圆环病毒2型保护猪的疫苗，用于3周及更大的猪。其它PCV2疫苗描述于例如WO2007/028823、WO 2007/094893和WO2008/076915中。
关于PRRS病毒，尽管已经描述了灭活病毒疫苗并且是商购可得的，但是包含活的减毒形式的欧洲型（I型）或北美型（II型）的改良活疫苗（MLV）疫苗是用于其控制的主要的免疫学工具。几种疫苗在本领域中是商购可得的。Porcilis® PRRS（可从MSD AnimalHealth，Boxmeer，荷兰获得）是包含减毒活PRRS病毒I型的疫苗，并且注册用于减轻由PRRS病毒感染引起的感染（病毒血症）。Ingelvac PRRS® MLV（可从Boehringer Ingelheim，Ingelheim获得）是一种有助于减轻由PRRS病毒引起的疾病的疫苗，并且该疫苗提供针对不同类型株的交叉保护。Fostera® PRRS（可从Zoeitis，Florham Park，New Jersey，美国获得）也是MLV疫苗，并注册用于针对PRRS病毒引起的呼吸和生殖这两种形式的疾病进行保护。其它PRRS疫苗描述于例如WO2006/074986、US 8728487和WO2014/048955中。
发明目的
对于猪的健康管理，持续需要方便、安全且有效的手段。本发明的目的是提供满足这种需要，特别是对新的PCV2/PRRS病毒组合疫苗的需要的疫苗。
发明概述
为了满足本发明的目的，已经设计了一种新疫苗，该疫苗包含组合的猪圆环病毒2型的非复制性免疫原和减毒活PRRS病毒，用于通过将该疫苗施用于动物的真皮中，针对猪圆环病毒2型(PCV2)感染和PRRS病毒感染预防性治疗动物。
尽管两种病毒疫苗都是已知的并且是商购可得的，但是没有可用于皮内施用的组合疫苗，该疫苗是有效的并且同时对于在幼年动物中使用是安全的。众所周知，并非所有考虑或建议的抗原组合都可以得到安全和有效的组合疫苗。事实上，即使当单一（单价）疫苗安全且有效时，关于组合疫苗的稳定性、安全性和效力也存在高度不确定性。
欧洲医药产品评价机构（European Agency for the Evaluation of MedicinalProducts, EMEA）的兽医医药产品委员会在其出版物“Note for guidance: requirementsfor combined veterinary products”（EMEA，2000，CVMP/IWP/52/97-FINAL）中陈述了（第2 页/6页）：“组合疫苗的开发不是简单明了的。每种组合都应当分别在质量、安全性和效力方面进行开发和研究”。该委员会进一步指出寻找好的组合疫苗通常包括组合疫苗中单个组分，包括例如防腐剂、赋形剂和稳定剂、灭活剂以及佐剂之间的相容性。在第3页的第一段中，其陈述：“在组合疫苗中，多于一种组分的存在经常可以引起相互作用，导致与当单独施用一种或多种特定组分时相比，对单个组分的反应减弱或增强……此类相互作用在性质上通常是免疫学的，但也可能是由其它对免疫系统直接影响较少的因素所引起的”，以及“当使用佐剂来增加对组合疫苗的免疫反应时，可能出现特殊问题”。
美国卫生和公众服务部（U.S. Department of Health and Human Services），食品药品监督管理局（Food and Drug Administration），生物制品评价和研究中心（Centerfor Biologics Evaluation and Research）于1997年4月出版了“Guidance forIndustry, for the evaluation of combination vaccines for preventablediseases: Production, Testing and Clinical Studies”，在该指南中陈述了（第3页，在“组分的相容性”下）：“经验已经表明，将单价疫苗进行组合可能得到不如理想中安全或有效的新组合。有时，灭活疫苗的组分可以对一种或多种活性组分起到不利的作用”，这表明尤其是灭活的疫苗可能对活疫苗的效力产生负面的影响，如例如将活百日咳疫苗和灭活脊髓灰质炎病毒疫苗进行组合时发生的，其产生百日咳效价降低的疫苗。这表示疫苗中任何附加组分都可能会使最终产品的安全性和效价与单个疫苗相比更复杂。
世界卫生组织（World Health Organization ， WHO）已经出版了称为“VaccineSafety Basics”的电子学习教程，其在模块2（MODULE 2） 中考虑组合疫苗。该模块开头提到“获得许可的组合疫苗在国家管理机构批准之前要进行广泛的测试，以确保产品安全、有效以及具有可接受的质量”。它还陈述到：“对于所有的组合，制造商因而必须评价每种抗原性组分的效价、当组合以诱导免疫时疫苗组分的有效性、可能恢复为毒性的风险，以及与其它疫苗组分的反应”。
因此，设计一种新的组合疫苗并不是简单明了的，更不用说用于特定施用部位的新疫苗。例如，世界卫生组织（WHO）已经出版了称为“Vaccine Safety Basics”的电子学习教程，在该教程第53页，其报道了“施用途径是通过其将疫苗（或药物）与身体接触的途径。这是免疫成功的关键因素。物质必须从进入的部位转运到希望发挥其作用的身体部分。然而，为了这个目的使用身体的转运机制，并非是微不足道的”。
在此方面，加利福尼亚卫生服务部的免疫分部(California Department ofHealth Services’ Immunization Branch)出版了正确免疫的指南（http://www.cdc.gov/vaccines/pubs/ pinkbook/ downloads/appendices/d/vacc_admin.pdf）。关于施用部位，它在第7页，第一个完整段落中陈述：“每种疫苗的推荐途径和部位是基于临床试验、实践经验和理论考虑的。该信息包括在每种疫苗的制造商的产品信息中。在疫苗施用中使用5种途径。偏离推荐途径可能降低疫苗效力或增加局部不良反应”。在第14页，谈到了唯一获得美国许可的皮内疫苗：“Fluzone Intradermal是唯一美国许可的通过皮内途径施用的疫苗。它仅批准用于18至64岁的人。这种Fluzone制剂与灭活流感疫苗（TIV）的肌内制剂是不同的。其它的TIV制剂不应当通过皮内途径施用”。
总而言之，众所周知，在特定部位接种，更不用说在特定部位接种组合疫苗，不是简单明了的，并且需要实验来确定安全性和效力。
关于皮内施用，尽管通常使用无针接种装置如IDAL®接种器（可从MSD AnimalHealth，Boxmeer，荷兰获得）进行皮内施用，但“皮内”施用本身不应等同于“无针”施用。 世界卫生组织在其2009年8月27日题为“Intradermal Delivery of Vaccines; A review ofthe literature and the potential for development for use in low- and middle-income countries”的文章中确实清楚地表明“无针”接种不一定是指“皮内”接种（见该综述的第3页表1）。 只有当无针装置“配置用于皮内接种”时，疫苗才可以确实（至少部分地）递送到真皮中。 否则，疫苗可以作为一个整体皮下或肌内递送。
本发明还涉及用于针对猪圆环病毒2型(PCV2)感染和PRRS病毒感染预防性治疗动物的方法，该方法是通过给动物皮内施用包含组合的PCV2的非复制性免疫原和减毒活PRRS病毒的疫苗，并且涉及猪圆环病毒2型(PCV2)的非复制性免疫原和减毒活PRRS病毒用于制造包含组合的所述PCV2的免疫原和所述减毒活PRRS病毒的疫苗的用途，所述疫苗用于给动物皮内施用以针对PCV2感染和PRRS病毒感染预防性治疗动物。
注意到在疫苗中，免疫原（也称为抗原）通常与药学上可接受的载体组合，所述药学上可接受的载体即生物相容性介质，即，在施用后不会在受试动物中诱导显著的不良反应，能够在施用疫苗后将免疫原呈递给宿主动物的免疫系统的介质，例如含有水和/或任何其它生物相容性溶剂的液体，或固体载体，例如通常用于获得冻干疫苗（基于糖和/或蛋白质），任选地包含免疫刺激剂（佐剂），其在施用于动物后诱导免疫反应，用于针对野生型微生物感染治疗动物，即，用于帮助预防、改善或治愈这种感染或由其引起的病症。 任选地，根据疫苗的预期用途或所需性质，添加其它物质如稳定剂、粘度调节剂或其它组分。
定义
疫苗是一种药物组合物，它对于施用于受试动物是安全的，并且能够在该动物中诱导针对致病微生物的保护性免疫，即诱导如下文所定义的成功的预防性治疗。
病原体的非复制性免疫原是除作为整体的活的复制性病原体(处于野生型或减毒形式)之外的对应于该病原体的任何物质或化合物，要针对所述病原体引起免疫反应，使得作为这种免疫反应的结果，对应的毒性病原体或一种或多种其毒力因子将被宿主的免疫系统识别，并且最终至少部分被中和。非复制性免疫原性的典型实例是杀死的完整病原体和这些病原体的亚单位，如衣壳蛋白和其它表面表达的蛋白，例如重组表达的蛋白。
针对病原体感染的预防性治疗有助于预防或改善该病原体感染或由该感染引起的病症（由致病病原体的治疗后攻击引起），特别是在这种攻击后减少其在宿主中的载量，并且任选地有助于预防或改善由该病原体的治疗后病感染引起的一种或多种临床表现。
减毒活病原体是具有降低的毒力的病原体的活的、可复制的形式。减毒过程采用感染性病原体并改变它以使其变得无害或毒性较低，这通常是通过病原体经细胞系统的多次传代或通过遗传修饰病原体。
用于预防性治疗的疫苗的单剂施用意指为了获得保护性免疫，不需要用第二次施用疫苗来加强接种。在两次注射方案中，第一次（初免）接种通常在第一次施用起6周内，一般在第一次施用起3周或甚至2周内加强，并且仅在第二次（加强）施用后可以获得保护性免疫，即，如上文定义的成功的预防性治疗。
本发明的实施方案
在第一个实施方案中，疫苗通过单剂施用。发现单剂施用导致有效的接种。这提供了一种非常方便和经济的方式来针对两种致病病毒感染保护动物。
在下一个实施方案中，用无针接种装置施用疫苗，该装置使用疫苗的射流来经过动物皮肤到达真皮。在该实施方案中，通过无针接种装置提供向真皮内的接种，该装置使用疫苗的液体射流（高压流体流），通常使用0.05-0.2ml范围内的极低体积的疫苗。这进一步提高了疫苗和施用方法的安全性。
在另一个实施方案中，非复制性免疫原是重组表达的猪圆环病毒2型的ORF2蛋白，例如由本领域已知的杆状病毒表达。已证明这种重组蛋白适于在本发明中应用。 特别地，ORF2蛋白可以在例如WO2007/028823、WO 2007/094893或WO2008/076915中描述的杆状病毒表达系统中表达。
在又一个实施方案中，将PCV2的免疫原和减毒活PRRS病毒在施用前24小时内，优选6小时内组合在疫苗中。在临施用前将抗原组合，给选择赋形剂提供了更多自由度，因为长期稳定性尽管对于许多药物组合物，甚至对于包含本身是已知的PCV2 ORF2抗原的组合疫苗(例如，Porcilis® PCV M Hyo，可以从MSD Animal Health获得)是已知的，但可能仍然无法简单明了地实现，至少不是对于任何和所有药学上可接受的载体组合物都是如此。
在又一个实施方案中，疫苗另外包含猪肺炎支原体（Mycoplasma hyopneumoniae，M.hyo）的非复制性免疫原。在该实施方案中，该疫苗能够通过使用仅一种疫苗来提供针对三种主要猪病原体的保护。存在许多针对M.hyo的商业疫苗，并且这些常规用于大多数商业猪养殖操作中。通常，这些疫苗包含非复制性免疫原，诸如亚单位蛋白和/或菌苗(即一种组合物，其包含杀死的细菌(作为完整细胞、(部分)裂解的、均质化的、弗氏压碎的(Frenchpressed)、其组合)，或包含另一种形式的杀死的细菌，只要该组合物源自杀死的细菌培养物)，其通常通过肠胃外注射来施用。一些实例为：RespiSure® (Zoetis)、Ingelvac® M.hyo和MycoFLEX® (Boehringer Ingelheim)、Hyoresp® (Merial)、Stellamune®Mycoplasma (Elanco Animal Health)、Fostera® PCV MH (Zoetis)和M+Pac® (MSDAnimal Health)。
现在将使用以下实施例进一步解释本发明。
实施例
研究1
目标
该研究的目标是评价当溶解于各种PCV2 ORF2疫苗中时，皮内施用后减毒活PRRS病毒疫苗的效力和安全性。通过评估抗ORF2血清学，评价对于针对PCV2感染的保护的效力（已知抗ORF2抗体中和PCV2病毒）。通过评估在接种后4周用致病性PRRS株攻击后的PRRS病毒血症，评价针对PRRS病毒感染的效力。
实验设计
10只母猪的后代可供本研究使用。将总共50只动物分配到5组，每组10只仔猪。当所有动物大约4周龄时，将它们转移到动物设施中。使用IDAL®接种器，对第1至4组进行皮内接种至颈部右侧。第1组至第3组各自接受基于ORF2蛋白的PCV2疫苗，在其中重构活PRRS病毒疫苗(Porcilis PRRS)。各种PCV2疫苗来自三种不同的生产运行。每种疫苗含有每剂ORF2蛋白9μg的ORF2蛋白（与商购可得的Porcilis® PCV疫苗中每剂超过20μg相比），并且是基于商购可得的XSolve佐剂（MSD Animal Health，Boxmeer，荷兰），其中加入了3％卵清蛋白作为稳定剂。PRRS疫苗是冻干的疫苗，并且在临施用前使用适当的PCV2疫苗或稀释剂重构，以含有104.5 TCID50的病毒/200μl剂量。第4组仅接受PRRS疫苗，且第5组保持未接种并充当对照。每天观察所有仔猪的临床体征。当动物为约8周龄(第28天)时，用致病性PRRS病毒(I型)对它们攻击感染。攻击材料在2 ml中含有(计算剂量的) 5.3 log10 TCID50的病毒。鼻内施用所述材料，每个鼻孔1ml。在观察期结束时(接种后49天，对应于攻击后21天)，将所有猪处死。在第0、14、28 (临攻击前)、31、35、38、42和49天分别从所有动物采集血液样品(经由颈静脉)并测试PRRS病毒的存在，测试针对PRRSV和PCV2的抗体。
结果
由于接种，没有动物显示任何临床体征，并且直肠温度保持在距对照1.5℃内。因此，疫苗被认为是安全的。
PCV2血清学反应的结果在图1中给出。看起来所有组合疫苗都诱导阳性抗ORF2抗体反应，这意味着疫苗诱导针对野生型PCV2感染的保护性免疫。
PRRS血清学反应的结果在图2中给出。看起来所有组合疫苗，如商购可得的PRRS疫苗一样，在攻击前诱导阳性抗PRRS抗体反应。这表明所述疫苗提供针对PRRS病毒感染的保护。在图3中给出了病毒血症数据。看起来所有疫苗都提供针对PRRS病毒感染的保护，因为病毒血症水平在每个时间点都低于阳性对照动物(第5组)中的水平。
研究2
目标：第2项研究的目标是评价当溶解于不同的PCV2/Mhyo组合疫苗中时，皮内施用后减毒活PRRS病毒疫苗的效力和安全性。通过评估抗ORF2血清学来评价对于针对PCV2感染的保护的效力。通过比较血清学反应与商购可得的Mhyo疫苗Porcilis® Mhyo (MSD AnimalHealth, Boxmeer，荷兰)的血清学反应，来评价针对猪肺炎支原体感染的效力。通过评估在接种后4周用致病性PRRS株攻击后的PRRS病毒血症，评价针对PRRS病毒感染的效力。
实验设计
10只母猪的后代可供本研究使用。将总共40只动物分配至4组，每组10只仔猪。当所有动物大约4周龄时，将它们转移到动物设施中。使用IDAL®接种器，对第1至4组进行皮内接种至颈部右侧。第1组和第2组各自接受基于ORF2蛋白的PCV2疫苗，其另外包含Mhyo菌苗(与Porcilis M Hyo中相同)，在所述组合疫苗中重构活PRRS病毒疫苗(Porcilis PRRS)。用于第1组的疫苗基于Montanide 佐剂 (IMS 251，可获自SEPPIC，法国)，其中添加3％卵清蛋白。第2组的疫苗含有相同的佐剂，但不添加卵清蛋白。每种疫苗含有9μg/剂的ORF2蛋白，以及商购可得的疫苗Porcilis® M Hyo ID ONCE中M Hyo抗原浓度的2倍的Mhyo抗原。PRRS疫苗是冻干的疫苗，并且在临施用前使用适当的PCV2疫苗或稀释剂重构，以含有104.5 TCID50的病毒/200μl剂量。第3组仅接受PRRS疫苗，且第4组保持未接种并充当对照。每天观察所有仔猪的临床体征。当动物为约8周龄(第28天)时，用致病性PRRS病毒(I型)对它们攻击感染。攻击材料在2 ml中含有(计算剂量的) 5.3 log10 TCID50的病毒。鼻内施用所述材料，每个鼻孔1ml。在观察期结束时(疫苗接种后49天，对应于攻击后21天)，将所有猪处死。在第0、14、28 (临攻击前)、31、35、38、42和49天分别从所有动物采集血液样品(经由颈静脉)并测试PRRS病毒的存在，测试针对PRRSV、PCV2和Mhyo的抗体。
结果
由于接种，没有动物显示任何临床体征，并且直肠温度保持在距对照1.5℃内。因此，疫苗被认为是安全的。
关于Mhyo，组合疫苗的血清学反应看起来与用商购可得的疫苗Porcilis M Hyo可获得的血清学反应相当(图中未描绘数值结果)。因此可以推断出疫苗针对Mhyo感染进行保护。
PCV2血清学反应的结果在图4中给出。看起来两种组合疫苗都诱导阳性抗ORF2抗体反应，这意味着疫苗诱导针对野生型PCV2感染的保护。
PRRS血清学反应的结果在图5中给出。看起来两种组合疫苗，如商购可得的PRRS疫苗一样，在攻击前诱导阳性抗PRRS抗体反应。这表明所述疫苗提供针对PRRS病毒感染的保护。在图6中给出了病毒血症数据。看起来所有三种疫苗都提供针对PRRS病毒感染的保护，因为病毒血症水平在每个时间点都低于阳性对照动物(第4组)中的水平。

Claims (10)

1.包含组合的猪圆环病毒2型的非复制性免疫原和减毒活PRRS病毒的疫苗，其用于通过将该疫苗施用于动物的真皮中，针对猪圆环病毒2型(PCV2)感染和PRRS病毒感染预防性治疗动物。
2.根据权利要求1使用的疫苗，其特征在于所述疫苗通过单剂施用。
3.根据前述权利要求中任一项使用的疫苗，其特征在于所述疫苗使用无针接种装置施用。
4.根据前述权利要求中任一项使用的疫苗，其特征在于PCV2的非复制性免疫原是重组表达的PCV2的ORF2蛋白。
5.根据前述权利要求中任一项使用的疫苗，其特征在于PCV2的非复制性免疫原是杆状病毒表达的PCV2的ORF2蛋白。
6.根据前述权利要求中任一项使用的疫苗，其特征在于在施用前24小时内将PCV2的免疫原和所述减毒活PRRS病毒组合在疫苗中。
7.根据前述权利要求中任一项使用的疫苗，其特征在于在施用前6小时内将PCV2的免疫原和所述减毒活PRRS病毒组合在疫苗中。
8.根据前述权利要求中任一项使用的疫苗，其特征在于该疫苗另外包含猪肺炎支原体（Mycoplasma hyopneumoniae）的非复制性免疫原。
9.针对猪圆环病毒2型(PCV2)感染和PRRS病毒感染预防性治疗动物的方法，该方法是通过将包含组合的PCV2的非复制性免疫原和减毒活PRRS病毒的疫苗施用于动物的真皮内。
10.猪圆环病毒2型(PCV2)的非复制性免疫原和减毒活PRRS病毒用于制造包含组合的所述PCV2的免疫原和所述减毒活PRRS病毒的疫苗的用途，所述疫苗用于给动物皮内施用以针对PCV2感染和PRRS病毒感染预防性治疗动物。
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