RO115881B1

RO115881B1 - Derivati de triazol [4,3-alfa]piridine, compozitie farmaceutica si metoda de tratament

Info

Publication number: RO115881B1
Application number: RO96-01157A
Authority: RO
Inventors: Allen J Duplantier; Kelvin Cooper
Original assignee: Pfizer
Priority date: 1995-06-06
Filing date: 1996-06-06
Publication date: 2000-07-28
Also published as: NO962320D0; KR100225719B1; DE69525978D1; AU5477396A; NZ286734A; JP3107827B2; EP0837860A1; DK0837860T3; ES2172583T3; WO1996039408A1; TW460469B; MX9709897A; CZ287251B6; RU2161158C2; MA23893A1; HU9601541D0; PT837860E; SA96170065B1; CZ162696A3; HUP9601541A3

Abstract

Inventia se refera la derivati de triazol [4,3-alfa]piridine avand formula generala structurala (I): la o metoda de tratament si la o compozitie farmaceutica. Acesti derivati se folosesc in tratarea bolilor inflamatorii.

Description

Invenția de față se referă la derivați de triazol [4,3-a]piridine, la o compoziție farmaceutică pe baza acestor derivați și la o metodă de tratare a stării inflamatorii la mamifere. Acești derivați se folosesc în tratarea bolilor inflamatorii.

Deci, prezenta invenție se referă la derivați de triciclic 5,6-dihidro-9Hpirazol[3,4-c]-1,2,4-triazol[4,3-a]piridine care sunt inhibitori selectivi ai fosfodiesterazei (PDE) tip IV sau ai producerii factorului de necroză a tumorii (TNF) și ca atare sunt utili în tratamentul astmului, artritei, bronșitei, bolii obstructive a căilor respiratorii cronice, psoriazisului, rinitei alergice, dermatitei și altor boli inflamatorii, cât și al bolii SIDA (AIDS), formării puroiului în părțile infectate ale corpului (sepsis), șocului septic și altor boli, cum ar fi cașexia, cuprinzând producerea de factor de necroză a tumorii (TNF).

Invenția conține, de asemenea, o metodă de tratare a bolilor mai sus amintite, la mamifere și, în special, la oameni, precum și la compozițiile farmaceutice care conțin drept ingredient activ acești derivați.

De la recunoașterea faptului că AMP ciclic este un al doilea mesager intracelular (E.W.Sutherland, și T.W.Rall, Pharrnacol.Rev./OBO, 1960, 12, 265), inhibarea fosfodiesterazelor a constituit o țintă pentru modularea și, în consecință, pentru intervenția terapeutică în domeniul proceselor maladive. Mai recent, au fost recunoscute clase distincte de PDE (J.A.Beavo și D.H.Reifsnyder, TiPS, 1990, 1_1_. 150), și selectivitatea lor privind inhibarea a condus la îmbunătățirea terapiei medicamentoase (C.D.Nicholson, R.a.Challiss și M.Shahid, TiPS, 1991,12, 19). în mod special, s-a recunoscut că inhibarea PDE tip IV poate duce la inhibarea eliberării mediatorului inflamator (M.W.Verghese și colaboratorii, J.Mol.Cell.Cardiol., 1989, 12 (Suppl.il), S 61) și relaxarea musculaturii netede a căilor respiratorii (T.J.Torphy în Directions for New Anti-Asthma Drugs (Noi direcții în domeniul medicamentelor antiasmatice), editată de S.R.O'Donnell și C.G.A.Persson, 1988, 37, Birkhauser - Verlag). Astfel, compușii ce inhibă PDE tip IV, dar care au o slabă activitate față de alte tipuri de PDS, inhibă eliberarea mediatorilor inflamatori și relaxează mușchiul neted al căilor respiratorii fără să producă efecte cardiovasculare sau efecte antiplachetare.

TNF este recunoscut ca fiind implicat în multe infecții și multe maladii autoimune, inclusiv cașexia (N.Friers, Febs Letters, 1991, 285, 199). Mai mult, s-a arătat că TNF este primul mediator al răspunsului inflamator observat în sepsis și șocul septic (C.E.Spooner și colaboratorii, Clinical Immunology and Immunopathology, 1992, 62, S11).

Derivații, conform invenției, pot avea activitate inhibitoare combinată a PDE IV și TNF.

Invenția de față are ca obiect derivați de triazol [4,3-a]piridine care au formula generală structurală I:

RO 115881 Bl în care

R¹ este reprezentat de un atom de hidrogen, o grupă alchil cu 1 ...6 atomi de carbon, alcoxi cu 1...6 atomi de carbon, alchenil cu 2...4 atomi de carbon, fenil, dimetilamino, cîcloalchil cu 3...6 atomi de carbon-alchil cu 1 ...3 atomi de carbon sau 50 acil cu 1 ...6 atomi de carbon, grupele alchil, fenil sau alchil fenil putând fi nesubstituite sau substituite cu una până la două grupe hidroxi, alchil cu 1 ...3 atomi de carbon, sau trifluormetil, sau cu până la trei atomi de halogen;

R² și R³ sunt fiecare independent selectați din cadrul grupului constând din hidrogen, o grupă alchil cu 1...14 atomi de carbon, alcoxi cu 1 ...7 atomi de carbon- 55 alchil cu 1 ...7 atomi de carbon, alchenil cu 1 ...14 atomi de carbon, cîcloalchil cu 3...7 atomi de carbon, cîcloalchil cu 3...7 atomi de carbon-alchil cu 1 ...2 atomi de carbon, o grupă saturată sau nesaturată heterociclică (Qq-CJ heterociclu (CH₂]_n în care n este O, 1 sau 2, conținând ca heteroatom una sau două grupe constând din oxigen, sulf, sulfonil, azot și NR₄ unde 6 o

R⁴ este reprezentat de un atom de hidrogen sau o grupă alchil cu 1 ...4 atomi de carbon; sau o grupă având formula generală II:

în care a este un număr întreg de la 1 la 5; b este ca și c, zero sau 1; R⁵ este un atom de hidrogen, o grupă hidroxi, alchil cu 1...5 atomi de carbon, alchenil cu 2...5 70 atomi de carbon, alcoxi cu 1...5 atomi de carbon, cicloalcoxi cu 3...6 atomi de carbon, un atom de halogen, o grupă trifluormetil, C0₂R⁶, C0NR⁶R⁷, NR⁶R⁷, N02 sau SO2NR⁶R⁷ unde R⁶ și R⁷ reprezintă independent un atom de hidrogen sau o grupă alchil cu 1 ...4 atomi de carbon; unde Z este oxigen, sulf, SO2, CO sau NH⁸ unde R⁸ este un atom de hidrogen sau o grupă alchil cu 1 ...4 atomi de carbon; și Y este o 75 grupă alchilen cu 1...5 atomi de carbon sau alchenil cu 2...6 atomi de carbon facultativ substituit cu până la două grupe alchil cu 1...7 atomi de carbon sau cîcloalchil cu 3...7 atomi de carbon; unde fiecare din grupele alchil, alchenil, cîcloalchil, alcoxialchil sau heterociclice pot fi substituite cu 1 ...14, de preferință 1 ...5, grupe constând din alchil cu 1...2 atomi de carbon, trifluormetil sau un atom de 80 halogen; și

R⁹ și R¹° sunt independent selectați din cadrul grupului constând dintr-un atom de hidrogen, grupe alchil cu 1...6 atomi de carbon, alcoxi cu 1...6 atomi de carbon, arii cu 6... 10 atomi de carbon și ariloxi cu 6...10 atomi de carbon, precum și sărurile acestor compuși, acceptabile farmaceutic. 85

Derivații importanți conform invenției sunt următorii:

9-ciclopentil-5,6-dihidro-7-etil-3-fenil-9H-pirazol[3,4-c]-1,2,4-triazol[4,3-a]piridină ; 9-ciclopentil-5,6-dihidro-7-etil-3-(4-piridil)-9H-pirazol[3,4-c]-1,2,4-triazol[4,3ajpiridină;

9-ciclopentil-5,6-dihidro-7-etil-3-(3-tienil)-9H-pirazol[3,4-c]-1,2,4-triazol[4,3- 90 ajpiridină;

3,9-diciclopentil-5,6-dihidro-7-etil-9H-pirazol[3,4-c]-1,2,4-triazol[4,3-a] pi r id i n ă;

RO 115881 Bl

9-ciclopentil-5,6-dihidro-7-etil-3-(metilciclohex-l-il)-9H-pirazol[3,4-c]-1,2,4triazol[4,3-a)piridină;

3-(terț-butil)-9-ciclopentil-5,6-dihidro-7-etil-9H-pirazol[3,4-c]-1,2,4-triazol[4,3ocjpiridină;

9-ciclopentil-5,6-dihidro-7-etil-3-(tien-2-il)-9H-pirazol[3,4-c)-1,2,4-triazol[4,3ocjpiridină;

3-(2-clorf enil)-9-ciclopentil-5,6-dihidro-7-etil-9H-pirazol[3,4-c]-1,2,4-triazol[4,3ocjpiridină;

9-ciclopentil-5,6-dihidro-7-etil-3-(2-iodfenil)-9H-pirazol[3,4-c)-1,2,4-triazol[4,3ajpiridină; și

5,6-dihidro-7-etil-9-(4-fluorfenil-3-(1-metilciclohex-1-il)-9H-pirazol[3,4-c]-1,2,4triazol[4,3-a]piridină.

Un alt obiect al invenției îl constituie o metodă pentru inhibarea fosfodiesterazei (PDE) tip IV și producerea factorului de necroză a tumorii (TNF) prin administrarea, unui pacient, a unei cantități eficiente de derivat având caracteristicile de mai sus.

Prin metoda de tratare a stărilor inflamatorii la mamifere, conform invenției, se administrează acestui mamifer o cantitate eficientă atât de derivat conform invenției, cât și de săruri acceptabile farmaceutic, ale acestor derivați.

Un alt obiect al invenției constă într-o compoziție farmaceutică pentru (a) tratamentul astmului, artritei, bronșitei, bolilor cronice obstructive ale căilor respiratorii, psoriazisului, rinitei alergice, dermatitei și al altor boli inflamatorii caracterizate prin activitatea fosfodiesterazei (PDE) tip IV, SIDA, sepsis, a șocului septic și altor boli, cum ar fi cașexia, cuprinzând producerea de TNF, sau (b) inhibarea fosfodiesterazei (PDE) tip IV și producerea factorului de necroză a tumorii (TNF), compoziție constituită dintr-o cantitate eficientă de derivat având caracteristicile de mai sus și un suport purtător, acceptabil din punct de vedere farmaceutic.

Invenția de față prezintă avantajul obținerii unor derivați de triazol [4,3-a]piridine care au activitate inhibitorie combinată a PDE IV și TNF.

Invenția de față se referă la derivați de triazol [4,3-a]piridine având formula generală I:

cât și la sărurile acestora acceptabile din punct de vedere farmaceutic în care:

R¹ este reprezentat de un atom de hidrogen, o grupă alchil cu 1 la 6 atomi de carbon, alcoxi cu 1 la 6 atomi de carbon, alchenil cu 2 la 4 atomi de carbon, fenil, dimetilamino, cicloalchil cu 3 la 6 atomi de carbon, cicloalchil cu 3 la 6 atomi de carbon-alchil cu 1 la 3 atomi de carbon sau acil cu 1 la 6 atomi de carbon, în care, grupele alchil, fenil sau alchenil pot fi substituite cu până la două grupe hidroxi, alchil cu 1 la 3 atomi de carbon, sau grupe trifluorometil, sau cu până la trei atomi de halogen;

RO 115881 Bl

145

R² și R³ sunt fiecare independent selectați din cadrul grupului constând din hidrogen, alchil cu 1 la 14 atomi de carbon, alcoxi cu 1 la 7 atomi de carbon-alchil cu 1 la 7 atomi de carbon, alchenil cu 2 la 14 atomi de carbon, cicloalchenil cu 3 la 7 atomi de carbon, cicloalchil cu 3 la 7 atomi de carbon-alchil cu 1 la 2 atomi de carbon, grupă saturată sau nesaturată (C^-C/heterociclică (CH₂)_n în care n este O, 1 sau 2, conținând drept heteroatom una sau două grupe constând din oxigen, sulf, sulfonil, azot și NR⁴ unde R⁴ este hidrogen sau alchil cu 1 la 4 atomi de carbon; sau o grupă cu formula generală ΙΓ:

-(Y)_b-(Z]_c-C₆H₄-(R⁵]_a (ΙΓ) în care a este un întreg de la 1 la 5; b și c sunt zero sau 1 ;R⁵ este hidrogen, hidroxi, alchil cu 1 la 5 atomi de carbon, alchenil cu 2 la 5 atomi de carbon, alcoxi cu 1 la 5 atomi de carbon, cicloalcoxi cu 3 la 6 atomi de carbon, halogen, trifluormetil, C02R^s, C0NR⁶R⁷, NR⁶R⁷, NO2 sau SO₂NR⁶R⁷ unde R⁶ și R⁷ reprezintă fiecare independent hidrogen sau alchil cu 1 la 4 atomi de carbon; unde Z este oxigen, sulf, SO₂, CO sau NR⁸ unde R⁸ este hidrogen sau alchil cu 1 la 4 atomi de carbon; și Y este alchilen cu 1 la 5 atomi de carbon sau alchenil cu 2 la 6 atomi de carbon eventual substituit cu până la două grupe alchil cu 1 la 7 atomi de carbon sau cicloalchil cu 3 până la 7 atomi de carbon; unde fiecare dintre grupele alchil, alchenil, cicloalchil, alcoxialchil sau heterociclice pot fi substituite cu 1 până la 14, preferabil 1 până la 5, din grupele constituite din alchil cu 1 până la 2 atomi de carbon, trifluormetil sau halogen; și

R⁹ și R¹⁰ sunt fiecare independent selectați din cadrul grupului constând din hidrogen, alchil cu 1 la 6 atomi de carbon, alcoxi cu 1 la 6 atomi de carbon, arii cu 6 la 10 atomi de carbon și ariloxi cu 6 la 10 atomi de carbon.

Termenul “alchil”, așa cum se utilizează pe parcursul prezentei descrieri de invenție, fără ca să se specifice altfel, include radicalii monovalenți ai hidrocarburilor saturate cu părți lanțuri, ramificate sau ciclice sau combinații ale acestora.

Termenul “alcoxi”, așa cum se utilizează pe parcursul prezentei descrieri de invenție include grupele □ în care radicalul alchil este definit mai sus.

Termenul “tienil”, așa cum se utilizează pe parcursul prezentei descrieri de invenție, fără ca să se indice altfel, este definit de tiofen-CH_a.

Termenul arii”, așa cum se utilizează pe parcursul prezentei descrieri de invenție, fără ca să se indice altfel, include un radical organic derivat de la o hidrocarbură aromatică prin îndepărtarea unui atom de hidrogen, cum ar fi naftil sau fenil, eventual substituit cu 1 până la 3 substituenți care sunt independent selectați din cadrul grupului constând din fluor, clor, ciano, nitro, trifluorometil, alcoxi cu 1 la 6 atomi de carbon, ariloxi cu 6 la 10 atomi de carbon, trifluorometoxi, difluoroetoxi și alchil cu 1 până la 6 atomi de carbon.

Termenul “ariloxi”, așa cum se utilizează pe parcursul prezentei descrieri de invenție, include grupele O-aril în care radicalul arii este definit mai sus.

Termenul “acil”, așa cum se utilizează pe parcursul prezentei descrieri de invenție, fără să se indice altfel, include un radical de formula generală RCO în care R este o grupă alchil, alcoxi, arii arilalchil sau arilalchiloxi și termenii alchil” sau “arii” sunt definiți anterior.

Derivații preferați cu formula l conform invenției includ acei compuși în care R³este reprezentat de metil, etil sau izopropil.

150

155

160

165

170

175

180

185

RO 115881 Bl

Alți derivați preferați având formula I includ acei compuși în care R³ este reprezentat de o grupă alchil cu 1 până la 6 atomi de carbon, alchenil cu 2 până la 6 atomi de carbon, cicloalchil cu 3 până la 7 atomi de carbon, cicloalchil cu 3 până la 7 atomi de carbon-alchil cu 1 până la 5 atomi de carbon sau fenil eventual substituit cu una sau două grupe, grupe constând din hidrogen, hidroxi, alchil cu 1 până la 5 atomi de carbon, alchenil cu 2 până la 5 atomi de carbon, alcoxi cu 1 până la 5 atomi de carbon, halogen, trifluormetil, C0₂R⁶,C0NR⁶R⁷, NR⁶R⁷, NC^ sau SC^NRpR⁷ în care Rf³și R⁷ sunt independent reprezentați de hidrogen sau un radical alchil cu 1 la 4 atomi de carbon.

Derivații având formula I în mod specific preferați includ următorii compuși: 9-ciclopentil-5,6-dihidro-7-etil-3-fenil-9H-pirazol[3,4-c]-1,2,4-triazol[4,3-a]piridină; 9-ciclopentil-5,6-dihidro-7-etil-3-(furan-2-il)-9H-pirazol[3,4-c]-1,2,4-triazol[4,3ajpiridină;

9-ciclopentil-5,6-dihidro-7-etil-3-(2-piridil)-9H-pirazol[3,4-c]-1,2,4-triazol[4,3ccjpiridină;

9-ciclopentil-5,6-dihidro-7-etil-3-(4-piridil)-9H-pirazol[3,4-c]-1,2,4-triazol[4,3a]piridină;

9-ciclopentil-5,6-dihidro-7-etil-3-(3-tienil)-9H-pirazol[3,4-c]-1,2,4-triazol[4,3a]piridină;

3-benzil-9-ciclopentil-5,6-dihidro-7-etil-9H-pirazol[3,4-c]-1,2,4-triazol[4,3oc]piridină;

9-ciclopentil-5,6-dihidro-7-etil-3-propil-9H-pirazol[3,4-c]-1,2,4-triazol[4,3ajpiridină;

3,9-diciclopentil-5,6-dihidro-7-etil-9H-pirazol[3,4-c]-1,2,4-triazol[4,3-a]piridină;

9-ciclopentil-5,6-dihidro-7-etil-3-(1-metilciclohex-1-il)-9H-pirazol[3,4-c]-1,2,4triazol[4,3-a]piridină;

3-(terț-butil]-9-ciclopentil-5,6-dihidro-7-etil-9H-pirazol[3,4-c]-1,2,4-triazol[4,3a]piridină;

9-ciclopentil-5,6-dihidro-7-etil-3-{2-metilfenil]-9H-pirazol[3,4-c]-1,2,4-triazol[4,3a]piridină;

9-ciclopentil-5,6-dihidro-7-etil-3-(2-metoxifenil)-9H-pirazol[3,4-c]-1,2,4-triazol[4,3ajpiridină;

9-ciclopentil-5,6-dihidro-7-etil-3-(tien-2-il)-9H-pirazol[3,4-c]-1,2,4-triazol[4,3a]piridină;

3-(2-clorfenil]-9-ciclopentil-5,6-dihidro-7-etil-9H-pirazol[3,4-c]-1,2,4-triazol[4,3ot]piridină;

9-ciclopentil-5,6-dihidro-7-etil-3-(2-iodofenil]-9H-pirazol[3,4-c]-1,2,4-triazol[4,3a]piridină;

9-ciclopentil-5,6-dihidro-7-etil-3-(2-trifluorometilfenil)-9H-pirazol[3,4-c]-1,2,4triazol[4,3-a]piridină;

Prezenta invenție se referă, de asemenea, la un procedeu pentru inhibarea fosfodiesterazei (PDE) tip IV și la producerea de TNF prin administrarea pacientului a unei cantității eficiente de derivat conform invenției având formula generală I, sau a sărurilor sale acceptate din punct de vedere farmaceutic.

Prezenta invenție se referă de asemenea la o metodă pentru tratarea stării inflamatorii la mamifere, procedeu ce constă în administrarea, la aceste mamifere, a unei cantități antiinflamatorii de derivat conform invenției sau a sărurilor acestora, acceptabile din punct de vedere farmaceutic.

RO 115881 Bl

240

Prezenta invenție se mai referă la compoziția farmaceutică destinată tratamentului (a) astmului, artritei, bronșitei, bolii ostructive cronice a căilor respiratorii, psoriazisului, rinitei alergice,dermatitei și altor maladii inflamatorii caracterizată prin activitatea fosfodiesterazei (PDE) tip IV, față de AIDS, sepsis, șocul septic și alte maladii, cum ar fi cașexia, cuprinzând producerea de TNF, sau (b] inhibarea fosfodiesterazei (PDE) TIP IV și producerea de TNF cuprinzând o cantitate eficientă de compus având formula generală I sau sărurilor sale acceptate din punct de vedere farmaceutic ale acestora împreună cu un suport (purtător) acceptabil din punct de vedere farmaceutic.

Invenția de față se mai referă, de asemenea, la un procedeu pentru tratarea sau prevenirea condiției sau stării selectate din cadrul grupului constând din astm, artrită, bronșită, maladie obstructivă cronică a căilor respiratorii, psoriazis, rinită alergică, dermatită și alte boli inflamatorii, AIDS, șoc septic și alte maladii, cum ar fi cașexia, cuprinzând producerea TNF și care constă în administrarea pacientului a unei cantități eficiente de compus cu formula generală I sau sărurilor acestora, acceptabile din punct de vedere farmaceutic.

Următoarele scheme de reacție ilustrează, dar nu se limitează la, prepararea derivaților, conform prezentei invenții. Exceptând cazurile când se indică altfel, R¹, R², R³, R⁹ și R¹⁰ în schemele de reacție și discuțiile următoare sunt asemenea celor definiți mai sus.

Prepararea 1

Â(III)

245

250

255

260

265

270

(V)

275

280 h₃C0

RO 115881 Bl

Prepararea 2

(VII)

p

Prepararea 3

(XII) (IX)

RO 115881 Bl

Prepararea 4

330

(XIII)

335

340

345

350

355

360

Schema 2

365

370

375 (XI)

RO 115881 Bl

Schema 3

(XIV)

(XV)

(XVI)

în faza de reacție 1 din prepararea 1, compusul 2-pirolidinonă cu formula generală III este convertit în compusul corespunzător N-(metoxifenil)-2-pirolidonă cu formula generală IV, prin reacția compusului III cu 4-iodanisol sau 4-bromanisol încălzit în prezența pulberii de cupru și carbonatului de potasiu. Amestecul de reacție este încălzit la o temperatură între aproximativ 11O°C până la aproximativ 17O°C, de preferință aproximativ 15O°C, pe o perioadă de timp de aproximativ 14 h până la aproximativ 22 h, de preferință aproximativ 18 h, în mediu de reacție inert.

RO 115881 Bl

425 în faza de reacție 2, din prepararea 1, halogenura de R¹, în care R¹ este o grupă alchil cu 1 până la 6 atomi de carbon, se adaugă la o suspensie de magneziu într-un solvent aprotic anhidru. Amestecul de reacție se încălzește la reflux până se consumă tot magneziul, după care se răcește la o temperatură de aproximativ -15°C până la aproximativ 15°C, de preferință la aproximativ O°C. Se adaugă apoi compusul N-(4-metiloxifenil)-2-pirolidonă cu formula generală IV și amestecul de reacție se încălzește la temperatura camerei cu agitare pe o perioadă de timp de aproximativ 1,5 h până la aproximativ 2,5 h, de preferință aproximativ 2,0 h. Halogenurile de alchil chspunzătoare includ brometanul, brommetanul sau brompropanul. Solventul aprotic anhidru preferat este eterul anhidru.

Intermediarul dorit se izolează și convertește la compusul chspunzător 1,2, 5, 6-tetrahidropiridină cu formula generală V, dispersând precipitatul într-un amestec de solvent aprotic nepolar și o bază. Se adaugă clorură de etil oxalil și amestecul de reacție se încălzește la reflux o perioadă de timp de aproximativ 1,5 h până la aproximativ 4,5 h, de preferință aproximativ 3,0 h. Solventul aprotic nepolar preferat este benzenul și baza preferată este hidroxidul de sodiu. Se îndepărtează solvenții și reziduul rezultat se tratează cu o soluție de alcoxid de sodiu în etanol. După încălzirea la reflux o perioadă de timp de aproximativ 1 h până la 3 h, de preferință aproximativ 1,5 h, amestecul se concentrează sub presiune redusă și se acidulează la un pH de aproximativ 3, cu acid clorhidric.

în faza de reacție 3 din prepararea 1, compusul cu formula generală V este convertit în compusul chspunzător 3-metoxi-1,2,5,6-tetrahidropiridină cu formula generală VI prin încălzirea la reflux a amestecului de reacție constând din compusul cu formula generală V și 3-metil-1 -p-toliltriazen în solvent aprotic, de preferință 1,2dicloretanul, pe o perioadă de timp cuprinsă între aproximativ 30 min și aproximativ 2 h, de preferință aproximativ 45 min.

în faza de reacție 1 din prepararea 2, compusul 1, 2, 5, 6-tetrahidropiridina cu formula VII, în care R¹¹ este reprezentat de hidrogen sau metil, este convertit la compusul chspunzător 4, 5, 6,7-tetrahidro-7-oxo-1H-pirazol[3,4-c]-piridină cu formula generală VIII prin reacția compusului cu formula VII cu compusul hidrazină cu formula R³HNNH₂, în care R³ are semnificațiile definite mai sus. Ambii derivați ai compusului cu formula VII, 3-hidroxi și 3-metoxi, pot fi utilizați ca materii prime în unul dintre cele trei seturi diferite de condiții de reacție.

în unul din seturile de condiții de reacție, 1, 2, 5, 6-tetrahidropiridina cu formula generală VII este convertită la compusul corespunzător cu formula generală VIII prin reacția compusului cu formula VII cu hidroclorura de hidrazină și alcoxid de sodiu în solvent protic polar anhidru. Alcoxidul de sodiu preferat este metoxidul de sodiu și solventul protic polar preferat anhidru este etanolul anhidru. Amestecul de reacție se încălzește la reflux timp de aproximativ 9 h până la aproximativ 15 h, de preferință aproximativ 12 h.

în al doilea set de condiții de reacție, 1, 2, 5, 6-tetrahidropiridina, compusul cu formula VII se convertește la compusul corepunzător cu formula VIII prin reacția compusului cu formula VII cu hidrazina în solvent protic polar anhidru, de preferință etanol. Amestecul de reacție se încălzește la reflux pentru o perioadă de timp de la aproximativ 16 h până la aproximativ 24 h, de preferință aproximativ 20 h.

430

435

440

445

450

455

460

465

RO 115881 Bl în al treilea set de condiții de reacție, 1, 2, 5, 6-tetrahidropiridina, compusul cu formula VII, se convertește la compusul corespunzător cu formula VIII, prin reacția compusului cu formula VII fie cu o hidrazină, fie cu o hidroclorură de hidrazină în solvent protic polar, de preferință metanol. Amestecul de reacție se încălzește la o temperatură între aproximativ 7O°C până la aproximativ 11D°C, de preferință aproximativ 9O°C, sub un curent ușor de azot până când tot solventul se îndepărtează. Amestecul pur este apoi încălzit la o temperatură între aproximativ 12O°C până la aproximativ 18O°C, de preferință aproximativ 15O°C, pentru o perioadă de timp cuprins între aproximativ 30 min până la aproximativ 90 min, preferabil 60 min.

în faza de reacție 2 din prepararea 2, compusul cu formula VIII este convertit la compusul chspunzător 6-H-4, 5, 6, 7-tetrahidro-7-oxo-1 H-pirazol [3,4-c] piridină cu formula IX prin reacția unei soluții de compus cu formula VIII în solvent aprotic polar, de preferință acetonitril, cu o soluție de nitrat de ceriu (IV) amoniu în apă la o temperatură cuprinsă între aproximativ - 15°C până la aproximativ 15°C, de preferință aproximativ O°C, pe o perioadă de timp cuprinsă între aproximativ 20 min până la aproximativ 50 min, de preferință aproximativ 35 min. După finalizarea reacției, amestecul se diluează cu apă și se extrage cu acetat de etil. Extractele organice combinate se spală cu soluție saturată de bicarbonat de sodiu (sodiu hidrogeno carbonat) urmată de sulfit de sodiu.

în faza de reacție 1 din prepararea 3, compusul cu formula generală XII, preparat conform descrierii din brevetul US 3423414, se convertește la compusul cu formula VIII, în care R¹ este dimetilamino, prin tratarea compusului cu formula XII cu hidrură de sodiu în solvent aprotic polar, cum ar fi tetrahidrofuranul, la o temperatură cuprinsă între aproximativ O°C până la aproximativ 62°C, de preferință aproximativ 25°C, pe o perioadă de timp cuprinsă între aproximativ 1 h până la aproximativ 6 h, de preferință aproximativ 1 h. 0 cantitate în exces de iodură de metil se adaugă apoi la amestecul de reacție la temperatura camerei și amestecul de reacție se lasă sub agitare pe o perioadă de timp cuprinsă între aproximativ 1 h și aproximativ 24 h, de preferință aproximativ 2 h.

în faza de reacție 2 din prepararea 3, compusul cu formula generală VIII se supune reacției în continuare, pentru a se obține compusul corespunzător 6-H-4, 5, 6,

7-tetrahidro-7-oxo - 1H - pirazolo [3,4-c]-piridina cu formula IX, în care R¹ este dialchilamino, conform procedeului descris mai sus la faza de reacție 2 din prepararea 2.

în faza de reacție 1 din prepararea 4, compusul cu formula XII se convertește la compusul corespunzător cu formula XIII, prin reacția compusului cu formula XII cu bromtrimetilsilan și nitrit de sodiu în solvent aprotic, cum ar fi tetraclorura de carbon, la temperatura cuprinsă între aproximativ O°C și aproximativ 25°C, de preferință aproximativ 25°C, pe o perioadă de timp cuprinsă între aproximativ 6 h până la aproximativ 48 h, de preferință aproximativ 24 h.

în faza de reacție 2 din prepararea 4, compusul cu formula XIII se convertește la compusul corespunzător cu formula VIII, în care R¹ este reprezentat de vinii, prin reacția compusului cu formula XIII cu viniltributilstaniu și o cantitate catalitică de tetrakis (trifenilfosfin) paladiu (O) în solvent aprotic nepolar, cum ar fi benzenul, la o temperatură între aproximativ 8O°C până la aproximativ 12O°C, de preferință aproximativ 1OO°C, pentru o perioadă de timp cuprinsă între aproximativ 24 h până la aproximativ 72 de h, de preferință aproximativ 48 h.

RO 115881 Bl în faza de reacție 3 din prepararea 3, compusul cu formula generală VIII se supune reacției în continuare pentru a se obține compusul corespunzător 6-H-4, 5, 6, 7-tetrahidro-7-oxo-1 H-pirazol [3,4-c]piridină cu formula IX, în care R¹ este alchenil, 515 conform procedeului descris mai sus la reacția 2 din prepararea 2.

în faza de reacție 1 din schema 1, compusul lactam cu formula IX se convertește la compusul corespunzător tiolactam cu formula X, prin reacția compusului cu formula IX cu pentasulfură fosforoasă în solvent aprotic polar, cum ar fi 1,4-dioxanul sau piridina. Amestecul de reacție se încălzește la reflux pentru o perioadă de timp 520 cuprinsă între aproximativ 12 h până la aproximativ 48 h, de preferință aproximativ 18 h. în schema de reacție 1, din faza de reacție 2, tiolactama cu formula X se convertește la compusul corespunzător triciclic 5,6-dihidro-9H-pirazol [3,4-c]-1,2,4-triazol [4,3-a] piridină cu formula I prin tratarea compusului cu formula X cu hidrazină anhidră în prezență de solvent aprotic anhidru, cum ar fi piridina, în condiții inerte de 525 reacție. Amestecul de reacție se încălzește la o temperatură cuprinsă între aproximativ 5O°C până la aproximativ 1OO°C, de preferință la aproximativ 7O°C pe o perioadă de timp între aproximativ 5 min până la aproximativ 30 mine, de preferință aproximativ 5 min. Se îndepărtează apoi materiile volatile sub presiune redusă și se adaugă solvent aprotic anhidru proaspăt, de preferință piridină, după care se adaugă 530 o clorură acidă corespunzătoare cum ar fi cea de formula R²C0CI, în care R² este definit ca mai sus. Amestecul de reacție rezultat se agită pe o perioadă de timp cuprinsă între aproximativ 1 oră până la aproximativ 4 h, de preferință aproximativ 2 h. Materiile volatile sunt din nou îndepărtate sub presiune redusă. Reziduul se dizolvă în solvent aprotic, cum ar fi dimetilformamida, și se încălzește la reflux pentru o perioadă 535 de timp cuprinsă între aproximativ 1 h și aproximativ 4 h, de preferință aproximativ 2 h.

în faza de reacție 1 din schema 2, compusul tiolactamă cu formula X este convertit la compusul corespunzător metilitio cu formula XI, prin tratarea amestecului constând din compusul cu formula IX și silicagel în solvent aprotic, cum ar fi eterul, 540 cu o soluție de diazometan în eter. Temperatura de reacție este cuprinsă, în general, în domeniul de la aproximativ - 5°C până la aproximativ 10°C, de preferință aproximativ □°C, pe o perioadă de timp cuprinsă între aproximativ 30 min până la aproximativ 5 h, preferabil aproximativ 1 h.

în faza de reacție 2 din schema 2, compusul metiltiol cu formula XI se conver- 545 tește la compusul corespunzător triciclic 5,6-dihidro-9H-pirazol[3,4-c]-1,2,4-triazol[4,3-a]piridină cu formula I prin reacția compusului cu formula XI, cu compusul hidrazidă având formula R²C0NHNH₂, sau sarea corespunzătoare hidroclorură, în solvent aprotic, cum ar fi piridina, în condiții inerte de reacție. Amestecul de reacție se încălzește la o temperatură cuprinsă între aproximativ 120°C până la aproximativ 550 150°C, de preferință aproximativ 135°C, pe o perioadă de timp cuprinsă între aproximativ de 2 h până la aproximativ 6 h, de preferință aproximativ 4 h. Materiile volatile sunt apoi îndepărtate la presiune redusă și uleiul rezultat este apoi încălzit în continuare la o temperatură cuprinsă între aproximativ 135°C până la aproximativ 165°C, de preferință aproximativ 150°C, pe o perioadă de timp între aproximativ 2 555 h până la aproximativ 6 h, de preferință aproximativ 4 h.

în faza de reacție 1 din schema 3, compusul cu formula XIV este convertit la compusul chspunzător cu formula XV conform procedeului descris în Canadian Journal of Chemistry. 33, 1714 (1955).

RO 115881 Bl în faza de reacție 2 din schema 3, compusul cu formula XV este convertit la compusul corespunzător cu formula XVI, în care R¹² este alchil cu 1 până la 6 atomi de carbon, prin reacția compusului cu formula XV cu alchil litiu în solvent aprotic polar, cum ar fi un eter, la o temperatură cuprinsă între aproximativ -5O°C până la aproximativ - 8O°C, de preferință aproximativ - 78°C, pentru o perioadă de timp cuprinsă între aproximativ 15 min până la aproximativ 2 h, de preferință aproximativ 30 min.

în faza de reacție 3 din schema 3, compusul cu formula XVI este convertit la compusul corespunzător 5,6-dihidro-9H-pirazol [3,4-c]-1,2,4-triazol-[4,3-cc] piridină cu formula I, în care R¹ este alchil cu 1 la 6 atomi de carbon, prin tratarea compusului cu formula XVI cu clorocromat de piridină în solvent aprotic nepolar, cum ar fi clorură de metilen, la temperatura camerei pentru o perioadă de timp cuprinsă între aproximativ 6 h până la aproximativ 24 h, de preferință aproximativ 12 h.

Abilitatea compușilor sau a sărurilor acestora, acceptabile din punct de vedere farmaceutic, de a inhiba fosfodiesteraza IV (PDE₄) și, în consecință, demonstrarea eficienței lor pentru tratarea maladiilor inflamatoare este prezentată de următoarele studii in vitro.

Testări biologice Eosinofil uman PDE

Sânge periferic uman se colectează în acid etilendiaminotetraacetic, diluat 1:2 cu acid piperazin-N,N’-bis-2-etansulfonic (PIPES) tamponat și apoi depus pe soluție percoll. Gradienții se formează prin centrifugare timp de 30 min la 2000 rpm la temperatura de 4°C. Partea rămasă după izolare, care se bazează pe procedeul Kita și colaboratorii, J.lmmunol., 152, 5457 (1994), se efectuează la temperatura de 4°C.

Stratul neutrofil/eosinofil se colectează din gradientul de percolare(eluare) și celulele roșii/hematiile sunt lizate. Celulele rămase se spală în PIPES (1% FCS), se incubează cu microperle anti-CD16 (MACS) timp de 1 h, și se trece printr-o coloană magnetică pentru a îndepărta neutrofilele. Eosinofilele sunt colectate în eluat și analizate în ceea ce privește viabilitatea lor cu albastru trypan și în ceea ce privește puritatea prin diferite colorări rapide de frotiu (diff-quick stain). Puritatea eosinofilică este de obicei mai mare de 99% utilizând această metodă.

Eosinofilele purificate sunt resuspendate în 750 μΙ de tampon de lizare PDE (20 mM trietilamină, 1 mM acid etilendiaminotetraacetic 100 //g/ml bacitracină, 2 mM benzamidină, 50 μΜ leupeptină, 50 μΜ PMSF, 100 μο/ιτιΙ inhibitor tripsină de soia) și se răcesc rapid în azot lichid. Celulele sunt dezghețate ușor și supuse tratamentului cu ultrasunete (sonicated). Membranele sunt supuse unei mișcări turbionare (vortexed) (ruperea este confirmată prin colorarea fragmentelor cu albastru Trypan). Celulele rupte sunt centrifugate la 45 k rpm timp de 30 min la 4°C, pentru izolarea membranelor. Citosolul este decantat și membrana resuspendată la 200 μο/ιτιΙ pentru a fi utilizată ca sursă de PDE în studiul de hidroliză cu o productivitate (randament al ferestrei) de la 3000 până la 5000 numărări.

Compușii se dizolvă în dimetil sulfoxid la 10-2M, apoi se diluează 1:25 în apă la 4 x 10^M. Această suspensie este diluată în serie 1:10 în 4% dimetil sulfoxid, pentru a ajunge la o concentrație finală în dimetil sulfoxid de 1% în studiul final.

Testul de inhibare a fosfodiesterazei în tuburi de sticlă (cutii Petri) de 12 x 75 mm se adaugă:

μΙ tampon de încercare PDE (200 mM Tris/40 mM MgC12) μΙ 4nM/ml cAMP stoc

RO 115881 Bl μΙ compus de testare μΙ sursă PDE (membrană]

Control de fond = membrană fiartă 10 min.

Control pozitiv = 25 μΙ membrană nefiartă

Incubare 25 min în baie de apă la 37°C.

Reacția este stopată prin fierberea probelor timp de 5 min. Probele se aplică pe Affi-gel în coloană [1 ml volumul patului) inițial echilibrat cu acid acetic 0,25 M urmat de 0,1 mM acid N-[2-hidroxietil]piperazin-N’-2-etansulfonic (HEPESJ/0,1 mM NaCI soluție tampon de spălare (pH = 8,5). cAMP se spală din coloană cu HEPES/NaCI, 5'-AMP este eluatîn 4 volume cu acid acetic 0,25 M. O cantitate de 1 ml eluat este evaluat în 3 ml fluid de scintilație timp de 1 min (3H).

Conversia substratului = (cpm control pozitiv x 4)/activitate totală. Viteza de conversie trebuie să fie cuprinsă între 3 și 15% pentru ca experimentul să fie valid.

% Inhibare = 1-(eluat cpm-fond cpm/control cpm-fond pm] x 100.

IC50s sunt generați prin regresia liniară a curbei titrului de inhibare (porțiune liniară); și se exprimă în μΜ.

TNF

Abilitatea (capacitatea) compușilor sau sărurilor lor acceptabile din punct de vedere farmaceutic de a inhiba producerea TNF și, în consecință, de a demonstra eficiența lor la tratarea bolilor cuprinzând producerea de TNF este prezentată prin următoarele studii in vitro:

Se colectează sânge periferic (100 ml) de la voluntari (oameni) în acid etilendiaminotetraacetic (EDTA). Se izolează celulele mononucleare prin tehnica ficoll/Hypaque și se spală de trei ori în soluție salină Hank incomplet echilibrată (HBSS). Celulele sunt resuspendate la o concentrație finală de 1 χ 10⁶ celule pe mililitru (cpm) în RPMI preîncălzit (conținând 5% FCS, glutamină, pen/step și nistatină). Monocitele sunt depuse (placate) ca 1 χ 10⁶ celule în 1 ml în plăci cu 24 scobituri. Celulele sunt incubate la 37°C (5% bioxid de carbon) și se lasă să adere la plăci timp de 2 h, după care perioadă celulele neaderate sunt îndepărtate prin spălare ușoară. Compușii de încercare (10 μΙ) se adaugă apoi în celule la 3-4 concentrații fiecare și incubați timp de 1 h. Lipopolizaharida (LPS) (10 μΙ) se adaugă în fiecare scobitură (orificiul) corespunzător. Plăcile sunt incubate peste noapte (18 h) la 37°C. La sfârșitul perioadei de incubare TNF se analizează prin fracționare (separare) ELISA (Trusa R&D Quantikine Kit).

Determinările IC₅₀ se efectuează pentru fiecare compus pe baza analizei de regresie liniară.

Sărurile de adiție cu acid, acceptabile din punct de vedere farmaceutic ale compușilor conform prezentei invenții le includ, dar nu limitează la acestea, pe cele formate prin adiție de HCI, HBr, HN0₃, H_aSO₄, H₃P0₄, CH₃S0₃H, p-CH₃C₆H₄S0₃H, CH₃C00H, acid gluconic, acid tartric, acid maleic și acid succinic. Sărurile cationice acceptabile din punct de vedere farmaceutic ale compușilor conform prezentei invenții corespunzătoare formulei generale I, în care R⁵ este C00R⁶ în care R⁶ este hidrogen, le includ, dar nu limitează la acestea, pe cele de sodium, potasiu, calciu, magneziu, amoniu, Ν,Ν’-dibenziletilendiamină, N-metilglucamină (meglumină), etanolamină și dietanolamină.

610

615

620

625

630

635

640

645

650

RO 115881 Bl

Pentru a se administra la oameni în tratamentul curativ sau cel profilactic al maladiilor inflamatorii, dozele orale ale compușilor cu formula generală I și sărurile acestora, acceptabile din punct de vedere farmaceutic, în continuare considerate drept compuși activi, sunt, în genera,I în domeniul de la 0,1 ,,.400 mg zilnic pentru un adult cu greutatea medie 70 kg. Astfel, pentru un pacient adult caracteristic, tabletele individuale sau capsulele conțin de la 0,1 până la 50 mg compus activ, întrun vehiculant sau suport acceptabil din punct de vedere farmaceutic. Dozările pentru administrarea intravenoasă sunt caracteristice în domeniul de la 0,1 până la 40 mg pe o singură doză așa cum se cere. Pentru administrarea intranazală sau inhalare, doza este în general formulată ca soluție de 0,1 până la 1% (gr/v). în practică, medicul va determina doza actuală care va fi cea mai utilă pentru un pacient individual și aceasta va varia cu vârsta, greutatea și răspunsul particular al fiecărui pacient. Dozele de mai sus sunt exemple pentru cazuri medii, dar, desigur, în anumite cazuri individuale sunt necesare doze mai mici sau mai mari.

Pentru a se administra la oameni în vederea inhibării TNF, pot fi utilizate o varietate de căi convenționale, inclusiv cea orală, parenterală sau topică. în general, compusul activ va fi administrat oral sau parenteral, la doze cuprinse între aproximativ 0,1 și 25 mg/kg corp greutate de subiect tratat zilnic, preferabil de la aproximativ 0,3 până la 5 mg/kg. Derivații cu formula generală I pot fi administrați topic sub formă de unguent sau cremă în concentrații de aproximativ 0,5% până la aproximativ 1%, aplicat, în general, de 2 sau 3 ori pe zi pe zona afectată. Cu toate acestea, vor fi necesare anumite variații în dozare depinzând de condiția subiectului ce urmează a fi tratat. Persoana responsabilă pentru administrare va determina, în orice situație, doza corespunzătoare pentru subiectul individual. Pentru uz uman, compușii activi conform prezentei invenții pot fi administrați singuri, dar în general vor fi administrați în amestec cu un diluant farmaceutic sau un suport farmaceutic selectat ținând cont de calea intenționată de administrare și de practica farmaceutică standard. De exemplu, pot fi administrați pe cale orală sub formă de tablete conținând asemenea excipienți cum ar fi amidonul sau lactoza, sau în capsule sau ovule fie singuri, fie în amestec de excipienți, sau sub formă de elixiruri sau suspensii conținând agenți aromatizanți sau coloranți. Pot fi injectați parenteral, de exemplu intravenos, intramuscular sau subcutanat. Pentru administrarea parenterală, cel mai bine pot fi utilizați sub forma de soluție apoasă sterilă care conține și alte sustanțe; de exemplu suficiente săruri sau glucoză pentru a face soluția izotonică.

Se dau în continuare exemple de realizare a invenției, cu mențiunea că materiile prime din preparările 1...4 sunt obținute conform descrierii din publicația PCT WO 9501980

Prepararea 1. 1 -ciclopentil-4,5-dihidro-3-etil· 7-metiltio-1 H-pirazol[3,4-c]-piridină Se agită magnetic un amestec de 1-ciclopentil-3-etil-7-tio-4,5,6,7-tetrahidro-1 Hpirazol[3,4-c]-piridină (0,322 g), gel de silice neutru (10 g) și eter (100 ml) într-un balon Erlenmeyer de 500 ml răcit la 0°C. La acest amestec se adaugă încet un exces de soluție de diazometan în eter. Dezvoltarea de gaz apare, după 1 h și reacția se stopează cu acid acetic (1 picătură], amestecul se filtrează și se concentrează la presiune redusă, pentru a se obține un ulei galben. Uleiul se purifică prin cromatografie pe silicagel, utilizând la eluarea coloanei amestec 1:4 acetat de etil/hexan și se obțin 0,232 g de ulei galben.

RO 115881 Bl

Analiza pentru C₁₄H₂₁N₃S;

Calculat: C 63,85; H 8,04; N 15,94

Găsit: C 64,01; H 8,37; N 15,71.

Prepararea 2. 1-ciclopentil-3-etil-7-tio-4,5,6,7-tetrahidro-1H-pirazol[3,4-c]- 700 piridină

O soluție de 1-ciclopentil-3-etil-7-oxi>4,5,6,7-tetrahidro-1 H-pirazol[3,4-c]-piridină (10,0 g) în 1,4-dioxan anhidru se tratează cu pentasulfură fosforoasă (3,9 g). După agitarea la reflux timp de 12 h amestecul se răcește la temperatura ambiantă și se concentrează la presiune redusă. Uleiul galben rezultat se dizolvă în clorură de metilen 705 și se spală cu apă și saramură, se usucă pe sulfat de sodiu și se concentrează sub presiune redusă. Reziduul oranj se purifică prin cromatografiere pe silicagel, utilizând un gradient de amestecare al hexanilor în clorură de metilen ca eluent pentru a se obține 9,3 g de solid de culoare galbenă. Punctul de topire 152...153°C.

Analiza pentru C₁₃H_igN₃S;	710
Calculat: C 62,63;	H 7,68;	N 16,86
Găsit: C 62,14;	H 7,51;	N 16,35.

Prepararea 3. 1-ciclopentil-3-etil-6-(4-metoxifenil]-7-oxo-4,5,6,7-tetrahidro-1Hpirazol[3,4-c]-piridină

Se încălzește la reflux, sub agitare un amestec de 3-metoxi-1-(3-metoxifenil)-2- 715 oxo4-propionil-1,2,5,6-tetrahidro-piridină (0,49 g, 1,7 mmoli), hidroclorură de ciclopentilhidrazină (0,40 g) și metoxid de sodiu (46 mg, 0,85 mmol) în etanol anhidru. După 18 h, amestecul se concentrează sub presiune redusă și se cromatografiază pe coloană cu silicagel, utilizând ca eluent un amestec 1:4 acetat de etil/hexan obținându-se un solid de culoare albă. Recristalizarea din eter duce la obținerea unui 720 produs cristalizat acicular. Punctul de topire 64...65°C; MS m/z (M+) 340,2025; HRMN (M+) 340,2046.

Prepararea 4. 1-ciclopentil-3-etil-7-oxo-4,5,6,7-tetrahidro-1H-pirazol[3,4-c]piridină

O soluție sub agitare conținând 1-ciclopentil-3-etil-6-(4-metoxifenil)-7-oxo- 725 4,5,6,7-tetrahidro-1 H-pirazol[3,4-c]-piridină (2,58 g,,7,60 mmol)în acetonitril (90 ml) la 0°C se tratează cu o soluție de nitrat de amoniu ceric (12,5 g, 22,8 mmol) în apă (110 ml). După agitarea timp de 35 min, amestecul se diluează cu apă (550 ml) și se extrage cu acetat de etil (100 x 4 ml). Straturile organice combinate se spală cu soluție saturată de bicarbonat de sodiu 50% (250 ml),urmată de spălare cu soluție 730 10% sulfit de sodiu până când soluția de spălare apoasă devine galben pal. Stratul organic se spală apoi în continuare cu soluție saturată de bicarbonat de saramură, și se tratează cu cărbune decolorant. După agitare timp de 30 min, amestecul se usucă pe sulfat de sodiu, se filtrează prin celit și se concentrează la presiune redusă. Reziduul brun se recristalizează din eter pentru a da 8,14 grame de turtă solidă. 735 Punctul de topire 143...145°C; MS (M/Z) 234; Ή-RMN (250 MHz, CDCI₃)1,21 (t, J = 7,6 Hz, 3H), 1,62-2,13 (m,8H), 2,62 (q, J = 7,6 Hz, 2H), 2,73 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 3,51 (dt, J = 2,7 și 6,8 Hz, 2H) 5,47 (s, 1 HJ, 5,61 (pentet, J = 7,7 Hz, 1H).

Exemplul 1. 9-ciclopentil-5,6-dihidro-7-etil-3-(3-piridil)-9H-pirazol[3,4-c]-1,2,4triazol [4,3-a]piridină 740

-ciclopentil-4,5-dihidro-3-etil-7-metiltio-1 H-pirazol(3,4-c)-piridină (0,036 g, 0,14 mmol) și hidrazida acidului nicotinic (0,021 g, 0,15 mmol) se dizolvă în piridină anhidră (5 ml) într-un balon uscat, la flacără.

RO 115881 Bl

Se adaugă un condensator uscat la etuvă, care a fost etanșat cu septum și care are o ieșire la un barbotor. Se introduce un ac lung de oțel inoxidabil prin septum și centrul condensatorului în soluția agitată magnetic. Se barbotează azot prin acul lung. Balonul se încălzește la 135°C timp de 4 h. Apoi se îndepărtează piridina sub purjare de azot. Uleiul rezultat se încălzește la 15O°C timp de 4 h. Balonul se răcește la temperatura ambiantă și conține 0,045 g de compus brut din titlu sub forma unui solid alb. Produsul brut nu conține nici o impuritate măsurabilă prin cromatografie în strat subțire. Produsul poate fi purificat fie prin cromatografiere pe coloană cu silicagel, utilizând un gradient de amestec de acetat de etil/hexan drept eluent, sau fie prin recristalizare dintr-un amestec de acetat de etil în hexan. Punctul de topire este de

14O...145°C (brut): ¹H-RMN (300 MHz, CDCI₃)0 1,24 (t, J=7,6 Hz, 3H), 1,72 (m,2H), 1,94 (m, 2H), 2,16 (m, 4H), 2,66 (q, J = 7,6 Hz, 2H), 2,98 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 4,25 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 5,60 (quintet, J = 7,7 Hz, 1H), 7,48 (dd, J = 4,9 și 7,8 Hz, 1H), 8,05 (d, H = 8,0 Hz, 1H). 8,75 (dd, J = 1,4 și 4,9 Hz, 1H) 8,9 (d, J = 1,7 Hz, 1H); Analiza pentru C_igH₂₂N₆:

Calculat: C 68,23; H 6,63; N 25,13

Găsit: C 67,39; H 6,87; N 24,00.

Exemplele 2 - 18. Reacția hidrazidei corespunzătoare cu 1-ciclopentil-4,5dihidro-3-etil-7-metiltio-1 H-pirazol(3,4-c]-piridină, analog procedeului din exemplul 1, duce la următorii compuși cu formula I, unde R¹ este etil și R³ ciclopentil.

in vo ro rrRO 115881 Bl

HRMS sau analiza (găsit) %C, %H, %N

HRMS [M+H]334,2O32

CD LD σί τ— co rx’ CD cu rx’ CD

69,42;7,30;18,13

fX LD co’ |X CD_ cd’ CU CD St CD

CD st oi CD CD ix’ O st τ— fX

68,61 :6,82:18,82

IX St σί τ^- CD CD cd’ CD 00 cd’ CD

58,54;5,93;17,88

HRMS [M+H]338,2O93

CD O του rx st co r T + CD Σ CE I

HRMS [M+H]350,1981

HRMS [M+H]364,2137

68,68:6,63:20,04

LD CO CO N X § CD Σ

MS[m/z)364

CD CD CD CU ra’ □ st T + Σ cn Σ oc T

HRMS [M+H]335,1984

HRMS sau analiza (calculat) %C, %H, %N

CU cn O cu st ω CC T + U.J

rx CD cu in in cd’ iii co cd’ CD

rx cu cd’ co CD cd’ cd’ co σί CD

ra σί CD LD cd’ iii ld_ st CD

CD V^- O CU IO cu rx’ σί ld in' [X

|X cu σί co’ CD cd’ όί CD σί CD

St o o cu co’ CD_ CD St [X co CD

LD o oo cu (X ld’ cu ω co’ LD

co CD O CU co’ co co T +

o του rx’ st co I +

ra CD O LD CO I +

IX co cu St CD CO T + 1 —u

o CU CD CD CD co CO ra’ CD

o o st CU cd' O st I +

St co CD ld’ CD CO T +

G.M.

cu sf CC CC co

co co cu co

ld st LD CD CO

LD co’ ld co

ID st rx st CD

fx St co’ CD co

st St oi St CD

St CD rx’ 00 co

co St ix’ co co

IX st rx’ st co

LD St σί st co

IX st co CD CO

LO St σί St co

co St Sj co co

O LD co’ CD CO

cu LD rx’ o st

CD CO St CO CO

ω CL

1

(X CD LD CD

CU 0 co ST“

LD sico

cu τCD o

ΓΧ cu co

co LD cu

00 CD CD

CD LO o co

[X CD

CD 0 St cu

CD 1 IX st

CD o cu

LD CO LD

Φ D

IX ό

O O CU ra cn

OJ CC

c Φ M—

c CD c_ Σ3 V cu

c CD M— X o Φ E LD

c <U V co

Έ (D H— Φ E cu

Έ Φ M— X o ω E cu

Έ ω M— X o c_ TD x: 4

CU 1 c (D Țj CD E i î o 9 CD

o N CD c_ Q. 4J cu E 1 co LD

'n c cu X)

c Φ M— X o c_ Ό co

2-hidroxi-3-metilfenil

c ω X o c_ Ό x: CU

'c_ 'O- CU

'isi c <D X> X o c_ Ό X TO

N C CD .Q X O CD E TJ 1 st co'

^-c_ 'CL 1 st

=«: X LU

cu

co

st

LD

CD

(X

ω

CD

O

-

cu

co

st

LD

CD

IX

ra

RO 115881 Bl

Exemplul 19. 9-ciclopentil-5,6-dihidro-7-etil-3-[tien-2-il)-9H-pirazol[3,4-c]-1,2,4triazol [4,3-a]piridină

1-ciclopentil-3-etil-7-ticn4,5,6,7-tetrahidro-1 H-pirazol[3,4-c]-piridină (0,35 g, 1,4 mmol) se dizolvă în 4 ml piridină anhidră într-un balon uscat, la flacără sub hidrogen. Balonul se încălzește la 70°C și se adaugă 1,5 ml de hidrazină anhidră. Soluția galbenă devine roz și se agită timp de 5 min. Piridină și excesul de hidrazină se îndepărtează apoi sub presiune redusă, pentru a rezulta un solid de culoare roz, care devine apoi verde deschis după ce a fost introdus sub vacuum (aproximativ 0,1 mm) timp de 30 min. Apoi se adaugă în balon piridină anhidră (4 ml) urmată de clorură de 2-tiofen carbonil (0,69 grame, 4,7 mmoli], și amestecul se agită timp de 2 h. Piridină se îndepărtează sub presiune redusă, reziduul se dizolvă în dimetilformamidă (4 ml) și se încălzește la reflux timp de 2 h. Amestecul se răcește la temperatura ambiantă, se diluează cu apă și se extrage cu acetat de etil. Stratul apos se aduce la pH bazic pH=12 cu hidroxid de sodiu 1N și se extrage cu acetat de etil de trei ori. Straturile organice combinate se spală cu hidroxid de sodiu 1N, apă și saramură, se usucă pe sulfat de sodiu și se concentrează sub presiune redusă. Uleiul rezultat se purifică prin cromatografiere pe silica gel în coloană, utilizând gradientul de amestecare acetat de etil și hexan ca eluent, pentru a obține 304 mg de compus din titlu sub forma unui compus alb. Punctul de topire 125...126°C; ¹H-RMN (300 MHz, CDCI₃) δ 1,25 (t,j=7,5Hz, 3H), 1,60-1,74 (m, 2H), 1,9-2,0 (m, 2H), 2,11-2,21 (m, 4H), 2,67 (q, J = 7,6 Hz, 2H), 3,00 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 4,30 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 5,60 (quintet, J = 7,7 Hz, 1H), 7,20 (dd, J = 3,9 și 5,1 Hz, 1H), 7,49-7,54 (m, 2H). Analiza pentru: C₁₈H₂₁N₅S; Calculat: C, 6368; H, 6,24; N, 20,63; Găsit: C, 63,66; H, 6,19; N, 21,00.

Exemplele 20-30. Reacția dintre clorură acidă corespunzătoare cu hidrazina și 1-ciclopentil-3-etil-7-tio-4,5_l6,7-tetrahidro-1H-pirazol[3,4-c]-piridină, analog procedeului descris în cadrul exemplului 19, duce la obținerea derivaților cu formula generală I, în care R¹ este reprezentat de etil și R³ este reprezentat de ciclopentil.

in !—I oo

RO 115881 Bl

HRMS sau analiza (găsit) %C, %H, %N	HRMS [M+H]300,2188	66,56:7,85:25,44	co 00 00 cu st CD st cu ra CD	co □ cri ΓΧ CD cd' CD cu LD CD	HRMS [M+H]326,2345	MS(m/z)300	00 ra CD cu st ra co I + ω Σ o: I	ra O co cu st CD ra o CD CD	cn 00 st § ra st CD ra	St rx cd cri ra ra co st CD	r~ ra cu cu oo 00 oo o CD oo CD
HRMS sau analiza (calculat) %C, %H, %N	ra ra cu O O ra I +	ra ra cu o CD rx cri co CO ra	LD O cri co o ra cri cu uri CD	st O cri co O cd cri cu ID CD	ra st co cu cd’ cu co T +		ra ra CD cu st ra co T +	CD rx cu cu sf rx ra CD 00 CD	ra cu ra co co st cri cu cu ra	ra st ix CD ra ra co co cu CD	St co cu cu ra CD co rx CD 00 CD
G.M.	st cri CD cu	IX co_ rx cu	cn 00 rx CD CO	cn ra_ rx CD CD	00 st ra cu CD	st st cri cn cu	st co ra co	rx ra_ oo CD CD	st CD cri ra st	st st O st	ra St co co
□old	cu cn ώ ra	ra 1 st IX	CU co	00 LD V	'S5 □	ă5 ZJ	'ω 2	co 1 CD	rx ra st	ra 1 St ra	ra 1 st St
CU CE	Q. o Q. £	’Î3 CD E	c Φ »+— c_ O CJ CU	c Φ t o ? co	•M c Φ CL O O Ό	o c_ CL O N	' T r- Φ _C o o _O Φ E 1	CO 1 Ί3 ’c_ ΟΙ. O O 1 CU	Έ φ H— Ό O cu	c Φ M— '75 Φ E c_ O M— C_ V cu	'73 Σ3 _Q ώ. C. S
* X LLI	O cu	cu	CU CU	CD CU	st cu	ra cu	CD cu	rx cu	00 cu	CD cu	O CO

RO 115881 Bl

Exemplul 31. 5,6-dihidro-7-etil-9-[4-fluorofenil]-3-[ 1-metilciclohexil-1-il)-9H-pirazol[3,4-c]-1,2,4-triazol-[4,3-a[piridină

Se dizolvă 3-etil-1 (4-fluorofenil)-7-tio-4,5,6,7-tetrahidro-1 H-pirazol[3,4-c]piridina (0,092 g) în piridină anhidră (5 ml) și soluția se încălzește la 7O°C. Se adaugă hidrazină anhidră (2 ml) și soluția galbenă rezultată devine ușor bej. După 5 min, materiile volatile sunt îndepărtate sub presiune redusă, pentru a se obține un solid de culoare galbenă. Apoi se adaugă piridină anhidră (5 ml), la clorură de 1-metilciclohexan carbonil (0,2 g). După agitarea timp de 2 h la temperatura ambiantă, piridină se îndepărtează sub presiune redusă și reziduul se dizolvă în dimetilformamidă (5 ml). După agitarea la reflux timp de 12 h, soluția se răcește la temperatura ambiantă, se diluează cu apă și se extrage cu acetat de etil. Straturile organice combinate se spală cu apă și saramură, și apoi se usucă pe sulfat de sodiu. Concentrarea sub presiune redusă duce la obținerea unui ulei de culoare brună. Uleiul se purifică prin cromatografiere pe coloană cu silicagel, utilizând ca eluent amestec 1:2 acetat de etil/hexan, obținându-se 0,09 g de solid galben opal. Punctul de topire 60...61 °C; MS (m(z) 380.

Claims

Revendicări

1. Derivați de triazol [4,3-a]piridine caracterizați prin aceea că au formula generală structurală I:

(I) în care

R¹ este reprezentat de un atom de hidrogen, o grupă alchil cu 1 ...6 atomi de carbon, alcoxi cu 1...6 atomi de carbon, alchenil cu 2...4 atomi de carbon, fenil, dimetilamino, cicloalchil cu 3-6 atomi de carbon, cicloalchil cu 3...6 atomi de carbonalchil cu 1...3 atomi de carbon sau acil cu 1...6 atomi de carbon, grupele alchil, fenil sau alchil fenil putând fi nesubstituite sau substituite cu una până la două grupe hidroxi, alchil cu 1 ...3 atomi de carbon, sau trifluormetil, sau cu până la trei atomi de halogen;

R² și R³ sunt fiecare independent selectați din cadrul grupului constând din hidrogen, o grupă alchil cu 1...14 atomi de carbon, alcoxi cu 1...7 atomi de carbonalchil cu 1 ...7 atomi de carbon, alchenil cu 1 ...14 atomi de carbon, cicloalchil cu 3...7 atomi de carbon, cicloalchil cu 3...7 atomi de carbon-alchil cu 1...2 atomi de carbon, o grupă saturata sau nesaturată heterociclică (C₄-CJ heterociclu (CHgț, în care n este □, 1 sau 2, conținând ca heteroatom una sau două grupe constând din oxigen, sulf, sulfonil, azot și NR₄ unde

RO 115881 Bl

R⁴ este reprezentat de un atom de hidrogen sau o grupă alchil cu 1 ...4 atomi de carbon; sau o grupă având formula generală II;

(II)

880 în care a este un număr întreg de la 1 la 5; fa este ca și c, zero sau 1; R⁵ este un atom de hidrogen, o grupă hidroxi, alchil cu 1 ...5 atomi de carbon, alchenil cu 2...5 885 atomi de carbon, alcoxi cu 1...5 atomi de carbon, cicloalcoxi cu 3...6 atomi de carbon, un atom de halogen, o grupă trifluormetil, CD₂R⁶, C0NR⁶R⁷, NR⁶R⁷, NO2 sau S02NR^bR⁷ unde R⁶ și R⁷ reprezintă independent un atom de hidrogen sau o grupă alchil cu 1 ...4 atomi de carbon; Z este oxigen, sulf, S02, CO sau NR⁸ unde R⁸ este un atom de hidrogen sau o grupă alchil cu 1...4 atomi de carbon; și Y este o grupă 890 alchilen cu 1...5 atomi de carbon sau alchenil cu 2...6 atomi de carbon eventual substituit cu până la două grupe alchil cu 1...7 atomi de carbon sau cicloalchil cu

3...7 atomi de carbon; unde fiecare din grupele alchil, alchenil, cicloalchil, alcoxialchil sau heterociclice pot fi substituite cu 1...14, de preferință 1...5, grupe constând din alchil cu 1...2 atomi de carbon, trifluormetil sau un atom de halogen; și 895

R⁹ și R¹⁰ sunt independent selectați din cadrul grupului constând dintr-un atom de hidrogen, grupe alchil cu 1...6 atomi de carbon, alcoxi cu 1...6 atomi de carbon, arii cu 6...10 atomi de carbon și ariloxi cu 6...10 atomi de carbon, precum și sărurile acestor compuși, acceptabile farmaceutic.
2. Derivați conform revendicării 1, caracterizați prin aceea că R¹ este repre- 900 zentat de o grupă metil, etil sau izopropil.
3. Derivați conform revendicării 1, caracterizați prin aceea că R³ este reprezentat de o grupă alchil cu 1 ...6 atomi de carbon, alchenil cu 2...6 atomi de carbon, cicloalchil cu 3...7 atomi de carbon, cicloalchil cu 3...7 atomi de carbon-alchil cu 1 ...2 atomi de carbon sau fenil eventual substituit cu una sau două grupe constând din 905 hidrogen, hidroxi, alchil cu 1...5 atomi de carbon, alchenil cu 2...5 atomi de carbon, alcoxi cu 1...5 atomi de carbon, halogen, trifluormetil, C0₂R⁶, CONR⁶R⁷, N0_P sau S0₂NR⁶R⁷ unde R⁶ și R⁷ reprezintă fiecare independent hidrogen sau alchil cu 1 ...4 atomi de carbon.
4. Derivați conform revendicării 1, caracterizați prin aceea că sunt repre- 910 zentați de următorii compuși:

9-ciclopentil-5,6-dihidro-7-etil-3-fenil-9H-pirazol[3,4-c]-1,2,4-triazol[4,3-a]piridină;

9-ciclopentil-5,6-dihidro-7-etil-3-(4-piridil)-9H-pirazol[3,4-c]-1,2,4-triazol[4,3ocjpiridină;

9-ciclopentil-5,6-dihidro-7-etil-3-(3-tienil]-9H-pirazol[3,4-c]-1,2,4-triazol[4,3- 915 <x]piridină;

3,9-diciclopentil-5,6-dihidro-7-etil-9H-pirazol[3,4-c]-1,2,4-triazol[4,3-a]piridină;

9-ciclopentil-5,6-dihidro-7-etil-3-(metilciclohex-l-il)-9H-pirazol[3,4-c]-1,2,4triazol[4,3-a]piridină;

3-(terț-butil)-9-ciclopentil-5,6-dihidro-7-etil-9H-pirazol[3,4-c]-1,2,4-triazol[4,3- 920 ccjpiridină;

RO 115881 Bl

9-ciclopentil-5,6-dihidro-7-etil-3-(tien-2-il)-9H-pirazol[3,4-c]-1,2,4-triazol[4,3ajpiridină;

3-(2-clorfenil)-9-ciclopentil-5,6-dihidro-7-etil-9H-pirazol[3,4-c]-1,2,4-triazol[4,3ajpiridină;

9-ciclopentil-5,6-dihidro-7-etil-3-(2-iodfenil)-9H-pirazol[3,4-c]-1,2,4-triazol[4,3ajpiridină; și
5,6-dihidro-7-etil-9-(4-fluorfenil-3-(1-metilciclohex-1-il)-9H-pirazol[3,4-c]-1,2,4triazol[4,3-a]piridină.

5. Metodă de tratament pentru inhibarea fosfodiesterazei (PDE) tip IV și producerea factorului de necroză a tumorii (TNF) caracterizată prin aceea că se administrează la un pacient o cantitate eficientă de derivat având caracteristicile din revendicarea 1.
6. Metodă de tratament al stării inflamatorii la mamifere caracterizată prin aceea că se administrează la acest mamifer atât o cantitate de derivat având formula generală I, cât și a sărurile sale acceptabile din punct de vedere farmaceutic.
7. Metodă de tratament sau de prevenire a stării selectate din cadrul grupului constând din astm, artrită, bronșită, boală cronică obstructivă a căilor respiratorii, psoriazis, rinită alergică, dermatită și alte maladii inflamatorii cât și SIDA, șoc septic și alte maladii, cum ar fi cașexia, caracterizată prin aceea că, cuprinde producerea TNF și administrarea la un pacient a unei cantități eficiente de derivat având caracteristicile din revendicarea 1.
8. Compoziție farmaceutică pentru (a) tratamentul astmului, artritei, bronșitei, bolilor cronice obstructive ale căilor respiratorii, psoriazisului, rinitei alergice, dermatitei și a altor boli inflamatorii caracterizate prin activitatea fosfodiesterazei (PDE) tip IV, SIDA, sepsis, a șocului septic și altor boli, cum ar fi cașexia, cuprinzând producerea de TNF, sau (b) inhibarea fosfodiesterazei (PDE) tip IV și producerea factorului de necroză a tumorii (TNF), caracterizată prin aceea că este constituită dintr-o cantitate eficientă de derivat având caracteristicile din revendicarea 1 și un suport purtător acceptabil din punct de vedere farmaceutic.