PT747354E - Derivados de oxindol 3-substituidos como modulares do canal do potassio - Google Patents

Description

DESCRIÇÃO

“DERIVADOS DE OXINDOL 3-SUBSTITUÍDOS COMO MODULADORES DO CANAL DO POTÁSSIO” A presente invenção diz respeito a novos derivados de oxindol 3-fenil--substituídos os quais constituem moduladores dos canais do potássio (Maxi-K) activados pelo cálcio de larga condutância e são, por consequência, úteis na protecção de células neuronais, especialmente no tratamento oú na prevenção da apoplexia isquémica. A presente invenção proporciona também um processo de tratamento com os novos derivados de oxindol e às suas composições farmacêuticas.

Os canais do potássio desempenham um papel chave na regulação do potencial da membrana da célula e na modulação da excitabilidade da célula. Os canais do potássio são largamente regulados pela tensão, metabolismo celular, processos mediados pelo cálcio e pelo receptor. [Cook, N. S., Trends in Pharmacol. Sciences (1988), 9, 21; e Quast, U., et al, Trends in Pharmacol Sciences (1989), JO, 431], Os canais do potássio (K<;a) activados pelo cálcio constituem um grupo diferente de canais iónicos que partilham uma dependência nos iões cálcio intracelulares quanto à actividade. A actividade dos canais Kca é regulada pela tensão membranar intracelular [Ca‘:] e pela fosforilação. Com base nas suas condutâncias de canal único nas soluções simétricas de K', os canais Kca são divididos em três subclasses : Condutância grande (maxi - K) > I 50 pS; condutância intermédia 50 - 150 pS; condutância pequena < 50 pS. Os canais do potássio (Maxi- K) activados pelo cálcio de grande condutância encontram-se presentes em muitas células excitáveis incluindo os neurónios, as células cardíacas e diversos tipos de células do músculo liso. [Singer, J. et al., Pfluuers Archiv. (1987) 408, 98; Baro, I., et al., Pfluaers Archiv. (1989) 4]4 (Suppl. 1), SI68; e Ahmed, F. et al., Br. J Pharmacol. (1984) 83, 227],

Os iões potássio desempenham um papel dominante no controlo do potencial da membrana em repouso na maior parte das células excitáveis e mantém a tensão transmembranar próxima do potencial de equilíbrio de K" (Ek) de cerca de -90 mV. Verificou-se que a abertura dos canais do potássio desvia o potencial da membrana da célula no sentido do potencial de equilíbrio da membrana de potássio (Ek), daí resultando a hiperpolarização da célula. [Cook, N. S., Trends in Pharmacol. Sciences (1988), 9, 21 ]. As células hiperpolarizadas mostram uma resposta reduzida a estímulos despolarizantes potencialmente perigosos. Os canais Maxi-K que são regulados tanto pela tensão como pelo Ca2" intracelular actuam por forma a limitarem a despolarização e a entrada do cálcio e podem ser particularmente eficazes do bloqueio dos estímulos perigosos ou danifícadores. Por consequência, a hiperpolarização da célula pela abertura dos canais Maxi-K pode ter como resultado a protecção de células neuronais sob condições isquémicas.

Referiu-se uma gama de compostos de ocorrência sintética e natural com a actividade de abertura de m&xi-K. A pirone de avena extraída de aveia comum avena sativa foi identificada como um abridor do canal maxi-K utilizando a técnica da bicamada lipídica [pedido de patente de invenção internacional WO 93/08800, publicado em 13 de Maio de 1993], Descreveu-se o 6-bromo-8-(metilamino)— imidazo[ 1,2-a]pirazina-2-carbonitrilo (SCA-40) como um abridor do canal maxi-K. com experiências electrofisiológicas muito limitadas. [Laurent, F. et al., Br. J. Pharmacol. (1993) 108. 622 - 626], Descobriu-se que o flavanoide Phloretin aumentava a probabilidade de abertura dos canais do potássio activados pelo Ca2" em fibras nervosas mielinadas de Xenopus laevis utilizando emplastros de exterior-para fora [Koh, D-S., et al., Neuroscience Lett. (1994) 165, 167 - 170],

Descreveu-se um número de oxindóis substituídos como sendo agentes neuroanabólicos por H. Kuch et al na patente de invenção norte-americana n° 4 542 148, concedida em 17 de Setembro de 1985 e n° 4 614 739, concedida em 30 de Setembro de 1986. A patente de invenção WO-A-9 518 105, publicada após a data da prioridade reivindicada pelo presente pedido de patente de invenção, descreve oxindóis 3-fenil-substituídos de fórmulas gerais VII’ e V’ como intremediários na preparação de derivados de l,3-di-hidroindol-2-ona substituídos em posição 3 por um grupo que contém azoto, compostos esses que são indicados como tendo uma afinidade para os receptores vasopressina e/ou ocitocina.

No pedido de patente de invenção europeia EP-477 819 publicado em 4 de Janeiro de 1992 e que corresponde à patente de invenção norte-americana n° 5 200 422, concedida em 6 de abnl de 1993 a Olesen, et al., encontra-se descrito um número de derivados do benzimidazol como abridores dos canais maxi-K pelo uso de um canal único e experiências de penso-grampo na célula completa em células do músculo liso aórtico. Outro trabalho foi descrito por Olesen, et al em Enropean JL Pharmacol.. 251. 53 - 59(1994). A apoplexia é presentemente reconhecida como sendo a terceira causa principal da incapacidade e da morte dos adultos nos Estados Unidos da América e na Europa. Na última década, realizaram-se diversas tentativas para minimizar os danos no cérebro relacionados com a apoplexia incluindo inibidores de AMPA/cainato, N-metil-D-aspartato (NMDA) e inibidores da retoma da adenosina. Constitui o objecto da presente invenção proporcionar novos compostos que modulem os canais do potássio, em particular canais do potássio (Maxi-K) activados pelo cálcio de grande condutância que serão úteis na redução dos danos neuronais durante a apoplexia isquémica. A presente invenção proporciona novos derivados de oxindol de fórmula geral

na qual os símbolos R, R1, R2, R3, R4, R' e R6 têm os significados definidos mais abaixo, ou um seu sal, solvato ou hidrato não tóxico aceitável sob o ponto de vista farmacêutico os quais são abridores dos canais do K activados pelo cálcio de grande condutância também conhecidos como canais maxi-K ou BK. A presente invenção proporciona igualmente composições farmacêuticas que compreendem os referidos derivados de oxindol e o processo de tratamento de perturbações sensíveis à actividade de abertura do canal de potássio tais como isquémia, convulsões, asma. incontinência urinária e danos cerebrais traumáticos.

A presente invenção proporciona novos derivados de oxindol que são abridores potentes dos canais do ΚΓ activados pelo cálcio, de elevada condutância, (canal BK) e que têm a fórmula geral R1

na qual o símbolo R representa um átomo de hidrogénio ou de flúor ou um grupo hidroxi os símbolos R1, Ri, R3 e R4 representam, cada um, independentemente, um átomo de hidrogénio ou de halogéneo ou um grupo alquilo CrC4, trifluorometilo, fenilo, p-metilfenilo ou p-trifluorometilfenilo; ou os símbolos R1 e R2, R2 e R3 ou R3 e R4 são ligados conjuntamente para formar um anel benzo fundido; o símbolo R5 representa um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo CpQ; o símbolo R6 representa um átomo de cloro ou um grupo trifluorometilo, ou um seu sal, solvato ou hidrato não tóxico aceitável sob o ponto de vista farmacêutico.

Os compostos preferidos de acordo com a fórmula geral (I) são indicados a seguir nas reivindicações 2 a 23. A presente invenção proporciona igualmente o uso para o tratamento ou o alívio de perturbações associadas com os canais BK, especialmente isquémia, convulsões, asma, incontinência urinária e danos cerebrais traumáticos de uma quantidade eficaz sob o ponto de vista farmacêutico de um composto de fórmula geral (I) ou um seu sal, solvato ou hidrato não tóxico aceitável sob o ponto de vista 7 6 farmacêutico, eventualmente em associação com um adjuvante, veículo ou diluente aceitável sob o ponto de vista farmacêutico. O termo “alquilo C]-C4” tal como utilizado na presente memória descritiva e nas reivindicações (a menos que o contexto indique de outro modo) significa grupos alquilo de cadeia linear ou ramificada tais como metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, t-butilo. De preferência, estes grupos contêm entre 1 e 2 átomos de carbono. A menos que se especifique de outro modo, o termo “halogéneo” tal como utilizado na presente memória descritiva e nas reivindicações pretende-se que inclua bromo, cloro, iodo e flúor, enquanto que o termo “halogeneto” se pretende que inclua um anião brometo, cloreto e íodeto.

Como os compostos de acordo com a presente invenção podem possuir um átomo de carbono assimétrico em posição 3 do anel oxindol, a presente invenção inclui o racemato bem como as formas enantioméricas individuais dos compostos de fórmula geral (I) tal como descrito na presente memória descritiva e nas reivindicações. O uso de uma designação simples tal como (3R.) ou (3S) pretende-se que inclua principalmente um estereoisómero. Podem separar-se as misturas de isómeros dos isómeros individuais de acordo com métodos que são conhecidos de per si, por exemplo cristalização ffaccionada, cromatografia de adsorção ou outros processos de separação apropriados. Podem separar-se os racematos resultantes nos antípodas pela maneira habitual após introdução de grupos formadores de sal apropriados, por exemplo pela formação de uma mistura de sais diastereoisoméricos com agentes formadores de sais opticamente activos, separação da mistura em sais diastereoméricos e conversão dos sais separados nos compostos livres. As formas 7

enantioméricas possíveis podem também ser separadas por fraccionamento através de colunas de cromatografía líquida de alta pressão quiral. Como alternativa, pode preparar-se os enantiómeros opticamente activos dos compostos de fórmula geral (I) por processos sintéticos estereo-selectivos, alguns dos quais são descritos na presente memória descritiva. O uso de reagentes opticamente activos em associação com o intermediário apropriado descrito na presente memória descritiva produziria o enantiómero desejado do composto de fórmula geral (I). A expressão “sal não tóxico aceitável sob o ponto de vista farmacêutico” tal como utilizada na presente memória descritiva e nas reivindicações pretende-se que inclua sais de adição de bases não tóxicos com bases inorgânicas. Bases inorgânicas apropriadas tais como bases de metais alcalinos e alcalino-terrosos incluem catiões metálicos tais como sódio, potássio, magnésio, cálcio e similares.

Alguns dos compostos da presente invenção podem existir em formas não solvatadas bem como em formas solvatadas incluindo formas hidratadas tais como mono-hidrato, di-hidrato, semi-hidrato, tri-hidrato, tetra-hidrato e similares. Os produtos podem ser solvatos verdadeiros, embora noutros casos, os produtos possam reter meramente solvente adventício ou ser uma mistura de solvato mais algum solvente adventício. Deve apreciar-se pelos especialistas na matéria que as formas solvatadas são equivalentes a formas não solvatadas e pretende-se que se considerem incluídas dentro do âmbito do presente invenção.

No processo da presente invenção, a expressão “quantidade terapeuticamente eficaz” significa a quantidade total de cada componente activo do processo que é suficiente para apresentar um benefício ao paciente significativo, isto 8 8/ζ J'" j é, cura de condições agudas caractenzadas por abridores dos canais do K' activados pelo cálcio de grande condutância ou aumento de velocidade de cura de tais estados. Quando aplicada a um ingrediente activo individual, administrado sozinho, a expressão refere-se a esse ingrediente sozinho. Quando aplicada a uma combinação, a expressão refere-se a quantidades combinadas dos ingredientes activos que resultam num efeito terapêutico, quer administrados em combinação, em série ou simultaneamente. Os termos “tratar, tratando ou tratamento” tal como utilizados na presente memória descritiva ou nas reivindicações significam prevenir ou melhorar doenças, danos nos tecidos e/ou smtomas associados com um mau funcionamento de polarização e condutância da membrana celular.

Os compostos de fórmula geral (I) podem ser preparados por diversos processos tais como os ilustrados na presente memória descritiva e nos exemplos, nos esquemas de reacção e nas suas variações que seriam evidentes para os especialistas na matéria. Podem preparar-se com vantagem os diversos derivados de oxindol de fórmula geral (I) a partir de intermediários de isatina os quais são geralmente bem conhecidos e um processo geral de preparação encontra-se ilustrado no Esquema Reaccional 1 e um exemplo específico no Esquema Reaccional 2.

No processo para a preparação de intermediários de isatina de fórmula geral VII, pode utilizar-se um número de processos bem estabelecidos e vulgarmente conhecidos tais como os descritos por Sandmeyer, T., Helv. Chim. Acta, 2, 234 (1919); Stolle, R., J. Prakt. Chem.. 105, 137 (1922); e Gassman, P., et al., J. Org. Chem., 42, 1344 (1977). Contudo, um processo mais preferido para a preparação de isatinas de fórmula geral VII a partir das anilinas apropriadamente substituídas de 9

fórmula geral V encontra-se descrito por Hewawasam, P., et al., Tetrahedron Lett.. 35, 7303 (1994) e encontra-se ilustrado no Esquema Reaccional 1. Este processo parece ser insensível à natureza electrónica dos substituintes ligados ao núcleo aromático e é caracterizado pelo controlo regioquímico previsível. ESQUEMA REACCIONAL 1

Será apreciado pelos especialistas na matéria que quando o grupo amino de um composto de anilina de fórmula geral V se encontra apropriadamente protegido tal como com grupos protectores N-pivaloílo e N-(terc.-butoxicarbonilo), ela pode dirigir metalação para a aposição orto. Uma vez formados os dianiões, pode usar-se a reacção com cerca de 1,2 equivalentes de oxalato de dietilo a baixas temperaturas tais como -78°C para introduzir um radical orto de α-cetoéster no grupo amino protegido do derivado de anilina para produzir o composto de fórmula A SS 10 7< o f? geral VI. A eliminação do grupo protector seguida pela ciclização espontânea produzirá com vantagem a isatina de fórmula geral VII. Para elaborar ainda no processo do Esquema Reaccional 1, os diamões de N-pivaloilanilinas ou N-(terc--butoxicarbonil)-anilinas são gerados com vantagem utilizando cerca de 2,2 a 2,4 vezes em excesso de uma variedade de reagentes de butil-lítio tais como reagentes n-butil-, s-butil- e t-butil-lítio em THF a uma temperatura compreendida entre 0 e -40°C entre 2 e 7 horas.

Num processo típico, adiciona-se oxalato de dietilo líquido puro (1,2 equivalentes) a uma solução do dianião agitada a uma temperatura de -78°C sob atmosfera de azoto. Após agitação durante 30 - 45 minutos, extingue-se a reacção com HC1 IN e dilui-se com éter para se obter o composto de fórmula geral VI. Muito embora se possam purificar os intermediários de α-cetoésteres de fórmula geral VI para finalidades de caracterização, esta fase não é necessána e o produto bruto pode ser vantajosamente desprotegido para proporcionar as isatinas com um rendimento global excelente. A desprotecção dos radicais N-(terc.-butoxicarbonilo) ou pivaloílo pode realizar-se utilizando HC1 3N/THF ou HC1 12N/DME, respectivamente, à temperatura de refluxo. Por evaporação dos solventes voláteis, as isatinas de uma maneira geral precipitam a partir do resíduo aquoso e são isoladas por filtração.

Um método alternativo para a preparação de isatinas utilizando o processo de Gassman, et al encontra-se ilustrado no Esquema Reaccional 2 para a preparação de 4,6-bis-(trifluorometil)-isatina de fórmula geral Vila. ESQUEMA REACCIONAL 2

hO

CF3

1.*BuOCI,CH2«2,-65 eC

CO2B refluxo CFj SUe hexanos ,

2. MeSCH2C02Et, -65 °C 3. EtaN, -65 °C to r. t FjC

HgO VIII

F3C

H BF3.OEt2 THF-H2O

O Vila

Como se ilustra no Esquema Reaccional 2, a N-cloração de 3,5-bis-(trifluorometil)-anilina com hipoclonto de terc.-butilo recentemente preparado seguida pela adição consecutiva de (metiltio)-acetato de etilo e trietilamina proporciona o aminoéster que, por aquecimento de hexanos à ebulição, sofrem ciclização para proporcionar a (metiltio)-mdolona de fórmula geral VIII. A cloração do composto de fórmula geral VIII com a N-clorossuccinimida (NCS) proporciona a cc-cloro-(metiltio)-indolona correspondente que, por hidrólise com HgO-BF3«OEt2 em THF-HiO proporciona a isatma desejada de fórmula geral Vila.

As isatinas de fórmula geral VII, preparadas conforme descrito nos Esquemas Reaccionais 1 e 2 anteriores ou por processos bem conhecidos na literatura, foram convertidas nas hidroxiindolonas de fórmulas gerais lia e Ilb conforme se ilustra no Esquema Reaccional 3. A adição de uma solução de THF a ou um reagente de Grignard ou aril-lítio derivado in-situ a partir de um anisol, ao sal de sódio da isatina de fórmula geral VII preparado convenientemente com NaH em THF, proporcionou as hidroxi-indolonas desejadas de fórmula geral lia. A maior 12

parte das hidroxi-indolonas foram purificadas quer por recristalização ou por trituração com solventes orgânicos apropriados. A desmetilação do radical éter metílico do composto de fórmula geral lia com BBr3 em CH2C12 sob condições cuidadosamente controladas desde -78 até 0°C proporcionou os fenóis desejados de fórmula geral Ilb. Descobriu-se que a reacção não devia com vantagem ser aquecida, acima de 0°C e, uma vez terminada a desmetilação, a reacção deveria ser extinta com NaHC03 saturado seguida por acidificação com HC1 diluído antes da sua extracção com um solvente orgânico para se obter as hidroxi-indolonas de fórmula geral Ilb. ESQUEMA REACCIONAL 3

o OH VII M = MgBror Li tla Ilb

Uma tentativa alternativa e mais directa para as hidroxi-indolonas de fórmula geral Ilb foi desenvolvida pela adição de fenolatos de magnésio às isatinas de fórmula geral VII conforme se ilustra no Esquema Reaccional 4. ESQUEMA REACCIONAL 4

o OH VII Rb 13 s. \ 6* j'

Ao contrário do processo descrito no Esquema Reaccional 3 que envolve a reacção de adição de Grignard seguida pela desmetilação do éter metílico produzido, o fenol livre de fórmula geral Ilb é obtido directamente por esta via alternativa. O processo do Esquema Reaccional 4 que envolve a reacção de fenolatos de magnésio preparados mediante mistura do fenol desejado e brometo de etil-magnésio com isatinas de fórmula geral VII em cloreto de metileno, tolueno ou DMF proporciona com vantagem a hidroxi-indolona desejada de fórmula geral Ilb. Além disso, descobriu-se que uma variedade de fenolatos de magnésio deficientes em electrões podiam ser adicionados às isatinas de fórmula geral VII de uma maneira vantajosamente conveniente numa reacção de um vaso para produzir directamente as hidroxi-indolonas de fórmula geral Ilb.

Quando se desejar preparar as indolonas de fórmulas gerais Illa e Illb, desidroxila-se selectivamente a hidroxi-indolona correspondente de fórmula geral lia com trietilsilano e ácido trifluoroacético (TFA) como se ilustra no Esquema Reaccional 5. ESQUEMA REACCIONAL 5

lia Hla

Realiza-se a desoxigenação em dicloroetano a refluxo durante vários dias 14 14

e adicionam-se quantidades extra de TFA para preencher quaisquer perdas. Mais preferivelmente, realiza-se a desoxigenação num tubo fechado com trietilsilano puro e TFA a cerca de 110 - 120°C. Como será apreciado pelos especialistas na matéria, a velocidade de desoxigenação era dependente da natureza electrónica dos substituintes presentes na hidroxi-indolona de fórmula geral lia e os compostos de fórmula geral lia insubstituídos e ricos em electrões eram desoxigenados muito mais facilmente em comparação com os compostos de fórmula geral lia deficientes em electrões. A desmetilação do radical éter metílico do composto de fórmula geral Illa com BBr3 em CH2C12 sob condições cuidadosamente controladas entre -78°C e 0°C proporcionou o fenol correspondente de fórmula geral Illb.

Uma via alternativa para a indolona de fórmula geral 111a que evita o recurso ao trietilsilano e ao ácido trifluoroacético a temperaturas compreendidas entre 110 e 120°C durante diversos dias encontra-se ilustrada no Esquema Reaccional 6. O processo representado no Esquema Reaccional 6 ilustra a preparação de uma indolona específica de fórmula geral IIIc, na qual os símbolos Rl, R3 e R4 representam, cada um, um átomo de hidrogénio, o símbolo R2 representa um grupo trifluorometilo e o símbolo R6 representa um átomo de cloro. Deste modo, a cloraçao de ácido 2-metoxi-fenilacético disponível no comércio com S02C12 em ácido acético proporciona o ácido 5-cloro-2-metoxifenilacético que se converte no éster metílico de fórmula geral X utilizando sulfato de dimetilo e K2C03 anidro em CH3CN. A reacção do enolato de potássio de éster de fórmula geral X com 4-fluoro--3-nitrobenzotrifluoreto na presença de um equivalente de mais ó/.v-(tnmetilsilil)--amida de potássio (KHMDS) em THF a -78°C teve como resultado a formação de >* 15 uma solução azul escura de enolato de potássio de fórmula geral XI e o processamento acídico da reacção proporcionou o éster desejado de fórmula geral XI com um rendimento de 75 %. Por redução do grupo nitro no composto de fórmula geral XI com ferro em ácido acético, o anilino-éster resultante cicliza espontaneamente para proporcionar a indolona desejada de fórmula geral IIIc com um rendimento recristalizado de 84 %. ESQUEMA REACCIONAL 6 CH2C02H 1. S02ci2> AcOH CHjCPzMe 1. KHMDS (2.1 eqt), THF A. .OMe 2. MejSO^ K2CO3 CH3CN X. ,OMe 2. ÍT c/' X -78 to-40 °C; 75%

Quando se desejar preparar as fluoroindolonas de fórmula geral IV, faz-se reagir a hidroxi-indolona correspondente de fórmula geral lia com trifluoreto de dietilamino-enxoffe (DAST) conforme se ilustra no Esquema Reaccional 7. De preferência, realiza-se a reacção com DAST no seio de um solvente orgânico tal como cloreto de metileno a uma temperatura de cerca de -78 a 0°C. Deve apreciar-se pelos especialistas na matéria que a hidroxi-indolona de fórmula geral

Ila produzirá por consequência a fluoroindolona correspondente de fórmula geral IV.

As formas enantioméricas substancialmente puras da fluoroindolona de fórmula geral IV podem ser obtidas facilmente mediante separação da mistura racémica utilizando métodos de cromatografia líquida de alta pressão quiral tal com descritos na presente memória descritiva e por outros métodos bem conhecidos. ESQUEMA REACCIONAL 7

Quando se pretende preparar a forma enantiomérica substancialmente pura da hidroxi-indolona de fórmulas gerais Ila e IIB, oxida-se selectivamente a indolona correspondente de fórmula geral Illa utilizando a (+)-(2R. 8aS)- ou (-)-(2S. 8aR)-(canforasulfonil)-oxaziridina quiral disponível no comércio de fórmula geral IXa ou IXb, respectivamente, conforme se indica no Esquema Reaccional 8. 17 ESQUEMA REACCIONAL 8

No processo do Esquema Reaccional 8, trata-se a hidroxilação da indolona de fórmula geral III com bis-(trimetilsilil)-amida de potássio (KHMDS) em THF e oxida-se o enolato de potássio resultante na indolona de fórmula geral Illa com a oxaziridina quiral de fórmula geral IXa ou IXb a uma temperatura de cerca de -78°C seguida pelo aquecimento gradual até 0°C e extinguindo então com ácido acético glacial para se obter a hidroxi-indolona desejada correspondente de fórmula geral Ilc ou Ild, respectivamente, com rendimento elevado e elevada pureza enantiomérica conforme determinado pela aplicação da RMN quiral-com desvio por 18

solvente (L)-trifluorometilfenil-carbinol. No processo de hidroxilação do Esquema Reaccional 8, é muito vantajoso utilizar THF desgasado seco sob atmosfera de árgon para impedir a hidroxilação com oxigénio molecular e reter um grau elevado de hidroxilação assimétrica.. Finalmente, os radicais éter metílico das hidroxi-indolonas de fórmulas gerais IIc e Ild, podem ser desmetilados com BBr3 em cloreto de metileno para se obter os fenóis correspondentes de fórmula geral lie e Ilf, respectivamente. Num exemplo específico descrito na presente memória descritiva, prepara-se cada um dos compostos do exemplo 12 e dos compostos do exemplo 13 com mais do que 95 % de pureza enantiomérica.

Numa forma de realização preferida da presente invenção os compostos de fórmula geral II tem a fórmula geral R1

na qual os símbolos R1, R2, R3 e R4 representam, cada um, independentemente, um átomo de hidrogénio ou de halogéneo ou um grupo metilo ou trifluorometilo e quando os símbolos R1, R3 e R4 representam, cada um, um átomo de hidrogénio, o símbolo R2 representa um grupo fenilo, p-metilfenilo ou tnfluorometilfenilo; ou os símbolos R1 e R2, Ri e R3 ou R3 e R4 são ligados conjuntamente para formar um anel benzo fundido, o símbolo R-' representa um átomo de hidrogénio ou um grupo metilo; e o símbolo 19 R6 representa um átomo de cloro ou um grupo trifluorometilo; ou um seu sal, solvato ou hidrato não tóxico aceitável sob o ponto de vista farmacêutico.

Numa outra forma de realização preferida da presente invenção, os compostos de fórmula geral III têm a fórmula geral R1

na qual os símbolos R1, R2, R3 e R4 representam, cada um, independentemente, um átomo de hidrogénio ou de halogéneo ou um grupo metilo ou trifluorometilo, e quando os símbolos R1, R3 e R4 representam, cada um, um átomo de hidrogénio, o símbolo R2 representa um grupo fenilo, p-metilfenilo ou trifluorometilfenilo; ou os símbolos R1 e R\ R* e R3 ou R3 e R4 são ligados conjuntamente para formar um anel benzo fundido; o símbolo R' representa um átomo de hidrogénio ou um grupo metilo; e o símbolo R6 representa um átomo de cloro ou um grupo trifluorometilo; ou um seu sal, solvato ou hidrato não tóxico aceitável sob o ponto de vista farmacêutico.

De acordo com ainda uma outra forma de realização preferida da presente invenção, os compostos de fórmula geral IV têm a fórmula geral R1

IV

20 na qual os símbolos R1, R2, R3 e R4 representam, cada um, independentemente, um átomo de hidrogénio ou de halogéneo ou um grupo metilo ou trifluorometilo e quando os símbolos R1, R3 e R4 representam, cada um, um átomo de hidrogénio, o símbolo R* representa um grupo fenilo, p-metilfenilo ou trifluorometilfenilo; ou os símbolos R1 e R", R^ e R3 ou R3 e R4 são ligados conjuntamente para formar um anel benzo fundido; o símbolo R5 representa um grupo alquilo Ci-C4; e o símbolo R6 representa um átomo de cloro ou um grupo trifluorometilo; ou um seu sal, solvato ou hidrato não tóxico aceitável sob o ponto de vista farmacêutico.

De acordo com um outro aspecto, a presente invenção proporciona um processo para o tratamento de ou a protecção de perturbações que são mediadas pela abertura dos canais K" activados pelo cálcio de grande condutància (canais BK) num mamífero com necessidade de um tal tratamento, que compreende a administração ao referido mamífero de uma quantidade eficaz sob o ponto de vista terapêutico de um composto de fórmula geral (I) ou de um seu sal, solvato ou hidrato não tóxico aceitável sob o ponto de vista farmacêutico. De preferência, os compostos de fórmula geral (I) são úteis no tratamento de isquémia, convulsões, asma, incontinência urinária e danos cerebrais traumáticos e outras perturbações sensíveis à actividade activadora do canal BK. Mais preferivelmente, os compostos de fórmula geral (I) são úteis no tratamento da isquémia cerebral.

De acordo com um outro aspecto ainda, a presente invenção proporciona composições farmacêuticas que compreendem pelo menos um composto de fórmula geral (1) em associação com um adjuvante, veículo ou diluente farmacêutico. 21 21

Actividade Biológica

Os canais do potássio (ΚΓ) são famílias estrutural e funcionalmente diferentes das proteínas selectivas de canal do K as quais são ubíquas em células, indicativas da sua importância central na regulação de um número de funções chave das células [Rudy, B., Neuroscience. 25: 729 - 749 (1988)]. Embora largamente distribuídas como uma classe de canais ΚΓ encontram-se distribuídas diferentemente como membros individuais desta classe ou como famílias. [Gehlert, D. R., et aL, Neuroscience. 52: 191 - 205 (1993)]. De uma maneira geral, a activação dos canais do K em células, e particularmente em células excitáveis tais neurónios e células musculares, conduz à hiperpolanzação da membrana da célula, ou no caso de células despolarizadas, à repolarização. Além de actuarem como um grampo de voltagem da membrana endógena, os canais do K podem responder a eventos celulares importantes tais com modificações na concentração intracelular de ATP ou da concentração intracelular do cálcio (Ca2-). O papel central dos canais do K na regulação de numerosas funções das células toma-os alvos particularmente importantes para o desenvolvimento terapêutico. [Cook, N. S., Potassium channels : Structure, classification, function and therapeutic potencial. Ellis Horwood, Chinchester (1990)]. Uma classe de canais K—, os canais Ca2- activados pelo K~ com grande condutância (canais maxi-K ou BK), é regulada pela tensão transmembranar, Ca2 intracelular, e uma variedade de outros factores tais como o estado de fosforilação da proteína do canal. [Latorre, R., et aL, Ann. Rev. Phvsiol.. 51 : 385 — 399 (1989)]. A condutância do canal individual grande (geralmente > 150 pS) e o elevado grau de especificidade para os canais K de BK indicam que 22 pequenos números dos canais podiam afectar profundamente a condutância da membrana e a excitabilidade celular. Além disso, o aumento da probabilidade de abertura com o aumento do Ca2- intracelular indica o envolvimento dos canais BK na modulação dos fenómenos dependentes do Ca2: tais como a secreção e a contracção muscular. [Asano, M., et al., J. Pharmacol. Exp. Ther.. 267 : 1277 - 1285 (1993)].

Os abridores de BK exercem os seus efeitos celulares pelo aumento da probabilidade de abrir estes canais [McKay, M. C., et al., J. Neurophvsiol.. 71 . 1873 - 1882 (1994); e Olesen, S.-P., Exp. Opin. Invest. Druas, 3 : 1181 - 1188 (1994)]. Este aumento na abertura de canais individuais BK resulta colectivamente na hiperpolarização das membranas celulares, particularmente em células despolarizadas, produzido por aumentos significativos na condutância mediada pelo BK na célula completa. A capacidade dos compostos descritos na presente invenção para abrir os canais BK e aumentar as correntes mediadas por BK (K^) de exterior da célula completa foi obtida sob condições de tensão-arco pela determinação da sua capacidade para aumentar a corrente exterior mediada por BK em mamíferos clonados (mSlO ou hSlo) expressa heterologamente em oocitos de Xenopus [Butler, A., et al., Science. 261 : 221 - 224 (1993); e Dworetzky, S. I., et al., Mol. Brain Res.. 27 : 189 - 193 (1994)]. As duas construções de BK utilizadas representam proteínas homólogas praticamente estruturalmente idênticas e provaram ser farmacologicamente idênticas nos nossos testes. Para isolar a corrente de BK a partir de corrente nativa (antecedente, não BK), a ibenotoxina toxina que bloqueia o / 23 canal potente de BK foi utilizada para uma concentração supra máxima (IBTX) [Galvez, A., et al, 1 Biol. Chem. 265 : 11083 - 11090 (1990)] (50 nM). Determinou-se a contribuição relativa da corrente dos canais de BK para uma corrente total de saída por subtracção da corrente remanescente na presença de IBTX (corrente não BK) a partir de perfis de corrente obtidos em todas as outras condições experimentais (controlo, fármaco e lavagem). Determinou-se que para as concentrações ensaiadas os compostos perfilados não efectuaram as correntes nativas não-BK nos oocitos. Ensaiaram-se todos os compostos em pelo menos 5 oocitos e foram referidos para uma concentração individual de 20 μΜ; o efeito dos compostos escolhidos de fórmula geral (I) sob a corrente BK foi expresso como a percentagem de corrente sensível ao IBTX de controlo e encontra-se indicada no Quadro 1. Conseguiram-se os registos utilizando técnicas de voltagem-grampo convencionais de dois eléctrodos [Stuhmer, W, et al., Methods in Enzvmologv. Vol. 207 : 319-339 (1992)]; os protocolos de tensão-grampo consistiam em uma fase com uma duração de 500 - 750 ms de despolarizações a partir de um potencial de manutenção de -60 mV a +140 mV em fases de 20 mV. Os meios experimentais (solução modificada de Barth) consistiam em (em mi\l) : NaCl (88), NaHC03 (2,4), KC1 (1,0), HEPES (10), MgS04 (0,82), Ca(N03)2 (0,33), CaCl2 (0,41); pH 7,5. QUADROl

Efeito de Compostos Seleccionados sobre os Canais BK

Exemplo N° 1 4 6 7 9 13 14 15 16 22 25 31 33

Corrente de BK* + + + * a 20 μΜ expressa como percentagem de controlos; + = 100- 125% ++= 125 - 150 % +++ = >150%

Examinou-se também o composto do Exemplo 3 com pensos cortados de dentro para fora com canal único a partir de células COS transfectadas de maneira estável com mSlo e com pensos obtidos a partir de oocitos que exprimem hSlo e descobriu-se um aumento eficaz da probabilidade aberta em ambos os sistemas para uma concentração de 1 μΜ. Examinaram-se outros compostos utilizando técnicas de penso-grampo com célula total e canal simples em células HEK 293 que exprimem de maneira transiente e estável canais de hSlo BK para níveis elevados, e, por exemplo, descobriu-se que os compostos dos exemplos 14, 37 e 38 eram muito potentes e abridores eficazes dos canais de hSlo BK sob condições de célula total e 25 25

registo de penso-grampo excitados (de dentro para fora e exterior-fora).

Para determinar a capacidade destes compostos para reduzir as perdas celulares que resultam da isquémia neuronal, empregou-se um modelo de roedor padrão de isquémica focal permanente, o qual envolve a oclusão da artéria cerebral média no rato hipertenso espontaneamente (modelo MCAO) [Tamura, A., et al., Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism, Volume 1, 53 -60, (1981)].

Avaliaram-se os compostos escolhidos no modelo da apoplexia focal que envolve a oclusão da artéria cerebral média permanente (MCAO) no rato hipertenso espontaneamente. Este processo dá como resultado um volume de enfarto neo-cortical fiavelmente grande que é medido por meio de uma exclusão de corante vital numa série de fatias através do cérebro 24 horas após MCAO. No presente ensaio, administraram-se os compostos utilizando uma via de administração i.v. ou i.p. às duas horas após a oclusão. Por exemplo, neste modelo, o composto do exemplo 4 reduziu o volume do enfarte cortical de cerca de 18 % quando administrado por via intravenosa (0,03 mg/kg) e de cerca de 26 % quando administrado por via intraperitoneal (10 mg/kg), ou como uma grande pílula duas horas após a oclusão da artéria cerebral média em comparação com o controlo tratado com veículo (2 % de DMSO, 98 % de PG). De igual modo, neste modelo, o composto do exemplo 14 reduziu o volume de enfarto cortical de cerca de 18 % quando administrado por via intravenosa (0,3 mg/kg) sob a forma de uma pilula grande individual duas horas após a oclusão da artéria cerebral média em comparação com o controlo tratado com veículo (2 % de DMSO, 98 % de PH).

Os resultados dos ensaios anteriores in vitro e in vivo demonstram, que os 26

ν" ί compostos da presente invenção são abridores potentes dos canais do K" activados pelo cálcio de grande condutância (canais maxi-K ou BK). Deste modo, os compostos da presente invenção são úteis para o tratamento de perturbações humanas que resultam de um mau funcionamento da polarização e da condutância da membrana celular e, de preferência, são indicados para o tratamento da isquémia, convulsões, asma, incontinência urinária e danos traumáticos do cérebro e outras perturbações sensíveis à actividade activadora do canal BK. Mais preferivelmente, os compostos de fórmula geral I são úteis no tratamento da isquémia cerebral.

Por consequência, os compostos de fórmula geral I ou as suas composições farmacêuticas são úteis no tratamento, alívio ou eliminação de perturbações ou outras perturbações associadas com os canais BK. Tais perturbações mcluem isquémia, convulsões, asma, incontinência urinária e danos cerebrais traumáticos, bem como outras perturbações sensíveis aos abridores do canal do potássio.

Numa outra forma de realização, a presente invenção inclui composições farmacêuticas que compreendem pelo menos um composto de fórmula geral I em associação com um adjuvante, veículo ou diluente farmacêutico.

Ainda de acordo com uma outra forma de realização, a presente invenção diz respeito a um processo de tratamento ou prevenção de perturbações que respondem à abertura dos canais de potássio num mamífero com necessidade de um tal tratamento, que compreende a administração ao referido mamífero de uma quantidade eficaz sob o ponto de vista terapêutico de um composto de fórmula geral I ou um seu sal, solvato ou hidrato não tóxico, aceitável sob o ponto de vista 27 / v./\ farmacêutico.

Ainda de acordo com uma outra forma de realização, a presente invenção diz respeito a um processo para o tratamento de um estado isquémico em um mamífero com necessidade de um tal tratamento, que compreende a administração ao referido mamífero de uma quantidade eficaz sob o ponto de vista terapêutico de um composto de fórmula geral (I) ou de um seu sal, solvato ou hidrato não tóxico aceitável sob o ponto de vista farmacêutico.

Para utilização terapêutica, os compostos activos sob o ponto de vista farmacológico de fórmula geral 1 são normalmente administrados sob a forma de uma composição farmacêutica que compreende o (ou um) ingrediente activo essencial pelo menos um tal composto em associação com um veículo líquido ou sólido aceitável sob o ponto de vista farmacêutico e, eventualmente, com adjuvantes e excipientes aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico utilizando técnicas padrão e convencionais.

As composições farmacêuticas incluem formas de dosagem apropriadas para administração oral, parentérica (incluindo sub-cutânea, intra-muscular, intradérmica e intravenosa) brônquica ou nasal. Deste modo, se se utilizar um veículo sólido, pode transformar-se a preparação em comprimidos, colocar-se em uma cápsula de gelatina dura sob a forma de pó ou de grânulo, ou sob a forma de um trocisco ou de uma pastilha. O veículo sólido pode conter excipientes convencionais tais como agentes ligantes, cargas, lubrificantes para a formação de comprimidos, desintegrantes, agentes molhantes e similares. O comprimido pode, se assim se desejar, ser revestido com uma película por técnicas convencionais. Se se utilizar um 28 28

veículo líquido, a preparação pode apresentar-se sob a forma de um xarope, emulsão, cápsula de gelatina mole, veículo estéril para injecção, suspensão líquida aquosa ou não aquosa, ou pode ser um produto seco para reconstituição com água ou com outro veículo apropriado antes da utilização. As preparações líquidas podem conter aditivos líquidos convencionais tais como agentes de suspensão, agentes emulsionantes, agentes molhantes, veículo não aquoso (incluindo óleos comestíveis), conservantes, bem como agentes aromatizantes e/ou corantes. Para administração parentérica, um veículo compreenderá normalmente água estéril, pelo menos em grande parte, embora possam utilizar-se soluções salinas, soluções de glicose e similares. Podem também utilizar-se suspensões injectáveis, caso esse em que podem empregar-se agentes de suspensão convencionais. Podem adicionar-se conservantes convencionais, agentes tampão e similares igualmente para as formas de dosagem parentéricas. Particularmente útil é a administração de um composto de fórmula geral I directamente em formulações parentéricas Preparam-se as formulações farmacêuticas de acordo com técnicas convencionais apropriadas para a preparação desejada que contém quantidades apropriadas do ingrediente activo, ou seja, o composto de fórmula geral I de acordo com a presente invenção. Veja-se, por exemplo, Remingtoms Pharmaceutical Sciences. Mack Publishing Company, Easton, PA, 17a edição, 1985. A dosagem dos compostos de fórmula geral I para se conseguir um efeito terapêutico dependerá não só de factores tais como a idade, o peso e o sexo do paciente e o modo de administração, mas também do grau de actividade de activação do canal do potássio desejado e a potência do composto particular a ser utilizado 29 ν' ν /És' ,Í> ' para a perturbação particular de doença em questão. Contempla-se também que o tratamento e a dosagem do composto particular pode ser administrada em uma forma de dosagem unitária e que a forma de dosagem unitária seria ajustada de conformidade pelo especialista na matéria para reflectir o nível relativo de actividade. A decisão quanto à dosagem particular a ser utilizada (e o número de vezes a ser administrada por dia) encontra-se dentro do critério do clínico assistente e pode variar por titulação da dosagem às circunstâncias particulares da presente invenção para produzir o efeito terapêutico desejado.

Uma dose apropriada de um composto de fórmula geral I ou de uma sua composição farmacêutica para um mamífero, incluindo o homem, que sofre de, ou que provavelmente virá a sofrer de qualquer estado conforme descrito na presente memóna descritiva é uma quantidade de ingrediente activo compreendida entre cerca de 0,1 .ug/kg e 100 mgdcg de peso do corpo. Para administração parentérica, a dose encontrar-se-á compreendida entre 1 .ug/kg e 10 mg/kg de peso do corpo para administração intravenosa. De preferência administra-se o ingrediente activo em doses iguais desde uma até quatro vezes ao dia. Contudo, habitualmente administra--se uma dose pequena, e aumenta-se gradualmente a dosagem até se determinar a dosagem óptima para o hospedeiro em tratamento.

Contudo, deve entender-se que a quantidade do composto realmente administrada será determinada pelo clínico assistente, à luz das circunstâncias relevantes incluindo o estado a tratar, a escolha do composto a ser administrado, a via escolhida de administração, a idade, o peso e a resposta do paciente individual, e a gravidade dos sintomas do paciente. 3Θ / * Dão-se os exemplos seguintes a título ilustrativo.

DESCRIÇÃO DE FORMAS DE REALIZAÇÃO ESPECÍFICAS

Nos exemplos seguintes, todas as temperaturas são dadas em graus centígrados. Os pontos de fusão foram registados num aparelho de determinação do ponto de fusão por via capilar Gallenkamp e os pontos de ebulição foram medidos a pressões específicas (mm Hg) e ambas as temperaturas não são corrigidas. Os espectros de ressonância magnética do protão (RMN ’H) e de ressonância magnética do carbono (RMN 13C) foram registados num Bruker AC 300 e um espectro de ressonância magnética do flúor (RMN 19F) foi registado num Bruker AM 300, equipado com uma sonda QNP. Todos os espectros foram determinados nos solventes indicados e os desvios químicos encontram-se registados em unidades δ a jusante do padrão interno de tetrametilsilano (TMS) e registam-se as constantes de acoplamento intraprotónicas em Hertz (Hz). Os padrões de separação são designados como segue : s, singuleto; d, dupleto; t, tripleto; q, quarteto, m, multipleto; br, pico largo; dd, dupleto de dupletos; bd, dupleto largo; dt, dupleto de tripletos; bs, singuleto largo; dq, dupleto de quarteto. Os espectros de infravermelho (IV) utilizando o brometo de potássio (KBr) foram determinados num espectrómetro Perkin Elmer 781 de 4000 cm'1 a 400 cm'1, calibrado a 1601 cm'1 de absorção de uma película de poliestireno e foram registados em centímetros recíprocos (cm'1). Determinaram-se as rotações ópticas [a]D2:! num polarímetro de Perkin-Elmer 41 nos solventes indicados. Os espectros de massa de baixa resolução (EM) e o peso molecular aparente (MH ) ou (M-H)' foram determinados num Finniaen TSQ 7000. A análise elementar é registada como percentagem em peso. 31

As preparações números 1 a 5 seguintes ilustram processos reais representativos da preparação de intermediários e métodos para a preparação de produtos de acordo com a presente invenção. Deve também ser evidente para os especialistas na matéria que a substituição apropriada tanto dos materiais como dos métodos descritos na presente memória descritiva produzirá os exemplos ilustrados a seguir e os que se encontram incluídos no âmbito da presente invenção.

Prenaracâo N° 1 6-(Trifluorometil)-1 //-indol-2.3-diona

Aqueceu-se uma mistura agitada pura de 3-aminobenzotriíluoreto (82,4 g, 0,51 mol) e (Boc)20 (123 g, 0,56 mol) à temperatura de 80°C durante 2-3 horas até terminar a libertação de C02. Deixou-se arrefecer a mistura e evaporou-se rotativamente o tBuOH. Recristalizou-se o produto sólido branco resultante a partir dos hexanos para se obter agulhas brancas (119 g, 89 %) de N-(/erc-butoxicarboml)--aminobenzotrifluoreto.

Adicionou-se sec-BuLi (338 mL, 0,44 mol, 1,3M em ciclo-hexano) no decurso de 20 minutos a uma solução agitada fria (-78°C) de N-Boc-amino-benzotrifluoreto (52,25 g, 0,2 mol) em THF anidro (200 mL) sob atmosfera de azoto. Aqueceu-se a solução parcial amarela resultante até uma temperatura compreendida entre -45 e 40°C e manteve-se durante duas horas. Arrefeceu-se a suspensão amarela espessa resultante do dianião à temperatura de -78°C e adicionou-se rapidamente oxalato de dietilo anidro puro (35,1 g, 0,24 mol). Agitou-se a solução resultante laranja castanha à temperatura de -78°C durante uma hora. Diluiu-se a reacção com 200 mL de éter, extinguiu-se com 150 mL de HCl 3N (150 32

mL) e deixou-se então aquecer até à temperatura ambiente. Separou-se a camada orgânica, lavou-se com água, com salmoura e secou-se então (Na2S04). A evaporação dos solventes proporcionou um óleo dourado-amarelo (80,7 g) que se cromatografou por via intermitente (gel de sílica / CH2C12) para se obter o ceto-éster puro (61,1 g, 85 %) : IV (película, cm'1) 3320, 1740, 1670, 1540, 1370, 1340, 1250, 1140; RMN (300 MHz, CDC13) ó 1,40 (3 H, t, J = 7,1 Hz), 1,51 (9 H, s), 4, 45 (2 H, q, J = 7,1 Hz), 7,25 (1 H, d, J = 8,3 Hz), 7,79 (1 H, d, J = 8,3 Hz), 8,86 (1 H, s), 10,40 (I H, brd s); EM (m/e (362 (ΜΙΓ).

Aqueceu-se a refluxo durante 6 horas uma solução agitada do ceto-éster (57 g, 0,158 mol) em THF (1 L) e HC1 3N (250 mL). Deixou-se arrefecer a mistura e evaporou-se rotativamente o THF. Deixou-se arrefecer a suspensão laranja resultante. Filtrou-se o sólido, lavou-se com água e secou-se então ao ar durante a noite para se obter a 6-(trifluorometil)-isatina (29,6 g, 87 %): P. F. 196 - 198°C; IV (KBr, cm'1) 3100, 1750, 1710, 1320, .1170, 1125; RMN ]H (300 MHz, DMSO-4) δ 7,09 (1 H, s), 7,39 (1 H, d, J = 7,7 Hz), 7,68 (1 H, d, J = 7,7 Hz), 11,26 (1 H, brd s), EM m/e 216 (MFT).

Anal, calculada para QH+FjNC^ : C, 50,28; H, 1,91; N, 6,47.

Encontrada : C, 50,25; H, 1,87; N, 6,5 1.

Preparou-se a isatina seguinte de acordo com um processo semelhante. 5-(TrifIuorometil)-l//-indol-2,3-diona : P.F. 188- 190°C

Preparação N° 2 4.6-/?A-('Trifluorometin-l//-indol-2,3-diona

Adicionou-se gota a gota tBuOCl (2,2 g, 20 mmol) preparado 33 recentemente a uma solução agitada fria (-65°C) de 3,5-ôA’-(trifluorometil)-anilina (4,58 g, 20 mmol) em CH2C12 anidro (25 mL). Decorridos 10 minutos, adicionou-se (metiltio)-acetato de etilo puro (2,68 g, 20 mmol) e agitou-se a mistura à temperatura de -65°C durante 1 hora. Adicionou-se trietilamina (2,68 g, 20 mmol) e deixou-se então aquecer a mistura até à temperatura ambiente. Extinguiu-se a mistura reaccional com água, separou-se a camada orgânica e evaporou-se então rotativamente. Dissolveram-se 6,35 g do resíduo oleoso em hexanos e ferveu-se durante várias horas após o que se deixou arrefecer. Filtrou-se o precipitado sólido bege e lavou-se com hexanos para se obter 3,67 g de (metiltio)-indolona pura intermediária.

Adicionou-se N-clorossuccinimida (1,31 g, 9,8 mmol) a uma solução agitada de (metiltio)-indolona (2,95 g, 9,4 mmol) em CC14 (150 mL). Agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante 6 horas e 30 minutos. Filtrou-se a suspensão, lavou-se com CC14 e evaporou-se o filtrado rotativamente a 25 - 30°C. dissolveu-se o óleo residual castanho claro num volume mínimo (~ 5-10 mL) de CCI4 e manteve-se num banho de gelo. Filtraram-se os últimos vestígios de succinimida precipitada e lavou-se com hexanos. A evaporação do filtrado proporcionou um óleo vermelho-castanho (3,56 g) de α-clorooxmdol que se utilizou na fase seguinte sem purificação ulterior.

Adicionou-se BF3*OEt2 puro (1,16 mL, 9,4 mmol) a uma suspensão agitada de HgO em THF-H20 a 4 : 1 (100 mL). Adicionou-se uma solução de a-clorooxindol (3,56 g) em THF (20 mL) e agitou-se a mistura durante 2-3 dias. Filtrou-se a suspensão através de uma almofada de celite e lavou-se o filtrado com 34 ,

J salmoura saturada e secou-se em seguida (Na2S04). A evaporação do THF proporcionou 3,2 g de isatina bruta que se recristalizou em éter para se obter 4,6-bis--(trifluorometil)-lH-indol-2,3-diona pura (1,27 g): P.F. 200 -203°C; IV (KBr, cm'1) 1778, 1748, 1278, 1138; RMN *H (300 MHz, DMSO-d^) 5 7,40 (1 H, s), 7,61 (1 H, s), 11,52 (1 H, s); EM m/e 284 (MH').

Prepararam-se as isatinas seguintes de acordo com a literatura conhecida, P.M. Magmnity, et al, J. Am, Chem. Soe., 73, 3579 (1951) e C. S. Marvel, et al, Organic Svnthesis Coll. Vol. \ 327 - 330.

4-(Trifluorometil)-l//-indol-2,3-diona : P.F. 210 - 212°C 7-(Trifluorometil)-lFMndol-2,3-dioiia : P.F. 190- 192°C 4,6-Dicloro-l//-indol-2,3-diona : P.F. 258 - 260°C

Podem também preparar-se as isatinas seguintes pelos métodos na referência citada. l//-Benz[g]indol-2,3-diona, P.F. 256 - 259°C (dec.) [H. Cassebaum, Chem. Ber.. 90. 2876(1957)]. l//-Benz[f]indol-2,3-diona; P.F. 250 - 255°C (dec.) [A. Etienne et al.. Buli, Soc. Chem... Fr, 6, 743 - 748 (1954)]. l//-Benz[e]indol-2,3-diona; P.F. 252 - 254°C (dec.) [W. Wendelin, et al.. J. Het. Chem.. 24. 1381 (1987)]. 6-Fenil-l//-indol-2,3-diona; P.F. 196 - 198°C [P. W. Sadler, J, Ora, Chem.. 21. 169 (1956)]. 6-Iodo-l//-indol-2,3-diona; P.F. 196 - 198°C [Von. W. Langenbeck, et. Al... J, Prakt. Chemie.. 4. IV, 136-146(1956)]. 35 ~/s / *y V.'

Preparação N° 3

Processo Geral para a preparação de 1.3-di-hidro-3-hidroxi-3-(2-hidroxiaril)-2//--indol-2-onas : B1

Método A : Adicionou-se uma solução do reagente de Grignard 2-metoxi-arilo (1-2 eq.) em THF a uma solução agitada fria (-20°C) de sal de sódio da isatma em THF sob atmosfera de azoto. Deixou-se aquecer a mistura até à temperatura ambiente e manteve-se até (I - 2 horas) se ter consumido a isatina. Diluiu-se a mistura reaccional com éter, arrefeceu-se com um banho de gelo e extinguiu-se então com HC1 IN. Separou-se a camada orgânica, lavou-se com NaOH 0,5N, água, salmoura e secou-se então (Na2S04). Triturou-se o sólido bruto isolado após evaporação dos solventes com CH2C12 para se obter as l,3-di-hidro-3--hidroxi-3-(2--metoxiaril)-2//-indol-2-onas puras com um rendimento de 70 - 95 %.

Realizou-se a desmetilação do radical éter metílico do produto anterior com BBr3 em CH2C12. A uma solução agitada fria (-78°C) de l,3-di-hidro-3-hidroxi--3-(2-metoxiaril)-2H-mdol-2-ona em CH2C12 anidro, adicionou-se, sob atmosfera de azoto, BBr3 (3 eq.; solução 1M em CH2C12). Aqueceu-se a mistura num banho de gelo e manteve-se até ao desaparecimento do material inicial por CCF (1-2 horas). Extinguiu-se a reacção com NaHC03 saturado e acidificou-se então com HC1 IN. Quando o produto é solúvel em CH2C12, separa-se a camada orgânica, lava-se com salmoura e seca-se então (MgS04). Se o produto for insolúvel em CH2C12, evapora- 36 36

-se rotativamente a camada orgânica à temperatura ambiente e extrai-se o resíduo aquoso com EtOAc. Lava-se o extracto de EtOAc com salmoura e seca-se então (Na2S04). A evaporação do solvente orgânico proporciona as l,3-di-hidro-3-hidroxi--3-(2-hidroxiaril)-2H-indol-2-onas. Purifíca-se o produto bruto quer mediante trituração ou recristalização a partir de um solvente apropriado para se obter o produto puro com um rendimento de 80 - 95 %. Método B : Preparou-se o fenolato de bromomagnésio fazendo reagir um equivalente do fenol em éter com um equivalente da solução etérea de brometo de etil-magnésio à temperatura de 0°C e deixou-se então aquecer até à temperatura ambiente. Evaporou-se rotativamente a suspensão resultante do fenolato de bromomagnésio em éter à temperatura de 25°C até à secura e dissolveu-se então em CH2C12 anidro. Adicionou-se uma solução de isatma (1 eq.) em CH2CI2 à solução de fenolato de bromomagnésio e agitou-se a mistura à temperatura ambiente até se ter consumido completamente a isatina (1-24 horas). Extinguiu-se a reacção ou com uma solução saturada de NH4CI ou com HC1 IN e extraiu-se em seguida com CH2C12. Purificou-se o produto bruto quer mediante trituração ou recristalização a partir de um solvente apropriado para se obter as l,3-di-hidro-3-hidroxi-3-(2--hidroxiaril)-2H-indol-2-onas puras.

Preparação N° 4

Processo Geral para a preparação de L3-di-hidro-3-(2-hidroxiaril)-2H-indol-2-onas R1

0 37 £

Aqueceu-se uma mistura agitada pura de l,3-di-hidro-3-hidroxi-3-(2--metoxiaril)-2H-indol-2-ona (1 eq.), trietilsilano (3 eq.) e ácido trifluoroacético (3 eq.) à temperatura de 110 - 120°C num tubo fechado durante 1 - 3 dias até se ter completado a desoxigenação por análise CCF. Evaporou-se rotativamente o Et3SiH e TFA em excesso e cromatografou-se intermitentemente o resíduo (gel de sílica / 3 % MeOH em CH2C12) para se obter o produto desoxigenado desejado l,3-di-hidro-3--(2-metoxiaril)-2H-indol-2-ona (80 - 90 %). A desmetilação do radical éter metílico realizou-se com BBr3 (3 eq.) a -78°C até 0°C seguida pelo processamento habitual conforme descrito na preparação 3 para se obter o produto do título.

Preparação N° 5

Processo Geral para a preparação de 1.3-di-hidro-3-fluoro-3-(2-metoxiaril)-2H--indol-2-onas R1

Adicionou-se gota a gota trifluoreto dietilamino-enxofre puro (DAST) a uma solução agitada fria (-78°C) ou uma suspensão do 3-aril-1,3-di-hidro-3-hidroxi--2H-indol-2-ona sob atmosfera de azoto. Deixou-se aquecer até 0°C a mistura resultante. Seguiu-se o progresso da reacção mediante CCF. Extinguiu-se a mistura reaccional com água à temperatura de 0°C. Quando o produto era solúvel em CH2C12, separou-se a camada orgânica, lavou-se com salmoura e em seguida 38 secou-se (MgS04). Se o produto for insolúvel ou parcialmente solúvel em CH2C12, evapora-se rotativamente a camada orgânica à temperatura ambiente e extrai-se o resíduo aquoso com EtOAc. Lava-se o extracto de EtOAc com salmoura e seca-se então (Na2S04). A evaporação do solvente orgânico proporcionou as 3-aril-1,3-di--hidro-3-fluoro-2H-indol-2-onas. Purificaram-se os produtos brutos tanto por trituração como por recristalização a partir dos solventes apropriados para se obter os produtos puros com um rendimento de 90 - 95 %.

Preparação N° 6 (5-Cloro-2-metoxifenil)-acetato de metilo

Adicionou-se gota a gota no decurso de 30 minutos S02C12 puro (30,5 g, 18 mL, 0,225 mol) a uma solução parcial fria (5°C) de ácido 2-(metoxifenil)-acético (25 g, 0,15 mol) em AcOH glacial (500 mL). Agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante 16 horas e despejou-se então em 2,5 L de água fria com agitação vigorosa. Deixou-se o precipitado branco resultante em repouso à temperatura ambiente durante 2-3 horas, filtrou-se então, lavou-se com água e secou-se em seguida o ar durante a noite para se obter o ácido (5-cloro-2-metoxifeni)-acético (19,8 g, 66%).

Aqueceu-se a refluxo sob atmosfera de azoto durante duas horas uma suspensão agitada de ácido (5-cloro-2-metoxifenil)-acético (10 g, 0,05 mol), K2C03 anidro (8,3 g, 0,06 mol) e sulfato de dimetilo (7,6 g, 0,06 mol) em CH3CN anidro (60 mL). Deixou-se arrefecer a mistura reaccional e extinguiu-se o sulfato de dimetilo em excesso com Et3N (I mL) após o que se filtrou. Evaporou-se rotativamente o filtrado e suspendeu-se o resíduo em água e extraiu-se com éter. 39 lavou-se com NaHC03 saturado, água, salmoura e em seguida secou-se (Na2S04). A filtração e a evaporação do éter proporcionou um óleo incolor que se destilou sob vazio para se obter o (5-cloro-2-metoxifenil)-acetato de metilo (10,1 g, 94 %) : P.F. 96 - 98°C / 0,5 torr; IV (película, cm'1) 1742, 1250, 1150, 1028; RMN 'H (300 MHz, CDC13) δ 3,56 (2 H, s), 3,66 (3 H, s), 3,76 (3 H, s), 8,75 (l H, d, J = 8,6 Hz), 7,13 (1 H, d, J = 2,5 Hz), 7,17 (1 H, dd, J = 8,6 e 2,5 Hz); EM m/e 215 (MH").

Exemplo 1 (±)-3-(5-cloro-2-metoxifenil)-1.3-di-hidro-3-hidroxi-6-(trifluorometil)-2H-indol-2- -ona P.F. 207 - 2I0°C; IV (KBr, cm'1) 3400, 1730, 1320, 1250, 1125, 1170; RMN XH (300 MHz, DMSO-4) Ô 3,41 (3 H, s=, 6,91 (1 H, d, J = 0,73 Hz), 6,94 (l H, s), 7,05 (2 H,m), 7,19(1 H, d, J = 8,2 Hz), 7,35(1 H, dd, J = 8,6 e 2,7 Hz), 7,80(1 H, d, J = 2,7 Hz), 1,067 (1 H, s); RMN ,3C (75 MHz, DMSO-d*) δ 55,95, 74,25, 105,21, 113,52, 118,45, 122,28, 124,27, 124,46, 126,83, 128,70, 129,47 (q), 131,31, 136,60, 143,88, 154,30, 177,29, EM m/e 358 (MH").

Anal, calculada para C^HuCIFjNOj C, 53,72; H, 3,09; N, 3,83.

Encontrada C, 53,43, H, 2,99; N, 3,83.

Exemplo 2 (±')-3-(5-Cloro-2-metoxifenil)-l,3-di-hidro-6-(tnfluorometill)-2//-indol-2-ona

Aqueceu-se a refluxo durante uma hora uma suspensão agitada de (5-cloro-2-metoxifenil)-[2-nitro-4-(tnfluorometil)-fenil]-acetato de metilo (2,02 g, 5 mmol) e ferro em pó (1,18 g, 20 mmol) em AcOH gla. (25 mL). Deixou-se arrefecer a suspensão e despejou-se em seguida em 100 mL de água fria com agitação 40

vigorosa. Extraiu-se o produto com éter (2 x 50 mL), lavou-se com HC1 6N (50 mL), água, salmoura, e secou-se então (Na2S04). A evaporação do éter proporcionou um sólido bege (1,8 g) que se triturou com éter para se obter o produto desejado sob a forma de um sólido de cor branca suja (1,61 g, 95 %) : P.F. 210-213°C; IV (KBr, cm-1) 3200, 1710, 1320, 1250, 1170, 1120, 1050; RMN 'H (300 MHz, DMSO-de) δ 33,57 (3H, s), 4,91 (1 H, s) 7,02 (1 H, d, J = 8,8 Hz), 7,06 (2 H, m), 7,21, (1 H, dd, J - 7,7 e 0,6 Hz), 7,35 (2 H, m), 10,77 (1 H, s); RMN ,3C (75 MHz, DMSO-d*) δ 48,25, 56,07, 105,05, 113,58, 118,26, 122,42,124,18,126,03, 127,38, 128,60 (q), 128,70, 130,65, 134,37, 143,58, 156,09, 176,73; EM m/e 342 (MH ).

Anal, calculada para Ci6HuC1F3N02 : C, 56,24; H, 3,24; N, 4,09

Encontrada : C, 56,37; H, 3,25; N, 4,07 Exemplo 3 (±l-3-(5-Cloro-2-hidroxifeniD-1.3-di-hidro-3-hidroxi-ó-(trifiuorometii~)-2//-indol-2- -ona P.F. 210-213°C; IV (KBr, cm’1) 3300,1725, 1320, 1250, 1170,1140; RMN 'H (300 MHz, DMSO-dé) δ 36,61 (1 H, dd, J = 8,5 e 2,6 Hz), 6,81 (1 H, s), 7,02, (1 H, s), 7,05 (1 H, d, J = 7,7 Hz), 7,17 (2 H, m), 7,71 (1 H, d, J = 2,7 Hz), 9,72 (1 H, s), 10,60 (1 H, s); RMN 13C (75 MHz, DMSO-d6) δ 74,37, 105,17, 116,48, 118,30, 122,34, 124,32, 125,92, 126,84, 128,33, 129,14, 129,26 (q), 136,87, 144,11, 152,37, 177,30; EM m/e 344 (MH").

Anal, calculada para Q5H9CIF3NO3 : C, 52,42; H, 2,64, N, 4,08

Encontrada : C, 52,19; H, 2,57; N, 3,97

Example 4 41

/ y'

(=b)-3-(5-Cloro-2-hidroxifenil)-1.3-di-hidro-6-(trifluorometil)-2H-indol-2-ona

Adicionou-se uma solução de BBr3 (12 mL, 12 mmol; IM em CH2C12) a uma solução agitada fria (-78°C) de (±)-3-(5-cloro-2-metoxifenil)-l,3-di-hidro-6--(trifluorometil)-2H-indol-2-ona (1,37 g, 4 mmol) em CH2C12 anidro (20 mL). Deixou-se aquecer a mistura até à temperatura ambiente e manteve-se durante duas horas. Extinguiu-se a reacção com NaHC03 saturado e acidificou-se então com HC1 IN. Separou-se a camada orgânica, lavou-se com água, com salmoura e secou-se em seguida (MgS04) A evaporação do CH2C12 proporcionou um produto sólido branco sujo que se triturou com CH2C12 quente para se obter o composto do título (1,21 g, 93%) : P.F. 266 - 268°C; IV (KBr, cm'1) 3320, 1690, 1310, 1250, 1160,1125, RMN 'H (300 MHz, DMSO-dé) δ 4,85 (1 H, s), 6,75 (1 H, d, J = 8,6 Hz), 7,04 (1 H, s), 7,11, (1 H, d, J = 7,7 Hz), 7,17(1 H, dd, J = 8,6 e 2,6 Hz), 7,22 (1H, d, J = 8,0 Hz), 7,26 (1 H, d, J = 2,4 Hz), 9,82 (1 H, s), 10,73 (1 H, s); RMN 13C (75 MHz, DMSO-d6) δ 48,47, 104,94, 116,84, 118,16, 122,27, 124,20, 125,61, 126,06, 128,05. 128,41, 130,76, 134,72, 143,69, 154,26, 176,92, EM m/E 328 (ΜΕΓ).

Anal. calculada para Ci?H9C1F3NC)2 : C, 54,98, H, 2,77; N, 4,27.

Encontrada : C, 54,84; H, 2,64; N, 4,16.

Example 5 (±)-3-( 5-Cloro-2-hidroxifenil)-1.3-di-hidro-3-hidroxi-5-(trifluorometil)-2H-indol-2--ona P.F. 156-158°C; IV (KBr, cm'1) 3350, 1740, 1325, 1260, 1 160, 1120, RMN ’H (300 MHz, DMSO-ds) δ 6,62 (1 H, d, J = 8,5 Hz), 6,80 (1 H, s), 6,98 (1 H, d, J = 8,1 Hz), 7,09 (1 H, d, J = 1,2 Hz). 7,17 (1 H, dd, J =8.5 e 2,7 Hz), 7,56(1 H. dd, J = 8,1 e 1,2 42

Hz), 7,73 (1 H, d, J = 2,7 Hz), 9,73 (1 H, s), 10,72 (l H, s); RMN l3C (75 MHz, DMSO-dé) δ 74,37, 109,44, 116,52, 120,16, 121,75 (q), 122,37, 126,42, 126,75, 126,93, 128,37, 129,28, 133,33, 146,94, 152,36, 177,56; EM m/e 344 (MH").

Anal, calculada para C15H9CIF3NO3: C, 52,42, H, 2,64; N, 4,08.

Encontrada : C, 52,19; H, 2,48, N, 4,13.

Example 6 (±)-3-(5-Cloro-2-hidroxifenil)-4.6-dicloro-1.3-di-hidro-3-hidroxi-2H-indol-2-ona P,F, 232-235°C (dec,); IV (KBr, cm'1) 3400, 1730, 1275, RMN ’H (300 MHz, DMSO-d*) δ 6,61 (1 H, d, J = 8,5 Hz), 6,79 (1 H, d, J = 1,7 Hz), 6,81 (1 H, s), 6,94 (1 H, d, J = 1,7 Hz), 7,14 (1 H, dd, J = 8,5 e 2,7 Hz), 7,71 (1 H, d, J = 2,7 Fiz), 9,71 (1 H, s), 10,71 (1 H, s); RMN 13C (75 MHz, DMSO-dé) δ 74,77, 108,31, 116,32, 121,22, 122,07, 127,55, 128,20, 128,39, 130,40, 134,05, 146,26, 152,27, 176,89; EM m/e 344 (MH").

Anal. calculada para C14H8Cl3NC)3 : C, 48,80; H, 2,34; N, 4,06 Encontrada : C, 48,70; H, 2,35; N, 4,01 Exemplo 7 (±)-3-(5-Cloro-2-hidroxifeniD-1.3-di-hidro-3-hidroxi-7-(trifIuorometil)-2H-indol-2- -ona P.F. 205-207°C; IV (KBr, cm'1) 3250, 1745, 1340, 1240, 1175, 1120; RMN *H (300 MHz, DMSO-de) δ 6,59 (1 H, d, J = 8,5 Hz), 6,99 (1 H, t, J =7,7 Hz), 7,10 (1 H, d, J = 7,1 Hz), 7,16 (l H, dd, J = 8,5 e 2,7 Hz), 7,44(1 H, d, J = 7,8 Hz), 7,72 (1 H, d, J = 2,7 Hz), 9,79 (1 H, s), 10,79 (1 H, s); RMN l3C (75 MHz, DMSO-d«) δ 73,41, 110,10 (q), 116,37,121,43, 122,27, 125,16, 125,61, 126,83, 127.53, 128,30, 129,37, 43 134,40, 140,72, 152,38, 178,02; EM m/e 344 (MH1;

Anal. calculada para Ci5H9ClF3NO3*0,2H2O : C, 51,88, H, 2,73; N, 4,03.

Encontrada : C, 51,87; H, 2,75, N, 3,98. Exemplo 8 (±)-3-( 5-Cloro-2-hidroxifeml)-1,3-di-hidro-3-hidroxi-4-tnfluorometil)-2H-indol-2--ona P.F. 239 - 242°C, IV (KBr, cm'1) 3300, 1725,1330, 1250, 1170, 1140; RMN 'H (300 MHz, DMSO-dé) δ 6,56 (1 H, d, J = 8,5 Hz), 6,76 (1 H, s), 7,07-7,13 (3 H, m), 7,39 (1 H, t, J = 7,9 Hz), 7,66 (1 H, s), 9,57 (1 H. s), 10,71 (1 H, s); RMN 13C (75 MHz, DMSO-d*) δ 74,93, 113,23, 116,01, 118,26, 121 ,60, 121,84, 125,50 (q), 127,77, 127,95, 128,76, 129,57, 129,73, 145,00, 152,40, 176,89; EM m/e 344 (MH").

Anal. calculada para C15H9CIF3NO3 : C, 52,42; H, 2,64; N, 4,08.

Encontrada : C, 52,16; H, 2,87; N, 4,06.

Exemplo 9 (±)-1.3-Di-hidro-3-hidroxi-3-r2-hidroxi-5-(trifluorometil)-femH-6-(trifIuorometil)- -2H-indol-2-ona P.F. 175 - 177°C; RMN 'H (300 MHz, DMSO-d6) δ 6,77 (1 H, d, J = 8,3 Hz), 7,02-7,09 (2 H, m), 7,19 (1H, d, J = 7,7 Hz), 7,51 (1 H, d, J = 8,3 Hz), 8,08 (1 H, s), 10,40 (1 H, s), 10,67 (1 H, s); EM m/e 378 (MH7).

Anal. calculada para Ci6H9F6N03 . C, 50,94; H, 2,40; N, 3,71.

Encontrada : C, 50,85; H, 2,34, N, 3,76.

Exemplo 10 (±)-3-(5 - Cloro -2- hidroxifenil)-l,3-di-hidro-3-hidroxi-4.6-bis-(trifluorometil)-2H- 44 44 A % -indoI-2-ona P.F. 191-193°C; IV (KBr, cm'1) 3700-2500, 1740, 1280, 1170, 1130; RiVlN 'H (300 MHz, DMSO-dé) δ 6,59 (l H, d, J = 8,5 Hz), 7,06 (1 H, s), 7,15 (lh, dd, J = 8,5 e 2,6 Hz), 7,34 (1H, s), 7,45 (1 H, s), 7,68 (1H, d, J = 2,6 Hz), 9,74 (1H, s), 11,07 (1H, s); EM m/z (MH).

Anal. Calculada para C16H8C1F6N03 · 0,2H2O : C : 46,24; H, 2,05; N, 3,87.

Encontrada : C, 46,24, H, 2,18; N, 3,27. Exemplo 11 (-)-3-(5-Cloro -2- metoxifenil)-L3-di-hidro-3-hidroxi-6-(trifluorometil)-2//-indol-2--ona

Adicionou-se gota a gota uma solução de 6/.s-(tnmetilsil11 )-amida (2,2 mL, 1,1 mmol, 0,5 M em tolueno) a uma solução agitada fria (-78°C) de (±)-3--(5-cloro-2-metoxifenil)-l,3-di-hidro-6-(trifluorometil)-2/i-indoi-2-ona (342 mg, 1 mmol) em THF (3 mL) desgasado anidro sob atmosfera de árgon. Agitou-se a solução amarela clara resultante do enoato de potássio à temperatura de -78°C durante 30 minutos. Adicionou-se gota a gota no decurso de 5 minutos uma solução de (lS)-(+)-(10-canforasulfonil)-oxaziridina (252 mg, 1,1 mmol) em 2 mL de THF desagasado anidro à solução de anolato à temperatura de -78°C. Agitou-se a mistura à temperatura de -78°C durante uma hora e deixou-se então aquecer num banho de gelo (0 - 5°C). Extinguiu-se a reacçâo com AcOH glacial (0,1 mL), diluiu-se com 25 mL de éter seguindo-se uma adição de uma solução saturada de NH4C1 (10 mL). Separou-se a camada orgânica, lavou-se com NaHC03 saturado, com água, com salmoura e secou-se então (Na2S04). A filtração e a evaporação dos solventes 45 45

proporcionou 0,54 g de um produto bruto que se triturou com éter para eliminar o subproduto insolúvel de (canforasulfonil)-imina mediante filtração. A evaporação do filtrado proporcionou 0,39 g de produto ligeiramente contaminado com o subproduto. Triturou-se 0,39 g de produto bruto com CH2C12 à ebulição para se obter 230 mg de hidroxi-indalona desejada pura. A concentração da água mãe seguida por re-trituração com CH2C12 proporcionou mais 72 mg para se obter 302 mg (84 %) do produto combinado : P.F. 244 - 245°C; [a]D25 - 166,78° (CHC13); IV (KBr, cm'1) 3300 - 3100, 1722, 1320, 1250, 1125, RMN 'H (300 MHz, DMSO-dé) δ 3,42 (3 H, s), 6,90 (1 H, s), 6,93 (1H, d, J = 8,7 Hz), 7,04 (1 H, d, J = 7,7 Hz), 7,05 (1 H, s), 7,19 (T H, d, J = 7,7 Hz), 7,35 (1 H, dd, J = 8,7 e 2,7 Hz), 7,79 (1 H, d, J = 2,7 Hz), 10,67 (1 H, brd s); EM m/e 358 (MH-).

Anal, calculada para C16H11CIF3NO3 : C, 53,72; H, 3,10, N, 3,92.

Encontrada : C, 53,77; H, 2,95; N, 3,95.

Exemplo 12 (±)-3-(5-Cloro-2-hidroxifenil)-l,3-di-hidro-3-hidroxi-6-(trifluorometil)-2//-indol-2- -ona

Adicionou-se gota a gota uma solução de BBr3 (1,4 mL, 1 M em CH2C12) a uma solução agitada fria (-78°C) de (-)-3-(5-cloro-2-metoxifenil)-l,3-di-hidro-3--hidroxi-6-(trifluorometil)-2//-indol-2-ona [preparada no Exemplo 11] (170 mg, 0,475 mmol) em CH2C12 anidro (10 mL). Aqueceu-se a mistura resultante num banho de gelo e manteve-se durante 2 horas. Extmguiu-se a reacção com NaHCCb saturado e acidificou-se então com HC1 IN. Separou-se a camada orgânica turva, evaporou-se rotativamente, dissolveu-se em EtOAc (25 mL) e combinou-se então 46 7. com a camada aquosa. Separou-se a camada de EtOAc e lavou-se com água, com salmoura e secou-se em seguida (Na2S04). A filtração e a evaporação proporcionaram 198 mg de produto bruto que foi submetido a cromatografía intremitente (gel de sílica / 10 % MeOH em CH2C12) para se obter 164 mg (100 %) do produto do título puro sob a forma de um sólido branco . P.F. 200 - 201°C; [α]ο2' + 29,90° (CHC13); IV (KBr, cm'1) 3540, 3350, 1725, 1320, 1160, 1130; RMN ’H (300 MHz, DMSO-d*) δ 6,60 (1 H, d J = 8,5 Hz), 6,82 (1 H, brd s), 7,02 (1H, s), 7,05 (l H, d, J = 7,6 Hz), 7,17 (2 H, m), 7,71 (1 H, d, J = 2,7 Hz), 9,75 (1 H, brd s), 10,61 (1 H, s); EM m/e 344 (MH").

Anal, calculada para C15H9CIF3NO3 : C, 52,42; H, 2,64, N, 4,08.

Encontrada : C, 52,62; H, 2,48; N, 4,04.

Exemplo 13 (-')-3-(5-Cloro -2- hidroxifenin-E3-di-hidro-3-hidroxi-6-(tnfiUorometil)-2H-indol-2--ona P.F. 198 - 200°C; [ct]25D -22,18° (CHC13); IV (KBr, cm'1) 3540, 3300, 1725, 1320, 1125; RMN ’H (300 MHz, DMSO-dJ δ 6,60 (lH,d,J = 8,6 Hz), 6,82 (1 H, brd s). 7,02, (1 H, s), 7,05 (l H, d, J = 7,6 Hz), 7,17 (2 H, m), 7,72(1 H, d, J - 2,7 Hz), 9,75 (1 H, brd s), 10,61 (1 H, s); EM m/z 344 (ΜΕΓ).

Anal. calculada para C15H9CIF3NO3: C, 52,42; H, 2,64; N, 4,08.

Encontrada : C, 52,40, H, 2,59, N, 4,01.

Exemplo 14 (±)-3-( 5-Cloro - 2 - metoxifenil)-! .3-di-hidro-3-fluoro-6-(tnfluorometil)-2//-indol-2--ona 4* 47 P.F. 168-170°C; IV (KBr, cm'1) 3200, 1734,1320, 1268, 1132; RMN 'H (300 MHz, CDC13) δ 3,53 (3 H, s), 6,76 (1 H, dd, J = 8,7 e 1,0 Hz), 7,14 (1 H, d, J = 2,0 Hz), 7,18 (1 H, dd, J = 7,8 e 2,0 Hz), 7,26 (1 H, d, J =7,8 Hz), 7,33 (1 H, dd, J = 8,7 e 2,6 Hz), 7,78 (1 H, dd, J = 2,6 e 1,0 Hz), 9,00 (1 H, s), RMN 19F (282 MHz, CDC13) δ -63,10 (6-CF3), -159,87 (3-F); EM m/z 360 (MH ).

Anal. calculada para C16H10CIF4NO2 : C, 53,43; H, 2,80, N, 3,89.

Encontrada : C, 53,44; H, 2,79; N, 3,84.

Exemplo 15 (±)-3-(5-Cloro-2-hidroxifenil)-1.3-di-hidro-3-hidroxi-2H-benzrglindol-2-ona P.F. 170-172°C; RMN *H (300 MHz, DMSO-d*) δ 6,58 (1 H, d, J = 8,5 Hz), 6,66 (1 H, s), 7,02 (1 H, d, J = 8,2 Hz), 7,14(1 H. dd, J = 8,5 e 2,6 Hz), 7,42 (1 H, d, J = 8,2 Hz), 7,45 - 7,53 (2 H, m), 7,76 (1 H, d, J = 2,6 Hz), 7,85 (1 H, dd, J = 7,2 e 2,1 Hz), 8,10 (1 H, d, J = 7,2 Hz), 9,57 (1 H, brd s), 11,03 (i H, s), EM m/z 324 [M-H)*].

Anal. calculada para QssH^ClNO.^O.ISH-O : C, 65,46; H, 3,82; N, 4,24.

Encontrada : C, 65,48; H, 3,60; N, 3,89.

Exemplo 16 (±)-3-(5-Cloro-2-hidroxifenil)-1.3-di-hidro-6-fenil-2H-indol-2-one P.F. 221 - 225°C (dec,); RMN ]H (300 MHz, DMSO-d^) δ 6,78 (1 H, J = 9,1 Hz), 6,99(1 H, d, J = 7,6 Hz), 7,05(1 H, d. J = 6,6 Hz), 7,12-7,16(3 H, m), 7,34(1 H, t, J = 7,3 Hz), 7,44 (2H, t, J = 7,2 Hz), 7,58 (2H, d, J = 7,6 Hz), 9,83 (1 H, s), 10,59 (1 H, s); EM m/z 336 (MH').

Anal. calculada para C2oH14C1N02«H20 : C, 68,29; H, 4.01; N, 3.98.

Encontrada : C, 68,47; H, 3,81, N, 3,89. 48

. S *

Exemplo 17 (±)-3-(5-Cloro-2-hidroxifenin-l,3-di-hidro-2H-benzrg1indol-2-ona P.F. 211- 215°C (dec); RMN 'H (300 MHz, DMSO-d8) δ 4,97 (1 H, s), 6,80 (1H, d, J = 8,9 Hz), 7,10-7,17 (3 H, s), 7,46-7,53 (3 H, m), 7,87 (1 H, d, J = 7,5 Hz), 8,10 (1 H, d, 1 = 8,0 Hz), 9,83 (1 H, s), 11,25 (1 H, s); EM m/z 308 [M-H)'].

Anal. calculada para C18H12C1N02»H20 : C, 65,96, H, 4,31; N, 4,27.

Encontrada : C, 65,87; H, 3,99; N, 3,88.

Exemplo 18 (±)-3-(5-Cloro-2-metoxifemP-1.3-di-hidro-3-fluoro-6-fenil-2H-indol-2-ona IV (KBr, cm’1) 3200, 1738, 1338, 1266, 1120, 766, 693; RMN 'H (300 MHz, CDC13) δ 3,56 (3 H, s), 6,76 (1 H, d, J = 8,7 Hz), 7,11 (1 H, s), 7,14 (1 H, d, J = 2,3 Hz), 7,20 (1 H, d, J = 7,9 Hz), 7,31 (1 H, dd, J = 8,6 e 2,3 Hz), 7,37 (1 H, d, J = 7,0 Hz), 7,43 (2 H, m), 7,54 (2 H, d, J = 6,9 Hz), 7,80 (2 H, d, J = 2,5 Hz); RMN iyF (282 MHz, CDCI3) δ -156,62 (3-F); EM m/z 366 [M-H)-].

Exemplo 19 (±)-3-(5-Cloro-2-metoxifenil)-l,3-di-hidro-3-fluoro-6-iodo-2H-indol-2-ona P.F. 205-210°C; IV (KBr, cm'1) 3600 - 3200, 1736, 1266; RMN 'H (300 MHz, CDCI3) δ 3,55 (3 H, s), 6,74 (1 H, d, J = 9,8 Hz), 6,80 (1 H, dd, J = 7,8 e 2,5 Hz), 7,26 (1 H, s), 7,28-7,35 (2 H, m), 7,66 (1 H, brd s), 7,74 (1 H, d, J = 2,1 Hz); RMN 19F (282 MHz, CDCI3) δ -28,75(7) (3-F); EM m/z 416 [M-H)'].

Exemplo 20 (±)-3-(5-Cloro-2-hidroxifenil)-1.3-di-hidro-6-(4-metilfenil)-2H-indol-2-ona P.F. 277 - 279°C (dec ); IV (KBr, cm'1) 3200, 1686; RMN 'H (300 MHz, DMSO-d6) 49 δ 2,32 (3 Η, s), 4,78 (1 Η, s), 6,81 (1 Η, d, J = 9,1 Hz), 6,97 (1 H, d, J = 7,7 Hz), 7,03(1 H, d, J = 9,1 Hz)), 7,09 (1 H, d, J = 1,4 Hz), 7,12 - 7,16 (2 H, m), 7,24 (2 H, d, J = 8,5 Hz), 7,47 (2 H, d, J = 8,1 Hz), 9,87 (1 H, s), 10,58 (1 H, s); EM m/z 348 [(M-H)-].

Exemplo 21 (=b)-3-(5-Cloro -2- metoxifenil)-! .3-di-hidro-3-fluoro-7-(trifluorometi1)-2H-indol-2--ona P.F. 230-233°C; IV (KBr, cm'1) 3230, 1754, 1322, 1212, 1128; RMN *H (300 MHz, CDClj) δ 3,52 (3 H, s), 6,73 (1 H, d, J = 8,5 Hz), 7,08 (1 H, t, 8,1 Hz), 7,24 (1 H, s), 7,31 (1 H, dd, J = 8,5 e 2,1 Hz), 7,51 (1 H, d, J = 7,4 Hz), 7,62 (1 H, brd s), 7,76 (1 H, d, J = 2,1 Hz); RMN 19F (282 MHz, CDC13) δ -61,03 (7-CF3), -159,54 (3-F); EM m/z 358 [M-H)·].

Anal. calculada para C[6HioC1F4N02 : C, 53,43; H, 2,80; N, 3,89.

Encontrada . C, 53,09; H, 2,88; N, 3,78.

Exemplo 22 (±)-3-(5-Cloro-2-hidroxifenil)-1.3-di-hidro-2H-benzre]indol-2-ona P.F. 158 - 160°C, RMN *H (300 MHz, DMSO-dô) δ 5,17(1 H, brd s), 6,79 (l H, brd s), 7,13 (1 H, d, J = 6,5 Hz), 7,21 -7,24 (3 H, m), 7,29-7,31 (2 H, m), 7,83 (3 H, m), 10,63 (1 H, a); EM m/z 308 [M-H) ].

Anal. calculada para Ci8H,3ClN0;*l,25H20 : C, 65,07; H, 4,40; N, 4,22.

Encontrada : C, 64,70; H, 4,38; N, 4,08.

Exemplo 23 ('±V3-(5-Cloro-2-metoxifenil)-1.3-di-hidro-3-fluoro-5-metil-2H-indol-2-ona 50 P.F. 193-195°C; IV (KBr, cm'1) 3200, 1732, 1270, 1216; RMN 'H (300 MHz, CDC13) δ 2,22 (3 H, s), 3,53 (3 H, s), 6,74 (1 H, d, J = 8,4 Hz), 6,77 (1 H, d, J = 7,5 Hz), 6,87 (1 H, s), 7,07 (1 H, d, J = 8,0 Hz), 7,29 (1 H, dd, J = 8,8 e 2,5 Hz), 7,77(1 H, d, J = 2,5 Hz), 8,16 (1 H, brd s); RMN ,9F (282 MHz, CDC13) δ -157,38 (3-F); EM m/z 304 [M-H)’].

Anal. calculada para C16H13C1FN02: C, 62,86, H, 4,29, N, 4,58.

Encontrada : C, 62,67; H, 4,29; N, 4,49.

Exemplo 24 (±)-3-(5-cloro-2-metoxifenil)-1.3-di-hidro-3-fluoro-4.6-bis(trifluorometil)-2H-indol- -2-ona P.F. 262 - 264°C; IV (KBr, cm'1) 3200, 1750, 1316, 1280, 1202, 1140; RMN Ή (300 MHz, CDCI3) δ 3,38 (3 H, s), 6,63 (1 H, dd, J = 8,7 e 1,1 Hz), 7,21 (1 H, dd, J = 8,7 e 2,5 Hz), 7,29 (1 H, s), 7,33 (1 H, s), 7,63 (1 H, d, J = 2,1 Hz), 10,91 (1 H, brd s); RMN ,9F (282 MHz, CDC13) δ -60,00 (CF3), -63,40 (CF3), -163,42 (3-F), EM m /z 426 [M-H)-].

Anal. calculada para C17H9C1F7N02: C, 47,74; H, 2,12; N, 3,27.

Encontrada : C, 47,58; H, 2,18; N, 3,19.

Exemplo 25 (±)-3-(5-Cloro-2-metoxifenil)l .3-di-hidro-3.5-difluoro-2H-indol-2-ona P.F. 205-207°C; IV (KBr, cm·') 3200, 1732, 1272, 1218, 1 144; RMN 'H (300 MHz, CDCI3) δ 3,53 (3 H, s), 6,75 (1 H, dd, J = 8,8 e 1,1 Hz), 6,78 - 6,84 (2 H, m), 6,95-7,02 (1 H, m), 7,31 (I H, dd, J = 8,7 e 2,6 Hz), 7,75 (1 H, d, J = 2,1 Hz), 8,48 (1 H, brd s); RMN ,9F (282 MHz, CDC13) δ -119,53 (5-F), -158,81 (3-9; EM m/z 308 51 ί.

Anal. calculada para Ci5Hi0ClF2NO2: C, 58,17; H, 3,25; N, 4,52.

Encontrada : C, 58,02; H, 3,45; N, 4,41.

Exemplo 26 (±)-5-Bromo-3-(5-Cloro-3-metoxifenin-L3-di-hidro-3-fluoro-2H-indol-2-ona P,F, 206-208°C; IV (KBr, cm'1) 3200, 1738, 1300, 1262, 1216, 1126, 820; RMN 'H (300 MHz, CDC13) δ 3,53 (3 H, s), 6,75 (1 H, d, J = 8,2 Hz), 6,78 (1 H, d, J = 7,4 Hz), 7,17 (1 H, s), 7,32 (1 H, dd, J = 8,5 e 2,3 Hz), 7,41 10 (l H, d, J = 8,2 Hz), 7,74 (1 H, d, J = 2,4 HZ), 8,37(1 H, brd s); RMN ,9F (282 MHz, CDC13) δ -158,55 (3-F); EM m/z 368 [M-H) ].

Anal. calculada para C15H10BrClFNO2 : C,48,61; H, 2,72; N, 3,78.

Encontrada : C,48,71; H, 2,36; N, 3,58.

Exemplo 27 (±)-3-(5-Cloro-2-hidroxifenin-1.3-di-hidro-6-F4-(tnfluorometir)-fenil1-2H-indol-2- -ona P.F. 221-225°C; IV (KBr, cm·') 3278, 1686, 1326, 1276; RMN *H (300 MHz. DMSO-dé) δ 4,81 (1 H, s), 6,77 (1 H, d, J = 8,4 Hz), 7,04 (1 H, d, J = 7,6 Hz), 7,10 (1 H, d, J = 1,3 Hz), 7,14 (1 H, d, J = 2,6 Hz), 7,18 - 7,23 (3H, m), 7,77-7,84 (3 H, m), 9,83 (1 H, s), 10,64 (1 H, s); EM m/z 402 [M-H)’].

Anal. calculada para C2iH13ClF3NO2«0,25H2O : C, 61,78; H, 3,33; N, 3,43.

Encontrada : C, 61,97; H, 3,63; N, 3,62.

Exemplo 28 (±)-3-(5-Cloro-2-hidroxiíenil)-l -3-di-hidro-2H-indol-2-ona 52 52

P.F. 256-258°C; IV (KBr, cm'1) 3300, 3200, 1680, 820, 750; RMN *H (300 MHz, DMSO-d*,) δ 4,75 (1 H, s), 6,78 (1 H, d, J = 8,6 Hz), 6,85 (2 H, t, J = 8,1 Hz), 6,92 (1 H, d, J = 7,2 Hz), 7,08 (1 H, d, J = 2,5 Hz), 7,11-7,17 (2 H, m), 8,78 (1 H, s), 10,46 (1 H, s); RMN 13C (75 MHz, DMSO-4) δ 48,04, 109,09, 116,87, 121,31, 122,20, 123,72, 126,61, 127,64, 127,99, 130,01, 130,05, 142,78, 154,40, 177,17; EM m/z 260 (MFT).

Anal. calculada para Ci4Hi0C1NO2 : C, 64,75; H, 3,88; N, 5,39.

Encontrada : C, 64,63; H, 3,93; N, 5,23.

Exemplo 29 (±)-3-(5-Cloro-2-metoxifeniD-1.3-di-hidro-3-hidroxi-5-(trifluorometil)-2H-indol-2- -ona P.F. 218 - 220°C; IV (KBr, cm’1) 3350, 1730, 1325, 1260, 1150, 1120; RMN lH (300 MHz, DMSO-ck) δ 3,41 (3 H, s), 6,88 (1 H, s), 6,93 (1 H, d, J = 8,8 Hz), 7,01 (1 H, d, J = 8,1 Hz), 7,09 (1 H, d, J = 1,6 Hz), 7,35 (1 H, dd, J = 8,7 e 2,7 Hz), 7,56 (1 H, dd, J = 8,1 e 1,1 Hz), 7,80 (1 H, d, J = 2,7 Hz), 10,77(1 H, s); RMN 13C (75 MHz, DMSO-dé) δ 55,97, 74,26, 109,51, 113,61, 120,06, 120,11, 121,8 (m, CF3), 124,50, 126,37, 126,94, 128,72, 131,38, 133,10, 146,70, 154,31, 177,55; EM m/z 358 (MH').

Anal. calculada para C16HUC1F3N03 : C, 53,72; H, 3,10; N, 3,92.

Encontrada : C, 53,51; H, 3,00; N, 3,91.

Exemplo 30 (±)-5-Bromo-3-(5-cloro-2-metoxifenil)-1.3-di-hidro-3-hidroxi-2H-indol-2-ona P.F. 245 - 247°C; IV (KBr, cm'1) 3450-3200, 1712, 1246; RMN Ή (300 MHz. 53 DMSO-d<;) δ 3,42 (3 H, s), 6,79 (2 Η, d, J = 8,3 Hz), 6,91 (1 H, d, J = 7,1 Hz), 6,93 (1 H, s), 7,31-7,36 (2 H, m), 7,76 (1 H, d, J = 2,7 Hz), 10,50 (1 H, s); RMN 13C (75 MHz, DMSO-dé) 6 55,95, 74,60,111,25, 112,82, 113,49, 124,41, 126,25, 126,85, 128,59, 131 ,58, 131 ,68, 134,62, 142,34, 154,32, 177,12; EM m/z 370 (MH ).

Anal. calculada para CisHnBrCINCb : C, 48,88, H, 3,01; N, 3,80.

Encontrada : C, 49,52; H, 3,03; N, 3,58.

Exemplo 31 (=)-3-t5-Cloro-2-hidroxifenil~)-4.6-dicloro-1.3-di-hidro-2H-indol-2-ona P.F. 238-240°C; IV (KBr, cm1) 3400, 1694, 1318; RMN lH (300 MHz, DMSO-d6) δ 4,83 (1 H, brd s), 6,70 (1 H, brd s), 6,82 (1 H, s), 7,01 (1 H, s), 7,14 (1 H, dd, J = 8.7 e 2,4 Hz), 7,4 (1 H, brd s), 9,70 (1 H, brd s), 10,82 (1 H, s); EM m/z 328 (MH’).

Exemplo 32 (±')-3-(5-Cloro-2-metoxifenil)-1.3-di-hidro-3-hidroxi-6-iodo-2H-indol-2-ona P.F. 209-211°C; RMN 'H (300 MHz, DMSO-de) δ 3,42 (3 H, s), 6,62 (1 H, d, J = 7.7 Hz), 6,73 (1 H, s), 6,91 (1 H, d, J = 8,8 Hz), 7,13(1 H, d, J = 1,4 Hz), 7,18(1 H, dd, J = 7,7 e 1,4 Hz), 7,32 (1 H, dd, J = 8,8 e 2,7 Hz), 7,75 (1 H, d, J = 2,7 Hz), 10,46 (1 H, s), RMN 13C (75 MHz, DMSO-d*) δ 55,99, 74,34, 94,43, 113,48, 117,55, 124,36, 125,60, 126,76, 128,48, 129,99, 131,75, 132,06, 144,60, 154,33, 177,28; EM m/z 416 (MH").

Anal. calculada para QjH, ]CIINO3.0!25CH2Cl2 : C,41,93; H, 2,65; N, 3,21.

Encontrada : C,41,98; H, 2,73; N, 3,19.

Exemplo 33 (±)-3-(5-Cloro-2-hidroxifeni0-1.3-di-hidro-6-iodo-2H-indol-2-one 54 P.F. 199-203°C (dec); EM m/z 386 (MH").

Anal. calculada para CnH^CllNC^F^O : C, 39,04, H, 2,71; N, 3,14.

Encontrada : C, 38,82; H, 2,40; N, 3,04.

Exemplo 34 (±)-3-(5-Cloro-2-metoxifenin-l,3-di-hidro-3-hidroxi-2H-benzrflindol-2-ona P.F. 305 - 307°C (dec.) IV (KBr, cm'1) 3356, 1728, 1248; RMN 'H (300 MHz, DMSO-d*) Ô 3,32 (3 H, s), 6,79 (1 H, s), 6,89 (1 H, d, J = 8,7 Hz), 7,14 (1 H, s), 7,24 (1 H, 1, J = 7,0 Hz), 7,32 (1 H, d, J = 2,7 Hz), 7,35-7,41 (2 H, m), 7,75 (2 H, t, J = 8,5 Hz), 7,85 (1 H, d, J = 2,7 Hz), 10,71 (1 H, s); EM m/z 357 (M+NH4).

Exemplo 35 (±)-3-(5-Cloro-2-hidroxifenil)-1.3-di-hidro-3-hidroxi-2H-benzrflindol-2-ona P.F. 160 - 165°C (dec ); IV (KBr, cm'1) 3400, 1706; RMN 'H (300 MHz, CDCI3-CD3OD) 6 6,71 (1 H, dd, J = 7,4 e 1,4 Hz), 7,03 (1 H, s), 7,05 (1 H, d, J = 2,6 Hz), 7,12 (1 H, s), 7,22 (2 H, m), 7,29 (1 H, d, J = 8,1 Hz), 7,38 (2 H, t, J = 8,2 Hz), 7,64-7,69 (3 H, m); EM m/z 324 (M-H).

Exemplo 36 (±)-3-(5-Cloro-2-hidroxifenin-U 3-di-hidro-2H-benzrflindol-2-ona P.F. 254 - 256°C (dec.); IV (KBr, cm-1) 3300, 1690,1250, 740; RMN ’H (300 MHz, DMSO-df,) δ 4,88 (1 H, s), 6,75 (1 H, d, J = 8,6 Hz), 7,15 (1 H, s), 7,18 (l H, d, J = 2,7 Hz), 7,22-7,27 (2 H, m), 7,37 (I H, t, J = 8,1 Hz), 7,42 (1 H, s), 7,55 (2 H, t, J = 9,4 Hz), 9,75 (1 H, s), 10,77 (1 H, s); EM m/z 308 (M-H)'.

Exemplo 37 13SW+H 5-cloro-2-metoxifenil)-l .3-di-hidro-3-fluoro-6-(trifluorometil)-2//-indol- 0 / -2-ona

Separou-se o composto racémico do Exemplo 14 nos seus enantiómeros utilizando uma coluna analítica de HPLC Chiracel-OD (250 x 4,6 mm) utilizando hexanos / álcool isopropílico a 9:1 como solvente de eluição com um caudal de 0,75 mL/min. O método de detecção utilizou um detector HP 1090 UV com uma rede de diodos para um comprimento de onda de 220 nm. O primeiro enantiómero que foi eluído a partir da coluna tinha um tempo de retenção de cerca de 8,22 minutos e foi determinado como sendo o enantiómero (+) do composto do título. Numa escala preparativa, pode desdobrar-se até 1 g do racemato com uma única injecção sobre uma coluna preparativa de HPLC de Chiracel-OD 5X50 cm utilizando hexanos/álcool isopropílico a 9:1 com um caudal de 85 mL/minuto com uma separação da linha de base. A recristalização do enantiómero a partir do cloreto de metileno / hexanos proporcionou cristais apropriados para uma análise de raios X do cristal individual. Utilizando o espalhamento anómalo a partir do átomo de cloro, a configuração absoluta no átomo de carbono assimétrico foi estabelecida como sendo S para o enantiómero (+). O enantiómero era idêntico ao racemato com respeito ao RMN, espectro de massa, CCF e IV. Descobriu-se que o composto do título tinha um P.F. = 198 - 200°C e [cc]D25 + 149,84° (MeOH).

Exemplo 38 (3R)-(-)-(5-Cloro-2-metoxifenil)-L3-di-hidro-3-fluoro-6-(trifluorometil)-2//-indol- -2-ona

Separou-se o composto racémico do Exemplo 14 nos seus enantiómeros utilizando uma coluna analítica de HPLC Chiracel-OD (250 x 4,6 mm) utilizando 56 hexanos / álcool isopropílico a 9:1 como solvente de eluição para um caudal de 0,75 mL/min. O método de detecção utiliza um detector HP 1090 UV com uma rede de díodos para um comprimento de onda de 220 nm. A partir do processo experimental descrito no Exemplo 37, eluiu-se o segundo enantiómero a partir da segunda coluna para um tempo de retenção de cerca de 11,58 minutos e foi determinado como sendo o enantiómero (-) do composto do título. Numa escala preparativa, até 1 g de racemato pode ser desdobrado com uma única injecção de coluna de HPLC preparatva Chiracel-OD 5X50 cm utilizando hexanos / álcool isopropílico a 9:1 para um caudal de 85 mL/minuto com uma separação da linha de base. A recristalização do isómero individual a partir de cloreto de metileno/hexanos proporcionou cristais apropriados para uma análise de raios X do cristal individual. Utilizando o espalhamento anómalo a partir do átomo de cloro, a configuração absoluta no átomo de carbono assimétrico foi estabelecida como sendo R para o enantiómero (-). O enantiómero era idêntico ao racemato com respeito ao RMN, espectro de massa, CCF e IV. Verificou-se que o composto do título tinha um P.F. = 199 - 201 °C e [a]D25 - 149,43° (MeOH).

Claims (27)

1 "-“5 ,/ S REIVINDICAÇÕES 1. Composto de fórmula geral R1

na qual o símbolo R representa um átomo de hidrogénio ou de flúor ou um grupo hidroxi os símbolos R1, R2, R3 e R4 representam, cada um, independentemente, um átomo de hidrogénio ou de halogéneo ou um grupo alquilo Ci-C4, trifluorometilo, fenilo, p-metilfenilo ou p-trifluorometilfemlo, ou os símbolos R1 e R2, R2 e R3 ou R3 e R4 são ligados conjuntamente para formar um anel benzo fundido; o símbolo R5 representa um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo C[-C4; o símbolo R6 representa um átomo de cloro ou um grupo trifluorometilo; ou um seu sal, solvato ou hidrato não tóxico aceitável sob o ponto de vista farmacêutico.

2. Composto de acordo com a reivindicação 1 de fórmula geral R1

f? na qual os símbolos R1, R2, R3 e R4 representam, cada um, independentemente, um átomo de hidrogénio ou de halogéneo ou um grupo alquilo Ct_* ou tnfluorometilo e quando os símbolos R1 e R4 representam, cada um, um átomo de hidrogénio, os símbolos R2 e R3 representam, cada um, um grupo fenilo, p-metilfenilo ou p-tri-fluorometilfenilo; ou os símbolos R1 e R2, R2 e R3 ou R3 e R4 são ligados conjuntamente para ligar um anel benzo fundido; o símbolo R3 representa um átomo de hidrogénio ou um grupo metilo; e o símbolo R6 representa um átomo de cloro ou um grupo trifluorometilo; ou um seu sal, solvato ou hidrato não tóxico aceitável sob o ponto de vista farmacêutico.

3. Composto de acordo com a reivindicação 1 de fórmula geral R1

na qual os símbolos R1, R2, R3 e R4 representam, cada um, independentemente, um átomo de hidrogénio ou de halogéneo ou um grupo alquilo ou trifluorometilo, e quando os símbolos R1 e R4 representam, cada um, um átomo de hidrogénio, os símbolos R^ e R3 representam, cada um, um grupo fenilo, p-metilfenilo ou p-tri-fluorometilfemlo; ou os símbolos R1 e R2, R2 e R3 ou R3 e R4 são ligados conjuntamente para formar um anel benzo fundido; o símbolo R3 representa um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo C]_4; e o símbolo R*5 representa um átomo

3 de cloro ou um grupo trifluorometilo; ou um seu sal, solvato ou hidrato não tóxico aceitável sob o ponto de vista farmacêutico.

4. Composto de acordo com a reivindicação 1 de fórmula geral R1

IV na qual os símbolos R1, R“, R3 e R4 representam, cada um, independentemente, um átomo de hidrogénio ou de halogéneo ou um grupo alquilo Ci_» ou trifluorometilo e quando os símbolos R1 e R4 representam, cada um, um átomo de hidrogénio, os símbolo R2 e R3 representam, cada um, um grupo fenilo, p-metilfenilo ou p-tri-fluorometilfenilo; ou os símbolos R1 e R2, R^ e R3 ou R3 e R4 são ligados conjuntamente para formar um anel benzo fundido; o símbolo R" representa um grupo alquilo C,-C4, e o símbolo R6 representa um átomo de cloro ou um grupo trifluorometilo, ou um seu sal, solvato ou hidrato não tóxico aceitável sob o ponto de vista farmacêutico.

5. Composto de acordo com a reivindicação 2, em que os símbolos R1, R2, R3 e R4 representam, cada um, independentemente, um átomo de hidrogénio ou de halogéneo ou um grupo metilo ou trifluorometilo, ou um seu sal, solvato ou hidrato não tóxico aceitável sob o ponto de vista farmacêutico.

6. Composto de acordo com a reivindicação l, em que os símbolos R1, R3 e R4 representam, cada um, um átomo de hidrogénio e o símbolo R^ representa um átomo de halogéneo ou um grupo trifluorometilo ou fenilo; ou um seu sal, solvato ou hidrato não tóxico aceitável sob o ponto de vista farmacêutico.

7. Composto de acordo com a reivindicação 2, em que os símbolos R1 e R2, R2 e R3 ou R3 e R4 são unidos conjuntamente para formar uma anel benzo fundido, ou um seu sal, solvato ou hidrato não tóxico aceitável sob o ponto de vista farmacêutico.

8. Composto de acordo com a reivindicação 2, em que o símbolo R' representa um átomo de hidrogénio; ou um seu sal, solvato ou hidrato não tóxico aceitável sob o ponto de vista farmacêutico.

9. Composto de acordo com a reivindicação 2, em que o símbolo R6 representa um átomo de cloro, ou um seu sal, solvato ou hidrato não tóxico aceitável sob o ponto de vista farmacêutico.

10. Composto de acordo com a reivindicação 3, em que os símbolos R1, R*, R3 e R4 representam, cada um, independentemente, um átomo de hidrogénio ou de halogéneo ou um grupo metilo ou trifluorometilo, ou um seu sal, solvato ou hidrato não tóxico aceitável sob o ponto de vista farmacêutico.

11. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que os símbolos R1, R3 e R4 representam, cada um, um átomo de hidrogénio e o símbolo R" representa um átomo de halogéneo ou um grupo trifluorometilo ou fenilo: ou um seu sal, solvato ou hidrato não tóxico aceitável sob o ponto de vista farmacêutico.

12. Composto de acordo com a reivindicação 3, em que os símbolos R1 e R2, R2 e R3 ou R3 e R4 são unidos conjuntamente para formar um anel benzo fundido; ou um seu sal, solvato ou hidrato não tóxico aceitável sob o ponto de vista 5 farmacêutico.

13. Composto de acordo com a reivindicação 3, em que o símbolo R5 representa um átomo de hidrogénio; ou um seu sal, solvato ou hidrato não tóxico aceitável sob o ponto de vista farmacêutico.

14. Composto de acordo com a reivindicação 3, em que o símbolo R6 representa um átomo de cloro; ou um seu sal, solvato ou hidrato não tóxico aceitável sob o ponto de vista farmacêutico.

15. Composto de acordo com a reivindicação 4, em que os símbolos R1, R2, R3 e R4 representam, cada um, independentemente, um átomo de hidrogénio ou de halogéneo, ou um grupo metilo ou trifluorometilo; ou um seu sal, solvato ou hidrato não tóxico aceitável sob o ponto de vista farmacêutico.

16. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que os símbolos R1, R3 e R4 representam, cada um, um átomo de hidrogénio e o símbolo R2 representa um átomo de halogéneo ou um grupo trifluorometilo ou fenilo; ou um seu sal, solvato ou hidrato não tóxico aceitável sob o ponto de vista farmacêutico.

17. Composto de acordo com a reivindicação 4, em que os símbolos R1 e R2, R2 e R3 ou R3 e R4 são ligados conjuntamente para formar um anel benzo fundido; ou um seu sal, solvato ou hidrato não tóxico aceitável sob o ponto de vista farmacêutico.

18. Composto de acordo com a reivindicação 4, em que o símbolo R'' representa um grupo metilo, ou um seu sal, solvato ou hidrato não tóxico aceitável sob o ponto de vista farmacêutico.

19. Composto de acordo com a reivindicação 4, em que o símbolo R6 / Ν. / j: 6y representa um átomo de cloro; ou um seu sal, solvato ou hidrato não tóxico aceitável sob o ponto de vista farmacêutico.

20. Composto de acordo com a reivindicação 1, escolhido no grupo que consiste em : (±)-3-(5 - cloro-2-metoxifenil)-1,3-di-hidro-3-hidroxi-6-(trifluorometil)-2//-indol-2--ona; (±)-3-(5 - cloro-2-metoxifenil)-l ,3-di-hidro-6-(trifluorometil)-2//-indol-2-ona; (±)-3-(5 - cloro-2-hidroxifenil)-l ,3-di-hidro-3-hidroxi-6-(trifluorometil)-2//-indol-2--ona; (±)-3-(5-cloro-2-hidroxifenil)-l,3-di-hidro-6-(trifluorometil)-2H-indol-2-ona; (±)-3-(5-cloro-2-hidroxifenil)-4,6-dicloro-l,3-di-hidro-3-hidroxi-2H-indol-2-ona; (±)-3-(5-cloro-2-hidroxifenil)-l,3-di-hidro-3-hidroxi-7-(trifluorometil)-2H-indol-2- -ona; (±)-3-(5-cloro-2-hidroxifenil)-l,3-di-hidro-3-hidroxi-4-trifluorometil)-2H-indol-2- -ona; (±)-l,3-di-hidro-3-hidroxi-3-[2-hidroxi-5-(trifluorometil)-fenil]-6-(trifluorometil)- -2H-indol-2-ona; (±)-3-(5-cloro-2-hidroxifenil)-l,3-di-hidro-3-hidroxi - 4,6 - bis (trifluorometil) - 2H--indol-2-ona; (-)-3-(5-cloro -2- metoxifenil)-l,3-di-hidro-3-hidroxi-6-(trifluorometil)-2H-indol-2--ona; (+)-3-(5-cloro-2-hidroxifenil)-1,3-di-hidro-3-hidroxi-6-(trifluorometil) -2H- indol-2--ona;

(-)-3-(5-cloro-2-hidroxiferiil)-1,3-di-hidro-3-hidroxi-6-(trifluorometil) -2H- indol-2--ona; (±)-3-(5-cloro-2-metoxifenil)-l,3-di-hidro-3-fluoro-6-(trifluorometil) - 2H - indol-2--ona; (3S)-(-i-)-(5 - cloro-2-metoxifenil)-1,3-di-hidro-3-fluoro-6-(trifluorometil)-2H-indol--2-ona; (3R)-(-)-(5-cloro-2-metoxifenil)-l,3-di-hidro-3-fIuoro-6-(trifluorometil)-2H-indol-2- -ona; (±)-3-(5-cloro-2-hidroxifenil)-l,3-di-hidro-3-hidroxi-2H-benz[g]indol-2-ona; (±)-3-(5-cloro-2-hidroxifenil)-l,3-di-hidro-6-fenil-2H-indol-2-ona; (±)-3-(5-cloro-2-hidroxifenil)-l,3-di-hidro-2H-benz[g]indol-2-ona; (±)-3-(5-cloro-2-metoxifenil)-l,3-di-hidro-3-fluoro-6-fenil-2H-indol-2-ona, (±)-3-(5-cloro-2-metoxifenil)-l,3-di-hidro-3-fluoro-6-iodo-2H-indol-2-ona; (±)-3-(5-cloro-2-hidroxifenil)-l:,3-di-hidro-6-(4-metilfenil)-2H-indol-2-ona; (±)-3-(5 - cloro -2-metoxifenil)-l,3-di-hidro-3-fluoro-7-(trifluorometil)-2H-indol-2--ona; (±)-3-(5-cloro-2-hidroxifenil)-l,3-di-hidro-2H-benz[e]indol-2-ona; (=)-3 -(5 -cloro-2-metoxi fenil)-1,3 -di-hidro-3 -fluoro-5-metil-2 H-indol -2-ona; (±)-3-(5 - cloro - 2 - metoxifenil) -1,3-di-hidro-3-fluoro-4,6-te-(trifluorometil)-2H--indol-2-ona; (±)-5-bromo-3-(5-cloro-2-metoxifenil)-L3-di-hidro-3-fluoro-2H-indol-2-ona; (±)-3-(5 - cloro -2-hidroxifenil)-l,3-di-hidro-6-[4-(trifluorometil)-fenil]-2H-indol-2--ona; 8 / , £V; ,/·

(±)-3-(5-cloro-2-hidroxifenil)-l,3-di-hidro-2H-indol-2-ona; (±)-5-bromo-3-(5-cloro-2-metoxifenil)-l,3-di-hidro-3-hidroxi-2H-indol-2-ona; (±)-3-(5-cloro-2-hidroxifenil)-4,6-dicloro-l,3-di-hidro-2H-indol-2-ona, (±)-3-(5-cloro-2-metoxifenil)-l,3-di-hidro-3-hidroxi-6-iodo-2H-indol-2-ona; (±)-3-(5-cloro-2-hidroxifenil)-l,3-di-hidro-6-iodo-2h-indol-2-ona; (±)-3-(5-cloro-2-metoxifenil)-l,3-di-hidro-3-hidroxi-2H-benz[f]indol-2-ona, (±)-3-(5-cloro-2-hidroxifenil)-l,3-di-hidro-3-hidroxi-2H-benz[f]indol-2-ona; e (±)-3 -(5 -cloro-2-hidroxifen il)-1,3 -di -hidro-2 H-benzo[f] indol -2 -ona.

21. Composto de acordo com a reivindicação 20 escolhido do grupo que consiste em : (±)-3-(5-cloro-2-hidroxifenil)-l,3-di-hidro-6-(trifluorometil)-2//-indol-2-ona; (+)-3-(5 - cloro-2-hidroxifeml)-l ,3-di-hidro-3-hidroxi-6-(trifluorometil)-2//-indol-2--ona; (±)-3-(5 - cloro - 2-metoxifenil)-l,3-di-hidro-3-fluoro-6-(trifluorometil)-2/7-indol-2--ona, (±)-3-(5-cloro-2-hidroxifeml)-l,3-di-hidro-3-hidroxi-2//-benz[g]mdol-2-ona, (±)-3-(5-cloro-2-hidroxifenil)-1,3-di-hidro-6-fenil-2//-indol-2-ona; e (±)-3-(5-cloro-2-hidroxifenil)-l,3-di-hidro-2//-benz[e]indol-2-ona,

22. Composto de acordo com a reivindicação 1 que é a (3S)-(+)-(5-cloro--2-metoxifenil)-l:,3-di-hidro-3-fluoro-6-(trifluorometil)-2//-indol-2-ona.

23. Composto de acordo com a reivindicação 1 que é a (3R)-(-)-(5-cloro--2-metoxifenil)-l,3-di-hidro-3-fluoro-6-(tnfluorometil)-2//-indol-2-ona.

24. Composição farmacêutica para o tratamento de perturbações que 9 reagem aos abridores dos canais do potássio activados pelo cálcio de larga condutância que compreendem uma quantidade eficaz sob o ponto de vista terapêutico do composto tal como definido em uma qualquer das reivindicações 1 a 23 em associação com um adjuvante, veículo ou diluente aceitável sob o ponto de vista farmacêutico.

25. Composto de acordo com uma qualquer das reivindicações 1 a 23 ou uma composição de acordo com a reivindicação 24, para utilização no tratamento de perturbações que reagem aos abridores dos canais do potássio activados pelo cálcio de larga condutância.

26. Composto de acordo com uma qualquer das reivindicações 1 a 23 ou uma composição de acordo com a reivindicação 24, para utilização no tratamento da isquémia, convulsões, asma, incontinência urinária ou danos cerebrais traumáticos.

27. Composto de acordo com uma qualquer das reivindicações 1 a 23 ou uma composição de acordo com a reivindicação 24 para utilização no tratamento da isquémia cerebral. Lisboa, 22 de Agosto de 2000

RESUMO “DERIVADOS DE OXINDOL 3-SUBSTITUÍDOS COMO MODULADORES DO CANAL DO POTÁSSIO” Proporcionam-se novos derivados de oxindol 3-fenil-substituídos de fórmula geral

R1 R2 R» na qual o símbolo R representa um átomo de hidrogénio ou de flúor ou um grupo hidroxi, os símbolos R1, R2, R3 e R4 representam, cada um, independentemente, um átomo de hidrogénio ou de halogéneo ou um grupo alquilo C1-C4, trifluorometilo, fenilo, p-metil-fenilo ou p-trifluorometilfneilo; ou os símbolos Rl e R2, R2 e R3 ou R3 e R4 são ligados conjuntamente para formar um anel benzo fundido; o símbolo R" representa um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo Ci-C4; e o símbolo R6 representa um átomo de cloro ou um grupo trifluorometilo; ou um seu sal, solvato ou hidrato não tóxico aceitável sob o ponto de vista 2 farmacêutico, os quais são abridores dos canais do potássio activados pelo cálcio de larga condutância e são úteis no tratamento de perturbações que reagem à abertura dos canais do potássio. Lisboa, 22 de Agosto de 2000