PT1944322E - Tratamento de distúrbios relacionados com tnf-alfa - Google Patents

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PT1944322E
PT1944322E PT71504427T PT07150442T PT1944322E PT 1944322 E PT1944322 E PT 1944322E PT 71504427 T PT71504427 T PT 71504427T PT 07150442 T PT07150442 T PT 07150442T PT 1944322 E PT1944322 E PT 1944322E
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PT
Portugal
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tnf
quot
antibody
disease
disorder
Prior art date
Application number
PT71504427T
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English (en)
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Jochen G Salfeld
Subhashis Banerjee
Lori K Taylor
Clive E Spiegler
Daniel Edward Tracey
Eliot Keith Chartash
Rebecca S Hoffman
William T Barchuk
Philip Yan
Anwar Murtaza
Steven Fischkoff
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Abbvie Biotechnology Ltd
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Description

DESCRIÇÃO
"Tratamento de distúrbios relacionados com TNF-alfa" PEDIDOS RELACIONADOS
Este pedido reivindica prioridade ao Pedido Provisório U.S. No. de Série 60/397275 apresentado anteriormente, a 19 de Julho de 2002. Este pedido reivindica também prioridade ao Pedido Provisório U.S. No. de Série 60/411081 apresentado anteriormente, a 16 de Setembro de 2002, e o Pedido Provisório U.S. No. de Série 60/417490 apresentado anteriormente, a 10 de Outubro de 2002. Este pedido reivindica também prioridade ao Pedido Provisório U.S. No. de Série 60/455777 anteriormente apresentado, a 18 de Março de 2003. Os quatro pedidos provisórios acima referidos podem ser acedidos através do arquivo de US 2004-0136990 AI. Além disso, este pedido está relacionado com as Patentes U.S. Nos. 6090382, 6258562, e 6509015. Este pedido está também relacionado com Pedido de Patente U.S. No. de Série 09/801185, apresentado a 7 de Março de 2001, que pode ser acedido através do ficheiro US 2007-0249813 Al; Pedido de Patente U.S. No. de Série 10/302356, apresentado a 22 de Novembro de 2002; que pode ser acedido através do ficheiro US 2006-0024293 Al; Pedido de Patente U.S. No. de Série 10/163657, apresentado a 2 de Junho de 2002 que pode ser acedido através do ficheiro US 2012-0177596 Al; e Pedido de Patente U.S. No. de Série 10/133715, apresentado a 26 de Abril de 2002 que pode ser acedido através do ficheiro WO 2004/004633 A2.
ANTECEDENTES DO INVENTO
As citocinas, tais como interleucina-1 (IL-1) e o factor de necrose tumoral (TNF), são moléculas produzidas por uma variedade de células, tais como monócitos e macrófagos, que foram identificadas como mediadores de processos inflamatórios. As citocinas, incluindo o TNF, regulam a intensidade e a duração da resposta inflamatória que ocorre em resultado de uma lesão ou infecção. O TNF (éambeferido como TNF) foi implicado na fisiopatologia de uma variedade de doenças e distúrbios humanos, incluindo sepsia, infecções, doenças autoimunes, rejeição de transplantes e doença de enxerto-versus-hospedeiro (ver p. ex., Moeller et al., (1990) Cytokine 2:162; Patente U.S. No. 5231024 para Moeller et al.; Publicação de Patente Europeia No. 260610 BI por Moeller, A. et al. ; Vasilli (1992) Annu. Rev. Immunol. 10:411; Tracey e Cerami (1994) Annu. Rev. Med. 45:491). R.E. Schopf et al.·. "Treatment of psoriasis with the chimeric monoclonal antibody against tumor necrosis factor alpha, infliximab", JOURNAL OF THE AMERICAN ACADEMY OF DERMATOLOGY, C.V. MOSBY, ST. LOUIS, MO, US, vol. 46, no. 6, 1 de Junho de 2002 divulga um ensaio clinico aberto durante ο qual os pacientes receberam infliximab, 5 mg/kg, por via intravenosa nas semanas 0, 2, e 6.
SUMÁRIO DO INVENTO
Existe a necessidade de tratar distúrbios relacionados com TNF , onde a atividade de TÉFprejudicial, de um modo seguro e eficaz. O presente invento refere-se a anticorpos para utilização em métodos para tratamento seguro e eficaz de distúrbios relacionados com TNF onde a atividade de TNF é prejudicial. O presente invento proporciona um anticorpo humano de neutralização anti-TNF , de elevada afinidade, isolado, para utilização em tratamento de psoriase de placas crónica moderada a grave num sujeito através da administração do anticorpo por via subcutânea ao sujeito a uma dose de 40 mg a cada duas semanas, de modo a que a referida psoriase de placas crónica moderada a grave seja tratada, em que o anticorpo anti-TNF huménadalimumab. É também aqui descrito um método de tratamento de um distúrbio relacionado com TNF num sujeito, compreendendo a administração ao sujeito de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um anticorpo de TNF de neutra$i0a de elevada afinidade, de modo a que o referido distúrbio seja tratado. O distúrbio relacionado com TNF pode ser uma espondiloartropatia, um distúrbio pulmonar, um distúrbio coronário, um distúrbio metabólico, anemia, dor, um distúrbio hepático, um distúrbio da pele, um distúrbio das unhas, ou vasculite. Noutra concretização, o distúrbio relacionado com TNF é caquexia relacionada com a idade, doença de Alzheimer, edema cerebral, lesão inflamatória cerebral, síndroma da fadiga crónica, dermatomiosite, reações a fármacos, edema em e/ou à volta da espinal-medula, febres periódicas familiares, síndroma de Felty, fibrose, glomerulonefrites (p. ex. glomerulonefrite pós-estreptocóccica ou nefropatia de IgA) , desprendimento de próteses, poliangiite microscópica, doença do tecido conjuntivo mista, mieloma múltiplo, cancro e caquexia, distúrbio de múltiplos órgãos, síndroma mielo-displásico, osteólise de orquitismo, pancreatite, incluindo abscesso agudo, crónico e pancreático, doença periodontal, polimiosite, insuficiência renal progressiva, pseudogota, piodermite gangrenosa, policondrite recidivante, doença cardíaca reumática, sarcoidose, colangite esclerosante, acidente vascular cerebral, reparação de aneurisma da aorta torácico-abdominal (TAAA), síndroma periódica associada ao receptor de TNF (TRAPS), sintomas relacionados com a vacina da Febre Amarela, doenças inflamatórias associadas ao ouvido, inflamação crónica do ouvido, ou inflamação pediátrica do ouvido. 0 distúrbio relacionado com TNF p<tdffiloém ser um distúrbio relacionado com doença de Crohn, artrite juvenil/doença de Still (JRA), uveíte, ciática, prostatite, endometriose, neovascularização da coroideia, lúpus, síndroma de Sjogren, e degeneração macular húmida. 0 anticorpo aqui divulgado é um anticorpo humano isolado, ou uma porção deste de ligação ao antigénio, que se dissocia do TNF humano com umadéC lxlCú8 M ou menos e uma constante de velocidade K0ff de lxlCú3 s~3 ou menos, ambas determinadas através de ressonância de plasmão de superfície, e neutraliza a citotoxicidade de TNF humano num ensàinovitro padrão de L929 com uma IC50 de lxlCú7 M ou menos. 0 anticorpo aqui divulgado é um anticorpo humano isolado, ou uma porção de ligação ao antigénio deste que se dissocia do TNF humano com uma constante de velocidade Me lxlCú3 s~3 ou menos, tal como determinado através de ressonância de plasmão de superfície; tem um domínio CDR3 de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 3, ou modificada a partir de SEQ ID NO: 3 através de uma única substituição de alanina na posição 1, 4, 5, 7 ou 8 ou através de uma a cinco substituições de aminoácidos conservativas nas posições 1, 3, 4, 6, 7, 8 e/ou 9; e tem um domínio CDR3 de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 4, ou modificada a partir de SEQ ID NO: 4 através de uma única substituição de alanina na posição 2, 3, 4, 5, 6, 8, 9, 10 ou 11 ou através de uma a cinco substituições de aminoácidos conservativas nas posições 2, 3, 4, 5, 6, 8, 9, 10, 11 e/ou 12. O anticorpo aqui divulgado é um anticorpo humano isolado, ou uma porção de ligação ao antigénio deste, com uma região variável de cadeia leve (LCVR) compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 1 e uma região variável de cadeia pesada (HCVR) compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 2.
Na concretização do invento, o anticorpo é D2E7, também referido como HUMIRA® ou adalimumab. É também aqui descrito um método de tratamento de um sujeito sofrendo de um distúrbio relacionado com TNF compreendendo a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um anticorpo de TNF , ou um fragmento de ligação ao antigénio deste, ao sujeito, em que o anticorpo se dissocia do TNF humano com umadéC 1χ10~8 M ou menos e uma constante de velocidade K0ff de lxlCú3 s~3 ou menos, ambas determinadas através de ressonância de plasmão de superfície, e neutraliza a citotoxicidade do TNF humano num ensaio in vitro padrão de L929 com uma ICso de lxlCh7 M ou menos, de modo a que o referido distúrbio relacionado com TNF seja tratado. É também aqui descrito um método de tratamento de um sujeito sofrendo de um distúrbio relacionado com TNF , compreendendo a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um anticorpo de TNF , ou um fragmento de ligação ao antigénio deste, em que o anticorpo se dissocia do TNF humano com uma constante de velocidads He lxlCú3 s~3 ou menos, tal como determinado através de ressonância de plasmão de superfície; tem um domínio CDR3 de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 3, ou modificada a partir de SEQ ID NO: 3 através de uma única substituição de alanina na posição 1, 4, 5, 7 ou 8 ou através de uma a cinco substituições de aminoácidos conservativas nas posições 1, 3, 4, 6, 7, 8 e/ou 9; e tem um domínio CDR3 de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 4, ou modificada a partir de SEQ ID NO: 4 através de uma única substituição de alanina na posição 2, 3, 4, 5, 6, 8, 9, 10 ou 11 ou através de uma a cinco substituições de aminoácidos conservativas nas posições 2, 3, 4, 5, 6, 8, 9, 10, 11 e/ou 12, de modo a que o referido distúrbio relacionado com TNF seja tratado. É também aqui descrito um método de tratamento de um sujeito sofrendo de um distúrbio relacionado com TNF , compreendendo a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um anticorpo de TNF , ou um fragmento de ligação ao antigénio deste, com uma região variável de cadeia leve (LCVR) compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 1 e uma região variável de cadeia pesada (HCVR) compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 2, de modo a que o referido distúrbio relacionado com TNF seja tratado. O anticorpo de TNF , ou f ragment cçtfe liga ao antigénio deste, pode ser D2E7. O anticorpo de TNF pode ser administrado com pelo menos um agente terapêutico adicional. É também aqui descrito um método para inibição da atividade de TNF humano num sujeito humano sofrendo de um distúrbio relacionado com TNF , compreendendo a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um anticorpo de TNF , ou um fragmento de $ãga ao antigénio deste, ao sujeito, em que o anticorpo se dissocia do TNF humano com uma
Kd de lxlCh8 M ou menos e uma constante de velocidade K0ff de lxlCh3 s~3 ou menos, ambas determinadas através de ressonância de plasmão de superfície, e neutraliza a citotoxicidade do TNF humano num ensaiovitro padrão de L929 com uma IC50 de lxlCh7 M ou menos. O anticorpo de TNF , ou fragmento de <£ãga ao antigénio deste, pode ser D2E7. É também aqui descrito um método de tratamento de um sujeito sofrendo de um distúrbio relacionado com TNF , compreendendo a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de D2E7, ou um fragmento de ligação ao antigénio deste, ao sujeito, de modo a que a doença seja tratada. É também aqui descrito um método de tratamento de um sujeito sofrendo de um distúrbio relacionado com TNF , compreendendo a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de D2E7, ou um fragmento de ligação ao antigénio deste, ao sujeito, de modo a que a doença seja tratada.
Quando D2E7 (também referido como HUMIRA® ou adalimumab) é administrado, pode ser administrado com pelo menos um agente terapêutico adicional. É também aqui descrito um estojo compreendendo uma composição farmacêutica compreendendo um anticorpo de TNF , ou uma porção de ligação ao antigénio deste, e um transportador farmaceuticamente aceitável; e instruções para administração a um sujeito da composição farmacêutica de anticorpo de TNF para tratamento de um sujeito que esteja a sofrer de um distúrbio relacionado com TNF . 0 anticorpo de TNF , ou uma porção de ligação ao antigénio deste, pode ser D2E7 (HUMIRA®) .
DESCRIÇÃO DETALHADA DO INVENTO São aqui descritos métodos de tratamento de distúrbios relacionados com TNF em que a atividade de TNF , p. ex., a atividade do TNF humano, é prejudicial. Os métodos incluem a administração ao sujeito de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um inibidor de TNF , de modo a que o âibio relacionado com TNF seja tratado. São também aqui descritos métodos em que o inibidor de TNF é administrado em combinação com outro agente terapêutico para tratar um distúrbio relacionado com TNF . 0 tratamento com anticorpos e fragmentos de anticorpo, e composições farmacêuticas compreendendo um inibidor de TNF , e um transportador farmaceuticamente aceitável para o tratamento de distúrbios relacionados com TNF ão teambém descritos.
Definições
Para que o presente invento possa ser mais facilmente compreendido, certos termos são primeiro definidos. 0 termo "TNF humano" (aqui abreviado como hTNF , 01 simplesmente hTNF), tal como aqui utilizado, destina-se a referir um citocina humana que existe como uma forma seqregada de 17 kDa e uma forma associada à membrana de 26 kDa, cuja forma biologicamente ativa é composta por um trimero de moléculas ligadas de forma não covalente de 17 kDa. A estrutura de hTNF é melhor descrita em, por exemplo, Pennica, D., et ai., (1984) Nature 312:724-729; Davis, J.M., et al. , (1987)
Biochemistry 26:1322-1326; e Jones, E.Y., et al. , (1989) Nature
338:225-228. 0 termo TNF humano destina-se a incluir TNF humano recombinante (rhTNF ) , que pode ser preparado aé^av de métodos de expressão recombinante padrão ou adquirido comercialmente (R & D Systems, No. de Catálogo 210-TA, Minneapolis, MN). 0 TNF é também referido como TNF.
0 termo "inibidor de TNF " inclui agentes que inibem TNF
Exemplos de inibidores de TNF incluem etanercept (EnB,rel
Amgen), infliximab (Remicade®, Johnson and Johnson), anticorpo monoclonal anti-TNF humano (D2E7/HUMIRA®, Abbott
Laboratories), CDP 571 (Celltech) , e CDP 870 (Celltech) e outros compostos que inibem a atividade de TNF , de modo a que quando administrado a um sujeito sofrendo de ou em risco de sofrer de um distúrbio em que a atividade de TNF é prejudicial, o distúrbio seja tratado. Um inibidor de TNF pode ser um composto, excluindo etanercept e infliximab, que iniba a atividade de TNF . Os inibidores de TNF podem sei utilizados para tratar um distúrbio relacionado com TNF , tal como descrito em mais detalhe na secção II. O inibidor de TNF , excluindo etanercept e infliximab, pode ser utilizado para tratar um distúrbio relacionado com TNF . O inibidor de TNF , excluindo etanercept e infliximab, pode ser utilizado para tratar espondilite anquilosante. O termo inclui também cada um dos anticorpos humanos anti-TNF eçpes de anticorpo aqui descritas bem como os descritos nas Patentes U.S. Nos. 6090382; 6258562; 6509015, e nos Pedidos de Patente U.S. No. de Série 09/801185, que pode ser acedido através do ficheiro de US 2007-0249813 Al, e 10/302356, que pode ser acedido através do ficheiro de US 2006-0024293 Al. O termo "anticorpo", tal como aqui utilizado, destina-se a referir moléculas de imunoglobulina constituídas por quatro cadeias polipeptídicas, duas cadeias pesadas (H) e duas cadeias leves (L) interligadas através de ligações dissulfureto. Cada cadeia pesada é constituída por uma região variável de cadeia pesada (aqui abreviada como HCVR ou VH) e uma região constante de cadeia pesada. A região constante de cadeia pesada é constituída por três domínios, CHI, CH2 e CH3. Cada cadeia leve é constituída por uma região variável de cadeia leve (aqui abreviada como LCVR ou VL) e uma região constante de cadeia leve. A região constante de cadeia leve é constituída por um domínio, CL. As regiões VH e VL podem ser ainda subdivididas em regiões de hipervariabilidade, designadas regiões determinantes de complementaridade (CDR), intercaladas com regiões que são muito mais conservadas, designadas regiões estruturais (FR). Cada VH e VL é constituída por três CDR e quatro FR, dispostas do terminal amino para o terminal carboxilo na seguinte ordem: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4. Os anticorpos do invento são descritos em maior detalhe nas Patentes U.S. Nos. 6090382, 6258562, e 6509015, e nos Pedidos de Patente U.S. No. de Série 09/801185, que pode ser acedido através do ficheiro de US 2007-0249813 Al, e 10/302356, que pode ser acedido através do ficheiro de US 2006-0024293 Al. O termo "porção de ligação ao antigénio" de um anticorpo (ou simplesmente "porção de anticorpo"), tal como aqui utilizado, refere-se a um ou mais fragmentos de um anticorpo que mantêm a capacidade para se ligar especificamente a um antigénio (p. ex., hTNF ) . Foi demonstrado que a função de ligação ao antigénio de um anticorpo pode ser realizada através de fragmentos de um anticorpo inteiro. Exemplos de fragmentos de ligação englobados dentro do termo "porção de ligação ao antigénio" de um anticorpo incluem (i) um fragmento Fab, um fragmento monovalente consistindo nos domínios VL, VH, CL e CHI; (ii) um fragmento F(ab')2, um fragmento bivalente compreendendo dois fragmentos Fab ligados através de uma ponte dissulfureto na região charneira; (iii) um fragmento Fd consistindo nos domínios VH e CHI; (iv) um fragmento Fv consistindo nos domínios VL e VH de um único braço de um anticorpo, (v) um fragmento dAb (Ward et al. , (1989) Nature 341:544-546), que consiste num domínio VH; e (vi) uma região determinante de complementaridade isolada (CDR). Além disso, embora os dois domínios do fragmento Fv, VL e VH, serem codificados por dois genes separados, eles podem ser unidos, utilizando métodos recombinantes, através de um ligador sintético que lhes permita serem produzidos como uma única cadeia proteica em que as regiões VL e VH emparelham para formar moléculas monovalentes (conhecidas como Fv de cadeia simples (scFv) ; ver p. ex., Bird et ai., (1988) Science 242:423-426; e Huston et al., (1988) Proc. Natl. Acad. Sei. USA 85:5879-5883). Pretende-se que tais anticorpos de cadeia simples estejam também incluídos no termo "porção de ligação ao antigénio" de um anticorpo. Outras formas de anticorpos de cadeia simples, tais como diacorpos estão também englobadas. Os diacorpos são anticorpos bivalentes, biespecíficos nos quais os domínios VH e VL são expressos numa única cadeia polipeptídica, mas utilizando um ligador que seja demasiado curto para permitir o emparelhamento entre os dois domínios na mesma cadeia, forçando assim os domínios a emparelhar com domínios complementares de outra cadeia e a criar dois locais de ligação ao antigénio (ver p. ex., Holliger, P., et ai., (1993) Proc. Natl. Acad. Sei. USA 90:6444-6448; Poljak, R.J., et al., (1994) Structure 2:1121-1123) . As porções de anticorpo são descritas em maior detalhe nas Patentes U.S. Nos. 6090382, 6258562, 6509015, e nos Pedidos de Patente U.S. No. de Série 09/801185, que pode ser acedido através do ficheiro de US 2007-0249813 Al e 10/302356, que pode ser acedido através do ficheiro de US 2006-0024293 Al.
Os fragmentos de ligação são produzidos através de técnicas de ADN recombinante, ou através de clivagem enzimática ou química de imunoglobulinas intactas. Fragmentos de ligação incluem Fab, Fab', F(ab')2, Fabc, Fv, cadeias simples e anticorpos de cadeia simples. Excepto as imunoglobulinas ou anticorpos "biespecíficos" ou "bifuncionais", entenda-se que uma imunoglobulina ou anticorpo possui cada um dos seus locais de ligação idênticos. Um anticorpo "biespecífico" ou "bifuncional" é um anticorpo híbrido artificial possuindo dois pares diferentes de cadeia pesada/leve e dois locais de ligação diferentes. Os anticorpos biespecíficos podem ser produzidos através de uma variedade de métodos incluindo fusão de hibridomas ou ligação de fragmentos Fab'. Ver, p. ex., Songsivilai & Lachmann, Clin. Exp. Immunol. 79:315-321 (1990); Kostelny et al. , J. Immunol. 148:1547-1553 (1992) .
Uma "substituição de aminoácidos conservativa", tal como aqui utilizado, é uma em que um resíduo de aminoácido é substituído por outro resíduo de aminoácido possuindo uma cadeia simples semelhante. As famílias de resíduos de aminoácidos possuindo cadeias laterais semelhantes foram definidas na técnica, incluindo cadeias laterais básicas (p. ex., lisina, arqinina, histidina), cadeias laterais ácidas (p. ex., ácido aspártico, ácido glutâmico), cadeias laterais polares sem carga (p. ex., glicina, asparagina, glutamina, serina, treonina, tirosina, cisteína), cadeias laterais não polares (p. ex., alanina, valina, leucina, isoleucina, prolina, fenilalanina, metionina, triptofano), cadeias laterais beta-ramifiçadas (p. ex., treonina, valina, isoleucina) e cadeias laterais aromáticas (p. ex., tirosina, fenilalanina, triptofano, histidina). 0 termo "anticorpo humano", tal como aqui utilizado, destina-se a incluir anticorpos possuindo regiões variáveis e constantes derivadas de sequências de imunoglobulina da linha germinativa humana. Os anticorpos humanos podem incluir resíduos de aminoácidos não codificados por sequências de imunoglobulina da linha germinativa humana (p. ex., mutações introduzidas através de mutagénese aleatória ou dirigida ao local in vitro ou através de mutação somática in vivo) , por exemplo nas CDR e em particular na CDR3. No entanto, o termo "anticorpo humano", tal como aqui utilizado, não se destina a incluir anticorpos em que sequências de CDR derivadas da linha germinativa de outra espécie de mamífero, tal como ratinho, foram enxertadas em sequências estruturais humanas. 0 termo "anticorpo humano recombinante", tal como aqui utilizado, destina-se a incluir todos os anticorpos humanos que sejam preparados, expressos, gerados ou isolados por meios recombinantes, tais como anticorpos expressos utilizando um vector de expressão recombinante transfectado para uma célula hospedeira (descrita mais abaixo), anticorpos isolados a partir de uma biblioteca combinatória de anticorpos humanos recombinantes (descrita mais abaixo), anticorpos isolados a partir de um animal (p. ex., um ratinho) que seja transgénico para genes de imunoglobulina humana (ver, p. ex., Taylor, L.D. et ai., (1992) Nucl. Acids Res. 20:6287) ou anticorpos preparados, expressos, gerados ou isolados através de qualquer outro meio que envolva o processamento alternativo de sequências génicas de imunoglobulina humana com outras sequências de ADN. Tais anticorpos humanos recombinantes têm regiões variáveis e constantes derivadas de sequências de imunoglobulina da linha germinativa humana. Em certas concretizações, no entanto, tais anticorpos humanos recombinantes são sujeitos a mutagénese in vitro (ou, quando é usado um animal transgénico para sequências de Ig humanas, mutagénese somática in vivo) e assim as sequências de aminoácidos das regiões VH e VL dos anticorpos recombinantes são sequências que, embora derivadas de e relacionadas com as sequências de VH e VL da linha germinativa humana, podem não existir naturalmente dentro do repertório de anticorpos da linha germinativa humana in vivo.
Um "anticorpo isolado", tal como aqui utilizado, destina-se a referir um anticorpo que é substancialmente livre de outros anticorpos possuindo diferentes especificidade antigénicas (p. ex., um anticorpo isolado que se liga especificamente a hTNF é substancialmente livre de anticorpos que se ligam especif icamente a outro antigénios além de hTNF ) .
Um anticorpo isolado que se liga especificamente a hTNF pode, no entanto, ter reatividade cruzada com outros antigénios, tais como moléculas de TNF de outras espécies (discutidas em maior detalhe abaixo) . Além disso, um anticorpo isolado pode ser substancialmente livre de outro material celular e/ou químicos.
Um "anticorpo de neutralização", tal como aqui utilizado (ou um "anticorpo que neutralizou a atividade de hTNF "), destina-se a referir um anticorpo cuja ligação a hTNF resulta em inibição da atividade biológica de hTNF . Eifoábição da atividade biológica de hTNF pode ser avaliada através da medição de um ou mais indicadores da atividade biológica de hTNF , tal como citotoxicidade induzida por hTNF in(quer vitro quer in vivo), ativação celular induzida por hTNF e ligação de hTNF a receptores de hTNF . Estes indicadores ds atividade biológica de hTNF podem ser ensaiados atravésude ou mais de vários ensaios padrão in vitro ou in vivo conhecidos na técnica (ver Patente U.S. No. 6090382). De preferência, a capacidade de um anticorpo para neutralizar a atividade de hTNF é avaliada através da inibição da citotoxicidade induzida por hTNF de células L929. Como parâmetro adicional ou alternativo da atividade de hTNF , a capacidade de um anticorpo para inibir a expressão induzida por hTNF de ElAMm HUVEC, como medida da ativação celular induzida por hTNF , pode ser avaliada. 0 termo "ressonância de plasmão de superfície", tal como aqui utilizado, refere-se a um fenómeno óptico que permite a análise de interações bio-específicas em tempo real, através da detecção de alterações nas concentrações de proteína numa matriz biossensora, por exemplo, utilizando o sistema BIAcore (Pharmacia Biosensor AB, Uppsala, Suécia e Piscataway, NJ).
Para mais descrições, ver Exemplo 1 da Patente U.S. 6258562 e Jõnsson et ai., (1993) Ann. Biol. Clin. 51:19; Jõnsson et al. , (1991) Biotechniques 11:620-627; Johnsson et al. , (1995) J.
Mol. Recognit. 8:125; e Johnnson et al., (1991) Anal. Biochem. 198:268. O termo "K0ff", tal como aqui utilizado, destina-se a referir a constante da velocidade de separação para a dissociação de um anticorpo do complexo anticorpo/antiqénio. O termo "Kd", tal como aqui utilizado, destina-se a referir a constante de dissociação de uma determinada interação anticorpo-antigénio. O termo "ICso" tal como aqui utilizado, destina-se a referir a concentração de inibidor necessária para inibir a finalidade biológica de interesse, p. ex., neutralizar a atividade de citotoxicidade. O termo "molécula de ácido nucleico", tal como aqui utilizado, destina-se a incluir moléculas de ADN e moléculas de ARN. Uma molécula de ácido nucleico pode ser de cadeia simples ou de cadeia dupla, mas de preferência é ADN de cadeia dupla. O termo "molécula de ácido nucleico isolada", tal como aqui utilizado em referência a ácidos nucleicos codificando anticorpos ou porções de anticorpo (p. ex., VH, VL, CDR3) que se ligam a hTNF , destina-se a referir uma molécula de ácido nucleico em que as sequências nucleotídicas codificando o anticorpo ou a porção de anticorpo são livres de outras sequências nucleotidicas codificando anticorpos ou porções de anticorpo que se ligam a outros antigénios além de hTNF ,
sequências essas que podem flanquear naturalmente o ácido nucleico em ADN genómico humano. Assim, por exemplo, um ácido nucleico isolado do invento codificando uma região VH de um anticorpo anti-hTNF ão nontém outras sequências codificando outras regiões VH que se ligam a outros antigénios além de hTNF 0 termo "vector", tal como aqui utilizado, destina-se a referir uma molécula de ácido nucleico capaz de transportar outro ácido nucleico ao qual foi ligado. Um tipo de vector é um "plasmídeo", que se refere a uma volta de ADN de cadeia dupla circular na qual podem ser ligados segmentos de ADN adicionais. Outro tipo de vector é um vector virai, em que segmentos de ADN adicionais podem ser ligados no genoma virai. Certos vectores são capazes de replicação autónoma numa célula hospedeira na qual são introduzidos (p. ex., vectores bacterianos possuindo uma origem de replicação bacteriana e vectores de mamíferos epissómicos). Outros vectores (p. ex., vectores não epissómicos de mamífero) podem ser integrados no genoma de uma célula hospedeira após introdução na célula hospedeira, e são assim replicados juntamente com o genoma do hospedeiro. Além disso, certos vectores são capazes de dirigir a expressão de genes aos quais estão operativamente ligados.
Tais vectores são aqui referidos como "vectores de expressão recombinante" (ou simplesmente, "vectores de expressão"). Em geral, os vectores de expressão com utilidade em técnicas de ADN recombinante estão frequentemente na forma de plasmídeos.
No presente fascículo, "plasmídeo" e "vector" podem ser utilizados indiferentemente uma vez que o plasmídeo é a forma mais vulgarmente utilizada de vector. No entanto, o termo destina-se a incluir outras formas de vectores de expressão, tais como vectores virais (p. ex., retrovirus de replicação deficiente, adenovirus e vírus adeno-associados) , que servem funções equivalentes. 0 termo "célula hospedeira recombinante" (ou simplesmente "célula hospedeira"), tal como aqui utilizado, destina-se a referir uma célula na qual foi introduzido um vector de expressão recombinante. Deve ser entendido que tais termos pretendem referir-se não só à célula sujeita em particular, mas à descendência de tal célula. Como certas modificações podem ocorrer em gerações subsequentes devido a mutação ou influências ambientais, tal descendência pode, de facto, não ser idêntica à célula parental, mas estar ainda incluída no âmbito do termo "célula hospedeira" tal como aqui utilizado. 0 termo "dosagem", tal como aqui utilizado, refere-se à administração de uma substância (p. ex., um anticorpo anti-TNF ) para atingir um objectivo terapêutico (p. ex., o tratamento de um distúrbio associado a TNF ) .
Os termos "regime de dosagem bissemanal", "dosagem bissemanal", e "administração bissemanal", tal como aqui utilizados, referem-se ao decurso de tempo de administração de uma substância (p. ex., um anticorpo anti-TNF ) a um sujeito para alcançar um objectivo terapêutico (p. ex., o tratamento de um distúrbio associado a TNF ) . 0 regime de dosagem bissemanal não se destina a incluir um regime de dosagem semanal. De preferência, a substância é administrada a cada 9-19 dias, de maior preferência, a cada 11-17 dias, ainda de preferência, a cada 13-15 dias, e ainda de maior preferência, a cada 14 dias. 0 termo "combinação", tal como na frase "um primeiro agente em combinação com um segundo agente" inclui a coadministração de um primeiro agente e um segundo agente, que, por exemplo, podem ser dissolvidos ou misturados no mesmo transportador farmaceuticamente aceitável, ou administração de um primeiro agente, seguido do segundo agente, ou administração do segundo agente, seguido do primeiro agente. São aqui descritos, portanto, métodos de combinação de tratamento terapêutico e composições farmacêuticas de combinação. 0 termo "concomitante" como na frase "tratamento terapêutico concomitante" inclui a administração de um agente na presença de um segundo agente. Um método de tratamento terapêutico concomitante inclui métodos em que o primeiro, segundo, terceiro, ou mais agentes são coadministrados. Um método de tratamento terapêutico concomitante inclui também métodos em que o primeiro ou mais agentes são administrados na presença de um segundo ou mais agentes, em que o segundo ou mais agentes, por exemplo, podem ter sido previamente administrados. Um método de tratamento terapêutico concomitante pode ser executado passo a passo por diferentes atores. Por exemplo, um ator pode administrar a um sujeito um primeiro agente e um segundo ator pode administrar ao sujeito um segundo agente, e os passos de administração podem ser executados ao mesmo tempo, ou aproximadamente ao mesmo tempo, ou em tempos distantes, desde que o primeiro agente (e mais agentes) seja após a administração na presença do segundo agente (e mais agentes). 0 ator e o sujeito podem ser a mesma entidade (p. ex., humano). 0 termo "terapia de combinação", tal como aqui utilizado, refere-se à administração de duas ou mais substâncias terapêuticas, p. ex., um anticorpo anti-TNF e outro fármaco,
tal como DMARD ou NSAID. 0 outro fármaco ou fármacos podem ser administrados concomitantemente com, antes de, ou após a administração de um anticorpo anti-TNF 0 termo "condição mediada por TNF " ou "distúrbio relacionado com TNF " refere-se a um distúrbio fisiológico local e/ou sistémico em que TNF é um mediador primário conduzindo à manifestação do distúrbio. 0 termo "distúrbio inflamatório" ou "doença inflamatória", tal como aqui utilizados indiferentemente, referem-se a uma doença mediada por inflamação, quer seja ou não também mediada pelo sistema imunitário. Os distúrbios inflamatórios são distúrbios em que uma resposta inflamatória excessiva ou desregulada conduz a sintomas inflamatórios excessivos, danos do tecido do hospedeiro ou perda da função do tecido. Exemplos incluem artrite reumatoide e espondiloartropatias. 0 distúrbio inflamatório pode referir-se a uma doença mediada por inflamação excluindo osteoartrite e espondilite reumatoide. 0 termo "doença pulmonar", tal como aqui utilizado, refere-se a qualquer doença idiopática pulmonar intersticial e/ou distúrbio obstrutivo crónico das vias respiratórias. 0 termo doença pulmonar pode incluir qualquer doença pulmonar e/ou distúrbio obstrutivo crónico da vias respiratórias excluindo choque pulmonar, doença inflamatória pulmonar crónica, sarcoidose pulmonar, fibrose pulmonar e silicose. 0 termo "doença pulmonar intersticial idiopática" ou "doença pulmonar intersticial idiopática", tal como aqui utilizados indiferentemente, refere-se a qualquer uma de várias doenças de etiologia desconhecida com características clínicas semelhantes, produzindo alterações patológicas difusas principalmente no tecido intersticial interalveolar. Exemplos de doenças pulmonares intersticiais idiopáticas incluem, mas não estão limitados a, fibrose pulmonar intersticial (FPI) . Numa concretização, doenças pulmonares intersticiais idiopáticas incluem qualquer uma de várias doenças de etiologia desconhecida com características clínicas semelhantes, produzindo alterações patológicas difusas primariamente no tecido intersticial interalveolar mas excluem choque pulmonar, doença inflamatória pulmonar crónica, sarcoidose pulmonar, fibrose pulmonar e silicose. 0 termo "distúrbio obstrutivo crónico das vias respiratórias" tal como aqui usado, referem-se a doenças pulmonares devido à obstrução crónica do fluxo de ar fisiologicamente determinada, independentemente da etiologia. Exemplos de distúrbios obstrutivos crónicos das vias respiratórias incluem, mas não estão limitados a, asma e doença pulmonar obstrutiva crónica (DPOC). Numa concretização, o termo distúrbio obstrutivo crónico das vias respiratórias inclui doenças pulmonares devido à obstrução crónica do fluxo de ar fisiologicamente determinada, mas exclui choque pulmonar, doença inflamatória pulmonar crónica, sarcoidose pulmonar, fibrose pulmonar e silicose. 0 termo "obstrução das vias respiratórias" refere-se a uma maior resistência ao fluxo de ar exibida por resultados espirométricos característicos. 0 termo "distúrbio cardiovascular" ou "distúrbio coronário", tal como aqui utilizado indiferentemente, refere-se a qualquer doença, distúrbio ou estado envolvendo o sistema cardiovascular, p. ex., o coração, os vasos sanguíneos, e/ou o sangue. Um distúrbio coronário é geralmente caracterizado por um estreitamento dos vasos sanguíneos que fornecem sangue e oxigénio ao coração (artérias coronárias) . A doença coronária resulta geralmente de uma acumulação de material gordo e placas. À medida que as artérias coronárias estreitam, o fluxo de sangue ao coração pode diminuir ou parar. Os distúrbios coronários podem aplicar-se a qualquer anomalia numa artéria, quer estrutural, histológica, bioquímica ou qualquer outra anomalia. Um exemplo de doença cardíaca coronária é a restenose. Numa concretização, um distúrbio coronário refere-se a qualquer doença, distúrbio, ou estado envolvendo o sistema cardiovascular excluindo isquemia do coração e insuficiência cardíaca. 0 termo "reestenose", tal como aqui utilizado, refere-se a recorrência de estenose, que é o estreitamento ou a constrição de uma artéria. A reestenose ocorre geralmente como uma lesão pré-oclusiva que se desenvolve após um procedimento reconstrutivo num vaso sanguíneo doente. 0 termo não é aplicado apenas à recorrência de uma estenose pré-existente, mas também a vasos anteriormente normais que se tornam parcialmente obstruídos após desvio vascular. É também aqui descrito um método de tratamento reestenose compreendendo a administração do anticorpo, ou a porção de ligação ao antigénio deste, a um sujeito que tenha ou esteja em risco de desenvolver reestenose. 0 termo "stent", tal como aqui utilizado, refere-se a uma estrutura que é inserida no lúmen de um vaso anatómico, p. ex., uma artéria, especialmente para manter aberta uma passagem anteriormente bloqueada. 0 stent é utilizado para manter o fluxo de fluidos (p. ex., sangue) de uma porção de um vaso para outra, e uma armação endovascular ou stent que mantém aberta uma passagem do corpo e/ou suporta o enxerto ou invólucro. Um stent é frequentemente utilizado após angioplastia de balão, embora possa também ser utilizado como terapia direta para o tratamento de estenose.
De acordo com a presente divulgação, o stent é de eluição de fármaco. 0 termo "de eluição de fármaco" refere-se a um stent que é revestido com uma formulação de fármaco de libertação lenta a moderada. Os termos "de eluição de fármaco" ou "de libertação de fármaco" ou "revestido com fármaco" são aqui utilizados indiferentemente. Um stent pode ser revestido com qualquer fármaco que trate uma doença cardíaca coronária, incluindo, por exemplo, o anticorpo, ou fragmento de ligação ao antigénio deste, aqui descrito. 0 stent pode distribuir D2E7. 0 stent pode distribuir D2E7 em combinação com outro fármaco utilizado para tratar distúrbios coronários, incluindo dexametasona, Alkeran, citoxano, Leukeran, cis-platina, BiCNU, adriamicina, doxorrubicina, cerubidina, idamicina, mitracina, mutamicina, fluorouracilo, metotrexato, toguanina, toxotere, etopósido, vincristina, irinotecano, hicamptina, matulano, vumon, hexalina, hidroxiureia, gemzar, oncovina, etofofos, tacrolimus (FK506), e os seguintes análogos de sirolimus: SDZ-RAD, CCI-779, 7-epi-rapamicina, 7-tiometil-rapamicina, 7-epi-trimetoxifenil- rapamicina, 7-epi-tiometil-rapamicina, 7-demetoxi-rapamicina, 32-demetoxi, 2-desmetil e prolina. 0 termo "distúrbio metabólico", tal como aqui utilizado, refere-se a doenças ou distúrbios que afectam como o corpo processa substâncias necessárias para realizar funções biológicas. Exemplos de distúrbios metabólicos incluem, mas não se limitam a, diabetes e obesidade. 0 termo "distúrbio metabólico" pode ser utilizado para referir distúrbios que afectam como o corpo processa substâncias necessárias para realizar funções fisiológicas, excluindo diabetes autoimune. 0 termo "diabetes" ou "distúrbio diabético" ou "diabetes mellitus", tal como aqui utilizado indiferentemente, refere-se a uma doença que é marcada por níveis elevados de açúcar (glicose) no sangue. A diabetes pode ser causada por pouca insulina (uma substância química produzida pelo pâncreas para regular o açúcar no sangue), resistência à insulina, ou ambas. A frase "distúrbios associados a diabetes", tal como aqui utilizada, refere-se a condições e outras doenças que são vulgarmente associadas a, ou relacionadas com diabetes. Exemplos de distúrbios associados a diabetes incluem, por exemplo, hiperglicemia, hiperinsulinemia, hiperlipidemia, resistência à insulina, metabolismo de glicose deficiente, obesidade, retinopatia diabética, degeneração macular, cataratas, nefropatia diabética, glomeruloesclerose, neuropatia diabética, disfunção eréctil, síndroma pré-menstrual, reestenose vascular, colite ulcerativa, doença cardíaca coronária, hipertensão, angina de peito, enfarte do miocárdio, acidente vascular cerebral, distúrbios da pele e do tecido conjuntivo, ulcerações dos pés, acidose metabólica, artrite, e osteoporose. 0 termo "obesidade" como aqui utilizado, refere-se a uma condição em que o sujeito tem um excesso de gordura corporal em relação à massa corporal magra. Numa concretização, a obesidade refere-se a uma condição na qual um indivíduo pesa pelo menos cerca de 20% ou mais acima do máximo desejável para a sua altura. Quando um adulto tem mais de 100 libras de excesso de peso, ele ou ela é considerado ter "obesidade mórbida". Noutra concretização, a obesidade é definida como um IMC (índice de massa corporal) acima de 30 kg/m2. O termo "anemia", tal como aqui utilizado, refere-se a um número anormalmente baixo de glóbulos vermelhos em circulação ou a uma diminuição da concentração de hemoglobina no sangue. O termo "dor", tal como aqui utilizado, refere-se a todos os tipos de dor. O termo refere-se a dores agudas e crónicas, tais como dor neuropática e dor pós-operatória, dor lombar crónica, dores de cabeça em salvas, neuralgia do herpes, dor do membro fantasma, dor central, dor de dentes, dor resistente a opiáceos, dor visceral, dor de cirurgia, dor de lesão óssea, dor durante o trabalho de parto, dor resultante de queimaduras, incluindo queimaduras solares, dor pós-parto, enxaqueca, dor de angina e dor relacionada com o trato genito-urinário incluindo cistite. O termo inclui também dor nocicetiva ou nociceção.
Tal como aqui utilizado, o termo "distúrbio hepático" refere-se a uma doença do fígado ou condição associada a lesão hepatocelular ou um distúrbio do trato biliar de mamífero e de preferência humano. Numa concretização, distúrbios hepáticos referem-se a uma doença de fígado ou condição associada a lesão hepatocelular ou um distúrbio do trato biliar humano excluindo hepatite, hepatite alcoólica, e hepatite virai. O termo "distúrbio de pele" ou "doença de pele", tal como aqui utilizado indiferentemente, refere-se a anomalias, com exceção de feridas de lesões, da pele que tenham induzido um estado de inflamação. Numa concretização, o distúrbio de pele é um distúrbio inflamatório da pele, em que a pele se caracteriza por dilatação capilar, infiltração leucocitária, vermelhidão, calor, e/ou dor. Exemplos de distúrbios da pele incluem, mas não se limitam a, psoriase, pênfigo vulgar, esclerodermia, dermatite atópica, sarcoidose, eritema nodoso, hidradenite supurativa, líquen plano, síndroma de Sweet, e vitiligo. 0 termo "psoriase", tal como aqui utilizado, refere-se a distúrbios de pele associados a hiperplasia epidérmica. Exemplos de psoriase incluem, mas não se limitam a, psoriase de placas crónica, psoriase gutata, psoriase inversa, psoriase pustulosa, psoriase vulgar, e psoriase eritrodérmica. A psoriase pode também estar associada a outras doenças inflamatórias, incluindo a doença inflamatória do intestino (DII) e a artrite reumatoide (AR). 0 termo "pele saudável" ou "pele normal" refere-se a pele não lesionada, i.e., sem eritema visualmente óbvio, edema, hiper, hipo ou pigmentações irregulares, formação de escamas, xerose, ou formação de bolhas. Pele histologicamente saudável ou normal refere-se a tecido de pele com aparência morfológica compreendendo as camadas basal, espinhosa, e granular bem organizadas, e um estrato córneo em múltiplas camadas coerente. 0 termo "distúrbio das unhas" ou "doença das unhas", tal como aqui utilizado, refere-se a condições em que as unhas das mãos ou as unhas dos pés têm cor, forma, textura, ou espessura anormal. 0 termo "vasculite" ou "vasculites" tal como aqui utilizado indiferentemente, refere-se a um grupo de distúrbios que são caracterizados pela inflamação de vasos sanguíneos. Vasos sanguíneos de todos os tamanhos podem ser afectados, do maior vaso no corpo (a aorta) até aos menores vasos sanguíneos na pele (capilares) . 0 tamanho do vaso sanguíneo afectado varia de acordo com o tipo específico de vasculite. 0 termo "estojo", tal como aqui utilizado, refere-se a um produto embalado que compreendendo componentes com os quais administrar o anticorpo de TNF do invento para tratamento de um distúrbio relacionado com TNF . 0 estcçjsmpreende de preferência uma caixa ou recipiente que contém os componentes do estojo. A caixa ou recipiente é afixada com uma etiqueta ou um protocolo aprovado pela Food and Drug Administration. A caixa ou o recipiente contém componentes do invento que são de preferência contidos dentro de recipientes de plástico, polietileno, polipropileno, etileno, ou propileno. Os recipientes podem ser tubos tapados ou garrafas. 0 estojo pode também incluir instruções para administração do anticorpo de TNF do invento. Vários aspectos do invento são aqui descritos em mais detalhe. I. Inibidores de TNF_do Invento
Este invento proporciona um anticorpo humano anti-TNF de neutralização, de elevada afinidade, isolado, para utilização em tratamento de psoriase de placas crónica moderada a grave num sujeito através de administração do anticorpo por via subcutânea ao sujeito a uma dose de 40 mg a cada duas semanas, de modo a que a referida psoriase de placas crónica moderada a grave seja tratada, em que o anticorpo anti-TNF humáno adalimumab. É também aqui descrito um método de tratamento de um distúrbio relacionado com TNF q. administração de um inibidor de TNF é benéfica. Estes métodos incluem a administração de anticorpos humanos isolados, ou porções de ligação ao antigénio destes, que se ligam a TNF humano com elevada afinidade e uma velocidade de separação baixa, e têm uma capacidade de neutralização elevada. Os anticorpos humanos são anticorpos anti-hTNF humanos de neutra$ã<2a recombinantes. O anticorpo de neutralização recombinante para utilização de acordo com o invento é aqui referido como D2E7, também referido como HUMIRA® e adalimumab (a sequência de aminoácidos da região VL de D2E7 é mostrada em SEQ ID NO: 1; a sequência de aminoácidos da região VH de D2E7 é mostrada em SEQ ID NO: 2) . As propriedades de D2E7 (HUMIRA®) foram descritas em Salfeld et al., Patente U.S. No. 6090382. O tratamento aqui descrito inclui a administração de anticorpos D2E7 e porções de anticorpo, anticorpos e porções de anticorpo relacionados com D2E7, e outros anticorpos humanos e porções de anticorpo com propriedades equivalentes a D2E7, tal como ligação de elevada afinidade a hTNF com baixa cinética de dissociação e elevada capacidade de neutralização. É também aqui descrito tratamento com um anticorpo humano isolado, ou uma porção de ligação ao antigénio deste, que se dissocia do TNF humano com uaad<K lxlCh8 M ou menos e uma constante de velocidade K0ff de lxlCh3 s_1 ou menos, ambas determinadas através de ressonância de plasmão de superfície, e neutraliza a citotoxicidade do TNF humano num ensanro vitro padrão de L929 com uma IC50 de lxlCh7 M ou menos. De maior preferência, o anticorpo humano isolado, ou porção de ligação ao antigénio deste, dissocia-se do TNF humano com uma He 5xlCF4 s_1 ou menos, ou mesmo ainda de preferência, com uma K0ff de lxlCh4 s_1 ou menos. De maior preferência, o anticorpo humano isolado, ou porção de ligação ao antigénio deste, neutraliza a citotoxicidade do TNF humano num ensáinovitro padrão de L929 com uma IC50 de lxlCh8 M ou menos, ainda de preferência com uma IC50 de lxlCh9 M ou menos e ainda de maior preferência com uma IC50 de lxlCh10 M ou menos. Numa concretização preferida, o anticorpo é um anticorpo humano recombinante isolado, ou uma porção de ligação ao antigénio deste.
É bem conhecido na técnica que os domínios CDR3 das cadeias pesada e leve do anticorpo têm um importante papel na especificidade/afinidade de ligação de um anticorpo para um antigénio. Assim, são aqui descritos métodos de tratamento de um distúrbio relacionado com TNF em quatávidade de TNF é prejudicial, através da administração de anticorpos humanos que têm uma cinética de dissociação lenta para associação com hTNF e que têm domínios CDR3 de cadeia leve e pesada que são estruturalmente idênticos ou relacionados com os de D2E7. A posição 9 de CDR3 de VL de D2E7 pode ser ocupada por Ala ou Thr sem afectar substancialmente a K0ff. Assim, um motivo de consenso para a CDR3 de VL de D2E7 compreende a sequência de aminoácidos: Q-R-Y-N-R-A-P-Y-(T/A) (SEQ ID NO: 3). Além disso, a posição 12 do CDR3 de VH de D2E7 pode ser ocupada por Tyr ou Asn, sem afectar substancialmente a K0ff. Assim, um motivo de consenso para o CDR3 de VH de D2E7 compreende a sequência de aminoácidos: V-S-Y-L-S-T-A-S-S-L-D-(Y/N) (SEQ ID NO: 4). Além disso, tal como demonstrado no Exemplo 2 de Patente U.S. No. 6090382, o domínio CDR3 das cadeias pesada e leve de D2E7 é passível de substituição com um único resíduo de alanina (na posição 1, 4, 5, 7 ou 8 dentro do CDR3 de VL ou na posição 2, 3, 4, 5, 6, 8, 9, 10 ou 11 dentro do CDR3 de VH) sem afectar substancialmente a K0ff. Além disso ainda, o perito na especialidade apreciará que, dada a receptividade dos domínios CDR3 de VL e VH de D2E7 a substituições por alanina, a substituição de outros aminoácidos dentro dos domínios CDR3 pode ser possível mantendo ainda a baixa constante de velocidade de separação do anticorpo, em particular substituições com aminoácidos conservatives. De preferência, não mais do que 1-5 substituições de aminoácidos conservativas são feitas dentro do domínio CDR3 de VL e/ou VH de D2E7. De maior preferência, não mais de uma a três substituições conservatives de aminoácidos são feitas dentro dos domínios CDR3 de VL e/ou VH de D2E7. Além disso, substituições de aminoácidos conservatives não devem ser feitas em posições de aminoácidos críticas para a ligação a hTNF . As põeÊ 2 e 5 do CDR3 de VL de D2E7 e as posições 1 e 7 do CDR3 de VH de D2E7, parecem ser criticas para a interação com hTNF e, assim, substituições de aminoácidos conservatives não são de preferência feitas nestas posições (embora uma substituição de alanina na posição 5 do CDR3 de VL de D2E7 seja aceitável, tal como descrito acima) (ver Patente U.S. No. 6090382) .
Assim, são também aqui descritos métodos de tratamento de um distúrbio relacionado com TNF através da administração de um anticorpo humano isolado, ou porção de ligação ao antigénio deste. O anticorpo ou porção de ligação ao antigénio deste contém de preferência as seguintes características: a) dissocia-se do TNF humano com uma constante de velocidade K0ff de lxlCh3 s_1 ou menos, tal como determinado através de ressonância de plasmão de superfície; b) tem um domínio CDR3 de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 3, ou modificada a partir de SEQ ID NO: 3 através de uma única substituição de alanina na posição 1, 4, 5, 7 ou 8 ou através de uma a cinco substituições conservativas de aminoácidos nas posições 1, 3, 4, 6, 7, 8 e/ou 9; c) tem um domínio CDR3 de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 4, ou modificada a partir de SEQ ID NO: 4 através de uma única substituição de alanina na posição 2, 3, 4, 5, 6, 8, 9, 10 ou 11 ou através de uma a cinco substituições de aminoácidos conservativas nas posições 2, 3, 4, 5, 6, 8, 9, 10, 11 e/ou 12.
De maior preferência, o anticorpo, ou porção de ligação ao antigénio deste, dissocia-se do TNF humano com uma He 5xl0~4 s_1 ou menos. Ainda de preferência, o anticorpo, ou porção de ligação ao antigénio deste, dissocia-se do TNF humano com uma K0ff de lxlCh4 s_1 ou menos. São também aqui descritos métodos de tratamento de um distúrbio relacionado com TNF através da administração de um anticorpo humano isolado, ou porção de ligação ao antigénio deste. O anticorpo ou porção de ligação ao antigénio deste contém de preferência uma região variável de cadeia leve (LCVR) possuindo um domínio CDR3 compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 3, ou modificada a partir de SEQ ID NO: 3 através de uma única substituição de alanina na posição 1, 4, 5, 7 ou 8, e com a região variável de cadeia pesada (HCVR) possuindo um domínio CDR3 compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 4, ou modificada a partir de SEQ ID NO: 4 através de uma única substituição de alanina na posição 2, 3, 4, 5, 6, 8, 9, 10 ou 11. De preferência, a LCVR tem ainda um domínio CDR2 compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 5 (i.e., o CDR2 de VL de D2E7) e a HCVR tem ainda um domínio CDR2 compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 6 (i.e., o CDR2 de VH de D2E7) . Ainda de maior
preferência, a LCVR tem ainda o domínio CDR1 compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 7 (i.e., o CDR1 de VL de D2E7) e a HCVR tem um domínio CDR1 compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 8 (i.e., o CDR1 de VH de D2E7) .
As regiões estruturais para VL são de preferência da família da linha germinativa de V I humana, de maior preferência do gene A20 da linha germinativa de Vk humana e de maior preferência das sequências estruturais de VL de D2E7 mostradas nas Figuras IA e 1B da Patente U.S. No. 6090382. As regiões estruturais para VH são de preferência da família da linha germinativa de Vh3 humana, de maior preferência do gene DP-31 da linha germinativa de VH humana e ainda de maior preferência das sequências estruturais de VH de D2E7 mostradas nas Figuras 2A e 2B da Patente U.S. No. 6090382.
Assim, são também aqui descritos métodos de tratamento de um distúrbio relacionado com TNF através da administração de um anticorpo humano isolado, ou porção de ligação ao antigénio deste. 0 anticorpo ou porção de ligação ao antigénio deste contém de preferência uma região variável de cadeia leve (LCVR) compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 1 (i.e., a VL de D2E7) e uma região variável de cadeia pesada (HCVR) compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 2 (i.e., a VH de D2E7) . Em certas concretizações, o anticorpo compreende uma região constante de cadeia pesada, tal como uma região constante de IgGl, IgG2, IgG3, IgG4, IgA, IgE, IgM ou IgD. De preferência, a região constante de cadeia pesada é uma região constante de cadeia pesada de IgGl ou uma região constante de cadeia pesada de IgG4. Além disso, o anticorpo pode compreender uma região constante de cadeia leve, uma região constante de cadeia leve capa ou uma região constante de cadeia leve lambda.
De preferência, o anticorpo compreende uma região constante de cadeia leve capa. Alternativamente, a porção de anticorpo pode ser, por exemplo, um fragmento Fab ou um fragmento Fv de cadeia simples. São também aqui descritos métodos de tratamento de um distúrbio relacionado com TNF em que a adminiçfidade um anticorpo anti-TNF é uma administração benéfica de um anticorpo humano isolado, ou de porções de ligação ao antigénio deste. 0 anticorpo ou porção de ligação ao antigénio deste contém de preferência domínios CDR3 de VL e VH relacionados com D2E7, por exemplo, anticorpos, ou porções de ligação ao antigénio destes, com uma região variável de cadeia leve (LCVR) possuindo um domínio CDR3 compreendendo uma sequência de
aminoácidos selecionada a partir do grupo que consiste em SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 17, SEQ ID
NO: 18, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 21, SEQ ID
NO: 22, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 25 e SEQ ID NO: 26 ou com uma região variável de cadeia pesada (HCVR) possuindo um domínio CDR3 compreendendo uma sequência de
aminoácidos selecionada a partir do grupo que consiste em SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 31, SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 34 e SEQ ID NO: 35.
Noutra concretização, o inibidor de TNF aqui descrito é etanercept (descrito em WO 91/03553 e WO 09/406476), infliximab (descrito na Patente U.S. No. 5656272), CDP571 (um anticorpo monoclonal IgG4 anti-TNF-alfa humanizado), CDP 870 (um fragmento de anticorpo monoclonal anti-TNF-alfa humanizado) , D2E7 (um mAb anti-TNF humano), receptor solúvel de TNF Tipo I, ou um receptor de TNF Tipo I solúvel pequilado (PEG TNF-R1). O anticorpo de TNF aqui descrito pode ser modificado.
Nalgumas concretizações, o anticorpo de TNF ou fragmentos de ligação ao antigénio deste, é quimicamente modificado para proporcionar um efeito desejado. Por exemplo, a peguilação de anticorpos e fragmentos de anticorpo pode ser realizada através de qualquer uma das reações de peguilação conhecidas na técnica, tal como descrito, por exemplo, nas seguintes referências: Focus on Growth Factors 3:4-10 (1992); EP 0154316; e EP 0401384. De preferência, a peguilação é realizada através de uma reação de acilação ou uma reação de alquilação com a uma molécula de polietilenoglicol reativa (ou um polímero reativo solúvel em água análogo). Um polímero solúvel em água preferido para peguilação dos anticorpos e fragmentos de anticorpo aqui descritos é polietilenoglicol (PEG). Tal como aqui utilizado, "polietilenoglicol" significa englobar qualquer uma das formas de PEG que foram utilizadas para derivar outras proteínas, tais como mono (C1-C10) alcoxi- ou ariloxi-polietilenoglicol.
Os métodos para preparação de anticorpos peguilados e fragmentos de anticorpo aqui descritos compreenderão geralmente os passos de (a) fazer reagir o anticorpo ou fragmento de anticorpo com polietilenoglicol, tal como um derivado éster ou aldeído reativo de PEG, sob condições pelas quais o anticorpo ou fragmento de anticorpo fica ligado a um ou mais grupos de PEG, e (b) obtenção dos produtos de reação.
Será evidente para um vulgar perito na técnica selecionar as condições óptimas de reação ou as reações de acilação com base em parâmetros conhecidos e no resultado desejado.
Os anticorpos e fragmentos de anticorpo peguilados podem ser geralmente usados para tratar distúrbios relacionados com TNF aéeavda administração dos anticorpos de TNF e fragmentos de anticorpo aqui descritos. Geralmente, os anticorpos e fragmentos de anticorpo peguilados têm maior semivida, em comparação com os anticorpos e fragmentos de anticorpo não peguilados. Os anticorpos e fragmentos de anticorpo peguilados podem ser empregues sozinhos, em conjunto, ou em combinação com outras composições farmacêuticas.
De acordo com a presente divulgação, os anticorpos de TNF ou fragmentos destes podem ser alterados, em que a região constante do anticorpo é modificada para reduzir pelo menos uma função efectora biológica mediada pela região constante relativamente a um anticorpo não modificado. Para modificar um anticorpo da presente divulgação de modo a que exiba reduzida ligação ao receptor de Fc, o segmento da região constante de imunoglobulina do anticorpo pode ser mutado em regiões particulares necessárias para as interações do receptor de Fc (FcR) (ver p. ex., Canfield, S.M. e S.L. Morrison (1991) J.
Exp. Med. 173:14 83-14 91; e Lund, J. et ai., (1991) J. of Immunol. 147:2657-2662) . A redução da capacidade de ligação a FcR do anticorpo pode também reduzir outras funções efectoras que se baseiam nas interações de FcR, tais como opsonização e fagocitose e citotoxicidade celular dependente de antigénio.
Um anticorpo ou porção de anticorpo aqui descrito pode ser derivado ou ligado a outra molécula funcional (p. ex., outro péptido ou proteína). Assim, os anticorpos e porções de anticorpo destinam-se a incluir formas derivadas e modificadas de outra forma dos anticorpos anti-hTNF humanos aqui descritos, incluindo moléculas de imunoadesão. Por exemplo, um anticorpo ou porção de anticorpo aqui descrito pode ser funcionalmente ligado (através de acoplamento químico, fusão genética, associação não covalente ou de outra forma) a uma ou mais entidades moleculares, tais como outro anticorpo (p. ex., um anticorpo biespecífico ou um diacorpo), um agente detectável, um agente citotóxico, um agente farmacêutico, e/ou uma proteína ou um péptido que possa mediar a associação do anticorpo ou porção de anticorpo com outra molécula (tal como uma região central de estreptavidina ou uma etiqueta de poli-histidina).
Um tipo de anticorpo derivado é produzido através de reticulação de dois ou more anticorpos (do mesmo tipo ou de diferentes tipos, p. ex. , para gerar anticorpos biespecificos). Agentes de reticulação adequados incluem aqueles que são heterobifuncionais, possuindo dois grupos distintamente reativos separados por um espaçador apropriado (p. ex., éster de m-maleimidobenzoil-N-hidroxisuccinimida) ou homobifuncional (p. ex., suberato de dissuccinimidilo) . Tais ligadores estão disponíveis em Pierce Chemical Company, Rockford, IL.
Agentes detectáveis úteis com os quais um anticorpo ou porção de anticorpo aqui descrito pode ser derivado incluem compostos fluorescentes. Exemplos de agentes detectáveis fluorescentes incluem fluoresceína, isotiocianato de fluoresceína, rodamina, cloreto de 5-dimetilamina-1-naftalenossulfonilo, ficoeritrina e semelhantes. Um anticorpo pode também ser derivado com enzimas detectáveis, tais como fosfatase alcalina, peroxidase de rábano, glicose-oxidase e semelhantes. Quando um anticorpo é derivado com uma enzima detectável, este é detectado adicionando reagentes adicionais que a enzima utiliza para produzir um produto de reação detectável. Por exemplo, quando o agente detectável peroxidase de rábano está presente, a adição de peróxido de hidrogénio e diaminobenzidina leva a um produto de reação colorido, que é detectável. Um anticorpo pode também ser derivado com biotina, e detectado através da medição indireta da ligação a avidina ou estreptavidina.
Um anticorpo, ou porção de anticorpo, tal como aqui descrito pode ser preparado através de expressão recombinante dos genes de cadeia leve e pesada de imunoglobulina numa célula hospedeira. Para expressar um anticorpo de forma recombinante, uma célula hospedeira é transfectada com um ou mais vectores de expressão recombinantes possuindo fragmentos de ADN codificando as cadeias leve e pesada de imunoglobulina do anticorpo de modo a que as cadeias leve e pesada sejam expressas na célula hospedeira e, de preferência, segregadas para o meio no qual as células hospedeiras são cultivadas, meio a partir do qual os anticorpos podem ser recuperados. As metodologias de ADN recombinante padrão são usadas para obter genes de cadeias pesada e leve de anticorpo, incorporar estes genes em vectores de expressão recombinante e introduzir os vectores em células hospedeiras, tal como as descritas em
Sambrook, Fritsch e Maniatis (eds), "Molecular Cloning; A Laboratory Manual", Segunda Edição, Cold Spring Harbor, N.Y., (1989), Ausubel, F.M. et al., (eds.) "Current Protocols in Molecular Biology", Greene Publishing Associates, (1989) e na Patente U.S. No. 4816397 por Boss et al.
Para expressar D2E7 ou um anticorpo relacionado com D2E7, são primeiro obtidos fragmentos de ADN codificando regiões variáveis de cadeia leve e pesada. Estes ADN podem ser obtidos através de amplificação e modificação de sequências variáveis de cadeia leve e pesada da linha germinativa utilizando reação em cadeia da polimerase (PCR). As sequências de ADN da linha germinativa para genes da região variável humana de cadeia pesada e leve são conhecidas na técnica (ver p. ex., a base de dados "Vbase" de sequências da linha germinativa humana; ver também Rabat, E.A., et al. , (1991) "Sequences of Proteins of Immunological Interest". Quinta Edição, U.S. Department of Health and Human Services, Publicação NIH No. 91-3242; Tomlinson, I.M., et al. , (1992) "The Repertoire of Human Germline VH Sequences Reveals about Fifty Groups of VH Segments with Different Hypervariable Loops" J. Mol. Biol. 227:776-798; e Cox, J.P.L. et al. , (1994) "A Directory of Human Germ-line V78 Segments Reveals a Strong Bias in their Usage" Eur. J Immunol. 24:827-836; cujo conteúdo de cada uma é expressamente incorporado). Para obter um fragmento de ADN codificando a região variável de cadeia pesada de D2E7, ou um anticorpo relacionado com D2E7, um membro da família Vh3 de genes de VH da linha germinativa humana é amplificado através de PCR padrão. De preferência, é amplificada a sequência da linha germinativa de VH de DP-31. Para obter um fragmento de ADN codificando a região variável de cadeia leve de D2E7, ou um anticorpo relacionado com D2E7, um membro da família V I de genes de VL da linha germinativa humana é amplificado através de PCR padrão. De maior preferência, é amplificada a sequência da linha germinativa de VL de A20. Iniciadores de PCR adequados para utilização em amplificação das sequências de VH de DP-31 da linha germinativa e de VL de A20 da linha germinativa podem ser concebidos com base nas sequências nucleotídicas divulgadas nas referências citada supra, utilizando métodos padrão.
Uma vez obtidos os fragmentos VH e VL da linha germinativa, estas sequências podem ser mutadas para codificar as sequências de aminoácidos de D2E7 ou relacionadas com D2E7 aqui divulgadas. As sequências de aminoácidos codificadas pelas sequências de ADN de VH e VL da linha germinativa são primeiro comparadas com as sequências de aminoácidos de VH e VL de D2E7 ou relacionadas com D2E7 para identificar resíduos de aminoácidos na sequência de D2E7 ou relacionada com D2E7 que difiram da linha germinativa. Em seguida, os nucleótidos adequados das sequências de ADN da linha germinativa são mutados de modo a que a sequência da linha germinativa mutada codifique a sequência de aminoácidos de D2E7 ou relacionada com D2E7, usando o código genético para determinar que alterações de nucleótidos devem ser feitas. A mutagénese das sequências da linha germinativa é realizada através de métodos padrão, tal como mutagénese mediada por PCR (em que os nucleótidos mutados são incorporados nos iniciadores de PCR de modo a que o produto de PCR contenha as mutações) , ou mutagénese dirigida ao local.
Uma vez obtidos fragmentos de ADN codificando os segmentos VH e VL de D2E7 ou relacionados com D2E7 (através de amplificação e mutagénese dos genes de VH e VL da linha germinativa, tal como descrito acima), estes fragmentos de ADN podem ainda ser manipulados através de técnicas de ADN recombinante padrão, por exemplo para converter os genes da região variável em genes das cadeias do anticorpo inteiro, em genes de fragmentos Fab ou num gene de scFv. Nestas manipulações, um fragmento de ADN codificando VL ou VH é operacionalmente ligado a outro fragmento de ADN codificando para outra proteína, tal como uma região constante de anticorpo ou um ligador flexível. 0 termo "operativamente ligado", tal como utilizado neste contexto, destina-se a significar que os dois fragmentos de ADN são unidos de modo a que as sequências de aminoácidos codificadas pelos dois fragmentos de ADN permaneçam enquadradas. 0 ADN isolado codificando a região de VH pode ser convertido num gene inteiro da cadeia pesada ligando de forma operativa o ADN codificando VH a outra molécula de ADN codificando as regiões constantes de cadeia pesada (CHI, CH2 e CH3). As sequências dos genes das regiões constantes de cadeia pesada humana são conhecidas na técnica (ver p. ex., Rabat, E.A., et al., (1991) "Sequences of Proteins of Immunological Interest", Quinta Edição, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242) e fragmentos de ADN englobando estas regiões podem ser obtidos através de amplificação por PCR padrão. A região constante de cadeia pesada pode ser uma região constante de IgGl, IgG2, IgG3, IgG4, IgA, IgE, IgM ou IgD, mas é de preferência uma região constante de IgGl ou IgG4 . Para um gene de cadeia pesada de fragmento Fab, o ADN codificando VH pode ser operativamente ligado a outra molécula de ADN codificando apenas a região constante da cadeia pesada CHI. 0 ADN isolado codificando a região VL pode ser convertido num gene de cadeia leve inteiro (bem como um gene de cadeia leve de Fab) através da ligação de forma operativa do ADN codificando VL a outra molécula de ADN codificando a região constante de cadeia leve, CL. As sequências dos genes de região constante de cadeia leve humana são conhecidas na técnica (ver p. ex., Rabat, E.A., et al., (1991) "Sequences of Proteins of Immunological Interest", Quinta Edição, U.S. Department of Health and Human Services, Publicação NIH No. 91-3242) e fragmentos de ADN englobando estas regiões podem ser obtidos através de amplificação por PCR padrão. A região constante de cadeia leve pode ser uma região constante capa ou lambda, mas é de preferência uma região constante capa.
Para gerar um gene de scFv, os fragmentos de ADN codificando VH e VL são ligados de forma operativa a outro fragmento codificando um ligador flexível, p. ex., codificando a sequência de aminoácidos (Gly4-Ser) 3, de modo a que as sequências de VH e VL possam ser expressas como uma proteína contígua de cadeia simples, com as regiões VL e VH ligadas pelo ligador flexível (ver, p. ex., Bird et al., (1988) Science 242:423-426; Huston et al., (1988) Proc. Natl. Acad. Sei. USA 85:5879-5883; McCafferty et al., Nature (1990) 348:552-554).
Para expressar o anticorpo do invento, ADN codificando cadeias leves e pesadas, parciais ou inteiras, obtidas tal como descrito acima, são inseridas em vectores de expressão de modo a que os genes sejam ligados de forma operativa a sequências de controlo da transcrição e da tradução. Neste contexto, o termo "operativamente ligado" destina-se a significar que um gene de anticorpo está ligado num vector de modo a que as sequências de controlo da transcrição e tradução dentro do vector sirvam a sua função pretendida de regular a transcrição e tradução do gene do anticorpo. As sequências do vector de expressão e de controlo da expressão são escolhidas para serem compatíveis com a célula hospedeira de expressão utilizada. 0 gene da cadeia leve do anticorpo e o gene da cadeia pesada do anticorpo podem ser inseridos em vectores separados ou, mais tipicamente, ambos os genes ser inseridos no mesmo vector de expressão. Os genes do anticorpo são inseridos no vector de expressão através de métodos padrão (p. ex., ligação de locais de restrição complementares no fragmento do gene de anticorpo e no vector, ou ligação de extremidades cegas, se não estiverem presentes locais de restrição). Antes da inserção das sequências de cadeia leve ou pesada de D2E7 ou relacionadas com D2E7, o vector de expressão pode já transportar sequências da região constante de anticorpo. Por exemplo, uma abordagem para converter as sequências de VH e VL de D2E7 ou relacionadas com D2E7, nos genes inteiros do anticorpo é inseri-las em vectores de expressão codificando já as regiões constantes de cadeia pesada e de cadeia leve, respectivamente, de modo a que o segmento de VH seja operativamente ligado ao ou aos segmentos CH dentro do vector e que o segmento VL seja operativamente ligado ao segmento CL dentro do vector. Além disso ou alternativamente, o vector de expressão recombinante pode codificar um péptido sinal que facilite a secreção da cadeia de anticorpo a partir de uma célula hospedeira. 0 gene da cadeia de anticorpo pode ser clonado no vector de modo a que o péptido sinal seja ligado enquadrado com o terminal amino do gene da cadeia de anticorpo. 0 péptido sinal pode ser um péptido sinal de imunoglobulina ou um péptido sinal heterólogo (i.e., um péptido sinal de uma proteína não imunoglobulina).
Além dos genes da cadeia de anticorpo, os vectores de expressão recombinantes do invento possuem sequências reguladoras que controlam a expressão dos genes de cadeias de anticorpo numa célula hospedeira. 0 termo "sequência reguladora" destina-se a incluir promotores, estimuladores e outros elementos de controlo da expressão (p. ex., sinais de poliadenilação) que controlam a transcrição ou tradução dos genes de cadeias de anticorpo. Tais sequências reguladoras são descritas, por exemplo, em Goeddel; "Gene Expression Technology: Methods in Enzymology" 185, Academic Press, San Diego, CA (1990) . Será apreciado pelos peritos na especialidade que o desenho do vector de expressão, incluindo a seleção de sequências reguladoras pode depender de factores tais como a escolha da célula hospedeira a transformar, o nível de expressão da proteína desejada, etc. Sequências reguladoras preferidas para expressão em células hospedeiras de mamífero incluem elementos virais que dirigem níveis elevados de expressão de proteínas em células de mamífero, tais como promotores e/ou estimuladores derivados de citomegalovírus (CMV) (tais como o promotor/estimulador CMV), Vírus Símio 40 (SV40) (tal como o promotor/estimulador SV40), adenovirus, (p. ex., o promotor tardio principal de adenovirus (AdMLP)) e polioma. Para uma descrição adicional de elementos reguladores virais e sequências destes, ver p. ex., Patente U.S. No. 5168062 por Stinski, Patente U.S. No. 4510245 por Bell et ai., e Patente U.S. No. 4968615 por Schaffner et al.
Além dos genes de cadeias de anticorpo e sequências reguladoras, os vectores de expressão recombinante aqui descritos podem possuir sequências adicionais, tais como as sequências que regulam a replicação do vector em células hospedeiras (p. ex., origens de replicação) e genes marcadores selecionáveis. O gene marcador selecionável facilita a seleção de células hospedeiras nas quais o vector foi introduzido (ver, p. ex., Patentes U.S. Nos. 4399216, 4634665 e 5179017 todas por Axel et al.) . Por exemplo, tipicamente o gene marcador seleccionável confere resistência a fármacos, tais como G418, higromicina ou metotrexato, numa célula hospedeira na qual o vector foi introduzido. Genes marcadores selecionáveis preferidos incluem o gene da di-hidrofolato-redutase (DHFR) (para utilização em células hospedeiras dhfr~ com seleção de metotrexato/amplificação) e o gene neo (para seleção com G418).
Para expressão das cadeias leves e pesadas, o ou os vectores de expressão codificando as cadeias pesada e leve são transfectados para uma célula hospedeira através de técnicas padrão. As várias formas do termo "transfecção" destinam-se a abranger uma ampla variedade de técnicas vulgarmente utilizadas para a introdução de ADN exógeno numa célula hospedeira procariótica ou eucariótica, p. ex., electroporação, precipitação com fosfato de cálcio, transfecção com DEAE-dextrano e semelhantes. Embora seja teoricamente possível expressar os anticorpos do invento em células hospedeiras quer procariotas quer eucariotas, a expressão de anticorpos em células eucariotas, e de preferência células hospedeiras de mamífero, é a mais preferida porque é mais provável que estas células eucarióticas, e em particular as células de mamífero, montem e segreguem um anticorpo corretamente dobrado e imunologicamente ativo do que as células procarióticas. A expressão procariótica de genes de anticorpos foi relatada como sendo ineficaz para a produção de rendimentos elevados de anticorpo ativo (Boss, MA e Wood, CR (1985) Immunology Today 6:12-13). Células hospedeiras de mamífero preferidas para expressão dos anticorpos recombinantes do invento incluem células de Ovário de Hamster Chinês (CHO) (incluindo células CHO dhfr-, descritas em Urlaub e Chasin (1980) Proc. Natl. Acad. Sei. USA 77:4216-4220, utilizadas com um marcador selecionável de DHFR, p. ex., tal como descrito em R.J. Kaufman e P.A. Sharp (1982) Mol. Biol. 159:601-621), células de mieloma NSO, células COS e células SP2. Quando os vectores de expressão recombinante codificando genes de anticorpo são introduzidos em células hospedeiras de mamífero, os anticorpos são produzidos cultivando as células hospedeiras durante um período de tempo suficiente para permitir a expressão do anticorpo nas células hospedeiras ou, de maior preferência, a secreção do anticorpo para o meio de cultura em que as células hospedeiras são criadas. Os anticorpos podem ser recuperados a partir do meio de cultura utilizando métodos de purificação de proteínas padrão.
De acordo com a presente divulgação, células hospedeiras podem também ser utilizadas para produzir porções de anticorpos intactos, tais como fragmentos Fab ou moléculas de scFv. Por exemplo, pode ser desejável transfectar uma célula hospedeira com ADN codificando quer a cadeia leve quer a cadeia pesada (mas não ambas) de um anticorpo da presente divulgação. A tecnologia de ADN recombinante pode também ser usada para remover parte ou a totalidade do ADN codificando qualquer uma ou ambas as cadeias leve e pesada que não sejam necessárias para a ligação a hTNF . As moléculas expressas a partir destas moléculas de ADN truncadas estão também englobadas pelos anticorpos da presente divulgação. Além disso, podem ser produzidos anticorpos bifuncionais em que uma cadeia pesada e uma leve são um anticorpo da presente divulgação e a outra cadeia pesada e leve são específicas para um antigénio diferente de hTNF aésade reticulação de um anticorpo da presente divulgação com um segundo anticorpo através de métodos de reticulação química padrão.
Num sistema preferido para expressão recombinante de um anticorpo do invento, um vector de expressão recombinante codificando tanto a cadeia pesada do anticorpo como a cadeia leve do anticorpo é introduzido em células CHO dhfr- através de transfecção mediada por fosfato de cálcio. Dentro do vector de expressão recombinante, os genes das cadeias pesada e leve de anticorpo são, cada um, ligados de forma operativa aos elementos de regulação estimulador CMV/promotor AdMLP para dirigir elevados níveis de transcrição dos genes. 0 vector de expressão recombinante possui também um gene de DHFR, que permite a seleção de células CHO que foram transfectadas com o vector usando seleção com metotrexato/amplificação. As células hospedeiras transformantes selecionadas são cultivadas para permitir a expressão das cadeias pesada e leve do anticorpo e o anticorpo intacto é recuperado a partir do meio de cultura. São usadas técnicas de biologia molecular padrão para preparar o vector de expressão recombinante, transfectar as células hospedeiras, selecionar os transformantes, cultivar as células hospedeiras e recuperar o anticorpo a partir do meio de cultura.
Os anticorpos humanos recombinantes além de D2E7 ou uma porção de ligação ao antigénio destes, ou anticorpos relacionados com D2E7 aqui divulgados podem ser isolados através de pesquisa de uma biblioteca combinatória de anticorpos recombinantes, de preferência uma biblioteca de apresentação fágica de scFv, preparada usando ADNc de VL e VH humana preparados a partir de ARNm derivado de linfócitos humanos. As metodologias para preparação e pesquisa de tais bibliotecas são conhecidas na técnica. Além dos estojos disponíveis comercialmente para a geração de bibliotecas de apresentação fágica (p. ex., "Pharmacia Recombinant Phage
Antibody System", No. de catálogo 27-9400-01; e o estojo de apresentação fágica Stratagene SurfZAP™, No. de catálogo 240612), exemplos de métodos e reagentes particularmente passíveis de utilização na geração e pesquisa de bibliotecas de apresentação de anticorpos podem ser verificados em, por exemplo, Ladner et ai., Patente U.S. No. 5223409; Rang et ai., Publicação PCT No. WO 92/18619; Dower et ai., Publicação PCT No. WO 91/17271; Winter et ai., Publicação PCT No. WO 92/20791; Markland et ai., Publicação PCT No. WO 92/15679; Breitling et ai., Publicação PCT No. WO 93/01288; McCafferty et ai., Publicação PCT No. WO 92/01047; Garrard et ai., Publicação PCT No. WO 92/09690; Fuchs et ai., (1991) Bio/Technology 9:1370-1372; Hay et ai., (1992) Hum. Antibody Hybridomas 3:81-85;
Huse et ai., (1989) Science 246:1275-1281; McCafferty et al., Nature (1990) 348:552-554; Griffiths et al. , (1993) EMBO J. 12:725-734; Hawkins et al., (1992) J. Mol. Biol. 226:889-896;
Clackson et al. , (1991) Nature 352:624-628; Gram et al., (1992) ΡΛ/AS 89:357 6-3580; Garrard et al., (1991) Bio/Technology 2:1373-1377; Hoogenboom et al. , (1991) Λ/izc. Acid. Res. 19:4133- 4137; e Barbas et al., (1991) PNAS 88:7978-7982. Métodos de isolamento de anticorpos humanos com elevada afinidade e uma constante de velocidade de dissociação baixa para hTNF ão s descritos nas Patentes U.S. Nos. 6090382, 6258562, e 6509015.
II. Utilizações de Inibidores de TNF
É aqui divulgado um método para inibição de atividade de TNF num sujeito sofrendo de um úibto relacionado com TNF em que a atividade de TNF é prejudicial. Numa concretização, o inibidor de TNF é D2E7, também referido como HUMIRA® (adalimumab). TNF foi implicado na fisiopatologia de uma ampla variedade de distúrbios relacionados com TNF incluindo sepsia, infecções, doenças autoimunes, rejeição de transplantes e doença de enxerto-versus-hospedeiro (ver p. ex., Moeller, A., et al., (1990) Cytokine 2:162-169; Patente U.S. No. 5231024 para Moeller et al. ; Publicação de Patente Europeia No. 260610 BI por Moeller, A., et al., Vasilli, P. (1992) Annu. Rev. Immunol. 10:411-452; Tracey, K.J. e Cerami, A. (1994) Annu. Rev. Med. 45:491-503). São aqui descritos métodos para inibição da atividade de TNF num sujeito sofrendo de um distúrbio relacionado com TNF método esse que compreende a administração ao sujeito de um anticorpo, porção de anticorpo, ou outro inibidor de TNF de modo a que a atividade de TNF no sujeito sofrendo do úidsio relacionado com TNF seja inibida. São aqui descritos métodos para a inibição ou diminuição da atividade de TNF num sujeito com vasculite, compreendendo a administração ao sujeito de um anticorpo, ou porção de anticorpo, ou outro inibidor de TNF de modo a que a atividade de TNF no sujeito seja inibida ou diminuída. De preferência, o TNF é TNF humano e o sujeito é um sujeito humano. Alternativamente, o sujeito pode ser um mamífero expressando um TNF com o qual um anticorpo da presente divulqação reaja de forma cruzada. Mais ainda, o sujeito pode ser um mamífero no qual foi introduzido hTNF (p. ex., através de administração de hTNF , ou através de expressão de um transgene de hTNF ). Um anticorpo aqui descrito pode ser administrado a um sujeito humano para fins terapêuticos (discutido mais abaixo).
Além disso, um anticorpo do invento pode ser administrado a um mamífero não humano expressando um TNF com o qual o anticorpo reaja de forma cruzada (p. ex., um primata, porco ou ratinho) para fins veterinários ou como um modelo animal de doença humana. Em relação a estes últimos, tais modelos animais podem ser úteis para avaliar a eficácia terapêutica dos anticorpos do invento (p. ex., testes de dosagens e intervalos de tempo de administração) . Exemplos de modelos animais utilizados para estudar espondiloartropatias incluem ratinhos transgénicos ank/ank, ratos transgénicos HLA-B27 (ver Taurog et ai., (1998) "The Spondylarthritides. Oxford", Oxford
University Press).
Exemplos de modelos animais utilizados para avaliar a eficácia terapêutica de um agente para tratamento de um distúrbio hepático incluem o modelo de vírus da hepatite C de chimpanzé (ver Shimizu et ai. (1990) Proc. Natl. Acad. Sei. USA 87:6441). Exemplos de modelos animais utilizados para estudar distúrbios de pele e distúrbios das unhas incluem, por exemplo, o modelo de imunodeficiência combinada grave (SCID) de ratinho (psoríase) e da linha de Smith (SL) de galinha e de despigmentação de ratinho (vitiligo) (ver Nickoloff (2000) Investig. Dermatol. Symp. Proc. 5:67; Austin et ai., (1995)
Am. J. Pathol. 146:1529; Lerner et al. , (1986) J. Invest. Dermatol. 87:2 99) .
Exemplos de modelos animais para avaliar a eficácia de um anticorpo de TNF para o tratamento de um úlifeto metabólico incluem ratinhos transgénicos NOD, ratinhos Akita, ratinhos transgénicos NSY e ratinhos oh/ob (ver Baeder et al. , (1992) Clin. Exp. Immunol. 89:174; Haseyama et al. , (2002) Tohoku, J. Exp. Med. 198:233; Makino et al. , (1980) : Exp. Anim. 29:1; Kolb (1987) Diabetes/Metabolism Reviews 3:751; Hamada et al. (2001) Metabolism. 50:1282; Coleman, (1978) Diabetologia, 14:141; Bailey et al., (1982) Int. J. Obesity 6:11). Exemplos de modelos animais utilizados para estudar vasculite incluem o modelo de HSV de ratinho (doença de Behcet), o modelo de L. casei de ratinho (doença de Kawasaki), e o modelo de ANCA de ratinho (doença de Kawasaki). Outros modelos de vasculite incluem a estirpe McH5-lpr/lpr (Nose, M., et ai., (1996) Am. J. Path. 149:1763) e a estirpe SCG/Kj de ratinhos (Kinjoh, et al., (1993) Proc. Natl. Acad. Sei., USA 90:3413) . Estas estirpes de ratinhos desenvolvem espontaneamente glomerulonefrite crescente e vasculite necrosante das pequenas artérias e arteriolas do baço, estômago, coração, útero e ovários. Estes animais desenvolvem hipergamaglobulinemia e auto-anticorpos ANCA que reagem com a mieloperoxidase (MPO). Além disso, a imunização de ratos com MPO humana resulta em glomerulonefrite necrosante crescente associada a ANCA (Brouwer, E., et ai., (1993) J. Exp. Med. 177:905).
Exemplos de modelos animais utilizados para estudar a doença pulmonar intersticial idiopática e distúrbios obstrutivos crónicos das vias respiratórias incluem ratinhos com asma alérgica induzida por ovalbumina (OVA) e ratinhos com doença pulmonar obstrutiva crónica induzida por fumo de cigarro (veja Hessel, EM., et al., (1995) Eur. J. Pharmacol. 293:401; Keast D, et al., (1981) J. Pathol. 135:249).
Modelos animais vulgarmente utilizados para estudo de distúrbios coronários, incluindo reestenose, incluem o modelo de ligadura da artéria carótida de rato ou ratinho e o modelo de lesão da artéria carótida (Ferns et ai., (1991) Science 253:1129; Clowes et al., (1983) Lab. Invest. 49:208; Lindner et al. , (1993) Circ. Res. 73:792) . No modelo de ligadura da artéria carótida, o fluxo de sangue arterial é interrompido através de ligadura do vaso próximo da bifurcação distai. Tal como descrito em Clowes et al., o modelo de lesão da artéria carótida é realizado de modo a que a artéria carótida comum seja desnudada do endotélio através da passagem intra-luminal de um cateter de balão introduzido através da artéria carótida externa. Em 2 semanas, a artéria carótida está acentuadamente estreitada devido à constrição das células do músculo liso, mas entre as 2 e 12 semanas a espessura da intima duplica conduzindo a uma diminuição do tamanho do lúmen. Qualquer um destes modelos pode ser utilizado para determinar a potencial ação terapêutica dos anticorpos de TNF aqui descritos na prevenção e no tratamento de reestenose em humanos.
Exemplos de modelos animais utilizados para estudar anemia incluem ratos inoculados com polímeros de peptidolglicano-polissacárido (ver Coccia et ai., (2001) Exp. Hematologia. 29:1201-1209). Exemplos de modelos animais utilizados para estudar dor são bem conhecidos na técnica, e incluem o modelo de ligadura do nervo ciático de rato, e o modelo de ligação do nervo espinal segmentar de rato (ver Bennett e Zie, (1988) Pain 33:87-107; Kim e Chung (1992) Pain 50:355-363).
Tal como aqui utilizado, o termo "distúrbio relacionado com TNF em que a atividade de TNF é prejudicial" destina-se a incluir doenças relacionadas com TNF e outros distúrbios em que se mostrou que a presença de TNF num sujeito sofrendo do distúrbio é ou suspeita-se que seja responsável pela fisiopatologia do distúrbio ou um factor que contribui para um agravamento do distúrbio, p. ex., artrite reumatoide juvenil.
Assim, distúrbios relacionados com TNF em quat4vidade de TNF é prejudicial são distúrbios em que se espera que a inibição da atividade de TNF alivie os sintomas e/ou a progressão do distúrbio. Tais distúrbios podem ser evidenciados, por exemplo, através de um aumento na concentração de TNF num fluido è§bêo de um sujeito sofrendo do distúrbio (p. ex., um aumento na concentração de TNF no soro, plasma, fluido sinovisiç. do sujeito), que pode ser detectado, por exemplo, utilizando um anticorpo anti-TNF tal como descrito acima. O uso dos anticorpos, porções de anticorpo e outros inibidores de TNF aqui descritos no tratamento de um distúrbio especifico relacionado com TNF em que a atividade de TNF é prejudicial, é melhor discutido abaixo. Em certas concretizações, o anticorpo, porção de anticorpo, ou outro inibidor de TNF é administrado ao sujeito em combinação com outro agente terapêutico, tal como descrito abaixo na Secção III. A. Espondiloartropatias 0 TNF foi implicado na f isiopatologia de uma ampla variedade de distúrbios, incluindo doença inflamatórias tais como espondiloartropatias (ver p. ex., Moeller, A., et ai., (1990) Cytokine 2:162-169; Patente U.S. No. 5231024 para Moeller et ai.; Publicação de Patente Europeia No. 260610 BI por Moeller, A). São aqui descritos métodos para a atividade de TNF num sujeito sofrendo de um tal dibio, métodos que compreendem a administração ao sujeito de um anticorpo, porção de anticorpo, ou outro inibidor de TNF de modo a que a atividade de TNF no sujeito sofrendo de uma espondiloartropatia seja inibida. Numa concretização, é aqui descrito um método de tratamento de espondiloartropatias.
Tal como aqui utilizado, o termo "espondiloartropatia" ou "espondiloartropatias" é utilizado para referir qualquer uma de várias doenças afectando as articulações da coluna vertebral, em que tais doenças partilham caracteristicas clinicas, radiológicas, e histológicas comuns. Várias espondiloartropatias partilham caracteristicas genéticas, i.e. estão associadas ao alelo HLA-B27. Numa concretização, o termo espondiloartropatia é utilizado para se referir a qualquer uma de diversas doenças que afectam as articulações da coluna, excluindo espondilite anquilosante, em que tais doenças partilham caracteristicas clinicas, radiológicas e histológicas comuns. Exemplos de espondiloartropatias incluem espondilite anquilosante, artrite/espondilite psoriática, artrite enteropática, artrite reativa ou síndroma de Reiter, e espondiloartropatias indiferenciadas. O anticorpo de TNF aqui descrito pode também ser usado para tratar sujeitos que estão em risco de desenvolver uma espondiloartropatia. Exemplos de sujeitos que estão em risco de ter espondiloartropatias incluem humanos que sofram de artrite. As espondiloartropatias podem estar associadas a outras formas de artrite, incluindo artrite reumatoide. Numa concretização, o anticorpo aqui descrito é utilizado para tratar um sujeito que sofra de uma espondiloartropatia associada a artrite reumatoide. Exemplos de espondiloartropatias que podem ser tratadas com o anticorpo de TNF aqui descrito são descritos abaixo: 1. Espondilite Anquilosante (EA) 0 factor de necrose tumoral foi implicado na fisiopatologia da espondilite anquilosante (ver Verjans et ai., (1991) Arthritis Rheum. 34(4) : 4 8 6; Verjans et al., (1994) Clin. Exp. Immunol. 97(1) : 4 5; Kaijtzel et al. , (1999) Hum. Immunol. 60(2) :140) . A espondilite anquilosante (EA) é um distúrbio inflamatório envolvendo inflamação de uma ou mais vértebras. A EA é uma doença inflamatória crónica que afecta o esqueleto axial e/ou as articulações periféricas, incluindo as articulações entre as vértebras da coluna vertebral e as articulações sacroiliacas e as articulações entre a coluna vertebral e a pélvis. A EA pode eventualmente fazer com que as vértebras afectadas se fundam ou cresçam juntas. As espondiloartropatias, incluindo a EA, podem estar associadas a artrite psoriática (APs) e/ou doença inflamatória do intestino (DII), incluindo colite ulcerativa e doença de Crohn.
As manifestações iniciais da EA podem ser determinadas através de testes radiológicos, incluindo tomografias computadorizadas e exames de RMN. As manifestações iniciais de EA incluem muitas vezes sacroileite e alterações nas articulações sacroiliacas tal como evidenciado pelo esbatimento das margens corticais do osso subcrondral, seguido de erosões e esclerose. A fadiga tem sido também observada como um sintoma comum de EA (Duffy et al., (2002) ACR 66th Annual Scientific Meeting Abstract) . Assim, o anticorpo, ou fragmento de ligação ao antigénio deste, aqui descrito pode ser utilizado para tratar EA. Numa concretização, o anticorpo de TNF , ou fragmento de $ãga ao antigénio deste, é utilizado para tratar espondiloartropatia associada a DII, incluindo EA. A EA é frequentemente tratada com medicamentos anti-inflamatórios não esteroides (ΑΙΝΕ), tais como aspirina ou indometacina. Assim, o anticorpo de TNF aqui descrito pode também ser administrado em combinação com agentes normalmente utilizados para reduzir inflamação e dor geralmente associadas a espondilite anquilosante. 2. Artrite psoriática 0 factor de necrose de tumoral foi implicado na fisiopatologia de artrite psoriática (Partsch et ai., (1998)
Ann. Rheum. Dis. 57:691; Ritchlin et ai., (1998) J. Rheumatol. 25:1544). Tal como aqui referido, a artrite psoriática (APs) ou psoriase associada à pele, refere-se a artrite inflamatória crónica que está associada a psoriase. A psoriase é uma condição crónica da pele comum que causa manchas vermelhas no corpo. Cerca de 1 em 20 indivíduos com psoriase desenvolverão artrite juntamente com a condição da pele, e em cerca de 75% dos casos, a psoriase precede a artrite. A APs apresenta-se numa variedade de formas, variando de artrite moderada a grave, em que a artrite afecta normalmente os dedos das mãos e a coluna vertebral. Quando a coluna vertebral é afectada, os sintomas são semelhantes aos da espondilite anquilosante, tal como descrito acima. O anticorpo de TNF , ou um fragmento de ligação ao antigénio deste, aqui descrito pode ser utilizado para tratar APs. A APs está por vezes associada a artrite mutilante. A artrite mutilante refere-se a um distúrbio que se caracteriza por erosão óssea excessiva, que resulta numa deformidade erosiva grosseira, que mutila a articulação. Numa concretização, o anticorpo de TNF , ou fra<g©ede ligação ao antigénio deste, aqui descrito pode ser utilizado para tratar artrite mutilante. 3. Artrite reativa/Síndroma de Reiter O factor de necrose tumoral foi implicado na fisiopatologia da artrite reativa, que é também referida como síndroma de Reiter (Braun et ai., (1999) Arthritis Rheum. 42(10) :2039) . A artrite reativa (ARe) refere-se a artrite que complica uma infecção noutras partes do corpo, frequentemente após infecções entéricas ou urogenitais. A ARe é frequentemente caracterizada por certos sintomas clínicos, incluindo inflamação das articulações (artrite), uretrite, conjuntivite e lesões da pele e das membranas mucosas. Além disso, a ARe pode ocorrer após infecção com uma doença sexualmente transmissível ou infecção disentérica, incluindo clamídia, Campylobacter, Salmonella, ou Yersinia. Assim, o anticorpo de TNF , ou fragmento de (Jãgaao antigénio deste, aqui descrito pode ser utilizado para tratar ARe. 4. Espondiloartropatias indiferenciadas
Numa concretização, os anticorpos de TNF aqui descritos são utilizados para tratar sujeitos sofrendo de espondiloartropatias indiferenciadas (ver Zeidler et ai., (1992) Rheum. Dis. Clin. North. Am. 18:187). Outros termos usados para descrever espondiloartropatias indiferenciadas incluem oligoartrite seronegativa e oligoartrite indiferenciada. As espondiloartropatias indiferenciadas, tal como aqui utilizado, referem-se a um distúrbio em que o sujeito demonstra apenas alguns dos sintomas associados a uma espondiloartropatia. Esta condição é habitualmente observada em jovens adultos que não têm DII, psoríase, ou os sintomas clássicos de EA ou síndroma de Reiter. Nalguns casos, as espondiloartropatias indiferenciadas podem ser uma indicação precoce de EA. Numa concretização, o anticorpo de TNF , ou um fragmento de ligação ao antigénio deste, aqui descrito pode ser utilizado para tratar espondiloartropatias indiferenciadas. B. Distúrbios Pulmonares 0 TNF foi implicado na f isiopatologia de uma ampla variedade de distúrbios pulmonares, incluindo distúrbios pulmonares tais como doença pulmonar intersticial idiopática e distúrbios obstrutivos crónicos das vias respiratórias (ver p. ex., Piquet, PF et al. , (1989) J. Exp. Med. 170:655-63;
Whyte, M, et al. , (2000) Am. J. Respir. Crit. Care Med. 162:755-8; Anticevich, SZ, et al., (1995) Eur. J. Pharmacol. 284:221-5). São aqui descritos métodos para inibir a atividade de TNF num sujeito sofrendo de um tal úifeto pulmonar, cujo método compreende a administração ao sujeito de um anticorpo, porção de anticorpo, ou outro inibidor de TNF de modo a que tal atividade de TNF no sujeito que sofra de doença pulmonar intersticial idiopática crónica ou um distúrbio obstrutivo das vias respiratórias seja inibida. Exemplos de doenças pulmonares intersticiais idiopáticas e distúrbios obstrutivos crónicos das vias respiratórias em que a atividade de TNF é prejudicial são discutidos mais adiante. 1. Doença pulmonar intersticial idiopática
Numa concretização, o anticorpo de TNF aqui descrito é utilizado para tratar sujeitos que tenham uma doença pulmonar intersticial idiopática. As doenças pulmonares intersticiais idiopáticas afetam os pulmões de três maneiras: primeiro, o tecido pulmonar é danificado de alguma forma conhecida ou desconhecida; segundo, as paredes dos sacos de ar nos pulmões tornam-se inflamadas; e, finalmente começa a formação de cicatrizes (ou fibrose) no interstício (ou tecido entre os sacos de ar), e o pulmão torna-se rígido. Exemplos de doenças pulmonares intersticiais idiopáticas são descritos abaixo. a. Fibrose pulmonar idiopática (FPI) 0 factor de necrose tumoral foi implicado na fisiopatologia da fibrose pulmonar idiopática (FPI) (ver Piquet, PF, et ai., (1989) J. Exp. Med. 170:655-63; Whyte M, et ai., (2000) Am. J. Respir. Crit. Care Med. 162:755-8; Corbett EL, et ai. , (2002) Am. J. Respir. Crit. Care Med. 165:690-3). Por exemplo, verificou-se que os pacientes com FPI têm níveis aumentados de expressão de TNF em macrófagos e em células epiteliais de tipo II (Piquet et ai., (1993) Am. J. Pathol. 143:651; Nash et ai., (1993) Histopathology 22:343; Zhang et ai. , (1993) J. Immunol. 150:4188) . Certos polimorfismos genéticos estão também associados a maior expressão de TNF, e estão implicados no desempenho de um papel na FPI e silicose (Whyte et ai., supra; Corbett EL, et ai., supra) . O termo "fibrose pulmonar idiopática" ou "FPI" refere-se a um grupo de distúrbios caracterizados por inflamação e eventualmente cicatrização dos tecidos pulmonares profundos, conduzindo a falta de ar. A cicatrização dos alvéolos (sacos de ar) , e das suas estruturas de suporte (o interstício) em FPI leva eventualmente a uma perda das unidades alveolares funcionais e uma redução da transferência de oxigénio do ar para o sangue. A FPI também é referida como doença pulmonar difusa do parênquima; alveolite; alveolite fibrosante criptogénica (AFC); pneumonite pulmonar idiopática (PPI); e pneumonite intersticial usual (PIU). FPI é frequentemente usado como sinónimo de PIU ("FPI/PIU") porque a PIU é o padrão celular mais comum visto no diagnóstico patológico de FPI.
Os pacientes com FPI apresentam frequentemente alguns sintomas, incluindo uma tosse seca, dor no peito e/ou falta de ar. Os fármacos vulgarmente utilizados para o tratamento de FPI são prednisona e citoxano, embora apenas uma fracção dos pacientes melhore com o uso continuado destes fármacos (American Thoracic Society (2000) Am. J. Respir. Crit. Care Med. 161:646). A administração de oxigénio e o transplante do pulmão são outras escolhas para tratamento. Numa concretização, o anticorpo de TNF aqui descrito é administrado ao sujeito em combinação com outro agente terapêutico adicional, por exemplo oxigénio, para o tratamento de fibrose pulmonar idiopática. 2. Distúrbio obstrutivo crónico das vias respiratórias
Numa concretização, o anticorpo de TNF aqui descrito é utilizado para tratar um sujeito que tenha um distúrbio obstrutivo crónico do fluxo de ar. Nestas doenças, a obstrução do fluxo de ar pode ser crónica e persistente ou episódica e recorrente. A obstrução do fluxo de ar é habitualmente determinada através de espirometria expiratória forçada, que é o registo do volume expirado contra o tempo durante uma expiração máxima. Num sujeito que não tenha um fluxo de ar obstruído, uma expiração forçada completa leva usualmente entre 3 e 4 segundos. Num paciente com distúrbio do fluxo de ar obstrutivo crónico, em que o fluxo de ar está obstruído, usualmente leva até 15 a 20 segundos e pode ser limitado pelo tempo de apneia. O volume expiratório forçado normal no primeiro segundo da expiração (VEFi) é facilmente medido e previsto com precisão com base na idade, no sexo e na altura. A razão de VEFi para a capacidade vital forçada (VEFi/CVF) excede normalmente 0,75. O registo do fluxo de ar contra o volume durante a expiração forçada e uma subsequente inspiração forçada - a volta de fluxo-volume - é também útil, principalmente para distinguir o estreitamento das vias aéreas superiores do das inferiores. Exemplos de distúrbios obstrutivos crónicos das vias respiratórias são descritos abaixo. a. Asma 0 factor de necrose tumoral foi implicado na fisiopatologia da asma, (Anticevich, SZ, et al., (1995) Eur. J. Pharmacol. 284:221-5; Thomas, PS, et al. , 1995. Am. J. Respir. Crit. Care Med. 152:76-80; Thomas, PS, Heywood, G. (2002) Thorax. 57:774-8). Por exemplo, verificou-se que os ataques agudos de asma estão associados a neutrofilia pulmonar e níveis elevados de TNF BAL (Ordonez CL. et al., (2000) Am. J. Respir. Crit. Care Med. 161:1185) . Verificou-se que a gravidade dos sintomas de asma se correlaciona com níveis de endotoxinas no pó doméstico. Nos ratos, os anticorpos anti-TNF reduziram as alterações nas vias respiratórias induzidas por endotoxinas (Kips et al., (1992) Am. Rev. Respir. Dis. 145:332). O termo "asma" tal como aqui utilizado, refere-se a um distúrbio em que a inflamação das vias respiratórias faz com que o fluxo de ar para dentro e para fora dos pulmões esteja restringido. A asma é também referida como asma brônquica, asma induzida por exercício - doença brônquica e reativa das vias respiratórias (RAD). Nalguns casos, a asma está associada a alergias e/ou é familiar. A asma inclui uma condição que se caracteriza por flutuações difundidas no diâmetro ou calibre das vias respiratórias brônquicas durante curtos períodos de tempo, resultando em alterações na função pulmonar. O aumento da resistência ao fluxo de ar resultante produz sintomas no sujeito afectado, incluindo falta de ar (dispneia), constrição no peito ou "aperto", e chiado.
Os pacientes com asma são caracterizados de acordo com as diretrizes do NIH, são descritas como intermitente leve, persistente leve, persistente moderada e persistente grave (ver NAEPP Expert Panel Report Guidelines for the Diagnosis and Management of Asthma-Update on Selected Topics 2002. JACI 2002; 110: S141-S209; "Guidelines for the Diagnosis and
Management of Asthma". Publicação NIH 97-4051, Julho 1997). Os pacientes com diagnóstico de asma persistente moderada são frequentemente tratados com corticosteróides inalados. Os pacientes com diagnóstico de asma persistente grave são frequentemente tratados com altas doses de corticosteroides inalados e corticosteroides p.o. b. Doença pulmonar obstrutiva crónica (DPOC) O factor de necrose tumoral foi implicado na fisiopatologia de doença pulmonar obstrutiva crónica, (Keatings, VM. (2000) Chest. 118:971-5; Sakao, S, et ai., (2001) Am. J. Respir. Crit. Care Med. 163:420-22; Sakao, S., et ai. , (2002) Chest 122:416-20) . O termo "doença pulmonar obstrutiva crónica" ou "DPOC" tal como aqui utilizado indiferentemente, refere-se a um grupo de doenças pulmonares caracterizadas por fluxo de ar limitado com graus variáveis de ampliação dos alvéolos e destruição do tecido pulmonar. O termo DPOC inclui bronquite crónica (hipersecreção de muco com hiperplasia da glândula submucosa de células caliciformes), bronquite obstrutiva crónica, ou enfisema (destruição do parênquima das vias respiratórias), ou combinações destas condições. O enfisema e a bronquite crónica são as formas mais comuns de doença pulmonar obstrutiva crónica. A DPOC é definida por obstrução irreversível das vias respiratórias.
Na DPOC, a inflamação crónica leva ao estreitamento fixo das vias respiratórias pequenas e destruição do parênquima pulmonar e da parede alveolar (enfisema). Esta caracteriza-se por aumento do número de macrófagos, neutrófilos e linfócitos T citotóxicos alveolares, e pela libertação de múltiplos mediadores inflamatórios (lípidos, quimiocinas, citocinas, factores de crescimento). Esta inflamação leva a fibrose com um estreitamento das vias respiratórias pequenas e destruição do parênquima pulmonar. Existe também um elevado nível de stresse oxidativo, que pode amplificar esta inflamação. C. Distúrbios Coronários O TNF foi implicado na f isiopatologia de uma ampla variedade de distúrbios coronários, incluindo reestenose (ver, p. ex., Clausell et al. , (1994), supra·, Medall et al. , (1997)
Heart 78(3):273). Tal como aqui utilizado, o termo "um distúrbio coronário em que a atividade de TNF é prejudicial" destina-se a incluir doenças coronárias e cardiovasculares em que se mostrou que a presença de TNF num sujeito sofrendo do distúrbio é ou suspeita-se que seja responsável pela fisiopatologia do distúrbio ou um factor que contribui para um agravamento do distúrbio, incluindo distúrbios cardiovasculares, p. ex., reestenose. Os distúrbios coronários em que a atividade de TNF é prejudicial resultam frequentemente de um bloqueio numa artéria. Um tal bloqueio pode ser causado por um coágulo, que geralmente se forma numa artéria coronária que foi anteriormente estreitada por alterações geralmente relacionadas com aterosclerose. Por exemplo, se a placa aterosclerótica dentro da parede arterial se quebrar, pode provocar a formação de um trombo ou coágulo.
Tais distúrbios podem ser evidenciados, por exemplo, por um aumento na concentração de TNF num fluido biológico de um sujeito sofrendo do distúrbio (p. ex., um aumento na concentração de TNF no soro, plasma, fluido sinovietç:. do sujeito), que pode ser detetado, por exemplo, utilizando um anticorpo anti-TNF , tal como descrito acima. Um distúrbio coronário pode também ser causado por um desequilíbrio na pressão arterial, um mau funcionamento do coração, ou uma oclusão de um vaso sanguíneo, p. ex., por um trombo. Distúrbios coronários incluem tanto doença da artéria coronária como doença vascular periférica.
Existem numerosos exemplos de distúrbios coronários em que a atividade de TNF é prejudicial, incluindo reestenose. A utilização dos anticorpos, porções de anticorpo e outros inibidores de TNF aqui descritos, no tratamento de úíteios coronários específicos é discutida mais adiante. Em certas concretizações, o anticorpo, porção de anticorpo, ou outro inibidor de TNF aqui descrito é administrado ao sujeito em combinação com outro agente terapêutico, tal como descrito abaixo. É aqui descrito um método para inibição da atividade de TNF num sujeito com um difeto coronário. São também aqui descritos métodos para inibição ou diminuição da atividade de TNF num sujeito com um distúrbio coronário, compreendendo a administração ao sujeito de um anticorpo, ou porção de anticorpo, ou outro inibidor de TNF aqui descrito de modo a que a atividade de TNF no sujeito seja inibida ou diááau
De preferência, o TNF é TNF humano e o sujeito jeito su humano. Alternativamente, o sujeito pode ser um mamífero expressando um TNF com o qual um anticorpo aqui descrito reaja de forma cruzada. Ainda adicionalmente, o sujeito pode ser um mamífero no qual foi introduzido hTNF (p. ex. ,raaés de administração de hTNF ou através da expressão de um transgene de hTNF ). Um anticorpo aqui descrito pode ser administrado a um sujeito humano para fins terapêuticos (discutido mais adiante). Além disso, um anticorpo aqui descrito pode ser administrado a um mamífero não humano expressando um TNF com o qual o anticorpo reaja de forma cruzada (p. ex., um primata, porco ou ratinho) para fins veterinários ou como um modelo animal de doença humana. Independentemente dos últimos, tais modelos animais podem ser úteis para avaliação da eficácia terapêutica dos anticorpos aqui descritos (p. ex., testes das dosagens e intervalos de tempo de administração).
Modelos animais vulgarmente utilizados para estudo de distúrbios coronários, incluindo reestenose, incluem o modelo de ligadura da artéria carótida de rato ou ratinho e o modelo de lesão da artéria carótida (Ferns et al. , (1991) Science 253:1129; Clowes et ai., (1983) Lab. Invest. 49:208; Lindner et al. , (1993) Circ. Res. 73:792) . No modelo de ligadura da artéria carótida, o fluxo de sangue arterial é interrompido através da ligação do vaso próximo da bifurcação distai. Tal como descrito em Clowes et al., o modelo de lesão da artéria carótida é realizado de modo a que a artéria carótida comum seja desnudada do endotélio através da passagem intraluminal de um cateter de balão introduzido através da artéria carótida externa. Às 2 semanas, a artéria carótida está marcadamente estreitada devido à constrição das células do músculo liso, mas entre as 2 e as 12 semanas a espessura da íntima duplica conduzindo a uma diminuição do tamanho do lúmen. Qualquer um destes modelos pode ser utilizado para determinar o potencial da ação terapêutica dos anticorpos de TNF aqui descritos na prevenção e no tratamento de reestenose em humanos. O anticorpo aqui descrito pode ser utilizado para tratar distúrbios cardiovasculares em que a atividade de TNF seja prejudicial, em que se espera que a inibição da atividade de TNF alivie os sintomas e/ou a progãesda doença coronária ou previna a doença coronária. Os sujeitos sofrendo de, ou em risco de desenvolvimento de distúrbios coronários podem ser identificados através de sintomas clínicos. Sintomas clínicos na doença coronária incluem geralmente dor no peito, falta de ar, fraqueza, desmaios, alterações na consciência, dor nas extremidades, dispneia paroxística noturna, ataques isquémicos transitórios e outros desses fenómenos experimentados pelo paciente. Os sinais clínicos de doença coronária podem também incluir anomalias electrocardiográficas, pulsos periféricos alterados, sopros arteriais, sons, frequências e sibilos cardíacos anormais, distensão venosa jugular, alterações neurológicas e outras tais verificações discernidas pelo clínico. Os distúrbios coronários podem também ser evidenciados, por exemplo, por um aumento na concentração de TNF num fluido Ògòdio de um sujeito sofrendo do distúrbio (p. ex., um aumento na concentração de TNF no soro, plasma, fluido sinovial, etc., do sujeito).
Exemplos de um distúrbio cardiovascular incluem, mas não estão limitados a, doença da artéria coronária, angina de peito, enfarte do miocárdio, danos no tecido cardiovascular causados por paragem cardíaca, danos do tecido cardiovascular causados por bypass cardíaco, choque cardiogénico, e hipertensão, aterosclerose, espasmo da artéria coronária, doença arterial coronária, doença valvular, arritmias, e cardiomiopatias. A utilização dos anticorpos, porções de anticorpo e outros inibidores de TNF aqui descritos no tratamento de doenças cardiovasculares específicas é discutido mais adiante. Em certas concretizações, o anticorpo, porção de anticorpo, ou outro inibidor de TNF aqui descrito é administrado ao sujeito em combinação com outro agente terapêutico, tal como descrito abaixo na secção III. 1. Reestenose 0 TNF foi implicado na fisiopatologia da reestenose (ver,
Zhou et al., (2002) Atherosclerosis 161:153; Javed et al., (2002) Exp. and Mol. Pathol. 73:104) . Por exemplo, no modelo de oclusão da carótida de murídeo, demonstrou-se em ratinhos TNF -/- uma redução de sete vezes na hiperplasia inicial em comparação com ratinhos de tipo selvagem (Zimmerman et ai., (2002) Am. J. Phsiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 283:R505). A reestenose pode ocorrer em resultado de qualquer tipo de reconstrução vascular, mesmo na vasculatura coronária ou na periferia (Colburn e Moore (1998) Myointimal Hyperplasia págs. 690-709 em "Vascular Surgery: A Comprehensive Review
Philadelphia"; Saunders). Por exemplo, estudos relataram taxas de reestenose sintomática de 30-50% após angioplastias coronárias (ver Berk e Harris (1995) Adv. Intern. Med. 40:455-501). Após endarterectomias da carótida, como mais um exemplo, 20% dos pacientes estudados tinham um estreitamento luminal superior a 50% (Clagett et al. , (1986) J. Vasc. Surg. 3:10- 23). A reestenose é evidenciada em diferentes graus de sintomatologia que acompanham lesões pré-oclusivas em diferentes localizações anatómicas, devido a uma combinação de fatores incluindo a natureza dos vasos envolvidos, a extensão da doença residual, e a hemodinâmica local. "Estenose", tal como aqui utilizado refere-se a um estreitamento de uma artéria tal como observado no distúrbio oclusivo ou na reestenose. A estenose pode ser acompanhada por sintomas que refletem uma diminuição do fluxo sanguíneo após o segmento arterial estreitado, caso em que o distúrbio dando origem à estenose é denominado como doença (isto é, doença oclusiva ou doença de reestenose) . A estenose pode existir de forma assintomática num vaso, para ser detetada apenas através de uma intervenção de diagnóstico tal como uma angiografia ou um estudo laboratorial vascular. O anticorpo aqui descrito pode ser utilizado para tratar um sujeito sofrendo de, ou em risco de desenvolver reestenose.
Um sujeito em risco de desenvolver reestenose inclui um sujeito que tenha sido submetido a ACTP . O sujeito pode ter tido também um stent inserido para prevenir reestenose. O anticorpo de TNF pode ser utilizado sozinho ou em combihacom um stent para prevenir a re-ocorrência de estenose num sujeito sofrendo de doença cardiovascular. 2. Insuficiência Cardíaca Congestiva O TNF foi implicado na fisiopatologia de insuficiência cardíaca congestiva (ver Zhou et al., (2002) Atherosclerosis 161:153) . Os níveis séricos de TNF são elevados em pacientes com insuficiência cardíaca congestiva, de uma forma que é diretamente proporcional à gravidade da doença (Levine et ai., (1990) N. Engl. J. Med. 323:236; Torre-Amione et al.r (1996) J. Am. Coll. Cardiol. 27:1201). Além disso, também foi mostrado que os inibidores de TNF melhoram os sintomas de insuficiência cardíaca congestiva (Chung et ai., (2003) Circulation 107:3133).
Tal como aqui utilizado, o termo "insuficiência cardíaca congestiva" inclui uma condição caracterizada por uma reduzida capacidade do coração para suprir os requisitos de oxigénio do corpo. Os sintomas e sinais de insuficiência cardíaca congestiva incluem diminuição do fluxo sanguíneo para os vários tecidos do corpo, acumulação de excesso de sangue em vários órgãos, p. ex., quando o coração não consegue bombear o sangue que regressa a ele pelas grandes veias, dispneia de esforço, fadiga e/ou edema periférico, p. ex., edema periférico resultante de disfunção ventricular esquerda. A insuficiência cardíaca congestiva pode ser aguda ou crónica. A manifestação de insuficiência cardíaca congestiva ocorre geralmente secundária a uma variedade de distúrbios cardíacos ou sistémicos que partilham uma perda temporária ou permanente da função cardíaca. Exemplos de tais distúrbios incluem hipertensão, doença arterial coronária, doença valvular, e cardiomiopatias, p. ex., cardiomiopatias hipertróficas, dilativas, ou restritivas.
Um "sujeito que tenha sofrido ou sofra de insuficiência cardíaca congestiva" é um sujeito que tem um distúrbio envolvendo uma síndroma clínica de diversas etiologias ligadas pelo denominador comum de bombeamento do coração diminuído, em que o coração é incapaz de bombear sangue comensurável com os requisitos dos tecidos metabolizadores, ou pode fazê-lo apenas a partir de uma pressão de enchimento elevada. Um "sujeito em risco de desenvolver insuficiência cardíaca congestiva" é um sujeito que tem uma propensão para desenvolver insuficiência cardíaca congestiva devido a certos fatores que afetam o sistema cardiovascular do sujeito. É desejável reduzir o risco de, ou prevenir o desenvolvimento de insuficiência cardíaca congestiva nestes sujeitos. A frase "com insuficiência cardíaca congestiva" inclui doentes que estão em risco de sofrer desta condição em relação à população geral, mesmo que possam ainda não ter sofrido desta, em virtude de apresentarem fatores de risco. Por exemplo, um paciente com hipertensão não tratada pode não ter sofrido de insuficiência cardíaca congestiva, mas está em risco devido à sua condição de hipertensão. 0 anticorpo D2E7 pode ser utilizado para tratar um sujeito em risco de desenvolver insuficiência cardíaca congestiva. 3. Síndromas coronárias agudas 0 TNF foi implicado na fisiopatologia de síndromas coronárias agudas (ver Libby (1995) Circulation 91:2844). As síndromas coronárias agudas incluem os distúrbios em que o sujeito experimenta dor devido a uma restrição de fluxo de sangue, resultando em que não chega ao coração oxigénio suficiente. Estudos verificaram que o TNF desempenha um papel na síndroma coronária aguda. Por exemplo, num novo modelo de rato de transplante cardíaco heterotrópico-ligadura coronária capaz de induzir enfarte do miocárdio na ausência de efeitos hemodinâmicos a jusante, a administração de recetor de TNF solúvel quimérico (sTNFR) aboliu a remodelação e disfunção transiente de LV (Nakamura, et ai., (2003) J. Cardiol. 41:41). Verificou-se também que a injeção direta de um plasmídeo de expressão de sTNFR no miocárdio, resultou numa redução do tamanho do enfarte em ratos experimentais de enfarte agudo do miocárdio (EAM) (Sugano et al., (2002) FASEB J. 16:1421).
Numa concretização, o anticorpo de TNF aqui descrito é usado para tratar ou prevenir uma síndroma coronária aguda num sujeito, em que a síndroma coronária aguda é um enfarte do miocárdio ou angina.
Tal como aqui utilizado, o termo "enfarte do miocárdio" ou "EM" refere-se a um ataque cardíaco. Um enfarte do miocárdio envolve a necrose ou dano permanente de uma região do coração devido a um fornecimento inadequado de oxigénio a essa área.
Esta necrose é tipicamente causada por uma obstrução numa artéria coronária a partir de qualquer aterosclerose ou um embolismo. EM que são tratados pelo anticorpo de TNF aqui descrito incluem enfarte do miocárdio tanto de ondas Q como de ondas não Q. A maioria dos ataques cardíacos são causados por um coágulo que bloqueia uma das artérias coronárias (os vasos sanguíneos que trazem o sangue e o oxigénio para o músculo cardíaco). Por exemplo, um coágulo na artéria coronária interrompe o fluxo de sangue e de oxigénio para o músculo cardíaco, causando a morte das células do coração dessa área. 0 músculo cardíaco danificado perde permanentemente a sua capacidade de contrair, e o músculo cardíaco remanescente precisa de o compensar. Um EM pode também ser causado por stresse demasiado grande no indivíduo. 0 termo "angina" refere-se a dor espasmódica, asfixiante ou sufocante, e denota especialmente a angina de peito que é uma dor torácica paroxística devida, na maioria das vezes, a anóxia do miocárdio. A angina inclui tanto angina variante como angina de esforço. Um sujeito possuindo angina tem uma doença cardíaca isquémica que se manifesta por dor súbita, grave, de pressão subesternal que irradia geralmente para o ombro esquerdo e ao longo do braço esquerdo. 0 TNF foi implicado em angina, uma vez que os níveis de TNF são sobre-regulados em doentes tanto com EM como com angina estável (Balbay et al., (2001) Angiology 52109) . 4. Aterosclerose "Aterosclerose" tal como aqui utilizado refere-se a uma condição na qual material gordo é depositado ao longo das paredes das artérias. Este material gordo espessa, endurece, e pode eventualmente bloquear as artérias. A aterosclerose é também referida arteriosclerose, endurecimento das artérias, e acumulação de placa arterial. Foi demonstrado que anticorpos policlonais dirigidos contra TNF ao s eficazes para neutralizar a atividade de TNF resultando em inflamação e reestenose no modelo de coelho de aterosclerose (Zhou et al., supra) . Assim, o anticorpo de TNF aqui descrito pode ser usado para tratar ou prevenir sujeitos afligidos com ou em risco de ter aterosclerose. 5. Cardiomiopatia O termo "cardiomiopatia" tal como aqui utilizado é utilizado para definir doenças do miocárdio em que o músculo do coração ou miocárdio é enfraquecido, geralmente resultando em bombeamento inadequado do coração. A cardiomiopatia pode ser causada por infeções virais, ataques cardíacos, alcoolismo, hipertensão grave de longo prazo (pressão arterial alta), ou por causas autoimunes.
Em aproximadamente 75-80% dos pacientes com insuficiência cardíaca a doença das artérias coronárias é a causa subjacente da cardiomiopatia e é designada "cardiomiopatia isquémica" . A cardiomiopatia isquémica é causada por ataques cardíacos, que deixam cicatrizes no músculo cardíaco ou miocárdio. O miocárdio afetado não é então capaz de contribuir para a função de bombeamento do coração. Quanto maiores as cicatrizes ou mais numerosos os ataques cardíacos, maior é a possibilidade de desenvolver cardiopatia isquémica.
As cardiomiopatias que não são atribuídas a doença das artérias coronárias subjacente, são designadas "cardiomiopatias não isquémicas. As "cardiomiopatias não isquémicas incluem, mas não estão limitadas a cardiomiopatia idiopática, cardiomiopatia hipertrófica, cardiomiopatia alcoólica, cardiomiopatia dilatada, cardiomiopatia periparto, e cardiomiopatia restritiva. D. Distúrbios Metabólicos O TNF foi implicado na fisiopatologia de uma grande variedade de distúrbios, incluindo distúrbios metabólicos, tais como diabetes e obesidade (Spiegelman e Hotamisligil (1993) Cell 73: 625; Chu et ai., (2000) Int. J. Obes. Relat.
Metab. Disord. 24:1085; Ishii et ai., (2000) Metabolism 49:1616). São aqui descritos métodos para a atividade de TNF num sujeito sofrendo de tal distúrbio metabólico, cujo método compreende a administração ao sujeito de um anticorpo, porção de anticorpo, ou outro inibidor de TNF de modo a que a atividade de TNF no sujeito sofrendo de um drteio metabólico seja inibida. O anticorpo de TNF pode também ser utilizado para tratar sujeitos que estejam em risco de desenvolver um distúrbio metabólico. Os distúrbios metabólicos são frequentemente associados a artrite, incluindo artrite reumatoide. Numa concretização, o anticorpo aqui descrito é utilizado para tratar um sujeito que sofra de um distúrbio metabólico associado a artrite reumatoide. Noutra concretização, o anticorpo de TNF aqui descrétaatilizado para tratar distúrbios associados a diabetes ou obesidade.
Os distúrbios metabólicos afetam como o corpo processa as substâncias necessárias para realizar funções fisiológicas. Vários distúrbios metabólicos partilham certas características, isto é, estão associados a resistência à insulina, falta de capacidade de regular o açúcar no sangue, aumento de peso e aumento do índice de massa corporal. Exemplos de distúrbios metabólicos incluem diabetes e obesidade. Exemplos de diabetes incluem diabetes mellitus tipo 1, diabetes mellitus tipo 2, neuropatia diabética, neuropatia periférica, retinopatia diabética, úlceras diabéticas, úlceras de retinopatia, macrovasculopatia diabética e obesidade. Exemplos de distúrbios metabólicos que podem ser tratados com o anticorpo TNF aqui descrito estão descritos com mais detalhe adiante: 1. Diabetes 0 fator de necrose tumoral foi implicado na fisiopatologia de diabetes, (ver p. ex., Navarro J.F., Mora C., Maca, Am. J. Kidney Dis. 2003 Jul; 42(1):53-61; Daimon, M. et ai., Diabetes Care. 2003 Jul; 26(7):2015-20; Zhang, M. et ai., J. Tongji Med Univ. 1999; 19(3):203-5, Barbieri, M. et ai., Am. J. Hypertens. 2003 Jul; 16(7) :537-43) . Por exemplo, TNF está implicado na fisiopatologia de resistência à insulina. Verificou-se que os níveis séricos de TNF em pacientes com cancro gastrointestinal se correlacionam com a resistência à insulina (ver p. ex., McCall, J. et ai., Br. J. Surg. 1992; 79:1361-3). A diabetes inclui os dois tipos mais comuns do distúrbio, nomeadamente diabetes tipo I e diabetes tipo II, que resultam ambos da incapacidade do corpo para regular insulina. A insulina é uma hormona libertada pelo pâncreas em resposta ao aumento dos níveis de açúcar (glicose) no sangue. O termo "diabetes tipo 1", tal como aqui utilizado, refere-se a uma doença crónica que ocorre quando o pâncreas produz pouca insulina para regular os níveis de açúcar no sangue apropriadamente. A diabetes tipo 1 é também referida como diabetes mellitus insulinodependente, DMID, diabetes de início juvenil e diabetes - tipo I. A diabetes tipo 1 representa o resultado de uma destruição autoimune progressiva das células- paátreas com subsequente deficiência de insulina. 0 termo "diabetes tipo 2", refere-se a uma doença crónica que ocorre quando o pâncreas não produz insulina suficiente para manter os níveis de glicose no sangue normais, frequentemente porque o corpo não responde bem à insulina. A diabetes tipo 2 é também referida como diabetes mellitus não insulinodependente, DMND, e diabetes - tipo II. A diabetes pode ser diagnosticada através da administração de um teste de tolerância à glicose.
Clinicamente, a diabetes é frequentemente dividida em várias categorias básicas. Exemplos primários destas categorias incluem diabetes mellitus autoimune, diabetes mellitus não insulinodependente (tipo 1 DMND), diabetes mellitus insulinodependente (tipo 2 DMID), diabetes mellitus não autoimune, diabetes mellitus não insulinodependente (tipo 2 DMNID), e diabetes juvenil de início tardio (MODY). Outra categoria, frequentemente referida como secundária, refere-se a diabetes provocada por uma condição identificável que causa ou permite que uma síndroma diabética se desenvolva. Exemplos de categorias secundárias incluem, diabetes causada por doença pancreática, anomalias hormonais, diabetes induzida por fármacos ou químicos, diabetes causada por anomalias do recetor de insulina, diabetes associada a síndromas genéticas, e diabetes de outras causas (ver p. ex., Harrison (1996) 14th ed., New York, McGraw-Hill) . A diabetes manifesta-se nas categorias anteriores e pode causar várias complicações que são discutidas nas secções a seguir. Assim, o anticorpo, ou fragmento de ligação ao antigénio deste, aqui descrito pode ser utilizado para tratar diabetes. Numa concretização, o anticorpo de TNF , ou um fragmento de ligação ao antigénio deste, aqui descrito é utilizado para tratar diabetes associada às categorias identificadas acima. A diabetes é frequentemente tratada com dieta, dosagens de insulina, e vários medicamentos aqui descritos. Assim, o anticorpo de TNF pode também ser administrado em combinação com agentes normalmente utilizados para tratar distúrbios metabólicos e dor geralmente associados a diabetes.
Numa concretização, o anticorpo de TNF aqui descrito pode também ser usado para tratar distúrbios associados a diabetes. A diabetes manifesta-se em muitas complicações e condições associadas a diabetes, incluindo as seguintes categorias: a. Neuropatia Diabética e Neuropatia Periférica 0 fator de necrose tumoral foi implicado na fisiopatologia da neuropatia diabética e neuropatia periférica (ver Benjafield et al., (2001) Diabetes Care. 24:753; Qiang, X. et al., (1998) Diabetologia. 41:1321-6; Pfeiffer et al., (1997)
Horm. Me tab. Res. 29:111) . O termo "neuropatia", também referido como danos diabéticos dos nervos, tal como aqui utilizado, refere-se a uma complicação comum da diabetes na qual os nervos são danificados em resultado de hiperglicemia (elevados níveis de açúcar no sangue). É reconhecida uma variedade de neuropatias diabéticas, tais como polineuropatia sensorimotora distai, neuropatia motora focal, e neuropatia autonômica. O termo "neuropatia periférica", também conhecida como neurite periférica e neuropatia diabética, tal como aqui utilizado, refere-se à falha dos nervos em transmitir informação para e a partir do cérebro e espinal-medula. A neuropatia periférica produz sintomas tais como dor, perda de sensibilidade, e incapacidade de controlar os músculos. Nalguns casos, a insuficiência dos nervos para controlar os vasos sanguíneos, a função intestinal, e outros órgãos resulta em pressão sanguínea anormal, digestão, e perda de outros processos básicos involuntários. A neuropatia periférica pode envolver danos num único nervo ou grupo de nervos (mononeuropatia) ou pode afetar vários nervos (polineuropatia).
As neuropatias que afetam pequenas fibras mielinizadas e não mielinizadas dos nervos simpáticos e parassimpáticos são conhecidas como "neuropatias periféricas". Além disso, o distúrbio relacionado de neuropatia periférica, também conhecido como neurite periférica e neuropatia diabética, refere-se à incapacidade dos nervos em transmitir a informação para e a partir do cérebro e espinal-medula. Isso produz sintomas tais como dor, perda de sensibilidade, e incapacidade de controlar os músculos. Nalguns casos, a incapacidade dos nervos em controlar os vasos sanguíneos, a função intestinal, e outros órgãos resulta em pressão sanguínea anormal, digestão anormal, e perda de outros processos básicos involuntários. A neuropatia periférica pode envolver danos num único nervo ou grupo de nervos (mononeuropatia) ou pode afetar vários nervos (polineuropatia). 0 termo "neuropatia diabética" refere-se a uma complicação comum da diabetes, em que nervos estão danificados em resultado de hiperglicemia (elevados níveis de açúcar no sangue). A neuropatia diabética é também referida como neuropatia e danos nos nervos diabéticos. É reconhecida uma variedade de neuropatias diabéticas, tais como polineuropatia sensorimotora distai, neuropatia motora focal, e neuropatia autonômica. b. Retinopatia Diabética 0 fator de necrose tumoral foi implicado na fisiopatologia da retinopatia diabética (Scholz et ai., (2003) Trends Microbiol. 11:171) . O termo "retinopatia diabética" tal como aqui utilizado, refere-se a lesão progressiva da retina do olho causada por diabetes de longo prazo. A retinopatia diabética inclui retinopatia proliferativa. A neuropatia proliferativa inclui por sua vez neovascularização, hemorragia da retina e descolamento da retina.
Na retinopatia avançada, pequenos vasos proliferam na superfície da retina. Estes vasos sanguíneos são frágeis, tendem a sangrar e podem causar hemorragias da retina. A hemorragia pode obscurecer a visão, e à medida que a hemorragia é reabsorvida forma tecidos fibrosos que predispõem a descolamentos da retina e perda de visão. Além disso, a retinopatia diabética inclui retinopatia proliferativa que inclui neovascularização, hemorragia da retina e descolamento da retina. A retinopatia diabética inclui também "retinopatia de fundo" que envolve mudanças ocorrendo com as camadas da retina. c. Ulcerações Diabéticas e Ulcerações de Retinopatia 0 fator de necrose tumoral foi implicado na fisiopatologia de ulcerações diabéticas, (ver Lee Lee et ai., (2003) Hum. Immunol. 64:614; Navarro et ai., (2003) Am. J. Kidney. Dis. 42:53; Daimon et al., (2003) Diabetes Care. 26:2015; Zhang et ai., (1999) J. Tongji Med. Univ. 19:203; Barbieri et al., (2003) Am. JHypertens. 16:537; Venn et al., (1993) Arthritis Rheum. 36:819; Westacott et al., (1994) J. Rheumatol. 21:1710). O termo "ulcerações diabéticas", tal como aqui utilizado, refere-se a uma úlcera que resulta como uma complicação da diabetes. Uma úlcera é uma lesão tipo cratera na pele ou membrana mucosa causada por uma condição inflamatória, infeciosa, maligna ou um distúrbio metabólico. Tipicamente as úlceras diabéticas podem ser verificadas nos membros e nas extremidades, mais tipicamente nos pés. Essas úlceras, causadas por condições diabéticas, tais como neuropatias e uma insuficiência vascular, podem levar a isquemia e má cicatrização de feridas. Ulcerações mais extensas podem evoluir para osteomielite. Uma vez desenvolvida a osteomielite, esta pode ser difícil de erradicar apenas com antibióticos e pode ser necessária a amputação. O termo "ulcerações de retinopatia", como aqui utilizado refere-se a uma úlcera que causa ou resulta em danos no olho e na retina do olho. As ulcerações de retinopatia podem incluir condições tais como hemorragias retinopáticas. d. Macrovasculopatia Diabética O fator de necrose tumoral foi implicado na fisiopatologia da macrovasculopatia diabética (Devaraj et ai., (2000) Circulation. 102:191; Hattori Y et al., (2000) Cardiovasc. Res. 46:188; Clausell N et al., (1999) Cardiovasc. Pathol. 8:145). O termo "macrovasculopatia diabética", também referida como "doença macrovascular", tal como aqui utilizado, refere-se a uma doença dos vasos sanguíneos que resulta de diabetes. A complicação da macrovasculopatia diabética ocorre quando, por exemplo, gordura e coágulos sanguíneos se acumulam nos grandes vasos sanguíneos e aderem às paredes dos vasos. As macrovasculopatias diabéticas incluem doenças tais como doença coronária, doença cerebrovascular e doença vascular periférica, hiperglicemia e doença cardiovascular, e acidentes vasculares cerebrais. 2. Obesidade 0 fator de necrose tumoral foi implicado na fisiopatologia da obesidade (ver, p. ex., Pihlajamaki, J. et al., (2003) Obes.
Res. 11:912; Barbieri et al., (2003) Am. J. Hypertens. 16:537;
Tsuda et al., (2003) J. Nutr. 133:2125). A obesidade aumenta o risco de uma pessoa de doença e morte devido a diabetes, acidente vascular cerebral, doença arterial coronária, hipertensão, colesterol elevado e distúrbios nos rins e vesícula biliar. A obesidade pode também aumentar o risco de alguns tipos de cancro e pode ser um fator de risco para o desenvolvimento de osteoartrite e apneia do sono. A obesidade pode ser tratada com o anticorpo aqui descrito sozinho ou em combinação com outros distúrbios metabólicos, incluindo diabetes. E. Anemia O TNF foi implicado na fisiopatologia de uma grande variedade de anemias (ver, p. ex. , Jongen-Lavrencic M., et al., (1997) J. Rheumatol. 24 (8) : 1504-9; Demeter J., et al. , (2002) Ann. Hematol. 81 (10) :566-9; DiCato M., (2003) The
Oncologist 8 (supl. 1):19-21). São aqui descritos métodos para inibição da atividade de TNF num sujeito sofrendo de um tal distúrbio, cujo método compreende a administração ao sujeito de um anticorpo, porção de anticorpo, ou outro inibidor de TNF de modo a que seja inibida a atividade de TNF no sujeite sofrendo de anemia. Numa concretização, a anemia está associada a artrite reumatoide. O termo "anemia" tal como aqui utilizado, refere-se a um número anormalmente baixo de glóbulos vermelhos em circulação ou uma diminuição da concentração de hemoglobina no sangue.
Exemplos de anemia relacionada com artrite reumatoide incluem, por exemplo, anemia de doença crónica, anemia por deficiência de ferro, e anemia hemolítica autoimune. Numa concretização, descreve-se aqui um método para tratar anemias relacionadas com, por exemplo, artrite reumatoide, anemias de infeção e doenças inflamatórias crónicas, anemia por deficiência de ferro, anemia hemolítica autoimune, anemia mielotísica, anemia aplásica, anemia hipoplásica, aplasia pura dos glóbulos vermelhos e anemia associada a insuficiência renal ou distúrbios endócrinos, anemias megaloblásticas, defeitos no heme ou na síntese de globina, anemia causada por um defeito estrutural nos glóbulos vermelhos, p. ex., anemia falciforme e anemias de origens desconhecidas tais como anemia sideroblástica, anemia associada a infeções crónicas tais como malária, tripanossomíase, HIV, vírus da hepatite ou outros vírus, e anemias mielotísicas causadas por deficiências da medula. F. Dor 0 TNF foi implicado na fisiopatologia de uma grande variedade de síndromas de dor (ver, p. ex., Sorkin, LS et ai., (1997) Neuroscience. 81(1):255-62; Huygen, FJ., et al. , (2002)
Mediators Inflamm. 11(1) :47-51; Parada, CA., et al. , (2003)
Eur. J. Neurosci. 17(9) :1847-52) . São aqui descritos métodos para inibição da atividade de TNF num sujeito sofrendo de um tal distúrbio de dor, cujo método compreende a administração ao sujeito de um anticorpo, porção de anticorpo, ou outro inibidor de TNF de modo a que seja inibida a atividade de TNF no sujeito sofrendo de dor. A dor foi definida numa variedade de formas, incluindo dor nocicetiva e dor neuropática. A forma mais vulgarmente experimentada da dor pode ser definida como o efeito de um estimulo nas terminações nervosas, o que resulta na transmissão de impulsos para o cérebro. A dor está também vulgarmente associada a distúrbios inflamatórios, incluindo, por exemplo, artrite reumatoide.
Numa concretização, o anticorpo aqui descrito é utilizado para tratar um sujeito que sofra de dor associada a artrite reumatoide. Exemplos de distúrbios de dor, em que a atividade de TNF é prejudicial são discutidos mais adiante. 1. Dor Neuropática 0 fator de necrose tumoral foi implicado na fisiopatologia da dor neuropática (ver Sommer, C., (1999) Schmerz 13(5) :315- 23; Empl, M. et al., (2001) Neurology 56(10) :1371-7; Schafers, M, et al., (2003) J. Neurosci. 23(7) :3028-38) . Tal como aqui utilizado, o termo "dor neuropática" refere-se a dor que resulta de lesão num nervo, espinal-medula, ou cérebro, e envolve frequentemente supersensibilidade neural. Exemplos de dor neuropática incluem dor lombar crónica, dor associada a artrite, dor associada a cancro, neuralgia de herpes, dor do membro fantasma, dor central, dor neuropática resistente a opioides, dor de lesão óssea, e dor durante o trabalho de parto. Outros exemplos de dor neuropática incluem dor pós-operatória, cefaleias em salvas, dor de dentes, dor cirúrgica, dor resultante de queimaduras graves, por exemplo de terceiro grau, dor pós-parto, dor de angina, dor relacionada com o trato genitourinário, incluindo cistite. A dor neuropática é diferenciada da dor nocicetiva. A dor envolvendo um mecanismo nocicetivo está geralmente limitada no tempo ao período de reparação do tecido e é geralmente aliviada por agentes analgésicos disponíveis ou opioides (Myers, Regional Anesthesia 20:173-184 (1995)) . A dor neuropática é tipicamente de longa duração ou crónica e desenvolve-se frequentemente dias ou meses após uma lesão inicial aguda num tecido. A dor neuropática pode envolver dor persistente, espontânea, bem como alodinia, que é uma resposta dolorosa a um estímulo que normalmente não é doloroso. A dor neuropática pode também ser caracterizada por hiperalgesia, em que há uma resposta acentuada a um estímulo doloroso que habitualmente é trivial, tal como uma picada de alfinete. Ao contrário da dor nocicetiva, a dor neuropática é geralmente resistente à terapia de opioides (Myers, supra, 1995). Assim, o anticorpo, ou fragmento de ligação ao antigénio deste, aqui descrito pode ser utilizado para tratar dor neuropática. 2. Dor nocicetiva
Tal como aqui utilizado, o termo "dor nocicetiva" refere-se a dor que é transmitida através de vias neuronais intactas, i.e., dor causada por uma lesão no corpo. A dor nocicetiva inclui sensação somática e função normal da dor, e informa o sujeito de dano tecidual iminente. A via nocicetiva existe para proteção do sujeito (p. ex., a dor sentida em resposta a uma queimadura) . A dor nocicetiva inclui dor óssea, dor visceral, e dor associada a tecidos moles. 0 fator de necrose tumoral foi implicado na fisiopatologia de dor visceral (ver Coelho A., et al., (2000) Am. J. Physiol.
Gastrointest. Liver Physiol. 279:G7 81-G7 90; Coelho A, et al. , (2000) Brain Res Bull. 52 (3) :223-8) . A dor visceral é utilizada para se referir a dor nocicetiva que é mediada por recetores nas fibras nervosas A-delta e C. As fibras nervosas A-delta e C são as que estão localizadas na pele, no osso, no tecido conjuntivo, no músculo e nas vísceras. A dor visceral pode ser vaga na distribuição, espasmódica na natureza e é geralmente descrita como de natureza profunda, causadora de sofrimento, de aperto e cólica. Exemplos de dor visceral incluem dor associada a um ataque cardíaco, em que a dor visceral pode ser sentida no braço, no pescoço e/ou nas costas, e dor da cápsula do fígado, em que a dor visceral pode ser sentida nas costas e/ou no ombro direito. Assim, o anticorpo de TNF , ou fragmento de ligação ao antigénio deste, aqui descrito pode ser utilizado para tratar dor visceral. G. Distúrbios Hepáticos O TNF foi implicado na fisiopatologia de uma grande variedade de distúrbios hepáticos (ver p. ex., Colletti, LM., et al. , (1990) J. Clin. Invest. 85(6) :1936-1943; Tiegs, G. (1997) Acta Gastroenterol. Belg. 60(2):176-9; Fernandez, ED., et al., (2000) J. Endotoxin. Res. 6(4) :321-8) . São aqui descritos métodos para a atividade de TNF num sujeito sofrendo de um tal distúrbio hepático, cujo método compreende a administração ao sujeito de um anticorpo, porção de anticorpo, ou outro inibidor de TNF aqui descrito de modo a que seja inibida tal atividade de TNF no sujeito sofrendo de um distúrbio hepático.
Tal como aqui utilizado, o termo "um distúrbio hepático em que a atividade de TNF é prejudicial" destina-se a incluir doenças e outros distúrbios do fígado em que se mostrou que a presença do TNF num sujeito sofrendo do distúrbio é ou suspeita-se que seja responsável pela fisiopatologia do distúrbio, ou um factor que contribui para piorar o distúrbio. Assim, um distúrbio hepático em que a atividade de TNF é prejudicial é um distúrbio no qual se espera que a inibição da atividade de TNF alivie os sintomas e/ou a progãassio distúrbio hepático.
Distúrbios hepáticos incluem muitas doenças e distúrbios em que o fígado funciona de forma incorreta ou cessa de funcionar. As lesões hepatocelulares podem incluir cirrose alcoólica, deficiência em anti-tripsina 1, cirrose autoimune, cirrose criptogénica, hepatite fulminante, hepatite B e C, e esteato-hepatite. Exemplos de distúrbios do trato biliar incluem fibrose quística, cirrose biliar primária, colangite esclerosante e obstrução biliar (Wiesner, R.H, "Current Indications, Contra-Indications and Timing for Liver Transplantation" (1996), em "Transplantation of the Liver", Saunders (publ.); Busuttil, R. W. and Klintmalm, G. B. (eds.) Capítulo 6, p. ex., Tabelas 6-3 e 6-5 bem como as FIGS. 6-11; Klein, A. W., (1998) "Partial Hypertension: The Role of Liver
Transplantation", Musby (publ.) em "Current Surgical Therapy 6.sup.th" Ed. Cameron, J. (ed). 0 termo "hepatite" refere-se a inflamação do fígado. A hepatite pode ser causada por infeções com vários organismos, incluindo bactérias, vírus (Hepatite A, B, C, etc.) ou parasitas. Toxinas químicas tais como álcool, fármacos ou cogumelos venenosos podem também danificar o fígado e fazer com que se torne inflamado. Uma causa rara mas extremamente perigosa de hepatite resulta de sobredosagem de acetaminofeno (Tylenol), que pode ser mortal. Além disso, as células imunitárias do corpo podem atacar o fígado e causar hepatite autoimune. A hepatite pode resolver-se rapidamente (hepatite aguda), ou causar doença de longo prazo (hepatite crónica). Nalguns casos, podem resultar danos progressivos do fígado ou insuficiência hepática. A incidência e gravidade da hepatite variam dependendo de muitos fatores, incluindo a causa dos danos no fígado e quaisquer doenças subjacentes num paciente.
Numa concretização, é aqui descrito um método para tratamento de um distúrbio hepático no qual a atividade de TNF é prejudicial, compreendendo a administração a um sujeito de uma quantidade eficaz de um inibidor de TNF , de modo a que o referido distúrbio seja tratado. Numa concretização, o distúrbio hepático é selecionado a partir do grupo que consiste em vírus da hepatite C, hepatite autoimune, doença do fígado gordo, vírus da hepatite B, hepatotoxicidade, e hepatite não alcoólica, incluindo esteato-hepatite não alcoólica (EHNA). Exemplos de distúrbios hepáticos são ainda descritos abaixo. 1. Vírus da Hepatite C (HCV) 0 fator de necrose tumoral foi implicado na fisiopatologia do vírus da hepatite C (ver Gonzalez-Amaro (1994) J. Exp. Med. 179:841-8; Nelson, DR, et al., (1997) Dig. Dis. Sei. 42:2487- 94; Kallinowski, B, et al., (1998) Clin Exp Immunol. 111:269- 77) . 0 termo "vírus da hepatite C" ou "HCV" é utilizado para descrever o vírus da hepatite que é o agente causal da hepatite não-A, não-B. 0 vírus da hepatite C causa uma inflamação do fígado. A infeção por HCV causa hepatite C. A hepatite C na fase aguda é, em geral, mais suave do que a hepatite B, mas uma grande proporção de tais infeções torna-se crónica. 0 HCV é a principal causa de hepatite aguda e doença crónica do fígado, incluindo cirrose e cancro do fígado. 0 HCV é um dos vírus (A, B, C, D, e E), que em conjunto representam a grande maioria dos casos de hepatites virais. É um vírus de ARN encapsulado da família Flaviviridae que parece ter uma estreita gama de hospedeiros. Uma característica importante do vírus é a mutabilidade relativa do seu genoma, que por sua vez está provavelmente relacionada com a elevada propensão (80%) de induzir infeção crónica. O HCV é agrupado em vários genótipos distintos que podem ser importantes na determinação da gravidade da doença e da resposta ao tratamento. Numa concretização, o anticorpo de TNF , ou um fragmento de ligação ao antigénio deste, aqui descrito pode ser utilizado para tratar HCV.
Numa concretização, os sujeitos que estão infetados com HCV são tratados com o anticorpo de TNF aqui desorit
Sintomas da infeção de HCV (hepatite C) incluem pelo menos um dos seguintes: icterícia, dor abdominal (especialmente no abdómen superior direito), fadiga, perda de apetite, náuseas e vómitos, febre baixa, fezes pálidas ou cor de argila, urina escura, e comichão generalizada. No entanto, deve notar-se que muitas pessoas que estão infetadas com o vírus da hepatite C não têm sintomas, uma vez que a hepatite C é frequentemente detetada durante os testes de sangue para um procedimento físico ou outro médico de rotina. 2. Hepatite Autoimune (HAI) 0 fator de necrose tumoral foi implicado na fisiopatologia de hepatite autoimune (ver Cookson, S. et al., (1999) Hepatology 30(4):851-6; Jazrawi S. et al., (2003) Liver Transpl. 9(4):377-82). Tal como aqui utilizado, "hepatite autoimune" refere-se a um distúrbio hepático caracterizado por inflamação do fígado causado por células imunitárias solitárias que tomam erradamente as células normais do fígado por um tecido estranho ou patogénio (agente causador da doença). A hepatite autoimune é frequentemente responsável por uma destruição progressiva do parênquima hepático com uma elevada taxa de mortalidade se deixada sem tratamento (Johnson, PJ et al., (1993), Hepatology, 18:998-1005). Uma das características de hepatite autoimune é a presença de auto-anticorpos em circulação em quase 90% dos soros dos pacientes. Tais anticorpos podem ser utilizados para identificar sujeitos com hepatite autoimune.
As diferenças clínicas e serológicas entre os pacientes levaram à classificação da HAI em dois tipos. A Tipo 1 caracteriza-se pela presença de anticorpos anti-músculo liso (SMA) e/ou anti-nucleares (ANA) no soro dos pacientes, enquanto o soro de pacientes do Tipo II mostra anticorpos microssomais do rim anti-fígado tipo 1 (LKM1) (Homberg, J.C. et al. , (1987) Hepatology, 7:1333-1339; Maggiore G. et al., (1993) J. Pediatr. Gastroenterol Nutr., 17:376-381). Um marcador serológico, anticorpos do citosol anti-fígado tipo I (LC1), foi identificado em 30% dos pacientes com uma HAI tipo II. Além disso, provou-se que LC1 é apenas um marcador serológico em 10% dos pacientes testados (Martini E. et al., (1988) Hepatology, 8:1662-1666). Numa concretização, o anticorpo de TNF , ou fragmento de Çãgaao antigénio deste, aqui descrito é utilizado para tratar HAI. 3. Doença do fígado gordo 0 fator de necrose tumoral foi implicado na fisiopatologia da doença do fígado gordo (ver Valenti L. et ai., (2002) Gastroenerology 122(2):27 4-8 0; Li Z. et al. , (2003) Hepatology 37(2) :343-50) . A doença do fígado gordo refere-se a uma doença em que a gordura (hepatócitos) está excessivamente acumulada no fígado. Crê-se que a doença do fígado gordo seja causada por supernutrição, hiperingestão de álcool, diabetes e efeitos colaterais devidos a administração de produtos farmacêuticos. A doença do fígado gordo pode causar doenças graves tais como hepatite crónica e cirrose hepática. Em pacientes com doença do fígado gordo, os lípidos, particularmente a gordura neutra, acumulam-se em hepatócitos na medida em que o montante excede o intervalo fisiologicamente permissível. De um ponto de vista bioquímico, um padrão para o julgamento do fígado gordo é que o peso de gordura neutra seja de cerca de 10% (100 mg/g de peso fresco) ou mais de peso fresco do tecido hepático. Numa concretização, o anticorpo de TNF , ou fragmento de çjigaao antigénio deste, aqui descrito pode ser utilizado para tratar a doença de fígado gordo. 4. Vírus da Hepatite B (HBV) O fator de necrose tumoral foi implicado na fisiopatologia do vírus da hepatite B (ver Kasahara, S. et al. , (2003) J. Virol. 77 (4) : 2469-76; Wang, F.S., (2003) World J.
Gastroenterol. 9(4):641-4; Biermer, M. et al. , (2003) J. Virol. 77(7) :4033-42) . O termo "vírus de hepatite B" (HBV) é utilizado para descrever o vírus (vírus da hepatite do soro) que produz hepatite virai tipo B em humanos. Esta é uma doença viral com um longo período de incubação (cerca de 50 a 160 dias) em contraste com o vírus da hepatite A (vírus da hepatite infeciosa) que tem um curto período de incubação. O vírus da hepatite B é usualmente transmitido por injeção de sangue ou derivados de sangue infetados ou apenas pelo uso de agulhas, lancetas ou outros instrumentos contaminados. Clinicamente e patologicamente, a doença é semelhante à hepatite virai tipo A; no entanto, não há nenhuma imunidade protetora cruzada. O antigénio virai (HBAg) é verificado no soro após a infeção. 0 vírus de hepatite B infecta humanos a uma taxa muito elevada. A maioria das pessoas que ficam infetadas com hepatite B livram-se do vírus no prazo de 6 meses, em que uma infeção curta é conhecida como um caso "agudo" de Hepatite B. Estima-se que pelo menos cerca de 300 milhões de pessoas sejam portadores crónicos de HBV. A infeção com os vírus resulta numa gama de sintomas clínicos incluindo de sintomas menores semelhantes aos da gripe até à morte. Numa concretização, o anticorpo de TNF , ou fragmento de ligação ao antigénio deste, aqui descrito pode ser utilizado para tratar infeção de HBV. 5. Hepatotoxicidade O fator de necrose tumoral foi implicado na fisiopatologia de hepatotoxicidade (ver Bruccoleri A. et ai., (1997) Hepatology 25(1) :133-41; Luster M.I. et al. , (2000) Ann. NYAcad. Sei. 919:214-20; Simeonova P. et al., (2001) Toxicol.
Appl. Pharmacol. 177(2):112-20). O termo hepatotoxicidade refere-se a uma lesão do fígado causada por medicações e outros químicos ou fármacos. O melhor indicador para a identificação de toxicidade do fígado num sujeito é a elevação de certas medições de enzimas no sangue, tais como a AST (aspartato-aminotransferase), ALT (alanina-aminotransferase) e GOT (glutamato-oxalacetato-transaminase). A hepatotoxicidade pode causar danos permanentes e morte. Sintomas iniciais de hepatotoxicidade podem incluir sintomas gastrointestinais agudos, p. ex., diarreia grave. A segunda fase de hepatotoxicidade caracteriza-se por redução dos sintomas. Durante esta subsidência aparente, surgem provas bioquímicas de lesão hepática. A oligúria (produção de urina diminuída) é normal durante a segunda fase. A terceira fase, a de lesão hepática evidente, torna-se aparente clinicamente 3 a 5 dias após a ingestão do químico, com o surgimento de icterícia. A insuficiência renal pode também ocorrer. Os sintomas de hepatite induzida quimicamente (induzida por fármacos) são semelhantes aos da hepatite infeciosa. Numa concretização, o anticorpo de TNF , ou fragmento de ligação ao antigénio deste, aqui descrito pode ser utilizado para tratar hepatotoxicidade. 6. Insuficiência hepática (p. ex. insuficiência hepática crónica) 0 fator de necrose tumoral foi implicado na fisiopatologia da insuficiência hepática (p. ex., insuficiência hepática crónica) (ver Takenaka, K. et ai., (1998) Dig. Dis. Sei. 43 (4): 887-92; Nagaki M. et ai., (1999) J. Hepatol. 31(6):997-1005; Streetz K. et ai., (2000) Gastroenterology. 119(2):446-60. A insuficiência hepática, incluindo insuficiência hepática crónica, desenvolve-se geralmente ao longo um período de anos e é causada por uma agressão repetida no fígado (tal como abuso de álcool ou infeção com vírus da hepatite), que danifica lentamente o órgão. Menos frequentemente, a insuficiência hepática é aguda, e ocorre ao longo de um período de dias ou semanas. As causas da insuficiência hepática aguda incluem infeções do vírus da hepatite, fármacos, gravidez, doença autoimune, e súbito baixo fluxo de sangue para o fígado. Numa concretização, o anticorpo de TNF ,feagmento de ligação ao antigénio deste, aqui descrito pode ser utilizado para insuficiência hepática.
7. Hepatite não alcoólica, incluindo EHNA O fator de necrose tumoral foi implicado na fisiopatologia da hepatite não alcoólica, incluindo esteato-hepatite não alcoólica (ver Crespo, J. et ai., (2001) Hepatology.
34 (6) : 1158-63; Pessayre D. et ai., (2002) 282 (2) :G193-9) . O termo "esteato-hepatite não alcoólica" ou "EHNA" refere-se ao desenvolvimento de alterações histológicas no fígado que são comparáveis às induzidas por ingestão excessiva de álcool, mas na ausência de abuso de álcool. A EHNA é caracterizada por esteatose macrovesicular e/ou microvesicular, inflamação lobular e portal, e ocasionalmente corpos de Mallory com fibrose e cirrose. A EHNA também está vilgarmente associada a hiperlipidemia, obesidade e diabetes mellitus tipo II.
Condições clínicas adicionais que caracterizam a esteatose e inflamação hepáticas incluem jejum excessivo, bypass jejuno-ileal, nutrição parentérica total, hepatite C crónica, doença de Wilson, e efeitos adversos de fármacos tais como de corticosteroides, bloqueadores de canais de cálcio, estrogénios sintéticos de alta dose, metotrexato e amiodarona.
Assim, o termo "esteato-hepatite não alcoólica" pode ser usado para descrever aqueles pacientes que apresentam estes resultados de biopsia, juntamente com a ausência de (a) consumo significativo de álcool, (b) cirurgia anterior para perda de peso, (c) história de uso de fármacos associado a esteato-hepatite, (d) evidência de doença hepática genética ou (e) infeção de hepatite C crónica (ver, J.R. et ai., (1980) Mayo Clin. Proc., 55:434; Powell E. et al., (1990) Hepatol., 11:74) .
Numa concretização, o anticorpo de TNF , ou fragmento de ligação ao antigénio deste, aqui descrito pode ser utilizado para tratar EHNA. H. Distúrbios da Pele e das Unhas
Numa concretização, o anticorpo de TNF aqui descrito é utilizado para tratar distúrbios da pele e das unhas. Tal como aqui utilizado, o termo "distúrbio da pele e das unhas em que a atividade de TNF é prejudicial" destina-se a incluir distúrbios da pele e/ou das unhas e outros distúrbios em que a presença de TNF num sujeito sofrendo do distúrbio foi
mostrada ser ou é suspeita de ser responsável pela fisiopatologia do distúrbio ou um factor que contribui para um agravamento do distúrbio, p. ex. , psoriase. Assim, distúrbios da pele e das unhas nos quais a atividade de TNF é prejudicial são distúrbios em que se espera que a inibição da atividade de TNF alivie os sintomas e/ou a progressão do distúrbio. A utilização dos anticorpos, porções de anticorpo, e outros inibidores de TNF aqui descritos no tratamento de distúrbios da pele e das unhas específicos é discutida mais abaixo. Em certas concretizações, o anticorpo, porção de anticorpo, ou outro inibidor de TNF aqui descrâtadministrado ao sujeito em combinação com outro agente terapêutico, tal como descrito abaixo na Secção III. Numa concretização, o anticorpo de TNF do invento é administrado ao sujeito em combinação com outro agente terapêutico para o tratamento de psoriase e o tratamento de psoriase associada a artrite. I. Psoriase O fator de necrose tumoral foi implicado na fisiopatologia de psoriase (Takematsu et al., (1989) Arch. Dermatol. Res. 281:398; Victor e Gottlieb (2 002) J. Drugs Dermatol. 1 (3) : 2 64) . A psoríase é descrita como uma inflamação da pele (irritação e vermelhidão) caracterizada por episódios frequentes de vermelhidão, comichão e escamas grossas, secas, prateadas na pele. Em particular, formam-se lesões que envolvem alterações primárias e secundárias na proliferação epidérmica, respostas inflamatórias da pele e uma expressão de moléculas reguladoras tais como linfocinas e fatores inflamatórios. A pele psoriática é caracterizada morfologicamente por um aumento da renovação das células epidérmicas, epiderme espessada, queratinização anormal, infiltrados de células inflamatórias na epiderme e infiltração de leucócitos polimorfonucleares e linfócitos na camada de epiderme, resultando num aumento no ciclo celular basal. A psoríase envolve frequentemente as unhas, que frequentemente apresentam sulcos, separação da unha, espessamento, e descoloração. A psoríase está muitas vezes associada a outras doenças inflamatórias, por exemplo artrite, incluindo artrite reumatoide, doença inflamatória do intestino (DII) e doença de Crohn. A evidência de psoríase é mais vulgarmente observada no tronco, cotovelos, joelhos, couro cabeludo, dobras da pele, ou unhas dos dedos das mãos, mas pode afetar qualquer uma ou todas as partes da pele. Normalmente, leva cerca de um mês para que as novas células da pele se movam das camadas inferiores para a superfície. Na psoríase, este processo leva apenas alguns dias, resultando numa acumulação de células mortas da pele e formação de escamas espessas. Sintomas da psoríase incluem: manchas na pele, que são secas ou vermelhas, cobertas com escamas prateadas, partes de pele levantada, acompanhadas por bordas vermelhas, que podem rachar e tornar-se dolorosas, e que normalmente são verde-acinzentadas nos cotovelos, joelhos, tronco, couro cabeludo e mãos; lesões da pele, incluindo pústulas, fissuras na pele e vermelhidão da pele; dor nas articulações ou dor que pode estar associada a artrite, p. ex., artrite psoriática. 0 tratamento para a psoríase inclui frequentemente corticosteroides tópicos, análogos da vitamina D, e retinoides tópicos ou orais ou combinações destes. Numa concretização, o inibidor de TNF do inveétadministrado em combinação com ou na presença de um destes tratamentos comuns. Agentes terapêuticos adicionais que podem também ser combinados com o inibidor de TNF do invento para tratamento de pase são descritos em maior detalhe na Secção III.B. 0 diagnóstico de psoríase é geralmente baseado na aparência da pele. Além disso pode ser necessária uma biopsia da pele, ou raspagem e cultura de partes de pele para descartar outros distúrbios da pele. Um raio-x pode ser usado para verificar quanto a artrite psoriática se estiver presente e persistente dor articular.
Um inibidor de TNF pode ser utilizado para tratar psoríase, incluindo psoríase de placas crónica, psoríase em gota, psoríase inversa, psoríase pustulosa, pênfigo vulgar, psoríase eritrodérmica, psoríase associada a doença inflamatória do intestino (DII), e psoríase associada a artrite reumatoide (AR). Tipos específicos de psoríase estão descritos em detalhe abaixo: a. Psoríase em placas crónica 0 fator de necrose tumoral foi implicado na fisiopatologia da psoríase de placas crónica (Asadullah et ai., (1999) Br. J. Dermatol. 141:94) . A psoríase de placas crónica (também referida como psoríase vulgar) é a forma mais frequente de psoríase. A psoríase de placas crónica caracteriza-se por placas avermelhadas de pele elevadas, variando do tamanho de uma moeda a muito maiores. Na psoríase de placas crónica, as placas podem ser simples ou múltiplas, podem variar em tamanho desde alguns milímetros até vários centímetros. As placas são geralmente vermelhas com uma superfície escamosa, e refletem a luz quando raspadas suavemente, criando um efeito "prateado". As lesões (que são frequentemente simétricas) da psoríase de placas crónica ocorrem por todo o corpo, mas com predileção por superfícies extensoras, incluindo os joelhos, cotovelos, regiões lombossacrais, couro cabeludo e unhas. Ocasionalmente, a psoríase de placas crónica pode ocorrer no pénis, na vulva e nas flexões, mas é geralmente ausente escamação. 0 diagnóstico de pacientes com psoríase de placas crónica é geralmente baseado nas características clínicas descritas acima. Em particular, a distribuição, a cor e a escamação prateada típica da lesão na psoríase de placas crónica são características da psoríase de placas crónica. b. Psoriase em gota A psoriase em gota refere-se a uma forma de psoriase com placas de escamação em forma de gota de água caracteristicas. As crises de psoriase em gota seguem-se geralmente a uma infeção, mais notavelmente uma infeção de garganta por estreptococos. 0 diagnóstico de psoriase em gota é geralmente baseado na aparência da pele, e no facto de haver frequentemente uma história de dor de garganta recente. c. Psoriase inversa A psoriase inversa é uma forma de psoriase em que o paciente tem áreas da pele lisas, geralmente húmidas que estão vermelhas e inflamadas, o que é diferente da escamação associada a psoriase de placas. A psoriase inversa é também referida como psoriase intertiginosa ou psoriase de flexão. A psoriase inversa ocorre principalmente nas axilas, virilhas, sob a mama e noutras dobras da pele em torno dos genitais e das nádegas, e, como resultado dos locais de apresentação, a fricção e o suor podem irritar as áreas afetadas. d. Psoriase pustulosa A psoriase pustulosa é uma forma de psoriase que causa bolhas cheias de pus, que variam em tamanho e localização, mas ocorrem frequentemente nas mãos e nos pés. As bolhas podem ser localizadas, ou espalhadas ao longo de grandes áreas do corpo. A psoriase pustulosa pode ser tanto suave como dolorosa, pode causar febres. e. Outros distúrbios de psoriase
Outros exemplos de distúrbios psoriáticos que podem ser tratados com o anticorpo de TNF aqui descrito incluem psse eritrodérmica, psoriase vulgar associada a DII, e psoriase associada a artrite, incluindo artrite reumatoide. 2. Pênfigo vulgar 0 pênfigo vulgar é uma doença dermatológica autoimune sistémica grave que afeta frequentemente a membrana mucosa oral e a pele. Pensa-se que a patogénese do pênfigo vulgar é um processo autoimune que é dirigido para a pele e desmossomas da membrana mucosa oral. Consequentemente, as células não aderem umas às outras. 0 distúrbio manifesta-se como grandes bolhas cheias de fluido que tendem a romper, e tem uma aparência histológica distinta. Os agentes anti-inflamatórios são a única terapia eficaz para esta doença que tem uma elevada taxa de mortalidade. As complicações que surgem em doentes que sofrem de pênfigo vulgar são dor intratável, interferência com a nutrição e perda de fluidos, e infeções. 3. Dermatite atópica/eczema A dermatite atópica (também referida como eczema) é um distúrbio crónico da pele categorizado por placas de escamação e comichão. As pessoas com eczema têm frequentemente uma história familiar de condições alérgicas como asma, febre dos fenos ou eczema. A dermatite atópica é uma reação de hipersensibilidade (semelhante a uma alergia) que ocorre na pele, provocando inflamação crónica. A inflamação faz com que a pele se torne pruriginosa e escamosa. A irritação crónica e o coçar podem fazer com que a pele engrosse e ganhe textura de couro. A exposição a irritantes ambientais pode piorar os sintomas, tal como secura da pele, exposição a água, mudanças de temperatura, e stresse.
Os sujeitos com dermatite atópica podem ser identificados através de certos sintomas, que incluem frequentemente prurido intenso, bolhas com exsudação e crostas, vermelhidão da pele ou inflamação em torno das bolhas, erupção cutânea, áreas de pele seca semelhante a couro, áreas de pele áspera do coçar, e descargas/sangramento do ouvido. 4. Sarcoidose A sarcoidose é uma doença em que ocorre inflamação granulomatosa nos nódulos linfáticos, no fígado, no pulmão, nos olhos, na pele, e/ou noutros tecidos. A sarcoidose inclui sarcoidose cutânea (sarcoidose da pele) e sarcoidose nodular (sarcoidose dos nódulos linfáticos). Os pacientes com sarcoidose podem ser identificados pelos sintomas, que incluem frequentemente desconforto geral, mal-estar ou uma sensação de doença; febre; lesões da pele. 5. Eritema nodoso
Eritema nodoso refere-se a um distúrbio inflamatório que é caracterizado por nódulos moles, vermelhos sob a pele, tipicamente na parte inferior anterior das pernas. As lesões associadas a eritema nodoso começam frequentemente como caroços dolorosos vermelhos quentes planos mas firmes (aproximadamente de uma polegada de diâmetro). Dentro de poucos dias as lesões podem tornar-se arroxeadas, e em seguida ao longo de várias semanas desaparecem numa mancha plana acastanhada.
Nalguns casos, o eritema nodoso pode estar associado a infeções, incluindo, estreptococos, coccidioidomicose, tuberculose, hepatite B, sífilis, doença do arranhão de gato, tularemia, Yersinia, Leptospirosis psittacosis, histoplasmose, mononucleose (EBV). Noutros casos, o eritema nodoso pode estar associado a sensibilidade a certos medicamentos incluindo, contracetivos orais, penicilina, sulfonamidas, sulfonas, barbitúricos, hidantoína, fenacetina, salicilatos, iodetos, e progestina. 0 eritema nodoso está frequentemente associado a outros distúrbios, incluindo leucemia, sarcoidose, febre reumática, e colite ulcerosa.
Os sintomas de eritema nodoso apresentam-se geralmente nas canelas, mas as lesões podem também ocorrer noutras áreas do corpo, incluindo as nádegas, barrigas da perna, tornozelos, coxas e extremidades superiores. Outros sintomas nos sujeitos com eritema nodoso podem incluir febre e mal-estar. 6. Hidradenite supurativa A hidradenite supurativa refere-se a um distúrbio de pele em que lesões ou caroços inchados, dolorosos, inflamados, se desenvolvem na virilha e por vezes sob os braços e sob as mamas. A hidradenite supurativa ocorre quando as saídas das glândulas apócrinas ficam bloqueadas pela transpiração ou são incapazes de drenar normalmente por causa do desenvolvimento incompleto da glândula. As secreções retidas nas glândulas forçam a transpiração e as bactérias para o tecido circundante, causando endurecimento, inflamação e infeção subcutâneos. A hidradenite supurativa está confinada a áreas do corpo que contêm glândulas apócrinas. Estas áreas são as axilas, aréola do mamilo, virilha, períneo, regiões circum-anal e periumbilical . 7. Líquen plano 0 fator de necrose tumoral foi implicado na fisiopatologia de líquen plano (Sklavounou et ai., (2000) J. Oral Pathol. Med. 29:370). O líquen plano refere-se a um distúrbio da pele e das membranas mucosas resultando em inflamação, comichão, e lesões distintivas na pele. O líquen plano pode estar associado a hepatite C ou certos medicamentos. 8. Síndroma de Sweet
Citocinas inflamatórias, incluindo o fator de necrose tumoral, foram implicadas na fisiopatologia da síndroma de Sweet (Reuss-Borst et al., (1993) Br. J. Haematol. 84:356). A síndroma de Sweet, que foi descrita por R.D. Sweet em 1964, é caracterizada pelo aparecimento súbito de febre, leucocitose, e erupção cutânea. A erupção consiste em pápulas e placas moles, eritematosas bem demarcadas que microscopicamente mostram infiltrados neutrofílicos densos. As lesões podem aparecer em qualquer parte, mas favorecem a parte superior do corpo, incluindo o rosto. As lesões individuais são frequentemente descritas como pseudovesiculosas ou pseudopustulosas, mas podem ser francamente pustulosas, bolhosas, ou ulcerativas. O envolvimento oral e do olho (conjuntivite ou episclerite) têm também sido frequentemente relatados em pacientes com síndroma de Sweet. A leucemia foi também associada a síndroma de Sweet. 9. Vitiligo O vitiligo refere-se a uma condição da pele em que há perda de pigmento de áreas de pele resultando em manchas brancas irregulares com textura da pele normal. As lesões caracteristicas de vitiligo aparecem como áreas despigmentadas planas. Os bordos das lesões são bem definidos mas irregulares. Frequentemente as áreas afetadas em sujeitos com vitiligo incluem a face, os cotovelos e joelhos, as mãos e os pés e a genitália. 10. Esclerodermia O fator de necrose tumoral foi implicado na fisiopatologia de esclerodermia (Tutuncu, Z. et ai., (2002) Clin. Exp. Rheumatol. 20(6 Supl. 28) :S146-51; Mackiewicz Z et al. , (2003) Clin. Exp. Rheumatol. 21(l):41-8; Murota, H. et al., (2003) Arthritis Rheum. 48(4) :1117-25) . Esclerodermia refere-se a uma doença difusa do tecido conjuntivo caraterizada por alterações na pele, nos vasos sanguíneos, nos músculos esqueléticos, e nos órgãos internos. A esclerodermia é também referida com síndroma CREST ou esclerose sistémica progressiva, e afeta geralmente pessoas entre as idades de 30-50. As mulheres são afetadas mais frequentemente que os homens. A causa da esclerodermia é desconhecida. A doença pode produzir sintomas locais ou sistémicos. O curso e a gravidade da doença variam amplamente nas pessoas afetadas. Depósitos de excesso de colagénio na pele e outros órgãos produzem os sintomas. Também ocorrem danos nos pequenos vasos sanguíneos dentro da pele e órgãos afetados. Na pele, pode ocorrer ulceração, calcificação, e alterações na pigmentação. As caraterísticas sistémicas podem incluir fibrose e degeneração do coração, dos pulmões, dos rins e do trato gastrointestinal.
Os pacientes que sofrem de esclerodermia exibem certas caracteristicas clínicas, incluindo, branqueamento, azulamento, ou vermelhidão dos dedos das mãos e dos pés em resposta ao calor e ao frio (fenómeno de Raynaud), dor, rigidez e inchaço dos dedos e das articulações, espessamento da pele e mãos e antebraços brilhantes, refluxo esofágico ou azia, dificuldade em engolir, e falta de ar. Outros sintomas clínicos usados para diagnosticar esclerodermia incluem, uma taxa elevada de sedimentação de eritrócitos (TSE), um elevado fator reumatoide (FR), um teste positivo de anticorpos antinucleares, um exame de urina que mostre proteína e sangue microscópico, uma radiografia do tórax que possa mostrar fibrose, e estudos da função pulmonar que mostram doença pulmonar restritiva. 11. Distúrbios das unhas
Os distúrbios das unhas incluem qualquer anomalia da unha. Distúrbios das unhas específicos incluem, mas não estão limitados a, formação de sulcos, coiloníquia, linhas de Beau, unhas de colher, onicólise, unhas amarelas, pterígio (visto em líquen plano), e leuconíquia. A formação de sulcos é caracterizada pela presença de pequenas depressões na superfície da unha. Cristas ou elevações lineares podem desenvolver-se ao longo da unha ocorrendo na direção do "comprimento" ou "transversal". As linhas de Beau são depressões lineares que ocorrem "cruzadas" (transversais) na unha das mãos. A leuconíquia descreve listras brancas ou manchas nas unhas. A coiloníquia é uma forma anormal da unha das mãos onde a unha elevou cristas e está fina e côncava. A coiloníquia está frequentemente associada a deficiência de ferro.
Distúrbios das unhas que podem ser tratados com o anticorpo de TNF aqui descrito incluem também unhas psoriáticas. As unhas psoriáticas incluem alterações nas unhas que são atribuíveis a psoríase. Nalguns casos a psoríase pode ocorrer apenas nas unhas e em nenhum outro lugar do corpo. As alterações psoriáticas nas unhas variam de suaves a graves, geralmente refletindo a extensão do envolvimento psoriático da lâmina ungueal, da matriz ungueal, isto é, o tecido a partir do qual a unha cresce, do leito ungueal, ou seja, o tecido debaixo da unha, e da pele na base da unha. Os danos no leito ungueal pela psoríase de tipo pustuloso podem resultar na perda da unha. As alterações nas unhas na psoríase estão divididas em categorias gerais que podem ocorrer isoladamente ou em conjunto. Numa categoria de unhas psoriáticas, a lâmina ungueal é profundamente sulcada, provavelmente devido a defeitos no crescimento das unhas causados pela psoríase. Noutra categoria, a unha tem uma descoloração de amarelo a amarelo-rosa, provavelmente devido ao envolvimento psoriático do leito ungueal. Um terceiro subtipo de unhas psoriáticas é caracterizado por áreas brancas que aparecem sob a lâmina ungueal. As áreas brancas são de facto bolhas de ar que marcam pontos onde a lâmina ungueal se torna destacada do leito ungueal. Pode também haver pele avermelhada em torno da unha.
Uma quarta categoria é evidenciada pela desintegração da lâmina ungueal em pedaços amarelados, ou seja, onicodistrofia, provavelmente devido ao envolvimento psoriático na matriz ungueal. Uma quinta categoria é caracterizada pela perda da unha na sua totalidade, devido ao envolvimento psoriático da matriz ungueal e do leito ungueal. 0 anticorpo de TNF aqui descrito pode também ser utilizado para tratar distúrbios das unhas frequentemente associados a líquen plano. As unhas em sujeitos com líquen plano mostram frequentemente adelgaçamento e rugosidade à superfície da lâmina ungueal com sulcos longitudinais ou pterígio. 0 anticorpo de TNF aqui descrito pode ser utilizado para tratar distúrbios das unhas, tais como os descritos aqui. Frequentemente, os distúrbios das unhas estão associados a distúrbios da pele. Numa concretização, é aqui descrito um método de tratamento para distúrbios das unhas com um anticorpo de TNF . Noutra concreÇãop. o distúrbio das unhas está associado a outro distúrbio, incluindo um distúrbio da pele tal como psoríase. Noutra concretização, o distúrbio associado a um distúrbio das unhas é artrite, incluindo artrite psoriática. 12. Outros Distúrbios da Pele e das Unhas 0 anticorpo de TNF aqui descrito pode ser utilizado para tratar outros distúrbios da pele e das unhas, tais como dermatite actínica crónica, penfigoide bolhoso, e alopecia areata. A dermatite actínica crónica (DAC) é também referida como dermatite de fotossensibilidade/síndroma reticuloide actínica (DF/RA). A DAC é uma condição em que a pele se torna inflamada, particularmente em áreas que foram expostas à luz solar ou à luz artificial. Vulgarmente, os pacientes com DAC têm alergias a certas substâncias que entram em contacto com a sua pele, especialmente várias flores, madeiras, perfumes, protetores solares e compostos de borracha. 0 penfigoide bolhoso refere-se a um distúrbio de pele caracterizado pela formação de grandes bolhas no tronco e extremidades. Alopecia areata refere-se à perda de cabelo caracterizada por manchas redondas de calvície completa no couro cabeludo ou na barba. I. Vasculites 0 TNF foi implicado na fisiopatologia de uma variedade de vasculites (ver, por exemplo, Deguchi et al. , (1989) Lancet 2:745) . Numa concretização, é aqui descrito um método para inibição da atividade de TNF num sujeito sofrendo de uma vasculite em que a atividade de TNF é prejudicial.
Tal como aqui utilizado, o termo "uma vasculite em que a atividade de TNF é prejudicial" destina-se a incluir uma vasculite em que se mostrou que a presença de TNF num sujeito sofrendo do distúrbio era ou suspeita-se que seja responsável pela fisiopatologia do distúrbio ou um fator que contribui para um agravamento do distúrbio. Tais distúrbios podem ser evidenciados, por exemplo, por um aumento na concentração de TNF num fluido 6gòd:o de um sujeito sofrendo do distúrbio (p. ex., um aumento na concentração de TNF no soro, plasma, fluido sinovial, etc., do sujeito), que pode ser detetado, por exemplo, utilizando um anticorpo anti-TNF tal como descrito acima.
Existem numerosos exemplos de vasculites em que a atividade de TNF é prejudicial, incluindo a doença de Behcet. A utilização dos anticorpos, porções de anticorpo, e outros inibidores de TNF aqui descritos no tratamento de vasculites específicas é discutida mais abaixo. Em certas concretizações, o anticorpo, porção de anticorpo, ou outro inibidor de TNF aqui descrito é administrado ao sujeito em combinação com outro agente terapêutico adicional, tal como descrito abaixo. 0 anticorpo aqui descrito pode ser utilizado para tratar vasculite na qual a atividade de TNF é prejudicial, em que se espera que a inibição da atividade de TNF alivie os sintomas e/ou a progressão da vasculite ou previna a vasculite. Os sujeitos sofrendo de ou em risco de desenvolverem vasculite podem ser identificados através de sintomas e testes clínicos.
Por exemplo, os sujeitos com vasculites desenvolvem frequentemente anticorpos para certas proteínas no citoplasma dos neutrófilos, anticorpos citoplasmáticos anti-neutrófilos (ANCA). Assim, nalguns casos, as vasculites podem ser evidenciadas por testes (p. ex., ELISA), que medem a presença de ANCA. A vasculite e as suas consequências poderão ser a única manifestação da doença ou podem ser um componente secundário de outra doença primária. A vasculite pode estar confinada a um único órgão ou pode afetar simultaneamente vários órgãos e, dependendo da síndroma, artérias e veias de todos os tamanhos podem ser afetadas. A vasculite pode afetar qualquer órgão no corpo.
Na vasculite, o lúmen do vaso está geralmente comprometido, o que está associado com isquemia dos tecidos fornecidos pelos vasos envolvidos. A vasta gama de distúrbios que pode resultar deste processo deve-se ao facto de qualquer tipo, tamanho e localização do vaso (p. ex., artéria, veia, arteríola, vénula, capilar) poder estar envolvido. As vasculites são geralmente classificadas de acordo com o tamanho dos vasos afetados, tal como descrito abaixo. Deve notar-se que algumas vasculites de vasos pequenos e grandes podem envolver artérias de tamanho médio; mas as vasculites de vasos grandes e médios não envolvem vasos menores do que artérias. A doença dos grandes vasos inclui, mas não está limitada a, arterite de células gigantes, também conhecida como arterite temporal ou arterite craniana, polimialgia reumática, e doença de Takayasu ou arterite, que é também conhecida como síndroma do arco aórtico, arterite das jovens e doença da ausência de pulso. A doença dos vasos médios inclui, mas não está limitada a, poliarterite nodosa clássica e doença de Kawasaki, também conhecida como síndroma do nódulo linfático mucocutâneo. Exemplos não limitativos de doença dos pequenos vasos são a Síndroma de Behcet, granulomatose de Wegner, poliangite microscópica, vasculite de hipersensibilidade, também conhecida como vasculite cutânea, vasculite de pequenos vasos, púrpura de Henoch-Schonlein, granulamotose e vasculite alérgicas, também conhecidas como síndroma de Churg Strauss. Outras vasculites incluem, mas não estão limitadas a, vasculite isolada do sistema nervoso central, e tromboangite obliterante, também conhecida como doença de Buerger. A Poliarterite nodosa clássica (PAN), PAN microscópica, e granulomatose alérgica são também frequentemente agrupadas e são chamadas de vasculites necrosantes sistémicas. Uma descrição mais detalhada de vasculite é descrita abaixo: 1. Vasculite dos grandes vasos
Numa concretização, o anticorpo de TNF aqui descreto utilizado para tratar sujeitos que tenham vasculite dos grandes vasos. 0 termo "grande ou grandes vasos" tal como aqui utilizado refere-se à aorta e aos maiores ramos dirigidos para as maiores regiões do corpo. Os grandes vasos incluem, por exemplo, a aorta, e os seus ramos e veias correspondentes, p. ex., a artéria subclávia; a artéria braquiocefálica; a artéria carótida comum; a veia inominada; as veias jugulares interna e externa; as artérias e veias pulmonares; as veias cavas; as artérias e veias renais; as artérias e veias femorais; e as artérias carótidas. Exemplos de vasculite dos grandes vasos são descritos abaixo. a. Arterite de células gigantes (ACG) 0 fator de necrose tumoral foi implicado na fisiopatologia da arterite de células gigantes (Sneller, M.C. (2002) Cleve. Clin. J. Med. 69:SII40-3; Schett, G., et al. , (2002) Ann. Rheum. Dis. 61:463). A arterite de células gigantes (ACG), refere-se a uma vasculite envolvendo inflamação e danos nos vasos sanguíneos, particularmente nas artérias grandes ou médias que se ramificam a partir da artéria carótida externa do pescoço. A ACG é também referida como arterite temporal, ou arterite craniana, e é a vasculite primária mais comum nos idosos. Afeta quase exclusivamente sujeitos com mais de 50 anos de idade, no entanto, há casos bem documentados de pacientes com 40 anos ou mais jovens. A ACG afeta geralmente artérias extracranianas. A ACG afeta geralmente artérias extracranianas. A ACG pode afetar os ramos das artérias carótidas, incluindo a artéria temporal. A ACG é também uma doença sistémica que pode envolver artérias em múltiplos locais.
Histopatologicamente, a ACG é uma panarterite com infiltrados de células mononucleares inflamatórias na parede do vaso com frequente formação de células gigantes tipo
Langhans. Existe proliferação da intima, inflamação granulomatosa e fragmentação da lâmina elástica interna. As descobertas patológicas em órgãos é o resultado de isquemia relacionada com os vasos envolvidos.
Os pacientes que sofrem de ACG apresentam certos sintomas clínicos, incluindo febre, dor de cabeça, anemia e alta taxa de sedimentação de eritrócitos (TSE). Outras indicações típicas de ACG incluem claudicação da mandíbula ou da língua, maciez do couro cabeludo, sintomas constitucionais, edema de disco ótico pálido (particularmente edema de disco "branco de giz"), e distúrbios da visão. 0 diagnóstico é confirmado através de biopsia da artéria temporal. b. Polimialgia reumática 0 fator de necrose tumoral foi implicado na fisiopatologia da polimialgia reumática (Straub, R.H., et al., (2002)
Rheumatology (Oxford) 41:423; Uddhammar, A., et al., (1998)
Br. J Rheumatol. 37:766) . A polimialgia reumática refere-se a um distúrbio reumático que está associado a dor muscular moderada a grave e rigidez no pescoço, ombro, e anca, mais notória na parte da manhã. A expressão de IL-6 e IL-1 foi também detetada na maioria dos monócitos em circulação em pacientes com a polimialgia reumática. A polimialgia reumática pode ocorrer de forma independente, ou pode coexistir com ou preceder ACG, que é uma inflamação dos vasos sanguíneos. c. Arterite de Takayasu O fator de necrose tumoral foi implicado na fisiopatologia da artrite de Takayasu (Kobayashi, Y. e Numano, F. (2002) Intern. Med. 41:44; Fraga, A. e Medina F. (2002) Curr. Rheumatol. Rep. 4:30). A arterite de Takayasu refere-se a uma vasculite caracterizada por uma inflamação da aorta e dos seus ramos principais. A arterite de Takayasu (também conhecida com síndroma do arco aórtico, arterite das jovens e doença de ausência de pulso) afeta a aorta torácica e abdominal e os seus principais ramos ou as artérias pulmonares. O espessamento fibrótico da parede da aorta e dos seus ramos (p. ex., artérias carótida, inominada e subclávia) pode levar à redução do tamanho do lúmen dos vasos que surgem do arco aórtico. Esta condição afeta também tipicamente as artérias renais. A arterite de Takayasu afeta principalmente mulheres jovens, geralmente com idades entre 20-40 anos de idade, particularmente de ascendência asiática, e pode ser manifestada por mal-estar, artralgias e aparecimento gradual de claudicação das extremidades. A maioria dos pacientes tem pulsos assimetricamente reduzidos, normalmente em conjunto com uma pressão sanguínea diferencial nos braços. Pode ocorrer estenose da artéria coronária e/ou renal.
As características clínicas da arterite de Takayasu podem ser divididas em características da doença inflamatória precoce e características da doença tardia. As características clínicas do estádio inflamatório precoce da doença de Takayasu são: mal-estar, febre baixa, perda de peso, mialgia, artralgia e eritema multiforme. Estágios posteriores da doença de Takayasu são caracterizados por estenose fibrótica das artérias e trombose. As principais características clínicas resultantes são fenómenos isquémicos, p. ex.. pulsos arteriais fracos e assimétricos, discrepância da pressão sanguínea entre os braços, perturbação visual, p. ex.. escotomas e hemianopia, outras características neurológicas incluindo vertigem e sincope, hemiparesia ou acidente vascular cerebral. As características clínicas resultam de isquemia devido a estenose arterial e trombose. 2. Doença dos Vasos Médios
Numa concretização, o anticorpo de TNF aqui descrito é utilizado para tratar sujeitos que tenham vasculite dos vasos médios. O termo "vaso ou vasos médios" é utilizado para referir os vasos que são as principais artérias viscerais. Exemplos de vasos médios incluem as artérias e veias mesentéricas, as artérias e veias ilíacas e as artérias e veias maxilares. Exemplos de vasculite dos vasos médios são descritos abaixo. a. Poliarterite Nodosa O fator de necrose tumoral foi implicado na fisiopatologia da poliarterite nodosa (DiGirolamo, N., et ai., (1997) J.
Leukoc. Biol. 61:667). A poliarterite nodosa, ou periarterite nodosa, refere-se a vasculite que é uma doença grave dos vasos sanguíneos na qual as artérias de tamanho pequeno e médio ficam inchadas e danificadas porque são atacadas por células imunitárias nocivas. A poliarterite nodosa afeta geralmente adultos mais frequentemente do que as crianças. Danifica os tecidos fornecidos pelas artérias afetadas porque estes não recebem oxigénio e nutrientes suficientes sem um fornecimento de sangue correto.
Os sintomas que são exibidos em pacientes com poliarterite nodosa resultam geralmente de danos nos órgãos afetados, frequentemente a pele, o coração, os rins, e o sistema nervoso. Sintomas generalizados de poliarterite nodosa incluem febre, fadiga, fraqueza, perda de apetite e perda de peso. Dores musculares (mialgia) e dores nas articulações (artralgia) são comuns. A pele de sujeitos com poliarterite nodosa pode também apresentar erupções cutâneas, inchaço, úlceras e nódulos (lesões nodulares). A PAN (poliarterite nodosa) clássica é uma arterite sistémica das arterites musculares pequenas a médias em que o envolvimento das artérias renais e viscerais é comum. Os vasos abdominais têm aneurismas ou oclusões em 50% dos pacientes de PAN. A PAN clássica não envolve as artérias pulmonares, embora os vasos brônquicos possam estar envolvidos. Os granulomas, eosinofilia significativa e uma diátese alérgica não são parte da síndroma. Embora possa estar envolvido qualquer sistema de órgãos, as manifestações mais comuns incluem neuropatia periférica, mononeurite múltipla, isquemia intestinal, isquemia renal, dor testicular e livedo reticular. b. Doença de Kawasaki O fator de necrose tumoral foi implicado na fisiopatologia da doença de Kawasaki (Sundel, R.P. (2002) Curr. Rheumatol.
Rep. 4:474; Gedalia, A. (2002) Curr. Rheumatol. Rep. 4:25) . Embora a causa da doença de Kawasaki seja desconhecida, está associada a inflamação aguda das artérias coronárias, sugerindo que os danos nos tecidos associados a esta doença podem ser mediados por agentes pró-inflamatórios tais como TNF . A doença de Kawasaki refere-se a uma vasculite que afeta as membranas mucosas, os nódulos linfáticos, o revestimento dos vasos sanguíneos e o coração. A doença de Kawasaki é também frequentemente referida como síndroma mucocutânea dos nódulos linfáticos, doença mucocutânea dos nódulos linfáticos, e poliarterite infantil. Os sujeitos afetados com a doença de Kawasaki desenvolvem vasculite envolvendo frequentemente as artérias coronárias o que pode levar a pericardite e miocardite. Frequentemente, à medida que a inflamação aguda diminui, as artérias coronárias podem desenvolver aneurisma, trombose e levar a enfarte do miocárdio. A doença de Kawasaki é uma vasculite sistémica febril associada a edema nas palmas das mãos e solas dos pés, com alargamento dos nódulos linfáticos cervicais, lábios rachados e "língua de morango". Embora a resposta inflamatória seja verificada em vasos ao longo de todo o corpo, o local mais comum de danos do órgão final é nas artérias coronárias. A doença de Kawasaki afeta predominantemente crianças com idade inferior a 5. A maior incidência é no Japão mas está a tornar-se cada vez mais reconhecida no Ocidente e é hoje a principal causa de doença cardíaca adquirida em crianças nos Estados Unidos. A complicação mais grave da doença de Kawasaki é a arterite coronária e a formação de aneurismas que ocorre num terço dos pacientes não tratados. 3. Doença de vasos pequenos
Numa concretização, o anticorpo de TNF aqui descréto utilizado para tratar sujeitos que tenham vasculite dos vasos pequenos. 0 termo "vaso ou vasos pequenos" é utilizado para referir arteríolas, vénulas e capilares. As arteríolas são artérias que contêm apenas 1 ou 2 camadas de células de músculo liso e são terminais e contínuas com a rede capilar. As vénulas levam o sangue da rede capilar para as veias e os capilares ligam as arteríolas e as vénulas. Exemplos de vasculites dos vasos pequenos são descritos abaixo. a. Doença de Behçet 0 fator de necrose tumoral foi implicado na fisiopatologia da doença de Behçet (Sfikakis, P.P. (2002) Ann. Rheum. Dis. 61:ii51-3; Dogan, D. e Farah, C. (2002) Oftalmologia. 52:23) . A doença de Behçet é um distúrbio crónico que envolve inflamação dos vasos sanguíneos em todo o corpo. A doença de Behçet pode também causar diversos tipos de lesões de pele, artrite, inflamação do intestino, e meningite (inflamação das membranas do cérebro e espinal-medula). Como resultado da doença de Behçet, o sujeito com o distúrbio pode ter inflamação em tecidos e órgãos de todo o corpo, incluindo o trato gastrointestinal, o sistema nervoso central, o sistema vascular, pulmões, e rins. A doença de Behçet é três vezes mais comum em homens que em mulheres e é mais comum no Mediterrâneo leste e no Japão.
Os sujeitos que têm doença de Behçet podem apresentar sintomas clínicos incluindo úlceras orais recorrentes (que se assemelham a aftas), úlceras genitais recorrentes e inflamação dos olhos. Os níveis séricos de TNF 7-8ÍLIL-I, IL-6, INF- e IL-12 estão elevados nos pacientes de Behçet, e foi mostrado que a produção destes fatores é elevada nos monócitos dos pacientes de Behçet (ver, p. ex., "Inflammatory disease of Blood Vessels" (2001) Marcel Dekker, Inc., eds. G.S. Hforaman e C.M. Weyand, p. 473). b. Granulomatose de Wegener O fator de necrose tumoral foi implicado na fisiopatologia da granulomatose de Wegener (Marquez, J., et al. , (2003) Curr.
Rheumatol. Rep. 5:128; Harman, L.E. e Margo, C.E. (1998) Surv. Ophthalmol. 42:458). A granulomatose de Wegener refere-se a uma vasculite que causa inflamação dos vasos sanguíneos no trato respiratório superior (nariz, seios, orelhas), pulmões e rins. A granulomatose de Wegener também é referida como granulomatose de linha média. A granulomatose de Wegener inclui uma inflamação granulomatosa envolvendo o trato respiratório e vasculite necrosante afetando os vasos de tamanho pequeno a médio. Os sujeitos que têm granulomatose de Wegener têm também frequentemente artrite (inflamação das articulações) . A glomerulonefrite pode também estar presente em sujeitos afetados, mas podem estar envolvidos praticamente todos os órgãos.
Os pacientes afetados com granulomatose de Wegener apresentam tipicamente sintomas clínicos compreendendo sinusite recorrente ou epistaxis, ulcerações das mucosas, otite média, tosse, hemoptise e dispneia. Os primeiros sintomas da granulomatose de Wegener incluem frequentemente sintomas do trato respiratório superior, dores nas articulações, fraqueza e cansaço. c. Síndroma de Churg-Strauss 0 fator de necrose tumoral foi implicado na fisiopatologia da síndroma de Churg-Strauss (Gross, W.L (2002) Curr. Opin. Rheumatol. 14:11; Churg, W.A. (2001) Mod. Pathol. 14:1284). A síndroma de Churg-Strauss refere-se a uma vasculite que é sistémica e mostra sinais de manifestação precoce de asma e eosinofilia. A síndroma de Churg-Strauss é também referida como granulomatose alérgica e angiite, e ocorre na definição de rinite alérgica, asma e eosinofilia. Sinusite e infiltrados pulmonares podem também ocorrer na síndroma de Churg-Strauss, afetando principalmente o pulmão e o coração. A neuropatia periférica, arterite coronária e o envolvimento gastrointestinal são comuns.
Os pacientes afligidos com a síndroma de Churg-Strauss podem ser diagnosticados de acordo com critérios estabelecidos pelo American College of Rheumatology (ACR). Estes critérios destinam-se a distinguir CSS de outras formas de vasculite.
Nem todos os pacientes verificam todos os critérios. Alguns, de facto, podem ter apenas 2 ou 3 critérios, contudo podem ainda ser classificados como tendo síndroma de Churg-Strauss. O ACR selecionou 6 características da doença (critérios) como sendo os que melhor distinguem a síndroma de Churg-Strauss de outras vasculites. Estes critérios incluem: 1) asma; 2) eosinofilia [>10% na contagem diferencial de leucócitos]; 3) mononeuropatia; 4) infiltrados pulmonares transientes em radiografias do tórax; 5) anomalias dos seios paranasais; e 6) biopsia contendo um vaso sanguíneo com eosinófilos extravasculares.
J. Outros Distúrbios Relacionados com TNF
Numa concretização, é aqui descrito um método para tratamento de um distúrbio relacionado com TNF em que a atividade de TNF é prejudicial, compreendendo a administração a um sujeito de uma quantidade eficaz de um inibidor de TNF , de modo a que o referido distúrbio relacionado com TNF seja tratado. Exemplos de distúrbios relacionados com TNF em que a atividade de TNF é prejudicial, são discutidos mais abaixo. 1. Distúrbios Relacionados com Doença de Crohn 0 fator de necrose tumoral foi implicado na fisiopatologia de distúrbios inflamatórios do intestino (DII), incluindo a doença de Crohn (ver, p. ex. , Tracy, K.J., et al. , (1986)
Science 234:470-474; Sun, X-M, et al., (1988) J. Clin. Invest. 81:1328-1331; MacDonald, T.T., et al., (1990) Clin. Exp.
Immunol. 81: 301-305).
Numa concretização, o inibidor de TNF aqui descrito é utilizado para tratar distúrbios frequentemente associados a DII e doença de Crohn. O termo "distúrbio relacionado com doença inflamatória do intestino (DII)" ou "distúrbio relacionado com doença de Crohn", tal como aqui utilizados indiferentemente, são utilizados para descrever condições e complicações vulgarmente associadas a DII e doença de Crohn. Exemplos de distúrbios relacionados com doença de Crohn incluem fistulas na bexiga, vagina e pele; obstruções intestinais; abscessos; deficiências nutricionais; complicações do uso de corticosteroides; inflamação das articulações; eritema nodoso; pioderma gangrenoso; e lesões do olho. Outros distúrbios vulgarmente associados a doença de Crohn incluem artralgias relacionadas com Crohn, doença de Crohn fistulizante, colite indeterminada, e pouchite. 2. Artrite Juvenil O fator de necrose tumoral foi implicado na fisiopatologia da artrite juvenil, incluindo artrite reumatoide juvenil (Grom et al. , (1996) Arthritis. Rheum. 39:1703; Mangge et al. , (1995)
Arthritis. Rheum. 8:211) . Numa concretização, o anticorpo de TNF aqui descrito é utilizado para tratar artrite reumatoide juvenil. O termo "artrite reumatoide juvenil" ou "ARJ" tal como aqui utilizado refere-se a uma doença inflamatória crónica que ocorre antes dos 16 anos de idade, que pode causar danos nas articulações ou nos tecidos conjuntivos. A ARJ é também referida como poliartrite crónica juvenil e doença de Still. A ARJ causa inflamação e rigidez das articulações durante mais de 6 semanas numa criança com 16 anos de idade ou menos. A inflamação provoca vermelhidão, inchaço, calor e dor nas articulações. Qualquer articulação pode ser afetada e a inflamação pode limitar a mobilidade das articulações afetadas. Um tipo de ARJ pode também afetar os órgãos internos. ARJ é frequentemente classificada em três tipos pelo número de articulações envolvidas, pelos sintomas, e pela presença ou ausência de certos anticorpos verificados através de um exame de sangue. Estas classificações ajudam o médico a determinar como a doença progredirá e se os órgãos internos ou a pele estão afetados. As classificações de ARJ incluem o seguinte: a. ARJ pauciarticular, em que o paciente tem quatro ou menos articulações afetadas. A pauciarticular é a forma mais comum de ARJ, e afeta tipicamente as grandes articulações, tais como os joelhos. b. ARJ poliarticular, em que cinco ou mais articulações estão afetadas. As pequenas articulações, tais como as das mãos e dos pés, são mais frequentemente afetadas, mas a doença pode também afetar as grandes articulações. c. ARJ sistémica é caraterizada por inchaço das articulações, febre, ligeira erupção cutânea, e pode também afetar órgãos internos tais como o coração, fígado, baço e nódulos linfáticos. A ARJ sistémica é também referida como doença de Still. Uma pequena percentagem destas crianças desenvolve artrite em muitas articulações e pode ter artrite grave que continua na vida adulta. 3. Endometriose 0 fator de necrose tumoral foi implicado na fisiopatologia da endometriose, uma vez que as mulheres com endometriose têm elevados níveis peritoneais de TNF (Eisermann, J., et al. , (1988) Fértil Steril 50:573; Halme, J. (1989) Am. J. Obstet. Gynecol. 161:1718; Mori, H., et al. , (1991) Am. J. Reprod. Immunol. 26:62; Taketani, Y., et al., (1992) Am. J. Obstet. Gynecol. 167:265; Overton, C., et al. , (1996) Hum. Reprod. 1996; 11:380) . Numa concretização, o anticorpo de TNF aqui descrito é utilizado para tratar endometriose. O termo "endometriose" tal como aqui utilizado refere-se a uma condição em que o tecido que normalmente reveste o útero (endométrio) cresce noutras áreas do corpo, causando dor, sangramento irregular, e frequentemente infertilidade. 4. Prostatite O fator de necrose tumoral foi implicado na fisiopatologia da prostatite, uma vez que os homens com prostatite crónica e dor pélvica crónica têm níveis significativamente mais elevados de TNF e IL-1 no sémen em comparação com os controlos (Alexander, R.B., et al., (1998) Urology 52:744; Nadler, R.B., et al. , (2000) J. Urol. 164:214; Orhan et al., (2001) Int. J.
Urol. 8:495) Além disso, num modelo de rato de prostatite os níveis de TNF estavam também aumentados em comparação com os controlos (Asakawa, K., et al., (2001) Hinyokika Kiyo 47:459;
Harris et ai., (2000) Prostate 44:25). Numa concretização, o anticorpo de TNF aqui descri&o utilizado para tratar prostatite. O termo "prostatite" tal como aqui utilizado refere-se a uma inflamação da próstata. A prostatite é também referida como síndroma de dor pélvica. A prostatite manifesta-se numa variedade de formas, incluindo prostatite não bacteriana, prostatite aguda, prostatite bacteriana, e prostatite aguda. A prostatite aguda refere-se a uma inflamação da glândula da próstata, que se desenvolve subitamente. A prostatite aguda é geralmente causada por uma infeção bacteriana da glândula da próstata. A prostatite crónica é uma inflamação da glândula da próstata que se desenvolve de forma gradual, continua, durante um período prolongado, e tem tipicamente sintomas subtis. A prostatite crónica é também geralmente causada por uma infeção bacteriana. 5. Distúrbios autoimunes O fator de necrose tumoral foi implicado na fisiopatologia de muitos distúrbios autoimunes, incluindo lúpus (Shvidel, et ai., (2002) Hematol J. 3:32; Studnicka-Benke et al., (1996)
Br. J. Rheumatol. 35:1067) . Numa concretização, o anticorpo de TNF aqui descriéo utilizado para tratar distúrbios autoimunes tais como lúpus, doenças autoimunes de múltiplos sistemas, e perda auditiva autoimune. 0 termo "lúpus" tal como aqui utilizado refere-se a um distúrbio autoimune inflamatório crónico chamado lúpus eritematoso que pode afetar muitos sistemas de órgãos, incluindo a pele, as articulações e os órgãos internos. 0 lúpus é um termo geral que inclui vários tipos específicos de lúpus, incluindo lúpus sistémico, nefrite lúpica e cerebrite lúpica.
No lúpus sistémico (LES), as defesas naturais do corpo voltam-se contra o corpo e células imunitárias nocivas atacam os tecidos do corpo. Podem ser produzidos anticorpos que podem reagir contra as células sanguíneas, os órgãos e os tecidos do corpo. Esta reação leva a que as células imunitárias ataquem os sistemas afetados, produzindo uma doença crónica. A nefrite lúpica, também referida como doença glomerular lúpica, é o distúrbio renal que é normalmente uma complicação do LES, e caracteriza-se por danos no glomérulo e perda progressiva da função renal. A cerebrite lúpica refere-se a uma outra complicação do LES, que é a inflamação do cérebro e/ou do sistema nervoso central. 6. Neovascularização da coroideia 0 fator de necrose tumoral foi implicado na fisiopatologia da neovascularização da coroideia. Por exemplo, em membranas neovasculares da coroideia excisadas cirurgicamente, os vasos neovasculares coram positivo tanto para TNF como para IL-1 (Oh, H. et al., (1999) Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 40:1891) .
Numa concretização, o anticorpo de TNF aqui descrito é utilizado para tratar a neovascularização da coroideia. O termo "neovascularização da coroideia" tal como aqui utilizado refere-se ao crescimento de novos vasos sanguíneos que originam da coroideia através de uma ruptura na membrana de Bruch para o epitélio pigmentar sub-retiniano (sub-RPE) ou espaço sub-retiniano. A neovascularização da coroideia (NVC) é uma das principais causas de perda visual em pacientes com a doença. 7. Ciática 0 fator de necrose tumoral foi implicado na fisiopatologia da ciática (Ozaktay et ai., (2002) Eur. Spine J. 11:467; Brisby et ai., (2002) Eur. Spine J. 11:62) . Numa concretização, o anticorpo de TNF aqui descriâo utilizado para tratar ciática. O termo "ciática" tal como aqui utilizado refere-se a uma condição envolvendo movimento e/ou sensação prejudicados na perna, causados por lesão do nervo ciático. A ciática é também vulgarmente referida como neuropatia do nervo ciático e disfunção do nervo ciático. A ciática é uma forma de neuropatia periférica. Ocorre quando há danos no nervo ciático, localizado na parte de trás da perna. O nervo ciático controla os músculos da parte de trás do joelho e da perna inferior e proporciona sensação à parte de trás da coxa, parte da perna inferior e sola do pé. A dor ciática pode ser indicativa de outro distúrbio, incluindo uma hérnia discai lombar, estenose espinal, doença degenerativa do disco, espondilolistese ístimica e síndroma piniforme. 8. Síndroma de Sjogren
O fator de necrose tumoral foi implicado na fisiopatologia da síndroma de Sjogren (Koski et ai., (2001) Clin. Exp. Rheumatol. 19:131). Numa concretização, o anticorpo de TNF aqui descrito é utilizado para tratar síndroma de Sjogren. O termo "síndroma de Sjogren" tal como aqui utilizado refere-se a um distúrbio inflamatório sistémico caracterizado por boca seca, diminuição de ruptura, e outras membranas mucosas secas, e está frequentemente associada a distúrbios reumáticos autoimunes, tais como artrite reumatoide. A secura dos olhos e da boca são os sintomas mais comuns desta síndroma. Os sintomas podem ocorrer por si só, ou com sintomas associados a artrite reumatoide ou outras doenças do tecido conjuntivo. Pode haver um aumento associado das glândulas salivares. Outros órgãos podem ficar afetados. A síndroma pode estar associada a artrite reumatoide, lúpus eritematoso sistémico, esclerodermia, polimiosite e outras doenças. 9. Uveíte 0 fator de necrose tumoral foi implicado na fisiopatologia da uveíte (Wakefield e Lloyd (1992) Cytokine 4:1; Woon et al., (1998) Curr. Eye Res. 17: 955) . Numa concretização, o anticorpo de TNF aqui descrétutilizado para tratar uveíte. 0 termo "uveíte" tal como aqui utilizado refere-se a uma inflamação da úvea, que é a camada entre a esclerótica e a retina, que inclui a íris, o corpo ciliar e a coroideia. A uveíte é também vulgarmente referida como irite, pars planitis, coroidite, coriorretinite, uveíte anterior, e uveíte posterior. A forma mais comum de uveíte é a uveíte anterior, que envolve inflamação na parte da frente do olho, que é geralmente isolada para a íris. Esta condição é frequentemente chamada de irite. Numa concretização, o termo uveíte refere-se a uma inflamação da úvea que exclui inflamação associada a uma doença autoimune, i.e., exclui a uveíte autoimune. 10. Degeneração macular húmida O fator de necrose tumoral foi implicado na fisiopatologia da degeneração macular húmida. Numa concretização, o anticorpo de TNF aqui descrétcmtilizado para tratar a degeneração macular húmida. O termo "degeneração macular húmida", tal como aqui utilizado refere-se a um distúrbio que afeta a mácula (a parte central da retina do olho) e causa diminuição da acuidade visual e possível perda da visão central. Os pacientes com degeneração macular húmida desenvolvem novos vasos sanguíneos sob a retina, o que provoca hemorragia, inchaço, e tecido de cicatriz. 11. Osteoporose O fator de necrose tumoral foi implicado na fisiopatologia da osteoporose (Tsutsumimoto et al., (1999) J. Bone Miner Res. 14:1751). A osteoporose é utilizada para referir um distúrbio caracterizado pela progressiva perda de densidade óssea e adelgaçamento do tecido ósseo. A osteoporose ocorre quando o corpo não consegue formar novo osso suficiente, ou quando muito osso velho é reabsorvido pelo corpo, ou ambos. O anticorpo de TNF , ou um fragmento de <£ãga ao antigénio deste, aqui descrito pode ser utilizado para tratar osteoporose. 12. Osteoartrite 0 fator de necrose tumoral foi implicado na fisiopatologia da osteoartrite (Venn et ai., (1993) Arthritis. Rheum. 36:819; Westacott et ai., (1994) J. Rheumatol. 21:1710) . A osteoartrite (OA) é também referida como osteoartrite hipertrófica, osteoartrose, e doença degenerativa das articulações. A OA é uma doença degenerativa crónica das articulações esqueléticas, que afeta articulações especificas, vulgarmente joelhos, ancas, articulações das mãos e coluna vertebral, em adultos de todas as idades. A OA é caracterizada por várias das seguintes manifestações incluindo degeneração e adelgaçamento da cartilagem articular com o desenvolvimento associado de "úlceras" ou crateras, formação de osteófitos, hipertrofia do osso nas margens, e alterações na membrana sinovial e alargamento das articulações afetadas. Além disso, a osteoartrite é acompanhada por dor e rigidez, particularmente após atividade prolongada. O anticorpo, ou fragmento de ligação ao antigénio deste, aqui descrito pode ser utilizado para tratar osteoartrite. Aspetos radiográficos caracteristicos da osteoartrite incluem estreitamento do espaço articular, esclerose subcondral, osteofitose, formação de cistos subcondrais, corpo ósseo solto (ou "rato articular").
Os medicamentos utilizados para tratar osteoartrite incluem uma variedade de fármacos anti-inflamatórios não esteroides (ΑΙΝΕ). Além disso, inibidores de COX 2, incluindo Celebrex, Vioxx, e Bextra, e Etoricoxib, são também utilizados para tratar OA. Os esteroides, que são injetados diretamente na articulação, podem também ser utilizados para reduzir a inflamação e dor. Os anticorpos de TNF aqui descritos podem ser administrados em combinação com um ΑΙΝΕ, um inibidor de COX2, e/ou esteroides. 13. Outros
Os anticorpos, e porções de anticorpos, aqui descritos, podem também ser utilizados para tratar vários outros distúrbios em que a atividade de TNF seja prejudicial.
Exemplos de outras doenças e distúrbios em que a atividade de TNF tem sido implicada na fisiopatologia, e que podem assim ser tratados utilizando um anticorpo, ou porção de anticorpo, aqui descrito, incluem caquexia relacionada com a idade, doença de Alzheimer, edema cerebral, lesão inflamatória do cérebro, cancro, cancro e caquexia, síndroma de fadiga crónica, dermatomiosite, reações medicamentosas, tais como a síndroma de Stevens-Johnson e reação de Jarisch-Herxheimer, edema em e/ou ao redor da espinal-medula, febres periódicas familiares, síndroma de Felty, fibrose, glomerulonefrites (p. ex., glomerulonefrite pós-estreptococos ou nefropatia de IgA) , afrouxamento de próteses, poliangiite microscópica, distúrbio do tecido conjuntivo misto, mieloma múltiplo, cancro e caquexia, distúrbio de múltiplos órgãos, síndroma mielodisplásica, osteólise do orquitismo, pancreatite, incluindo abscesso agudo, crónico e pancreático, doença periodontal, polimiosite, insuficiência renal progressiva, pseudogota, pioderma gangrenoso, policondrite recidivante, doença cardíaca reumática, sarcoidose, colangite esclerosante, acidente vascular cerebral, recuperação de aneurisma da aorta torácico-abdominal (AATA), síndroma periódica associada ao recetor de TNF (TRAPS), sintomas relacionados com a vacinação da febre-amarela, doenças inflamatórias associadas ao ouvido, inflamação crónica do ouvido, otite média crónica com ou sem colesteatoma, inflamação pediátrica do ouvido, miotose, cancro do ovário, cancro colorretal, distúrbios associados a transplante, terapia associada a síndroma inflamatória induzida (p. ex., síndromas após administração de IL-2), e um distúrbio associado a uma lesão de reperfusão.
Entende-se que todos os distúrbios relacionados com TNF acima mencionados incluem as formas de adulto e juvenil da doença se apropriado. Entende-se também que todos os distúrbios acima mencionadas incluem tanto a forma crónica como a aguda da doença. Além disso, o anticorpo de TNF aqui descrito pode ser utilizado para tratar cada um dos distúrbios relacionados com TNF acima mencionados sozinhos ou em combinação uns com os outros, p. ex., um sujeito que esteja a sofrer de uveíte e lúpus. III. Composições Farmacêuticas e Administração Farmacêutica A. Composições e Administração 0 anticorpo do invento pode ser incorporado em composições farmacêuticas adequadas para administração a um sujeito. Tipicamente, a composição farmacêutica compreende um anticorpo do invento e um transportador farmaceuticamente aceitável. Tal como aqui utilizado, "transportador farmaceuticamente aceitável" inclui qualquer um e todos os solventes, meios de dispersão, revestimentos, agentes antibacterianos e antifúngicos, agentes isotónicos e de retardamento da absorção, e semelhantes que sejam fisiologicamente
compatíveis. Exemplos de transportadores farmaceuticamente aceitáveis incluem um ou mais de água, solução salina, solução salina tamponada com fosfato, dextrose, glicerol, etanol e semelhantes, bem como combinações destes. Em muitos casos, é preferível incluir agentes isotónicos, por exemplo, açúcares, poliálcoois tais como manitol, sorbitol, ou cloreto de sódio na composição. Transportadores farmaceuticamente aceitáveis podem compreender ainda quantidades menores de substâncias auxiliares tais como agentes molhantes ou emulsionantes, conservantes ou tampões, que aumentem a validade ou a eficácia do anticorpo, porção de anticorpo, ou outro inibidor de TNF
As composições aqui descritas podem estar numa variedade de formas. Estas incluem, por exemplo, formas de dosagem líquidas, semissólidas e sólidas, tais como soluções liquidas (p. ex., soluções injetáveis e infusíveis), dispersões ou suspensões, comprimidos, pílulas, pós, lipossomas e supositórios. A forma preferida depende do modo de administração pretendido e da aplicação terapêutica. As composições preferidas típicas estão na forma de soluções injetáveis ou infusíveis, tais como composições semelhantes às utilizadas para a imunização passiva de humanos com outros anticorpos ou outros inibidores de TNF . 0 modo preferido de administração é o parentérico (p. ex., intravenoso, subcutâneo, intraperitoneal, intramuscular). Numa concretização preferida, o anticorpo ou outro inibidor de TNF é administrado por infusão ou injeção intravenosa. Numa outra concretização preferida, o anticorpo ou outro inibidor de TNF é administrado por injeção intramuscular ou subcutânea.
As composições terapêuticas devem ser tipicamente estéreis e estáveis sob as condições de fabrico e armazenamento. A composição pode ser formulada como uma solução, microemulsão, dispersão, lipossomas ou outra estrutura ordenada adequada para uma concentração de fármaco elevada. Soluções injetáveis estéreis podem ser preparadas incorporando o composto ativo (isto é, anticorpo, porção de anticorpo, ou outro inibidor de TNF ) na quantidade requerida num solvente apropriado com um ou uma combinação dos ingredientes enumerados acima, tal como requerido, seguido de esterilização por filtração. Geralmente, as dispersões são preparadas por incorporação do composto ativo num veiculo estéril que contém um meio de dispersão básico e os outros ingredientes necessários a partir dos enumerados acima. No caso de pós estéreis para a preparação de soluções injetáveis estéreis, os métodos preferidos de preparação são secagem em vácuo e secagem por congelação que produz um pó do ingrediente ativo mais qualquer ingrediente adicional desejado a partir de uma solução previamente esterilizada por filtração destes. A fluidez correta de uma solução pode ser mantida, por exemplo, através da utilização de um revestimento tal como lecitina, através da manutenção do tamanho de partícula requerido no caso de dispersão e através da utilização de tensioativos. A absorção prolongada de composições injetáveis pode ser conseguida incluindo na composição um agente que atrase a absorção, por exemplo, sais de monoestearato e gelatina.
Compostos ativos suplementares podem também ser incorporados nas composições. Em certas concretizações, o anticorpo da invenção é coformulado e/ou coadministrado com um ou mais agentes terapêuticos adicionais. Por exemplo, o anticorpo anti-hTNF do invento pode ser coformulado e/ou
coadministrado com um ou mais DMARD ou um ou mais ΑΙΝΕ ou um ou mais anticorpos adicionais que se ligam a outros alvos (p. ex., anticorpos que se ligam a outras citocinas ou que se ligam a moléculas da superfície celular), uma ou mais citocinas, recetor de TNF úsel (ver, p. ex. , Publicação PCT No. WO 94/06476) e/ou um ou mais agentes químicos que inibem a produção ou atividade de hTNF (tais como derivados de ciclo- hexano-ilideno, tal como descrito na Publicação PCT No. WO 93/19751) ou qualquer combinação destes. Além disso, um ou mais anticorpos do invento pode ser utilizado em combinação com dois ou mais dos agentes terapêuticos anteriores adicionais. Tais terapias de combinação podem utilizar, vantajosamente, dosagens mais baixas dos agentes terapêuticos administrados, evitando assim possíveis efeitos colaterais, complicações ou baixo nível de resposta por parte do paciente associado às várias monoterapias. São também aqui descritas composições farmacêuticas compreendendo uma quantidade eficaz de um inibidor de TNF e um transportador farmaceuticamente aceitável, em que a quantidade eficaz do inibidor de TNF pode ser eficaz para tratar um distúrbio relacionado com TNF , incluindo, por exemplo, ciática, endometriose e prostatite.
Os anticorpos, porções de anticorpo, e outros inibidores de TNF aqui descritos podem ser administrados aésade uma variedade de métodos conhecidos na arte, embora para muitas aplicações terapêuticas a via/o modo de administração preferido seja a injeção ou infusão intravenosa. Tal como será apreciado pelos peritos na especialidade, a via e/ou o modo de administração variarão dependendo dos resultados desejados. Em certas concretizações, o composto ativo pode ser preparado com um transportador que protegerá o composto contra libertação rápida, tal como uma formulação de libertação controlada, incluindo implantes, adesivos transdérmicos e sistemas de distribuição microencapsulados. Podem ser utilizados polímeros biocompatíveis biodegradáveis tais como acetato de etileno de vinilo, polianidridos, ácido poliglicólico, colagénio, poliortoésteres e ácido polilático. Muitos métodos para a preparação de tais formulações estão patenteados ou são geralmente conhecidos dos peritos na especialidade. Ver, p. ex., "Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems", J.R. Robinson, ed., Marcel Dekker, Inc., Nova Iorque, 1978.
Os anticorpos de TNF aqui descritos podem também ser administrados na forma de formulações de cristais proteicos, que incluem uma combinação de cristais proteicos encapsulados dentro de um transportador polimérico para formar partículas revestidas. As partículas revestidas da formulação de cristais proteicos podem ter uma morfologia esférica e ser microesferas de até 500 micrómetros em diâmetro ou podem ter alguma outra morfologia e ser micropartícuias. A concentração aumentada de cristais proteicos permite que o anticorpo do invento seja distribuído por via subcutânea. Os anticorpos de TNF aqui descritos podem ser distribuídos através de um sistema de distribuição de proteínas, em que uma ou mais de uma formulação ou composição de cristais proteicos, é administrada a um sujeito com um distúrbio relacionado com TNF .cAmposições
e os métodos de preparação de formulações estabilizadas de cristais de anticorpo inteiro ou cristais de fragmentos de anticorpo são também descritos em WO 02/072636. Numa concretização, uma formulação compreendendo os fragmentos de anticorpos cristalizados descritos nos Exemplos 37 e 38 é usada para tratar um distúrbio relacionado com TNF
Um anticorpo, porção de anticorpo, ou outro inibidor de TNF aqui descrito pode ser oralmente administrado, por exemplo, com um diluente inerte ou um transportador comestível assimilável. O composto (e outros ingredientes, se desejado) pode também ser envolvido por uma cápsula dura ou mole de gelatina, comprimido em comprimidos, ou incorporado diretamente na dieta do sujeito. Para administração terapêutica oral, os compostos podem ser incorporados com excipientes e utilizados na forma de comprimidos ingeríveis, comprimidos bucais, trociscos, cápsulas, elixires, suspensões, xaropes, hóstias, e semelhantes. Para administrar um composto através de outra que não a administração parentérica, pode ser necessário revestir o composto com, ou coadministrar o composto com, um material para prevenir a sua inativação.
As composições farmacêuticas do invento podem incluir uma "quantidade terapeuticamente eficaz" ou uma "quantidade profilaticamente eficaz" de um anticorpo do invento. Uma "quantidade terapeuticamente eficaz" refere-se a uma quantidade eficaz, nas dosagens e durante os período de tempo necessários, para alcançar o resultado terapêutico desejado.
Uma quantidade terapeuticamente eficaz do anticorpo, porção de anticorpo, ou outro inibidor de TNF pode variar de acordo com fatores tais como o estado de doença, a idade, o sexo, e o peso do indivíduo, e a capacidade do anticorpo, porção de anticorpo, outro inibidor de TNF de desencadear uma resposta desejada no indivíduo. Uma quantidade terapeuticamente eficaz é também aquela em que quaisquer efeitos tóxicos ou prejudiciais do anticorpo, porção de anticorpo, ou outro inibidor de TNF ão s compensados pelos efeitos terapeuticamente benéficos. Uma "quantidade profilaticamente eficaz" refere-se a uma quantidade eficaz, nas dosagens e durante os períodos de tempo necessários, para alcançar o resultado profilático desejado. Tipicamente, uma vez que uma dose profilática é utilizada em sujeitos antes ou numa fase precoce da doença, a quantidade profilaticamente eficaz será inferior à quantidade terapeuticamente eficaz.
Os regimes de dosagem podem ser ajustados para proporcionar a resposta desejada ótima (p. ex., uma resposta terapêutica ou profilática). Por exemplo, pode ser administrado um único bolo, podem ser administradas várias doses divididas ao longo do tempo ou uma dose pode ser proporcionalmente reduzida ou aumentada tal como indicado pelas exigências da situação terapêutica. É especialmente vantajoso formular composições parentéricas na forma de unidade de dosagem para facilidade de administração e uniformidade de dosagem. A forma de unidade de dosagem, tal como aqui utilizada, refere-se a unidades fisicamente discretas adequadas como dosagens unitárias para os sujeitos mamíferos a tratar; cada unidade contendo uma quantidade predeterminada de composto ativo calculada para produzir o efeito terapêutico desejado em associação com o veiculo farmacêutico requerido. A especificação para as formas de dosagem unitárias do invento é ditada por e diretamente dependente de (a) as características únicas do composto ativo e o efeito terapêutico ou profilático particular a alcançar, e (b) as limitações inerentes na técnica de compor um tal composto ativo para o tratamento de sensibilidade em indivíduos.
Um intervalo exemplar, não limitativo para uma quantidade terapeuticamente ou profilaticamente eficaz de um anticorpo ou porção de anticorpo aqui descrito é de 10-150 mg, de maior preferência 20-80 mg e ainda de preferência cerca 40 mg. Deve notar-se que os valores de dosagem podem variar com o tipo e a gravidade da condição a aliviar. Deve ainda ser entendido que para qualquer sujeito particular, os regimes de dosagem específicos devem ser ajustados ao longo do tempo de acordo com a necessidade individual e o julgamento profissional da pessoa que administra ou supervisiona a administração das composições, e que os intervalos de dosagem aqui estabelecidos são apenas exemplares e não se destinam a limitar o âmbito ou a prática da composição descrita. Intervalos intermédios às concentrações acima citadas, p. ex. , cerca de 6-144 mg/ml, podem também ser utilizados. Por exemplo, intervalos de valores usando uma combinação de qualquer um dos valores acima citados como limite superior e/ou inferior destinam-se a ser incluídos. São também aqui descritas composições farmacêuticas empacotadas que compreendem um inibidor de TNF do invento e instruções para utilização do inibidor para tratar distúrbios relacionados com TNF , tal como descrito acima. São também aqui descritos estojos contendo uma composição farmacêutica compreendendo um anticorpo anti-TNF e um transportador farmaceuticamente aceitável e uma ou mais composições farmacêuticas compreendendo cada uma um fármaco útil para o tratamento de um distúrbio relacionado com TNF e um transportador farmaceuticamente aceitável.
Alternativamente, o estojo compreende uma única composição farmacêutica compreendendo um anticorpo anti-TNF , um ou mais fármacos úteis para o tratamento de um distúrbio relacionado com TNF e um transportador farmaceuticamente aáeét. Os estojos contêm instruções para o doseamento das composições farmacêuticas para o tratamento de um distúrbio relacionado com TNF em que a admini<5i.®ade um anticorpo anti-TNF seja benéfica, tal como lúpus. São também aqui descritas composições farmacêuticas empacotadas ou estojos que compreendem um inibidor de TNF do invento e instruções para a utilização do inibidor para tratar um determinado distúrbio, em que a atividade de TNF é prejudicial, como descrito acima. 0 pacote ou estojo pode conter alternativamente o inibidor de TNF e pode ser promovido para utilização, quer no interior da embalagem quer através de informação anexa, para as utilizações ou o tratamento dos distúrbios aqui descritos. Os produtos farmacêuticos empacotados ou estojos podem ainda incluir um segundo agente (tal como aqui descrito) empacotado com ou copromovido com instruções para utilização do segundo agente com um primeiro agente (tal como aqui descrito). B. Agentes terapêuticos adicionais São aqui descritas composições farmacêuticas e métodos de utilização destas para o tratamento de um distúrbio relacionado com TNF . As compões, farmacêuticas compreendem um primeiro agente que previne ou inibe um distúrbio relacionado com TNF A composição farmacêutica pode também incluir um segundo agente que seja um ingrediente farmacêutico ativo; isto é, o segundo agente é terapêutico e a sua função está para além da de um ingrediente inativo, tal como um transportador farmacêutico, conservante, diluente ou tampão. 0 segundo agente pode ser útil no tratamento ou na prevenção de distúrbios relacionadas com TNF . 0 segundo agente pode diminuir ou tratar pelo menos um sintoma associado à doença alvo. 0 primeiro e segundo agentes podem exercer os seus efeitos biológicos através de mecanismos de ação semelhantes ou não relacionados; ou um ou ambos do primeiro e segundo agentes podem exercer os seus efeitos biológicos através de uma multiplicidade de mecanismos de ação. Uma composição farmacêutica pode também compreender um terceiro composto, ou mesmo ainda mais, em que o terceiro (e quarto, etc.) composto tem as mesmas caracteristicas de um segundo agente.
Deve entender-se que as composições farmacêuticas aqui descritas podem ter o primeiro e o segundo, terceiro, ou mais agentes no mesmo transportador farmaceuticamente aceitável ou num transportador farmaceuticamente aceitável diferente para cada uma das concretizações descritas. Deve entender-se ainda que o primeiro, segundo, terceiro e mais agentes podem ser administrados simultaneamente ou sequencialmente dentro das concretizações descritas. Alternativamente, um primeiro e segundo agentes podem ser administrados simultaneamente, e um terceiro ou agente adicional pode ser administrado antes ou depois dos primeiros dois agentes. A combinação de agentes utilizada dentro dos métodos e das composições farmacêuticas aqui descritos pode ter um efeito terapêutico aditivo ou sinergético sobre a ou as condições ou a ou as doenças alvo para tratamento. A combinação de agentes utilizados nos métodos ou nas composições farmacêuticas aqui descritos pode também reduzir um efeito prejudicial associado a pelo menos um dos agentes quando administrado por si só ou sem outro ou outros agentes da composição farmacêutica particular. Por exemplo, a toxicidade dos efeitos secundários de um agente pode ser atenuada por um outro agente da composição, permitindo assim uma dosagem mais elevada, melhorando a adesão do paciente, e melhorando os resultados terapêuticos. Os efeitos aditivos ou sinérgicos, benefícios e vantagens das composições aplicam-se a classes de agentes terapêuticos, quer classes estruturais quer funcionais, ou aos próprios compostos individuais.
Compostos ativos suplementares podem também ser incorporados nas composições. Em certas concretizações, um anticorpo ou porção de anticorpo aqui descrito é coformulado com e/ou coadministrado com um ou mais agentes terapêuticos adicionais, que são úteis para o tratamento do distúrbio relacionado com TNF em que a atividade de TêlFpre judicial.
Por exemplo, um anticorpo anti-hTNF ,çporde anticorpo, ou outro inibidor de TNF aqui descrito pode ser coformulado e/ou coadministrado com um ou mais anticorpos adicionais que se ligam a outros alvos (p. ex., anticorpos que se ligam a outras citocinas ou que se ligam a moléculas da superfície celular), uma ou mais citocinas, recetor de TNF ú^sel (ver p. ex. ,
Publicação PCT No. WO 94/06476) e/ou um ou mais agentes químicos que inibem a produção ou a atividade de hTNF (tais como derivados de ciclo-hexano-ilideno, tal como descrito na Publicação PCT No. WO 93/19751) . Além disso, um ou mais anticorpos ou outros inibidores de TNF aqui descritos podem ser usados em combinação com dois ou mais dos agentes terapêuticos anteriores. Tais terapias de combinação podem utilizar vantajosamente dosagens mais baixas dos agentes terapêuticos administrados, evitando assim possíveis toxicidades ou complicações associadas às várias monoterapias. O ou os agentes terapêuticos específicos são geralmente selecionados com base no distúrbio particular relacionado com TNF a tratar, tal como discutido abaixo.
Exemplos não limitativos de agentes terapêuticos adicionais com os quais um anticorpo, porção de anticorpo, ou outro inibidor de TNF aqui descrito pode ser combinado incluem os seguintes: fármaco ou fármacos anti-inflamatórios não esteroides (ΑΙΝΕ); fármaco ou fármacos anti-inflamatórios supressores de citocinas (AISC); CDP-571/BAY-10-3356 (anticorpo humanizado anti-TNF ; Celltech/Bayer); cA2/infliximab (anticorpo quimérico anti-TNF ; Centocor); 75 kdTNFR-IgG/etanercept (proteína de fusão recetor de TNF de 75 kDa-IgG; Immunex; ver p. ex., Arthritis & Rheumatism (1994)
Vol. 37, S295; J. Invest. Med. (1996) Vol. 44, 235A); 55 kdTNF-IgG (proteína de fusão recetor de TNF de 55 kDa-IgG; Hforamann-LaRoche); IDEC-CE9.1/SB 210396 (anticorpo anti-CD4 primatizado que não esgota; IDEC/SmithKline; ver p. ex., Arthritis & Rheumatism (1995) Vol. 38, S185); DAB 486-IL-2 e/ou DAB 389-IL-2 (proteínas de fusão de IL-2; Seragen; ver p. ex., Arthritis & Rheumatism (1993) Vol. 36, 1223); Anti-Tac (anti-IL-2R humanizado; Protein Design Labs/Roche); IL-4 (citocina anti-inflamatória; DNAX/Schering); IL-10 (SCH 52000; IL-10 recombinante, citocina anti-inflamatória; DNAX/Schering); IL-4; IL-10 e/ou agonistas de IL-4 (p. ex., anticorpos agonistas); IL-1RA (antagonista do recetor de IL-1; Synergen/Amgen); TNF-bp/s-TNF (proteína de ligação a TNF solúvel; ver p. ex., Arthritis & Rheumatism (1996) Vol. 39, No. 9 (suplemento), S284; Amer. J. Physiol. - Heart e Circulatory Physiology (1995)
Vol. 268, págs. 37-42); R973401 (inibidor da fosfodiesterase
Tipo IV; ver p. ex., Arthritis & Rheumatism (1996) Vol. 39,
No. 9 (suplemento), S282); MK-966 (inibidor de COX-2; ver p. ex., Arthritis & Rheumatism (1996) Vol. 39, No. 9 (suplemento), S81); Iloprost (ver p. ex., Arthritis & Rheumatism (1996) Vol. 39, No. 9 (suplemento), S82); metotrexato; talidomida (ver p. ex., Arthritis & Rheumatism (1996) Vol. 39, No. 9 (suplemento), S282) e fármacos relacionados com talidomida (p. ex., Celgen); leflunomida (anti-inflamatório e inibidor de citocinas; ver p. ex., Arthritis & Rheumatism (1996) Vol. 39, No. 9 (suplemento), S131; Inflammation Research (1996) Vol. 45, págs. 103-107); ácido tranexâmico (inibidor da ativação do plasminogénio; ver p. ex., Arthritis & Rheumatism (1996) Vol. 39, No. 9 (suplemento), S284); T-614 (inibidor de citocinas; ver p. ex., Arthritis & Rheumatism (1996) Vol. 39, No. 9 (suplemento), S282); prostaglandina EI (ver p. ex., Arthritis & Rheumatism (1996) Vol. 39, No. 9 (suplemento), S282); Tenidap (fármaco anti-inflamatório não esteroide; ver p. ex., Arthritis & Rheumatism (1996) Vol. 39, No. 9 (suplemento), S280); Naproxeno (fármaco anti-inflamatório não esteroide; ver p. ex., Neuro Report. (1996) Vol. 7, págs. 1209-1213); Meloxicam (fármaco anti-inflamatório não esteroide); Ibuprofeno (fármaco anti- inflamatório não esteroide) ; Piroxicam (fármaco anti- inflamatório não esteroide); Diclofenac (fármaco anti- inflamatório não esteroide); Indometacina (fármaco anti- inflamatório não esteroide); Sulfassalazina (ver p. ex., Arthritis & Rheumatism (1996) Vol. 39, No. 9 (suplemento), S281); Azatioprina (ver p. ex., Arthritis & Rheumatism (1996)
Vol. 39, No. 9 (suplemento), S281); inibidor de ICE (inibidor da enzima conversora da interleucina-1 ); zap-70 e/ou inibidor de lck (inibidor da tirosina-cinase zap-70 ou lck); inibidor de VEGF e/ou inibidor de VEGF-R (inibidor do fator de crescimento de células endoteliais vasculares ou recetor do fator de crescimento de células endoteliais vasculares; inibidores de angiogénese); fármacos anti-inflamatórios corticosteroides (p. ex., SB203580); inibidores da convertase de TNF; anticorpos anti-IL-12; anticorpos anti-IL-18; interleucina-11 (ver p. ex., Arthritis & Rheumatism (1996)
Vol. 39, No. 9 (suplemento), S296); interleucina-13 (ver p. ex., Arthritis & Rheumatism (1996) Vol. 39, No. 9 (suplemento), S308); inibidores de interleucina-17 (ver p. ex., Arthritis & Rheumatism (1996) Vol. 39, No. 9 (suplemento), S120); ouro; penicilamina; cloroquina; hidroxicloroquina; clorambucilo; ciclofosfamida; ciclosporina; irradiação linfóide total; globulina anti-timócitos; anticorpos anti-CD4; CD5-toxinas; péptidos e colagénio administrados por via oral; lobenzarit dissódico; Agentes de Regulação de Citocinas (CRA) HP228 e HP466 (Houghten Pharmaceuticals, Inc.); oligodesoxinucleótidos de fosforotioato antissentido ICAM-1 (ISIS 2302; Isis
Pharmaceuticals, Inc.); recetor do complemento solúvel 1 (ΤΡΙΟ; T Cell Sciences, Inc.); prednisona; orgoteina; polissulfato de glicosaminoglicano; minociclina; anticorpos anti-IL2R; lipídios marinhos e botânicos (ácidos gordos de peixes e sementes de plantas; ver p. ex., DeLuca et ai., (1995) Rheum. Dis. Clin. North Am. 21:759-777); auranofina; fenilbutazona; ácido meclofenâmico; ácido flufenâmico; globulina imunitária intravenosa; zileuton; ácido micofenólico (RS-61443); tacrolimus (FK-506); sirolimus (rapamicina); amiprilose (terafectina); cladribina (2- clorodesoxiadenosina); azaribina; metotrexato; antivirais; e agentes de modulação do sistema imunitário. Qualquer um dos agentes acima mencionados pode ser administrado em combinação com o anticorpo de TNF aqui descrito para tratar um distúrbio
relacionado com TNF 0 anticorpo de TNF aqui descrito pode ser administrado em combinação com um dos seguintes agentes para o tratamento de artrite reumatoide: inibidor de KDR de molécula pequena (ABT-123), inibidor de Tie-2 de molécula pequena; metotrexato; prednisona; celecoxib; ácido fólico; sulfato de hidroxicloroquina; rofecoxib; etanercept; infliximab; leflunomida; naproxeno; valdecoxib; sulfasalazina; metilprednisolona; ibuprofeno; meloxicam; acetato de metilprednisolona; tiomalato sódico de ouro; aspirina; azatioprina; acetonido de triamcinolona; napsilato de propoxifeno/apap; folato; nabumetona; diclofenac; piroxicam; etodolac; diclofenac sódico; oxaprozina; oxicodona-HCl; bitartarato de hidrocodona/apap; diclofenac sódico/misoprostol; fentanilo; anaquinra, recombinante humano; tramadol-HCl; salsalato; sulindac; cianocobalamina/fa/piridoxina; acetaminofeno; alendronato sódico; prednisolona; sulfato de morfina; cloridrato de lidocaina; indometacina; sulfato de glucosamina/condroitina; ciclosporina; amitriptilina-HCl; sulfadiazina; oxicodona-HCl/acetaminofeno; olopatadina-HCl; misoprostol; naproxeno sódico; omeprazole; micofenolato-mofetilo; ciclofosfamida; rituximab; IL-1 TRAP; MRA; CTLA4-IG; IL-18 BP; ABT-874; ABT-325 (anti-IL 18); anti-IL 15; BIRB-796; SCIO-469; VX-702; AMG-548; VX-740; Roflumilast; IC-485; CDC-801; e mesopram. Noutra concretização, o anticorpo de TNF aqui descrito é administrado para o tratamento de um distúrbio relacionado com TNF em combinação com um dos agentes acima mencionados para o tratamento de artrite reumatoide.
Numa concretização, o anticorpo de TNF iaqfescrito é administrado em combinação com um dos seguintes agentes para o tratamento de um distúrbio relacionado com TNF em que a atividade de TNF é prejudicial: anticorpo anti-IL12 (ABT 874); anticorpo anti-IL18 (ABT 325); inibidor de LCK de molécula pequena; inibidor de COT de molécula pequena; anticorpo anti-IL1; inibidor de MK2 de molécula pequena; anticorpo anti-CD19; inibidor de CXCR3 de molécula pequena; inibidor de CCR5 de molécula pequena; inibidor de CCR11 de molécula pequena; anticorpo anti-seletina E/L; inibidor de P2X7 de molécula pequena; inibidor de IRAK-4 de molécula pequena; agonista de molécula pequena do recetor de glucocorticoide; anticorpo anti-recetor C5a; inibidor de molécula pequena do recetor C5a; anticorpo anti-CD32; e CD32 como proteína terapêutica.
Ainda noutra concretização, o anticorpo de TNF aqui descrito é administrado em combinação com um antibiótico ou agente anti-infecioso. Agentes anti-infeciosos incluem aqueles agentes conhecidos na técnica para tratar infeções virais, fúngicas, parasíticas ou bacterianas. 0 termo "antibiótico", tal como aqui utilizado, refere-se a uma substância química que inibe o crescimento de, ou mata, microrganismos. Englobados por este termo estão antibióticos produzidos por um microrganismo, bem como antibióticos sintéticos (p. ex., análogos) conhecidos na técnica. Os antibióticos incluem, mas não se limitam a, claritromicina (Biaxin®) , ciprofloxacina (Cipro®) , e metronidazole (Flagyl®) .
Noutra forma de realização, o anticorpo de TNF aqui descrito é administrado em combinação com um agente terapêutico adicional para tratar ciática ou dor. Exemplos de agentes que podem ser utilizados para reduzir ou inibir os sintomas de ciática ou dor incluem bitartarato de hidrocodona/apap, rofecoxib, ciclobenzaprina-HCl, metilprednisolona, naproxeno, ibuprofeno, oxicodona-HCl/acetaminofeno, celecoxib, valdecoxib, acetato de metilprednisolona, prednisona, fosfato de codeína/apap, tramadol-HCl/acetaminofeno, metaxalona, meloxicam, metocarbamol, cloridrato de lidocaína, diclofenac sódico, gabapentina, dexametasona, carisoprodol, trometamina de cetorolac, indometacina, acetaminofeno, diazepam, nabumetona, oxicodona-HCl, tizanidina-HCl, diclofenac sódico/misoprostol, napsilato de propoxifeno/apap, asa/oxicod/oxicodona ter, ibuprofeno/hidrocodona bit, tramadol HC1, etodolac, propoxifeno-HCl, amitriptilina-HCl, carisoprodol/codeína fos/asa, sulfato de morfina, multivitaminas, naproxeno sódico, citrato de orfenadrina, e temazepam.
Ainda noutra concretização, o distúrbio relacionado com TNF é tratado com o anticorpo de TNF aqui descrito em combinação com hemodiálise.
Noutra concretização, o anticorpo de TNF aqui descrito é utilizado em combinação com um fármaco utilizado para tratar doença de Crohn ou um distúrbio relacionado com Crohn. Exemplos de agentes terapêuticos adicionais que podem ser utilizados para tratar doença de Crohn incluem mesalamina, prednisona, azatioprina, mercaptopurina, infliximab, budesonida, sulfassalazina, metilprednisolona sod sue, difenoxilato/atrop sulf, cloridrato de loperamida, metotrexato, omeprazole, folato, ciprofloxacina/dextrose-água, bitartarato de hidrocodona/apap, cloridrato de tetraciclina, fluocinonida, metronidazole, timerosal/ácido bórico, colestiramina/sacarose, cloridrato de ciprofloxacina, sulfato de hiosciamina, cloridrato de meperidina, cloridrato de midazolam, oxicodona-HCl/acetaminofeno, cloridrato de prometazina, fosfato de sódio, sulfametoxazol/trimetoprim, celecoxib, policarbofilo, napsilato de propoxifeno, hidrocortisona, multivitaminas, balsalazida dissódica, fosfato de codeina/apap, colesevelam-HCl, cianocobalamina, ácido fólico, levofloxacina, metilprednisolona, natalizumab, e interferão-gama.
Noutra concretização, o anticorpo de TNF aqui descrito é administrado em combinação com um terapêutico adicional para tratar asma. Exemplos de agentes que podem ser utilizados para reduzir ou inibir os sintomas de asma incluem o seguinte: albuterol; salmeterol/fluticasona; sódio; propionato de fluticasona; budesonide; prednisona; xinafoato de salmeterol; levalbuterol-HCl; sulfato/ipratrópio; fosfato sódico de prednisolona; triamcinolona-acetonido; dipropionato de beclometasona; brometo de ipratrópio; Azitromicina; acetato de pirbuterol, prednisolona, teofilina anidra, metilprednisolona sod succ, claritromicina, zafirlucaste, fumarato de formoterol, vacina do vírus da gripe, metilprednisolona, tri-hidrato, flunisolida, injeção de alergia, cromolina sódica, cloridrato de fexofenadina, flunisolida/mentol, amoxicilina/clavulanato, levofloxacina, dispositivo inalador auxiliar, guaifenesina, fosfato sod de dexametasona; moxifloxacina-HCl; hiclato; guaifenesina/d-metorfano; pefedrina/cod/clorfenir; gatifloxacina; cloridrato de cetirizina; furoato de mometasona; xinafoato de salmeterol; benzonatato; cefalexina; pe/hidrocodona/clorfenir; cetirizina-HCl/pseudoefed; fenilefrina/cod/prometazina; codeína/prometazina; cefprozil; dexametasona; guaifenesina/pseudoefedrina, clorfeniramina/hidrocodona, nedocromilo sódico, sulfato de terbutalina, epinefrina e metilprednisolona, sulfato de metaproterenol.
Noutra concretização, o anticorpo de TNF aqui descrito é administrado em combinação com um agente terapêutico adicional para tratar DPOC. Exemplos de agentes que podem ser utilizados para reduzir ou inibir os sintomas de DPOC incluem, sulfato de albuterol/ipratrópio; brometo de ipratrópio; salmeterol/fluticasona; albuterol; salmeterol; xinafoato; propionato de fluticasona; prednisona; teofilina anidra; metilprednisolona sod succ; montelucaste sódico; budesonida; fumarato de formoterol; triamcinolona-acetonido; levofloxacina; guaifenesina; azitromicina; beclometasona; dipropionato; levalbuterol-HCl; flunisolida; sódio; tri-hidrato; gatifloxacina; zafirlucaste; amoxicilina/clavulanato; flunisolida/mentol; clorfeniramina/hidrocodona; sulfato de metaproterenol; metilprednisolona; furoato; efedrina/cod/clorfenir; acetato de pirbuterol; -efedrina/loratadina; sulfato de terbutalina; brometo de tiotrópio; (R, R)-formoterol; TgAAT; Cilomilast e Roflumilast.
Noutra concretização, o anticorpo de TNF aqui descrito é administrado em combinação com um agente terapêutico adicional para tratar FPI. Exemplos de agentes que podem ser utilizados para reduzir ou inibir os sintomas de FPI incluem prednisona; azatioprina; albuterol; colchicinas; sulfato; digoxina; interferão gama; metilprednisolona sod succ; furosemida; lisinopril; nitroglicerina; espironolactona; ciclofosfamida; brometo de ipratrópio; actinomicina d; alteplase; propionato de fluticasona; levofloxacina; sulfato de metaproterenol; sulfato de morfina; oxicodona-HCl; cloreto de potássio; triamcinolona-acetonido; tacrolimus anidro; cálcio; interferão-alfa; metotrexato; micofenolato-mofetilo.
Um anticorpo de TNF aqui descrito pode ser administrado em combinação com um agente que é vulgarmente utilizado para tratar espondiloartropatias. Exemplos de tais agentes incluem fármacos anti-inflamatórios não esteroides (ΑΙΝΕ), inibidores de COX 2, incluindo Celebrex®, Vioxx®, e Bextra®, e etoricoxib. Fisioterapia também é vulgarmente utilizada para tratar espondiloartropatias, vulgarmente em conjunto com fármacos anti-inflamatórios não esteroides.
Noutra concretização, o anticorpo de TNF aqui descrito é administrado em combinação com um agente terapêutico adicional para tratar espondilite anquilosante. Exemplos de agentes que podem ser utilizados para reduzir ou inibir os sintomas de espondilite anquilosante incluem ibuprofeno, diclofenac e misoprostol, naproxeno, meloxicam, indometacina, diclofenac, celecoxib, rofecoxib, sulfasalazina, prednisona, metotrexato, azatioprina, minociclina, prednisona, etanercept, e infliximab.
Noutra concretização, o anticorpo de TNF aqui descrito é administrado em combinação com um agente terapêutico adicional para tratar artrite psoriática. Exemplos de agentes que podem ser utilizados para reduzir ou inibir os sintomas da artrite psoriática incluem metotrexato; etanercept; rofecoxib; celecoxib; ácido fólico; sulfassalazina; naproxeno; leflunomida; acetato de metilprednisolona; indometacina; sulfato de hidroxicloroquina; sulindac; prednisona; betametasona diprop aumentada; infliximab; metotrexato; folato; triamcinolona-acetonido; diclofenac; dimetilsulfóxido; piroxicam; diclofenac sódico; cetoprofeno; meloxicam; prednisona; metilprednisolona; nabumetona; tolmetina sódica; calcipotrieno; ciclosporina; diclofenac; sódio/misoprostol; fluocinonido; sulfato de glucosamina; tiomalato sódico de ouro; hidrocodona; bitartrato/apap; ibuprofeno; risedronato de sódio; sulfadiazina; tioguanina; valdecoxib; alefacept; e efalizumab. 0 inibidor de TNF pode ser administrado na sequência de um procedimento inicial para tratamento de doença cardíaca coronária. Exemplos de tais procedimentos incluem, mas não estão limitados a enxerto de bypass da artéria coronária (CABG) e angioplastia coronária de balão transluminal percutânea (PTCA) ou angioplastia. Numa concretização, é administrado o inibidor de TNF para prevenir que ocorra novamente estenose. 0 inibidor de TNF pode ser administrado para prevenir ou tratar reestenose. É também aqui descrito um método de tratamento, em que o inibidor de TNF é administrado antes, em conjunto com, ou após a inserção de um stent na artéria de um sujeito que recebe um procedimento para tratar doença cardíaca coronária. Numa concretização, o stent é administrado após CABG ou PTCA. Pode ser utilizada uma grande variedade de enxertos de stent no contexto da presente divulgação, dependendo do local e da natureza do tratamento desejado. Os enxertos de stent podem ser, por exemplo, enxertos bifurcados ou em tubo, cilíndricos ou biselados, autoexpansíveis ou expansíveis por balão, de corpo único, ou modulares. Além disso, o enxerto de stent pode ser adaptado para libertar o fármaco apenas em extremidades distais, ou ao longo de todo o corpo do enxerto de stent. 0 inibidor de TNF aqui descrito pode também ser administrado num stent. 0 anticorpo de TNF , incluindo, por exemplo, D2E7/HUMIRA® pode ser administrado por um stent de eluição de fármacos. 0 anticorpo de TNF aqui descrito pode ser administrado em combinação com um agente terapêutico adicional para tratar reestenose. Exemplos de agentes que podem ser utilizados para tratar ou prevenir reestenose incluem sirolimus, paclitaxel, everolimus, tacrolimus, ABT-578, e acetaminofeno. 0 anticorpo de TNF aqui descrito pode ser administrado em combinação com um agente terapêutico adicional para tratar enfarte do miocárdio. Exemplos de agentes que podem ser utilizados para tratar ou prevenir enfarte do miocárdio incluem aspirina, nitroglicerina, tartrato de metoprolol, enoxaparina sódica, heparina sódica, bissulfato de clopidogrel, carvedilol, atenolol, sulfato de morfina, succinato de metoprolol, varfarina sódica, lisinopril, mononitrato de isosorbide, digoxina, furosemida, simvastatina, ramipril, tenecteplase, maleato de enalapril, torsemida, retavase, losartan potássico, quinapril-HCl/mag carb, bumetanida, alteplase, enalaprilat, cloridrato de amiodarona, tirofiban-HC1 m-hidratado, cloridrato de diltiazem, captopril, irbesartan, valsartan, cloridrato de propranolol, fosinopril sódico, cloridrato de lidocaína, eptifibatida, cefazolina sódica, sulfato de atropina, ácido aminocapróico, espironolatona, interferão, cloridrato de sotalol, cloreto de potássio, docusato sódico, dobutamina-HCl, alprazolam, pravastatina sódica, atorvastatina de cálcio, cloridrato de midazolam, cloridrato de meperidina, dinitrato de isossorbida, epinefrina, cloridrato de dopamina, bivalirudina, rosuvastatina, ezetimiba/sinvastatina, avasimibe, abciximab e cariporide. 0 anticorpo de TNF aqui descrito pode ser administrado em combinação com um agente terapêutico adicional para tratar angina. Exemplos de agentes que podem ser utilizados para tratar ou prevenir angina incluem: aspirina; nitroglicerina; mononitrato de isosorbida; succinato de metoprolol; atenolol; tartarato de metoprolol; besilato de amlodipina, cloridrato de dilitiazem, dinitrato de isossorbida; bissulfato de clopidogrel; nifedipina; atorvastatina de cálcio; cloreto de potássio; furosemida; sinvastatina; verapamil-HCl; digoxina; propranolol-HCl; carvedilo; lisinopril; espironolatona; hidroclorotiazida; maleato de enalapril; madolol; ramipril; enoxaparina sódica; heparina sódica; valsartan; cloridrato de sotalol; fenofibrato; ezetimibe; bumetanida; losartan potássico; lisinopril/hidroclorotiazida; felodipina; captopril; e fumarato de bisoprolol.
Um anticorpo de TNF pode ser administrado em comlpãoa com um agente que seja vulgarmente utilizado para tratar o vírus de hepatite C. Exemplos de tais agentes incluem Interferão-alfa-2a, Interferão alfa-2b, Interferão alfa-conl, Interferão alfa-nl, Interferão alfa-2a peguilado, Interferão alfa-2b peguilado, Ribavirina, Peginterferão alfa-2b e ribavirina, Ácido Ursodesoxicólico, Ácido Glicirrízico, Timalfasin, Maxamina, e VX-497. 0 anticorpo de TNF do invento é administrado em combinação com corticosteroides tópicos, análogos da vitamina D, e retinoides tópicos ou orais, ou combinações destes, para o tratamento de psoríase. Além disso, o anticorpo de TNF do invento é administrado em combinação com um dos seguintes agentes para o tratamento de psoríase: inibidor de KDR de molécula pequena (ABT-123) , inibidor de Tie-2 de molécula pequena, calcipotrieno, propionato de clobetasol, triamcinolona-acetonido, propionato de halobetasol, tazaroteno, metotrexato, fluocinonida, betametasona diprop aumentada, fluocinolona, acetonido, acitretina, champô de alcatrão, valerato de betametasona, furoato de mometasona, cetoconazol, pramoxina/fluocinolona, valerato de hidrocortisona, flurandrenolida, ureia, betametasona, propionato de clobetasol/emoll, propionato de fluticasona, azitromicina, hidrocortisona, formula hidratante, ácido fólico, desonida, alcatrão de carvão, diacetato de diflorasona, etanercept, ácido fólico, ácido láctico, metoxsaleno, HC/bismuto-subgal/znox/resor, acetato de metilprednisolona, prednisona, protetor solar, ácido salicílico, halcinonida, antralina, pivalato de clocortolona, extrato de carvão, alcatrão de carvão/ácido salicílico, alcatrão de carvão/ácido salicílico/enxofre, desoximetasona, diazepam, emoliente, emoliente pimecrolimus, fluocinonida/emoliente, óleo mineral/óleo de rícino/na lact, óleo mineral/óleo de amendoim, petróleo/miristato de isopropilo, psoraleno, ácido salicílico, sabão/tribromsalan, timerosal/ácido bórico, celecoxib, infliximab, alefacept, efalizumab, tacrolimus, pimecrolimus, PUVA, UVB, e sulfasalazina.
Um anticorpo, porção de anticorpo, ou outro inibidor de TNF aqui descrito pode ser utilizado em combihacom outros agentes para tratar doenças de pele. Por exemplo, um anticorpo, porção de anticorpo, ou outro inibidor de TNF aqui descrito pode ser combinado com terapia de PUVA. PUVA é uma combinação de psoraleno (P) e radiação ultravioleta de ondas longas (UVA) que é utilizada para tratar muitas doenças de pele diferentes.
Os anticorpos, porções de anticorpo, ou outros inibidores de TNF aqui descritos podem também ser combinados com pimecrolimus. Noutra concretização, é utilizado adalimumab para tratar psoríase, em que adalimumab é administrado em combinação com tacrolimus. Noutra concretização, tacrolimus e adalimumab são administrados em combinação com metotrexato e/ou ciclosporina. Ainda noutra concretização, adalimumab é administrado com tratamento laser de excímero para tratamento de psoríase.
Exemplos não limitativos de outros agentes terapêuticos com os quais um inibidor de TNF pode ser combinado para tratar um distúrbio da pele ou das unhas incluem fototerapia UVA e UVB. Outros exemplos não limitativos que podem ser utilizados em combinação com um inibidor de TNF incluem agentes terapêuticos adicionais anti-IL-12 e anti-IL-18, incluindo anticorpos. 0 anticorpo TNF aqui descrito pode ser administrado em combinação com um agente terapêutico adicional no tratamento da doença de Behçet. Agentes terapêuticos adicionais que podem ser utilizados para tratar a doença de Behçet incluem, mas não estão limitados a, prednisona, ciclofosfamida (Citoxano), Azatioprina (também chamado imuran), metotrexato, timetoprim/sulfametoxazol (também chamado bactrim ou septra) e ácido fólico.
Qualquer um dos agentes terapêuticos mencionados acima, sozinho ou em combinação, pode ser administrado a um sujeito sofrendo de um distúrbio relacionado com TNF em que o TÉF prejudicial, em combinação com o anticorpo de TNF aqui descrito. Qualquer um dos agentes terapêuticos mencionados acima, sozinho ou em combinação, pode ser administrado a um sujeito sofrendo de artrite reumatoide além de um anticorpo de TNF para tratar um distúrbio relacionado com TNF .
Este invento é ainda ilustrado pelos seguintes exemplos que não devem ser entendidos como limitativos.
EXEMPLOS
Exemplo Comparativo 1: Inibidor de TNF_no Modelo de Rato para
Espondilite Anquilosante
Administração de anticorpo de TNF a ratos com antigénio de leucócitos humanos B27 (HLA-B27) para testar a inibição de anquilose progressiva 344 Ratos Fisher geneticamente manipulados para serem portadores de um elevado número de cópias do alelo B27 do complexo principal de histocompatibilidade humano classe 1 e dos genes de 2-microglobulina exibem sintomas semelhantes a espondiloartopatias humanas particularmente espondilite anquilosante (EA) (Zhang et ai., Curr. Rheumatol. Rep. 2002; 4:507) . Ratos machos transgénicos com o antigénio de leucócitos humano B27 (HLA-B27) são obtidos às 10 semanas de idade e são alojados num biotério até terem 40 semanas de idade. Um grupo de ratos Fisher 344 é obtido e serve como controlos não transgénicos. Os ratos de controlo são adquiridos às 36 semanas e são alojados no biotério sob as mesmas condições durante mais 3 a 4 semanas.
Antes do tratamento experimental, os pesos corporais são medidos tanto para os ratos transgénicos HLA-B27 como para os ratos de controlo para garantir que não há nenhuma diferença significativa entre os dois. Aos ratos são então administradas, por via intraperitoneal (ip), doses ou de um placebo ou de um anticorpo monoclonal anti-TNF que se sabe que se liga e neutraliza TNF de rato, p. ex. , o anticorpo TN3 (TN3-19.12) (ver Marzi et ai., (1995) Shock 3:27; Williams et ai., (1992) Proc. Natl. Acad. Sei. USA. 89:9784; BD Biosciences Pharmingen). Os ratos são avaliados quanto a sintomas de EA, utilizando os seguintes testes que começam cerca das 36 semanas de idade e continuam durante todo o estudo: peso, preensão de uma rede de arame pela pata dianteira, capacidade de agarrar-se a uma rede de arame invertida, marcha, flexibilidade do tórax, mobilidade da coluna vertebral, e aparência dos olhos, da pele, das unhas, dos órgãos genitais e das articulações axiais e periféricas do esqueleto em relação a vermelhidão e inchaço, deformidade articular e mobilidade. Os ratos também são examinados quanto a evidência de artrite, particularmente diminuições nos sintomas de EA nos ratos tratados, e são observados de perto quanto a características de crescimento e alterações na pele e nas unhas. Às 4, 6, 8, 10, 12, 16, e 20 semanas, os ratos são sacrificados para análise radiográfica e microscópica.
Exemplo Comparativo 2: Efeitos Inibidores de TNF nos Sintomas de EA
Espondilite Anquilosante- Considerações Clinicas
Os pacientes que exibem sintomas normalmente associados a EA são examinados e testados para determinar se sofrem de EA, e, assim, se qualificam para o estudo. Sintomas normalmente associados a EA são dor lombar que é pior após inatividade, rigidez e limitação do movimento na região lombar, dor e rigidez na anca, expansão limitada do peito, gama limitada de movimentos (especialmente envolvendo a coluna e as ancas), dor nas articulações e inchaço das articulações nos ombros, joelhos, e tornozelos, dor no pescoço, dor no calcanhar, inclinação crónica para alivio dos sintomas, fadiga, febre, baixo valor, perda de apetite, perda de peso, e/ou inflamação ocular. É feito um exame físico aos pacientes para determinar se exibem ou não quaisquer sintomas característicos indicativos de movimento da coluna vertebral ou expansão torácica limitados associados a EA. Exemplos de testes que indicam EA incluem raios X das articulações sacroilíacas e vértebras os quais mostrem verificações características associadas a EA. A espondilite anquilosante é diagnosticada usando os critérios modificados de Nova Iorque (Moll et ai., (1973) Ann. Rheum. Dis. 32:354; Van der Linden et al., (1984) Arthritis
Rheum. 27:361). Os critérios de Nova Iorque para a espondilite anquilosante são uma modificação dos critérios de Roma tal como proposto no Simpósio CIOMS em Nova Iorque durante 1966. Combinam tanto critérios clínicos como verificações radiográficas da articulação sacroilíaca. Critérios clínicos dos critérios de Nova Iorque: (a) Limitação do movimento da coluna lombar em todos os 3 planos (flexão anterior, flexão lateral, extensão) . Marcações na pele para ajudar no exame são mostradas em Moll, s upra; (b) Uma história de dor ou a presença de dor na junção dorso-lombar ou na coluna lombar; e (c) Limitação da expansão torácica a 1 polegada (2,5 cm) ou menos medida ao nível do quarto espaço intercostal. índice de Pontuação para os Critérios de Nova Iorque
0 curso clínico de EA é medido através da utilização de qualquer número de instrumentos para avaliar vários sintomas de EA. Algumas das escalas vulgarmente utilizadas incluem a Avaliação na Espondilite Anquilosante (ASAS), índice de
Atividade da Doença Espondilite Anquilosante de Bath (BASDAI) (Garrett et al., (1994) J. Rheumatol. 21:2286), o índice de Metrologia de Espondilite Anquilosante de Bath (BASMI) (Jenkinson et al., (1994) J. Rheumatol. 21:1694), e o índice Funcional de Espondilite Anquilosante de Bath (BASFI) (Calin et al., (1994) J. Rheumatol. 21:2281) . Estes índices podem ser utilizados para monitorizar um paciente ao longo do tempo e determinar a melhoria. Cada uma destas escalas é melhor descrita a seguir:
Critérios para Medição do Curso Clínico de EA 1. A Avaliação na Espondilite Anquilosante (ASAS20) é o ponto final primário nos estudos de Fase 3 de EA cruciais. Uma melhoria >20% e melhoria absoluta de >10 unidades (escala de 0-100) em >3 de 4 domínios: Avaliação Geral do Sujeito, Dor, Função, e Inflamação. Deve haver uma ausência de deterioração no potencial domínio restante (a deterioração é definida como uma alteração para pior de >20% e um agravamento líquido de >10 unidades (escala de 0-100). 2. O índice de Atividade da Doença Espondilite Anquilosante de Bath (BASDAI) pode ser utilizado para avaliar o nível de atividade da doença num paciente com EA. BASDAI foca-se nos sinais e sintomas dos aspetos inflamatórios de EA, dor nas costas noturna e total, a avaliação geral do paciente e medições físicas reais da mobilidade da coluna tais como o teste de Schober, o registo da expansão torácica e a medição do occipício à parede. BASDAI mede a atividade da doença com base em seis perguntas relacionadas com fadiga, dores na coluna, artrite periférica, entesite (inflamação nos pontos onde os tendões/ligamentos/cápsula articular entram no osso) e rigidez matinal. Estas perguntas são respondidas numa escala analógica visual horizontal de 10 cm que mede a gravidade da fadiga, dor nas articulações da coluna e periféricas, sensibilidade localizada e rigidez matinal (tanto qualitativa como quantitativa). O resultado final de BASDAI tem um intervalo de 0 a 10. 3. O índice Funcional de Espondilite Anquilosante de Bath (BASFI) mede o comprometimento da função física causado por EA, e é um instrumento de autoavaliação que é composto por 8 perguntas específicas em relação à função em EA, e 2 questões que refletem a capacidade do paciente para lidar com a vida quotidiana. Cada pergunta é respondida numa escala analógica visual horizontal de 10 cm, cuja média dá a pontuação de BASFI (0-10). 4. O índice de Metrologia de Espondilite Anquilosante de Bath (BASMI) consiste em 5 medições clínicas simples que proporcionam um índice composto e definem o estado da doença em EA. A análise da metrologia (20 medições) identificou estas 5 medições como refletindo com mais precisão o estado axial: rotação cervical, distância do trago à parede, flexão lateral, teste modificado de Schober, e distância intermaleolar. O BASMI é rápido (7 minutos), reprodutível, e sensível a alterações em todo o espectro da doença. O índice BASMI compreende 5 medidas de mobilidade da anca e da coluna em EA. As cinco medições de BASMI, na escala de 0 (leve) a 10 (grave), incluem distância do trago à parede, rotação cervical, flexão lombar, flexão lateral lombar, e distância intermaleolar.
As combinações dos critérios acima mencionados são usadas para avaliar pacientes. Além disso, marcadores radiográficos, de MRI, e de degradação óssea e da cartilagem podem ser utilizados para determinar a atividade da doença em pacientes com EA.
Estudos clínicos que examinam D2E7 em sujeitos humanos com EA ativa É administrada aos pacientes uma dose de D2E7 s.c. num ensaio clínico controlado com placebo durante um período de semanas, e são reexaminados a cada 2-6 semanas durante o ano seguinte para determinar se os sintomas de EA estão reduzidos ou tratados. Uma dose de 4 0 mg a cada duas semanas, que é eficaz e segura em tratamento de artrite reumatoide, é utilizada no estudo. Apenas os pacientes que têm um diagnóstico confirmado de EA ativa, tal como definido por terem 2 dos 3 critérios seguintes - índice BASDAI, uma escala visual analógica (EVA) para dor e a presença de rigidez matinal - são escolhidos para o estudo. O índice BASDAI é descrito em maior detalhe acima. Para serem recrutados para este estudo, os pacientes devem ter dor significativa na triagem e no limiar, uma pontuação de dor de >4 numa EVA de 10 cm, e uma pontuação de BASDAI de >4. Fármacos antirreumáticos modificadoras de doença (FARMD) ou outros agentes imunossupressores são permitidos no estudo. É permitido aos pacientes a entrada se estiverem a uma dose equivalente de <10 mg de prednisona por dia.
Os exames de triagem são realizados antes do recrutamento para o estudo para documentar a história médica de cada paciente e as verificações atuais. A seguinte informação é obtida a partir de cada paciente: rigidez matinal (duração e gravidade), ocorrência de uveite anterior (número de episódios e duração), e o número de articulações periféricas inflamadas. Para cada paciente, são obtidas radiografias da coluna vertebral e das articulações sacroiliacas. Ressonância magnética pode também ser usada para documentar a coluna vertebral dos pacientes recrutados.
Os pacientes são divididos aleatoriamente em grupos experimentais e de placebo, e é administrado D2E7 ou o placebo, uma vez a cada duas semanas de forma cega até à semana 12 ou à semana 24. D2E7 foi administrado em doses de 20 a 80 mg que foram utilizadas de forma eficaz para tratar artrite reumatoide; uma dose de 40 mg foi determinada como sendo eficaz. Pode ser necessária uma dose mais elevada para tratar inflamação da coluna vertebral, assim uma dose mais elevada (40 mg semanais nesses doentes que são não respondedores e que não estejam a metotrexato) é usada no estudo. É calculada a percentagem de pacientes que conseguem uma ASAS20.
Exemplo Comparativo 3: Inibidor de TNF em Estudo Clinico para Artrite Psoriática D2E7 em sujeitos humanos com artrite psoriática
Os pacientes com artrite psoriática moderada a grave de qualquer subtipo (artrite das articulações inter-falanges distais, artrite mutilante, poliartrite simétrica, oligoartrite assimétrica e/ou espoiloartropatia) são selecionados para o estudo. Os pacientes falharam ou exibiram intolerância a fármacos anti-inflamatórias não esteroides (ΑΙΝΕ) ou fármacos antirreumáticos modificadores de doença (FARMD). A terapia é administrada isoladamente e/ou em combinação com ΑΙΝΕ e FARMD.
Os intervalos de dosagem a avaliar incluem 40 mg a cada duas semanas, que é a dose de D2E7 que se verificou ser mais eficaz a tratar artrite reumatoide nos pacientes. Uma dose mais elevada (40 mg por semana) está também a ser estudada. Os estudos são uma comparação com o placebo durante 12 a 24 semanas seguidos de terapia aberta para determinar a segurança e eficácia a longo prazo.
Os pacientes são examinados clinicamente na triagem, limiar, e com frequência durante o tratamento. A eficácia primária para sinais e sintomas é medida através dos critérios preliminares de American College of Rheumatology para melhoria (ACR20) às 12 semanas. Um objetivo primário adicional inclui a avaliação de alterações radiológicas ao longo de 6 a 12 meses para avaliar alterações nos danos estruturais. Várias outras avaliações são realizadas durante o tratamento, incluindo Critérios de Resposta de Artrite Psoriática (PsARC), medições da qualidade de vida e avaliações de pele para determinar a eficácia em lesões de psoríase (índice de gravidade da área de psoríase (PASI) e avaliações da lesão alvo).
Exemplo Comparativo 4: Inibidor de TNF_em Modelo de Rato para
Asma
Estudo de anticorpo de TNF utilizando ratinhos com asma alérgica induzida por ovalbumina (OVA) O modelo de ratinho de asma alérgica por OVA (Hessel, E.M., et ai., (1995) Eur. J. Pharmacol. 293:401; Daphne, T., et ai., (2001) Am. J. Respír. Cell Mol. Biol. 25:751, é utilizado no seguinte estudo para tratamento de asma alérgica.
Todos os ratinhos são sensibilizados a OVA (albumina de ovo de galinha, grau V bruto; Sigma, St. Louis, MO) . A sensibilização ativa é realizada sem um adjuvante dando sete injeções intraperitoneais de 10 g de OVA em 0,5 ml de solução salina apirogénica em dias alternados (uma injeção por dia) .
Três semanas após a última sensibilização, os ratinhos são expostos a 16 confrontos com OVA (2 mg/ml em solução salina apirogénica) ou 16 confrontos com solução salina em aerossol durante 5 minutos em dias consecutivos (um aerossol por dia).
Um grupo adicional de ratinhos recebe primeiro oito aerossóis de OVA, seguido por oito aerossóis de solução salina (OVA/solução salina, grupo de resolução espontânea).
Para a experiência no modelo mais grave de asma alérgica em curso, todos os ratinhos são sensibilizados a OVA através de sensibilização ativa com duas injeções intraperitoneais (7 dias de intervalo) de 0,1 ml de antigénio precipitado em alúmen, compreendendo 10 g de OVA adsoHvédi 2,25 mg de alúmen (Alumlmject; Pierce, Rockford, IL). Duas semanas após a segunda sensibilização, os ratinhos são expostos a seis confrontos com OVA (10 mg/ml em solução salina apirogénica) ou confrontos de seis aerossóis de solução salina durante 20 min de três em três dias (um aerossol de três em três dias) . Um grupo adicional de ratinhos recebe primeiro três aerossóis de OVA, seguido por três aerossóis de solução salina (OVA/solução salina, grupo de resolução espontânea). O tratamento de aerossol é realizado numa câmara de exposição de acrílico (5 litros), acoplada a um nebulizador Pari LC Star (PARI Respiratory Equipment, Richmond, VA; tamanho de partícula 2,5-3,1 m) acionado por ar comprimido com um caudal de 6 litros/min. O aerossol é dado em grupos compostos por no máximo oito animais.
Um anticorpo anti-TNF monoclonal que se sabe ligar-se a, e neutralizar TNF de ratinho, p. ex., anticorpo TN3 (TN3- 19.12) (ver Marzi et al., (1995) Shock 3:27; Williams et al., (1992) Proc. Natl. Acad. Sei. USA. 89:9784; BD Biosciences Pharmingen) é administrado aos ratinhos sensibilizados com OVA num intervalo de doses após a segunda sensibilização de acordo com protocolos padrão conhecidos na técnica. Controlos de placebo apropriados são também administrados. A capacidade de resposta das vias respiratórias é medida em ratinhos conscientes, sem restrições usando pletismografia barométrica de corpo inteiro através do registo das curvas de pressão respiratória em resposta a metacolina inalada (cloreto de acetil- -metileolina; Sigma). Resumidamente, os ratinhos são colocados numa câmara de corpo inteiro, e são obtidas leituras basais e calculada a média para 3 min. Solução salina em aerossol, seguindo-se o dobro da concentração de metacolina (variando 1,6-50 mg/ml de solução salina), são nebulizadas durante 3 min, e as leituras são tomadas e calculada a média para 3 min após cada nebulização. As curvas de dose-resposta (CDR) para a metacolina são estatisticamente analisadas através de um modelo linear geral de medições repetidas seguido por comparação post-hoc entre os grupos. Os dados são transformados em LOG antes da análise para egualizar as variâncias em todos os grupos.
Após a medição da capacidade de resposta in vivo das vias respiratórias, os ratinhos são sacrificados através de injeção intraperitoneal de 1 ml de uretano a 10% em solução salina apirogénica (Sigma). Subseguentemente, os ratinhos são sangrados por punção cardíaca, e a IgE específica de OVA é medida através de ELISA. Resumidamente, placas de microtitulação (Nunc A/S, Roskilde, Dinamarca) são revestidas de um dia para o outro a 4°C com 2 g/ml de anticorpo de rato anti-IgE de ratinho (clone EM95) diluído em solução salina tamponada com fosfato (PBS). No dia seguinte, o ELISA é realizado à temperatura ambiente. Após blogueio com tampão de ELISA (PBS contendo albumina de soro bovino a 0,5% [Sigma], EDTA 2 mM, NaCl 136,9 mM, Tris 50 mM, Tween-20 a 0,05% [Merck, Whitehouse Station, NJ], pH 7,2) durante 1 h, amostras de soro e uma curva padrão em duplicado (a partir de 1:10), diluídos em tampão de ELISA, são adicionadas durante 2 h. Um padrão de referência de IgE específica de OVA é obtido através de imunização intraperitoneal com OVA e é-lhe atribuído arbitrariamente um valor de 10000 unidades experimentais/ml (UE/ml) . Após a incubação, 1 g/ml de CWánjugada com digoxigenina (DIG), gue é preparada a partir de um estojo contendo DIG-ácido 3-o-metilcarbonil- -aminocapróico-N- hidroxi-succinimida-éster (Roche Diagnostics, Basileia, Suíça) em tampão de ELISA, é adicionado durante 1,5 horas seguido por incubação com fragmentos Fab anti-DIG acoplados a peroxidase de rábano (Roche Diagnostics) diluídos 1:500 em tampão de ELISA durante 1 hora. A revelação da cor é efetuada com substrato dicloreto de o-fenilenodiamina (0,4 mg/mL, Sigma) e H2O2 4 mM em PBS e parada através da adição de H2SO4 4 Μ. A densidade ótica é lida a 492 nm, utilizando um leitor de microplacas
Benchmark (Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA) . 0 limite de deteção do ELISA é de 0,5 EU/ml de IgE.
Uma lavagem brônquio-alveolar (LBA) é realizada imediatamente após sangria dos ratinhos. Resumidamente, as vias respiratórias são lavadas cinco vezes através de uma cânula traqueal com aliquotas de 1 ml de solução salina apirogénica aquecida a 37°C. O fluido de lavagem recuperado é reunido e as células são sedimentadas (32 xg, 4°C, 5 min) e ressuspensas em 150 1 de PBS frio. O número total de células no FLBA é determinado usando uma câmara de contagem Burker-Túrk (Karl Hecht Assistent KG, Sondheim/Rõhm, Alemanha). Para contagens diferenciais de células de FLBA, são feitas preparações de Cytospin e cora-se com Diff-Quick (Dade AG, Dudingen, Suíça). Por Cytospin, são contadas 400 células que são diferenciadas em células mononucleares (monócitos, macrófagos e linfócitos), eosinófilos, e neutrófilos através de morfologia normal. A análise estatística é realizada utilizando o teste U não paramétrico de Mann-Whitney. A produção de citocinas por células T estimuladas de novo pelo antigénio no tecido pulmonar é determinada tal como descrito anteriormente (Hofstra, C.L., et ai., (1999) Inflamm.
Res. 48:602). Resumidamente, os pulmões são lavados tal como descrito acima e perfundidos através do ventrículo direito com 4 ml de solução salina contendo heparina a 100 U/ml para remover todo o sangue e leucócitos intravasculares. O tecido pulmonar completo é removido e transferido para PBS estéril frio. Os pulmões são então picados e digeridos em 3 ml de RPMI 1640 contendo colagenase A e ADNase I (grau II) a 2,4 mg/ml (ambas de RocheDiagnostics) durante 30 min a 37°C. A atividade da colagenase é parada através da adição de soro fetal de vitelo (FCS) . O tecido de pulmão digerido é filtrado através de um filtro de células de nylon de 70 m (Becton Dickinson
Labware, Franklin Lakes, NJ) com 10 ml de RPMI 1640 para obter uma suspensão de célula única. A suspensão de células de pulmão é lavada, ressuspensa em meio de cultura (RPMI 1640 contendo FCS a 10%, glutamax I a 1%, e gentamicina [todos de Life Technologies, Gaithersburg, MD] ) e -mercaptoetanol 50 mM (Sigma), e o número total de células de pulmão é determinado utilizando uma câmara de contagem Burker-Turk. As células pulmonares (8xl05 células pulmonares/poço) são cultivadas em placas de 96 poços de fundo redondo (Greiner Bio-One GmbH, Kremsmuenster, Áustria), na presença de OVA (10 g/ml) ou apenas meio. Como controlo positivo, as células são cultivadas na presença de anticorpo de rato anti-CD3 de ratinho ligado às placas (clone 17A2, 50 pg/ml, revestidas de um dia para o outro a 4°C). Cada estimulação in vitro é realizada em triplicado.
Após 5 dias de cultura a 37 °C, o sobrenadante é recolhido, reunido por estimulação, e armazenado a -20°C até os níveis de citocina serem determinados por ELISA.
Os ELISA de IFN- , IL-4, IL-5, IL-10, e IL-13 são realizados de acordo com as instruções do fabricante (PharMingen, San Diego, CA). Os limites de deteção dos ELISA são de 160 pg/ml para IFN- , 16 pg/ml para IL-4, 32 pg/ml para IL-5, e 100 pg/ml para IL-10 e IL-13.
Em todas as experiências, a capacidade de resposta das vias respiratórias a metacolina, os níveis de IgE especifica de OVA no soro, a infiltração celular no FLBA, e as respostas de células T no tecido pulmonar são medidas 24 horas após o último confronto em cada ratinho.
As melhorias na asma nos ratinhos experimentais são marcadas por uma diminuição do número de células mononucleares (incluindo monócitos, macrófagos e linfócitos), eosinófilos, e neutrófilos no FLBA, uma diminuição da hiper-reatividade das vias respiratórias, e uma diminuição na produção de citocinas por células T estimuladas de novo com o antigénio no tecido pulmonar.
Exemplo Comparativo 5: Inibidor de TNF_em Modelo de Ratinho de Doença Pulmonar Obstrutiva Crónica (DPOC)
Estudo examinando o tratamento para o alargamento e inflamação alveolares O presente estudo é realizado utilizando um modelo de ratinho de DPOC induzida por fumo de cigarro (Keast, D. et al., (1981) J. Pathol. 135:249; Hautmaki, R.D., et al., (1997)
Science 277:2002) . Em resposta ao fumo de cigarro, foi observado o recrutamento de células inflamatórias para os pulmões, seguido de alterações patológicas características de enfisema. Estudos anteriores mostraram que o recrutamento progressivo de células inflamatórias começa no primeiro mês de fumo seguido de alargamento do espaço de ar após 3 a 4 meses de exposição ao cigarro (Hautmaki et al., (1997) Science 277:2002).
Os ratinhos são expostos ao fumo de dois cigarros sem filtro por dia, 6 dias por semana, durante 6 meses, com a utilização de um aparelho de fumar com a câmara adaptada para ratinhos. Animais da mesma idade não fumadores são utilizados como controlos. Após 6 meses de exposição ao fumo, tal como descrito acima, um anticorpo monoclonal anti-TNF que se sabe ligar-se a, e neutralizar o TNF de ratinho, p. ex., TN3 de anticorpo (TN3-19.12) (ver Marzi et al., (1995) Shock 3:27;
Williams et al., (1992) Proc. Natl. Acad. Sei. USA 89:9784; BD
Biosciences Pharmingen) é administrado num intervalo de doses de acordo com protocolos padrão conhecidos na técnica. Um controlo de placebo adequado é também administrado. Aos ratinhos é administrado o tratamento de anticorpo durante um período de 21 dias. Os ratinhos são sacrificados, seguido de exame do volume pulmonar e conformidade, medição de citocinas, medição do índice histológico do muco, alargamento do dueto alveolar, medição do espaço de ar, e contagens de macrófagos alveolares e intersticiais e tamanho alveolar, tal como descrito abaixo.
Após tratamento com anticorpo, a lavagem bronquiolar é realizada em animais eutanasiados; a traqueia é isolada através de dissecção romba, e um tubo de pequeno calibre é inserido e fixado nas vias respiratórias. Dois volumes de 1,0 ml de PBS com BSA a 0,1% são instilados, suavemente aspirados, e reunidos. Cada amostra de fluido de LBA é centrifugada, e os sobrenadantes são armazenados a -70°C até à sua utilização. As medições de citocinas são tal como descritas no Exemplo 5.
Para determinar o volume do pulmão e a conformidade, os animais são anestesiados, a traqueia é canulada, e os pulmões são ventilados com O2 a 100% através de uma peça de fixação em "T". A traqueia é em seguida apertada e o oxigénio absorvido na face da perfusão pulmonar em curso. No final desta desgaseificação, os pulmões e coração são removidos em bloco e inflados com PBS a pressões gradualmente crescentes de 0 a 30 cm. O tamanho do pulmão a cada intervalo de 5 cm é avaliado através do deslocamento do volume. Um aumento do volume do pulmão dos animais tratados em comparação com o os animais de controlo tratados com placebo indica uma melhoria de DPOC.
Para a análise histológica, os animais são sacrificados e é realizada esternotomia mediana, e a perfusão do coração direito é realizada com PBS isento de cálcio e magnésio para limpar o espaço intravascular pulmonar. Os pulmões são então fixados à pressão (25 cm) com formalina neutra tamponada a 10%, fixados de um dia para o outro em formalina a 10%, embebidos em parafina, seccionados a 5 me corados com hematoxilina e eosina (H&E) e ácido periódico de Schiff com diastase (D-PAS). O índice histológico de muco (HMI) proporciona uma medição da percentagem de células epiteliais que são D-PAS+ por unidade de membrana basal das vias respiratórias. É calculado a partir de secções coradas com D-PAS (Cohn, L., et al., (1997) J. Exp.
Med. 186:1737) . Uma diminuição no HMI dos animais tratados em comparação com animais de controlo tratados com placebo indica uma melhoria na DPOC.
Lm, um indicador do tamanho do espaço de ar, é calculado para cada ratinho a partir de 15 campos aleatórios a x200 por meio de uma grelha de contagem de 50 linhas (comprimento total de 10 mm) . Os resultados são a média das medições de dois investigadores independentes. Um aumento no tamanho do espaço de ar dos animais tratados em comparação com animais de controlo tratados com placebo indica uma melhoria na DPOC.
Para determinar o alargamento do dueto alveolar, são medidas as áreas de superfície proximal do terminal da transição bronquíolo-ducto alveolar que se estende 250 m para dentro do dueto usando suporte lógico de análise de imagem Optimus 5.2 (Optimus, Bothell, WA) . Uma diminuição no tamanho do dueto alveolar de animais tratados em comparação com animais de controlo tratados com placebo indica uma melhoria na DPOC.
Os macrófagos alveolares e intersticiais são quantificados através da contagem de macrófagos identificados por imunocoloração com Mac-3 de murídeo (anticorpo de rato para ratinho (0,5 mg/ml), utilizado a uma diluição 1:4000; PharMingen, San Diego, CA) , utilizando avidina-biotina alcalina. Uma diminuição no número de macrófagos alveolares e intersticiais de animais tratados em comparação com animais de controlo tratados com placebo indica uma melhoria na DPOC. O tamanho do alvéolo é estimado a partir do comprimento da corda média do espaço aéreo (Ray, P., et al., (1997) J. Clin. Invest. 100:2501) . Esta medição é semelhante à intercepção linear média, uma medida padrão do tamanho do espaço de ar, mas tem a vantagem de ser independente da espessura do septo alveolar. Seções são preparadas tal como é descrito acima. Para obter imagens ao acaso para análise, cada lâmina de vidro é colocada sobre uma grelha retangular impressa e uma série de pontos colocados sobre a lamela na intersecção das linhas de grelha, isto é, a intervalos de aproximadamente 1 mm. Os campos tão próximo quanto possível de cada ponto são adquiridos através de varrimento sistemático a intervalos de 2 mm. Os campos contendo artefactos identificáveis ou estruturas não alveoladas tais como feixes bronco-vasculares ou pleura são descartados.
Um mínimo de dez campos de cada pulmão de ratinho é adquirido num computador Macintosh G3 (Apple Computer Inc., Cupertino, Califórnia, EUA), através de uma placa digitalizadora de vídeo. As imagens são adquiridas numa escala de cinzentos de 8 bits com uma ampliação final de 1,5 pixels por micrómetro. As imagens são analisadas num computador Macintosh usando o programa de domínio público NIH Image escrito por Wayne Rasband no NIH utilizando uma macro escrita à medida disponível a partir do sítio da internet (http://rsb.info.nih.gov/nih-image). É definido manualmente o limiar das imagens que são depois suavizadas e invertidas. A imagem é então sujeita a correspondência lógica de imagens sequenciais "e" operações com uma rede horizontal e em seguida vertical. São feitas pelo menos 300 medições por campo para cada animal. É calculada a média de ar do espaço aéreo por cima como comprimento da corda média. O comprimento da corda aumenta com o alargamento alveolar. Um aumento no tamanho alveolar de animais tratados em comparação com animais de controlo tratados com placebo indica uma melhoria na DPOC.
Exemplo Comparativo 6: Inibidor de TNF em Modelo de Ratinho de Fibrose Pulmonar Idiopática (FPI)
Estudo do tratamento de FPI usando o modelo de ratinho de fibrose pulmonar induzida por bleomicina 0 seguinte ensaio é realizado utilizando o modelo de ratinho de fibrose pulmonar induzida por bleomicina (revisto em Bowden, D.H. (1984) Lab. Invest. 50:487; Tokuda, A., et al., (2000) J. Immunol. 164:2745) . É administrado sulfato de bleomicina a fêmeas de ratinhos C57BL/6J com 8-10 semanas de idade. Resumidamente, os ratinhos C57BL/6J são anestesiados com 200 μΐ de pentobarbital a 5 mg/ml injetados i.p., seguido por instilação intratraqueal de sulfato de bleomicina a 3 mg/kg em 50 μΐ de solução salina estéril.
Um anticorpo anti-TNF monoclonal que se sabe ligar-se a, e neutralizar TNF de ratinho, p. ex., o anticorpo TN3 (TN3- 19.12) (ver Marzi et al., (1995) Shock 3:27; Williams et al., (1992) Proc. Natl. Acad. Sei. USA 89:9784; BD Biosciences Pharmingen) é administrado aos ratinhos com fibrose pulmonar induzida com bleomicina num intervalo de doses, após instilação intratraqueal de bleomicina, tal como descrito acima. Um controlo de placebo adequado é também administrado. Os ratinhos são tratados duas vezes por dia durante 14 dias.
Os ratinhos são sacrificados 20 e 60 dias após o tratamento com bleomicina. Os tecidos são fixados em formalina tamponada a 10% e embebidos em parafina. As seções são coradas com hematoxilina e eosina e examinadas por microscopia ótica.
As contagens de leucócitos infiltrantes pulmonares, medições de citocinas, e o teor total de colagénio no pulmão são determinados tal como descrito abaixo.
As células de LBA e os leucócitos infiltrantes pulmonares são preparados tal como é descrito em Smith et ai., (1994) J. Immunol. 153:4704. Em resumo, após anestesia, 1 ml de PBS é instilado e retirado cinco vezes do pulmão por meio de uma cânula intratraqueal. Os fluidos de LBA são recolhidos e após lise total de GV são determinadas as contagens dos leucócitos.
Os diferenciais de células são determinados após centrifugação Cytospin. Os espécimes são corados com produtos Diff-Quik (Baxter, Miami, FL).
Para isolar leucócitos infiltrantes pulmonares, os pulmões são perfundidos com solução salina, dissecados da cavidade torácica, e, em seguida, picados com tesouras. Cada amostra é incubada durante 30 minutos a 37°C num agitador rotativo em 15 ml de tampão de digestão (FCS a 10% em RPMI 1640 com colagenase a 1%; Wako Pure Chemical Osaka, Japão). Em seguida, a amostra é pressionada através de uma malha de nylon e suspensa em FCS a 10%-RPMI 1640 após ser enxaguada. A suspensão de células é tratada com Histopaque-1119 (Sigma, St. Louis, MO) e centrifugada a 2000 rpm durante 20 min para remover células do parênquima pulmonar e GV. O sedimento é ressuspenso em FCS a 2,5%-PBS após ser enxaguado. Após as contagens de células serem realizadas, são conduzidas análises de citometria de fluxo de imunofluorescência.
As análises de imunofluorescência de leucócitos do sangue periférico e leucócitos infiltrantes pulmonares são realizadas com o uso de um separador de células Epics Elite (Coulter Electronics, Hialeah, FL) tal como descrito anteriormente (Yoneyama et al. , (1998) J. Clin. Invest. 102:1933; Murai et al., (1999) J. Clin. Invest. 104:49). Os leucócitos do sangue periférico são preparados a partir de ratinhos normais com tampão de lise de GV. Após incubação com Fc Block (anti-CD16/32; PharMingen, San Diego, CA) durante 10 min, as células são coradas com mAb conjugado com PE contra CD3, CD4, CD8, CDllb, CDllc, e Gr-1 (Pharmingen), e também coradas com 20 g/ml de Ac policlonal de coelho anti-CCRl, seguido de coloração com anticorpo de cabra anti-IgG de coelho conjugado com FITC (Leinco Technologies, St. Louis, MO) . Antes das análises é realizada coloração de iodeto de propídio (Sigma) para remover as células mortas. Uma diminuição no número de leucócitos infiltrantes pulmonares dos animais tratados em comparação com animais de controlo tratados com placebo indica uma melhoria da FPI. A imuno-histoquímica das amostras pulmonares é realizada como se segue: espécimes de pulmão são preparados tal como descrito anteriormente (Yoneyama et ai., (1998) J. Clin.
Invest. 102:1933; Murai et al. , (1999) J. Clin. Invest. 104:49). Resumidamente, os espécimes de pulmão são fixados em periodato-lisina-paraformaldeído, lavados com PBS contendo sacarose, embebidos em composto Tissue-Tek OCT (Miles, Elkhart, IN) , congelados em azoto liquido, e cortados em seções de 7 micrómetros de espessura com um crióstato. Após inibição da atividade da peroxidase endógena, as seções são incubadas com o primeiro Ab. Os Ab utilizados são Ab de coelho anti-CCR1, de rato anti-F4/80 (BMA Biomedicals, Genebra, Suíça), de rato anti-CD4, de rato anti-CD8, de rato anti-Gr-1 (PharMingen), de rato anti-células dentriticas não linfoides (NLDC)-145, e de rato anti-MHC classe II (BMA Biomedicals) .
Como controlo negativo é utilizada uma IgG de coelho ou uma IgG de rato, respetivamente. São tratados sequencialmente com ambas as IgG de cabra anti-coelho conjugadas com HRP (Cedarlane Laboratories, Hornby, Ontario, Canadá) ou uma IgG de cabra anti-rato conjugada com HRP (Biosource International, Camarillo, CA). Após coloração com o estojo de substrato 3,3'-diaminobenzidina (Wako Pure Chemical) ou 3-amino-9-etilcarbazol (Vector Laboratories, Burlingame, CA) , as amostras são contrastadas com hematoxilina de Mayer. Uma diminuição em CCR1, e diminuições do número de células T CD4+, células T CD8+, células dendríticas não linfoides (NLDC), e células possuindo MHC de classe II dos animais tratados em comparação com animais de controlo tratados com placebo indicam uma melhoria na FPI. O teor de colagénio total no pulmão é determinado através do ensaio de colagénio total solúvel utilizando o estojo de Ensaio de Colagénio Sircol (Biocolor, Irlanda do Norte) de acordo com as instruções do fabricante. Resumidamente, os pulmões são colhidos no dia 14 após administração de bleomicina e homogeneizados em 10 ml de ácido acético 0,5 M contendo cerca de 1 mg de pepsina/10 mg de resíduo de tecido. Cada amostra é incubada durante 24 h a 4°C com agitação. Após centrifugação, são ensaiados 200 1 de cada sobrenadante. Um mililitro de reagente corante Sircol que se liga ao colagénio é adicionado a cada amostra e, em seguida, misturado durante 30 min. Após centrifugação, o sedimento é suspenso em 1 ml do reagente alcalino incluído no estojo e lido a 540 nm por um espectrofotómetro. As soluções padrão de colagénio são utilizadas para construir uma curva padrão. Os colagénios contêm cerca de 14% de hidroxiprolina em peso, e o teor de colagénio obtido com este método correlaciona-se bem com o teor de hidroxiprolina de acordo com os dados do fabricante.
Uma diminuição do teor de colagénio pulmonar dos animais tratados em comparação com animais de controlo tratados com placebo indica uma melhoria na FPI.
Utilizando o modelo de ratinho de fibrose pulmonar induzida por bleomicina, os ratinhos são examinados quanto a uma diminuição das contagens de células de LBA, uma diminuição nos leucócitos do sangue periférico e leucócitos infiltrantes pulmonares. Os ratinhos são também examinados quanto a uma diminuição no teor total de colagénio no pulmão em ratinhos tratados com D2E7, em comparação com ratinhos tratados com placebo.
Exemplo Comparativo 7: Inibidor de TNF_no Tratamento de Asma
Estudo clinico de D2E7 em sujeitos humanos com asma
Pacientes de 12 a 65 anos de idade são elegíveis para o estudo se tiverem tido um diagnóstico documentado de asma de pelo menos 2 anos de duração e tiverem tido também broncoespasmo reversível comprovado com um aumento em VEF1 de 15% ou mais após a administração de albuterol nos seis meses anteriores. Critérios adicionais de inclusão incluem, um limiar de VEF1 entre 50% e 80% do normal previsto, ausência de qualquer outra doença clinicamente significativa além de asma, um histórico de uso diário de corticosteroides inalados e cessação de todo o uso de -agbnistas 30 dias antes do início do estudo.
Uma visita de base ocorre no prazo de 7 dias após a visita de triagem. Todos os pacientes passam por avaliação de VEF1 e têm um exame físico completo. É realizada auscultação pulmonar e exames da orofaringe, e são avaliados os sintomas de asma.
Os pacientes que se qualificam são atribuídos aleatoriamente a um grupo de tratamento incluindo um grupo de placebo.
Na sequência das medições limiares, os pacientes começam a receber tratamento. São distribuídos aleatoriamente e tratados com D2E7 ou placebo de um modo cego. Nos dias 15 e 29, todos os exames realizados na visita de base são repetidos.
Um ECG de 12 derivações é também realizado. São revistos cartões diários com os pacientes em relação ao uso de outros medicamentos e quaisquer eventos adversos.
As melhorias são determinadas em testes de espirometria medidos a cada visita. Estes incluem VEF1, pico do fluxo expiratório (PFE), Capacidade Vital Forçada (CVF), e fluxo expiratório forçado a de 25% a 75% de CVF. 0 VEF1 na visita final é considerado como a medida de eficácia primária. Os testes PFE de duas vezes por dia realizados pelo paciente são comparados e é calculado o número de inalações de medicação de resgate. As avaliações do paciente/médico dos sintomas de asma (sibilância, aperto no peito, falta de ar e tosse) são caracterizadas por gravidade. A conformidade é avaliada pela revisão dos cartões diários do paciente e através da recolha de medicação do estudo não utilizada.
Exemplo Comparativo 8: Inibidor de TNF_no Tratamento de DPOC
Estudo clinico examinando D2E7 em sujeitos humanos com DPOC A população do estudo consiste em sujeitos do sexo masculino e feminino que têm 40 a 80 anos de idade com diagnóstico de DPOC. Os sujeitos devem ter uma melhor relação VEF1/CVF <0,70 litros, obstrução das vias respiratórias fixa, definida por aumento em VEF1 <15% ou <200 ml (ou ambos) após a administração de albuterol e um VEF1 pós-albuterol entre 30 e 70% do previsto. Os sujeitos têm também de ser atuais ou antigos fumadores com uma história de fumo de >10 anos seguidos.
Após as medições limiares, os pacientes começam a receber tratamento. São distribuídos aleatoriamente e tratados com D2E7, ou placebo de um modo cego.
As melhorias são marcadas por um aumento da pré-dose limiar após a medicação do estudo no VEF1 pré-broncodilatador e alteração desde o limiar na pontuação total do St. George's Respiratory Questionnaire (Jones, P.W., et ai., (1991) Resp.
Med. 85(supl):25) que indica uma melhoria na qualidade de vida dos pacientes. As melhorias são também consideradas como um
aumento da CVF limiar na gamela, um aumento no tempo para a primeira exacerbação de DPOC, e uma diminuição do valor limiar em falta de ar pós-exercício (Escala modificada de Borg; Stulbarg, M., Adams, L. "Dyspnea". Em: Murray J, Nadei J, eds. "Textbook of Respiratory Medicine". Philadelphia, PA: WB
Saunders, 2000; 541-552) . As medidas de segurança são eventos adversos, sinais vitais, eletrocardiograma em todas as visitas duplamente cegas e avaliações laboratoriais.
Exemplo Comparativo 9: Inibidor de TNF_no Tratamento de FPI
Estudo clinico de D2E7 em sujeitos humanos com FPI É realizado um estudo multicêntrico, duplamente cego, controlado por placebo, comparando o tratamento de pacientes com FPI com D2E7 versus o tratamento com placebo. Os pacientes são elegíveis para o estudo se tiverem FPI verificada histologicamente e um declínio da função pulmonar de pelo menos 10% durante os 12 meses antes do início do estudo, apesar do tratamento contínuo ou repetido com glucocorticoides ou outros agentes imunossupressores ou ambos durante pelo menos 6 meses. A principal característica histológica utilizada para identificar FPI é a presença de lesões fibróticas subpleurais e periacinares com apenas pouca infiltração celular. A ausência de infiltrados irregulares bilaterais em tomografia computadorizada de alta resolução e a demonstração de distribuição predominantemente periférica de lesões são os critérios radiológicos para identificação da doença. Os pacientes com uma história de exposição a pó orgânico ou inorgânico ou fármacos que se sabe causarem fibrose pulmonar e aqueles com doença do tecido conjuntivo ou outras doenças pulmonares crónicas são excluídos. Os pacientes em fase terminal de FPI tal como identificado com base na capacidade pulmonar total de menos de 45% do normal previsto são também excluídos. São tomados os valores limiares para os testes de função pulmonar de repetição, CVF, capacidade pulmonar total (CPT) e saturação de oxigénio.
Na sequência das medições limiares, os pacientes começam a receber tratamento. São distribuídos aleatoriamente e tratados com D2E7, ou placebo de um modo cego.
As melhorias em pacientes com FPI incluem um aumento global da taxa de sobrevida dos pacientes no estudo, e melhorias na CVF, capacidade pulmonar total (CPT) e saturação de oxigénio. A melhoria da função pulmonar é definida como um aumento de 10% ou mais no valor previsto de CVF ou CPT, ou um aumento de 3% ou mais na saturação de oxigénio com a mesma fração de ar expirado, em repouso ou esforço. Uma diminuição de modo semelhante para cada mediação é considerada uma deterioração. Os pacientes que não demonstram melhoria ou deterioração são considerados estáveis.
Exemplo Comparativo 10: Inibidor de TNF_na feãdu de
Inflamação e Reestenose
Estudo de reestenose utilizando o modelo de artéria carótida de ratinho 0 seguinte estudo de reestenose é realizado utilizando o modelo de artéria carótida de ratinho (Kumar e Lindner (1997) Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. 17:2238; de Waard et ai., (2002) Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 22:1978). Ratinhos, com idades variando de dois a quatro meses, são anestesiados através de injeção intraperitoneal (i.p.) de uma solução de xilazina. A artéria carótida comum esquerda é dissecada e ligada perto da bifurcação da carótida. Os ratinhos são então deixados recuperar.
Um anticorpo monoclonal anti-TNF que se sabe ligar-se a, e neutralizar TNF de ratinho, p. ex., o anticorpo TN3 (TN3- 19.12) (ver Marzi et ai., (1995) Shock 3:27; Williams et ai., (1992) Proc. Natl. Acad. Sei. USA 89:9784; BD Biosciences
Pharmingen) é administrado ao grupo experimental. Os ratinhos recebem injeções subcutâneas diárias por semana do anticorpo anti-TNF ou de um placebo. 2,5 ou 4 semanas após a ligadura da artéria carótida, os ratinhos são sacrificados e subsequentemente fixados através de perfusão com paraformaldeido a 4% em PBS. As artérias carótidas são excisadas, imersas em etanol a 70% (v/v), e embebidas em parafina. A artéria carótida direita não ligada serve como controlo interno tanto para os ratinhos injetados com D2E7 como para os injetados com placebo. São cortadas seções em série para análise morfométrica, tal como descrito em de Waard et al. , supra. A análise morfométrica proporciona uma medida da área total do vaso para as carótidas ligadas tratadas e não tratadas a certas distâncias definidas de um ponto físico de referência comum. Foi anteriormente mostrado que a ligadura resulta no estreitamento das artérias (remodelação construtiva) (Kumar e Lindner, supra; Kumar et ai., (1997) Circulation 96:4333). As secções transversais das carótidas são montadas em lâminas de microscópio e coradas com hematoxilina e eosina. Imagens das artérias carótidas são obtidas utilizando fotografia digital microscópica e as áreas das secções transversais da íntima e da média são medidas quanto a uma diminuição no estreitamento arterial (ou seja, maior diâmetro do vaso), em comparação com os ratinhos injetados com placebo.
Exemplo Comparativo 11: Inibidor de TNF_no Modelo de
Aterosclerose de Macaco
Efeito de D2E7 no modelo de aterosclerose de macaco 0 seguinte estudo é realizado utilizando um modelo de macaco de aterosclerose induzida por dieta (Lentz SR et al., (2002) Circulation 106 (7) :842-6; Sundell CL et al., (2003) 305 (3) :1116-23) .
Macacos cinomolgos adultos (Macaca fascicularis) são alimentados com uma dieta aterogénica que contém colesterol a 0,7% e 43% das calorias totais como gordura. Após 44±1 meses na dieta aterogénica, os animais são sedados com cloridrato de cetamina (20 mg/kb IM) e anestesiados com pentobarbital sódico (20 mg/kg IV) . Um cateter não obstrutivo é inserido numa artéria axilar para amostragem de sangue, e a veia axilar é canulada para administração de D2E7 ou placebo e anestesia suplementar (pentobarbital sódico a 5 mg/kg por hora). Mostrou-se que D2E7 inibe eficazmente a atividade de TNF numa variedade de espécies, incluindo macacos cinomolgos (ver Patente U.S. No. 6258562).
Antes da infusão de D2E7 ou placebo, é recolhido sangue da artéria axilar diretamente para um volume de 1/10 de citrato de sódio a 3,8% para ensaio hemostático. Após a recolha, as amostras de sangue são colocadas imediatamente em gelo, e o plasma é isolado através de centrifugação a 2500 g durante 30 minutos a 4°C. Amostras de sangue adicionais são recolhidas em tubos separadores de soro para determinação de colesterol ou em tubos separadores de soro preparados com EDTA a 3,4 mmol/L para determinação da homocisteina plasmática total (tHCY). D2E7 ou placebo é infundido em 10 ml de solução salina ao longo de 10 minutos através do cateter da veia axilar. Após a infusão, são colhidas regularmente amostras de sangue. O grau a que os animais estão a sofrer de aterosclerose após o tratamento é avaliado de várias maneiras. Amostras de soro são regularmente tomadas dos macacos e analisadas relativamente ao colesterol total, colesterol HDL, colesterol LDL, tHCY e triglicéridos. Os macacos tratados são examinados para determinar se o colesterol total e o colesterol LDL e os níveis de tHCY estão mais baixos em comparação com macacos tratados com placebo, e se os níveis de HDL estão mais elevados.
Exemplo Comparativo 12: Inibidor de TNF_no Tratamento da
Reestenose em Pacientes
Estudo de D2E7 em sujeitos humanos com reestenose
Os pacientes que foram submetidos a angioplastia de balão são escolhidos para o estudo, pois têm uma maior probabilidade de ocorrência de reestenose dentro dos primeiros seis meses após a angioplastia.
Antes do tratamento, as estimativas dos parâmetros dos vasos e das lesões são feitas com referência ao cateter guia.
As estimativas incluem diâmetro de referência dos vasos (DRV), diâmetro luminal mínimo pré-tratamento (DLM, que é determinado através de (DRV χ [1 - estenose percentual do diâmetro pré-procedimento] ) , DLM pós-procedimento (que é determinado através de (DRV χ [1 - estenose percentual do diâmetro pós-procedimento] ), ganho agudo (DLM pós-procedimento - DLM pré-procedimento) , número de vasos doentes e número de vasos tratados.
Ao grupo experimental de pacientes são administradas doses de D2E7 bissemanais e semanais de 40 mg ou de um placebo.
As dosagens podem ser ajustadas por um perito na especialidade entendido em reestenose. Os pacientes são seguidos e avaliados aos seis meses pós-angioplastia para determinar se ocorreu reestenose. Os pacientes são também avaliados aos 9 meses e a longo prazo para determinar o efeito da reestenose retardada nos grupos em que a reestenose foi prevenida ou reduzida devido a tratamento. As estimativas dos parâmetros dos vasos e das lesões são registadas após o tratamento de D2E7. Análise estatística é realizada para comparar a extensão da reestenose nos pacientes (Jackson et al., (2003) Am. Heart J. 145 : 875) .
Exemplo Comparativo 13: Inibidor de TNF_no Tratamento de
Insuficiência Cardíaca
Estudo clinico de D2E7 em sujeitos humanos com insuficiência cardíaca
Pacientes com insuficiência cardíaca estável de classe II ou IV da New York Association (NYHA) e fração de ejeção do ventrículo esquerdo inferior a 35% são escolhidos para o estudo. Sob o padrão da NYHA, os pacientes de classe III são definidos como aqueles com limitação acentuada da atividade, ou seja, estão confortáveis só em repouso, e os paciente de classe IV são definidos como aqueles que devem estar em repouso completo, i.e., confinados à cama ou cadeira, ou onde qualquer atividade física traz desconforto e ocorrem sintomas em repouso. Tal como descrito em Burns et al., a fração de ejeção ventricular esquerda está associada a mortalidade em seis meses (Burns et al., (2002) J. Am. Coll. Cardiol. 39:30) .
Os pacientes recebem doses de D2E7 quinzenais a 40 mg, ou uma dose ajustada por um perito na especialidade entendido em insuficiência cardíaca. Ao grupo de controlo é dado um placebo.
Os pacientes são submetidos a exames em 1, 2, 6, 10, 14, 20, e 18 semanas. Em cada visita, cada paciente é examinado e é-lhe dada uma avaliação quanto ao seu estado geral de insuficiência cardíaca, em relação ao seu estado no início do estudo, ou seja, é avaliada a sua classe de NYHA. No final do estudo de insuficiência cardíaca, a classe final de NYHA do paciente é comparada com a classe de NHYA inicial.
Exemplo Comparativo 14: Inibidor de TNF_em Modelo de Diabetes de Ratinho
Estudo de anticorpo de TNF no modelo NOD de ratinho 0 seguinte ensaio é realizado utilizando o modelo de ratinho diabético não obeso (NOD) para diabetes tipo 1. No início do estudo, os níveis de insulina são estabelecidos testando os níveis de glicose no sangue dos ratinhos NOD. Os níveis de insulina limiares são estabelecidos submetendo a jejum os ratinhos de um dia para o outro (17 horas). 0 nível de glicose no sangue é verificado, e verificado novamente quatro minutos após a administração de glicose. A glicose no sangue é determinada com um medidor de reflexão. A glicose (200 mg/ml em cloreto de sódio a 0, 85%) em seringas de 1 ml foi pré-aquecida a 40°C e os ratinhos injetados ip a 3 g/kg de peso corporal. A segunda medição de glicose no sangue é determinada 4 minutos após a administração da glicose. As amostras da segunda medição do sangue são usadas para determinar o nível de glicose no sangue utilizando o Glucometer Elite. A restante amostra de sangue é colhida para tubos de microcentrifuga e utilizada para separar o soro para determinação da insulina ou do péptido C. Os níveis de insulina são determinados utilizando um estojo de radioimunoensaio (RIA) de roedores segundo a instruções dos fabricantes ou um imunoensaio ligado a enzima (ELISA).
Os ratinhos diabéticos são escolhidos com base nos critérios de que eles têm leituras de glicose no sangue superiores a 300 mg/dl. Os ratinhos não diabéticos são escolhidos de modo a que as suas leituras da glicose sejam inferiores a 200 mg/dl pelo medidor de glicose. Os ratinhos NOD (aqueles que apresentaram a leitura de glicose descrita acima) são deixados desenvolver diabetes, e são-lhes administradas doses de um placebo ou um anticorpo monoclonal anti-TNF que se sabe ligar-se a, e neutralizar TNF de ratinho, p. ex., anticorpo TN3 (TN3-19.12) (ver Marzi et ai., (1995) Shock 3:27; Williams et ai., (1992) Proc. Natl. Acad.
Sei. USA 89:9784; BD Biosciences Pharmingen). Os ratinhos recebem injeções subcutâneas diárias de anticorpo de TNF ou um placebo. Os níveis de insulina e glicose são medidos em incrementos semanais para determinar se há uma diminuição nos níveis de glicose no sangue.
Exemplo Comparativo 15: Inibidor de TNF em Modelo de Diabetes de Ratinho
Estudo de anticorpo de TNF em modelo de ratinho diabético tipo 2 0 seguinte estudo é realizado usando o modelo de ratinho NSY (diabetes tipo 2) (Ueda et ai., Diabetes Vol. 48, maio de 1999, 1168:1174) . 0 ratinho NSY imita de perto a diabetes tipo 2 humana por o início ser dependente da idade, os animais não são gravemente obesos, e tanto a resistência à insulina como a resposta afetada da insulina à glicose contribuem para o desenvolvimento da doença. Este estudo avalia vários dados fenotípicos, incluindo níveis de glicose, níveis de insulina, altura e peso do ratinho. A glicose é medida no ratinho NSY de acordo com técnicas padrão, incluindo através de um teste de tolerância à glicose por via intravenosa. A resistência limiar à glicose é medida antes de 12 semanas antes do início do estudo, e a glicose, insulina, altura e peso são registados em conformidade.
Aos ratinhos NSY são administradas doses de um placebo ou de um anticorpo anti-TNF monoclonal que se sabe ligar-se a, e neutralizar TNF de ratinho, p. ex., anticorpo TN3 (TN3- 19.12) (ver Marzi et ai., (1995) Shock 3:27; Williams et ai., (1992) Proc. Natl. Acad. Sei. USA 89:9784; BD Biosciences Pharmingen). Os ratinhos recebem injeções subcutâneas diárias de anticorpo anti-TNF ou um placebo. As medições do nível de glicose são tomadas 120 minutos após a administração de glicose por via intraperitoneal, a 0, 12, 24, 36, e 48 semanas após o início do estudo para examinar se existe uma diminuição na intolerância à glicose.
Exemplo Comparativo 16: Inibidor de TNF_no Modelo de Ratinho
Obeso
Estudo do anticorpo de TNF no modelo de ratinho para obesidade 0 seguinte estudo é realizado utilizando o modelo de murideo de ratinhos obesos (ob/ob) . Os ratinhos são avaliados quanto à perda de peso e uma redução no seu índice de massa corporal. Os ratinhos obesos são caracterizados por obesidade acentuada, hiperfagia, hiperglicemia transiente e concentração plasmática de insulina acentuadamente elevada associada a um aumento no número e tamanho de células beta dos ilhéus de Langerhans (Coleman, supra) . Os ratinhos obesos (ob/ob) são fenotipicamente distinguidos dos seus companheiros de ninhada magros (ob/+ e +/+) com cerca de 26 dias de idade, com base no peso corporal. Os ratinhos obesos ganham peso rapidamente e têm marcada obesidade às 5 semanas de idade. Os ratinhos obesos alcançam um peso corporal máximo de 60-70 gramas com uma idade de 7-8 meses, enquanto os companheiros de ninhada magros atingem o seu peso máximo de 30-40 gramas em 3-4 meses (Coleman, supra; Westman (1968) Diabetologia 4:141; Bray &
York (1971) Physiological reviews 51:598) .
Ratinhos ob/ob com treze (13) semanas de idade e ratinhos de controlo de tipo selvagem correspondentes são pesados para estabelecer um peso limiar. Aos ratinhos são administradas doses de um placebo ou um anticorpo monoclonal anti-TNF que se sabe ligar-se a, e neutralizar TNF de ratinho, p. ex., o anticorpo TN3 (TN3-19.12) (ver Marzi et al., (1995) Shock 3:27;
Williams et al., (1992) Proc. Natl. Acad. Sei. USA 89:9784; BD
Biosciences Pharmingen). Os ratinhos receberam injeções subcutâneas diárias de anticorpo de TNF ou um placebo. Todos os ratinhos são alimentados com uma dieta rica em gordura (58% de gordura, Research Diets D12330) durante 12 semanas. Os pesos corporais são registados semanalmente. Após 12 semanas, os ratinhos são eutanasiados, e as almofadas de gordura são dissecadas e pesadas, bem como o peso final do animal para determinar o índice final de massa corporal (IMC) e a ocorrência de obesidade.
Alternativamente, os ratinhos ob/ob podem ser tratados com D2E7 começando no nascimento, e alimentados com uma dieta normal, i.e., dieta não pobre em gordura, não rica em gordura.
Os ratinhos tratados e de controlo (companheiros da mesma ninhada ob/ob) são pesados semanalmente. Normalmente, às cinco semanas os ratinhos ob/ob exibem um IMC que indica que são obesos. Os ratinhos são examinados às cinco semanas, para determinar se têm uma medição de IMC inferior à dos controlos.
Exemplo Comparativo 17: Inibidor de TNF_no Tratamento de
Diabetes Tipo 2 em Humanos
Estudo de D2E7 em sujeitos humanos com diabetes tipo 2
Os pacientes que são diagnosticados com diabetes tipo 2 são selecionados para o estudo. São utilizados os seguintes critérios de inclusão: 40-65 anos de idade, duração conhecida da diabetes >12 meses, IMC estável <35 kg/m2, pressão arterial supina <140/90 mm/Hg, creatinina no soro <106 mol/1, m24-h UAE entre 20 e 200 g/min em amostras avaliadas semanalmente durante os 3 meses anteriores à primeira avaliação e no período corrido de 15 dias de placebo, e nenhuma doença cardiovascular, hepática, ou sistémica antes do início do estudo. Os sujeitos não tomam quaisquer fármacos adicionais além daqueles para o tratamento da sua diabetes. Durante três dias antes e durante a duração do estudo, os pacientes seguem uma dieta isocalórica ( 0, 13 mJ x1 kg dia-1, 50% de hidratos de carbono, 35% de lipídios, 15% de proteínas), sem restrição na ingestão de sódio. A aderência às recomendações dietéticas é controlada em cada visita.
Aos pacientes são administrados 40 mg de D2E7 num regime de dosagem quinzenal, embora esta dose e a frequência da dose possam ser ajustadas por um perito na especialidade com conhecimento de tratamentos de HCV. Os pacientes são monitorizados pelo menos semanalmente durante doze semanas, com ensaios repetidos como os que foram realizados antes da iniciação do tratamento de D2E7 e tal como descrito abaixo.
Para a avaliação de cada paciente ao longo do estudo, são realizados os seguintes exames limiares: medições da pressão arterial supina; IMC; a média de três amostras de urina de vinte e quatro horas; níveis de glicose no sangue; glicose na urina de 24 horas; níveis de creatinina sérica; eliminação de creatinina; e uma leitura de eletrocardiograma. Além disso, cada sujeito mantém um diário para monitorizar sintomas diabéticos tipo 2 típicos tais como fadiga, sede excessiva, micção frequente, visão turva, alta taxa de infeções, feridas que cicatrizam lentamente, alterações de humor e problemas sexuais. Os pacientes são examinados para determinar se existe uma redução nos níveis de glicose no sangue em D2E7, bem como redução dos sintomas típicos da diabetes tipo II tais como fadiga, sede excessiva, micção frequente, visão turva, taxa elevada de infeções, feridas que cicatrizam lentamente, e alterações de humor.
Exemplo Comparativo 18: Inibidor de TNF_em Anemia de
Deficiência de Ferro
Estudo do anticorpo de TNF no modelo de rato de deficiência de ferro 0 presente estudo é realizado usando o modelo animal de rato de anemia por deficiência de ferro (Catani et ai., (2003)
Braz. J. Med. Biol. Res. 36; 693) . Ratos machos Wistar-EPM (aproximadamente três semanas de idade) são alimentados com uma dieta AIN-93G (American Institute of Nutrition Rodent Diets) isenta da ferro durante um período de duas semanas para induzir anemia por deficiência de ferro. Aos ratos são administradas doses de um placebo ou um anticorpo monoclonal anti-TNF que se sabe ligar-se a, e neutralizar TNF de rato, p. ex., o anticorpo TN3 (TN3-19.12) (ver Marzi et ai., (1995)
Shock 3:27; Williams et ai., (1992) Proc. Natl. Acad. Sei. USA. 89:9784; BD Biosciences Pharmingen) . As amostras de sangue são tomadas pré e pós-tratamento para determinar os valores de hemoglobina e hematócrito. Para a análise de hematócrito e da concentração de hemoglobina, o sangue é recolhido e misturado com 5 ml de EDTA 0,5 Μ. O hematócrito é determinado através de centrifugação do sangue em capilares heparinizados selados. As concentrações de hemoglobina são calculadas a partir da absorvância a 546 nm de cianmetemoglobina. Os ratos são examinados para determinar se houve uma medição do hematócrito melhorada.
Exemplo Comparativo 19: Estudo do Inibidor de TNF_na Anemia de Doença Crónica
Estudo do anticorpo de TNF na anemia associada a doença inflamatória crónica 0 seguinte ensaio é realizado com um modelo de rato de anemia de doença crónica (Coccia et ai., (2001) Exp. Hematology 29; 1201) . Fêmeas de ratos Lewis de oito a dez semanas de idade foram inoculadas no dia 0 com uma injeção intraperitoneal (i.p.) de polímeros de peptidoglicano-polissacárido (PG-APS) suspenso em solução salina a 0,85% equilibrada para uma dose de 15 yg de ramnose/kg. O sangue é colhido através das veias da cauda para tubos Microtainer revestidos com EDTA e são realizadas contagens de sangue completo (CSC) num ADVA 120 Hematology System calibrado para sangue de rato. Uma amostra de sangue adicional é colhida e separada em tubos de centrífuga de separação de soro Microtainer e os soros são analisados quanto a concentrações de ferro, bilirrubina, e EPO endógena.
Aos ratos são administradas doses de um placebo ou um anticorpo monoclonal anti-TNF que se sabe ligar-se a, e neutralizar TNF de ratinho, p. ex., o anticorpo TN3 (TN3-19.12) (ver Marzi et al., (1995) Shock 3:27; Williams et al., (1992) Proc. Natl.
Acad. Sei. USA. 89:9784; BD Biosciences Pharmingen), e examinados quanto a melhores medições da concentração de ferro, bilirrubina e EPO.
Exemplo Comparativo 20: Inibidor de TNF_em Anemia
Estudo do anticorpo D2E7 em sujeitos humanos com anemia
Os pacientes que apresentam sintomas normalmente associados a anemia são examinados e testados para determinar se sofrem de anemia. Sintomas normalmente associados a anemia são fadiga, dor no peito, falta de ar, palidez, e aumento da frequência cardíaca. Exemplos de testes que indicam anemia são as contagens de sangue completo (CSC) , contagem de reticulócitos, e medições de fornecimento de ferro, incluindo o ferro sérico, a capacidade total de ligação ao ferro e a ferritina sérica. Em pacientes com anemia grave e anomalias na morfologia dos glóbulos vermelhos, um aspirado de medula óssea e biopsia são ferramentas de diagnóstico importantes. Os pacientes que sofrem de anemia são selecionados para o estudo.
No teste de CSC, os contadores de células automáticos medem vários parâmetros como parte da CSC, incluindo a hemoglobina, contagem de glóbulos vermelhos, distribuição do volume de glóbulos vermelhos, contagem de plaquetas e contagem de glóbulos brancos. 0 contador calcula também o hematócrito (com base na contagem de GV e do volume) , o volume celular médio (VCM) (com base na distribuição de volume), hemoglobina celular média (HCM) (hemoglobina dividida pelo hematócrito), e a largura de distribuição de glóbulos vermelhos (RDW). Os índices de glóbulos vermelhos e RDW são utilizados em conjunto com uma inspeção direta do esfregaço de sangue corado com Wright para avaliar a morfologia dos glóbulos vermelhos.
Tal como o teste de CSC, uma medida precisa da contagem de reticulócitos é chave para a classificação inicial de qualquer anemia. Os reticulócitos são glóbulos vermelhos recém-nascidos que contêm ARN residual suficiente para que possam ser corados com um corante supravital e contados como uma percentagem da população de glóbulos vermelhos em circulação. No estado basal, a contagem de reticulócitos normal varia de 1 a 2 por cento de acordo com o método de contagem. Isto correlaciona-se com a substituição diária normal de aproximadamente 1 por cento da população de glóbulos vermelhos em circulação. Aumentos na contagem de reticulócitos proporcionam uma medida fiável da resposta de produção de glóbulos vermelhos à anemia.
Para utilizar a contagem de reticulócitos como uma medida de produção, esta deve primeiro ser corrigida para alterações no hematócrito do paciente e para o efeito da eritropoetina na libertação inicial de reticulócitos da medula para a circulação. A correção do hematócrito (HCT) converte a percentagem de reticulócitos num número absoluto: % de Reticulócitos x « % absoluta de reticulócitos 45% A correção dos reticulócitos de medula ("deslocamento") envolve a divisão da percentagem absoluta por um fator de 1,5 a 2,5 sempre que haja policromasia proeminente no esfregaço do sangue periférico. A correção do deslocamento deve sempre ser aplicada a qualquer paciente com anemia e uma contagem de reticulócitos muito alta para proporcionar um verdadeiro índice de produção de glóbulos vermelhos eficaz. Um paciente normal responderá a um hematócrito inferior a 30 por cento com um aumento de duas a três vezes no índice de produção de reticulócitos. Esta medição sozinha confirmará, portanto, o facto de que o paciente tem uma resposta de eritropoetina adequada, uma medula eritroide normal, e fornecimento de ferro suficiente para enfrentar o confronto. Quando o índice de reticulócitos cai abaixo de 2, deve estar presente um defeito na proliferação da medula ou maturação dos precursores.
As medições padrão de fornecimento de ferro incluem o ferro sérico, a capacidade de ligação do ferro à transferrina (CLFT), e o nível de ferritina sérica. O ferro sérico normal varia 9 a 27 mol/1 (50 a 150 g/dl), enquanto a CLFT normal é de 54 a 64 pmol/l (300 a 360 pg/dl) . Portanto, no estado basal, apenas 30 a 50 porcento da transferrina em circulação é saturada com ferro. Informação importante é proporcionada por cada medição bem como é calculada a saturação percentual. A ferritina sérica é utilizada para avaliar as reservas de ferro do corpo. Os machos adultos têm níveis de ferritina no soro de entre 50 e 150 mg/1, correspondendo a reservas de ferro de 600 a 1000 mg. As fêmeas adultas têm menores níveis séricos de ferritina (15 a 50 mg/L) e reservas de ferro menores (0 a 300 mg). Níveis de ferritina sérica inferiores são observados como reservas de ferro esgotadas; níveis abaixo de 15 mg/1 indicam esgotamento das reservas e deficiência de ferro.
Uma amostra de medula óssea é prontamente obtida através de aspirado por agulha ou biopsia. É de grande valor em pacientes que têm uma anemia hipoproliferativa ou um distúrbio de maturação dos glóbulos vermelhos, proporcionando informação valiosa sobre a estrutura e celularidade da medula, bem como da proliferação e maturação de precursores. A proporção de precursores eritroides para granulocíticos (razão E/G) é usada para avaliar a capacidade proliferativa dos precursores eritroides. Um paciente com anemia hipoproliferativa e um índice de reticulócitos <2 demonstrará uma razão E/G <1:3 ou 1:2. Em contraste, o paciente de anemia hemolítica com um índice de produção >3-5 terá uma razão E/G >1:1. Defeitos de maturação dos precursores dos glóbulos vermelhos são identificados a partir do desencontro entre a razão E/G e o índice de produção de reticulócitos. Estes indivíduos demonstram uma razão E/G superior a 1:1 em conjunto com um baixo índice de reticulócitos, típico da eritropoese ineficaz de um distúrbio de maturação.
Na sequência de medições limiares, os pacientes começam a receber tratamento. São distribuídos aleatoriamente e tratados com D2E7 ou placebo de um modo cego. A contagem de sangue completo (CSC) dos pacientes, contagem de reticulócitos, e medições do fornecimento de ferro são monitorizadas pelo menos a cada duas semanas.
Exemplo Comparativo 21: Inibidor de TNF_no Modelo animal de
Dor Neuropática
Anticorpo de TNF no modelo de ligadura do nervo ciático de rato 0 seguinte estudo é realizado usando o modelo de ligadura do nervo ciático de rato para dor neuropática (Bennett e Zie (1988) Pain 33:87). Medições comportamentais limiares (resposta a alodinia mecânica e hiperalgesia térmica, cujos protocolos são descritos abaixo) são feitas antes da cirurgia. A hiperalgesia térmica refere-se ao limiar de dor por calor do rato, e a alodinia mecânica refere-se ao limiar de resposta a estímulos tácteis ligeiros. Ratos Sprague-Dawley machos, pesando entre 120-150 gramas, são anestesiados e é realizado um procedimento de ligadura do nervo ciático em cada. O procedimento de ligadura do nervo ciático consiste em expor o nervo ciático comum, que é então amarrado frouxamente com 4 ligaduras com espaçamento de cerca de 1 mm. Os ratos são deixados a recuperar e são-lhes administradas doses de um placebo ou um anticorpo anti-TNF monoclonal que se sabe ligar- se a, e neutralizar TNF de rato, p. ex., o anticorpo TN3 (TN3- 19.12) (ver Marzi et ai., (1995) Shock 3:27; Williams et ai., (1992) Proc. Natl. Acad. Sei. USA. 89:9784; BD Biosciences Pharmingen). Os grupos experimentais recebem diariamente injeções subcutâneas por semana de anticorpo de TNF ou um placebo.
Após a cirurgia, a alodinia mecânica e hiperalgesia térmica são realizadas numa base semanal durante 10 semanas. 0 teste de analgesia examina respostas a calor nocivo e é determinado colocando os ratos numa câmara com um piso de vidro transparente e apontando uma fonte de calor radiante por baixo do chão à superfície plantar do pé afetado. A latência e a duração da retirada são registadas. O aumento da latência de retirada da pata traseira após o tratamento é demonstrativo da atividade analgésica.
As respostas a estímulos mecânicos normalmente inócuos (medição da alodinia mecânica) são determinadas colocando os ratos numa câmara com um piso de tela e estimulando a superfície plantar da pata traseira com pelos de von Frey graduados, que são calibrados pelos gramas de força necessários para os dobrar. Os ratos com ligadura do nervo ciático respondem a gramas menores de estimulação mecânica através da retirada reflexiva do pé que os ratos não operados. Esta resposta a estímulos que são normalmente inócuos é denominada alodinia. Os aumentos nos gramas de força mecânica requerida para produzir a retirada da pata após o tratamento são demonstrativos da atividade antialodínica e de uma diminuição da dor neuropática.
Exemplo Comparativo 22: Inibidor de TNF_num Modelo Animal de
Dor Neuropática
Estudo de anticorpo de TNF no modelo de rato de ligadura segmentar do nervo espinal O seguinte estudo é realizado usando o modelo de ligadura segmentar do nervo espinal de rato para dor neuropática (Kim e Chung, Pain 50 (1992) 355-363). Ratos machos Sprague-Dawley, pesando 120-150 gramas, são anestesiados e colocados numa posição de bruços. Os músculos paraespinais esquerdos são separados dos processos espinosos ao nível de L4-S2. As raízes dos nervos L5 e L6 esquerdos são expostas e firmemente ligadas com sutura cirúrgica 6-0 de seda distai ao gânglio da raiz dorsal. Os ratos são deixados recuperar e são-lhes administradas doses de um placebo ou um anticorpo monoclonal anti-TNF que se sabe ligar-se a, e neutralizar o TNF de rato, p. ex., o anticorpo TN3 (TN3-19.12) (ver Marzi et al., (1995)
Shock 3:27; Williams et al., (1992) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89:9784; BD Biosciences Pharmingen). Os grupos experimentais recebem injeções subcutâneas diárias por semana de anticorpo de TNF ou um placebo. Medições comportamentais limiares (resposta a alodinia mecânica e testes de hiperalgesia térmica, tal como descrito acima) são feitas antes da cirurgia. Após a cirurgia, os testes da alodinia mecânica e analgesia para dor neuropática são realizados numa base semanal durante 10 semanas.
Exemplo Comparativo 23: Inibidor de TNF_no Tratamento de Dor
Neuropática
Estudo examinando D2E7 em sujeitos humanos com dor neuropática
Pacientes diagnosticados com dor neuropática são selecionados para o estudo. Dor neuropática clinica é determinada com base em razões clinicas, incluindo a história, o exame físico e investigação adequada de sintomas e sinais manifestados pelo paciente. As definições dos critérios de diagnóstico definidos na Classification of Chronic Pain da International Association for the study of Pain (IASP), são utilizadas para apoiar o diagnóstico clínico de dor neuropática. Os pacientes são excluídos com base em critérios, incluindo, mas não limitados a, outro problema de dor de gravidade igual ou superior que possa prejudicar a avaliação de dor neuropática; distúrbios neurológicos ou psiquiátricos significativos não relacionados com causas de dor neuropática que possam prejudicar a avaliação de dor neuropática; abuso atual de fármacos ou álcool; e doença do fígado, renal ou pulmonar clinicamente significativa.
As avaliações de dor neuropática do paciente são feitas usando ferramentas de avaliação de dor padrão, tais como Short Form-McGill Pain Questionnaire (SF-MPQ); uma Escala Visual Analógica vertical de 100 mm (EVA) (0 = sem dor, 100 = dor intolerável); e a Clinician Global Impression of Change (CGIC) . O paciente pode também usar um diário para registar a sua dor neuropática. Todas as noites, os pacientes avaliam a intensidade média da sua dor durante as 24 horas precedentes.
Após uma semana de medições limiares, os pacientes começam a receber tratamento. São distribuídos aleatoriamente e tratados com D2E7 ou com placebo de uma forma cega. Os pacientes são monitorizados a cada duas semanas, e examinados quanto a uma redução na avaliação de dor neuropática do paciente e intensidade média de dor, tal como registado nos seus diários.
Exemplo Comparativo 24: Inibidor de TNF_num Modelo Animal
para Infeção de Hepatite C
Estudo da D2E7 no modelo de chimpanzé de HCV 0 seguinte estudo é realizado utilizando o modelo de chimpanzé de vírus da hepatite C (HCV) (Shimizu et ai., (1990) Proc. Natl. Acad. Sei. USA 87:6441).
Os chimpanzés são inoculados por via intravenosa (i.v.) com 0,5 ml de plasma não diluído obtido a partir de um paciente com hepatite não-A, não-B aguda pós-transfusão. O inoculo contém, por exemplo, 106'5 doses infeciosas de 50% de chimpanzé por ml (CID5o/ml) de HCV. Amostras de soro e espécimes de biopsia do fígado são tomadas antes da inoculação e semanalmente após o tratamento. Após a inoculação, são administradas aos chimpanzés doses de D2E7, ou de um placebo. D2E7 é eficaz na ligação a TNF de um modo de elevada afinidade entre as espécies, ver Patente U.S. No. 6258562.
Os níveis de HCV após inoculação são monitorizados de várias maneiras. Amostras de soro são tomadas periodicamente dos chimpanzés e ensaiadas quanto à alanina-aminotransferase (ALT). O ensaio ALT é um de um grupo de testes conhecidos como testes da função hepática (ou TFH), e é usado para monitorizar lesões do fígado. O anticorpo para HCV (anticorpo anti-C100-3) em circulação é detetado pelo sistema de teste ELISA de anticorpo BCV. Além disso, o HCV é detetado nas amostras de soro, os ensaios de ADNc/PCR são realizados tal como descrito em Weiner et ai., (1990) Lancet 335:1. Espécimes de biopsia de fígado congelados são também testados quanto ao antigénio citoplasmático através de coloração de imunofluorescência com anticorpo monoclonal 48-1 de acordo com o método descrito em Shimizu et ai., (1985) Proc. Natl. Acad Sei. USA 82; 2138. Os chimpanzés tratados são examinados para determinar se os níveis de ALT e os níveis séricos de HCV são inferiores em comparação com os dos chimpanzés tratados com placebo.
Exemplo Comparativo 25: Inibidor de TNF_na Infeção de HCV
Humana
Estudo de D2E7 no tratamento de HCV em humanos
Homens e mulheres com 18 a 70 anos com infeção de HCV crónica compensada são selecionados. Para se qualificarem para o estudo, os pacientes devem testar positivo para anti-HCV (ensaio imunoenzimático de segunda geração) e ARN de HCV através da transcrição inversa-reação em cadeia da polimerase (RT-PCR). Os pacientes têm também uma biopsia do fígado dentro de um ano da entrada no estudo mostrando hepatite crónica, e têm elevados níveis de alanina-transaminase (ALT) no soro durante pelo menos 6 meses antes do inicio do tratamento. As contagens de leucócitos à entrada devem ser de menos de 2500/ 1; as contagens de plaquetas devem ser maiores que 70000/ 1. Critérios de exclusão incluem, mas não estão limitados a qualquer outra causa de doença do fígado ou outros distúrbios relevantes, incluindo imunodeficiência humana ou coinfeção pelo vírus de hepatite B; anomalias cardíacas ou cardiovasculares clinicamente significativas, enxertos de órgãos, infeção bacteriana ou fúngica sistémica; distúrbios hemorrágicos clinicamente significativos; abuso de álcool ou drogas no ano anterior. O ARN de HCV no soro pré-tratamento e pós-tratamento é quantificado por um ensaio de RT-PCR padronizado. A deteção qualitativa do ARN de HCV é realizada através de RT-PCR em amostras de soro obtidas pós-tratamento. A genotipagem de HCV é realizada através de um ensaio de hibridização inversa. Os estados emocionais e psicológicos são medidos utilizando escalas adequadas de qualidade de vida relacionadas com a saúde.
Após as medições limiares, os pacientes começam a receber tratamento. São distribuídos aleatoriamente e tratados com D2E7 ou com placebo de uma forma cega. Aos pacientes são administrados 40 mg de D2E7 num regime de dosagem quinzenal, embora esta dose e a frequência da dose possam ser ajustadas por um perito na especialidade com conhecimento de tratamentos de HCV. Os pacientes são monitorizados pelo menos a cada 4 semanas, com ensaios repetidos tais como os que foram realizados antes do inicio do tratamento de D2E7. Uma diminuição nos níveis de HCV em relação aos que receberam apenas placebo é evidenciada por um sinal de RT-PCR mais fraco.
Exemplo 2 6: Inibidor de TNF_no Modelo de Ratinho para Éaee
Estudo de anticorpo de TNF no modelo de ratinho SCID de psoriase
Ratinhos com Imunodeficiência Combinada Grave (SCID) que foram submetidos a transplante de placas de psoriase humanas são selecionados como um modelo animal para estudar psoriase porque estes ratinhos retêm as características clínicas e histológicas típicas da psoriase por um período prolongado (Nickoloff et al., (1995) Am. J. Pathol. 146:580-8). Fêmeas de ratinhos SCID C.B17 com 2-3 meses de idade não consanguíneas são obtidas a partir de uma instalação de criação animal livre de patogénios. Espécimes de pele humana são tomados a partir de pacientes do sexo masculino brancos com psoriase de placas crónica. Os espécimes de pele em forma de fuso com 1x3 cm polegadas de tamanho compreendendo pele clinicamente envolvida são obtidos sob anestesia local e são preparados para transplante através da remoção da gordura subcutânea, mantidos em solução salina tamponada com fosfato (PBS) arrefecida. Os espécimes de pele são enxertados em 1-2 horas.
Os espécimes de pele de espessura completa são dissecados em pedaços de 8-10 mm de diâmetro e são então transplantados para as costas dos ratinhos, cada ratinho transportando um transplante. Para o procedimento cirúrgico, os ratinhos são anestesiados através de injeção intraperitoneal (i.p.) de uma mistura 1:1 de di-hidrogenocitrato de midazolam e fentanilo. Uma peça em forma de fuso de pele de espessura total é enxertada num defeito de espessura total de excisão correspondente do dorso central pelado e é fixado por suturas de monofilamento 6-0 atraumáticas. Após ser aplicada uma gaze impregnada de vaselina estéril, o doado é protegido de danos por uma sutura de bolsa de pele sobre a área transplantada usando a pele lateral adjacente. As suturas e a bolsa atada por cima são deixadas no local até que se resolvam espontaneamente após 2- 3 semanas.
As quimeras de pele SCID-humana exibem sintomas semelhantes aos da psoríase humana. Uma placa transplantada no ratinho SCID mostra características clínicas típicas da psoríase, incluindo escamas, eritema e espessamento. Este modelo apresenta também caracteristicas histológicas típicas da psoríase, incluindo paraqueratose, acantose, cristas epiteliais alongadas, afinamento supra-papilar, e infiltrados linfomononucleares na derme papilar.
Os ratinhos SCID transplantados são injetados por via subcutânea no local da lesão com um placebo ou com um anticorpo monoclonal anti-TNF que se sabe ligar-se a, e neutralizar o TNF de ratinho, p. ex., o anticorpo TN3 (TN3-19.12) (ver Marzi et al., (1995) Shock 3:27; Williams et al., (1992) Proc. Natl.
Acad. Sei. USA 89:9784; BD Biosciences Pharmingen). Os grupos experimentais recebem injeções subcutâneas diárias por semana de anticorpo de TNF ou de um placebo. A melhoria nos ratinhos SCID tratados com anticorpo de TNF é evidenciada por uma redução nos sintomas associados às placas de psoríase.
Exemplo 27: Adalimumab em Estudos Clínicos para Psoríase D2E7 em sujeitos humanos com psoríase
Pacientes com psoríase de placas crónica moderada a grave são selecionados para o estudo. Nenhum dos pacientes terá recebido quaisquer tratamentos de psoríase durante pelo menos 4 semanas ou quaisquer tratamentos tópicos durante pelo menos 2 semanas antes da entrada no estudo. As doses de D2E7 começam a 40 mg por semana ou 40 mg a cada duas semanas administradas por injeção subcutânea.
Os pacientes são examinados clinicamente a cada 2-4 semanas. A atividade clínica das lesões psoriáticas de pele é avaliada por meio do índice de Área e Gravidade de Psoríase (PASI) (Fredriksson e Pettersson (1978) Dermatológica 157:238- 44) e a Avaliação Global do Médico pelo mesmo investigador para assegurar avaliações consistentes. Na semana 12, é determinado o ponto final primário de proporção de pacientes que atingiram uma redução de pelo menos 75% na pontuação de PASI em relação ao limiar. 0 prurido é avaliado através da utilização de uma escala validada. As avaliações de qualidade de vida são medidas utilizando instrumentos validados, incluindo, mas não limitados a DLQI, SF-36, e EQ-5D. Fotografias de corpo inteiro excluindo a face são tomadas nas visitas programadas ao longo do estudo.
Amostras de biopsia da pele são obtidas a intervalos programados durante o estudo para correlacionar a histologia e biomarcadores na pele com o tratamento. Uma biopsia de pele normal é obtida no limiar para comparação com a pele psoriática.
Exemplo Comparativo 28. Inibidor de TNF_num Modelo Animal para Doença de Behçet
Estudo de anticorpo de TNF no modelo de ratinho da síndroma de Behçet 0 seguinte estudo é realizado utilizando o modelo de HSV de ratinho da doença de Behçet (Hirata, Y., et ai., (1993) Acta. Otolaryngol. Supl. 503:7 9) . Os lóbulos das orelhas de ratinhos que expressam TNF humano (EM&O J. (1991) 10:4025- 4031 para descrição mais detalhada) são riscados com uma agulha, depois inoculados com 1,0*106 unidades formadoras de placas fágicas (pfu)/ml de solução de Vírus Herpes Simplex tipo 1 (HSV1) (estirpe KOS), que faz com que células inflamatórias se acumulem nos, e em torno dos, vasos sanguíneos. Como resultado, ocorrem lesões intestinais, orais, no lóbulo da orelha, e epiteliais genitais. Um ratinho com síndroma semelhante a doença de Behçet é definido como um ratinho com dois ou mais sintomas, que são semelhantes às alterações morfológicas típicas observadas na doença de Behçet humana.
Um anticorpo anti-TNF monoclonal que se sabe ligar-se a, e neutralizar TNF de ratinho, p. ex., o anticorpo TN3 (TN3- 19.12) (ver Marzi et al., (1995) Shock 3:27; Williams et al., (1992) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89:9784; BD Biosciences Pharmingen) é administrado aos ratinhos com síndroma de Behçet induzida por HSV num intervalo de doses tanto antes como após a inoculação, ou a partir do dia da ocorrência da lesão. Controlos de placebo apropriados são também administrados. A perda de cabelo, ulceração da pele da boca e genital, e o envolvimento do olho são monitorados, e são colhidas amostras de tecido das lesões. As amostras de tecido são fixadas em formalina e impregnadas em parafina para a análise de secções.
As secções das lesões são coradas com hematoxilina e eosina e examinadas quanto ao aparecimento de células inflamatórias.
Como controlo, são inoculados 30 ratinhos no mesmo local com um meio de cultura. Quatro semanas depois, é realizada uma segunda inoculação utilizando o mesmo método, seguido de 16 semanas de observação.
Os ratinhos são examinados quanto a crescimento de novo do cabelo e uma diminuição nas ulcerações nos ratinhos tratados em comparação com os ratinhos tratados com placebo. As melhorias em lesões em ratinhos tratados, tal como determinado através de inspeção visual e análise histológica, observando-se uma diminuição da inflamação no local da úlceração e uma diminuição no número de células inflamatórias, p. ex. , células T, no local da ulceração são também outras indicações de melhorias.
Exemplo Comparativo 29. Inibidor de TNF_no Tratamento da
Doença de Kawasaki
Efeito do anticorpo de TNF na Doença de Kawasaki usando o modelo de ratinho de L. casei
Usando o modelo de ratinho de L. casei da doença de Kawasaki (Lehman, T.J., et ai., (1985) Arthritis Rheum. 28:652; Duong, T.T. (2002) Int. Immunol. 15:79; Brahn, E., et al. , (1999) Clin. Immunol. 90:147), é realizado o seguinte estudo. A arterite coronária é induzida em ratinhos expressando TNF humano (ver acima) com uma única injeção intraperitoneal (ip) de fragmentos celulares de Lactobacillus casei. Foi demonstrado que as secções histológicas dos corações de ratinhos tratados com L. casei, assemelham-se a vasculite e aneurismas observados nas artérias coronárias médias de crianças com doença de Kawasaki (Lehman et ai., (1985) Arthritis Rheum. 28:652; Duong (2002) Int. Immunol. 15:79; Brahn et ai., (1999) Clin. Immunol. 90:147) .
Aos ratinhos injetados com L. casei é administrado um placebo de controlo ou um anticorpo anti-TNF monoclonal que se sabe ligar-se a, e neutralizar TNF de ratinho, p. ex., o anticorpo TN3 (TN3-19.12) (ver Marzi et ai., (1995) Shock 3:27; Williams et ai., (1992) Proc. Natl. Acad. Sei. USA 89:9784; BD Biosciences Pharmingen) por via intraperitoneal através de protocolos padrão. Os corações de ratinhos injetados são colhidos no dia 14 (doença precoce) ou no final do estudo (doença estabelecida). Cortes histológicos são pontuados de forma cega para vasculite.
Uma diminuição da arterite coronária é avaliada através da determinação de uma redução nas lesões inflamatórias da parede dos vasos coronários de ratinhos tratados com anticorpo de TNF, em comparação com animais tratados com placebo. Uma diminuição da arterite coronária é avaliada como uma redução no infiltrado de células mononucleares inflamatórias da parede dos vasos coronários acompanhada por uma redução na proliferação da intima e menos estreitamento do lúmen do vaso, em comparação com animais tratados com placebo.
Exemplo Comparativo 30. Inibidor de TNF_num Modelo Animal para a Doença de Kawasaki
Anticorpo de TNF na Doença de Kawasaki usando o Modelo de Ratinho de ANCA 0 seguinte estudo é realizado usando o modelo de ratinho de anticorpos anti-células endoteliais (ANCA) da Doença de Kawasaki (Grunebaum et ai., (2002) Clin. Exp. Immunol. 130:233; Blank et ai., (1995) Clin. Exp. Immunol. 102:120; Tomer et ai., (1995) Arthritis Rheum. 38:1375; Damianovich et ai., (1996) J. Immunol. 156:4946). Os animais são imunizados com anticorpos anti-células endoteliais (ANCA) contendo anticorpos específicos de proteinase 3 derivados do plasma de um paciente de granulomatose de Wegener. Os ratinhos são imunizados com ANCA purificados e os ratinhos de controlo são injetados com IgG normal. Aos ratinhos são administradas doses semanais de um placebo ou de um anticorpo monoclonal anti-TNF que se sabe ligar-se a, e neutralizar TNF de ratinho, p. ex., o anticorpo TN3 (TN3-19.12) (ver Marzi et al. , (1995) Shock 3:27; Williams
et al., (1992) Proc. Natl. Acad. Sei. USA 89:9784; BD
Biosciences Pharmingen) durante até quatro meses. Três meses após a imunização com os ANCA humanos, os ratinhos desenvolvem anticorpos endógenos para ANCA. Os ratinhos são eutanasiados, e os pulmões, rins e coração são examinados histologicamente quanto à infiltração de células linfoides em torno das arteríolas e vénulas, bem como deposição de Ig na parte externa das paredes dos vasos sanguíneos, tal como observado em pacientes com Doença de Kawasaki (Grunebaum et al. , (2002)
Clin. Exp. Immunol. 130:233; Blank et al., (1995) Clin. Exp.
Immunol. 102:120; Tomer et al., (1995) Arthritis Rheum. 38:1375; Damianovich et al., (1996) J. Immunol. 156:4946) . Uma diminuição na infiltração de células linfoides e na deposição de IgG nas paredes dos vasos e uma diminuição no título de anticorpos de ANCA é indicativa de uma melhoria na doença de Kawasaki.
Exemplo Comparativo 31. Inibidor de TNF_no Tratamento da
Doença de Kawasaki
Estudo clínico de D2E7 em sujeitos humanos com doença de Kawasaki
Pacientes sofrendo de doença de Kawasaki (DK) são recrutados para o estudo; todos os pacientes têm febre e pelo menos 4 dos 5 critérios clínicos publicados para DK (Barron, K.S., et al., (1999) J. Rheumatol. 26:170). São também identificados casos de controlo. O diâmetro das artérias coronárias é medido por ecocardiografia e corrigido para a área de superfície corporal. Os electrocardiogramas são pesquisados quanto a alterações típicas que podem estar presentes em DK incluindo PR prolongado ou intervalo QT, ondas Q anormais, alterações das ondas ST e T, tensões baixas ou arritmias. Aos pacientes de DK é administrado D2E7 em doses bissemanais e semanais de 40 mg ou um placebo. As dosagens podem ser ajustadas por um perito na especialidade entendido em DK. Os pacientes são monitorizados quanto à redução da febre. Terapia adjuvante, p. ex., corticosteroides, é administrada conforme necessário. Os pacientes são monitorizados e é utilizada ecocardiografia de acompanhamento para determinar se ocorreu dano na artéria coronária ou se ocorreu uma melhoria das lesões coronárias, demonstrada através de melhores resultados no ecocardiograma.
Exemplo Comparativo 32. Inibidor de TNF_no Tratamento da
Doença de Behçet
Estudo Clinico de D2E7 em Sujeitos Humanos com Doença de Behçet
Os pacientes para o estudo são selecionados se cumprirem os critérios de International Study Group, que requerem a presença de ulceração oral mais quaisquer duas de ulceração genital, lesões do olho típicas definidas, lesões de pele típicas definidas, ou um teste de patergia positivo (Lancet. (1990) 335:1078; Kaklamani, V.G. et al., (2001) Semin.
Arthritis Rheum. 30:299) durante uma média de 6 anos. Aos pacientes de Behçet é administrado D2E7 em doses bissemanais e semanas de 40 mg ou um placebo. As dosagens podem ser ajustadas por um vulgar perito na especialidade entendido em doença de Behçet. Aos pacientes tratados e de placebo é feito um exame sistémico e avaliação oftalmológica detalhada, incluindo acuidade visual, medição da pressão intraocular, biomicroscopia com lâmpada de fenda e oftalmoscopia indireta do segmento posterior seguida de fotografia de fundo, tanto antes como após o regime de tratamento. Os pacientes são examinados quanto a uma melhoria nos sintomas documentados associados a doença de Behçet, p. ex., redução da inflamação do olho e redução do número ou gravidade das úlceras da boca.
Exemplo Comparativo 33: Inibidor de TNF_num Modelo Animal para Lúpus
Estudo do anticorpo de TNF no modelo de lúpus de ratinho O modelo de ratinho MRL/lpr é escolhido para estudar lúpus (Reilly e Gilkeson (2002) Immunologic Research. 25(2) : 143-153; Mishra et al. , (2003) J. Clin. Invest. 111(4) :539-552) . Os ratinhos MRL/lpr exibem o aparecimento de uma síndroma autoimune acelerada com ativação de células B policlonais e hipergamaglobulinemia começando cerca das 8 semanas de idade.
Em ratinhos MRL/lpr, existe evidência serológica de uma variedade de auto-anticorpos, incluindo auto-anticorpos anti-ADN de cadeia dupla (anti-ADNcd) e hipocomplementemia às 12-16 semanas de idade. Os ratinhos MRL/lpr exibem sinais clínicos de artrite, linfadenopatia massiva, esplenomegalia, vasculite, e glomerulonefrite (GN) com a idade de 16-24 semanas. Aproximadamente 50% dos ratinhos MRL/lpr morrem às 24 semanas de idade, principalmente de insuficiência renal. São utilizadas fêmeas de ratinhos MRL/lpr com oito semanas de idade neste estudo. Às 14 semanas, os ratinhos MRL/lpr são injetados por via intraperitoneal (i.p.) com concentrações variáveis de um placebo ou são deixados a recuperar e são-lhes administradas doses de um placebo ou de um anticorpo anti-TNF monoclonal que se sabe ligar-se a, e neutralizar TNF de ratinho, p. ex., o anticorpo TN3 (TN3-19.12) (ver Marzi et ai., (1995) Shock 3:27; Williams et ai., (1992) Proc. Natl. Acad. Sei. USA. 89:9784; BD Biosciences Pharmingen) . Os grupos experimentais recebem injeções subcutâneas diárias por semana de anticorpo de TNF ou um placebo.
Alguns pacientes com lúpus desenvolvem nefrite do lúpus que é definida por uma inflamação persistente (irritação e inchaço) no rim. Estes pacientes podem eventualmente desenvolver insuficiência renal e necessitar de diálise ou transplante renal. Para examinar a progressão da doença renal, os ratinhos MRL/lpr são colocados em gaiolas metabólicas para colheitas de urina de 24 horas após injeção com D2E7. A excreção urinária de albumina é determinada pré e pós-tratamento com D2E7 por ELISA utilizando uma curva padrão de concentrações conhecidas de albumina de ratinho (Cappel Research products, Durham, North Carolina, EUA, tal como descrito em Weinberg et ai., (1994) J. Exp. Med. 179:651) . Melhorias em manifestações precoces da doença e progressão da proteinúria são evidenciadas por uma diminuição na excreção média de albumina após o tratamento.
Os ratinhos são sacrificados na semana 19 por deslocamento cervical após anestesia com isoflurano e os rins são removidos.
Um rim é fixado com formalina tamponada, embebido em parafina, secionado e corado com H&E. A patologia renal é examinada e classificada através de métodos padrão para inflamação glomerular, proliferação, formação crescente, e necrose. São também observadas alterações intersticiais e vasculite. São atribuídas pontuações de 0 a 3 a cada uma das características, e, em seguida, adicionadas em conjunto para se obter uma pontuação renal final, tal como descrito por Watson et ai., (1992) J. Exp. Med. 17 6:1645-1656. As pontuações para necrose e formação crescente são duplicadas antes da adição. Por exemplo, a inflamação glomerular é classificada como se segue: 0, normal; 1, poucas células inflamatórias; 2, inflamação moderada; e 3, inflamação grave. As melhorias são evidenciadas por sinais mínimos de inflamação ou proliferação celular (um índice de patologia renal inferior) na secção do rim do ratinho tratado com D2E7, em comparação com o ratinho tratado com placebo. O peso do baço é também medido para determinar o atraso ou a prevenção da progressão da atividade do lúpus nos ratinhos. O tamanho do baço é um indicador da atividade de lúpus que reflete a imunopatologia subjacente da doença. Os ratinhos MRL/lpr desenvolvem esplenomegalia massiva e linfadenopatia com a progressão da doença. Para determinar o tamanho do baço, com a idade de 19 semanas, os animais de cada grupo de ratinhos (tratamento e placebo) são sacrificados e os pesos médios do baço determinados. Um menor peso do baço médio indica uma melhoria no lúpus.
Exemplo Comparativo 34: Inibidor de TNF_para Tratamento do Lúpus
Estudo examinando D2E7 em sujeitos humanos com lúpus
Pacientes diagnosticados com lúpus são selecionados para o estudo de base. Os pacientes são selecionados com base na sua apresentação de sintomas normalmente associados a lúpus incluindo febre, fadiga, desconforto geral, inquietação ou sensação de doença (mal-estar), perda de peso, erupções cutâneas, erupção cutânea em "borboleta", a luz solar agrava a erupção cutânea, sensibilidade à luz solar, dor e inchaço nas articulações, artrite, glândulas inchadas, dores musculares, náuseas e vómitos, dor torácica pleuritica, convulsões e psicose. Outros sintomas incluem sangue na urina, tosse com sangue, hemorragia nasal, dificuldade de deglutição, a cor da pele é desigual, manchas vermelhas na pele, dedos que mudam de cor sobre pressão ou no frio (fenómeno de Raynaud) , dormência e formigueiro, feridas na boca, perda de cabelo, dor abdominal e distúrbios visuais. É feito um exame físico aos pacientes para determinar se apresentam ou não qualquer um dos sintomas característicos indicativos de lúpus. 0 diagnóstico de lúpus baseia-se na presença de pelo menos quatro das onze características típicas da doença.
Os testes para determinar a presença dessas manifestações da doença podem variar mas incluirão alguns dos seguintes: painel de anticorpos antinucleares (ANA), incluindo anticorpos anti-ADN e anticorpos anti-Smith, com os dois últimos testes geralmente positivos no lúpus sozinho; erupção ou lesões cutâneas características; radiografia de tórax mostrando pleurite ou pericardite; ouvir o peito com um estetoscópio revelando atrito cardíaco ou atrito pleural; a análise da urina mostra sangue, cálculos, ou proteína na urina; um hemograma completo mostrando uma diminuição nalguns tipos de células; biopsia do rim; e exame neurológico. Esta doença pode também alterar os resultados dos seguintes ensaios: contagem de glóbulos brancos; eletroforese da globulina sérica; fator reumatoide; proteína, urina; eletroforese de proteínas - soro; teste da mancha de mononucleose; taxa de sedimentação de eritrócitos (ESR); crioglobulinas; teste de Coombs direto; componente do complemento 3 (C3); complemento; anticorpo anti-tiroide microssomal; anticorpo anti-tiroglobulina; anticorpo anti-mitocôndria; e anticorpo anti-músculo liso.
Os pacientes são divididos aleatoriamente em grupos experimentais e de placebo, e é-lhes administrado D2E7 ou o placebo. Os intervalos de dosagem são utilizados no estudo para determinar qual a dose mais eficaz para tratamento de lúpus. Os intervalos de dosagem são utilizados no estudo para determinar que dose é mais eficaz para tratamento de lúpus. As dosagens devem começar a 40 mg, a qual é a dose de D2E7 que se verificou ser mais eficaz a tratar artrite reumatoide em pacientes. Aos pacientes são dadas 4 a 7 infusões de D2E7 ou de placebo. Os pacientes são reexaminados a cada duas semanas para determinar se os sintomas de lúpus estão reduzidos ou tratados, determinado através de uma redução de ESR e dos níveis de proteína C reativa (CRP).
Exemplo Comparativo 35: Inibidor de TNF_na Síndroma de Sjõgren
Estudo examinando D2E7 em sujeitos humanos com síndroma de Sjõgren
Os pacientes que verificam a classificação de European and the American College of Rheumatology para a doença primária de Sjogren são selecionados para o estudo (ver Vitali et ai., (1993) Arthritis Rheum. 36:340-7; Fox et ai., (1986) Arthritis Rheum. 29:577-85) . Os pacientes têm pelo menos 18 anos de idade. No momento do recrutamento todos os pacientes têm doença ativa primária de Sjogren, que é definida como a presença no rastreio de pelo menos uma taxa elevada de sedimentação de eritrócitos (ESR;> 25/mm/h) ou hipergamaglobulinemia (>1,4 g/litro). Os fármacos antirreumáticos modificadores de doença (FARMD) e os corticosteroides não são permitidos durante o estudo e são interrompidos pelo menos 4 semanas antes do limiar. Critérios de exclusão incluem infeção grave nos 3 meses anteriores, tuberculose latente, infeção documentada por vírus da imunodeficiência humana ou vírus da hepatite C, vasculite com perigo de vida, malignidade conhecida, doença grave ou não controlada concomitante, e a presença de qualquer outra doença do tecido conjuntivo. O estudo inclui a administração de 3 infusões de D2E7 (a uma dosagem de cerca de 40 mg) nas semanas 0, 2, e 6 e 2 visitas de acompanhamento nas semanas 10 e 14. Os pacientes são deixados continuar as lágrimas artificiais, desde que a dosagem e o programa sejam estáveis ao longo do estudo.
As avaliações clínicas, oftalmológicas e biológicas são realizadas no limiar e nas semanas 2, 4, 6, 10 e 14. As avaliações clínicas são realizadas pelo mesmo médico. Estas incluem um exame físico geral, uma avaliação da boca seca (utilizando uma escala de 0-2 onde 0 = sem secura, 1 = secura suave a moderada, e 2 = secura grave) , e um teste de fala (número de vezes que a palavra "puttica" pode ser repetida durante um período de 2 minutos, uma técnica apresentada por P.J. Shirlaw na Conference on New Advances in Basic Science, Diagnosis and Treatment of Sjogren's Syndrome, Londres, janeiro de 1997). Além disso, toda a saliva não estimulada é recolhida durante 5 minutos utilizando a técnica do cuspo de acordo com os métodos estabelecidos, e as amostras são pesadas numa balança analítica para determinar o volume de saliva obtido (1 g = 1 ml) (Navazesh (1993) Ann. NY Acad. Sci. 694:72-7) . A avaliação do olho seco é também realizada (registada numa escala de 0-2, onde 0 = sem sintomas, 1 = sintomas leves a moderados aliviados por lágrimas artificiais (LA), e 2 = sintomas graves não aliviados por LA), e é determinada a frequência de utilização de LA.
Aos pacientes é também feita uma avaliação da fadiga (escala visual analógica (EVA) de 0-100 mm) e estes respondem a um questionário de fadiga (0 = sem fadiga, 1 = fadiga leve que não interfere com as atividades diárias, 2 = fadiga moderada que interfere com as atividades diárias, e 3 = fadiga com atividades gravemente reduzidas). A avaliação clínica pode também incluir uma contagem de articulações sensíveis (máximo de 64), contagem de pontos sensíveis (máximo de 18), e avaliação da dor do paciente (EVA de 0-100 mm) . A avaliação global do paciente e do médico foram feitas usando um EVA de 0-100 mm.
Todas as avaliações oftalmológicas são realizadas pelo mesmo médico e incluem um teste de tempo de ruptura da película lacrimal com fluoresceína (TBUT), o teste I de Schirmer, e uma avaliação da córnea realizada através da coloração verde de lissamina (pontuação de van Bijsterveld de 0-9). Os parâmetros biológicos são medidos através do estudo e incluem ESR, o nível de proteína C reativa (PCR), hemograma completo, testes de função renal e hepática, níveis de creatina-fosfocinase, níveis séricos de IgA, IgM, IgG, anticorpos antinucleares (ANA), e fator reumatoide (RF, e tipificação de linfócitos (número de células CD4= e CD8=). A diminuição nos sintomas associados aos sintomas da síndroma de Sjõgren incluem redução nos pontos sensíveis e dor nas articulações periféricas.
Exemplo Comparativo 36: Inibidor de TNF na Artrite Reumatoide Juvenil
Estudo examinando D2E7 em crianças com artrite reumatoide juvenil São selecionados para o estudo pacientes com artrite reumatoide juvenil diagnosticada (ARJ). Os pacientes recebem D2E7 durante 16 semanas e depois são divididos aleatoriamente em grupos experimentais e de placebo. Aos pacientes são administrados D2E7 ou placebo. Aos pacientes é administrado um intervalo de doses de entre cerca de 20 mg/m2/ASC (Área superficial corporal) até um máximo de 40 mg a cada duas semanas. Aos pacientes são dadas injeções subcutâneas de D2E7 ou de placebo a cada duas semanas durante a duração do tratamento. Os pacientes são reexaminados a cada duas semanas para determinar se os sintomas de ARJ estão reduzidos ou tratados. As melhorias na ARJ são determinadas através de uma diminuição nos sintomas clínicos da doença. A melhoria na ARJ é determinada utilizando critérios definidos por Giannini (Giannini et al. , (1997) Arthritis & Rheumatism 40: 1202) .
Usando este critério, a definição de melhoria é uma melhoria de pelo menos 30% desde o limiar em 3 de quaisquer 6 variáveis no conjunto principal, com não mais de 1 das restantes variáveis a agravar em >30%. As variáveis no conjunto principal consistem em avaliação global pelo médico da atividade da doença, avaliação de pai/paciente do bem-estar geral (cada uma registada numa Escala Analógica Visual de 10 cm), capacidade funcional, número de articulações com artrite ativa, número de articulações com gama limitada de movimentos, e taxa de sedimentação de eritrócitos.
Exemplo 37: Cristalização do fragmento F(ab)'2 de D2E7
Geração e purificação do fragmento F (ab) '2 de D2E7
Um fragmento F (ab) '2 de D2E7 foi gerado e purificado de acordo com o seguinte procedimento. Dois ml de IgG de D2E7 (aproximadamente 63 mg/ml) foram dialisados contra 1 litro de Tampão A (NaOAc 2 0 mM, pH 4) de um dia para o outro. Após diálise, a proteína foi diluída até uma concentração de 20 mg/ml. A pepsina imobilizada (Pierce; 6,7 ml de pasta) foi misturada com 27 ml de Tampão A, misturada e centrifugada (centrífuga de chão Beckman, 5000 rpm, 10 min). O sobrenadante foi removido, e este processo de lavagem foi repetido mais duas vezes. A pepsina imobilizada lavada foi ressuspensa em 13,3 ml de Tampão A. D2E7 (7,275 ml, 20 mg/ml, 145,5 mg) foi misturado com 7,725 ml de Tampão A e 7,5 ml da pasta de pepsina imobilizada lavada. A mistura de D2E7/pepsina foi incubada a 37°C durante 4,5 h com agitação (300 rpm). A pepsina imobilizada foi então separada através de centrifugação. A análise do sobrenadante através de SDS-PAGE indicou que a digestão de D2E7 estava essencialmente completa (banda de 115 kDa não reduzido, bandas de 0 e3 32 kDa reduzidas). O fragmento F (ab) '2 de D2E7 foi separado de D2E7 intacto e fragmentos Fc utilizando cromatografia de Proteína A. Metade do sobrenadante da reação acima (10 ml) foi diluída com 10 ml de Tampão B (fosfato de Na 20 mM, pH 7), filtrada através de um filtro Acrodisk de 0,45 m, e carregada numa coluna de
Proteína A Sepharose de 5 ml (Pharmacia Hi-Trap; lavada anteriormente com 50 ml de Tampão B) . As frações foram recolhidas. Após a mistura de proteína ser carregada, a coluna foi lavada com Tampão B até que a absorvância a 280 nm restabelecesse um limiar. As proteínas ligadas foram eluídas com 5 ml de Tampão C (ácido cítrico 100 mM, pH 3) ; estas frações foram neutralizadas através da adição de 0,2 ml de Tris*HCl 2 M, pH 8,9. As frações foram analisadas através de SDS-PAGE; as que continham o fragmento F (ab) '2 de D2E7 foram reunidas ( 42 ml). As concenêeaç de proteína foram determinadas através da absorvância a 280 nm em guanidina·HC1 6 M, pH 7 (coeficientes de extinção calculados: D2E7, 1,39 (UA-mL)/mg; F(ab) '2, 1,36 (UA-ml)/mg) . O banco do fluxo continha 38,2 mg de proteína (concentração, 0,91 mg/ml), o que representa um rendimento de 79% de F (ab) '2 (o rendimento teórico é de 2/3 do material de partida, dividido por dois [somente metade purificada], isto é, 48,5 mg). O fragmento F (ab) '2 de D2E7 foi ainda purificado através de cromatografia de exclusão de tamanho. O fluxo de Proteína A reunido foi concentrado de 42 para 20 ml, e uma porção (í ml, 7,5 mg) foi então cromatografada numa coluna Superdex 200 (26/60, Pharmacia) previamente equilibrada (e eluída) com Tampão D (HEPES 20 mM, pH 7, NaCl 150 mM, EDTA 0,1 mM). Foram observados dois picos através da absorvância a 280 nm: Pico 1, que elui a 172-200 ml, consistiu em F(ab)'2 (análise através de SDS-PAGE; banda 115 kDa não reduzida, bandas 30 e 31 reduzidas); Pico 2, eluindo a 236-248 ml, consistiu em um ou mais fragmentos de baixo peso molecular ( 15 kDa, reduzida ou não reduzida) . O Pico 1 foi concentrado até 5,3 mg/ml para ensaios de cristalização.
Cristalização do Fragmento F (ab) '2 de D2E7 O fragmento F (ab) '2 de D2E7 (5,3 mg/ml em HEPES 20 mM, pH 7, NaCl 150 mM, EDTA 0,1 mM) foi cristalizado usando o método de difusão de vapor da gota assente através da mistura de volumes iguais de F (ab) '2 e tampão de cristalização (aprox. 1 μΐ de cada) e permitindo que a mistura se equilibre contra o Tampão de cristalização a 4 ou 18°C. Os tampões de cristalização utilizados consistiram nos Hampton Research Crystal Screens I (soluções 1-48) e II (soluções 1-48), Emerald Bioestruturas Wizard Screens I e II (cada uma das soluções 1-48), e Jena Biosciences Screens 1-10 (cada uma das soluções 1-24) . Os cristais foram obtidos sob muitas condições diferentes, tal como resumido na Tabela 1.
Tabela 1. Sumário das condições de cristalização para o fragmento F(ab) '2 de D2E7
As seguintes condições (tal como descrito na Tabela 1) produziram cristais que podem ser utilizados para cristais de difração de qualidade: Wizard II, 11, 18, 2-propanol a 10%, cacodilato 0,1 M pH 6,5, Zn(Oac)2 0,2 M, cristais pequenos hexagonais ou romboédricos; Wizard II, PEG 8K a 10%, fosfato de Na/K 0,1 M pH 6,2, NaCl 0,2 M, cristais de grandes placas crescidos em grupos; JB 3, C6, 18, PEG 4K a 25%, Citrato de Na 0,1 M pH 5,6, Acetato de amónio 0,2 M, agulhas longas e finas; Hampton 2, 15, 18, AS 0,5 M, Acetato de Na tri-hidratado 0,1 M, pH 5,6, Sulfato de Li mono-hidratado 1,0 M, grupos de agulhas pequenas.
Exemplo 38: Cristalização do fragmento Fab de D2E7
Geração e purificação do fragmento Fab de D2E7
Um fragmento Fab de D2E7 foi gerado e purificado de acordo com o seguinte procedimento. Quatro ml de IgG D2E7 (diluídos até cerca de 20 mg/ml) foram diluídos com 4 ml de Tampão E (fosfato de Na 20 mM, cisteína*HCl 5 mM, EDTA 10 mM, pH 7) e misturado com 6,5 ml de uma pasta de papaína imobilizada (Pierce, 1%; lavada duas vezes anteriormente com 26 ml de Tampão E) . A mistura D2E7/papaína foi incubada a 37°C de um dia para o outro com agitação (300 rpm). A papaína imobilizada e a proteína precipitada foram separadas através de centrifugação; a análise do sobrenadante através de SDS-PAGE indicou que a digestão de D2E7 estava parcialmente completa (bandas de ~55, 50, 34, e 30 kDa não reduzidas, com algum D2E7 intacto e parcialmente digerido a -115 e -150 kDa; e bandas de -30 e -32 kDa reduzidas, bem como uma banda de -50 kDa) . No entanto, a digestão foi parada e sujeita a purificação. O fragmento Fab de D2E7 foi purificado através de cromatografia de Proteína A e cromatografia de exclusão de tamanho em Superdex 200 essencialmente como descrito acima para o fragmento F(ab)'2. O banco de fluxo da coluna de Proteína A (21 ml) continha -9,2 mg (0,44 mg/ml), enquanto o eluato de Proteína A (4 ml) continha -19,5 mg (4,9 mg/ml) . A análise através de SDS-PAGE indicou que o fluxo era essencialmente fragmento Fab puro (banda de -48 e -30 kDa não reduzidas, larga a -30 kDa reduzida), enquanto o eluato estava intacto e D2E7 parcialmente digerido. O fragmento Fab foi ainda purificado numa coluna Superdex 200, eluindo a 216-232 ml, i.e., tal como esperado, após o fragmento F(ab) '2 mas antes mas antes dos pequenos fragmentos Fc. O fragmento Fab de D2E7 foi concentrado até 12,7 mg/ml para ensaios de cristalização, tal como descrito abaixo.
Cristalização do Fragmento Fab de D2E7 O fragmento Fab de D2E7 (12,7 mg/ml em HEPES 20 mM, pH 7, NaCl 150 mM, EDTA 0,1 mM) foi cristalizado utilizando o método de difusão de vapor de gota assente essencialmente tal como descrito acima para o fragmento F(ab)'2. Os cristais foram obtidos sob muitas condições diferentes, tal como resumido na Tabela 2.
Tabela 2. Sumário das condições de cristalização para o fragmento Fab de D2E7
As seguintes condições (tal como descrito na Tabela 2) produziram cristais que podem ser utilizados para cristais de difração de qualidade: Hampton 2, 1, 4C, NaCl 2 M, PEG 6K a
10%, grupos de pequenas placas; Hampton 1 46, 4C, Acetato de Ca 0,2 M, Cacodilato de Na 0,1 M, pH 6,5, PEG 18K a 8%, grupos de grandes placas; Wizard I, 28, 4C, PEG 3K a 20%, Hepes 0,1 M pH 7,5, NaCl 0,2 M, grupos de grandes placas orto-romboédricas; Wizard II 3, 4C, PEG 8K a 20%, Tris 0, 1 M pH 8,5, MgCÍ2 0,2 M, grupo de placas grandes hex. ou ort. em fase de sep.
LISTAGEM DAS SEQUÊNCIAS <110> Abbott Laboratories, S.A., et ai.
<120> Tratamento de Distúrbios Relacionados com TNF
<130> BPI-187PC <140> <141> <150> 60/397,275 <151> 2002-07-19 <150> 60/411,081 <151> 2002-09-16 <150> 60/417,490 <151> 2002-10-10 <150> 60/455,777 <151> 2003-03-18 <160> 37 <170> FastSEQ para Windows Versão 4.0
<210> 1 <211> 107 <212> PRT <213> Sequência Artificial <220> <223> Anticorpo humano mutado <400> 1
Asp lie Gin Met Thr Gin Ser Pro Ser £er Leu Ser Ala Ser Val Ely -*1 5 10 IS
Asp Arg Val Thr lie Thr Cys Arg Ala ser Gin Gly He Arg Asn Tyr 20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu He 25 40 45
Tyr Ala Ala Ser Thr Leu. Gin Ser Gly Val Pro Ser Arg Pbe Ser Gly 50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr -Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Ser Leu Gin Pro 65 70 75 B0
Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gin Arg Tyr Asn Arg Ala Pro Tyr B5 50 95
Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105
<210> 2 <211> 121 <212> PRT <213> Sequência Artificial <400> 2
Glu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly leu Val Gin Pro Gly Arg 1 5 10 IS
Ser leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asp Asp Tyr 20 25 30
Ala Met His Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45
Ser Ala lie Thr Trp Asn Ser Gly His lie Asp Tyr Ala Asp Ser Val 5D * 55 60
Glu Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 80
Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 S5
Als Lys Val Ser Tyr Leu Ser Thr Ala Ser Ser Leu Asp Tyr Trp Gly 100 105 110
Gin Gly Thr leu Val Thr Val Ser Ser 115 120
<210> 3 <211> 9 <212> PRT <213> Sequência Artificial <220> <221> VARIANTE <222> 9 <223> Xaa = Thr ou Ala <223> Anticorpo humano mutado <400> 3
Gin Arg Tyr Asn Arg Ala Pro Tyr Xaa 1 5
<210> 4 <211> 12 <212> PRT <213> Sequência Artificial <220> <221> VARIANTE <222> 12 <223> Xaa = Tyr ou Asn <223> Anticorpo humano mutado <400> 4
Val Ser Tyr Leu Ser Thr Ala Ser Ser Leu Asp Xaa 15 10
<210> 5 <211> 7 <212> PRT <213> Sequência Artificial <220> <223> Anticorpo humano mutado <400> 5
Ala Ala Ser Thr Leu Gin Sex 1 5
<210> 6 <211> 17 <212> PRT <213> Sequência Artificial <220> <223> Anticorpo humano mutado <400> 6
Ala He Thr Trn Asn Ser Gly His He Aso 7yr Ala Asp Ser Val Glu 1 5 ' 10 15
Gly
<210> 7 <211> 11 <212> PRT <213> Sequência Artificial <220> <223> Anticorpo humano mutado <400> 7
Arg Ala Ser Gin Gly lie Arg Asn 2yr Leu Ala 1 5 10
<210> 8 <211> 5 <212> PRT <213> Sequência Artificial <220> <223> Anticorpo humano mutado <400> 8
Asp Tyr Ala Met His 1 " 5
<210> 9 <211> 107 <212> PRT <213> Sequência Artificial <220> <223> Anticorpo humano mutado <400> 9
Asp lie Gin Met Tbr Gin Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser He Gly 15 10 15
Asp Arg Val Thr lie Thr Cys Arg Ala Ser Gin Gly lie Arg Asn Tyr 20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Prc Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu lie 35 40 45
Tyr Ala Ale 3er Thr Leu Gin Ser Gly val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr He Ser Ser Leu Gin Pro 65 70 75 80
Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gin Lys Tyr Asn Ser Ala Pro Tyr 85 90 95
Ala ?he Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105
<210> 10 <211> 121 <212> PRT <213> Sequência Artificial <220> <223> Anticorpo humano mutado <400> 10
Gin Val Gin Leu Vsl Glu Ser Gly Gly Gly Leu Vai Gin Pro Giy Arg 15 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cya Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asp Asp Tyr 20 25 30
Ala Met His Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Asp Trp Val 35 40 45
Ser Ala He Thr Trp Asn Ser Gly his lie Asp Tyr Ale Asp Eer Val 50 ’ 55 60
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Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 35 30 95
Thr Lys Ala Ser Tyr Leu Ser Thr Ser Ser Ser Leu Asp Asn Trp Gly 100 105 110
Gin Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120
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Gin Lys Tyr Asn Ser Ala Pro Tyr Ala 1 ' 5
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Ala Ser Tyr Leu Ser Thr Ser Phe Ser Leu Asp Tyr 15 10
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Val Ser Tyr Leu Ser Thr Ala Ser Ser Leu Asp Asn 15 10
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<210> 37 <211> 363 <212> ADN <213> Sequência Artificial <220> <223> Anticorpo humano mutado <400> 37 gagytgcagc tggLggagtc tgggggaggc ttggtacagc ccggcaggtc ccfcgagactc 60 tcctgcgcgg cctctggatt cacctttgat gattatgcca tgcactgggt ccggcaagct 120 ccagggaagg gcctggaatg ggtctcagct atcacttgga atagtggtca catagactat 180 gcggact^tg tggagggccg attcaccatc tccagagaca acgccaagaa ctccctgtat 240
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Lisboa, 2015-05-26

Claims (1)

  1. REIVINDICAÇÕES 1. Anticorpo anti-TNF humano isolado de elevada afinidade, neutralizante, para utilização em tratamento de psoriase de placas crónica moderada a grave num sujeito através da administração do anticorpo por via subcutânea ao sujeito a uma dose de 4 0 mg de duas em duas semanas, de modo a que a referida psoriase de placas crónica moderada a grave seja tratada, em que o anticorpo anti-TNF huménadalimumab. Lisboa, 2015-05-26
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Families Citing this family (187)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6090382A (en) * 1996-02-09 2000-07-18 Basf Aktiengesellschaft Human antibodies that bind human TNFα
ATE239041T1 (de) * 1996-02-09 2003-05-15 Basf Ag Humane antikörper welche an humanen tnfalpha binden
US7115557B2 (en) * 1998-09-25 2006-10-03 Sciaticon Ab Use of certain drugs for treating nerve root injury
US20050226845A1 (en) * 2004-03-10 2005-10-13 Chih-Ping Liu Method of treatment using interferon-tau
US7723303B2 (en) * 2000-08-24 2010-05-25 The Regents Of The University Of California Peptides and peptide mimetics to treat pathologies characterized by an inflammatory response
US8568766B2 (en) 2000-08-24 2013-10-29 Gattadahalli M. Anantharamaiah Peptides and peptide mimetics to treat pathologies associated with eye disease
US7148197B2 (en) * 2000-08-24 2006-12-12 The Regents Of The University Of California Orally administered small peptides synergize statin activity
US7199102B2 (en) 2000-08-24 2007-04-03 The Regents Of The University Of California Orally administered peptides synergize statin activity
CA2817619A1 (en) 2001-06-08 2002-12-08 Abbott Laboratories (Bermuda) Ltd. Methods of administering anti-tnf.alpha. antibodies
US20060241074A1 (en) * 2001-08-14 2006-10-26 The General Hospital Corporation Methods for treatment of pain
MY140561A (en) 2002-02-20 2009-12-31 Nycomed Gmbh Dosage form containing pde 4 inhibitor as active ingredient
US20040009172A1 (en) * 2002-04-26 2004-01-15 Steven Fischkoff Use of anti-TNFalpha antibodies and another drug
US9028822B2 (en) 2002-06-28 2015-05-12 Domantis Limited Antagonists against TNFR1 and methods of use therefor
US20090280065A1 (en) * 2006-04-10 2009-11-12 Willian Mary K Uses and Compositions for Treatment of Psoriasis
AR040603A1 (es) * 2002-07-19 2005-04-13 Abbott Lab S A El uso de un anticuerpo anti-tnfalfa neutralizador de alta afinidad en la fabricacion de un medicamento y conjunto de elementos
US20040033228A1 (en) 2002-08-16 2004-02-19 Hans-Juergen Krause Formulation of human antibodies for treating TNF-alpha associated disorders
US9415102B2 (en) 2002-09-06 2016-08-16 Alexion Pharmaceuticals, Inc. High concentration formulations of anti-C5 antibodies
US20050271660A1 (en) 2002-09-06 2005-12-08 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Nebulization of monoclonal antibodies for treating pulmonary diseases
MY150740A (en) * 2002-10-24 2014-02-28 Abbvie Biotechnology Ltd Low dose methods for treating disorders in which tnf? activity is detrimental
AU2003298015A1 (en) * 2002-12-05 2004-06-30 Pdl Biopharma, Inc. Methods of treatment of ulcerative colitis with anti-cd3 antibodies
DE10303974A1 (de) 2003-01-31 2004-08-05 Abbott Gmbh & Co. Kg Amyloid-β(1-42)-Oligomere, Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung
RS20050669A (en) 2003-03-10 2008-04-04 Altana Pharma Ag., Novel process for the preparation of roflumilast
CA2523267C (en) 2003-04-23 2013-09-03 Biovalve Technologies, Inc. Hydraulically actuated pump for long duration medicament administration
US20040229878A1 (en) * 2003-05-13 2004-11-18 Depuy Spine, Inc. Transdiscal administration of specific inhibitors of P38 kinase
US7553827B2 (en) * 2003-08-13 2009-06-30 Depuy Spine, Inc. Transdiscal administration of cycline compounds
US7429378B2 (en) * 2003-05-13 2008-09-30 Depuy Spine, Inc. Transdiscal administration of high affinity anti-MMP inhibitors
US8273347B2 (en) * 2003-05-13 2012-09-25 Depuy Spine, Inc. Autologous treatment of degenerated disc with cells
US7344716B2 (en) * 2003-05-13 2008-03-18 Depuy Spine, Inc. Transdiscal administration of specific inhibitors of pro-inflammatory cytokines
US8361467B2 (en) * 2003-07-30 2013-01-29 Depuy Spine, Inc. Trans-capsular administration of high specificity cytokine inhibitors into orthopedic joints
RU2353384C2 (ru) * 2003-08-04 2009-04-27 Бристол-Маерс Сквибб Компани Способ лечения сердечно-сосудистого заболевания с применением растворимого ctla4
US7396819B2 (en) * 2003-08-08 2008-07-08 Virbac Corporation Anthelmintic formulations
EP1684758A4 (en) * 2003-11-06 2009-02-18 Celgene Corp METHODS AND COMPOSITIONS USING THALIDOMIDE FOR THE TREATMENT AND MANAGEMENT OF CANCERS AND OTHER DISEASES
US8895540B2 (en) * 2003-11-26 2014-11-25 DePuy Synthes Products, LLC Local intraosseous administration of bone forming agents and anti-resorptive agents, and devices therefor
US7582612B2 (en) * 2004-03-12 2009-09-01 Hartz Mountain Corporation Multi-action anthelmintic formulations
TW201705980A (zh) 2004-04-09 2017-02-16 艾伯維生物技術有限責任公司 用於治療ＴＮＦα相關失調症之多重可變劑量療法
GB0414054D0 (en) 2004-06-23 2004-07-28 Owen Mumford Ltd Improvements relating to automatic injection devices
TWI307630B (en) * 2004-07-01 2009-03-21 Glaxo Group Ltd Immunoglobulins
US9089636B2 (en) 2004-07-02 2015-07-28 Valeritas, Inc. Methods and devices for delivering GLP-1 and uses thereof
US20060046961A1 (en) * 2004-09-02 2006-03-02 Mckay William F Controlled and directed local delivery of anti-inflammatory compositions
WO2006034056A2 (en) * 2004-09-16 2006-03-30 The Regents Of The University Of California G-type peptides and other agents to ameliorate atherosclerosis and other pathologies
DE102004046235A1 (de) * 2004-09-22 2006-03-30 Altana Pharma Ag Arzneimittelzubereitung
US20060083741A1 (en) * 2004-10-08 2006-04-20 Hoffman Rebecca S Treatment of respiratory syncytial virus (RSV) infection
BRPI0517148A (pt) 2004-12-06 2008-09-30 Univ California método de aperfeiçoamento da estrutura e/ou função arterìola; agente ativo e kit para tratamento
DK1861074T3 (da) * 2005-03-16 2013-07-29 Takeda Gmbh Smagsmaskeret doseringsform indeholdende roflumilast
US7431927B2 (en) 2005-03-24 2008-10-07 Epitomics, Inc. TNFα-neutralizing antibodies
AU2006230419A1 (en) * 2005-03-31 2006-10-05 Targeted Genetics Corporation Methods for lowering the level of tumor necrosis factor (TNF) in TNF-associated disorders
US20080293639A1 (en) * 2005-04-29 2008-11-27 The Regents Of The University Of California Peptides and peptide mimetics to treat pathologies characterized by an inflammatory response
EP2368561B1 (en) * 2005-04-29 2013-12-04 The Regents of The University of California Peptides and peptide mimetics to treat pathologies characterized by an inflammatory response
AU2012254978C1 (en) * 2005-05-16 2017-06-01 Abbvie Biotechnology Ltd Use of TNF inhibitor for treatment of erosive polyarthritis
CN102961746B (zh) 2005-05-16 2016-06-15 艾伯维生物技术有限公司 TNFα抑制剂治疗腐蚀性多关节炎的用途
US20060286142A1 (en) * 2005-06-03 2006-12-21 Biohesion, Inc. Gold surfaces coated with a thermostable chemically resistant polypeptide layer and applications thereof
CA2610839C (en) 2005-06-14 2019-06-25 Amgen Inc. Self-buffering protein formulations
US20070041905A1 (en) * 2005-08-19 2007-02-22 Hoffman Rebecca S Method of treating depression using a TNF-alpha antibody
TWI333959B (en) * 2005-08-31 2010-12-01 Academia Sinica Methods and reagents for the analysis and purification of polysaccharides
US7943134B2 (en) 2005-08-31 2011-05-17 Academia Sinica Compositions and methods for identifying response targets and treating flavivirus infection responses
RS53055B (en) * 2005-11-01 2014-04-30 Abbvie Biotechnology Ltd PROCEDURES FOR DETERMINING THE EFFICIENCY OF ADALIMUMAB IN RESPONDENTS WHO HAVE ANKILLOSATIVE SPONDILITIS USING CTX-II AND MMP3 AS BIOMARKERS
RU2432362C2 (ru) 2005-11-30 2011-10-27 Эбботт Лэборетриз Моноклональные антитела и их применения
PT2289909E (pt) 2005-11-30 2015-02-10 Abbvie Inc Método de rastreio, processo de purificação de globulómeros a-beta não difundíveis, anticorpos selectivos contra os referidos globulómeros a-beta não difundíveis e processo para o fabrico dos referidos anticorpos
US8795668B2 (en) * 2005-12-23 2014-08-05 The Regents Of The University Of Michigan Methods for treating pulmonary fibrosis
CN101460216B (zh) 2006-03-30 2013-06-19 瓦莱里塔斯公司 多筒式流体递送器械
NZ596517A (en) 2006-04-05 2013-06-28 Abbott Biotech Ltd Antibody purification
US20090317399A1 (en) * 2006-04-10 2009-12-24 Pollack Paul F Uses and compositions for treatment of CROHN'S disease
US20080118496A1 (en) * 2006-04-10 2008-05-22 Medich John R Uses and compositions for treatment of juvenile rheumatoid arthritis
EP2010214A4 (en) 2006-04-10 2010-06-16 Abbott Biotech Ltd USES AND COMPOSITIONS FOR THE TREATMENT OF RHEUMATOID ARTHRITIS
WO2008063213A2 (en) 2006-04-10 2008-05-29 Abbott Biotechnology Ltd. Uses and compositions for treatment of psoriatic arthritis
US9605064B2 (en) * 2006-04-10 2017-03-28 Abbvie Biotechnology Ltd Methods and compositions for treatment of skin disorders
WO2007120823A2 (en) * 2006-04-10 2007-10-25 Abbott Biotechnology Ltd. Uses and compositions for treatment of psoriasis
EP2012586A4 (en) * 2006-04-10 2010-08-18 Abbott Biotech Ltd USES AND COMPOSITIONS FOR THE TREATMENT OF ANKYLOSANTE SPONDYLARTHRITIS
US20080131374A1 (en) * 2006-04-19 2008-06-05 Medich John R Uses and compositions for treatment of rheumatoid arthritis
RU2449808C2 (ru) * 2006-04-21 2012-05-10 Сентокор, Инк. Антагонисты cxcl13 и их применение для лечения воспалительных заболеваний
US20080311043A1 (en) * 2006-06-08 2008-12-18 Hoffman Rebecca S Uses and compositions for treatment of psoriatic arthritis
US20100021451A1 (en) 2006-06-08 2010-01-28 Wong Robert L Uses and compositions for treatment of ankylosing spondylitis
BRPI0713802A2 (pt) * 2006-06-30 2012-11-06 Abbott Biotech Ltd dispositivo de injeção automático
EP2684895A1 (en) * 2006-10-27 2014-01-15 AbbVie Biotechnology Ltd Crystalline anti-hTNFalpha antibodies
US8455626B2 (en) 2006-11-30 2013-06-04 Abbott Laboratories Aβ conformer selective anti-aβ globulomer monoclonal antibodies
CN101200465B (zh) * 2006-12-11 2010-12-29 和记黄埔医药（上海）有限公司 一种十氢化萘类化合物及其医药用途
WO2008104386A2 (en) 2007-02-27 2008-09-04 Abbott Gmbh & Co. Kg Method for the treatment of amyloidoses
EP2142565A4 (en) 2007-03-29 2010-03-31 Abbott Lab CRYSTALLINE HUMAN ANTI-IL-12 ANTIBODIES
US20080254011A1 (en) * 2007-04-11 2008-10-16 Peter Rothschild Use of selected lactic acid bacteria for reducing atherosclerosis
WO2008141511A1 (fr) * 2007-05-22 2008-11-27 Human Antibodomics (Shanghai) Inc. ANTICORPS MONOCLONAL HUMAIN ANTI-TNFα ET SON UTILISATION
WO2008150491A2 (en) * 2007-05-31 2008-12-11 Abbott Laboratories BIOMARKERS PREDICTIVE OF THE RESPONSIVENESS TO TNFα INHIBITORS IN AUTOIMMUNE DISORDERS
US8999337B2 (en) 2007-06-11 2015-04-07 Abbvie Biotechnology Ltd. Methods for treating juvenile idiopathic arthritis by inhibition of TNFα
US20090110679A1 (en) * 2007-07-13 2009-04-30 Luk-Chiu Li Methods and compositions for pulmonary administration of a TNFa inhibitor
US7919250B2 (en) * 2007-07-31 2011-04-05 New York University Diagnostic and treatment methods for characterizing bacterial microbiota in skin conditions
SG183709A1 (en) 2007-08-08 2012-09-27 Abbott Lab Compositions and methods for crystallizing antibodies
EP2682400B1 (en) 2007-08-28 2017-09-20 Uab Research Foundation Synthetic apolipoprotein E mimicking polypeptides and methods of use
CA2697957A1 (en) 2007-08-28 2009-03-12 Uab Research Foundation Synthetic apolipoprotein e mimicking polypeptides and methods of use
US20090098136A1 (en) * 2007-10-15 2009-04-16 Alcon Research, Ltd. Use of tnf receptor antagonists for treating dry eye
US20090170770A1 (en) * 2007-11-06 2009-07-02 Ali Hafezi-Moghadam Methods and compositions for treating conditions associated with angiogenesis using a vascular adhesion protein-1 (vap 1) inhibitor
US8883146B2 (en) 2007-11-30 2014-11-11 Abbvie Inc. Protein formulations and methods of making same
CA2904458C (en) 2007-11-30 2017-07-25 Wolfgang Fraunhofer Protein formulations and methods of making same
US8986696B2 (en) * 2007-12-21 2015-03-24 Depuy Mitek, Inc. Trans-capsular administration of p38 map kinase inhibitors into orthopedic joints
US20090162351A1 (en) * 2007-12-21 2009-06-25 Depuy Spine, Inc. Transdiscal administration of inhibitors of p38 MAP kinase
CA2710333A1 (en) * 2008-01-03 2009-07-09 Abbott Biotechnology Ltd. Predicting long-term efficacy of a compound in the treatment of psoriasis
EP2249809A1 (en) 2008-01-15 2010-11-17 Abbott GmbH & Co. KG Powdered protein compositions and methods of making same
US9365644B2 (en) * 2008-04-23 2016-06-14 Epitomics, Inc. Anti-TNFα antibody
CN102257006A (zh) * 2008-10-20 2011-11-23 雅培制药有限公司 使用a蛋白亲和层析分离和纯化抗体
US8722860B2 (en) * 2009-04-16 2014-05-13 Abbvie Biotherapeutics Inc. Anti-TNF-α antibodies and their uses
RU2524487C2 (ru) 2009-04-29 2014-07-27 Эббви Байотекнолоджи Лтд Автоматическое инъекционное устройство
MX2011011772A (es) * 2009-05-04 2012-02-08 Abbott Biotech Ltd Formulaicones estables de anticuerpos humanos anti-tnf-alfa con alta concentracion de proteina.
AU2010331936B2 (en) 2009-12-15 2014-08-28 Abbvie Biotechnology Ltd Improved firing button for automatic injection device
WO2011084714A2 (en) * 2009-12-17 2011-07-14 Biogen Idec Ma Inc. STABILIZED ANTI-TNF-ALPHA scFv MOLECULES OR ANTI-TWEAK scFv MOLECULES AND USES THEREOF
ES2684475T3 (es) 2010-04-15 2018-10-03 Abbvie Inc. Proteínas que se unen a beta amiloide
KR20130092418A (ko) 2010-04-21 2013-08-20 애브비 바이오테크놀로지 리미티드 치료제의 제어된 전달을 위한 착용형 자동 주사 디바이스
CA2801917C (en) 2010-06-03 2017-04-25 Abbvie Biotechnology Ltd Uses and compositions for treatment of hidradenitis suppurativa (hs)
CA2808187A1 (en) 2010-08-14 2012-02-23 Abbvie Inc. Amyloid-beta binding proteins
RU2639386C2 (ru) 2010-11-11 2017-12-21 Эббви Байотекнолоджи Лтд. УЛУЧШЕННЫЕ ВЫСОКОКОНЦЕТРИРОВАННЫЕ ЖИДКИЕ ПРЕПАРАТЫ АНТИТЕЛ ПРОТИВ TNF-альфа
CN103533975B (zh) 2011-01-24 2017-03-22 艾伯维生物技术有限公司 具有模制抓握面的自动注射装置
US9387195B2 (en) 2011-03-07 2016-07-12 Celgene Corporation Methods for treating diseases using isoindoline compounds
ES2711670T3 (es) * 2011-04-12 2019-05-06 Moerae Matrix Inc Composiciones y métodos para la prevención o tratamiento de la fibrosis pulmonar
US9890200B2 (en) 2011-04-12 2018-02-13 Moerae Matrix, Inc. Compositions and methods for preventing or treating diseases, conditions, or processes characterized by aberrant fibroblast proliferation and extracellular matrix deposition
EP2702077A2 (en) 2011-04-27 2014-03-05 AbbVie Inc. Methods for controlling the galactosylation profile of recombinantly-expressed proteins
AU2012311908A1 (en) * 2011-09-23 2014-03-27 Westfalische Wilhelms-Universitaet Muenster Yersinia outer protein m (YopM) in the treatment of psoriasis
US9067990B2 (en) 2013-03-14 2015-06-30 Abbvie, Inc. Protein purification using displacement chromatography
US9150645B2 (en) 2012-04-20 2015-10-06 Abbvie, Inc. Cell culture methods to reduce acidic species
WO2013158273A1 (en) 2012-04-20 2013-10-24 Abbvie Inc. Methods to modulate c-terminal lysine variant distribution
US9249182B2 (en) 2012-05-24 2016-02-02 Abbvie, Inc. Purification of antibodies using hydrophobic interaction chromatography
KR101514238B1 (ko) 2012-06-21 2015-04-28 한올바이오파마주식회사 변형된 인간 종양 괴사 인자 수용체-1 폴리펩티드의 신규 용도
SG11201504249XA (en) 2012-09-02 2015-07-30 Abbvie Inc Methods to control protein heterogeneity
US9512214B2 (en) 2012-09-02 2016-12-06 Abbvie, Inc. Methods to control protein heterogeneity
PE20151434A1 (es) * 2012-10-22 2015-10-16 Stealth Peptides Int Inc Metodos para la reduccion de los riesgos asociados con el insuficiencia cardiaca y factores asociados con el mismo
US20140255403A1 (en) * 2013-03-06 2014-09-11 Hadasit Medical Research Services & Development Ltd. Oral composition comprising a tnf antagonist and use thereof
WO2014143205A1 (en) 2013-03-12 2014-09-18 Abbvie Inc. Human antibodies that bind human tnf-alpha and methods of preparing the same
US9017687B1 (en) 2013-10-18 2015-04-28 Abbvie, Inc. Low acidic species compositions and methods for producing and using the same using displacement chromatography
US8921526B2 (en) 2013-03-14 2014-12-30 Abbvie, Inc. Mutated anti-TNFα antibodies and methods of their use
WO2014151878A2 (en) 2013-03-14 2014-09-25 Abbvie Inc. Methods for modulating protein glycosylation profiles of recombinant protein therapeutics using monosaccharides and oligosacharides
MX2015012778A (es) 2013-03-15 2016-01-20 Intermune Inc Marcadores proteomicos de fibrosis pulmonar idiopatica (fpi).
TWI516272B (zh) * 2013-06-05 2016-01-11 財團法人工業技術研究院 應用於生髮之方法及醫藥組成物
CN104341502B (zh) 2013-08-09 2016-04-27 北京天成新脉生物技术有限公司 低免疫原性抗TNF-α全人源单抗及其应用
PL226431B1 (pl) 2013-08-23 2017-07-31 Inst Biochemii I Biofizyki Polskiej Akademii Nauk Cząsteczka miRNA do zastosowania do wytwarzania leku do zmniejszania reakcji zapalnej lub zapobiegania zwiększaniu się reakcji zapalnej organizmu
US9598667B2 (en) 2013-10-04 2017-03-21 Abbvie Inc. Use of metal ions for modulation of protein glycosylation profiles of recombinant proteins
AU2014337263B2 (en) 2013-10-16 2019-12-12 Outlook Therapeutics, Inc. Buffer formulations for enhanced antibody stability
US8946395B1 (en) 2013-10-18 2015-02-03 Abbvie Inc. Purification of proteins using hydrophobic interaction chromatography
US9085618B2 (en) 2013-10-18 2015-07-21 Abbvie, Inc. Low acidic species compositions and methods for producing and using the same
US9181337B2 (en) 2013-10-18 2015-11-10 Abbvie, Inc. Modulated lysine variant species compositions and methods for producing and using the same
WO2015073884A2 (en) 2013-11-15 2015-05-21 Abbvie, Inc. Glycoengineered binding protein compositions
CN103961694A (zh) * 2014-04-18 2014-08-06 陶惠人 基于p-硝基苯丙氨酸插入法构建的骨质疏松疫苗
US10351621B2 (en) 2014-06-24 2019-07-16 Immunomedics, Inc. Anti-histone therapy in acute kidney injury
CA2953567C (en) 2014-06-24 2023-09-05 Immunomedics, Inc. Anti-histone therapy for vascular necrosis in severe glomerulonephritis
US9764122B2 (en) 2014-07-25 2017-09-19 Warsaw Orthopedic, Inc. Drug delivery device and methods having an occluding member
US9775978B2 (en) 2014-07-25 2017-10-03 Warsaw Orthopedic, Inc. Drug delivery device and methods having a retaining member
IL250302B (en) 2014-07-31 2022-07-01 Uab Research Foundation Apoe mimetic peptides with high potency to clear plasma cholesterol
KR20170075793A (ko) * 2014-11-05 2017-07-03 제넨테크, 인크. 박테리아 내 2쇄 단백질을 생산하는 방법
MX2017005925A (es) 2014-11-05 2017-11-08 Genentech Inc Metodos de producción de proteínas de cadena doble en bacterias.
JP6706617B2 (ja) 2014-11-06 2020-06-10 スカラー ロック インコーポレイテッドＳｃｈｏｌａｒ Ｒｏｃｋ，Ｉｎｃ． 抗プロ／潜在型−ミオスタチン抗体およびその使用
WO2016089706A1 (en) * 2014-12-01 2016-06-09 Truinject Medical Corp. Injection training tool emitting omnidirectional light
EP3247718B1 (en) 2015-01-21 2021-09-01 Outlook Therapeutics, Inc. Modulation of charge variants in a monoclonal antibody composition
EP3679798B1 (en) 2015-02-03 2021-11-17 Mayo Foundation for Medical Education and Research Methods and materials for assessing and treating arthritis
DK4089113T3 (da) 2015-03-31 2024-02-05 Sorriso Pharmaceuticals Inc Polypeptider
EP3078675A1 (en) 2015-04-10 2016-10-12 Ares Trading S.A. Induction dosing regimen for the treatment of tnf alpha mediated disorders
WO2016201409A1 (en) * 2015-06-12 2016-12-15 Georgia State University Research Foundation Compositions and methods for treating opioid tolerance
CN105175529A (zh) * 2015-07-16 2015-12-23 中国科学院海洋研究所 一种鱼类肿瘤坏死因子家族蛋白的重组蛋白及其应用
JP2018527903A (ja) * 2015-07-22 2018-09-27 スカラー ロック インコーポレイテッドＳｃｈｏｌａｒ Ｒｏｃｋ，Ｉｎｃ． Ｇｄｆ１１結合タンパク質およびその使用
EP3922645A1 (en) 2015-09-15 2021-12-15 Scholar Rock, Inc. Anti-pro/latent-myostatin antibodies and uses thereof
US10076650B2 (en) 2015-11-23 2018-09-18 Warsaw Orthopedic, Inc. Enhanced stylet for drug depot injector
AU2017206069A1 (en) 2016-01-08 2018-07-19 Scholar Rock, Inc. Anti-pro/latent myostatin antibodies and methods of use thereof
JP7084308B2 (ja) 2016-02-03 2022-06-14 アウトルック セラピューティクス，インコーポレイティド 抗体安定性を増大させるための緩衝液製剤
US10465003B2 (en) * 2016-02-05 2019-11-05 Janssen Biotech, Inc. Anti-TNF antibodies, compositions, methods and use for the treatment or prevention of type 1 diabetes
KR20230028813A (ko) 2016-06-13 2023-03-02 스칼러 락, 인크. 미오스타틴 억제제의 용도 및 조합 요법
US10549081B2 (en) 2016-06-23 2020-02-04 Warsaw Orthopedic, Inc. Drug delivery device and methods having a retaining member
WO2018045258A1 (en) * 2016-09-02 2018-03-08 The University Of Chicago TREATMENT OF TNF-alpha CYTOTOXICITY
US20190202907A1 (en) * 2016-09-02 2019-07-04 180 Therapeutics Lp Method of treating systemic fibrotic disorders using an il-33/tnf bispecific antibody
WO2018060453A1 (en) 2016-09-30 2018-04-05 Vhsquared Limited Compositions
US20180110856A1 (en) 2016-10-21 2018-04-26 Amgen Inc. Pharmaceutical Formulations and Methods of Making the Same
US10434261B2 (en) 2016-11-08 2019-10-08 Warsaw Orthopedic, Inc. Drug pellet delivery system and method
EP4410832A2 (en) 2016-12-14 2024-08-07 Biora Therapeutics, Inc. Treatment of a disease of the gastrointestinal tract with a tnf inhibitor
JP7198757B2 (ja) 2017-01-06 2023-01-04 スカラー ロック インコーポレイテッド ミオスタチン活性化の阻害により代謝疾患を処置するための方法
KR101946884B1 (ko) * 2017-04-25 2019-02-13 고려대학교 산학협력단 대사체 분석을 이용한 베체트병의 진단방법
WO2018195764A1 (zh) * 2017-04-25 2018-11-01 群康生技股份有限公司 注射笔
WO2018226991A1 (en) 2017-06-07 2018-12-13 Shifamed Holdings, Llc Intravascular fluid movement devices, systems, and methods of use
KR20190024572A (ko) * 2017-08-30 2019-03-08 (주)셀트리온 TNFα 관련 질환을 치료하기 위한 피하 투여 요법
CN107362351B (zh) * 2017-09-04 2020-11-10 上海市儿童医院 Il-36r的拮抗剂在制备镇痛药物中的应用
CN111556763B (zh) 2017-11-13 2023-09-01 施菲姆德控股有限责任公司 血管内流体运动装置、系统
WO2019152875A1 (en) 2018-02-01 2019-08-08 Shifamed Holdings, Llc Intravascular blood pumps and methods of use and manufacture
CN108588040B (zh) * 2018-06-08 2021-06-15 中国医学科学院病原生物学研究所 重组MtMetRS、其晶体及它们在制备抗结核药物中的应用
JP2021530553A (ja) * 2018-07-25 2021-11-11 ラッシュ ユニバーシティ メディカル センターRush University Medical Center 標的サイトカイン枯渇による腎臓病の再発の抑制
CN113164105A (zh) 2018-10-26 2021-07-23 美国雅培糖尿病护理公司 用于生理参数分析的方法、设备和系统
CN109998488B (zh) * 2019-04-13 2022-08-02 中国医学科学院北京协和医院 克罗恩病和肠道溃疡型淋巴瘤的鉴别模型及构建方法
EP3983067A4 (en) * 2019-06-17 2023-06-14 Mayo Foundation for Medical Education and Research PREVOTELLA PREPARATIONS AND THE TREATMENT OF CHRONIC OBSTRUCTIVE BRONCHOPNEUMOPATHY (COPD) AND OTHER LUNG CONDITIONS
WO2020254827A1 (en) 2019-06-21 2020-12-24 Vhsquared Limited Polypeptides
EP3986931A1 (en) 2019-06-21 2022-04-27 Sorriso Pharmaceuticals, Inc. Polypeptides
US11964145B2 (en) 2019-07-12 2024-04-23 Shifamed Holdings, Llc Intravascular blood pumps and methods of manufacture and use
WO2021016372A1 (en) 2019-07-22 2021-01-28 Shifamed Holdings, Llc Intravascular blood pumps with struts and methods of use and manufacture
AU2020339737A1 (en) * 2019-08-30 2022-03-17 Vestlandets Innovasjonsselskap As Method for the treatment of chronic fatigue syndrome using an inhibitory or cytotoxic agent against plasma cells
WO2021062265A1 (en) 2019-09-25 2021-04-01 Shifamed Holdings, Llc Intravascular blood pump systems and methods of use and control thereof
CN114828891A (zh) * 2019-10-18 2022-07-29 比奥兹普科德公司 以异常干细胞为靶标的糖尿病治疗
TWI807338B (zh) * 2020-06-26 2023-07-01 美商美國禮來大藥廠 結合ＴＧＦ-α及表皮調節素（ＥＰＩＲＥＧＵＬＩＮ）之抗體於治療疼痛之用途

Family Cites Families (105)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6448A (en) 1849-05-15 Improvement in cut-offs and steam-stops of rotary engines
US5179017A (en) 1980-02-25 1993-01-12 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials
US4399216A (en) 1980-02-25 1983-08-16 The Trustees Of Columbia University Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials
US4634665A (en) 1980-02-25 1987-01-06 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials
US4510245A (en) 1982-11-18 1985-04-09 Chiron Corporation Adenovirus promoter system
GB8308235D0 (en) 1983-03-25 1983-05-05 Celltech Ltd Polypeptides
DE3572982D1 (en) 1984-03-06 1989-10-19 Takeda Chemical Industries Ltd Chemically modified lymphokine and production thereof
US5672347A (en) * 1984-07-05 1997-09-30 Genentech, Inc. Tumor necrosis factor antagonists and their use
US5168062A (en) 1985-01-30 1992-12-01 University Of Iowa Research Foundation Transfer vectors and microorganisms containing human cytomegalovirus immediate-early promoter-regulatory DNA sequence
US4968615A (en) 1985-12-18 1990-11-06 Ciba-Geigy Corporation Deoxyribonucleic acid segment from a virus
DE3631229A1 (de) 1986-09-13 1988-03-24 Basf Ag Monoklonale antikoerper gegen humanen tumornekrosefaktor (tnf) und deren verwendung
US5223409A (en) 1988-09-02 1993-06-29 Protein Engineering Corp. Directed evolution of novel binding proteins
ATE135370T1 (de) 1988-12-22 1996-03-15 Kirin Amgen Inc Chemisch modifizierte granulocytenkolonie erregender faktor
US5959087A (en) * 1989-08-07 1999-09-28 Peptide Technology, Ltd. Tumour necrosis factor binding ligands
US6451983B2 (en) * 1989-08-07 2002-09-17 Peptech Limited Tumor necrosis factor antibodies
FR2651130B1 (fr) * 1989-08-23 1991-12-13 Roussel Uclaf Sequence d'oligonucleotides anti-sens, anti-arn message du tnf alpha, procede de preparation, application a titre de medicaments et compositions pharmaceutiques.
AU630497B2 (en) 1989-09-05 1992-10-29 Immunex Corporation Tumor necrosis factor-alpha and -beta receptors
US5859205A (en) * 1989-12-21 1999-01-12 Celltech Limited Humanised antibodies
GB8928874D0 (en) * 1989-12-21 1990-02-28 Celltech Ltd Humanised antibodies
US20020099179A1 (en) * 1989-12-21 2002-07-25 Linda K. Jolliffe Cdr-grafted antibodies
US5427908A (en) 1990-05-01 1995-06-27 Affymax Technologies N.V. Recombinant library screening methods
GB9014932D0 (en) * 1990-07-05 1990-08-22 Celltech Ltd Recombinant dna product and method
EP0585287B1 (en) 1990-07-10 1999-10-13 Cambridge Antibody Technology Limited Methods for producing members of specific binding pairs
GB9015198D0 (en) 1990-07-10 1990-08-29 Brien Caroline J O Binding substance
DE69129154T2 (de) 1990-12-03 1998-08-20 Genentech, Inc., South San Francisco, Calif. Verfahren zur anreicherung von proteinvarianten mit geänderten bindungseigenschaften
US5994510A (en) * 1990-12-21 1999-11-30 Celltech Therapeutics Limited Recombinant antibodies specific for TNFα
WO1992015677A1 (en) 1991-03-01 1992-09-17 Protein Engineering Corporation Process for the development of binding mini-proteins
US20040120952A1 (en) * 2000-08-07 2004-06-24 Centocor, Inc Anti-TNF antibodies and peptides of human tumor necrosis factor
US6277969B1 (en) * 1991-03-18 2001-08-21 New York University Anti-TNF antibodies and peptides of human tumor necrosis factor
US20070298040A1 (en) * 1991-03-18 2007-12-27 Centocor, Inc. Methods of treating seronegative arthropathy with anti-TNF antibodies
US5656272A (en) * 1991-03-18 1997-08-12 New York University Medical Center Methods of treating TNF-α-mediated Crohn's disease using chimeric anti-TNF antibodies
US20060246073A1 (en) * 1991-03-18 2006-11-02 Knight David M Anti-TNF antibodies and peptides of human tumor necrosis factor
US7192584B2 (en) * 1991-03-18 2007-03-20 Centocor, Inc. Methods of treating psoriasis with anti-TNF antibodies
DK1097945T3 (da) * 1991-03-18 2007-11-05 Univ New York Monoklonale og kimære antistoffer, der er specifikke for human tumornekrosefaktor
ES2223040T3 (es) 1991-04-10 2005-02-16 The Scripps Research Institute Bibliotecas de receptor heterodimerilo que usan fagemidos.
DE4122599C2 (de) 1991-07-08 1993-11-11 Deutsches Krebsforsch Phagemid zum Screenen von Antikörpern
MX9301942A (es) 1992-04-02 1994-08-31 Smithkline Beecham Corp Derivados de ciclohexan-ilideno novedosos.
EP0620739A4 (en) 1992-09-15 1997-01-15 Immunex Corp Method of treating tnf-dependent inflammation using tumor necrosis factor antagonists.
US6270766B1 (en) * 1992-10-08 2001-08-07 The Kennedy Institute Of Rheumatology Anti-TNF antibodies and methotrexate in the treatment of arthritis and crohn's disease
DE122009000074I1 (de) * 1993-03-05 2011-12-01 Bayer Healthcare Ag Humane monoklonale anti-TNF alpha Antikorper.
NZ278607A (en) * 1994-02-07 1999-05-28 Knoll Ag Use of tnf antagonists for treating disorders involving elevated serum levels of il-6 wherein the serum levels are 500pg/ml or above
US6090382A (en) * 1996-02-09 2000-07-18 Basf Aktiengesellschaft Human antibodies that bind human TNFα
CN1213428A (zh) * 1996-02-08 1999-04-07 沃威克·安德鲁·麦坚石 可锁定的联接件
ATE239041T1 (de) * 1996-02-09 2003-05-15 Basf Ag Humane antikörper welche an humanen tnfalpha binden
ES2168581T3 (es) * 1996-06-27 2002-06-16 Pfizer Derivados de indazol sustituidos.
WO1998022460A1 (en) * 1996-11-15 1998-05-28 Darwin Discovery Limited Bicyclic aryl carboxamides and their therapeutic use
CA2290021A1 (en) * 1997-05-12 1998-11-19 The Kennedy Institute Of Rheumatology Suppression of tumor necrosis factor alpha and vascular endothelial growth factor in therapy
JPH11127882A (ja) * 1997-10-27 1999-05-18 Nippon Kayaku Co Ltd 新規生理活性物質ｎｋ３０４２４ａ，ｎｋ３０４２４ｂ，それらの製造法およびそれらの用途
US6379666B1 (en) * 1999-02-24 2002-04-30 Edward L. Tobinick TNF inhibitors for the treatment of neurological, retinal and muscular disorders
US6177077B1 (en) * 1999-02-24 2001-01-23 Edward L. Tobinick TNT inhibitors for the treatment of neurological disorders
US6419944B2 (en) * 1999-02-24 2002-07-16 Edward L. Tobinick Cytokine antagonists for the treatment of localized disorders
US6537549B2 (en) * 1999-02-24 2003-03-25 Edward L. Tobinick Cytokine antagonists for the treatment of localized disorders
US6423321B2 (en) * 1999-02-24 2002-07-23 Edward L. Tobinick Cytokine antagonists for the treatment of sensorineural hearing loss
DK1041072T3 (da) * 1999-03-31 2003-11-10 Pfizer Prod Inc Dioxocyclopentylhydroxamsyrer
US20010021380A1 (en) * 1999-04-19 2001-09-13 Pluenneke John D. Soluble tumor necrosis factor receptor treatment of medical disorders
US6833268B1 (en) * 1999-06-10 2004-12-21 Abgenix, Inc. Transgenic animals for producing specific isotypes of human antibodies via non-cognate switch regions
AU3082401A (en) * 1999-11-24 2001-06-04 Centocor Inc. Therapy of psoriasis
JP4812921B2 (ja) * 2000-04-14 2011-11-09 田辺三菱製薬株式会社 ベーチェット病治療剤
GB0013810D0 (en) * 2000-06-06 2000-07-26 Celltech Chiroscience Ltd Biological products
US20050249735A1 (en) * 2000-08-07 2005-11-10 Centocor, Inc. Methods of treating ankylosing spondylitis using anti-TNF antibodies and peptides of human tumor necrosis factor
UA81743C2 (uk) * 2000-08-07 2008-02-11 Центокор, Инк. МОНОКЛОНАЛЬНЕ АНТИТІЛО ЛЮДИНИ, ЩО СПЕЦИФІЧНО ЗВ'ЯЗУЄТЬСЯ З ФАКТОРОМ НЕКРОЗУ ПУХЛИН АЛЬФА (ФНПα), ФАРМАЦЕВТИЧНА КОМПОЗИЦІЯ, ЩО ЙОГО МІСТИТЬ, ТА СПОСІБ ЛІКУВАННЯ РЕВМАТОЇДНОГО АРТРИТУ
US20060018907A1 (en) * 2000-08-07 2006-01-26 Centocor, Inc. Anti-TNF antibodies and peptides of human tumor necrosis factor
KR20100031769A (ko) * 2000-12-28 2010-03-24 알투스 파마슈티컬스 인코포레이티드 전항체 및 이의 단편의 결정과 이의 제조 및 사용 방법
WO2002096461A1 (en) * 2001-05-25 2002-12-05 Abbott Gmbh & Co. Kg Use of anti-tnf antibodies as drugs in treating septic disorders of anemic patients
CA2817619A1 (en) * 2001-06-08 2002-12-08 Abbott Laboratories (Bermuda) Ltd. Methods of administering anti-tnf.alpha. antibodies
US20030161828A1 (en) * 2002-02-19 2003-08-28 Abbott Gmbh & Co. Kg Use of TNF antagonists as drugs for the treatment of patients with an inflammatory reaction and without suffering from total organ failure
US20030206898A1 (en) * 2002-04-26 2003-11-06 Steven Fischkoff Use of anti-TNFalpha antibodies and another drug
US20040009172A1 (en) * 2002-04-26 2004-01-15 Steven Fischkoff Use of anti-TNFalpha antibodies and another drug
AR040603A1 (es) * 2002-07-19 2005-04-13 Abbott Lab S A El uso de un anticuerpo anti-tnfalfa neutralizador de alta afinidad en la fabricacion de un medicamento y conjunto de elementos
US20090280065A1 (en) * 2006-04-10 2009-11-12 Willian Mary K Uses and Compositions for Treatment of Psoriasis
US20040033228A1 (en) * 2002-08-16 2004-02-19 Hans-Juergen Krause Formulation of human antibodies for treating TNF-alpha associated disorders
MY150740A (en) * 2002-10-24 2014-02-28 Abbvie Biotechnology Ltd Low dose methods for treating disorders in which tnf? activity is detrimental
PL217296B1 (pl) * 2002-11-15 2014-07-31 Genmab As Wyizolowane ludzkie przeciwciało monoklonalne, wytwarzająca je hybrydoma, kodujący to przeciwciało wektor ekspresyjny i zawierająca je kompozycja farmaceutyczna, immunokoniugat, bispecyficzna lub multispecyficzna cząsteczka obejmująca kwasy nukleinowe kodujące ciężki i lekki łańcuch transfektoma, ich zastosowania, zwłaszcza w medycynie, obejmująca te kwasy ex vivo eukariotyczna lub prokariotyczna komórka gospodarza oraz nie będące człowiekiem zwierzę transgeniczne lub roślina, sposób in vitro hamowania wzrostu i/lub proliferacji komórek wyrażających CD25 lub eliminowania komórek wyrażających CD25, sposób wykrywania w próbce obecności antygenu CD25 lub komórki wyrażającej CD25, zestaw diagnostyczny do wykrywania w próbce obecności antygenu CD25 lub komórki wyrażającej CD25
US7101978B2 (en) * 2003-01-08 2006-09-05 Applied Molecular Evolution TNF-α binding molecules
US20040193466A1 (en) * 2003-03-27 2004-09-30 Irena Kull Method and process for managing a yard
TW201705980A (zh) * 2004-04-09 2017-02-16 艾伯維生物技術有限責任公司 用於治療ＴＮＦα相關失調症之多重可變劑量療法
US20060083741A1 (en) * 2004-10-08 2006-04-20 Hoffman Rebecca S Treatment of respiratory syncytial virus (RSV) infection
CN102961746B (zh) * 2005-05-16 2016-06-15 艾伯维生物技术有限公司 TNFα抑制剂治疗腐蚀性多关节炎的用途
US20070041905A1 (en) * 2005-08-19 2007-02-22 Hoffman Rebecca S Method of treating depression using a TNF-alpha antibody
RS53055B (en) * 2005-11-01 2014-04-30 Abbvie Biotechnology Ltd PROCEDURES FOR DETERMINING THE EFFICIENCY OF ADALIMUMAB IN RESPONDENTS WHO HAVE ANKILLOSATIVE SPONDILITIS USING CTX-II AND MMP3 AS BIOMARKERS
NZ596517A (en) * 2006-04-05 2013-06-28 Abbott Biotech Ltd Antibody purification
EP2010214A4 (en) * 2006-04-10 2010-06-16 Abbott Biotech Ltd USES AND COMPOSITIONS FOR THE TREATMENT OF RHEUMATOID ARTHRITIS
US20080118496A1 (en) * 2006-04-10 2008-05-22 Medich John R Uses and compositions for treatment of juvenile rheumatoid arthritis
US20090317399A1 (en) * 2006-04-10 2009-12-24 Pollack Paul F Uses and compositions for treatment of CROHN'S disease
WO2008063213A2 (en) * 2006-04-10 2008-05-29 Abbott Biotechnology Ltd. Uses and compositions for treatment of psoriatic arthritis
EP2012586A4 (en) * 2006-04-10 2010-08-18 Abbott Biotech Ltd USES AND COMPOSITIONS FOR THE TREATMENT OF ANKYLOSANTE SPONDYLARTHRITIS
US20080131374A1 (en) * 2006-04-19 2008-06-05 Medich John R Uses and compositions for treatment of rheumatoid arthritis
US20100021451A1 (en) * 2006-06-08 2010-01-28 Wong Robert L Uses and compositions for treatment of ankylosing spondylitis
US20080311043A1 (en) * 2006-06-08 2008-12-18 Hoffman Rebecca S Uses and compositions for treatment of psoriatic arthritis
BRPI0713802A2 (pt) * 2006-06-30 2012-11-06 Abbott Biotech Ltd dispositivo de injeção automático
TWI456062B (zh) * 2006-09-13 2014-10-11 Abbvie Inc 細胞培養改良
EP2684895A1 (en) * 2006-10-27 2014-01-15 AbbVie Biotechnology Ltd Crystalline anti-hTNFalpha antibodies
WO2008150491A2 (en) * 2007-05-31 2008-12-11 Abbott Laboratories BIOMARKERS PREDICTIVE OF THE RESPONSIVENESS TO TNFα INHIBITORS IN AUTOIMMUNE DISORDERS
WO2008150490A2 (en) * 2007-06-01 2008-12-11 Abbott Biotechnology Ltd. Uses and compositions for treatment of psoriasis and crohn's disease
US8999337B2 (en) * 2007-06-11 2015-04-07 Abbvie Biotechnology Ltd. Methods for treating juvenile idiopathic arthritis by inhibition of TNFα
US20090110679A1 (en) * 2007-07-13 2009-04-30 Luk-Chiu Li Methods and compositions for pulmonary administration of a TNFa inhibitor
SG183709A1 (en) * 2007-08-08 2012-09-27 Abbott Lab Compositions and methods for crystallizing antibodies
CA2904458C (en) * 2007-11-30 2017-07-25 Wolfgang Fraunhofer Protein formulations and methods of making same
CA2710333A1 (en) * 2008-01-03 2009-07-09 Abbott Biotechnology Ltd. Predicting long-term efficacy of a compound in the treatment of psoriasis
BRPI0906490A2 (pt) * 2008-01-15 2015-07-14 Abbott Lab Vetores de expressão de mamífero melhorados e uso dos mesmos
EP2249809A1 (en) * 2008-01-15 2010-11-17 Abbott GmbH & Co. KG Powdered protein compositions and methods of making same
CA2717905A1 (en) * 2008-03-24 2009-10-01 Abbott Biotechnology Ltd. Methods and compositions for treating bone loss
US8550074B2 (en) * 2009-01-15 2013-10-08 Manta Devices, Llc Delivery device and related methods
RU2524487C2 (ru) * 2009-04-29 2014-07-27 Эббви Байотекнолоджи Лтд Автоматическое инъекционное устройство
MX2011011772A (es) * 2009-05-04 2012-02-08 Abbott Biotech Ltd Formulaicones estables de anticuerpos humanos anti-tnf-alfa con alta concentracion de proteina.

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KR20050042466A (ko) 2005-05-09
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MXPA05000815A (es) 2005-04-28
PL401886A1 (pl) 2013-05-27
PL374865A1 (en) 2005-11-14
IL166280A (en) 2012-08-30
US20040126372A1 (en) 2004-07-01
AU2003267999B2 (en) 2010-03-11

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