JPH11127882A - 新規生理活性物質ｎｋ３０４２４ａ，ｎｋ３０４２４ｂ，それらの製造法およびそれらの用途 - Google Patents
新規生理活性物質ｎｋ３０４２４ａ，ｎｋ３０４２４ｂ，それらの製造法およびそれらの用途Info
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- JPH11127882A JPH11127882A JP30950597A JP30950597A JPH11127882A JP H11127882 A JPH11127882 A JP H11127882A JP 30950597 A JP30950597 A JP 30950597A JP 30950597 A JP30950597 A JP 30950597A JP H11127882 A JPH11127882 A JP H11127882A
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Abstract
(57)【要約】
【目的】ＴＮＦα産生抑制作用を有する新規生理活性物
質ＮＫ３０４２４ＡおよびＮＫ３０４２４Ｂを提供す
る。さらに、該化合物あるいはそれらの薬学的に許容し
得る塩および医薬用添加剤とからなる医薬品を提供す
る。 【構成】生理活性物質ＮＫ３０４２４ＡおよびＮＫ３０
４２４Ｂは、ストレプトミセス属に属し該化合物の生産
能を有する微生物、例えばストレプトミセス・エスピー
ＮＡ ３０４２４株（工業技術院生命工学工業技術研究
所にＦＥＲＭ Ｐ−１６４２２として寄託）の培養によ
って得られる。両化合物の分子式はＣ３０Ｈ４６Ｎ２Ｏ
１０Ｓで、分子量は６２６である。
質ＮＫ３０４２４ＡおよびＮＫ３０４２４Ｂを提供す
る。さらに、該化合物あるいはそれらの薬学的に許容し
得る塩および医薬用添加剤とからなる医薬品を提供す
る。 【構成】生理活性物質ＮＫ３０４２４ＡおよびＮＫ３０
４２４Ｂは、ストレプトミセス属に属し該化合物の生産
能を有する微生物、例えばストレプトミセス・エスピー
ＮＡ ３０４２４株（工業技術院生命工学工業技術研究
所にＦＥＲＭ Ｐ−１６４２２として寄託）の培養によ
って得られる。両化合物の分子式はＣ３０Ｈ４６Ｎ２Ｏ
１０Ｓで、分子量は６２６である。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、新規生理活性物質
ＮＫ３０４２４ＡあるいはＮＫ３０４２４Ｂ、それらの
製造法およびそれらの用途に関する。本発明の化合物
は、ＴＮＦα産生抑制作用を示し、慢性関節リウマチ、
川崎病、クローン病、ベーチェット病、気管支喘息、癌
悪液質、敗血症、腎炎、肝炎、血管炎、心不全、高脂血
症、多発性硬化症、神経障害、脊髄症、痴呆症、糖尿
病、ウイルス感染症等の治療薬あるいは予防薬などとし
て使用できる。
ＮＫ３０４２４ＡあるいはＮＫ３０４２４Ｂ、それらの
製造法およびそれらの用途に関する。本発明の化合物
は、ＴＮＦα産生抑制作用を示し、慢性関節リウマチ、
川崎病、クローン病、ベーチェット病、気管支喘息、癌
悪液質、敗血症、腎炎、肝炎、血管炎、心不全、高脂血
症、多発性硬化症、神経障害、脊髄症、痴呆症、糖尿
病、ウイルス感染症等の治療薬あるいは予防薬などとし
て使用できる。
【０００２】
【従来の技術】ＴＮＦαは、マクロファージ、単球のみ
ならず、多くの細胞から産生され、多様な生物活性を示
す事が知られている。また、各種の疾患、例えば慢性関
節リウマチ〔Ａｎｎ．Ｒｈｅｕｍ．Ｄｉｓ．第４９巻、
６６９頁（１９９０）〕、川崎病〔Ｃｌｉｎ．Ｉｍｍｕ
ｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｐａｔｈｏｌ．第５６巻、２９頁
（１９９０）〕、クローン病〔Ａｒｃｈ．Ｄｉｓ．Ｃｈ
ｉｌｄ、第６６巻、５６１頁（１９９１）〕、ベーチェ
ット病〔Ｊ．Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ．第１７巻、１１０７
頁（１９９０）、気管支喘息〔Ｊ．Ａｌｌｅｒｇｙ Ｃ
ｌｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．第８９巻、９５８頁（１９９
２）〕、癌悪液質〔Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｌｅｔｔ．第１１
巻、１７３頁（１９８５）〕、敗血症〔Ｓｃｉｅｎｃ
ｅ、第２２９巻、８６９頁（１９８６）〕等では、ＴＮ
Ｆαの異常な産生が見られ、疾患の増悪因子として働い
ていると考えられている。さらに腎炎、肝炎、血管炎、
心不全、高脂血症、多発性硬化症、神経障害、脊髄症、
痴呆症、糖尿病、ウイルス感染症等の疾患においてもＴ
ＮＦαの関与が示唆されている。したがって、ＴＮＦα
の産生を抑制する物質がこれら疾患の治療薬あるいは予
防薬として期待され、有用な新規ＴＮＦα産生抑制剤の
発明が待たれている。
ならず、多くの細胞から産生され、多様な生物活性を示
す事が知られている。また、各種の疾患、例えば慢性関
節リウマチ〔Ａｎｎ．Ｒｈｅｕｍ．Ｄｉｓ．第４９巻、
６６９頁（１９９０）〕、川崎病〔Ｃｌｉｎ．Ｉｍｍｕ
ｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｐａｔｈｏｌ．第５６巻、２９頁
（１９９０）〕、クローン病〔Ａｒｃｈ．Ｄｉｓ．Ｃｈ
ｉｌｄ、第６６巻、５６１頁（１９９１）〕、ベーチェ
ット病〔Ｊ．Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ．第１７巻、１１０７
頁（１９９０）、気管支喘息〔Ｊ．Ａｌｌｅｒｇｙ Ｃ
ｌｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．第８９巻、９５８頁（１９９
２）〕、癌悪液質〔Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｌｅｔｔ．第１１
巻、１７３頁（１９８５）〕、敗血症〔Ｓｃｉｅｎｃ
ｅ、第２２９巻、８６９頁（１９８６）〕等では、ＴＮ
Ｆαの異常な産生が見られ、疾患の増悪因子として働い
ていると考えられている。さらに腎炎、肝炎、血管炎、
心不全、高脂血症、多発性硬化症、神経障害、脊髄症、
痴呆症、糖尿病、ウイルス感染症等の疾患においてもＴ
ＮＦαの関与が示唆されている。したがって、ＴＮＦα
の産生を抑制する物質がこれら疾患の治療薬あるいは予
防薬として期待され、有用な新規ＴＮＦα産生抑制剤の
発明が待たれている。
【０００３】一方、本発明の生理活性物質ＮＫ３０４２
４Ａあるいは、ＮＫ３０４２４Ｂは、新規な化合物であ
り、これらと同一の物理化学的性質、および、生理活性
を有する物質は、報告されていない。
４Ａあるいは、ＮＫ３０４２４Ｂは、新規な化合物であ
り、これらと同一の物理化学的性質、および、生理活性
を有する物質は、報告されていない。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、ＴＮ
Ｆα産生抑制活性をもつ新規な生理活性物質を提供する
ことにある。
Ｆα産生抑制活性をもつ新規な生理活性物質を提供する
ことにある。
【０００５】また、本発明の目的は、慢性関節リウマ
チ、川崎病、クローン病、ベーチェット病、気管支喘
息、癌悪液質、敗血症、腎炎、肝炎、血管炎、心不全、
高脂血症、多発性硬化症、神経障害、脊髄症、痴呆症、
糖尿病、ウイルス感染症等の疾患において、その治療上
あるいは予防上有用な医薬を提供することにある。
チ、川崎病、クローン病、ベーチェット病、気管支喘
息、癌悪液質、敗血症、腎炎、肝炎、血管炎、心不全、
高脂血症、多発性硬化症、神経障害、脊髄症、痴呆症、
糖尿病、ウイルス感染症等の疾患において、その治療上
あるいは予防上有用な医薬を提供することにある。
【０００６】さらに、本発明の目的は、上記生理活性物
質の製造法を提供することにある。
質の製造法を提供することにある。
【０００７】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、微生物の
代謝産物について、種々検索した結果、放線菌に属する
一菌株が、ＴＮＦα産生抑制活性を有する生理活性物質
ＮＫ３０４２４ＡとＮＫ３０４２４Ｂを産生する事を見
出した。
代謝産物について、種々検索した結果、放線菌に属する
一菌株が、ＴＮＦα産生抑制活性を有する生理活性物質
ＮＫ３０４２４ＡとＮＫ３０４２４Ｂを産生する事を見
出した。
【０００８】本発明は、上記知見に基づいて完成された
ものである。生理活性物質ＮＫ３０４２４Ａまたは、Ｎ
Ｋ３０４２４Ｂは、ストレプトミセス属に属するＮＫ３
０４２４Ａまたは、ＮＫ３０４２４Ｂ生産菌を培養し、
該化合物を生成せしめ、この培養物より採取する事によ
り得られる。
ものである。生理活性物質ＮＫ３０４２４Ａまたは、Ｎ
Ｋ３０４２４Ｂは、ストレプトミセス属に属するＮＫ３
０４２４Ａまたは、ＮＫ３０４２４Ｂ生産菌を培養し、
該化合物を生成せしめ、この培養物より採取する事によ
り得られる。
【０００９】ＮＫ３０４２４Ａまたは、ＮＫ３０４２４
Ｂの生産菌の代表的なものとして、土壌より分離したス
トレプトミセス・エスピー（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ
ｓｐ．）ＮＡ ３０４２４株が挙げられる。以下に、
本菌株の菌学的性状を示す。
Ｂの生産菌の代表的なものとして、土壌より分離したス
トレプトミセス・エスピー（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ
ｓｐ．）ＮＡ ３０４２４株が挙げられる。以下に、
本菌株の菌学的性状を示す。
【００１０】１．形態的性質 ２７°Ｃで２週間後に観察した結果、気菌糸は単純分岐
し、その先端はらせん状で、輪生枝の形成は認められな
い。また、胞子嚢及び遊走子も認められない。胞子表面
は平滑で、胞子はシリンダー型で、大きさは０．５〜
０．９×０．９〜１．３μｍである。また、１０個以上
の連鎖をなして胞子が形成される。
し、その先端はらせん状で、輪生枝の形成は認められな
い。また、胞子嚢及び遊走子も認められない。胞子表面
は平滑で、胞子はシリンダー型で、大きさは０．５〜
０．９×０．９〜１．３μｍである。また、１０個以上
の連鎖をなして胞子が形成される。
【００１１】２．各種培地における生育 各種培地上、２７°Ｃ、２週間後の生育状態を下記表１
に示す。
に示す。
【００１２】
【表１】
【００１３】３．生理学的性質 生育至適温度 ： ２７〜３７°Ｃ 硝酸塩の還元 ： 陽性 スターチの加水分解（スターチ・無機塩寒天培地）：
陽性 脱脂牛乳のペプトン化 ： 陰性 ゼラチンの液化 ： 陽性 メラニン様色素の生成 ： 陽性 ４．炭素源の利用性（プリドハム・ゴドリーブ寒天培地
上） Ｌ−アラビノース ＋ Ｄ−キシロース ＋ Ｄ−グルコース ＋ Ｄ−フラクトース ＋ シュクロース ＋ イノシトール ＋ Ｌ−ラムノース ＋ ラフィノース − Ｄ−マンニトール ＋
陽性 脱脂牛乳のペプトン化 ： 陰性 ゼラチンの液化 ： 陽性 メラニン様色素の生成 ： 陽性 ４．炭素源の利用性（プリドハム・ゴドリーブ寒天培地
上） Ｌ−アラビノース ＋ Ｄ−キシロース ＋ Ｄ−グルコース ＋ Ｄ−フラクトース ＋ シュクロース ＋ イノシトール ＋ Ｌ−ラムノース ＋ ラフィノース − Ｄ−マンニトール ＋
【００１４】５．細胞壁中のジアミノピメリン酸 ＬＬ−ジアミノピメリン酸である。以上を要約すると、
本菌株は細胞壁がＬＬ−ジアミノピメリン酸であり、ま
た、メナキノンの種類は、主にＭＫ−９（Ｈ８）、ＭＫ
−９（Ｈ６）である。インターナショナル・ストレプト
ミセス属・プロジェクト（略称ＩＳＰ）の方法によれ
ば、胞子形成菌糸の形態は、Ｓｅｃｔｉｏｎ Ｓｐｉｒ
ａｌｅｓに属し胞子表面は平滑で、成熟した菌糸の色は
灰色系統（Ｇｒａｙ ｃｏｌｏｒ−ｓｅｒｉｅｓ）で黒
色の湿潤性（ハイグロスコピック）を呈する。メラニン
様色素を生産し、培地中に茶色味の可溶性色素を呈す
る。また、基生菌糸の色はうす黄からうす黄茶を呈す
る。炭素源としてはＬ−アラビノース、Ｄ−キシロー
ス、Ｄ−グルコース、Ｄ−フラクトース、シュクロー
ス、イノシトール、Ｌ−ラムノース、Ｄ−マンニトール
を利用し、ラフィノースは、利用しない。
本菌株は細胞壁がＬＬ−ジアミノピメリン酸であり、ま
た、メナキノンの種類は、主にＭＫ−９（Ｈ８）、ＭＫ
−９（Ｈ６）である。インターナショナル・ストレプト
ミセス属・プロジェクト（略称ＩＳＰ）の方法によれ
ば、胞子形成菌糸の形態は、Ｓｅｃｔｉｏｎ Ｓｐｉｒ
ａｌｅｓに属し胞子表面は平滑で、成熟した菌糸の色は
灰色系統（Ｇｒａｙ ｃｏｌｏｒ−ｓｅｒｉｅｓ）で黒
色の湿潤性（ハイグロスコピック）を呈する。メラニン
様色素を生産し、培地中に茶色味の可溶性色素を呈す
る。また、基生菌糸の色はうす黄からうす黄茶を呈す
る。炭素源としてはＬ−アラビノース、Ｄ−キシロー
ス、Ｄ−グルコース、Ｄ−フラクトース、シュクロー
ス、イノシトール、Ｌ−ラムノース、Ｄ−マンニトール
を利用し、ラフィノースは、利用しない。
【００１５】以上の性質をもとにアール・イー・ブッフ
ァナン・アンド・エヌ・イー・ギボンズ編、バージーズ
・マニュアル・オブ・デタミネーティブ・バクテリオロ
ジー（Ｂｅｒｇｅｙ’ｓ Ｍａｎｕａｌ ｏｆ Ｄｅｔ
ｅｒｍｉｎａｔｉｖｅＢａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ）第８
版、１９７４年に従って検索を行った結果、上記ＮＡ
３０４２４株はストレプトミセス属に属することが判明
した。よって、本菌をストレプトミセス・エスピー（Ｓ
ｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｓｐ．）ＮＡ３０４２４と命
名した。該菌株は、工業技術院生命工学工業技術研究所
に、ＦＥＲＭ Ｐ−１６４２２として寄託されている。
ァナン・アンド・エヌ・イー・ギボンズ編、バージーズ
・マニュアル・オブ・デタミネーティブ・バクテリオロ
ジー（Ｂｅｒｇｅｙ’ｓ Ｍａｎｕａｌ ｏｆ Ｄｅｔ
ｅｒｍｉｎａｔｉｖｅＢａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ）第８
版、１９７４年に従って検索を行った結果、上記ＮＡ
３０４２４株はストレプトミセス属に属することが判明
した。よって、本菌をストレプトミセス・エスピー（Ｓ
ｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｓｐ．）ＮＡ３０４２４と命
名した。該菌株は、工業技術院生命工学工業技術研究所
に、ＦＥＲＭ Ｐ−１６４２２として寄託されている。
【００１６】本発明に用いるストレプトミセス属に属す
る菌株は他のストレプトミセス属の菌株と同様、その性
状が変化しやすい。例えば、紫外線、エックス線および
薬品などを用いる人工的な変異手段で容易に変異しうる
ものである。このように得られたどの様な変異株であっ
ても本発明の対象とする生理活性物質ＮＫ３０４２４Ａ
または（および）ＮＫ３０４２４Ｂの生産能を有するも
のは、全て本発明に使用する事ができる。
る菌株は他のストレプトミセス属の菌株と同様、その性
状が変化しやすい。例えば、紫外線、エックス線および
薬品などを用いる人工的な変異手段で容易に変異しうる
ものである。このように得られたどの様な変異株であっ
ても本発明の対象とする生理活性物質ＮＫ３０４２４Ａ
または（および）ＮＫ３０４２４Ｂの生産能を有するも
のは、全て本発明に使用する事ができる。
【００１７】本発明によりＮＫ３０４２４Ａまたは（お
よび）ＮＫ３０４２４Ｂを製造するには、まず前記菌株
を放線菌が利用し得る栄養物を含有する培地で好気的に
培養する。栄養源としては、従来から放線菌の培養に利
用されている公知のものが使用でき、例えば炭素源とし
ては、グルコース、グリセリン、ガラクトース、水飴、
デキストリン、シュクロース、でんぷん、糖蜜、動・植
物油等を使用できる。また、窒素源としては、大豆粉、
小麦、小麦胚芽、コーンスティープ・リカー、肉エキ
ス、ペプトン、酵母エキス、硫酸アンモニウム、硝酸ソ
ーダ、尿素等を単独かまたは組み合わせて用いることが
できる。その他、必要に応じ、ナトリウム、コバルト、
塩素、硫酸、燐酸、およびその他のイオンを生成するこ
とのできる無機塩類を添加することは有効である。ま
た、菌の生育を助け、生理活性物質ＮＫ３０４２４Ａま
たは（および）ＮＫ３０４２４Ｂの生産を促進するよう
な有機および無機物を適当に添加することができる。
よび）ＮＫ３０４２４Ｂを製造するには、まず前記菌株
を放線菌が利用し得る栄養物を含有する培地で好気的に
培養する。栄養源としては、従来から放線菌の培養に利
用されている公知のものが使用でき、例えば炭素源とし
ては、グルコース、グリセリン、ガラクトース、水飴、
デキストリン、シュクロース、でんぷん、糖蜜、動・植
物油等を使用できる。また、窒素源としては、大豆粉、
小麦、小麦胚芽、コーンスティープ・リカー、肉エキ
ス、ペプトン、酵母エキス、硫酸アンモニウム、硝酸ソ
ーダ、尿素等を単独かまたは組み合わせて用いることが
できる。その他、必要に応じ、ナトリウム、コバルト、
塩素、硫酸、燐酸、およびその他のイオンを生成するこ
とのできる無機塩類を添加することは有効である。ま
た、菌の生育を助け、生理活性物質ＮＫ３０４２４Ａま
たは（および）ＮＫ３０４２４Ｂの生産を促進するよう
な有機および無機物を適当に添加することができる。
【００１８】培養法としては、液体培養法、、特に深部
攪拌培養法が適している。培養に適当な温度は１５〜３
７°Ｃであるが、多くの場合、２６〜３０°Ｃ付近で培
養する。生理活性物質ＮＫ３０４２４Ａまたは（およ
び）ＮＫ３０４２４Ｂの生産は、培地や培養条件により
異なるが、振盪培養、タンク培養とも通常１〜１０日の
間でその蓄積が最高に達する。培養物中の生理活性物質
ＮＫ３０４２４Ａまたは（および）ＮＫ３０４２４Ｂの
蓄積量が最高になった時に、培養を停止し、培養液から
目的物質を単離する。
攪拌培養法が適している。培養に適当な温度は１５〜３
７°Ｃであるが、多くの場合、２６〜３０°Ｃ付近で培
養する。生理活性物質ＮＫ３０４２４Ａまたは（およ
び）ＮＫ３０４２４Ｂの生産は、培地や培養条件により
異なるが、振盪培養、タンク培養とも通常１〜１０日の
間でその蓄積が最高に達する。培養物中の生理活性物質
ＮＫ３０４２４Ａまたは（および）ＮＫ３０４２４Ｂの
蓄積量が最高になった時に、培養を停止し、培養液から
目的物質を単離する。
【００１９】生理活性物質ＮＫ３０４２４Ａまたは（お
よび）ＮＫ３０４２４Ｂの培養液からの採取にあたって
は、その性状を利用した通常の分離手段を適宜組み合わ
せて精製することができる。すなわち、培養液を遠心分
離あるいはろ過によりろ液と菌体部に分離し、得られた
ろ液をダイアイオンＨＰ−２０（商品名：三菱化成製）
などに吸着させ、低級アルコールやアセトン等により溶
出するか、あるいは１−ブタノール等の有機溶媒で抽出
することによりＮＫ３０４２４Ａまたは（および）ＮＫ
３０４２４Ｂの画分を得ることができる。
よび）ＮＫ３０４２４Ｂの培養液からの採取にあたって
は、その性状を利用した通常の分離手段を適宜組み合わ
せて精製することができる。すなわち、培養液を遠心分
離あるいはろ過によりろ液と菌体部に分離し、得られた
ろ液をダイアイオンＨＰ−２０（商品名：三菱化成製）
などに吸着させ、低級アルコールやアセトン等により溶
出するか、あるいは１−ブタノール等の有機溶媒で抽出
することによりＮＫ３０４２４Ａまたは（および）ＮＫ
３０４２４Ｂの画分を得ることができる。
【００２０】上述の方法に加え、物質の採取に用いられ
る公知の方法、たとえば吸着クロマトグラフィー、ゲル
濾過クロマトグラフィー、薄層クロマトグラフィーより
のかき取り、高速液体クロマトグラフィー等を適宜組み
合わせ、あるいは繰り返すことによってＮＫ３０４２４
Ａまたは（および）ＮＫ３０４２４Ｂを純粋に単離する
ことができる。
る公知の方法、たとえば吸着クロマトグラフィー、ゲル
濾過クロマトグラフィー、薄層クロマトグラフィーより
のかき取り、高速液体クロマトグラフィー等を適宜組み
合わせ、あるいは繰り返すことによってＮＫ３０４２４
Ａまたは（および）ＮＫ３０４２４Ｂを純粋に単離する
ことができる。
【００２１】上記のようにして得られた生理活性物質Ｎ
Ｋ３０４２４ＡおよびＮＫ３０４２４Ｂの理化学的性質
を下記に示す。
Ｋ３０４２４ＡおよびＮＫ３０４２４Ｂの理化学的性質
を下記に示す。
【００２２】ａ）ＮＫ３０４２４Ａ １）外観：白色粉末 ２）融点：１２９〜１３１°Ｃ（分解点） ３）分子式：Ｃ３０Ｈ４６Ｎ２Ｏ１０Ｓ（高分解能マス
スペクトル法により測定） ４）分子量：６２６（ＦＡＢ−ＭＳ法により測定した
（Ｍ＋Ｈ）＋＝６２７） ５）紫外線吸収スペクトル ：水溶液で測定した結果
は、図１に示す通りで、２０５ｎｍ（ε１９０３０）、
２８８ｎｍ（ε３７５）に極大吸収を示す。 ６）赤外線吸収スペクトル：臭化カリウム錠剤で測定し
たスペクトルを図２に示す。 ７）水素核磁気共鳴スペクトル：重水中、５００ＭＨｚ
で測定したスペクトルを図３に示す。 ８）炭素核磁気共鳴スペクトル：重水中、１２５ＭＨｚ
で測定したスペクトルを図４に示す。 ９）溶解性：水、メタノール、ジメチルスルホキシドに
易溶。ノルマルヘキサン、酢酸エチルに不溶。 １０）呈色反応：ライドン−スミス、ニンヒドリン、硫
酸、過マンガン酸カリウムに陽性。エールリッヒ、坂
口、ドラーゲンドルフに陰性。 １１）薄層クロマトグラフィーのＲｆ値：０．５ シリカゲル（メルク社製 シリカゲル６０Ｆ２５４）薄
層を用い、展開溶媒として、１−ブタノール−酢酸−水
（４：１：１）を用いた。
スペクトル法により測定） ４）分子量：６２６（ＦＡＢ−ＭＳ法により測定した
（Ｍ＋Ｈ）＋＝６２７） ５）紫外線吸収スペクトル ：水溶液で測定した結果
は、図１に示す通りで、２０５ｎｍ（ε１９０３０）、
２８８ｎｍ（ε３７５）に極大吸収を示す。 ６）赤外線吸収スペクトル：臭化カリウム錠剤で測定し
たスペクトルを図２に示す。 ７）水素核磁気共鳴スペクトル：重水中、５００ＭＨｚ
で測定したスペクトルを図３に示す。 ８）炭素核磁気共鳴スペクトル：重水中、１２５ＭＨｚ
で測定したスペクトルを図４に示す。 ９）溶解性：水、メタノール、ジメチルスルホキシドに
易溶。ノルマルヘキサン、酢酸エチルに不溶。 １０）呈色反応：ライドン−スミス、ニンヒドリン、硫
酸、過マンガン酸カリウムに陽性。エールリッヒ、坂
口、ドラーゲンドルフに陰性。 １１）薄層クロマトグラフィーのＲｆ値：０．５ シリカゲル（メルク社製 シリカゲル６０Ｆ２５４）薄
層を用い、展開溶媒として、１−ブタノール−酢酸−水
（４：１：１）を用いた。
【００２３】ｂ）ＮＫ３０４２４Ｂ １）外観：白色粉末 ２）融点：１２９〜１３３°Ｃ（分解点） ３）分子式：Ｃ３０Ｈ４６Ｎ２Ｏ１０Ｓ（高分解能マス
スペクトル法により測定） ４）分子量：６２６（ＦＡＢ−ＭＳ法により測定した
（Ｍ＋Ｈ）＋＝６２７） ５）紫外線吸収スペクトル ：水溶液で測定した結果
は、図５に示す通りで、２０５ｎｍ（ε１８９８０）、
２８８ｎｍ（ε５００）に極大吸収を示す。 ６）赤外線吸収スペクトル：臭化カリウム錠剤で測定し
たスペクトルを図６に示す。 ７）水素核磁気共鳴スペクトル：重水中、５００ＭＨｚ
で測定したスペクトルを図７に示す。 ８）炭素核磁気共鳴スペクトル：重水中、１２５ＭＨｚ
で測定したスペクトルを図８に示す。 ９）溶解性：水、メタノール、ジメチルスルホキシドに
易溶。ノルマルヘキサン、酢酸エチルに不溶。 １０）呈色反応：ライドン−スミス、ニンヒドリン、硫
酸、過マンガン酸カリウムに陽性。エールリッヒ、坂
口、ドラーゲンドルフに陰性。 １１）薄層クロマトグラフィーのＲｆ値：０．５ シリカゲル（メルク社製 シリカゲル６０Ｆ２５４）薄
層を用い、展開溶媒として、１−ブタノール−酢酸−水
（４：１：１）を用いた。
スペクトル法により測定） ４）分子量：６２６（ＦＡＢ−ＭＳ法により測定した
（Ｍ＋Ｈ）＋＝６２７） ５）紫外線吸収スペクトル ：水溶液で測定した結果
は、図５に示す通りで、２０５ｎｍ（ε１８９８０）、
２８８ｎｍ（ε５００）に極大吸収を示す。 ６）赤外線吸収スペクトル：臭化カリウム錠剤で測定し
たスペクトルを図６に示す。 ７）水素核磁気共鳴スペクトル：重水中、５００ＭＨｚ
で測定したスペクトルを図７に示す。 ８）炭素核磁気共鳴スペクトル：重水中、１２５ＭＨｚ
で測定したスペクトルを図８に示す。 ９）溶解性：水、メタノール、ジメチルスルホキシドに
易溶。ノルマルヘキサン、酢酸エチルに不溶。 １０）呈色反応：ライドン−スミス、ニンヒドリン、硫
酸、過マンガン酸カリウムに陽性。エールリッヒ、坂
口、ドラーゲンドルフに陰性。 １１）薄層クロマトグラフィーのＲｆ値：０．５ シリカゲル（メルク社製 シリカゲル６０Ｆ２５４）薄
層を用い、展開溶媒として、１−ブタノール−酢酸−水
（４：１：１）を用いた。
【００２４】本発明において、ＮＫ３０４２４Ａあるい
は、ＮＫ３０４２４Ｂは、その薬学的に許容し得る塩の
形態にあってもよく、このような塩としては、例えばナ
トリウム、カリウムなどのアルカリ金属および塩酸や硫
酸などとの塩が挙げられる。
は、ＮＫ３０４２４Ｂは、その薬学的に許容し得る塩の
形態にあってもよく、このような塩としては、例えばナ
トリウム、カリウムなどのアルカリ金属および塩酸や硫
酸などとの塩が挙げられる。
【００２５】ＮＫ３０４２４Ａあるいは、ＮＫ３０４２
４Ｂの薬学的に許容される塩の薬学的に許容し得る塩
は、公知の方法によって製造することができ、例えば水
酸化ナトリウム、水酸化カリウムおよび塩酸、硫酸など
を含む溶液で対応するＮＫ３０４２４Ａあるいは、ＮＫ
３０４２４Ｂを処理することによって得ることができ
る。
４Ｂの薬学的に許容される塩の薬学的に許容し得る塩
は、公知の方法によって製造することができ、例えば水
酸化ナトリウム、水酸化カリウムおよび塩酸、硫酸など
を含む溶液で対応するＮＫ３０４２４Ａあるいは、ＮＫ
３０４２４Ｂを処理することによって得ることができ
る。
【００２６】本発明のＮＫ３０４２４Ａ、ＮＫ３０４２
４Ｂ又はそれらの薬学的に許容される塩は後記のごと
く、ＴＮＦα産生抑制活性をもつ生理活性物質である。
医薬品として使用する場合の製剤化および投与方法は従
来公知の種々の方法が適用できる。すなわち、投与方法
としては注射、経口、直腸投与などが可能である。製剤
形態としては注射剤、粉末剤、顆粒剤、錠剤、座剤、カ
プセル剤などの形態がとり得る。
４Ｂ又はそれらの薬学的に許容される塩は後記のごと
く、ＴＮＦα産生抑制活性をもつ生理活性物質である。
医薬品として使用する場合の製剤化および投与方法は従
来公知の種々の方法が適用できる。すなわち、投与方法
としては注射、経口、直腸投与などが可能である。製剤
形態としては注射剤、粉末剤、顆粒剤、錠剤、座剤、カ
プセル剤などの形態がとり得る。
【００２７】製剤化の際にＮＫ３０４２４Ａ，ＮＫ３０
４２４Ｂ又はその塩に悪影響を与えない限り、医薬用に
用いられる種々の医薬用添加剤、すなわち、担体やその
他の助剤、例えば安定剤、防腐剤、無痛化剤、乳化剤等
が必要に応じて使用され得る。製剤において、ＮＫ３０
４２４Ａ、ＮＫ３０４２４Ｂ又はその塩の含量は製剤形
態等により広範囲に変えることが可能であり、一般には
ＮＫ３０４２４Ａ，ＮＫ３０４２４Ｂ又はその塩を０．
０１〜１００％（重量）、好ましくは０．１〜７０％
（重量）含有し、残りは通常医薬用に使用される添加剤
からなる。
４２４Ｂ又はその塩に悪影響を与えない限り、医薬用に
用いられる種々の医薬用添加剤、すなわち、担体やその
他の助剤、例えば安定剤、防腐剤、無痛化剤、乳化剤等
が必要に応じて使用され得る。製剤において、ＮＫ３０
４２４Ａ、ＮＫ３０４２４Ｂ又はその塩の含量は製剤形
態等により広範囲に変えることが可能であり、一般には
ＮＫ３０４２４Ａ，ＮＫ３０４２４Ｂ又はその塩を０．
０１〜１００％（重量）、好ましくは０．１〜７０％
（重量）含有し、残りは通常医薬用に使用される添加剤
からなる。
【００２８】ＮＫ３０４２４Ａ、ＮＫ３０４２４Ｂ又は
その塩の投与量は疾患、症状、投与方法等により異なる
が、成人１人１日あたり０．０１〜８００ｍｇ程度であ
る。
その塩の投与量は疾患、症状、投与方法等により異なる
が、成人１人１日あたり０．０１〜８００ｍｇ程度であ
る。
【００２９】以下にＮＫ３０４２４ＡおよびＮＫ３０４
２４Ｂが、ＴＮＦα産生抑制作用を有し、且つ毒性を示
さないことを試験例により示す。
２４Ｂが、ＴＮＦα産生抑制作用を有し、且つ毒性を示
さないことを試験例により示す。
【００３０】試験例１ ＴＮＦα産生抑制作用 チオグリコレートにより誘導したマウス腹腔マクロファ
ージを用いて、ＮＫ３０４２４ＡおよびＮＫ３０４２４
ＢのＴＮＦα産生抑制活性を測定した。上記細胞の培養
液（細胞数５０万個／ウェル）中に被験薬を添加し、そ
の後ＴＮＦαの誘導物質としてリポポリサッカライドを
最終濃度１００ｎｇ／ｍｌとなるよう加え、さらに２０
時間培養した。この培養液中のＴＮＦα濃度をバイオア
ッセイにて定量した。バイオアッセイはＬ−９２９（マ
ウス結合組織由来細胞）に対する細胞障害性試験（Ｋｉ
ｅｎｅｒ，Ｐ．Ａ．らの方法、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．第
１４１巻、８７０頁、一部改変）により行った。結果
は、容量−反応曲線からＩＣ５０値を求め、その値を表
２に示した。
ージを用いて、ＮＫ３０４２４ＡおよびＮＫ３０４２４
ＢのＴＮＦα産生抑制活性を測定した。上記細胞の培養
液（細胞数５０万個／ウェル）中に被験薬を添加し、そ
の後ＴＮＦαの誘導物質としてリポポリサッカライドを
最終濃度１００ｎｇ／ｍｌとなるよう加え、さらに２０
時間培養した。この培養液中のＴＮＦα濃度をバイオア
ッセイにて定量した。バイオアッセイはＬ−９２９（マ
ウス結合組織由来細胞）に対する細胞障害性試験（Ｋｉ
ｅｎｅｒ，Ｐ．Ａ．らの方法、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．第
１４１巻、８７０頁、一部改変）により行った。結果
は、容量−反応曲線からＩＣ５０値を求め、その値を表
２に示した。
【００３１】
【表２】 ＮＫ３０４２４ＡおよびＮＫ３０４２４ＢのＴＮＦα産生抑制活性 化合物 ＩＣ５０（μＭ） ＮＫ３０４２４Ａ ０．９７ＮＫ３０４２４Ｂ ０．８６
【００３２】試験例２ ラットにおける毒性 ＮＫ３０４２４ＡまたはＮＫ３０４２４Ｂを生理食塩水
に溶解して、大腿部静脈より投与し、毒性を調べたとこ
ろ、両化合物とも２０ｍｇ／ｋｇで毒性を示さなかっ
た。
に溶解して、大腿部静脈より投与し、毒性を調べたとこ
ろ、両化合物とも２０ｍｇ／ｋｇで毒性を示さなかっ
た。
【００３３】試験例から明らかな様に、本発明のＮＫ３
０４２４ＡおよびＮＫ３０４２４Ｂは、ＴＮＦα産生抑
制作用を有し、且つ毒性を示さない。
０４２４ＡおよびＮＫ３０４２４Ｂは、ＴＮＦα産生抑
制作用を有し、且つ毒性を示さない。
【００３４】
【発明の効果】本発明では新規な生理活性物質ＮＫ３０
４２４Ａ，ＮＫ３０４２４Ｂ又はそれらの薬学的に許容
される塩が提供され、これら化合物はＴＮＦαの産生を
抑制する。したがって、ＴＮＦα産生抑制剤として、ま
た、慢性関節リウマチ、川崎病、クローン病、ベーチェ
ット病、気管支喘息、癌悪液質、敗血症、腎炎、肝炎、
血管炎、心不全、高脂血症、多発性硬化症、神経障害、
脊髄症、痴呆症、糖尿病、ウイルス感染症等の疾患にお
いて、その治療薬あるいは予防薬として有用である。
４２４Ａ，ＮＫ３０４２４Ｂ又はそれらの薬学的に許容
される塩が提供され、これら化合物はＴＮＦαの産生を
抑制する。したがって、ＴＮＦα産生抑制剤として、ま
た、慢性関節リウマチ、川崎病、クローン病、ベーチェ
ット病、気管支喘息、癌悪液質、敗血症、腎炎、肝炎、
血管炎、心不全、高脂血症、多発性硬化症、神経障害、
脊髄症、痴呆症、糖尿病、ウイルス感染症等の疾患にお
いて、その治療薬あるいは予防薬として有用である。
【００３５】
【実施例】以下に本発明の実施例を示すが、これは単な
る一例示であって何等、本発明を限定するものではな
く、種々の変法が可能である。
る一例示であって何等、本発明を限定するものではな
く、種々の変法が可能である。
【００３６】実施例１ （１）醗酵 凍結菌および種母作成用の培地として、グリセリン２．
０％、グルコース１．０％、アジプロンＥ３（味の素
製）０．５％、ペプトン（極東社製）０．５％、酵母エ
キス０．５％、燐酸水素二カリウム０．０５％、硫酸マ
グネシウム０．０５％、炭酸カルシウム０．２％から成
る培地を用いた。
０％、グルコース１．０％、アジプロンＥ３（味の素
製）０．５％、ペプトン（極東社製）０．５％、酵母エ
キス０．５％、燐酸水素二カリウム０．０５％、硫酸マ
グネシウム０．０５％、炭酸カルシウム０．２％から成
る培地を用いた。
【００３７】５００ｍｌ容三角フラスコに上記培地を１
００ｍｌ分注し、１２０℃で２０分間滅菌し、これにス
トレプトミセス・エスピーＮＡ ３０４２４株（ＦＥＲ
ＭＰ−１６４２２）の斜面培養の１〜２白金耳を接種
し、２７℃、２００回転／分の回転式振盪機にて２日間
培養した。得られた培養物に同容量の３０％グリセリン
水溶液を加え、攪拌後５ｍｌずつ分注して−８０°Ｃに
て凍結したものを凍結菌とした。
００ｍｌ分注し、１２０℃で２０分間滅菌し、これにス
トレプトミセス・エスピーＮＡ ３０４２４株（ＦＥＲ
ＭＰ−１６４２２）の斜面培養の１〜２白金耳を接種
し、２７℃、２００回転／分の回転式振盪機にて２日間
培養した。得られた培養物に同容量の３０％グリセリン
水溶液を加え、攪拌後５ｍｌずつ分注して−８０°Ｃに
て凍結したものを凍結菌とした。
【００３８】こうして得た凍結菌を、同様の培地１００
ｍｌを含む４本の５００ｍｌ容三角フラスコに、接種量
が１％となるように、解凍後直に接種し、同一条件下で
２日間培養を行い、これを種母とした。
ｍｌを含む４本の５００ｍｌ容三角フラスコに、接種量
が１％となるように、解凍後直に接種し、同一条件下で
２日間培養を行い、これを種母とした。
【００３９】生産培地としては、グルコース１．０％、
可溶性澱粉４．０％、アジプロンＥ３（味の素製）２．
０％、コーンスティープ・リカー（日食社製）０．５
％、塩化カリウム０．０３％、燐酸水素二カリウム０．
０５％、硫酸マグネシウム０．０５％、炭酸カルシウム
０．２％、から成る培地を用いた。なお、滅菌前の培地
はｐＨ６．８に調整して使用した。
可溶性澱粉４．０％、アジプロンＥ３（味の素製）２．
０％、コーンスティープ・リカー（日食社製）０．５
％、塩化カリウム０．０３％、燐酸水素二カリウム０．
０５％、硫酸マグネシウム０．０５％、炭酸カルシウム
０．２％、から成る培地を用いた。なお、滅菌前の培地
はｐＨ６．８に調整して使用した。
【００４０】生産培地２０リットルを５００ｍｌ容三角
フラスコ２２０本に分注し、１２０℃で２０分間滅菌
後、上記の種母１ｍｌずつを移植し、２７℃、２００回
転／分の回転式振盪機にて４日間培養した。培養終了
後、培養液１６．９リットルを６Ｎ塩酸にてｐＨ５．８
とした後、濾過し培養濾液１４．２リットルを得た。
フラスコ２２０本に分注し、１２０℃で２０分間滅菌
後、上記の種母１ｍｌずつを移植し、２７℃、２００回
転／分の回転式振盪機にて４日間培養した。培養終了
後、培養液１６．９リットルを６Ｎ塩酸にてｐＨ５．８
とした後、濾過し培養濾液１４．２リットルを得た。
【００４１】（２）精製 この濾液を１１５０ｍｌ（φ５７×４５０ｍｍ）のダイ
アイオンＨＰ−２０（三菱化成製）のカラムに吸着さ
せ、１．２リットルの水と４．５リットルの３５％メタ
ノール水溶液にて洗浄した後、２．２５リットルの８０
％メタノール水溶液にて溶出し、さらに溶出液を３０５
ｍｌに濃縮した。この濃縮液を希塩酸にてｐＨ５．５と
し、脂溶性の不純物を等量の酢酸エチルで２回抽出して
除去した。得られた水層に燐酸二水素ナトリウムを加え
てｐＨ７．０とし、５０ｍＭ塩化ナトリウム−５０ｍＭ
燐酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ７．０）にて平衡化したＤ
ＥＡＥ−セファデックスＡ−２５（ファルマシア製）の
２５０ｍｌ（φ４１×１９０ｍｍ）のカラムに通液し、
さらに上記緩衝液を通液し、未吸着の画分４５０ｍｌを
得た。これを再び希塩酸にてｐＨ５．６とし、８０ｍｌ
（φ３０×１１５ｍｍ）のダイアイオンＨＰ−２０ＳＳ
（１００−２００メッシュ、三菱化成製）に吸着させ、
２４０ｍｌの水で洗浄後２３０ｍｌの８０％メタノール
水溶液にて溶出した。この溶出液を凍結乾燥することに
より、粗精製物であるオレンジ色粉末３３１０ｍｇを得
た。
アイオンＨＰ−２０（三菱化成製）のカラムに吸着さ
せ、１．２リットルの水と４．５リットルの３５％メタ
ノール水溶液にて洗浄した後、２．２５リットルの８０
％メタノール水溶液にて溶出し、さらに溶出液を３０５
ｍｌに濃縮した。この濃縮液を希塩酸にてｐＨ５．５と
し、脂溶性の不純物を等量の酢酸エチルで２回抽出して
除去した。得られた水層に燐酸二水素ナトリウムを加え
てｐＨ７．０とし、５０ｍＭ塩化ナトリウム−５０ｍＭ
燐酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ７．０）にて平衡化したＤ
ＥＡＥ−セファデックスＡ−２５（ファルマシア製）の
２５０ｍｌ（φ４１×１９０ｍｍ）のカラムに通液し、
さらに上記緩衝液を通液し、未吸着の画分４５０ｍｌを
得た。これを再び希塩酸にてｐＨ５．６とし、８０ｍｌ
（φ３０×１１５ｍｍ）のダイアイオンＨＰ−２０ＳＳ
（１００−２００メッシュ、三菱化成製）に吸着させ、
２４０ｍｌの水で洗浄後２３０ｍｌの８０％メタノール
水溶液にて溶出した。この溶出液を凍結乾燥することに
より、粗精製物であるオレンジ色粉末３３１０ｍｇを得
た。
【００４２】この粗精製物の一部１６５０ｍｇを２０％
メタノール水溶液３３ｍｌに溶解後、あらかじめ同混合
溶媒で充填したＹＭＣ−ＧＥＬ（ＯＤＳ−Ａ６０−２０
０／６０、山村化学研究所社製）１０００ｍｌ（φ４７
×５７５ｍｍ）のカラムにかけ、２０％、３０％、４０
％、６０％メタノール水溶液で段階的に溶出、分画し
た。６０％メタノール水溶液で溶出した分画のうち、Ｎ
Ｋ３０４２４Ａを多く含む画分（Ａ）およびＮＫ３０４
２４Ｂを多く含む画分（Ｂ）を集め、凍結乾燥し、それ
ぞれ２８４ｍｇ、５２５ｍｇを得た。
メタノール水溶液３３ｍｌに溶解後、あらかじめ同混合
溶媒で充填したＹＭＣ−ＧＥＬ（ＯＤＳ−Ａ６０−２０
０／６０、山村化学研究所社製）１０００ｍｌ（φ４７
×５７５ｍｍ）のカラムにかけ、２０％、３０％、４０
％、６０％メタノール水溶液で段階的に溶出、分画し
た。６０％メタノール水溶液で溶出した分画のうち、Ｎ
Ｋ３０４２４Ａを多く含む画分（Ａ）およびＮＫ３０４
２４Ｂを多く含む画分（Ｂ）を集め、凍結乾燥し、それ
ぞれ２８４ｍｇ、５２５ｍｇを得た。
【００４３】次いでこの（Ａ）（Ｂ）両画分を逆相高速
液体クロマトグラフィーに付して精製した。即ち、逆相
カラムのカプセルパックＣ１８ ＵＧ１２０（２０φ×
２５０ｍｍ、資生堂製）に画分（Ａ）の５０ｍｇに相当
する水溶液を注入し、１８％アセトニトリル水溶液を用
いて流速８ｍｌ／分で展開溶出した。ＮＫ３０４２４Ａ
は、注入後５５分に溶出された。この溶出部を凍結乾燥
した。同様の操作を繰り返し、画分（Ａ）より、５９ｍ
ｇの粗ＮＫ３０４２４Ａを得た。一方、同様のカラムに
画分（Ｂ）の５０ｍｇに相当する水溶液を注入し、１９
％アセトニトリル水溶液を用いて流速７．５ｍｌ／分で
展開溶出すると、ＮＫ３０４２４Ａは４５分に、ＮＫ３
０４２４Ｂは４９分に溶出された。それぞれの溶出部を
凍結乾燥した。同様の操作を繰り返すことにより、画分
（Ｂ）より７７ｍｇの粗ＮＫ３０４２４Ａと１９８ｍｇ
の純粋なＮＫ３０４２４Ｂを得た。
液体クロマトグラフィーに付して精製した。即ち、逆相
カラムのカプセルパックＣ１８ ＵＧ１２０（２０φ×
２５０ｍｍ、資生堂製）に画分（Ａ）の５０ｍｇに相当
する水溶液を注入し、１８％アセトニトリル水溶液を用
いて流速８ｍｌ／分で展開溶出した。ＮＫ３０４２４Ａ
は、注入後５５分に溶出された。この溶出部を凍結乾燥
した。同様の操作を繰り返し、画分（Ａ）より、５９ｍ
ｇの粗ＮＫ３０４２４Ａを得た。一方、同様のカラムに
画分（Ｂ）の５０ｍｇに相当する水溶液を注入し、１９
％アセトニトリル水溶液を用いて流速７．５ｍｌ／分で
展開溶出すると、ＮＫ３０４２４Ａは４５分に、ＮＫ３
０４２４Ｂは４９分に溶出された。それぞれの溶出部を
凍結乾燥した。同様の操作を繰り返すことにより、画分
（Ｂ）より７７ｍｇの粗ＮＫ３０４２４Ａと１９８ｍｇ
の純粋なＮＫ３０４２４Ｂを得た。
【００４４】画分（Ａ）と画分（Ｂ）から得られた粗Ｎ
Ｋ３０４２４Ａを合わせて、再度逆相高速液体クロマト
グラフィーに付して精製した。逆相カラムのＰＥＧＡＳ
ＩＬＯＤＳ（１０φ×２５０ｍｍ、センシュー科学製）
に粗ＮＫ３０４２４Ａの１０ｍｇに相当する水溶液を注
入し、２０％アセトニトリル水溶液を用いて流速２．５
ｍｌ／分で展開溶出した。ＮＫ３０４２４Ａは、注入後
３４分に溶出された。この溶出部を凍結乾燥した。同様
の操作を繰り返すことにより、４５ｍｇの純粋なＮＫ３
０４２４Ａを得た。
Ｋ３０４２４Ａを合わせて、再度逆相高速液体クロマト
グラフィーに付して精製した。逆相カラムのＰＥＧＡＳ
ＩＬＯＤＳ（１０φ×２５０ｍｍ、センシュー科学製）
に粗ＮＫ３０４２４Ａの１０ｍｇに相当する水溶液を注
入し、２０％アセトニトリル水溶液を用いて流速２．５
ｍｌ／分で展開溶出した。ＮＫ３０４２４Ａは、注入後
３４分に溶出された。この溶出部を凍結乾燥した。同様
の操作を繰り返すことにより、４５ｍｇの純粋なＮＫ３
０４２４Ａを得た。
【図１】ＮＫ３０４２４Ａ水溶液の紫外線吸収スペクト
ルを示す。
ルを示す。
【図２】ＮＫ３０４２４Ａの臭化カリウム錠内での赤外
線吸収スペクトルを示す。
線吸収スペクトルを示す。
【図３】ＮＫ３０４２４Ａの重水中で測定した５００Ｍ
Hz水素核磁気共鳴スペクトルを示す。
Hz水素核磁気共鳴スペクトルを示す。
【図４】ＮＫ３０４２４Ａの重水中で測定した１２５Ｍ
Hz炭素核磁気共鳴スペクトルを示す。
Hz炭素核磁気共鳴スペクトルを示す。
【図５】ＮＫ３０４２４Ｂ水溶液の紫外線吸収スペクト
ルを示す。
ルを示す。
【図６】ＮＫ３０４２４Ｂの臭化カリウム錠内での赤外
線吸収スペクトルを示す。
線吸収スペクトルを示す。
【図７】ＮＫ３０４２４Ｂの重水中で測定した５００Ｍ
Hz水素核磁気共鳴スペクトルを示す。
Hz水素核磁気共鳴スペクトルを示す。
【図８】ＮＫ３０４２４Ｂの重水中で測定した１２５Ｍ
Hz炭素核磁気共鳴スペクトルを示す。
Hz炭素核磁気共鳴スペクトルを示す。
Claims (7)
- 【請求項１】 下記の理化学的性質を示す生理活性物質
ＮＫ３０４２４Ａ，ＮＫ３０４２４Ｂ又はそれらの薬学
的に許容される塩。 ａ）ＮＫ３０４２４Ａ １）外観：白色粉末 ２）融点：１２９〜１３１°Ｃ（分解点） ３）分子式：Ｃ３０Ｈ４６Ｎ２Ｏ１０Ｓ（高分解能マス
スペクトル法により測定） ４）分子量：６２６（ＦＡＢ−ＭＳ法により測定した
（Ｍ＋Ｈ）＋＝６２７） ５）紫外線吸収スペクトル ：水溶液で測定した結果
は、第１図に示す通りで、２０５ｎｍ（ε１９０３
０）、２８８ｎｍ（ε３７５）に極大吸収を示す。 ６）赤外線吸収スペクトル：臭化カリウム錠剤で測定し
たスペクトルを第２図に示す。 ７）水素核磁気共鳴スペクトル：重水中、５００ＭＨｚ
で測定したスペクトルを第３図に示す。 ８）炭素核磁気共鳴スペクトル：重水中、１２５ＭＨｚ
で測定したスペクトルを第４図に示す。 ９）溶解性：水、メタノール、ジメチルスルホキシドに
易溶。ノルマルヘキサン、酢酸エチルに不溶。 １０）呈色反応：ライドン−スミス、ニンヒドリン、硫
酸、過マンガン酸カリウムに陽性。エールリッヒ、坂
口、ドラーゲンドルフに陰性。 １１）薄層クロマトグラフィーのＲｆ値：０．５ シリカゲル（メルク社製 シリカゲル６０Ｆ２５４）薄
層を用い、展開溶媒として、１−ブタノール−酢酸−水
（４：１：１）を用いた。 ｂ）ＮＫ３０４２４Ｂ １）外観：白色粉末 ２）融点：１２９〜１３３°Ｃ（分解点） ３）分子式：Ｃ３０Ｈ４６Ｎ２Ｏ１０Ｓ（高分解能マス
スペクトル法により測定） ４）分子量：６２６（ＦＡＢ−ＭＳ法により測定した
（Ｍ＋Ｈ）＋＝６２７） ５）紫外線吸収スペクトル ：水溶液で測定した結果
は、第５図に示す通りで、２０５ｎｍ（ε１８９８
０）、２８８ｎｍ（ε５００）に極大吸収を示す。 ６）赤外線吸収スペクトル：臭化カリウム錠剤で測定し
たスペクトルを第６図に示す。 ７）水素核磁気共鳴スペクトル：重水中、５００ＭＨｚ
で測定したスペクトルを第７図に示す。 ８）炭素核磁気共鳴スペクトル：重水中、１２５ＭＨｚ
で測定したスペクトルを第８図に示す。 ９）溶解性：水、メタノール、ジメチルスルホキシドに
易溶。ノルマルヘキサン、酢酸エチルに不溶。 １０）呈色反応：ライドン−スミス、ニンヒドリン、硫
酸、過マンガン酸カリウムに陽性。エールリッヒ、坂
口、ドラーゲンドルフに陰性。 １１）薄層クロマトグラフィーのＲｆ値：０．５ シリカゲル（メルク社製 シリカゲル６０Ｆ２５４）薄
層を用い、展開溶媒として、１−ブタノール−酢酸−水
（４：１：１）を用いた。 - 【請求項２】ストレプトミセス属に属し、請求項１に記
載の生理活性物質ＮＫ３０４２４Ａまたは、ＮＫ３０４
２４Ｂを生産する能力を有する微生物を、栄養培地にて
培養し、培養物中に生理活性物質ＮＫ３０４２４Ａまた
はＮＫ３０４２４Ｂを生成蓄積せしめ、これを採取する
ことを特徴とする生理活性物質ＮＫ３０４２４Ａまたは
ＮＫ３０４２４Ｂの製造法。 - 【請求項３】請求項１に記載のＮＫ３０４２４Ａまた
は、ＮＫ３０４２４Ｂ、あるいはそれらの薬学的に許容
し得る塩および医薬用添加剤とからなる医薬。 - 【請求項４】請求項１に記載のＮＫ３０４２４Ａまた
は、ＮＫ３０４２４Ｂ、あるいはそれらの薬学的に許容
し得る塩および医薬用添加剤とからなる腫瘍壊死因子α
（ＴＮＦα）産生抑制剤。 - 【請求項５】慢性関節リウマチ、川崎病、クローン病、
ベーチェット病、気管支喘息、癌悪液質、敗血症、腎
炎、肝炎、血管炎、心不全、高脂血症、多発性硬化症、
神経障害、脊髄症、痴呆症、糖尿病、ウイルス感染症の
いずれかに対する治療あるいは予防の目的で用いられる
請求項３記載の医薬。 - 【請求項６】請求項１に記載の生理活性物質ＮＫ３０４
２４Ａまたは、ＮＫ３０４２４Ｂを生産する能力を有す
るストレプトミセス属放線菌。 - 【請求項７】ストレプトミセス・エスピーＮＡ３０４２
４（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｓｐ．ＮＡ３０４２
４、生命工学工業技術研究所寄託ＦＥＲＭ ｐ−１６４
２２）株又はその変異株。
Priority Applications (1)
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|---|---|---|---|
| JP30950597A JPH11127882A (ja) | 1997-10-27 | 1997-10-27 | 新規生理活性物質ｎｋ３０４２４ａ，ｎｋ３０４２４ｂ，それらの製造法およびそれらの用途 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP30950597A JPH11127882A (ja) | 1997-10-27 | 1997-10-27 | 新規生理活性物質ｎｋ３０４２４ａ，ｎｋ３０４２４ｂ，それらの製造法およびそれらの用途 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH11127882A true JPH11127882A (ja) | 1999-05-18 |
Family
ID=17993815
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP30950597A Pending JPH11127882A (ja) | 1997-10-27 | 1997-10-27 | 新規生理活性物質ｎｋ３０４２４ａ，ｎｋ３０４２４ｂ，それらの製造法およびそれらの用途 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH11127882A (ja) |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2003045430A1 (en) * | 2001-11-23 | 2003-06-05 | King's College London | Tnf-alpha inhibitors for the treatment of hepatic diseases |
| JP2010209070A (ja) * | 2002-07-19 | 2010-09-24 | Abbott Biotechnology Ltd | ＴＮＦα関連疾患の治療 |
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| US8999337B2 (en) | 2007-06-11 | 2015-04-07 | Abbvie Biotechnology Ltd. | Methods for treating juvenile idiopathic arthritis by inhibition of TNFα |
| US9605064B2 (en) | 2006-04-10 | 2017-03-28 | Abbvie Biotechnology Ltd | Methods and compositions for treatment of skin disorders |
| US9624295B2 (en) | 2006-04-10 | 2017-04-18 | Abbvie Biotechnology Ltd. | Uses and compositions for treatment of psoriatic arthritis |
-
1997
- 1997-10-27 JP JP30950597A patent/JPH11127882A/ja active Pending
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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| JP2015221798A (ja) * | 2002-07-19 | 2015-12-10 | アッヴィ バイオテクノロジー リミテッド | ＴＮＦα関連疾患の治療 |
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| US8986693B1 (en) | 2004-04-09 | 2015-03-24 | Abbvie Biotechnology Ltd. | Use of TNFα inhibitor for treatment of psoriasis |
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| US8999337B2 (en) | 2007-06-11 | 2015-04-07 | Abbvie Biotechnology Ltd. | Methods for treating juvenile idiopathic arthritis by inhibition of TNFα |
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| US9669093B2 (en) | 2007-06-11 | 2017-06-06 | Abbvie Biotechnology Ltd | Methods for treating juvenile idiopathic arthritis |
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