PT1517697E

PT1517697E - Preparações ácidas de insulina com estabilidade melhorada

Info

Publication number: PT1517697E
Application number: PT37325362T
Authority: PT
Inventors: Anette Brunner-Schwarz; Norbert Lill
Original assignee: Sanofi Aventis Deutschland
Priority date: 2002-06-18
Filing date: 2003-06-05
Publication date: 2012-12-17
Also published as: MEP28708A; NO328567B1; TWI315201B; RU2313362C2; CN1662252A; IL165788A; ECSP045496A; UA79477C2; MA27205A1; CN102133393B; PL372072A1; HN2003000184A; DK1517697T3; RU2005100959A; AR039688A1; AU2003238471B2; CR7614A; RS52388B; OA12870A; BRPI0311877B1

Description

DESCRIÇÃO "PREPARAÇÕES ÁCIDAS DE INSULINA COM ESTABILIDADE MELHORADA" A invenção refere-se a uma formulação farmacêutica contendo um polipéptido seleccionado de um grupo contendo insulina, um metabolito de insulina, um análogo de insulina, um derivado de insulina ou suas combinações; um tensioactivo ou combinações de dois ou mais tensioactivos; opcionalmente um agente de conservação ou combinações de dois ou mais agentes de conservação; e opcionalmente um agente de isotonização, tampões ou substâncias auxiliares adicionais ou suas combinações, em que a formulação farmacêutica apresenta um valor de pH na gama ácida.

Estas formulações podem ser empregues para o tratamento de diabetes e são particularmente adequadas para preparações em que é necessária uma estabilidade elevada face a cargas térmicas e/ou fisico-mecânicas. A invenção refere-se igualmente a preparações parentéricas que contêm formulações deste tipo e que possam ser aplicadas no caso de diabetes, bem como a métodos para produzir as preparações e para melhorar a estabilidade de preparações de insulina.

Em todo o mundo, cerca de 120 milhões de pessoas padecem de Diabetes mellitus. Entre estas encontram-se cerca de 12 milhões de diabéticos de tipo I, para quem a substituição da secreção endócrina de insulina em falta representa actualmente a única terapia possível. Os afectados estão dependentes de injecções de 1 insulina durante toda a vida, em regra várias vezes ao dia. Em oposição à diabetes de tipo I, no caso da diabetes de tipo II não existe basicamente uma deficiência de inulina, no entanto, numa multiplicidade de casos, sobretudo nos estádios avançados, o tratamento com insulina é visto como a forma de terapia mais favorável, eventualmente em combinação com um antidiabético oral. Em pessoas saudáveis, a libertação de insulina pelo pâncreas está estritamente acoplada à concentração de glucose no sangue. Níveis aumentados de glucose no sangue, como ocorrem após as refeições, são rapidamente compensados através de um aumento correspondente da secreção de insulina. No estado em jejum, o nível de insulina no plasma diminui para um valor basal, que é suficiente para garantir um abastecimento contínuo de glucose a órgãos e tecidos sensíveis à insulina e para manter baixa a produção hepática de glucose durante a noite. A substituição da secreção de insulina própria do organismo por aplicação exógena de insulina, maioritariamente subcutânea, não alcança, em regra, nada semelhante à qualidade descrita acima da regulação fisiológica da glucose no sangue. Frequentemente ocorrem desvios da glucose no sangue para cima ou para baixo, que nas suas formas mais severas podem ser ameaçadores para a vida. No entanto, a par disso, níveis de glucose no sangue aumentados durante anos, sem sintomas iniciais, também representam um risco elevado para a saúde. 0 estudo DCCT em larga escala nos EUA (The Diabetes Control and Complications Trial Research Group (1993) N. Engl. J. Med. 329, 977 - 986) demonstrou claramente que níveis de glucose no sangue aumentados de forma crónica são no essencial responsáveis pelo desenvolvimento de lesões diabéticas tardias. As lesões diabéticas tardias são lesões micro e macrovasculares, que se manifestam nalguns casos como retinopatia, nefropatia ou neuropatia e conduzem à cegueira, falha renal, bem como à perda 2 de extremidades e além disso são acompanhadas por um risco aumentado para doenças cardiacas/vasculares. Daqui pode inferir-se que uma terapia melhorada da diabetes tem que ter em primeiro lugar como objectivo manter a glucose no sangue o mais proximamente possível na gama fisiológica. De acordo com o conceito da terapia intensiva de insulina, isto deve ser alcançado através de várias injecções diárias de preparações de insulina de acção rápida e lenta. Formulações de acção rápida são dadas às refeições, para compensar o aumento pós-prandial da glucose no sangue. Insulinas basais de acção lenta devem assegurar o abastecimento basal com insulina, em particular durante a noite, sem conduzir a uma hipoglicémia. A insulina é um polipéptido de 51 aminoácidos, que se distribuem em 2 cadeias de aminoácidos: a cadeia A com 21 aminoácidos e a cadeia B com 30 aminoácidos. As cadeias estão ligadas uma à outra através de 2 pontes dissulfureto. As preparações de insulina são empregues desde há muitos anos para a terapia da diabetes. Para o efeito não são utilizadas apenas insulinas de ocorrência natural, mas recentemente também são utilizados derivados de insulina e análogos de insulina.

Os análogos de insulina são análogos de insulinas de ocorrência natural, nomeadamente insulina humana e insulinas animais, que se diferenciam pela substituição de pelo menos um resíduo de aminoácido de ocorrência natural por outros aminoácidos e/ou adição/eliminação de pelo menos um resíduo de aminoácido da insulina de ocorrência natural correspondente, de outro modo igual. Neste caso também pode tratar-se de aminoácidos que não ocorram naturalmente. 3

Os derivados de insulina são derivados de insulina de ocorrência natural ou de um análogo de insulina, que são obtidos por modificação química. A modificação química pode consistir p. ex. na adição de um ou vários grupos químicos determinados a um ou vários aminoácidos. Em regra, os derivados de insulina e análogos de insulina têm uma acção um pouco alterada face à insulina humana.

Os análogos de insulina com entrada em actividade acelerada são descritos nos documentos EP 0214826, EP 0375437 e EP0678522. O documento EP 0124826 refere-se, entre outros, a substituições de B27 e B28. O documento EP 0678522 descreve análogos de insulina que apresentam diferentes aminoácidos na posição B29, de um modo preferido prolina, no entanto não apresentam ácido glutâmico. O documento EP 0375437 compreende análogos de insulina com lisina ou arginina em B28 que, opcionalmente, podem ser adicionalmente modificados em B3 e/ou A21.

No documento EP 0419504 são revelados análogos de insulina que estão protegidos contra modificações químicas, em que estão alteradas a asparagina em B3 e pelo menos um aminoácido adicional nas posições A5, A15, A18 ou A21.

Em regra, os derivados de insulina e análogos de insulina têm uma acção um pouco alterada face à insulina humana.

No documento WO 92/00321 são descritos análogos de insulina em que pelo menos um aminoácido das posições BI - B6 está substituído por lisina ou arginina. De acordo com o documento WO 92/00321, as insulinas deste tipo apresentam uma acção 4 prolongada. Os análogos de insulina descritos no documento EP-A 0368187 também apresentam uma acção retardada.

As preparações de insulina de insulinas de ocorrência natural que se encontram no mercado para a substituição de insulina diferenciam-se na origem da insulina (p. ex. insulina bovina, porcina, humana) , bem como na composição, pelo que o perfil de acção (entrada em acção e duração da acção) pode ser influenciado. Pela combinação de diferentes preparados de insulina podem alcançar-se os mais diferentes perfis de acção e ajustar o mais possível valores fisiológicos de açúcar no sangue. Hoje em dia, a tecnologia do ADN recombinante possibilita a preparação de insulinas modificadas deste tipo. Entre estas conta-se a insulina glargina (Gly(A21)-Arg(B31)-Arg(B32)-insulina humana) com uma duração de acção prolongada. A insulina glargina é injectada como solução ácida, límpida, e precipita como associado hexamérico estável devido às suas propriedades de dissolução na gama de pH fisiológico do tecido subcutâneo. A insulina glargina é injectada uma vez ao dia e, face a outras insulinas de acção prolongada, caracteriza-se pelo seu baixo perfil no soro e a redução com isso associada do perigo de hipoglicémias nocturnas (Schubert-Zsilavecz et al., 2: 125 - 130 (2001)) . A preparação específica da insulina glargina, que conduz à duração de acção prolongada, é caracterizada, em oposição às preparações descritas até à data, por uma solução límpida com valor de pH ácido. Precisamente no caso de valor de pH ácido, as insulinas mostram no entanto uma estabilidade diminuída e uma tendência elevada para a agregação no caso de carga térmica e físico-mecânica, que se pode manifestar na forma de turvações e precipitações (formações de partículas) (Brange et al., j. Ph. 5

Sei. 86: 517 - 525 (1997)) . A tendência para a agregação pode ser adicionalmente promovida por superfícies hidrofóbicas, que estejam em contacto com a solução (Sluzky et al., Proc. Natl. Acad. Sei. 88: 9377 - 9381 (1991)). Como superfícies hidrofóbicas podem ser referidos os recipientes de vidro das preparações, o material da rolha das tampas, ou a interface da solução relativamente ao sobrenadante gasoso. A par disso, as gotículas mais finas de óleo de sílica podem funcionar como núcleos de agregação hidrofóbicos adicionais aquando da remoção da dose diária de insulina através de seringas de insulina usuais no mercado, silicanizadas, e acelerar o processo. 0 documento WO 01/43762 descreve preparações farmacêuticas parentéricas, aquosas, contendo um polipéptido e glicerol, em que a estabilização da preparação deve ser alcançada pela remoção por purificação de componentes desestabilizadores do glicerol. O documento WO 00/23098 descreve preparações de insulina estabilizadas com polissorbato 20 ou poloxamero 188 para aplicação pulmonar, no entanto não descreve a estabilização em solução ácida contra núcleos de agregação. O pedido de patente internacional PCT/EP02/02625 (não publicado) descreve preparações de insulina isentas de zinco e pobres em zinco em que a adição de tensioactivos melhora a estabilidade à temperatura ambiente e temperatura do corpo e no caso de carga mecânica, no entanto não descreve a estabilização de preparações ácidas de insulina contra núcleos de agregação hidrofóbicos. 6 A presente invenção tem por conseguinte por base o objectivo de encontrar preparações para insulinas solúveis em ácidos com tensioactivos, que se caracterizem por uma elevada estabilidade de longo prazo face a cargas por temperatura ou stresses físico-mecânicos e que tolerem uma carga elevada com núcleos de agregação hidrofóbicos.

Foi agora descoberto de um modo surpreendente que a adição de tensioactivos pode aumentar fortemente a estabilidade de preparações ácidas de insulina e com isso podem mesmo ser preparadas preparações que garantam a estabilidade superior face a núcleos de agregação hidrofóbicos, durante vários meses no caso de carga de temperatura.

As preparações farmacêuticas compreendem 60 - 6000 nmol/mL, de um modo preferido 240 - 3000 nmol/mL de uma insulina, um metabolito de insulina, um análogo de insulina ou um derivado de insulina.

Como tensioactivos podem encontrar utilização o Tween® 20 e Tween® 80. Os tensioactivos estão presentes na preparação farmacêutica numa concentração de 5 - 200 pg/mL, de um modo preferido de 5 - 120 pg/mL, e de um modo preferido em particular de 20 - 75 pg/mL. A preparação pode além disso compreender agentes de conservação (p. ex. fenol, cresol, parabenos), agentes de isotonização (p. ex. manitol, sorbitol, lactose, dextrose, trealose, cloreto de sódio, glicerol), substâncias tampão, sais, ácidos e bases, bem como agentes auxiliares adicionais. Estas substâncias podem estar presentes respectivamente isoladamente ou também como misturas. 7 0 glicerol, dextrose, lactose, sorbitol e manitol estão presentes habitualmente na preparação farmacêutica numa concentração de 100 - 250 mM, NaCl numa concentração de até 150 mM. As substâncias tampão, como p. ex. tampão fosfato, acetato, citrato, arginina, glicilglicerina ou TRIS (isto é, 2-amino-2-hidroximetil-l,3-propanodiol), bem como os sais correspondentes, estão presentes numa concentração de 5 - 250 mM, de um modo preferido 10 - 100 mM. As substâncias auxiliares adicionais podem ser, entre outras, sais ou arginina.

Na patente US 4994439 são reveladas composições de proteínas ou péptidos para a administração através de membranas, que mostram toxicidade baixa e uma permeação eficiente, em que está contida uma mistura de um sal ou fusidato de ácido gálico com um detergente não iónico.

No pedido de patente francês com o número de publicação 2456522 são revelados preparados de insulina com substâncias auxiliares para a reabsorção por mucosas. Estas substâncias auxiliares representam ácidos inorgânicos e diferentes ácidos carboxílicos.

No pedido de patente alemão com o número de publicação 4140186 AI são reveladas formas de aplicação perorai com uma matriz de gelatina ou um derivado de gelatina, em que a substância activa, em particular insulina, está distribuída na matriz. 0 objecto da invenção é por conseguinte uma formulação farmacêutica compreendendo

Gly(A21), Arg(B31), Arg(B32)-insulina humana um tensioactivo, selecionado de um grupo compreendendo Tween® 20 e Tween® 80 numa concentração de 5 - 200 pg/mL; opcionalmente um agente de conservação ou combinações de dois ou mais agentes de conservação; e opcionalmente um agente de isotonização, tampões ou substâncias auxiliares adicionais ou suas combinações; em gue a formulação farmacêutica é uma solução límpida, gue apresenta um valor de pH na gama ácida (pH 3,5 - 4,5). É preferida uma formulação farmacêutica do tipo em que o agente de conservação é seleccionado de um grupo compreendendo fenol, cresol, parabenos; em que o agente de isotonização é seleccionado de um grupo compreendendo manitol, sorbitol, cloreto de sódio, glicerol; em que as substâncias auxiliares são seleccionadas de um grupo compreendendo substâncias tampão, ácidos, bases.

Um objecto adicional da invenção é uma formulação farmacêutica como descrita acima, em que a insulina, o análogo de insulina, o metabolito activo de insulina e/ou o derivado de insulina está presente numa concentração de 60 - 6000 nmole/mL, de um modo preferido numa concentração de 240 - 3000 nmole/mL (isto corresponde aproximadamente a uma concentração de 1,4 - 35 mg/mL ou 40 - 500 unidades/mL) ; em que o tensioactivo está presente numa concentração de 5 - 200 pg/mL, de um modo preferido de 5 - 120 pg/mL, e de um modo mais preferido de 20 - 75 pg/mL.

Um objecto adicional da invenção é uma formulação farmacêutica como descrita acima, em que o glicerol e/ou manitol 9 está presente numa concentração de 100 - 250 mM, e/ou NaCl está presente de um modo preferido numa concentração de até 150 mM.

Um objecto adicional da invenção é uma formulação farmacêutica como descrita acima, em que uma substância tampão está presente numa concentração de 5 - 250 mM.

Um objecto adicional da invenção é uma formulação farmacêutica de insulina que contém aditivos adicionais, como p. ex. sais, que retardam a libertação de insulina. Também estão ai incluídas misturas de insulinas de libertação retardada deste tipo com formulações descritas acima.

Um objecto adicional da invenção é um método para a preparação de formulações farmacêuticas deste tipo. As últimas são adequadas para o tratamento de Diabetes mellitus.

Um objecto adicional da invenção é a utilização ou a adição de tensioactivos como estabilizadores durante o processo de preparação de insulina, análogos de insulina ou derivados de insulina ou das suas preparações.

Em seguida o pedido é descrito com base em alguns exemplos, que de modo algum o devem limitar.

Exemplos:

Os exemplos seguintes devem explicar mais detalhadamente o conceito da invenção, sem a limitar. 10

Pesquisas de comparação: são preparadas diferentes preparações com o análogo de insulina glargina, (Gly(A21), Arg(B31), Arg(B32)-insulina humana). Para o efeito a insulina glargina foi suspensa numa parte de água para fins de injecção, dissolvida a pH 3 - 4, os outros componentes são adicionados, o valor de pH é ajustado com ácido clorídrico/NaOH para 4,0 +/- 0,2 e enche-se até ao volume final. A concentração de insulina glargina perfaz em cada uma das pesquisas descritas abaixo 3,6378 mg/mL (corresponde a 100 unidades/mL). É preparada de modo idêntico uma segunda preparação, no entanto é ainda adicionada uma quantidade determinada de um tensioactivo. As soluções são utilizadas para encher recipientes de vidro de 10 mL e são seladas. Estes recipientes são então expostos a condições de stress simuladas de utilização ou fisico-mecânicas: 1. Teste de utilização: os recipientes são distribuídos em caixas com tampas telescópicas e armazenados a +25 °C e humidade do ar controlada, sob exclusão de luz, durante o período de tempo do ensaio de 28 dias. Para a simulação da toma pelo doente são removidas uma vez ao dia cerca de 5 IU da solução com uma seringa de insulina usual no mercado e descartadas. No início e no final da semana de trabalho este processo é realizado duas vezes, para simular a toma no fim-de-semana. Antes de cada toma efectua-se a observação visual da solução nos recipientes relativamente à turvação e/ou formação de partículas. 2. Teste de agitação: os recipientes são colocados numa caixa com tampa telescópica colocada sobre um agitador de laboratório com incubadora e termostato, e são agitados a 25 °C com 90 movimentos/min paralelamente ao 11 movimento horizontal, durante um período de tempo de 10 dias. Após tempos definidos é determinado o valor da turvação das amostras por meio de um espectrofotómetro de laboratório para a turvação (nefelómetro) em unidades de nefelométricas de formaldazina (Unidade Nefelométrica de Formaldazina = FNU) . O valor da turvação corresponde à intensidade da radiação dispersa da luz irradiada em partículas em suspensão na amostra.

Exemplo 1: estabilização do período in use de insulina glargina com polissorbato 20 (Tween® 20) a) A solução é filtrada de forma esterilizante através de uma combinação de filtros de 0,2 pm e 0,1 ym. Em seguida ela é utilizada para encher frascos de injecção de 10 mL e é selada com tampas de rebordo com disco de selagem inserido. b) É preparada de modo idêntico uma solução de comparação, no entanto é primeiro suspendida uma quantidade adequada de tensioactivo (10 - 30 ppm de polissorbato 20) em água para fins de injecção.

As amostras são armazenadas a +5 °C, 25 °C e 37 °C durante um período de tempo determinado. Em seguida, 10 amostras são respectivamente sujeitas a um teste em utilização. Os resultados estão resumidos na tabela seguinte. 12

Armazenamento de 3 meses a 5 °C Número de frasquinhos com formação de partículas após Amostra de teste 7 dias 14 dias 21 dias 28 dias Insulina glargina 7 10 10 10 Insulina glargina + 0,010 mg/mL de Polissorbato 20 0 0 0 0 Insulina glargina + 0,015 mg/mL de Polissorbato 20 0 0 0 0 Insulina glargina + 0,020 mg/mL de Polissorbato 20 0 0 0 1 Insulina glargina + 0,030 mg/mL de Polissorbato 20 0 0 0 0

Armazenamento de 6 meses a 5 °C Número de frasquinhos com formação de partículas após Amostra de teste 7 dias 14 dias 21 dias 28 dias Insulina glargina 1 10 10 10 Insulina glargina + 0,010 mg/mL de Polissorbato 20 0 0 0 1 Insulina glargina + 0,015 mg/mL de Polissorbato 20 0 0 0 0 Insulina glargina + 0,020 mg/mL de Polissorbato 20 0 0 0 1 Insulina glargina + 0,030 mg/mL de Polissorbato 20 0 0 0 0 13

Armazenamento de 3 meses a 25 °C Número de frasquinhos com formação de partículas após Amostra de teste 7 dias 14 dias 21 dias 28 dias Insulina glargina 9 10 10 10 Insulina glargina + 0,010 mg/mL de Polissorbato 20 2 2 2 2 Insulina glargina + 0,015 mg/mL de Polissorbato 20 0 0 0 1 Insulina glargina + 0,020 mg/mL de Polissorbato 20 0 0 0 0 Insulina glargina + 0,030 mg/mL de Polissorbato 20 0 0 0 0

Armazenamento de 6 meses a 25 °C Número de frasquinhos com formação de partículas após Amostra de teste 7 dias 14 dias 21 dias 28 dias Insulina glargina 10 10 10 10 Insulina glargina + 0,010 mg/mL de Polissorbato 20 0 0 0 1 Insulina glargina + 0,015 mg/mL de Polissorbato 20 0 0 1 0 Insulina glargina + 0,020 mg/mL de Polissorbato 20 0 0 0 0 Insulina glargina + 0,030 mg/mL de Polissorbato 20 0 0 0 0 14

Armazenamento de 1 mês a 37 °C Número de frasquinhos com formação de partículas após Amostra de teste 7 dias 14 dias 21 dias 28 dias Insulina glargina 0 10 10 10 Insulina glargina + 0,010 mg/mL de Polissorbato 20 0 3 3 5 Insulina glargina + 0,015 mg/mL de Polissorbato 20 0 0 0 0 Insulina glargina + 0,020 mg/mL de Polissorbato 20 0 0 0 0 Insulina glargina + 0,030 mg/mL de Polissorbato 20 0 0 0 0

Armazenamento de 3 meses a 37 °C Número de frasquinhos com formação de partículas após Amostra de teste 7 dias 14 dias 21 dias 28 dias Insulina glargina 5 9 10 10 Insulina glargina + 0,010 mg/mL de Polissorbato 20 1 1 1 1 Insulina glargina + 0,015 mg/mL de Polissorbato 20 0 0 0 0 Insulina glargina + 0,020 mg/mL de Polissorbato 20 0 0 0 0 Insulina glargina + 0,030 mg/mL de Polissorbato 20 0 0 0 0 15

Armazenamento de 6 meses a 37 °C Número de frasquinhos com formação de partículas após Amostra de teste 7 dias 14 dias 21 dias 28 dias Insulina glargina 10 10 10 10 Insulina glargina + 0,010 mg/mL de Polissorbato 20 0 0 0 0 Insulina glargina + 0,015 mg/mL de Polissorbato 20 0 0 1 0 Insulina glargina + 0,020 mg/mL de Polissorbato 20 0 0 0 0 Insulina glargina + 0,030 mg/mL de Polissorbato 20 1 1 1 1

Sem adição de polissorbato 20 pode ocorrer formação de partículas na solução já após 7 dias em utilização. Pela adição de polissorbato 20, a formação de partículas pode ser marcadamente reprimida durante o período em utilização. A acção estabilizadora do polissorbato 20 persiste também no caso do armazenamento a temperaturas elevadas durante um período de tempo de 3 meses. Não pode ser comprovado um declínio da acção estabilizadora pela possível hidrólise do polissorbato em meio ácido da solução em comparação com os dados após 1 mês de armazenamento. 16

Exemplo polissorbato estabilização de 2 : 20 no caso de carga de insulina glargina stress físico-mecânica com a) A solução é filtrada de forma esterilizante através de uma combinação de filtros de 0,2 pm e 0,1 pm. Em seguida ela é utilizada para encher frascos de injecção de 10 mL e é selada com tampas de rebordo com disco de selagem inserido. b) E preparada de modo idêntico uma solução de comparação, no entanto é primeiro suspendida uma quantidade adequada de tensioactivo (0,010 - 0,030 mg/mL de polissorbato 20) em água para fins de injecção.

As amostras são armazenadas a +5 °C, 25 °C e 37 °C durante um período de tempo determinado. Em seguida, 5 amostras são respectivamente sujeitas a um teste de agitação. Os resultados estão resumidos na tabela seguinte, o limite de 15 FNU corresponde a turvações que são reconhecíveis à luz do dia. 17

Armazenamento de 1 mês a 5 °C Número de frasquinhos > 15 FNU Amostra de teste 0 dias 0,5 dias 1 dias 2 dias 3 dias 4 dias 6 dias 8 dias 10 dias Insulina glargina 0 0 0 2 3 3 4 4 4 Insulina glargina + 0,010 mg/mL de Polissorbato 20 0 0 0 0 0 1 3 4 5 Insulina glargina + 0,015 mg/mL de Polissorbato 20 0 0 0 0 0 0 0 0 0 Insulina glargina + 0,020 mg/mL de Polissorbato 20 0 0 0 0 0 0 0 0 0 Insulina glargina + 0,030 mg/mL de Polissorbato 20 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Armazenamento de 1 mês a 25 °C Número de frasquinhos > 15 FNU Amostra de teste 0 dias 0,5 dias 1 dias 2 dias 3 dias 4 dias 6 dias 8 dias 10 dias Insulina glargina 0 0 0 1 1 1 1 2 3 Insulina glargina + 0,010 mg/mL de Polissorbato 20 0 0 0 0 0 0 1 2 3 Insulina glargina + 0,015 mg/mL de Polissorbato 20 0 0 0 0 0 0 0 0 0 Insulina glargina + 0,020 mg/mL de Polissorbato 20 0 0 0 0 0 0 0 0 0 Insulina glargina + 0,030 mg/mL de Polissorbato 20 0 0 0 0 0 0 0 0 0 18

Armazenamento de 1 mês a 37 °C Número de frasquinhos > 15 FNU Amostra de teste 0 dias 0, 5 dias 1 dias 2 dias 3 dias 4 dias 6 dias 8 dias 10 dias Insulina glargina 0 0 0 2 5 5 5 5 5 Insulina glargina + 0,010 mg/mL de Polissorbato 20 0 0 0 0 0 0 0 0 0 Insulina glargina + 0,015 mg/mL de Polissorbato 20 0 0 0 0 0 0 0 0 0 Insulina glargina + 0,020 mg/mL de Polissorbato 20 0 0 0 0 0 0 0 0 0 Insulina glargina + 0,030 mg/mL de Polissorbato 20 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Sem adição de polissorbato 20 pode ocorrer turvação visível na solução já após 2 dias de forte carga físico-mecânica. Pela adição de polissorbato 20, a formação de turvação pode ser marcadamente reprimida durante o stress físico-mecânico. A acção estabilizadora do polissorbato 20 também persiste no caso do armazenamento a temperaturas elevadas. Não pode ser comprovado um declínio da acção estabilizadora pela possível hidrólise do polissorbato em meio ácido da solução. 19

Exemplo 3: comparação da estabilização do período in use de insulina glargina com polissorbato 20 (Tween® 20) e com polissorbato 80 (Tween® 80)

Abrir respectivamente 10 frasquinhos para a adição de 5 mL de solução injectável de glargina e a) adição de 0,001 mg/mL de polissorbato 20 b) adição de 0,01 mg/mL de polissorbato 20 c) adição de 0,001 mg/mL de polissorbato 80 d) adição de 0,01 mg/mL de polissorbato 80 na forma de uma solução mãe concentrada.

As amostras são sujeitas em seguida a um teste em utilização.

Os resultados estão resumidos na tabela seguinte.

Frasquinhos com formação de parti cuias após Amostra de teste 7 dias 14 dias 21 dias 28 dias sim, as sim, as Insulina glargina partículas partículas não sim + 0,001 mg/mL de aparecem aparecem Polissorbato 20 reforçadas reforçadas Insulina glargina + 0,010 mg/mL de não não não não Polissorbato 20 sim, as sim, as Insulina glargina partículas partículas não sim + 0,001 mg/mL de aparecem aparecem Polissorbato 80 reforçadas reforçadas Insulina glargina + 0,010 mg/mL de não não não não Polissorbato 80 20

Uma adição de polissorbato 20 ou de polissorbato 80 numa concentração de 0,01 mg/mL estão em iguais condições de estabilizar a solução face à formação de partículas durante o período em utilização.

Lisboa, 28 de Novembro de 2012 21

Claims

REIVINDICAÇÕES 1. Formulação farmacêutica compreendendo Gly(A21), Arg(B31), Arg(B32)-insulina humana; um tensioactivo, seleccionado de um grupo compreendendo Tween® 2 0 e Tween® 80 numa concentração de 5 - 200 yg/mL; opcionalmente, um agente de conservação ou combinações de dois ou mais agentes de conservação; e, opcionalmente, um agente de isotonização, tampões ou outras substâncias auxiliares adicionais ou suas combinações; em que a formulação farmacêutica é uma solução límpida, que apresenta um valor de pH na gama ácida (pH 3,5 - 4,5).
2. Formulação farmacêutica de acordo com a reivindicação 1, em que o agente de conservação é seleccionado de um grupo compreendendo fenol, cresol, clorocresol, álcool benzílico, parabenos.
3. Formulação farmacêutica de acordo com uma das reivindicações 1 ou 2, em que o agente de isotonização é seleccionado de um grupo compreendendo manitol, sorbitol, lactose, dextrose, trealose, cloreto de sódio, glicerol.
4. Formulação farmacêutica de acordo com uma das reivindicações 1 a 3, em que as substâncias auxiliares são seleccionadas de um grupo compreendendo substâncias tampão, como p. ex. TRIS, fosfato, citrato, acetato, glicilglicerina ou outras substâncias como ácidos, bases, sais. 1
5. Formulação farmacêutica de acordo com uma das reivindicações anteriores, em que a Gly(A21), Arg(B31), Arg(B32)-insulina humana está presente numa concentração de 60 - 6000 nmole/mL.
6. Formulação farmacêutica de acordo com a reivindicação 5, em que a Gly(A21), Arg(B31), Arg(B32)-insulina humana está presente numa concentração de 240 - 3000 nmole/mL.
7. Formulação farmacêutica de acordo com a reivindicação 6, em que o tensioactivo está presente numa concentração de 5 - 120 pg/mL.
8. Formulação farmacêutica de acordo com a reivindicação 7, em que o tensioactivo está presente numa concentração de 20 - 75 pg/mL.
9. Formulação farmacêutica de acordo com uma ou várias das reivindicações 4 - 8, em que o glicerol e/ou manitol está presente numa concentração de 100 - 250 mM.
10. Formulação farmacêutica de acordo com a reivindicação 9, em que o NaCl está presente numa concentração de até 150 mM.
11. Formulação farmacêutica de acordo com uma das reivindicações anteriores, em que a substância tampão está presente numa concentração de 5 - 250 mM.
12. Formulação farmacêutica de acordo com uma das reivindicações anteriores, em que o tensioactivo é Tween® 20 . 2 com uma das tensioactivo é
13. Formulação farmacêutica de acordo reivindicações anteriores, em que o Tween® 80 . Lisboa, 28 de Novembro de 2012 3