PT1079807E - Preparações para aplicação de agentes anti inflamatórios, em especial de agentes antissépticos e/ou agentes que promovam a cicatrização de feridas, na parte inferior do aparelho respiratório - Google Patents

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DESCRIÇÃO "PREPARAÇÕES PARA APLICAÇÃO DE AGENTES ΑΝΤΙ INFLAMATÓRIOS, EM ESPECIAL DE AGENTES ANTISSÉPTICOS E/OU AGENTES QUE PROMOVAM A CICATRIZAÇÃO DE FERIDAS, NA PARTE INFERIOR DO APARELHO RESPIRATÓRIO" A invenção diz respeito a preparações para a aplicação de agentes com propriedades anti inflamatórias, em especial antissépticas e/ou de promoção da cicatrização de feridas na parte inferior do aparelho respiratório. As preparações são especificamente aplicadas à traqueia, aos brônquios e aos alvéolos, na parte inferior dos aparelhos respiratórios de humanos e animais. Para além disso, a invenção diz respeito a um método de impedir ou de tratar infecções pela aplicação de uma preparação farmacêutica. São conhecidos diversos agentes antibióticos e antissépticos para o tratamento tópico de doenças infecciosas. Uma desvantagem decisiva dos agentes antibióticos é que as bactérias infectantes exibem resistências primárias, e podem adquirir resistências secundárias, contra estes agentes. Para além disto, os antibióticos levam amiúde à sensibilização do paciente. A utilização de, por exemplo, antissépticos que libertem halogéneo, tais como o iodo povidona, também conhecida como iodo polividona, ou iodo PVP, isto é, o complexo de iodo 2 com poli(l-vinil-2-pirrolidin-2-ona), pode impedir as resistências. Os agentes antissépticos são também muito mais raramente alergénicos, em comparação com os antibióticos.

No presente, as doenças inflamatórias do aparelho respiratório são tratadas com antibióticos. A aplicação de agentes antibióticos ao aparelho respiratório tem sido sujeita a diversas publicações de revisão e a publicações científicas, com ênfase para a parte inferior do aparelho respiratório.

Ramsey et ai., por exemplo, descrevem a administração intermitente de tobramicina inalada, em pacientes com fibrose quística, em "The New England Journal of Medicine", Volume 340, Número 1, 1999, p. 23-30. Foi investigada por Wiener-Kronish no "Journal of Antimicrobial Chemotherapy" (1996) 38, p. 809-818, a inclusão em aerossóis de imipenem/cilastatina, para impedir os danos agudos aos pulmões induzidos por pseudomonas. As aplicações de diversos agentes antibióticos tais como benzil penicilina, tobramicina ou amicacina aos pulmões, para o tratamento de doenças infecciosas, foram descritas por Schreier em diversos artigos de revisão recentes, por exemplo em "Medicai applications of liposomes", Papahadjopoulos e Lasic (edit.), Elsevier 1998. No entanto, o tratamento com antibióticos leva ãs complicações que são do conhecimento dos especialistas da técnica. Por exemplo, 3 os pacientes que sofram de bronquite aguda ou crónica são amiúde tratados com antibióticos para lhes aliviar os sintomas. Isto leva amiúde apenas a resistências por parte da bactéria responsável pelos sintomas. Muitas doenças do aparelho respiratório são provocadas por vírus. Os antibióticos não são eficientes em tais casos, e esses pacientes não são curados das infecçóes. A utilização de antissépticos e/ou de agentes capazes de promover a cicatrização de feridas para aplicação externa a seres humanos e a animais é descrita na nossa patente anterior EP 0 639 373. Nesse documento mostra-se especificamente que as preparações de iodo PVP são aplicáveis topicamente na parte externa dos olhos. Estas preparações assumem em geral a forma de uma formulação de um creme, um unguento, uma loção, um gel ou gotas. Os liposomas são veículos bem conhecidos para fármacos, e portanto a aplicação de medicamentos sob forma de liposomas tem sido um assunto de investigação há já bastante tempo. Pode consultar-se uma obra geral acerca de administração aos pulmões de fármacos encapsulados em liposomas para a terapia da asma, "Pulmonary delivery of liposomes" (H. Schreier, em "Journal of Controlled Release", 24, 1993, p. 209-223). A caracterização físico-química de aerossóis com liposomas e também as suas aplicações terapêuticas ao aparelho respiratório são demonstradas nesse documento. Incluem-se nos fármacos cuja administração aos pulmões por intermédio de liposomas foi investigada, por exemplo, agentes anti cancro, péptidos, enzimas, compostos anti asmáticos e anti alérgicos e, tal como se mencionou acima, também 4 antibióticos. Também foi descrita a formulação de aerossóis com liposomas ou de aerossóis em pó com liposomas usando, por exemplo, um inalador de pós secos, por H. Schreier em "Formulation and in vitro performance of liposome powder aerosols" (S. T. P. Pharma Sciences 4, 1994, p. 38-44).

Embora tenha sido prestada muita atenção aos liposomas como transportadores de fármacos, como se pode comprovar nos documentos citados, não parece existir técnica anterior no que toca a liposomas e outros sistemas em partículas como transportadores de agentes anti inflamatórios, antissépticos e/ou promotores da cicatrização para aplicações no corpo, em especial na parte inferior do aparelho respiratório, incluindo a traqueia, os brônquios e os alvéolos.

Parte da técnica anterior que se citou acima diz respeito a preparações de liposomas. Deve entender-se que existem outros agentes transportadores alternativos de fármacos, em sistemas semelhantes constituídos por partículas. Estes sistemas de transporte de fármacos podem ser utilizados frequentemente - e também no contexto desta invenção - e incluem micro esferas (em general contendo polímeros lipofílicos), nanopartículas, "Partículas Prorosas Grandes", e moléculas de substâncias farmacológicas individualmente revestidas, produzidas por exemplo usando técnicas de deposição laser pulsada (PLD). Podem utilizar-se estes métodos PLD para aplicar revestimentos a fármacos pulverulentos e para modificar as 5 propriedades superficiais e a taxa de libertação de uma série de sistemas de fármacos.

Sempre que se faça referência de aqui em diante nestes documentos a liposomas ou a veículos em partículas, deve entender-se que estes incluem também esses veículos alternativos.

Sabe-se na técnica que a administração de partículas inaláveis pelo aparelho respiratório pode ser conseguida por nebulização ou por inclusão num aerossol, das preparações de liposomas, da micro esferas, de Partículas Porosas Grandes, dos PLD ou das nanopartículas ou por inalação de pós secos com as preparações respectivas.

Parece que existe uma relutância marcada na técnica, em aplicar desinfectantes em partes interiores do corpo, excepto talvez nos casos de complicações sépticas que constituam ameaça de morte.

Em geral, as preparações de antibiótico parecem ser preferidas, mesmo atentas as suas desvantagens descritas acima.

Um objecto da invenção em apreço é proporcionar uma preparação bem tolerada, fácil de aplicar, anti inflamatória, antisséptica e/ou promotora de cicatrização de feridas, que proporcione uma libertação prolongada e um 6 efeito tópico prolongado do agente activo na parte inferior do aparelho respiratório.

De acordo com a invenção, consegue-se este objecto na medida em que a preparação contenha pelo menos um agente anti inflamatório, antisséptico e/ou promotor da cicatrização de feridas , sob a forma de uma preparação num veículo em partículas, tal como definido na reivindicação independente 1.

As reivindicações dependentes definem concretizações vantajosas adicionais da invenção.

No contexto desta invenção, entende-se que nos agentes anti inflamatórios se incluem agentes antissépticos, agentes antibióticos, corticosteróides, e agentes de cicatrização de feridas, tal como se definem adiante.

No contexto desta invenção, entende-se que se incluem nos agentes antissépticos aqueles agentes desinfectantes que são aceitáveis do ponto de vista farmacêutico e são adequados para o tratamento da parte inferior do aparelho respiratório, na medida em que possam ser formulados de acordo com a invenção.

Mais especificamente, incluem-se nos agentes antissépticos, entre outros, compostos que libertam oxigénio e halogéneo; compostos metálicos, por exemplo 7 compostos de prata e de mercúrio; desinfectantes orgânicos incluindo entre outros compostos que libertam formaldeído, álcoois, fenóis incluindo alquilfenóis e arilfenóis bem como fenóis halogenados, quinolinas e acridinas, hexahidropirimidinas, compostos de amónio quaternário e sais de imínio, e guanidinas.

Incluem-se nos agentes de cicatrização de feridas, os que promovem a granulação e a epitelialização, tais como dexpantenol, alantoínas, azulenos, taninos, e compostos do tipo da vitamina B. A invenção baseia-se no facto surpreendente de que os veículos em partículas, em especial os liposomas, mas também as micro esferas, as nanopartículas e as moléculas de substâncias farmacológicas revestidas, serem altamente apropriados como veículos para agentes antissépticos, em especial para iodo povidona, e para agentes que promovem a cicatrização de feridas, para aplicação na parte inferior do aparelho respiratório.

As preparações de acordo com esta invenção permitem uma libertação prolongada do agente ou dos agentes, e proporcionam uma actividade tópica e durável no local em que se pretende a sua actuação, por interacção com as superfícies das células. A invenção é, noutro aspecto, baseada num outro facto surpreendente e inesperado, è bem cabido na técnica 8 que a formação de novos tecidos no corpo pode provocar problemas. Assim, sabe-se que a reparação dos tecidos do corpo pode ser acompanhada pela formação de tecido cicatricial, que pode ser funcional e/ou cosmeticamente nocivo, ou pelo menos indesejável. A hiperqueratose e a proliferação não controlada de tecido podem provocar danos importantes, levando a disfunções, e podem também evidentemente ser cosmeticamente indesejáveis. Depois das infecções e das inflamações, o tecido que volta a crescer ou está em cicatrização pode provocar neoplasmas e crescimento intersticial. É portanto bem sabido na técnica que na cura das doenças, uma remodelação adequada do tecido não só é desejável, mas é de facto necessária.

Descobriu-se agora de forma surpreendente que a utilização de agentes anti inflamatórios, por si sós ou em conjunto com outros agentes desses, leva a uma formação de tecido corporal indesejável muito menor no decurso da reparação do tecido e dos outros processos de crescimento tecidular. Assim, a formação de tecidos cicatriciais é diminuída, na pele mas também na mucosa e noutros tecidos, tais como o músculo ou os tecidos dos órgãos interiores. A hiperqueratose pode ser completamente suprimida, e o crescimento intersticial, ou a formação de neoplasmas, durante a cura de doenças infecciosas é também muito menor.

Um objecto conseguido pela invenção é portanto ligado à melhoria da reparação dos tecidos no corpo. A invenção consegue isto pela aplicação de agentes anti 9 inflamatórios, sob a forma de uma preparação num veículo em partículas, tal como se define nas reivindicações independentes.

Pode administrar-se a preparação anti inflamatória, antisséptica e/ou para cícatrização de feridas ao aparelho respiratório, utilizando um agente de nebulização carregado com a preparação em veículo em partículas, ou pela inalação da preparação respectiva em pós secos. Por exemplo, pode-se preparar uma preparação de liposomas carregando liposomas com iodo PVP, por um procedimento convencional. É também possível compactar os liposomas carregados, opcionalmente em conjunto com materiais auxiliares, tais como açúcares com pequena massa molecular, de preferência lactose, num reservatório de medicamento sólido bem compactado. Esta reserva de medicamento pode então sofrer abrasão ou ser micronizada ou tratada de outros modos para dela se obter um pó sob a forma de partículas. A preparação de liposomas resultante pode ser administrada por inalação da preparação sob a forma de um aerossol de pós, tal como descrito, por exemplo, em "Acute Effects of Liposome Aerosol Inhalation on Pulmonary Function in Healthy Human Volunteers" (Thomas et ai., Preliminary report, Volume 99, 1991, p. 1268-1270).

As pressões para se preparar a reserva do medicamento sólido bem compactado estão de preferência na 10 gama de entre 50-500 MPa. Uma reserva de medicamento deste tipo foi descrita no WO 94/14.490, e um dispositivo para administração está descrito no WO 93/24.165. A natureza ou constituição dos liposomas não é em geral crítica. Pode-se administrar uma preparação de liposomas tal como, por exemplo, a descrita na 0 639.373 por inalação de um aerossol. Incorpora-se a descrição da EP 0 639.373 por citação.

As preparações de acordo com a invenção presente não contêm aparentemente o agente activo, tal como iodo povidona, apenas encapsulado no veículo em partículas, especialmente em liposomas. Parece que existe também uma quantidade determinada de agente que não está contido dentro do veículo. As preparações de acordo com a invenção evidenciam muitas vezes um efeito inicial pronunciado, o qual é observado para além da libertação mais lenta, prolongada , do agente activo a partir do veículo Este efeito é observado em especial quando o veículo contém liposomas. Sem que se pretenda uma dependência em relação a qualquer explicação teórica, assume-se presentemente que para além do agente activo encapsulado dentro dos liposomas, está presente algum agente activo fora dos liposomas, que está provavelmente ligado fracamente às superfícies exteriores dos liposomas. Isto pode ser devido à associação de moléculas do agente activo com a membrana do liposoma, ou pode ser devido à formação de uma camada de moléculas do agente sobre a superfície do liposoma, camada 11 essa que reveste parcial ou completamente o liposoma, por fora. O tipo e a intensidade deste efeito inicial do agente podem, por exemplo, ser influenciado pela escolha dos parâmetros de concentração.

As substâncias anfifílicas que se conheciam em geral na técnica anterior como formando membranas liposomais podem ser utilizadas no contexto da invenção desde que sejam aceitáveis do ponto de vista farmacêutico para a aplicação a que se destinariam. Hoje em dia, preferem-se os sistemas formadores de liposomas que incluam lecitina. Esses sistemas podem incluir lecitina de soja hidrogenada, para além de colesterol e de hexahidrato de succinato dissódico; prefere-se especificamente hoje em dia utilizar lecitina de soja hidrogenada como único agente formador de membrana.

Os métodos conhecidos na técnica anterior para formar estruturas de liposomas são descritos nos documentos citados acima e podem em geral ser utilizados no contexto da invenção.

De modo geral, estes métodos incluem a agitação mecânica de uma mistura adequada contendo a substância formadora de membrana, e água ou uma solução aquosa.

Prefere-se uma filtração através de membranas adequadas para a formação de liposomas de dimensões substancialmente uniformes. 12 A dimensão média dos liposomas de acordo com esta invenção pode variar adentro de uma gama larga, em geral entre cerca de 1 e cerca de 50 μπα, de preferência na gama d entre 1 e 3 0 μπι de diâmetro. Para soluções, podem ser mais adequados diâmetros médios inferiores, por exemplo diâmetros de cerca de 100 nm.

Os liposomas de acordo com esta invenção têm uma dimensão substancialmente uniforme, na gama de diâmetros de entre cerca de 2 0 e 3 0 μιη, para aplicação na traqueia, na gama de diâmetros de entre cerca de 10 e 20 pm para aplicação nos brônquios, e diâmetros de entre cerca de 1 e 6 μπι, em especial diâmetros de entre cerca de 2 e 5 μπι, para aplicação aos alvéolos.

Quando se utilizarem veículos alternativos em partículas, eles são em geral preparados tal como é conhecido na técnica. Assim, as micro esferas que são utilizadas para transportar uma larga gama de agentes terapêuticos ou cosméticos são feitas tal como se descreveu, por exemplo no WO 95/15.118.

Podem utilizar-se em alguns casos nanopartículas, desde que elas possam ser carregadas com uma quantidade suficiente de agente activo, e possam ser administradas à parte inferior do aparelho respiratório de acordo com esta invenção. Elas podem ser preparadas de acordo com métodos conhecidos na técnica, como por exemplo os descritos por 13

Heyder (GSF Muenchen) em "Drugs delivered to the lung", Abstracts IV, Hilton Head Island Conference, Maio de 1998.

Também são adequados para a formação de preparações em partículas desta invenção, métodos que recorram a um aparelho de deposição laser pulsada (PLD) com um alvo polimérico, para aplicar revestimentos a fármacos em pó durante um processo não aquoso e curto. Estes foram descritos por exemplo por Talton et al., "Novel Coating Method for Improved Dry Delivery", Univ. of Florida UF 1887 (1998) .

Um outro sistema de transporte ainda recorre a Partículas Porosas Grandes, tal como descritas por David A. Edwards et al., em "Large Porous Particles for Pulmonary Drug Delivery" (Science, 20 de Junho de 1997, Vol. 276, p. 1868-1871) . A dimensão média das Partículas Porosas Grandes de acordo com esta invenção pode ser por exemplo de entre cerca de 5 e 20 μπι de diâmetro, para aplicação aos alvéolos.

Incluem-se nos agentes anti inflamatórios preferidos os agentes antissépticos, antibióticos, corticosteróides e promotores de cicatrização de feridas, como substâncias únicas ou misturados uns com os outros.

Incluem-se nos agentes antissépticos preferidos, as substâncias farmacêuticas bem conhecidas que proporcionam um efeito rápido, uma larga gama de 14 actividade, uma toxicidade sistémica pequena, e uma boa compatibilidade com os tecidos. Eles podem ser seleccionados por exemplo de entre o conjunto constituído por compostos metálicos, compostos fenólicos, detergentes, iodo e complexos com iodo. Um agente antisséptico preferido é iodo povidona.

Incluem-se nos agentes promotores de cicatrização de feridas preferidos, substâncias que têm sido descritas na literatura para esse tipo de aplicações. Incluem-se nesses agentes preferidos substâncias que se sabe promoverem a epitelialização. Nelas se incluem vitaminas, especificamente pertencentes ao grupo B, a alantoína, alguns azulenos, etc.

Algumas concretizações que são actualmente muito preferidas desta invenção, incluem agentes anti inflamatórios ou misturas desses agentes que evidenciem efeitos benéficos quanto à reparação dos tecidos, em especial no que toca à remodelação funcional e cosmética dos tecidos. Nestas concretizações, o agente activo é amiúde um antisséptico, tal como iodo-PVP, ou um antibiótico.

Nas concretizações preferidas, as preparações da invenção contendo anti inflamatórios, e em especial agentes antissépticos e/ou promotores da cicatrização de feridas, podem incluir agentes adicionais tais como agentes anestésicos. As preparações inventivas também contêm mais 15 agentes habituais, incluindo adjuvantes e aditivos, antioxidantes, agentes conservantes ou agentes que confiram consistência, tais como aditivos para ajustamento da viscosidade, emulgentes, etc.

Em geral, seleccionar-se-ão as concentrações das preparações, as dimensões de partículas, as quantidades de agentes activos por unidade de massa, etc., para esses transportadores alternativos, de forma a corresponderem basicamente aos parâmetros descritos neste documento no que toca a preparações liposomais. A selecção e a descrição de tais parâmetros com base, entre outros, em experimentação simples de conceber, estão bem ao alcance de um trabalhador médio com experiência desta técnica.

Uma utilização que é hoje em dia altamente preferida das preparações inventivas de liposomas é o tratamento de infecções da parte inferior do aparelho respiratório, incluindo a traqueia, os brônquios e os alvéolos, em especial quando as preparações liposomais contenham iodo povidona. Também para esta indicação, as preparações antissépticas inventivas, em especial as que contenham iodo PVP, têm a grande vantagem de não provocarem resistências e de levarem a muito menos reacções alérgicas, enquanto permitem uma terapia muito eficiente face ao seu custo com um efeito de espectro muito amplo. Uma preparação de iodo povidona em liposomas, de acordo com esta invenção é eficaz, por exemplo, contra vírus. Para além disto, uma preparação de liposomas de um agente microbicida tal como 16 iodo povidona proporciona uma libertação prolongada do agente a partir dos líposomas, levando o agente até às regiões pulmonares, por exemplo às regiões dos alvéolos do pulmão. Isto leva a um efeito mais prolongado da substância microbiológica, e portanto a uma sua aplicação menos frequente, em comparação com a das soluções antissépticas habituais. A invenção presente também é útil no tratamento de doenças infecciosas, ou para aliviar doenças tais como as infecções com HIV que são acompanhadas por infecções oportunísticas. Para além, disto, os pacientes que possuam um sistema imunológico suprimido, por exemplo após transplantes de órgãos, podem ser tratados de acordo com a invenção. Em especial, podem tratar-se com a preparação de povidona iodo de acordo com a invenção, a bronquite aguda e crónica, a pneumonia, a bronquiectasia, a fibrose quistica, a difteria, e a tuberculose.

Uma outra utilização altamente preferida é na reparação de tecidos, em especial na remodelação funcional e cosmética.

As preparações de acordo com a invenção presente assumem uma série de formas, que são adequadas para administração através da parte inferior do aparelho respiratório, incluindo formulações líquidas ou sólidas aceitáveis do ponto de vista farmacêutico, que são apropriadas para gerar partículas inaláveis. As preparações 17 de acordo com esta invenção podem portanto assumir a forma de um aerossol (de pós) ou a forma de um reservatório de um medicamento sólido compactado, de preferência um comprimido toroidal, mais preferivelmente uma cápsula em gelatina, um pó, uma aspersão, uma emulsão, uma dispersão, uma suspensão ou mesmo uma solução contendo o veículo e o agente ou os agentes.

Em geral, a quantidade de agentes activos numa preparação inventiva será determinada por um lado pelo efeito pretendido, e por outro lado, pela capacidade de transporte do agente que a preparação tenha.

Para as preparações inventivas contendo grandes quantidades de agentes activos ou dosagens elevadas de agente activo, são preferidas as preparações nebulizadas ou os aerossóis em relação aos pós ou aos aerossóis de pós. De um ponto de vista alargado, a quantidade de agente activo numa preparação de veículo inventivo, pode variar em concentração entre o limite inferior de eficácia do agente e a carga máxima do agente na preparação de veículo respectiva.

Mais especificamente, para um agente antisséptico, tal como iodo povidona, uma solução ou uma dispersão numa preparação inventiva de veículo, em especial quando o veículo é uma preparação de liposomas, pode conter entre 0,1 e 10 g de agente em 100 g de preparação. Uma preparação deste tipo conterá então tipicamente entre 1 e 5 18 g de substância formadora de membrana de liposoma, em especial lecitina, por 100 g de preparação.

Uma preparação inventiva em aerossol ou para aspersão conterá amiúde até 50 mg, mas poderá conter até 100 mg e mais, de formulação de agente liposomal activo e pode, por exemplo, ser administrada com 5 doses de aspersão, contendo cada uma delas 20 mg de formulação de agente liposomal activo. A preparação incluirá tipicamente pelo menos 10 %, em peso, de um agente activo tal como iodo PVP, nos liposomas carregados (ou nas partículas alternativas de veículo) , mas pode conter até 50 %, em peso ou ainda mais, do agente activo. Quando o agente activo for iodo PVP, a quantidade de iodo disponível será em geral de cerca de 10 %, em peso (em relação a iodo PVP).

Podem encontrar-se formulações mais específicas nos exemplos de formulação.

As características e as vantagens desta invenção tornar-se-ão aparentes em mais pormenor a partir da descrição de concretizações preferidas que se segue. Nestas concretizações, em que se inclui um modo melhor, apresenta-se a iodo povidona como um exemplo de um agente antisséptico, e escolhem-se liposomas como seu veículo. Isto não deve, no entanto, ser interpretado como uma restrição desta invenção a agentes antissépticos ou, entre 19 os agentes antissépticos, a iodo povidona, nem e/ou a liposomas como veículo, embora essas preparações sejam especificamente preferidas.

Um método preferido para se produzirem os liposomas da invenção pode ser descrito em geral como se segue:

As componentes lipídicas formadoras de membranas, por exemplo a lecitina, são dissolvidas num solvente adequado tal como clorofórmio ou numa mistura a 2:1 de metanol e clorofórmio, e são filtradas em condições estéreis. Resulta portanto um filme lipídico produzido sobre um substrato com uma superfície estéril, tal como pérolas em vidro, pela evaporação controlada do solvente. Em alguns casos, pode ser mais do que suficiente formar-se o filme sobre a superfície interior do recipiente utilizado para a evaporação do solvente, sem se utilizar um substrato específico para aumentar a superfície.

Prepara-se um sistema aquoso a partir das componentes do electrólito e dos (um ou mais) agentes activos, para ser incorporado na preparação do liposoma. Um tal sistema aquoso pode conter por exemplo 10 mmol/L de hidrogenofosfato de sódio e 0,9 % de cloreto de sódio, a pH 7,4; o sistema aquoso conterá para além disso pelo menos a quantidade pretendida de do agente activo, que nos exemplos de concretização é iodo povidona. Muitas vezes, o sistema aquoso conterá uma quantidade em excesso, de agente ou 20 agentes .

Os liposomas são em geral formados agitando o sistema aquoso referido na presença do filme referido, formado pelas componentes lipídicas. Nesta altura, podem adicionar-se mais aditivos para melhorar a formação de liposomas; por exemplo, pode adicionar-se colato de sódio. A formação de liposomas também pode ser influenciada por uma acção mecânica tal como a filtração sob pressão, através de, por exemplo, membranas de policarbonato, ou a centrifugação. Em geral, a dispersão liposomal em bruto será lavada, por exemplo com uma solução de electrólito tal como a utilizada na preparação de da solução do agente activo descrita acima.

Quando se obtiveram os liposomas com a distribuição de dimensões pretendida, e se lavaram, eles podem voltar a ser dispersos numa solução de electrólito como já se descreveu, contendo também amiúde açúcares tais como sacarose ou um substituto de açúcar que seja adequado. A dispersão pode ser liofilizada, seca em congelado. Ela pode, antes da utilização, ser reconstituída pela adição de água e por agitação mecânica adequada à temperatura de transição da componente lipídica, que para a lecitina de soja hidrogenada é de, por exemplo, 55°C.

Nos Exemplos seguintes, utilizou-se lecitina de soa hidrogenada (EPIKURON™ 200 SH que se pode obter junto da Lukas Meyer, Alemanha, ou PHOSPOLIPON™ 90 H, que se 21 pode obter junto da Nattermann Phospholipid GmbH, Alemanha). No entanto, podem utilizar-se outras substâncias lipídicas aceitáveis do ponto de vista farmacêutico e formadoras de membranas de liposoma, e o especialista da técnica fera que é fácil encontrar sistemas alternativos para formação de liposomas, a partir de quanto está descrito na técnica anterior.

Exemplo de Concretização I

Num balão de vidro de 1000 mL contendo pérolas de vidro para aumentar a sua superfície, colocam-se 51,9 mg de colesterol e 213 mg de lecitina de soja hidrogenada dissolvidas numa quantidade suficiente de uma mistura a 2:1 de metanol e clorofórmio. Evapora-se èntão o solvente em vazio até se formar um filme sobre a superfície interior do balão e as das pérolas de vidro.

Dissolvem-se em separado 2,4 g de iodo PVP (contendo cerca de 10 % de iodo disponível) em 12 mL de água.

Mais uma vez noutro recipiente, dissolvem-se 8,77 g de cloreto de sódio e 1,78 g de Na2HP04*2H20 em 400 mL de água. Adiciona-se mais água até perfazer um volume total de 980 mL, e depois, cerca de 12 mL de ácido clorídrico IN para se ajustar o pH a 7,4. Adiciona-se então água a esta solução para perfazer exactamente um volume de 1000 mL. 22

Num quarto recipiente, dissolveram-se 900 mg de sacarose e 57 mg de succinato dissódico em 12 mL de água.

Adicionou-se então a solução de iodo PVP ao filme lipídico no balão, e agitou-se a mistura até que o filme se dissolvesse. Separou-se a formulação de liposomas resultante dos lípidos hidratados no balão. Centrifugou-se o produto e descartou-se o líquido sobrenadante. Adicionou-se a solução de sacarose (12 mL) e centrifugou-se de novo o produto. Em seguida descartou-se mais uma vez o líquido sobrenadante. Nesta altura, podia levar-se a cabo mais um passo de lavagem, usando a solução de sacarose ou a solução tampão de cloreto de sódio.

Depois do último passo de centrifugação e de se descartar o sobrenadante, adicionou-se 12 mL da solução tampão de cloreto de sódio, e distribuíram-se homogeneamente os liposomas nesse meio. Repartiu-se então o produto por frascos contendo cada um deles 2 mL de dispersão de liposomas, e submeteram-se os frascos a um passo de liofilização.

Depois da liofilização, cada frasco continha cerca de 40 mg de sólidos. O método do Exemplo de Concretização 1 apresenta uma desvantagem não muito importante, resultante do facto de a solução de iodo PVP utilizada, devido à sua elevada percentagem de sólidos, ser bastante viscosa e portanto 23 mais difícil de manusear.

Exemplo de Concretização II

Num balão de 2 00 0 mL contendo pérolas de vidro para aumentar a superfície total, dissolveram-se 173 mg de lecitina de soja hidrogenada e 90 mg de succinato dissódico em cerca de d 60 mL de uma mistura de metanol/clorofórmio a 2:1. Removeu-se o solvente em vazio até se formar um filme.

Dissolveu-se 4 g de iodo PVP (com 10 % de iodo disponível) em 40 mL da solução tampão de cloreto de sódio descrita no Exemplo de Concretização I, e adicionou-se esta solução ao filme lipídico no balão. Agitou-se então o balão até o filme se dissolver e se formares liposomas.

Centrifugou-se o produto e descartou-se o líquido sobrenadante.

Adicionou-se à pastilha de liposoma que se formou mais 4 0 mL de solução tampão de cloreto de sódio, e repetiu-se o passo de centrifugação. Voltou a descartar-se o sobrenadante. Nesta altura, podia repetir-se o passo de lavagem sempre que necessário.

Depois dos passos de centrifugação e decantação finais, adicionou-se de novo 40 mL de solução tampão de cloreto de sódio aos liposomas precipitados. Distribuiu-se a dispersão homogénea por frascos, contendo cada frasco 24 cerca de 2 mL de dispersão de liposomas, e submeteram-se os frascos a um passo de liofilização.

Desta forma obteve-se cerca de 200 mg de sólidos por frasco.

Tal como o método do Exemplo de Concretização I, o método descrito acima utiliza um passo de hidratação depois da formação do filme na presença de solventes orgânicos, e pretende atingir taxas de inclusão de entre 5 e 15 %. Deste métodos resultam em geral liposomas razoavelmente grandes e amiúde multilamelares.

Podem modificar-se os métodos descritos acima por um passo de filtração sob pressão elevada, através de uma membrana adequada, tal como uma membrana de policarbonato depois de se terem formado os liposomas em bruto ou em qualquer dos passos subsequentes de lavagem, ou directamente utilizando homogeneização sob alta pressão. Desta forma obtêm-se liposomas de dimensões muito menores, unilamelares, com quantidades maiores de agente encapsulado.

Em vez de uma homogeneização sob alta pressão, podem utilizar-se outros métodos conhecidos na técnica, para se obterem liposomas com dimensões pequenas e uniformes.

Exemplo de Concretização III 25

Preparou-se uma cápsula de gelatina, que é adequada para gerar partículas inaláveis, a partir de 20 g de liposomas de iodo povidona contendo material liofilizado de acordo com o método de preparação geral mencionado acima, e 20 mg de lactose, pela aplicação de pressões de até 500 MPa. A partir da cápsula dura obtida, preparou-se um pó ou um aerossol de pós por métodos abrasivos, utilizando um inalador de pós (Orbital-Inhaler, da Brin Tech International Ltd.).

Também é possível preparar concretizações semelhantes às que se descreveram acima, que incluam um agente capaz de promover a cicatrização de feridas em vez de, e não para além de, o agente antisséptico, tal como por exemplo o iodo povidona descrito nos exemplos de concretização acima. Hoje em dia é no entanto preferido utilizar-se um agente de cicatrização de feridas (quando se utiliza um) para além de um agente antisséptico.

Para a aplicação das preparações inventivas a um paciente, podem utilizar-se sistemas conhecidos, tais como inaladores, inaladores de pós, embalagens sob pressão com duas câmaras de gás, sistemas dispensadores de aspersões aerossolizadas, nebulizadores, compressores, etc.

Exemplo de Concretização IV

Utilizando um nebulizador a ar, transformaram-se 26 as preparações de liposomas em aerossóis. A quantidade e as características de aerossóis de liposomas obtidos com um nebulizador já foram descritas. As gotículas resultantes tinham um diâmetro aerodinâmico médio em massa de cerca de 2,4 μιη e eram portanto adequadas para deposição na região alveolar.

Usando as preparações inventivas foram então levados a cabo testes de eficiência, como se segue:

Teste I

Trata-se de um teste in vitro do efeito bactericida proporcionado por uma preparação inventiva de liposomas com iodo povidona. 0 teste foi baseado no teste da suspensão quantitativa, tal como descrito em "Richtlinien der Deutschen Gesellschaft fuer Hygiene und Mikrobiologie", 1989. Neste teste, o agente bactericida é utilizado para matar Staphylococcus aureus (ATCC 29213), um problema de importância primordial na higiene hospitalar. A preparação de liposomas que se utilizou foi a do Exemplo de Concretização I. Com diferentes períodos de contacto, de entre 1 e 120 minutos, determinou-se a concentração mínima da preparação em água, que era capaz de matar os estafilococos.

Ilustram-se os resultados na Tabela 1. 27

TABELA I

Período de Contacto (Minutos)_Concentração Bactericida 1,2,3,4 0,060 % 5,30,60 0,015 % 120 0,007 %

Os resultados mostrara que a períodos de contacto curtos (entre 1 e 4 minutos) a concentração bactericida pode ser tão pequena como 0,6 % e a períodos de contacto longos (120 minutos), a concentração bactericida pode ser tão pequena como 0,007 %.

Teste II A actividade virucida e clamidicida de liposomas com iodo PVP foi estudada, em culturas de células, por Wutzler et al. , 9th European Congress for Clinic Microbiology and Infection Diseases, Berlim, Março 1999. Em culturas de células, os liposomas com iodo PVP são altamente eficazes contra vírus de herpes simplex do tipo 1 e contra adenovirus de tipo 8, enquanto as experiências de citotoxicidade a longo prazo indicavam que a forma em liposomas é mais bem tolerada do que iodo PVP aquosos, pela maioria das linha de células testada. O iodo PVP sob forma liposómica não é genotõxico.

Teste III 28

Comparou-se uma preparação liposomal de um hidrogel de iodo PVP a 3%, com um unguento contendo iodo PVP a 3 %, no qual o agente activo não se encontrava sob forma liposómica. Aplicou-se o agente a culturas padrão in vítro de pele e de explantes de peritoneu de rato, como despiste quanto à compatibilidade de tecidos da pele com desinfectantes em feridas. A taxa de crescimento dos explantes cultivados foi estudada ao fim de 30 minutos de exposição e incubação com uma substância em teste.

Mais uma vez, a tolerância substancialmente melhor à preparação liposómica estava claramente evidenciada nos resultados, em termos da taxa de crescimento do peritoneu e da pele.

Com o unguento, a taxa de crescimento do peritoneu atingiu 85 %, e a de crescimento da pele atingiu 90% ; com a formulação liposomal em hidrogel, a taxa de crescimento do peritoneu atingiu 96 %, e a de crescimento da pele atingiu 108 %; estes valores devem ser comparados com os valores de 100 % para um teste de controlo usando uma solução de Ringer como agente.

Lisboa, 4 de Dezembro de 2006

Claims (14)

1 REIVINDICAÇÕES 1. A utilização de agentes antissépticos e/ou de agentes que promovam a cicatrização de feridas para a manufactura de uma preparação farmacêutica para a prevenção e o tratamento de infecções na parte inferior do aparelho respiratório, para o tratamento de feridas na parte inferior do aparelho respiratório, e/ou para a remodelação e reparação funcional de tecido na parte inferior do aparelho respiratório, em que a preparação contenha uma quantidade eficaz do ponto de vista farmacêutico de pelo menos um dos agentes referidos, em combinação com um veículo em partículas, e em que o agente ou agentes referidos estejam presentes dentro e fora do referido veículo.

2. A utilização da reivindicação 1, caracterizada por o referido veículo em partículas conter pelo menos um de entre uma preparação de liposomas, uma preparação em micro esferas, uma preparação em nanopartículas, uma preparação de Partículas Grandes Porosas ou uma preparação de moléculas revestidas com polímeros por pulsos de laser.

3. A utilização das reivindicações 1 ou 2, caracterizada por se seleccionar o agente antisséptico de entre compostos que libertam oxigénio e halogéneo; compostos metálicos, tais como compostos de prata e de 2 mercúrio; desinfectantes orgânicos incluindo entre outros compostos que libertam formaldeído, álcoois, fenóis incluindo alquilfenóis e arilfenóis bem como fenóis halogenados, quinolinas e acridinas, hexahidropirimidinas, compostos de amónio quaternário e sais de imínio, e guanidinas, e seja seleccionado de preferência de entre o conjunto constituído por derivados de fenol tais como timol, eugenol e hexaclorofene, iodo e complexos de iodo, e seja de preferência iodo povidona.

4. A utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 2 ou 3, caracterizada por se seleccionar 0 agente promotor de cicatrização de entre agentes que promovam a granulação e a epitelialização tais como o dexpantol, as alantoínas, os azulenos, os taninos, ou compostos da série das Vitaminas B.

5. A utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizada por conter pelo menos um agente antisséptico e um agente promotor da cicatrização de feridas.

6. A utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizada por as partículas de veículo terem uma dimensão de diâmetro na gama de entre 1 e 5 0 μπι, preferivelmente na gama de entre 1 e 30 μπι, e mais preferivelmente na gama de entre 2 0 e 3 0 μτη para aplicação na traqueia, e uma dimensão de diâmetro na gama de entre 10 e 2 0 μπι para aplicação nos brônquios e um 3 diâmetro de entre 1 e 6 μπι, e em especial de entre 2 e 5 μτη para aplicação aos alvéolos.

7. A utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizada por o veículo, em especial a preparação de liposomas, libertar o agente ao longo de um período prolongado de tempo, de preferência um período prolongado com uma duração de diversas horas, a uma taxa de libertação aproximadamente constante.

8. A utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizada por a preparação conter adicionalmente pelo menos um agente activo como anestésico.

9. A utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizada por a preparação conter aditivos e adjuvantes tais como agentes conservantes, antioxidantes e aditivos formadores de consistência.

10. A utilização consoante qualquer uma das reivindicações 1 a 9, estando a preparação numa forma adequada para administração pela parte inferior do aparelho respiratório, e contendo o veículo carregado com o agente activo, em especial sob a forma de liposomas, de preferência sob a forma de um aerossol, em especial de um aerossol de põs, ou sob a forma de um reservatório com um medicamento sólido compactado, de preferência um comprimido 4 toroidal, mas preferivelmente uma cápsula de gelatina, um pó, uma emulsão, uma dispersão, uma suspensão ou uma solução contendo o veículo e o agente ou agentes numa formulação sólida ou líquida e aceitável do ponto de vista farmacêutico, que seja aceitável para gerar partículas inaláveis.

11. A utilização consoante qualquer uma das reivindicações anteriores, assumindo a preparação a forma de uma formulação de uma solução ou uma dispersão farmacêutica, que contenha: a) liposomas contendo entre 1 e 5 %, em peso, de uma substância aceitável do ponto de vista farmacêutico e formadora de uma membrana de liposoma; e b) entre 0,1 e 10 %, em peso, de um agente antisséptico tal como iodo povidona.

12. A utilização consoante qualquer uma das reivindicações 1 a 11, em que a preparação seja adequada para o tratamento de doenças infecciosas ou para o alívio de doenças que sejam acompanhadas por infecções oportunistas ou por um sistema imunológico suprimido.

13. A utilização consoante qualquer uma das reivindicações 1 a 11, em que a preparação seja adequada para o tratamento de bronquite aguda e crónica, pneumonia, bronquiectasia, fibrose quística, difteria e/ou tuberculose.

14. A utilização consoante qualquer uma das reivindicações 1 a 11, em que a preparação seja adequada para tratamentos de remodelação funcional ou de reparação de tecidos. Lisboa, 4 de Dezembro de 2006