KR102026805B1 - 항염 화장료 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명에 따른 항염 화장료 조성물은 판테놀 및 알라닐글루타민이 담지된 리포좀을 포함함으로써 기존 판테놀 또는 알라닐글루타민의 끈적이는 사용감 단점을 극복하면서 작은 량으로 동등이상의 항염효과를 나타내며, 또한 리포좀으로 인해 보습효능이 상승되는 화장료 조성물을 제조할 수 있다.

Description

항염 화장료 조성물{A anti-inflammation cosmetic composition}

본 발명은 피부 염증의 개선을 위한 조성물에 관한 것으로, 상세하게는 내부에 판테놀 및 아미노카르복시산을 함유하는 리포좀을 포함하는 항염 화장료 조성물에 관한 것이다.

피부는 신체에서 가장 큰 장기로 외부에 노출되어 있어 각종 외부 자극에 민감하게 반응하는 면역기관이다. 이러한 이유로 피부에는 염증과 가려움증을 동반하는 각종 질환이 빈번히 발생하여 피부 미용에 손상 및 탈모를 일으키는 주요 원인이 된다.

피부는 신체의 표면을 덮고 있으므로 자외선과 같은 외부로부터의 자극이나 여러 병원체에 직접 접촉될 기회가 많고, 체내로부터 영향을 강하게 받는다. 또한, 유전, 염증, 양성 및 악성 종양, 호르몬, 외상, 퇴행변성 등의 병적 변화에 영향을 받으므로 다양한 원인에 의하여 질환이 유발된다.

화장품은 피부를 보호하고 미화 청결을 위해 사용되는 제품이다. 그러나 화장품의 화장료 조성물을 자세하게 살펴보면 피부 보호의 목적과는 상이한 성분들이 제품 형성에 불가결한 존재로서 사용된다. 예를 들면 계면활성제, 방부제, 향료, 자외선 차단제, 색소 및 기타 효능, 효과를 부여하기 위해 사용되는 여러 가지 성분들을 들 수 있다. 특히 최근에는 기능성 화장품이 개발되면서 AHA(알파 하이드로시산), 레티놀, 알부틴 등의 성분 즉, 피부에 다소의 부작용이 있더라도 각종 기능을 가진 성분들이 포함된 다양한 기능성 화장품이 시판되고 있다.

이러한 성분들은 일반적으로 피부에 염증이나, 뾰루지, 부종 등 여러가지 부작용을 발생시키는 것으로 알려져 있다[Maibach ,H. i., Contact Dermatitis, 6, p.369~404, 1980]. 또한, 체내로부터 배출되는 피지 성분, 땀 성분 및 화장료 성분 중의 지방산, 고급 알콜, 단백질 등이 피부 상에 존재하는 피부 상재균들에 의해 독성이 강한 물질로 분해되고 이들로 인해 피부 염증이 유발될 수도 있으며, 태양으로부터 나오는 자외선에 의해서도 피부 염증이 유발된다는 것은 잘 알려진 사실이다.

염증은 세포나 조직이 어떠한 원인에 의해 손상을 받으면 그 반응을 최소화하고 손상된 부위를 원상으로 회복시키려는 일련의 방어 목적으로 나타나는 것으로, 신경 및 혈관, 임파관, 체액 반응, 세포 반응을 일으켜 결과적으로 통증, 부종, 발적, 발열 등을 일으켜 기능장애를 유발하는 것이다. 이러한 염증을 유발하는 원인으로 외상, 동상, 화상, 방사능 등에 의한 물리적 요인과 산(acid)과 같은 화학물질에 의한 화학적 요인 및 항체 반응에 의한 면역학적 요인 등이 있으며, 그 외에 혈관이나 호르몬 불균형에 의해서도 염증이 발생된다. 외부 자극에 의해 손상된 세포들이 분비한 여러 화학 매개 물질에 의해 혈관 확장이 일어나고, 투과성이 높아짐에 따라 항체, 보체, 혈장(plasma), 식균 세포들이 염증부위로 몰려들게 되며, 이러한 현상이 홍반의 원인이 된다.

혈관 활성 폴리펩타이드인 키닌(kinin), 프라스민(plasmin), 컴프리먼트(complement) 등이 혈관 확장 수축 및 주화성(chemotaxis) 작용을 하고 그 외에 인터루킨-6(IL-6) 등과 같은 림포카인과 아라키돈산(arachidonic acid) 등이 염증 반응을 담당한다. 물리적 자극, 화학적 자극에 의해 활성화된 포스포리파아제 의해 생성된 아라키돈산은 다시 싸이크로옥시게나아제(cyclooxygenase) 혹은 리포시게나아제(lipooxygenase)의 2 가지 경로를 거쳐 염증 매개체인 프로스타그란딘(prostaglandin), 류코트리엔(lukotriene)들로 대사되어 다양한 염증 반응을 매개한다[Thomas. R., Rev. Physiol.Biochem. Pharmacol., 100, 1984].

태양광으로부터 조사되는 자외선(UV)은 지구에 도달하는 빛의 일부에 해당하는 적은 양이지만, 홍반, 색소 침착, 주름 및 대부분의 피부암을 유발시키는 요소로서 작용한다. 다량의 자외선으로 인해 피부에서는 각질층의 구조에 염증이 생기고, 각질 배리어(barrier) 기능이 저하된다고 알려져 있다.

자외선으로 인한 피부 세포 및 조직의 손상을 주도하는 것은 반응성이 큰 활성 산소이며, 이들은 항산화 효소와 비효소적 항산화제들로 구성된 항산화 방어망을 파괴함으로써 결국에는 탄력 감소, 주름 생성, 각질 비후, 콜라겐 분해 등의 증상을 유발하여 광노화(Scharffetter-Kochanek et al.,Exp Gerontol, 35(3):307-316, 2000) 또는 피부암과 같은 피부 질환을 야기 시키는 것으로 알려져 있다. 이러한 자외선에 의해 유발되는 피부 질환을 예방 또는 치료하기 위해서는 생체 내 뿐만 아니라 피부에서 주로 작용하는 효소의 생성을 활성화할 수 있는 시스템 구축이 필요하다.

또한, 피부의 치유된 창상 부위에서 발견되는 염증 후 색소 침착이나, 피부염의 증상으로 나타나는 과색소 침착 등의 피부 색소 침착 질환도 자외선에 의한 피부염으로 인해 흔히 발생한다. 따라서 자외선에 의한 피부염을 효과적으로 예방하고 치료할 수 있다면, 피부 색소 침착질환을 조기에 예방할 수 있다.

염증을 소실시키기 위해 염증원의 제거, 생체 반응 및 증상을 감소시키는 작용을 하는 것을 항염제라 한다. 현재까지 항염의 목적으로 이용되는 물질로는 비스테로이드계로 프루폐나믹산(flufenamic acid), 이부프로펜(ibuprofen), 벤지다민(benzydamine), 인도메타신(indomethacin) 등이 있고, 스테로이드계로 프레드니솔론(prednisolone) 및 덱사메타손(dexamethasone) 등이 있고, 그 외 알란토인, 아즈엔, 하이드로코티존, 감초산 및 그 유도체(β-글리칠레친산, 글리칠레친산유도체) 등이 항염증에 효과가 있는 것으로 알려져 있다. 그러나 스테로이드계 물질은 피부에 대한 안전성면에서 대부분 문제점을 안고 있어서 그 사용량이 제한되고 있으며, 인도메타신은 화장료에는 사용할 수 없고, 감초산 및 그 유도체는 안정화시키기 어렵거나 용해도가 좋지 않아 실제 제품 적용 시 농도의 제한으로 인하여 실질적인 효과를 거두기 어려운 점이 있다. 이로 인해 현재 주로 많이 사용되고 있는 항염성분으로 판테놀과 알라닐글루타민이 있다. 하지만 이 두 성분은 항염 목적으로 사용함량을 증가할 경우 화장료로서의 끈적이는 사용감으로 인해 사용감이 저해되는 단점과 비용부담이 증가하는 단점이 있다.

한편 리포좀은 잘 알려진 약의 담체이며, 따라서 리포좀 형태로 약물에 적용하는 것은 꽤 오랜동안 연구의 대상이 되어 왔다. 천식의 치료에서 약물을 캡슐화한 리포좀의 폐로의 수송에 관한 개요가 "리포좀의 폐수송"(H. Schreier, "Journal of Controlled Release", 24, 1993, pp.209-223)의 보고에 의하여 제공되었다. 리포좀 에어로졸의 물리화학적 특성과 또한 그들의 호흡기에의 치료적 적용이 여기에 나타나 있다.

리포좀을 통한 폐 수송용으로 조사된 약물은, 예를 들면, 항암제, 펩타이드, 효소, 항천식 및 항알레르기 화합물 및 상기한 바와 같이 항생제도 또한 포함한다. 예를 들면, 건조 파우더 흡입기를 사용한 리포좀 파우더 에어로졸 또는 리포좀 에어로졸의 형태가 또한 H. Schreier 에 의하여 "리포좀 파우더 에어로졸의 형태와 시험관에서의 성능"(S.T.P. Pharma Sciences 4, 1994, pp.38-44)에 기술되어 있다.

상기 언급한 자료로부터도 알 수 있듯이 약의 담체로서의 리포좀에 주어지는 많은 관심에도 불구하고, 항염제의 담체로서의 타 미립자 및 리포좀과 관련된 선행기술은 나타나지 않고 있다.

대한민국 등록특허 10-0613706 (2006년 08월 21일)

본 발명은 상기와 같은 문제점을 해결하기 위해 안출된 것으로, 염증반응에서 중요한 효소인 cPLA₂ 활성을 저해시키는 물질인 아미노카르복시산과 싸이크로옥시게나아제의 활성을 억제하여 염증 치료에 효과적인 판테놀이 내부에 함유된 리포좀을 포함하는 항염 화장료 조성물에 관한 것이다.

본 발명은 항염 화장료 조성물에 관한 것이다.

본 발명의 일 양태는 내부에 판테놀 및 아미노카르복시산이 담지된 리포좀을 포함하는 항염 화장료 조성물에 관한 것이다.

본 발명에서 상기 아미노카르복시산은 글리신, 아미노2아세트산, 글리실글리신, 글리실-L-글루타민, L-알라닐-L-글루타민, β-알라닐-L-히스티딘 및 L-글루타민산나트륨에서 선택되는 어느 하나 또는 복수이며, 더욱 상세하게는 L-알라닐-L-글루타민인 것을 특징으로 한다.

본 발명에서 상기 리포좀 조성물은 판테놀과 아미로카르복시산의 함량이 각각 1.0 내지 5.0 중량% 및 1.0 내지 5.0 중량%일 수 있으며, 상기 리포좀의 평균입경은 10 내지 100㎚일 수 있다.

또한 상기 조성물은 전체 100 중량% 중 리포좀을 0.1 내지 5 중량% 포함할 수 있으며, 스킨, 에멀젼, 크림, 선크림, 파운데이션, 에센스, 젤, 팩, 마스크팩, 폼클렌저, 바디클렌저, 유연화장수, 아이라이너, 샴푸, 린스, 비누, 정발제, 양모제, 헤어크림, 헤어 스타일링젤, 윤활제, 치약 및 물티슈로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 제형일 수 있다.

본 발명에 따른 항염 화장료 조성물은 판테놀 및 알라닐글루타민이 담지된 리포좀을 포함함으로써 기존 판테놀 또는 알라닐글루타민의 끈적이는 사용감 단점을 극복하면서 작은 량으로 동등이상의 항염효과를 나타내며, 또한 리포좀으로 인해 보습효능이 상승되는 화장료 조성물을 제조할 수 있다.

도 1은 실험예 9를 통해 실험한 사용감 개선 평가 결과를 도시한 것이다.

이하, 구체적인 실시예를 통해 본 발명에 따른 항염 화장료 조성물을 더욱 상세히 설명한다. 다음에 소개되는 구체예들은 당업자에게 본 발명의 사상이 충분히 전달될 수 있도록 하기 위해 예로서 제공되는 것이다.

따라서 본 발명은 이하 제시되는 구체예들에 한정되지 않고 다른 형태로 구체화될 수도 있으며, 이하 제시되는 구체예들은 본 발명의 사상을 명확히 하기 위해 기재된 것일 뿐, 본 발명이 이에 제한되는 것은 아니다.

이때, 사용되는 기술 용어 및 과학 용어에 있어서 다른 정의가 없다면, 이 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 통상적으로 이해하고 있는 의미를 가지며, 하기의 설명에서 본 발명의 요지를 불필요하게 흐릴 수 있는 공지 기능 및 구성에 대한 설명은 생략한다.

또한 명세서 및 첨부된 특허청구범위에서 사용되는 단수 형태는 문맥에서 특별한 지시가 없는 한 복수 형태도 포함하는 것으로 의도할 수 있다.

또한, 본 발명의 구성 요소를 설명하는 데 있어서, 제 1, 제 2, A, B, (a), (b) 등의 용어를 사용할 수 있다. 이러한 용어는 그 구성 요소를 다른 구성 요소와 구별하기 위한 것일 뿐, 그 용어에 의해 해당 구성 요소의 본질이나 차례 또는 순서 등이 한정되지 않는다. 어떤 구성 요소가 다른 구성요소에 "연결", "결합" 또는 "접속"된다고 기재된 경우, 그 구성 요소는 그 다른 구성요소에 직접적으로 연결되거나 또는 접속될 수 있지만, 각 구성 요소 사이에 또 다른 구성 요소가 "연결", "결합" 또는 "접속"될 수도 있다고 이해되어야 할 것이다.

본 발명에서 용어 ‘피부 외용제’란 피부에 적용하는 조성물 전반을 포괄하는 개념으로, 예를 들어, 기초 화장료, 메이크업 화장료, 모발용 화장료 등 각종 화장료; 연고제, 크림제, 로션제 등 의약품 및 의약부외품을 포함한 피부 외용으로 적용되는 약학 조성물 등을 포함하는 개념이다.

cPLA₂(Cytosolic phospholipase A₂)는 세포막의 인지질 (phospholipid)로 부터 아라키돈 산 (arachidonic acid)을 합성하는 효소이다. 아라키돈 산은 염증반응에 중요한 역할을 하는 아이코사노이드 (eicosanoid) 라고 알려진 각종 류코트리엔 (leukotriens), 프로스타글란딘 (prostaglandins), 스롬복산 (thromboxanes)을 포함하여 혈소판 활성인자 (platelet-activating factor)를 합성케 하는 물질이다 (J. Biol. Chem. 1997. 272(27):16709-16712). 이들 물질들은 모두 강력한 염증 매개 물질로, 과학자들은 염증반응을 억제하기 위하여 이들 물질에 대한 억제제를 개발하기 위하여 많은 노력을 하여 왔다. 이렇듯 cPLA₂는 모든 염증반응 유발에 가장 중요한 효소로 알려져 있으며, 따라서 cPLA₂ 유전자를 제거한 마우스에서는 아토피를 포함한 각종 염증질환이 잘 일어나지 않는 것으로 보고되었다 (Adv Exp Med Biol. 2002;507:25-31). 현재 사람에서 사용되고 있는 cPLA₂ 억제제로 잘 알려진 약제는 스테로이드이다. 그러나 스테로이드는 부작용이 심하여 그 사용이 제한적이며 내성을 보이기 때문에, 안전하고 부작용이 없는 cPLA₂ 억제제 개발은 인류가 해결하여야 할 과제중 하나이다.

cPLA₂ 활성 억제에 관한 기작 연구에서 글루타민은 cPLA₂ 활성에 이르는 상위 신호전달 (upstream signaling pathway) 물질인 MAP kinase를 비활성화 시킴으로써 cPLA₂ 활성을 억제함을 밝히었다 (J. Immunol. 2009. 182:7957-7962). 이러한 연구는 글루타민은 아미노산 중에서 혈중 농도가 가장 높은 아미노산이며 또한 그 안정성이 이미 확인된 물질임을 감안하여, 글루타민을 피부염 개선제로 사용할 수 있는 가능성을 제시한 중요한 연구라고 사료된다.

그러나 글루타민은 1) 수용 상태에서는 자연 상태에서 존재하는 L-form이 D-form으로 전환되는 이성화(isomerization)가 일어나 그 활성이 감소하며, 2) 물에 녹는 용해도는 4%가 최대로, 그 용해도가 낮다는 단점을 가지고 있다.

따라서 본 발명자들은 여러 종류의 피부염에서 아미노카르복시산인 글루타민과 결합된 펩타이드 형태가 활성 및 용해도의 문제 없이 피부염 개선에 우수함을 실험을 통하여 확인하여 본 발명을 완성하게 되었다.

본 발명에 따른 항염 화장료 조성물은 내부에 판테놀 및 아미노카르복시산이 담지된 리포좀을 포함할 수 있다.

상기 판테놀(Panthenol)은 염증 매개체인 프로스타그란딘(prostaglandin), 류코트리엔(lukotriene)을 대사하는 싸이크로옥시게나아제의 활성을 억제하며, 또한 세포 성장을 촉진하고 피부의 보습을 유지하는 기능을 하며, 피부 점막에 윤기를 제공하고, 주름, 탄력, 기미 등 피부 노화를 예방하는 효과가 있다. 상기 판테놀은 상기 전체 담지 조성물 100 중량% 중 1.0 내지 5.0 중량% 포함될 수 있다. 상기 범위에서 첨가되는 다른 성분의 물성을 저하시키지 않고 피부보습력이 우수할 수 있다.

상기 리포좀은 적어도 하나의 지질 이중층(lipid bilayer) (지질막(lipid membrane))으로 만들어진 인공적으로 제조된 소포(vesicle)를 의미하는 것을 뜻하고, 여기서 상기 리포좀은 자연적으로 유도된 또는 합성 인지질 (phospholipid) 또는 다른 계면활성제, 및 선택적으로 콜레스테롤 및 단백질과 같은 다른 막 성분을 포함하고, 이것의 구조는, 전술된 바와 같이, 상기 아미노카르복시산과 판테놀과 같은 유효성분에 대한 물리적 저장소 (physical reservoir)로서 작용할 수 있다.

바람직하게는 본 발명에 따른 리포좀은 즉, 적어도 하나의 자연적으로 유도된 또는 합성 인지질을 포함하는 리포좀이며, 선택적으로 본 발명에 따른 인지질-포함 리포좀은 콜레스테롤 및 단백질과 같은 또 다른 막 성분을 포함할 수 있다.

본 발명에서 상기 인지질은 인산기를 함유하는 지질 또는 글리세라이드를 의미한다. 따라서 상기 인지질은, 예를 들어, 레시틴(lecithin), 포스파티딜(phosphatidyl) 에탄올아민(ethanolamine), 포스파티딜 이노시톨(inositol), 포스파티딜 세린(serine), 디포스파티딜 글리세롤(glycerol) (카르디올리핀(cardiolipin)), 디라우로일(dilauroyl) 포스파티딜 콜린(choline), 디미리스토일(dimyristoyl) 포스파티딜콜린, 디팔미토일(dipalmitoyl) 포스파티딜 콜린, 디스테아로일(distearoyl) 포스파티딜 콜린, 디올레오일(dioleoyl) 포스파티딜 콜린, 디미리스토일 포스파티딜 에탄올아민, 디팔미토일 포스파티딜 에탄올아민, 디팔미토일 포스파티딜 글리세롤, 디미리스토일 포스파티딘산(phosphatidic acid), 디팔미토일 포스파티딘산, 디팔미토일 포스파티딜 세린, 디팔미토일 스핀고마이엘린(sphingomyelin), 1-스테아린산(stearic acid)-2 팔미토일포스파티딜 콜린, 폴리에틸렌 글리콜-2-스테아로일포스파티딜 에탄올아민 등을 들 수 있다.

바람직하게는, 본 발명에 따른 리포좀은 인지질을 포함하는 리포좀이고, 여기서 각 리포좀에 존재하는 인지질의 양은 상기 리포좀을 형성하는 모든 막 성분 (인지질, 다른 계면활성제, 및 선택적으로 어떤 엔캡슐화된 용매)의 총 중량에 기초하여, 바람직하게는 적어도 30 중량%, 더욱 바람직하게는 30 내지 80 중량%의 범위, 더더욱 바람직하게는 30 내지 60 중량%의 범위이다.

또한 본 발명에서 상기 리포좀은 레시틴을 포함하는 리포좀이다. 따라서, 본 발명은 또한, 전술된 바와 같은 조성물에 관한 것으로, 여기서 상기 리포좀은 레시틴을 포함하는 리포좀이다. 유사하게, 본 발명은, 전술된 바와 같은, 조성물을 제조하기 위한 방법, 상기 방법에 의해 얻어질 수 있거나 또는 얻어진 조성물에 관한 것으로, 여기서 상기 리포좀은 레시틴을 포함하는 리포좀일 수 있다.

상기 레시틴은 적절하게 정제될 수 있는, 자연적으로 발생하는 또는 합성 레시틴에 관한 것이다. 적절한 레시틴은 계란 또는 콩으로부터 유도된 레시틴을 포함하지만, 이에 제한되는 것은 아니다. 더욱 적절한 레시틴은 디헥사노일(dihexanoyl)-L-알파-레시틴, 디옥타노일(dioctanoyl)-L-알파-레시틴, 디데카노일(didecanoyl)-L-알파-레시틴, 디도데카노일(didodecanoyl)-L-알파-레시틴, 디테트라데카노일(ditetradecanoyl)-L-알파-레시틴, 디헥사데카노일(dihexadecanoyl)-L-알파-레시틴, 디옥타데카노일(dioctadecanoyl)-L-알파-레시틴, 디올레오일-L-알파-레시틴, 디린올레오일-L-알파-레시틴, 알파-팔미톨을 포함하지만, 이에 제한되는 것은 아니다. 레시틴은 통상적으로 인산의 콜린 에스테르에 연결된 지방산의 디글리세라이드의 혼합물이고, 분리(isolation)의 방법에 의존하여 다른 양의 다른 화합물들을 함유할 수 있다. 통상적으로, 상업적인 레시틴은 아세톤-불용성 포스파티드(phosphatide)의 혼합물이다. 바람직하게는, 상기 레시틴은 기술 분야에서 잘 알려진 방법을 사용하여, 콩 및 옥수수, 가장 바람직하게는 콩을 포함하는 씨로부터 얻어진다. 콩으로부터 얻어진 레시틴은 본 발명에서 콩 레시틴이라 한다.

상기 리포좀은 구조를 한정하는 것은 아니나, 다중막(multilamellar) 또는 단일막(unilamellar) 구조를 가질 수 있으며, 단일막 구조가 바람직하다.

상기 리포좀은 평균직경을 한정하는 것은 아니나, 광자상관법(Photon Correlation Spectroscopy, PCS)에 의해 측정된, 1 내지 500 nm의 범위, 바람직하게는 10 nm 내지 100 nm의 범위를 가질 수 있다.

상기 아미노카르복시산은 피부에 대한 항염, 항자극효과가 우수하고, 다른 물질과의 혼화성이 좋아 가공성이 우수하다.

비필수 아미노산인 L-글루타민 (L-glutamine)은 혈장에서 가장 풍부한 아미노산이고, 대부분의 세포를 위한 에너지 기질로서, 다른 조직들 간의 질소와 탄소-골격 교환에 있어서 중요한 역할을 담당한다. 중증 손상 모델을 포함한 내독소 쇼크 동물모델을 이용한 연구에서 글루타민 보충이 생존율을 향상시키고(Shock 2001. 16:398-402), 사람을 대상으로 한 임상시험들에서도 글루타민이 감염성 합병증을 줄이고, 입원 기간을 단축시키며, 많은 환자 군에서 입원비용을 감소시킨다는 것이 증명되었다(Nutrition 1997; 13:295~302).

그러나 글루타민은 1) 수용 상태에서는 빠르게 가수분해가 일어나거나, 자연 상에서 존재하는 L-form이 D-form으로 전환하는 이성화(isomerization)가 일어나 그 활성이 감소하며, 2) 물에 녹는 용해도가 3-3.5%가 최대로 그 용해도가 낮다는 단점을 가지고 있다.

이러한 단점을 극복하기 위하여 글루타민에 다른 아미노산을 결합시킨 디펩타이드(alanyl-glutamine 및 glycyl-glutamine)가 개발되었다(J. Nutr. 2001. 131: 2562S-2568S. Nutrition 1997. 13:73I-737). 이들 디펩타이드는 활성이 2년 이상 지속 될 뿐 아니라 그 용해도는 글루타민에 비해 월등히 높다.

본 발명은 하기와 같은 디펩타이드, 아미노카르복시산의 특성을 이용한 것으로, 이들의 예를 들면, 글리신, 알라닌, β-알라닌, 발린, 로이신, 이소로이신, 세린, 트레오닌,아스파라긴산, 글르타민산, 아스파라긴, 글르타민, 사르코신, 시트룰린, 매티오닌, α-아미노부티르산, β-아미노부티르산, γ-아미노부티르산, ε-아미노카프론산, 페닐알라닌, 티로신, 히스티딘, 프롤린, 4-히드록시프롤린, 2-피롤리돈-5-카르복시산, 이미노2아세트산, L-글루타민산나트륨 등을 들 수 있다.

또한 상기 아미노카르복시산이 펩티드결합으로 결합한 화합물로 예를 들면, 글리실글리신, 글리실글리실글리신, 글리실글리실글리실글리신, 글리실알라닌, 글리실아스파라긴, 글리실로이신, 글리실이소로이신, 글리실페닐알라닌, 글리실프롤린, 글리실사르코신, 글리실세린, 글리실트레오닌, 글리실발린, 글리실글르타민, 알라닐알라닌, 알라닐아스파라긴, 알라닐글루타민, 알라닐글리신, 알라닐페닐알라닌, 알라닐티로신, β-알라닐히스티딘, 폴리아스파라긴산, 폴리글르타민산 등을 들 수 있다.

상기 아미노카르복시산으로 바람직하게는 L-알라닐-L-글루타민을 사용하는 것이 바람직하다. 상기 L-알라닐-L-글루타민은 특히 항염, 항자극 효과가 우수하여 피부염에 개선효과가 매우 우수함을 나타낸다.

상기 아미노카르복시산은 상기 담지 조성물 100 중량% 중 1.0 내지 5.0 중량% 포함할 수 있다. 상기 범위에서 리포좀의 물성을 유지하면서도 피부염의 개선효과가 우수하다.

또한 본 발명은 상기 판테놀과 아미노카르복시산이 담지된 리포좀을 포함하는 상기 항염 화장료 조성물을 포함한다. 이때 상기 항염 화장료 조성물은 상기 리포좀을 전체 조성물 100 중량% 중 0.1 내지 5.0 중량% 포함할 수 있다. 상기 범위에서 동등 이상의 항염효과를 얻을 수 있으며, 판테놀과 알라닐글루타민 특유의 끈적이는 사용감을 완전히 해소할 수 있다.

상기 화장료 조성물은 화장료 조성물로서 공지된 임의의 제형일 수 있으며, 예를 들어 스킨, 에멀젼, 크림, 선크림, 파운데이션, 에센스, 젤, 팩, 마스크팩, 폼클렌저, 바디클렌저, 유연화장수, 아이라이너, 샴푸, 린스, 비누, 정발제, 양모제, 헤어크림, 헤어 스타일링 젤, 윤활제, 치약 및 물티슈로 이루어진 군에서 선택된 하나의 제형일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

상기 화장료 조성물은 상기 제형에 따라 상기 화장료 조성물의 효과를 손상시키지 않는 범위에서 각종 공지의 첨가제를 추가로 포함할 수 있으며, 일 구체예에 따르면 담체, 용매, 계면활성제, 유화제, 경점제, 컨디셔너, 연화제, 피부 보호 성분, 보습제, 증점제, 윤활제, 충전제, 산화방지제, 기타 보존제, 활성 성분, 특히 피부학적으로 활성인 성분 및 향료 등과, 이들의 혼합물을 추가로 함유할 수 있다.

상기 담체로는 동물섬유, 식물섬유, 왁스, 파라핀,전분, 트라가칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크, 산화아연, 락토오스, 실리카, 알루미늄 하이드록사이드, 칼슘 실리케이트, 폴리아미드 파우더, 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌글리콜, 액상 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미세결정 셀룰로오스, 알루미늄 메타하이드록사이드, 벤토나이트, 아가 또는 트라가칸트, 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세라이드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 오일, 리놀린 유도체, 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등을 포함할 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

상기 계면활성제로는 알킬 설페이트(예: 나트륨 라우릴 설페이트, 암모늄 라우릴 설페이트, 나트륨 세테아릴 설페이트); 알킬 설포아세테이트(예: 나트륨 라우릴 설포아세테이트); 알킬 에테르 설페이트(예: 나트륨 라우레트 설페이트, 나트륨 트리데세트 설페이트, 나트륨 올레트 설페이트, 암모늄 라우레트 설페이트); 알킬 에테르 설포석시네이트(예: 이나트륨 라우레트 설포석시네이트); 알킬 글리코사이드(예: 데실 글루코사이드, 라우릴 글루코사이드); 알킬 이세티오네이트 양쪽성 화합물(예: 코카미도프로필 베타인, 나트륨 코코암포아세테이트, 나트륨 라우로암포아세테이트, 이나트륨 라우로암포디아세테이트, 이나트륨 코코암포디아세테이트, 나트륨 라우로암포프리피오네이트, 이나트륨 라우로암포디프로피오네이트, 상기 언급한 양쪽성 화합물의 칼륨 또는 암모늄 염, 카프릴/카프라미도프로필 베타인, 운데실렌아미도프로필 베타인, 라우로미도프로필 베타인) 및 지방 알콜 폴리글리콜 에테르 등을 들 수 있다.

상기 유화제로는 지방산의 염(예: 나트륨 스테아레이트 또는 나트륨 팔미테이트, 유기 비누(예: 모노-, 디- 또는 트리에탄올아미놀레에이트), 황화 또는 설폰화 화합물(예: 나트륨 라우릴 설페이트 또는 나트륨 세틸 설포네이트), 사포닌, 라메폰과 같은 음이온성 화합물; 양이온성 화합물(예: 4급 암모늄 염); 비이온성 화합물(예: 지방 알콜, 포화 또는 불포화 지방산과의 지방산 에스테르, 지방산의 폴리옥시에틸렌에스테르 또는 폴리옥시에틸렌에테르, 에틸렌 옥사이드와 프로필렌 옥사이드 또는 프로필렌 글리콜로부터의 중합체), 양쪽성 화합물(예: 포스파티드), 단백질(예: 젤라틴, 카제인, 알킬아미도베타인, 알킬 베타인 및 암포글리시네이트), 알킬 포스페이트, 알킬폴리옥시에틸렌 포스페이트 또는 상응하는 산, 실리콘 유도체(예: 알킬 디메티콘코플리올) 등을 들 수 있다.

상기 경점제로는 지방 알콜 또는 지방산 에스테르와 이들의 혼합물, 예를 들면, 아세틸화 라놀린 알콜, 알루미늄 스테아레이트, 카보머, 세틸 알콜, 글리세릴 올레에이트, 글리세릴 스테아레이트, 글리세릴 스테아레이트(및) PEG 100 스테아레이트, 마그네슘 스테아레이트, 마그네슘 설페이트, 올레산, 스테아르산, 스테아릴 알콜, 미리스틸 미리스테이트, 이소프로필 팔미테이트, 밀납 및 이의 합성 등가물 및 카보머 등을 들 수 있다.

상기 컨디셔너로는 알킬아미도 암모늄락테이트, 세트리모늄 클로라이드 및 디스테아로일에틸 하이드록시에틸모늄 메토설페이트 및 세테아릴 알콜, 세틸 디메티콘, 세틸 리시놀레에이트, 디메티콘, 라우레트-23, 라우레트-4, 폴리데센, 레티닐 팔미테이트, 4급화 단백질 가수분해물, 4급화 셀룰로즈 및 전분 유도체, 아크릴산 또는 메타크릴산이나 염의 4급화 공중합체, 4급화 실리콘 유도체 등을 들 수 있다.

상기 연화제로는 세테아릴 이소노나노에이트, 세테아릴 옥타노에이트, 데실 올레에이트, 이소옥틸 스테아레이트, 코코 카프릴레이트/카프레이트, 에틸헥실 하이드록시스테아레이트, 에틸헥실 이소노나노에이트, 이소프로필 이소스테아레이트, 이소프로필 미리스테이트, 올레일 올레에이트, 헥실 라우레이트, 파라피눔 리퀴덤, PEG-75 라놀린, PEG-7 글리세릴 코코에이트, 페트롤라툼, 오조케리트 사이클로메티콘, 디메티콘, 디메티콘 코폴리올, 디카프릴릴 에테르, 부티로스페르뭄파르키, 벅서스 키넨시스, 카놀라, 카르나우바 세라, 코페르니시아 세리페라, 오에노테라 비엔니스, 엘래이스 기넨시스, 프루너스 둘시스, 스쿠알란, 제아 메이, 글리신 소야, 헬리안투스 안누스, 라놀린, 경화 피마자유, 수소화 폴리이소부텐, 수크로즈 코코에이트, 스테아록시 디메티콘, 라놀린 알콜, 이소헥사데칸 등을 들 수 있다.

상기 피부 보호용 성분으로는 식물 추출물, 비스아볼롤, 소염제, 우레아, 알란토인, 판테놀 및 판테놀 유도체, 피탄트리올, 비타민 A, E, C, D, 동물 또는 식물 유래의 세라마이드 및 레시틴 등을 들 수 있다.

상기 보습제로는 부틸렌 글리콜, 세틸 알콜, 디메티콘, 디미리스틸 타르트레이트, 글루코즈 글리세레스-26, 글리세린, 글리세릴 스테아레이트, 가수분해 유단백질, 락트산, 락토즈 및 다른 당, 라우레트-8, 레시틴, 옥톡시글리세린, PEG-12, PEG-135, PEG-150, PEG-20, PEG-8, 펜틸렌 글리콜, 헥실렌 글리콜, 피탄트리올, 폴리 쿼터늄-39 PPG-20 메틸 글루코즈 에테르, 프로필렌 글리콜, 나트륨 히알루로네이트, 나트륨 락테이트, 나트륨 PCA, 소르비톨, 석시노글리칸, 합성 밀납, 트리-C14-15 알킬 시트레이트, 전분 등을 들 수 있다.

상기 증점제로는 아크릴레이트/스테아레스-20 메타크릴레이트 공중합체, 카보머, 카복시메틸 전분, 세라 알바, 디메티콘/비닐 디메티콘 가교중합체, 프로필렌 글리콜 알기네이트, 하이드록시에틸셀룰로즈, 하이드록시프로필메틸셀룰로즈, 실리카, 실리카 디메틸 실릴레이트, 크산탄 고무, 수소화 부틸렌/에틸렌/스티렌 공중합체 등을 들 수 있다.

상기 윤활제로는 아디프산, 푸마르산과 이의 염, 벤조산과 이의 염, 글리세린 트리아세테이트, 나트륨 또는 마그네슘 라우릴 설페이트, 마그네슘 스테아레이트, 고체 폴리에틸렌글리콜, 폴리비닐피롤리돈, 붕산, 모노-라우레이트 또는 모노-팔미테이트, 미리스틸 알콜, 세틸 알콜, 세틸스테아릴 알콜, 활석, 고급 지방산의 칼슘 또는 마그네슘 염, 고급 지방산의 모노-, 디- 또는 트리글리세리드, 폴리테트라플루오르에틸렌 등을 들 수 있다.

상기 산화방지제로는 설파이트(예: 아황산나트륨), 토코페롤 또는 이의 유도체, 아스코르브산 또는 이의 유도체, 시트르산, 프로필 갈레이트, 키토산 글리콜레이트, 시스테인, N-아세틸 시스테인 + 황산아연, 티오설페이트(예: 티오황산나트륨) 및 폴리페놀 등을 들 수 있다.

또한 상기 조성물은 피부의 적용 부위에 따라 다양한 활성 성분을 포함할 수 있다. 이러한 활성 성분의 예를 들면, 항미생물제, 소염제, 식물 추출제, 비스아볼롤, 판테놀, 토코페롤, 자상 방지, 항자극제 또는 비듬방지용 활성제나, 노화 방지제(예: 레티놀 및 멜리비오즈 등)를 추가로 함유할 수 있다. 다른 적합한 활성제는, 예를 들면, 메디카고 오피시날리스(Medicago officinalis), 악티니디아 키넨시스(Actinidia chinensis), 알란토인, 알로에 바르바덴시스(Aloe barbadensis), 아노나 케리몰리아(Anona cherimolia), 안테미스 노빌리스(Anthemis nobilis), 아라키스 히포개아(Arachis hypogaea), 아르니카 몬타나(Arnica Montana), 아베나 사티바(Avena sativa), 베타-카로텐, 비스아볼롤, 보라고 오피시날리스(Borago officinalis), 부틸렌 글리콜, 칼렌둘라 오피시날리스(Calendula officinalis), 카멜리아 시넨시스(Camellia sinensis), 캄포르, 칸디다 봄비콜라(Candida bombicola), 카프릴로일 글리신, 카리카 파파야(Carica papaya), 센타우레아 시아누스(Centaurea cyanus), 세틸피리디늄 클로라이드, 카모밀라 레쿠티타(Chamomilla recutita), 케노포듐 퀴노아(Chenopodium quinoa), 킨코나 숙시루브라(Chinchona succirubra), 콘드루스 크리스푸스(Chondrus crispus), 시트루스 아우란튬 둘시스( Citrus aurantium dulcis), 시트루스 그란디스(Citrus grandis), 시트루스 리모눔(Citrus limonum), 코코스 누시페라(Cocos nucifera), 코페아 아라비카(Coffea Arabica), 크라태구스 모노기나(Crataegus monogina), 쿠쿠미스 멜로(Cucumis melo), 디클로로페닐 이미다졸디옥솔란, 엔테로모르파 콤프레사(Enteromorpha compressa), 에퀴세툼 아르벤제(Equsetum arvense), 에톡시디글리콜, 에틸 판테놀, 파르네솔, 페룰산, 프라가리아 킬로엔시스(Fragaria chiloensis), 겐티아나 루테아(Gentiana lutea), 깅코 빌로바(Ginkgo biloba), 글리세린, 글리세릴 라우레이트, 글리시르히자 글라브라(Glycyrrhiza glabra), 하마멜리스 비르기니아나(Hamamelis virginiana), 헬리오트로핀, 수소화 야자 글리세라이드, 시트레이트, 가수분해 피마자유, 가수분해 밀 단백질, 하이페리쿰 퍼포라툼(Hypericum perforatum), 아이리스 플로렌티나(Iris florentina), 주니페루스 콤무니스(Juniperus communis), 락티스 프로테이눔(Lactis proteinum), 락토즈, 라우소니아 이네르미스(Lawsonia inermis), 리날룰, 리눔 우시타티시뭄(Linum usitatissimum), 리신, 마그네슘 아스파르테이트, 마그니페라 인디카(Magnifera indica), 말바 실베스트리스(Malva sylvestris), 만니톨, 멜 멜라레우카 알테르니폴리아(mel Melaleuca alternifolia), 멘타 피페리타(Mentha piperita), 멘톨, 메틸 락테이트, 미모사 테누이플로라(Mimosa tenuiflora), 님패아 알바(Nymphaea alba), 올라플루르, 오리자 사티바(Oryza sativa), 판테놀, 파라피눔 리퀴둠, PEG-20M, PEG-26 호호바산, PEG-26 호호바 알콜, PEG-35 피마자유, PEG-40 수소화 피마자유, PEG-60 수소화 피마자유, PEG-8 카프릴/카프르산, 페르시아 그라티시마(Persea gratissima), 페트롤라툼, 칼륨 아스파르테이트, 칼륨 소르베이트, 프로필렌 글리콜, 프루누스 아미그달루스 둘시스(Prunus amygdalus dulcis), 프루누스 아르메니아카(Prunus armeniaca), 프루누스 페르시카(Prunus persica), 레티닐 팔미테이트, 리시누스 콤무니스(Ricinus communis), 로사 카니나(Rosa canina), 로즈마리누스 오피시날리스(Rosmarinus officinalis), 루부스 이대우스(Rubus idaeus), 살리실산, 삼부쿠스 니그라(Sambucus nigra), 사르코신, 세레노아 세룰라타(Serenoa serrulata), 시몬드시아 키넨시스(Simmondsia chinensis), 나트륨 카복시메틸 베타글루칸, 나트륨 코코일 아미노산, 나트륨 히알루로네이트, 나트륨 팔미토일 프랄린, 스테아록시트리메틸실란, 스테아릴 알콜, 황화TEA-리시놀레에이트, 활석, 티무스 불가리스(Thymus vulgaris), 틸리아 코르다타(Tilia cordata), 토코페롤, 토코페릴 아세테이트, 트리데세트-9, 트리티쿰 불가레, 티로신, 운데실레노일 글리신, 우레아, 박시늄 미르틸루스(Vaccinium myrtillus), 발린, 산화아연, 황산아연 등을 들 수 있다.

이하, 실시예 및 비교예를 들어 본 발명을 더욱 상세히 설명한다. 다만 하기 실시예 및 비교예는 본 발명을 상세히 설명하기 위한 하나의 예시일 뿐, 본 발명이 하기 실시예에 의해 제한되는 것은 아니다.

(실시예 1 내지 3 및 비교예 1 내지 5) : 리포좀 조성물의 제조

판테놀 또는 및 알라닐글루타민과 인지질(레시틴)을 포함하는 리포좀의 포집된 판테놀과 알라닐글루타민이 염증억제 및 피부 자극을 개선시키는지 여부를 확인하기 위해, 하기 표1에 나타낸 원료와 함량을 사용하여 다음과 같은 방법으로 리포좀 조성물(비교예 3 내지 5 및 실시예 1 내지 3)을 제조하였으며, 비교에1 내지 2는 원료 1에 원료 3 또는 4를 단순 용해하였다.

먼저, 원료 2 내지 8을 혼합하면서 70 ℃로 가온 후, 용해한 다음, 70 ℃로 가온된 원료 1에 천천히 투입하여 20분간 교반하였다. 상기 교반한 혼합물을 고압호모게나이져를 통해 1,300 Bar로 처리하여 균질화하였다.

[표 1] - 리포좀 조성물의 성분 및 함량(중량 %)

(실험예 1) - 리포좀 조성물의 입도분석

상기 제조된 리포좀 조성물의 입자의 분포와 크기를 조사하기 위해 입도분석기(PHOTAL OTSUKA ELECTRONICS, JAPAN(ELS-800))를 이용하여 평균 입자크기를 확인하였다.

[표 2] - 리포좀 조성물의 평균 입자크기(㎚)

상기 표 2와 같이 리포좀 입자 크기를 조사한 결과 평균 입자크기가 70 내지 500 ㎚의 나노사이즈로 형성되었으며, 실시예 2 내지 3은 비교예 3 내지 5와 실시예 1에 비해 상대적으로 입자크기가 크게 형성됨을 확인하였다.

(실험예 2) - 안정성 평가

안정성 평가를 위해 비교예 3 내지 5와 실시예 1 내지 3을 실온(20℃), 0℃, 40℃, 45℃, 50℃, cycle chamber(-10℃ → 45℃ → -10℃)에서 1개월간 보관한 후, 리포좀의 분리/석출 여부를 관찰하여 안정성을 평가하였다. 분리/석출 정도에 따라 매우 양호: ○, 미량석출: △, 석출: ×로 표시하였다.

[표 3] - 안정성 실험 결과

상기 표 3에서 나타낸 바와 같이, 비교예 3 내지 5와 실시예 1은 실시예 2 내지 3에 비해 안정성이 우수한 것으로 나타났으며, 실시예 2 내지 3은 판테놀과 알라닐글루타민이 고함량 담지되어 입자크기가 커서 상대적으로 안정성이 떨어지는 것을 확인하였다.

(실험예 3) - 피부 투과성

Franz glass cell(Standard 직경 9㎜, Receiver 5㎖, Permegear)을 이용하여 피부투과성을 확인하였다. 구체적으로, 상기 Glass cell의 상단과 하단 사이에 비교예 1 내지 5와 실시예 1 내지 3을 각각 50㎎씩 도포한 돼지피부(0.7㎜ 두께, Medikinetics)를 장착하고, 상단과 하단에 각각 500㎕와 5㎖의 TBS(50mM Tris pH 7.5, 150mM NaCl)를 가하였다. 8시간 후 돼지 피부 조직을 파쇄하여 판테놀과 알라닐글루타민의 양을 정량 분석하였고, 단위면적당 투과량(㎍/cm2)을 하기 표 4에 나타내었다.

[표 4] - 피부 투과율

상기 표 4와 같이 비교예 4 내지 5와 실시예 1이 비교예 1 내지 2와 실시예 2 내지 3에 비해 월등히 피부 투과량이 향상됨을 확인하였다.

실험예 1 내지 3의 결과를 통해, 리포좀 제조 시 판테놀과 알라닐글루타민의 총 함량은 안정성과 입자크기를 고려 시 최대 10 중량%가 적절하며, 리포좀으로 담지된 판테놀과 알라닐글루타민이 리포좀을 사용하지 않은 비교예 1 내지 2과 비교 시 이들의 혼합물을 포함하는 리포좀이 피부 투과율이 현저하게 높으므로, 활성성분의 경피 흡수율 개선에 유용하게 사용될 수 있음을 알 수 있었다.

(실험예 4) - cPLA₂ 활성 측정

임상용 마우스는 특정 병원체가 없는 암컷 BALB/c 마우스는 Samtako Bio Korea Inc.에서 구입하였고, 기류식 무균 실험대에 수용하여 표준 고형사료를 원하는 대로(ad libitum) 공급하며 사육하였다. 실시예의 개시 시점에 마우스는 7-8주령이었다.

다음으로 마우스를 희생시켜 폐를 적출하고 PhosphoSafe Extraction Reagent(Novagen, Madison, WI)를 이용하여 폐를 분쇄하여 세포 용해물 (cell lysate)을 준비한다. 세포 용해물 (Cell lysate)을 10% SDS 폴리아크릴아마이드젤(polyacrylamide gel) 상에서 전기영동을 실시한 후 프로탄 니트로셀로로오스(Protran nitrocellulose) 막(Schleicher & Schuell, Keene, NH)에 옮기고 마우스 phospho-cPLA₂ 및 cPLA₂에 대한 일차항체를 이용하여 웨스턴 블롯팅 (Western blotting)을 실시하였다(J. Immunol. 2009. 182:7957-7962).

(cPLA₂ 활성 측정)

폐조직에서 cPLA₂ 활성을 측정하였다. 마우스를 희생시켜 50mM Tris-Cl, pH 7.5, 1 mM EDTA, 150 mM NaCl 및 프로테아제 억제제 (protease inhibitors)가 포함된 완충액을 이용하여 팁-타입 소니케이터 (tip-type sonicator (Branson Sonifier, Branson Ultrasonics Corp., CT, 20% amplitude, 3 min))로 폐를 마쇄하였다. 1,000,000g 에서 1 시간 원심시켜 상층액에서 cPLA₂ 활성을 측정하였다 (J Allergy Clin Immunol. 2005. 116:537-543).

이와는 별개로 LPS 50㎎을 마우스 꼬리 정맥으로 주사하고 10분 후에 실시예 및 비교예의 시편 0.5 ㎖을 마우스 복강에 주사하였다. 펩타이드 주사 10분 후에 전체 마우스를 희생시켜 폐를 적출하여 cPLA₂ 인산화 및 활성 저해능을 측정하였다.

[표 5] - cPLA₂ 활성 저해율

상기 표 5와 같이 본 발명에 따른 실시예 1, 2는 비교예 1 내지 5에 비해 cPLA₂ 인산화 및 활성 저해능이 훨씬 우수한 것을 알 수 있다.

(실험예 5) - 싸이클로옥시게나아제 저해효과

본 발명의 리포좀의 싸이클로옥시게나아제 저해 효과를 하기와 같이 측정하였다. 싸이클로옥시게나아제는 아라키돈산을 기질로 하여 프로스타그란딘(prostaglandin), 트롬복산(thromboxane) 등을 합성하여 염증에 관여한다고 알려진 효소로 양 저정낭(sheep seminal vesicle)으로부터 추출한 것으로 Pel-Freeze사의 것을 사용하였다.

싸이클로옥시게나아제 추출과정을 간략히 설명하면 양 저정낭(sheep seminal vesicle)으로부터 추출하여 사용하였다. 본 발명에 따른 싸이클로옥시게나제(Cyclooxygenase, COX)는 상기 양 저정낭을 분쇄후 3,000rpm에서 10분 동안 원심 분리하여 상등액을 취한 후, 상등액을 10,000rpm에서 1 시간 동안 원심 분리하여 침전물을 분리하고 트리스 완충액 (0.1M, pH 8.0)에 녹여 제조되었다.

25㎍ 헤모글로빈을 트리스 완충용액(0.1M, pH 8.0) 100㎖에 넣고 1.1mM 아라키돈산이 되도록 기질을 만든 후, 상기 기질에 10,000 unit의 싸이클로옥시게나제 10 ㎕를 넣는다. 여기에 비교예 1내지 5와 실시예 1 내지 3을 각각 0.5ppm, 10ppm, 50ppm으로 첨가한 후, 측정기(Yellow Spring Instrument company. Model 53 oxygen monitor)로 초기 산소 소모량을 측정하여 싸이클로옥시게나제 활성을 확인하였다. 그 결과를 하기 표 6에 나타내었다.

[표 6] - 싸이클로옥시게나아제 저해율

N=3

*저해율 (%) = [(대조군의 초기 산소 소모량 - 시료의 초기 산소 소모량) / 대조군의 초기 산소 소모량] ×100

상기 표 6을 통하여, 본 발명의 리포좀이 싸이크로옥시게나아제에 대한 저해효과가 우수함을 확인할 수 있었다.

(실험예 6) - 항염 효과

본 발명의 리포좀의 항염효과를 확인하기 위하여 아라키돈산(arachidonic acid)을 이용한 평가법[A. Crummey, G. P. Harper, E. A. Boyle and F. R. Mangan. Inhibition of arachidonic acid-induced ear edema as a model for assessing topical anti-inflammatory compound. Agents and Actions, 1987, 20, p.69~76]을 사용하여 하기와 같이 실시하였다.

마우스(hairless mouse)를 시료 당 각 7 마리씩 나누어 양쪽 귀를 시료 적용 전 에탄올로 깨끗이 세척하고 마이크로미터를 이용하여 측정한 후, 비교예 1 내지 5와 실시예 1 내지 3을 2.0 %를 처리하는 시료군과 인도메타신(indomethacin) 2.0 %를 처리하는 비교군, 그리고 아라키돈산만을 처리하는 대조군으로 나누어 실험을 실시하여 마우스의 귀 두께의 평균치를 측정하였다. 시료군과 인도메타신을 처리하는 비교군은 시료 20 ㎕를, 대조군에는 에탄올 20 ㎕를 1 일 1 회 4 일간 지속적으로 도포하였다. 마지막으로 도포하고 1 시간이 경과한 후에, 좌측에는 에탄올을, 우측귀에는 아라키돈산을 2 ㎎/ear 도포하였고, 도포 1 시간 후 귀의 부종(eaema) 정도를 마이크로미터를 이용하여 양쪽 귀에 대하여 3 회씩 반복 측정하였다. 처리군의 좌측귀는 시료 자체에 의한 염증 유발 정도를 알아보기 위한 대조군으로 이용하였다. 항염효과는 아라키돈산만을 처리한 대조군을 기준으로 부종억제 정도로 판정하고, 그 결과를 하기 표 7에 나타내었다.

[표 7]

*억제율 (%) = (A - B) / A ×100

A : 대조군 귀의 평균 두께 변화(아라키돈산 처리 귀의 두께 - 비처리 귀의 두께)

B : 시료 도포군의 귀의 평균 두께 변화(시료 처리 귀의 두께 - 비처리 귀의 두께)

상기 표 7을 통하여, 본 발명의 판테놀과 알라닐글루타민이 담지된 리포좀인 실시예 1과 2는 각각 39.4 %, 28.2 %의 높은 염증 억제율을 나타내는 것을 확인할 수 있었다. 이러한 억제율 수치는 의약품 성분으로서 항염효과가 매우 우수한 물질인 인도메타신 대비 약 60~80 % 정도의 우수한 항염효과를 나타내는 것이다. 또한, 부종 증가율로 유의차 검증 시, 상기 리포좀은 아라키돈산과 99 %의 유의차를 갖는 효과를 나타내었다.

(실험예 7) - 인체에 대한 1차 자극성 시험(Human patch test)

건강한 성인 남녀 50명을 대상으로 CTFA 가이드라인(The Cosmetic, Toiletry and Fragrance Association. Inc. Washington, D.C., 20036, 1991)에 따라 인체에 대한 1 차 자극시험을 실시하였다. 표 8과 같이 화장수를 제조하여 각 비교예 및 실시예 99.0%, 소디움라우릴셀페이트 1.0%를 함유한 시료, 소디움라우릴셀페이트 1.0%와 정제수(to 100%)를 함유한 시료 그리고 정제수를 시료로 하여 인체 자극성을 평가하였다. 핀 쳄버(Finn Chamber)에 상기 시료들을 각각 20㎕씩 적하시킨 후, 이것을 시험 부위인 인체의 등에 얹어 테이프로 고정시켰다. 이어서 24시간 동안 첩포한 후, 첩포를 제거하였다. 첩포를 제거한 후 4시간이 경과한 다음 시험 부위의 피부 반응을 다음 기준에 따라 판정하여 그 결과를 표 9에 나타내었다.

[표 8] - 화장수 제조

<판정 기준>

－ : 홍반이나 특이한 현상 없음

±: 주위보다 약간 붉어짐

＋ : 주위보다 현저히 붉어짐

＋＋ : 주위보다 심하게 붉어지고 부풀어 오름

자극도=[(±수 ×1 ＋ (＋)수 ×2 ＋ (＋＋) 수 ×3] / 피시험자 수

[표 9]

상기 표 9에서 알 수 있는 바와 같이, 실시예 4 내지 5는 비교예 6 내지 10와 비교시 소디움라우릴설페이트의 자극을 크게 완화시켜주었다. 이러한 결과는 전술한 항염 효과 실험에서 나타난 바와 같이 뛰어난 염증완화 효과에 기인된 것이라고 생각되며, 이를 통해, 본 발명에 따른 리포좀에 담지된 판테놀과 알라닐글루타민은 피부 투과성이 높아, 작은 량으로도 항염 효과가 우수하게 나타나는 것을 알 수 있다.

(실험예 8) - 인체에 대한 항염 관능시험

10명의 피험자를 대상으로 뾰루지가 난 곳에 표 8의 화장수를 각각 하루 2회 7일간 2.0 mg/㎠ 씩 첩포하여 변화를 관찰하였다. 대조군으로는 물을 사용하였다

[표 10]

상기 표 10에서 알 수 있는 바와 같이, 실시예 4 내지 5는 비교예 6 내지 10에 비해 포루지를 효과적으로 완화시켰다. 이러한 결과는 전술한 피부투과성 및 항염효과 실험에서 나타난 바와 같이 뛰어난 염증완화 효과에 기인된 것이라고 생각되며, 이를 통해, 본 발명에 따른 판테놀과 알라닐글루타민이 담지된 리포좀은 피부에 안전하면서 염증 완화 효과가 우수한 성분임을 알 수 있다.

(실험예 9) - 사용감 개선 평가

상기 비교예 6 내지 7 및 실시예 4에 따라 제조된 화장수의 사용감을 피험자를 대상으로 관능 평가하였다. 피험자는 30세 내지 50세의 성인 여성 20명을 대상으로 세안 후 견본 하나만 사용한 후 사용감을 하기 기술된 평가 기준에 따라 평가하여 도 1에 나타내었다.

<평가 기준>

매우 나쁨 : 1, 나쁨 : 2, 보통 : 3, 좋음 : 4, 매우 좋음 : 5

도 1에서 보듯이, 본 발명에 따른 실시예 4를 사용한 경우 흡수력, 촉촉함, 끈적임, 영양감, 사용 후 느낌 등 여러 평가 부분에서 전체적인 만족도가 비교예 6 내지 7에 비해 매우 우수함을 알 수 있었다.

(실험예 10) - 수분 보유능 평가

상기 비교예 6 내지 7 및 실시예 4에 따라 제조된 화장수의 피부 보습력을 비교 평가하기 위하여, 상기 각 화장수를 각각 피부에 정량 도포한 후, 각질층의 수분 보유량을 측정하고 평가하였다. 수분 보습력은 피부 수분함량 측정기(skin surface hygrometer, 모델명: SKICON-200, 일본 IBS사 제품)을 이용하여 측정하였다. 구체적으로, 25℃ 온도, 상대습도 45의 항온 항습실에서 상기 비교예 6 내지 7 및 실시예 4에 따라 제조된 화장수를 각각 20명의 피시험자의 팔의 안쪽에 일정량(2 ㎎/㎠)을 도포한 후 잘 문지르고, 평가 전의 수분 보유능을 기준으로 1시간과 3시간 후의 수분 증가율(%)을 측정하여 보습 효과를 평가하였다. 결과를 하기 표 11에 나타내었다.

[표 11]

상기 표 11에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 상기 실시예 4에서 제조된 실시예 1의 리포좀을 함유하는 화장수는 비교예 6 내지 7의 판테놀과 알라닐글루타민을 직접 용해한 화장수에 비하여 도포 1시간 후 및 도포 3시간 후의 수분 보유 증가율이 훨씬 높은 것을 확인하였다. 이는, 본 발명에 따른 실시예 1의 리포좀을 함유하는 화장료 조성물이 뛰어난 보습효과가 있음을 의미한다.

Claims (8)

1. 내부에 판테놀 및 L-알라닐-L-글루타민이 담지된 리포좀을 포함하는 항염 화장료 조성물로서, 상기 리포좀은 내부에 판테놀 및 L-알라닐-L-글루타민이 전체 리포좀 100 중량% 중 각각 0.1 내지 5 중량% 포함하며,
   상기 항염 화장료 조성물은, 전체 조성물 100 중량% 중 상기 리포좀을 0.1 내지 5 중량% 포함하는 것을 특징으로 하는 항염 화장료 조성물.
   
2. 삭제
3. 삭제
4. 삭제
5. 삭제
6. 제 1항에 있어서,
   상가 리포좀의 평균입경은 10 내지 200㎚인 항염 화장료 조성물.
   
7. 삭제
8. 제 1항에 있어서,
   상기 조성물은 스킨, 에멀젼, 크림, 선크림, 파운데이션, 에센스, 젤, 팩, 마스크팩, 폼클렌저, 바디클렌저, 유연화장수, 아이라이너, 샴푸, 린스, 비누, 정발제, 양모제, 헤어크림, 헤어 스타일링젤, 윤활제 및 물티슈로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 제형인 항염 화장료 조성물.

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