ES2260915T3 - Preparaciones para la aplicacion de agentets antiinflamatorios, especialmente de agentes antisepticos, y/o de agentes que estimulan la cicatrizacion de heridas, en el tracto respiatorio superior y/o en el oido. - Google Patents

Abstract

Utilización de povidona yodada en combinación con una preparación de liposomas, en la fabricación de una preparación farmacéutica para la prevención o el tratamiento de infecciones, el tratamiento de heridas y/o para el remodelado funcional y la reparación de tejidos, en el tejido epitelial ciliado del tracto respiratorio superior y del oído.

Description

Preparaciones para la aplicación de agentes antiinflamatorios, especialmente de agentes antisépticos, y/o de agentes que estimulan la cicatrización de heridas, en el tracto respiratorio superior y/o en el oído.

La invención se refiere a la utilización de povidona yodada en combinación con una preparación de liposomas en la fabricación de una preparación farmacéutica para la prevención o el tratamiento de infecciones, el tratamiento de heridas y/o para el remodelado de tejido funcional y reparación del tejido epitelial ciliado del tracto respiratorio superior y del oído.

Se conoce una pluralidad de diferentes agentes antibióticos y antisépticos para el tratamiento tópico de enfermedades infecciosas. Una desventaja decisiva de los agentes antibióticos es que las bacterias infectivas muestran resistencias primarias, y pueden adquirir resistencias secundarias frente a estos agentes. Además, los antibióticos con bastante frecuencia provocan sensibilización en el paciente. La utilización de, por ejemplo, antisépticos que liberan halógenos, como la povidona yodada, también conocida como polividona yodada o PVP-yodo, es decir, el complejo poli(1-vinil-2-pirrolidín-2-ona)-yodo, puede prevenir resistencias. Los agentes antisépticos son también mucho más raramente alergénicos que los antibióticos.

En la actualidad, se tratan las enfermedades infecciosas del tracto respiratorio con antibióticos. Varias revisiones y artículos se han referido a la aplicación de agentes antibióticos a través del tracto respiratorio, aunque centrándose en el tracto respiratorio inferior. Ramsey et al., por ejemplo, describen la administración intermitente de tobramicina inhalada en pacientes con fibrosis quística en The New England Journal of Medicine, Volumen 340, Número 1, 1999, páginas 23-30.

Wiener-Kronish ha investigado la aerosolización de imipenem/cilastatina para la prevención de lesiones pulmonares agudas inducidas por Pseudomonas, ver "Aerosolization of imipenem/cilastatin prevents pseudomona-induced acute lung injury" (Journal of Antimicrobial Chemotherapy (1996) 38, p. 809-818).

Schreier describe en varias revisiones recientes las aplicaciones pulmonares de diferentes agentes antibióticos, como la bencil penicilina, la tobramicina o la amicacina, para el tratamiento de enfermedades infecciosas, por ejemplo en "Pulmonary applications of liposomes" (Medical applications of liposomes, Papahadjopoulos and Lasic (eds.), Elsevier, 1998).

Sin embargo, el tratamiento con antibióticos conduce a complicaciones conocidas por el experto en la materia. Por ejemplo, los pacientes que sufren laringofaringitis aguda o crónica con frecuencia se tratan con antibióticos para aliviar los síntomas. Ello con frecuencia meramente conduce a resistencias de las bacterias responsables de los síntomas. Muchas enfermedades del tracto respiratorio son causadas por virus. Un ejemplo típico, en el tracto respiratorio superior, es la rinitis. Los antibióticos son ineficientes en estos casos, y estos pacientes no son curados de las infecciones.

En la patente anterior de los presentes inventores, EP 0 639 373, se describe la utilización de antisépticos y/o de agentes estimulantes de la cicatrización de heridas para la aplicación externa en humanos y en animales. Específicamente, en la misma se muestran preparaciones de liposomas de PVP-yodo que son aplicables tópicamente en las partes externas del ojo. Estas preparaciones generalmente adoptan la forma de crema, pomada, loción, gel o formulación de gotas.

Los liposomas son portadores de fármaco bien conocidos y, por lo tanto, durante bastante tiempo ha sido tema de investigación la aplicación de medicamentos en liposomas. La revisión titulada "Pulmonary delivery of liposomes" (H. Schreier, en "Journal of Controlled Release" 24, 1993, p. 209-2239) proporciona una visión general referida a la administración pulmonar de fármacos encapsulados en liposomas en la terapia del asma. En la misma se muestra la caracterización fisicoquímica de aerosoles de liposomas, además de sus aplicaciones terapéuticas en el tracto respiratorio. Entre los fármacos que se han investigado para la administración pulmonar mediante liposomas se incluyen, por ejemplo, los agentes anticáncer, péptidos, enzimas, compuestos antiasmáticos y antialérgicos y, tal como se ha indicado anteriormente, también los antibióticos. H. Schreier también ha descrito la formulación de aerosoles de liposomas o de aerosoles de polvo de liposomas utilizando, por ejemplo, un inhalador de polvo seco, en "Formulation and in vitro performance of liposome powder aerosols" (S.T.P. Pharma Sciences 4, 1994, p. 38-44).

Aunque se ha prestado mucha atención a los liposomas como portadores farmacológicos, como puede apreciarse a partir de los documentos indicados, aparentemente no existen antecedentes de la técnica referentes a liposomas y a otros particulados como portadores de antiinflamatorios, especialmente antisépticos y/o para agentes estimulantes de la cicatrización de heridas para aplicaciones en el cuerpo, especialmente en el tracto respiratorio superior, incluyendo la boca, garganta y nariz, y en el oído.

Es conocido de la técnica que la administración de partículas inhalables en el tracto respiratorio puede conseguirse mediante nebulización o aerosolización de los liposomas o mediante inhalación de polvos secos de la preparación respectiva.

Aparentemente existe una marcada reticencia en la técnica a aplicar desinfectantes en partes internas del cuerpo, excepto quizás en casos extremos de complicaciones sépticas potencialmente letales.

Generalmente, las preparaciones antibióticas aparentemente son preferentes, incluso en vista de las desventajas anteriormente comentadas.

Un objetivo de la invención es proporcionar un antiinflamatorio de fácil aplicación y bien tolerado, especialmente un antiséptico y/o una preparación estimulante de la cicatrización de heridas, que proporcione una liberación prolongada y un efecto tópico prolongado del agente activo en el tracto respiratorio inferior.

De acuerdo con la invención, dicho objetivo se consigue con una preparación que comprende povidona yodada en combinación con una preparación de liposomas, como se define en la reivindicación independiente 3.

Las reivindicaciones dependientes definen formas de realización ventajosas adicionales de la invención.

En el contexto de la invención, el tracto respiratorio superior se considera que incluye ampliamente las áreas de la boca, nariz y garganta, hacia abajo hasta la laringe inclusive y excluyendo las áreas de piel facial externas de boca y nariz. El tracto respiratorio superior comprende aquellas partes que puede considerarse que están en el interior del cuerpo. En el mismo contexto, el oído se considera que incluye ampliamente aquellas partes del oído que están en el interior del cráneo, pero que son accesibles desde el exterior del mismo. Generalmente, ello incluye los conductos del oído externo y, en algunos casos, el oído medio, pero excluye el oído interno y también aquellas partes del oído externo que rodean al orificio del oído, en el exterior del cráneo.

De acuerdo con la presente invención, la preparación puede contener además por lo menos un agente estimulante de la cicatrización de heridas.

Los agentes de cicatrización de heridas comprenden agentes que estimulan la granulación y la epitelización, como dexpantenol, alantoínas, azulenos, taninos y compuestos de tipo vitamina B.

La invención se basa en el hecho inesperado de que los liposomas son altamente adecuados como portadores para agentes antisépticos, especialmente para la povidona yodada, y para agentes estimulantes de la cicatrización de heridas, para la aplicación en el tejido epitelial ciliado del tracto respiratorio superior.

Las preparaciones de acuerdo con la presente invención permiten la liberación prolongada del agente o agentes, y proporcionan una actividad prolongada y tópica en el lugar deseado de acción mediante la interacción con superficies celulares.

La invención se basa, en otro aspecto, en otro hecho sorprendente e inesperado. Es bien conocido en la técnica que la formación de nuevos tejidos corporales puede provocar problemas. De este modo, es conocido que la reparación de tejidos corporales puede verse acompañada de la formación de tejidos cicatrizales, que pueden ser funcional y/o cosméticamente perjudiciales, o por lo menos, no deseables. La hiperqueratosis y la proliferación incontrolada de tejido puede provocar graves daños, conduciendo a disfunciones, y además evidentemente puede ser cosméticamente no deseable. Tras las infecciones e inflamaciones, el nuevo crecimiento de tejido de cicatrización puede provocar neoplasmas y entrecrecimiento. De este modo, es bien conocido en la técnica que en la curación de enfermedades, el remodelado apropiado de tejido no sólo es deseable sino, de hecho, necesario.

Ahora se ha descubierto inesperadamente que la utilización de povidona yodada sola o en combinación con otros agentes similares, conduce a la formación marcadamente reducida de tejido corporal no deseable en el transcurso de la reparación de tejidos y de otros procesos de crecimiento de tejidos. De este modo, se reduce la formación de tejidos cicatrizales, en la piel y también en las mucosas y en otros tejidos, como los tejidos musculares o en tejidos de órganos internos. La hiperqueratosis puede suprimirse por completo, y el entrecrecimiento o la formación de neoplasmas en la curación de enfermedades infecciones también se ve altamente reducida.

Un objetivo conseguido por la invención se refiere a la reparación mejorada de tejidos en el cuerpo. La invención consigue lo anterior mediante la aplicación de povidona yodada en combinación con una preparación de liposomas según se define en las reivindicaciones independientes.

La preparación antiinflamatoria, antiséptica y/o cicatrizadora de heridas puede administrarse en el tracto respiratorio mediante un agente de nebulización cargado con la preparación de liposomas, o mediante inhalación de polvo seco de la preparación respectiva. Por ejemplo, una preparación de liposomas puede prepararse mediante la carga de liposomas con PVP-yodo en un procedimiento convencional.

También es posible compactar los liposomas cargados, opcionalmente junto con materiales auxiliares, tales como azúcares de bajo peso molecular, preferentemente lactosa, en un reservorio de medicamento sólido fuertemente compactado. Esta reserva de medicamento seguidamente puede granularse o micronizarse, o tratarse de otras maneras para proporcionar el polvo en forma de partículas. La preparación de liposomas resultante puede administrarse mediante inhalación de la preparación en la forma de un aerosol de polvo, como se describe, por ejemplo, en "Acute Effects of Liposome Aerosol Inhalation on Pulmonary Function in Healthy Human Volunteers" (Thomas et al., Preliminary report, Volume 99, 1991, p. 1268-1270). Las presiones para la preparación de reserva de medicamento sólido fuertemente compactado están comprendidas preferentemente en el intervalo entre 50 y 500 MPa. Se describe esta reserva de medicamento en WO 94/14490 y se describe un dispositivo para la administración en WO 93/24165.

La naturaleza o constitución de los liposomas generalmente no es crítica. La preparación de liposomas como se describe, por ejemplo, en EP 0 639 373 puede administrarse en la nariz o en la garganta como un aerosol, por ejemplo, un pulverizador de bomba. Para las aplicaciones en la cavidad oral, las preparaciones inventivas preferentemente se formulan como un pulverizador de bomba, gel o solución de enjuague.

Las preparaciones de acuerdo con la presente invención aparentemente no sólo contienen el agente activo, povidona yodada, encapsulada en los liposomas. Aparentemente también existe cierta cantidad de agente que no está contenida en el interior de los liposomas. Las preparaciones de acuerdo con la invención con frecuencia muestran un efecto inicial marcado en que se observa la liberación prolongada más lenta del agente activo desde los liposomas. Sin deseo de ser destinada a ninguna explicación teórica en particular, en la actualidad se supone que, además del agente activo encapsulado en el interior de los liposomas, algunos agentes activos están presentes en el exterior de los liposomas y probablemente unidos laxamente a las superficies externas de los liposomas. Ello podría deberse a que moléculas de agente activo se asocian a la membrana liposómica, o podría deberse a que las moléculas de agente activo forman una capa sobre la superficie liposómica, capa que recubre parcialmente o incluso totalmente a los liposomas externamente. El tipo y cantidad de este efecto inicial del agente puede verse influido, por ejemplo, por la selección de los parámetros de concentración.

Las sustancias anfifílicas, generalmente se conoce de la técnica anterior que forman membranas liposómicas, pueden utilizarse en el contexto de la invención con la condición de que sean farmacéuticamente aceptables para la aplicación deseada. En la actualidad, los sistemas que forman liposomas que comprenden lecitina son preferentes. Estos sistemas pueden comprender lecitina granulada de soja hidrogenada aparte de colesterol y succinato-hexahidrato disódico; en la actualidad es específicamente preferente utilizar lecitina granulada de soja hidrogenada como único agente formador de membrana.

Los procedimientos conocidos de la técnica anterior para la formación de estructuras liposómicas se describen en los documentos indicados anteriormente y pueden utilizarse generalmente en el contexto de la invención. Ampliamente, estos procedimientos comprenden la agitación mecánica de una mezcla adecuada que contiene la sustancia formadora de membrana y agua o una solución acuosa. La filtración a través de membranas adecuadas es preferente para formar un tamaño de liposoma sustancialmente uniforme.

El tamaño medio de los liposomas de acuerdo con la presente invención puede variar en un intervalo amplio, generalmente de entre aproximadamente 1 y aproximadamente 20.000 nm. Los liposomas con diámetros comprendidos en el intervalo entre aproximadamente 50 y 4.000 nm son preferentes. Los liposomas con diámetros de aproximadamente 1.000 nm en la actualidad son más preferentes para, por ejemplo, aplicaciones de gel. Para las soluciones, pueden ser más adecuados los diámetros medios más reducidos.

Los agentes estimulantes de la cicatrización de heridas que son preferentes comprenden sustancias que se han descrito en la literatura para esta aplicación. Entre los agentes de este tipo que son preferentes se incluyen las sustancias que se conoce que estimulan la epitelización. Entre éstas se incluyen las vitaminas, específicamente del grupo de las vitaminas B, la alantoína, algunos azulenos, etc..

Algunas formas de realización de la invención altamente preferentes en la actualidad comprenden povidona yodada o combinaciones de povidona yodada con otros agentes que muestran efectos beneficiosos en la reparación de tejidos, especialmente con respecto al remodelado funcional y cosmético de tejidos.

En las formas de realización preferentes, las preparaciones de la invención que contienen povidona yodada pueden comprender agentes adicionales, como agentes anestésicos. Las preparaciones inventivas también pueden contener agentes adicionales habituales, incluyendo adyuvantes y aditivos, antioxidantes, agentes conservantes o agentes formadores, como aditivos ajustadores de la viscosidad, emulsionantes, etcétera.

Una utilización altamente preferente en la actualidad de las preparaciones de liposomas inventivas es en el tratamiento local de infecciones de nariz, boca y garganta, especialmente cuando las preparaciones de liposomas contienen povidona yodada. También en esta indicación, las preparaciones antisépticas inventivas, especialmente aquéllas que contienen PVP-yodo, tienen la gran ventaja de no causar resistencias y de provocar reacciones mucho menos alérgicas, permitiendo una terapia con una muy buena relación coste-eficacia con un amplio espectro de efectos. Una preparación de liposomas de povidona yodada de acuerdo con la presente invención es, por ejemplo, efectiva contra virus, como el herpes simplex. Los agentes antibióticos no proporcionan este efecto. Además, una preparación de liposomas de un agente microbiocida como la povidona yodada proporciona una liberación prolongada del agente desde los liposomas en la mucosa nasal u oral. Ello provoca el efecto prolongado de la sustancia antimicrobiana, y de este modo, a una aplicación menos frecuente, en comparación con las preparaciones habituales de soluciones
antisépticas.

La presente invención también es útil en el tratamiento de enfermedades infecciosas o para el alivio de enfermedades, como las infecciones por VIH que se ven acompañadas por infecciones oportunistas. También pueden tratarse de acuerdo con la invención los pacientes con un sistema inmunológico suprimido, por ejemplo tras un trasplante de órgano. En particular, con la preparación de povidona yodada de acuerdo con la invención puede tratarse la laringofaringitis aguda y crónica y la angina.

Una utilización adicional altamente preferente es en la reparación de tejidos, especialmente en el remodelado funcional y cosmético de tejidos.

Las preparaciones de acuerdo con la presente invención pueden adoptar una diversidad de formas, que son adecuadas para la administración a través del tracto respiratorio superior y del oído, incluyendo formulaciones sólidas o líquidas farmacéuticamente aceptables. Por lo tanto, las preparaciones de acuerdo con la presente invención pueden presentarse en forma de aerosol (de polvo) o en forma de un reservorio de medicamento sólido compactado, preferentemente una tableta anular, más preferentemente una cápsula de gelatina, unos polvos, una pulverización, una emulsión, una dispersión, una suspensión o una solución que contiene el portador y el agente o agentes. Pueden ser en forma de gel, o en alguna otra forma de aplicación semisólida, viscosa o sólida, por ejemplo para la aplicación en la cavidad oral.

Generalmente, la cantidad de agentes activos en una preparación inventiva se determinará a partir del efecto deseado, por una parte, y de la capacidad portadora de agente que presente la preparación de liposomas, por otra
parte.

Para las preparaciones inventivas con grandes cantidades de agentes activos o dosis elevadas de agente activo, preparaciones sólidas, líquidas o de gel son frecuentemente preferentes frente a preparaciones nebulizadas o los aerosoles, o frente a los polvos o los aerosoles de polvos. Ampliamente, la cantidad de agente activo en una preparación de liposomas inventiva puede estar comprendida en el intervalo de concentraciones entre el límite inferior de efectividad del agente y la carga máxima de agente en la preparación de liposomas respectiva.

Más específicamente, para la povidona yodada, una solución o dispersión en una preparación portadora inventiva, especialmente cuando el portador es una preparación de liposomas, puede contener entre 0,1 y 10 g de agente en 100 g de preparación. En este caso, la preparación típicamente contendrá entre 1 y 5 g de sustancia formadora de membrana liposómica, especialmente lecitina, por cada 100 g de preparación.

En una loción, que puede ser una loción hidrofílica o lipofílica, un intervalo típico de povidona yodada es de entre 0,5 y 10 g de agente, y de entre 1 y 5 g, preferentemente de aproximadamente 4 g, de agente formador de membrana liposómica, como lecitina granulada de soja hidrogenada, por cada 100 g de loción. En el caso de una loción hidrofílica, con frecuencia se utiliza una solución de electrolito para preparar la loción que contiene liposomas. Con frecuencia se prepara una loción lipofílica a partir de agente, sustancia formadora de membrana y agentes de formación lipofílicos, como triglicéridos de longitud de cadena intermedia, etcétera.

Una crema hidrofílica que comprende una preparación de liposomas inventiva generalmente comprenderá entre 0,1 y 10 g de povidona yodada, junto con entre aproximadamente 1 y 10 g de sustancia formadora de membrana y aditivos formadores de crema O/W típica adicionales, por cada 100 g de crema.

Una crema anfifílica comparable de acuerdo con la invención tendrá un contenido similar de agente y de sustancia formadora de membrana, como lecitina, y tendrá los aditivos adicionales típicos de una crema anfifílica.

Una pomada hidrofílica de acuerdo con la invención puede comprender, ampliamente, entre 0,1 y 10 g de agente y entre 1 y 10 g de sustancia formadora de membrana liposómica, como lecitina, junto con sustancias de base de pomada típicos de la técnica anterior, como Macrogol (TM) y agua, en 100 g de pomada.

Un hidrogel no alcohólico de acuerdo con la invención podría comprender, ampliamente, entre 1 y 5 g de povidona yodada, aproximadamente 2 g de lecitina y sustancias formadoras de gel, como Carbopol (TM), con agente ajustador de pH y agua para formar 100 g de hidrogel.

Una preparación inventiva de aerosol o de pulverización con frecuencia comprenderá hasta 50 mg, pero podría comprender hasta 100 mg o más de formulación de agente activo liposómico, por dosis unitaria de pulverización. La preparación de pulverización típicamente comprenderá por lo menos 10% en peso de PVP-yodo en los liposomas cargados (o partículas portadoras alternativas), pero puede comprender hasta el 50% en peso o incluso más de agente activo. Cuando el agente activo sea PVP-yodo, la cantidad de yodo disponible generalmente será de aproximadamente el 10% en peso (respecto a PVP-yodo).

Se pondrán de manifiesto formulaciones más específicas a partir de los ejemplos de formas de realización.

Las características y ventajas de la presente invención se pondrán de manifiesto en más detalle a partir de la descripción siguiente de las formas de realización preferentes. En estas formas de realización, que incluyen un mejor modo, se ejemplifica la povidona yodada como agente antiséptico y se seleccionan liposomas como el portador.

Un procedimiento preferente para producir los liposomas de la invención puede describirse en general de la manera siguiente:

Los componentes lipídicos formadores de membrana, por ejemplo lecitina, se disuelven en un disolvente adecuado, como cloroformo o una mezcla 2:1 de metanol y cloroformo, y se filtran bajo condiciones estériles. A continuación, se produce una película lipídica sobre un sustrato estéril de superficie elevada, como perlas de vidrio, mediante evaporación controlada del disolvente. En algunos casos puede ser suficiente formar la película sobre la superficie interna del recipiente utilizado evaporando el disolvente, sin utilizar un sustrato específico para incrementar la superficie.

Se prepara un sistema acuoso a partir de componentes electrolíticos y del agente o agentes activos a incorporar en la preparación de liposomas. Este sistema acuoso puede comprender, por ejemplo, 10 mmoles/l de hidrogenofosfato sódico y cloruro sódico al 0,9%, a pH 7,4; además, el sistema acuoso comprende por lo menos la cantidad deseada del agente activo, que en los ejemplos de realización es povidona yodada. Con frecuencia, el sistema acuoso comprende una cantidad en exceso de uno o más agentes.

Generalmente, los liposomas se forman mediante agitación de dicho sistema acuoso en presencia de dicha película formada por los componentes lipídicos. En esta etapa pueden añadirse aditivos adicionales para mejorar la formación de los liposomas; por ejemplo, puede añadirse colato sódico. También puede influirse sobre la formación de los liposomas mediante la acción mecánica, como mediante filtración por presión a través de, por ejemplo, membranas de policarbonato, o centrifugación. Generalmente, se lava la dispersión de liposomas cruda, por ejemplo con solución de electrolito, como la utilizada para preparar la solución anteriormente indicada del agente activo.

Tras la obtención y lavado de los liposomas con la distribución de tamaño requerida, pueden dispersarse nuevamente en una solución de electrolito, como se ha descrito anteriormente, que con frecuencia también comprende azúcares, como sacarosa o un sustituto adecuado de azúcar. La dispersión puede secarse por congelación y puede liofilizarse. Puede, previamente a su utilización, reconstituirse mediante la adición de agua y la agitación mecánica adecuada a la temperatura de transición del componente lipídico, que para la lecitina de soja hidrogenada es, por ejemplo, de 55ºC.

En los Ejemplos siguientes, se utilizó lecitina granulada de soja hidrogenada (EPIKURON (TM) 200 SH obtenible de Lukas Meyer, Alemania, o PHOSPOLIPON (TM) 90H, obtenible de Nattermann Phospholipid GmbH, Alemania). Sin embargo, en su lugar pueden utilizarse otras sustancias formadoras de membrana liposómica farmacéuticamente aceptables, y al experto en la técnica le será fácil seleccionar sistemas alternativos adecuados de formación de liposomas a partir de lo descrito en la técnica anterior.

Ejemplo de realización I

En un matraz de vidrio de 1.000 ml, con perlas de vidrio para incrementar la superficie, se disolvieron 51,9 mg de colesterol y 213 mg de lecitina granulada de soja hidrogenada en una cantidad suficiente de mezcla de metanol y cloroformo a una proporción de 2:1. A continuación, se evaporó el disolvente bajo vacío hasta formar una película sobre la superficie interior del matraz y sobre las perlas de vidrio.

Se disolvieron separadamente 2,4 g de PVP-yodo (que contenía aproximadamente 10% de yodo disponible) en 12 ml de agua.

Nuevamente en un recipiente separado, se disolvieron 8,77 g de cloruro sódico y 1,78 g de Na_{2}HPO_{4}\cdot2H_{2}O en 400 ml de agua. Se añadió agua adicional hasta un volumen total de 980 ml, y después se añadieron aproximadamente 12 ml de ácido hidroclórico 1 N para ajustar el pH a 7,4. A continuación, esta solución se enrasó con agua a exactamente 1.000 ml.

En un cuarto recipiente, se disolvieron 900 mg de sacarosa y 57 mg de succinato disódico en 12 ml de agua.

A continuación, se añadió la solución de PVP-yodo a la película lipídica en el matraz y la mezcla se agitó hasta la disolución de la película. Ello produjo la formación de liposomas a partir de los lípidos hidratados presentes en el matraz. El producto se centrifugó y se descartó el sobrenadante líquido. Se añadió la solución de sacarosa hasta completar 12 ml y el producto se centrifugó nuevamente. Después, el líquido sobrenadante se descartó nuevamente. En esta etapa, pudo llevarse a cabo una etapa adicional de lavado con la solución de sacarosa o con la solución tampón de cloruro sódico.

Tras la última etapa de centrifugación y tras descartar el sobrenadante, se añadió solución tampón de cloruro sódico hasta un volumen de 12 ml, y se distribuyeron homogéneamente los liposomas en dicha solución. A continuación, se distribuyó el producto en viales, conteniendo cada uno 2 ml de dispersión de liposomas, y seguidamente los viales se sometieron a una etapa de secado por congelación.

Tras el secado por congelación, cada vial comprendía aproximadamente 40 mg de sólidos.

El procedimiento del Ejemplo de realización I tiene una desventaja menor en que la solución de PVP-yodo utilizada, debido al elevado porcentaje de sólidos, es bastante viscosa y, de este modo, es más difícil de manipular.

Ejemplo de realización II

En un matraz de 2.000 ml con perlas de vidrio para incrementar la superficie, se disolvieron 173 mg de lecitina granulada de soja hidrogenada y 90 mg de succinato disódico en aproximadamente 60 ml de una mezcla de metanol/cloroformo en una proporción de 2:1. Se eliminó el disolvente bajo vacío hasta la formación de una película.

Se disolvieron 4 g de PVP-yodo (10% de yodo disponible) en 40 ml de la solución tampón de cloruro sódico indicada en el Ejemplo de realización I, y se añadieron a la película lipídica en el matraz. A continuación, se agitó el matraz hasta disolver la película y formar los liposomas.

El producto se centrifugó y se descartó el sobrenadante líquido.

Al pellet de liposomas producido de este modo, se añadió solución tampón adicional de cloruro sódico hasta completar 40 ml, y se repitió la etapa de centrifugación. Nuevamente se descartó el sobrenadante. Alcanzada esta etapa, podría repetirse la etapa de lavado en caso necesario.

Tras la etapa final de centrifugación y de decantación, se añadió nuevamente solución tampón de cloruro sódico a los liposomas precipitados hasta completar 40 ml. A continuación, se distribuyó la dispersión homogénea en viales, conteniendo cada vial aproximadamente 2 ml de dispersión de liposomas, y seguidamente los viales se sometieron a una etapa de secado por congelación. Ello produjo aproximadamente 200 mg de sólidos secados por congelación por vial.

A partir de los sólidos secados por congelación de los Ejemplos I y II, se realizaron preparaciones adicionales, como se describe en Ejemplos de realización e informes de ensayo posteriores.

Al igual que el procedimiento del Ejemplo de realización I, el procedimiento anteriormente descrito utiliza una etapa de hidratación tras la formación de película en presencia de disolventes orgánicos y alcanza tasas de inclusión de entre el 5% y el 15%. Estos procedimientos generalmente producen liposomas bastante grandes y con frecuencia multilamelares.

Los procedimientos anteriormente descritos pueden modificarse mediante una etapa de filtración a alta presión a través de una membrana adecuada, como una membrana de policarbonato, tras formarse los liposomas crudos o después de cualquiera de las etapas de lavado posteriores, o directamente mediante la utilización de homogenización a alta presión. Ello produce liposomas unilamelares de tamaño mucho menor con cantidades incrementadas de agente encapsulado.

En lugar de la homogeneización a alta presión, pueden utilizarse otros procedimientos de la técnica anterior que se conoce que proporcionan liposomas uniformes de tamaño reducido.

Ejemplo de realización III

Se preparó una crema hidrofílica (O/W) a partir de 10 g de liposomas de lecitina de soja granulada hidrogenada/PVP-yodo, como se ha descrito en el Ejemplo de realización II; estos se mezclaron con 4 g de polisorbato 40 (TM), 8 g de alcohol cetilestearílico, 8 g de glicerol, 24 g de vaselina blanca y agua hasta completar 100 g.

Ejemplo de realización IV

Se preparó una crema anfifílica a partir de 10 g de liposomas de lecitina de soja granulada hidrogenada/povidona yodada, como se describe en el Ejemplo de realización II; 7,5 g de triglicéridos de longitud de cadena intermedia, 7 g de monoestearato de polioxietilenglicerol, 6 g de alcohol cetilestearílico, 8 g de propilenglicol, 25 g de vaselina blanca y agua hasta completar 100 g.

Ejemplo de realización V

Se preparó una pomada hidrofílica que puede enjuagarse con agua, a partir de 10 g de PVP-yodo liposómico, como se describe en el Ejemplo de realización II, 55 g de Macrogol 400 (TM), 25 g de Macrogol 4000 (TM) y agua hasta completar 100 g.

Ejemplo de realización VI

Se preparó un hidrogel a partir de 4 g de PVP-yodo liposómico, como se describe en el Ejemplo de realización II, 0,5 g de carbopol 980 NF (TM), hidróxido sódico hasta un pH de 7, agua hasta completar 100 g.

Son concebibles modificaciones adicionales de las realizaciones anteriormente descritas.

De este modo, las cremas de los Ejemplos de realización III y IV pueden tener un contenido adicional de un agente conocido que estimula la cicatrización de heridas, como la alantoína. Este agente se añade en una concentración farmacéuticamente útil, en el caso de la alantoína, comprendida en el intervalo entre 0,1 y 0,5 g por cada 100 g de crema. El agente de cicatrización de heridas puede incorporarse en la crema base, en cuyo caso estará mayoritariamente en el exterior de los liposomas. Sin embargo, puede incorporarse parcial o mayoritariamente en los liposomas, en cuyo caso se añadirá en una etapa adecuada correspondiente del procedimiento de preparación de liposomas.

Son fácilmente concibles alternativas similares a partir de los Ejemplos de realización adicionales.

También es posible preparar realizaciones similares a las anteriormente descritas, que comprenden un agente capaz de estimular la cicatrización de heridas en sustitución del agente antiséptico, y no además del mismo, como, por ejemplo, povidona yodada, descrita en los Ejemplos de realización anteriores. Sin embargo, en la actualidad es preferente utilizar un agente estimulante de la cicatrización de heridas (si se utiliza alguno) además de un agente antiséptico.

Para la aplicación de las preparaciones inventivas en el paciente, pueden utilizarse sistemas conocidos, como aplicadores de bomba neumática, paquetes de presión de dos cámaras, dispensadores de aerosol pulverizado, etc.

En un aplicador de bomba neumática, se proporciona un dispositivo de fuelle entre una válvula situada aguas arriba y una válvula situada aguas abajo, funcionando ambas válvulas en la misma dirección única. Un depósito situado aguas arriba del dispositivo de válvulas y del fuelle contiene una reserva de preparación farmacéutica, como una pomada o un gel.

Al comprimir el fuelle, se abre la válvula aguas abajo permitiendo que una cantidad dosificada de preparación salga del dispositivo para su aplicación. Al extender el fuelle, esta válvula se cierre y previene la reentrada de la preparación. Simultáneamente, se abre la válvula aguas arriba, permitiendo que la preparación entre desde el depósito en el fuelle, para su liberación a través de la válvula aguas abajo en la siguiente etapa de compresión del fuelle.

El depósito se sella con un elemento de cierre que puede moverse dentro del depósito como se mueve un pistón en un cilindro. Mediante el vaciado por etapas del depósito, se succiona este elemento de cierre hacia el interior del depósito, de modo que la cantidad restante de preparación farmacéutica en el depósito está aislada en todo momento, permitiendo simultáneamente el vaciado del mismo.

Dicho dispositivo es útil para preparaciones pastosas, cremas, pomadas, etcétera.

En un paquete de presión de gas de dos cámaras, una bolsa de material flexible de película de plástico contiene la preparación farmacéutica. Con frecuencia, está realizada en polietileno de alta presión.

Un recipiente a presión hermético a los gases contiene la bolsa, conteniendo además una reserva de gas presurizado, muy frecuentemente un gas inerte comprimido, como nitrógeno o aire.

La bolsa de película de plástico tiene únicamente una salida, que está conectada estanca a los gases con la pared interior del recipiente a presión, rodeando una sola abertura del mismo. El gas presurizado en el recipiente tiende a comprimir la bolsa, empujando la preparación farmacéutica dentro de la bolsa hacia el exterior a través de la abertura de la bolsa y de este modo través de la abertura del recipiente. En la boca del recipiente se proporciona una válvula y, por si acaso, un dispositivo de cabeza de pulverización. El accionamiento de la válvula libera una niebla de pulverización, un chorro de líquido o una parte de sólido fluible, como crema. Mediante la utilización de dicho sistema, pueden dosificarse y aplicarse soluciones, emulsiones, cremas, pomadas y geles.

A continuación, se llevaron a cabo ensayos de eficiencia de utilización de las preparaciones inventivas, de la manera siguiente:

Ensayo I

Se trata de un ensayo in vitro del efecto bactericida proporcionado por una preparación inventiva de liposomas de povidona yodada. El ensayo se basó en el ensayo de suspensión cuantitativa descrito en "Richtlinien der Deutschen Gesellschaft für Hygiene und Mikrobiologie", 1989. En este ensayo, se utilizó el agente bactericida para eliminar Staphylococcus aureus (ATCC 29213), un problema importante en la higiene hospitalaria.

La preparación de liposomas utilizada fue la del Ejemplo de realización I. Se determinó la concentración mínima de preparación en agua capaz de eliminar los estafilococos en diferentes tiempos de contacto entre 1 y 120 minutos.

Se muestran los resultados en la Tabla 1.

TABLA 1

Tiempo de contacto (minutos)	Concentración de bactericida
	1, 2, 3, 4	\geq 0,060%
	5, 30, 60	\geq 0,015%
	120	\geq 0,007%

Los resultados muestran que en tiempos de contacto cortos (entre 1 y 4 minutos), la concentración de bactericida es de tan sólo el 0,06%, y que en tiempos de contacto largos (120 minutos), la concentración de bactericida puede ser de tan sólo el 0,007%.

Ensayo II

Wutzler et al., 9th European Congres for Clinic Microbiology and Infection Diseases, Berlin, marzo de 1999, estudiaron la actividad viricida y clamicida del PVP-yodo liposómico en cultivos celulares. En cultivo celular, el PVP-yodo liposómico es altamente efectivo contra el virus del herpes simplex de tipo 1 y el adenovirus de tipo 8, mientras que los experimentos de citotoxicidad a largo plazo indicaban que la mayoría de las líneas celulares toleraban mejor la forma liposómica que el PVP-yodo acuoso. El PVP-yodo en forma liposómica no es genotóxico.

Ensayo III

Se comparó una preparación liposómica en hidrogel de PVP-yodo al 3% con una pomada de PVP-yodo al 3%, en la que el agente activo no era en forma liposómica. El agente se aplicó a cultivos in vitro estandarizados de piel de rata y explantes de peritoneo, como cribado para la compatibilidad de tejidos de antiinfectivos de la piel y de heridas.

Se estudió la tasa de crecimiento de cultivos de explantes tras 30 minutos de exposición e incubación con una sustancia de ensayo.

Nuevamente, se puso claramente de manifiesto en los resultados la tolerancia sustancialmente mayor de la preparación liposómica, en términos de tasa de crecimiento del peritoneo y de tasa de crecimiento de la piel.

Con la pomada, la tasa de crecimiento del peritoneo alcanzó el 85% y la tasa de crecimiento de la piel alcanzó el 90%; con la formulación liposómica en hidrogel, la tasa de crecimiento del peritoneo era del 96%, y la tasa de crecimiento de la piel era del 108%; estos valores deben compararse con valores del 100% en un ensayo de control con solución de Ringer como agente.

Ensayo IV

Se estudió la tolerancia de las soluciones liposómicas de PVP-yodo para aplicaciones nasales mediante la investigación de la influencia de diferentes sustancias de ensayo sobre las células epiteliales ciliadas, es decir, las células más sensibles de la membrana mucosa. Puede determinarse la presencia de daño citotóxico de estas células, que causaría una restricción de la eliminación mucociliar, mediante una reducción detectable de la vibración ciliar.

Se analizaron células de epitelio ciliado humano mediante un procedimiento in vitro que permite determinar la actividad ciliar o la vibración ciliar. Las células correspondientes se expusieron y se incubaron con 100 \mul de sustancia de ensayo a una temperatura de 37ºC. Tras un periodo de incubación de 5 minutos, se midió la vibración ciliar.

Mediante la utilización de este procedimiento in vitro con una solución nutriente (Dulbecco) como estándar, se sometieron a ensayo una solución de clorohexidina al 0,2% (agente antiséptico típico), soluciones convencionales de povidona yodada (Betaisodona®) a diferentes concentraciones (al 5,0%, al 2,5% y al 1,25% de PVP-yodo), y una solución liposómica con 4,5% de PVP-yodo.

En los resultados se puso claramente de manifiesto la tolerancia sustancialmente mejor de la preparación liposómica: al exponer las células epiteliales ciliadas a las soluciones de Betaisodona con 5,0% o 2,5% de PVP-yodo, no pudo observarse actividad ciliar transcurrido el periodo de incubación. El tratamiento de las células con una solución de clorohexidina condujo a una reducción de la vibración ciliar observada en comparación con el estándar (solución nutriente). La solución de Betaisodona de baja concentración, con 1,25% de PVP-yodo, no provocó una reducción detectable de la actividad ciliar. Con respecto a la vibración ciliar observada, no pudieron determinarse diferencias respecto al estándar (solución nutriente) al exponer las células epiteliales ciliadas humanas a solución liposómica concentrada al 4,5% de PVP-yodo.

Dichos resultados indican que la formulación liposómica es bien tolerada en aplicación nasal y que es ventajosa con respecto a, por ejemplo, la clorohexidina o las soluciones convencionales de Betaisodona.

Claims (9)

1. Utilización de povidona yodada en combinación con una preparación de liposomas, en la fabricación de una preparación farmacéutica para la prevención o el tratamiento de infecciones, el tratamiento de heridas y/o para el remodelado funcional y la reparación de tejidos, en el tejido epitelial ciliado del tracto respiratorio superior y del oído.

2. Utilización según la reivindicación 1,

caracterizada porque la preparación contiene además por lo menos un agente estimulante de cicatrización de heridas seleccionado de entre agentes que estimulan la granulación y la epitelización, como dexpantenol, alantoínas, azulenos, taninos y compuestos de la serie de las vitaminas B.

3. Utilización según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores,

caracterizada porque los liposomas tienen un tamaño comprendido en el intervalo de entre 4.000 y 20.000 nm de diámetro.

4. Utilización según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores,

caracterizada porque la preparación de liposomas libera el agente a lo largo de un periodo de tiempo prolongado, preferentemente un periodo de tiempo prolongado de varias horas de duración, liberando preferentemente el agente aproximadamente a la misma tasa de liberación a lo largo del periodo de tiempo de liberación.

5. Utilización según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores,

caracterizada porque la preparación comprende además por lo menos un agente anestésicamente activo.

6. Utilización según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores,

caracterizada porque la preparación contiene aditivos y adyuvantes, tales como agentes conservantes, antioxidantes y aditivos formadores de consistencia.

7. Utilización según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, estando la preparación en la forma de una formulación de solución farmacéutica, que comprende:

a)

liposomas que comprenden entre el 1% y el 5% en peso de una sustancia formadora de membrana liposómica farmacéuticamente aceptable, preferentemente lecitina; y

b)

entre el 0,1% y el 10% en peso de povidona yodada.

8. Utilización según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en la que la preparación es adecuada para el tratamiento de enfermedades infecciosas o el alivio de enfermedades acompañadas de infecciones oportunistas o de la supresión del sistema inmunológico.

9. Utilización según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en la que la preparación es adecuada para el tratamiento de la laringofaringitis aguda y/o crónica, de la angina y/o de la rinitis.