PL28679B1 - Sposób otrzymywania hormonów gonadotropowych z surowicy zrebnych klaczy. - Google Patents

Description

Wiadomo, ze surowica klaczy zrebnych jest w pewnym ograniczonym okresie do¬ skonalym materialem wyjsciowym do o- trzymywania hormonów gonadotropowych (porównac Goss i Cole, Endocrinology, tom 15, str. 214, 1931; patent angielski nr 440 530 i patent amerykanski nr 2 027 446).Za pomoca sposobu wedlug wspomnia¬ nego patentu amerykanskiego otrzymuje sie hormon gonadotropowy przez wylugo¬ wanie przysadki mózgowej albo osadu, o- trzymywanego przez stracanie acetonem bialka surowicy klaczy, za pomoca bardzo rozcienczonego roztworu alkoholu (6%- owego), o napieciu powierzchniowym za¬ leznym od zawartosci alkoholu.Ten sposób pracy powoduje straty hormonu, który zostaje w znacznej mierze zatrzymany w osadzie straconym acetonem, i wymaga poza tym bardzo powolnego i dlugiego odparowywania 60/ tworów alkoholowych w temperaturze 40°C.*) Wlascicielka patentu oswiadczyla, ze wynalazca jest Casimir Funk (Francja).Sposób wedlug wynalazku niniejszego jest znacznie prostszy w porównaniu ze znanymi dotychczas metodami. Do przepro¬ wadzania tego .sposobu stosuje sie jedynie alkohol, rozcienczony kwas solny i nieco rozcienczonego lugu sodowego, przy czym otrzymiye sie koncowy produkt bardzo czystym wydajnoscia, prawie równa teore¬ tycznej.Stwierdzono, ze z surowicy zrebnych klaczy o ph = 5 mozna stracic wieksza czesc bialka za pomoca mniej wiecej jednej objetosci slabego alkoholu, podczas gdy hormony w tych warunkach pozostaja w roztworze, z którego mozna je otrzymac w stanie bardzo czystym przez stracenie moc¬ niejszym alkoholem, najkorzystniej az do uzyskania roztworu o mocy 77°/o, i wielo¬ krotne rozpuszczanie w rozcienczonych lu¬ gach potasowcowych oraz ponowne wytra¬ canie alkoholem po zobojetnieniu zasado¬ wego roztworu. Hormony moga byc rów¬ niez wylugowywane nie tylko za pomoca slabych lugów, ale równiez za pomoca je¬ dynie wody. Jednakze ten sposób pracy wymaga wiecej czasu i daje mniejsze wy¬ dajnosci.Przyklad. Do 45 1 surowicy zrebnych klaczy dodaje sie 2 1 normalnego kwasu solnego i 47,6 1 alkoholu o mocy 96% (ob¬ jetosciowych). W tych warunkach po doda¬ niu alkoholu o obranym stezeniu straca sie wylacznie bialko o duzym ciezarze cza¬ steczkowym, hormon zas gonadotropowy zostaje w roztworze. Powstaly osad bialka usuwa sie, a do przesaczu dodaje sie nieco soli kuchennej oraz 1,5 czesci objetosciowej swiezego alkoholu o wiekszym stezeniu. W ten sposób otrzymany drugi osad zostaje zebrany dokladnie, przy czym zawiera on, calkowita ilosc .surowych hormonów w ste¬ zonej postaci. Nastepne oczyszczanie prze¬ prowadza sie, jak nastepuje: Otrzymany produkt zarabia sie na pap¬ ke za pomoca 500 cm3 wody, dodaje sie rozcienczonego lugu sodowego, az do uzy¬ skania slabego odczynu zasadowego o ph — 9, po czym odwirowuje sie od sklad¬ ników nierozpuszczalnych, zobojetnia, za¬ daje 1 czescia objetosciowa alkoholu i znów odwirowuje. Produkt odwirowany zadaje sie w koncu 1,5 czesci objetosciowej alko¬ holu. Otrzymany produkt zawiera juz o- czyszczone hormony (drugi stopien oczysz¬ czenia) , ale rozpuszczanie i stracanie suro¬ wego produktu nalezy powtórzyc co naj¬ mniej jeszcze czterokrotnie. Praktycznie biorac lugowanie przeprowadza sie dopóty, az 48%-owy roztwór alkoholowy, zadany 1,5 czesci objetosciowej alkoholu, da jedy¬ nie nieznaczny osad.Wreszcie ostateczne oczyszczenie pro¬ duktu przeprowadza sie rozpuszczajac go i stracajac po raz piaty w ten sposób, ze pra¬ wie oczyszczony hormon zostaje ponownie zarobiony na papke, papka zostaje dopro¬ wadzona do odczynu zasadowego, odwiro¬ wana i potraktowana alkoholem jak wy¬ zej.Otrzymany w ten sposób produkt kon¬ cowy, zawiera 7 g bialego proszku, dosko¬ nale rozpuszczalnego w wodzie, którego dzialanie fizjologiczne, tak zwana jednost¬ ka Evajisa, jest zawarta w granicach 10 — 15 y ( y = 1/1000 miligrama). Jednostka Evansa jest to taka ilosc hormonu, która zastrzyknieta w trzech dawkach trzyty¬ godniowej samicy szczura powoduje na piaty dzien pieciokrotne powiekszenie jaj¬ ników. PL

Claims (2)

1. Zastrzezenia patentowe. 1. Sposób otrzymywania hormonów gonadotropowych z surowicy zrebnych kla¬ czy, znamienny tym, ze z surowicy o Vh=& usuwa sie wieksza czesc bialka za pomoca mniej wiecej jednej objetosci alkoholu, po czym surowy hormon, zawarty w przesa¬ czu, wydziela sie z przesaczu przez doda¬ wanie alkoholu, najkorzystniej az do uzy¬ skania roztworu o mocy 77°/o. — 2 —
2. 2. Sposób wedlug zastrz. 1, znamien¬ ny tym, ze z otrzymanego surowego pro¬ duktu uzyskuje sie hormony w dwóch stop¬ niach, przy czym surowy produkt, zawiera- jacy hormon, rozpuszcza sie w rozcienczo¬ nym lugu potasowcowym, a po zobojetnie¬ niu rozcienczonym kwasem solnym zadaje sie go 1 czescia objetosciowa alkoholu, od¬ dziela od skladników nierozpuszczalnych i .powtórnie odzyskuje z roztworu przez do¬ danie 1,5 czesci objetosciowej alkoholu. S o ciete de Tlnstitut de Serotherapie h e m o p o i e t i q u e S. A. Zastepca: inz. B. Muller, rzecznik patentowy. .flftUK. M AftCT CZERHiAKO*SKA 22fc PL