PL223446B1

PL223446B1 - 4'-O-β-D-glukopiranozyloksantohumol C i sposób jego wytwarzania

Info

Publication number: PL223446B1
Application number: PL405460A
Authority: PL
Inventors: Jarosław Popłoński; Ewa Huszcza
Original assignee: Univ Przyrodniczy We Wrocławiu
Priority date: 2013-09-27
Filing date: 2013-09-27
Publication date: 2016-10-31
Also published as: PL405460A1

Description

Opis wynalazku

Przedmiotem wynalazku jest 4'-O^-D-glukopiranozyloksantohumol C, (Nazwa wg IUPAC to (E)-1-(5-O-fi-D-glukopiranozylo-7-metoksy-2,2-dimetylo-2H-chromen-6-yl)-3-(4-hydroksyfenylo)-prop-2-en-1-on), o wzorze 2, przedstawionym na rysunku oraz sposób jego wytwarzania.

Związek ten jest biologicznie czynny i może mieć zastosowanie w przemyśle spożywczym i farmaceutycznym.

Dotychczas, w literaturze nie jest znany 4’-O-3-D-glukopiranozyloksantohumol C ani sposób jego wytwarzania.

Istotą wynalazku jest 4'-O^-D-glukopiranozyloksantohumol C.

Natomiast istotą sposobu wytwarzania tego związku jest to, że otrzymuje się go na drodze reakcji mikrobiologicznej transformacji substratu, jakim jest ksantohumol C. Grzyby z gatunku Absidia coerulea, namnaża się w płynnym podłożu mikrobiologicznym, charakterystycznym dla grzybów, przy ciągłym mieszaniu reagentów, w temperaturze 12-40°C. Następnie do narośniętej hodowli dodaje się substrat i dalej prowadzi się proces, aż do całkowitego zużycia substratu. Po zakończeniu transform acji roztwór transformacyjny ekstrahuje się rozpuszczalnikami organicznymi niemieszającymi się z wodą, oddziela frakcję organiczną, osusza bezwodnym siarczanem magnezu, odparowuje rozpuszczalnik i tak otrzymany surowy produkt oczyszcza się za pomocą technik chromatograficznych.

Korzystnie jest, gdy proces namnażania drobnoustroju prowadzi się w temperaturze 30°C.

Postępując zgodnie z wynalazkiem, w wyniku działania układu enzymatycznego zawartego w żywych komórkach kultury Absidia coerulea, następuje reakcja glikozylacji substratu.

Zasadniczą zaletą wynalazku jest otrzymanie, w łagodnych warunkach, 4’-O-3-D-glukopiranozyloksantohumolu C, o wzorze 2, jako głównego produktu reakcji w kulturze Absidia coerulea z wydajnością 41,1%.

Wynalazek jest bliżej objaśniony w przykładzie wykonania.

P r z y k ł a d 1. Do kolby o pojemności 300 cm , w której znajduje się 100 cm sterylnej pożyw₃ ki zawierającej 3 g glukozy i 1 g aminobaku na 1 dm wody destylowanej, wprowadza się grzyby Absidia coerulea. Po 4 dniach wzrostu drobnoustrojów w temperaturze 30°C i przy ciągłym wstrząsaniu, ₃ dodaje się 15 mg ksantohumolu C, o wzorze 1, rozpuszczonego w 1 cm metanolu. Transformację prowadzi się przy ciągłym wstrząsaniu przez 8 dób. Następnie, uzyskany roztwór transformacyjny ekstrahuje się trzykrotnie octanem etylu, osusza bezwodnym siarczanem magnezu i odparowuje ro zpuszczalnik. Otrzymuje się 30,5 mg surowego produktu, który oczyszcza się chromatograficznie, używając jako eluentu mieszaninę chloroform:metanol w stosunku objętościowym 9:1.

Po oczyszczeniu otrzymuje się 9 mg 4’-O-3-D-glukopiranozyloksantohumolu C, o wzorze 2, z wydajnością 41,1%.

Uzyskany produkt charakteryzuje się następującymi danymi spektralnymi:

¹H NMR (600 MHz, aceton-da) δ: 1,42 (3H, s, H-4”), 1,43 (3H, s, H-5”), 3,21 (1H, m, H-5'”), 3,27 (1H, m, H-4'”), 3,34 (1H, m, H-2'”), 3,39 (1H, m, H-3'”), 3,57 (1H, m, C-6'”b), 3,73 (3H, s, C6'-OCH3), 3,77 (1H, m, H-6”'a), 4,56 (2H, d, J = 7,5 Hz, H-1”'), 5,63 (1H, d, J = 10 Hz, H-2”), 6,35 (1H, s, H-5'), 6,86 (1H, d, J = 16 Hz, H-a), 6,89 (2H, pd, J = 8,6 Hz, H-3, H-5), 6,97 (1H, d, J = 10 Hz H-1”), 7,33 (1H, d, J = 16 Hz, H-β), 7,55 (2H, pd, J = 8,6 Hz, H-2, H-6).

¹³C NMR (150 MHz, aceton^) δ: 27,66 (C-4”), 28,01 (C-5”), 56,13 (C6'-OCH3), 62,74 (C-6'”), 71,17 (C-4”'), 75,16 (C-2'”), 77,00 (C-3”), 77,36 (C-3”'), 77,60 (C-5”), 97,35 (C-5'), 106,13 (C-1'”), 108,21 (C-3'), 116,54 (C-3, C-5), 117,52 (C-1”), 117,74 (C-1'), 127,01 (H-a), 127,04 (C-1), 128,32 (C-2”), 131,14 (C-2, C-6), 145,26 (H-β), 151,88 (C-2'), 156,60 (C-4'), 158,71 (C6'), 160,63 (C-4), 194,92 (C=O).

Claims

Zastrzeżenia patentowe

1.4'-O^-D-glukopiranozyloksantohumol C, o wzorze 2.
2. Sposób wytwarzania 4'-O^-D-glukopiranozyloksantohumol C, o wzorze 2, znamienny tym, że związek ten otrzymuje się na drodze reakcji mikrobiologicznej transformacji substratu, którym jest ksantohumol C o wzorze 1, polegającej na tym, że grzyby z gatunku Absidia coerulea, namnaża się w płynnym podłożu mikrobiologicznym, charakterystycznym dla grzybów, przy ciągłym mieszaniu reagentów, w temperaturze 12-40°C, po czym do narośniętej hodowli dodaje się substrat i dalej prowadzi

PL 223 446 B1 się proces, aż do całkowitego zużycia substratu, po czym po zakończeniu transformacji roztwór tran sformacyjny ekstrahuje się rozpuszczalnikami organicznymi niemieszającymi się z wodą, oddziela frakcję organiczną, osusza bezwodnym siarczanem magnezu, odparowuje rozpuszczalnik i tak otrzymany surowy produkt oczyszcza się za pomocą technik chromatograficznych.
3. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że proces prowadzi się w temperaturze 30°C.