PL223444B1

PL223444B1 - Sposób wytwarzania 1",2", α,β-tetrahydroksantohumolu C

Info

Publication number: PL223444B1
Application number: PL405458A
Authority: PL
Inventors: Jarosław Popłoński; Ewa Huszcza
Original assignee: Univ Przyrodniczy We Wrocławiu
Priority date: 2013-09-27
Filing date: 2013-09-27
Publication date: 2016-10-31
Also published as: PL405458A1

Description

Opis wynalazku

Przedmiotem wynalazku jest sposób otrzymywania 1”,2”,a,3-tetrahydroksantohumolu C, (Nazwa wg IUPAC to 1-(5-hydroksy-7-metoksy-2,2-dimetylochroman-6-yl)-3-(4-hydroksyfenylo)-propan-1-on), o wzorze 2, przedstawionym na rysunku. Związek ten może mieć zastosowanie jako czynnik zapobiegający i ochronny w leczeniu zaburzeń neuronalnych, jak również czynnik inicjujący zwiększony p oziom różnicowania neuronów.

Dotychczas, w literaturze znane są chemiczne metody otrzymywania 1”,2”,a^-tetrahydroksantohumolu C opisane w zgłoszeniu patentowym WO 2012172090.

Istotą wynalazku jest to, że otrzymuje się go na drodze reakcji mikrobiologicznej transformacji substratu, jakim jest 1”,2”-dihydroksantohumol C. Grzyby z gatunku Fusarium tricinctum, namnaża się w płynnym podłożu mikrobiologicznym, charakterystycznym dla grzybów, przy ciągłym mieszaniu r eagentów, w temperaturze 12-40°C. Następnie do narośniętej hodowli dodaje się substrat i dalej prowadzi się proces, aż do całkowitego zużycia substratu. Po zakończeniu transformacji roztwór transformacyjny ekstrahuje się rozpuszczalnikami organicznymi niemieszającymi się z wodą, oddziela frakcję organiczną, osusza bezwodnym siarczanem magnezu, odparowuje rozpuszczalnik i tak otrzymany surowy produkt oczyszcza się pomocą technik chromatograficznych.

Korzystnie jest, gdy proces namnażania drobnoustroju prowadzi się w temperaturze 30°C.

Postępując zgodnie z wynalazkiem, w wyniku działania układu enzymatycznego zawartego w żywych komórkach kultury Fusarium tricinctum, następuje reakcja redukcji wiązania olefinowego substratu.

Zasadniczą zaletą wynalazku jest otrzymanie, w łagodnych warunkach 1”,2”,a,3-tetrahydroksantohumolu C, o wzorze 2, jako głównego produktu reakcji w kulturze Fusarium tricinctum z wydajnością 26,52%.

Wynalazek jest bliżej objaśniony w przykładzie wykonania.

P r z y k ł a d 1. Do kolby o pojemności 300 cm , w której znajduje się 100 cm sterylnej pożyw₃ ki zawierającej 3 g glukozy i 1 g aminobaku na 1 dm wody destylowanej, wprowadza się grzyby Fusarium tricinctum. Po 4 dniach wzrostu drobnoustrojów w temperaturze 30°C i przy ciągłym wstrząsaniu, ₃ dodaje się 15 mg 1”,2”-dihydroksantohumol C, o wzorze 1, rozpuszczonego w 1 cm metanolu. Transformację prowadzi się przy ciągłym wstrząsaniu przez 8 dób. Następnie, uzyskany roztwór transformacyjny ekstrahuje się trzykrotnie octanem etylu, osusza bezwodnym siarczanem magnezu i odpar owuje rozpuszczalnik. Otrzymuje się 35 mg surowego produktu, który oczyszcza się chromatograficznie, używając jako eluentu mieszaninę heksan:aceton w stosunku objętościowym 1:1.

Po oczyszczeniu otrzymuje się 4 mg 1”,2”,a,3-tetrahydroksantohumolu C, o wzorze 2, z wydajnością 26,52%.

Uzyskany produkt charakteryzuje się następującymi danymi spektralnymi:

¹H NMR (600 MHz, aceton-da) δ: 1,32 (6H, s, H-4”, H-5”), 1,80 (2H, t, J = 6,8 Hz, H-2”), 2,55 (2H, t, J = 6,8 Hz, H-1”), 2,85 (2H, m, Η-β), 3,26 (2H, m, H-a), 3,87 (3H, s, C6'-OCH3), 5,91 (1H, s, H-5'), 6,76 (2H, pd, J = 8,4 Hz, H-3, H-5), 7,09 (2H, pd, J = 8,4 Hz, H-2, H-6), 14,43 (C2'-OH).

¹³C NMR (150 MHz, aceton^) δ: 16,71 (C-1”), 26,86 (C-4”, C-5”), 30,78 (Η-β), 32,57 (C-2”), 46,69 (H-a), 56,08 (C6-CH3), 76,68 (C-3”), 92,36 (C-5'), 102,32 (C-3'), 105,48 (C-1'), 116,02 (C-3, C-5), 130,18 (C-2, C-6), 133,33 (C-1), 156,47 (C-4), 161,70 (C-4'), 162,02 (C-6'), 165,60 (C-2'), 205,55 (C=O).

Claims

Zastrzeżenia patentowe

1. Sposób wytwarzania 1”,2”,a^-tetrahydroksantohumolu C, o wzorze 2, znamienny tym, że związek ten otrzymuje się na drodze reakcji mikrobiologicznej transformacji substratu, którym jest 1”,2”-dihydroksantohumol C o wzorze 1, polegającej na tym, że grzyby z gatunku Fusarium tricinctum, namnaża się w płynnym podłożu mikrobiologicznym, charakterystycznym dla grzybów, przy ciągłym mieszaniu reagentów, w temperaturze 12-40°C, po czym do narośniętej hodowli dodaje się substrat i dalej prowadzi się proces, aż do całkowitego zużycia substratu, po czym po zakończeniu transform acji roztwór transformacyjny ekstrahuje się rozpuszczalnikami organicznymi niemieszającymi się z wodą, oddziela frakcję organiczną, osusza bezwodnym siarczanem magnezu, odparowuje rozpuszczalnik i tak otrzymany surowy produkt oczyszcza się za pomocą technik chromatograficznych.
2. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że proces prowadzi się w temperaturze 30°C.