PL223441B1

PL223441B1 - 4'-O-β-D-glukopiranozylo-4,2'-dihydroksy-6'-metoksy-3'-prenylo-α,β-dihydrochalkon oraz sposób jego wytwarzania

Info

Publication number: PL223441B1
Application number: PL405455A
Authority: PL
Inventors: Jarosław Popłoński; Anna Madej; Tomasz Tronina; Ewa Huszcza
Original assignee: Univ Przyrodniczy We Wrocławiu
Priority date: 2013-09-27
Filing date: 2013-09-27
Publication date: 2016-10-31
Also published as: PL405455A1

Abstract

Wynalazek dotyczy nowego związku chemicznego 4′-O-β-D-glukopiranozylo-4,2′-dihydroksy-6′-metoksy-3′- prenylo-α,β- dihydrochalkon, o wzorze 2 oraz sposobu jego wytwarzania na drodze transformacji mikrobiologicznej, przy użyciu systemu enzymatycznego grzybów z gatunku Absidia coerulea. Jako substrat stosuje się 4,4′,2′-trihydroksy-6′-metoksy-3′-prenylo-α,β- dihydrochalkon, o wzorze 1. Związek o wzorze 2 jest biologicznie czynny i może mieć zastosowanie w przemyśle spożywczym i farmaceutycznym.

Description

Opis wynalazku

Przedmiotem wynalazku jest 4'-O^-D-glukopiranozylo-4,2'-dihydroksy-6'-metoksy-3'-prenylo-α,β-dihydrochalkon, o wzorze 2, przedstawionym na rysunku oraz sposób jego wytwarzania.

Związek ten jest biologicznie czynny i może mieć zastosowanie w przemyśle spożywczym i farmaceutycznym.

Dotychczas, w literaturze nie jest znany 4'-O^-D-glukopiranozylo-4,2'-dihydroksy-6'-metoksy-3'-prenylo-a^-dihydrochalkon ani sposób jego wytwarzania.

Istotą wynalazku jest 4'-O^-D-glukopiranozylo-4,2'-dihydroksy-6'-metoksy-3'-prenylo-a^-dihydrochalkon.

Natomiast istotą sposobu wytwarzania tego związku jest to, że otrzymuje się go na drodze reakcji mikrobiologicznej transformacji substratu, którym jest jakim jest 4,4',2'-trihydroksy-6'-metoksy-3'-prenylo-a^-dihydrochalkon. Grzyby z gatunku Absidia coerulea, namnaża się w płynnym podłożu mikrobiologicznym, charakterystycznym dla grzybów, przy ciągłym mieszaniu reagentów, w temperaturze 12-40°C. Następnie do narośniętej hodowli dodaje się substrat i dalej prowadzi się proces, aż do całkowitego zużycia substratu. Po zakończeniu transformacji roztwór transformacyjny ekstrahuje się rozpuszczalnikami organicznymi niemieszającymi się z wodą, oddziela frakcję organiczną, osusza bezwodnym siarczanem magnezu, odparowuje rozpuszczalnik i tak otrzymany surowy produkt oczyszcza się za pomocą technik chromatograficznych.

Korzystnie jest, gdy proces namnażania drobnoustroju prowadzi się w temperaturze 30°C.

Postępując zgodnie z wynalazkiem, w wyniku działania układu enzymatycznego zawartego w żywych komórkach kultury Absidia coerulea, następuje reakcja glikozylacji, w substracie.

Zasadniczą zaletą wynalazku jest otrzymanie, w łagodnych warunkach, 4'-O^-D-glukopiranozylo-4,2'-dihydroksy-6'-metoksy-3'-prenylo-a^-dihydrochalkon, o wzorze 2, jako głównego produktu reakcji w kulturze Absidia coerulea z wydajnością 69,8%.

Wynalazek jest bliżej objaśniony w przykładzie wykonania.

P r z y k ł a d 1. Do kolby o pojemności 300 cm , w której znajduje się 100 cm sterylnej pożyw₃ ki zawierającej 3 g glukozy i 1 g aminobaku na 1 dm wody destylowanej, wprowadza się grzyby Absidia coerulea. Po 4 dniach wzrostu drobnoustrojów w temperaturze 30°C i przy ciągłym wstrząsaniu, dodaje się 15 mg 4,4',2'-trihydroksy-6'-metoksy-3'-prenylo-a^-dihydrochalkon, o wzorze 1, rozpuszczonego w 1 cm³ metanolu. Transformację prowadzi się przy ciągłym wstrząsaniu przez 8 dób. Następnie, uzyskany roztwór transformacyjny ekstrahuje się trzykrotnie octanem etylu, osusza bezwodnym siarczanem magnezu i odparowuje rozpuszczalnik. Otrzymuje się 35,5 mg surowego produktu, który oczyszcza się chromatograficznie, używając jako eluentu mieszaninę chloroform:metanol w stosunku objętościowym 9:1.

Po oczyszczeniu otrzymuje się 15,23 mg 4'-O^-D-glukopiranozylo-4,2'-dihydroksy-6'-metoksy-3'-prenylo-a^-dihydrochalkon, o wzorze 2, z wydajnością 69,8%.

Uzyskany produkt charakteryzuje się następującymi danymi spektralnymi:

¹H NMR (600 MHz, aceton-da) δ: 1,62 (3H, s, H-5”), 1,76 (3H, s, H-4”), 2,86 (2H, m, H-β), 3,28 (2H, m, H-a), 3,40 (1H, m, H-1”a), 3,22 (1H, m, H-1”b), 3,40 (1H, m, H-4'”), 3,54 (1H, m, H-3'”), 3,57 (1H, m, H-2'”), 3,61 (1H, m, H-5”'), 3,67 (1H, m, H-6”'a), 3,93 (3H, s, C6’-OCH3), 3,94 (1H, m, H-6”'a), 5,09 (1H, d, J= 7,4 Hz, H-1'”), 5,24 (1H, m, H-2”), 6,46 (1H, s, H-5'), 6,75 (2H, pd, J= 8,4 Hz, H-3, H-5) 7,08 (2H, pd, J= 8,4 Hz, H-2, H-6), 8,14 (C4-OH), 14,05 (C2'-OH).

¹³C NMR (150 MHz, aceton-da) δ:17,97 (C-4”), 22,12 (C-1”), 25,90 (C-5”), 30,65 (C-β), 47,18 (C-a), 56,18 (C6'-OCH3), 62,76 (C-6'”), 71,53 (C-4‘”), 74,63 (C-2'”), 78,28 (3m), 78,33 (C-5'”), 91,12 (C-5'), 101,46 (C-1”'), 106,92 (C-1'), 110, 93 (C-3'), 116,01 (C-3, C-5), 123,95 (C-2”), 130,15 (C-2, C-6), 130,98 (C-3”), 133,22 (C-1), 156,42 (C-4), 162,17 (C-6'), 162,36 (C-4'), 164,41 (C-2'), 206,05 (C=O).

Claims

Zastrzeżenia patentowe

1. 4'-O^-D-glukopiranozylo-4,2'-dihydroksy-6'-metoksy-3'-prenylo-a^-dihydrochalkon, o wzorze 2.
2. Sposób wytwarzania 4'-O^-D-glukopiranozylo-4,2'-dihydroksy-6'-metoksy-3'-prenylo-a^-dihydrochalkon, o wzorze 2, znamienny tym, że związek ten otrzymuje się na drodze reakcji mikroPL 223 441 B1 biologicznej transformacji substratu, którym jest 4,4’,2’-trihydroksy-6’-metoksy-3’-prenylo-a,3-dihydrochalkon o wzorze 1, polegającej na tym, że grzyby z gatunku Absidia coerulea, namnaża się w płynnym podłożu mikrobiologicznym, charakterystycznym dla grzybów, przy ciągłym mieszaniu reagentów, w temperaturze 12-40°C, po czym do narośniętej hodowli dodaje się substrat i dalej prowadzi się proces, aż do całkowitego zużycia substratu, po czym po zakończeniu transformacji roztwór transformacyjny ekstrahuje się rozpuszczalnikami organicznymi niemieszającymi się z wodą, oddziela frakcję organiczną, osusza bezwodnym siarczanem magnezu, odparowuje rozpuszczalnik i tak otrzymany surowy produkt oczyszcza się za pomocą technik chromatograficznych.
3. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że proces prowadzi się w temperaturze 30°C.

Rysunki