PL226315B1

PL226315B1 - 2’-O-β-D-glukopiranozylo-1’’,2’’,α, β-tetrahydroksantohumol C i sposób jego otrzymywania

Info

Publication number: PL226315B1
Application number: PL409617A
Authority: PL
Inventors: Jarosław Popłoński; Ewa Huszcza; Sandra Sordon; Monika Siepka
Original assignee: Univ Przyrodniczy We Wrocławiu
Priority date: 2014-09-29
Filing date: 2014-09-29
Publication date: 2017-07-31
Also published as: PL409617A1

Description

Opis wynalazku

Przedmiotem wynalazku jest 2'-O-3-D-glukopiranozylo-1”,2”,a,3-tetrahydroksantohumol C, o wzorze 2, przedstawionym na rysunku oraz sposób jego otrzymywania. Nazwa tego nowego związku wg IUPAC to 1-(5-O-3-D-glukopiranozylo-7-metoksy-2,2-dimetylochroman-6-yl)-3-(4-hydroksyfenylo)-propan-1-on.

Związek ten jest biologicznie czynny, o właściwościach antyproliferacyjnych. Może mieć zastosowanie w przemyśle spożywczym i farmaceutycznym.

Dotychczas, w literaturze nie jest znany 2'-O-3-D-glukopiranozylo-1”,2”,a,3-tetrahydroksantohumol C, ani sposób jego wytwarzania.

Istotą wynalazku jest nowy 2'-0-3-D-glukopiranozylo-1”,2”,a,3-tetrahydroksantohumol C.

Natomiast istotą sposobu otrzymywania tego związku jest to, że otrzymuje się go na drodze reakcji mikrobiologicznej transformacji substratu, jakim jest 1”,2”,a,3-tetrahydroksantohumol C. Grzyby z gatunku Absidia coerulea, namnaża się w płynnym podłożu mikrobiologicznym, charakterystycznym dla grzybów, przy ciągłym mieszaniu reagentów, w temperaturze od 12 do 40°C, Następnie do narośniętej hodowli się substrat i dalej prowadzi się proces, aż do całkowitego zużycia substratu. Po zakończeniu transformacji roztwór transformacyjny ekstrahuje się rozpuszczalnikami organicznymi niemieszającymi się z wodą, oddziela frakcję organiczną, osusza bezwodnym siarczanem magnezu, odparowuje rozpuszczalnik i tak otrzymany surowy produkt oczyszcza za pomocą technik chromatograficznych.

Korzystnie jest, gdy proces namnażania drobnoustroju prowadzi się w temperaturze 30°C.

Korzystnie również jest, gdy rozpuszczalnikiem organicznym niemieszającym się z wodą jest octan etylu.

Postępując zgodnie z wynalazkiem, w wyniku działania układu enzymatycznego zawartego w żywych komórkach kultury Absidia coerulea, następuje reakcja glukozylacji substratu.

Zasadniczą zaletą wynalazku jest otrzymanie, w łagodnych warunkach, 2'-O^-D-glukopiranozylo-1”,2”,a,3-tetrahydroksantohumolu C, jako głównego produktu reakcji w kulturze Absidia coerulea, z wydajnością 82%.

Wynalazek jest bliżej objaśniony w przykładzie wykonania.

P r z y k ł a d 1. Do kolby o pojemności 300 cm³, w której znajduje się 100 cm³ sterylnej pożyw₃ ki zawierającej 3 g glukozy i 1 g aminobaku na 1 dm³ wody destylowanej, wprowadza się grzyby Absidia coerulea. Po 4 dniach wzrostu drobnoustrojów w temperaturze 30°C i przy ciągłym wstrząsaniu, ₃ dodaje się 15 mg 1”,2”,a,3-tetrahydroksantohumol C, o wzorze 1, rozpuszczonego w 1 cm metanolu (stężenie substratu 150 mg/L). Transformację prowadzi się przy ciągłym wstrząsaniu przez 8 dób. Następnie, uzyskany roztwór transformacyjny ekstrahuje się trzykrotnie octanem etylu, osusza bezwodnym siarczanem magnezu i odparowuje rozpuszczalnik. Otrzymuje się 23,0 mg surowego produktu, który oczyszcza się chromatograficznie, używając jako eluentu mieszaninę chloroform: metanol w stosunku objętościowym 9:1.

Po oczyszczeniu otrzymuje się 17,9 mg 2'-O-3-D-glukopiranozylo-1”,2”,a,3-tetrahydroksantohumol C, o wzorze 2, z wydajnością 82%.

Uzyskany produkt charakteryzuje się następującymi danymi spektralnymi:

¹H NMR (600 MHz, aceton-^) δ: 1,30 (3H, s, H-4”), 1,31 (3H, s, H-5”), 1,75 ( 2H, m, H-2”), 2,80 (1H, m, H-1”a), 2,88 (1H, m, H-l”b), 2,83 (2H, m, H-β), 2,92 (1H, m, H-a-a), 3,19 (1H, m, H-a-b), 3,21 (1H, m, H-5'”), 3,29 ( 1H, m, H- 4'”), 3,42 (1H, m, H-2'”), 3,43 (1H, m, H-3'”), 3,55 (1H, m, C-6'”a), 3,71 (3H, s, C6'-OCH3), 3,76 (1H, m, C-6”'b), 4,62 (1H, d, J = 7,0 Hz, H-1”'), 6,24 (1H, s, H-5'), 6,73 (2H, m, J = 8,2 Hz, H-3, H-5), 7,05 (2H, m, J = 8,2 Hz, H-2, H-6).

¹³C NMR (150 MHz, aceton-^) δ: 17,90 (C-1”), 26,68 (C-4”), 27,30 (C-5”), 29,46 (C-β), 32,86 (C-2”), 47,87 (C-a), 56,15 (C6'-OCH3), 63,25 (C-6'”), 71,16 (C-4'”), 75,40 (C-2'”), 75,47 (C-3”), 77,75 (C-3”'), 77,87 (C-5'”), 98,16 (C-5'), 105,16 (C-1'”), 108,50 (C-3'), 115,95 (C-3, C-5), 119,64 (C-1'),

130,08 (C-2, C-6), 133,16 (C-1), 153,33 (C-2'), 156,36 (C-4), 157,36 (C-6'), 157, 38 (C-4'), 204,92 (C=O).

PL 226 315 B1

Claims

1. 2'-O-3-D-glukopiranozylo-1 ”,2”,a,3-tetrahydroksantohumol C, o wzorze 2.

2. Sposób otrzymywania 2'-O-3-D-glukopiranozylo-1”,2”,a,3-tetrahydroksantohumolu C, znamienny tym, że związek ten otrzymuje sie na drodze reakcji mikrobiologicznej transformacji substratu, którym jest 1”,2”,a,3-tetrahydroksantohumoI o wzorze 1, polegającej na tym, że grzyby z gatunku Absidia coerulea, namnaża się w płynnym podłożu mikrobiologicznym, charakterystycznym dla grzybów, przy ciągłym mieszaniu reagentów, w temperaturze od 12 do 40°C, po czym do narośniętej hodowli dodaje się substrat i dalej prowadzi się proces, aż do całkowitego zużycia substratu, po czym po zakończeniu transformacji roztwór transformacyjny ekstrahuje się rozpuszczalnikiem organicznym niemieszającym się z wodą, oddziela frakcję organiczną, osusza bezwodnym siarczanem magnezu, odparowuje rozpuszczalnik i tak otrzymany surowy produkt oczyszcza się za pomocą technik chromatograficznych,

3. Sposób według zastrz. 2, znamienny tym, że proces namnażania drobnoustroju prowadzi się w temperaturze 30°C.

4. Sposób według zastrz. 2, znamienny tym, że rozpuszczalnikiem organicznym niemieszającym się z wodą jest octan etylu.