PL213614B1

PL213614B1 - Nowy 7-O-p-D-4'"-metoksyglukopiranozyd 8-prenylonaringeniny i sposób jego wytwarzania

Info

Publication number: PL213614B1
Application number: PL388575A
Authority: PL
Inventors: Bartmanska Agnieszka; Tronina Tomasz; Huszcza Ewa
Original assignee: Uniwersytet Przyrodniczy We Wroclawiu
Priority date: 2009-07-20
Filing date: 2009-07-20
Publication date: 2013-04-30
Also published as: PL388575A1

Description

Opis patentowy

Przedmiotem wynalazku jest nowy 7-0-3-D-4'-metoksyglukopiranozyd 8-prenylonaringeniny, o wzorze przedstawionym na rysunku, oraz sposób jego wytwarzania. Związek ten jest biologicznie czynny i może znaleźć zastosowanie w przemyśle farmaceutycznym. Glikozylacja flawonoidów zwiększa ich hydrofilowość, co można wykorzystać podczas produkcji łatwo rozpuszczalnych w wodzie leków lub nutraceutyków. Powstały produkt może być materiałem wyjściowym dla dalszych strukturalnych modyfikacji, które posłużą do komercyjnej produkcji jeszcze aktywniejszych związków.

W dostępnej literaturze nie znaleziono przykładu otrzymywania 7-0-3-D-4'-metoksyglukopiranozydu 8-prenylonaringeniny, zarówno na drodze chemicznej jak i mikrobiologicznej.

Wynalazek dotyczy mikrobiologicznego sposobu wytwarzania nowego związku chemicznego 7-0-3-D-4'-metoksyglukopiranozydu 8-prenylonaringeniny, o wzorze 2. Istota wynalazku polega na tym, że substrat, którym jest 8-prenylonaringenina, o wzorze 1, poddaje się biotransformacji kulturą szczepu z gatunku Beauveria bassiana AM278.

Korzystnie jest, gdy reakcję prowadzi się kulturą wodną, przy ciągłym mieszaniu reagentów, w temperaturze 283-313 K i w ciemności.

Postępując zgodnie z wynalazkiem, w wyniku działania układu enzymatycznego, zawartego w żywych komórkach kultury Beauveria bassiana AM278, następuje przyłączenie metoksylowanej glukozy do substratu. Uzyskany w ten sposób produkt wydziela się z wodnej kultury drobnoustroju, znanym sposobem, przez ekstrakcję octanem etylu.

Zasadniczą zaletą wynalazku jest otrzymanie w łagodnych warunkach 7-0-3-D-4'-metoksyglukopiranozydu 8-prenylonaringeniny, jako głównego produktu reakcji, z wydajnością 30-60%.

Wynalazek jest bliżej objaśniony w przykładzie wykonania.

P r z y k ł a d.

Do 4 kolbek o pojemności 300 cm³, w których znajduje się 100 cm³ sterylnej pożywki, zawierającej 9 g glukozy i 3 g aminobaku, wprowadza się szczep Beauveria bassiana AM278. Po 2 dniach wzrostu w temperaturze około 300 K i przy ciągłym wstrząsaniu, dodaje się 70 mg 8-prenylo₃ naringeniny, o wzorze 1, rozpuszczonej w 4 cm³ metanolu. Reakcję prowadzi się przy ciągłym wstrząsaniu przez 6 dób.

Następnie, uzyskany roztwór transformacyjny ekstrahuje się trzykrotnie octanem etylu, osusza siarczanem magnezu i odparowuje rozpuszczalnik. Otrzymuje się ok. 90 mg surowego produktu, który oczyszcza się chromatograficznie, używając jako eluentu mieszaniny chloroform-metanol w stosunku 6:1.

Na tej drodze otrzymuje się 36 mg 7-0-3-D-4'-metoksyglukopiranozydu 8-prenylonaringeniny (wydajność 32,9%).

Uzyskany produkt charakteryzuje się następującymi danymi spektralnymi:

UV (MeOH) X_max: 234, 286, 342;

¹H NMR (aceton-cfe, 600 MHz), δ: 12,08/12,09 (1H, br, s, 5-OH), 8,59/8,61 (1H, br, s, 4'-OH), 7,40 (2H, d, J = 8,5 Hz, H-2',6'), 6,90 (2H, d, J= 8,5 Hz, H-3',5'), 6,26/6,27 (1H, s, H-6), 5,47/5,48 (1H, t, J = 3,5 Hz, H-2), 5,21 (1H. t, J = 7,2 Hz, H-2''), 5,03/5,06 (1H, d, J = 7,8 Hz. H-1'), 3,85 (1H, m, J = 12,0 Hz, H-6'''), 3,71 (1H, m, J = 16,4 Hz, H-6'), 3,65 (1H, t, J = 9,0 Hz, H-5'), 3,56 (3H, s, 4' -OMe), 3,54 (1H, t, J = 9,0 Hz, H-3'), 3,55 (1H, m, H-4'), 3,23 (1H, m, H-2'), 3,21 (1H, m, H-1), 3,18 (1H, m, H-3ax), 2,80/2,83 (1H, m, J = 4,7 Hz, H-3eq), 1,61 (3H, s, H-4), 1,61 (3H, s, H-5);

¹³C NMR (aceton-d6, 600 MHz), δ: 199,3 (C-4), 165,3 (C-7), 163,9/164,0 (C-5), 161,3 (C-9), 159,6 (C-4'), 132,2 (C-3), 131,8 (C-1'), 129,8 (C-2',6'), 124,8 (C-2), 117,2 (C-3',5'), 111,2/111,3 (C-8), 105,4 (C-10), 102,1/102,2 (C-1'), 97,2 (C-6), 80,9 (C-2'), 80,8 (C-2), 80,0 (C-5'), 78,1 (C-4'), 75,9 (C-3'), 63,0 (C-6'), 61,5 (4'-OMe), 44,5/44,6 (C-3), 26,9 (C-5), 23,4 (C-1), 19,0 (C-4).

Claims

1. Nowy 7-0-3-D-4'-metoksyglukopiranozyd 8-prenylonaringeniny, o wzorze 2.

2. Sposób wytwarzania nowego 7-0-3-D-4'-metoksyglukopiranozydu 8-prenylonaringeniny o wzorze 2, na drodze mikrobiologicznej, znamienny tym, że substrat, jakim jest 8-prenylonaringenina, o wzorze 1, poddaje się biotransformacji kulturą szczepu Beauveria bassiana AM278.

PL 213 614 B1

3. Sposób według zastrz. 2, znamienny tym, że reakcję prowadzi się wodną kulturą przy ciągłym mieszaniu.

4. Sposób według zastrz. 2, znamienny tym, że reakcję prowadzi się w temperaturze 283-313 K.

5. Sposób według zastrz. 2, znamienny tym, że reakcję prowadzi się w ciemności.