PL222788B1

PL222788B1 - 4'-O-β-D-4'''-metoksy-glukopiranozylo-4,2'-dihydroksy-6'-metoksy-3'-prenylo-α,β-dihydrochalkon i sposób jego otrzymywania

Info

Publication number: PL222788B1
Application number: PL405700A
Authority: PL
Inventors: Jarosław Popłoński; Ewa Huszcza
Original assignee: Univ Przyrodniczy We Wrocławiu
Priority date: 2013-10-21
Filing date: 2013-10-21
Publication date: 2016-09-30
Also published as: PL405700A1

Description

Opis wynalazku

Przedmiotem wynalazku jest 4'-0-^-D-4”'-metoksy-glukopiranozylo-4,2'-dihydroksy-6'-metoksy-3’-prenylo-a,3-dihydrochalkon, o wzorze 2, przedstawionym na rysunku oraz sposób jego otrz ymywania.

Związek ten jest biologicznie czynny i może mieć zastosowanie w przemyśle spożywczym i farmaceutycznym.

Dotychczas, w literaturze nie jest znany 4'-0-^-D-4”'-metoksy-glukopiranozylo-4,2'-dihydroksy-6’-metoksy-3’-prenylo-a,3-dihydrochalkon ani sposób jego wytwarzania.

Istotą wynalazku jest 4'-0-^-D-4”'-metoksy-glukopiranozylo-4,2'-dihydroksy-6'-metoksy-3'-prenylo-a,3-dihydrochalkon.

Natomiast istotą sposobu otrzymywania tego związku jest to, że otrzymuje się go na drodze reakcji mikrobiologicznej transformacji substratu, którym jest 4,4',2'-trihydroksy-6'-metoksy-3'-prenylo-α,β-dihydrochalkon. Grzyby z gatunku Beauveria bassiana, namnaża się w płynnym podłożu mikrobiologicznym, charakterystycznym dla grzybów, przy ciągłym mieszaniu reagentów, w temperaturze 12-40°C. Następnie do narośniętej hodowli dodaje się substrat i dalej prowadzi się proces, aż do całkowitego zużycia substratu. Po zakończeniu transformacji roztwór transformacyjny ekstrahuje się rozpuszczalnikami organicznymi niemieszającymi się z wodą, oddziela frakcję organiczną, osusza bezwodnym siarczanem magnezu, odparowuje rozpuszczalnik i tak otrzymany surowy produkt oczyszcza się za pomocą technik chromatograficznych.

Korzystnie jest, gdy proces namnażania drobnoustroju prowadzi się w temperaturze 30°C.

Postępując zgodnie z wynalazkiem, w wyniku działania układu enzymatycznego zawartego w żywych komórkach kultury Beauveria bassiana, następuje reakcja glikozylacji w substracie.

Zasadniczą zaletą wynalazku jest otrzymanie, w łagodnych warunkach, 4'-O^-D-4”'-metoksyglukopiranozylo-4,2'-dihydroksy-6'-metoksy-3'-prenylo-a^-dihydrochalkonu, o wzorze 2, jako głównego produktu reakcji w kulturze Beauveria bassiana z wydajnością 39,3%.

Wynalazek jest bliżej objaśniony w przykładzie wykonania.

P r z y k ł a d 1. Do kolby o pojemności 300 cm , w której znajduje się 100 cm sterylnej pożyw₃ ki zawierającej 3 g glukozy i 1 g aminobaku na 1 dm wody destylowanej, wprowadza się grzyby Beauveria bassiana. Po 4 dniach wzrostu drobnoustrojów w temperaturze 30°C i przy ciągłym wstrząsaniu, dodaje się 15 mg 4,4',2'-trihydroksy-6'-metoksy-3'-prenylo-a^-dihydrochalkon, o wzorze 1, rozpuszczonego w 1 cm³ metanolu. Transformację prowadzi się przy ciągłym wstrząsaniu przez 8 dób. Następnie, uzyskany roztwór transformacyjny ekstrahuje się trzykrotnie octanem etylu, osusza bezwodnym siarczanem magnezu i odparowuje rozpuszczalnik. Otrzymuje się 24 mg surowego produktu, który oczyszcza się chromatograficznie, używając jako eluentu mieszaninę chloroform:metanol w stosunku objętościowym 9:1.

Po oczyszczeniu otrzymuje się 8,8 mg 4'-O^-D-4”'-metoksy-glukopiranozylo-4,2'-dihydroksy-6'-metoksy-3'-prenylo-a^-dihydrochalkonu, o wzorze 2, z wydajnością 39,3%.

Uzyskany produkt charakteryzuje się następującymi danymi spektralnymi:

¹H NMR (600 MHz, aceton-de) δ: 1,62 (3H, s, H-4”), 1,76 (3H, s, H-5”), 2,86 (2H, m, H-β), 3,13 (1H, t, J = 9,3 Hz, H-4'”), 3,22 (1H, dd, J = 13,8 H i 6,9 Hz, H-1”b), 3,28 (2H, dd, J = 8,5 Hz i 6,9 Hz, H-a), 3,40 (1H, dd, J = 13,8 H i 7,8 Hz, H-1”a), 3,55 (C4'”-OCH3), 3,57 (1H, m, H-3'”), 3,58 (1H, m, H-2'”), 3,63 (1H, m, H-5”'), 3,68 (1H, m, H-6”'b), 3,87 (1H, m, H-6'”a), 3,91 (3H, s, C6'-OCH3), 5,24 (1H, m, H-2”), 5,06 (1H, d, J = 7,7 Hz, H-1”'), 6,34 (1H, s, H-5'), 6,75 (2H, pd, J = 8,3 Hz, H-3, H-5), 7,08 (2H, pd, J = 8,3 Hz, H-2, H-6).

¹³C NMR (150 MHz, aceton-d6) δ: 17,96 (C-5”), 22,11 (C-1”), 25,90 (C-4”), 30,64 (C-β), 47,18 (C-a), 56,17 (C6-OCH3), 60,59 (C4”'-OCH3), 62,31 (C-6'”), 74,89 (C-2'”), 77,47 (C-3'”), 78,26 (C-5”'), 80,55 (C-4'”), 91,06 (C-5'), 101,22 (C-1'”), 106,94 (C-1'), 110,96 (C-3'), 116,01 (C-3, C-5), 123,94 (C-2”), 130,15 (C-2, C-6), 130,99 (C-3”), 133,22 (C-1), 156,43 (C-4), 162,15 (C-6'), 162,29 (C-4'), 164,43 (C-2'), 206,26 (C=O).

Claims

Zastrzeżenia patentowe

1. 4'-0-^-D-4”'-metoksy-glukopiranozylo-4,2'-dihydroksy-6'-metoksy-3'-prenylo-a^-dihydrochalkon, o wzorze 2.

PL 222 788 B1
2. Sposób otrzymywania 4’-0-^-D-4”’-metoksy-glukopiranozylo-4,2’-dihydroksy-6’-metoksy-3’-prenylo-a,3-dihydrochalkonu, znamienny tym, że związek ten otrzymuje sie na drodze reakcji mikrobiologicznej transformacji substratu, którym jest 4,4’,2’-trihydroksy-6’-metoksy-3’-prenylo-a,3-dihydrochalkon o wzorze 1, polegającej na tym, że grzyby z gatunku Beauveria bassiana, namnaża się w płynnym podłożu mikrobiologicznym, charakterystycznym dla grzybów, przy ciągłym mieszaniu reagentów, w temperaturze 12-40°C, po czym do narośniętej hodowli dodaje się substrat i dalej prowadzi się proces, aż do całkowitego zużycia substratu, po czym po zakończeniu transformacji roztwór transformacyjny ekstrahuje się rozpuszczalnikami organicznymi niemieszającymi się z wodą, oddziela frakcję organiczną, osusza bezwodnym siarczanem magnezu, odparowuje rozpuszczalnik i tak otrzymany surowy produkt oczyszcza się za pomocą technik chromatograficznych.
3. Sposób według zastrz. 2, znamienny tym, że proces prowadzi się w temperaturze 30°C.