PL223443B1

PL223443B1 - 4'-O-β-D-4'''-metoksy-glukopiranozylo-1", 2"-dihydroksantohumol K i sposób jego wytwarzania

Info

Publication number: PL223443B1
Application number: PL405457A
Authority: PL
Inventors: Jarosław Popłoński; Anna Madej; Tomasz Tronina; Ewa Huszcza
Original assignee: Univ Przyrodniczy We Wrocławiu
Priority date: 2013-09-27
Filing date: 2013-09-27
Publication date: 2016-10-31
Also published as: PL405457A1

Description

Opis wynalazku

Przedmiotem wynalazku jest 4'-O^-D-4”'-metoksy-glukopiranozylo-1”,2”-dihydroksantohumol K, (Nazwa wg IUPAC to (E)-1-(5-O-fi-D-4’-metoksy-glukopiranozylo-7-metoksy-2,2-dimetylochroman-8-yl)-3-(4-hydroksyfenylo)-prop-2-en-1-on), o wzorze 2, przedstawionym na rysunku oraz sposób jego wytwarzania.

Związek ten jest biologicznie czynny i może mieć zastosowanie w przemyśle spożywczym i farmaceutycznym.

Dotychczas, w literaturze nie jest znany 4’-O-3-D-4”’-metoksy-glukopiranozylo-1”,2”-dihydroksantohumol K ani sposób jego wytwarzania.

Istotą wynalazku jest 4’-O-3-D-4”’-metoksy-glukopiranozylo-1”,2”-dihydroksantohumol K.

Natomiast istotą sposobu wytwarzania tego związku jest to, że otrzymuje się go na drodze reakcji mikrobiologicznej transformacji substratu, jakim jest 1”,2”-dihydroksantohumol K. Grzyby z gatunku Beauveria bassiana, namnaża się w płynnym podłożu mikrobiologicznym, charakterystycznym dla grzybów, przy ciągłym mieszaniu reagentów, w temperaturze 12-40°C. Następnie do narośniętej hodowli dodaje się substrat i dalej prowadzi się proces, aż do całkowitego zużycia substratu. Po zakończeniu transformacji roztwór transformacyjny ekstrahuje się rozpuszczalnikami organicznymi niemieszającymi się z wodą, oddziela frakcję organiczną, osusza bezwodnym siarczanem magnezu, odparowuje rozpuszczalnik i tak otrzymany surowy produkt oczyszcza się za pomocą technik chromatograficznych.

Korzystnie jest, gdy proces namnażania drobnoustroju prowadzi się w temperaturze 30°C.

Postępując zgodnie z wynalazkiem, w wyniku działania układu enzymatycznego zawartego w żywych komórkach kultury gatunku Beauveria bassiana, następuje reakcja glikozylacji substratu.

Zasadniczą zaletą wynalazku jest otrzymanie, w łagodnych warunkach, 4’-O-3-D-4”’-metoksyglukopiranozylo-1”,2”-dihydroksantohumolu K, o wzorze 2, jako głównego produktu reakcji w kulturze gatunku Beauveria bassiana z wydajnością 26,81%.

Wynalazek jest bliżej objaśniony w przykładzie wykonania.

P r z y k ł a d 1. Do kolby o pojemności 300 cm , w której znajduje się 100 cm sterylnej pożywki ₃ zawierającej 3 g glukozy i 1 g aminobaku na 1 dm wody destylowanej, wprowadza się grzyby gatunku

Beauveria bassiana. Po 4 dniach wzrostu drobnoustrojów w temperaturze 30°C i przy ciągłym wstrzą₃ saniu, dodaje się 15 mg 1”,2”-dihydroksantohumol K, o wzorze 1, rozpuszczonego w 1 cm metanolu. Transformację prowadzi się przy ciągłym wstrząsaniu przez 8 dób. Następnie, uzyskany roztwór transformacyjny ekstrahuje się trzykrotnie octanem etylu, osusza bezwodnym siarczanem magnezu i odp arowuje rozpuszczalnik. Otrzymuje się 28 mg surowego produktu, który oczyszcza się chromatograficznie, używając jako eluentu mieszaninę chloroform:metanol w stosunku objętościowym 9:1.

Po oczyszczeniu otrzymuje się 8,0 mg 4’-O-3-D-4”’-metoksy-glukopiranozylo-1,2”-dihydroksantohumolu K, o wzorze 2, z wydajnością 26,81%.

Uzyskany produkt charakteryzuje się następującymi danymi spektralnymi:

1H NMR (600 MHz, CD3OD) δ: 1,21 (3H, s, H-3”), 1,22 (3H, s, H-5”), 1,75 (2H, m, H-1”), 2,67 (1H, m, H-2”b), 2,80 (1H, m, H-2”a), 3,16 (1H, m, H-5'”), 3,48 (1H, m, C-4”), 3,52 (1H, m, H-2”), 3,59 (3H, s, C4”-OCH3), 3,60 (1 H, m, H-3”), 3,73 (3H, s, C6'-OCH3), 3,87 (1H, m, C-6'”a), 3,69 (1H, m, C-6'”b), 4,95 (1H, d, J = 7,8 Hz, H-1'”), 6,51 (1H, s, H-5'), 6,74 (1H, d, J = 16,0 Hz, H-a), 6,80 (2H, pd, J = 8,6 Hz, H-3, H-5), 7,19 (1H, d, J = 16,0 Hz, H-β), 7,41 (2H, pd, J = 8,6 Hz, H-2, H-6).

13C NMR (150 MHz, CD3OD) δ: 17,80 (C-2”), 26,51 (C-4”), 27,15 (C-5”), 33,03 (C-1”), 56,33 (C6'-OCH3), 60,89 (C4”'-OCH3), 62,32 (C-6'”), 75,05 (C-2'”), 75,99 (C-3”), 77,52 (C-4'”), 77,98 (C-3'”), 80,98 (C-5'”), 92,70 (C-5'), 102,23 (C-1'”), 105,42 (C-3'), 113,25 (C-1'), 116,98 (C-3, C-5), 126,86 (C-a), 127,41 (C-1), 131,77 (C-2, C-6), 153,68 (C-2'), 157,81 (C-6'), 158,57 (C-4'), 161,30 (C-4), 177,95 (C-β), 198,29 (C=O).

Claims

Zastrzeżenia patentowe

1.4'-O^-D-4”'-metoksy-glukopiranozylo-1”,2”-dihydroksantohumol K, o wzorze 2.
2. Sposób wytwarzania nowego 4'-O^-D-4'”-metoksy-glukopiranozylo-1”,2”-dihydroksantohumolu K, o wzorze 2, znamienny tym, że związek ten otrzymuje się na drodze reakcji mikrobiologicznej transformacji substratu, którym jest 1”,2”-dihydroksantohumol K o wzorze 1, polegającej

PL 223 443 B1 na tym, że grzyby z gatunku gatunku Beauveria bassiana, namnaża się w płynnym podłożu mikrobiologicznym, charakterystycznym dla grzybów, przy ciągłym mieszaniu reagentów, w temperaturze, 2-40°C, po czym do narośniętej hodowli dodaje się substrat i dalej prowadzi się proces, aż do całk owitego zużycia substratu, po czym po zakończeniu transformacji roztwór transformacyjny ekstrahuje się rozpuszczalnikami organicznymi niemieszającymi się z wodą, oddziela frakcję organiczną, osusza bezwodnym siarczanem magnezu, odparowuje rozpuszczalnik i tak otrzymany surowy produkt oczyszcza się za pomocą technik chromatograficznych.
3. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że proces prowadzi się w temperaturze 30°C.

Rysunki